SA109300713B1 - مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة - Google Patents

مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة Download PDF

Info

Publication number
SA109300713B1
SA109300713B1 SA109300713A SA109300713A SA109300713B1 SA 109300713 B1 SA109300713 B1 SA 109300713B1 SA 109300713 A SA109300713 A SA 109300713A SA 109300713 A SA109300713 A SA 109300713A SA 109300713 B1 SA109300713 B1 SA 109300713B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
barley
mmt
mutation
malt
leu
Prior art date
Application number
SA109300713A
Other languages
English (en)
Inventor
Soren Knudsen
Gustav Hambraeus
Lene Molskov Bech
Steen Bech Sorensen
Brigitte Skadhauge
Klaus Breddam
Ole Olsen
Original Assignee
Carlsberg Breweries As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41137843&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SA109300713(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Carlsberg Breweries As filed Critical Carlsberg Breweries As
Publication of SA109300713B1 publication Critical patent/SA109300713B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C1/00—Preparation of malt
    • C12C1/18—Preparation of malt extract or of special kinds of malt, e.g. caramel, black malt
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1003—Transferases (2.) transferring one-carbon groups (2.1)
    • C12N9/1007—Methyltransferases (general) (2.1.1.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C12/00—Processes specially adapted for making special kinds of beer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
    • C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C2200/00—Special features
    • C12C2200/01—Use of specific genetic variants of barley or other sources of fermentable carbohydrates for beer brewing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y201/00—Transferases transferring one-carbon groups (2.1)
    • C12Y201/01—Methyltransferases (2.1.1)
    • C12Y201/01012—Methionine S-methyltransferase (2.1.1.12)

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Non-Alcoholic Beverages (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Cereal-Derived Products (AREA)
  • Alcoholic Beverages (AREA)
  • Noodles (AREA)

Abstract

طبقا للاختراع، هناك مشروبات beverages مشتقة متوافرة من الشعير barley تتميز بمستويات قليلة بدرجة جديرة بالذكر من كل من dimethyl (sulfide (DMS و/أو مصدره الأولي -S (methyl-L-methionine (SMM ، أو تفتقد المركبات المذكورة. إضافيا ، يتعلق الاختراع بطرق لإنتاج المشروبات المذكورة أعلاه وأيضا بنباتات شعير barley plants مفيدة في تحضير تلك المشروبات، بالإضافة إلى منتجات نباتية أخرى محضرة من النباتات المذكورة. إن استخدام الاختراع يتيح اتخاذ إجراءات إنتاج محسنة من أجل المشروبات التي لها أنماط مذاق محسنة، ويتيح أيضا تخفيض في استهلاك الطاقة الحرارية عند الإنتاج.

