SK18362002A3 - Použitie prostriedku s obsahom fúzneho proteínu - Google Patents
Použitie prostriedku s obsahom fúzneho proteínu Download PDFInfo
- Publication number
- SK18362002A3 SK18362002A3 SK1836-2002A SK18362002A SK18362002A3 SK 18362002 A3 SK18362002 A3 SK 18362002A3 SK 18362002 A SK18362002 A SK 18362002A SK 18362002 A3 SK18362002 A3 SK 18362002A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- hpv
- protein
- hsp
- warts
- proteins
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 title claims description 34
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 title claims description 34
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 claims abstract description 141
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 119
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 112
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 39
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 208000009608 Papillomavirus Infections Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 55
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 45
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 43
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 17
- 206010059313 Anogenital warts Diseases 0.000 claims description 13
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 13
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 12
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 12
- 208000025009 anogenital human papillomavirus infection Diseases 0.000 claims description 11
- 201000004201 anogenital venereal wart Diseases 0.000 claims description 11
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 11
- 102100038222 60 kDa heat shock protein, mitochondrial Human genes 0.000 claims description 10
- 101710154868 60 kDa heat shock protein, mitochondrial Proteins 0.000 claims description 10
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- 241000186366 Mycobacterium bovis Species 0.000 claims description 5
- 101100507655 Canis lupus familiaris HSPA1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 4
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims description 4
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 claims description 3
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 claims description 3
- 208000003154 papilloma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029211 papillomatosis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010051999 Anogenital dysplasia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010043515 Throat cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 claims 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 46
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 abstract description 43
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 abstract description 43
- 208000021145 human papilloma virus infection Diseases 0.000 abstract 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 100
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 40
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 40
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 40
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 33
- 230000004044 response Effects 0.000 description 23
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 19
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 15
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 14
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 13
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 13
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 11
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 8
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 8
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 8
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 7
- 208000032124 Squamous Intraepithelial Lesions Diseases 0.000 description 6
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- 102100024341 10 kDa heat shock protein, mitochondrial Human genes 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 102100029721 DnaJ homolog subfamily B member 1 Human genes 0.000 description 5
- 108010042283 HSP40 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 101710122378 10 kDa heat shock protein, mitochondrial Proteins 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 102100034051 Heat shock protein HSP 90-alpha Human genes 0.000 description 4
- 101001016865 Homo sapiens Heat shock protein HSP 90-alpha Proteins 0.000 description 4
- 101000599573 Homo sapiens InaD-like protein Proteins 0.000 description 4
- 101000767631 Human papillomavirus type 16 Protein E7 Proteins 0.000 description 4
- 102100037978 InaD-like protein Human genes 0.000 description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 4
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 4
- -1 TF55 Proteins 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 108010059013 Chaperonin 10 Proteins 0.000 description 3
- 208000000907 Condylomata Acuminata Diseases 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 3
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 3
- 238000010317 ablation therapy Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 208000001307 recurrent respiratory papillomatosis Diseases 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 108010058432 Chaperonin 60 Proteins 0.000 description 2
- 102000006303 Chaperonin 60 Human genes 0.000 description 2
- 101100016370 Danio rerio hsp90a.1 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100285708 Dictyostelium discoideum hspD gene Proteins 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001003102 Homo sapiens Hypoxia up-regulated protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 102100020755 Hypoxia up-regulated protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 206010023849 Laryngeal papilloma Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000186362 Mycobacterium leprae Species 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 101100071627 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) swo1 gene Proteins 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 108010027179 Tacrolimus Binding Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000018679 Tacrolimus Binding Proteins Human genes 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 2
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 2
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 208000009000 laryngeal papillomatosis Diseases 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000004381 surface treatment Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101100506090 Caenorhabditis elegans hil-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100124795 Caenorhabditis elegans hsp-110 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100021868 Calnexin Human genes 0.000 description 1
- 108010056891 Calnexin Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 1
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 1
- 206010008263 Cervical dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 101100117177 Coxiella burnetii (strain RSA 493 / Nine Mile phase I) dnaK gene Proteins 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 101100125027 Dictyostelium discoideum mhsp70 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 1
- 102100029714 DnaJ homolog subfamily B member 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 1
- 108700041152 Endoplasmic Reticulum Chaperone BiP Proteins 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010069271 FKBP-13 Proteins 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000272496 Galliformes Species 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100023737 GrpE protein homolog 1, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 102100036242 HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 2 chain Human genes 0.000 description 1
- 102000004447 HSP40 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101150031823 HSP70 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010027814 HSP72 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101150112743 HSPA5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150043239 HSPA8 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101710121996 Hexon protein p72 Proteins 0.000 description 1
- 101100387776 Homo sapiens DNAJB1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000866020 Homo sapiens DnaJ homolog subfamily B member 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000829489 Homo sapiens GrpE protein homolog 1, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101000930801 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 2 chain Proteins 0.000 description 1
- 101000827313 Homo sapiens Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP3 Proteins 0.000 description 1
- 101150028525 Hsp83 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150065069 Hsp90b1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000701828 Human papillomavirus type 11 Species 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108020005350 Initiator Codon Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 description 1
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 101150043276 Lon gene Proteins 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 101100110331 Mus musculus Adamtsl2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100400378 Mus musculus Marveld2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 description 1
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 241000187644 Mycobacterium vaccae Species 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102100027913 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP1A Human genes 0.000 description 1
- 102100026408 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP2 Human genes 0.000 description 1
- 102100023846 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP3 Human genes 0.000 description 1
- 102100020739 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP4 Human genes 0.000 description 1
- 108010020062 Peptidylprolyl Isomerase Proteins 0.000 description 1
- 102000009658 Peptidylprolyl Isomerase Human genes 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 102000006010 Protein Disulfide-Isomerase Human genes 0.000 description 1
- 101710132595 Protein E7 Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 101100235786 Rattus norvegicus Lonp1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000015815 Rectal disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008063 Small Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010088928 Small Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 101150077085 TCP1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010006877 Tacrolimus Binding Protein 1A Proteins 0.000 description 1
- 108010010427 Thermosomes Proteins 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 201000007538 anal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003436 cytoskeletal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 101150052825 dnaK gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 108010017007 glucose-regulated proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000014726 immortalization of host cell Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001759 immunoprophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 101150066555 lacZ gene Proteins 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- ADKOXSOCTOWDOP-UHFFFAOYSA-L magnesium;aluminum;dihydroxide;trihydrate Chemical compound O.O.O.[OH-].[OH-].[Mg+2].[Al] ADKOXSOCTOWDOP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000007479 molecular analysis Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000027450 oncoproteins Human genes 0.000 description 1
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 210000004224 pleura Anatomy 0.000 description 1
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 229940043274 prophylactic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 108020003519 protein disulfide isomerase Proteins 0.000 description 1
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 1
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 108020003113 steroid hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 108010067247 tacrolimus binding protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006163 transport media Substances 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000029302 virus maturation Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 210000001260 vocal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/162—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/164—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/12—Keratolytics, e.g. wart or anti-corn preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6043—Heat shock proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
Oblasť techniky
Tento vynález sa týka použitia prostriedku s obsahom fúzneho proteínu na prípravu liečiva na liečenie infekcií spôsobených ľudským papiloma vírusom.
Doterajší stav techniky
Infekcia ľudským papiloma vírusom (HPV - human papiloma vírus) je bežná. HPV môže byť prenášaný pohlavnou cestou, odhaduje sa, že je infikovaných 20 až 80 % pohlavne aktívnej dospelej populácie. Zatiaľ čo väčšina infekcií je bezpríznaková, môžu tieto infekcie viesť k vývoju genitálnych bradavíc (ktoré sú rozšírené asi u 1 až 5 % dospelých) a karcinómu anogenitálneho traktu. S PHV majú tiež silnú spojitosť ďalšie typy karcinómov, ako cervikálny karcinóm (karcinóm pošvového hrdla) (Frazer, Genitourin. Med. 72: 398-403, 1996). HPV typy 6, 11, 18, 31 a 33 sú často spojené so zvýšeným rizikom rakoviny, s typmi 16 a/alebo 18 boli zistené vo viacej ako 90 % prípadoch cervikálne karcinómy (van Driel a spol., „Chapter 66: Papillomaviruses,“ In: Virology, 3rd Edition, Fields a spol., Eds., Raven Press, Philadelphia, pp 2007-2109, a zur Hausen, J. Natl. Cancer Inst. 92: 690-698, 2000.
V súčasnosti neexistuje bezpečný a účinný spôsob liečenia alebo prevencie bradavíc alebo vyššie opísaných chorôb zameraný na imunitný systém. Úsilie vyvinúť takéto terapeutické postupy boli komplikované z niekoľkých príčin, jednou z nich je dogma, že antigény z jednotlivého HPV typu vzbudzujú limitovanú typovo špecifickú imunitnú odpoveď. V dôsledku toho bolo odporúčané, že pre široko účinnú liečbu HPV je nevyhnutný kokteil obsahujúci antigény z niekoľkých rôznych typov HPV (Caine a spol., Science 288: 1753, 200).
Podstata vynálezu
Tento vynález je založený čiastočne na objave, že fúzia proteínu obsahujúceho proteín z jedného typu HPV môže byť použitá na liečbu choroby alebo stavu, ktorý bol zavinený infekciou iným typom HPV. Napríklad, antigén HPV typu 16 fúzovaný k bakteriálnemu proteínu tepelného šoku (heat shock proteín - hsp) bol účinný pri liečbe ľudských análne genitálnych bradavíc spôsobených iným typom HPV ako typ 1 (napr. HPV typ 6 a 11). Tento výsledok podporujú dve tvrdenia : 1) že bradavice môžu byť liečené HPV proteínom a 2) že pre širokú účinnosť terapeutických prostriedkov zameraných na HPV nie je nevyhnutné, aby obsahovali proteínové antigény z odlišných HPV typov.
V súlade s tým, tento vynález charakterizuje spôsob liečenia bradavíc u takto postihnutých osôb podávaním prostriedku obsahujúceho 1) hsp alebo jeho imunostimulačný fragment a 2) HPV proteín (napr. antigénny proteín ako je Eľ proteín, napr HPV typu 16) alebo jeho antigénne fragmenty. Tieto zložky tu môžu byť uvádzané ako „zložka 1“ a „zložka 2“. Proteín hsp (alebo jeho imunostimulačný fragment) a HPV proteín (alebo jeho antigénny fragment) môžu byť buď jednoducho kombinované v tom istom preparáte, alebo pevnejšie viazané chemickou konjugáciou alebo fúziou (tj. môže byť podávaný fúzny proteín obsahujúci vyššie uvedené zložky alebo molekula nukleovej kyseliny, ktorá ho kóduje). Ak sú zložka 1 a zložka 2 kombinované, konjugované alebo fúzované, mali by byť podávané súčasne. Každá zložka môže byť však tiež podávaná samostatne (napríklad postupne) a zložka 2 môže byť podávaná bez zložky 1. Vyššie opísaný spôsob môže obsahovať krok, v ktorom je u osoby, ktorá má, alebo je podozrivá, že má bradavice, urobené preukazné vyšetrenie (v súvislosti s liečbou pacienta by táto identifikácia mala byť urobená predtým, ako sa začne podávať terapeutický prostriedok). Praktickí lekári a ostatní odborníci v odbore sú schopní dobre rozpoznať tieto subjekty.
Spôsoby podľa tohto vynálezu môžu byť tiež využité na prevenciu bradavíc v takom prípade, keď je identifikovaný pacient, ktorý túto liečbu požaduje, alebo by pre neho mohla byť prínosná na prevenciu bradavíc (skôr ako u osôb, u ktorých sa už bradavice prejavili).
Vynález tiež charakterizuje spôsoby liečenia osôb, ktoré trpia chorobami alebo stavmi zavinenými HPV prvého typu (napríklad typom 5,6, 11, 18,31, 33, 35, 45, 54, 60 alebo 70). pričom týmto pacientom je podávaný prostriedok obsahujúci :1) proteín hsp alebo iný imunostimulačný fragment a 2) proteín HPV druhového typu (napríklad typu 16) alebo jeho antigénny fragment. To znamená, že HPV „prvého typu1’ a HPV „druhého typu“ sa vzájomne líšia, sú to teda dva rozdielne typy HPV. Proteín hsp (alebo jeho imunostimulačný fragment) a HPV proteín (alebo jeho antigénny fragment) môžu byť buď jednoducho kombinované v tom istom preparáte alebo tesnejšie viazané chemickou konjugáciou alebo fúziou (tj. je možné podávať fúzny proteín obsahujúci vyššie uvedené zložky aiebo molekulu nukleovej kyseiiny, ktorá ho kóduje). Pokiaľ je podávaná kombinovaná, konjugovaná alebo fúzovaná zložka 1 a zložka 2, mali by byť podávané súčasne. Každá zložka však môže byť tiež podávaná samostatne (tj. postupne) a zložka 2 môže byť podávaná bez zložky 1. Tu znova môže spôsob zahŕňať krok preukazného vyšetrenia u pacienta, ktorý je, alebo existuje podozrenie, že je infikovaný HPV (alebo chorobou alebo stavom s ním spojeným).
Ak má byť subjektu, ktorý je infikovaný HPV prvého typu, podávaný prostriedok obsahujúci HPV druhého typu, môže byť tento spôsob liečby uskutočnený pred stanovením typu HPV infekcie predtým, ako sa prejaví, alebo ako k nej dôjde (tj. pred začatím liečby alebo profylaxie nie je nutné poznať presný typ HPV, ktorým bola alebo bude osoba infikovaná). Ak ide o preventívne spôsoby liečenia, môžu obsahovať krok identifikácie u pacientov, ktorí to požadujú, alebo pre ktorých by bola prospešná prevencia infekcie HPV.
Tu uvedené prostriedky môžu byť podávané v množstvách, ktoré sú dostačujúce na liečenie bradavíc [pri, napríklad, zmenšení veľkosti alebo zmene tvaru bradavíc alebo pri zlepšení príznaku spojeného s.bradavicou (napr bolesti často spojenej s bradavicami na klenbe nohy); ak má subjekt viacej ako jednu bradavicu, liečenie umožní zvládnuť zníženie počtu bradavíc]. Tu uvedené prostriedky môžu byť podávané v množstvách postačujúcich na liečenie chcrôb [napr. rakoviny (ako je cervikálny karcinóm alebo análny karcinóm) alebo iných stavov (napr. dysplazia (ako je cervikálna alebo análna dyspiazia)]. ktoré sú spôsobené alebo spojené s infekciou HPV. Hoci bradavice sú samostatne úvedené nižšie, tvoria tiež stav zavinený alebo spojený s HPV. Praktickí lekári a ostatní rutinní pracovníci v odbore poznajú účinnú liečbu bradavíc alebo chorôb alebo stavov spojených s HPV, ak ide o zoslabenie nežiaduceho fyziologického narušenia spojeného s bradavicami alebo týmito chorobami alebo stavmi. Klinické a fyziologické prejavy bradavíc, rovnako ako choroby alebo stavy spojené s infekciou HPV, sú uvedené napríklad vo Fauci a spol., Harrison's Principles of Internal Medicíne, 14th Edition, McGrav-HilI Press, New York, pp 302-303 and 1098-1100, 1998.
