SK145298A3 - Antivirally active heterocyclic azahexane derivatives, process for their preparation, pharmaceutical composition containing same and their use - Google Patents

Antivirally active heterocyclic azahexane derivatives, process for their preparation, pharmaceutical composition containing same and their use Download PDF

Info

Publication number
SK145298A3
SK145298A3 SK1452-98A SK145298A SK145298A3 SK 145298 A3 SK145298 A3 SK 145298A3 SK 145298 A SK145298 A SK 145298A SK 145298 A3 SK145298 A3 SK 145298A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
group
phenyl
formula
amino
methoxycarbonyl
Prior art date
Application number
SK1452-98A
Other languages
English (en)
Other versions
SK285048B6 (sk
Inventor
Alexander Fassler
Guido Bold
Hans-Georg Capraro
Marc Lang
Satish Chandra Khanna
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27171723&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SK145298(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of SK145298A3 publication Critical patent/SK145298A3/sk
Publication of SK285048B6 publication Critical patent/SK285048B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C07D213/42—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms having hetero atoms attached to the substituent nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C281/00—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group
    • C07C281/02—Compounds containing any of the groups, e.g. carbazates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C281/00—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group
    • C07C281/02—Compounds containing any of the groups, e.g. carbazates
    • C07C281/04—Compounds containing any of the groups, e.g. carbazates the other nitrogen atom being further doubly-bound to a carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/28—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/20—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by nitrogen atoms
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Heterocyklické azahexánové deriváty, spôsob ich prípravy, farmaceutický prostriedok, ktorý ich obsahuje a ich použitie
Oblasť techniky
Predložený vynález opisuje heterocyklické azahexánové deriváty, ktoré sa môžu využiť ako substrátové izostéry retrovírusovej aspartátproteázy, ich soli, spôsob prípravy týchto zlúčenín a ich solí, farmaceutických prostriedkov, ktoré obsahujú tieto zlúčeniny a ich soli a použitie týchto zlúčenín a ich solí (samotných alebo v kombinácii s inými retrovírusovo aktívnymi zlúčeninami) pri liečení alebo diagnostikovaní človeka alebo živočíchov alebo pri príprave farmaceutických prostriedkov.
Doterajší stav techniky
Podľa odhadov WHO existuje asi viac ako 20 miliónov ľudí nakazených ľudským vírusom nedostatku imunity, HIV-1 alebo HIV-2. Iba z niekoľkými výnimkami pri nakazených jedincoch ochorenie vyústi, po úvodných štádiách, ako je ARDS, do viditeľného ochorenia imunitného systému známeho ako získaný syndróm zlyhania imunity alebo AIDS. Vo väčšine prípadov ochorenie skôr alebo neskôr vedie k úmrtiu nakazeného pacienta.
Doteraz sa liečba retrovírusových ochorení, ako je AIDS, skladala hlavne z použitia inhibítorov reverznej transkriptázy, enzýmu účinného pri zmene retrovírusovej RNA na DNA, ako je 3'-azido-3'-deoxytymidín (AZT) alebo dideoxyinozín (DDI) a tiež trisodná soľ fosfonoformiátu, amónium-21-tungstenato-9-antimonátu, l-S-D-ribofuranoxyl-l,2,4-triazol-3-karboxamid a dideoxycytidín a tiež adriamycin. Uskutočnili sa pokusy zaviesť do tela, napríklad vo forme rekombinantnej molekuly alebo fragmentu molekuly, receptor T4-buniek, ktorý je prítomný v určitých bunkách ochranného systému človeka a je zodpovedný za pripevnenie a zavedenie nákazlivých častíc vírusu do buniek a teda za ich nákazu. Výsledkom je, že sa väzbové miesta pre vírus blokujú tak, že virióny už nie sú schopné viazač sa do buniek. Tiež sa v niektorých ďalších prípadoch používali zlúčeniny, ktoré pôsobia preventívne proti preniknutiu vírusu bunkovou membránou, ako napríklad polymanoacetáty.
Prvý inhibítor tzv. retrovírusovej aspartátproteázy, ktorý sa osvedčil v boji s nákazou, bol saquinavir, (n-terc-butyldekahydro-2- [ (R) -hydroxy-4-fenyl-3 (S) - [Ν-2-chinolylkarbonyl-L-aspartyl] amino] butyl) - (4aS, 8aS) -izochinolín-3 (S) -karboxamid (Ro 31-8959) ) . Ďalej nasledovali indinavir (Merck) a ritonavir (Abbott).
Vyvíjalo sa tiež vel'a ďalších inhibítorov retrovírusove j aspartátproteázy, enzýmu, ktorého funkcia je charakterizovaná nasledovne:
Vo vírusoch AIDS, HIV-1 a HIV-2 a iných retrovírusoch, napríklad zodpovedajúcich vírusoch mačiek (FIV) a opíc (SIV), je proteolytická maturácia, napríklad jadrových proteínov vírusu vyvolaná aspartátproteázou, ako je HIV proteáza. Bez tejto proteolytickej maturácie nemôžu vzniknúť infekčné častice vírusu. Vzhľadom ku kľúčovej úlohe aspartátproteáz, ako sú HIV-1 alebo HIV-2 proteázy, pri maturácii vírusov a na základe experimentálnych výsledkov, napríklad na infikovaných bunkových kultúrach, je pravdepodobné, že účinné potlačenie kroku maturácie vyvolané touto proteázou bude potláčať zhromažďovanie maturovaných viriónov in vivo. Inhibítory proteázy je preto možné použiť terapeuticky.
Cieľom predloženého vynálezu je poskytnúť, nový typ zlúčeniny, ktorá je vybavená najmä vysokým stupňom inhibičnej aktivity proti replikácii vírusu v bunkách, vysokou antivírusovou aktivitou proti viacerým bunkovým kmeňom, vrátane tých, ktoré sú rezistentné k známym zlúčeninám, ako je saquinavir, ritonavir a indinavir, a najmä výhodnými farmakologickými vlastnosťami, napríklad dobrou farmakokinetikou, ako je vysoká biologická využiteľnosť a vysoká hladina v krvi a/alebo vysoká selektivita.
Podstata vynálezu
Azahexánové deriváty ceniny všeobecného vzorca podľa
I predloženého vynálezu sú zlú-
NH
CH \6 (D kde
R1 je nižšia alkoxykarbonylová skupina,
R2 je sekundárna alebo terciárna nižšia alkylová skupina alebo alkyltioalkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny,
R3 je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jedným alebo viacerými alkoxylovými skupinami, alebo cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka,
R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, kedy každá táto skupina je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklickou skupinou, ktorá je viazaná pomocou kruhového atómu uhlíka, má 5 až 8 kruhových atómov, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina (-S0-) a sulfonylová skupina (-S02-) a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou, v ktorej je alkylová skupina nižšia,
R5 má nezávisle na R2 jeden z významov uvedených pre R2, a
R6 je nezávisle na R1 nižšia alkoxykarbonylová skupina, alebo ich soli s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca soľ.
Zlúčeniny majú neočakávane dobré a prekvapujúco pozitívne farmakologické vlastnosti, ktoré sú podrobne opísané ďalej, a je možné ich relatívne ľahko pripraviť.
Pokiaľ nie je uvedené inak, používané všeobecné termíny majú výhodne v rozsahu tohto opisu nasledujúce významy:
Termín nižší11 znamená zvyšok, ktorý obsahuje do a vrátane maximálne 7 atómov uhlíka, výhodne do a vrátane maximálne 4 atómy uhlíka, tieto zvyšky sú nerozvetvené alebo raz alebo viackrát rozvetvené.
Nižšia alkylová skupina a alkylová skupina obsahujúca 1 až 4 atómy uhlíka je najmä terc-butylová skupina, sek-butylová skupina, izobutylová skupina, n-butylová skupina, izopropylová skupina, n-propylová skupina, etylová skupina a metylová skupina .
Všetky odkazy na zlúčeniny, soli a podobne v množnom čísle tiež zahŕňajú zlúčeninu, soľ a podobne.
Akékoľvek prítomné asymetrické uhlíkové atómy, napríklad atómy uhlíka viazané k zvyškom R a R , môžu byť v konfigurácii (R)-, (S)- alebo (R,S)-, výhodne v konfigurácii (R)- alebo (S)-, konfigurácia (S)- je výhodná najmä v prípade atómu uhlíka, ktorý nesie zvyšky R a/alebo R v zlúčeninách všeobecného vzorca I. Uvedené zlúčeniny môžu byť vo forme izomérnych zmesí alebo vo forme čistých izomérov, výhodne vo forme enantiometricky čistých diastereomérov.
Nižšia alkoxykarbonylová skupina je výhodne alkoxykarbonylová skupina obsahujúca 1 až 4 atómy uhlíka, kde alkylový zvyšok môže byť rozvetvený alebo nerozvetvený a je to najmä etoxykarbonylová skupina alebo metoxykarbonylová skupina.
Sekundárna alebo terciárna nižšia alkylová skupina je najmä sek-butylová skupina, fcerc-butylová skupina alebo izopropylová skupina.
Alkyltioalkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny je najmä metyltiometylová skupina.
Fenylová skupina, ktorá je nesubstituované alebo substituovaná jednou alebo viacerými nižšími alkoxylovými skupinami je najmä fenylová skupina, ktorá je nesubstituované alebo substituovaná jednou až troma nižšími alkoxylovými skupinami, najmä metoxylovou skupinou. V prípade, že sú prítomné tri metoxylovš substituenty, sú najmä v polohách 2,3,4 fenylového kruhu a v prípade, že je prítomný jeden metoxylový substituent, je tento substituent najmä v polohách 2-, 3- alebo zvlášť v polohe 4-. Výhodná je nesubstituovaná fenylová skupina.
Cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka je najmä cyklopentylová skupina alebo zvlášť cyklohexylová skupina .
O
Ako R fenylová skupina je výhodná cyklohexylová skupina.
Pri fenylovej alebo cyklohexylovej skupine substituovanej v polohe 4 nenasýtenou heterocyklickou skupinou, ktorá je viazaná cez uhlíkový atóm v kruhu, má 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina (-S-) a sulfonylová skupina (-SC^-) a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, majú heterocyklylové zvyšky najmä nasledujúce významy:
Nenasýtená heterocyklylová skupina, ktorá je viazaná cez uhlíkový atóm kruhu, má 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina (-S-) a sulfonylová skupina (-S02-) a je nesubstituované alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou, najmä metylovou skupinou alebo fenyl- nižšou alkylovou skupinou, kde nižšia alkylová skupina je nerozvetvená alebo rozvetvená, najmä 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou, je cez uhlíkový atóm kruhu viazaná najmä jedna z nasledujúcich skupín: tienylová skupina (=tiofenylová skupina) ; oxazolylová skupina; tiazolylová skupina; imidazolylová skupina; 1,4-tiazinylová skupina; triazolylová skupina, ktorá je nesubstituované alebo, najmä, substituovaná 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou, ako je 1-, 2- alebo 4-(metyl alebo terc-butyl)triazol-3-ylová skupina; tetrazolylová skupina, ktorá je nesubstituované alebo, najmä substituovaná 1-metyl-l-f enyletylovou skupinou alebo výhodne nižšou alkylovou skupinou, ako napríklad terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou, ako je 2H-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná 1-metyl-1-fenyletylovou skupinou alebo výhodne nižšou alkylovou skupinou, ako terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou, alebo lH-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou; pyridinylová skupina; pyrazinylová skupina; a pyrimidinylová skupina; zvlášč 2- alebo 3-tienylová skupina (=tiofen-2-ylová skupina alebo tiofen-3-ylová skupina); tiazol-5-ylová skupina; tiazol-2-ylová skupina; 2H-tetrazol-5-ylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo, zvlášú substituovaná v polohe 2 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou; lH-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná v polohe 1 metylovou skupinou; pyridin-2-ylová skupina; pyridin-3-ylová skupina; pyridin-4-ylová skupina; alebo pyrazin-2-ylová skupina.
R4 je výhodne fenylová skupina substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklickou skupinou, ktorá je viazaná pomocou kruhového atómu uhlíka, má 5 až 8 atómov kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina (-S0-) a sulfonylová skupina (-SC^-) a je nesubstituovanú alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, kde heterocyklylová skupina má výhodne uvedený význam ako výhodný.
Zlúčeniny vzorec la všeobecného vzorca I majú výhodne všeobecný
kde zvyšky sú definované vyššie.
Soli sú najmä farmaceutický prijateľnými soľami zlúčenín všeobecného vzorca I.
Soli sa pripravia napríklad zo zlúčenín všeobecného vzorca I, ktoré majú zásaditú R4-CH2- skupinu nesúcu atóm dusíka, ako kyslé adičné soli, výhodne s anorganickými kyselinami, napríklad s hydrohalogénkyselinami, ako je kyselina chlorovodíková, kyselinou sírovou alebo kyselinou fosforečnou, alebo so silnými organickými kyselinami, ako sú sulfónové kyseliny, sulfokyseliny alebo fosforečné kyseliny alebo N-substituované sulfámové kyseliny (výhodne s pKa < 1) . Iné soli sa môžu pripravil ak sa v skupine R^ vyskytuje zásaditý heterocyklický zvyšok, napríklad pyridylová skupina. Tieto soli zahŕňajú najmä kyslé adičné soli s organickými alebo anorganickými kyselinami, najmä s farmaceutický prijateľnými kyselinami. Vhodnými anorganickými soľami sú napríklad hydrohalogénkyseliny ako je kyselina chlorovodíková, kyselina sírová a kyselina fosforečná. Vhodnými organickými kyselinami sú napríklad karboxylové kyseliny, fosfonová kyseliny,sulfónové kyseliny alebo sulfámové kyseliny, napríklad kyselina octová, kyselina propiónová, kyselina oktánová, kyselina dekánová, kyselina dodekánová, kyselina glykolová, kyselina mliečna, kyselina 2-hydroxymaslová, glukónová kyselina, glukózmonokarboxylová kyselina, kyselina fumarová, kyselina jantárová, kyselina adipová, kyselina pimelová, kyselina korková, kyselina azelaová, kyselina jablčná, kyselina vínna, kyselina citrónová, kyselina glukarová, kyselina galaktárová, aminokyseliny ako je kyselina glutámová, kyselina asparágová, N-metylglycín, acetylaminokyseliny, N-acetylasparagín alebo N-acetylcysteín, kyselina pyrohroznová, kyselina acetooctová, fosfoserín, 2- alebo 3Tglycerofosforečné kyseliny, glukóz-6-fosforečná kyselina, glukóz-1-fosforečná kyselina, fruktóz-1,β-bisfosforečná kyselina, maleínová kyselina, hydroxymaleínová kyselina, metylmaleínová kyselina, cyklohexánkarboxylová kyselina, adamantánkarboxylová kyselina, benzoová kyselina, salicylová kyselina, 1- alebo 3-hydroxynaftyl-2-karboxylová kyselina, 3,4,5-trimetoxybenzoová kyselina, 2-fenoxybenzoová kyselina, 2-acetoxybenzoová kyselina, 4-aminosalicylová kyselina, ftalová kyselina, fenyloctová kyselina, mandľová kyselina, škoricová kyselina, glukurónová kyselina, galakturónová kyselina, metánsulfónová kyselina alebo etánsulfónová kyselina, 2-hydroxyetánsulfónová kyselina, etán-1,2-disulfónová kyselina, benzénsulfónová kyselina, 2-naftalénsulfónová kyselina, 1,5-naftaléndisulfónová kyselina, 2-, 3- alebo 4-metylbenzénsulfónová kyselina, metylsírová kyselina, etylsírová kyselina, dodecylová kyselina, N-cyklohexylsulfámová kyselina, Ν-metyl-, N-etyl- alebo N-propylsulfánová kyselina, alebo iné organické protónové kyseliny ako je kyselina askorbová.
Pokial sú prítomné záporne nabité skupiny, ako je tetrazolylová skupina v R4, soli sa môžu tiež pripraviť so zásadami, napríklad soli kovov alebo amóniove soli, ako sú soli alkalických kovov alebo soli kovov alkalických zemín, napríklad soli sodíka, soli draslíka, soli horčíka alebo soli vápnika alebo amónne soli s amoniakom alebo vhodnými organickými amínmi, ako sú terciárne monoamíny, napríklad trietylamín alebo tri-(2-hydroxyetyl)amín, alebo heterocyklické zásady napríklad N-etylpiperidín alebo N,N'-dimetylpiperazín.
Na účely izolácie alebo čistenia je tiež možné použiť farmaceutický nevhodné soli, napríklad pikráty a perchloráty. Terapeuticky sa využívajú iba farmaceutický prijateľné soli voľných zlúčenín (prípadne vo forme farmaceutických prostriedkov) a sú preto výhodné.
Vzhľadom na blízky vzťah medzi novými zlúčeninami vo voľnej forme a vo forme svojich solí, vrátane solí, ktoré môžu byť použité ako medziprodukty, napríklad pri čistení nových zlúčenín alebo pri ich identifikácii, so všetkými odkazmi na voľné zlúčeniny uvedené vyššie a nižšie sa rozumejú tiež zodpovedajúce soli, ktoré sú vhodné a prospešné.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I majú cenné farmakologické vlastnosti. Majú retrovírusovú aktivitu najmä proti vírusom HIV-1 a HIV-2, ktoré spôsobujú AIDS, a môžu prekvapujúco vykazovať kombinované účinky v spojení s inými zlúčeninami, ktoré sú aktívne proti retrovírusovej aspartátproteáze. Zlúčeniny všeobecného vzorca I sú inhibítormi retrovírusovej aspartátproteázy, najmä inhibítormi aspartátproteázy HIV-1 a tiež HIV-2 a sú preto vhodné na liečbu retrovírusových ochorení, ako je AIDS alebo štádiá, ktoré jej predchádzajú (napríklad ARDS). Zlúčeniny všeobecného vzorca I tiež vykazujú aktivitu proti zodpovedajúcim živočíšnym retrovírusom ako je SIV (u opíc) alebo FIV (u mačiek).
Zlúčeniny všeobecného vzorca I prekvapujúco vykazujú najmä výhodné a dôležité farmakologické vlastnosti, napríklad velmi vysokú antivírusovú aktivitu pri testovaných bunkách proti rôznym bunkovým kmeňom, vrátane tých, ktoré sú odolné proti ostatným inhibítorom proteáz, napríklad pri bunkách MT2, dobré farmakokinetické vlastnosti, ako je biologická využiteľnosť, vysoká selektivita a najmä vysoká hladina v krvi (dokonca v prípade orálneho podávania).
Inhibičné pôsobenie zlúčenín všeobecného vzorca I na proteolytickú aktivitu HIV-1 proteázy môže byť demonštrované napríklad pomocou známych postupov (pozri A. D. Richards a kol. J. Biol. Chem. 265 (14), 7733-7736 (1990). V tejto metóde sa inhibícia pôsobenia HlV-proteázy (príprava pozri S. Billich a kol., J. Biol. Chem. 263 (34), 17905-17908 (1990)) meria v prítomnosti ikozapeptidu RRSNQVSQNYPIVQNIQGRR (syntetický substrát HIV-l-proteázy, pripravený pomocou syntézy peptidov podľa známych postupov (pozri J. Schneider a kol., Celí 54, 363-368 (1988)), ktorý obsahuje ako analóg substrátu jedno zo štiepiacich miest gag prekurzora proteínu (prírodný substrát HIV-1 proteázy). Tento substrát a produkty jeho štiepenia sa analyzujú pomocou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie (HPLC).
Testovaná zlúčenina sa rozpustí v dimetylsulfoxide. Enzymatický test sa uskutočňuje pomocou pridania vhodného roztoku inhibítora v 20 mM β-morfolínetánsulfónovej kyseliny (MES) ako pufra s pH 6,0 k testovanej zmesi. Zmes obsahuje vyššie uvedený ikozapeptid (122 μΜ) v 20 mM MES pufre s pH 6,0. Použije sa 100 μΐ na testovanú dávku. Reakcia sa naštartuje pridaním 10 ml roztoku HIV-1 proteázy a zastaví sa po 1 hodine inkubácie pri 37 °C po pridaní 10 μΐ 0,3 M kyseliny chloristej. Po odstredení vzorky pri 10 000 x g počas 5 minút sa 20 μΐ vzniknutého supernatantu nanesie na 125 x 4,6 mm NucleosilR Cl8-5m-HPLC kolónu (reverzná fáza dodávaná od firmy Macherey & Nagel, Duren, FRG, založená na silikagéli, na ktorý sa naviažu alkylové reťazce obsahujúce 18 atómov uhlíka). Nerozštiepený ikozapeptid a produkt jeho štiepenia sa z kolóny vymývajú pomocou nasledujúceho gradientu: 100 % eluent 1 —> 50 % eluentu l + 50 % eluentu 2 (eluent 1: 10 % acetonitril,90 % voda, 0, 1 % kyseliny trifluóroctovej (TFA); eluent 2: 75 % acetonitril, 25 % voda, 0,08 % TFA) 15 minút, pri prietoku 1 ml/min. . Kvantifikácia vymytých peptidových fragmentov sa uskutočňuje meraním výšky píkov produktu štiepenia pri 215 nm.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I vykazujú inhibičné pôsobenie v nanomolárnom množstve; výhodne vykazujú hodnoty IC5Q (IC50 znamená koncentráciu, pri ktorej dochádza k 50 % zníženiu aktivity HlV-proteázy v porovnaní s kontrolným pokusom bez inhibície) približne pri 2 x 10 až 5 x 10 J M, výhodne 5 x 108 až 5 x 10’9 M.
Alternatívny spôsob (pozri Matayoshi a kol., Science 247, 954-958 (1990), tu upravené) určenia inhibičného pôsobenia proti HIV-1 proteáze je možné v skratke opísať, nasledujúcim spôsobom: proteáza (čistenie: pozri Leuthardt a kol., FEBS Lett. 326, 275-80 (1993) sa inkubuje pri laboratórnej teplote v 100 μΐ testovaného pufra (20 mM MES pH 6,0; 200 mM chlorid sodný; 1 mM ditiotreitol; 0,01 % polyetylénglykol (stredná molárna hmotnosť 6000 až 8000 da) s 10 μΜ fluorogénneho substrátu SC4400 (4-(4-dimetylaminofenylazo)benzoyl-/-aminobutyryl-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gln-EDANS (EDANS = 5-(2-aminoetylamino)-1-naftalénsulfónová kyselina); Neosystem Laboratoire, France). Reakcia sa ukončí pridaním 900 μΐ 0,03 M kyseliny chloristej . Aktivita HIV-l-proteázy sa určí meraním zvýšenia fluorescencie pri \ex = 336, ^em = 485 nm. Hodnoty IC^q zlúčenín všeobecného vzorca I sa určia ako koncentrácie zlúčeniny, ktorá je potrebná na inhibíciu aktivity proteázy pri teste z 50 %. Číselné hodnoty sa získajú z počítačovo získaného grafu pre dáta týkajúce sa najmenej 5 koncentrácií zlúčeniny všeobecného vzorca I pri troch určeniach každej koncentrácie.
Pomocou ďalšieho testu sa môže ukázať, že zlúčeniny všeobecného vzorca I chránia bunky normálne infikované HIV z takej infekcie alebo aspoň túto infekciu spomaľujú. Pri tomto teste sa použijú MT-2 bunky infikované HIV-1(MN. MT-2 bunky sa transformujú pomocou HTLV-1 (vírus spôsobujúci leukémiu) a pokračuje sa v spracovávaní; bunky sú preto citlivé najmä na cytopatogénne pôsobenie HIV. MT-2 bunky je možné získať od AIDS Research and Reference Reagent Program, Division of AIDS, NIAID, NIH od Dr. Douglas Richman (pozri J. Biol. Chem. 263, 5870-5875 (1988) a tiež Science 229, 563-566 (1985)). MT-2 bunky sa kultivujú v RPMI 1640 médiu (Gibco, Škótsko; RPMI obsahuje zmes aminokyselín bez glutamínu) doplnenom 10 % teplom deaktivovaným fetálnym sérom teliat, glutamínom a štandardnými antibiotikami. Vo všetkých prípadoch sú bunky, a tiež zásobný roztok vírusu použité na infikáciu (HIV-l/MN), bez mykoplazmy. Zásobný roztok vírusu sa pripraví ako supernatant bunkovej kultúry trvalé infikovaného bunkového kmeňa H9/HIV-1/MN, ktorý je možné získaú od AIDS Research and Reference Program, Division of AIDS, NIAID, NIH od Dr. Róbert Gallo (pozri tiež Science 224, 500-503 (1984) a Science 226, 1165-1170 (1984)). Titer zásobného roztoku HIV-1(MN vírusu (určený titráciou na MT-2-bunky) je 4,2 x 105 TCID50/ml (TCID50 = infekčná dávka tkanivovej kultúry = dávka, ktorá infikuje 50 % buniek MT-2). Aby sa odmeralo inhibičné pôsobenie zlúčenín všeobecného vzorca I na infekciu, pridá sa 50 μΐ testovanej zlúčeniny v kultivačnom médiu a 2800 TCID50 HIV-l/MN v 100 μΐ kultivačného média k 2 x 104 MT-2 buniek v exponenciálnom štádiu rastu, ktoré sa umiestnili v 50 μΐ kultivačného média do 96 jamkovej mikrotitračnej dosky (s guľatým dnom). Po 4 dňoch inkubácie (37 °C, % oxid uhličitý) sa z každej jamky odobrala 10 μΐ vzorka supernatantu, previedla sa do ďalšej 96 jamkovej mikrotitračnej dosky a (ak to bolo potrebné) skladovala sa pri -20 °C. Aby sa odmerala aktivita reverznej transkriptázy spojená s vírusom, ku každej vzorke sa pridalo 30 μΐ zmesi reverznej transkriptázy (RT). Zmes reverznej transkriptázy obsahovala 50 mM Tris(a, oí, α-tris (hydroxymetyl) -metylamín, veľmi čistej, Merck, Nemecko) pH 7,8; 75 mM chloridu draselného, 2 mM ditiotreitolu, 5 mM chloridu horečnatého; 0, 1 % Nonidet P-40 (detergent; Sigma, Švajčiarsko), 0,8 mM EDTA, 10 μ9/πι1 Poly-A (Pharmacia, Uppsala, Švédsko) a 0,16 μg/ml oligo (T) (=pdT(12-18), Pharmacia,Uppsala, Švédsko) ako základný templát - ak je to potrebné, zmes sa prefiltruje cez 0, 45 mm filter Acrodisk (Gelman Sciences Inc., Ann Arbor, USA). Skladuje sa pri -20 °C. Pred testom sa 0,1 % (objem/objem) [a-32P]dTTP pridá k alikvotným dielom roztoku a tak sa stanoví rádioaktivita 10 μα/ml.
Po zmiešaní sa doska inkubuje 2 hodiny pri 37 °C. 5 μΐ reakčnej zmesi sa prevedie na DE81 papier (Whatman, jeden filter na jamku). Suché filtre sa premývajú trikrát 5 minút 300 mM chlorid sodný/25 mM citrát trisodný a potom raz etano13 lom a znova sa sušia vzduchom. Rádioaktivita filtrov sa meria v Matrix Packard 96 jamkovom počítadle (Packard, Zurich, Švajčiarsko) . Vypočítajú sa hodnoty ED9Q a definujú sa ako koncentrácie testovanej zlúčeniny, ktorá zníži RT aktivitu z 90 % v porovnaní s kontrolným testom bez zlúčeniny.
Výhodné zlúčeniny všeobecného vzorca I vykazujú EDgg, to . -7 w je 90 % inhibíciu replikácie vírusu, pri koncentrácii 10 az 10”9 M, zvlášť 5 x 109 až 109 M.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I sú vhodné na veľmi účinné bránenie replikácie HIV-1 v bunkových kultúrach.
Aby sa určila farmakokinetiká, zlúčeniny všeobecného vzorca I sa rozpustia v dimetylsulfoxide (DMSO) pri koncetrácii 240 mg/ml. Roztoky ktoré vznikli sa zriedia 1:20 (objem/objem) 20 % (hmotnosť/objem) vodným roztokom hydroxypropyl-S-cyklodextr£nu a získa sa tak koncentrácia príslušnej testovanej zlúčeniny 12 mg/ml. Na vzniknutý roztok sa krátko pôsobí ultrazvukom a orálne sa podáva samiciam BALB/c myší (Bomholtgarde, Kodaň, Dánsko) pomocou rúrky na umelú výživu v dávke 120 mg/kg. V určených časoch po podávaní (napríklad 30, 60, 90, 120 minút) sa myši usmrtia a plazma sa skladuje v heparinizovaných skúmavkách. Krv sa odstredí (12 000 x g, minút) a plazma sa vyberie. Z plazmy sa odstránia proteíny pomocou pridania ekvivalentného objemu acetonitrilu. Zmes sa premieša s použitím vírivkového miešadla a nechá sa stáť pri laboratórnej teplote 20 až 30 minút. Zrazenina sa peletuje odstredením (12 000 x g, 5 minút) a koncentrácia testovanej zlúčeniny sa určí pomocou vysokovýkonnej kvapalinovej chromatografie na reverznú fázu (HPLC).
HPLC analýza vzoriek získaných podľa spôsobu opísaného vyššie sa uskutočňuje na 125 x 4,6 mm NucleosilR C18kolóne (materiál pre reverznú fázu dodáva Macherey a Nagel, Duren, Nemecko, je založený na silikagéli, ktorý je derivátizovaný uhlíkovými zvyškami obsahujúcimi 18 atómov uhlíka), s použitím 2 cm dlhej prípravnej kolóny z rovnakého materiálu. Test sa uskutočňuje s nasledujúcim lineárnym gradientom acetonitril/ /voda (v každom prípade s prítomnosťou 0,05 % kyseliny trifluóroctovej) : 20 % acetonitril až 100 % acetonitril 20 minút; potom 5 minút 100 % acetonitril; potom znova pri pôvodných podmienkach za 1 minútu a 4 minúty dostaví znova rovnováha. Prietok je 1 ml/minúta. Pri týchto podmienkach zlúčeniny všeobecného vzorca I z príkladu 1, napríklad, majú retenčný čas asi 15,5 minúty a medzu detegovateľnosti 0,1 až 0,2 μΜ. Testované zlúčeniny sa detegujú pomocou merania UV absorpcie pri 255 nm. Piky sa identifikujú pomocou retenčného času a UV spektra medzi 205 až 400 nm. Koncentrácia sa určí pomocou metódy vonkajšieho štandardu; na určenie koncentrácie sa získaná výška píkov porovná so štandardnými krivkami. Štandardné .krivky sa získajú pomocou analogickej HPLC analýzy plazmy myší, ktorá obsahuje známe koncentrácie príslušnej testovanej zlúčeniny a ktorá sa spracovala podľa opísaného spôsobu.
Pri týchto experimentoch zlúčeniny všeobecného vzorca I produkujú koncentráciu v plazme ďaleko nad ΕΏθθ, ktorý sa určil pri bunkových experimentoch, napríklad viac ako 8 000 krát vyšší ako ED^q po 30 minútach a viac ako 10 500 krát vyšší ako ED^q po 90 minútach, výhodne je koncentrácia v plazme 0,1 μΜ až 25 μΜ, najmä 1 μτη až 25 μτα., 30 minút po orálnom podaní a koncentrácia v plazme 0,5 μΜ až 35 μΜ, 1 μΜ až 35 μΜ, 90 minút po orálnom podaní.
Analogicky u psov sa množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I v krvi, napríklad cieľovej zlúčeniny z príkladu 46, môže merať s použitím prostriedkov podľa príkladov 63 alebo 64, kedy sa použije napríklad 92 až 100 mg/kg zlúčeniny, ktorá sa podáva pomocou rúrky do žalúdka, potom sa množstvo v krvi môže merač napríklad 1, 2, 3, 4, 6, 8a 24 hodín po podávaní, V tomto prípade sa potom nájdu v krvi množstvá v rozsahu mikromólov.
Najmä kombinácia vysokej biologickej využiteľnosti (vysokého množstva v krvi), ktorá je samotná prekvapujúca, a neočakávane dobrého ED^q pri pokusoch s bunkami, sú zlúčeniny podľa predloženého vynálezu cenné neočakávaným spôsobom. Aktivita proti inhibítorom retrovírusovej aspartátproteázy, ku ktorým sa už vyvinula rezistencia je tiež možná a je ďalšou dôležitou výhodou zlúčenín podľa predloženého vynálezu.
Aktivita môže byť demonštrovaná napríklad nasledujúcim testom:
HIV proteázy rezistentné k rôznym inhibítorom sa klonovali nasledujúcim spôsobom:
Pomocou PCR podporenej mutagenézy a klonovania sa mutanti HIV proteázy, ktoré sú založené na infekčnom klone pNL4-3 (voľne dostupné od NIH AIDS reference and reagent program, pôvodný odkaz je A. Adachi a kol., J. Virol. (1986) 59,
284-291, ale môže to byt aj akýkoľvek iný kloň HIV, alebo dokonca klinický materiál s podmienkou, že je zaistená porovnáteľnosť) . Títo inak izogénni mutanti obsahujú len tie zmeny, ktoré sa opísali v publikáciách týkajúcich sa rezistencie vírusov k rôznym inhibítorom proteáz. Klonovanými fragmentárni je, napríklad, iba 500 základným párov na dĺžku, všetky zostávajúce sú nezmenené. Použitím mutácie vždy na rovnaký kloň je zaistená priama porovnateľnosť, čo by nebolo zaistené v prípade priameho porovnania klinických vzoriek alebo rôznych HIV klonov. Pri prechodnom transfekčnom teste s DNA u ľudských T4 pozitívnych buniek (HeLaT4), vzniknuté provírusy tiež demonštrujú výskyt zníženej inhibičnej aktivity v porovnaní s prírodným typom vírusu, čo je zvýšená rezistencia. Tento systém sa použil ako prechodný transfekčný systém s DNA pre testy:
1) s cieľom identifikovať možnú skríženú rezistenciu variantov proteáz k niekoľkým inhibítorom proteáz; a
2) s cieľom stanoviť potenčný a rezistenčný profil nových látok, ktoré by mohli byť inhibítormi.
Napríklad v uvedenom transfekčnom systéme 1-[4-(pyridin-2-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl16
- (L) -terc-leucyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán (príklad 46) má potenciu in vitro takú, že pri IC90 < 30 nM, je prakticky lepší ako saquinavir (Hoffmann-LaRoche, pozri ďalej) a aktivita voči rezistentnému variantu (451/76F kmeň), ktorá sa stanovila proti 5 (S) -(terc-butoxykarbonylamino)-4(S)-hydroxy-6-fenyl-2(R)-(2,3,4-trimetoxyfenylmetyl)-hexanoyl-(L)-valyl-N-(2-metoxyetyl)amidu (= Lasinavir, pozri EP 0 708 085, zverejnené 24.4.1996; Novartis AG, pôvodne Ciba-Geigy AG), je porovnateľná so saquinavirom a lepšia ako u indinaviru (Merck & Co., Inc., pozri nižšie) alebo ritonaviru (Abbott, pozri nižšie) . V porovnaní s inými kmeňmi (napríklad 46I/47V/50V (VX478)), 10 nM produkuje aktivitu, ktorá je silnejšia (nekvantifikované) ako je aktivita saquinaviru, ritonaviru a indinaviru. Namiesto uvedených kmeňov môžu sa použiť akékoľvek T4 pozitívne bunky, ako sú HeLa T4 bunky, uložené pod názvom Richard Axel a Paul Maddon v NIH AIDS reference and reagent program a sú dostupné z tohto zdroja.
V zásade sú zodpovedajúce mutácie pre uvedené systémy na rezistenciu známe (pozri napríklad kmene príbuzné 48V/90M) (rezistencia k saquinaviru): Jacobsen, H., Yasargil, K., Winslow, D.L., Craig, J.C., Krohn, A., Duncan, I.B., & Mous, J.
Virology 206, 527 (1995); Merck Mutationen (niektoré, napríklad 71V/82T/84V): Condra, J.H., Scheif, W.A., Blahý, O.M.., Gabryelski, L.J., Graham, D.J., Quintero, J.C., Rhodes, A., Robbins, H.L·., Roth, E., Shivaprakash, M., & a kol., Náture 374, 569 (1995); Abbott 82V/84V kmeň : Markowitz, M., Mo, H., Kempf, D.J., Norbeck, D.W., Bhat, T.N., Erickson, J.W., & Ho, D.D.J. Virol. 69, 701 (1995).
Pri určení protienzymatickej aktivity proti rôznym humánnym aspartátproteázam podľa známych spôsobov (pozri napríklad, Biochem. J. 265, 871-878 (1990)), vykazujú zlúčeniny vzorca
I vysokú selektivitu k retrovírusovej aspartátproteáze HIV, najmä HIV-l. Napríklad inhibičná konštanta (IC5q) pre zlúčeniny vzorca I pri testoch proti cathepsinu D je vyššia ako 10 μΜ, najmä vyššia ako 25 μΜ. IC50 proti humánnemu cathepsinu D pri tomto teste sa meralo pri pH 3,1. Testovanie sa uskutoč17 ňovalo podľa známych postupov s použitím substrátu KPIQF*NphRL (pozri Jupp, R.A., Dunn, B.M., Jacobs, J.W. , Vjasuk, G., Arcuri, K.E., Veber, D.F., S. Perow, D.S., Payne, L. S., Boger, J., DeLazlo, S., Chakrabarty, P.K., TenBroeke, J., Hangauer, D.G., Ondeyka, D., Greenlee, W.J. and Kay, J.: The selectivity of statine-based inhibitors against various human aspartic proteases. Biochem. J. 265: 871 - 878 (1990)).
Zlúčeniny všeobecného vzorca I je možné použiť samotné alebo v kombináciách (ako sada kombinácií zodpovedajúcich prostriedkov alebo ako kombinácia jednotlivých zlúčenín alebo jednotlivých prostriedkov v časovom slede) s jednou alebo viacerými farmaceutický aktívnymi zlúčeninami (alebo ich šol'ami s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina schopná tvoriť sol), ktoré pôsobia proti retrovírusom, najmä HIV, ako je HIV-1 alebo HIV-2; najmä s inhibítormi reverznej transkriptázy, zvlášť analógy nukleozidov, najmä 3'-azido-3'-deoxypyrimidínom (= zidovudín = RETROVIRR, Burroughs-Wellcome) , 2 1 , 3'-dideoxycytidínom (=zalcitabín = HIVIDR, Hoffmann-La Roche), 21,31-dideoxyinozínom (= didanozín = 1/(DEX, Bristol-Myers-Squibb) alebo (2R,cis)-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3 -oxatiolan-5-yl) - (1H) -pyrimidin-2-ónom (= lamivudin, Glaxo); najmä d4C = 2',3'-didehydro-21,31-dideoxycytidínom, d4T = 2 1 , 3 '-didehydro-2',31-dideoxytymidínom (= stavudín = ZERITR) alebo 21,3'-dideoxyinozínom (= ddlno = DZI = didanozín = p
- VIDEX ); alebo nenukleozidnými analógmi, ako je 11-cyklopropyl-5,11-dihydro-4-metyl-(6H)-dipyrido[3,2-b;21,3'-e]-[1,4]diazepin-6-ón; alebo s jedným alebo viacerými (najmä s jedným až dvoma) inými inhibítormi retrovírusovej aspartátproteázy, najmä aspartátproteázy HIV, ako je zvlášť HIV-1 a HIV-2, najmä
a) jeden z inhibítorov uvedených v EP 0 346 847 (zverejnené 20.12.1989) a v EP 0 432 695 (zverejnené 19.06.1991; zodpovedá US 5 196 438, zverejnené 23.03.1993), najmä zlúčenina označená Ro 31-8959 (= saquinavir; Hoffmann LaRoche);
b) jeden z inhibítorov uvedených v EP 0 541 168 (zverejnené 12.05.1993; zodpovedá US 5 413 999), najmä zlúčenina označená
L-735,524 (= indinavir = CRIXIVANR; Merck a Co., Inc.,;
c) jeden z inhibítorov uvedených v EP 0 486 948 (zverejnené 27.5.1992; zodpovedá US 5 354 866), najmä zlúčenina označená ABT-538 (= ritonavir; Abbott);
d) zlúčenina označená KVX-478 (alebo VX-478 alebo 141W94; GfaxoWellcome, Vertex and Kissei Pharmaceuticals);
e) zlúčenina označená
f) zlúčenina označená
g) zlúčenina označená
h) zlúčenina označená
-Ingelheim), a/alebo
AG-1343 (Agouron);
KNI-272 (Nippon Mining);
U-96988 (Upjohn);
BILA-201 1 BS (= palinavir; Boehringeri) zlúčenina 5 (S) - (terc-butoxykarbonylamino)-4 (S)-hydroxy-6- fenyl-2 (R) - (2,3,4-trimetoxyfenylmetyl) -hexanoyl- (L) -valyl-N- (2-metoxyetyl) amid (= lazinavir, pozri EP 0 708 085, zverejnený 24.04.1996; Novartis AG, pôvodne Ciba-Geigy AG), alebo v každom prípade soli, s podmienkou, že sú prítomné skupiny tvoriace soli.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu tiež použiť na prevenciu, kontrolu a liečbu retrovírusových infekcií, najmä HIV, ako je HIV-1 alebo HIV-2, v bunkovej kultúre, najmä v bunkových kultúrach bunkových kmeňov lymfocytov teplokrvných živočíchov, čo je výhodné najmä v prípade cenných bunkových kultúr, ktoré produkujú, napríklad, špecifické protilátky, vakcíny alebo látok pôsobiacich ako poslíčkovia, ako sú interleukíny a podobne, a majú vysokú komerčnú hodnotu.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I môžu byť tiež použité ako štandardy pri experimentoch, napríklad ako HPLC štandardy alebo štandardy na porovnanie živočíšnych modelov vzhľadom na rôzne inhibítory aspartátproteáz, napríklad vzhľadom na pozorovateľnú hladinu v krvi.
V skupine výhodných zlúčenín všeobecného vzorca I uvedenej nižšie je možné v prípade výhodných prostriedkov (napríklad s cieľom nahradit; všeobecnejšie definície špecifickejšími definíciami, najmä definíciami, ktoré sú výhodné) použiú definície substituentov zo všeobecnej definície už uvedenej; v každom prípade je k uvedenej definícii udaná preferencia, ktorá je výhodná alebo uvedená ako príklady.
Výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca I, najmä zlúčeniny všeobecného vzorca la, kde
R1 je nižšia alkoxykarbonylová skupina, najmä metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina,
R2 je izopropylová skupina, sek-butylová skupina (výhodne v konfigurácii (S)), alebo terc-butylová skupina,
R2 je fenylová skupina alebo tiež cyklohexylová skupina,
R4 je fenylová skupina substituovaná v polohe 4 jednou z nasledujúcich skupín viazaných pomocou atómu uhlíka v kruhu: tienylová skupina (=tiofenylová skupina); oxazolylová skupina; tiazolylová skupina; imidazolylová skupina; 1,4-tiazinylová skupina; triazolylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo, najmä, substituovaná 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou, ako je 1-, 2- alebo 4-(mety1 alebo terc-butyl)triazol-3-ylová skupina; tetrazolylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo, najmä, substituovaná 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne nižšou alkylovou skupinou, ako je terc-butylová skupina alebo najmä metylová skupina, ako je 2H-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne nižšou alkylovou skupinou, ako je terc-butylová skupina alebo najmä metylová skupina, alebo lH-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná metylovou skupinou; pyridinylová skupina; pyrazinylová skupina a pyrimidinylová skupina;
najmä 2- alebo 3-tienylová skupina (=tiofen-2-ylová skupina alebo tiofen-3-ylová skupina); tiazol-5-ylová skupina; tiazol-2-ylová skupina; 2H-tetrazol-5-ylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo, najmä, substituovaná v polohe 2-, 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou; lH-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná v polohe 1- metylovou skupinou; pyridín-2-ylová skupina; pyridin-3-ylová skupina; pyridin-4-ylová skupina; alebo pyrazin-2-ylová skupina;
R5 je izopropylová skupina, sek-butylová skupina (výhodne v konfigurácii (S)-), terc-butylová skupina alebo metyltiometylová skupina, z?