Description

¥ مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد ‎(DMS)‏ ‎Barley and malt-derived beverages with low DMS levels‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع إن كل الإشارات إلى براءات الاختراع وغير براءات الاختراع المذكورة في هذا الطلب مدمجة هنا بالإشارة الكاملة. يتعلق الاختراع الحالي بمشروبات ‎(beverages)‏ مشتقة من الشعير ‎(barley)‏ تتميز © بمستويات قليلة بدرجة جديرة بالذكر من كل من ‎(DMS) dimethyl sulfide‏ و/أو مصدره الأولي ‎(SMM) S-methyl-L-methionine‏ أو تفتقد واحد من أو بصورة مفضلة كلا من المركبين المذكورين . إضافيا؛ يتعلق الاختراع بطرق لإنتاج المشروبات ‎(beverages)‏ المذكورة أعلاه وأيضا بنباتات ‎(barley plants) jad‏ مفيدة في تحضير تلك المشروبات ‎«(beverages)‏ ‏بالإضافة إلى منتجات أخرى محضرة من النباتات المذكورة. برغم أن الاختراع يمكن من إنتاج ‎٠‏ مشروبات ‎(beverages)‏ تتميز بأنماط مذاق محسنة؛ فإنه يسهل أيضا نموذجا جديدا لطرق إنتاج مع تقليلات ‎Spas‏ بالذكر في دخل الطاقة الحرارية. تحديدا بالنسبة لغليان الورت ‎(Wort)‏ ‏إن المشروبات ‎(beverages)‏ تحديدا البيرة ‎(Beer)‏ يمكن إنتاجها على أساس شعير ‎“Hordeum vulgare, L. — (barley)‏ وهو نبات محصول أحادي الفلقة تتم زراعته في أجزاء ‎٠‏ كثيرة من العالم. إن الشعير ‎(barley)‏ هام اقتصادياء كمادة خام لمنتجات صناعية؛ متضمنة البيرة ‎«(Beer)‏ وأيضا كمصدر لطعام الحيوان. في البيرة ‎(Beer)‏ بالإضافة إلى في كثير من الخضروات والمواد الغذائية- متضمنة الشاي؛ الكاكاو؛ ‎(alll‏ الذرة السكرية؛ وخضروات مطهية كثيرة- يضيف ‎DMS‏ سمات رائحة ونكهة ظاهرة؛ مفيدة بصفة عامة إلى المنتج. على أية حال؛ فإن المستوى العالي من ‎DMS‏ ‎٠‏ يسبب وجود نكهة قد تكون غير مرغوبة؛ دائما ما توصف مثل "الذرةٍ السكرية المطهية" أو أحيانا ‎Jie‏ "شبيهة الكشمش (عنب بدون بذر) الأسود". اعتمادا على نوع البيرة ‎(Beer)‏ فإن مستويات ‎DMS‏ قد تصل نموذجيا إلى ‎١464‏ ‏ميكروجرام/ لتر وأحيانا يمكن أن تصل إلى مقدار كبير مثل ‎gia ١٠١‏ على البليون ‎You)‏ v ‏ميكروجرام/ لتر)؛ ويساهم المركب المذكور غالبا في وجود نكهات "خضار مطهو" أو 'تشبه‎ ‏الكرنب". على أيه حال؛ فإن المستوى القليل من المركب مطلوب أحيانا في البيرة الكبيرة لأنه‎ ‏قد يساهم في اكتمال التذوق والنكهة الكلية للبيرة ن©056؛ إن القيمة الحرجة الحسية‎ ‏ميكروجرام/ لتر‎ 40-7٠ ‏حوالي‎ JU ‏حوالي 50-75 جزء على البليون» على سبيل‎ ‏جزءِ‎ ٠١ > DMS ‏تكون مستويات‎ Laie ‏ملحوظة‎ DMS ‏1987).لا تكون نكهة‎ (Meilgaard) © ‏على البليون.‎
يخلق ‎SMM‏ المشار إليه هنا كمصدر أولي ‎«(DMSP) DMS‏ في لبابات الشعير ‎(barley kernel)‏ النابتة بتأثير مكونات وظيفية لدورة ‎SMM‏ (الشكل ‎١‏ ()). هناء يحفز الإنزيم ‎methionine ~~ (Met)-S-methyltransferase (MMT)‏ تحول مجموعة ‎methyl‏ ‎V+‏ من ‎S-adenosyl-methionine (AdoMet)‏ إلى ‎(Met‏ لتكوين ‎SMM‏ يمكن في المقابل أن يخدم المركب الأخير كمادة معطية ‎methyl‏ من أجل تصنيع ‎Met‏ من ‎chomocysteine (Hey)‏ وهو تفاعل يحفزه ‎.(HMT) Hcy-S-methyl transferase ay) ١‏ على الرغم من وجود جدال حول دور محدد للإنزيم ‎MMT‏ فقد كان يعتقد أوليا أنه يمنع النقص في تجمعات ‎Met‏ من أجل تكوين ‎protein‏ بواسطة تجاوز الحد في تكوين ‎AdoMet‏ ‎«Mudd and Datko) ٠‏ +149( يعتقد أيضا أن دورة ‎SMM‏ لها وظيفة في انتقال ‎sulfur‏ ‏مسافة طويلة في النباتات؛ مع تدفق كبير من ‎Met‏ إلى ‎SIMM‏ في الأوراق؛ نقل اللحاء لمركب ‎(SMM‏ وإعادة تحويل ‎SMM‏ إلى ‎Met‏ في اللبابات ‎(kernel)‏ النامية أو أنسجة مخترقة ‎Bourgis et al)‏ 1499(. لقد كشفت تجارب عنصر استشفافي إشعاعي لاحقا أن الدورة المذكورة تقوم بالتحكم في مستويات ‎AdoMet‏ بدلا من منع نقص ‎(V+ +) Ranocha et al) Met ٠‏ يتعلق تفسير بديل ‎SMM sad‏ الفسيولوجي في النباتات بتنظيم تكوين ‎Ko et al.) ethylene‏ ؛ ‎٠٠١‏ ) » أساسيا مع أفكار ظهرت من خلال التجارب
مع ‎1-aminocyclopropane-1-carboxylate‏ مخلق من خميرة من عائلة ‎Pichia‏ ‏توقع ‎)١٠15١( McElroy and Jacobsen‏ أنه من الممكن تنظيم تكوين ‎SMM‏ باستخدام؛ مثلا؛ تقنية مضادة للإحساس. على أية حال؛ لا يوجد دليل متوافر عن جينات ‎(genes)‏ خاصة ‎YO‏ مستهدفة لمضاد الإحساس؛ لكنه كان من المتوقع أن تكون إمكانية الناتج الإيجابي موضعا للتساؤل لأن التقليلات الكبيرة في مستويات ‎SMM‏ يمكن أن تكون ضارة لنمو ونشوء الشعير ‎(barley)‏ لم يطرح ‎Jacobsen s McElroy‏ (أعلاه) حلول بديلة للحصول على مستوى أقل من
¢ ‎SMM‏ إضافياء حسب الشرح بالتفصيل أدناه؛ فإن التقنيات المضادة للإحساس لم يتم تطبيقها كليا في الشعير ‎(barley)‏ من أجل إخماد بصورة كاملة لإظهار جين ‎(gene)‏ ‏لسوء الحظ؛ لا توجد طرق متوافرة لتحضير نباتات شعير ‎(barley plants)‏ طفرية تفتقد ‎LIS‏ ‏لإظهار ‎protein‏ معين. بصفة عامة بالنسبة للشعير ‎cal (barley)‏ التقتيات للإحساس إلى © وجود نباتات طفرية لا تزال تظهر بعض ‎protein‏ الذي نحن بصدده (انظر على سبيل المثال ‎£)93A Robbins et al.‏ لماك لطفاىق ‏ ١٠٠؛ ‎.)٠٠١١ Hansenetal.‏ أيضا » لم تتوافر طرق مؤثرة لتحضير طفرات خاصة باستخدام ‎RNA /DNA‏ هجين أو تكوين طفري موجه لمكان للاستخدام في نباتات الشعير ‎(barley plants)‏ ما يتفق مع هذاء وعلى الرغم من الجهود المكثفة؛ فإن مخترعوا الطلب الحالي ليسوا على دراية بأي مثال منشور ‎٠‏ يتعلق باستهداف ناجح ‎(pad‏ متعلق ب ‎oLigonucleotide‏ في الشعير ‎(barley)‏ على الرغم من عدم اتباعه في الشعير ((16:)؛ فقد ذكر ‎)٠٠١*( Terada sy lida‏ إن استهداف جين ‎(gene)‏ ‏موجه لأجل ‎oLigonucleotide‏ قد تم اختباره في الذرة؛ التبغ والأرز- لكن في كل الحالات مع جين مقاوم لمبيدات الأعشاب ‎acetoiactate synthase (ALS)‏ كهدف. طبقا لاستنتاج ‎lida‏ ‎Terada‏ (أعلاه) » فلا تزال هناك حاجة لتأكيد ما إذا كانت السياسة المذكورة ‎code‏ مع ‎١‏ تعديلات ملاثمة؛ ‎(Sa‏ استخدامها لجينات ‎(genes)‏ بخلاف تلك القابلة للانتقاء مباشرة؛ ‎Mie‏ ‏جينات ‎ALS (genes)‏ إن التكوين الطفري المستهدف باستخدام ‎nucleases‏ إصبع ‎zine‏ يمثل وسيلة أخرى يمكن أن تسع بدرجة قوية بتحريات إضافية في علم أحياء النبات الأساسي أو تعديلات في نباتات محصول ‎Kumar ¢Y «+0 (Tzfira and White ¢Y+ + (Durai et al.)‏ ‎(Yo rT cet al.‏ أيضا في هذه الحالة؛ فإن التكوين الطفري لم يتم اتباعه أو استخدامه بصورة ‎Ye‏ ناجحة في الشعير ‎(barley)‏ ‏برغم ذلك؛ يمكن تحضير طفرات شعير بتكوين طفري عشوائي باستخدام معالجة بالأشعة أو معالجة كيميائية؛ مثلا ‎dallas‏ مع ‎sodium azide (NaN3)‏ كمثال يتعلق بلبابات الشعير ‎(barley Kernels)‏ المتكونة طفريا من خلال استخدام ‎(NaN3‏ وبفحصها بعد ذلك من أجل المستويات العالية من ‎phosphate‏ الحر من أجل فحص الطفرات ‎(mutation)‏ قليلة ‎(Rasmussen and Hatzack) phytate 8‏ 994٠)؛‏ تم تحديد إجمالي ‎٠١‏ طفرات ‎(mutations)‏ ‏من ‎٠0089‏ لبابة ‎(kernel)‏ مفحوصة. برغم أنه بعيد عن الممكن دائماء فإن إيجاد طفرة
° ‎(mutation)‏ خاصة بعد معالجة ‎NaN;‏ يعتمد على التواجد الدائم وطريقة الفحص المؤترة؛ ولذلك فهو بعيد عن النجاح دائما. يتعلق جزء صعب مرتبط بتحديد أهداف جزيئية واعدة في التناسل التقليدي للنبات بصعوبات في تأكيد تحديد المكون (المكونات) في مسار كيميائي حيوي محدد الذي يجب 0 اختلاله من أجل إنتاج التغيير المطلوب في فصل النظام؛ وبالتالي القدرة على ترسيخ طريقة فحص مفيدة. إن تحضينات متعلقة بإنتاج البيرة عند درجات حرارة مرتفعة ‎Jie‏ تجفيف الشعير في الفرن» أو تسخين وغليان ورت الشعير؛ قد تحث تحول كيميائي من ‎SMM‏ إلى ‎DMS‏ بسبب خواص متأصلة من ‎(DMS‏ خصوصا نقطة غليانها عند فقط 7١7/8-7*مئوية؛‏ فإن ‎ia‏ كبير من ‎٠‏ 0348 المتكون أثناء التسخين في الفرن وغليان الورت قد يفقد في ‎die. gall‏ درجات حرارة فوق تقريبا ‎٠‏ /7*"مثوية. ينخفض تطاير ‎DMS‏ إلى مستويات منخفضة ‎Scheuren and ( las‏ ‎«Sommer‏ (١١٠٠)؛‏ مع تعديل شروط أكسدة إضافية إلى 01450. عندما يكون زمن حفظ أو إثارة غليان الوررت غير كاف لتحويل ‎SMM‏ متخلف؛ قد يستمر ‎DMS‏ في التكون مع تبريد الورت؛ مع تحول لاحق إلى البيرة. ‎Ye‏ جرى تطوير طرق تقنية لخفض مستوى ‎DMS‏ في البيرة. بذلك» تصف براءة الاختراع الأفريقية ‎YAOYA/AY‏ طريقة لخفض مستويات ‎DMS‏ في الشعير؛ تشمل معالجة الشعير المذكور بالبخار. في طلب براءة الاختراع الأمريكي ‎٠٠0١6/٠0697184‏ إلى ‎Bisgaard-‏ ‎Frantzen, H. et al‏ جرى وصف طرق تخمير تشمل معالجة الهريس بالحرارة عند ‎٠‏ 7١*مثوية‏ وأعلى من هذا. وفي براءة الاختراع الأمريكية رقم 477144 07 إلى ‎Reuther, H‏ جرى وصف ‎Yo‏ طرق لتحضير بيرة منخفضة ‎carbohydrate‏ حيث تشمل الطرق الغليان المكثف للورت ثم غسيل الورت المذكور مع ‎.carbondioxide‏ مع هذاء تستهلك كل المعالجات المذكورة مستويات عالية من الطاقة؛ وأيضا قد تعدل من خصائص الملت (شعير منبت بالنقع في الماء) أو الورت. الوصف العام للاختراع ‎Yo‏ يكشف الاختراع الحالي عن مشروبات ‎(beverages)‏ محضرة من الشعير» أو أجزاء منه؛ تحديدا بيرة ‎(Beer)‏ لها نكهة محسنة. تظهر المشروبات ‎(beverages)‏ المعلنة هنا مستويات
; قليلة جدا من ‎(DMS‏ أو أيضا عدم وجود ‎DMS‏ بالمرة- تحديدا مشروبات ‎(beverages)‏ بها مستويات ‎DMS‏ أقل من القيمة الحرجة للتذوق؛ وبالتالي تتميز بغياب مذاق ‎DMS‏ علاوة على ذلك؛ فإن مشروبات ‎(beverages)‏ الاختراع لها خواص مذاق فائقة. طبقا ‎cll)‏ ‏تتميز مشروبات ‎(beverages)‏ الاختراع بأنها متوازنة وقابلة للشرب بصفة خاصة مع نكهة لها © درجة عالية من الانتعاش؛ أروماتية وزهرية. لذلك؛ يوفر الاختراع مشروبات ‎(beverages)‏ لها خواص نكهة لافتة للنظر اعتمادا على عدم وجود ‎DMS‏ أو مستويات ‎ALE DMS‏ اتضح هنا أن ‎DMS‏ يؤثرهِ بدرجة مدهشة على إحساس الإنسان بمركبات ‎estery‏ في البيرة ‎(Beer)‏ (انظر الشكل ‎١‏ (ب))؛ وهذا متطابق مع نموذج وفرهِ المخترعون يخفي فيه ‎DMS‏ مذاق المركبات المذكورة. ‎٠١‏ ما له أهمية وافرة أن الاختراع الحالي يوفر لبابات شعير أو ملت ‎(malt)‏ بها عيوب تخمد بصفة خاصة تكوين مصدر أولي ‎DMS‏ بهذه الطريقة؛ فإن الإخفاء الموصوف أعلاه للمذاق ‎estery‏ بواسطة ‎DMS‏ يمكن تفاديه؛ وذلك يمكن من وجود فرص جديدة في الاستعمال الصناعي للشعير والملت ‎(malt)‏ إضافياء فإن لبابات الشعير ‎(barley Kernels)‏ أو الملت التي بها عيوب تخمد بصفة خاصة تكوين مصدر أولي ‎DMS‏ لها أيضا خواص مذاق يسببها ‎Ve‏ غياب ‎DMS‏ بذاته. من الجدير ‎SAL‏ فإن الشعير أو الملت المذكور يمكن إنجازه كمادة خام في استخدامات صناعية مؤثرة للمساعدة في ترسيخ معايير ضبط إنتاج مفصلة أبعد بكتير من القدرات المعاصرة. بصفة خاصة. تتعلق التحسينات بأمور متعلقة بجودة البيرة وإمكانية التدعيم البيئي في إنتاج ‎apd)‏ بصفة خاصة من أجل: ‎DMS ‏بيرة بها مستوى قليل من مذاق يخص‎ )١( ‏محسن؛‎ estery ‏بيرة لها نمط مذاق‎ (Y) XY. ‏دخل طاقة قليل لإنتاج البيرة؛ و‎ (V) (Wort) ‏استهلاك قليل للطاقة في إنتاج الورت‎ (€) ‏يوفر الاختراع الحالي نباتات ولبابات شعير تتحقق فيها التحسينات المذكورة.‎ ‏مع عمليات‎ SMM ‏لذلك؛ بدون التقيد بالاعتبارات النظرية الخاصة بكيفية تداخل أيض‎ ‏حيوية أخرى؛ فإن الاختراع الحالي يوفر فرص غير متوافرة بعد لتنفيذ واستكشاف تناسل‎ Yo
SMM ‏المعيبة في تكوين‎ (barley plants) ‏واستخدام صناعي لنباتات الشعير‎
لا
يكشف الاختراع الحالي عن أن المشروبات ‎(beverages)‏ التي تتميز بمستويات قليلة من مذاق يخص ‎DMS‏ ونمط مذاق ‎estery‏ محسنء و/أو مشروبات متوازنة بصفة خاصة وقابلة للشرب أي؛ لها نكهة على درجات عالية من الانتعاش» أروماتية؛ وزهرية- يمكن تحضيرها من نباتات الشعير» أو أجزاء منهاء تحمل طفرة ‎(mutation)‏ في الجين المشفر ‎(MMT‏ وذلك
© يسبب فقد كامل لنشاط ‎MMT‏ يرمز هنا إلى تلك النباتات بأنها شعير "ناقص- 7/111".
لذلك؛ يتعلق الاختراع في جانب بمشروبات محضرة من نبات شعير ‎«(barley plant)‏ أو جزء ‎die‏ حيث يحتوي المشروب المذكور مستوى من ‎DMS‏ أقل من ‎"٠‏ جزءٍ على البليون (مثلا أقل من 90 جزء على البليون 0148)؛ وحيث يحمل نبات الشعير المذكور طفرة في الجين المشفر ‎MMT‏ مما يسبب فقد كلي لنشاط ‎MMT‏
‎٠١‏ في جانب ‎OAT‏ يوفر الاختراع نباتات شعير ‎(barley plants)‏ مفيدة لتحضير المشروبات المذكورة. طبقا لذلك؛ فإنه هدف أيضا للاختراع أن يوفر نبات شعير ‎c(barley plant)‏ أو ‎sya‏ ‏منه؛ حيث يحمل نبات الشعير طفرة في الجين المشفر ‎MMT‏ تسبب فقد ‎AS‏ لإنزيم ‎MMT‏ ‏وظيفي.
‏إضافياء يتعلق الاختراع بمنتجات نبات ناتجة من نبات الشعير ناقص ‎MMT‏ المذكورء
‎١‏ متضمنة؛ على سبيل المثال؛ تركيبات ملت وورت؛ أو أشربة أو خلاصات معتمدة على الشعير؛ أو أشربة أو خلاصات معتمدة على الملت؛ أو مواد إضافية. إن المواد الإضافية في السياق الحالي هي شعير غير ملت؛ والذي قد يستخدم إما وحده أو في اتحاد مع شعير ملت لتحضير الورت. أيضاء يوفر الاختراع طرق لتحضير نباتات الشعير المذكورة؛ بالإضافة إلى طرق لتحضير المشروبات ومنتجات النبات الأخرى.
‏أ ‎Lil)‏ في عالم به فوضى مناخية على الأجندة العالمية؛ لابد أن يساهم المجتمع والصناعة في التقليلات الكلية ‎Glad‏ غاز الصوب الزراعية والفوائد البيئية. إن هدف الاختراع بذلك هو توفير نباتات شعير مفيدة لإنتاج بيرة باستخدام طرق تستهلك طاقة قليلة. طبقا لذلك؛ فإن نباتات الشعير من الاختراع مفيدة لإنتاج بيرة باستخدام طرق تقل ‎Led‏ الفترات الزمنية لخطوات التسخين؛ أو تقل فيها درجة الحرارة في خطوات التسخين؛ مقارنة بطرق
‏5 التحضير القياسية. ما لها أهمية أساسية هي الفوائد في خطوات تجفيف آتون وإجراءات غليان الورت؛ والتي قد تكون بدرجة مفيدة قصيرة الأمد أو تجرى عند درجات حرارة أقل مقارنة
A
‏بالأنظمة القياسية للتخمر وإنتاج البيرة؛ وتقلل استهلاك الطاقة لتوفير طرق أكثر دواما في‎ ‏البقاء لإنتاج البيرة.‎ ‏تحديد قوائم الترتيب‎ ‏يمكن إدراك الاختراع بصورة تامة أكثر من الوصف التفصيلي التالي والتحديد التالي لقوائم‎ ‏الترتيب (ملخصة في جدول ١٠)؛ وذلك يشكل جزءا من هذا الطلب. يقدم الجدول المذكور‎ © ‏الموصوفة هناء إن الإشارة إلى المواد الأولية‎ polypeptides s ‏قوائم بالأحماض النووية‎ ‏تشمل أجزاء الحمض النووي المشفرة‎ gDNA 5 cDNA ‏بالإضافة إلى نسخ‎ oligonucleotide ‏والمحددات المقابلة‎ cpolypeptides ‏لكل أو قسم جوهري من هذه‎ A tied polypeptides ‏(تعريف الترتيب رقم: ). إن وصف الترتيب وتحديد قوائم الترتيب المرفقة هنا تتبع القواعد التي‎ ‏في طلبات براءة الاختراع.‎ amino acid ‏و/أو‎ nucleotide ‏تحكم توضيح ترتيب‎ ٠ : ‏للرسومات‎ paid ‏شرح‎ ‏ومتوسط درجات النكهة.‎ SMM ‏مكونات منتقاة من دورة‎ ١ ‏يبين الشكل‎ methyl ‏بتحريل‎ SMM ‏يخلق فيها‎ SMM ‏(أ) مكونات منتقاة من دورة‎ ‏مع تحفيز بواسطة إنزيم‎ cmethionine (Met) ‏عسندمنطاعها ”5-8005 إلى‎ (SAM) ‏من‎ ‏كمادة معطية‎ SMM ‏يمكن في المقابل أن يخدم‎ .Hry-S-methyltransferase (HMT) ٠ ‏في تفاعل يحفزه الإنزيم‎ chomocysteine (Hey) ‏من‎ Met ‏لتكوين‎ methyl ‏يبين الشرح كيفية ارتباط التفاعلات غير العكسية‎ (Hey-S-methyltransferase (HMT) ‏بينما يحول‎ Mets 7 ‏بصورة أساسية. إن كل تحول للدورة لا طائل منه لأنه يستهلك ثم يجدد‎ ٠ ‏و1 (غير مبين). (ب) توضيح لمتوسط درجات‎ PPi cadenosine ‏إلى‎ ATP ‏النكهة؛ + الحيود القياسي» بواسطة مجموعة من المتخصصين في تذوق البيرة بالنسبة للخواص‎ Y- ‏و0148- عينات البيرة. إن العينات المقارنة للبيرة القياسية بها بيرة‎ cestery ‏المعروفة- القوام»‎ ٠ ‏يعطي التركيزات التالية في البيرة:‎ esters ‏فقط (الأعمدة المعلمة مع "0")؛ أو بها خليط من‎ ‏,»جزء على‎ ٠ © 800027186681 ‏على المليون‎ cia V,0 cethyl acetate ‏على المليون‎ ois ؛)"٠١" ‏(الأعمدة المعلمة‎ ethyl octanoate ‏جزء على المليون‎ ١١ cethyl hexanoate ‏المليون‎ ‎.)"7" ‏(الأعمدة المعلمة‎ DMS ‏على البليون‎ gia ٠٠١ ‏سالفة الذكر المتضمنة‎ ester ‏وخلطة‎ 5
SMM-OPA ‏يبين شكل ¥ الجزيئات المشتملة في التكوين القلوي للمركب الاستشعاعي‎
يبين شكل ؟ نتائج ‎HPLC‏ وتجارب تبقع ‎western‏ لتحديد النوع الشكلي ناقص- ‎MMT‏ ‏للطفرة ‎ATT‏ والطفرة ‎VE 0A‏ )1( مثال عن الفصل المعتمد على ‎HPLC‏ لخلاصة من براعم نابتة ‎cv.
Prestige‏ يبين فصل ‎asparagine «glutamic acid (Glu) «aspartic acid (Asp)‏ ‎.SMM serine (Ser) ¢«(Asn)‏ إن الاستشعاع لخلاصات مشتقة- ‎OPA‏ براعم نابتة للشعير © تتم إثارته عند ‎VE‏ نانومتر ويقاس الانبعاث عند ‎49٠‏ نانومتر. (ب) فصل معتمد على - ‎HPLC‏ لخلاصات من الطفرات المشار إليها والنوع البري ‎cv.
Sebastian‏ إن فصل المكونات في خلاصة طفرة يوفر كروماتوجرام بدون ذروات ‎SMM add‏ (ج) نتائج تبقع ‎Western‏ ‏لأجل ‎proteins‏ منفصلة بالمقاس من خلاصات براعم نابتة للنوع البري ‎Prestige‏ (الخانة ‎((Y‏ ‏الطفرة 80567 (الخانة ‎oF‏ النوع البري ‎Sebastian‏ (الخانة ©( والطفرة ‎Aa) ١5018‏ 6). ‎٠‏ تنفصل ‎proteins‏ مرجعية لها الأوزان المشار إليها بالكيلو دالتون في الخانات ‎Veto)‏ ‏بينما يستخدم ‎MMT‏ مخلق من خلايا ‎coli‏ .25 كمثال مقارن وينفصل في الخانة ‎A‏ حسب التفصيل في المثال ‎VY‏ فإن حزم ‎protein‏ المصبوغ + ‎VY‏ كيلو دالتون تمثل ‎MMT‏ بينما أن الحزمة 80 كيلو دالتون في خلاصة ‎EB. coli‏ ليست مشتقة من ‎MMT‏ لأنها تظهر أيضا في خلاصات خلايا مقارنة سالبة متحولة مع ناقل ‎PET19b‏ (قارن شكل ‎VE‏ (ب)؛ (ج)). ‎Vo‏ يبين شكل 4 غياب نشاط ‎MMT‏ في براعم نابتة عمرها ؛ أيام لطفرة ‎OSA TY‏ مع وجود أنشطة ظاهرة في البراعم النابتة من النوع البري لطول إنبات مشابه. يتحدد نشاط ‎MMT‏ ‏باستخدام ‎PHISAM‏ كمادة خاضعة. إن التحول الذي يحفزه ‎MMT‏ لمجموعة ‎methyl‏ من ‎[PHISAM‏ إلى ‎Met‏ لتكوين ‎SMM‏ تتم مراقبته بعد وميض بعد إزالة ‎PHISAM‏ المتبقي بواسطة ‎aad‏ نباتي نشط. إن هذا يربط المادة الخاضعة- لكن ليس ‎SMM ite‏ المعلم جديد ‎٠‏ التخليق. يبين الشرح ‎SMM Lad‏ غائب في براعم نابتة طفرية؛ لكنه موجود في تلك من النوع البري. تم تحليل إجمالي ‎Te‏ برعم نابت من كل من النباتات الطفرية والنوع ‎١٠ call‏ من الطفرية 5 ‎VO‏ من النوع البري. يبين شكل © مقارنة محتويات ‎DMSP‏ الحر 5 ‎DMS‏ الحر في الملت» ‎«ysl‏ والبيرة من النوع البري والناقص- ‎MMT‏ (أ) كل من الملت الأخضر والمجفف في آتون للطفرة ‎AY‏ ‎YO‏ به ‎pati‏ بدرجة ملحوظة في مستويات ©1145 5 ‎DMS‏ الحر. (ب) إن الورت السكر والمغلي للطفرة 8057 يفتقد في الغالب ‎DMSP‏ و0345 الحرء وأيضا فإن البيرة المصنعة باستخدام الطفرة 8017 للملت قليلة للغاية في مستوى ‎DMS‏ الحر.
Ye. ‏أشخاص متخصصين في تذوق‎ ٠١ ‏مقارنات نمط النكهة المقررة بواسطة‎ ١ ‏يبين شكل‎ ‏والطفرة‎ cv. Power ‏البيرة الكبيرة؛ تشمل الاختبارات بيرة متخمرة مع ملت من النوع البري‎ ‏يجعل هذا النوع من التحليل من الممكن استخدام عدد من معايير‎ (MMT ‏(ناقصة-‎ 7 ‏النكهة المحددة مسبقا كما مبين في الرسوم البيانية؛ يمكن تقديرها على نطاق درجي من صفر-‎ ‏تقدر النكهة بأنها "حدية”؛ تقابل درجة 0( فقط إذا كانت خاصيتها تعتبر قصوى بالنسبة‎ . © ‏ملخص لتقييم خبراء تذوق البيرة للبيرة المختلطة مع‎ ١ ‏لنوع البيرة المحللة. (أ) يقدم جدول‎ ‏(ب) ملخص يقدم بالتفصيل تقييم خبراء التذوق لبيرة بدون إضافات.‎ alcohols s esters ‏إن لبابات الجيل‎ NaN; ‏توضيحا لطريقة انتشار لبابات شعير طفرية بواسطة‎ ١ ‏يبين شكل‎ ‏(م صفر) تنمو إلى نباتات تمثل شتلة للبابات الجيل (م١). يمكن زراعة هذه ونموها إلى نباتات‎ ‏وتمثل شتلة للبابات‎ (Ya) ‏التي تنتج لبابات جديدة للجيل (م "). بعد ذلك؛ تنمو نباتات‎ (Yo) 0٠
Mie (Leia ‏ويمكن استخدام عينات‎ «sally (Va) ‏يمكن السماح للبابات الجيل‎ (Ya) ‏الجيل‎ ‏وتستخدم زهرات النباتات‎ (Ya) ‏بذور‎ deh) ‏من أجل التحليل. يمكن أيضا‎ ccoleoptiles ‏المقابلة للتهجينات المتبادلة للحصول على نباتات الجيل (م4).‎ ‏منظور عام تخطيطي مبسط لعملية إنتاج بيرة مفضلة؛ تتضمن نقع حبة‎ A ‏يبين شكل‎ (0) ‏تكوين هريس‎ o£) ‏طحن الملت الجاف‎ oF) ‏تجفيف آتون‎ oY) ‏إنبات‎ )١( ‏الشعير‎ ١ ‏ترشيح (1)؛ علي الورت في وجود مواد معالجة إضافية (7)» تخمر في وجود خميرة (8)؛‎ ‏زجاجات؛ عبوات؛ أو ما شابه‎ lie ‏التعبئة في؛‎ (Vo) ‏إنضاج البيرة (9)؛ ترشيح البيرة‎ ‏يمكن تجميع العمليات المنفردة إلى قطاعات تشمل إنتاج ملت‎ .)١7( ‏ووضع علامة‎ ؛)١١(‎ ‏على الرغم‎ .)1-٠١( ‏إنتاج ورت (1-4)؛ تخمر (4-4))؛ وتحضير البيرة النهائية‎ (TY) ‏أنه تم توضيح طريقة مفضلة؛ يمكن توقع وجود طرق أخرى يتم فيها حذف بعض الخطوات‎ eT ‏الموصوفة (إن الترشيح؛ مثلاء يمكن حذفه أو يمكن عدم إضافة مواد المعالجة الإضافية)؛ أو‎ ‏يمكن أيضاف إنتاج‎ (carbonate ‏قد تضاف خطوات إضافية (مثلا إضافة مواد مساعدة أو‎ ‏البيرة باستخدام خلطات من شعير ملت وغير ملت؛ أو فقط شعير ملت؛ وفي تلك الحالة‎ ‏تضاف إنزيمات خارجية دائما أثناء عملية تكوين الهريس.‎ ‏يبين شكل ؟‎ MMT ‏يبين شكل 9؛ في شكل تخطيطي؛ تنسيق جين الشعير المشفر‎ vo ‏بداية الترجمة‎ codons ‏(تعريف الترتيب رقم: ؟)؛ يشمل‎ bp 717718 ‏طوله‎ genomic ‏ترتيب‎ ‏كمربعات مرقمة وخطوط غير مرقمة؛ على‎ introns 5 Exons ‏الإيقاف. تبين‎ codons
١١ ‏مبين كرأس سهم ليشير إلى الاتجاه الكلي للنسخ والترجمة. تشير أرقام‎ VY Exon ‏الترتيب. إن‎ codon ‏المحددة بالنسبة للقاعدة الأولي من‎ exons ‏لأجل‎ vy “0 ‏إلى الطرف‎ Nucleotide ‏التي تقابل التكبيرات باستخدام‎ PCR ‏بداية الترجمة. موضح أيضا المواقع التقريبية لامتدادات‎ .7 ‏مجموعات المادة الأولية المذكورة في الجدول‎
° يبين شكل ‎٠١‏ ترتيب ‎cDNA‏ من أجل ‎MMT‏ شعير من ‎«cv.
Prestige‏ يشمل ‎codons‏ ‏بداية الترجمة والإيقاف؛ أي؛ منطقة التشفير (تعريف الترتيب رقم: ‎o£‏ مصطفة مع الترتيب المترجم (تعريف الترتيب رقم: ‎oT‏ باستخدام الشفرة من حرف واحد ‎.amino acids Jay‏
يبين شكل ‎VY‏ اصطفاف ترتيب إنزيمات ‎MMT‏ المتماظلة تقريبا لشعير ‎cvs.
Haruna Nijo‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎Prestige s oY‏ (تعريف الترتيب رقم: 1( هناك
‎٠‏ تعليم لأثتين من اختلافات متخلف ‎amino acid‏ منفصلة كمربعات سوداء مع حروف بيضاء. يبين شكل ‎١١‏ كيفية تنشيط طفرة شعير 80767 لمواقع الجديلة الشفرية في الجين من أجل ‎MMT‏ 0( تشير أسهم أفقية صغيرة أسفل توضيح التركيب ‎genomic‏ للجين من أجل ‎MMT‏ ‏إلى موضع التقسية التقريبي لمجموعة المادة الأولية ‎Vo‏ قارن جدول 4. (ب) رؤية حزم ‎DNA‏ عقب ارتحال كهربي لهلام ‎agarose‏ لتحليل تفاعل سلسلة ‎polymerase‏ نسخ ‎(Se‏ ‎(RT-PCR) ١٠‏ للمنتجات باستخدام جزيء تركيبي 1118 من أي من النوع البري ‎cv.
Prestige‏ أو الطفرة 007 8. )=( توضيح لتبيان بناء ‎intron-exon‏ لمنتجات ‎PCR‏ ‏في المجموعة (ب)؛ باستخدام نفس عناصر الرسم البياني كما في (أ). إن ‎Exon‏ © للمنتج 4 أقصر مقارنة بذلك من النوع البري. تشير رؤوس الأسهم الرأسية إلى الأماكن التقريبية لأجل ‎codons‏ إيقاف ترجمة غير ناضجة. بسبب اختيار المواد الأولية؛ فإن المنتجات لا تشمل ‎١ exons ٠‏ و7. من المتوقع؛ على أية حال؛ أن 1118 يمل أيضا ‎١ exons‏ و؟. (د) وصف تفصيلي للنسخ الناتجة من موقع جديلة 0" الطفري ‎(Mut)‏ ‏والنوع البري ‎(WT)‏ في ‎intron‏ © مع الإشارة إلى موقع الطفرةٍ بالقاعدة التي تحتها خط. إن الأسهم المتصلة بالخطوط المصمتة؛ المعلمة ؟ 5 ‎of‏ تعلم الأماكن المعطية والمستقبلة المستعملة أثناء جديلة المنتج ‏ والمنتج ‎of‏ على الترتيب (مثلا المجموعة ج). إن الخطوط ‎Yo‏ المتقطعة؛ المعلمة ‎*Y‏ تشير إلى جديلة نسخة النوع البري (المنتج ‎١‏ في المجموعة (ج)) ‎ls‏ ‏المنتج غير المجدول ؟ (قارن المجموعة (ج)). إن قواعد ‎introns exons‏ © عبارة عن حروف في الحالة السفلية والعلوية؛ على الترتيب. ‎Nt: nucleotide‏ (ه) منظور عام لتركيبة
VY
مواقع الجديلة ©" و7 في أحاديات الغمد ‎(Sinibaldi and Mettler)‏ 1997)؛ مقارنة مع ترتيب ‎intron‏ © في الجين من أجل ‎MMT‏ للطفرة ‎AY‏ ‏يبين شكل ‎plasmids VY‏ إظهار من أجل إظهار مغاير لإنزيم ‎MMTs‏ شاذة للطفرة ‎(AY‏ واصطفاف ‎proteins‏ مشفرة. 00( توضيح للجزء ‎Ncol-BamHI‏ من ‎pET19b-‏ ‎“MMT ©‏ متضمنا مواقع تحديد منتقاة- تشفر ‎MMT‏ نوع بري مندمج مع ترتيب يخص جزء ملحق- ‎His‏ (* ¢ ترتيب 14611111111111111111111؛ تعريف الترتيب رقم: 1( في إطار مع موقع ‎kinase‏ معوي (* *؛ ترتيب ‎¢SSGHIDDDDKH‏ تعريف الترتيب رقم: ‎(Ve‏ توجد بنيات حذف موضحة في (ب)؛ (ج)» و(د). (ه) اصطفاف ترتيبات ‎MMT‏ المشفرة (تعريف الترتيب ‎Yo AF VY rad;‏ للبنيات المبيئة في ‎of)‏ (ب)»؛ (ج)؛ (د)؛ على الترتيب). ‎٠‏ يستخدم ‎peptide‏ مصنع مقابل لامتداد الترتيب معلم مع علامات نجمية من أجل توليد أجسام مضادة عديدة النسخ ضد ‎MMT‏ شعير. إن أرقام متخلف طول الترتيب 77 و85١٠‏ غير مبينة لإنزيم النوع البري (تعريف الترتيب رقم: 36). يبين شكل ‎VE‏ نتائج الإظهار المغاير في ‎E.coli‏ لأشكال النوع البري والطفرية من ‎MMT‏ ‏من ‎cv. Prestige‏ والطفرة ‎(AY‏ على الترتيب؛ مع تفاصيل تجريبية موصوفة في المثال ‎١7 Ve‏ . تخدم خلاصة من خلايا ‎coli‏ .8 متحولة مع ناقل 011190 بالإضافة إلى قاسم تام من 41 تنقي؛ كعينات مقارنة تجريبية. إن مناطق الهلام بين الخانات ؛ و# لكل من التبقعات؛ المشتملة بيانات غير خاصة بالاستخدام الحالي؛ يتم محوها إلكترونيا عقب المسح الفحصي. (أ) أنماط ‎HPLC‏ من أجل ‎SMM‏ نقي بالإضافة إلى خلاصات من ‎coli WA‏ .15 متحولة مع ‎Lad) plasmids‏ إليها. لأغراض المقارنة؛ فإن الأنماط هي أيضا ‎ga‏ تكاملي للشكل ‎AA‏ ‎٠‏ (ب) نتائج تبقع ‎Western‏ لأجل ‎proteins‏ منفصلة بالمقاس من خلاصات خلوية قابلة للذوبان من خلايا ‎E. coli‏ متحولة مع ‎pET-MMT plasmids‏ (الخانة ‎¢(Y‏ ‎pET19b-Line8063-Prod3‏ (الخانة ¥(« ‎pET19b-Line8063-Prod4‏ (الخانة ؛) و81196م (الخانة #). تتفصل في الخانة ‎proteins ١‏ مرجعية لها الأوزان المشار إليها بالكيلو دالتون. (ج) نتائج تبقع ‎Western‏ لأجل ‎proteins‏ منفصلة بالمقاس من خلاصات ‎Yo‏ أجسام تضمن من خلايا ‎coli‏ .2 متحولة مع ‎plasmids‏ كما هو مذكور في قاموس المصطلحات للإشارة إلى ‎pall‏ (ب) هنا أعلاه. إن الأجسام المضادة الأولية عديدة النسخ
VY
المستخدمة في تحليلات ‎western‏ 42.50 ضد ‎MMT peptide‏ شعير مصنع طوله 10 متخلف» يقابل امتداد ‎amino acid‏ المعلم مع العلامات النجمية في الشكل ‎AY‏ ‏يبين شكل ‎Yo‏ أساليب لتحديد الحبات التي تتميز بطفرة 0630768 في جين ‎MMT‏ ‏للطفرة 057 8. (أ) في التفاعل المفترض ‎١‏ والتفاعل 7؛ فإن مجموعة المادة الأولية ١7؛‏ قارن © جدول ا ينتج ‎bp 0018-777١ ha‏ ولا ينتج جزء؛ على الترتيب؛ كما هو مبين تخطيطيا بواسطة الحزمة المصبوغة مع ‎ethidium bromide‏ عقب الارتحال الكهربي لهلام ‎agarose‏ ‏للتفاعلات المقابلة (ج). في التفاعلات المفترضة ؟ و؛ (ب) ‎alg‏ الأخير فقط جزء ‎PCR‏ ‏تشير الأسهم الأفقية إلى تطابق ترتيب كامل مع ‎DNA‏ جزيء تركيبي بينما تشير الأسهم التي لها اتحنتاء حاد إلسى عدم تطابق. (د) تحليل تبقع ‎Western‏ مع ‎٠‏ جسم مضاد لمضاد- ‎MMT‏ يدرك إنزيم ‎١٠١ MMT‏ كيلو دالتون في لبابة ‎(kernels)‏ من النوع البري ‎cv. Prestige‏ (الخانة ؟)؛ لكن ليس في تلك للطفرة ‎JA +1Y‏ تتنفصل ‎Proteins‏ قياسية في الخانة ‎»١‏ مع الأوزان المقابلة المحددة بالكيلو دالتون. يبين شكل ‎١١‏ كيفية تنشيط طفرة الشعير ‎١40٠8‏ لمواقع الجديلة مشفرة في الجين من أجل ‎MMT‏ 0 الأسهم الأفقية الصغيرة- أسفل توضيح البناء ‎genomic‏ للجين من أجل ‎-MMT ٠‏ تشير إلى موقع التقسية التقريبي لمجموعة المادة الأولية 11 انظر جدول 4. (ب) رؤية حزم ‎DNA‏ بعد ارتحال كهربي لهلام ‎agarose‏ لمنتجات ‎RT-PCR‏ باستخدام جزيء تركيبي ‎RNA‏ من أي من النوع البري ‎(cv. Sebastian)‏ أو الطفرة ‎(VEYA‏ )=( وصف لتوضيح بناء ‎intron-exon‏ لمنتجات ‎PCR‏ في المجموعة (ب)؛ باستخدام نفس عناصر الرسم البياني كما في المثال ‎.١‏ إن ‎Y Exon‏ في المنتج ‎A‏ مبتور مقارنة مع ذلك للنوع البري. تشير ‎٠‏ رؤوس الأسهم الرأسية إلى المواضع التقريبية ‎codons‏ إيقاف الترجمة الغير ناضجة. نظرا لاختيار المواد الأولية؛ لا تشمل المنتجات ‎.١ exon‏ من المتوقع؛ على أية ‎«Js‏ أن ‎mRNA‏ ‏يشمل أيضا ‎.١ exon‏ (د) توضيح مفصل للنسخ الناتجة من موقع جديلة 0“ الطفري ‎Mut.)‏ ‏والنوع البري ‎(WT)‏ في ‎oY intron‏ مع الإشارة إلى موقع الطفرة بالقاعدة التي تحتها خط. إن الأسهم المتصلة بخطوط مصمتة المعلمة ‎A 5 ١‏ تعلم المواقع المعطية والقابلة المستعملة أثناء ‎YO‏ جديلة المنتج 7 والمنتج ‎oA‏ على الترتيب (قارن المجموعة (ج)). يشير الخط المتقطع المعلم ‎*١‏ إلى جديلة نسخة النوع البري (المنتج 0 في المجموعة (ج)) وإلى منتج +7 غير مجدول (قارن المجموعة (ج)). إن قواعد ‎introns exons‏ ؟ ممثلة بحروف في الحالة السفلية
١ "7 ‏و‎ "٠ ‏(ه) منظور شامل لتركيبة مواقع الجديلة‎ WNT: nucleotide ‏والعلوية؛ على الترتيب.‎ ‏للجين من‎ Y 10000 ‏مقارنة مع ترتيب‎ (Sinibaldi and Mettler, supra) ‏في أحاديات الغمد‎
NEVA ‏للطفرة‎ MMT ‏أجل‎ ‏إظهار من أجل إظهار مغاير لإنزيم 1,115 شاذة للطفرة‎ plasmids VY ‏يبين شكل‎ ‏من‎ Neol-BamHI ‏مشفرة. (أ) توضيح للجزء‎ proteins ‏واصطفاف‎ VEYA © ‏نوع بري مندمج مع ترتيب‎ MMT ‏متضمنا أماكن تحديد منتقاة- تشفر‎ —pET19b-MMT ‏ترتيب 11611111111111111111111؛ تعريف الترتيب رقم: 19) في‎ »* ) His ‏ملحق-‎ sia ‏يخص‎ ‎(Ve ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ¢SSGHIDDDDKH ‏معوي )** ¢ ترتقيب‎ kinase ‏إطار مع موقع‎ ‏المشفرة‎ MMT ‏توجد بنيات حذف موضحة في (ب)؛ )=( و(د). (ه) اصطفاف ترتيبات‎ ‏(ب)؛ (ج)؛ (د)؛ على‎ off) ‏للبنيات المبينة في‎ 76 YE YY OA ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ ٠ ‏إلى ؛8١٠ غير مبين للإنزيم من النوع البري‎ 7١١ ‏الترتيب). إن رقم متخلف طول الترتيب‎ (OA ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ ‏للإظهار المغاير في ناه» .2 لأشكال من‎ HPLC ‏نتائج تجريبية تعتمد على‎ VA ‏يبين شكل‎ ‏على الترتيب؛ مع وصف‎ ٠6017 ‏والطفرة‎ cv. Prestige ‏من‎ MMT ‏النوع البري وطفرية من‎ ‏متحولة مع‎ E.coli ‏نقي وخلاصة خلايا‎ SMM ‏للتفاصيل التجريبية في المثال . يخدم‎ Ve ‏فإن الرسومات الكروماتوجرافية‎ lal) ‏كعينات مقارنة تجريبية. للأغراض‎ pET19b ‏الناقل‎ ‎.)أ(١‎ 4 ‏المعلمة مع علامات نجمية هي أيضا أجزاء مكملة للشكل‎ ‏في‎ 1462 A ‏توضيح عن أسلوب وراثي لتحديد حبوب تتميز بطفرة‎ ١9 ‏يبين شكل‎ ‏(أ) في التفاعلات المفترضة (و)؛ مجموعة المادة‎ ٠50148 ‏للطفرة‎ MMT ‏الجين من أجل‎ ‏ينتج جزء؛ على الترتيب؛ كما‎ Ygbp PCR -١7١ ‏جدول 4« ينتج جزء‎ pail «4 ‏الأولية‎ x. ‏عقب ارتحال كهربي لهلام‎ ethidium bromide ‏مبين تخطيطيا بالحزمة المصبوغة مع‎ ‏المقابلة (ج). في التفاعلات المفترضة £57 (ب)؛ يولد الأخير فقط جزء‎ Ble lal agarose ‏جزيء تركيبي؛‎ DNA ‏تشير الأسهم الأفقية إلى تطابق ترتيب كامل مع‎ (bp ١7( PCR ‏مع جسم مضاد‎ Western ‏لأسهم مع انحناء حاد إلى عدم تطابق. (د) تحليل تبقع‎ ١ ‏بينما تدل‎ ‏كيلو دالتون في لبابة نوع بري‎ ٠١7١ MMT ‏يدرك إنزيم‎ MMT ‏لمضاد-‎ Yo ‏القياسية في‎ proteins ‏تنفصل‎ .) £2) A ‏(خائة ١)؛ لكن ليس في تلك الطفرة‎ cv. Sebastian ‏ويشار إلى الأوزان المقابلة بالكيلو دالتون.‎ ٠ ‏الخانة‎
Yo ‏تعريفات‎ ‏في الوصفء الأشكال والجداول التالية؛ يستخدم عدد من المصطلحات. لتوفير المواصفات‎ ‏وعناصر الحماية؛ متضمنة نطاق يعطى لتلك المصطلحات؛ تتوافر التعريفات التالية:‎ ‏يمكن أن يعني واحد أو أكثرء اعتمادا على‎ Anil ‏حسب الاستخدام هناء فإن "الصيغة‎ ‏السياق المستخدمة فيه.‎ ‏زراعية” سمة شكلية نوعية أو وراثية لنبات تساهم في الأداء أو‎ Aad ‏يصف المصطلح‎ ‏القيمة الاقتصادية للنبات المذكور. تتضمن تلك السمات مقاومة مرض»؛ مقاومة حشرة؛ مقاومة‎ ‏فيروس؛ مقاومة دودة خيطية؛ تحمل الجفاف؛ تحمل الملوحة العالية؛ الإنتاجية؛ ارتفاع النبات؛‎ ‏في اللبابة وما شابه.‎ nitrogen ‏أيام النضوج؛ درجة اللبابة (أي؛ تجزئة مقاس اللبابة)؛ محتوى‎ ٠ ‏تحديدا عند الاستخدام لوصف عملية‎ pull ‏إن المصطلح 'شعير" عند الإشارة إلى تصنيع‎ ‏تكوين ملت؛ يعني لبابات شعير. في كل الحالات الأخرى إذا لم يحدد خلاف ذلك؛ فإن‎ ‏أن الجزء‎ Cus ‏متضمنا أي تشكيلة؛‎ «(Hordeum vulgare, L) ‏"الشعير" يعني نبات الشعير‎ ‏من نبات الشعير؛ مثلا أي أنسجة أو خلايا.‎ eda ‏من نبات الشعير هو أي‎ ‏تتم زراعتها‎ «Graminae ‏إن نبات "حبي" حسب التحديد هنا هو عضو من عائلة نبات‎ Ve ‏أساسيا من أجل بذورها التي تحتوي التشا. تتضمن نبات حبية؛ بدون تحديد الشعير‎ ‏الشوفان‎ (Secale) ‏الجاودار‎ (Zea) ‏الأرز (ه2©)» الذرة‎ (Triticum) ‏القمح‎ «(Hordeum) ‏و11106816» هجين جاودار - قمح.‎ «(Sorghum) ‏السورغام‎ (Avena)
DMS ‏أو مادة تسبق‎ DMS ‏إن "0145" حسب الاستخدام هنا هو اختصار لمصدر أولي‎ ‏الجزء‎ SMM ‏أثناء إنتاج المشروبات. يمثل‎ DMS ‏أيء الجزيئات التي يمكن أن تتحول إلى‎ ve ‏التي‎ DMS ‏محدد هنا بأنه كمية‎ DMSP ‏الغالب من؛ إذا لم يكن كل؛ ©0145. إن مستوى‎ ‏في مادة النبات المخصصة؛ أو ناتج من ذلك؛ بالغليان عند شروط‎ DMSP ‏يمكن أن تتولد من‎ ‏جزء‎ ١ ‏إلى‎ DMSP ‏جزءٍ على البليون‎ ١ ‏قلوية لمدة ساعة. كما محدد هناء يمكن أن يتحول‎
DMS ‏على المليون‎ ‏إن "تشفير" أو 'مشفر" في سياق الحمض النووي المخصص يعني اشتمال معلومات‎ Ye ‏قد يشمل ترتيبات غير‎ protein ‏المخصص. إن حمض نووي يشفر‎ protein ‏الترجمة في‎ ‏في مناطق مترجمة من الحمض النووي؛ أو قد يفتقد تلك الترتيبات‎ (introns ‏مترجمة (مثلا‎
غير المترجمة المتفاعلة ‎ie)‏ في ‎(cDNA‏ إن المعلومات التي يتم بواسطتها تشفير ‎protein‏ ‏مخصصة باستخدام ‎.codons‏ ‏حسب الاستخدام هناء فإن 'إظهار” في سياق الأحماض النووية يجب إدراكه بأنه نسخ وتراكم ‎mRNA‏ إحساس أو ‎RNA‏ مضاد للإحساس ‎Fide‏ من جزءء حمض نووي. يشير © "إظهار" المستخدم في سياق ‎proteins‏ إلى ترجمة ‎mRNA‏ إلى ‎.polypeptide‏ ‏إن المصطلح "جين" يعني قطعة ‎DNA‏ المشتملة في إنتاج سلسلة ‎¢polypeptide‏ إنه يتضمن مناطق تسبق وتلي منطقة التشفير (محثة ومنهية). إضافة ‎oll‏ فإن جينات النبات غير متصلة مع ‎proteins‏ تشفرهاء تتكون من ‎exons‏ تقاطعها ‎introns‏ بعد النسخ إلى ‎(RNA‏ ‏تزال ‎introns‏ بالجديلة لتوليد ‎RNA‏ رسول ناضج ‎(MRNA)‏ إن "مواقع الجديلة" بين ‎exons‏
‎٠‏ تحددها نموذجيا ترتيبات متفق عليها تؤثر كإشارات جديلة من أجل عملية الجدل؛ تتكون من حذف ‎intron‏ من نسخة ‎RNA‏ الأولي وتوصيل أو اندماج نهايات ‎RNA‏ المتبقي على كل من جانبي ‎intron‏ المستأاصل.
‏إن المصطلح "إنبات" حسب الاستخدام هنا يعني ابتداء أو استمرار النمو بواسطة لبابة شعير في تركيبات متنوعة؛ مثل التربة العادية الموجودة في الطبيعة يمكن أيضا أن يتم الإنبات
‎٠‏ في تربة أوعية موضوعة في حجرات نمو وما شابه؛ أو يتم مثلا على ورق ترشيح مبلل موضوع في أطباق ‎Petri‏ معملية قياسية أو أثناء تكوين الملت ‎Oe)‏ في خزانات فقع أو صناديق إنبات في مصنع تكوين ملت). إن الإنبات مفهوم بصفة عامة أنه يتضمن تميه اللبايات» انتفاخ اللبابات وحث نمو الجنين. تتضمن العوامل البيئية المؤثرة في الإنبات الرطوبة؛ درجة الحرارة ومستوى ‎oxygen‏ يراقب نمو الجذور والبراعم.
‏9 حسب الاستخدام هناء يعني المصطلح ‎"Ag ra’‏ أن المادة تزال من بيئتها الأصلية. على سبيل المثال» فإن ‎polynucleotide‏ أو ‎polypeptide‏ طبيعي الوجود موجود في ‎ALS‏ حي يكون غير معزول؛ لكن نفس ‎polynucleotide‏ أو ‎polypeptide‏ المنفصل عن بعض من أو كل المواد الموجودة الملازمة في الجهاز الطبيعي؛ يكون معزولا. يمكن أن تشكل تلك ‎polynucleotides‏ جزءا من ناقل و/أو يمكن أن تشكل تلك ‎polypeptide sl polynucleotide‏
‎YO‏ جزءا من تركيبة؛ ولا تزال أيضا معزولة لأن ذلك الناقل أو تلك التركيبة ليس جزءا من بيئتها الطبيعية.
VY
‏(ثمرة جافة غير متفتحة ذات بذرة واحدة)‎ B31 Jats ‏محدد بأنه‎ LT ‏إن المصطلح‎ ‏الحبية؛ ويشير أيضا إلى البذرة الداخلية؛ القنابة السفلية والحرشف. في معظم تشكيلات الشعير‎ ‏من اللبابة بعد الدريس. على أيه حال؛ توجد‎ eda ‏تلتصق القنابة السفلية والحرشف مع البرة وهم‎ ‏أيضا تشكيلات شعير عارية. في هذه؛ تكون البرة حرة من القنابة السفلية والحرشف وتنفصل‎ ‏و"حبة" بصورة تبادلية هنا.‎ "LL ‏عند الدريس حرة كما في القمح. تستخدم المصطلحات‎ © ‏مع التخصيب الذي يتم فيه إيداع‎ ag ‏يشير 'نمو حبة' إلى الفترة في دورة حياة الشعير التي‎ «phenolics ‏نشاء مواد‎ oligosaccharides ‏مخزونات أيضية مثلا سكريات»‎ ‏مع أو بدون استهداف حويصلة؛ في أنسجة مختلفة في اللبابة؛‎ «proteins 3 camino acids ‏منوي داخلي؛ الغدقة (الغلاف الخارجي الصلب للبذرة)؛ الأليرون (مادة حبيبية بروتينية في‎ Jie ‏البذرة) والصفيحة؛ مما يؤدي إلى تضخم اللبابة؛ امتلاء اللباية؛ وتنتهي بنضوج وجفاف اللبابة.‎ ٠ ‏تشير إلى نقص‎ "MMT ‏وظيفي" و'فقد كلي لنشاط‎ MMT ‏إن المصطلحات 'فقد كلي‎ ‏يمكن تحديده‎ MMT ‏بدون نشاط‎ (barley plant) ‏أي؛ نبات شعير‎ (MMT ‏النشاط الإنزيمي‎
MMT ‏عند استخدام الاختبار الموصوف في المثال ¥ هنا أدناه. بطريقة بديلة؛ يتحدد نشاط‎ protein ‏للشعير المذكور وتحديد ما إذا كان‎ MMT »0118 ‏بعزل‎ (barley plant) ‏لنبات شعير‎
Met ‏إلى‎ SAM ‏من‎ methyl ‏المذكور قادرا على تحفيز تحول مجموعة‎ cDNA ‏الذي يشفره‎ ٠
SMM ‏وبالتالي تكوين‎ ‏يشير المصطلح "مشروب ملت" إلى مشروبات محضرة باستخدام ملت» اختياريا في مزيج‎ ‏خلطات شعير ملت وغير ملت؛ تفضل مشروبات محضرة بطريقة‎ Jie ‏مع مقومات أخرى؛‎ ‏بيرة أو‎ Sie ‏تتضمن خطوة حضانة ملت مع ماء ساخن. قد يكون مشروب الملت هوء‎ ‏ملتينات.‎ > ٠ ‏تمت حضانته‎ Mie ‏يشير المصطلح " مشروب ملت متخمر” إلى مشروب ملت تم تخمره؛‎ ‏مع خميرة.‎ ‏إلى النشاط الإنزيمي لإنزيم الشعير‎ MMT ‏يشير المصطلح "نشاط‎ ‏هو‎ "MMT ‏00106لط61. في سياق الاختراع الحالي؛ فإن "نشاط‎ S-methyltransferase ‏حتى ولو كان إنزيم‎ SMM ‏لينتج‎ Met sulfur ‏عند ذرةٍ‎ MMT ‏التي يحفزها‎ methylation Yo ‏طبقا للاختراع‎ MMT ‏فلأغراض تحديد نشاط‎ gyal ‏قادرا على تحفيز تفاعلات‎ 7
YA
‏هو المهم. يحدد الشكل ١(ب) التفاعلات الكيميائية‎ SMM ‏الحالي؛ فإن نشاط المكون-‎ .methylation ‏بواسطة‎ SMM ‏إلى‎ Met ‏الحيوية التي يتحول فيها‎ ‏إن 'تكوين ملت" هو شكل خاص لإنبات لبابات الشعير يحدث تحت شروط بيئية خاضعة‎ ‏للسيطرة في؛ بدون تحديد؛ خزانات نقع وصناديق إنبات في مصنع تكوين ملت. طبقا لعملية‎ ‏الاختراع الحالي؛ يبدأ تكوين الملت أثناء و/أو بعد نقع لبابات الشعير. يمكن أن تتوقف عملية‎ © ‏عدم تجفيف‎ Alla ‏في عملية تجفيف آتون. في‎ Sle ‏تكوين الملت بتجفيف لبابات الشعير؛‎ (malt composition) ‏الملت في آتون؛ يشار إليه 'ملت أخضر". من المفهوم أن تركيبة ملت‎ ‏مثل ملت نقي ناقص 1117 أو‎ MMT ‏تشمل ملت ناقص‎ MMT ‏محضرة من شعير ناقص‎ ‏يمكن معالجة الملت؛ مثلا بالطحن؛ وفي‎ MMT ‏أي توليفة من الملت مشتملة ملت ناقص‎
Sepak ‏تلك الحالة يمكن الإشارة إليه أيضا بأنه "ملت مطحون" أو‎ ٠ ‏إن 'تكوين هريس" هو حضانة للملت المطحون في ماء. يفضل إجراء تكوين هريس عند‎ ‏الإنزيمية‎ polymerization ‏حرارة خاصة وفي حجم خاص من الماء للسماح بإزالة‎ da ‏المطلوبة للمواد الخاضعة. إن درجة حرارة وحجم الماء لهما أهمية لأن ذلك يؤثر على معدل‎ ‏نقص نشاط الإنزيم المشتق من الملت؛ وبالتالي كمية التحلل المائي للنشا بصفة خاصة الممكن‎ ‏والمفهوم‎ sae lua ‏هام أيضا. يمكن تكوين هريس في وجود مواد‎ Protease ‏حدوثه. إن مفعول‎ ١٠ ‏بخلاف الملت؛ مثل؛ بدون تحديد؛ شعير (متضمنا‎ carbohydrate ‏أنها تشمل أي مصدر‎ ‏جريش أو‎ Jie ‏لبابات كاملة أو منتجات معالجة‎ Jie ‏أو ذرة؛ أو أرز إما‎ (MMT ‏شعير ناقص‎ ‏المستخدمة كلها أساسيا كمصدر إضافي لخلاصة (تجرع أشربة نموذجيا أثناء غليان‎ (Lis ‏الملت). إن متطلبات معالجة مادة مساعدة في أداة تخمر تعتمد على مذاق ونوع المادة‎ ‏المساعدة المستخدمة وتحديدا درجات حرارة تهلم أو تسيل النشاء إذا كانت درجة حرارة التهلم‎ ٠ ‏أعلى من درجة حرارة تسكر الملت الطبيعية؛ فعندئذ تتهلم النشا وتتسيل قبل الإضافة إلى‎ ‏الهريس.‎ ‏فإن‎ (Ya) > ‏عند تثبيت طفرة محددة كسمة مميزة وراثية متماثلة الزيجوت؛ مثلا في توليد‎ ‏أو مثل "خط‎ (Mutant) ‏"طفرة‎ Jie can) ‏يرمز هنا بصورة تبادلية‎ Julia) ‏نبات الشعير‎ ‏"خط".‎ Jie ‏طفري" أو‎ Ye ‏تتضمن "الطفرات" إزالات؛ استبدالات؛ تحويلات بينية وطفرات نقطة في مناطق التشفير‎ ‏وعدم التشفير لجين» حيث تكون منطقة عدم التشفير بصورة مفضلة هي المنطقة المحثة أو‎
45ص ‎introns‏ قد تكون الإزالات للجين كله أو فقط لقسم من الجين. تتعلق طفرات نقطة بتغيرات قاعدة واحدة أو زوج قاعدة واحد وقد تنتج ‎codons‏ إيقاف؛ طفرات انتقال إطارء أو استبدالات ‎camino acid‏ إن الطفرات الجسدية هي تلك التي تحدث فقط في خلايا أو أنسجة معينة من النبات ولا يتم توريثها للجيل التالي. يمكن وجود طفرات خط جرثومة في أي خلية من النبات © ويمكن توريثها. حسب الاستخدام ‎cla‏ يشير المصطلح ‎~MMT"‏ ناقص” إلى فقط كلي ‎methionine ay‏ ‎S-methyl‏ وظيفي. لذلك؛ فإن "نبات شعير ‎(barley plant)‏ به ‎“MMT‏ ناقص" هو نبات شعير ‎(barley plant)‏ يشمل طفرة في الجين المشفر ‎MMT‏ تؤدي إلى فقد كلي لإنزيم ‎MMT‏ ‏وظيفي. بصورة مشابهة فإن 'لبابات بها ‎“MMT‏ ناقص" هي لبابات تشمل طفرة في الجين ‎٠‏ المشفر ‎MMT‏ تؤدي إلى فقد كلي لإنزيم ‎MMT‏ وظيفي؛ ‎Nag‏ ‏إن المصطلح "أجزاء من نبات شعير" المشتمل مثلا في معنى ‎ball‏ 'نبات شعير أو جزء منه"؛ يتضمن ‎WA‏ نبات شعيرء ‎protoplasts‏ نبات شعير؛ مزارع نسيج خلية نبات يمكن منها تجديد تولد نباتات شعير؛ لحاءات نبات شعير؛ وخلايا نبات شعير سليمة في النباتات أو أجزاء أكبر من نباتات شعير؛ مثل أجنة؛ حبة لقاح؛ بويضات؛ زهورء لبابات؛ أوراق؛ جذور؛ مقدمات ‎٠‏ الجذورء المثبرء أو أي ‎eda‏ من النبات. إن ‎"PCR"‏ أو 'تفاعل سلسلة ‎"polymerase‏ يعلمه جيدا المهرة في الفن كتقنية مستخدمة لتكبير قطع ‎DNA‏ خاصة (براءات الاختراع أرقام 4187194 و ‎EA Nod‏ إلى ‎Mullis, K.B.‏ وآخرين). أيضا فإن النسخ العكسي ‎(RT)-PCR‏ معروف جيدا للمهرة في الفن. يهدف إجراء ‎RT-PCR‏ على عينة حيوية إلى تحديد ‎mRNAs‏ ظاهرة لجين خاص. بالنسبة ‎٠‏ الإنزيم ‎(MMT‏ يتضمن ‎RT-PCR‏ بصفة عامة الحصول على عينة متوقع احتوائها ‎mRNA‏ ‏من أجل ‎(MMT‏ إجراء ‎RT-PCR‏ على العينة مع ‎transcriptase‏ عكسي» ‎polymerase‏ وزوج مواد أولية خاصة؛ لتكبير ‎RNA‏ إذا كان موجوداء وتحديد ناتج التكبير كدلالة على وجود ‎RNA‏ يشفر ‎MMT‏ في العينة. تعمل المواد الأولية في أزواج- 'مادة أولية مباشرة" (أو ‎sale‏ ‏أولية شريط علوي" أو 'مادة أولية ‎sald (dle‏ أولية عكسية" ‎ve‏ (و 'مادة أولية شريط سفلي"). إن ترتيبات المادة الأولية موجودة هنا في الاتجاه ©" إلى 3”.
١ ‏منتج ناتج من معالجة نبات أو جزء من‎ (Plant product) ‏يعني المصطلح "منتج نبات‎ «ays ‏المذكور هو ملت؛‎ (Plant product) ‏نبات. على سبيل المثال؛ قد يكون منتج النبات‎ ‏مشروب متخمر أو غير متخمر؛ طعام أو منتج إطعام.‎ ‏هي مجموعة من‎ Jal ‏إن 'مجموعة متخصصة في تذوق البيرة"” في معنى الطلب‎ esters ‏المتخصصين المدربين بشدة على تذوق ووصف نكهات البيرة» مع تركيز خاص على‎ 2 ‏والقوام. برغم وجود عدد من الأدوات‎ sulfur ‏الأعلى؛ الأحماض الدهنية؛ مكونات‎ alcohols ‏التحليلية لتقييم مكونات النكهة؛ فإن الأهمية النسبية للمكونات النشطة مع النكهة من الصعب‎ ‏حال؛ يمكن تقييم تلك الخصائص المعقدة بواسطة المتخصصين في‎ al ‏تحديدها تحليليا. على‎ ‏تركيزات خاصة‎ Led) ‏التذوق. يتضمن تدريبهم المستمر تذوق وتقييم عينات بيرة قياسية مضاف‎ «ethyl acetate ¢isoamylacetate ‏من مكونات البيرة- مثلا‎ ٠ .isoamylalcohol 5 ethyl hexanote ‏لجين. لذلك؛ فقد يكون موقع‎ introns 5 exons ‏الحدود بين‎ "Ana ‏يعني المصطلح 'موقع‎ ‏المسمى أيضا 'موقع معطى"- أو الحد الذي‎ —intron ‏إلى‎ exon ‏الجديلة هو الحد المستمر من‎ ‏المحدد أيضا أنه 'موقع مستقبل". إن موقع الجديلة في النباتات يشمل‎ exon ‏عن‎ intron ‏يفصل‎ ‏يتكون بصفة عامة من‎ intron ‏نموذجيا ترتيبات متفق عليها. إن الطرف ©" من‎ ٠ ‏من‎ intron ‏من‎ ١ ‏ويتكون عادة الطرف‎ «(mRNA ‏في‎ GU) ‏محمي‎ 61 dinucleotide ‏يشمل بذلك الطرف “7 من‎ intron ‏محمي. إن موقع الجديلة 0“ لأجل‎ dinucleotide AG ‏من 101:00. بصورة مفضلة؛ في سياق الاختراع‎ YF ‏ويشمل موقع الجديلة ؟” الطرف‎ 0 ‏إما:‎ intron ‏الحالي؛ يكون موقع الجديلة لأجل‎ dale ‏في 010:00 وهو بصفة‎ 5' dinucleotide ‏المتكون من معظم‎ "٠# ‏موقع الجديلة‎ )١( ٠. ‏؛ أو‎ 1 ‏وهو بصفة عامة‎ cintron ‏لأجل‎ 3' dinucleotide ‏المتكون من معظم‎ FY ‏موقع الجديلة‎ )7(
AG
‏إن "مواقع جديلة مستقرة" غير مدركة تحت الشروط العادية وبالتالي لا تسبب الجدل‎ ‏طبيعيا. على أية حال؛ في النسخ الحاملة طفرات نقطة في عناصر طبيعية؛ فإن تلك الأماكن‎ YO ‏يمكن تنشيطها من أجل أحداث الجدل.‎
١ ‏معزولة من نفس الأنواع أو من أنواع مختلفة‎ WIA ‏تشير 'مزرعة نسيج” إلى تركيبة تشمل‎ ‏لحاءات؛ أجنة؛ حبة‎ protoplasts ‏أو مجموعة من تلك الخلية منسقة في أجزاء نبات؛ مثلاء‎ ‏وما شابه.‎ cual ‏لقاح؛‎ ‏المولد الأولي لأشكال‎ (Hordeum vulgare ssp.
Spontaneum ‏يعتبر "الشعير البري"‎ ‏الشعير المزروعة في الوقت الحاضر. إن انتقال الشعير من الحالة البرية إلى المزروعة يتطابق‎ © ‏مع استثئناس النبات في "سلالات أرضية شعير". إن هذا يتعلق وراثيا بدرجة قريبة أكثر‎ ‏بالأشكال المتنوعة الحديثة أكثر من الشعير البري.‎ ‏يشير المصطلح "نوع بري" إلى نبات شعير متولد تقليدياء يفضل أن يشير المصطلح إلى‎ ‏نبات الشعير المشتقة منه نباتات شعير الاختراع الحالي؛ أيء النباتات الأصلية. إن لبابات‎ ‏"أشكال متنوعة" (غالبا ما تختصر‎ Jie ‏شركة البذور‎ Mie ‏شعير نوع بري متوافرة عامة من؛‎ ٠ ‏إلى ".5»©")؛ أي؛ تلك اللبابات المشابهة وراثيا المدونة بواسطة منظمات تناسل نبات قومية.‎ ‏إن المصطلحات "شكل متنوع" و'تشكيلة” مستخدمة هنا بالتبادل.‎ ‏إن المصطلح "ورت" يعني خلاصة من الملت؛ مثلا ملت محطون أو ملت أخضر أو ملت‎ ‏أخضر مطحون. بالإضافة إلى الملت المذكور. يمكن تحضير الخلاصة السائلة من الملت‎ ‏إضافية تحتوي نشا متحولة جزئيا إلى سكريات قابلة للتخمر. يتم‎ Bale Jie ‏ومكونات إضافية؛‎ ١ ‏متبوعا اختياريا 'بالتطهير”؛ أي؛ عملية استخلاص‎ comp ‏الحصول عامة على الورت بتكوين‎ ‏سكريات متخلفة ومركبات أخرى من حبة معالجة بعد الهريس مع ماء ساخن. يجرى التطهير‎ ‏أو جهاز آخر يسمح بفصل السائل المستخلص عن‎ coup ‏مرشح‎ dauter ‏نموذجيا في برميل‎ ‏بينما أن الورت‎ dl ‏عامة بأنه 'ورت‎ ad) ‏الحبة المعالجة. إن الورت الناتج بعد الهريس يشار‎ ‏"ورت ثان". إذا لم يحدد ذلك؛ فإن المصطلح ورت قد‎ ash ‏الناتج بعد التطهير يشار إليه عامة‎ ٠ ‏ورت أول؛ ورت ثان أو اتحاد لكليهما. إثناء إنتاج البيرة؛ يغلى الورت مع مواد إضافة‎ Jig ‏منكهة. إن الورت المحضر بدون غليان مع مواد إضافة منكهة قد يشار إليه أيضا 'ورت‎ ‏محلى" بينما الورت الذي يغلى مع أو بدون مواد إضافية منكهة قد يشار إليه "ورت مغلي".‎ ‏نبات الشعير‎ «Hordeum vulgare ssp.
Spontaneum ‏إن الشعير عائلة نباتات. يعتبر الشعير البري؛‎ Yo ‏المصدر الأولي المولد لأشكال الشعير المزروعة اليوم. إن تحول الشعير من حالة برية إلى‎ ‏عند مواقع عديدة.‎ allele ‏مزروعة يعتقد أنه متطابق مع التغير الجذري في معدلات تكرار‎ Alls
YY
‏إن 211168 النادرة والأحداث الطفرية الجديدة ينتقيها الفلاحون بصورة إيجابية وذلك رسخ بسرعة‎ ‏السمات الجديدة لأنواع النبات المستأنسة؛ المشار إليها 'سلالات أرضية شعير". إن هذا قريب‎ ‏جدا بدرجة أكبر وراثيا مع الأشكال المتنوعة الحديثة أكثر من الشعير البري. حتى أواخر القرن‎ ‏التاسع عشرء أظهرت سلالات أرضية شعير تواجدا كخلطات مغايرةٍ للغاية من خطوط داخلية‎ ‏التوالد وسلالات منعزلة هجينة؛ متضمنة نباتات قليلة مشتقة من تزاوجات عشوائية في الأجيال‎ © ‏الأولى. تم استبدال معظم السلالات الأرضية في الزراعات المتطورة بواسطة أشكال متنوعة‎ ‏خط نقي. إن المستويات المتوسطة أو العالية من التباين الجيني تميز السلالات الأرضية‎ ‏مثلت الأشكال المتنوعة 'للشعير الحديث" انتقاءات من السلالات الأرضية. تم‎ (Wg ‏المتبقية.‎ ‏تلك التي لها‎ Jia ‏اشتقاق هذه لاحقا من دورات ناجحة من التزاوجات بين خطوط نقية موجودة؛‎ (oe ‏مصادر جغرافية متباينة. في النهاية؛ كانت النتيجة تحديدا شديدا للقاعدة الجينية في كثير‎ ٠ ‏وربما كل» الزراعات المتطورة. مقارنة بالسلالات الأرضية؛ فإن الأشكال المتنوعة من الشعير‎ ‏19957)؛ على سبيل‎ von Bothmer 1997 (Nevo) ‏الحديث لها خواص محسنة كثيرة‎ ‏المثال؛ لكن بدون تحديد:‎ ‏لبابات مغطاة وعارية؛‎ )١( ‏سكون البذرة؛‎ )( Vo ‏مقاومة المرض؛‎ )7( ‏للتربة)؛‎ PH ‏التحمل البيئي (مثلا الجفاف أو‎ (£) ‏الأخرى؛‎ amino acids s lusine ‏نسب‎ (©) ¢Protein ‏محتوى‎ (7) «Nitrogen ‏محتوى‎ (V) ‏ف‎ ‎¢Carbohydrate ‏تركيبة‎ (A) ¢Hordein ‏تركيبة‎ (4) ‏في الاختراع الحالي؛ يشمل المصطلح "شعير” أي نبات شعير. لذلك؛ يتعلق الاختراع بأي‎ ‏وظيفي.‎ MMT ‏تنتج تدفق كلي لإنزيم‎ (MMT ‏نبات شعير يحمل طفرة في الجين المشفر‎ ‏على أية حال فإن نباتات شعير مفضلة للاستخدام مع الاختراع الحالي هي أشكال شعير‎ Yo ‏متنوعة حديثة أو خطوط شعير نقية. إن الشكل المتنوع للشعير للاستخدام مع الاختراع الحالي‎ ‏هو؛ مثلا؛ المنتقى من المجموعة المتكونة من‎ yy
Sebastian, Celeste, Tangent, Lux, Prestige, Saloon, Neruda, Harrington, Klages,
Manley, Schooner, Stirling, Clipper, Franklin, Alexis, Blenheim, Ariel, Lenka,
Maresi, Steffi, Gimpel, Cheri, Krona, Camargue, Chariot, Derkado, Prisma, Union,
Beka, Kym, Asahi 5, KOU A, Swan Hals, Kanto Nakate Gold, Hakata No. 2,
Kirin - choku No. 1, Kanto late Variety Gold, Fuji Nijo, New Golden, Satukio °
Nijo, Seijo No. 17, Akagi Nijo, Azuma Golden, Amagi Nijpo, Nishino Gold,
Misato golden, Haruna Nijo, Scarlett, Quench, NFC Tipple and Jersey ‏يفضل من المجموعة المتكونة من‎
Haruna Nijo, Sebastian, Tangent, Lux, Prestige, Saloon, Neruda, Power, Quench and NFC Tipple. Ye ‏طبقا لذلك؛ في تطبيق الاختراع؛ يكون النبات المذكور عبارة عن شكل متباين شعير حديث‎ ‏وظيفي؛ يفضل شكل‎ MMT ‏تؤدي إلى فقد كلي لإنزيم‎ MMT ‏يحمل طفرة في الجين المشفر‎ ‏متنوع واحد ينتقى من مجموعة الأشكال المتتوعة للشعير الموصوفة هنا أعلاه. في هذا‎ ‏التطبيق؛ يفضل طبقا لذلك أن يكون نبات الشعير ليس هو سلالة أرضية شعير.‎ ‏فإن نبات الشعير طبقا للاختراع قد‎ Ole ‏قد يكون نبات الشعير في أي شكل مناسب.‎ \o ‏يكون عبارة عن نبات شعير حبي؛ نبات جاف؛ نبات متجانسء أو لبابة شعير مطحونة. قد‎ ‏يكون النبات نباتا ناضجاء جنينيا؛ لبابة نامية؛ لبابة ملت؛ لبابة ملت مطحونة أو إلخ.‎ ‏لبابات؛ أجنة؛ أوراق؛‎ Jie ‏إن أجزاء نبات الشعير قد تكون أي أجزاء مناسبة من النبات؛‎ ‏قد يكون قطاع من لبابة؛ جنين؛‎ Sle ‏سيقان» جذور» زهور أو أجزاء من ذلك. إن الجزء؛‎ ‏جذر أو زهرة. إن جزء نباتات شعير قد يكون أيضا عبارة عن قسم من مادة‎ (Gla ‏ورقة»‎ "٠ ‏متجانسة؛ قسم من خلاصة؛ أو قسم من نبات شعير مطحون أو لبابة.‎ ‏في تطبيق للاختراع؛ قد تكون أجزاء نبات الشعير عبارة عن خلايا من نبات الشعير‎ ‏حية يمكن أن تنمو في المعمل؛ مثلا في مزارع خلية أو نسيج.‎ WDA ‏المذكورء تفضل‎ ‏وظيفي‎ MMT ‏فقد إنزيم‎ ‏مشروبات محضرة من نباتات شعير» أو أجزاء‎ Jie ‏يتعلق الاختراع الحالي بمنتجات نبات؛‎ Yo ‏تؤدي إلى فقد لإنزيم‎ MMT ‏من ذلك؛ تحمل نباتات الشعير المذكورة طفرة في الجين من أجل‎ ‏يفضل‎ JY) ‏يفضل 7997 على‎ (MMT ‏وظيفي؛ مثلا فقد 790 على الأقل من نشاط‎ 17
Y¢ ‏مقارنة‎ MMT ‏أكثر 7949 على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر 794,5 على الأقل من نشاط‎ ‏بالمستوى المقابل في الشعير النوع البري. يفضل مقارنة بأي من الأشكال المتنوعة للشعير من‎ cv. Prestige ‏النوع البري الموصوفة هنا أعلاه؛ يفضل أكثر مقارنة بالشعير من النوع البري‎ ‏تنتج فقد كلي‎ (MMT ‏الأكثر تفضيلا أن يحمل نبات الشعير المذكور طفرة في الجين المشفر‎
MMT ‏لوظيفة‎ ©
OB (Jud) ‏وظيفي قد يعتمد على آليات مختلفة.على سبيل‎ MMT ‏إن الفقد الكلي لإنزيم‎ ‏مختل الوظيفة في النبات المذكورء أي؛‎ protein ‏وظيفي قد ينتج من‎ MMT ‏الفقد الكلي لإنزيم‎ ‏طفري بدون نشاط يمكن تحديده. على سبيل‎ MMT protein Jie ‏مختل الوظيفة؛‎ MMT ‏إنزيم‎ ‏قد يعتمد‎ MMT ‏مبتور. إن فقد نشاط‎ protein ‏للطفرة قد يشكل‎ MMT protein ‏المثال» فإن‎ ‏الوظيفة.‎ Jide MMT protein «a ‏بالتشابه على آليات مختلفة؛‎ ٠ ‏طفري بقدرته على تحفيز تحول مجموعة‎ MMT protein ‏بصورة مفضلة؛ يتحدد نشاط‎ ‏حسب‎ (JU ‏على سبيل‎ laa ‏قد يتم‎ SMM ‏وبذلك يتكون‎ Met ‏إلى‎ SAM ‏من‎ methyl ‏لإنزيم‎ amino acid ‏الوصف في المثال ؛ هنا لاحقا. يفضل؛ أن يتم الحصول على ترتيب‎ ‏الشعير المعزول المقابل. يتم هذا أساسيا‎ cDNA ‏طفري بتحديد الترتيب المترجم لأجل‎ 171 ‏الطفري لنبات الشعير‎ MMT ‏بعد. بطريقة بديلة؛ ينتج‎ Led ‏هنا‎ A ‏حسب الوصف في المثال‎ ١ ١١ ‏والمثال‎ ١١ ‏من الاختراع بإظهار مغاير في مزرعة خلية بكتيرية حسب الوصف في المثال‎
MMT ‏المخلق خامد النشاط كإنزيم‎ protein ‏هنا فيما بعد؛ ويلي ذلك تحديد أن‎ ‏إن نقص‎ MMT protein ‏وظيفي بنقص‎ MMT ‏يمكن إدراك الفقد الكلي لإتزيم‎
MMT protein ‏قد يشمل نبات الشعير‎ lla) MMT ‏يؤدي إلى فقد وظيفة‎ MMT protein ‏مستوى صفرء أو فقد بقدر ضئيل جداء ويفضل لا يمكن تحديده. يمكن تحديد وجود أو غياب‎ XY ‏بأي وسيلة مناسبة معروفة للشخص الماهر في الفن. على أية حال؛ يفضل‎ MMT protein ‏بأجسام مضادة خاصة تدرك‎ MMT protein ‏بتقنيات يتحدد فيها‎ (proteins) protein ‏تحليل‎ ‏أو اختبار امتصاص مناعي‎ western ‏تبقع‎ Oia ‏قد تكون التقنيات المذكورة هي؛‎ MMT ‏متصل بإنزيم»؛ وقد تكون الأجسام المضادة الخاصة المذكورة أحادية النسخ أو عديدة النسخ.‎ epitopes ‏بصورة مفضلة؛ على أية حال؛ تكون الأجسام المضادة المذكورة عديدة النسخ تدرك‎ © ‏يمكن تحديد هذه أيضا بطريقة غير مباشرة؛ مثلاء بطرق‎ .MMT protein ‏مختلفة كثيرة في‎ ‏لذلك؛ في تطبيق مفضل للاختراع؛ يقال أن نبات الشعير يحمل طفرة في‎ MMT ‏لتحديد نشاط‎
Yo
MMT protein ‏عند عدم وجود‎ MMT ‏لنشاط‎ AS ‏وذلك بسبب فقد‎ MMT ‏الجين المشفر‎ ‏يمكن تحديده في النبات المذكور. بصفة خاصة؛ فإن هذه هي الحالة عندما لا يمكن تحديد‎ ‏في نبات الشعير المذكور- يفضل‎ .7٠0 + ‏كيلو دالتون‎ ١١١ ‏مع وزن تقريبي‎ MMT protein western ‏حسب التحليل بواسطة تبقع‎ Saal) ‏في لبابات نبات الشعير‎ ‏نتيجة لعدم وجود أو وجود قدر ضئيل‎ Load ‏وظيفي قد يكون‎ MMT ‏إن الفقد الكلي لإنزيم‎ ° ‏سوف يعلم الشخص الماهر أن غياب‎ MMT mRNA ‏جدا منء يفضل عدم وجود؛ نسخ‎
MMT protein le ‏سوف يؤدي أيضا إلى‎ MMT ‏نسخة‎ ‏وظيفي نتيجة لإظهار نسخة‎ MMT andy ‏يفضل؛ على أية حال؛ أن يكون الفقد الكلي‎ ‏شاذ للنسخة الأولية؛ مثلاء‎ Jaa ‏شاذة. قد يكون سبب وجود النسخة المذكورة حدث‎ 7 ‏يمكن‎ JU ‏على سبيل‎ MMT ‏بسبب طفرة في موقع الجدل. إن إظهار النسخ المشفرة‎ ٠
RT-PCR ‏أو بطرق‎ Northern ‏تحديده بتبقع‎ ‏وظيفي في نباتات شعير الاختراع الحالي تسببه واحدة أو‎ MMT ‏إن الفقد الكلي لإنزيم‎ ‏أكثر من الطفرات. لذلك؛ فإن نباتات شعير الاختراع الحالي» بصفة عامة؛ تحمل طفرةٍ واحدة‎ ‏قد تكون الطفرة (الطفرات) المذكورة في مناطق تنظيمية؛ مثلا في‎ MMT ‏على الأقل في جين‎ ‏لذلك‎ protein ‏قد تكون الطفرة (الطفرات) المذكورة في منطقة تشفير‎ introns ‏المحثة؛ أو‎ Vo ‏إن الطفرات‎ MMT ‏وظيفي قد يتحدد أيضا بتحليل الطفرات في الجين المشفر‎ MMT ‏فإن فقد‎ ‏تحديدها بترتيب الجين المذكور؛ ثم مقارنته مع ترتيب‎ Sle ‏يمكن؛‎ MMT ‏في الجين المشفر‎ oF ‏تعريف الترتيب رقم:‎ (Jie ‏المحدد هنا‎ ev. Prestige ‏النوع البري؛ يفضل ترتيب النوع البري‎ ‏بصورة مفضلة؛ بعد تحديد الطفرة؛ يتم‎ .)١١ ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ ov. Sebastian ‏أو ذلك من‎ . 4 ‏مثلا حسب الوصف في المثال ؟ أو المثال‎ MMT ‏تأكيد فقد الوظيفة باختبار نشاط‎ x. ‏كامل الطول من الشعير‎ MMT protein ‏يعني أن يشمل‎ MMT protein ‏إن المصطلح‎ ‏وظيفي لذلك. في هذا السياق؛ فإن مماتل‎ Bilas ‏كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 7؛ أو‎ ‏ذلك لأجل‎ Jie 775+ MMT ‏مع نفس المستوى من نشاط‎ MMT protein ‏وظيفي هو‎
MMT ‏شعير كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 7؛ حيث يتحدد نشاط‎ MMT protein ‏أو المثال ؛ هنا أدناه.‎ oY ‏حسب الوصف في المثال‎ YO ‏مثلا 744؛ مثال 744,5 من نشاط‎ 745 Jie ‏إن نبات الشعير مع فقد 7495 على الأقل»‎ ‏وظيفي جزئيا أو يفضل‎ MMT ‏قد يشمل شكل مبتور من‎ MMT ‏لنشاط‎ JS ‏مع فقد‎ of MMT
غير وظيفي؛ مثل شكل مبتور ‎N= (hha‏ أو طرفي-0. قد يشمل نبات شعير أكثر من شكل مبتور واحد من ‎MMT‏ مثل ‎oY‏ أو مثلا ‎oF‏ أو مثلا أكثر من “ أشكال مبتورة مختلفة من 7ه وقد ينتج هذا من نسخ مجدولة بصورة شاذة. إن الأشكال المبتورة المذكورة تشمل فقط قطعة طرفية-1< من ‎MMT‏ بالإضافة إلى القطعة الطرفية-14 من ‎MMT‏ نوع بري؛ ‎OH‏ ‎٠‏ أشكال ‎MMT‏ المبتورة المذكورة قد تشمل ترتيبات طرفية-© إضافية غير موجودة في ‎MMT‏ ‏النوع البري. إن الترتيبات الإضافية ‎Cag hall‏ المذكورة 038 على سبيل ‎JE‏ تشكل ترتيبات 00 مترجمة؛ ‎Jia‏ تلك المتكونة في ‎MRNA‏ الطفري بسبب جديلة شاذة. يفضل؛ أن تشمل أشكال ‎MMT‏ المبتورة المذكورة في المعظم 000 يفضل أكثر £00 في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 4060 في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر ‎305٠‏ في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر ‎TY‏ في ‎٠‏ المعظم؛ أيضا يفضل أكثر ‎3١١‏ في المعظم؛ أو في المعظم ‎YAA‏ متخلف ‎amino acid‏ طرفي-17 من تعريف الترتيب رقم: ‎WT‏ إن هذه هي الحالة بصفة خاصة عندما يكون في نبات الشعير المذكور فقد كلي لنشاط ‎MMT‏ على أية حال ‎a‏ يشمل أيضا ‎MMT‏ مقدار أقل؛ ‎Ds‏ مالا يزيد عن ‎(Fev‏ على سبيل المثال مالا يزيد عن ‎Yor‏ مثلا مالا يزيد عن ‎Yoo‏ ‏مثلا ‎٠50‏ في المعظم؛ مثلا مالا يزيد عن ‎(VEY‏ أو مالا يزيد عن ‎amino acids YY‏
Sted) ‏طرفي-11 من تعريف الترتيب‎ ١ amino ‏أو‎ ١١-١ amino acids ‏المبتور من‎ MMT ‏في تطبيق مفضل جداء يتكون شكل‎ ‏واختياريا ترتيبات إضافية طرفية-0 غير موجودة‎ ١ ‏من تعريف الترتيب رقم:‎ ؟//4-١‎ acids ‏النوع البري. يفضل؛ أن تتكون الترتيبات الإضافية الطرفية-© المذكورة في المعظم‎ MMT ‏في‎ ‏في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر‎ ٠١ ‏في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر‎ ١ ‏من ٠©؛ يفضل أكثر‎ ‏في تطبيق مفضل جداء قد يكون الشكل المبتور‎ amino acid ١ ‏؟ في المعظم؛ أو في المعظم‎ ٠
SOY ‏تعريف الترتقيب رقم:‎ VY ‏المطابق تعريف الترتيب رقم:‎ protein ‏هو‎ MMT ‏من‎ ‎Vo ‏أو رقم‎ ١١ ‏تعريف الترتيب رقم: ١١؛ أو رقم‎ proteins ‏إن‎ VO ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ليست إنزيمات ‎MMT‏ وظيفية. في تطبيق آخر مفضل جداء قد يتكون شكل ‎MMT‏ المبتور من ‎1597-١1 amino acids‏ ‎Yo‏ أو ‎١7-١ amino acids‏ من تعريف الترتيب رقم: ‎VA‏ واختياريا ترتيبات إضافية طرفية-© غير موجودة في ‎MMT‏ النوع البري. يفضل؛ أن تتكون الترتيبات الإضافية الطرفية- © المذكورة في المعظم من 00 يفضل أكثر ‎5٠‏ في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 0٠؛‏ في
Yv amino Vo ‏أو في المعظم‎ (FF ‏المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 879 المعظم» أو في المعظم‎ ‏المطابق‎ protein ‏هو‎ MMT ‏في تطبيق مفضل جداء قد يكون الشكل المبتور من‎ .5 ‏أو تعريف الترتيب رقم: 77. إن‎ VE ‏أو تعريف الترتيب رقم:‎ YY ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ‏وظيفية.‎ MMT ‏أو رقم 77 ليست إنزيمات‎ (YE ‏أو رقم‎ (YY ‏تعريف الترتيب رقم:‎ proteins ‏تتواجد أشكال 7 المبتورة المذكورة أعلاه مثلا في نبات شعير يحمل طفرةٍ في الجين‎ ° ‏إيقاف غير مكتمل لينتج جين يشفر أشكال‎ codon ‏حيث تدخل الطفرة المذكورة‎ (MMT ‏المشفر‎ ‏المبتورة المذكورة أعلاه.‎ 71 ‏يشمل بعض؛‎ MRNA ‏في تطبيق مفضل للاختراع» يشمل نبات الشعير جين منسوخ في‎ ‏النوع البري مجدولين معا بدون تدخل يبين شكل 4 بناء‎ MMT ‏لكن ليس كل؛ جين‎
MMT ‏نوع بري للشعير). في تطبيق» يفضل طبقا لذلك أن يشمل‎ MMT ‏لجين‎ intron-exon ٠ ‏7؛ 3 4 05 مجدولة مع‎ ٠ exons ‏لنبات الشعير طبقا للاختراع في المعظم‎ mRNA ‏بدون تدخل بالإضافة إلى‎ Lae ‏مجدولة‎ Y 5) exons ‏بعضها بدون تدخل؛ أو متلا في معظم‎ ‏لنبات الشعير طبقا للاختراع قد‎ MMT mRNAs ‏المذكورة المجدولة مع بعضهاء فإن‎ exons ‏و/أو 5:ه»» نوع بري؛ حيث تفصل‎ introns ‏تشمل ترتيبات إضافية طرفية ©" مشتقة من‎
Lada ‏شاد لنبات الشعير‎ MMT mRNA ‏ترتيبات عده»». إن أمثلة مفضلة من‎ introns YO ١١ ‏وطبقا لذلك مع أطوال جزء ©- موضحة في الشكل‎ RT-PCR ‏للاختراع- حسب تحديد‎ ‏الشاذة لنباتات الشعير طبقا للاختراع هي تلك‎ mRNAs ‏أن تكون‎ «AST ‏يفضل‎ VT ‏والشكل‎ ‎mRNAs sf ‏؟ عند الطرف فب‎ و١‎ exons ‏المشتملة إضافيا على‎ OY ‏الموضحة في الشكل‎
Co ‏عند الطرف‎ ١ exon ‏الموضحة في شكل 6 المشتملة إضافيا على‎
MMT ‏في تطبيق مفضل جدا للاختراع الحالي؛ يشمل نبات الشعير الحامل طفرة في جين‎ Ye ‏مجدول بصورة شاذة. بصورة‎ mRNA ‏تؤدي إلى وجود‎ MMT ‏طفرة في موقع الجديلة في جين‎ ‏أيضا يفضل أكثر في موقع‎ (MMT ‏لجين‎ intron ‏مفضلة أكثرء تتمركز الطفرة المذكورة في‎ ١ intron ‏م-ثلا في موقع الجديلة 0 على‎ cintron Jay To ‏الجديلة‎ ‏الذي‎ intron) Y intron ‏7)؛ مثلا في موقع الجديلة ©" على‎ و١‎ exons ‏الذي يفصل‎ intron) exons ‏الذي يفصل‎ intron) ¥ intron ‏مثلا في موقع الجديلة ©" على‎ (YY exons ‏يفصل‎ © ‏و ©(« مثلا‎ exons ‏الذي يفصل‎ intron) ¢ intron ‏"و؛)؛ مثلا في موقع الجديلة 0" على‎ ‏1)؛ مثلا في موقع‎ © exons ‏الذي يفصل‎ intron) © intron ‏في موقع الجديلة 0" على‎
YA
‏وأكثر تفضيلاً في موقع‎ «(V 51 exons ‏الذي يفصل‎ intron) 1 intron ‏الجديلة © على‎ .0 intron sl ١ intron ‏الجديلة © على‎ introns ‏للقاعدة 0" الطرفية لأجل‎ GA ‏يفضل أن تكون الطفرة المذكورة هي طفرةٍ‎ ‏أو‎ 7 intron ‏للقاعدة ©" الطرفية لأجل‎ GA ‏سالفة الذكر. لذلك؛ فإن طفرة مفضلة جدا هي‎ .# intron ‏للقاعدة ©" الغالبة لأجل‎ GA ‏طفرة‎ © ‏يمكن تحضير نبات الشعير طبقا للاختراع بأي طريقة مناسبة معروفة للماهر في الفن؛‎
MMT ‏يفضل بالطريقة المحددة هنا أدناه في الجزء "تحضير نباتات شعير مع فقد كامل لإنزيم‎ ‏وظيفي".‎ ‏طبقا‎ MMT ‏في تطبيق للاختراع؛ يفضل أن يكون لنباتات الشعير مع فقد كلي للنشاط‎ ‏للاختراع الحالي؛ سمات مميزة فسيولوجية وللحبة النامية وللنبات مساوية للشعير من النوع‎ ٠ ‏مشابه لشعير من النوع البري‎ MMT ‏يفضل لذلك أن يكون نبات الشعير الناقص‎ clin ‏البري.‎ ‏ارتفاع النبات؛ عدد الغصينات الجذرية في النباتء‎ Jie ‏بالنسبة للسمات المميزة الهامة زراعيا؛‎ ‏بداية الإزهار و/أو عدد الحبات في السنبلة.‎ ‏لنبات الشعير طبقا للاختراع ترتيب‎ MMT ‏في تطبيق مفضل جداء يكون للجين المشفر‎ ‏كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 8. لذلك؛ يفضل أن يحمل نبات الشعير طبقا للاختراع‎ ١ ‏للقاعدة رقم 0979 في تعريف الترتيب رقم: 7 (حيث أن تعريف الترتيب رقم: ؟‎ GA ‏طفرة‎ ‎-(cv. Prestige « js MMT ‏النوع البري من أجل‎ genomic ‏هو الترتيب‎ ١١ ‏هو نبات الشعير المودع في‎ MMT ‏إن مثال مفضل لنبات شعير به فقد كلي لنشاط‎ ‏مع‎ ٠٠١١8 ‏أكتوبر‎ ‎American Type Culture Collection (ATCC) Patent Depository, 10801 University Ye
Blvd., Manassas, VA 20110, United States and referred to as "Barley, Hordeum vulgare; Line 8063". ‏عن خط الشعير 80567 المودع مع‎ ple ‏لذلك؛ فإن نبات شعير الاختراع يمكن أن يكون‎ ‏أو أي‎ (40 7-1 :ATCC Patent Deposit Designation) ٠١ ‏أكتوبر‎ Y ATCC ‏نبات شعير طبقا للاختراع له‎ MMT ‏نبات شعير من ذلك؛ حيث يكون الجين المشفر‎ Jus Yo
A ‏ترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم:‎
