SK143597A3 - Clostridial toxin derivatives able to modify peripheral sensory afferent functions - Google Patents
Clostridial toxin derivatives able to modify peripheral sensory afferent functions Download PDFInfo
- Publication number
- SK143597A3 SK143597A3 SK1435-97A SK143597A SK143597A3 SK 143597 A3 SK143597 A3 SK 143597A3 SK 143597 A SK143597 A SK 143597A SK 143597 A3 SK143597 A3 SK 143597A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- composition
- chain
- composition according
- clostridial neurotoxin
- fragment
- Prior art date
Links
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 title claims description 39
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 title claims description 10
- 230000006870 function Effects 0.000 title claims description 8
- 231100001102 clostridial toxin Toxicity 0.000 title description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 35
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 31
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 17
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 102
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims description 61
- 210000003766 afferent neuron Anatomy 0.000 claims description 50
- 230000036407 pain Effects 0.000 claims description 50
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 47
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 claims description 45
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 claims description 32
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 claims description 32
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 claims description 32
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 claims description 32
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 claims description 25
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 claims description 25
- 230000003040 nociceptive effect Effects 0.000 claims description 25
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 claims description 21
- 241001112695 Clostridiales Species 0.000 claims description 15
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 12
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 12
- 101710138657 Neurotoxin Proteins 0.000 claims description 10
- 210000001176 projection neuron Anatomy 0.000 claims description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 10
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 claims description 9
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 7
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 claims description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 6
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000008058 pain sensation Effects 0.000 claims description 4
- 210000000063 presynaptic terminal Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 claims description 4
- 230000007441 retrograde transport Effects 0.000 claims description 4
- 230000000720 neurosecretory effect Effects 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 3
- 102000007339 Nerve Growth Factor Receptors Human genes 0.000 claims description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 2
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims description 2
- 108010057266 Type A Botulinum Toxins Proteins 0.000 claims 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims 4
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 4
- 229940094657 botulinum toxin type a Drugs 0.000 claims 4
- 108010074523 rimabotulinumtoxinB Proteins 0.000 claims 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 2
- 108010032605 Nerve Growth Factor Receptors Proteins 0.000 claims 1
- 102000028517 Neuropeptide receptor Human genes 0.000 claims 1
- 108070000018 Neuropeptide receptor Proteins 0.000 claims 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 claims 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 claims 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 17
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 abstract description 5
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 abstract description 4
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 abstract description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 abstract description 2
- 230000005945 translocation Effects 0.000 abstract description 2
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 abstract 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 abstract 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 abstract 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 abstract 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 22
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 description 9
- 108010057722 Synaptosomal-Associated Protein 25 Proteins 0.000 description 9
- 102000004183 Synaptosomal-Associated Protein 25 Human genes 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 229940005483 opioid analgesics Drugs 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 8
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 8
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 8
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 7
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 210000001170 unmyelinated nerve fiber Anatomy 0.000 description 6
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 5
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 5
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 5
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 5
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000003098 Ganglion Cysts Diseases 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 4
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 4
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 208000005400 Synovial Cyst Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- 210000000609 ganglia Anatomy 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 4
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- NITXODYAMWZEJY-UHFFFAOYSA-N 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanehydrazide Chemical compound NNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 NITXODYAMWZEJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000036861 Zinc-dependent endopeptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091006982 Zinc-dependent endopeptidases Proteins 0.000 description 3
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 3
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 3
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 3
- QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N (2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-1-[(2R)-2-amino-5-carbamimidamidopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-N-[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]pentanediamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N 0.000 description 2
- IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=CC=C1OCCO IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 2
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000004454 Hyperalgesia Diseases 0.000 description 2
- 102400001355 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 101710151321 Melanostatin Proteins 0.000 description 2
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102400000064 Neuropeptide Y Human genes 0.000 description 2
- 102000004230 Neurotrophin 3 Human genes 0.000 description 2
- 108090000742 Neurotrophin 3 Proteins 0.000 description 2
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010093625 Opioid Peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000001490 Opioid Peptides Human genes 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102400000096 Substance P Human genes 0.000 description 2
- 101800003906 Substance P Proteins 0.000 description 2
- 229920004929 Triton X-114 Polymers 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 208000005298 acute pain Diseases 0.000 description 2
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 229940077737 brain-derived neurotrophic factor Drugs 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N capsaicin Chemical compound COC1=CC(CNC(=O)CCCC\C=C\C(C)C)=CC=C1O YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 210000003792 cranial nerve Anatomy 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 2
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 2
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 229940032018 neurotrophin 3 Drugs 0.000 description 2
- URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N nucleopeptide y Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000003399 opiate peptide Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 210000001044 sensory neuron Anatomy 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 210000001679 solitary nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-ylideneazanium;chloride Chemical compound Cl.N=C1CCCS1 ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 2
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- QXXBUXBKXUHVQH-FMTGAZOMSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-3-hydroxy-2-[[2-[[2-[[(2s)-1-[(2s)-1-[(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-methylbutan Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(O)=O)C(C)C)CCN1C(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 QXXBUXBKXUHVQH-FMTGAZOMSA-N 0.000 description 1
- MISJXUDJCSZFAH-UHFFFAOYSA-N 1-sulfanylpyridin-2-one Chemical compound SN1C=CC=CC1=O MISJXUDJCSZFAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 description 1
- 102400000967 Bradykinin Human genes 0.000 description 1
- 206010006784 Burning sensation Diseases 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 102100038518 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 108090000932 Calcitonin Gene-Related Peptide Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101800001982 Cholecystokinin Proteins 0.000 description 1
- 102100025841 Cholecystokinin Human genes 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241000193155 Clostridium botulinum Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001539473 Euphoria Species 0.000 description 1
- 206010015535 Euphoric mood Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N Heroin Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)OC(C)=O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4OC(C)=O GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N 0.000 description 1
- 208000035154 Hyperesthesia Diseases 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010022714 Intestinal ulcer Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N Met-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 108010042237 Methionine Enkephalin Proteins 0.000 description 1
- 108091008604 NGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010029174 Nerve compression Diseases 0.000 description 1
- 208000028389 Nerve injury Diseases 0.000 description 1
- 208000005890 Neuroma Diseases 0.000 description 1
- 206010029315 Neuromuscular blockade Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 208000001294 Nociceptive Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 108010010469 Qa-SNARE Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010005730 R-SNARE Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010038678 Respiratory depression Diseases 0.000 description 1
- 102000002215 Synaptobrevin Human genes 0.000 description 1
- 102000050389 Syntaxin Human genes 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 210000003626 afferent pathway Anatomy 0.000 description 1
- 206010053552 allodynia Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 description 1
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960002504 capsaicin Drugs 0.000 description 1
- 235000017663 capsaicin Nutrition 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940107137 cholecystokinin Drugs 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229960002069 diamorphine Drugs 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 230000028023 exocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001247 head activator peptide Proteins 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002102 hyperpolarization Effects 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000030214 innervation Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- -1 lactose saccharide Chemical class 0.000 description 1
- 210000005053 lamin Anatomy 0.000 description 1
- 238000003475 lamination Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000003466 luteinizing hormone derivative Substances 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000001386 multineuronal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 1
- 230000029854 negative regulation of acetylcholine secretion Effects 0.000 description 1
- 230000008764 nerve damage Effects 0.000 description 1
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 1
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 description 1
- 230000003957 neurotransmitter release Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008052 pain pathway Effects 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000008288 physiological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 210000001034 respiratory center Anatomy 0.000 description 1
- 238000009938 salting Methods 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000009155 sensory pathway Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 210000004001 thalamic nuclei Anatomy 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 210000000836 trigeminal nuclei Anatomy 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/48—Nerve growth factor [NGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
- A61K38/4893—Botulinum neurotoxin (3.4.24.69)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/33—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Clostridium (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/832—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving bacterial toxin that has modified amino acid sequence
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
Deriváty klostrídiových toxínov, ktoré sú schopné modifikovať funkcie periférneho senzorického afereiitného neurónu
Oblasť techniky
Tento vynález sa zaoberá novým prípravkom, ktorý je schopný modifikovať funkciu periférneho aferentného neurónu. Prípravok môže inhibovať uvoľňovanie neurotransmiteru z oddelených populácií neurónov, a týra redukovať alebo výhodne zabraňovať prenosu aferentných bolestivých signálov z periférnych vlákien vedúcich bolesť na vlákna centrálne. Prípravok môže byť použitý ako liečivo na liečbu bolesti, najmä chronických bolestí.
Doterajší stav techniky
Zmysel hmat je tradične považovaný za jeden z piatich klasických zmyslov, ale v skutočnosti je vysoko komplexný a sprostredkováva veľké množstvá odlišných pocitov. Tieto pocity sú na periférii detekované mnohými špecializovanými nervovými zakončeniami a pripojenými Štruktúrami. Niektoré z nich sú -špecifické na mechanické podnety rôznych druhov ako je hmat, tlak, vibrácia á deformácia vlasov alebo chlpov. Iná trieda nervov je schopná detekovať teploty, s odlišnými vláknami aktivovanými teplom a chladom. Ďalšia populácia nervových zakončení nie je normálne excitovaná miernymi podnetmi, ale iba podnetmi silnými. Senzqrické nervy tejto kategórie odpovedajú často na viacej ako jeden podnet a sú známe ako polymodálne vlákna s vysokým prahom. Tieto vlákna sú využívané na vycítenie potenciálne poškodzujúcich situácií alebo objektov. Polymodálne vlákna taktiež prenášajú chemické signály ako sú pálčivé pocity vyvolávané kyselinou. Tak môže zmysel hmatu preniesť veľmi detailný popis objektov a slúžiť nielen pre informáciu, ale aj pre varovanie pred udalosťmi.
Prevod šenzorických signálov z periférie na pocit samotný sa dosiahne multineuronálnou dráhou a mozgovými centrami spracovávajúcimi informácie. Prvé neuróny dráhy zapojené do prenosu šenzorických podnetov sa nazývajú primárne senzorické aferentné neuróny. Telá buniek primárnych šenzorických aferentných neurónov hlavy a niektorých vnútorných orgánov sídlia v rôznych gangliách spojených s kraniálnymi nervami, najmä jadrami trojklaného nervu a jadrom solitárneho traktu (nucleus tractus solitarius). Bunkové telá primárnych šenzorických aferentných neurónov pre zvyšok tela ležia v gangliách zadných rohov miechy. Primárne senzorické aferentné neuróny a ich výbežky boli klasifikované histologický: bunkové telá spadajú do dvoch tried: typ A je veľký (60 až 120 /xm v priemere) , zatiaľ čo typ B je menší (14 až 30 /xm) a početnejší. Podobne aj výbežky spadajú do dvoch kategórií: vlákna C nemajú myelínovú pochvu, ktorú majú vlákna A. Vlákna A môžu byť d'alej rozdelené na vlákna AS, ktoré sú s väčším priemerom s dobre vyvinutým myélínom a vlákna Αδ, ktoré sú slabšie s menej dobre vyvinutým mýelínom. Obecne ša má za to, že vlákna AS pochádzajú z bunkových tiel typu A a vlákna Aô a C pochádzajú z bunkových tiel typu B. Tieto skupiny môžu byť ďalej rozšírené a rozdelené štúdiom seléktívnej expresie mnohých molekulárnych markerov.
Funkčné analýzy naznačujú, že za normálnych podmienok vlákna AS prenášajú zmysel hmatu a rozlíšenie miernych teplôt, zatiaľ čo vlákna C sú prevažne ekvivalentné s polymodálnymi vláknami s vysokým prahom uvedeným vyššie. Úloha vlákien Aô je menej jasná, pretože sa zdá, že môžu reagovať rôznym spôsobom, ako vlákna nielen s vysokým, ale nízkym prahom.
Po aktiväcii primárnych senzorických aferentných neurónov je ďalším krokom v prevode senzorických signálov aktivácia projekčných neurónov, ktoré prenášajú signál do vyšších častí centrálneho nervového systému, ako sú jadrá thalamu. Bunkové telá týchto neurónov (iných ako priamo súvisejúcich s kraniálnymi nervami) sú lokalizované v zadnom miechovom rohu. Tu sú rovnálco lokalizované synapsie medzi primárnymi aferentnými a projekčnými neurónami. Zadný roh je organizovaný do rady lamiel, ktoré sú usporiadané tak, že lamina I je najviacej dorzálné, nasledovaná laminou II atď. Pre kožné primárne aferentné neuróny majú vlákna C synapsie v laminách la II, vlákna Aô v laminách I, II a V a vlákna AS v laminách III, IV a V. Predpokladá sa, že hlbšie laminy (V až VII, X) sú zapojené do senzorických dráh prichádzajúcich z hlbších tkanív, ako sú svaly a vnútornosti.
Predominantný neúrotransmiter na synapsiach medzi primárnymi aferentnými a projekčnými neurónami je glutamát, i keď, čo je dôležité, vlákna C obsahujú niekoľko neuropeptidov, ako je substancia P a peptid príbuzný génu kalcitonínu (CGRP). Vlákna A môžu za určitých podmienok taktiež exprimovať neuropeptidy, ako je neuropeptid Y.
Účinnosť prenosu na týchto synapsiach môže byť zmenená zostupnými dráhami a lokálnymi inteŕneurónami v mieche. Aby sa zaistil mechanizmus pre zvýšené alebo znížené uvedomovanie pocitov, uvoľňujú tieto modulačné neuróny množstvá mediátorov, ktoré sú alebo inhibičné (napr. opioidné peptidy, glycín) alebo excitačné (napr. oxid dusnatý, cholecystokinín).
Kategória pocitu, ktorý vyžaduje takúto fyziologickú moduláciu, je bolesť. Bolesť je pocit, ktorý môže varovať pred zranením alebo chorobou, a ako taký je nevyhnutný v každodennom živote. Avšak občas nastáva doba, kedy je potrebné ju ignorovať, čo je fyziologickou funkciou napríklad opioidných peptidov. Nanešťastie, napriek týmto fyziologickým mechanizmom, môže bolesť pokračovať a byť prežívaná počas choroby alebo po zranení dávno potom, čo jej užitočnosť pominula. Za týchto podmienok sa stáva bolesť príznakom choroby, ktorý je lepšie zmierniť.
