SA92130322B1 - التسلسل البروتيني لعامل التسمم النباتي جيلونين - Google Patents
التسلسل البروتيني لعامل التسمم النباتي جيلونين Download PDFInfo
- Publication number
- SA92130322B1 SA92130322B1 SA92130322A SA92130322A SA92130322B1 SA 92130322 B1 SA92130322 B1 SA 92130322B1 SA 92130322 A SA92130322 A SA 92130322A SA 92130322 A SA92130322 A SA 92130322A SA 92130322 B1 SA92130322 B1 SA 92130322B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- leu
- lys
- gly
- ala
- asn
- Prior art date
Links
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 title claims abstract description 37
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 36
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 36
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 title description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 12
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 19
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 10
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 8
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 claims description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 4
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 claims description 4
- 230000014616 translation Effects 0.000 claims description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 2
- ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N 0.000 claims 2
- POFWRMVFWIJXHP-UHFFFAOYSA-N n-benzyl-9-(oxan-2-yl)purin-6-amine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNC(C=1N=C2)=NC=NC=1N2C1CCCCO1 POFWRMVFWIJXHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- HQJKCXHQNUCKMY-GHCJXIJMSA-N Ala-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N HQJKCXHQNUCKMY-GHCJXIJMSA-N 0.000 claims 1
- SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N Ala-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 claims 1
- BGGAIXWIZCIFSG-XDTLVQLUSA-N Ala-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BGGAIXWIZCIFSG-XDTLVQLUSA-N 0.000 claims 1
- UAOSDDXCTBIPCA-QXEWZRGKSA-N Arg-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UAOSDDXCTBIPCA-QXEWZRGKSA-N 0.000 claims 1
- WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- BSYKSCBTTQKOJG-GUBZILKMSA-N Arg-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BSYKSCBTTQKOJG-GUBZILKMSA-N 0.000 claims 1
- INOIAEUXVVNJKA-XGEHTFHBSA-N Arg-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O INOIAEUXVVNJKA-XGEHTFHBSA-N 0.000 claims 1
- WOZDCBHUGJVJPL-AVGNSLFASA-N Arg-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N WOZDCBHUGJVJPL-AVGNSLFASA-N 0.000 claims 1
- POOCJCRBHHMAOS-FXQIFTODSA-N Asn-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O POOCJCRBHHMAOS-FXQIFTODSA-N 0.000 claims 1
- NVGWESORMHFISY-SRVKXCTJSA-N Asn-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O NVGWESORMHFISY-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- VKCOHFFSTKCXEQ-OLHMAJIHSA-N Asn-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VKCOHFFSTKCXEQ-OLHMAJIHSA-N 0.000 claims 1
- PIWWUBYJNONVTJ-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asp-Asn Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)C(=O)N PIWWUBYJNONVTJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 claims 1
- JREOBWLIZLXRIS-GUBZILKMSA-N Asn-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JREOBWLIZLXRIS-GUBZILKMSA-N 0.000 claims 1
- OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- XFJKRRCWLTZIQA-XIRDDKMYSA-N Asn-Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N XFJKRRCWLTZIQA-XIRDDKMYSA-N 0.000 claims 1
- HZZIFFOVHLWGCS-KKUMJFAQSA-N Asn-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HZZIFFOVHLWGCS-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- HCZQKHSRYHCPSD-IUKAMOBKSA-N Asn-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HCZQKHSRYHCPSD-IUKAMOBKSA-N 0.000 claims 1
- QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N Asn-Tyr-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- ZSJFGGSPCCHMNE-LAEOZQHASA-N Asp-Gln-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N ZSJFGGSPCCHMNE-LAEOZQHASA-N 0.000 claims 1
- XJQRWGXKUSDEFI-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XJQRWGXKUSDEFI-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims 1
- RKXVTTIQNKPCHU-KKHAAJSZSA-N Asp-Val-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O RKXVTTIQNKPCHU-KKHAAJSZSA-N 0.000 claims 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- YYLBXQJGWOQZOU-IHRRRGAJSA-N Cys-Phe-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](CS)N YYLBXQJGWOQZOU-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- OPINTGHFESTVAX-BQBZGAKWSA-N Gln-Arg Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N OPINTGHFESTVAX-BQBZGAKWSA-N 0.000 claims 1
- TWTWUBHEWQPMQW-ZPFDUUQYSA-N Gln-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O TWTWUBHEWQPMQW-ZPFDUUQYSA-N 0.000 claims 1
- RUFHOVYUYSNDNY-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O RUFHOVYUYSNDNY-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims 1
- AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- UHVIQGKBMXEVGN-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O UHVIQGKBMXEVGN-WDSKDSINSA-N 0.000 claims 1
- SYWCGQOIIARSIX-SRVKXCTJSA-N Glu-Pro-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SYWCGQOIIARSIX-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- BRFJMRSRMOMIMU-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BRFJMRSRMOMIMU-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 1
- FUTAPPOITCCWTH-WHFBIAKZSA-N Gly-Asp-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FUTAPPOITCCWTH-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 1
- LXXANCRPFBSSKS-IUCAKERBSA-N Gly-Gln-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LXXANCRPFBSSKS-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- ZQIMMEYPEXIYBB-IUCAKERBSA-N Gly-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CN ZQIMMEYPEXIYBB-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N 0.000 claims 1
- FXGRXIATVXUAHO-WEDXCCLWSA-N Gly-Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCCN FXGRXIATVXUAHO-WEDXCCLWSA-N 0.000 claims 1
- QGDOOCIPHSSADO-STQMWFEESA-N Gly-Met-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QGDOOCIPHSSADO-STQMWFEESA-N 0.000 claims 1
- VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N Ile-Ala-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N 0.000 claims 1
- BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N Ile-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N 0.000 claims 1
- IVXJIMGDOYRLQU-XUXIUFHCSA-N Ile-Pro-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IVXJIMGDOYRLQU-XUXIUFHCSA-N 0.000 claims 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N L-Prolyl-L-glutamic acid Chemical group OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 claims 1
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N Leu-Arg-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- CCQLQKZTXZBXTN-NHCYSSNCSA-N Leu-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O CCQLQKZTXZBXTN-NHCYSSNCSA-N 0.000 claims 1
- QNTJIDXQHWUBKC-BZSNNMDCSA-N Leu-Lys-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QNTJIDXQHWUBKC-BZSNNMDCSA-N 0.000 claims 1
- RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N Leu-Lys-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N 0.000 claims 1
- INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N Leu-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N 0.000 claims 1
- PJWOOBTYQNNRBF-BZSNNMDCSA-N Leu-Phe-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N PJWOOBTYQNNRBF-BZSNNMDCSA-N 0.000 claims 1
- NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N Lys-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N 0.000 claims 1
- HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- ITWQLSZTLBKWJM-YUMQZZPRSA-N Lys-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN ITWQLSZTLBKWJM-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N Lys-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- FPQMQEOVSKMVMA-ACRUOGEOSA-N Lys-Tyr-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O FPQMQEOVSKMVMA-ACRUOGEOSA-N 0.000 claims 1
- LBSWWNKMVPAXOI-GUBZILKMSA-N Met-Val-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LBSWWNKMVPAXOI-GUBZILKMSA-N 0.000 claims 1
- NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N Phe-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N 0.000 claims 1
- IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N Phe-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N 0.000 claims 1
- BPIMVBKDLSBKIJ-FCLVOEFKSA-N Phe-Thr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BPIMVBKDLSBKIJ-FCLVOEFKSA-N 0.000 claims 1
- UTAUEDINXUMHLG-FXQIFTODSA-N Pro-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 UTAUEDINXUMHLG-FXQIFTODSA-N 0.000 claims 1
- UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims 1
- IURWWZYKYPEANQ-HJGDQZAQSA-N Pro-Thr-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IURWWZYKYPEANQ-HJGDQZAQSA-N 0.000 claims 1
- SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims 1
- QGAHMVHBORDHDC-YUMQZZPRSA-N Ser-His-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CN=CN1 QGAHMVHBORDHDC-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims 1
- KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N Ser-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N 0.000 claims 1
- ODRUTDLAONAVDV-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ODRUTDLAONAVDV-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- YRJOLUDFVAUXLI-GSSVUCPTSA-N Thr-Thr-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O YRJOLUDFVAUXLI-GSSVUCPTSA-N 0.000 claims 1
- RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N Thr-Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N 0.000 claims 1
- KVEWWQRTAVMOFT-KJEVXHAQSA-N Thr-Tyr-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KVEWWQRTAVMOFT-KJEVXHAQSA-N 0.000 claims 1
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 claims 1
- HTHCZRWCFXMENJ-KKUMJFAQSA-N Tyr-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HTHCZRWCFXMENJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- KEHKBBUYZWAMHL-DZKIICNBSA-N Tyr-Gln-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KEHKBBUYZWAMHL-DZKIICNBSA-N 0.000 claims 1