Yq ‏لنبات الشعير طبقا للاختراع له‎ MMT ‏في تطبيق مفضل جداء فإن الجين المشفر‎ ‏يفضل أن يحمل نبات الشعير‎ (lla) V8 ‏الترتيب كما هو محدد في تعريف الترتيب رقم:‎ ‏(حيث أن‎ ١١ ‏طبقا للاختراع طفرة مرج-6 عند القاعدة رقم 1477 من تعريف الترتيب رقم:‎ ov. ‏لشعير‎ MMT ‏النوع البري من أجل‎ genomic ‏هو الترتيب‎ VT ‏تعريف الترتيب رقم:‎ .(Sebastian © ‏وظيفي‎ MMT ‏تحضير نباتات شعير مع فقد كامل لإنزيم‎ ‏وظيفي بأي طريقة‎ MMT ‏يمكن تحضير نبات الشعير مع فقد كامل لإنزيم‎ op ad ‏طبقا‎ ‏مناسبة معروفة للماهر في الفن. بصورة مفضلة؛ يحضر نبات شعير الاختراع بطريقة تشمل‎ ‏مثلا؛ لبابات‎ (Lia ‏خطوات تكوين طفرةٍ في نباتات الشعير- أو أجزاء‎ ‏للأهمية؛ يتعلق‎ MMT ‏شعير- ثم فحص وانتقاء نباتات الشعير التي بها فقد كامل لنشاط‎ ٠ ‏الاختراع الحالي؛ في جانب؛ بطريقة فحص جديدة ومؤثرة جدا للسماح بتحديد نباتات الشعير‎ ‏المذكورة.‎ ‏طبقا لذلك؛ فإنه هدف للاختراع الحالي أن يوفر طرق لتحضير نبات شعير يحمل طفرة في‎ ‏تشمل الطرق المذكورة خطوات:‎ MMT ‏تسبب فقد كامل لنشاط‎ MMT ‏جين‎ ‏و/أو نسيج الشعير‎ (barley cells) ‏الشعير‎ WA ‏تكوين طفرة في نباتات الشعير و/أو‎ )١( yo ‏وبذلك‎ «(barley embryos) ‏و/أو لبابات الشعير و/أو أجنة الشعير‎ «(barley tissue) ‏و‎ MO ‏نحصل على جيل شعير‎ > ‏تناسل) نباتات الشعير الطفرية المذكورة؛ اللبابات؛ و/أو الأجنة لمدة‎ Ole) ‏نمو‎ (Y) ‏صحيح > ؟؛‎ de ‏هو‎ x Cus Mx ‏وبذلك نحصل على نبات شعير مع جيل‎ cola ‏و‎ Ye ‏المذكورة؛ و‎ Mx ‏الحصول على عينة من نباتات شعير‎ (V) ‏في العينة المذكورة؛ و‎ SMM ‏(؟) تحديد مستوى‎ ‏يفضل أقل من‎ SMM ‏جزء على البليون‎ ٠١ ‏انتقاء نباتات تشمل فيها العينة أقل من‎ (0) ‏لا يمكن تحديده؛ و‎ SMM ‏يفضل أكثر‎ «SMM ‏جزءٍ على البليون‎ © ‏و‎ MMT ‏ترتيب جزء على الأقل من جين‎ (1) Yo
SMMT ‏انتقاء نباتات تحمل طفرة في جين‎ (V)
بذلك نحصل على نبات شعيرء يحمل طفرة في جين ‎MMT‏ تسبب فقد كامل لإنزيم ‎MMT‏ ‏وظيفي. ‏قد تشمل الخطوة ‎)١(‏ في القائمة أعلاه إجراء طفرة لمادة شعير حية تنتقى من المجموعة المتكونة من نباتات شعير؛ خلايا شعيرء نسيج شعيرء لبابات شعير ‎٠‏ وأجنة شعيرء يفضل أن تنتقى من المجموعة المتكونة من نباتات شعيرء لبابات شعير وأجنة ‎pe‏ يفضل أكثر لبابات شعير. يمكن إجراء تكوين طفري بأي طريقة مناسبة. في تطبيق؛ يجرى التكوين الطفري بحضانة لنبات شعير أو ‎ga‏ منه- مثلا لبابات شعير أو خلايا منفردة من الشعير- مع عامل تكوين طفرة. إن تلك العوامل معروفة للماهر في ‎call‏ ‏ويمكن أن تنتقى؛ مثلاء من المجموعة المتكونة من ‎¢«(NaN3) sodium azide‏ ‎«(MNU) methyl nitrosourea «(AG) azidoglycerol «(EMS) ethyl methanesulfonate ٠‏ ‎.(MH) maleic hydrazide‏ في تطبيق ‎AT‏ يجرى التكوين الطفري باستخدام أشعة؛ مثلا ضوء فوق بنفسجي؛ على نبات شعير» أو جزء منه؛ مثل اللبابة. في تطبيقات مفضلة للاختراع؛ يجرى التكوين الطفري طبقا لأي من الطرق المحددة هنا أدناه في جزء 'تكوين طفري كيميائي”. هناك مثال غير مفيد ‎١٠‏ لبروتوكول تكوين طفري مناسب موجود في المثال ‎١‏ من براءة الاختراع الأمريكية رقم 4708 من ‎K. etal.‏ ,56008 بالإضافة إلى في المثال ¥ هنا أدناه. يفضل إجراء التكوين الطفري بطريقة يكون معدل التكرار المتوقع للطفرات المطلوبة على الأقل ‎cn,‏ مثلا في نطاق من 4,0 إلى ©؛ مثلا في نطاق من 5 إلى 1,3 في ‎٠٠٠٠١‏ ‏حبة؛ عند فحص شعير من الجيل (م). ‎ve‏ في تطبيق مفضل» يتم تكوين طفرة في لبابات الشعير. يرمز إلى هذه الجيل ‎MO‏ ‏(انظر أيضا الشكل ‎AV‏ ‏عقب التكوين الطفري؛ تنتقى نباتات الشعيرء أو جزءٍ منهاء بدون نشاط ‎MMT‏ يمكن تحديده. يفضل؛ أن يشمل الانتقاء الحصول على عينة من نبات شعير؛ يفضل من نبات شعير ‎Lia (gall‏ يفضل أكثر من نبات شعير نامي لمدة ؛ أيام. يفضل أن تكون العينة من ‎coleoptile Yo‏ و/أو ورقة أولية؛ يفضل من ورقة. لذلك؛ قد تكون العينة؛ ‎Ole‏ في نطاق ‎١‏ سم إلى ؟ سم من نسيج ورقة.
يمكن استخلاص العينة وتحليلها باتباع بروتوكول مطور حديثا متعدد الخطوة» حسب الوصف هناء يشمل الاستخدام المتعاقب لمذيبات ومواد رابطة مختلفة. بصفة ‎dale‏ يمكن استخلاص العينة؛ مثلا مع مذيب أو خليط مذيبات؛ يفضل ماء و/أو مذيبات عضوية. قد يكون المذيب العضوي هوء ‎calcohol «Mia‏ يفضل ‎~methanol‏ أو قد يكون المذيب العضوي © مثلا ‎calkyl-halide‏ يفضل ‎chloroform‏ في تطبيق ‎(Juba‏ يكون المذيب هو خليط من ‎«methanol «sl‏ و ‎chloroform‏ يمكن إجراء الاستخلاص المذكور بدرجة مفيدة أثناء ‎halal‏ ‎Sli‏ باستخدام هزاز أو خلاط. يمكن إضافة دعامة صلبة إلى خليط المذيب/ العينة- مثلا خرزة؛ ‎Jie‏ خرزة زجاج. في تطبيق مفضل؛ تؤخذ عينة الورقة سالفة الذكر من لبابات جيل ‎Mx‏ حيث ‎x‏ هو عدد ‎٠‏ صحيح > ؟؛ يفضل في نطاق من ؟ إلى ‎8٠١‏ يفضل أكثر في نطاق من © إلى 8. في تطبيق مفضل ‎clan‏ يتحدد مستوى ‎SMM‏ في النباتات النامية (م7)؛ أو في عينات من ذلك (مثل الأوراق). في التطبيق المذكور؛ يفضل أن تنمو لبابات شعير طفرية من الجيل ‎MO‏ ‏للحصول على نباتات شعيرء ‎Allg‏ تتزاوج بعد ذلك للحصول على لبابات الجيل (م١).‏ يكرر الإجراء حتى تتوافر لبابات من الجيل ‎(Va)‏ (قارن شكل ‎(VY‏ ‎yo‏ يفضل أن يعتمد تحديد مستوى ‎SMM‏ على الإجراء الجديد الموصوف أدناه. للأهمية؛ تسمح هذه الطريقة بفحص عالي الدخل؛ يجعلها ملائمة لتحديد نباتات شعير تتميز بفقد كامل لإنزيم ‎MMT‏ ‏بصفة عامة؛ يفضل أن تشمل الطريقة تفاعل العينة؛ أو يفضل خلاصة من العينة المذكورة. محضرة كما هو موصوف أعلاه؛ مع مركب قادر على ربط ‎SMM‏ اتضح أن ‎٠‏ العامل الكاشف ‎Sigma, cat.no.
P7914;) OPA‏ قارن شكل ‎oY‏ يشار إليه هنا لاحقا فقط بأنه ‎«OPA‏ مفيد تحديدا لتحديد مستويات ‎.SMM‏ يتفاعل ‎«OPA‏ من ضمن مركبات أخرى؛ مع ‎SMM‏ لتكوين الجزيء المشار إليه ‎SMM-OPA‏ (قارن شكل ‎.)١‏ يفضل أن يشمل التفاعل حضانة ‎OPA‏ مع خلاصة العينة المحضرة حسب الوصف أعلاه. إضافيا يفضل إضافة ‎3-mercapto-propionic acid‏ إلى خليط التفاعل. يفضل حفظ الخليط عند أس ‎YO‏ هيدروجيني قلوي؛ يفضل في نطاق من ‎(A‏ )0 يفضل أكثر في نطاق 4 إلى ١١؛‏ أيضا يفضل أكثر في نطاق 9,5 إلى 0,0 ‎Je)‏ عند أس هيدروجيني ‎.٠١‏ يفضل إجراء الحضانة عند درجة ‎Bila‏ من صفر*مئوية إلى ١٠”مثوية؛‏ يفضل في نطاق من ١"مئوية‏ إلى ‎AA‏ vy ‏أيضا يفضل أكثر في نطاق من‎ die ‏إلى‎ 30a ‏أيضا يفضل أكثر في نطاق من‎ ‏دقائق.‎ ٠١ > ‏مثلا عند ؛“مئوية. يفضل أن تكون فترة الحضانة‎ (Asie ‏'*مئوية إلى‎ 456 ‏نانومتر و‎ YE ‏يمتص ويبعث ضوء عند‎ SMM-OPA ‏استنادا إلى الملحوظة بأن‎ ‏نانومترء على الترتيب؛ فإن تحديده ممكن باستخدام فحص مجهري طيفي استشعاعي. يفضل‎ ‏أن تشمل العملية الأولية للتحديد فصل الخلاصة على عمود؛ يفضل على عمود‎ © (Phenomenex, catno. 00A-4439-80; ‏ملليمتر ؟ ميكرون‎ 77*٠١ 018 Gemini ‏متبوعا بتحديد الاستشعاع باستخدام نظام تحليل كروماتوجرافي سائل‎ (Phenomenex, 2006) (UPLC ‏(نظام‎ Ultra Performance Liquid Chromatography ‏عالي الدخل؛ يفضل‎ ‏نانومتر‎ 75٠8 ‏مصمم لتحديد وقياس مستوى استشعاع الجزيئات التي لها إثارة عند‎ )»+ 5 ‏لا يمكن تحديده” يعني‎ SMM" ‏نانومتر. عند استخدام هذه الطريقة؛ فإن‎ 40 ٠ ‏وانبعاث عند‎ ٠ ‏في هذا السياق؛ فإن "كتف"‎ SMM ‏غياب مركبات يمكن تحديدها تنفصل بصورة مشتركة مع‎ ‏صغير على ذروة رسم كروماتوجرافي يعتبر ذروة اصطناعية. إن كتف صغير على جانب اليد‎ ‏لذلك؛ على‎ SMM ‏لا يعتبر طبقا لذلك ممثلا لذروة‎ oF ‏قارن شكل‎ cAsn/Ser ‏اليمنى لذروة‎ ‏يصنفان‎ (QF ‏سبيل المثال؛ يعتبر الرسمان الكروماتوجرافيان العلويان كما هو مبين في الشكل‎ ‏لا يمكن تحديده"؛ بينما يمثل الرسم الكروماتوجرافي السفلي في الشكل المذكور فصل‎ 5004" ٠
SMM ‏عينة تشمل‎ ‏هناك طريقة مفضلة لانتقاء نباتات‎ LY ‏حسب الوصف في المثال‎ SMM ‏يفضل تحديد‎
Lia ‏إن نبات الشعير النامي؛‎ LY ‏شعير طبقا للاختراع موصوفة هنا فيما بعد في المثال‎ ‏نامي لمدة ؛ أيام تفيد له بصفة خاصة طريقة الفحص المذكورة‎ ped ‏يفضل أكثر من نبات‎ ‏أعلاه. قبل كل شيء فإن الطريقة التحليلية جديدة. إضافة لذلك؛ فإنها ميزة هامة للطريقة أعلاه‎ ٠ ‏أوراق نباتات شعير نامية. إن‎ Jie ‏في نباتات شعير نامية؛‎ SMM ‏أنها مقررة لتحديد مستويات‎ ‏توقيت أخذ العينات من الشعير النامي يسهل الحصول على مستحضر نظيف بصورة غير‎ ‏عينات ورق من‎ Mia (gal ‏معتمد على ©.1071. هناك عينات‎ SMM ‏متوقعة من أجل تحديد‎ ‏ويمكن عامة عدم استعمالها في‎ lela ‏حبوب مشابهة حسب الوصف أعلاه معقدة جدا في‎
SMM ‏الطريقة الكروماتوجرافية المذكورة لتحديد مستويات‎ 5 ‏لا يمكن‎ SMM ‏يفضل‎ «SMM ‏جزءٍ على البليون‎ ٠١ ‏عقب تحديد نبات شعير به أقل من‎ ‏منه؛ يتم ترتيبه نموذجيا لتحديد ما إذا كان يمكن‎ sha ‏المقابل؛ أو‎ MMT ‏تحديده؛ فإن جين‎
تصنيف نبات الشعير الذي نحن نصوره بأن به طفرة في جين ‎MMT‏ إن نباتات الشعير المتميزة بوجود ‎SMM‏ لا يمكن تحديده؛ والتي تكون فيها واحدة أو أكثر من قواعد الجين المشفر ‎MMT‏ مختلفة مقارنة مع ترتيب النوع البري؛ يتم عندئذ انتقائها. في هذا السياق؛ يفضل أن يكون ترتيب النوع البري هو الترتيب الموجود في الشكل المتنوع المقابل للشعير من © النوع البري؛ يفضل الترتيب المحدد هنا ‎Jie‏ تعريف الترتيب رقم: . توصف هنا أعلاه طفرات إن طفرات الشعير المنتقاة يمكن أن تنمو إضافياء ويعاد فحص نباتات الأجيال التالية من أجل محتوى ‎SMM‏ بعد انتقاء نباتات شعير ‎Bae‏ يمكن تضمنها في برامج التناسل باستعمال تلك الطرق التقليدية الموصوفة هنا أدناه في جزء "تناسل النبات". ‎٠‏ منتجات نبات يتعلق الاختراع الحالي في جانب بمشروبات أو منتجات نبات أخرى مع مستويات قليلة من ‎DMS‏ يفضل من نبات شعير؛ أو أجزاء منهاء تحمل طفرة في جين ‎MMT‏ تسبب فقد كامل لوظيفة ‎MMT‏ للأهمية؛ تشمل منتجات النبات تلك؛ عامة؛ مستويات قليلة جدا من ‎DMS‏ ‏علاوة على هذا فإن هذه المنتجات النباتية تشمل أيضا عموما مستويات منخفضة جدا من ‎SMM Vo‏ ويفضل أيضا مستويات منخفضة جدا من 01480. بدون التقيد بالتظرية؛ أدرك المقدمون للطلب أن غياب ‎SMM‏ شعير ومشتق من الملف ينتج مستويات قليلة جدا من ‎DMS‏ ‏في المشروبات؛ وأيضا في منتجات نبات أخرى محضرة من الشعير المذكور المتميز بفقد إنزيم 7 وظيفي. يوصف هنا لاحقا ‎Abie]‏ لمنتجات نبات مفيدة؛ ‎(Fie‏ مشروبات؛ محضرة من نباتات شعير بها فقد كامل لنشاط ‎MMT‏ ‎Ye‏ يفضل أن تحتوي المشروبات المذكورة؛ أو منتجات النبات المذكورة على: )0( أقل من 770؛ يفضل أقل من ‎77١‏ يفضل أكثر - أقل من 719 أيضا يفضل أكثر - أقل من ‎DMS 7٠١‏ و/أو ‎(Y)‏ أقل من 770 يفضل أقل من ‎77١0‏ يفضل أكثر = أقل من 719 أيضا يفضل أكثر- ‎Jil‏ من ‎7٠‏ مثلا أقل من 70 على سبيل المثال أقل من 77 ‎SMM‏ من ‎Yo‏ محتوى ‎SMM 5 DMS‏ على الترتيب؛ لمشروب مشابه أو منتج نبات ‎(Plant product)‏ مشابه محضر من نباتات شعير النوع البري. من المفضل أيضا أكثر أن تحتوي المشروبات المذكورة أو منتجات النبات المذكورة على:
‎)١(‏ أقل من ‎Yo‏ جزء على البليون؛ يفضل أقل من ‎ein YO‏ على البليون؛ يفضل أكثر - أقل من ‎sia Yo‏ على البليون؛ أيضا يفضل أكثر - أقل من 10 جزء على البليون» أيضا يفضل أكثر- أقل من ‎٠١‏ جزء على البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزءٍ على البليون؛ أيضا يفضل أكثر- ‎DMS‏ غير قابل للتحديد؛ و/أو ° (7) أقل من ‎5٠‏ جزء على البليون؛ يفضل أقل من 40 جزء على البليون؛ يفضل أكثر - أقل من ‎7٠0‏ جزءٍ على البليون؛ أيضا يفضل أكثر - أقل من ‎٠١‏ جزء على البليون» أيضا يفضل ‎ST‏ = أقل من ‎٠١‏ جزء على البليون؛ ‎Lad‏ يفضل أكثر - أقل من © جزءٍ على البليون» أيضا يفضل أكثر ‎SMM‏ لا يمكن تحديده. بالإضافة إلى هذا يفضل أن يشمل منتج النبات أقل من ‎JY‏ يفضل أقل من ‎77١‏ ‎١‏ يفضل ‎ST‏ أقل من ‎١715‏ يفضل أكثر أيضا أقل من ‎7٠١‏ من محتوي ‎Cid DMSO‏ ‎Silas‏ أو منتج نبات محضر من نباتات الشعير من النوع البري. إن منتج النبات ‎(Plant product)‏ طبقا للاختراع الحالي هوء في جانب؛ لبابات شعير تحمل طفرة تؤدي إلى فقد كامل لإنزيم ‎MMT‏ وظيفي. قد يكون منتج النبات ‎(Plant product)‏ أيضا عبارة عن تركيبات تشمل اللبابات المذكورة وتركيبات محضرة من
‎٠‏ اللبابات المذكورة؛ بالإضافة إلى منتجات نبات أخرى محضرة من اللبابات المذكورة.
‏في جانب؛ يكون منتج النبات ‎(Plant product)‏ طبقا للاختراع تركيبة ملت محضرة بواسطة لبابات ملت لنباتات شعير تحمل طفرة في الجين المشفر ‎MMT‏ تسبب فقد كلي لنشاط 7. إن المصطلح "تكوين ملت" مفهوم أنه إنماء لبابات شعير منقوعة؛ يتم تحت شروط بيئية خاضعة للسيطرة (مثلا كما هو مبين في الشكل ‎(A‏
‎١‏ إن تكوين ملت هو عملية نقع وإنبات خاضعة للسيطرة؛ يليها تجفيف (يفضل تجفيف آتون) لحبة الشعير. قبل التجفيف؛ يشار إلى حبوب الشعير المنقوعة والنابتة "ملت أخضر” وقد تكون أيضا عبارة من منتج نبات ‎(Plant product)‏ طبقا للاختراع الحالي. إن هذا التسلسل للأحداث هام لتكوين إنزيمات عديدة تسبب تعديل للحبة في عمليات تخدم أساسيا في إزالة بلمرة جدران خلية المنوي الداخلي الميتة وتحريك المواد المغذية للحبة. في عملية التجفيف؛
‎Yo‏ تنتج نكهة ولون (مثلا لون بني) نتيجة لتفاعلات كيميائية. برغم أن الاستخدام الأساسي للملت هو إنتاج مشروب؛ فمن الممكن أيضا استعماله في عمليات صناعية أخرى؛ مثلا كمصدر
Yo ‏إنزيم في صناعة المخبوزات؛ أو كعامل مكسب للنكهة وللون في صناعة الأطعمة؛ مثل ملت‎ ‏أو طحين ملت؛ أو بصورة غير مباشرة كشراب ملت؛ إلخ.‎ ‏في جانب؛ يتعلق الاختراع الحالي بطرق لإنتاج تركيبة الملت المذكورة. يفضل أن تشمل‎ ‏الطرق خطوات:‎ ‏تسبب فقد كلي‎ MMT ‏توفير لبابات شعير من نبات يحمل طفرة في الجين المشفر‎ )١( ° «MMT Jalal ‏نقع اللبابات المذكورة؛‎ )7( ‏مسبقة التحديد؛‎ dag pd ‏إنبات اللبابات المنقوعة تحت‎ )( ‏تجفيف اللبابات النامية المذكورة.‎ (£) ‏قد ينتج الملت بأي‎ Sie DMS ‏و/أو‎ SMM ‏بذلك تنتج تركيبة ملت بها مستوى قليل من‎ Ve .(YAAY) Hough et al. 5 (Y4AY) Briggs et al. ‏من الطرق الموصوفة بواسطة‎ ‏يمكن أيضا استخدام أي طريقة أخرى مناسبة لإنتاج الملت مع الاختراع‎ (Ja ‏على أية‎ ‏خاصة؛ تتضمن؛ بدون تحديد؛ طرق تحميص الملت.‎ aga ‏طرق إنتاج ملت ذات‎ Sia ‏الحالي؛‎ ‎APT A= TY ‏مركب طيار في الواقع مع درجة غليان‎ DMS ‏للأهمية؛ إن‎ ‏أعلاه)» وأثناء إنتاج الملت؛ مثلا أثناء تجفيف آتون؛ تخضع التركيبة نموذجيا‎ cImashuku) ٠ ‏أثتاء تبريد تركيبة ملت‎ (Ja ‏على أية‎ DMS ‏لحرارة بحيث تتبخر بعيدا كميات جوهرية من‎ ‏إن ميزة كبرى للاختراع‎ -(DMSP) DMS ‏من مصادر أولية‎ DMS ‏عادية؛ قد يتولد مزيد من‎ ‏في تركيبة الملت (قارن المثال‎ DMS ‏الحالي هي عدم تولد أو تولد قدر ضئيل جدا فقط» من‎ (()e ‏شكل‎ en ‏في الملت. يعتمد العديد من هذه الطرق على‎ DMS ‏جرى وصف طرق لخفض تركيز‎ Y. ‏معالجة الملت بالحرارة. معالجة الحرارة المذكورة قد تكون ببساطة تسخين الملت على سبيل‎ ‏الحر باستخدام البخار. بذلك؛ فإن معالجة الملت‎ DMS ‏المثال أثناء التجفيف في الفرن لتبخير‎ ‏الحر في الملت. مع هذاء تخفض هذه الطرق أساسا‎ DMS ‏بالبخار قد تخفض مستويات‎
Ladle ‏بدرجة أقل. كما هو‎ SMM ‏الحر في الملت؛ ولكنها تؤثر في مستوى‎ DMS ‏مستوى‎ ‏تركيبات الملت؛ مستويات منخفضة‎ Jia ‏يفضل أن تشمل منتجات النبات من الاختراع؛‎ def Yo ‏في تجسيد من الاختراع جرى إخضاع تركيبات الملت من الاختراع فقط‎ .SMM 5 DMS ‏من‎
لمعالجة محدودة تتضمن تطاير وإزالة ‎DMS‏ الحر بالبخارء أو كبديل لم يتم إخضاعها لمعالجة تتضمن تطاير وإزالة ‎DMS‏ الحر باستخدام البخار أثناء التجفيف في الفرن. في تجسيد من الاختراع؛ يفضل عدم معالجة الملت طبقا للاختراع بملح ‎Ji cbromate‏ ‎potassium bromate‏ أو ‎.calcium bromate‏ ° يمكن معالجة الملت إضافيا؛ ‎Sle‏ بالطحن وبذلك نحصل على ملت مطحون. لذلك؛ فإن منتج النبات طبقا للاختراع قد يكون عبارة عن أي نوع ملت؛ مثل ملت غير معالج؛ أو ملت مطحون؛ أو طحين من ذلك. يشمل الملت المطحون والطحين ‎cada‏ مكونات كيميائية للملت؛ تتضمن خلايا ميتة تفتقد القدرة على إعادة الإنماء. يفضل أن تشمل تركيبات ملت الاختراع في المعظم ‎oF‏ يفضل في المعظم ‎oF‏ يفضل أكثر ‎١ ٠‏ في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 0,5 في المعظم؛ ‎١,7 Jie‏ ميكروجرام/ جرام في المعظم من حر. ‎(lla)‏ يفضل أن تشمل تركيبات ملت الاختراع في المعظم 7؛ يفضل ‎١‏ في المعظم؛ يفضل أكثر ‎٠,#‏ ميكروجرام/ جرام في المعظم من ‎SMM‏ ‏في جاتب مفضل يوفر الاختراع تركيبات ملت تشمل في المعظم ‎«Yor‏ يفضل في المعظم ‎Vou‏ يفضل أكثر ‎٠٠١‏ في المعظم؛ ‎Lia‏ يفضل أكثر ‎٠‏ © في المعظم؛ ‎YO (Jia‏ في المعظم ‎Vo‏ جزء على البليون من ‎DMS‏ حر. إضافياء يفضل أن تشمل تركيبات ملت الاختراع في المعظم ؛ يفضل في المعظم ‎00s‏ يفضل أكثر في المعظم ‎You‏ يفضل أكثر أيضا في المعظم ‎٠٠١‏ جزءٍ في المليون؛ وأيضا يفضل أكثر في المعظم ‎٠‏ 5 جزءٍ في المليون ‎SMM‏ ‏يفضل أيضا أن تشمل تركيبات من الاختراع في المعظم ١٠0٠٠؛‏ يفضل في المعظم © يفضل أكثر في المعظم ١٠٠؛‏ أيضا يفضل أكثر في المعظم ‎gia * ٠‏ في المليون ‎DMSP‏ ‎“٠‏ -- في جانب آخر يتعلق الاختراع بتركيبات ملت أخضر تشمل في المعظم ‎0٠0‏ 5؛ يفضل أكثر في المعظم ‎You‏ أيضا يفضل أكثر في المعظم ‎٠0٠١‏ أيضا يفضل أكثر في المعظم ‎Laff 0‏ يفضل أكثر في المعظم ‎(YOu‏ مثلا في المعظم ‎Vou‏ جزءٍ في المليون ‎DMSP‏ ‏يفضل أيضا أن ‎Jedi‏ تركيبات الملت الأخضر المذكورة في المعظم ‎١7٠١‏ يفضل في المعظم ‎V0‏ يفضل أكثر في المعظم ‎٠٠١‏ أيضا يفضل أكثر في المعظم ‎٠‏ ؛ مثل في المعظم ‎Yo‏ ‎YO‏ جزء في المليون ‎DMS‏ > في ‎AT cals‏ فإن منتجات النبات طبقا للاختراع هي أشربة؛ ‎Jie‏ شراب شعير أو شراب ملت شعير. يمكن أيضا أن يكون منتج النبات هو خلاصة شعير أو ملت.
vv ‏تكون منتجات النبات طبقا للاختراع هي تركيبات ورت محضرة من‎ AT ‏في جانب‎ ‏تسبب فقد كلي لنشاط‎ MMT ‏تركيبات ملت مشتقة من لبابات شعير تحمل طفرة في جين‎ ‏المثال 71؛ شكل *(ب)). يمكن تحضير الورت المذكور من لبابات ناقصة‎ dail) MMT ‏أو خلطات تشمل لبابات أخرى أيضا. يتعلق الاختراع أيضا بتركيبات ورق‎ (adi MMT ‏منه؛ وحده أو مختلط مع مكونات أخرى. قد تكون‎ shal ‏محضرة من شعير ناقص-00341؛ أو‎ © ‏تركيبات الورت المذكورة هي ورت أول؛ و/أو ثاني؛ و/أو إضافي. قد تكون تركيبات الورت‎ ‏تحتوي تركيبة ورت على‎ dale ‏عبارة عن ورت محلي؛ ورت مغلي؛ أو خليط من ذلك. بصفة‎ ‏قابلة للتخمر» وتكون الأخيرة أساسيا‎ carbohydrates s amino nitrogen ‏مستوى عال من‎ ‏توضح الطريقة العامة لتحضير ورت من ملت. بصفة‎ A ‏في الشكل‎ maltose ‏عبارة عن‎ ‏عامة؛ يحضر الورت بحضانة للملت مع ماء في عملية تكوين هريس. أثناء تكوين الهريس؛ قد‎ ٠ ‏مثلا مواد إضافية‎ carbohydrate ‏تدعم تركيبة الملت/ الماء مع تركيبات إضافية غنية مع‎ ‏ذرة؛ أو أرز. إن المواد الإضافية الحبيبية غير الملت معروفة عامة بأنها تحتوي على‎ ud ‏مستويات قليلة جدا من الإنزيمات؛ وذلك يجعل التدعيم مع الملت أو إنزيمات خارجية ضروريا‎ ‏لتحويمل السقر و/أو توليد خلاصسة:؛ متضيتنا توليد‎ . ‏حر‎ amino nitrogen ٠
في أحد تجسيدات الاختراع؛ قد يكون منتج النبات عبارة عن شعير غير ملت؛ والذي قد
يكون ‎dade‏ على سبيل المثال كمادة إضافية أثناء تكوين الهريس. بصفة عامة؛ فإن الخطوة الأولى في عملية إنتاج الورت هي طحن الملت بحيث يصل الماء بدرجة زائدة إلى جسيمات الحبة في مرحلة تكوين الهريس- وقد يعتبر ذلك امتدادا لعملية ‎٠‏ تكوين الملت مع ‎AI)‏ بلمرة إنزيمية للمواد الخاضعة. أثناء تكوين الهريس» يحضن الملت المطحون مع سائل؛ مثل الماء. تكون درجة حرارة الحضانة ‎Le)‏ ثابتة (تكون هريس متساوي الحرارة)» أو تزداد تدريجيا. في تجسيد مفضل؛ لا تتجاوز درجة حرارة الهريس الأولية ٠/ا"مئوية؛‏ يفضل أن لا تتجاوز 69"مثوية؛ بذلك على سبيل ‎JE)‏ تتراوح درجة حرارة الهريس الابتدائية من ‎٠٠‏ إلى 19"مثوية؛ كما في حدود 00 إلى 19"مئوية؛ على سبيل المثال في ‎Yo‏ حدود 00 إلى 15"مئوية. إذا كانت درجة حرارة الهريس الابتدائية ‎lle‏ جداء فإنها سوف تؤثر في النشاط الإنزيمي للهريس وقد تخفض؛ أو حتى تزيل؛ نشاطات إنزيمية مرغوب فيهاء؛ ‎Los‏ ‏ينتج ‎die‏ نوعية مختلفة من الورت. في أي من الحالتين؛ تتحرر المواد الخاضعة القابلة للذوبان
YA
‏الناتجة في تكوين الملت وتكوين الهريس في جزء السائل المذكور. يوفر ترشيح تالي فصل‎ ‏لسائل الورت والجسيمات الصلبة المتخلفة؛ يرمز إلى الأخيرة حبات مستنفذة. قد يرمز أيضا‎ ‏إلى الورت المذكور بأنه 'ورت أول". بعد الترشيح؛ يمكن الحصول على 'ورت ثاني" بالتطهير‎
Briggs et ‏ساخن. توصف أمثلة غير مقيدة لإجراءات مناسبة لتحضير ورت بواسطة:‎ cle ‏مع‎ ‎(YAY) Houghetal. 5 (Y4AY) al. © ‏والإضافي؛ ويخضع بعد ذلك للغليان. إن الورت غير‎ (AL ‏قد يتحد الورت الأول؛‎ ‏المغلي. إما ورت أول نقي أو ورت متحدء يشار إليه أيضا بأنه 'ورت محلي"؛ بينما بعد الغليان‎ ‏قد يشار إليه 'ورت مغلي". إذا كان الورت سوف يستخدم في إنتاج بيرة» تضاف دائما مواد‎ ‏إضافة منكهة قبل الغليان.‎ ‏منهاء‎ shal ‏أيضا تحضير تركيبة الورت بحضانة لنباتات شعير ناقصة-2013117؛ أو‎ (Say Ve ‏غير ملت؛ أو أجزاء منهاء مع واحد أو أكثر من‎ MMT ‏مثل نباتات ناقصة‎ ‏إنزيمات مناسبة؛ مثل تركيبات إنزيم؛ أو تركيبات خليط إنزيم؛ على سبيل المثال‎ ‏يمكن أيضا تحضير تركيبة الورت باستخدام خليط ملت‎ .Ultraflo or Cereflo (Novozymes) ‏أو أجزاء من ذلك أو شعير غير ملت فقطء واختياريا إضافة واحد‎ le ‏ونباتات شعير غير‎ ‏(يفضل‎ glucanases «amylases ‏أو أكثر من إنزيمات مناسبة أثناء التحضير المذكور؛ تحديدا‎ ١ «(arabinoxylanase ‏ل‎ xylanase ‏و/أو‎ «(glucanase =p -) ١ ‏رأاحكت‎ Sis =(¢-Y) ‏أو خلطات إنزيم تشمل واحد أو أكثر من الإنزيمات سالفة الذكر؛ مثلاء‎ «proteases lf 3 .(Novozymes) OndeaPro ‏إضافة خليط إنزيم‎ ‏هريس ملت واستخدامه كمادة إضافية. بصفة‎ A ‏يمكن إضافة شعير الاختراع الحالي‎ ‏خاصة أكثر » يمكن استخدام شعير الاختراع مع ملت في أي اتحاد من أجل تكوين هريس؛ مع‎ ve ‏صفرء أو‎ :٠٠١ = ‏أو بدون إنزيمات تخمر؛ مثل؛ بدون تحديد نسب الشعير: الملت التي‎ ‏ماق أرى تفصف أى تقلا‎ ‏دقيقة‎ ٠١ ‏في طرق التخمر التقليدية؛ يغلى الورت لمدة طويلة؛ بصفة عامة في نطاق من‎ ‏وهو مركب‎ DMS ‏الأسباب لذلك أن الغليان الممتد الوقت يقلل كمية‎ aad ‏دقيقة؛‎ ١7١ ‏إلى‎ ‏فإن الغليان ممتد الأمد غير مرغوب لعدد من الأسباب الأخرى؛ على‎ Ja ‏طيار. على أية‎ Ye ‏توفير طاقة وفيرة. إضافة لذلك؛ قد يؤدي الغليان‎ allay ‏سبيل المثال لأن الغليان ممتد الأمد‎ ‏غير مرغوبة. طبقا للاختراع الحالي؛‎ Strecker aldehyde ‏المذكور إلى تولد نكهات إضافية‎
يمكن إنتاج ورت مع مستويات قليلة من ‎DMS‏ من شعير ناقص ‎MMT‏ حتى بدون غليان ممتد الأمد. لذلك؛ فإن الورت طبقا لتجسيد مفضل للاختراع يغلى لمدة £0 دقيقة في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر ‎٠‏ دقيقة في المعظم؛ مثلا في المعظم ‎VO‏ دقيقة. من الجدير بالذكر أنه حتى عند غليان الورت بدرجة شديدة؛ يتولد أيضا ‎DMS‏ من ‎DMSP‏ مع مرور الوقت. ‎٠‏ للأهمية؛ فإن الورت ‎Lida‏ للاختراع الحالي يحتفظ بمستوى قليل من ‎(DMS‏ أقل جوهريا من ذلك الناتج بعد غليان ورت عادي. في تجسيد إضافي من الاختراع؛ يفضل عدم إخضاع الورت للغسيل مع ‎carbon dioxide‏ بعد غليان الورت وقبل التخمير. يفضل؛ أن تشمل تركيبات الورت من الاختراع أقل من ‎7١0‏ جزء في ‎sll‏ يفضل أقل ‎٠‏ .من ‎YO‏ جزء في البليون؛ يفضل أكثر أقل من ‎Yo‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ‎٠‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ‎٠١‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر 0148 لا يمكن تحديده و/أو أقل من ‎5٠‏ جزء في البليون» يفضل أقل من ‎5٠0‏ جزء في البليون؛ يفضل أكثر أقل من ‎To‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل ‎LAST‏ أقل من ‎Yo‏ جزء في البليون» أيضا يفضل أكثر أقل من ‎٠١‏ جزء في البليون؛ ‎٠‏ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر ‎SMM‏ لا يمكن تحديده. إن منتجات النبات؛ أو أجزاء منهاء من الاختراع الحالي قد تشكل أيضا تركيبات طعام؛ تركيبات إطعام؛ وتركيبات مادة خام عطرية تشمل نباتات ‎pad‏ تحمل طفرة في الجين المشفر 1. تسبب فقد كامل لنشاط ‎MMT‏ قد تكون تركيبات الطعام؛ مثلا؛ لكن بدون تحديد؛ عبارة عن لبابات شعير وغير ملت؛ طحين ‎Gad ued‏ عصيدة؛ خلطات حبية تشمل شعير؛ ‎٠‏ - منتجات صحية؛ ‎Jie‏ مشروبات تشمل شعير؛ أشربة شعير؛ وتركيبات شعير ‎All)‏ مطحونة أو منبثقة. تتضمن تركيبات الإطعام؛ على سبيل المثال؛ تركيبات تشمل لبابات شعير» و/أو طحين شعير. إن تركيبات مادة خام عطرية موصوفة هنا أدناه. يتعلق الاختراع أيضا بخلطات من منتجات النبات الموصوفة هنا. على سبيل المثال؛ يتعلق الاختراع في جانب واحد بتركيبة محضرة بخليط من: ‎)١( Yo‏ تركيبة تشمل نبات ‎pad‏ ¢ أو جزء منه؛ يحمل طفرة في الجين المشفر ‎MMT‏ تسبب فقد كامل لنشاط ‎MMT‏ و (7) تركيبة ملت محضرة من لبابات ناقصة-11141.
في جانب ‎ciate‏ يتعلق الاختراع الحالي؛ بمشروبات؛ يفضل أكثر بمشرويات مشتقة من الملت ؛ ‎Jia‏ بيرة تحتوي على مستويات قليلة من ‎(DMS‏ حيث تحضر المشروبات المذكورة باستخدام شعير ناقص ‎MMT‏ أو ‎shal‏ منه.
لذلك؛ في تطبيق مفضلء يتعلق الاختراع بمشروبات؛ يفضل أكثر بمشروبات مشتقة من
‎٠‏ الملت؛ مثل البيرة؛ تحتوي المشروبات أو البيرة المذكورة على:
‎)١(‏ أقل من ‎٠‏ جزء في البليون» يفضل أقل من ‎YO‏ جزء في البليون؛ يفضل أكثر أقل من ‎Yo‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ‎Vo‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ‎٠١‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ ‎Lad‏ يفضل أكثر 4 غير قابل للتحديد؛ و/أو
‎١‏ (7) أقل من ‎5٠‏ جزء في ‎sald)‏ يفضل أقل من ‎5٠‏ جزءٍ في البليون؛ يفضل أكثر أقل من ٠؟‏ جزء في البليون» أيضا يفضل أكثر أقل من ‎٠١‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ‎٠١‏ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ وأيضا يفضل أكثر ‎SMM‏ لا يمكن تحديده.
‏يفضل أن يحضر المشروب بتخمر شعير ناقص ‎MMT‏ أو أجزاء منه؛ أو خلاصات منه؛
‎١‏ على سبيل المثال بتخمر ورت ناتج باستخدام ملت ناتج من شعير ناقص ‎MMT‏ وحده أو في اتحاد مع مقومات أخرى.
‏على أيه ‎Js‏ في تطبيقات أخرى للاختراع» يكون المشروب مشروب غير متخمر؛ مثلا ورت؛ يفضل ورت محضر من ملت ناقص ‎MMT‏ يشمل الاختراع الحالي أيضا تحضير المشروب المذكور من نباتات شعير غير ملت أو أجزاء منها؛ يفضل من نباتات شعير غير
‏.ملت ناقصة ‎MMT‏ أجزاء منها.
‏قد يكون المشروب مشروب غير كحولي؛ مثل بيرة خالية الكحول أو أنواع أخرى من مشروبات غير ‎calcoholic‏ مثل مشروبات ملت غير كحولي؛ ‎.maltina Jie‏
‏يفضل؛ على أية حال؛ أن يحضر المشروب المذكور من تركيبة ملت تشمل لبابات شعير ناقصة ‎MMT‏ يفضل أكثر؛ أن يكون المشروب المذكور بيرة. قد تكون هذه هي أي نوع من
‎Yo‏ البيرة المعروفة للماهر في الفن. في أحد التجسيدات؛ تكون البيرة؛» على سبيل ‎JU)‏ بيرة كبيرة. يفضل أن تكون ‎Ball‏ مخمرة باستخدام تركيبة ملت تشمل شعير نامي ناقص ‎MMT‏ قد تشمل أيضا تركيبة الملت؛ على أية حال؛ مكونات ‎(al‏ على سبيل المثال حبوب أخرى نابتة
١ ‏و/أو الجاودار» أو مواد خام غير نباتية تشمل‎ cad ‏أو غير نابتة؛ مثل شعير نوع بري؛‎ ‏سكريات أو تركيبات مشتقة من مواد خام متحولة أو غير متحولة إلى ملت؛ تتضمن تركيبات‎ ‏شراب.‎ ‏لذلك؛ حتى‎ SMM ‏متضمنا‎ DMSP ‏مع مرور الوقت قد يتولد من‎ DMS ‏يعتقد عموما أن‎
DMS ‏أوليا في المشروب؛ فعندئذ قد يتراكم‎ DMS ‏من‎ laa ‏عند عدم وجود أو وجود قدر ضئيل‎ © ‏مع مرور الوقت. على أية حال؛ إنه هدف للاختراع الحالي أن يوفر مشروبات تحتوي على‎ ‏حتى بعد التخزين.‎ DMS ‏قدر ضئيل منء أو لا تحتوي؛ على‎ ‏طبقا لذلك؛ فإن هدف الاختراع الحالي أن يوفر مشروبات مشتقة من نبات شعير؛ مثل بيرة‎ ‏يفضل أكثر‎ ald) ‏في‎ ea YO ‏جزء في البليون» يفضل أقل من‎ Vo ‏تحتوي على أقل من‎ ‏جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من 10 جزء في البليون؛ أيضا يفضل‎ Yo ‏أقل من‎ ٠ ‏جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ أيضا يفضل‎ ٠١ ‏أكثر أقل من‎ ‏يفضل أسبوعين على‎ (J ‏غير قابل للتحديد بعد التخزين لمدة أسبوع واحد على‎ DMS ‏أكثر‎ ‏يفضل أكثر ؟ أسابيع على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر ؛ أسابيع على الأقل؛ مثلا في‎ (JE) ‏شهرء‎ ١١ ‏إلى ؟ شهور؛ مثلا في نطاق ؟ إلى +7 شهور؛ مثلا في نطاق + إلى‎ ١ ‏نطاق من‎ ‏في‎ Jie ‏؟*مئوية؛‎ ٠0 ‏إلى‎ geo ‏مثلا لأكثر من سنة. يتم التخزين عند درجة حرارة في نطاق‎ 0 ‏؟"مئوية.‎ ٠0 ‏إلى‎ Aggro ‏نطاق‎ ‏إضافة لذلك؛ يفضل أن تتميز المشروبات طبقا للاختراع الحالي بخصائص مذاق فائقة.‎ ‏بالتحديد؛ يفضل أن تتميز المشروبات طبقا للاختراع بكونها أكثر أروماتية وعطرية من البيرة‎ ‏شكل 1). بدون التقيد بالنظرية؛ يوفر الاختراع الحالي نظرية‎ VY ‏"العادية' المقابلة (انظر مثال‎ ‏و51 يسبب الإحساس الزائد بالتكهات‎ DMS ‏أن المستويات القليلة من أو حتى عدم وجود؛‎ ٠ ‏الأروماتية والعطرية.‎ ‏بصورة مفضلة؛ تتحدد النكهات الأروماتية والعطرية بواسطة مجموعة خبراء تذوق‎ ‏محترفين. في التجسيدات التي يكون فيها المشروب هو البيرة؛ عندئذ يفضل أن تتكون مجموعة‎ ‏خبراء الاختبار من متذوقي بيرة محترفين. هناء يشار أيضا إلى "مجموعة خبراء تذوق بيرة‎ ‏محترفين" بأنها "مجموعة خبراء تذوق مدربين"؛ أو 'مجموعة خبراء تذوق بيرة متخصصين".‎ Yo ‏بذاته له تأثير وفير على خواص مذاق البيرة؛ فقد‎ DMS ‏برغم وجود معلومات جيدة عن أن‎ ‏متعددة‎ sulfur ‏يظهر بعض خبراء التذوق ميلا إلى تسجيل تقييمات غير دقيقة لنكهات تشبه‎
الأوجه. إن السبب ببساطة أن قائمة الخبراء تظل "غير ‎plas‏ بدرجة ملائمة نتيجة للاختلافات في أجسامهم بالنكهة؛ لقد تم حل هذه العقبة المعقدة؛ حسب الوصف هنا؛ بترسيخ مجموعة خبراء متخصصين مدربين بشدة من 9 على الأقل من متذوقي ‎Bull‏ مدربين على التقييم بدرجة حرجة لخواص مذاق ‎alcohols cesters‏ العلياء مكونات ‎csulfur‏ وقوام البيرة.
2 إن مجموعة خبراء التذوق لابد أن تتكون من 4 أشخاص على الأقل؛ يفضل في نطاق 1 إلى ‎٠١‏ شخص؛ مثلا 4 إلى ‎١١‏ شخص؛ مثلا ‎٠١‏ أشخاص. لابد أن يكون كل عضو مجموعة تذوق بصورة مفضلة مدرب بشدة؛ بالتحديد لابد أن يكون كل شخص ماهرا في تقييم خواص مذاق ‎alcohols «esters‏ العلياء مكونات ‎csulfur‏ وقوام البيرة. يمكن عندئذ لكل عضو ‎Ae gens‏ تذوق تقييم ملحوظات النكهة المختلفة على نظام درجي من صفر إلى 20 إن معايير
‎٠‏ النكهة يفضل أن تنتقى من المجموعة المتكونة من شدة المرارة؛ نوعية المرارة» القوام؛ التوازن؛ الانتعاش؛ قابلية الشرب؛ الأروماتية؛ ‎alcoholic cestery‏ المذيب؛ الزهرية؛ التي بها إضافات مسكرة» الراتتجية؛ نكهة الملف؛ الحبيبية»؛ الكراميل؛ الاحتراقية؛ ‎sulfury phenolic‏ الحمضية والحلاوة.
‏في استخدام الطريقة المذكورة ‎ode‏ يفضل أن تعطى مشروبات الاختراع درجة أعلى
‎٠‏ لواحدة على ‎(EY)‏ يفضل ؟ على الأقل؛ يفضل أكثر © على ‎JE‏ يفضل أكثر ؛ على الأقل» يفضل أكثر أيضا لكل من الخواص الأروماتية/ العطرية المنتقاة من المجموعة المتكونة من الأروماتية» ‎cestery‏ ©:ا2160:0/ المذيب»؛ الزهرية؛ والمسكرة مقارنة بمشروب له محتوى ‎ethanol‏ مشابه؛ ومحضر من شعير نوع بري؛ يفضل من ‎cov.
Power‏ عند ضبط أنماط ‎ester/alcohol‏ لكل من المشروبين لكي تكون متشابهة؛ وتكون المشروبات محضرة بنفس
‎٠‏ الطريقة. إضافة لذلك؛ باستخدام الطريقة المذكورة أعلاه؛ يفضل أن تكون لمشروبات الاختراع درجة أعلى من واحدة على الأقل؛ يفضل ‎١‏ على الأقل؛ يفضل أكثر كل من الخصائص العامة الثلاثة المنتقاة من المجموعة المتكونة من التوازن» الانتعاش» وقابلية الشرب مقارنة بمشروب به محتوى ‎ethanol‏ مشابه؛ ومحضر من شعير نوع بري؛ يفضل من ‎cov.
Power‏ عند ضبط
‎vo‏ أنماط ‎ester/alcohol‏ لكل من المشروبين لتكون متشابهة.
‏باستخدام الطريقة الموصوفة أعلاه؛ يفضل أن تكون لمشروبات الاختراع قيمة درجة من ‎١‏ على الأقل؛ يفضل أكثر ‎١,7‏ على الأقل ‎Jel‏ من أجل الانتعاش و/أو ‎estery‏ مقارنة
بمشروب به محتوى ‎ethanol‏ مشابه؛ ومحضر من شعير نوع بري؛ يفضل من ‎cv.
Power‏ عند ضبط ‎ester Jalal‏ لكل من المشروبين لتكون متشابهة. في سياق الطلب الحالي؛ يعتبر نمط ‎ester/alcohol‏ متشابها عند ضبط المركبات التي عددها ‎١١‏ المذكورة في الجدول ‎١‏ إلى مستويات متشابهة (انظر مثلا مثال ١)؛‏ أي؛ تحتوي © المشروبات على نفس الكمية؛ + 270 من ‎VY‏ مركب المذكورين في جدول ‎.١‏ يعتبر محتوى ‎ethanol‏ متشابها إذا كان هو نفسه؛ + ‎JY‏ يفضل نفسه + ‎.7٠١‏ ‏لذلك؛ يفضل أن مشروبات الاختراع؛ عند ضبطها إلى محتوى من ‎١١‏ مركب التالية (انظر القائمة في جدول ‎١‏ ومثال 7): ‎١ acetaldehyde (V)‏ جزء في المليون + ‎Ye‏ ‎YE ethylformiate (Y) ١‏ ,0 جزء في المليون + ‎Ye‏ ‎ethylacetate )١(‏ ؛,؟؟ جزءٍ في المليون + ‎٠0‏ 77؛ ‎isobutylacetate (£)‏ 5 ,؛ جزء في المليون + ‎Yo‏ ‎٠,4 1-propanol (©)‏ جزء في المليون + 778؛ ‎isobutanol )1(‏ 7 جزء في المليون + ‎AY‏ ‎VEY isoamylacetate (V) Vo‏ جزء في المليون + ‎Yo‏ ‎٠," 1-butanol (A)‏ جزء في المليون + ‎Yo‏ ‎OF isoamylalcolhol (4)‏ جزءٍ في المليون + ‎AY‏ ‎VY ethylhexanoate (V+)‏ ,+ جزء في المليون + 0٠77؛‏ ‎٠.0٠ n-hexylacetate (VV)‏ جزء في المليون + 770؛ ‎cthyloctanoate (VY) 9‏ 0.77 جزء في المليون ‎JY et‏ تتميز بأنها لها قيمة درجة ‎١‏ على الأقل؛ يفضل ‎١‏ على الأقل؛ يفضل أكثر 3 على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر ؛ على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر 0 على الأقل. أيضا يفضل أكثر كل الخواص التالية ‎sic)‏ التحديد حسب الوصف في مثال 7): ‎)١(‏ 'متوازنة" (درجة ‎Y,0‏ على ‎(JY)‏ يفضل 7,7 على الأقل)؛ ¥0 () 'الانتعاش” (درجة ‎To‏ على ‎JST‏ يفضل ‎YY‏ على الأقل؛ يفضل أكثر 7,9 على ‎JS)‏ أيضا يفضل أكثر ‎3,١‏ على الأقل)؛
‎ALE (V)‏ الشرب" (درجة ‎Y,0‏ على الأقل؛ يفضل 7.7 على الأقل؛ يفضل أكثر ‎Ya‏ ‏على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر ؟ على الأقل)؛ )£( "أروماتية" (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل ‎YY‏ على الأقل؛ يفضل أكثر 7,5 على الأقل)؛ ° )©( "عاو" (درجة *, على الأقل؛ يفضل ‎YY‏ على الأقل؛ يفضل أكثر 3,9 على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر 3 على الأقل)؛ ‎"ude alcoholic” (1)‏ (درجة 1,0 على الأقل)؛ ‎(V)‏ زهرية' (درجة ‎١,7‏ على الأقل؛ يفضل ‎١,9‏ على الأقل)؛ ‎(A)‏ 'منكهة بالجنجل" (درجة ‎٠,8‏ على الأقل)؛ ‎Ve‏ يفضل أكثر الخواص التالية (عند التحديد حسب الوصف في مثال 1): ‎)١(‏ "الانتعاش": (درجة ‎Y,0‏ على الأقل؛ يفضل 7,7 على الأقل؛ يفضل أكثر 3,9 على ‎(JY‏ أيضا يفضل أكثر ‎3,١‏ على الأقل)؛ ‎ALE (Y)‏ الشرب" (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل 7,7 على الأقل؛ يفضل أكثر ‎Ya‏ ‏على ‎(JS)‏ أيضا يفضل أكثر 3 على الأقل)؛ ‎Vo‏ (7) "أروماتية" (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل 7,7 على ‎JE‏ يفضل أكثر 7,5 على الأقل) ¢ ‎estery” (£)‏ (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل 7,7 على الأقل؛ يفضل أكثر ‎va‏ على ‎JY)‏ أيضا يفضل أكثر 3 على الأقل)؛ ‎oll]‏ يفضل أن يكون للمشروب طبقا للاختراع: ‎)١( A‏ درجة "انتعاش (88800655)" 7,5 على الأقل بمقياس درجي صفر إلى © عند التقييم بواسطة مجموعة خبراء مذاق محترفين؛ و/أو (7) درجة ‎TLE‏ شرب ‎(drinkability)‏ 1,8 على الأقل على مقياس درجي صفر إلى * عند التقييم بواسطة مجموعة خبراء مذاق محترفين؛ و/أو )9( درجة "نكهة أروماتية ‎Y,0 "(aromatic flavor)‏ على الأقل على مقياس درجي صفر ‎Ye‏ إلى © عند التقييم بواسطة مجموعة خبراء مذاق محترفين؛ ‎Ss‏ ‏(4) درجة "نكهة ‎flavor) ester‏ (عا»وع)” ‎Y,0‏ على الأقل على مقياس درجي صفر إلى 0 عند التقييم بواسطة خبراء مذاق محترفين؛
تع
بشرط أن نمط ‎ester/alcohol‏ للمشروب يكون حسب الإشارة في المثال 7؛ جدول ‎١‏ في العمود
07 ناقص ‎(null MMT)‏ المضاف إليه الخلطة ‎١‏ والخلطة 7. بصفة خاصة؛ يعلن الاختراع الحالي عن أن وجود ‎DMS‏ في مشروب قد يخفي المذاق 7©. طبقا ‎dN‏ فإن غرض الاختراع الحالي أن يوفر مشروبات لها درجة أكبر من المذاق ‎costery ©‏ حيث يتم تقييم المذاق المذكور بواسطة خبراء مذاق مدربين- يفضل خبراء مذاق مدربين عددهم 9 على الأقل- مقارنة مع المشروب المحضر بنفس الطريقة؛ لكنه يشمل على الأقل ‎٠٠١‏ جزءٍ على البليون ‎(DMS‏ مثلا في نطاق ‎٠٠١‏ إلى ‎ein Tor‏ على البليون ‎DMS‏ ‏أو مقارنة مع مشروب محضر بنفس الطريقة؛ لكنه يشمل على الأقل ‎5٠‏ جزء على البليون ؛ مثلا في نطاق من ‎5٠‏ إلى ‎٠٠١‏ جزء على البليون. إن الدرجة الأعلى المذكورة
8 ‏نقطة على الأقل؛ مثلا‎ ١,7 ‏يفضل‎ (JY) ‏نقطة على‎ ١,5 Ji ‏يفضل أن‎ estery Gaal) ‏على نطاق درجي من صفر إلى‎ estery ‏نقطة على الأقل أو أكبر من ذلك؛ عند تحديد المذاق‎ ‏حسب الوصف أعلاه.‎ ©
يتعلق الاختراع أيضا بطرق لإنتاج المشروبات المذكورة أعلاه؛ يفضل أن تشمل الخطوات: ‎)١(‏ توفير تركيب ملت تشمل لبابات ناقصة ‎MMT‏ نابتة؛
‎(V) Yo‏ تصنيع تركيبة ملت المذكورة في شكل مشروب؛ بذلك نحصل على مشروب يحتوي على أقل من ‎7١0‏ جزءٍ على البليون؛ يفضل أقل من ‎Yo‏ ‏جزء على البليون؛ يفضل أكثر- أقل من ‎eda ٠١‏ على البليون؛ أيضا يفضل ‎JST‏ = أقل من ‎٠‏ جزء على البليون» أيضا يفضل أكثر- أقل من ‎٠١‏ جزء على البليون؛ أيضا يفضل أكثر- أقل من © جزءٍ على البليون؛ أيضا يفضل ‎DMS ST‏ لا يمكن تحديده.
‏7 في تجسيد مفضل؛ يكون المشروب بيرة (©056. في هذه الحالة؛ يفضل أن تشمل خطوة المعالجة تحضير ورت من تركيبة ملت المذكورة؛ ‎lie‏ بأي من الطرق الموصوفة هنا أعلاه؛ وتخمير ورت المذكور.
‏بصفة عامة؛ يمكن تصنيع البيرة من حبات شعير ملت و/أو غير ملت. إن ملت؛
‏بالإضافة إلى مواد الإضافة المنكهة والخميرة؛ تساهم في نكهة ولون البيرة. إضافة لذلك؛ يقوم
‎cle YO‏ بوظيفة مصدر ‎Su‏ قابل للتخمر؛ ‎Lady‏ كمصدر لأجل إنزيمات. يبين شكل + التمثيل التخطيطي للعملية العامة لإنتاج ‎pull‏ بينما يوجد وصف مفصل لطرق لتكوين ملت والتخمر؛
‎.(Y4AY) Hough etal. 5 )١٠1481( Briggs etal. ‏في المطبوعات بواسطة:‎ Sia
هناك طرق عددية يتم تحديثها بانتظام متوافرة لتحليلات الشعير؛ ملت؛ ومنتجات البيرة. تتضمن هذه؛ على سبيل المثال؛ بدون تحديد: ‎American Society of Brewing )4 ©) American Association of Cereal Chemists‏ ‎nstitute of Brewing s «(}44A) European Brewery Convention + (Y44Y) Chemists‏ ‎.)١147( ٠‏ يلاحظ استعمال إجراءات خاصة كثيرة من أجل أداة تخمر خاصة؛ وتتعلق التباينات الأكثر أهمية بتفضيلات المستهلك المحلي. يمكن استخدام أي من تلك الطرق لإنتاج البيرة مع الاختراع الحالي. يمكن الحصول على تركيبة ملت للمشروبات سالفة ‎SAN‏ = متضمنة مثلا بيرة» مشروبات ‎Ye‏ ملت أو ورت غير متخمر؛ على سبيل المثال؛ بأي من الطرق الموصوفة هنا أعلاه. يمكن تحضير ورت من تركيبة ملت المذكورة. يفضل أن تشمل الخطوة الأولى لإنتاج البيرة من ورت غلي ورت المذكور. أثناء الغليان؛ يمكن إضافة مقومات ‎Jie opal‏ أشربة حبية ‎(cereal syrups)‏ أو إضافات منكهة ‎«(hops)‏ ‏حيث يوفر المكون الأخير السمات النموذجية اللاذعة والأروماتية للبيرة. إن غلي ورت يسبب ‎Lead ٠‏ تجمع بين ‎Proteins 5 polyphenols‏ متغيرة الطبيعة؛ والتي قد تتربسب أثناء الأطوار التالية في إنتاج البيرة. أيضاء فإن غليان ورت قد يسبب تبخير للمركبات الطيارة ‎(volatile‏ ‎«compounds)‏ متضمنة ‎.DMS‏ على ‎il‏ حال كما هو مذكور ‎lel‏ ‏فإن ورت المحضر من شعير ناقص ‎MMT‏ يحتوي على قدر ضئيل؛ أو لا يحتوي؛ على ‎(DMS‏ وذلك يجعل من الممكن التقليل جوهريا لزمن غليان ذلك ورت. بعد ‎call‏ ينقل ورت ‎٠٠‏ إلى أوعية تخمر تحتوي على خميرة؛ يفضل خميرة مخمرة من النوع ‎Saccharomyces‏ ‏1065. سوف يتخمر ورت لأي فترة زمنية مناسبة؛ عامة في نطاق من ‎١‏ إلى ‎٠٠١‏ ‏يوم. ‏بعد ذلك يمكن معالجة البيرة إضافياء على سبيل المثال تبريدها. يمكن أيضا ترشيحها و/أو توسيع نطاقها- وهي عملية تسبب وجود رائحة سارة ونكهة أقل شبها بالخميرة. يمكن ‎Yo‏ أيضا إضافة مواد إضافة ‎(additives)‏ إضافة ‎«lA‏ يمكن إضافة ,(00. ‎chal‏ يمكن بسترة ‎(pasteurized)‏ البيرة وترشيحها؛ قبل تعبئتها في زجاجات أو علب.
ty ‏هناك طرق كثيرة متوافرة لتحديد ما إذا كان نبات الشعير أو منتج نبات محضر من نبات‎ ‏سوف تشمل منتجات‎ MMT ‏تسبب الفقد الكلي لوظيفة‎ MMT ‏شعير يحمل طفرة في جين‎ ‏من النبات المستعمل لإنتاجها. لذلك؛ سوف‎ genomic DNA ‏على الأقل بعض‎ dale ‏النبات‎ ‏لكن أيضا تشمل خلاصات الشعير أو‎ cgenomic DNA ‏يحتوي ملت على كميات كبيرة من‎ ‏من الشعير أو ملت المذكور. أيضا فإن المشروبات‎ genomic DNA «Cys ‏ملت؛ مثل‎ ٠ ‏من النبات المذكور. بتحليل‎ genomic DNA ‏قد تشمل‎ gyal) Jia ‏المعتمدة على الشعير»؛‎ ‏في منتج نبات؛ يمكن تحقيق ما إذا كان النبات المحضر منه منتج النبات يحمل طفرة‎ DNA ‏يمكن أن تكون الطفرة المذكورة؛ مثلاء هي‎ MMT ‏تسبب الفقد الكلي لوظيفة‎ MMT ‏في جين‎ ‏وظيفي‎ MMT ‏الموصوفة هنا أعلاه في الجزء 'فقد إنزيم‎ MMT ‏أي من الطفرات في جين‎ ‏بأي طريقة مفيدة؛ مثلا‎ genomic DNA ‏وومل". يمكن تحليل‎ of functional MMT enzyme) ٠ ‏عند افترارض طفرة‎ PCR ‏متضمنة طرق تعتمد على‎ « pail) ‏الترتيب أو بطرق تعتمد على‎ ‏يمكن‎ SNP ‏فعندئذ يمكن استعمال تحليل تعدد شكلي؛ مثلا تحليل‎ (MMT ‏خاصة في جين‎ ‏إن الماهر يمكنه تكييف‎ .١7و‎ ١١ ‏إجراء ذلك التحليل حسب الوصف هنا لاحقا في المثالين‎ ‏بادئة‎ sale ‏الخاص الموصوف في هذه الأمثلة للاستخدام مع طفرات أخرى أو‎ SNP ‏تحليل‎ ‏أخرى.‎ ٠ ‏عندما تحضر فقط منتجات النبات المذكورة أعلاه من نباتات شعير تحمل طفرة في جين‎ ‏الغياب لأجل‎ Julie ‏الوجود‎ Load ‏فعندئذ يدل‎ MMT ‏تسبب الفقد الكامل لوظيفة‎ MMT ‏على ما إذا كان منتج النبات المذكور‎ MMT Protein ‏شعير و/أو‎ MMT mRNA ‏بروتين‎ ‏طبقا لذلك» يمكن إجراء اختبار لمنتج النبات بتحليل تبقع‎ MMT ‏محضرا من شعير ناقص‎ ‏أو‎ «Northern ‏أو بتحليل تبقع‎ «RT-PCR ‏آخرء أو بواسطة‎ Protein ‏أو تحليل‎ «western ٠ ‏أخرى. إن تلك التحليلات مفيدة تحديدا عندما يكون منتج النبات هو ملت.‎ mRNA ‏بتحليلات‎ ‎DMS 3 SMM
SMM ‏في منتج نبات بأي طريقة مناسبة. يمكن تحديد‎ DMS 5 SMM ‏يمكن تحديد كمية‎ ‏وظيفي‎ MMT ‏أساسيا حسب الوصف هنا أعلاه في الجزء 'تحضير نبات شعير مع فقد كلي‎ ‏يوصف فيه تحديد‎ Cua (Preparing barley plants with a total loss of functional MMT) ~~ Ye (OPA ‏باقترانه مع مركب»؛ مثل‎ SMM ‏في عينة شعير. لذلك؛ يمكن تحديد‎ SMM ‏مستويات‎
ب وتحديد الاستشعاع؛ ‎Sle‏ باستخدام نطاق 101.0. بالنسبة للقياس الكمي؛ يمكن تحديد منطقة الرسم الكروماتوجرافي المقابلة لذروة ‎SMM‏ ‏من أجل قياس أكثر دقة؛ يفضل تحديد كميات كل من ‎DMSP 5 DMS‏ (مثل ‎«(SMM‏ ‏المركب الأخير مقاس ‎DMS Jie‏ بعد التنشيط» باستخدام تحليل كروماتوجرافي غازي شعري © عالي الاضمحلال. يحدد 0148 الكلي في عينات ورت أو بيرة هنا بأنه المحصلة الكمية لمركب ‎DMS‏ الحر وأشكال مصدره الأولي؛ المسمى ‎DMSP‏ باستخدام هذا التحديد؛ يمكن تحديد كمية ‎DMSP‏ في عينة ورت أو بيرة على أنها الفرق بين ‎DMS‏ الكلي (مقاس في العينة ‎Aad)‏ يفضل في عينة مغلية عند شروط قلوية لمدة ساعة واحدة)؛ و0148 الحر (مقاس في العينة غير المغلية). يبين المثال 6 بالتفصيل الطرق المفضلة لقياس مستويات ‎DMS‏ الكلي ‎٠‏ والحر. تكوين طفري كيميائي لتوليد نباتات شعير تحمل طفرة في جين ‎MMT‏ تسبب الفقد الكلي لنشاط ‎MMT‏ طبقا للاختراع الحالي؛ يمكن تحضير عدد كبير جدا من طفرات الشعير بأي طريقة تكوين طفري مناسبة؛ على سبيل ‎JU‏ باستخدام تكوين طفري كيميائي للبابات الشعير- وهي طريقة ‎٠‏ معروفة بأنها تحث الطفرات عشوائيا. يمكن إجراء تكوين طفري للشعير باستخدام أي مادة كيميائية تكون طفرة. يفضل؛ على أية حال؛ أن يتم ذلك بمعالجة اللبابات مع ‎NaN;‏ (انظر شكل ‎o(V‏ وترك اللبابات الحية لكي تنبت؛ ثم يتم تحليل نباتات النسل. يحتوي جيل النبات ‎lil‏ من اللبابات الخاضعة للطفرة؛ المشار إليه ‎MO‏ على هجائن مغايرة ‎zygote‏ لأي طفرة محددة. إن نباتات النتاج المجمعة بعد التلقيح الذاتي يشار إليها الجيل (م١)؛‏ وتنفصل فيها ‎|٠٠‏ طفرة محددة إلى ‎zygotes‏ المغايرة و0165ع7< المتماثلة المقابلة. إن معالجة لبابات الشعير مع ‎NaN;‏ لا يساوي معالجة خلية شعير وحيدة؛ لأن اللبابات بعد المعالجة سوف تحتوي على بعض الخلايا غير الطفرية وتشكيلة من الخلايا التي بها طفرات ‎Cage .DNA‏ تفقد الطفرات في أنسال الخلية التي لا تنتج خط الجرثومة؛ بمعنى أن الهدف هو استهداف الجين الطفري للخلايا القليلة التي تنمو في أنسجة تناسلية؛ وذلك يساهم في نشوء ‎Ye‏ الجيل (م١).‏ لتحديد الكفاءة الكلية للطفرة» يمكن عد الهجائن المصابة بالمهاق والنباتات المصابة بالمهاق في الأجيال (م صفر) و(م١)؛‏ على الترتيب. إن تسجيل عدد الطفرة كوظيفة للنباتات
£9 الحية يعطي تقديرا لكفاءة الطفرة؛ بينما أن تسجيل عدد الطفرة كوظيفة للبذور المعالجة يوفر القياس المتحد لكل من كفاءة الطفرة وقتل اللبابة. يلاحظ أن الخلايا لها آليات ضمانة جودة عند كل خطوة فعليا من إظهار الجين؛ ربما لتخفيف حدة تأثيرات الطفرات المتلفة. إن المثال الذي تمت دراسته جيدا في سويات النواة هو © تحلل ‎mRNA‏ بواسطة- غير إحساس؛ المسمى ‎(NMD‏ الذي يمنع تكون ‎Proteins‏ خطيرة بدرجة قوية ومبتورة بصورة مبكرة ‎٠٠١١ «Carmichael 5 Magquat)‏ الم اع لك ‎.)٠٠١١‏ ‏في ‎(NMD‏ يتحدد ‎codon‏ إنهاء بأنه غير مكتمل بواسطة مكانه بالنسبة لعناصر التيار الهابط المزيلة للثبات. إن الطفرات التي تولد ‎codons‏ إنهاء (غير إحساس) غير مكتملة؛ المسماة ‎(PCTs‏ تزيد أحيانا مستويات النسخ المجدولة تبادليا التي تفلت من الطفرات المؤذية؛ وبذلك ‎٠‏ تؤمن بدرجة قوية وظيفة ‎Mendell) Protein‏ وعاعنط ‎.))٠٠١١(‏ ‏تناسل النيات إن نمو المحصول يمكن رؤيته كعملية طويلة تبداً مع إدخال سمة جديدة. من منظور مولد نبات؛ فإن هذه الخطوة غالبا ما تنتج نبات له نمط كلي من السمات الزراعية المطلوبة بدرجة أقل مما يحدث مع التشكيلات التجارية الحالية. في تجسيد مفضل للاختراع الحالي؛ فإن ‎١‏ الغرض طبقا لذلك هو توفير نباتات شعير مفيدة زراعيا تحمل طفرة في جين ‎MMT‏ تسبب الفقد الكلي لأجل إنزيم ‎MMT‏ الوظيفي. بالإضافة إلى سمة نقص ‎MMT‏ هناك عوامل أخرى يمكن اعتبارها أيضا في الفن لتوليد تشكيلة شعير ملتي تجارية؛ تتضمن؛ بدون تحديد إنتاجية اللبابة؛ مقاس ‎Ab‏ ومعايير تتعلق بأداء تكوين ملت أو أداء التخمر. لأن الكثير من- إن لم يكن كل- تلك السمات خاضعة ‎٠‏ للتحكم الوراثي» فإن الاختراع الحالي يوفر ‎Lad‏ أنواع شعير حديثة؛ متماثلة ‎zygotes‏ عالية الإنتاجية ‎Say‏ تحضيرها من تزاوجات مع نباتات الشعير ناقصة-301/71. إن لبابات نباتات الشعير تلك توفر مادة خام جديدة بدون إنزيم ‎MMT‏ وظيفي. إن مولد الشعير الماهر سيكون قادرا على إحداث تزاوج لنبات شعير ناقص ‎MMT‏ من الاختراع مع نباتات شعير أخرى» وبالتالي انتقاء وإنماء أجيال لها سمات تنتج أنواع فائقة. تعتبر تلك الأجيال جزءا من الاختراع ‎Yo‏ الحالي. بطريقة ‎edly‏ يمكن لمولد الشعير أن يستعمل نباتات الاختراع الحالي من أجل تكوين طفري إضافي لتوليد أنواع جديدة مشتقة من شعير ناقص ‎MMT‏
يمكن استعمال نباتات الشعير طبقا للاختراع الحالي في مجهودات التناسل طبقا لأي برنامج مناسب. إن غرضا ‎Hal‏ للاختراع الحالي هو توفير نباتات شعير ممتازة زراعيا تشمل سمة نقص ‎MMT‏ طبقا لذلك؛ يتعلق الاختراع الحالي أيضا بطرق لإنتاج نبات شعير جديد ناقص ‎MMT‏ ‏© بتزاوج نبات شعير أصلي أول مع نبات شعير أصلي ‎(ol‏ حيث يكون النبات الأول أو الثاني هو شعير ناقص ‎MMT‏ إضافياء يمتل كل من نبات الشعير الأصلي الأول والثاني نوع شعير ناقص 24211. ‎«iM‏ فإن أيا من الطرق التالية المستخدمة تشكيلة شعير ناقص-1011 هي جزء من الاختراع: الذاتية؛ التزاوج العكسي؛ التزاوج مع مجموعات؛ الخ. إن كل النباتات الناتجة باستخدام تشكيلة شعير ناقص ‎MMT‏ كجيل ‎«al‏ هي في نطاق هذا الاختراع» متضمنة تلك ‎٠‏ النباتات النامية من تشكيلات مشتقة من تشكيلة شعير ناقص ‎MMT‏ يمكن أيضا استخدام شعير ناقص ‎MMT‏ من أجل التحويل الجيني في تلك الحالات التي يتم فيها إدخال ‎DNA‏ ‏خارجي وإظهاره في نبات أو نسيج ناقص ‎MMT‏ ‎(Sa‏ استخدام طرق التزاوج العكسي؛ مع الاختراع الحالي لإدخال سمة ‎MMT- aii‏ لنبات شعر طفري في تشكيلة أخرى؛ مثلاء في نوع ‎al‏ » مثلا في ‎Sev.
Scarlett‏ ‎-cv.
Jersey | ٠‏ وكل منهما نوع شعير ملتي معاصر عالي الإنتاجية. في بروتوكول تزاوج عكسي قياسي؛ فإن التشكيلة الأصلية ذات الأهمية؛ أي؛ النبات الأصلي المتكرر موضع الأهمية؛ تتزاوج مع تشكيلة ثانية (أي نبات أصلي غير متكرر)؛ تحمل الجين الوحيد الهام المراد نقله. إن نباتات النسل الناتجة ناقصة-1447 من هذا التزاوج تتزاوج بعد ذلك مع النبات الأصلي المتكرر؛ وتكرر هذه العملية حتى الحصول على نبات شعير حيث يتم أساسيا استرجاع كل ‎Ye‏ السمات المميزة الخاصة بالنبات الأصلي المتكرر في النبات المتولد؛ بالإضافة إلى التشييد الجيني المنقول للسمة ناقصة ‎MMT‏ للنبات الأصلي غير المتكرر. في النهاية؛ فإن نبات التزاوج العكسي المتولد الأخير يتذوت ليعطي نباتات جيل متناسل نقي ناقص ‎MMT‏ ‏إن وجود نبات أصلي متكرر مناسب مفضل في إجراء التزاوج العكسي الناجح؛ يتضمن الهدف منه إدخال سمة نقص ‎MMT‏ في التشكيلة الأصلية. لتحقيق هذاء؛ يتم تعديل التشييد ‎YO‏ الجيني للتشكيلة المتكررة مع تلك للسمة ناقصة ‎MMT‏ من النبات الأصلي غير المتكررء بينما يتم أساسيا استبقاء كل الخواص الوراثية من التشكيلة الأصلية. برغم أن طرق التزاوج العكسي
‏سائد؛ فمن الممكن إجراء‎ allele ‏مبسطة عند تخصيص الصفة الوراثية المراد نقلها بواسطة‎ ‏متنحية.‎ MMT ‏تزاوج عكسي من أجل سمة ناقصة‎ ‏تشمل طريقة لتعجيل عملية تناسل النبات انقسام أولي لطفرات متولدة باستخدام مزرعة‎ ‏نسيج وتقنيات تجديد تولد. لذلك؛ يوفر جانب آخر من الاختراع الحالي خلاياء؛ والتي- عند‎
Salil) ‏على سبيل المثال؛ قد يشمل‎ MMT ‏النمو والتباين- تنتج نباتات شعير بها سمة نقص‎ © ‏خصب أو استخدام طرق زراعة بوغ صغير.‎ Hie ‏تزاوجات تقليدية؛ تحضير نباتات مشتقة من‎ ‏يوفر أيضا تجسيد للاختراع الحالي نباتات شعير لا تحمل فقط طفرة في الجين‎ ‏لكن أيضا واحدة أو أكثر من طفرةٍ (طفرات)‎ MMIT ‏تسبب الفقد الكلي لنشاط‎ MMT ‏المشفر‎ ‏إضافية مفيدة. تتضمن تلك الطفرات الإضافية؛ على سبيل المثال؛ طفرات في جين الشعير‎
LOX-1 ‏مثل طفرة تسبب وجود مستوى أقل من نشاط‎ clipoxygenase-1 (LOX-1) ‏المشفر‎ ٠
Douma, A.C. et ‏(مثلا الطفرة الموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية رقم 11369415 إلى‎ ‏أي من الطفرات المعلتة في براءة‎ Jie (LOX-1 ‏)؛ أو طفرة تسبب الفقد الكامل لوظيفة‎ ‏للطلب الدولي‎ PCT ‏أو طلب براءة اختراع‎ 1470٠06 ‏الاختراع الأمريكية رقم‎ genomic ‏بصفة خاصة طفرات تشمل ترتيب‎ (Breddam, K. et al. ‏إلى‎ ٠٠١١734 ‏أو تعريف الترتيب رقم: 1 من براءة‎ Y ‏للجين المشفر 1076-1 طبقا لتعريف الترتيب رقم:‎ ١
Breddam. K. etal ‏إلى‎ 16700٠06 ‏الاختراع الأمريكية رقم‎ ‏إن ملت ناقص-1.0721» حسب الوصف في براءات الاختراع وطلبات براءات الاختراع‎ ‏مادة خام لتجفيف آتون عند درجة حرارة منخفضة في عملية‎ atl ‏المذكورة أعلاه؛ يوفر»‎ ‏متحدة يمكن؛ على أية‎ MMT ‏تكوين ملت من الشعير. إن طفرة ثنائية ناقصة-1.076-1 وناقصة‎
MMT 5 LOX-1 ‏حالء؛ أن تكون فائقة ومفيدة للغاية في صناعة التخمر لأن كلا من نشاط‎ XY: ‏سيصبح خامدا. يمكن الحصول على نباتات الشعير تلك بتزاوج نباتات شعير طبقا للاختراع‎ ‏أو طلب براءة اختراع‎ 470٠06 ‏الحالي مع تلك الموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية رقم‎ .Breddam, K. etal ‏إلى‎ ٠٠١٠ /١897974 ‏للطلب الدولي‎ 1 ‏الأمثلة‎ ‏توضح الأمثلة هنا التجسيدات المفضلة للاختراع؛ ولا يجب اعتبارها مقيدة للاختراع.‎ Yo nucleic ‏إذا لم يحدد خلاف ذلك؛ تجرى التقنيات الحيوية الجزيئية الأساسية لمعالجة‎ .(Y++)) Russel s Sambrook ‏وبكتريا حسب الوصف في‎ «Proteins ‏5؛‎ oy ١ ‏المثال‎ ‏للبيرة‎ estery ‏يخفي المذاق‎ 5 ‏صعبا بصفة عامة؛ حتى بين متذوقي بيرة‎ ying sulfir ‏إن تمييز ملاحظة النكهة شبيهة‎ ‏بدلا من السمات‎ sulfury” ‏مذاق البيرة المصطلح العام‎ shod ‏خبراء عامين. غالبا يستخدم‎ ‏و"0115”- لتمييز‎ "hydrogen sulfide" «"mercaptan” ‏المتخصصة أكثر- مثالا‎ sulfury © .sulfury ‏السمة‎ ‏بعد تكوين مجموعة كبيرة من 9 متذوقين؛ يدرب الأعضاء بشدة في استشفاف رائحة‎ ‏تؤثر‎ sulfur ‏يثير الدهشة اتضح أن إضافة مكونات‎ Leas esulfur ‏المكونات التي تحتوي على‎ ‏بقوة على الإحساس بمكونات نكهة أخرى؛ وهي خاصية تؤدي إلى إعطاء درجات أقل من أجل‎ ‏وقوام البيرة.‎ estery ‏مثلا المذاق‎ ٠ ‏المشاركة. يقدم إلى‎ de gen) ‏لتدريب‎ DMS ‏في مجموعة تجارب أخرى. يتم اختيار‎ sulfur ‏المشاركين عينات بيرة؛ بها تركيزات عالية من المكونات المذكورة التي تحتوي على‎ "DMS" ‏و‎ <"estery” ¢'(body) ‏ويتم سؤالهم عن المذاق وتحديد درجة للسمات المميزة "القوام‎ ‏على نظام درجي من صفر (غير موجودة) إلى © (حدية). تتضمن كل سلسلة من الاختبارات‎ ‏بيرة قياسية متوافرة تجاريا وء للمشاركين؛ من عينات غير معلومة.‎ ٠ ester ‏يوضح الشكل ١(ب) نتائج متوسط الدرجات من سلسلة اختبار تشمل عينات بيرة بها‎ ‏عند الاتحاد مع‎ (DMS ‏على الترتيب. كانت النتيجة غير المتوقعة أن إضافة‎ cester/DMS ester ‏المحسوسة مقارنة مع تلك الناتجة عند إضافة‎ estery ‏تؤثر سلبيا على الدرجة‎ cester ‏تزيد درجة تلك‎ DMS ‏فقط. بالمثل؛ تقل سمة قوام البيرة. من غير المثير للدهشة؛ فإن إضافة‎ ‏الخاصية.‎ ٠ ‏توضح النتائج المذكورة أعلاه أن قدرة خبراء المذاق المتخصصين على تذوق مكون نكهة‎ ‏حسب التحديد‎ "(flavor background) ‏واحد يبدو أنها تعتمد بدرجة كبيرة على "أساس النكهة‎ ‏بواسطة مكونات نكهة أخرى.‎ ‏إن الاكتشاف المدهش من اختبارات المذاق؛ الملخصة في الشكل ١(ب)؛ يوفر أيضا‎ ‏وطفرات شعير مفيدة‎ (DMS ‏من‎ ALE ‏أساسا للاختراع الحالي بتوفير مشروبات بها مستويات‎ Ye ‏بحيث إن‎ SMM ‏لتحضير تلك المشروبات؛ أي؛ طفرات شعير ناقصة المقدرة على تكوين‎ oy ‏استعمال المادة الخام المقابلة في إنتاج المشروب لا تمكن فقط من توليد منتجات بها قدر أقل‎ estery ‏من أو ليس بها 01/45 لكن أيضا مع وعود في تحسينات من أجل الميزة‎
Y ‏المثال‎ ‎١ ‏إجراء الفحص»؛ الطريقة‎ cv. Sebastian scv. Prestige ‏تحضن لبابات مجموعة من نباتات شعير من‎ °
Kleinhofs et ‏باتباع التفاصيل التجريبية المتوافرة بواسطة‎ NaN; ‏على انفصال مع مولد الطفرة‎
DNA ‏تم اختيار هذا الإجراء نظرا لإمكانيته المعروفة بتضمن طفرات نقطة في‎ (VIVA) al. ‏للشعير.‎ genomic ‏في قطع أرض حقل من خلال جيلين‎ (Va) ‏في التجارب؛ تنمو حبات طفرية من الجيل‎ ‏لأغراض‎ (Ta) ‏من الجيل‎ zygote ‏متعاقبين؛ لتنتج في النهاية نسبة كبيرة من نباتات متماثلة‎ ٠ ‏على طفرات جين عند معدل‎ (Ya) ‏الفحص. من المتوقع أن تحتوي الحبوب الطفرية من الجيل‎ ‏لا يتم‎ (Y 2) ‏يلاحظ أن حبوب‎ ٠. ‏أعلاه)‎ «Kleinhofs et al.) ‏حبة‎ ٠٠٠٠١ ‏تكرار 9,٠-7,؟ لكل‎ ‏فحصها.‎ ‏إجراء فحص سريع عالي الدخل لتحديد حبوب شعير‎ Jal ‏يصف الاختراع‎ dad] ‏يمكن تحديده أثناء تكوين‎ SMM ‏توفر النتقص في تكوين‎ MMT ‏تفتقد نشاط‎ (Ya) ‏طفرية‎ ٠ ‏والورقة الأولية‎ coleoptile ‏يتراكم أساسيا في‎ SMM ‏ملت. لذلك؛ وجد المقدمون للطلب أن‎ ‏من نسيج ورقة‎ amino acids ‏يمكن أن يتم باستخلاص‎ SMM ‏للشعير النابت؛ وأن تحديد‎
OPA ‏المستخلصة مع‎ amino acids ‏مسحوق لحبوب نامية عمرها 4 أعوام؛ ويلي ذلك تفاعل‎ .)١ ‏لتكوين منتجات استشعاعية للغاية (انظر شكل‎ ‏من الناحية العملية؛ يجرى كل اختبار بإنبات- في صندوق لدن مغلق مع قطعة واحدة من‎ Ye ‏مم)- لحبتين من كل من 94 طفرة محتملة‎ ٠,1 X Y47) Whatman #1 ‏ورق ترشيح‎ ‏ونباتين من النوع البري. يكرر الاختبار لحبوب طفرية محتملة متعددة (انظر أدناه). عند بداية‎
Vo ‏ملليلتر من ماء صنبور إلى الصندوق اللدن المذكور؛ ثم يضاف‎ Yo ‏الإنبات» يضاف‎ ‏سم من أنسجة‎ 3-١ ‏ملليلتر من ماء صنبور عند يومين من الإنبات. بعد ؛ أيام إنبات؛ ينقل‎ ‏ملليلتر تحتوي‎ ٠,7 ‏تحتوي فيها كل من 97 عين سعة‎ ((ABgene) ‏ورقة إلى أطباق تخزين‎ Ye ‏على خرزة زجاجية قطرها © مم و0٠0٠ ميكرولتر من خليط 1:59:17 (حجم/ حجم/ حجم) من‎ ‏هرتز في‎ ١ ‏يرج الطبق عندئذ لمدة £0 ثانية عند تردد‎ chloroform methanol ‏ماء:‎ o¢ ‏عقب ذلك؛ ينقل الطبق إلى جهاز طرد مركزي‎ (Resch) ٠٠١ MM ‏مطحنة معملية‎ ‏دقيقة عند درجة حرارة‎ ١١ ‏ويدوم عند 5000 دورة في الدقيقة لمدة‎ «(Rotanta 460R, Hettich) ‏ميكرولتر من المادة الطافية إلى طبق تخزين‎ ٠١ ‏الغرفة لترسيب مادة غير قابلة للذوبان. ينقل‎ ‏ميكرولتر ماء و60‎ ٠٠١ ‏رقم كتالوج 4541 181007)؛ وتخلط مع‎ (Waters) ‏به 97 عين‎ ‏ميكرولتر محلول تفاعل يحتوي على خليط من 00 £01100 (حجم/ حجم) من عامل كاشف‎ © ‏رقم كتالوج‎ ¢Aldrich) 3-mercaptopropionic acid :(Y31V P ‏رقم كتالوج‎ «Sigma) OPA ‏دقائق على الأقل للحصول على اشتقاق‎ ٠١ ‏يحضن الخليط عند ؛*مئوية لمدة‎ (0A M ‏مجهز مع‎ Waters ‏معتمد على‎ UPLC ‏مع /07. باستخدام نظام‎ amino acids ‏كمي لعينة‎
X 3,١ C18 Gemini ‏محدد استشعاع؛ ينفصل ¥ ميكرولتر من الخليط المشتق على عمود‎ ‏رقم كتالرج 171-850 1 باستخدام‎ (Phenomenex) ‏مم من جسيمات ؟ ميكرومتر‎ ١ Ve ‏مللي جزيئي جرامي مثبت أس هيدروجيني‎ £0) A ‏فصل متدرج بخلط طور متحرك‎ ‏[محلول 05 11؟ (حجم: حجم: حجم) من‎ B ‏وطور متحرك‎ (V,A pH ‏عند‎ «(NaH,PO4 ‏تتم إثارة مشتقات‎ .]) ٠٠١76 Phenomenex) ‏لمصقطاع: ماء حسب الوصف‎ :acetonitrile ‏المنفصلة عند 560 ؟ نانومتر؛ بينما يقاس انبعاث الضوء عند £00 نانومتر. يبين شكل‎ OPA glutamic acid «aspartic acid (Asp) ‏مثال لرسم كروماتوجرافي يوضح نمط فصل‎ (hr Yo ‏إن المركب الأخير متضمن» لأن الغرض‎ -SMM js serine (Ser) «asparagine (Asn) «(Glu) ‏أي؛ نبات تكون ذروة‎ SMM ‏الشامل للمشروع هو تحديد نبات شعير ناقص القدرة على تكوين‎ ‏الرسم الكروماتوجرافي المقابلة الخاصة به صغيرة جدا أو يفضل غير موجودة.‎ ١ ‏إجراء الفحص» الطريقة‎ 7 في نفس الوقت مع التجارب الموصوفة أعلاه في المثال الحالي؛ أجريت محاولات لتحقيق طريقة فحص سريعة جدا لتحديد نبتات شعير ناقصة إنزيم ‎MMT‏ نشط. اعتمادا على حقيقة أن النبتات المذكورة يمكن أن تتمو في وجود ‎YOu‏ ميكروجزيئي جرامي ‎(Na-selenite‏ بشرط أن تحتوي النباتات على ‎MMT‏ نشط لتحويل ‎(Na-selenite‏ تصمم طريقة فحص للتسجيل الدرجي بصريا لنبتات مع نمو قليل في وجود تركيز 118-56160116 المذكور. من ev. ‏سنبلة- تحتوي كل منها على ١”7-<٠؟ لبابة- من شعير‎ 17١7604 ‏الناحية العملية؛ توضع‎ Yo ‏توضع في صواني لدنة مملوءة مع وسط نمو‎ (Ya) ‏الجيل‎ (NaN; ‏به طفرةٍ بواسطة‎ 6 ‏يسمح للبابات السنابل‎ .118-50160116 (aba ‏ميكروجزيئي‎ 15٠ ‏مدعم مع‎ Vermeculite ‏قياسي‎ so ‏نبات يتميز بنمو قليل؛‎ AVY ‏سم. ينقل إجمالي‎ ١١ ‏بالإنبات والنمو إلى نبتات طولها حوالي‎ ‏سم في الطول؛ إلى تربة حديثة التحضير وتترك لتنمو إضافيا. على أية‎ ١١ > ‏أي؛ نبتات‎ ‏حسب التحديد بالمقارنة مع‎ (JE MMT ‏لم يكن أي من النباتات المذكورة له نشاط‎ Js ‏طبقا لذلك؛ لم تنتج طريقة الفحص الموصوفة أعلاه طفرات؛‎ SMM ‏مستويات النوع البري من‎ ‏ولذلك يتم إنهاؤها.‎ ‏مثال ؟‎ ‏الطفرات الممكنة‎ cv. Prestige ‏من‎ NaNj-p—e ‏لبابة طفرية‎ YAOA 5 Ve YEA ‏تم فحص إجمالي‎ (YF ‏في المثال‎ ١ ‏(انظر الطريقة‎ SMM ‏.»©؛ على الترتيب» من أجل محتوى‎ Sebastian s ‏بهدف تحديد تلك القليلة للغاية في المحتوى المذكور عند المقارنة مع حبوب النوع البري. تم‎ ٠
AY ‏تحديدا حبوب من العينة رقم‎ (Yo) ‏من الطفرات الممكنة في الجيل‎ ١ ‏فقط تحديد‎ ‏وهو مسمى مستخدم‎ (AY ‏والمشار إليها هنا لاحقا بأنها طفرة‎ cv. Prestige ‏(المشتقة من‎ ov. ‏(مشتقة من‎ ٠5014 ‏أيضا لحبوب الأجيال التالية؛ الشكل “(ب))؛ وحبوب من العينة رقم‎ ‏المسمى المستخدم أيضا لحبوب للأجيال‎ 6) £0) A ‏والمسماة هنا لاحقا طفرة‎ Sebastian ‏الحبوب لكل طفرة إلى الجيل (م؛)؛ وعندئذ يتم‎ ati ‏التالية؛ موضحة في الشكل ؟(ب)).‎ Ne
VEYA ‏حصادهاء وفي النهاية يعاد تحليلها. تحدد النتيجة أن حبوب الطفرة 80167 والطفرة‎
SMM LK ‏وربما تفتقد‎ «SMM ‏بها محتويات قليلة للغاية من‎ ‏لتحديد أن الطفرة 8067 والطفرة‎ western ‏في تجربة منفصلة؛ يستخدم تحليل تبقع‎ ‏يتم إنبات حبوب الطفرات ونباتات النوع البري المقابلة في‎ MMT ‏ناقصة إنزيم‎ ١0 ‏حبة من كل عينة إلى أنبوب‎ J ‏الظلام لمدة ؛ أيام على ورق ترشيح منقوع في ماء.‎ ٠ ‏وتتجانس باستخدام مدقة (عضو التأنيث في‎ cele ‏ميكرولتر‎ YO ‏يحتوي على‎ 1 ‏ميكرولتر‎ Yo ‏دورة في الدقيقة؛ يخلط‎ ١٠٠١ ‏دقائق عند‎ ٠ ‏النبات). بعد طرد مركزي لمدة‎ ‏مركزة ؛‎ SDS ‏من الخلاصة السائلة مع © ميكرومتر من مثبت أس هيدروجيني قياسي لعينة‎ ‏وقاسم تام من نفس‎ OY ‏مرات. باستخدام نفس الطريقة المناعية حسب الوصف في المثال‎
Proteins ‏المذكور؛ تنفصل بالانتقال الكهربي‎ JU ‏المفصل في‎ MMT ‏الجسم المضاد‎ Yo ‏إن غياب‎ cwestern ‏خلاصات العينة للبابات النابتة سالفة الذكر بالمقاس وتخضع لتحليل تبقع‎ ‏ملحوظ للخلاصات المنفصلة‎ MMT ‏كيلو دالتون؛ المقابلة‎ VY + ‏مصبوغ‎ Protein ‏حزمة‎
بالمقاس للطفرة ‎ATF‏ والطفرة ‎VEYA‏ على أية حال؛ فإن حزمة ‎١7١ Protein‏ كيلو دالتون مرثئية بوضوح في الخلاصات من لبابات النوع البري النابتة (الشكل "(ج)). إن اتحاد نتائج تحليل ‎western‏ مع غياب ‎SMM‏ في خلاصات الطفرة ‎AY‏ والطفرة ‎OV EIA‏ لكن مع وجود ‎SMM‏ في خلاصات لبابات النوع البري (انظر الشكل ؟(ب))؛ يؤكد جوهريا أن الطفرة © 8057 والطفرة ‎١50178‏ يمثلان طفرات ناقصة بالنسبة لسمة ‎MMT‏ ‏المثال ‏ ‏قياسات نشاط ‎MMT‏ للطفرة ‎AY‏ ‏إن إنزيم ‎MMT‏ يحفز نقل مجموعة ‎methyl‏ من ‎SAM‏ إلى ‎Met‏ لتكوين ‎SMM‏ (انظر الشكل ١(ب)).‏ باستخدام ‎PHISAM‏ كمادة خاضعة؛ التي تكون فيها مجموعة ‎methyl‏ معلمة ‎٠‏ بواسطة ‎ctritium‏ يمكن مراقبة انتقال مجموعة ‎methyl‏ المذكورة بعد الوميض بعد إزالة الباقي من ‎PHISAM‏ بواسطة فحم نباتي نشط. إن المركب الأخير يربط المادة الخاضعة؛ لكن لا يربط منتج ‎SMM‏ المعلم جديد التكوين ‎٠ (Y440 Pimenta et al.)‏ يسمح هذا بتحديد أنشطة 71 ومحتويات ‎(SMM‏ وتتحدد الأخيرة حسب الوصف في المثال "؛ في خلاصات ‎١١‏ ‏برعم من كل من الطفرة 8017 ‎ov.
Prestige s‏ (شكل ¢( ‎aay.‏ فحص البيانات أن ‎MMT‏ ‎Ne‏ يحفز تكوين ‎SMM‏ في لبابات النوع البري؛ وهي خاصية غائبة في حبوب الطفرة ‎AY‏ ‏مثال ه تكوين ملت وتخمر على نطاق إرشادي للبابات ناقصة ‎MMT‏ للطفرة 8017 إن تحليلات تكوين ملت وتخمر مع ملت للطفرة 8017 وملت مرجعي من ‎cv.
Power‏ تشمل الخطوات التالية: ‎)١( ve‏ إنبات؛ متضمن ‎cali‏ لتوليد ملت أخضر؛ يليه أحيانا تجفيف آتون للحصول على ملت مجفف في أتون؛ (7) تحضير ورت؛ ‎(V)‏ فصل ورت؛ )4( غلي ورت؛ ‎Yoo‏ )©( تخمر ورت مع الخميرة ‎¢Saccharomyces carlsbergensis‏ )1( زيادة حجم البيرة؛ ‎(V)‏ ترشيح بيرة صافية؛ و
لاه ‎(A)‏ تعبئة ‎all‏ في زجاجات. بالنسبة لكل من الطفرة 4077 ‎ov.
Powers‏ (عينة مرجعية)؛ يستخدم ‎Te‏ كجم ملت للتغمر. تطحن عينات ملت؛ ويضاف ماء صنبور عندئذ إلى ‎١٠١‏ لتر لكل عينة. يجرى تكوين هريس عند ١٠"مئوية‏ لمدة ‎Ye‏ دقيقة؛ ثم تزداد خلال © دقائق إلى ©1“مئوية؛ وعند © درجة الحرارة تلك تستمر الحضانة لمدة 00 دقيقة. يخضع الهريس عندئذ لزيادة في درجة الحرارة لمدة ‎Vo‏ دقيقة إلى 78"مئوية؛ ويتم تكوين الهريس بعد حضانة لمدة © دقائق. تتضمن عمليات تخمر تالية ترشيح ورت» خطوة غليان مدتها ساعة واحدة؛ وفصل في دوامة. يتم التخمر لمدة 7 أيام؛ زيادة حجم وتعبثة للبيرة النهائية في زجاجات من الزجاج الأخضر طبقا لمواصفات الممارسة العملية القياسية للتخمر؛ على سبيل المثال حسب الوصف ‎٠‏ بواسطة ‎.)١987( Hough et aly «()9AY) Briggs et al.‏ إجمالياء تحضر ‎ala) ٠٠١‏ سعة ؟؟ لتر مكعب مع بيرة مشتقة من ملت نوع بري وملت طفري. مثال 1 مستويات ‎DMSP 3 DMS‏ في بيرة مصنعة من ملت ناقص ‎MMT‏ ‏تتخمر البيرة من ملت ناقص ‎ov.
Powers MMT‏ حسب الوصف في المثال 0 أثناء ‎٠‏ عمليات تكوين ملت والتخمر؛ تتحدد مستويات ‎DMS‏ و ‎DMSP‏ الحرة في ملت أخضر ومجفف في آتون (الشكل #())؛ بالإضافة إلى في ورت المحلى والمغلي المقابل» وأيضا في البيرة النهائية (الشكل *(ب)). تتحدد مستويات ‎DMSP § DMS‏ أساسيا حسب الوصف بواسطة ‎¢(Y4A +) Hysert et al.‏ مع تحديد خاص بواسطة ‎sulfur‏ باستخدام تحليل كروماتوجرافي غازي ساكن مع حيز قمي ‎Ye‏ على ‎.350B Sulfur Chemiluminescence Detector (Sievers)‏ يتم أخذ العينات باستخدام جهاز أوتوماتي ‎(HS-40 Automated Headspace Sampler, Perkin Elmer)‏ إن المستويات الكلية من ‎«gl (DMS‏ محصلة ‎DMS‏ و ‎DMSP‏ الحر في ورت وخلاصات ملت الأخضر والجاف؛ يتم الحصول عليها بغلي العينات المقابلة تحت شروط قلوية لمدة ساعة واحدة. تخضع العينات عندئذ لتحليل حيز قمي لتحديد مستويات ‎DMS‏ حسب الوصف مسبقا ‎Ob‏ ‎Ye‏ الفرق بين مستويات ‎DMS‏ الكلية في العينات المغلية؛ و0115 الحر في العينات غير المغلية المقابلة محدد بأنه يساوي كمية ‎DMSP‏ في العينة. تتحدد نوعية ‎DMS‏ الحر في البيرة أساسيا مثل تلك لأجل ورت ‎Hysert etal.)‏ أعلاه).
oA 7 ‏المثال‎ ‎MMT ‏اختبار بيرة متخمرة مع ملت ناقص‎ ‏تقييم خبراء تذوق بيرة محترفين بيرة ناتجة على نطاق إرشادي متخمرة‎ AAS ‏بغرض تحقيق‎ ‏جزء‎ DMS ‏مقاسة بأنها تحتوي على ؛‎ syn ‏يجرى تذوق نمط على‎ MMT ‏مع ملت ناقص‎ ‏جزء على البليون» والبيرة المذكورة‎ DMS VT ‏على البليون. كمرجع تستخدم بيرة عادية بها‎ 0 .cv.