Klinicky môže byť bolesť rozdelená do troch kategórií: 1. Akutná bolesť obvykle vyplývajúca zo zranenia alebo chirurgického výkonu, ktorá podľa očakávania mizne, keď je poranenie zhojené. 2. Chronická bolesť vyplývajúca z malignej choroby - väčšina ľudí s rakovinou v štádiu metastáz cíti miernu až krutú bolesť a tento stav sa -vyrieši alebo úspešnou liečbou choroby alebo smrťou pacienta. 3. Chronická bolesť nespôsobená malignou chorobou - čo je sťažnosť heterogénneho pôvodu vyvolaná rôznymi druhami ochorení, vrátane artritídy a periférnych neuropatií, ktoré nie sú obvykle život ohrozujúce, ale môžu trvať po desaťročie so zvyšujúcou sa hladinou bolesti.
Lepšie sa chápe fyziológia bolesti, ktorá je následkom poškodenia tkaniva, ako bolesti, ktorá je spôsobená poškodením centrálneho nervového systému. Za normálnych podmienok sú pocity, ktoré vedú k bolesti, najskôr prevádzané vláknami Αδ a C, ktoré nesú vysokoprahové signály. Tak sú synapsie v laminách I a II zapojené do prenosu bolestivých signálov a používajú glutamát a peptidy uvoľňované vláknami C, aby sa aktivovali príslušné projekčné neuróny. Avšak je tu dôkaz, že v niektorých stavoch chronickej bolesti môžu nosiť bolestivé signály iné vlákna A (vrátane vlákien Αβ), a môžu teda účinkovať ako primárne nociceptívne aferentné dráhy, napríklad v hyperalgézii a alodynii, ktoré sú spojené s neuropatickou bolesťou. Tieto zmeny boli spojené s expresiou peptidov, ako je neuropeptid Y vo vláknach A. V priebehu rôznych stavov chronickej bolesti môžu byť synapsie rôznych senzorických aferentných neurónov s neurónami projekčnými modifikované niekoľkými spôsobmi: môžu nastať zmeny morfológie vyvolávajúcej zvýšenie počtu synapsií, môžu sa meniť hladiny a pomery rôznych peptidov a môže sa meniť senzitivita projekčného neurónu.
S vedomím rozsiahlosti klinického problému predstavovaného bolesťou, bolo vynaložené značné úsilie pre získanie spôsobov, ako bolesť zmierniť. Najčastejšie používané farmaceutické prípravky na zmiernenie bolesti spadajú do dvoch skupín: 1. Nesťeroidné protizápalové lieky (non-steroidal anti-inflammatory drugs - NSAIDs).vrátane aspirínu a ibuprofénu, 2. Opioidy, vrátane morfínu.
NSAIDs majú svoj hlavný analgetický účinok na periférii, kde inhibujú produkciu prostaglandínov poškodenými tkanivami. Bolo dokázané, že prostaglandíny sú periférne mediátory bolesti a zápalu a zníženie ich koncentrácie dáva pacientovi úľavu. To je špeciálne prípad miernej artritídy, kedy je hlavnou príčinou bolestí zápal. Zdá sa, že prostaglandíny sú zapojené do sprostredkovania bolesti v mieche a mozgu, čo môže vysvetliť, prečo majú NSAIDs analgetické účinky pri niektorých bolestivých stavoch, ktoré sa netýkajú zápalu alebo poškodenia periférnych tkanív. Avšak pretože prostaglandíny sú iba jeden z niekoľkých mediátorov bolesti, sú NSAIDs samotné účinné iba pri zmierňovaní niektorých typov miernej bolesti na prijateľnú hladinu. Predpokladá sa, že majú strop aktivity, pri ktorom zvýšenie dávky nezvýši úľavu od bolesti. Ďalej majú vedľajšie účinky, ktoré obmedzujú ich použiteľnosť pri chronických ťažkostiach. Použitie NSAIDs je spojené s podráždením gastrointestinálneho traktu a dlhodobé používanie môže napomáhať rozvoju extenzívnych ulcerácí čriev. To sa stáva najmä u starších pacientov, ktorí tvoria najväčšiu skupinu pacientov, napríklad s artritídou.
Opioidy účinkujú ha úrovni miechy, kde inhibujú účinnosť neurotranzmisie medzi primárnymi nociceptivnymi vláknami (hlavne vláknami C) a projekčnými neurónami. Dosahujú toho tak, že spôsobia prelongovanú hyperpolarizáciu obidvoch prvkov týchto synapsií. Použitie opioidov je účinné v zmierňovaní väčšiny typov akútnej bolesti a chronickej malignej bolesti. Avšak je niekoľko chronických maligných bolestivých stavov, ktoré sú čiastočne alebo úplne refraktérne na analgéziu opioidami, najmä tie, ktoré zahrňujú kompresiu nervov, napr. tvorbou tumoru.. Nanešťastie opioidy majú taktiež nežiaduce systémové vedľajšie účinky vrátane: 1. depresie dýchacieho ústrojenstva na úrovni respiračných centier v mozgovom kmeni, 2. navodenie zápchy účinku na hladkú muskulatúru rôznymi druhmi gastrointestihálneho traktu, vrátane sedatívneho účinku a 3. psychoaktívne účinky a navodenia eufórie. Tieto vedľalejšie účinky nastávajú pri dávkach podobných tým, ktoré produkujú analgéziu, a preto limitujú dávky, ktoré môžu byť podávané pacientom.
Podávanie opioidov na úrovni miechy môže znížiť výskyt vedľajších účinkov, ale vyžaduje alebo často opakované spinálne injekcie alebo zavedenie katétru, oba postupy nesú zvýšené riziko pre pacienta. Zavedenie katétru vyžaduje, že pacient je v podstate pripútaný na lôžko, čo ďalej obmedzuje kvalitu jeho života.
Použitie opioidov na liečbu niektorých ďalších typov chronickej bolesti je obecne neúčinné alebo nežiaduce. Príklady zahrňujú bolesť spojenú s revmatoidnou artritídou a neurómami, ktoré sa vyvíjajú po poranení nervu. Nežiaduca povaha liečby opioidami u týchto pacientov sa netýka ibä už uvedených vedľajších účinkov a pravdepodobného trvania choroby, ale taktiež štvrtého vedľajšieho účinku opioidov: závislosti. Opioidy ako je morfin a heroín sú veľmi dobre známe návykové drogy, ktoré vedú k fyzickej závislosti, tento posledný vedľajší účinok sa týka rozvoja tolerancie: dávka lieku potrebná pre tvorbu stejného analgetického účinku sa s časom zvyšuje. To môže viesť k stavu, v ktorom dávky potrebné pre zmiernenie bolesti sú už život ohrožujúce vďaka prvým trom vedľajším účinkom.
I keď NSAIDs a opioidy sú užitočné v liečbe bolesti, je všéobecne jasné,že nie sú často vhodné pre adekvátnu liečbu bolesti, najmä chronickej a silnej bolesti.
Používajú sa aj ďalšie spôsoby liečby, najmä na liečbu chronickej silnej bolesti vrátane chirurgických lézií dráh bolesti na niekoľkých úrovniach od periférnych nervov cez oblasť zadných koreňov a chordotómie až ku zničeniu hypofýzy. To sú však väčšinou závažné operácie, ktoré sú spojené s významným rizikom pre pacienta.
Preto je očividné, že pretrváva významná potreba vývoja nových tried farmaceutických prípravkov na liečbu mnohých typov bolesti. Požadované vlastnosti takýchto nových liečiv môžu byť v stručnosti vyjadrené, takto: 1. schopnosť dať významnú úľavu od bolesti vrátane silnej bolesti, 2. nedostatok systémových vedľajších účinkov, ktoré významne zhoršujú pacientovú kvalitu života, 3. dlhotrvajúce pôsobenie, ktoré nevyžaduje časté injekcie alebo dlhodobú katetrizáčiu pacienta, 4. obstaranie prípravkov, ktoré nevedú k tolerancii, ai s ňou spojenej závislosti.
Podstata vynálezu
Predkladaný vynález sa zaoberá prípravkom, ktorý môže znížiť a výhodne zabrániť prenosu bolestivých signálov z periférie do centrálneho nervového systému, a tým zmierniť pocit bolesti. Špecificky vynález predkladá prípravok, ktorý môže znížiť a výhodne zabrániť v prenose bolestivých signálov z nociceptívnych aferentných neurónov na projekčné neuróny. Konkrétnejšie vynález predkladá prípravok, ktorý môže inhibovať exocytózu aspoň jednej substancie neurotransmiteru alebo neuromodulátoru z aspoň jednej kategórie nociceptívnych aferentných neurónov.
Vynález za prvé predkladá prípravok, ktorý môže byť podávaný systémovo a môže byť špecificky zameraný proti definovaným populáciám nociceptívnych aferentných neurónov, aby inhiboval uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru zo synaptických nervových zakončení.
Vynález za druhé predkladá prípravok, ktorý môže byť podávaný lokálne v periférii a ktorý je schopný inhibovať uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru zo synaptických Zakončení nociceptívnych aferentných neurónov prenášajúcich bolestivý signál z periférie.
Vynález za tretie predkladá prípravok, ktorý môže byť podávaný do miechy a ktorý môže inhibovať uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru zo synaptických zakončení nociceptívnych aferentnýeh neurónov, ktoré končia v tejto oblasti miechy.
Vynález za štvrté predkladá prípravok, ktorý môže byt špecificky zameraný proti definovaným populáciám aferentnýeh neurónov tak, že účinok prípravku je obmedzený na tento typ buniek.
Vynález za piate predkladá spôsob liečby bolesti, ktorý zahrňuje podávanie účinnej dávky prípravku podľa vynálezu.
Vynález za šieste predkladá prípravok, ktorý môže byt rekombinantne exprimovaný ako fúzovaný proteín, ktorý obsahuje požadované zložky prípravku.
V tomto popise sa uvažuje, že nasledujúce termíny majú nasledujúce významy, bez toho, že sme si priali byt týmito definíciami obmedzovaní:
Ľahký reťazec znamená menší z dvoch polypeptidových reťazcov, ktoré tvoria klostrídiové neurotoxíny, má molekulovú hmotnosť približne 50 kD a obecne sa uvádza ako L-reťazec alebo jednodušie L.
Ťažký reťazec znamená väčší z dvoch polypeptidových reťazcov, ktoré tvoria klostrídiové neurotoxíny, má molekulovú hmotnosť približne 100 kD a obecne sa uvádza ako H-reťazec alebo jednodušie H.
Fragment Hg znamená fragment pochádzajúci z H-reťazca klostrídiového neurotoxínu, ktorý je približne ekvivalentný karboxy-koncovej polovici H-reťazca, alebo doméne odpovedajúcej tomuto fragmentu v intaktnom H-reťazci. Obsahuje doménu prirodzeného toxínu zapojeného do
-Ι .
väzby na motoneuróny.
Fragment Hn znamená fragment pochádzajúci z H-reťäzca klostrídiového neurotoxínu, ktorý je približne ekvivalentný amino-koncovej polovici H-reťazca, alebo doméne odpovedajúcej tomuto fragmentu v intaktnom H-reťazci. Obsahuje doménu zapojenú v translokácii L-reťazca cez endozomálne membrány.
LHn znamená fragment pochádzajúci z klostrídiového neurotoxínu, ktorý obsahuje L-reťazec, alebo jeho funkčný fragment združený s fragmentom Hn. Obecne sa odvodzuje z intaktného neurotoxínu proteolýzou.
Cieľová skupina (targeting moiety - TM) znamená akúkoľvek chemickú štruktúru prípravku, ktorá funkčne interaguje s väzbovým miestom tak, že spôsobí fyzické spojenie medzi prípravkom a povrchom primárneho senzorického aferentného neurónu.
Väzbové miesto (binding site - BS) označuje štruktúru na povrchu bunky, s ktorou sú schopné exogénne molekuly interagovať tak, že vyvolajú fyzické spojenie s bunkou.
Primárny senzorický aferentný neurón je nervová bunka, ktorá prináša senzorickú informáciu z periférie centrálnemu nervovému systému.
Primárny nociceptívny aferentný neurón je nervová bunka,ktorá prináša senzorickú informáciu z periférie centrálnemu nervovému systému, kde táto informácia môže mať za následok pocit bolesti.
Je očividné, že prípravok na zníženie alebo zabránenie prenosu bolestivých signálov z periférnych nociceptívnych aferentných neurónov na projekčné neuróny má mnoho potenciálnych aplikácií v redukcii pocitu bolesti, najmä silnej, chronickej bolesti.
Podľa vynálezu sa predkladá prípravok, ktorý môže inhibovať uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru alebo obidvoch zo synaptických zakončení nociceptívnych aferentných neurónov.
Prípravok má množstvo jednotlivých funkcií:
1. Viaže sa k povrchovej štruktúre (väzbové miesto - BS), ktorá je charakteristická a špecifická pre nociceptívne aferentné neuróny.
2. Preniká do neurónu. Vstup molekúl do bunky môže prebehnúť procesom endocytozy. Len určité BS na bunkovom povrchu sú schopné endocytozy a výhodne je BS, ku ktorému sa viaže prípravok, práve takéto. V jednom aspekte tohto vynálezu je BS prítomné na periférnych senzorických vláknach nociceptívneho aferentného neurónu a nasledovne po internalizácii podstupuje retrográdny transport do bunkového tela a centrálnych výbežkov neurónu takým spôsobom, že prípravok je do týchto oblastí neurónu dodávaný tiež. V ďalšom aspekte tohto vynálezu je BS, ku ktorému sa prípravok viaže, prítomné na centrálnych výbežkách alebo bunkovom tele nociceptívneho aferentného neurónu.
3. Prípravok preniká do cytozolu.
4. Prípravok modifikuje zložky exocytotického aparátu prítomné v synaptických zakončeniach centrálnych výbežkov týchto neurónov tak, že sa znižuje alebo výhodne zabraňuje uvoľňovaniu aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru zo synaptického zakončenia.
Prekvapivo je prípravok predkladaného vynálezu tvorený modifikáciou klostrídiového neurotoxínu alebo jeho fragmentov.
