SA515360933B1 - نظير إنسولين جديد واستخدامه - Google Patents

نظير إنسولين جديد واستخدامه Download PDF

Info

Publication number
SA515360933B1
SA515360933B1 SA515360933A SA515360933A SA515360933B1 SA 515360933 B1 SA515360933 B1 SA 515360933B1 SA 515360933 A SA515360933 A SA 515360933A SA 515360933 A SA515360933 A SA 515360933A SA 515360933 B1 SA515360933 B1 SA 515360933B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
insulin
immunoglobulin
conjugate
group
region
Prior art date
Application number
SA515360933A
Other languages
English (en)
Inventor
ميونج هيون جانج
سونج يوب جونج
ان يونج شوى
سى شانج كون
جين يونج كيم
دى جين كيم
سيونج سو كيم
هيون يو كيه كيم
يونج هو هاه
سانج يون هاوانج
سونج هى هونج
Original Assignee
هانمي فارم. كو.، ليمتد‏
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by هانمي فارم. كو.، ليمتد‏ filed Critical هانمي فارم. كو.، ليمتد‏
Publication of SA515360933B1 publication Critical patent/SA515360933B1/ar

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/62—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بنظير إنسولين insulin analog يتضمن عيار إنسولين مخفض reduced insulin titer وألفة ارتباط reduced insulin receptor مستقبل إنسولين مخفضة reduced insulin receptor مقارنة بالصورة الأصلية بغرض زيادة عمر النصف لإنسولين half-life of insulin الدم، مركب مترافق conjugate محضر بواسطة ربط نظير الإنسولين ومادة حاملة carrier، صيغة طويلة المفعول long-acting formulation تتضمن المركب المترافق، وطريقة لتحضير المركب المترافق. شكل 6