Power ‏ناتجة من استخدام ملت من‎ ‏العليا بتحليل‎ alcohols s ‏البيرة‎ esters ‏قبل تحليل المذاق؛ يتم الحصول على أنماط‎ ‏مركب‎ VY ‏بها مستويات أقل في ؟ من‎ MMT ‏كروماتوجرافي غازي. إن بيرة ملت ناقص‎ cethyl acetate ‏تتكون من‎ -١ ‏ترش خلطة‎ ٠ ‏في اختبار التذوق الأول‎ .)١ ‏محلل (جدول‎ ‏لتأكيد أن‎ (MMT ‏في البيرة المتخمرة مع ملت ناقص‎ -ethyl octanoate s <isoamyl acetate ٠ ‏إن البيرتين الكبيرتين بهما مستويات متشابهة من تلك المركبات النشطة بالنسبة للنكهة التي‎ ‏إن غرض الاختبار الثاني هو بيرة بها محتوى‎ .)١ ‏القياسي (انظر جدول‎ ester ‏تساهم في نمط‎ ‏التي تتكون من‎ =F ‏مع سمات نكهة زائدة. لذلك؛ ترش الخلطة‎ pS ester ‏(جدول‎ cv.
Power ‏في بيرة ملت‎ -ethyl octanoate 5 cethyl hexanote ¢isoamyl acetate ‏والخلطة ؟.‎ ١ ‏مع كل من الخلطة‎ MMT ‏بينما ترش البيرة من ملت ناقص‎ )١ ١ ‏تختبر عندئذ البيرة الموصوفة أعلاه بواسطة مجموعة متذوقين للبيرة مدربين بدرجة كبيرة‎ ‏سمة خاصة للبيرة- كل منها على مقياس؛ أو نطاق درجي؛‎ ٠١ ‏يقدمون بتقييم‎ ٠١ ‏وعددهم‎ ‎.)1 ‏من صفر إلى © (شكل‎ ‏هناك تأثير ملحوظ‎ cester ‏كما هو مبين بالتفصيل في الشكل ١لأ) بالنسبة للبيرة عالية‎ ‏على الإحساس بالنكهات -الأروماتية العطرية في "البيرة القليلة جدا في 0148 المتخمرة على‎ Yo - ‏مقارنة ببيرة قياسية بها نفس المستوى. تسجل درجات أعلى لكل النكهات‎ MMT ‏ملت ناقص‎ ester ‏التي بها نمط‎ (MMT ‏الأروماتية العطرية المختبرة. حتى في البيرة من ملت الناقص‎ ‏(شكل 1(ب))؛ يسجل إحساس زائد بالنكهات - الأروماتية العطرية؛ مرة ثانية يظهر ذلك‎ gale ‏يوفر تأثيرا إيجابيا بالنسبة للإحساس بمركبات البيرة الأروماتية.‎ DMS ‏أن المستوى القليل من‎ ‏إن تفسير تلك الظاهرة هو ببساطة أن 0148 في البيرة يخفي مذاق النكهات - الأروماتية‎ Yeo ‏عوامل هامة عند اختبار درجة الإنعاش بالنسبة للمشروب.‎ Ji ‏العطرية المبهجة؛ التي‎ ‏في البيرة‎ alcohol 5 ester ‏تحليلات‎ :١ ‏جدول‎ oq ws
Cl eee
Te [eee
Ca [ow ee
Ce nee |e
Cee ee ee [ee
Ce ‏ا‎ |e
Cae [| ve | eee
Te [en [eC
Te [ee
Cer ee ‏اال‎ eee .isoamy] acetate 5 2-methyl-butyl acetate ‏محصلة تركيزات‎ * .isoamyl alcohol 5 2-methyl-1-butanol ‏محصلة تركيزات‎ **
A ‏المثال‎ ‎cv. Prestige ‏في شعير‎ MMT ‏تحديد ترتيب الجين المشفر‎ ‏بين نباتات شعير‎ MMT ‏المسبب للاختلاف في نشاط‎ genomic ‏بهدف تحقيق التباين‎ ° codons 4lsh ‏الذي يشمل‎ DNA ‏النوع البري والطفرية؛ فإن المجهود الأولي هو لتحديد ترتيب‎ ‏غير المعلوم مسبقا لجين‎ genomic ‏البداية والإيقاف لجين الشعير المقابل. لتحقيق ترتيب‎ ‏من أوراق نبتات شعير‎ (DNA) genomic DNA ‏شعير» فإن الخطوة الأولى هي تنقية‎ 71 ‏باتباع الإرشادات المتوافرة من مورد‎ cov. Prestige call 1 ‏عمرها‎ ‎The Plant DNA Isolation Kit (Roche, cat.no. 1667319). Ye
Te
MMT ‏المشفر‎ cDNA ‏مع ترتيب‎ Jali oligonucleotide ‏بعد ذلك؛ تصمم مواد أولية‎ ‏شعير‎ DNA ‏باستخدام‎ .)١ ‏815028870؛ تعريف الترتيب رقم:‎ :GenBank ‏(رقم الوصول في‎ ‏أولية مختلفة؛ المذكورة‎ sale ‏قياسية مع +7 مجموعات‎ PCR ‏كجزيء تركيبي؛ تجرى تكبيرات‎ ‏لها في الجدول 7. في شكل أزواج؛ اتضح أن المواد الأولية تكون مقساة في‎ DNA ‏ترتيبات‎ ‎exons ‏وى‎ ١ exons ‏بداية الترجمة) روت‎ codon ‏(متضمنة وفي التيار الهابط من‎ ١ exons © ‏(متضمنة وفي التيار الصاعد من‎ ١7و‎ ١١ exonss ١١و‎ 9 exons «5 © exons «© ¢ ‏تشمل بطولها‎ DNA ‏إيقاف الترجمة). يولد © من الستة تفاعلات سالفة الذكر قطع‎ 0 ‏(انظر شكل‎ ١-١١ exons 11-4 exons «1-9 exons ‏دح‎ exons ‏7ح‎ exons
Y exons ‏بداية الترجمة‎ codon ‏تشمل بطولها‎ DNA ‏قطعة‎ alg ‏يفترض أن هناك تفاعل‎ .)4 ‏وشكل 1)؛ لكن‎ ١ ‏كما هو مذكور في الجدول‎ ١ ‏(أي؛ التفاعل مع مجموعة المادة الأولية رقم‎ ٠ ‏فإن‎ chase ‏تلاحظ فقط عيوب صناعية في التفاعل. برغم أن سبب هذه الصعوبة لا يزال‎ ‏المحتوى الكبير بدرجة ملحوظة من قواعد 6 و© في قطعة الجين الهامة قد يكون هو السبب‎
PCR ‏في فشل التكبير الصحيح للترتيب. نتيجة لذلك؛ تستعمل مواد مدعمة عديدة لتفاعل‎ .0-0 ‏متوافرة تجاريا- محددة لتسهيل تكبير مناطق جين غنية مع‎ codon ‏في التيار الهابط منء لكنها لا تزال تحتوي؛ على‎ DNA ‏في محاولات لتكبير قطعة‎ yo ‏على الرغم من المحاولات الكثيرة؛ فإن كل المجهودات‎ MMT ‏البداية لجين الشعير المشفر‎ ‏قد فشلت بالنسبة لتكبير القطعة المحددة بالمواد الأولية في‎ gDNA ‏التي تستعمل جزيء تركيبي‎ .7 ‏كما هو مذكور في جدول‎ ١ ‏التفاعل‎ ‎RNA ‏المشتق من‎ cDNA ‏إلى جانب تجارب تكبير 0178ع» تمت أيضا دراسة إذا كان‎ ‏المزعج للجين من‎ exon ‏_من أوراق نبتة شعير يشكل جزيء تركيبي وظيفي لتكبير ترتيب‎ ٠ ‏كلي وينقى من وريقات نبتات شعير عمرها ؛ أيام؛‎ RNA ‏أجل 7. طبقا لذلك؛ يستخلص‎ ‏باستعمال المكون والإرشادات من‎ cov. Prestige
The FastRNA ProGreen Kit (Q-BlOgene, cat.no. 6045-050). ‏اتحادات أزواج‎ A ‏[أي»‎ ¥ X A ‏قياسية‎ RT-PCR ‏تستخدم قواسم تامة من ذلك في تفاعلات‎ ‏حسب التفصيل‎ [oli] ‏مع كل منها 7 من مثبتات أس هيدروجيني‎ oF ‏_مادة أولية (جدول‎ ٠ ‏تنفصل أجزاء‎ .OneStep RT-PCR kit (Qiagen, cat.no. 210212) ‏في الإرشادات من أجل‎ ‏؛ ويكشف تحليل تالي عن أن منتجات التفاعل يمكن فقط الحصول‎ ZY agarose ‏على هلامات‎
عليها باستخدام مثبت الأس الهيدروجيني ‎١‏ من المجموعة المذكورة. تتم عندئذ تنقية حزم ‎DNA‏ الهامة باستخدام مجموعة استخلاص هلام ‎Qiagen) Qiaexll‏ رقم كتالوج )0+ ‎(Y+‏ ‏تجرى تكبيرات ‎RT-PCR‏ منفصلة مع مجموعة المادة الأولية رقم ‎٠١ oY‏ و١١‏ (انظر جدول ")؛ في وجود محلول-0 من المجموعة ‎RT-PCR‏ سالفة الذكر. إن أجزاء ‎DNA‏ الهامة تكون © أيضا نقية في هذه الحالة. عقب إدخال أجزاء ‎DNA‏ المنفردة في الناقل ‎pCR2.1-TOPO‏ ‎«(Invitrogen, cat.no.
K4500-01)‏ واستقبال حامل الجين من العائل في خلايا ‎coli‏ .1 مع البنية؛ تتحدد ترتيبات ‎DNA‏ المقابلة لإدخالات ‎plasmid‏
بصورة مجمعة؛ فإن المجهودات المتحدة الموصوفة أعلاه تتبلور في تجميع ترتيب ‎genomic‏ يشمل بطوله 5 بداية وايقاف الترجمة لجين ‎MMT‏ شعير من ‎cv.
Prestige‏ ‎٠‏ (تعريف الترتيب رقم: ؟). من خلال اصطفاف ترتيب ‎cDNA‏ وترتيبات ‎«genomic‏ أي؛ اصطفاف تعريف الترتيب رقم: ؟ مع تعريف الترتيب رقم: ٠؛‏ تحدد أن جين الشعير من أجل ‎MMT‏ حسب التوضيح في شكل 9؛ يتضمن ‎exons ١١‏ (إجماليا 7777 ‎(bp‏ يفصلها ‎١١‏ ‎introns‏ (إجماليا 7197 (ط). إن ترتيب ‎amino acid‏ المشتق من أجل ‎MMT‏ من ‎cv.‏ ‏86 مبين في شكل ‎٠0‏ ومذكور كتعريف الترتيب ‎tad)‏ 6. باستثناء ‎Prol57—Ala‏ ‎Met985—>Tyry ٠‏ في ترتيب ‎amino acid‏ المشتق سالف الذكر من أجل ‎ov.
Oe MMT‏ ‎(Prestige‏ تكشف مقارنة مع ذلك من ‎GenBank accession no. ) cv.
Haruna Nijo‏
70 تعريف الترتيب رقم: ؟) عن تمائل كامل (شكل ‎.)١١‏
— + ‏ب‎ ‎4 137 ‏م <ا‎ 3 PR = - 3 3, J © ‏ل‎ ‎2 | + 2 9 = Z 7) 33 + 0 — . 3 9 . ov — < < = 0 3 a o 38 |] ~ |Z |Z |v |Z 5 2 Je I» ‏و‎ > >» wl It 5 135 = ‏ا ا 1 ا ا‎ 1 5 7 2 > = = 3 > a 5 Sole ‏“ا‎ os ‏#ا‎ {2
S| + 3 5 TIE TE ‏الاب‎ 5 ‏ال‎ TI ‏ود وح‎ TIE ‏ا 3 ا ب‎ 12 333 4 ‏ف‎ Oo ‏و ]309 ا د 5 د 4 ل‎
ENE EE EE CEE RR
> ‏ل‎ Q 1: ‏قا كا ا‎ lo 5 5 2 | 3 3 Js LIB 5 ‏واه اه‎ 2 oP 11 Brisa tira ‏ال‎ 162286542835 3 ‏ب 5 2 دان نان حي‎ : O < 7 = O 0 3 ٍ TR 3 - 52 ‏يق‎ 37 ‏ص‎ l ® = 9 = = © 1 + 2 ‏ل‎ > 5 < 3 ١ QO Q < Oo = +], < S > Bg < 1 2 = O a < ‏لاب‎ ‎: ٍ
TO SO TE > < = O ‏يخ‎ ‎181 3 898 0
SCE ECECECHE
2 E3E3035 35363 ' og FE Jo FS |= S 0
J 24343-40483434
SLE »)© ‏اه‎ rl <0 > 4 ‏ار ار كد دا د‎ 5 ‏وان نان ذال بيات‎ < 9 oO < Q
TERE EEE
1 3 3 8 8 © 3
Bg = 9 E 2
O
٠ - 8 8 8 3. E ١ 9 2 Bg ‏ا‎ FG { ‏ب‎ QO 5
Ja =| > << a” =o = > 3 33 fo 4 2 3 ‏و3‎ ‎>33 ‏حي‎ ‎17 ‎3338711] DDE IE 3 alge (2 ‏ضما‎ 2 |e ‏ا !ا‎
SFE SL i 2a 39 23 oO alo ‏واج‎ glo ‏واج واج‎ go TG 333 33333333353 375 0 ‏0د‎ 0 ١ ‏ل‎ 5 29 29 359 592 9 all: 43433 0 8 slg 2348334338 ‏جاه جه وله وه وه قا ى ا‎ 1212 Brg 88808008 7 : a ‏قا هه ق .ةوق‎ ol ‏ره‎ 0 |Q oa |L ‏م‎ ‎J | +7 ‏ان ان اي‎ To Te ‏زات‎ To ‏ب‎ ‎I J Q Q Q Q Q Q Q
J O 0 3 O 3 3 O ِ * 2 5 9 8 8 38 ©
Ly BEE EEE EE 2 + 0 0 O 0 0 S 5 0 < O 3 30 0 0 = 0 = 12 BE 3 3 EIB ‏مخ‎ ‎2 < < < < < OS Oo z ‏ىه تاه يا ب‎ go >30 To Te Te
AEE CE EEE EEE
12g; 33333333 : 3 ‏اب — — — _ = :© السب‎ — 250222825 RE 30 RE 3
J 313151319516131 — 5 9 43 43 48 45 Ag + 4 SLB ISB ‏ا -ه © - 0 ا.‎
O20 ‏رده ا كا ات 00 كره‎
OQ O 3 3 O OQ 3 2 2 RB BB kB EB B® 8B
EE lo lo ‏ب ا‎ ] Oo O O O O O O 0 5 3 v = he 0
7 * * + ‏فط‎ ‎TR 3 2 3 3 ‏ن‎ _ 4 3 ‏حََ‎ 4 + 4 ‏سي‎ 2 0 = ‏إ‎ 2 : : 307 1 4 3 = 2 3 ‏د‎ ‎23 83 © 11 =| 2
S30
Oo 0 3 “ly, sR 3
Or | 4 ‏د‎ 4
SL = 3, 3 = MN = w ‏م = نا‎ ‏ص‎ 10 TOA. 7 3 7 ‏م10‎ ‎35 3 & 5 37 ‏م‎ ‎ta ‎Oo ‎2 3
S
2 oq o
Be ‏في‎ ‎© ‏يرا‎ ‎Oo ~~
O
3 3 = 0 3 7 3 3 ‏ب‎ ‏ب‎ ‎Q
مثال 9 التغير الطفري للجين الذي يشفر ‎MMT‏ لطفرة 80717 الشعير في موقع الجديلة 0 من ‎intron‏ © إن محتوى ‎SMM‏ في البذور الصغيرة للشعير من طفرة 8017 منخفض جدا أو منعدم © (مثال 7)؛ مع غياب نشاط ‎MMT‏ (مثال ؛). على أساس هذه النتيجة؛ لقد جرى التحري عن سواء إذا حدثت استبدالات القاعدة في جين يشفر ‎MMT‏ بواسطة معالجة ‎alge‏ طفري ‎NaN;‏ ‏الأصلي للبابات الشعير. كنتيجة لهذا هناك محاولات لتكبير؛ استنساخ وترتيب الجين المذكور لطفرة 8057 لتأسيس القاعدة الجزيئية من أجل نوع شكلي معدوم ‎MMT‏ ‏بعد التكبير بواسطة 1 مجموعات مادة ‎Als‏ فإن ترتيب ‎nucleotide‏ للجين ‎٠‏ من النوع البري لأجل 1 من ‎cv.
Prestige‏ (جدول ؟؛ مفصل في مثال ‎(A‏ ‏بطريقة ‎Ailes‏ تتم مراقبته من أجل طفرة الشعير ‎JAY‏ بإيجازء يستخلص ‎genomic DNA‏ من الطفرة؛ ويتم إقحام أجزاء تم تكبيرها وهي تخص جين ‎MMT‏ من ذلك في الناقل ‎PCR2.1-‏ ‎«TOPO (Invitrogen, cat.no.
K4500-01)‏ وتستنسخ؛ يحدد ترتيبهاء تتصل (تعريف الترتيب رقم: 4)؛ وتقارن في النهاية بتلك التي تخص الشعير من النوع البري. لا تحدد أي طفرة في ‎VO‏ جزءٍ تشفير ‎protein‏ من جين ‎MMT‏ على أية ‎(Ja‏ إن مقارنة ترتيبات ‎intron‏ للطفرة والجينات من النوع البري تظهر انتقال قاعدة ‎GA‏ عند القاعدة الأولى من ‎o intron‏ ‎nucleotide)‏ رقم 096 من تعريف الترتيب رقم: ‎(A‏ إن القاعدة المذكورة هي جزء من موقع جديلة © من ‎intron‏ 5؛ حيث تؤثر في ‎RNA dallas‏ الأولي للجين؛ أي وصل بالجدل ‎Mettler 5 Sinibaldi) RNA‏ 1947؛ انظر أيضا شكل ‎(VY‏ ‏7 لتقييم الأدوار الممكنة للطفرة القاعدية فيما يخص باضطراب الموصل بجدل الجين الطبيعي في الجين الذي يشفر ‎MMT‏ لطفرة ‎A+ TY‏ يجرى تحليل مفصل على ‎RNA‏ المشتق من الطفرة للكشف عن المركبات الوسطية للوصل بالجدل. تختار هذه الطريقة لأن التبديلات في '5 ‎GT dinucleotide‏ من ‎introns‏ قد يؤدي إلى تراكم المركبات الوسطية للوصل بالجدل ) ‎Lai et‏ ‎al‏ 1999( ‎Yo‏ لتكبير الأجزاء ذات الأهمية؛ فإن التحليل يتبع التوصيات المتوافرة لاستخدام مجموعة ‎RT-‏ ‎.(OneStep RT-PCR from Qiagen, catno. 210212) PCR‏ عند استخدام الجزيء التركيبي؛ ينقى ‎١‏ ميكروجرام من ‎RNA‏ إجمالي من وريقات بذور صغيرة عمرها ؛ أيام من
+13
‎cv.
Prestige‏ والطفرة ‎(ArT‏ كما هو موصوف في مثال 8. باستخدام مجموعة المادة الأولية ‎٠‏ (جدول 4)؛ ‎bea‏ تفاعل ‎RT-PCR‏ لتكبير منطقة الجين التي تمتد فوق ‎V exons ¥ exon‏ في نسخ ‎MMT‏ لأجل ‎Prestige‏ نوع بري والطفرة 8057 ‎JS)‏ ١١(أ)).‏ بعد التكبير؛ تتحل
‏منتجات التفاعل بواسطة الارتحال الكهربي على هلام ‎7١ agarose‏ (الشكل "(ب)). ° إن فحص المنتجات المكبرة يظهر شريط فردي فقط من التفاعل مع ‎RNA‏ نوع بري (الشكل ؟(ب)). ستأمسل هذا من الهلام؛ وينقى باستخدام مكونات مجموعة ‎Qiaexll‏ ‎١ catno. «Qiagen)‏ #١٠٠)؛‏ ويتم إقحامه في الناقل ‎(Invitrogen, ~~ pCR2.1-TOPO‏ ‎cat.no.
K4500-01)‏ يستنسخ ويحدد ترتيبه. إن التحليلات توضح وجود جزء ‎bp —AAY‏ (المنتج ‎١‏ في الشكل ١١(ب)؛‏ تعريف الترتيب رقم: 9)؛ مميز بترتيب مماثل لقواعد الامتداد
‎٠‏ 777-447 من ‎cDNA‏ كامل الطول لأجل ‎MMT‏ الشعير نوع بري (تعريف الترتيب رقم: ؛). اعتمادا على هذه النتيجة؛ يعبر الوصل بالجدل عملية غير متعلقة بإظهار جين من نوع بري.
‏إن تفاعل ‎RT-PCR‏ المماثل للموصوف في الفقرة السابقة؛ ‎Lad‏ عدا تطبيق الجزيء التركيبي المنقى ‎RNA‏ من الطفرة 60757 يولد ¥ أجزاء ‎DNA‏ خاصة- يشار إليهم بالمنتج
‎١‏ المنتج ‎oF‏ المنتج ؛ في الشكل ١١(ب)-‏ يختلف كل منهم في الطول من المنتج ‎١‏ المكبر باستخدام ‎RNA‏ نوع بري (الشكل ١١(ب)).‏ تبعا لهذاء تتم عرقلة معالجة ‎mRNA‏ الأولي بواسطة طفرة قاعدة فردية في موقع الجديلة ©" من ‎intron‏ © في جين ‎MMT‏ من الطفرة ‎ATT‏ إن سير التفاعل هذا يبطل تماما استخدام موقع الجديلة 70 لكنه ينشط استخدام مواقع الجديلة الإضافية الشفرية.
‎٠‏ كمحاولة لمواجهة المسبب الجزيئي الكامن للحصول على ؟ أجزاء ‎PCR‏ المذكورة أعلاه في الطفرات ‎ATT‏ يحضر كل جزءٍ لتحديد ترتيب ‎DNA‏ باستخدام الإجراء كالموصوف أعلاه في المثال ‎A‏ لأجل شرائط ‎DNA‏ المشتقة من ‎PCR‏ من ‎Prestige‏ .»0. يبلغ طول أكبر جزء ‎bp ٠٠١‏ (المنتج ‎Y‏ في الشكل ١١(ج)؛‏ تعريف الترتيب رقم: ١٠)؛‏ ووجد أنه يتضمن كل ‎intron‏ ©« بينما المنتج ؟ (الشكل ١١(ج)؛‏ تعريف الترتيب رقم: ‎(VY‏ والمنتج ؛ (الشكل ‎VY‏
‎YO‏ (ج)؛ تعريف الترتيب رقم: ‎(VE‏ يبلغ طوله 505 برط ‎bp AY‏ على الترتيب؛ ولهذا يكونان أقصر من الجزء ‎bp —AAY‏ من ‎RNA‏ نوع بري (قارن الوصف أعلاه). إن تحليل ترتيب av ‏بينما تحليل المنتج ؛ يظهر في‎ <0 intron ‏للمنتج ؟ يظهر موقع جديلة شفري في وسط‎ DNA ‏(د)).‎ ١ ‏(الشكل‎ © exon ‏إيقاف ترجمة ناضجة‎ codons ‏هو اكتشاف‎ DNA ‏من النتائج الهامة أيضا لتحليلات ترتيب‎ ‏عند الموضع 2090-7088 طبقا لترقيم القاعدة الذي يخص‎ TGA] 7 ‏قبل الأوان في المنتج‎ ‏عند‎ TGA] ‏(تعريف الترتيب رقم: 7)]؛ منتج ؟‎ ©». Prestige ‏الشعير؛‎ genomic DNA © cv. ‏من الشعير»‎ genomic DNA ‏الموضع 7090-7088 طبقا لترقيم القاعدة الذي يخص‎ ‏عند الموضع 91-77489؟؟ طبقا‎ TGA] ‏(تعريف الترتيب رقم: ١)]؛ والمنتج ؛‎ 86 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ cv. Prestige ‏من الشعير؛‎ genomic DNA ‏لترقيم القاعدة الذي يخص‎ ‏على الترتيب. إن‎ camino acid ‏و7185‎ 71١ ‏مترجمة طولهاة1‎ proteins ‏)أ مما ينتج‎ ‏المنتج‎ oY ‏المنتج‎ ١ ‏(ج) يوفر مقارنة بيانية وملخص عن نتائج تحديد ترتيب المنتج‎ ٠١١ ‏الشكل‎ ٠ ‏توفر بيانات خاصة عن‎ (A) ‏(د) والشكل‎ ١7 ‏التوضيحات في الشكل‎ Lay of ‏؟ والمنتج‎ ‏القواعد الخاصة الداخلة في أحداث الوصل بالجدل البديل.‎ ‏الشعير‎ MMT ‏جدول ؛: المواد الأولية للكشف عن الوصل بالجدل البديل للجين الذي يشفر‎ ‏المادة الأولية المعكوسة‎ ١ ‏رقم نهايات منتج | المادة الأولية المتقدمة (ترتيب‎
Te To ‏(ترتيب‎ *#(DNA '¥ « "© RT-PCR | ‏مجموعة‎ ‎*++(DNA ‏المادة‎ ‏الأولية‎ ‎AAATCCAGCAACAAGATTC | GTTTATGGTCTGGATATAAACC | ‏يسبب‎ +١ ‏(تعريف الترتيب‎ CGGAAA ٍِ CAAG ee ‏مسيم‎ ‎CTGCATAATTTTIGITTGCC | AGGATICCAGCAAAGAAAGAA | qpy—y sn 14 ‏(تعريف الترتيب‎ AGAGC | )17 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ GC ‏ا اد‎ | 6 .8 067 ‏للطفرة‎ RNA ‏باستخدام الجزيء التركيبي‎ RT-PCR ‏لأجل‎ )1
NEVA ‏للطفرة‎ RNA ‏باستخدام الجزيء التركيبي‎ RT-PCR ‏لأجل‎ )+ Yo .)4 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ MMT ‏لأجل‎ cDNA ‏ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص‎ )*
PCR ‏الترتيب عند النهاية ©" من الجزء المذكور في عمود "نهايات منتج‎ )**
PCR ‏المذكور في عمود 'نهايات منتج‎ shall ‏ترتيب التكملة عند النهاية 7" من‎ )***
TA
٠١ ‏مثال‎ ‏من نوع بري‎ MMT ‏يشفر‎ leh] Plasmid ‏بسبب الملاحظتين التاليتين:‎
SMM ‏والقدرة على تخليق‎ MMT ‏إلى‎ E. coli Lda ‏افتقار‎ (i) ¢(Y49A «Thanbicher et al.) ° ¢(Y+ + Y «Tagamount et al.) E. coli ‏النبات في‎ MMT ‏إمكانية تخليق‎ (ii) ‏الشعير الطفرية أو المبتورة في البكتيريا سالفة الذكر يتيح‎ MMT ‏فإن الإظهار المغاير لأجل‎ ‏الشعير‎ MMT ‏الإنزيمي. بالنسبة إلى‎ Balsall ‏طريقة جديدة للحث من أجلء أو تأكيد افتقارهاء‎ ‏فإنه قد يعمل كمثال مقارن موجب في تلك التجارب؛ وتتمثل‎ 2. coli ‏المخلق نوع بري من‎
MMT ‏للإظهار المغاير الذي يخص‎ 2. coli ‏إظهار‎ plasmid ‏المهام في تصميم وتشييد‎ ٠ ‏الشعير.‎ ‏الإجمالي من وريقات بذور صغيرة‎ RNA ‏لتكبير الترتيبات ذات الصلة؛ يستخلص أولا‎ ‏ميكروجرام منه‎ ١ ‏(كما هو مفصل في المثال 4( ويستخدم‎ cv. Prestige ‏أيام من‎ اهرمع‎
VY ‏قياسيء فيما عدا أن تضاف مجموعة المادة الأولية‎ RT-PCR ‏كجزيء تركيبي في تفاعل‎ pCR2.1-TOPO ‏إلى خليط التفاعل (جدول *). يتم إقحام المنتج المكبر في الناقل‎ ١٠ cplasmid ‏بعد امستتنساخ‎ plasmid pCR2.1-TOPO-MMT ‏مما ينتج‎ «(Invitrogen) cv. Prestige ‏يحدد ترتيب الإقحام الكامل (تعريف الترتيب رقم: ©( ويقارن مع ترتيب‎ ‏في المنتج المستنسخ‎ PCR ‏يحثه‎ nucLeotide ‏(تعريف الترتيب رقم: 4؛).تحدد ؟ اختلافات‎
MMT amino acid ‏معطية استبدالات‎ «(G303 1>A sT2954>C T131 0—>A) ‏هو محدد بمقارنة تعريف‎ LS) 6171011 —Sery Tyr985—>Met <Leud37—>His | ٠ ‏لمؤالفة تأثير‎ amino acid ‏لا يتوقع أي تغيرات‎ (Vad) ‏الترتيب رقم: 1 وتعريف الترتيب‎ ‏المخلق بطريقة قد تكون متعلقة بالطلب الحالي. يعتمد هذا الاستنتاج على اكتشاف أن‎ 7 ‏نشط يمكن إدراكه بواسطة الأجسام المضادة لمضاد‎ protein ‏الذي تم إظهاره هو‎ protein
OY ‏إ(قارن مثال‎ 7 569-bp ‏مما ينتج جزء‎ (Ndel-EcoRI ‏مع‎ pCR2.1-TOPO-MMT ‏بعد هذاء يقطع‎ Yo pET19b ‏يتم إقحام الجزء '5 في ناقل إظهار‎ .2699-bp 3' EcoRI ‏وجزء‎ Ndel-EcoRI 5' ‏,60ع11078)؛ وفي موقع‎ cat.no. 69677-3) Ndel-EcoRI ‏الذي يصبح خطيا بواسطة‎
‎EcoRI‏ من ‎plasmid‏ الناتج يتم إقحام جزءء 771449- ‎bp‏ ©" المذكور أعلاه؛ وبهذا يتولد ‎plasmid pET19b-MMT‏ الإظهار (الشكل ‎١١‏ (أ)). إن ‎plasmid‏ الإظهار هذا يشفر 17 المتصل مع الجزء الملحق ‎His‏ الطرفي ‎(MGHHHHHHHHHH) N‏ تعريف الترتيب رقم: 19( وموقع ‎kinase‏ معوي (550111011011611؛ تعريف الترتيب رقم: ‎(Ve‏ ‏© جدول 10 المواد الأولية لتكبير ترتيب تشفير ‎protein‏ الذي يخص جين الشعير لأجل ‎MMT‏ ‏رقم مجموعة | نهايات منتج المادة الأولية المتقدمة المادة الأولية المعكوسة المادة الأولية ‎Wo oui) "RT-PCR ١‏ (ترتيب ‎Wo To‏ ‎*#%(DNA **(DNA‏ ‎vy‏ صب | ‎GAATTCTAGTTGCTACCATIC | CATATGATGGCTGCGGCGGC‏ 060 إ#إ(تعريف ‎ACCTTAGCACC‏ (تعريف م ا ‎ee‏ اح *) ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ‎DNA‏ لأجل ‎MMT‏ (تعريف الترتيب رقم: #)؛ أي استثتاء امتداد الترتيب ‎AATTC 5 CAT‏ قبل وبعد ‎codon‏ البداية ‎codons‏ الإيقاف»؛ على الترتيب. **) الترتيب عند النهاية 0 من الجزءٍ المذكور في عمود 'نهايات منتج ‎(RT-PCR‏ كما ‎٠‏ هو محدد بواسطة مجموعة المادة الأولية. موقع ‎Ndel‏ تحته خط؛ ‎codon‏ بداية ترجمة تحته خط مزدوج. ***) ترتيب التكملة عند النهاية ‎TV‏ من ‎hall‏ المذكور في عمود " نهايات منتج ‎RT-‏ ‎"PCR‏ موقع ‎EcoRI‏ تحته خط؛ ‎codon‏ إيقاف ترجمة؛ متضمنا جزءء من موقع ‎ECORI‏ المبين بحروف مائلة. ‎٠‏ مثال ‎١١‏ ‏5 إظهار تشفير ‎MMTs‏ مبتورة من طفرة ‎AY‏ ‏إن الجين الذي يشفر ‎MMT‏ من طفرة 8017 موجود في مثال 4 المبين بأنه محتوي على انتقال قاعدة ‎GA‏ في موقع الجديلة ©" من ‎intron‏ © وبهذا ينشط مواقع الجديلة الشفرية التي تؤدي إلى إظهار ‎١‏ نسخ غير طبيعية (قارن الشكل ‎(VY‏ (ج))؛ حيث تحتوي كل ‎٠٠‏ واحدة على ‎codon‏ إيقاف ناضج قبل الأوان. لتأكيد أن النسخ الطفرية تشفر ‎MMTs‏ غير الوظيفية؛ يتم تكبير كل إطار قراءة مفتوح مقابل ويقحم في ناقل إظهار ‎LSE. coli‏ هو موصوف أدناه . يلاحظ أن ¥ من النسخ
Ye ‏(ب))؛ تشفران‎ VY ‏المجدولة تبادلياء تحديدا تلك التي تنتج المنتج ؟ والمنتج 9 (الشكل‎ ‏الإظهار لتحديد ما إذا كانت‎ Plasmids ‏من‎ ١ ‏المتماثلة. طبقا لهذاء يكفي فقط‎ 5 ‏الوظيفية.‎ MMT ‏تشفر إنزيمات‎ 8٠67 ‏الجينات المجدولة بصورةٍ غير طبيعية لطفرة الشعير‎ ‏(د)؛ فيمكن‎ VY ‏قارن الشكل‎ ATT ‏بمعرفة ترتيب منتجات الجديلة الشفرية في الطفرة‎ ‏الإظهار حيث تتضح تفاصيل‎ plasmid pETI9b-MMT ‏تكبير أجزاء الجين ذات الصلة من‎ 0 ؛١ ‏كما هي مدرجة في جدول‎ OVA ‏تستخدم مجموعة المادة الأولية‎ .٠١ ‏تشييده في المثال‎ (YY ‏من المنتج ¥ (تعريف الترتيب رقم:‎ Sacll-BamHI ‏من الجينات كأجزاء‎ YF ‏لتكبير أجزاء‎
PET19b- ‏يتبادل هؤلاء لاحقا مع الجزء المقابل لأجل‎ (YA ‏والمنتج ؟ (تعريف الترتيب رقم:‎ ‏الإظهار‎ plasmids pET19b-Line8063-Prod2 ‏مما ينتج‎ »))(١١ ‏(قارن الشكل‎ 71 ‏(ج)). إن التفاعلات المجراة‎ ١١ ‏(الشكل‎ pET19b-Line8063-Prod3 5 ؛))ب(١١ ‏(الشكل‎ ٠ plasmid pET19b- ‏(جدول 6) لتوليد»‎ V4 ‏على نحو متواز تستخدم مجموعة مادة أولية‎ ‏يدرج ترتيب‎ YA ‏(د)؛ حيث أن تعريف الترتيب رقم:‎ ١“ ‏الإظهار (الشكل‎ Line8063-Prod4 ‏مبتور يقابل ذلك الذي يخص المنتج ؛ (قارن‎ MMT ‏المنتج ؛ للاستنساخ)؛ المصمم لتخليق‎ ‏(ب)).‎ ١١ ‏شكل‎ ‏نوع بري مع المنتجات‎ MMT ‏مفصلة عن‎ amino acid ‏(ه) يوفر مقارنة ترتيب‎ VY ‏شكل‎ Yo .8 067 ‏المبتورة التي تشفرها طفرة‎ (Plasmid ‏لطفرة 8057 (لتشييدات‎ DNA ‏جدول +: المواد الأولية لتكبير أجزاء‎ «0 ‏رقم نهايات منتج | المنتج النهائي (تعريف | ترتيب المادة الأولية (ترتيب‎ ***)0(] 7 ‏الترتيب رقم:)‎ RT-PCR | ‏مجموعة‎ ‏المادة‎ ‏الأولية‎ ‏متقدم:‎ YA YY YV-) YA
GGCCGCGGGGCTCGAGTG VAY —V¥Y tad) ‏(تعريف الترتيب‎ CCGCAC (vr ‏معكوس:‎ ‎GGATCCTCAAAGAATTGCT ‎ATCTGCATAA- ‎TTTTTGTTTGCCAGAGC
١لا‏ ا | ‎rein‏ ‏14 لأ ‎Yq‏ متقدم: حي ‎GGCCGCGGGGCTCGAGTG‏ ‎CTTCCGCAC‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎(Vo‏ ‏معكوس: ‎GGATCCTTAGCAGCCTTGT‏ ‎CCTGGCCGGCCTCCCATG‏ ‏(تعريف الترتيب رقم: ‎(V7‏ ‏*) تشير الأرقام إلى أرقام ‎nucleotide‏ في رقم تعريف الترتيب المقابل كما هو مدرج في العمود المجاور. **) يستخدم خط فردي لتعليم مواقع ‎BamHI Sacil‏ للمادة الأولية المتقدمة والمعكوسة؛ على الترتيب. تشير الخطوط التحتية المزدوجة إلى ‎codons‏ إيقاف. ‎٠‏ مثال ‎VY‏ ‏أشكال غير نشطة من ‎MMT‏ مخلق لطفرة ‎AY‏ ‏للتحقق من أن أشكال حذف ‎MMT‏ لطفرة 8017 هي أشكال غير نشطة إنزيميا؛ ‎Jas‏ ‏خلايا ‎coli‏ .2 للسلالة 3121 على حدة مع 121190م ‎«pET19b-MMT «plasmids‏ ‎pET19b-Line8063-Prod4 5 «<pET19b-Line8063-Prod3‏ (قارن ‎(VV JSS‏ وتتكاثر بعدئذ ‎٠‏ طوال الليل في © ملليلتر من وسط ‎Luria Broth (LB)‏ قياسي» محتوي على ‎-ampicillin‏ ‏يضاف ‎YO‏ ,) ملليلتر من قاسم تام من كل مزرعة إلى ‎٠٠١‏ ملليلتر من 1.3 طازج» ويحضن عند ١7"مئوية‏ حتى تصل كتافة الخلية إلى 0م016 = ‎Lo,‏ عند هذه النقطة؛ يضاف ‎٠‏ 5 ميكرولتر من ‎١ IPTG‏ جزيئي جرامي لحث إظهار ‎protein‏ مغاير. بعد التحضين طوال الليل عند ١٠سمئوية.‏ تترسب خلايا المزرع الفردية بالطرد ‎١‏ المركزي لمدة ‎A BENT‏ عند ‎5060٠0‏ دورة في الدقيقة»؛ ؛ “مئوية. يعاد تعليق كل كرية خلية في © مليلقر من 11:0 ثم يطبق عليها عدة دورات تجميد- إذابة؛ وتحضن في النهاية لمدة ‎"١‏ دقيقة عند ١"“مئوية‏ في وجود تقريبا ‎You‏ وحدة/ لتر من ‎(Sigma, cat.no.
E8263-25KU) nuclease‏ لتقليل لزوجة العينة. بعد الطرد المركزي الذي دام لمدة ‎7١‏ دقيقة عند 506086 دورة في الدقيقة؛ ؛ “مئوية؛ لفصل ‎proteins‏ القابلة للذوبان في ‎vo‏ الخلية (محددة بأنها متواجدة في طور سائل) من ‎ALG proteins‏ للذوبان (محددة بأنها موجودة
ل في شكل كرية)؛ تغسل الكرية إضافيا بإعادة تعليقها في “ ملليلتر من 11:0 المحتوي على ‎١‏ ‏مجم من ‎lysozyme‏ بعد التحضين الذي مدته 0 دقائق عند درجة الحرارة المحيطة؛ تخفف العينة بإضافة ‎١١‏ ملليلتر من 11:0. تجرى © دورات غسيل- ترسيب مماثلة قبل استخلاص ‎proteins‏ أجسام الإدماج في الكرية مع ‎١‏ ملليلتر من مثبت أس هيدروجيني ‎ov Tris-Cl‏ © مللي جزيئي جرامي؛ أس هيدروجيني ‎A‏ محتوي على ‎١ urea‏ جزيئي جرامي؛ ‎B-‏ ‎mercaptoethanol‏ © مللي جزيئي جرامي. لتقييم نشاط ‎MMT‏ ينقل ‎٠ ٠‏ ميكرولتر من العينات المحتوية على ‎AL proteins‏ للذوبان في الخلية (كما هو محدد هنا أعلاه) إلى ‎You‏ ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني ‎K-‏ ‎Yo phosphate‏ مللي جزيئي ‎(aba‏ أس هيدروجيني ؛ محتوي على ‎AdoMet‏ 4 مللي ‎٠‏ جزيئي جرامي؛ 146 ‎٠١‏ مللي ‎١ DTT eb (in‏ مللي جزيئي جرامي؛ ‎١١‏ مجم/ ملليلتر من ‎(BSA‏ بعد التحضين لمدة ساعة عند ‎٠‏ *"مثوية؛ ترشح العينات؛ ويسمح بتفاعل ‎٠‏ ميكرولتر من القواسم ‎Al)‏ مع ‎OPA‏ كما هو مبين في المثال ". يلي هذا تحليل مستويات ‎SMM‏ كما هو موصوف في المثال المذكور؛ مع النتائج الملخصة في الشكل ‎VE‏ ‏0( . إن فقط خلاصة الخلايا المنقولة مع 1:7196-14241م تظهر ذروة مخطط كروماتوجرافي ‎٠١‏ النفس زمن الاستبقاء مقل الذروة الخاصة بمقياس ‎SMM‏ تبعا لهذاء إن غياب الذروات المماثلة في المخططات الكروماتوجرافية من الخلايا المنقولة مع ‎PET19b-‏ ‎pET19b-Line8063-Prod4 5 Line8063-Prod3‏ يشيران إلى أن الطفرة 8017 ينقصها القدرة على توليد ‎MMT‏ النشط. تتوجه تجربة منفصلة إلى التحقق من أن الطفرة 8097 تفتقر إلى القدرة على توليد ‎MMT‏ ‎٠‏ نشط كامل الطول. تفصل © ميكرولتر من عينات ‎ALE‏ للذوبان في الخلية و١٠‏ ميكرولتر من عينات ‎proteins‏ مشتقة من الكرية لخلاصات ‎E.coli‏ المذكورة أعلاه بواسطة الارتحال الكهربي القياسي ويتم جسها مع جسم لمضاد ‎MMT‏ عديد النسخ من أرنب موجه ضد ‎Age‏ ‏مضاد ‎peptide‏ طوله ‎١١‏ متخلف من ‎MMT‏ الشعير [قارن الشكل ‎١١‏ (ه) (امتداد الترتيب المعلم مع علامات نجمية)؛ يشترى مستحضر كبير ‎١١‏ ملليلتر له انجذاب منقى من جسم ‎Yo‏ مضاد لمضاد ‎MMT‏ عديد النسخ من ‎(Project No.
L0402801K; animal No.
Invitrogen‏ ‎«C7511)‏ ويستخدم في تحليلات تبقع ‎western‏ قياسية عند تخفيف ‎٠٠٠١٠١:١‏ (الشكل ‎Ve‏ ‏(ب)» )=(
‎lad‏ يتم حمل ‎proteins‏ المذكورة أعلاه على هلام ‎ZY + SDS-polyacrylamide‏ وتفصل بواسطة الارتحال الكهربي عند ‎You‏ فولط لمدة ‎VO‏ دقيقة؛ وبعد ذلك ‎proteins Jai‏ إلى غشاء ‎(Immobilon-P, Millipore) polyvinylidene fluoride‏ من خلال جهاز تبقع إلكتروني ‎(Trans-Blot SD Semi-Dry Transfer Cell, BioRad)‏ الذي يعمل عند 0,¥ مللي ‎٠‏ أمبير لكل سم" (أقصى فولطية ©7). توضع البقع العابرة لمدة ساعة عند © 7"مئوية في مثبت أس هيدروجيني للتثبيط ‎x ١[‏ محلول ملح ثابت الأس الهيدروجيني ‎BSA «(PBS) phosphate‏ ‎.]7١‏ يزال محلول التثبيط ويوضع الغشاء في محلول من جسم مضاد لمضاد ‎MMT‏ لمدة ساعة. بعد ذلك؛ يشطف الغشاء مع ‎PBS X ١‏ ويحضن لمدة ساعة في محلول من ‎alkaline‏ ‎phosphatase‏ لمضاد أرنب من ماعز ‎.(Sigma)‏ بعد التحضين المذكور ‎del‏ يشطف ‎٠‏ الغشاء في ‎(TBS ” ١‏ يليه رؤية شرائط ‎protein‏ باستخدام ‎tetrazolium‏ أزرق ‎nitro‏ 5 -5 ‎(Sigma) bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate‏ يشطف الهلام في النهاية في الماء لإيقاف تفاعل ‎-phosphatase‏
يستخدم مستحضر من جسم مضاد لمضاد ‎(MMT‏ كما هو موصوف هنا أعلاه؛ لجس بقع ‎proteins‏ القابلة للذوبان في الخلية والمشتقة من كرية التي تخص ‎E. coli WIA‏ المنقولة مع ‎pETI9b-MMT Vo‏ (الشكل ‎٠4‏ (ب)»؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم ‎PET19b- «('Y"‏ ‎Line8063-Prod3‏ (الشكل ‎٠4‏ (ب)»؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم "") ‎PET19b-‏ ‎Line8063-Prod4‏ (الشكل ‎٠4‏ (ب)؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم "4" و ‎pET19b‏ (الشكل 4 (ب)؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم 107( على الرغم من الاختلافات الموجودة في أنماط الربط بشريط الإجمالية من ‎ALIEN proteins‏ للذوبان في الخلية والمشتقة من كرية (حيث تظهر ‎٠‏ الأخيرة عموما كلطخة من شرائط ‎protein‏ التي ‎fas‏ عند قمة الهلام وتمتد للأسفل حتى قاع الهلام)؛ يتم إدراك ‎MMT‏ كامل الطول كشريط ‎protein‏ الذي يهاجر بصورة مشتركة مع ‎protein‏ علامة ‎٠١١‏ كيلو دالتون (الخانات التي تأخذ رقم ‎)"٠"‏ في خلاصات من الخلايا المنقولة مع ‎.pET19b-MMT‏ يتوقع أن الأشكال غير النشطة من ‎MMT protein‏ للخلايا المنقولة مع ‎pET19b-Line8063-Prod3‏ و ‎pET19b-Line8063-Prod4‏ أن تقابل الشرائط © الملطخة بشدة في منطقة البقعة بين ‎٠‏ £0 كيلو دالتون . من المذكور أن شريط ‎protein‏ ‎٠‏ كيلو دالتون الملطخ هو شريط غير مشتق من ‎MMT‏ كما أنه يظهر أيضا في خلاصات
الخلايا المقارنة الموجبة المنقولة مع الناقل ‎-PET19b‏
اعتمادا على النتائج التجريبية مع الإظهار المغاير لأشكال ‎MMT‏ كما هو موصوف هنا ‎diel‏ ومصمم لتوليد أشكال ‎MMT‏ مخلق لأجل طفرة 8017 والشعير من نوع بري؛ يتم استنتاج أن فقط ‎MMT‏ نوع بري؛ ليس أشكال ‎MMT‏ في الطفرة المذكورة؛ هو شكل غير نشط. تبعا لهذاء تتقيد القدرة على تحفيز تحويل ‎Met‏ إلى ‎SMM‏ مصدرة أولي ‎DMS‏ بالشعير ‎٠‏ من النوع البري؛ كما هو مقابل إلى الطفرة 017 8. مثال ‎١١‏ ‏أنظمة مراقبة لطفرة الشعير ‎AY‏ ‏بالإضافة إلى الاختبار الحيوي الكيميائي للكشف عن لبابات الشعير في ‎Byala‏ 8007 (قارن المثال ‎oY‏ فإن ‎JU‏ الحالي يصف طريقة جينية مهيأة لتحديد لبابات طفرية أو ‎٠‏ منتجاتها. بالتعديلات المناسبة المعروفة للماهرين في الفن؛ قد تطبق الطريقة أيضا للكشف ‎lee‏ ‏إذا تم تحضير منتج نباتي معين باستخدام طفرة الشعير 067 8. يعتمد الاختبار على التحليل للكشف عن الشكل المتعدد لأجل ‎nucleotide‏ الفردي ‎(SNP)‏ تحديدا طفرة ‎GA‏ عند الموضع 0716 ؟ لجين ‎MTT‏ في الطفرة ‎(ATT‏ كما هو مبين في الشكل 10 ومع سمات مجموعات المادة الأولية ‎oligonucleotide‏ المدرجة في جدول 7. ‎Vo‏ يتولد منتج ‎PCR‏ طوله ‎77/١‏ ما- مع الترتيب المحدد ‎aly‏ تعريف الترتيب رقم: 7؟- عند استخدام مجموعة المادة الأولية رقم ‎٠١‏ في التفاعل مع ‎genomic DNA‏ من ‎cv.
Prestige‏ الشعير كجزيء تركيبي؛ بينم لا يتم تكبير أي منتج عندما يعمل ‎genomic DNA‏ لطفرة 7 كجزيء تركيبي- في الحالة الأخيرة ببساطة بسبب عدم وجود ازدواج قاعدة بين النهاية ‎YF‏ من المادة الأولية المعكوسة والجزيء التركيبي (الشكل 9١لأ)).على‏ أية حال؛ يتم الحصول ‎Yo‏ على منتج ‎bp YY) PCR‏ مع مجموعة المادة الأولية رقم ‎7١‏ في تكبير ‎PCR‏ مع ‎genomic‏ ‎DNA‏ لطفرة 8067 (تعريف الترتيب رقم: 4 3؛ الشكل ‎V9‏ )1( لأن المادة الأولية المعكوسة لديها انسجام ترتيب كامل مع الجزيء التركيبي. تصمم مجموعة المادة الأولية رقم ‎YY‏ ‏المكونة من ؛ مواد أولية مذكورة أعلاه ومدرجة لمجموعة المادة الأولية رقم ‎7١‏ و١7-‏ اثنين لتكبير ‎gia‏ محتوي على طفرة ه<-03076 في جين ‎MMT‏ لطفرة ‎(ATT‏ واثنين لأجل طفرة ‎Yo‏ مدج-061462 في جين ‎MMT‏ لطفرة ‎VE VA‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎FN‏ قارن مثال ‎-)١١7‏ ‏لمراقبة وجود جين طفري لأجل ‎MMT‏ المحتوي على كل من طفرات ‎nucleotide‏ سالفة الذكر.
Yo
يجري تجريبيا كل واحد من تكبيرات ‎PCR‏ المذكورة أعلاه ‎RedTaq polymerase Jeli‏ genomic DNA ‏نانوجرام من‎ ٠٠١ ‏,008ع:5)» مكون من‎ cat.no.
D6063) ‏ميكرولتر‎ ٠
و١*-١٠٠‏ بيكو جزيء جرامي من كل مادة أولية من مجموعة مادة أولية خاصة (جدول 7).
بعد التكبير في جهاز تدوير ‎PCR‏ قياسي ‎١(‏ دقيقة عند 10*مئوية؛ ثم ‎Ve‏ دورة من:
© 44تمئوية؛ ‎٠١‏ ثانية- ‎٠١ duit‏ ثانية-77*مئوية؛ ‎Ve‏ ثانية؛ تنتهي مع ‎٠١‏ دقائق عند 7"مثوية)؛ إن ‎YO‏ ميكرولتر من قاسم تام من العينة يطبق عليه ارتحال كهربي قياسي على
هلام ‎LY agarose‏ كما هو مبين في الشكل ‎Yo‏ )=( إن ‎PCR‏ مع ‎genomic DNA‏ لأجل ‎cv.
Prestige‏ في وجود مجموعة المادة الأولية رقم ‎٠٠‏ ومجموعة المادة الأولية رقم ‎YY‏ ينتج
جزء ‎bp - YY) DNA‏ ولا ينتج أي أجزاء» على الترتيب. بيتما ‎PCR‏ مع ‎genomic DNA‏
‎٠‏ لطفرة 80317 في وجود مجموعة مادة أولية رقم ‎Yo‏ ومجموعة مادة أولية رقم ‎7١‏ لا ينتج أي أجزاء وينتج جزء ‎bp - YY) DNA‏ على الترتيب. في هذه الحالات التي تكون فيها النتيجة الأخيرة هي نتائج تفاعل ‎PCR‏ مع ‎genomic DNA‏ من حبة شعير مجهولة الهوية؛ فهناك احتمالية كبيرة أن يكون ‎DNA‏ للجزيء التركيبي مماثلا لذلك الذي يخص الطفرة ‎AY‏ ‏تشتمل الجهود الإضافية لدعم هذا الاستنتاج على تحليلات لاختبار مستويات ‎SMM‏ (قارن
‎.)4 ‏(قارن مثال‎ MMT ‏ومستويات نشاط‎ oY ‏مثال‎ Vo
‏تشتمل طريقة منفصلة للتحقق من أن الطفرة 80917 تفتقر إلى ‎MMT‏ على تحليل تبقع ‎cwestern‏ باستخدام الإجراء التقني والجسم المضاد لمضاد ‎MMT‏ كما هو مبين في مثال ؟. بصورة عملية؛ يتم إنبات لبابات ‎ev.
Prestige‏ ولبابات طفرة ‎ATT‏ عند ١٠“مئوية‏ لمدة ؟
‎You ‏ويلي هذا التجانس المنفصل لنوع بري واحد ولبابة طفرية واحد؛ كل منهما في‎ al
‎Yo‏ ميكرولتر من 1120. بعد الطرد المركزي عند ‎١7٠٠١‏ دورة في الدقيقة لمدة ‎٠١‏ دقائق؛ يخلط ‎٠‏ ميكرولتر من كل ‎ale‏ طافية مع © ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني لحمل ‎SDS‏
‏يغلي لمدة 0 دقائق؛ يحمل على هلام ‎«VY SDS-polyacrylamide‏ يفصل بالارتحال الكهربي؛ يتبقع كهربيا؛ ويتم جسه في النهاية مع جسم ‎alias‏ لمضاد ‎MMT‏ عديد النسخ (الشكل ‎Vo‏ (د)). يتم بسهولة إدراك شريط ‎MMT protein‏ مميز وزنه ‎١٠١‏ كيلو دالتون في
‎Yo‏ خلاصة ‎cov.
Prestige‏ بينما ‎protein‏ النشط ‎Lelie‏ من طفرة 80967 لا يهاجر بصورة مشتركة مع ‎protein‏ علامة ‎١١١‏ كيلو دالتون. طبقا لهذاء إن طريقة تحليل تبقع ‎western‏ المذكورة أعلاه هي طريقة مفيدة لفحص ما إذا كانت لبابات الشعير النابتة تنتج ‎MMT‏ أو تفتقر إلى vi ‏هذه القدرة. قد تستخدم اختبارات جزيئية وحيوية كيميائية إضافية لتأكيد أن حبة معينة هي حبة‎
AY ‏مشتقة من الطفرة‎
AY ‏عن الطفرة‎ SNP ‏المواد الأولية لكشف‎ iV ‏جدول‎ ‏رقم نهايات المنتج النهائي | المادة الأولية المتقدمة المادة الأولية‎ 0 ‏(ترتيب معطى 0 -> | المعكوسة (ترتيب‎ ١ quill ‏مجموعة | منتج (تعريف‎ ‏جلا0)***»‎ 3 « | ****(DNA V ‏رقم:)‎ PCR awl ‏الأولية‎ ‎CATCTAGTCACTCAA | CGATTCCAGCTTCCGG vv _YATY Y. eg | ne 7 ١ (vv ‏رقم:‎ ‎CATCTAGTCACTCAA | CGATTCCAGCTTCCGG vs - 1 "١ : ‏ريف الي (تعريف التوتيب رثم‎ TE TT 0 (YA ‏رقم:‎ ‎CATCTAGTCACTCAA | CGATTCCAGCTTCCGG vi _Y AT YY : ‏ركه‎ ish ‏ا يف رق ريف‎ HT ar (va ‏رقم:‎ ‎CTACGGAACAAGAG | GGCATCCAGATTCCAT 2 -١ ١ ‏(تعريف | 01000441 (تعريف‎ CTICAG LEAT (Af ‏الترتيب رقم:‎ (Av ‏ا الترتيب رقم:‎ ‏(تعريف‎ MMT ‏من نوع بري لأجل‎ genomic ‏ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب‎ )* ‏الترتيب رقم: ؟).‎ oo
AY ‏لأجل 1 من الطفرة‎ genomic ‏ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب‎ (** (A ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ ‏من الطفرة‎ MMT ‏لأجل‎ genomic ‏ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب‎ )*** (VA ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ VENA
PCR ‏الترتيب عند النهاية ©" للجزء المدرج في عمود 'نهايات منتج‎ )*+*** Ve
PCR ‏للجزء المذكور في عمود 'نهايات منتج‎ YF ‏ترتيب التكملة عند النهاية‎ )+****
vy
Ve ‏مثال‎ ‏هو جين طفري في موقع الجديلة 0 من‎ 1١6014 ‏لطفرة الشعير‎ MMT ‏الجين الذي يشفر‎ intron2 ‏أو مستويات منعدمة إطلاقاء في‎ SMM ‏بعد اكتشاف المستويات المنخفضة للغاية من‎ ‎٠‏ خلاصات لبابات الإنبات لطفرة الشعير ‎١٠6018‏ يخضع النبات إلى تحليلات تحت نفس الشروط التجريبية كتلك الموصوفة لأجل طفرة 8017 في المثال 4 أعلاه. مع هذاء تكون المادة النباتية من النوع البري في هذه الحالة هي مادة من ‎Sebastian‏ .7؛ كما هي مستخدمة للتوليد الطفري مع ‎NaN;‏ في رقعة من لبابات مشتملة على طفرة ‎.٠60٠8‏ تصمم التجارب التي تحدد الطفرة؛ التي تنتج النوع الشكلي الناقص ‎(MMT‏ وتنفذ كما هو موصوف هنا أدناه. ‎Ye‏ أولاء تجرى مقارنة لترتيبات ‎genomic DNA‏ والمميز لأجل الجين الذي ينفذ ‎MMT‏ من ‎cv. Sebastian‏ (تعريف الترتيب رقم ‎٠٠‏ لأجل ترتيب ‎¢genomic DNA‏ تعريف الترتيب رقم: ‎VY‏ لأجل ترتيب ‎«cDNA‏ تعريف الترتيب رقم: ‎VA‏ لأجل ترتيب ‎cDNA‏ المترجم؛ في كل الحالات مع الترتيبات المماثلة لهذه التي تخص ‎cv. Sebastian‏ كما هو موصوف في المثال ‎A‏ ‎(Lia‏ والطفرة ‎١6014‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎١9‏ لأجل ‎genomic call‏ وتعريفات الترتيب ‎٠‏ أرقام: ‎Jal Yo (YF oY) 7١‏ ترتيبات ‎(cDNA‏ مع التركيز على المناطق التي تقوم على امتداد ‎codons‏ البداية والإيقاف للترجمة. يحدد انتقال قاعدة ‎GA‏ في جزء جين محدد الترتيب لطفرة ‎lund) £0 VA‏ في موقع مانح جديلة مانحة موضوع مباشرة بعد ‎١ exon‏ عند القاعدة الأولى من ‎«Y intron‏ تحديدا أكثر عند ‎nucleotide‏ رقم 677 ‎-١‏ ومن المتوقع بالتالي أن يؤثر على معالجة ‎RNA‏ الأولي لنسخة الجين (الشكل ‎(V1‏ ‏7 ثانياء باستخدام مجموعة المادة الأولية ‎١3‏ (جدول ؛)؛ يهياً تفاعل ‎RT-PCR‏ ويجهز لتكبير منطقة الجين التي تمتد فوق ‎exon ¥ exon‏ * من الجين الذي يشفر ‎MMT‏ من ‎cv. Sebastian‏ والطفرة ‎١0٠78‏ (الشكل ‎١١‏ (أ)). بعد تكبير ‎DNA‏ إن منتجات التفاعل يتم عليها تطبيق الارتحال الكهربي لهلام ‎agarose‏ ويتم تصوير النتيجة في الشكل ١١(ب).‏ بالتشابه مع ذلك الموصوف لأجل الطفرة ‎ATF‏ في المثال 9؛ إن ‎RNA‏ نوع بري من ‎cv.Sebastian Yo‏ ينتج جزء ‎PCR‏ واحد؛ المنتج © في الشكل ‎(VT‏ والذي يتماثل في الطول وترتيب ‎(DNA‏ قارن تعريف الترتيب رقم: ١٠؛‏ مع ذلك الذي يخص قواعد الامتداد من ‎VET‏ ‏إلى ‎TY‏ من ‎cDNA‏ كامل الطول لأجل ‎MMT‏ الشعير من نوع بري (تعريف الترتيب رقم:
YA
‏تؤكد هذه النتيجة مرة أخرى أن الوصل بالجدل البديل ليس سمة لإظهار جين من نوع‎ .)١١ ‏بري.‎ ‏والذي‎ PCR ‏في تفاعل‎ ٠40178 ‏للجزيء التركيبي المنقى من الطفرة‎ RNA ‏ثالثاء يستخدم‎ ‏(تعريف‎ ١ ‏المنتج‎ (YY ‏يولد ؟ أجزاء خاصة- يشار إليها بالمنتج + (تعريف الترتيب رقم:‎ ‏(ج)- والتي‎ (DT ‏في الشكل‎ )1١ ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ( A ‏والمنتج‎ (YF ‏الترتيب رقم:‎ ٠ ‏تكون مختلفة في الطول والترتقيب عن المنتج المكبر للجزيء التركيبي بري النوع. تقترح هذه‎ ‏لطفرة‎ MMT ‏؟ في جين‎ intron ‏الملاحظة أن الطفرة الفردية في موقع الجديلة ©" من‎ ‏الأولي بإزالة موقع الجديلة الطبيعي؛ لكنها بدلا من ذلك‎ mRNA ‏تعرقل معالجة‎ ٠0 + ‏تنشط استخدام مواقع الجديلة الإضافية الشفرية. في هذا الصددء؛ بالنسبة لكل من المنتج‎ ‏بينما يحدد الموقع بالنسبة للمنتج 4 في‎ oY intron ‏والمنتج 7 يحدد موقع جديلة شفري في‎ ٠ ‏(ج) لنتائج تحديد الترتيب المذكورة أعلاه.‎ ١6 ‏تتوافر مقارنة بيانية في الشكل‎ LY exon ‏إيقاف ترجمة ناضجة قبل‎ codons ‏بإظهار‎ DNA ‏بالإضافة لهذاء تقوم تحليلات ترتيب‎ ‏لترقيم القاعدة الذي يغص‎ Lida ١581-1574 ‏عند القواعد‎ TAG] 1 ‏الأوان في المنتج‎
TAA] ١ ‏(تعريف الترتيب رقم: ١٠١)]؛ المنتج‎ cv. Sebastian ‏من الشعير»‎ genomic DNA ‏من الشعير؛‎ genomic DNA ‏طبقا إلى ترقيم القاعدة الذي يخص‎ ١847-1784 68 ‏عند القواعد‎ Vo 1918-1917 ‏عند القواعد‎ TGA] A ‏والمنتج‎ ([(V1 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ ov. Sebastian ‏(تعريف الترتيب‎ cv. Sebastian ‏من الشعير؛‎ genomic DNA ‏طبقا لترقيم القاعدة الذي يخص‎
VIF OA OAT ‏مترجمة يبنلغ طولها‎ proteins ‏مما ينتج‎ »])١١ ‏رقم:‎ ‏وتعريف الترتيب‎ (VE ‏تعريف الترتيب رقم:‎ YY ‏المدرجة كتعريف الترتيب رقم:‎ camino acid ‏(الشكل‎ AY ‏على الترتيب. بالتشابه مع النتائج الموصوفة أعلاه لأجل الطفرة‎ YN ‏رقم:‎ ٠ ‏عن طبيعة‎ ald ‏(ه) توفر بيانات‎ (IT JEN ‏(ه))؛ فإن التوضيحات في‎ (IY ‏القواعد الخاصة الداخلة في أحداث الوصل بالجدل البديل.‎
Yo ‏مثال‎ ‎VEYA ‏مبتورة من الطفرة‎ MMTs ‏الإظهار لتخليق‎ 5 ‏الإظهار التي توجه‎ plasmids ‏إن الأساس المنطقي والاستراتيجية اللذين يخصان تشييد‎ Yo ‏يتشابهان مع ما هو‎ ١6018 ‏المشتق من الطفرة‎ MMT ‏تخليق © نسخ مبتورة مخلقة من‎ ‏لأجل الطفرة 017 8. بإيجاز؛ إن هدف التجربة هو التحقق من أن‎ ١١ ‏موصوف في المثال‎
الأحداث الشاذة للوصل بالجدل التي تخص الطفرة ‎١540087‏ تولد نسخ تشفر ‎MMTs‏ غير التشطة. إن امتدادات الجين المخلق يجب بالتبعية أن تشفر ‎proteins‏ التي لها ترتيبات- المدرجة في تعريف الترتيب رقم: ‎(YY‏ تعريف الترتيب رقم: ‎VE‏ وتعريف الترتيب رقم: 77- تبين الأحداث الشاذة للوصل بالجدل التي تنتج المنتج 1 المنتج 7 والمنتج ‎A‏ (قارن الشكل ‎(CECI‏ ‏باستخدام ‎plasmid pET19b-MMT‏ قارن المثال ‎٠‏ كجزيء تركيبي في ؟ ‎PCRs‏ ‏قياسية متعاقبة مع مجموعة المادة الأولية أرقام ‎YO 5 YE YY‏ (جدول ‎oA‏ ينتج جزء مكبر ‎394-bp‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎.)٠١‏ يتم هضم هذا بواسطة ‎Sacll-BamHI‏ ويرتبط مع جزء ‎Sacll-BamHI‏ كبير من ‎pET19b-MMT‏ (الشكل 7١١(أ))؛‏ مما يعطي ‎plasmid PET19b-‏ ‎٠‏ 110614086-0:006 الإظهار (الشكل ‎VY‏ (ب))؛ مصمم لتخليق ‎MMT‏ مبتور يقابل المنتج + كما يصورهِ الشكل ‎(NT‏ ‏باستخدام نفس الإجراء الموصوف هنا أعلاه لأجل الجزء 44 ؟- ‎bp‏ لكن ‎OY)‏ مع مجموعة مادة أولية أرقام ‎YE YY‏ و16 في ؟ تكبيرات ‎PCR‏ متعاقبة (جدول ‎((A‏ ‏يتولد جزء ‎bp— YY‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎١‏ 7)؛ والذي عند هضمه مع ‎Sacll-BamHI‏ يرتبط ‎Vo‏ .مع جز ‎Sacll-BamHI‏ كبير من 1217196-31417م (الشكل ١١())؛‏ معطيا ‎plasmid pET19b-Line14086-Prod7‏ (شكل ‎VV‏ (ج)) ‎Plasmide bie‏ الإظهار هذا لتخليق 17 مبتور يقابل ذلك الذي يوفر المنتج ‎١‏ كما يصوره الشكل ‎(YT‏ ‏في تجربة موازية- تجرى بطريقة مماثلة للموصوفة أعلاه لأجل ‎PET19b-MMT‏ لكن مع مجموعة مادة أولية أرقام ‎YA YY‏ (جدول ‎—(A‏ يتم تكبير جزء ©77- ‎bp‏ (تعريف الترتيب ‎٠‏ رقم: ‎(VY‏ والذي عند هضمه مع ‎Sacll-BamHI‏ يرتبط مع جزء ‎Sacll-BamHI‏ كبير من ‎pET19b-MMT‏ (الشكل ‎VY‏ )((« مما يعطي ‎plasmid pET19b-Line14086-Prod8‏ الإظهار (الشكل 7١١٠(د))‏ لتخليق ‎MMT‏ مبتور يقابل المنتج ‎A‏ (قارن الشكل ١١(ب)).‏
2 4 io 3 w Q سر سر ار ‎on‏ ~= 9 34 7 2 = 8 ‏ب‎ < © ١ = 7 4 © J S34 J © 3 SEE 2 2594 ‏ل‎ - ‏نع . ان‎ = 3 2 0 S 9 S < 3 2 ‏انا‎ > < < 3 =| ‏نا‎ = — S ‏ب‎ S > | © OQ
A 3 = oe De = QO < 2 5 = 9 4 52 O = < < S| BE — < S $ <| ‏ما‎ O > SO Q O OQ
Z = < | 9 < ‏ا5‎ S
A O ‏تي ى‎ ١ ‏نب‎ < < << < ‏م‎ | 0 < ol EB < & 39/2 ا ‎S‏ د 43 EEE: EEE 23 2 S58 5 3 = 3 = 2 3 oO > | QO | 5 < 2 < > انبا ات 3 4 | ~ ol = SS ‏ا‎ ١ ‏ي‎ OU 3 O =
Va. ‏ص‎ > > ١ ‏ن‎ ٠| ‏ب‎ < ‎22g 2.28 O‏ 9 7 ال ‎= 9 S38 =e ‎4 5 S ‏و5833‎ 323 = ‎J. 1 ‏الح‎ << Q OQ =< ‏ب‎ ‏3 3493 23 ؟ 1 ‎ً < — ‎il a * 9 pI O 5 Oo < ‏ب ب‎ + Oo = ‏الل‎ < ak EEE INE ‎S|, 2 22S 5 3 5 ‎4 $ ‎2 1 AE Q ‏ب‎ 5 ‎SZ oS =< 1 = 3 EN 2 ‎N << $ QO‏ = 1 ب ‎Z kK: < = 31 >‏ اث ‎a ; SQ 3 oO : 3 * <£ S ° 5 2 3 ‏ا ا 5 | حر )| ود‎ ‏ا‎ 3 = |e 2 : <3 Z = < > ‏إ‎ ‎+ ‏ج‎ = > << QO < Of QO : < 3 ‘J ‏جه‎ a 0 a
Jr 3 J 3 -— >» ‏سي 1 اي‎ >
J 1 5 ' lo ١ 7 ‏ع‎ > 4 > J, > J,
Let 03 7 a ‏ع‎ ‎ow < 3 373 1+ : : ‏و ا‎ . + 7 3 3 3 > +
<< >
EF
1 $ Oo
I 6») . < a OO ; 544% 4354 8 0 a . 3) © p= ve 3) 5 ‏ب‎ ‎5 3 oy B= 5 3 os 7 ‏رن‎ ‎2333 ] 833 Tis 218 27 ‏و‎ £818 8 4|595 - ‏و‎ 5 2S = 2
S 5 3 3 A = E 2 < <
OlE © 90 = 2/5 S % QO ~~ >» ‏نج‎ QQ Q 5 =
Ae - ‏اج‎ 9 5 ٍ ‏ع‎ z 35 8398 ‏م‎ < =| 2 S S 5:
Allg 8 = c <|E ZS 3 ‏ب = > ب ب‎ 3 2 5 a) OQ = OO = 1 = 0 S 4 = < 5 = S 3 8 1 Jig ] - = S = ‏ب‎ EN oO 1 < a 0 < =~ 3 7 S “i > ‏بن بس‎ 2 =
QO 1 Oo 3 : 2 S = 9 2 =
QO wT 38 SIT 8 3 5 S 3 a 1 ‏ج‎ = —_ ‏ب ست = نا‎ 7 «13% | 7 83 9 3 © © 7 = 3 = = = . = J a3 3 + 3 3 3 2 4 > 3 : < 3 OQ 0 << ‏ا جع © 2 3 اس‎ ِ 5 1 5 of - = 5 5 Sr
T = T= =< < 5 =< < = . 3 < ‏ص‎ ٍ 3 Z 2 0 ‏أن‎ ‎~ ‏دا دا جع‎ ! |! > ‏لم > ل‎ a z $ = 2
I
) — >» r ok
AY
‏تحته خط؛ في كل التفاعلات.‎ Sacll ‏يلاحظ أن نفس المادة الأولية المتقدمة؛ مع موقع‎ )* ‏الجزيء التركيبي تبرز‎ DNA ‏بالنسبة للمواد الأولية المعكوسة؛ إن امتداد ©" بدون التقسية إلى‎ ‏إيقاف‎ codons ‏تتضح بحروف مائلة؛ وتظهر‎ BamHI ‏بوضع خط تحتي موجي؛ إن مواقع‎ ‏الترجمة التكميلية بحروف سوداء ثخينة.‎ ‏تشير الأرقام إلى أرقام 106 في رقم تعريف الترتيب المقابل في العمود‎ )** ° ‏المجاور.‎ ‎١١ ‏مثال‎ ‎VE VA ‏المخلق من طفرة‎ MMT ‏الأشكال غير النشطة لأجل‎ ‏حيث أن البنيات المشتقة من الطفرة 8017 المستبدلة مع تلك‎ OY JB) ‏يتم اتباع إجراء‎ 051190- Linel4018-Prod6 gE. coli ‏تتقل بكتيريا‎ V+ VA ‏التي تخص طفرة‎ ٠ ‏(أ)-(د)؛ مع‎ VV J all) pET19b-Line14018-Prod8 s pET19b-Line14018-Prod7 ‏المقابل المبين في الشكل 7١١(ه))- لكن التجارب التي تستبعد‎ amino acid ‏اصطفاف‎ ‏تظهر مقابل‎ VY ‏الموصوف في المثال‎ MMT ‏كجسم مضاد لمضاد‎ western ‏تحليلات تبقع‎
NEVA ‏لأجل الطفرة‎ MMT ‏امتداد ترتيب غائب في جزء خاص من‎ ‏لهذا‎ (VA ‏(شكل‎ SMM ‏لا تظهر أن من خلاصات البكتيريا المنقولة قدرتها على توليد‎ Vo ‏أعلاه يمنح أساس الذي يستنتج منه أن طفرة الشعير‎ ١١ ‏فإن نفس النقاش الموجود بالمثال‎ ‏المصدر‎ SMM ‏غير وظيفية والتي تفتقر للقدرة الحفزية لتشكيل‎ MMT ‏تولد إنزيمات‎ ٠0
DMS ‏الأولي‎ ‎١١ ‏مثال‎ ‎VENA ‏أنظمة مراقبة لأجل طفرةٍ الشعير‎ ٠ ‏(قارن‎ VEYA ‏بالإضافة إلى الاختبار الحيوي الكيميائي للكشف عن لبابات الشعير لطفرة‎ ‏يصف المثال الحالي طريقة جينية قد تم تصميمها لتحديد اللبابات الطفرية أو‎ oY ‏المتال‎ ‏يعتمد هذا على التحليل للكشف عن‎ VEYA ‏المنتجات النباتية المحضرة من طفرة الشعير‎ ١77 ‏عند الموضع‎ GA ‏تحديدا طفرة‎ (SNP) ‏الفردي‎ nucleotide ‏الشكل المتعدد لأجل‎ ‏ومع سمات مجموعات المادة‎ V4 ‏لجين 1411 في طفرة 4018٠؛ كما هو موضح في شكل‎ Yo +A ‏المدرجة في جدول‎ oligonucleotide ‏الأولية‎
AY
‏مع الترتيب المحدد بأنه تعريف الترتيب رقم: 10 عندما‎ -121 bp ‏طوله‎ PCR ‏يتولد منتج‎ ‏من‎ genomic DNA ‏تستخدم مجموعة مادة أولية رقم 4 في التفاعل مع‎ ‏الشعير كجزيء تركيبي؛ بينما لا يتم تكبير أي منتج عندما يعمل‎ cv. Sebastian ‏كجزيء تركيبي - في الحالة الأخيرة ببساطة بسبب عدم‎ VENA ‏من طفرة‎ genomic DNA ‏وجود ازدواج قاعدة بين النهاية 7 من المادة الأولية المعكوسة والجزيء التركيبي (الشكل‎ © ‏مع مجموعة المادة الأولية‎ bp -١"١ PCR ‏(ب)). على أية حال؛ يتم الحصول على منتج‎ 4 f(T ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ ٠0٠48 ‏من طفرة‎ genomic DNA ‏مع‎ PCR ‏تكبير‎ AY ‏رقم‎ ‎.))ب(٠9 ‏لأن المادة الأولية المعكوسة لديها انسجام ترتيب كامل مع الجزيء التركيبي (الشكل‎ ‏المكونة من 4 مواد أولية مذكورة أعلاه ومدرجة‎ (VY ‏تصمم مجموعة المادة الأولية رقم‎ ‏محتوي على طفرة 8ج-061462 في‎ sha ‏ا لمجموعة المادة الأولية رقم 74 و١7- اثنين لتكبير‎ ٠ ‏(أي؛ تعريف الترتيب رقم: 37)؛ واثنين لأجل طفرة‎ ٠4018 ‏من الطفرة‎ MMT ‏جين‎ ‏من الطفرة 80567 (أي؛ تعريف الترتيب رقم: 4 ؟؛ قارن المثال‎ MMT ‏في جين‎ 03076-<8 nucleotide ‏لمراقبة وجود جين طفري لأجل 1 المحتوي على كل من طفرات‎ -) ‏المذكور سالفا.‎ ‏ميكرولتر من‎ ٠٠ ‏المذكورة أعلاه كتفاعل‎ PCR ‏يجرى تجريبيا كل واحد من تكبيرات‎ - ٠ genomic ‏ناتوجرام من‎ Yoo ‏المكون من‎ ¢(Sigma, cat.no. D6063) RedTaq polymerase ‏بيكوجزيء جرامي من كل مادة أولية من مجموعة مادة أولية خاصة (جدول‎ ٠٠١-٠١ ‏و‎ DNA ‏دورة من:‎ To ‏دقيقة عند 15"مثوية؛ ثم‎ ١ ( ‏قياسي‎ PCR ‏بعد التكبير في جهاز تدوير‎ .)١ ‏دقائق عند‎ ٠١ ‏ثانية؛ تنتهي مع‎ 3١ ‏ثانية- 77"مئوية؛‎ Ye dps TE ‏ثانية-‎ ٠0 Asli ‏ميكرولتر من قاسم تام من العينة يطبق عليه الارتحال الكهربي القياسي‎ YO ‏؟لا*مئوية)؛ فإن‎ Ye ‏عنسمدع من‎ DNA ‏مع‎ PCR ‏كما هو مبين في الشكل 4حج) إن‎ . LY agarose ‏على هلام‎ ‏ينتج‎ Ve ‏ومجموعة المادة الأولية رقم‎ YO ‏في وجود مجموعة المادة الأولية رقم‎ Cv. Sebastian genomic DNA ‏مع‎ PCR ‏ولا ينتج أي أجزاء؛ على الترتيب. بينما‎ bp =) YY) DNA ‏جزء‎ ‏في وجود مجموعة المادة الأولية رقم 79 ومجموعة المادة الأولية رقم 30 لا‎ ٠40948 ‏لطفرة‎ ‏على الترتيب. في هذه الحالات التي تكون فيها‎ bp =) YY DNA ‏ينتج أي أجزاء وينتج جزء‎ ¥@ ‏من حبة شعير مجهولة الهوية؛‎ genomic DNA ‏مع‎ PCR ‏النتيجة الأخيرة هي نتائج تفاعل‎ ‏للجزيء التركيبي مماثلا لذلك الذي يخص الطفرة‎ DNA ‏فهناك احتمالية كبيرة أن يكون‎
عم ‎.٠08‏ تشتمل الجهود الإضافية لدعم هذا الاستنتاج على تحليلات لاختبار مستويات 41 (قارن مثال ‎oY‏ ومستويات نشاط ‎MMT‏ (قارن مثال 4). تشتمل طريقة منفصلة للتحقق من أن الطفرة ‎١6094‏ تفتقر إلى ‎MMT‏ على تحليل تبقع ‎western‏ باستخدام الإجراء التقني والجسم المضاد لمضاد ‎MMT‏ كما هو مبين في مثال 7. © بصورة عملية؛ يتم إنبات لبابات ‎ov.
Sebastian‏ ولبابات طفرة ‎١56017‏ عند ١٠“مئوية‏ لمدة ؛ ‎col‏ ويلي هذا التجانس المنفصل لنوع بري واحد ولبابة طفرية واحد؛ كل منهما في ‎٠٠١‏ ‏ميكرولتر من ‎(HO‏ بعد الطرد المركزي عند ‎١٠٠١‏ دورةٍ في الدقيقة لمدة ‎٠١‏ دقائق؛ يخلط ‎VO‏ ميكرولتر من كل مادة طافية مع © ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني لحمل ‎SDS‏ ‏يغلى لمدة 0 دقائق؛ يحمل على هلام ‎«VY SDS-polyacrylamide‏ يفصل بالارتحال ‎٠‏ الكهربي؛ يتبقع كهربياء ويتم جسه في النهاية مع جسم مضاد لمضاد ‎MMT‏ عديد النسخ (الشكل ١١(د))‏ . يتم بسهولة إدراك شريط ‎MMT protein‏ مميز وزنه ‎١٠١‏ كيلو دالتون في خلاصة ‎cov.
Sebastian‏ بينما ‎protein‏ النشط مناعيا من طفرة ‎١50178‏ لا يهاجر بصورة مشتركة مع ‎protein‏ علامة ‎٠١8١‏ كيلو دالتون. طبقا لهذاء إن طريقة تحليل تبقع ‎western‏ ‏المذكورة أعلاه هي طريقة مفيدة لفحص ما إذا كانت لبابات الشعير النابتة تنتج 11347 أو ‎٠‏ تفتقر إلى هذه القدرة. قد تستخدم اختبارات جزيئية وحيوية كيميائية إضافية لتأكيد أن حبة معينة هي حبة مشتقة من الطفرة ‎NEA‏ ‏جدول 4: المواد الأولية لكشف ‎SNP‏ عن الطفرة ‎١55617‏ ‏رقم نهايات المنتج النهائي | المادة الأولية المتقدمة | المادة الأولية المعكوسة مجموعة | ‎١ pe‏ (تعريف الترتيب ‎١‏ (ترتيب معطى 0« | ‎Veo iy)‏ المادة ‎PCR‏ رقم:) ‎****(DNA 'Y‏ الري(0)***+* الأولية ‎CTACGGAACAAGAGGT | GGCATCCAGATTCCAT vo 141 Yq‏ ‎EEE‏ ‏الترتيب رقم: ‎(BY‏ | الترتيب رقم: ‎(V0)‏ ‎CTACGGAACAAGAGGT | GGCATCCAGATTCCAT v1 -١١ v.‏ ‎EE‏ ‏الترتيب رقم: ‎(AA‏ الترتيب رقم: ‎(YoY‏ ‎CTACGGAACAAGAGGT | GGCATCCAGATTCCAT ve -١171 vy‏ 0 6 (تعريف 7 (تعريف
Ao apm zl
CATCTAGTCACTCAAAG | CGATTCCAGCTTCCGG ve —YAY) ‏(تعريف‎ AATTGCTAT | ‏م 0 (تعريف الترتيب‎ 1 )٠١ 4 ‏الترتيب رقم:‎ )٠٠١ ‏رقم:‎ ‏(تعريف‎ MMT ‏من نوع بري لأجل‎ genomic ‏ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب‎ )*
NAR ‏الترتيب رقم:‎ ١017 ‏من الطفرة‎ MMT ‏لأجل‎ genomic ‏ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب‎ )** .)١9 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎
AY ‏لأجل 1 من الطفرة‎ genomic ‏ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب‎ (+ ° (A ‏(تعريف الترتيب رقم:‎
PCR ‏الترتيب عند النهاية ©" للجزء المدرج في عمود 'نهايات منتج‎ )**** "PCR ‏ترتيب التكملة عند النهاية ؟” للجزء المذكور في عمود "نهايات منتج‎ )***** ‏المراجع المذكورة‎ ‏وثاثق براءة الاختراع‎ ٠ ‏وآخرين.‎ Mullis, KB. ‏براءة الاختراع الأمريكية رقم 5187197 بواسطة‎ ‏وآخرين.‎ Mullis, 16.3. ‏براءة الاختراع الأمريكية رقم 48001949 بواسطة‎
Reuther,H ‏براءة الاختراع الأمريكية رقم 4 4714 07 بواسطة‎ ‏وآخرين.‎ Douma, A.C. ‏براءة الاختراع الأمريكية رقم 1170816 بواسطة‎ ‏وآخرين.‎ Breddam, K. ‏بواسطة‎ ١ 4700٠06 ‏براءة الاختراع الأمريكية رقم‎ Vo
Bisgaard- ‏إلى‎ Yo o/c cOVTAE ‏منشور طلب براءة الاختراع الأمريكية رقم‎
Frantzen,H,et al. 17/7/8178 ‏براءة الاختراع الأسترالية رقم‎
Breddam, 16. ‏بواسطة‎ ٠٠058/08949764 ‏طلب براءة اختراع 001 للطلب الدولي‎ ‏وآخرين.‎ ٠ ‏النشرات الأخرى‎
American Association of Cereal Chemists, "Approved methods of the American
Association of Cereal Chemists." ISBN 0-913250-86-4 (1995).
تم ‎American Society of Brewing Chemists, "Methods of analysis of the American‏ ‎Society of Brewing Chemists." ISBN 1-881696-01-4(1992).‏ ‎Bourgis, F. et al., "S-Methylmethionine plays a major role in phloem sulfur‏ ‎transport and is synthesized by a novel type of methyltransferase.” Plant Cell‏ ° .1999 ,11:1485-1497 ‎Briggs, D.E. et al., "Malting and brewing science.
Volume I Malt and sweet wort."‏ ‎Chapman and Hall, New York, USA.
ISBN 0412165805, 1981.‏ ‎Dufour, J.P., "Direct assay of S-methylmethionine using high-performance liquid‏ ‎chromatography and fluorescence techniques." J.
Am.
Soc.
Brew.
Chem. 44:1-‏ ‎Ye‏ .6,1986 ‎Durai, S. et al., "Zinc finger nucleases: custom-designed molecular scissors for‏ ‎genome engineering of plant and mammalian cells." Nucleic Acids Res. 33:5978-‏ .2005 ,5990 ‎European Brewery Convention, "Analytica - EBC." ISBN 3-418-00759-7 (1998).‏ ‎Hansen, M. et al., "Antisense-mediated suppression of C-hordein biosynthesis in Vo‏ ‎the barley grain results in correlated changes in the transcriptome, protein profile,‏ ‎and amino acid composition." J.
Exp.
Bot. 58:3987-3995, 2007.‏ ‎Hough, 1.5. et al. "Malting and brewing science.
Volume II Hopped wort and‏ ‎beer." Chapman and Hall, New York, USA.
ISBN 0412165902, 1982.‏ ‎Hysert, D.W. et al., "The origin and control of dimethyl sulfide and its precursor in ٠‏ ‎malt." Tech.
Q.
MBAA 17:34-43, 1980.‏ ‎lida, S. and Terada, R., "Modification of endogenous natural genes by gene‏ ‎targeting in rice and other higher plants." Plant Mol.
Biol. 59:205-219, 2005.‏ ‎Imashuku, H., "Two new technologies for efficient and flexible wort boiling: 1.‏ ‎Rest before wort boiling to convert SMM to DMS; 2. Hop boiling separately from Yo‏ ‎wort." 3rd World Brewing Congress, Presentation 0-52, Program Book, p. 91 and‏ ‎attached presentation slides, 2008.‏
AY
Institute of Brewing, "Institute of Brewing. Methods of analysis." ISBN 0-900489- 10-3, 1997.
Kleinhofs, A. et al., "Induction and selection of specific gene mutations in
Hordeum and Pisum." Mutat. Res. 51:29-35, 1978.
Ko, S. et al., "S-Methylmethionine is both a substrate and an inactivator of 1- ° aminocyclopropane-1-carboxylate synthase." Arch. Biochem. Biophys. 421:85- 90, 2004.
Kocsic, M.G. et al., "Insertional inactivation of the methionine S-methyltransferase gene eliminates the S-methylmethionine cycle and increases the methylation ratio." Plant Physiol. 131:1808-1815,2003. Ve
Kumar, S. et al., "Gene targeting in plants: fingers on the move." Trends Plant Sci. 11:159-161,2006.
Lai, S. et al., "A splice site mutant of maize activates cryptic splice sites, elicits intron inclusion and exon exclusion, and permits branch point elucidation." Plant
Physiol.121:411-418,1999. Yo
Magquat, L.E. and Carmichael, G.G., "Quality control of mRNA function." Cell 104:173-176,2001.
McElroy, D. and Jacobsen, J., "What's brewing in barley biotechnology?"
Bio/Technology 13:245-249, 1995.
Meilgaard, M.C., "Prediction of flavour differences between beers from their ‏ص‎ ‎chemical composition." J. Agric. Food Chem. 30:1009-1017, 1982.
Mendell, J.T. and Dietz, H.C., "When the message goes awry: Disease-producing mutations that influence mRNA content and performance." Cell 107:411 -414, 2002.
Mudd, S.H. and Datko, A.H., "The S-methylmethionine cycle in Lemna Yo paucicostata." Plant Physiol. 93:623-630, 1990.
AA
Nevo, E. "Origin, evolution, population genetics and resources for breeding of wild barley, Hordeum spontaneum, in the Fertile Crescent." In Shewry, P.R. (ed.): "Barley: Genetics, Biochemistry, Molecular Biology and Biotechnology," pp. 19- 43. CAB International, Wallingford, UK. ISBN 0-85198-725-7, 1992. 1992.
Pimenta, M.J. et al., "Determination of S-adenosyl-L-methionine:L-methionine S- ° methyltransferase activity by selective adsorption of [methyl->H]S- adenosylmethionine onto activated charcoal." Anal. Biochem. 225:167-169, 1995.
Phenomenex, "HPLC application." ID No.: 15992, 2006.
Ranocha, P. et al., "The S-methylmethionine cycle in angiosperms: ubiquity, antiquity and activity." Plant J. 25:575-584, 2001. Ye
Rasmussen, S.K. and Hatzack, F., "Identification of two low-phytate barley (Hordeum vulgare L.) grain mutants by TLC and genetic analysis." Hereditas 129:107-112,1998.
Robbins M.P. et al., "Gene manipulation of condensed tannins in higher plants."
Plant Physiol. 116:1133-1144, 1998. Vo
Sambrook, J. and Russell, D.W., "Molecular cloning. A laboratory manual, 3rd
Ed.", Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York,
U.S.A. ISBN30 0-87969-577-3,2001.
Scheuren, H. and Sommer, K., "Vaporescence versus boiling - Expulsion of aromatic compounds during the whole wort production.” 3rd World Brewing Yo
Congress, Presentation 0-55, Program Book, ‏.م‎ 92 and attached presentation slides, 2008.
Sinibaldi, R.M. and Mettler L.J., "Intron splicing and intron-mediated enhanced expression in monocots." Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 42:229-257, 1992.
Stahl, Y. et al., "Antisense downregulation of the barley limit dextrinase inhibitor Yo modulates starch granule sizes distribution, starch composition and amylopectin structure”. Plant J. 39:599-611, 2004.
قم ‎Tagmount, A. et al., "An essential role of S-adenosyl-L-methionine:L-methionine‏ ‎S-methyltransferase in selenium volatilization by plants.
Methylation of‏ ‎selenomethionine to selenium-methyl-L-selenium-methionine, the precursor of‏ ‎volatile selenium." Plant Phys. 130:847-856, 2002.‏ ‎Thanbichler, M. et al., "S-Methylmethionine metabolism in Escherichia coli."J. 8‏ ‎Bacteriol. 181:662-665, 1998.‏ ‎Tzfira, T. and White, C., "Towards targeted mutagenesis and gene replacement in‏ ‎plants." Trends Biotechnol. 23:567-569, 2005.‏ ‎von Bothmer, R. "The wild species of Hordeum: Relationships and potential use‏ ‎for Improvement of cultivated barley." In Shewry, P.
R. (ed.): "Barley: Genetics, ٠١‏ ‎Biochemistry, Molecular Biology and Biotechnology," pp. 3-18. CAB‏ ‎International, Wallingford, UK.
ISBN 0-85198-725-7, 1992.‏ ‎Wu, J. et al., "Nonsense-mediated mRNA decay (NMD) silences the accumulation‏ ‎of aberrant trypsin proteinase inhibitor mRNA in Nicotiana attenuata." Plant J.‏ ‎Vo‏ .2007 ,51:693-706 جدول ‎:٠١‏ قائمة الترتيب cv. ‏الشعير من‎ cDNA Nucleic acid ١ ‏رقم:‎
‎«Haruna Nijo‏ يمتد فوق ‎codons‏ البداية والإيقاف في جين ‎«cDNA -MMT‏ إطار
‏قراءة مفتوح لأجل ‎MMT‏
‏يستخلص ‎ill‏ من ‎GenBank‏ برقم وصول ‎AB028870‏
‏رقم: ‎Protien Y‏ الترتيب الذي يخص ‎MMT‏
‎cv.
Haruna ‏الشعير من‎
‎Nijo‏ مترجم من تعريف q. wes cv. ‏الشعير من‎ DNA Nucleic acid ‏رقم: ؟‎ genomic ‏ترتيب‎ «Prestige ‏البداية‎ codons ‏يمتد فوق‎
MMT ‏والإيقاف في جين‎ cv. ‏الشعير من‎ cDNA Nucleic acid ‏رقم: ؛‎ codons ‏فوق‎ Jia «Prestige ‏البداية والإيقاف في جين‎ ‏من‎ cDNA ‏ترتيب‎ MMT ‏إطار القراءة المفتوح لأجل‎
MMT
‏الشعير معاد‎ cDNA Nucleic acid o ‏رقم:‎ ‎tev. Prestige ‏استنساخه من‎ ‏معاد استنساخه من‎ cDNA ‏إطار القراءة المفتوح لأجل‎ ‏الذي يمتد فوق‎ MMT ‏البداية والإيقاف في‎ 98 ‏لكن محتوي‎ MMT ‏جين‎ ‏على ؟ طفرات (قارن مثال‎ ‏مستخدم لأجل الإظهار‎ .)٠ ‏الشعير‎ MMT ‏المغاير لأجل‎ -E. coli ‏في‎ ‏الشعير‎ MMT ‏الترتيب لأجل‎ Protein + ‏رقم:‎ ‏المترجم‎ cov. Prestige ‏من‎ ‎. 4 ‏من تعريف الترتيب رقم:‎ ‏تريب لأجل 7 من‎ Protein 7: ‏رقم‎ ‎«cv. Prestige ‏الشعير»‎ ‏مترجم من تعريف الترتيب‎
رقم: ©؛ يستخدم لتخليق ‎er ||‏ رقم: 8 ‎DNA Nucleic acid‏ الشعير من الطفرة 7 الترتيب ‎Genomic‏ ‏لأجل ‎MMT‏ الذي يمتد فوق 08 البداية والإيقاف في جين ‎MMT‏ ‏رقم: 4 ‎Nucleic acid‏ ترتيب جزءِ ‎RT-PCR‏ المكبر من ‎cv.
Prestige‏ الشعير» طبقا للمنتج ‎١‏ في الشكل "١(ب)‏ )2 رقم: ‎Nucleic acid ٠١‏ ترتيب جزء ‎RT-PCR‏ المكبر من طفرة الشعير ‎AY‏ ‏طبقا للمنتج ؟ في الشكل "ا(ب)» (ج) رقم: ‎Protein ١١‏ ترتيب مترجم كامل ‎Bide‏ من ‎RNA‏ مجدول بطريقة خاطئة من الطفرة 8057 ‎RNA‏ ‏المذكور يعمل كجزيء تركيبي في تكبير ‎RT-PCR‏ مما يوفر المنتج ؟ في الشكل ١١(ب)؛‏ )© رقم: ‎Nucleic acid ١١‏ ترتيب جزء ‎RT-PCR‏ المكبر من طفرة الشعير ‎AY‏ ‏مقابل المنتج ‎AY‏ الشكل "ا(ب)» (ج). رقم: ‎Protien ٠١‏ ترتيب مترجم كامل مشتق من ‎RNA‏ المجدول بطريقة ay ‏خاطئة من طفرة الشعير‎ ‏المذكور‎ RNA ‏يعمل‎ 7 ‏كجزيء تركيبي في تكبير‎ ‏مما يوفر المنتج ؟‎ RT-PCR 2) S(T ‏في الشكل‎ ‏المكبر‎ RT-PCR ja ‏ترتيب‎ Nucleic acid VE ‏رقم:‎ ‎ATTY ‏من طفرة الشعير‎ ‏الذي يقابل المنتج ؛ في‎ ‏(ج).‎ (Yds ‏ترتيب مترجم كامل مشتق من‎ Protien ١١ ‏رقم:‎ ‏المجدول بطريقة‎ RNA 860577 ‏خاطئة من الطفرة‎ ‏المذكور كجزيء‎ RNA ‏يعمل‎ ‎RT-PCR ‏تركيبي في تكبير‎ ‏ض مما يوفر المنتج ؛ في الشكل‎ 2) (=) cv. ‏الشعير من‎ DNA Nucleic acid ١١ ‏رقم:‎ ‏الترتيب‎ «Sebastian
MMT ‏لأجل‎ Genomic codons ‏الذي يمتد فوق‎ ‏البداية والإيقاف في جين‎
MMT cv. ‏الشعير من‎ cDNA Nucleic acid ١١ ‏رقم:‎ ‎cDNA ‏ترتيب‎ 2 ‏لإطار القراءة المفتوح لأجل‎ ‏يمتد فوق‎ A MMT ‏البداية والإيقاف في‎ 95
MMT ‏جين‎ ay cv. ‏الشعير من‎ MMT ‏ترتيب‎ Protien ١8 ‏رقم:‎ ‏المترجم من‎ (Sebastian
AY ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ‏الشعير من الطفرة‎ @DNA Nucleic acid 14 ‏رقم:‎ ‎Genomic ‏الترتيب‎ ٠08 ‏الذي يمتد فوق‎ MMT ‏لأجل‎ ‏البداية والإيقاف في‎ 98
MMT ‏جين‎ ‏المكبر‎ RT-PCR ‏ترتيب جزء‎ Nucleic acid Yo ‏رقم:‎ ‏الشعيرء‎ cv.Sebastian ‏من‎ ‏الذي يقابل المنتج © في‎ ‏الشكل ١١(ب) (ج).‎ ‏المكبر‎ RT-PCR ea ‏ترتيب‎ Nucleic acid YY ‏رقم:‎ ‎VENA ‏من طفرة الشعير‎ ‏الذي يقابل المنتج 7 في‎ ‏الشكل 16 )=( (ج).‎ ‏ترتيب بطريقة كامل المشتق‎ Protien YY ‏رقم:‎ ‏المجدول بطريقة‎ RNA ‏من‎ ‎VE VA ‏خاطئة من الطفرة‎ ‏المذكور كجزيء‎ RNA ‏يعمل‎ ‎RT-PCR ‏تركيبي في تكبير‎ ‏في الشكل‎ idl ‏مما يوفر‎ (2) (1 ‏المكبر‎ RT-PCR ea ‏ترتيب‎ Nucleic acid YY ‏رقم:‎ ‎NEVA ‏من طفرة الشعير‎ ‏في‎ ١ ‏الذي يقابل المنتج‎ 2) of) ‏الشكل‎
‎RNA‏ مجدول بطريقة خاطئة من طفرة الشعير 46178 يعمل ‎RNA‏ المذكور كجزيء تركيبي في تكبير ‎RT-PCR‏ ‏مما يوفر المنتج ‎١‏ في الشكل 7( )2 رقم: ‎Nucleic acid Yo‏ ترتيب جزءء ‎RT-PCR‏ المكبر من طفرة الشعير ‎VEDA‏ ‏الذي يقابل المنتج 4 في الشكل ١١(ب)»‏ )3( رقم: 16 ام ترتيب مترجم كامل مشتق من ‎RNA‏ مجدول بطريقة خاطئة من طفرة الشعير ‎VENA‏ ‏يعمل ‎RNA‏ المذكور كجزيء تركيبي في تكبير ‎RT-PCR‏ ‏مما يوفر المنتج / في الشكل الب (ج) رقم: ‎Nucleic acid YV‏ جزء ‎Sacll-BamHI‏ من المنتج 2 (الشكل ‎(IY‏ ‏(ج))- مع موقع ‎BamHI‏ ‏مقحم مباشرة بعد ‎codon‏ ‏إيقاف الترجمة- لتشييد ‎plasmid pET19b-‏ ‎Line8063-Prod2‏ الإظهار (قارن الشكل ‎٠١١‏ (ب)). رقم: ‎Sacll-BamHI a Nucleic acid YA‏ من المنتج ¥ (الشكل ‎(VY‏ ‏(ج))- مع مرقع ‎BamHI‏
