SA109300713B1 - مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة - Google Patents
مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة Download PDFInfo
- Publication number
- SA109300713B1 SA109300713B1 SA109300713A SA109300713A SA109300713B1 SA 109300713 B1 SA109300713 B1 SA 109300713B1 SA 109300713 A SA109300713 A SA 109300713A SA 109300713 A SA109300713 A SA 109300713A SA 109300713 B1 SA109300713 B1 SA 109300713B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- barley
- mmt
- mutation
- malt
- leu
- Prior art date
Links
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 title claims abstract description 287
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 189
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 title claims abstract description 95
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 title claims description 398
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 149
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 141
- 241000209219 Hordeum Species 0.000 claims abstract description 45
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 34
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 251
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 211
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 111
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 49
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 42
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 40
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- 235000019520 non-alcoholic beverage Nutrition 0.000 claims description 33
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 31
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 30
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 27
- 101150024478 MMT1 gene Proteins 0.000 claims description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 20
- 230000035784 germination Effects 0.000 claims description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 17
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 claims description 15
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 15
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 12
- YDBYJHTYSHBBAU-YFKPBYRVSA-N S-methyl-L-methioninate Chemical compound C[S+](C)CC[C@H](N)C([O-])=O YDBYJHTYSHBBAU-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 11
- 229960005173 methiosulfonium chloride Drugs 0.000 claims description 10
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 9
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 8
- 230000004224 protection Effects 0.000 claims description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 6
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000005360 mashing Methods 0.000 claims description 3
- 101150000874 11 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 2
- 241001168730 Simo Species 0.000 claims 1
- 210000001061 forehead Anatomy 0.000 claims 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims 1
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 abstract description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 22
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 abstract description 3
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 abstract description 3
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 abstract 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 152
- 239000000047 product Substances 0.000 description 144
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 106
- DFPOZTRSOAQFIK-UHFFFAOYSA-N S,S-dimethyl-beta-propiothetin Chemical compound C[S+](C)CCC([O-])=O DFPOZTRSOAQFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 94
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 85
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 83
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 83
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 74
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 72
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 59
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 59
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 59
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 58
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 48
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 43
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 41
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 41
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 40
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 38
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 38
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 35
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 33
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 33
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 33
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 33
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 33
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 32
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 32
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 29
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 28
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 25
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 25
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 25
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 23
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 21
- 230000009946 DNA mutation Effects 0.000 description 20
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 20
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 19
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 19
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 19
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 19
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 19
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000000463 material Substances 0.000 description 17
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 description 15
- DPWGZWUMUUJQDT-IUCAKERBSA-N Leu-Gln-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O DPWGZWUMUUJQDT-IUCAKERBSA-N 0.000 description 14
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N Leu-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 14
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 14
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 14
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 13
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 13
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 13
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 13
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 12
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 12
- VPSHHQXIWLGVDD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O VPSHHQXIWLGVDD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 11
- HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 11
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 11
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 11
- AXFMEGAFCUULFV-BLFANLJRSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2s,3r)-2-amino-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound CC[C@@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AXFMEGAFCUULFV-BLFANLJRSA-N 0.000 description 10
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 10
- LXTGAOAXPSJWOU-DCAQKATOSA-N Asn-Arg-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LXTGAOAXPSJWOU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 10
- DONWIPDSZZJHHK-HJGDQZAQSA-N Asp-Lys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O DONWIPDSZZJHHK-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 10
- BOXNGMVEVOGXOJ-UBHSHLNASA-N Asp-Trp-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N BOXNGMVEVOGXOJ-UBHSHLNASA-N 0.000 description 10
- CEXINUGNTZFNRY-BYPYZUCNSA-N Gly-Cys-Gly Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC([O-])=O CEXINUGNTZFNRY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 10
- UYNXBNHVWFNVIN-HJWJTTGWSA-N Ile-Phe-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)CC)CC1=CC=CC=C1 UYNXBNHVWFNVIN-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 10
- DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 10
- KZZCOWMDDXDKSS-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KZZCOWMDDXDKSS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 10
- BPIMVBKDLSBKIJ-FCLVOEFKSA-N Phe-Thr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BPIMVBKDLSBKIJ-FCLVOEFKSA-N 0.000 description 10
- HFZNNDWPHBRNPV-KZVJFYERSA-N Pro-Ala-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HFZNNDWPHBRNPV-KZVJFYERSA-N 0.000 description 10
- ZCXQTRXYZOSGJR-FXQIFTODSA-N Pro-Asp-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZCXQTRXYZOSGJR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 10
- LWMQRHDTXHQQOV-MXAVVETBSA-N Ser-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LWMQRHDTXHQQOV-MXAVVETBSA-N 0.000 description 10
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HVHJYXDXRIWELT-RYUDHWBXSA-N Tyr-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O HVHJYXDXRIWELT-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 10
- YFOCMOVJBQDBCE-NRPADANISA-N Val-Ala-Glu Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N YFOCMOVJBQDBCE-NRPADANISA-N 0.000 description 10
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 10
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 108010085325 histidylproline Proteins 0.000 description 10
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 10
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 10
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 9
- GURLOFOJBHRPJN-AAEUAGOBSA-N Asn-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N GURLOFOJBHRPJN-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 9
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 9
- URHJPNHRQMQGOZ-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O URHJPNHRQMQGOZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 9
- OKCJTECLRDARDZ-XIRDDKMYSA-N Lys-Trp-Cys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)=CNC2=C1 OKCJTECLRDARDZ-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 9
- CHQWUYSNAOABIP-ZPFDUUQYSA-N Met-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N CHQWUYSNAOABIP-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 9
- SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 9
- MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N S-adenosyl-L-methioninate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C[S+](CC[C@H](N)C([O-])=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N 0.000 description 9
- 108010085203 methionylmethionine Proteins 0.000 description 9
- IILUKIJNFMUBNF-IHRRRGAJSA-N Phe-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O IILUKIJNFMUBNF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 8
- KNYPNEYICHHLQL-ACRUOGEOSA-N Phe-Leu-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 KNYPNEYICHHLQL-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 8
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 8
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 8
- 108010019832 glycyl-asparaginyl-glycine Proteins 0.000 description 8
- MLFHJEHSLIIPHL-UHFFFAOYSA-N isoamyl acetate Chemical compound CC(C)CCOC(C)=O MLFHJEHSLIIPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010047926 leucyl-lysyl-tyrosine Proteins 0.000 description 8
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 8
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 8
- WZGZDOXCDLLTHE-SYWGBEHUSA-N Ala-Trp-Ile Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N)=CNC2=C1 WZGZDOXCDLLTHE-SYWGBEHUSA-N 0.000 description 7
- YJHKTAMKPGFJCT-NRPADANISA-N Ala-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YJHKTAMKPGFJCT-NRPADANISA-N 0.000 description 7
- TZFQICWZWFNIKU-KKUMJFAQSA-N Asn-Leu-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TZFQICWZWFNIKU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 7
- QXOPPIDJKPEKCW-GUBZILKMSA-N Asn-Pro-Arg Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O QXOPPIDJKPEKCW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 7
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 7
- RDDSZZJOKDVPAE-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RDDSZZJOKDVPAE-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 7
- CUXJIASLBRJOFV-LAEOZQHASA-N Glu-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O CUXJIASLBRJOFV-LAEOZQHASA-N 0.000 description 7
- UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N Gly-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N 0.000 description 7
- JXUGDUWBMKIJDC-NAKRPEOUSA-N Ile-Ala-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O JXUGDUWBMKIJDC-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 7
- AGGIYSLVUKVOPT-HTFCKZLJSA-N Ile-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N AGGIYSLVUKVOPT-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 7
- APQYGMBHIVXFML-OSUNSFLBSA-N Ile-Val-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N APQYGMBHIVXFML-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 7
- RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N L-isoleucyl-L-alanine Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- WUFYAPWIHCUMLL-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WUFYAPWIHCUMLL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 7
- KTFHTMHHKXUYPW-ZPFDUUQYSA-N Leu-Asp-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O KTFHTMHHKXUYPW-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 7
- DSZFTPCSFVWMKP-DCAQKATOSA-N Met-Ser-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN DSZFTPCSFVWMKP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 7
- BGOWRLSWJCVYAQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BGOWRLSWJCVYAQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 7
- UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N Ser-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 7
- MFQMZDPAZRZAPV-NAKRPEOUSA-N Ser-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CO)N MFQMZDPAZRZAPV-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 7
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N Tyr-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 7
- CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N Tyr-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N 0.000 description 7
- GUIYPEKUEMQBIK-JSGCOSHPSA-N Val-Tyr-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)NCC(O)=O GUIYPEKUEMQBIK-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 7
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 7
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 7
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 7
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 6
- -1 Alcohols esters Chemical class 0.000 description 6
- LLUGJARLJCGLAR-CYDGBPFRSA-N Arg-Ile-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N LLUGJARLJCGLAR-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 6
- JWKDQOORUCYUIW-ZPFDUUQYSA-N Asn-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JWKDQOORUCYUIW-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 6
- YUOXLJYVSZYPBJ-CIUDSAMLSA-N Asn-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YUOXLJYVSZYPBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- GMXSSZUVDNPRMA-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GMXSSZUVDNPRMA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PJBVXVBTTFZPHJ-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Asp Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N PJBVXVBTTFZPHJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- MRWYPDWDZSLWJM-ACZMJKKPSA-N Glu-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MRWYPDWDZSLWJM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- LEGMTEAZGRRIMY-ZKWXMUAHSA-N Gly-Cys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)CN LEGMTEAZGRRIMY-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- WGNOPSQMIQERPK-GARJFASQSA-N Leu-Asn-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N WGNOPSQMIQERPK-GARJFASQSA-N 0.000 description 6
- WGNOPSQMIQERPK-UHFFFAOYSA-N Leu-Asn-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(=O)N)C(=O)N1CCCC1C(=O)O WGNOPSQMIQERPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SQUFDMCWMFOEBA-KKUMJFAQSA-N Leu-Ser-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 SQUFDMCWMFOEBA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- SVBJIZVVYJYGLA-DCAQKATOSA-N Leu-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SVBJIZVVYJYGLA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 6
- RPWTZTBIFGENIA-VOAKCMCISA-N Lys-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RPWTZTBIFGENIA-VOAKCMCISA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 6
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 6
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 6
- NJJBATPLUQHRBM-IHRRRGAJSA-N Phe-Pro-Ser Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O NJJBATPLUQHRBM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 6
- WGAQWMRJUFQXMF-ZPFDUUQYSA-N Pro-Gln-Ile Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WGAQWMRJUFQXMF-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 6
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 6
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 6
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 6
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 6
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 6
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 6
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 6
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 6
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 6
- CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 5
- OEUQMKNNOWJREN-AVGNSLFASA-N Asp-Gln-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N OEUQMKNNOWJREN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 5
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 5
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 5
- AUEJLPRZGVVDNU-UHFFFAOYSA-N N-L-tyrosyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 AUEJLPRZGVVDNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 5
- YUPRIZTWANWWHK-DZKIICNBSA-N Phe-Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N YUPRIZTWANWWHK-DZKIICNBSA-N 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 229960001570 ademetionine Drugs 0.000 description 5
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 239000005454 flavour additive Substances 0.000 description 5
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 5
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 5
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 5
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 5
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 5
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 5
- XWTNPSHCJMZAHQ-QMMMGPOBSA-N 2-[[2-[[2-[[(2s)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XWTNPSHCJMZAHQ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- UWQJHXKARZWDIJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Cys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O UWQJHXKARZWDIJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- HXNNRBHASOSVPG-GUBZILKMSA-N Ala-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HXNNRBHASOSVPG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N Ala-Gly-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- QHASENCZLDHBGX-ONGXEEELSA-N Ala-Gly-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QHASENCZLDHBGX-ONGXEEELSA-N 0.000 description 4
- RZZMZYZXNJRPOJ-BJDJZHNGSA-N Ala-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N RZZMZYZXNJRPOJ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 4
- VNYMOTCMNHJGTG-JBDRJPRFSA-N Ala-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VNYMOTCMNHJGTG-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 4
- CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- DWYROCSXOOMOEU-CIUDSAMLSA-N Ala-Met-Glu Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N DWYROCSXOOMOEU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- 108010011667 Ala-Phe-Ala Proteins 0.000 description 4
- ZBLQIYPCUWZSRZ-QEJZJMRPSA-N Ala-Phe-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CC1=CC=CC=C1 ZBLQIYPCUWZSRZ-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 4
- IHMCQESUJVZTKW-UBHSHLNASA-N Ala-Phe-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CC1=CC=CC=C1 IHMCQESUJVZTKW-UBHSHLNASA-N 0.000 description 4
- VHAQSYHSDKERBS-XPUUQOCRSA-N Ala-Val-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O VHAQSYHSDKERBS-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 4
- UPKMBGAAEZGHOC-RWMBFGLXSA-N Arg-His-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O UPKMBGAAEZGHOC-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 4
- FLYANDHDFRGGTM-PYJNHQTQSA-N Arg-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N FLYANDHDFRGGTM-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 4
- CZUHPNLXLWMYMG-UBHSHLNASA-N Arg-Phe-Ala Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 CZUHPNLXLWMYMG-UBHSHLNASA-N 0.000 description 4
- INXWADWANGLMPJ-JYJNAYRXSA-N Arg-Phe-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 INXWADWANGLMPJ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 4
- VDCIPFYVCICPEC-FXQIFTODSA-N Asn-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VDCIPFYVCICPEC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- OOWSBIOUKIUWLO-RCOVLWMOSA-N Asn-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OOWSBIOUKIUWLO-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 4
- LWXJVHTUEDHDLG-XUXIUFHCSA-N Asn-Leu-Leu-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LWXJVHTUEDHDLG-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 4
- COWITDLVHMZSIW-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O COWITDLVHMZSIW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- ICDDSTLEMLGSTB-GUBZILKMSA-N Asn-Met-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ICDDSTLEMLGSTB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- OROMFUQQTSWUTI-IHRRRGAJSA-N Asn-Phe-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N OROMFUQQTSWUTI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- OSZBYGVKAFZWKC-FXQIFTODSA-N Asn-Pro-Cys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O OSZBYGVKAFZWKC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- HRGGPWBIMIQANI-GUBZILKMSA-N Asp-Gln-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HRGGPWBIMIQANI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- NBKLEMWHDLAUEM-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N NBKLEMWHDLAUEM-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- XMKXONRMGJXCJV-LAEOZQHASA-N Asp-Val-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XMKXONRMGJXCJV-LAEOZQHASA-N 0.000 description 4
- XWKPSMRPIKKDDU-RCOVLWMOSA-N Asp-Val-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O XWKPSMRPIKKDDU-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 4
- ZUNMTUPRQMWMHX-LSJOCFKGSA-N Asp-Val-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZUNMTUPRQMWMHX-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YFXFOZPXVFPBDH-VZFHVOOUSA-N Cys-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CS)C(O)=O YFXFOZPXVFPBDH-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 4
- JDHMXPSXWMPYQZ-AAEUAGOBSA-N Cys-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CS)N JDHMXPSXWMPYQZ-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 4
- SBDVXRYCOIEYNV-YUMQZZPRSA-N Cys-His-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N SBDVXRYCOIEYNV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- KCPOQGRVVXYLAC-KKUMJFAQSA-N Cys-Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KCPOQGRVVXYLAC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- 108010090461 DFG peptide Proteins 0.000 description 4
- UEILCTONAMOGBR-RWRJDSDZSA-N Gln-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O UEILCTONAMOGBR-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 4
- IIMZHVKZBGSEKZ-SZMVWBNQSA-N Gln-Trp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IIMZHVKZBGSEKZ-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 4
- SOEXCCGNHQBFPV-DLOVCJGASA-N Gln-Val-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SOEXCCGNHQBFPV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 4
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N Glu-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 4
- CAVMESABQIKFKT-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N CAVMESABQIKFKT-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- KRGZZKWSBGPLKL-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N KRGZZKWSBGPLKL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- DVLZZEPUNFEUBW-AVGNSLFASA-N Glu-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N DVLZZEPUNFEUBW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- QXUPRMQJDWJDFR-NRPADANISA-N Glu-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QXUPRMQJDWJDFR-NRPADANISA-N 0.000 description 4
- KKBWDNZXYLGJEY-UHFFFAOYSA-N Gly-Arg-Pro Natural products NCC(=O)NC(CCNC(=N)N)C(=O)N1CCCC1C(=O)O KKBWDNZXYLGJEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N 0.000 description 4
- HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ile-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- DHNXGWVNLFPOMQ-KBPBESRZSA-N Gly-Phe-His Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)NC(=O)CN DHNXGWVNLFPOMQ-KBPBESRZSA-N 0.000 description 4
- ZVXMEWXHFBYJPI-LSJOCFKGSA-N Gly-Val-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ZVXMEWXHFBYJPI-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 4
- FIMNVXRZGUAGBI-AVGNSLFASA-N His-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FIMNVXRZGUAGBI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- XDIVYNSPYBLSME-DCAQKATOSA-N His-Met-Asp Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N XDIVYNSPYBLSME-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- 235000017335 Hordeum vulgare subsp spontaneum Nutrition 0.000 description 4
- 241001299819 Hordeum vulgare subsp. spontaneum Species 0.000 description 4
- KFVUBLZRFSVDGO-BYULHYEWSA-N Ile-Gly-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O KFVUBLZRFSVDGO-BYULHYEWSA-N 0.000 description 4
- WCNWGAUZWWSYDG-SVSWQMSJSA-N Ile-Thr-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N WCNWGAUZWWSYDG-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N Leu-Ala-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- MMEDVBWCMGRKKC-GARJFASQSA-N Leu-Asp-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N MMEDVBWCMGRKKC-GARJFASQSA-N 0.000 description 4
- ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N Leu-Gln-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- ZALAVHVPPOHAOL-XUXIUFHCSA-N Leu-Ile-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N ZALAVHVPPOHAOL-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 4
- ONPJGOIVICHWBW-BZSNNMDCSA-N Leu-Lys-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 ONPJGOIVICHWBW-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- NJMXCOOEFLMZSR-AVGNSLFASA-N Leu-Met-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NJMXCOOEFLMZSR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- YRRCOJOXAJNSAX-IHRRRGAJSA-N Leu-Pro-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YRRCOJOXAJNSAX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- IDGZVZJLYFTXSL-DCAQKATOSA-N Leu-Ser-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IDGZVZJLYFTXSL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- IWMJFLJQHIDZQW-KKUMJFAQSA-N Leu-Ser-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IWMJFLJQHIDZQW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- KCXUCYYZNZFGLL-SRVKXCTJSA-N Lys-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KCXUCYYZNZFGLL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- CBNMHRCLYBJIIZ-XUXIUFHCSA-N Lys-Ile-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N CBNMHRCLYBJIIZ-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 4
- YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- LOGFVTREOLYCPF-RHYQMDGZSA-N Lys-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- YRAWWKUTNBILNT-FXQIFTODSA-N Met-Ala-Ala Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YRAWWKUTNBILNT-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- HLQWFLJOJRFXHO-CIUDSAMLSA-N Met-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HLQWFLJOJRFXHO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- AFFKUNVPPLQUGA-DCAQKATOSA-N Met-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O AFFKUNVPPLQUGA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- CGUYGMFQZCYJSG-DCAQKATOSA-N Met-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CGUYGMFQZCYJSG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 4
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 4
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 4
- ZWJKVFAYPLPCQB-UNQGMJICSA-N Phe-Arg-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccccc1)C(O)=O ZWJKVFAYPLPCQB-UNQGMJICSA-N 0.000 description 4
- LNIIRLODKOWQIY-IHRRRGAJSA-N Phe-Asn-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O LNIIRLODKOWQIY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- XMPUYNHKEPFERE-IHRRRGAJSA-N Phe-Asp-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 XMPUYNHKEPFERE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- MGBRZXXGQBAULP-DRZSPHRISA-N Phe-Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 MGBRZXXGQBAULP-DRZSPHRISA-N 0.000 description 4
- KJJROSNFBRWPHS-JYJNAYRXSA-N Phe-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KJJROSNFBRWPHS-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 4
- NHCKESBLOMHIIE-IRXDYDNUSA-N Phe-Gly-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 NHCKESBLOMHIIE-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 4
- FINLZXKJWTYYLC-ACRUOGEOSA-N Phe-His-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FINLZXKJWTYYLC-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 4
- GRVMHFCZUIYNKQ-UFYCRDLUSA-N Phe-Phe-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GRVMHFCZUIYNKQ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 4
- GLJZDMZJHFXJQG-BZSNNMDCSA-N Phe-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O GLJZDMZJHFXJQG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=CC=C1 MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- APMXLWHMIVWLLR-BZSNNMDCSA-N Phe-Tyr-Ser Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 APMXLWHMIVWLLR-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- DZZCICYRSZASNF-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 DZZCICYRSZASNF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- CJZTUKSFZUSNCC-FXQIFTODSA-N Pro-Asp-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 CJZTUKSFZUSNCC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N Pro-Gly-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- DXTOOBDIIAJZBJ-BQBZGAKWSA-N Pro-Gly-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DXTOOBDIIAJZBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- AQSMZTIEJMZQEC-DCAQKATOSA-N Pro-His-Ser Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O AQSMZTIEJMZQEC-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- VTFXTWDFPTWNJY-RHYQMDGZSA-N Pro-Leu-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VTFXTWDFPTWNJY-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N Pro-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- RNEFESSBTOQSAC-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-His Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O RNEFESSBTOQSAC-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asp-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- MUARUIBTKQJKFY-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MUARUIBTKQJKFY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 4
- PKXHGEXFMIZSER-QTKMDUPCSA-N Thr-Arg-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N)O PKXHGEXFMIZSER-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 4
- QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N Thr-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 4
- MECLEFZMPPOEAC-VOAKCMCISA-N Thr-Leu-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O MECLEFZMPPOEAC-VOAKCMCISA-N 0.000 description 4
- AHERARIZBPOMNU-KATARQTJSA-N Thr-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AHERARIZBPOMNU-KATARQTJSA-N 0.000 description 4
- IEZVHOULSUULHD-XGEHTFHBSA-N Thr-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IEZVHOULSUULHD-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 4
- NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N Thr-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N 0.000 description 4
- BPGDJSUFQKWUBK-KJEVXHAQSA-N Thr-Val-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 BPGDJSUFQKWUBK-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 4
- GWQUSADRQCTMHN-NWLDYVSISA-N Trp-Gln-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O GWQUSADRQCTMHN-NWLDYVSISA-N 0.000 description 4
- LFCQXIXJQXWZJI-BZSNNMDCSA-N Tyr-His-His Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CC3=CN=CN3)C(=O)O)N)O LFCQXIXJQXWZJI-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- LDKDSFQSEUOCOO-RPTUDFQQSA-N Tyr-Thr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LDKDSFQSEUOCOO-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 4
- WYOBRXPIZVKNMF-IRXDYDNUSA-N Tyr-Tyr-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 WYOBRXPIZVKNMF-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 4
- JFAWZADYPRMRCO-UBHSHLNASA-N Val-Ala-Phe Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JFAWZADYPRMRCO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 4
- WGHVMKFREWGCGR-SRVKXCTJSA-N Val-Arg-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N WGHVMKFREWGCGR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- UDNYEPLJTRDMEJ-RCOVLWMOSA-N Val-Asn-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N UDNYEPLJTRDMEJ-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 4
- OVLIFGQSBSNGHY-KKHAAJSZSA-N Val-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O OVLIFGQSBSNGHY-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 4
- YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N Val-Thr-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N 0.000 description 4
- GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N Val-Thr-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 4
- 108010039538 alanyl-glycyl-aspartyl-valine Proteins 0.000 description 4
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 108010059459 arginyl-threonyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 108010013768 glutamyl-aspartyl-proline Proteins 0.000 description 4
- 229940117955 isoamyl acetate Drugs 0.000 description 4
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 4
- 108010073093 leucyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 4
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 4
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 238000004890 malting Methods 0.000 description 4
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 4
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 4
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 4
- 108700004896 tripeptide FEG Proteins 0.000 description 4
- 108010021199 valyl-valyl-valine Proteins 0.000 description 4
- QPRQEDXDYOZYLA-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutan-1-ol Chemical compound CCC(C)CO QPRQEDXDYOZYLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N Ala-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 3
- TZDNWXDLYFIFPT-BJDJZHNGSA-N Ala-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O TZDNWXDLYFIFPT-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- LNNSWWRRYJLGNI-NAKRPEOUSA-N Ala-Ile-Val Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O LNNSWWRRYJLGNI-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 3
- YHKANGMVQWRMAP-DCAQKATOSA-N Ala-Leu-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YHKANGMVQWRMAP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- QUIGLPSHIFPEOV-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O QUIGLPSHIFPEOV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- KYDYGANDJHFBCW-DRZSPHRISA-N Ala-Phe-Gln Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N KYDYGANDJHFBCW-DRZSPHRISA-N 0.000 description 3
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N Ala-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 3
- XSLGWYYNOSUMRM-ZKWXMUAHSA-N Ala-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XSLGWYYNOSUMRM-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 3
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 3
- IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N Arg-Arg-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(O)=O IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- IIAXFBUTKIDDIP-ULQDDVLXSA-N Arg-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O IIAXFBUTKIDDIP-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 3
- IBLAOXSULLECQZ-IUKAMOBKSA-N Asn-Ile-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O IBLAOXSULLECQZ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 3
- NCFJQJRLQJEECD-NHCYSSNCSA-N Asn-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NCFJQJRLQJEECD-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- ORJQQZIXTOYGGH-SRVKXCTJSA-N Asn-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ORJQQZIXTOYGGH-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- KRXIWXCXOARFNT-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O KRXIWXCXOARFNT-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- FAEIQWHBRBWUBN-FXQIFTODSA-N Asp-Arg-Ser Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)CN=C(N)N FAEIQWHBRBWUBN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N Asp-Arg-Val Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 3
- BRRPVTUFESPTCP-ACZMJKKPSA-N Asp-Ser-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O BRRPVTUFESPTCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N Asp-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N Asp-Thr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 3
- UXIPUCUHQBIQOS-SRVKXCTJSA-N Asp-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O UXIPUCUHQBIQOS-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 3
- LBOLGUYQEPZSKM-YUMQZZPRSA-N Cys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CS)N LBOLGUYQEPZSKM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- LYSHSHHDBVKJRN-JBDRJPRFSA-N Cys-Ile-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N LYSHSHHDBVKJRN-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 3
- ZGERHCJBLPQPGV-ACZMJKKPSA-N Cys-Ser-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CS)N ZGERHCJBLPQPGV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N Gln-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N 0.000 description 3
- IYAUFWMUCGBFMQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)CN=C(N)N IYAUFWMUCGBFMQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- AIGROOHQXCACHL-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O AIGROOHQXCACHL-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- ZCOJVESMNGBGLF-GRLWGSQLSA-N Glu-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ZCOJVESMNGBGLF-GRLWGSQLSA-N 0.000 description 3
- GJBUAAAIZSRCDC-GVXVVHGQSA-N Glu-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GJBUAAAIZSRCDC-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- MIIGESVJEBDJMP-FHWLQOOXSA-N Glu-Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MIIGESVJEBDJMP-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 3
- QJVZSVUYZFYLFQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O QJVZSVUYZFYLFQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- BXSZPACYCMNKLS-AVGNSLFASA-N Glu-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O BXSZPACYCMNKLS-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- WZSHYFGOLPXPLL-RYUDHWBXSA-N Gly-Phe-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WZSHYFGOLPXPLL-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- GLACUWHUYFBSPJ-FJXKBIBVSA-N Gly-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN GLACUWHUYFBSPJ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 3
- UMBDRSMLCUYIRI-DVJZZOLTSA-N Gly-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)CN)O UMBDRSMLCUYIRI-DVJZZOLTSA-N 0.000 description 3
- YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N Gly-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 3
- OQDLKDUVMTUPPG-AVGNSLFASA-N His-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OQDLKDUVMTUPPG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- UKTUOMWSJPXODT-GUDRVLHUSA-N Ile-Asn-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N UKTUOMWSJPXODT-GUDRVLHUSA-N 0.000 description 3
- BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N Ile-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N 0.000 description 3
- PHIXPNQDGGILMP-YVNDNENWSA-N Ile-Glu-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N PHIXPNQDGGILMP-YVNDNENWSA-N 0.000 description 3
- WVUDHMBJNBWZBU-XUXIUFHCSA-N Ile-Lys-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N WVUDHMBJNBWZBU-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 3
- XMYURPUVJSKTMC-KBIXCLLPSA-N Ile-Ser-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N XMYURPUVJSKTMC-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 3
- ZNOBVZFCHNHKHA-KBIXCLLPSA-N Ile-Ser-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N ZNOBVZFCHNHKHA-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 3
- HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- AVEGDIAXTDVBJS-XUXIUFHCSA-N Leu-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AVEGDIAXTDVBJS-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 3