„Subjektami“, pre ktoré môžu byť vyššie uvedené spôsoby liečby prínosné, sú tie, ktoré môžu byť infikované papiloma vírusmi [napr. cicavce, ako sú ľudia, hospodárske zvieratá (napr. kravy, kone, prasatá, ovce a kozy) a domáce zvieratá (napr. mačky a psy)]. Bradavice sa môžu u týchto subjektov vyskytovať na genitáliách, koži alebo vnútorných orgánoch (tak ako bradavice, ktoré sa objavujú na hlasivkách pri opakovaných respiračných papilomatózach (RRP-recurrent respirátory papillomatosis; známe tiež ako papilomatóza hrtanu mladistvých (JLP - juvemle laryngeal papillomatosis), alebo prudký nástup opakovanej papilomatózy dospelých (adult-onset RRP).
Vynález ďalej zahŕňa použitie jedného alebo viacej tu uvedených prostriedkov (vrátane tých, ktoré obsahujú proteíny, konjugáty proteínov alebo fúzne proteíny alebo molekuly nukleových kyselín, ktoré ich kódujú) na liečenie subjektu, ktorý má bradavice alebo choroby alebo stavy spojené s (alebo zavinené) infekciou HPV, podľa tu uvedených spôsobov.
„Antigénny fragment“ proteinu (napr. HPV proteinu) je ktorákoľvek časť proteinu, ktorá, ak sa podáva podľa tu uvedených spôsobov, vyvoláva u subjektu imunitnú odpoveď, ktorá je buď špecifická voči fragmentu alebo je špecifická pre proteín, z ktorého bol fragment získaný. Imunitná odpoveď môže byť buď humorálna alebo bunkami sprostredkovaná odpoveď. Napríklad antigénny fragment môže byť HLA peptidový antigén triedy 1, ako je uvedené nižšie. Rutinní pracovníci v odbore sú si vedomí toho, že imunitná odpoveď vyžadovaná v kontexte tohto vynálezu môže byť vytváraná nie iba intaktnými proteínmi, ale taktiež mutantnými proteínmi [napr. tými, ktoré obsahujú jednu alebo viacej adícií, substitúcií (napr. konzervatívne substitúcie aminokyselín) alebo deléciu vo svojich aminokyselinových sekvenciách]. Mutantné HPV antigény môžu byť ľahko pripravené a testované z hľadiska svojej práceschopnosti v súvislosti s týmto vynálezom.
„Imunostimulačným fragmentom“ proteínu (napr. hsp) je ktorákoľvek časť proteínu, ktorá ak sa podáva podľa tu uvedených spôsobov, zlepšuje imunitnú odpoveď antigénu. Napríklad, ak sa zlepší imunitná odpoveď voči HPV proteínu, ak je tento HPV proteín podávaný s (napr. fúzovaný na) fragmentom hsp, potom je tento fragment imunostimulačným fragmentom hsp Rutinní pracovníci v odbore sú si vedomí toho, že imunitná odpoveď môže byť zlepšená mutantnými hsp [napr. hsp, ktoré obsahujú jednu alebo viacej adícií, substitúciu (napr. konzervatívne substitúcie aminokyselín) alebo deléciu vo svojej aminokyselinovej sekvencii], Mutantné hsp môžu byť ľahko pripravené a testované z hľadiska svojej schopnosti zlepšenia imunitnej odpovede voči HPV antigénu.
Spôsobmi podľa tohto vynálezu sa zabezpečujú vhodné možnosti · 1) liečenia alebo prevencie bradavíc a 2) liečenia alebo prevencie chorôb alebo stavov spôsobených (alebo spojených s) infekciou jedným z typov HPV (tj. používania) pomocou prostriedku obsahujúceho HPV iného typu. U mnohých subjektov, ak nie väčšinou, môže byť následne použitý prostriedok obsahujúci jediný typ HPV, bez ohľadu na to, ktorým typom sú infikované (alebo ktorým môžu byť infiKované). Je prekvapujúce, že prostriedky na báze HPV sú účinné za týchto okolností (tj. okolností vyžadujúcich krížovú reaktivitu). Predpokladalo sa totiž, že antigény jedného typu HPV nemôžu vzbudiť účinnú imunitnú odpoveď proti inému typu. Ďalšie rysy alebo výhody tohto vynálezu budú zrejmé z nasledujúceho podrobného opisu a tiež z nárokov.
Tento vynález sa týka široko účinných terapeutických činidiel založených na HPV, ktoré obsahujú hsp HPV proteín (napr. proteínový antigén). Bez obmedzenia tohto vynálezu iba na spôsoby, v ktorých liečivá založené na HPV uplatňujú svoj účinok prostredníctvom zvláštneho mechanizmu, sú tieto činidlá zamýšľané na vytvorenie imunitnej odpovede, ktorá zlepšuje bradavice a iné stavy (napr. dysplazie) a choroby (napr. karcinóm) spojené s infekciami HPV. Je zrejmé, že hoci prostriedky podľa tohto vynálezu môžu obsahovať HPV proteín od viacej ako jedného typu HPV, môžu však tiež obsahovať HPV proteín iba z jedného samostatného typu. Okrem toho, prostriedky, ktoré obsahujú HPV proteín z jediného typu HPV, sú užitočné pri liečení alebo prevencii bradavíc alebo iných chorôb spojených s HPV alebo stavov zavinených iným (tj. odlišným) typom HPV. V súvislosti s týmto vynálezom sú nižšie diskutované rôzne ďalšie materiály a postupy.
Príprava fúznych proteinov
Sekvencie nukleových kyselín kódujúce proteíny hsp a HPV proteíny sú známe a dostupné rutinným odborníkom v odbore. Konštrukty nukleových kyselín teda kódujúce fúzne polypeptidy užitočné pre spôsoby podľa tohto vynálezu môžu byť ľahko pripravené použitím rutinných metód [podobne, ako môžu byť použité molekuly nukleových kyselín na produkciu proteinov hsp a HPV proteinov jednotlivo; jednotlivé proteíny môžu potom byť kombinované fyzikálne (napr. jednoduchým zmiešaním dohromady) alebo spojené chemickou konjugáciou (pozri nižšie) alebo prostredníctvom disulfidových väzieb]. Príklady sekvencií nukleových kyselín, ktoré kódujú hsp voliteľne fúzovaný k antigénu (napr. HPV antigén) je možné nájsť v International Publication Nos. WO 89/12 455, WO 94/29 459, WO 98/23 735 a WO 99/07 860 a v nich uvedených odkazoch. Spôsoby, pri ktorých môžu byť exprimované a puriflkované proteíny, vrátane fúzovaných proteinov, sú ďalej uvedené nižšie.
Príprava proteínových konjugátov
Zložka 1 a zložka 2 môžu byť tiež spojené potranslačnou konjugáciou jednotlivých proteinov hsp a jednotlivých HPV antigénov. Spôsoby pre chemické konjugovanie dvoch proteinov (alebo ich časti) sú známe odborníkom v odbore (pozri napríklad techniky opísané v Hermanson, Bioconjugate Techniques, Academic Press, San Diego, CA 1996 ; Lussow a spol., Eur, J. Immun. 21:2297-2302, 1991 a Barrios a spol., Eur. J. Immun. 22:1365-1372,1992). Konjugáty môžu byť pripravené pomocou spôsobov, ktoré používajú krížovo viazané činidlá, ako je glutaraldehyd (ktorý sa stane časťou výsledného konjugátu), alebo takých, ktoré spájajú zložku 1 a zložku 2 pomocou disulfidových väzieb. Na uľahčenie tvorby disulfidových väzieb môžu byť použité cysteinové zostatky, ktoré sú buď prirodzene prítomné alebo rekombínantne vložené do hsp, HPV antigén alebo obidve. Prostriedky obsahujúce proteíny hsp alebo ich imunostimulačné fragmenty (tj. zložku 1), ktoré sú nekovalentne spojené s HPV antigénmi, môžu byť pripravené tak, ako je opísané v US patentoch č. 6 048 530; 6 017 544; 6 017 540; 6 007 821; 5 985 270; 5 948 646; 5 935 576; 5 837 251; 5 830 464 alebo 5 750 119. Pozri tiež US patent 5 997 973; 5 961 979; 6 030 618; 6 139 841; 6 156 302; 6 168 793 a International Publication No. WO 97/06 821.
Bez ohľadu na konečnú konfiguráciu podávaného prostriedku, môže zložka 1 a 2 obsahovať nasledujúce komponenty.
Antigény HPV proteínu
Na použitie do prostriedkov je vhodný ktorýkoľvek antigén HPV (napríklad vyššie opísané zmesi, konjugáty a fúzne proteíny) podľa tohto vynálezu. Avšak obzvlášť vhodné by boli HPV antigény, ktoré exprimujú rozpoznateľné epitopy na povrchu buniek infikovaných HPV. HPV exprimuje šesť alebo sedem neštrukturálnych proteínov a dva štrukturálne proteíny a každý z nich môže slúžiť ako cieľ pri tu uvedených imunoprofylaktických alebo imunoterapeutických prístupoch.
Vírusové kapsidové proteíny (viral capsid proteins ) L1 a L2 sú bývalé štrukturálne proteíny. Ľ1 je hlavný kapsidový proteín, ktorého sekvencia aminokyselín je vysoko zachovaná medzi rôznymi typmi HPV. Existuje tu sedem skorých neštrukturálnych proteínov. Proteín y E, E2 a E4 hrajú dôiežitú úlohu pri replikácii vírusu. Proteín E4 hrá tiež úlohu pri zrení vírusu. Úloha E5 proteínu je menej dobre známa. Proteíny E6 a E7 sú onkoproteíny, ktoré sú rozhodujúce pre vírusovú replikáciu, rovnako tak pre transformáciu hostiteľskej bunky a urobia ju nesmrteľnou.
Hsp proteíny
Bolo izolované, klonované a charakterizované veľké množstvo hsp proteínov z rôznych skupín organizmov [Mizzen, Biotherapy 10: 173-189, 1998; pričom tu použitý termín „proteín tepelného šoku“ („heat shock protein(s), skrátene hsp(s) je synonymom k proteínom uvádzaným ako „stresové proteíny“ („stres proteins) alebo ich zahŕňaj. Imunostimulačné proteíny hsp alebo ich fragmenty sú vhodné do tu opísaných prostriedkov (napríklad ako časti fúzneho polypeptidu). Proteíny Hsp70, Hsp60, Hsp20-30 a Hsp10 patria medzi hlavné rozhodujúce činitele rozpoznávané hostiteľskou imunitnou odpoveďou na infekciu Mycobacteríum tuberculosis a Mycobacteríum leprae. Okrem toho, proteín Hsp65 z Bacille Calmette Guerin (BCG)., kmeňa Mycobacteríum bovis, bol uznaný ako účinné imunostimulačné činidlo, ako je opísané v nižšie uvedených príkladoch.
Rodiny génov a proteíny hsp, z ktorých ktorýkoľvek môže byť použitý, ako je tu opísané pre zložku 1, sú dobre známe odborníkov v odbore. Tieto zahŕňajú napríklad Hsp100-200, Hsp90, Lon, Hsp70, Hsp60, TF55, Hsp40, FKBP proteíny cyklofylíny, Hsp20-30, CIpP, CrpE, Hsp10, ubichitin, calnexin a proteíny disulfidových izomeráz. Pozri napríklad Macario, Cold Sping Harbor Laboratory Res. 25: 59-70, 1995; Parsell a spol., Rev. Genet. 27:437-496, 1993 a US patent č. 5 232 833. Proteiny Hsp môžu byť, ale nie je to podmienkou, cicavčie, bakteriálne alebo mykobakteriálne hsp.
Grp170 (pre glukózou riadený proteín - glucose-regulated protein) ie príkladom z rodiny proteinov hsp 100-200 Grp170 sídli v dutine (lumen) endoplazmatického retikula, v pre-Golgiho aparáte a môže hrať úlohu pri konformácii a kompletovaní imunoglobulínov.
Príklady proteínov hsp z rodiny proteínov hsp 100 zahŕňajú cicavčie Hsp 110, kvasinkový Hsp 104 a E. coli proteiny hsp ClpA; CIpB, CIpC, CIpX a CIpY.
Príklady proteínov hsp z rodiny hsp90 zahŕňajú HtpG v E. col:, Hsp83 v kvasinkách Hsp90 alfa, Hsp90 beta a Grp94 u ľudí Hsp90 viaže skupiny proteínov, ktoré sú typickými molekulami bunkových regulátorov, ako sú receptory steroidných hormónov (napríklad receptory glukokortikoidu, estrogénu, progesteronu a testosterónu), transkripčné faktory a proteínkinázy: ktoré hrajú úlohu v signálnych mechanizmoch transdukcie. Proteiny Hsp sa taktiež zúčastňujú pri tvorbe rozsiahlych komplexov, ktoré zahŕňajú ďalšie stresové proteiny
Lon je tetramerickou ATP-dependentnou (závislou na prítomnosti ATP v médiu) proteázou, ktorá degraduje nepôvodné proteiny v E. coli.
Príklady proteínov hsp z rodiny hsp 70 zahŕňajú Hsp72 a Hsc73 z cicavčích buniek, DnaK z baktérií alebo mykobaktérií ako sú Mycobacterrium leprea, Mycobaclerium luberculosis a Mycobacterium bovis (ako je Bacille-Calmette Guerin ; tz uvedenom ako hsp71), DnaK z E. coli, kvasinky a iné prokaryonty a BiP a Grp78. Hsp70 je schopný špecificky viazať ATP rovnako tak, ako rozvinuté polypeptidy a peptidy; proteín hsp70 sa zúčastňuje v procese zvinutia (konformácie) a rozvinutia proteínov, rovnako ako pri kompletovaní a dekompletovaní proteínových kompiexov. Príkladom proteínu hsp z rodiny Hsp60 je Hsp65 z mykobaktérií. Bakteriálny Hsp60 je tiež obvykle známy ako GroEL. Hsp60 tvoria homooligomérne komplexy a zdá sa, že zohrávajú kľúčovú úlohu pri zvinutí proteínov. Homológy Hsp60 sú prítomné v mitochondriách a chloroplastoch eukaryontov.
Príklady proteínov hsp z rodiny TF55 zahŕňajú Tcpl, TRiC a termozómy Tieto proteiny sa typicky vyskytujú v cytoplazme eukaryontov a niektorých archeobakténí a tvoria mnohočlenné kruhy podporujúce zvinutie (konformáciu) proteinov. Sú tiež slabo homologické k Hsp60.
Príklady proteinov hsp z rodiny Hsp40 zahŕňajú DnaJ z prokaryontov, ako sú E. coli a mykobaktérie a HSJ1, HDJ1 a Hsp40. Proteín Hsp40 hrá úlohu ako molekulárny sprievodca pri zvinutí proteinov, termálnej tolerancii a replikácii DNA, okrem ďalších bunkových aktivít.
Príklady proteinov FKBP zahŕňajú FKBP12, FKBP13, FKBP25 a FKBP59, Fprl a Nepi. U týchto proteinov je typická peptidyl-prolyl izomerázová aktivita a interagujú s imunosupresívnymi látkami ako sú FK506 a rapamycín. Typicky sa tieto proteíny vyskytujú v cytoplazme a endoplazmatickom retikule.
Príklady cyklofylínov zahŕňajú cyklofylíny A, B a C. Tieto proteíny majú peptidylpropyl izomerázovú aktivitu a interagujú s imunosupresívnou látkou cyklosporínom A.