R je nižšia alkoxykarbonylová skupina, najmä metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina, alebo ich soli (najmä farmaceutický prijateľné soli), s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca soľ.
Výhodnejšie sú zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde:
*1
R j e metoxykarbonylova skupina alebo etoxykarbonylová skupina,
R je izopropylová skupina, sek-butylová skupina alebo terc-butylová skupina, *3
R je fenylová skupina,
R4 je fenylová skupina substituovaná v polohe 4- fenylového kruhu 2- alebo 3-tienylovou skupinou (=tiofen-2-ylová skupina alebo tiofen-3-ylová skupina); tiazol-5-ylová skupina; tiazol-2-ylová skupina; 2H-tetrazol-5-ylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo najmä substituovaná v polohe 2- 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou; lH-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná v polohe 1- metylovou skupinou; pyridin-2-ylovou skupinou; pyridin-3-ylovou skupinou; pyridin-4-ylovou skupinou; alebo pyrazin-2-ylovou skupinou; a najmä je to 4-(tiazol-2-yl)-fenylová skupina; 4-(tiazol-5-yl)-fenylová skupina; 4-(pyridin-2-yl)-fenylová skupina; alebo 4-(2-metyltetrazol-5-yl)-fenylová skupina;
R5 je izopropylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina alebo metyltiometylová skupina;
g
R 3e metoxykarbonylova skupina alebo etoxykarbonylová skupina;
s výhradou, ze najmenej jeden zo zvyškov R-6 a R3 je terc-butylová skupina, s podmienkou, že je fenylová skupina substituovaná v polohe 4- fenylového kruhu 2- alebo 3-tienylovou skupinou (=tiofen-2-ylová skupina alebo tiofen-3-ylová skupina) ; tiazol-5-ylová skupina; tiazol-2-ylová skupina; 2H-tetrazol-5-ylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo najmä substituovaná v polohe 2- 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou alebo výhodne terc-butylovou skupinou alebo najmä metylovou skupinou; lH-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná v polohe 1- metylovou skupinou; pyridin-3-ylovou skupinou; pyridin-4-ylovou skupinou; alebo pyrazin-2-ylovou skupinou;
alebo (výhodne farmaceutický prijateľné) ich soli, s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca soľ.
Zvlášť výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde:
R1 je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina,
R2 je izopropylová skupina, sek-butylová skupina alebo terc-butylová skupina,
R3 je fenylová skupina,
R4 je 4-(tiazol-2-yl)-fenylová skupina, 4-(tiazol-5-yl)-fenylová skupina, 4-(pyridin-2-yl)-fenylová skupina alebo 4- (2-metyltetrazol-5-yl) - fenylová skupina,·
R5 je izopropylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina alebo metyltiometylová skupina; a
R^ je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina;
alebo (výhodne farmaceutický prijateľné) ich soli, s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca soľ.
Najvýhodnejšie sú zlúčeniny všeobecného vzorca I uvedené nižšie alebo (výhodne farmaceutický prijateľné) ich soli:
1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino - 6 - f enyl-2 -azahexán;
1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) -amino-6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -S-metylcysteinyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-etoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) 23
-amino-6 - f enyl-2 -azahexán;
1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) ami· no-6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucy 1) - amino - 6 - f enyl - 2 - azahexán ;
1- [4- (tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) - amino - 6 - f enyl - 2 - azahexán ;
1- [4- (tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (2-metyl-2H-tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-me toxykarbonyl- (L) -valyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-me toxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl
- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) - amino - 6 - f enyl - 2 - azahexán; alebo
1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl -(L) - terc-leucyl) amino-5 (S)-N- (N-metoxykarbonyl-(L) -valyl) ami no- 6 -f eny1-2 -a z ahexán.
Zvlášť výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca I uvedené v príkladoch, alebo ich farmaceutický prijateľné soli s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca soľ.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I a soli týchto zlúčenín, ktoré majú najmenej jednu skupinu tvoriacu soľ sa pripravia známym spôsobom, napríklad nasledovne:
c ď kde zvyšky R , R3 a R sú definované pre zlúčeniny všeobecného * vzorca I, sa pridá k epoxidu vzorca IV , najmä vzorca IV
(IV*) (IV),
O Q kde zvyšky R, R a R sú definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, voľné funkčné skupiny s výnimkou skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú, ak je to potrebné, v chránenej forme, a akékoľvek chrániace skupiny sa odstránia, alebo
b) aminozlúčenina všeobecného vzorca V ,
(V najmä všeobecného vzorca V
kde zvyšky R1, R2, R^ a R4 sú definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, sa kondenzuje s kyselinou vzorca
alebo s reaktívnym derivátom tejto kyseliny, kde zvyšky R5 a R^ sú definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú ak je to potrebné v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
c) amino zlúčenina všeobecného vzorca Vil’
najmä všeobecného vzorca VII
(VII), kde zvyšky R3 , R4, R5 a R6 sú becného vzorca I, sa kondenzuje definované pre zlúčeninu všeos kyselinou všeobecného vzorca
OH (vín:
alebo s reaktívnym derivátom tejto kyseliny, kde zvyšky R1 a R sú definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú, ak je to potrebné, v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
d) na prípravu zlúčeniny vzorca I, kde páry substituentov R1 a R6 a R2 a R5 sú v každom prípade dva identické zvyšky, ako je definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, a R2 a R* sú definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, sa diaminozlúčenina vzorca IX*
(IX*), najmä všeobecného vzorca IX
(IX) kde zvyšky boli už definované, kondenzuje s kyselinou všeobecného vzorca r’ z c.h oh nhY (VlIIa) alebo s jej reaktívnym derivátom, kde R1' a R2' sú rovnaké ako bolo definované pre R1 a R6 a pre R2 a R5, v tomto poradí, vo vzorci I, páry R1 a R6 a R2 a R5 sú v každom prípade dva rovnaké zvyšky, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú, ak je to potrebné v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
e) iminozlúčenina všeobecného vzorca (ľ)
(ľ ) najmä zlúčenina I
(ľ )
-i n o c £ kde zvyšky R , R , R , R3 a R° sú rovnaké ako bolo definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, sa reaguje so zlúčeninou všeobecného vzorca X
R (X) kde X je odstupujúca skupina a R4 je rovnaká ako bolo definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie, sú v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
f) iminozlúčenina všeobecného vzorca (ľ)
najmä vzorca 1'
kde zvyšky R1, R2, R3, R5 a R6 sú rovnaké ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, sa reaguje s aldehydom všeobecného vzorca X* (X*) kde R4 je rovnaké ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo s jeho reaktívnym derivátom, pri redukčnej alkylácii, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie, sú v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, a ak je to vhodné, zlúčenina všeobecného vzorca I, ktorá obsahuje najmenej jednu skupinu tvoriacu soľ, a ktorú je možné získať akýmkoľvek postupom a) až f) sa prevedie na jej soľ alebo sa získaná soľ prevedie na voľnú zlúčeninu alebo na inú soľ a/alebo izomérne zmesi, ktoré je možné získať, sa oddelia a/alebo zlúčenina všeobecného vzorca I podľa predloženého vynálezu sa prevedie na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I podľa predloženého vynálezu.
Uvedené spôsoby sú podrobnejšie opísané ďalej s odkazom na výhodné uskutočnenia.
V nasledujúcom opise jednotlivých spôsobov a príprav východiskových látok, ak nie je uvedené inak, zvyšky R , R , R3, R4, R5 a r6 sú rovnaké ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, prednosť, sa dáva v každom prípade definíciám uvedeným ako výhodné.
Postup a) (pridanie amínu k epoxidu)
V derivátoch hydrazínu všeobecného vzorca III, aminoskupina zúčastňujúca sa reakcie má výhodne voľný atóm vodíka; na zvýšenie reaktivity derivátu hydrazínu môže byť však derivatizovaná.
Epoxid všeobecného vzorca IV umožní konečné pridanie derivátu hydrazínu uskutočniť výhodnejšie.
Vo východiskových látkach, funkčné skupiny, pri ktorých sa má zabrániť reakcii, najmä karboxylová skupina, aminoskupina a hydroxylová skupina, sa môžu chrániť vhodnými chrániacimi skupinami (obvyklými chrániacimi skupinami), ktoré sa obvykle používajú pri syntéze peptidových zlúčenín, a tiež pri syntéze cefalosporínov a penicilínov, rovnako ako derivátov nukleových kyselín a cukrov. Tieto chrániace skupiny môžu byť už prítomné vo východiskových látkach a sú určené na chránenie príslušných funkčných skupín proti nežiaducim sekundárnym reakciám, ako je acylácia, eterifikácia, esterifikácia, oxidácia, solvolýza a podobne. v niektorých prípadoch môžu chrániace skupiny ďalej spôsobiť, že reakcia prebieha selektívne, napríklad stereoselektívne. Pre chrániace skupiny je charakteristické, že ich je možné ľahko odstrániť, t.j. bez uskutočnenia nežiaducej vedľajšej reakcie, napríklad pomocou solvolýzy, redukcie, fotolýzy a tiež enzymaticky, napríklad tiež pri fyziologických podmienkach. Zvyšky analogické chrániacim skupinám môžu však byť tiež prítomné v koncových produktoch. Zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktoré obsahujú chránené funkčné skupiny, môžu mať vyššiu metabolickú stabilitu alebo farmakodynamické vlastnosti, ktoré sú v niektorých prípadoch lepšie, ako pri zodpovedajúcich zlúčeninách, ktoré majú funkčné skupiny voľné. Chrániace skupiny sú uvedené s ohľadom na ich skutočný zmysel, ak príslušné zvyšky nie sú prítomné v koncovom produkte.
Chránenie funkčných skupín týmito chrániacimi skupinami, chrániace skupiny samotné a reakcie na ich odstránenie sú opísané napríklad v štandardných spracovaniach ako v J. F. W. McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plénum Press, Londýn a New York 1973, v Th. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York 1981, v The Peptids, časť 3 (E. Gross a J. Meienhofer, vyd.), Academic Press, Londýn a New York 1981, v Methoden der organischen Chemie (Methods of Organic Chemistry), Houben-Weyl, štvrté vydanie, časť 15/1, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, v H.-D. Jakubke a H. Jescheit, Aminosäuren, Peptid, Protein (Amino acids, peotids, proteins), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach a Basle 1982, a v Jochen Lehmann, Chemie der Kohfenhydrate: Monosaccharid und Deriváte (The Chemistry of Carbohydrates: monosaccharids and derivatives) , Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974.
Karboxylová skupina sa chráni, napríklad, vo forme esterovej skupiny, ktorá sa môže selektívne štiepiť pri miernych podmienkach. Karboxylová skupina chránená v esterifikovanej forme sa esterifikuje najmä nižšou alkylovou skupinou, ktorá je výhodne rozvetvená v polohe 1- nižšej alkylovej skupiny alebo substituovaná v polohe 1- alebo 2-nižšej alkylovej skupiny vhodnými substituentami.
Chránená karboxylová skupina esterifikovaná nižšou alkylovou skupinou je napríklad metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina.
Chránená karboxylová skupina esterifikovaná nižšou alkylovou skupinou, ktorá je rozvetvená v polohe 1- nižšej alkylovej skupiny je, napríklad, terc-alkoxykarbonylová skupina· ob32 sahujúca nižšiu alkoxylovú. skupinu, napríklad fcerc-butoxykarbonylová skupina.
Chránená karboxylová skupina esterifikovaná nižšou alkylovou skupinou, ktorá je substituovaná v polohe 1- alebo 2alkylovej skupiny vhodnými substituentami je napríklad arylmetoxykarbonylová skupina obsahujúca jeden alebo dva arylové zvyšky, kde arylová skupina je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo mono-, di- alebo tri-substituovaná, napríklad nižšou alkylovou skupinou, napríklad terc-alkylovou skupinou, kedy alkylová skupina je nižšia, ako je terc-butylová skupina, nižšou alkoxylovou skupinou, napríklad metoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atómom halogénu, napríklad atómom chlóru, a/alebo nitroskupinou, napríklad benzyloxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina substituovaná uvedenými substituentami, napríklad 4-nitrobenzyloxykarbonylová skupina alebo 4-metoxybenzyloxykarbonylová skupina, difenylmetoxykarbonylová skupina alebo difenylmetoxykarbonylová skupina substituovaná uvedenými substituentami, napríklad di- (4-metoxyfenyl)metoxykarbonylová skupina, a tiež karboxylová skupina esterifikovaná nižšou alkylovou skupinou, nižšia alkylová skupina je substituovaná v polohe 1- alebo 2- vhodnými substituentami, ako sú 1-alkoxyalkoxykarbonylová skupina, kedy obidve alkoxylové skupiny sú nižšie, napríklad metoxymetoxykarbonylová skupina, 1-metoxyetoxykarbonylová skupina alebo 1-etoxyetoxykarbonylová skupina, 1-alkyltioalkoxykarbonylová skupina, kedy alkyltioskupina a alkoxylová skupina sú nižšie, napríklad 1-metyltiometoxykarbonylová skupina alebo 1-etyltioetoxykarbonylová skupina, aroylmetoxykarbonylová skupina, kde aroylová skupina je benzoylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná, napríklad atómom halogénu, ako je atóm brómu, napríklad fenylacyloxykarbonylová skupina, 2-halogénalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, napríklad 2,2,2-trichlóretoxykarbonylová skupina, 2-brómme t oxykarbonylová skupina alebo 2-jódetoxykarbonylová skupina; rovnako ako 2-(silyl)alkoxykarbonyl, kedy silylová skupina je trisubstituovaná a alkoxylová skupina je nižšia, kde substituenty sú nezávisle na sebe alifatický, arylalifatický, cyklo33 alifatický alebo aromatický uhľovodíkový zvyšok, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný, napríklad nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxylovou skupinou, arylovou skupinou, atómom halogénu a/alebo nitroskupinou, napríklad nižšia alkylová skupina, fenylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, cykloalkylová skupina alebo fenylová skupina, ktoré sú nesubst i tuované alebo substituované tak, ako je uvedené vyššie, napríklad 2-trialkylsilylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu a nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je 2-trialkylsilyletoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, napríklad 2-trimetylsilyletoxykarbonylová skupina alebo 2-(di-n-butylmetylsilyl)-etoxykarbonylová skupina, alebo 2-triarylsilyletoxykarbonylová skupina, ako je trifenylsilyletoxykarbonylová skupina.
Karboxylová skupina môže byť tiež chránená vo forme organickej silyloxykarbonylovej skupiny. Organická silyloxykarbonylová skupina je napríklad trialkylsilyloxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, napríklad trimetylsilyloxykarbonylová skupina.
Chránená karboxylová skupina je výhodne terc-alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, napríklad terc-butoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, 4-nitrobenzyloxykarbonylová skupina, 9-fluorenylmetoxykarbonylová skupina alebo difenylmetoxykarbonylová skupina.
Chránená aminoskupina môže byť chránená skupinami chrániacimi aminoskupinu napríklad vo forme acylaminoskupiny, arylmetylaminoskupiny, eterif ikovanej merkaptoaminoskupiny, 2-acylalk-l-enylaminoskupiny obsahujúca nižšiu alkenylovú skupinu alebo silylaminoskupiny, alebo vo forme azidoskupiny.
V zodpovedajúcej acylaminoskupine je acylová skupina napríklad acylový zvyšok organickej karboxylovej skupiny obsahujúca napríklad do 18 atómov uhlíka, najmä nesubstituovaná alebo substituovaná, napríklad halogénom alebo arylovou skupinou substituované, nižšie alkánkarboxylové kyseliny alebo ne34 substituované alebo substituované, napríklad halogén-, nižšie alkoxy- alebo nitro-substituované, kyseliny benzoové, alebo výhodne poloester kyseliny uhličitej. Takýmito acylovými skupinami sú napríklad nižšia alkanoylová skupina, ako je formylová skupina, acetylová skupina, propionylová skupina alebo pivaloylová skupina, halogénalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, napríklad 2-halogénacetylová skupina, ako je 2-chlór-, 2-bróm-, 2-jód-, 2,2,2-trifluór- alebo 2,2,2-trichlór-acetylová skupina, nesubstituovaná alebo substituovaná, napríklad halogén-, nižšia alkoxy- alebo nitrosubstituovaná benzoylová skupina, ako je benzoylová skupina, 4-chlórbenzoylová skupina, 4-metoxybenzoylová skupina alebo 4nitrobenzoylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, výhodne nižšia alkoxykarbonylová skupina, ktorá, je rozvetvená v polohe l- nižšej alkylovej skupiny alebo vhodne substituovaná v polohe 1- alebo 2-, napríklad terc-alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je terc-butoxykarbonylová skupina, arylmetoxykarbonylová skupina obsahujúca jeden, dva alebo tri arylové zvyšky, ktorými sú fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo mono- alebo poly- substituovaná, napríklad nižšou alkylovou skupinou, najmä terc-alkylovou skupinou, kedy alkylová skupina je nižšia, ako je terc-butylová skupina,nižšou alkoxyskupinou, ako je metoxyskupina, hydroxylovou skupinou, atómom halogénu, ako je atóm chlóru a/alebo nitroskupinou, napríklad benzyloxykarbonylová skupina, 4-nitrobenzyloxykarbonylová skupina, difenylmetoxykarbonylová skupina, 9-fluorenylmetoxykarbonylová skupina alebo di-(4-metoxyfenyl) metoxykarbonylová skupina, aroylmetoxykarbonylová skupina, kde aroylová skupina je výhodne benzoylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná, napríklad atómom halogénu, ako je bróm, napríklad fenylacyloxykarbonylová skupina, 2-halogénalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, napríklad 2,2,2-trichlóretoxykarbonylová skupina, 2-brómetoxykarbonylová skupina alebo 2-jódetoxykarbonylová skupina, 2-(silyl)alkoxykarbonyl, kde silylová skupina je trisubstituovaná a alkoxylová skupina je nižšia, napríklad 2-trialkylsilylalkoxykarbonyl, kde alkylová skupina a alkoxylová skupina sú nižšie, ako je 2-trimetylsilyletoxykarbonylová skupina alebo 2- (di-n-butylmetylsilyl)etoxykarbonylová skupina, alebo triarylsilylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, napríklad 2-trifenylsilyletoxykarbony1ová skúp ina.
V arylmetylaminoskupine, napríklad mono-, di- alebo najmä triarylmetylaminoskupine, sú arylové zvyšky najmä nesubstituované alebo substituované fenylovými skupinami. Takýmito skupinami sú napríklad benzylaminoskupina, difenylmetylaminoskupina alebo najmä tritylaminoskupina, alebo zvlášť. 1-arylalkylmetylaminoskupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, kde nižšia alkylová skupina je výhodne rozvetvená v polohe 1-, ako v 1-metyl-l-f enyletylaminoskupine.
V eterifikovanej merkaptoaminoskupine, je merkaptoskupina najmä vo forme substituovanej aryltioskupiny alebo arylalkyltioskupiny obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, kde arylovou skupinou je napríklad fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná, napríklad nižšou alkylovou skupinou, ako je metylová skupina alebo terc-butylová skupina, nižšou alkoxylovou skupinou, ako je metoxylová skupina, atómom halogénu, ako je atóm chlóru, a/alebo nitroskupinou, napríklad 4-nitrofenyltioskupina.
V 2-acylalk-l-enylovej skupine obsahujúcej nižšiu alkenylovú skupinu, ktorá môže byť použitá ako skupina chrániaca aminoskupinu, acylová skupina je napríklad zodpovedajúci zvyšok nižšej alkánkarboxylovej kyseliny, benzoovej kyseliny, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná, napríklad nižšou alkylovou skupinou, ako je metylová skupina alebo terc-butylová skupina, nižšou alkoxyskupinou, ako je metoxyskupina, atómom halogénu, ako je atóm chlóru, a/alebo nitroskupinou, alebo najmä poloester kyseliny uhličitej, ako je poloester kyseliny uhličitej obsahujúci nižšiu alkylovú skupinu. Zodpovedajúcimi chrániacimi skupinami sú najmä l-alkanoylalk-l-en-2-ylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu a nižšiu alkenylovú skupinu, napríklad l-alkanoyl-prop-l-en-2-ylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, ako je l-acetylprop-l-en-236
-ylová skupina, alebo alkoxykarbonylalk-l-en-2-ylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu a nižšiu alkenylovú skupinu, napríklad alkoxykarbonylprop-l-en-2-ylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je 1-etoxykarbonylprop-l-en-2-ylová skupina.
Silylaminoskupina je napríklad trialkylsilylamino skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny, napríklad trimetylsilylaminoskupina alebo terc-butyldimetylsilylaminoskupina. Atóm kremíka silylovej skupiny môže byť tiež substituovaný iba dvoma nižšími alkylovými skupinami, napríklad metylovými skupinami, a aminoskupinou alebo karboxylovou skupinou druhej molekuly všeobecného vzorca I. Zlúčeniny, ktoré obsahujú takéto chrániace skupiny, sa môžu pripraviť napríklad s použitím zodpovedajúcich chlórsilanov, ako je dimetylchlórsilan, ako sililačných činidiel.
Aminoskupina sa môže chrániť tiež prevedením na protónovanú formu; vhodnými zodpovedajúcimi aniónmi sú najmä anióny silných anorganických kyselín, ako je kyselina sírová, kyselina fosforečná alebo hydrohalogénkyseliny, napríklad anión chlóru alebo anión brómu, alebo organických sulfónových kyselín, ako je kyselina p-toluénsulfónová.
Výhodnými skupinami chrániacimi aminoskupinu sú nižšia alkoxykarbonylová skupina, fenylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, fluorenylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, 2-alkanoyl-alk-1-en-2-ylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu a nižšiu alkenylovú skupinu, 1-metyl-1-fenyl-etylová skupina a alkoxykarbonylalk-l-en-2-ylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu a nižšiu alkenylovú skupinu.
Hydroxylová skupina môže byť chránená napríklad acylovou skupinou, napríklad nižšou alkanoylovou skupinou, ktorá je substituovaná atómom halogénu, ako je atóm chlóru, ako je 2,2-dichlóracetylová skupina, alebo najmä acylovým zvyškom poloesteru kyseliny uhličitej, ktorý je uvedený pri skupinách chrániacich aminoskupinu. Výhodnými skupinami chrániacimi hydroxylovú skupinu sú napríklad 2,2,2-trichlóretoxykarbonylová skupina, 4-nitrobenzyloxykarbonylová skupina, difenylmetoxykarbonylová skupina alebo tritylová skupina. Hydroxylová skupina môže byť tiež chránená trialkylsilylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, napríklad trimetylsilylovou skupinou, triizopropylsilylovou skupinou alebo terc-butyldimetylsilylovou skupinou, lahko odstrániteľnou eterifikačnou skupinou, napríklad alkylovou skupinou, ako je nižšia terc-alkylová skupina, napríklad terc-butylová skupina, oxa- alebo tiaalifatickou skupinou alebo tiacykloalifatickou skupinou, najmä 2-oxa- alebo 2-tiaalifatickou skupinou alebo 2-tiacykloalifatickou skupinou, uhľovodíkovým zvyškom, napríklad 1-alkoxyalkylovou skupinou, kde alkylová skupina aj alkoxylová skupina sú nižšie alebo 1-alkyltioalkylovou skupinou, kde obidve alkylové skupiny sú nižšie, ako je metoxymetylová skupina, 1-metoxyetylová skupina, 1-etoxyetylová skupina, metyltiometylová skupina, 1-metyltioetylová skupina alebo 1-etyltioetylová skupina, alebo 2-oxa- alebo 2-tiacykloalkylovou skupinou obsahujúcou 5 až 7 atómov v kruhu, ako je 2-tetrahydrofurylová skupina alebo 2-tetrahydropyranylová skupina, alebo zodpovedajúce tiaanalógy a tiež 1-f enyl alky lovou skupinou, kde alkylová skupina je nižšia, ako je benzylová skupina, difenylmetylová skupina alebo tritylová skupina, kde fenylové zvyšky môžu byť substituované, napríklad atómom halogénu, napríklad atómom chlóru, nižšou alkoxylovou skupinou, napríklad metoxylovou skupinou a/alebo nitroskupinou.
Hydroxylová skupina a aminoskupina, ktoré spolu v molekule susedia, môžu byť chránené napríklad dvojväzbovými chrániacimi skupinami, ako je metylénová skupina, ktorá je výhodne substituovaná napríklad jedným alebo dvoma alkylovými zvyškami alebo oxoskupinou, napríklad nesubstituovaná alebo substituovaná alkylidénová skupina, napríklad nižšia alkylidénová skupina, ako je izopropylidénová skupina, cykloalkylidénová skupina, ako je cyklohexylidénová skupina, a karbonylová skupina alebo benzylidénová skupina.
V súvislosti s týmto opisom, sa chrániacou skupinou, napríklad skupinou chrániacou karboxylovú skupinu, rozumie tiež polymérny nosič, ktorý je viazaný ľahko odstrániteľným spôsobom k funkčnej skupine, napríklad karboxylová skupina, ktorá sa má chrániť napríklad vhodným nosičom pre Merrifieldovu syntézu. Takýmto vhodným polymérnym nosičom je napríklad polystyrénová živica slabo zosietená kopolymerácia s divinylbenzénom a vybavená mostíkmi pre vratnú väzbu.
Pridávanie zlúčenín všeobecného vzorca III k epoxidom všeobecného vzorca IV sa uskutočňuje výhodne pri reakčných podmienkach obvykle používaných pri adícii nukleofilov na epoxidy.
Adícia sa uskutočňuje najmä vo vodnom rozpúšťadle a/alebo s prítomnosťou polárnych rozpúšťadiel, ako sú alkoholy, napríklad metanol, etanol, izopropanol alebo etylénglykol, étery, ako je dioxán, amidy, ako je dimetylformamid, alebo fenoly, ako je fenol a tiež pri bezvodých podmienkach,v nepolárnych rozpúšťadlách ako je benzén alebo toluén, alebo v emulzii benzén/voda, prípadne v prítomnosti kyslého alebo zásaditého katalyzátora, napríklad v roztoku hydroxidu alkalického kovu, ako je roztok hydroxidu draselného, alebo v prítomnosti katalyzátora v pevnej fáze legovaného hydrazínom, ako je oxid hlinitý, v éteroch, napríklad v dietylétere, obvykle pri teplotách od 0 °C do teploty varu príslušnej reakčnej zmesi, výhodne od 20 °C do teploty varu rozpúšťadla, prípadne za zvýšeného tlaku, napríklad v hrubostennej skúmavke, pričom v tomto prípade je tiež možné prekročiť teplotu varu merateľnú pri normálnom tlaku, a/alebo pod inertným plynom, ako je dusík alebo argón, je tiež možné, aby každá zo zlúčenín III a IV bola prítomná v prebytku, napríklad v molárnom pomere 1:1 až 1:100, najmä v molárnom pomere 1:1 až 1:10, zvlášť v pomere 1:1 až 1:3 .
Odstránenie chrániacich skupín môže byť uskutočnené podľa spôsobov opísaných nižšie pod názvom Odstránenie chrániacich skupín.
Postup b) (vznik amidickej väzby)
Pri východiskových funkčné skupiny, okrem látkach všeobecného vzorca V a VI sa skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie alebo nereagujú za reakčných podmienok, chránia nezávisle na sebe jednou z chrániacich skupín uvedených v postupe a).
Zlúčeniny všeobecného vzorca VI buď obsahujú voľnú karboxylovú skupinu alebo sú vo forme reaktívneho derivátu tejto kyseliny, napríklad vo forme odvodeného aktivovaného esteru alebo reaktívneho anhydridu, alebo vo forme aktívneho cyklického amidu. Reaktívne deriváty kyselín môžu tiež vznikať, in situ.
Aktivované estery zlúčenín všeobecného vzorca VI, ktoré majú koncovú karboxylovú skupinu, sú najmä estery nenasýtené na atóme uhlíka pripojenom k zvyšku, ktorý sa má esterifikovať, napríklad estery vinylesterového typu, ako sú vinylestery (ktoré sa získajú napríklad transesterifikáciou zodpovedajúcich esterov vinylacetátom; spôsob aktivovaného vinylesteru), karbamoylestery (ktoré sa získajú napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s izoxazoliovým činidlom; 1,2-oxazoliová alebo Woodwardova metóda), alebo 1-alkoxyvinylestery obsahujúce nižšie alkoxylové skupiny (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s nižším alkoxyacetylénom; etoxyacetylénová metóda), alebo estery amidínového typu, ako sú Ν,Ν'-disubstituované amidinoestery (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s vhodným N,N' -disubstituovaným karbodiimidom, napríklad N,N' -dicyklohexylkarbodiimidom alebo najmä N- (3-dimetylaminopropyl) -N1 -etylkarbodiimidom; karbodiimidová metóda), alebo Ν,Ν-disubstituované amidinoestery (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s N,N-disubstituovaným kyanamidom; kyanamidová metóda), vhodné arylové estery, najmä fenylestery vhodne substituované substituentami priťahujúcimi elektróny (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s vhodne substituovaným fenolom, napríklad 4-nitrofenolom, 4-metylsulfonylfenolom, 2,4,5-trichlórfenolom, 2,3,4,5, β-pentachlórfenolom alebo 4-fenyldiazofenolom, v prítomnosti vhodného kondenzačného činidla, ako je N,N' -dicyklohexylkarbodiimid; metóda aktivovaných arylesterov), kyanometylestery (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s chlóracetonitrilom v prítomnosti zásady; kyanometylesterová metóda), tioestery, najmä nesubstituované alebo substituované, napríklad nitro-substituované, fenyltioestery (získajú sa napríklad pomocou reakcie zodpovedajúcej kyseliny s nesubstituovanými alebo substituovanými, napríklad nitroskupinou substituovanými, tiofenoly, pomocou anhydridovej alebo karbodiimidovej metódy; metóda aktivovaných tiolesterov), alebo najmä aminoestery alebo amidoestery (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s N-hydroxyaminozlúčeninou alebo N-hydroxyamidozlúčeninou, napríklad N-hydroxysukcinimidom, N-hydroxypiperidínom, N-hydroxyftalimidom, imidom N-hydroxy-5-norbornom-2,3-dikarboxylovej kyseliny, 1-hydroxybenzotriazolom alebo 3-hydroxy-3,4-dihydro-l,2,3-benzotriazin-4-ónom, napríklad pomocou anhydridovej alebo karbodiimidovej metódy; metóda aktivovaných N-hydroxyesterov) . Môžu sa tiež použiť vnútorné estery, napríklad ^-laktóny.
Anhydridy kyselín môžu byť najmä symetrické alebo výhodne zmiešané anhydridy kyselín, napríklad anhydridy s anorganickými kyselinami, ako sú halogenidy kyselín, najmä chloridy kyselín (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s tionylchloridom, chloridom fosforečným, fosgénom alebo oxalylchloridom; metóda chloridov kyselín), azidy (získajú sa napríklad zo zodpovedajúcich kyselín cez zodpovedajúce hydrazidy a ich reakciou s kyselinou dusitou; azidová metóda) anhydridy s poloestermi kyseliny uhličitej, napríklad poloestery kyseliny uhličitej obsahujúce nižšiu alkylovú skupinu (najmä metylester kyseliny chlórmravčej) (získa sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s nižším alkylesterom kyseliny chlórmravčej alebo s l-alkoxykarbonyl-2-alkoxy-l,2-dihydrochinolínom obsahujúcim nižšie alkoxylové skupiny; metóda anhydridov kyseliny O-alkyluhličitej) alebo anhydridy s dihalogenovanou, najmä dichlórovanou, kyselinou fosforečnou (získa sa napríklad pomocou reakcie zodpovedajúcej kyseliny s oxychloridom fosfo41 rečným, metóda oxychloridu fosforečného), anhydridy s inými derivátmi kyseliny fosforečnej (napríklad získané reakciou s fenyl-N-fenylfosforamidochloridátom alebo reakciou s amidmi kyseliny alkylfosforečnej v prítomnosti anhydridov sulfónových kyselín a/alebo racemizačne redukčných prísad, ako je N-hydroxybenzotriazol, alebo v prítomnosti dietylesteru kyanofosfónovej kyseliny) alebo s derivátmi kyseliny fosforitej, alebo anhydridy organických kyselín, ako sú zmesové anhydridy organických karboxylových kyselín (získajú sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s nesubstituovaným alebo substituovaným nižším halogenidom alkánkarboxylovej kyseliny alebo s halogenidom fenylalkánkarboxylovej kyseliny obsahujúcim nižší alkánový zvyšok, napríklad s chloridom fenyloctovej kyseliny, chloridom pivalovej kyseliny alebo chloridom trifluóroctovej kyseliny; metóda zmesových anhydridov karboxylových kyselín) alebo s organickými sulfónovými kyselinami (získajú sa napríklad reakciou soli, ako soľ alkalického kovu, zodpovedajúcej kyseliny s vhodným halogenidom organickej sulfónovej kyseliny, ako je chlorid nižší alkán- alebo aryl-, napríklad metán- alebo p-toluén-sulfónovej kyseliny; metóda zmesových anhydridov kyseliny sulfónovej) a symetrické anhydridy (získajú sa napríklad kondenzáciou zodpovedajúcej kyseliny v prítomnosti karbodiimidu alebo 1-dietylaminopropínu; metóda symetrických anhydridov) .
Vhodnými cyklickými amidmi sú najmä amidy s päťčlenným diazacyklom aromatického charakteru, ako sú amidy s imidazolmi, napríklad imidazolom (získa sa napríklad reakciou zodpovedajúcej kyseliny s N,N'-karbonyldiimidazolom; imidazolová metóda) , alebo pyrazoly, napríklad 3,5-dimetylpyrazolom (získa sa napríklad cez hydrazid kyseliny reakciou s acetylacetónom; pyrazolidová metóda) .
Ako bolo uvedené, deriváty karboxylových kyselín používané ako acylačné činidlá môžu tiež vznikač in situ. Napríklad, N,N’ -disubstituované amidinoestery môžu vznikať in situ reakciou zmesi východiskových látok všeobecného vzorca V a kyseliny použitej ako acylačného činidla v prítomnosti vhodného
N, N'-disubstituovaného karbodiimidu, napríklad Ν,Ν'-cyklohexylkarbodiimidu alebo najmä N- (3-dimetylaminopropyl)-N'-etylkarbodiimidu. Ďalej, amino alebo amidoestery kyselín použitých ako acylačné činidlá môžu vznikať v prítomnosti východiskovej látky, ktorá má byť acylovaná, reakciou zmesi zospovedajúcej kyseliny a amino východiskovej látky v prítomnosti N,N'-disubstituovaného karbodiimidu, napríklad N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a N-hydroxyamínu alebo N-hydroxyamidu, napríklad N-hydroxysukcinimidu, ak je to vhodné v prítomnosti vhodnej zásady, napríklad 4-dimetylaminopyridínu. Ďalej môže byť aktivácia in situ dosiahnutá reakciou s Ν,Ν,Ν',Ν1-tetraalkyluróniových zlúčenín, ako je O-benzotriazol-l-yl-N, N,N' ,N'-tetrametyluróniumhexafluórfosfát, 0-(1,2-dihydro-2-oxo-1-pyridýl) -N,N,N' , N' -tetrametyluróniumtetraf luoroborát (v prítomnosti alebo bez prítomnosti 1,8-diazabicyklo[5,4,0] undec-7-én-(1,5-5)) alebo O-(3,4-dihydro-4-oxo-l,2,3-benzotriazolin-3-yl) -N,N,Ν' , N'- tetrametyluróniumtetraf luoroborát. Anhydridy kyseliny fosforečnej a karboxylových kyselín všeobecného vzorca VI je možné pripraviť tiež in situ reakciou amidu kyseliny alkylfosforečnej , ako je triamid kyseliny hexametylfosforečnej, v prítomnosti anhydridu sulfonovej kyseliny, ako je anhydrid kyseliny 4-toluénsulfónovej, so soľou, ako je tetrafluórborát, napríklad tetrafluórborát sodný, alebo s iným derivátom triamidu kyseliny hexametylfosforečnej, ako je benzotriazol-l-yl-oxytris (dime tyl amino) fosfóniumhexaf luorid, výhodne v prítomnosti racemizačne redukčného činidla, ako je N-hydroxybenzotriazol.
Aminoskupina zlúčenín všeobecného vzorca V, ktorá sa zúčastňuje reakcie, nesie výhodne najmenej jeden reaktívny atóm vodíka, najmä ak reagujúca karboxylová skupina, sulfonylová skupina alebo fosforylová skupina je prítomná v reaktívnej forme; môže byť však sama derivatizovaná, napríklad reakciou s fosfitom, ako je dietylchlórfosfit, 1,2-fenylénchlórfosfit, etyldichlórfosfit, etylénchlórfosfit alebo tetraetylpyrofosfit. Derivát takej zlúčeniny obsahujúci aminoskupinu je, napríklad, tiež halogenid karbamovej kyseliny alebo izokyanát, aminoskupina, ktorá sa zúčastní reakcie, býva substituovaná halogénkarbonylovou skupinou, napríklad chlórkarbonylovou skupinou, alebo upravená vo forme izokyanátovej skupiny.
Kondenzácia pri ktorej vzniká amidická väzba môže byť uskutočnená známym spôsobom, napríklad tak, ako je opísané v štandardných postupoch, ako je Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, štvrté vydanie, časť 15/11 (1974), časť IX (1955), časť Eli (1985), Georg Thieme Verlag, Stuttgart, The Peptids (E. Gross a J. Meienhofer, vyd.), časti 1 a 2, Academic Press, London a New York, 1979/1980, alebo M. Bodansky, Principles of Peptid Synthesis, Springer-Verfag, Berlín 1984.
Kondenzácia voľnej karboxylovej kyseliny s vhodným amínom môže byť uskutočnená výhodne v prítomnosti jedného z vhodných kondenzačných činidiel, alebo s použitím anhydridov karboxylových kyselín alebo halogenidov karboxylových kyselín, ako sú chloridy alebo aktivované estery karboxylových kyselín, ako sú p-nitrofenylestery. Obvyklými kondenzačnými činidlami sú napríklad karbodiimidy, napríklad dietylkarbodiimid, dipropylkarbodiimid alebo dicyklohexylkarbodiimid alebo najmä N-(3-dimetylaminopropyl)-N'-etylkarbodiimid, tiež vhodné karbonylové zlúčeniny, napríklad karbonylimidazol, 1,2-oxazoliové zlúčeniny, napríklad 2-etyl-5-fenyl-1,2-oxazolium-3'-sulfonát a 2-terc-butyl-5-metylizoxazoliumperchlorát, alebo vhodné acylaminozlúčeniny, napríklad 2-etoxy-l-etoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolín, N,N,N',N'-tetraalkyluróniové zlúčeniny, ako je O-benzotriazol-l-yl-N,N,N1,N'-tetrametyluróniumhexafluorofosfát alebo najmä 0-(1,2-dihydro-2-oxo-l-pyridyl)-N,N,N',N'-tetrametyluróniumtetrafluoroborát (v prítomnosti alebo neprítomnosti 1,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-én-(1,5-5)), tiež aktivované deriváty kyseliny fosforečnej, napríklad difenylfosforylazid, dietylfosforylkyanid, fenyl-N-fenylfosforamidochloridát, chlorid kyseliny bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosfónovej alebo 1-benzotriazolyloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluorofosfát.
Pokial.je to vhodné, pridá sa organická zásada, výhodne terciárny amín, napríklad trialkylamín obsahujúci nižšie alkylové skupiny, najmä etyldiizopropylamín alebo zvlášť trietylamín a/alebo heterocyklická zásada, napríklad 4-dimetylaminopyridín alebo výhodne N-metylmorfolín alebo pyridín.
Kondenzácia aktivovaných esterov, reaktívnych anhydridov alebo reaktívnych cyklických amidov so zodpovedajúcimi amínmi sa obvykle uskutočňuje v prítomnosti organickej zásady, napríklad trialkylamínov obsahujúcich nižšie aminoskupiny, napríklad trietylamínu alebo tributylamínu alebo vyššie uvedených organických zásad. Pokiaľ je to vhodné, kondenzačné činidlo sa ďalej použije napríklad tak, ako je opísané pre voľné karboxylové kyseliny.
Kondenzácia anhydridov kyselín s amínmi sa môže napríklad uskutočniť v prítomnosti anorganických uhličitanov, napríklad uhličitanu amónneho alebo uhličitanov alkalických kovov alebo hydrogenuhličitanu amónneho alebo hydrogenuhličitanov alkalických kovov, ako je uhličitan sodný alebo draselný alebo hydrogenuhličitan sodný alebo draselný (ak je to vhodné, spolu so síranom).
Chloridy karboxylových kyselín, napríklad deriváty kyseliny chlóruhličitej odvodené od kyseliny všeobecného vzorca VI, sa kondenzujú so zodpovedajúcimi amínmi výhodne v prítomnosti organického amínu, napríklad vyššie uvedených trialkylamínov obsahujúcich nižšie alkylové skupiny alebo heterocyklických zásad, ak je to vhodné v prítomnosti hydrogensíranu alebo hydroxidu, výhodne hydroxidu alkalického hydroxidu, ako je hydroxid sodný.
Kondenzácia sa výhodne uskutočňuje v inertnom, aprotickom, výhodne bezvodom, rozpúšťadle alebo zmesi rozpúšťadiel, napríklad v amide karboxylovej kyseliny, napríklad formamide alebo dimetylformamide, halogénovaných uhľovodíkoch, napríklad dichlórmetáne, tetrachlórmetáne alebo chlórbenzéne, v ketónoch, napríklad v acetóne, v cyklickom étere, napríklad tetrahydrofuráne alebo dioxáne, v estere, napríklad v etylacetáte, alebo v nitrile, napríklad acetonitrile, alebo v ich zmesi, ak je to vhodné pri zníženej alebo zvýšenej teplote, napríklad pri teplote v rozsahu asi -40 °C až asi +100 °C, výhodne -10 °C až asi +70 °C a ak sa použijú arylsulfonylestéry, tiež pri teplote +100 °C až +200 °C, najmä pri teplote 10 °C až 30 °C a ak je to vhodné v atmosfére inertného plynu, napríklad v atmosfére dusíka alebo argónu.
Môžu sa tiež použiť vodné, napríklad alkoholické rozpúšťadlá, napríklad etanol, alebo aromatické rozpúšťadlá, napríklad benzén alebo toluén. Pokiaľ sú ako zásady prítomné hydroxidy alkalických kovov, môže sa tiež, ak je to vhodné, pridať acetón.