مقحم مباشرة بعد ‎codon‏ ‏إيقاف الترجمة- لتشييد ‎plasmid pET19b-‏ ‎Line8063-Prod3‏ الإظهار (قارن الشكل ‎١١‏ (ج)) (مماتل لتعريف الترتيب رقم: ‎(YY‏ ‏رقم: ‎Nucleic acid YA‏ جزء ‎Sacll-BamHI‏ من المنتج ؛ (الشكل ‎(QI Y‏ (ج))- مع موقع ‎BamHI‏ ‏مقحم مباشرة بعد ‎codon‏ ‏إيقاف الترجمة- لتشييد ‎plasmid pET19b-‏ ‎Line8063-Prod4‏ الإظهار (قارن الشكل ‎١١‏ (د)). رقم: ‎Nucleic acid ٠١‏ جزء ‎Sacll-BamHI‏ من المنتج ‎١‏ (الشكل ‎١١‏ (ب)؛ (ج))- مع موقع ‎BamHI‏ ‏مقحم مباشرة بعد ‎codon‏ ‏إيقاف الترجمة- لتشييد ‎plasmid pET19b-‏ ‎Line14018-Prod6‏ الإظهار (قارن الشكل ١١٠(ب)).‏ رقم: ‎Nucleic acid 7١‏ جزء ‎Sacll-BamHI‏ من المنتج ‎١‏ (الشكل ‎٠١‏ (ب)؛ (ج))- مع موقع ‎BamHI‏ ‏مقحم مباشرة بعد ‎codon‏ ‏إيقاف الترجمة- لتشييد ‎plasmid pET19b-‏ ‎Line14018-Prod7‏ الإظهار (قارن الشكل ‎٠١‏ (ج)).
a ‏من‎ Sacll-BamHI ‏جزء‎ Nucleic acid YY ‏رقم:‎ ‏(الشكل 1" (ب)؛‎ A ‏المنتج‎ ‎BamHI ‏(ج))- مع مرقع‎ codon ‏مقحم مباشرةٍ بعد‎ ‏إيقاف الترجمة- لتشييد‎ plasmid pET19b- ‏الإظهار‎ Line14018-Prod8 .))د(١‎ ١7 ‏(قارن الشكل‎ ‏متولد من‎ PCR ‏جزء‎ Nucleic acid YY ‏رقم:‎ ‎cv. ‏من‎ genomic DNA ‏مكبر باستخدام‎ (Prestige 9٠ ‏مجموعة مادة أولية رقم‎ )7 ‏(قارن جدول‎ ‏أذ م"‎ : Nucleic acid ve ‏قا‎ ‎JR Hela PCR ‏جرء‎ ad) ‏من الطفرة‎ genomic DNA ‏باستخدام‎ a (AY
YY ‏مجموعة مادة أولية رقم‎ )7 ‏(قارن جدول‎ ‏مثو لد م"‎ PCR ‏دم‎ Nucleic acid Yo ‏قا‎ ‏رقم: جزء مدولد من‎ cv. ‏من‎ genomic DNA ‏باستخدام‎ Sa «Sebastian
Yq ‏مجموعة مادة أولية رقم‎ (2 ‏(قارن جدول‎ ‏ذء 06 متولد م"‎ Nucleic acid veld ‏رقم : جزء مدولد من‎ ‏من طفرة‎ genomic DNA ‏مكبر باستخدام‎ VEYA
Ya ‏مجموعة مادة أولية رقم‎ )4 ‏(قارن جدول‎
‎Nucleic acid‏ مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: ‎os TV‏ الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر 1 الشعير. ‎Nucleic acid‏ مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: ‎‘os . YA‏ الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر 1 الشعير. ‎Nucleic acid‏ مادة أولية متقدمة لتكبير ‎a YA‏ الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر الشعير. ‎Nucleic acid ~‏ مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: 56 الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر 1 الشعير. ‎Nucleic acid‏ مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: ‎Co ١‏ الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر 1 الشعير. ‎Nucleic acid‏ مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: 7 ‎Lo‏ ‏الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر 1 الشعير. ‎Nucleic acid 2‏ مادة أولية معكوسة لتكبير رقم . . ‎J‏ ‏الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر 1 الشعير. ‎Nucleic acid‏ مادة أولية معكوسة لتكبير رقم: ‎EE‏ ‏الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفر الشعير. ‎Nucleic acid‏ مادة أولية معكوسة لتكبير رقم: £0 ‎Lo‏ ‏الترتيب ‎genomic‏ الذي يشفقر 1 الشعير. مادة أولية معكوسة لتكبير رقم: 1 aA ‏الذي يشفر‎ genomic ‏الترتيب‎ ‏الشعير.‎ 1 ‏أولية معكوسة لتكبير‎ sale Nucleic acid fy ‏رقم‎ ‏الذي يشفر‎ genomic ‏الترتيب‎ ‎. pill MMT ‏مادة أولية معكوسة لتكبير‎ Nucleic acid EA ‏رقم:‎ ‏الذي يشفر‎ genomic ‏الترتيب‎ ‎. ‏الشعير‎ 1 ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid £4 ‏رقم:‎ ‎MMT ‏يشفر‎ cDNA ‏ترتيب‎ ‏الشعير.‎ ‏أولية متقدمة لتكبير‎ sala Nucleic acid 5٠ ‏رقم:‎ ‎MMT ‏يشفر‎ cDNA ‏ترتيب‎ ‏الشعير.‎ ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid 0) ‏رقم:‎ ‎MMT ‏يشفر‎ cDNA ‏ترتيب‎ ‏الشعير.‎ ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid oY ‏رقم:‎ ‎MMT ‏يشفر‎ cDNA ‏ترتيب‎ ‏الشعير.‎ ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid oF ‏رقم:‎ ‎MMT ‏يشفر‎ cDNA ‏ترتيب‎ ‏الشعير.‎ ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid of ‏رقم:‎ ‎MMT ‏يشفر‎ cDNA ‏ترتيب‎ ‏الشعير.‎ ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid 20 ‏رقم:‎ ‎MMT ‏يشفر‎ cDNA ‏ترتيب‎
‎ee |‏ رقم: 51 ‎Nucleic acid‏ مادة أولية متقدمة لتكبير ‎cDNA in‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: ‎Nucleic acid OV‏ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: ‎Nucleic acid OA‏ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: 04 ‎Nucleic acid‏ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: 60 ‎Nucleic acid‏ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: ‎Nucleic acid +١‏ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: 67 ‎Nucleic acid‏ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: 7+ ‎Nucleic acid‏ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير. ‏رقم: 64 ‎ala Nucleic acid‏ أولية معكوسة لتكبير ترتيب ‎cDNA‏ يشفر ‎MMT‏ ‏الشعير.
Yoo
Nucleic acid 10 ‏رقم:‎ ‏الوصل بالجدل البديل لجين‎ ‏الشعير.‎ MMT ‏يشفر‎ >
Nucleic acid 176 ‏رقم:‎ ‏الوصل بالجدل البديل لجين‎ ‏الشعير.‎ MMT ‏ا يشفر‎
Nucleic acid TV ‏رقم:‎ ‏عن الوصل بالجدل البديل‎ ‏الشعير.‎ MMT ‏ا لجين يشفر‎
Nucleic acid A ‏رقم:‎ ‏عن الوصل بالجدل البديل‎ . ‏الشعير‎ MMT ‏ا لجين يشفر‎ ‏ض‎ ‏ماد أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid Vv) ٍ = ‏الذي يشفر ترتيب‎ Protien ٍ
MMT ‏جين الشعير‎ ‏مادة أولية معكوسة لتكبير‎ Nucleic acid VY ‏رقم:‎ ‏الذي يشفر ترتيب‎ 08
MMT ‏ا جين الشعير‎ ‏ض‎ ‏رقم: آلا‎ a ER
Reni Ea 8057 ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎Nucleic acid ‏خلأ‎ sa ‏الب‎
٠١١ ‏مادة أولية متقدمة لكشة‎ Nucleic acid VY ‏رقم و‎
AY ‏عن طفرة‎ SNP ‏مادة أولية متقدمة كذ‎ Nucleic acid VA ‏رقم‎ ‎AY ‏عن طفرة‎ SNP iC] ‏مادة أولية متقدمة‎ Nucleic acid Va ‏رقم:‎ ‎AY ‏عن طفرة‎ SNP 23) ‏مادة أولية متقدمة‎ Nucleic acid Av ‏رقم:‎ ‎AY ‏عن طفرة‎ SNP ‏لكشة‎ i ‏مادة أولية‎ Nucleic acid AY ‏رقم:‎ ‎8017 ‏عن طفرة‎ SNP ‏مادة أولية معكوسة لكشة‎ Nucleic acid AY ‏رقم:‎ ‎AY ‏عن طفرة‎ SNP ‏لكشة‎ i ‏مادة أولية‎ Nucleic acid AY : ‏رقم‎ ‎AY ‏عن طفرة‎ SNP ‏أكضة‎ A oS ‏مادة أولية‎ Nucleic acid AS : ‏رقم‎ ‏عن طفرة تيم‎ SNP >: ‏ماد أولية متقدمة‎ Nucleic acid Ao ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎٠ ‎ne ay fa Nucleic acid AT: a8 ‏رقم : مادة أولية معكوسة لتكبير‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎١٠ ‎>: ‏ماد أولية متقدمة‎ Nucleic acid AY ‏رقم ب‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎١٠١ ‏ا‎ sf. Nucleic acid AA ‏د‎ ‏معكوسة لتكبير‎ all ‏رقم : مادة‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎
٠ ‏مادة أولية متقدمة لتكبي‎ Nucleic acid Ad ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎٠6 ‏مادة أولية معكوسة لتكبي‎ Nucleic acid 10 ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎٠ ‏مادة أولية متقدمة لتكبي‎ Nucleic acid 1) ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‏:ا‎ ‏مادة أولية معكوسة لتكبير‎ Nucleic acid 57 ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‏ا‎ ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid 17 ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎YEA ‏مادة أولية معكوسة لتكبير‎ Nucleic acid q¢ ‏رقم‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‏ما‎ ‏مادة أولية متقدمة لتكبير‎ Nucleic acid 40 ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎YEA ‏أولية معكوسة لتكبير‎ sale Nucleic acid 17 ‏رقم:‎ ‏من طفرة‎ DNA ‏أجزاء‎ ‎٠١ ‏مادة أولية متقدمة لكشف‎ Nucleic acid AV ‏رقم:‎ ‎١٠5٠8 ‏عن طفرة‎ SNP ‏مادة أولية متقدمة لكشف‎ Nucleic acid IA ‏رقم:‎ ‎١٠٠18 ‏عن طفرة‎ SNP
٠١
رقم: 44 ‎Nucleic acid‏ مادة أولية متقدمة لكشة ‎SNP‏ عن طفرة ‎١55178‏
رقم: ‎Nucleic acid ٠٠١‏ مادة أولية متقدمة لكشة ‎SNP‏ عن طفرة ‎١618‏
رقم: ‎Nucleic acid ٠١١‏ مادة أولية معكوسة 2.380 ‎SNP‏ عن طفرة ‎١6178‏
رقم: ‎Nucleic acid ٠١١‏ مادة أولية معكوسة لكشة ‎SNP‏ عن طفرة ‎١6178‏
رقم: ‎Nucleic acid Vo‏ مادة أولية معكوسة لكشة ‎SNP‏ عن طفرة ‎١٠١٠68‏
رقم: ‎Nucleic acid ٠١‏ مادة أولية معكوسة لكشة ‎SNP‏ عن طفرة ‎١56178‏
AR
‏قائمة الترتيب‎
Carlsberg Breweries A/S >١٠١<
Heineken Technical Services B.V. ‏منخفضة‎ DMS ‏مشروبات مشتقة من الشعير وملت مع مستويات‎ >١١< 1600000 >٠٠١< ٠١: >< ٠,4 ‏إصدار‎ Patentln <VV > ١ > ٠< ‏ات‎ >" ١ <
DNA <Y\)Y> ‏الشعير‎ cv. Haruna Nijo >17 ١< ١ >. .< atggetgegg cggeggeggga cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠ geggegtacg gegeegecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠٠٠ gaggecagge ggetectegg cgeegtgega cggegetteg cegeeggegg cecggeegeg ٠ gggctegagt gettecgeac cttccactte cgeatccacg acgtegtect cgacceccac ٠6 ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatettc ٠ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgca £Y gaaaagtggt gcccttcgaa ggtttatggt ctggatataa acccaagacc tatcaagatt ¢ Ae gcatggataa acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg ٠8 gaggggaaaa cattgcttga cagagtcgaa ttctatgaat ctgatcttct ttcttactgt ٠ agagataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat tcttaacccc ٠ aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt ctigtactcc VY. ttgagcaact actgtgetct ccagggtttt gttgaggacc aatttggect cgggttgatt VA. gctecgggetg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtettat ggtattcaac ٠ atgggaggcc ggecaggaca aggtgtetgt gagegectat ttcttcgeeg tggatttege 8 atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgecg acacagacat ctcegettta ٠
١٠١.
gttgaaattg agaaaaatag ccggcatcge ttcgagttct ttatggatct 1 ٠ cagcctgtgt gtgegegeac ageatgggea ‏الممدعتدمما‎ ctggtggecg 0161 ٠١ getttgtetg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtgaagaa aatatttgag ٠ ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agctcectcg atttgtcett tgatgatgat ٠٠٠ tctgttgetg atgaaaaaat tectttecta geatacctag ctagtttett gcaagagaat ٠ aagtctaatc cttgtgagec tccagetgga tgtttaaatt tccggaatct tgttgetgga ٠١٠ tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgttgttgt gttcccatee YYA cgtgetgttg caatcgaaaa tgetcttegg ttgttctcac ctggacttge aattgttgac ٠8 gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa tggttaacat ctttagcaat tgaggaaagt Youu aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠٠ gagttgatca ggaaactgaa gccccaggtt — gttgttactg geatggetca gtttgaggcet ٠١٠ atcaccagtg ctgctttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg ticecgatta 1 As ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctgc caagctcaaa tggtgtattg 8 aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag YA.» aatcaggttt ~~ attctgatct ggaagttget tttgctatct ctgaagatcc aactgtttat ٠ aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata cttcigtgat cagccagcac Yay. tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg geatttcaaa ttggtgaccg gceatccacaa ١ AA caagagagag aacctgcaga agtgatatct aaggagatga tagggttttc aagttcagct ٠١8 215160906066 tagaaggagce tgagtttttc gttcctggtt ccatggaatc cggtgtcata ٠ catatggatc tggaccgcag cttcttgeca gtaccttetg cagtaaacge ctccattttc ١٠٠ gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaactg atgtccgttc cagcattcag 1٠ cagctggtga aagatagcta tggtttctca geaggeggtg cttctgaaat tatatacggg 10 aacacctgtc tcgegctett caacaagctt gttctttget geatgcaaga acagggeace YY ٠8 ttgettttce ccttgggaac caacgggeat tatgtcaacg cagcaaagtt tgtgaatgea ١٠85 accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggcttca agatcgaacc aagtgetcta 1٠ gecgacacac tagagaaggt gtctcageeg tgggtetata 1116186666 cacaatcaac YoY. cctactgget tectgtacag tgacgacgat atagcagage tgetttetgt ctgtgegaca 06 tacggagcca gggtggtegat agatacctcc tcetctggtc tggagtteca agecacegge Y1¢
١ tgcagccagt ggaatttgga aagatgtctt tctaatgtca agtcttcaaa gecctegtte 1٠8 tccgttgtce tgetcggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg ٠ tttctgatta tgagcgactc gtecttggtt gacacafttt acagtttcec aagcettgagt YA ١ cggecacaca geacgttgaa ‏عللاعدعماو‎ aggaagcetgt tgggtcttaa gaaccagaag YAA. gatcagcatt tctctgatct catecttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgecgac Y 44 cagttgatca agatgcttga gagetgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate 9.٠ tcgatgcttg caaaaccgac ‏المعماودي‎ ggcaaatcge tcaaggtgga ‏48م‎ Yelle ggcaagetgg acagccacaa catgagggaa gecctcetga ggtccaccgg getgtgeatt YY Ye agcagcageg ggtggacagg ggtgecggac tactgeeget tcagctttge tetggagage YA. ggcgacttcg accgggecat ggagtgeate geecggttca gggagetggt ccttggtgge YY ٠8 ggtgctaagg tgaatggtag caactag yyy ١ <YY.>
Yo AA > ١<
PRT <Y\)Y> ‏الشعير‎ ev. Haruna Nijo <YYY>
Y ‏<يءع>‎ ‎Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ 5 ١ ٠ ١ o
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Ye Yo 7١
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $e $0 val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
On 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His no Ye Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln GIn Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
AO 9. q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu
Yeo ١٠١ ٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu
٠١ ١١ VY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠١ \Yo ١٠8
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Pro Ile Lys Ile
Yeo ١٠ yoo "٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro ١١5 ‏لاا‎ ١75 lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg val Glu Phe Tyr
YAS YAo V4.
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١5 Yoo Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala 7٠ 7١١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. YYo Yéo
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yé¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yl. Yio YV.
Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ‏د دا‎ YAO
Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Yao Yoo
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu
Y.o 7,١ Yio YY.
Val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp
Yyo 7 7١
Leu Val Gly Asp ‏ماه‎ Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met
Yeo Yio Yo.
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser val Tyr Ser Cys Gln
Yoo Yi. Yio
Leu Arg Gln Pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
TV. ‏دا‎ YA
Gly Phe His Glu Val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp ‏مم7‎ Ya. Yao ‏ف‎
٠١
Ser Val Ala Asp Glu Lys Ile Pro Phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe £0 ٠ ١١
Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro Cys Glu pro pro Ala Gly Cys Leu ٠ ‏د‎ gy.
Asn Phe Arg Asn Leu val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile (yo 4 ‏م‎ ‎Pro Leu Thr Pro Asp Asn Val Val Val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala £0. ‏دم‎ ra
Ile Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp ¢lo Lv. tyo EA
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala ‏م 86 م‎ [le Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr Val Ile Glu Ala
Oa 0.0 oY.
Pro Arg Gln Ser Asp Leu Leu lle Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys Pro ه١‎ oY. ovo
Gln Val Val Val Thr Gly Met Ala Gin Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala oy. ovo of
Ala Phe val Asn Leu Leu Ser Val Thr Lys Asp Val Gly Ser Arg Leu o¢o 00, ooo oT.
Leu Leu Asp Ile Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser oto ov. ovo
Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA ‏ديه‎ 094.
Ala Ile Leu Cys Gly Leu Val Lys Asn Gln val Tyr Ser Asp Leu Glu odo Tew 1.0
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr val Tyr Lys Ala Leu Ser ٠ ‏ولي‎ “٠
Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser Val Ile Ser Gln His
Ye 17 yo 6
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe ‏فاه‎ Ile Gly Asp 1¢0 10. 100
Arg His Pro Gin Gln Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu 1٠ le vs
Met Ile Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu
<١ vo TA ‏دغ‎ ‎Phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 14. 140 Va
Asp Arg Ser Phe Leu Pro Val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe ‏.لا‎ ال٠‎ Vio VY.
Glu Ser Phe Val Arg Gln Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arg ‏ألا 76 هلا‎
Ser Ser Ile Gln ‏مله‎ Leu Val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly \& Veo Yo.
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
Yoo 7٠ Yio
Lys Leu Val Leu Cys Cys Met Gln Glu Gln Gly Thr Leu Leu Phe Pro ‏لال‎ Yvo YA
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr Val Asn Ala Ala Lys Phe Val Asn Ala ‏دالا‎ Va. ‏0ل‎ Ave
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu ‏ميم‎ AY Ayo
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp val
AY + AYo AY
Tyr Ile Ser Gly Pro Thr Ile Asn Pro Thr Gly Phe Leu Tyr Ser Asp
AYo Ags Ago
Asp Asp lle Ala Glu Leu Leu Ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
AO Aoo ATs
Val Val Ile Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Ato INE AVo AN
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn Val Lys Ser Ser
AAO ‏ف‎ Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu
Quen 4.0 ٠
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١١ ٠ Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser
Y. Yo 44
Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn Gln Lys q¢0o 0. qo00 4
١٠
Asp Gln His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu ‏عله‎ Lys Glu Thr Leu Lys av. ve
Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Met Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp
AA ‏مم‎ 44.
Ala val Gly cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala 440 ١٠ ٠ ٠ 2
Tyr Ile Gly Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu ٠١١ ٠١١ YoY ٠ ‏هت‎ ٠
Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu
YoY ٠١ ٠١ o ٠ o
Cys lle Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val pro Asp Tyr Cys Arg
Yo ٠١6 ٠١٠ ٠ ‏هت‎ ٠
Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu ٠١٠ ٠١ ٠١
Qo ٠ o
Cys Ile Ala Arg phe Arg Glu Leu Val Leu Gly Gly Gly Ala Lys ٠١ ٠١ ٠١ . ‏هت‎ ٠
Val Asn Gly Ser Asn ٠ o 7 >7٠٠< 1091 > ١<
DNA <Y\Y> ‏الشعير‎ cv. prestige <YVYY> ١ ‏<ي.ع>‎ ‎atggetgegg cggeggggga cgiggaggeg tiectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠
١١ geggegtacg gegecgeecaa ggecgtgetg gageggeteg aggegeegge 6 ١٠١ gaggccagge ggetectegg cgecgtgega cggegettcg ccgecggegg cecggeegeg YA gggctcgagt gettccgeac cttecacttc cgeatccacg acgtegtect cgacceecac Yeo ctccaaggtt gcceggecce ttcectacac accegttgtc gacccgeate tetttegeeg Yoo atctggecgt caaaagcacg cggettggta gaaatcaage ctgeaatcct gatccgttta Yi. tggctggeca gtcgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tctctaatct ١ ctacctgacc atataccgag ttggttttet ttettettgt ttccgtattt gtgtagtttt ¢A. ttettttctt tcgagceatga tgttctttga attaatgcgt accagactcc agtaattcga 68 cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa tttataacac aacgaggctt tgatcaagtg ٠٠ gtttatgtag aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta ttteccaaca ٠ attttgatgg cctctaagea tcctgtagtc atgtctactg tgtaagetac agatttattic ٠ atgtctatgt gtaagctgea aatggagaga aaagctatct atttggttgt tccagettgt ٠ tctttggcag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaagcac gacaaatgag ٠8 tggggcaage atgctgeccaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggeatgt ٠ tatctttttt tttceettet actcagtttc ttctttggga gaacaatcct actcaaccta 47» taatcataag aataaaagca agacagatga gtgctgcaga ctattggcat atataacaac ٠ taaataggac atctgtccge tatatcttta ~~ gttaataatt gtatatagac gcagtctttg ٠٠١ tgctggaaaa actgcaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ٠٠ cttetttgtt ~~ acgttttgtg tgcataaagc attaacttct gtetttagtt ggcgeagegg ٠٠ taaaaacacc ~~ cattgcttaa tattttattt gctttccgta gcttgataaa atttcaactg ٠١٠ cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠ ccagaagact ggtcattcac ‏عدععما10‎ ggtctcaacc ggeatccaga ttecatcttc ١ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgeca ٠ gaaaagtggt gcccttcgaa ggttggecace ftettgttccg tagatattta tcttatcteg ٠٠٠ tttgttgcaa acatgggacc tgcagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠ cttttaggtg tctgccagta gtetgetggt ggtctaattt tcttggtata cctgatgecg ٠١١ tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggcaa ggcattacca ccacatattg titctacaat ٠١٠ gctgaacaat tgctctectt tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgea ccttagtagt YV¢
١٠١ ttaagccaca aataccageg ‏#الممقعاقة‎ gtttgcagtc agcettggeat 001 YA gagccttggt tgttcttttg aaggtttatg gtctggatat aaacccaaga gctatcaaga ٠ ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggtctccca atctatgatg YAY. cggaggggaa aacattgctt gacagagtcg aattctatga atctgatctt ctttcttact ٠٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggtcag ١8 gtttttacca ~~ atttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat 88018 ٠ ttaatatctg cctttcagat 1014266606 aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact 7١" gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc ‏المصعيدي‎ actgtgetct ccaggtgagt YYY. tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgtta ctaaatggtt acccatgtca ٠ gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttct YY ٠8 atcctgaaat tgactttaca atgcttgttc ataatctget tacgaaatat gegtttgaac ٠8 atttctcttt ‏#عماعتاف)‎ catgtggtca gacctttata taagaaaatg aagtttttgt ١٠ agaaataatg tatgctttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtet YoY. aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag ١ ggggttagca gtccaaatcc acctcaagtt caacctattg ‏لللاممفقاقه‎ ggtcttacaa 18 cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca gictttccta taaaaatgtc 48 ٠ tggaattatt aacagcggta tttattttta ~~ ccctgtttaa tttttteett tgctaaaaga 1٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY. getgattgta cgattccage tteeggttgt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgetge ٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa ١11٠6 gggatatctg tgataaagcc tagtggtctt atggtattca acatgggagg ccggecagga ١٠٠ caaggtgtct gtgagecgeet atttctacge cgtggatttc geatcaataa getctggeaa Yo» acaaaaatta tgcaggtagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt YY» ttccatgcca gcaacageat tatatcetgg ttagaggaat atgcetcttca tgttgcacac 2٠ caatcttcag ctgggectag aattttcatc taccggetta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtetttg caggetgetg acacagacat ٠٠ ctecgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttcgagfttet ttatggatet ‏؟؟‎ ٠ tgttggggat cagcctgtgt gtgegegeac ageatgggea tacatgaaat ctggtggeeg YEV «
١٠١ catttcacat ~~ gctttgtctg ‏عاهعمامقاع‎ tcaacttcgc cageccaace 1 YEA actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat aataatttgg 74 agaatttcag 8 tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcagcag ٠٠ ctcectegat ttgtectttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttcctage ٠ atacctagct agtttettge aagagaataa gtctaatcct tgtgagectc cagcetggatg YVY. tttaaatttc cggaatcttg ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac ٠ tcctgatgta agacttggtg ‏عمععاتماه‎ acaattatgt ttgeftatta gaaattcata 6 agatcaacct atttgatgct tctcacgtat gcttcatgtg acacttcett ttcctetggt 18 gcaccagaat gttgttgtgt tcccatcccg tgetgttgeca atcgaaaatg ctetteggtt Yai. gttctcacct ggacttgeaa ttgttgacga acacctaacc agacacttge ccaagcaatg ٠ gttaacatct ttagcaattg aggtactttg accgatactc ccctetttet ttetgtgttt € vA ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagtt atgctgacaa gaatttcgat ¢ ١٠ gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca 8 7 tcgaagcacc acgccaatca gatttgetga ttgagttgat caggaaactg aagcectcagg EY. ttgttgttac tggeatgget cagtttgagg ctatcaccag tgetgettte gtgaacttat ARE taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatttcagaa catctggaat €Y A. tgtctagtct gccaagctca aatggtgtat tgaaatatct tgetgggaag acectgectt 48 cacatgeggc tatattgtgt ~~ ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagcctgaac £0. + tctagttgaa ctgttgtgeca tactatatag aatatcttga cttttatatg tactttagaa £07. acactgttta aatgtactca tttetttttg cttcatttta cttgcaggtt tattctgatc ٠ tggaagttgc ttttgctatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta £TA. ttgagctatt ggaaggacat actictgtga tcagccagea ctattatggt tgtettttec 78 atgagetget ggeatttcaa attggtgacc ggeatccaca acaagaggta aacatggett €A geetetteca gttetceate tcactcagtt ctgtccacaa ggtgecgaat gatctgttca ٠ agtggacact cccctcagca cgggeaaget agtccatgaa tttggattag ttecctetta 4٠ getgggtact tcgattacac cacaatgage tcctcaacgt ggtctggttt atgtttttca £€4A tgttttccet ctaatgtttg gttgetcttt ttcagagaga acctgcagaa gtgatatcta 5 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccct agaaggaget — gagttttteg 0٠
١6 ttcctggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgeage ttettgecag © ٠١٠ taccttctge agtaaacgcc 160811662 aaagttttgt tcgtcagaac 21686188 © YY. ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcagc agcetggtgaa agatagctat ggttictcag © YA. caggeggtge ttctgaaatt atatacggga acacctgtct cgegetctte aacaagcttg © Yeo ttctttgctg catgcaagaa cagggeacct tgettttece cttgggaace aacgggeatt © ‏م‎ ‎acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt © £1 caggcttcaa gatcgaacca agtgctctag ccgacacact agagaaggtg tctcageegt 8 Yo gggtctatat ttctggeecc acaatcaacc ctactggett cctgtacagt gacgacgata 05 Ae tagcagaget getttetgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect © 16 cctetggtct ggagttccaa gecaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtettt ‏لاه‎ ‎ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegttct ccgttgtect getcggagag ctgtectttg © Vi. agctgaccac ggcetgggett gatttcgggt ttctgattat gagegactcg tccttggttg ٠ acacatttta cagtttccca agcttgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca ‏مغيض‎ ‎ggaagcetgtt gggtcttaag aaccagaagg atcageattt ctctgatetc atccttgage © 44 agaaggagac gttgaagaat cgtgccgace agttgatcaa ggtatgeett ttgggatatc Teen ctgtgtttag ~~ getctetgtt ttettccect gatcagetet cegatecect tacatcctta Te ggctaatttc agtacttcaa gtttgecacg catttctgac atattcttic ctettgtttt ١٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgcett gagagetgeg getgggacge tgtgggctge 1٠ catggcggea tctcgatget tgecaaaaccg accgectaca ttggeaaatc getcaaggtg 1 ٠ gacggetttg agggcaaget ggacagecac aacatgaggg aageccteet gaggtecace ٠ gggctgtgea ttagcagcag cgggtggaca ggggtgecgg actactgeeg cttcagettt 177٠ getetggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tcgeecggtt cagggagetg 8 ١ gicettggtg geggtgctaa ggtgaatggt 8 104 >١'٠< <٠ا‏ "> الت
DNA <Y\Y> ‏الشعير‎ cv. prestige ‏7؟>‎ ١< ‏ا‎
١١٠ atggetgegg cggegggega cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge 086 1. geggegtacg gegeegecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee Ye. gaggecagge ggeteetegg cgecgtgega cggegettcg ccgeeggegg ceeggeegry YA. gggctcgagt gettcegecac cttccactte cgeatccacg acgtegiect cgacceccac Yeo ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatctic Yi. agggataaga cagtagcaga getgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgea ١ gaaaagtggt gecccttcgaa ggtttatggt ‏ممتمادوياه‎ acccaagagc 161 EA gcatggataa acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg © ¢ gaggggaaaa cattgettga cagagtcgaa ttctatgaat ctgatctict ttcttactgt ٠ agagataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat fcttaaccee 11. aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt ctigtactce VY. ttgagcaact actgtgetct ccagggtttt gttgaggace aatttggeet cgggttgatt YA getcgggetg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtettat ggtaticaac AEs atgggaggce ggecaggaca aggtgtetgt gagegectat ttctacgeeg tggatticge Qe atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgetg acacagacat — ctcegettta ٠ gitgaaattg agaaaaatag ‏عععاتمعديو‎ ttcgagttct ‏عأعتدوعياما‎ 1 ٠١ cagectgtgt gtgegegeac agceatgggea tacatgaaat ctggtggecg catttcacat ٠١٠ getttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtgaagaa aatatttgag ٠ ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agctcecetcg atttgtcctt tgatgatgat ٠٠٠ tetgttgctg atgaaaaaat tcctttccta geatacctag ctagtttctt gcaagagaat ٠٠ aagtctaatc cttgtgagcc tccagctgga tgfttaaatt tccggaatct tgttgctgga ٠١ tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgtigttgt gttcecatce ٠ cgtgetgttg caatcgaaaa tgetettcgg ttgttctcac ctggacttge aattgttgac ٠8 gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa tggttaacat ctttagcaat tgaggaaagt Youu aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠ gagttgatca ggaaactgaa gcctcaggtt gttgttactg geatggetca gtttgagget YY. atcaccagtg ctgetttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg ttcecgatta ٠
١ ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctgc caagctcaaa ‏عاتماقاعع1‎ VV. aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag YA aatcaggttt attctgatct ggaagttget tttgctatct ctgaagatce aactgtttat ٠ aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata cttctgtgat 6 ٠١١ tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg geatttcaaa ttggtgaccg ‏0816068088ع‎ ١ AA. caagagagag aacctgcaga agtgatatct aaggagatga tagggttttc aagttcaget ١ atgtccaccc tagaaggage tgagtttttc ~~ gttcctggtt ccatggaatc cggtgtcata ١٠ catatggatc tggaccgcag cttettgeca gtaccttetg cagtaaacgce ctccattttc YY» gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaaccg atgtccgtic cagcattcag YYY cagctggtga aagatageta tggtttctca geaggeggtg — cttctgaaat tatatacggg YYA. aacacctgtc tcgegetett caacaagett gttetttget geatgecaaga acagggeace ٠8 ttgettttec ccttgggaac caacgggeat tacgtcaacg cagcaaagit tgtgaatgca 68 accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggcttca agatcgaacc aagtgetcta Y£7 « gcecgacacac tagagaaggt gtctcageeg tgggtetata 1016606066 cacaatcaac ١٠ cctactgget teetgtacag tgacgacgat atagcagage tgctttctgt ctgtgcgaca ١68 tacggagcca gggtggtgat agatacctec 16010188616 tggagttcca agecacegge ٠8 tgcagccagt ggaatttgga aagatgtctt tctaatgtca agtcttcaaa gecetegtte 178 tcegttgtee tgetcggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg ٠ tttctgatta tgagegactc gtccttggtt gacacatttt acagtttccc aagcttgagt YAY. cggecacaca geacgttgaa gtacacgttc aggaagetgt tgggtcttaa gaaccagaag ١ gatcagcatt tctctgatct catccttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgecgac ٠6 cagitgatca agacgcttga gagetgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate ٠ tcgatgettg caaaaccgac cgectacatt ggcaaatcge tcaaggtgga cggetttgag ١٠ ggcaagetgg acagecacaa catgagggaa gecctectga ggtccaccgg getgtgeatt ‏؟‎ ٠٠ agcagcagcg ggtggacagg ggtgeecggac tactgeeget tcagetttge tetggagage YVYA ggcgacttcg accgggecat ggagtgeatc geccggttca ggagetggt cettggtgge YY E ggtgctaagg tgaatggtag caactag yyy ‏هه‎ <Y\V\.>
لا ‎YYiy >" ١<‏ ‎١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‎ev. prestige >7 ١١<‏ الشعير ‎<u>‏ 0 ‎atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠‏ ‎geggegtacg gegeegecaa ggecgtgetg gageggetcg aggegeegge cacgegtgea ١١‏ ‎gaggcecgte ggeteetegg cgeegtgega cgtegttttg cageagglgg tecageegeg YA‏ ‎gggctegagt gettecgeac cttccacttc cgeatccacg acgtegtect cgacceecac Yeo‏ ‎ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠‏ ‎ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggeatccaga ttccatcttc Yi.‏ ‎agggataaga cagtagcaga getgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcactigea ٠‏ ‎acccaagage 0161 EA‏ ممتعادوعياه ‎gaaaagtggt gcccttcgaa ggtttatggt‏ ‎gcatggataa ~~ acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg © 2‏ ‎gaggggaaaa cattgcttga cagagtcgaa ttctatgaat ctgatcttct ttcttactgt ٠‏ ‎agggataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat tcttaaccee ٠‏ أ ‎aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactec ١‏ ‎VA.‏ اللمعتاوجععنه ‎ttgagcaact actgtgctct ccagggtttt gttgaggacc aatttggect‏ ‎gctcgggctg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtettat ggtattcaac ٠6‏ ‎atgggaggcc ggeecgggea aggtgtetgt gagegectat ttettcgeeg tggatticge Qe‏ ‎atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgecg acacagacat ctcegettta ٠‏ ‎gttgaaattg agaaaaatag ccggeatcge ttcgagttct ttatggatet tgttggggat ٠‏ ‎cagectgtgt gtgegegeac agcatgggea tacatgaaat ctggtggecg catttcacat |) «A‏ ‎getttgtetg tgtatagetg tcaacttcge cageccaacc aggtgaagaa aatatttgag ١٠‏ ‎ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agcteccteg atttgtcctt tgatgatgat ٠١٠‏ ‎tetgttgetg atgaaaaaat tcctttccta geatacctag ctagtttctt gcaagagaat ٠١٠‏ ‎aagtctaatc cttgtgagec tccagetgga tgtttaaatt tccggaatca tgttgetgga ١‏ ‎tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgttgttgt gttcccatce YVA‏ ‎cgtgctgttg caatcgaaaa tgetcttegg ttgttctcac ctggacttge aattgttgac ٠٠8‏
لا ‎ ctttagcaat tgaggaaagt ١٠١‏ لمعممااوعا ‎gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa‏ ‎aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠٠‏ ‎gagttgatca ggaaactgaa gccccaggtt — gtigitactg geatggetca gtttgagget ١١٠‏ ‎atcaccagtg ctgctttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg tteccgatta A.‏ ‎ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctge caagetcaaa — tggtgtattg ٠‏ ‎aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag ٠‏ ‎aatcaggttt atfctgatct ggaagttget tttgctatct ctgaagatce aactgtttat YA.‏ ‎aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata cttctgtgat cagecageac YAY.‏ ‎tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg gcatttcaaa ttggtgaccg gcatccacaa ٠‏ ‎aaggagatga tagggtttic 1081 ١8‏ المتقامدياعهة ‎caagagagag aacctgcaga‏ ‎atgtccaccc tagaaggagce tgagtttttc ~~ gttcctggtt ccatggaatc cggtgtcata ١٠‏ ‎catatggatc tggaccgcag cttcttgecca gtaccttetg cagtaaacge ctccatttte ١٠٠٠‏ ‎gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaactg atgtcegtic cagcattcag ١7١‏ ‎cagctggtga aagatagcta tggtttctca geaggeggtg cttctgaaat tatatacggg ٠‏ ‎aacacctgtc tegegetett caacaagcett gttctttgct geatgcaaga acagggeace YY ٠6‏ ‎ttgcttttcc ccttgggaac caacgggeat tatgtcaacg cagcaaagit tgtgaatgca Yeon‏ ‎accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggettca agatcgaacc aagtgetcta 1٠‏ ‎gcegacacac tagagaaggt gtctcagecg tgggtetata tttetggeec cacaatcaac YOY «‏ ‎cctactgget tcctgtacag tgacgacgat atagcagage tgctttetgt ctgtgegaca Yo A‏ ‎tacggageca gggtggtgat agatacctcc tectetggte tggagttcea agecacegge YU €‏ ‎tgcagccagt ggaatttgga aagatgictt tctaatgtca agtcttcaaa gecctegtte 1٠٠‏ ‎tcegttgtee tgetcggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg ٠‏ ‎tttctgatta tgagegactc gtcettggtt gacacatttt acagtttccc aagettgagt YAY.‏ ‎cggeeacaca geacgttgaa gtacactttc aggaagetgt tgggtcttaa gaaccagaag YAA‏ ‎gatcageatt tctctgatct catccttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgeegac 16‏ ‎cagttgatca agatgcttga gagctgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate ٠‏ ‎tcgatgettg caaaaccgac cgectacatt agcaaatcge tcaaggtgga cggetttgag ١٠‏ ‎ggcaagctgg acagccacaa catgagggaa gecctectga ggtccaccgg getgtgeatt ١٠٠‏
١٠ agcagcagcg ggtggacagg ggtgeeggac tactgecget 10801066 6 YYA. ggcgacttcg accgggecat ggagtgeatc geccggttca gggagetggt ccttggtgga 7" ggtgctaagg tgaatggtag caactag yyy 1 > ٠١<
Yo AA ‏؟>‎ ١<
PRT <Y\Y> ‏الشعير‎ cv. prestige >7 ١١< “2 ‏<..ء)؛>‎ ‎Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln \ ° " Vo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg \K Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo 2 ¢o val Arg Arg Arg phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ox 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His lo Ya Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 9. q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ١ ٠١٠ ١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠ ٠١ ‘Yo
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١ ‘Yo ١٠٠
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile
Yeo You ‘Yoo ١١٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro ٠١٠ ‏دلا ا‎
Ile Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YA. YAo ٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp
VY. 40 Yoo Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn pro Asn Pro Glu Ala ٠ ١١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser ¥Yo 7 7 ‏6ل‎ ‎Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe val Glu Asp Gln Phe Gly
Y¢o You Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yi. Yio YY.
Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ‏د‎ YA. YAo
Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Ydo ١
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu ٠.٠ 7٠ Yio ry. val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp 7١ YY. 7٠
Leu Val Gly Asp Gln Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met 7٠ Yeo Yo.
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser Val Tyr Ser Cys Gln
Yoo Yi. Yio
Leu Arg Gln Pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
TV. ‏م‎ YA
Gly Phe His Glu Val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp ‏مي‎ Ya. ‏م كن‎
Ser Val Ala Asp Glu Lys ‏ع1‎ Pro Phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe 0 A to
Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro cys Glu Pro Pro Ala Gly Cys Leu £Y ١ EY.
Asn Phe Arg Asn Leu Val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile (yo 4 ‏م‎ ‎Pro Leu Thr Pro Asp Asn Val Val Val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala to. too £7. lle Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp
EV. ‏دلا‎ EA
١7١
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala ‏م‎ 86 ¢q0
Ile Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr Val Ile Glu Ala
Ou 0.0 oY.
Pro Arg Gin Ser Asp Leu Leu Ile Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys Pro ه١‎ oY. oYo
Gln Val val Val Thr Gly Met Ala Gln Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala oy. ‏هه‎ 0%.
Ala Phe Val Asn Leu Leu Ser Val Thr Lys Asp Val Gly Ser Arg Leu o¢o 00. ‏دده‎ 2٠
Leu Leu Asp Ile Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser ofo oY. oYo
Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA ‏ديه‎ 09.
Ala Ile Leu Cys Gly Leu val Lys Asn Gln Val Tyr Ser Asp Leu Glu odo Ten 1.0
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr Val Tyr Lys Ala Leu Ser ٠ Ye 7٠
Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser val Ile Ser Gln His vo 1 17 6
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe Gln Ile Gly Asp “١22ه‎ 10. 00
Arg His Pro Gln Gln Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu
Tt 116 We
Met Ile Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu lve TA ‏دغ‎ ‎Phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 14. 140 Yau
Asp Arg Ser Phe Leu Pro Val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe
Vio ال٠‎ Vio AK
Glu Ser Phe Val Arg Gln Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arq ‏هلا ل هلا‎
Ser Ser Ile Gln Gln Leu val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly ‏ملا م لا‎ Yo.
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
١١
Yoo vi. vio
Lys Leu val Leu Cys Cys Met Gln Glu Gln Gly Thr Leu Leu Phe Pro ‏للا‎ yve YA
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr Val Asn Ala Ala Lys Phe Val Asn Ala
YAo va. Yao Ave
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu
Avo AY Ao
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp Val
AY» AYo AY
Tyr Ile Ser Gly pro Thr Ile Asn Pro Thr Gly Phe Leu Tyr Ser Asp
AY 0 AEs Ago
Asp Asp lle Ala Glu Leu Leu ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
AO. Aoo AT.
Val Val Ile Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Ato AV AVo AA
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn Val Lys Ser Ser
AAO Ads Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu
Qu q.0 1
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١١ 4 Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser 7. 17٠ 4
Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn Gln Lys ‏م‎ 0. q00 ‏ف‎ ‎Asp ‏ماه‎ His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu Gln Lys Glu Thr Leu Lys qo av. ve
Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Thr Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp
AA aA0 44.
Ala val Gly Cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala 44¢ You ٠ ٠ o
Tyr Ile Gly Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu ٠١١ ٠١١ ٠١ ٠ 2 ٠
١١
Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu ٠١ ٠١ ٠١ ‏هت‎ ٠ ‏هت‎ ‎Cys Ile Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val Pro Asp Tyr Cys Arg
AER ٠6 ١٠١٠ ٠ 5 ٠
Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu ١٠١٠ ٠١ ٠ o ٠ o
Cys lle Ala Arg Phe Arg Glu Leu Val Leu Gly Gly Gly Ala Lys
YeoV YoV ٠ ٠ 2 ٠
Val Asn Gly Ser Asn ٠ o ‏؟> لا‎ ٠١<
Yo AA ‏؟>‎ ١<
PRT <Y\Y> ‏الشعير‎ cv, prestige >7 ١١<
Y >.
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ ‏هه‎ ٠١ yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Y. Yo 79١
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo 2 ¢o
Val Arg Arg Arg phe Ala Ala Gly Gly pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
On oo Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp val Val Leu Asp Pro His ‏دلا ولا‎ As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao a. 0
١
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠. ١٠١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠١ YY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١٠ ٠١١ ١8
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile
Yeo You Yoo ٠٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro
Vie VV ‏دل‎ ‎lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YA. YAo ٠8
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp do Yoo ٠١٠
Arg Ile val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ٠ ١١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. YYo ٠6
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu ‏عله‎ Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Y¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yl. Yio ‏لال‎ ‎Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ‏دلا‎ YA ‏دم‎ ‎val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly phe Arg Ile Asn Lys Leu
Yq. Ydo Toe
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu 9. YY. Yio YY. val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp
YYo YY. YYyo
Leu val Gly Asp Gln Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met
Yeu Veo You
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser Val Tyr Ser Cys Gin
Yoo v1. Yio
Leu Arg Gln pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
١١٠ 1٠ Yvo YA.
Gly Phe His Glu val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp ‏عم‎ va. Yao ‏ف‎ ‎Ser Val Ala Asp Glu Lys Ile Pro Phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe §.0 ٠٠ ١١
Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro Cys Glu Pro Pro Ala Gly Cys Leu
A ¢Yo ٠
Asn Phe Arg Asn His Val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile ١ 6 8
Pro Leu Thr Pro Asp Asn val val Val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala £0. too 8٠
Ile Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp to EV ‏ف دلاء‎
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala ‏مد‎ 86 5
Ile Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr Val Ile Glu Ala
Ou 0.0 oY.
Pro Arg Gln ser Asp Leu Leu Ile Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys Pro oye oY. oYo
Gln Val Val Val Thr Gly Met Ala Gln Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala ov. oyo 0%.
Ala Phe Val Asn Leu Leu Ser val Thr Lys Asp Val Gly Ser Arg Leu o0¢o 00. 000 oT
Leu Leu Asp Ile Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser ofo oY. ‏داه‎ ‎Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA ‏ممه‎ 4
Ala Ile Leu Cys Gly Leu Val Lys Asn ‏ماه‎ Val Tyr Ser Asp Leu Glu oqo Teo 1.0
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr Val Tyr Lys Ala Leu Ser ٠ 1٠٠ Ye.
Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser Val Ile Ser Gln His
Yo 19 ve 16
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe Gln Ile Gly Asp 1¢0 10. R00
١77
Arg His Pro Gln ‏ماه‎ Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu 11 16 Wa
Met Ile Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu ve TA Ae phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 168 140 Yoo
Asp Arg Ser Phe Leu Pro Val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe
Y.o0 ال٠ ‏دالا‎ VY.
Glu Ser Phe Val Arg ‏عله‎ Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arg ‏ه ألا‎ VY. ‏دلا‎ ‎Ser Ser Ile Gln Gln Leu Val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly ‏معلا معلا‎ You
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
Yoo Ya. Yio
Lys Leu val Leu Cys Cys Met Gln Glu Gln Gly Thr Leu Leu Phe pro
YY. ‏هلإلا‎ YA
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr Val Asn Ala Ala Lys Phe Val Asn Ala
YAo Va. 75 Ae
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu
Avo AY Ayo
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp val
AY» AYo AY
Tyr lle Ser Gly Pro Thr Ile Asn pro Thr Gly Phe Leu Tyr Ser Asp ‏دام‎ Ags Ago
Asp Asp Ile Ala Glu Leu Leu Ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
AO» Aco ATs
Val val Ile Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Alle INE AVo AA
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn Val Lys Ser Ser
AAO AQ. Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu ue 9.0 4
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١٠ 4٠ Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser
فا ‎AA Yo 4‏ ‎Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn Gln Lys‏ ‎to 0. qo00 1.‏ ‎Asp Gln His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu Gln Lys Glu Thr Leu Lys‏ ‎qo av. ve‏ ‎Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Met Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp‏ ‎AA Ao 86‏ ‎Ala Val Gly Cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala‏ ‎٠ ٠‏ 440 ‎٠ 2‏ ‎Tyr lle Ser Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu‏ ‎٠١١ ٠١١ ٠١‏ ‎٠‏ هت ‎٠‏ ‎Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu‏ ‎YoY ٠ ٠١‏ ‎o ٠ o‏ ‎Cys lle Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val Pro Asp Tyr Cys Arg‏ ‎Yo ٠١6 ٠١٠‏ . هت ‎٠‏ ‎Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu‏ ‎Yeo ٠١ ٠‏ م ‎o ٠‏ ‎Cys Ile Ala Arg Phe Arg Glu Leu Vai Leu Gly Gly Gly Ala Lys‏ ‎٠١ ٠١ ٠١‏ ‎٠ ° ٠‏ ‎val Asn Gly Ser Asn‏ ‎٠‏ ‏هت ‎٠<‏ > / ولق الح ‎١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‎١<‏ > شعير» طفرة ‎AY‏
ا <> "م ‎atggetgegg cggeggggga cgtggageeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠‏ ‎geggegtacg gegeegecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠‏ ‎gaggccagge ggeteetegg cgecgtgega cggegetteg ccgeeggegg ceeggecgeg YA‏ ‎gggctcgagt gettecgeac cttceacttc cgeatccacg acgtegtect cgacceecac ٠‏ ‎ctccaaggtt geccecggeeee tteectacac accegttgte gaccegeate tetttcgeeg Yoo‏ ‎atctggecgt caaaagcacg cggettggta gaaatcaage ctgcaatcct gatcegttta Yl.‏ ‎tggctggeca gtcgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tetctaatct ٠‏ ‎ctacctgacc atataccgag ttggttttct ttettettgt ttccgtattt gtgtagtttt EA.‏ ‎ttettttctt tcgagcatga tgttetttga attaatgegt accagactcc agtaattcga 8‏ ‎cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa tttataacac aacgaggett tgatcaagtg ٠‏ ‎gtttatgtag ~~ aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta tttcccaaca ٠‏ ‎attttgatgg cctctaagca tcctgtagtc atgtctactg tgtaagctac agatttatic VY.‏ ‎atgtctatgt gtaagctgca aatggagaga aaagctatct atttggttgt tccagettgt VA.‏ ‎tctttggcag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaagcac gacaaatgag AE‏ ‎tggggcaage atgetgccaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggcatgt Qe‏ ‎tatctttttt tttcccttet actcagtttc ttctttggga gaacaatcet actcaaccta 0‏ ‎taatcataag aataaaagca agacagatga gtgctgcaga ctattggcat atataacaac ٠‏ ‎taaataggac atctgtccge tatatcttta gttaataatt gtatatagac gcagtctttg ٠‏ ‎tgetggaaaa actgceaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ١٠‏ ‎cttetttgtt acgttttgtg tgcataaage attaacttct gtctttagtt ggcgeagegg ٠٠‏ ‎taaaaacacc cattgcttaa tattttattt — gctttccgta gcttgataaa atttcaactg ٠١ ٠‏ ‎cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠‏ ‎ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaace ggcatccaga ttccatcttc ١‏ ‎agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgeacttgea ٠٠‏ ‎gaaaagtggt gcccttcgaa ggttggeace ftettgttccg tagatattta tcttatcteg ٠٠‏ ‎tttgttgcaa acatgggacc tgeagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠٠‏ ‎cttttaggtg tctgccagta gtctgetggt ggtctaattt tcttggtata cctgatgeeg ١٠‏
١ tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggecaa ggeattacca ccacatattg titctacaat ٠ gctgaacaat tgctcteett tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgea ccttagtagt YVé ttaagccaca aataccagcg aatcaaatta gtttgcagtc agcettggeat tacctiactt YA gagccttggt tgttcttttg aaggtttatg gtctggatat aaacccaaga gctatcaaga ١ As ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggtctccca atctatgatg Yay. cggaggggaa aacattgett gacagagtcg aattctatga atctgatctt ctttcttact ٠٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggicag ١8 gtttttacca ~~ afttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat 816 ٠ ttaatatctg cctttcagat tcttaacccc aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact ١٠ gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc ttgagcaact actgtgetct ccaggtgagt YYY. tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgtta ctaaatggtt acccatgtca 10 gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttct YY ٠ atcctgaaat tgactttaca atgcttgttc ataatctgct tacgaaatat ‏6م16‎ ٠ atttctettt tccttgtagg catgtggtca gacctttata taagaaaatg aagtttttgt ١ ٠ agaaataatg tatgctttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtet Yo \K aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag ١ ggggttagca ‏ععلممعماعو‎ acctcaagtt caacctattg cataactttt ggtcttacaa 1١٠ cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca gtctttccta taaaaatgtc tgetggaata ٠ tggaattatt aacagcggta tttattttta ccctgtttaa ttttttectt tgctaaaaga 11٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY. gctgattgta cgattccage tteeggttgt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgetge 1٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctegggttga ttgetcggge tgttgaagaa 16 gggatatctg tgataaagcc tagtggtctt atggtattca acatgggagg ccggecagga ٠ caaggtgtct gtgagcgect atttctacge cgtggatttc geatcaataa getetggeaa ٠ acaaaaafta tgcagatagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt ٠٠ ttccatgeca gcaacageat tatatcetgg ttagaggaat atgetcttca tgttgeacac 7٠٠ caatcttcag ctgggcctag aattttcatc taccggetta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtctttg caggetgetg acacagacat YY»
YY ctccgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttegagttet ttatggatet 7٠ tgttgggeat cagcctgtgt gtgegegeac agcatgggea 0 ctggtggeeg 7٠٠ catttcacat gctttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtacctat YEA actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat ‏8م‎ 74 agaatttcag gtgaagaaaa tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcagcag 11٠ ctcectcgat ttgtectttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttcctage 111٠6 atacctagct agtttcttgc aagagaataa gtctaatcet 1618886016 038 YVY. tttagatttc cggaatcttg ~~ ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac 1٠ tcctgatgta agacttggtg ~~ tctattgect aca'attatgt ttgettatta gaaattcata 1 agatcaacct atttgatgct tctcacgtat gcttcatgtg acacttectt ttectetggt Yao gcaccagaat gttgttgtgt tcccatcceg tgetgttgea atcgaaaatg ‏ماه‎ Yau. gttctcacct ggacttgcaa ttgttgacga acacctaacc agacacttgc ccaagcaatg EY gttaacatct ~~ ttagcaattg aggtactitg accgatactc cectetttct ttetgtgttt € + A ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagit atgctgacaa gaatttcgat 8 gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca ‏8ع‎ ٠ tcgaagcacc acgccaatca gatttgctga ttgagttgat caggaaactg 8 71٠ ttgttgttac tggeatgget cagtttgagg ctatcaccag tgetgettte gtgaacttat ١٠ taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatttcagaa catctggaat 0 tgtctagtct gccaagetca aatggtgtat tgaaatatct tgctgggaag accetgecett 6 cacatgcggc tatattgtgt ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagectgaac 4+3 tctagttgaa ctgttgtgea tactatatag aatatcttga cttttatatg ~~ tactttagaa £07. acactgttta aatgtactca tttctttttg ~~ cttcatttta cttgcaggtt tattctgatc 5٠ tggaagttge ttttgetatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta 0٠ ttgagctatt ggaaggacat acttctgtga tcagccagea ctattatggt tgtcttttcc ¢VE atgagctget ggeatttcaa attggtgacc ggcatccaca acaagaggta aacatggett EA geetettcca gtictecate tcactcagtt ctgtccacaa ggtgecgaat gatctgttca EAT agtggacact cccctcagea cgggeaaget agtccatgaa tttggattag ftecctetta €4Y getgggetact tegattacac cacaatgage tectcaacgt ggtetggttt atgittitca ٠
YY tgttttccet ctaatgtitg gttgctettt ttcagagaga acctgcagaa gtgatatcta 6 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccet agaaggaget | gagtttttcg © ٠ ttcetggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgeage 11011860686 © ١٠ taccttctge agtaaacgcc tccattttcg aaagttttgt tcgtcagaac atcactgatt © YY. ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcage agcetggtgaa agatagetat ggttictcag © YA caggeggtge tictgaaatt atatacggga acacctgtct cgegetettc aacaagettg 6 ttetttgetg catgcaagaa cagggeacct tgettttece cttgggaace aacgggeatt © Ea acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt © ٠ caggcttcaa gatcgaacca ‏عماعامعاعة‎ ccgacacact agagaaggtg 1016826061 8 Ye ggetctatat ttetggeeee acaatcaacc ctactggett cctgtacagt gacgacgata 08 Ae tagcagagct getttctgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect © 16 cctetggtct ‏ممه عاتجمعع‎ gecaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtcttt ‏اه‎ ‎ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegttct ccgttgteet getcggagag ctgtectttg 0٠ agctgaccac ggctgggett gatttcgggt ttetgattat gagegactcg tecttggttg ٠ acacatttta cagtttccca agettgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca OAA« ggaagcetgtt gggltcttaag aaccagaagg — atcageattt ctctgatctc atccttgage 6 agaaggagac gttgaagaat cgtgccgacc agttgatcaa ggtatgeett ttgggatate ٠٠ ctgtgtttag ~~ gctetetgtt ttcttcecet gatcagetet ccgatcecet tacatectta ١٠ ggctaatttc agtacttcaa gtttgecacg catttctgac atattctttc ctettgtttt ١٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgett gagagetgeg getgggacge tgtgggetge 1٠ catggcggea tctcgatget tgcaaaaccg accgectaca ttggeaaatc gcetcaaggtg yen gacggctttg agggcaaget ggacagecac aacatgaggg aagceectect gaggtecace 1 Yoo gggctgtoca ttagcageag cgggtggaca ggggtgcegg actactgecg cttcagettt 1٠ getctggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tcgeceggit cagggagetg 14 gtecttggtg geggtgetaa ggtgaatggt agcaactag 14 ><
AAY ‏؟>‎ ١<
DNA ‏؟>‎ ١<
‏الشعير‎ cv. prestige >7 ١١< qd >). gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg catggataaa 8 To aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgegg aggggaaaac attgettgac ١٠١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt ٠ gatcgeattg ttggatgcat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag Yeo attgtaactg aaaattcaag tgaggagttc ttgtactcct tgageaacta ctgtgetcte Yoo cagggttttg ttgaggacca atttggectc gggttgattg ctcgggetgt tgaagaaggg i. atatctgtga taaagcctag tggtcttatg gtattcaaca tgggaggecg gccaggacaa AR ggtgtetgtg agegectatt tettcgecgt ggatttegea tcaataaget ctggeaaaca EA aaaattatgc aggctgetga cacagacatc tccgetttag ttgaaattga gaaaaatage © 2 cgacatcget tcgagttctt ‏المتموعتما‎ gttggggatc agectgtgtg tgegegeaca Ten gcatgggcat acatgaaatc tggtggecge atttcacatg ctttgtctgt gtatagetgt 1٠ caacttcgcc agcccaacca ggtgaagaaa atatttgagt tecttaaaga cggattecat YY. gaagtcagca gctcectega tttgtecttt gatgatgatt ctgttgetga tgaaaaaatt VA. cetttcctag catacctage tagtttcttg caagagaata agtctaatcc ttgtgageet ٠6 ccagctggat ~~ gfttaaattt ccggaatctt gttgetggat tt AAY ٠١ > ٠<
Yo AQ > ١<
DNA <Y\Y>
AY ‏طفرة‎ ¢ ped > ١< ١٠١ >. gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg catggataaa 48 Te aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgegg aggggaaaac attgcettgac ١٠١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt ٠ gatcgcattg ttggatgcat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag Yéo attgtaactg aaaattcaag tgaggagttc ttgtactcct tgagcaacta ctgtgetcte Yoo caggftttgt tgaggaccaa tttggectcg ggttgattge tcgggcetgtt gaagaaggga ٠ tatctgtgat aaagcctagt ggtcttatgg tattcaacat gggaggeegg ccaggacaag EY gtgtctgtga gegectattt ctacgecgtg gatttcgeat caataagetc tggcaaacaa EA aaattatgca gatagcaatt cttcgagtga ctagatgtta actaatccca gtgtttttcc 6 atgccagcaa cagcafttgta tectggttag aggaatatge tcttcatgtt gcacaccaat ٠ cttcatctgg acctggaatt ttcatctacc ggettacatt tttacattac agaaccaatt 1. tttgttgagg atcattacca actagttggg tctttgeagg ctgetgacac agacatctee VY. gctttagtte aaattgagaa aaatagccga catcgeticg agttctttat ~~ ggatcttgtt VA. ggggatcage ctgtgtgtge gegeacagea tgggeataca tgaaatctgg tggecgeatt Ag tcacatgett tgtctgtgta tagetgtcaa cttcgecage ccaaccaggt gaagaaaata A tttgagttcc ttaaagacgg attccatgaa gtcagcaget | ccctegattt gtectttgat a1. gatgattctg ttgctgatga aaaaattcct ttcctageat acctagetag tttetigeaa ٠ gagaataagt ctaatccttg tgagcctcca getggatgtt 18 gaatcttgtt ٠ getggattt ١٠4
VY > ٠٠<
Yio ><
DNA <Y\Y>
AY ‏شعير»؛ طفرة‎ <VIY>
YY >...