- JXGUUJMPCRXMSO-HJOGWXRNSA-N Tyr-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 JXGUUJMPCRXMSO-HJOGWXRNSA-N 0.000 claims 1
- BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N Val-Asp-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N 0.000 claims 1
- ROLGIBMFNMZANA-GVXVVHGQSA-N Val-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ROLGIBMFNMZANA-GVXVVHGQSA-N 0.000 claims 1
- WNZSAUMKZQXHNC-UKJIMTQDSA-N Val-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N WNZSAUMKZQXHNC-UKJIMTQDSA-N 0.000 claims 1
- CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N Val-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N 0.000 claims 1
- AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N Val-Val-Gly Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC([O-])=O AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 claims 1
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 claims 1
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 claims 1
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 claims 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 claims 1
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 claims 1
- 108010084572 phenylalanyl-valine Proteins 0.000 claims 1
- 108010025826 prolyl-leucyl-arginine Proteins 0.000 claims 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 claims 1
- 210000003370 receptor cell Anatomy 0.000 claims 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 claims 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 abstract description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 abstract description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 abstract description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 abstract description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 abstract description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 34
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 18
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 17
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 description 16
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 12
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 12
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 10
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 8
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 8
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 7
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 7
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 7
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 6
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 6
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 4
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 4
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 3
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000221018 Gelonium Species 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 3
- 108010021119 Trichosanthin Proteins 0.000 description 3
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 3
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 2
- 101710186708 Agglutinin Proteins 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N Arginine Chemical compound OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 101710146024 Horcolin Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 101710189395 Lectin Proteins 0.000 description 2
- 101710179758 Mannose-specific lectin Proteins 0.000 description 2
- 101710150763 Mannose-specific lectin 1 Proteins 0.000 description 2
- 101710150745 Mannose-specific lectin 2 Proteins 0.000 description 2
- 231100000742 Plant toxin Toxicity 0.000 description 2
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 2
- -1 amino acid salt Chemical class 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 239000010440 gypsum Substances 0.000 description 2
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 2
- 239000003123 plant toxin Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- LCTORNIWLGOBPB-GASJEMHNSA-N (3r,4s,5s,6r)-2-amino-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound NC1(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LCTORNIWLGOBPB-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000144619 Abrus precatorius Species 0.000 description 1
- 108010001949 Algal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108030000961 Aminopeptidase Y Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- XPGVTUBABLRGHY-BIIVOSGPSA-N Asp-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N XPGVTUBABLRGHY-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 101800001415 Bri23 peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000107 C-terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 101800000655 C-terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 235000014066 European mistletoe Nutrition 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 238000003231 Lowry assay Methods 0.000 description 1
- 238000009013 Lowry's assay Methods 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 244000022198 Mirabilis jalapa Species 0.000 description 1
- 235000009053 Mirabilis jalapa Nutrition 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940123573 Protein synthesis inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 244000152640 Rhipsalis cassutha Species 0.000 description 1
- 235000012300 Rhipsalis cassutha Nutrition 0.000 description 1
- 240000000528 Ricinus communis Species 0.000 description 1
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 1
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 1
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 description 1
- 101710084578 Short neurotoxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710182532 Toxin a Proteins 0.000 description 1
- 101710131583 Trypsin-10 Proteins 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000015107 ale Nutrition 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine Chemical group N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N 0.000 description 1
- 230000008236 biological pathway Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 125000000837 carbohydrate group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000021523 carboxylation Effects 0.000 description 1
- 238000006473 carboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N cibacron blue Chemical compound C1=2C(=O)C3=CC=CC=C3C(=O)C=2C(N)=C(S(O)(=O)=O)C=C1NC(C=C1S(O)(=O)=O)=CC=C1NC(N=1)=NC(Cl)=NC=1NC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000006674 lysosomal degradation Effects 0.000 description 1
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 108010010621 modeccin Proteins 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013021 overheating Methods 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 108700028325 pokeweed antiviral Proteins 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000000007 protein synthesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000001995 reticulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- XREXPQGDOPQPAH-QKUPJAQQSA-K trisodium;[(z)-18-[1,3-bis[[(z)-12-sulfonatooxyoctadec-9-enoyl]oxy]propan-2-yloxy]-18-oxooctadec-9-en-7-yl] sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].CCCCCCC(OS([O-])(=O)=O)C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(CCCCCC)OS([O-])(=O)=O)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(CCCCCC)OS([O-])(=O)=O XREXPQGDOPQPAH-QKUPJAQQSA-K 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010072147 type V-S pancreatic trypsin Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/55—Fusion polypeptide containing a fusion with a toxin, e.g. diphteria toxin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
يتعلق هذا الاختراع ب جيلونين gelonin منقى فعليا وأجزاء سمية مشتقة منه toxic fragments، وتسلسل ل DNA يحمل شفرة الجيلونين و استخدام ذلك ال DNA في إنتاج الجيلونين والأجزاء السمية و بروتينات ملتحمة النوى الذرية fusion protein بواسطة تقنية الهندسة الوراثية recombinant technology . وبشكل خاص يتعلق هذا الاختراع بالتسلسل الأولي للأحماض الأمينية للجيلونين وتسلسل ال DNA الذي يحمل شفرة الجيلونين المذكور وإنتاج جيلونين مصنع synthetic gelonin وأجزاءسمية مشتقة منه.
Description
التسلسل البروتيني لعامل التسمم النباتي جيلونين الوصف الكامل خلفية الاختراع
من أكبر التحديات لصنع دواء لمعالجة أي مرض هي فاعلية هذا الدواء وكفاءته.هناك أدوية متنوعة متوفرة لعلاج السرطان تعاني من هذه المشاكل.إن مفهوم أدوية السموم المستهدفة لورم معين بدأت في البحث الكثيف © خلال السنوات القليلة الأخيرة (شورب 4Ae Thorpe )2 التطبيقات الكلينيكية البيولوجية Af Biol Clin Applications : 75 - 7١د موللر Moller 1987 دورية عامة عن المناعة ImmunRev. «¢ أ : )= (YYo ¢ وحديثاً تستعمل كل من الأجسام المضادة أحادية وعديدة التتقسيل monoclonal and polyclonal antibodies والليكتيسايتات selectins ٠ اللمفوكينات lymphokines والهرمونات hormones حيث تتعرف على نهايات خاصة على سطح خلية الورم السرطاني ؛ كمواد حاملة لكي تحمل العوامل السمية إلى الخلية ؛ حيث تستطيع الأخيرة أن تبدى فعالية سسمية خلوية ( بلاتلر 8181# وغيره AAO ام الكيمياء الحيوية ١11 : ١ Biochemistry — 174 ء فرانكل Frankel وغيره9488١ م J, Biol, Res, Modif VO التعديلات إلى البحث العلمي البيولوجي 4 :41-137 ريمان Reimann وغيسره 588 ام J ClinInvest. الاستتقاء الإكلينيكي VFA — 1Y4 : AY ¢ شوارتز Schwartz and Vale Judy 144١م علم الغدد YYeu - 164558 : YY Endocrinology sla all سكوت Scott وغيسره Natl.Cancer.Inst. at 4AY آ المعهد الوطني للسرطان MVP =r : ١ Yo ء؛ سنغ Singh وغيره 584١م الكيمياء الحيوية Biol.Chem. 114 : 4 - ؛ سرينفازان Srinivasan وغيره دحام :Y4Y FEBS Letters ف شوارتز Schwartz وغيره 941١م علم الغددالصماء ١7١ Endocrinology (VET - ١ : كما أنه تم بحث الأجزاء السمية toxic moieties لمدى أبعد مع
هذه Jaf gall الحاملة متضمنة النيوكليودات المشعة -radionuclides ov v
(غوس Ghose وغيره 577١م ١ Br,Med,J : 0 = 4%( والأدوية السمية الخلوية cytotoxic المستخدمة بصفة شائعة في المعالجة الكيميائيمة للسرطان (ثشورب و روز Thorp and Ross 1987م نظره عامة عن عل المناعة YOY = 114: 17 Immun.Rev. ¢ دوجير Deweger وغيره 1987م نظطره © عامة عن ale المناعة TY Immun.Rev. : 74 - £0 ؛ أرنون Amon ؛ سيلا a) AAY Sela نظره عامة عن علم المناعة ImmunRev. 7ح بم - ات بيم Pimm وغيره 187١م YYo : VY Cancer Immun.