- HGFGEMSVBMCFKK-MNXVOIDGSA-N Leu-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HGFGEMSVBMCFKK-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 3
- PDQDCFBVYXEFSD-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asp Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PDQDCFBVYXEFSD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- BIZNDKMFQHDOIE-KKUMJFAQSA-N Leu-Phe-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIZNDKMFQHDOIE-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- PTRKPHUGYULXPU-KKUMJFAQSA-N Leu-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PTRKPHUGYULXPU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- CHJKEDSZNSONPS-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CHJKEDSZNSONPS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N Lys-Asn-Gln Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N Lys-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 3
- RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N Lys-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- KUQWVNFMZLHAPA-CIUDSAMLSA-N Met-Ala-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O KUQWVNFMZLHAPA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- GETCJHFFECHWHI-QXEWZRGKSA-N Met-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N GETCJHFFECHWHI-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- LGBVMDMZZFYSFW-HJWJTTGWSA-N Phe-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N LGBVMDMZZFYSFW-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 3
- OSBADCBXAMSPQD-YESZJQIVSA-N Phe-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N OSBADCBXAMSPQD-YESZJQIVSA-N 0.000 description 3
- ZUQACJLOHYRVPJ-DKIMLUQUSA-N Phe-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ZUQACJLOHYRVPJ-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 3
- MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 3
- IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N Pro-Ala-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- HPXVFFIIGOAQRV-DCAQKATOSA-N Pro-Arg-Gln Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HPXVFFIIGOAQRV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- FKLSMYYLJHYPHH-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FKLSMYYLJHYPHH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- POQFNPILEQEODH-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ala Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O POQFNPILEQEODH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- HOJUNFDJDAPVBI-BZSNNMDCSA-N Pro-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@@H]3CCCN3 HOJUNFDJDAPVBI-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 3
- IYCBDVBJWDXQRR-FXQIFTODSA-N Ser-Ala-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O IYCBDVBJWDXQRR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- WXWDPFVKQRVJBJ-CIUDSAMLSA-N Ser-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N WXWDPFVKQRVJBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N Ser-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 3
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 3
- ZUUDNCOCILSYAM-KKHAAJSZSA-N Thr-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZUUDNCOCILSYAM-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 3
- ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N Thr-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- ZTPXSEUVYNNZRB-CDMKHQONSA-N Thr-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ZTPXSEUVYNNZRB-CDMKHQONSA-N 0.000 description 3
- YJCVECXVYHZOBK-KNZXXDILSA-N Thr-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N YJCVECXVYHZOBK-KNZXXDILSA-N 0.000 description 3
- MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N Thr-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N 0.000 description 3
- KRDSCBLRHORMRK-JXUBOQSCSA-N Thr-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KRDSCBLRHORMRK-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 3
- BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N Thr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 3
- KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N Thr-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 3
- ADBFWLXCCKIXBQ-XIRDDKMYSA-N Trp-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N ADBFWLXCCKIXBQ-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 3
- GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N Tyr-Asp-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 3
- CDHQEOXPWBDFPL-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gly-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CDHQEOXPWBDFPL-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- GGXUDPQWAWRINY-XEGUGMAKSA-N Tyr-Ile-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 GGXUDPQWAWRINY-XEGUGMAKSA-N 0.000 description 3
- QARCDOCCDOLJSF-HJPIBITLSA-N Tyr-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N QARCDOCCDOLJSF-HJPIBITLSA-N 0.000 description 3
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KOPBYUSPXBQIHD-NRPADANISA-N Val-Cys-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N KOPBYUSPXBQIHD-NRPADANISA-N 0.000 description 3
- VXDSPJJQUQDCKH-UKJIMTQDSA-N Val-Ile-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VXDSPJJQUQDCKH-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 3
- LYERIXUFCYVFFX-GVXVVHGQSA-N Val-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LYERIXUFCYVFFX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- XXWBHOWRARMUOC-NHCYSSNCSA-N Val-Lys-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N XXWBHOWRARMUOC-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- JAKHAONCJJZVHT-DCAQKATOSA-N Val-Lys-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N JAKHAONCJJZVHT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- RYHUIHUOYRNNIE-NRPADANISA-N Val-Ser-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N RYHUIHUOYRNNIE-NRPADANISA-N 0.000 description 3
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 3
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 3
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 229940098396 barley grain Drugs 0.000 description 3
- SHZIWNPUGXLXDT-UHFFFAOYSA-N caproic acid ethyl ester Natural products CCCCCC(=O)OCC SHZIWNPUGXLXDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 3
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- AOGQPLXWSUTHQB-UHFFFAOYSA-N hexyl acetate Chemical compound CCCCCCOC(C)=O AOGQPLXWSUTHQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 3
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 3
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 3
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 3
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 3
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 3
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- LSLXWOCIIFUZCQ-SRVKXCTJSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-methyl-1-oxobutyl]amino]-3-methyl-1-oxobutyl]amino]-3-methylbutanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O LSLXWOCIIFUZCQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 3-mercaptopropanoic acid Chemical compound OC(=O)CCS DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N Ala-Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N Ala-Glu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- OMMDTNGURYRDAC-NRPADANISA-N Ala-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OMMDTNGURYRDAC-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- LJFNNUBZSZCZFN-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Cys Chemical compound N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O LJFNNUBZSZCZFN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- PCIFXPRIFWKWLK-YUMQZZPRSA-N Ala-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N PCIFXPRIFWKWLK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- CBQYNPHHHJTCJS-UHFFFAOYSA-N Alline Chemical compound C1=CC=C2C3(O)CCN(C)C3NC2=C1 CBQYNPHHHJTCJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 2
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 2
- PVSNBTCXCQIXSE-JYJNAYRXSA-N Arg-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PVSNBTCXCQIXSE-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- HPSVTWMFWCHKFN-GARJFASQSA-N Arg-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O HPSVTWMFWCHKFN-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- DPLFNLDACGGBAK-KKUMJFAQSA-N Arg-Phe-Glu Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N DPLFNLDACGGBAK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- ASQKVGRCKOFKIU-KZVJFYERSA-N Arg-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O ASQKVGRCKOFKIU-KZVJFYERSA-N 0.000 description 2
- GWNMUVANAWDZTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N GWNMUVANAWDZTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- MYVBTYXSWILFCG-BQBZGAKWSA-N Asn-Met-Gly Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N MYVBTYXSWILFCG-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- TVVYVAUGRHNTGT-UGYAYLCHSA-N Asp-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O TVVYVAUGRHNTGT-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 2
- YBMUFUWSMIKJQA-GUBZILKMSA-N Asp-Gln-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YBMUFUWSMIKJQA-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- CSEJMKNZDCJYGJ-XHNCKOQMSA-N Asp-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)O CSEJMKNZDCJYGJ-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 2
- KHBLRHKVXICFMY-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Lys Chemical compound N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O KHBLRHKVXICFMY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N Asp-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- IWLZBRTUIVXZJD-OLHMAJIHSA-N Asp-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IWLZBRTUIVXZJD-OLHMAJIHSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 2
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020001019 DNA Primers Proteins 0.000 description 2
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 2
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 2
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 2
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YJIUYQKQBBQYHZ-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YJIUYQKQBBQYHZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- XXLBHPPXDUWYAG-XQXXSGGOSA-N Gln-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XXLBHPPXDUWYAG-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- XFKUFUJECJUQTQ-CIUDSAMLSA-N Gln-Gln-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XFKUFUJECJUQTQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- KVXVVDFOZNYYKZ-DCAQKATOSA-N Gln-Gln-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KVXVVDFOZNYYKZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- HDUDGCZEOZEFOA-KBIXCLLPSA-N Gln-Ile-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N HDUDGCZEOZEFOA-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 2
- VAIWPXWHWAPYDF-FXQIFTODSA-N Glu-Asp-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O VAIWPXWHWAPYDF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- SWRVAQHFBRZVNX-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SWRVAQHFBRZVNX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- DCBSZJJHOTXMHY-DCAQKATOSA-N Glu-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DCBSZJJHOTXMHY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- OCQUNKSFDYDXBG-QXEWZRGKSA-N Gly-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N OCQUNKSFDYDXBG-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 2
- IXKRSKPKSLXIHN-YUMQZZPRSA-N Gly-Cys-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IXKRSKPKSLXIHN-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- GGAPHLIUUTVYMX-QWRGUYRKSA-N Gly-Phe-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C[NH3+])CC1=CC=CC=C1 GGAPHLIUUTVYMX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- VDCRBJACQKOSMS-JSGCOSHPSA-N Gly-Phe-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VDCRBJACQKOSMS-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 2
- GGLIDLCEPDHEJO-BQBZGAKWSA-N Gly-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN GGLIDLCEPDHEJO-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- HYWZHNUGAYVEEW-KKUMJFAQSA-N His-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N HYWZHNUGAYVEEW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- 235000008694 Humulus lupulus Nutrition 0.000 description 2
- CIJLNXXMDUOFPH-HJWJTTGWSA-N Ile-Pro-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 CIJLNXXMDUOFPH-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 2
- YKZAMJXNJUWFIK-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N YKZAMJXNJUWFIK-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 2
- VGSPNSSCMOHRRR-BJDJZHNGSA-N Ile-Ser-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N VGSPNSSCMOHRRR-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N Ile-Tyr-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N Leu-Ala-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- SUPVSFFZWVOEOI-CQDKDKBSSA-N Leu-Ala-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 SUPVSFFZWVOEOI-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 2
- SUPVSFFZWVOEOI-UHFFFAOYSA-N Leu-Ala-Tyr Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 SUPVSFFZWVOEOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YKNBJXOJTURHCU-DCAQKATOSA-N Leu-Asp-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YKNBJXOJTURHCU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- KVMULWOHPPMHHE-DCAQKATOSA-N Leu-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O KVMULWOHPPMHHE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- LAGPXKYZCCTSGQ-JYJNAYRXSA-N Leu-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LAGPXKYZCCTSGQ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N Leu-Gly-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 2
- KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N Leu-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 2
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N Leu-Val-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- 241000209510 Liliopsida Species 0.000 description 2
- SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N Lys-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- MDSUKZSLOATHMH-UHFFFAOYSA-N N-L-leucyl-L-valine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(C)C)C(O)=O MDSUKZSLOATHMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-N-nitrosourea Chemical compound O=NN(C)C(N)=O ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100022915 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) cys-11 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100068676 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) gln-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- DEZCWWXTRAKZKJ-UFYCRDLUSA-N Phe-Phe-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O DEZCWWXTRAKZKJ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- AFNJAQVMTIQTCB-DLOVCJGASA-N Phe-Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 AFNJAQVMTIQTCB-DLOVCJGASA-N 0.000 description 2
- XDMMOISUAHXXFD-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XDMMOISUAHXXFD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- CDHURCQGUDNBMA-UBHSHLNASA-N Phe-Val-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 CDHURCQGUDNBMA-UBHSHLNASA-N 0.000 description 2
- GOUWCZRDTWTODO-YDHLFZDLSA-N Phe-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GOUWCZRDTWTODO-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- LXLFEIHKWGHJJB-XUXIUFHCSA-N Pro-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 LXLFEIHKWGHJJB-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 2
- 230000009948 RNA mutation Effects 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- GXXTUIUYTWGPMV-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GXXTUIUYTWGPMV-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- VQBLHWSPVYYZTB-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CO)N VQBLHWSPVYYZTB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- FYUIFUJFNCLUIX-XVYDVKMFSA-N Ser-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FYUIFUJFNCLUIX-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 2
- FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N Ser-Tyr-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- PMTWIUBUQRGCSB-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PMTWIUBUQRGCSB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015076 Shorea robusta Nutrition 0.000 description 2
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- NIWAGRRZHCMPOY-GMVOTWDCSA-N Trp-Ala-Tyr Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N NIWAGRRZHCMPOY-GMVOTWDCSA-N 0.000 description 2
- KWKJGBHDYJOVCR-SRVKXCTJSA-N Tyr-Ser-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O KWKJGBHDYJOVCR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- AEOFMCAKYIQQFY-YDHLFZDLSA-N Tyr-Val-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AEOFMCAKYIQQFY-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N Val-Arg-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- HNWQUBBOBKSFQV-AVGNSLFASA-N Val-Arg-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N HNWQUBBOBKSFQV-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- CWSIBTLMMQLPPZ-FXQIFTODSA-N Val-Cys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C(C)C)N CWSIBTLMMQLPPZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- VCAWFLIWYNMHQP-UKJIMTQDSA-N Val-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VCAWFLIWYNMHQP-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 2
- FOADDSDHGRFUOC-DZKIICNBSA-N Val-Glu-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N FOADDSDHGRFUOC-DZKIICNBSA-N 0.000 description 2
- KTEZUXISLQTDDQ-NHCYSSNCSA-N Val-Lys-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N KTEZUXISLQTDDQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- VCIYTVOBLZHFSC-XHSDSOJGSA-N Val-Phe-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N VCIYTVOBLZHFSC-XHSDSOJGSA-N 0.000 description 2
- WBPFYNYTYASCQP-CYDGBPFRSA-N Val-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N WBPFYNYTYASCQP-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- 108010078114 alanyl-tryptophyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 2
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229960004424 carbon dioxide Drugs 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 2
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006872 enzymatic polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 229940093499 ethyl acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 2
- YYZUSRORWSJGET-UHFFFAOYSA-N ethyl octanoate Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC YYZUSRORWSJGET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 2
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 108010062266 glycyl-glycyl-argininal Proteins 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 231100000567 intoxicating Toxicity 0.000 description 2
- 230000002673 intoxicating effect Effects 0.000 description 2
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 2
- 235000021577 malt beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 238000003976 plant breeding Methods 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010093296 prolyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 2
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 2
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 2
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 2
- 229940082569 selenite Drugs 0.000 description 2
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 2
- 235000019615 sensations Nutrition 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- GSNSZGRVLRAJCA-UHFFFAOYSA-N (2-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl) dihydrogen phosphate Chemical compound C1=CC(Cl)=C2C(OP(O)(=O)O)=C(Br)NC2=C1 GSNSZGRVLRAJCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IGXNPQWXIRIGBF-KEOOTSPTSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 IGXNPQWXIRIGBF-KEOOTSPTSA-N 0.000 description 1
- WCLKSQYCWXZMGX-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrabromo-5,6-dimethoxybenzene Chemical compound COC1=C(Br)C(Br)=C(Br)C(Br)=C1OC WCLKSQYCWXZMGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAJPWUMXBYXFCZ-UHFFFAOYSA-N 1-aminocyclopropanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CC1 PAJPWUMXBYXFCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XHIUFYZDQBSEMF-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutyl acetate Chemical compound CCC(C)COC(C)=O XHIUFYZDQBSEMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 3,5-dimethylcyclopentane-1,2-dione Chemical compound CC1CC(C)C(=O)C1=O MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWNSFEAWWGGSKJ-UHFFFAOYSA-N 4-acetyl-4-methylheptanedinitrile Chemical compound N#CCCC(C)(C(=O)C)CCC#N XWNSFEAWWGGSKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150030286 71 gene Proteins 0.000 description 1
- 102220491264 ADP-ribosylation factor 6_Y31V_mutation Human genes 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N Ala-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102220495837 Alkaline ceramidase 1_Y49A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- JTKLCCFLSLCCST-SZMVWBNQSA-N Arg-Arg-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 JTKLCCFLSLCCST-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- HYQYLOSCICEYTR-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HYQYLOSCICEYTR-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- RAKKBBHMTJSXOY-XVYDVKMFSA-N Asn-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RAKKBBHMTJSXOY-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- UYXXMIZGHYKYAT-NHCYSSNCSA-N Asn-His-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N UYXXMIZGHYKYAT-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- CELPEWWLSXMVPH-CIUDSAMLSA-N Asp-Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CELPEWWLSXMVPH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WXASLRQUSYWVNE-FXQIFTODSA-N Asp-Cys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N WXASLRQUSYWVNE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KHGPWGKPYHPOIK-QWRGUYRKSA-N Asp-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O KHGPWGKPYHPOIK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- RTXQQDVBACBSCW-CFMVVWHZSA-N Asp-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RTXQQDVBACBSCW-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- NZWDWXSWUQCNMG-GARJFASQSA-N Asp-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)O NZWDWXSWUQCNMG-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- XYPJXLLXNSAWHZ-SRVKXCTJSA-N Asp-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O XYPJXLLXNSAWHZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 235000005781 Avena Nutrition 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004154 Calcium bromate Substances 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VFGADOJXRLWTBU-JBDRJPRFSA-N Cys-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VFGADOJXRLWTBU-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- NDNZRWUDUMTITL-FXQIFTODSA-N Cys-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NDNZRWUDUMTITL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- YWEHYKGJWHPGPY-XGEHTFHBSA-N Cys-Thr-Arg Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O YWEHYKGJWHPGPY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000940468 Drosophila melanogaster COP9 signalosome complex subunit 2 Proteins 0.000 description 1
- 101100447647 Drosophila melanogaster GlyRS gene Proteins 0.000 description 1
- 101100234002 Drosophila melanogaster Shal gene Proteins 0.000 description 1
- 206010013911 Dysgeusia Diseases 0.000 description 1
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 1
- 108010013369 Enteropeptidase Proteins 0.000 description 1
- 102100029727 Enteropeptidase Human genes 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- JFOKLAPFYCTNHW-SRVKXCTJSA-N Gln-Arg-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N JFOKLAPFYCTNHW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BLOXULLYFRGYKZ-GUBZILKMSA-N Gln-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O BLOXULLYFRGYKZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N Gln-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- CGYDXNKRIMJMLV-GUBZILKMSA-N Glu-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CGYDXNKRIMJMLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- AKJRHDMTEJXTPV-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AKJRHDMTEJXTPV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- LVCHEMOPBORRLB-DCAQKATOSA-N Glu-Gln-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O LVCHEMOPBORRLB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IQACOVZVOMVILH-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O IQACOVZVOMVILH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VGBSZQSKQRMLHD-MNXVOIDGSA-N Glu-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VGBSZQSKQRMLHD-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- FQFWFZWOHOEVMZ-IHRRRGAJSA-N Glu-Phe-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FQFWFZWOHOEVMZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YQAQQKPWFOBSMU-WDCWCFNPSA-N Glu-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YQAQQKPWFOBSMU-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- FGGKGJHCVMYGCD-UKJIMTQDSA-N Glu-Val-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGGKGJHCVMYGCD-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- YYXJFBMCOUSYSF-RYUDHWBXSA-N Gly-Phe-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYXJFBMCOUSYSF-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- FFALDIDGPLUDKV-ZDLURKLDSA-N Gly-Thr-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FFALDIDGPLUDKV-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- VTZYMXGGXOFBMX-DJFWLOJKSA-N His-Ile-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O VTZYMXGGXOFBMX-DJFWLOJKSA-N 0.000 description 1
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N Ile-Glu-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- DFFTXLCCDFYRKD-MBLNEYKQSA-N Ile-Gly-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N DFFTXLCCDFYRKD-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- CKRFDMPBSWYOBT-PPCPHDFISA-N Ile-Lys-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N CKRFDMPBSWYOBT-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- SAVXZJYTTQQQDD-QEWYBTABSA-N Ile-Phe-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N SAVXZJYTTQQQDD-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- BCISUQVFDGYZBO-QSFUFRPTSA-N Ile-Val-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O BCISUQVFDGYZBO-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- 241000917703 Leia Species 0.000 description 1
- XIRYQRLFHWWWTC-QEJZJMRPSA-N Leu-Ala-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XIRYQRLFHWWWTC-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- GRZSCTXVCDUIPO-SRVKXCTJSA-N Leu-Arg-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O GRZSCTXVCDUIPO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QUAAUWNLWMLERT-IHRRRGAJSA-N Leu-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QUAAUWNLWMLERT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- GZAUZBUKDXYPEH-CIUDSAMLSA-N Leu-Cys-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N GZAUZBUKDXYPEH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NEEOBPIXKWSBRF-IUCAKERBSA-N Leu-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O NEEOBPIXKWSBRF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N Leu-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- LZHJZLHSRGWBBE-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O LZHJZLHSRGWBBE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N Leu-Phe-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N 0.000 description 1
- YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N Leu-Val-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 1
- KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N Lys-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N Lys-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- LJADEBULDNKJNK-IHRRRGAJSA-N Lys-Leu-Val Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O LJADEBULDNKJNK-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N Lys-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 description 1
- BGRDGMRNKXEXQD-UHFFFAOYSA-N Maleic hydrazide Chemical compound OC1=CC=C(O)N=N1 BGRDGMRNKXEXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005983 Maleic hydrazide Substances 0.000 description 1
- 108091027974 Mature messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- FWTBMGAKKPSTBT-GUBZILKMSA-N Met-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FWTBMGAKKPSTBT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XKJUFUPCHARJKX-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-His Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XKJUFUPCHARJKX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- UDOYVQQKQHZYMB-DCAQKATOSA-N Met-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UDOYVQQKQHZYMB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- DBMLDOWSVHMQQN-XGEHTFHBSA-N Met-Ser-Thr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DBMLDOWSVHMQQN-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- OTKQHDPECKUDSB-SZMVWBNQSA-N Met-Val-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(O)=O)=CNC2=C1 OTKQHDPECKUDSB-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N Methanethiol Chemical compound SC LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 101100121460 Mus musculus Gcsam gene Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001325209 Nama Species 0.000 description 1
- 101100491597 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) arg-6 gene Proteins 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000009004 PCR Kit Methods 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 102100026459 POU domain, class 3, transcription factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710133394 POU domain, class 3, transcription factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- LRBSWBVUCLLRLU-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LRBSWBVUCLLRLU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- QSWKNJAPHQDAAS-MELADBBJSA-N Phe-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)O QSWKNJAPHQDAAS-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 108700001094 Plant Genes Proteins 0.000 description 1
- 201000010273 Porphyria Cutanea Tarda Diseases 0.000 description 1
- 239000004153 Potassium bromate Substances 0.000 description 1
- HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N Pro-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- INXAPZFIOVGHSV-CIUDSAMLSA-N Pro-Asn-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 INXAPZFIOVGHSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AMBLXEMWFARNNQ-DCAQKATOSA-N Pro-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 AMBLXEMWFARNNQ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N Pro-Thr-Gly Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 101100247669 Quaranfil virus (isolate QrfV/Tick/Afghanistan/EG_T_377/1968) PB1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 125000000066 S-methyl group Chemical group [H]C([H])([H])S* 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 235000003534 Saccharomyces carlsbergensis Nutrition 0.000 description 1
- 241001123227 Saccharomyces pastorianus Species 0.000 description 1
- 101150025928 Segment-1 gene Proteins 0.000 description 1
- MOVJSUIKUNCVMG-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)O MOVJSUIKUNCVMG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- UICKAKRRRBTILH-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N UICKAKRRRBTILH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N Ser-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 1
- SFTZTYBXIXLRGQ-JBDRJPRFSA-N Ser-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SFTZTYBXIXLRGQ-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- GVMUJUPXFQFBBZ-GUBZILKMSA-N Ser-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GVMUJUPXFQFBBZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- HHJFMHQYEAAOBM-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HHJFMHQYEAAOBM-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 244000166071 Shorea robusta Species 0.000 description 1
- 241000244177 Strongyloides stercoralis Species 0.000 description 1
- 101150088517 TCTA gene Proteins 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 241000769223 Thenea Species 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 101100242902 Thogoto virus (isolate SiAr 126) Segment 1 gene Proteins 0.000 description 1
- PAXANSWUSVPFNK-IUKAMOBKSA-N Thr-Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N PAXANSWUSVPFNK-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- APQHKWPGGHMYKJ-UHFFFAOYSA-N Tributyltin oxide Chemical compound CCCC[Sn](CCCC)(CCCC)O[Sn](CCCC)(CCCC)CCCC APQHKWPGGHMYKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UJGDFQRPYGJBEH-AAEUAGOBSA-N Trp-Ser-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)O)N UJGDFQRPYGJBEH-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 1
- SEXRBCGSZRCIPE-LYSGOOTNSA-N Trp-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O SEXRBCGSZRCIPE-LYSGOOTNSA-N 0.000 description 1
- KLGFILUOTCBNLJ-IHRRRGAJSA-N Tyr-Cys-Arg Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N)O KLGFILUOTCBNLJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- QHLIUFUEUDFAOT-MGHWNKPDSA-N Tyr-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N QHLIUFUEUDFAOT-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- KGSDLCMCDFETHU-YESZJQIVSA-N Tyr-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O KGSDLCMCDFETHU-YESZJQIVSA-N 0.000 description 1
- XLDYBRXERHITNH-QSFUFRPTSA-N Val-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C XLDYBRXERHITNH-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- OVBMCNDKCWAXMZ-NAKRPEOUSA-N Val-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N OVBMCNDKCWAXMZ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N Val-Lys-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ZXYPHBKIZLAQTL-QXEWZRGKSA-N Val-Pro-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N ZXYPHBKIZLAQTL-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 1
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 244000245420 ail Species 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002547 anomalous effect Effects 0.000 description 1
- 108010052439 arabinoxylanase Proteins 0.000 description 1
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 229940069780 barley extract Drugs 0.000 description 1
- 230000037429 base substitution Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000008238 biochemical pathway Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 235000019397 calcium bromate Nutrition 0.000 description 1
- 238000003965 capillary gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000013736 caramel Nutrition 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- SWULYVBHRSPZCK-UHFFFAOYSA-N diazonio(1,2,3-trihydroxypropyl)azanide Chemical compound OCC(O)C(O)[N-][N+]#N SWULYVBHRSPZCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000024346 drought recovery Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 206010014881 enterobiasis Diseases 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019985 fermented beverage Nutrition 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N formic acid ethyl ester Natural products CCOC=O WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 101150110946 gatC gene Proteins 0.000 description 1
- 238000010363 gene targeting Methods 0.000 description 1
- 230000008570 general process Effects 0.000 description 1
- 230000008826 genomic mutation Effects 0.000 description 1
- 108010059898 glycyl-tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010020688 glycylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 239000005431 greenhouse gas Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000009399 inbreeding Methods 0.000 description 1
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000009830 intercalation Methods 0.000 description 1
- 230000002687 intercalation Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N iso-butyl acetate Natural products CC(C)COC(C)=O GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M isocaproate Chemical compound CC(C)CCC([O-])=O FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid methyl ester Natural products COC(=O)CC(C)C OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 108010076756 leucyl-alanyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 229930013686 lignan Natural products 0.000 description 1
- 235000009408 lignans Nutrition 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000011022 opal Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000026961 phloem transport Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- NUSQOFAKCBLANB-UHFFFAOYSA-N phthalocyanine tetrasulfonic acid Chemical compound C12=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C2C(N=C2NC(C3=CC=C(C=C32)S(O)(=O)=O)=N2)=NC1=NC([C]1C=CC(=CC1=1)S(O)(=O)=O)=NC=1N=C1[C]3C=CC(S(O)(=O)=O)=CC3=C2N1 NUSQOFAKCBLANB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 235000021395 porridge Nutrition 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 235000019396 potassium bromate Nutrition 0.000 description 1
- 229940094037 potassium bromate Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 1
- 238000000275 quality assurance Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 1
- 235000008001 rakum palm Nutrition 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 230000014284 seed dormancy process Effects 0.000 description 1
- 230000010153 self-pollination Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 235000014214 soft drink Nutrition 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 108010036320 valylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000020985 whole grains Nutrition 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C1/00—Preparation of malt
- C12C1/18—Preparation of malt extract or of special kinds of malt, e.g. caramel, black malt
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1003—Transferases (2.) transferring one-carbon groups (2.1)
- C12N9/1007—Methyltransferases (general) (2.1.1.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C12/00—Processes specially adapted for making special kinds of beer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C2200/00—Special features
- C12C2200/01—Use of specific genetic variants of barley or other sources of fermentable carbohydrates for beer brewing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y201/00—Transferases transferring one-carbon groups (2.1)
- C12Y201/01—Methyltransferases (2.1.1)
- C12Y201/01012—Methionine S-methyltransferase (2.1.1.12)
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Cereal-Derived Products (AREA)
- Alcoholic Beverages (AREA)
- Noodles (AREA)
Abstract
طبقا للاختراع، هناك مشروبات beverages مشتقة متوافرة من الشعير barley تتميز بمستويات قليلة بدرجة جديرة بالذكر من كل من dimethyl (sulfide (DMS و/أو مصدره الأولي -S (methyl-L-methionine (SMM ، أو تفتقد المركبات المذكورة. إضافيا ، يتعلق الاختراع بطرق لإنتاج المشروبات المذكورة أعلاه وأيضا بنباتات شعير barley plants مفيدة في تحضير تلك المشروبات، بالإضافة إلى منتجات نباتية أخرى محضرة من النباتات المذكورة. إن استخدام الاختراع يتيح اتخاذ إجراءات إنتاج محسنة من أجل المشروبات التي لها أنماط مذاق محسنة، ويتيح أيضا تخفيض في استهلاك الطاقة الحرارية عند الإنتاج.
Description
¥ مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (DMS) Barley and malt-derived beverages with low DMS levels الوصف الكامل خلفية الاختراع إن كل الإشارات إلى براءات الاختراع وغير براءات الاختراع المذكورة في هذا الطلب مدمجة هنا بالإشارة الكاملة. يتعلق الاختراع الحالي بمشروبات (beverages) مشتقة من الشعير (barley) تتميز © بمستويات قليلة بدرجة جديرة بالذكر من كل من (DMS) dimethyl sulfide و/أو مصدره الأولي (SMM) S-methyl-L-methionine أو تفتقد واحد من أو بصورة مفضلة كلا من المركبين المذكورين . إضافيا؛ يتعلق الاختراع بطرق لإنتاج المشروبات (beverages) المذكورة أعلاه وأيضا بنباتات (barley plants) jad مفيدة في تحضير تلك المشروبات «(beverages) بالإضافة إلى منتجات أخرى محضرة من النباتات المذكورة. برغم أن الاختراع يمكن من إنتاج ٠ مشروبات (beverages) تتميز بأنماط مذاق محسنة؛ فإنه يسهل أيضا نموذجا جديدا لطرق إنتاج مع تقليلات Spas بالذكر في دخل الطاقة الحرارية. تحديدا بالنسبة لغليان الورت (Wort) إن المشروبات (beverages) تحديدا البيرة (Beer) يمكن إنتاجها على أساس شعير “Hordeum vulgare, L. — (barley) وهو نبات محصول أحادي الفلقة تتم زراعته في أجزاء ٠ كثيرة من العالم. إن الشعير (barley) هام اقتصادياء كمادة خام لمنتجات صناعية؛ متضمنة البيرة «(Beer) وأيضا كمصدر لطعام الحيوان. في البيرة (Beer) بالإضافة إلى في كثير من الخضروات والمواد الغذائية- متضمنة الشاي؛ الكاكاو؛ (alll الذرة السكرية؛ وخضروات مطهية كثيرة- يضيف DMS سمات رائحة ونكهة ظاهرة؛ مفيدة بصفة عامة إلى المنتج. على أية حال؛ فإن المستوى العالي من DMS ٠ يسبب وجود نكهة قد تكون غير مرغوبة؛ دائما ما توصف مثل "الذرةٍ السكرية المطهية" أو أحيانا Jie "شبيهة الكشمش (عنب بدون بذر) الأسود". اعتمادا على نوع البيرة (Beer) فإن مستويات DMS قد تصل نموذجيا إلى ١464 ميكروجرام/ لتر وأحيانا يمكن أن تصل إلى مقدار كبير مثل gia ١٠١ على البليون You) v ميكروجرام/ لتر)؛ ويساهم المركب المذكور غالبا في وجود نكهات "خضار مطهو" أو 'تشبه الكرنب". على أيه حال؛ فإن المستوى القليل من المركب مطلوب أحيانا في البيرة الكبيرة لأنه قد يساهم في اكتمال التذوق والنكهة الكلية للبيرة ن©056؛ إن القيمة الحرجة الحسية ميكروجرام/ لتر 40-7٠ حوالي JU حوالي 50-75 جزء على البليون» على سبيل جزءِ ٠١ > DMS تكون مستويات Laie ملحوظة DMS 1987).لا تكون نكهة (Meilgaard) © على البليون.