Proteín Hsp20-30 je taktiež uvedený ako malý Hsp. Proteín Hsp20-30 sa typicky vyskytuje vo veľkých homooligomérnych komplexoch alebo prípadne tiež v heterooligomérnych komplexoch. Organizmus alebo bunkový typ môžu exprimovať niekoľko rôznych typov malých proteinov Hsp. Proteín Hsp20-30 interaguje so štruktúrami cytoskeletu a môže hrať regulačnú úlohu pri polymerácii/depolymerácii aktínu. Proteín Hsp20-30 je rýchlo fosforylovaný pri strese alebo vystavení kľudových buniek rastovým faktorom. Homológy Hsp obsahujú alfa-kryštalín.
Proteín CIpP je proteáza E. coli zapojená pri degradácii abnormálnych proteinov. Homológy CIpP sa vyskytujú v chloroplastoch. Proteíny CIpP tvoria heterooligomérne komplexy s CIpA.
Proteín CrpE je proteín E. coli s molekulovou hmotnosťou okolo 20 kDa, ktorý sa zúčastňuje pri záchrane stresom poškodených proteinov, ako aj degradácie poškodených proteinov. GrpE hrajú úlohu pri riadení expresie stresových génov v E. coli.
Príklady proteinov Hsp10 zahŕňajú GroES a Cpn IO. Hsp10 sa vyskytuje v E. coli a v mitochondriách a chloroplastoch eukaryontných buniek. Hsp10 tvoria sedemčlenné kruhy, ktoré sa viažu s Hsp60 oligomérmi. Hsp10 sa tiež zúčastňuje pri zvinutí (konfirmácii) proteinov.
Bolo zistené, že ubichitín viaže proteíny v koordinácii s proteolytickými presunmi proteinov ATP-dependentných cytosolických proteáz.
Stresové proteíny užitočné v tomto vynáleze môžu byť získané z enterobaktérií (napríklad E. colľ), mykobaktérií (obzvlášť M. leprae, M. tuberculosis, M. vaccae, M. smegmatis a M. bovis), kvasiniek, mušiek Drosophila, stavovcov (napríklad vtákov alebo cicavcov ako hlodavcov alebo primátov vrátane človeka).
Expresia a purifikácia proteínov
Proteíny môžu byť pripravené rekombinantným spôsobom. Presnejšie, proteíny hsp (alebo ich fragmenty) a HPV antigény (alebo ich fragmenty), ktoré môžu byť podávané samostatne, v kombináciách alebo po konjugácii, pripadne fúziou proteínov obsahujúcich zložku 1 a zložku 2, môžu byť pripravené rekombinantným spôsobom v baktériách, kvasinkách, rastlinách alebo rastlinných bunkách alebo zvieratách alebo živočíšnych bunkách. Napríklad proteíny hsp, HPV antigény a fúzne proteíny, ktoré ich obsahujú, môžu byť pripravené transformáciou (premenou) (napríklad transfekciou, transdukciou alebo infekciou) hostiteľskej bunky sekvenciou nukleových kyselín vo vhodnom expresívnom nosiči. Vhodné expresívne nosiče zahŕňajú plazmidy, vírusové častice a fágy. Pre bunky hmyzu sú vhodné expresívne vektory baculovírusu. Do genómu hostiteľskej bunky môže byť integrovaný úplný expresívny nosič alebo jeho časť. Za niektorých okolností je požiadavka použiť indukovateľný expresívny vektor, napríklad LASCSWITCH® Inducible Expression Systém (Stratagene ; La Jolla, CA).
Odborníci v oblasti molekulárnej biológie vedia, že získanie rekombinantných proteínov potrebných pri tu uvedených spôsoboch je.možné použiť ktorýkoľvek z veľkého množstva typov expresívnych systémov (napr. fúzne proteíny). Presné použitie hostiteľskej bunky a vektora nie je pre tento vynález rozhodujúce.
Ako je uvedené vyššie, zložka 1, zložka 2 a fúzne proteíny, ktoré tieto zložky obsahujú, môžu byť produkované rastlinnými bunkami. Pre rastlinné bunky su vhodné vírusové expresívne vektory (napr. vírus karfiolovej mozaiky a vírus tabakovej mozaiky) a plazmidové expresívne vektory (napr Ti plazmid). Takéto bunky sú dostupné od širokého spektra zdrojov (napr. The Američan Type Cuiture Collection, Manassas, VA ; pozri tiež napríklad Ausubel a spoť, Current Protocois in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York, 1994). Spôsoby transformácie a výber expresívnych nosičov budú závisieť od vybratého hostiteľského systému.
Spôsoby transformácie sú opísané napr. v Pouwels a spol., Cloning Vectors: A Laboratory Manual 1985, Supp. 1987.
Hostiteľské bunky pre expresívne nosiče môžu byť kultivované v konvenčných živných médiách upravených podľa potreby pre aktiváciu alebo represiu vybraného génu, selekciou ,,transformátorov“(transformovaných buniek) alebo amplikáciou vybraného génu.
Tam, kde je to vhodné alebo užitočné, môže nukleová kyselina kódujúca fúzny proteín obsahovať signálnu frekvenciu pre exkréciu fúzneho proteínu, napríklad uľahčenie izolácie proteínu z bunkovej kultúry. Špecifické iniciačné signály môžu byť tiež požadované pre účinnú transláciu vložených sekvencii nukleových kyselín. Tieto signály obsahujú ATG iniciačný kodón a priľahlé sekvencie. V niektorých prípadoch musia byť zaistené exogénne translačné kontrolné signály, ktoré možno obsahujú ATG iniciačný kodón. Ďalej je dôležité, aby iniciačný kodón bol vo fáze čítacieho rámca požadovanej kódujúcej sekvencie,. aby bola zaistená translácia úplného inzertu. Tieto exogénne translačné kontrolné signály a iniciačné kodóny môž,u byť rôzneho pôvodu, ako prírodné, tak aj syntetické. Účinnosť expresie môže byť zvýšená inklúziou vhodných zosilňovačov transkripcie alebo translácie, (sú napr. uvedené v Bittner a spol., Methods in Enzymol. 153:516, 1987).
Zložka 1, zložka 2 a fúzne proteíny, ktoré tieto zložky obsahujú, môžu byť rozpustné za normálnych fyziologických podmienok. Okrem toho môžu takéto fúzne proteíny obsahovať jeden alebo viacej nepríbuzných (tj. non-hsp, non-HPV) proteínov (v celom alebo čiastočnom rozsahu) za účelom vytvorenia aspoň jedného trojitého fúzneho proteínu. „Tretí“ proteín môže byť taký, ktorý uľahčuje purifikáciu, detekciu alebo rozpúšťanie fúzneho proteínu alebo obstaráva niektoré jeho funkcie. Napríklad expresívny vektor pUR278 (Ruther a spol., EMBO J, 2:1791, 1983) môže byť použitý na vytvorenie lacZ fúznych proteínov a vektory pGEX môžu byť použité na expresiu cudzích polypeptidov ako fúznych proteínov obsahujúcich glutatión S· transferázu (GST). Obvykle sú takéto fúzne proteíny rozpustné a môžu byť ľahko purifikované z lyzovaných buniek adsorpciou na glutatión-agarózových častiach s následnou elúciou v prítomnosti voľného glutatiónu. Vektory pGEX sú konštruované tak, aby obsahovali trombín alebo faktor Xa pre miesta proteázového štiepenia tak, že klonovaný cieľový génový produkt môže byť uvoľnený'z GST skupiny. Týmto „tretím“ proteínom môže byť taktiež doména imunoglobuťínu Fc.
Takýto fúzny proteín môže byť ihneď purifikovaný za použitia afinitnej kolóny. Fúzne proteíny používané v spôsoboch podľa tohto vynálezu môžu samozrejme obsahovať viacej ako jednu zložku 1 a/alebo viacej ako jednu zložku 2 a zložky 1 a 2 môžu byť priamo alebo nepriamo viazané (napr. medzi nimi môžu byť jeden alebo viacej zostatkov aminokyselín).
Proteín (napr. proteín hsp, HPV antigén alebo fúzny proteín obsahujúci hsp proteín) môže byť purifikovaný pomocou protilátky, na ktorú sa tento proteín špecificky viaže. Odborní pracovníci v odbore používajú bežnú purifikáciu proteínov spôsobmi založenými na afinitnej chromatografii. Pozri napríklad Janknecht s spoť, Proc. Natl. Acad. Sci. USA . 88:8972, 1981, pre purifikáciu nedenaturovaných fúznych proteínov exprimovaných v ľudských bunkových líniách V tomto systéme je zainteresovaný gén subklonovaný do vakcínia rekombinantného plazmidu tak, že otvorený čítací rámec génu je translačne fúzovaný κ amínovému koncu skladajúcemu sa zo šiestich histidínových zostatkov. Extrakty z buniek infikovaných rekcmbinantným vakcinia vírusom sú nanesené na Ni2* nitriloacetát-agarózové kolóny a proteíny s histidínovými koncami sú selektívne eluované použitím pufrov obsahujúcich imidazol. Rovnaký postup môže byť použitý pre bakteriálnu kultúru.
Proteíny obsahujúce fúzne proteíny (hlavne tie, ktoré obsahujú krátke antigénne fragmenty ) môžu byť tiež pripravené chemickou syntézou (napr. pomocou spôsobov uvedených v Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd ed., 1984 The Pierce Chemical Co., Rockford , II.).
Takto izolované proteíny môžu byť, ak je treba, ďalej puriflkované a/alebo koncentrované a to tak dlho, aby sa týmto neznížila ich schopnosť vzbudzovať imunitnú odpoveď postačujúcu na to, aby boli účinné pri spôsoboch liečenia podľa tohto vynálezu. V odbore je známe veľké množstvo spôsobov purifikácie a koncentrácie proteínov, pozri napr. Fisher, Laboratory Techniques In Biochemistry And Molecular Biology, Work and Burdon, Eds., Elsevier, 1980), zahrňujúce ultracentrifugáciu a/alebo precipitáciu (napr. síranom amónnym), mikrofiltráciu (napr. membránová a recirkulačná filtrácia), gélová filtrácia (napr. koióna plnená materiálmi Sepharose CL-6B, CL-4B, CL-2B, 6B, 4B alebo 2B, Sephacryl s-400 alebo S-300, Superose 6 alebo Ultrogel A2, A4 alebo A6; všetky dostupné od fy. Pharmacia Corp.), rýchlou proteínovou kvapalinovou chromatografiou (FPLC - fast proteín liquid chromatography) a vysoko výkonnou kvapalinovou chromatografiou (HPLC-high performance liquid chromatography).
Krížové reaktívne sekvencie HPV
Pracovníci v odbore sú schopní rozhodnúť, či prostriedok obsahujúci HPV antigén prvého typu môže byť použitý na liečenie subjektov infikovaných druhým typom HPV. Stanovenia, na ktorých môžu byť takéto rozhodnutia založené, zahŕňajú prognostické skúšky (napr. tie, ktoré používajú počítačové modely) a biologické stanovenia, v ktorých sa skutočne robí test krížovej reaktivity. Môžu byť použité jeden alebo obidva typy stanovenia (predpokladá sa, nie však náhodou, že výsledky získané v prognostickom stanovení budú ďalej testované biologickými zložkami). Jednotlivé príklady sú uvedené nižšie.
Testovanie krížovej reaktivity (tj. schopnosť prostriedku obsahujúceho HPV antigén jedného typu účinne liečiť subjekt infikovaný iným typom HPV, alebo ktorý má chorobu alebo stav spojený s HPV iného typu) môže byť uskutočnené dobre zavedenými imunobiologickými metódami. Ako príklad demonštrácie imunitnej krížovej reaktivity môžu byť uvedené bitransgénne myši konštruované pre expresiu väzobnej oblasti antigénu ľudskej MHC triedy I molekúl a ľudského génu CD8 (Lustgarten a spol., Human Immunol.52:109, 1997 : Vitiello a spol., J. Exp. Med. 173: 1007, 1991).
Presnejšie, HLA-A2/CD8 bitransgénna myš (Lustgarten a spol., supra) môže byť použitá na demonštráciu krížovej reaktivity cytotoxických T lymfocytov (CTL) vzbudenej voči HPV16E7 proti peptidom odvodeným od proteínu E7 HPV6 a 11 za použitia štandardných imunologických techník (pozri napr. Coligan a spol., Eds., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons,. 1999). Stručne povedané, myši sú raz až trikrát imunizované fúznym proteínom HspE7 (na báze BCG Hsp65 a HPV16E7 molekulách) v časových intervaloch 7 až 21 dní. Proteín Hsp E7 je suspendovaný vo fyziologickom roztoku pufrovanom fosfátom (PBS-phosphatebuffered saline) a podávaný subkutánne v rozmedzí dávkovania od 1 μρ do 1000 pg na myš. Po siedmich dňoch bolo podávanie HspE7 ukončené, myši usmrtené, týmto myšiam boli odobraté sleziny a tkanivo bolo disociované do podoby monobunkovej suspenzie. Bunky CTL, ktoré sú špecifické pre HPV6 E7 sú restimúiované (povzbudené) prídavkom HLA-A2 väzbových peptidov odvodených od HPV16E7,
HPV6E7 a HPV11E7, do kultivačného média pri koncentrácii 1 μΜ. Bunky môžu byť restimulované napríklad v 6 jamkových platniach, ktoré majú v každej jamke rôzny peptid. Peptidy (napríklad desať peptidov) s najvyššou predpokladanou väzobnou afinitou, ako je definované pomocou počítačového algoritmu, môžu byť použité pre každý z typov HPV16, HPV6 a HPV11 [alebo ktorýkoľvek iný typ HPV; pozri Parker a spol., Immunol. 152 : 163, 1994; algoritmus je taktiež dostupný na internete prostredníctvom BIMAS (Bioinformatics & Molecular Analysis Section) Webovej siete National Institutes of Heath sprístupnenej 26. Júna 2001 na http://bimas. dcrt.nih.gov/]. Okrem toho, tam, kde sa od seba líšia, môžu byť tiež použité korešpondujúce peptidy z iných dvoch genotypov HPV (tj. HPV16E7 peptid 11-20 a HPV6 a 11 peptidy 11-20).
Nasleduje obdobie (napr. jeden týždeň) restimulácie in vitro, pričom by maia byť meraná CTL aktivita pomocou lýzie T2 cieľových buniek “pulzovaných“ HLA-A2 väzobnými peptidmi odvodenými od HPV16E7, HPV6E7 a HPV11 E7. Okrem toho, antigén špecifické T lymfocyty, ktoré rozpoznajú HLA-A2 väzobné peptidy odvodené od HPV16 E7, HPV6 E7 a HPV11 E7, môžu byť merané pomocou ELISPOT analýzy buniek so sekréciou INF-γ za použitia skôr opísaných metód (Asal a spel., Clin. Diagn. Lab. Immunol. 7 : 145,2000). Tieto analýzy by mohli byť uskutočnené na myšiach transgénnych pre iné HLA alely.