Description

— \ — نظير إنسولين جديد واستخدامه ‎Novel insulin analog and use thereof‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بنظير إنسولين 808109 105110 يتضمن عيار إنسولين مخفض ‎reduced‏ ‎insulin titer‏ وألفة ارتباط ‎binding affinity‏ مستقبل إنسولين ‎reduced insulin aids‏ ‎receptor‏ مقارنة بالصورة الأصلية بغرض زيادة عمر النصف لإنسولين الدم ‎blood half-life‏ ‎cof insulin 5‏ مركب مترافق ‎conjugate‏ محضر بواسطة ربط نظير الإنسولين ومادة حاملة ‎ccarrier‏ صيغة طويلة المفعول ‎formulation‏ 100-8011709 تتضمن المركب المترافق» وطريقة لتحضير المركب المترافق. البروتينات في الكائن الحي ‎Vivo proteins‏ معروفة بأنه يتم استبعادها عبر مسارات ‎routes‏ ‏مختلفة؛ ‎Jie‏ التدهور ‎degradation‏ بواسطة إنزيمات التحلل البروتيني ‎proteolytic enzymes‏ 0 في الدم؛ افرازات ‎kidney KI excretion‏ أو التصفية ‎clearance‏ بواسطة المستقبلات ‎receptors‏ بالتالي؛ هناك العديد من الجهود التي تم بذلها من أجل تحسين الفعالية العلاجية ‎therapeutic efficacy‏ بواسطة تجنب ‎oll‏ تصفية البروتين ‎protein clearance‏ ‎mechanisms‏ وزيادة عمر النصف للبروتينات النشطة فسيولرجيا ‎physiologically active‏ ‎.proteins‏ ‏5 على الناحية ‎(AY‏ الإنسولين ‎insulin‏ عبارة عن هرمون ‎hormone‏ إفرازه بواسطة بنكرياس الجسم البشري ‎chuman body‏ والذي ينظم مستويات جلوكوز الدم ‎blood glucose‏ 5 ويلعب دورا في الحفاظ على مستويات جلوكوز الدم أثناء حمل الجلوكوز الفائض ‎surplus‏ ‏686 في الدم إلى خلايا ‎cells‏ لتوفير الطاقة ‎energy‏ للخلايا. بالنسبة لمرضى السكري ‎«diabetic patients‏ مع ذلك؛ لا يعمل الإنسولين بشكل مناسب بسبب نقص الإنسولين؛ مقاومة ‎resistance 20‏ الإنسولين» ونقص وظيفة الخلية بيتا ‎function‏ ال9©-0618 وبالتالي لا يمكن استخدام الجلوكوز في الدم كمصدر للطاقة ‎source‏ لا60619 ويرتفع مستوى الجلوكوز في الدم ‎blood‏ ‏بد
ا
ا©187| 01106056؛ بما يؤدي إلى فرط سكر الدم ‎.hyperglycemia‏ بالأخيرء يتم الإفراز البولي ‎curinary excretion‏ الذي يساهم في تطوير العديد من المضاعفات 00000116816005._بالتالي؛ يكون علاج الإنسولين ‎insulin therapy‏ ضروريا من أجل خلل في إفراز الإنسولين ‎abnormal‏ ‎insulin secretion‏ (النوع ‎)١‏ أو مقاومة الإنسولين ‎insulin resistance‏ (النوع ‎(Il‏ ويمكن أن يتم تنفيذ مستويات جلوكوز الدم بشكل طبيعي بواسطة إعطاء الإنسولين ‎insulin administration‏ مع ‎Jie «lh‏ بروتين 0001610 وهرمونات ببتيدية ‎«sal peptide hormones‏ كان الإنسولين قصير الوجود في الكائن الحي؛ وبالتالي كان له عيب الإعطاء المتكرر ‎repeated‏ ‎administration‏ هذا الإعطاء المتكرر يسبب ألم حاد ‎pain‏ 5617616 وعدم ‎dal)‏ للمرضى. لهذا السبب؛ من أجل تحسين بقاؤه بواسطة زيادة في الكائن الحي عمر النصف للبروتين وتقليل 0 تكرارية الإعطاء ‎cadministration frequency‏ وهناك العديد من الدراسات التي أجريت على صيغة البروتين ‎protein formulation‏ والترافق الكيميائي ‎chemical conjugation‏ (مركب حمض دهني مترافق ‎cfatty acid conjugate‏ مركب بوليمر بولي ‎cli)‏ مترافق ‎polyethylene‏ ‎«(polymer conjugate‏ يتضمن الإنسولين طويل المدى ‎long-acting insulin‏ المتاح تجاريا إنسولين جالارجين 91819106 105110 بواسطة ‎Sanofi Aventis‏ (لانتوس ‎clantus‏ المستمر لمدة 5 تصل إلى ‎77-٠7١‏ ساعة)؛ وانسولين ديتيمير ‎insulin detemir‏ (ليفيمير ‎levemir‏ الذي يستمر لمدة تصل إلى حوالي ‎77-١8‏ ساعة) وتريسيبا ‎tresiba‏ (ديجلوديك ‎cdegludec‏ الذي يستمر لمدة تصل إلى حوالي ‎٠‏ ساعة) المصنع بواسطة ‎Novo Nordisk‏ لا تقوم صيغ الإنسولين طويل المدى ‎insulin formulations‏ 801109 0179| بإنتا ج قمم 06816 في تركيزات إنسولين الدم ‎blood‏ ‎Sally 5cinsulin concentration‏ يمكن أن تكون مناسبة كإنسولين أساسي ‎-basalinsulin‏ مع 0 ذلك؛ لأن هذه الصيغ لا تتضمن ‎jee‏ نصف طويل بشكل مناسب؛ يكون العيب هو استخدام واحدة أو اثنين من الحقن ‎injections‏ اليومية. بالتالي؛ هناك تقييد في الحصول على الهدف المقصود وهو تنفيذ تقليل إعطاء بشكل ملحوظ لتحسين ملائمة مرضى السكري الذين هم في حاجة إلى
الإعطاء طويل المدى ‎long-term administration‏ أشار البحث السابق إلى عملية تصفية ‎clearance process‏ معينة في الكائن الحي إنسولين؛ تتم ‎75٠ al) 5‏ أو أكثر من الإنسولين في الكبد وتتم إزالة ما يتبقى عبر عملية تصفية يتوسط فيها مسنقل
بد
— ¢ —
‎(RMC) receptor mediated clearance‏ في المواقع المستهدفة ‎target sites‏ مثل العضل
‎imuscle‏ الدهون ‎fat‏ الكبد ‎diver‏ إلخ.
‏في هذا الشأن؛ أشارت عدة دراسات؛ تتضمن ,959 :286 )1998( ‎J Pharmacol Exp Ther‏
‎(Diabetes Care (1990) 13: 923, Diabetes (1990) 39: 1033‏ إلى أن النشاط في
‏5 المعمل قد تم تقليله لتجنب تصفية يتوسط فيها مستقل للإنسولين؛ وبالتالية زيادة مستوى ‎blood all‏
‎level‏ مع ذلك؛ لا يمكن لنظائر الإنسولين ‎insulin analogs‏ التي لها ألفة ارتباط مستقبل
‎receptor binding affinity‏ مخفضة أن تتجنب التصفية الكلوية ‎clearance‏ ا618؟ والتي هي
‏آلية التصفية الأساسية ‎main clearance mechanism‏ على الرغم من تقليل تصفية يتوسط فيها
‏مستقل. بالتالي؛ كان هناك ‎ad‏ على الزيادة الملحوظة في عمر النصف للدم ‎.blood half-life‏ 10 بناء على هذه الخلفية؛ بذل المخترعون جهود من أجل زيادة عمر النصف لإنسولين ‎Lad)‏ نتيجة
‎«lI‏ وجدوا أن ثمة نظير إنسولين ‎novel insulin analog was‏ لا يتضمن متواليات إنسولين
‏أصلية ‎native insulin sequence‏ ولكن يبين متوالية إنسولين غير أصلية ‎non-native‏
‎insulin sequence‏ تبين معايرة أقل في المعمل ‎reduced in-vitro titer‏ وألفة ارتباط مستقبل
‏إنسولين مخفضة؛ وبالتالي؛ يمكن تقليل التصفية الكلوية له. ويمكن أيضا إيجاد أن ‎jee‏ النصف ا لإنسولين الدم يمكن أن تتم زيادتها أيضا بواسطة ربط نظير الإنسولين بشظية ‎fragment‏ جلوبولين
‏مناعي ‎immunoglobulin‏ اف سى © كمادة حاملة فعالة لتحسين ‎jee‏ النصف؛ وبالتالي
‏إكمال الاختراع الحالي.
‏الوصف العام للاختراع
‏أحد أهداف الاختراع الحالي هو توفير نظير إنسولين محضر ليتم تقليله في المعايرة في المعمل بغرض إطالة عمر نصف الإنسولين في الكائن الحي ¢ ومركب مترافق محضر ‎dad gs‏ ربط مادة
‏حاملة به.
‏تحديداء أحد أهداف الاختراع الحالي هو توفير نظير إنسولين يتضمن عيار إنسولين مخفض؛ مقارنة
‏بالصورة الأصلية.
‏بد
‎Qo _‏ _ ثمة هدف آخر للاختراع الحالي هو توفير مركب نظير إنسولين مترافق محضر بواسطة ربط نظير الإنسولين بالمادة الحاملة. ثمة هدف آخر أيضا للاختراع الحالي هو توفير صيغة إنسولين طويل المدى تتضمن المركب المترافق لنظير الإنسولين.
‏5 ثمة هدف آخر أيضا للاختراع الحالي هو توفير طريقة لتحضير المركب المترافق لنظير الإنسولين. ثمة هدف آخر أيضا للاختراع الحالي هو توفير طريقة لزيادة عمر النصف في الكائن الحي باستخدام نظير الإنسولين أو المركب المترافق لنظير الإنسولين محضر بواسطة ربط نظير الإنسولين بالمادة الحاملة. ثمة هدف ‎AT‏ أيضا للاختراع الحالي هو توفير طريقة لعلاج الأمراض المرتبطة بالإنسولين
‎cinsulin-related diseases 0‏ تتضمن خطوة إعطاء نظير الإنسولين أو المركب المترافق لنظير الإنسولين إلى خاضع ‎subject‏ في حاجة له. في أحد الجوانب»؛ لتحقيق الأهداف المذكورة أعلاه؛ يوفر الاختراع الحالي نظير إنسولين يتضمن عيار إنسولين مخفض؛ مقارنة بالصورة الأصلية؛ حيث يتم تعديل حمض أميني ‎acid‏ 811100 من السلسلة 8 أو سلسلة ‎A‏
‏5 في أحد النماذج المعينة؛ يوفر الاختراع الحالي نظير إنسولين يتضمن ألفة ارتباط مستقبل إنسولين 244 مخفضة. في نموذج ‎AT‏ معين؛ يوفر الاختراع الحالي نظير إنسولين غير أصلي؛ حيث تم اختيار حمض أميني واحد من المجموعة التي تتكون من حمض أميني ثامن» حمض أميني ثالث وعشرين» حمض أميني رابع وعشرين ¢ وحمض أميني خامس وعشرين من السلسلة ‎B‏ وحمض أميني أول حمض
‏0 أميني ثاني؛ وحمض أميني تاسع عشر من السلسلة ‎A‏ مستبدل بألانين ‎calanine‏ أو التي يتم ‎led‏ ‏استبدال الحمض الأميني الرابع عشر من السلسلة ‎A‏ بحمض الجلوتاميك ‎glutamic acid‏ أو الأسباراجين ‎asparagine‏ في نظير الإنسولين وفقا للاختراع الحالي.
‎yey
— أ — في أحد النماذ ‎z‏ المعينة أيضا يوفر الاختراع الحالي نظير إنسولين ¢ حيث نظير الإنسولين وفقا للاختراع الحالي تم اختياره من المجموعة التي تتكون من متواليات بأرقام هوية. ‎YE 77 ١‏ ‎JUVE YY (Ve (YA YT‏ في جانب ‎AT‏ يوفر الاختراع الحالي مركب نظير إنسولين مترافق محضر بواسطة ربط نظير إنسولين المذكور أعلاه ‎sale‏ حاملة قادرة على ‎pee A)‏ النصف. في أحد النماذج المعينة؛ يوفر الاختراع الحالي مركب نظير إنسولين مترافق» حيث المركب المترافق لنظير الإنسولين محضر بواسطة ربط )1( نظير إنسولين المذكور أعلاه ‎(ii)‏ منطقة ‎region‏ ‏جلوبولين مناعي ‎Fc immunoglobulin‏ عبر ‎Ly, (iii)‏ ببتيد ‎peptide linker‏ أو رابط من نوع غير ببتيديل ‎anon—peptidyl linker‏ تم اختياره من المجموعة التي تتكون من بولي إيثيلين جليكول ‎Js «polyethylene glycol 0‏ بروبيلين جليكول ‎(polypropylene glycol‏ بوليمرات مشتركة ‎cOpolymers‏ من ‎pli)‏ جليكول-بروبيلين جليكول ‎«ethylene glycol—-propylene glycol‏ بوليولات معالجة ببولي أوكسي إيثيل ‎(polyoxyethylated polyols‏ كحولات بولي فينيل ‎«polyvinyl alcohols‏ بولي سكاريدات ‎polysaccharides‏ ديكستران 06081؛ بولي فينيل إيثيل إيثر؛ بوليمرات قابلة للتحلل البيولوجي ‎biodegradable polymers‏ بوليمرات د هنية ‎lipid‏ ‏5 0615لاا0م.؛ كيتينات 001005؛ حمض هيالورونيك ‎chyaluronic acid‏ وتوليفات مما سبق. في جانب ‎AT‏ أيضاء يوفر الاختراع الحالي صيغة إنسولين طويل المدى تتضمن نظير إنسولين المذكور أعلاه مركب مترافق؛ حيث تتم زيادة المدة والثبات في الكائن الحي. في أحد النماذج المعينة؛ يوفر الاختراع ‎Jal‏ صيغة طويلة المفعول والتي يتم استخدامها لعلاج السكري ‎treatment of diabetes‏ في نموذج آخرء يوفر الاختراع الحالي طريقة لتحضير نظير إنسولين المذكور أعلاه مركب مترافق. في أحد النماذج المعينة أيضاء يوفر الاختراع الحالي طريقة لزيادة ‎pee‏ النصف في الكائن الحي باستخدام نظير الإنسولين أو المركب المترافق لنظير الإنسولين محضر بواسطة ربط نظير الإنسولين والمادة الحاملة. بد
في أحد النماذج المعينة أيضاء يوفر الاختراع الحالي طريقة لعلاج الأمراض المرتبطة بالإنسولين؛ تتضمن خطوة إعطاء نظير الإنسولين أو المركب المترافق لنظير الإنسولين إلى خاضع في حاجة له. لآثار المفيدة نظير إنسولين غير أصلي وفقا للاختراع الحالي له عيار إنسولين مخفض وألفة ارتباط مستقبل
إنسولين مخفضة؛ مقارنة بالصورة الأصلية؛ وبالتالي يتجنب آليات التصفية في الكائن الحي. بالتالي؛ يتضمن نظير الإنسولين عمر نصف للدم مطول في الكائن ‎all‏ ومترافق نظير إنسولين-جلوبولين مناعي 0اا05ا808109-100000009 ‎insulin‏ © محضر بواسطة باستخدامه يبين عمر نصف للدم مطول بشكل ملحوظ؛ وبالتالي يتم تحسين ملائمته لمرضى في حاجة لإعطاء الإنسولين.
0 شرح مختصر للرسومات الشكل ‎١‏ يبين نتيجة تحليل نقاء ‎purity‏ نظير إنسولين بواسطةة رحلان البروتين ‎protein‏ ‎celectrophoresis‏ والتي تكون نتيجة لنظير الانسولين التمثيلي ‎representative insulin‏ 9 النظير رقم ‎١‏ (الخط ‎:١‏ مرقم حجم؛ الخط ؟: إنسولين أصلي ‎cnative insulin‏ الخط ‎oY‏ نظير إنسولين (رقم ٠)؛‏
5 الشكل ¥ يبين نتيجة تحليل نقاء لنظير إنسولين بواسطة كروماتوجراف ‎Je‏ الضغط ‎high‏ ‎cpressure chromatography‏ والتي تكون نتيجة لنظير الانسولين التمثيلي؛ النظير رقم 7 ‎A)))‏ ‎¢((B) SE-HPLC (RP-HPLC‏ الشكل © يبين نتيجة تخطيط ببتيد ‎peptide mapping‏ لنظير إنسولين؛ والتي تكون نتيجة لنظير الانسولين التمثيلي؛ النظير رقم ‎(A) ١‏ إنسولين أصلي؛ ‎(B)‏ نظير إنسولين ‎(VA)‏
الشكل ؛ يبين نتيجة تحليل نقاء لمترافق نظير إنسولين-جلوبولين مناعي © بواسطة رحلان البروتين ¢ والتي تكون نتيجة لنظير الانسولين التمثيلي النظير رقم ‎Y‏ (الخط 1: مرقم حجم ‎+٠‏ الخط ": مترافق نظير إنسولين (رقم ١)-جلوبولين‏ مناعي ‎{Fe‏
بد
— A —
الشكل © يبين نتيجة تحليل نقاء لمترافق نظير إنسولين-جلوبولين مناعي ‎FO‏ بواسطة كروماتوجراف ‎Je‏ الضغط؛ والتي تكون نتيجة لنظير الانسولين التمثيلي؛ النظير رقم ‎«(RP-HPLC (A)) ١‏
‎¢(IE-HPLC (C) «SE-HPLC (B)‏ و الشكل 1 يبين نتيجة تحليل الخواص الصيدلانية الحركية ‎pharmacokinetics‏ لمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي 10510-10100090 ‎Fe native‏ ومترافق نظير إنسولين- جلوبولين مناعي ‎AFC‏ جرذان طبيعية ‎101108١1815‏ والتي تكون نتيجة لنظير الاتسولين التمثيلي؛ النظير رقم ‎١‏ (0: مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fe‏ (7, ؟ نانومول/كجم)؛ ©: مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي © )10,1 نانومول/كجم)؛ 10 مترافق نظير إنسولين-جلوبولين مناعي ‎AR ,١( Fc‏ نانومول/كجم)؛ | مترافق نظير إنسولين -جلوبولين مناعي ‎Fc‏ ) )10
‏10 نانومول/كجم). ‎(A)‏ مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ©" ومترافق نظير إنسولين (رقم )- جلوبولين مناعي ‎Fe‏ (8) مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎FC‏ ومترافق نظير إنسولين (رقم 4)-جلوبولين مناعي ‎(C) Fe‏ مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ومترافق نظير إنسولين (رقم 1)-جلوبولين مناعي ‎(FC‏ ‏الوصف ‎١‏ لتفصيلي:
‏5 يتعلق الاختراع الحالي بنظير إنسولين يتضمن معايرة مخفضة في الكائن ‎reduced 10- all‏ ‎titer‏ 100/. يتسم نظير الإنسولين هذا يتسم بأنه يتضمن متواليات الإنسولين غير الأصلي وبالتالي؛ يكون لها ألفة ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة؛ مقارنة بالإنسولين ا لأصلي ؛ وبالتالي؛ يتم تقليل التصفية التي يتوسط فيها المستقبل بشكل ملحوظ بواسطة الانفصال الثابت المتزايد ‎increased‏ ‎constant‏ 015500181100؛ بما يسفر عن زيادة في عمر نصف للدم.
‏20 حسب ما هو مستخدم » يتضمن المصطلح "نظير إنسولين" نظائر مختلفة لها عيار إنسولين مخفض ‘ مقارنة بالصورة الأصلية. يمكن أن يكون نظير الإنسولين عبارة عن نظير إنسولين يتضمن عيار إنسولين مخفض؛ مقارنة بالصورة الأصلية؛ حيث يتم تعديل حمض أميني من السلسلة 8 أو سلسلة ‎A‏ للإنسولين. سوف تكون متواليات الحمض الأميني للإنسولين الأصلي كما يلي.
‏بد
— q —
-سلسلة ‎A‏ ‎Gly-lle-Val-Glu-GIn-Cys-Cys-Thr-Ser-lle-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-‏ ‎Glu-Asn-Tyr-Cys—Asn‏ (متوالية برقم هوية ‎(YY‏ ‏-سلسلة 8:
‎Phe-Val-Asn-GIn-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu- 5‏ ‎Tyr-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly—Phe—-Phe-Tyr-Thr-Pro—Lys-Thr‏ ‏(متوالية برقم هوية ‎(FA‏ ‏نظير الإنسولين المستخدم في الأمثلة وفقا للاختراع الحالي عبارة عن نظير إنسولين محضر بواسطة تقنية ‎sale)‏ توليف جينية ‎.genetic recombination technique‏ مع ذلك؛ لا يقتصر الاختراع
‏0 الحالي عليه؛ ولكنه يتضمن كل مركبات الإنسولين ‎insulins‏ التي لها معايرة مخفضة في الكائن الحي. بشكل مفضل؛ يمكن أن يتضمن نظير الإنسولين مركبات الإنسولين محولة ‎inverted‏ ‏155 صور مغايرة من إنسولين ‎Las dnsulin variants‏ إنسولين ‎insulin fragments‏ أو ما شابه؛ ويمكن أن تتضمن طريقة التحضير طريقة طور صلب ‎solid phase method‏ بالإضافة إلى تقنية إعادة توليف جينية؛ ولكنها غير مقيدة عليها.
‏5 نظير الإنسولين عبارة عن ببتيد يتضمن وظيفة التحكم في جلوكوز الدم في الجسم؛ والتي تطابق تلك الخاصة بالإنسولين» ويتضمن هذا الببتيد مساعدات 890101515 ومشتقات وشظايا ومركبات مغايرة ‎oe variants‏ الإنسولين أو ما شابه. يشير مساعد الإنسولين ‎insulin agonist‏ وفقا للاختراع الحالي إلى ‎substance sale‏ نزتبط مستقبل الإنسولين في الكائن الحي ‎vivo receptor of insulin‏ لتبين النشاطات البيولوجية
‎biological activities 20‏ مثل الإنسولين» بغض النظر عن بنية الإنسولين ‎structure of insulin‏ يدل نظير الإنسولين وفقا للاختراع الحالي على ببتيد يبين تجانس متوالية ‎sequence homology‏ على الأقل بمقدار 7860 في متوالية حمض أميني ‎amino acid sequence‏ مقارنة بسلسلة ‎A‏ أو سلسلة 8 للإنسولين الأصلي؛ والتي تتضمن بعض مجموعات من وحدات حمض أميني بنائية
‏بد
— \ «=
‎amino acid residues‏ المعدلة في صورة استبدال كيميائي ‎chemical substitution‏ (على
‏سبيل ‎(JE‏ المعالجة بألفا-ميثيل ‎calpha—methylation‏ المعالجة بألفا -هيدروكسيل ‎alpha—‏
‎«(hydroxylation‏ إزالة (على سبيل المثال؛ إزالة مجموعة الأمين ‎(deamination‏ أو التعديل(على
‏سبيل ‎(JB‏ المعالجة بل١-ميثيل ‎o(N-methylation‏ وله وظيفة التحكم في جلوكوز الدم في
‏5 الجسم. فيما يتعلق بأهداف الاختراع الحالي؛ نظير الإنسولين عبارة عن نظير إنسولين يتضمن ألفة
‏ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة؛ مقارنة بالصورة الأصلية؛ ومركبات نظير الإنسولين التي لها عيار
‏إنسولين مخفض مقارنة بالصورة الأصلية والمتضمنة هنا دون تقييد.