يخلق SMM المشار إليه هنا كمصدر أولي «(DMSP) DMS في لبابات الشعير (barley kernel) النابتة بتأثير مكونات وظيفية لدورة SMM (الشكل ١ ()). هناء يحفز الإنزيم methionine ~~ (Met)-S-methyltransferase (MMT) تحول مجموعة methyl V+ من S-adenosyl-methionine (AdoMet) إلى (Met لتكوين SMM يمكن في المقابل أن يخدم المركب الأخير كمادة معطية methyl من أجل تصنيع Met من chomocysteine (Hey) وهو تفاعل يحفزه .(HMT) Hcy-S-methyl transferase ay) ١ على الرغم من وجود جدال حول دور محدد للإنزيم MMT فقد كان يعتقد أوليا أنه يمنع النقص في تجمعات Met من أجل تكوين protein بواسطة تجاوز الحد في تكوين AdoMet «Mudd and Datko) ٠ +149( يعتقد أيضا أن دورة SMM لها وظيفة في انتقال sulfur مسافة طويلة في النباتات؛ مع تدفق كبير من Met إلى SIMM في الأوراق؛ نقل اللحاء لمركب (SMM وإعادة تحويل SMM إلى Met في اللبابات (kernel) النامية أو أنسجة مخترقة Bourgis et al) 1499(. لقد كشفت تجارب عنصر استشفافي إشعاعي لاحقا أن الدورة المذكورة تقوم بالتحكم في مستويات AdoMet بدلا من منع نقص (V+ +) Ranocha et al) Met ٠ يتعلق تفسير بديل SMM sad الفسيولوجي في النباتات بتنظيم تكوين Ko et al.) ethylene ؛ ٠٠١ ) » أساسيا مع أفكار ظهرت من خلال التجارب
مع 1-aminocyclopropane-1-carboxylate مخلق من خميرة من عائلة Pichia توقع )١٠15١( McElroy and Jacobsen أنه من الممكن تنظيم تكوين SMM باستخدام؛ مثلا؛ تقنية مضادة للإحساس. على أية حال؛ لا يوجد دليل متوافر عن جينات (genes) خاصة YO مستهدفة لمضاد الإحساس؛ لكنه كان من المتوقع أن تكون إمكانية الناتج الإيجابي موضعا للتساؤل لأن التقليلات الكبيرة في مستويات SMM يمكن أن تكون ضارة لنمو ونشوء الشعير (barley) لم يطرح Jacobsen s McElroy (أعلاه) حلول بديلة للحصول على مستوى أقل من
¢ SMM إضافياء حسب الشرح بالتفصيل أدناه؛ فإن التقنيات المضادة للإحساس لم يتم تطبيقها كليا في الشعير (barley) من أجل إخماد بصورة كاملة لإظهار جين (gene) لسوء الحظ؛ لا توجد طرق متوافرة لتحضير نباتات شعير (barley plants) طفرية تفتقد LIS لإظهار protein معين. بصفة عامة بالنسبة للشعير cal (barley) التقتيات للإحساس إلى © وجود نباتات طفرية لا تزال تظهر بعض protein الذي نحن بصدده (انظر على سبيل المثال £)93A Robbins et al. لماك لطفاىق ١٠٠؛ .)٠٠١١ Hansenetal. أيضا » لم تتوافر طرق مؤثرة لتحضير طفرات خاصة باستخدام RNA /DNA هجين أو تكوين طفري موجه لمكان للاستخدام في نباتات الشعير (barley plants) ما يتفق مع هذاء وعلى الرغم من الجهود المكثفة؛ فإن مخترعوا الطلب الحالي ليسوا على دراية بأي مثال منشور ٠ يتعلق باستهداف ناجح (pad متعلق ب oLigonucleotide في الشعير (barley) على الرغم من عدم اتباعه في الشعير ((16:)؛ فقد ذكر )٠٠١*( Terada sy lida إن استهداف جين (gene) موجه لأجل oLigonucleotide قد تم اختباره في الذرة؛ التبغ والأرز- لكن في كل الحالات مع جين مقاوم لمبيدات الأعشاب acetoiactate synthase (ALS) كهدف. طبقا لاستنتاج lida Terada (أعلاه) » فلا تزال هناك حاجة لتأكيد ما إذا كانت السياسة المذكورة code مع ١ تعديلات ملاثمة؛ (Sa استخدامها لجينات (genes) بخلاف تلك القابلة للانتقاء مباشرة؛ Mie جينات ALS (genes) إن التكوين الطفري المستهدف باستخدام nucleases إصبع zine يمثل وسيلة أخرى يمكن أن تسع بدرجة قوية بتحريات إضافية في علم أحياء النبات الأساسي أو تعديلات في نباتات محصول Kumar ¢Y «+0 (Tzfira and White ¢Y+ + (Durai et al.) (Yo rT cet al. أيضا في هذه الحالة؛ فإن التكوين الطفري لم يتم اتباعه أو استخدامه بصورة Ye ناجحة في الشعير (barley) برغم ذلك؛ يمكن تحضير طفرات شعير بتكوين طفري عشوائي باستخدام معالجة بالأشعة أو معالجة كيميائية؛ مثلا dallas مع sodium azide (NaN3) كمثال يتعلق بلبابات الشعير (barley Kernels) المتكونة طفريا من خلال استخدام (NaN3 وبفحصها بعد ذلك من أجل المستويات العالية من phosphate الحر من أجل فحص الطفرات (mutation) قليلة (Rasmussen and Hatzack) phytate 8 994٠)؛ تم تحديد إجمالي ٠١ طفرات (mutations) من ٠0089 لبابة (kernel) مفحوصة. برغم أنه بعيد عن الممكن دائماء فإن إيجاد طفرة
° (mutation) خاصة بعد معالجة NaN; يعتمد على التواجد الدائم وطريقة الفحص المؤترة؛ ولذلك فهو بعيد عن النجاح دائما. يتعلق جزء صعب مرتبط بتحديد أهداف جزيئية واعدة في التناسل التقليدي للنبات بصعوبات في تأكيد تحديد المكون (المكونات) في مسار كيميائي حيوي محدد الذي يجب 0 اختلاله من أجل إنتاج التغيير المطلوب في فصل النظام؛ وبالتالي القدرة على ترسيخ طريقة فحص مفيدة. إن تحضينات متعلقة بإنتاج البيرة عند درجات حرارة مرتفعة Jie تجفيف الشعير في الفرن» أو تسخين وغليان ورت الشعير؛ قد تحث تحول كيميائي من SMM إلى DMS بسبب خواص متأصلة من (DMS خصوصا نقطة غليانها عند فقط 7١7/8-7*مئوية؛ فإن ia كبير من ٠ 0348 المتكون أثناء التسخين في الفرن وغليان الورت قد يفقد في die. gall درجات حرارة فوق تقريبا ٠ /7*"مثوية. ينخفض تطاير DMS إلى مستويات منخفضة Scheuren and ( las «Sommer (١١٠٠)؛ مع تعديل شروط أكسدة إضافية إلى 01450. عندما يكون زمن حفظ أو إثارة غليان الوررت غير كاف لتحويل SMM متخلف؛ قد يستمر DMS في التكون مع تبريد الورت؛ مع تحول لاحق إلى البيرة. Ye جرى تطوير طرق تقنية لخفض مستوى DMS في البيرة. بذلك» تصف براءة الاختراع الأفريقية YAOYA/AY طريقة لخفض مستويات DMS في الشعير؛ تشمل معالجة الشعير المذكور بالبخار. في طلب براءة الاختراع الأمريكي ٠٠0١6/٠0697184 إلى Bisgaard- Frantzen, H. et al جرى وصف طرق تخمير تشمل معالجة الهريس بالحرارة عند ٠ 7١*مثوية وأعلى من هذا. وفي براءة الاختراع الأمريكية رقم 477144 07 إلى Reuther, H جرى وصف Yo طرق لتحضير بيرة منخفضة carbohydrate حيث تشمل الطرق الغليان المكثف للورت ثم غسيل الورت المذكور مع .carbondioxide مع هذاء تستهلك كل المعالجات المذكورة مستويات عالية من الطاقة؛ وأيضا قد تعدل من خصائص الملت (شعير منبت بالنقع في الماء) أو الورت. الوصف العام للاختراع Yo يكشف الاختراع الحالي عن مشروبات (beverages) محضرة من الشعير» أو أجزاء منه؛ تحديدا بيرة (Beer) لها نكهة محسنة. تظهر المشروبات (beverages) المعلنة هنا مستويات
; قليلة جدا من (DMS أو أيضا عدم وجود DMS بالمرة- تحديدا مشروبات (beverages) بها مستويات DMS أقل من القيمة الحرجة للتذوق؛ وبالتالي تتميز بغياب مذاق DMS علاوة على ذلك؛ فإن مشروبات (beverages) الاختراع لها خواص مذاق فائقة. طبقا cll) تتميز مشروبات (beverages) الاختراع بأنها متوازنة وقابلة للشرب بصفة خاصة مع نكهة لها © درجة عالية من الانتعاش؛ أروماتية وزهرية. لذلك؛ يوفر الاختراع مشروبات (beverages) لها خواص نكهة لافتة للنظر اعتمادا على عدم وجود DMS أو مستويات ALE DMS اتضح هنا أن DMS يؤثرهِ بدرجة مدهشة على إحساس الإنسان بمركبات estery في البيرة (Beer) (انظر الشكل ١ (ب))؛ وهذا متطابق مع نموذج وفرهِ المخترعون يخفي فيه DMS مذاق المركبات المذكورة. ٠١ ما له أهمية وافرة أن الاختراع الحالي يوفر لبابات شعير أو ملت (malt) بها عيوب تخمد بصفة خاصة تكوين مصدر أولي DMS بهذه الطريقة؛ فإن الإخفاء الموصوف أعلاه للمذاق estery بواسطة DMS يمكن تفاديه؛ وذلك يمكن من وجود فرص جديدة في الاستعمال الصناعي للشعير والملت (malt) إضافياء فإن لبابات الشعير (barley Kernels) أو الملت التي بها عيوب تخمد بصفة خاصة تكوين مصدر أولي DMS لها أيضا خواص مذاق يسببها Ve غياب DMS بذاته. من الجدير SAL فإن الشعير أو الملت المذكور يمكن إنجازه كمادة خام في استخدامات صناعية مؤثرة للمساعدة في ترسيخ معايير ضبط إنتاج مفصلة أبعد بكتير من القدرات المعاصرة. بصفة خاصة. تتعلق التحسينات بأمور متعلقة بجودة البيرة وإمكانية التدعيم البيئي في إنتاج apd) بصفة خاصة من أجل: DMS بيرة بها مستوى قليل من مذاق يخص )١( محسن؛ estery بيرة لها نمط مذاق (Y) XY. دخل طاقة قليل لإنتاج البيرة؛ و (V) (Wort) استهلاك قليل للطاقة في إنتاج الورت (€) يوفر الاختراع الحالي نباتات ولبابات شعير تتحقق فيها التحسينات المذكورة. مع عمليات SMM لذلك؛ بدون التقيد بالاعتبارات النظرية الخاصة بكيفية تداخل أيض حيوية أخرى؛ فإن الاختراع الحالي يوفر فرص غير متوافرة بعد لتنفيذ واستكشاف تناسل Yo
SMM المعيبة في تكوين (barley plants) واستخدام صناعي لنباتات الشعير
لا
يكشف الاختراع الحالي عن أن المشروبات (beverages) التي تتميز بمستويات قليلة من مذاق يخص DMS ونمط مذاق estery محسنء و/أو مشروبات متوازنة بصفة خاصة وقابلة للشرب أي؛ لها نكهة على درجات عالية من الانتعاش» أروماتية؛ وزهرية- يمكن تحضيرها من نباتات الشعير» أو أجزاء منهاء تحمل طفرة (mutation) في الجين المشفر (MMT وذلك
© يسبب فقد كامل لنشاط MMT يرمز هنا إلى تلك النباتات بأنها شعير "ناقص- 7/111".
لذلك؛ يتعلق الاختراع في جانب بمشروبات محضرة من نبات شعير «(barley plant) أو جزء die حيث يحتوي المشروب المذكور مستوى من DMS أقل من "٠ جزءٍ على البليون (مثلا أقل من 90 جزء على البليون 0148)؛ وحيث يحمل نبات الشعير المذكور طفرة في الجين المشفر MMT مما يسبب فقد كلي لنشاط MMT
٠١ في جانب OAT يوفر الاختراع نباتات شعير (barley plants) مفيدة لتحضير المشروبات المذكورة. طبقا لذلك؛ فإنه هدف أيضا للاختراع أن يوفر نبات شعير c(barley plant) أو sya منه؛ حيث يحمل نبات الشعير طفرة في الجين المشفر MMT تسبب فقد AS لإنزيم MMT وظيفي.
إضافياء يتعلق الاختراع بمنتجات نبات ناتجة من نبات الشعير ناقص MMT المذكورء
١ متضمنة؛ على سبيل المثال؛ تركيبات ملت وورت؛ أو أشربة أو خلاصات معتمدة على الشعير؛ أو أشربة أو خلاصات معتمدة على الملت؛ أو مواد إضافية. إن المواد الإضافية في السياق الحالي هي شعير غير ملت؛ والذي قد يستخدم إما وحده أو في اتحاد مع شعير ملت لتحضير الورت. أيضاء يوفر الاختراع طرق لتحضير نباتات الشعير المذكورة؛ بالإضافة إلى طرق لتحضير المشروبات ومنتجات النبات الأخرى.
أ Lil) في عالم به فوضى مناخية على الأجندة العالمية؛ لابد أن يساهم المجتمع والصناعة في التقليلات الكلية Glad غاز الصوب الزراعية والفوائد البيئية. إن هدف الاختراع بذلك هو توفير نباتات شعير مفيدة لإنتاج بيرة باستخدام طرق تستهلك طاقة قليلة. طبقا لذلك؛ فإن نباتات الشعير من الاختراع مفيدة لإنتاج بيرة باستخدام طرق تقل Led الفترات الزمنية لخطوات التسخين؛ أو تقل فيها درجة الحرارة في خطوات التسخين؛ مقارنة بطرق
5 التحضير القياسية. ما لها أهمية أساسية هي الفوائد في خطوات تجفيف آتون وإجراءات غليان الورت؛ والتي قد تكون بدرجة مفيدة قصيرة الأمد أو تجرى عند درجات حرارة أقل مقارنة
A
بالأنظمة القياسية للتخمر وإنتاج البيرة؛ وتقلل استهلاك الطاقة لتوفير طرق أكثر دواما في البقاء لإنتاج البيرة. تحديد قوائم الترتيب يمكن إدراك الاختراع بصورة تامة أكثر من الوصف التفصيلي التالي والتحديد التالي لقوائم الترتيب (ملخصة في جدول ١٠)؛ وذلك يشكل جزءا من هذا الطلب. يقدم الجدول المذكور © الموصوفة هناء إن الإشارة إلى المواد الأولية polypeptides s قوائم بالأحماض النووية تشمل أجزاء الحمض النووي المشفرة gDNA 5 cDNA بالإضافة إلى نسخ oligonucleotide والمحددات المقابلة cpolypeptides لكل أو قسم جوهري من هذه A tied polypeptides (تعريف الترتيب رقم: ). إن وصف الترتيب وتحديد قوائم الترتيب المرفقة هنا تتبع القواعد التي في طلبات براءة الاختراع. amino acid و/أو nucleotide تحكم توضيح ترتيب ٠ : للرسومات paid شرح ومتوسط درجات النكهة. SMM مكونات منتقاة من دورة ١ يبين الشكل methyl بتحريل SMM يخلق فيها SMM (أ) مكونات منتقاة من دورة مع تحفيز بواسطة إنزيم cmethionine (Met) عسندمنطاعها ”5-8005 إلى (SAM) من كمادة معطية SMM يمكن في المقابل أن يخدم .Hry-S-methyltransferase (HMT) ٠ في تفاعل يحفزه الإنزيم chomocysteine (Hey) من Met لتكوين methyl يبين الشرح كيفية ارتباط التفاعلات غير العكسية (Hey-S-methyltransferase (HMT) بينما يحول Mets 7 بصورة أساسية. إن كل تحول للدورة لا طائل منه لأنه يستهلك ثم يجدد ٠ و1 (غير مبين). (ب) توضيح لمتوسط درجات PPi cadenosine إلى ATP النكهة؛ + الحيود القياسي» بواسطة مجموعة من المتخصصين في تذوق البيرة بالنسبة للخواص Y- و0148- عينات البيرة. إن العينات المقارنة للبيرة القياسية بها بيرة cestery المعروفة- القوام» ٠ يعطي التركيزات التالية في البيرة: esters فقط (الأعمدة المعلمة مع "0")؛ أو بها خليط من ,»جزء على ٠ © 800027186681 على المليون cia V,0 cethyl acetate على المليون ois ؛)"٠١" (الأعمدة المعلمة ethyl octanoate جزء على المليون ١١ cethyl hexanoate المليون .)"7" (الأعمدة المعلمة DMS على البليون gia ٠٠١ سالفة الذكر المتضمنة ester وخلطة 5
SMM-OPA يبين شكل ¥ الجزيئات المشتملة في التكوين القلوي للمركب الاستشعاعي
يبين شكل ؟ نتائج HPLC وتجارب تبقع western لتحديد النوع الشكلي ناقص- MMT للطفرة ATT والطفرة VE 0A )1( مثال عن الفصل المعتمد على HPLC لخلاصة من براعم نابتة cv.
Prestige يبين فصل asparagine «glutamic acid (Glu) «aspartic acid (Asp) .SMM serine (Ser) ¢«(Asn) إن الاستشعاع لخلاصات مشتقة- OPA براعم نابتة للشعير © تتم إثارته عند VE نانومتر ويقاس الانبعاث عند 49٠ نانومتر. (ب) فصل معتمد على - HPLC لخلاصات من الطفرات المشار إليها والنوع البري cv.
Sebastian إن فصل المكونات في خلاصة طفرة يوفر كروماتوجرام بدون ذروات SMM add (ج) نتائج تبقع Western لأجل proteins منفصلة بالمقاس من خلاصات براعم نابتة للنوع البري Prestige (الخانة ((Y الطفرة 80567 (الخانة oF النوع البري Sebastian (الخانة ©( والطفرة Aa) ١5018 6). ٠ تنفصل proteins مرجعية لها الأوزان المشار إليها بالكيلو دالتون في الخانات Veto) بينما يستخدم MMT مخلق من خلايا coli .25 كمثال مقارن وينفصل في الخانة A حسب التفصيل في المثال VY فإن حزم protein المصبوغ + VY كيلو دالتون تمثل MMT بينما أن الحزمة 80 كيلو دالتون في خلاصة EB. coli ليست مشتقة من MMT لأنها تظهر أيضا في خلاصات خلايا مقارنة سالبة متحولة مع ناقل PET19b (قارن شكل VE (ب)؛ (ج)). Vo يبين شكل 4 غياب نشاط MMT في براعم نابتة عمرها ؛ أيام لطفرة OSA TY مع وجود أنشطة ظاهرة في البراعم النابتة من النوع البري لطول إنبات مشابه. يتحدد نشاط MMT باستخدام PHISAM كمادة خاضعة. إن التحول الذي يحفزه MMT لمجموعة methyl من [PHISAM إلى Met لتكوين SMM تتم مراقبته بعد وميض بعد إزالة PHISAM المتبقي بواسطة aad نباتي نشط. إن هذا يربط المادة الخاضعة- لكن ليس SMM ite المعلم جديد ٠ التخليق. يبين الشرح SMM Lad غائب في براعم نابتة طفرية؛ لكنه موجود في تلك من النوع البري. تم تحليل إجمالي Te برعم نابت من كل من النباتات الطفرية والنوع ١٠ call من الطفرية 5 VO من النوع البري. يبين شكل © مقارنة محتويات DMSP الحر 5 DMS الحر في الملت» «ysl والبيرة من النوع البري والناقص- MMT (أ) كل من الملت الأخضر والمجفف في آتون للطفرة AY YO به pati بدرجة ملحوظة في مستويات ©1145 5 DMS الحر. (ب) إن الورت السكر والمغلي للطفرة 8057 يفتقد في الغالب DMSP و0345 الحرء وأيضا فإن البيرة المصنعة باستخدام الطفرة 8017 للملت قليلة للغاية في مستوى DMS الحر.
Ye. أشخاص متخصصين في تذوق ٠١ مقارنات نمط النكهة المقررة بواسطة ١ يبين شكل والطفرة cv. Power البيرة الكبيرة؛ تشمل الاختبارات بيرة متخمرة مع ملت من النوع البري يجعل هذا النوع من التحليل من الممكن استخدام عدد من معايير (MMT (ناقصة- 7 النكهة المحددة مسبقا كما مبين في الرسوم البيانية؛ يمكن تقديرها على نطاق درجي من صفر- تقدر النكهة بأنها "حدية”؛ تقابل درجة 0( فقط إذا كانت خاصيتها تعتبر قصوى بالنسبة . © ملخص لتقييم خبراء تذوق البيرة للبيرة المختلطة مع ١ لنوع البيرة المحللة. (أ) يقدم جدول (ب) ملخص يقدم بالتفصيل تقييم خبراء التذوق لبيرة بدون إضافات. alcohols s esters إن لبابات الجيل NaN; توضيحا لطريقة انتشار لبابات شعير طفرية بواسطة ١ يبين شكل (م صفر) تنمو إلى نباتات تمثل شتلة للبابات الجيل (م١). يمكن زراعة هذه ونموها إلى نباتات وتمثل شتلة للبابات (Ya) التي تنتج لبابات جديدة للجيل (م "). بعد ذلك؛ تنمو نباتات (Yo) 0٠
Mie (Leia ويمكن استخدام عينات «sally (Va) يمكن السماح للبابات الجيل (Ya) الجيل وتستخدم زهرات النباتات (Ya) بذور deh) من أجل التحليل. يمكن أيضا ccoleoptiles المقابلة للتهجينات المتبادلة للحصول على نباتات الجيل (م4). منظور عام تخطيطي مبسط لعملية إنتاج بيرة مفضلة؛ تتضمن نقع حبة A يبين شكل (0) تكوين هريس o£) طحن الملت الجاف oF) تجفيف آتون oY) إنبات )١( الشعير ١ ترشيح (1)؛ علي الورت في وجود مواد معالجة إضافية (7)» تخمر في وجود خميرة (8)؛ زجاجات؛ عبوات؛ أو ما شابه lie التعبئة في؛ (Vo) إنضاج البيرة (9)؛ ترشيح البيرة يمكن تجميع العمليات المنفردة إلى قطاعات تشمل إنتاج ملت .)١7( ووضع علامة ؛)١١( على الرغم .)1-٠١( إنتاج ورت (1-4)؛ تخمر (4-4))؛ وتحضير البيرة النهائية (TY) أنه تم توضيح طريقة مفضلة؛ يمكن توقع وجود طرق أخرى يتم فيها حذف بعض الخطوات eT الموصوفة (إن الترشيح؛ مثلاء يمكن حذفه أو يمكن عدم إضافة مواد المعالجة الإضافية)؛ أو يمكن أيضاف إنتاج (carbonate قد تضاف خطوات إضافية (مثلا إضافة مواد مساعدة أو البيرة باستخدام خلطات من شعير ملت وغير ملت؛ أو فقط شعير ملت؛ وفي تلك الحالة تضاف إنزيمات خارجية دائما أثناء عملية تكوين الهريس. يبين شكل ؟ MMT يبين شكل 9؛ في شكل تخطيطي؛ تنسيق جين الشعير المشفر vo بداية الترجمة codons (تعريف الترتيب رقم: ؟)؛ يشمل bp 717718 طوله genomic ترتيب كمربعات مرقمة وخطوط غير مرقمة؛ على introns 5 Exons الإيقاف. تبين codons
١١ مبين كرأس سهم ليشير إلى الاتجاه الكلي للنسخ والترجمة. تشير أرقام VY Exon الترتيب. إن codon المحددة بالنسبة للقاعدة الأولي من exons لأجل vy “0 إلى الطرف Nucleotide التي تقابل التكبيرات باستخدام PCR بداية الترجمة. موضح أيضا المواقع التقريبية لامتدادات .7 مجموعات المادة الأولية المذكورة في الجدول
° يبين شكل ٠١ ترتيب cDNA من أجل MMT شعير من «cv.
Prestige يشمل codons بداية الترجمة والإيقاف؛ أي؛ منطقة التشفير (تعريف الترتيب رقم: o£ مصطفة مع الترتيب المترجم (تعريف الترتيب رقم: oT باستخدام الشفرة من حرف واحد .amino acids Jay
يبين شكل VY اصطفاف ترتيب إنزيمات MMT المتماظلة تقريبا لشعير cvs.
Haruna Nijo (تعريف الترتيب رقم: Prestige s oY (تعريف الترتيب رقم: 1( هناك
٠ تعليم لأثتين من اختلافات متخلف amino acid منفصلة كمربعات سوداء مع حروف بيضاء. يبين شكل ١١ كيفية تنشيط طفرة شعير 80767 لمواقع الجديلة الشفرية في الجين من أجل MMT 0( تشير أسهم أفقية صغيرة أسفل توضيح التركيب genomic للجين من أجل MMT إلى موضع التقسية التقريبي لمجموعة المادة الأولية Vo قارن جدول 4. (ب) رؤية حزم DNA عقب ارتحال كهربي لهلام agarose لتحليل تفاعل سلسلة polymerase نسخ (Se (RT-PCR) ١٠ للمنتجات باستخدام جزيء تركيبي 1118 من أي من النوع البري cv.