Kondenzácia sa môže tiež uskutočňovať podľa postupu známeho ako syntéza na pevnej fáze, ktorú opísal R. Merrifield, napríklad v Agew. Chem. 97, 801-812 (1985), Naturwissenschafen 71, 252-258 (1984) alebo R. A. Hougten, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 5131-5135 (1985).
Uvoľnenie chrániacich skupín sa môže uskutočniť podľa spôsobu opísaného ďalej pod názvom Odstránenie chrániacich skupín.
Postup c) (vznik amidickej väzby)
Vo východiskových látkach vzorcov VII a VIII, funkčné skupiny, okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie alebo skupín, ktoré nereagujú pri podmienkach reakcie, sa chránia nezávisle na sebe chrániacimi skupinami uvedenými v postupe a) .
Postup je celkom analogický tomu, čo je uvedené v postupe b) , ale zlúčeniny všeobecného vzorca VII sa použijú namiesto zlúčenín všeobecného vzorca V a zlúčeniny všeobecného vzorca VIII sa použijú namiesto zlúčenín všeobecného vzorca VI.
. Uvoľnenie. . chrániacich skupín sa môže uskutočniť podľa postupu opísaného nižšie pod názvom Odstránenie chrániacich skupín.
Postup d) (vznik amidickej väzby)
Vo východiskových látkach všeobecného vzorca IX a v kyseline všeobecného vzorca VlIIa vhodnej na zavedenie identického acylového zvyšku, alebo v ich reaktívnych derivátoch, funkčné skupiny, ktoré sa nezúčastňujú reakcie alebo skupiny, ktoré nereagujú pri reakčných podmienkach, sa chránia nezávisle na sebe chrániacimi skupinami uvedenými v postupe a).
Výhodnými východiskovými zlúčeninami všeobecného vzorca IX, ktoré môžu byť chránené chrániacimi skupinami, sú zlúčeniny všeobecného vzorca II opísané nižšie v odseku týkajúcom sa východiskových zlúčenín.
Spôsob je celkom analogický tomu, čo je opísané v postupe b) , ale zlúčeniny všeobecného vzorca IX sa použijú namiesto zlúčenín všeobecného vzorca V a zlúčeniny všeobecného vzorca VlIIa sa použijú namiesto zlúčenín všeobecného vzorca VI.
Uvoľnenie chrániacich skupín sa môže uskutočniť podľa postupu opísaného nižšie pod názvom Odstránenie chrániacich skupín.
Spôsob e) (alkylácia sekundárneho atómu dusíka)
Vo východiskových látkach všeobecného vzorca 1' a všeobecného vzorca X alebo v ich reaktívnych derivátoch, sa funkčné skupiny, ktoré sa nezúčastňujú reakcie alebo ktoré nereagujú pri podmienkach reakcie, chránia nezávisle na sebe jednou z chrániacich skupín uvedených v postupe a).
Odstupujúcou skupinou X je najmä nukleofúgna skupina vybraná zo skupiny obsahujúcej hydroxylovú skupinu esterifikovanú silnou anorganickou kyselinou alebo organickou kyselinou, ako je hydroxylovú skupina esterifikovaná minerálnou kyselinou, napríklad hydrohalogénkyselinou, ako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková alebo kyselina jodovodíková, hydroxylovú skupina esterifikovaná silnou organickou sulfónovou kyselinou, ako je alkánsulfónová kyselina obsahujúca nižší alkánový zvyšok, ktorá je nesubstituovanú alebo substituovaná napríklad atómom halogénu, ako je atóm fluóru, alebo aromatická sulfónová kyselina, napríklad benzénsulfónová kyselina, ktorá je nesubstituovanú alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou, ako je metylová skupina, atómom halogénu ako je atóm brómu a/alebo nitroskupinou, napríklad metánsulfónová kyselina, p-brómtoluénsulfónová kyselina alebo p-toluénsulfónová kyselina a hydroxylovú skupina esterifikovaná azoimidom.
Substitúcia môže prebiehať pri podmienkach nukleofilnej substitučnej reakcie prvého alebo druhého rádu.
Napríklad jedna zo zlúčenín všeobecného vzorca X, kde X je odstupujúca skupina, ktorá obsahuje vysoko polarizovateľný elektrónový obal, napríklad jód, môže byť použitá v polárnom aprotickom rozpúšťadle, napríklad v acetóne, acetonitrile, nitrometáne, dimetylsulfoxide alebo dimetylformamide. Reakcia sa môže tiež uskutočniť vo vode, prípadne s pridaním organického rozpúšťadla, napríklad etanolu, tetrahydrofuránu alebo acetónu, ako rozpúšťadla. Substitučná reakcia sa uskutočňuje, ak je to vhodné, pri zníženej alebo zvýšenej teplote, napríklad v teplotnom rozsahu asi -40 °C až asi 100 °C, výhodne od -10 °C do asi 50 °C, a ak je to potrebné, pod inertným plynom, napríklad v atmosfére dusíka alebo argónu.
Spôsob e) nie je vo všetkých prípadoch úspešný, často je možné ho uskutočniť za zvláštnych podmienok a je preto menej výhodným spôsobom.
Uvoľnenie chrániacich skupín sa môže uskutočniť podľa postupu opísaného nižšie pod názvom Odstránenie chrániacich skupín.
Spôsob f) (reduktívna alkylácia sekundárnej aminoskupiny)
Vo východiskových látkach všeobecného vzorca ľ a všeobecného vzorca X* alebo v ich reaktívnych derivátoch, sa funkčné skupiny, ktoré sa nezúčastňujú reakcie alebo ktoré nereagujú pri podmienkach reakcie, chránia nezávisle na sebe vhodnými chrániacimi skupinami uvedenými v postupe a).
Reaktívnymi derivátmi zlúčenín všeobecného vzorca I sú napríklad zodpovedajúce hydrogensíričitanové adukty alebo najmä poloacetalové alebo ketalové zlúčeniny všeobecného vzorca X* s alkoholmi, napríklad s nižšími alkanolmi; alebo tioacetaly zlúčenín všeobecného vzorca X* s merkaptánmi, napríklad nižšími alkánsulfidmi. Pripravia sa voľné aldehydy všeobecného vzorca X*.
Reduktívna alkylácia sa obvykle uskutočňuje za hydrogenácie v prítomnosti katalyzátora, najmä katalyzátora vzácneho kovu, ako je platina alebo najmä paládium, ktoré sú viazané najmä k nosiču, ako je uhlík, alebo katalyzátoru ťažkého kovu, ako je Raneyov nikel, pri normálnom tlaku alebo pri tlaku 0,1 až 10 MPa alebo za redukcie pomocou komplexných hydridov, ako sú borohydridy, najmä kyanoborohydridy alkalických kovov, napríklad kyanobórhydrid sodný, v prítomnosti vhodnej kyseliny, výhodne relatívne slabej kyseliny, ako sú nižšie alkánkarboxylové kyseliny alebo najmä sulfónové kyseliny, ako je napríklad kyselina p-toluénsulfónová; vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad v alkoholoch, ako je metanol alebo etanol, alebo éteroch, napríklad cyklických éteroch, ako je tetrahydrofurán, v prítomnosti alebo bez prítomnosti vody.
Uvoľnenie chrániacich skupín sa môže uskutočniť podľa postupu opísaného nižšie pod názvom Odstránenie chrániacich skupín.
Odstránenie chrániacich skupín
Odstránenie chrániacich skupín, ktoré nie sú zložkami požadovaného cieľového produktu všeobecného vzorca I, napríklad skupiny chrániacej karboxylovú skupinu, aminoskupinu a hydroxylovú skupinu, sa uskutočňuje známym spôsobom, napríklad pomocou solvolýzy, najmä hydrolýzy, alkoholýzy alebo acidolýzy, alebo pomocou redukcie, najmä hydrogenolýzy alebo chemickej redukcie, a tiež fotolýzy, po jednotlivých krokoch, alebo, ak je to vhodné, súčasne, je tiež možné použiť enzymatické spôsoby. Odstránenie chrániacich skupín je opísané napríklad v štandardných postupoch opísaných v odseku týkajúcom sa chrániacich skupín.
Napríklad chránená karboxylová skupina, napríklad terc-alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, nižšia alkoxykarbonylová skupina substituovaná v polohe 2-trisubstituovanou silylovou skupinou alebo v polohe 1- nižšou alkoxy alebo nižšou alkyltioskupinou, alebo nesubstituovaná alebo substituovaná difenylmetoxykarbonylová skupina môže byť prevedená na voľnú karboxylovú skupinu reakciou s vhodnou kyselinou, ako je kyselina mravčia, kyselina chlorovodíková alebo kyselina trifluóroctová, ak je to vhodné, s pridaním nukleofilnej zlúčeniny, ako fenol alebo anizol. Karboxylová skupina môže byť uvoľnená z nižšej alkoxykarbonylovej zlúčeniny pomocou zásady, ako sú hydroxidy, napríklad hydroxidy alkalických kovov, ako je hydroxid sodný alebo hydroxid draselný. Nesubstituovanú alebo substituované benzyloxykarbonylové zlúčeniny môžu byť štiepené napríklad pomocou hydrogenolýzy, t.j. reakcie s vodíkom v prítomnosti kovového hydrogenačného katalyzátora, ako je paládiový katalyzátor. Ďalej môže byť vhodne substituovaná benzyloxykarbonylová zlúčenina, ako je 4-nitrobenzyloxykarbonylová zlúčenina, prevedená na voľnú karboxylovú zlúčeninu tiež redukciou, napríklad reakciou s hydrogensíričitanom alkalického kovu, ako je hydrogensíričitan sodný, alebo pomocou redukujúceho kovu, napríklad zinku, alebo pomocou redukujúcej soli kovu, ako je chrómnatá soľ, napríklad chlorid chrómnatý, obvykle v prítomnosti činidla poskytujúceho, vodík tak, že je spolu s kovom schopný produkovať vznikajúci vodík, ako sú kyseliny, najmä vhodné karboxylové kyseliny, ako sú nesubstituovane alebo substituované, napríklad hydroxylovou skupinou substituované, nižšie alkánkarboxylové kyseliny, napríklad kyselina octová, kyselina mravčia, kyselina glykolová, kyselina difenylglykolová, kyselina mliečna, kyselina mandlová, kyselina 4-chlórmandľová, alebo kyselina vínna, alebo v prítomnosti alkoholu alebo tiolu, výhodne sa pridá voda. Pomocou reakcie s redukujúcim kovom alebo redukujúcou soľou kovu, ako je opísané, môžu byť tiež na voľnú karboxylovú kyselinu prevedené 2-halogénalkoxykarbonylové zlúčeniny obsahujúce nižšiu alkoxylovú skupinu (ak je to vhodné, po prevedení 2-brómalkoxykarbonylovej zlúčeniny obsahujúcej nižšiu alkoxylovú skupinu na zodpovedajúcu 2 -jódalkoxykarbonyl zlúčeninu obsahujúcu nižšiu alkoxylovú skupinu) alebo aroylmetoxykarbonylové zlúčeniny. Aroylmetoxykarbonylové zlúčeniny môžu byť tiež štiepené reakciou s nukleofilným činidlom, výhodne tvoriacim sol, ako je tiofenolát sodný alebo jodid sodný, 2-(silyl) alkoxykarbonylové zlúčeniny, ktoré sú trisubstituované na silylovej skupine a obsahujú nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je 2-trialkylsilylalkoxykarbonylová zlúčenina obsahujúca nižšie alkylové skupiny a nižšiu alkoxylovú skupinu, môže byť tiež na voľnú kyselinu prevedená pomocou reakcie so soľou kyseliny fluorovodíkovej, ktorá uvoľňuje fluórový anión, ako je fluorid alkalického kovu, napríklad fluorid sodný alebo fluorid draselný, ak je to vhodné v prítomnosti makrocyklického polyéteru (crown ether) alebo pomocou fluoridu organickej kvartérnej zásady, ako je tetraalkylamóniumfluorid obsahujúci nižšie alkylové skupiny alebo trialkylarylalkylamóniumfluorid obsahujúci nižšie alkylové skupiny, napríklad tetraetylamóniumfluorid alebo tetrabutylamóniumfluorid, v prítomnosti aprotického, polárneho rozpúšťadla, ako je dimetylsulfoxid alebo Ν,Ν-dimetylacetamid. Karboxylová skupina chránená vo forme organickej silyloxykarbonylovej skupiny, ako je trialkylsilyloxykarbonylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny, napríklad trimetylsilyloxykarbonylová skupina, môže byť uvoľnená bežným spôsobom pomocou solvolýzy, napríklad pomocou reakcie s vodou, alkoholom alebo kyselinou, alebo ďalej s fluoridom, ako je opísané vyššie. Esterifikované karboxylové skupiny môžu byť tiež štiepené enzymaticky, napríklad pomocou es51 teraz alebo vhodných peptidáz, napríklad s použitím trypsínu.
Chránená aminoskupina sa uvol'ní pomocou známych postupov a podľa povahy chrániacej skupiny, rôznymi spôsobmi, výhodne pomocou solvolýzy alebo redukcie. Nižšie alkoxykarbonylaminoskupiny, ako je terc-butoxykarbonylaminoskupina, môžu byť štiepené v prítomnosti kyselín, napríklad minerálnych kyselín, napríklad halogenovodíkov, ako je chlorovodík alebo bromovodík alebo kyselina sírová alebo kyselina fosforečná, ale výhodne pomocou chlorovodíka, alebo v prítomnosti silnej organickej kyseliny, ako je trihalogénoctová kyselina, napríklad kyselina trif luóroctová, alebo kyselina mravčia, v prítomnosti alebo bez prítomnosti polárnych rozpúšťadiel, ako je voda alebo étery, výhodne cyklické étery,ako je dioxán; alebo nitrily,ako je acetonitril, 2-halogénalkoxykarbonylaminoskupiny obsahujúce nižšiu alkoxylovú skupinu (ak je to vhodné po prevedení 2-brómalkoxykarbonylaminoskupiny obsahujúcej nižšiu alkoxylovú skupinu na 2-jódalkoxykarbonylaminoskupinu obsahujúcu nižšiu alkoxylovú skupinu) , alebo sa priamo rozpustí v kvapalnej karboxylovej kyseline, ako je kyselina mravčia, aroylmetoxykarbonylaminoskupina alebo 4-nitrobenzyloxykarbonylaminoskupina môže byť štiepená, napríklad pomocou reakcie s vhodným redukčným činidlom, ako je zinok v prítomnosti vhodnej karboxylovej kyseliny, ako je vodná kyselina octová. Aroylmetoxykarbonylaminoskupiny môžu byť tiež štiepené pomocou reakcie s nukleofilným činidlom, výhodne tvoriacim soľ, ako je tiofenolát sodný a 4-nitrobenzyloxykarbonylaminoskupina môže byť tiež štiepená pomocou reakcie s hydrogénsiričitanom alkalického kovu, napríklad s hydrogénsiričitanom sodným. Nesubst ituované alebo substituované difenylmetoxykarbonylaminoskupiny, tetraalkoxykarbonylaminoskupiny obsahujúce nižšie alkoxylové skupiny alebo 2-(silyl) alkoxykarbonylaminoskupiny, v ktorých je silylová skupina trisubstituovaná a alkoxylová skupina nižšia, ako je 2-trialkylsilylalkoxykarbonylaminoskupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny a nižšie alkoxylové skupiny, môžu byť štiepené pomocou reakcie s vhodnou kyselinou, napríklad kyselinou mravčou alebo kyselinou trifluóroctovou; nesubstituované alebo substituované benzyloxykarbonylaminosku52 piny môžu byť štiepené napríklad pomocou hydrogenolýzy, t.j. reakciou s vodíkom v prítomnosti vhodného hydrogenačného katalyzátora, ako je platinový alebo paládiový katalyzátor; nesubstituované alebo substituované triarylmetylaminoskupiny alebo formylaminoskupiny môžu byť štiepené napríklad pomocou reakcie s kyselinou ako je minerálna kyselina, napríklad kyselina chlorovodíková, alebo organické kyseliny, ako je napríklad kyselina mravčia, kyselina octová alebo kyselina trifluóroctová ak je to vhodné v prítomnosti vody, a aminoskupina chránená vo forme silylaminoskupiny, napríklad pomocou hydrolýzy alebo alkoholýzy. Aminoskupina chránená pomocou 2-halogénacetylovej skupiny, napríklad 2-chlóracetylovej skupiny, môže byť uvoľnená pomocou reakcie s tiomočovinou v prítomnosti zásady, alebo so soľou tiolátu, ako je tiolát alkalického kovu tiomočoviny a následnou hydrolýzou, ako je alkoholýza alebo hydrolýza, vzniknutého substitučného produktu. Aminoskupina sa uvoľní z trif luóracetylaminoskupiny, napríklad pomocou hydrogenolýzy pomocou zásady, napríklad hydroxidov alebo uhličitanov alkalických kovov, ako je uhličitan sodný alebo uhličitan draselný, v polárnom rozpúšťadle, napríklad v alkoholoch, ako je metanol, v prítomnosti alebo bez prítomnosti vody, pri teplote 0 až 100 °C, najmä pri teplote varu. Aminoskupina chránená pomocou 2-(silyl)-alkoxykarbonylovej skupiny, kde silylová skupina je trisubstituovaná a alkoxylová skupina je nižšia, ako je 2-trialkylsilylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny a nižšiu alkoxylovú skupinu, môže byť tiež na voľnú aminoskupinu prevedená pomocou reakcie so soľou kyseliny fluorovodíkovej, ktorá uvoľňuje fluoridové anióny, ako je uvedené v súvislosti s uvoľňovaním chránených karboxylových skupín, ktoré sú chránené zodpovedajúcim spôsobom. 1-Arylalkylmetylová chrániaca skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, kde nižšia alkylová skupina je výhodne rozvetvená v polohe 1-, ako je 1-metyl-1-fenyletylová skupina, môže byt odstránená najmä v prítomnosti silnej kyseliny, ako je kyselina sírová (napríklad 80 % kyselina sírová) vo vodnom roztoku, pri výhodných teplotách -10 °C až 30 °C, najmä asi pri 0 °C.
Podobne môže byť s použitím fluoridových iónov odstránená silylová skupina, ako je trimetylsilylová skupina, viazaná priamo na heteroatóm.
Aminoskupina chránená vo forme azidoskupiny sa prevedie na voľnú aminoskupinu napríklad pomocou redukcie, napríklad pomocou katalytickej hydrogenácie vodíkom s prítomnosťou hydrogenačného katalyzátora, ako je oxid platiny, paládium alebo Raneyov nikel, redukciou s využitím merkaptozlúčeniny, ako je ditiotreitol alebo merkaptoetanol, alebo pomocou reakcie so zinkom v prítomnosti kyseliny, ako je kyselina octová. Katalytická hydrogenácia sa výhodne uskutočňuje v inertnom rozpúšťadle, ako sú halogénované uhľovodíky, napríklad dichlórmetán, alebo vo vode alebo v zmesi vody a organického rozpúšťadla, ako je alkohol alebo dioxán, pri teplote 20 až 25 °C, alebo s chladením alebo zohrievaním.
Hydroxylová skupina chránená vhodnou acylovou skupinou, trialkylsilylovou skupinou obsahujúcou nižšie alkylové skupiny alebo nesubstituovanou alebo substituovanou 1-fenylalkylovou akupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu sa voľní analogickým spôsobom ako zodpovedajúca chránená aminoskupina. Hydroxylová skupina chránená 2,2-dichlóracetylovou skupinou sa uvoľní, napríklad pomocou zásaditej hydrolýzy a hydroxylová skupina chránená terc-alkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu alebo 2-oxa- alebo 2-tia-alifatickou skupinou alebo -cykloalifatickou uhľovodíkovou skupinou sa uvoľní pomocou acidolýzy, napríklad reakciou s minerálnou kyselinou alebo silnou karboxylovou kyselinou, napríklad kyselinou trifluóroctovou. Susediace hydroxylové a aminoskupiny, ktoré sú chránené spolu pomocou dvojväzbovej chrániacej skupiny, výhodne napríklad metylénovej skupiny mono- alebo di-substituovanej nižšou alkylovou skupinou, ako je nižšia alkylidénová skupina, napríklad izopropylidénová skupina, cykloalkylidínová skupina, napríklad cyklohexylidénová skupina, alebo benzylidénová skupina, môže byť uvoľnená pomocou kyslej solvolýzy, najmä v prítomnosti minerálnej kyseliny alebo silnej organickej kyseliny. Trialkylsilylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny môže byť tiež odstránená pomocou acidolýzy, napríklad minerálnou kyselinou, výhodne kyselinou fluorovodíkovou, alebo silnou karboxylovou kyselinou. 2-Halogénalkoxykarbonylovú skupinu obsahujúcu nižšiu alkoxylovú skupinu je možné odstrániť pomocou vyššie uvedených redukčných činidiel, napríklad pomocou redukujúceho kovu, ako je zinok, redukujúcej soli kovu, ako je chrómnatá soľ, alebo s použitím zlúčenín síry, napríklad hydrogénsíričitanu sodného alebo najmä síričitanu sodného a sírouhlíka. Pokiaľ je prítomných niekoľko chránených funkčných skupín, ak je to vhodné, chrániace skupiny môžu byť vybrané tak, že môže byť naraz odstránených viac takýchto skupín, napríklad odstránením trifluóracetylovej skupiny ako skupiny chrániacej aminoskupinu pomocou zásaditej katalýzy, napríklad uhličitanom draselným v zmesi metanol/voda a následným odstránením terc-butoxykarbonylovej skupiny ako skupiny chrániacej aminoskupinu, napríklad pomocou kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne alebo v acetonitrile (v prítomnosti alebo neprítomnosti vody) alebo pomocou kyseliny mravčej, alebo selektívne odstránenie 1-metyl-l-fenyletylovej skupiny ako skupiny chrániacej aminoskupinu s použitím kyseliny sírovej ; alebo všeobecne pomocou acidolýzy, ako je reakcia s kyselinou trifluóroctovou alebo s vodíkom a hydrogenačným katalyzátorom, ako je paládium na uhlíku. Naopak môžu byť tiež skupiny vybrané tak, že nemôžu byť odstránené naraz, ale v požadovanom poradí, za získania zodpovedajúcich medziproduktov.
Ďalšie kroky spôsobu
V ďalších krokoch spôsobu, ktoré sú nepovinné, funkčné skupiny východiskových zlúčenín, ktoré sa nezúčastňujú reakcie, môžu byť nechránené alebo môžu byť v chránenej forme, napríklad môžu byť chránené jednou alebo viacerými chrániacimi skupinami uvedenými vyššie v postupe a) . Chrániace skupiny môžu zostať na cieľovom produkte alebo niektoré alebo všetky môžu byť odstránené podľa jedného alebo viacerých z postupov uvedených pod názvom Odstránenie chrániacich skupín.
Soli zlúčenín všeobecného vzorca I, ktoré obsahujú skúpi55 ny tvoriace soľ, môžu byť pripravené známym spôsobom. Napríklad kyslé adičné soli zlúčenín všeobecného vzorca I sa môžu získať napríklad pomocou reakcie s kyselinou alebo s vhodným činidlom na výmenu iónov.
Soli môžu byť známym spôsobom prevedené na voľné zlúčeniny, napríklad pomocou reakcie s vhodným zásaditým činidlom.
Stereoizomérne zmesi, napríklad zmesi diastereoizomérov, môžu byť oddelené na zodpovedajúce izoméry známym spôsobom pomocou vhodného separačného postupu. Napríklad zmesi diastereoizomérov môžu byť rozdelené na jednotlivé diastereoizoméry pomocou frakčnej kryštalizácie, chromatografie, delenia medzi rozpúšťadlá a podobne. Toto delenie sa môže uskutočňovať buď v štádiu jednej z východiskových látok alebo u samotnej zlúčeniny všeobecného vzorca I.
U zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde R2 je fenylová skupina, môže byť fenylová skupina hydrogenovaná, napríklad pomocou katalytickej hydrogenácie, najmä v prítomnosti oxidov ťažkých kovov, ako sú zmesové oxidy ródia/paládia, napríklad Nishimurov katalyzátor, výhodne v polárnom rozpúšťadle, ako je alkohol, napríklad metanol alebo etanol, pri teplote 0 až 80 °C, najmä 10 až 40 °C a výhodný tlak pri hydrogenácii je 100 kPa až 1 MPa, výhodne pri normálnom tlaku.
V zlúčeninách všeobecného vzorca I, kde R4 je 4-tetrazol-5-ylfenylová skupina, nižšia alkylová skupina, napríklad metylová skupina, môže byť uskutočnená reakciou s nižším alkylhalogenidom alebo nižším alkylarylsulfonátom, ako je nižší alkyl j odid alebo nižší alkyltoluénsulfonát, napríklad metyljodid alebo terc-butyljodid, výhodne v prítomnosti uhličitanu cesného v zmesi s cyklickým éterom, ako je dioxán a amid N, N-dialkylalkánkarboxylovej kyseliny obsahujúci nižšie alkylové skupiny, ako je dimetylformamid, pri výhodnej teplote -10 °C až 40 °C, najmä 0 °C až 30 °C.
V zlúčenine všeobecného vzorca I, kde R4 je 4-(l- alebo
2-fenyl- nižšia alkylová skupina, ako je 1- alebo 2-(l-metyl-1-fenyletyl)-tetrazol-5-yl) fenylová skupina, fenylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu (výhodne 1-metyl-1-fenyletylová skupina) môže byť odstránená reakciou so silnou minerálnou kyselinou, ako je kyselina sírová, vo vodnom roztoku, výhodne pri teplotách -20 °C až 30 °C, napríklad 0 °C.
Všeobecné podmienky postupu
Všetky kroky postupu uvedené v tomto texte sa uskutočňujú za známych reakčných podmienok, ale výhodne za podmienok, ktoré sú špecificky uvedené, bez prítomnosti alebo obvykle v prítomnosti rozpúšťadiel alebo riedidiel, výhodne tých rozpúšťadiel alebo riedidiel, ktoré sú inertné vzhľadom na použité reagenty a rozpúšťadlá, bez prítomnosti alebo v prítomnosti katalyzátora, kondenzačných činidiel alebo neutralizujúcich činidiel, napríklad ionomeničov, ako sú látky meniace katióny, napríklad v H+ forme, v závislosti na povahe reakcie a/alebo reaktantov pri zníženej, normálnej alebo zvýšenej teplote, napríklad pri teplote v rozsahu -100 °C až 190 °C, výhodne asi -80 °C až 150 °C, napríklad -80 °C až -60 °C, pri laboratórnej teplote, pri teplote -20 °C až 40 °C alebo pri teplote varu použitého rozpúšťadla, pri atmosférickom tlaku alebo v uzatvorenej nádobe, prípadne pri tlaku a/alebo v inertnej atmosfére, napríklad v argónovej alebo dusíkovej atmosfére.
V prípade všetkých východiskových látok a medziproduktov môžu byť prítomné soli, ak sú prítomné skupiny tvoriace soli. Soli môžu byť tiež prítomné v priebehu reakcie týchto zlúčenín, s podmienkou, že neovplyvnia reakciu.
Vo všetkých reakčných krokoch môže byť akákoľvek zmes, ktorá vzniká oddelená na jednotlivé izoméry, napríklad diastereoizoméry alebo enantioméry, alebo na požadované zmesi izomérov, napríklad racemáty alebo diastereoizomérne zmesi, napríklad analogickým spôsobom ako je opísané pod nadpisom Ďalšie kroky spôsobu.
V určitých prípadoch, napríklad v prípade hydrogenácie, je možné uskutočňovať stereoselektívne reakcie tak, že môžu byť ľahšie získané jednotlivé izoméry.
Medzi rozpúšťadlá, z ktorých sa vyberajú tie, ktoré sú vhodné na konkrétne reakcie, patrí napríklad voda, estery, ako sú nižšie alkylalkanoáty, napríklad dietylacetát, étery, ako sú alifatické étery, napríklad dietyléter, alebo cyklické étery, napríklad tetrahydrofurán, kvapalné aromatické uhľovodíky, ako je benzén alebo toluén, alkoholy, ako je metanol, etanol alebo 1- alebo 2-propanol, nitrily, ako je acetonitril, halogénované uhľovodíky, ako je metylénchlorid, amidy kyselín, ako je dimetylformamid, zásady, ako sú heterocyklické dusíkaté zásady, napríklad pyridín, anhydridy karboxylových kyselín, ako sú anhydridy nižších alkánových kyselín, napríklad acetánhydrid, cyklické, lineárne alebo rozvetvené uhľovodíky, ako je cyklohexán, hexán alebo izopentán, alebo zmesi týchto rozpúšťadiel, napríklad vodné roztoky, ak opis postupov neuvádza niečo iné. Zmesi rozpúšťadiel môžu byť tiež použité pri spracovaní, napríklad pri chromatografii alebo extrakcii.
Predložený vynález sa týka tiež takých foriem a postupov, kde sa zlúčeniny získatelné ako medziprodukty v akomkoľvek stupni, použijú ako východiskové látky a uskutočňujú sa zostávajúce kroky alebo postup sa preruší v akomkoľvek stupni alebo pri reakčných podmienkach vznikne východisková látky alebo sa použije vo forme reaktívneho derivátu alebo soli, alebo zlúčeniny získatelnej podľa postupu podľa predloženého vynálezu vzniknú pri podmienkach postupu a ďalej sa spracujú in situ,je výhodné použiť východiskové látky, z ktorých vzniknú zlúčeniny opísané vyššie ako výhodné, najmä zlúčeniny, ktoré sú opísané ako zvlášť výhodné, zvlášť potom výhodné a/alebo veľmi výhodné .
Príprava zlúčenín všeobecného vzorca I sa výhodne uskutočňuje analogickým spôsobom, ako je opísané v postupoch a krokoch postupov uvedených v príkladoch.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I, vrátane ich solí, môžu byť tiež získané vo forme hydrátov, alebo ich kryštály môžu obsahovať napríklad rozpúšťadlo použité pri kryštalizácii.
Farmaceutické prostriedky
Predložený vynález sa týka farmaceutických prostriedkov obsahujúcich zlúčeniny všeobecného vzorca I , ktorými su najmä zlúčeniny všeobecného vzorca I a zvlášť zlúčeniny všeobecného vzorca la.
Farmakologicky prijateľné zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu byť použité napríklad pri príprave farmaceutických prostriedkov, ktoré obsahujú účinné množstvo aktívnej zložky spolu alebo s prímesami významného množstva anorganického alebo organického, pevného alebo kvapalného, farmaceutický prijateľného nosiča.
Vynález sa tiež týka farmaceutických prostriedkov vhodných na podávanie teplokrvným živočíchom, najmä človeku, pri liečbe alebo prevencii ochorení, ktoré reagujú na inhibíciu retrovírusovej proteázy, najmä retrovírusovej aspartátproteázy, ako je HIV-1 alebo HIV-2 gag proteáza, napríklad retrovírusových ochorení, ako je AIDS alebo jeho prvotné štádiá, obsahujúcich zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo ich farmaceutický prijateľných solí, v množstve účinnom na inhibíciu retrovírusovej proteázy, spolu s najmenej jedným farmaceutický prijateľným nosičom.
Farmaceutické prostriedky podľa predloženého vynálezu sú prostriedky na enterálne, ako je nazálne, rektálne alebo orálne, alebo parenterálne, ako je svalové alebo vnútrožilové podávanie teplokrvným živočíchom (človeku a zvieratám), ktoré obsahujú účinnú dávku farmakologicky aktívnej zložky, samotnej alebo spolu s významným množstvom farmaceutický prijateľného nosiča. Dávka účinnej zložky závisí na druhu teplokrvného živočícha, telesnej hmotnosti, veku a individuálnom stave, individuálnych farmakokinetických údajoch, ochorenia, ktoré sa lieči a spôsobe podávania.
Vynález sa tiež týka spôsobu liečby ochorení spôsobených vírusmi, najmä retrovírusmi, zvlášť AIDS alebo jeho prvotných štádií, kedy sa terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I* alebo jej farmaceutický prijateľná soľ podáva v dávkach, ktoré sú účinné pri liečbe uvedených ochorení najmä u teplokrvných živočíchov, napríklad u človeka, ktorý následkom jedného z uvedených ochorení, najmä AIDS alebo jeho prvotných štádií, takúto liečbu vyžaduje. Výhodná dávka na podávanie teplokrvným živočíchom, napríklad človeku, ktorý má telesnú hmotnosť 70 kg, sú asi 3 mg až asi 3 g, výhodne asi 10 mg až asi 1,5 g, napríklad 50 mg až 1000 mg na osobu a deň, pričom sa táto dávka rozdelí na 1 až 3 jednotlivé dávky, ktoré môžu byť napríklad rovnako veľké. Deťom sa obvykle podáva polovičná dávka ako dospelým.
Farmaceutické prostriedky obsahujú asi 1 % až 95 %, výhodne asi 20 % až 90 %, aktívnej zložky. Farmaceutické prostriedky podľa predloženého vynálezu môžu byť napríklad vo forme jednotlivej dávky, ako je forma ampúl, fioliek, čapíkov, dražé, tabliet alebo toboliek.
Farmaceutické prostriedky podľa predloženého vynálezu sa pripravia známym spôsobom, napríklad pomocou obvyklého rozpustenia, lyofilizácie, zmiešania, granulácie alebo úpravy do sladenej formy.
Výhodne sa používajú roztoky aktívnej zložky, a tiež suspenzie, a najmä izotonické vodné roztoky alebo suspenzie, napríklad v prípade lyofilizovaných prostriedkov, ktoré obsahujú aktívnu zložku samotnú alebo spolu s nosičom, napríklad manitolom, sa pred použitím pripravia roztoky alebo suspenzie. Farmaceutické prostriedky môžu byť sterilizované a/alebo môžu obsahovať prísady, napríklad konzervačné látky, stabilizátory, zvlhčujúce činidlá a/alebo emulgátory, rozpúšťadlá, soli na reguláciu osmotického tlaku a/alebo pufre, alebo kyseliny, napríklad kyselinu citrónovú, a pripravia sa známym spôsobom, napríklad pomocou bežného rozpustenia alebo lyofilizačného procesu. Uvedené roztoky alebo suspenzie môžu obsahovať látky zvyšujúce viskozitu, ako je sodná soľ karboxymetylcelulózy, karboxymetylcelulóza, hydroxypropylmetylcelulóza (napríklad celulóza HPM603), silikagél, dextrán, polyvinylpyrolidón alebo želatínu.
Suspenzie v oleji na injekčné podávanie obsahujú ako olejovú zložku rastlinný, syntetický alebo polosyntetický olej. Ako príklady sa môžu uviesť najmä kvapalné estery mastných kyselín obsahujúce ako kyselinovú zložku mastnú kyselinu s dlhým reťazcom obsahujúcu 8 až 22, najmä 12 až 22 atómov uhlíka, napríklad kyselina laurová, kyselina tridekánová, kyselina myristová, kyselina pentadekánová, kyselina palmitová, kyselina margarová, kyselina stearová, kyselina arachidová, kyselina behénová, alebo zodpovedajúce nenasýtené kyseliny, napríklad kyselina olejová, kyselina elaidová, kyselina eruková, kyselina brazidová alebo kyselina linolénová, ak je to vhodné, pridajú sa antioxidanty, napríklad vitamín E, β-karotén alebo
3,5-diterc-butyl-4-hydroxytoluén. Alkoholová zložka týchto esterov mastných kyselín obsahuje maximálne 6 atómov uhlíka a je mono- alebo polyhydroxylovaná, napríklad mono-, di- alebo trihydroxylovaná, napríklad metanol, etanol, propanol, butanol alebo pentanol alebo ich izoméry,, ale najmä glykol a glycerol. Ako príklady sa môžu uviesť nasledujúce estery mastných kyselín: etylester kyseliny olejovej, izopropylester kyseliny myristovej, izopropylester kyseliny palmitovej, Labrafil M 2375 (polyoxyetylénglycerol trioleát, Gatterfosé, Paríž), Miglyol 812 (triglycerid nasýtených mastných kyselín s uhlíkovým reťazcom s dĺžkou 8 až 12 atómov uhlíka, Huls, Nemecko), ale najmä rastlinné oleje, ako je bavlníkový olej, mandľový olej, olivový olej, ricínový olej, sójový olej a najmä olej podzemnice olejnatej a sezamový olej.
Prostriedky na injekčné podávanie sa pripravia obvyklým spôsobom pri sterilných podmienkach; rovnaký spôsob sa použije pri uvedení prostriedkov do ampúl alebo fioliek a uzatvorených nádob.
Farmaceutické prostriedky na orálne podávanie sa môžu získať zmiešaním aktívnej zložky s pevnými nosičmi, ak je to vhodné, granuláciou vzniknutej zmesi a spracovaním zmesi, ak je to vhodné alebo potrebné, po pridaní vhodných prísad, do tabliet, dražé alebo toboliek. Je tiež možné umiestniť aktívne zložky do plastových nosičov, ktoré umožňujú difúziu aktívnej zložky alebo jej uvoľňovanie v odmeranom množstve.
Vhodnými nosičmi sú najmä plnivá ako sú cukry, napríklad laktóza, sacharóza, manitol alebo sorbitol, celulózové prostriedky a/alebo fosforečnany vápenaté, napríklad fosforečnan vápenatý alebo hydrogenfosforečnan vápenatý, a tiež spojivá, ako sú škrobové pasty obsahujúce napríklad kukuričný, pšeničný, ryžový alebo zemiakový škrob, želatínu, tragakant, metylcelulózu, hydroxypropylmetylcelulózu, sodnú soľ karboxymetylcelulózy a/alebo polyvinylpyrolidón, a/alebo, ak je to vhodné, látky uľahčujúce rozpad, ako sú vyššie uvedené škroby, tiež karboxyme tyl škrob, zosietený polyvinylpyrolidón, agar, kyselina algínová alebo ich soli, ako je alginát sodný. Prísadami sú najmä látky upravujúce tuk a mazivá, napríklad kyselina kremičitá, mastenec, kyselina stearová alebo ich soli, ako je stearát horečnatý alebo vápenatý a/alebo polyetylénglykol. Jadrá dražé sú vybavené vhodnými obalmi, prípadne na Črevné použitie, ktoré sa pripravia z koncentrovaných roztokov cukru, ktoré môžu obsahovať arabskú gumu, mastenec, polyvinylpyrolidón, polyetylénglykol a/alebo oxid titaničitý, alebo z poťahovacích roztokov vo vhodných organických rozpúšťadlách alebo, pri príprave obalov dražé na črevné použitie, z roztokov vhodných prípravkov obsahujúcich celulózu, ako je ftalát etylcelulózy alebo ftalát hydroxypropylmetylcelulózy.
Tobolkami sú tvrdé želatínové tobolky a tiež mäkké, uzatvorené tobolky vyrobené zo želatíny a zmäkčovadla ako je glycerol alebo sorbitol. Tvrdé želatínové tobolky môžu obsahovať aktívnu zložku vo forme granúl, napríklad s plnivom, ako je laktóza, spojivom ako je škrob a/alebo látky uľahčujúcej prehli tanie, ako je mastenec alebo stearát horečnatý, a ak je to vhodné, stabilizátory. V tobolkách.je aktívna zložka výhodne rozpustená alebo suspendovaná vo vhodnom olejovitom nosiči, ako sú mastné oleje, parafínový olej alebo kvapalné polyetylénglykoly, je tiež možné pridať stabilizátory a/alebo antibakteriálne činidlá. Ako príklady týchto olejov môžu byť uvedené kvapalné estery mastných kyselín, ktoré obsahujú ako kyselinovú zložku mastnú kyselinu s dlhým reťazcom, napríklad obsahujúcu 8 až 22 atómov uhlíka, najmä 12 až 22 atómov uhlíka, napríklad kyselina laurová, kyselina tridekánová, kyselina myristová, kyselina pentadekánová, kyselina palmitová, kyselina margarová, kyselina stearová, kyselina arachidová, kyselina behénová alebo zodpovedajúce nenasýtené kyseliny, napríklad kyselina olejová, kyselina elaidová, kyselina eruková, kyselina brazidová alebo kyselina linoleová, ak je to vhodné, pridajú sa antioxidanty, napríklad vitamín E, β-karotén alebo 3,5-diterc-butyl-4-hydroxytoluén. Alkoholová zložka týchto esterov mastných kyselín obsahuje maximálne 6 atómov uhlíka a je mono- alebo polyhydroxylovaná, napríklad mono-, di- alebo trihydroxylovaná, napríklad metanol, etanol, propanol, butanol alebo pentanol alebo ich izoméry, ale najmä glykol a glycerol. Ako príklady môžu byť uvedené nasledujúce estery mastných kyselín: etylester kyseliny olejovej, izopropylester kyseliny myristovej, izopropylester kyseliny palmitovej, Labrafil M 2375 (polyoxyetylénglycerol trioleát, Gatterfosé, Paríž), Miglyol 812 (triglycerid nasýtených mastných kyselín s uhlíkovým reťazcom s dĺžkou 8 až 12 atómov uhlíka, Húls, Nemecko), ale najmä rastlinné oleje, ako je bavlníkový olej, mandľový olej, olivový olej, ricínový olej, sójový olej a najmä olej podzemnice olejnatej a zvlášť sezamový olej. Je tiež možné použiť parafínový olej. Môžu sa tiež pridať stabilizátory, ako sú emulgátory, zvlhčujúce činidlá alebo povrchovo aktívne látky, spojivá, ako sú škrobové pasty obsahujúce napríklad kukuričný, pšeničný, ryžový alebo zemiakový škrob, želatínu, tragakant, metylcelulózu, hydroxypropylmetylcelulózu alebo hydroxypropylcelulózu (výhodný) , sodnú soľ karboxymetylcelulózy, cyklodextrín (y) a/alebo polyvinylpyrolidón, a/alebo äntibakteriálne činidlá. Vhodnými emulgátormi sú najmä kyselina olejová, neionogénne povrchovo aktívne látky typu polyhydroxyalkoholesterov mastných kyselín, ako je sorbitan monolaurát, mono63 oleát, monostearát alebo monopalmitát, sorbitan tristearát alebo trioleát, polyoxyetylénové adukty polyhydroxyalkoholesterov mastných kyselín,ako je polyoxyetylénsorbitanmonolaurát, monooleát, monostearát, monopalmitát, tristearát alebo trioleát, polyetylénglykolestery mastných kyselín, ako je polyoxyetylstearát, polyoxyetylénglykol (300 alebo 400) stearát, polyetylénglykol 2000 stearát, najmä polymérne bloky etylénoxid/ /propylénoxid typu PluronicR (Wyandotte Chem. Corp.; ochranná známka BASF, FRG) alebo typu SynperonicR (ICI). Napríklad ak nie je aktívna zložka rozpustná v uvedených olejoch, je prítomná vo forme suspenzie, napríklad s veľkosťou častíc 1 až 100 mm. Tieto suspenzie môžu byť tiež použité ako také, to znamená bez toboliek.
K tabletám alebo obalom dražé alebo k stenám toboliek môžu byť. tiež pridané farbivá alebo pigmenty, napríklad na identifikáciu účelu alebo na označenie rôznych dávok aktívnej zložky.