‏طالما أن نظير الإنسولين قادر على إظهار مستوى تطبيع 1016078128000 مخفض يتوسط فيه
‏مستقبل أو تصفية يتوسط فيها مستقبل؛ ولم يتم تحديد نوعه أو حجمه ‎aaa‏ نظير الإنسولين؛ 0 الذي يتوسط في آلية التصفية الأساسية في الكائن الحي هو التطبيع الذي يتوسط فيه المستقبل
‎receptor-mediated ‏أو تصفية يتوسط فيها مستقبل‎ receptor-mediated internalization
‎clearance‏ وهو مناسب لكل أهداف وفقا للاختراع الحالي.
‏تشير شظية إنسولين وفقا للاختراع الحالي إلى نوع الإنسولين حيث تتم إضافة أو حذف واحد أو
‏أكثر من الأحماض الأمينية ‎acids‏ 800100؛ ويمكن أن تكون الأحماض الأمينية المضافة عبارة عن الأحماض الأمينية غير الأصلية ‎non-native amino acids‏ (على سبيل المثال؛ النوع ‎D‏
‏من الحمض الأميني). تقوم شظايا الإنسولين بالحصول على وظيفة التحكم في جلوكوز الدم في
‏الجسم.
‏تشير مواد الإنسولين المغايرة ‎variant‏ 17151117 وفقا للاختراع الحالي إلى ببتيد يختلف عن الإنسولين
‏في واحد أو أكثر من متواليات الأحماض الأمينية ‎camino acid sequences‏ وتتضمن وظيفة 0 التحكم في جلوكوز الدم في الجسم.
‏يمكن استخدام الطرق المناظرة الخاصة لتحضير مساعدات ومشتقات وشظايا ومركبات مغايرة من
‏الإنسولين وفقا للاختراع الحالي بشكل مستقل أو في توليفة. ‎Ole‏ تم تضمين ببتيدات يختلف منها
‏واحد أو أكثر من متواليات الأحماض الأمينية عن تلك الخاصة بالإنسولين والتي تتضمن نزع الأمين
‏بد
-١١- ‏وأيضا‎ amino-terminal amino acid residue ‏عند وحدات الحمض الأميني الطرفي البناثية‎ ‏تتضمن وظيفة التحكم في جلوكوز الدم في الجسم في الاختراع الحالي.‎ ‏يمكن أن يكون نظير الإنسولين عبارة عن نظير إنسولين حيث واحد أو أكثر من الأحماض‎ daa ‏الأمينية تم اختياره من المجموعة التي تتكون من حمض أميني ثامن؛ حمض أميني ثالث وعشرين؛‎ ‏وحمض أميني أول؛‎ BALL ‏حمض أميني رابع وعشرين» وحمض أميني خامس وعشرين من‎ 5
Gls 8 ‏وحمض أميني تاسع عشر من السلسلة‎ de ‏حمض أميني ثاني؛ وحمض أميني رابع‎ ‏يتم استبدالها بحمض أميني آخرء وبشكل مفضل»_ التي فيها واحد أو أكثر من الأحماض الأمينية‎ ‏تكون مختارة من مجموعة تتألف من حمض أميني ثامن عشر؛ حمض أميني 77؛ حمض أميني‎ ‏من السلسلة 8 وحمض أميني واحد؛ وحمض أميني اثنين» وحمض أميني‎ Yo ‏وحمض أميني‎ (VE ‏تاسع عشر من سلسلة 8 يتم استبدالها بألانين أو التي يتم فيها استبدال الحمض الأميني الرابع عشر‎ 0 ‏بحمض الجلوتاميك أو الأسباراجين. علاوة على ذلك؛ يمكن اختيار نظير الإنسولين‎ A ALL ‏من‎ ‎YE 7 ‏ىت‎ YA ‏تت‎ YE YY ‏من المجموعة التي تتكون من متواليات بأرقام هرية. ىت‎ ‏و7؛ ولكن يمكن أن تتضمن أي نظير إنسولين يتضمن ألفة ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة دون‎
YY 7١0 ‏وفقا لأحد النماذج وفقا للاختراع الحالي؛ تحديدا نظائر الإنسولين لمتواليات بأرقام هوية.‎ 5 ‏تحديداء تم إيجاد أن مركبات نظير الإنسولين المناظرة؛ 7؛‎ (FT TE FY ١ YA CYT CVE ‏لها ألفة ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة في المعمل؛‎ (V1 5078 FY ‏و9 (متواليات بأرقام هوية.‎ cA .)4 ‏مقارنة بالصورة الأصلية (الجدول‎ ‏يوفر الاختراع الحالي مركب نظير إنسولين مترافق محضر بواسطة ربط نظير‎ AT ‏في جانب‎ ‏الإنسولين ومادة حاملة.‎ 0
SE ‏النصف في‎ jee ‏مادة قادرة على زيادة‎ "Ala ‏حسب ما هو مستخدم؛ يتضمن المصطلح 'مادة‎ ‏يتسم نظير الإنسولين وفقا للاختراع‎ linked insulin 808109 ‏لنظير الإنسولين المربوط‎ all ‏الحالي بأنه يتضمن ألفة ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة بشكل ملحوظ؛ مقارنة بالصورة الأصلية؛‎ ‏وتتجنب التصفية التي يتوسطفيها مستقبل أو التصفية الكلوية. بالتالي؛ إذا كانت مادة حاملة معروف‎ yey
-١١7- ‏أنها تزيد عمر النصف في الكائن الحي عند الارتباط بالأنواع النشطة فسيولوجيا من بولي ببتيدات‎ ‏بنظير الإنسولين» سوف يكون من الواضح أن عمر النصف في الكائن‎ dase polypeptides ‏الحي يمكن أن يتم تحسينه وأنه يمكن استخدام المركب المترافق الناتج كصيغة طويلة المفعول.‎ ‏مثلاء لأن تحسين عمر النصف هو الأولوية الأولى؛ لا تقتصر المادة الحاملة التي سيتم ربطها‎ ‏تتضمن المادة‎ WFC ‏بالإنسولين الجديد الذي له معايرة مخفضة غير مقيد بمنطقة الجلوبولين المناعي‎ 5 ‏النصف‎ jee Ala) ‏والتي تكون قادرة على‎ biocompatible material ‏الحاملة مادة متوافقة حيويا‎ ‏بواسطة ربطه بأي مادة واحدة متوافقة حيويا؛ قادرة على تقليل التصفية الكلوية؛‎ al ‏في الكائن‎ ‏والذي تم اختياره من المجموعة التي تتكون من العديد من البوليمرات (على سبيل المثال؛ بولي إيثيلين‎ ‏جليكول وحمض دهنيء ألبومين وشظايا مما سبق؛ متوالية حمض أميني معينة؛ إلخ.)؛ ألبومين‎ ‏وبوليمرات من‎ calbumin—binding materials ‏مما سبق؛ مواد ربط ألبومين‎ Lad salbumin 0
FERN ‏وحدات متكررة من متواليات حمض أميني معينة؛ جسم مضاد؛ شظايا جسم مضاد؛ مواد ربط‎ ‏فيبرونكتين‎ nucleotide ‏أو مشتقات مما سبق؛ نيكلوتيد‎ all ‏في نسيج واصل في الكائن‎ ‏سكاريد 58000310106؛ وبوليمرات» ولكنها غير مقيدة‎ transferrin ‏ترانسفيرين‎ fibronectin ‏النصف في‎ jee ‏عليها. علاوة على ذلك؛ الطريقة لربط المادة المتوافقة حيويا قادرة على إطالة‎ genetic ‏الكائن الحي لنظير الإنسولين التي لها معايرة مخفضة تتضمن إعادة الارتباط الجيني‎ 5 ‏لمركب مترافق في المعمل أو ما شابه. يمكن أن تتضمن أمثلة المادة المتوافقة‎ crecombination ‏أو ألبومين. يمكن‎ cad ‏بولي إيثيلين جليكول؛ شظية حمض‎ nd ‏حمض‎ (FORD ‏حيويا رابط‎
Fo ‏منطقة جلوبولين مناعي‎ FERN ‏أن يتضمن رابط‎ ‏المادة الحاملة ببعضها البعض عبر ببتيد أو‎ Jie ‏يمكن ربط نظير الإنسولين والمادة المتوافقة حيويا‎
Jinker ‏كرابط‎ non—-peptidyl polymer ‏بوليمر من نوع غير ببتيديل‎ 20 ‏يمكن أن يكون مركب الإنسولين المترافق عبارة عن مركب نظير إنسولين مترافق محضر بواسطة‎ ‏رابط ببتيد أو رابط من نوع‎ (il) ‏منطقة الجلوبولين المناعي © عبر‎ (ii) 5 ‏نظير الإنسولين‎ (i) ‏ربط‎ ‏غير ببتيديل تم اختياره من المجموعة التي تتكون من بولي (يثيلين جليكول؛ بولي بروبيلين جليكول؛‎ ‏كحول‎ edi) ‏بوليمرات مشتركة من إيثيلين جليكول- بروبيلين جليكول؛ بوليول معالجة ببولي أوكسي‎ ‏بد‎
بولي فينيل؛ بولي سكاريدات؛ ديكستران؛ بولي فينيل إيثيل إيثرء بوليمر قابل للتحلل الحيوي؛ بوليمرات
دهنية؛ كيتينات؛ حمض هيالورونيك وتوليفات مما سبق.
في أحد النماذج المعينة للمركب المترافق لنظير الإنسولين وفقا للاختراع الحالي؛ يرتبط بوليمر من
نوع غير ببتيديل كرابط بطرف الحمض الأميني ‎terminus‏ 87100 من السلسلة 8 لنظير الإنسولين. في نموذج آخر معين للمركب المترافق وفقا للاختراع الحالي؛ يرتبط بوليمر من نوع غير ببتيديل
كرابط بالوحدات البنائية للسلسلة 8 لنظير الإنسولين. يؤدي التعديل في سلسلة ‎A‏ للإنسولين إلى
تقليل في النشاط والأمان. في هذه النماذج؛ بالتالي؛ يرتبط بوليمر من نوع غير ببتيديل كرابط بسلسلة
8 للإنسولين؛ وبالتالي يتم الحفاظ على نشاط إنسولين وتحسين الأمان فيه.
حسب ما هو مستخدم 3 يعني المصطلح 'نشاط" قدرة الإنسولين على الارتباط بمستقبل ا لإنسولين
0 ويعني أن الإنسولين يرتبط بمستقبله ليبين أثره. يمكن تحقيق هذا الارتباط للبوليمر من نوع غير ببتيديل إلى طرف الحمض الأميني من السلسلة 8 للإنسولين وفقا للاختراع الحالي بواسطة التحكم في الرقم الهيدروجيني؛ ويكون نطاق الرقم الهيدروجيني المفضل هو 5,؛ إلى 5,. حسب ما هو مستخدم؛ يمكن استخدام المصطلح "الطرف ل ‎‘N-terminus‏ بالتبادل بينيا مع "المنطقة الطرفية ‎"N-terminal region N‏
في أحد الأمثلة المعينة؛ قام المخترعون بتحضير مترافق نظير إنسولين-بولي إيثيلين جليكول- جلوبولين مناعي © بواسطة ربط بولي إيثيلين جليكول بالطرف !ا لمنطقة جلوبولين مناعي ‎Fe‏ ‏واقران الطرف ل انتقائيا من السلسلة 8 للإنسولين به. تمت زيادة عمر نصف المصل ‎serum‏ ‏لمترافق نظير إنسولين-بولي إيثيلين جليكول- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ مقارنة بمركب مترافق؛ وقد أظهر أثر انخفاض في سكر الدم ‎hypoglycemic effect‏ في النماذج الحيوانية ‎disease‏
‎animal models 0‏ بالتالي» سوف يكون من الواضح أنه يمكن الحصول على صيغة إنسولين جديد طويل المدى يحافظ على النشاط في الكائن الحي. منطقة الجلوبولين المناعي © آمنة للاستخدام كمادة حاملة لعقار ‎drug carrier‏ لأنها عبارة عن بولي ببتيد قابل للتحلل البيولوجي ‎biodegradable polypeptide‏ والذي يتم تأيضه في الكاثئن الحي. أيضا ؛ وكان لمنطقة الجلوبولين المناعي ‎Fe‏ وزن جزيئي ‎weight‏ 171016010181 منخفض
‎ey
-؟١-‏ ‎lps‏ مقارنة بجزيئات الجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin molecules‏ الكلية؛ وبالتالي؛ سوف يكون مفيدا من حيث التحضير والتنقية ‎purification‏ والناتج الخاصة بالمركب المترافق. لا تحتوي منطقة الجلوبولين المناعي ‎Fo‏ على شظية فاب ‎Fab‏ والتي تكون غير متجانسة بسبب متواليات الأحماض الأمينية المختلفة وفقا لفئات الجسم المضاد الفرعية ‎«antibody subclasses‏ وبالتالي يمكن توقع أن تزيد منطقة الجلوبولين المناعي © تجانس المواد وتكون ذات تضاد جيني ‎Jif antigenic‏ في الدم. حسب ما هو مستخدم؛ يشير المصطلح 'منطقة جلوبولين مناعي ©" إلى بروتين والتي تتضمن المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة ‎(CH2) ١‏ والمنطقة الثابتة ‎constant region‏ للسلسلة الثقيلة ‎(CH3) 7 heavy-chain‏ لجلوبولين مناعي؛ باستثناء المناطق المتغيرة للسلاسل ‎agli chains‏ 0 والخفيفة؛ المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة ‎(CHI) ١‏ والمنطقة الثابتة للسلسلة الخفيفة ‎(CL1) ١‏ للجلوبولين المناعي. يمكن أن تتضمن أيضا منطقة مفصلية ‎hinge region‏ عند المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة. أيضاء يمكن أن تتضمن منطقة الجلوبولين المناعي ‎Fo‏ وفقا للاختراع الحالي ‎sia‏ ‏أو كل من المنطقة ‎Fe‏ التي تتضمن المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة ‎(CHT) ١‏ و/أو المنطقة الثابتة للسلسلة الخفيفة ‎(CLT) ١‏ باستثناء المناطق المتغيرة للسلاسل الثقيلة والخفيفة للجلوبولين المناعي؛ 5 طالما أنه لها أثر مشابه بشكل أساسي أو أفضل من الصورة الأصلية. أيضاء قد تكون عبارة عن شظية بها حذف في جزء طويل من متوالية الحمض الأميني ل ‎CH2‏ و/أو ‎.CH3‏ ‏ذلك أنء منطقة الجلوبولين المناعي ‎Fe‏ وفقا للاختراع الحالي يمكن أن تتضمن ‎domain lai )١‏ ‎«CHI‏ نطاق ‎«CH2‏ نطاق ‎CH3‏ ونطاق ‎(Y «CH4‏ نطاق ‎CHI‏ ونطاق 0112؛ ‎)١‏ نطاق ‎CHI‏ ‏ونطاق ‎«CH3‏ ؛) نطاق ‎CH2‏ ونطاق 0113؛ 0( توليفة واحد أو أكثر من نطاقات ‎domains‏ ‏0 وجلوبولين مناعي منطقة مفصلية (أو جزء من المنطقة المفصلية)؛ ‎(1s‏ دايمر ‎010716١‏ من كل نطاق من المناطق الثابتة للسلسلة الثقيلة والمنطقة الثابتة للسلسلة الخفيفة. أيضاء تتضمن منطقة الجلوبولين المناعي ‎Fo‏ وفقا للاختراع الحالي مشتق متوالية ‎sequence‏ ‏76 (متطفر ‎(mutant‏ منه بالإضافة إلى متوالية حمض أميني أصلي. مشتق متوالية حمض أميني له متوالية تختلف من متوالية الحمض الأميني الأصلي بسبب عملية حذف أو إدخال 5 أو الاستبدال المحافظ أو غير المحافظ أو توليفات من واحد أو أكثر من وحدات حمض أميني بنائية. بد
-١م-‎
‎ti‏ في ‎(IgG Fo‏ يمكن استخدام وحدات حمض أميني بنائية المعروفة بأهميتها في الارتباط» عند
‏المواقع ‎YE‏ إلى 7748 ‎PVA 799 YAY‏ إلى ‎"١‏ أو ‎PY‏ إلى ‎(FF)‏ كهدف مناسب
‏للتعديل.
‏علاوة على ذلك؛ هناك العديد من الاختلافات الممكنة؛ ‎Ally‏ تتضمن مشتقات ‎derivatives‏ بها
‏5 حذف لمنطقة قادرة على تشكيل رابط ثنائي كبريتيد ‎disulfide bond‏ حذف العديد من وحدات
‏حمض أميني بنائية عند الطرف ‎N‏ لصورة ‎FC‏ أصلية؛ أو إضافة وحدات بنائية من وحدات ميثيونين
‏بنائية ‎methionine residue‏ إلى الطرف !ا من صورة ‎Jalal Fe‏ علاوة على ‎ely‏ لإزالة
‏وظائف المستجيب ‎(So effector functions‏ أن ‎ay‏ الحذف في موقع ربط مكمل
‎cytotoxicity ‏(سمية خلوية‎ ADCC ‏وموقع‎ C1 ‏مثل موقع ربط‎ ccomplement-binding site ‏الكشف عن‎ 5 (antibody dependent cell ‏يتوسط بها جسم مضاد قائم على أساس خلية‎ 0
‏تقنيات تحضير مشتقات المتوالية ‎sequence derivatives‏ لمنطقة الجلوبولين المناعي ‎Fe‏ في
‏براءة الاختراع الدولية رقم 4977/97 ‎YY‏ وبراءة الاختراع الدولية رقم 4171/91 7.
‏يتغير الحمض الأميني في البروتينات والببتيدات ‎peptides‏ والتي لا تغير نشاط الجزيئات
‎H.Neurath, R.L.Hill, The Proteins, ) ‏بشكل عام؛ والمعروفة في المجال‎ molecules ‏أغلب الاستبدالات التي التي تتم هي‎ os (Academic Press, New York, 1979 5
‎«Ala/Val SerfAsn Ala/Thr (Ala/Gly 156١ Asp/Glu Val/lle Ala/Ser
‎«Ala/Glu «Leu /Val Leu/lle <Asp/Asn (Lys[Arg Ala/Pro .Thy/Phe Ser/Gly
‎(Asp [Gly‏ في كلا الاتجاهين.
‏يمكن تعديل منطقة ‎(Fe‏ عند الحاجة؛ بواسطة المعالجة بفسفور ‎phosphorylation‏ أو كبريت ‎sulfation 0‏ أو أكريل ‎acrylation‏ أو جليكوسيل ‎glycosylation‏ أو ميثيل ‎amidation‏
‎methylation‏ أو فارنيسيل ‎farnesylation‏ أو أسيتيل ‎acetylation‏ أو أميد 8011081100 أو ما
‏شابه.
‏بد
-؟١-‏ مشتقات ‎Fe‏ المذكورة أعلاه عبارة عن مشتقات لها نشاط بيولوجي ‎biological activity‏ مطابق لذلك الخاصة بالمنطقة ‎Fe‏ وفقا للاختراع الحالي أو بنيةذات ثبات محسن ‎improved structural‏ ‎stability‏ ضد الحرارة ‎cheat‏ الرقم الهيدروجيني؛ أو ما شابه. علاوة على ذلك؛ يمكن الحصول على منطقة ‎Fes‏ من الصورة الأصلية المعزولة من البشر والحيوانات التي تتضمن بقر ‎jeleCOWS‏ 00815,؛ خنازير ‎swine‏ فئران ‎mice‏ أرانب ‎«rabbits‏ ‏هامستر ‎hamsters‏ جرذان 815 والخنازير الغينية ‎(guinea pigs‏ أو يمكن أن تكون عبارة عن نواتج عودة الارتباط الجيني ‎recombinants‏ أو مشتقات مما سبق؛ تم الحصول عليها من الخلايا الحيوانية ‎animal cells‏ أو الجسيمات الدقيقة ‎microorganisms‏ هناء يمكن الحصول عليها من جلوبولين مناعي أصلي بواسطة ‎Jie‏ الجلوبولينات المناعية ‎immunoglobulins‏ الكلية من 0 الكائنات البشري أو الحيوانية ومعالجتها بإنزيم بروتين متحلل ‎proteolytic enzyme‏ يقوم ‎Gibb‏ ‏0 بهضم الجلوبولين المناعي الأصلي إلى ‎Fab‏ ومناطق © وتنتج نتائج ببسين عن إنتاج 0م و85(2). وهذه الشظايا يمكن إخضاعها لكروماتوجراف استبعاد على أساس الحجم ‎size—‏ ‎exclusion chromatography‏ لعزل ‎Fc‏ أو ‎.pF’c‏ ‏بشكل مفضل؛ منطقة ‎Fe‏ مشتقة بشريا عبارة عن منطقة جلوبولين مناعي ‎Fe‏ ناتج عودة الارتباط 5 الجيني والذي يتم الحصول عليه من كائن دقيق ‎.microorganism‏ ‏علاوة على ذلك يمكن أن تكون منطقة الجلوبولين المناعي ‎AFC‏ صورة لها سلاسل سكر أصلية؛ سلاسل سكر مكبرة مقارنة بصورة أصلية أو سلاسل سكر مخفضة ‎native sugar chains‏ مقارنة بالصورة الأصلية؛ أو يمكن أن تكون في صورة تم فيها نزع الجليكوسيل ‎.deglycosylated form‏ يمكن تحقيق الزيادة أو النقص أو إزالة سلاسل سكر ‎sugar chains‏ الجلوبولين المناعي ‎Fo‏ ‏0 بواسطة طرق عامة في المجال؛ ‎Jie‏ طريقة كيميائية؛ طريقة إنزيمية ‎44h yenzymaticmethod‏ الهندسة الوراثية ‎genetic engineering method‏ باستخدام ‎(AIS‏ دقيق. هنا؛ تنتج إزالة ساسل السكر من منطقة ‎FC‏ عن نقص حاد في ألفة الارتباط بالمكمل ‎complement‏ (010) ونقص أو فقدان في السمية الخلوية التي تتوسطفيها الخلية القائمة على أساس الجسم المضاد أو السمية الخلوية المعتمدة على المكمل؛ وبالتالي لا يتم تحفيز استجابات مناعية ‎Immune responses‏ غير 5 ضرورية في الكائن ‎Lal‏ في هذا الشأن؛ تشكل منطقة جلوبولين مناعي ‎FC‏ في صورة منزوعة بد
-١١- ‏والتي يمكن أن تكون‎ aglycosylated ‏أو معدوم الجليكوسيل‎ deglycosylated ‏الجليكوسيل‎ ‏مناسبة لهدف الاختراع الحالي كمادة حاملة لعقار.‎ ‏حسب ما هو مستخدم؛ تنفيذ إزالة إنزيمية‎ 'deglycosylation ‏يعني المصطلح "نزع الجليكوسيل‎ ‏إنتاج منطقة‎ "aglycosylation ‏ويتضمن المصطلح "عديم الجليكوسيل‎ Fe ‏لشق السكر من منطقة‎ ‏بواسطة خلية بدائية النواة‎ unglycosylated form ‏في صورة غير معالجة بالجليكوسيل‎ FC 5
.coli ‏الإشريكية القولونية‎ «Junie ‏بشكل‎ (prokaryote ‏على الناحية الأخرى؛ يمكن أن تكون منطقة الجلوبولين المناعي © مشتقة من البشر أو الحيوانات‎ ‏هامستر» جرذان والخنازير الغينية؛ وبشكل‎ cul ‏ماعز؛ خنازير؛ فثران؛‎ ci ‏الأخرى والتي تتضمن‎ ‏عبارة عن منطقة‎ Fo ‏مفضل البشر. علاوة على ذلك؛ يمكن أن تكون منطقة الجلوبولين المناعي‎
0 © مشتقة من ‎dgM IgE (IgD (IgA (IgG‏ أو التي تتم بواسطة توليفات ‎combinations‏ منها أو مهجنات ‎hybrids‏ مما سبق. بشكل مفضل؛ سوف يتم اشتقاقها من 06ا أو ‎Als gM‏ تكون من بين أكثر البروتينات وفرةٍ في الدم البشري ‎blood‏ 1007180؛ وبشكل أكثر ‎Suni‏ من 6وا والمعروف بأنه يحسن أعمار النصف ‎half-lives‏ لبروتينات ربط المركبات الترابطية ‎ligand—‏ ‎.binding proteins‏
على الناحية الأخرى؛ يعني المصطلح "توليفة ‎‘combination‏ حسب ما هو ‎aie‏ أن البولي الببتيدات تقوم بترميز مناطق جلوبولين مناعي ‎Fo‏ من نفس الأصل مرتبطة ببولي ببتيد أحادي السلسلة ‎single—chain polypeptide‏ من أصل مختلف لتكوين دايمر أو مالتيمر ]0700|81008. ذلك أنه يمكن تكوين الدايمر أو المالتيمر من اثنين أو أكثر من الشظايا التي تم اختيارها من المجموعة التي تتكون من ‎Fc Lad‏ وا ‎Fc «IgM Fc IgA Fc‏ ناوا ‎Fc‏ عوا.