Immunotherap — ؛ ؛ رولاند Rowland وأكستون Axton 1185م المعالجة المناعية لمناعء i السرطان -١ : ٠١ Cancer Immun.
Immunotherap 7) ٠ والبروتينات المشتقة من البكتيريا والنباتات مث الدفتيريا diphtheria أو ريسين Ticin (جانسين Jansen وغيره 1488م نظرة عامة عن علم المناعة ١18 : 7 ImmunRev. - 71 ؛ راسو Raso 1447م نظرة عامة عن علم المناعة NY ImmunRev. : 1 = أ١ فيتا Vitetta QV AAT, ye نظرة عامة عن علم المناعة 1Y ImmunRev. :10:4 = YAY ٠ « تيلفيل Nelville ويول Youle 1989م نظرة عامة عن علم المناعة UY Immun.Rev. : 497 - 1 ثورب Thorp وغيره الفكلم ل عط ١١١ Biochem : 4497 - 454 ).يصنع الجزىء الخاص specific molecule بواسطة (Pls) السلسلة ب الغير خاصة nonspecific B-chain بجسسم مضاد أو
هرمون. Ye. تكون السموم البكتيرية والنباتية Pseudomonase ¢ diphtheria toxin (DT) Jie aeruginosa toxin A »و أبرين abrin ¢ و ريسين cricin و الهدال Mistletoe « والمودسين Modeccin ؛ و Shigella toxin عوامل فعالة لتدمير الخلية وذلك يرجع إلى قدرتها على تعطيل الوظائف الخلوية الحرجة ؛ مثلاً سميات الدفتريا diphtheria toxin والريسين 1010 تشبط Adee تصنيع البروتين Yo الخلوي وذلك عن طريق تشبيط عملية إطالة العامل الثاني وتثبيط وحدة ٠١ الريبوزومية على التوالي (السميات البككيرية Bacterial Toxin والأغضية Cell membranes A lal » جيلا جازويس Jelajaszewics ؛ وادستروم 4A Wadstrom )2 مطبعة مؤسسة أكاديمياً؛ ص (YA) ؛ وتعتبر تلك
١٠ا/
¢ السموم فعالة بدرجة كبيرة لأنها عبارة عن إنزيمات و تعمل كمواد حفازة catalytically أكثر منها موحدة للعناصر .stoichiometrically جزيئات تلك السموم عبارة عن سلسلة ببيتيدية عديدة نشطة أنزيمياً ء غالباً تسمى سلسلة " أ chain’ ه أو جزء "أ" ؛ متصلة إلى واحدة أو أكثر © من سلاسل أو أجزاء ببتيدية عديدة ؛ وغالباً تسمى سلاسل ب B chain أو أجزاء " ب " ؛ التي تربط الجبسزئ إلى سطح الخلية وتمكن السلسلة أ للوصول إلى موضعها المؤثر ؛ أي العصارة الخلوية ( السيتوبلازم ) cytosol ¢ وتتم وظيفتها التكسيرية. يطلق على طريقة الحصول على المزيد من السيتوبلازم إيلاج internalization أو تسميم intoxication أو نقل translocation ٠ وتنتمي السموم_البروتينية إلى طائفة تحمل سلسلتين يشار إليهما بسلسلة أ وسلسلة ب. السلسلة ب لها مقدرة على الإرتباط بجميع الخلايا تقريباً؛ بينما السلسلة أ لها المقدرة على الفعالية السمية الخلورية cytotoxic activity ¢ ويعتقد أن السلسلة أ يجب أن تكون محرره في الوقت لمناسب من السلسلة ب ويكون ذلك Le بواسطة إختزال الرابطة الكبريتية الثنائية bond ١٠ 01901506 لكي نجعل السلسلة أفعالة. وتكون تلك السموم الطبيعية غالباً غير إنتقائية لخلية معطاة أو لنوع النسيج لأن سلاسل ب لها تتعرف وترتبط بالمستقبلات الموجودة في الخلايا المختلفة النوع. تعتبر إمكانية توافر جزئ سام ليس له سمية خلوية على مختلف أنواع الخلايا Laie يوخذ مفردا ذو إمكانية محدودة ؛ يمد Yo استخدام_سلاسل مفردة موجودة طبيعياً لجزئيات سمية والتي لا ترتبط بنفسها إلى مستقبلات سطح الخلية ولذلك لا يمكن إيلاجها طبيعياً بواسطة الخلايا ٠ الجزئيات السامة التي تكون نسبياً غير سامة إلى معظم الخلايا ؛ إذا لم تكن كلهاء عندما تعطي مفردة ؛ وتكون تلك السموم الموجودة طبيعياً لسلسلة مفردة معروفة حتى اليوم ؛ متضمنة ؛ ولكن لا تكون محددة ؛ إلى بروتين YO بذرة خروع مضاد للفيروسات lady SL) pokeweed antiviral protein Houston (ysis 5 Ramakrishanan كلم YeA—= Yo): ££ Cancer Res. ¢ صابونين saponin شورب Thorp وغيره Vo J.Natl. cancer inst. 2 4A0 : ٠ - 104( ؛ و الجيلونين (ستريب Stipe وغيره ١480 م الكيمياء الحيوية
Yov o ؛ وتكون تك البروتينات غير سامة (90F - 14417 : Yoo J. Biol.chem. البروتين في pial إلى الخلايا في شكلها الحر ؛ ولكن تستطيع تثبيط حالة قدرتها على الدغخول إلى الخلية ؛ تكون إمكاتية توفر تلك السموم مفردة السلسلة بالشكل_النقي فعلياً محدودة تبعاً إلى الحقيقة بأنها تكون نقية من المصادر النباتية حيث توجد كميات قليلة نسبياً وتكون إمكانية تركيز © نسخ السموم في النباتات معتمدة على ظطروف نمو النبات وظروف جني التبات. الجلونين عبارة عن سلسلة ببتتدية عديدة مفردة معزولة من بذور = YA vo ؛ لها وزن جزيئ حوالي Gelomium multiforam تاتبنلا glycoprotein كيلو دالتون ؛ الجيلونين عبارة عن جليكوبروتين 30,8560 ٠ تقريباً ويحتوي على بقايا مانوز A,) © isoelectric point ذا نقطة استواء كهربي
Falasca (فالاسكا mannose and glucosamin residues وجلوكوز أمين على . )904- 805 : 7١١7 Biochem.J. وغيره؟18 ام الكيمياء الحيوية من النباتات الأخرى والسممم البكتيرية ؛ تكون تنك a El البروتينات غير سامة للخلايا بنفسها ؛ ولكن عندما تنتقل إلى الخلايا خلال ناقل ؛ فهي ٠ الريبوزومية ؛ تقترح بيانات البيولوجية داخل الجسم 8 ٠١ تخرب وحدة الحي أو خارجه بأن الجيلونين يكون مكافئ أو مفضل إلى السموم النباتية الأخرى ؛ في الواقع ؛ تشير نتائج مقارنة ترافقات الجيلونين خارج الجسم الحي وداخله مع ترافقات سلسلة أ بأن تحتوي على فعالية مماثلة ؛ انتقائية
Sivan أفضل ؛ تمركز ورم سرطاني أفضل ؛ تأثيرات علاجية هامة (سيفان ٠ على أية حال ؛ تكون ¢ (YYYY¥ = ©1143: £V Cancer Res. م١987 وغيره إمكانية توافر نسخ ممكنة النمو بسرعة من الجيلونين من مصادر طبيعية محدودة. بالإضافة ؛ تكون تنقية الجيلونين من مصادر نباتية صعبة ويكون . الناتج قليل جداً ولقد ظهر أن الجيلونين بنفسه يكون مجهضاً في الفثران ويساعد على Yo وغيره Yeung (يونج dependent cell المضادة AWRY المعتمدة على LOL AY سمية (YA = ف : ١ internal.].peptide protein Res, لم AAA
Yov q od العديد من الباحثين استخدموا الجيلونين كمركب ذو سمية خلوية كميائياً peptide أجسام مضادة وحيدة التنسيل أو إلى خلايا هرمونية بيبتيدية chemical حال ؛ يقلل التحوير الكيميائي a .على targeting hormonecellular للجيلونين والأجزاء الخلوية المستهدفة من الفاعلية المطلوبة modification والفاعلية السمية الخلوية للجيلونين بنفسها . علاوة على ذلك ؛ تكون © المصادر الطبيعية للجيلونين معرضة إلى التغير والتقلب في الحصاد ونمو النبات مما يؤثرعلى الفاعلية السمية والخلوية للجيلونين . تزداد القدرة على انتاج توكسين . جيلونين مصنع كيميائياً أو بأستخدام الهندسة الوراثية تزود البراءة الحالية بجيلونين نقي فعلياً متضمناً على تسلسل الأحماض