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln \ ° ١ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Y ٠ ‏أ‎ 2 Y ٠
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $e ¢o
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ou 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His
Ye Yo Ae
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 1. {0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu
١٠7 ٠ ٠١ ١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠٠ VY \Yo
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠ ١١١ ١8
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala lle Lys Ile
Véo You yoo ٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro
Vo ٠ ١70
Ile Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YA YAO ٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١٠0 You ‏.لا‎ ‎Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn pro Asn Pro Glu Ala 7٠ ١٠ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. vo vi.
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yéo You Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Ye. Yio YV.
Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ‏د‎ YA. YAo val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Ydo Yoo
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ile Ala Ile Leu
Y.o 7١ Yio ١١ > ٠< q00 >7١١<
DNA ‏؟>‎ ١<
AY ‏شعيرء طفرة‎ >7 ١<
VY >..< gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg ‏8ه ممعادوعياده‎ To
‘Yo aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgcgg aggggaaaac attgettgac ١١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt YA gatcgeattg ttggatgeat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag ٠ attgtaactg aaaattcaag tgaggagtic ttgtactcct tgagcaacta ctgtgetete AK caggttttgt tgaggaccaa titggcetcg ggttgattge tcgggetgit gaagaaggga Yi. tatctgtgat aaagcctagt ggtcttatgg tattcaacat gggaggecgg ccaggacaag ٠ gtgtctgtga gegectattt ctacgeegtg gatttcgeat caataagetc tggcaaacaa EA aaattatgca gatagcaatt cttcgagtga ctagatgtta actaatccca gtgtttttcc 68 atgccagecaa cageattgta tcctggetge tgacacagac atctecgett tagttgaaat 1٠ tgagaaaaat agccgacatc gcttcgagtt ctttatggat cttgttgggg 1000 1. gtgtgcgege acageatggg catacatgaa atctggtgge cgeatttcac atgettigtc ‏ألا‎ ‎tgtgtatage ‏عتامممعاعا‎ gccagcccaa ccaggtgaag — aaaatatttg agttccttaa YA agacggattc catgaagtca gcagetcect cgatttgtec tttgatgatg attetgtige AE tgatgaaaaa attcctttcc tagcatacct agctagtttc ttgcaagaga ataagtctaa Qe tecttgtgag cctecagetg gatgtttaaa tttccggaat cttgtigetg gattt 9400 ١١ >١7 ٠<
Yio > ١<
PRT <Y\Y>
AY ‏؟> شعير»؛ طفرة‎ ١<
VV >...
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys ‏دا‎ ١ ° ٠١ yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Ye Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo ¢w ¢o
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys 04 00 Te
Phe Arg Thr Phe His phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His lo Ve veo As
١77
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 4 qo
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١5 ١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١١ ١٠١ ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser He Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠١٠ ١١٠ ٠
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile
Vio You yoo ٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro
Vio VV. ‏د‎ ‎lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg val Glu Phe Tyr
YA ‏ميا‎ ٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ١5 Yoo Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ٠ Yio YY»
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser ye 9 7 Yt.
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Y¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yi. Yio YV. pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ‏ذا‎ YA ‏ع‎ ‎Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Yqo 7٠
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ile Ala Ile Leu 7.٠ 7٠ Yio
YE <YY.>
AY <YYY>
DNA ‏؟>‎ ١<
AY ‏شعير» طفرة‎ >7١ ١<
وا
VE ‏<..ع>‎ ‎gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg ‏6م111 مممتدععاد‎ To aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgegg aggggaaaac attgcetigac ١١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt ٠٠ gatcgcattg ttggatgcat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag 6 attgtaactg aaaattcaag tgaggagttc ttgtactcct tgagcaacta ctgtgcetcte Yoo caggttttgt tgaggaccaa tttggeetcg ggttgattge tcgggetgtt gaagaaggga Yi. tatctgtgat aaagcctagt ggtcttatgg tattcaacat gggaggccgg ccaggacaag ١ gctgetgaca cagacatctc cgcetttagtt gaaattgaga aaaatagecg 166 EA gagttcttta tggatcttgt tggggatcag cctgtgtgtg cgegeacage atgggeatac © 2 atgaaatctg gtggecgeat ttcacatget ttgtctgtgt atagetgtca 18 Ten cccaaccagg tgaagaaaat afttgagttc cttaaagacg gattccatga agtcageage 11٠ tccctegatt tgtectttga tgatgattct gttgetgatg aaaaaattcc tticctagea ‏ا‎ Ye tacctagcta gtttcttgca agagaataag tctaatcctt gtgagectce agetggatgt VA ttaaatttcc ~~ ggaatcttgt tgctggattt AY
Yo >١٠ ١<
YAQ >" ١ <
PRT <V\Y>
AY ‏7؟> شعيرء طفرة‎ ١<
YO <§ a>
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gin ١ ° ٠١ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala val Leu Glu Arg
Y. Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo 2 to val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys oa co Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His lo ‏دلا ولا‎ As
YYA
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 4 q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١ ١٠١
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠٠ ١٠١١ ‘Yo
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys
YY. \Yo ١٠6
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile yéo You yoo 1٠٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro ١5 ٠ ‏دل‎ ‎lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg val Glu Phe Tyr
YAS YAo ١٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١50 Yoo Y.0
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ١٠ ١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo 9 YYo 6
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu ‏ماه‎ Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yé¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Ya. Yio ‏لأ‎ ‎Pro Ser Gly Leu Met val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ‏ذا‎ YA ‏معلا‎ ‎Cys ‎٠١ > ٠< [41 >؟7١١<‎
DNA <Y\Y> ‏الشعير‎ cv. Sebastian >17 ١١< ٠١ >< atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac Te geggegtacg gegecgecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegecgge cacgegegee ٠٠
اكد ‎gaggccagge ggetectegg cgeegtgega cggegeticg cecgeeggegg ceeggecgeg YA‏ ‎gggctcgagt gettcegeac cttceactte cgeatccacg acgtegtect cgacceecac ٠‏ ‎ctccaaggtt gcceggeeee ttcectacac accegttgtc gacccgeatc 18 79.‏ ‎ ctgeaatcct gatcegttta 1.‏ عع مدمتمممع ‎atctggecgt caaaagcacg cggcettggta‏ ‎tggctggeca gtcgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tetctaatct ١‏ ‎ctacctgacc atataccgag ttggttttct ttettettgt ttccgtattt gtgtagtttt ٠‏ ‎ttettttctt tcgagcatga tgttctttga attaatgegt accagactcc agtaattcga 8‏ ‎cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa titataacac aacgaggett tgatcaagtg Teo‏ ‎gtttatgtag aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta tttcccaaca ٠‏ ‎attttgatgg cctctaagca tcctgtagtc atgtctactg tgtaagctac agatttatic YY.‏ ‎atgtctatgt gtaagctgca aatggagaga aaagctatct atttggttgt tccagcettigt YA‏ ‎tctttggcag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaageac gacaaatgag AE‏ ‎tggggcaage atgctgecaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggcatgt Qo‏ ‎tatetttitt tttcccttct actcagttte ttctttggga gaacaatcct actcaaccta ) ٠8‏ ‎taatcataag aataaaagca agacagatga gtgetgcaga ctattggcat atataacaac ٠ A‏ ‎taaataggac atctgtccgce tatatcttta ~~ gttaataatt gtatatagac gcagtetttg ٠١‏ ‎tgctggaaaa actgcaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ٠‏ ‎cttctttgtt acgttttgtg tgcataaage attaacttct gtctttagtt ggegeagegg ٠٠‏ ‎taaaaacacc cattgcttaa tattttattt gctttccgta gcettgataaa atttcaactg ٠١‏ ‎cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠‏ ‎ggtctcaacc ggeatccaga 1166810116 ١ YA‏ عدععماه ‎ccagaagact ggtcattcac‏ ‎agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgea Yes‏ ‎gadaagtggt gccecttcgaa ggttggeace tettgticcg tagatattta tcttatcteg ٠٠‏ ‎tttgttgcaa acatgggacc tgcagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠٠‏ ‎cttttaggtg tctgccagta gtetgetggt ggtctaattt tcttggtata cctgatgeeg ٠٠‏ ‎tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggcaa ggcattacca ccacatattg tttctacaat 1 As‏ ‎gctgaacaat tgctctectt tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgea ccttagtagt 8‏ ‎ttaagccaca aataccagcg —aatcaaatta gtttgecagtc agettggeat taccttactt ٠‏
٠ 2601 tgttcttttg aaggtttatg ‏لمتدوعاماع‎ aaacccaaga gctatcaaga YAR. ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggictccea atctatgatg ٠٠ cggaggggaa aacattgctt gacagagtcg aattctatga atctgatett ctttcttact ٠2٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggtcag ٠١ gittttacca ~~ atttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat caaaatgcce ٠٠ ttaatatctg ~~ cctttcagat tcttaacccc aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact ١٠١ gaaaattcaa gtgaggagit cttgtactcc ttgagcaact actgtgetet ccaggtgagt YY Ye. tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgtta ctaaatggit acccatgtca ١٠ gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttet ١ 8 atcctgaaat tgactttaca atgcettgttc ataatctget tacgaaatat gegtttgaac ٠8 atttctcttt tccttgtagg catgtggtca gacctttata 48 aagtttttgt ٠ agaaataatg ~~ tatgetttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtct YoY. aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag ١8 gggettagca gtccaaatcc acctcaagtt caacctattg cataactttt ggtcttacaa 116 cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca ‏مامعتتاماع‎ taaaaatgtc tgetggaata ‏يكلا‎ ‎tggaattatt 38 tttattttta ~~ ccctgtttaa ttttttectt tgctaaaaga 1٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY» gctgattgta cgattccage ttccggtigt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgetge ٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa ١16 gggatatctg tgataaagcc tagtggtctt atggtattca acatgggagg ccggecagga ٠ caaggtgtct gtgagegeet atttctacge cgtggatttc gcatcaataa gcetctggeaa Yolo acaaaaatta tgcaggtagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt ٠١ ttccatgeca gcaacageat tatatcctgg ttagaggaat atgcetcttca tgttgcacac ٠ caatcttcag ctgggectag aattttcatc taccggctta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtctttg caggetgetg acacagacat ٠٠ ctccgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttcgagttct ttatggatct 1 tgttggggat cagcctgtgt gtgegegeac agceatgggea tacatgaaat ctggtggecg 7٠ catttcacat getttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtacctat YEA.
٠١ actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat aataatttgg 18 agaatttcag gtgaagaaaa tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcageag ٠٠ cteectegat ttgtcctttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttcctage 1٠ atacctagcet agtttcttgc aagagaataa gtctaatcct tgtgagectc cagetggatg 7٠ tttaaatttc ‏عالمتمدوعي‎ ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac 1 tcctgatgta agacttggtg tctattgect acaattatgt ttgcttatta gaaattcata 8 agatcaacct atttgatget tctcacgtat gcttcatgtg acacttectt ttectetggt ١ Qe gcaccagaat gttgttgtgt tcccatcceg tgetgttgea atcgaaaatg ctetteggtt V a. gttctcacet ggacttgcaa ttgttgacga acacctaacc agacacttge ccaagcaatg 5 gttaacatct ttagcaattg aggtactttg accgatacte ccctetttet ttetgtgttt € «A ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagtt atgctgacaa gaatticgat 46 gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca gtaactgtaa ٠٠ tcgaagcacc acgccaatca gatttgetga ttgagttgat caggaaactg aagcctcagg ٠ ttgttgttac tggcatggct cagtttgagg ctatcaccag tgetgetttc gtgaacttat ٠ taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatticagaa catctggaat ¢YA. tgtctagtct gccaagctca aatggtgtat tgaaatatct tgctgggaag accctgeett 446 cacatgcggc tatattgtgt ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagectgaac ٠٠8 tctagttgaa ctgttgtgca tactatatag aatatcttga cttttatatg tactttagaa 50٠ acactgttta aatgtactca tttetttttg cttcatttta cttgcaggtt tattctgatc 51٠ tggaagttec ttttgctatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta £1A.« ttgagctatt ggaaggacat acttctgtga tcagccageca ctattatggt tgtettttcc ٠8 atgagetget ggeatttcaa attggtgacc ggeatccaca acaagaggta aacatggett ٠ geetettcca gttctccate tecactcagtt ctgiccacaa ggtgecgaat gatetgttca ٠ agtggacact cccctcagea cgggecaaget agtccatgaa tttggattag ttcectetta €4Y gctgggtact tcgattacac cacaatgagc tcctcaacgt ggtctggtit atgtttttca £49A. tgttttceet ctaatgtttg gttgctettt ttcagagaga acctgcagaa gtgatatcta ٠8 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccct agaaggaget — gagtttttcg 0٠ ttcctggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgecage ttettgecag 0٠
١7 taccttctge agtaaacgec tccattttcg aaagttttgt tcgtcagaac atcactgatt ٠٠ ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcage agctggtgaa agatagetat ggtttctcag 0٠ caggcggtge ttctgaaatt atatacggga acacctgtet cgegetettc aacaagettg ٠ ttetttgetg catgcaagaa cagggeacct tgcttttcce cttgggaace aacgggeatt 8 acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt ٠ caggcttcaa gatcgaacca agtgetctag ccgacacact agagaaggtg tctcagecgt 0٠ gggtctatat ttetggecce acaatcaace ctactggett cetgtacagt gacgacgata ‏0ه‎ ‎tagcagagct getttetgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect 07 ¢ cctetggtct ggagttccaa geccaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtettt OV es ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegtict cegttgteet getcggagag ctgtectttg 0٠ agctgaccac ggetgggcett gatttcgggt ttctgattat gagcgactcg tccttggttg 0٠ acacatttta cagtttccca agcttgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca 0AA. ggaagetgtt gggtcttaag aaccagaagg — atcageattt ctctgatctc atecttgage 6 agaaggagac gttgaagaat cgtgccgacc agttgatcaa ggtatgectt ttgggatatc ٠٠ ctgtgtttag ~~ gctctetgtt ttctteccect gatcagetet ccgatceeet tacatcctta ١٠ ggctaatttc agtacttcaa gtttgecacg catttetgac atattctttc ctettgtttt ١٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgctt gagagcetgeg getgggacge tgtgggetge 1 catggcggca tctcgatget tgcaaaaccg accgectaca ttggcaaatc getcaaggtg ١٠ gacggctttg agggcaagct ggacagccac aacatgaggg aageccteet gaggtccace ١٠ gggctgtgea ttagcagcag cgggtggaca ggggtgccgg actactgecg cttcagettt 17٠ getetggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tegeceggtt cagggagetg 1٠٠ gtecttggte geggtgctaa ggtgaatggt agcaactag 104
VY > ٠١< ت١‎ >" ١
DNA <Y\Y> ‏الشعير‎ cv. Sebastian <YYY>
VV ‏<ي.ع>‎ ‎atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg tiectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠٠
١١ geggegtacg gegeecgecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠ gaggccagge ggctectegg cgecgtgega cggegetteg ccgeeggegg cecggeegeg ٠ gggctcgagt gettcegeac cttccacttc cgeatccacg acgtegtect cgacecceac ٠٠ ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatcttc ٠ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgeacttgca ٠ gaaaagtggt gcccttcgaa ggtttatggt ctggatataa acccaagage tatcaagatt ٠ gcatggataa acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg 6 gaggggaaaa cattgcttga cagagtcgaa ttctatgaat — ctgatcttct ttettactgt ٠ agagataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat tcttaaccce ٠ aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc YY. ttgagcaact actgtgctct ccagggtttt gttgaggacc aatttggeet cgggttgatt 2 getcgggetg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtcttat ggtattcaac A € atgggaggce ggccaggaca aggtgtetgt gagegectat ttctacgecg tggatttcge ٠8 atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgetg acacagacat ctccgettta ٠ gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcgc ttcgagttct ttatggatct tgttggggat ٠٠ cagcctgtgt gtgegegeac agceatgggea tacatgaaat ctggtggeeg catttcacat ٠ getttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtgaagaa aatatttgag ٠١٠ ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agctcecteg atttgtectt tgatgatgat ٠١٠٠ tctgttgetg atgaaaaaat tcctttccta gcatacctag ctagtttctt gcaagagaat ٠ ٠ aagtctaatc cttgtgagee tccagetgga tgtttaaatt tccggaatct tgttgetgga ٠١ ٠ tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgttgttgt gttcccatece YYA cgtgetgitg caatcgaaaa tgetcticgg ttgtictcac ctggacttge aattgttgac ٠8 gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa tggttaacat ctttagcaat tgaggaaagt ٠٠٠ aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠١ gagttgatca ggaaactgaa gcctcaggtt gttgttactg gcatggetca gtttgagget YY.» atcaccagtg ctgctttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg ttccegatta ٠٠ ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctge caagctcaaa tggtgtattg ١ ٠6
Yee aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag ٠ aatcaggttt attctgatct ggaagttgct tttgctatct ctgaagatce aactgtttat AT» aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata ctictgtgat cagccageac ) ay. tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg gcatttcaaa ttggtgaccg gcatccacaa ١ QA caagagagag aacctgcaga agtgatatct aaggagatga tagggtittc aagttcaget ١٠8 atgtccaccc tagaaggagce tgagtttttc ~~ gttectggtt ccatggaatc cggtgtcata ١٠ catatggatc tggaccgeag cttcttgcca gtaccttctg cagtaaacge ctceatttte ٠ gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaaccg atgtcegtic cagcattcag YY Ye. cagctggtga aagatageta tggtttctca geaggeggtg cttctgaaat tatatacggg 8 aacacctgtc tcgegetett caacaagett gttetttget geatgcaaga acagggeace ٠6 ttgettttec ccttgggaac caacgggeat tacgtcaacg cagcaaagit tgtgaatgeca 68 accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggetica agatcgaacc aagtgetcta ٠ gcegacacac tagagaaggt gtctcagecg tgggtetata titctggeee cacaatcaac YO» cctactgget tectgtacag tgacgacgat atagcagage tgctttetgt ctgtgegaca “٠ tacggageca gggtggtgat agatacctcc tcetctggtc tggagttcca agecacegge YU ¢ tgcagccagt ggaatttgga aagatgtctt tctaatgtca agtcttcaaa geectegttc 18 tcegttgtce tgcteggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg 7٠ tttctgatta tgagcgactc gtccttggtt gacacatttt acagtttccc aagcttgagt YAY. cggecacaca geacgttgaa gtacacgttc aggaagetgt tgggtcttaa gaaccagaag ٠ gatcagecatt tctctgatct catccttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgeegac ٠8 cagttgatca agacgcttga gagctgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate ٠٠٠ tcgatgettg caaaaccgac cgectacatt ggeaaatcge tcaaggtgga cggetttgag Yo. ggcaagetgg acagecacaa catgagggaa gecctcetga ggtccaccgg getgtgeatt ٠٠ agcagcageg ggtggacagg ggtgecggac tactgeeget tcagetttge tetggagage Y YA ggcgacttcg accgggecat ggagtgeatc geecggttca gggagetggt cettggtgge YY ¢ ggtgctaagg tgaatggtag caactag 77١
YA >< ٠١غ‎ > ١<
٠
PRT <Y\Y> ‏الشعير‎ cv. Sebastian <YYY>
YA >.
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ ‏هه‎ ٠ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg ١ Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo ‏م ف‎
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys oO 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp val Val Leu Asp Pro His “0 ‏ولا‎ Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 4 {0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١ YY.
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١١ YY. ١١٠
Gly cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١٠ ١١١ Yeo
Pro Ser Lys val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn pro Arg Pro Ile Lys Ile ١٠٠ Yo. yoo "٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro 110 ٠ ١ lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YAS YAO ١
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١5 You Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ٠ ١٠ YY.
Met Ser Lys Ile val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. YYo Yéo
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yéo You Yoo
YE
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser val Ile Lys
Yl. Yio ‏لأ‎ ‎Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ‏بلا دلا‎ YAo
Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Yqo You
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu
Y.o 7٠ Yio YY. val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp 7١ YY. Yyo
Leu Val Gly Asp Gln Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met
Yio Vio Yo.
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser val Tyr ser Cys Gln
Yoo Ye. Yio
Leu Arg Gln Pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
YV. ‏د‎ YA
Gly Phe His Glu val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp ‏عي‎ va. Yao 6
Ser val Ala Asp Glu Lys Ile Pro phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe $40 tA ‏دا‎ ‎Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro Cys Glu Pro Pro Ala Gly Cys Leu
EY. ‏و‎ ey.
Asn Phe Arg Asn Leu Val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile ٠ 4 ‏م‎ ‎Pro Leu Thr Pro Asp Asn val val val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala $0 ‏دم‎ ٠
Ile Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp ‏م1‎ ٠ ¢vo EA
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala ‏م‎ 8 0
Ile Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr val Ile Glu Ala
Ove 0.0 0).
Pro Arg Gln Ser Asp Leu Leu Ile Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys pro ‏داه‎ oY. oYo
Gln val val Val Thr Gly Met Ala Gln Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala
٠ oY. ‏ده‎ Of
Ala Phe Val Asn Leu Leu Ser val Thr Lys Asp val Gly Ser Arg Leu ‏هه‎ 00. 000 oT.
Leu Leu Asp lle Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser ovo ov. ovo
Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA OAC 09.
Ala Ile Leu Cys Gly Leu Val Lys Asn Gln val Tyr Ser Asp Leu Glu odo 8١ “١.
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr Val Tyr Lys Ala Leu Ser
TY. 1٠ ‏أ‎ ‎Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser Val Ile Ser ‏عله‎ His
Ye 1٠ Yo 16
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe Gln Ile Gly Asp ‏هه“ 06“ همي“‎
Arg His Pro Gln Gln Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu 11: ‏م‎ We
Met lle Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu vo TA TA0
Phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 14. 140 Vo
Asp Arg Ser Phe Leu pro val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe
Yo ل٠‎ Yio YY.
Glu Ser Phe Val Arg Gln Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arg ‏هآلا‎ YY. ‏هل‎ ‎Ser Ser Ile Gln ‏ماه‎ Leu Val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly 76 ‏م لا‎ You
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
Yoo Ya. Yio
Lys Leu val Leu Cys Cys Met Gln Glu ‏ماه‎ Gly Thr Leu Leu Phe Pro
VV. ‏بالا هلالا‎
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr val Asn Ala Ala Lys Phe val Asn Ala
YAo va. ‏0ل‎ I)
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu
Avo AY» Ayo
YEA
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp val
AY» AYo AY
Tyr Ile Ser Gly Pro Thr Ile Asn Pro Thr Gly phe Leu Tyr Ser Asp ‏دام‎ Ags Ago
Asp Asp Ile Ala Glu Leu Leu Ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
Ao. Aco Ae val Val 11 Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Avo AVY» AYo AAS
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn val Lys Ser Ser
AAO Ads Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu
Qe q.0 ٠
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١٠ 4٠ Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser av. yo 44
Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn ‏ماه‎ Lys ‏ف 55 04 م‎
Asp ‏ماه‎ His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu Gln Lys Glu Thr Leu Lys av. ave
Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Met Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp
AA aA0 4.
Ala val Gly Cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala ٠ You ٠ 2
Tyr Ile Gly Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu ٠١١ ٠١١ ٠١ ٠ ‏هت‎ .
Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu ٠ YoY ٠١ o ٠ Qo
Cys lle Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val Pro Asp Tyr Cys Arg 6 ٠6 ٠١٠ . o ٠
١4
Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu ٠١٠ ٠١ ٠١ 2 ٠ 5
Cys Ile Ala Arg Phe Arg Glu Leu Val Leu Gly Gly Gly Ala Lys ٠١ ٠١ ٠ ٠ 2 ٠
Val Asn Gly Ser Asn ٠ ٠١ > ٠٠< 1¢09 > ١<
DNA > ١< ١46178 ‏شعيرء طفرة‎ > ١<
V4 >..< atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg 1002:6266 cgtgecagge gtegggegac ٠٠ geggegtacg gegeecgecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠ gaggccagge ggctectegg cgeegtgega cggegcetteg cegeeggegg cecggeegeg ٠٠ gggetegagt gettcecgeac cttecacttc cgeatccacg acgtegteet cgaccecccac ١6 ctccaaggtt geecggeeee tteectacac accegttgte gaccegeate tetttcgeeg ٠ atctggeegt caaaagcacg cggcettggta gaaatcaage ctgeaatcet gatcegttta ٠ tggctggeca gtecgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tctctaatct ٠ ctacctgacc atataccgag ttggttttct ticttettgt ttecgtattt gtgtagtitt EA. ttettttett tcgagcatga tgttctttga attaatgegt accagactcc agtaattcga 068 cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa tttataacac aacgaggett tgatcaagtg ٠ gtttatgtag aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta tttcccaaca ٠ attttgatgg cctctaagca tcctgtagtc atgtctactg tgtaagetac agatttattc ١ atgtctatgt gtaagctgca aatggagaga aaagctatct — atttggttgt tccagettgt ٠٠ tctttggeag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaagcac gacaaatgag ٠ tggggcaage atgctgecaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggeatgt 4.
Yo. tatctttttt tttccettct actcagtttc ttctttggga gaacaatcct actcaaccta ) ٠8 taatcataag aataaaagca agacagatga gtgctgcaga ctattggcat atataacaac ٠٠ taaataggac atctgtcege tatatcttta ~~ gttaataatt gtatatagac gcagtetttg ٠١٠ tgctggaaaa actgcaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ١٠ cttetttgtt ~~ acgttttgtg tgcataaage attaacttct gtetttagtt ggcgecagegg ٠١٠٠ taaaaacacc cattgcttaa tattttattt gctttccgta gcttgataaa atttcaactg ٠١٠ cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatcttc ١١ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgeacttgeca ٠8 gaaaagtgot gcccttcgaa gattggeacc tettgttceg tagatattta tcttatcteg ٠٠٠ tttgttgcaa acatgggacc tgcagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠٠ cttttaggtg tctgccagta gtctgetggt ggtctaattt tettggtata cctgatgeeg ٠٠١ tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggcaa ggcattacca ccacatattg tttctacaat ١١ gctgaacaat tgcetctectt tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgca ccttagtagt ١ ttaagccaca aataccagcg — aatcaaatta gtttgcagtc agettggeat taccttactt ٠٠ gagccttggt tgttettttg aaggtttatg gtctggatat aaacccaaga gctatcaaga YAT « ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggtctccca atctatgatg ٠ cggaggggaa aacattgctt gacagagtcg aattctatga atctgatctt ctttcttact ٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggtcag ٠١٠8 gtttttacca ~~ atttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat caaaatgeec ١٠٠ ttaatatctg ~~ cctttcagat tcttaacccc aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact ٠٠ gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc ttgagcaact actgtgetct ccaggtgagt ١١ ٠ tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgita ctaaatggtt acccatgtca ٠ gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttct YY ٠8 atcctgaaat tgactttaca atgcttgttc ataatctgct tacgaaatat gegtttgaac ١258 atttctettt tccttgtagg catgtggtca gacctttata taagaaaatg aagtttttgt ١٠ agaaataatg tatgctttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtct ١٠٠ aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag “٠ yo)
ggggttagca gtccaaatcc acctcaagtt caacctattg — cataactttt ggtcttacaa 18 cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca gtctttecta taaaaatgtc tgetggaata 1١٠٠ tggaattatt 28 tttattttta ‏قاع‎ ttttttectt tgetaaaaga 1٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY. gctgattgta cgattccage tteeggttgt taattttgtt atgtttgtga actttgctgc “٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa YQ ¢ gggatatctg tgataaagcc tagtggtett atggtattca acatgggagg ccggecagga ٠٠ caaggtgtct gtgagegect atttctacge cgtggatttc gcatcaataa getctggcaa ١٠ acaaaaatta tgcaggtagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt ١٠٠ ttccatgeca gcaacagcat tatatcetgg ttagaggaat atgetcttca tgttgcacac ٠٠ caatcttcag ctgggcectag aattttcatc taccggetta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtctttg caggetgetg acacagacat ١١٠٠ ctccgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttegagttct ttatggatet ‏؟؟‎ ٠ tgttgggeat cagccetgtgt gtgegegeac ageatgggea tacatgaaat ctggtggeeg ٠ catttcacat gctttgtctg tgtatagetg tcaacttcgc cagcccaacc aggtacctat YEA « actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat aataatttgg Yo ¢. agaatttcag gtgaagaaaa tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcageag ٠٠ cteectegat ttgteetttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttectage 1٠ atacctagct ~~ agtttcttgc aagagaataa gtctaatcct tgtgagectc cagetggatg 1١٠ tttaaatttc cggaatcttg ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac ١١٠ tcctgatgta agacttggtg tctattgect acaattatgt ttgettatta gaaattcata YAS agatcaacct atttgatgct tctcacgtat gcttcatgtg acacttcett ttectetggt ¥4 . » gcaccagaat gttgttgtgt tcccatceccg tgetgttgea ‏عتمم عاد‎ ctettcggtt ٠ gttctcacct ggacttgcaa ttgttgacga acacctaacc agacacttgc ccaagcaatg ٠ gttaacatct ttagcaattg aggtactttg accgatactc ccctetttct ttetgtgttt € « As ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagtt atgctgacaa gaatttcgat 58 gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca gtaactgtaa ٠٠ tcgaagcacc acgccaatca gatttgetga ttgagttgat caggaaactg aagcctcagg ٠ yoy ttgttgttac tggeatgget cagtttgagg ctatcaccag tgetgetttc gtgaacttat 2 ٠ taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatttcagaa catctggaat £Y A. tgtctagtct gccaagetca aatggtgtat tgaaatatct tgctgggaag accctgectt 468 cacatgcggce tatattgtgt ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagcctgaac ٠٠ tctagttgaa ctgttgtgca tactatatag aatatcttga cttttatatg tactttagaa 50٠ acactgttta aatgtactca tttctttttg ~~ cttcatttta cttgeaggtt tattctgatc 4٠٠ tggaagttge ~~ ttttgctatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta 41 ttgagctatt ggaaggacat acttctgtga tcagccagea — ctattatggt tgtettttce €VE atgagctget ggcatttcaa attggtgacc ggeatccaca acaagaggta aacatggett ٠ geetettcca gttetccate tcactcagtt ctgtccacaa ggtgecgaat gatetgttca ٠ agtggacact cccctcagca cgggcaaget agtccatgaa tttggattag tteectetta £€4Y getgggtact tcgattacac cacaatgage tectcaacgt ggtetggttt atgtttttca ٠ tgttttcect ctaatgtttg gttgctettt ttcagagaga acctgcagaa — gtgatatcta 8 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccct agaaggaget — gagtttttcg 0٠ ttcctggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgcage ttettgeccag ه٠‎ taccttctge agtaaacgcc tccattttcg aaagttttgt tcgtcagaac atcactgatt oYY ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcage agcetggtgaa agatagctat ggtttctcag 0 caggeggtge tictgaaatt atatacggga acacctgtct cgegetettc aacaagettg oY ٠8 ttctttgetg catgcaagaa cagggeacct tgcttttcee cttgggaace aacgggeatt ©¢€ « « acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt ٠8 caggcttcaa gatcgaacca agtgcetctag ccgacacact agagaaggtg tctcagecgt 0٠ gggtctatat ttctggecee acaatcaacc ctactggett cctgtacagt gacgacgata ‏ده‎ ‎tagcagaget getttetgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect ٠ cctetggtct ggagttccaa gecaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtettt 00٠ ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegttct cegttgtect getcggagag ctgtectttg ٠ agctgaccac ggctgggctt gatttcgget ttctgattat gagcgactcg tecttggttg ٠ acacafttta cagtttccca agcttgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca “٠ ggaagcetgtt gggtcttaag aaccagaagg atcageattt ctetgatctc atecttgage 6
٠١١ agaaggagac gttgaagaat cgtgccgacc agttgatcaa ggtatgectt ttgggatatc ٠٠ ctgtgtttag ~~ gctctctgtt ticttccect gatcagetct 088160066 tacatectta ٠١٠ ggctaatttc agtacttcaa gtttgccacg catttctgac atattctttc ctettgtttt ٠٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgcett gagagetgeg getgggacge tgtgggetge 1٠ catggcggeca tctcgatget tgcaaaaccg accgectaca ttggcaaatc gctcaaggtg ١1 gacggctttg agggcaagct ggacagccac aacatgaggg aagecctcct gaggtccace 1٠ gggctgtgeca ttagcagcag cgggtggaca ggggtgecgg actactgeeg cttcagettt 17 ٠ getctggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tcgeceggtt cagggagetg 1٠ gteettggatg geggtgctaa ggtgaatggt agcaactag 1509 ٠١ ‏؟>‎ ٠١<
TAA > ١<
DNA ‏؟>‎ ١ < ‏الشعير‎ cv. sebastian >١7 ١١ <
Yo <§0a> aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccagcattt tcattccaga "٠ agactggtca ttcactttct acgagggtct caaccggecat ccagaticca tettcaggga ٠٠ taagacagta gcagagctgg gatgtggecaa tggttggata tccattgecac ttgecagaaaa ٠٠ gtggtgcect tcgaaggttt atggtctgga tataaaccca agagctatca agattgeatg ١6 gataaacctt tacttgaatg cactagacga cgatggtctc ccaatctatg atgcggaggg ٠ gaaaacattg cttgacagag tcgaattcta tgaatctgat cttetttctt actgtagaga ٠ taacaagata gaacttgatc gcattgttgg atgcatacca cagattctta accccaatce £Y agaggcaatg tcaaagattg taactgaaaa ttcaagtgag gagttcttgt actccttgag ¢A. caactactgt gctctccagg — gttttgttga ggaccaattt ggectegggt tgattgetcg © ¢ ggctgttgaa gaagggatat ctgtgataaa gcctagtggt — cttatggtat tcaacatggg ٠٠ aggccggeca ggacaaggtg tetgtgageg cctatttctt cgecgtggat ttcgcatcaa ٠٠ taagctctgg caaacaaaaa ttatgcag TAA
YY >١٠< ٠١.٠.١ <YVY>
ٍ ١:
DNA ‏؟>‎ ١<
VEYA ‏طفرة‎ ¢ ye d >7١ ١<
YY <g> aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccagcattt tcattccaga To agactggtca ttcactttct acgagggtct caaccggcat ccagattcca tcttcaggga ٠ taagacagta gcagagctgg gatgtggecaa tggttggata tccattgeac ttgcagaaaa ٠٠ gtggtgccet tcgaagattg geacctettg ttccgtagat atttatctta ~~ tctegtttgt ١٠6 tgcaaacatg ggacctgecag aagttagaca tttactcagg ttactttata ~~ tgaaactttt ٠٠ aggtgtctgc cagtagtctg ctggtggtct aattttcttg gtatacctga tgcegtcgag ٠ catattgctt ~~ tcaaattitg ggcaaggcat taccaccaca tattgtttct acaatgctga ٠٠ acaattgctc tcctttgaaa ggaagaaaaa caagaatgac atgcacctta gtagtttaag ¢A« ccacaaatac cagcgaatca aaftagtttg cagtcagett ggeattacet tacttgagee © ¢ ttggttgttc ttttgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagetat caagattgca ٠ tggataaacc tttacttgaa tgcactagac gacgatggtc tcccaatcta tgatgeggag 1٠ gggaaaacat tgcttgacag agtcgaattc tatgaatctg atcttetttc ttactgtaga VY. gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct taaccccaat VA. ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg aggagttett gtactecttg ٠ agcaactact gtgetetcca gggttttgtt gaggaccaat ttggectegg gttgattget ٠8 cgggetgttg aagaagggat atctgtgata aagcctagtg — gtettatggt attcaacatg ٠ ggaggecgge caggacaagg tgtetgtgag cgectatttc ttcgeegtgg atttegeatc ٠٠ aataagctct ggcaaacaaa aattatgcag ٠١
YY > ٠٠<
YAT >١7 ١<
PRT > ١5617 ‏شعيرء طفرة‎ >77 ١١<
YY >..<
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gin ١ 2 ٠ yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala val Leu Glu Arg
Yoo
Y ٠ Y 2 "1 ٠
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $e £0
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ow ‏دهت‎ Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His lo Ye Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao q. 40
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ١ «٠. ١ «0 ١ ١ ٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١١٠١ ١٠١ ١١ ©
Gly Cys Gly Asn Gly Trp lle Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠١٠ ١١١ ١
Pro Ser Lys Ile Gly Thr Ser Cys Ser Val Asp Ile Tyr Leu Ile Ser
Yeo You Yoo Ye.
Phe val Ala Asn Met Gly Pro Ala Glu Val Arg His Leu Leu Arg Leu
Yio VV. ‏دلا‎ ‎Leu Tyr Met Lys Leu Leu Gly val Cys ‏ماه‎ ‎YA. ‏ميا‎ ‎YY >؟٠٠<‎ ‏اللا‎ >١7 ١١<
DNA <Y\Y>
YE ‏شعيرء طفرة ل‎ > ١ ١١<
YY ‏<.ءع>‎ ‎aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccagcattt tcattccaga Te agactggtca ttcactttct acgagggtct caaccggeat ccagattcca tcttcaggga ٠٠ taagacagta gcagagcetgg gatgtggeaa tggttggata tccattgecac ttgcagaaaa ٠٠ gtggtgeect tcgaagattg geacctcttg 1 atttatctta ~~ tctcgtttgt ٠ tgcaaacatg ggacctgcag aagttagaca tttactcagg tttatggtct ggatataaac ٠٠ ccaagagcta tcaagattgc atggataaac ctttacttga atgcactaga cgacgatggt ٠
١٠١ ctcccaatct atgatgegga ggggaaaaca ttgettgaca gagtcgaatt ctatgaatct ٠٠ gatcttcttt ~~ cttactgtag agataacaag atagaacttg atcgeattgt tggatgcata ٠ ccacagattc ttaaccccaa tccagaggcea atgtcaaaga ttgtaactga aaattcaagt 08 gaggagttct tgtactcctt gagcaactac tgtgetctec agggttitgt tgaggaccaa ٠ tttggectcg ggttgattge tcgggetgtt gaagaaggga tatctgtgat aaagectagt 1٠ ggtcttatgg tattcaacat gggaggccgg ccaggacaag — gtgtetgtga gegectattt VY cttcgecgtg gatttcgeat caataagctc tggcaaacaa aaattatgea ‏ع‎ Yvy ٠ > ٠٠< ‏نما‎ > ١<
PRT <Y\Y> ١٠١ ‏7؟> شعيرء طفرة‎ ١ <
Y ¢ < ¢ ve
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ 5 ١ ٠ ١ Oo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Y. Yo Ya
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $a to val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ow ‏ده‎ Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His 2 Oo 7 ٠ Y 0 A ٠
Leu ‏عات‎ Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
AO 9. 40
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ١ ١٠١ YY
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr val Ala Glu Leu ١١١ YY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١ ١١٠ Yeo
Pro Ser Lys lle Gly Thr Ser Cys Ser val Asp Ile Tyr Leu Ile Ser
Yeo You Yoo ٠٠
١٠دال‎
Phe Val Ala Asn Met Gly Pro Ala Glu Val Arg His Leu Leu Arg Phe
Vio ٠ ١١5
Met val Trp Ile
YA
Yo <Y¥V).> 16 >١7اا<‎
DNA ‏؟>‎ ١< ١٠5517 ‏شعير» طفرة‎ >١7 ١١<
Yo <u> aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccageattt tcattccaga To agactggtca ttcactttct acgagggtet caaccggeat ccagattcca tcttcaggga ٠٠٠ taagacagta gcagagetgg gatgtggeaa tggtttatgg tctggatata aacccaagag YA.
Ctatcaagat tgcatggata aacctttact tgaatgcact agacgacgat ggtctceccaa Y¢o fctatgatge ggaggggaaa acattgettg acagagtcga attctatgaa tctgatctte ٠ tttcttactg tagagataac aagatagaac ttgatcgcat tgttggatge ataccacaga ٠ ticttaaccc caatccagag gcaatgtcaa agattgtaac tgaaaatica agtgaggagt ٠ tctigtactc cttgagcaac tactgtgetc tccagggttt tgttgaggac caatttggee ٠٠ fcgggttgat tgcteggget gttgaagaag ‏تدع‎ gataaagcct agtggtetta o¢. tggtattcaa catgggagee cggecaggac aaggtgtetg tgagegecta tttcttcgee ٠ gtggatttcg catcaataag ctctggcaaa caaaaattat 088 1 1١ > ٠١< ٠١١ > ١١<
PRT >" ١١< ١5517 ‏شعيرء طفرة‎ >١7 ١١< ١ >..<
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys 2 ١ 5 ٠١ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala val Leu Glu Arg
Yo. Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
٠١
Yo $a to
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
On 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His lo Ye Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao q. q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١ ١١
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr val Ala Glu Leu ١١١ YY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Leu Trp Ser Gly Tyr Lys Pro Lys Ser Tyr Gln \ Y ٠ ١ 2 ١ ¢ ٠
Asp Cys Met Asp Lys Pro Leu Leu Glu Cys Thr Arg Arg Arg Trp Ser
Veo You Yoo ٠١٠
Pro Asn Leu
YV > ٠<
YAY > ١<
DNA >7 ١ < ‏صناعى‎ < Y \ + <YY.> ١ ‏جزء من المنتج‎ Sacll BamHI <YYY>
YV >. ggccgeggge ctegagtget tccgeacett ccacttccge atccacgacg tegtectcga Te cccccaccte caaggattce agcaaagaaa gaagcetaaca atgatggaga tacccageat ٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccggc atccagattc ٠٠ catcttcagg gataagacag tagcagaget gggatgtggc aatggttgga tatccattge ٠ acttgcagaa aagtggtgcc cttcgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagetat ٠ caagattgca tggataaacc tttacttgaa tgcactagac gacgatggtc tcccaatcta ٠ tgatgcggag ggoaaaacat tgettgacag agtcgaattc 18 atcttetttc £Y « ttactgtaga gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct ٠
١١4 taaccccaat ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg aggagtictt © 2 gtactccttg agcaactact gtgetctcca gggttttgtt gaggaccaat ttggectegg Ten gttgattgct cgggctgttg aagaagggat atctgtgata aagectagtg — gtcttatggt 1. attcaacatg ggaggecgge caggacaagg tgtetgtgag cgectatttc tacgeegigg YY. atttcgcatc ~~ aataagctct ggcaaacaaa aattatgeag atagcaattc tttgaggatc VA
Cc YAN ‎٠١<‏ تكلا ‎YAY > ١< ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‏<١١؟‏ > صناعي ‎<YY.> ‎Sacll BamHI <YYY>‏ جزء من المنتج ؟ ‏ا ‎ggeegegggg ctegagtget tecgeacctt ccacttcege atccacgacg 008 To ccccecaccte caaggattcc agcaaagaaa gaagctaaca atgatggaga tacccageat ١ Ye tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc ٠٠ catcttcagg gataagacag tagcagagcet gggatgtgge aatggttgga tatccattge ٠ acttgcagaa aagtggtgec cttcgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagctat Yoo caagattgca tggataaacc tttacttgaa tgcactagac gacgatggic ‏8م‎ Yi. tgatgcggag gggaaaacat tgcttgacag agtcgaattc tatgaatetg atcttcttte ٠ ttactgtaga gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct EA taaccccaat ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg aggagttctt o¢. gtactccttg agcaactact gtgctctcca gggttttgtt gaggaccaat ttggectegg ٠٠ gttgattget cgggcetgttg aagaagggat atctgtgata aagectagtg — gtcttatggt 17. attcaacatg ggaggecgge caggacaagg tgtetgtgag cgectatttc tacgeegtgg VY» atttcgcatc ~~ aataagctct ggcaaacaaa aattatgcag atagcaattc tttgaggatc YA.
Cc YAN
Ya >؟٠٠<‎
٠١٠ ‏.لا‎ >7١١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >” ١< <YY.> 6 ‏جزء من المنتج‎ Sacll BamHI <YYY>
Yq ‏<ي.ع>‎ ‎ggecgegggg ctegagtget tecgeacett ccacttecge atccacgacg 8 1. ‏عات‎ caaggattcc agcaaagaaa gaagcetaaca atgatggaga tacccageat ٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc YA catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge aatggttgga tatccattge Yeo acttgcagaa aagtggtgec cttcgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagctat Yoo caagattgca tggataaacc ftftacttgaa tgcactagac gacgatggtc tcccaatcta 1. tgatgcggag gggaaaacat tgettgacag agtcgaattc tatgaatctg atcttcttte ٠ ttactgtaga gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct EA taaccccaat ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg —aggagttctt 08 gtactccttg agcaactact gtgetcteca gggttttgtt gaggaccaat ttggeetegg ٠ gttgattget cgggetgttg aagaagggat atctgtgata aagectagtg gtcttatggt 7. attcaacatg ggaggccgge caggacaagg ctgctaagga tec YoY ٠١ > ٠٠< 64 ><
DNA <Y\Y> ‏صنا عي‎ >” ١١< <YY.> ‏جزء من المنتج أ‎ Sacll BamHI <YYY>
Ye >< ggecegegggg ctegagtget tcegeacctt ccacttecge 2160008066 008 Te cccecaccte caaggattce agcaaagaaa gaagcetaaca atgatggaga tacccagcat ٠٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccggc atccagatic yA.
٠١ catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge aatggttgga 10166266 ٠8 acttgcagaa aagtggtgec cttcgaagat tggeacctct tgticcgtag atatttatct ٠٠ tatctcgttt gttgcaaaca tgggacctge agaagttaga catttactca ggttacttta ٠ tatgaaactt ttaggtgtct gccagtaggg 216 8:
YY > ٠٠< 7 <yyy>
DNA ‏7؟>‎ ١ < ‏صناعي‎ >١١١< <YY.>
V ‏جزء من المنتج‎ Sacll BamHI <YYY>
YY >. ggeegegggg ctegagtget tecgeacctt ccactteege atccacgacg tegtectega Te cccccaccte caaggattcc agcaaagaaa gaagctaaca atgatggaga tacccageat Ye tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc ٠٠ catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge aatggttgga tatccattge ٠٠8 acttgcagaa aagtggtgee cttcgaagat tggcacctct tgticcgtag atatttatct ٠٠ tatctcgttt gttgcaaaca tgggacctge agaagttaga catttactca ggtttatggt ٠ ctggatataa ggatce 171
YY >" ٠٠<
YYo ><
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >< <YY.>
A ‏جزء من المنتج‎ Sacll BamHI <YYY>
YY <¢ve> ggcegeggge ctegagtget tecgeacctt ccacttcege atccacgacg tegtectega To ccceccacctc caaggattcc agcaaagaaa gaagctaaca atgatggaga tacccageat ٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc ٠٠٠
١ catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge ةفاعوالاقلا‎ ggtctggata Yo taaacccaag agctatcaag attgcatgga taaaccttta cttgaatgca ctagacgacg Yao atggtctccc aatctataag gatcc 7١ ١7 > ٠<
YVY > ١٠<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏.بن الشعير‎ Prestige >7 ١١<
YY ‏<م.>‎ ‎cgattccagc 2 taattttgtt ‏دعاعتناعتة‎ actttgctge 1 To ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetecggge tgttgaagaa gggatatetg ١٠١ tgataaagec tagtggtctt ‏#مالماوعاة‎ acatgggagg ccggecagga 1 YA. gtgagcgect atttctacge cgtggatttc gcatcaataa getctggeaa acaaaaatta Yeo tgcaggtagc ~~ aattctttga gtgactagat g 7
Ye <yy.> ‏الا‎ > ١٠<
DNA ‏؟>‎ ١<
AY ‏؟> الشعير طفرة‎ ١<
YE >..< cgattccage ttecggttgt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgctge attcagggtt Te ttottgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa gggatatctg ١١ tgataaagcc tagtggtett atggtattca acatgggagg ccggecagga caaggtgtct YA gtgagcgeet atttctacge cgtggatttc geatcaataa gctctggcaa acaaaaatta Yo tgcagatagc ~~ aattctttga gtgactagat g YV)
Yo <¥).>
YYY ><
DNA ‏؟>‎ ١< ‏الشعير‎ cv. sebastian >17 ١<
Vo >) ..< ggcatccaga ttccatcttc agggataaga cagtagcaga gctgggatgt 1 Te ggatatccat tgeacttgca gaaaagtggt gceccttcgaa ggttggeace tetigttecg ١٠١ t ١7١ ١ > ٠٠< ١7١ <YVY>
DNA <Y\Y> ‏الشعير‎ cv. sebastian <Y)Y>
YU <g> ggcatccaga ttccatcttc agggataaga cagtagcaga getgggatgt ggcaatggtt Ta ggatatccat tgeacttgca gaaaagtggt geccttcgaa gattggeace tettgttecg ١١ tag ١١١
YV > ٠١<
Yo ‏؟>‎ ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
YV <¢ve> atggcetgegg cggeggggga cgtgg Yo
YA <YY.>
YY > ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
YA >. aggattccag caaagaaaga age YY 1 > ٠٠<
Y¢ >١١<
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ <YYY> <YYV.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Ya <g> gattcttaac cccaatccag aggce Y¢ gr >١7٠<
Yo ‏؟>‎ ١<
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ <YYYV> <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Sv <g> ggettttgtt gaggaccaat ttgge Yo ١٠ <YVY.>
YY ><
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ <YYY> <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> ٠ <g> tgctgetttc gtgaacttat t ‏ص‎ ‎7 >١٠< 7 > ١٠
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >< <YY.>
Yo ‏أولي‎ PCR <YYY>
EY <g> catatggatc tggaccgcag cttett Yi
EY <YY.>
Yo > ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
EY >..< ccttcgaagg geaccacttt tctge Yo 6 <YY.>
Yo ‏؟>‎ ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >” ١١< <YYV.> ‏أولي‎ PCR <YYY> £8 <g> ctggagagca cagtagttge tcaag Yo to <YVY.>
Yo > ١<
DNA ‏؟>‎ ١ < ‏صناعي‎ >١١ ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> $0 <¢va> ctgcataatt tttgtttgee agage Yo £1 <YY).>
Y¢ > ‏<ا‎ ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ <YYY> <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> £1 <g> tacaccattt gagcttggca gact Y¢ ‏ا‎ >١٠٠<
Y¢ ><
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ >١١ ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
EY <g> aaaatggagg cgtttactge agaa AR?
EA <YY>
YV > ١٠<
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ >< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
EA <g> ctagttgcta ccattcacct tagcacc Yv £4 <YY.>
Yo ‏؟>‎ ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >؟١١<‎ <YY.> yay ‏أولي‎ PCR <YYY> £4 <g> atggetgegg cggegggeea 088 Yo or <YY >
Yo >؟١<‎
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ <YIY> <YYV.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Or <¢va> atggetgegg cggeggggea 88 Yo 0) <Y\.>
Yo ‏؟>‎ ١ <
DNA > < ‏صناعي‎ > ؟١١<‎ <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> 0) >. atggetgegg cggeggggga cgtgg Yo oY >" ٠٠<
Yo ‏7؟>‎ ١<
DNA <Y)Y> ‏صناعي‎ >١١١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> oF ‏<.ي..ع>‎ ‎atggetgegg cggegggega 888 Yo oy <Y).>
حا ‎Yo ><‏ ‎١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‎>١7 ١<‏ صناعي ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎OV <¢ va>‏ ‎atggetgegg cggeggggga cgteg ve‏ ‎<Y\Y.>‏ 0% ‎١<‏ ؟> ‎Yo‏ ‎DNA >7 ١<‏ ‎١<‏ ؟> صناعي ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي ل {¢< 08 ‎ggctectcgg cgeegtgega cggcg Yo‏ ‎<Y\.>‏ 00 ‎Yo >١7 ١<‏ ‎DNA <Y\Y>‏ ‎١١<‏ ”> صناعي ‎<YVY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي .> 00 ‎ggctectegg cgeegtgega cggcg Yo‏ ‎on <Y\).>‏ ‎Yo <Y\Y\>‏ ‎DNA <Y\Y>‏ <> صناعي ‎<YY.>‏
‏أولي‎ PCR ><
Of > ‏<ر.‎ ‎ggetectegg 021668 cggeg Yo oY >< ٠١ <YVY>
DNA ‏؟>‎ ١ < ‏صناعي‎ > ١١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
OV > ‏<ي.‎ ‎gtacgcegeg 66025 Ye
OA > ٠١<
Yo > ١٠<
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ > ؟١١'<‎ <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
ON > wv e> ccgeeggegg cgaagegecg \K 084 <Y\)Y.>
Yo <YYY>
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ >” ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> 04 <¢va> gtgcggaage actcgagecc ١ ٠١ > ٠٠<
٠
Ye >١7 ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >” ١١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Te >). 5155215252 728 ١ 1) > ٠٠< 1 >"١ا<‎
DNA ‏7؟>‎ ١ < ‏صناعي‎ >١7 ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> 1١ <€ee> cttggaggte ggggtegage acgacg 71
TY > ٠٠<
Ye > ١ا<‎
DNA > ١< ‏صناعي‎ >< <YY > ‏أولي‎ PCR <YYY> 1١ >< gtocggaage 0168206 ١ 17 > ٠٠<
Ye <YYY>
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ >" ١<
YY) ‏أولي‎ PCR <YYY> 17 >..< cgtggatgeg 8 ve 1¢ <YYV.>
YU >؟7١<‎
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ > ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> ٠1 <u> ctiggaggtg ggggtlcgage acgacg 571 > ٠٠< 1١ > ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏؟> صناعي‎ ١١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> ‏<ي. > م“‎ gtttatggtc tggatataaa cccaag Yi 17 <YV.>
YY ><
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >” ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> 11 > ..< aggattccag caaagaaaga age yy
TV <YY.>
‘YY
Yo >؟١<‎
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ >”١١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
TY >. ‏<ء‎ ‎23312600868 acaagattec ggaaa Yo
TA <YY.>
Yo > ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >< <YYV.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
TA > ‏حي‎ ‎ctgcataatt tttgtttgee agagc Yo 14 >7٠٠< ١١ > ‏<ا‎ ‎PRT > ١< ‏؟> صناعي‎ ١< <YY.>
His Tag <YYY> 19 <g>
Met Gly His His His His His His His His His His ١ 2 ٠١ ‏.لا‎ <YY.>
YY >؟١<‎
PRT >< ‏صناعي‎ >" ١<
ل ‎<YY >‏ ‎<VY 7‏ موضع ‎Enterokinase‏ ‎Ye >62‏ ‎Ser Ser Gly His Ile Asp Asp Asp Asp Lys His‏ ‎١ ° )‏ ‎YY <YY.>‏ ‎YY ><‏ ‎DNA <Y\Y>‏ <> صناعي ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي <..ءع> ‎VY‏ ‏نص ‎catatgatgg ctgcggegge gggggacgtg g‏ ‎YY <YY.>‏ ‎YY > ١١<‏ ‎١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‏<> صناعي ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎YY <g>‏ ‎gaattctagt ~~ tgctaccatt caccttagca cc YY‏ ‎YY > ٠<‏ <١ا‏ ؟> ‎YV‏ ‎١١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‏<> صناعي ‎<YY.>‏ ٍْ ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎VY >...‏
YV¢ ggecgegggg ctegagtgcet tccgeac ‏ف‎ ‏غلا‎ <YY.> £1 >؟١ا<‎
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >”١١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
VE >. ggatcctcaa agaattgcta tetgceataat tittgtttge cagagc £1
Yo >١١ <
YV > ‏<ا‎ ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ > ؟١١<‎ <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Yo >). ggccgegggg ctegagtgct tccgeac ‏ا‎ ‏كلا‎ > ٠١<
YY > ‏<ا‎ ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >١١ ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> ‏كلا‎ <g> ggatecttag cagecttgtc ctggeeggee tcecatg vv
YY >< 14 > ١<
DNA <Y\Y> vo ‏؟> صناعي‎ < <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
YY > ‏حي .ع‎ cgattccage ttceggttg Va
VA > ٠١< ٠١ ‏؟>‎ ١١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏؟> صناعي‎ ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
VA > ..< cgattccage ttccggttg 3 ‏كلا‎ > ٠١< 14 > ١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏؟> صناعي‎ ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Va >... cgaticcage ticeggttg 1
Av > ٠<
YY ><
DNA > ١< ‏؟> صناعي‎ ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> ‏مي .> يم‎ ggcatccaga ttccatctte ag YY
AY > ٠٠< 11 >" ١<
DNA > ١< ‎>”١<‏ صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎AY <g> ‎catctagtca ctcaaagaat tgetac A
AY > ٠< ‎1١ > ١< ‎DNA <Y\Y> ‏<> صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎AY >..< ‎catctagtca ctcaaagaat tgetat 71
AY > ٠< ‎1١ ‏؟>‎ ١ا<‎ ‎DNA <Y\Y> ‏<؟١‏ ؟> صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎AY <€vo>‏ ‎catctagtca ctcaaagaat tgctat 93
AE ><
YY >" ١<
DNA <Y\Y>
فاخا ‎>١١ ١<‏ صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎AE >. ‎ctacggaaca agaggtgeca at YY
Ao > ٠٠< ‎YV ‏؟>‎ ا٠<‎ ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‎١١<‏ > صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‏.> عم ‎4 ctegagtget tccgeac vv
AT ‏؟>‎ ٠< ‎17 > ١< ‎DNA <Y\Y> ‏<> صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎AT >. ‎cgagataaga taaatatcta cggaacaaga ggtgccaatc ttcgaaggge accactttic + 186 i) ‎AY > ٠< ‎YV > ‏<ا‎ ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >”١١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
YVYA
AY > ‏حي‎ ‎ggeecgegggg ctegagtact tccgeac ‏ل‎ ‎AN > ٠٠< ‏.لا‎ >١<
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >” ١١< >١7 7١< ‏أولي‎ PCR <YYY>
AN > ‏حب‎ ‎aacctgagta aatgtctaac ttctgeaggt cccatgtttg caacaaacga gataagataa Te atatctacgg Ya ‏؟> كم‎ ٠<
YV >" ‏<ا‎ ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ <Y\Y> <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> ‏كم‎ >. ggeegegggg ‏مه‎ tcegeac ‏ل‎ ‎Qe >< 17 > ١<
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ >” ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Qe <fee> ggatcectac tggeagacac ctaaaagtt catataaagt aacctgagta aatgtctaac Te ttetge "1
١ > ٠<
YY ‏؟>‎ ١<
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ >” ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> 1) <g> ggecgegggg ctegagtget tcegeac ‏يض‎ ‎7 >؟٠<‎ ‏كي‎ 7<
DNA ‏؟>‎ ١١< ‏صناعي‎ >؟١١<‎ <YY > ‏أولي‎ PCR <YYY>
AY <¢ve> ggatccttat atccagacca faaacctgag taaatgicta acttctge ‏بم‎ ‎7 >؟7٠٠<‎
YY ‏؟>‎ ١<
DNA <Y\Y> ‏<؟> صناعي‎ <YY > ‏أولي‎ PCR <YYY> 7 >... ggcegegggg ctegagtget tccgeac ‏للا‎ ‎4 <Y\V.>
Ae <YYY>
DNA <Y\Y> ‏صناعي‎ ><
حا ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي ...> ‎aggtttatcc 1 gatagetctt gggtttatat ccagaccata aaccattgcc Te‏ ‎acatcccage tetgetactg Ae‏ ‎>7٠٠<‏ 40 ‎YY > ١٠<‏ ‎DNA <Y\Y>‏ ‎١١<‏ ”> صناعي ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎qo >...‏ لا ‎ggecgegggg ctegagtget tccgeac‏ ‎>7٠‏ 1 ‎Av ><‏ ‎DNA <Y\Y>‏ ‎>”١١<‏ صناعي ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎AN <g>‏ ‎ggatccttat agattgggag accatcglcg tctagtgcat tcaagtaaag gtttatccat “16.‏ ‎gcaatcttga 8 Ae‏ ‎Vv > ٠<‏ ‎١<‏ ؟> ‎YV‏ ‎١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‎١١<‏ > صناعي ‎<YY.>‏ ‎PCR <YYY>‏ أولي
YAN
AY >. ggcatccaga ttccatctte ag ‏ا‎ ‎AA >7٠<
YV > ا٠<‎
DNA <Y\Y> ‎١١<‏ ”> صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎GA <¢ ve > ‎ggcatccaga ttecatcttc ag Yv 14 >< ‎YY <YVYV> ‎DNA >7 ١< ‎>١١ ١<‏ صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎94 <g> ‎ggcatccaga ttecatettc ag YY
Yeo > ٠١< ‎٠١ ‏7؟>‎ ١< ‎DNA > ١< ‏<> صناعي ‎<YY.> ‎PCR <YYY>‏ أولي ‎٠١١. >. ١2 ‎cgattccage ttceggttg 8
Yo) > ٠<
YY > ١<
YAY
DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >١١ 75 <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
Yeo) >. ctacggaaca agaggtgeca ac YY ٠١١ > ٠<
YY >" ١<
DNA > ١< ‏صناعي‎ >١7 ١< <YY > ‏أولي‎ PCR <YYY> ٠١١ ‏<ي.>‎ ‎ctacggaaca agaggtgcca at YY ٠١١ > ٠١<
YY ><
DNA ‏7؟>‎ ١ < ‏صناعي‎ >” ١< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY> ٠١١ <gee> ctacggaaca agaggtgeca at YY ٠١: >7٠< 7 >" ‏<ا‎ ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‏صناعي‎ >< <YY.> ‏أولي‎ PCR <YYY>
YAY
١٠١ >< catctagtca ctcaaagaat tgctat 97