يعني المصطلح "هجين ‎Chybrid‏ حسب ما هو مستخدم؛ أن المتواليات التي ترمز اثنين أو أكثر من مناطق جلوبولين مناعي ‎FO‏ من أصول مختلفة كما هو موجود في منطقة جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ‏أحادي ‎LAL)‏ في الاختراع الحالي؛ هناك العديد من أنواع الهجين المتاحة. حيث يمكن تكوين نطاقات هجين ‎hybrids‏ 0000810 من واحد إلى أربعة نطاقات تم اختيارها من المجموعة التي
بد
م١-‏ تتكرون من آنا ‎Fc of CH4 003 (CH2‏ وا ‎«Fc lgD sFc IgE (Fc IgA (Fc IgM‏ ويمكن أن تتضمن المنطقة المفصلية. على ‎(AY) alll‏ يتم تقسيم ‎IgG‏ إلى الفئات الفرحية ‎IgG]‏ 1962 1063 و1964 ويتضمن الاختراع الحالي توليفات ومركبات هجين منها. يفضل الفئات الفرعية ‎19G2‏ و964ا والأكثر تفضيلا هو منطقة 6 ل 1064 التي نادرا ما يكون لها وظائف مفعل ‎effector functions‏ مثل ‎CDC‏ (السمية التي تعتمد على مكمل ‎.(complement dependent cytotoxicity‏ ذلك أنء كمادة حاملة لعقار وفقا للاختراع الحالي؛ تكون أفضل منطقة جلوبولين مناعي ‎FC‏ عبارة عن منطقة 6 1964 2 بشري غير معالج بجليكوسيل ‎.non-glycosylated‏ المنطقة ‎Fe‏ المشتقة ‎dy‏ ‏أكثر تفضيلا من المنطقة © المنتشرة والتي يمكن أن تعمل كمولد ضد في الجسم البشري وتسبب 0 استجابات مناعية غير مطلوبة ‎Jie‏ إنتاج جسم مضاد جديد في مقابل مولد الضد ‎antigen‏ ‏في النموذج المعين للمركب المترافق لنظير الإنسولين؛ يمكن ربط كل أطراف بوليمر من نوع غير ببتيديل بالطرف لا لمنطقة الجلوبولين المناعي © ومجموعة الأمين للطرف لا من السلسلة 8 لنظير الإنسولين أو مجموعة ع-أمينو ‎group‏ 8-800100 أو مجموعة ثيول ‎thiol group‏ لوحدات الليسين الداخلي البنائية ‎internal lysine residue‏ السلسلة 8؛ على التوالي. يتم تنفيذ نظير منطقة © ا-رابط-إنسولين ‎@ylinker—insulin‏ للاختراع الحالي بمعدلات جزيئية ‎molar ratios‏ مختلفة. ذلك أن ‎ae‏ شظايا ‎Fo‏ و/أو رابط المرتبطة بنظير إنسولين واحد غير مقيد. علاوة على ذلك؛ يمكن أن تتضمن عملية ربط منطقة ‎(FC‏ رابط معين؛ ونظير الإنسولين ‎By‏ ‏للاختراع ‎all‏ كل أنواع الروابط التساهمية ‎covalent bonds‏ وكل أنواع الروابط غير المتكافئة ‎Jisnon—covalent bonds 0‏ روابط الهيدروجين ‎chydrogen bonds‏ التفاعلات الأيونية ‎ionic‏ ‎interactions‏ وقوى ‎van der Waals forces‏ والتفاعلات الكارهة للماء ‎hydrophobic‏ ‎Laie interactions‏ يتم التعبير عن منطقة ‎Fe‏ ونظير الإنسولين كبروتين دمج ‎fusion protein‏ بواسطة ‎sale)‏ الارتباط الجيني. مع ذلك؛ ‎lad‏ يتعلق بالنشاط الفسيولوجي ‎physiological activity‏ بد
‎q —‏ \ — لنظير الإنسولين؛ يتم تنفيذ عملية الربط ‎linkage‏ بشكل مفضل بواسطة روابط تساهمية؛ ولكنها غير مقيدة عليها. على الناحية ‎(AY)‏ يمكن ربط منطقة ‎Fe‏ وفقا للاختراع الحالي؛ رابط معين ونظير إنسولين كل بالآخر عند الطرف لا أو الطرف © 0-161071071015؛ وبشكل مفضل عند مجموعة ‎3a‏ وخصوصاء يمكن تكوين رابط متكافئ عند طرف أمينو طرفي 600 16100011081 ‎camino‏ وحدات حمض أميني بنائية ‎@amino acid residue‏ من ليسين 7/5176 وحدات حمض أميني بنائية من هستيدين 19006 ؛ أو وحدات سيستين بنائية حرة ‎free cysteine residue‏ علاوة على ذلك؛ يمكن تنفيذ ربط منطقة © وفقا للاختراع الحالي؛ رابط معين؛ ونظير الإنسولين في اتجاه معين. ذلك أنه؛ يمكن ربط الرابط بالطرف ‎(N‏ الطرف © أو مجموعة حرة من منطقة 0 الجلوبولين المناعي ‎(Fe‏ ويمكن ربطه أيضا بالطرف ل الطرف © أو مجموعة حرة من لنظير الإنسولين. يمكن ربط رابط من نوع غير ببتيديل بشظية مجموعة الأمين الطرفية ‎N‏ للجلوبولين المناعي؛ ولا تتقيد بأي من وحدات الليسين البنائية ‎lysine residue‏ أو السيستين ‎cysteine‏ لمتوالية شظية الجلوبولين المناعي ‎.immunoglobulin fragment sequence‏ 5 أيضاء في النموذج المحدد للمركب المترافق لنظير الإنسولين» يمكن ربط طرف بوليمر من نوع غير ببتيديل بالوحدات البنائية للحمض الأميني ‎internal amino acid residue‏ أو مجموعة تفاعلية حرة ‎free reactive group‏ قادرة على الارتباط بالمجموعة التفاعلية عند طرف بوليمر من نوع غير ببتيديل؛ بالإضافة إلى الطرف لا لمنطقة الجلوبولين المناعي ‎FC‏ ولكنها غير مقيدة عليها. في الاختراع الحالي؛ يعني بوليمر من نوع غير ببتيديل أن يكون عبارة عن بوليمر متوافق بيولوجيا 0 تتضمن اثنين أو ‎SST‏ من وحدات متكررة مرتبطة ببعضها البعض؛ حيث الوحدات المتكررة متصلة بواسطة أي رابط تساهمي ‎covalent bond‏ باستثناء الرابط الببتيدي ‎peptide bond‏ يمكن أن يكون البوليمر من نوع غير ببتيديل ذو طرفين أو ثلاثة أطراف. يمكن اختيار بوليمر من نوع غير ببتيديل والذي يمكن استخدامه في الاختراع الحالي من المجموعة التي تتكون من بولي إيثيلين جليكول؛ بولي بروبيلين جليكول؛ بوليمرات مشتركة من ايثيلين جليكول بد
م وبروبيلين جليكول؛ بوليولات معالجة ببولي أوكسي إيثيل؛ كحول بولي فينيل؛ بولي سكاريدات؛ ديكستران؛ بولي فينيل إيثيل إيثر» بوليمرات ‎ALE‏ للتحلل البيولوجي مثل ‎PLA‏ (بولي (حمض لاكتيك) ‎PLGA ) poly(lactic acid)‏ (حمض بولي لاكتيك -جليكوليك ‎acid‏ 16ا60لا18006-9/ر001م)؛ بوليمرات دهنية؛ كيتينات؛ حمض هيالورونيك؛ وتوليفات مما سبق؛ وبشكل مفضل؛ بولي إيثيلين جليكول. سوف يتم تضمين المشتقات مما سبق أيضا في المجال ويتم تحضيرها بسهولة في إطار الخبرة في المجال المتضمنة أيضا في المنظور وفقا للاختراع الحالي. يتضمن الرابط الببتيدي الذي يتم استخدامه في بروتين الدمج الذي تم الحصول عليه بواسطة طريقة دمج إطار ‎inframe fusion method‏ تقليدي عيوب في أنه يتم شقه بسهولة في الكائن الحي بواسطة إنزيم تحليل البروتين ‎all scproteolyticenzyme‏ لا يمكن الحصول على الأثر الفعال لزيادة عمر النصف للدم للعقار النشط ‎active drug‏ بواسطة ‎Akal sald)‏ كما هو متوقع. في الاختراع الحالي؛ مع ذلك؛ يمكن تحضير المركب المترافق باستخدام رابط من نوع غير ببتيديل بالإضافة إلى الرابط الببتيدي. في رابط من نوع غير ببتيديل؛ يمكن استخدام البوليمر يتضمن مقاومة إنزيم تحليل البروتين للحفاظ على عمر النصف للدم للببتيد المشابه لذلك الخاص بالمادة الحاملة. ‎July‏ يمكن استخدام أي بوليمر من نوع غير ببتيديل دون تقييد؛ طالما أن هذا البوليمر له هذه الوظيفة المذكورة» وهي ‎eof‏ البوليمر له مقاومة إنزيم تحليل البروتين في الكائن الحي. يتضمن البوليمر من نوع غير ببتيديل وزن جزيئي يتفاوت من ‎١‏ إلى ‎٠٠١‏ كيلو دالتون؛ وبشكل مفضل؛ يتفاوض من ‎١‏ إلى ‎7١0‏ كيلو دالتون. يمكن أن يكون بوليمر من نوع غير ببتيديل وفقا للاختراع الحالي؛ مرتبط بمنطقة الجلوبولين المناعي ‎Fo‏ عبارة عن بوليمر أو توليفة واحدة من أنواع مختلفة من البوليمرات. يتضمن البوليمر من نوع غير ببتيديل المستخدم في الاختراع الحالي مجموعة تفاعلية قادرة على الارتباط بمنطقة الجلوبولين المناعي ‎Fe‏ والعقار البروتيني. يتضمن البوليمر من نوع غير ببتيديل مجموعة تفاعلية عند كلا الطرفين؛ ‎ally‏ تم اختيارها بشكل مفضل من المجموعة التي تتكون من مجموعة ألدهايد تفاعلية ‎reactive aldehyde group‏ ‎de sans‏ بروبيون ألد هايد ‎propionaldehyde group‏ مجموعة بيوتير ألد هايد ‎butyraldehyde‏ ‎ey‏ yy .succinimide derivative ‏مكسينيميد‎ File gmaleimide group ‏مجموعة ماليميد‎ cgroup «succinimidyl propionate ‏يمكن أن يكون مشتق سكسينيميد عبارة عن سكسينيميديل بروبيونات‎ ‏مكسينيميديل كربوكسي ميثيل‎ hydroxy . ‏هيدروكسي مكسينيميديل الإ50066107010‎ .succinimidyl carbonate ‏أو كربونات سكسينيميديل‎ ¢succinimidyl carboxymethyl ‏تحديداء عندما يكون البوليمر من نوع غير ببتيديل ذو مجموعة ألدهايد تفاعلية عند كلا طرفيه؛ من‎ 5 ‏الفعال في الربط عند كلا الطرفين مع بولي ببتيد نشط فسيولوجيا وجلوبولين مناعي بأقل قدر من‎ reductive ‏التفاعلات غير المحددة. يكون المنتج النهائي المولد بواسطة تفاعل الألكلة الاختزالي‎ ‏أكثر ملائمة من تلك المرتبطة بواسطة رابط‎ aldehyde bond ‏بواسطة رابط ألدهايد‎ alkylation ‏ترتبط مجموعة الألدهايد التفاعلية انتقائيا بالطرف !ا عند درجة حموضة‎ .800106 bond ‏أميد‎ ‏منخفضة؛ ويرتبط بوحدات ليسين بنائية لتكوين رابط تساهمي عند درجة حموضة عالية؛ مثل درجة‎ 0
A,r ‏حموضة‎ ‏يمكن أن تكون المجموعات التفاعلية عند كل أطراف بوليمر من نوع غير ببتيديل مشابهة أو مختلفة‎ ‏يمكن أن يمتلك البوليمر غير الببتيدي مجموعة ماليميد عند أحد‎ Sle .ضعبلا ‏عن بعضها‎ ‏أو مجموعة‎ propionaldehyde group ‏بروبيون ألدهايد‎ de sane cual ‏الأطراف»؛ ومجموعة‎ ‏عند الطرف الآخر. عندما استخدام بولي إيثيلين جليكول‎ butyraldehyde group ‏بيوتير ألدهايد‎ 5 ‏عند كلا طرفيه كبوليمر من نوع غير ببتيديل؛‎ hydroxy group ‏ذو مجموعة هيدروكسي تفاعلي‎ ‏يمكن تنشيط مجموعة الهيدروكسي إلى العديد من المجموعات التفاعلية بواسطة تفاعلات كيميائية‎ ‏معروفة؛ أو يمكن استخدام بولي إيثيلين جليكول الذي يتضمن مجموعة تفاعلية معدلة متاحة تجاريا‎ ‏من أجل تحضير مركب نظير إنسولين المترافق ذو السلسلة الواحدة وفقا للاختراع الحالي.‎ ‏يقوم المركب المترافق لنظير الإنسولين وفقا للاختراع الحالي بالحفاظ على نشاطات في الكائن الحي‎ 0 sugar Sul ‏وأيض‎ energy metabolism ‏أيض الطاقة‎ Jie ‏للإنسولين التقليدي‎ ‏وأيضا تقوم بزيادة عمر نصف للدم لنظير الإنسولين وتزيد مدة الفعالية في الكائن‎ metabolism ‏مفيد في علاج السكري.‎ BHAA ‏بشكل ملحوظ للببتيد؛ وبالتالي؛ يكون المركب‎ a)
Al ‏في أحد الأمثلة وفقا للاختراع الحالي؛ وقد تم التأكيد على أن نظير الإنسولين الذي يتضمن‎ ‏ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة يبين عمر نصف أكثر فعالية في الكائن الحي من مركب الإنسولين‎ 5 ‏بد‎
"١ ‏الأصلي المترافق؛ عند الارتباط بالمادة الحاملة القادرة على إطالة عمر النصف في الكائن الحي‎ .)6 ‏(الشكل‎ ‏يوفر الاختراع الحالي صيغة إنسولين طويل المدى تتضمن المركب المترافق لنظير‎ AT ‏في جانب‎ ‏الإنسولين. يمكن أن تكون صيغة الإنسولين طويل المدى عبارة عن صيغة إنسولين طويل المدييتمتع‎ ‏بمدة وثبات زائد في الكائن الحي. يمكن أن تكون الصيغة طويلة المفعول عبارة عن تركيبة صيدلانية‎ 5 ‏لعلاج السكري.‎ pharmaceutical composition ‏يمكن أن تتضمن التركيبة الصيدلانية تتضمن المركب المترافق وفقا للاختراع الحالي مواد حاملة‎ ‏للإعطاء الصيدلاني؛ يمكن أن‎ pharmaceutically acceptable carriers ‏مقبولة صيدلانيا‎ ‏رابط‎ harmaceutically acceptable carrier ‏تتضمن المادة الحاملة المقبولة صيدلانيا‎ ‏عامل‎ «solubilizer cui excipient ‏سواغ‎ cdisintegrator ‏مفتت‎ dubricant ‏مزلق‎ binder 0 «suspending agent ‏عامل تعليق‎ «stabilizer ‏عامل تثبيت‎ (dispersing agent ‏تشتيت‎ ‏أو ما شابه. بالنسبة للمستحضرات القابلة للحقن‎ perfume ‏عطر‎ coloring agent ‏عامل تلوين‎ ‏الحاملة المقبولة صيدلانيا عامل تنظيم‎ sald) ‏يمكن أن تتضمن‎ cinjectable preparations «solubilizer ‏مذيب‎ analgesic ‏مسكن‎ cpreserving agent lis ‏عامل‎ 5116١100 agent ‏وعامل تثبيت. للمستحضرات الخاصة بالإعطاء الموضعي‎ 15010016 agent ‏عامل متساوي التوتر‎ 5 ‏سواغ‎ base sale ‏الحاملة المقبولة صيدلانيا‎ salad) ‏يمكن أن تتضمن‎ ctopical administration ‏010101»©؛ مزلق؛ عامل حفظ أو ما شابه. يمكن صياغة التركيبة الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي‎ ‏في توليفة مع المواد الحاملة المقبولة صيدلانيا‎ dosage forms ‏في العديد من صور الجرعات‎ ‏يمكن صياغة التركيبة الصيدلانية‎ coral administration ‏للإعطاء الفمي‎ Sie ‏المذكورة أعلاه.‎ ‏معلقات‎ celixirs ‏أكاسير‎ capsules ‏كبسولات‎ troches ‏حبوب‎ tablets ‏في أقراص‎ 0 ‏بالنسبة للمستحضرات القابلة للحقن؛‎ wafers ‏أو رقائق هشة‎ syrups ‏شارب‎ (suspensions ‏أو‎ single-dose ampule ‏يمكن صياغة التركيبة الصيدلانية في صورة أمبول أحادي الجرعة‎ ‏يمكن صياغة التركيبة الصيدلانية أيضا في‎ .07001/005© container ‏حاوية متعددة الجرعات‎ ‏أو معلقات أو حبوب أو أقراص أو كبسولات ومستحضرات إطلاق مستديم‎ solutions ‏شكل محاليل‎ .sustained release preparations 5 vey
اس على الناحية ‎og AY‏ تتضمن أمثلة المواد الحاملة ‎carriers‏ السواغات ‎excipients‏ والمخففات 115 مناسبة للصياغة لاكتوز 1801056 دكستروز ‎dextrose‏ سكروز ‎csUCrose‏ سوربيتول ‎csorbitol‏ مانيتول ‎cmannitol‏ زيليتول ‎cerythritol J su fi yl exylitol‏ مالتيتول 018111101 ‎Lal‏ ‎starch‏ أكاسيا ‎acacia‏ آلجينات ‎alginate‏ جيلاتين ‎(gelatin‏ فوسفات الكالسيوم ‎calcium‏ ‎phosphate 5‏ سيليكات الكالسيوم ‎calcium silicate‏ السيليلوز ‎ccellulose‏ ميثيل سيليلوز
‎emethylcellulose‏ بلورات سيليلوز دقيقة ‎ccrocrystalline cellulose‏ بولي فينيل بيروليدون ‎cpolyvinylpyrrolidone‏ الماء؛ ميثيل هيدروكسي بنزوات ‎«methylhydroxybenzoate‏ بروبيل هيدروكسي بنزوات ‎qpropylhydroxybenzoate‏ تلك 1816؛ ستيرات مغنيسيوم ‎magnesium‏ ‎«Stearate‏ زيوت معدنية ‎mineral oils‏ أو ما شابه.
‏0 علاوة على ذلك»؛ يمكن أيضا أن تتضمن الصيغ الصيدلانية ‎pharmaceutical formulations‏ مواد ملء ‎fillers‏ أو عوامل مضادة للتختر ‎J anti—coagulating agents‏ مزلقات ‎lubricants‏ ‏أو مواد مرطبة 016018015 عطور ‎perfumes‏ مطهرات ‎antiseptics‏ أو ما شابه. في جانب ‎AT‏ أيضاء يوفر الاختراع الحالي طريقة لعلاج الأمراض المرتبطة بالإنسولين» تتضمن إعطاء نظير الإنسولين أو المركب ‎GAD‏ لنظير الإنسولين إلى خاضع في حاجة له.
‏5 المركب المترافق وفقا للاختراع الحالي مفيد في علاج السكري؛ وبالتالي؛ يمكن علاج هذا المرض بواسطة إعطاء التركيبة الصيدلانية التي تحتوي عليه. يتضمن المصطلح "إعطاء"؛ حسب ما هو مستخدم؛ ‎JAY‏ مادة محددة مسبقا داخل مريض بواسطة الطريقة المناسبة. يمكن إعطاء المركب المترافق وفقا للاختراع الحالي عبر أي من المسارات الشائعة طالما أنه 308 على الوصول إلى النسيج ‎tissue‏ المطلوب. يمكن إجراء عملية الإعطاء عبر
‏0 الغشاء البريتوني ‎Intraperitoneal‏ أو عبر الوريد ‎Jintravenous‏ في العضل ‎intramuscular‏ ‏أو تحت الجلد ‎subcutaneous‏ عبر الجلد ‎intradermal‏ في الفم ‎08١‏ أو موضعيا ‎topical‏ ‏أو عبر الفم ‎intranasal‏ أو .عبر الجهاز التنفسي ‎intrapulmonary‏ أو عبر المستقيم ‎oKcintrarectal‏ الاختراع الحالي غير مقيد بما سبق. مع ذلك؛ حيث أن الببتيدات يتم هضمها عند الإعطاء الفمي؛ يجب أن تكون المكونات النشطة ‎active ingredients‏ للتركيبة مغلفة أو
‎ey
— ¢ \ — مصاغة للوقاية من التحلل ‎degradation‏ المعدة ‎stomach‏ بشكل مفضل؛ يمكن إعطاء التركيبة الحالية في صورة قابلة للحقن ‎injectable form‏ علاوة على ذلك؛ يمكن إعطاء التركيبة الصيدلانية بواسطة جهاز 80083131015 معين قادر على نقل المكونات النشطة إلى إلى خلية مستهدفة ‎target cell‏ أيضاء يمكن تحديد التركيبة الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي بواسطة ‎sae‏ عوامل 1801005 ذات صلة تتضمن أنواع أمراض التي يتم علاجها ومسارات الإعطاء ‎administration routes‏ وسن المريض والنوع والوزن وحدة المرض ‎severity of illness‏ بالإضافة إلى أنواع العقار ‎OSS‏ ‏نشط ‎component‏ 801176. _ حيث تتمتع التركيبة الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي بمدة وعيار ممتاز في الكائن الحي » وسوف تتمتع ‎Bhan‏ تقليل تكرارية إعطا ¢ الصيغة الصيدلانية وفقا للاختراع 0 الحالي. في جانب آخر أيضاء يوفر الاختراع الحالي طريقة لتحضير المركب المترافق لنظير الإنسولين؛ تتضمن تحضير نظير الإنسولين؛ تحضير المادة الحاملة؛ وربط نظير الإنسولين والمادة الحاملة. في جانب آخر أيضاء يوفر الاختراع الحالي طريقة لزيادة عمر النصف في الكائن الحي باستخدام نظير الإنسولين أو المركب المترافق لنظير الإنسولين والذي يتم تحضيره بواسطة ربط نظير الإنسولين ‎saldly 5‏ الحاملة. وضع الاختراع ‎Lag‏ يلي سوف يتم وصف الاختراع الحالي بالمزيد من التفاصيل بالإشارة إلى ‎WARY‏ مع ذلك؛ هذه ‎EY)‏ هي للأغراض التوضيحية ‎dah‏ ولا يقصد تقييد الاختراع بواسطة هذه الأمثلة. ‎:١ JE‏ تحضير عامل توجيه يعبر عن ناقل يعبر عن نظير ‎analog—expressing vector‏ 0 إنسولين أحادي السلسلة ‎single chain insulin‏ من أجل تحضير مركبات نظير الإنسولين؛ كل منها تتضمن حمض أميني معدل في سلسلة 8 أو سلسلة 8؛ باستخدام الإنسولين ناقل تعبير أصلي ‎native insulin—expressing vector‏ كقالب بد
"١ ‏وبعد‎ oY ‏أمامية وعكسية (الجدول‎ oligonucleotides ‏تم تخليط أوليجونيكلوتيدات‎ template .analog gene ‏لتكبير كل نظير جين‎ POR ‏ذلك تم تنفيذ‎ 8 ‏التالي؛ تم ذكر أسماء متواليات الأحماض الأمينية المعدلة في سلسلة 8 أو سلسلة‎ ١ ‏في الجدول‎ ‏مستبدل بألانين؛ ويمثل‎ A ‏أول جليسين 9170176 من السلسلة‎ ١ ‏والنظير. حيث؛ يمثل النظير‎ ‏النظير ؛ جليسين ثامن السلسلة 8 مستبدل بألانين.‎ 5 ]١ ‏[الجدول‎ النظير المتوالية المعدلة
