SK19712000A3 - DERIVµTY EPOTILŕNU, SPâSOB ICH PRÖPRAVY, FARMACEUTICKµ KOMPOZÖCIA S ICH OBSAHOM A ICH POU¦ITIE - Google Patents

DERIVµTY EPOTILŕNU, SPâSOB ICH PRÖPRAVY, FARMACEUTICKµ KOMPOZÖCIA S ICH OBSAHOM A ICH POU¦ITIE Download PDF

Info

Publication number
SK19712000A3
SK19712000A3 SK1971-2000A SK19712000A SK19712000A3 SK 19712000 A3 SK19712000 A3 SK 19712000A3 SK 19712000 A SK19712000 A SK 19712000A SK 19712000 A3 SK19712000 A3 SK 19712000A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
group
formula
compound
alkyl
absent
Prior art date
Application number
SK1971-2000A
Other languages
English (en)
Other versions
SK285647B6 (sk
Inventor
Kyriacos Costa Nicolaou
Nigel Paul King
Maurice Raymond Verschoyle Finlay
Yun He
Frank Roschangar
Dionisios Vourloumis
Hans Vallberg
Antony Bigot
Original Assignee
Novartis Ag
The Scripps Research Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis Ag, The Scripps Research Institute filed Critical Novartis Ag
Publication of SK19712000A3 publication Critical patent/SK19712000A3/sk
Publication of SK285647B6 publication Critical patent/SK285647B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D313/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Silicon Polymers (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Lubricants (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Deriváty epothilonu, spôsob ich prípravy, farmaceutická kompozícia s ich obsahom a ich použitie
Oblasť techniky
Predložený vynález sa týka analógov epothilonu, ktoré sú modifikované v postrannom reťazci a spôsobov prípravy týchto zlúčenín, ich použitia pri liečení ochorení alebo pri príprave farmaceutických prostriedkov na liečenie ochorení a tiež nových medziproduktov použitých pri syntéze týchto analógov a nových spôsobov syntézy.
Doterajší stav techniky
Epothilony 1 až 5 sú prírodné látky, ktoré sú cytotoxické dokonca proti nádorovým bunkám odolným proti paclitaxelu prostredníctvom podpory polymerizácie a- a β- tubulínových podjednotiek a stabilizácie vznikajúcich mikrotubulových štruktúr. Epothilony nahradí paclitaxel (aktívna látka prostriedku TAXOL™) v jeho mikrotubulovom väzbovom mieste a je o nich známe, že sú účinnejšie, ako paclitaxel, keď ide o stabilizáciu mikrotubulov.
« R
1: R = H, R1 = Me: epothilon A
2: R = Me, R1 = Me: epothilon B
3: R = H, R1 = CH2OH: epothilon E
4: R = H: epothilon C
5: R = Me: epothilon D • · · · · · • · · · · ··· · • ···· · · · · · · • · · · · ···
Žiadané sú analógy epothilonu A a B, ktoré majú vynikajúce farmakologické vlastnosti, najmä jednu alebo viac nasledujúcich vlastnosti: lepší liečebný index (napríklad väčší rozsah cytotoxických dávok proti napríklad proliferatívnym ochoreniam, bez toho aby boli toxické k normálnym bunkám), lepšie farmakokinetické vlastnosti, lepšie farmakodynamické vlastnosti, lepšiu rozpustnosť vo vode, lepšiu účinnosť proti typom nádorových buniek, ktoré sú alebo sa stali odolné proti liečeniu jedným alebo viacerými chemoterapeutikami, lepšie vlastnosti uľahčujúce výrobu prostriedkov, napríklad lepšiu rozpustnosť v polárnych rozpúšťadlách, najmä v tých, ktoré obsahujú vodu, lepšiu stabilitu, vhodnú prípravu zlúčenín samotných, lepšiu inhibíciu proliferácie na bunkovej úrovni, vyššiu úroveň stabilizačného vplyvu na mikrotubuly a/alebo špecifické farmakologické profily.
Podstata vynálezu
Predložený vynález sa týka nových zlúčenín, ktoré majú jednu alebo viac skôr uvedených výhodných vlastností.
Hlavný aspekt podľa predloženého vynálezu sa týka epothilonovej analógnej zlúčeniny všeobecného vzorca I
R4 0
(I) kde vlnitá väzba znamená, že väzba a je prítomná buď v cis alebo trans forme;
(i) R2 je neprítomná alebo je atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo φφ φ φ φ φ · •
φ φ φ · · φφ φφφφ φ ·φ φφφφ· φ φφ • ·· φ· φφφ φφφφ φφ φ je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a väzba; ak R2 je neprítomná, potom b a c nie je dvojitá väzba; a ak a je sú atóm kyslíka, je jednoduchá prítomné a a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
R3 je vybraná zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; -OCH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až δ atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3.
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je skupina vybraná z nasledujúcich štruktúr:
alebo, v širšom aspekte podľa vynálezu, vzorca
N
CH2OH
N
N
N *···
kde R a R' sú nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina alebo v širšom význame podľa vynálezu je ďalej R' hydroxymetylová skupina alebo fluórmetylová skupina a R je atóm vodíka alebo metylová skupina.
(ii) a, ak je R3 nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina,· terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3,· alebo skupina -CH2-S-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3, a ostatné symboly okrem R1 majú význam uvedený skôr, R1 môže byť tiež skupina vybraná z nasledujúcich štruktúr:
alebo, ak R3 má jeden z významov uvedených v definícii R3 pod (ii) iný, ako metylová skupina, R1 môže byť tiež skupina vzorca
• · · · · · • · • ··· ·· · • · · • · · ·
• · ··· (iii) a ak R3 je atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2CI; skupina -CH2OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; alebo skupina -CH2-S-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najma skupina CH2-S-CH3,
R2 je atóm kyslíka, b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba, potom R1 môže byť tiež skupina vzorca:
alebo (iv) a ak R3 je nižšia alkylová skupina iná, ako metylová skupina, najmä etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; alebo je výhodne skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O- (alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; alebo skupina -CH2-S-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina CH2-S-CH3; a ostatné symboly okrem R1 majú význam uvedený pod (i)
R1 môže byť tiež skupina vzorca
OH alebo soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I, ak je prítomná skupina ·· ···· • · • ··· ·· ·· tvoriaca soľ.
Ďalší aspekt podľa predloženého vynálezu sa týka spôsobu syntézy zlúčeniny vzorca
(kde Q je atóm vodíka alebo výhodne metylová skupina) a/alebo spôsobu syntézy zlúčeniny vzorca
Ak nie je uvedené inak, majú termíny používané podľa vynálezu skôr alebo ďalej nasledujúce významy:
Nižšia alkylová skupina môže byť lineárna alebo raz alebo viackrát rozvetvená a výhodne obsahuje až vrátane 7 atómov uhlíka, výhodnejšie až vrátane 4 atómy uhlíka. Výhodne je nižšia alkylová skupina metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, czopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina alebo ďalej n-pentylová skupina alebo n-hexylová skupina.
Ochrannou skupinou je výhodne štandardná ochranná skupina. Ak je v zlúčenine všeobecného vzorca I potrebné chrániť jednu alebo viac iných funkčných skupín, napríklad karboxylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, aminoskupinu, alebo merkaptoskupinu, ·· · ·· ···· ·· ·· ··· ··· • · · · ···· · * • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· · pretože by sa tieto skupiny nemali zúčastňovať reakcie, použijú sa skupiny, ktoré sa obvykle používajú pri syntéze peptidových zlúčenín a tiež cefalosporínov a penicilínov a tiež derivátov nukleových kyselín a cukrov.
Ochranné skupiny môžu byť vždy prítomné v prekurzoroch a môžu chrániť príslušné skupiny pred nežiaducimi sekundárnymi reakciami, ako je acylácia, eterifikácia, esterifikácia, oxidácia, solvolýza a podobné reakcie. Vlastnosťou ochranných skupín je, že je možné ich ľahko odstrániť, to znamená bez nežiaducich sekundárnych reakcií, typicky pomocou solvolýzy, redukcie, fotolýzy alebo tiež enzýmovej reakcie, napríklad za podmienok podobných fyziologickým podmienkam a ďalej je ich vlastnosťou to, že nie sú prítomné vo výsledných produktoch. Odborníci pracujúci v tejto oblasti vedia alebo môžu ľahko zistiť, ktoré ochranné skupiny sú vhodné na reakcie uvedené skôr a ďalej.
Chránenie týchto funkčných skupín takými ochrannými skupinami, chrániace skupiny samotné a reakcie na ich odstránenie sú opísané napríklad v štandardne odkazovaných prácach, ako je J.F.W. McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plénum Press, London a New York 1973, v T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York 1981, v The Peptides; diel 3 (vydavatelia: E. Gross a J. Meienhofer), Academic Press, London a New York 1981, v Methoden der organischen Chemie (Methods of organic chemistry), Houben Weyl, štvrté vydanie, diel 15/1, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, v H. D. Jakubke a H. Jescheit, Aminosäuren, Peptide, Proteine (Amino acids, peptides, proteins), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, a Basel 1982, a v Jochen Lehmann, Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide und Deriváte (Chemistry of carbohydrates: monosaccharides and derivatives), Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974. Zvlášť výhodnými ochrannými skupinami sú skupiny chrániace hydroxylovú skupinu, ako je terc-butyldimetylsilylová skupina alebo tritylová skupina.
·· • ··· · · • · · · · ···· • · · · ·· ··· ·· ·
R4 a R5 sú výhodne atóm vodíka.
Väzba označená vlnovkou, vychádzajúca z atómu uhlíka nesúceho skupinu R3 znamená, že väzba a je prítomná v trans- alebo výhodne cis- forme.
Soľami sú najmä farmaceutický prijateľné soli zlúčenín všeobecného vzorca I.
Tieto soli vznikajú napríklad ako kyslé adičné soli, výhodne s organickými alebo anorganickými kyselinami, zo zlúčenín všeobecného vzorca I obsahujúcich zásaditý atóm dusíka a ide najmä o farmaceutický prijateľné soli. Vhodnými anorganickými kyselinami sú napríklad halogenovodíkove kyseliny, ako je kyselina chlorovodíková, kyselina sírová alebo kyselina fosforečná. Vhodnými organickými kyselinami sú napríklad karboxylové kyseliny, fosfónové kyseliny, sulfónové kyseliny alebo sulfámové kyseliny, napríklad kyselina octová, kyselina propiónová, kyselina oktánová, kyselina dekánová, kyselina dodekánová, kyselina glykolová, kyselina mliečna, kyselina fumarová, kyselina jantárová, kyselina adipová, kyselina pimelová, kyselina suberová, kyselina azelaová, kyselina jablčná, kyselina vínna, kyselina citrónová, aminokyseliny, ako je kyselina glutámová alebo kyselina aspartová, kyselina maleínová, kyselina hydroxymaleínová, kyselina metylmaleínová, kyselina cyklohexánkarboxylová, kyselina adamantánkarboxylová, kyselina benzoová, kyselina salicylová, kyselina 4-aminosalicylová, kyselina ftalová, kyselina fenyloctová, kyselina mandľová, kyselina škoricová, kyselina metánalebo etánsulfónová, kyselina 2-hydroxyetánsulfónová, kyselina etán-1,2-disulfónová, kyselina benzénsulfónová, kyselina 2-naftalénsulfónová, kyselina 1,5-naftaléndisulfónová, kyselina 2-, 3- alebo 4-metylbenzénsulfónová, kyselina metylsírová, kyselina etylsírová, kyselina dodecylsírová, kyselina N-cyklohexylsulfámová, kyselina Ν-metyl-, N-etyl alebo N-propylsulfámová alebo iné organické protónové kyseliny, ako je kyselina askorbová.
Na izoláciu alebo čistenie je možné tiež použiť farma9
·· • • · ···· ·· ·
• · • • • • • • • ·
• • · • • ··· • • •
• ···· • · • • • · • •
• ···· • • • ·· • • ··· • ·· • • ···
ceuticky neprijateľné soli, napríklad pikráty alebo chloristany. Na terapeutické účely sa používajú len farmaceutický prijateľné soli alebo voľné zlúčeniny (ak ich je možné vo farmaceutickom prostriedku použiť) a tieto látky sú výhodné.
Vzhľadom na blízky vzťah medzi novými zlúčeninami vo voľnej forme a vo forme solí, vrátane solí, ktoré je možné použiť ako medziprodukty, napríklad pri čistení alebo identifikácii nových zlúčenín, sa akýkoľvek odkaz na voľné zlúčeniny uvedený skôr alebo ďalej týka tiež, ak je to vhodné, zodpovedajúcich solí a naopak.
Termín približne alebo asi v súvislosti s číselnými hodnotami, napríklad približne dvojnásobný molárny prebytok alebo podobne, výhodne znamená, že daná číselná hodnota sa môže odchýliť od daného čísla až o ± 10%, výhodnejšie až o ± 3%; najvýhodnejšie je číselná hodnota taká, ako je uvedené.
Vo výhodnom uskutočnení podľa predloženého vynálezu sú zlúčeniny všeobecného vzorca I, ako sú opísané v bode (iv) (kde R1
z rozsahu podľa predloženého vynálezu vylúčené.
Tiež skupina zlúčenín všeobecného vzorca
I bez zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde R1 je skupina vzorca
N
CH2OH
·· ·· ···· • · • ··· ·· ··
je výhodná (zvyšné symboly majú významy definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I).
Zvlášť výhodná je buď zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej soľ.
Biologická aktivita
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu použiť na liečenie proliferativnych ochorení, najmä na rakoviny, ako je rakovina pľúc, najmä nemalobunkový pľúcny karcinóm, rakovina prostaty, čreva, napríklad rakovina konečníka a tračníka, epidermoidné nádory, ako sú nádory hlavy a/alebo krku, alebo rakovina prsníkov, alebc iné rakoviny, ako je rakovina močového mechúra, slinivky brušnej alebo mozgu alebo melanóm, vrátane najmä liečenia rakoviny, ktorá je odolná proti mnohým liečivám (napríklad z dôvodu expresie p-glykoproteínu = P-gp) a/alebo ktorá nezaberá na liečenie paclitaxelom (napríklad vo forme TAXOL).
Biologické testovanie
Schopnosť zlúčenín podľa predloženého vynálezu blokovať depclymerizáciu mikrotubulov sa môže preukázať pomocou nasledujúceho testu:
Mikrotubulový test sa uskutočňuje podľa postupu opísaného v literatúre a zisťuje sa pri ňom schopnosť syntetizovaných zlúčenín tvoriť a stabilizovať mikrotubuly. Vykonáva sa tiež štúdia cytctoxicity.
Pri zlúčeninách všeobecného vzorca I sa testuje ich schopnosť pôsobiť na hromadenie tubulínu s použitím čisteného tubulí11 ··«· • · · ·· ···· ·· • · · · · · · • · ' · · ··· · • ···· · · · · · · • · · · · · ···· · ·· ··· ·· ··· nu pomocou testu vyvinutého tak, aby sa zosilneli rozdiely medzi zlúčeninami aktívnejšími, ako Taxol. Ukázalo sa, že zlúčeniny všeobecného vzorca I majú vysokú hladinu cytotoxickej a tubulínovej polymerizačnéj aktivity v porovnaní s epothilonmi A a B. (Lin a kol., Cancer Chemother. Pharmacol. 38, 136-140 (1996); Rogan a kol., Science 244, 994-996 (1984)).
Fitračný kolorimetrický test
Do skúmavky sa umiestni mikrotubulový proteín (0,25 ml 1 mg/ml) a pridá sa 2,5 μΐ testovanej zlúčeniny. Vzorka sa premieša a inkubuje sa 30 minút pri 37°C. Vzorka 150 μΐ sa prevedie do 96 jamkovej hydrofilnej filtračnej doštičky Millipore Multiscreen Durapore s veľkosťou pórov 0,22 μπι, ktorá sa vopred za vákua premyje 200 μΐ pufra MEM. Jamka sa potom premyje 200 μΐ pufra MEM. S cieľom zafarbiť naviazaný proteín na doštičke sa na filter na 2 minúty pridá 50 μΐ roztoku amidovej černe (0,1% černe naftol blue (Sigma)/45% metanol/10% kyselina octová) a znova sa aplikuje vákuum. Dvakrát sa pridá 200 μΐ roztoku odfarbujúceho amidovú čerň (90% metanol/2% kyseliny octovej), aby sa ocstránilo nenaviazané farbivo. Signál sa kvantifikuje pomocou spôsobu opísaného v Schaffner a Weissmann a kol., Anál. Biochem., 56: 502-514, 1973 nasledujúcim spôsobom: do jamky sa pridá 200 μΐ elučného roztoku (25 mM NaOH-0,05 mM EDTA-50% etanol) a roztok sa po 5 minútach premieša pipetou. Nasleduje 10 minút inkubácie pri teplote miestnosti, do každej jamky 96 jamkovej doštičky sa pridá 150 μΐ elučného roztoku a meria sa absorbancia pomocou zariadenia Microplate Reader od spoločnosti Molecular Devices.
Cytotoxická aktivita zlúčenín všeobecného vzorca I sa hodnotí pomocou testov cytotoxicity s bunkovými líniami 1A9, 1A9PTX10 (mutant α-tubulínu) a 1A9PTX22 (mutant α-tubulinu). Ako prírodné epothilony 1 a 2 vykazujú zlúčeniny všeobecného vzorca I značnú aktivitu proti zmeneným bunkovým líniám exprimujúcim a-tubulin ·· ·· · • · · · ·· ···· • · • ··· • · ·· • ···· · ·· • 9 99
999 9 99999 ····
999
1Α9ΡΤΧ10 a 1A9PTX22. Pri zlúčenine všeobecného vzorca I sa výhodné hodnoty IC50 (koncentrácia, pri ktorej dochádza k polovičnému, ako maximálnemu rastu nádorových buniek v porovnaní s kontrolou bez pridania inhibítora všeobecného vzorca I) pohybujú v rozsahu 1 až 1000 nM, výhodne 1 až 200 nM.
Schopnosť zlúčenín podľa predloženého vynálezu inhibovať rast nádoru sa môže preukázať pomocou nasledujúcich testov s nasledujúcimi bunkovými líniami.
Kolorimetrický test cytotoxicity pre screening protirakovinových liečiv
Použitý kolorimetrický test cytotoxicity je upraveným postupom, ktorý opísal Skehan a kol. (Journal of Nation Cancer Inst 82: 1107-1112; 19901). Postup ponúka rýchly, citlivý a lacný spôsob merania obsahu celulárneho proteínu adherentných a suspenzných kultúr v 96 jamkových mikrotitračných doštičkách. Spôsob je vhodný na in vitro výskum protinádorových liekov a používa sa v National Cancer Inštitúte.
Kultúry fixované kyselinou trichlóroctovou sa farbia 30 minút 0,4% (hmotn./objem) sulforhodamínom B (SRB) rozpusteným v 1% kyseline octovej. Nenaviazané farbivo sa odstráni štvornásobným premytím 1% kyselinou octovou a farbivo viazané na proteín sa extrahuje 10 nM nepufrovanou zásadou Tris [tris(hydroxymetyl)aminometán] s cieľom určiť optickú hustotu v zariadení na odčítanie 96 jamkových doštičiek s počítačovým rozhraním. Výsledky testu SRB sú lineárne vzhľadom na počet buniek a hodnoty pre bunkové proteíny meraným pomocou testov podľa Lowry a Bradford pri hustotách v rozsahu od rozptýlenej subkonfluencie do mnohovrstvovej suprakonfluencie. Pomer signálu k šumu pri 564 nm je asi 1,5 pri 1000 bunkách na jamku.
SRB test poskytuje kalorimetrický výsledok, ktorý je nedeštruktívny, dlho stabilný a viditeľný voľným okom. Poskytuje citlivé meranie cytotoxicity vyvolanej liekom. SRB fluoreskuje ·· · ·· ···· ·· · ··· ··· ···· • · · · · ··· · · · • ···· ··· · · · · · • · · · · · · · ···· · ·· ··· ·· ··· pri excitácii laserom pri 488 nm a môže sa merať kvantitatívne na úrovni jednej bunky pomocou statickej fluorescenčnej cytometrie (Shekan a kol., Journal of National Cancer Inst 82: 1107-1112, 19901).
Alternatívne sa účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca I ako inhibítorov depolymerizácie mikrotubulov môže demonštrovať nasledujúcim spôsobom:
Zásobné roztoky testovaných zlúčenín sa pripravia v dimetylsulfoxide a skladujú sa pri -20°C. Mikrotubulový proteín sa získa z mozgu ošípanej pomocou dvoch cyklov depolymerizácie/ polymerizácie závislej na teplote, ako je opísané vo Weingarten a kol., Biochemistry 1974; 13: 5529-37. Pracovné zásobné roztoky mikrotubulového proteínu (to znamená tubulínu plus proteinov asociovaných s mikrotubulmi) sa skladujú pri -70°C. Stupeň polymerizácie mikrotubulového proteínu vyvolanej testovanou zlúčeninou sa meria podlá postupov známych z literatúry (pozri Lin a kol., Cancer Chem. Pharm. 1996; 38: 136-140). V krátkosti sa 5 μΐ zásobného roztoku testovanej zlúčeniny vopred zmieša v dvadsaťnásobku požadovanej výslednej koncentrácie so 45 μΐ vody pri teplote miestnosti a zmes sa potom umiestni na ľad. Alikvotný diel pracovného zásobného roztoku mikrotubulového proteínu z mozgu ošípanej sa rýchlo roztopí a potom sa zriedi na 2 mg/ml ľadovo studeným 2 x MEM pufrom (200 ml MES, 2 mM EGTA, 2 mM MgCl2, pH 6,7) (MES = 2-morfolínetánsulfónová kyselina, EGTA = etylénglykol-bis-(2-(2-aminoetyl)tetraoctová kyselina). Polymerizačná reakcia sa potom zaháji pridaním vždy 50 μΐ roztoku mikrotubulového proteínu k testovanej zlúčenine, potom sa vzorka inkubuje vo vodnom kúpeli pri teplote miestnosti. Potom sa reakčná zmes umiestni do Eppendorfovej mikroodstredivky a inkubuje sa ďalších 15 minút pri teplote miestnosti. Vzorky sa potom odstreďujú 20 minút pri 14 000 otáčkach za minútu pri teplote miestnosti aby sa oddelil polymerizovaný mikrotubulový proteín od nepolymerizovaného. Ako nepriama miera polymerizácie ··
• · · • · · · · • · · · ···· · • ······ · · · · • · · · · ···· · ·· ··· ·· · tubulínu sa koncentrácia proteínu v supernatante (ktorý obsahuje zvyšok nepolymerizovaného, rozpustného mikrotubulového proteínu) urči podľa spôsobu Lowry (DC Assay Kit, Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) a optická hustota (OD) farebnej reakcie sa určí pri 750 nm pomocou spektrometra (SpectraMax 340, Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Rozdiely v OD medzi vzorkami ošetrenými testovanou zlúčeninou a kontrolou ošetrenou vehikulom sa porovnajú s rozdielmi inkubovaných vzoriek, ktoré obsahujú 25 μΜ epothilonu B (pozitívna kontrola). Stupeň polymerizácie, ktorá je vyvolaná testovanou zlúčeninou, je vyjadrený vzhľadom na pozitívnu kontrolu (100%) . Porovnaním niekoľkých koncentrácii sa určí EC50 (koncentrácia, pri ktorej dochádza k 50% maximálnej polymerizácii). Pre zlúčeniny všeobecného vzorca I ležia hodnoty EC50 výhodne v rozsahu 1 až 200, výhodne 1 až 50 μΜ. Vyvolanie polymerizácie tubulínu testovanou zlúčeninou všeobecného vzorca I v koncentrácii 5 μΜ ako percentuálna hodnota v porovnaní s 25 μΜ epothilonu B výhodne leží v rozsahu 50 až 100%, výhodne 80 až 100%.
Účinnosť proti nádorovým bunkám sa tiež môže preukázať nasledujúcim spôsobom:
Pripravia sa zásobné roztoky testovanej zlúčeniny všeobecného vzorca I (10 mM) v dimetylsulfoxide a skladujú sa pri -20°C. Ľudské KB-31 (odolné proti mnohým liekom, nadmerne exprimujúce P-gp 170) KB-8511 epidermoidné karcinómové bunky sú od Dr. M. Baker, Roswell Park Memoriál Inštitúte (Buffalo, NY, USA) (opis pozri tiež Akiyama a kol., Somat. Celí. Mol. Genetics 11, 117-126 (1985) a Fojo A. a kol., Cancer Res. 45, 3002-3007 (1985) - KB-31 a KB-8511 sú obidva deriváty bunkovej línie KB (Američan Type Culture Collection) a sú to bunky ľudského epidermoidného karcinómu. Bunky KB-31 sa môžu kultivovať v monovrstvách s použitím teľacieho séra (M.A.Bioproducts), L-glutamínu (Flow), penicilínu (50 jednotiek/ml) a streptomycínu (50 μς/πιΐ; Flow); potom sa kultivujú pri rýchlosti zdvojnásobe9
99· • · ·
99 • ···· •·
999 9· ·· ···· • · • ··· ·· nia asi 22 hodín a relatívna účinnosť ich uchytenia je asi 60%. KB-8511 je variant odvodený od bunkovej línie KB-31, ktorá sa získa cyklickým spracovaním colchicinom a vykazuje štyridsaťnásobok relatívnej rezistencie proti colchicínu v porovnaní s bunkami KB-31. Bunky sa inkubujú pri 37’C v inkubátore s 5% objemovými oxidu uhličitého a pri 80% relatívnej atmosférickej vlhkosti v MEM-a médiu, ktoré obsahuje ribonukleozidy a dezoxyribonukleozidy (Gibco BRL), a je doplnené 10 IU penicilínu, 10 pg/ml streptomycínu a 5% fetálneho teľacieho séra. Bunky sa potom umiestnia v množstve 1,5 x 103 bunky/jamka do 96 jamkových mikrotitračných doštičiek a inkubujú sa cez noc. Sériové zriedenia testovaných zlúčenín v kultivačnom médiu sa pridajú v dni 1. Doštičky sa potom inkubujú ďalšie 4 dni; potom sa bunky fixujú s použitím 3,3% (objemovo) glutaraldehydu, premyjú sa vodou a nakoniec sa farbia 0,05% (hmotn./objem) metylénovou modrou. Po ďalšom premytí sa farbivo eluuje 3% kyselinou chlorovodíkovou a meria sa optická hustota pri 665 nm pomccou spektrometra SpectraMax 340 (molecular Devices, Sunnyvale, CA) . Hodnoty IC50 sa určia pomocou matematickej korelácie dát do krivky s použitím programu SoftPro 2,0 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) a vzorca [(OD ošetrené)-(OD východiskový)]/[OD kontroly)-(OD východiskový) [ x 100.
Hodnota IC50 je definovaná ako koncentrácia testovanej zlúčeniny na konci času inkubácie, ktorá vedie k 50% počtu buniek v porovnaní s kontrolou bez testovanej zlúčeniny (koncentrácia pri polovičnej, ako maximálnej inhibícii rastu buniek). Zlúčeniny všeobecného vzorca I výhodne vykazujú IC50 v rozsahu 0,1 x 10-9 až 500 x 10’9, výhodne 0,1 až 60 nM.
Porovnávacie testy sa môžu tiež uskutočniť inými nádorovými bunkovými líniami, ako sú A459 (pľúca; ATCC CCL 185), NCIH460 (pľúca), Colo 205 (hrubé črevo; ATCC No. CCL 222); HCT-15 (hrubé
črevo; ATCC CCL 225 - ATCC = Američan Type Culture Collection
Rockville, MD, USA)), HCT116 (hrubé črevo), Dul45 (prostata;
·· · • · · • · · • ···· • · ··· · · ·· ···· ··· • · · · ··· • ···· · ·· ··· ····· • · · · ·· ·· ··· ·· ···
ATCC No. HTB 81; pozri tiež Cancer Res. 37, 4049-58 [1978]),
PC-3M (prostata - derivát necitlivý na hormóny, získaný od Dr.I.J.Fidler (MD Anderson Cancer Center, Hcuston, TX, USA) a odvodený od PC-3, čo je bunková línia dostupná od ATCC (ATCC CRL 1435)), MCF-7 (prsník; ATCC HTB 22) alebo MCF-7/ADR (prsník, odolný proti mnohým liekom; opis pozri Blobe G.C. a kol., J. Biol. Chem. (1983), 658664; bunková línia je velmi odolná (360až 2400 násobne) k doxorubicínu a Vinea alkaloidom v porovnaní s MDR-7 prirodzený typ buniek)), kedy sa dosiahnu podobné výsledky, ako s bunkami KB-31 a KB-8511. Zlúčeniny všeobecného vzorca I výhodne vykazujú pri týchto testoch IC5q v rozsahu 0,1 x x 10-9 v rozsahu 0,1 x 109 až 500 x 10-9, výhodne 0,1 až 60 nM.
Na základe týchto vlastností sú zlúčeniny všeobecného vzorca I (to znamená aj ich soli) vhodné na liečenie proliferatívnych ochorení, ako sú najmä nádorové ochorenia, vrátane tiež metastáz, ak sú prítomné, napríklad pevných nádorov, ako je nádor plúc, nádor prsníkov, rakovina konečníka a tračníka, melanóm, nádor mozgu, nádor slinivky brušnej, nádor hlavy a krku, rakovina močového mechúra, neuroblastóm, nádor hltana, alebo tiež proliferatívnych ochorení krviniek, ako je leukémia; alebo ďalej na liečenie iných ochorení, ktoré reagujú na liečbu inhibítormi depolymerácie mikrotubulov, ako je psoriáza. Zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo ich soli sú tiež vhodné na potiahnutie medicinálnych implantátov (využiteľných pri profylaxii restenózy) (pozri Medzinárodná patentová prihláška WO 99/16416, priorita 29. septembra 1997).
Aktivita zlúčenín podľa predloženého vynálezu in vivo sa môže demonštrovať na nasledujúcom živočíšnom modeli:
Samice alebo samci nahých myší BALB/c nu/nu sa držia za sterilných podmienok (10 až 12 myší na klietku typu III) s voľným prístupom ku kŕmení a vode. Myši vážia v čase implantácie nádoru 20 až 25 g. Nádory sa myšiam zavedú podkožnou injekciou buniek (minimálne 2 x 106 buniek v 100 μΐ PBS alebo média) (4-8 ·· ···· • · • ··· myši na bunkovú líniu). Vznikajúce nádory sa pred začiatkom liečby sériovo pasážujú minimálne trikrát po sebe. Fragmenty nádorov (asi 25 mg) sa s.c. implantujú do ľavej slabiny živočíchov trokarovou ihlou s veľkosťou 13, pričom je zviera pod anestéziou (Abbot, Švajčiarsko).
Rast nádoru a telesná hmotnosť sa sledujú raz alebo dvakrát týždenne. Všetky liečivá sa podávajú vnútrožilovo (i.v.) a liečenie sa zaháji vtedy, keď je stredný objem nádoru 100 až 250 mm3, v závislosti od typu nádoru. Objemy nádoru sa určia podľa vzorca (L x D x π)/6 (pozri Cancer Chemother. Pharmacol. 24: 148-154, [1989]). Pri liečení epothilonmi všeobecného vzorca
I sa mení dávka a frekvencia podávania. Porovnávacie činidlá sa podávajú podľa vopred určeného optimálneho režimu liečby. Okrem prebiehajúcich zmien v objeme nádorov v priebehu liečby sa protinádorová aktivita vyjadrí ako T/C % (stredný rast objemu nádoru liečených zvierat delené stredným rastom nádoru kontrolných zvierat krát 100). Regresia nádoru (%) znamená najmenší stredný objem nádoru v porovnaní so stredným objemom nádoru na začiatku liečby podľa vzorca Regresia (%) = (1 Vkomec/Vštart) x 100 (VkOmec = konečný stredný objem nádoru, Vätart = stredný objem nádoru na začiatku liečby.
Na tomto modeli sa môže testovať inhibičný efekt zlúčeniny podľa predloženého vynálezu na rast napríklad nádorov odvodených od nasledujúcich bunkových línií:
Ľudský kolorektálny adenokarcinómový bunkový kmeň HCT-15 (ATCC CCL 225) je od Američan Type Culture Collection (Rockville, MD, USA), a bunky sa kultivujú in vitro podľa odporúčania výrobcu. HCT-15 je bunková línia podobná epitelu (Cancer Res. 39: 1020-25 [1979]), ktorá je odolná proti mnohým liekom, pretože exprimuje P-glykoproteín (P-gp, gpl70, MDR-1; Anticancer Res. 11: 1309-12 (1991); J. Biol. Chem. 264: 18031-40 [1989]; Int. J.Cancer 1991; 49: 696-703 [1991]) a tiež vďaka rezistenčnému mechanizmu závislému od glutatiónu (Int. J.Cancer 1991; 49:
·· · ···· ·· * · ·· ··· ···· • · · ···· » · · ···· ··· ···· · • · ·· ···· ···· · ·· ··· ·· ♦ ··
688-95 [1991]). Bunková línia Colo 205 je tiež bunková línia ľudského karcinómu hrubého čreva (ATCC No. CCL 222; pozri tiež Cancer Res. 38, 1345-55 [1978], ktorá sa izolovala z ascitickej kvapaliny tekutiny pacienta a vykazuje morfológiu podobnú epitelu a všeobecne sa považuje za citlivú na lieky. Ľudská bunková línia rakoviny prostaty nezávislá od androgénu sa použije na stanovenie subkutánneho a ortotopického modelu u myší. Ľudský metastatický karcinóm prostaty PC-3M sa získa od Dr. I.J. Fidler (MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, USA) a kultivuje sa v médiu Ham F12K doplnenom 7% (objemovo) FBS. Bunková línia PC-3M je výsledkom izolácie z metastáz pečene produkovaných nahou myšou po intrasplenickej injekcii buniek PC-3 [ATCC CRL 1435; Američan Type Culture Collection (Rockville, MD, USA)], a môžu rásť v Eaglovom MEM doplnenom 10% fetálnym teľacím sérom, pyruvátom sodným, neesenciálnymi aminokyselinami, L-glutamínom, dvojnásobným vitamínovým roztokom (Gibco Laboratories, Long Island, N.Y.) a penicilínom-streptomycínom (Flow Laboratories, Rockville, Md.). Bunková línia PC-3M je necitlivá na hormóny (to znamená, že rastie v neprítomnosti androgénov). Bunková línia PC-3 je androgén receptor negatívny, čo je možné predpokladať odvodením PC-3M bunkovej línie. Bunková línia PC-3 je dostupná od ATCC (ATCC CRL 1435) a zodpovedá čistému adenokarcinómu prostaty IV izolovanému zo šesťdesiatdvaročného muža, belocha; bunky vykazujú malú kyslú fosfatázovú a testosterón 5-a-reduktázovú aktivitu. Bunky sú takmer triploid s modálnym počtom 62 chromozómov. Pomocou analýzy Q-pásu nie je možné detegovať žiadne normálne Y chromozómy. Ľudský adenokarcinóm pľúc A549 (ATCC CCL 185; izolovaný ako explantátová kultúra z tkaniva karcinómu pľúc od päťdesiatosemročného muža, belocha); má epiteliálnu morfológiu a môže syntetizovať lecitín s vysokým percentom nenasýtených mastných kyselín s použitím cytidín difosfocholínovej cesty; vo všetkých ir.etafázach sa našiel subtelocentrický markerový chromozóm obsahujúci chromozóm 6 a dlhé ramienko chromozómu 1. Ľudský karcinóm prsníka ZR-75-1 (ATCC CRL 1500; izolovaný z malígnej ascitickej efúzie šesťdesiattriročnej ženy, belošky s infiltru19 ·· · ·· ···· ·· · • · · ··· ···· • · · · · ··· · · · • ···· ··· ···· · • · · · ···· ···· · ·· ··· ·· ··· júcim duktálnym karcinómom); je mamárneho epiteliálneho pôvodu; bunky majú receptory estrogénu a ďalších steroidných hormónov a majú hypertriploidný počet chromozómov. Ľudská epidermálna (ústa) rakovinová bunková línia KB-8511 (P-gp nadmerne exprimujúca bunková línia odvodená od epidermoidného (ústa) KB-31 rakovinového bunkového kmeňa) sa získa od Dr. R.M.Baker, Roswell Park Memoriál Inštitúte (Buffalo, N.Y., USA) (opis pozri Akiyama a kol., Somat. Celí. Mol. Genetics 11, 117-126 (1985) a Fojo A., a kol., Cancer Res. 45, 3002-3007 (1985)) a kultivuje sa tak, ako je opísané skôr (Meyer, T., a kol., Int. J. Cancer 43, 851-856 (1989)). KB-8511 bunky, ako bunky KB-31, sú odvodené od bunkovej línie KB (ATCC) a sú to ľudské epidermálne rakovinové bunky; bunky KB-31 sa môžu kultivovať v monovrstve s použitím Eaglovho média modifikovaného Dulbecco (D-MEM) s 10% fetálnym teľacím sérom (M.A. Bioproducts), L-glutamínom (Flow), penicilínom (50 jednotiek/ml) a streptomycínom (50 mg/ml (Flow); potom sa kultivujú zdvojnásobujúci čas 22 hodín a ich relatívna poťahovacia účinnosť je asi 60%. KB-8511 je bunková línia odvodená od bunkovej línie KB-31 pomocou cyklov spracovania colchicínom; vykazuje asi štyridsaťnásobok relatívnej rezistencie proti colchicínu v porovnaní s bunkami KB-31; môže sa kultivovať za rovnakých podmienok, ako KB-31.
Rozpustnosť
Rozpustnosť vo vode sa určí nasledujúcim spôsobom: zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej soľ sa mieša vo vode pri teplote miestnosti pokiaľ sa už žiadna ďalšia zlúčenina nerozpúšťa (asi 1 hodinu). Zistená rozpustnosť je výhodne 0,01 až 1% hmotnostné.
V skupinách výhodných zlúčenín všeobecného vzorca I uvedených ďalej sa môžu vhodne použiť definície substituentov zo všeobecných definícií uvedených skôr, napríklad s cieľom nahradiť všeobecnejšie definície presnejšími definíciami alebo najmä definíciami označenými ako výhodné.
Predložený vynález sa výhodne týka zlúčenín všeobecného vzorca I, kde ·· · ·· ···· • · • ··· ···
R2 je neprítomná alebo je atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 je neprítomná, potom b a c sú neprítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
R3 je skupina vybraná zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2í; skupina -CH2CI; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je skupina vybraná z nasledujúcich štruktúr:
kde R a R' sú nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina;
alebo ich solí, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
·· · ·· ···· • · • ···
Predložený vynález sa výhodne týka tiež zlúčenín všeobecného vzorca I, kde
R2 je neprítomná alebo je atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 je neprítomná, potom b a c sú neprítomné a a je dvojitá vazba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c sú neprítomné;
R3 je skupina vybraná zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka; nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S (alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je vybraná z nasledujúcich štruktúr:
N
N
·· ···· kde R' je hydroxymetylová skupina alebo fluórmetylová skupina a R je atóm vodíka alebo metylová skupina, alebo ich soli, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
Predložený vynález sa výhodne týka tiež zlúčenín všeobecného vzorca I, kde
R2 je neprítomná alebo je to atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 je neprítomná, potom b a c sú neprítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
R3 je skupina vybraná zo skupiny, ktorú tvorí nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je vybraná z nasledujúcich štruktúr:
·· ···· • · • ···
alebo ich soli, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
Predložený vynález sa výhodne týka tiež zlúčenín všeobecného vzorca I, kde
R2 je neprítomná alebo je to atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 je neprítomná, potom b a c sú neprítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c sú neprítomné;