Východiskové látky
Predložený vynález sa týka tiež východiskových látok a/alebo medziproduktov a spôsobu ich prípravy. Použité východiskové látky a vybrané reakčné podmienky sú výhodne tie, ktoré vedú k zlúčeninám uvedeným ako výhodné.
Pri príprave všetkých východiskových látok, môžu byť. voľné funkčné skupiny, ktoré sa nezúčastnia príslušnej reakcie, v chránenej forme, napríklad môžu byť chránené chrániacimi skupinami uvedenými v postupe a) . Tieto chrániace skupiny môžu byť vo vhodnej chvíli odstránené pomocou reakcií, ktoré sú opísané pod nadpisom Odstránenie chrániacich skupín.
Východiskové látky postupu a) sú známe lebo, ak sú nové, môžu sa pripraviť podľa známych postupov; napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca III je možné pripraviť z hydrazínu alebo jeho vhodného derivátu a zlúčeniny všeobecného vzorca IV je možné pripraviť z vhodných aminokyselín alebo ich analógov, napríklad obsahujúcich jeden z uvedených postranných reťazcov
Zlúčeniny všeobecného vzorca III je možné pripraviť napríklad zo zlúčenín všeobecného vzorca
H2N-NH-R' (XI) ktoré sú známe alebo sa môžu pripraviť z hydrazínu zavedením 7 chrániacich skupín tak, ako je opísané v postupe a) a kde R je atóm vodíka alebo skupina chrániaca aminoskupinu tak, ako je opísané v postupe b), najmä terc-alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je terc-butoxykarbonylová skupina, arylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je benzyloxykarbonylová skupina alebo 9-fluorenylmetoxykarbonylová skupina alebo jedna z vyššie uvedených skupín chrániacich acylaminoskupinu, najmä trifluóracetylová skupina, alkyláciou zlúčeniny všeobecného vzorca X ako je opísané vyššie v postupe e), alebo reakciou zvyšku vzorca
-R (A) kde R41 je taký, ako je definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, reakciou vhodnej karbonylovej zlúčeniny všeobecného * vzorca X , alebo jej reaktívneho derivátu tak, ako je definované v postupe f) s voľnou aminoskupinou zlúčeniny všeobecného vzorca XI alebo jej acylovaným derivátom a následnou redukciou vzniknutého hydrazónu a vzniká hydrazínový derivát všeobecného vzorca 4 NH \/ \ 7
NH—R (xn), zvyšky vo všetkých uvedených zlúčeninách sú už definované a funkčné skupiny vyskytujúce sa v reagentoch, ktoré sa nezúčastňujú reakcie, sa, ak je to potrebné, chránia, a ak je to vhodné, odstráni sa chrániaca skupina R7 a potom sa kondenzujú pri podmienkach uvedených v postupe b) so zlúčeninou všeobecného vzorca VI alebo s derivátom tejto kyseliny tak, ako je opísané v postupe b).
Karbonylovými zlúčeninami všeobecného vzorca X* alebo ich reaktívnymi derivátmi, ktoré sú vhodné na zavedenie zvyšku vzorca A, a ktoré sa použijú na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca XII tak, ako je definované v postupe f) , sú aldehydy alebo ich reaktívne deriváty, ktorých reaktívna karbonylová skupina sa po reakcii so zlúčeninou všeobecného vzorca XI a následnej redukcii stane súčasťou uvedeného zvyšku vzorca A.
Reakcia karbonylových zlúčenín so zlúčeninami všeobecného vzorca XI, pri ktorej vznikajú zodpovedajúce hydrazóny sa uskutočňuje pri podmienkach bežne používaných na reakciu karbonylových zlúčenín s amínmi, výhodne v polárnom organickom rozpúšťadle, napríklad v éteroch, ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter, alkoholoch, ako je metanol alebo etanol, amidoch karboxylových kyselín, ako je dimetylformamid alebo v esteroch, ako je etylacetát, alebo vo vodnom roztoku, výhodne v metanole a tiež v prítomnosti alebo bez prítomnosti kyslého katalyzátora, napríklad karboxylových kyselín, ako je kyselina mravčia alebo kyselina octová, sulfónových kyselín, ako je kyselina p-toluénsulfónová, pri teplotách 0 °C až teplote varu reakčnej zmesi, výhodne pri teplotách 20 °C až teplote varu reakčnej zmesi.
Získajú sa zlúčeniny všeobecného vzorca
(XII*),
NH—R
7 kde R a R sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca XII.
Redukcia vzniknutého hydrazónu všeobecného vzorca XII* sa výhodne uskutočňuje pomocou hydrogenácie v prítomnosti vhodné66 ho katalyzátora alebo pomocou komplexných hydridov v prítomnosti kyselín. Ako katalyzátory vhodné na hydrogenáciu sa používajú kovy, ako je nikel, železo, kobalt alebo ruténium, alebo vzácne kovy alebo ich oxidy, ako je paládium alebo ródium alebo ich oxidy, prípadne napríklad zakotvené na vhodnom nosiči ako je síran bárnatý, oxid hlinitý alebo uhlík (aktívne uhlie) alebo vo forme skeletových katalyzátorov, ako je Raneyov nikel. Rozpúšťadlami, ktoré sa obvykle používajú na katalytickú hydrogenáciu, sú napríklad voda, alkoholy, ako je metanol alebo etanol, estery, ako je etylacetát, étery, ako je dioxán, chlórované uhľovodíky, ako je dichlórmetán, amidy karboxylových kyselín, ako je dimetylformamid, alebo karboxylové kyseliny, ako je ľadová kyselina octová alebo zmesi týchto rozpúšťadiel. Hydrogenácia sa uskutočňuje výhodne pri teplote 10 až 250 °C, najmä pri laboratórnej teplote až 100 °C a tlak vodíka je výhodne 0,1 až 20 MPa, najmä 0,1 až 1 MPa, v bežnej aparatúre. Pri redukcii komplexnými hydridmi, najmä borohydridmi, ako sú kyanoborohydridy alkalických kovov, napríklad kyanoborohydrid sodný, je výhodné pridať slabé kyseliny, ako sú sulfónové kyseliny, napríklad kyselina p-toluénsulfónová, alebo karboxylové kyseliny, ako je kyselina octová, výhodne v alkoholoch, ako je metanol alebo etanol alebo ich zmes s vodou (pozri napríklad Tetrahedron 49, 8605-8628 (1993)).
Zlúčeniny všeobecného vzorca XI je tiež možné alkylovať redukciou priamo so zlúčeninami všeobecného vzorca X*, alebo s ich reaktívnymi derivátmi tak, ako je definované v postupe f) , pri podmienkach, ktoré sú analogické podmienkam uvedeným v postupe f).
Pri príprave zlúčenín všeobecného vzorca XI sú tiež výhodné najmä reakčné podmienky, ktoré sú opísané v J. Chem. Soc. Perkin I, 1712 (1975).
Zlúčeniny všeobecného vzorca III je možné tiež získať napríklad pomocou reakcie zlúčeniny všeobecného vzorca XII*, ktorá je už definovaná, kde R7 je atóm vodíka (získajú sa napríklad odstránením chrániacich skupín, ak je R7 chrániaca sku67 pina), priamo pomocou kondenzácie pri podmienkach uvedených v postupe b) s kyselinami vzorca VI, alebo derivátmi kyselín uvedenými v postupe b), pri získaní zlúčenín všeobecného vzorca
(III*) kde zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I. Tieto zlúčeniny sa potom pomocou redukcie pri analogických podmienkach, ktoré sú uvedené na redukciu hydrazónov všeobecného vzorca XII , prevedú na zlúčeniny všeobecného vzorca III.
Zlúčeniny všeobecného vzorca III* sa môžu tiež získať zo zodpovedajúcich zlúčenín všeobecného vzorca III', ktoré sú definované ďalej, pomocou reakcie týchto zlúčenín so zlúčeninami všeobecného vzorca X*, ktoré sú definované vyššie, pri vzniku hydrazónov všeobecného vzorca III pri podmienkach, ktoré sú analogické podmienkam opísaných na reakciu karbonylových zlúčenín všeobecného vzorca X* s hydrazínmi všeobecného vzorca XI.
Zlúčeniny všeobecného vzorca IV môžu byť pripravené napríklad pomocou redukcie aminokyseliny všeobecného vzorca
(XIII), kde R8 je atóm vodíka alebo najmä jedna aminoskupinu,ktoré sú uvedené v postupe zo skupín chrániacich a), najmä terc-alkoxy68 karbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je terc-butoxykarbonylová skupina, arylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je benzyloxykarbonylová skupina alebo 9-fluorenylmetoxykarbonylová skupina alebo jedna zo skupín chrániacich acylaminoskupinu, ktoré sú uvedené v postupe a), najmä trifluóracetylová skupina a R3 je rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, pričom vzniká aldehyd všeobecného vzorca.
(XIV), kde zvyšky sú už definované, následnou reakciou tohto aldehydu s ylidovou zlúčeninou, výhodne ylidovou zlúčeninou síry, pričom vzniká epoxid všeobecného vzorca (xv), kde zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované vyššie. Potom sa odstráni chrániaca skupina R8 (vzniknutá voľná aminozlúčenina, kde R8 je atóm vodíka môže byť stabilná, napríklad vo forme kyslej adičnej soli) a nakoniec sa acyluje aminoskupina vzniknutej zlúčeniny kyselinou všeobecného vzorca VIII, kde zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca VIII, pri analogických podmienkach, ako je opísané v postupe b).
Redukcia aminokyselín všeobecného vzorca XIII na zodpove69 dajúce aldehydy všeobecného vzorca XIV sa uskutočňuje napríklad pomocou redukcie na zodpovedajúce alkoholy a následnou oxidáciou na uvedené aldehydy.
Redukcia na alkoholy (voľná zlúčenina alebo (ak je to nevyhnutné po zavedení chrániacich skupín tak, ako je opísané v postupe a)) zlúčeniny, ktorá je chránená na atóme dusíka
Q skupinou R všeobecného vzorca nh ch2oh /8 4
R (XIII ) , kde zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca XIII, sa uskutočňuje napríklad pomocou hydrogenácie halogenidov kyselín alebo iných aktivovaných derivátov karboxylových kyselín uvedených v postupe b) pri podmienkach uvedených na hydrogenáciu hydrazónov získaných zo zlúčenín všeobecného vzorca XII, dibóranom alebo komplexnými hydridmi, ako je borohydrid sodný. Následná oxidácia vzniknutých alkoholov je možná napríklad pomocou oxidácie hydroxylovej skupiny sulfoxidmi, ako je dimetylsulfoxid, v prítomnosti činidla, ktoré aktivuje hydroxylovú skupinu, ako je chlorid karboxylovej skupiny, napríklad oxalylchlorid, v inertnom rozpúšťadle, napríklad halogénovanom uhľovodíku, ako je dichlórmetán a/alebo acyklický alebo cyklický éter, ako je tetrahydrofurán, pri teplote -80 °C až 0 °C, napríklad -78 °C až -50 °C, alebo pomocou oxidácie napríklad oxidom chrómovým alebo jeho derivátmi, ako je pyridínium chromát alebo terc-butylchromát, dichróman/kyselina sírová, oxidom sírovým v prítomnosti heterocyklickej zásady, ako je pyridín/oxid sírový, a tiež kyselinou dusičnou, oxidom manganičitým, oxidom selenitičým, vo vode, organických rozpúšťadlách ako sú halogénované rozpúšťadlá, napríklad dichlórmetán, amidy karboxylových kyselín, ako je dimetylformamid, alebo dialkylsulfoxidoch obsahujúcich nižšiu alkylovú skupinu, ako je dimetylsulfoxid, v prítomnosti alebo bez prítomnosti zásaditých amínov, napríklad trialkylamínov obsahujúcich nižšie alkylové skupiny, ako je trietylamín, pri teplote -50 °C až 100 °C, výhodne -10 °C až 50 °C, alebo pomocou katalytickej dehydrogenácie, napríklad v prítomnosti kovového striebra, medi, zmesového oxidu medi a chrómu alebo oxidu zinočnatého pri teplote 200 až 400 °C (v kontaktnej rúrke) s následným rýchlym ochladením. Je tiež možná oxidácia 2,2,6,
- tetrametylpiperidin-l-oxylom v prítomnosti NaOCl (pozri Anelli a kol., Org. Synth. 69, 212 (1990)).
Možná je tiež priama redukcia aminokyselín na aldehydy, napríklad pomocou hydrogenácie s prítomnosťou priotráveného paládiového katalyzátora alebo redukciou zodpovedajúcich esterov aminokyselín, napríklad nižších alkylesterov, ako je etylester, komplexnými hydridmi, napríklad borohydridmi, ako je borohydrid sodný alebo výhodne hydridy hliníka, napríklad lítiumalumínium hydrid, lítiumtri(terc-butoxy)alumíniumhydrid alebo najmä diizobutylalumíniumhydrid, v nepolárnych rozpúšťadlách, napríklad uhľovodíkoch alebo aromatických rozpúšťadlách, ako je toluén, pri teplote -100 °C až 0 °C, výhodne -70 °C až -30 °C, a následnej reakcie pričom vznikajú zodpovedajúce semikarbazóny, napríklad so zodpovedajúcimi kyslými sólami semikarbazónov, ako je hydrochlorid semikazbazidu, v systéme vodných rozpúšťadiel, ako je alkohol/voda, napríklad etanol/voda, pri teplotách -20 °C až 60 °C, výhodne 10 °C až 30 °C vzniknutého semikarbazónu s reaktívnym aldehydom, napríklad formaldehydom, v inertnom rozpúšťadle, napríklad polárnom organickom rozpúšťadle, napríklad amide karboxylovej kyseliny, ako je dimetylformamid, pri teplote -30 °C až 60 °C, výhodne 0 °C až 30 °C a potom s kyselinou, napríklad silnou minerálnou kyselinou, ako sú halogenovodíky, vo vodnom roztoku, prípadne v prítomnosti rozpúšťadla, ktoré sa používalo predtým, pri teplotách -40 °C až 50 °C, výhodne -10 °C až 30 °C. Zodpovedajúce estery sa získajú pomocou reakcie aminokyselín so zodpovedajúcimi karboxylovými kyselinami pri analogických podmienkach, ktoré sa použili pri kondenzácii v postupe b) , napríklad reakcie s halogenidmi anorganických kyselín, ako je tionylchlorid, v zmesiach organických rozpúšťadiel, ako sú zmesi aromatických a alkoholických rozpúšťadiel, napríklad toluénu a etanolu, pri teplotách -50 °C až 50 °C, výhodne -10 °C až 20 °C.
Príprava zlúčenín všeobecného vzorca XIV sa uskutočňuje zvlášť výhodným spôsobom pri podmienkach, ktoré sú analogické reakčným podmienkam uvedeným v J. Org. Chem. 47, 3 016, (1982) alebo v J. Org. Chem. 43, 3624 (1978).
Sírnym ylidom vhodným na prevedenie zlúčenín všeobecného vzorca XIV na epoxidy všeobecného vzorca XV je napríklad dialkyl sulf óniumme tyl id, napríklad dimetylsulfóniummetylid, alkyldialkylaminosulfóniummetylid alebo fenyldialkylaminosulfôniummetylid, napríklad metyldimetylaminosulfóniummetylid, alebo fenyldimetylaminosulfóniummetylid alebo dialkylsulfóniummetylid, napríklad dimetylsulfóniummetylid alebo dietylsulfóniummetylid.
Príslušná sírna ylidová zlúčenina sa výhodne pripraví in situ zo zodpovedajúcej sulfóniovej alebo sulfoxoniovej soli a zásady, napríklad hydridu sodného, v dipolárnom aprotickom rozpúšťadle, napríklad v dimetylsulfoxide, alebo étere, napríklad tetrahydrofuráne alebo 1,2-dimetoxyetáne a potom reaguje so zlúčeninou všeobecného vzorca XIV. Reakcia sa väčšinou uskutočňuje pri laboratórnej teplote, pri chladení, napríklad pod -20 °C, alebo pri slabom zohrievaní, napríklad do 40 °C. Sulfid, sulfinamid a sulfoxid, ktorý súčasne vznikne, sa odstráni pri následnom vodnom spracovaní.
Reakcia so sírnym ylidom sa uskutočňuje zvlášť vhodným spôsobom, ktorý je analogický podmienkam uvedeným v J. Org. Chem. 50, 4616 (1985).
Zlúčeniny všeobecného vzorca XV sa môžu tiež získať zo zlúčenín všeobecného vzorca XIV, ktoré sú už definované, pomocou ich reakcie s trialkylsilylmetyl Grignardovou zlúčeninou obsahujúcou nižšie alkylové skupiny, ktoré sa napríklad pripravia zo zodpovedajúceho halogénmetylsilanu, ako je chlórme72 tyltrimetylsilan, v inertnom rozpúšťadle, napríklad étere, ako je dioxán alebo dietyléter, pri teplote 0 až 50 °C, napríklad pri laboratórnej teplote až 40 °C, následnej eliminácii pri odstránení silylového zvyšku a vzniku dvojitej väzby, napríklad pomocou Lewisovej kyseliny, ako je fluorid boritý, všetky skupiny chrániace aminoskupinu R8 sa výhodne odstránia v inertnom rozpúšťadle, napríklad v étere ako je dietyléter, alebo halogénovanom uhľovodíku, ako je dichlórmetán, alebo ich zmesi, pri teplote -50 °C až teplota varu, najmä 0 až 30 °C, ak je to vhodné, opakovanej acylácii za zavedenia skupiny chrániacej aminoskupinu R12, ktorá je už definovaná, a oxidácie vzniknutej dvojitej väzby pri získaní oxíranu, výhodne pomocou peroxykarboxylovej kyseliny, napríklad kyseliny m-chlórperoxybenzoovej alebo kyseliny monoperoxyftalovej (napríklad vo forme soli horčíka), v inertnom rozpúšťadle, napríklad halogénovanom uhľovodíku, ako je dichlórmetán, alebo alkoholoch, ako je metanol, nižších alkanoylnitriloch, ako je acetonitril, vode alebo ich zmesiach, pri teplotách -20 °C až teplota varu reakčnej zmesi, napríklad 10 až 50 °C.
Zlúčeniny všeobecného vzorca IV sa výhodne pripravia tak, že sa vychádza priamo z alkoholu všeobecného vzorca XIII*, ktorý je definovaný vyššie, ktorý je tiež komerčne dostupný, a tento alkohol reaguje s kyselinou všeobecného vzorca VIII, alebo s jej reaktívnym derivátom, ako je definované v postupe c) , pri podmienkach, ktoré sú tam uvedené, ak je to potrebné so zavedenými chrániacimi skupinami tak, ako je opísané v postupe a) , ktoré sa vo vhodnej chvíli odstránia tak, ako je opísané pod nadpisom Odstránenie chrániacich skupín. Získa sa zlúčenina, ktorá je analogická zlúčenine všeobecného vzorca XIII*, kde pozícia R8 je obsadená zodpovedajúcim acylovým zvyškom z kyseliny všeobecného vzorca VIII; vzniknutá zlúčenina sa oxiduje pri podmienkach, ktoré sú analogické podmienkam uvedeným pre oxidáciu alkoholov všeobecného vzorca XIII* pričom vzniká zodpovedajúci aldehyd všeobecného vzorca
O
R
H
O (XIV*) ,
kde zvyšky sú definované vyššie, a tento aldehyd sa potom prevedie, napríklad pomocou ylidovej zlúčeniny, ktorá je opísaná na prevedenie zlúčeniny všeobecného vzorca XIV na zlúčeninu všeobecného vzorca XV, na zlúčeninu všeobecného vzorca IV.
Východiskové látky postupov b) , c) a d) sú známe lebo, ak sú nové, môžu sa pripraviť pomocou známych postupov; napríklad zlúčenina všeobecného vzorca V môže byť pripravená z vhodného derivátu hydrazínu všeobecného vzorca XII, kde R7 je chrániaca skupina a ostatné zvyšky sú definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca V a vhodného epoxidu všeobecného vzorca IV, kde sú zvyšky definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I (postup b); zlúčeninu všeobecného vzorca VII je možné pripraviť z vhodného derivátu hydrazínu všeobecného vzorca III kde sú zvyšky rovnaké, ako je definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I a vhodného epoxidu všeobecného vzorca XV,
Q kde R je chrániaca skupina a ostatné zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I (postup c); a zlúčenina všeobecného vzorca IX môže byť pripravená z vhodného derivátu hydrazínu všeobecného vzorca XII, kde R7 je atóm vodíka a ostatné zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I a vhodného epoxidu všeobecného vzorca XV, kde R8 je chrániaca skupina a ostatné zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I (postup d) analogicky ako v postupe a), prípadne s použitím a odstránením chrániacich skupín tak, ako je opísané v postupe a) a pod nadpisom Odstránenie chrániacich skupín, chrániace skupiny R7 a R8 sú výhodne definované v definícii zlúčenín všeobecného vzorca XI a XIII, v tomto poradí.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I', kde sú substituenty definované vyššie, môžu byť pripravené napríklad zo zlúčenín všeobecného vzorca III', h2n
NH / \ 6 CH R diľ) kde sú zvyšky rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, analogickým spôsobom, ako bolo opísané v postupe b), reakciou zlúčenín všeobecného vzorca IV, kde všetky prítomné funkčné skupiny, ktoré sa nezúčastňujú reakcie, môžu byť chránené tak, ako je opísané v postupe b) a po reakcii znova uvoľnené.
Zlúčeniny všeobecného vzorca III' sa môžu získať zo zlúčenín všeobecného vzorca XI, ktoré sú definované vyššie, pomocou reakcie s kyselinou všeobecného vzorca VI alebo jej reaktívnym derivátom, kde zvyšky sú definované vyššie, analogickým spôsobom, ako je opísané pre reakciu zlúčenín všeobecného vzorca XII s kyselinou všeobecného vzorca VI a, ak je to vhod•-Ί né, pomocou následného odstránenia chrániacej skupiny R podľa niektorého z postupov uvedených pod nadpisom Odstránenie chrániacich skupín.
Pokiaľ sú prítomné dve skupiny chrániace aminoskupinu, môžu byť rovnaké alebo rôzne.
Použitými skupinami chrániacimi aminoskupinu sú napríklad skupiny chrániace aminoskupinu uvedené v postupe a) . Výhodné sú tie zodpovedajúce skupiny, kde sú chrániace skupiny vybrané z tých, ktoré sú uvedené ako výhodné pre R a R v zlúčeninách všeobecného vzorca XI a XIII, v tomto poradí.
Príprava chránených zlúčenín všeobecného vzorca I sa usΊ5 kutočňuje napríklad podľa ktoréhokoľvek spôsobu uvedeného vyššie, najmä zo zlúčenín všeobecného vzorca III a IV, kde funkčné skupiny môžu byť chránené funkčnými skupinami opísanými v postupe a).
Kyseliny všeobecného vzorca VI, VIII a VlIIa a zlúčeniny všeobecného vzorca X a aldehydy vhodné na zavedenie zvyšku vzorca A, ktoré sa používajú pri príprave zlúčenín všeobecného vzorca XII môžu byť pripravené podľa známych postupov, ak nie sú známe.
Príprava kyselín všeobecného vzorca VI sa uskutočňuje pomocou reakcie derivátov nižších alkoxykarboxylových kyselín, ktoré sú vhodné na zavedenie nižších alkoxykarbonylových zvyškov, napríklad pomocou reakcie zodpovedajúcich dialkylesterov kyseliny pyrouhličitej obsahujúcich nižšie alkylové skupiny (najmä dimetylesteru kyseliny pyrouhličitej; Aldrich, Švajčiarsko) alebo výhodne nižších alkylesterov haloformových kyselín, ako sú nižšie alkylestery kyseliny chloromravčej (najmä metylester kyseliny chloromravčej, Fluka, Švajčiarsko), s aminokyselinami všeobecného vzorca
(XVI) kde R.5 je definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca VI, pri podmienkach, ktoré sú analogické podmienkam opísaným pre acyláciu v postupe b), najmä vo vodnom roztoku hydroxidu alkalického kovu, napríklad vo vodnom roztoky hydroxidu sodného, v prítomnosti dioxánu pri teplote 20 až 100 °C, najmä 50 až 70 °C.
Zodpovedajúcim spôsobom je možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca VIII z aminokyselín všeobecného vzorca í? ΝΗ2
HO
CH (XVII), kde R2 je rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I a zlúčeniny všeobecného vzorca VlIIa je možné pripraviť z aminokyselín všeobecného vzorca
NH2
HO
CH (XVIII) kde R2, je rovnaké ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca VIII', pomocou reakcie s derivátmi nižších alkoxykarboxylových kyselín, ktoré sú vhodné na zavedenie nižších alkoxykarbonylových zvyškov.
Aminokyseliny všeobecných vzorcov XVI, XVII a XVIII sú známe, alebo je možné ich pripraviť podľa známych postupov. Výhodne sú vo forme (S) (vzhľadom na a-uhlíkový atóm) .
Zlúčeniny všeobecného vzorca IV môžu byť tiež pripravené kondenzáciou zlúčeniny všeobecného vzorca XIX (XIX)
so zlúčeninou všeobecného vzorca XVIII, ktorá je definovaná vyššie. Kondenzácia s kyselinou všeobecného vzorca VIII alebo derivátom tejto kyseliny, sa uskutočňuje pri podmienkach, ktoré sú analogické podmienkam uvedeným v postupe e). Získajú sa zlúčeniny všeobecného vzorca XX
(XX) kde R1 a R2 je rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I.
Epoxidácia sa uskutočňuje kyslíkom alebo výhodne chemicky viazaným kyslíkom, napríklad v hydroperoxidoch, peroxide vodíka alebo peroxykyselinách, ako je kyselina peroxybenzoová, kyselina peroxymravčia, kyselina peroxyoctová, kyselina monoperoxyftalová, kyselina peroxywolfrámová alebo najmä kyselina m-chlórperoxybenzoová, v inertných rozpúšťadlách, ako sú étery, napríklad dietyléter, pri výhodných teplotách -20 až 50 °C, pričom vznikajú zlúčeniny všeobecného vzorca IV, ktoré sú definované vyššie.
Východisková látka všeobecného vzorca XIX sa získa výhodne reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca XIV, kde R3 je fényQ lová skupina a R je chraniaca skupina s Grignardovým činidlom, ktoré zavádza metylidénovú skupinu, najmä trimetylsilylmetylovým Grignardovým činidlom (ClMgC^Si(CH3)3 - ktoré sa pripraví z chlórtrimetylmetylsilanu (Fluka, Švajčiarsko) pri podmienkach, ktoré sa obvykle používajú na prípravu Grignardových zlúčenín) v inertnom rozpúšťadle, ako je éter, napríklad dietyléter, pri výhodnej teplote -65 až 0 °C a následným odstránením hydroxylovej skupiny a trimetylsilylovej skupiny, napríklad fluoridom boritým v étere, ako je dietyléter, pri výhodných teplotách -20 až 30 °C, pri súčasnom odstránení
Q chrániacej skupiny R (najmä v prípade odstránenia terc-butoxykarbonylovej chrániacej skupiny) alebo pri následnom odstránení chrániacich skupín tak, ako je opísané pod nadpisom Odstránenie chrániacich skupín.
Možná je tiež príprava vychádzajúca zo zlúčeniny všeobecného vzorca XIV, kde R^ je fenylová skupina a R® je chrániaca skupina s použitím vhodného Wittigovho činidla, ako je metyltrifenylfosfóniumbromid alebo jodid s prítomnosťou silnej zásady, ako je amid sodný, pri teplotách -90 až 0 °C, následné odstránenie chrániacej skupiny R podlá podmienok uvedených pod nadpisom Odstránenie chrániacich skupín.
Zlúčeniny všeobecného vzorca X* sú známe, môžu sa pripraviť podľa známych postupov, alebo sa môžu pripraviť napríklad nasledujúcim spôsobom:
S použitím zlúčeniny všeobecného vzorca XXI
(XXI) kde Hal je atóm halogénu, najmä atóm brómu alebo chlóru, a jej reakciou s nenasýteným heterocyklom, ktorý obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina (-SO-) a sulfonylová skupina (-SO2-) a je nenasýtený alebo substituovaný nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, najmä triazol alebo tiofén, v prítomnosti tetrakis(trifenylfosf in) paládia ako katalyzátora a v prítomnosti nižšieho alkanoátu alkalického kovu, ako je acetát draselný, vo vhodnom rozpúšťadle, najmä Ν,Ν-dialkylalkanoylamide obsahujúcom nižšie alkylové skupiny a nižšiu alkanoylovú skupinu, ako je dimetylacetamid, pri výhodných teplotách 80 °C až teplota varu reakčnej zmesi, napríklad asi pri 150 °C, sa získa zodpovedajúca zlúčenina všeobecného vzorca X*, najmä 4-(tiazol-5-yl)-benzaldehyd alebo 4-(tiofen-2-yl)benzaldehyd.
Alternatívne je možné vychádzať zo zlúčeniny vzorca XXI, ktorá je definovaná vyššie, pri vzniku zodpovedajúceho dialkylacetalu obsahujúceho nižšie alkylové skupiny (pozri napr. J. Org. Chem. 56, 4280 (1991)), napríklad brómbenzaldehyddimetylacetalu (získa sa napríklad reakciou 4-brómbenzaldehydu s trimetylesterom kyseliny ortomravčej v alkohole, ako je metanol, v prítomnosti kyseliny, ako je kyselina p-toluénsulfonová (môže sa tiež použiť vo forme hydrátu) ) . Vzniknutý dialkylacetal 4-halogénbenzaldehydu obsahujúci nižšie alkylové skupiny sa potom prevedie, pomocou reakcie s horčíkom s prítomnosťou katalytického množstva jódu vo vhodnom rozpúšťadle, ako je éter, napríklad tetrahydrofurán, pri výhodnej teplote 0 až 70 0C na zodpovedajúce Grignardove činidlo všeobecného vzorca XXII,
(XXII) kde Hal je atóm halogénu, najmä atóm chlóru alebo brómu, a Z je nižšia alkylová skupina. Toto činidlo potom reaguje, v prítomnosti 1,3-bis(difenylfosfino)propánnikel (II) chloridu ako katalyzátora vo vhodnom rozpúšťadle, ako je éter, napríklad tetrahydrofurán, vo zvlášť výhodnom spôsobe sa pridá vhodný komplexný hydrid, najmä diizobutylalumíniumhydrid (napríklad rozpustený v uhľovodíku, ako je hexán), pri výhodnej teplote 0 až 60 °C, so zlúčeninou všeobecného vzorca XXIII
R9-Haľ (XXIII) kde R9 je nenasýtená heterocyklická skupina, ktorá obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina (-SO-) a sulfonylová skupina (-SO2-) a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, a kde Haľ je atóm chlóru, najmä atóm brómu, s následnou kyslou hydrolýzou acetalu (napríklad chlorovodíkom vo vode), pri vzniku zodpovedajúcej aldehydickej zlúčeniny všeobecného vzorca X*. Výhodnými zlúčeninami všeobecného vzorca XXIII pri príprave nasledujúcich zlúčenín všeobecného vzorca X* sú 2-brómtiazol, 2- alebo 3-brómpyridín alebo 2-chlórpyrazín: 4-(tiazol-2-yl)benzaldehyd, 4-(pyridin-2-yl alebo -3-yl)benzaldehyd alebo 4-(pyrazin-2-yl)benzaldehyd.
Zlúčeniny všeobecného vzorca X*, kde R4 je 4-(tetrazolyľ -5-yl) fenylová skupina sa získajú pomocou reakcie 4-kyanobenzaldehydu s azidom alkalického kovu, ako je azid sodný, v prítomnosti vhodného halogenidu alkalického kovu, ako chlorid lítny, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je 2-metoxyetanol, výhodne pri teplote varu. Pomocou reakcie s fenylalkylhalogenidom obsahujúcim nižšiu alkylovú skupinu alebo výhodne s fenylalkénmi obsahujúcimi nižšiu alkénovú skupinu, ako je 2-fenylpropén, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je toluén, a vhodnej kyseline, ako je kyselina metánsulfónová, výhodne pri teplote varu, sa získajú zodpovedajúce 1- alebo 2- fenylalkylové zlúčeniny obsahujúce nižšiu alkylovú skupinu všeobecného vzorca X*. Pomocou reakcie s nižším alkylhalogenidom, ako je jodid alebo bromid, napríklad metyljodid, v prítomnosti uhličitanu alkalického kovu, ako je uhličitan draselný alebo najmä uhličitan cesný, a vhodného rozpúšťadla, ako je dioxán, pri výhodnej teplote 0 až 30 °C, sa získajú zlúčeniny všeobecného vzorca X* substituované na tetrazolylovom kruhu nižšou alkylovou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, najmä 4-(ľ
-metyltetrazol-5-yl) benzaldehyd.
Zlúčeniny všeobecného vzorca X sa môžu pripraviť zo zodpovedajúcich zlúčenín všeobecného vzorca X* redukciou aldehydickej skupiny na hydroxymetylovú skupinu (napríklad pomocou komplexných hydridov, ako je lítiumalumíniumhydrid v etanole, disiamylboran v tetrahydrofuráne, borohydrid sodný v prítomnosti chloridu lítneho v diglykole alebo borohydrid sodný v etanole) a následným zavedením zvyšku X pomocou esterifikácie silnými anorganickými alebo organickými kyselinami, ako sú minerálne kyseliny, napríklad hydrohalogénkyseliny, ako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková alebo kyselina jodovodíková,alebo silnými organickými sulfónovými kyselinami, ako sú nesubstituované alebo substituované, napríklad atómom halogénu substituované, napríklad atómom fluóru substituované, nižšie alkánsulfónové kyseliny alebo aromatické sulfónové kyseliny, napríklad kyselina benzénsulfónová, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou, ako je metylová skupina, atómom halogénu, ako je atóm brómu a/alebo nitroskupinou, napríklad kyselina metánsulfónová, kyselina p-brómtoluénsulfónová alebo kyselina p-toluénsulfónová, alebo kyselina azidovodíková, podľa štandardných postupov. Napríklad pomocou reakcie s halogenidom anorganické kyseliny, ako sú tionylhalogenidy alebo fosforylhalogenidy (napríklad chloridy, bromidy, jodidy), môže byť zavedený halogénový zvyšok X, alebo môžu byť pomocou reakcie s inými vhodnými organickými alebo anorganickými kyselinami, ako sú silné organické sulfónové kyseliny (použité napríklad ako chloridy kyselín), získané zlúčeniny všeobecného vzorca X.
Východiskové látky (najmä všeobecného vzorca IV , V , VII*, IX* a (I1)* môžu byť tiež pripravené analogickým spôsobom, ako je uvedené v EP 0 521 827 alebo EP 0 672 448 alebo je možné ich pripraviť pomocou odkazov, ktoré sú tam uvedené, alebo sú známe, môžu sa pripraviť podľa známych postupov alebo sú komerčne dostupné.
Príprava východiskových látok na prípravu zlúčenín všeo82 becného vzorca I sa výhodne uvádza analogickým spôsobom a analogickými krokmi, ako je opísané v príkladoch.
Z východiskových látok podľa predloženého vynálezu sú zvlášť výhodné (ak nie sú substituenty špecificky definované, použije sa význam uvedený v definícii pre zlúčeniny všeobecného vzorca I):
(1) zlúčenina všeobecného vzorca XX, kde je met oxy kar bonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina a R je terc-butylová skupina;
(2) zlúčeniny všeobecného vzorca IV, kde R3· je met oxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina a R2 je terc-butylová skupina;
(3) zlúčeniny všeobecného vzorca III*, najmä tie, kde R5 je £
terc-butylová skupina a R je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina;
(4) zlúčeniny všeobecného vzorca XII;
(5) zlúčeniny všeobecného vzorca XII*;
(6) zlúčeniny všeobecného vzorca III;
(7) zlúčeniny všeobecného vzorca V;
(8) zlúčeniny všeobecného vzorca VII;
(9) zlúčeniny všeobecného vzorca IX;
(10) zlúčeniny všeobecného vzorca X;
(11) zlúčenina všeobecného vzorca X vybraná zo 4-(1-metyltetrazol-5-yl) -benzaldehydu, 4- (tiazol-2-yl) -benzaldehydu, 4-(pyridin-2-yl alebo -3-yl)-benzaldehydu, 4-(pyrazin-2-yl)-benzaldehydu, 4-(tiazol-5-yl)-benzaldehydu a
4-(tiofen-2-yl)-benzaldehydu;
(12) zlúčeniny všeobecného vzorca XXIV
(XXIV) kde R13 a R14 sú skupiny chrániace aminoskupinu, ktoré sú rôzne, vybrané zo skupín uvedených v postupe a), najmä terc-alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxylovú skupinu, ako je terc-butoxykarbonylová skupina, alebo skupina chrániaca acylaminoskupinu, najmä trifluóracetylova skupina; výhodne je R trifluóracetylová skupina a R14 je terc-butoxykarbonylová skupina; (tieto zlúčeniny sú zlúčeninami všeobecného vzorca IX, ktoré sú chránené na obidvoch aminoskupinách);
(13) zlúčeniny všeobecného vzorca XXV,
(XXV) kde R3·4 je skupina chrániaca aminoskupinu, rovnaká ako je definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca XXIV, najmä terc-butoxykarbonylová skupina;
(14) zlúčeniny všeobecného vzorca XXVI,
R
R \
o (XXVI)
kde R18 je skupina chrániaca aminoskupinu, najmä terc-butoxykarbonylová skupina, a ostatné zvyšky sú rovnaké, ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I;
(15) 1- [4- (2-terc-butyl-2H-tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -N- (terc-butyloxykarbonyl) amino-2-N- [N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucyl] amino-6-fenyl-2-azahexán (ako medziprodukt, ale farmaceutický aktívny) .
Pokiaľ sú prítomné skupiny tvoriace soli, zlúčeniny uvedené pod (1) až (15) ako východiskové látky môžu byť tiež vo forme solí.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Nasledujúce príklady slúžia na ilustráciu vynálezu, ale neobmedzujú jeho rozsah.
Teploty sú uvedené v stupňoch Celzia (°C). Pokiaľ nie je uvedená žiadna teplota, reakcia sa uskutočňuje pri laboratórnej teplote. Hodnoty Rf, ktoré udávajú pomer infiltrácie príslušnej látky vzhľadom na infiltráciu čela rozpúšťadla, sa určia na doskách s tenkou vrstvou silikagélu (Merck, Darmstadt, Nemecko) pomocou chromatografie na tenkej vrstve (TLC) s použitím systému rozpúšťadiel, ktorý je v každom prípade uvedený.
Použité HPLC gradienty:
HPLC2q_10q 20 % —> 100 % a) v b) 20 minút.
HPLC2q_10q (12') 20 % —> 100 % v k) 12 minút, potom 8 minút
100 % a)
HPLC5_6o 60 % a) v b) 15 minút.
Eluent a): acetonitril + 0,05 % kyselina trifluóroctová;
eluent b) : voda + 0,05 % kyselina trif luóroctová.
Kolóna (250 x 4,6 mm) vybavená reverznou fázou C18-Nucleosil (5 gm stredná veľkosť častíc, silikagel kovalentne derivát i zovaný oktadecylsilanmi, Macherey & Nagel, :Duren, Nemecko) . Detekcia pomocou UV-absorpcie pri 254 nm. Retenčné časy (tRefc) sú uvedené v minútach. Prietok 1 ml/min.
Ostatné použité skratky majú nasledujúci význam:
abs . absolútne (znamená, že je rozpúšťadlo bezvodé)
anal. elementárna analýza
Boe terc-butoxykarbonylová skupina
calc. vypočítané
DBU 1,8-diazabicyklo[5,4,0] undec-7-én-(1,5-5)
TLC chromatografia na tenkej vrstve
DIPE diizopropyléter
DMF dimetylformamid
DPPP [1,3-bis (difenylfosfino) propán]nikel(II)chlorid (Aldrich, Milwaukee, USA)
EDC hydrochlorid N-etyl-N'-(3-dimetylaminopropyl)kar-
bodiimidu
éter dietyléter
FAB-MS hmotnostná spektroskopia s odstrelovaním rýchlymi atómami
sat. nasýtený
HOAc kyselina octová
HOBT 1-hydroxybenzotriazol
HPLC vysokotlaková kvapalinová chromatografia
Hunigova zásada N-etyldiizopropylamín
MeOH metanol
min minúta(y)
NMM N-metylmorfolín
Pd/C paládium na aktívnom uhlí
Pd(PPh3)4 tetrakis(trifenylfosfín)paládium
izo-PrOH izopropanol
Rf pomer infiltrácie zlúčeniny čela eluentu pri TLC
SiO2 silikagél
m. p. teplota topenia
solanka nasýtený roztok chloridu sodného
TEA trietylamín
TFA kyselina trifluóroctová
THF
TPTU p-TSA tetrahydrofurán (dest. zo sodík/benzofenón)
0-(1,2-dihydro-2-oxo-l-pyridyl)-N,N,N',N'-tetrametyluróniumtetrafluoroborát kyselina p-toluénsulfónová
Zdroje niektorých derivátov aminokyselín použitých ako východiskové látky:
- (2R)-[(1'S)-Boc-amino-21-fenyletyl]oxiran J. Org. Chem. 50, 4615 (1985)
- (2R) -[(1'S)-(trifluóracetyl)amino-2'-fenyletyl] oxiran (Európsky patent EP 0 521 827, strana 78, príklad 16d))
-N-metoxykarbonyl-(L)-valín (príprava pozri Chem. Lett. 705 (1980))
-N-etoxykarbonyl-(L)-valín (príprava pozri J. Org. Chem. 60, 7256 (1995))
-N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucín (príprava pozri Chem. Lett. 705 (1980))
Príklad 1
1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl (L)-valyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Bez prístupu vlhkosti sa 735 mg (4,20 mmol) N-metoxykarbonyl (L)-valínu (pozri EP 0 604 368, príklad 2b)), 1548 mg (8,07 mmol) z EDC a 654 mg (4,844 mmol) HOBT umiestni do 10 ml dimetylformamidu. K bielej suspenzii sa pridá 1,13 ml (8,07 mmol) TEA a zmes sa mieša 3 0 minút pri laboratórnej teplote. Potom sa pridá 595 mg (1,62 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl) - fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu rozpusteného v 1 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša cez noc do ukončenia reakcie. Reakčná zmes sa zahustí odparením,· vzniknutý olej sa rozpustí v dichlórmetáne a premyje sa 10 % roztokom kyseliny citrónovej, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Vodná vrstva sa dvakrát extrahuje dichlórmetánom; spojené organické vrstvy sa filtrujú cez upchávku z bavlnenej vaty a zahustia odparením. Po kolónovej chromatograf ii (silikagél; dichlórmetán/metanol/voda/kyselina octová 85:13:1,5:0,5) a zrážaní DIPE z koncentrovaného roztoku v metylénchloride sa získa zlúčenina uvedená v názve: : TLC: Rg= 0,57 (dichlórmetán/metanol/voda/kyselina octová 85:13:1,5: :0,5); HPLC2q_iqq tRet = 3,0; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 683 .