Inou možnosťou je meranie schopnosti CTL, ktoré sú indukované imunizáciou pomocou HspE7 za účelom krížovej reakcie s peptidmi odvodenými od proteínov HPV6 alebo 11 E7 v HLA-A2 pozitívnych ľudských subjektoch, ktoré sa podrobili liečbe genitálnych bradavíc za použitia HspE7. Monojadrové bunky periférnej krvi (PBMC - peripheral blood mononuclear celíš) môžu byť izolované zo subjektov (napr. ľudských pacientov) pred liečením a niekoľko dní (napr. 7 dní) po každom liečení pomocou HspE7. Bunky môžu byť analyzované pomocou fluorogénnych MHC-peptidových komplexov (tetraméry, Altman a spol., Science 274: 94 1996) alebo pomocou ELISPOT analýzy (Asal a spol., Clin. Diagn. Lab. Immunol. 7:145, 2000). Bunky môžu byť stanovené priamo z periférnej krvi a potom nasleduje restimulácia in vitro, ako je opísaná (Youde a spol. Cancer Res. 60: 365, 2000). Pre restimuláciu in vitro sú kultivované bunky PBMC (2 x 106 /ml) v RPMH640 s 10 % ľudským AB sérom (RAB) a peptidom s koncentráciou 10 pg/mL Restimulované peptidy by mali byť odvodené od HPV16E7 a mali by obsahovať peptidy (napr. desať peptidov) s najvyššou predpokladanou HLA-A2 väzobnou afinitou, ako je definované počítačovým algoritmom (Parker a spol., supra). Štvrtý deň je do každej jamky pridané 4,1 ml RAB obsahujúceho IL-2 v koncentrácii 25 jednotiek/ml. šiesty deň je I ml média nahradený 1 ml média obsahujúceho 10 jednotiek IL-2/ml. Siedmy deň su ožiarené autológne bunky PBMC (čerstvé alebo zmrazené a potom rozmrazené) resuspendované v RAB obsahujúcim 10 ng/ml peptidu a 3 ng/ml β2 -mikroglobulínu pri koncentrácii 3 x 106 buniek/ml. Bunky vykazujúce antigén sa nechajú počas dvoch hodín zachytávať (adhézia) a potom sú premyté za účelom odstránenia nezachytených buniek pred prídavkom 1 až 2 x 106 efektorových buniek/rni Na deviaty deň je do každej jamky pridaný 1 ml RAB obsahujúci 25 jednotiek IL-2/rnl. Na trinásty deň sú obsahy jamôk rozdelené dc zložených doštičiek a médium, (obsahujúce 10 jednotiek IL-2/ml) je upravené na pôvodný objem. Bunky sú použité na štrnásty deň. Pre analýzu FACS sú pripravené tetraméry podľa už skôr opísaného spôsobu (Altman a spol.. Science 274:94, 1996). Peptidy použité na dávkovanie tetramérov sú HLA-A2 väzobné peptidy odvodené od E7 molekúl HPV16, HPV6 a HPV11. Peptidy (napr. desať peptidov) s najvyššou predpokladanou HLA-A2 väzobnou afinitou, ako sú definované počítačovým algoritmom (Parker a spol., supra) sú použiteľné pre každý z HPV, HPV6 a HPV11. Okrem toho, pokiaľ sú rozdielne, sú tiež použité korešponudjúce peptidy z iných dvoch HPV genotypov (tj. HPV16E7 peptid 11-20 a HPV6 a 11 peptidy 11-20) Čerstvé alebo restimulovaré bunky PBMC sú napustené PE-značenými HPV-E7 peptidovými tetramérmi a FITC značenou anti-CD8 protilátkou a analyzované prietokovou cytometriou, ako bo!o už opísané. ELISPOT analýza antigén špecifických T lymfocytov, ktoré rozpoznajú HLAA2 väzobné peptidy pochádzajúce zHPV16 E7, HPV6 E7 a HPV11 E7 prítomné v čerstvých a restimulovaných bunkách PBMC, je urobená použitím skôr opísaných metód (Asal a spol., Clin. Diagn. Lab. Immunol. 7 : 145, 2000). Podobne môžu byť tieto techniky aplikované v prípade subjektov s inými HLA haplotypmi.
Okrem toho je možné testovať schopnosť ľudských buniek PBMC pochádzajúcich od zdravých HLA-A2 pozitívnych dobrovoľníkov ktorí neboli predtým liečení pomocou HspE7, stimulovaných in vitro HspE7 proteínom alebo pepticimi pochádzajúcimi z HPV typu 16 E7, za účelom krížovej reakcie s bunkami „pulzovanými“ korešpondujúcimi peptidmi z iných dvoch HFV genotypov (6 a 11). Bunky sú stimulované a stanovené pomocou v odbore bežných postupov. Stručne povedané, bunky PBMC sú izolované z periférnej krvi, adhéziou zachytené bunky sú oddelené od nezachytených buniek a tieto zachytené bunky sú kultivované za účelom vytvorenia dendritických buniek (dendritic celís-DC), ako je opísané v Current Protocols in Immunology (Coligan a spol., Eds., John Wiley & Sons, pp 7.32.7-8, 1999). Adhéziou nezachytené bunky sú kryoskopicky konzervované v 90% FCS/ 10% DMSO pre použitie v ďalšom stupni stanovenia.
Pre stimuláciu sú DC „pulzované 50 pg/ml HspE7 alebo 40 pg/ml príslušného peptidu a 3 pg/ml β2 - mikroglobulínu počas 24 hodín pri teplote 37 °C, 5% CO2 (Kawashima a spol., Human Immunol. 59:1, 1998). Použitými peptidmi sú HLA-A2 väzobné peptidy pochádzajúce z E7 molekúl HPV16, HPV6 a HPV11. Peptidy (napr. desať peptidov) s najvyššou predpokladanou HLA-A2 väzobnou afinitou, ako sú definované počítačovým algoritmom (Parker a spol., supra) sú použité pre každý z HPV16, HPV6 a HPV11. Okrem toho, pokiaľ sú rozdielne, by mali byť tiež použité korešpondujúce peptidy z iných dvoch HPV genotypov /tj. HPV16 E peptid 11-20 a HPV6 a 11 peptidy 11 -20). Bunky CD8+ sú izolované pomocou metódy pozitívnej selekcie z kryoskopicky konzervovaných autológnych buniek, ktoré sa adhéziou nezachytili, použitím imunomagnetických perál (Miltenyi Biotec). Peptid/proteín dávkované DC sú ožiarené 4200 radmi a zmiešané s autológnymi CD8+ bunkami v pomere 1 : 20 do napr. 48 jamkových platní obsahujúcich 0,25 x 105 CD8+ buniek a 10 ng/ml IL-7 v 0,5 ml RAB. Na siedmy a štrnásty deň sú bunky restimulované pomocou autológnych peptidom „pulzovaných“ adhézií zachytených APC (Kawashima a spol., Human Immunol. 59:1, 1998). Kultúry sú dopĺňané výživou každé 2 až 3 dní pomocou 10 U/ml hlL-2. HPV E7 peptid špecifické T lymfocyty sú analyzované pomocou fluorogénnych MHC-peptidových komplexov (tetramérmi, Altman a spol., Science 274:94, 1996) alebo ELISPOT analýzy (Asal a spol., Clin. Diagn. Lab. Immunol. 7 : 145,2000) po siedmich a štrnástich dňoch stimulácie in vitro. Tetraméry pre analýzu FACS sú pripravené podľa skôr uvedeného spôobu (Altman a spol. Science 274 : 94, 1996). Peptidmi použitými pre dávkovanie tetramérov by mali byť HLA-A2 väzobné peptidy pochádzajúce z E7 molekúl HPV16, HPV6 a HPV11, ako je opísané vyššie. Peptid špecifické T lymfocyty sú napustené PE-značenými HPV-E7 peptidovými tetramérmi a FITC značenou anti-CD8 protilátkou a analyzované metódou prietokovej cytometrie (Youde a spol., Cancer Res. 60: 365, 2000). ELISPOT analýza antigén špecifických T lymfocytov, ktoré rozpoznajú HLA-A2 väzobné peptidy pochádzajúce z HPV 16 E7, HPV6 E7 a HPV11 E7 je uskutočnená použitím skôr opísaných metód (Asal a spol., Clin. Diagn Lab. Immunol. 7:145, 2000). Podobne môžu byť tieto techniky aplikované v prípade subjektov s inými typmi HLA haplotypov.
Podávanie prostriedkov
Tento vynález zahŕňa prostriedky obsahujúce aspoň jeden HPV proteínový antigén [napr. HPV proteínový antigén (alebo jeho antigénne fragmenty]), HPV proteínový antigén zmiešaný alebo konjugovaný s hsp (alebo jeho imunostirnulačnými fragmentmi) alebo fúzny proteín obsahujúci HPV proteínový antigén (alebo jeho antigénne fragmenty) a hsp (alebo jeho irnunostimulačné fragmenty}]. Tieto proteíny môžu byť podľa potreby suspendované vo farmaceutický prijateľnom nosiči, akým je rozpúšťadlo (napr. PBS) alebo uhličitanový roztok (napr. 0,24M NaHCO3). Vhodné nosiče sú vyberané na základe spôsobu a cesty podávania a noriem farmaceutickej praxe. Vhodné farmaceutické nosiče a rozpúšťadlá, rovnako tak ako nutné farmaceutické požiadavky na ich použitie, sú uvedené v Remington s Pharmaceutical Sciences. V prostriedkoch môžu byť tiež obsiahnuté adjuvans, ako napríklad cholera toxín, termolabilný enterotoxín Escherichia coli (LT), lipozómy, alebo komplex stimulujúci imunitu (ISCOM - immune-stimulating complex).
Nie je nutné, aby boli proteíny (napr. fúzny proteín) podávané subjektu priamo. Namiesto nich môžu byť podávané sekvencie nukleových kyselín kódujúce príslušný proteín; proteín bude potom exprimovaný priamo v subjekte in vivo. Nukleová kyselina môže byť buď časťou vektora (ako je vírusový vektor, napríklad časť genómu vírusového vektora), alebo zapuzdrená (encapsulated), napríklad v lipozómoch. Inou možnosťou je dodávanie nukleových kyselín v podobe nechránených nukleových kyselín.
Prostriedky môžu byť pripravené vo fcrme roztoku, suspenzie, čapíkcv, tabliet, granúl, prášku, kapsúl, masti alebo krému. Ako je uvedené vyššie, pri príprave týchto prostriedkov môže byť zahrnutý jeden alebo viacej farmaceutických nosičov. Nasledujúce príklady farmaceutický prijateľných nosičov alebo iných aditív zahŕňajú rozpúšťadlá (napr. etanol, polysorbáty alebo Cremophor EL® ), činidlo na úpravu izotonicity, konzervačné látky, antioxidačné činidlo, pomocné prostriedky (napr laktóza, škrob, kryštalická celulóza, mamtol, maltóza, kyslý fosforečnan vápenatý, slabý anhydrid kyseliny kremičitej alebo uhličitan vápenatý), spojivá (napr. škrob, polyvinylpyrolidón, hydroxypropylcelulóza, etylcelulóza. karboxymetylcelulóza alebo arabská guma), mazadlá (napr. horečnatá soľ kyseliny stearovej, mastenec alebo stužené tuky) Ak je to nutné (alebo požadované), môže byť tiež pridaný glycerín, dimetylacetamid, laktát sodný, povrchovoaktívna látka, hydroxid sodný, etyléndiamín, etanolarniri, kyslý uhličitan vápenatý, arginín, me-glumín alebo ŕr/s-aminometán. Biologicky rozložiteľné polyméry ako sú poly-D,L-laktid-ko-glykolid alebo polyglykolid môžu byť použité ako objemná matrica, pokiaľ je požadované pomalé uvoľňovanie prostriedku (pozri napríklad US patent č. 5 417 986, 4 675 381 a 4 450 150). Farmaceutické prípravky ako sú roztoky, tablety, granule alebo kapsule môžu byť tvorené týmito zložkami. Pokiaľ je prostriedok podávaný orálne, môžu byť pridané tiež farbivá, aromatické prísady a príchute.
Terapeutické prostriedky môžu byť podávané akoukoľvek vhodnou cestou, napríklad intravenózne, intraarteriálne, lokálne, intraperitoneálne (do pobrušnice), iritrapleurálne (do pohrudnice), orálne, subkutánne, intramuskulárne, intradermálne, ' sublinguálne, intraepidermálne, nazálne, intrapulmonárrre (napr. inhaláciou), vaginálne alebo rektálne.
Množstvo podávaného prostriedku bude závislé, napríklad, od konkrétneho prostriedku, či je adjuvans podávané súčasne s prostriedkom, typu súčasne podávaného adjuvans, od spôsobu a frekvencie podávania a požadovaného účinku (napr. ochrana alebo liečenie). Dávky sú určované podľa predpisov odborníkov zaoberajúcich sa vývojom liečiv a profylaktických činidiel. Obvykle sú prostriedky podľa tohto vynálezu podávané v množstvách v rozsahu medzi 1 pg a 100 mg na dávku pre dospelého človeka. Ak sa súčasne s prostriedkom podáva adjuvans, množstvo, ktoré môže byť použité pre dospelého človeka, sa pohybuje v rozsahu medzi 1 ng a 1 mg. Podávanie prostriedku je opakované ako je nevyhnutné, čo môže byť rozhodnuté odborníkom s praxou v odbore. Napríklad po základnej dávke môžu nasledovať tri podporné dávky v týždňových alebo mesačných intervaloch. Podporná injekcia môže byť podaná v 3. až 12. týždni po prvom podaní a druhá podporná injekcia môže byť podaná o 3 až 12 týždňov neskôr za použitia rovnakého prípravku. Subjektu môžu byť urobené odbery séra alebo T buniek za účelom testovania imunitnej odpovede vzbudenej liečebným prostriedkom proti HPV antigénu obsiahnutom napríklad vo fúznom proteíne alebo konjugáte proteínu. Spôsoby stanovenia protilátok alebo cytotoxických T buniek proti špecifickému antigénu sú dobre známe odborníkom v odbore. Podľa potreby môžu byť podávané ďalšie podporné dávky. Imunizačný protokol môže byť optimalizovaný s cieľom vzbudenia maximálnej imunitnej odpovede, napríklad premenlivým množstvom fúzneho proteínu v prostriedku.
Proteíny tu opísané môžu byť samozrejme podávané poskytnutím nukleovej kyseliny ako vírusového vektora (napr. retrovírusový alebo adenovírusový vektor).
Predpokladá sa, že odborníci v odbore môžu využiť tento vynález v plnom rozsahu na základe vyššie uvedeného opisu a príkladu nižšie uvedeného, bez toho, aby bolo treba ďalšie podrobné spracovanie. Nasledujúci príklad sa chápe iba ako znázornenie toho, akým spôsobom môžu odborníci v odbore izolovať a použiť fúzne polypeptidy a nijako nelimituje zostatok opisu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Fúzny polypeptid obsahujúci M. bovis BCG Hsp65 viazaný na E7 protein HPV typu 16 bol pripravený rekombinantným spôsobom a vytvorený ako je opísané vo WO 99/07 860. Hsp65 patrí do rodiny stresových proteínov Hsp60. V smere klinických skúšok na ľuďoch zá účelom testovania účinnosti týchto fúznych polypeptidov pri liečení análnych intraépiteliálnych poškodení s vysokým stupňom šupinovitosti (HSIL-high-grade squamous intraepithelial lesions) boli urobené nasledujúce pozorovania.
