SE467782B - Dierytromycin- och dikolinsalterna av /3s(z)/-2///1-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimetyl-4-oxo-1-(sulfoxi)-3-azetidinyl/amino/-2-oxoetyliden/amino/oxi/-aettiksyra anvaendbara vid behandling av bakterieinfektioner i daeggdjur samt foerfarande foer framstaellning daerav - Google Patents

Description

467 782 Även om tidigare teknik allmänt har beskrivit de farmaceu- tiskt godtagbara salterna av syran (M$)= Hêš med formeln I, har dierytromycin- och dikolinsalterna därav inte tidigare be- skrivits. Man tror att dessa salter med en distinkt kristal- lin struktur har den högsta graden av kemisk stabilitet i fast tillstånd. Eftersom därför de flesta av de farmaceutiskt god- tagbara salterna av syran (Ü9 = Heš med formeln I som tidigare beskrivits har varit amorfa till strukturen, var det oväntat att en kombination av erytromycin- eller kolinhydroxid med syran (Mg = HQ) med formeln I, skulle ge denna stabila kri- stallina struktur. De facto var monoerytromycin-, monoerytro- mycinmononatrium- och monokolin-salterna av syran (Mæ = H&% med formeln I samflüga amorfa. Överraskande har dierytromycin- saltet och dikolinsaltet en distinkt kristallin struktur som ger en förbättrad stabilitet till föreningarna förutom deras breda antimikrobiella spektrum.

Den fria syran (Ma = Hëš med formeln I kan framställas genom acylering av en förening med formeln II NH2 ÉI \É c m C-CH3 N-OSOÄSHD / O/ med en förening med formeln (innefattande skyddade och aktiverade derivatformer därav, såsom karboxvlsyrahalogeniden eller karboxylsyraanhydriden) .II (l 4e7 782 med användning av artkända tekniker.

Omsättning av den fria syran med formeln I i ett lösnings- medel såsom metanol eller etanol, med erytromycin eller kolin ger de önskade salterna. I exempelvis den ovan angivna reak- tionen kan den fria syran omsättas med erytromycinmonohydrat eller kolinhydroxid (dvs. trimetyl-(2-hydroxietyl)ammonium- hydroxid).

Alternativt kan utgående från en saltform av den fria syran katjondelen av saltet avlägsnas enligt kända metoder såsom genom behandling med ett starkt katjonbytarharts. Den så bil- dade fria syran med formeln I omsättes därefter med erytromy- cin eller kolin till bildning av den önskade produkten.

För att bekämpa ett brett spektrum av bakterieinfektioner i däggdjur kan en förening enligt föreliggande uppfinning admi- nistreras till ett däggdjur i behov därav i en mängd av unge- fär l,4 mg/kg/dag till ungefär 350 mg/kg/dag, företrädesvis ungefär l4 mg/kg/dag till ungefär 100 mg/kg/dag. Alla admini- strationssätt som tidigare använts för att avlämna penicil- liner och cefalosporiner till infektionsstället är alltså in- begripmaför användning med den nya familjen av ß-laktamer enligt föreliggande uppfinning. Sådana administrationsmetoder innefattar oral, intravenös, intramuskulär administration och administration som suppositorium. Dikolinsaltet är effektivt mot gramnegativa bakterier och dierytromycinsaltet är effek- tivt mot gramnegativa och grampositiva bakterier.

Fastän dierytromycin- och dikolinsalterna av syran (D69 = Hšä med formeln I företrädesvis användes som kristallina före- ningar är de amorfa formerna av dessa salter även nya effek- tiva antibakteriella medel. Som sådana är även de amorfa di- erytromycin- och dikolinsalterna inbegripna inom ramen för föreliggande uppfinning.

Följande exempel tjänar att ytterligare beskriva specifika ut- föringsformer av de nya antibiotikumen; emellertid bör före- 467 782 4 liggande uppfinning inte begränsas till de däri beskrivna detaljerna.