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
la) 4- (Tiazol-5-yl) -benzaldehyd
V Cariovej trubici sa mieša zmes 3,7 g (20 mmol) 4-brómbenzaldehydu (Fluka, Švajčiarsko), 6,64 ml (93 mmol) tiazolu, 2,94 g octanu draselného a 1,16 g (1 mmol) Pd(PPh3)4 v 50 ml dimetylacetamidu 12 hodín pri 150 °C. Reakčná zmes sa zahustí odparením. K zvyšku sa pridá voda a zmes sa trikrát extrahuje dichlórmetánom. Organická vrstva sa filtruje cez upchávku z bavlnenej vaty, zahustí sa odparením a čistí sa pomocou chromatografie (silikagél; hexán/etylacetát 1:2), získa sa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_1qq tRet = 11,4;
^H-NMR (deuterochloroform) δ 9,98 (s, HCO), 9,03 (s, H(2)tiaz°1)> θ)32 (S) jj^tiazol), 7<95 a 7f85 (2df J=8z vždy
2H) ;ďalej tiež signály hydrátu (« 12 %) : 8,92 (s, H(2)t^azo^·), 8,15 (s, H(4)tiazo1), 7,62 a 7,53 (2d, J=8, vždy 2H) , 5,54 (s, HC(OH) 2) .
lb) N-l- (terc-butoxykarbonyl) -N-2- { [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -me89 tylidén}hydrazón
Roztok 1,22 g (6,45 mmol) 4-(tiazol-5-yl)-benzaldehydu a 1,12 g (6,14 mmol) terc-butylkarbazátu (Fluka, Švajčiarsko) v 40 ml etanolu sa mieša 12 hodín pri teplote 80 °C. Po ochladení a kryštalizácii pridaním 60 ml vody pri 0 °C sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia 170-171 °C; HPLC2O-ioo t-Ret = i3,5.
lc) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2-[4-(tiazol-5-yl)-benzyl] -hydrazín
V dusíkovej atmosfére sa 20,4 g (67,2 mmol) N-l- (terc-butoxykarbonyl)-N-2-{[4(tiazol-5-yl)-fenyl]-metylidén}-hydrazónu umiestni do 120 ml tetrahydrofuránu a pridá sa 4,67 g (70,7 mmol; 95 %) kyanobórhydridu sodného. K zmesi sa potom prikvapká 12,8 g (67,2 mmol) kyseliny p-toluénsulfónovej v 120 ml tetrahydrofuránu (pH 3-4) . Po 7 hodinách sa pridá voda a etylacetát a vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa ešte dvakrát etylacetátom. Organická vrstva sa premyje solankou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. K vzniknutému hustému oleju sa pridá 80 ml dichlóretánu a 8 0 ml IN roztoku hydroxidu sodného (pení) a zmes sa zohrieva 7 hodín do varu. Reakčná zmes sa ochladí a zriedi sa dichlórmetánom a vodou; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje dichlórmetánom. Organická vrstva sa suší nad síranom sodným, zahustí sa odparením a čistí sa pomocou chromatografie (silikagél, hexán/etylacetát 2:1). Po miešaní v hexáne sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 93-95 °C; TLC: Rf= 0,12 (hexán/etylacetát 2:1);
Elementárna analýza (C15H19N3°2S) vypočítané nájdené
C 58,99, C 58,98,
H 6,27, N 13,76, H 6,34, N 13,64,
S 10,50; S 10,66;
HPLC20-100: tRet = 10,1.
ld) 1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis [ (terc-butoxykarbonyl)amino]-fenyl-2-azahexán
Suspenzia 1,21 g (4,6 mmol) (2R)-[(1'S)-Boc-amino-2'-fenyletyl] oxiránu a 1,4 g (4,6 mmol) N-1-(terc-butoxykarbonyl) -N-2- [4- (tiazol- 5 -yl) -benzyl] -hydrazínu v 25 ml izopropylalkoholu sa zohrieva cez noc do varu. Reakčná zmes sa ochladí a pridá sa voda. Vrstva zrazeniny sa zleje z oleja, ktorý sa oddelí; olej sa suší vo vákuu a čistí sa pomocou chromatografie (silikagél; metylénchlorid/metanol 30:1), získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf= 0,2 (metylénchlorid/metanol 30:1); ΗΡΙιΟ20_10θ: tRet = 17,2.
le) 1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2 -azahexán
Roztok 1,14 g (2,0 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-5 (S) -2,5-bis [ (terc-butoxykarbonyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu v 100 ml kyseliny mravčej sa mieša 3 hodiny pri laboratórnej teplote a potom sa zahustí odparením. K zvyšku sa pridá nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného a dichlórmetán; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje dichlórmetánom. Organická vrstva sa premyje solankou, filtruje cez upchávku z bavlnenej vaty a zahustí sa odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve, ktorá sa priamo použije pri reakcii.
Príklad 2
1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) -valyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl)-amino-6-feriyl-2-azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 344 mg 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N-(N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu a 191 μΐ (1,74 mmol) NMM v 5,6 ml dimetylformamidu pridá k 122 mg (0,6 96 mmol) N-metoxy-karbonyl-(L)-valínu a 173 mg (0,58 mmol) TPTU v 2,9 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 16 hodín. Reakčná zmes sa naleje do zmesi ľad/voda, mieša sa 30 minút a filtruje. Po čistení zvyšku pomocou kolónovej chromatografie (silikagél; metylénchlorid/tetrahydrofurán 4:1) a miešania v étere sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 134-135 °C; HPLC2q_10q: tRet = 14,0;
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 697.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
2a) 1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-(trifluóracetyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
Suspenzia 5,32 g (20,5 mmol) (2R)-[(11 S)-(trifluóracetyl) amino-2'-fenyletyl]oxiranu a 5,7 g (18,6 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2- [4-(tiazol-5-yl)-benzyl]hydrazínu (príklad lc) v 95 ml izopropylalkoholu sa 8 hodín zohrieva do varu. Po ochladení sa reakčná zmes čiastočne zahustí odparením a nechá sa stáť pri 0 °C, dochádza ku kryštalizácii a zlúčenina uvedená v názve sa odfiltruje za odsávania a suší sa. TLC: Rf= 0,39 (metylénchlorid/tetrahydrofurán 10:1); ΗΡΒΟ20_100: tRet = 16'5; ’
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 565. Ďalší produkt je možné získať z matečných lúhov pomocou ich zohrievania s (2R)-[ (11 S) -(trifluóracetyl)amino-21-fenyletyl]oxiranom v izopropylalkohole a čistením kolónovou chromatografiou (silikagél; metylénchlorid/tetrahydrofurán 15:1).
2b) 1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(fcerc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-amino-6-fenyl-2-azahexán
100 ml IN roztoku uhličitanu draselného sa prikvapká k roztoku 5,646 g (10,0 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-(trifluóracetyl)-amino-6-fenyl-2-azahexánu v' 100 ml metanolu a zmes sa mieša 15 hodín pri 70 ?C. Pridá sa dichlórmetán a voda; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát extrahuje dichlórmetánom. Organické vrstvy sa dvakrát premyjú vodou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve:
Elementárna analýza (Ο25Η·32 Ν4θ35 (0,53 voda)) vypočítané C 62,80, H 6,97, N 11,72, S 6,71, H2O 2,00; nájdené C 63,2, H 7,01, N 11,57, S 6,49, H20 1,98;
HPLC20-100: fcRet
11,5.
2c) 1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyllamino - 6 - fenyl-2-azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 1,36 g (7,2 mmol) N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucínu (príklad 2e) , 2,59 g (13, mmol) EDC a 1,22 g (9,0 mmol) HOBT rozpustí v 20 ml dimetylformamidu. Po 15 minútach sa pridá 3,79 ml (27 mmol) TEA a potom sa prikvapká roztok 2,11 g (4,5 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -amino-6-fenyl-2-azahexánu v 41 ml dimetylformamidu. Po 3 hodinách sa reakčná zmes zahustí odparením. Vzniknutý olej sa rozpustí v etylacetáte a malom množstve tetrahydrofuránu a premyje sa dvakrát vodou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, dvakrát vodou a solankou. Vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom; spojené organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným a zahustia vo vákuu. Po čistení pomocou kolónovej chromatografie (silikagél; metylénchlorid/tetrahydrofurán 5:1) a kryštalizácii zo zmesi etylacetát/DIPE sa získa zlúčenina uvedená v názve:
HPLC2q_]_qq : tfcet = 16,0; FAB hmotnostné spektroskopia (M+H)+= 640.
2d) 1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
742 mg(l,16 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydro93 xy-2- (terc-butoxykarbony1)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu a 12 ml kyseliny mravčej sa mieša 7 hodín pri laboratórnej teplote a potom sa zahustí odparením. K zvyšku sa pridá nasýtený roztok hydrogenuhličitanu sodného a etylacetát; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa etylacetátom. Organické vrstvy sa spracujú vodou a solankou, sušia nad síranom sodným a zahustia vo vákuu odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve, ktorá sa použije priamo.
2e) N-(Metoxykarbonyl)-(L)-terc-leucín
23,5 ml (305 mmol) metylchloroformiátu sa v priebehu 20 minút pridá k roztoku 20 g (152 mmol) (L)-terc-leucínu (=2(S)-2-amino-3,3-dimetylbutánová kyselina = (L)-a-terc-butylglycín; Fluka, Švajčiarsko) v zmesi s 252 ml (504 mmol) 2N vodného roztoku hydroxidu sodného a 80 ml dioxánu a reakčný roztok sa zohrieva na 60 °C 14 hodín. Po ochladení na laboratórnu teplotu sa reakčný roztok premyje dvakrát dichlórmetánom. Vodná fáza sa okyslí na pH 2 pomocou 4N roztoku vodnej kyseliny chlorovodíkovej a extrahuje sa trikrát etylacetátom. Organické extrakty sa spoja, sušia sa nad síranom sodným a zahustia sa odparením, produkt začína tuhnúť. Vyluhovaním stuhnutej pevnej látky hexánom sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bieleho prášku. Teplota topenia 106-108 °C.
Príklad 3
1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl-(L)- terc-leucyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 292 mg 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 2d) a 165 /xl (1, 5 mmol) NMM v 4,8 ml dimetylformamidu pridá k 113,5 mg N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucínu (príklad 2e) a 149 mg (0, 50 mmol) TPTU v 2,5 ml dimetylformamidu a reakčná zmes sa mie94 ša 14 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa naleje do 0,2 litra zmesi ľad/voda, mieša sa 45 minút a filtruje. Po kolónovej chromatografii zvyšku (silikagel; metylénchlorid/ /etanol 20:1) a kryštalizácii zo zmesi etylacetát/éter/hexán sa získa zlúčenina uvedená v názve:teplota topenia 207-209 °C; TLC: Rf = 0,25 (metylénchlorid/etanol 20:1);
HPLC2q_j_qq: tRet = 14,7; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 711.
Príklad 4
1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) izoleucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl) - amino - 6 - f enyl - 2 - az ahexán
V argónovej atmosfére sa 292 mg 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-β-fenyl-2-azahexánu (príklad 2d) a 165 μΐ (1, mmol) NMM v 4,8 ml dimetylformamidu pridá k 113 mg N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu a 149 mg (0,50 mmol) TPTU v 2, 5 ml dimetylformamidu, zmes sa mieša 14 hodín pri laboratórnej teplote a spracuje sa analogickým spôsobom ako v príklade 3, získa sa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 139-141 °C; TLC: Rf = 0,7 (metylénchlorid/metanol 10:1);
HPLC2o-ioO: tRet=14,6;
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 711.
Príklad 5
1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-metoxykarbonyl- (L) - S-metylcysteinyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc- leucyl) amino- 6 - f enyl - 2 - azahexán
V argónovej atmosfére sa 292 mg l-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc95
-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexán (príklad 2d) a 165 μΐ (i,5 mmol) NMM v 4,8 ml dimetylf ormamidu pridá k 116 mg (0,60 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-S-metylcysteínu a 149 mg (0,50 mmol) TPTU v 2,5 ml dimetylformamidu, zmes sa mieša 5 hodín pri laboratórnej teplote a spracuje sa analogickým spôsobom ako v príklade 3, získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,4 (metylénchlorid/metanol 10:1);
HPLC2q_10q: tRet = 13,6; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 715 .
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
5a) N-metoxykarbonyl-(L)-S-metylcystein
Pri chladení ľadom sa 16,8 g (177,5 mmol) metylesteru kyseliny chlórmravčej prikvapká k roztoku 12,0 g (88,8 mmol)
S-metyl- (L)-cysteínu ((S)-2-amino-3-metylmerkaptopropiónová kyselina: Fluka, Švajčiarsko) v 150 ml 2N roztoku hydroxidu sodného 18 ml dioxánu a zmes sa mieša cez noc pri 70 °C až sa neukonči reakcia. Reakčná zmes sa zriedi 150 ml dichlórmetánu; vodná vrstva sa oddelí, okyslí IN kyselinou chlorovodíkovou a trikrát extrahuje etylacetátom. Po sušení nad síranom sodným a zahustení etylacetátovej vrstvy odparením sa získa zlúčenina uvedená v názve: FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 194.
Príklad 6
1- [4-(Tiazol-5-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-etoxykarbonyl- (L) -valyl)amino-5-(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl)-amino-6-fenyl-2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 344 mg 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 2d) a 191 μΐ (1/ 74 mmol) NMM v 5,6 ml dimetylformamidu pridá k 132 mg (0, 7 mmol) N-etoxykarbonyl-(L)-valínu (EP 0 604 368, príklad 9a) a 173 mg (0,58 mmol) TPTU v 2,9 ml dimetylformamidu, zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc a spracuje sa analogickým spôsobom ako v príklade 3, získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,45 (metylénchlorid/tetrahydrofurán 4:1); hplc20-100: fcRet = 14'7;
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 711.
Príklad 7
1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino - 6 - f enyl - 2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 213 mg (1,13 mmol) N-metoxykarbonyl - (L) - terc-leucínu (príklad 2e) , 431 mg (2,25 mmol) EDC a 304 mg (2,25 mmol) HOBT umiestni do 18 ml DMF. Po 15 minútach sa pridá 627 μΐ (4,5 mmol) TEA a 0,75 mmol 1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-met-oxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu. Po 2 hodinách sa pridá voda a etylacetát; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát etylacetátom. Organické vrstvy sa premyjú dvakrát vodou, nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, dvakrát vodou a solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia sa odparením. Po kolónovej chromatografií (silikagél; metylénchlorid/tetrahydrofurán 5:1) a kryštalizácii z éteru sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 200-201 °C;
HPLC2O-ioo: fcRet = 14'0;
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 697.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
7a) 1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
3Ί
V dusíkovej atmosfére sa 2,66 g (15,2 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) -valínu, 5,46 g (28,5 mmol) EDC a 2,57 g (19 mmol) HOBT rozpustí v 42 ml dimetylformamidu. Pridá sa 7,9 ml (57 mmol) TEA a po 2 0 minútach sa prikvapká roztok 4,4 6 g (9,5 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 2b) v 85 ml dimetylformamidu. Po 1,5 hodine sa reakčná zmes spracuje analogickým spôsobom ako v príklade 2č. Po kryštalizácii zo zmesi tetrahydrofurán/éter sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia 114-115 °C; HPLC2q_1qq: tRet = 15,1.
FAB hmotnostná spektroskopia (Μ+Η)+ = 626.
7b) 1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N- (N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
1,25 g (2,0 mmol) 1- [4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl- (L) valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu a 18 ml kyseliny mravčej reaguje analogickým spôsobom ako v príklade 2d), vzniká zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_-]_oo: tRet = 1O'°·
Príklad 8
1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-2-Ν-(N-etoxykarbonyl-(L) -valyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6 -fenyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 7 sa 213 mg (1,13 mmol) N-etoxy-karbonyl-(L)-valínu, 431 mg (2,25 mmol) EDC a 304 mg (2,25 mmol) HOBT v 18 ml dimetylformamidu a 627 μΐ (4,5 mmol) TEA reaguje s 0,75 mmol 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5 (S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 7b), získa sa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 243-244 °C; HPLC20_100: tRet = 14,0.
FAB hmotnostná spektroskopia (Μ+Η)+
697.
Príklad 9
1- [4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-S (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino - 6 - f enyl-2 -azahexán
V atmosfére argónu sa 0,6 mmol 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4 (S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu a 198 μΐ (1,8 mmól) NMM v 5,8 ml dimetylformamidu pridá k 136 mg (0,72 mmól) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu a 179 mg (0,60 mmol) TPTU 3 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša 14 hodín pri laboratórnej teplote a spracuje sa analogickým spôsobom ako v príklade 3, získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,59 (metylénchlorid/tetrahydrofurán 3:1); HPLC20_10q: tRet = 14, 0;
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 697.
Príklad 10
1- [4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) -S-metylcysteinyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 0,58 mmol 1-[4-(tiazol-5yl) -fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N- (N-metoxykarbonyl-(L)191 μΐ (1,74 mmol) NMM k 134 mg (0,696 mmol) (príklad 5a) a 173 mg
-valyl)-amino-6-fenyl-2-azahexánu a v 5,6 ml dimetylformamidu pridá N-metoxykarbonyl-(L)-S-metylcysteínu (0,58 mmol) TPTU v 2,9 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša 15 hodín pri laboratórnej teplote a spracuje sa analogickým spôsobom ako v príklade 3, získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf=0,17 (metylénchlorid/tetrahydrofurán 4:1); HPLC20_10q: tRet = 13,0; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 701.
Príklad 11
1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl)amino-5(S)-N- (N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 0,5 mmol 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izo-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu a 165 μΐ (1,5 mmol) NMM v 4,8 ml dimetylformamidu pridá k 113,5 mg (0,60 mmol) N-metoxykarbonyl-(L) -terc-leucínu (príklad 2e) a 149 mg (0, mmol) TPTU v 2,5 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša 14 hodín pri laboratórnej teplote. Pridá sa voda s:ľadom a etylacetát. Organická vrstva sa dvakrát premyje vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí odparením. Po kolónovej chromatografií (silikagél; etylacetát) a kryštalizácii zo zmesi etylacetát/éter/hexán sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,42 (metylénchlorid/etanol 10:1);
HPLC2q_q_qq · tRet = 14,8; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 711.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
11a) 1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izo-leucyl) amino - 6 - fenyl- 2-azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 1,36 g (7,2 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucínu, 2,59 g (13,5 mmol) EDC a 1,22 g (9 mmol) HOBT rozpustí v 20 ml dimetylformamidu. Po 3 0 minútach sa pridá 3,79 ml (27 mmol) TEA a prikvapká sa roztok 2,11 g (4,5 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 2b) v 40 ml dimetylformamidu. Po 3 hodinách sa reakčná zmes spracuje analogickým spôsobom ako v príklade 2c a získa sa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia 163-166 °C;
Elementárna analýza (C33H45N5OgS (0,14 H2O))
100 vypočítané C 61,71, H 7,11, N 10,90, S 4,99, H20 0,39;
nájdené C 61,61, H 7,10, N 10,79, S 4,76, H20 0,4;
HPLC2q_10q:tRet = 16,0; FAB hmotnostné spektroskopia (M+H)+=640 lib) l-[4-(Tiazol-5-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
320 mg (0,50 mmol) 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu a 6 ml kyseliny mravčej reaguje analogickým spôsobom ako v príklade 2d, vzniká zlúčenina uvedená v názve, ktorá sa použije priamo.
Príklad 12
1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl - (L) -izo-leucyl) amino-6 - f enyl -2-azahexán
Analogicky ako v príklade 7 sa 140 mg (0,80 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 288 mg (1,5 mmol) EDC a 135 mg (1,0 mmol) HOBT v 2 ml dimetyl f ormamidu a 418 μΐ TEA reaguje s 0,5 mmol 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu v 5 ml dimetylformamidu, vzniká zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 202-204 °C; HPLC2q_10q:tRet = 14,0; FAB hmotnostné spektroskopia (M+H)+ = 697.
Príklad 13
1-[4-(Tiazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L)-izoleucyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 7 sa 175 mg (0,92 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucín, 332 mg (1,7 mmol) EDC
101 a 156 mg (1,15 mmol) HOBT v 2,5 ml dimetylformamidu a 483 μΐ (3,47 mmól) TEA reaguje s 0,578 mmól 1-[4-(tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 11b) v 5,2 ml dimetylformamidu, získa sa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 213-216 °C; HPLC20-100 : tRet = 14 ’ 7 ' FAJB hmotnostné spektroskopia (M+H) + = 711.
Príklad 14
1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-etoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2 -azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 7 sa 175 mg (0,92 mmol) N-etoxykarbonyl-(L)-valínu, 332 mg (1,7 mmol) EDC a 156 mg (1,15 mmol) HOBT v 2,5 ml dimetylformamidu a 483 μΐ (3,47 mmol) TEA reaguje s 0,578 mmol 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izo-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 11b) v 5,2 ml dimetylformamidu, získa sa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 200-203 °C; HPLC2q_1qq:tRet = 14> &> FAB hmotnostné spektroskopia (M+H)+ = 711.
Príklad 15
1- [4- (Tiazol-5-yl) -fenyl-4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - S-me tyl cysteinyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 0,5 mmol 1-[4-(tiazol-5-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl)-amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 11b) a 165 μΐ (1,5 mmol) NMM v 4,8 ml dimetylf ormamidu pridá pri chladení ľadom k 116 mg (0,60 mmol) N-metoxykarbonyl-(L) -S-metylcysteínu (príklad 5a) a 149 mg (0,50 mmol) TPTU v 2,5 ml dimetylfor102 amidu a zmes sa mieša 12 hodín pri laboratórnej teplote. Pridá sa voda a etylacetát; vodná vrstva sa oddelí, extrahuje dvakrát etylacetátom. Organická vrstva sa dvakrát premyje vodou a solankou, suší nad síranom sodným a čiastočne zahustí odparením. Po pridaní éteru zlúčenina uvedená v názve kryštalizuje: teplota topenia 179-181 °C; TLC: Rf = 0,67 (metylénchlorid/ /etanol 10:1); HPLC2q_10q:tRet = 13,6; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 715.
Príklad 16
1- [4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-S(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán
V atmosfére argónu sa 2,58 g (13,7 mmol) N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucínu a 4,09 g (13,7 mmol) TPTU rozpustí v 15, 5 ml dimetylformamidu; pri chladení sa pridá 5,7 ml (24, mmol) Hunigovej zásady a zmes sa mieša 10 minút. Potom sa pridá roztok 2,29 g (6,20 mmol) 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4 (S) -hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu v 15,5 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 16 hodín. Svetložltý reakčný roztok sa naleje do vody s ľadom; pridá sa etylacetát a zmes sa mieša 3 0 minút. Vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát etylacetátom. Organické vrstvy sa dvakrát extrahujú vodou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a dvakrát solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí odparením. Po kolónovej chromatografii (silikagél; hexán/etylacetát 1:3) a kryštalizácii zo zmesi metylénchlorid/DIPE sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0, 18 (hexán/etylacetát 1:3); HPLC20_1qq ^2') : 'Ret = 11,0; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 711; [a] 0 (c = 0,6, etanol) = = -46 °.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
16a) 4-(Tiazol-2-yl)-benzaldehyd
103
V argónovej atmosfére sa 9,2 g (379 mmol) horčíka umiestni do 84 ml tetrahydrofuránu a zohrieva sa na 60 °C. V priebehu 30 minút sa prikvapká roztok 82,6 g (357 mmol) dimetylacetalu 4-brómbenzaldehydu (príprava pozri J. Org. Chem. 56, 4280 (1991)) v 677 ml tetrahydrofuránu a zmes sa mieša pri teplote varu 40 minút. Grignardov roztok sa ochladí, zleje do prikvapkávacej nálievky a prikvapká sa v priebehu 3 0 minút k červenej suspenzii 31,7 ml (338 mmol) 2-brómtiazolu (Fluka, Švajčiarsko) a 5,39 g (9,95 mmol) DPPP v 1,68 1 tetrahydrofuránu. Zmes sa mieša 12 hodín pri laboratórnej teplote; potom sa pridá 5,3 9 g DPPP a zmes sa mieša ďalších 7 hodín. Pridá sa 84 0 ml vody a zmes sa mieša 10 minút; tetrahydrofurán sa odparí s použitím rotačnej odparky a zvyšok sa mieša 1,5 hodiny v 1,0 1 éteru a 340 ml 2N kyseliny chlorovodíkovej. Organická vrstva sa dvakrát premyje 0,5 N kyselinou chlorovodíkovou, vodou, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, vodou, solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí odparením. Po chromatografii (silikagél; hexán/etylacetát 4:1) a vylúhovaní v hexáne sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf= 0,21 (hexán/etylacetát 3:1); teplota topenia: 91-92 °C;
Elementárna analýza (CiqH7NOS) vypočítané C 63,47, H 3,73, N 7,40, S 16,94;
nájdené C 63,14, H 3,79, N 7,27, S 17,08;
1H NMR (deuterochloroform) δ 10,05 (s, HCO) , 8,15 (d, J=8,
2H), 7,95 (m, 3H) , 7,45 (d, J=3, 1H) .
16b) N-l- (terc-Butoxykarbonyl) -N-2- { [4- (tiazol-2-yl) -fenyl] -metylidén}-hydrazón
Roztok 27,6 g (145 mmol) 4-(tiazol-2-yl)-benzaldehydu a 19,7 g (149 mmol) terc-butylkarbazátu v 920 ml etanolu sa mieša 18 hodín pri 80 °C. Po ochladení, zahustení odparením a miešaní s DIPE sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf =0,31 (toluén/etylacetát 3:1); HPLC20_10Q: tRet = 14,5.
104
16c) N-l- (terc-Butoxykarbonyl) -N-2- [4- (tiazol-2-yl) -benzyl] -hydrazín
V dusíkovej atmosfére sa 77,6 g (256 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl) -N-2-{ [4 (tiazol-2-yl)-fenyl]-metylidén}-hydrazónu umiestni do 450 ml tetrahydrof uránu, a pridá sa 16,9 g (257 mmol; 95 %) kyanoborohydridu sodného. Prikvapká sa roztok
49,6 g (261 mmol) monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej v 450 ml tetrahydrof uránu (pH 3-4) . Po 17 hodinách sa pridá ďalších 3,38 g kyanoborohydridu sodného; pH zmesi sa pomocou roztoku monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej upraví na 3-4 a zmes sa mieša ďalšie 3 hodiny do ukončenia reakcie. Pridá sa voda a etylacetát; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje etylacetátom. Organické vrstvy sa premyjú solankou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a dvakrát solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia odprením. Vzniknutý viskózny olej sa prevedie do 300 ml 1,2-dichlóretánu; pomaly sa pridá 300 Ml IN roztoku hydroxidu sodného (penenie) a zmes sa zohrieva 3,5 hodiny do varu. Zmes sa ochladí a zriedi dichlórmetánom a vodou; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát extrahuje dichlórmetánom. Organická vrstva sa suší nad síranom sodným, zahustí odparením a čistí pomocou chromatografie (silikagél; toluén/acetón 9:1-6:1). Po miešaní v hexáne sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,3 (hexán/etylacetát 3:2); HPLC2O_ioo: fcRet = H'1·
16d) 1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[(terc-butoxykarbonyl) amino] - 6-fenyl-2-azahexán
Roztok 6,00 g (22,8 mmol) (2R)-[(1'S)-Boc-amino-2'-fenyletyl] oxiránu a 5,37 g (17,6 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl) -N-2- [4- (tiazol-2-yl) -benzyl] -hydrazínu v 550 ml izopropanolu sa cez noc zohrieva do varu. Reakčná zmes sa ochladí na laboratórnu teplotu, počas miešania a chladenia ľadom sa naleje do 0,2 1 vody. Po filtrácii za odsávania, premytí vodou a éterom a sušení sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf= 0,36 (hexán/ /acetón 3:2); HPLC20_10Q(12,j: tRet = 12,7. Ďalší produkt sa môže izolovať z matečných lúhov pomocou chro105 matografie (silikagel; hexán/acetón 3:2).
16e) 1- [4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S) -2,5-diamino-6 -fenyl-2-azahexán
Roztok 4,3 g (7,56 mmol) 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [ (terc-butoxykarbonyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu v 378 ml kyseliny mravčej sa mieša 3,5 hodiny v argónovej atmosfére pri laboratórnej teplote a potom sa zahustí odparením. K zvyšku sa pridá nasýtený roztok hydrogenuhličitanu sodného a dichlórmetán; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát extrahuje dichlórmetánom. Organické vrstvy sa premyjú solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia odparením,:získa sa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_]_qq (^21) : tRet = = 6,8.
Príklad 17
1- [4- (Tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L) -valyl)-amino-6-fenyl-2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 294 mg 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)-amino-6-f enyl-2-azahexánu a 165 μΐ (1,5 mmol) NMM v 4,8 ml dimetylformamidu pridá k 113,5 mg (0,60 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) - terc- leucínu (príklad 2e) a 149 mg (0,50 mmol) TPTU v 2,5 ml dimetylformamidu pri 0 °C a zmes sa mieša 18 hodín pri laboratórnej teplote. Pridá sa etylacetát a voda; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát etylacetátom. Organické vrstvy sa premyjú dvakrát vodou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia odparením. Po kolónovej chromatografii (silikagél; dichlórmetán/tetrahydrofurán 4:1) a zrážaní hexánom z koncentrovaného roztoku v dichlórmetáne sa získa zlúčenina uvedená v názve: ΗΡύΟ20_100: tRet = 14,5; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 697.
106
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
17a) 1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-(trifluóracetyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
S vylúčením vzduchu sa 4,8 g (18,5 mmol) (2R)-[(1'S)- (trif luóracetyl) amino-2 1 -fenyletyl] oxiranu a 3,78 g (12,4 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2-[4-(tiazol-2-yl)benzyl]hydrazínu (príklad 16c) v 62 ml izopropanolu zohrieva 10 hodín do varu. Po ochladení reakčnej zmesi, filtrácii a premytí éterom sa získa zlúčenina uvedená v názve:
Elementárna analýza (c27h31n4f3o4s) vypočítané nájdené
C 57,44, H 5,53, C 57,27, H 5,49,
N 9,92, F 10,09, S 5,68; N 9,91, F 9,94, S 5,70;
HPLC2q_2_qq: tRet = 16,9; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 565 .
Ďalší produkt je možné izolovať z filtrátu po zahustení odparením, kolónovej chromatografii (silikagél; metylénchlorid/tetrahydrofurán 25:1) a miešaní v zmesi éter/etylacetát.
17b) 1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl) amino-5(S)-amino-6-fenyl-2-azahexán ml IN roztoku uhličitanu draselného sa prikvapká k 3, 12 g (5,5 mmol) 1-[4-(tiazol-2-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-(trifluóracetyl)amino-6-fenyl-2- azahexánu v 55 ml metanolu a zmes sa mieša 9 hodín pri 70 °C. Zmes sa ochladí a pridá sa asi 30 ml metanolu a odparí sa, pridá sa dichlórmetán a voda a vodná vrstva sa oddelí a extrahuje dichlórmetánom; organické vrstvy sa premyjú vodou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia odparením , získa sa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_10q: tRet = 11,9; FAB hmotová spektroskopia (M+H)+ =
469 .
107
17c) l-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl) amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6f enyl-2 -az ahexán
V dusíkovej atmosfére sa 1,4 g (8,0 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) -valínu, 2,87 g (15 mmol) EDC a 1,35 g (10 mmol) HOBT rozpustí v 22 ml dimetylformamidu. Po 45 minútach sa pridá 4,2 ml (3 0 mmol) TEA a potom sa prikvapká roztok 2,34 g (5,0 mmol) 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S)-amino-6-fenyl-2-azahexánu v 45 ml dimetylformamidu. Po 1,5 hodine sa reakčná zmes zahustí odparením; zvyšok sa prevedie do dichlórmetánu a premyje vodou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou. Vodná vrstva sa dvakrát extrahuje dichlórmetánom; spojené organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným a zahustia odparením. Po kolónovej chromatografii (silikagél; metylénchlorid/etylacetát 2:1) a kryštalizácii zo zmesi etylacetát/éter sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 178-179 °C; HPLC20_100: tRefc = 15,8.
17d) 1-[4- (Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
0,94 g (1,5 mmol) 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)valyl) amino-6-f enyl-2-azahexánu a 18 ml kyseliny mravčej sa 6 hodín mieša pri laboratórnej teplote a potom sa spracuje analogickým spôsobom ako v príklade 2d) , získa sa zlúčenina uvedená v názve: FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 526.
Príklad 18
1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino - 6 - f enyl-2 -az ahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 7 sa 106 mg (0,56
108 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu, 201 mg (1,05 mmol) EDC a 95 mg (0,7 mmol) HOBT v 4,6 ml dimetylformamidu a 293 μΐ (2, 1 mmol) TEA reaguje s 0,35 mmol 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4 (S) -hydroxy-2-amino-5(S) -N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu, získa sa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 227-229 °C; HPLC2q_1qq: tRet= 14/5; FAB hmotová spektroskopia (M+H) + = 697.
Príklad 19
1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-etoxykarbonyl- (L) - valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl - (L) -valyl) amino-6- fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 7 sa 106 mg (0,56 mmol) N-etoxykarbonyl-(L)-valínu, 201 mg (1,05 mmol) EDC a 95 mg (0,7 mmol) HOBT v 4,6 ml dimetylformamidu a 293 μΐ (2,1 mmol) TEA reaguje s 0,35 mmol 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4 (S) -hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-4-(L)-valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánom, získa sa zlúčenina uvedená v názve :
Elementárna analýza:
{C35H48N9°7S (0'20 H20)) vypočítané nájdené
C 60,01, H 6,96, C 60,07, H 6,78,
N 12,00, S 4,58, H20 0,51; N 11,93, S 4,70, H2O 0,52;
HPLC2o-ioo: tRet
14,6;
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+=697.
Príklad 20
1- [4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis(N- (N-metoxykarbonyl- (L)-valyl)amino] -6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 7 sa 140 mg (0,80 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 288 mg (1,5 mmol) EDC
109 a 135 mg (1,0 mmol) HOBT v 2,2 ml dimetylformamidu a 418 μΐ (3,0 mmol) TEA reaguje s 0,5 mmol 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánom v 4,5 ml dimetylformamidu, získa sa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 207-210 °C; HPLC2q_2_qq: tRet = 13,8; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ =
683 .
Príklad 21
1- [4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
V argónovej atmosfére sa 294 mg 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu a 165 μΐ (1,5 mmol) NMM v 4,8 ml dimetylformamidu pridá k 113,5 mg (0,60 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucínu (príklad 2e) a 149 mg (0,50 mmol) TPTU 2,5 ml dimetylformamidu pri 0 °C a zmes sa mieša 16 hodín pri laboratórnej teplote. Pridá sa zmes lad-voda a etylacetát; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyje dvakrát vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Po kolónovej chromatografií (silikagel; etylacetát) a kryštalizácii zo zmesi etylacetát/ /éter/hexán sa získa zlúčenina uvedená v názve:
Elementárna analýza (C36H50NgO7S (1,4 % H2o)) vypočítané C 59,97, H 7,15, N 11,66, S 4,45;
nájdené C 59,99, H 7,18, N 11,35, S 4,59;
TLC: Rf = 0,51 (metylénchlorid/tetrahydrofurán 3:1);
HPLC20_100: tRet = 15,2; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+=711
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
110
21a) 1-[4-Tiazol-2-yl)-fenyl-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl)amino-6-f enyl-2 -azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 938 mg (4,96 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu, 1,78 g (9,3 mmol) EDC a 838 mg (6,2 mmol) HOBT rozpustí v 13,7 ml dimetylformamidu. Po 3 0 minútach sa pridá 2,6 ml(18,6 mmol) TEA a potom sa prikvapká roztok 1,45 g (3,1 mmol) 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 17b) v 28 ml dimetylformamidu. Po 3 hodinách sa reakčná zmes zahustí odparením; zvyšok sa prevedie do etylacetátu a malého množstva tetrahydrofuránu a premyje sa vodou, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, vodou a solankou. Vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom; spojené organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným a zahustia sa odparením. Po kolónovej chromatograf ii (silikagél; dichlórmetán/tetrahydrofurán 5:1) a po miešaní v zmesi etylacetát/DIPE sa získa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_]_qq: tj^et = 16,3; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 640.
21b) 1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5 (S)-N- (N- met oxykarbonyl- (L) - izoleucyl) amino-6- fenyl -2 -azahexán
761 mg (1,2 mmol) 1-[4-(tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu a 12 ml kyseliny mravčej sa 7 hodín mieša pri laboratórnej teplote a potom sa spracuje analogickým spôsobom ako v príklade 2d) , získa sa zlúčenina uvedená v názve.
Príklad 22
1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-etoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino - 6 - f eny 1 - 2 - azahexán
111
V argónovej atmosfére sa 321 mg (0,60 mmol) 1- [4- (tiazol-2-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl- (L)-izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 21b) a 182 mg (1,8 mmol) NMM v 5,8 ml dimetylformamidu pridá k 136 mg (0,72 mmol) N-etoxykarbonyl-(L)-valínu a 178 mg (0,60 mmol) TPTU v 3 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša 15 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa naleje do zmesi ľad/voda, mieša sa 30 minút a filtruje sa. Po kryštalizácii z tetrahydrofuránu s DIPE a hexánom sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 209-211 °C; HPLC2q_1qq: tRet = 15,2; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 711.
Príklad 23
1-[4-(Tiazol-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) -valyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl)amino - 6 - fény1-2 -azahexán
V argónovej atmosfére sa 321 mg (0,60 mmol) l-[4- (tiazol-2-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S) -N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 21b) a 182 mg (1,8 mmol) NMM v 5,8 ml dimetylformamidu pridá k 126 mg (0,72 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu a 178 mg (0,60 mmol) TPTU v 3 ml dimetylformamidu; zmes sa mieša 15 hodín pri laboratórnej teplote a potom sa spracuje analogickým spôsobom ako v príklade 3. TLC: Rf = 0,15 (metylénchlorid/tetrahydrofurán 4:1) ;
HPLC20_1q0: tRet = 14,5; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 697.
Príklad 24
1- [4- (Tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -S-metylcysteinyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
112
V argónovej atmosfére sa 303 mg (0,50 mmol) 1- [4- (tiazol-2-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 21b) a 165 μΐ (1,5 mmol) NMM v 5 ml DMF pridá k 116 mg (0,60 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-S-metylcysteínu (príklad 5a) a 14 9 mg (0,50 mmol) TPTU v 2,5 ml dimetylformamidu pri chladení ľadom a zmes sa mieša 4 hodiny pri laboratórnej teplote. Zmes sa naleje do ľadu a vody, mieša sa 30 minút a dvakrát sa extrahuje etylacetátom. Organické vrstvy sa premyjú dvakrát vodou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, dvakrát vodou a solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia vo vákuu. Po kolónovej chromatografii (silikagél; metylénchlorid/etanol 20: :1) a miešaní v DIPE sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,39 (metylénchlorid/metanol 10:1); HPLC2q_10q: tRet = 14,0; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 715 .
Príklad 25 l - {4-[2-(l-Metyl-1-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl}-4(S)-hydroxy-2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6 -fenyl-2 -azahexán
S vylúčením vzduchu sa 261 mg (1,38 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) - terc- leucínu (príklad 2e), 496 mg (2,58 mmol) EDC a 232 mg (1,72 mmol) HOBT rozpustí v 7,5 ml dimetylformamidu. Po 15 minútach sa pridá 0,72 ml (5,17 mmol) TEA a 585 mg (0,86 mmol) hydrochloridu 1-{4[2-(1-metyl-1-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl] -fenyl}-4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl-(L) terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu v 3,5 ml dimetylformamidu. Po 20 hodinách sa zmes zahustí odparením a k zvyšku sa pridá voda a dichlórmetán; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje dichlórmetánom. Organické vrstvy sa premyjú 10 % roztokom kyseliny citrónovej, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia odparením. Po zrážaní z koncentrovaného roztoku v etylacetáte pomocou zmesi DIPE/hexán sa získa
113 zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_iqo= tRet. = 17,5; FAB hmotová spektroskopia (M+H) + - 814.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
25a) 4-(Tetrazol-5-yl)-benzaldehyd
20,0 g (0,47 mol) chloridu lítneho a 20,5 g (0,315 mol) azidu sodného sa pridá k 41,2 g (0,315 mol) 4-kyanobenzaldehydu (Fluka, Švajčiarsko) v 310 ml metoxyetanolu (Fluka, Švajčiarsko) a zmes sa zohrieva do varu v argónovej atmosfére 6 hodín. Po ochladení sa reakčná zmes naleje do 1 litra zmesi ľad/37 % kyselina chlorovodíková 10:1 a mieša sa do skončenia reakcie. Po filtrácii a premytí vodou sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 180-182 °C;
1H-NMR (perdeuterodimetylsulfoxid) δ 10,11 (s, HCO), 8,29 a 8,14 (2d, J=8, vždy 2H) .
25b) 4-[2-(1-Metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-benzaldehyd
V dusíkovej atmosfére sa roztok 6,9 g (58 mmol) 2-fenylpropénu (Fluka, Švajčiarsko) a 22 ml toluénu prikvapká k 10 g (57 mmol) 4-(tetrazol-5-yl)-benzaldehydu a 1 g (5,7 mmol) kyseliny metánsulfónovej v 44 ml vriaceho toluénu a zmes sa potom 1 hodinu mieša pri vare. Ochladená reakčná zmes sa dvakrát premyje nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve:
^H NMR (perdeuterodimetylsulfoxid) δ 10,09 (s, HCO), 8,29 a
8,08 (2d, J=8, každý 2H), 7,33 a 7,17 (2m, 5H), 2,17 (s, 6H).
25c) N-l - (terc-butoxykarbonyl)-N-2-{4-[2-(l-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]fenyl-metylidén}-hydrazón
13,0 g (42 mmol) 4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-benzaldehydu a 5,98 g (45,2 mmol) terc-butylkarbazátu
114 v 300 ml etanolu sa mieša 20 hodín pri 80 °C. Reakčná zmes sa potom zahustí odparením na polovicu; pridá sa 420 ml vody a zmes sa trikrát extrahuje etylacetátom. Organické vrstvy sa premyjú dvakrát nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia sa odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve:
HPLC20-100: fcRet
17,7.
25d) N-l- (terc-butoxykarbonyl) -N-2- {4- [2- (1-metyl-1-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]benzyl}-hydrazín
V dusíkovej atmosfére sa 11,6 g (28,5 mmol) N-l - (terc-butoxykarbonyl) -N-2 - {4 - [2- (l-metyl-l-fenyletyl): -2Htetrazol-5-yl] fenylmetylidén}-hydrazónu umiestni do 140 ml tetrahydrofuránu a pridá sa 2,32 g (31,3 mmol; 85 %) kyanobórhydrid sodný. Prikvapká sa roztok 5,42 g (28,5 mmol) kyseliny p-toluénsulfónovej v 90 ml tetrahydrof uránu. Po 4 hodinách sa reakčná zmes zahustí odparením; zvyšok sa prevedie do etylacetátu a premyje sa nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou. Vodná vrstva sa extrahuje dvakrát etylacetátom; organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným, zahustia sa odparením. Zvyšok sa prevedie do 250 ml metanolu a pri chladení sa pridá 125 1 tetrahydrofuránu, 37 g K2B4O7 x H20 v 125 ml vody a zmes sa mieša cez noc. Zmes sa čiastočne zahustí odparením s použitím rotačnej odparky a zriedi sa dichlórmetánom a vodou; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje dichlórmetánom. Organická vrstva sa suší nad síranom sodným a odparí sa, vzniká zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_100: tRet = 16,4.