Klostridiové neurotoxíny sú proteíny s molekulovou hmotnosťou rádovo 150 kD. Sú tvorené rôznymi druhmi rodu Clostridium, najvýznamnejšie C.tetani a niekoľkými kmeňmi C. botulinum. V súčasnosti je známych osem rôznych tried neurotoxínov: tetanový toxín a botulotoxín so šérotypmi A, B, Cl, D, E, FaG, ktoré majú podobné štruktúry a spôsoby pôsobenia. Klostridiové neurotoxíny sú syntetizované baktériou ako jednoduchý polypeptid, ktorý je po translácii modifikovaný tak, že tvorí dva polypeptidové reťazce spojené dohromady disulfidovou väzbou. Dva reťazce sa.nazývajú ťažký reťazec (H), ktorý má molekulovú hmotnosť približne 100 kD, a ľahký reťazec (L), ktorý má molekulovú hmotnosť približne 50 kD. Klostridiové neurotoxíny sa viažu na akceptorové miesto na bunkovej membráne motoneurónu na nervosvalovej platničke a sú intemalizované mechanizmom endocytózy. Internalizované klostridiové neurotoxíny majú velmi špecifickú endopeptidázovú aktivitu závislú od zínka, ktorá hydrolyzuje špecifickú peptidovú väzbu v aspoň jednom z troch proteínov, synaptobrevínu, syntaxínu alebo SNAP-25, čo sú rozhodujúce zložky neurosekrečného aparátu, a táto aktivita klostrídiových toxínov vedie v dôsledku k dlhotrvajúcej svalovej paralýze. Zistilo sa, že za endopeptidázovú aktivitu klostrídiových neurotoxínov závislú od zinka odpovedá L-reťazec. Klostrídiové neurotoxíny sú vysoko selektívne pre motoneuróny kvôli špecifickej povahe akceptorového miesta na týchto neurónoch. Je známe, že väzbová aktivita klostrídiových neurotoxínov špecifická pre nervosvalovú platničku sa nachádza v karboxy-koncovej časti zložky ťažkého reťazca dvojreťazcovej neurotoxínovej fragment
L-retazca molekuly, oblasti známe ako Hc.
Prekvapivo je kovalentnou väzbou klostrídiového neurotoxínu alebo hybridu dvoch klostrídiových neurotoxínov, v ktorých bola odstránená alebo modifikovaná oblasť Hc H-reťazca, k novej molekule alebo skupine, cieľovej skupine (TM), ktorá sa viaže na BS na povrchu senzorických neurónov, tvorený nový prípravok schopný inhibovať uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru z nociceptívnych aferentných neurónov. Ďalší prekvapivý aspekt predkladaného vynálezu je to, že ak je L-reťazec klostrídiového neurotoxínu alebo obsahujúci endopeptidázovú aktivitu kovalentne viazaný k TM, ktorá môže tiež uskutočniť internalizáciu L-reťazca alebo jeho fragmentu do cytoplazmy senzorického neurónu, je rovnako vytvorený novy prípravok schopný inhibovať uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru. Kovalentné väzby používané pre zlučovanie skladbových častí prípravku môžu obsahovať príslušné oddeľujúce oblasti.
TM dodáva špecificitu pre BS na nociceptívnom aferentnom neuróne. Zložka TM prípravku môže obsahovať jednu z mnohých molekúl viažucich bunku, vrátane, ale neobmedzeno na, protilátok, monoklonálnych protilátok, protilátkových fragmentov (Fab, F(ab)'2, Fv, ScFv atď.), lektínov a ligandov na receptory pre hormóny, cýtbkíny, rastové faktory alebo neuropeptidy. Zoznam možných TM je uvedený v tabul'ke 1, tento zoznam je ilustratívny a nepredpokladá sa, že limituje oblasť: TM, ktoré môžu splňovať požiadavky tohto vynálezu. V jednom prevedení vynálezu sa TM viaže na BS, ktoré podstupuje retrográdny transport.
V obore je známe, že časť Hc neurotoxínovej molekuly môže byť z ďalšej časti ťažkého reťazca, známej ako Hn, odstránená tak, že fragment Hn zostáva spojený disulfidovou väzbou s ľahkým reťazcom (L-reťazec) neurotoxínovej molekuly za vzniku fragmentu známeho ako LH^. Tak je v jednom prevedení predkladaného vynálezu fragment LHn klostrídiového neurotoxínu kovalentne viazaný k TM, za použitia väzieb, ktoré môžu obsahovať jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí.
V ďalšom prevedení vynálezu je doména Hc klostrídiového neurotoxínu mutovaná alebo modifikovaná, napr. chemickou modifikáciou tak, aby sa znížila alebo výhodne vyradila jej schopnosť viazať neurotoxín k receptorom na nervosvalovej platničke. Tento modifikovaný klostrídiový neurotoxín je potom kovalentne viazaný k TM, za použitia väzieb, ktoré môžu obsahovať jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí.
V ďalšom prevedení vynálezu je ťažký reťazec klostrídiového neurotoxínu, v ktorom je mutovaná alebo modifikovaná doména Hc, napr. chemickou modifikáciou, tak, aby sa znížila alebo výhodne vyradila jej schopnosť viazať neurotoxín k receptorom na nervosvalovej platničke, spojený s L-reťazcom odlišného klostrídiového , neurotoxínu. Hybrid modifikovaného klostrídiového neurotoxínu je potom kovalentne viazaný k TM, za použitia väzieb, ktoré môžu obsahovať jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí.
V dalšom prevedení vynálezu je časť Hn klostrídiového neurotoxínu spojená s L-reťazcom odlišného klostrídiového neurotoxínu. Hybrid LHn je potom kovalentne viazaný k TM, za použitia väzieb, ktoré môžu obsahovať jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí.
V ďalšom prevedení vynálezu je ľahký reťazec klostrídiového neurotoxínu alebo fragment ľahkého reťazca obsahujúci endopeptidázovú aktivitu viazaný, za použitia väzieb, ktoré môžu obsahovať jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí, k TM, ktorá môže tiež vykonať internalizáciu ľahkého reťazca alebo jeho fragmentu obsahujúceho endopeptidázovú aktivitu do cytoplazmy bunky.
V dalšom prevedení vynálezu je prípravok rekombinantne exprimovaný ako fúzovaný proteín, ktorý obsahuje príslušný fragment cieľovej skupiny (TM) naviac k akýmkoľvek žiaducim oddeľujúcim doménam. Rekombinantne exprimovaný prípravok môže pochádzať ako celok z génu kódujúceho jeden sérotyp neurotoxínu alebo je chiméra pochádzajúca z génov kódujúcich dva odlišné sérotypy.
V ďalšom prevedení vynálezu je požadovaná LHn, ktorá môže byť hybrid La Hn rôznych typov klostrídiového toxínu, rekombinantne exprimovaná ako fúzovaný proteín s TM, a môže pôsobiť na fragmentu tiež obsahovať jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí.
V ďalšom prevedení vynálezu je ľahký reťazec klostrídiového neurotoxínu alebo fragment ľahkého reťazca obsahujúci endopeptidázovú aktivitu rekombinantne exprimovaný ako fúzovaný proteín s TM, ktorá môže tiež internalizáciu ľahkého reťazcét alebo jeho obsahujúceho endopeptidázovú aktivitu do cytoplazmy bunky. Exprimovaný fúzovaný proteín môže tiež obsahovať jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí.
Základom popisu tohto vynálezu je vytvorenie nových prípravkov s velmi špecifickými a definovanými aktivitami proti vymedzenej a definovanej triede neurónov (primárne senzorické aferentné neuróny), a prípravok môže byť ako taký považovaný za predstaviteľa neurotoxínu. V doterajšom stave techniky v obore je dobre známe liečebné použitie natívneho botulotoxínu. Avšak spôsob pôsobenia botulotoxínov ako je opísaný, je mechanizmom - inhibicie sekrécie acetylchólínu a proti kategórii cieľových neurónov- eferentné motoneuróny, zreteľne odlišný od prípravkov opísaných v tomto vynáleze. V stave techniky sa neuvádza ani aktivita ani chemická štruktúra objavených prípravkov. Tak i keď, ako sa diskutuje v tejto žiadosti,, stav techniky uvádza mnoho o nativných klostrídiových neurotoxínoch, nativné nemodifikované klostrídiové neurotoxíny nie sú predmetom tohto popisu vynálezu. Prípravok podľa tohto vynálezu vyžaduje modifikáciu klostrídiových neurotoxínov tak, že vybraná vlastnosť uvedená v doterajšom stave techniky je odstránená. Modifikovaný neurotoxín je potom spojený s novou vybranou funkciou (TM) za vzniku nového prípravku s novými biologickými vlastnosťami odlišnými od vlastností nativných klostrídiových neurotoxínov a neuvedenými v stave techniky. Predmetom tohto vynálezu je nový prípravok s novými vlastnosťami
Popis obrázkov
Obrázok 1 ukazuje analýzu SDS-PAGE (farbené Coomasie) frakcií vylučovacej chromatografie produktov kopulačnej reakcie medzi derivátom nervového rastového faktoru (Nerve Growth Factor - NGF) a derivátom LH
Tí z BoNT/A.
Obrázok 2 ukazuje analýzu SDS-PAGE (farbené za redukujúcich
LH
Coomasie) konjugátu NGF a a heredukujúcich podmienok.
Obrázok 3 ukazuje Westernov blot extraktov z buniek PC12 ošetrených konjugátom NGF a LH^, skúmaným protilátkou, ktorá rozpoznáva produkt proteolýzy SNAP-25 L-reťazcom BoNT/A.
Obrázok 4 ukazuje Westernov blot extraktov z krysích neurónov ganglií zadných rohov miechy s konjugátom NGF a LHn, testovaným protilátkou, ktorá rozpoznáva produkt proteolýzy SNAP-25 L-reťazcom BoNT/A.
Predkladaný vynález bude ďalej ilustrovaný nasledujúcimi neobmedzujúcimi pŕíkladami.
Príklady realizácie vynálezu
Príklad 1
Syntéza konjugátu NGE a fragmentu LHN BoNT/A
Lyofilizovaný myší 2,5 S NGF bol rozpustený pridaním vody a dialyzovaný do pufru MES (0,1 M MES, 0,1 M chlorid sodný, pH 5i0). K tomuto roztoku (s koncentráciou 0,3 mg/ml) sa pridal PDPH (100 mg/ml v DMF) na konečnú koncentráciu 1 mg/ml. Po zamiešaní ból pridaný pevný EDAC, aby vznikla konečná koncentrácia 0,2 mg/ml. Reakcia sa nechala prebiehať aspoň 30 minút pri teplote miestnosti. Nadbytok PDPH bol potom odstránený vysoľovaním cez kolonu PD-10 (Pharmacia) ekvilibrovanú predtým pufrom MES.
Fragment LHn BoNT/A bol tvorený v podstate spôsobom podľa Shone, C.C., Hambleton, P., a Melling, J., 1987, Eur.
J. Biochem., 167, 175-180. Množstvo LH ekvivalentné polovici použitej hmotnosti NGF bolo rozpustené v trietanolamínovom pufru (0,02 M trietanolamín/HCl, 0,1 M chlorid sodný, pH 7,8) v koncentrácii 1 mg/ml, a reagovalo s Trautovým reagens (100 mM zásobný roztok v IM trietanolamín/HCl, pH 8,0) v konečnej koncentrácii 2 mM. Po jednej hodine bol LHn vysolený do PBSE (fyziologický roztok pufrovaný fosfátom s 1 mM EDTA) za použitia kolony PD-10 (Phärmacia). Proteínová frakcia eluátu z kolony bola koncentrovaná použitím Microcon 50 (Amicon) na koncentráciu 2 mg/ml.
Derivát NGF bol vystavený konečnému koncentračnému kroku, ktorý mal za následok redukciu objemu ňa menej ako 10 % východiskového objemu a potom zmiešaný s derivátom LHn cez noc pri teplote miestnosti. Produkty reakcie boli analyzované elektroforézou v polyakrylamidovom gele za prítomnosti dodecylsulfátu sodného (SDS-PAGE) .
Konjugát pochádzajúci z vyššie uvedenej reakcie bol Čiastočne purifikovaný vylučovacou chromatografiou cez
Bio-Gel P-100 (Bio-Rad). Elučný profil sa sledoval meraním optickej denzity v 280 nm a SDS-PAGE analýzou frakcií. To umožnilo oddelenie konjugátu od voľného NGF a vedľajších produktov reakcie.
Obr. l ukazuje SDS-PAGE analýzu frakcií z jednej takejto kolony Bio-Gel P-100. Voľný LHn a konjugát (molekulová hmotnosť 100 kD a viacej) sú jasne separované od väčšiny voľného NGF (molekulová hmotnosť 13 kD). Pretože
2,5 S NGF je homodimér tvorený nekovalentnými interakciami, je disociovaný opracovaním s SDS. Tak molekuly, ktoré tvorili koyalentné priečne väzby s LHn iba cez jednu subjednotku, počas SDS-PAGE analýzy disociujú a dávajú vznik pásu'voľného NGF pozorovateľného vo frakciách 4 až 6. Tento výsledok dokladá, že homodimérová štruktúra NGF zostáva po vzniku derivátu intaktná. Voľný LHn pozorovateľný v týchto frakciách predstavuje menšiu zložku, ktorá nie je spojená s NGF. Frakcie 4 až 6 boli pred ďalšou analýzou zlúčené.
Obr. 2 ukazuje analýzu konjugátu pomocou SDS-PAGE za redukujúcich a neredukujúcich podmienok. Dráha 1 je voľný LH za nereduku júcich podmienok, dráha 2 je to isté množstvo
LHn redukovaného 50 mM ditiotreitolom. Dráhy 3 a 4 ukazujú konjugát po vylučovacej chromatografii alebo neredukovaný (dráha 3) alebo redukovaný (dráha 4) ditiotreitolom. Podobne dráhy 5 a 6 ukazujú NGF bez alebo s redukciou, v uvedenom poradí. Výsledky jasne ukazujú, že látka v dráhe 5 so .zreteľnou molekulovou hmotnosťou väčšou ako 100 kD, vytvára za redukujúcich podmienok iba pásy tvoriace súčasť LHn a NGF. Ďalej intenzita pásov po redukcii je taká, že musí pochádzať z materiálu iného ako malé množstvá voľného LHn a NGF pozorované v neredukovanej vzorke. Jediný dostupný zdroj pre prebytok je látka so zreteľnou molekulovou hmotnosťou >100 kD. Konjugát vo frakciách získaných vylučovacou chromatografiou tak predstavuje NGF a LHn kovalentne viazané redukovateľnými disulfidovými väzbami.