R3 je vybraná zo skupiny, ktorú tvorí nižšia alkylová skupina iná, ako metylová skupina, najmä etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2CI; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm ·· · ······ ·· • · · ··· ·· • · · · ···· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · a • ·· · · ·· ··· ·· ··· vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka;
R1 je skupina vzorca
alebo ich soli, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soli.
Predložený vzorca I, kde vynález sa výhodne týka tiež zlúčenín všeobecného
R2 je atóm kyslíka, b a c sú obidve jednoduchá väzba, jednoduchá väzba
R3 je vybraná zo skupiny, ktorú najmä metylová skupina, etylová izopropylová skupina, n-butylová terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, skupina -CH=CH2; -C=CH; skupina -CH2F;
tvorí nižšia alkylová skupina, n-propylová skupina, izobutylová n-hexylová skupina -CH2C1;
skupina, skupina, skupina, skupina;
skupina
-CH2-OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-C-CH3; a skupina obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka;
R1 je vybraná z nasledujúcich štruktúr:
alebo ich soli, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
Predložený vynález sa výhodne týka tiež zlúčenín všeobecného ·· • · • · · · ·
• · · « • ·· ··· ·· vzorca I, kde
R2 je neprítomná alebo je to atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 je neprítomná, potom b a c sú neprítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c sú neprítomné;
R3 je vybraná zo skupiny, ktorú tvorí nižšia alkylová skupina iná, ako metylová skupina, najmä etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina alebo n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; -OCH; skupina -CH2F; skupina -CH2CI; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodika; a
R1 je skupina vzorca
OH alebo ich soli, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
Výhodnejšie sa predložený vynález týka zlúčenín všeobecného vzorca la ·· ···· • ·
kde, nezávisle od seba, skupiny R sú atóm vodíka alebo metylová skupina alebo ich soli.
Presnejšie sa predložený vynález týka tiež zlúčenín všeobecného vzorca lb,
kde sú nezávisle od seba skupiny R atóm vodíka alebo metylová skupina alebo ich soli.
Predložený vynález všeobecného vzorca lc sa najvýhodnejšie týka tiež zlúčenín
-X? L—R*
(lc)
O ÓH 0
kde R* je metylová skupina.
·· • ·· ··· · e·
• · • • · • • · • ·
• • · • · ··· • ·
• ···· • · · • · • ·
•
• ·· · • ·· • ·· • · • ·
Predložený vynález sa najvýhodnejšie týka tiež zlúčenín
všeobecného vzorca Id
ηο^Λ,,. / -S ^A N
1 0 (Id)
0 ÓH 0
kde A je etylová skupina, fluórmetylová skupina, metoxyskupina, metyltioskupina alebo etenylová skupina (skupina -CH=CH2) a
D je atóm vodíka, atóm fluóru, hydroxylová skupina alebo metylová skupina, najmä atóm vodíka.
Predložený vynález sa najvýhodnejšie týka tiež zlúčenín všeobecného vzorca Ie
kde A je etylová skupina, fluórmetylová skupina, metoxyskupina, metyltioskupina alebo etenylová skupina (skupina -CH=CH2) a
D je atóm vodíka, atóm fluóru, hydroxylová skupina alebo metylová skupina.
Predložený vynález sa najvýhodnejšie týka zlúčenín všeobecného vzorca I uvedených v príkladoch alebo ich farmaceutický prijateľných solí, ak je prítomná jedna alebo viac skupín schopných tvoriť soli.
28 ·· · • · · • · · • ···· · • · • · • · • · ···· ·· • · ··· · • · ·
···· · ·· ··· ··
Najvýhodnejšie sa predložený vynález týka zlúčenín vybraných
zo skupiny, ktorú tvorí zlúčenina D (príklad 1) , zlúčenina
z príkladu 2A, zlúčenina z príkladu 2C , zlúčenina 18b (pozri
príklad 4), zlúčenina 19b (pozri príklad 4), zlúčenina 46 (pozri
príklad 4) , zlúčenina 50 (pozri príklad 4), zlúčenina 52 (pozri
príklad 4) , zlúčenina 53 (pozri príklad 4), zlúčenina 58 (pozri
príklad 4) , zlúčenina 59 (pozri príklad 4), zlúčenina 66 (pozri
príklad 4), zlúčenina 67 (pozri príklad ‘ i)r a zlúčenina 68 (poz-
ri príklad 4) , alebo ich farmaceutický prijateľné soli, ak je
viac skupín schopných tvoriť soľ.
prítomná jedna alebo • ·
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu syntetizovať s použitím spôsobov, ktoré sú analogické známym spôsobom, výhodne pomocou spôsobu, ktorý sa vyznačuje tým, že sa
a) reaguje jodid všeobecného vzorca II
(II) kde R2, R3, R4, R5, a, bača vlnitá väzba majú významy definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, so zlúčeninou všeobecného vzorca III
R^SnfRH (III) kde R1 má význam definovaný pre všeobecný vzorec I a R je nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina alebo n-butylová skupina alebo
b) reaguje zlúčenina cínu všeobecného vzorca IV,
·· é • · ···· ·· ·
• · • • · • • · • ·
• • · • f ··· • 1 •
• ···· • · i • · 1 •
• • • · • • · •
«··· • ·· ··· 99 • · ·
(IV) kde R2, R3, R4, R5, a, bača vlnitá väzba majú významy definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, s jodidom všeobecného vzorca V
Rx-I (V) kde R1 má význam definovaný pre všeobecný vzorec I;
a, ak je to potrebné, vznikajúca zlúčenina všeobecného vzorca I sa prevedie na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I, vznikajúca voľná zlúčenina všeobecného vzorca I sa prevedie na soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I a/alebo vznikajúca soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I sa prevedie na voľnú zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo na inú soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I a/alebo sa stereoizomérna zmes zlúčenín všeobecného vzorca I rozštiepi na zodpovedajúce izoméry.
Podrobný opis výhodných podmienok spôsobu
Vo všetkých východiskových látkach sa, ak je to potrebné, môžu funkčné skupiny, ktoré sa nezúčastňujú reakcie, chrániť ochrannými skupinami, najmä štandardnými ochrannými skupinami. Ochranné skupiny, spôsob ich zavádzania a ich odštiepenie sú odborníkom pracujúcim v tejto oblasti známe a sú opísané naprílad v odkazoch uvedených skôr.
Reakcia a): Reakcia ((výhodne upravená) Stilleho kondenzácia) sa výhodne uskutočňuje za štandardných podmienok; výhodnejšie sa reakcia uskutočňuje (i) vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad v toluéne, pri zvýšenej ·· · ·· ···· ·· • · · ··· ··· • · · · · ··· · · • ···· · · · · · · · ···· · ·· ··· ·· · teplote, najmä 90 až 100°C, výhodne s prebytkom zlúčeniny cínu všeobecného vzorca III, výhodne v molárnom prebytku 1,1 až 3, napríklad 1,5 až 2; a v prítomnosti katalytického množstva, výhodne 1 až 30%, výhodnejšie 5 až 10%, Pd(PPh3)4; alebo (ii) vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad dimetylformamide (DMF), pri teplote 10 až 40°C, najmä pri 25°C, výhodne s prebytkom zlúčeniny cír.u všeobecného vzorca III, výhodne v molárnom prebytku
1,1 až 3, napríklad 1,5 až 2,3; v prítomnosti katalytického množstva, výhodne 10 až 50%, najmä 20 až 30%, Pd(MeCN)2CI2 ·
Alternatívne podmienky tejto kondenzácie zahŕňajú tiež použitie nasledujúcich činidiel a/alebo podmienok:
(iii) 2-tiofénkarboxylát meďný, N-metyl-2-pyrolidín.
(iv) PdC12(MeCN)2 (kat.), dimetylformamid, 50 až 150°C (s alebo bez pridania terciárnej zásady).
(v) Pd (PPh3) 4/CuI (kat.), dimetylformamid, 50 až 150°C (s alebo bez pridania terciárnej zásady).
Reakcia b) : Reakcia (zlepšená Stilleho kondenzácia) sa výhodne uskutočňuje za štandardných podmienok; výhodnejšie sa reakcia uskutočňuje vo vhodnom rozpúšťadle, najmä v dimetylformamide, pri teplote 50 až 100°C, výhodne 80 až 85°C, výhodne s prebytkom j odídu všeobecného vzorca V, v prítomnosti katalytického množstva AsPh3, výhodne 0,4 ekvivalentov, Cul, výhodne asi 0,1 ekvivalentu a PdCl2 (MeCN) 2/ výhodne 0,2 ekvivalentu.
Zvlášť výhodne sa reakcia uskutočňuje za podmienok uvedených v príkladoch.
Konverzia zlúčenín/solí
Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu previesť na iné zlúčeniny všeobecného vzorca I pomocou štandardných alebo nových postupov.
Napríklad zlúčenina všeobecného vzorca I, kde R2 nie je pri31
9
9 • 9 9
9999 ·99· • · • ··· • 99 9
99 • t999
99
99
99999 • 9 99 •9
9· tomná, b a c nie sú prítomné a a je dvojitá väzba a ostatné skupiny sú také, ako je opísané pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, sa môže previesť na zodpovedajúci epoxid, kde R2 je atóm kyslíka a b a c sú prítomné a a je jednoduchá väzba. Výhodne sa epoxidácia uskutočňuje v prítomnosti (+)-dietyl-D-tartrátu ((+)-DET) (výhodne asi 0,5 ekvivalentu), Ti(i-PrO)4 (výhodne asi 0,5 ekvivalentov, terc-butylhydroperoxidu (výhodne asi 2,2 ekvivalentu) a molekulových sít, najmä 4A molekulových sít, vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad dichlórmetáne a prípadne alkáne, ako je dekán, pri nízkej teplote, výhodne -78 až 0°C, najmä -40°C;
alebo v prítomnosti peroxidu vodíka (výhodne 30 ekvivalentov), acetonitrilu (výhodne asi 60 ekvivalentov), zásady, najmä hydrogenuhličitanu draselného (výhodne asi 10· ekvivalentov) vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad alkohole, výhodne metanole, výhodne pri teplote 10 až 40°C, napríklad 25°C.
Zlúčenina všeobecného vzorca I, kde R3 je hydroxymetylová skupina, sa môže previesť na zlúčeninu všeobecného vzorca I, kde R3 je fluórmetylová skupina, napríklad reakciou s DAST (výhodne 1,05 až 1,4 ekvivalentu) vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad dichlórmetáne, pri nízkej teplote, výhodne -95 až 0°C, najmä -78°C. DAST je dietylaminosulfurtrifluorid.
Zlúčenina všeobecného vzorca I, kde R3 je jódmetylová skupina, sa môže previesť na zlúčeninu všeobecného vzorca I, kde R3 je metylová skupina, napríklad pomocou reakcie s kyanoborohydridom (výhodne 10 ekvivalentov) v HMPA (hexametylfosfortriamid) pri zvýšenej teplote, napríklad 40 až 45°C.
Ďalšie konverzie sa môžu uskutočniť pomocou známych postupov, ktoré sú opísané napríklad v Medzinárodnej patentovej prihláške WO 98/25929, ktorá je tu uvedená formou odkazu.
Soli zlúčeniny všeobecného vzorca I obsahujúce skupinu schopnú tvoriť sol sa môžu pripraviť známymi postupmi. Kyslé adičné soli zlúčenín všeobecného vzorca I sa teda môžu pripraviť ·· · ·· ···· ·· • · · · · · · · · • · · t ···· I · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· · reakciou s kyselinou alebo vhodným ionomeničovým činidlom.
Soli sa môžu obvykle previesť na voľné zlúčeniny napríklad reakciou s vhodným zásaditým činidlom, napríklad s uhličitanom alkalického kovu, hydrogenuhličitanom alkalického kovu, hydroxidom alkalického kovu, typicky s uhličitanom draselným alebo hydroxidom sodným.
Vznikajúca voľná zlúčenina sa môže potom, ak je to potrebné, previesť na iné soli tak, ako je opísané pri tvorbe solí z voľných zlúčenín.
Stereoizomérne zmesi, napríklad zmesi diastereomérov, sa môžu rozdeliť na zodpovedajúce izoméry známym spôsobom, pomocou vhodnej separačnej metódy. Diastereomérne zmesi sa môžu napríklad rozdeliť na jednotlivé diastereoméry pomocou frakčnej kryštalizácie, chromatografie, delenia rozpúšťadiel a pomocou podobných spôsobov. Delenie sa môže uskutočňovať buď na úrovni východiskovej zlúčeniny alebo samotnej zlúčeniny všeobecného vzorca I. Enantioméry sa môžu rozdeliť cez vznik diastereomérnych solí, napríklad prípravou solí s enantiomérne čistou chirálnou zlúčeninou, alebo pomocou chromatografie, napríklad HPLC, s použitím chromatografických substrátov s chirálnymi ligandami.
Východiskové látky
Východiskové látky a medziprodukty sú odborníkom v tejto oblasti známe, komerčne dostupné a/alebo sa pripravia podľa postupov, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti známe alebo pomocou analogických postupov.
Zlúčeniny všeobecného vzorca II a všeobecného vzorca III sa môžu napríklad syntetizovať podľa postupov opísaných v Medzinárodnej patentovej prihláške WO 98/25929, ktorá je tu uvedená ako odkaz, alebo analogicky spôsobom uvedeným v príkladoch.
Zlúčeniny všeobecného vzorca IV je možné pripraviť reakciou ·· · ·· ···· ·· · • · · ··· ···· • · · · · ··· · · ·
ΌΟ · ···· «·· ···· · ········ ···· · ·· ··· ·· ··· príslušných zlúčenín všeobecného vzorca II, napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca II s (R)6Sn2, kde R je nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina alebo n-butylová skupina, v prítomnosti vhodnej dusíkatej zásady, napríklad Hunigovej zásady, a v prítomnosti katalytického množstva (výhodne 0,1 ekvivalentu) Pd(PPh3)4 vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad v toluéne, pri zvýšenej teplote, napríklad 30 až 90°C, najmä 80 až 85°C.
Jodidy všeobecného vzorca V sú známe a môžu sa získať podľa postupov opísaných v literatúre alebo sú komerčne dostupné. Napríklad 2-jód-6-metylpyridín sa môže získať podlá postupu opísaného v Klei, E., Teuben, J.H., J. Organomet. Chem. 1981, 214, 53-64; 2-jód-5-metylpyridín podlá postupu opísaného v Talik, T., Talik, Z., Rozc. Chem., 1968, 42, 2061-76; a 2-jód-4-metylpyridín podľa postupu opísaného v Talik, T., Talik, Z., Rozc. Chem., 1968, 42, 2061-76, Yamamoto, Y., Yanagi, A., Heterocycles 1981, 16, 1161-4 alebo Katritzki, A.R.,; Eweiss, N.F., Nie, P.-L.,
JCS, Perkin Trans I 1979, 433-5. Zodpovedajúce zlúčeniny všeobecného vzorca V substituované hydroxymetylovou skupinou sú dostupné napríklad oxidáciou metylovej skupiny jodidov uvedených skôr pomocou oxidu seleničitého a následnou redukciou napríklad NaBH4 alebo DIBALH aldehydu alebo oxidáciou metylovej skupiny pričom vzniká kyselina (napríklad manganistanom draselným) a následnou redukciou esteru, napríklad DIBALom.
Výhodne sa môžu nové alebo tiež známe východiskové látky a medziprodukty pripraviť podľa spôsobov (alebo analogicky), ako je opísané v príkladoch, keď sa množstvá, teploty a podobne pri príslušných reakciách môžu upraviť napríklad v rozsahu ± 99%, výhodne ± 25% a môžu sa použiť ďalšie vhodné rozpúšťadlá a činidlá .
Predložený vynález sa týka tiež všetkých nových medziproduktov, najmä tých, ktoré sú uvedené v príkladoch.
Predložený vynález sa týka tiež spôsobu syntézy zlúčeniny
·· • • · ···· ·· ·
• • • • • • • · • ·
• • e • • ··· • · •
• ···· • · • • · • · •
• • • • • • · •
··· · • ·· ··· ·· • · ·
všeobecného vzorca VI
(VI) ktorý sa vyznačuje tým, že sa zlúčenina všeobecného vzorca VII
(VII) kde R3 je nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina alebo n-butylová skupina, kondenzuje s jodidom všeobecného vzorca VIII
(VIII) (komerčne dostupný, napríklad od TCI, USA), najmä za podmienok Stilleho kondenzácie a za analogických/modifikovaných podmienok; najmä vo vhodnom rozpúšťadle, najmä v dialkylalkanoylamide obsahujúcom nižšie alkylové skupiny a nižšiu alkanoylovú skupinu, výhodne dimetylformamide alebo dimetylacetamide; zlúčenina všeobecného vzorca VIII sa výhodne použije v miernom molárnom prebytku nad zlúčeninou všeobecného vzorca VII, napríklad v 1,1 až 5-násobnom, najmä 1,5 až 2,5 násobnom prebytku, napríklad v 2,1 násobnom prebytku; v prítomnosti katalytického množstva AsPh3 (najmä 0,4 ekvivalentu), PdCl2(MeCN)2 (najmä asi 0,2 ekvivalentu) a Cul (najmä asi 0,1 ekvivalentu); za zvýšenej teploty, napríklad v rozsahu 50 až 90°C, výhodne 80 až 85°C. Ďalšie reakčné podmienky sú uvedené v podrobnom opise pri variante spôsobu (a) ·· · • · ·· • · · • · · · • · · ·· ··· ·· e • · · • · · • ···· • · ···· · ·· ···· • ·· • ···· • · ·· • ·· ·· ··· (Reakcia a)) pri syntéze zlúčeniny všeobecného vzorca
I.
Reakčné podmienky sa môžu optimalizovať pre príslušné substráty spôsobom, ktorý je odborníkom pracujúcim v tejto oblasti známy.
Predložený vynález sa týka tiež obráteného postupu, keď sa namiesto zlúčeniny všeobecného vzorca VII použije analóg, kde namiesto skupiny Sn(R)3 je prítomný jód a namiesto zlúčeniny všeobecného vzorca VIII sa použije analóg, ktorý má skupinu Sn(R)3 namiesto jódu. Reakčné podmienky sú potom analogické podmienkam uvedeným pri spôsobe a) skôr pre syntézu zlúčeniny všeobecného vzorca I.
Predložený vynález sa týka tiež spôsobov syntézy epothilonov E a najmä F, všeobecného vzorca IX kde Q je
atóm vodíka (epothilon E) alebo metylová skupina (epothilon F), ktorý sa vyznačuje tým, že sa zlúčenina všeobecného vzorca X
epoxiduje v prítomnosti peroxidu na zlúčeninu všeobecného vzorca IX, výhodne s použitím štandardných reakčných podmienok pre epoxidáciu, výhodnejšie epoxidáciu v prítomnosti peroxidu vodí36
BB · BB ···· ·· • · · BBB ···
BBB B B BBB B B • BBBB B B B BBB B
B B B B BBB ···· B BB BBB BB B ka, zásady, najmä hydrogénuhličitanu draselného, acetonitrilu a vhodného rozpúšťadla, najmä alkoholu, napríklad metanolu, pri teplote výhodne v rozsahu 0 až 50°C, najmä 25°C (vznik in situ ak ide o metylperoxykarboxímovú kyselinu);
alebo v prítomnosti (+)-dietyl-D-tartrátu a izopropoxidu titaničitého, potom terc-butylhydroperoxidu v príslušnom rozpúšťadle, napríklad dichlórmetáne a prípadne dekáne pri nízkej teplote, napríklad -78°C až 0, najmä -40°C.
Tieto reakcie majú okrem iného tú výhodu, že poskytujú výsledné produkty vo vysokom výťažku a s dobrou izomérnou čistotou.
Farmaceutické prípravky
Predložený vynález sa týka tiež použitia zlúčeniny všeobecného vzorca I na výrobu farmaceutickej kompozície na použitie proti proliferatívnemu ochoreniu, ktoré je definované skôr; alebo farmaceutickej kompozície na liečenie uvedeného proliferatívneho ochorenia obsahujúcej zlúčeninu podlá predloženého vynálezu a farmaceutický prijatelný nosič.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa ďalej označujú ako aktívne zložky alebo látky.
Predložený vynález sa týka tiež farmaceutických kompozícií obsahujúcich aktívnu zložku, ktorá je definovaná skôr, na liečenie proliferatívneho ochorenia, ktoré je najmä definované skôr, a prípravy farmaceutických kompozícií na túto liečbu.
Predložený vynález sa týka tiež farmaceutickej kompozície, ktorá je vhodná na podávanie teplokrvným živočíchom, najmä človeku, na liečenie proliferativnych ochorení, ktoré sú definované skôr, obsahujúcej také množstvo aktívnej látky, ktoré je účinné na liečenie uvedeného proliferatívneho ochorenia, spolu s najmenej jedným farmaceutický prijateľným nosičom. Farmaceutické kompozície podlá predloženého vynálezu sú vhodné na enterálne podá37
·· • • e ···· ·· •
9 · • • • • • • • *
• • · • · ··· • • •
• ···· • · • • · • • •
• • • • • • • •
···· • ·· ··· ·· • · ·
vanie, ako je nazálne, rektálne alebo orálne podávanie alebo výhodne parenterálne podávanie, ako je medzisvalové alebo vnútrožilové podávanie teplokrvným živočíchom (človeku alebo živočíchovi) , a obsahujú účinné množstvo farmakologicky aktívnej zložky samotnej alebo v kombinácii s významným množstvom farmaceutický prijateľného nosiča. Dávka aktívnej zložky závisí od druhu teplokrvného živočícha, telesnej hmotnosti, veku a individuálnom stave, individuálnych farmakokinetických vlastnostiach, ochorení, ktoré sa má liečiť a spôsobe podávania; dávkou je výhodne jedna z výhodných dávok definovaných ďalej a ak sa uvažuje pediatrické použitie, táto dávka sa upraví.
Farmaceutické kompozície obsahujú 0,00002 až 95%, najmä (napríklad v prípade infúznych roztokov, ktoré sú pripravené na použitie) 0,0001 až 0,02% alebo (v prípade infúznych koncentrátov) asi 0,1 až 95%, výhodne 20 až 90%, aktívnej zložky (v každom prípade hmotnostné). Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu môžu byť napríklad v jednotkových dávkovacích formách, ako sú formy ampúl, fioliek, čapíkov, dražé, tabliet alebo toboliek.
Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu sa pripravia pomocou spôsobov, ktoré sú odborníkov v tejto oblasti známe, napríklad pomocou obvyklého rozpúšťania, lyofilizácie, miešania, granulácie alebo spôsobov poťahovania.
Výhodne sa používajú roztoky a tiež suspenzie aktívnej zložky a najmä izotonické vodné roztoky alebo suspenzie. Ak je to možné, napríklad v prípade lyofilizovaných kompozícií, ktoré obsahujú aktívnu zložku samotnú alebo spolu s farmaceutický prijateľným nosičom, napríklad manitolom, pripravia sa tieto roztoky pred použitím. Farmaceutické kompozície sa môžu sterilizovať a/alebo môžu obsahovať prísady, napríklad konzervačné látky, stabilizátory, zvlhčujúce činidlá a/alebo emulgačné činidlá, solubulizéry, soli regulujúce osmotický tlak a/alebo pufry a pripravia sa známymi postupmi, napríklad pomocou bežného roz38 ·· · • · · • · · • ···· • · ···· · ·· ···· • · • ··· ♦ · · · • · · ·· ··· ·· · • · ·· • e· • · ·· • ·· ····· púšťania alebo pomocou lyofilizačných postupov. Uvedené roztoky môžu obsahovať látky regulujúce viskozitu, ako je sodná sol karboxymetylcelulózy, karboxymetylcelulóza, dextrán, polyvinylpyrolidón alebo želatína.
Suspenzie v oleji obsahujú ako olejovú zložku rastlinné, syntetické alebo polosyntetické oleje, ktoré sa bežne používajú na injekčné účely. Ako príklady je možné uviesť najmä kvapalné estery mastných kyselín, ktoré obsahujú ako kyselinovú zložku mastnú kyselinu s dlhým reťazcom obsahujúcim 8 až 22, najmä 12 až 22 atómov uhlíka, napríklad kyselinu laurovú, kyselinu tridecylovú, kyselinu myristovú, kyselinu pentadecylovú, kyselinu palmitovú, kyselinu margarovú, kyselinu stearovú, kyselinu arachidovú, kyselinu behénovú alebo zodpovedajúce nenasýtené kyseliny, napríklad kyselinu olejovú, kyselinu elaidovú, kyselinu erukovú, kyselinu brasidovú alebo kyselinu linolénovú, ak je to potrebné, spolu s antioxidantami, napríklad vitamínom E, betakaroténom alebo 3,5-diterc-butyl-4-hydroxytoluénom. Alkoholová zložka týchto esterov mastných kyselín obsahuje maximálne 6 atómov uhlíka a je to mono- alebo polyhydroxyalkohol, napríklad mono-, di- alebo trihydroxyalkohol, napríklad metanol, etanol, propanol, butanol alebo pentanol alebo ich izoméry, ale najmä glykol alebo glycerol.
Injekčné alebo infúzne kompozície sa pripravia bežným spôsobom za sterilných podmienok; to isté platí o zavádzaní kompozícií do ampúl alebo fioliek a uzatváraní nádob.
Výhodný je infúzny prostriedok obsahujúci aktívnu zložku a farmaceutický prijateľné organické rozpúšťadlo.
Farmaceutický prijateľné organické rozpúšťadlo používané v prostriedku podľa predloženého vynálezu sa môže vybrať zo všetkých organických rozpúšťadiel, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti známe. Výhodne je rozpúšťadlo vybrané z alkoholov, napríklad absolútny etanol alebo zmesi etanolu a vody, výhodnejšie 70% etanol, polyetylénglykol 300, polyetylénglykol 400, polypro39 ·· · ·· ···· ·· · • · · · · · ···· • · · · · ··· · e t • ···· · · · ···· · • · ···>·· ···· · ·· ··· ·· ··· pylénglykcl alebo N-metylpyrolidón, najvýhodnejšie polypropylénglykol alebo 70% etanol alebo polyetylénglykol 300.
Aktívna zložka môže byť výhodne v kompozícii prítomná v koncentrácii asi 0,01 až 100 mg/ml, výhodnejšie 0,1 až 100 mg/ml, ešte výhodnejšie 1 až 10 mg/ml (najmä v infúznych koncentrátoch) .
Aktívna zložka sa môže použiť ako čistá látka alebo ako zmes s inou aktívnou látkou. Keď sa aktívna látka použije v čistej forme, výhodne sa použije v koncentrácii 0,01 až 100, výhodnejšie 0,05 až 50, ešte výhodnejšie 1 až 10 mg/ml (toto číslo sa týka najmä infúzneho koncentrátu, ktorý sa pred použitím riedi, pozri ďalej).
Tieto prostriedky sa výhodne skladujú vo fiolkách alebo v ampuliach. Typicky sú fiolky alebo ampuly sklenené, napríklad z borokremičitého skla alebo zo skla obsahujúceho oxid vápenatý a hydroxid sodný. Fiolky alebo ampuly môžu mať akýkoľvek bežne používaný objem, výhodne sú dostatočne veľké na to, aby sa do nich vošlo 0,5 až 5 ml kompozície. Prostriedky sú stabilné počas skladovania 12 až 24 mesiacov pri teplote najmenej 2 až 8°C.
Prostriedky sa musia pred podávaním aktívnej látky pacientovi riediť vodným médiom vhodným na vnútrožilové podávanie.
Infúzny roztok musí mať výhodne rovnaký alebo v podstate rovnaký osmotický tlak, ako telesná tekutina. Vodné médium teda výhodne obsahuje izotonické činidlo, ktoré upravuje osmotický tlak infúzneho roztoku na rovnakú alebo v podstate rovnakú hodnotu, ako má telesná kvapalina.
Izotonické činidlo sa môže vybrať zo všetkých takých činidiel, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti známe, ako je napríklad manitol, dextróza, glukóza a chlorid sodný. Izotonickým činidlom je výhodne glukóza alebo chlorid sodný. Izotonické činidlo sa môže používať v množstve, ktoré upraví osmotický tlak ·· · ·· ···· ·· ··· · · · ·· • · · · · ··· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· infúzneho roztoku na rovnaký alebo v podstate rovnaký, ako má telesná kvapalina. Presné potrebné množstvá sa môžu určiť pomocou bežných pokusov a budú závisieť na zložení infúzneho roztoku a povahe izotonického činidla. Výber príslušného izotonického činidla sa uskutočňuje s ohľadom na vlastnosti aktívneho činidla .
Koncentrácia izotonického činidla vo vodnom médiu bude závisieť na povahe príslušného použitého izotonického činidla. Keď sa použije glukóza, výhodne sa použije koncentrácia 1 až 5% hmotn./objem, výhodnejšie 5% hmotn./objem. Ak je izotonickým činidlom chlorid sodný, výhodne sa použije množstvo až 1% hmotn./objem, najmä 0,9% hmotn./objem.
Infúzny prostriedok sa môže riediť vodným médiom. Množstvo vodného média použitého ako rozpúšťadlo sa vyberie podľa požadovanej koncentrácie aktívnej látky v infúznom roztoku. Infúzny roztok sa výhodne pripraví zmiešaním infúzneho koncentrátu z fiolky alebo ampuly so skôr uvedeným vodným médiom, pričom sa získa objem 20 ml až 200 ml, výhodne 50 ml až 100 ml.
Infúzne roztoky môžu obsahovať iné prísady bežne používané v prostriedkoch, ktoré sa majú podávať vnútrožilovo. Prísady zahŕňajú antioxidanty. Infúzne roztoky sa môžu pripraviť zmiešaním prostriedku z ampuly alebo fiolky s vodným médiom, napríklad 5% (hmotn./objem) roztokom WFI alebo najmä 0,9% roztokom chloridu sodného vo vhodnej nádobe, napríklad v infúznom vrecku alebo fľaške. Hneď ako sa infúzny roztok pripraví, výhodne sa ihneď alebo v krátkom čase (napríklad do 6 hodín) použije. Nádoby, v ktorých sa udržujú infúzne roztoky, sa môžu vybrať z bežných nádob, ktoré nereagujú s infúznym roztokom. Vhodné sú sklenené nádoby vyrobené z typov skla uvedených skôr, aj keď môže byť výhodné použiť plastové nádoby, napríklad plastové infúzne vrecká.
Predložený vynález sa týka tiež spôsobov liečenia teplokrvných živočíchov, najmä človeka, ktorý potrebuje takú liečbu, najmä liečenia proliferativnych ochorení, keď tento spôsob zahŕ41 ·· ···· • · • ··· • ···· • *· • k· ·· ···
• · · ňa podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli uvedenému teplokrvnému živočíchovi, najmä človeku, v množstve, ktoré je dostatočné na uvedenú liečbu, najmä účinné proti uvedenému proliferatívnemu ochoreniu.
Dávkovacie formy sa môžu vhodne podávať vnútrožilovo v dávkach 0,01 mg až 100 mg/m2 aktívnej látky, výhodne 0,1 až 20 mg/m2 aktívnej látky. Presná potrebná dávka a trvanie podávania bude závisieť na závažnosti ochorenia, stave pacienta a režime podávania. Dávka sa môže podávať denne alebo výhodne v intervaloch niekoľkých dní alebo týždňov, napríklad týždenne alebo každé tri týždne. Pretože sa dávka môže podávať vnútrožilovo, odporúčaná dávka a koncentrácia v krvi sa môže určiť presne na základe bežných in vivo a in vitro postupov.
Farmaceutické kompozície na orálne podávanie sa môžu získať zmiešaním aktívnej látky s pevnými nosičmi, ak je to potrebné, granuláciou vznikajúcej zmesi a spracovaním zmesi (ak je to potrebné, po pridaní vhodných prísad) do tabliet, jadier dražé alebo toboliek. Je možné ich tiež umiestniť do plastových nosičov, ktoré umožňujú, aby aktívna zložka difundovala alebo sa uvoľnila vo vopred určenom množstve.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu použiť samotné alebo v kombinácii s inými farmaceutický účinnými látkami, napríklad s inými chemoterapeuticky účinnými látkami, ako sú klasické cytostatiká. V prípade kombinácii s inou chemoterapeuticky účinnou látkou sa pripravia spôsobom opísaným skôr fixné kombinácie dvoch alebo viacerých zložiek alebo dvoch alebo viacerých nezávislých prostriedkov (napríklad v súprave obsahujúcej jednotlivé zložky) alebo sa iné chemoterapeutiká použijú v štandardných prostriedkoch, ktoré sú na trhu a sú odborníkom v tejto oblasti známe a zlúčenina podľa predloženého vynálezu a akékoľvek iné chemoterapeutikum sa podáva v intervaloch, ktoré umožňujú spoločný, adičný alebo výhodne synergický vplyv na liečenie nádoru.
Nasledujúce príklady sú určené na ilustráciu predloženého vynálezu a v žiadnom prípade neobmedzujú jeho rozsah.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
5-Metylpyridínový analóg D epothilonu B
Schéma 1B
C
K roztoku 20 mg (0,035 mmol) zlúčeniny B v 350 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa pridá 17 mg (0,077 mmol, 2,1 ekvivalentu) zlúčeniny C a potom 4 mg (0,4 ekvivalentu) AsPh3, 2 mg (0,2 ekvivalentu) PdC12(MeCN)2 a 1 mg (0,1 ekvivalentu) jodidu meďného a získaná suspenzia sa 25 minút mieša v olejovom kúpeli pri teplote 80-85°C. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a dimetylformamid sa oddestiluje. Zvyšok sa prevedie do etylacetátu, filtruje sa cez malé množstvo silikagélu a eluuje sa zmesou hexánu a etylacetátu 1/1 (objemovo). Roztok sa potom odparí vo vákuu a čistí sa pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (hexán/etylacetát 1/2) a získa sa zlúčenina D: MS (elektrónsprej): vypočítané (M+H)+ = 502, nájdené: 502. 1H-NMR (600 MHz, deuterochloroform): 8,37 (s,
1H, H pyridínu); 7,50 (d, ·· ···· • · • ···
J = 7,5 Hz, 1H, H pyridínu); 7,19 (d, J = 7,5 Hz, 1H, H pyridínu); 6,59 (s, 1H, =CH pyridínu).
Východiskové látky:
Schéma IA:
7002 B
K roztoku 55 mg (0,1 mmol) zlúčeniny 7002 (pozri schéma 11 ďalej) v 1 ml (0,1 M) toluénu) sa pridajú 4 μΐ (0,2 ekvivalentu) Híinigovej zásady a 12 mg (0,1 ekvivalentu) Pd(PPh3)4 a 91 μΐ (5 ekvivalentov) (Meg)Sn2. Tento roztok sa 15 minút zohrieva na teplotu 80-85°C a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Žltý roztok sa potom filtruje cez malý stĺpec silikagélu a eluuje sa zmesou hexánu a etylacetátu (1/1, objemovo). Roztok sa potom odparí vo vákuu a zvyšok sa čistí pomocou velmi rýchlej chromatografie (hexán/dietyléter 1/1 až hexán/etylacetát 1/1) a získa sa 20,2 mg (34,4%) zlúčeniny B vo forme voskovitej pevnej látky. Údaje o látke B: HRMS (FAB Cs) : očakávané: M+Cs = 703/705/707, 1276, nájdené: 703/705/707,1402. 1H NMR (600 MHz, deuterochloroform): δ 5,88 (t, JH-sn = 40,6 Hz, 1H, =CH-SnMe3) a 0,18 (t, JH-sn = = 40,6 Hz, 9H, SnMe3) .
Príklad 2
Analogickým spôsobom, ako v príklade 1 sa pripravia nasledujúce zlúčeniny:
·· ···· • · • ···
Zlúčenina R1 Fyzikálne údaje Východisková látka
Príklad 2A) Výťažok=40%;MS(FAB)očakávané(M+ +Cs): 620,1988, nájdené:620,2010; B plus
Á J ’H NMR (500 MHz, CDC13) : 8,53 (d, J=
=4,4 Hz, 1H, H pyridínu);7,72(t,J= Λ J
=7,4 Hz, 1H, H pyridínu);7,31(d,J= =7,7 Hz, 1H, H pyridínu);7,17(t,J= =6, 6Hz, 1H, H pyridínu); 6,65 (s, 1H, =CH pyridínu)
Príklad 2B) ľľH Výťažok=14%; MS(FAB)očakávané (M+ +Cs):634,2145, nájdené:634,2122; 3H NMR (500 MHz,CDC13): 8,36(d,J= 'ΊΓΊ
J J
=4,4Hz, 1H, H pyridínu); 7,53 (d, J= 7, 4Hz, 1H, H pyridínu); 7,13 (dd, J= 4,4 Hz, J=7,4 Hz, 1H, H pyridínu); 6,64(s,1H,=CH pyridínu)
Príklad 2C) 7) Výťažok = 20%; MS(FAB) očakávané (M+Cs):634,2145, nájdené;634,2124; ľH NMR(500 MHz,CDCl3): 8,38(d,J= Γ)
=4,8 Hz, 1H, H pyridínu); 7,11 (s, 1H, H pyridínu); 6,98 (d,J=4,8 Hz, 1H, H pyridínu); 6,59 (s, 1H, =CH pyridínu) /v
Príklad 3
Totálna syntéza epothilonu E a príbuzných analógov s modifikovaným postranným reťazcom prostredníctvom stratégie založenej na
Stilleho kondenzačnej reakcii
Prvá totálna syntéza epothilonu E (3) sa uskutočňuje pomocou postupu, ktorého kľúčovým krokom je Stilleho kondenzácia (Stille a kol., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1986, 25, 508-524; Farina a kol. J. Org. React. 1997, 50, 1-65) medzi vinyljodidom 7 a tiazolovou skupinou (8h, schéma 2a) . Jadro makrolaktónového fragmentu 7, ktoré sa pripraví uzatvorením kruhu pomocou metatézie olefínu (RCM), sa potom použije na zabezpečenie vhodného a flexibilného prístupu k rôznym analógom epothilonu 9 modifikovaným v postrannom reťazci na biologické testovanie (schéma 2b). RCM reakcia použitá na prípravu zlúčeniny 7 tiež poskytuje trans-makrolaktón 11 (schéma 2b), ktorý slúži ako alternatívny templát pre Stilleho kondenzačnú reakciu, poskytuje ďalšie skupiny analógov 10.
Schéma 2:
a) retrosyntetická analýza a stratégia totálnej syntézy epothilonu E
b) Analógy epothilonu C (9) v postrannom reťazci a ich
Δ12'13 trans—izomér (10) ·· ···· • · • ··· ····
Chemická syntéza potrebných vinyljodidov 7 a 11 je opísaná v Medzinárodnej patentovej prihláške WO 98/25929.
Stanánoví kondenzační partneri používaní pri Stilleho kondenzácii sú uvedení v schéme 3.
Schéma 3:
19b, d,h,j,p,q, r, s
18b, d, h, j , p, q, r, s
8b: X-SMe, R=Me
8d: X“OEt, R=n-butyl
8p: X=OMe, R=Me
8h: X=OH, R=n-butyl 8j: X=F, R=n-butyl
Stilleho kondenzácia: Postup A: 2,0 ekvivalentu zlúčeniny 8, 5-10% molárnych Pd(PPh3)4, toluén, 90-100°C, 15-40 minút, 39-88%; postup B: 2,0-2,2 ekvivalentu zlúčeniny 8, 20-30% molárnych Pd(MeCN) 2C12, dimetylformamid, 25°C, 12-33 hodín, 49-94%.
Kondenzační partneri 8b, 8d, 8h a 8j a ďalšie stanány 8p-r sa pripravia z ľahko dostupného 2,4-dibrómtiazolu 20 cez monobromidy 21 tak, ako je uvedené v schéme 4 a 5.
·· • ·· ···· ·· ·
• · • • • • e ···· • · • · • · · • ··· • • · • · • · · • · • • •
• ···· • ·· ··· ·· ···
Schéma 4:
b: 21b d: 21d
f: MqSnSnMg
21b: X-SMe 8b: X=SMe
21p: X=OMe 8p: X=OMe
21d: X=OEt 8d: X=OEt
g: n-BuLi n-Bu3SnCl
Príprava A) stanánov 8b, 8d a 8p. Činidlá a podmienky: (b) 3,0 ekvivalentu NaSMe, etanol, 25°C, 2 hodiny, 92%; (d) 13 ekvivalentov hydroxidu sodného, etanol, 25°C, 30 hodín, 91%; (e) 13 ekvivalentov hydroxidu sodného, metanol, 25°C, 16 hodín, 82%;
(f) 5-10 ekvivalentov Me3SnSnMe3, 5-10% molárnych Pd(PPh3)4, toluén, 8C-100°C, 0,5-3 hodiny, 81 - 100%; (g) 1,1 ekvivalentu n-BuLi, 1,2 ekvivalentu n-Bu3SnCl, 78 až 25°C, 30 minút, 98%;
Schéma 5:
d. n-BuLi, DMF
b. n-BuLi, n-Bu3SnCI
e. NaBH4
n-BuLi,
21h X = OH s X = OTBS
__/ j. PÁST
N n-Bu3Sn
X = OTBS, R = n-Bu3Sn
X = OH, R = n-Bu3Sn
·· · ·· ···· ·· · ··· · · · ···· • · · · · ··· · · · • ···· · · · · · · · · • · ······ ···· 9 ·· ··· ·· ···