Exempel 1 /3S(Z)/-///1-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimety1-4-oxo-l- (sulfooxi)-3-azetidinyl/amino/-2-oxoetyliden/amino/-oxi/- ättiksyra, dikolinsalt A. 2-Amino-«f//2-(difenylmetoxi)-2-oxoetoxi/imino/-4-tiazol- ättiksyra, 1H-bensotriazol-1-yl-ester (Z)-2-Amino-dr//2-(difenylmetoxi)-2-oxoetoxi/-imino/-4-tia- zolättiksyra (6,165 g; 15,0 mmol) och 1-hydroxibensotriazol (2,115 g, 15,0 mmol, torkad i vakuum vid 80°C i 18 timmar) i dimetylformamid (30 ml) kyldes till -5°C, omrördes kraftigt och dicyklohexylkarbodiimid (3,708 g, 18,0 mmol) tillsattes.

Efter 5 timmar filtrerades blandningen, de fasta substanserna tvättades med iskyld dimetylformamid (10 ml). Filtratet kyl- des därefter i ett isbad och späddes med etylacetat (150 ml).

Lösningen tvättades med fem 40 ml-portioner av saltlake inne- hållande iskallt vatten (2 ml), torkades över vattenfritt magnesiumsulfat och filtrerades. Filtratet koncentrerades i vakuum och den fasta återstoden sönderdelades med eter (50 ml), sugfiltrerades, tvättades med eter (20 ml) och torkades under vakuum och gav 6,48 g av titel A-föreningen, smältpunkt 97+°C.

B. (S)-(1-hydroxi-2,2-dimetyl-4 oxo-3-azetidinyl)karbamid- syra, 1,1-dimetyletylester U ' (S)-/2,2-dimety1-4-oxo-1-(fenylmetoxi)-3-azetidiny1/karbamid- syra, 1,1-dimetyletylester (l4,77 g) löstes i 100 ml 15%-ig etanol i etylacetat. Till denna lösning sattes 5 % palladium på kol (0,75 g) och blandningen besprutades med väte i 1,5 timmar. Reaktionsblandningen filtrerades genom en Celite-kudde och sköljdes med 15 % etanol i etylacetat (35 ml) och etyl- acetat (50 ml). Filtratet koncentrerades i vakuum och gav 10,6 g av en vit-fast substans. Den fasta substansen upplöstes i het etylacetat (25 ml, 10 minuter, 85°C bad) och gav en färg- lös lösning. Lösningen fick stå i 30 minuter vid rumstempera- tur och 1,5 timmar i ett isbad för att kristallisera. Kristal- 467p7s2 lerna samlades, tvättades med l0 ml kall etylacetat och torkades i vakuum och gav 8,82 g av titel B-föreningen. Om- kristallisation ur modervätskeresten, l,6 g, ur 8 ml etyl- acetat gav ytterlgiare 0,87 g av titel B-föreningen. Det kombinerade utbytet av omkristalliserad produkt var 9,69 g.

C. (S)-3-amino-2,2-dimetyl-4-oxo-3-azetidinylsulfat Klorsulfonsyra (7 ml) upplöstes i diklormetan (210 ml) och kyldes till -40°C under argon i ett kärl (500 ml) med en over- head-omrörare. Pyridin (20,8 ml) tillsattes droppvis under l0 minuter. Den tjocka vita suspensionen omrördes i 10 minuter i ett 0°C-bad och i 10 minuter i ett rumstemperatur-bad. Titel B-föreningen (ll,5 g) tillsattes, sköljdes med metylenklorid (20 ml) och blandningen omrördes i 3,5 timmar vid rumstempera- tur. Vatten (250 ml) och tetrabutylammoniumvätesulfat (l7 g) tillsattes och blandningen omrördes och separerades i skikt.

Vattenskiktet återextraherades med diklormetan (2 x 50 ml).

Det kombinerade diklormetanextraktet torkades över natrium- sulfat-magnesiumsulfat och blandningen filtrerades och kon- centrerades i vakuum. Återstoden upplöstes i etylacetat (50 ml) och lämnades vid 5°C i en timme. Blandningen filtrerades och den fasta substansen sköljdes med etylacetat (2 x 25 ml).