Frakcie obsahujúce konjugát boli skladované v 4°C, až kým neboli potrebné.
Príklad 2
Aktivity konjugátu NGF a LHn v bunkách PC-12
Bunky PC12 sú bunkovou líniou neuroektodermálneho pôvodu a sú obecne používané ako modelový systém pre štúdium nervovej funkcie. Ako modelový systém pre testovanie funkcie konjugátu NGF a LHn majú dva nevyhnutné charakteristické znaky: za prvé je dobre známe, že majú na bunkovom povrchu receptory pre NGF, o ktorých bolo dokázané, že sú zapojené do diferenciačného procesu ako odpioveď na nízke koncentrácie NGF. Za druhé bolo dokázané, že obsahujú exocytotický aparát pre uvoľňovanie neurotransmiteru vrátane, čo je v tomto prípade dôležité, SNAP-25.
Bunky PC12 boli prenesené na doštičku s 24 jamkami, ktorá bola potiahnutá základovou membránovou živnou pôdou MATRIGEL (Collaborative Biomedical Products) s hustotou približne 5xl05 buniek na jamku. Po niekoľkých dňoch v tkanivovej kultúre (RPMI 1640 a 2 mM glutamín, 10% konské sérum a 5% fétálne teľacie sérum, 37°C, 5% CO ) bolo živné médium nahradené čerstvým médiom s pridaným konjugátom (pripraveným ako je opísané v príklade 1) alebo LH^ alebo bez prídavku čohokoľvek. Potom,čo bolo udržované v tkanivivej kultúre cez noc, bolo médium odstránené a bunky boli jedenkrát premyté čerstvým médiom.Potom boli bunky lyzované pridaním 0,45 ml hydroxidu sodného (0,2 M) po dobu 30 minút. Po tejto dobe boli roztoky neutralizované pridaním 0,45 ml kyseliny chlorovodíkovej (0,2 M), pokračované 0,1 ml HEPES/NaOH (1 M, pH 7,4) . Aby sa z týchto zmesí extrahovali membránové proteíny, bol pridaný Triton-X-114 (10%, v/v) a zmes sa inkubovala pri 4°C po dobu 60 minút, nerozpustná látka bola potom odstránená stočením v centrifúge a supernatanty boli zohrievané na 37°C po dobu 30 minút. Výsledné dve fázy boli oddelené stočením a horná fáza odstránená. Proteíny zo spodnej fázy boli precipitované chloroform/metanolom pre analýzu metódou Westemového blotu.
Vzorky boli oddelené SDS-PAGE a prenesené na nitrocelulózovú membránu. Potom bola detegovaná pŕóteolýza SNAP-25, rozhodujúce zložky neurosekrečného procesu, a substrátu pre endopeptidázovú aktivitu (závislú od zinku)
BoNT/A, reakciou s protilátkou, ktorá rozpoznáva novo odkrytý karboxy-koniec naštepeného SNAP-25 (protilátka je opísaná v patentovej žiadosti PCT/GB95/01279). Obrázok 3 ukazuje príklad takéhoto Westernového blotu. Vo vzorkách z kontrolných buniek (dráhy 1 a 2) nebola pozorovaná významná imunoreaktivita, zatiaľ čo pás odpovedajúci molekulovej hmotnosti 29 kD bol slabo pozorovaný vo vzorkách inkubovaných s 10 mg/ml LHn (dráhy 5 a 6) a silno v vzorkách inkubovaných s 10 mg/ml konjugátu NGF a LHn (dráhy 3 a 4) . Táto inkubácia buniek PC12 s konjugátom vedie k výraznej proteolýze SNAP-25 naznačujúcej, že konjugát dodal od zinku závislú proteolytickú aktivitu L-retazca BoNT/A do cytoplazmy buniek. Pre zložky tvoriace konjugát bola táto aktivita pozorované v menšej miere alebo nebola pozorovaná vôbec.
Inkubácia buniek s konjugátom v prítomnosti nadbytku voľného NGF mala za následok zníženie produkcie proteolytického produktu SNAP-25,v porovnaní s inkubáciou so samotným konjugátom. To naznačuje, že pôsobenie konjugátu nastáva pomocou cieľovej skupiny NGF, ktorá interaguje s receptormi pre NGF na bunkovom povrchu.
Príklad 3
Aktivita konjugátu NGF a LH^ v primárnych tkanivových kultúrach neurónov ganglií zadných koreňov
Ganglie zadných koreňov obsahujú bunkové telá primárnych nociceptívnych aferentných neurónov. Je dobre zistené, že v primárnych kultúrach in vitro tohto tkaniva si neuróny zachovajú mnoho charakteristických vlastností nociceptívnych aferentných neurónov. Tieto vlastnosti zahrňujú schopnosť uvoľňovať neuropeptidy, ako je substancia P, ako odpoveď na chemické podnety, o ktorých je známe, že spôsobujú bolesť in vivo (napr. kapsaícín). Ďalej je známe, že tieto neuróny majú receptory pre NGF.
Primárne tkanivové kultúry neurónov ganglií zadných koreňov boli založené po separácii ganglií disekovaných z krysích embryí (embryonálny vek 12 až 15 dní). Bunky boli prenesené na doštičky s 12 jamkami s počiatočnou hustotou 3 x 10s buniek/dostičku v živnom médiu obsahujúcom NGF (100 ng/ml). Po jednom dni kultivácie bolo pridané čerstvé médium obsahujúce cytozín arabinozid (10 mM) k usmrteniu buniek iného ako nervového pôvodu. Cytozín arabinozid bol odstránený po 2 až 4 dňoch. Po niekoľkých ďalších dňoch kultivácie bolo živné médium nahradené čerstvým médiom obsahujúcim konjugát alebo LHn bez prítomnosti NGF. Po inkubácii pri 37°C cez noc bolo médium odstránené, bunky boli lyzované a hydrofóbne proteíny extrahované použitím Tritonu-X-114, ako je opísané v prípade 2.
Vzorky boli analyzované metódou Westernového blotu, ako je opísané v prípade 2, s protilátkou, ktorá rozpoznáva produkt BoNT/A proteolýzy SNAP-25. Vo vzorkách z kontrolných buniek (dráha 4) nebola pozorovaná žiadna imunoreaktivita, zaial čo pás odpovedajúci molekulovej hmotnosti 29 kD bol slabo pozorovaný vo vzorkách inkubovaných s 10 mg/ml LHn (dráha 3) a silno vo vzorkách inkubovaných s 10 mg/ml konjugátu NGF a LHn (dráhy l a 2).
Tento výsledok naznačuje, že konjugát môže dodať proteolyticky aktívny L-reťazec BoNT/A do cytoplazmy nervových buniek, ktoré in vivo tvoria primárne nociceptívne aferentné neuróny.
Príklad 4
Produkcia chimérického LHn,ktorého L-reťazec pochádza z BoNT/B a fragment z BoNT/A
Fragment Hn BoNT/A je tvorený podľa spôsobu, ktorý opísali Shon, C.C., Hambleton,P., a Melling, J. (1987, Eur. J. Biochem., 167, 175-180) a L-reťazec BoNT/B .podľa metódy, ktorú opísali Sathyamoorthy, V. a DasGupta, B.R. (1985, J. Biol. Chem., 260, 10461-10466). Voľný cysteín fragmentu Hn BoNT/A je potom derivovaný pridaním nadbytku dipyridyl disulfidu (pomer počtu molekúl 10:1) a nasleduje inkubácia pri 4°C cez noc. Prebytok dipyridyl disulfidu a vedľajšieho produktu tiopyridónu je potom odstránený vysolením proteínu cez kolonu PD10 (Pharmacia) do PBS.
Derivát Hn je zakoncentrovaný tak, že koncentrácia proteínu je väčšia ako 1 mg/ml pred tým, ako je zmiešaný s ekvimolárnym množstvom L-reťazca z BoNT/B (>1 mg/ml v PBS). Po inkubácii cez noc pri teplote miestnosti je zmes separovaná vylučovaciou chromatografiou na Superose 6 (Pharmacia) a frakcie sú analyzované SDS-PAGE. Chimérický LHn je potom dostupný pre deriváciu, aby sa vytvoril plánovaný konjugát, ako je opísané v prípade 1.
Príklady opísané vyššie sú pre vynález čisto ilustrativne. Pri syntéze prípravku je spojenie TM s modifikovaným klostrídiovým neurotoxínom alebo jeho fragmentom dosiahnuté cestou chemickej kopulácie využitím reagencií a techník, ktoré sú odborníkom známe. Tak, i keď uvedené príklady používajú iba chemické postupy založené na PDPH/EDAC a Trautovom reagens, akékoľvek iné chemické postupy smerujúce ku kovalentnému pripojeniu zložky TM prípravku ku zložke pochádzajúcej z klostrídiového neurotoxínu sú odborníkom známe, sú pokryté oblasťou tejto žiadosti. Podobne je odborníkom jasné, že každá DNA kódujúca každý celý prípravok alebo jeho fragmenty môže byt ľahko pripravená a, ak je exprimovaná v príslušnom organizme, môže byť použitá, aby rekombinantne produkovala prípravok alebo jeho fragmenty. Takéto genetické konštrukty prípravku vynálezu, ktoré získajú odborníci pomocou známých techník, sú pokryté oblasťou tohto vynálezu.
Tabuľka .1 - Možné cieľové skupiny (tärgeting moieties - TM)
Rastové faktory:
l. Nervový rastový faktor (NGF)
2. Faktor inhibujúci leukocyty (LIF)
3. Zásaditý fibroblastový rastový faktor (bFGF)
4. Neurótrofický faktor pochádzajúci z mozgu (BDNF)
5. Neurotrofin-3 (NT-3)
6. Aktivátorový peptid hlavy nezmara (HHAP)
7. Transformujúci rastový faktor 1 (TGF-l)
8. Transformujúci rastový faktor 2 (TGF-2)
9. Transformujúci rastový faktor (TGFJ
10. Epidermálny rastový faktor (EGF)
11. Ciliárny neurotrofický faktor (CNTF)
Cytokíny:
1. Nádorový nekrotický faktor (TNF)
2. Interleukín-1 (IL-1)
3. Interleukín-1 (IL-1)
4. Interleukín-8 (IL-8)
Peptidy:
1. -Endorfín
2. Metionin-enkefalín
3. D-Ala2-D-Leus-enkefalín
4. Bradykinín
Protilátky:
1. Protilátky proti laktózovým sacharidovým epitopom, ktoré sa nachádzajú na povrchu neurónov ganglií zadných koreňov (napr. monoklonálne protilátky 1B2 a LA4).
2. Protilátky proti akémukoľvek z receptorov pre ligandy uvedené vyššie.
3. Protilátky proti povrchovo exprimovanému antigénu Thyl (napr. monoklonálne protilátky MRC ΌΧ7).
Priemyselná využiteľnosť
Prípravok opísaný v tomto vynáleze môže byť použitý in vivo, alebo priamo alebo ako farmaceutický prijateľná sol, pri liečbe bolesti.
Napríklad prípravok podľa -vynálezu môže byť použitý systémovo pri liečbe silnej chronickej bolesti. Špecifickým príkladom je použitie pri liečbe klinickej bolesti spojenej s revmatoidnou artritídou, ktorá postihuje mnoho kĺbov.
V ďalšom príklade môže byť prípravok podľa vynálezu aplikovaný lokálne pri liečbe bolesti.. Špecifickým príkladom je lokálna liečba injekciou do bolestivého kĺbu so zápalom.
V ďalšom príklade môže byť prípravok podľa vynálezu pri liečbe bolesti podávaný spinálnou injekciou (épidurálnou alebo intratekálnou) na úrovni chrbticového segmentu zapojeného do inervácie postihnutého orgánu. To je napríklad použiteľné pri liečbe hlbokej tkanivovej bolesti, ako je chronická bolesť pri malignom ochorení.
Claims (4)
- PATENTOVÉ NÁROKY:1. Prípravok vyznačujúci sa t ý m, že prejavuje špecificitu pre periférne senzorické aferentné neuróny, a ktorý obsahuje molekulu schopnú zaviesť proteázovú aktivitu špecifickú pre zložky neurosekrečného aparátu do cytozolu primárneho senzorického aferentného neurónu, a tým inhibujúci prenos signálov medzi primárnym senzorickým aferentným neurónom a projekčným neurónom tak, že riadi uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru z primárneho senzorického aferentného neurónu.2. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že proteázová aktivita je proteázová aktivita ľahkého reťazca (L-reťazec) klostrídiového neurotoxínu alebo jeho fragmentu, ktorý si zachoval proteázovú aktivitu.3. Prípravok podľa ktoréhokoľvek predchádzajúceho nároku, vyznačujúci sa tým, že obsahuje cieľovú skupinu (targeting moiety - in) spojenú s klostridiovým neurotoxínom, v ktorom je ťažký reťazec (H-ŕeťazec) odstránený alebo modifikovaný, TM je schopná funkčne interagovať s väzbovým miestom tak, že spôsobí fyzické spojenie medzi prípravkom a povrchom primárneho senzorického aferentného neurónu.4. Prípravok podľa ktoréhokoľvek predchádzajúceho nároku, vyznačujúci sa skupinu (targeting moiety neurotoxínom, v ktorom je H J c modifikovaná.5. Prípravok podľa nároku tým, že modifikovaný klostrídiového neurotoxínu.t ý m, že obsahuje cieľovú - TM) spojenú s klostrídiovým časť H-reťazca odstránená alebo4, v y z n a č u j ú c i s aH-reťazec je fragment Hn6. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 5, vyznačujúci sa tým, že zložka klostrídiového neurotoxínu je získaná z botulotoxínu.7. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 6, vyznačujúci sa tým, že zložka klostrídiového neurotoxínu je získaná z botulotoxínu typu A.8. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 6, vyznačujúci sa tým, že zložka klostrídiového neurotoxínu je získaná z botulotoxínu typu B.9. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 6., v y z n a čujú c i s a t ý m, že zložka klostrídiového neurotoxínu je získaná z botulotoxínu typu Cl.10. Prípravok pódia ktoréhokoľvek vyznačujúci sa tým, modifikovaný chemičkou deriváciou tak, z nárokov 2 až 9, že H-reťazec je aby sa znížila alebo odstránila jeho nativná väzbová afinita pre motoneuróny.ll. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 9, vyznačujúci s -a tým, že H-reťazec je modifikovaný mutáciou tak, aby sa znížila alebo odstránila jeho nativná väzbová afinita pre motoneuróny.12. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 9, vyznačujúci sa tým, že H-reťazec je modifikovaný proteolýzou tak, aby sa znížila alebo odstránila jeho nativná väzbovä afinita pre motoneuróny.