Príprava stanánov 8h, 8j a 8q-s. Činidlá a podmienky: (a) 1,05 ekvivalentu n-Bu3SnCH=CH2, toluén, 100°C, 21 hodín, 83%; (b) 1,1-1,2 ekvivalentu n-BuLi, 1,2 - 1,25 ekvivalentu n-Bu3SnCl, -78 až 25°C, 1 hodina, 28 - 85%; (c) H2, 0,15 ekvivalentu oxidu platičitého, etanol, 25°C, 4 hodiny; 84%; (d) 1,2 ekvivalentu n-BuLi, 2,0 ekvivalentu dimetylformamidu, -78 až 25°C, 2 hodiny; (e) 1,9 ekvivalentu NaBH4, metanol, 25°C, 30 minút, 63% po dvoch krokoch; (f) 1,3 ekvivalentu TBSCI, 2,0 ekvivalentu imidazolu, dichlórmetán, 25°C, 0,5 hodiny, 96%; (h) 1,2 ekvivalentu TBAF, tetrahydrofurán, 25°C, 20 minút, 95%; (j) 1,1 ekvivalentu DAST, dichlórmetán, -78 až 25°C, 10 minút, 57%. DAST = dietylaminosulfurtrifluorid.
Sulfid 21b sa získa vo výťažku 92% nahradením 2-brómového substituenta zlúčeniny 20 tiometylovou skupinou s použitím tiometoxidu sodného (etanol, 25°C). Etoxy a metoxytiazoly 21d a 21p sa pripravia reakciou dibromidu 20 s hydroxidom sodným v etanole a metanole, v tomto poradí. Bromidy (21b, 21d a 21p) sa potom prevedú na požadované trimetylstanány (8b, p) pomocou hexametyldicínu za katalýzy paládiom [Pd(PPh3)4, toluén, 80 - 100°C], zatiaľ čo tri-n-butylstanán 8d sa získa z etoxybromidu 21d výmenou halogénu za kov (n-BuLi, dietyléter, -78°C) a následnou reakciou s tri-n-butylcínchloridom vo výťažku 98%.
Syntéza stanánov (8h, 8j, 8q-r) sa môže tiež uskutočniť z bežných prekurzorov 20 (schéma 5) . Uskutoční sa teda paládiom katalyzovaná alkenylácia [n-Bu3SnCH=CH2, Pd(PPh3)4, toluén, 100°C]
2,4-dibrómtiazolu 20 a získa sa monobromid 21q, ktorý sa podrobí výmene halogénu za kov (n-BuLi, dietyléter, -78°C) a následne sa reakčná zmes rozloží tri-n-butylcínchloridom a získa sa požadovaný stanán 8q. Redukcia vinylbromidu 21q ako medziproduktu (H2, oxid platičitý, etanol, 25°C) poskytne etyltiazol 21r, ktorý sa prevedie na stanán 8r rovnakým spôsobom, ako je opísané pre 8q. Syntéza stanánov 8h a 8j sa uskutoční cez kľúčový hydroxymetyltiazol 21h.
9· ···· • · • ··· ·· • ·99· · · 9 999
9 9 9 9 9 ···· 9 9· ··· ·· 9
Ako je uvedené v schéme 5, tento samotný alkohol sa získa z dibromidu 20 v dvoj krokovej syntéze zahŕňajúcej litiáciu (n-BuLi, dietyléter, -78°C) a následné rozloženie reakčnej zmesi dimetylformamidom a získa sa aldehyd 22 ako medziprodukt, ktorý sa potom redukuje (NaBH4, metanol, 25°C) a získa sa požadovaný alkohol 21h v celkovom výťažku 63%. Konverzia zlúčeniny 21h na star.án 8h vyžaduje troj krokovú sekvenciu zahŕňajúcu chránenie hydroxylovej skupiny (TBSCI, imidazol, dichlórmetán, 96%), stanyláciu (i. n-BuLi, dietyléter, -78°C; ii. n-Bu3SnCl, 85%) a následné odstránenie ochrannej skupiny (TBAF, tetrahydrofurán, 25°C, 95%). Fluorácia získaného stanánu 8h (DAST, dichlórmetán, -78°C) poskytne priamo stanán 8j vo výťažku 57%.
Po príprave nevyhnutných zložiek sa našiel kritický krok Stilleho kondenzácie. Ukázalo sa, že sú vhodné dve alternatívne skupiny reakčných podmienok (schéma 3) . Postup A zahŕňa zahrievanie toluénového roztoku požadovaného vinyljodidu (7 alebo 11) s vhodným stanánom 8 v prítomnosti katalytického množstva Pd(PPh3)4 pri teplote 80-100°C 15-40 minút. Tento postup sa použije na kondenzáciu stanánov 8b a 8h. Zostávajúce stanány 8d a 8j sa kondenzujú s použitím alternatívnej, miernejšej, metódy, postupu B, pri ktorom sa zmes vinyljodidu (7 alebo 11) a stanánu 8 v dimetylformamide reaguje s PdCl2(MeCN)2 pri 25°C.
Kondenzácia vinyljodidu 7 a stanánu 8h poskytne makrolaktón 18h, ktorý slúži ako prekurzor prírodného epothilonu E (3) (schéma 6a).
Schéma 6a
18h
a. CH3C(=NH)OOH
HC
OH O
OH
O
O ·· ···· • · • ···
Príprava epoxidu 3. Činidlá a podmienky: (a) 30 ekvivalentov peroxidu vodíka, 60 ekvivalentov acetonitrilu, 10 ekvivalentov hydrogenuhličitanu sodného, metanol, 25°C, 6 hodín, 66% (založené na 50% konverzii).
Totálna syntéza sa dokončí epoxidáciou pomocou in situ generovanej metylperoxykarboximidovej kyseliny (peroxid vodíka, hydrogenuhličitan sodný, acetonitril, metanol, 25°C; Chaudhuri a kol., J. J. Org. Chem. 1982, 47, 5196-5198) a vzniká epothilon E (3) (66% vzhľadom na 50% konverziu), ktorý má rovnaké fyzikálne charakteristiky (XH NMR, [a]D) ako je uvedené v literatúre.
Postup pomocou Stilleho reakcie teda’ poskytuje ľahký prístup k rôznym analógom epothilonu B (2) modifikovaným v postrannom reťazci, ako na C-26, tak v postrannom reťazci. Retrosyntetická analýza analógov epothilonu, ktoré majú tieto dvojaké modifikácie, je uvedená v schéme 6b a vyžaduje prípravu kritického fragmentu 24 s vinyljodidovým jadrom. Predpokladá sa, že makrolaktonizačný prístup podobný tomu, ktorý sa používa pri tejto syntéze epothilonu B a rôznych analógov epothilonu, je na tento cieľ najvhodnejší.
Schéma 6b
Stabilizovaná Wittigova reakcia
Yamaguchiho makrolaktonizácia
·· · • · · • · · • ···· · •· • 99 9· ·· ···· • · · • e ··· • · · ·· ··· ·· ·
999 • 9·
9 99
99
99999
Ilustrácia retrosyntetickej analýzy analógov epothilonu, ktoré majú modifikovaný C-26 a skupiny v postrannom reťazci.
Syntéza začína od vinyljodidu 13 (schéma 7) použitého pri príprave epothilonu E a príbuzných analógov (schéma 3).
Schéma 7
h. Endersova alkylácia
i. MMPP
34: R = CN
35: R = CHO
j. DIBAL ·· · ·· ···· ·· ··· · · · · · · • e · · ···· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· ·
Stereoselektivna syntéza aldehydu 35. Činidlá a podmienky: (a) 1,7 ekvivalentu TBSCI, 2,8 ekvivalentu imidazolu, dimetylformamid, 0 až 25°C, 7 hodín, 84%; (b) i. 1,0% molárneho oxidu osmičelého, 1,1 ekvivalentu NMO, THF:terc-BuOH:H2O (5:5:1), 0 až 25°C, 13 hodín, 89%; ii. 6,0 ekvivalentu NaIO4, MeOH:H2O (2:1),
0°C, 30 minút, 92%; (c) 2,4 ekvivalentu 27, benzén, var, 1,2 hodiny, 98%; (d) 3,0 ekvivalentu DIBAL, tetrahydrofurán, -78°C,
2,5 hodiny, 100%; (e) 1,4 ekvivalentu TrCl, 1,7 ekvivalentu
4-DMAP, dimetylformamid, 80°C, 21 hodín, 95%; (f) 1,4 ekvivalen- tu 9-BBN, tetrahydrofurán, 0°C, 9 hodin; potom 3N vodný hydroxid sodr.ý a 30% peroxid vodíka, 0°C, 1 hodina, 95%; (g) 2,6 ekvivalentu 12, 5,0 ekvivalentu imidazolu, 2,5 ekvivalentu Ph3P, Et2O:MeCN (3:1), 0°C, 45 minút, 97%; (h) 1,3 ekvivalentu SAMP hydrazónu propiónaldehydu; 1,4 ekvivalentu LDA, tetrahydrofurán, 0°C, 16 hodín; potom 100°C a pridá sa 1,0 ekvivalentu 32 v tetrahydrofuráne, -100 až -20°C, 20 hodín, 71%; (i) 2,5 ekvivalentu
MMPP, MeOH:fosfátový pufor pH 7 (1:1), 0°C, 3,5 hodiny, 89%; (j)
3,0 ekvivalentu DIBAL, toluén, -78°C, 1 hodina, 88%.
9-BBN = 9-borabicyklo-[3,3,1]nonán; DIBAL = diizobutylalumíniumhydrid; 4-DMAP = 4-dimetylaminopyridín; LDA = lítiumdiizopropylamid; NMO = N-oxid 4-metylmorfolínu; SAMP = (S)-(-)-l-amino-2-(metoxymetyl)pyrolidin; MMPP = horečnatá soľ monoperoxyftalovej kyseliny.
Chránenie alylickej hydroxylovej skupiny (TBSCI, imidazol, dimetylformamid, 0 až 25°C) poskytne silyléter 25 (84%), ktorý sa prevedie na aldehyd 26 pomocou dvoj krokovej sekvencie dihydroxylácie-glykolové štiepenie (oxid osmičelý, NMO, THF/ terc-BuOH/H2O 0 až 25°C; potom jodistan sodný, MeOH/H2O, 0°C, 82% po dvoch krokoch). Stereokontrolovaná Wittigova reakcia so stabilizovaným ylidom 27 (benzén, var; Marshall a kol. J. Org. Chem. 1986, 51, 1735-1741; Bestmann a kol. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1965, 4, 645-660) poskytne ester 28 ako jeden geometrický izomér vo výťažku 98%. Redukciou tejto zlúčeniny (DIBAL, tetrahydrofurán, -78°C) sa získa alkohol 29, ktorý je chránený ·· · ·· ···· ·· ··· ··· · · · • · · 9 · 999 9 ·
9999 999 9999 · 9 9 9 9 9
9999 9 99 999 99 9 ako trifenylmetylový (tritylový) derivát 30 (TrCl, 4-DMAP, dimetylformamid, 70°C, 95%).
Opracovanie výslednej olefinickej skupiny sa potom dosiahne selektívnou hydroboráciou-oxidáciou a získa sa alkohol 31 (9-BBN, tetrahydrofurán, 0°C; potom hydroxid sodný, peroxid vodíka, 0°C), ktorý sa potom prevedie na dijodid 32 (I2, imidazol, Ph3P, 0°C) v celkovom výťažku 92%. Zavedenie C8 stereocentra sa potom uskutoční podľa Enderovho alkylačného postupu (SAMP hydrazón propiónaldehydu, LDA, tetrahydrofurán, 0°C; potom -100°C a pridá sa 32 v tetrahydrofuráne; Enders a kol. Asymmetric Synthesis 1984; Morrison, J.D., Ed.; Academic Press, Orlando, Vol. 3, str. 275-339; ďakujeme Prof. Endersovi za láskavé venovanie SAMP) a vzniká SAMP hydrazónu 33 vo výťažku 71%. Prevedenie na nitril 34 (MMPP, MeOH/fosfátový pufor pH 7, 0°C, 89%) a redukcia (DIBAL, toluén, -78°C) poskytne požadovaný aldehyd 35 vo výťažku 88%.
Transformácia aldehydu 35 na požadované makrolidné jadro epothilonu 24 je zhrnutá v schéme 8.
·· · • · ·· • · · • · · · • · ·
999
Schéma 8 ·· · • · · • ···· · • · ···· · ·· ···· • ·· • ···· • ·· • ·· ·· ···
I
OTBS
ácič
44: R « Tr, R1 = TBS
24: R = R'= H ·· · ·· ···· ·· · ··· ··· · · ·· • e · · · ··· · · · • ···· · · · · · · · · • · ·· · · · · ···· · ·· ··· ·· ···
Stereoselektívna syntéza vinyljodidu 24. Činidlá a podmienky: (a) 1,45 ekvivalentu LDA, tetrahydrofurán, -78°C, potom 1,4 ekvivalentu 36 v tetrahydrofuráne, -78°C, 1,5 hodiny potom;
-40°C, 0,5 hodiny; potom 1,0 ekvivalentu 35 v tetrahydrofuráne pri -78°C (kombinovaný výťažok 66%, pomer 37:38 asi 1,5:1); (b)
3,2 ekvivalentu TBSOTf, 4,3 ekvivalentu 2,6-lutidinu, dichlórmetán, -20 až 0°C, 2,5 hodiny, 90%; (c) HF.pyr. v pyridíne, tetrahydrofurán, 0°C, 3 hodiny, 84%; (d) 2,0 ekvivalentu (COC1)2, 4,0 ekvivalentu dimetylsulfoxidu, 6,0 ekvivalentu trietylaminu, dichlórmetán, -78 až 0°C, 1,5 hodiny, 98%; (e) 5,0 ekvivalentu
NaC102, 75 ekvivalentov 2-metyl-2-buténu, 2,5 ekvivalentu
NaH2?O4, terc-BuOH: H2O (4,5:1), 25°C, 40 minút, 100%; (f) 6,0 ekvivalentu TBAF, tetrahydrofurán, 0 až 25°C, 19 hodín, 95%; (g)
6,0 ekvivalentu trietylaminu, 2,4 ekvivalentu 2,4,6-trichlórbenzoylchloridu, tetrahydrofurán, 0°C, 1,5 hodiny; potom sa pridá roztok 2,2 ekvivalentu 4-DMAP v toluéne (0,005 M vzhľadom na 43), 75°C, 2,5 hodiny, 84%; (h) 25% objemovo HF.pyr. v tetrahydrofuráne 0 až 25°C, 15 hodín, 86%. TBAF = tetranbutylamóniumfluorid.
Aldolová reakcia ketónu 36, používaná skôr pri syntéze epothilonu B a podobných analógov (LDA, tetrahydrofurán, -78 až -40°C) a aldehydu 35, poskytne alkoholy 37 a 38 s celkovým výťažkom 66%, s miernou selektivitou na požadovaný 6R, 7S diastereoizomér (37). Separácia a silylácia (TBSOTf, 2,6-lutidin, dichlórmetán, -20 až 0°C) správneho aldolového produktu 37 poskytne cris-silyléter 39 vo výťažku 90%. Selektívne odstránenie primárnej silyléterovej ochrannej skupiny (HF.pyr. v pyridín/tetrahydrofurán, 0°C) poskytne alkohol 40 (84%), ktorý sa oxiduje na kyselinu 42 cez aldehyd 41 pomocou dvoj krokového postupu [Swern; potom NaC102, 2-metyl-2-butén, NaH2PO4, terc-BuOH/H2O, 25°C, 98% po dvoch krokoch). Odstránenie kremíkovej ochrannej skupiny na C15 (TBAF, tetrahydrofurán, 0 až 25°C) poskytne hydroxykyselinu 43 (95%) a je to základ pre proces makrolidizácie. Tento kľúčový krok sa uskutoční za podmienok Yamaguchiho reakcie (2,4,6-tri57 ·· · • · · ·· ···· • · • ··· • · · ···· · · • · · • ··· e b ···· · «· ··· ·· · chlórbenzoylchlorid, trietylamin, tetrahydrofurán; potom sa pridá roztok 4-DMAP v toluéne, 0,005 M, 75°C; Inanaga a kol., Bull. Chem. Soc. Jpn. 1979, 52, 1989; Mulzer a kol. Synthesis 1992, 215-228; Nicolaou a kol., Chem. Eur. J. 1996, 2, 847-868) a získa sa chránené jadro epothilonu 44 vo výťažku 84%. Syntéza kľúčového vinyljodidového medziproduktu 24 sa dokončí úplným odstránením ochranných skupín (HF.pyr., tetrahydrofurán, 0 až 25°C, 86%).
Stilleho kondenzačný postup sa potom použije na pripojenie požadovanej heterocyklickej skupiny k medziproduktu 24. Pôvodne sa predpokladalo, že bude najpraktickejším a najúčinnejším spôsobom mierny postup B využívajúci PdC12(MeCN)2 a tento postup sa použije na prípravu C26 hydroxyepothilonov 45-48 (schéma 9) z vinyljodidu 24 a vhodných stanánov 8 (pozri schéma 4 a 5).
Schéma 9 ·· · • · · • · · • ···· · • · ···· · ·· ···· • ·· • ···· • ·· • ·· ·· ··· ·· · • · ·· • ·· • · ·· • ·· ·····
45: X = CH2F
46: X = OMe
47: X = Et
48: X = CH2OH
49: X = CH=CH2
54: X = CH2F 55: X = OMe 56: X = Et
50: X = CH2F
51: X = OMe
52: X = Et
53: X = CH=CHZ
58: X = CH2F
59: X = OMe ·· · • · · • · · • ···· • · ···· · ·· ····
• • •
• • ···
• • • ·
• • •
·· ···
···
Syntéza analógov epothilonu 54-56 a 58, 59 a deoxyepothilonov 45-49 a 50-53. Činidlá a podmienky: (a) postup A: 1,7 ekvivalentu 8,13% mol Pd(PPh3)4, toluén, 100°C, 2 hodiny, 15%; postup B: 1,5-2,0 ekvivalentu 8, 10-20% molárnych Pd(MeCN)2CI2, dimetylformamid, 25°C, 15-33 hodín, 41-56%; (b) 1,05-1,4 ekvivalentu DAST, dichlórmetán, -78°C, 10 minút, 26-58%; (c) 0,5 ekvivalentu (+)-DET, 0,5 ekvivalentu Ti(i-PrO)4, 2,2 ekvivalentu terc-BuOOH, -40°C, dichlórmetán, 4A molekulové sitá, 12 hodín, 52-89%. DET = = dietyltartrát.
Tieto podmienky nie sú vhodné na kondenzáciu zlúčeniny 24 a vinylstanánu 8q (pozri schému 5). Použitie alternatívy postupu A vedie k požadovanému epothilonu 49, avšak v zlom výťažku.
Prítomnosť hydroxylovej funkčnej skupiny na C25 ponúka ďalšie možnosti na opracovanie epothilonového produktu. Napríklad C26 alkoholy 45-47 a 49 reagujú s DAST (dichlórmetán, -78°C) a získajú sa fluorované analógy epothilonu 50-53 v priemerných výťažkoch, čo je uvedené v schéme 9. Alternatívne poskytne asymetrická epoxidácia látok 45 a 46 s podmienkami Katsuki-Sharplesovej reakcie ((+)—DET, Ti(i-PrO)4, terc-BuOOH, 4A molekulové sitá, dichlórmetán, -40°C; Katsuki, T.; Sharpless, K.B., J. Am. Chem. Soc. 1980, 102, 5976-5978) epothilony 54 a 55, v tomto poradí. Následná reakcia s DAST (dichlórmetán, -78°C) poskytne ďalšie analógy 58 a 59, znova v priemerných výťažkoch. V tejto súvislosti sa našla účinnejšia cesta k epoxidom, ako 54 a 55, keď sa uskutoční asymetrická epoxidácia vinyljodidu 24 a vzniká obvyklý medziprodukt, ktorý potom slúži ako substrát pre Stilleho kondenzáciu. Napriek pôvodným pochybnostiam týkajúcich sa kompatibility epoxidovej funkčnej skupiny s podmienkami Stilleho reakcie sa epoxid 57 potrebný na tento spôsob pripraví z olefínu 24 vo výťažku 81% tak, ako je opísané pri syntéze 45 a 46. Zistilo sa, že použitie štandardných kondenzačných podmienok B, s použitím stanánu 8r, viedlo k úspešnej príprave analógu epothilonu 56 (73% vzhľadom na 70% konverziu).
·· ···· • · • ···
Úspech Stilleho kondenzačného postupu pri substrátoch, ktoré majú epoxidové skupiny, naznačuje, že epothilony 66-68 sa môžu pripraviť z bežného medziproduktu 65, ako je uvedené v schéme
10.
Schéma 10
·· · • · · • · ·
6i .· ··:· ···· · ·· ···· ··· • · · · ··· • ···· · ·· ··· · · · ·· • · · · ·· ·· ··· ·· ···
Syntéza epothilonov 66-68 substituovaných na C26. Činidlá a podmienky: (a) 15 ekvivalentov trietylamínu, 8,0 ekvivalentu
TMSCI, dimetylformamid, 25°C, 12 hodín; (b) silikagél, dichlórmetán, 25°C, 12 hodin, 98% po dvoch krokoch; (c) 3,0 ekvivalentu NMO, 10% molárnych TPAP, dichlórmetán, 25°C, 40 minút, 90%;(d)
9,7 ekvivalentu Ph3P+CH3Br‘ v zmesi s NaNH2, tetrahydrofurán, -5°C, 65%; (e) 25 ekvivalentov H2NNH2, 16 ekvivalentov peroxidu vodíka, etanol, 0°C, 3 hodiny; (f) HF.pyr.pyridín v tetrahydrofuráne, 0 až 25°C, 2 hodiny, 75% po dvoch krokoch; (g) 1,7-2,3 ekvivalentu 8, 0,2-0,3% molárnych Pd(MeCN) 2CI2, dimetylformamid,
25°C, 15-23 hodín, 52-79%. TPAP = tetrapropylamóniumperutenát.
Príprava požadovaného templátu (65) sa uskutoční pomocou päťkrokovej sekvencie, ktorá sa začne s celkom chráneným triolom 57 (TMSCI, trietylamín, dimetylformamid, 25°C). Pomocou selektívneho odstránenia ochrannej skupiny s použitím silikagélu (dichlórmetán, 25°C, 98% po dvoch krokoch), odhalí primárnu hydroxylovú funkčnú skupinu v polohe C26, ktorá sa potom oxiduje (TPAP, NMO, 4A molekulové sitá, dichlórmetán, 25°C) a získa sa aldehyd 62 v 90% výťažku. Metylenáciou pomocou metyltrifenylfosfóniumbromidu (Schlosserova instantná ylidová zmes, tetrahydrofurán, -5°C; Schlosser, M., Schaub, B., Chimia 1982, 36,
3965) sa získa olefín 63 (65%), ktorý sa redukuje pomocou in situ generovaného diimidu (H2NNH2, peroxid vodíka, etanol, 0°C) a získa sa medziprodukt 64. Po odstránení zostávajúcich silyléterových ochranných skupín (HF.pyridín (=pyr.) v pyridíne/tetrahydrofurán, 0°C) sa získa požadovaný vinyljodid 65 vo výťažku 75% po dvoch krokoch. Potom sa použije Stilleho kondenzačný postup B opísaný skôr a pripravia sa epothilony 66-68 v priemerných výťažkoch (schéma 10).
Chémia opísaná v tomto príklade spočíva v Stilleho kondenzačnom prístupe, pomocou ktorého sa z obvyklého makrolidového medziproduktu pripraví rad analógov epothilonu s rôznym postranným reťazcom alebo postranným reťazcom aj polohou C26.
• · ···· ·· e··· • · • ···
Príklad 4
Vzorce zlúčenín podľa predloženého vynálezu
Tabuľka: Vzorce zlúčenín podľa predloženého vynálezu
Číslo Zlúčenina
1 e Y
ΛΑ i í
HO^ -N
'ζγνγ
O ÓH °
18h:X = OH
2 (Vzorec pozri číslo 1)
18j:X = OH
3 HO. 1 L y X*'' ''·> N/X/ C-X* N
^λ/Χ/Χ/0
0 ÓH 0
18d:X = OEt
4 (Vzorec pozri číslo 3)
18b:X = SMe
5 HO. J,, L Y. iii n X P
...«'X/' XyXX/· N
óh o
19h:X = OH
6 (Vzorec pozri číslo 5)
19j:X = F
·· ···· • · • ··· ····
7 ‘O0 L i Jl .-•M' ÔH 0 19d:X = OEt N
8 (Vzorec pozri číslo 7)
19b:X = SMe
9 OH
|ΖΊ 1 f S />~x
ΗογΑ. kzAA N
x yS^v0
0 ÓH o
45:X = CH2F
10 (Vzorec pozri číslo 9)
46:X = OMe
11 (Vzorec pozri číslo 9)
47: X = CH2CH3
12 (Vzorec pozri čislo 9)
48:X = CH2OH
13 (Vzorec pozri číslo 9)
49 :X = CH = CH2
14
Λί i í ho^ 1 Ä A S ^“x N
v\z\/0
o ÔH o
50:X = CH2F
15 (Vzorec pozri číslo 14)
51:X = OMe
16 (Vzorec pozri číslo 14)
52:X = CH = CH2
·· · ·· ···· ·· ··· · · · ·· a · · · ···· ··
CA 9 ···· · · · · · ·· , e · · · ·· ···· · ·· ··· ··
17 (Vzorec pozri číslo 53: X = CH2CH3 14)
18 ^-OH
S
HO>)jl. J í λ“χ N
0 ÓH 0
54:X = CH2F
19 (Vzorec pozri číslo 18)
55:X = OMe
20 (Vzorec pozri číslo 18)
56: X = CH2CH3
21 F
•S
HCXJ 1 í ^~x
N
X '^'XXX/0
0 ÓH O
58:X = CH2F
22 (Vzorec pozri číslo 21)
59:X = OMe
23
s
HO^ J 1 1 f X
x/V1 M
\Z\z°
0 ÓH 0
66:X = CH2F
24 (Vzorec pozri číslo 23)
67:X = OMe
25 (Vzorec pozri číslo 23)
68: X = CH2CH3
26 epothilon A
Výsledky biologických testov
• · 9 9 9 999 9 99
9 9 e 9 9 9 • 9
9 9 9 • 9 999 • 9
e 9999 9 9 9 9 9· 9
9 9 • 9 9 • 9
···· 9 99 999 9 9
Príklad 5
Podľa spôsobov opísaných skôr (meria sa inhibícia depolymerizácie tubulinu zlúčeninou všeobecného vzorca I pomocou mikrotubulov z mozgu ošípaných, v porovnaní s 25 μΜ epothilonu B; bunkové testy sú analogické testom opísaným skôr pre bunky KB-31), sa pre príslušné zlúčeniny všeobecného vzorca I získajú výsledky uvedené v nasledujúcej tabuľke:
Zlúč. Tubulína KB-31b KB-8511C A549d HCT-15® HCT-116®
(%) IC50 [nM] IC50 [nM] IC50 [nM] ICso [nM] IC50 [nM]
D (Pr.l) 88,9 0,108 0,105 0,17 0,247 0,209
Pr. 2C 89, 9 0,153 0,163 0,24 0,298 0,373
a) Vyvolanie polymerácie tubulinu pri koncentrácii testovanej zlúčeniny 5 μΜ proti epothilonu B pri 25 μΜ (v %), b) epidermoid, c) epidermoid (P-gp nadmerná expresia), d) pľúca, e) hrubé črevo.
Zlúč. DU145f IC50 [nM] PC-3Mf IC50 [nM] MCF-79 IC5q [nM] MCF-7/ADRh IC5o [nM]
D (pr.l) 0,252 0,361 0,114 0, 853
Pr. 2B 0,320 0,498 0,144 1,31
f) prostata, 9) prsník, h) prsník [odolnosť proti viacerým liekom).
Príklad 6
Ďalšie zlúčeniny všeobecného vzorca I
Analogickým spôsobom, ako je opísané skôr alebo ďalej, sa pripravia nasledujúce zlúčeniny všeobecného vzorca I:
·· ·
SMe
Príklad 6 (ii)
o ··· • · ·· ···· • · • ··· • · • · ··· ·· •· •· •· •· ··
e· • ·· ···· ·· •
• · • • • • • • • ·
• • · • • ··· • • •
• ···· • · • • • · • •
• • • • • • • •
··· · • ·· ··· ·· ·· ·
Príklad (v)
Príklad (vi)
Príklad (vii)
Príklad 6 (viii)
Príklad 7
Farmaceutický prostriedok mg analógu epothilonu D (príklad 1) alebo analógu epothilonu z príkladu 2C) sa rozpustí v 1,0 ml 98-100% propylénglykolu. Roztok sa sterilné filtruje cez filter s veľkosťou pórov 0,22 mikrónov a naplní sa do 1 ml ampúl. Naplnené ampuly sa skladujú a prevážajú. Pred vnútrožilovým podávaním sa obsah ampuly pridá k 250 až 1000 ml 5% roztoku clukózy vo vode na injekčné účely.
·· • ·· ···· ··
• · • • • • • · ·
• • · • • ··· • ·
• • ··· • · • • · • ·
• • • • • • ·
··· · • ·· ··· ·· ·
Príklad 8
Použitie ďalších stanánov pri syntéze analógov epothilonu s modifikovaným postranným reťazcom je ilustrované v schémach 11 a 12.
Schéma 11
·· ···· • e • ···
R = H, Me
R* = H, Me alebo ochranná skupina, výhodne H alebo Me
Všeobecný spôsob syntézy rôznych analógov epothilonu B s modifikovaným postranným reťazcom obsahujúcich pyridinové a imidazolové modifikácie.
a: ako je opísané skôr (pozri Nicolaou a kol., Tetrahedron 54, 7127-7166 (1998));
b, d, e: podmienky, ako je opísané skôr (pozri Nicolaou a kol., Tetrahedron 54, 7127-7166); c: NaBH3CN, HMPA, 40-45°C.
·· · ·· ···· ·· · ··· ··· ···· • · · · · ··· · · · • ···· ··· ···· · • · ······ ···· · ·· ··· ·· ···
Použijú sa ochranné skupiny, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti známe, najmä tie, ktoré sú opísané v uvedených štandardných odkazoch a tiež sa použijú spôsoby ich zavádzania a odstránenia opísané v týchto štandardných odkazoch.
Výhodne je v 7006 R* atóm vodíka alebo metylová skupina, R je výhodne metylová skupina.
Použitie Stilleho kondenzácie na prípravu viacerých analógov epothilonu s modifikovaným postranným reťazcom z bežných prekurzorov 57 a 8h, 8x, 8y a 8z je opísané v schéme 11 a 12. Vinyljodid 7002 sa pripraví zo skôr uvedenej zlúčeniny hydroxylovanej v polohe C26 a postup zahŕňa konverziu zlúčeniny 57 na dijodid 7001 a následnú redukciu s použitím NaBHjCN: Dijodid 7001 (1 ekvivalent; z 57) s kyanoborohydridom sodným (10 ekvivalentov) sa rozpustí v bezvodom HMPA (0,2 M) a získaná zmes sa zahrieva 40 hodín na 45 až 50°C. Po ochladení na teplotu miestnosti sa pridá voda a vodná fáza sa extrahuje štyrikrát etylacetátom. Spojené organické frakcie sa sušia nad síranom sodným a filtrujú sa cez krátky stĺpec silikagélu, aby sa odstránili stopy HMPA (elúcia zmesou 50% etylacetátu v hexáne). Po odparení rozpúšťadiel sa zvyšok čistí pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie za elúcie zmesou 50% etylacetátu v hexáne a získa sa čistý vinyljodid 7002 vo výťažku 84%. Uskutočni sa kondenzácia postranného reťazca epothilonu E a kondenzácia rôznych pyridínov a imidazolov sa dosiahne prostredníctvom kondenzácie rôznych alternatívnych postranných reťazcov s aromatickými stanánmi tak, ako je uvedené v schéme 11 a 12 pomocou štandardných postupov opísaných podlá vynálezu.
·· • ·· ···· ·· •
• · • • • • • • • ·
• • · • • ··· • • •
• • ··· • · • • • · • •
• • • • • • • •
···· • ·· ··· • · • · ·
Schéma 12
FŕSnSnR* Pd(O) alebo nBuLi, RŕSnCI
ArBr --------* ArSnR3
Príklady niektorých postranných reťazcov modifikovaných analógov epothilonu s využitím uvedených arylstanánov (ArSnR3) buď z metatézneho alebo makrolaktonizačného prístupu, kde R je n-butylová skupina alebo metylová skupina. Stanány sa syntetizujú s použitím štandardných podmienok, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti známe. X je skupina vybraná zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka; nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2CI; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-(alkyl) obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3; a R je ·· · ·· ···· ·· ··· ··· ··· _ _ · · · · · ··· · 9 /3 · ···· · · · · · · · ······· ···· · ·· ··· ·· · metylová skupina alebo n-butylová skupina.
Syntetické postupy
Všeobecne: všetky reakcie sa (ak nie je uvedené inak) uskutočňujú v atmosfére argónu so suchými, čerstvo destilovanými rozpúšťadlami za bezvodých podmienok. Tetrahydrofurán (THF) a dietyléter (éter) sa destilujú zo zmesi sodíka a benzofenónu, a dichlórmetán (CH2C12) , benzén (PhH) a toluén z hydridu vápenatého. Bezvodé rozpúšťadlá sa získajú tiež ich filtráciou cez komerčne dostupné kolóny s aktivovanou alumínou. Ak nie je uvedené inak, výťažky sa týkajú chromatografickv a spektroskopicky (3Η NMR) homogénnych látok. Ak nie je uvedené inak, všetky roztoky použité pri spracovaní sú nasýtené. Ak nie je uvedené inak, všetky činidlá sa kupujú v najvyššej komerčne dostupnej kvalite a používajú sa bez čistenia. Všetky reakcie sa sledujú pomocou chromatografie na tenkej vrstve na silikagélových doštičkách 0,25 mm od E. Merck (60F-254) s použitím UV svetla ako vizualizačného činidla a 7% etanolického roztoku fosfomolybdénovej kyseliny alebo p-anizaldehydu a tepla ako vyvíjačieho činidla. Na veľmi rýchlu kolónovú chromatografiu sa používa silikagél E. Merck (60, veľkosť častíc 0,040 až 0,063 mm). Separácia pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie sa uskutočňuje na silikagélových doštičkách 0,25, 0,50 alebo 1 mm od E. Merck (60F-254). NMR spektrá sa zaznamenávajú na prístroji Bruker
DRX-600, AMX-500, AMX-400 alebo AC-250 a kalibrujú sa s použitím zvyškového nedeuterovaného rozpúšťadla ako vnútorného štandardu. Pre multiplicity sa používajú nasledujúce skratky: s singlet; d dublet; t triplet; kv kvartet; m multiplet; pás niekoľko prekrývajúcich sa signálov; š široký. IČ spektrá sa zaznamenávajú na spektrometri Perkin-Elmer 1600 série FT-IR. Optická otáčavosť sa zaznamenáva na polarimetri Perkin-Elmer 241. Vysoko rozlíšené hmotnostné spektrá (HRMS) sa zaznamenávajú na hmotnostnom spektrometri VG ZAB-ZSE za podmienok odstreľovania rýchlymi atómami (FAB).
·· • • · ···· ·· •
• · • • · • • · • ·
• • · • · ··· • · •
• ···· • · · • • · · •
• • • · • • · •
···· • • · ··· ·· ···
cis-Makrolaktóndiol 7 ilustrovaný v schéme 3
K roztoku 305 mg (0,491 mmol) jodidu 16 v 8,2 ml (0,06 M) tetrahydrofuránu sa pri 25°C pridá 2,7 ml HF.pyr. a získaný roztok sa mieša pri tejto teplote 27 hodín. Reakčná zmes sa rozloží opatrným pridaním 100 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 100 ml etylacetátu k zmesi a získaný dvojfázový systém sa 2 hodiny mieša pri 25°C. Extrakty sa potom rozdelia a organická vrstva sa premyje 100 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 100 ml solanky a potom sa suší nad síranom sodným. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 20 až 50% etylacetátu v hexáne) sa získa 208 mg (84%) diolu 7. Rf = 0,21 (silikagél, 25% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -53,1 (c 1,37, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3499 (š), 2930, 1732, 1688, 1469, 1379, 1259,
1149, 1093, 1048, 1006, 732 cm’1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,43 (s, 1H, ICH=C (CH3) ) , 5,44 (ddd, J=10,5, 10,5,
4,5 Hz, 1E, CH=CHCH2), 5,34 (dd, J=9,5, 2,0 Hz, 1H, CHOCO) , 5,32 (ddd, J=10,5, 10,5, 5,5 Hz, 1H, CH=CHCH2) , 4,07 (ddd, J=ll,0, 6,0, 3,0 Hz, 1H, (CH3)2CCH(OH) ) , 3,73 (ddd, J=2,5, 2,5, 2,5 Hz,
1H, CHOH(CHCH3) ) ,
3,10 (kvd, J=7,0,
2,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 2,84 (d,
J=2,5 Ηζ,ΙΗ,
CH(CH3)CHOHCH(CH3) ), 2,66 (ddd, J=15,0,
9,5,
9,5 Hz, 1H, =CHCH2CHO), 2,51 (dd, J=15,5, 11,0 Hz, 1H, CH2COO) ,
2,42 (dd, J=15,5, 3, 0 Hz, 1H, CH2COO) f 2,35 (d, J=6, 0 Hz, 1H,
(CH3)2CHOH, 2,21-2,12 (m, 2H) , 2,05-1, 97 (m, 1H) , 1,88 (s, 3H,
ICH=CCH3), 1,76-1,70 (m, 1H) , 1,70-1, 62 (m, 1H) , 1,32 (s, 3H,
C(CH3)2), 1,18 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,10 (s, 3H,
C(CH3) 2), 1,35-1,05 (m, 3H) , 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) ;
HRMS (FAB), vypočítané pre C22H35ľO5 (M + Cs+) 639, 0584, nájdené
639,0557.
trans-Makrolaktóndiol 11 ilustrovaný v schéme 3
Roztok 194 mg (0,313 mmol) jodidu 17 v 5,2 ml (0,06 M) tetrahydrofuránu reaguje s 1,7 ml HF.pyr. podľa postupu opísaného
·· • • · ···· ··
• · • • · • • · •
• • · • · ··· • ·
• • ··· • · · • • · ·
• • • · • • ·
···· • ·· ··· • · •
na prípravu zlúčeniny 7 a po čistení pomocou velmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 20 až 50% etylacetátu v hexáne) sa získa 134 mg (85%) diolu 11. Rf = 0,16 (silikagél, 25% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -20,0 (c 1,15, chloroform); IČ (film) vraax 3478, 2930, 1732, 1693 cm-1; TH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,37 (d, J=l,5 Hz, 1H, ICHCCH3) , 5,35 (ddd, J=14,5, 7,0, 7,0 Hz, 1H, CH=CHCH2), 5,24 (ddd, J=14,5, 7,0, 7,0 Hz, 1H, CJÍ=CHCH2), 5,17 (dd, J=6,5, 3,5 Hz, 1H, CHOCO) , 4,41 (dd, J=8,0,
3,5 Hz, 1H, (CH3)2CCH(OTBS) ) , 3,85 (šs, 1H, CHOH (CHCH3) ) , 3,38 (šs, 1H, CHOŕŕ(CHCH3) ) , 3,18 (kvd, J=7,0, 6,5 Hz, 1H, CH3Cfí(C=O) ) , 2, 68-2,34 (m, 4H) , 2,44 (s, 3H, CH3Ar) , 2,19-2,11 (m, 1H) , 1,96 (s, 3H, CE3C=CH), 1, 99-1, 93 (m, 1H) , 1,67-1,52 (m, 2H) , 1,48-1,42 (m, 1H), 1,31-0,99 (m, 2H) , 1,22 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,14 (s, 3H, C(CH3)2), 1,09 (s, 3H, C(CH3)2), 1,02 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) , 0,84 (s, 9H, SiC (CH3) 3 (CH3) 2) , 0,08 (s, 3H, SiC (CH3) 3 (Cŕí3) 2) , -0,01 (s, 3H, SiC (CH3) 3 (CH3) 2) ; HRMS (FAB) , vypočítané pre C22H35lO5 (M + Cs+) 639, 0584, nájdené 639, 0606.
2-Tiometyl-4-brómtiazol 21b uvedený v schéme 4 mg (0,34 mmol, 1,0 ekvivalentu) 2,4-Dibrómtiazolu 20 sa rozpusti v 2,3 ml (0,15 M) etanolu a reaguje so 75 mg (1,02 mmol, 3,0 ekvivalentu) tiometoxidu sodného. Reakčná zmes sa mieša 2 hodiny pri 25°C, pričom sa skončenie reakcie stanoví pomocou 2H NMR. Zmes sa naleje do 5 ml vody a dvakrát sa extrahuje 5 ml éteru. Spojené organické frakcie sa sušia nad síranom horečnatým, rozpúšťadlá sa odparia a zvyšok sa čistí pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 5% etylacetátu v hexáne) a získa sa 77 mg (92%) 2-tiometyl-4-brómtiazolu 21b. Rf = 0,58 (silikagél, 10% etylacetátu v hexáne); IČ (film) vmax 3118, 2926, 1459, 1430, 1388, 1242, 1040, 966, 876, 818 cm’1; XH NMR, 500 MHz deuterochloroform) δ 7,07 (s, 1H, ArH), 2,69 (s, 3H, SCH3) ; GC/MS (EI), vypočítané pre C4H4BrNS2 (M+) 209/211, nájdené 209/211.
e· · • · · ·· • · · ·· • ·<*·· · ·· e · ·· ···· · ·· ·· ···· ··
• • · •
··· • ·
• • · ·
• • ·
··· ·· •
2-Etoxy-4-brómtiazol 21d ilustrovaný v schéme 4
K roztoku 58 mg (0,239 mmol, 1,0 ekvivalentu) 2,4-dibrómtiazolu 20 v 2,4 ml (0,1 M) etanolu sa pridá 122 mg (3,05 mmol,
12,8 ekvivalentu) hydroxidu sodného a získaný roztok sa mieša pri 25°C ak podía TLC nevymizne dibromid (asi 30 hodín). Získaný žltý roztok sa potom extrahuje medzi 10 ml éteru a 10 ml nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa extrahuje 10 ml éteru a spojené organické extrakty sa premyjú 20 ml solanky, sušia sa nad síranom sodným a opatrne sa odparia za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 17% éteru v hexáne) sa získa 45 mg (91%) 2-etoxy-4-brómtiazolu 21d vo forme prchavého oleja. Rf = 0,58 (silikagél, 17% éteru v hexáre) ; IČ (film) vmax 3125, 2983, 2936, 2740, 1514, 1480, 1392, 1360, 1277, 1234, 1080, 1018, 897, 823 cm-1; XH NMR (500 MHz deuterochloroform) δ 6,57 (s, 1H, ArH) , 4,48 (kv, J=7,0 Hz, 2H, CH3CH2) , 1,43 (t, J=7,0 Hz, CH3CH2) ; GC/MS (EI), vypočítané pre C4H4BrNSO (M+) 193/195, nájdené 193/195.
2-Metoxy-4-brómtiazol 21p ilustrovaný v schéme 4
K rozcoku 253 mg (1,04 mmol, 1,0 ekvivalentu) 2,4-dibrómtiazolu 20 v 10,5 ml (0,1 M) metanolu sa pridá 555 mg (13,9 mmol, 13,3 ekvivalentu) hydroxidu sodného a získaný roztok sa mieša pri 25°C ak podľa TLC nevymizne dibromid (asi 16 hodín). Získaný žltý roztok sa potom extrahuje medzi 10 ml éteru a 10 ml nasýteného roztoku chloridu amónneho a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa extrahuje 10 ml éteru a spojené organické extrakty sa sušia nad síranom sodným a opatrne sa odparia za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 10% éteru v hexáne) sa získa 138 mg (82%) 2-metoxy-4-brómtiazolu 21p vo forme prchavého oleja. Rf = 0,56 (silikagél, 17% éteru v hexáne) ; IČ (film) Vmax 3125, 2952, 2752, 1524, 1520, 1481, 1417, 1277, 1238, 1081, 982, 884, 819 cm-1; XH NMR
·· • • · ···· ··
• · • • • • • • ·
• • · • • ··· • •
• ···· • · • • • · •
• • • · • • •
• · · · • • · ··· • · •
(500 MHz, deuterochloroform) δ 6,58 (s, 1H, írH) , 4,09 (kv, 3H, CH3) ; GC/MS (EI), vypočítané pre CsHgBrNSO (M) 207/209, nájdené 207/209.
2-Hydroxymetyl-4-brómtiazol 21H ilustrovaný v schéme 4
K roztoku 50 mg (0,206 mmol, 1,0 ekvivalentu) 2,4-dibrómtiazolu 20 v 2,0 ml (0,1 M) bezvodého éteru sa pri teplote -78°C pridá 154 μΐ (1,6 M roztok v hexáne, 0,274 mmol, 1,2 ekvivalentu) a získaný roztok sa mieša 30 minút pri tejto teplote. Pri -78°C sa pridá 32 μΐ (0,412 mmol, 2,0 ekvivalentu) dimetylformamidu a po 30 minútach miešania pri -78°C sa reakčná zmes pomaly v priebehu 2 hodín zahreje na 25°C. Pridajú sa 2,0 ml hexánu a získaná zmes sa filtruje cez krátku kolónu silikagélu za elúcie zmesou 30% etylacetátu v hexáne. Rozpúšťadlo sa odparí a získa sa 50 mg surového aldehydu 22, ktorý sa priamo použije v ďalšom kroku.
K roztoku 50 mg aldehydu 20 v 2,0 ml metanolu sa pri 25°C pridá 15 mg (0,397 mmol, 1,9 ekvivalentu) hydridu sodného a získaná zmes sa mieša 30 minút pri tejto teplote. Pridá sa 1,0 ml etylacetátu a 2,0 ml hexánu a zmes sa filtruje cez krátku kolónu silikagélu za elúcie etylacetátom. Rozpúšťadlá sa potom odparia a surový produkt sa čistí pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 20 až 50% etylacetátu v hexáne) a získa sa 25 mg (63% po dvoch krokoch) 2-hydroxymetyl-4-brómtiazolu 21H. Rf = 0,16 (silikagél, 18% etylacetátu v hexáne); IČ (film) vmax 3288, 3122, 2922, 2855, 1486, 1447, 1345, 1250, 1183, 1085, 1059, 967, 893 cm-1; 1H NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,20 (s, 1H, ArH), 4,93 (s, 2H, CH2) ; HRMS (FAB) , vypočítané pre C4H4BrNOS (M+H+) 193, 9275, nájdené 193, 9283.
2-(terc-Butyldimetylsilyloxymetyl)-4-brómtiazol 21s ilustrovaný v schéme 5
K roztoku 59 mg (0,304 mmol, 1,0 ekvivalentu) alkoholu 21H v
1,0 ml (0,608 (0,456 ·· · • · · • · ···· (0,3 M) dichlórmetánu sa pri 25°C mmol, mmol, minútach a potom odparení
Rf = 60
2,0 ekvivalentu) imidazolu, ···· ·· ···· • · • ··· • · • · ··· pridá potom
1,3 ekvivalentu) terc-butyldimetylchlórsilánu.
pri 25°C sa reakčná sa filtruje cez silikagél sa získa mg (96%)
10%
2943, 2858, 1489,
1465,
780 cm-1; XH NMR (500
MHz, •· · •· •· •· ·· · mg mg
Po zmes rozloží 100 ml metanolu za elúcie dichlórmetánom. Po požadovaného silyléteru
21s.
etylacetátu v hexáne)
1355, 1254, 1193, ; IČ (film)
1108, 887,
Vmax
841, deuterochloroform) δ 7,16 (s, 1H, ArH),
0,94
4,93 (s, 2H, CH2), (s, 9H, SiC(CH3) 3(CH3)2) , 0,12 (s, 6H,
SiC(CH3) 3(CH3)2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre Ci0Hi8BrNOSSi (M+H+)
308,0140, nájdené 308,0151.
2-Vinyl-4-orómtiazol 21q ilustrovaný v schéme 5
K roztoku 437 mg (1,80 mmol, 1,0 ekvivalentu) 2,4-dibrómtiazolu 20 v toluéne sa pridá 552 μΐ (1,89 mmol, 1,05 ekvivalentu) tri-n-butyl(vinyl)cínu, potom 208 mg (0,180 mmol, 0,1 ekvivalentu) Pd(PPh3)4 a získaná zmes sa zahrieva na 100°C. Po 21 hodinách sa reakčná zmes ochladí a čistí sa priamo pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 0 až 9% éteru v hexáne) a získa sa 285 mg (83%) 2-vinyl-4-brómtiazolu 21q vo forme oleja. Rf = 0,50 (silikagél, 17% éteru v hexáre) ; IČ (film) vmax 3121, 1470, 1259, 1226, 1124, 1082, 975, 926, 887, 833 cm-1;
XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,13 (s, 1H, ArH), 6,86 (dd, J=17,5, 11,0 Hz, 1H, CH=CH2) , 6,09 (d, J=17,5 Hz, 1H,
CHCH2), 5,59 (d, J=10,5 Hz, 1H, CHCH2) ; GC/MS (EI) , vypočítané pre C5H4BrNS (M+) 189/191, nájdené 189/191.
2-Etyl-4-brómtiazol 21r ilustrovaný v schéme 5
K roztoku 279 mg (1,47 mmol, 1,0 ekvivalentu) 2-vinyl-4-brómtiazolu 21q v 15 ml (0,1 M) etanolu sa pridá 50 mg (0,220 mmol, 0,15 ekvivalentu) oxidu platičitého a získaná zmes sa mieša 4 hodiny pri 25°C vo vodíkovej atmosfére. Po filtrácii cez krátku kolónu silikagélu za elúcie etylacetátom a opatrnom odparení za zníženého tlaku sa získa 238 mg (84%) 2-etyl-4-brómtiazolu 21r. Rf = 0,63 (silikagél, dichlórmetán) ; IČ (film) Vmax 3122, 2974, 2932, 1483, 1456, 1245, 1181, 1090, 1040, 956, 884, 831 cm-1; τΗ NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,08 (s, 1H, ArH), 3,03 (kv, J=7,5 Hz, 2H, CH2CH3) , 1,37 (t, J=7,5 Hz, 2H, CH2CH3) ;
GC/MS (EI), vypočítané pre CsHgBrNS (M+) 191/193, nájdené
191/193.
2-Tiometyl-4-trimetylstanyltiazol 8b ilustrovaný v schéme 3
K roztoku 51 mg (0,24 mmol, 1,0 ekvivalentu) brómtiazolu 21b v 4,9 ml (0,1 M) odplyneného toluénu sa pridá 498 μΐ (2,4 mmol, 10 ekvivalentov) hexametyldicínu a 14 mg (0,012 mmol, 0,05 ekvivalentov) Pd(PPh3)4 a reakčná zmes sa 3 hodiny zahrieva na 80°C. Potom sa reakčná zmes ochladí na 25°C a po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 5% trietylamínu v hexáne) sa získa 71 mg (100%) stanánu 8b. Rf = 0,67 (silikagél; vopred spracovaný Et3N, 10% etylacetátu) ; IČ (film) vmax 2981, 2924, 1382, 1030, 772 cm“1; ΧΗ NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,25 (s, 1H, ArH), 2,70 (s, 3H, SCH3) , 0,32 (s, 9H, Sn(CH3)3); HRMS (FAB), vypočítané pre C7Hi3NS2Sn (M+H+) 295, 9588, nájdené 295,9576.
2-Metoxy-4-trimetylstanyltiazol 8p ilustrovaný v schéme 4
K roztoku 147 mg (0,758 mmol, 1,0 ekvivalentu) brómtiazolu 21p v 7,6 ml (0,1 M) odplyneného toluénu sa pridá 785 μΐ (3,79 mmol, 5,0 ekvivalentu) hexametyldicínu a 88 mg (0,076 mmol) Pd(PPh3)4 a reakčná zmes sa 30 minút zahrieva na 100°C podľa postupu opísaného na prípravu stanánu 8b. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 5% trietylamínu v hexáne) sa získa 170 mg (81%) stanánu 8p. Rf = 0,49 (silikagél; vopred spracovaný Et3N, 17% éteru v hexáne); IČ (film) vmax 2985, 2948, 2915, 1512, 1414, 1259, 1234,
·· • • · ···· ··
• · • • • • 9 · ·
• • · • • ··· • ·
• ···· • · • • • · ·
• • • • • • ·
···· • ·· ··· ·· ·
1219, 1087, 988 cm-1; ΣΗ NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,72 (s, 1H, ArH), 4,07 (s, 3H, OCH3) , 0,32 (s, 9H, Sn(CH3)3); HRMS (FAB), vypočítané pre C7Hi3NOSSn (M+H+) 279, 9818, nájdené 279,9810.
2-(terc-butyldimetylsilyloxymetyl)-4-tri-n-butylstanyltiazol 8s ilustrovaný v schéme 5
K roztoku 20 mg (0,065 mmol, 1,0 ekvivalentu) brómtiazolu 21 v 1,0 ml (0,07 M) éteru sa pri teplote -78°C pridá 49 μΐ (1,6 M roztok v hexáne, 0,078 mmol, 1,2 ekvivalentu.! n-BuLi a získaná zmes sa 10 minút mieša pri teplote -78°C. Potom sa pridá 23 μΐ (0,078 mmol, 1,2 ekvivalentu) tri-n-butylcínchloridu, roztok sa mieša 10 minút pri -78°C a potom sa pomaly v priebehu 1 hodiny zahreje na 25°C. Reakčná zmes sa zriedi 2,0 ml hexánu a potom sa filtruje cez silikagél za elúcie zmesou 20% etylacetátu v hexáne. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolóncvej chromatografie (silikagél, vopred spracovaný trietylamínom, 5% éteru v hexáne) sa získa 35 mg (85%) požadovaného stanánu 8s. Rf = 0,36 (silikagél, 5% etylacetátu v hexáne); IČ (film) vmax 2955, 2928, 2856, 1464, 1353, 1255, 1185, 1103, 1081, 1006, 841 cm-1; NMR (500 MHz, deuterobenzén) δ 7,08 (s, 1H, ArH), 4,98 (s, 2H, CH2) , 1, 75-1,57 (m, 6H, CH3CH2) , 1,44-1,31 (m, 6H, CH3CH2CH2) , 1,26-1,09 (m, 6H, CH3CH2CH2CH2) , 0,94 (s, 9H, SiC (CH3) 3 (CH3) 2) , 0,91 (t, J= =7,0 Hz, 9H, CH3), -0,02 (s, 6H, SiC (CH3) 3 (CH3) 2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C22H4sNOSSiSn (M+H+) 520,2093, nájdené 520,2074.
2-Hydroxymetyl-4-tri-n-butylstanyltiazol 8h ilustrovaný v schéme 5
K roztoku 20 mg (0,039 mmol, 1,0 ekvivalentu) silyléteru v
1,0 ml (0,04 M) tetrahydrofuránu sa pridá 46 μΐ (1,0 M roztok v tetrahydrofuráne, 0,046 mmol, 1,2 ekvivalentu) TBAF a reakčná zmes sa mieša 20 minút pri teplote 25°C. Pridajú sa 2,0 ml hexánu a zmes sa filtruje cez silikagél za elúcie etylacetátom. Po
• · 9 99 • · · · ·· ·
9 9 9 9 • • • • ··
• 9 9 9 • ··· • • •
• 9999 9 9 • • • 9 • •
9 9999 9 9 9 9 • · • ·· · • ·· • • 999
odparení rozpúšťadiel sa získa 15 mg (95%) požadovaného alkoholu 8h. Rf = 0,09 (silikagél, 20% éteru v hexáne); IČ (film) vmax 3209, 2956, 2923, 2855, 1461, 1342, 1253, 1174, 1064, 962 cm'1;
1H NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,30 (m, 1H, ArH), 4,99 (s, 2H, CH2), 3,64 (šs, 1H, OH), 1,62-1, 45 (m, 6H, CH3CH2) , 1,38-1,27 (m, 6H, CH3CH2CH2), 1,19-1,02 (m, 6H, CH3CH2CH2CH2) , 0,88 (t,
J=7,0 Hz, 9H, CH3); HRMS (FAB) , vypočítané pre Ci6H3iNOSSn (M+H+) 406,1228, nájdené 406,1237.
2-Fluórmetyl-4-tri-n-butylstanyltiazol 8j ilustrovaný v schéme 5
K roztoku 90 mg (0,223 mmol, 1,0 ekvivalentu) alkoholu 8h v
2,2 ml (0,1 M) dichlórmetánu sa pri -78°C pridá 32 μΐ (0,242 mmol, 1,1 ekvivalentu) DAST a roztok sa mieša 10 minút pri tejto teplote. Reakčná zmes sa rozloží 2 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a nechá sa zahriať na 25°C a potom sa extrahuje medzi 15 ml dichlórmetánu a 15 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa dvakrát extrahuje 1.5 ml dichlórmetánu. Spojené organické extrakty sa premyjú 40 ml solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, vopred spracovaný trietylamínom, 17% éteru v hexáne) sa získa 52 mg (57%) stanánu 8j. Rf = 0,59 (silikagél, 17% éteru v hexáne); IČ (film) vmax 2956, 2925, 2870, 2863, 1464, 1376, 1358,
1184, 1084, 1023, 874, 807 cm-1; TH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,41 (s, 1H, ArH), 5,69 (d, J=47,5 Hz, 2H, CH2F) , 1,58-1,52 (m, 6H, (CH3Cŕf2 (CH2) 2) 3Sn) , 1,36-1, 29 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2)3Sn) , 1,14-1,07 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) , 0,88 (t,
J=7,5 Hz, 9H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C16H30FNSSn (M+H+) 408,1183, nájdené 408,1169.
2-Etoxy-4-tri-n-butylstanyltiazol 8d ilustrovaný v schéme 4
Roztok 82 mg (0,394 mmol, 1,0 ekvivalentu) brómtiazolu 21d v
• · • ·· ···· ·· •
• · • • · • • · • ·
• • · • · ··· • · •
• ···· • · · • • · · •
• • • · • • · •
• · · · • ·· ··· ·· • · ·
3,9 ml (0,1 M) éteru reaguje s 289 μΐ (1,5 M roztok v hexáne, 0, 433 mmol, 1,1 ekvivalentu) n-BuLi a 128 μΐ (0,473 mmol, 1,2 ekvivalentu) n-butylcinchloridu podľa postupu opísaného pri príprave stanánu 8s a po čistení pomocou kolónovej chromatografie
(silikagél, vopred spracovaný trietylamínom, hexán) sa získa
161 mg (98%) stanánu 8d. IČ (film) vmax 2956, 2927, 2870, 2851,
1504, 1472, 1258, 1257, 1232, 1211, 1082, 1023, 960, 894,
872 cm \· XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,65 (s, 1H, ArH) ,
4,43 (kv, J=7,0 Hz, 2H, CH3CH2O) , 1,61-1,53 (m, 6H,
(CH3CH2 (CH2) 2) 3Sn) , 1,43 (t, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH2) , 1,37-1, 30 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) , 1, 08-1, 04 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) , 0,89 (t, J=7,5 Hz, 9H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) ; HRMS (FAB), vypočítané pre
Ci7H33NOSSn (M+H+) 418,1380, nájdené 418,1396.
2-Vinyl-4-tri-n-butylstanyltiazol 8q ilustrovaný v schéme 5
Roztok 191 mg (1,00 mmol, 1,0 ekvivalentu) brómtiazolu 21q v 14,0 ml (C,07 M) éteru reaguje s 804 μΐ (1,5 M roztok v hexáne,
1,2 ekvivalentu) n-BuLi a 341 μΐ (1,26 mmol, 1,25 ekvivalentu) tri-n-butylcínchloridu podľa postupu opísaného na prípravu stanánu 8s. Po čistení pomocou kolónovej chromatografie (silikagél, vopred spracovaný trietylamínom, hexán) sa získa 112 mg (28%) stanánu 8q. Rf = 0,63 (silikagél, 17% éteru v hexáne); IČ (film) vmax 2956, 2925, 2870, 2850, 1459, 1377, 1205, 1080, 981, 913,
868 cm-1; ΤΗ NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,21 (s, 1H, ArH), 7,02 (dd, J=17,5, 11,0 Hz, 1H, CHCH2) , 6,00 (d, J=17,5 Hz, 1H, CHCH2), 5,52 (d, J=ll,0 Hz, 1H, CH=CH2) , 1,61-1,53 (m, 6H, (CH3CH2 (CH2) 2) 3Sn) , 1,37-1,27 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) , 1,13-1,10 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) , 0,88 (t, J=7,5 Hz, 9H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C17H3iNSSn (M+H+) 402,1279, nájdené 402,1290.
2-Etyl-4-tri-n-butylstanyltiazol 8r ilustrovaný v schéme 5
Roztok 238 mg (1,24 mmol, 1,0 ekvivalentu) brómtiazolu 21r v
·· ···· ··
• · • • ·
• • ··· • ·
• · • • · ·
• • • • ·
• · ··· ··
• · · .·!.!
• · ···· ·
12,0 ml (0,1 M) éteru sa pri -78°C reaguje s 909 μΐ (1,5 M roztoku v hexáne, 1,36 mmol, 1,1 ekvivalentu) n-BuLi a 403 μΐ (1,49 mmol, 1,2 ekvivalentu) tri-n-butylcínchloridu podľa postupu opísaného na prípravu stanánu 8s. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, vopred spracovaný trietylamínom, hexán) sa získa 357 mg (72%) stanánu 8r. Rf = 0,64 (silikagél, dichlórmetán); IČ (film) vmax 2956, 2925, 2870, 2852, 1464, 1376, 1292, 1174, 1072, 1033, 953, 875 cm-1; XH NMR (400 MHz, deuterochloroform) δ 7,18 (s, 1H, ArH) , 3,10 (kv,
J=7,6 Hz, 2H, CH3CH2Ar), 1,60-1,50 (m, 6H, (CH3CH2 (CH2) 2) 3Sn) , 1,39 (t, J=7,6 Hz, 3H, CH3CH2Ar) , 1,36-1,30 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) ,
1,13-1,08 (m, 6H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) , 0,88 (t, J=7,3 Hz, 9H, (CH3CH2CH2CH2) 3Sn) ; HRMS (FAB), vypočítané pre Ci7H33NSSn (M+H+) 404,1434, nájdené 404,1416.
cis-Makrolaktón 18h ilustrovaný v schéme 3
Roztok 10,0 mg (0,020 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 7, 16,0 mg (0,040 mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu 8h a 2,1 mg (0,002 mmol, 0,1 ekvivalentu) Pd(PPh3)4 v 200 μΐ (0,1 M) odplyneného toluénu sa 20 minút zahrieva na 100°C. Reakčná zmes sa naleje do 5 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného-chloridu sodného a dvakrát sa extrahuje 5 ml etylacetátu. Spojené organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným, rozpúšťadlá sa odparia a zvyšok sa čistí pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (500 mm silikagélová doska, 50% etylacetátu v hexáne) a získa sa 7,5 mg (76%) makrolaktónu 18h. Rf = 0,29 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22D -44,2 (c 0,60, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3387 (š), 2925, 2859, 1730, 1688, 1508, 1461, 1256, 1183, 1150, 1061, 980, 755 cm’1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,12 (s, 1H, ArH), 6,61 (s, 1H, CH=C(CH3)), 5,45 (ddd, J=10,5, 10,5, 4,5 Hz, 1H, CH=CHCH2) , 5,38 (ddd, J=10,5, 10,5, 5,0 Hz, 1H, CH=CHCH2) , 5,31 (d, J=8,5 Hz, 1H, CHOCO), 4,92 (d, J=4,0 Hz, 2H, CH2OH) , 4,23 (ddd, J=ll,5, 5,5,
·· • · • • • • • · ···· • • • · ·· • • • ···· • ··· • ·· ·
• • • · • • • • ·
• · · · • ·· ·· · • · • ·
2,5 Hz, 1H, (CH3)2CCH(OH) ) , 3,75-3,71 (m, 1H, CfíOH (CHCH3) ) ,3,32 (d, J=5,5 Hz, 1H, C(CH3)2CHOH) , 3,25 (t, J=4,0 Hz, 1H, CH2OH) ,
3,13 (kvd, J=7,0, 2,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 3,03 (d, J=2,0 Hz, 1H, CH3CHCH (Oŕí) CHCH3) , 2,68 (ddd, J=15,0, 9,5, 9,5 Hz, 1H, =CHCH2CHO) , 2,50 (dd, J=15,0, 11,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,35 (dd, J=15,0, 2,5 Hz, 1H, CH2COO), 2,31-2,24 (m, 1H, =CHCH2CHO) , 2,24-2,16 (m, 1H) , 2,09 (s, 3H, CH=CCH3) , 2,06-1,98 (m,1H) ,
1,82-1,73 (m, 1H) , 1,72-1, 62 (m, 1H) , 1,39-1,17 (m, 3H) ,1,33 (s, 3H, C(CH3)2), 1,19 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,08(s,
3H, C(CH3)2), 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C26H39NOgS (M+Cs+) 626, 1552, nájdené 626, 1530.
Epothilon E (3) ilustrovaný v schémach 2 a 3
K roztoku 10,0 mg (0,020 mmol, 1,0 ekvivalentu) laktónu 18h v 600 μΐ (0,03 M) metanolu sa pridá 32 μΐ (0,606 mmol, 30 ekvivalentov) acetonitrilu, 10 mg (0,102 mmol, 5 ekvivalentov) hydrogenuhličitanu sodného a 27 μΐ (35% roztok vo vode (hmotnostne) , 0,303 mmol, 15 ekvivalentov) peroxidu vodíka a reakčná zmes sa mieša 3 hodiny pri 25°C. Potom sa pridá ďalších 32 μΐ (0,606 mmol, 30 ekvivalentov) acetonitrilu, 10 mg (0,102 mmol, 5 ekvivalentov) hydrogenuhličitanu sodného a 27 μΐ (35% (hmotn.) roztok vo vode, 0,303 mmol, 15 ekvivalentov) peroxidu vodíka a miešanie pokračuje ďalšie 3 hodiny. Reakčná zmes sa potom priamo filtruje cez krátky stĺpec silikagélu za elúcie éterom a filtrát sa odparí za zníženého tlaku. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 50% etylacetátu v hexáne) sa získa 5,0 mg (50% nezreagovanej východiskovej látky 18h a 3,4 mg (33%) epothilonu E (3). Rf = 0,56 (silikagél, 66% etylacetátu v hexáne); [a]22D = -27,5 (c 0,20, chloroform); IČ (film) vmax 3413, 2928, 2867, 1731, 1689, 1462, 1375, 1257, 1152, 1061, 978, 756 cm-1; ľH NMR (600 MHz, deuterochloroform) Ô 7,13 (s, 1H, ArH) , 6,61 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,46 (dd, J=8,l, 2,4 Hz, 1H, CHOCO) , 4,94 (d, J=5,2 Hz, 2H, ·· • · ·· · • · ·· ···· • ·
CH2OH) , 4,16-4,12 85 a · · ···· • ···· · · · · • a e · · ae a · · ·· ··· 3,82-3,78 (m, • · • · · • e ·· 1H,
(m, 1H, (CH3)2CCH(OH) ) ,
CfíOH (CHCH3) ) , 3,66 (šs, 1H, OH), 3,23 (kvd, J=6,8, 5,2 Hz, 1H,
CH3CH(C=O) ) , 3,04 (ddd, J=8,l, 4,5, 4,5 Hz, 1H, CH2CH(O)CHCH2) ,
2,91 (ddd, J=7,3, 4,5, 4,1 Hz, 1H, CH2CH(O)CHCH2) , 2,61 (t,
J=5,2 Hz, 1H , CH2OH) , 2 ,55 (dd, J=14,7, 10, 4 Hz, 1H, CH2COO) ,
2,48 (šs, 1H r OH), 2,45 (dd, J=14,7, 3,2 Hz, 1H, CH2COO), 2, 14-
-2,07 (m, 1H , CH2CH(O)CHCH2) , 2,11 (s, 3H, CH=CCH3) , 1,91 (ddd,
J=15,l, 8,1, 8,1 Hz, 1H, CH2CH (0) CHCH2) , ľ., 78-1, 66 (m, 2H,
1,18 (d,
1,52-1,38 (m,
CH2CH(O)CHCH2) ,
5H), 1,36 (s, 3H, C(CH3)2),
3H, J=6,8 Hz,
CH3CH(C=O) ) ,
1,01 (d,
J=7,0 Hz, 3H, (M+H+) 510,2525,
CH3CHCH2); HRMS (FAB), nájdené 510,2539.
vypočítané pre
C26H39NO7S cis-Makrolaktón
18b ilustrovaný v schéme 3
Roztok 9,2 mg (0,018 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 7, mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu
8b a 2,1 mg (0,0018 mmol, 0,1 ekvivalentu Pd(PPh3)4 v 180 μΐ (0,1 M) odplyneného toluénu sa 40 minút zahrieva na 100°C podľa postupu opísaného na prípravu laktónu 18h. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 75% éteru v hexáne) sa získa 4,1 mg (44%) makrolaktónu 18b. Rf = 0,50 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -38,6 (c 0,21, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3444, 2925, 1732, 1682, 1259,
1037, 756 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform)
10,5,
4,0 Hz,
2H,
CH=CHCH2), 5,39 (ddd, J=10,5, 10,5, 4,0 Hz,
1H, CH=CHCH2) ,
5,29 (d, J=8,0 Hz,
1H, CHOCO), 4,20 (ddd, J=ll,0,
5,5,
2,5 Hz,
1H, (CH3) 2CCH(OH) ) ,
3,75-3,73 (m, 1H, CHOH (CHCH3) ) , 3,13 (kvd,
J=6,5,
2,0 Hz, 1H,
CH3CH(C=O) ) , 2,98 (d, J=2,0 Hz,
1H,
CHOH(CHCH3) ) , 2,93 (d,
J=5,5 Hz, 1H, (CH3)2CCH(OH) ) ,
2,71 (ddd,
J=15,0, 10,0, 10,0 Hz,
1H, CH=CHCH2) , 2,70 (s, 3H,
SCH3) ,
2,51 (dd, J=15,5, 11,5 Hz, 1H, CH2COO) ,
2,30 (dd, J=15,0,
2,5 Hz, 1H,
CH2COO) , 2,28-2,16 (m, 2H) , 2,13 (d,
J=l,0 Hz, 3H, CH=CCH3) ,
2,06-1,98 (m, 1H) , 1,79-1,60 (m,
2H) ,
1,40-1,06 (m, 3H), 1,33 (s, 3H, C(CH3)2), 1,19 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,09 (s, ·· ···· • · • ···
3H, C(CH3)2)r 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) ; HRMS (FAB) , vypočítané pre C26H39NO5S2 (M+Cs+) 642,1324, nájdené 642,1345.
trans-Makrolaktón 19b ilustrovaný v schéme 3
Roztok 6,9 mg (0,014 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 11,
8,2 mg (0,028 mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu
8b a
1,6 mg (0,0014 mmol, 0,1 ekvivalentu) neného toluénu sa 40 minút
Pd(PPh3)4 v 140 μΐ zahrieva na 1CO°C (0,1 M) odplypodľa postupu opísaného na prípravu laktónu
18h. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 75% éteru v hexáne) sa získa 5,0 mg (72%) makrolaktónu 19b. Rf = 0,47 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22 D-32,9 (c 0,35, chloroform); IČ (film) vmax 3488, 2928, 1728, 1692, 1259, 1036, 800, 757 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,00 (s, 1H, ArH), 6,48 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,53 (ddd, J=15,0,7,5,
7.5 Hz, 1E, CH=CHCH2), 5,40 (d, J=8,0 Hz, 1H, CHOCO) , 5,39 (ddd,
J=15,0, 7,5, 7,5 Hz, 1H, CH=CHCH2) , 4,12 ;ddd, J=ll,0,2,5,
2.5 Hz, 1H, (CH3) 2CCHOH) , 3, 77-3, 74 (m, 1H, CHOH (CHCH3) ) ,3,24 (m, 1H, CH=CHCH2), 3,07 (m, 1H, CH3CH(C=O) ) , 2,70 (s, 3H, SCH3) ,
2,61 (d, J=3,5 Hz, 1H, CHOH(CHCH3) ) , 2,59-2,44 (m, 5H), 2,19-2,12 (m, 1H), 2,13 (s, 3H, CH=CCH3) , 2,02-1, 94 (m, 1H) , 1, 70-1,55 (m, 2H), 1,48-1,41 (m, 1H) , 1,29 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H,
CH3CHCH2); HRMS (FAB), vypočítané pre C26H39NO5S2 (M+Cs+) 642,1324, nájdené 642,1298.
cis-Makrolaktón 18d ilustrovaný v schéme 3
Roztok 14 mg (0,028 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 7, mg (0,055 mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu 8d a 2,0 mg (0, 008 mmol, 0,3 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 280 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 20 hodín pri 25°C. Získaná zmes sa odparí za zníženého tlaku, filtruje sa cez silikagél za ··· · · · · · · • · B · · ··· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· · elúcie etylacetátom a čistí sa pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 50% éteru v hexáne) a získa sa 12,5 mg (89%) makrolaktónu 18d. Rf = 0,30 (silikagél, 66% éteru v hexáne); [a]22 D -70,2 (c 0,63, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3501 (š), 2934, 1732, 1688, 1526,
1472, 1386, 1232, 1150, 1091, 1007 cm-1; ľH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,47 (s, 1H, ArH), 6,33 (s, 1H, CH=C(CH3)), 5,43 (ddd, J=10,5, 10,5, 3,5 Hz, CH=CHCH2) , 5,37 (ddd, J=10,5, 10,5,
4,5 Hz, 1H, CH=CHCH2), 5,26 (dd, J=9,5, 1,5 Hz, 1H, CHOCO) , 4,44 (kv, J=7,C Hz, 2H, CH3CH2O), 4,18 (ddd, J=ll,0, 5,5, 2,5 Hz, 1H, (CH3)2CCH(OH) ) , 3,73 (m, 1H, CHOH (CHCH3) ) , 3,12 (kvd, J=7,0,
2,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 2,98 (d, J=l,5 Hz, 1H, OH), 2,95(d,
J=5,5 Hz, 1H, OH), 2,69 (ddd, J=15,Ó, 10,0, 10,0 Hz,1H,
CH=CHCH2CHO) , 2,49 (dd, J=15,5, 11,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,36 (dd,
J=15,5, 2,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,23-2,16 (m, 3H) , 2,11 (s,3H,
CH=C(CH3)), 2,04-1, 98 (m, 1H) , 1,77-1,71 (m, 1H) , 1,70-1,61(m,
1H), 1,42 (t, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH2O) , 1,38-1,16 (m, 2H) , 1,31 (s, 3H, C(CH3)2), 1,17 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C27H4iNO6S (M+Cs+) 640,1709, nájdené 640,1732.
trans-Makrolaktón 19d ilustrovaný v schéme 3
Roztok 14 mg (0,028 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 11, 23 mg (0,055 mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu 8d a 2,0 mg (0,008 mmol, 0,3 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 280 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 20 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného pre syntézu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 50% etylacetátu v hexáne) sa získa 12 mg (86%) makrolaktónu 19d. Rf = 0,27 (silikagél, 66% éteru v hexáne); [a]22D -28,0 (c 0,48, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3495 (š), 2930, 1732, 1690, 1526, 1472, 1233, 1017, 976 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,50 (s, 1H, ArH), 6,30 (s, 1H, CH=C(CH3)),
·· B ·· ···· ·* •
♦ · • • · • • Λ • ·
• • • • · ···· • • · • · · • · ··· • · • • 9 • · • · t •
···· • ·· ··· ·· ···
5.57- 5,51 (m, 1H, CH=CHCH2) , 5,42-5, 36 (m, 1H, CH=CHCH2) , 5,37 (dd, J=9,0, 2,5 Hz, 1H, CHOCO) , 4,46 (kv, J=7,0 Hz, 2H, CH3CH2O) , 4,10 (ddd, J=10,5, 3,5, 3,0 Hz, 1H, (CH3) 2CCH(OH) ) , 3,76-3, 73 (m, 1H, CHOH(CHCH3) ) , 3,23 (kvd, J=7,0, 4,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 3,07 (d, J=3,5 Hz, 1H, OH), 2,57-2,38 (m, 3H) , 2,56 (dd, J=15,5,
10.5 Hz, 1H, CH2COO), 2,47 (dd, J=15,5, 2,5 Hz, 1H, CH2COO) ,
2,18-2,16 (m, 1H) , 2,13 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,03-1,94 (m, 1H) , 1,70-1,55 (m, 2H) , 1,48-1,41 (m, 1H) , 1,44 (t, J=7,0 Hz, 3H,
CH3CH2O), 1,29 (s, 3H, C(CH3)2), 1,27-1,16 (m, 1H) , 1,18 (d,
J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 0,98 (d,
J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C27H4iNOgS (M+Cs+) 640,1709, nájdené 640,1731.
trans-Makrolaktón 19h ilustrovaný v schéme 3
Roztok 5,1 mg (0,010 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 11, 8,0 mg (0,020 mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu 8h a 1,1 mg (0,001 mmol, 0,1 ekvivalentu) Pd(PPh3)4 v 100 μΐ (0,1 M) odplyneného toluénu sa 20 minút zahrieva na 100°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18h. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 50% etylacetátu v hexáne) sa získa 4,3 mg (88%) makrolaktónu 19h. Rf = 0,20 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -31,5 (c 0,60, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3410 (š), 2930, 1726, 1692, 1463, 1374, 1255, 1180, 1064, 973 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,13 (s, 1H, ArH) , 6,60 (s, 1H, Cíŕ=C(CH3)),
5,48 (ddd, J=15,0, 7,5, 7,5 Hz, 1H, CH=CHCH2) , 5,40 (dd, J=5,5,
5.5 Hz, 1H, CHOCO), 5,35 (ddd, J=15,0, 7,5, 7,5 Hz, 1H,
CH=CHCH2), 4,91 (d, J=7,0 Hz, 2H, CH2OH) , 4,23 (ddd, J=9,5, 3,5, 3,0 Hz, 1H, (CH3) 2CCH(OH) ) , 3,74 (ddd, J=7,0, 5,0, 2,5 Hz, 1H, CHOH(CHCH3) ) , 3,34 (t, J=7,0 Hz, 1H, CH2Oŕí) , 3,26 (kvd, J=7,0, 7,0 Hz, 1H, CH3CH(C=0)), 3,05 (d, J=3,5 Hz, 1H, C (CH3) 2CHOH) ,
3,00 (d, J=5,0 Hz, 1H, CH3CHCH(OH)CHCH3) , 2,56 (dd, J=15,5,
9.5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,47 (dd, J=15,5, 3,0 Hz, 1H, CH2COO) ,
2.58- 2,45 (m, 1H, =CHCH2CH) , 2,24-2,16 (m, 1H, =CHCH2CH) , 2,08 ·· · ·· ···· ·· • B · ··· · ·
B B B B B BBB B · • B··· · · · · · · · • e · b e · t
BB·· 9 ·· 999 ·· ··· (s, 3H, CH=CCH3), 1, 98-1, 90 (m, 1H) , 1, 63-1,56 (m, 2H) , 1,54-1,46 (m, 1H) , 1,41-1,30 (m, 1H) , 1,27 (s, 3H, C(CH3)z), 1,20 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C26H3gNO6S (M+Cs+) 626, 1552, nájdené 626, 1536.
cis-Makrolaktón 18j ilustrovaný v schéme 3
Roztok 12,5 mg (0,025 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 7, 20 mg (0,04 9 mmol, 2,0 ekvivalentu stanánu 8j) a 1,5 mg (0,006 mmol, 0,2 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 250 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 20 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 67% éteru v hexáne) sa získa 9 mg (74%) makrolaktónu 18 j. Rf = 0,32 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -65,3 (c 0,45, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3406 (š), 2924, 2852, 1732, 1682, 1455, 1366, 1263, 1192, 1148, 1096,
1043, 983, 881 cm-1; ľH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,21 (s, 1H, ArH), 6,62 (s, 1H, CH=C(CH3)), 5,60 (d, J=47,0 Hz, 2H,
CH2F) , 5,45 (ddd, J=10,5, 10,5, 4,0 Hz, 1H, CH=CHCH2) , 5,38 (ddd, J=10,0, 10,0, 5,0 Hz, 1H, Cŕí=CHCH2) , 5,31 (dd, J=10,0, 1,5 Hz,
1H, CHOCO), 4,19 (ddd, 1H, J=ll,0, 5,0, 2,5 Hz, 1H, (CH3)2CCÍÍ(OH) ) , 3,73 (m, 1H, CHOH (CHCH3) ) , 3,13 (kvd, J=7,0,
2,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 2,97 (d, J=2,0 Hz, 1H, OH), 2,93(d,
J=5,5 Hz, 1H, OH), 2,71 (ddd, J=15,0, 10,0, 10,0 Hz, 1H,
CH=CHCH2CHO), 2,51 (dd, J=15,5, 11,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,39 (dd,
J=15,5, 2,0 Hz, 1H, CH2COO), 2,29-2,22 (m, 1H) , 2,22-2,16(m,
1H), 2,11 (d, J=l,0 Hz, 3H, CH=C(CH3)), 2,06-1, 99 (m,1H) ,
1,77-1,71 (m, 1H) , 1,69-1,62 (m, 1H) , 1,38-1,16 (m, 3H) , 1,32 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,08 (s,
3H, C(CH3)2), 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHCH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C26H38FNO5S (M+Cs+) 628,1509, nájdené 628,1530.
·· • ·· ···· ·· •
• · • • • • • • • ·
• • · • • ··· • • •
• ···· • · • • • · • •
• • • • • • • •
··· · • ·· ··· ·· • · ·
trans-Makrolaktón 19j ilustrovaný v schéme 3
Roztok 15 mg (0,030 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu, mg (0,066 mmol, 2,2 ekvivalentu) stanánu 8j a 1,5 mg (0,C06 mmol, 0,2 ekvivalentu PdC12(MeCN)2 v 300 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 20 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18d. Po paratívnej tenkovrstvovej chromatografie doska, 50% etylacetátu v hexáne) sa makrolaktónu 19j . Rf = 0,17 (silikagél, čistení (250 mm získa pomocou presilikagélová
33% éteru [a]22 D 37,1 (c 0,55, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3508 (š),
2934, 1730, 1690, 1505, 1461, 1428, 1366, 1251, 1196, 1150,
1041, 977 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,22 (s, 1H,
ArH), 6,58 (s, 1H, CH=C(CH3)), 5,61 (d, J=47,0 Hz, 2H, CH2F) ,
5, 55-5,50 (m, 1H, CH=CHCH2) , 5,41-5,35 (m, 2H, CH=CHCH2 a CHOCO) ,
4,15 (ddd, J=10,0, 3,5, 3,0 Hz, 1H, (CH3) 2CCH(OH) ) , 3,75-3, 73 (m,
1H, CHOH(CHCH3) ) , 3,24 (kvd, J=7,0, 4,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 3,05 (d, J=4,0 Hz, 1H, OH), 2,62 (d, J=4,0 Hz, 1H, OH), 2,56 (dd, J=15,0, 10,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,49 (dd, J=15,5, 2,5 Hz, 1H,
CH2COO), 2,49-2,44 (m, 2H), 2,20-2,13 (m, 1H), 2,10 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,01-1,93 (m, 1H) , 1,67-1,56 (m, 2H) , 1,49-1,43 (m,
1H), 1,31-1,17 (m, 2H) , 1,28 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18 (d, J=6,5 Hz, 3H, CH3CH(C=O)), 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 0,98 (d, J=7,0 Hz, 3H,
CH3CHCH2); HRMS (FAB), vypočítané pre C26H38FNO5S (M+Cs+) 628,1509, nájdené 628,1487.
Silyléter 25 ilustrovaný v schéme 7
K roztoku 12,96 g (54,4 mmol, 1,0 ekvivalentu) alkoholu 13 v 180 ml (0,3 M) dimetylformamidu sa pri 0°C pridá 10,2 g (150,0 mmcl, 2,8 ekvivalentu) imidazolu a potom 13,5 g (89,9 mmol, 1,7 ekvivalentu) terc-butyldimetylchlórsilánu. Po 7 hodinách pri 25°C sa rozpúšťadlo odstráni za zníženého tlaku a získaný olej sa extrahuje medzi 200 ml éteru a 200 ml nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho. Vodná vrstva sa extrahu·· · • · ·· • 9 9
9 9 9
9 9
999 ·· · • · · • · · • ···· • · ···· · ·· ···· • ·· • ···· • · ··
99 ··999 je 200 ml éteru a spojené organické extrakty sa premyjú 550 ml solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 0 až 5% etylacetátu v hexáne) sa získa 16,03 g (84%) silyléteru 25 vo forme oleja. Rf = 0,48 (hexán) ; [oc]22d -17,5 (c 1,65, chloroform); IČ (tenký film) vmax 2954, 2928, 2857, 1472, 1361, 1278, 1252, 1082, 914, 836, 776, 677 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,15 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,74-5, 66 (m, 1H, CH=CH2) , 5,03 (šm, 1H, CH=CH2) , 5,01 (s, 1H, CH=CH2) 4,16 (dd, J=6,5, 6,5 Hz, 1H, CHOH) , 2,25 (m, 1H, CH2-CHCH2), 1,77 (s, 3H, CH=CCH3) , 0,88 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,04 (s, 3H, Si(CH3)2), -0,01 (s, 3H, Si(CH3)2).
Aldehyd 26 ilustrovaný v schéme 7
K roztoku 16,0 g (45,3 mmol, 1,0 ekvivalentu) olefínu 25 v zmesi 206 ml tetrahydrofuránu, 206 ml terc-butanolu a 41 ml vody sa pri 0°C pridá 5,84 g (49,8 mmol, 1,1 ekvivalentu) N-oxidu 4-metylmorfolínu (NMO) a potom 5,2 ml (2,5% hmotn./objem v terc-butanole, 0,453 mmol, 0,01 ekvivalentu) oxidu osmičelého. Zmes sa energicky mieša 13 hodín pri 25°C a potom sa rozloží pridaním 125 ml nasýteného vodného roztoku síričitanu sodného. Vznikajúci roztok sa mieša 2 hodiny a potom sa extrahuje medzi 150 ml etylacetátu a 150 ml vody. Organická fáza sa oddelí a vodná fáza sa dvakrát extrahuje 200 ml etylacetátu. Spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým, filtrujú sa a rozpúšťadlo sa odparí za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej chromatografie (silikagél, 50 až 90% éteru v hexáne) sa získa 1,0 g (6%) nezreagovanej východiskovej látky a
15,5 g (89%) požadovaného diolu ako zmesi diastereomérov v pomere približne 1:1. Rf = 0,44 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); IČ (tenký film) vraax 3387, 2952, 2928, 1252, 1080, 837,
777 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,28 a 6,26 (singlety, 1H celkom, CH=CCH3) , 4,47-4,42 (m, 1H, CHOSi) , 3,86-3,76 (m, 1H, CHOH), 3,61-3,55 a 3, 49-3,39 (m, 2H celkom, CH2OH) , 3,33 ·· · ·· ···· ·· • · · · · · · • · · · ···· · · ···· · · · 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
999 9 99 999 99 a 3,15 (2 dublety, J=2,0 a 3,5 Hz, 1H celkom, CHOH) , 2,46 a 2,45 (triplety, J=5,5 a 5,5 Hz, CH2OH) , 1,78 a 1,76 (singlety, 3H celkom), 1,63-1, 60 a 1,58-1,53 (m, 2H celkom, CH2), 0,88 a 0,87 (singlety, 9H celkom, SiC(CH3)3), 0,08 a 0,07 (singlety, 3H celkom, Si(CH3)2), 0,01 a 0,00 (singlety, 3H celkom, Si(CH3)2);
HRMS (FAB), vypočítané pre Ci3H27lO3Si (M+Na+) 409, 0672, nájdené
409,0662.
23,3 g (60,2 mmol, 1,0 ekvivalentu) diolov (získaných podľa postupu opísaného skôr) sa rozpustí v zmesi 400 ml metanolu a 200 ml vody a roztok sa ochladí na 0°C. Potom sa v priebehu 5 minút po častiach pridá 77,2 g (361,1 mmol, 6,0 ekvivalentov) jodistanu sodného a získaná suspenzia sa energicky mieša 30 minút pri 25°C. Po skončení reakcie sa zmes extrahuje medzi 500 ml dichlórmetánu a 500 ml vody a organická fáza sa oddelí. Vodná fáza sa extrahuje 500 ml dichlórmetánu a spojené organické extrakty sa premyjú 1 litrom solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 17 až 50% éteru v hexáne) sa získa 19,6 g (92%) aldehydu 26 vo forme ole-
ja. Rf = 0,35 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a]22 D -34,1
(c 2, 8, chloroform); IČ (tenký film) vmax 2954, 2928 , 2885, 2856,
1728, 1471, 1279, 1254, 1091, 838, 777, 677 cm’1; XH NMR
(500 MHz, deuterochloroform) δ 9,73 (dd, J=2,5, 2,5 Hz, 1H, CHO),
6, 34 (s, 1H, CH=CCH3), 4,70 (dd, J=8,0, 4,0 Hz, 1H, CHOSi), 2,68
(ddd, J=16,0, 8,3, 2,5 Hz, 1H, (CHO)CH2), 2,44 (ddd, J=16,0, 4,0,
2,5 Hz, 1H, (CHO)CH2), 1,80 (s, 3H, CH=CCH3) , 0,85 (s, 9H,
SiC(CH3)3), 0,05 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,01 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre Ci2H23IO2Si (M+Na+) 377,0410, nájdené
377,0402.
Metylester 28 ilustrovaný v schéme 7
Zmes 19,6 g (55,2 mmol, 1,0 ekvivalentu) aldehydu 26 a
50,2 g (134,0 mmol, 2,4 ekvivalentu) stabilizovaného ylidu 27 ·· · ·· ···· ·· • · · · · · · • · · · e ··· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ··· · ·· ··· ·· [pripraveného zo 4-bróm-l-buténu pomocou: (i) prípravy fosfóniovej soli; (ii) prípravy aniónu s KHMDS; a (iii) rozloženia MeOC(O)Cl] (pozri Marshall, J.A., a kol., J. Org. Chem. 51, 1735-1741 (1986) a Bestmann, H.J., Angew. Chem. Int. Ed. Engl.
1965, 645-60) v 550 ml (0,1 M) benzénu sa 1,5 hodiny zahrieva do varu pod spätným chladičom. Po ochladení na 25°C sa zmes filtruje a rozpúšťadlo sa odparí za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 9 až 17% éteru v hexáne) sa získa 24,5 g (98%) metylesteru 28. Rf = 0,37 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a]22D -7,25 (c 1,6, chloroform) ; IČ (tenký film) Vmax 3078, 2952, 2920, 2856, 1720, 1462, 1434, 1276, 1253, 1208, 1084, 836, 776, 672 cm-1; XH NMR (600 MHz deuterochloroform) δ 6,81 (dd, J=7,4, 7,4 Hz, 1H, CH=CCOOCH3) ,
6,22 (s, 1H, CH=CCH3), 5,83-5,75 (m, 1H, CH=CH2) , 4,99-4,98 (m, 1H, CH=CH2) , 4,96 (m, 1H, CH=CH2) , 4,22 (dd, J=7,5, 5,1 Hz, 1H,
CHOSi), 3,72 (s, 3H, COOCH3) , 3,05 (d, J=6,0 Hz, 2H, CH2C (CO2Me) ) , 2,40 (ddd, J=15,0, 7,5, 7,5 Hz, 1H, CH2CHOSi) , 2,33 (ddd, J=15,0, 7,5, 5,1 Hz, 1H, CH2CHOSi) , 1,77 (s, 3H, CH=CCH3)
0,85 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,02 (s, 3H, Si(CH3)2), -0,02 (s, 3H,
Si(CH3)2); HRMS (FAB) , vypočítané pre Ci8H31IO3Si (M+Cs+) 583,0142, nájdené 583,0159.
Alylalkohol 29 ilustrovaný v schéme 7
24,5 g (54,3 mmol, 1,0 ekvivalentu) Metylesteru 28 sa rozpusti v 280 ml tetrahydrofuránu a roztok sa ochladí na -78°C. V priebehu 50 minút sa pri -78°C prikvapká 163,0 ml, IM roztok v dichlórmetáne (163,0 mmol, 3,0 ekvivalentu) DIBAL a reakčná zmes sa mieša ďalších 80 minút. Reakčná zmes sa rozloží 150 ml nasýteného vodného roztoku tartrátu sodno draselného a získaná zmes sa nechá 15 hodín zahrievať na teplotu miestnosti. Organická vrstva sa oddelí a vodná vrstva sa trikrát extrahuje 250 ml éteru. Spojené organické extrakty sa premyjú 650 ml solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (šili94
·· • ·· ···· ··
• · • • • • • •
• • · • • ··· • •
• ···· • · • • • · •
• • • • • • •
···· • ·· ··· ··
··· kagél, 17 až 50% éteru v hexáne) sa získa 22,9 g, 100% alkoholu 29. Rf = 0,11 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a]22 D -7,25 (c 1,6, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3346, 3078, 2954, 2928, 2857, 1637, 1471, 1361, 1276, 1252, 1078, 1005, 836, 775, 674,
558 cm-1; 1H NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,16 (s, 1H,
CH=CCH3) , 5,81-5,73 (m, 1H, CH=CH2) , 5,45 (dd, J=6,5, 6,5 Hz, 1H, CH=CCH2OH) , 5,03 (m, 2H, CH=CH2) , 4,16 (dd, J=6,5, 6,5 Hz, 1H, CHOSi), 4,02 (d, J=4,5 Hz, 2H, CH2OH) , 2,85 (dd, J=15,0, 5,1 Hz, 1H, CH2CH=CH2), 2,84 (dd, J=15,0, 5,0 Hz, 1H, CH2CH=CH2) , 2,27 (ddd, J=15,0, 6,5, 6,5 Hz, 1H, CH2CHOSi) , 2,25 (ddd, J=15,0, 6,5,
6,5 Hz, 1H, CH2CHOSi), 1,78 (s, 3H, CH=CCH3) , 0,88 (s, 9H,
SÍC(CH3)3), 0,02 (s, 3H, Si(CH3)2), -0,02 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre Ci7H3iIO2Si (M+Cs+) , 555,0192 nájdené
555,0177.
Trifenylmetyléter 30 ilustrovaný v schéme 7
23,5 g (55,7 mmol, 1,0 ekvivalentu) Alkoholu 29 sa rozpustí v 300 ml (0,15 M) dimetylformamidu a pridá sa 11,3 g (92,5 mmol,
1.7 ekvivalentu) 4-DMAP a 22,1 g (79,3 mmol, 1,4 ekvivalentu) tritylchloridu. Reakčná zmes sa mieša 21 hodín pri 80°C, ochladí sa na teplotu miestnosti a rozpúšťadlo sa odparí za zníženého tlaku. Získaný zvyšok sa čistí pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie a získa sa 35,3 g (95%) požadovaného éteru 30 vo forme oleja. Rf = 0,88 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a]22 D 0,74 (c 0,3, chloroform); IČ (tenký film) v^x 3058, 2927, 2854, 1488, 1470, 1448, 1250, 1082, 836, 702, 632 cm-1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,45-7,43 (m, 5H, Ph) , 7,32-7,21 (m, 10H, Ph), 6,19 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,61 (m, 2H, CH=CH2,
CH=CH2), 4,87 (m, 2H, CH=CH2, CH(C) CH2OTr) , 4,19 (dd, J=6,8,
6.8 Hz, 1H, CHOSi), 3,46 (s, 2H, CH2OTr) , 2,78 (dd, J=15,4,
6,7 Hz, 1H, CH2CH=CH2), 2,73 (dd, J=15,4, 6,3 Hz, 1H, CH2CH=CH2) , 2,33 (ddd, J=14,5, 6,8, 6,8 Hz, 1H, CH2CHOSi), 2,31 (ddd, J=14,5,