Prestige أو الطفرة 007 8. )=( توضيح لتبيان بناء intron-exon لمنتجات PCR في المجموعة (ب)؛ باستخدام نفس عناصر الرسم البياني كما في (أ). إن Exon © للمنتج 4 أقصر مقارنة بذلك من النوع البري. تشير رؤوس الأسهم الرأسية إلى الأماكن التقريبية لأجل codons إيقاف ترجمة غير ناضجة. بسبب اختيار المواد الأولية؛ فإن المنتجات لا تشمل ١ exons ٠ و7. من المتوقع؛ على أية حال؛ أن 1118 يمل أيضا ١ exons و؟. (د) وصف تفصيلي للنسخ الناتجة من موقع جديلة 0" الطفري (Mut) والنوع البري (WT) في intron © مع الإشارة إلى موقع الطفرةٍ بالقاعدة التي تحتها خط. إن الأسهم المتصلة بالخطوط المصمتة؛ المعلمة ؟ 5 of تعلم الأماكن المعطية والمستقبلة المستعملة أثناء جديلة المنتج والمنتج of على الترتيب (مثلا المجموعة ج). إن الخطوط Yo المتقطعة؛ المعلمة *Y تشير إلى جديلة نسخة النوع البري (المنتج ١ في المجموعة (ج)) ls المنتج غير المجدول ؟ (قارن المجموعة (ج)). إن قواعد introns exons © عبارة عن حروف في الحالة السفلية والعلوية؛ على الترتيب. Nt: nucleotide (ه) منظور عام لتركيبة
VY
مواقع الجديلة ©" و7 في أحاديات الغمد (Sinibaldi and Mettler) 1997)؛ مقارنة مع ترتيب intron © في الجين من أجل MMT للطفرة AY يبين شكل plasmids VY إظهار من أجل إظهار مغاير لإنزيم MMTs شاذة للطفرة (AY واصطفاف proteins مشفرة. 00( توضيح للجزء Ncol-BamHI من pET19b- “MMT © متضمنا مواقع تحديد منتقاة- تشفر MMT نوع بري مندمج مع ترتيب يخص جزء ملحق- His (* ¢ ترتيب 14611111111111111111111؛ تعريف الترتيب رقم: 1( في إطار مع موقع kinase معوي (* *؛ ترتيب ¢SSGHIDDDDKH تعريف الترتيب رقم: (Ve توجد بنيات حذف موضحة في (ب)؛ (ج)» و(د). (ه) اصطفاف ترتيبات MMT المشفرة (تعريف الترتيب Yo AF VY rad; للبنيات المبيئة في of) (ب)»؛ (ج)؛ (د)؛ على الترتيب). ٠ يستخدم peptide مصنع مقابل لامتداد الترتيب معلم مع علامات نجمية من أجل توليد أجسام مضادة عديدة النسخ ضد MMT شعير. إن أرقام متخلف طول الترتيب 77 و85١٠ غير مبينة لإنزيم النوع البري (تعريف الترتيب رقم: 36). يبين شكل VE نتائج الإظهار المغاير في E.coli لأشكال النوع البري والطفرية من MMT من cv. Prestige والطفرة (AY على الترتيب؛ مع تفاصيل تجريبية موصوفة في المثال ١7 Ve . تخدم خلاصة من خلايا coli .8 متحولة مع ناقل 011190 بالإضافة إلى قاسم تام من 41 تنقي؛ كعينات مقارنة تجريبية. إن مناطق الهلام بين الخانات ؛ و# لكل من التبقعات؛ المشتملة بيانات غير خاصة بالاستخدام الحالي؛ يتم محوها إلكترونيا عقب المسح الفحصي. (أ) أنماط HPLC من أجل SMM نقي بالإضافة إلى خلاصات من coli WA .15 متحولة مع Lad) plasmids إليها. لأغراض المقارنة؛ فإن الأنماط هي أيضا ga تكاملي للشكل AA ٠ (ب) نتائج تبقع Western لأجل proteins منفصلة بالمقاس من خلاصات خلوية قابلة للذوبان من خلايا E. coli متحولة مع pET-MMT plasmids (الخانة ¢(Y pET19b-Line8063-Prod3 (الخانة ¥(« pET19b-Line8063-Prod4 (الخانة ؛) و81196م (الخانة #). تتفصل في الخانة proteins ١ مرجعية لها الأوزان المشار إليها بالكيلو دالتون. (ج) نتائج تبقع Western لأجل proteins منفصلة بالمقاس من خلاصات Yo أجسام تضمن من خلايا coli .2 متحولة مع plasmids كما هو مذكور في قاموس المصطلحات للإشارة إلى pall (ب) هنا أعلاه. إن الأجسام المضادة الأولية عديدة النسخ
VY
المستخدمة في تحليلات western 42.50 ضد MMT peptide شعير مصنع طوله 10 متخلف» يقابل امتداد amino acid المعلم مع العلامات النجمية في الشكل AY يبين شكل Yo أساليب لتحديد الحبات التي تتميز بطفرة 0630768 في جين MMT للطفرة 057 8. (أ) في التفاعل المفترض ١ والتفاعل 7؛ فإن مجموعة المادة الأولية ١7؛ قارن © جدول ا ينتج bp 0018-777١ ha ولا ينتج جزء؛ على الترتيب؛ كما هو مبين تخطيطيا بواسطة الحزمة المصبوغة مع ethidium bromide عقب الارتحال الكهربي لهلام agarose للتفاعلات المقابلة (ج). في التفاعلات المفترضة ؟ و؛ (ب) alg الأخير فقط جزء PCR تشير الأسهم الأفقية إلى تطابق ترتيب كامل مع DNA جزيء تركيبي بينما تشير الأسهم التي لها اتحنتاء حاد إلسى عدم تطابق. (د) تحليل تبقع Western مع ٠ جسم مضاد لمضاد- MMT يدرك إنزيم ١٠١ MMT كيلو دالتون في لبابة (kernels) من النوع البري cv. Prestige (الخانة ؟)؛ لكن ليس في تلك للطفرة JA +1Y تتنفصل Proteins قياسية في الخانة »١ مع الأوزان المقابلة المحددة بالكيلو دالتون. يبين شكل ١١ كيفية تنشيط طفرة الشعير ١40٠8 لمواقع الجديلة مشفرة في الجين من أجل MMT 0 الأسهم الأفقية الصغيرة- أسفل توضيح البناء genomic للجين من أجل -MMT ٠ تشير إلى موقع التقسية التقريبي لمجموعة المادة الأولية 11 انظر جدول 4. (ب) رؤية حزم DNA بعد ارتحال كهربي لهلام agarose لمنتجات RT-PCR باستخدام جزيء تركيبي RNA من أي من النوع البري (cv. Sebastian) أو الطفرة (VEYA )=( وصف لتوضيح بناء intron-exon لمنتجات PCR في المجموعة (ب)؛ باستخدام نفس عناصر الرسم البياني كما في المثال .١ إن Y Exon في المنتج A مبتور مقارنة مع ذلك للنوع البري. تشير ٠ رؤوس الأسهم الرأسية إلى المواضع التقريبية codons إيقاف الترجمة الغير ناضجة. نظرا لاختيار المواد الأولية؛ لا تشمل المنتجات .١ exon من المتوقع؛ على أية «Js أن mRNA يشمل أيضا .١ exon (د) توضيح مفصل للنسخ الناتجة من موقع جديلة 0“ الطفري Mut.) والنوع البري (WT) في oY intron مع الإشارة إلى موقع الطفرة بالقاعدة التي تحتها خط. إن الأسهم المتصلة بخطوط مصمتة المعلمة A 5 ١ تعلم المواقع المعطية والقابلة المستعملة أثناء YO جديلة المنتج 7 والمنتج oA على الترتيب (قارن المجموعة (ج)). يشير الخط المتقطع المعلم *١ إلى جديلة نسخة النوع البري (المنتج 0 في المجموعة (ج)) وإلى منتج +7 غير مجدول (قارن المجموعة (ج)). إن قواعد introns exons ؟ ممثلة بحروف في الحالة السفلية
١ "7 و "٠ (ه) منظور شامل لتركيبة مواقع الجديلة WNT: nucleotide والعلوية؛ على الترتيب. للجين من Y 10000 مقارنة مع ترتيب (Sinibaldi and Mettler, supra) في أحاديات الغمد
NEVA للطفرة MMT أجل إظهار من أجل إظهار مغاير لإنزيم 1,115 شاذة للطفرة plasmids VY يبين شكل من Neol-BamHI مشفرة. (أ) توضيح للجزء proteins واصطفاف VEYA © نوع بري مندمج مع ترتيب MMT متضمنا أماكن تحديد منتقاة- تشفر —pET19b-MMT ترتيب 11611111111111111111111؛ تعريف الترتيب رقم: 19) في »* ) His ملحق- sia يخص (Ve تعريف الترتيب رقم: ¢SSGHIDDDDKH معوي )** ¢ ترتقيب kinase إطار مع موقع المشفرة MMT توجد بنيات حذف موضحة في (ب)؛ )=( و(د). (ه) اصطفاف ترتيبات (ب)؛ (ج)؛ (د)؛ على off) للبنيات المبينة في 76 YE YY OA (تعريف الترتيب رقم: ٠ إلى ؛8١٠ غير مبين للإنزيم من النوع البري 7١١ الترتيب). إن رقم متخلف طول الترتيب (OA (تعريف الترتيب رقم: للإظهار المغاير في ناه» .2 لأشكال من HPLC نتائج تجريبية تعتمد على VA يبين شكل على الترتيب؛ مع وصف ٠6017 والطفرة cv. Prestige من MMT النوع البري وطفرية من متحولة مع E.coli نقي وخلاصة خلايا SMM للتفاصيل التجريبية في المثال . يخدم Ve فإن الرسومات الكروماتوجرافية lal) كعينات مقارنة تجريبية. للأغراض pET19b الناقل .)أ(١ 4 المعلمة مع علامات نجمية هي أيضا أجزاء مكملة للشكل في 1462 A توضيح عن أسلوب وراثي لتحديد حبوب تتميز بطفرة ١9 يبين شكل (أ) في التفاعلات المفترضة (و)؛ مجموعة المادة ٠50148 للطفرة MMT الجين من أجل ينتج جزء؛ على الترتيب؛ كما Ygbp PCR -١7١ جدول 4« ينتج جزء pail «4 الأولية x. عقب ارتحال كهربي لهلام ethidium bromide مبين تخطيطيا بالحزمة المصبوغة مع المقابلة (ج). في التفاعلات المفترضة £57 (ب)؛ يولد الأخير فقط جزء Ble lal agarose جزيء تركيبي؛ DNA تشير الأسهم الأفقية إلى تطابق ترتيب كامل مع (bp ١7( PCR مع جسم مضاد Western لأسهم مع انحناء حاد إلى عدم تطابق. (د) تحليل تبقع ١ بينما تدل كيلو دالتون في لبابة نوع بري ٠١7١ MMT يدرك إنزيم MMT لمضاد- Yo القياسية في proteins تنفصل .) £2) A (خائة ١)؛ لكن ليس في تلك الطفرة cv. Sebastian ويشار إلى الأوزان المقابلة بالكيلو دالتون. ٠ الخانة
Yo تعريفات في الوصفء الأشكال والجداول التالية؛ يستخدم عدد من المصطلحات. لتوفير المواصفات وعناصر الحماية؛ متضمنة نطاق يعطى لتلك المصطلحات؛ تتوافر التعريفات التالية: يمكن أن يعني واحد أو أكثرء اعتمادا على Anil حسب الاستخدام هناء فإن "الصيغة السياق المستخدمة فيه. زراعية” سمة شكلية نوعية أو وراثية لنبات تساهم في الأداء أو Aad يصف المصطلح القيمة الاقتصادية للنبات المذكور. تتضمن تلك السمات مقاومة مرض»؛ مقاومة حشرة؛ مقاومة فيروس؛ مقاومة دودة خيطية؛ تحمل الجفاف؛ تحمل الملوحة العالية؛ الإنتاجية؛ ارتفاع النبات؛ في اللبابة وما شابه. nitrogen أيام النضوج؛ درجة اللبابة (أي؛ تجزئة مقاس اللبابة)؛ محتوى ٠ تحديدا عند الاستخدام لوصف عملية pull إن المصطلح 'شعير" عند الإشارة إلى تصنيع تكوين ملت؛ يعني لبابات شعير. في كل الحالات الأخرى إذا لم يحدد خلاف ذلك؛ فإن أن الجزء Cus متضمنا أي تشكيلة؛ «(Hordeum vulgare, L) "الشعير" يعني نبات الشعير من نبات الشعير؛ مثلا أي أنسجة أو خلايا. eda من نبات الشعير هو أي تتم زراعتها «Graminae إن نبات "حبي" حسب التحديد هنا هو عضو من عائلة نبات Ve أساسيا من أجل بذورها التي تحتوي التشا. تتضمن نبات حبية؛ بدون تحديد الشعير الشوفان (Secale) الجاودار (Zea) الأرز (ه2©)» الذرة (Triticum) القمح «(Hordeum) و11106816» هجين جاودار - قمح. «(Sorghum) السورغام (Avena)
DMS أو مادة تسبق DMS إن "0145" حسب الاستخدام هنا هو اختصار لمصدر أولي الجزء SMM أثناء إنتاج المشروبات. يمثل DMS أيء الجزيئات التي يمكن أن تتحول إلى ve التي DMS محدد هنا بأنه كمية DMSP الغالب من؛ إذا لم يكن كل؛ ©0145. إن مستوى في مادة النبات المخصصة؛ أو ناتج من ذلك؛ بالغليان عند شروط DMSP يمكن أن تتولد من جزء ١ إلى DMSP جزءٍ على البليون ١ قلوية لمدة ساعة. كما محدد هناء يمكن أن يتحول
DMS على المليون إن "تشفير" أو 'مشفر" في سياق الحمض النووي المخصص يعني اشتمال معلومات Ye قد يشمل ترتيبات غير protein المخصص. إن حمض نووي يشفر protein الترجمة في في مناطق مترجمة من الحمض النووي؛ أو قد يفتقد تلك الترتيبات (introns مترجمة (مثلا
غير المترجمة المتفاعلة ie) في (cDNA إن المعلومات التي يتم بواسطتها تشفير protein مخصصة باستخدام .codons حسب الاستخدام هناء فإن 'إظهار” في سياق الأحماض النووية يجب إدراكه بأنه نسخ وتراكم mRNA إحساس أو RNA مضاد للإحساس Fide من جزءء حمض نووي. يشير © "إظهار" المستخدم في سياق proteins إلى ترجمة mRNA إلى .polypeptide إن المصطلح "جين" يعني قطعة DNA المشتملة في إنتاج سلسلة ¢polypeptide إنه يتضمن مناطق تسبق وتلي منطقة التشفير (محثة ومنهية). إضافة oll فإن جينات النبات غير متصلة مع proteins تشفرهاء تتكون من exons تقاطعها introns بعد النسخ إلى (RNA تزال introns بالجديلة لتوليد RNA رسول ناضج (MRNA) إن "مواقع الجديلة" بين exons
٠ تحددها نموذجيا ترتيبات متفق عليها تؤثر كإشارات جديلة من أجل عملية الجدل؛ تتكون من حذف intron من نسخة RNA الأولي وتوصيل أو اندماج نهايات RNA المتبقي على كل من جانبي intron المستأاصل.
إن المصطلح "إنبات" حسب الاستخدام هنا يعني ابتداء أو استمرار النمو بواسطة لبابة شعير في تركيبات متنوعة؛ مثل التربة العادية الموجودة في الطبيعة يمكن أيضا أن يتم الإنبات
٠ في تربة أوعية موضوعة في حجرات نمو وما شابه؛ أو يتم مثلا على ورق ترشيح مبلل موضوع في أطباق Petri معملية قياسية أو أثناء تكوين الملت Oe) في خزانات فقع أو صناديق إنبات في مصنع تكوين ملت). إن الإنبات مفهوم بصفة عامة أنه يتضمن تميه اللبايات» انتفاخ اللبابات وحث نمو الجنين. تتضمن العوامل البيئية المؤثرة في الإنبات الرطوبة؛ درجة الحرارة ومستوى oxygen يراقب نمو الجذور والبراعم.
9 حسب الاستخدام هناء يعني المصطلح "Ag ra’ أن المادة تزال من بيئتها الأصلية. على سبيل المثال» فإن polynucleotide أو polypeptide طبيعي الوجود موجود في ALS حي يكون غير معزول؛ لكن نفس polynucleotide أو polypeptide المنفصل عن بعض من أو كل المواد الموجودة الملازمة في الجهاز الطبيعي؛ يكون معزولا. يمكن أن تشكل تلك polynucleotides جزءا من ناقل و/أو يمكن أن تشكل تلك polypeptide sl polynucleotide
YO جزءا من تركيبة؛ ولا تزال أيضا معزولة لأن ذلك الناقل أو تلك التركيبة ليس جزءا من بيئتها الطبيعية.
VY
(ثمرة جافة غير متفتحة ذات بذرة واحدة) B31 Jats محدد بأنه LT إن المصطلح الحبية؛ ويشير أيضا إلى البذرة الداخلية؛ القنابة السفلية والحرشف. في معظم تشكيلات الشعير من اللبابة بعد الدريس. على أيه حال؛ توجد eda تلتصق القنابة السفلية والحرشف مع البرة وهم أيضا تشكيلات شعير عارية. في هذه؛ تكون البرة حرة من القنابة السفلية والحرشف وتنفصل و"حبة" بصورة تبادلية هنا. "LL عند الدريس حرة كما في القمح. تستخدم المصطلحات © مع التخصيب الذي يتم فيه إيداع ag يشير 'نمو حبة' إلى الفترة في دورة حياة الشعير التي «phenolics نشاء مواد oligosaccharides مخزونات أيضية مثلا سكريات» مع أو بدون استهداف حويصلة؛ في أنسجة مختلفة في اللبابة؛ «proteins 3 camino acids منوي داخلي؛ الغدقة (الغلاف الخارجي الصلب للبذرة)؛ الأليرون (مادة حبيبية بروتينية في Jie البذرة) والصفيحة؛ مما يؤدي إلى تضخم اللبابة؛ امتلاء اللباية؛ وتنتهي بنضوج وجفاف اللبابة. ٠ تشير إلى نقص "MMT وظيفي" و'فقد كلي لنشاط MMT إن المصطلحات 'فقد كلي يمكن تحديده MMT بدون نشاط (barley plant) أي؛ نبات شعير (MMT النشاط الإنزيمي
MMT عند استخدام الاختبار الموصوف في المثال ¥ هنا أدناه. بطريقة بديلة؛ يتحدد نشاط protein للشعير المذكور وتحديد ما إذا كان MMT »0118 بعزل (barley plant) لنبات شعير
Met إلى SAM من methyl المذكور قادرا على تحفيز تحول مجموعة cDNA الذي يشفره ٠
SMM وبالتالي تكوين يشير المصطلح "مشروب ملت" إلى مشروبات محضرة باستخدام ملت» اختياريا في مزيج خلطات شعير ملت وغير ملت؛ تفضل مشروبات محضرة بطريقة Jie مع مقومات أخرى؛ بيرة أو Sie تتضمن خطوة حضانة ملت مع ماء ساخن. قد يكون مشروب الملت هوء ملتينات. > ٠ تمت حضانته Mie يشير المصطلح " مشروب ملت متخمر” إلى مشروب ملت تم تخمره؛ مع خميرة. إلى النشاط الإنزيمي لإنزيم الشعير MMT يشير المصطلح "نشاط هو "MMT 00106لط61. في سياق الاختراع الحالي؛ فإن "نشاط S-methyltransferase حتى ولو كان إنزيم SMM لينتج Met sulfur عند ذرةٍ MMT التي يحفزها methylation Yo طبقا للاختراع MMT فلأغراض تحديد نشاط gyal قادرا على تحفيز تفاعلات 7
YA
هو المهم. يحدد الشكل ١(ب) التفاعلات الكيميائية SMM الحالي؛ فإن نشاط المكون- .methylation بواسطة SMM إلى Met الحيوية التي يتحول فيها إن 'تكوين ملت" هو شكل خاص لإنبات لبابات الشعير يحدث تحت شروط بيئية خاضعة للسيطرة في؛ بدون تحديد؛ خزانات نقع وصناديق إنبات في مصنع تكوين ملت. طبقا لعملية الاختراع الحالي؛ يبدأ تكوين الملت أثناء و/أو بعد نقع لبابات الشعير. يمكن أن تتوقف عملية © عدم تجفيف Alla في عملية تجفيف آتون. في Sle تكوين الملت بتجفيف لبابات الشعير؛ (malt composition) الملت في آتون؛ يشار إليه 'ملت أخضر". من المفهوم أن تركيبة ملت مثل ملت نقي ناقص 1117 أو MMT تشمل ملت ناقص MMT محضرة من شعير ناقص يمكن معالجة الملت؛ مثلا بالطحن؛ وفي MMT أي توليفة من الملت مشتملة ملت ناقص
Sepak تلك الحالة يمكن الإشارة إليه أيضا بأنه "ملت مطحون" أو ٠ إن 'تكوين هريس" هو حضانة للملت المطحون في ماء. يفضل إجراء تكوين هريس عند الإنزيمية polymerization حرارة خاصة وفي حجم خاص من الماء للسماح بإزالة da المطلوبة للمواد الخاضعة. إن درجة حرارة وحجم الماء لهما أهمية لأن ذلك يؤثر على معدل نقص نشاط الإنزيم المشتق من الملت؛ وبالتالي كمية التحلل المائي للنشا بصفة خاصة الممكن والمفهوم sae lua هام أيضا. يمكن تكوين هريس في وجود مواد Protease حدوثه. إن مفعول ١٠ بخلاف الملت؛ مثل؛ بدون تحديد؛ شعير (متضمنا carbohydrate أنها تشمل أي مصدر جريش أو Jie لبابات كاملة أو منتجات معالجة Jie أو ذرة؛ أو أرز إما (MMT شعير ناقص المستخدمة كلها أساسيا كمصدر إضافي لخلاصة (تجرع أشربة نموذجيا أثناء غليان (Lis الملت). إن متطلبات معالجة مادة مساعدة في أداة تخمر تعتمد على مذاق ونوع المادة المساعدة المستخدمة وتحديدا درجات حرارة تهلم أو تسيل النشاء إذا كانت درجة حرارة التهلم ٠ أعلى من درجة حرارة تسكر الملت الطبيعية؛ فعندئذ تتهلم النشا وتتسيل قبل الإضافة إلى الهريس. فإن (Ya) > عند تثبيت طفرة محددة كسمة مميزة وراثية متماثلة الزيجوت؛ مثلا في توليد أو مثل "خط (Mutant) "طفرة Jie can) يرمز هنا بصورة تبادلية Julia) نبات الشعير "خط". Jie طفري" أو Ye تتضمن "الطفرات" إزالات؛ استبدالات؛ تحويلات بينية وطفرات نقطة في مناطق التشفير وعدم التشفير لجين» حيث تكون منطقة عدم التشفير بصورة مفضلة هي المنطقة المحثة أو
45ص introns قد تكون الإزالات للجين كله أو فقط لقسم من الجين. تتعلق طفرات نقطة بتغيرات قاعدة واحدة أو زوج قاعدة واحد وقد تنتج codons إيقاف؛ طفرات انتقال إطارء أو استبدالات camino acid إن الطفرات الجسدية هي تلك التي تحدث فقط في خلايا أو أنسجة معينة من النبات ولا يتم توريثها للجيل التالي. يمكن وجود طفرات خط جرثومة في أي خلية من النبات © ويمكن توريثها. حسب الاستخدام cla يشير المصطلح ~MMT" ناقص” إلى فقط كلي methionine ay S-methyl وظيفي. لذلك؛ فإن "نبات شعير (barley plant) به “MMT ناقص" هو نبات شعير (barley plant) يشمل طفرة في الجين المشفر MMT تؤدي إلى فقد كلي لإنزيم MMT وظيفي. بصورة مشابهة فإن 'لبابات بها “MMT ناقص" هي لبابات تشمل طفرة في الجين ٠ المشفر MMT تؤدي إلى فقد كلي لإنزيم MMT وظيفي؛ Nag إن المصطلح "أجزاء من نبات شعير" المشتمل مثلا في معنى ball 'نبات شعير أو جزء منه"؛ يتضمن WA نبات شعيرء protoplasts نبات شعير؛ مزارع نسيج خلية نبات يمكن منها تجديد تولد نباتات شعير؛ لحاءات نبات شعير؛ وخلايا نبات شعير سليمة في النباتات أو أجزاء أكبر من نباتات شعير؛ مثل أجنة؛ حبة لقاح؛ بويضات؛ زهورء لبابات؛ أوراق؛ جذور؛ مقدمات ٠ الجذورء المثبرء أو أي eda من النبات. إن "PCR" أو 'تفاعل سلسلة "polymerase يعلمه جيدا المهرة في الفن كتقنية مستخدمة لتكبير قطع DNA خاصة (براءات الاختراع أرقام 4187194 و EA Nod إلى Mullis, K.B. وآخرين). أيضا فإن النسخ العكسي (RT)-PCR معروف جيدا للمهرة في الفن. يهدف إجراء RT-PCR على عينة حيوية إلى تحديد mRNAs ظاهرة لجين خاص. بالنسبة ٠ الإنزيم (MMT يتضمن RT-PCR بصفة عامة الحصول على عينة متوقع احتوائها mRNA من أجل (MMT إجراء RT-PCR على العينة مع transcriptase عكسي» polymerase وزوج مواد أولية خاصة؛ لتكبير RNA إذا كان موجوداء وتحديد ناتج التكبير كدلالة على وجود RNA يشفر MMT في العينة. تعمل المواد الأولية في أزواج- 'مادة أولية مباشرة" (أو sale أولية شريط علوي" أو 'مادة أولية sald (dle أولية عكسية" ve (و 'مادة أولية شريط سفلي"). إن ترتيبات المادة الأولية موجودة هنا في الاتجاه ©" إلى 3”.
١ منتج ناتج من معالجة نبات أو جزء من (Plant product) يعني المصطلح "منتج نبات «ays المذكور هو ملت؛ (Plant product) نبات. على سبيل المثال؛ قد يكون منتج النبات مشروب متخمر أو غير متخمر؛ طعام أو منتج إطعام. هي مجموعة من Jal إن 'مجموعة متخصصة في تذوق البيرة"” في معنى الطلب esters المتخصصين المدربين بشدة على تذوق ووصف نكهات البيرة» مع تركيز خاص على 2 والقوام. برغم وجود عدد من الأدوات sulfur الأعلى؛ الأحماض الدهنية؛ مكونات alcohols التحليلية لتقييم مكونات النكهة؛ فإن الأهمية النسبية للمكونات النشطة مع النكهة من الصعب حال؛ يمكن تقييم تلك الخصائص المعقدة بواسطة المتخصصين في al تحديدها تحليليا. على تركيزات خاصة Led) التذوق. يتضمن تدريبهم المستمر تذوق وتقييم عينات بيرة قياسية مضاف «ethyl acetate ¢isoamylacetate من مكونات البيرة- مثلا ٠ .isoamylalcohol 5 ethyl hexanote لجين. لذلك؛ فقد يكون موقع introns 5 exons الحدود بين "Ana يعني المصطلح 'موقع المسمى أيضا 'موقع معطى"- أو الحد الذي —intron إلى exon الجديلة هو الحد المستمر من المحدد أيضا أنه 'موقع مستقبل". إن موقع الجديلة في النباتات يشمل exon عن intron يفصل يتكون بصفة عامة من intron نموذجيا ترتيبات متفق عليها. إن الطرف ©" من ٠ من intron من ١ ويتكون عادة الطرف «(mRNA في GU) محمي 61 dinucleotide يشمل بذلك الطرف “7 من intron محمي. إن موقع الجديلة 0“ لأجل dinucleotide AG من 101:00. بصورة مفضلة؛ في سياق الاختراع YF ويشمل موقع الجديلة ؟” الطرف 0 إما: intron الحالي؛ يكون موقع الجديلة لأجل dale في 010:00 وهو بصفة 5' dinucleotide المتكون من معظم "٠# موقع الجديلة )١( ٠. ؛ أو 1 وهو بصفة عامة cintron لأجل 3' dinucleotide المتكون من معظم FY موقع الجديلة )7(
AG
إن "مواقع جديلة مستقرة" غير مدركة تحت الشروط العادية وبالتالي لا تسبب الجدل طبيعيا. على أية حال؛ في النسخ الحاملة طفرات نقطة في عناصر طبيعية؛ فإن تلك الأماكن YO يمكن تنشيطها من أجل أحداث الجدل.
١ معزولة من نفس الأنواع أو من أنواع مختلفة WIA تشير 'مزرعة نسيج” إلى تركيبة تشمل لحاءات؛ أجنة؛ حبة protoplasts أو مجموعة من تلك الخلية منسقة في أجزاء نبات؛ مثلاء وما شابه. cual لقاح؛ المولد الأولي لأشكال (Hordeum vulgare ssp.
Spontaneum يعتبر "الشعير البري" الشعير المزروعة في الوقت الحاضر. إن انتقال الشعير من الحالة البرية إلى المزروعة يتطابق © مع استثئناس النبات في "سلالات أرضية شعير". إن هذا يتعلق وراثيا بدرجة قريبة أكثر بالأشكال المتنوعة الحديثة أكثر من الشعير البري. يشير المصطلح "نوع بري" إلى نبات شعير متولد تقليدياء يفضل أن يشير المصطلح إلى نبات الشعير المشتقة منه نباتات شعير الاختراع الحالي؛ أيء النباتات الأصلية. إن لبابات "أشكال متنوعة" (غالبا ما تختصر Jie شركة البذور Mie شعير نوع بري متوافرة عامة من؛ ٠ إلى ".5»©")؛ أي؛ تلك اللبابات المشابهة وراثيا المدونة بواسطة منظمات تناسل نبات قومية. إن المصطلحات "شكل متنوع" و'تشكيلة” مستخدمة هنا بالتبادل. إن المصطلح "ورت" يعني خلاصة من الملت؛ مثلا ملت محطون أو ملت أخضر أو ملت أخضر مطحون. بالإضافة إلى الملت المذكور. يمكن تحضير الخلاصة السائلة من الملت إضافية تحتوي نشا متحولة جزئيا إلى سكريات قابلة للتخمر. يتم Bale Jie ومكونات إضافية؛ ١ متبوعا اختياريا 'بالتطهير”؛ أي؛ عملية استخلاص comp الحصول عامة على الورت بتكوين سكريات متخلفة ومركبات أخرى من حبة معالجة بعد الهريس مع ماء ساخن. يجرى التطهير أو جهاز آخر يسمح بفصل السائل المستخلص عن coup مرشح dauter نموذجيا في برميل بينما أن الورت dl عامة بأنه 'ورت ad) الحبة المعالجة. إن الورت الناتج بعد الهريس يشار "ورت ثان". إذا لم يحدد ذلك؛ فإن المصطلح ورت قد ash الناتج بعد التطهير يشار إليه عامة ٠ ورت أول؛ ورت ثان أو اتحاد لكليهما. إثناء إنتاج البيرة؛ يغلى الورت مع مواد إضافة Jig منكهة. إن الورت المحضر بدون غليان مع مواد إضافة منكهة قد يشار إليه أيضا 'ورت محلى" بينما الورت الذي يغلى مع أو بدون مواد إضافية منكهة قد يشار إليه "ورت مغلي". نبات الشعير «Hordeum vulgare ssp.