13. Prípravok podľa nároku 12, v y z n a čujúci s a tým, že je tvorený spojením botulotoxínu typu A. TM s fragmentom LH N 14. Prípravok podľa nároku 12, v y z n a čujúci s a tým, že je tvorený spojením botulotoxínu typu B. TM s fragmentom LH N 15. Prípravok podľa nároku 12, v y z n a č u j ú c i s a tým, že je tvorený spojením TM s fragmentom LH N botulotoxínu typu Cl.16. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 12, vyznačujúci sa t ý m, že H-reťazec je získaný z odlišného klostrídiového neurotoxínu> ako z ktorého je získaný L-reťazec.17. Prípravok podľa nároku 16 v y z n a č u j ú c i sa tým, že H-reťazec je získaný z botulotoxínu typu A a L-reťazec je získaný z botulotoxínu typu B.18. Prípravok pódia nároku 17, vyznačujúci sa tým, že je zložený z TM spojenej s fragmentom Hn botulotoxínu typu A a L-reťazcom botulotoxínu typu B.19. Prípravok podľa vyznačujúci fragment L-reťazca kovalentnou väzbou.ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 18, sa tým, že L--reťazec alebo je spojený s H-reťazcom priamou20. Prípravok podľa ktoréhokoľvek vyznačujúci sa tým, z nárokov 2 až 18, že L-reťazec alebo fragment L-retazca je spojený s H-retazcom kovalentnou väzbou, ktorá obsahuje jednu alebo viacej oddeľujúcich oblastí.21. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 20 vyznačujúci sa týra, že TM sama je schopná dodať L-retazec alebo fragment L-reťazca do cytozolu primárneho senzorického aferentného neurónu.22. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 21, vyznačujúci sa tým, že schopnosť dodať L-reťazec alebo fragment L-retazca do cytozolu primárneho senzorického aferentného neurónu je výhradne obsiahnutá v TM.23. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 22, vyznačujúci s a t ý m, že TM obsahuje ligand pre väzbové miesto na bunkovom povrchu primárneho senzorického aferentného neurónu.24. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 23, vyznačujúci š a tým, že TM sa viaže na väzbové miesto, ktoré je charakteristické pre konkrétnu vymedzenú populáciu primárnych senzorických aferentných neurónov.25. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 24, vyznačujúci sa tým, že TM sa viaže na väzbové miesto, ktoré je charakteristické pre konkrétnu vymedzenú populáciu primárnych nociceptívnych aferentných neurónov.26. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 25, vyznačujúci sa tým, že TM sa viaže na väzbové miesto, ktoré podstupuje v primárnom senzorickom aferentnom neuróne retrográdny transport.27. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 26, vyznačujúci sa t ý m, že TM sa viaže na väzbové miesto, ktoré podstupuje v primárnom nociceptívnom aferentnom neuróne retrográdny transport.28. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 27, vyznačujúci sa tým, že TM obsahuje ligand pre receptor na bunkovom povrchu primárneho senzorického aferentného neurónu.29. Prípravok podľa vyznačujúci receptor rastového aferentného neurónu.ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 28, sa t ý m, že TM obsahuje ligand pre faktoru primárneho senzorického30. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 28, vyznačujúci sa tým, že TM obsahuje ligand pre neuropeptidový receptor primárneho senzorického aferentného neurónu.31. Prípravok podľa vyznačujúci cytokínový receptor neurónu.32. Prípravok podľa vyznačujúci hormónový receptor neurónu.ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 28, sa t ý m, že TM obsahuje ligand pre primárneho senzorického aferentného ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 28, sa t ý m, že TM obsahuje ligand pre primárneho senzorického aferentného33. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 32, vyznačujúci sa tým, že TM obsahuje monoklonálnu protilátku alebo pochádza z monoklonálnej protilátky k povrchovému antigénu primárneho senzorického aferentného neurónu.34. Prípravok podľa nároku 29, vyznačujúci sa t ý m, že TM obsahuje ligand pre receptor nervového rastového faktoru.35. Prípravok podľa nároku 34, vyznačujúci sa tým, že TM obsahuje nervový rastový faktor.36. Prípravok podľa nároku 35, vyznačujúci sa t ý m, že obsahuje nervový rastový faktor spojený s fragmentom LHn botulotoxínu typu A.37. Prípravok podľa ktoréhokoľvek predchádzajúceho nároku, vyznačujúci sa tým, že TM je spojená so zložkou pochádzajúcou z klostrídiového neurotoxínu priamou kovalentnou väzbou.38. Prípravok podľa ktoréhokoľvek predchádzajúceho nároku, vyznačuj ucí sa zložkou pochádzajúcou z kovalentnou väzbou, ktorá oddeľujúcich oblastí.t ý m, že TM je spojená, so klostrídiového neurotoxínu obsahuje jednu alebo viacej39. Prípravok podľa ktoréhokoľvek predchádzajúceho nároku, vyznačujúci s ä tým, že zabraňuje uvoľňovaniu neurotransmiteru alebo neuromodulátoru z primárneho senzorického aferentného neurónu.40. Prípravok podľa ktoréhokoľvek predchádzajúceho nároku, vyznačujúci sa tým, že inhibuje uvoľňovanie neurotransmiteru alebo neuromodulátoru z primárneho nociceptívneho aferentného neurónu.41. Spôsob vyznačujúci sa tým, že sa získa prípravok podľa ktoréhokoľvek predchádzajúceho nároku, ktorý modifikovanémuTM obsahuje kovalentné pripojenie klostrídiovému neurotoxínu alebo fragmentu klostrídiovému neurotoxínu.42. Spôsob vyznačujúci sa tým, že sa získa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40, ktorý obsahuje kovalentné pripojenie TM k modifikovanému klostrídiovému neurotoxínu alebo fragmentu klostrídiovému neurotoxínu so zahrnutím jednej alebo viacerých oddeľujúcich oblastí.43. Spôsob vyznačujúci sa tým, že sa získa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40, ktorý obsahuje konštrukciu genetického konštruktu, ktorý kóduje modifikovaný klostrídiový neurotoxín alebo fragment klostrídiového neurotoxínu, začlenenie konštruktu do hostiteľského organizmu exprimujúceho konštrukt tak, aby produkoval modifikovaný klostrídiový neurotoxín alebo fragment klostrídiového neurotoxínu, a kovalentné pripojenie modifikovaného klostrídiového neurotoxínu alebo fragmentu klostrídiového neurotoxínu k TM.44. Spôsob vyznačujúci sa tým., že sa získa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov l až 40, ktorý obsahuje konštrukciu genetického konštruktu, ktorý kóduje modifikovaný klostrídióvý néurotoxín alebo fragment klostrídiového neurotoxínu, začlenenie konštruktu do hostiteľského organizmu exprimujúceho konštrukt tak, aby produkoval modifikovaný klostrídiový néurotoxín alebo fragment klostrídiového neurotoxínu, a kovalentné pripojenie modifikovaného klostrídiového neurotoxínu alebo fragmentu klostrídiového neurotoxínu k TM so zahrnutím jednej alebo viacerých oddeľujúcich oblastí.45. Spôsob vyznačujúci sa tým, žese získá prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40, ktorý obsahuje konštrukciu genetického konštruktu, ktorý kóduje prípravok, začlenenie konštruktu do hostiteľského organizmu a exprimujúceho konštrukt tak, aby produkoval prípravok.46. Spôsob vyznačujúci sa tým, že riadi uvoľňovanie neurotransmiteru alebo neuromodulätoru z primárneho sénzorického aférentného neurónu tým, že používa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40.47. Spôsob vyznačujúci sa tým, že riadi uvoľňovanie neurotransmiteru alebo neuromodulátoru z primárneho nociceptívneho aferentného neurónu tým, že používa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40.48. Spôsob vyznačujúci sa tým, že riadi prenos senzorickej informácie z primárneho senzorického aferentného neurónu na projekčný neurón tým, že používa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40.49. Spôsob vyznačujúci sa tým, že riadi prenos senzorickej informácie z primárneho nociceptívneho aferentného neurónu na projekčný neurón tým, že používa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40.50. Spôsob v yznačujúci sa tým, že riadi pocit bolesti tým, že používa prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40.51. Použitie prípravku podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40 alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli ako liečiva na zmiernenie bolesti.52. Použitie prípravku podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40 alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli ako liečiva k prevencii bolesti.53. Použitie prípravku podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40 pri výrobe liečiva na zmiernenie bolesti.54. Použitie prípravku podľa ktoréhokoľvek z nárokov l až 40 pri výrobe liečiva k prevencii bolesti.55. Spôsob zmiernenia bolesti vyznačujúci sa tým, že obsahuje podávanie účinnej dávky prípravku podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40.56. Spôsob prevencie bolesti vyznačujúci sa tým, že obsahuje podávanie účinnej dávky prípravku podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 40.57. Prípravok vyznačujúci sa tým, že prejavuje špecificitu k periférnym senzorickým aferentným neurónom, ktorý môže inhibovať uvoľňovanie aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru alebo obidvoch zo synaptických zakončení nociceptívnych aferentných neurónov, prípravok, ktorý má nasledujúce jednotlivé funkcie:1) viaže sa na povrchovú štruktúru (väzbové miesto - binding site BS), ktorá je charakteristická a špecifická pre nociceptívne aferentné neuróny, - 2) vstupuje do neurónu,
- 3) vstupuje do cytozolu a
- 4) modifikuje zložky exocytotického aparátu zastúpeného v synaptických zakončeniach centrálnych výbežkov néurónov tak, že sa redukuje alebo zabraňuje uvoľňovaniu aspoň jedného neurotransmiteru alebo neuromodulátoru zo synaptického zakončenia.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9508204.6A GB9508204D0 (en) | 1995-04-21 | 1995-04-21 | A novel agent able to modify peripheral afferent function |
| PCT/GB1996/000916 WO1996033273A1 (en) | 1995-04-21 | 1996-04-16 | Botulinum toxin derivatives able to modify peripheral sensory afferent functions |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK143597A3 true SK143597A3 (en) | 1998-09-09 |
Family
ID=10773357
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1435-97A SK143597A3 (en) | 1995-04-21 | 1996-04-16 | Clostridial toxin derivatives able to modify peripheral sensory afferent functions |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (7) | US5989545A (sk) |
| EP (1) | EP0826051B1 (sk) |
| JP (1) | JP4304241B2 (sk) |
| KR (1) | KR19990007943A (sk) |
| CN (1) | CN1122718C (sk) |
| AT (1) | ATE274581T1 (sk) |
| AU (1) | AU705924B2 (sk) |
| BG (1) | BG101984A (sk) |
| BR (1) | BR9609870A (sk) |
| CA (1) | CA2218857C (sk) |
| CZ (1) | CZ332297A3 (sk) |
| DE (1) | DE69633228T2 (sk) |
| ES (1) | ES2225876T3 (sk) |
| GB (1) | GB9508204D0 (sk) |
| HU (1) | HUP9802392A3 (sk) |
| NO (1) | NO974845L (sk) |
| NZ (1) | NZ305411A (sk) |
| PL (1) | PL323006A1 (sk) |
| PT (1) | PT826051E (sk) |
| RU (1) | RU2165976C2 (sk) |
| SG (1) | SG52602A1 (sk) |
| SK (1) | SK143597A3 (sk) |
| TR (1) | TR199701215T1 (sk) |
| WO (1) | WO1996033273A1 (sk) |
| ZA (1) | ZA963129B (sk) |
Families Citing this family (248)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7214787B1 (en) * | 1993-09-21 | 2007-05-08 | United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Recombinant vaccine against botulinum neurotoxin |
| US6967088B1 (en) * | 1995-03-16 | 2005-11-22 | Allergan, Inc. | Soluble recombinant botulinum toxin proteins |
| GB9508204D0 (en) * | 1995-04-21 | 1995-06-07 | Speywood Lab Ltd | A novel agent able to modify peripheral afferent function |
| GB9617671D0 (en) | 1996-08-23 | 1996-10-02 | Microbiological Res Authority | Recombinant toxin fragments |
| US8012491B2 (en) | 1996-08-23 | 2011-09-06 | Syntaxin, Ltd. | Recombinant toxin fragments |
| US7192596B2 (en) * | 1996-08-23 | 2007-03-20 | The Health Protection Agency Ipsen Limited | Recombinant toxin fragments |
| US9066943B2 (en) * | 1997-07-15 | 2015-06-30 | The Regents Of The University Of Colorado | Use of botulinum toxin therapy for treatment of urological neurological conditions |