DNA وتمد البراءة أيضاً بسلسل ١ الأمينية كما هو موضحاً في شكل Ve للجيلونين الموضح في شكل ؟ ؛ ويمد استخدام التسلسلات في الاختراع الحالي لإنتاج جيلونين نقي فعلياً بكميات كثيرة عن طريق تقنية الهندسة الوراثية بكميات كبيرة من المادة السامة التي لم تتوافر حتى الآن من مصادر طبيعية عادية. شرح مختصر للرسومات: VO تسلسل الأحماض الأمينية للجيلونين. ١ يوضح شكل — شضفرة 011 للجيلونين. ١ يصف شكل — تشاكل اللأحماض الأمينية للجيلونين مع تسلسل JSS يصف - مادة أساسية تشكل ¢ Ricin A سلسلة ctrichosanthin كوزانثين الثلاثي مادة أولية منفصلة من بذرة نبات الخروع وسلسلة أبرين أ ٠١ .Abrin A .CNBr لأجزاء HPLC يصف شكل ؛ صورة جانبية — و الشكل 0ج صورة جانبية ل:- odo يصف شكل -
HPLC Staphylococcus protease Lys - ¢ (7) staphylococcus protease (ب) بروتياز مكور عنقودي Yo . staphylococcus protease هيدروكسيل أمين وصنف للجيلونين (©) والشكل ١د رسم بياني للمناطق الكارهة للماء alee يصف شكل - hydrophobicity plots ov
(أ)الجيلونين gelonin (ب) رين ricin (ج) ثلاثي كوزنثين trichosanthin 8 أبرين Abrin 2 (ه) مادة تشكل اولية agglutinin precursor الوصف التفصيلي: يشير التعبير " نقي فعلياً substantially pure " عندما يطبق على بروتين الجيلونين في البراءة الحالية أن السلسلة البيبتيدية العديدة تكون فعليا خالية من البروتينات النباتية الأخرى المرتبطة مع الجيلوفين في حالته ٠ الطبيعية وتظهر استجابة إنتاجية للطريقة المستخدمة في تحليل البروتينات المعاد انتاجها أو الاستجابة بالتحليل الكروموتجرافي ؛ aed الخروج elution profiles والفاعلية السمية . لا يشير التعبير " نقي فعلياً " لإستثناء المغاليط المصنعة أو المصنعة من بروتين الجيلونين مع مركبات أخرى. : تتم تنقية الجيلونين من بذور نبات Gelonium multiforum بواسطة VO تقنيات معروفة للخبراء في المجال ؛ يحدد تسلسل الأحماض الأمينية باستخدام طريقة إدمان Edman المعدلة للإنحاال. تطبق عينات الجيلونين إلى حجرة تفاعل منعكسة الوضع وتعرض طريقة إدمان المعدلة للإنحلال.وقد وجد أن نهاية المجموعة الأمينية No) (terminal للجيلونين تكون غير متجانسة ( تكون Chal جزئيات Ye البروتين بوضع حمض أمين أقصر من الآخر ) ؛ ويؤدي غير التجانس الى صعوبة في تسلسل أكثر من 5٠0 دورة ؛ لذلك ؛ لكي تحدد أحماض أمينية أخرى في هذا التسلسل ؛ فإنه يفضل استخدام طريقة الإنحلال أنزيمياً .enzymatic cleavage وبصفة عامة يتم الحصول على التسلسل الداخلي للبروتينات عن طريق التصنيف أو قطع أكبر جزئ بروتيني إلى أجزاء صغيرة عن YO طريق الهدم كيميائياً وأنزيمياً . عندما يتعرض الجللونين الطبيعي لإنزيمات الهدم ( الهضم ) لتكسير البروتين إلى بروتين أبسط ؛ فإنه قد وجد أنها تكون غير كاملة القطع . ووجدت هذه التجزئه بسبب وجبسود الرابطة الكبريتية الثنائية في الجزء النهائي 37 من الجزئ . يتم تير
A
حمض alkylation هذه الرابطة عن طريق الاختزال واستخدام عامل الألكة الخليك الأيودي منتجاً الجزئ الذي يكون أقل ذوبانية من المادة ( الطبيعية عند درجة الحموضة المطلوبة للأنزيمات الهأاضمة الهضم الهادىء ) . تنتج الترافقات المصنعة من الجيلونين الطبيعي مع (Lysc) , Lysine amino peptidase الليسين أمينو ببتيداز ¢ trypsin التربسين © كيموتريسين (V8) staphloccas protease بروتياز المكور العنقودي تعطي الطرف النهائي للمجموعة الكربوكسيلية ' © " من الجزئ chymotrypsin ويوضح ذلك أن الجزء النهائي 17 من الجزء لا يمكن الحصول عليه بسهولة عن طريق الأنزيمات المصنعة ( من تحليل النهاية 17 إلى حمض الأميني المتبقية). Ve ؛ أسبارتيك دوهال Ala ألانين » pro برولين Ve ينحل الجيلونين مع بروميد السيانوجين cyanogens bromide إلى ؟ ببتيدات كبيرة . تذوب التقسيمات التامة البروتينية ٠7 ( protein aliquot Me جم / مللى لتر ) في 71٠0 حمض فورميك formatic acid تضاف بلورة من cyanogens bromide إلى المحلول ويسمح للتفاعل لأن يواصل لمدة الا تقل عن ١8 ساعة ؛ ثم يخفف المحلول بالماء توضع في عمود تسلسل صغير.بعد وضع العينة ؛ يستخدم محلول متدرج SSA ( من ١ - (ZY. بروبانول عادي N-propanol مع TFA 7 ,١ لتجنب خروج أجبزاء .4 كما يوضح النقل بواسطة الإذابة أو الإمتزاج شكل opie ببتيدات متوافقة ؛ يتم ONBr ينتج الهضم الأنزيمي لكل من البروتين أو أجزاء مللي مولار من ٠٠١ SDS TN في Lyal endo peptase عمل هضم أنزيمي مع Vo / ,\ في Staphylococcus protease Aureus ¢ 6. + درجة حموضة Tris محلول يحتوي الجيلونين على جزيء واحد من TrypsinTween 7 ,١ ؛ في i SDS عند الوضع ينتج الاختزال ؛ وعملية إدخال مجموعة cys حمض السستين الكربوكسيل (عملية الكربوكسيلية) بروتين حيث يسترد عن استخدام طريقة المنعكسة وتكون أكثر عرضة للهضم الأنزيمي ؛ لذلك ؛ تنفذ معظم HPLC YO التفاعلات ( الهضم ) الأنزيمية في SDS 7 ,١ أو Tween 7 ,١ . بعد أن يصطف ال ١٠١ الباقي من terminal - © بواسطة ترافقات من مصنفات CNBr وتحللات أنزيمية ؛ يقدر التسلسل المتبقي الغير معروف بين
Yov q حمض Jala بواسطة ترافق من التحويرالكيميائي الألكلة عن طريق 7١ البقية £0 إلى الجيلونين Jay ؛ ثم SDS الخليك الأيودي لسسيستين وذوبانية البروتين القلوي مع عند درجة حرارة 7١72م لفترة صغيرة LYSC مع المزيد من أنزيم RCM الألكايلي ساعات ) ؛ صوره جانبية توضح النقل بواسطة الإذابة أو #٠ - ١ ( من الزمن
Jo الإمتزاج شكل © تنتج تلك الطريقة تسلسل جديد لم يظهر من قبل يوضح ذلك التسلسل الجديد عن وجود ترافق من Ans - Gly ؛ ويكون ذلك الترافق من الأحماض الأمينية قابل للإنحلال بواسطة الطريقة الكيميائية بإمستخدام الهيدروكسيل أمين hydroxylamine ٠١ يتم انحلال الهيدروكسيل أمين بواسطة إضافة ٠٠١ ميكروجم من الجيلونين إلى هيدروكسيل أمين محضر حديثاً(؟ مولار) في محلول منظم من نوع M tris درجة الحموضة 4 مع ؟ مول EDTA Nacl مسا + ZY إيثانول ؛ بعد التحضين لمدة ١ ساعات في درجة حرارة الغرفة ؛ يوضع كل مخلوط التفاعل عمود تسلسل ثم يغسل العمود بعد ذلك ب ZY 178 في الماء Vo وأيضاً يجنب مع متدرج أستيونيتريل Acetonitrile gradient أو يسلسل مباشرة كمخلوط ؛ ينتج ذلك Pla SY الكيميائي ببتيد كبير كاره للماء large hydrophobic peptide والذي يحتوي على تسلسل ٠٠١ حمسض أميني والتي تربط مع Asp - Ala - Pro في المتبقي 7١ . صوره جانبية توضع النقل بواسطة الإذابة أو الإمتزاج كما في الشكل دج . Ve البقية ؛ يقدر مقطع قصير من تسلسل متوافق من البقية 4٠ إلى 5٠ بواسطة هضم الجيلونين بدون عملية الأكلة ب Lysc في SDS ؛ بعد ذلك تهضم غالبية الجزء النهائي © من المادة ؛ ثم يهضم المخلوط مرة أخرى بواسطة أنزيم الكيموتريبسين chymotrypsin ¢ ثم تفصل المنتجات المهضومة بعد ذلك بواسطة HPLC يكشف تحليل التسلسل الببتيدي الكبير على تسلسل ( سيرين Ser - ثيرونين Thr - لايسين (Lys YO مبتدءاً من ٠٠ تقريباً حمض أميني من نهاية فرعية N من الجزئ ؛ وهذا يصبح مفيدا حيث أنها تستخلص الجزء غير متجانس من الجزء تسمح إجراء تسلسل أطول. yov