25e) 1-{4- [2- (1-Metyl-l-fenyl-etyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl}-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-(trifluóracetyl)amino-6 -fenyl-2-azahexán
Zmes 6,05 g (23,4 mmol) (2R)-[(1'S)-(trifluóracetyl)amino-2'-fenyletyl]oxiránu a 9,54 g (23,4 mmol) N-l-(terc-butoxy-karbonyl) -N-2- {4- [2- (1-metyl-l-fenyl-etyl) -2H-tetrazol-5-yl]-benzyl}-hydrazínu v 200 ml izopropylalkoholu sa
115 hodín zohrieva na 90 °C. Po zahustení odparením a chromatograf ii (silikagél; metylénchlorid/éter 20:1) a kryštalizácii z metanolu sa získa zlúčenina uvedená v názve:
Elementárna analýza (C34H40N7O4F3) vypočítané C 61,16, H 6,04, N 14,68;
nájdené C 61,37, H 6,02, N 14,80.
25f) 1- {4-[2-(1-Metyl-1-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl}-
-4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -amino-6- fenyl-2-azahexán ml IN roztoku uhličitanu draselného sa prikvapká pri 70 °C k 1,9 g (2,8 mmol) 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl] -fenyl}-4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl)amino-5 (S) -(trifluóracetyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu v 29 ml metanolu a zmes sa mieša 15 hodín. Po ochladení a odparení vo vákuu sa pridá dichlórmetán a voda; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje s dichlórmetánom. Organická vrstva sa premyje vodou, suší sa nad síranom sodným a zahustí odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_1qq: tRet = 15,1; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 469.
25g) 1-{4- [2-(1-Metyl-1-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl] -fenyl}-4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
S vylúčením vzduchu sa 868 mg (4,59 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucínu (príklad 2e) , 1,64 g (8,58 mmol) EDC a 773 mg (5,72 mmol) HOBT rozpustí v 24,5 ml dimetylformamidu. Po 15 minútach sa pridá 2,39 ml (17,2 mmol) TEA a 1,64 g (2, 86 mmol) 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl} -4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-amino-6-fenyl-2-azahexánu v 12 ml dimetylformamidu. Po 20 hodinách sa zmes zahustí odparením, k zvyšku sa pridá voda a dichlórmetán; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát dichlórmetánom. Organická vrstva sa premyje 10 % roztokom kyseliny citrónovej, ne nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Po vylúhovaní DIPE sa získa zlúčenina uvedená v názve:
HPLC2q_1oo: tRet = 18'6'· FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+= = 743 .
25h) Hydrochlorid 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl}-4 (S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu
V dusíkovej atmosfére sa 1,37 g (1,84 mmol) l-{4-[2-(l-metyl-l-fenyletyl) -2H-tetrazol-5-yl] -fenyl}-4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-met oxykarbonyl - (L) -terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu mieša v 64 ml acetonitrilu a 64 ml vodnej 2N kyseliny chlorovodíkovej pri laboratórnej teplote 6 dní. Reakčná zmes sa filtruje a filtrát sa zahustí odparením pri vysokom vákuu pri laboratórnej teplote a nakoniec sa lyofilizuje z dioxánu, získa sa zlúčenina uvedená v názve :
hplc20-100: fcRet = 14,2; 1H-NMR (deuterochloroform) δ 8,10 (d, J=8, 2Harom),
1H aróm ), 7,53 (m, 2Harom), 7,32 (m, 3H Taronh
7,17 (m,
7,8 (m,
6Harom),
23 (s 2H ctetrazol-chraniaca skupinaj
Príklad 26
1- [4-(Tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyI-2-azahexán
34,5 ml 80 % vodného roztoku kyseliny sírovej sa pri chladení ľadom pridá k 345,6 mg (0,424 mmol) 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl) -2H-tetrazol-5-yl] -fenyl} -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,
5-bis [N- (N-me t oxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu. Po 75 minútach sa reakčná zmes naleje do 800 ml zmesi voda/ľad a trikrát sa extrahuje etylacetátom. Organické vrstvy sa premyjú trikrát vodou a solankou, sušia sa nad síra117 nom sodným a zahustia odparením. Po kolónovej chromatogrfii (silikagél; etylacetát/etanol 8:1 až 2:1) sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,38 (etylacetát/etanol 2:1); HPLC2q_2_Oq: tRet = 12'5; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 696 .
zohriať na laboratórnu 1 ekvivalent uhličitanu
Príklad 27
1- [4- (2-Metyl-2H-tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán a (1-metyl-lH-tetrazolyl izomér)
V dusíkovej atmosfére sa 100 mg (0,144 mmol) 1- [4- (tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(Nmetoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu rozpustí v 1 ml zmesi dime.tylformamid/dioxán 1:1 a pri 0 °C sa pridá 73,2 mg (0,224 mmol) uhličitanu cesného a 6,9 μΐ (0, 111 mmol) metyljodidu v 1 ml dioxánu. Zmes sa nechá pomaly teplotu cez noc a pridá sa ďalší cesného a metyljodidu. Po ďalších dňoch pri laboratórnej teplote sa reakčná zmes zriedi etylacetátom a IN roztokom hydroxidu sodného. Vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa dvakrát premyje vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Po kolónovej chromatografii (silikagél; dichlórmetán/etylacetát 1:1 až 1:2) sa získa čistá výsledná zlúčenina A (asi 3 diely), potom 1-[4-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucyl) amino]-6-f enyl-2-azahexánu (B) (asi 1 (metylénchlorid/etylacetát 1:1); hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 0,09 (metylénchlorid/etylacetát 1:1);
hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 710.
diel) : A : TLC: Rf =0,26
hplc2o-ioo: tRet = 14,2; FAB
= 710. B: TLC: Rf = 0,09
hplc2O_ioo: tRet = 13,3; FAB
Alternatívny spôsob prípravy zlúčeniny uvedenej v názve:
118
V dusíkovej atmosfére sa 14,56 g (77 mmol) N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucínu a 22,87 g (77 mmol) TPTU mieša v 77 ml dimetylformamidu a 37,3 ml (218 mmol) Hunigovej zásady pri laboratórnej teplote 30 minút. Reakčná zmes sa potom pri chladení ľadom prikvapká k 35,2 mmol dihydrochloridu 1- [4-(2-metyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5diamino-6-fenyl-2-azahexánu v 77 ml dimetylformamidu. Po 15 hodinách miešania pri laboratórnej teplote sa reakčná zmes čiastočne zahustí odparením a zvyšok (asi 80 ml) sa naleje do 5 1 vody; zmes sa mieša 30 minút a surový produkt sa odfiltruje. Po rozpustení v 90 ml vriaceho etanolu, pridaní 600 ml DIPE a ochladení sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia 191- -192 °C; [a]D = -46 °C (c = 0,5; etanol).
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
27a) 4-(2-Metyl-2H-tetrazol-5-yl) -benzaldehyd
Pri chladení ľadom sa roztok 75,5 g (0,434 mol) 4-(tetrazol-5-yl)-benzaldehydu (príklad 25a) v 550 ml zmesi dimetylformamid/dioxán 1:1 prikvapká k 179,7 g (1,30 mol) uhličitanu draselného v 200 ml zmesi dimetylformamid/dioxán; zmes sa mieša 30 minút a potom sa pridá 40 ml (0,64 mmol) metyljodidu. Zmes sa mieša 3 hodiny v ľadovom kúpeli a potom 15 hodín pri laboratórnej teplote; reakčná zmes sa naleje do 2,8 1 zmesi ľad/voda a mieša sa 10 minút; zlúčenina uvedená v názve sa odfiltruje a premyje vodou: teplota topenia: 137-139 °C; 200 ml DMF/dioxán 1:1, zmes sa mieša 30 minút a potom sa pridá 40 ml (0,64 mol) metyljodidu. Zmes sa mieša 3 hodiny v ľadovom kúpeli a 15 hodín pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa naleje do 2,8 1 ľadovej vody a mieša sa 10 minút.
1h-NMR (perdeuterometanol/deuterochloroform) δ 10,05 (s, HCO), 8,29 a 8,03 (2d, J=8, vždy 2H) , 4,43 (s, 3H) .
27b) N-l- (terc-But y loxykarbony 1) -N-2- [4- (2-metyl-2H-tetrazol-5-yl) -fenylmetylidén] -hydrazón
119
75,0 g (0,40 mol) 4-(2-metyl-2H-tetrazol-5-yl) -benzaldehydu a 56,4 g (0,426 mol) terc-butylkarbazátu v 1400 ml izopropanolu sa mieša 24 hodín pri 90 °C. K ochladenej reakčnej zmesi sa pridá 2,2 1 vody a zmes sa mieša do skončenia reakcie; zlúčenina uvedená v názve sa odfiltruje a premyje vodou: teplota topenia: 195-197 °C;
Elementárna analýza (C14H18N6°2) vypočítané C 55,62, H 6,00, N 27,80;
nájdené C 55,50, H 5,93, N 27,61.
27c) N-l- (terc-Butyloxykarbonyl) -N-2- [4- (2-metyl-2H-tetrazol-5-yl) -benzyl] -hydrazín
V dusíkovej atmosfére sa 30,0 g (99,2 mmol) N-l- (terc-butyloxykarbonyl) -N-2- [4- (2-metyl-2H-tetrazol-5-yl) fenylmetylidén]-hydrazónu umiestni do 350 ml tetrahydrofuránu a pridá sa 8,79 g (119 mmol; 85 %) kyanoborohydridu sodného. K tejto zmesi sa prikvapká roztok 22,6 g (119 mmol) monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej v 175 ml tetrahydrofuránu (dochádza k zrážaniu). Po 2 hodinách sa pevná látka odfiltruje, premyje dôkladne etylacetátom a vyradí sa. K filtrátu sa pridá voda a etylacetát; vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Vzniknuté kryštály sa prevedú do 417 ml metanolu a 208 ml tetrahydrofuránu a prikvapká sa roztok 127 g (415 mmol) tetrahydrátu tetraboritanu draselného v 417 ml vody (vzniká pena) . Zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc, naleje sa do 2,2 1 vody a trikrát sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí odparením. Surový produkt sa spojí s látkou z druhej, rovnakej dávky a filtruje sa cez silikagél s použitím zmesi dichlórmetán/tetrahydrofurán ako eluentu. Po zahustení odparením na objem asi 0,1 1 a pridaní 150 ml DIPE sa získa kryštalická zlúčenina uvedená v názve
120 (ktorá, môže byť alternatívne tiež získaná pomocou katalytickej hydrogenácie N-l-(Boe)-N-2-[4-(2-metyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl-metylidén]-hydrazónu na Lindlarovom katalyzátore v metanole) : teplota topenia: 100-102 °C; TLC: Rf =0,47 (me ty lénchlorid/tetrahydrof urán 10:1) ;
^H NMR (deuterometanol) δ 8,06 a 7,52 (2d, J=8, vždy 2H) , 4,42 (s, 3H) , 4,00 (s, 2H) , 1,44 (s, 9H);
HPLC20-100: fcRet = 10'2·
27d) 1-[4-(2-Metyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(terc-butyloxykarbonyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
36,33 g (138 mmol) (2R)-[(1’S)-Boc-amino-2'-fenyletyl]oxiranu a 38,17 g (125 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2- [4-(2-metyl-2H-tetrazol-5-yl)-benzyl]-hydrazínu sa zohrieva v 964 ml izopropanolu pri 90 °C 20 hodín. Kryštalická zlúčenina uvedená v názve sa môže oddeliť z chladnej reakčnej zmesi filtráciou. Ďalší produkt vykryštalizuje z filtrátu po pridaní 1,2 1 vody: teplota topenia: 175-178 °C; TLC: Rf = 0,22 (metylénchlorid/etylacetát 6:1); HPLC20_100: tRet = 16,9.
27e) Dihydrochlorid 1-[4-(2-metyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexán ml 4N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej sa pridá k roztoku 20,0 g (35,2 mmol) 1-[4-(2-metyl-2H-tetrazol-5-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [ (terc-butyloxykarbonyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu v 279 ml tetrahydrofuránu. Zmes sa mieša 8 hodín pri 50 °C, potom sa opatrne zahustí odparením pri laboratórnej teplote. Olejovitý zvyšok sa prevedie do dvojnásobného množstva etanolu a znova sa zahustí odparením, získa sa kryštalická zlúčenina uvedená v názve. Aby bolo možné určiť analytické údaje, 1 g surového produktu sa mieša v 6 ml teplého izopropanolu, pridá sa 6 ml DIPE, zmes sa ochladí a oddelí sa filtráciou: teplota topenia: 227-230 °C;
121
hplc20-100 : tRet 7'4;
Elementárna analýza (C19H25N7 0,2 HC1 (+0,20 H20))
vypočítané C 51,40, H 6,22, N 22,08, Cl 15,97, H2O 0,81;
nájdené C 51,50, H 6,33, N 22,28, Cl 15,88, H2O 0,80.
Príklad 28
1- {4 - [2- (1-Metyl-l-fenyl-etyl) -2H-tetrazol-5-yl] -fenyl} -4 (S) -hydroxy-2N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izo-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
S vylúčením vzduchu sa 261 mg (1,38 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucínu, 496 mg (2,58 mmol) EDC a 232 mg (1,72 mmol) HOBT rozpustí v 7,5 ml dimetylformamidu. Po 15 minútach sa pridá 0,72 ml (5,17 mmol) TEA a 585 mg (0,86 mmol) hydrochloridu 1-{4- [2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl}-4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 25h) v 3,5 ml dimetylformamidu. Po 25 hodinách sa reakčná zmes spracuje tak, ako je opísané v príklade 25i. Po zrážaní pomocou DIPE z koncentrovaného roztoku v dichlórmetáne sa získa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_100: tRet = 17'5; FAB hmotnostné spektroskopia (M+H)+= = 814.
Príklad 29
1- [4- (Tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - izoleucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-1 eucy 1) amino - 6 - f enyl - 2 - azahexán ml 80 % vodného roztoku kyseliny sírovej sa pri chladení ľadom pridá k 354 mg (0,435 mmól) 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl) -2H-tetrazol-5-yl] -fenyl} -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl- (L) 122
- terc-leucyl)-amino-6-fenyl-2-azahexánu. Po 75 minútach miešania sa zmes spracuje analogickým spôsobom ako v príklade 26, získa sa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_1qq: tRet = 12,6; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + =696.
Príklad 30
1- [4-(2-Metyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-metoxykarbonyl- (L) -izo-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 72 mg (0,103 mmol) l-[4-(tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl)amino-6-feny 1-2-azahexán rozpustí v 0,5 ml dimetylformamidu a pri 0 °C sa pridá 71 mg (0,217 mmol) uhličitanu cesného a 6,9 μΐ (0,111 mmol) metyljodidu v 1 ml dioxáne. Zmes sa nechá pomaly cez noc zohriať na laboratórnu teplotu a potom sa zriedi etylacetátom a IN roztokom hydroxidu sodného. Vodná vrstva sa oddelí a dvakrát sa extrahuje etylacetátom. Organické vrstvy sa dvakrát premyjú vodou a solankou, sušia sa nad síranom sodným a zahustia sa odparením, získa sa zlúčenina A, ktorá ďalej obsahuje asi 20 % 1-[4-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucyl) amino-6-feny 1-2-azahexánu (B) :
HPLC2o-ioo A: tRet = 14'3; HPLC20-100 B: tRet = 13'3' FAB hmotová spektroskopia (M+H) + = 710.
Príklad 31
1- {4-[2-(1-Metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl}-4(S)-hydroxy-2N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán S
S vylúčením vzduchu sa 128 mg (0,67 mmol) N-metoxykarbonyl - (L) - terc- leucínu (príklad 2e), 243 mg (1,27 mmol) EDC
123 a 114 mg (0,84 mmol) HOBT rozpustí v 2 ml dimetylformamidu. Po 15 minútach sa pridá 0,35 ml (2,5 mmoDTEA a 286 mg (0,42 mmol) hydrochloridu 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl] -fenyl}-4 (S) -hydroxyamino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl) amino-6-f enyl-2-azahexánu v 1,5 ml dimetylformamidu. Po 20 hodinách sa reakčná zmes spracuje analogickým spôsobom, ako je opísané v príklade 25. Po chromatografií (silikagél; etylacetát/toluén/metylénchlorid 2:1:1) sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,22 (metylénchlorid/etylacetát 1:1); HPLC20_100 : tRet = 17,3; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 814.
Východiskové látky sa pripravia nasledujúcim spôsobom:
31a) 1-{4-[2-(1-Metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl] -fenyl}-4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L)-izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
S vylúčením vzduchu sa 270 mg (1,43 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu, 513 mg (2,67 mmol) EDC a 241 mg (1, 78 mmól) HOBT rozpustí v 7,8 ml dimetylformamidu. Po 15 minútach miešania sa pridá 0,75 ml (5,4 mmol) TEA a 510 mg (0,89 mmol) 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl} -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 25f) v 3,7 ml dimetylformamidu. Po 2 0 hodinách sa reakčná zmes spracuje analogickým spôsobom ako je opísané v príklade 2g) , získa sa zlúčenina uvedená v názve: HPLC2q_100 : tRet = 18,5; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = =743.
31b) Hydrochlorid 1-{4-[2-(1-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl] - fenyl}-4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu
V dusíkovej atmosfére sa 317 mg (0,43 mmol) l-{4-[2-(l-metyl-l-fenyletyl) -2H-tetrazol-5-yl] -fenyl} -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-f enyl-2-azahexán v 15 ml acetonitrilu a 15 1
124
2Ν kyseliny chlorovodíkovej mieša 20 hodín pri 50 °C a zmes sa spracuje analogickým spôsobom, ako je opísané v príklade 25h, získa sa zlúčenina uvedená v názve: HPLC20_10q : tRet = 14,4.
Príklad 32
1- [4- (Tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 26 sa z l-{4-[2-(l-metyl-l-fenyletyl)-2H-tetrazol-5-yl]-fenyl}-4(S)-hydroxy-2-N- (N-metoxykarbonyl - (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L)-izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu odstráni chrániaca skupina pomocou 80 % kyseliny sírovej a získa sa zlúčenina uvedená v názve.
Príklad 33
1- [4-(2-Metyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν-(N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 30 sa 1-[4-(tetrazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl - (L) - izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu v zmesi dimetylformamid/dioxán metyluje s uhličitanom céznym a metyljodidom.
Príklad 34
1-[4-(2-terc-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl-(L) -terc-leucyl)amino] -6-fenyl-2-azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 54 mg (0,28 mmol)
125
N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucínu a 84 mg (0,28 mmol) TPTU v 1 ml dimetylformamidu a 94 μΐ (0,85 mmol) NMM mieša 10 minút pri laboratórnej teplote. K tejto zmesi sa potom pridá 175 mg (0,283 mmol) hydrochloridu 1-[4-(2-terc-butyl-2H-tetrazol-5-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -amino-2-Ν- [N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucyl] amino-6-fenyl-2-azahexánu v 2 ml dimetylformamidu a reakčná zmes sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote do skončenia reakcie. Reakčná zmes sa naleje do 40 ml vody a extrahuje sa trikrát dichlórmetánom. Organická vrstva sa filtruje cez upchávku z bavlnenej vaty, zahustí sa odparením a čistí sa pomocou chromatografie (silikagél; metylénchlorid/metanol 25:1): TLC: R^ = 0,48 (metylénchlorid/ metanol 19:1);
HPLC2q_2_qq (2.2' ) : fcRet = 11'8; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 752.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
34a) N-l-(terc-Butoxykarbonyl)-N-2-[N-metoxykarbonyl - (L)- terc-leucyl]-hydrazín
S vylúčením vzduchu sa 10,0 g (52,8 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) - terc- leucínu, 11,1 g (58 mmol) EDC a 7,85 g (58 mmol) HOBT umiestni do 13 0 ml etylacetátu a pridá sa 7,0 ml (63 mmol) NMM. Po 30 minútach sa pridá 7,69 g (58 mmol) terc-butylkarbazátu a zmes sa potom mieša pri laboratórnej teplote 16 hodín. Reakčná zmes sa zriedi 300 ml etylacetátu a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou. Vodné vrstvy sa znova dvakrát extrahujú etylacetátom. Organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným a zahustia sa odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve.
1H NMR (perdeuterometanol) δ 3,98 (s, 1H), 3,66 (s, 3H), 1,47 a 1,03 (2s, 2x 9H) .
34b) [N-Metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl] -hydrazín
52,8 mmol N-l- (terc-butyloxykarbonyl) -N-2- [N-metoxykar126 bonyl-(L) - terc-leucyl]-hydrazín sa rozpustí v 100 ml 4N kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne a mieša sa 18 hodín pri laboratórnej teplote. Suspenzia sa zahustí odparením; zvyšok sa prevedie do nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a extrahuje sa štyrikrát veľkým množstvom dichlórmetánu. Po filtrácii organickej vrstvy cez upchávku z bavlnenej vaty a zahustení odparením sa získa zlúčenina uvedená v názve:
1H NMR (perdeuterometanol) δ 3,89 (s, 1H), 3,66 (s, 3H), 0,99 (s, 9H) .
34c) N-l-[N-Metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl]-N-2-[4-(tetrazol- 5-yl)-fenylmetylidén]-hydrazón
Roztok 3,0 g (14,8 mmol) [N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl] -hydraz inu a 2,57 g (14,8 mmol) 4-(tetrazol-5-yl)-benzaldehydu (príklad 25a) v 30 ml izopropanolu sa 18 hodín zohrieva do varu. Zmes sa ochladí; pridá sa 100 ml vody a zrazená zlúčenina uvedená v názve sa odfiltruje:
*·Η NMR (perdeuterometanol) δ 8,23 (s, 1H) , 8,15-7,9 (m, 4H) ,
4,08 (s, 1H), 3,67 (s, 3H), 1,06 (s, 9H).
34d) N-l- [N-Metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl] -N-2- [4- (2- terc.butyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenylmetylidén]-hydrazón
V autokláve sa 3,0 g (8,3 mmol) N-l-[N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl]-N-2-[4-(tetrazol-5-yl)-fenylmetylidén]-hydrazónu, 1,2 g izobuténu a 54 μΐ kyseliny metánsulfónovej v 25 ml toluénu zohrieva 1 hodinu na 110 °C. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Vodné vrstvy sa znova extrahujú dvakrát etylacetátom,· organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným a zahustia sa odparením. Po kolónovej chromatografii (silikagél; hexán/etylacetát 1:1) sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,22 (hexán/etylacetát 1:1);
HPLC
20-100 (12') : fcRet =
11,1;
127
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 416.
34e) N-l-[N-Metoxykarbonyl-(L)- terc.leucyl]-N-2-[4-(2-terc.butyl-2H-tetrazol-5-yl)-benzil]-hydrazín
V dusíkovej atmosfére sa 2,00 g (4,81 mmol) N-l-[N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl] -N-2- [4- (2-terc.butyl-2H-tetrazol-5-yl) -fenylmetylidén] -hydrazónu rozpustí v 9 ml tetrahydrofuránu a pridá sa 317 mg (4,8 mmol; 95 %) kyanoborohydridu sodného. Prikvapká sa roztok 915 mg (4,8 mmol) monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej v 9 ml tetrahydrofuránu. Po 18 hodinách sa pridá etylacetát a zmes sa premyje nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Vodné vrstvy sa extrahujú ďalej dvakrát etylacetátom. Organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným a zahustia sa odparením. Zvyšok sa prevedie do 20 ml tetrahydrofuránu a 20 ml vody, pridá sa
6,18 g (20 mmol) tetrahydrátu tetraboritanu draselného a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Vodné vrstvy sa dvakrát extrahujú etylacetátom; organické vrstvy sa sušia nad síranom sodným a zahustia sa odparením. Po kolónovej chromatografií (silikagél; hexán/etylacetát 1:2) sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,28 (hexán/etylacetát 1:2);
1H NMR (perdeuterometanol) δ 8,07 a 7,53 (2d, J=8, vždy 2H), 4,03 (s, 2H), 3,84 (s, 1H), 3,64 (s, 3H), 1,81 a 0,92 (2s, vždy 9H).
34f) 1-[4-(2-terc-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl] -4(S) -hydroxy-5(S)-N-(terc-butyloxykarbonyl)amino-2-Ν-[N-metoxykarbonyl- (L)-terc-leucyl]amino-6-fenyl-2-azahexán
737 mg (2,80 mmol) (2R)-[(11 S)-Boc-amino-2'-fenyletyl]oxiránu a 1,17 g (2,80 mmol) N-l-[N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl] -N-2- [4- (2- terc-butyl-2H-tetrazol-5-yl) -benzyl] -hydrazínu sa zohrieva v 15 ml izopropy1alkoholu 6 hodín pri 90 °C. Po pridaní 100 ml vody produkt vykryštalizuje a odfiltruje sa.
128
Po rekryštalizácii pridaním zmesi DIPE/hexán ku koncentrovanému roztoku v dichlórmetáne pri 0 °C sa získa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,34 (dichlórmetán/metanol 30:1);
HPLC20-100 (12 1) : tRet = 12'5·
34g) Hydrochlorid 1-[4-(2-terc-butyl-2H-tetrazol-5-yl) fenyl]-4 (S) -hydroxy-5 (S) -amino-2-Ν- [N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl]amino- 6 -fenyl-2 -azahexánu
V dusíkovej atmosfére sa 200 mg (0,293 mmol) 1-[4-(2- terc-butyl-2H-tetrazol-5-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -N- (terc-butyloxykarbonyl) amino-2-Ν- [N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leu cyl] amino-6-fenyl-2-azahexánu rozpustí v 2,3 ml tetrahydrofuránu; pridá sa 1,6 ml vodnej 2N kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša 8 hodín pri 50 °C. Reakčný roztok sa zahustí odparením; zvyšok sa niekoľkokrát prevedie do etanolu a znova sa zahustí odparením (získa sa zlúčenina uvedená v názve): TLC: Rf = 0,08 (dichlórmetán/metanol 30:1); HPLC2q_1qq^2, ) : tRet= = 9'9; 1H NMR (perdeuterometanol) δ 8,03 a 7,50 (2d, J=8, vždy 2Η),
7,32 (m, 5H), 4,18 a 3,91 (2d, J=4, 2H), 3,80 (m, 1H), 3,68 (s, 1H) , 3,58 (S, 3H) , 3,57 (m, 1H) , 3,3-2,9 (m, 4H) , 1,81 a 0,75 (2s, vždy 9H) .
Príklad 35
1- [4- (2-terc-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 54 mg (0,308 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) -valínu a 92 mg (0,308 mmol) TPTU v 1 ml dimetylformamidu a 101 μΐ (0,91 mmol) NMM mieša 10 minút pri laboratórnej teplote. Pridá sa 190 mg (0,308 mmol) hydrochloridu 1- [4- (2- terc-butyl-2H-tetrazol-5-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) 129
-amino-2-Ν- [N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl] amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 34g) v 2 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša cez noc pri laboratórnej teplote do skončenia reakcie. Reakčná zmes sa zriedi dichlórmetánom a premyje sa solankou. Vodná vrstva sa extrahuje dvakrát dichlórmetánom; organické vrstvy sa filtrujú cez upchávku z bavlnenej vaty, zahustia sa odparením a čistia sa pomocou chromatografie (silikagél; metylénchlorid/metanol 30:1); TLC: Rf = 0,21 (metylénchlorid/ metanol 19:1); FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 738.
Príklad 36
1- [4-(2-Metyl-2H-tetrazol-5-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-Ν- (Nmetoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
Zlúčenina uvedená v názve sa pripraví analogickým spôsobom ako zlúčeniny uvedené v iných príkladoch.
Príklad 37
1- [4 -(Pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-S(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl- (L)-valyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
S vylúčením vzdušnej vlhkosti sa 455 mg (2,6 mmol) N-metoxykarbonyl - (L) -valínu, 940 mg (4,9 mmol) EDC a 405 mg (3 mmol) HOBT umiestni do 10 ml dimetylformamidu a zohrieva sa na 40 °C. Pridá sa 1,1 ml (7,9 mmol) TEA a zmes sa mieša ďalších 15 minút. Pridá sa 500 mg (0,98 mmol) hydrochloridu 1-[4 -(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc. Reakčná zmes sa značne zahustí odparením za vysokého vákua; zvyšok sa rozpustí v dichlórmetáne a premyje sa za odsávania roztokom uhličitanu sodného (jedenkrát), fosfátovým pufrom pH=7 (dvakrát) a solankou. Po odstránení rozpúšťadla sa zvyšok čistí pomocou chromatografie na silikagéli (eluent: metylénchlorid/metanol 15:1). Frakcie obsahujúce produkt sa
130 zahustia a zlúčenina uvedená v názve sa zráža DIPE. Produkt je možné lyofilizovať z dioxánu. HPLC2q_10q : tRet = 10,06; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 677.
1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz): 8,58 (m, 1H) , 7,78 a 7,50 (vždy d, J=5, 2x2H), 8,0-7,73 (m, 2H), 7,33 (m, 1H), 7,30-7,05 (m, 5H), 3,62 a 3,60 (vždy s,2x3H), 1,85 a 1,68 (vždy m,2xlH), 0,76 (t, J=4, 6H) , 0,65 a 0,58 (vždy d, J=4, 2x3H) .
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
37a) Dimetylacetal 4-brómbenzaldehydu
21,1 g (114 mmol) 4-brómbenzaldehydu a 20 ml (182 mmol) trimetylortoformiátu (obidva Fluka, Švajčiarsko) sa rozpustí v 35 ml metanolu, a pri laboratórnej teplote sa pridá 0,65 g (3,4 mmol) monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej (exotermná reakcia). Reakčná zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 20 hodín. Kyselina sa potom neutralizuje 0,62 ml 30 % roztoku metanolátu sodného v metanole (3,4 mmol); reakčná zmes sa zahustí odparením s použitím rotačnej odparky a zvyšok sa destiluje. Výsledná zlúčenina sa získa vo forme bezfarebnej kvapaliny. TLC: Rf = 0,58 (hexán/etylacetát 2:1). Teplota varu: 90-92 °C (0,4 kPa).
1H NMR (deuterochloroform; 200 MHz): 7,50 a 7,32 (vždy d, J=9, 2x2H) , 5,36 (s, 1H), 3,31 (s, 6H) .
37b) 4-(Pyridin-2-yl)-benzaldehyd
6,93 g (29,9 mmol) dimetylacetalu 4-brómbenzaldehydu v 40 ml tetrahydrofuránu sa prikvapká k teplej (40 až 50 °C) suspenzii 0,8 g (31,6 mmol) horčíkových hoblín a malému množstvu jódu v tetrahydrofuráne. Reakčná zmes sa zohrieva na 65 °C a mieša sa pri tejto teplote 30 minút. Zmes sa nechá ochladiť na laboratórnu teplotu a grignardovo činidlo sa prikvapká k roztoku 4,46 g (28,2 mmol) 2-brómpyridínu (Fluka, Švajčiarsko) a 0,4 g (0,74 mmol) DPPP (Fluka, Švajčiarsko)
131 v 100 ml tetrahydrofuránu (slabá exotermná reakcia) . Po prikvapkaní sa reakčná zmes zohrieva do varu 4 hodiny a nechá sa ochladiť; pridá sa 100 ml vody. Zmes sa pomocou rotačnej odparky zahustí asi na 50 ml, zriedi sa etylacetátom a extrahuje sa 0,1 N roztokom kyseliny chlorovodíkovej (trikrát). Spojené chlorovodíkové extrakty sa miešajú pri laboratórnej teplote 20 minút, pH sa upraví na zásadité pomocou koncentrovaného roztoku amoniaku a extrahuje sa dichlórmetánom. Po odstránení rozpúšťadla sa zvyšok čistí pomocou chromatografie na silikagéli (hexán/etylacetát 2:1). Frakcie obsahujúce výslednú zlúčeninu sa zahustia a požadovaná zlúčenina spontánne vykryštalizuje.
TLC: Rf = 0,22 (hexán/etylacetát 2:1). HPLC2q_1qq: tRet = S,08.
1H NMR (deuterochloroform; 200 MHz): 8,73 (d, J=5, 2H), 8,16 a 7,97 (vždy d, 2x2H), 7,80 (d, J=4, 2H), 7,3 (m, 1H) .
37c) N-l-(terc-Butoxykarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-2-yl) -fenyl]-metylidén}-hydrazón
Roztok 2 g (1,05 mmol) 4-(pyridin-2-yl)-benzaldehydu a 1, 37 g (1 mmol) terc-butylkarbazátu (Fluka, Švajčiarsko) v 30 ml etanolu sa mieša 5 hodín pri 80 °C (po 4 hodinách sa pridá ďalšieho 0,05 ekvivalentu terc-butylkarbazátu). Reakčná zmes sa nechá ochladiť, zriedi sa vodou a požadovaná zlúčenina vykryštalizuje. TLC: Rf = 0,51 (metylénchlorid/metanol 15:1).
HPLC
20-100 'Ret = 8,92.
1H NMR (deuterochloroform; 200 MHz): 8,68 (m, 1H), 8,21 (s,
1H) , 7,98 (d, J=9, 2H časť A aromatického AB systému), 7,85 (s, 1H), 7,8-7,6 (m, 4H), 7,22 (m, 1H), 1,53 (s, 9H).
37d) N-l-(terc-Butoxykarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-2-yl) -benzyl]-hydrazín g (6,7 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-2-yl)-fenyl]-metylidén}hydrazónu a 0,2 g 5 % paládia na
132 aktívnom uhlí v 30 ml metanolu sa hydrogenuje pri normálnom tlaku pri laboratórnej teplote 8 hodín. Katalyzátor sa odfiltruje a premyje sa metanolom ; rozpúšťadlo sa odparí. Zlúčenina uvedená v názve sa získa vo forme bezfarebného viskózneho oleja, ktorý tuhne pri sušení za vysokého vákua. TLC: Rf=0,46 (metylénchlorid/metanol 15:1). HPLC20_100: tRet= 6,71.
1H NMR (deuterochloroform; 200 MHz): 8,69 (m, 1H), 7,96 a 7,45 (vždy d, J=2, 2x2H), 7,8-7,65 (m, 2H), 7,22 (m, 1H), 4,06 (s,
2H) , 1,47 (s, 9H) .
37e) 1-[4-(Pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis- [(terc-butoxykarbonyl)amino] -6-fenyl-2-azahexán
Roztok 1,06 g (4 mmol) (2R)-[(ľS)-Boc-amino-21-fenyletyl]oxiranu a 1,2 g (4 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2- [4-(pyridin-2-yl)-benzyl]-hydrazínu v 20 ml izopropanolu sa mieša 16 hodín pri 80 °C. Po ochladení sa reakčná zmes zahustí odparením na rotačnej odparke, pričom sa výsledná zlúčenina vylúči ako bezfarebná zrazenina. Ďalší produkt je možné vyzrážať pridaním vody k matečným lúhom. TLC: Rf =0,53 (metylénchlorid/metanol 15:1). HPLC20_100: tRet= 13,15.
^H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz) : 8,57 (s, 1H) , 7,85 a 7, (vždy d, J=9, 2x2H), 8,0-7,7 (m, 2H), 7,33 (m, 1H), 7,3-7, (m, 6H) , 3,91 (s, 2H), 3,82-3,55 (m, 2H) , 3,05-2,45 (m, 4H) ,
1,31 (S, 18H).
37f) Hydrochlorid 1- [4- (pyridín-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexán ml dimetylformamidu sa pridá k zmesi obsahujúcej 1, 43 g(2,54 mmol) 1-[4-(pyridin-2-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-5 (S)-2,5-bis [ (terc-butoxykarbonyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu v 30 ml 4N roztoku chlorovodíka v dioxáne (Aldrich) (exotermná reakcia) a zmes sa mieša 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Potom sa odparí rozpúšťadlo; k zvyšku sa trikrát pridá toluén a zmes sa vždy zahustí odparením. Zvyšky sa rozpustia v horúcom metanole a výsledná zlúčenina sa zráža vo forme živicovej
133 zrazeniny pomocou zmesi DIPE/hexán. Po sušení pri vysokom vákuu sa získa objemná pena. HPLC^.gQ.· tRet= 9,87.
1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz): 8,78 (d, J=5, 1H) , 8,72 (dt, J=2,5 a 7,5, 1H), 8,35 (d, J=7,5, 1H), 8,1 (dd, J= vždy 7,5, 1H), 8,02 a 7,72 (vždy d, J=9, 2x2H), 7,45-7,15 (m, 5H) ,
4,27 a 4,15 (vždy d, J=12,5, 2x2H).
Príklad 38
1- [4-(Pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S) - 2,5-bis[N-(N-etoxykarbonyl- (L) -valyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37 sa po spracovaní získa výsledná zlúčenina z 300 mg (0,59 mmol) hydrochloridu 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S) -2,5-diamino-6- fenyl-2-azahexánu (príklad 37f), 446 mg (2,36 mmol) N-etoxykarbonyl -(L)-valínu, 679 mg (3,54 mmol) EDC, 398 mg (2,95 mmol) HOBT a 0,82 ml (5,9 mmol) TEA v 10 ml dimetylformamidu. TLC: Rf= 0,19 (metylénchlorid/metanol 15: 1) .HPLC2q_10q :
tRet= 11,68.
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 705.
Príklad 39
1-[4-(Pyridin-3-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S) -2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37 sa po spracovaní získa výsledná zlúčenina z 550 mg (1,52 mmol) 1-[4-(pyridin-3-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu, 691 mg (3,94 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 1,45 g (7,59 mmol) EDC, 614 mg (4,55 mmol) HOBT a 1,06 ml (7,59 mmol) TEA v 10 ml dimetylformamidu. (Na rozdiel od opisu v príklade 37 sa organická vrstva premyje nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, 10 % kyselinou citrónovou a solankou). TLC:
134
Rf = 0,4 (metylšnchlorid/metanol 15:1). HPLC2q_1oq: tRgt= 9,
91; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 677.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
39a) 4-(Pyridin-3-yl)-benzaldehyd
Analogickým spôsobom ako v príklade 37b sa výsledná zlúčenina pripraví z 6,39 g (29,9 mmol) dimetylacetalu 4-brómbenzaldehydu (pripraveného podľa príkladu 37a), 0,8 g (31,6 mmol) horčíkových hoblín, 2,77 ml (28,2 mmol) 3-brómpyridínu (Fluka, Švajčiarsko) a 0,4 g (0,74 mmol) DPPP v 150 ml tetrahydrof uránu. HPLC2q_2_qq: fcRet= 5'50· 1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz): 10,04 (s, 1H), 8,87 (d,
J=2,5, 1H), 8,58 (dd, J= asi 1,5 a 5, 1H) , 8,17 (m, J=7,5,
1H) 8,05 a 7,88 (vždy d, J=9, 2x2H) , 7,56 (dd, J=7,5 a 5, 1H) .
39b) N-l-(terc-Butoxykarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-3-yl)-fenyl]-metylidén}-hydrazón
Analogickým spôsobom ako v príklade 37c sa výsledná zlúčenina pripraví zo 4,11 g (22,4 mmol) 4(pyridin-3-yl)-benzaldehydu a 2,82 g (21,3 mmol) terc-butylkarbazátu (Fluka, Švajčiarsko) v 60 ml etanolu. HPLC2q_100: tRgt= 8,88.
NMR (perdeuterometanol, 200 MHz): 8,83 (d, J=2,5, 1H) , 8,53 (d, J=5, 1H), 8,14 (m, J=7,5, 1H) , 7,97 (s, 1H) , 7,85 a 7,71 (vždy d, J=9, 2x2H), 7,53 (dd, J=7,5 a 5, 1H) .
39c) N-l-(terc-Butoxykarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-3-yl)-benzyl]-hydrazín
Analogickým spôsobom ako v príklade 37d sa výsledná zlúčenina pripraví z 5,03 g (16,9 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl) -N-2-{4-[(pyridin-3-yl)-fenyl]-metylidén}-hydrazónu a 0,5 g 5 % paládia na uhlí v 120 ml metanolu, výsledná zlúčenina sa použije ďalej bez čistenia. HPLC20_100: tRet= 6,36.
135 1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz): 7,63 a 7,51 (vždy d, J=9, 2x2H), 3,97 (s, 2H) , 1,43 (s, 9H) .
39d) 1-[4-(Pyridín-3-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37e sa výsledná zlúčenina pripraví z 3,82 g (12,8 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl) -N-2-[4-(pyridín-3-yl)-benzyl]-hydrazínu a 3,36 g (12,8 mmol) (2R)- [ (11 S)-Boc-amino-2'-fenyletyl]oxiránu po 14 hodinách pri 80 °C. Čistenie sa uskutočňuje pomocou kolónovej chromatografie na silikagéli (hexán/etylacetát 1:2). TLC: Rf = 0,27 (hexán/etylacetát 1:2). ΗΡύύ20_100: tRet= 13,0.
1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz): 7,62 a 7,52 (vždy d, J=9, 2x2H), 7,4-7,0 (m, 5H), 3,93 (s, 2H), 1,33 a 1,31 (vždy s,
2x9H).
9e) 1-[4-(Pyridín-3-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-S(S) - 2,5-diamino-6 -fenyl-2-az ahexán g (1,88 mmol) 1-[4-(pyridin-3-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-5(S) -2,5-bis[(terc-butoxykarbonyl)amino]-6-fenyl-2-azahexánu sa rozpustí v 10 ml kyseliny mravčej a roztok sa mieša 5 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustí odparením, zvyšok sa rozpustí v dichlórmetáne a organická vrstva sa premyje nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Po odstránení rozpúšťadla sa získa výsledná zlúčenina vo forme hnedého oleja, ktorý sa použije ďalej bez čistenia.
Príklad 40
1-[4-(Pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl- (L)-valyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37 sa zlúčenina uve136 dená v názve získa zo 473 mg (0,75 mmol) hydrochloridu 1- [4-(pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu, 263 mg (1,5 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 575 mg (3 mmol) EDC (Fluka, Švajčiarsko), 405 mg (3 mmol) HOBT (Fluka) a 1,7 ml (12 mmol) TEA v 10 ml dimetylformamidu. Spracovanie sa uskutočňuje analogickým spôsobom ako v príklade 40f, s použitím etylacetátu namiesto dichlórmetánu. Zlúčeninu je možné lyofilizovaú z dioxánu. TLC: Rf = 0,28 (etylacetát).
HPLC2o_ioo: tRet31 13,11;
FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 678.