AIG = A ١ ‏النظير‎ النظير ؟ ‎A‏ هج كخم النظير ؟ ‎A‏ هب ‎AIRY‏
BSG — A ‏النظير ؟‎ النظير © ‎A‏ »— ال النظير ‎١‏ 4 جا تو
BOF — 4 ١ ‏النظير‎ النظير 4 عب ‎AY‏ النظير 1 يا م بذ فلم تم ذكر المواد البادئة ‎Primers‏ لتكبير نظير إنسولين في الجدول التالي ؟. [الجدول ؟] النظائر ‎Aad‏ رقم هوية المتوالية
Trey
00 00610006006 متوالية برقم ‎b ICAGCATIGTICOACARTCGCACGCTICTGLAGSRACCE‏ . هوية: ‎١‏ ‏النظير ‎١‏ ‏متوالية > برقم هوية: ‎Y‏ ‏متوالية > برقم النظير ؟ § 406 218 النغنفةة 1006061 5ف 0060 5 هوية: ؟ ‎DH 061060811610001 00 ¥ ١‏ اال ٍ متوالية > برقم هوية: ¢ متوالية > برقم لتظير ؟ 1010100 5 هية: > ‎OGATCCTCAGTTACACGCATTTICCAGCTAGTAGAG 3‏ 5 متوالية ‎dy‏ ‏هوية: + متوالية > برقم النظير ؟ ل ‎Vr‏ ‏ٍ & بلدا 101100 فلا008 0001م انااان! أنا0م 9 متوالية ‏ برقم هوية: ‎A‏ ‏متوالية > برقم ‎AS 3 a‏ ا ا مم ‎ls‏ ه ‎BUTTREOTGTGTAGRAGAACGLTCGTICOCCOEACACTAG §‏ متوالية ‎Sy‏ ‏هوية: ‎Ye‏ ‏نظي + ا ‎dn‏ ‏ٍ ا لان 0017110561616 5 هوية: ‎١١‏ ‏ل
متوالية ‎dr‏ ‏هوية: ‎VY‏ ‏متوالية ‎dr‏ ‎AREY’ FTAA AAA Ad SAR at) 2 RE 2‏ ل ” 3 ‎BTRCGGGRMACEAGACTICGCATACACACCCAAGACCOGD‏ يي ¥ 000000000 000001011000161 5 متالية ‎dy‏ ‏هوية: ‎١‏ ‏متوالية > برقم ول انون باب اننا ال-0 هوية: ‎١١‏ ‏النظير ‎A‏ ا : ‎Ae b-Cagtaglclosagelatteoagagageanatyetye-3‏ برقم هوية: ‎١١‏ ‏متوالية > برقم ا ‎Words‏ ‏النظير ؟ م ا ‎ange 9 00000‏ برقم هوية: ‎YA‏ ‏ثم تنفيذ ‎PCR‏ لتكبير نظير إنسولين تحت ظروف 5 م لمدة ‎١‏ ثانية 5 ‎NE‏ لمدة ‎al ١‏ م ‎١ sad‏ دقائق على مدار ‎YA‏ دورة. تم إدخال نظائر شظية إنسولين ‎insulin analog‏ ‎A) fragments‏ تم الحصول عليها في هذه الظروف في ناقل 01220 ليتم التعبير عنها كأجسام تضمين ‎(gla‏ 500165 100115101 171780681181 وتم تحديد نواقل التعبير ‎expression‏ ‎vectors 5‏ الناتج كمركبات نظير الإنسولين ‎١ 01225 insulin analogs‏ إلى ‎ .5‏ تضمنت نواقل التعبير المشتمل عليها المتضمنة أحماض نووية 8005 تقوم بترميز متوالية الأحماض الأمينية لمركبات نظير الإنسولين ‎١‏ إلى 9 في ظروف التحكم في محسن ‎(TT promoter‏ وتم التعبير عن بروتينات نظير الإنسولين كأجسام تضمين في الخلايا المضيفة ‎host cells‏ ‎ey‏
تم تحديد متواليات ‎DNA‏ ومتواليات بروتين لمركبات نظير الإنسولين ‎١‏ إلى 9 في الجدول التالي ‎Y‏ ‏[الجدول ؟] ‎a -‏ النظير المتوالية م حك = = ا المتوالية تع عفد ‎GT‏ وت ‎TCA TAL‏ عضو ‎TET‏ ا خب ‎BAC C&A‏ للم ا ‎GAS CGA GHT 112 TT TAC ATA CUT‏ مقا ‎GTS TOO‏ فت الخال ات ‎GAG GUA SAG GAL TG Cale HTH (3G LAG‏ ماما ‎AAG AUC COU‏ ‎SUA GGT AGC CTS CAG DNA‏ تلفق ‎GOI GGG BUC COT‏ قاع ‎GAG‏ فته ‎YA‏ ‏واي ‎TOU CTO DAG AAG UOT GIG ATY‏ قفن ‎SOC TES GET CE GARY‏ نظير ‎Gab‏ كلل ‎TGC TERT AUT ARI ATC TGC TCC C70 TAU AG‏ فقا ‎GAR‏ ‎ASE TAL 100 RAL 1‏ ‎١‏ ‎His Lew Sys Gly Ser Mis Lou Wal Gla Abs Less Tyr Lew‏ ضاق ‎Pre Wal Aan‏ ‎Wat Cpr aly Glu Arg Ely Plies Bee Tye Thee Fen Lys Thr Reg Seg Gl la‏ ‎Ala Gly Cw‏ باد ‎Pro‏ وات ‎Gly‏ وات ‎Wal Glu Leu‏ علي ‎Sv‏ لوك ات ‎a Asp Lew‏ 0 ‎Be Val add‏ وام ‎Lao Slo Gy Ser Leu (la Lys Arg‏ ملم ‎Ser Lon Gh Pro Lew‏ ‎Bhs Asa Tyr Os‏ بها صا ‎Tye‏ يها ‎a Gin Cys Cys Thy See The Cvs Ser‏ ‎Assy‏ ‎GAA GIT‏ ماله فت ‎ITC GIT AAC Tad CAC TTS TOT GG Toa CAL‏ لأا ‎CFC TAC UTA GTS THD Gin Ras RA GOL TTC TT TA SOA‏ ‎CAL‏ قم ‎SAG ACT UGE C0 GAG GEA HAG GAL CTH CAS GIG‏ ‎CAG DNA‏ و3 ‎GUE AGT‏ فضا ‎GGT TUT GOT‏ اه عمو ‎AR GP GAG CHG‏ ماب ‎CAG AAG CLT BOT‏ مت ‎SL THR OOO CTH GAG GGG YEO‏ نظير 5 + ‎TG TOT ANT AG ATE Tia Tod OFC Tal CAG‏ قف ‎GIES GAS‏ ‎GAG AAD TAD TOU AAT ١‏ ل يما ‎Leu Val Blu Als Lew Tye‏ جلا ‎Less Cys Gly Ser‏ ونا صل ‎San‏ او ‎Piss‏ ‎Fhe Fhe Ter The Pra Lys The Arg fog Glu 8s‏ ينظ وه ‎wal Dyn Oly Olu‏ بروثين ‎Gly Al Giy‏ ممق ‎Ody Ode Ob‏ بها ‎Wal Gly Gls val Gh‏ صلق ‎YY Gls Asp Le‏ ‎Wal had‏ حالم ‎Ser Leu Gin Lys Sey Gly‏ بت ‎Glu‏ مضا ‎Gls Fro Leu Ala‏ يها ‎Gar‏ ‎Tyr Sn Lew Gla San Tyr Sys‏ يها ‎Sys Cys Thy Sor Te Cvs Ber‏ صلق ‎Glo‏ ‎Hepes‏ ‎vey‏
YIU GIT Aa 8A ‏عقت‎ TTS ‏ياه نذا‎ TOS ‏فب ف‎ QT HAS HOT
CVC TAC OTA OTH TOU Gh GAG ‏قنك‎ GNC TH TTC TAC Als {00
BEL AUC NLT CHG GAG ‏قاف‎ HAG GAD ‏ملب‎ CAG ‏اله‎ Gi JAG
YV an GAG CTO GEC SOG GEC ‏لع‎ GOT GOA DUD AGE 0 CAG DNA
COR TYG GUE ‏يفا فضة قفا وا‎ CT CAD SAG TOT GOT ATT IR
GRA ‏فق‎ TEE FHT ACT AGE ATC TGO TOO CF TAD CAG DTG GAD ‏نظير‎ ‎ARC GEG THC ‏فق‎ 7
Pree Val ‏ديح‎ Gln His ew ‏كوب‎ Gly Ser ‏جا‎ Leu Val Glu ‏ملم‎ Lou ‏كرت‎ Lew v
Wad Dye Ole ‏يلت وعم نلف‎ Pls Phe Tyr Thr Pra Ups Thr ‏ويم‎ deg Glu Aa
Ys Cha Beg Lew Sn Val Gf Gln Val Glu Leu Oe ‏بلق‎ Gly Sa ‏ولت‎ Als Gly Cw
Sor Leas ‏حاط‎ Fro Len Sle Lau Glo Gly Sor Law ‏ماق‎ Lis Ang Gly Se Wad HL
Gis ‏ملق‎ Cys Cys The Ser Be Ops Sor bee Tee Gla Lew She Asn Ada Cys
Ags
FTC GET AAR CAA CAC 116 161 G00 TOA SAC TG ‏فته‎ GAR BCT
CTC TAL TTA GT THE GGG GAS QA GGT TTC THD TAL ALA JCC
AAS ‏اد‎ CHC CHG GAR BUA GAG GAL CTS CAG OTD ‏فقة‎ CAG
YO G76 GAG CTS ‏عمق عون عقو‎ BUT GGT GOA GRC AGE ‏فك‎ CAG DNA
EE TIE ‏تعن‎ CT GAG ‏ففرا‎ TOO ‏خا‎ CAS ARG COT Ges ATT ‏شتت‎ ‎AA CAR TOS TOT ‏لد‎ AT ATC TSC TOU CTC TA ‏ف مف‎ GAG ‏نظير‎ ‎2 ‎sal Tar TEC ‏عذق‎ ‎¢ ‎Phe Wal Aor Gin His Lou Cys Ala ‏رمك‎ His Leu Vad Glas Ala ‏يها‎ Tw Lew
Val ‏جر‎ Gly Glu Sig Gly Plies Phe Tyr Thy Pro Lys The Arg Rey Gls ala va Glu Asp Yew Gln Wal Gly Gla Val Gh ‏يها‎ Gly Gly Gly Peo Gly Ala Gy Cw
Sor Lat Glen Fro bes Sls Lew Gla Gly Tae Lew Gli Lys ‏جات وية‎ He Yad EN
Glu Gly ‏وى‎ Cys The Ser fle Cys Ser Low Tyr Gin Leu ‏حث بت‎ Tyr Oy
Asn
TTC ATT AAD CAA CAL TYG VHT GGU ‏فا‎ C&C UTS OTE SAR SOT
CRC TAT OTA GTG ‏اما‎ GHG GAS CHA HIG TTC TH TAC ACA JOT
SAG SOU ‏عو‎ Od GAD ‏ذا‎ HAG GAD ‏فك‎ Cal ‏الاق‎ GHG CAG
Yv ‏فتن‎ GAG CTH GOL BOG ‏تع عمو‎ BHT DUA SGC AGS 16 CAG DNA
CUT TT GUE OTS Gad GG TOC OVO CAG a8 THT GOI ATT ‏ان‎ ‎GRA CRA TOI TOT ACC AGU ATT ‏تا‎ TCO UTE ‏غذة‎ CAL ‏تا‎ GAD
ART TAD TOU AML ‏نظير‎ ‏محال‎ Yat As Glo Mis ‏بها‎ Cys Gly Sor Hs Low Wal Glu Aly Lew Tyr ‏بها‎ ° : Wal Cys tly Oily Arg Ala Fhe Blige Yes Thr Pro Lys The Avg Avg Glo Ada
YA : Glu Asp Less Gin Wal ‏وات‎ Gis Wal Glu Law Gly Gly Gly Sao Gy Als GY ‏بن‎ ‎Ser ‏صا مسا‎ Pro ‏يسا‎ Al ‏بها‎ Glu Gly Ser ‏داق وها‎ Lys rg Gly ‏ملا‎ vat ‏الفا‎ ‎: Sha ‏حا‎ Uys Ons The Ser le Uys Sor Lew Hr Gin Leu Shi ‏صم‎ Tyr ys : Asn ‏ب د‎
_ Ad «=
TRO GT aad CAR CAD 135 TOT OGD TO& CAC OTE ‏فاته‎ SAR ‏العو‎ ‎CT TAL CTA GTS TEL GOD Gaul ‏فت‎ GT ‏قت‎ THD TAS ACA STL
AAG BCC CHT COG GEO GUA GAG ‏مل لقا‎ SAS ‏قلطم‎ GGG ‏فشن‎ ‎Ya GIG GAG ‏ها‎ Guard Hla GE COT GOT ‏قاة‎ GLE AGC TV ‏قف‎ DNA
CIE ITE OCC TO Gad DGG TC ‏قت‎ CAD AAG TOT GC ATT GN ‏فقت‎ CAA TRC TET ACS AGE aT TOE Tal CTE YA CAG TTR GAG .
AAL TAL TGC AAT ‏نظير‎ ‎Phas Val ‏صق‎ xn Hig ‏بيغا‎ Ops Gly ‏سك‎ His ‏با‎ Val Sha ‏يها فلخ‎ Tyr Weg 1
Wal Eos Db Glo Arg Gly Ada Pia Tyr Thy Pro Lys Thr Ang Arg Bi Als v hu Begs Leas dn Vad ‏كلت وان‎ Wal Glu Lew Gly Gd Gly Pro Gly Ala By 0 ‏نه و‎ Gln Fre Len Al ‏بها‎ Glu Gly See ‏نضا‎ Gln Lys Avg ‏يات‎ Te ‏توب‎ OT
Gala Oy Cys Cys Fy See He Oye Sev ‏يسا‎ Tr ‏صلق‎ Low ON San Tye Sys
Air 176 GUY Adel CA CAL TT 101 G0 TEA AC ‏اله فت‎ Gad GY £70 TAL OTA ‏قتي‎ TOO GO ada ‏فوت‎ O60 TT GCG TAL ACA CU
AAG AUT ‏“قا‎ COG GAG GUA GAG GARE ‏قت‎ CAG GIG GGG CAG
VY ‏فته‎ BAG CTE ‏عفه‎ G00 BOC CCT GOT GUA HG AGL ‏تك‎ CAG DNA
L000 11 GUS ‏فته‎ DA GO TOU STH ‏ضف‎ ASS ‏ألم عضن توم‎ GG
QAM CAS TOL THT ADL AGL ATC Yad TH CFTC TAD CAs ‏وال‎ Bad ‏نظير‎ ‎ARE TAL THU AAC ١ ‏ددا‎ Wal Bsr ‏صل‎ Ris Lew Cys Gly Ser Hs ‏يها‎ Wal ‏بتي‎ Sa Lew Tyr Leu v
Wal Cys Gly Glo ‏ويم‎ Oly Phe Ala Tyr The Pro Lys Thr Arg Avg Glo Ada vy Sli Asp Lew ‏ما‎ Val Gly Gln Vial Glu Lew Gly Gly Gly Fro Gly ala Gi 0
Serv ‏ص علط بها‎ Lew ‏نضا فل‎ Glue Sly Ser ‏را‎ Gln Lys Sug ‏جات‎ Be Val had
Ghar ‏صا‎ Cys Cvs The Ser le Cys Ser Lew Tyr Gln Lene Gl Asn Tyr Cys
Hae 172 17 AAD CAA CAL TTS VOT GG ‏قت‎ CAL CTE GIG Gas ‏تلن‎ ‎STC TAL OTA GTS TOE BGG GAS £08 BG 110 TC TAC ACA CK
ARG ACC TOU DGG GAR OLA GAD BAC ‏فت‎ CAG GTO GON CAG
VY EVE GAG ‏تت‎ B00 GGG GOL CCT GUT GOA GEL AGU ‏فت‎ CAG DNA
SIO TTR GUE CTE AG GIG TOC ‏اد‎ CA AAS ‏نهنا‎ GRC ATT ‏م‎ ‎AG LAR THO YET 800 AGC ATT THO TCO ITE GRA CAL ‏يكت‎ Gad
SAL TAL TG Aa TGA 7
Five Yal ‏محم‎ Sin His Leu ‏حب‎ Gly Ser His Lea ‏اول‎ Gla ‏فاخ‎ Leu Tyr Len A
Wad Cys hy Gh Arg Gly Fhe Phe Tye The Pro Lys The Aug Arg Si ‏حلم‎ ‎2 Glu Asp Lew ‏صل‎ Vai Bly Ol Wal Ble Lay Gly ‏ل‎ Oly ‏جاق م‎ Ala ‏يرثت‎ 0
Sev bes Gly Fra Leg Ala Leu Glu GY Ser ‏بس‎ Gla bys &rg Gly Se wal aha
She Gln Cys Cys The Sen Tle Ups Ser ‏نضا‎ Glu Gla Leo Gli Asn Tyr Os
Asn
_ Ad \ —_
TYE GTY ASC CAA CAC FTG TOT ‏عفد‎ YO& CAD CFG GT GRA HCY
CVC TAC CTA GTQ TEE HG BAA CORA GOI TL TH TAC ACA ‏جع‎ ‎ARG BCC CBE COG GAG GEA SAG GAC ‏مت‎ CAG GTS GHG TAG
VO ‏كته‎ GAG LTH GG SOG GGL COT GET GLA GGL AGL CT TAG DNA £05 TV GC ‏ته‎ GAS GIG TOU CTR CAD ABE ‏توت‎ GOT ATT GG ‏خرف فضي‎ TOE THT ACL AGE ATU Yl TOL UTE ASD CAS CTH GAG 5
AAC TAL TOGO AAL TOA > ‏اا ا ل‎ 4
Flee Wal &sn Gln is Leu Cys Shy Ser His Lew Val Shu Sle Leu Tyr ‏نا‎ ‎Wal Cys Gly ‏سا‎ Arg Gly Phe Phe Tyr The Pro Lys The Arg Arg ‏بات‎ Als
Oder Asp ‏حاط يسا‎ Wal Gl Sle Wal Glas ‏بها‎ Gly Gh Gly Bre Gly ‏ملم‎ Oly . vio N A 1 : . ‏بروتين‎ ‎Ger ‏ما‎ Oy Pro Lea ‏ماه وما فلخ‎ Gly ‏مك‎ Lew ‏لف‎ Lvs ‏جات ويه‎ He val
Cin Gln Ops ‏سخ‎ The Ser lle Cys ‏عة‎ dou Asm ‏صلق‎ Leu Gl dan Tyr Qs
Ran ‏نظير إنسولين ناتج عودة الارتباط الجيني‎ fusion peptide ‏؟: التعبير عن ببتيد دمج‎ JE recombinant insulin analog ‏لارتباط الجينى تحت التحكم الخاص بمعزز‎ ١ ‏ثم تنفيذ التعبير عن مركبات نظير | لإنسولين ناتج عودة‎ 1-0017 ‏(الإشريكية القولونية‎ BL21-DE3 ‏_تم تحويل الإشريكية القولونية‎ .17 promoter ‏مع كل من نواقل التعبير عن نظير إنسولين‎ (Novagen ¢(ompT hsdS(rB-mB-) gal ADE3 5 ‏به‎ asd protocol ‏الجيني. تم إجراء التحويل وفق للبروتوكول‎ BUSY sae ‏ناتج‎ ‏محولة مع كل ناقل تعبير‎ Single colonies ‏جمع وتلقيح مستعمرات فردية‎ 3 (Novagen) ‏الذي يحتوي‎ (LB) Luria ‏من مرق‎ XY ‏ناتج عودة الارتباط الجيني في‎ expression vector
A ‏ميكروجرام/مل) وتمت الزراعة عند ١7م لمدة 10 ساعة.‎ © ١( ampicillin ‏على أمبيسيللين‎ ‏ناتج عودة الارتباط الجيني و77 من وسط‎ strain culture broth abl. ‏خلط مرق مزرعة‎ 0 ‏(حجم/حجم). تم‎ ١:١ ‏بمعدل‎ glycerol ‏من جليسرول‎ 77١0 ‏الذي يحتوي على‎ LB medium ‏م 3 والذى ثم استخدامه‎ ١٠2 76- ‏التخزين عند‎ As cryotu be ‏مل إلى أنبوب مبرد‎ ١ ‏تصريف كل‎ ‏لإنتاج بروتين دمج ناتج عودة الارتباط الجيني.‎ cell stock ‏كخلية احتياطية‎ ‏من كل‎ vial ‏قارورة‎ a 3 Cad ¢ ‏للتعبير عن مركبات نظير الإنسولين ناتج عودة ا لارتباط الجينى‎ shaking ‏مرق 0118ا؛ وتمت زراعتها مع الرج‎ XY ‏مل من‎ 5 ٠٠ ‏خلية احتياطية وتم تلقيحها في‎ 15 . H H A 7 oe It ~ w 0 . 5,0 ‏إلى‎ OD600 ‏عندما يصل‎ cultivation ‏ساعة. .تم إنهاء المزرحة‎ ١-١6 ‏عند ١7م لمدة‎ .5660 culture broth ‏8016نا© كمرق مزرعة أساسية‎ broth ‏أو أعلى. تم استخدام مرق المزرعة‎
Trew
دج تم تلقيح مرق هذه المزرعة الأساسية إلى جهاز تخمير سعة ‎MSJ-U2,) jlo. fermentor‏ ‎(B.E.MARUBISHI, Japan‏ والتي تحتوي على ‎١١7‏ لترة من وسط التخمير ‎fermentation‏ ‏,م وتم بدء حمام تخمير أولي ‎initial bath fermentation‏ تم الإبقاء على ظروف المزرعة ‎culture conditions‏ عند درجة حرارة قدرها ١7”م؛‏ معدل تدفق 010/1816 بمقدار ‎Yo‏ ‏5 لتر/دقيقة ‎(vvm ١(‏ بسرعة إثارة ‎speed‏ 89181100 قدرها ‎٠٠١‏ لفة/دقيقة؛ وعند ‎dap‏ حموضة ‎٠‏ بواسطة باستخدام 770 من محلول أمونيا ‎.ammonia solution‏ .تم تنفيذ التخمير ‎Fermentation‏ في وضع التغذية على دفعات ‎fed-batch mode‏ بواسطة إضافة محلول تغذية ‎(feeding solution‏ عند استهلاك المواد الغذائية 0710116015 في مرق المزرعة. تمت مراقبة نمو السلسلة ‎strain‏ بواسطة صمام ‎valve‏ 010. & إدخال ‎IPTG‏ في تركيز قدره 5560 ميكرومولار ‎ce 0‏ عندما كان صمام ‎OD‏ أعلى من ‎(JAY) am .٠٠١‏ تم أيضا تنفيذ المزرعة لمدة حوالي ‎YOY‏ ساعة._بعد إنهاء المزرعة؛ تم جمع سلالات ناتج عودة الارتباط الجيني ‎recombinant‏ ‏5 بواسطة الطرد المركزي ‎centrifugation‏ وتم التخزين عند ‎A=‏ لحين الاستخدام. المثال ؟: استخلاص واعادة مضاعفة ‎refolding‏ نظير إنسولين ناتج عودة الارتباط الجيني من أجل تغيير مركبات نظير الإنسولين ناتج عودة الارتباط الجيني المعبر عنها في ‎JE‏ 7 إلى صور ‎ALE‏ للذوبان ‎soluble forms‏ تم تمزيق الخلايا متبوعا بإعادة المضاعفة. تمت إعادة تعليق ‎٠٠١‏ جم (وزن رطب ‎(Wet weight‏ من الكريات الخلوية ‎١ cell pellet‏ لترة من محلول تنظيم التحلل ‎lysis buffer‏ )+0 مل مولار من ‎1715-110١‏ (درجة حموضة ‎٠‏ ,.)؛ ‎١‏ مل مولار من ‎EDTA‏ (درجة حموضة ‎٠‏ .8)؛ ‎١.7‏ مولار من 80ل و ‎Triton 7١,5‏ 26-100). .تم تمزيق الخلايا بواسطة معالج ‎ad‏ دقيق ‎AC) M-110EH microfluidizer processor‏ ‎(Technology Corp.
Model M1475C 0‏ عند ضغط تشغيل ‎operating pressure‏ قدره ‎٠٠‏ رطل/بوصة مربعة. بعد ذلك تم إجراء طرد مركزي للخلايا المتحللة الممزقة ‎cell lysate‏ عند ه7060 لفة/دقيقة و ؛ "م لمدة ‎٠١‏ دقيقة. تم نبذ المواد الطافية 50106117181801 وتم تعليق الكريات ‎Apellet‏ ؟ لتر من محلول منظم غسول ‎Triton 7 «,0) washing buffer‏ 22-100 و +0 مل مولار من 115-1101 (درجة حموضة ٠.8)؛ ‎١,7‏ مولار من ‎١ NaCl‏ مل مولار من ‎(EDTA‏ ‏5 بعد الطرد المركزي عند ‎700٠0‏ لفة/دقيقة و؛ "م لمدة ‎٠١‏ دقيقة؛ تمت إعادة تعليق كرية الخلية ‎cell‏ ‏بد
اا ‎pellet‏ في ماء مقطر ‎cdistilled water‏ متبوعة بالطرد المركزي بنفس الطريقة. بالتالي تمت إعادة تعليق الكرية في 50860 من المحلول المنظم ‎١(‏ مولار من جليسين ‎TVA (Glycine‏ جم من سيستين-ا10ا؛ درجة حموضة ‎(Ve,‏ وتم التقليب عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة. من أجل استخلاص نظير الإنسولين ناتج عودة الارتباط الجيني تم بعد ذلك إعادة تعليقه؛ تمت إضافة 060 ملل من ‎A‏ مولار من اليوريا 068 وتم التقليب عند 60؟"م ‎sal‏ ساعة. لإعادة مضاعفة مركبات نظير 8081095 الإنسولين ناتج عودة الارتباط الجيني المذابة ‎solubilized recombinant‏ ‎dnsulin‏ ثم تنفيذ الطرد المركزي عند ‎7.6١ dic‏ لفة/دقيقة و 2 م لمدة ‎١‏ دقيقة ‎As‏ الحصول على المواد الطافية. ‏ تمت إضافة ؟ لتر من الماء المقطر ‎Lo‏ إليه باستخدام مضخة تمعجية ‎peristaltic pump‏ عند معدل تدفق قدره ‎٠٠٠١‏ مل/ساعة أثنا ء التقليب ‎stirring‏ عند عند 4 أم
0 المدة ‎١١‏ ساعة. ‎JE‏ ؛: التنقية ‎purification‏ بكروماتوجراف ربط كاتيون ‎Cation binding‏ ‎chromatography‏ ‏تم تحميل العينة التي تمت مضاعفتها على عمود ‎(GE healthcare) Source 5 column‏ نمت معايرته ب ‎5١‏ مل مولار من محلول منظم ‎510116١‏ من سترات الصوديوم ‎sodium citrate‏ (درجة
‎dia gen 15‏ ً, ( الذي يحتوي على م من (يثانول ‎«ethanol‏ وبعد ذلك ثم شطف البروتينات نظير الإنسولين ‎٠ insulin analog proteins‏ أضعاف حجم العمود بتدريج خطي ‎linear‏ ‎gradient‏ من 20 إلى ‎٠١ 2٠٠١‏ مل مولار من محلول منظم سترات الصوديوم (درجة حموضة ‎)٠.٠‏ يحتوي على ‎١,*©‏ مولار من كلوريد بوتاسيوم ‎chloride‏ 00185510107 و 45 7 من إيثانول. المثال ‎ro‏ معالجة تربسين ‎Trypsin‏ وكربوكسي ببتيداز ‎B Carboxypeptidase‏
‏20 ثتمت إزالة الأملاح ‎Salts‏ من العينات المشطوفة ‎eluted samples‏ باستخدام عمود إزالة ملح ‎cdesalting column‏ وتم تبادل المادة المنظمة بمحلول منظم ‎٠١(‏ مل مولار من ‎Tris=HCI‏ ‏درجة حموضة ‎Lad (Av‏ يتعلق بعينة البروتين التي تم الحصول عليها؛ تمت إضافة تريبسين يناظر ‎٠٠٠١‏ معدل مولاري ©8110 +1018 وكربوكسي ببتيداز 8 يناظر ‎٠٠٠١0‏ معدل مولاري؛ وبعد
‏بد