Det totala filtratet koncentrerades i vakuum och gav det orena sulfatet.

Det orena sulfatet (30 g) upplöstes i diklormetan (125 ml).

Anisol (10 ml) sattes till blandningen, som därefter kyldes under argon till -5°C. Trifluorättiksyra (50 ml) tillsattes under 10 minuter och lösningen omrördes i 2,5 timmar vid -5° till 0°C. Blandningen späddes med etylacetat (50 ml) och filt- rerades under argon. Den fasta substansen tvättades med två 50 ml-portioner diklormetan och fyra 50 ml-portioner etylacetat.

Den fasta substansen torkades därefter i vakuum i en timme vid till 50°C och i 18 timmar vid rumstemperatur och gav oren titel C-förening, 9,4 g, som vit granulär fast substans.

Den orena fasta substansen, 0,5 g, suspenderades i absolut etanol (15 ml) och vatten (6 ml) tillsattes. Blandningen om- 467 782 6 rördes i l minut i ett 50°C-bad och filtrerades, sköljdes med etanol (5 ml). Filtratet koncentrerades i vakuum under 25°C till ungefär l0 ml. Den erhållna uppslamningen kyldes till O°C i l5 minuter och filtrerades. Kristallerna tvättades med kall etanol (2 ml) och torkades i vakuum vid rumstemperatur och gav 0,317 g av titel C-föreningen som fina vita nålar, smältpunkt l40-l42°C.

D. /3S(Z)/-///l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimetyl-4-oxo- l-(sulfooxi)-3-azetidinyl/-amino/-2-oxoetyliden/amino/oxi/- ättiksyra, difenylmetylester, tetrabutylammoniumsalt Trietylamin (O,l4 ml, 1,0 mmol) sattes till en iskyld suspen- sion av titel C-föreningen (0,2l3 g, 1,0 mmol) i diklormetan (l0 ml). Titel A-föreningen (0,547 g, l,0 mmol) tillsattes och därefter en andra ekvivalent trietylamin (O,l4 ml, l,0 mmol).

Isbadet avlägsnades och blandningen omrördes i 6,5 timmar vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen återkyldes i ett isbad och blandades med en iskall lösning av tetrabutylammoniumväte- sulfat (0,339 g, l,0 mmol) i vatten (15 ml). Diklormetanfasen tvättades med natriumvätekarbonatlösning (0,l26 g, 1,5 mmol i ml vatten) och omrördes med magnesiumsulfat i l0 minuter, filtrerades och lösningsmedlet avlägsnades i vakuum. Produkten torkades under vakuum över fosforpentoxid i 2 dagar och gav titel D-föreningen (0,80 9), som en glasartad fast substans.

E. /3S(Z)/-///l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimetyl-4-oxo- l-(sulfooxi)-3-azetidinyl/-amino/-2-oxoetyliden/amino/oxi/- ättiksyra En lösning av titel D-föreningen (4,l0l g, rv5 mmol) och ani- sol (l ml) kyldes till -l5°C och behandlades med trifluor- ättiksyra (15 ml) under mycket kraftig omröring. Efter en timme under -lO°C överfördes reaktionskolven till ett isbad.

Etylacetat (150 ml) infördes via en tillsatstratt under l5 minuter och omröringen fortsattes vid rumstemperatur i l5 minuter. Blandningen filtrerades och den fasta substansen tvättades med etylacetat (25 ml) och torkades under vakuum och gav 2,34 g av titel E-föreningen. .u 7 F. /35(Z)/-///l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimetyl-4- oxo-l-/sulfooxi)-3-azetidinyl/-amino/-2-oxoetyliden/amino/- oxi/-ättiksyra, dikolinsalt Till en filtrerad lösning av den fria syran av del E (7,6O g, 13,7 mmol) i 200 ml 95%-ig etanol sattes en absolut etanol- lösning av kolinhydroxid (53 ml av en 0,465 M lösning, 24,6 mmol, 90 % av den teoretiskt erforderliga mängden) droppvis under 6 minuter. Till den erhållna lösningen, som var svagt gul och lätt grumlig, sattes under god omröring isopropanol (250 ml) under 8 minuter och den erhållna lösningen ympades.