Spontaneum إن الشعير عائلة نباتات. يعتبر الشعير البري؛ Yo المصدر الأولي المولد لأشكال الشعير المزروعة اليوم. إن تحول الشعير من حالة برية إلى عند مواقع عديدة. allele مزروعة يعتقد أنه متطابق مع التغير الجذري في معدلات تكرار Alls
YY
إن 211168 النادرة والأحداث الطفرية الجديدة ينتقيها الفلاحون بصورة إيجابية وذلك رسخ بسرعة السمات الجديدة لأنواع النبات المستأنسة؛ المشار إليها 'سلالات أرضية شعير". إن هذا قريب جدا بدرجة أكبر وراثيا مع الأشكال المتنوعة الحديثة أكثر من الشعير البري. حتى أواخر القرن التاسع عشرء أظهرت سلالات أرضية شعير تواجدا كخلطات مغايرةٍ للغاية من خطوط داخلية التوالد وسلالات منعزلة هجينة؛ متضمنة نباتات قليلة مشتقة من تزاوجات عشوائية في الأجيال © الأولى. تم استبدال معظم السلالات الأرضية في الزراعات المتطورة بواسطة أشكال متنوعة خط نقي. إن المستويات المتوسطة أو العالية من التباين الجيني تميز السلالات الأرضية مثلت الأشكال المتنوعة 'للشعير الحديث" انتقاءات من السلالات الأرضية. تم (Wg المتبقية. تلك التي لها Jia اشتقاق هذه لاحقا من دورات ناجحة من التزاوجات بين خطوط نقية موجودة؛ (oe مصادر جغرافية متباينة. في النهاية؛ كانت النتيجة تحديدا شديدا للقاعدة الجينية في كثير ٠ وربما كل» الزراعات المتطورة. مقارنة بالسلالات الأرضية؛ فإن الأشكال المتنوعة من الشعير 19957)؛ على سبيل von Bothmer 1997 (Nevo) الحديث لها خواص محسنة كثيرة المثال؛ لكن بدون تحديد: لبابات مغطاة وعارية؛ )١( سكون البذرة؛ )( Vo مقاومة المرض؛ )7( للتربة)؛ PH التحمل البيئي (مثلا الجفاف أو (£) الأخرى؛ amino acids s lusine نسب (©) ¢Protein محتوى (7) «Nitrogen محتوى (V) ف ¢Carbohydrate تركيبة (A) ¢Hordein تركيبة (4) في الاختراع الحالي؛ يشمل المصطلح "شعير” أي نبات شعير. لذلك؛ يتعلق الاختراع بأي وظيفي. MMT تنتج تدفق كلي لإنزيم (MMT نبات شعير يحمل طفرة في الجين المشفر على أية حال فإن نباتات شعير مفضلة للاستخدام مع الاختراع الحالي هي أشكال شعير Yo متنوعة حديثة أو خطوط شعير نقية. إن الشكل المتنوع للشعير للاستخدام مع الاختراع الحالي هو؛ مثلا؛ المنتقى من المجموعة المتكونة من yy
Sebastian, Celeste, Tangent, Lux, Prestige, Saloon, Neruda, Harrington, Klages,
Manley, Schooner, Stirling, Clipper, Franklin, Alexis, Blenheim, Ariel, Lenka,
Maresi, Steffi, Gimpel, Cheri, Krona, Camargue, Chariot, Derkado, Prisma, Union,
Beka, Kym, Asahi 5, KOU A, Swan Hals, Kanto Nakate Gold, Hakata No. 2,
Kirin - choku No. 1, Kanto late Variety Gold, Fuji Nijo, New Golden, Satukio °
Nijo, Seijo No. 17, Akagi Nijo, Azuma Golden, Amagi Nijpo, Nishino Gold,
Misato golden, Haruna Nijo, Scarlett, Quench, NFC Tipple and Jersey يفضل من المجموعة المتكونة من
Haruna Nijo, Sebastian, Tangent, Lux, Prestige, Saloon, Neruda, Power, Quench and NFC Tipple. Ye طبقا لذلك؛ في تطبيق الاختراع؛ يكون النبات المذكور عبارة عن شكل متباين شعير حديث وظيفي؛ يفضل شكل MMT تؤدي إلى فقد كلي لإنزيم MMT يحمل طفرة في الجين المشفر متنوع واحد ينتقى من مجموعة الأشكال المتتوعة للشعير الموصوفة هنا أعلاه. في هذا التطبيق؛ يفضل طبقا لذلك أن يكون نبات الشعير ليس هو سلالة أرضية شعير. فإن نبات الشعير طبقا للاختراع قد Ole قد يكون نبات الشعير في أي شكل مناسب. \o يكون عبارة عن نبات شعير حبي؛ نبات جاف؛ نبات متجانسء أو لبابة شعير مطحونة. قد يكون النبات نباتا ناضجاء جنينيا؛ لبابة نامية؛ لبابة ملت؛ لبابة ملت مطحونة أو إلخ. لبابات؛ أجنة؛ أوراق؛ Jie إن أجزاء نبات الشعير قد تكون أي أجزاء مناسبة من النبات؛ قد يكون قطاع من لبابة؛ جنين؛ Sle سيقان» جذور» زهور أو أجزاء من ذلك. إن الجزء؛ جذر أو زهرة. إن جزء نباتات شعير قد يكون أيضا عبارة عن قسم من مادة (Gla ورقة» "٠ متجانسة؛ قسم من خلاصة؛ أو قسم من نبات شعير مطحون أو لبابة. في تطبيق للاختراع؛ قد تكون أجزاء نبات الشعير عبارة عن خلايا من نبات الشعير حية يمكن أن تنمو في المعمل؛ مثلا في مزارع خلية أو نسيج. WDA المذكورء تفضل وظيفي MMT فقد إنزيم مشروبات محضرة من نباتات شعير» أو أجزاء Jie يتعلق الاختراع الحالي بمنتجات نبات؛ Yo تؤدي إلى فقد لإنزيم MMT من ذلك؛ تحمل نباتات الشعير المذكورة طفرة في الجين من أجل يفضل JY) يفضل 7997 على (MMT وظيفي؛ مثلا فقد 790 على الأقل من نشاط 17
Y¢ مقارنة MMT أكثر 7949 على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر 794,5 على الأقل من نشاط بالمستوى المقابل في الشعير النوع البري. يفضل مقارنة بأي من الأشكال المتنوعة للشعير من cv. Prestige النوع البري الموصوفة هنا أعلاه؛ يفضل أكثر مقارنة بالشعير من النوع البري تنتج فقد كلي (MMT الأكثر تفضيلا أن يحمل نبات الشعير المذكور طفرة في الجين المشفر
MMT لوظيفة ©
OB (Jud) وظيفي قد يعتمد على آليات مختلفة.على سبيل MMT إن الفقد الكلي لإنزيم مختل الوظيفة في النبات المذكورء أي؛ protein وظيفي قد ينتج من MMT الفقد الكلي لإنزيم طفري بدون نشاط يمكن تحديده. على سبيل MMT protein Jie مختل الوظيفة؛ MMT إنزيم قد يعتمد MMT مبتور. إن فقد نشاط protein للطفرة قد يشكل MMT protein المثال» فإن الوظيفة. Jide MMT protein «a بالتشابه على آليات مختلفة؛ ٠ طفري بقدرته على تحفيز تحول مجموعة MMT protein بصورة مفضلة؛ يتحدد نشاط حسب (JU على سبيل laa قد يتم SMM وبذلك يتكون Met إلى SAM من methyl لإنزيم amino acid الوصف في المثال ؛ هنا لاحقا. يفضل؛ أن يتم الحصول على ترتيب الشعير المعزول المقابل. يتم هذا أساسيا cDNA طفري بتحديد الترتيب المترجم لأجل 171 الطفري لنبات الشعير MMT بعد. بطريقة بديلة؛ ينتج Led هنا A حسب الوصف في المثال ١ ١١ والمثال ١١ من الاختراع بإظهار مغاير في مزرعة خلية بكتيرية حسب الوصف في المثال
MMT المخلق خامد النشاط كإنزيم protein هنا فيما بعد؛ ويلي ذلك تحديد أن إن نقص MMT protein وظيفي بنقص MMT يمكن إدراك الفقد الكلي لإتزيم
MMT protein قد يشمل نبات الشعير lla) MMT يؤدي إلى فقد وظيفة MMT protein مستوى صفرء أو فقد بقدر ضئيل جداء ويفضل لا يمكن تحديده. يمكن تحديد وجود أو غياب XY بأي وسيلة مناسبة معروفة للشخص الماهر في الفن. على أية حال؛ يفضل MMT protein بأجسام مضادة خاصة تدرك MMT protein بتقنيات يتحدد فيها (proteins) protein تحليل أو اختبار امتصاص مناعي western تبقع Oia قد تكون التقنيات المذكورة هي؛ MMT متصل بإنزيم»؛ وقد تكون الأجسام المضادة الخاصة المذكورة أحادية النسخ أو عديدة النسخ. epitopes بصورة مفضلة؛ على أية حال؛ تكون الأجسام المضادة المذكورة عديدة النسخ تدرك © يمكن تحديد هذه أيضا بطريقة غير مباشرة؛ مثلاء بطرق .MMT protein مختلفة كثيرة في لذلك؛ في تطبيق مفضل للاختراع؛ يقال أن نبات الشعير يحمل طفرة في MMT لتحديد نشاط
Yo
MMT protein عند عدم وجود MMT لنشاط AS وذلك بسبب فقد MMT الجين المشفر يمكن تحديده في النبات المذكور. بصفة خاصة؛ فإن هذه هي الحالة عندما لا يمكن تحديد في نبات الشعير المذكور- يفضل .7٠0 + كيلو دالتون ١١١ مع وزن تقريبي MMT protein western حسب التحليل بواسطة تبقع Saal) في لبابات نبات الشعير نتيجة لعدم وجود أو وجود قدر ضئيل Load وظيفي قد يكون MMT إن الفقد الكلي لإنزيم ° سوف يعلم الشخص الماهر أن غياب MMT mRNA جدا منء يفضل عدم وجود؛ نسخ
MMT protein le سوف يؤدي أيضا إلى MMT نسخة وظيفي نتيجة لإظهار نسخة MMT andy يفضل؛ على أية حال؛ أن يكون الفقد الكلي شاذ للنسخة الأولية؛ مثلاء Jaa شاذة. قد يكون سبب وجود النسخة المذكورة حدث 7 يمكن JU على سبيل MMT بسبب طفرة في موقع الجدل. إن إظهار النسخ المشفرة ٠
RT-PCR أو بطرق Northern تحديده بتبقع وظيفي في نباتات شعير الاختراع الحالي تسببه واحدة أو MMT إن الفقد الكلي لإنزيم أكثر من الطفرات. لذلك؛ فإن نباتات شعير الاختراع الحالي» بصفة عامة؛ تحمل طفرةٍ واحدة قد تكون الطفرة (الطفرات) المذكورة في مناطق تنظيمية؛ مثلا في MMT على الأقل في جين لذلك protein قد تكون الطفرة (الطفرات) المذكورة في منطقة تشفير introns المحثة؛ أو Vo إن الطفرات MMT وظيفي قد يتحدد أيضا بتحليل الطفرات في الجين المشفر MMT فإن فقد تحديدها بترتيب الجين المذكور؛ ثم مقارنته مع ترتيب Sle يمكن؛ MMT في الجين المشفر oF تعريف الترتيب رقم: (Jie المحدد هنا ev. Prestige النوع البري؛ يفضل ترتيب النوع البري بصورة مفضلة؛ بعد تحديد الطفرة؛ يتم .)١١ (تعريف الترتيب رقم: ov. Sebastian أو ذلك من . 4 مثلا حسب الوصف في المثال ؟ أو المثال MMT تأكيد فقد الوظيفة باختبار نشاط x. كامل الطول من الشعير MMT protein يعني أن يشمل MMT protein إن المصطلح وظيفي لذلك. في هذا السياق؛ فإن مماتل Bilas كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 7؛ أو ذلك لأجل Jie 775+ MMT مع نفس المستوى من نشاط MMT protein وظيفي هو
MMT شعير كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 7؛ حيث يتحدد نشاط MMT protein أو المثال ؛ هنا أدناه. oY حسب الوصف في المثال YO مثلا 744؛ مثال 744,5 من نشاط 745 Jie إن نبات الشعير مع فقد 7495 على الأقل» وظيفي جزئيا أو يفضل MMT قد يشمل شكل مبتور من MMT لنشاط JS مع فقد of MMT
غير وظيفي؛ مثل شكل مبتور N= (hha أو طرفي-0. قد يشمل نبات شعير أكثر من شكل مبتور واحد من MMT مثل oY أو مثلا oF أو مثلا أكثر من “ أشكال مبتورة مختلفة من 7ه وقد ينتج هذا من نسخ مجدولة بصورة شاذة. إن الأشكال المبتورة المذكورة تشمل فقط قطعة طرفية-1< من MMT بالإضافة إلى القطعة الطرفية-14 من MMT نوع بري؛ OH ٠ أشكال MMT المبتورة المذكورة قد تشمل ترتيبات طرفية-© إضافية غير موجودة في MMT النوع البري. إن الترتيبات الإضافية Cag hall المذكورة 038 على سبيل JE تشكل ترتيبات 00 مترجمة؛ Jia تلك المتكونة في MRNA الطفري بسبب جديلة شاذة. يفضل؛ أن تشمل أشكال MMT المبتورة المذكورة في المعظم 000 يفضل أكثر £00 في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 4060 في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 305٠ في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر TY في ٠ المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 3١١ في المعظم؛ أو في المعظم YAA متخلف amino acid طرفي-17 من تعريف الترتيب رقم: WT إن هذه هي الحالة بصفة خاصة عندما يكون في نبات الشعير المذكور فقد كلي لنشاط MMT على أية حال a يشمل أيضا MMT مقدار أقل؛ Ds مالا يزيد عن (Fev على سبيل المثال مالا يزيد عن Yor مثلا مالا يزيد عن Yoo مثلا ٠50 في المعظم؛ مثلا مالا يزيد عن (VEY أو مالا يزيد عن amino acids YY
Sted) طرفي-11 من تعريف الترتيب ١ amino أو ١١-١ amino acids المبتور من MMT في تطبيق مفضل جداء يتكون شكل واختياريا ترتيبات إضافية طرفية-0 غير موجودة ١ من تعريف الترتيب رقم: ؟//4-١ acids النوع البري. يفضل؛ أن تتكون الترتيبات الإضافية الطرفية-© المذكورة في المعظم MMT في في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر ٠١ في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر ١ من ٠©؛ يفضل أكثر في تطبيق مفضل جداء قد يكون الشكل المبتور amino acid ١ ؟ في المعظم؛ أو في المعظم ٠
SOY تعريف الترتقيب رقم: VY المطابق تعريف الترتيب رقم: protein هو MMT من Vo أو رقم ١١ تعريف الترتيب رقم: ١١؛ أو رقم proteins إن VO تعريف الترتيب رقم: ليست إنزيمات MMT وظيفية. في تطبيق آخر مفضل جداء قد يتكون شكل MMT المبتور من 1597-١1 amino acids Yo أو ١7-١ amino acids من تعريف الترتيب رقم: VA واختياريا ترتيبات إضافية طرفية-© غير موجودة في MMT النوع البري. يفضل؛ أن تتكون الترتيبات الإضافية الطرفية- © المذكورة في المعظم من 00 يفضل أكثر 5٠ في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 0٠؛ في
Yv amino Vo أو في المعظم (FF المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 879 المعظم» أو في المعظم المطابق protein هو MMT في تطبيق مفضل جداء قد يكون الشكل المبتور من .5 أو تعريف الترتيب رقم: 77. إن VE أو تعريف الترتيب رقم: YY تعريف الترتيب رقم: وظيفية. MMT أو رقم 77 ليست إنزيمات (YE أو رقم (YY تعريف الترتيب رقم: proteins تتواجد أشكال 7 المبتورة المذكورة أعلاه مثلا في نبات شعير يحمل طفرةٍ في الجين ° إيقاف غير مكتمل لينتج جين يشفر أشكال codon حيث تدخل الطفرة المذكورة (MMT المشفر المبتورة المذكورة أعلاه. 71 يشمل بعض؛ MRNA في تطبيق مفضل للاختراع» يشمل نبات الشعير جين منسوخ في النوع البري مجدولين معا بدون تدخل يبين شكل 4 بناء MMT لكن ليس كل؛ جين
MMT نوع بري للشعير). في تطبيق» يفضل طبقا لذلك أن يشمل MMT لجين intron-exon ٠ 7؛ 3 4 05 مجدولة مع ٠ exons لنبات الشعير طبقا للاختراع في المعظم mRNA بدون تدخل بالإضافة إلى Lae مجدولة Y 5) exons بعضها بدون تدخل؛ أو متلا في معظم لنبات الشعير طبقا للاختراع قد MMT mRNAs المذكورة المجدولة مع بعضهاء فإن exons و/أو 5:ه»» نوع بري؛ حيث تفصل introns تشمل ترتيبات إضافية طرفية ©" مشتقة من
Lada شاد لنبات الشعير MMT mRNA ترتيبات عده»». إن أمثلة مفضلة من introns YO ١١ وطبقا لذلك مع أطوال جزء ©- موضحة في الشكل RT-PCR للاختراع- حسب تحديد الشاذة لنباتات الشعير طبقا للاختراع هي تلك mRNAs أن تكون «AST يفضل VT والشكل mRNAs sf ؟ عند الطرف فب و١ exons المشتملة إضافيا على OY الموضحة في الشكل
Co عند الطرف ١ exon الموضحة في شكل 6 المشتملة إضافيا على
MMT في تطبيق مفضل جدا للاختراع الحالي؛ يشمل نبات الشعير الحامل طفرة في جين Ye مجدول بصورة شاذة. بصورة mRNA تؤدي إلى وجود MMT طفرة في موقع الجديلة في جين أيضا يفضل أكثر في موقع (MMT لجين intron مفضلة أكثرء تتمركز الطفرة المذكورة في ١ intron م-ثلا في موقع الجديلة 0 على cintron Jay To الجديلة الذي intron) Y intron 7)؛ مثلا في موقع الجديلة ©" على و١ exons الذي يفصل intron) exons الذي يفصل intron) ¥ intron مثلا في موقع الجديلة ©" على (YY exons يفصل © و ©(« مثلا exons الذي يفصل intron) ¢ intron "و؛)؛ مثلا في موقع الجديلة 0" على 1)؛ مثلا في موقع © exons الذي يفصل intron) © intron في موقع الجديلة 0" على
YA
وأكثر تفضيلاً في موقع «(V 51 exons الذي يفصل intron) 1 intron الجديلة © على .0 intron sl ١ intron الجديلة © على introns للقاعدة 0" الطرفية لأجل GA يفضل أن تكون الطفرة المذكورة هي طفرةٍ أو 7 intron للقاعدة ©" الطرفية لأجل GA سالفة الذكر. لذلك؛ فإن طفرة مفضلة جدا هي .# intron للقاعدة ©" الغالبة لأجل GA طفرة © يمكن تحضير نبات الشعير طبقا للاختراع بأي طريقة مناسبة معروفة للماهر في الفن؛
MMT يفضل بالطريقة المحددة هنا أدناه في الجزء "تحضير نباتات شعير مع فقد كامل لإنزيم وظيفي". طبقا MMT في تطبيق للاختراع؛ يفضل أن يكون لنباتات الشعير مع فقد كلي للنشاط للاختراع الحالي؛ سمات مميزة فسيولوجية وللحبة النامية وللنبات مساوية للشعير من النوع ٠ مشابه لشعير من النوع البري MMT يفضل لذلك أن يكون نبات الشعير الناقص clin البري. ارتفاع النبات؛ عدد الغصينات الجذرية في النباتء Jie بالنسبة للسمات المميزة الهامة زراعيا؛ بداية الإزهار و/أو عدد الحبات في السنبلة. لنبات الشعير طبقا للاختراع ترتيب MMT في تطبيق مفضل جداء يكون للجين المشفر كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 8. لذلك؛ يفضل أن يحمل نبات الشعير طبقا للاختراع ١ للقاعدة رقم 0979 في تعريف الترتيب رقم: 7 (حيث أن تعريف الترتيب رقم: ؟ GA طفرة -(cv. Prestige « js MMT النوع البري من أجل genomic هو الترتيب ١١ هو نبات الشعير المودع في MMT إن مثال مفضل لنبات شعير به فقد كلي لنشاط مع ٠٠١١8 أكتوبر American Type Culture Collection (ATCC) Patent Depository, 10801 University Ye
Blvd., Manassas, VA 20110, United States and referred to as "Barley, Hordeum vulgare; Line 8063". عن خط الشعير 80567 المودع مع ple لذلك؛ فإن نبات شعير الاختراع يمكن أن يكون أو أي (40 7-1 :ATCC Patent Deposit Designation) ٠١ أكتوبر Y ATCC نبات شعير طبقا للاختراع له MMT نبات شعير من ذلك؛ حيث يكون الجين المشفر Jus Yo
A ترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم:
Yq لنبات الشعير طبقا للاختراع له MMT في تطبيق مفضل جداء فإن الجين المشفر يفضل أن يحمل نبات الشعير (lla) V8 الترتيب كما هو محدد في تعريف الترتيب رقم: (حيث أن ١١ طبقا للاختراع طفرة مرج-6 عند القاعدة رقم 1477 من تعريف الترتيب رقم: ov. لشعير MMT النوع البري من أجل genomic هو الترتيب VT تعريف الترتيب رقم: .(Sebastian © وظيفي MMT تحضير نباتات شعير مع فقد كامل لإنزيم وظيفي بأي طريقة MMT يمكن تحضير نبات الشعير مع فقد كامل لإنزيم op ad طبقا مناسبة معروفة للماهر في الفن. بصورة مفضلة؛ يحضر نبات شعير الاختراع بطريقة تشمل مثلا؛ لبابات (Lia خطوات تكوين طفرةٍ في نباتات الشعير- أو أجزاء للأهمية؛ يتعلق MMT شعير- ثم فحص وانتقاء نباتات الشعير التي بها فقد كامل لنشاط ٠ الاختراع الحالي؛ في جانب؛ بطريقة فحص جديدة ومؤثرة جدا للسماح بتحديد نباتات الشعير المذكورة. طبقا لذلك؛ فإنه هدف للاختراع الحالي أن يوفر طرق لتحضير نبات شعير يحمل طفرة في تشمل الطرق المذكورة خطوات: MMT تسبب فقد كامل لنشاط MMT جين و/أو نسيج الشعير (barley cells) الشعير WA تكوين طفرة في نباتات الشعير و/أو )١( yo وبذلك «(barley embryos) و/أو لبابات الشعير و/أو أجنة الشعير «(barley tissue) و MO نحصل على جيل شعير > تناسل) نباتات الشعير الطفرية المذكورة؛ اللبابات؛ و/أو الأجنة لمدة Ole) نمو (Y) صحيح > ؟؛ de هو x Cus Mx وبذلك نحصل على نبات شعير مع جيل cola و Ye المذكورة؛ و Mx الحصول على عينة من نباتات شعير (V) في العينة المذكورة؛ و SMM (؟) تحديد مستوى يفضل أقل من SMM جزء على البليون ٠١ انتقاء نباتات تشمل فيها العينة أقل من (0) لا يمكن تحديده؛ و SMM يفضل أكثر «SMM جزءٍ على البليون © و MMT ترتيب جزء على الأقل من جين (1) Yo
SMMT انتقاء نباتات تحمل طفرة في جين (V)
بذلك نحصل على نبات شعيرء يحمل طفرة في جين MMT تسبب فقد كامل لإنزيم MMT وظيفي. قد تشمل الخطوة )١( في القائمة أعلاه إجراء طفرة لمادة شعير حية تنتقى من المجموعة المتكونة من نباتات شعير؛ خلايا شعيرء نسيج شعيرء لبابات شعير ٠ وأجنة شعيرء يفضل أن تنتقى من المجموعة المتكونة من نباتات شعيرء لبابات شعير وأجنة pe يفضل أكثر لبابات شعير. يمكن إجراء تكوين طفري بأي طريقة مناسبة. في تطبيق؛ يجرى التكوين الطفري بحضانة لنبات شعير أو ga منه- مثلا لبابات شعير أو خلايا منفردة من الشعير- مع عامل تكوين طفرة. إن تلك العوامل معروفة للماهر في call ويمكن أن تنتقى؛ مثلاء من المجموعة المتكونة من ¢«(NaN3) sodium azide «(MNU) methyl nitrosourea «(AG) azidoglycerol «(EMS) ethyl methanesulfonate ٠ .(MH) maleic hydrazide في تطبيق AT يجرى التكوين الطفري باستخدام أشعة؛ مثلا ضوء فوق بنفسجي؛ على نبات شعير» أو جزء منه؛ مثل اللبابة. في تطبيقات مفضلة للاختراع؛ يجرى التكوين الطفري طبقا لأي من الطرق المحددة هنا أدناه في جزء 'تكوين طفري كيميائي”. هناك مثال غير مفيد ١٠ لبروتوكول تكوين طفري مناسب موجود في المثال ١ من براءة الاختراع الأمريكية رقم 4708 من K. etal. ,56008 بالإضافة إلى في المثال ¥ هنا أدناه. يفضل إجراء التكوين الطفري بطريقة يكون معدل التكرار المتوقع للطفرات المطلوبة على الأقل cn, مثلا في نطاق من 4,0 إلى ©؛ مثلا في نطاق من 5 إلى 1,3 في ٠٠٠٠١ حبة؛ عند فحص شعير من الجيل (م). ve في تطبيق مفضل» يتم تكوين طفرة في لبابات الشعير. يرمز إلى هذه الجيل MO (انظر أيضا الشكل AV عقب التكوين الطفري؛ تنتقى نباتات الشعيرء أو جزءٍ منهاء بدون نشاط MMT يمكن تحديده. يفضل؛ أن يشمل الانتقاء الحصول على عينة من نبات شعير؛ يفضل من نبات شعير Lia (gall يفضل أكثر من نبات شعير نامي لمدة ؛ أيام. يفضل أن تكون العينة من coleoptile Yo و/أو ورقة أولية؛ يفضل من ورقة. لذلك؛ قد تكون العينة؛ Ole في نطاق ١ سم إلى ؟ سم من نسيج ورقة.
يمكن استخلاص العينة وتحليلها باتباع بروتوكول مطور حديثا متعدد الخطوة» حسب الوصف هناء يشمل الاستخدام المتعاقب لمذيبات ومواد رابطة مختلفة. بصفة dale يمكن استخلاص العينة؛ مثلا مع مذيب أو خليط مذيبات؛ يفضل ماء و/أو مذيبات عضوية. قد يكون المذيب العضوي هوء calcohol «Mia يفضل ~methanol أو قد يكون المذيب العضوي © مثلا calkyl-halide يفضل chloroform في تطبيق (Juba يكون المذيب هو خليط من «methanol «sl و chloroform يمكن إجراء الاستخلاص المذكور بدرجة مفيدة أثناء halal Sli باستخدام هزاز أو خلاط. يمكن إضافة دعامة صلبة إلى خليط المذيب/ العينة- مثلا خرزة؛ Jie خرزة زجاج. في تطبيق مفضل؛ تؤخذ عينة الورقة سالفة الذكر من لبابات جيل Mx حيث x هو عدد ٠ صحيح > ؟؛ يفضل في نطاق من ؟ إلى 8٠١ يفضل أكثر في نطاق من © إلى 8. في تطبيق مفضل clan يتحدد مستوى SMM في النباتات النامية (م7)؛ أو في عينات من ذلك (مثل الأوراق). في التطبيق المذكور؛ يفضل أن تنمو لبابات شعير طفرية من الجيل MO للحصول على نباتات شعيرء Allg تتزاوج بعد ذلك للحصول على لبابات الجيل (م١). يكرر الإجراء حتى تتوافر لبابات من الجيل (Va) (قارن شكل (VY yo يفضل أن يعتمد تحديد مستوى SMM على الإجراء الجديد الموصوف أدناه. للأهمية؛ تسمح هذه الطريقة بفحص عالي الدخل؛ يجعلها ملائمة لتحديد نباتات شعير تتميز بفقد كامل لإنزيم MMT بصفة عامة؛ يفضل أن تشمل الطريقة تفاعل العينة؛ أو يفضل خلاصة من العينة المذكورة. محضرة كما هو موصوف أعلاه؛ مع مركب قادر على ربط SMM اتضح أن ٠ العامل الكاشف Sigma, cat.no.
P7914;) OPA قارن شكل oY يشار إليه هنا لاحقا فقط بأنه «OPA مفيد تحديدا لتحديد مستويات .SMM يتفاعل «OPA من ضمن مركبات أخرى؛ مع SMM لتكوين الجزيء المشار إليه SMM-OPA (قارن شكل .)١ يفضل أن يشمل التفاعل حضانة OPA مع خلاصة العينة المحضرة حسب الوصف أعلاه. إضافيا يفضل إضافة 3-mercapto-propionic acid إلى خليط التفاعل. يفضل حفظ الخليط عند أس YO هيدروجيني قلوي؛ يفضل في نطاق من (A )0 يفضل أكثر في نطاق 4 إلى ١١؛ أيضا يفضل أكثر في نطاق 9,5 إلى 0,0 Je) عند أس هيدروجيني .٠١ يفضل إجراء الحضانة عند درجة Bila من صفر*مئوية إلى ١٠”مثوية؛ يفضل في نطاق من ١"مئوية إلى AA vy أيضا يفضل أكثر في نطاق من die إلى 30a أيضا يفضل أكثر في نطاق من دقائق. ٠١ > مثلا عند ؛“مئوية. يفضل أن تكون فترة الحضانة (Asie '*مئوية إلى 456 نانومتر و YE يمتص ويبعث ضوء عند SMM-OPA استنادا إلى الملحوظة بأن نانومترء على الترتيب؛ فإن تحديده ممكن باستخدام فحص مجهري طيفي استشعاعي. يفضل أن تشمل العملية الأولية للتحديد فصل الخلاصة على عمود؛ يفضل على عمود © (Phenomenex, catno. 00A-4439-80; ملليمتر ؟ ميكرون 77*٠١ 018 Gemini متبوعا بتحديد الاستشعاع باستخدام نظام تحليل كروماتوجرافي سائل (Phenomenex, 2006) (UPLC (نظام Ultra Performance Liquid Chromatography عالي الدخل؛ يفضل نانومتر 75٠8 مصمم لتحديد وقياس مستوى استشعاع الجزيئات التي لها إثارة عند )»+ 5 لا يمكن تحديده” يعني SMM" نانومتر. عند استخدام هذه الطريقة؛ فإن 40 ٠ وانبعاث عند ٠ في هذا السياق؛ فإن "كتف" SMM غياب مركبات يمكن تحديدها تنفصل بصورة مشتركة مع صغير على ذروة رسم كروماتوجرافي يعتبر ذروة اصطناعية. إن كتف صغير على جانب اليد لذلك؛ على SMM لا يعتبر طبقا لذلك ممثلا لذروة oF قارن شكل cAsn/Ser اليمنى لذروة يصنفان (QF سبيل المثال؛ يعتبر الرسمان الكروماتوجرافيان العلويان كما هو مبين في الشكل لا يمكن تحديده"؛ بينما يمثل الرسم الكروماتوجرافي السفلي في الشكل المذكور فصل 5004" ٠
SMM عينة تشمل هناك طريقة مفضلة لانتقاء نباتات LY حسب الوصف في المثال SMM يفضل تحديد
Lia إن نبات الشعير النامي؛ LY شعير طبقا للاختراع موصوفة هنا فيما بعد في المثال نامي لمدة ؛ أيام تفيد له بصفة خاصة طريقة الفحص المذكورة ped يفضل أكثر من نبات أعلاه. قبل كل شيء فإن الطريقة التحليلية جديدة. إضافة لذلك؛ فإنها ميزة هامة للطريقة أعلاه ٠ أوراق نباتات شعير نامية. إن Jie في نباتات شعير نامية؛ SMM أنها مقررة لتحديد مستويات توقيت أخذ العينات من الشعير النامي يسهل الحصول على مستحضر نظيف بصورة غير عينات ورق من Mia (gal معتمد على ©.1071. هناك عينات SMM متوقعة من أجل تحديد ويمكن عامة عدم استعمالها في lela حبوب مشابهة حسب الوصف أعلاه معقدة جدا في
SMM الطريقة الكروماتوجرافية المذكورة لتحديد مستويات 5 لا يمكن SMM يفضل «SMM جزءٍ على البليون ٠١ عقب تحديد نبات شعير به أقل من منه؛ يتم ترتيبه نموذجيا لتحديد ما إذا كان يمكن sha المقابل؛ أو MMT تحديده؛ فإن جين
تصنيف نبات الشعير الذي نحن نصوره بأن به طفرة في جين MMT إن نباتات الشعير المتميزة بوجود SMM لا يمكن تحديده؛ والتي تكون فيها واحدة أو أكثر من قواعد الجين المشفر MMT مختلفة مقارنة مع ترتيب النوع البري؛ يتم عندئذ انتقائها. في هذا السياق؛ يفضل أن يكون ترتيب النوع البري هو الترتيب الموجود في الشكل المتنوع المقابل للشعير من © النوع البري؛ يفضل الترتيب المحدد هنا Jie تعريف الترتيب رقم: . توصف هنا أعلاه طفرات إن طفرات الشعير المنتقاة يمكن أن تنمو إضافياء ويعاد فحص نباتات الأجيال التالية من أجل محتوى SMM بعد انتقاء نباتات شعير Bae يمكن تضمنها في برامج التناسل باستعمال تلك الطرق التقليدية الموصوفة هنا أدناه في جزء "تناسل النبات". ٠ منتجات نبات يتعلق الاختراع الحالي في جانب بمشروبات أو منتجات نبات أخرى مع مستويات قليلة من DMS يفضل من نبات شعير؛ أو أجزاء منهاء تحمل طفرة في جين MMT تسبب فقد كامل لوظيفة MMT للأهمية؛ تشمل منتجات النبات تلك؛ عامة؛ مستويات قليلة جدا من DMS علاوة على هذا فإن هذه المنتجات النباتية تشمل أيضا عموما مستويات منخفضة جدا من SMM Vo ويفضل أيضا مستويات منخفضة جدا من 01480. بدون التقيد بالتظرية؛ أدرك المقدمون للطلب أن غياب SMM شعير ومشتق من الملف ينتج مستويات قليلة جدا من DMS في المشروبات؛ وأيضا في منتجات نبات أخرى محضرة من الشعير المذكور المتميز بفقد إنزيم 7 وظيفي. يوصف هنا لاحقا Abie] لمنتجات نبات مفيدة؛ (Fie مشروبات؛ محضرة من نباتات شعير بها فقد كامل لنشاط MMT Ye يفضل أن تحتوي المشروبات المذكورة؛ أو منتجات النبات المذكورة على: )0( أقل من 770؛ يفضل أقل من 77١ يفضل أكثر - أقل من 719 أيضا يفضل أكثر - أقل من DMS 7٠١ و/أو (Y) أقل من 770 يفضل أقل من 77١0 يفضل أكثر = أقل من 719 أيضا يفضل أكثر- Jil من 7٠ مثلا أقل من 70 على سبيل المثال أقل من 77 SMM من Yo محتوى SMM 5 DMS على الترتيب؛ لمشروب مشابه أو منتج نبات (Plant product) مشابه محضر من نباتات شعير النوع البري. من المفضل أيضا أكثر أن تحتوي المشروبات المذكورة أو منتجات النبات المذكورة على:
)١( أقل من Yo جزء على البليون؛ يفضل أقل من ein YO على البليون؛ يفضل أكثر - أقل من sia Yo على البليون؛ أيضا يفضل أكثر - أقل من 10 جزء على البليون» أيضا يفضل أكثر- أقل من ٠١ جزء على البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزءٍ على البليون؛ أيضا يفضل أكثر- DMS غير قابل للتحديد؛ و/أو ° (7) أقل من 5٠ جزء على البليون؛ يفضل أقل من 40 جزء على البليون؛ يفضل أكثر - أقل من 7٠0 جزءٍ على البليون؛ أيضا يفضل أكثر - أقل من ٠١ جزء على البليون» أيضا يفضل ST = أقل من ٠١ جزء على البليون؛ Lad يفضل أكثر - أقل من © جزءٍ على البليون» أيضا يفضل أكثر SMM لا يمكن تحديده. بالإضافة إلى هذا يفضل أن يشمل منتج النبات أقل من JY يفضل أقل من 77١ ١ يفضل ST أقل من ١715 يفضل أكثر أيضا أقل من 7٠١ من محتوي Cid DMSO Silas أو منتج نبات محضر من نباتات الشعير من النوع البري. إن منتج النبات (Plant product) طبقا للاختراع الحالي هوء في جانب؛ لبابات شعير تحمل طفرة تؤدي إلى فقد كامل لإنزيم MMT وظيفي. قد يكون منتج النبات (Plant product) أيضا عبارة عن تركيبات تشمل اللبابات المذكورة وتركيبات محضرة من
٠ اللبابات المذكورة؛ بالإضافة إلى منتجات نبات أخرى محضرة من اللبابات المذكورة.