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
40a) 4-(Pyrazin-2-yl)-benzaldehyd (pozri EP 0 344 577) ml tetrahydrofuránu sa preleje cez 2,72 g (112 mmol) horčíkových hoblín, ktoré sa predtým odmastili hexánom a aktivovali malým množstvom jódu, a zmes sa zohrieva na 50 °C. V priebehu 30 minút sa prikvapká roztok dimetylacetalu 4-brómbenzaldehydu (pripravený podľa príkladu 37a) v 200 ml tetrahydrofuránu. Najskôr je reakcia exotermná, pri dokončovaní prikvapkávania sa reakčná zmes zohrieva na asi 60 °C. Po ďalších 3 0 minútach zohrievania na 60 °C sa reakčná zmes nechá ochladiť na laboratórnu teplotu a zleje sa z nezreagovaného horčíka; vzniknutý roztok obsahujúci Grignardove činidlo sa prikvapká pri laboratórnej teplote v priebehu 20 minút k suspenzii 11,45 g (100 mmol) 2-chlórpyrazínu (Fluka, Švajčiarsko) a 1,6 g DPPP (Aldrich, Švajčiarsko) v 500 ml tetrahydrofuránu (slabá exotermná reakcia). Zmes sa potom mieša pri laboratórnej teplote 19 hodín. Potom sa k reakčnej zmesi pridá 250 ml vody a zmes sa mieša 19 hodín. Tetrahydrofurán sa odparí vo vákuu; k suspenzii sa pridá 300 ml etylacetátu a 100 ml 2N kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša 5 minút. Po oddelení organickej vrstvy, sa táto vrstva mieša ešte dvakrát so
137
100 ml v obidvoch prípadoch, 0,5 N kyseliny chlorovodíkovej 5 minút. Etylacetátová vrstva sa premyje postupne nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou a zahustí sa. Zlúčenina uvedená v názve sa získa ako svetlohnedé kryštály. Zlúčenina sa rekryštalizuje zo zmesi dichlórmetán/hexán. Teplota topenia·. 86-88 °C. TLC: Rf = 0,17 (hexán/etylacetát 2:1). HPLC2q_1qq: ϋ/θ6· 1H NMR (perdeuterochloroform; 200 MHz): 10,12 (s, 1H) , 9,14 (d, Jsl, 1H), 8,70 (d, Jsl, 1H), 8,60 (t, Jsl, 1H), 8,22 a 8,03 (vždy d, J=9, 2x2H).
40b) N-l- (terc-butoxykarbonyl) -N-2- {4- [ (pyrazin-2-yl) -fenyl] -metylidén}-hydrazón
Analogickým spôsobom ako v príklade 37c sa výsledná zlúčenina pripraví z 12,4 g (67,3 mmol) 4-(pyrazin-2-yl)-benzaldehydu a 8,5 g (64 mmol) terc-butylkarbazátu (Fluka, Švajčiarsko) v 170 ml etanolu po 5 hodinách pri 80 °C, pričom výsledná zlúčenina kryštalizuje spontánne; teplota topenia: 190-198 °C. TLC: Rf = 0,47 (etylacetát). HPLC20_100: tRet= 13, 41.
0c) N-l - (terc-Butoxykarbonyl) -N-2 - [4- (pyrazin-2-yl) -benzyl] -hydrazin
Analogickým spôsobom ako v príklade 37d sa výsledná zlúčenina získa vo forme oleja z 0,6 g (2 mmol) N-l- (terc-butoxy-karbonyl) -N-2-{4 - [ (pyrazin-2-yl) - fenyl] -metylidén}-hydr a zónu a 0,15 g 5 % paládia na uhlí v 15 ml tetrahydrofuránu vo vodíkovej atmosfére počas 13 hodín pri laboratórnej teplote. Zlúčenina uvedená v názve kryštalizuje pomocou triturácie éterom. Látka sa rekryštalizuj e zo zmesi etylacetát/petroléter. Teplota topenia: 110-111 °C. HPLC20_100: tRet= 9,62.
NMR (deuterochloroform; 200 MHz): 9,09 (s, 1H), 8,65 (t, Jsl , 1H), 8,51 (t, Jsl, 1H) , 8,05 a 7,53 (vždy d, J=5, 2x2H),
138
4,00 (s, 2H) , 1,43 (s, 9H) .
40d) 1- [4- (Pyrazin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5(S)-trifluóracetyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37e sa výsledná zlúčenina získa vo forme béžových kryštálov z 10,5 g (35 mmol) N-l- (terc-butoxykarbonyl-N-2- [4- (pyrazin-2-yl) -benzyl] -hydrazínu a 11,7 g (45 mmol) (2R)-[(1'S)-(trifluóracetyl)amino-21 -fenyletyl] -oxiránu (EP 0 521 827, príklad 16d) v 150 ml izopropanolu. Teplota topenia: 194-196 °C. TLC: Rf = 0,38 (hexán/etylacetát 1:2). HPLC2q_]_qq: tRet= 16#27.
40e) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl) amino-5(S)-amino-6-fenyl-2-azahexán
11,75 g (21 mmol) 1-[4-(pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-(trifluóracetyl)amino-6 -f enyl-2-azahexánu sa suspenduj e v 500 ml metanolu a pri 60 °C sa pridá 105 ml roztoku uhličitanu draselného vo vode. Zmes sa mieša 3 hodiny pri 75 °C; metanol sa odparí a zvyšok sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa raz premyje vodou a raz solankou a zahusti sa. Zlúčenina uvedená v názve sa získa vo forme hnedooranžových kryštálov, ktoré sa môžu rekryštalizovaú zo zmesi etylacetát/petroléter. Teplota topenia: 146-148 °C. TLC: Rf = 0,08 (metylénchlorid/metanol 10:1). HPLC20-100: tRet= 13-'23·
40f) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L) -valyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37 sa zlúčenina uvedená v názve získa z 3,2 g (7 mmol) 1-[4(pyrazin-2-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -amino-6-fenyl-2-azahexánu, 2,54 g (14 mmol) N-metoxykarbonyl-(L) -valín, 5,4 g (28 mmol) EDC (Fúka, Švajčiarsko), 3,8 g (28 mmol)
139
HOBT (Fluka, Švajčiarsko) a 7,1 g (70 mmol) TEA v 130 ml dimetylformamidu. Reakčná zmes sa spracuje pomocou odstránenia dimetylformamidu, prevedením zvyšku do dichlórmetánu a premytím organickej vrstvy postupne vodou, zmesou nasýtený roztok hydrogenuhličitanu sodného/voda 1:1, 10 % kyselinou citrónovou, vodou a solankou. Zlúčenina kryštalizuje po zahustení. Teplota topenia: 218:220 °C. TLC: Rf = 0,29 (metylénchlorid/metanol
10:1) . HPLC20_10Q: tRefc= 15, 11.
40q) Hydrochlorid 1-[4-(Pyrazin-2-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S)-N- (N-metoxykarbonyl-(L)-valyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu
3,4 g (5,5 mmol) 1-[4-(pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu v 100 ml 4N roztoku chlorovodíka v dioxáne (Aldrich) a 10 ml metanolu sa mieša 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlo sa odparí; k zvyšku sa dvakrát pridá dioxán a odparí sa. Zlúčenina uvedená v názve sa získa vo forme viskózneho oleja, ktorý kryštalizuje po triturácii éterom. Teplota topenia 194-198 °C. TLC: Rf = 0,35 (metylénchlorid/metanol 10:1). HPLC2q_1qq: tRet= 9,77.
Príklad 41
1- [4- (Pyrazin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) -i zo leucyl) amino] -5 (S) - [N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino] - 6-fenyl-2-azahexán
142 mg (0,75 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu a 223 g (0,75 mmol) TPTU v 3 ml dimetylformamidu sa mieša 10 minút pri laboratórnej teplote a potom sa pridá roztok 473 mg (0,75 mmol) hydrochloridu 1-[4-(pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 40g) a 0,33 ml NMM v 3 ml dimetylformamidu. Zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc. Zmes sa spracuje pomocou pomalého prikvapkávania reakčnej zmesi do
140
100 ml vody, miešaním 20 minút pri laboratórnej teplote a izoláciou vylúčenej zrazeniny filtráciou. Zrazenina sa premyje vodou a prevedie sa do dichlórmetánu; organická vrstva sa premyje postupne vodou, zmesou nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného/voda 1:1, vodou a solankou. Po odstránení rozpúšťadla sa zvyšok vylúhuje éterom a zlúčenina uvedená v názve sa získa vo forme bezfarebného prášku. Zlúčeninu je možné lyofilizovať z dioxánu. TLC: Rf= 0,28 (etylacetát). HPLC2Q-1OO:tRet =13' 78. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 692.
Príklad 42
1- [4- (Pyrazin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino]-5 (S) - [N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valy 1) amino]-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 41 sa spracovaním získa výsledná zlúčenina zo 142 mg (0,75 mmol) N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucínu (príklad 2e), 223 mg (0,75 mmol) TPTU v 3 ml dimetylformamidu (roztok A) a 435 mg (0,75 mmol) hydrochloridu 1-[4-(pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 40g) a 0,33 ml NMM v 3 ml dimetylformamidu (roztok B) zlúčenina uvedená v názve spontánne kryštalizuje po odparení rozpúšťadla. Zlúčeninu je možné lyofilizovať z dioxánu. TLC: Rf = 0,46 (metylénchlorid/metanol 10:1). HPLC2q_]_qq : tRet = = 13,85. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 692.
Príklad 43
1-[4-(Pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl)amino] -6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 41 sa po spracovaní získa zlúčenina uvedená v názve zo 132 mg (0,7 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu a 208 mg (0,7 mmol) TPTU v 3
141 ml dimetylformamidu (roztok A) a 400 mg (0,7 mmol) hydrochloridu 1- [4- (pyrazin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 44b) a 0,31 ml (2,8 mmol) NMM v 3 ml dimetylformamidu, zlúčenina uvedená v názve sa získa v kryštalickej forme po vylúhovaní v étere. Teplota topenia: 211-217 ’C. TLC: Rf= 0, 41 (metylénchlorid/metanol 10:1), HPLC2q_-j_qq : fcRet = 14'49· FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 706.
Príklad 44
1- [4- (Pyrazin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino] -5 (S) - [N- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl) amino] - 6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 41 sa po spracovaní získa zlúčenina uvedená v názve zo 175 mg (1 mmol) N-metoxykarbonyl - (L)-valínu, 297 mg (1 mmol) TPTU (Fluka, Švajčiarsko) v 4 ml dimetylformamidu (roztok A) a 571 mg (1 mmol) hydrochloridu 1- [4- (pyrazin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu a 0,44 ml (4 mmol) NMM v 4 ml dimetylformamidu (roztok B) ; zlúčenina uvedená v názve sa môže pripraviť v kryštalickej forme po vylúhovaní v étere. Teplota topenia: 205-208 ’C. HPLC2q_10q:tRet = 13,87. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 692 .
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
44a) 1- [4- (Pyrazin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino - 6 - f enyl - 2 - azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37 sa zlúčenina uvedená v názve získa z 2,3 g (5 mmol) 1-[4-(pyrazin-2-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (terc-butoxykarbonyl) amino-5 (S) -amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 40e), 1,9 g (10 mmol) N-metoxy142 karbonyl-(L)-izoleucínu, 3,8 g (20 mmol) EDC, 2,7 g (20 mmol) HOBT a 5,1 g (50 mmol) TEA v 90 ml dimetylformamidu. Spracovanie sa uskutoční tak, ako je opísané v príklade 40f. Zlúčeninu je možné rekryštalizovať z etylacetátu. TLC: Rf = 0, 58 (metylénchlorid/metanol 10:1). HPLC2q_2_qq : tRet = 15' 68· 1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz) okrem iného: 9,08 (s, 1H),
8,65 (široký s, 1H), 8,51 (d, Jsl, 1H), 8,02 a 7,52 (vždy d, J=5, 2x2H), 7,3-7,1 (m, 5H), 3,92 (s, 2H), 3,62 (s, 3H), 1,28 (s, 9H), 0,8 (t, J=5, 3H), 0,73 (d, J=4, 3H).
44b) Hydrochlorid 1-[4-(Pyrazin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu
Analogickým spôsobom ako v príklade 40g sa zlúčenina uvedená v názve pripraví z 2,1 g (3,3 mmol) 1-[4-(pyrazin-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2-(terc-butoxykarbonyl)amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu v 60 ml 4N roztoku chlorovodíka v dioxáne a 10 ml metanolu, pričom sa výsledná zlúčenina môže kryštalizovať z éteru. Teplota topenia 200-201 °C. HPLC2q_^qq : tRet = 10,52.
Príklad 45
1-[4-Tiofen-2-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl- (L)-valyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37 sa zlúčenina uvedená v názve pripraví z 500 mg (1,36 mmol)
1-[4-(tiofen-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5 (S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu, 620 mg (3,54 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 1,3 g (6,8 mmol) EDC, 551 mg (4,08 mmol) HOBT a 0,95 ml (6,8 mmol) TEA v 10 ml dimetylformamidu, výslednú zlúčeninu je možné lyofilizovať z dioxánu. TLC: Rf =0,51 (metylénchlorid /metanol 15:1).
HPLC2q_10q:tRet = 15,30. FAB hmotnostná.spektroskopia (M+H)+ =
143
682 .
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
45a) 4-(Tiofen-2-yl)-benzaldehyd (pozri Heterocycles 31, 1951 (1990))
3,7 g (20 mmol) 4-brómbenzaldehyd, 9,5 ml (120 mmol) tiofénu, 2,94 g (30 mmol) octanu draselného a 1,16 g (1 mmol) tetrakis (trifenylfosfín) paládia (Fluka, Švajčiarsko) v 50 ml dimetylacetamidu sa umiestni do tlakového reaktora a mieša sa pri 150 °C v dusíkovej atmosfére 16 hodín. Reakčná zmes sa zahustí odparením; zvyšok sa prevedie do vody a trikrát sa extrahuje dichlórmetánom. Po odstránení rozpúšťadla sa zvyšok čistí pomocou chromatografie na silikagéli (hexán/etylacetát 4:1) . Zlúčenina uvedená v názve sa získa vo forme žltej pevnej látky. TLC: Rf = 0,3 6 (hexán/etylacetát 4:1).
HPLC2O-ioo : fcRet = 15'26· 1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz): 9,98 (s, 1H) , 7,93 a 7,85 (vždy d, J=9,5, 2x2H), 7,60 (d, J=2,5, 1H), 7,52 (d, J=5, 1H), 7,17 (dd, J=2,5 a 5, 1H) .
45b) N-l- (terc-Butoxykarbonyl) -N-2-{4- [ (tiofen-2-yl) -fenyl]metyl idén} -hydrazón
Analogickým spôsobom ako v príklade 37c sa zlúčenina uvedená v názve pripraví vo forme žltých kryštálov z 2,47 g (13, 1 mmol) 4-(tiofen-2-yl)-benzaldehydu a 1,65 g (12,49 mmol) terc-butylkarbazátu (Fluka, Švajčiarsko) v 30 ml etanolu (4, 5 hodiny pri 90 °C) .
Teplota topenia: 162-165 °C. HPLC2q_1qq : tRet ~ 16<08· 1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz) okrem iného: 7,91 (s, 1H) ,
1,53 (s, 9H) .
45c) N-l-(terc-Butoxykarbonyl)-N-2-[4-(tiofen-2-yl)-benzyl]144 hydrazín
3,35 g (11,1 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2-{4-[ (tiofen-2-yl)-fenyl]-metylidén}-hydrazónu a 0,819 g (11,1 mmol) kyanobórhydridu sodného (Fluka, Švajčiarsko) sa rozpustí v 11 ml tetrahydrofuránu (čierny roztok) a v priebehu 5 hodín sa prikvapká k roztoku 2,11 g (11,1 mmol) monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej rozpustenej v 11 ml tetrahydrofuránu. Zmes sa mieša cez noc v dusíkovej atmosfére pri laboratórnej teplote (pH asi 3 až 4) a potom sa zriedi etylacetátom. Organická vrstva sa premyje postupne solankou, nasýteným roztokom uhličitanu draselného a znova solankou. Organická vrstva sa zahustí odparením a zvyšok sa prevedie do 13,3 ml IN roztoku hydroxidu sodného; pridá sa 15 ml dichlórmetánu a zmes sa zohrieva 3 hodiny do varu v kúpeli s teplotou 60 °C. Po oddelení organickej vrstvy sa táto vrstva odparí do sucha. Zlúčenina uvedená v názve sa získa vo forme svetložltého oleja.
hplc20-100 : tRet = 12'36· 1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz) okrem iného: 3,91 (s, 2H), 1,42 (s, 9H).
45d) 1-[4-(Tiofen-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[(terc-butoxykarbony1)amino] -6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 37e sa zlúčenina uvedená v názve získa z 3,39 g (11,1 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2-[4-(tiofen-2-yl)-benzyl]-hydrazínu a 2,93 g (11,1 mmol) (2R)-[(11 S)-Boc-amino-21-fenyletyl]oxiránu (J. Org. Chem. 50, 4615 (1985)) v 50 ml izopropanolu, zlúčenina uvedená v názve po ochladení reakčnej zmesi spontánne kryštalizuje. Teplota topenia: 165-168 °C. HPLC2q_iqq : tRet11 18'84· 1H NMR (perdeuterometanol; 200 MHz) okrem iného: 7,56 (d, J=9, 2H) , 7,5-7,3 (m, 4H) , 7,3-7,1 (m, 5H) , 7,08 (dd, J=2 a 5, 1H) , 3,85 (s, 2H), 1,33 a 1,32 (vždy s, 2x9H).
45e) 1-[4-(Tiofen-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexán
145
Analogickým spôsobom ako v príklade 39e sa zlúčenina uvedená v názve získa vo forme nažltlého oleja z 3,16 g (5, 57 mmol) 1-[4-(tiofen-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis [(terc-butoxykarbonyl) amino]-6-fenyl-2-azahexánu v 30 ml kyseliny mravčej po 6 hodinách miešania pri laboratórnej teplote; tento olej sa použije ďalej bez čistenia.
1H NMR (perdeuterometanol;200 MHz) okrem iného: 7,62 (d, J=9, 2H), 7,5-7,1 (niekoľko m, prekryté, 9H), 7,09 (dd, J=2 a 5, 1H) , 3,72 (s, 2H) .
Príklad 46
1-[4-(Pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl - (L) - terc-leucyl) amino] - 6-fenyl-2-azahexán
Spôsob A:
S vylúčením vlhkosti sa 10,85 g N-metoxykarbonyl-(L)-tercleucínu (príklad 2e) a 17,1 g TPTU umiestni do 65 ml dimetylformamidu. K bielej suspenzii sa pridá 35,1 ml Hunigovej zásady a zmes sa mieša 20 minút pri laboratórnej teplote. Potom sa pridá 13,2 g (26 mmol) hydrochloridu 1- [4-(pyridin-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 37f) rozpusteného v 65 ml dime tyl f ormamidu a zmes sa mieša 24 hodín do skončenia reakcie (po 20 hodinách sa pridá ďalších 5 ml Hunigovej zásady). Reakčná zmes sa naleje do 600 ml vody a vzniknutá zrazenina sa odfiltruje a premyje vodou. Filtračný zvyšok sa potom rozpustí v dichlórmetáne a premyje sa nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a solankou. Po sušení nad síranom sodným a zahustení sa vzniknutá pena vylúhuje DIPE; pevná látka sa odfiltruje a suší. Surový produkt sa znova rozpustí v dichlórmetáne, pridá sa s aktívnym uhlím a po filtrácii sa zráža éterom. Vzniknutá zlúčenina uvedená v názve sa suší v exzikátore pri 40 °C pri vysokom vákuu; teplota topenia: 202-204 °C; TLC: Rf = 0,38 (etylacetát); HPLC2o_ioo;tRet= 11,81. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ =
146
705 .
Ďalší produkt je možné získať z materských lúhov po chromatografii (silikagél, hexán/etylacetát, potom etylacetát) a po kryštalizácii z éteru (teplota topenia 206-207 °C).
Spôsob B:
Analogickým spôsobom ako v príklade 4 sa 1,32 g 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L) -terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu v 5 ml dimetylformamidu pridá k 0,42 g (2,2 mmol) (N-metoxykarbonyl-(L)- terc-leucínu, 0,654 g (2,2 mmol) TPTU a 840 μΐ (5 mmol). Hunigovej zásady v 5 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote 22 hodín a spracuje sa analogickým spôsobom ako v príklade 3, získa sa zlúčenina uvedená v názve.
Východiskové látky sa pripravia nasledujúcim spôsobom:
46a) 1-[4-(Pyridin-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-2-N-Boe-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogickým spôsobom ako v príklade 1 sa roztok 3,93 g (8,5 mmol) hydrochloridu 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2- (N-Boc-amino)-5(S)-amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 47b) v 50 ml dimetylformamidu prikvapká k zmesi 2,58 g (13,6 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)- terc-leucínu, 4,88 g (25,5 mmol) EDC a 2,3 g (17 mmol) HOBT v 50 ml dimetylformamidu. Po spracovaní sa surový produkt vylúhuje v zmesi dichlórmetán/DIPE, odfiltruje sa a suší, získa sa zlúčenina uvedená v názve. TLC: Rf = 0,5 (etylacetát); HPLC20_10q : tRet= 12,32; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 634.
46b) Hydrochlorid 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu
147
Analogickým spôsobom ako v príklade 37f) sa 130 ml 4M roztoku kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne pridá k 4,4 g (6, 94 mmol) 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2N-Boc-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -terc-leucyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu a zmes sa zriedi 7 ml dimetylformamidu. Po 2, 75 hodinách sa reakčná zmes spracuje. Získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,44 (metylénchlorid/metanol: 9/1); HPLC2q_10q : tRet= 8»47»' FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 534 .
Alternatívny postup na prípravu výslednej zlúčeniny z príkladu 46 je nasledujúci: :
Príklad 46*
1- [4-(Pyridín-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-metoxykarbonyl- (L)-terc-leucyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
I
S vylúčením vlhkosti sa 567 g (3,0 mol) N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucínu (príklad 2e) a 891 g (3,0 mol) TPTU umiestni do 3 litrov metylénchloridu; pri chladení ľadom sa prikvapká 775 g (6 mol) Hunigovej zásady a zmes sa mieša 20 minút. Potom sa k roztoku pridá suspenzia 432 g (1,0 mol) trihydrochloridu 1- [4- (pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu v troch litroch dichlórmetánu a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote cez noc do skončenia reakcie. Reakčná zmes sa premyje 10 1 vody, 10 1 nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 5 1 solanky. Vodná vrstva sa ďalej extrahuje dvakrát 5 1 dichlórmetánu; organická vrstva sa suší nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Zvyšok sa rozpustí v 6 1 etylacetátu a filtruje sa cez 500 g silikagélu; kolóna sa prepláchne 6 1 etylacetátu a frakcie obsahujúce produkt sa zahustia odparením. Po miešaní vo vriacej zmesi DIPE/etanol (9 1; 1 hodina), ochladení a filtrácii sa pripraví zlúčenina uvedená v názve, ktorú je možné ďalej čistiť pomocou rekryštalizácie zo zmesi etanol/voda (teplota topenia 207-209 °C) .
148
Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:
*a) 4-(Pyridin-2-yl)-benzaldehyd g jódu, potom 200 g dimetylacetalu 4-brómbenzaldehydu (príklad 37a) sa pridá k 317 g (13,0 mol) horčíka v 3,5 1 tetrahydrofuránu (v dusíkovej atmosfére) . Keď sa reakcia rozbehne (ak je potrebné, po zohriatí), prikvapká sa 2540 g (celkom 2740 g; 11,8 mol) dimetylacetalu 4-brómbenzaldehydu v 3,5 1 toluénu (25 °C až 30 °C, 1 hodina) a reakčná zmes sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Grignardovo činidlo sa potom prevedie do prikvapkávacej nálievky druhej aparatúry obsahujúcej 1750 g (11,0 mol) 2-brómpyridínu (Fluka, Švajčiarsko) v 3,31 tetrahydrofuránu, 38 g (70 mmol) DPPP a 330 ml diizobutylalumíniumhydridu (20 % v hexáne) . Pri teplote 15 až 20 °C sa prikvapká Grignardovo činidlo (45 minút). Po 90 minútach miešania pri laboratórnej teplote sa reakčná zmes naleje do 10 kg ľadu, 1,5 1 koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a 1,5 kg kyseliny citrónovej. Pridá sa 1 kg Hyflo Super Cel a zmes sa mieša 1 hodinu a filtruje sa; zvyšok sa premyje 2 1 voda, dvakrát 2 1 toluénu a nakoniec dvakrát 2 1 IN roztoku kyseliny chlorovodíkovej. Prvý filtrát a premývacia voda sa spoja; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát toluénovými filtrátmi. Vzniknutá organická vrstva sa premyje dvoma filtrátmi obsahujúcimi kyselinu chlorovodíkovú. Vodné vrstvy sa spoja; pridá sa 6 1 toluénu a pH zmesi sa pomocou 4, 6 1 roztoku hydroxidu sodného (30 % vo vode) upraví na hodnotu 8 až 9. Zmes sa filtruje cez Hyflo (filtračný prostriedok založený na kremeline, Fluka, Švajčiarsko); vodná vrstva sa oddelí a extrahuje dvakrát 2 1 toluénu. Organické vrstvy sa dvakrát premyjú vodou, sušia sa nad síranom sodným a spracujú sa pomocou aktívneho uhlia. Po pridaní 0,5 kg silikagélu, miešaní, filtrácii a zahustení odparením sa získa zlúčenina uvedená v názve (fyzikálne údaje ako v príklade 37b).
*b) N-l- (terc-Butoxykarbonyl) -N-2-{4- [ (pyridin-2-yl) -fenyl] -metylidén}-hydrazón
149
Roztok 1770 g (9,67 mol) 4-(pyridín-2-yl)-benzaldehydu a 1220 g (9,2 mol) terc-butylkarbazátu (Fluka, Švajčiarsko) v 12,5 1 etanolu sa 4 hodiny zohrieva do varu. Zmes sa ochladí na 40 °C a pridá sa 6 kg ľadu; zmes sa filtruje a zlúčenina uvedená v názve sa premyje 6 1 vody, pričom sa táto zlúčenina získa v čistej forme (fyzikálne údaje rovnaké ako v príklade 37c) .
c) N-l-(terc-Butoxykarbonyl)-N-2-[4-(pyridín-2-yl)-benzyl]-hydrazín
Suspenzia 1655 g (5,57 mol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2-(4-[(pyridin-2-yl)fenyl]-metylidén)-hydrazónu v 12 1 metanolu sa hydrogenuje v prítomnosti 166 g 10 % paládia na uhlí pri normálnom tlaku pri laboratórnej teplote. Katalyzátor sa odfiltruje a premyje dôkladne metanolom; rozpúšťadlo sa odparí. ! Po kryštalizácii z hexánu sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia 74-77 °C.
*d) 1- [4 -(Pyridin-2-yl)-fenyl] -4(S)-hydroxy-5(S) - 2,5-bis[terc-butoxykarbonyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Roztok 1185 g (4,5 mol) (2R)-[(1'S)-(terc-butoxykarbonyl) amino-21 -fenyletyl] oxiranu a 1230 g (4,1 mol) N-l-(terc-butoxykarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-2-yl)-benzyl]hydrazínu v 14 1 izopropanolu sa 16 hodín zohrieva do varu. Po ochladení sa pridá 15 kg ľadu a 10 1 vody; zmes sa mieša 2 hodiny; kryštály sa odfiltrujú a premyjú 6 1 vody. Po dvojitom miešaní vždy v 5 1 éteru, filtrácii, premytí 2 1 éteru a nakoniec 2 1 zmesi éter/terc-butylmetyléter 1:1 sa získa zlúčenina uvedená v názve s teplotou topenia 183-188 °C.
*e) Trihydrochlorid 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-fenyl-2-azahexánu
Roztok 1465 g (2,6 mol) l-[4-(pyridín-2-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-5 (S)-2,5-bis[(terc-butoxykarbonyl)amino] -6-fenyl-2-azahexánu v 12 1 tetrahydrofuránu a 4 1 kyseliny chlorovodí150 kove j (4N roztok vo vode) sa 4 hodiny mieša pri 50 °C. Zo vzniknutej dvojfázovej zmesi sa oddelí vodná vrstva a zahustí sa odparením vo vákuu. Zvyšok sa zriedi 4 1 etanolu, zahustí sa odparením, zriedi sa 4 1 zmesi etanol/toluén 1:1, zahustí sa odparením, zriedi sa 4 1 etanolu a znova sa zahustí odparením. Po miešaní v 9 1 DIPE a filtrácii sa získa zlúčenina uvedená v názve (fyzikálne údaje sú rovnaké ako v príklade 37f).
e (i) Alternatívne sa l-(4-(pyridin-2-yl)-fenyl)-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-di[(terc-butoxykarbonyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán pripraví nasledujúcim spôsobom:
V dusíkovej atmosfére sa 2,1 ml (2,1 mmol) 1,00 M diizobutylalumíniumhydridu v metylénchloride pomaly prikvapká k ľadovo chladnému roztoku 200 mg (0,347 mmol) 1-[4-(pyridin-2-yl) fenyl] -l-oxo-5- (S ') -2,5-di [ (terc-butoxykarbonyl) amino] -4 (S)-hydroxy-6-fenyl-2-azahexánu v 5 ml tetrahydrofuránu (pení). Po 2 hodinách sa pridá 7 ml etylacetátu a po ďalších 30 minútach 70 ml metanolu. Reakčná zmes sa zohreje na laboratórnu teplotu a mieša sa 2 hodiny; pridá sa 0,5 ml vody a 5 g síranu sodného a zmes sa znova mieša 1 hodinu do skončenia reakcie. Soli sa odfiltrujú a filtrát sa zahustí odparením. Po strednotlakovej chromatografii (silikagel; hexán/etylacetát 3: 2 až etylacetát) sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia 184 °C; TLC (hexán/etylacetát 1:1): Rf = 0,26; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+= 563.
Príprava východiskovej látky, 1-[4-(pyridin-2-yl)fenyl]-1-oxo-5 (S) -2,5-di [ (terc-butoxykarbonyl) amino] -4 (S) -hydroxy-6-fenyl-2-azahexánu, sa uskutočňuje pomocou nasledujúcich krokov:
Krok (1) Metylester kyseliny 4-(pyridin-2-yl)-benzoovej:
24,0 g (150 mmol) metylesteru kyseliny 4-kyanobenzoovej (Fluka, Švajčiarsko) v 150 ml toluénu sa v acetylénovej atmosfére umiestni do autoklávu a pridá sa 0,30 g (1,6 mmol) kobaltocénu (= dicyklopentadienylcobalt; Aldrich, Milwaukee, USA) . Na zmes sa potom 15 minút pôsobí acetylénom s tlakom
151
15.10^ Pa zohrieva sa na 180 °C a mieša sa 12 hodín. Po ochladení a uvoľnení tlaku sa k čiernej suspenzii pridá 9,5 g aktívneho uhlia; zmes sa zriedi 250 ml toluénu, mieša sa 30 minút, filtruje sa a zahustí odparením. Po kryštalizácii z teplého éteru pridaním hexánu sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia: 96 °C; TLC (hexán/etylacetát 4:1) : Rf = 0,37; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 214. Ďalší produkt je možné získať z materských lúhov pomocou kolónovej chromatografie (silikagél, hexán/etylacetát 19:1 až 4:1).
Krok (2) Kyselina 4-(pyridín-2-yl)-benzoová:
12,85 g (60,2 mmol) metylesteru kyseliny 4-(pyridín-2-yl) -benzoovej v 125 ml metanolu a 67 ml IN roztoku hydroxidu sodného sa mieša 6 hodín pri laboratórnej teplote. Vzniknutý roztok sa čiastočne zahustí odparením; vodný zvyšok sa extrahuje etylacetátom a pomocou 2N roztoku kyseliny chlorovodíkovej sa okyslí na pH 1,5. Zlúčenina uvedená v názve sa zráža a je možné ju odfiltrovať a premyť vodou: TLC (etylacetát) : Rf= = 0,35; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 200.
Krok (3) Anhydrid kyseliny 4-(pyridin-2-yl)-benzoovej a kyseliny izobutyloxymravčej:
S vylúčením vzduchu sa 6,0 g (30 mmol) kyseliny 4-(pyridin-2 -yl) -benzoovej suspenduje pri -20 °C v 90 ml tetrahydrofuránu a pridá sa 9,90 ml (90 mmol) N-metylmorfolínu a 4,32 ml (33 mmol) izobutylchlórformiátu. Po 30 minútach sa reakčná zmes filtruje, premyje malým množstvom studeného tetrahydrofuránu a filtrát sa čiastočne zahustí odparením; zvyšok sa zriedi dichlórmetánom, premyje sa zmesou lad/voda, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením, získa sa zlúčenina uvedená v názve:
^H NMR (deuterochloroform) okrem iného: 8,75 (m, 1H) , 8,16 (AB, J=8, 4H), 7,81 (m, 2H), 7,32 (štvorčiarový systém, J=5, 1H) , 4,16 (d, J=7, 2H), 2,10 (deväťčiarový systém, J=7, 1H), •1,02 (d, J=7, 6H).
< I
152
Krok (4) i-(R) -Kyano-2 (S) - (N- terc.butoxykarbonylamino) -3-fenylpropyl [4-(2-pyridyl)]benzoát:
Pri 0 ’C sa 250 mg (0,9 mmol) benzyltrietylamóniumchloridu pridá k 2,0 g (30 mmol) kyanidu draselného v 7,5 ml vody a 7,5 ml metylénchloridu. Potom sa postupne prikvapká roztok 6,21 g (24,9 mmol) Boe-(L)-fenylalaninalu v 10 ml metylénchloridu a roztok asi 30 mmol zmesného anhydridu kyseliny 4- (pyridin-2-yl) -benzoovej a kyseliny izobutyloxymravčej v 10 ml metylénchloridu. Po 20 minútach pri 0 °C sa pokračuje v miešaní pri laboratórnej teplote ďalšie 4 hodiny a reakčná zmes sa nakoniec zriedi zmesou dichlórmetán/voda. Vodná fáza sa oddelí a extrahuje sa dvakrát dichlórmetánom. Organická vrstva sa premyje trikrát vodou a solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Po kolónovej chromatografii (silikagél; hexán/etylacetát 4:1 až 2:1) sa získa zmes 5:1 1- (R) -kyano-2 (S) - (N-terc-butoxykarbonylamino) -3-fenylpropyl [4(2-pyridyl) ]-benzoátu a 1-(S)-kyano-2 (S) - (N-terc-butoxykarbonylamino)-3-f enylpropyl [4-(2-pyridyl)]-benzoátu: TLC (hexán/ etylacetát, 4:1): Rf = 0,11; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+= 458;
1H NMR (deuterochloroform) okrem iného 5,66 (d, J=6, 5/6 H,
1-(R)epimér) , 5,53 (m, 1/6 H, 1-(S)epimér).
Po vylúhovaní DIPE sa získa diastereomérne čistý 1-(R)-kyano-2 (S) - (N-terc-butoxykarbonylamino) -3-fenylpropyl [4- (2-pyridyl)]-benzoát: teplota topenia 140-141 ’C.
Krok (5) 4-(S)-1,4-Di [(terc-butoxykarbonyl) amino]-3 (R) - [4- (pyridín-2-yl) fenyl] -karbonyloxy-5-fenyl-l-azapent-1-én:
2,29 g (5,0 mmol) 1-(R)-kyano-2 (S) - (N-terc-butoxykarbonylamino)-3-f enylpropyl [4-(2-pyridyl)]-benzoát sa rozpustí v 80 ml metanolu a pridá sa 900 mg (15 mmol) kyseliny octovej a 661,5 mg (5 mmol) terc-butylkarbazátu; po pridaní 2,3 g Raneyovho niklu sa zmes hydrogenuje. Čiastočne zrazený produkt
153 sa rozpustí pomocou pridania metanolu a mierneho zohriatia; katalyzátor sa odfiltruje a filtrát sa zahustí odparením. Zvyšok sa prevedie do zmesi etylacetát/nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát etylacetátom. Organická vrstva sa premyje solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Po strednotlakovej chromatografii (silikagél; hexán/etylacetát 4:1 až etylacetát) sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota topenia 195-196 °C; TLC (hexán/etylacetát 1:1): Rf = 0,39; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 575.
Krok (6) 1-[4-(Pyridín-2-yl)fenyl]-l-oxo-5(S)-2,5-di[(terc-butoxykarbonyl) amino]-4(S)-hydroxy-6-fenyl-2-azahexán
V dusíkovej atmosfére sa 111 mg (85 %; 1,5 mmol) kyanoborohydridu sodného pridá k roztoku 862 mg (1,5 mmol) 4-(S)-l, 4-di [(terc-butoxykarbonyl)amino]-3(R)-[4-(pyridín-2-yl)fenyl] -karbonyloxy-5-fenyl-l-azapent-ľénu v 10 ml tetrahydrofuránu. Prikvapká sa roztok 290 mg (1,5 mmol) kyseliny p-toluénsulfónovej v 4 ml tetrahydrofuránu. Po 2,5 hodine miešania sa pridá ďalších 55 mg kyanoborohydridu sodného a 145 mg kyseliny p-toluénsulfónovej v 2 ml tetrahydrofuránu a zmes sa znova mieša 2,5 hodiny. Reakčná zmes sa potom naleje do 230 ml 1 % roztoku tetrahydrátu tetraboritanu draselného vo vode, mieša sa cez noc do skončenia reakcie, filtruje sa a premyje vodou. Zvyšok sa prevedie do etylacetátu; roztok sa premyje solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením {získa sa 4-(S)-1,4-di[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3 (S) -[4-(pyridin-2-yl)fenyl]karbonyloxy-5-fenyl-l-azapentán: TLC (hexán/etylacetát 1:1): Rf = 0,45}. Vzniknutá pena sa rozpustí v 25 ml dietylénglykoldimetyléteru; pridá sa 250 μΐ 7-metyl-l,5,7-triazabicyklo[4,4,0]dec-5-énu (Fluka, Švajčiarsko) a zmes sa zohrieva 1, 5 hodiny na 80 °C. Zmes sa zahustí pri vysokom vákuu a zvyšok sa prevedie do zmesi etylacetát/voda; vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát etylacetátom. Organická vrstva sa premyje solankou, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa odparením. Po kryštalizácii zo zmesi DIPE/hexán sa získa zlúčenina uvedená v názve: teplota
154 topenia 104-105 °C; TLC (hexán/ /etylacetát 1:1): Rf = 0,20; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+= 577.
Príklad 47 [4- (Pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L)-izoleucyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán
Pod dusíkovou atmosférou sa v 1 ml dimetylformamidu rozpustí 0,45 g (1,5 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu, 0,85 g (4,5 mmol) EDC a 0,4 g (3 mmol) HOBT. Po pridaní 1,26 ml TEA sa zmes 10 minút mieša, a potom sa po kvapkách pridá roztok 0,96 g (1,5 mmol) hydrochloridu 1-[4-(pyridín-2-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-f enyl-2-azahexánu v 10 ml dimetylformamidu. Po 2 hodinách sa zmes zahustí odparením a získaný olej sa rozpustí v dichlórmetáne a premyje sa vodou, 2x nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného. Vodná fáza sa extrahuje dichlórmetánom a spojené organické fázy sa vysušia síranom sodným a zahustia odparením. Zvyšok sa najskôr vylúhuje v DIPE a potom v zmesi dichlórmetán/éter, a potom sa sfiltruje a vysuší, získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,45 (etylacetát); HPLC20_100 : tRet= 11,71; FAB MS (M+H)+ = 705.
Východisková látka sa pripraví nasledovne:
47a) 1- [4- (Pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (N-Boc-amino) -5(S) -trifluóracetylamino-6-fenyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 37e) sa nechá reagovať 7 g (23 mmol) N-l-(terc-butoxykarbonyl) -N-2- [4-(pyridin-2-yl) -benzyl]-hydrazínu so 6 g (23 mmol) (2R)-[(1'S)-trifluóracetyl-amino-2 1-f enyletyl]-oxiránu v 125 ml izopropanolu pri 8 0 °C, vzniká zlúčenina uvedená v názve. TLC: Rf = 0,33 (dichlórmetán/metanol: l/l); HPLC20_10Q : tRet= 12,76; FAB MS (M+H)+= =559.
155
47b) 1- [4- (Pyridín-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (N-Boc-amino) -5(S)-amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 40e sa rozpustí 5,6 g (10 mmol) 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-5 (S)-2-(N-Boc-amino) -5-(trifluóracetylamino)-6-fenyl-2-azahexánu v 130 ml metanolu, zohreje sa na 65 °C a pridaním po kvapkách 50 ml IM vodného roztoku uhličitanu draselného sa prevedie na zlúčeninu uvedenú v názve. TLC: Rf = 0,17 (dichlórmetán/metanol: 9/1) ;
HPLC20_100 : tRet= 8,50; FAB MS (M+H) + = 463.
47c) 1- [4- (Pyridin-2-yl-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N-Boc-aminp-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl)amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 1 sa k zmesi 1,06 g (5,6 mmol)
N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu, 2,01 g (10,5 mmol) EDC a 0,95 g (7 mmol) HOBT v 20 ml dimetylformamidu po kvapkách pridá roztok 1,62 g (3,5 mmol) 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-(N-Boc-amino)-5 (S)-amino-6-fenyl-2-azahexánu v 25 ml dimetylformamidu. Po spracovaní sa surový produkt vylúhuje v DIPE, sfiltruje sa a vysuší. TLC: Rf = 0,59 (etylacetát);
HPLC20_100 : tRet= 12,52. FAB MS (M+H)+ = 634.
47d) Hydrochlorid 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 40g) sa k 1,9 g (3 mmol) 1-[4- (pyridín-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N-Boc-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu pridá 4 0 ml 4M kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne a zmes sa zriedi 3 ml dimetylformamidu. Po 2,5 hodine sa zmes spracuje a získa sa zlúčenina uvedená v názve: TLC: Rf = 0,55 (dichlórmetán/ metanol: 9/1); HPLC20_100 : tRet= 8,74; FAB MS (M+H)+ =
156
Príklad 48
1- [4- (Pyridín-2-yl) -fenyl]-4 (S) -hydroxy-2-N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6 -f enyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 1 sa k zmesi 0,42 g (2,4 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 0,862 g (4,5’ mmol) EDC, 0,405 g (3 mmol) HOBT a 1,26 ml TEA v 10 ml dimetylformamidu po kvapkách pridá roztok 0,964 g hydrochloridu (1,5 mmol) 1-[4-(pyridín-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu v 10 ml dimetylformamidu. Po spracovaní sa surový produkt vylúhuje v DIPE, sfiltruje sa a vysuší. Následná kolenová chromatografia (SiO2; hexán/etylacetát: 1/1 až 3/1) poskytne čistú zlúčeninu uvedenú v názve (TLC: Rf = 0,35 (etylacetát); HPLC2q_1qq : tRet= 10,9; FAB MS (M+H) + = 691.
Príklad 49
1- [4- (Pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) -ami no-6 -f enyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 1 sa k zmesi 0,152 g (0,8 mmol) N-metoxykarbonyl-(L) - terc-leucínu, 0,287 g (1,5 mmol) EDC, 0,135 g (1 mmol) HOBT a 0,49 ml TEA v 3 ml dimetylformamidu po kvapkách pridá roztok 0,315 g (0,5 mmol) hydrochloridu l-[4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L)-valyl)amino-6-fenyl-2-azahexánu v 3 ml dimetylformamidu. Po spracovaní sa surový produkt čistí strednotlakovou kolónovou chromatografiou (SiO2; hexán/etylacetát), získa sa zlúčenina uvedená v názve. TLC: Rf = 0,35 (etylacetát); HPLC2q_10q : tRet= 11»05. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+= 691.