6,8, 6,8 Hz, 1H, CH2CHOSi), 1,80 (s, 3H, CH=CCH3) , 0,87 (s, 9H,
SiC(CH3)3), 0,04 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,00 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C36H45IO2SÍ (M+Cs+) , 797,1288 nájdené
·· • 44 ···· • 4 •
• · • • • • • • • ·
• 4 • • 444 • •
• ···· • 4 • • • · • •
• • • • • • • •
···· • 4· ··· ·· ···
797,1309.
Alkohol 31 ilustrovaný v schéme 7
35,3 g (53,1 mmol, 1,0 ekvivalentu) Olefínu 30 sa rozpustí v ml (1,0 M) tetrahydrofuránu a roztok sa ochladí na 0°C. V priebehu 1,5 hodiny sa prikvapká 149 ml (0,5 M roztok v tetrahydrofurár.e, 74,5 mmol, 1,4 ekvivalentu) 9-BBN a získaná zmes sa mieša 9 hodín pri 0°C. Pridá sa 106 ml 3N roztoku hydroxidu sodného (319,0 mmol, 6,0 ekvivalentov), potom 32 ml (30% hmotnostné roztok vo vode, 319,0 mmol, 6,0 ekvivalentov) vodného peroxidu vodíka. Miešanie pokračuje 1 hodinu pri 0°C, potom sa reakčná zmes zriedi 500 ml éteru a 500 ml vody. Organická vrstva sa oddelí a vodná vrstva sa dvakrát extrahuje 500 ml éteru. Spojené organické extrakty sa premyjú 1 litrom solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou velmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli (9 až 50% éteru v hexáne) sa získa 34,6 g (95%) primárneho alkoholu
31. Rf = 0,54 (silikagél, 60% éteru v hexáne); [a]22D -3,5 (c 0,2,
chloroform); IČ (tenký film) Vmax 3380, 3058, 3032, 2926, 2855,
1489, 1449, 1278, 1251, 1078, 835, 706, 632 „ -1. cm / XH NMR
(500 MHz, deuterochloroform) δ 7,47-7,45 (m, 5H, Ph) , 7,32-7,22 (m, 10H, Ph), 6,22 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,58 (dd, J=7,l, 7,1 Hz, 1H, C=CHCH2), 4,22 (dd, J=6,8, 6,0 Hz, 1H, CHOSi) , 3,52 (šm, 2H, CH2OH), 3,50 (s, 2H, CH2OTr), 2,33 (dd, J=14,5, 6,8, 6,8 Hz, 1H, CH2CHOSi), 2,28 (ddd, J=14,5, 6,8, 6,8 Hz, 1H, CH2CHOSi) , 2,14 (m, 2H, CH2CH2CH2OH) , 1,82 (s, 3H, CH=CCH3) , 1,46 (m, 2H, Cŕf2CH2OH), 0,90 (s, 9H, SÍC(CH3)3), 0,06 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,02 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C36H47IO3S1 (M+Cs+) , 815,1394 nájdené 815,1430.
Jodid 32 ilustrovaný v schéme 7
Roztok 34,6 g (50,73 mmol, 1,0 ekvivalentu) alkoholu 31 v zmesi s 380 ml éteru a 127 ml acetonitrilu sa ochladí na 0°C.
·· • ·· ···· 99 ·
• · • • • • • · • 9
• • · • • ··· • · 9
• ···· • · • • · • · •
• • • • • · •
···· • ·· ·· · ·· ···
Potom sa pridá 17,3 g (253,7 mmol, 5,0 ekvivalentu) imidazolu a
33,3 g (126,8 mmol, 2,5 ekvivalentu) PPh3 a zmes sa mieša pokial sa nerozpustia pevné látky. Pridá sa 33,5 g (131,9 mmol, 2,6 ekvivalentov) jódu a zmes sa mieša 45 minút pri 0°C. Reakčná zmes sa rozloží pridaním 150 ml nasýteného vodného roztoku Na2S2O3 a vrstvy sa rozdelia. Vodná vrstva sa potom extrahuje dvakrát 250 ml solanky a spojené organické extrakty sa premyjú 750 ml solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 5 až 9% éteru v hexáne) sa získa 39,2 g (97%) jodidu 32. Rf = 0,88 (silikagél, 60% éteru v hexáne); [a]22 D -2,9 (c 2,6, chloroform); IČ (tenký film) ν^χ 3057, 2926, 2855, 1481, 1448, 1251, 1083, 939, 836, 774, 706, 632 cm1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,49-7,45 (m, 5H, Ph) , 7,33-7,23 (m, 10H,
Ph) , 6,23 (s, 1H, CH=CCH3), 5,67 (dd, J=7,2, 7,1 Hz, 1H, CH2C=C/Í) , 4,22 (dd, J=6,8, 6,8 Hz, 1H, CHOSi) , 3,51 (s, 2H, CH2OTr) , 3,07 (dd, J=7,l, 7,0 Hz, 2H, CH2I) , 2,34 (ddd, J=14,5, 6,8, 6,8 Hz, 1H, CH2CHOSi) , 2,25 (ddd, J=14,5, 6,8, 6,8 Hz, CH2CHOSi), 2,13 (m, 2H, CH2CH2CH2I), 1,84 (s, 3H, CH=CCH3) , 1,75 (m, 2H, CH2CH2CH2I), 0,90 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,07 (s, 3H,
Si(CH3)2), 0,02 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C36H46I2O2SÍ (M+Cs+), 925, 0411, nájdené 925,0450.
Hydrazón 33 ilustrovaný v schéme 7
5,0 ml (35,28 mmol, 1,4 ekvivalentu) Diizopropylamínu sa pri 0°C pridá k roztoku 22,0 ml (1,6 M roztok v hexáne, 35,28 mmol, 1,4 ekvivalentu) n-BuLi v 32 ml tetrahydrofuránu a mieša sa 1 hodinu. K tomuto čerstvo pripravenému roztoku LDA sa pridá 5,6 g (32,76 mmol, 1,3 ekvivalentu) SAMP hydrazónu propiónaldehydu v 16 ml tetrahydrofuránu. Po 16 hodinách miešania sa získaný žltý roztok ochladí na -100°C a v priebehu 2 hodín sa prikvapká roztok 20,0 g (25,23 mmol, 1,0 ekvivalentu) jodidu 32 v 32 ml tetrahydrofuránu. Zmes sa mieša 20 hodín pri -20°C a potom sa naleje do 50 ml nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho
·· • ·· ···· ·· ·
• · • • · • • · ··
• • • · · ··· • · ·
• ···· · · · • · • · ·
• • · · • • · ·
···· • ·· ··· ·· ···
a trikrát sa extrahuje 100 ml éteru. Spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým, filtrujú sa a odparia. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli (5 až 50% éteru v hexáne) sa získa 15,0 g (71%) hydrazónu 33 vo forme žltého oleja. Rf = 0,63 (silikagél, 40% éteru v hexáne); [a] 22 d 22,7 (c 0,2, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3057, 2927, 2854, 1489, 1448, 1251, 1078, 940, 836, 775, 706, 668, 632 cm-1; ΧΗ NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,46-7,44 (m, 5H, pH),
7,31-7,21 (m, 10H, Ph), 6,40 (d, J=6,5 Hz, 1H, N=CH) , 6,21 (s, 1H, CH=CCH3), 5,50 (dd, J=7,0, 7,0 Hz, 1H, CH2C=CH) , 4,20 (dd, J=6,0, 6,0 Hz, 1H, CHOSi), 3,54 (dd, J=9,2, 3,5 Hz, 1H, CH2OCH3) , 3,45 (s, 2H, CH2OTr), 3,41 (dd, J=9,5, 7,0 Hz, 1H, C/Í2OCH3) , 3,37 (s, 3H, CH2OCH3), 3, 32-3, 30 (m, 2H, CH2N) , 2, 60-2,55 (m, 1H) ,
2,34-2,20 (m, 3H) , 2,04-1, 95 (m, 1H) , 1, 98-1,73 (m, 5H) , 1,82 (s, 3H, CH=CCH3), 1,38-1,21 (m, 4H) , 0,96 (d, J=6,9 Hz, 3H, CHCH3), 0,39 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,06 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,01 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C45H63IN2O3Si (M+Cs+) ,
967,2707, nájdené 967,2740.
Nitril 34 ilustrovaný v schéme 7
52,4 g horečnatej soli monoperoxyftalovej kyseliny (MMPP.6H2O, 80%, 84,8 mmol, 2,5 ekvivalentu) sa v priebehu 10 minút po častiach pri 0°C pridá k dobre miešanému roztoku 28,3 g (33,9 mmol, 1,0 ekvivalentu) hydrazónu 33 v zmesi 283 ml metanolu, 100 ml tetrahydrofuránu a 283 ml fosfátového pufra s pH 7. Zmes sa mieša 1,5 hodiny pri 0°C a potom sa v dvoch dieloch v priebehu 30 minút pridá ďalších 120 ml tetrahydrofuránu, aby sa pomohlo rozpusteniu východiskovej látky. Po ďalšej 1,5 hodine miešania sa reakčná zmes naleje do 750 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt sa extrahuje 750 ml éteru a potom dvakrát 750 ml etylacetátu. Spojené organické extrakty sa premyjú 1 litrom solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli (9 až 20%
• · • • · • · · · ·· •
• • • • • • • · • ·
• • · • • ··· • • •
• ···· • · • • • · • •
• • • • • • • •
• · · · • • · ··· ·· ···
éteru v hexáne) sa získa 21,8 g (89%) nitrilu 34 vo forme bezfarebného oleja. Rf = 0,44 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a]22 D +2,9 (c 1,2, deuterochloroform) ; IČ (tenký film) vmax 3057, 2928, 2855, 2238, 1490, 1448, 1252, 1081, 836, 775, 707, 632 cm'1;
XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7, 47-7,45 (m, 5H, Ph) ,
7,33-7,23 (m, 10H, Ph) , 6,22 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,56 (dd, J=6,8,
6,8 Hz, 1H, CH2C=CH), 4,21 (dd, J=6,8, 6,8 Hz, 1H, CHOSi), 3,49 (s, 2H, CH2OTr), 2,48 (m, 1H, CH(CH3) ), 2,29 (ddd, J=14,5, 6,8,
6,8 Hz, 1H, CH2CHOSi), 2,24 (ddd, J=14,5, 6,8, 6,8 Hz, 1H, CH2CHOSí), 2,07 (m, 2H, CH2 (C) CH2OTr) , 1,82 (s, 3H, CH=CCH3) , 1,58-1,23 (m, 4H) , 1,24 (d, J=7,0 Hz, 3H, CHCH3) , 0,90 (s, 9H,
SiC(CH3)3), 0,07 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,0 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAE), vypočítané pre C39H5oIN02Si (M+Cs+) , 852,1710, nájdené
852,1738.
Aldehyd 35 ilustrovaný v schéme 7
7,01 g (9,74 mmol, 1,0 ekvivalentu) Nitrilu 34 sa rozpustí v 195 ml (0,05 M) a ochladí sa na -78°C. V priebehu 10 minút sa pri -78°C prikvapká 29,2 ml (1,0 M roztok v toluéne, 29,2 mmol, 3,0 ekvivalentu) DIBAL. Reakčná zmes sa mieša pri -78°C, pokiaľ sa podľa TLC (asi 1 hodina) reakcia neskončí. Potom sa postupne pridá 10 ml metanolu a 10 ml (l,0N roztok vo vode) kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa v priebehu 1 hodiny zahreje na 0°C. Pridá sa 250 ml éteru a 250 ml vody a vrstvy sa oddelia. Vodná fáza sa dvakrát extrahuje 250 ml éteru a spojené organické extrakty sa premyjú 500 ml solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 17 až 33% éteru v hexáne) sa získa 6,18 g (88%) aldehydu 35 vo forme oleja. Rf = 0,51 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a]22 D +2,0 (c, 0,3, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3057, 2927, 2855, 1726, 1490,
1448, 1251, 1081, 836, 775, 707, 632 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 9,51 (d, J=l,9 Hz, 1H, CHO) , 7,46-7,45 (m, 5H, Ph), 7,32-7,22 (m, 10H, Ph) , 6,20 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,54 (dd,
·· • • · ···· ·· ·
• · • • • • • e • ·
• • · • • ··· • · •
• ···· • · • • • · · •
• • • • • • · •
• · · · • • · ··· • · ·· ·
J=7,0, 7,0 Hz, 1H, CH2C=CH) , 4,20 (dd, J=6,5, 6,0 Hz, 1H, CHOSi) , 3,47 (s, 2H, CH2OTr), 2,34-2,20 (m, 3H, CH2CHOSi a CH(CH3) ) , 2,04 (m,2H, CH2(C)CH2OTr) , 1,82 (s, 3H, CH=CCH3) , 1,66 (m, 1H) ,
1,30-1,19 (m, 3H), 1,02 (d, J=7,0 Hz, 3H, CHCH3) , 0,89 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,06 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,00 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C3gH5iIO3Si (M+Cs+), 855, 1707, nájdené 855,1672.
tris-(Silylétery) 37 a 38 ilustrované v schéme 8
Roztok 1,20 g (2,99 mmol, 1,4 ekvivalentu) ketónu 36 (pozri Nicolaou, K.C., a kol., J. Am. Chem. Soc. 119, 7974-91 (1997) v 4,3 ml tetrahydrofuránu sa v priebehu 5 minút pri -78°C prikvapká k čerstvo pripravenému roztoku LDA [424 μΐ (3,03 mmol, 1,45 ekvivalentu) diizopropylamínu sa pri 0°C pridá k 2,00 ml (1,52 M roztok v hexáne, 3,04 mmol, 1,45 ekvivalentu) n-BuLi a po 5 minútach sa pridá 4,3 ml tetrahydrofuránu]. Po 1,5 hodine miešania pri -78°C sa roztok nechá zahriať v priebehu 30 minút na teplotu -40°C. Reakčná zmes sa potom ochladí na -78°C a v priebehu 15 minút sa prikvapká roztok 1,51 g (2,09 mmol, 1,0 ekvivalentu) aldehydu 35 v 12,5 ml tetrahydrofuránu. Získaná zmes sa mieša 1 hodinu pri -78°C a potom sa rozloží prikvapkaním nasýteného vodného roztoku kyseliny octovej (3,1 ml 1 M roztoku v tetrahydrofuráne, 3,10 mmol, 1,5 ekvivalentu). Zmes sa potom zahreje r.a 25°C a extrahuje sa medzi 25 ml éteru a 25 ml nasýteného roztoku chloridu amónneho. Vodná vrstva sa trikrát extrahuje 25 ml éteru a spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a odparia sa vo vákuu. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 4 až 20% éteru v hexáne sa získa 502 mg (42%) nezreagovaného ketónu, 705 mg (27%) nežiaduceho aldolového produktu 38 a zmes 1,136 g (podľa ΤΗ NMR je pomer 37:35 približne 9:1) požadovaného aldolového produktu 37 a nezreagovaného aldehydu 35 (to znamená výťažok 39% zlúčeniny 37). Táto zmes sa hneď použije v ďalšom kroku. 37: (hlavný) (získa sa vo forme bezfarebného oleja ako zmes
100 ·· ···· • · • · ··
CH(Cff3)), 0,92 (nezreteľný d,
3H, Si(CH3)2), obsahujúca zlúčeninu 35, pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 10 až 17% etylacetátu v hexáne). Rf = 0,22 (silikagél, 10% éteru v hexáne); [<x] 22d -20,2 (c 0,3, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3486, 2954, 2928, 2856, 1682, 1472, 1448, 1253, 1090, 994, 836, 775, 706, 668, 632 cm’1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,45-7, 43 (m, 5H, Ph) , 7,30-7,19 (m, 10H, Ph) , 6,19 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,51 (dd, J=7,0,
6,9 Hz, 1H, C=CHCH2), 4,18 (dd, J=6,3, 6,2 Hz, 1H, CHOSi) , 3,88 (dd, J=7,5, 2,6 Hz, 1H, CHOSi), 3,65 (m, 1H, CH2OSi) , 3,59 (m, 1H, CH2OSi), 3,46 (d, J=ll,2 Hz, 1H, CH2OTr), 3,43 (d, J=ll,2 Hz, 1H, CH2OTr) , 3,27 (m, 1H, CH3CH(C=O)), 3,22 (d, J=9,3 Hz, 1H,
CHOH), 2,32-2,18 (m, 2H, C=CHCH2CHOSi) , 2,00 (m,2H,
CH2(C)CH2OTr) , 1,80 (s, 3H, CH=C(CH3)), 1,66 (m, 2H) , 1,46(m,
2H), 1,27 (m, 1H, CH(CH3) ), 1,19 (s, 3H, C(CH3)2), 1,07 (s,3H,
C(CH3)2), 0,99 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,89 (s,9H,
SÍC(CH3)3), 0,87 (s, 9H, SÍC(CH3)3), 0,86 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,71 (d, J=6,7 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,10 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,07 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,04 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,03 (s, 6H, Si(CH3)2), -0,01 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C6oH97l06Si3 (M+Cs+) , 1257,4692, nájdené 1257,4639. 38: (minoritný) bezfarebný olej;
Rf = 0,38 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a] 22 D -11,9 (c 2,9, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3501, 2954, 2930, 2856, 1682, 1469, 1254, 1088, 836, 776, 705, 670 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,46-7,44 (m, 5H, Ph), 7,31-7,21 (m, 10H, Ph),
6,21 (s, 1H, Ctf=CCH3), 5,52 (dd, J=7,0, 6,9 Hz, 1H, C=CHCH2),
4,20 (dd, J=6,5, 6,5 Hz, 1H, CHOSi), 3,88 (dd, J=7,5, 2,5 Hz,
1H, CHOSi), 3,67 (m, 1H, CH2OSi) , 3,60 (m, 1H, CH2OSi), 3,46(s,
2H, CH2OTr), 3,30-3,21 (m, 2H, CHOH, CH3CH(C=O)), 2,30-2,25(m,
2H, C=CHCH2CHOSi) , 2,05-1,93 (m, 2H, CH2C (CH2OTr) =CH) , 1,81(s,
3H, CH=C(CH3)), 1,63 (m, 1H, CH(CH3) , 1,45 (m, 2H) , 1,24 (m, 2H) , (S, 3H, C(CH3)2), 1,05 (s, 3H, C(CH3)2), 1,01 (d, J=6,9 Hz, 3H, (s, 18H, SiC(CH3)3), 0,89 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,88 3H, CH(CH3)), 0,88 (s, 18H, SÍC(CH3)3), 0,11 (s,
0,07 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,06 (s, 3H, SÍ(CH3)2),
101 ··· ······ ·· ··· ··· · · · • · · · · ··· · · ······· · ··· · • · · · · · · ···· · ····· ·· ·
0,04 (s, 6H, Si(CH3)2), 0,01 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C6oHg7l06Si3 (M+Cs+) 1257,4692, nájdené 1257,4749.
tetra-(Silyléter) 39, ktorý je ilustrovaný v schéme 8
1,136 g (0, 933 mmol, 1,0 ekvivalentu, zmes s aldehydom 35 približne 9:1) Alkoholu 37 sa rozpustí v 5,0 ml dichlórmetánu, ochladí sa na -20°C a reaguje so 470 μΐ (4,04 mmol, 4,3 ekvivalentu) 2,6-lutidínu a 695 μΐ (3,03 mmol, 3,2 ekvivalentu) terc-butyldimetylsilyltrifluórmetánsulfonátu. Zmes sa potom mieša 2,5 hodiny za pomalého zahrievania na teplotu miestnosti. Reakcia sa potom rozloží 25 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a vodná fáza sa trikrát extrahuje 25 ml éteru. Spojené organické extrakty sa premyjú 250 ml solanky, sušia sa nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 4 až 9% éteru v hexáne sa získa 1,04 g (90%) tetra-(silyléteru) 39 vo forme bezfarebného oleja. Rf = 0,91 (silikagél, 20% éteru v hexáne); [a]22 D -16,8 (c 0,7, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3058, 2951, 2856, 1693, 1471,
1253, 1079, 1004, 836, 706 cm'1; 1H NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,46-7,43 (m, 5H, Ph), 7,29-7,19 (m, 10H, Ph), 6,19 (s, 1H, CH=CCH3), 5,49 (dd, J=7,0, 7,0 Hz, 1H, C=CHCH2), 4,18 (dd,
J=6,3, 6,1 Hz, 1H, CHOSi), 3,85 (dd, J=7,6, 2,5 Hz, 1H, CHOSi), 3,70 (dd, J=6,7, 2,0 Hz, 1H, CHOSi), 3,67 (ddd, J=9,6, 4,8,
4,8 Hz, 1H, CH2OSi), 3,59 (ddd, J=9,7, 7,9, 7,9 Hz, 1H, CH2OSi), 3,45 (d, J=ll,2 Hz, 1H, CH2OTr), 3,42 (d, J=ll,2 Hz, 1H, CH2OTr), 3,08 (qd, J=6,8, 6,8 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 2,27 (ddd, J=14,4, 7,2,
7,2 Hz, 1H, C=CHCH2CHOSi) , 2,23 (ddd, J=14,5, 6,2, 6,2 Hz, 1H,
C=CHCH2CHOSi) , 1,97 (m, 2H, CH2C (CH2OTr) =CH) , 1,79 (s,3H,
CH=C(CH3)); 1,57 (m, 1H) , 1,46 (m, 1H) , 1,25 (m, 3H) , 1,17(s,
3H, C(CH3)2), 1,01 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,95 (s,3H,
C(CH3)2), 0,87 (s, 18H, SiC(CH3)3) 0,86 (s, 18H, SiC(CH3)3),
0,09-0,03 (m, 24H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre
C66HmIO6SÍ4 (M+Cs+) , 1371,5557, nájdené 1371, 5523.
102 ·· · • · • · · • ···· • ·· · ·· ···· ··· • · · · ·· · • · ··· · ·· ··· ····· • · · · ·· • · ··· ·· ·· ·
Alkohol 40 ilustrovaný v schéme 8
K roztoku 180 g (0,145 mmol) tetra-silyl éter 39 v 1,5 ml tetrahydroduránu sa pri 0°C pridá 1,5 ml HF.pyr. v zmesi pyridin/tetrahydrofurán (pripraveného zo zásobného roztoku obsahujúceho 420 μΐ HF.pyridínu, 1,14 ml pyridínu a 2,00 ml tetrahydrofuránu) a miešanie pokračuje ďalšiu 1 hodinu pri 0°C. Reakcia sa rozloží opatrným pridaním nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt sa trikrát extrahuje 25 ml etylacetátu. Spojené organické extrakty sa potom sušia nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou (30% éteru v hexáne) sa získa 137 mg (84%) alkoholu 40 vo forme svetlo žltého oleja. Rf = 0,36 (silikagél, 40% éteru v hexáne); [a]22D -26,0 (c C, 3, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3422, 2928, 2855, 1690, 1490, 1471, 1448, 1360, 1252, 1086, 1004, 986, 836, 774, 706 cm-1; 2H NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,44-7,42 (m, 5H, Ph), 7,29-7,20 (m, 10H, Ph) , 6,19 (s, 1H, CH=CCH3), 5,49 (dd, J=7,l, 7,1 Hz, 1H, C=CHCH2), 4,17 (dd, J=6,2, 6,0 Hz, 1H, CHOSi) , 4,03 (dd, J=6,6, 3,7 Hz, 1H, CHOSi), 3,73 (dd, J=7,2, 1,7 Hz, 1H, CHOSi), 3,65 (m, 2H, CH2OH) , 3,45 (d, J=ll,7 Hz, 1H, CH2OTr) ,
3,42 (d, J=ll,7 Hz, 1H, CH2OTr) , 3,06 (kvd, J=6,9, 6,9 Hz, 1H,
CH3CH(C=O) ) , 2,28 (ddd, J=14,7, 7,3, 7,3 Hz, 1H, C=CHCH2CHOSi) ,
2,22 (ddd, J=14,7, 6,3, 6,3 Hz, 1H, C=CHCH2CHOSi) , 1,98 (m, 2H,
CH2C(CH2OTr)=CH) , 1,79 (s, 3H, CH=C(CH3)), 1,56 (m, 2H) , 1,24 (m, 3H), 1,18 (s, 3H, C(CH3)2), 1,03 (d, J=6,9 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,97 (s, 3H, C(CH3)2), 0,87 (3 singlety, 27H, SiC(CH3)3), 0,81 (d, J=6,7 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,10 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,04 (s, 9H, Si(CH3)2), 0,03 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,00 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C6oH97l06Si3 (M+Cs+) , 1257,4692, nájdené 1257,4780.
Aldehyd 41 ilustrovaný v schéme 8
K roztoku 150 μΐ (1,72 mmol, 2,0 ekvivalentu) oxalylchloridu
103 ·· ···· • · • ··· v 10 ml dichlórmetánu sa pri teplote -78°C prikvapká 247 μΐ (3,48 mmol, 4,0 ekvivalentu) dimetylsulfoxidu. Po 10 minútach miešania pri teplote -78°C sa prikvapká roztok 960 mg (0,853 mmol, 1,0 ekvivalentu) alkoholu 40 v 10 ml dichlórmetánu. Získaný roztok sa mieša 1 hodinu pri teplote -78°C a potom sa pridá 714 μΐ (5,12 mmol, 6,0 ekvivalentu) trietylamínu a reakčná zmes sa nechá 30 minút zahrievať na 25°C. Pridá sa 30 ml vody a produkt sa extrahuje trikrát 40 ml éteru. Spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a potom sa odparia za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 17 až 50% éteru v hexáne sa získa 943 mg (98%) aldehydu vo forme bezfarebného oleja. Rf = 0,74 (silikagél, 40% éteru' v hexáne); [a]22 D -10,8 (c 0,1, chloroform); IČ (tenký film) vmax 2928, 2855, 1728, 1690, 1471, 1448, 1260, 1252, 1085, 987, 836, 774, 706 cm'1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 9,74 (dd, J=2,4, 1,5 Hz, 1H, CHO), 7,44-7,42 (m, 5H, Ph) , 7,29-7,20 (m, 10H, Ph) , 6,19 (s, 1H,
CH=CCH3) , 5,49 (dd, J=7,0, 6,8 Hz, 1H, C=CHCH2) , 4,44 (dd, J=6,3, 5,0 Hz, 1H, CHOSi), 4,18 (dd, J=6,9, 6,4 Hz, 1H, CHOSi) , 3,70 (dd, J=7,2, 1,8 Hz, 1H, CHOSi), 3,45 (d, J=ll,4 Hz, 1H, CH2OTr), 3,42 (d, J=ll,4 Hz, 1H, CH2OTr) , 3,05 (kvd, J=7,0, 7,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 2,49 (ddd, J=17,0, 4,5, 1,4 Hz, CH2CHO) , 2,38 (ddd,
J=17,0, 5,4, 2,8 Hz, 1H, CH2CHO), 2,27 (ddd, J=14,0, 7,1, 7,1 Hz,
1H, C=CHCH2CHOSÍ) , 2,23 (ddd, J=14,5, 6,5, 6,5 : Hz, 1H,
C=CHCH2CHOSi) , 1,98 (m, 2H, CH2C(CH2OTr)=CH) , 1,79 (s, 3H,
CH=C(CH3)), 1,27 (m, 4H), 1,19 (s, 3H, C(CH3)2) 1,12 (m, 1H) ,
1,00 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3), 0,98 (s, 3H, C(CH3)2), 0,87 (s,
27H, SÍ(CH3)3), 0,80 (d, J=6,7 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,07 (s, 3H,
Si(CH3)2), 0,04 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,03 (s, 3H, Si(CH3) 2) t 0,03
(s, 3H, Si(CH3)2), 0,02 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,00 (s, 3H, Si(CH3)2);
HRMS (FAB), vypočítané pre C6qH95IO6Sí3 (M+Cs+) , 1255,4536, nájdené
1255, 4561.
104
·· • • · ···· • ·
• · • • · • • • ·
• • · • · ··· • •
• ···· • · · • • · •
• • • · • • •
··· · • • · ··· ·· •
Karboxylová kyselina 42 ilustrovaná v schéme 8
K roztoku 943 mg (0,839 mmol, 1,0 ekvivalentu) aldehydu 41 v
38,5 ml terc-BuOH a 8,4 ml vody sa pridá 31,5 ml (2M roztok v tetrahydrofuráne, 63,0 mmol, 75 ekvivalentov) 2-metyl-2-buténu a 250 mg (2,08 mmol, 2,5 ekvivalentu) NaH2PO4 a potom 380 mg (4,20 mmol, 0,5 ekvivalentu) NaClO2 a získaná zmes sa mieša 40 minút pri 25°C. Prchavé látky sa odparia vo vákuu a zvyšok sa extrahuje medzi 40 ml etylacetátu a 40 ml solanky a vrstvy sa oddelia. Vodná fáza sa potom trikrát extrahuje 40 ml etylacetátu a spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a potom sa odparia za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 60% éteru v hexáne sa získa 956 mg (100%) karboxylovej kyseliny vo forme oleja. Rf = 0,47 (silikagél, 40% éteru v hexáne);
[a]22 D -19,6 (c 0,2 chloroform); IČ (tenký film) vmax 3389, 2930,
2856, 1711, 1469, 1254, 1085, 988, 835, 775, 705 cm1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,44-7,43 (m, 5H, Ph), 7,29-7,20 (m, 10H, Ph) , 6,19 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,49 (dd, J=7,3, 7,1 Hz, 1H, C=CHCH2) , 4,34 (dd, J=6,4, 3,3 Hz, 1H, CHOSi), 4,18 (dd, J=6,2,
6,2 Hz, 1H, CHOSi), 3,72 (dd, J=7,2, 1,7 Hz, 1H, CHOSi), 3,45 (d, J=ll,4 Hz, 1H, CH2OTr) , 3,41 (d, J=ll,4 Hz, 1H, CH2OTr), 3,07 (kvd, J=7,0, 7,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 2,46 (dd, J=16,3, 3,1 Hz, 1H, CH2CO2H), 2,32-2,18 (m, 3H, CH2CO2H a C=CHCH2CHOSi) , 1,97 (m, 2H, CH2C (CH2OTr)=CH) , 1,80 (s, 3H, CH=C(CH3)), 1,31-1,19 (m, 5H) , 1,19 (s, 3H, C(CH3)2), 1,02 (d, J=6,9 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,99 (s, 3H, C(CH3)2), 0,87 (s, 27H, Si(CH3)3), 0,80 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,07 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,04 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,04 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,03 (s, 3H, SÍ(CH3)2), 0,02 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,0 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C6oHg5l07Si3 (M+Cs+) , 1271,4485, nájdené 1271,4550.
Hydroxykyselina 43 ilustrovaná v schéme 4
Roztok 956 mg (0,839 mmol, 1,0 ekvivalentu) karboxylovej ··· ······ ·· · ··· ··· ···· 1 Λ E ····· ··* * · ·
1UQ · ···· · · · · · · · · • · ·· · · · · ···· · ·· ··· ·· ··· kyseliny 42 v 17 ml tetrahydrofuránu sa pri 0°C reaguje s 5,0 ml (1,0 M roztok v tetrahydrofuráne, 5,00 mmol, 6,0 ekvivalentu) TBAF a zmes sa nechá v priebehu 19 hodín zahriať na teplotu miestnosti. Reakcia sa potom rozloží pridaním 40 ml nasýteného roztoku chloridu amónneho a produkt sa trikrát extrahuje 40 ml etylacetátu. Spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 5% metanolu v dichlórmetáne sa získa 817 mg (95%) hydroxykyseliny 43 vo forme žltého oleja. Rf = 0,27 (silikagél, 5% metanolu v dichlórmetáne); [ot]22d -11,4 (c 0,2, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3364, 3057, 2938, 2856, 1712, 1694, 1469, 1254, 1086, 1053, 988, 836, 776, 734, 705 cm-1; NMR (600 MHz, deuterochloroform) Ô 7,43-7,42 (m, 5H, Ph), 7,30-7,21 (m, 10H, Ph) , 6,32 (s, 1H, CH=CCH3), 5,46 (dd, J=7,2, 7,2 Hz, 1H, C=CHCH2) , 4,35 (dd,
J=6,3, 3,2 Hz, 1H, CHOH) , 4,21 (dd, J=6,4, 6,3 Hz, 1H, CHOSi) ,
3,73 (dd, J=7,3, 1,2 Hz, 1H, CHOSi), 3,52 (d, J=12,l Hz, 1H, CH2OTr), 3,48 (d, J=12,l Hz, 1H, CH2OTr) , 3,06 (m, 2H, CH3CH(C=O), a OH), 2,45 (dd, J=16,4, 3,0 Hz, 1H, CH2CO2H), 2,35 (m, 2H, C=CHCH2CHOH) , 2,29 (dd, J=16,4, 6,5 Hz, 1H, CH2CO2H) ,
2,07-1, 94 (m, 2H, CH2C (CH2OTr) =CH) , 1,85 (s, 3H, CH=C(CH3)), 1,71 (m, 1H) , 1,39 (m, 1H, CH(CH3) ), 1,27 (m, 3H) , 1,18 (s, 3H,
C(CH3)2), 1,02 (nezreteľný d, 3H, CH(CH3)), 1,02 (s, 3H, C(CH3)2), 0,87 (s, 18H, Si(CH3)3), 0,81 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,09 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,07 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,04 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,02 (s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C54H8iIO7Si2 (M+Cs+), 1157,3620, nájdené 1157,3669.
Makrolaktón 44 ilustrovaný v schéme 8
K roztoku 1,06 g (1,04 mmol, 1,0 ekvivalentu) hydroxykyseliny 43 v 15 ml (0,07 M) tetrahydrofuránu sa pridá 870 μΐ (0,24 mmol, 6,0 ekvivalentu) trietylamínu a 390 μΐ (2,50 mmol,
2,4 ekvivalentu) 2,4,6-trichlórbenzoylchloridu. Reakčná zmes sa mieša 1,5 hodiny pri 0°C a potom sa pri 75°C pomaly v priebehu
106 hodín pridá pomocou ihlovej pumpy roztok 280 mg (2,29 mmol, ·· « ·· ···· • · • ···
2,2 ekvivalentu) 4-DMAP v 208 ml toluénu (0,005 M vzhľadom na zlúčeninu 43). Zmes sa mieša pri tejto teplote ďalších 0,5 hodi ny a potom sa odparí za zníženého tlaku. Získaný zvyšok sa filtruje cez krátky stĺpec silikagélu za elúcie zmesou 50% éteru v hexáne. Po čistení pomocou veľmi rýchlej chromatografie za elúcie zmesou 17% éteru v hexáne sa získa 877 mg (84%) makrolaktónu 44 vo forme bezfarebnej peny. Rf = 0,19 (10% éteru v hexáne); [a]22D -7,4 (c 0,2, chloroform); IČ (tenký film) vmax 2929, 2855, 1742, 1695, 1468, 1381, 1253, 1156, 1065, 985, 834, 774, 733, 706 cm'1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,44-7,42 (m, 5H,Ph), 7,29-7,20 (m, 10H, Ph) , 6,39 (s, 1H, CH=CCH3) ,
5,51 (dd, J= 9,5, 6,8 Hz, 1H, C=CHCH2), 5,07 (d, J=9,3 Hz, 1H,
CHOCO), 4,02 (d, J=9,2 Hz , 1H , CHOSi), 3,82 (d, J=8,9 Hz, 1H,
CHOSi), 3,46 (d, J=ll,5 Hz , 1H, , CH2OTr) , 3,42 (d, J=ll,5 Hz, 1H,
CH2OTr), 2,95 (dkv, J=8,7, 7,0 Hz, 1H, CH3CH(C= =0) ) , 2,72 (m, 2H,
C=CHCH2CHO a CH2COO), 2,54 (dd, J=16,2, 9,7 Hz, 1H , CH2COO) , 2,29
(m, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,12 (dd, J=14,3, 5,1 Hz, 1H, CH2C (CH2OTr) = =CH), 1,98 (m, CH2C(CH2OTr)=CH) , 1,88 (s, 3H, CH=C(CH3)), 1,44-
-1,23 (m, 5H) , 1,18 (s, 3H, C(CH3)2), 1, 10 (s, 3H, C(CH3)2), 1,07
(d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,92 (s, 9H, Si(CH3)3), 0,82 (d,
J=6, 9 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,72 (s, 9H, Si(CH3)3), 0,08 (s, 3H,
Si(CH3)2) , 0,05 (s, 3H, Si(CH3)2), 0,05 (s, 3H, SÍ(CH3)2), - 0,32
(s, 3H, Si(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C54H79IO6Si2 (M+Cs+) ,
1139,3514, nájdené 1139,3459.
Tricl 24 ilustrovaný v schéme 8
K roztoku 608 mg (0,604 mmol, 1,0 ekvivalentu) makrolaktónu 44 v 45 ml tetrahydrofuránu sa pri 0°C pridá 15 ml HF.pyr. . Získaná zmes sa nechá zahriať v priebehu 15 hodín na 25°C a potom sa ochladí na 0°C a opatrne sa rozloží pridaním 50 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Produkt sa potom extrahuje trikrát 50 ml etylacetátu a spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a odparia sa za zníže107 ·· ···· • · • e·· ného tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 60% etylacetátu v hexáne sa získa 280 mg (86%) triolu 24 vo forme bezfarebnej peny. Rf = 0,32 (silikagél, 60% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -32,1 (c 0,2, chloroform); IČ (tenký film) vraax 3413, 2923, 2857, 1731, 1686, 1461, 1379, 1259, 1148, 1046, 737 cm-1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 6,43 (s, 1H, CH=CCH3), 5,38 (dd, J=9,7,
5,4 Hz, 1H, C=CHCH2), 5,29 (dd, J=8,8, 1,9 Hz, 1H, CHOCO) , 4,08 (m, 1H, CHOH), 4,06 (d, J=13,0 Hz, 1H, CH2OH) , 4,00 (d, J=13,0 Hz, 1H, CH2OH), 3,69 (dd, J=3,5, 3,4 Hz, 1H, CHOH) , 3,12 (kvd, J=6,9, 3,1 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 2,76 (šs, 1H, OH), 2,67 (ddd, J=15,0, 9,7, 9,7 Hz, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,45 (dd, J=15,4,
10,6 Hz, 1H, CH2COO), 2,38 (šs, 1H, ÓH), 2,33 (dd, J=15,4, 3,0 Hz, 1H, CH2COO) , 2,21 (m, 2H, CH2C (CH2OH) =CH) , 2,06 (m, 1H,
C=CHCH2CHO) , 1,87 ( s, 3H, CH=C(CH3), 1,71 (m, 1H) , 1, 66 (m, 1H),
1,32 (s, 3H, C(CH3) 2) , 1,29-1,24 (m, 3H) , 1,17 (d, J=6, 9 Hz, 3H,
CH(CH3) ) , 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3) ) ;
HRMS (FAB), vypočítané pre Ο23Η37ΐΟβ (M+Cs+) , 669, 0689, nájdené
669,0711.
Makrolaktón 45 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 55 mg (0,103 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 24, 84 mg (0,207 mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu 8j a 4 mg (0,015 mmol, 0,15 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 1 ml (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 33 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 80% etylacetátu v hexáne) sa získa 21 mg (39%) východiskového vinyljodidu 24 a 30 mg (56%) makrolaktónu 45. Rf = 0,48 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22o -48,3 (c 0,2, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3372, 2924, 2860, 1731, 1682,
1454, 1384, 1252, 1148, 1040, 979, 735 cm1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,21 (s, 1H, ArH) , 6,61 (s, 1H, CIf=CCH3) ,
5,58 (d, J=47,0 Hz, 2H, CH2F) , 5,45 (dd, J=9,8, 5,3 Hz, 1H,
108
C=CHCH2), 5,26 (dd, J=9,4, 2,0 Hz, 1H, CHOCO) , 4,23 (dd, J=10,9,
·· • • · ···· ·· ·
• · • • · • • • ··
• • · • · ··· • • •
• ···· • · · • • · • •
• • • · • • • •
··· · • • · ··· ·· • •e
2,4 Hz, 1H, CfiOH), 4,08 (d, J=13,l Hz, 1H, CH2OH) , 4,01 (d,
J=13,l Hz, 1H, CH2OH) , 3, 70 (dd, J=4,2, 2,7 Hz, 1H, CflOH), 3,16
(kvd, J=6,8, 2,6 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 2,94 (šs, 1H, OH) , 2, 69
(ddd, J=15,2, 9,6, 9,6 Hz, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,46 (dd, J=14,8,
10,9 Hz, 1H, CH2COO) , 2,36-2,24 (m, 2H, CH2C (CH2OH) =CH) , 2,30 (dd, J=14,8, 2,6 Hz, 1H, CH2COO) , 2,09 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,07 (m, 1H, C=CHCH2CHO) , 1, 77-1,58 (m, 5H) , 1,33 (s, 3H, C(CH3)2)),
1,17 (d, J=6,9 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,06 (s, 3H, C(CH3)2), 1,00 (d,
J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C22H4oFNOsS (M+Cs+) , 658,1615, nájdené 658,1644.
Makrolaktón 46 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 32 mg (0,050 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 24, 28 mg (0,101 mmol, 1,7 ekvivalentu) stanánu 8p a 1,7 mg (0,07 mmol, 0,1 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 sa mieša 20 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 80% etylacetátu v hexáne) sa získa 6 mg (19%) východiskového vinyljodidu 24 a 17 mg (54%) makrolaktónu 46. Rf = 0,37 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne);
[a]22 D -48,7 (c 0,15, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3402, 2931, 2874, 1731, 1686, 1533, 1458, 1420, 1383, 1242, 1150,1048,
1007, 979 cm'1; NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,50 (s, 1H, ArH), 6,36 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,45 (dd, J=10,0, 5,0 Hz,1H,
C=CflCH2), 5,23 (dd, J=9,5, 1,5 Hz, 1H, CHOCO), 4,24 (šd,
J=ll,0 Hz, 1H, CHOH), 4,11-3,68 (m, 1H, CH2OH) , 4,07 (s,3H,
OCH3), 4,01 (d, J=13,0 Hz, 1H, C#2OH), 3,71 (dd, J=4,0, 2,5 Hz,
1H, CHOH) , 3,30 (šs, 1H, OH), 3,16 (kvd, J=7,0, 2,5 Hz, 1H,
CH3CH(C=O)), 3,00 (šs, 1H, OH), 2,68 (ddd, J=15,0, 10,0, 9,5 Hz, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,46 (dd, J=15,0, 11,0 Hz, 1H, CH2COO) ,2,30-2,20 (m, 2H, CH2C(CH2OH)=CH) , 2,29 (dd, J=15,0, 3,0 Hz,1H,
CH2COO) , 2,11-2,04 (m, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,11 (s, 3H, CH=C(CH3)),
1,83-1,61 (m, 4H) , 1,41-1,25 (m, 1H) , 1,33 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18
109 ·· ···· ·♦ · ··· ··· · · · · • · · · · ··· · · · • ···· ··· ···· · • · ······ ···· · ·· ··· ·· ··· (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 1,01 (d,
J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB) , vypočítané pre C27H41NO7S (M+Cs+), 656, 1658, nájdené 656, 1675.
Makrolaktón 47 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 41 mg (0,076 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 24, mg (0,151 mmol, 2,0 ekvivalentu) stanánu 8r a 4 mg (0,015 mmol,
0,2 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 760 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 21 hodín pri postupu opísaného pre syntézu makrolaktónu 18d.
25°C podlá
Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 80% etylacetátu v hexáne) sa získa 6 mg (15%) východiskového vinyljodidu 24 a 20,5 mg (51%) makrolaktónu
47. Rf = 0,41 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -86,0 (c 0,25, chloroform); IČ (tenký film) ν^χ 3387, 2968, 2936, 2874, 1733, 1685, 1458, 1381, 1253, 1149, 1050, 1003, 912 cm’1; ľH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,97 (s, 1H, ArH) , 6,63 (s, 1H,
CH=CCH3), 5,43 (dd, J=9,0, 5,5 Hz, 1H, C=CHCH2) , 5,25 (dd, J=8,5, 2,0 Hz, 1H, CHOCO), 4,32 (ddd, J=ll,0, 5,5, 2,5 Hz, 1H, CHOH) , 4,12-4,07 (m, 2H, CH2OH a OH), 4,02 (d, J=ll,0 Hz, 1H, CH2OH) , 3,69 (dd, J=2,0, 2,0 Hz, 1H, CHOH) , 3,16 (kvd, J=7,0, 2,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 3,08 (šs, 1H, OH), 2,98 (kv, J=7,0 Hz, 2H, CH2CH3), 2,61 (ddd, J=15,0, 9,0, 9,0 Hz, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,46 (dd, J=14,5, 11,0 Hz, 1H, CH2COO), 2,38 (dd, J=15,0, 4,0 Hz, 1H, CH2C(CH2OH)=CH) , 2,31-2,25 (m, 1H, CH2C (CH2OH) =CH) , 2,23 (dd,
J=14,5, 2,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,17-2,07 (m, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,04 (s, 3H, CH=C(CH3)), 1,97 (šs, 1H, OH), 1,78-1,61 (m, 3H) , 1,38
-1,23 (m, 2H), 1,37 (kv, J=7,0 Hz, 3H, CH2CH3) , 1,35 (s, 3H, C(CE3)2), 1,18 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,05 (s, 3H, C(CH3)2), 1,01 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C28H43NO6S (M+Na+), 544,2709, nájdené 544,2724.
110
BB • BB BBBB • B B
• · • • · • e B b e
• • · • B BBB B B B
• ···· • · · • · B B B
• • • B • B B B
BBB B • • · BBB BB BBB
Makrolaktón 48 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 26 mg (0,048 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 24, 29 mg (0,072 mmol, 1,5 ekvivalentu) stanánu 8h a 1,5 mg (0,006 mmol, 0,1 ekvivalentu) PdC12(MeCN)2 v 480 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetyl f ormamidu sa mieša 15 hodin pri 25 °C podľa postupu opísaného pre syntézu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, etylacetát) sa získa 10,5 mg (40%) východiskového vinyljodidu 24 a 10,5 mg (41%) makrolaktónu 48. Rf = 0,27 (silikagél, etylacetát); [a]22 D 43,0 (c 0,14, chloroform); IČ (tenký film) 3388, 2924, 2851, 1732, 1682, 1462, 1384, 1251, 1185,
1150, 1067 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,13 (s,
IH, ArH), 6,63 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,45 (dd, J=9,0, 6,0 Hz, 1H,