Ye يشتمل بروتين الجيلونين على YOA حمض أميني ؛ حيث يوضح التسلسل في شكل ١ ؛ تتم مقارنة تسلسل الأحماض الأمينية للجيلونين بالنسبة إلى التشلسلات الأخرى المعروفة والمتوافرة في تسلسلات Ao المعلومات (Genxbanlh,PIR,EMBL) لكي تحدد Lee إذا كان الجيلونين يحتوي على © أية مناطق متجانسة مع البروتينيات الأخرى ؛ تظهر مقارنة تسلسل الحمض الأمين للجيلونين مع البروتينات الأخرى المتضمنة على تسلسل حمض أميني معروف أن تسلسل الجيلونين يكون فريداً ؛ يكشف عن تجانس أجبزاء محددة من تسلسل Gish al بالنسبة إلى أجزاء البروتينات الأخرى ؛ على Ju المثال » يبدى الجيلونين 7١١ تجانس مع alphatrichosanthin مسن Trichosanthin kirlowi 10 ٠ ¢ 777,8 تجانبس مع Abrin A chain من Indian Licquorice « 778,7 تجانس مع Agglutinin precursar من زيت بذرة الخروع ٠ 777,7 تجانس مع Ricind ؛ سلسلة أ من زيت بذرة الخروعو 777,7 تجانس مع البروتين المضاد للفيروسات antiviral protein من mirabilis jalapa ؛» يوضح ملخص لدرجة التجانس مع تلك البروتينات وأنواع أخرى في . الشكل Ye ه تماثل للمناطق الكارهة للماء من 7 = ١ توضح الرسوم البيانية في الأشكال وإلى البروتينات المائعة للريبوزومات Ricin الريسين Trichosauthin ثلاثي كوزانثين .ribosomal inhibiting proteins يوضح رسم بياني للمناطق الكارهة للماء للمتبقي 38 - Vou cA Yo -186.وتكون تلك هي المناطق الكارهة للماء يحتمصل حدوث طي فعلي في الجزء ؛ ويلاحظ ذلك التشابه في توزيغ المناطق الكارمة للماء أيضاً للسموم الأخرى ( أنظر شكل ١أ = 1ه ) ويمكن أن يقترح أن Sod الأنزيمي التشط يمكن أن يستمر خلال تلك المناطق المثناه ؛ لذلك ؛ يمكن ألا تتواجد المنطقة النشطة للأنزيم في المنطقة الخطية من الجزئ ويمكن أن Yo تحتاج تلك البناءات لأن تصبح مثتاه على نمو كافي لتبلغ المركز الأنزيمي المناسب.
Yov
١١ recombinant للجيلونين ؛ من الممكن انتاج جيلونين مأشوب CDNA باستخدام تزود ب Sal ؛ يمكن أن تظهر الطفرات بصورة دقيقة في gelonin بدون المجموعات الكربوهيدراتية التي من الممكن أن تخطئ recombinant gelonin يمكن . gelonin-antibody conjugates في توجيه توافقات جسم مضاد وجيلونين عن طريق تقنية recombinant gelonin molecules انتاج جزئيات الجيلونين المأشوبة © لكي تكون ذات فعالية سمية site directed mutagenesis الطفرة الموجهه نحو الموقع كمية أكبر من الجزئ الطبيعي ؛ ولكي تصبح أكثر فعالية ذاتية عندما تلامس جسم مضاد أحادي التنسيل J fe سطح الخلية عن طريق ناقل ؛ لكي 2 WIFN-EGF-TL-2 J مستهدف ligand أو monoclonal antibody يقاوم التحلل الليسوزومي وبذلك يصبح أكثر استقرارا ويعسمل لفترة أطول ٠ toxic moiety كجزيء سمي recombinant gelonin يمكن أيضاً أن تهندس جزثئيات الجيلوتين المأشوبة لكي تحتوي على 209:00 products كمنتجات ملتحمة النوى الذرية molecules ؛ فعالية TNF المصيغات الوظيفية الأخرى لكي تقتل الخلايا مثل النشاط الأنزيمي ؛ فعالية السمية الثانوية مثل مفعول سمية الدفتيريا ( حيث تكون الفعالية الثانوية « TEND) © وبذلك تصنع سموم عليا ) السابقة عن مسارات_بيولوجية متنوعة عن الجيلونين أو سموم ذات وظائف متعددة. super toxin مع fusion proteins يمكن أن تهندس البروتينات الملتحمة النوى الذرية الجيلونين لكي تحمل أدوية مثل عوامل المعالجة بالمواد الكيميائية أو النظائر الأجل الصور بالأشعة أو المعالجبة بالإضعاع ؛ ويمكن أن تتضمن ٠ abortification algal ببتيدات الجيلونين على الاستعمال مثل على عوامل عوامل مضادة « immuno suppressive agent عوامل كبح المناعة ¢ agent anti viral agent وكعوامل مضادة للفيروسات ¢ anti cancer agent للسرطان .anti HIV agent مقثل التالية بوصف تفصيلي عن التحضير «والخصائص و A BY تمد Yo تسلسل الأحماض الأمينية لجيلونين ؛ توصف الطرق العملية المستخدمة
VY
بالتقصيل في الأمئلة الموضحة فيما بعد ؛ لا تعد تلك الأمة تحديد للبراءة بأية وسسيلة. تنقية وخصائص الجيلونين. :١ مثال sd عملياً Gelonium multiforum ينفصل الجيلونين من بذور نبات © وغيره 480١م الكيمياء الحيوية Strip للطريقة العملية الموصوفة (ستريب 1467).بإيجاز؛ يستخلص الجيلونين من البذور - 2447 Yoo Biochemistry بواسطة الطحن المتجانس في محلول ملحي منظم يمنع زيادة درجة
Aa) تركيز الهيدروجين للمحلول عند إضافة حمض أو قاعدة مول (theo الحموضة 2,4 ).يتم تركيزالرائق بعد الديلزه مع Vo فوسفات صوديوم ( درجة الحموضة 1,5 ) ؛ وينقي الجيلونين مرة أخرى كما سيلي ذكره ؛ تقيم نقاوة سم 100 exchange chromatography بواسطة بواسطة جهاز كرومانوجرافية سائل ذا ضغط عالي gelonin toxin الجيلونتين sodium dodecylsulphate- polyacylamide gel electrophoresis (SDS ىو (HPLC) كشريط مفرد مع وزن جزيئي تقريباً من gelonin toxin ؛ ينزح سم الجيلونين page) VO دالقكون. Fees = Ya, كما يلي وصفه في مثال ¥ بواسطة منع gelonin toxin تقاس فعالية سم الجيلونين تصنيع البروتين في نظام خلوي مطلق. وتطحن في طاحن ag ull وفول Gelonium multiform تقشر بذور على baie مولار كلوريد صوديوم VE متجانس مع + أحجام من Ve ؛ تترك ناتج ) ٠,4 خمسة مللي مول فوسفات صوديوم ( درجة حموضة ¢ الطحن المتجانس لمدة يوم عند درجة حرارة ؛أم مع التقليب المستمر دقيقة Ye تبرد في تلج ويطرد في جهاز طرد مركزي 0,000" لفة لمدة عند صفر مئوية.تستخرج الرائق وتتم عملية ديلزه مع * مللي مول pm 10 فوسفات صوديوم ( درجة الحموضة 6,5 ) وتركز باستخدام مرشح YO
VY