Dvadsaťdva pacientov sa zúčastnilo nä pokuse metódou náhodného výberu, uskutočneného vo viacerých spolupracujúcich strediskách zameraného na skúšku HspE7 pri liečbe análnej HSIL, pričom boli uskutočnené kontroly s placebom a dvojitými slepými pokusmi. Vhodní pacienti mali biopsiou potvrdené análne poškodenie (HSIL) a boli negatívni na ľudský vírus straty imunity (HIV - human immunodeficiency vírus). U pacientov bol stanovený typ HPV použitím buniek získaných análnym výterom, avšak nepožadovalo sa, aby mali typ HPV-16. V jednotlivých poškodeniach nebol stanovovaný typ HPV. Pacienti dostali tri subkutánne injekcie buď 100 pg HspE7 alebo placeba v mesačných intervaloch. Boli hodnotení z hľadiska liečebnej odpovede na základe vyšetrenia stolice, anoskopie vysokého rozlíšenia (HRA-high-resolution anascopy) s biopsiou a komplexným vyšetrením praktického lekára. Pokiaľ boli pacienti po 12 alebo 24 týždňoch v kontrolnom pokuse bez odozvy [tj. tí, u ktorých pretrvávalo análne poškodenie (HSIL)J, pristúpilo sa k prechodu na tzv. open-label pokus (tj. s presne známym postupom liečby), pričom títo pacienti dostali tri injekcie po 500 pg HspE7 v mesačných intervaloch. Liečebné priradenie bolo opäť metódou dvojitého slepého pokusu v placebom kontrolovanej skúške, pričom slepý pokus nebol prerušený.
Za účelom určenia typov HPV infikovaných pacientov boli pri výbere pacientov (screening visit) tesne pred biopsiou odobraté vzorky z konečníka pacientom zúčastňujúcich sa námatkového placebom kontrolovaného pokusu, pri odbere bola použitá metóda Darconovho výteru. Po preložení do transportného média pre vzorky [Sample Transport Médium (Digene)] bola izolovaná DNA a použitá na určenie typu HPV. Na zosilnenie HPV DNA pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCRpolymerase chain reaction) bola použitá súhlasná sada primerov MY09/MY11. Nasledoval zosilňovací krok, vzorky boli prenesené odsatím na nylonovú membránu (blotted) a skúšané pomocou biotínom značených oligonukleotidov špecifických pre 29 odlišných typov HPV (6, 11, 16, 18, 26, 31, 32, 33, 35, 39, 40, 45, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 58, 59, 61, 66, 68, 69, 70, 73, AE2, Pap155 a Pap291) plus spojené sondy obsahujúce primery pre typy HPV (2, 13, 34, 42, 57, 62, 64, 67, 72 a W13B). Vzorky, ktoré vytvárali „bodkový otlačok“ („dot blot“), boli hodnotené buď pozitívne alebo negatívne pre jednotlivé typy HPV porovnaním so štandardizovanými kontrolami za použitia 5 bodovej stupnice ; stav 1 alebo vyšší bol hodnotený ako pozitívny.
Na overenie úspešnosti PCR bolo urobené v každej vzorke beta-globínom riadené zosilnenie a detekčná skúška. Ak vzorka nebola pozitívna na beta-giobin, bol PCR krok považovaný za technicky chybný. Pokiaľ súhlasná skúška neskončila stavom 2 alebo vyšším, bola vzorka považovaná za „HPV negatívnu“.
V čase svojho vstupu do tzv. „open label“ pokusu mali štrnásti z dvadsiatich dvoch pacientov (64%) anogenitálne bradavice, ktoré pretrvávali aj počas predchádzajúceho dvojitého slepého pokusu, pri ktorom dostali v mesačných intervaloch tri injekcie, každú po 100 pg HspE7 alebo placeba. U ôsmich (57%) z týchto štrnástich pacientov došlo k zhoršeniu, štyria pacienti (29%) zostali bezo zmeny a u dvoch pacientov (14%) došlo k zlepšeniu (u jedného k výraznému, u druhého k minimálnemu), čo bolo zistené v čase ich prechodu na „open labeíed“ pokus. Ďalší pacient mal kondylomy prítomné na začiatku dvojitého pokusu, ktoré sa rozpustilo ešte pred začiatkom „open labele“ a bol vylúčený z tejto analýzy, rovnako ako sedem ďalších pacientov, ktorí nemali detekovateľné bradavice počas žiadneho pokusu. Kondylomy boli prítomné v anorektálnom kanále' u všetkých štrnástich pacientov (100%) a taktiež pacientov na začiatku „open labeľ pokusu bola vyšetrujúcim lekárom doporučená potreba chirurgického odstránenia u jedenástich pacientov (79%), potreba lokálneho odstránenia (ablatívna liečba) (napr. kvapalným dusíkom, elektrokauterom) u dvoch pacientov (14%) a jednému pacientovi (7% ) bola doporučená povrchová liečba (tj. imiquimod). U týchto pacientov bola odložená liečba doporučená vyšetrujúcim lekárom, v súlade s tým dostali miesto toho v rámci „open labeľ pokusu tri injekcie HspE7 po 500 pg v mesačných intervaloch.
Mesiac po konečnom liečení pomocou 500 pg HspE7 nemali už dvaja pacienti (14%) detekovateľné bradavice, u jedenástich pacientov (79%) bolo zaznamenané zmenšenie veľkosti a zníženie počtu bradavíc v porovnaní s ich stavom pri nástupe „open labeľ pokusu a u jedného pacienta (7%) došlo naopak k zväčšeniu bradavíc (tabuľka 1). V čase primárneho bodu vyhodnotenia „open labeľ pokusu (4 mesiace po poslednej dávke) zaznamenal ďalší pacient zlepšenie z čiastočnej do úplnej odozvy (tj. bradavice nebolo vidieť), čo robilo (21%) zo všetkých troch zúčastnených (tabuľka 1). U žiadneho z týchto testovaných nedošlo počas šiestich mesiacov vyhodnocovania „open labeľ1- pokusu k recidíve. U desiatich pacientov (71%) pokračovalo zlepšenie čiastočnej odozvy (tj. bradavice sa ďalej značne zmenšili čo do veľkosti a zmenšenia rozsahu liečby potrebnej na úplné odstránenie zostávajúcich bradavíc). Iba u jedného pacienta (bez odozvy) (7%) nedošlo k zlepšeniu v „open labeľ* pokuse.
Tabuľka 1 [Zhrnutie odozvy pozorovanej u anogenitálnych bradavíc pc liečbe HspÉ7 i Počet pacientov (%)
| Výsledok | 12. týžaeň * | 24. týždeň ** | |
| (n =14) | (n=14) | ||
| Pacienti s úpinou odozvou | 2(14) | 3 (21) | |
| Pacienti s čiastočnou odozvou | 11 (79) | 10 (71) | |
| Pacienti bez odozvy | 1 (7) | 1 (7) |
* jeden miesiac po ukončení liečenia 500 pg HspE7 ** štyri mesiace po ukončení liečenia 500 μρ HspE7
Na konci pokusu vyššie uvedených troch pacientov s úplnou odozvou neodporučil ošetrujúci lekár ďalšiu liečbu. Ako je uvedené v tabuľke 2, liečbou doporučenou ošetrujúcim lekárom bola u pacientov s čiastočnou odozvou ablatívna liečba (kvapalný dusík atp.) (6 zo 14, tj. 43%) alebo liečenie povrchovým činidlom (4 zo 14, tj. 29%); ďalšie chirurgické odstránenie bola doporučené jednému pacientovi bez odozvy (1 zo 14, tj. 7%). Všetkých dvadsať pacientov sa nechalo zaregistrovať do zoznamu pre dlhodobé pokračovanie sledovania ich odozvy (na liečbu) a súhiasiio s odložením liečby odporučenej ošetrujúcim lekárom.
Tabuľka 2
Zhodnotenie odozvy anogenitálnych bradavíc a klinicky doporučená liečba
Začiatok* 12. týždeň** 24. týždeň ***
| Pacient | Doporučená | Odozva | Doporučená | Odozva | Doporučená |
| (číslo) | liečba | bradavíc | liečba | bradavíc | liečby |
| 003 | chirurgická | ÚO | povrchová | ÚO | žiadna |
| 004 | chirurgická | ČO | ablatívna | ČO | ablatívna |
| 005 | povrchová | ČO | povrchová | ÚO | žiadna |
| 006 | chirurgická | ČO | chirurgická | ČO | ablatívna |
| 008 | ablatívna | ČO | povrchová | ČO | povrchová |
| 009 | chirurgická | ČO | Ablatívna | ČO | povrchová |
| 010 | chirurgická | ČO | ablatívna | ČO | ablatívna |
| 011 | chirurgická | ÚO | povrchová | ÚO | žiadna |
| 014 | chirurgická | ČO | povrchová | ČÓ | povrchová |
| 016 | chirurgická | zhoršenie | chirurgická | zhoršenie | chirurgická |
| 017 | ablatívna | ČO | povrchová | ČO | povrchová |
| 020 | chirurgická | ČO | ablatívna | ČO | ablatívna |
| 021 | chirurgická | ČO | ablatívna | ČO | ablatívna |
| 022 | chirurgická | ČO | ablatívna | ČO _ | ablatívna |
* začiatok sa vzťahuje k začiatku „open-labeľ pokusu ** jeden mesiac po ukončení liečenia 500 μρ HspE7 *** štyri mesiace po ukončení liečenia 500 μρ HspE7
Skratky : ČO = čiastočná odozva ; ÚO = úplná odozva
U všetkých štrnástich pacientov, u ktorých boli diagnostikované anogenitálne bradavice, bola detekovaná HPV DNA mnohých typov vo vzorcoch análnych výtercv počas výberu pre prvý námatkový placebom kontrolovaný pokus (tabuľka 3). U dvanástich pacientov (86%) bol prítomný HPV-6 a/ alebo 11. Jeden pacient mal iba
HPV-16 a príbuzné typy a u ďalšieho pacienta nemohol byť určený typ. Tri zo štrnástich pacientov (21%) bolí pozitívni pre HPV-16. Väčšina pacientov, ktorým sa bradavice zlepšili (11 z 13, tj. 85%), nemalo HPV-16. Pacient bez odozvy taktiež nemal HPV-16 (pozri tabuľku 3).
Tabuľka 3
HPV typy pacientov s anogenitálnymi bradavicami
| Pacient (číslo) | HPV typ vo vzorcoch análneho výteru pri výbere * | Odozva bradavíc v 24. týždni ** |
| 003 | 6, 11, 16 | ÚO |
| 004 | 6, 54 | čo |
| 005 | 6 ,70 | ÚO |
| 006 | 6, 11,45 | ČO |
| 008 | 16, 31, 55 | ČO |
| 009 | 6, 11, 59 | čo |
| 010 | 6, 11.45, 54 | čo |
| 011 | HPV pozitívny, typ neznámy | ÚO |
| 014 | 6, 11 | ČO |
| 016 | 11,61 | zhoršenie |
| 017 | HPV negatívny | ČO |
| 020 | 6, 11, 16 | ČO |
| 021 | 6, 31, 53, 58, 59, 61, 66 | ČO |
| 022 | 6 | ČO i |
* Výberové vyšetrenie námatkového klinického pokusu kontrolovaného placebom ** Štyri mesiace po poslednom liečení 500 pg HapE7
Skratky HPV = human papilloma vírus; ÚO = úplná odozva : ČO = čiastočná odozva
V tomto ,open-labeľ prechodovom pokuse s HspE7 (500 pg v trojmesačných intervaloch), zahŕňajúcom pacientov s pretrvávajúcimi HSIL a sprievodnými bradavicami, traja zo štrnástich pacientov (17 %). ktorí mali bradavice na začiatku pokusu, nemali ich štyri mesiace po poslednej dávke. Ďalších desať pacientov (71%) zaznamenalo zlepšenie príznakov (tj. bradavice sa význačne zmenšili čo do veľkosti a pokračovalo aj obmedzenie rozsahu liečby potrebnej na odstránenie zostávajúcich bradavíc. U jedného pacienta (7%) nedošlo k zlepšeniu po uskutočnení pokusu a okrem toho mu bola ošetrujúcim lekárom doporučená chirurgická liečba.
Pred prihlásením k „open-labeľ pokusu by väčšina pacientov na tomto mieste podstúpila chirurgický zásah za účelom odstránenia bradavíc (11 zo 14, tj. 79%). Na konci pokusu bola chirurgická liečba doporučená iba jednému pacientovi. Miestna ablatívna terapia (napr. dusík, elektrokauter) bola doporučená šiestim pacientom (43 %) a liečba pomocou povrchového činidla (napr. imiquimod) bola doporučená štyrom pacientom (29%). Traja pacienti nepotrebovali žiadnu dalšiu liečbu.
Odozva je považovaná za progresívne zlepšenie, pokiaľ počas viacej ako šesť mesiacov nedôjde k recidíve, čo ani u jedného z účastníkov nedošlo. Postupné a progresívne rozpustenie kondylomatov je v súlade s predpokladanou imunologickou odpoveďou hostiteľa po indukcii (vzbudenie) bunkovej imunity pomocou HspE7.
Dvom pacientom v dvojitom slepom pokuse sa trocha zlepšili kondilomy pred vstupom do „open-labeľ pokusu. Zatiaľ slepý pokus bol neukončený a preto sa nevie, či títo pacienti dostali 100 pg HspE7 alebo placebo. Avšak, vzhľadom k odozve pozorovanej pri „open-labeľ pokuse aplikáciou troch injekcií 500 pg HspE7 v mesačnom intervale, sa javí vyššia dávka účinnejšia ako 100 pg.
HPV-16 DNA bola detekovaná vo vzorkách análnych výterov iba u troch z trinástich pacientov (23%), ktorým sa zlepšili bradavice po liečbe HspF.7. DNA zHPV-6, HPV-11 alebo obidvoch bola detekovaná u väčšiny pacientov, ktorých bradavice reagovali na liečbu HspE7. Tieto výsledky naznačujú, že tu existuje imunologická krížová reaktivita medzi HPV typmi v odozve voči HspE7.
Ak sa zhrnú výsledky tu uvedené, je zrejmé, že HspE7 má široké spektrum účinku pri pôsobení na anogenitálne bradavice. Táto účinnosť sa nejaví byť obmedzená iba na pacientov HPV-16 pozitívnych, ale prechádza na veľké množstvo HPV typov. Predpokladá sa, že HspE7 bude účinkovať pri liečbe chorôb v anogenitálnej oblasti vyvolaných HPV a že tento účinok nebude obmedzený iba na HPV-16 pozitívnych pacientov.
Pozorovania tu uvedené naznačujú, že terapeutické ošetrenie pomocou HspE7 sa môže stať podstatou nového jednoduchého a nechirurgického spôsobu liečenia anogenitálych bradavíc, ktorý by pri minimálnom zaťažení umožnil zmenšenie bradavíc, čím by sa znížil rozsah liečení a výsledná chorobnosť. Vnútorne anorektálne choroby často vyžadujú ďalšiu liečbu, ktorá môže byť pomerne bolestivá a oslabujúca. Akákoľvek liečba, ktorá zaisťuje dokonca aspoň čiastočnú odozvu, ktorá zmenší alebo vylúči množstvo alebo rozsah chirurgickej alebo ablatívnej terapie, sa robí s cieľom zníženia chorobnosti, zmenšenia strát pracovného času a zlepšenia kvality života.