C=CHCH2), 5,27 (šd, J=7,0 Hz, 1H, CHOCO), 4,29 (dd, J=ll,0,
2,5 Hz, 1H, CHOH), 4,09 (d, J=13,0 Hz, 1H, CH2OH) , 4,00 (d,
J=13,0 Hz, 1H, CH2OH), 3,68 (dd, J=4,0, 2,5 Hz, 1H, CHOH) , 3,15 (kvd, J=6,5, 2,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 2,99 (šs, 1H, OH), 2,65 (ddd, J=15,0, 9,0, 9,0 Hz, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,46 (dd, J=14,5,
II, 0 Hz, 1H, CH2COO), 2,39-2, 33 (m, 1H, CH2C (CH2OH) =CH) , 2,26 (dd, J=14,5, 2,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,26-2,20 (m, 1H, CH2C(CH2OH) = =CH) , 2,14-2,10 (m, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,07 (s, 3H, CH=C(CH3)), 1,99-1,61 (m, 4H) , 1,42-1,24 (m, 2H) , 1,33 (s, 3H, C(CH3)2), 1,16 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,04 (s, 3H, C(CH3)2), 1,00 (d,
J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C27H41NO7S (M+Cs+) , 656, 1658, nájdené 656, 1677.
Makrolaktón 49 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 37 mg (0,069 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 24, 47 mg (0,117 mmol, 1,7 ekvivalentu) stanánu 8q a 10 mg (0,009 mmol, 0,13 ekvivalentu) Pd(PPh3)4 v 780 μΐ (0,1 M) odplyneného toluénu sa 2 hodiny zahrieva na 100°C podľa postupu opísaného pre syntézu makrolaktónu 18h. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska,
111
·· • ·· ···· ··
• · • • • • • •
• • · • • ··· • •
• ···· • · • • · • •
• • • • • • •
··· · • ·· ··· ··
80% etylacetátu v hexáne) sa získa 5,5 mg (15%) makrolaktónu 49. Rf = 0,35 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -48,1 (c 0,27, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3403, 2930, 2873, 1732,
1686, 1462, 1381, 1291, 1266, 1250, 1149, 1004, 980, 937 cm-1;
NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,04 (s, 1H, ArH), 6,85 (dd, J=17,5, 11,0 Hz, 1H, CH=CH2) , 6,61 (s, 1H, CH=CCH3) , 6,05 (d, J=17,5 Hz, 1H, CH=CH2), 5,56 (d, J=ll,0 Hz, 1H, CH=CH2) , 5,45 (dd, J=10,0, 5,5 Hz, 1H, C=CHCH2) , 5,26 (dd, J=9,5, 2,0 Hz, 1H, CHOCO), 4,29 (ddd, J=ll,0, 6,0, 2,5 Hz, 1H, CHOH) , 4,09 (dd,
J=13,0, 6,5 Hz, 1H, CH2OH) ,
4,02 (dd, J=13,0, 6,0 Hz, 1H, CH2OH) ,
3,71 (ddd,
J=4,5, 2,5, 2,5
Hz, 1H,
CHOH) , 3,54 (d, J=6,0 Hz,
1H,
3, 17
2,0 Hz,
1H, CH3CH(C=O) ) , 3,02 (d,
J=2,0
Hz,
1H, OH), 2,68 (ddd,
J=15,0,
10,0, 9,0 Hz,
1H,
C=CHCH2CHO) , 2,45 (dd, J=14,5,
11,0 Hz,
1H, 3H, CH2COO),
2,37-2,31 (m, 1H, CH2C (CH2OH) =CH)
2,30-2,24 (m, 1H, CH2C(CH2OH) = =CH) , 2,28 (dd, J=15,0, 3,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,14-2,07 (m, 1H, C=CHCH2CHO), 2,09 (d, J=l,0 Hz, 1H, CH=C (CH3) ) , 1,79-1,60 (m, 4H) , 1,39-1,25 (m, 2H) , 1,35 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,07 (s, 3H), C(CH3)2), 1,02 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C28H41NO6S (M+Cs+) , 652,1709, nájdené 652,1693.
Flucrid 50 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 3,6 mg (0,007 mmol, 1,0 ekvivalentu) triolu 45 v 0,1 ml (0,07 M) dichlórmetánu sa pri -78°C reaguje s 11 μΐ 0,7 M roztoku DAST v dichlórmetáne (0,008 mmol, 1,1 ekvivalentu) a zmes sa mieša 10 minút pri -78°C. Reakcia sa rozloží pridaním 500 μΐ nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa nechá zahriať na 25°C. Produkt sa potom extrahuje medzi 5 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 5 ml dichlórmetánu a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa dvakrát extrahuje 5 ml dichlórmetánu a spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie
112 ·· · ·· ···· ·· • · β ··· · · · • · · · · ··· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· · (250 mm silikagélová doska, 40% etylacetátu v hexáne) sa získa 2,1 mg (58%) fluoridu 50. Rf = 0,39 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -34,4 (c 0,09, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3413, 2919, 2849, 1725, 1684, 1465, 1381, 1290, 1250, 1150,
1041, 979, 872 cm“1; 1H NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,22 (s, 1H, ArH) , 6,62 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,60 (d, J=47,0 Hz, 2H,
ArCH2F) , 5,56-5, 52 (m, 1H, C=CHCH2) , 5,27 (dd, J=9,5, 2,0 Hz, 1H, CHOCO), 4,79 (dd, J=82,2, 10,8 Hz, 1H, CH=CCH2F), 4,71 (dd,
J=81,8, 10,8 Hz, 1H, CH=CCH2F) , 4,24 (dd, J=10,9, 2,6 Hz, 1H,
CHOH) , 3,70 (dd, J=4,3, 2,5 Hz, 1H, CHOH) , 3,15 (kvd, J=6,8,
2,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 3, 00-2,85 (m, 1H, OH), 2,71 (m, 1H,
C=CHCíí2CHO) , 2,46 (dd, J=14,9, 11,0 Hz, 1H, CH2COO) , 2,38-2,29 (m, 2H, CH2C (CH2OH)=CH) , 2,30 (dd, J=14,9, 2,8 Hz, 1H, CH2COO) ,
2,15-2,09 (m, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,11 (d, J=l,0 Hz, CH=C(CH3)), 1,80-1,50 (m, 4H), 1,37-1,29 (m, 2H) , 1,33 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,06 (s, 3H, C(CH3)2), 1,01 (d,
J=7,l Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C27H39F2NO5S (M+H+) , 528,2595, nájdené 528,2610.
Fluorid 51 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 8,2 mg (0,016 mmol, 1,0 ekvivalentu) triolu 46 v 200 μΐ (0,08 M) dichlórmetánu sa pri -78°C reaguje s 0,025 ml, 0,019 mmol, 1,2 ekvivalentu) DAST a získaná zmes sa mieša 10 minút pri -78°C podľa postupu opísaného na prípravu fluoridu 50. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 30% etylacetátu v hexáne) sa získa
3,5 mg (43%) fluoridu 51. Rf = 0,57 (silikagél, 60% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -41,7 (c 0,11, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3418, 2925, 2852, 1734, 1686, 1535, 1461, 1415, 1383, 1334,
1241, 1150, 1045, 976 cm“1; 1H NMR (400 MHz, deuterochloroform) δ 6,51 (s, 1H, ArH), 6,37 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,55-5,51 (m, 1H, C=CHCH2), 5,22 (dd, J=10,0, 2,0 Hz, 1H, CHOCO), 4,81 (dd, J=74,0, 11,0 Hz, 1H, CH=CCH2F), 4,71 (dd, J=73,0, 11,0 Hz, 1H, CH=CCH2F) , 4,26 (dd, J=ll,0, 2,5 Hz, 1H, CHOH) , 4,09 (s, 3H, CH3O) , 3,71 ·· · ·· ···· ·· • · · · · · · •· · · ···· · • ·*·· · · · ···· · • · ······ ···· · ·· ··· ·· ···
113 (dd, J=4,5,
2,0 Hz, 1H, CHOH) , 3,17 (kvd, J=7,0,
2,5 Hz,
1H,
CH3CH(C=O) ) ,
3,01-2,95 (m,
1H, OH), 2,76-2,68 (m,
1H,
C=CHCH2CHO) ,
2,47 (dd,
J=14,5,
11,0 Hz, 1H, CH2COO) ,
2,37-2,27 (m, 2H, CH2C (CH2OH) =CH) ,
2,29 (dd, J=14,5, 2,5 Hz, 1H,
CH2COO),
2,17-2,11 (m, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,14 (s, 3H, CH=C(CH3)), (m, 4H), 1,40-1,22 (m, 2H) , 1,34 (s, 3H, C(CH3)2), 1,19
1,80-1,50 (d, J=7,0
Hz, 3H, CH(CH3)), 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 1,03 (d, J=7,0 Hz, 3H,
CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C27H40FNO6S (M+H+) , 526,2639, nájdené 526,2625.
Fluorid 52 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 12,5 mg (0,024 mmol, 1,0 ekvivalentu) triolu 47 v 500 μΐ (0,05 M) dichlórmetánu sa pri -78°C reaguje s 250 μΐ (0,1 M roztok v dichlórmetáne, 0,025 mmol, 1,05 ekvivalentu) DAST a získaná zmes sa mieša 10 minút pri -78°C podľa postupu opísaného na prípravu fluoridu 50. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 60% etylacetátu v hexáne) sa získa 5,1 mg (41%) fluoridu 52. Rf = 0,19 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -68,6 (c 0,22, chloroform); IČ (tenký film) νΜΧ 3504, 2969, 2935, 2877, 1736, 1687, 1461, 1369, 1290, 1250, 1148, 1068, 1044, 1008,
976 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,98 (s, 1H, ArH), 6,60 (s, 1H, CH=CCH3), 5, 56-5,52 (m, 1H, C=CHCH2) , 5,23 (dd,
J=10,0, 2,0 Hz, 1H, CHOCO), 4,80 (dd, J=73,0, 10,5 Hz, 1H,
CH=CCŕí2F) , 4,71 (dd, J=72,5, 10,5 Hz, 1H, CH=CCH2F) , 4,33 (ddd,
J=ll,0, 5,5, 2,5 Hz, 1H, CHOH) , 3,71 (ddd, J=5,0, 2,5, 2,0 Hz,
1H, CHOH), 3,71 (d, J=6,0 Hz, 1H, CHOH) , 3,17 (kvd, J=7,0,
2,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 3,07 (m, 1H, OH), 4,51 (kv, J=7,5 Hz,
2H, CH2CH3), 2,70 (ddd, J=15,0, 10,0, 2,0 Hz, 1H, C=CHCH2CHO) ,
2,45 (dd, J=14,5, 11,0 Hz, 1H, CH2COO), 2,39-2,28 (m, 2H,
CH2C (CH2OH)=CH) , 2,26 (dd, J=14,5, 2,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,17-2,10 (m, 1H, C=CHCH2CHO), 2,08 (d, J=l,5 Hz, 3H, CH=C(CH3)), 1,80-1,67 (m, 3H), 1,39 (t, J=7,5 Hz, 3H, CH2CH3) , 1, 39-1,24 (m, 2H) , 1,35 (s, 3H, C(CH3)2), 1,19 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,07 (s, 3H,
114
·· • • · ···· • ·
• · • • · • • •
• • e • • ··· • •
• ···· • · • • · • •
• • • • • • •
···· • • · ··· • e
vypočítané ···
C(CH3)2), 1,03 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(Ctt3)); HRMS (FAB), pre C28H42FNO5S (M+Cs+) , 656, 1822, nájdené 656, 1843.
Fluorid 53 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 6,0 mg (0,0151 mmol, 1,0 ekvivalentu) triolu 49 v
1,5 ml (0,01 M) dichlórmetánu sa pri -78°C reaguje s 0,20 ml (0,08 M roztok v dichlórmetáne, 0,016 mmol, 1,1 ekvivalentu) DAST a získaná zmes sa mieša 10 minút pri -78°C podlá postupu opísaného na prípravu fluoridu 50. Po čistení pomocou preparatívr.ej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 50% etylacetátu v hexáne) sa získa 3,0 mg (50%) fluoridu 53. Rf = 0,50 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -12,4 (c 0,2, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3408, 2926, 2851, 1732, 1682, 1462, 1384, 1292, 1250, 1150, 1068, 974 cm’1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,04 (s, 1H, ArH) , 6,86 (dd, J=17,4, 10,8 Hz, 1H, CH=CH2) , 6,59 (s, 1H, CH=CCH3) , 6,05 (d, J=17,5 Hz, 1H, CH=CH2), 5,55 (d, J=ll,0 Hz, 1H, CH=CH2) 5,57-5,51 (m, 1H, C=CHCH2), 5,25 (d, J=10,0 Hz, 1H, CHOCO) , 4,79 (dd, J=83,8, 10,7 Hz, 1H, CH=CCH2F) , 4,71 (dd, J=83,6, 10,7 Hz, 1H,
CH=CCH2F) , 4,28 (dd, J=10,6, 1,6 Hz, 1H, CHOH) , 3,70 (m, 1H,
CHOH), 3, 33-3, 25 (m, 1H, CHOH) , 3,16 (kvd, J=7,0, 2,1 Hz, 1H,
CH3CH(C=O) ) , 2,98 (m, 1H, OH), 2,75-2, 66 (m, 1H, C=CHCH2CHO) ,
2,46 (dd, J=14,6, 11,0Hz, 1H, CH2COO), 2,37-2,27 (m, 2H,
CH2C (CH2OH)=CH) , 2,28 (dd, J=14,6, 2,6 Hz, 1H, CH2COO) , 2,15-2,08 (m, 1H, C=CHCH2CHO) , 2,11 (s, 3H, CH=C(CJÍ3)), 1,80-1, 64 (m, 3H) , 1,43-1,27 (m, 2H) , 1,34 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 1,03 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C^bHíoFNOsS (M+H+), 522,2689, nájdené
522,2704.
Epoxid 54 ilustrovaný v schéme 9
K roztoku 25,4 mg (0,049 mmol, 1,0 ekvivalentu) alylalkoholu 45 a 4A molekulových sít v 0,50 ml dichlórmetánu sa pri -40°C
115
• · • ·· ·· ·
• · • • • • • • • ·
• • · • • ··· • • •
• ···· • · • • • · • •
• • • • • • • •
···· • ·· ··· ·· • · ·
prikvapká 41 μΐ (0,59 M roztok v dichlórmetáne, 0,024 mmol, 0,5 ekvivalentu) (+)-dietyl-D-tartrátu, potom 55 μΐ (0,35 M roztok v dichlórmetáne, 0,019 mmol, 0,4 ekvivalentu) titániumizopropoxidu. Po 1 hodine pri tejto teplote sa pridá 22 μΐ 5 M roztoku terc-butylhydroperoxidu v dekáne (0,110 mmol, 2,2 ekvivalentu) a reakčná zmes sa mieša 2 hodiny pri -30°C. Reakčná zmes sa potom filtruje cez kremelinu do 10 ml nasýteného vodného roztoku síranu sodného za elúcie 10 ml etylacetátu. Získaná dvojfázová zmes sa potom mieša 1 hodinu a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa extrahuje trikrát 10 ml etylacetátu a spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 80% etylacetátu v hexáne) sa získa 13,5 mg (52%) epoxidu 54. Rf = 0,23 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -55,4 (c 0,06, chloroform) ; IČ (tenký film) vmax 3425, 2929, 2862, 1732, 1688, 1456,
1367, 1292, 1258, 1195, 1149, 1040, 980 cm-1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 7,22 (s, 1H, ArH) , 6,62 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,59 (d, J=47,0 Hz, 2H, ArCH2F) , 5,46 (dd, J=6,7, 3,4 Hz, 1H,
CHOCO) , 4,14-4,09 (m, 1H, CHOH) , 3,89 (d, J=6,4 Hz, 1H, OH),
3,76 (šs, 1H, CffOH), 3,72 (d, J=12,l Hz, 1H, CH2OH), 3,56 (dd, J=12,l, 7,5 Hz, 1H, CH2OH) , 3,33 (kvd, J=6,8, 5,3 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 3,16 (dd, J=6,3, 6,1 Hz, 1H, C (O) CHCH2CHO) , 2,55 (dd, J=14,l, 10,2 Hz, 1H, CH2COO) , 2,50 (šs, 1H, OH), 2,41 (dd, J=14,l, 3,1 Hz, 1H, CH2COO), 2,11 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,10-1,97 (m, 2H, C(O)CHCH2CHO) , 1,91-1,81 (m, 2H, CH2C(CH2OH)), 1,74-1,60 (m, 3H), 1,50-1,30 (m, 2H) , 1,34 (s, 3H, C(CH3)2), 1,18 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,06 (s, 3H, C(CH3)2), 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H, C(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C27H40FNO7S (M+H+) , 542,2588, nájdené 542,2575.
Epoxid 55 ilustrovaný v schéme 9
K roztoku 22 mg (0,042 mmol, 1,0 ekvivalentuá) alylického alkoholu 46 a 4A molekulových sít sa pri -40°C prikvapká 4 μΐ
116
·· • ·· ···· ·· •
• · • • · • • · ··
• • · • · ··· • • •
• ···· • · · • · • · •
• • • · • • • •
···· • ·· ··· ·· ···
(0,021 mmol, 0,5 ekvivalentu) (+)-dietyl-D-tartrátu, potom 5 μΐ (0,016 mmol, 0,4 ekvivalentu) titániumizopropoxidu a po 1 hodine pri tejto teplote 18 μΐ 5 M roztoku terc-butylhydroperoxidu v dekáne (0,092 mmol, 2,2 ekvivalentu) podlá postupu opísaného na prípravu epoxidu 54. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélove dosky, 80% etylacetátu v hexáne) sa získa 16 mg (70%) epoxidu 55. Rf = 0,25 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -44,8 (c 1,4, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3435, 2959, 2935, 2877, 1732,
1689, 1534, 1459, 1421, 1371, 1338, 1241, 1174, 1039, 980 cm-1;
XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,51 (s, 1H, ArH) , 6,35 (s, 1H, CH=CCH3), 5,40 (dd, J=7,0, 3,0 Hz, 1H, CHOCO) , 4,11 (ddd,
J=10,0, 6,5, 3,0 Hz, 1H, CflOH) , 4,07 (s, 3H, CH3O) , 3,88 (d, J=6,0 Hz, 1H, OH), 3,77-3,74 (m, 1H, C/ÍOH) , 3,73 (dd, J=12,5,
4,0 Hz, 1H, CH2OH), 3,57 (dd, J=12,5, 8,0 Hz, 1H, CH2OH) , 3,32 (qd, J=7,C, 5,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 3,16 (dd, J=7,0, 5,5 Hz, 1H,
C(O)CHCH2CHO) , 2,54 (dd, J=14,5, 10,0 Hz, 1H, CH2COO) , 2,50 (šs,
1H, OH), 2,40 (dd, J=14,5, 3,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,13 (s, 3H,
CH=C(CH3)), 2,12-2,05 (m, 1H, C (O) CHCH2CHO) , 2,03-1, 95 (m, 2H) ,
1,90-1,82 (m, 1H, CH2C (CH2OH) ) , 1,75-1, 60 (m, 2H) , 1, 50-1,20 (m, 3H), 1,35 (s, 3H, C(CH3)2), 1,16 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C27H4iNOaS (M+Cs+) , 672,1607, nájdené 672,1584.
Fluorid 58 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 5,0 mg (0,009 mmol, 1,0 ekvivalentu) triolu 54 v 1 ml (0,01 M) dichlórmetánu sa pri -78°C reaguje s 0,25 ml 0,1 M roztoku DAST v dichlórmetáne (0,025 mmol, 1,05 ekvivalentu) podlá postupu opísaného na prípravu fluoridu 50. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 60% etylacetátu v hexáne) sa získa 2,0 mg (41%) fluoridu 58. Rf = 0,22 (silikagél, 50% etylacetátu v hexáne); IČ (tenký film) vmax 3402, 2954, 2923, 2853, 1732, 1688, 1462, 1378, 1262,
1185, 1149, 1082, 1031, 980 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloro-
·· · • · · * · * ·· ···· • · · 1 •
117 • ···· · · · · • · · · · 9 • · •
···· · ·· ··· a
form) δ 7,23 (s, 1H, ArH), 6,63 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,60 (d,
J=47 Hz, 2H, ArCH2F), 5,47 (dd, J=7,0, 3,0 Hz, 1H, CHOCO) , 4,39 (dd, J=97,0, 10,5 Hz, 1H, C(O)CH2F), 4,30 (dd, J=97,0, 10,5 Hz, 1H, C(O)CH2F), 4,13 (ddd, J=9,5, 6,5, 3,0 Hz, 1H, CHOH) ,3,75 (dd, J=5,0, 5,0 Hz, 1H, CHOH) , 3,74 (d, J=7,0 Hz, 1H, OH), 3,31 (kvd, J=7,0, 6,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 3,02 (dd, J=6,0, 6,0 Hz,
1H, CH (O) CH2CHO) , 2,56 (dd, J=14,0, 10,0 Hz, 1H, CH2COO) ,2,46 (šs, 1H, OH), 2,42 (dd, J=14,0, 4,0 Hz, 1H, CE2COO), 2,13 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,10-1,97 (m, 3H) , 1, 95-1,87 (m, 1H) , 1,90-1,82(m,
1H), 1,75-1, 63 (m, 2H) , 1,50-1, 20 (m, 2H) , 1,36 (s, 3H, C(CH3)2),
1,16 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 1,01 (d, J=7,0 Hz, 3H, C(CH3)2); MS (elektrónsprej], vypočítané pre
C27H39F2NO6S (M+H+) 544, nájdené 544.
Fluorid 59 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 15 mg (0,028 mmol, 1,0 ekvivalentu) triolu 55 v 280 μΐ (0,1 M) dichlórmetánu sa pri -78°C reaguje s 5 μΐ (0,038 mmcl, 1,4 ekvivalentu) DAST podľa postupu opísaného na prípravu fluoridu 50. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, 50% etylacetátu v hexáne) sa získa 4,0 mg (26%) fluoridu 59. Rf = 0,42 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -29,4 (c 0,33, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3492, 2960, 2928, 2874, 2865, 1738, 1732, 1693, 1682, 1537, 1462, 1455, 1422, 1384, 1241,
1144, 980 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,52 (s, 1H, ArH), 6,35 (s, 1H, CH=CCH3), 5,41 (dd, J=7,0, 3,5 Hz, 1H, CHOCO),
4,40 (dd, J=lll,5, 10,5 Hz, 1H, CH2F) , 4,30 (dd, J=lll,5,
10.5 Hz, 1H, CH2F) , 4,14 (ddd, J=10,0, 7,0, 3,5 Hz, 1H, CHOH) ,
4,08 (s, 3H, CH3O) , 3,80 (d, J=7,0 Hz, 1H, OH), 3,78 (dd, J=3,5,
3.5 Hz, 1H, CHOH), 3,31 (kvd, J=7,0, 5,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O)),
3,01 (dd, J=7,0, 5,5 Hz, 1H, C (O) CHCH2CHO) , 2,55 (dd, J=14,5,
10,0 Hz, 1H, CH2COO), 2,53 (šs, 1H, OH), 2,40 (dd, J=14,5,
3,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,14 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,12-2,15-1,90 (m,
3H), 1,73-1,70 (m, 1H) , 1,55-1,24 (m, 5H) , 1,36 (s, 3H, C(CH3)2),
118 (d,
Z , vypočítané pre
J=7,0 Hz, 3H, C(CH3)2); HRMS (FAB) (M+Cs+) , 674,1564, nájdené 674, 1594.
Epoxid 57 uvedený v schéme 10
K roztoku 81 mg (0,151 mmol, alkoholu 24 a 4A molekulových sit v
-40°C prikvapká 13 μΐ (0,076 mmol, ·· · • · · • · • ···· • · • · · · · ·· ···· • ·· • ···· • ·· • ·· ·· ··· • t •· · •· •· •· ·· ·
1,00
C27H40FNO7S
1,0 ekvivalentu) alylického
1,25 ml dichlórmetánu sa pri
0,5 ekvivalentu) (+)-dietyl-D-tartrátu, potom 18 μΐ (0,060 mmol, 0,4 ekvivalentu) titániumizopropoxidu a po 1 hodine pri tejto teplote 66 μΐ
M roztoku terc-butylhydroperoxidu v dekáne (0,330 mmol, 2,2 ekvivalentu) a reakcia sa epoxidu 54.
Po čistení epoxidu 57.
uskutočňuje podľa postupu na prípravu pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie 80% etylacetátu v hexáne) sa získa 74 mg (89%) 0,34 (silikagél, 80% etylacetátu
Rf v hexáne);
2931, 2877, (c 0,3, chloroform); IČ (tenký film) vmax
1733, 1689, 1465, 1377, 1289, 1257,
1147,
3455, 2959,
1040,
979, deuterochloroform)
6,46
1H,
CH=CCH3) , 5,48 (dd, J=4,9,
4,7
Hz,
1H, CHOCO)
1H,
CHOH), 3,75 (dd, J=5,6, 3,4
Hz,
1H,
CHOH), 3,71 (d, J=12,5
Hz,
1H, CH2OH) ,
3,64 (šs, 1H,
OH) ,
3,56 (d, J=12,5 Hz,
1H,
CH2OH) ,
J=6,7,
6,7 Hz, 1H,
CH3CH(C=O)), 3,09 (dd,
J=6,3,
6,2 Hz, 1H,
C(O)CHCH2CHO) , 2,52 (dd, J=14,3, 9,8 Hz,
1H,
CH2COO) ,
2,43 (dd, J=14,3, 3,4 Hz, 1H, CH2COO) , 2,28 (šs,
1H, OH), 1,95 (m, 2H, C(O)CHCH2CHO), 1,86 (s,
CH2C(CH2OHI), 1,67
1, 61 (m, 1H), (m, 2H),
1,15 (d, J=6,8
Hz, 3H,
CH(CH3)), 1,06
0, 98
J=7,0 Hz, 3H,
C(CH3)2) vypočítané pre C23H37lO7 (d, (M+Na+) , 575,1483, nájdené ; HRMS (FAB),
575,1462.
Epoxid 56 ilustrovaný v schéme 9
Roztok 20 mg (0,036 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 57, mg (0,072 mmol, 1,5 ekvivalentu) stanánu 8r a 2,0 mg
119 (0, 004 mmol, 0,1 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 360 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 20 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu laktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, etylacetát) sa získa 6 mg (30%) východiskového vinyljodidu 57 a 10 mg (51%) makrolaktónu 56. Rf = 0,23 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22D -60,0 (c 0,14, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3414, 2969, 2933, 2872, 1736, 1687, 1458, 1373, 1293, 1258, 1150, 980, 914 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,99 (s, 1H, ArH) , 6,61 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,43 (dd, J=8,0 3,0 Hz, 1H, CHOCO) , 4,20 (ddd, J=9,5, 6,5, 3,0 Hz, 1H, CHOH) , 4,04 (d, J=6,5 Hz, 1H, OH), 3,77 (dd, J=4,0, 4,0 Hz, 1H, CHOH) , 3,74 (dd, J=12,5, 4,0 Hz, 1H, Cŕí2OH) , 3,57 (dd, J=12,5, 8,0 Hz, 1H, CH2OH), 3,32 (kvd, J=7,0, 4,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 3,16 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H, C (O) CHCH2CHO) , 3,01 (kv, J=7,5 Hz, 2H, CH2CH3), 2,56 (šs, 1H, OH), 2,54 (dd, J=14,0, 10,0 Hz, 1H, CH2COO), 2,38 (dd, J=14,0, 3,0 Hz, 1H, CH2COO) , 2,14 (ddd,
J=15,0, 4,5, 3,0 Hz, 1H, C (O) CHCH2CHO) , 2,11 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,02-1,96 (m, 1H, C (O) CHCH2CHO) , 1,93-1,84 (m, 1H) , 1,74-1,71 (m, 1H) , 1,55-1,25 (m, 5H), 1,40 (t, J=8,0 Hz, 3H, CH3CH2), 1,37 (s, 3H, C(CH3)2), 1,17 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 1,01 (d, J=7,0 Hz, 3H, C(CH3)2); HRMS (FAB), vypočítané pre C28H43NO7S (M+Na+), 560,2658, nájdené 560,2640.
jbís-Silyléter 61 ilustrovaný v schéme 10
K roztoku 83 mg (0,150 mmol, 1,0 ekvivalentu) triolu 57 v
1,5 ml (0,1 M) dimetylformamidu sa pridá 315 μΐ (2,26 mmol, 15 ekvivalentov) trietylamínu, potom 152 μΐ (1,20 mmol, 8 ekvivalentov) TMSC1 a zmes sa mieša 12 hodín pri 25°C. Zmes sa odparí za zníženého tlaku a získaný olej sa extrahuje medzi 10 ml éteru a 10 ml vody a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa extrahuje trikrát 10 ml éteru a spojené extrakty sa sušia nad síranom horečnatým, odparia sa za zníženého tlaku a potom sa filtrujú cez krátky stĺpec silikagélu. Získaný filtrát sa odparí, rozpus120 ·· · ti sa v 5 ml dichlórmetánu a pridá sa 1 g silikagélu. Získaná suspenzia sa mieša 12 hodín pri 25°C, filtruje sa a nakoniec sa filtruje cez krátky stĺpec silikagélu a získa sa 103 mg (98%) bis-silyléteru 61 vo forme peny. Rf = 0,48 (silikagél, 60% dietyléteru v hexáne); [a]22 D -19,1 (c 0,23, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3408, 2956, 1746, 1698, 1454, 1383, 1250, 1156, 1113, 1060, 1021, 985, 898, 841, 752 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,44 (s, 1H, ArH), 5,37 (dd, J=9,0 Hz, 1H, CHOCO),
4,01 (dd, J=10,5, 2,5 Hz, 1H, CHOH) , 3,86 (d, J=10,0 Hz, 1H,
CHOSi), 3,79 (dd, J=12,5, 4,5 Hz, 1H, CH2OH) , 3,49 (ddd, J=12,5,
10,5, 8,5 Hz, 1H, CH2OH), 3,39 (m, 1H, OH), 3,09 (dd, J=10,5,
3,5 Hz, 1H, CH(O)CH2CO), 2,97 (kvd, J=6,5, 4,0 Hz, 1H, CH3CH-
-(C=O)), 2,74 (dd, J=16,5, 10,5 Hz, 1H, CH2COO), 2,67 (dd,
J=16,0, 2,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,18-2,15 (m, 1H, CH(O) CH2CHO) ,
1,95-1,82 (m, 2H), 1,82 (s, 3H, CH3C=C), 1,68-1,40 (m, 4H), 1,24 (m, 2H), 1,18 (s, 3H, C(CH3)2), 1,11 (s, 3H, C(CH3)2), 1,06 (d, J=6,5 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,95 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,14 (s, 9H, (CH3)3Si), 0,06 (s, 9H, (CH3)3Si); HRMS (FAB), vypočítané pre
C29H53IO7Si2 (M+Cs+) , 829, 1429, nájdené 829, 1459.
Aldehyd 62 ilustrovaný v schéme 10
K suspenzii 20 mg (0,029 mmol, 1,0 ekvivalentu) alkoholu 61 a 4A molekulových sít v 0,25 ml dichlórmetánu sa pridá 10 mg (0,085 mmcl, 3,0 ekvivalentu) NMO a potom 1 mg (0,003 mmol, 0,1 ekvivalentu) TPAP. Získaná suspenzia sa mieša 40 minút pri 25°C a potom sa filtruje cez krátky stĺpec silikagélu a získa sa 18 mg (90%) aldehydu 62. Rf = 0,66 (silikagél, 60% dietyléteru v hexáne); IČ (tenký film) vmax 2956, 2913, 2851, 1732, 1698, 1454, 1383, 1250, 1156, 1113, 1021, 987, 895, 841, 750 cm-1; XH NMR (600 MHz, deuterochloroform) δ 8,84 (s, 1H, CH=O), 6,51 (s, 1H, ArH), 5,46 (dd, J=7,9, 3,4 Hz, 1H, CHOCO), 3,81 (d, J=8,3 Hz, 1H, CHOSi), 3,32 (dd, J=8,5, 4,2 Hz, 1H, CHOSi), 3,04 (kvd, J=7,l, 7,1 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 2,65 (dd, J=15,6, 8,3 Hz,
1H, CH2COO) , 2,59 (dd, J=15,6, 4,1 Hz, 1H, CH2COO), 2,21 (ddd,
121
J=15,2, (s, 3H, (m, 2H) ·· · • · · • · · • ···· • · ···· ·
3,8, 3,8 Hz, 1H, CH (O) CH2CHO) , 2,06-1,97
CH3C=CH), 1,87-1,80 (m, 1H) , 1,62-1,56 , 1,27-1,21 (nezreteľný m,
2H), 1,15
1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 1,08 (d, J=6,2 Hz, 3H,
J=6,9 Hz, (CH3)3Sí) ;
827,1272,
Olefin 63 (m, ·· ···· • ·· • 9· ·· • · ·· • ·9
99999 ·· •· · •· •· •· ·· ·
2H), 1,87
1Η) ,
3H,
CH(CH3) ) ,
3H, CH(CH3)), 0,13 (s, 9H, (CH3)3Si), 0,05
HRMS (FAB), vypočítané pre nájdené 827,1304.
ilustrovaný v schéme 10
1,51-1,41
C(CH3)2) ,
0,96 (d,
C29H51I07Si2 (s, 9H, (M+Cs+) ,
104 mg Metyltrifenylfosfóniumbromidu (zmes s amidom sodným (Aldrich), 0,250 mmol, 9,7 ekvivalentu) v 2,0 ml tetrahydrofuránu sa pri 5°C po častiach pridá k roztoku 18,0 mg (0,026 mmol, 1,0 ekvivalentu) aldehydu 62 v 0,5 ml tetrahydrofuránu a zmes sa mieša, pokiaľ sa podľa tenkovrstvovej chromatografie neskončí. Pridá sa 1 ml nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho a produkt sa trikrát extrahuje 2 ml éteru, suší sa nad síranom horečnatým a potom sa odparí za zníženého tlaku. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 15% éteru v hexáne) sa získa 11,7 mg (65%) olefínu 63. Rf = 0,50 (silikagél, 20% dietyléteru v hexáne); [ex]22 D -17,9 (c 0,2, chloroform); IČ (tenký film) vmax 2954, 2923, 1747, 1698, 1456, 1382,
1250, 1156, 1113, 1021, 986, 889, 841, 750 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,44 (s, 1H, ArH), 6,00 (dd, J=17,0, 10,0 Hz, 1H, CH=CH2), 5,36 (dd, J=9,0, 2,0 Hz, 1H, CHOCO), 5,29 (dd, J=17,5, 1,5 Hz, 1H, CH2=CH) , 5,14 (dd, J=10,5, 1,5 Hz, 1H, CH2=CH) , 4,12 (dd, J=9,0, 5,0 Hz, 1H, CHOSi), 3,85 (d, J=9,5 Hz, 1H, CHOSi), 3,04 (kvd, J=9,0, 7,0 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 2,85 (dd, J=9,5, 4,0 Hz, 1H, CH(O)CCH=CH2) , 2,73 (dd, J=16,0, 10,0 Hz, 1H, CH2COO), 2,65 (dd, J=16,0, 2,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,12 (ddd, J=15,0, 4,0, 2,0 Hz, 1H, CH2CH(O)), 1,93-1,78 Í3H, m), 1,84 (s,
3H, CH=CCH3) , 1,65-1,20 (m, 5H) , 1,19 (s, 3H, C(CH3)2), 1,11 (s,
3H, C(CH3)2), 1,08 (d, J=6,5 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,95 (d, J=7,0 Hz,
3H, CH(CH3)), 0,14 (s, 9H, (CH3)3Si), 0,07 (9H, s, (CH3)3Si); HRMS (FAB), vypočítané pre C3oH53I06Si2 (M+Cs+) , 825,1480, nájdené
122 ··· ·
825,1450.
Makrolaktón 65 ilustrovaný v schéme 10
Roztok 15 mg (0,022 mmol, 1,0 ekvivalentu) olefinu 63 v 1,0 ml etanolu reaguje so 17 μΐ (0,500 mmol, 25,0 ekvivalentu) hydrazinu a 25 μΐ (30% roztok vo vode (hmotn.), 0,370 mmol, 16,0 ekvivalentu) peroxidu vodíka a získaná zmes sa mieša 3 hodiny pri 0°C. Zmes sa potom extrahuje medzi 4 ml éteru a 2 ml vody a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa extrahuje trikrát 4 ml éteru a spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a odparia sa za zníženého tlaku a získa sa 15,0 mg peny, ktorá sa rozpustí v 1,5 ml tetrahydrofuránu a reaguje so 600 ml HF.pyr. v zmesi pyridín/tetrahydrofurán a zmes sa mieša 2 hodiny pri 0°C. Reakčná zmes sa potom rozloží 5 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje sa trikrát 3 ml etylacetátu. Spojené organické extrakty sa sušia nad síranom horečnatým a odparia sa vo vákuu. Po čistení pomocou veľmi rýchlej kolónovej chromatografie (silikagél, 80% éteru v hexáne) sa získa 9,4 mg (75%) makrolaktónu 65. Rf = 0,06 (silikagél, 60% éteru v hexáne); [ct]22D -19,3 (c 0,33, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3416, 2954, 2926, 2872, 1734, 1689, 1456, 1384, 1287, 1256, 1149, 1084, 978, 892 cm-1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,46 (s, 1H, CH=CCH3), 5,48 (dd, J=5,0, 5,0 Hz, 1H, CHOCO), 4,03 (šm, 1H, CHOH) , 3,76 (šm, 2H, CJiOH a OH) , 3,34 (kvd, J=6,5, 6,5 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ), 2,73 (dd, J=6,5, 6,5 Hz, 1H, CJÍ(O)CCH2CH3) , 2,54 (dd, J=14,5, 10,0 Hz, 1H, CH2COO) , 2,44 (dd, J=14,5, 8,5 Hz, 1H, CH2COO) , 2,29 (šs, 1H, OH), 1,96-1,85 (m, 2H), 1,89 (s, 3H, CH3C=CH) , 1, 70-1, 40 (m, 5H) , 1,31-1,24 (m, 4H), 1,35 (s, 3H, C (CH3) 2) , 1,19 (d, J=6,5 Hz, 3H, CH (CH3) ) , 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 0,99 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,91 (t,
J=7,5 Hz, 3H, CH3CH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C24H39IO6 (M+Cs+) 683,0846, nájdené 683,0870.
123 ·· ···· • · • ··· ··
Makrolaktón 66 ilustrovaný v schéme 10
Roztok 9,4 mg (0,017 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 65, 10 mg (0, 036 mmol, 2,1 ekvivalentu) stanánu 8j a 1,0 mg (0,004 mmol, 0,2 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 250 μΐ (0,07 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 15 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, etylacetát) sa získa 4,6 mg (52%) makrolaktónu 66. Rf = 0,40 (silikagél, 80% etylacetátu v hexáne); [a]22 D -30,0 (c 0,17, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3432, 2967, 2933, 2872, 1736, 1689, 1458, 1384, 1256, 1151, 1067, 1038, 979, 905,
733 cm'1; XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 7,23 (s, 1H, ArH), 6,62 (s, 1H, CH=CCH3), 5,59 (d, J=47,l Hz, 2H, CH2F), 5,46 (dd,
J=6,3, 3,7 Hz, 1H, CHOCO), 4,15 (d, J=8,8 Hz, 1H, CHOH) , 3,98 (šs, 1H, OH), 3,77 (šs, 1H, CHOH), 3,35 (kvd, J=6,6, 4,8 Hz, 1H, CH3CH(C=O) ) , 2,82 (dd, J=6,l, 6,1 Hz, 1H, CH(O) CCH2CH3) , 2,56 (dd, J=14,0, 9,9 Hz, 1H, CH2COO) , 2,48 (šs, 1H, OH), 2,41 (dd, J=14,0, 3,0 Hz, 1H, CH2COO) , 2,13 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,04 (ddd, J=15,l, 5,9, 4,0 Hz, 1H, CH2CH (O) CHCH2) , 2,00-1,94 (m, 1H, CH2CH(O)CHCH2) , 1,78-1,24 (m, 7H) , 1,36 (s, 3H, C(CH3)2), 1,17 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)); HRMS (FAB), vypočítané pre C2gH42FNOgS (M+Cs+) ,
672,1771, nájdené 672,1793.
Makrolaktón 67 ilustrovaný v schéme 10
Roztok 11 mg (0,020 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 65, 14 mg (0,034 mmol, 1,7 ekvivalentu) stanánu 8p a 1,0 mg (0,004 mmol, 0,2 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 250 μΐ (0,08 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 20 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, etylacetát) sa získa 8,5 mg (79%) makrolaktónu 67. Rf = 0,68 (silikagél, éter); [a]22 D -44,7 (c 0,08, chloroform); IČ
124 ·· · ·· ·· ···· • · · · · • · · · · ··· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· (tenký film) vmax 3442, 2964, 2934, 1732, 1683, 1536, 1461, 1422, 1384, 1241, 1150, 1070, 979, 906, 732 cm-1; rH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,52 (s, 1H, ArH), 6,36 (s, 1H, CH=CCH3) ,
5,41 (dd, J=7,0, 3,3 Hz, 1H, CHOCO) , 4,15 (ddd, J=10,3, 7,0,
3,7 Hz, 1H, CHOH), 4,08 (s, 3H, OCH3) , 3,99 (šd, J=6,3 Hz, 1H,
OH), 3,77 (šm, 1H, CHOH), 3,34 (kvd, J=6,6, 4,8 Hz, 1H,
CH3CH(C=O) ) , 2,81 (dd, J=6, 6, 5,9 Hz, 1H, CH(O) CCH2CH3) , 2,55 (dd, J=14,2, 10,1Hz, 1H, CH2COO) , 2,52 (šs, 1H, OH), 2,39 (dd, J=14,0, 2,9 Hz, 1H, CH2COO) , 2,14 (s, 3H, CH=C(CH3)), 2,05 (ddd, J=15,l, 5,5, 4,0 Hz, 1H, CH2CH (O) CHCH2) , 1, 98-1, 92 (m, 1H,
CH2CH(O)CHCH2) , 1,80-1,70 (m, 2H) , 1, 58-1, 39 (m, 5H) , 1,30-1,24 (m, 2H), 1,17 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,08 (s, 3H, C(CH3)2), 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,91 (t, J=7,4 Hz, 3H, CH3CH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C28H43NO7S (M+Cs+), 670,1815, nájdené
670,1837.
Makrolaktón 68 ilustrovaný v schéme 10
Roztok 5,8 mg (0,011 mmol, 1,0 ekvivalentu) vinyljodidu 65, 10 mg (0,025 mmol, 2,3 ekvivalentu) stanánu 8r a 1,0 mg (0,004 mmcl, 0,3 ekvivalentu) PdCl2(MeCN)2 v 100 μΐ (0,1 M) odplyneného dimetylformamidu sa mieša 23 hodín pri 25°C podľa postupu opísaného na prípravu makrolaktónu 18d. Po čistení pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (250 mm silikagélová doska, etylacetát) sa získa 3,7 mg (65%) makrolaktónu 68. Rf = 0,45 (silikagél, dietyléter) ; [a]22D -33,3 (c 0,09, chloroform); IČ (tenký film) vmax 3406, 2954, 2924, 2872, 1736, 1692, 1454, 1384, 1254, 1150, 1071, 979' cm-1; ΧΗ NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 6,99 (s, 1H, ArH), 6,60 (s, 1H, CH=CCH3) , 5,42(dd,
J=7,9, 3,1 Hz, 1H, CHOCO), 4,33 (šs, 1H, CHOH), 4,24(šd,
J=9,6 Hz, 1H, OH), 3,76 (šm, 1H, CHOH), 3,32 (kvd, J=6,8,
4,3 Hz, 1H, CH3CH(C=O)), 3,01 (kv, J=7,6 Hz, 2H, ArCH2CH3) ,2,82 (dd, J=7,4, 4,8 Hz, 1H, CH(O)CH2), 2,60 (šs, 1H, OH), 2,54(dd,
J=13,6, 10,3 Hz, 1H, CH2COO) , 2,35 (dd, J=14,0, 2,9 Hz,1H,
CH2COO) , 2,10-2,05 (nezreteľný m, 1H, CH2CH(O)), 2,09 (s,3H,
125 ·· · ·· ···· • 9 · 9 9· • · · · · 9999 • ···· 9 9 9999 • · 9 9 99 ···· · 99 999 99
CH=C(CH3)), 1,96-1, 90 (m, 1H, CH2CH (O) CHCH2) , 1, 80-1,67 (m, 2H) ,
1, 66-1,25 (m, 7H) , 1,38 (s, 3H, C(CH3)2), 1,16 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 1,07 (s, 3H, C(CH3)2), 1,00 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH(CH3)), 0,92 (t, J=7,4 Hz, 3H, CH3CH2) , 0,91 (t, J=7,5 Hz, 3H, CH3CH2) ; HRMS (FAB), vypočítané pre C29H45NO6S (M+Cs+) , 668,2022, nájdené 668,2042.
Testy polymerizácie tubulinu a cytotoxicity
Polymerizácia tubulinu sa určí pomocou filtračného kolorimetrického spôsobu, ktorý vyvinul Bollag a je opísaný v Cancer Res. 1995, 55, 2325-2333. Čistený tubulín (1 mg/ml) sa inkubuje 30 minút pri 37°C v prítomnosti každej zlúčeniny s koncentráciou 20 mM v pufri MEM [(100 mM 2(N-morfolino)etánsulfónová kyselina, pH 6,75, 1 mM etylénglykolbis (β-aminoetyléter)N,N, N',N'-tetraoctovej kyseliny a 1 mM MgCl2]; zmes sa potom filtruje za odstránenia nepolymerizovaného tubulinu pomocou 96 jamkovej hydrofilnej filtračnej doštičky s veľkosťou pórov 0,22 μιη Millipore Multiscreen Durapore; odobratý polymerizovaný tubulín sa farbí roztokom amidovej černe a kvantifikuje sa meraním absorbancie zafarbeného roztoku na zariadení Molecular Devices Microplate Reader. Rast všetkých bunkových línií sa hodnotí pomocou kvantifikácie proteínu v 96 jamkovej doštičke tak, ako je opísané skôr. Do každej jamky doštičky sa naočkuje 500 buniek a inkubuje sa pri rôznych koncentráciách epothilonov pri 37°C vo vlhkej atmosfére v prítomnosti 5% oxidu uhličitého 4 dni. Po fixácii buniek 50% trichlóroctovou kyselinou sa meria optická hustota, zodpovedajúce množstvo proteínov v 25 mM roztoku hydroxidu sodného (50% metanolu:50% vody) pri vlnovej dĺžke 564 nm. Hodnota IC50 ίθ definovaná ako dávka liečiva potrebná na inhibíciu rastu buniek o 50%.
Schéma 11 je uvedená s použitím podmienok opísaných v Nicolaou a kol., J. Am. Chem. Soc., 1997, 119, 7974-7991 a za podmienok uvedených v opise schémy 11.
·· ·· · ·· ···· ••J ······ • · · · · ···· ·
OZľ * ···· · · · · ··
1Z0 · · · · · ·· ···· · ·· ··· ·· ·
Vinyljodid 7002 ilustrovaný v schéme 11
Dijodid 7001 (1 ekvivalent; z 57) a kyanoborohydrid sodný (10 ekvivalentov) sa rozpustí v bezvodom HMPA (0,2 M) a získaná zmes sa 48 hodín zahrieva na 45-50°C. Po ochladení na teplotu miestnosti sa pridá voda a vodná fáza sa extrahuje štyrikrát etylacetátom. Spojené organické fázy sa sušia nad síranom sodným a filtrujú sa cez krátky stĺpec silikagélu, aby sa odstránili stopy HMPA (elúcia zmesou 50% etylacetátu v hexáne). Po odparení rozpúšťadiel sa zvyšok čistí pomocou preparatívnej tenkovrstvovej chromatografie (elúcia zmesou 50% etylacetátu v hexáne) a získa sa čistý vinyljodid 7002 s výťažkom 84%.