ء تتفصل العينة إلى طبقات في عمود تبادل أيوني CM - 52 - ion - exchange ٠,5 X ٠١ ( column سم ) يوازن مع 0 مللي مول فوسفات صسوديوم ( درجة حموضة 1,5 ) ؛ المادة التي تربط بالتبادل الأيوني راتتسجي سوف تنقل بالإذابة مع 400 مللي لتر من صفر إلى ؟, مول linear Nacl gradient © عند معدل YO مللي لتر ساعة عند ؛أم ؛ تجمع أجزاء ذات © لي لتر ؛ تراقب الأجزاء عند 180 نانومتر في جهاز قياس الطيف الضوئي spectrophotometer يكون الجيلونين في الأجزاء 00 — Vo وتصبح al قمة عالية للخروج.تجمع وتخزن تلك الأجزاء ؛ وتتم ديلزتها مع ١١.مولار كلوريد صوديوم في محلول منظم من ,١ مولار NaHPO; ٠ (درجة حموضة ٠,4 ) »؛ ثم توضع لعينة فيمابعد في عمود YX 74 ( cibacron blue spharose calunm سم ) ويوازن مسبقاً مع ,١ مولار ,11100و ,١ مولار Nacl منظم ويغسل العمود ب ¥ أحماض من المحلول المنظم و تخرج المادة مع 50860 مللي لتر من ملح متدرج خطبي ( من ,١ مولار 11801 إلى ,١ مولار (Nacl يلاحظ خروج بواسطة الامتزاج ٠ «هتبا» بإستخدام طريقة لوري Lowry assay لأجزاء العمود.تجمع الأجزاء المحتوية على Ad البروتين المفرد ويعمل له ديلزة لمدة يوم عند درجة حرارة 4 8م مع PBS ¢ ينقي سم الجيلونين gelonin toxin إلى درجة نقاوة تزيد عن 797 كما هو مقدراً من stained PAGE :51176.تفحص النقاوة والسوزن الجزيئي لكل تحضيسر بواسطة كروماتوجرافية سائل Je الضغط باستخدام عمود اختراق Yo هلام 3000 TSK مع ٠٠ مللي مول محلول فوسفات صسوديوم منظمء درجة حموضة ٠/4 و 7/15 من sodium dodecylsulphate-polyacylamide gel electrophoresis (SDS page) 3 ~ الجيلونين كشريط مفرد مع وزن جزيئي يقرب من 14,000 إلى Te دالتون. مثال 7: اختبار فعالية الجيلونين. vo يشير اختبار منع تصنيع بروتين مصنع خلوي على فاعلية الجيلونين ؛ يتم اختبار متع تصنيع بروتين مطلق خلوي عن طريق إضافة متعاقبة من 5٠ ميكرولتر خلايا شبكية مذابة لأرنب ) reticulocyte لاه ١
ن" «(lysate تذاب (li) في الحال قبل الاستخدام ؛ ترج بعد كل إضافة ؛ المكونات التالية ¢ ٠,8 مللي لتر من 7“١مولار Tris Hel ( درجة حموضة 4 )4.5 مللي لتر من Ales, Yo ¢ ethelene glycol لتر من ١ مولار «Hel يتكون ٠١ ميكرولتر من مخلوط نشط من ملح حمض الأمين SAEM من :- © 750,.مولار ٠١ (KCI مللي مولار و( Vo « Mg ) chico; مولار جلوكوز؛ ٠١ =a Yo مللي مولار أحماض أمينية ) باستشاء لليوسين Lecine ) © مللي مولار ٠١817 مللي مولار dle 04 » GTP مولار -138 ia) Hcl الحموضة ٠ (Vv, ١ ميك رولقتقر creatinine phosphate creatinine ¢«(Amersham, 348mCi/ mmal ) {'*c} leucene ,— ly Sue A « —phosphokinase ٠ وإضافة V,0 ميكرولتر من محاليل متضمنة على تركيزات متنوعة من مخلوط الجيلونين ؛ يحضن المخلوط لمدة 6١ دقيقة عند درجة حرارة ٠١ م. يضبط دمج Mc } leucine ) في محلول من المخلوط بواسطة ترسيب بروتين مصنع على مرشحات ليفية زجاجية ؛ ويغسل في TCA 7٠١ والاسيتون ؛ ويضبط النشاط الإشعاعي في عداد بيتا Beta-counter باستخدام alas uly Aquasol scintillation Fluid هذه التجربة ¢ VO يحتوي الجيلونين النقي على فاعلية محددة من ؛ ٠١ x وحدة/مللي جرام U/mg بروتين. وحدة فعالية الجيلونين هي كمية بروتين الجيلونين التي تحدث Jo. منع إندماج incorporation ل Mc } leucine ) من البروتين في خلية التجربة. : مثال ؟: تعيين تسلسل الأحماض الأمينية للجيلونين. يحدد تسلسل الأحماض الأمينية للجيلونين بإستخدام طريقة Edman gly Pla DU باستخدام متسلسل حمض أمين أتوماتيكي كما هو موصوف في طلب البراءة الأوربية رقم 757735. توضع الببتيدات الكبيرة والبروتين all مجزأة إلى الجزء المنعكس الوضع من حجرة تفاعل المتسلسل ؛ YO تستبعد المواد الغهير مرغوبة في المحلول المنظم بإضافة المزيد من الماء ؛ ثم تسلسل عينة البروتين أو الببتيد فيما بعد بواسطة طريقة إدمان
١ المستخلصة تحول إلى المكون ATZ الكيميائية مشتقات الحمض الأميني بواسطة 775 178 في الماء عند درجة حرارة 5م ؛ يتعرف على 2 منعكسة في عمود 1090 108 لكي يتم Ala بواسطة فصل تحليل PTH عينات الحصول على المزيد من تسلسل الحمض الأميني ؛ يهضم البروتين مع عوامل هادمة متنوعة وعوامل كيميائية متنوعة ؛ ثم ينقي الببتيد باستخدام © كرماتوجرافية سائل عالي الفاعلية.لقد وجد أن الجيلونين مقاوم تماماً عند تعرضه
Lysine and Arginin ينل فقط بعد ( Trypsin لأأزيم التربمين ؛ وجد أن البروتين (Lysine residuses ينحل فقط بعد ( acetyl trypsin و (residuses من الأنزيم. لا ترجع مقاومة الجيلونين إلى أنزيم (W/W) 75 له مقاومه إلى إلى نقص مناطق هضم التربسين proteolytic enzyme trypsin التربسين الهادم ٠ ١" لايسين و YY يحتوي الجيلونين على متبقى Cu trypsin cleavage sites إرجينين ؛ تشير تلك النتيجة إلى أنه ربما يكون الجيلونين جزيئ محكم proteolytic enzymes الرص مما يجعله غير متاح للأنزيمات الهادمة للبروتين في الوقت الذي وجد فيه أن الجيلونين مقاوم للإنحلال بواسطة الأنزيمات هادمة البروتينات ؛ فإنه يتم اختبار الإنحلال الكيميائي للبروتين. ٠
CNBr مثال 4: إنحلال الجيلونين بواسطة تضاف «formic acid V+ في ١ يذاب جيلونين محضر كما في مثال
VA إلى المحلول ؛ بعد مرور مالا يقل عن cyanogens bromide بلورة من سم ) في وضع © * pur 10) ساعة يوضع المحلول في عمود صغير Yo أو التحليل في (1.T 362:15 c-1B bonded phase cat 11 7191 - 02) منعكس ؛ ١ ملليمتر).ينتج من متدرج الخارج من ٠٠١ XE) عمود منعكس الوضع في ge مع )/ 178 في الماء © قمهم كماهو « propanol 77/6 — شكل 4 . ويكون قلسل كل قمة على حدة وأيضاً يستعمل هضسم إضافي مع الأتزيمات لكي تضم التسلسل الكلي سوياً ؛ تسلسل القمة Ye حيث phe (F) الأولى مباشرة وتعطي تسلسل يبدا بالحمض الأميني ( فينيل ألانين
Yov
يؤكد Glu (F) جزئ متبقي وتنتهي بالحمض الأميني جليوتامين YA تجبري mass spectroscopy ذلك التسلسل بواسطة المنظار الطيفي الكتلي للببتيد المعزول. تتسلسل القمة الثانية مباشرة Lyse وتهضم بواسطة وغير قابل للاختراق 47 cys حيث يستعمل val (V) وتعطي تسلسل يبدأ ب كما في Jubal) تتسلسل القمة الثالثشة وتعطي نفس cys 47 بعد Ala بعد © للقمة Lysc تصنيف Jue للقمة الثائية والثالثة SDS gel القمة الثانية . يوضح الثانية والثالثة إنه في القمة الثالثة تستمر النهاية © في 0103:0608 أيضاً ؛ ينتج من التربسين اللاحق لهضم الجيلونين بالببتيد الذي يربط عندما يسلسل التسلسل Trp يعطي ببتيد التربسين .CNBr peptide, silo
N-terminal .تعطي القمتين الرابعة والخامسة تسلسل TSGANGMFSEAVELER | ٠ ليعطي » Lysc,1/8, .ويستتخدم ذلك لبعض الهضمات بواسطة 17 . C-terminal بيبتيدات من الطرف النهائي للمجموعة الكربوكسيلية المحلل للجيلونين. cyanogen bromide لأنزيمي ل ١ مثال ه: الهضسم
Lysyl مع أنزيم CNBr ¢ أجبزا J تهضم عينات كل البروتينات
Veo SDS 7 +) ob في (Wako Chemical Dallas , Tex) ¢« endopeptidase ٠ staphylococcas Aureoos sl A حموضة da 0 Tris مللي مولار من محلول 177660207 ٠,١ في (sigma) أو تربسين SDS 7 +) في protease (pierce) وتسلسل الببتيدات المجمعة في HPLC تفصل مخاليط الهضم بواسطة gas- النموذج الأصلي للسلسلة باستخدام طرق إدمان للتسلسل في الطور الغازي -phase Edman sequencing method مثال 6: تسلسل الأحماض الأمينية لجيلونين. سلسلة حمض أميني متبقية بالتحليل التالي من الأجبزاء YOA ينتج ما مجموعه يحتوي ٠ تسلسل الأحماض الأمينية لجيلونين ١ في مثال . يوضح شكل LS CNBr من تسلسل DNA الجيلونين على 758 حمض أميني متبقي تقريباً. يستدل على تسلسل ©