Claims (1)

  1. YAS ‏عناصر_الحماية‎
    ‎-١ ١‏ مشروب ‎(beverage)‏ غير كحولي محضر من نبات شعير ‎«(barley plant)‏ أو جزء منه؛ ‎١"‏ حيث يحتوي المشروب ‎(beverage)‏ المذكور على مستوى من ‎dimethyl sulfide (DMS)‏ أقل " من ‎Yo‏ جزء بالبليون ومستوى ‎S-methyl-L-methionine (SMM)‏ أقل من ‎٠١‏ جزء بالبليون؛ ؛ وحيث يحمل نبات الشعير ‎(barley plant)‏ المذكور أو جزء منه؛ طفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene) ©‏ تشفر ‎MMT meyhionines-methyl-transferase‏ مما يسبب فقد كلي لنشاط ‎MMT‏ ‎١‏ ؟- المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لعنصر الحماية ٠؛‏ حيث يكون المشروب ‎(beverage) ١"‏ المذكور هو مشروب ‎(beverage)‏ ملت ‎.(malt)‏
    ‎١‏ ©- المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ‎١‏ و7؛ حيث " _يكون المشروب ‎(beverage)‏ هو مشروب ‎(beverage)‏ ملت متخمر غير كحولي.
    ‎١‏ 4- المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية السابقة؛ حيث " يحتوي المشروب ‎(beverage)‏ على ‎٠١ Jil‏ أجزاء بالبليون من ‎DMS‏
    ‎=o)‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ‎EL‏ حيث ‎Y‏ يحتوي المشروب ‎(beverage)‏ على أقل من١٠‏ أجزاء بالبليون ‎S-methyl-L-methionine‏ ‎(SMM) Y¥‏
    ‎١‏ +- المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ‎i)‏ حيث ‎١"‏ يحتوي المشروب ‎(beverage)‏ على ‎Jil‏ من ‎٠١‏ أجزاء بالبليون من ‎DMS‏ وأقل من ‎٠١‏ أجزاء " بالبليون ‎SMM‏
    ‏؛ - ‎-١7‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية السابقة؛ حيث © يحتوي المشروب على أقل من © أجزاء بالبليون ‎DMS‏ وأقل من © أجزاء في البليون ‎SMM‏
    ‎١‏ +- المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى 7 حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة ‎(mutation)‏ في موقع جديلة من الجين ‎(gene)‏ الذي يشفر ‎MMT‏
    ‎١‏ 4- المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي ‎Lida‏ لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎A‏ حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene)‏ الذي يشفر " 1201 متواجدة داخل موقع الجديلة من ‎intron‏
    مم ‎-٠١ ١‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى 5؛ حيث ‎Y‏ يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene)‏ الذي يشفر " 11111 وهي طفرة متواجدة داخل موقع الجديلة م" من ‎ia intron‏ طفرةٍ ‎G—>A (mutation)‏ ؛ للقاعدة 0“ الطرفية من ‎.intron‏ ‎-١١ ١‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎Ve‏ حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على الطفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene)‏ الذي " يشفر ‎MMT‏ وهي طفرة متواجدة داخل موقع الجديلة © من ‎intron‏ منتقاة من المجموعة ؛ المتكونة من ‎introns‏ ؟ 5 0. ‎TY‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎١٠١‏ حيث ؟_يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على الطفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene)‏ الذي 7 يشفر ‎MMT‏ وهي طفرة ‎G>A (mutation)‏ للقاعدة رقم ‎TY‏ من تعريف الترتيب رقم: 3. ‎VY)‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎٠١‏ حيث ‎١"‏ يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene)‏ الذي يشفر ¥ 112411 هي طفرة ‎GA (mutation)‏ للقاعدة رقم ‎١577‏ من تعريف الترتيب رقم: ‎AT‏ ‎-١4 ١‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎OF‏ حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة ‎(mutation)‏ تنتج جين ‎(gene)‏ يشفر شكل ‎TF‏ مبتور من ‎MMT‏ يشتمل على جزء ‎Nm bib‏ من ‎MMT‏ النوع البري الترتيبات الإضافية ؛ الطرفية-© غير الموجودة في 71 نوع بري؛ حيث يشتمل الجزء المذكور الطرفي ‎N‏ على 0 506 في المعظم؛ متخلف ‎N= (8k amino acid‏ من تعريف الترتيب رقم: 6. ‎-١٠ ١‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎NEV‏ ‎Y‏ حيث يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة ‎(mutation)‏ تدخل ‎codon‏ إيقاف " ناضج قبل الأوان في الجبين ‎(gene)‏ الذي يقفر ‎MMT‏ ‎-١١ ١‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لعنصر الحماية ‎VE‏ حيث يحضر المشروب " _من نبات شعير مشتمل على ‎codon‏ إيقاف ينتج جين ‎(gene)‏ يشفر أي من الأشكال المبتورة "من ‎MMT‏ طبقا لعنصر الحماية ‎.١6‏ ‎-١7 ١‏ المشروب ‎(beverage)‏ غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎VY‏ حيث ‎VY‏ يحضر المشروب من نبات شعير ينتقى نبات الشعير من مجموعة متكونة من نباتات تسمى
    YAR ‏من أكتوبر‎ ٠١ ‏المودع عند 8100 في‎ "Hordeum vulgare, Line 8063 «(barley) wd’ 7 ‏ونسل النباتات من ذلك.‎ PTA-9543 ‏تحت اسم‎ Yo oA Hid - ‏؛‎ ‏مطحونة للاستخدام في مشروب غير كحولي يشتمل‎ (malt composition) ‏تركيبة ملت‎ -١١ ١ ‏طفرة في‎ (barley plant) ‏معالج؛ حيث يحمل نبات الشعير‎ (barley plant) ‏على نبات شعير‎ " MMT ‏يسبب الفقد الكلي في‎ cmethionine S-methyltransferase (MMT) ‏جين يشفر‎ ¥ ‏؛ الوظيفي.‎ ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لعنصر‎ (composition malt) ‏تركيبة الملت‎ -١4 ١ ‏المذكور هو لبابة‎ (barley plant) ‏المذكور من نبات الشعير‎ all ‏حيث يكون‎ A ‏الحماية‎ " -((kernels) <UL) (kernel) " ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد‎ (composition malt) ‏تركيبة الملت‎ -٠١ ١ ‏مجفف‎ (malt) ‏هي ملت‎ (malt) ‏حيث تكون تركيبة الملت‎ Fo ‏إلى‎ ١8 ‏".من عناصر الحماية‎ ‏في آتون.‎ " ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد‎ (composition malt) ‏تركيبة الملت‎ -7١ ١ ٠٠١ ‏على‎ (malt composition) ‏تشتمل تركيبة الملت‎ Gus Yo ‏إلى‎ ١8 ‏من عناصر الحماية‎ "
    ‏حر.‎ DMS ‏"جز بالبليون في المعظم من‎ ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد‎ (composition malt) ‏تركيبة الملت‎ YY ١ ‏على‎ (malt composition) ‏حيث تشتمل تركيبة الملت‎ FY ‏إلى‎ ١8 ‏من عناصر الحماية‎ " SMM ‏جزء بالبليون في المعظم من‎ ٠٠٠١ " ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد‎ (composition malt) ‏؟7- تركيبة الملت‎ ١ ‏جزء في‎ ٠٠00 ‏حيث تشتمل تركيبة الملت في المعظم على‎ YY ‏إلى‎ ١8 ‏"من عناصر الحماية‎ SMM ‏جزء في البليون‎ ٠٠٠١ ‏حر وفي المعظم‎ DMS ‏البليون‎ ¥ ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي محضرة‎ (Wort composition) ‏تركيبة ورت‎ - 4 ١ ‏أو جزء منه؛ حيث يحمل نبات الشعير طفرة في الجين‎ «(barley plant) ‏باستخدام نبات شعير‎ " 0 ‏الوظيفي؛‎ MMT ‏عصنلدمنطاء» يسبب الفقد الكلي في‎ S-methyltransferase (MMT) ‏يشفر‎ ¥ ‏؛ باستخدام تركيبة ملت محضرة من نبات الشعير المذكور أو جزء منه؛ أو خلطات من ذلك.‎
    YAY ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لعنصر‎ (Wort composition) ‏©؟- تركيبة الورت‎ ١ ‏الحماية 4 7؛ حيث يجري إنتاج تركيبة الورت باستخدام الهريس في درجة حرارة لا تتجاوز‎ " ‏ال ف ا‎ ‏لعنصري‎ lh ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي‎ (Wort composition) ‏تركيبة الورت‎ -7١ ١ ‏حيث تغلي تركيبة الورت بحد أقصى £0 دقيقة.‎ YO ‏إلى‎ YE ‏الحماية‎ " ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد‎ (Wort composition) ‏تركيبة الورت‎ —YY ١ ‏المذكور من النبات المذكور هو لبابة‎ gall ‏حيث يكون‎ YT ‏إلى‎ YE ‏"من عناصر الحماية‎ ‏(لبابات (باعد»).‎ (kernel) " ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد‎ (Wort composition) ‏8؟- تركيبة الورت‎ ١ (malt ‏حيث تكون تركيبة الملت المذكورة هي تركيبة ملت‎ TY ‏إلى‎ YE ‏"من عناصر الحماية من‎ IY ‏إلى‎ ١8 ‏طبقا لأي واحد من عناصر الحماية من‎ composition) ¥ ‏إلى‎ ١ ‏غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية من‎ (beverage) ‏المشروب‎ -74 ١ ‏طبقا‎ (malt composition) ‏المذكور من تركيبة ملت‎ (beverage) ‏يحضر المشروب‎ Cus (VY X ‏طبقا لأي‎ (Wort composition) ‏إلى أو تركيبة ورت‎ ١8 ‏لأي واحد من عناصر الحماية‎ 7 JA ‏؛ واحد من عناصر الحماية ؛ ؟ إلى‎ ‏للاستخدام في مشروب غير كحولي منتقى من المجموعة‎ (plant product) ‏منتج نبات‎ =e) ‏وخلاصات‎ (barley) ‏خلاصات شعير‎ (malt) ‏أشربة ملت‎ (barley) ‏المتكونة من أشربة شعير‎ " ‏حيث يحضر منتج النبات من نبات شعير يحمل طفرة في الجين يشفر‎ (malt) ‏ملت‎ " ‏الوظيفي.‎ MMT ‏يسبب الفقد الكلي في‎ emethionine S-methyltransferase (MMT) ¢ ٠١ ‏غير كحولي محتوي على أقل من‎ (beverage) ‏لإنتاج مشروب‎ (method) ‏طريقة‎ -؟١‎ ١ ‏حيث تشتمل الطريقة المذكورة على خطوات:‎ (DMS ‏جزء في البليون من‎ " ‏أو أجزاء منه؛ حيث‎ «(barley plant) ‏أ تحضير تركيبة مشتملة على نبات شعير‎ OY ‏و9 إلى‎ ١ ‏يكون نبات الشعير كما هو محدد في أي من عناصر الحماية‎ ¢(beverage) ‏في شكل مشروب‎ )١( ‏إنتاج التركيبة‎ Lid ° ‏جزء في‎ ٠0 ‏غير كحولي محتوي على أقل من‎ (beverage) ‏حيث يتم الحصول على مشروب‎ 1 DMS ‏البليون‎ ١
    YAA ‏حيث تكون الطريقة المذكورة هي طريقة‎ 7١ ‏طبقا لعنصر الحماية‎ (method) ‏الطريقة‎ -*7 ١ DMS ‏جزءٍ في البليون‎ ٠١ ‏ا لإنتاج مشروب غير كحولي يحتوي على أقل من‎ " ‏إلى 7؛ حيث تشتمل‎ 9١ ‏طبقا لأي واحد من عناصر الحماية‎ (method) ‏“7-الطريقة‎ ١ ‏للاستخدام في مشروب غير‎ (malt composition) ‏على تحضير تركيبة ملت‎ (i) ‏الخطوة‎ " ‏المذكور.‎ (barley plant) ‏كحولي من لبابات نبات الشعير‎ F ‏حيث تشتمل إنتاج‎ FY ‏إلى‎ 9١ ‏طبقا لأي واحد من عناصر الحماية‎ (method) ‏4؛- الطريقة‎ ١ ‏غير كحولي على خطوة تهريس؛ وبذلك تنتج تركيبة‎ (beverage) ‏التركيبة في شكل مشروب‎ " ‏11ه117).‎ composition) ‏ورت‎ ‏طبقا لعنصر الحماية 4 ؛ حيث تجري خطوة الهريس باستخدام‎ (method) ‏©؟- الطريقة‎ ١ ‏ا"مئوية.‎ ٠ ‏هريس في درجة حرارة لا تتجاوز‎ " ‏حيث تشتمل‎ Fo ‏طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ١؟ إلى‎ (method) ‏+؟- الطريقة‎ ١ ‏غير كحولي على خطوة تهريس وخطوة‎ (beverage) ‏خطوة إنتاج التركيبة في شكل مشروب‎ " -(Wort composition) ‏ترشيح ورت وخطوة تطهير؛ وبذلك تنتج تركيبة ورت‎ ¥ ‏حيث معالجة التركيبة في‎ FT ‏إلى‎ VE ‏الطريقة طبقا لأي واحد من عناصر الحماية‎ YY) ‏غير كحولي تشمل خطوة غليان الورت المذكورة؛ حيث يغلي الورت‎ (beverage) ‏مشروب‎ ١ ‏المذكور في المعظم £0 دقيقة.‎ YF ‏حيث تشتمل‎ FY ‏طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ؛؟ إلى‎ (method) ‏الطريقة‎ ~YA ١ ‏غير كحولي على تخمر الورت المذكور.‎ (beverage) ‏خطوة إنتاج التركيبة في شكل مشروب‎ " ‏للاستخدام في مشروب‎ (malt composition) ‏لإنتاج تركيبة ملت‎ (method) ‏4؟- طريقة‎ ١ ‏حيث‎ ¢ ya DMS ‏جزءٍ في البليون في المعظم من‎ Yoo ‏غير كحولي تشمل‎ (beverage) VY ‏تشتمل الطريقة المذكورة على خطوات:‎ v7 ‏حيث يكون نبات الشعير هو نبات شعير كما هو‎ ped) ‏توفير لبابات من نبات‎ 1 t AY ‏و9 إلى‎ ١ ‏محدد في أي واحد من عناصر الحماية‎ 2 ‏تقع اللبابات المذكورة؛‎ Lj 1 ‏تن إنبات اللبابات المنقوعة تحت شروط مسبقة التحديد؛‎ 7 ‏معالجة اللبابات النابتة بالتسخين؛‎ Liv A
    ا 4 وبذلك تنتج تركيبة ملت ‎(malt composition)‏ للاستخدام في مشروب غير كحولي تشمل ‎٠٠١‏ ‎٠‏ جزءٍ في البليون في المعظم من ‎DMS‏ حر. ‎١‏ 46- طريقة ‎(method)‏ لتحضير نبات شعير ‎(barley plant)‏ للاستخدام في مشروب غير " كحولي يحمل طفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene)‏ الذي يشفر ‎MMT‏ مما يسبب فقد كامل " لنشاط ‎MMT‏ حيث تشتمل الطريقة على خطوات: ‎i ¢‏ تكوين طفرة ‎(mutation)‏ في نباتات الشعير ‎(barley plants)‏ و/أو لبابات الشعير ‎«(barley Kernels) °‏ و/أو أجنة الشعير ‎(barley embryos)‏ و/أو خلايا الشعير ‎(barley cells) 1‏ و/أو نسيج الشعير ‎(barley tissue)‏ وبذلك نحصل على جيل ل شعير ‎SIMO‏ ‎Ld A‏ نمو نباتات الشعير ‎(barley plants)‏ الطفرية المذكورة؛ اللبابات؛ ‎LOAN‏ ‏9 الأنسجة و/أو الأجنة ‎sad‏ جيلين على الأقل؛ وبذلك نحصل على نباتات شعير ‎(barley plants) Ve‏ مع جيل ‎Mx‏ حيث ‎X‏ هو عدد صحيح > ؟؛ و ‎iii ١١‏ الحصول على عينة من نباتات شعير ‎Mx (barley plants)‏ المذكورة؛ و ‎iv "‏ تحديد مستوى ‎SMM‏ في العينة المذكورة؛ و ‎Ly VY‏ انتقاء نباتات لا يمكن تحديد نشاط ‎¢SMM‏ و ‎vi Ve‏ ترتيب جزءٍ على الأقل من جين ‎MMT (gene)‏ و ‎vii yo‏ انتقاء نباتات تحمل طفرة ‎(mutation)‏ في جين ‎{MMT (gene)‏ ‎١١‏ وبذلك ينتج نبات شعير ‎(barley plant)‏ يحمل طفرة ‎(mutation)‏ في الجين ‎(gene)‏ الذي يشفر ‎MMT ١"‏ مما يسبب فقد كامل لنشاط ‎MMT‏
SA109300713A 2008-12-03 2009-12-05 مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة SA109300713B1 (ar)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DKPA200801708 2008-12-03