Claims (21)

1. Zlúčenina všeobecného vzorca I ·· · ·· ···· ·· ··· ··· ···
BBB B B Β·Β4 B • ···· · · B · · ·· e··· b ·· ····· b
PATENTOVÉ NÁROKY (I) kde vlnitá väzba znamená, že väzba a je prítomná buď v cis alebo trans forme;
(i) R2 nie je prítomná alebo je atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 nie je prítomná, potom b a c nie sú prítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
R3 je vybraná zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; -OCH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3,· a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
128 ·· · • · • · · • ···· · •· ···· ·· ···· • ·· • ···· • ·· • ·· • · ··· ·· · • ···
9 99
9 99
9 99
99999
R1 je skupina vybraná z nasledujúcich štruktúr:
kde R a
R' sú nižšia alkylová skupina alebo R' je hydroxymetylová skupina alebo fluórmetylová skupina a R je atóm vodíka alebo metylová skupina;
(ii) a, ak je R3 nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3,· alebo skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3,
129 byť ·· · v · · • · t • ···· • · ·· · · · ·· ···· •· · •· • ·· • ·· ·· ··· •· •· •· ·· · a ostatné symboly okrem R1 majú význam uvedený z nasledujúcich štruktúr:
skôr,
R1 môže tiež skupina vybraná alebo, ak R3 má jeden z významov uvedených v definícii R3 pod (ii) iný, ako metylová skupina, R1 môže byť tiež skupina vzorca (iii) a ak R3 je atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; alebo skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina CH2-S-CH3,
R2 je atóm kyslíka, b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba, potom R1 môže byť tiež skupina vzorca:
130 ·· · ·· ···· ·· • · · ··· · · • · · ···· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ·· ··· (iv) a ak R3 je nižšia alkylová skupina iná, ako metylová skupina, najmä etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; alebo je výhodne skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka,* najmä skupina -CH2-O-CH3; alebo skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina CH2-S-CH3; a ostatné symboly okrem R1 majú význam definovaný pod (i),
R1 môže byť tiež skupina vzorca alebo soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I, ak je prítomná skupina tvoriaca soľ.
2. Zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde
R2 je neprítomná alebo je to atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a “a je jednoduchá väzba; ak R2 nie je prítomná, potom b a c nie sú prítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
R3 je skupina vybraná zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, nižšia
131 ·· · • · · • · · • ···· • · ···· · ·· ···· • ·· • ···· • · ·· · • ·· ·· ··· ·· alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je skupina vybraná z nasledujúcich štruktúr:
kde R a R' sú nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina;
alebo jej soľ, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
3. Zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde
R2 nie je prítomná alebo je to atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 nie je prítomná, potom b a c nie sú prítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
·· ·· · ·· ···· • ·· ······ , _ ····» ··· t ( 132 · ···· · · · · · ··
A «-Ά. **····· ···· · 99 ·«· ···
R3 je skupina vybraná zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-0-CH3; a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je vybraná z nasledujúcich štruktúr: kde R' je hydroxymetylová skupina alebo fluórmetylová skupina a R je atóm vodíka alebo metylová skupina, alebo jej soľ, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
·· · ·· ···· • · · ··· · · • · · · ···· · · • ···· · · · · · · · • · · · · · · ···· · ·· ··· ··
133 ··
4. Zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde
R2 nie je prítomná alebo je to atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 nie je prítomná, potom b a c nie sú prítomné a a je dvcjitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
R3 je skupina vybraná zo skupiny, ktorú tvorí, nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2,· skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až S atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je vybraná z nasledujúcich štruktúr:
s\
N
F
S.
134 alebo jej soľ, ak je prítomná jedna alebo viac skupín schopných tvoriť soli.
·· • • · ···· ·· • • · • • · • • · • · • • · • · ··· • · • • ···· • · · • · • · • • • • · • • · • ··· · • ·· ·· · ·· ···
5. Zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde
R2 nie je prítomná alebo je to atóm kyslíka; a môže byť buď jednoduchá alebo dvojitá väzba; b môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba; a c môže byť buď neprítomná alebo je to jednoduchá väzba s podmienkou, že ak R2 je atóm kyslíka, potom b a c sú obidve jednoduchá väzba a a je jednoduchá väzba; ak R2 nie je prítomná, potom b a c nie sú prítomné a a je dvojitá väzba; a ak a je dvojitá väzba, potom R2, b a c nie sú prítomné;
R3 je vybraná zo skupiny, ktorú tvorí, nižšia alkylová skupina iná, ako metylová skupina, najmä etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina; skupina -ΟΗ=ΟΗ2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2CI; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je skupina vzorca alebo jej soľ, ak je prítomná jedna alebo viac skupín schopných tvoriť soli.
6. Zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde
135 ·· · • · · • · · • ···· • · ···· · ·· ···· • ·· • ···· • ·· • ·· ·· ··· •· •· •· •· ··
R2 je atóm kyslíka, b a jednoduchá väzba, c sú obidve jednoduchá väzba je
R3 je vybraná zo skupiny, najmä metylová skupina, izopropylová skupina, terc-butylová skupina, ktorú tvorí, nižšia alkylová n-propylová izobutylová n-hexylová etylová skupina, n-butylová skupina, n-pentylová skupina, skupina, skupina, skupina, skupina;
skupina -CH=CH2; skupina -CsCH; skupina -CH2F; skupina -CH2CI; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-alkvl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je vybraná z nasledujúcich štruktúr:
alebo jej soľ, ak je prítomná jedna alebo viac skupín schopných tvoriť soli.
7. Zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde
R2 nie je prítomná alebo je to atóm kyslíka; jednoduchá alebo dvojitá väzba;
bo je je to potom väzba;
to jednoduchá väzba; a c jednoduchá b a c ak R2 nie a môže byť buď b môže byť buď neprítomná alemôže byť buď neprítomná alebo väzba, s podmienkou, že ak R2 je sú obidve jednoduchá väzba a a je prítomná, potom b a c nie a je dvojitá väzná, potom R2, a je dvojitá väzba; a ak c nie sú prítomné;
atóm kyslíka, je jednoduchá sú prítomné a b a
R3 je vybraná zo skupiny, iná, ako metylová skupina, ktorú tvorí nižšia alkylová skupina výhodne etylová skupina, n-propylová • · & ·· ···· ·· · ··· ··· · · · · • · · · · ··· · · ·
1 oc · ···· ··· ···· ·
L-) u · ······· ···· · ·· ··· ·· ··· skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina alebo n-hexylová skupina; skupina -CH=CH2; skupina -C=CH; skupina -CH2F; skupina -CH2C1; skupina -CH2-OH; skupina -CH2-O-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-O-CH3; a skupina -CH2-S-alkyl obsahujúca v alkylovej časti 1 až 6 atómov uhlíka, najmä skupina -CH2-S-CH3;
R4 a R5 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm vodíka, metylová skupina alebo ochranná skupina, výhodne atóm vodíka; a
R1 je skupina vzorca
8. Zlúčenina podľa nároku 1, všeobecného vzorca la kde sú nezávisle od seba skupiny R atóm vodíka alebo metylová skupina, alebo jej soľ.
9. Zlúčenina podľa nároku 1, všeobecného vzorca lb
137 kde sú nezávisle od seba skupiny R atóm vodíka alebo metylová skupina, alebo jej soľ.
10. Zlúčenina všeobecného vzorca lc kde R* je metylová skupina alebo jej soľ.
11. Zlúčenina podľa nároku 1, všeobecného vzorca Id kde A je etylová skupina, fluórmetylová skupina, metoxyskupina, metyltioskupina alebo etenylová skupina (-CH=CH2) a
D je atóm vodíka, atóm fluóru, hydroxylová skupina alebo metylo-
• · • ·· ···· • · • • · • • · • • · • · • • · • · ··· • e • • • · · · • · · • • · · • • • • · • e · • • · · · • ·· • · · ·· • · ·
138 vá skupina.
12. Zlúčenina všeobecného vzorca le kde A je etylová skupina, fluórmetylová skupina, metoxyskupina, metyltioskupina alebo etenylová skupina (-CH=CH2) a
D je atóm vodíka, atóm fluóru, hydroxylová skapina alebo metylová skupina.
13.
Zlúčenina podlá nároku 1, vybraná zo zlúčenín nasledujúcich vzorcov:
(a)
O
139
• · • ·· ···· • · • · • • · • • • · • • · • · ··· • • • ···· • · · • • · • • ···· • ·· ··· ·· •
(b)
O • · ··
140 ·· · • · · ···· • · ···· ·· ···· • · • ··· e ·· • · • · ···
141 ·· ····
Ο
142
·· • ·· ···· ·· · • · • • • • • • • · • • • • • ··· • • • • • · · · • · • • • · • • • • • • • • • ···· • ·· ··· • · ···
(ο) (Ρ) (η)
Ο
Ο
143 ·· · ·· ···· • · ···· ···· • · · • · ··· • · · · • · · ·· ··· (r) (s)
d) (u) (V) (x) ·· · • · · (W) ; and ·· ···· • · • ··· • · • · ·· ··· ·· •· •· • ·· •9 alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, ak je prítomná skupina schopná tvoriť soľ.
14. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 12 a farmaceutický prijateľný nosič.
15. Zlúčenina podľa ktoréhokolvek z nárokov 1 až 12 na použitie pri liečení proliferatívneho ochorenia.
145
·· • ·· ···· ·· • · • • • • • • · • • · • • ··· • • • ···· • · • • • · • • • • • • • • ···· • ·· ··· ·· •
16. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 12 na prípravu liečiva na liečenie proliferatívnych ochorení.
17. Spôsob liečenia teplokrvného živočícha trpiaceho proliferatívnym ochorením, a ktorý potrebuje takú liečbu, vyznačujúci sa t ý m, že sa tomuto teplokrvnému živočíchovi podáva zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľná soľ podľa nároku 1, v množstve, ktoré je dostatočné na takú liečbu.
18. Farmaceutická kompozícia, ktorá je vhodná na podávanie teplokrvnému živočíchovi s cieľom liečiť proliferatívne ochorenia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje množstvo aktívnej zložky zlúčeniny všeobecného vzorca I, podľa nároku 1, ktoré je účinné na liečenie tohto proliferatívneho ochorenia, spolu s najmenej jedným farmaceutický prijateľným nosičom.
19. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca I, vyznačujúci sa tým, že sa
a) kondenzuje jodid všeobecného vzorca II (II) kde R2, R3, R4, R5, a, bača vlnitá väzba majú významy definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, v nároku 1, so zlúčeninou cínu všeobecného vzorca III
R1-Sn(R)3 (III)
146
·* • ·· e • · • • • • • • ·· • • · • • ··· • • • • ···· • · • • • · • • • • • · • • • • ···· • ·· ··· ·· ···
kde R1 má význam definovaný pre všeobecný vzorec I a R je nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina alebo n-butylová skupina alebo
b) sa kondenzuje zlúčenina cínu všeobecného vzorca IV, (IV) kde R2, R3, R4, R5, a, b a c a vlnitá väzba majú významy definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, s jodidom všeobecného vzorca V
R3-I (V) kde R1 má význam definovaný pre všeobecný vzorec I v nároku 1;
a, ak je to potrebné, vznikajúca zlúčenina všeobecného vzorca I sa prevedie na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I, vznikajúca voľná zlúčenina všeobecného vzorca I sa prevedie na soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I a/alebo vznikajúca soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I sa prevedie na voľnú zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo na inú soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I a/alebo sa stereoizomérna zmes zlúčenín všeobecného vzorca I rozštiepi na zodpovedajúce izoméry.
20. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca VI (VI)
OH
147 vyznačujúci sa tým, vzorca VII
·· • ·· ···· ·· · • • • • • • • • • · • • · • • ··· • • • • ···· • · • • • · • • • ··· · • • • ·· • • ··· • ·· • • ···
že sa zlúčenina všeobecného (VII) kde R3 je nižšia alkylová skupina, najmä metylová skupina alebo butylová skupina, kondenzuje s jodidom všeobecného vzorca VIII (VIII)
21.
Spôsob prípravy epothilonov E alebo F všeobecného vzorca IX kde Q je atóm vodíka alebo metylová skupina, vyznaču júci sa t ý m, že sa zlúčenina všeobecného vzorca X
148 ·· ···· kde Q je atóm vodíka alebo metylová skupina, epoxiduje v prítomnosti epoxidu na zlúčeninu všeobecného vzorca IX.
SK1971-2000A 1998-06-22 1999-06-21 Deriváty epotilónu, spôsob ich prípravy, farmaceutická kompozícia s ich obsahom a ich použitie SK285647B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/102,602 US6380394B1 (en) 1996-12-13 1998-06-22 Epothilone analogs
PCT/EP1999/004287 WO1999067252A2 (en) 1998-06-22 1999-06-21 Epothilone derivatives and their synthesis and use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK19712000A3 true SK19712000A3 (sk) 2001-09-11
SK285647B6 SK285647B6 (sk) 2007-05-03