VY
الأحماض الأمينية ¢ يوضح تسلسل DNA المنحل degenerate DNA في شكل JS .١ هذه الطرق السابقة والتي ذكرت تسلسل الأحماض الأمينية للجيلونين وتسلسل DNA من الممكن أن تثبط تصنيع بروتين خلوي ولكن لا ترتبط مع مستقبلات سطح الخلية. ° وبذلك تصبح البراءة ALS الوصف ٠ وإنه لمن الواضح إلى أي من الخبراء في المجال أنه يمكن عمل بعض التحورات والتغيرات له وبدون الخروج عن روح ومجال البراءة كما سيلي وصفه. ١ لا
Claims (1)
- YA منقى فعلياً له تسلسل الأحماض الأمينية gelonin toxic عامل التسمم جيلونين =) ١ : amino acid Gly Leu Asp Thr Val Ser Phe Ser Thr Lys Gly Ala Thr Tyr Ile ThrTyr Val Asn Phe Leu Asn Glu Leu Arg Val Lys Leu Lys Pro Glu GlyAsn Ser His Gly Ile Pro Leu Leu Arg Lys Gly Asp Asp Pro Gly LysCys Phe Val Leu Val Ala Leu Ser Asn Asp Asn Gly Gln Leu Ala Gl 60 Ie Ala ع1 Asp Val Thr Ser Val Tyr Val Val Gly Tyr Gln Val Arg 65 70 75 80 Asn Arg Ser Tyr Phe Phe Lys Asp Ala Pro Asp Ala Ala Tyr Glu Gly 85 90 95 Leu Phe Lys Asn Thr Ile Lys Asn Pro Leu Leu Phe Gly Gly Lys Thr 100 105 110 Y Arg Leu His Phe Gly Gly Ser Tyr Pro Ser Leu Glu Gly Glu Lys Ala 115 : 120 125 : Tyr Arg Glu Thr Thr Asp Leu Gly Ile Glu Pro Leu Arg Ile Gly Iie 130 135 140 Lys Lys Leu Asp Glu Asn Ala Ile Asp Asn Tyr Lys Pro Thr Glu Ile 145 150 155 160 Ala Ser Ser Leu Leu Val Val Ile Gln Met Val Ser Glu Ala Ala Arg 165 170 175 Phe Thr Phe Ile Glu Asn Gln Ile Arg Asn Asn Phe Gin Gln Arg lle 180 185 190 Arg Pro Ala Asn Asn Thr 1[ Ser Leu Glu Asn Lys Trp Gly Lys Leu 195 200 205 Ser Phe Gin Tle Arg Thr Ser Gly Ala Asn Gly Met Phe Ser Glu Ala } 210 215 220 Val Glu Leu Glu Arg Ala Asn Gly Lys Lys Tyr Tyr Val Thr Ala Val , 225 230 235 240 Asp Gln Val Lys Pro Lys Ile Ala Leu Leu Lys Phe Val Asp Lys Asp 245 250 255 : Pro Glu تحمل الأجزا ء السسابقة والمشتقات ٠ ese مشتقات sel eal او Y cellular protein الخلوي Ct gall السابقة لها فعالية تمنع تصنيع ¢ ٠ acell surface receptor ولكنها لا ترتبط إلى مستقبلات سطح الخلية ٠. \oV. له الصيغة التالية DNA Jd -Y \ GGNYINGAYA CNGTNWSNTT YWSNACNAAR GGNCCNACNT AYATHACNTA YGTINAAYTTY د YTNAAYGARY TNMGNGTNAA RYTNAARCCN GARGGNAAYW SNCAYGGNAT BCCNYTNYIN 120 MGNAARGGNF AYGAYCCNGG NAARTGYTTY GINYINGTNG CNYTNWSNAA YGAYAAYGGN 180 CARYTNGCNG ~~ ARATHGCNAT BGAYGINACN WSNGTNTAYG TNGTNGGNTA YCARGINMGN 0AAYMGNWSNT = AYTTYTTYAA RGAYGCNCCN GAYGCNGCNT AYGARGGNYT NTTYAARAAY 300 ¥ ACNATHAARA ~~ AYCCNYTNYT NTTYGGNGGN AARACNMGNY TNCAYTTYGG NGGNWSNTAY 0 CCNWSNYTNG ~ ARGGNGARAA RGCNTAYMGN GARACNACNG AYYTNGGNAT HGARCCNYTN 0 MGNATHGGNA THAARAARYT NGAYGARAAY GCNATHGAYA AYTAYAARCC NACNGARATH 0 GCNWSNWSNY TNYINGTNGT NATHCARATG GTNWSNGARG CNGCNMGNTT YACNTTYATH 540 GARAAYCARA THMGNAAYAA YTTYCARCAR MGNATHMGNC CNGCNAAYAA YACNATHWSN 0 YTINGARAAYA ARTGGGGNAA RYTINWSNTTY CARATHMGNA CNWSNGGNGC NAAYGGNATG 660 TTYWSNGARG ~~ CNGTNGARYT NGARMGNGCN AAYGGNAARA ARTAYTAYGT NACNGCNGIN 0 GAYCARGTNA ARCCNAARAT HGCNYTNYTN AARTTYGTNG AYAARGAYCC NGAR 774v حيث أنR=AoG K=GorT N = any ¢Y=CorT M=AorC 5 =CorG °B=C G orT V =A CoG W=AorT 1D=A G oT H=A CoT X = unknown 7A أو اجزا ء أو مشتقات منها » تحمل الأجزا السابقة ومشتقاتها شفرة4 الجيلونين gelonin أو عديد الببتيد polypeptide والتي تحتوي على الفعاليةVe التي تمنع تصتيع البروتين الخلوي cellular protein ولكنها لا ترتبط إلى: + acell surface receptor مستقبلات سطح الخلية ١
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US56722090A | 1990-08-14 | 1990-08-14 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA92130322B1 true SA92130322B1 (ar) | 2004-05-25 |
Family
ID=24266242
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA92130322A SA92130322B1 (ar) | 1990-08-14 | 1992-12-30 | التسلسل البروتيني لعامل التسمم النباتي جيلونين |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5631348A (ar) |
| EP (1) | EP0546087B1 (ar) |
| JP (1) | JPH06502847A (ar) |
| KR (1) | KR100220502B1 (ar) |
| CN (1) | CN1055123C (ar) |
| AT (1) | ATE150791T1 (ar) |
| CA (1) | CA2088068C (ar) |
| DE (1) | DE69125381T2 (ar) |
| DK (1) | DK0546087T3 (ar) |
| ES (1) | ES2100960T3 (ar) |
| FI (1) | FI112492B (ar) |
| GR (1) | GR3023593T3 (ar) |
| HK (1) | HK1006727A1 (ar) |
| IE (1) | IE912716A1 (ar) |
| IL (1) | IL99079A (ar) |
| NO (1) | NO309656B1 (ar) |
| NZ (1) | NZ239249A (ar) |
| PT (1) | PT98669B (ar) |
| RU (1) | RU2104285C1 (ar) |
| SA (1) | SA92130322B1 (ar) |
| WO (1) | WO1992003144A1 (ar) |
| ZA (1) | ZA916171B (ar) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ZA912490B (en) * | 1990-04-19 | 1992-12-30 | Res Dev Foundation | Antibody conjugates for treatment of neoplastic disease |
| IE912716A1 (en) | 1990-08-14 | 1992-02-26 | Res Dev Foundation | Protein Structure of the Plant Toxin Gelonin |
| RU2142015C1 (ru) * | 1991-09-06 | 1999-11-27 | Рисерч Дивелопмент Фаундейшн | Фрагмент днк, кодирующий белок гелонина, и способ его получения, вектор, обеспечивающий экспрессию белка гелонина, рекомбинантный штамм e.coli - продуцент белка гелонина |
| US6146850A (en) * | 1991-11-04 | 2000-11-14 | Xoma Corporation | Proteins encoding gelonin sequences |
| US5621083A (en) * | 1991-11-04 | 1997-04-15 | Xoma Corporation | Immunotoxins comprising ribosome-inactivating proteins |
| US5837491A (en) * | 1991-11-04 | 1998-11-17 | Xoma Corporation | Polynucleotides encoding gelonin sequences |
| US6599505B1 (en) * | 1992-04-10 | 2003-07-29 | Research Development Foundation | Immunotoxins directed against CD33 related surface antigens |
| US5684129A (en) * | 1992-07-07 | 1997-11-04 | Fish; Eleanor N. | Interferon receptor binding peptides |