— اذ ذلك تم التقليب عند ١١٠7م‏ لمدة ‎١6‏ ساعة. لإنهاء التفاعل؛ تم استخدام ‎١‏ مولار من سترات الصوديوم (درجة حموضة ‎)٠ ١‏ لتقليل درجة الحموضة إلى ‎Yo‏ ‎:١ JE‏ التنقية بكروماتوجراف ربط كاتيون بالتالي تم رفع العينة المتفاعلة على عمود 5 ‎(GE healthcare) Source‏ تمت معايرته ب ‎٠١‏ ‏5 مل مولار من محلول سترات الصوديوم منظم (درجة ‎dua gen‏ ,أ ( تحتوي على م من إيثانول وبعد ذلك ثم شطف بروتينات نظير ا لإنسولين في ‎٠‏ أضعاف حجم العمود مع تدرج خطي من م إلى ‎ARE‏ من ‎Yo‏ مل مولار من سترات الصوديوم (درجة ‎dia gan‏ ,ص ( من محلول منظم يحتوي على ‎١,5‏ مولار من كلوريد بوتاسيوم و45 7 إيثانول. المثال 7: تنقية كروماتوجراف ربط أيون ‎Anion binding chromatography‏ 0 تمت ‎AY‏ الأملاح من العينة المشطوفة باستخدام عمود نزع ملح؛ وتم استبدال المحلول المنظم بمحلول منظم ‎Vv)‏ مل مولار من ‎Tris=HCI‏ درجة حموضة ‎٠ (V,0‏ من أجل عزل نظير إنسولين نقي من العينة التي تم الحصول عليها في المثال ‎AT‏ تحميل العينة على عمود تبادل أنيون ‎(Source ©: GE healthcare) anion exchange column‏ تمت معايرته ب ‎٠١‏ مل مولار من محلول ‎Tris‏ منظم (درجة حموضة ‎¢(V,0‏ وتم شطف بروتين نظير الإنسولين في ‎٠‏ أضعاف حجم العمود بتدريج خطي من ‎yn‏ إلى ‎٠ ARE‏ مل مولار من محلول ‎Tris‏ (درجة حموضة 0, 0( منظم يحتوي على ‎١,5‏ مولار من كلوريد الصوديوم ‎.sodium chloride‏ تم تحليل نقاء نظير الإنسولين المنقى بواسطة رحلان البروتين ‎protein electrophoresis‏ ‎SDS-PAGE)‏ الشكل ‎)١‏ وكروماتوجراف عالي الضغط ‎high pressure chromatography‏ ‎(HPLC)‏ (الشكل ‎oY‏ وتم تحديد تعديلات الأحماض الأمينية بواسطة تخطيط ببتيد (الشكل ) 0 وتحليل الوزن الجزيئي لكل قمة ‎peak‏ ‏نتيجة لذلك؛ تم إيجاد أن كل نظير إنسولين يتضمن التعديل المطلوب في متوالية الحمض الأميني الخاصة به. المثال /: تحضير مترافق نظير إنسولين (رقم ١)-جلوبولين‏ مناعي ‎Fc‏ ‏بد
—yvo- ‏لنظير الإنسولين باستخدام‎ A ‏بمجموعة بولي إيثيلين جليكول من السلسلة بيتا‎ N ‏تمت معالجة الطرف‎ ‏تفاعل نظير الإنسولين وبولي إيثيلين‎ (Japan (NOF) ‏من 102ل بولي إيثيلين جليكول‎ 4 ‏مع تركيز نظير إنسولين بمقدار © ملجم/ملل عند ؛"م لمدة‎ ٠:4 ‏جليكول عند معدل جزيئي بمقدار‎ ‏مل مولار من سترات الصوديوم عند‎ ٠ ٠ ‏تصل إلى ساعتين. عند هذا الوقت؛ تم تنفيذ التفاعل في‎ ‏مل مولار من سيانو‎ Fv ‏درجة حموضة 57,0 760 أيزوبروبانول ا1500100800. تمت إضافة‎ 5 ‏وتم‎ reducing agent ‏كعامل اختزال‎ sodium cyanoborohydride ‏بوروهيدريد صوديوم‎
GE) SP-HP ‏بعمود‎ reaction solution ‏السماح بالتفاعل. تمت تنقية محلول التفاعل‎ (V+ ‏باستخدام محلول منظم يحتوي على سترات الصوديوم (درجة حموضة‎ (USA (Healthcare ‏انكا.‎ concentration gradient ‏وتدريج تركيز‎ Jol) ‏من‎ £20 5 ‏تم إجراء تفاعل بين نظير إنسولين‎ FC ‏لتحضير مترافق من نظير إنسولين وشظية جلوبولين مناعي‎ 0 ‏إلى‎ ١:١ ‏بمعدل جزيئي‎ Fo ‏جليكول واحدة وشظية جلوبولين مناعي‎ cli) ‏المعالج بمجموعة بولي‎ ‏كلي قدره‎ 01016111 concentration ‏ساعة؛ بتركيز بروتين‎ ١١ ‏وعند درجة حرارة 75م لمدة‎ 7
HEPES ‏مل مولار من‎ ٠٠١ ‏ملجم/ملل. في هذا الوقت؛ كانت ظروف تفاعل المحلول المنظم‎ ٠ ‏مل مولار من سيانو بوروهيدريد صوديوم كعامل اختزال‎ ٠١ ‏وتمت إضافة‎ (AY ‏عند درجة حموضة‎
Fo ‏إليه._بالتالي؛ تم ارتباط بولي إيثيلين جليكول بالطرف لا من الشق‎ 5 ‏مع‎ (USA (Healthcare GE) © HP ‏بعد إنهاء التفاعل؛ تم تحميل محلول التفاعل على عمود‎ ‏تدريجي لفصل شظية جلوبولين‎ NaCl ‏وتركيز‎ (V,0 ‏(درجة حموضة‎ Tris-HCI ‏محلول منظم‎ ‏غير المتفاعلة ونظير أنسولين أحادي مضاف إليه بولي إيثيلين جليكول.‎ Fo ‏مناعي‎ ‏كعمود ثانوي لإزالة شظية‎ (USA (Healthcare GE) Source 15150 ‏بالتالي» تم استخدام‎ ‏حيث تم ربط اثنين أو أكثر من مركبات نظير‎ (HRD ‏المتبقي والمركب‎ Fo elie ‏جلوبولين‎ 0 ‏من نظير الإنسولين‎ Ge ‏الإنسولين بشظية الجلوبولين المناعي © وبالتالي تم الحصول على‎ ‏هذا الوقت؛ تم تنفيذ الشطف باستخدام تركيز تدريجي‎ 8 WFC elie ‏وشظية مركب جلوبولين‎ ‏وتم تحليل‎ o(V,0 ‏(درجة حموضة‎ Tris—HCI ‏يحتوي على‎ ammonium sulfate ‏لسلفات أمونيوم‎ 505-( ‏مشطوف بواسطة رحلان البروتين‎ FO ‏مترافق من نظير الإنسولين-مركب جلوبولين مناعي‎ ‏بد‎
‎(PAGE‏ الشكل 4؛) وكروماتوجراف عالي الضغط(©-ا10!) (الشكل 0( ‎dass‏ لذلك؛ وجد أن المركب المترافق يتضمن على الأقل نقاء بنسبة 7949. ‎JB)‏ 9: مقارنة ألفة ربط مستقبل الإنسولين بين إنسولين أصلي؛ نظير إنسولين؛ مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎(FC‏ ومترافق نظير إنسولين-جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ‏5 من أجل قياس ألفة ربط مستقبل الإنسولين لمترافق نظير الإنسولين-مركب جلوبولين مناعي ‎Fo‏ تم استخدام رنين البلازمون السطحي ‎SPR, BIACORE ( Surface plasmon resonance‏ ‎GE healthcare‏ ,3000) للتحليل. تم نقل مستقبلات إنسولين ‎Insulinreceptors‏ على شريحة ‎CMS chip‏ بواسطة قارنة أمين ‎coupling‏ ©80710؛ وتم تنفيذ © عمليات تخفيف 01/011005 أو أكثر من إنسولين أصلي؛ نظير إنسولين؛ مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ومترافق 0 نظير إنسولين-جلوبولين مناعي ‎Fo‏ عليها؛ بشكل مستقل. بعد ذلك؛ تم فحص ألفة ربط مستقبل الإنسولين لكل مادة. ‎A‏ حساب ألفة ارتباط كل ‎sale‏ باستخدام ‎-BlAevaluation software‏ في هذا الوقت؛ كان النموذج المستخدم ‎١:١‏ من ارتباط 809001013 مع انحراف أساسي ‎baseline‏ ‎drift‏ ‏نتيجة لذلك؛ مقارنة بالإنسولين البشري ‎chuman insulin‏ أبدى نظير إنسولين (رقم 1( ألفة ارتباط مستقبل بمقدار ‎ZV EA‏ أبدى نظير إنسولين (رقم 7) ألفة ارتباط مستقبل بمقدار 9,8 أبدى نظير إنسولين (رقم ‎(A‏ ألفة ارتباط مستقبل بمقدار ١,759؛‏ أبدى نظير إنسولين (رقم 1) ألفة ارتباط مستقبل بمقدار ‎YAN‏ أبدى مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ألفة ارتباط مستقبل بمقدار 75,9-7,7 على أساس التجارب المنفذة؛ أبدى مترافق نظير إنسولين (رقم 7)-جلوبولين ‎Fe elie‏ ألفة ارتباط مستقبل بمقدار 70,9 أو أقل؛ أبدى مترافق نظير إنسولين (رقم ١)-جلوبولين‏ مناعي ‎Fe‏ ألفة ارتباط مستقبل بمقدار 71,4 أبدى مترافق نظير إنسولين (رقم 4)-جلوبولين مناعي ‎Fe‏ ألفة ارتباط مستقبل بمقدار 71,8 و ‎sad‏ مترافق نظير إنسولين (رقم 4)-جلوبولين مناعي ‎Fe‏ ‏ألفة ارتباط مستقبل بمقدار 77,7 (الجدول 4؛). نتيجة لذلك؛ تمت ملاحظة أن نظائر الإنسولين وفقا للاختراع الحالي يتمتع بألفة ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة؛ مقارنة بالإنسولين الأصلي؛ وكان لمترافقات نظير الإنسولين-مركب جلوبولين مناعي ©" أيضا ألفة ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة 5 بشكل ملحوظ. ل
—vV- [¢ ‏[الجدول رقم‎ ‏مقارنة ألفة ارتباط مستقبل إنسولين‎
Kc (nM) Ke(1/Ms, Ka(1/Ms, ‏رقم اسم المادة‎
X103) X102) ‏الاختبار‎ ‏الإنسولين البشري الأصلي 71 إلا م‎ ١ ‏اختبار‎ ‏لف لف ال‎ 7 TL VY A )6 ‏نظير إنسولين (رقم‎ (VE, (ZANE) (VY) £7, ٠١ 17,5 ‏اختيار ؟‎ ‏الإنسولين البشري الأصلي‎ ‏لف لف ال‎ ‏رلا يل‎ RARE FP NEES ‏مترافق إنسولين‎ (72,3) (1YV,Y) (77,3) Fe ‏مناعي‎ ‎ST ‏ار‎ DUS )6 ‏مترافق نظير إنسولين (رقم‎ (7,2) (ZY) (7+ 9) FC ‏جلوبولين مناعي‎ ‏ل‎ Yo, vy Y, Vi ‏اختبار ؟‎ ‏الإنسولين البشري الأصلي‎ ‏لف لف ال‎ 1 ‏م"‎ "714 (V ‏مترافق نظير إنسولين (رقم‎ (79,9) (ZYV,Y) (ZY, yey
م ؟- مترافق إنسولين أصلى- ‎v,20‏ عه يك اضفر جلوبولين مناعي ‎FC‏ (77.7) (4.5 75) ال مترافق نظير إنسولين (رقم ‎3٠٠ 7٠ A - )١‏ جلوبولين مناعي ‎Fe‏ 71 (757,1) )7,9( اختبار > 7,4 ‎١,4‏ ل الإنسولين البشري الأصلي )754501( ARES) AREY لاا ‎VY, ¢ ١,4‏ مترافق نظير إنسولين (رقم ‎(A‏ )7597/,1( AREA (2700)
VE i PU . ‏إنسولين‎ HA (7¥,V) (721) (7) FC ‏جلوبولين مناعي‎ 77١ 1,¢ oY = (A ‏مترافق نظير إنسولين (رقم‎ )71( )751.5( (7,9) Fo ‏جلوبولين مناعي‎ اختبار 5 م ف .© الإنسولين البشري الأصلي (7%) ٠ ‏ل‎ (7%) ٠ ‏ل‎ (7%) vr)
TE, ١4 Y, Ao (3 ‏مترافق نظير إنسولين (رقم‎ (YAN) (ZYYY,0) (%3Y,9)
ATY, ١4 ٠04 ‏مترافق . إنسولين أصلي-‎ ‏ال‎ (Avi) (14,7) Fe ‏جلوبولين مناعي‎
4+ مترافق نظير إنسولين (رقم 4) ‎P=‏ ب بس جلوبولين مناعي ‎(7Y,%) FC‏ (278,0) 1)
‎:٠١ JB)‏ مقارنة الفعالية في المعمل بين مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ومترافق
‏نظير إنسولين-جلوبولين مناعي ‎FC‏ ‏من أجل تقييم الفعالية في المعمل لمترافق نظير الإنسولين-مركب جلوبولين مناعي ‎Fo‏ تم استخدام خلايا دهنية ‎adipocytes‏ 13-11 3متباينة مشتقة من فأر ‎mouse—derived‏ لاختبار استهلاك الجلوكوز ‎glucose‏ أو تخليق الدهون ‎Wlipid synthesis‏ تمت زراعة ‎Wall‏ 313-11 بشكل ثانوي في ‎7٠0‏ من ‎Jae Jas) NBCS‏ حديث الولادة ‎(newborn calf serum‏ يحتوي على ‎(Dulbeco’s Modified Eagle’s Medium, Gibco, Cat.No, 12430) DMEM‏ مرتين أو ثلاثة مرات أسبوعياء وتم الإبقاء عليه. تم تعليق خلايا 313-11 في وسط تباين ‎DMEM J) +) differentiation medium‏ يحتوي على ‎(FBS‏ وبعد ذلك تم التلقيح عند كثافة ‎٠١4 *« 0‏ لكل عين في طبق ذو ‎EA‏ عين؛ وتمت زراعته لمدة 5448 ساعة. بالنسبة لتباين ‎WAN‏ ‏الدهنية ‎cadipocyte differentiation‏ تم خلط ‎١‏ ميكروجم/ملل من الإنسولين البشري ) ‎Sigma,‏ ‎(Cat.
No. 19278‏ 0,+ مل مولار من ‎IBMX‏ (7-أيزو بيوتيل- ١-ميثيل‏ زانثين - الأ3-1501 ‎Cat. 010.15879 «1-methylxanthine‏ ,510018)؛ ‎V5‏ ميكرومولار_ من ديكساميثازون ‎(Sigma, Cat.
No.
D4902) Dexamethasone‏ مع وسط التباين» وتمت إضافة ‎You‏ ‏5 ميكرولتر من الخليط ‎mixture‏ إلى كل عين ‎well‏ بعد إزالة الوسط السابق. بعد ‎tA‏ ساعة؛ تم تغيير الوسط بوسط تباين مكمل ب ‎١‏ ميكروجم/ملل فقط من الإنسولين البشري. بالتالي؛ عندما تم تغيير الوسط بوسط التباين المكمل ب ‎١‏ ميكروجم/ملل من الإنسولين البشري كل 48 ساعة؛ تم اختبار تحفيز الخلايا الدهنية ‎4-١7 sad‏ أيام. لاختبار استهلاك الجلوكوز؛ تم غسل الخلايا المتباين بوسط خالي من مصل ‎DMEM‏ مرة؛ وبعد ذلك تمت إضافة ‎Yoo‏ ميكرو لتر لتحفيز نفاد المصل 0 المدة ؛ ساعات. .تم استخدام وسط خالي من المصل لتنفيذ عمليات تخفيف ‎٠١‏ مرات للإنسولين البشري من ؟ ميكرومولار إلى ‎١.0٠‏ ميكرومولار؛ ولمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ‏ومترافقات نظير إنسولين-جلوبولين مناعي ‎FO‏ من ‎٠١‏ ميكرومولار إلى 05607 ميكرومولار. تم إضافة كل ‎Yoo‏ ميكرو لتر من العينات المحضرة إلى الخلايا وتمت الزراعة في ‎incubator dials‏
‏بد
=« ¢ — بها 75 ‎CO2‏ عند ١7م‏ لمدة ‎YE‏ ساعة. من أجل قياس الكمية المتبقية من الجلوكوز في الوسط بعد الحضانة ‎dncubation‏ تم أخذ © ميكرولتر من الوسط وتم التخفيف 0 مرات ب ‎«D-PBS‏ ‏متبوعة بفحص ‎.(GOPOD Assay Kit, Megazyme, Cat.
No.
K-GLUC) GOPOD‏ على امتصاص أساس محلول معياري من الجلوكوز ‎«glucose standard solution‏ تم تحويل تركيز الجلوكوز المتبقي في الوسط؛ وتم حساب ‎af‏ 5050 لاستهلاك الجلوكوز لمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fc‏ ومترافقات نظير إ(نسولين -جلوبولين مناعي ‎Fc‏ على التوالي . نتيجة لذلك؛ مقارنة بالإنسولين البشري أبدى مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ استهلاك جلوكوز بمقدار ‎٠١,76‏ أبدى مترافق نظير إنسولين (رقم 7)-جلوبولين مناعي © استهلاك جلوكوز بمقدار 0,47 7؛ أبدى مترافق نظير إنسولين (رقم ")-جلوبولين مناعي © استهلاك جلوكوز بمقدار 0 27,84؛ ‎ad‏ مترافق نظير إنسولين (رقم 48)-جلوبولين مناعي © استهلاك جلوكوز بمقدار 9 أبدى مترافق نظير إنسولين (رقم 4)-جلوبولين مناعي ‎Fo‏ استهلاك جلوكوز بمقدار ‎715,١‏ ‏(الجدول 5). بناء عليه؛ لوحظ أن نظير الإنسولين (رقم 7)-مركب جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ومترافق نظير إنسولين (رقم ١)-جلوبولين‏ مناعي ‎Fe‏ وفقا للاختراع الحالي كان لها معايرة أقل بشكل ملحوظ في المعمل؛ مقارنة بمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎(Fe‏ ومترافق نظير إنسولين (رقم 4)- 5 جلوبولين مناعي ‎FC‏ ومترافق نظير إنسولين (رقم ؟9)-جلوبولين مناعي ‎Fe‏ التي كان لها معايرة مشابهة لتلك الخاصة بمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ‏[الجدول رقم 0[ رقم اسم المادة (استهلاك الجلوكوز نسبة إلى الاختبار الإنسولين الأ ‎(es‏ ‏اختبار ‎١‏ الإنسولين البشري الأصلي ‎ARE‏ ‏مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fe‏ 291,13 مترافق نظير إنسولين ‎(TA)‏ = جلوبولين 70,57 مناعي ‎Fc‏ ‏بد
— \ ¢ — مترافق نظير إنسولين (رقم 7) - جلوبولين 71,84 مناعي ‎Fc‏ ‏اختبار ‎١‏ الإنسولين البشري الأصلي ‎ARE‏ ‏مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fe‏ 295,7 مترافق نظير إنسولين (رقم ‎(A‏ - جلوبولين 796.0 مناعي ‎Fc‏ ‎lal‏ الإنسولين البشري الأصلي ‎ARE‏ ‏مترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fe‏ 791,7 مترافق نظير إنسولين ‎(A)‏ - جلوبولين ‎799,١‏ ‏مناعي ‎Fc‏ ‎HAR JE‏ الخواص الصيدلانية الحركية لمترافق نظير إنسولين -جلوبولين مناعي ‎Fc‏ ‏من أجل فحص الخواص الصيدلانية الحركية لمترافقات نظير الإنسولين-مركب جلوبولين مناعي ‎Fe‏ تمت مقارنة تركيز الدم فيها على مدار الوقت في جرذان طبيعية (جرذان ‎«SD‏ ذكور ؛» ‎Tee‏ ‏أسابيع) والتي تم تكييفها لمدة © أيام على ‎dard)‏ تم حقن ‎7١,7‏ نانومول/كجم لمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎FC‏ 5 ,10 نانومول/كجم لمترافق نظير إنسولين-جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ‏تحت الجلدء على التوالي. ثم جمع الدم عند 6 ‎cg)‏ فى ‎YE‏ فى كا ‎AT‏ بك ‎NEE‏ ‎VTA‏ 197ء و7١؟‏ ساعة. عند كل نقطة زمنية؛ تم قياس تركيزات الدم لمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎FC‏ ومترافق نظير إنسولين-جلوبولين مناعي © بواسطة تجربة ماص مناعي مرتبط بإنزيم ‎enzyme linked immunosorbent assay‏ (/5ااع)؛ وتم استخدام إنسولين ‎(USA (ALPCO) ELISA 0‏ كطقم .مع ذلك؛ للكشف عن الجسم المضاد ‎detection‏ ‎cantibody‏ تم استخدام مترافق مضاد فأري ‎mouse anti-human‏ ل ‎19G4‏ بشري ‎HRP‏ ‎.(Alpha Diagnostic Intl, Inc, USA)‏ ‎vey‏
_— \ _ أبدت نتائج فحص الخواص الصيدلانية الحركية لمترافق إنسولين أصلي- جلوبولين مناعي ‎Fo‏ ‏ومترافق نظير الإنسولين-مركب جلوبولين مناعي © أن تركيزات الدم قد زادت نسبة إلى تركيزات الإعطاء ‎concentrations‏ 8001015021100؛ وأبدت مترافقات نظير الإنسولين-مركب جلوبولين مناعي ‎Fe‏ التي لها ألفة ارتباط منخفضة بمستقبل إنسولين زيادة ‎Alle‏ في عمر النصف»؛ مقارنة بالإنسولين الأصلي ©7- مركب مترافق (الشكل 1( تشير هذه النتائج إلى أنه عند تعديل نظائر الإنسولين وفقا للاختراع الحالي ليكون لها ألفة ارتباط بمستقبل إنسولين مخفضة مرتبطة بمنطقة جلوبولين مناعي © لتحضير مترافقات؛ يمكن أن يتم توفير المترافقات كصيغ مناسبة للإنسولين بسبب الزيادة الملحوظة في عمر نصف دم الكائن الحي 0 والتالي يتم استخدامها كعامل علاجي 896015 171618086116 فعال للسكري. علاوة على ذلك؛ حيث نظائر الإنسولين وفقا للاختراع الحالي تتضمن أيضا ألفة ارتباط مستقبل إنسولين مخفضة ومعايرة مخفضة؛ تبين نظائر الإنسولين أيضا نفس الأثر على الرغم من أنها مرتبطة بالمواد الحاملة المختلفة. وفقا للوصف السابق؛ سوف يكون من الواضح للخبير في المجال أن هناك العديد من التغييرات 5 والتعديلات التي يمكن تطبيقها والتي لن تخرج من منظور وروح الاختراع. ‎(JEL‏ يجب ‎ped‏ أن النموذ ‎z‏ المبين أعلاه غير ‎cada‏ ولكنه للشرح على كافة الجوانب. يتم تعريف منظور الاختراع بعناصر الحماية الملحقة وليس الوصف السابق لها؛ وبالتالي سوف تقع كل التغييرات والتعديلات في حدود واطار عناصر الحماية؛ أو ما يعادل هذه الحدود وبالتالي يقصد بها أن يتم التركيز عليها بواسطة عناصر الحماية. قائمة التتابع: 0 كيلو دالتون ‎Kay‏ وحدة ‎nal Je‏ ‎RP-HPLC 99.1% a‏ ‎yey‏ ve
SE-HPLC 99.7% ‏د"‎ ‏"هو دقيقة‎ ‏و (أ) شظية انشطار ©-0ا6 لمتوالية مركب الانسولين الاساسية‎ : GIVE QCCTSICSLYQLE NYCN ‏از" السلسلة‎ : FVNQHLCGSLVE ALYLVCGE ‏السلسلة ب‎ 0"
RGFYTPKT - ‏"اط" ظروف غير اختزالية‎ ‏الاختزال‎ pla (Y ‏تك" (ب) شظية انشطار ©-/ا6 امتوالية نظير الانسولين (رقم‎
SE-HPLC 98.8% "J
IE-HPLC 98.9% iN ‏سن الغلوبيولين المناعي لمركب الإنسولين الأساسي المركب الترابطي‎ ‏؟ نانومول/كجم‎ ٠7 FC : ‏ب" الغلوبيولين المناعي لمركب الإنسولين الأساسي المركب الترابطي‎ ‏نانومول/كجم‎ 190٠ FC 2 ‏المركب الترابطي‎ (VE) ‏الغلوبيولين المناعي لنظير الإنسولين‎ ‏نانومول/كجم‎ Fe 21,7 <
FC ‏المركب الترابطي‎ (V ‏المناعي لنظير الإنسولين (رقم‎ cls) ‏نانومول/كجم‎ ١5٠ 0 أ
— ¢ ¢ —
--- الغلوبيولين المناعي لنظير الإنسولين (رقم ‎(A‏ المركب الترابطي ص
‎Fc 2 1 7‏ ناتومول/كجم 0 الغلوبيولين المناعي لنظير الإنسولين (رقم ‎(A‏ المركب الترابطي ‎Fe‏ ‎3S‏
‏)100 نانومول/كجم 0 الغلوبيولين المناعي لنظير الإنسولين (رقم 4) المركب الترابطي ‎J‏
‎Fc 2 1 7‏ ناتومول/كجم --- الغلوبيولين المناعي لنظير الإنسولين (رقم 4) المركب الترابطي6"! ‎oe‏
‎١‏ ؟ نانومول/كجم ات" التركيز ‎(desl)‏ ‏ارش" الزمن (أيام) ‎RP-HPLC 98.6% ra‏
‎yey