Family

ID=22290705

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1971-2000A SK285647B6 (sk) 1998-06-22 1999-06-21 Deriváty epotilónu, spôsob ich prípravy, farmaceutická kompozícia s ich obsahom a ich použitie
SK5009-2007A SK287864B6 (sk) 1998-06-22 1999-06-21 Epothilone derivatives, pharmaceutical formulation containing thereof, their use and method of synthesis

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK5009-2007A SK287864B6 (sk) 1998-06-22 1999-06-21 Epothilone derivatives, pharmaceutical formulation containing thereof, their use and method of synthesis

Country Status (28)

Country Link
US (3) US6380394B1 (sk)
EP (2) EP1741715A1 (sk)
JP (1) JP4681732B2 (sk)
KR (3) KR20090066332A (sk)
CN (1) CN1192031C (sk)
AT (1) ATE343573T1 (sk)
AU (1) AU757854B2 (sk)
BR (1) BR9911420A (sk)
CA (1) CA2334342C (sk)
CY (1) CY1105863T1 (sk)
CZ (1) CZ301783B6 (sk)
DE (1) DE69933767T2 (sk)
DK (1) DK1089998T3 (sk)
ES (1) ES2273502T3 (sk)
HK (1) HK1038358A1 (sk)
HU (1) HUP0102711A3 (sk)
ID (1) ID28210A (sk)
IL (3) IL139784A0 (sk)
MX (1) MXPA00012443A (sk)
NO (1) NO328417B1 (sk)
NZ (1) NZ508622A (sk)
PL (1) PL197648B1 (sk)
PT (1) PT1089998E (sk)
RU (1) RU2227142C2 (sk)
SK (2) SK285647B6 (sk)
TR (1) TR200003844T2 (sk)
WO (1) WO1999067252A2 (sk)
ZA (1) ZA200007059B (sk)

Families Citing this family (93)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2218328T5 (es) 1995-11-17 2011-11-11 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Derivados de epotilón, su preparación y utilización.
CA2269118C (en) * 1996-11-18 2012-05-29 Gesellschaft Fur Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) Epothilone c, d, e and f, production process, and their use as cytostatic as well as phytosanitary agents
US20050043376A1 (en) * 1996-12-03 2005-02-24 Danishefsky Samuel J. Synthesis of epothilones, intermediates thereto, analogues and uses thereof
EP1386922B1 (en) * 1996-12-03 2012-04-11 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereof, analogues and uses thereof
US6204388B1 (en) * 1996-12-03 2001-03-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
US6867305B2 (en) * 1996-12-03 2005-03-15 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
US6660758B1 (en) * 1996-12-13 2003-12-09 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6605599B1 (en) * 1997-07-08 2003-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives
US6365749B1 (en) 1997-12-04 2002-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of ring-opened epothilone intermediates which are useful for the preparation of epothilone analogs
FR2775187B1 (fr) * 1998-02-25 2003-02-21 Novartis Ag Utilisation de l'epothilone b pour la fabrication d'une preparation pharmaceutique antiproliferative et d'une composition comprenant l'epothilone b comme agent antiproliferatif in vivo
US6498257B1 (en) 1998-04-21 2002-12-24 Bristol-Myers Squibb Company 2,3-olefinic epothilone derivatives
US6399638B1 (en) 1998-04-21 2002-06-04 Bristol-Myers Squibb Company 12,13-modified epothilone derivatives
DE19820599A1 (de) * 1998-05-08 1999-11-11 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilonderivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
DE19826988A1 (de) * 1998-06-18 1999-12-23 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon-Nebenkomponenten
US6410301B1 (en) 1998-11-20 2002-06-25 Kosan Biosciences, Inc. Myxococcus host cells for the production of epothilones
KR20070087132A (ko) 1998-11-20 2007-08-27 코산 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 에포틸론 및 에포틸론 유도체의 생산을 위한 재조합 방법및 물질
ATE254615T1 (de) * 1999-02-22 2003-12-15 Biotechnolog Forschung Gmbh C-21 modifizierte epothilone
US20020058286A1 (en) * 1999-02-24 2002-05-16 Danishefsky Samuel J. Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
CZ302788B6 (cs) 1999-04-15 2011-11-09 Bristol-Myers Squibb Company ´N-(2-Chlor-6-methylfenyl)-2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl]-2-methyl-4-pyrimidinyl]amino]-5-thiazolkarboxamid, jeho použití a farmaceutický prostredek s jeho obsahem
US7125875B2 (en) 1999-04-15 2006-10-24 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic protein tyrosine kinase inhibitors
WO2001038317A2 (en) * 1999-11-24 2001-05-31 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Fungicidal melithiazole derivatives
US6518421B1 (en) * 2000-03-20 2003-02-11 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of epothilone analogs
AU2001266583A1 (en) * 2000-05-26 2001-12-11 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone derivatives and methods for making and using the same
AU2001291876C1 (en) * 2000-09-22 2006-11-23 Gesellschaft Fuer Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) Triazolo-epothilones
US6989450B2 (en) * 2000-10-13 2006-01-24 The University Of Mississippi Synthesis of epothilones and related analogs
KR20030071853A (ko) 2001-01-25 2003-09-06 브리스톨-마이어스스퀴브컴파니 에포틸론 유사체를 함유한 비경구용 제제
NZ526871A (en) 2001-01-25 2006-01-27 Bristol Myers Squibb Co Pharmaceutical dosage forms of epothilones for oral administration
ATE389401T1 (de) 2001-01-25 2008-04-15 Bristol Myers Squibb Co Verfahren zur herstellung von pharmazeutischen zusammensetzungen enthaltend epothilon-analoga zur krebsbehandlung
CA2438598A1 (en) 2001-02-20 2002-08-29 Francis Y. F. Lee Epothilone derivatives for the treatment of refractory tumors
IL156988A0 (en) 2001-02-20 2004-02-08 Bristol Myers Squibb Co Pharmaceutical compositions containing epothilone derivatives
DE60211124T2 (de) * 2001-02-27 2006-11-30 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Abbau von Epothilonen
PL368973A1 (en) 2001-03-14 2005-04-04 Bristol-Myers Squibb Company Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of proliferative diseases
CA2449077A1 (en) * 2001-06-01 2002-12-12 Gregory D. Vite Epothilone derivatives
CA2456280A1 (en) * 2001-08-23 2003-03-06 Novartis Ag Cyclopropyl and cyclobutyl epothilone analogs
WO2003026744A1 (en) * 2001-09-25 2003-04-03 Alcon, Inc. The use of epothilones and analogs in conjunction with ophthalmic surgery
JP2005506366A (ja) * 2001-10-25 2005-03-03 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト 選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤を含む組合せ剤
WO2003048774A1 (en) * 2001-12-07 2003-06-12 Novartis Ag Use of alpha-tubulin acetylation levels as a biomarker for protein deacetylase inhibitors
MXPA04006822A (es) 2002-01-14 2004-12-08 Novartis Ag Combinaciones que comprenden epotilonas y anti-metabolitos.
TW200303202A (en) * 2002-02-15 2003-09-01 Bristol Myers Squibb Co Method of preparation of 21-amino epothilone derivatives
AU2003218107A1 (en) 2002-03-12 2003-09-29 Bristol-Myers Squibb Company C12-cyano epothilone derivatives
SI1483251T1 (sl) * 2002-03-12 2010-03-31 Bristol Myers Squibb Co C cian epotilonski derivati
TW200403994A (en) * 2002-04-04 2004-03-16 Bristol Myers Squibb Co Oral administration of EPOTHILONES
TW200400191A (en) * 2002-05-15 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pharmaceutical compositions and methods of using C-21 modified epothilone derivatives
US7405234B2 (en) 2002-05-17 2008-07-29 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclic modulators of androgen receptor function
AU2003243561A1 (en) 2002-06-14 2003-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of proliferative diseases
ATE381569T1 (de) * 2002-08-02 2008-01-15 Novartis Pharma Gmbh Epothilonderivate
US7649006B2 (en) 2002-08-23 2010-01-19 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
US6921769B2 (en) 2002-08-23 2005-07-26 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
MXPA05002113A (es) * 2002-08-23 2005-06-03 Sloan Kettering Inst Cancer Sintesis de epotilonas, intermediarios para ellas, analogos y usos de los mismos.
US7384964B2 (en) * 2002-08-23 2008-06-10 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto, analogues and uses thereof
AU2003275068B2 (en) 2002-09-23 2009-09-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods for the preparation, isolation and purification of epothilone B, and X-Ray crystal structures of epothilone B
SI1553938T1 (sl) * 2002-10-15 2007-06-30 Univ Louisiana State Uporaba epotilonskih derivatov za zdravljenje hiperparatiroidizma
US7632858B2 (en) 2002-11-15 2009-12-15 Bristol-Myers Squibb Company Open chain prolyl urea-related modulators of androgen receptor function
US20050171167A1 (en) * 2003-11-04 2005-08-04 Haby Thomas A. Process and formulation containing epothilones and analogs thereof
EP1559447A1 (en) 2004-01-30 2005-08-03 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Use of epothilones in the treatment of neuronal connectivity defects such as schizophrenia and autism
US7820702B2 (en) 2004-02-04 2010-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Sulfonylpyrrolidine modulators of androgen receptor function and method
US7378426B2 (en) 2004-03-01 2008-05-27 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterotricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3
US7696241B2 (en) 2004-03-04 2010-04-13 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclic compounds as modulators of androgen receptor function and method
US7625923B2 (en) 2004-03-04 2009-12-01 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclic modulators of androgen receptor function
GB0405898D0 (en) * 2004-03-16 2004-04-21 Novartis Ag Organic compounds
US10675326B2 (en) 2004-10-07 2020-06-09 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions comprising cupredoxins for treating cancer
EP1674098A1 (en) 2004-12-23 2006-06-28 Schering Aktiengesellschaft Stable and tolerable parental formulations of highly reactive organic drug substances with low or no solubility in water
CN101535492A (zh) 2005-02-11 2009-09-16 南加州大学 表达含有二硫键的蛋白质的方法
JP4954983B2 (ja) 2005-05-18 2012-06-20 ファーマサイエンス・インコーポレイテッド Ｂｉｒドメイン結合化合物
WO2007015929A2 (en) * 2005-07-27 2007-02-08 University Of Toledo Epothilone analogues
JP2009516753A (ja) * 2005-11-22 2009-04-23 ザ スクリップス リサーチ インスティテュート 高度に効力を持つエポチロンの化学合成
US7653731B2 (en) * 2006-02-24 2010-01-26 Microsoft Corporation Management of connections to external data
EP2029156A4 (en) * 2006-05-01 2010-07-21 Univ Southern California POLY THERAPY FOR TREATING CANCER
CN101535300B (zh) 2006-05-16 2014-05-28 埃格拉医疗公司 Iap bir域结合化合物
CN101600728A (zh) 2006-12-04 2009-12-09 伊利诺斯大学理事会 使用铜氧还蛋白和富含CpG的DNA治疗癌症的组合物和方法
MX2009008508A (es) 2007-02-08 2010-04-21 Univ Illinois Composiciones y m?todos para prevenir el c?ncer con cupredoxinas.
WO2008118327A1 (en) * 2007-03-23 2008-10-02 University Of Toledo Conformationally restrained epothilone analogues as anti-leukemic agents
EP2065054A1 (en) 2007-11-29 2009-06-03 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Combinations comprising a prostaglandin and uses thereof
EP2070521A1 (en) 2007-12-10 2009-06-17 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Surface-modified nanoparticles
DE102007059752A1 (de) 2007-12-10 2009-06-18 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Funktionalisierte, feste Polymernanopartikel enthaltend Epothilone
EP2321325A1 (en) * 2008-07-03 2011-05-18 Pharma Mar S.A. Antitumoral macrolides
WO2010056901A2 (en) 2008-11-13 2010-05-20 University Of Southern California Method of expressing proteins with disulfide bridges with enhanced yields and activity
EP2210584A1 (en) 2009-01-27 2010-07-28 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Stable polymeric composition comprising an epothilone and an amphiphilic block copolymer
CN102985439B9 (zh) 2010-02-12 2016-08-03 制药科学股份有限公司 Iap bir结构域结合化合物
CN105797168A (zh) 2010-05-18 2016-07-27 天蓝制药公司 用于治疗自身免疫性疾病或其它疾病的组合物和方法
CN103442737B (zh) 2011-01-20 2017-03-29 得克萨斯系统大学董事会 Mri标记、递送和提取系统及其制造方法和用途
CN102863474A (zh) 2011-07-09 2013-01-09 陈小平 一类治疗细胞增殖性疾病的铂化合物、其制备方法和应用
CN102993239A (zh) 2011-09-19 2013-03-27 陈小平 离去基团含氨基或烷胺基的丁二酸衍生物的铂类化合物
US9717803B2 (en) 2011-12-23 2017-08-01 Innate Pharma Enzymatic conjugation of polypeptides
US10132799B2 (en) 2012-07-13 2018-11-20 Innate Pharma Screening of conjugated antibodies
WO2014072482A1 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Innate Pharma Recognition tags for tgase-mediated conjugation
CN104768962B (zh) 2012-11-17 2017-04-05 北京市丰硕维康技术开发有限责任公司 离去基团是含氨基或烷氨基的丙二酸衍生物的铂类化合物
US9862692B2 (en) * 2013-01-23 2018-01-09 The University Of Toledo Highly selective anti-cancer agents targeting non-small cell lung cancer and other forms of cancer
EP2968582B1 (en) 2013-03-15 2020-07-01 Innate Pharma Solid phase tgase-mediated conjugation of antibodies
WO2014202773A1 (en) 2013-06-20 2014-12-24 Innate Pharma Enzymatic conjugation of polypeptides
JP6744212B2 (ja) 2013-06-21 2020-08-19 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニムＩｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｐｈａｒｍａ Ｓ．Ａ． ポリペプチドの酵素的結合
CA3002027A1 (en) * 2015-10-16 2017-04-20 William Marsh Rice University Epothilone analogs, methods of synthesis, methods of treatment, and drug conjugates thereof
WO2019092148A1 (en) 2017-11-10 2019-05-16 Innate Pharma Antibodies with functionalized glutamine residues

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4138042C2 (de) 1991-11-19 1993-10-14 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilone, deren Herstellungsverfahren sowie diese Verbindungen enthaltende Mittel
ES2218328T5 (es) 1995-11-17 2011-11-11 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Derivados de epotilón, su preparación y utilización.
NZ334821A (en) 1996-08-30 2000-12-22 Novartis Ag Method for producing epothilones
CA2269118C (en) 1996-11-18 2012-05-29 Gesellschaft Fur Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) Epothilone c, d, e and f, production process, and their use as cytostatic as well as phytosanitary agents
EP1386922B1 (en) 1996-12-03 2012-04-11 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereof, analogues and uses thereof
US6660758B1 (en) * 1996-12-13 2003-12-09 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6441186B1 (en) 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
CN1128803C (zh) 1997-02-25 2003-11-26 生物技术研究有限公司(Gbf) 环氧噻嗪酮b－n－氧化物及其制备方法
US6605599B1 (en) 1997-07-08 2003-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives
EP1847540A1 (de) 1997-08-09 2007-10-24 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Neue Epothilonderivate, Herstellungsverfahren dafür und ihre pharmazeutische Verwendung
DE19744135C1 (de) 1997-09-29 1999-03-25 Schering Ag Beschichtete medizinische Implantate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Restenoseprophylaxe

Also Published As

Publication number Publication date
US6531497B1 (en) 2003-03-11
HK1038358A1 (en) 2002-03-15
TR200003844T2 (tr) 2001-04-20
KR100864742B1 (ko) 2008-10-22
DE69933767T2 (de) 2007-09-13
EP1089998A2 (en) 2001-04-11
KR20090066332A (ko) 2009-06-23
ZA200007059B (en) 2002-01-30
AU4774899A (en) 2000-01-10
NZ508622A (en) 2003-07-25
ID28210A (id) 2001-05-10
PL345327A1 (en) 2001-12-17
MXPA00012443A (es) 2004-12-03
WO1999067252A3 (en) 2000-03-16
IL182744A (en) 2010-05-17
HUP0102711A3 (en) 2002-09-30
KR20080045298A (ko) 2008-05-22
CZ301783B6 (cs) 2010-06-23
EP1741715A1 (en) 2007-01-10
DE69933767D1 (de) 2006-12-07
DK1089998T3 (da) 2007-01-15
CN1192031C (zh) 2005-03-09
US6380394B1 (en) 2002-04-30
RU2227142C2 (ru) 2004-04-20
CA2334342A1 (en) 1999-12-29
IL182744A0 (en) 2007-07-24
ES2273502T3 (es) 2007-05-01
IL139784A (en) 2010-05-17
CZ20004769A3 (cs) 2001-07-11
EP1089998B1 (en) 2006-10-25
CY1105863T1 (el) 2011-02-02
US7579366B2 (en) 2009-08-25
IL139784A0 (en) 2002-02-10
SK285647B6 (sk) 2007-05-03
KR20010083060A (ko) 2001-08-31
HUP0102711A2 (hu) 2001-12-28
NO20006378L (no) 2001-02-21
PL197648B1 (pl) 2008-04-30
JP2002518504A (ja) 2002-06-25
JP4681732B2 (ja) 2011-05-11
NO328417B1 (no) 2010-02-15
CA2334342C (en) 2012-07-17
SK287864B6 (sk) 2012-02-03
US20030203938A1 (en) 2003-10-30
ATE343573T1 (de) 2006-11-15
PT1089998E (pt) 2007-01-31
NO20006378D0 (no) 2000-12-14
WO1999067252A2 (en) 1999-12-29
CN1306531A (zh) 2001-08-01
AU757854B2 (en) 2003-03-06
BR9911420A (pt) 2001-03-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK19712000A3 (sk) DERIVµTY EPOTILŕNU, SPâSOB ICH PRÖPRAVY, FARMACEUTICKµ KOMPOZÖCIA S ICH OBSAHOM A ICH POU¦ITIE
EP1506203B1 (en) Synthesis of epothilones, intermediates thereto, analogues and uses thereof
WO1999067253A2 (en) Desmethyl epothilones
JP2002518504A5 (sk)
US8513429B2 (en) Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
US6921769B2 (en) Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
JP4590268B2 (ja) エポシロン誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20130621