في جانب؛ يكون منتج النبات (Plant product) طبقا للاختراع تركيبة ملت محضرة بواسطة لبابات ملت لنباتات شعير تحمل طفرة في الجين المشفر MMT تسبب فقد كلي لنشاط 7. إن المصطلح "تكوين ملت" مفهوم أنه إنماء لبابات شعير منقوعة؛ يتم تحت شروط بيئية خاضعة للسيطرة (مثلا كما هو مبين في الشكل (A
١ إن تكوين ملت هو عملية نقع وإنبات خاضعة للسيطرة؛ يليها تجفيف (يفضل تجفيف آتون) لحبة الشعير. قبل التجفيف؛ يشار إلى حبوب الشعير المنقوعة والنابتة "ملت أخضر” وقد تكون أيضا عبارة من منتج نبات (Plant product) طبقا للاختراع الحالي. إن هذا التسلسل للأحداث هام لتكوين إنزيمات عديدة تسبب تعديل للحبة في عمليات تخدم أساسيا في إزالة بلمرة جدران خلية المنوي الداخلي الميتة وتحريك المواد المغذية للحبة. في عملية التجفيف؛
Yo تنتج نكهة ولون (مثلا لون بني) نتيجة لتفاعلات كيميائية. برغم أن الاستخدام الأساسي للملت هو إنتاج مشروب؛ فمن الممكن أيضا استعماله في عمليات صناعية أخرى؛ مثلا كمصدر
Yo إنزيم في صناعة المخبوزات؛ أو كعامل مكسب للنكهة وللون في صناعة الأطعمة؛ مثل ملت أو طحين ملت؛ أو بصورة غير مباشرة كشراب ملت؛ إلخ. في جانب؛ يتعلق الاختراع الحالي بطرق لإنتاج تركيبة الملت المذكورة. يفضل أن تشمل الطرق خطوات: تسبب فقد كلي MMT توفير لبابات شعير من نبات يحمل طفرة في الجين المشفر )١( ° «MMT Jalal نقع اللبابات المذكورة؛ )7( مسبقة التحديد؛ dag pd إنبات اللبابات المنقوعة تحت )( تجفيف اللبابات النامية المذكورة. (£) قد ينتج الملت بأي Sie DMS و/أو SMM بذلك تنتج تركيبة ملت بها مستوى قليل من Ve .(YAAY) Hough et al. 5 (Y4AY) Briggs et al. من الطرق الموصوفة بواسطة يمكن أيضا استخدام أي طريقة أخرى مناسبة لإنتاج الملت مع الاختراع (Ja على أية خاصة؛ تتضمن؛ بدون تحديد؛ طرق تحميص الملت. aga طرق إنتاج ملت ذات Sia الحالي؛ APT A= TY مركب طيار في الواقع مع درجة غليان DMS للأهمية؛ إن أعلاه)» وأثناء إنتاج الملت؛ مثلا أثناء تجفيف آتون؛ تخضع التركيبة نموذجيا cImashuku) ٠ أثتاء تبريد تركيبة ملت (Ja على أية DMS لحرارة بحيث تتبخر بعيدا كميات جوهرية من إن ميزة كبرى للاختراع -(DMSP) DMS من مصادر أولية DMS عادية؛ قد يتولد مزيد من في تركيبة الملت (قارن المثال DMS الحالي هي عدم تولد أو تولد قدر ضئيل جدا فقط» من (()e شكل en في الملت. يعتمد العديد من هذه الطرق على DMS جرى وصف طرق لخفض تركيز Y. معالجة الملت بالحرارة. معالجة الحرارة المذكورة قد تكون ببساطة تسخين الملت على سبيل الحر باستخدام البخار. بذلك؛ فإن معالجة الملت DMS المثال أثناء التجفيف في الفرن لتبخير الحر في الملت. مع هذاء تخفض هذه الطرق أساسا DMS بالبخار قد تخفض مستويات
Ladle بدرجة أقل. كما هو SMM الحر في الملت؛ ولكنها تؤثر في مستوى DMS مستوى تركيبات الملت؛ مستويات منخفضة Jia يفضل أن تشمل منتجات النبات من الاختراع؛ def Yo في تجسيد من الاختراع جرى إخضاع تركيبات الملت من الاختراع فقط .SMM 5 DMS من
لمعالجة محدودة تتضمن تطاير وإزالة DMS الحر بالبخارء أو كبديل لم يتم إخضاعها لمعالجة تتضمن تطاير وإزالة DMS الحر باستخدام البخار أثناء التجفيف في الفرن. في تجسيد من الاختراع؛ يفضل عدم معالجة الملت طبقا للاختراع بملح Ji cbromate potassium bromate أو .calcium bromate ° يمكن معالجة الملت إضافيا؛ Sle بالطحن وبذلك نحصل على ملت مطحون. لذلك؛ فإن منتج النبات طبقا للاختراع قد يكون عبارة عن أي نوع ملت؛ مثل ملت غير معالج؛ أو ملت مطحون؛ أو طحين من ذلك. يشمل الملت المطحون والطحين cada مكونات كيميائية للملت؛ تتضمن خلايا ميتة تفتقد القدرة على إعادة الإنماء. يفضل أن تشمل تركيبات ملت الاختراع في المعظم oF يفضل في المعظم oF يفضل أكثر ١ ٠ في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر 0,5 في المعظم؛ ١,7 Jie ميكروجرام/ جرام في المعظم من حر. (lla) يفضل أن تشمل تركيبات ملت الاختراع في المعظم 7؛ يفضل ١ في المعظم؛ يفضل أكثر ٠,# ميكروجرام/ جرام في المعظم من SMM في جاتب مفضل يوفر الاختراع تركيبات ملت تشمل في المعظم «Yor يفضل في المعظم Vou يفضل أكثر ٠٠١ في المعظم؛ Lia يفضل أكثر ٠ © في المعظم؛ YO (Jia في المعظم Vo جزء على البليون من DMS حر. إضافياء يفضل أن تشمل تركيبات ملت الاختراع في المعظم ؛ يفضل في المعظم 00s يفضل أكثر في المعظم You يفضل أكثر أيضا في المعظم ٠٠١ جزءٍ في المليون؛ وأيضا يفضل أكثر في المعظم ٠ 5 جزءٍ في المليون SMM يفضل أيضا أن تشمل تركيبات من الاختراع في المعظم ١٠0٠٠؛ يفضل في المعظم © يفضل أكثر في المعظم ١٠٠؛ أيضا يفضل أكثر في المعظم gia * ٠ في المليون DMSP “٠ -- في جانب آخر يتعلق الاختراع بتركيبات ملت أخضر تشمل في المعظم 0٠0 5؛ يفضل أكثر في المعظم You أيضا يفضل أكثر في المعظم ٠0٠١ أيضا يفضل أكثر في المعظم Laff 0 يفضل أكثر في المعظم (YOu مثلا في المعظم Vou جزءٍ في المليون DMSP يفضل أيضا أن Jedi تركيبات الملت الأخضر المذكورة في المعظم ١7٠١ يفضل في المعظم V0 يفضل أكثر في المعظم ٠٠١ أيضا يفضل أكثر في المعظم ٠ ؛ مثل في المعظم Yo YO جزء في المليون DMS > في AT cals فإن منتجات النبات طبقا للاختراع هي أشربة؛ Jie شراب شعير أو شراب ملت شعير. يمكن أيضا أن يكون منتج النبات هو خلاصة شعير أو ملت.
vv تكون منتجات النبات طبقا للاختراع هي تركيبات ورت محضرة من AT في جانب تسبب فقد كلي لنشاط MMT تركيبات ملت مشتقة من لبابات شعير تحمل طفرة في جين المثال 71؛ شكل *(ب)). يمكن تحضير الورت المذكور من لبابات ناقصة dail) MMT أو خلطات تشمل لبابات أخرى أيضا. يتعلق الاختراع أيضا بتركيبات ورق (adi MMT منه؛ وحده أو مختلط مع مكونات أخرى. قد تكون shal محضرة من شعير ناقص-00341؛ أو © تركيبات الورت المذكورة هي ورت أول؛ و/أو ثاني؛ و/أو إضافي. قد تكون تركيبات الورت تحتوي تركيبة ورت على dale عبارة عن ورت محلي؛ ورت مغلي؛ أو خليط من ذلك. بصفة قابلة للتخمر» وتكون الأخيرة أساسيا carbohydrates s amino nitrogen مستوى عال من توضح الطريقة العامة لتحضير ورت من ملت. بصفة A في الشكل maltose عبارة عن عامة؛ يحضر الورت بحضانة للملت مع ماء في عملية تكوين هريس. أثناء تكوين الهريس؛ قد ٠ مثلا مواد إضافية carbohydrate تدعم تركيبة الملت/ الماء مع تركيبات إضافية غنية مع ذرة؛ أو أرز. إن المواد الإضافية الحبيبية غير الملت معروفة عامة بأنها تحتوي على ud مستويات قليلة جدا من الإنزيمات؛ وذلك يجعل التدعيم مع الملت أو إنزيمات خارجية ضروريا لتحويمل السقر و/أو توليد خلاصسة:؛ متضيتنا توليد . حر amino nitrogen ٠
في أحد تجسيدات الاختراع؛ قد يكون منتج النبات عبارة عن شعير غير ملت؛ والذي قد
يكون dade على سبيل المثال كمادة إضافية أثناء تكوين الهريس. بصفة عامة؛ فإن الخطوة الأولى في عملية إنتاج الورت هي طحن الملت بحيث يصل الماء بدرجة زائدة إلى جسيمات الحبة في مرحلة تكوين الهريس- وقد يعتبر ذلك امتدادا لعملية ٠ تكوين الملت مع AI) بلمرة إنزيمية للمواد الخاضعة. أثناء تكوين الهريس» يحضن الملت المطحون مع سائل؛ مثل الماء. تكون درجة حرارة الحضانة Le) ثابتة (تكون هريس متساوي الحرارة)» أو تزداد تدريجيا. في تجسيد مفضل؛ لا تتجاوز درجة حرارة الهريس الأولية ٠/ا"مئوية؛ يفضل أن لا تتجاوز 69"مثوية؛ بذلك على سبيل JE) تتراوح درجة حرارة الهريس الابتدائية من ٠٠ إلى 19"مثوية؛ كما في حدود 00 إلى 19"مئوية؛ على سبيل المثال في Yo حدود 00 إلى 15"مئوية. إذا كانت درجة حرارة الهريس الابتدائية lle جداء فإنها سوف تؤثر في النشاط الإنزيمي للهريس وقد تخفض؛ أو حتى تزيل؛ نشاطات إنزيمية مرغوب فيهاء؛ Los ينتج die نوعية مختلفة من الورت. في أي من الحالتين؛ تتحرر المواد الخاضعة القابلة للذوبان
YA
الناتجة في تكوين الملت وتكوين الهريس في جزء السائل المذكور. يوفر ترشيح تالي فصل لسائل الورت والجسيمات الصلبة المتخلفة؛ يرمز إلى الأخيرة حبات مستنفذة. قد يرمز أيضا إلى الورت المذكور بأنه 'ورت أول". بعد الترشيح؛ يمكن الحصول على 'ورت ثاني" بالتطهير
Briggs et ساخن. توصف أمثلة غير مقيدة لإجراءات مناسبة لتحضير ورت بواسطة: cle مع (YAY) Houghetal. 5 (Y4AY) al. © والإضافي؛ ويخضع بعد ذلك للغليان. إن الورت غير (AL قد يتحد الورت الأول؛ المغلي. إما ورت أول نقي أو ورت متحدء يشار إليه أيضا بأنه 'ورت محلي"؛ بينما بعد الغليان قد يشار إليه 'ورت مغلي". إذا كان الورت سوف يستخدم في إنتاج بيرة» تضاف دائما مواد إضافة منكهة قبل الغليان. منهاء shal أيضا تحضير تركيبة الورت بحضانة لنباتات شعير ناقصة-2013117؛ أو (Say Ve غير ملت؛ أو أجزاء منهاء مع واحد أو أكثر من MMT مثل نباتات ناقصة إنزيمات مناسبة؛ مثل تركيبات إنزيم؛ أو تركيبات خليط إنزيم؛ على سبيل المثال يمكن أيضا تحضير تركيبة الورت باستخدام خليط ملت .Ultraflo or Cereflo (Novozymes) أو أجزاء من ذلك أو شعير غير ملت فقطء واختياريا إضافة واحد le ونباتات شعير غير (يفضل glucanases «amylases أو أكثر من إنزيمات مناسبة أثناء التحضير المذكور؛ تحديدا ١ «(arabinoxylanase ل xylanase و/أو «(glucanase =p -) ١ رأاحكت Sis =(¢-Y) أو خلطات إنزيم تشمل واحد أو أكثر من الإنزيمات سالفة الذكر؛ مثلاء «proteases lf 3 .(Novozymes) OndeaPro إضافة خليط إنزيم هريس ملت واستخدامه كمادة إضافية. بصفة A يمكن إضافة شعير الاختراع الحالي خاصة أكثر » يمكن استخدام شعير الاختراع مع ملت في أي اتحاد من أجل تكوين هريس؛ مع ve صفرء أو :٠٠١ = أو بدون إنزيمات تخمر؛ مثل؛ بدون تحديد نسب الشعير: الملت التي ماق أرى تفصف أى تقلا دقيقة ٠١ في طرق التخمر التقليدية؛ يغلى الورت لمدة طويلة؛ بصفة عامة في نطاق من وهو مركب DMS الأسباب لذلك أن الغليان الممتد الوقت يقلل كمية aad دقيقة؛ ١7١ إلى فإن الغليان ممتد الأمد غير مرغوب لعدد من الأسباب الأخرى؛ على Ja طيار. على أية Ye توفير طاقة وفيرة. إضافة لذلك؛ قد يؤدي الغليان allay سبيل المثال لأن الغليان ممتد الأمد غير مرغوبة. طبقا للاختراع الحالي؛ Strecker aldehyde المذكور إلى تولد نكهات إضافية
يمكن إنتاج ورت مع مستويات قليلة من DMS من شعير ناقص MMT حتى بدون غليان ممتد الأمد. لذلك؛ فإن الورت طبقا لتجسيد مفضل للاختراع يغلى لمدة £0 دقيقة في المعظم؛ أيضا يفضل أكثر ٠ دقيقة في المعظم؛ مثلا في المعظم VO دقيقة. من الجدير بالذكر أنه حتى عند غليان الورت بدرجة شديدة؛ يتولد أيضا DMS من DMSP مع مرور الوقت. ٠ للأهمية؛ فإن الورت Lida للاختراع الحالي يحتفظ بمستوى قليل من (DMS أقل جوهريا من ذلك الناتج بعد غليان ورت عادي. في تجسيد إضافي من الاختراع؛ يفضل عدم إخضاع الورت للغسيل مع carbon dioxide بعد غليان الورت وقبل التخمير. يفضل؛ أن تشمل تركيبات الورت من الاختراع أقل من 7١0 جزء في sll يفضل أقل ٠ .من YO جزء في البليون؛ يفضل أكثر أقل من Yo جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ٠ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ٠١ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر 0148 لا يمكن تحديده و/أو أقل من 5٠ جزء في البليون» يفضل أقل من 5٠0 جزء في البليون؛ يفضل أكثر أقل من To جزء في البليون؛ أيضا يفضل LAST أقل من Yo جزء في البليون» أيضا يفضل أكثر أقل من ٠١ جزء في البليون؛ ٠ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر SMM لا يمكن تحديده. إن منتجات النبات؛ أو أجزاء منهاء من الاختراع الحالي قد تشكل أيضا تركيبات طعام؛ تركيبات إطعام؛ وتركيبات مادة خام عطرية تشمل نباتات pad تحمل طفرة في الجين المشفر 1. تسبب فقد كامل لنشاط MMT قد تكون تركيبات الطعام؛ مثلا؛ لكن بدون تحديد؛ عبارة عن لبابات شعير وغير ملت؛ طحين Gad ued عصيدة؛ خلطات حبية تشمل شعير؛ ٠ - منتجات صحية؛ Jie مشروبات تشمل شعير؛ أشربة شعير؛ وتركيبات شعير All) مطحونة أو منبثقة. تتضمن تركيبات الإطعام؛ على سبيل المثال؛ تركيبات تشمل لبابات شعير» و/أو طحين شعير. إن تركيبات مادة خام عطرية موصوفة هنا أدناه. يتعلق الاختراع أيضا بخلطات من منتجات النبات الموصوفة هنا. على سبيل المثال؛ يتعلق الاختراع في جانب واحد بتركيبة محضرة بخليط من: )١( Yo تركيبة تشمل نبات pad ¢ أو جزء منه؛ يحمل طفرة في الجين المشفر MMT تسبب فقد كامل لنشاط MMT و (7) تركيبة ملت محضرة من لبابات ناقصة-11141.
في جانب ciate يتعلق الاختراع الحالي؛ بمشروبات؛ يفضل أكثر بمشرويات مشتقة من الملت ؛ Jia بيرة تحتوي على مستويات قليلة من (DMS حيث تحضر المشروبات المذكورة باستخدام شعير ناقص MMT أو shal منه.
لذلك؛ في تطبيق مفضلء يتعلق الاختراع بمشروبات؛ يفضل أكثر بمشروبات مشتقة من
٠ الملت؛ مثل البيرة؛ تحتوي المشروبات أو البيرة المذكورة على:
)١( أقل من ٠ جزء في البليون» يفضل أقل من YO جزء في البليون؛ يفضل أكثر أقل من Yo جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من Vo جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ٠١ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ Lad يفضل أكثر 4 غير قابل للتحديد؛ و/أو
١ (7) أقل من 5٠ جزء في sald) يفضل أقل من 5٠ جزءٍ في البليون؛ يفضل أكثر أقل من ٠؟ جزء في البليون» أيضا يفضل أكثر أقل من ٠١ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من ٠١ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ وأيضا يفضل أكثر SMM لا يمكن تحديده.
يفضل أن يحضر المشروب بتخمر شعير ناقص MMT أو أجزاء منه؛ أو خلاصات منه؛
١ على سبيل المثال بتخمر ورت ناتج باستخدام ملت ناتج من شعير ناقص MMT وحده أو في اتحاد مع مقومات أخرى.
على أيه Js في تطبيقات أخرى للاختراع» يكون المشروب مشروب غير متخمر؛ مثلا ورت؛ يفضل ورت محضر من ملت ناقص MMT يشمل الاختراع الحالي أيضا تحضير المشروب المذكور من نباتات شعير غير ملت أو أجزاء منها؛ يفضل من نباتات شعير غير
.ملت ناقصة MMT أجزاء منها.
قد يكون المشروب مشروب غير كحولي؛ مثل بيرة خالية الكحول أو أنواع أخرى من مشروبات غير calcoholic مثل مشروبات ملت غير كحولي؛ .maltina Jie
يفضل؛ على أية حال؛ أن يحضر المشروب المذكور من تركيبة ملت تشمل لبابات شعير ناقصة MMT يفضل أكثر؛ أن يكون المشروب المذكور بيرة. قد تكون هذه هي أي نوع من
Yo البيرة المعروفة للماهر في الفن. في أحد التجسيدات؛ تكون البيرة؛» على سبيل JU) بيرة كبيرة. يفضل أن تكون Ball مخمرة باستخدام تركيبة ملت تشمل شعير نامي ناقص MMT قد تشمل أيضا تركيبة الملت؛ على أية حال؛ مكونات (al على سبيل المثال حبوب أخرى نابتة
١ و/أو الجاودار» أو مواد خام غير نباتية تشمل cad أو غير نابتة؛ مثل شعير نوع بري؛ سكريات أو تركيبات مشتقة من مواد خام متحولة أو غير متحولة إلى ملت؛ تتضمن تركيبات شراب. لذلك؛ حتى SMM متضمنا DMSP مع مرور الوقت قد يتولد من DMS يعتقد عموما أن
DMS أوليا في المشروب؛ فعندئذ قد يتراكم DMS من laa عند عدم وجود أو وجود قدر ضئيل © مع مرور الوقت. على أية حال؛ إنه هدف للاختراع الحالي أن يوفر مشروبات تحتوي على حتى بعد التخزين. DMS قدر ضئيل منء أو لا تحتوي؛ على طبقا لذلك؛ فإن هدف الاختراع الحالي أن يوفر مشروبات مشتقة من نبات شعير؛ مثل بيرة يفضل أكثر ald) في ea YO جزء في البليون» يفضل أقل من Vo تحتوي على أقل من جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من 10 جزء في البليون؛ أيضا يفضل Yo أقل من ٠ جزء في البليون؛ أيضا يفضل أكثر أقل من © جزء في البليون؛ أيضا يفضل ٠١ أكثر أقل من يفضل أسبوعين على (J غير قابل للتحديد بعد التخزين لمدة أسبوع واحد على DMS أكثر يفضل أكثر ؟ أسابيع على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر ؛ أسابيع على الأقل؛ مثلا في (JE) شهرء ١١ إلى ؟ شهور؛ مثلا في نطاق ؟ إلى +7 شهور؛ مثلا في نطاق + إلى ١ نطاق من في Jie ؟*مئوية؛ ٠0 إلى geo مثلا لأكثر من سنة. يتم التخزين عند درجة حرارة في نطاق 0 ؟"مئوية. ٠0 إلى Aggro نطاق إضافة لذلك؛ يفضل أن تتميز المشروبات طبقا للاختراع الحالي بخصائص مذاق فائقة. بالتحديد؛ يفضل أن تتميز المشروبات طبقا للاختراع بكونها أكثر أروماتية وعطرية من البيرة شكل 1). بدون التقيد بالنظرية؛ يوفر الاختراع الحالي نظرية VY "العادية' المقابلة (انظر مثال و51 يسبب الإحساس الزائد بالتكهات DMS أن المستويات القليلة من أو حتى عدم وجود؛ ٠ الأروماتية والعطرية. بصورة مفضلة؛ تتحدد النكهات الأروماتية والعطرية بواسطة مجموعة خبراء تذوق محترفين. في التجسيدات التي يكون فيها المشروب هو البيرة؛ عندئذ يفضل أن تتكون مجموعة خبراء الاختبار من متذوقي بيرة محترفين. هناء يشار أيضا إلى "مجموعة خبراء تذوق بيرة محترفين" بأنها "مجموعة خبراء تذوق مدربين"؛ أو 'مجموعة خبراء تذوق بيرة متخصصين". Yo بذاته له تأثير وفير على خواص مذاق البيرة؛ فقد DMS برغم وجود معلومات جيدة عن أن متعددة sulfur يظهر بعض خبراء التذوق ميلا إلى تسجيل تقييمات غير دقيقة لنكهات تشبه
الأوجه. إن السبب ببساطة أن قائمة الخبراء تظل "غير plas بدرجة ملائمة نتيجة للاختلافات في أجسامهم بالنكهة؛ لقد تم حل هذه العقبة المعقدة؛ حسب الوصف هنا؛ بترسيخ مجموعة خبراء متخصصين مدربين بشدة من 9 على الأقل من متذوقي Bull مدربين على التقييم بدرجة حرجة لخواص مذاق alcohols cesters العلياء مكونات csulfur وقوام البيرة.
2 إن مجموعة خبراء التذوق لابد أن تتكون من 4 أشخاص على الأقل؛ يفضل في نطاق 1 إلى ٠١ شخص؛ مثلا 4 إلى ١١ شخص؛ مثلا ٠١ أشخاص. لابد أن يكون كل عضو مجموعة تذوق بصورة مفضلة مدرب بشدة؛ بالتحديد لابد أن يكون كل شخص ماهرا في تقييم خواص مذاق alcohols «esters العلياء مكونات csulfur وقوام البيرة. يمكن عندئذ لكل عضو Ae gens تذوق تقييم ملحوظات النكهة المختلفة على نظام درجي من صفر إلى 20 إن معايير
٠ النكهة يفضل أن تنتقى من المجموعة المتكونة من شدة المرارة؛ نوعية المرارة» القوام؛ التوازن؛ الانتعاش؛ قابلية الشرب؛ الأروماتية؛ alcoholic cestery المذيب؛ الزهرية؛ التي بها إضافات مسكرة» الراتتجية؛ نكهة الملف؛ الحبيبية»؛ الكراميل؛ الاحتراقية؛ sulfury phenolic الحمضية والحلاوة.
في استخدام الطريقة المذكورة ode يفضل أن تعطى مشروبات الاختراع درجة أعلى
٠ لواحدة على (EY) يفضل ؟ على الأقل؛ يفضل أكثر © على JE يفضل أكثر ؛ على الأقل» يفضل أكثر أيضا لكل من الخواص الأروماتية/ العطرية المنتقاة من المجموعة المتكونة من الأروماتية» cestery ©:ا2160:0/ المذيب»؛ الزهرية؛ والمسكرة مقارنة بمشروب له محتوى ethanol مشابه؛ ومحضر من شعير نوع بري؛ يفضل من cov.
Power عند ضبط أنماط ester/alcohol لكل من المشروبين لكي تكون متشابهة؛ وتكون المشروبات محضرة بنفس
٠ الطريقة. إضافة لذلك؛ باستخدام الطريقة المذكورة أعلاه؛ يفضل أن تكون لمشروبات الاختراع درجة أعلى من واحدة على الأقل؛ يفضل ١ على الأقل؛ يفضل أكثر كل من الخصائص العامة الثلاثة المنتقاة من المجموعة المتكونة من التوازن» الانتعاش» وقابلية الشرب مقارنة بمشروب به محتوى ethanol مشابه؛ ومحضر من شعير نوع بري؛ يفضل من cov.
Power عند ضبط
vo أنماط ester/alcohol لكل من المشروبين لتكون متشابهة.
باستخدام الطريقة الموصوفة أعلاه؛ يفضل أن تكون لمشروبات الاختراع قيمة درجة من ١ على الأقل؛ يفضل أكثر ١,7 على الأقل Jel من أجل الانتعاش و/أو estery مقارنة
بمشروب به محتوى ethanol مشابه؛ ومحضر من شعير نوع بري؛ يفضل من cv.
Power عند ضبط ester Jalal لكل من المشروبين لتكون متشابهة. في سياق الطلب الحالي؛ يعتبر نمط ester/alcohol متشابها عند ضبط المركبات التي عددها ١١ المذكورة في الجدول ١ إلى مستويات متشابهة (انظر مثلا مثال ١)؛ أي؛ تحتوي © المشروبات على نفس الكمية؛ + 270 من VY مركب المذكورين في جدول .١ يعتبر محتوى ethanol متشابها إذا كان هو نفسه؛ + JY يفضل نفسه + .7٠١ لذلك؛ يفضل أن مشروبات الاختراع؛ عند ضبطها إلى محتوى من ١١ مركب التالية (انظر القائمة في جدول ١ ومثال 7): ١ acetaldehyde (V) جزء في المليون + Ye YE ethylformiate (Y) ١ ,0 جزء في المليون + Ye ethylacetate )١( ؛,؟؟ جزءٍ في المليون + ٠0 77؛ isobutylacetate (£) 5 ,؛ جزء في المليون + Yo ٠,4 1-propanol (©) جزء في المليون + 778؛ isobutanol )1( 7 جزء في المليون + AY VEY isoamylacetate (V) Vo جزء في المليون + Yo ٠," 1-butanol (A) جزء في المليون + Yo OF isoamylalcolhol (4) جزءٍ في المليون + AY VY ethylhexanoate (V+) ,+ جزء في المليون + 0٠77؛ ٠.0٠ n-hexylacetate (VV) جزء في المليون + 770؛ cthyloctanoate (VY) 9 0.77 جزء في المليون JY et تتميز بأنها لها قيمة درجة ١ على الأقل؛ يفضل ١ على الأقل؛ يفضل أكثر 3 على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر ؛ على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر 0 على الأقل. أيضا يفضل أكثر كل الخواص التالية sic) التحديد حسب الوصف في مثال 7): )١( 'متوازنة" (درجة Y,0 على (JY) يفضل 7,7 على الأقل)؛ ¥0 () 'الانتعاش” (درجة To على JST يفضل YY على الأقل؛ يفضل أكثر 7,9 على JS) أيضا يفضل أكثر 3,١ على الأقل)؛
ALE (V) الشرب" (درجة Y,0 على الأقل؛ يفضل 7.7 على الأقل؛ يفضل أكثر Ya على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر ؟ على الأقل)؛ )£( "أروماتية" (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل YY على الأقل؛ يفضل أكثر 7,5 على الأقل)؛ ° )©( "عاو" (درجة *, على الأقل؛ يفضل YY على الأقل؛ يفضل أكثر 3,9 على الأقل؛ أيضا يفضل أكثر 3 على الأقل)؛ "ude alcoholic” (1) (درجة 1,0 على الأقل)؛ (V) زهرية' (درجة ١,7 على الأقل؛ يفضل ١,9 على الأقل)؛ (A) 'منكهة بالجنجل" (درجة ٠,8 على الأقل)؛ Ve يفضل أكثر الخواص التالية (عند التحديد حسب الوصف في مثال 1): )١( "الانتعاش": (درجة Y,0 على الأقل؛ يفضل 7,7 على الأقل؛ يفضل أكثر 3,9 على (JY أيضا يفضل أكثر 3,١ على الأقل)؛ ALE (Y) الشرب" (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل 7,7 على الأقل؛ يفضل أكثر Ya على (JS) أيضا يفضل أكثر 3 على الأقل)؛ Vo (7) "أروماتية" (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل 7,7 على JE يفضل أكثر 7,5 على الأقل) ¢ estery” (£) (درجة 7,5 على الأقل؛ يفضل 7,7 على الأقل؛ يفضل أكثر va على JY) أيضا يفضل أكثر 3 على الأقل)؛ oll] يفضل أن يكون للمشروب طبقا للاختراع: )١( A درجة "انتعاش (88800655)" 7,5 على الأقل بمقياس درجي صفر إلى © عند التقييم بواسطة مجموعة خبراء مذاق محترفين؛ و/أو (7) درجة TLE شرب (drinkability) 1,8 على الأقل على مقياس درجي صفر إلى * عند التقييم بواسطة مجموعة خبراء مذاق محترفين؛ و/أو )9( درجة "نكهة أروماتية Y,0 "(aromatic flavor) على الأقل على مقياس درجي صفر Ye إلى © عند التقييم بواسطة مجموعة خبراء مذاق محترفين؛ Ss (4) درجة "نكهة flavor) ester (عا»وع)” Y,0 على الأقل على مقياس درجي صفر إلى 0 عند التقييم بواسطة خبراء مذاق محترفين؛
تع
بشرط أن نمط ester/alcohol للمشروب يكون حسب الإشارة في المثال 7؛ جدول ١ في العمود
07 ناقص (null MMT) المضاف إليه الخلطة ١ والخلطة 7. بصفة خاصة؛ يعلن الاختراع الحالي عن أن وجود DMS في مشروب قد يخفي المذاق 7©. طبقا dN فإن غرض الاختراع الحالي أن يوفر مشروبات لها درجة أكبر من المذاق costery © حيث يتم تقييم المذاق المذكور بواسطة خبراء مذاق مدربين- يفضل خبراء مذاق مدربين عددهم 9 على الأقل- مقارنة مع المشروب المحضر بنفس الطريقة؛ لكنه يشمل على الأقل ٠٠١ جزءٍ على البليون (DMS مثلا في نطاق ٠٠١ إلى ein Tor على البليون DMS أو مقارنة مع مشروب محضر بنفس الطريقة؛ لكنه يشمل على الأقل 5٠ جزء على البليون ؛ مثلا في نطاق من 5٠ إلى ٠٠١ جزء على البليون. إن الدرجة الأعلى المذكورة
8 نقطة على الأقل؛ مثلا ١,7 يفضل (JY) نقطة على ١,5 Ji يفضل أن estery Gaal) على نطاق درجي من صفر إلى estery نقطة على الأقل أو أكبر من ذلك؛ عند تحديد المذاق حسب الوصف أعلاه. ©
يتعلق الاختراع أيضا بطرق لإنتاج المشروبات المذكورة أعلاه؛ يفضل أن تشمل الخطوات: )١( توفير تركيب ملت تشمل لبابات ناقصة MMT نابتة؛
(V) Yo تصنيع تركيبة ملت المذكورة في شكل مشروب؛ بذلك نحصل على مشروب يحتوي على أقل من 7١0 جزءٍ على البليون؛ يفضل أقل من Yo جزء على البليون؛ يفضل أكثر- أقل من eda ٠١ على البليون؛ أيضا يفضل JST = أقل من ٠ جزء على البليون» أيضا يفضل أكثر- أقل من ٠١ جزء على البليون؛ أيضا يفضل أكثر- أقل من © جزءٍ على البليون؛ أيضا يفضل DMS ST لا يمكن تحديده.