Efter omröring i 20 minuter tillsattes isopropanol (82 ml) under lO minuter. Efter omröring i ytterligare 25 minuter kyldes blandningen i ett isbad. Efter omröring i 20 minuter tillsattes isopropanol (82 ml) under 10 minuter. Efter omrö- ring i ytterligare 15 minuter tillsattes isopropanol (82 ml) i lO minuter. Efter omröring i ytterligare 20 minuter till- sattes isopropanol (82 ml) i 10 minuter. Efter omröring i ytterligare en timme vid O°C filtrerades blandningen under kväve, tvättades med två 50 ml-portioner isopropanol och torkades under vakuum och gav 7,08 g av titelföreningen.

Kristallinitet bekräftades genom röntgen-diffraktion.

Exempel 2 /3S(Z)/-2-///l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimetyl-4-oxo- l-(sulfooxi)-3-azetidinyl/amino/-2-oxoetyliden/amino/oxi/- ättiksyra, dierytromycinsalt A. /3S(Z)/-2-///l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimetyl-4- oxo-l-(sulfooxi)-3-azetidinyl/-amino/-2-oxoetyliden/-amino/- oxi/-ättiksyra En lösning.av dikolinsaltet i exempel l (250 mg; 0,383 mmol) i 2,5 ml vatten applicerades på en 2 ml-kolonn av Dowex 50W-X2 (H+), 200 till 400 mesh, och kolonnen eluerades tills effluen- ten var neutral vid vilken tidpunkt effluenten innehöll titel A-föreningen. 467 782- 467 782 8 B. /3S(Z)/-2-///l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-//2,2-dimetyl-4-oxo- l-(sulfooxi)-3-azetidinyl/amino/-2-oxoetyliden/-amino/oxi/- ättiksyra, dierytromycinsalt Till en lösning av erytromycinmonohydrat (575 mg, 0,765 mmol) i 5 ml metanol sattes 8,4 ml av effluenten erhållen i del A under omröring. Den erhållna klara lösningen koncentrerades i vakuum för att avlägsna metanolen och gav 5,6 g av en tjock vattenhaltig pasta. Denna tvättades genom centrifugering med en l0 ml- och två 5 ml-portioner vatten och torkades till konstant vikt i vakuum vid rumstemperatur och gav 369 mg av en fast substans. Utjämning med omgivningsfukt i 36 timmar gav 393 mg av titelföreningen som en fast substans. Kristallini- tet bekräftades genom röntgendiffraktion.

Claims (4)

7 467 782.
1. PATENTKRAV l. Dierytromycin- och dikolinsalterna av föreningen [3S(Z)]- 2[[[l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-[[2,2-dimetyl-4-oxo-l-(sulfoxi)- 3-azetidinyl]amino]-2-oxoetyliden]amino]ogi]-ättiksyra. 2. En förening enligt patentkravet l i kristallin form. 3. Dierytromycin- och dikolinsalterna av föreningen [3S(Z)]-
2. 2[[[l-(2-amino-4-tiazolyl)-2-[[2,2-dimetyl-4-oxo-1-(sulfoxi)-
3. 3-azetidinyl]amino]-2-oxoetyliden]amino]oxi]-ättiksyra till användning vid behandling av bakterieinfektioner i däggdjur.
4. 4. Ett förfarande för framställning av en förening med formeln \ FU) \\n=o ,ä 3 fflß Hzn N fi E c-CH3 \ I i - o c N-oso§ÄÉ9 / fl qnz o COÄÄÉE vari M* antingen är erytromycin eller kolin, vilket förfarande innefattar omsättning av en fri syra av föreningen med formeln I, vari M* = H+, med antingen erytromycin eller kolin, i när- varo av ett lösningsmedel, till dierytromycin- eller dikolin- saltet av föreningen med formeln I.