Tieto výsledky ukazujú, že prostriedok so zložením proteín tepelného šoku/antigén HPV typ 16 je účinný pri odstránení alebo zmenšení bradavíc,, o ktorých sa predpokladá, že sú spôsobené prevažne HPV typmi 6 a 11. Značný význam majú pozorovania, že 1) bradavice vôbec môžu byť liečené prostriedkami založenými na HPV a 2) prostriedky na báze HPV typu 16 boli účinné pri liečbe stavu zavineného pravdepodobne iným typom HPV ako typom 16. Posledný výsledok, objavenie krížovej reaktivity, bol úplne neočakávaný, vzhľadom k všeobecne rozšírenej domnienke, že iba typovo špecifický prostriedok môže vyvolať typovo špecifickú imunitnú odpoveď.
Na vysvetlenie možného mechanizmu krížovej reaktivity fúznych polypeptidov boli vypočítané väzby pre rôzne molekuly HL.A triedy I a peptidy E7 HPV typov 16,6 a 11. T-i/2 disociácia (polčas disociácie) bol vypočítaný za použitia algoritmu uvedeného v Parker a spol., J. Immunol. 152: 163, 1994 (pozri tiež vyššie uvedenú webovú adresu). Výsledky sú zhrnuté v tabuľke 4.
Tabuľka 4
| HLA Typ | HPV Typ 16 | HPV Typ 6 | HPV Typ 11 | ||||||
| ŕtart | sekvencia | Tm | Starí | sekvenc/βζ | Tl/2 | štart | sekvenckv | Tw | ||
| I . | |||||||||
| A1 | 44 | QAEPDRAHY | 90C | 44 | DSQPLKQHY | £ | & | DAQPLTQHY | 5 |
| 1£ | QPE7TDLYCY | 23 | 17 | PPDPVGLHČY | 6 | 17 | PPDPVGLHČY | 6 | |
| 6S | WECTDGDIR | 9 | |||||||
| A 0201 | 11 | YMLDLQPET | 375 | ||||||
| 7 | TLHEYMLDL | 201 | 7 | TLKDIVLDL | 7 | 7 | TLKDIVLDL | 7 | |
| 82 | LLMGTLGIV | 54 | 82 | LLLGTLNIV | 412 | 82 | LLLGTLNIV | 412 | |
| 28 | QLVDSSEDEV | 140 | 28 | QLEDSSEDEV | 9 | ||||
| 78 | TLEDLLMGT | 5 | 70 | VQQLLLGTL | 1 | 78 | QLQDLLLGT | 70 | |
| A 0205 | 7 | TLHEYMLDL | 50 | 7 | TLKDIVLDL | 4 | 7 | TLKDIVLDL | 4 ' 1 |
| 11 | YMLDLQPET | 27 | 12 | VLDLQPPDPV | 1 | 12 | VLDLQPPDPV | ||
| 82 | LLMGTLGIV | 20 | 82 | LLLGTLNIV | 20 | 82 | LLLGTLNIV | 20 | |
| 78 | TLEDLLMGT | 2 | 79 | VQQLLLGTL | 19 | 78 | QLQDLLLGT | 42 | |
| 5 | TPTLHEYML | 0 | 5 | HVTLKDIVL | 14 | 5 | LVTLKDIVL | 24 | |
| A24 | 56 | ŤFCCKCDSTL | 20 | ||||||
| 51 | HYNIVTFCC | 11 | 51 | HYQIVTCCC —] | 11 | 51 | HÝQILTCCC | g | |
| 24 | CYEQLNDSS | 9 | 25 | CYEQLVDSS | 9 | 25 | CYEQLEDSS | 9 | |
| 4 | DTPTLHEYML | 6 | 5 | HVTLKDIVL | 4 | 4 | RĽVTLKD1VL | 12 | |
| 39 | EVDGQDSQPL | 5 | 39 | KVDKQDAQPL | 10 | ||||
| A3 | 88 | GIVCPICSQK | 14 | 88 | NIVCPICAPK | 5 | 88 | NIVCPICAPK | 5 |
| 7 | TLHEYMLDL | 8 | 7 | TLKDIVLDL | 5 | 7 | TLKDIVLDL | 5 | |
| A68.1 ’ | 68 | CVQSTHVDIR | 200 | 68 | WQCTETDIR | 200 | 68 | WECTDGDIR | 200 |
| 89 | IVCPICSQK | 180 | 89 | IVCPICÄPK | 180 | 89 | IVCPICAPK | 180 | |
| A 1101 | 89 | IVCPICSQK | 2.0 | 89 | IVCPICAPK | 2 | 89 | IVCPICAPK | 2.0 |
| 68 | CVQSTHVDIR | 1.8 | 68 | WQCTETDIR | 1 | 68 | WQCTETDIR | 0.6 | |
| A_3101 | 69 | VQSTHVDJR | 4.0 | 69 | VQCTETDIR | 2 | 68 | WECTDGDIR | 2.0I |
| 88 | GIVCPICSQK | 0.4 | 88 | NIVCPICAPK | 0 | 88 | NIVCPICAPK | 0.4 | |
| i | |||||||||
| A_3302 | 68 | CVQSTHVDIR | 15 | 68 | WQCTETDIR | 15 | 63 | WECTDGDIR | 15 |
| 58 | DCKCDSTLR | 3 | 58 | 3CGCDSNVR | 3 | 58 | 3CGCDSNVR | 3 | |
| I | |||||||||
| B14 | 65 | -RLCVQSTHV | 30 | 65 | 7RLWQCTE | 1 | 65 | /RLWECrC ; | 1 |
| HLA Typ | i | HPV Typ | 16 | HPV Typ 6 | HPV Typ 11 | |||||
| I Štart | sekvencia | Tf/2 | štart | sekyencjí^ | štart | sckvenclcv | ||||
| 4 DTPTLHEYML | 1 | 8 | 3 GRHVTLKDI | 1 | 2 | 3 GRLVTLKDI | 6 | 0 | ||
| 5 TPTLHEYML | 3 | 6 VTLKDľVLDL | 1 | 3 | 6 VTLKDIVLDL | 1 | 5 | |||
| 7 | 6 R1LEDLLMGT | 1 7 | 6 IREVQQLLL | 4 7 | 6 IRQLQDLLL | 2 | 0 | |||
| B40 | 3 | 5 DEIDGPAGQA | 12( | 3 3 | 5 DEVDEVDGQ | í 3 | 5 DEVDKVDKQ | 2 | ||
| 7 | 4 VDIRTLEDL | 1( | 3 7 | 4 TDIREVQQL | 1( | 7 | 4 GDIRQLQDL | 2 | 3 | |
| T | 7 RTLEDLLMGT | C | ) T | Ί REVQQLLLGT | 16 | |||||
| 8’ | 7 LGIVCP1CS | í | 8' | 7 LNIVCPICA | 2 | 8' | 7 LNIVCPICA | zl | ||
| i | ||||||||||
| B60 | 7í | ) LEDLLMGTL | 176 | 7E | VQQLLLGTL | 2 | 7£ | LQDLLLGTL | ) | |
| 2C | )TDLYCYEQL | 44 | 21 | VGLHCYEQL | 9 | 21 | VGLHCYEQL | C | ||
| 7Z | í VDIRTLEDL | 4C | 74 | TDIREVQQL | 44 | 74 | GDIRQVQDL | 44 | ||
| 46 | VDGQDSQPL | 20 | 40 | VDKQDAQPL | 20 | |||||
| B61 | 36 | DEIDGPAGQA | 40 | 35 | DEVDEVDG | 1 | 35 | DEVDKVDKQ | 1 | |
| 34 | EEDEIDGPA | 20 | 33 | SEDEVDEV | 40 | 33 | SEDEVDKV j 40 | |||
| 72 | TETDIREV | 80 | 72 | 1DGDIRQL | 1 | |||||
| 29 | NDSSEEEDEI | 1 | 29 | LEDSSEDEV | 40 | |||||
| B62 | 15 | LQPETTDLY | 83 | 15 | LQPPDPVGL | 6 | 15 | LQPPDPVGL | 6 | |
| 43 | GQAEPDRAHY | 44 | 44 | DSQPLKQHY | I | 44 | DAQPLTQHY | 5 | ||
| 7 | TLHEYMLDL | 3 | 7 | TLKDIVLDL | 16 | 7 | TLKDIVLDL | Γ 16 | ||
| 82 | LLMGTLGIV | 2 | 83 | LLGTLNÍVC | 11 | 83 | LLGTLNÍVC | 11 | ||
| B7 | 5 | TPTLHEYML | 80 | 5 | HVTLKDľVL | 20 | 5 | LVT1.KDIVL | 20 | |
| 75 | D1RTLEDLL | 40 | 75 | DIREVQQLL | 40 | 75 | DIRQLQDLL | 40 | ||
| 46 | EPDRAHYNI | 2 | 46 | QPLKQHYQI | 8 | 46 | QPLTQHYQIL | BO | ||
| B8 | 58 | CCKCDSTLRL | 16 | 58 | CCGCDSNVRL | 1 | 58 | CCGCDSNVRL | 1 | |
| 75 | DIRTLEDL | 8 | 75 | DIREVQQL | 12 | 75 | DIRQLQDLL | 8 | ||
| 7 | TLKDIVLDL | 12 | 7 | TLKDIVLDL | 12 | |||||
| BJ27O2 | 48 | DRAHYNIVTF | 60 | 49 | KQHYQIVTC | 6 | 49 | TQHYQILTC | 2 | |
| 76 | IRTLEDLLM | 20 | 76 | IREVQQLLL | 60 | 76 | IRQLQDLLL | 60 | ||
| 65 | LRLCVQSTH | 20 | 65 | VRLWQCTET | 20 | 65 | VRLWECTD | |||
| 2 | HGDTPTLHEY | 1 | 3 | GRHVTLKDIV | 20 | 3 | GRLVTLKDIV | 2Ôj | ||
| B—2705 | 76 | RTLEDLLM | 600 | 76 | IREVQQLLL | 2000 | 76 | IRQLQDLLL | 2000 | |
| 65 | LRLCVQSTHV | 600 | 65 | VRLWQCTET | 200 | 65 | VRLWECTD | 2ÔI | ||
| 3 | GRHVTLKDIV | 600 | 3 | GRLVTLKDIV | 600 | |||||
| B 3501 | 5 | ľPTLHEYML | 20 | 5 | 4VTLKDÍVL | 1 | 5 | -VTLKDIVL | 1 | |
| 16 | □PETTDLYCY | 18 | 15 | .QPPDPVGL | 2 | 15 | .QPPDPVGL | 2 | ||
| 43 | GQAEPDRAHY | 6 | 44 | DSQPLKQHY | 10 | 44 | DAQPLTQHY | 6 | ||
| 46 | ZPDRAHYNIV | 1 | 46 | DPLKQHYQI | 8 | 46 | □PLTQHYQIL | 20 | ||
| B_3701 | 74 \ | /DIRTLEDLL | 200 | 74 | rDIREVQQLL | 300 | 74 | 3DIRQLQDLL | 200 | |
| 20 1 | rDLYCYEQL | 40 | 21 5 | /GLHCYEQLV | 1 | 21 | /GLHCYEQL | 1 | ||
| 40 \ | /DGQDSQPL | 40 | 40 | /DKQDAQPL | 40 | |||||
| 80 E | íDLLMGTLGI | 40 | 80 ( | DQLLLGTLN! | 1 | 80 | □DLLLGTLNI | 40 | ||
| _______________________| | ||||||||||
| B_3801 | 78 1 | ’LEDLĹLMGTL | 8 | 78 E | žVQQLLLGTL | 1 | 79 | .QDLLLGTL | 4 | |
| 50 / | kHYNIVŤFČ | 4 | 50 C | UHYQIVrCC | 4 | 50 | dhyqiltcc | 4 | ||
| 5 1 | ’PTLHEYML | 2 | 4 F | ÍHVTLKDIVL | 30 | 4 | ílvtlkdivl | 1 |
HPVTyp 11
HĽA
HPVTyp 16
B 3901
B 3902
B 4403
B 5101
B 5102
B 5103
B 5201
B 5801
Cw 0301
Cv/0401
Cw_0602
Cw_0702 sekvencia štart
STHVDIRTL
LEDLLMGTL GTLGIVCPl TLHEYMLDL
TLEDLLMGTL HVDIRTLEDL RTLEDLLMGT DTPTLHEYML
DEIDGPAGQA GDTPTLHEY QAEPDRAHY
CKCDSTLRL TLHEYMLDL LEDLLMGTL LQPETTDLY
DEVDEVDGQ
EPDRAHYNI MGTLGIVCPÍ
DSQPLKQHY REVQQLLLGT
EPDRAHYNIV DLLMGTLGIV
VGLHCYEQL TDIREVQQL QPLKQHYQIV
QPLKQHYQI
LGTLNIVCPl VGLHCYEQLV
QPLKQHYQI
LGTLNIVCPl VGLHCYEQLV
QPLKQHYQI LGTLNIVCPl
GDTPTLHEY LQPETTDLY
CGCDSNVRL TLKDIVLDL VQQLLLGTL LQPPDVGL
TDLYCYEQL VDIRTLEDL
EPDRAHYNI MGTLGIVCPÍ
RAHYNfVTF RTLEDLLMGT PTLHEYMLDL QAEPDRAHY GTLGIVCPl
GRHVTLKDI QPPDPVGLHC
KQHYQIVTCC REVQQLLLGT VTLKDIVLDL DSQPLKQHY GTLNIVCPI
ETDIREVQQL QPLKQHYQIV
VQQLLLGTL ETDIREVQQL IREVQQLLL RHVTLKDIVL
QPLKQHYQIV LLLGTLNIV GCDSNVRLW
VQQLLLGTL
GTLNIVCPI TLKDIVLDL
TFCCKCDSTL TPTLHEYML HVDIRTLEDL EPDRAHYNI
EPDRAHYNI 84 MGTLGIVCPÍ
79.0
24.0
HPVTyp 6 sekvcndcL· EVDGQDSQPL CTETDIREV
DEVDKVDKQ
DAQPLTQHY
CCCGCDSNV
QPLTQHYQI LGTLNIVCPl
LQDLLLGTL GTLNIVCPI TLKDIVLDL
VGĽHCYEQL GDIRQLQDL QPLTQHYQIL
QPLTQHYQI LGTLNIVCPl VGĽHCYEQL
DGDIRQLQDL QPLTQHYQIL
LTQHYQILTC RQLQDLLLGT VTLKDIVLDL DAQPLTQHY GTLNIVCPI
QPLTQHYQI LGTLNIVCPl
LQDLLLGTL GDIRQLQDL DIRQLQDLL GRLVTLKDI
QPLTQHYQIL
LLLGTLNIV GCDSNVRLW
CGCDSNVRLV VTLKDIVLDL ĹQLQDĽLLGTL LQPPDPVGL
GRLVTLKDI QPPDPVGLHC
48.0 77.0
6.0 44.0 85.0 ___sekvcncítl·
KVDKQDÁQPL CTDGDIRQL
| HLA Typ | HPV Typ | 16 | HPV Typ 6 | HPV Typ 11 | |||||
| štart | sekvencia | Tl/2 | Štart | seKvenc/cb | Tl/2 | štart | sekvendzv | T\n | |
| 43 | GQAEPDRAHY | 2 | 43 | QDSQPLKQHY | 11 | 43 | QDAQPLTQHY | 32 | |
| 7 | TLHEYMLDL | 1 | 7 | TLKDIVLDL | 4 | 7 | TLKDIVLDL | _____4 |
Hrubo vytlačené sekvencie peptidov udávajú dva vrcholové spojovníky pre každú molekulu HĽA a pre každý proteín E7 z každého typu HPV.