7 في تجسيد مفضل؛ يكون المشروب بيرة (©056. في هذه الحالة؛ يفضل أن تشمل خطوة المعالجة تحضير ورت من تركيبة ملت المذكورة؛ lie بأي من الطرق الموصوفة هنا أعلاه؛ وتخمير ورت المذكور.
بصفة عامة؛ يمكن تصنيع البيرة من حبات شعير ملت و/أو غير ملت. إن ملت؛
بالإضافة إلى مواد الإضافة المنكهة والخميرة؛ تساهم في نكهة ولون البيرة. إضافة لذلك؛ يقوم
cle YO بوظيفة مصدر Su قابل للتخمر؛ Lady كمصدر لأجل إنزيمات. يبين شكل + التمثيل التخطيطي للعملية العامة لإنتاج pull بينما يوجد وصف مفصل لطرق لتكوين ملت والتخمر؛
.(Y4AY) Hough etal. 5 )١٠1481( Briggs etal. في المطبوعات بواسطة: Sia
هناك طرق عددية يتم تحديثها بانتظام متوافرة لتحليلات الشعير؛ ملت؛ ومنتجات البيرة. تتضمن هذه؛ على سبيل المثال؛ بدون تحديد: American Society of Brewing )4 ©) American Association of Cereal Chemists nstitute of Brewing s «(}44A) European Brewery Convention + (Y44Y) Chemists .)١147( ٠ يلاحظ استعمال إجراءات خاصة كثيرة من أجل أداة تخمر خاصة؛ وتتعلق التباينات الأكثر أهمية بتفضيلات المستهلك المحلي. يمكن استخدام أي من تلك الطرق لإنتاج البيرة مع الاختراع الحالي. يمكن الحصول على تركيبة ملت للمشروبات سالفة SAN = متضمنة مثلا بيرة» مشروبات Ye ملت أو ورت غير متخمر؛ على سبيل المثال؛ بأي من الطرق الموصوفة هنا أعلاه. يمكن تحضير ورت من تركيبة ملت المذكورة. يفضل أن تشمل الخطوة الأولى لإنتاج البيرة من ورت غلي ورت المذكور. أثناء الغليان؛ يمكن إضافة مقومات Jie opal أشربة حبية (cereal syrups) أو إضافات منكهة «(hops) حيث يوفر المكون الأخير السمات النموذجية اللاذعة والأروماتية للبيرة. إن غلي ورت يسبب Lead ٠ تجمع بين Proteins 5 polyphenols متغيرة الطبيعة؛ والتي قد تتربسب أثناء الأطوار التالية في إنتاج البيرة. أيضاء فإن غليان ورت قد يسبب تبخير للمركبات الطيارة (volatile «compounds) متضمنة .DMS على il حال كما هو مذكور lel فإن ورت المحضر من شعير ناقص MMT يحتوي على قدر ضئيل؛ أو لا يحتوي؛ على (DMS وذلك يجعل من الممكن التقليل جوهريا لزمن غليان ذلك ورت. بعد call ينقل ورت ٠٠ إلى أوعية تخمر تحتوي على خميرة؛ يفضل خميرة مخمرة من النوع Saccharomyces 1065. سوف يتخمر ورت لأي فترة زمنية مناسبة؛ عامة في نطاق من ١ إلى ٠٠١ يوم. بعد ذلك يمكن معالجة البيرة إضافياء على سبيل المثال تبريدها. يمكن أيضا ترشيحها و/أو توسيع نطاقها- وهي عملية تسبب وجود رائحة سارة ونكهة أقل شبها بالخميرة. يمكن Yo أيضا إضافة مواد إضافة (additives) إضافة «lA يمكن إضافة ,(00. chal يمكن بسترة (pasteurized) البيرة وترشيحها؛ قبل تعبئتها في زجاجات أو علب.
ty هناك طرق كثيرة متوافرة لتحديد ما إذا كان نبات الشعير أو منتج نبات محضر من نبات سوف تشمل منتجات MMT تسبب الفقد الكلي لوظيفة MMT شعير يحمل طفرة في جين من النبات المستعمل لإنتاجها. لذلك؛ سوف genomic DNA على الأقل بعض dale النبات لكن أيضا تشمل خلاصات الشعير أو cgenomic DNA يحتوي ملت على كميات كبيرة من من الشعير أو ملت المذكور. أيضا فإن المشروبات genomic DNA «Cys ملت؛ مثل ٠ من النبات المذكور. بتحليل genomic DNA قد تشمل gyal) Jia المعتمدة على الشعير»؛ في منتج نبات؛ يمكن تحقيق ما إذا كان النبات المحضر منه منتج النبات يحمل طفرة DNA يمكن أن تكون الطفرة المذكورة؛ مثلاء هي MMT تسبب الفقد الكلي لوظيفة MMT في جين وظيفي MMT الموصوفة هنا أعلاه في الجزء 'فقد إنزيم MMT أي من الطفرات في جين بأي طريقة مفيدة؛ مثلا genomic DNA وومل". يمكن تحليل of functional MMT enzyme) ٠ عند افترارض طفرة PCR متضمنة طرق تعتمد على « pail) الترتيب أو بطرق تعتمد على يمكن SNP فعندئذ يمكن استعمال تحليل تعدد شكلي؛ مثلا تحليل (MMT خاصة في جين إن الماهر يمكنه تكييف .١7و ١١ إجراء ذلك التحليل حسب الوصف هنا لاحقا في المثالين بادئة sale الخاص الموصوف في هذه الأمثلة للاستخدام مع طفرات أخرى أو SNP تحليل أخرى. ٠ عندما تحضر فقط منتجات النبات المذكورة أعلاه من نباتات شعير تحمل طفرة في جين الغياب لأجل Julie الوجود Load فعندئذ يدل MMT تسبب الفقد الكامل لوظيفة MMT على ما إذا كان منتج النبات المذكور MMT Protein شعير و/أو MMT mRNA بروتين طبقا لذلك» يمكن إجراء اختبار لمنتج النبات بتحليل تبقع MMT محضرا من شعير ناقص أو «Northern أو بتحليل تبقع «RT-PCR آخرء أو بواسطة Protein أو تحليل «western ٠ أخرى. إن تلك التحليلات مفيدة تحديدا عندما يكون منتج النبات هو ملت. mRNA بتحليلات DMS 3 SMM
SMM في منتج نبات بأي طريقة مناسبة. يمكن تحديد DMS 5 SMM يمكن تحديد كمية وظيفي MMT أساسيا حسب الوصف هنا أعلاه في الجزء 'تحضير نبات شعير مع فقد كلي يوصف فيه تحديد Cua (Preparing barley plants with a total loss of functional MMT) ~~ Ye (OPA باقترانه مع مركب»؛ مثل SMM في عينة شعير. لذلك؛ يمكن تحديد SMM مستويات
ب وتحديد الاستشعاع؛ Sle باستخدام نطاق 101.0. بالنسبة للقياس الكمي؛ يمكن تحديد منطقة الرسم الكروماتوجرافي المقابلة لذروة SMM من أجل قياس أكثر دقة؛ يفضل تحديد كميات كل من DMSP 5 DMS (مثل «(SMM المركب الأخير مقاس DMS Jie بعد التنشيط» باستخدام تحليل كروماتوجرافي غازي شعري © عالي الاضمحلال. يحدد 0148 الكلي في عينات ورت أو بيرة هنا بأنه المحصلة الكمية لمركب DMS الحر وأشكال مصدره الأولي؛ المسمى DMSP باستخدام هذا التحديد؛ يمكن تحديد كمية DMSP في عينة ورت أو بيرة على أنها الفرق بين DMS الكلي (مقاس في العينة Aad) يفضل في عينة مغلية عند شروط قلوية لمدة ساعة واحدة)؛ و0148 الحر (مقاس في العينة غير المغلية). يبين المثال 6 بالتفصيل الطرق المفضلة لقياس مستويات DMS الكلي ٠ والحر. تكوين طفري كيميائي لتوليد نباتات شعير تحمل طفرة في جين MMT تسبب الفقد الكلي لنشاط MMT طبقا للاختراع الحالي؛ يمكن تحضير عدد كبير جدا من طفرات الشعير بأي طريقة تكوين طفري مناسبة؛ على سبيل JU باستخدام تكوين طفري كيميائي للبابات الشعير- وهي طريقة ٠ معروفة بأنها تحث الطفرات عشوائيا. يمكن إجراء تكوين طفري للشعير باستخدام أي مادة كيميائية تكون طفرة. يفضل؛ على أية حال؛ أن يتم ذلك بمعالجة اللبابات مع NaN; (انظر شكل o(V وترك اللبابات الحية لكي تنبت؛ ثم يتم تحليل نباتات النسل. يحتوي جيل النبات lil من اللبابات الخاضعة للطفرة؛ المشار إليه MO على هجائن مغايرة zygote لأي طفرة محددة. إن نباتات النتاج المجمعة بعد التلقيح الذاتي يشار إليها الجيل (م١)؛ وتنفصل فيها |٠٠ طفرة محددة إلى zygotes المغايرة و0165ع7< المتماثلة المقابلة. إن معالجة لبابات الشعير مع NaN; لا يساوي معالجة خلية شعير وحيدة؛ لأن اللبابات بعد المعالجة سوف تحتوي على بعض الخلايا غير الطفرية وتشكيلة من الخلايا التي بها طفرات Cage .DNA تفقد الطفرات في أنسال الخلية التي لا تنتج خط الجرثومة؛ بمعنى أن الهدف هو استهداف الجين الطفري للخلايا القليلة التي تنمو في أنسجة تناسلية؛ وذلك يساهم في نشوء Ye الجيل (م١). لتحديد الكفاءة الكلية للطفرة» يمكن عد الهجائن المصابة بالمهاق والنباتات المصابة بالمهاق في الأجيال (م صفر) و(م١)؛ على الترتيب. إن تسجيل عدد الطفرة كوظيفة للنباتات
£9 الحية يعطي تقديرا لكفاءة الطفرة؛ بينما أن تسجيل عدد الطفرة كوظيفة للبذور المعالجة يوفر القياس المتحد لكل من كفاءة الطفرة وقتل اللبابة. يلاحظ أن الخلايا لها آليات ضمانة جودة عند كل خطوة فعليا من إظهار الجين؛ ربما لتخفيف حدة تأثيرات الطفرات المتلفة. إن المثال الذي تمت دراسته جيدا في سويات النواة هو © تحلل mRNA بواسطة- غير إحساس؛ المسمى (NMD الذي يمنع تكون Proteins خطيرة بدرجة قوية ومبتورة بصورة مبكرة ٠٠١١ «Carmichael 5 Magquat) الم اع لك .)٠٠١١ في (NMD يتحدد codon إنهاء بأنه غير مكتمل بواسطة مكانه بالنسبة لعناصر التيار الهابط المزيلة للثبات. إن الطفرات التي تولد codons إنهاء (غير إحساس) غير مكتملة؛ المسماة (PCTs تزيد أحيانا مستويات النسخ المجدولة تبادليا التي تفلت من الطفرات المؤذية؛ وبذلك ٠ تؤمن بدرجة قوية وظيفة Mendell) Protein وعاعنط .))٠٠١١( تناسل النيات إن نمو المحصول يمكن رؤيته كعملية طويلة تبداً مع إدخال سمة جديدة. من منظور مولد نبات؛ فإن هذه الخطوة غالبا ما تنتج نبات له نمط كلي من السمات الزراعية المطلوبة بدرجة أقل مما يحدث مع التشكيلات التجارية الحالية. في تجسيد مفضل للاختراع الحالي؛ فإن ١ الغرض طبقا لذلك هو توفير نباتات شعير مفيدة زراعيا تحمل طفرة في جين MMT تسبب الفقد الكلي لأجل إنزيم MMT الوظيفي. بالإضافة إلى سمة نقص MMT هناك عوامل أخرى يمكن اعتبارها أيضا في الفن لتوليد تشكيلة شعير ملتي تجارية؛ تتضمن؛ بدون تحديد إنتاجية اللبابة؛ مقاس Ab ومعايير تتعلق بأداء تكوين ملت أو أداء التخمر. لأن الكثير من- إن لم يكن كل- تلك السمات خاضعة ٠ للتحكم الوراثي» فإن الاختراع الحالي يوفر Lad أنواع شعير حديثة؛ متماثلة zygotes عالية الإنتاجية Say تحضيرها من تزاوجات مع نباتات الشعير ناقصة-301/71. إن لبابات نباتات الشعير تلك توفر مادة خام جديدة بدون إنزيم MMT وظيفي. إن مولد الشعير الماهر سيكون قادرا على إحداث تزاوج لنبات شعير ناقص MMT من الاختراع مع نباتات شعير أخرى» وبالتالي انتقاء وإنماء أجيال لها سمات تنتج أنواع فائقة. تعتبر تلك الأجيال جزءا من الاختراع Yo الحالي. بطريقة edly يمكن لمولد الشعير أن يستعمل نباتات الاختراع الحالي من أجل تكوين طفري إضافي لتوليد أنواع جديدة مشتقة من شعير ناقص MMT
يمكن استعمال نباتات الشعير طبقا للاختراع الحالي في مجهودات التناسل طبقا لأي برنامج مناسب. إن غرضا Hal للاختراع الحالي هو توفير نباتات شعير ممتازة زراعيا تشمل سمة نقص MMT طبقا لذلك؛ يتعلق الاختراع الحالي أيضا بطرق لإنتاج نبات شعير جديد ناقص MMT © بتزاوج نبات شعير أصلي أول مع نبات شعير أصلي (ol حيث يكون النبات الأول أو الثاني هو شعير ناقص MMT إضافياء يمتل كل من نبات الشعير الأصلي الأول والثاني نوع شعير ناقص 24211. «iM فإن أيا من الطرق التالية المستخدمة تشكيلة شعير ناقص-1011 هي جزء من الاختراع: الذاتية؛ التزاوج العكسي؛ التزاوج مع مجموعات؛ الخ. إن كل النباتات الناتجة باستخدام تشكيلة شعير ناقص MMT كجيل «al هي في نطاق هذا الاختراع» متضمنة تلك ٠ النباتات النامية من تشكيلات مشتقة من تشكيلة شعير ناقص MMT يمكن أيضا استخدام شعير ناقص MMT من أجل التحويل الجيني في تلك الحالات التي يتم فيها إدخال DNA خارجي وإظهاره في نبات أو نسيج ناقص MMT (Sa استخدام طرق التزاوج العكسي؛ مع الاختراع الحالي لإدخال سمة MMT- aii لنبات شعر طفري في تشكيلة أخرى؛ مثلاء في نوع al » مثلا في Sev.
Scarlett -cv.
Jersey | ٠ وكل منهما نوع شعير ملتي معاصر عالي الإنتاجية. في بروتوكول تزاوج عكسي قياسي؛ فإن التشكيلة الأصلية ذات الأهمية؛ أي؛ النبات الأصلي المتكرر موضع الأهمية؛ تتزاوج مع تشكيلة ثانية (أي نبات أصلي غير متكرر)؛ تحمل الجين الوحيد الهام المراد نقله. إن نباتات النسل الناتجة ناقصة-1447 من هذا التزاوج تتزاوج بعد ذلك مع النبات الأصلي المتكرر؛ وتكرر هذه العملية حتى الحصول على نبات شعير حيث يتم أساسيا استرجاع كل Ye السمات المميزة الخاصة بالنبات الأصلي المتكرر في النبات المتولد؛ بالإضافة إلى التشييد الجيني المنقول للسمة ناقصة MMT للنبات الأصلي غير المتكرر. في النهاية؛ فإن نبات التزاوج العكسي المتولد الأخير يتذوت ليعطي نباتات جيل متناسل نقي ناقص MMT إن وجود نبات أصلي متكرر مناسب مفضل في إجراء التزاوج العكسي الناجح؛ يتضمن الهدف منه إدخال سمة نقص MMT في التشكيلة الأصلية. لتحقيق هذاء؛ يتم تعديل التشييد YO الجيني للتشكيلة المتكررة مع تلك للسمة ناقصة MMT من النبات الأصلي غير المتكررء بينما يتم أساسيا استبقاء كل الخواص الوراثية من التشكيلة الأصلية. برغم أن طرق التزاوج العكسي
سائد؛ فمن الممكن إجراء allele مبسطة عند تخصيص الصفة الوراثية المراد نقلها بواسطة متنحية. MMT تزاوج عكسي من أجل سمة ناقصة تشمل طريقة لتعجيل عملية تناسل النبات انقسام أولي لطفرات متولدة باستخدام مزرعة نسيج وتقنيات تجديد تولد. لذلك؛ يوفر جانب آخر من الاختراع الحالي خلاياء؛ والتي- عند
Salil) على سبيل المثال؛ قد يشمل MMT النمو والتباين- تنتج نباتات شعير بها سمة نقص © خصب أو استخدام طرق زراعة بوغ صغير. Hie تزاوجات تقليدية؛ تحضير نباتات مشتقة من يوفر أيضا تجسيد للاختراع الحالي نباتات شعير لا تحمل فقط طفرة في الجين لكن أيضا واحدة أو أكثر من طفرةٍ (طفرات) MMIT تسبب الفقد الكلي لنشاط MMT المشفر إضافية مفيدة. تتضمن تلك الطفرات الإضافية؛ على سبيل المثال؛ طفرات في جين الشعير
LOX-1 مثل طفرة تسبب وجود مستوى أقل من نشاط clipoxygenase-1 (LOX-1) المشفر ٠
Douma, A.C. et (مثلا الطفرة الموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية رقم 11369415 إلى أي من الطفرات المعلتة في براءة Jie (LOX-1 )؛ أو طفرة تسبب الفقد الكامل لوظيفة للطلب الدولي PCT أو طلب براءة اختراع 1470٠06 الاختراع الأمريكية رقم genomic بصفة خاصة طفرات تشمل ترتيب (Breddam, K. et al. إلى ٠٠١١734 أو تعريف الترتيب رقم: 1 من براءة Y للجين المشفر 1076-1 طبقا لتعريف الترتيب رقم: ١
Breddam. K. etal إلى 16700٠06 الاختراع الأمريكية رقم إن ملت ناقص-1.0721» حسب الوصف في براءات الاختراع وطلبات براءات الاختراع مادة خام لتجفيف آتون عند درجة حرارة منخفضة في عملية atl المذكورة أعلاه؛ يوفر» متحدة يمكن؛ على أية MMT تكوين ملت من الشعير. إن طفرة ثنائية ناقصة-1.076-1 وناقصة
MMT 5 LOX-1 حالء؛ أن تكون فائقة ومفيدة للغاية في صناعة التخمر لأن كلا من نشاط XY: سيصبح خامدا. يمكن الحصول على نباتات الشعير تلك بتزاوج نباتات شعير طبقا للاختراع أو طلب براءة اختراع 470٠06 الحالي مع تلك الموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية رقم .Breddam, K. etal إلى ٠٠١٠ /١897974 للطلب الدولي 1 الأمثلة توضح الأمثلة هنا التجسيدات المفضلة للاختراع؛ ولا يجب اعتبارها مقيدة للاختراع. Yo nucleic إذا لم يحدد خلاف ذلك؛ تجرى التقنيات الحيوية الجزيئية الأساسية لمعالجة .(Y++)) Russel s Sambrook وبكتريا حسب الوصف في «Proteins 5؛ oy ١ المثال للبيرة estery يخفي المذاق 5 صعبا بصفة عامة؛ حتى بين متذوقي بيرة ying sulfir إن تمييز ملاحظة النكهة شبيهة بدلا من السمات sulfury” مذاق البيرة المصطلح العام shod خبراء عامين. غالبا يستخدم و"0115”- لتمييز "hydrogen sulfide" «"mercaptan” المتخصصة أكثر- مثالا sulfury © .sulfury السمة بعد تكوين مجموعة كبيرة من 9 متذوقين؛ يدرب الأعضاء بشدة في استشفاف رائحة تؤثر sulfur يثير الدهشة اتضح أن إضافة مكونات Leas esulfur المكونات التي تحتوي على بقوة على الإحساس بمكونات نكهة أخرى؛ وهي خاصية تؤدي إلى إعطاء درجات أقل من أجل وقوام البيرة. estery مثلا المذاق ٠ المشاركة. يقدم إلى de gen) لتدريب DMS في مجموعة تجارب أخرى. يتم اختيار sulfur المشاركين عينات بيرة؛ بها تركيزات عالية من المكونات المذكورة التي تحتوي على "DMS" و <"estery” ¢'(body) ويتم سؤالهم عن المذاق وتحديد درجة للسمات المميزة "القوام على نظام درجي من صفر (غير موجودة) إلى © (حدية). تتضمن كل سلسلة من الاختبارات بيرة قياسية متوافرة تجاريا وء للمشاركين؛ من عينات غير معلومة. ٠ ester يوضح الشكل ١(ب) نتائج متوسط الدرجات من سلسلة اختبار تشمل عينات بيرة بها عند الاتحاد مع (DMS على الترتيب. كانت النتيجة غير المتوقعة أن إضافة cester/DMS ester المحسوسة مقارنة مع تلك الناتجة عند إضافة estery تؤثر سلبيا على الدرجة cester تزيد درجة تلك DMS فقط. بالمثل؛ تقل سمة قوام البيرة. من غير المثير للدهشة؛ فإن إضافة الخاصية. ٠ توضح النتائج المذكورة أعلاه أن قدرة خبراء المذاق المتخصصين على تذوق مكون نكهة حسب التحديد "(flavor background) واحد يبدو أنها تعتمد بدرجة كبيرة على "أساس النكهة بواسطة مكونات نكهة أخرى. إن الاكتشاف المدهش من اختبارات المذاق؛ الملخصة في الشكل ١(ب)؛ يوفر أيضا وطفرات شعير مفيدة (DMS من ALE أساسا للاختراع الحالي بتوفير مشروبات بها مستويات Ye بحيث إن SMM لتحضير تلك المشروبات؛ أي؛ طفرات شعير ناقصة المقدرة على تكوين oy استعمال المادة الخام المقابلة في إنتاج المشروب لا تمكن فقط من توليد منتجات بها قدر أقل estery من أو ليس بها 01/45 لكن أيضا مع وعود في تحسينات من أجل الميزة
Y المثال ١ إجراء الفحص»؛ الطريقة cv. Sebastian scv. Prestige تحضن لبابات مجموعة من نباتات شعير من °
Kleinhofs et باتباع التفاصيل التجريبية المتوافرة بواسطة NaN; على انفصال مع مولد الطفرة
DNA تم اختيار هذا الإجراء نظرا لإمكانيته المعروفة بتضمن طفرات نقطة في (VIVA) al. للشعير. genomic في قطع أرض حقل من خلال جيلين (Va) في التجارب؛ تنمو حبات طفرية من الجيل لأغراض (Ta) من الجيل zygote متعاقبين؛ لتنتج في النهاية نسبة كبيرة من نباتات متماثلة ٠ على طفرات جين عند معدل (Ya) الفحص. من المتوقع أن تحتوي الحبوب الطفرية من الجيل لا يتم (Y 2) يلاحظ أن حبوب ٠. أعلاه) «Kleinhofs et al.) حبة ٠٠٠٠١ تكرار 9,٠-7,؟ لكل فحصها. إجراء فحص سريع عالي الدخل لتحديد حبوب شعير Jal يصف الاختراع dad] يمكن تحديده أثناء تكوين SMM توفر النتقص في تكوين MMT تفتقد نشاط (Ya) طفرية ٠ والورقة الأولية coleoptile يتراكم أساسيا في SMM ملت. لذلك؛ وجد المقدمون للطلب أن من نسيج ورقة amino acids يمكن أن يتم باستخلاص SMM للشعير النابت؛ وأن تحديد
OPA المستخلصة مع amino acids مسحوق لحبوب نامية عمرها 4 أعوام؛ ويلي ذلك تفاعل .)١ لتكوين منتجات استشعاعية للغاية (انظر شكل من الناحية العملية؛ يجرى كل اختبار بإنبات- في صندوق لدن مغلق مع قطعة واحدة من Ye مم)- لحبتين من كل من 94 طفرة محتملة ٠,1 X Y47) Whatman #1 ورق ترشيح ونباتين من النوع البري. يكرر الاختبار لحبوب طفرية محتملة متعددة (انظر أدناه). عند بداية
Vo ملليلتر من ماء صنبور إلى الصندوق اللدن المذكور؛ ثم يضاف Yo الإنبات» يضاف سم من أنسجة 3-١ ملليلتر من ماء صنبور عند يومين من الإنبات. بعد ؛ أيام إنبات؛ ينقل ملليلتر تحتوي ٠,7 تحتوي فيها كل من 97 عين سعة ((ABgene) ورقة إلى أطباق تخزين Ye على خرزة زجاجية قطرها © مم و0٠0٠ ميكرولتر من خليط 1:59:17 (حجم/ حجم/ حجم) من هرتز في ١ يرج الطبق عندئذ لمدة £0 ثانية عند تردد chloroform methanol ماء: o¢ عقب ذلك؛ ينقل الطبق إلى جهاز طرد مركزي (Resch) ٠٠١ MM مطحنة معملية دقيقة عند درجة حرارة ١١ ويدوم عند 5000 دورة في الدقيقة لمدة «(Rotanta 460R, Hettich) ميكرولتر من المادة الطافية إلى طبق تخزين ٠١ الغرفة لترسيب مادة غير قابلة للذوبان. ينقل ميكرولتر ماء و60 ٠٠١ رقم كتالوج 4541 181007)؛ وتخلط مع (Waters) به 97 عين ميكرولتر محلول تفاعل يحتوي على خليط من 00 £01100 (حجم/ حجم) من عامل كاشف © رقم كتالوج ¢Aldrich) 3-mercaptopropionic acid :(Y31V P رقم كتالوج «Sigma) OPA دقائق على الأقل للحصول على اشتقاق ٠١ يحضن الخليط عند ؛*مئوية لمدة (0A M مجهز مع Waters معتمد على UPLC مع /07. باستخدام نظام amino acids كمي لعينة
X 3,١ C18 Gemini محدد استشعاع؛ ينفصل ¥ ميكرولتر من الخليط المشتق على عمود رقم كتالرج 171-850 1 باستخدام (Phenomenex) مم من جسيمات ؟ ميكرومتر ١ Ve مللي جزيئي جرامي مثبت أس هيدروجيني £0) A فصل متدرج بخلط طور متحرك [محلول 05 11؟ (حجم: حجم: حجم) من B وطور متحرك (V,A pH عند «(NaH,PO4 تتم إثارة مشتقات .]) ٠٠١76 Phenomenex) لمصقطاع: ماء حسب الوصف :acetonitrile المنفصلة عند 560 ؟ نانومتر؛ بينما يقاس انبعاث الضوء عند £00 نانومتر. يبين شكل OPA glutamic acid «aspartic acid (Asp) مثال لرسم كروماتوجرافي يوضح نمط فصل (hr Yo إن المركب الأخير متضمن» لأن الغرض -SMM js serine (Ser) «asparagine (Asn) «(Glu) أي؛ نبات تكون ذروة SMM الشامل للمشروع هو تحديد نبات شعير ناقص القدرة على تكوين الرسم الكروماتوجرافي المقابلة الخاصة به صغيرة جدا أو يفضل غير موجودة. ١ إجراء الفحص» الطريقة 7 في نفس الوقت مع التجارب الموصوفة أعلاه في المثال الحالي؛ أجريت محاولات لتحقيق طريقة فحص سريعة جدا لتحديد نبتات شعير ناقصة إنزيم MMT نشط. اعتمادا على حقيقة أن النبتات المذكورة يمكن أن تتمو في وجود YOu ميكروجزيئي جرامي (Na-selenite بشرط أن تحتوي النباتات على MMT نشط لتحويل (Na-selenite تصمم طريقة فحص للتسجيل الدرجي بصريا لنبتات مع نمو قليل في وجود تركيز 118-56160116 المذكور. من ev. سنبلة- تحتوي كل منها على ١”7-<٠؟ لبابة- من شعير 17١7604 الناحية العملية؛ توضع Yo توضع في صواني لدنة مملوءة مع وسط نمو (Ya) الجيل (NaN; به طفرةٍ بواسطة 6 يسمح للبابات السنابل .118-50160116 (aba ميكروجزيئي 15٠ مدعم مع Vermeculite قياسي so نبات يتميز بنمو قليل؛ AVY سم. ينقل إجمالي ١١ بالإنبات والنمو إلى نبتات طولها حوالي سم في الطول؛ إلى تربة حديثة التحضير وتترك لتنمو إضافيا. على أية ١١ > أي؛ نبتات حسب التحديد بالمقارنة مع (JE MMT لم يكن أي من النباتات المذكورة له نشاط Js طبقا لذلك؛ لم تنتج طريقة الفحص الموصوفة أعلاه طفرات؛ SMM مستويات النوع البري من ولذلك يتم إنهاؤها. مثال ؟ الطفرات الممكنة cv. Prestige من NaNj-p—e لبابة طفرية YAOA 5 Ve YEA تم فحص إجمالي (YF في المثال ١ (انظر الطريقة SMM .»©؛ على الترتيب» من أجل محتوى Sebastian s بهدف تحديد تلك القليلة للغاية في المحتوى المذكور عند المقارنة مع حبوب النوع البري. تم ٠
AY تحديدا حبوب من العينة رقم (Yo) من الطفرات الممكنة في الجيل ١ فقط تحديد وهو مسمى مستخدم (AY والمشار إليها هنا لاحقا بأنها طفرة cv. Prestige (المشتقة من ov. (مشتقة من ٠5014 أيضا لحبوب الأجيال التالية؛ الشكل “(ب))؛ وحبوب من العينة رقم المسمى المستخدم أيضا لحبوب للأجيال 6) £0) A والمسماة هنا لاحقا طفرة Sebastian الحبوب لكل طفرة إلى الجيل (م؛)؛ وعندئذ يتم ati التالية؛ موضحة في الشكل ؟(ب)). Ne
VEYA حصادهاء وفي النهاية يعاد تحليلها. تحدد النتيجة أن حبوب الطفرة 80167 والطفرة
SMM LK وربما تفتقد «SMM بها محتويات قليلة للغاية من لتحديد أن الطفرة 8067 والطفرة western في تجربة منفصلة؛ يستخدم تحليل تبقع يتم إنبات حبوب الطفرات ونباتات النوع البري المقابلة في MMT ناقصة إنزيم ١0 حبة من كل عينة إلى أنبوب J الظلام لمدة ؛ أيام على ورق ترشيح منقوع في ماء. ٠ وتتجانس باستخدام مدقة (عضو التأنيث في cele ميكرولتر YO يحتوي على 1 ميكرولتر Yo دورة في الدقيقة؛ يخلط ١٠٠١ دقائق عند ٠ النبات). بعد طرد مركزي لمدة مركزة ؛ SDS من الخلاصة السائلة مع © ميكرومتر من مثبت أس هيدروجيني قياسي لعينة وقاسم تام من نفس OY مرات. باستخدام نفس الطريقة المناعية حسب الوصف في المثال
Proteins المذكور؛ تنفصل بالانتقال الكهربي JU المفصل في MMT الجسم المضاد Yo إن غياب cwestern خلاصات العينة للبابات النابتة سالفة الذكر بالمقاس وتخضع لتحليل تبقع ملحوظ للخلاصات المنفصلة MMT كيلو دالتون؛ المقابلة VY + مصبوغ Protein حزمة
بالمقاس للطفرة ATF والطفرة VEYA على أية حال؛ فإن حزمة ١7١ Protein كيلو دالتون مرثئية بوضوح في الخلاصات من لبابات النوع البري النابتة (الشكل "(ج)). إن اتحاد نتائج تحليل western مع غياب SMM في خلاصات الطفرة AY والطفرة OV EIA لكن مع وجود SMM في خلاصات لبابات النوع البري (انظر الشكل ؟(ب))؛ يؤكد جوهريا أن الطفرة © 8057 والطفرة ١50178 يمثلان طفرات ناقصة بالنسبة لسمة MMT المثال قياسات نشاط MMT للطفرة AY إن إنزيم MMT يحفز نقل مجموعة methyl من SAM إلى Met لتكوين SMM (انظر الشكل ١(ب)). باستخدام PHISAM كمادة خاضعة؛ التي تكون فيها مجموعة methyl معلمة ٠ بواسطة ctritium يمكن مراقبة انتقال مجموعة methyl المذكورة بعد الوميض بعد إزالة الباقي من PHISAM بواسطة فحم نباتي نشط. إن المركب الأخير يربط المادة الخاضعة؛ لكن لا يربط منتج SMM المعلم جديد التكوين ٠ (Y440 Pimenta et al.) يسمح هذا بتحديد أنشطة 71 ومحتويات (SMM وتتحدد الأخيرة حسب الوصف في المثال "؛ في خلاصات ١١ برعم من كل من الطفرة 8017 ov.