| US7449192B2 (en) | 1997-07-15 | 2008-11-11 | The Regents Of The University Of Colorado | Use of neurotoxin therapy for treatment of urologic and related disorders related to neurogenic bladder dysfunction |
| US7455845B2 (en) * | 1997-07-15 | 2008-11-25 | The Regents Of The University Of Colorado | Use of neurotoxin therapy for treatment of urologic and related disorders related to lowering elevated bladder pressure |
| US7470431B2 (en) * | 1997-07-15 | 2008-12-30 | The Regents Of The University Of Colorado | Use of neurotoxin therapy for treatment of urological-neurological disorders associated with prostate cancer |
| ES2268567T5 (es) * | 1997-07-15 | 2010-11-02 | The Regents Of The University Of Colorado | Uso de terapia de neurotoxinas para el tratamiento de la retencion urinaria. |
| GB9721189D0 (en) * | 1997-10-08 | 1997-12-03 | Speywood Lab The Limited | Analgesic conjugates |
| US6600626B2 (en) | 1998-07-17 | 2003-07-29 | Hitachi, Ltd. | Magnetic disk apparatus |
| US6376460B2 (en) * | 1998-08-07 | 2002-04-23 | Flinders Technologies Pty. Ltd. | Method of modulating cellular activity |
| US8790897B2 (en) * | 1998-08-25 | 2014-07-29 | Syntaxin Ltd. | Treatment of mucus hypersecretion |
| GB9818548D0 (en) | 1998-08-25 | 1998-10-21 | Microbiological Res Authority | Treatment of mucas hypersecretion |
| US20080249019A1 (en) * | 1998-08-25 | 2008-10-09 | Syntaxin, Ltd. | Treatment of mucus hypersecretion |
| US20040071736A1 (en) | 1998-08-25 | 2004-04-15 | Health Protection Agency | Methods and compounds for the treatment of mucus hypersecretion |
| GB9824282D0 (en) * | 1998-11-05 | 1998-12-30 | Microbiological Research Agenc | Delivery of superoxide dismutase to neuronal cells |
| JP2000169389A (ja) * | 1998-12-08 | 2000-06-20 | Sumitomo Pharmaceut Co Ltd | 触覚異常治療剤 |
| US20040120891A1 (en) * | 1998-12-21 | 2004-06-24 | Craig Hill | Compounds for intracellular delivery of therapeutic moieties to nerve cells |
| US6652864B1 (en) * | 1998-12-21 | 2003-11-25 | Asilomar Pharmaceuticals, Inc. | Compounds for intracellular delivery of therapeutic moieties to nerve cells |
| GB9907429D0 (en) * | 1999-03-31 | 1999-05-26 | Microbiological Res Authority | Modulation of C-fibre activity |
| US6776990B2 (en) | 1999-04-08 | 2004-08-17 | Allergan, Inc. | Methods and compositions for the treatment of pancreatitis |
| EP1206554B2 (en) | 1999-08-25 | 2010-10-20 | Allergan, Inc. | Activatable recombinant neurotoxins |
| US20090018081A1 (en) * | 1999-08-25 | 2009-01-15 | Allergan, Inc. | Activatable clostridial toxins |
| US20080032931A1 (en) * | 1999-08-25 | 2008-02-07 | Steward Lance E | Activatable clostridial toxins |
| US7740868B2 (en) * | 1999-08-25 | 2010-06-22 | Allergan, Inc. | Activatable clostridial toxins |
| US20080038274A1 (en) | 1999-09-23 | 2008-02-14 | Foster Keith A | Inhibition of secretion from non-neuronal cells |
| GB9922554D0 (en) * | 1999-09-23 | 1999-11-24 | Microbiological Res Authority | Inhibition of secretion from non-neuronal cells |
| US20030180289A1 (en) * | 1999-09-23 | 2003-09-25 | Foster Keith Alan | Inhibition of secretion from non-neuronal cells |
| US6113915A (en) * | 1999-10-12 | 2000-09-05 | Allergan Sales, Inc. | Methods for treating pain |
| US7368532B2 (en) * | 1999-12-02 | 2008-05-06 | Syntaxin Limited | Constructs for delivery of therapeutic agents to neuronal cells |
| ES2216996T3 (es) * | 1999-12-02 | 2004-11-01 | Health Protection Agency | Construcciones para suministrar agentes terapeuticos a celulas neuronales. |
| US7838008B2 (en) | 1999-12-07 | 2010-11-23 | Allergan, Inc. | Methods for treating diverse cancers |
| US7838007B2 (en) | 1999-12-07 | 2010-11-23 | Allergan, Inc. | Methods for treating mammary gland disorders |
| US6500436B2 (en) | 2000-01-19 | 2002-12-31 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin derivatives and methods for treating pain |
| US7138127B1 (en) | 2000-01-19 | 2006-11-21 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin derivatives and methods for treating pain |
| US6641820B1 (en) | 2000-01-19 | 2003-11-04 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin derivatives and methods to treat pain |
| US6821520B2 (en) | 2000-02-15 | 2004-11-23 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin therapy for Hashimoto's thyroiditis |
| US6464986B1 (en) | 2000-04-14 | 2002-10-15 | Allegan Sales, Inc. | Method for treating pain by peripheral administration of a neurotoxin |
| US6565870B1 (en) | 2000-04-28 | 2003-05-20 | Allergan, Inc. | Methods for treating bone tumors |
| US20030195707A1 (en) * | 2000-05-25 | 2003-10-16 | Schork Nicholas J | Methods of dna marker-based genetic analysis using estimated haplotype frequencies and uses thereof |
| US20020077775A1 (en) * | 2000-05-25 | 2002-06-20 | Schork Nicholas J. | Methods of DNA marker-based genetic analysis using estimated haplotype frequencies and uses thereof |
| US20050214327A1 (en) * | 2000-06-02 | 2005-09-29 | Allergan, Inc. | Neurotoxin-containing suppositories and related methods |
| US20040033241A1 (en) * | 2000-06-02 | 2004-02-19 | Allergan, Inc. | Controlled release botulinum toxin system |
| US6306423B1 (en) | 2000-06-02 | 2001-10-23 | Allergan Sales, Inc. | Neurotoxin implant |
| US6306403B1 (en) * | 2000-06-14 | 2001-10-23 | Allergan Sales, Inc. | Method for treating parkinson's disease with a botulinum toxin |
| EP1365800B1 (en) * | 2000-06-28 | 2013-03-06 | Ira Sanders | Methods for using tetanus toxin for benificial purposes in animals (mammals) |
| DE10035156A1 (de) * | 2000-07-19 | 2002-02-07 | Biotecon Ges Fuer Biotechnologische Entwicklung & Consulting Mbh | Proteinkomplex als Vehikel für oral verfügbare Protein-Arzneimittel |
| US7491799B2 (en) | 2000-07-21 | 2009-02-17 | Allergan, Inc. | Modified botulinum neurotoxins |
| US20030219462A1 (en) * | 2000-07-21 | 2003-11-27 | Allergan Sales, Inc | Clostridial neurotoxin compositions and modified clostridial neurotoxins |
| AU8466501A (en) * | 2000-07-21 | 2002-02-05 | Essentia Biosystems Inc | Multi-component biological transport systems |
| US20040219619A1 (en) * | 2000-07-21 | 2004-11-04 | Ester Fernandez-Salas | Methods of identifying compounds that alter toxin persistence and/or protease activity |
| US7691983B2 (en) | 2000-07-21 | 2010-04-06 | Allergan, Inc. | Chimera botulinum toxin type E |
| US6903187B1 (en) * | 2000-07-21 | 2005-06-07 | Allergan, Inc. | Leucine-based motif and clostridial neurotoxins |
| US6831059B2 (en) * | 2000-10-20 | 2004-12-14 | Allergan, Inc. | Compositions and methods for treating gonadotrophin related illnesses |
| US6827931B1 (en) | 2000-10-20 | 2004-12-07 | Allergan, Inc. | Method for treating endocrine disorders |
| US20020127247A1 (en) | 2000-11-17 | 2002-09-12 | Allergen Sales, Inc. | Modified clostridial neurotoxins with altered biological persistence |
| US7223577B2 (en) | 2000-11-17 | 2007-05-29 | Allergan, Inc. | Post-translational modifications and Clostridial neurotoxins |
| US7273722B2 (en) | 2000-11-29 | 2007-09-25 | Allergan, Inc. | Neurotoxins with enhanced target specificity |
| US20070048335A1 (en) * | 2000-12-29 | 2007-03-01 | Allergan, Inc. | Methods for treating pain and hyperhidrosis |
| US6787517B1 (en) * | 2000-12-29 | 2004-09-07 | Allergan, Inc. | Agent and methods for treating pain |
| CA2367636C (en) * | 2001-04-12 | 2010-05-04 | Lisa Mckerracher | Fusion proteins |
| US7285631B2 (en) * | 2001-08-10 | 2007-10-23 | Serono Genetics Institute S.A. | Human cDNAs and proteins and uses thereof |
| US7208285B2 (en) | 2001-08-28 | 2007-04-24 | Allergan, Inc. | Fret protease assays for botulinum serotype A/E toxins |
| US7332567B2 (en) * | 2001-08-28 | 2008-02-19 | Allergan, Inc. | Fret protease assays for clostridial toxins |
| US8022172B2 (en) * | 2001-08-28 | 2011-09-20 | Allergan, Inc. | Luminescence resonance energy transfer (LRET) assays for clostridial toxin activity |
| US7374896B2 (en) * | 2001-08-28 | 2008-05-20 | Allergan, Inc. | GFP-SNAP25 fluorescence release assay for botulinum neurotoxin protease activity |
| US6623742B2 (en) | 2001-09-17 | 2003-09-23 | Allergan, Inc. | Methods for treating fibromyalgia |
| US7255866B2 (en) | 2001-09-17 | 2007-08-14 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin therapy for fibromyalgia |
| CA2369810C (en) | 2002-01-30 | 2007-08-07 | 1474791 Ontario Limited | Method of treating pain |
| US20050106183A1 (en) * | 2002-01-31 | 2005-05-19 | Lamb Gregory B. | Method of treating pain |
| US7022329B2 (en) * | 2002-02-25 | 2006-04-04 | Allergan, Inc. | Method for treating neurogenic inflammation pain with botulinum toxin and substance P components |
| US7140371B2 (en) * | 2002-03-14 | 2006-11-28 | Allergan, Inc. | Surface topography method for determining effects of a botulinum toxin upon a muscle and for comparing botulinum toxins |
| US6688311B2 (en) | 2002-03-14 | 2004-02-10 | Allergan, Inc. | Method for determining effect of a clostridial toxin upon a muscle |
| US6921538B2 (en) * | 2002-05-10 | 2005-07-26 | Allergan, Inc. | Therapeutic treatments for neuropsychiatric disorders |
| US7691394B2 (en) * | 2002-05-28 | 2010-04-06 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | High-potency botulinum toxin formulations |
| US20040009180A1 (en) * | 2002-07-11 | 2004-01-15 | Allergan, Inc. | Transdermal botulinum toxin compositions |
| US7183066B2 (en) * | 2002-09-27 | 2007-02-27 | Allergan, Inc. | Cell-based fluorescence resonance energy transfer (FRET) assays for clostridial toxins |
| US20040115139A1 (en) * | 2002-10-15 | 2004-06-17 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin dental therapies and procedures |
| US7238357B2 (en) * | 2002-11-05 | 2007-07-03 | Allergan, Inc. | Methods for treating ulcers and gastroesophageal reflux disease |
| US20040086532A1 (en) * | 2002-11-05 | 2004-05-06 | Allergan, Inc., | Botulinum toxin formulations for oral administration |
| US20040115727A1 (en) * | 2002-12-11 | 2004-06-17 | Allergan, Inc., A Corporation | Evolved clostridial toxins with altered protease specificity |
| BR0316871A (pt) * | 2002-12-20 | 2005-10-18 | Botulinum Toxin Res Ass Inc | Composições farmacêuticas aperfeiçoadas de toxina botulìnica |
| US20060153876A1 (en) * | 2003-02-24 | 2006-07-13 | Ira Sanders | Cell membrane translocation of regulated snare inhibitors, compositions therefor, and methods for treatment of disease |
| US8071550B2 (en) | 2003-03-03 | 2011-12-06 | Allergan, Inc. | Methods for treating uterine disorders |
| CA2518157C (en) * | 2003-03-06 | 2018-09-04 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | Treatment of sinusitis related chronic facial pain and headache with botulinum toxin |
| US7390496B2 (en) * | 2003-04-25 | 2008-06-24 | Allergan, Inc. | Therapeutic treatments for repetitive hand washing |
| US7393537B2 (en) * | 2003-04-25 | 2008-07-01 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin for treatment of obsessive compulsive finger biting disorder |
| US7393538B2 (en) * | 2003-04-25 | 2008-07-01 | Ackerman Alan H | Clostridial toxin treatment for dermatillomania |
| US7422753B2 (en) * | 2003-04-25 | 2008-09-09 | Allergan, Inc. | Methods for treating trichotillomania |
| US7396535B2 (en) * | 2003-04-25 | 2008-07-08 | Ackerman Alan H | Therapy for obsessive compulsive head banging |
| US6838434B2 (en) | 2003-05-02 | 2005-01-04 | Allergan, Inc. | Methods for treating sinus headache |
| US20040226556A1 (en) | 2003-05-13 | 2004-11-18 | Deem Mark E. | Apparatus for treating asthma using neurotoxin |
| US7220422B2 (en) * | 2003-05-20 | 2007-05-22 | Allergan, Inc. | Methods and compositions for treating eye disorders |
| US20040253274A1 (en) * | 2003-06-11 | 2004-12-16 | Allergan, Inc. | Use of a clostridial toxin to reduce appetite |
| GB0321344D0 (en) * | 2003-09-11 | 2003-10-15 | Health Prot Agency | Re-targeted toxin conjugates |
| US8734810B2 (en) * | 2003-10-29 | 2014-05-27 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin treatments of neurological and neuropsychiatric disorders |
| US8048423B2 (en) * | 2003-12-09 | 2011-11-01 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin therapy for skin disorders |