Východisková zlúčenina sa pripraví nasledovne:
157
49a) 1-(4- (Pyridin-2-yl) - fenyl) -4 (S) -hydroxy-2-N-Boc-amino -5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 1 sa k zmesi 2,49 g (14,2 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 5,1 g (26,6 mmol) EDC, 2,4 g (17,7 mmol) HOBT a 7,45 TEA v 50 ml dimetylformamidu po kvapkách pridá roztok 4,1 g (8,87 mmol) 1-[4-(pyridin-2-yl)fenyl] -4 (S) -hydroxy-2- (N-Boc-amino) -5 (S) -amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad 47b) v 50 ml dimetylformamidu. Po spracovaní' sa surový produkt 2x vylúhuje v DIPE, sfiltruje sa a vysuší, získa sa zlúčenina uvedená v názve. TLC: Rf = 0,42 (etylacetát); HPLC2q_1qq : tRet= ii»92; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+= 620.
49b) Hydrochlorid 1-[4-(Pyridin-2-yl)-fenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-S(S)-N-(N-metoxykarbonyl-(L)-valyl) amino-6-fenyl -2-azahexánu
Analogicky ako v príklade 37f) sa k 3,5 g (5,65 mmol)
1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N-Boc-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu pridá 3 0 ml 4M kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne a zmes sa zriedi 5 ml dimetylformamidu. Po 3,5 hodine sa zmes spracuje a získa sa zlúčenina uvedená v názve TLC: Rf = 0,53 (dichlórmetán/metanol: 9/1); HPLC2q_1qq : tRet = 8,00; FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 520.
Príklad 50
1- [4- (Pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl - (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-f enyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 46 sa nechá reagovať 0,96 g (1,5 mmol) 1-[4-(pyridin-2-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-fenyl-2-aza158 hexánu 3 HCl (príklad 47d) v 10 ml dimetylf ormamidu so zmesou 0,263 g (1,5 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-valínu, 0,446 g (1,5 mmol) TPTU a 0,78 ml (4,5 mmol) DBU v 7 ml dimetylformamidu. Po spracovaní sa získa zlúčenina uvedená v názve. TLC: Rf =
0,4 (etylacetát); HPLC20_1qq : tRet= H#23. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 691.
Príklad 51
1- [4- (Pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N- (N-metoxykarbonyl(L) -izoleucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6 -fenyl-2-azahexán
Analogicky ako v príklade 1 sa k zmesi 0,6 g (3,2 mmol) N-metoxykarbonyl-(L)-izoleucínu, 1,14 g (6 mmol) EDC, 0,54 g (4 mmol) HOBT a 1,68 ml TEA v 13 ml dimetyl f ormamidu po kvapkách pridá roztok 1,26 g (2 mmol) hydrochloridu l- [4- (pyridin-2-yl) - fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad
9b) v 12 ml dimetyl f ormamidu. Po spracovaní sa surový produkt vylúhuje v DIPE a čistí strednotlakovou kolónovou chromatografiou (SiO2; hexán/etylacetát) , získa sa zlúčenina uvedená v názve.TLC; Rf= 0,32 (etylacetát); HPLC20_10q : tRet= 11,04. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H) + = 6 91.
Príklad 52
1- [4- (Pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-etoxykarbonyl- (L) -valyl)amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2 -azahexán
Analogicky ako v príklade 1 sa k zmesi 0,303 g (1, 6 mmol) N-etoxykarbonyl-(L)-valínu, 0,575 g (3 mmol) EDC, 0,27 g (2 mmol) HOBT a 0,98 ml TEA v 7 ml dimetylf ormamidu po kvapkách pridá roztok 0,629 g (i mmol) hydrochloridu 1- (4- (pyridin-2-yl) - fenyl) -4 (S) -hydroxy-2-amino-5 (S) -N- (N-me159 toxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-fenyl-2-azahexánu (príklad
9b) v 5 ml dimetylformamidu. Po spracovaní sa surový produkt vylúhuje v DIPE a čistí strednotlakovou kolónovou chromatografiou (SiO2; hexán/etylacetát), získa sa zlúčenina uvedená v názve. TLC: Rf = 0,33 (etylacetát); HPLC2g_fQQ : tRet= = 11,13. FAB hmotnostná spektroskopia (M+H)+ = 691.
Príklad 53
Metánsulfónová soľ 1-[4-(Pyrid-2-yl)-fenyl]-4 (S)-hydroxy-S (S) -2,5 -bis [N- (N-metoxykarbonyl - (L) - terc-leucyl) amino] -6-f enyl-2-azahexánu
210 mg (0,28 mmol) 1- [4-(pyridín-2-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu (príklad 46) sa rozpustí v 10 ml dichlórmetánu a pri zohrievaní sa pridá 19,5 μΐ (0,3 mmol) metánsulfónove j kyseliny. Zlúčenina uvedená v názve sa vyzráža éterom, odfiltruje sa a vysuší pri zníženom tlaku pri 50 °C. FAB MS (M+H) + = 705.
^H NMR (perdeuterometanol) (v zátvorkách sú uvedené chemické posuny pyridínových protónov voľnej zásady); δ: 8,81 (8,6),
8,65 (7,9), 8,36 (7,8), 8,05 (7,35); signál metylovej skupiny soli δ (2,7 ppm) .
Príklad 54
Hydrochlorid 1- [4- (pyrid-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán mg (0,094 mmol) 1- [4-(pyrid-2-yl)-fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexánu (príklad 46) sa rozpustí v 6 ml dioxánu a pridá sa 25 ml 4M roztoku kyseliny chlorovodíkovej v dioxá160 ne. Výsledná zrazenina sa odfiltruje a vysuší. FAB MS (M+H)+=705.
1H NMR (perdeuterometanol) (chemické posuny pyridínových protónov voľnej zásady sú uvedené v zátvorkách); δ: 8,81 (8,6),
8,65 (7,9), 8,36 (7,8), 8,05 (7,35).
Elementárna analýza hydrátu zlúčeniny uvedenej v názve:
nájdené Cl 4,6 % vypočítané Cl 4,63 %.
Príklad 55
Roztok želatíny
Sterilné sfiltrovaný vodný roztok obsahujúci 20 % cyklodextrínu ako látky podporujúcej rozpúšťanie, ako aktívnu zložku jednu zo zlúčenín vzorca I uvedenú v predchádzajúcich príkladoch (napríklad zlúčenina uvedená v názve príkladu 2) sa pri aseptických podmienkach a zohrievaní zmieša so sterilným roztokom želatíny obsahujúcim ako konzervačnú látku fenol tak, aby mal 1,0 ml roztoku nasledujúce zloženie:
aktívna zložka 3 mg želatína 150 mg fenol 4,7 mg destilovaná voda obsahujúca 20 % cyklodextrínu ako látky podporujúcej rozpúšťanie 1,0 ml.
Príklad 56
Sterilný suchý prostriedok pre injekcie mg jednej zo zlúčenín vzorca I uvedených v predchádza161 júcich príkladoch (napríklad zlúčenina uvedená v názve príkladu 3) sa ako aktívna zložka rozpustí v 1 ml vodného roztoku obsahujúceho 20 mg manitolu a 20 % cyklodextrínu ako látky podporujúcej rozpúšťanie. Roztok sa sterilné sfiltruje a pri aseptických podmienkach sa nadávkuje do 2 ml ampúl, zmrazí sa na veľmi nízku teplotu a lyofilizuje sa. Pred použitím sa lyofilizát rozpustí v 1 ml destilovanej vody alebo 1 ml fyziologického salínu. Roztok sa podáva intramuskulárne alebo intravenózne. Prostriedok je možné pripraviť aj do dvojkomorovej striekačky na jedno použitie.
Príklad 57
Nosný sprej
500 mg jemne mletého prášku (< 5,0 mm) jednej zo zlúčenín vzorca I uvedených v predchádzajúcich príkladoch (napríklad zlúčenina uvedená v názve príkladu 4) sa suspenduje ako aktívna zložka v zmesi 3,5 ml Myglyolu 812R a 0,08 g benzylalkoholu. Suspenzia sa vnesie do zásobníka s dávkovacím ventilom. Do zásobníka sa potom ventilom pri tlaku vnesie 5,0 g Freónu 12R (dichlórdifluórmetán; ochranná známka firmy DuPont). Freón sa pretrepaním rozpustí v zmesi Myglyol/benzylalkohol. Rozprašovací zásobník obsahuje asi 100 jednotkových dávok, ktoré je možné podávať oddelene.
Príklad 58
Poťahované tablety
Na prípravu 10 000 tabliet obsahujúcich po 100 mg aktívnej látky sa spracujú nasledujúce zložky:
aktívna zložka 1000 g kukuričný škrob 680 g koloidná kyselina kremičitá 200 g
162 stearán horečnatý kyselina stearová sodná soľ karboxymetyl-škrobu voda g 50 g
250 g podľa potreby
Zmes jednej zo zlúčenín vzorca I uvedených v predchádzajúcich príkladoch (napríklad zlúčenina uvedená v názve príkladu 5) ako aktívnej zložky, 50 g kukuričného škrobu a koloidná kyselina kremičitá sa spracujú so škrobovým mazom pripraveným z 250 g kukuričného škrobu a 2,2 kg demineralizovanej vody, získa sa vlhká zmes hmoty, ktorá sa pretláča cez sito s 3 mm otvormi a suší sa vo fluidnej sušičke pri 45 °C : počas 30 minút. Vysušené granule sa pretláčajú cez sito s 1 mm otvormi, zmiešajú sa so skôr preosiatou zmesou (1 mm sito) 330 g kukuričného škrobu, stearanu horečnatého, kyseliny stearovej a sodnej soli karboxymetyl-škrobu a lisujú sa do formy mierne konvexných tabliet.
Príklad 59
Tobolky (I)
Jedna zo zlúčenín vzorca I uvedených v predchádzajúcich príkladoch (napríklad zlúčenina uvedená v názve príkladu 6) sa rozmixuje (veľkosť častíc 1 až 100 pm) s použitím bežného nožového mixéra (napríklad Turmix) . Rovnakým spôsobom sa rozmixuje Pluronic F 68 R (blokový polymér polyetylén a polypropylénglykolu; od firmy Wyandotte Chem. Corp., Michigan, USA; alebo od firmy Emkalyx, Francúzsko; ochranná známka BASF) a jemný podiel sa oddelí pomocou sita (0,5 mm) a použije ďalej - pozri ďalej. 16,00 g sezamového oleja sa vnesie do sklenenej kadinky a za miešania sa pridá 1,20 g rozmixovanej aktívnej látky, 1,20 g jemného podielu Pluronic F 68 R a 1,20 g hydroxypropylmetylcelulózy (Cellulose HP-M-603 od firmy Shin-Etsu Chemicals Ltd., Tokyo, Japonsko) . Mieša sa zariadením IKA-Werk (Nemecko) spojeným s ozubeným miešadlom (priemer: 46 mm) rýchlosťou 2000 otáčok za minútu). Dvadsať minút mieša163 nia uvedenou rýchlosťou poskytne suspenziu s konzistenciou cesta, ktoré sa vnesie do toboliek z tvrdej želatíny (20x40 mm; R.P. Scherer AG, Eberbach, Nemecko).
Príklad 60
Tobolky (II)
Na prípravu 10 000 kapsúl obsahujúcich po 100 mg aktívnej látky (jedna z látok uvedených v predchádzajúcich príkladoch, napríklad zlúčenina uvedená v názve príkladu 7) sa spracujú nasledujúce zložky:
aktívna zložka 1000 g RPluronic F 68 1000 g hydroxypropylmetylcelulóza 1000 g sezamový olej 1000 g (pôvod látok pozri príklad 10)
Do nádoby na zohrievanie (Fryma) sa vnesie sezamový olej , do ktorého sa rozptýli Pluronic F 68. Nádoba sa zohreje na 6 0 °C a RPluronic F 68 sa rozmieša (počas asi 2 hodín) . Za miešania a homogenizácie sa zmes ochladí asi na 30 ’C. Do zmesi sa rozptýli hydroxypropylmetylcelulóza a aktívna látka a zmes sa 1 hodinu mieša a homogenizuje. Suspenzia s konzistenciou cesta sa vnesie do toboliek z tvrdej želatíny (veľkosť 0; napríklad od firmy Elanco alebo Parke-Davies (Caprogel)) alebo do kapsúl z mäkkej želatíny (dĺžka 20 mm; R.P.Scherer AG, Eberbach, Nemecko) s použitím bežného zariadenia.
Príklad 61
Disperzia
Na prípravu disperzie obsahujúcej 120,0 mg aktívnej látky na 10 ml (výhodne látka uvedená v názve príkladu 46) sa spra164 čujú nasledujúce zložky:
aktívna látka 120,0 mg RKlucel HF (hydroxypropylcelulóza,·
Hercules, Nemecko) 50,0 mg
Tween 20 (polyoxyetylénsorbitanmonolaurát; Fluka, Švajčiarsko) 100,0 mg demineralizovaná voda 10,0 ml
Demineralizovaná voda sa vnesie do zásobníka a za miešania sa do nej pomaly rozptýli hydroxypropylcelulóza (magnetické miešadlo) a 1 hodinu sa nechá bobtnať. Potom sa pridá polyoxyetylénsorbitanmonolaurát a zmes sa mieša 5 minút (magnetické miešadlo). Nakoniec sa pridá aktívna látka a zmes sa mieša 15 minút (magnetické miešadlo).
Príklad 62
Inhibičná aktivita s ohľadom na HIV-1-proteázu
S použitím testovacieho opísaného systému a ikozapeptidu
RRSNQVSQNYPIVONIQGRR sa pre ledujúce hodnoty IC^q: nasledujúce príklady získajú nas-
Príklad IC5Q(gM) Príklad IC50
1 0,032 27 0,027
2 0,014 27 (1-metyl-lH-tetrazolyl izomér) 0,051
3 0,041 28 0,083
4 0,038 29 0,014
5 0,04 30 0,054
6 0,022 31 0,171
7 0,013 34 0,072
8 0,01 35 0,058
9 0,019 37 0,029
10 0,02 38 0,085
11 0,037 39 0,012
165
12 0,02 40 0,021
13 0,032 41 0,032
14 0,031 42 0,015
15 0,05 43 0,037
16 0,033 44 0,029
17 0,018 45 0,012
18 0,025 46 0,026
19 0,022 47 0,04
20 0,015 48 0,031
21 0,043 49 0,02
22 0,04 50 0,028
23 0,034 51 0,034
24 0,05 52 0, 034
25 0,1
26 0,021
Príklad 63
Ochrana MT-2 buniek proti infekcii HIV
S použitím uvedeného testovacieho systému má na inhibíciu infekcie MT-2 buniek vírusom HIV-l/MN zlúčenina uvedená v názve príkladu 46, 1-[4-(pyridín-2-yl)fenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán, nasledujúcu hodnotu ΕΌθθ : EDgo= = 0,003 μΜ.
Príklad 64
Koncentrácia v krvi myší
S použitím uvedeného testovacieho systému na stanovenie farmakokinetiky zlúčenín vzorca I vykazuje zlúčenina uvedená v názve príkladu 46, 1-[4-(pyridin-2-yl)fe-nyl]-4(S)-hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fe-nyl-2-azahexán, po orálnom podaní 120 mg/kg nasledujúcu koncentráciu v krvi:
Koncentrácia (μΜ) zlúčeniny uvedenej v názve príkladu 46 v plazme
166 min. 21,83 min po podaní 31,76
Príklad 65
Prostriedok - roztok (I)
Prostriedok obsahuje ako aktívnu zložku 100 mg zlúčeniny uvedenej v názve príkladu 46,100 mg racemickej kyseliny mliečnej (90 %), celulóza-HP-M-603, silikagél (Aerozil 200) a deionizovanú vodu (2 g) .
Príklad 66
Prostriedok - roztok (II)
Prostriedok obsahuje ako aktívnu zložku 18,4 mg zlúčeniny uvdenej v názve príkladu 46, 5 mg celulóza-HPM-603, 40 mg
N-metylpyrolidónu a dvakrát destilovanú vodu do 1 ml.
Príklad 67
Analogicky jednému z uvedených postupov sa pripraví
A) 1- [4- (pyridin-2-yl) fenyl] -4 (R) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis [N- (Nmetoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
B) 1- [4- (pyridin-2-yl) fenyl] -4 (R) -hydroxy-5 (R) -2,5-bis [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
C) 1- [4- (pyridin-2-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2- [N- (N-metoxy-karbonyl- (L) - terc-leucyl) -amino] -5- [N- (N-metoxykarbonyl- (D) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán; alebo
16(7
D) 1- [4- (pyridin-2-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2- [N- (N-metoxy karbonyl- (D) - terc-leucyl) amino] -5- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán.

Claims (27)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Zlúčenina všeobecného vzorca I kde
    R1 je nižšia alkoxykarbonylová skupina,
    R2 je sekundárna alebo terciárna nižšia alkylová skupina alebo alkyltioalkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny,
    R je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jednou alebo viacerými alkoxylovými skupinami, alebo cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka,
    R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, kedy každá táto skupina je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná pomocou kruhového atómu uhlíka, má 5 až 8 kruhových atómov, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovanú alebo substituovaná nižšou aikyiovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou, v ktorej je alkylová skupina nižšia, r5 má nezávisle na R2 jeden z významov uvedených pre R2, a
    169
    RS je nezávisle na R1 nižšia alkoxykarbonylová skupina, alebo jej sol, s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca sol.
  2. 2. Zlúčenina podľa nároku 1 všeobecného vzorca la kde zvyšky sú definované rovnako ako v nároku 1, alebo jej soľ, s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca soľ.
  3. 3. Zlúčenina všeobecného vzorca la podľa nároku 2, kde
    R1 je nižšia alkoxykarbonylová skupina,
    O
    R je izopropylová skupina, sek-butylová skupina alebo terc-butylová skupina,
    R3 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina,
    R4 je fenylová skupina substituovaná v polohe 4 jedným z nasledujúcich zvyškov, ktoré sú pripojené cez kruhový atóm uhlíka: tienylová skupina; oxazolylová skupina; tiazolylová skupina; imidazolylová skupina; 1,4-tiazinylová skupina; triazolylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná l-metyl-l-fenyletylovou skupinou, terc-butylovou skupinou alebo metylovou skupinou;
    170 tetrazolylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou, terc-butylovou skupinou alebo metylovou skupinou; pyridinylová skupina; pyrazinylová skupina; a pyrimidinylová skupina;
    R5 je izopropylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina alebo metyltiometylová skupina, a
    R5 je nižšia alkoxykarbonylová skupina, alebo jej soli, s podmienkou, že je prítomná najmenej jedna skupina tvoriaca soľ.
  4. 4. Zlúčenina všeobecného vzorca la podľa nároku 2, kde
    R1 je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina,
    O
    R je izopropylová skupina, sek-butylová skupina alebo terc-butylová skupina,
    R3 je fenylová skupina,
    R4 je fenylová skupina substituovaná v polohe 4 fenylového kruhu 2-tienylovou skupinou alebo 3-tienylovou skupinou; tiazol-5-ylová skupina; tiazol-2-ylová skupina; 2H-tetrazol-5-ylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná v polohe 2 1-metyl-l-fenyletylovou skupinou, terc-butylovou skupinou alebo metylovou skupinou; lH-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná v polohe 1 metylovou skupinou; pyridin-2-ylovou skupinou; pyridin-3-ylovou skupinou; pyridin-4-ylovou skupinou; alebo pyrazin-2-ylovou skupinou;
    c
    R je izopropylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina alebo metyltiometylová skupina; a
    171
    R6 je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina;
    s podmienkou, že najmenej jeden z dvoch zvyškov R2 a R5 je terc-butylová skupina, s podmienkou, že R4 je fenylová skupina sub- stituovaná v polohe 4 fenylového kruhu 2-tienylovou alebo 3-tienylovou skupinou; tiazol-5-ylová skupina; tiazol-2-ylová skupina; 2H-tetrazol-5-ylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná v polohe 2 1-metyl-1-fenylety lovou skupinou, terc-buty lovou skupinou alebo metylovou skupinou; 1H-tetrazol-5-ylová skupina substituovaná v polohe 1 metylovou skupinou; pyridin-3-ylovou skupinou; pyridin-4-ylovou skupinou; alebo pyrazin-2-ylovou skupinou;
    alebo jej soli, s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
  5. 5. Zlúčenina všeobecného vzorca la podľa nároku 2, kde
    R1 je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina,
    R je izopropylová skupina, sek-butylová skupina alebo terc-butylová skupina,
    O
    R je fenylová skupina,
    R4 je 4-(tiazol-2-yl)-fenylová skupina, 4-(tiazol-5-yl)-fenylová skupina, 4-(pyridin-2-yl)-fenylová skupina alebo 4- (2-metyltetrazol-5-yl) -fenylová skupina;
    c
    R je izopropylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina alebo metyltiometylová skupina; a
    Zľ I
    R je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina;
    172 alebo jej (výhodne farmaceutický prijateľná) soľ, s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
  6. 6. Zlúčenina všeobecného vzorca la podľa nároku 2, vybraná z nasledujúcich zlúčenín:
    1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino - 6 - f enyl - 2 - azahexán ;
    1- [4- (tiazol-5-yl) - fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N- (N-metoxykarbonyl- (L) - izoleucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6-f enyl-2-azahexán;
    1- [4- (tiazol-5-yl) - fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N- (N-metoxykarbonyl- (L) -S-metylcysteinyl)amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6-fenyl-2-azahexán;
    1- [4- (tíazol-5-yl) - fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N- (N-etoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino - 6 - fenyl - 2 - azahexán ;
    1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6-f enyl-2-azahexán;
    1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) -amino-6-fenyl-2-azahexán;
    1- [4- (tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl - (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán;
    1- [4- (tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino-6 - fenyl - 2 - azahexán;
    173
    1- [4- (tiazol-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -izoleucyl) amino-6-f eny 1-2-azahexán;
    1- [4- (pyridín-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl- (L)-valyl)amino]-6-fenyl-2-azahexán;
    1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-N- (N-metoxykarbonyl - (L) -valyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-6-f enyl-2-azahexán; a
    1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-2-Ν- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) amino-5 (S) -N- (N-metoxykarbonyl- (L) -valyl) amino - 6 - f enyl-2-azahexán;
    alebo v každom prípade jej farmaceutický prijateľná soľ, s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
  7. 7. Zlúčenina všeobecného vzorca la podľa nároku 2, ktorou je 1- [4- (tiazol-5-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) -amino] -6-fenyl-2-azahexán, alebo jej soľ.
  8. 8. Zlúčenina všeobecného vzorca la podľa nároku 2, ktorou je 1- [4- (2-metyl-2H-tetrazol-5-yl) fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl - (L) - terc-leucyl) amino] -6-fenyl-2-azahexán, alebo jej soľ.
  9. 9. Zlúčenina všeobecného vzorca la podľa nároku 2, ktorou je 1- [4- (pyridin-2-yl) -fenyl] -4 (S) -hydroxy-5 (S) -2,5-bis- [N- (N-metoxykarbonyl- (L) - terc-leucyl) -amino] -6-f enyl-2-azahexán, alebo jej soľ.
  10. 10. Zlúčenina všeobecného vzorca I* podľa ktoréhokoľvek z ná174 rokov 1 až 9 alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, na použitie pri spôsoboch liečby živočíchov alebo človeka.
  11. 11. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zlúčeninu všeobecného vzorca I* podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9, alebo farmaceutický prijateľnú soľ takej zlúčeniny, ktorá obsahuje najmenej jednu skupinu tvoriacu soľ, spolu s farmaceutický prijateľným nosičom.
  12. 12. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I* podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9, alebo farmaceutický prijateľné soli takej zlúčeniny, ktorá obsahuje najmenej jednu skupinu tvoriacu soľ, pri príprave farmaceutického prostriedku na použitie pri inhibícii aspartátproteázy HIV.
  13. 13. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9, alebo farmaceutický prijateľnej soli takej zlúčeniny, ktorá obsahuje najmenej jednu skupinu tvoriacu soľ, pri príprave farmaceutického prostriedku na použitie pri liečbe retrovírusového ochorenia.
  14. 14. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I* podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9 na liečbu retrovírusového ochorenia.
  15. 15. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca I* podľa nároku 1, alebo jej soli, vyznačujúci sa tým, že sa
    a) derivát hydrazínu vzorca
    175
    NH z v kde zvyšky R4, R5 a R6 sú definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, pridá k epoxidu vzorca IV*,
    1 O kde zvyšky R , R a RJ sú definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, vol'né funkčné skupiny s výnimkou skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú, pokiaľ je to potrebné, v chránenej forme, a akékoľvek chrániace skupiny sa odstránia, alebo
    b) aminozlúčenina všeobecného vzorca V (V*) kde zvyšky R1, R2, všeobecného vzorca I,
    R3 a R4 sú sa kondenzuje s definované pre zlúčeninu kyselinou vzorca VI
    Ο (VI) alebo s reaktívnym derivátom tejto kyseliny, kde zvyšky R5 a R sú definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, volne funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú, pokiaľ je to potrebné, v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
    c) aminozlúčenina všeobecného vzorca VII*, kde zvyšky R3, R4, R5 a R6 sú becného vzorca I, sa kondenzuje definované pre zlúčeninu všeos kyselinou všeobecného vzorca (VIII) alebo s reaktívnym derivátom tejto kyseliny, kde zvyšky R1 o a R sú definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú, ak je to potrebné, v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
    d) na prípravu zlúčeniny vzorca I, kde páry substituentov
    177 a R6 a R2 a R5 sú v každom prípade dva identické zvyšky, ako je definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, a R3 a R4 sú definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, sa diaminozlúčenina vzorca IX* kde zvyšky boli už všeobecného vzorca definované,
    R2’
    r] .CH OH kondenzuje s kyselinou (VlIIa) alebo s jej reaktívnym derivátom, kde R3·' a R21 sú rovnaké ako bolo definované pre R1 a R6 a pre R2 a R5, v tomto poradí, vo vzorci I, pary R a R a R a R sú v každom prípade dva rovnaké zvyšky, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie sú, ak je to potrebné v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
    e) iminozlúčenina všeobecného vzorca (ľ kde zvyšky R1, R2, R3, R5 a R6 sú rovnaké ako bolo definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, reaguje so zlúčeninou všeobecného vzorca X (X)
    178 kde X je odstupujúca skupina a R4 je rovnaká ako bolo definované pre zlúčeninu všeobecného vzorca I, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie, sú v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, alebo
    f) iminozlúčenina všeobecného vzorca (ľ) (ľ ) kde zvyšky R1, R2, R3, R5 a R5 sú rovnaké ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I, reaguje s aldehydom * všeobecného vzorca X (X*) kde R4 je rovnaké ako bolo definované pre zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo s jeho reaktívnym derivátom, pri redukčnej alkylácii, voľné funkčné skupiny okrem skupín, ktoré sa zúčastňujú reakcie, sú v chránenej forme, a všetky chrániace skupiny sa odstránia, a ak je to vhodné, zlúčenina všeobecného vzorca I, ktorá obsahuje najmenej jednu skupinu tvoriacu soľ, a ktorú je možné získať akýmkoľvek uvedeným postupom a) až f) sa prevedie na jej soľ alebo sa získaná soľ prevedie na voľnú zlúčeninu alebo na inú soľ a/alebo izomérne zmesi, ktoré je možné získať, sa oddelia a/alebo zlúčenina všeobecného vzorca I podľa predloženého vynálezu sa prevedie na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I podľa predloženého vynálezu.
    (XX)
    179
  16. 16 . Zlúčenina všeobecného vzorca XX kde R1 je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová skupina a R je terc-butylová skupina, alebo jej sol.
  17. 17. Zlúčenina všeobecného vzorca IV (IV) , kde R3· je metoxykarbonylová skupina alebo etoxykarbonylová
    O Q skupina a R je terc-butylová skupina a R je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovná jednou alebo viacerými nižšími alkoxylovými skupinami, alebo cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka.
  18. 18 . Zlúčenina všeobecného vzorca III
    NH
    CH R (III*)
    180 kde R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu.
    R3 je terc-butylová skupina a £
    R je metoxykarbonylová alebo etoxykarbonylová skupina; alebo jej soľ, pokiaľ je prítomná skupina tvoriaca soľ.
  19. 19. Zlúčenina všeobecného vzorca XII,
    R4 NH (XII) \Z \ 7
    NH—R7 kde R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovu skupinu a R' je skupina chrániaca aminoskupinu, alebo jej soľ, pokial je prítomná skupina tvoriaca sol.
  20. 20. Zlúčenina všeobecného vzorca XII*,
    181
    R N \ 7
    NH—R7 (XII)* kde R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylon vú skupinu a R je skupina chrániaca aminoskupinu, alebo jej soľ, pokiaľ je prítomná skupina tvoriaca soľ.
  21. 21. Zlúčenina všeobecného vzorca III, kde R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skuiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, r5 je izopropylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina alebo metyltiometylová skupina a R6 je nižšia alkoxykarbonylová skupina, alebo jej soľ, pokiaľ je
    182 prítomná skupina tvoriaca soľ.
  22. 22. Zlúčenina všeobecného vzorca V,
    OH \/CHJ y
    HN
    NH2 (V) kde R1 je nižšia alkoxykarbonylová skupina, n
    R je sekundárna alebo terciárna nižšia alkylova skupina alebo alkyltioalkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny,
    R3 je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jednou alebo viacerými alkoxylovými skupinami, alebo cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka, a
    R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, alebo jej soli s podmienkou, že je prítomná skupina tvoriaca soľ.
  23. 23. Zlúčenina všeobecného vzorca VII,
    183 kde
    R3 je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jednou alebo viacerými nižšími alkoxylovými skupinami, alebo cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka,
    R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu,
    R5 je sekundárna alebo terciárna nižšia alkylová skupina alebo alkyltioalkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny, a
    R6 je nižšia alkoxykarbonylová skupina, alebo jej soli s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
  24. 24. Zlúčenina všeobecného vzorca IX,
    184
    OH η2ν (IX) ľ3 kde
    R3 je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jedným alebo viacerými nižšími alkoxylovými zvyškami, alebo cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka, a
    R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, alebo jej soľ s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
  25. 25. Zlúčenina všeobecného vzorca XXIV, (XXIV)
    185 kde
    R12 a R14 sú skupiny chrániace, aminoskupinu, ktoré sú rôzne,
    R2 je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jednou alebo viacerými alkoxylovými skupinami, cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka, a
    R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, alebo jej soľ s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
  26. 26. Zlúčenina všeobecného vzorca XXV, kde R14 je skupina chrániaca aminoskupinu,
    R2 je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jednou alebo viacerými nižšími alkoxylovými skupinami, alebo cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka, a
    R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom
    186 každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je nesubstituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, alebo jej soľ s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
  27. 27. Zlúčenina všeobecného vzorca XXVI, (XXVI) kde R15 je skupina chrániaca aminoskupinu,
    R1 je nižšia alkoxykarbonylová skupina,
    R je sekundárna alebo terciárna nižšia alkylová skupina alebo alkyltioalkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny,
    R3 je fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná jednou alebo viacerými alkoxylovými skupinami, cykloalkylová skupina obsahujúca 4 až 8 atómov uhlíka, a
    R4 je fenylová skupina alebo cyklohexylová skupina, pričom každá z týchto skupín je substituovaná v polohe 4 nenasýtenou heterocyklylovou skupinou, ktorá je viazaná cez
    187 kruhový atóm uhlíka, obsahuje 5 až 8 atómov v kruhu, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané zo skupiny, ktorú tvorí atóm dusíka, atóm kyslíka, atóm síry, sulfinylová skupina a sulfonylová skupina a je ne substituovaná alebo substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo fenylalkvlovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, alebo jej soľ s podmienkou, že je prítomná aspoň jedna skupina tvoriaca soľ.
SK1452-98A 1996-04-22 1997-04-14 Heterocyklické azahexánové deriváty, spôsob ich prípravy, farmaceutický prostriedok, ktorý ich obsahuje, a ich použitie SK285048B6 (sk)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH101896 1996-04-22
CH2997 1997-01-08
CH22397 1997-01-31
PCT/EP1997/001860 WO1997040029A1 (en) 1996-04-22 1997-04-14 Antivirally active heterocyclic azahexane derivatives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK145298A3 true SK145298A3 (en) 1999-06-11
SK285048B6 SK285048B6 (sk) 2006-05-04

Family

ID=27171723

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1452-98A SK285048B6 (sk) 1996-04-22 1997-04-14 Heterocyklické azahexánové deriváty, spôsob ich prípravy, farmaceutický prostriedok, ktorý ich obsahuje, a ich použitie

Country Status (28)

Country Link
EP (1) EP0900210B1 (sk)
JP (1) JP3174347B2 (sk)
CN (3) CN1082508C (sk)
AR (1) AR006720A1 (sk)
AT (1) ATE288903T1 (sk)
AU (1) AU706183B2 (sk)
BR (1) BR9701877A (sk)
CA (3) CA2568104C (sk)
CY (1) CY2596B2 (sk)
CZ (1) CZ296135B6 (sk)
DE (2) DE122005000003I1 (sk)
DK (1) DK0900210T3 (sk)
EA (1) EA001794B1 (sk)
ES (1) ES2238720T3 (sk)
FR (1) FR05C0030I2 (sk)
HK (2) HK1018788A1 (sk)
HU (1) HU224125B1 (sk)
IL (1) IL126381A (sk)
LU (1) LU91189I2 (sk)
MY (1) MY114457A (sk)
NL (1) NL300203I2 (sk)
NO (2) NO313330B1 (sk)
NZ (3) NZ332118A (sk)
PT (1) PT900210E (sk)
SI (1) SI0900210T1 (sk)
SK (1) SK285048B6 (sk)
TW (1) TW409125B (sk)
WO (1) WO1997040029A1 (sk)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6087383A (en) 1998-01-20 2000-07-11 Bristol-Myers Squibb Company Bisulfate salt of HIV protease inhibitor
CA2331756A1 (en) * 1998-05-15 1999-11-25 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
US6251906B1 (en) 1998-05-15 2001-06-26 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
US6096894A (en) * 1998-07-29 2000-08-01 Sumika Fine Chemicals Co., Ltd. Production method of 2-(p-alkylphenyl)pyridine compound
ATE239707T1 (de) * 1998-08-07 2003-05-15 Sumika Fine Chemicals Co Ltd 2-phenylpyridine-derivate und verfahren zu deren herstellung
US6197803B1 (en) 1998-12-09 2001-03-06 American Home Products Corporation Heterocyclic carboxamide-containing thiourea inhibitors of herpes viruses containing phenylenediamine group
US6335350B1 (en) 1998-12-09 2002-01-01 American Home Products Corporation Acetamide and substituted acetamide-containing thiourea inhibitors of herpes viruses
US6207715B1 (en) 1998-12-09 2001-03-27 American Home Products Corporation Alpha-methylbenzyl-containing thiourea inhibitors of herpes viruses containing a substituted phenylene-diamine group
US6255349B1 (en) 1998-12-09 2001-07-03 American Home Products Corporation Alph-methylbenzyl-containing thiourea inhibitors of herpes viruses containing a phenylenediamine group
JP4222671B2 (ja) * 1999-02-15 2009-02-12 住友化学株式会社 ヒドラジン誘導体の製造方法
IT1313664B1 (it) 1999-10-12 2002-09-09 Norpharma S P A Processo per la preparazione di un composto aril-piridinico.
JP4278316B2 (ja) * 2000-07-14 2009-06-10 住友化学株式会社 ヒドラジン誘導体の製造方法
US6365745B1 (en) 2000-07-14 2002-04-02 Sumika Fine Chemicals Co., Ltd. Method for producing hydrazine derivative
US8519144B2 (en) 2002-10-02 2013-08-27 Euticals Prime European Therapeuticals Spa Process for the preparation of aryl-piridyl compounds
AU2003298868B2 (en) * 2002-12-06 2009-09-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions comprising a combination of diphenyl ura IMPDH inhibitors and apoptosis-inducing anti-cancer agents
ITMI20032338A1 (it) * 2003-11-28 2005-05-29 Dinamite Dipharma S P A In Forma A Bbreviata Diph Composti feniltetrazolici.
CN1980666B (zh) * 2004-05-04 2011-03-30 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 制备阿扎那韦硫酸氢盐的方法和新的形式
MX2007009655A (es) 2005-02-10 2007-09-26 Medivir Ab Inhibidores de la proteasa del vih.
US20090306112A1 (en) * 2006-07-21 2009-12-10 Gilead Sciences, Inc. Antiviral protease inhibitors
ES2356334T3 (es) * 2007-06-12 2011-04-07 Concert Pharmaceuticals, Inc. Derivados de azapéptidos como inhibidores de la proteasa vih.
WO2009130534A1 (en) * 2008-04-24 2009-10-29 Oxyrane (Pty) Ltd. Process for synthesizing atazanavir
EP2272830A1 (en) * 2009-06-18 2011-01-12 Esteve Química, S.A. Preparation process of an antivirally heterocyclic azahexane derivative
EP2272831A1 (en) 2009-06-26 2011-01-12 Prime European Therapeuticals S.p.A. Process for the preparation of arylpyridinyl compounds
WO2011037467A1 (en) 2009-09-28 2011-03-31 Stichting Katholieke Universiteit Atazanavir for treating inflammatory diseases
WO2011080562A1 (en) 2009-12-29 2011-07-07 Hetero Research Foundation Novel aza-peptides containing 2,2-disubstituted cyclobutyl and/or substituted alkoxy benzyl derivatives as antivirals
WO2011107843A2 (en) * 2010-03-01 2011-09-09 Lupin Limited Process for the preparation of atazanavir sulfate substantially free of diastereomers
EP2621472A1 (en) 2010-09-28 2013-08-07 Ratiopharm GmbH Dry processing of atazanavir
US20140343290A1 (en) * 2011-07-27 2014-11-20 Rakesh Kumar Singh Process for the preparation of atazanavir or its bisulfate salt
US9227990B2 (en) 2012-10-29 2016-01-05 Cipla Limited Antiviral phosphonate analogues and process for preparation thereof
CN104250224A (zh) * 2013-06-28 2014-12-31 上海威智医药科技有限公司 阿扎那韦富马酸盐及其制备和应用
CN104163787A (zh) * 2014-08-08 2014-11-26 山东威智医药工业有限公司 阿扎那韦及其硫酸盐的制备方法
CN107459496B (zh) * 2016-06-03 2022-07-19 华东理工大学 噻唑类衍生物在治疗病毒感染中的应用
JOP20180009A1 (ar) 2017-02-06 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مركبات مثبط فيروس hiv
CN107245052A (zh) * 2017-06-21 2017-10-13 连云港杰瑞药业有限公司 一种阿扎那韦制备方法
TWI829205B (zh) * 2018-07-30 2024-01-11 美商基利科學股份有限公司 抗hiv化合物
CN109251165B (zh) * 2018-10-02 2022-09-23 国药集团川抗制药有限公司 阿扎那韦达二4-氨基苯磺酸盐及其制备方法
CN109574916A (zh) * 2018-12-29 2019-04-05 常州吉恩药业有限公司 阿扎那韦中间体2-[4-(2-吡啶基)苄基]-肼羧酸叔丁酯的工业化生产方法
WO2021209563A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
CN113603634B (zh) * 2021-08-06 2023-03-21 江苏八巨药业有限公司 一种阿扎那韦中间体的制备方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IE20010533A1 (en) * 1990-11-20 2003-03-05 Abbott Lab Intermediates for preparing retroviral protease inhibiting compounds
ES2093237T3 (es) * 1991-07-03 1996-12-16 Ciba Geigy Ag Derivados de hidrazina farmacologicamente activos y procedimiento para su obtencion.
EP0604368B1 (de) * 1992-12-23 1996-09-18 Ciba-Geigy Ag Antiretrovirale hydrazinderivate
DE69332616T2 (de) * 1992-12-29 2003-11-06 Abbott Laboratories, Abbott Park Hemmer der retroviralen Protease
US5461067A (en) * 1993-02-25 1995-10-24 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds

Also Published As

Publication number Publication date
CA2568104A1 (en) 1997-10-30
CN1082508C (zh) 2002-04-10
IL126381A (en) 2001-08-26
EA199800899A1 (ru) 1999-10-28
CA2568104C (en) 2009-08-04
NO984900D0 (no) 1998-10-21
CN1319587A (zh) 2001-10-31
PT900210E (pt) 2005-06-30
AU2385997A (en) 1997-11-12
NZ509045A (en) 2002-09-27
NZ509046A (en) 2002-05-31
DE122005000003I1 (de) 2005-05-25
NO984900L (no) 1998-12-21
NZ332118A (en) 2001-02-23
EA001794B1 (ru) 2001-08-27
CA2250840C (en) 2006-07-04
MY114457A (en) 2002-10-31
ES2238720T3 (es) 2005-09-01
IL126381A0 (en) 1999-05-09
DE69732483D1 (de) 2005-03-17
CN1193010C (zh) 2005-03-16
LU91189I9 (sk) 2018-12-27
AU706183B2 (en) 1999-06-10
DK0900210T3 (da) 2005-05-02
JPH11511177A (ja) 1999-09-28
EP0900210B1 (en) 2005-02-09
SI0900210T1 (sk) 2005-08-31
DE69732483T2 (de) 2005-07-28
HUP9901612A2 (hu) 1999-08-30
NO2005010I1 (no) 2005-05-02
CN1616453A (zh) 2005-05-18
CA2510945C (en) 2007-01-16
CA2510945A1 (en) 1997-10-30
NO313330B1 (no) 2002-09-16
NL300203I1 (nl) 2005-10-03
LU91189I2 (fr) 2005-10-03
CZ337398A3 (cs) 1999-01-13
CN1216539A (zh) 1999-05-12
CY2596B2 (en) 2010-03-03
HK1075043A1 (en) 2005-12-02
CA2250840A1 (en) 1997-10-30
WO1997040029A1 (en) 1997-10-30
TW409125B (en) 2000-10-21
ATE288903T1 (de) 2005-02-15
BR9701877A (pt) 1998-09-29
EP0900210A1 (en) 1999-03-10
HUP9901612A3 (en) 2000-06-28
SK285048B6 (sk) 2006-05-04
FR05C0030I1 (sk) 2005-08-12
HU224125B1 (hu) 2005-05-30
CZ296135B6 (cs) 2006-01-11
CN1310905C (zh) 2007-04-18
HK1018788A1 (en) 2000-01-07
NL300203I2 (nl) 2005-11-01
FR05C0030I2 (fr) 2007-04-27
JP3174347B2 (ja) 2001-06-11
AR006720A1 (es) 1999-09-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK145298A3 (en) Antivirally active heterocyclic azahexane derivatives, process for their preparation, pharmaceutical composition containing same and their use
US6300519B1 (en) Antivirally active heterocyclic azahexane derivatives
US5807891A (en) Antiviral ethers of aspartate protease substrate isosteres
US5753652A (en) Antiretroviral hydrazine derivatives
EP0876336B1 (en) Azahexane derivatives as substrate isosters of retroviral asparate proteases
EP0604368A1 (de) Antiretrovirale hydrazinderivate
JP4100710B2 (ja) アニリノペプチド誘導体
KR100486051B1 (ko) 항바이러스활성헤테로시클릭아자헥산유도체

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Expiry date: 20170414