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA109300713B1 true SA109300713B1 (ar) 2014-09-11

Family

ID=41137843

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA109300713A SA109300713B1 (ar) 2008-12-03 2009-12-05 مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة

Country Status (29)

Country Link
US (1) US9834760B2 (ar)
EP (1) EP2373154B1 (ar)
JP (1) JP5774997B2 (ar)
KR (1) KR101769525B1 (ar)
CN (1) CN102291982B (ar)
AP (1) AP3392A (ar)
AR (1) AR074430A1 (ar)
AU (1) AU2009321894B2 (ar)
BR (1) BRPI0922349B8 (ar)
CA (1) CA2744836C (ar)
CL (1) CL2011001307A1 (ar)
EA (1) EA029777B1 (ar)
ES (1) ES2586616T3 (ar)
HK (1) HK1162852A1 (ar)
HR (1) HRP20160874T1 (ar)
HU (1) HUE030303T2 (ar)
IL (1) IL213324A (ar)
LT (1) LT2373154T (ar)
MX (1) MX2011005619A (ar)
MY (1) MY187926A (ar)
NZ (1) NZ593605A (ar)
PL (1) PL2373154T3 (ar)
PT (1) PT2373154T (ar)
SA (1) SA109300713B1 (ar)
SG (1) SG171940A1 (ar)
UA (1) UA105197C2 (ar)
UY (1) UY32282A (ar)
WO (1) WO2010063288A2 (ar)
ZA (1) ZA201104844B (ar)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9587210B2 (en) 2008-12-03 2017-03-07 Carlsberg Breweries A/S Energy saving brewing method
EA031578B1 (ru) 2010-06-03 2019-01-31 Карлсберг Брюириз А/С Способ получения напитка на основе ячменя
MA51532A (fr) * 2016-07-01 2020-11-11 Carlsberg Breweries As Boissons à base de céréale raffinée
RU2733294C1 (ru) 2016-11-18 2020-10-01 Балтика Брюэрис - Парт Оф Зе Карлсберг Груп Способ получения зернового солода и солодовый продукт, полученный таким способом
JP7116536B2 (ja) * 2017-10-17 2022-08-10 サッポロビール株式会社 ビールテイスト飲料、ビールテイスト飲料の製造方法及びビールテイスト飲料の高級感を改善する方法
UA128208C2 (uk) 2017-12-28 2024-05-08 Карлсберг А/С Спосіб одержання водного екстракту зернової культури та спосіб одержання напою
JP7359768B2 (ja) 2017-12-28 2023-10-11 カールスバーグ アグシャセルスガーブ 改善された細胞壁特性を有する穀類植物
RS65522B1 (sr) 2017-12-28 2024-06-28 Carlsberg As Brzi postupci za pripremu ekstrakata žitarica
MX2020006849A (es) 2017-12-28 2020-11-11 Carlsberg As Cebada con actividad enzimatica hidrolitica incrementada.
WO2019207063A1 (en) 2018-04-25 2019-10-31 Carlsberg A/S Barley based beverages
CN112345654A (zh) * 2019-08-06 2021-02-09 红塔烟草(集团)有限责任公司 一种基于色谱指纹图谱识别油斑烟污染源的方法
IL296009A (en) * 2020-03-02 2022-10-01 Carlsberg As Barley plants with high borderline dextrinase activity
CN112795545B (zh) * 2021-01-29 2022-04-12 浙江大学 大麦HvHMT3基因及其应用

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8813249D0 (en) * 1988-06-04 1988-07-06 Carlsberg As Method of brewing beer
US5242694A (en) * 1992-02-18 1993-09-07 G. Heileman Brewing Company, Inc. Process for brewing low carbohydrate near beer
AU653472B2 (en) * 1992-05-14 1994-09-29 Joe White Maltings Limited Malt production
GB9722027D0 (en) 1997-10-17 1997-12-17 Melica Hb Methods
US6326184B1 (en) * 1998-09-15 2001-12-04 Carlsberg A/S Method of producing a composite fermented beverage using genetically modified yeast strains
WO2000049157A2 (en) 1999-02-22 2000-08-24 University Of Florida Compositions and methods for altering sulfur content in plants
DK1346030T3 (da) * 2000-12-29 2012-02-13 Heineken Tech Services Byg med lavt indhold af lipoxygenase 1
US6660915B2 (en) * 2000-12-29 2003-12-09 Anna Christina Douma Low lipoxygenase 1 barley
WO2002088301A2 (en) 2001-05-02 2002-11-07 Gavish Galilee Bio Applications Ltd. Increased methionine in transgenic plants expressing mutant cystathionine gamma-synthase
WO2004011591A1 (en) 2002-07-25 2004-02-05 Novozymes A/S Mashing process
JP4113795B2 (ja) 2003-03-25 2008-07-09 サッポロビール株式会社 大麦リポキシゲナーゼ−１遺伝子、大麦の選抜方法、麦芽アルコール飲料用原料及び麦芽アルコール飲料の製造方法
US7420105B2 (en) * 2004-03-11 2008-09-02 Carlsberg A/S Barley for production of flavor-stable beverage
DE202007005281U1 (de) * 2007-04-11 2007-07-05 Hertel, Marcus, Dipl.-Ing. Vorrichtung zur Niedertemperaturwürzekochung

Also Published As

Publication number Publication date
UY32282A (es) 2010-06-30
KR20110094111A (ko) 2011-08-19
CL2011001307A1 (es) 2011-09-30
CN102291982A (zh) 2011-12-21
CA2744836C (en) 2022-04-12
JP5774997B2 (ja) 2015-09-09
AU2009321894A1 (en) 2011-07-14
MX2011005619A (es) 2011-09-09
IL213324A0 (en) 2011-07-31
AP2011005761A0 (en) 2011-06-30
WO2010063288A3 (en) 2011-07-14
HK1162852A1 (zh) 2012-09-07
JP2012510277A (ja) 2012-05-10
AU2009321894B2 (en) 2014-07-31
MY187926A (en) 2021-10-29
EP2373154A2 (en) 2011-10-12
UA105197C2 (ru) 2014-04-25
US9834760B2 (en) 2017-12-05
BRPI0922349B1 (pt) 2021-01-26
BRPI0922349A2 (pt) 2018-05-22
EA201170739A1 (ru) 2012-01-30
CA2744836A1 (en) 2010-06-10
CN102291982B (zh) 2014-06-04
HUE030303T2 (en) 2017-04-28
BRPI0922349B8 (pt) 2021-06-15
PT2373154T (pt) 2016-07-26
SG171940A1 (en) 2011-07-28
IL213324A (en) 2015-10-29
HRP20160874T1 (hr) 2016-10-07
AP3392A (en) 2015-08-31
US20110293779A1 (en) 2011-12-01
KR101769525B1 (ko) 2017-08-18
AR074430A1 (es) 2011-01-19
ES2586616T3 (es) 2016-10-17
ZA201104844B (en) 2012-10-31
EA029777B1 (ru) 2018-05-31
WO2010063288A2 (en) 2010-06-10
NZ593605A (en) 2012-10-26
EP2373154B1 (en) 2016-04-20
PL2373154T3 (pl) 2017-01-31
LT2373154T (lt) 2016-10-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA109300713B1 (ar) مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة
JP6007174B2 (ja) エネルギーを節約した醸造法
BRPI0508554B1 (pt) Bebida à base de planta de cevada que apresenta mutação no gene lox-1, bem como métodos para produzir bebida com qualidades organolépticas estáveis, composição de malte sem atividade de lox-1 e planta de cevada que apresenta mutação no gene lox-1
EA028532B1 (ru) Ячмень с уменьшенной липоксигеназной активностью
JP5004402B2 (ja) 低リポキシゲナーゼ１オオムギ
US20170183611A1 (en) Energy saving brewing method
Wei et al. Effect of high temperature on the enzymatic activities and transcriptional expression of starch debranching enzyme (DBE) multiple isoforms in developing rice endosperms
HU228383B1 (en) Overexpression of phosphoenolpyruvate carboxylase
JP2000508537A (ja) 新規植物ステロイド５αレダクターゼ、ＤＥＴ２