Claims (3)

  1. هه عناصر الحماية
    ‎.١‏ نظير أنسولين ‎insulin analog‏ يتضمن عيار أنسولين ‎insulin‏ مخفض مقارنة بالصورة الأصلية؛ حيث يكون لنظير الأنسولين 808109 105010 سلسلة ل لها متوالية برقم: ‎١7‏ و سلسلة 8 لها متوالية برقم: ‎Led YA‏ عدا استبدال للحمض الأميني ‎acid‏ 801100 رابع عشر (تيروسين) من السلسلة ‎A‏ بحمض جلوتاميك ‎glutamic‏ أو أسباراجين ‎asparagine‏ ‏5
    ‏". نظير الإنسولين ‎analog‏ 1705110 وفقا لعنصر الحماية ‎١‏ حيث عيار الإنسولين ‎insulin‏ ‏المخفض ناتج عن ألفة ارتباط مستقبل إنسولين ‎insulin receptor‏ مخفضة. ‎WY‏ نظير الإنسولين ‎insulin analog‏ وفقا لعنصر الحماية ‎١‏ حيث تم اختيار نظير الإنسولين ‎insulin analog 0‏ من المجموعة التي تتكون من متواليات بأرقام هوية. ‎FUSE‏
    ‏؛. مركب نظير أنسولين مترافق ‎analog conjugate‏ 050/0 حيث ‎(i)‏ نظير الأنسولين ‎insulin analog‏ وفقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ؟ يتم ربطه ب ‎sale (il)‏ واحدة متوافقة حيويا ‎biocompatible material‏ تم اختيارها من المجموعة التي تتكون من بولي ايثيلين جليكول ‎(polyethylene glycol‏ حمض دهني ‎cfatty acid‏ كوليسترول ‎«cholesterol‏ ألبومين ‎albumin‏ وشظايا مما سبق؛ مواد ربط ألبومين ‎calbumin—binding materials‏ بوليمرات ‎polymers‏ من وحدات متكررة من متواليات حمض أميني 0 800100 معينة؛ جسم مضاد ‎antibody‏ شظايا جسم مضاد ‎«antibody fragments‏ مواد ربط ‎binding materials‏ في نسيج واصل في الكائن الحي أو مشتقات مما سبق؛ نيكلوتيد ‎nucleotide‏ ‏0 فيبرونكتين ‎fibronectin‏ ترانسفيرين 11305160710 سكاريد ‎saccharide‏ وبوليمرات ‎polymers‏ كمادة حاملة ‎carrier‏ قادرة على ‎Al)‏ عمر النصف لنظير الأنسولين ‎insulin‏ ‏9 في الكائن الحي. ‎Lo‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎analog conjugate‏ 1050110 وفقا لعنصر الحماية 4؛ 5 حيث نظير الإنسولين ‎insulin analog‏ والمادة المتوافقة حيريا ‎biocompatible material‏ بد
    مرتبطان ببعضهما البعض عبر ببتيد ‎peptide‏ أو بوليمر من نوع غير ببتيديل ‎non-peptidyl‏ ‎polymer‏ كرابط ‎Jdinker‏
    ‎.١‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎analog conjugate‏ 1050110 وفقا لعنصر الحماية 4؛ حيث ‎FERN binding material Ly)‏ عبارة عن منطقة جلوبولين مناعي ‎immunoglobulin‏ ‏اف سى ‎Fc‏ ‎LY‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎analog conjugate‏ 1050110 وفقا لعنصر الحماية © حيث المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ محضر بواسطة ربط ‎(I)‏ ‏0 نظير الإنسولين ‎insulin analog‏ وفقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ؟ تكون مرتبطة ب ‎(il)‏ ‏منطقة جلوبولين مناعي ١1أ/ا0ا1010010009‏ اف سى ‎Fc‏ عبر ‎(iif)‏ رابط ببتيد ‎peptide linker‏ أو رابط من نوع غير ببتيديل ‎non-peptidyl linker‏ تم اختيارها من المجموعة التي تتكون من بولي إيثيلين جليكول ‎Js «polyethylene glycol‏ بروبيلين جليكول ‎polypropylene‏ ‎glycol‏ بوليمرات مشتركة ‎copolymers‏ من إيثيلين جليكول-بروبيلين جليكول ‎ethylene‏ ‎cglycol-propylene glycol 5‏ بوليولات معالجة ببولي أوكسي ‎polyoxyethylated Ji‏ ‎polyols‏ كحول بولي فينيل ‎polyvinyl alcohol‏ بولي مكاريدات ‎«polysaccharides‏ ‏ديكستران ‎cdextran‏ بولي فينيل (يثيل إيثر ‎polyvinyl ethyl ether‏ بوليمرات قابلة للتحلل البيولوجي ‎biodegradable polymers‏ بوليمرات د هنية ‎dipid polymers‏ كيتينات ‎«chitins‏ ‏حمض هيالورونيك ‎hyaluronic acid‏ وتوليفات مما سبق. ‎A‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ وفقا لعنصر الحماية ‎٠‏ ‏حيث رابط من نوع غير ببتيديل ‎non-peptidyl linker‏ مرتبطة بالطرف لا من السلسلة ‎B‏ ‏لنظير الإنسولين ‎insulin analog‏
    5 +. المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ وفقا لعنصر الحماية ‎Vv‏ ‏حيث كل أطراف 5 بوليمر من نوع غير ببتيديل ‎non—peptidyl polymer‏ مرتبطة بالطرف بد
    و ‎N-terminus N‏ لمنطقة الجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin‏ اف سى ‎FC‏ ومجموعة الأمين الطرفية ‎N-terminal amine group N‏ لنظير الإنسولين ‎insulin analog‏ أو مجموعة ع- أمينو ‎g~amino group‏ أو مجموعة ‎thiol group Js‏ لوحدات الليسين الداخلي البنائية ‎internal lysine residue‏ من السلسلة 8؛ على التوالي. ٠ ‏وفقا لعنصر الحماية‎ 17150110 analog conjugate ‏المركب المترافق لنظير الإنسولين‎ LY ‏غير معالجة بمجموعة‎ Fo ‏اف سى‎ immunoglobulin ‏حيث منطقة الجلوبولين المناعي‎ .aglycosylated ‏جليكوسيل‎
    ‎.١١ 00‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ وفقا لعنصر الحماية ‎Vv‏ ‏حيث منطقة الجلوبولين المناعي 100001009105110 اف سى © مكونة من نطاق ‎domain‏ ‏واحد إلى 4 نطاقات تم اختيارها من المجموعة التي تتكون من النطاقات ‎(CH2 CH]‏ 0113
    ‎.CH4‏ ‏5 ؟١.‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ وفقا لعنصر الحماية ‎Vv‏ ‏حيث منطقة الجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin‏ اف سى ‎Fe‏ عبارة عن منطقة اف سى ‎Fc‏ ‏مشتقة من ‎(IgA IgG‏ وا ‎IgE‏ أر ‎AgM‏ ‎NY‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎analog conjugate‏ 171510 وفقا لعنصر الحماية ‎AY‏ ‏0 حيث كل نطاق لمنطقة الجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin‏ اف سى ‎Fe‏ عبارة عن هجين 0 من نطاقات لها أصول مختلفة ومشتقة من جلوبولين مناعي ‎immunoglobulin:‏ تم اختياره من المجموعة التي تتكون من وا ‎IgA‏ ناوا ‎AgM 5 IgE‏
    4. المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ وفقا لعنصر الحماية ‎V‏ ‏5 حيث منطقة الجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin‏ اف ‎Few‏ تتضمن أيضا منطقة مفصلية
    ‎.hinge region‏ ‎vey
    A AY ‏لعنصر الحماية‎ insulin analog conjugate ‏المركب المترافق لنظير الإنسولين‎ Yo ‏أو‎ dimer ‏عبارة عن دايمر‎ Fe ‏اف سى‎ immunoglobulin ‏حيث منطقة الجلوبولين المناعي‎ single—chain ةلسلسلا ‏من جلوبولينات مناعية أحادية‎ oe multimer ‏مالتيمر‎ ‏مكونة من نطاقات من نفس الأصل.‎ immunoglobulins 5 AY ‏وفقا لعنصر الحماية‎ 1715110 analog conjugate ‏المركب المترافق لنظير الإنسولين‎ VT ‏عبارة عن منطقة اف سى‎ Fe ‏اف سى‎ immunoglobulin ‏حيث منطقة الجلوبولين المناعي‎ 1gG4 Fc ‎VY‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ وفقا لعنصر الحماية ‎AT‏ ‏حيث منطقة الجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin:‏ اف سى ‎Fe‏ منطقة اف سى ‎Fo‏ غير معالجة بالجلكوسيل ‎aglycosylated‏ مشتق من 1064 بشري. ‎١1# 5‏ . المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ وفقا لعنصر الحماية ‎Vv‏ ‏حيث المجموعة التفاعلية لرابط من نوع غير ببتيديل ‎linker‏ الا10م000-08 تم اختياره من المجموعة التي تتكون من مجموعة ألدهايد ‎aldehyde group‏ مجموعة بروبيون ألدهايد ‎«propionaldehyde group‏ مجموعة بيوتير ألدهايد ‎<butyraldehyde group‏ مجموعة ماليميد ‎maleimide group‏ ومشتق سكسينيميد ‎.succinimide derivative‏ ‏20
    ‏4. المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ لعنصر الحماية ‎OA‏ ‎dua‏ مشتق سكسينيميد ‎succinimide derivative‏ عبارة عن مسكسينيميديل بروبيونات ‎succinimidyl propionate‏ مكسينيميديل كربوكسي. ميثيل ‎succinimidyl‏ ‎«carboxymethyl‏ هيدروكسي سكسينيميديل ‎hydroxy succinimidyl‏ أو كربونات
    ‎.succinimidyl carbonate ‏مكسينيميديل‎ 5 ‏بد
    ‎LY‏ المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎analog conjugate‏ 17150110 وفقا لعنصر الحماية ‎٠‏ ‏حيث يتضمن رابط من نوع غير ببتيديل ‎non—peptidyl linker‏ مجموعات ألدهايد متفاعلة ‎reactive aldehyde groups‏ عند كلا طرفيه.
    ١؟.‏ صيغة إنسولين ‎insulin‏ طويل المدى لها مدة وثبات محسن في الكائن الحي؛ وتتضمن المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ لعنصر الحماية 4 .
    ". صيغة الإنسولين ‎insulin‏ طويل المدى وفقا لعنصر الحماية ‎(FY‏ حيث الصيغة عبارة عن عامل علاجي ‎therapeutic agent‏ للسكري ‎.diabetes‏ ‏10 ‎YY‏ طريقة لتحضير المركب المترافق لنظير الإنسولين ‎insulin analog conjugate‏ لعنصر الحماية ‎of‏ تتضمن: ربط نظير الإنسولين ‎insulin analog‏ بمادة متوافقة حيريا ‎biocompatible material‏ تم اختياره من المجموعة التي تتكون من بولي إيثيلين جليكول ‎polyethylene glycol‏ حمض 5 دهني ‎fatty acid‏ كوليسترول ‎cholesterol‏ ألبومين ‎albumin‏ وشظايا مما سبق» مواد ربط ألبومين ‎calbumin-binding materials‏ بوليمرات ‎polymers‏ من وحدات متكررة من متواليات حمض أميني ‎amino acid‏ معينة؛ جسم مضاد ‎antibody‏ شظايا جسم مضاد ‎antibody‏ ‎(fragments‏ مواد ربط ‎(FER binding materials‏ في نسيج واصل في الكائن الحي أو مشتقات مما سبق؛ نيكلوتيد ‎cnucleotide‏ فيبرونكتين ‎fibronectin‏ ترانسفيرين ‎transferrin‏ ‏20 مكاريد 586008+106؛ وبوليمرات ‎polymers‏ كمادة حاملة ‎carrier‏ 308 على ‎Ala)‏ عمر النتصف لنظير الأنسولين ‎insulin analog‏ في الكائن الحي. بد
    _ Qo = Aa LL SRA «3s Baa i” wm a Ln ١ ‏ال - ا‎ 0 nN AR - ‏ل | 0 ض‎ 0 ,! ‏بج »م‎ 0 NN RR RR RRR 8 RAR ‏:0خ‎ RW NN 0 | NY NN NR 0 = oo ‏ا اا ء.‎ 0 ‏ذ 0 ا ا ا‎ . ¢ = =. a - Co 0 ‏ا‎ 0 ٍ ‏ا ا ا ا‎ 0 ‏ا‎ ‎A ‎a ninm . Yo | - ‏ا‎ ‎a =.
    oe . RN \ Nh NR La NR = 8 ‏ا‎ ‏ا ا‎ ‏ا اا‎ ‏اد ا‎ XX . - nN NN) : a Oo NR RE NR 8 nn . a ‏اد اا ض‎ : 0 ‏ا ا اا‎ ١ ‏ا‎ ‎| - : . a ‏ض ااا ا ض‎ ‏ا ا‎ 0 ‏ا‎ a NM Tk nN oo 3 a Sa ‏ض‎ ‏ا‎ , ‏ض ا 0 اا‎ ْ ‏ا‎ ‏و ض‎ = CC . a LL oo Ala a RR a TH EN a ‏اس‎ ‎' ‏اد ل ااا‎ 1 ْ ‏ا‎ ‎١ ‏بم‎ ‎Soult ‎yey
    — \ جم 33 154 8 با ‎hod‏ 19[ 2 ‎(ct‏ ‏0 1 & 3 3 يد ب £ ‎S‏ 2% ‎LAE‏ ¥ ‎E R‏ \ : ‎i‏ : ‎Yoo. 4‏ ‎i‏ ‎ax‏ ‎i i‏ 8 ‎i‏ : ‎A LER X. 1‏ 33 3 ‎AF‏ ‎Ha oo‏ ; ا ‎ile a‏ ) ‎p‏ & & 5 5 _ : ‎fF five 3 5‏ 8 > سا وات 2 ‎ER:‏ & ا 8 ل ‎cx‏ 8 8 ا 1 0 ‎il 2 4 Cp‏ ¢ ل 0 1 اح ا حا ا ا د ماد اجات ال لتحت 500 مه مما مامه مات لامعا حير الا الل تست تح لق جا كد اميت داتعت عات ‎sors‏ ‎ER‏ 2 0 < ‎Ein‏ ون موا تاجات ل اكات اباك اها جا ‎A‏ يجا وا سهان ‎RE‏ وام تا اجا اماي لجا كا عا لصب موادا ون قي تيو ره صر بحاي جا ميت ا معي با برام باحق ‎Yo ye Yi Yo va vo $e £3 LI‏ 2 . ) * ( 22 <£ نيا 3 ف ب ا سان ' 77 إٍْ بو ‎YY‏ ‎x wt 10‏ ; - ‎LY ESS N M H .‏ . ‎٠ ١ a : :‏ 1 ‎i EE‏ ال ‎CE OR‏ { ُ : 8 ‎A 2 ny pr‏ ‎EARN ATE 5 TA w‏ ا :8 01 1 : 3 3 ‎Ted 8‏ £3 » ‎ii‏ ‏33 3 ‎i‏ ‎i‏ 3 2 3{ 2 1 ‎i 0 0‏ 1 ¥ ‎Ii §‏ أ ‎NS Se 3‏ : ‎F 331i 1‏ ‎iw BY‏ إلى ال د تجو لجسا ‎AN AA‏ اه ساك امو جا مسج 3 ا ‎A‏ الا ادس :1 3 ا 8 يماي تتودسك ما او ا سول اه وسو تسو جو سأ سو وا وما ااا امي تراس نسي وتو موسو ب ‎Yo iy 4 Yo LI Nid‏ يل« ا و 5 *
    — \ جم ‎“g »‏ 8 £ ‎Yi vi‏ أ نتسج ل > 3“ ‎"١‏ 7ح ا ‎Ya Ya‏ ب 3 30 » ده للا الا ‎ie‏ ا الا الا ا ا لال الات و حتت لاحم ‎MA Re‏ الجن جد مما الما م امسا سس ‎FI REN SIN‏ ; ب ام : 1 ‎en‏ ‎wo»‏ بأ ‎iT | Y 1] - a)‏ ‎i = 3 Cpt : 2: 2‏ ‎H‏ { ‎H !‏ ا ‎i} i ww bi !‏ ع ‎i od‏ إْ با؟+فقحق ‎1١)‏ أ 2 ‎er} 1 pik 3‏ 3 ‎H H 0 az os :‏ ‎i od‏ ب ‎i wd vent Bes lo 8 PINS BI‏ ‎Yi nn‏ ات امتح اس ‎Gy «PHA‏ لات ا ‎St‏ سن ‎RE‏ ا اا ‎A‏ لاي ل ‎Rint we =n ne Ba nc‏ 3 ‎RE oe ES‏ يم ‎i ied A Se ein on Bestar RA‏ ‎J \ Ey © >» 0‏ 0 يي ب ‎i‏ الي ‎ei‏ 1 ‎i = 1‏ | اي 2 ‎Posed‏ ‎Ye vi‏ أ ‎IE I‏ ‎id 0 4 1 i ys H‏ ‎bowed i 11 |] : i‏ ‎tH . - :‏ 0 1217 8 3 3 3 ‎PPE CS SRN . cen : H‏ تس 0 ‎i 0 3 ES.
    SOR.
    A‏ ‎TR TT ET TILT She ad‏ ل لاي ا ااا اا در ل ا ار لا ل ل ل ل ‎EH?‏ €< ‎j \ vi‏ ”3“ ‎of «© 2” $ *‏ ‎Ye‏ ب بأ * » 0 امار ‎١‏ أي ااا اا لي ور الايد لد لا امن اك ارو ا اراد .بمو فا لخي ‎Fn pr‏ لون حدر لاجد ا وله اع اسح ‎Fa a NH OX AR‏ ‎i ol :‏ 3 ق اق ل ب ¥ (ق-ق ‎To 4 ¥ Lod ¥ i‏ 8 1 > محر 8 ‎Tod 1 : ;‏ ‎H 1 0 i‏ 1 ‎N ww & 0 3 8‏ ‎H we § # 3 * % t‏ : 0 ! 1 أ ‎owed‏ ‎wd 5 i [a - H‏ + ‎NE‏ . ا بلقا رايط ‎SUS‏ الم ا ‎SE‏ ‎Sr . 8‏ 3 ب 0 وا الت ص 3 ‎i‏ ا ب ا د لات © سا ل ااا سنا ااا الا ذه ا 1 م 3 اد ا ااي ا لا روه أل يق صاب اا #لبيج سميج مو صل مجر يي ‎mein‏ ملا ‎Forres Same aga eres okie von ieee sos‏ 1 ©« ليما ُ ب ‎i jE i rv‏ ‎ted . : i 8 1‏ : = ب؟7 2 ا : ا ا ‎i o 0 { 5‏ 1 2 و بود : ‎ns | } 3 3 0 8‏ + ‎Cy 1 H H‏ 0 8 ‎b H N N 8 3 H‏ ‎H‏ ا 5 3 : 2 2 3 ‎ed i‏ 5 ‎ea 5 i‏ 3 ب ا 8 ‎H‏ ‏ٍ 1 ‎eal‏ جو تسلا توت ‎sido a RR RS‏ 1
    Cor «© i ‏وو‎ \ Sa 0 Y ae . Y - a ‏يا‎ ٍ ١ y .
  2. 2 Ca aa 0 ٠ ‏اا‎ ‎\Y = a8 = La La aa Sa * "0 ‏ب 0 اا ا‎ ‏ا اد ا ا‎ A a LL a 0 ‏ا - ل‎ . Le -
    a . LL - 0 ‏اا ا‎ : ‏اد اد‎ " ‏اا ا‎ ne ee aa =. Lo a
    LL . . ‏ا‎ ‎5 ‏ا ٍ ا‎ fis RN a Sa aa Sy ER . 1 ‏ال ا‎ ‏ا ا لا‎ ٍ ‏ل ا ا‎
    6. ‏ا اد ا ا‎ 0 " ‏ا‎ = LL - . ‏ا ا‎ 3 a Lo 0 ‏ا‎ 0 0" - . . . > - 0 ‏ا ا ا ا‎ ‏ا اا ا‎ 8" a 0 Ne NN So " - ٠ ‏ا ل"‎ Na Sa a Te a Veo CL a a LL . — 0 ‏اا ض‎ . . 388 ‏ا 0 ا‎ ‏ا‎ ‏اد اد‎ 0 ‏د ا اا‎ " ‏ا‎ Ne LL RRR Nn 0 1 3 EE ¢ ( < o {
    _ جم ‎KE 5‏ ا ‎J) ts “7‏ ( ‎FS : js ; 2‏ 1 ‎g 3 i . EE .‏ 3 ‎fs 3 2 : J‏ . 3 : § : ا 0 ا " راي : 2 8 4 8 با 1 3 ‎x‏ ‏1 3 8 ‎i‏ 1 ولا
    ‎a. 8‏ ‎i‏ 0 ‎i 1‏ ‎vod 13‏ ‎ia 0‏ $ ‎$i x §‏ 3 ‎bi RF pro‏ ‎a vie‏ ات ليام ا سمه مسا ‎ne‏ متتل . ‎fs ay x5 ”»‏ 6 د ‎AN‏ . ‎i‏ » 43[ 3 ري ‎f‏ ‏م :0 سي ‎ki 4 J” ani ANGRY‏ » اخ ‎Sl Hi HE‏ # * ِْ ‎Ao : { : : Sil‏
    ‎i. EE‏ 0 3 ‎RA 0 i LAS 2 0 : [EE‏ 2 حم ل لت ‎By it RE UE AR‏ ‎i‏ سس ‎an { 0‏ £0 ‎i 3‏ 4{ 8 2 <$ ‎Ho‏ ا ال لد © 0% ل الم ‎PF‏ ‎i #153‏ ‎CRIES 8‏ : او أي اي حت اا ‎AA ANS‏ رمسا اولي أ ‎RNY RN‏ خا اا اا لاا ‎AA‏ لما { ا مم ا اا اي مما ااا نا سا لا لان لاا ان ما اا الما ا ا » : ع ‎N Yo ¥ Ys ie oe‏ ززم الما 8 : = 3 > ‎a £ i «©» 3 : 0 :‏ : اق 2 0 ‎é 5 Pd‏ 1 ‎va 0 1 fron wr ane :‏ ‎i 4‏ : ‎Yad H 3 :‏ ‎x 0 8‏ 5 ص + ‎i i‏ 1 ‎rod 1‏ ‎H‏ 3 1 3 1 1 2 1 1 3 ‎A) 0 i HH‏ 33 3 ‎Pa‏ ‎id‏ 3 ‎od Ey‏ 8# + § 4 اا 0 3 3 ‎A A AS‏ 58 ل لص ا ل 3 . ‎LF Gaia‏ 0 بج ‎Te TET‏ م ع ‎You‏ وي 1 0 \ لشكز { - ‎vey‏
    —00— 7 “3 AEE o 1 a << ‏رس‎ . i \ 1 ‏سن ا و‎ 0 ‏لالش اك ألا‎ ١ ‏ام لب‎ 3 : i EY iW ‏«ع» ب‎ 4 ‏ع ع‎ £3 Meg, 7 Sal [WE] ‏د‎ 8 Es ESN 8 i 3 x, AN “ug %.. “3” EY : 2 8 Tag a 4 ) Sg ‏ف‎ 8 ‏ا سل‎ ٠ ‏ا‎ £ 3 A Ye ‏مدا اعم‎ ‏يب‎ ‎(=)
    ‎*. ‎ero my ‏م‎ ‎i 1 8 : * ‏“بين‎ rN ‏الك‎ * 1 1 ١ ‏ل‎ of Th ‏ل"‎ B Beg 4# ERR IY io ‏”ص مه ا اا‎ 8 ‏الل" 8 لابلا‎ 8 “8, fet a ‏ب‎ 8 *. N ‏ب‎ 10 Fe ne Beg 0 ‏ايها دتما ل‎ i: Es << “2
  3. 3 >. Jol 5 > 8 H wi Fo OR ‏بن‎ ‎i Hy X ‏خا تف اا الات‎ LOR ONSEN . 7 3 5 A ‏ا‎ ‎“os » () ‏و اا‎ ١ LEERY 3 oF 5 2, ie ¥ A Rig ag WO I
    I. Sr, ES 7 7 “4 081 ‏طب + ا وا زرالا‎ ‏بن‎ pd ‏تت‎ 8 i SW ‏وا دي‎ ‏ف‎ 2 ay . he Fe % ‏ب‎ ‎5 Ta ©. FW 5 © Say AY x ‏ال رك‎ H 0 p ¢ eT ‏ماهر 5ج‎ 0 ! ‏ما لح حت اين الحا قاد عد ام جا‎ a ‏عاد يعن ع اميد ان ام ات‎ oe ¢ ¥ $ > A Ye [43 oy » 4# " ‏أ أ ب 3 أ‎ yey
    مدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب ‎TAT‏ الرياض 57؟؟١١‏ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: ‎patents @kacst.edu.sa‏
SA515360933A 2013-02-26 2015-08-23 نظير إنسولين جديد واستخدامه SA515360933B1 (ar)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20130020703 2013-02-26
KR20130082511 2013-07-12
KR20140006937 2014-01-20
PCT/KR2014/001593 WO2014133324A1 (ko) 2013-02-26 2014-02-26 신규한 인슐린 아날로그 및 이의 용도