Výsledky v tabuľke 4 naznačujú, že antigén HPV typ 16E7 môže spustiť bunkami sprostredkovanú imunitnú odpoveď proti E7 antigénu iných typov HPV v závislosti na tej-ktorej skúšanej HLA molekule. Napríklad pre HLA B 2705 sa predpokladá vysoká úroveň vážnosti pre peptidy štartujúce z aminokyselinovej pozície 76 E7 vo všetkých troch typoch HPV. Potom je možné, že pre pacientov, ktorí exprimujú túto molekulu HLA, by bol prostriedok na báze HPV typu 16E7 krížovo reaktívny a potom užitočný pri liečbe alebo prevencii infekcie typov 6 a 11. Každý z týchto hrubo vytlačených peptidových fragmentov v tabuľke 4 predstavuje možný antigénny fragment, ktorý môže byť obsiahnutý v prostriedku (napr. tu uvedené fúzne polypeptidy) ako náhrada za úplný vírusový antigén E7. Samozrejme môžu byť použité dva alebo viacej takýchto zdanlivých ep.itopov HLA alebo môže byť tiež použitý dlhý fragment obsahujúci mnoho zdanlivých epitopov HLA.
Claims (19)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Použitie prostriedku s obsahom fúzneho proteínu obsahujúceho 1) protein tepelného šoku (hsp) alebo jeho imunostimulačný fragment a 2) protein ľudského papiloma vírusu (HPV) alebo jeho antigénny fragment na prípravu liečiva na liečenie bradavíc alebo podozrenia na bradavice.
- 2. Použitie prostriedku s obsahom fúzneho proteínu obsahujúceho 1) protein tepelného šoku (hsp) alebo jeho imunostimulačný fragment a 2) protein ľudského papiloma vírusu (HPV) alebo jeho antigénny fragment na prípravu liečiva podľa nároku 1 na liečenie chorôb alebo stavov spojených s infekciou proteínom odlišného ľudského papiloma vírusu (HPV).
- 3. Použitie nukleovej kyseliny kódujúcej fúzny polypeptid obsahujúci 1) protein tepelného šoku (hsp) alebo jeho imunostimulačný fragment a 2) protein ľudského papiloma vírusu (HPV) alebo jeho antigénny fragment na prípravu liečiva na liečenie bradavíc alebo podozrenia na bradavice.
- 4. Použitie nukleovej kyseliny kódujúcej fúzny polypeptid obsahujúci 1) protein tepelného šoku (hsp) alebo jeho imunostimulačný fragment a 2) protein ľudského papiloma vírusu (HPV) alebo jeho antigénny fragment na prípravu liečiva podľa nároku 3 na liečenie chorôb alebo stavov spojených s infekciou proteínom odlišného papiloma vírusu (HPV).
- 5. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde hsp je mykobateriálny hsp.
- 6. Použitie podľa nároku 5, kde mykobakteriálny hsp je Mycobacteríum bovis hsp.
- 7. Použitie podľa nároku 6, kde hsp je Mycobacteríum bovis Hsp65.
- 8. Použitie podľa nároku 7, kde hsp je členom rodiny proteínov Hsp60 aleboHsp70.
- 9. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde HPV je 16 typ HPV.
- 10. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde HPV protein je E7 protein.
- 11. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde prostriedok obsahuje 50 až 5000 pg fúzneho proteínu alebo 100 až 2000 pg fúzneho proteínu.'
- 12. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde prostriedok je určený na podávanie bez adjuvas.
- 13. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, že subjektom je cicavec.
- 14. Použitie podľa nároku 13, kde cicavcom je človek.
- 15. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde prostriedok je určený na podávanie v množstve postačujúcom na zníženie veľkosti bradavíc.
- 16. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde subjekt má chorobu alebo stav spojený s HPV typom 5,6, 11, 18,31, 33, 35, 45, 54, 60 alebo 70.
- 17. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde subjektu nebola pred podávaním prostriedku identifikovaná infekcia HPV podávaného typu.
- 18. Použitie podľa nároku 3 alebo 4, kde nukleová kyselina je obsiahnutá vo vírusovom vektore.
- 19. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde chorobou alebo stavom sú anogenitiálne bradavice, bradavice na klenbe nohy, karcinóm pošvového hrdla, dysplázia pošvového hrdla, análny karcinóm, análna dysplázia alebo chronické opakované papilomatózy.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US21420200P | 2000-06-26 | 2000-06-26 | |
| PCT/US2001/020240 WO2002000242A2 (en) | 2000-06-26 | 2001-06-26 | Human papilloma virus treatment |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK18362002A3 true SK18362002A3 (sk) | 2004-02-03 |
Family
ID=22798190
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1836-2002A SK18362002A3 (sk) | 2000-06-26 | 2001-06-26 | Použitie prostriedku s obsahom fúzneho proteínu |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US20020110566A1 (sk) |
| EP (1) | EP1296711B1 (sk) |
| JP (1) | JP2004512264A (sk) |
| KR (2) | KR100919266B1 (sk) |
| CN (1) | CN100441223C (sk) |
| AT (1) | ATE326236T1 (sk) |
| AU (3) | AU2001271449B2 (sk) |
| BR (1) | BR0111956A (sk) |
| CA (1) | CA2413543A1 (sk) |
| CY (1) | CY1105389T1 (sk) |
| CZ (1) | CZ20024154A3 (sk) |
| DE (1) | DE60119734T2 (sk) |
| DK (1) | DK1296711T3 (sk) |
| EE (1) | EE200200709A (sk) |
| ES (1) | ES2263637T3 (sk) |
| HR (1) | HRP20021015A2 (sk) |
| HU (1) | HUP0301308A3 (sk) |
| IL (1) | IL153474A0 (sk) |
| MX (1) | MXPA02012858A (sk) |
| NO (1) | NO20026044L (sk) |
| NZ (1) | NZ523408A (sk) |
| PL (1) | PL359930A1 (sk) |
| PT (1) | PT1296711E (sk) |
| RU (1) | RU2282461C2 (sk) |
| SK (1) | SK18362002A3 (sk) |
| WO (1) | WO2002000242A2 (sk) |
| ZA (1) | ZA200210211B (sk) |
Families Citing this family (53)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL105554A (en) * | 1992-05-05 | 1999-08-17 | Univ Leiden | Peptides of human papillomavirus for use in preparations elicit a human T cell response |
| US6495347B1 (en) | 1999-07-08 | 2002-12-17 | Stressgen Biotechnologies Corporation | Induction of a Th1-like response in vitro |
| US20050226890A1 (en) * | 1999-08-12 | 2005-10-13 | Cohen David I | Tat-based vaccine compositions and methods of making and using same |
| US20050100928A1 (en) * | 1999-09-16 | 2005-05-12 | Zycos Inc., A Delaware Corporation | Nucleic acids encoding polyepitope polypeptides |
| US8128922B2 (en) | 1999-10-20 | 2012-03-06 | Johns Hopkins University | Superior molecular vaccine linking the translocation domain of a bacterial toxin to an antigen |
| PT1296711E (pt) * | 2000-06-26 | 2006-08-31 | Stressgen Biotechnologies Corp | E7 de vph para o tratamento do virus do papiloma humano |
| WO2002012281A2 (en) | 2000-08-03 | 2002-02-14 | Johns Hopkins University | Molecular vaccine linking an endoplasmic reticulum chaperone polypeptide to an antigen |
| WO2005090392A1 (en) * | 2004-03-16 | 2005-09-29 | Inist Inc. | Tat-based tolerogen compositions and methods of making and using same |
| WO2006033665A1 (en) * | 2004-03-16 | 2006-03-30 | Inist Inc. | Tat-based vaccine compositions and methods of making and using same |
| WO2002062959A2 (en) | 2001-02-05 | 2002-08-15 | Stressgen Biotechnologies Corp. | Hepatitis b virus treatment |
| US6649402B2 (en) * | 2001-06-22 | 2003-11-18 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Microfabricated microbial growth assay method and apparatus |
| JP2006503914A (ja) * | 2002-10-21 | 2006-02-02 | エムジーアイ ファーマ バイオロジックス インコーポレイテッド | ヒトパピローマウイルス媒介性疾患を治療するための組成物および方法 |
| DK1572233T3 (da) * | 2002-12-20 | 2011-06-27 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Anvendelse af HPV16 og HPV18 som vaccine mod et eller flere onkogene HPV-vira af typerne 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 |
| WO2004098526A2 (en) | 2003-05-05 | 2004-11-18 | Johns Hopkins University | Anti-cancer dna vaccine employing plasmids encoding signal sequence, mutant oncoprotein antigen, and heat shock protein |
| WO2005026375A2 (en) | 2003-05-22 | 2005-03-24 | Fraunhofer Usa, Inc. | Recombinant carrier molecule for expression, delivery and purification of target polypeptides |
| DE10347710B4 (de) | 2003-10-14 | 2006-03-30 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung |
| WO2005041880A2 (en) * | 2003-10-29 | 2005-05-12 | Science & Technology Corporation @ Unm | RhPV AS A MODEL FOR HPV-INDUCED CANCERS |
| DE10357677A1 (de) * | 2003-12-10 | 2005-07-14 | Greiner Bio-One Gmbh | Primer und Sonden zum Nachweis genitaler HPV-Genotypen |
| CA2594040A1 (en) | 2005-01-06 | 2006-07-13 | The Johns Hopkins University | Rna interference that blocks expression of pro-apoptotic proteins potentiates immunity induced by dna and transfected dendritic cell vaccines |
| US8252893B2 (en) * | 2005-01-31 | 2012-08-28 | Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | CD8 T cell epitopes in HPV 16 E6 and E7 proteins and uses thereof |
| ES2363247T3 (es) * | 2005-04-27 | 2011-07-28 | Leiden University Medical Center | Tratamiento para neoplasias intraepiteliales anogenitales inducidas por vph. |
| US8962278B2 (en) * | 2005-08-03 | 2015-02-24 | Ibio Inc. | Compositions and methods for production of immunoglobulins |
| WO2007038083A2 (en) * | 2005-09-21 | 2007-04-05 | New York University | Heat shock proteins from mycobacterium leprae and uses thereof |
| US8277816B2 (en) * | 2006-02-13 | 2012-10-02 | Fraunhofer Usa, Inc. | Bacillus anthracis antigens, vaccine compositions, and related methods |
| EP1984388B1 (en) * | 2006-02-13 | 2016-07-06 | iBio, Inc. | Hpv antigens, vaccine compositions, and related methods |
| KR20080106433A (ko) * | 2006-02-13 | 2008-12-05 | 프라운호퍼 유에스에이, 인코포레이티드 | 인플루엔자 항원, 백신 조성물 및 관련 방법 |
| CN101489588A (zh) * | 2006-05-31 | 2009-07-22 | 恩文塔生物制药公司 | 生物活性的纯化HspE7组合物 |
| US9085638B2 (en) | 2007-03-07 | 2015-07-21 | The Johns Hopkins University | DNA vaccine enhancement with MHC class II activators |
| WO2008124483A1 (en) * | 2007-04-04 | 2008-10-16 | Specigen, Inc. | Protein cage immunotherapeutics |
| WO2008134643A2 (en) * | 2007-04-28 | 2008-11-06 | Fraunhofer Usa, Inc. | Trypanosoma antigens, vaccine compositions, and related methods |
| CA2692933C (en) | 2007-07-11 | 2016-10-18 | Fraunhofer Usa, Inc. | Yersinia pestis antigens, vaccine compositions, and related methods |
| US20110059130A1 (en) * | 2007-08-20 | 2011-03-10 | Fraunhofer Usa, Inc. | Prophylactic and therapeutic influenza vaccines, antigens, compositions and methods |
| US20090117140A1 (en) * | 2007-09-26 | 2009-05-07 | Mayumi Nakagawa | Human papilloma virus dominant CD4 T cell epitopes and uses thereof |
| WO2009094006A2 (en) * | 2007-10-25 | 2009-07-30 | Wake Forest University Health Sciences | Bordetella outer-membrane protein antigens and methods of making and using the same |
| CA2717854C (en) | 2008-03-03 | 2019-02-19 | The University Of Miami | Allogeneic cancer cell-based immunotherapy |
| JP2011515399A (ja) | 2008-03-20 | 2011-05-19 | ユニバーシティー オブ マイアミ | 熱ショックタンパクｇｐ９６ワクチン接種及びそれを用いた方法 |
| US8734803B2 (en) | 2008-09-28 | 2014-05-27 | Ibio Inc. | Humanized neuraminidase antibody and methods of use thereof |
| EP2349275B1 (en) * | 2008-10-31 | 2017-03-08 | Novartis AG | Combination of a phosphatidylinositol-3-kinase (pi3k) inhibitor and a mtor inhibitor. |
| KR101749353B1 (ko) * | 2008-11-28 | 2017-06-20 | 노파르티스 아게 | Ｈｓｐ90 억제제 및 ｍｔｏｒ 억제제를 포함하는 제약 조합물 |
| AU2010230073B2 (en) | 2009-03-23 | 2016-05-26 | Pin Pharma, Inc. | Treatment of cancer with immunostimulatory HIV Tat derivative polypeptides |
| WO2011041391A1 (en) | 2009-09-29 | 2011-04-07 | Fraunhofer Usa, Inc. | Influenza hemagglutinin antibodies, compositions, and related methods |
| US9662510B2 (en) | 2010-07-19 | 2017-05-30 | Emblation Limited | Apparatus and method for the treatment of dermatological diseases or conditions |
| US11963716B2 (en) | 2010-07-19 | 2024-04-23 | Emblation Limited | Apparatus and method for the treatment of dermatological diseases or conditions |
| CA2828443A1 (en) * | 2011-02-23 | 2012-08-30 | University Of Miami | Combined cell based gp96-ig-siv/hiv, recombinant gp120 protein vaccination for protection from siv/hiv |
| US9028884B2 (en) | 2013-08-13 | 2015-05-12 | Preventamedics LLC | Medical delivery devices and methods for applying a barrier composition to a targeted skin surface |
| US9663556B2 (en) | 2013-10-04 | 2017-05-30 | Pin Pharma, Inc. | Treatment of cancers with immunostimulatory HIV tat derivative polypeptides |
| GB2541749B (en) | 2015-08-31 | 2020-12-09 | Emblation Ltd | An interference suppression apparatus and method |
| US11497926B2 (en) | 2016-08-08 | 2022-11-15 | Emblation Limited | Method and apparatus for the treatment, management and/or control of pain |
| EP3600551A1 (en) | 2017-03-28 | 2020-02-05 | Emblation Limited | Stenosis treatment |
| US20230241207A1 (en) * | 2017-04-03 | 2023-08-03 | Neon Therapeutics, Inc. | Protein antigens and uses thereof |
| CN108409866A (zh) * | 2018-01-23 | 2018-08-17 | 合肥瑞城生生物科技有限公司 | 一种用于治疗和预防人乳头瘤病毒感染及相关疾病的多表位组合肽 |
| JP2021535197A (ja) * | 2018-08-06 | 2021-12-16 | ニールセン、バイオサイエンシズ、インコーポレイテッドNielsen Biosciences, Inc. | 疣贅の治療 |
| CN114478712B (zh) * | 2022-03-29 | 2022-09-23 | 深圳吉诺因生物科技有限公司 | Hpv抗原表位及其鉴定方法、应用 |
Family Cites Families (73)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4666847A (en) | 1981-01-16 | 1987-05-19 | Collaborative Research, Inc. | Recombinant DNA means and method |
| DK172882B1 (da) | 1983-02-07 | 1999-09-06 | Rothwell Property Ltd | DNA indeholdende udtrykkelseskontrolregion fra et eukaryot varmechokproteingen, vektor og eukaryot celle indeholdende DNA'e |
| US4797359A (en) | 1983-05-10 | 1989-01-10 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Heat shock regulated production of selected and fused proteins in yeast |
| GB8404280D0 (en) | 1984-02-17 | 1984-03-21 | Stanford J L | Biological preparations |
| IL71683A0 (en) | 1984-04-27 | 1984-09-30 | Yeda Res & Dev | Pharmaceutical compositions for treating arthritis type diseases comprising fractions obtained from mycobacteria |
| US4918164A (en) | 1987-09-10 | 1990-04-17 | Oncogen | Tumor immunotherapy using anti-idiotypic antibodies |