| US8871224B2 (en) | 2003-12-09 | 2014-10-28 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin therapy for skin disorders |
| US7270287B2 (en) * | 2004-01-06 | 2007-09-18 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin treatment for kinesia |
| US6974579B2 (en) * | 2004-01-08 | 2005-12-13 | Allergan, Inc. | Methods for treating vascular disorders |
| US20050191321A1 (en) | 2004-02-26 | 2005-09-01 | Allergan, Inc. | Methods for treating headache |
| US20100266638A1 (en) | 2004-02-26 | 2010-10-21 | Allergan, Inc. | Headache treatment method |
| US9078892B2 (en) * | 2004-02-26 | 2015-07-14 | Allergan, Inc. | Methods for treating pain and for treating a medication overuse disorder |
| SG150570A1 (en) * | 2004-03-03 | 2009-03-30 | Revance Therapeutics Inc | Compositions and methods for topical diagnostic and therapeutic transport |
| US9211248B2 (en) | 2004-03-03 | 2015-12-15 | Revance Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of botulinum toxins |
| US20050220821A1 (en) * | 2004-03-31 | 2005-10-06 | Allergan, Inc. | Pressure sore treatment |
| US20050220734A1 (en) * | 2004-04-02 | 2005-10-06 | Allergan, Inc. | Therapy for melanin related afflictions |
| US7691381B2 (en) * | 2004-04-15 | 2010-04-06 | Allergan, Inc. | Stabilized biodegradable neurotoxin implants |
| US6991789B2 (en) * | 2004-06-29 | 2006-01-31 | Allergas, Inc. | Methods of modulating intracellular degradation rates of toxins |
| US7811584B2 (en) * | 2004-06-30 | 2010-10-12 | Allergan, Inc. | Multivalent clostridial toxins |
| US7514088B2 (en) | 2005-03-15 | 2009-04-07 | Allergan, Inc. | Multivalent Clostridial toxin derivatives and methods of their use |
| US20060024331A1 (en) * | 2004-08-02 | 2006-02-02 | Ester Fernandez-Salas | Toxin compounds with enhanced membrane translocation characteristics |
| EP1784420B1 (en) * | 2004-09-01 | 2008-12-03 | Allergan, Inc. | Degradable clostridial toxins |
| US7429386B2 (en) * | 2004-09-03 | 2008-09-30 | Allergan, Inc. | Stretch mark treatment |
| US7179474B2 (en) * | 2004-09-03 | 2007-02-20 | Allergan, Inc. | Methods for treating a buttock deformity |
| DE102004043009A1 (de) | 2004-09-06 | 2006-03-23 | Toxogen Gmbh | Transportprotein zum Einbringen chemischer Verbindungen in Nervenzellen |
| US7399607B2 (en) * | 2004-09-22 | 2008-07-15 | Allergan, Inc. | Fluorescence polarization assays for determining clostridial toxin activity |
| US20060073208A1 (en) * | 2004-10-01 | 2006-04-06 | Allergan, Inc. | Cosmetic neurotoxin compositions and methods |
| US7897147B2 (en) * | 2004-10-20 | 2011-03-01 | Allergan, Inc. | Treatment of premenstrual disorders |
| CA2588758C (en) * | 2004-11-22 | 2017-01-03 | New York University | Genetically engineered clostridial genes, proteins encoded by the engineered genes, and uses thereof |
| US8399400B2 (en) | 2004-12-01 | 2013-03-19 | Syntaxin, Ltd. | Fusion proteins |
| US8778634B2 (en) | 2004-12-01 | 2014-07-15 | Syntaxin, Ltd. | Non-cytotoxic protein conjugates |
| GB0426397D0 (en) | 2004-12-01 | 2005-01-05 | Health Prot Agency | Fusion proteins |
| GB0426394D0 (en) * | 2004-12-01 | 2005-01-05 | Health Prot Agency | Fusion proteins |
| US7659092B2 (en) | 2004-12-01 | 2010-02-09 | Syntaxin, Ltd. | Fusion proteins |
| WO2006059093A2 (en) * | 2004-12-01 | 2006-06-08 | Health Protection Agency | Fusion proteins |
| WO2006059105A2 (en) * | 2004-12-01 | 2006-06-08 | Health Protection Agency | Non-cytotoxic Protein Conjugates |
| US8603779B2 (en) | 2004-12-01 | 2013-12-10 | Syntaxin, Ltd. | Non-cytotoxic protein conjugates |
| US8512984B2 (en) | 2004-12-01 | 2013-08-20 | Syntaxin, Ltd. | Non-cytotoxic protein conjugates |
| FR2879462B1 (fr) * | 2004-12-21 | 2008-12-26 | Sod Conseils Rech Applic | Utilisation de toxine botulique pour une insensibilisation locale prolongee |
| US7749515B2 (en) | 2005-02-01 | 2010-07-06 | Allergan, Inc. | Targeted delivery of botulinum toxin to the sphenopalatine ganglion |
| US7655244B2 (en) | 2005-02-01 | 2010-02-02 | Allergan, Inc. | Targeted delivery of botulinum toxin for the treatment and prevention of trigeminal autonomic cephalgias, migraine and vascular conditions |
| CN102499981B (zh) | 2005-03-03 | 2016-08-03 | 雷文斯治疗公司 | 用于局部施用和经皮肤递送肉毒杆菌毒素的组合物和方法 |
| US8021859B2 (en) * | 2005-03-15 | 2011-09-20 | Allergan, Inc. | Modified clostridial toxins with altered targeting capabilities for clostridial toxin target cells |
| WO2006099590A2 (en) | 2005-03-15 | 2006-09-21 | Allergan, Inc. | Modified clostridial toxins with altered targeting capabilities for clostridial toxin target cells |
| US7731411B2 (en) * | 2005-04-04 | 2010-06-08 | Schlumberger Technology Corporation | Circulating fluid system for powder fluidization and method of performing same |
| ES2259928B1 (es) * | 2005-04-08 | 2007-11-01 | Lipotec, S.A. | Composicion cosmetica o dermofarmaceutica que comprende peptidos derivados de encefalinas para reducir y/o eliminar arrugas faciales. |
| DE102005019302A1 (de) * | 2005-04-26 | 2006-11-16 | Toxogen Gmbh | Carrier zum Targeting von Nervenzellen |
| US7419675B2 (en) | 2005-05-26 | 2008-09-02 | Allergan, Inc. | Method for treating peritoneal adhesions |
| US8105611B2 (en) | 2005-06-17 | 2012-01-31 | Allergan, Inc. | Treatment of autoimmune disorder with a neurotoxin |
| US7910116B2 (en) * | 2005-08-24 | 2011-03-22 | Allergan, Inc. | Use of a botulinum toxin to improve gastric emptying and/or to treat GERD |
| DK1926744T4 (en) | 2005-09-19 | 2019-01-28 | Allergan Inc | CLOSTRIDIUM TOXIN-ACTIVABLE CLOSTRIDIAL TOXINES |
| US8168206B1 (en) | 2005-10-06 | 2012-05-01 | Allergan, Inc. | Animal protein-free pharmaceutical compositions |
| US7824694B2 (en) * | 2006-01-12 | 2010-11-02 | Allergan, Inc. | Methods for enhancing therapeutic effects of a neurotoxin |
| US20070178121A1 (en) * | 2006-01-27 | 2007-08-02 | Allergan, Inc. | Methods for enhancing skin treatments |
| EP2001902B1 (en) | 2006-03-14 | 2013-03-27 | Allergan, Inc. | Modified clostridial toxins with altered targeting capabilities for clostridial toxin target cells |
| US7794386B2 (en) | 2006-03-15 | 2010-09-14 | Allergan, Inc. | Methods for facilitating weight loss |
| US7811586B2 (en) * | 2006-05-02 | 2010-10-12 | Allergan, Inc. | Methods for alleviating testicular pain |
| CN101074935B (zh) * | 2006-05-19 | 2011-03-23 | 清华大学 | 探测器阵列及设备 |
| GB0610867D0 (en) * | 2006-06-01 | 2006-07-12 | Syntaxin Ltd | Treatment of pain |
| EP2041162A2 (en) | 2006-07-11 | 2009-04-01 | Allergan, Inc. | Modified clostridial toxins with enhanced translocation capability and enhanced targeting activity |
| CA2658260A1 (en) * | 2006-07-11 | 2008-01-17 | Allergan, Inc. | Modified clostridial toxins with enhanced translocation capabilities and altered targeting activity for clostridial toxin target cells |
| WO2008011157A2 (en) * | 2006-07-20 | 2008-01-24 | The General Hospital Corporation | Methods, compositions, and kits for the selective activation of protoxins through combinatorial targeting |
| US9061025B2 (en) * | 2006-08-31 | 2015-06-23 | Allergan, Inc. | Methods for selecting headache patients responsive to botulinum toxin therapy |
| US20080092910A1 (en) * | 2006-10-18 | 2008-04-24 | Allergan, Inc. | Apparatus and method for treating obesity using neurotoxins in conjunction with bariatric procedures |
| US20080113051A1 (en) * | 2006-11-13 | 2008-05-15 | Allergan, Inc. | Methods for alleviating tattoo pain |
| CN101583274A (zh) * | 2006-12-29 | 2009-11-18 | 雷文斯治疗公司 | 使用反向序列hiv-tat多肽的运输分子 |
| CA2694046C (en) * | 2007-07-26 | 2023-09-12 | Revance Therapeutics, Inc. | Cationic peptides and compositions thereof |
| CN101903035A (zh) * | 2007-10-23 | 2010-12-01 | 阿勒根公司 | 使用经修饰的梭菌毒素治疗慢性神经源性炎症的方法 |
| EP2211890A1 (en) * | 2007-10-23 | 2010-08-04 | Allergan, Inc. | Methods of treating urogenital-neurological disorders using modified clostridial toxins |
| US8483831B1 (en) | 2008-02-15 | 2013-07-09 | Holaira, Inc. | System and method for bronchial dilation |
| US8470337B2 (en) * | 2008-03-13 | 2013-06-25 | Allergan, Inc. | Therapeutic treatments using botulinum neurotoxin |
| US8617571B2 (en) * | 2008-04-03 | 2013-12-31 | Allergan, Inc. | Suture line administration technique using botulinum toxin |
| ES2398052T5 (es) | 2008-05-09 | 2021-10-25 | Nuvaira Inc | Sistemas para tratar un árbol bronquial |
| US8796216B2 (en) | 2008-06-12 | 2014-08-05 | Syntaxin Limited | Suppression of neuroendocrine diseases |
| KR101642363B1 (ko) * | 2008-06-12 | 2016-07-25 | 입센 바이오이노베이션 리미티드 | 신경내분비계 질환의 억제 |
| CN107446053A (zh) | 2008-06-12 | 2017-12-08 | 益普生生物创新有限公司 | 癌症的抑制 |
| MX2011001823A (es) * | 2008-08-29 | 2011-03-25 | Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa | Neurotoxinas clostridiales con persistencia alterada. |
| GB0820970D0 (en) | 2008-11-17 | 2008-12-24 | Syntaxin Ltd | Suppression of cancer |
| US20100124559A1 (en) * | 2008-11-20 | 2010-05-20 | Allergan, Inc. | Early Treatment and Prevention of Increased Muscle Tonicity |
| US8259461B2 (en) * | 2008-11-25 | 2012-09-04 | Micron Technology, Inc. | Apparatus for bypassing faulty connections |
| WO2010096134A1 (en) | 2008-12-04 | 2010-08-26 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | Extended length botulinum toxin formulation for human or mammalian use |
| EP2373294B1 (en) | 2008-12-10 | 2016-04-20 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin pharmaceutical compositions |
| KR102005930B1 (ko) | 2008-12-31 | 2019-07-31 | 레반스 테라퓨틱스, 아이엔씨. | 주사용 보툴리눔 독소 제제 |
| JP5826635B2 (ja) * | 2009-03-13 | 2015-12-02 | アラーガン、インコーポレイテッドＡｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ | 免疫系調節エンドペプチターゼ活性アッセイ |
| CN102869373B (zh) | 2009-06-25 | 2017-05-10 | 雷文斯治疗公司 | 不含白蛋白的肉毒杆菌毒素制剂 |
| WO2011022357A2 (en) * | 2009-08-17 | 2011-02-24 | East Carolina University | Fast acting snare-cleaving enzymes |
| WO2011023213A1 (en) * | 2009-08-28 | 2011-03-03 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Modified chemodenervating agents |
| WO2011041483A2 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-07 | Toxcure, Inc. | Use of botulinum neurotoxin to treat substance addictions |
| AU2010315396B2 (en) | 2009-10-27 | 2016-05-05 | Nuvaira, Inc | Delivery devices with coolable energy emitting assemblies |
| US8911439B2 (en) | 2009-11-11 | 2014-12-16 | Holaira, Inc. | Non-invasive and minimally invasive denervation methods and systems for performing the same |
| EP2498705B1 (en) | 2009-11-11 | 2014-10-15 | Holaira, Inc. | Device for treating tissue and controlling stenosis |
| EP2512505A2 (en) | 2009-12-16 | 2012-10-24 | Allergan, Inc. | Modified clostridial toxins comprising an integrated protease cleavage site-binding domain |
| US8546108B2 (en) | 2010-01-25 | 2013-10-01 | Allergan, Inc. | Methods of intracellular conversion of single-chain proteins into their di-chain form |
| DK3106170T3 (da) | 2010-05-20 | 2020-07-13 | Allergan Inc | Nedbrydelige clostridiumtoksiner |
| JP5779848B2 (ja) * | 2010-07-30 | 2015-09-16 | セイコーエプソン株式会社 | 液体吐出装置、液体吐出装置の駆動方法以上 |
| US20130330369A1 (en) | 2010-10-08 | 2013-12-12 | Allergan, Inc. | Reduction Of Antibody Response Against Botulinum Neurotoxin And Variants Thereof |
| WO2012075337A2 (en) * | 2010-12-01 | 2012-06-07 | Spinal Modulation, Inc. | Directed delivery of agents to neural anatomy |
| CN103402568B (zh) * | 2011-01-04 | 2016-06-29 | 赛诺菲-安万特德国有限公司 | 与预填充式注射器和安全装置组合使用的适配器机构、安全装置和注射装置 |
| WO2012103415A1 (en) | 2011-01-28 | 2012-08-02 | Allergan, Inc. | Dosage regimen for the treatment of multiple disorders with botulinum toxins |
| ES2634669T3 (es) | 2011-02-08 | 2017-09-28 | Halozyme, Inc. | Composición y formulación lipídica de una enzima de degradación de hialuronano y uso de la misma para el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata |
| GB201108108D0 (en) | 2011-05-16 | 2011-06-29 | Syntaxin Ltd | Therapeutic fusion proteins |
| EP2729163A1 (en) | 2011-07-08 | 2014-05-14 | Allergan, Inc. | Method for treatment of autonomic nervous system disorders |