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA515360933B1 true SA515360933B1 (ar) 2018-12-23

Family

ID=51428522

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA515360933A SA515360933B1 (ar) 2013-02-26 2015-08-23 نظير إنسولين جديد واستخدامه
SA518400491A SA518400491B1 (ar) 2013-02-26 2015-08-23 نظير إنسولين جديد واستخدامه

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA518400491A SA518400491B1 (ar) 2013-02-26 2015-08-23 نظير إنسولين جديد واستخدامه

Country Status (25)

Country Link
US (2) US20160008483A1 (ar)
EP (2) EP2963056B1 (ar)
JP (3) JP6552968B2 (ar)
KR (2) KR20140106452A (ar)
CN (2) CN104995206B (ar)
AU (2) AU2014221531B2 (ar)
BR (1) BR112015019985A2 (ar)
CA (1) CA2901873C (ar)
CL (1) CL2015002330A1 (ar)
DK (1) DK2963056T3 (ar)
ES (2) ES2770776T3 (ar)
HK (1) HK1211944A1 (ar)
IL (1) IL240717B (ar)
MX (1) MX366400B (ar)
MY (1) MY186990A (ar)
PE (2) PE20151409A1 (ar)
PH (1) PH12015501814A1 (ar)
PT (1) PT2963056T (ar)
RU (1) RU2676729C2 (ar)
SA (2) SA515360933B1 (ar)
SG (2) SG11201506095TA (ar)
TW (3) TWI755579B (ar)
UA (1) UA119533C2 (ar)
WO (1) WO2014133324A1 (ar)
ZA (1) ZA201507104B (ar)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20130049671A (ko) 2011-11-04 2013-05-14 한미사이언스 주식회사 생리활성 폴리펩타이드 결합체 제조 방법
AR090281A1 (es) * 2012-03-08 2014-10-29 Hanmi Science Co Ltd Proceso mejorado para la preparacion de un complejo polipeptidico fisiologicamente activo
PT2963056T (pt) * 2013-02-26 2020-02-19 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Análogo de insulina e utilização do mesmo
MA46146A1 (fr) * 2014-01-20 2020-12-31 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Insuline a action prolongée et utilisation associée
AR100639A1 (es) 2014-05-29 2016-10-19 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Composición para tratar diabetes que comprende conjugados de análogos de insulina de acción prolongada y conjugados de péptidos insulinotrópicos de acción prolongada
AR100695A1 (es) 2014-05-30 2016-10-26 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Composición para el tratamiento de diabetes mellitus que comprende insulina y un agonista dual glp-1 / glucagón
KR20150140177A (ko) 2014-06-05 2015-12-15 한미약품 주식회사 단백질 및 펩타이드의 면역원성을 감소시키는 방법
CN107810202A (zh) * 2015-02-17 2018-03-16 韩美药品株式会社 长效胰岛素或胰岛素类似物复合物
CN108026143B (zh) 2015-07-24 2022-05-27 韩美药品株式会社 制备生理活性多肽缀合物的方法
UY36870A (es) * 2015-08-28 2017-03-31 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Análogos de insulina novedosos
JP2018531007A (ja) * 2015-09-24 2018-10-25 ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド インスリンの製造方法
JP7158378B2 (ja) * 2016-09-23 2022-10-21 ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド インスリン受容体との結合力が減少された、インスリンアナログ及びその用途
WO2018105988A1 (ko) 2016-12-05 2018-06-14 한미약품 주식회사 면역반응이 약화된 결합체
JP7170332B2 (ja) 2016-12-09 2022-11-14 アクストン バイオサイエンシズ コーポレーション インスリンとｆｃの融合物および使用方法
BR112019016077A2 (pt) 2017-02-03 2020-03-31 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Conjugado da fórmula 1, método para preparar o conjugado, preparação de atuação longa, preparação para prevenir ou tratar diabetes e método para tratar diabetes
KR20180091773A (ko) 2017-02-07 2018-08-16 한미약품 주식회사 비펩티드성 중합체 링커 화합물, 그 링커 화합물을 포함하는 결합체, 및 이들의 제조방법
KR101941975B1 (ko) 2017-03-17 2019-01-25 고려대학교 산학협력단 Atpif1을 함유하는 당뇨 치료용 약학조성물
US11752216B2 (en) * 2017-03-23 2023-09-12 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Insulin analog complex with reduced affinity for insulin receptor and use thereof
JP7377195B2 (ja) 2017-09-29 2023-11-09 ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド リンカーとして非ペプチド性重合体結合脂肪酸誘導体化合物を含むタンパク質結合体及びその製造方法
CN111406073A (zh) * 2017-09-29 2020-07-10 韩美药品株式会社 具有提高功效的持久性蛋白质缀合物
US11267862B2 (en) 2018-06-29 2022-03-08 Akston Biosciences Corporation Ultra-long acting insulin-Fc fusion proteins and methods of use
AU2019291945A1 (en) 2018-06-29 2021-01-14 Akston Biosciences Corporation Ultra-long acting insulin-Fc fusion proteins and methods of use
AU2019398402A1 (en) 2018-12-11 2021-07-29 Sanofi Insulin analogs having reduced insulin receptor binding affinity
JP2022514835A (ja) 2018-12-21 2022-02-16 ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド インスリン及びグルカゴンを含む薬学組成物
EP3900735A4 (en) 2018-12-21 2022-09-07 Hanmi Pharm. Co., Ltd. PHARMACEUTICAL COMPOSITION WITH INSULIN AND TRIPLE AGONOISTS WITH ACTIVITY AGAINST ALL GLUCAGON AND GLP-1 AND GIP RECEPTORS
TW202120536A (zh) * 2019-07-31 2021-06-01 美商美國禮來大藥廠 鬆弛素(relaxin)類似物及其使用方法
CN114846025A (zh) 2019-12-19 2022-08-02 阿卡斯通生物科学公司 超长效胰岛素-Fc融合蛋白及其使用方法
US11186623B2 (en) 2019-12-24 2021-11-30 Akston Bioscience Corporation Ultra-long acting insulin-Fc fusion proteins and methods of use
AR121713A1 (es) 2020-03-31 2022-06-29 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Nuevos análogos de il-2 inmunoestimulantes
US11192930B2 (en) 2020-04-10 2021-12-07 Askton Bioscences Corporation Ultra-long acting insulin-Fc fusion protein and methods of use
DK3972987T3 (da) 2020-04-10 2023-07-31 Akston Biosciences Corp Antigenspecifik immunterapi til COVID-19-fusionsproteiner og fremgangsmåder til anvendelse deraf
WO2022017309A1 (zh) * 2020-07-24 2022-01-27 江苏晟斯生物制药有限公司 胰岛素-Fc融合蛋白及其应用
WO2023004406A2 (en) 2021-07-23 2023-01-26 Akston Biosciences Corporation Insulin-fc fusion proteins and methods of use to treat cancer
WO2023013638A1 (ja) * 2021-08-02 2023-02-09 Ｓｐｉｂｅｒ株式会社 合成皮革及びその製造方法
CN117881691A (zh) * 2021-08-02 2024-04-12 丝芭博株式会社 多孔质体及其制造方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6096871A (en) 1995-04-14 2000-08-01 Genentech, Inc. Polypeptides altered to contain an epitope from the Fc region of an IgG molecule for increased half-life
WO1997034631A1 (en) 1996-03-18 1997-09-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobin-like domains with increased half lives
DE19735711C2 (de) * 1997-08-18 2001-04-26 Aventis Pharma Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Vorläufers von Insulin oder Insulinderivaten mit korrekt verbundenen Cystinbrücken
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
JP2008169195A (ja) * 2007-01-05 2008-07-24 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体
CN101743252A (zh) * 2007-07-16 2010-06-16 诺沃-诺迪斯克有限公司 蛋白酶稳定化的、peg化的胰岛素类似物
CA2747490C (en) * 2008-12-19 2017-02-14 Indiana University Research And Technology Corporation Insulin analogs
US20120184488A1 (en) * 2009-09-01 2012-07-19 Case Western Reserve University Insulin analogues of enhanced receptor-binding specificity
AR081066A1 (es) * 2010-04-02 2012-06-06 Hanmi Holdings Co Ltd Conjugado de insulina donde se usa un fragmento de inmunoglobulina
KR101324828B1 (ko) * 2010-06-08 2013-11-01 한미사이언스 주식회사 면역글로불린 단편을 이용한 단쇄 인슐린 아날로그 약물 결합체
AU2011282988A1 (en) * 2010-07-28 2013-01-31 Smartcells, Inc. Recombinantly expressed insulin polypeptides and uses thereof
UA113626C2 (xx) * 2011-06-02 2017-02-27 Композиція для лікування діабету, що містить кон'югат інсуліну тривалої дії та кон'югат інсулінотропного пептиду тривалої дії
PT2963056T (pt) * 2013-02-26 2020-02-19 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Análogo de insulina e utilização do mesmo

Also Published As

Publication number Publication date
RU2676729C2 (ru) 2019-01-10
MX366400B (es) 2019-07-08
HK1211944A1 (en) 2016-06-03
TWI621626B (zh) 2018-04-21
TWI708782B (zh) 2020-11-01
ES2770776T3 (es) 2020-07-03
CN104995206A (zh) 2015-10-21
SA518400491B1 (ar) 2022-04-07
EP3616727B1 (en) 2021-03-31
KR20140106452A (ko) 2014-09-03
CN104995206B (zh) 2022-04-12
EP2963056A4 (en) 2017-06-07
ZA201507104B (en) 2019-04-24
NZ751062A (en) 2021-04-30
EP2963056B1 (en) 2019-11-13
PH12015501814B1 (en) 2015-12-07
PT2963056T (pt) 2020-02-19
AU2018267648B2 (en) 2020-04-16
PE20191481A1 (es) 2019-10-18
WO2014133324A1 (ko) 2014-09-04
TW201920243A (zh) 2019-06-01
JP6552968B2 (ja) 2019-07-31
BR112015019985A2 (pt) 2017-08-29
JP2021193089A (ja) 2021-12-23
AU2014221531A1 (en) 2015-08-27
TW201817741A (zh) 2018-05-16
CA2901873C (en) 2022-05-03
US20180256731A1 (en) 2018-09-13
CN114989289A (zh) 2022-09-02
JP2019187440A (ja) 2019-10-31
KR102413691B1 (ko) 2022-06-28
PE20151409A1 (es) 2015-10-07
AU2018267648A1 (en) 2018-12-13
SG10201907106VA (en) 2019-09-27
MX2015010471A (es) 2016-04-25
KR20210109491A (ko) 2021-09-06
EP3616727A1 (en) 2020-03-04
NZ710882A (en) 2021-01-29
RU2015138536A (ru) 2017-04-03
ES2868351T3 (es) 2021-10-21
SG11201506095TA (en) 2015-09-29
TW201520224A (zh) 2015-06-01
CL2015002330A1 (es) 2015-12-28
IL240717B (en) 2020-05-31
IL240717A0 (en) 2015-10-29
DK2963056T3 (da) 2020-02-17
UA119533C2 (uk) 2019-07-10
US20160008483A1 (en) 2016-01-14
EP2963056A1 (en) 2016-01-06
TWI755579B (zh) 2022-02-21
AU2014221531B2 (en) 2018-08-23
PH12015501814A1 (en) 2015-12-07
MY186990A (en) 2021-08-26
JP2016510003A (ja) 2016-04-04
CA2901873A1 (en) 2014-09-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA515360933B1 (ar) نظير إنسولين جديد واستخدامه
US10610568B2 (en) Compositions and methods of use for treating metabolic disorders
AU2020277290A1 (en) Composition for treating diabetes mellitus comprising insulin and a GLP-1/glucagon dual agonist
CN109810198B (zh) 利用免疫球蛋白片段的位点特异性glp-2缀合物
TW202140065A (zh) 包含長效胰島素類似物接合物及長效促胰島素肽接合物之治療糖尿病組成物
JP2021028329A (ja) タンパク質及びペプチドの免疫原性を減少させる方法
AU2014221534B2 (en) Site-specific insulin conjugate
TWI798209B (zh) 對胰島素受體有降低親和性之胰島素類似物之接合物及其用途
US20130259806A1 (en) Dimeric molecular complexes with free cysteine residues and conjugates thereof
NZ751062B2 (en) Novel insulin analog and use thereof
NZ710882B2 (en) Novel insulin analog and use thereof