| ZA200305980B (en) * | 2001-02-12 | 2007-01-31 | Res Dev Foundation | Modified proteins, designer toxins, and methods of making thereof |
| IL159894A0 (en) * | 2001-07-17 | 2004-06-20 | Res Dev Foundation | Therapeutic agents comprising pro-apoptotic proteins |
| US20040013691A1 (en) * | 2002-06-12 | 2004-01-22 | Rosenblum Michael G. | Immunotoxin as a therapeutic agent and uses thereof |
| AU2006210769A1 (en) * | 2005-02-01 | 2006-08-10 | Research Development Foundation | BLyS fusion proteins for targeting BLyS receptor and methods for treatment of B-cell proliferative disorders |
| WO2014127211A1 (en) | 2013-02-15 | 2014-08-21 | Research Development Foundation | Deimmunized gelonin molecules and therapies |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4446240A (en) * | 1981-01-30 | 1984-05-01 | Nerenberg Samuel T | Pancreas specific protein systems |
| US4921802A (en) * | 1983-05-05 | 1990-05-01 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Plant virus cDNA |
| US4888415A (en) * | 1985-03-04 | 1989-12-19 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Gelonin immunotoxin |
| US4810648A (en) * | 1986-01-08 | 1989-03-07 | Rhone Poulenc Agrochimie | Haloarylnitrile degrading gene, its use, and cells containing the gene |
| EP0341304A4 (en) | 1987-11-24 | 1991-01-30 | Genetics Institute, Inc. | Improved ricin molecules and ricin toxin conjugates |
| GB8801877D0 (en) * | 1988-01-28 | 1988-02-24 | Erba Carlo Spa | Nucleotide sequence encoding plant ribosome inactivating protein |
| IE62463B1 (en) * | 1988-07-07 | 1995-02-08 | Res Dev Foundation | Immunoconjugates for cancer diagnosis and therapy |
| IE912716A1 (en) | 1990-08-14 | 1992-02-26 | Res Dev Foundation | Protein Structure of the Plant Toxin Gelonin |
-
1991
- 1991-07-31 IE IE271691A patent/IE912716A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-08-02 NZ NZ239249A patent/NZ239249A/xx not_active IP Right Cessation
- 1991-08-05 IL IL9907991A patent/IL99079A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-08-06 ZA ZA916171A patent/ZA916171B/xx unknown
- 1991-08-13 PT PT98669A patent/PT98669B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-08-14 ES ES91917004T patent/ES2100960T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-08-14 RU RU93005126A patent/RU2104285C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1991-08-14 KR KR1019930700412A patent/KR100220502B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-08-14 JP JP3515854A patent/JPH06502847A/ja active Pending
- 1991-08-14 DE DE69125381T patent/DE69125381T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-08-14 AT AT91917004T patent/ATE150791T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-08-14 EP EP91917004A patent/EP0546087B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-08-14 CN CN91105802A patent/CN1055123C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1991-08-14 WO PCT/US1991/005766 patent/WO1992003144A1/en active IP Right Grant
- 1991-08-14 CA CA002088068A patent/CA2088068C/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-08-14 DK DK91917004.3T patent/DK0546087T3/da active
-
1992
- 1992-12-30 SA SA92130322A patent/SA92130322B1/ar unknown
-
1993
- 1993-02-08 NO NO930428A patent/NO309656B1/no not_active IP Right Cessation
- 1993-02-12 FI FI930626A patent/FI112492B/fi active
-
1994
- 1994-06-06 US US08/254,662 patent/US5631348A/en not_active Ceased
-
1997
- 1997-05-30 GR GR970401236T patent/GR3023593T3/el unknown
-
1998
- 1998-06-23 HK HK98106041A patent/HK1006727A1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-05-20 US US09/316,071 patent/USRE37462E1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4558935B2 (ja) | 粘液過剰分泌の治療のための組換えボツリヌス菌毒素 | |
| CN103987728B (zh) | 抗癌融合蛋白 | |
| SA92130322B1 (ar) | التسلسل البروتيني لعامل التسمم النباتي جيلونين | |
| JP2635035B2 (ja) | Ｃｙｓコドン修飾ＤＮＡ | |
| JPH07506842A (ja) | 二本鎖を有する非毒性リボソーム不活性化蛋白（ｒｉｐ），その製法および適用 | |
| JPH09509043A (ja) | 植物ブリオニア・ディオイカから単離された新規なリボソーム不活性化タンパク質 | |
| US4985541A (en) | Novel cytotoxic protein | |
| JP2001511122A (ja) | 新規な上皮組織標的化薬剤 | |
| CN106279404A (zh) | 一种可溶且稳定的异质二聚tcr | |
| Choe et al. | B3 (Fab)-PE38M: a recombinant immunotoxin in which a mutant form of Pseudomonas exotoxin is fused to the Fab fragment of monoclonal antibody B3 | |
| US8344109B2 (en) | Anti-ricin antibody | |
| Bidard et al. | Immunological and biochemical characterization of processing products from the neurotensin/neuromedin N precursor in the rat medullary thyroid carcinoma 6–23 cell line | |
| CN111363048B (zh) | 一种具有穿膜活性的可溶性重组苦荞金属硫蛋白FtMT及其制备方法 | |
| WO2010022639A1 (zh) | 靶特异性双突变体融合蛋白质 | |
| US5149528A (en) | Cytotoxic protein from Trichosanthes kirilowii | |
| JPH10505835A (ja) | 特定の細胞型への化学試薬の細胞内送達 | |
| JPH03504729A (ja) | マルトースに対して親和性のある物質（ＭａｌＥ）と、ＨＩＶウイルスに対する中和特性を有するＣＤ４タンパク質フラグメントとの融合によって生じた融合ＣＤ４ポリペプチド | |
| AU653365C (en) | Protein structure of the plant toxin gelonin | |
| GB2194241A (en) | Inhibitor of protein synthesis | |
| WO2012091590A1 (en) | A recombinant cytotoxin as well as a method of producing it | |
| GB2194948A (en) | Inhibitor of protein synthesis | |
| JPH0335793A (ja) | 修正されたｐｅ↓４↓０の産生 | |
| Gawinowicz et al. | Amino acid sequence of the FV region of a human monoclonal IgM (NOV) with specificity for the capsular polysaccharide of the group B meningococcus and of Escherichia coli K1, which cross-reacts with polynucleotides and with denatured DNA. | |
| Tonevitsky et al. | A new gene encoding the ribosome-inactivating protein from mistletoe extracts | |
| KR970009354B1 (ko) | 모티린형 폴리펩티드 및 그 용도 |