| US4784941A (en) | 1985-04-08 | 1988-11-15 | Genetic Systems Corporation | Expression and diagnostic use of pENV-3 encoded peptides which are immunologically reactive with antibodies to LAV |
| NO870027L (no) | 1986-01-06 | 1987-07-07 | Hoffmann La Roche | Ekspresjon av htlv-iii gag-gen. |
| US4734362A (en) | 1986-02-03 | 1988-03-29 | Cambridge Bioscience Corporation | Process for purifying recombinant proteins, and products thereof |
| US4906742A (en) | 1986-07-31 | 1990-03-06 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Encoding antigens of M. Leprae |
| US6007806A (en) | 1986-08-13 | 1999-12-28 | Transgene S.A. | Expression of a tumor-specific antigen by a recombinant vector virus and use thereof in preventive or curative treatment of the corresponding tumor |
| NL8701163A (nl) | 1986-09-09 | 1988-04-05 | Nederlanden Staat | Gebruik van een peptide voor de bereiding van preparaten voor het verlichten, het behandelen en de diagnose van autoimmuunziekten, in het bijzonder arthritische toestanden, verbindingen die met dit peptide verwant zijn, alsmede farmaceutische en diagnostische preparaten en testkits. |
| AU1548388A (en) | 1987-02-02 | 1988-08-24 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Mycobacterium tuberculosis genes and encoding protein antigens |
| US4952395A (en) | 1987-02-26 | 1990-08-28 | Scripps Clinic And Research Foundation | Mycobacterial recombinants and peptides |
| US5504005A (en) | 1987-03-02 | 1996-04-02 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | Recombinant mycobacterial vaccine |
| US4918166A (en) | 1987-04-10 | 1990-04-17 | Oxford Gene Systems Limited | Particulate hybrid HIV antigens |
| US5256767A (en) | 1987-06-10 | 1993-10-26 | The Immune Response Corporation | Retroviral antigens |
| NL8703107A (nl) | 1987-12-22 | 1989-07-17 | Nederlanden Staat | Polypeptiden en derivaten daarvan, alsmede de toepassing daarvan in farmaceutische en diagnostische preparaten. |
| US5204259A (en) | 1988-05-06 | 1993-04-20 | Pharmacia Genetic Engineering, Inc. | Methods and systems for producing HIV antigens |
| DE68924162T2 (de) | 1988-06-15 | 1996-04-25 | Whitehead Biomedical Inst | Stressproteine und verwendungen dafür. |
| WO1994029459A1 (en) | 1993-06-04 | 1994-12-22 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Stress proteins and uses therefor |
| US5858646A (en) | 1989-02-23 | 1999-01-12 | University Of Ottawa | Modified HIV-pol polypeptide having immunological activity for use as diagnostic reagent |
| US5114844A (en) | 1989-03-14 | 1992-05-19 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Diagnosis and treatment of insulin dependent diabetes mellitus |
| JPH04506297A (ja) | 1989-06-19 | 1992-11-05 | ホワイトヘツド・インスチチユート・フオー・バイオメデイカル・リサーチ | ベクター媒介ゲノム挿入及びｂｃｇにおけるｄｎａの発現 |
| GB8919321D0 (en) | 1989-08-25 | 1989-10-11 | Univ London | Treatment of chronic inflammatory conditions |
| GB9007194D0 (en) | 1990-03-30 | 1990-05-30 | Wellcome Found | Live vaccines |
| US5348945A (en) | 1990-04-06 | 1994-09-20 | Wake Forest University | Method of treatment with hsp70 |
| GB9024320D0 (en) | 1990-11-08 | 1990-12-19 | Univ London | Treatment of uveitis |
| ATE154759T1 (de) | 1990-11-08 | 1997-07-15 | Univ London | Mycobacterium als adjuvans für antigene |
| GB2251186A (en) | 1990-12-04 | 1992-07-01 | Randall Neal Gatz | Polypeptide for use in treatment of autoimmune disease |
| EP0521220A1 (en) | 1991-06-14 | 1993-01-07 | Institut Pasteur | Recombinant immunogenic actinomycetale |
| GB9113809D0 (en) | 1991-06-26 | 1991-08-14 | Cancer Res Campaign Tech | Papillomavirus l2 protein |
| IT1262896B (it) | 1992-03-06 | 1996-07-22 | Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini. | |
| US5580563A (en) | 1992-05-01 | 1996-12-03 | Tam; James P. | Multiple antigen peptide system having adjuvant properties, vaccines prepared therefrom and methods of use thereof |
| GB9211736D0 (en) | 1992-06-03 | 1992-07-15 | Univ Cardiff | Allergic treatment |
| US5736146A (en) | 1992-07-30 | 1998-04-07 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic peptide carriers and vaccines comprising them |
| IL102687A (en) | 1992-07-30 | 1997-06-10 | Yeda Res & Dev | Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them |
| US5404142A (en) | 1993-08-05 | 1995-04-04 | Analog Devices, Incorporated | Data-directed scrambler for multi-bit noise shaping D/A converters |
| JPH09504000A (ja) | 1993-08-11 | 1997-04-22 | ジェナー テクノロジーズ | 前立腺癌ワクチン |
| US5762939A (en) | 1993-09-13 | 1998-06-09 | Mg-Pmc, Llc | Method for producing influenza hemagglutinin multivalent vaccines using baculovirus |
| US5750119A (en) | 1994-01-13 | 1998-05-12 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Immunotherapeutic stress protein-peptide complexes against cancer |
| US5997873A (en) | 1994-01-13 | 1999-12-07 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Method of preparation of heat shock protein 70-peptide complexes |
| US5961979A (en) | 1994-03-16 | 1999-10-05 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Stress protein-peptide complexes as prophylactic and therapeutic vaccines against intracellular pathogens |
| IL109790A0 (en) | 1994-05-25 | 1994-08-26 | Yeda Res & Dev | Peptides used as carriers in immunogenic constructs suitable for development of synthetic vaccines |
| GB9419979D0 (en) | 1994-10-04 | 1994-11-16 | Medeva Holdings Bv | Vaccine compositions |
| AUPN015794A0 (en) | 1994-12-20 | 1995-01-19 | Csl Limited | Variants of human papilloma virus antigens |
| CA2211995A1 (en) | 1995-02-24 | 1996-08-29 | Cantab Pharmaceuticals Research Limited | Polypeptides useful as immunotherapeutic agents and methods of polypeptide preparation |
| CA2229595A1 (en) | 1995-08-18 | 1997-02-27 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Method for treatment of cancer and infectious diseases and compositions useful in same |
| US5985270A (en) | 1995-09-13 | 1999-11-16 | Fordham University | Adoptive immunotherapy using macrophages sensitized with heat shock protein-epitope complexes |
| US5837251A (en) | 1995-09-13 | 1998-11-17 | Fordham University | Compositions and methods using complexes of heat shock proteins and antigenic molecules for the treatment and prevention of neoplastic diseases |
| US5935576A (en) | 1995-09-13 | 1999-08-10 | Fordham University | Compositions and methods for the treatment and prevention of neoplastic diseases using heat shock proteins complexed with exogenous antigens |
| WO1997026910A2 (de) | 1996-01-27 | 1997-07-31 | Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin | Tumorimpfstoff für die immuntherapie von malignen tumoren |
| WO1998004706A1 (en) * | 1996-07-29 | 1998-02-05 | Cantab Pharmaceuticals Research Limited | Polypeptides useful as immunotherapeutic agents and methods of polypeptide preparation |
| US6130087A (en) | 1996-10-07 | 2000-10-10 | Fordham University | Methods for generating cytotoxic T cells in vitro |
| CA2272536A1 (en) | 1996-11-26 | 1998-06-04 | Stressgen Biotechnologies Corp. | Immune responses using compositions containing stress proteins |
| US5830464A (en) | 1997-02-07 | 1998-11-03 | Fordham University | Compositions and methods for the treatment and growth inhibition of cancer using heat shock/stress protein-peptide complexes in combination with adoptive immunotherapy |
| US6017540A (en) | 1997-02-07 | 2000-01-25 | Fordham University | Prevention and treatment of primary and metastatic neoplastic diseases and infectious diseases with heat shock/stress protein-peptide complexes |
| EP1047451A1 (en) | 1997-02-18 | 2000-11-02 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Use of heat shock proteins to deliver moieties into cells |
| ATE327259T1 (de) * | 1997-08-05 | 2006-06-15 | Stressgen Biotechnologies Corp | Immunantwort gegen hpv antigene hervorgerufen von zusammensetzungen die ein hpv antigen und ein stressprotein enthalten oder einem expressionsvektor fähig zur expression dieser proteine |
| US6007821A (en) | 1997-10-16 | 1999-12-28 | Fordham University | Method and compositions for the treatment of autoimmune disease using heat shock proteins |
| US5948646A (en) | 1997-12-11 | 1999-09-07 | Fordham University | Methods for preparation of vaccines against cancer comprising heat shock protein-peptide complexes |
| GB9727262D0 (en) | 1997-12-24 | 1998-02-25 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| CN1248631A (zh) * | 1998-09-24 | 2000-03-29 | 周国庆 | 一种免疫预防和免疫治疗性病和癌症的融合蛋白 |
| US6451316B1 (en) | 1998-10-05 | 2002-09-17 | University Of Conneticut Health Center | Methods for generating antigen-reactive T cells in vitro |
| US6475490B1 (en) | 1998-10-19 | 2002-11-05 | Fordham University | Compositions and methods for promoting tissue repair using heat shock proteins |
| US6497880B1 (en) | 1998-12-08 | 2002-12-24 | Stressgen Biotechnologies Corporation | Heat shock genes and proteins from Neisseria meningitidis, Candida glabrata and Aspergillus fumigatus |
| US6495347B1 (en) | 1999-07-08 | 2002-12-17 | Stressgen Biotechnologies Corporation | Induction of a Th1-like response in vitro |
| WO2001017554A1 (en) | 1999-09-10 | 2001-03-15 | Fordham University | Methods and compositions for the treatment and prevention of graft rejection using heat shock proteins |
| US20010034042A1 (en) | 2000-01-20 | 2001-10-25 | Srivastava Pramod K. | Complexes of peptide-binding fragments of heat shock proteins and their use as immunotherapeutic agents |
| AU2001229597A1 (en) | 2000-01-21 | 2001-07-31 | University Of Connecticut Health Center | Compositions and methods to treat neurodegenerative disorders |
| AU2001227960A1 (en) | 2000-01-21 | 2001-07-31 | University Of Connecticut Health Center | Heat shock/stress protein complexes as vaccines against neurodegenerative disorders |
| AU2001229592A1 (en) | 2000-01-21 | 2001-07-31 | University Of Connecticut Health Center | Vaccines against neurodegenerative disorders |
| PT1296711E (pt) * | 2000-06-26 | 2006-08-31 | Stressgen Biotechnologies Corp | E7 de vph para o tratamento do virus do papiloma humano |
-
2001
- 2001-06-26 PT PT01950461T patent/PT1296711E/pt unknown
- 2001-06-26 WO PCT/US2001/020240 patent/WO2002000242A2/en active IP Right Grant
- 2001-06-26 CN CNB018117724A patent/CN100441223C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-26 PL PL35993001A patent/PL359930A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2001-06-26 KR KR1020027017697A patent/KR100919266B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-06-26 MX MXPA02012858A patent/MXPA02012858A/es active IP Right Grant
- 2001-06-26 DE DE60119734T patent/DE60119734T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-26 SK SK1836-2002A patent/SK18362002A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2001-06-26 CA CA002413543A patent/CA2413543A1/en not_active Abandoned
- 2001-06-26 DK DK01950461T patent/DK1296711T3/da active
- 2001-06-26 IL IL15347401A patent/IL153474A0/xx unknown
- 2001-06-26 EE EEP200200709A patent/EE200200709A/xx unknown
- 2001-06-26 NZ NZ523408A patent/NZ523408A/en unknown
- 2001-06-26 JP JP2002505023A patent/JP2004512264A/ja not_active Withdrawn
- 2001-06-26 AU AU2001271449A patent/AU2001271449B2/en not_active Ceased
- 2001-06-26 RU RU2003101965/14A patent/RU2282461C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-06-26 AT AT01950461T patent/ATE326236T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-06-26 CZ CZ20024154A patent/CZ20024154A3/cs unknown
- 2001-06-26 AU AU7144901A patent/AU7144901A/xx active Pending
- 2001-06-26 KR KR1020087018500A patent/KR20080075560A/ko not_active Application Discontinuation
- 2001-06-26 BR BR0111956-7A patent/BR0111956A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-06-26 US US09/891,823 patent/US20020110566A1/en not_active Abandoned
- 2001-06-26 ES ES01950461T patent/ES2263637T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-26 HU HU0301308A patent/HUP0301308A3/hu unknown
- 2001-06-26 EP EP01950461A patent/EP1296711B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-12-16 NO NO20026044A patent/NO20026044L/no not_active Application Discontinuation
- 2002-12-17 ZA ZA200210211A patent/ZA200210211B/en unknown
- 2002-12-19 HR HR20021015A patent/HRP20021015A2/hr not_active Application Discontinuation
-
2003
- 2003-02-13 US US10/365,908 patent/US6797491B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2004
- 2004-06-18 US US10/871,138 patent/US7211411B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2006
- 2006-08-03 CY CY20061101090T patent/CY1105389T1/el unknown
- 2006-08-09 AU AU2006203436A patent/AU2006203436A1/en not_active Abandoned
-
2007
- 2007-04-26 US US11/796,144 patent/US7754449B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2001271449B2 (en) | Human papilloma virus treatment | |
| AU2001271449A1 (en) | Human papilloma virus treatment | |
| KR100843109B1 (ko) | 사람 유두종 바이러스 항원과 스트레스 단백질을 포함하는 융합 단백질을 포함하는 조성물에 의해 유도된 사람 유두종 바이러스 항원에 대한 면역 반응 | |
| EP1336621B1 (en) | Immune responses against HPV antigens elicited by compositions comprising an HPV antigen and a stress protein or an expression vector capable of expression of these proteins | |
| AU779770B2 (en) | Immune responses against HPV antigens elicited by compositions comprising an HPV antigen and a stress protein or an expression vector capable of expression of these proteins | |
| AU2005201826B2 (en) | Immune responses against HPV antigens elicited by compositions comprising an HPV antigen and a stress protein or an expression vector capable of expression of these proteins |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FC9A | Refused patent application |