| US8992941B2 (en) | 2011-07-08 | 2015-03-31 | Allergan, Inc. | Method for treatment of esophageal spasm |
| RU2014103543A (ru) | 2011-07-20 | 2015-08-27 | Аллерган, Инк. | Ботулотоксины для применения в способе лечения жировых отложений |
| US9393291B2 (en) | 2012-04-12 | 2016-07-19 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | Use of botulinum toxin for the treatment of cerebrovascular disease, renovascular and retinovascular circulatory beds |
| SG11201407784UA (en) | 2012-05-30 | 2014-12-30 | Harvard College | Engineered botulinum neurotoxin |
| US20140056870A1 (en) * | 2012-08-27 | 2014-02-27 | Allergan, Inc. | Fusion proteins |
| US9005628B2 (en) | 2012-10-04 | 2015-04-14 | Dublin City University | Biotherapy for pain |
| GB201219024D0 (en) | 2012-10-23 | 2012-12-05 | Syntaxin Ltd | Assay |
| US9398933B2 (en) | 2012-12-27 | 2016-07-26 | Holaira, Inc. | Methods for improving drug efficacy including a combination of drug administration and nerve modulation |
| JP2016513082A (ja) | 2013-01-28 | 2016-05-12 | ニューヨーク・ユニバーシティ | 無毒性神経毒誘導体を用いる治療方法 |
| GB201312317D0 (en) | 2013-07-09 | 2013-08-21 | Syntaxin Ltd | Cationic neurotoxins |
| US10149893B2 (en) | 2013-09-24 | 2018-12-11 | Allergan, Inc. | Methods for modifying progression of osteoarthritis |
| US9216210B2 (en) | 2013-12-23 | 2015-12-22 | Dublin City University | Multiprotease therapeutics for chronic pain |
| BR112016019104A2 (pt) * | 2014-02-19 | 2017-10-10 | Merz Pharma Gmbh &Co Kgaa | método para padronizar a sensibilidade de neurônios, método para a geração de neurônios, método para determinar a atividade biológica, uso de gt1b |
| KR20170026624A (ko) | 2014-07-07 | 2017-03-08 | 알러간, 인코포레이티드 | 조직 샘플에서 절단된 snap25를 검출하는 방법 |
| US11484580B2 (en) | 2014-07-18 | 2022-11-01 | Revance Therapeutics, Inc. | Topical ocular preparation of botulinum toxin for use in ocular surface disease |
| US9901627B2 (en) | 2014-07-18 | 2018-02-27 | Revance Therapeutics, Inc. | Topical ocular preparation of botulinum toxin for use in ocular surface disease |
| US11897921B2 (en) | 2014-12-09 | 2024-02-13 | New York University | Propeptide fusion comprising a mutated clostridium botulinum neurotoxin and a VHH domain |
| EP3822286A1 (en) | 2015-01-09 | 2021-05-19 | Ipsen Bioinnovation Limited | Cationic neurotoxins |
| US11268080B2 (en) | 2015-03-26 | 2022-03-08 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered botulinum neurotoxin |
| US11753633B2 (en) | 2015-08-27 | 2023-09-12 | President And Fellows Of Harvard College | Compositions and methods for treatment of pain |
| GB201517450D0 (en) | 2015-10-02 | 2015-11-18 | Ipsen Biopharm Ltd | Method |
| CN109476713A (zh) | 2016-06-08 | 2019-03-15 | 儿童医学中心公司 | 工程改造的肉毒杆菌神经毒素 |
| EP3263710A1 (en) | 2016-07-01 | 2018-01-03 | Ipsen Biopharm Limited | Production of activated clostridial neurotoxins |
| PL3481852T3 (pl) | 2016-07-08 | 2023-07-24 | Children's Medical Center Corporation | Nowa neurotoksyna botulinowa i jej pochodne |
| US11117935B2 (en) | 2016-08-24 | 2021-09-14 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered botulinum neurotoxin |
| WO2018038301A1 (en) | 2016-08-26 | 2018-03-01 | Hugel Inc. | Stabilized liquid formulation of botulinum toxin and preparation method thereof |
| HRP20191966T4 (hr) | 2016-09-13 | 2022-09-16 | Allergan, Inc. | Stabilizirani neproteinski klostridijalni pripravci toksina |
| TW201814045A (zh) | 2016-09-16 | 2018-04-16 | 英商艾普森生物製藥有限公司 | 製造雙鏈梭狀芽孢桿菌神經毒素之方法 |
| CN109790204A (zh) | 2016-09-29 | 2019-05-21 | 益普生生物制药有限公司 | 杂合神经毒素 |
| EP3312290A1 (en) | 2016-10-18 | 2018-04-25 | Ipsen Biopharm Limited | Cellular vamp cleavage assay |
| WO2018075783A2 (en) | 2016-10-20 | 2018-04-26 | President And Fellows Of Harvard College | In vitro and cell based assays for measuring the activity of botulinum neurotoxins |
| US11129906B1 (en) | 2016-12-07 | 2021-09-28 | David Gordon Bermudes | Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria |
| US20200255481A1 (en) | 2017-09-29 | 2020-08-13 | Children's Medical Center Corporation | Neurotoxin-like toxin and uses thereof |
| EP3470054B1 (en) | 2017-10-11 | 2023-09-20 | Hugel Inc. | Microstructure formulation techniques for botulinum toxin |
| US10525111B2 (en) | 2017-10-12 | 2020-01-07 | Hugel, Inc. | Microstructure formulation techniques for botulinum toxin |
| US10792400B2 (en) | 2017-10-12 | 2020-10-06 | Hugel Inc. | Microstructure formulation techniques for botulinum toxin |
| CA3220194A1 (en) | 2018-01-29 | 2019-08-01 | Ipsen Biopharm Limited | Non-neuronal snare-cleaving botulinum neurotoxins |
| US20210187194A1 (en) | 2018-02-26 | 2021-06-24 | Ipsen Biopharm Limited | Use of Ultrasound to Guide Injection of Non-cytotoxic Protease |
| JP2021525251A (ja) | 2018-05-21 | 2021-09-24 | イプセン バイオファーム リミテッドＩｐｓｅｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍ Ｌｉｍｉｔｅｄ | 骨癌誘発性アロディニアの抑制 |
| GB201815817D0 (en) | 2018-09-28 | 2018-11-14 | Ispen Biopharm Ltd | Clostridial neurotoxins comprising and exogenous activation loop |
| EP3825689A3 (en) | 2018-11-29 | 2021-09-15 | Hugel Inc. | A cell-based method for determining an activity of botulinum toxin |
| US20220016221A1 (en) | 2018-12-05 | 2022-01-20 | Ipsen Biopharm Limited | Treatment of symptoms of traumatic brain injury |
| GB201900621D0 (en) | 2019-01-16 | 2019-03-06 | Ipsen Biopharm Ltd | Labelled polypeptides |
| GB201914034D0 (en) | 2019-09-30 | 2019-11-13 | Ipsen Biopharm Ltd | Treatment of neurological disorders |
| GB202100566D0 (en) | 2021-01-15 | 2021-03-03 | Ipsen Biopharm Ltd | Treatment of brain damage |
| GB202104294D0 (en) | 2021-03-26 | 2021-05-12 | Ipsen Biopharm Ltd | Clostridial neurotoxins comprising an exogenous activation loop |
| JP2024513191A (ja) | 2021-03-30 | 2024-03-22 | イプセン バイオファーム リミテッド | 疼痛及び炎症性障害の処置 |
| WO2022208039A1 (en) | 2021-03-30 | 2022-10-06 | Ipsen Biopharm Limited | Catalytically inactive clostridial neurotoxins for the treatment of pain & inflammatory disorders |
| GB202116795D0 (en) | 2021-11-22 | 2022-01-05 | Ipsen Biopharm Ltd | Treatment of visceral pain |
| WO2023105289A1 (en) | 2021-12-06 | 2023-06-15 | Dublin City University | Methods and compositions for the treatment of pain |
| GB202214229D0 (en) | 2022-09-28 | 2022-11-09 | Ipsen Biopharm Ltd | Clostridial neurotoxins comprising an activating endosomal protease cleavage site |
| GB202214232D0 (en) | 2022-09-28 | 2022-11-09 | Ispen Biopharm Ltd | Clostridial neurotoxins comprising an activating exogenous protease cleavage site |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4664911A (en) * | 1983-06-21 | 1987-05-12 | Board Of Regents, University Of Texas System | Immunotoxin conjugates employing toxin B chain moieties |
| US5668255A (en) * | 1984-06-07 | 1997-09-16 | Seragen, Inc. | Hybrid molecules having translocation region and cell-binding region |
| WO1991009871A1 (en) | 1989-12-22 | 1991-07-11 | Seragen Incorporated | Hybrid molecules having translocation region and cell-binding region |
| AU1582692A (en) | 1991-03-08 | 1992-10-06 | Protein Design Labs, Inc. | Recombinant double chain immunotoxins |
| EP0603194A4 (en) * | 1991-07-05 | 1994-12-07 | Seragen Inc | TO THE RECEPTOR OF THE EPIDERMAL GROWTH FACTOR TARGETED MOLECULES FOR TREATING INFLAMMABLE ARTHRITIS. |
| WO1993004191A1 (en) | 1991-08-15 | 1993-03-04 | Neorx Corporation | Noncytolytic toxin conjugates |
| DE4139001A1 (de) * | 1991-11-27 | 1993-06-03 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur einschleusung von nukleinsaeuren in zellen |
| WO1993015766A1 (en) | 1992-02-10 | 1993-08-19 | Seragen, Inc. | Desensitization to specific allergens |
| AU6030494A (en) * | 1993-01-15 | 1994-08-15 | Associated Synapse Biologics | Method for treating myofascial pain syndrome |
| AU683275B2 (en) * | 1993-06-10 | 1997-11-06 | Allergan, Inc. | Multiple botulinum toxins for treating neuromuscular disorders and conditions |
| US5502037A (en) * | 1993-07-09 | 1996-03-26 | Neuromed Technologies, Inc. | Pro-cytotoxic drug conjugates for anticancer therapy |
| ATE366312T1 (de) | 1994-10-24 | 2007-07-15 | Ophidian Pharm Inc | Impfstoff und antitoxine zur behandlung und vorbeugung von c. difficile krankheiten |
| GB9508204D0 (en) * | 1995-04-21 | 1995-06-07 | Speywood Lab Ltd | A novel agent able to modify peripheral afferent function |
| US5898545A (en) * | 1997-07-01 | 1999-04-27 | International Business Machines Corporation | Head load/unload and disk airflow control apparatus |
| GB9721189D0 (en) * | 1997-10-08 | 1997-12-03 | Speywood Lab The Limited | Analgesic conjugates |
-
1995
- 1995-04-21 GB GBGB9508204.6A patent/GB9508204D0/en active Pending
-
1996
- 1996-03-18 SG SG1996006595A patent/SG52602A1/en unknown
- 1996-04-16 KR KR1019970707466A patent/KR19990007943A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-04-16 SK SK1435-97A patent/SK143597A3/sk unknown
- 1996-04-16 US US08/945,037 patent/US5989545A/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-04-16 CZ CZ973322A patent/CZ332297A3/cs unknown
- 1996-04-16 HU HU9802392A patent/HUP9802392A3/hu unknown
- 1996-04-16 AU AU53398/96A patent/AU705924B2/en not_active Ceased
- 1996-04-16 TR TR97/01215T patent/TR199701215T1/xx unknown
- 1996-04-16 AT AT96910091T patent/ATE274581T1/de active
- 1996-04-16 RU RU97119181/13A patent/RU2165976C2/ru active
- 1996-04-16 PL PL96323006A patent/PL323006A1/xx unknown
- 1996-04-16 JP JP53154696A patent/JP4304241B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-04-16 WO PCT/GB1996/000916 patent/WO1996033273A1/en active IP Right Grant
- 1996-04-16 BR BR9609870A patent/BR9609870A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-04-16 CA CA2218857A patent/CA2218857C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-04-16 PT PT96910091T patent/PT826051E/pt unknown
- 1996-04-16 ES ES96910091T patent/ES2225876T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-04-16 EP EP96910091A patent/EP0826051B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-04-16 NZ NZ305411A patent/NZ305411A/xx unknown
- 1996-04-16 DE DE69633228T patent/DE69633228T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-04-16 CN CN96194505A patent/CN1122718C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-04-19 ZA ZA963129A patent/ZA963129B/xx unknown
-
1997
- 1997-10-20 NO NO974845A patent/NO974845L/no not_active Application Discontinuation
- 1997-10-21 BG BG101984A patent/BG101984A/xx unknown
-
1999
- 1999-11-22 US US09/447,356 patent/US6395513B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-05-20 US US10/150,262 patent/US6962703B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-09-26 US US11/234,250 patent/US8158132B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2007
- 2007-06-28 US US11/819,650 patent/US7887810B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-06-28 US US11/819,648 patent/US7892560B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-10-11 US US13/270,662 patent/US20120141511A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK143597A3 (en) | Clostridial toxin derivatives able to modify peripheral sensory afferent functions | |
| US7456272B2 (en) | Neurotoxins with enhanced target specificity | |
| US9234011B2 (en) | Transport protein which is used to introduce chemical compounds into nerve cells | |
| US7833535B2 (en) | Clostridial toxin derivatives and methods for treating pain | |
| KR20040105818A (ko) | 심혈관 질환의 처치에 사용되는 보툴리눔 독소 | |
| Simpson | Identification of the characteristics that underlie botulinum toxin potency: implications for designing novel drugs | |
| JPH09507234A (ja) | 種々の疾病およびそれに伴う疼痛を処置するためのボツリヌス毒素 | |
| WO2002007759A2 (en) | Clostridial toxin derivatives and methods for treating pain | |
| DE60008915T2 (de) | Konstrukte zur verabreichung von therapeutischen wirkstoffen an die neuronzellen | |
| US10022450B2 (en) | Regulation of specific spinal neurons regulating pain transmission via chimeric toxins | |
| MXPA97008124A (en) | Botulinum toxin derivatives capable of modifying perfery affording functions |