Prestige s (شكل ¢( aay. فحص البيانات أن MMT Ne يحفز تكوين SMM في لبابات النوع البري؛ وهي خاصية غائبة في حبوب الطفرة AY مثال ه تكوين ملت وتخمر على نطاق إرشادي للبابات ناقصة MMT للطفرة 8017 إن تحليلات تكوين ملت وتخمر مع ملت للطفرة 8017 وملت مرجعي من cv.
Power تشمل الخطوات التالية: )١( ve إنبات؛ متضمن cali لتوليد ملت أخضر؛ يليه أحيانا تجفيف آتون للحصول على ملت مجفف في أتون؛ (7) تحضير ورت؛ (V) فصل ورت؛ )4( غلي ورت؛ Yoo )©( تخمر ورت مع الخميرة ¢Saccharomyces carlsbergensis )1( زيادة حجم البيرة؛ (V) ترشيح بيرة صافية؛ و
لاه (A) تعبئة all في زجاجات. بالنسبة لكل من الطفرة 4077 ov.
Powers (عينة مرجعية)؛ يستخدم Te كجم ملت للتغمر. تطحن عينات ملت؛ ويضاف ماء صنبور عندئذ إلى ١٠١ لتر لكل عينة. يجرى تكوين هريس عند ١٠"مئوية لمدة Ye دقيقة؛ ثم تزداد خلال © دقائق إلى ©1“مئوية؛ وعند © درجة الحرارة تلك تستمر الحضانة لمدة 00 دقيقة. يخضع الهريس عندئذ لزيادة في درجة الحرارة لمدة Vo دقيقة إلى 78"مئوية؛ ويتم تكوين الهريس بعد حضانة لمدة © دقائق. تتضمن عمليات تخمر تالية ترشيح ورت» خطوة غليان مدتها ساعة واحدة؛ وفصل في دوامة. يتم التخمر لمدة 7 أيام؛ زيادة حجم وتعبثة للبيرة النهائية في زجاجات من الزجاج الأخضر طبقا لمواصفات الممارسة العملية القياسية للتخمر؛ على سبيل المثال حسب الوصف ٠ بواسطة .)١987( Hough et aly «()9AY) Briggs et al. إجمالياء تحضر ala) ٠٠١ سعة ؟؟ لتر مكعب مع بيرة مشتقة من ملت نوع بري وملت طفري. مثال 1 مستويات DMSP 3 DMS في بيرة مصنعة من ملت ناقص MMT تتخمر البيرة من ملت ناقص ov.
Powers MMT حسب الوصف في المثال 0 أثناء ٠ عمليات تكوين ملت والتخمر؛ تتحدد مستويات DMS و DMSP الحرة في ملت أخضر ومجفف في آتون (الشكل #())؛ بالإضافة إلى في ورت المحلى والمغلي المقابل» وأيضا في البيرة النهائية (الشكل *(ب)). تتحدد مستويات DMSP § DMS أساسيا حسب الوصف بواسطة ¢(Y4A +) Hysert et al. مع تحديد خاص بواسطة sulfur باستخدام تحليل كروماتوجرافي غازي ساكن مع حيز قمي Ye على .350B Sulfur Chemiluminescence Detector (Sievers) يتم أخذ العينات باستخدام جهاز أوتوماتي (HS-40 Automated Headspace Sampler, Perkin Elmer) إن المستويات الكلية من «gl (DMS محصلة DMS و DMSP الحر في ورت وخلاصات ملت الأخضر والجاف؛ يتم الحصول عليها بغلي العينات المقابلة تحت شروط قلوية لمدة ساعة واحدة. تخضع العينات عندئذ لتحليل حيز قمي لتحديد مستويات DMS حسب الوصف مسبقا Ob Ye الفرق بين مستويات DMS الكلية في العينات المغلية؛ و0115 الحر في العينات غير المغلية المقابلة محدد بأنه يساوي كمية DMSP في العينة. تتحدد نوعية DMS الحر في البيرة أساسيا مثل تلك لأجل ورت Hysert etal.) أعلاه).
oA 7 المثال MMT اختبار بيرة متخمرة مع ملت ناقص تقييم خبراء تذوق بيرة محترفين بيرة ناتجة على نطاق إرشادي متخمرة AAS بغرض تحقيق جزء DMS مقاسة بأنها تحتوي على ؛ syn يجرى تذوق نمط على MMT مع ملت ناقص جزء على البليون» والبيرة المذكورة DMS VT على البليون. كمرجع تستخدم بيرة عادية بها 0 .cv.
Power ناتجة من استخدام ملت من العليا بتحليل alcohols s البيرة esters قبل تحليل المذاق؛ يتم الحصول على أنماط مركب VY بها مستويات أقل في ؟ من MMT كروماتوجرافي غازي. إن بيرة ملت ناقص cethyl acetate تتكون من -١ ترش خلطة ٠ في اختبار التذوق الأول .)١ محلل (جدول لتأكيد أن (MMT في البيرة المتخمرة مع ملت ناقص -ethyl octanoate s <isoamyl acetate ٠ إن البيرتين الكبيرتين بهما مستويات متشابهة من تلك المركبات النشطة بالنسبة للنكهة التي إن غرض الاختبار الثاني هو بيرة بها محتوى .)١ القياسي (انظر جدول ester تساهم في نمط التي تتكون من =F مع سمات نكهة زائدة. لذلك؛ ترش الخلطة pS ester (جدول cv.
Power في بيرة ملت -ethyl octanoate 5 cethyl hexanote ¢isoamyl acetate والخلطة ؟. ١ مع كل من الخلطة MMT بينما ترش البيرة من ملت ناقص )١ ١ تختبر عندئذ البيرة الموصوفة أعلاه بواسطة مجموعة متذوقين للبيرة مدربين بدرجة كبيرة سمة خاصة للبيرة- كل منها على مقياس؛ أو نطاق درجي؛ ٠١ يقدمون بتقييم ٠١ وعددهم .)1 من صفر إلى © (شكل هناك تأثير ملحوظ cester كما هو مبين بالتفصيل في الشكل ١لأ) بالنسبة للبيرة عالية على الإحساس بالنكهات -الأروماتية العطرية في "البيرة القليلة جدا في 0148 المتخمرة على Yo - مقارنة ببيرة قياسية بها نفس المستوى. تسجل درجات أعلى لكل النكهات MMT ملت ناقص ester التي بها نمط (MMT الأروماتية العطرية المختبرة. حتى في البيرة من ملت الناقص (شكل 1(ب))؛ يسجل إحساس زائد بالنكهات - الأروماتية العطرية؛ مرة ثانية يظهر ذلك gale يوفر تأثيرا إيجابيا بالنسبة للإحساس بمركبات البيرة الأروماتية. DMS أن المستوى القليل من إن تفسير تلك الظاهرة هو ببساطة أن 0148 في البيرة يخفي مذاق النكهات - الأروماتية Yeo عوامل هامة عند اختبار درجة الإنعاش بالنسبة للمشروب. Ji العطرية المبهجة؛ التي في البيرة alcohol 5 ester تحليلات :١ جدول oq ws
Cl eee
Te [eee
Ca [ow ee
Ce nee |e
Cee ee ee [ee
Ce ا |e
Cae [| ve | eee
Te [en [eC
Te [ee
Cer ee اال eee .isoamy] acetate 5 2-methyl-butyl acetate محصلة تركيزات * .isoamyl alcohol 5 2-methyl-1-butanol محصلة تركيزات **
A المثال cv. Prestige في شعير MMT تحديد ترتيب الجين المشفر بين نباتات شعير MMT المسبب للاختلاف في نشاط genomic بهدف تحقيق التباين ° codons 4lsh الذي يشمل DNA النوع البري والطفرية؛ فإن المجهود الأولي هو لتحديد ترتيب غير المعلوم مسبقا لجين genomic البداية والإيقاف لجين الشعير المقابل. لتحقيق ترتيب من أوراق نبتات شعير (DNA) genomic DNA شعير» فإن الخطوة الأولى هي تنقية 71 باتباع الإرشادات المتوافرة من مورد cov. Prestige call 1 عمرها The Plant DNA Isolation Kit (Roche, cat.no. 1667319). Ye
Te
MMT المشفر cDNA مع ترتيب Jali oligonucleotide بعد ذلك؛ تصمم مواد أولية شعير DNA باستخدام .)١ 815028870؛ تعريف الترتيب رقم: :GenBank (رقم الوصول في أولية مختلفة؛ المذكورة sale قياسية مع +7 مجموعات PCR كجزيء تركيبي؛ تجرى تكبيرات لها في الجدول 7. في شكل أزواج؛ اتضح أن المواد الأولية تكون مقساة في DNA ترتيبات exons وى ١ exons بداية الترجمة) روت codon (متضمنة وفي التيار الهابط من ١ exons © (متضمنة وفي التيار الصاعد من ١7و ١١ exonss ١١و 9 exons «5 © exons «© ¢ تشمل بطولها DNA إيقاف الترجمة). يولد © من الستة تفاعلات سالفة الذكر قطع 0 (انظر شكل ١-١١ exons 11-4 exons «1-9 exons دح exons 7ح exons
Y exons بداية الترجمة codon تشمل بطولها DNA قطعة alg يفترض أن هناك تفاعل .)4 وشكل 1)؛ لكن ١ كما هو مذكور في الجدول ١ (أي؛ التفاعل مع مجموعة المادة الأولية رقم ٠ فإن chase تلاحظ فقط عيوب صناعية في التفاعل. برغم أن سبب هذه الصعوبة لا يزال المحتوى الكبير بدرجة ملحوظة من قواعد 6 و© في قطعة الجين الهامة قد يكون هو السبب
PCR في فشل التكبير الصحيح للترتيب. نتيجة لذلك؛ تستعمل مواد مدعمة عديدة لتفاعل .0-0 متوافرة تجاريا- محددة لتسهيل تكبير مناطق جين غنية مع codon في التيار الهابط منء لكنها لا تزال تحتوي؛ على DNA في محاولات لتكبير قطعة yo على الرغم من المحاولات الكثيرة؛ فإن كل المجهودات MMT البداية لجين الشعير المشفر قد فشلت بالنسبة لتكبير القطعة المحددة بالمواد الأولية في gDNA التي تستعمل جزيء تركيبي .7 كما هو مذكور في جدول ١ التفاعل RNA المشتق من cDNA إلى جانب تجارب تكبير 0178ع» تمت أيضا دراسة إذا كان المزعج للجين من exon _من أوراق نبتة شعير يشكل جزيء تركيبي وظيفي لتكبير ترتيب ٠ كلي وينقى من وريقات نبتات شعير عمرها ؛ أيام؛ RNA أجل 7. طبقا لذلك؛ يستخلص باستعمال المكون والإرشادات من cov. Prestige
The FastRNA ProGreen Kit (Q-BlOgene, cat.no. 6045-050). اتحادات أزواج A [أي» ¥ X A قياسية RT-PCR تستخدم قواسم تامة من ذلك في تفاعلات حسب التفصيل [oli] مع كل منها 7 من مثبتات أس هيدروجيني oF _مادة أولية (جدول ٠ تنفصل أجزاء .OneStep RT-PCR kit (Qiagen, cat.no. 210212) في الإرشادات من أجل ؛ ويكشف تحليل تالي عن أن منتجات التفاعل يمكن فقط الحصول ZY agarose على هلامات
عليها باستخدام مثبت الأس الهيدروجيني ١ من المجموعة المذكورة. تتم عندئذ تنقية حزم DNA الهامة باستخدام مجموعة استخلاص هلام Qiagen) Qiaexll رقم كتالوج )0+ (Y+ تجرى تكبيرات RT-PCR منفصلة مع مجموعة المادة الأولية رقم ٠١ oY و١١ (انظر جدول ")؛ في وجود محلول-0 من المجموعة RT-PCR سالفة الذكر. إن أجزاء DNA الهامة تكون © أيضا نقية في هذه الحالة. عقب إدخال أجزاء DNA المنفردة في الناقل pCR2.1-TOPO «(Invitrogen, cat.no.
K4500-01) واستقبال حامل الجين من العائل في خلايا coli .1 مع البنية؛ تتحدد ترتيبات DNA المقابلة لإدخالات plasmid
بصورة مجمعة؛ فإن المجهودات المتحدة الموصوفة أعلاه تتبلور في تجميع ترتيب genomic يشمل بطوله 5 بداية وايقاف الترجمة لجين MMT شعير من cv.
Prestige ٠ (تعريف الترتيب رقم: ؟). من خلال اصطفاف ترتيب cDNA وترتيبات «genomic أي؛ اصطفاف تعريف الترتيب رقم: ؟ مع تعريف الترتيب رقم: ٠؛ تحدد أن جين الشعير من أجل MMT حسب التوضيح في شكل 9؛ يتضمن exons ١١ (إجماليا 7777 (bp يفصلها ١١ introns (إجماليا 7197 (ط). إن ترتيب amino acid المشتق من أجل MMT من cv. 86 مبين في شكل ٠0 ومذكور كتعريف الترتيب tad) 6. باستثناء Prol57—Ala Met985—>Tyry ٠ في ترتيب amino acid المشتق سالف الذكر من أجل ov.
Oe MMT (Prestige تكشف مقارنة مع ذلك من GenBank accession no. ) cv.
Haruna Nijo
70 تعريف الترتيب رقم: ؟) عن تمائل كامل (شكل .)١١
— + ب 4 137 م <ا 3 PR = - 3 3, J © ل 2 | + 2 9 = Z 7) 33 + 0 — . 3 9 . ov — < < = 0 3 a o 38 |] ~ |Z |Z |v |Z 5 2 Je I» و > >» wl It 5 135 = ا ا 1 ا ا 1 5 7 2 > = = 3 > a 5 Sole “ا os #ا {2
S| + 3 5 TIE TE الاب 5 ال TI ود وح TIE ا 3 ا ب 12 333 4 ف Oo و ]309 ا د 5 د 4 ل
ENE EE EE CEE RR
> ل Q 1: قا كا ا lo 5 5 2 | 3 3 Js LIB 5 واه اه 2 oP 11 Brisa tira ال 162286542835 3 ب 5 2 دان نان حي : O < 7 = O 0 3 ٍ TR 3 - 52 يق 37 ص l ® = 9 = = © 1 + 2 ل > 5 < 3 ١ QO Q < Oo = +], < S > Bg < 1 2 = O a < لاب : ٍ
TO SO TE > < = O يخ 181 3 898 0
SCE ECECECHE
2 E3E3035 35363 ' og FE Jo FS |= S 0
J 24343-40483434
SLE »)© اه rl <0 > 4 ار ار كد دا د 5 وان نان ذال بيات < 9 oO < Q
TERE EEE
1 3 3 8 8 © 3
Bg = 9 E 2
O
٠ - 8 8 8 3. E ١ 9 2 Bg ا FG { ب QO 5
Ja =| > << a” =o = > 3 33 fo 4 2 3 و3 >33 حي 17 3338711] DDE IE 3 alge (2 ضما 2 |e ا !ا
SFE SL i 2a 39 23 oO alo واج glo واج واج go TG 333 33333333353 375 0 0د 0 ١ ل 5 29 29 359 592 9 all: 43433 0 8 slg 2348334338 جاه جه وله وه وه قا ى ا 1212 Brg 88808008 7 : a قا هه ق .ةوق ol ره 0 |Q oa |L م J | +7 ان ان اي To Te زات To ب I J Q Q Q Q Q Q Q
J O 0 3 O 3 3 O ِ * 2 5 9 8 8 38 ©
Ly BEE EEE EE 2 + 0 0 O 0 0 S 5 0 < O 3 30 0 0 = 0 = 12 BE 3 3 EIB مخ 2 < < < < < OS Oo z ىه تاه يا ب go >30 To Te Te
AEE CE EEE EEE
12g; 33333333 : 3 اب — — — _ = :© السب — 250222825 RE 30 RE 3
J 313151319516131 — 5 9 43 43 48 45 Ag + 4 SLB ISB ا -ه © - 0 ا.
O20 رده ا كا ات 00 كره
OQ O 3 3 O OQ 3 2 2 RB BB kB EB B® 8B
EE lo lo ب ا ] Oo O O O O O O 0 5 3 v = he 0
7 * * + فط TR 3 2 3 3 ن _ 4 3 حََ 4 + 4 سي 2 0 = إ 2 : : 307 1 4 3 = 2 3 د 23 83 © 11 =| 2
S30
Oo 0 3 “ly, sR 3
Or | 4 د 4
SL = 3, 3 = MN = w م = نا ص 10 TOA. 7 3 7 م10 35 3 & 5 37 م ta Oo 2 3
S
2 oq o
Be في © يرا Oo ~~
O
3 3 = 0 3 7 3 3 ب ب Q
مثال 9 التغير الطفري للجين الذي يشفر MMT لطفرة 80717 الشعير في موقع الجديلة 0 من intron © إن محتوى SMM في البذور الصغيرة للشعير من طفرة 8017 منخفض جدا أو منعدم © (مثال 7)؛ مع غياب نشاط MMT (مثال ؛). على أساس هذه النتيجة؛ لقد جرى التحري عن سواء إذا حدثت استبدالات القاعدة في جين يشفر MMT بواسطة معالجة alge طفري NaN; الأصلي للبابات الشعير. كنتيجة لهذا هناك محاولات لتكبير؛ استنساخ وترتيب الجين المذكور لطفرة 8057 لتأسيس القاعدة الجزيئية من أجل نوع شكلي معدوم MMT بعد التكبير بواسطة 1 مجموعات مادة Als فإن ترتيب nucleotide للجين ٠ من النوع البري لأجل 1 من cv.
Prestige (جدول ؟؛ مفصل في مثال (A بطريقة Ailes تتم مراقبته من أجل طفرة الشعير JAY بإيجازء يستخلص genomic DNA من الطفرة؛ ويتم إقحام أجزاء تم تكبيرها وهي تخص جين MMT من ذلك في الناقل PCR2.1- «TOPO (Invitrogen, cat.no.
K4500-01) وتستنسخ؛ يحدد ترتيبهاء تتصل (تعريف الترتيب رقم: 4)؛ وتقارن في النهاية بتلك التي تخص الشعير من النوع البري. لا تحدد أي طفرة في VO جزءٍ تشفير protein من جين MMT على أية (Ja إن مقارنة ترتيبات intron للطفرة والجينات من النوع البري تظهر انتقال قاعدة GA عند القاعدة الأولى من o intron nucleotide) رقم 096 من تعريف الترتيب رقم: (A إن القاعدة المذكورة هي جزء من موقع جديلة © من intron 5؛ حيث تؤثر في RNA dallas الأولي للجين؛ أي وصل بالجدل Mettler 5 Sinibaldi) RNA 1947؛ انظر أيضا شكل (VY 7 لتقييم الأدوار الممكنة للطفرة القاعدية فيما يخص باضطراب الموصل بجدل الجين الطبيعي في الجين الذي يشفر MMT لطفرة A+ TY يجرى تحليل مفصل على RNA المشتق من الطفرة للكشف عن المركبات الوسطية للوصل بالجدل. تختار هذه الطريقة لأن التبديلات في '5 GT dinucleotide من introns قد يؤدي إلى تراكم المركبات الوسطية للوصل بالجدل ) Lai et al 1999( Yo لتكبير الأجزاء ذات الأهمية؛ فإن التحليل يتبع التوصيات المتوافرة لاستخدام مجموعة RT- .(OneStep RT-PCR from Qiagen, catno. 210212) PCR عند استخدام الجزيء التركيبي؛ ينقى ١ ميكروجرام من RNA إجمالي من وريقات بذور صغيرة عمرها ؛ أيام من
+13
cv.
Prestige والطفرة (ArT كما هو موصوف في مثال 8. باستخدام مجموعة المادة الأولية ٠ (جدول 4)؛ bea تفاعل RT-PCR لتكبير منطقة الجين التي تمتد فوق V exons ¥ exon في نسخ MMT لأجل Prestige نوع بري والطفرة 8057 JS) ١١(أ)). بعد التكبير؛ تتحل
منتجات التفاعل بواسطة الارتحال الكهربي على هلام 7١ agarose (الشكل "(ب)). ° إن فحص المنتجات المكبرة يظهر شريط فردي فقط من التفاعل مع RNA نوع بري (الشكل ؟(ب)). ستأمسل هذا من الهلام؛ وينقى باستخدام مكونات مجموعة Qiaexll ١ catno. «Qiagen) #١٠٠)؛ ويتم إقحامه في الناقل (Invitrogen, ~~ pCR2.1-TOPO cat.no.
K4500-01) يستنسخ ويحدد ترتيبه. إن التحليلات توضح وجود جزء bp —AAY (المنتج ١ في الشكل ١١(ب)؛ تعريف الترتيب رقم: 9)؛ مميز بترتيب مماثل لقواعد الامتداد
٠ 777-447 من cDNA كامل الطول لأجل MMT الشعير نوع بري (تعريف الترتيب رقم: ؛). اعتمادا على هذه النتيجة؛ يعبر الوصل بالجدل عملية غير متعلقة بإظهار جين من نوع بري.
إن تفاعل RT-PCR المماثل للموصوف في الفقرة السابقة؛ Lad عدا تطبيق الجزيء التركيبي المنقى RNA من الطفرة 60757 يولد ¥ أجزاء DNA خاصة- يشار إليهم بالمنتج
١ المنتج oF المنتج ؛ في الشكل ١١(ب)- يختلف كل منهم في الطول من المنتج ١ المكبر باستخدام RNA نوع بري (الشكل ١١(ب)). تبعا لهذاء تتم عرقلة معالجة mRNA الأولي بواسطة طفرة قاعدة فردية في موقع الجديلة ©" من intron © في جين MMT من الطفرة ATT إن سير التفاعل هذا يبطل تماما استخدام موقع الجديلة 70 لكنه ينشط استخدام مواقع الجديلة الإضافية الشفرية.
٠ كمحاولة لمواجهة المسبب الجزيئي الكامن للحصول على ؟ أجزاء PCR المذكورة أعلاه في الطفرات ATT يحضر كل جزءٍ لتحديد ترتيب DNA باستخدام الإجراء كالموصوف أعلاه في المثال A لأجل شرائط DNA المشتقة من PCR من Prestige .»0. يبلغ طول أكبر جزء bp ٠٠١ (المنتج Y في الشكل ١١(ج)؛ تعريف الترتيب رقم: ١٠)؛ ووجد أنه يتضمن كل intron ©« بينما المنتج ؟ (الشكل ١١(ج)؛ تعريف الترتيب رقم: (VY والمنتج ؛ (الشكل VY
YO (ج)؛ تعريف الترتيب رقم: (VE يبلغ طوله 505 برط bp AY على الترتيب؛ ولهذا يكونان أقصر من الجزء bp —AAY من RNA نوع بري (قارن الوصف أعلاه). إن تحليل ترتيب av بينما تحليل المنتج ؛ يظهر في <0 intron للمنتج ؟ يظهر موقع جديلة شفري في وسط DNA (د)). ١ (الشكل © exon إيقاف ترجمة ناضجة codons هو اكتشاف DNA من النتائج الهامة أيضا لتحليلات ترتيب عند الموضع 2090-7088 طبقا لترقيم القاعدة الذي يخص TGA] 7 قبل الأوان في المنتج عند TGA] (تعريف الترتيب رقم: 7)]؛ منتج ؟ ©». Prestige الشعير؛ genomic DNA © cv. من الشعير» genomic DNA الموضع 7090-7088 طبقا لترقيم القاعدة الذي يخص عند الموضع 91-77489؟؟ طبقا TGA] (تعريف الترتيب رقم: ١)]؛ والمنتج ؛ 86 (تعريف الترتيب رقم: cv. Prestige من الشعير؛ genomic DNA لترقيم القاعدة الذي يخص على الترتيب. إن camino acid و7185 71١ مترجمة طولهاة1 proteins )أ مما ينتج المنتج oY المنتج ١ (ج) يوفر مقارنة بيانية وملخص عن نتائج تحديد ترتيب المنتج ٠١١ الشكل ٠ توفر بيانات خاصة عن (A) (د) والشكل ١7 التوضيحات في الشكل Lay of ؟ والمنتج القواعد الخاصة الداخلة في أحداث الوصل بالجدل البديل. الشعير MMT جدول ؛: المواد الأولية للكشف عن الوصل بالجدل البديل للجين الذي يشفر المادة الأولية المعكوسة ١ رقم نهايات منتج | المادة الأولية المتقدمة (ترتيب
Te To (ترتيب *#(DNA '¥ « "© RT-PCR | مجموعة *++(DNA المادة الأولية AAATCCAGCAACAAGATTC | GTTTATGGTCTGGATATAAACC | يسبب +١ (تعريف الترتيب CGGAAA ٍِ CAAG ee مسيم CTGCATAATTTTIGITTGCC | AGGATICCAGCAAAGAAAGAA | qpy—y sn 14 (تعريف الترتيب AGAGC | )17 (تعريف الترتيب رقم: GC ا اد | 6 .8 067 للطفرة RNA باستخدام الجزيء التركيبي RT-PCR لأجل )1
NEVA للطفرة RNA باستخدام الجزيء التركيبي RT-PCR لأجل )+ Yo .)4 (تعريف الترتيب رقم: MMT لأجل cDNA ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص )*
PCR الترتيب عند النهاية ©" من الجزء المذكور في عمود "نهايات منتج )**
PCR المذكور في عمود 'نهايات منتج shall ترتيب التكملة عند النهاية 7" من )***
TA
٠١ مثال من نوع بري MMT يشفر leh] Plasmid بسبب الملاحظتين التاليتين:
SMM والقدرة على تخليق MMT إلى E. coli Lda افتقار (i) ¢(Y49A «Thanbicher et al.) ° ¢(Y+ + Y «Tagamount et al.) E. coli النبات في MMT إمكانية تخليق (ii) الشعير الطفرية أو المبتورة في البكتيريا سالفة الذكر يتيح MMT فإن الإظهار المغاير لأجل الشعير MMT الإنزيمي. بالنسبة إلى Balsall طريقة جديدة للحث من أجلء أو تأكيد افتقارهاء فإنه قد يعمل كمثال مقارن موجب في تلك التجارب؛ وتتمثل 2. coli المخلق نوع بري من
MMT للإظهار المغاير الذي يخص 2. coli إظهار plasmid المهام في تصميم وتشييد ٠ الشعير. الإجمالي من وريقات بذور صغيرة RNA لتكبير الترتيبات ذات الصلة؛ يستخلص أولا ميكروجرام منه ١ (كما هو مفصل في المثال 4( ويستخدم cv. Prestige أيام من اهرمع
VY قياسيء فيما عدا أن تضاف مجموعة المادة الأولية RT-PCR كجزيء تركيبي في تفاعل pCR2.1-TOPO إلى خليط التفاعل (جدول *). يتم إقحام المنتج المكبر في الناقل ١٠ cplasmid بعد امستتنساخ plasmid pCR2.1-TOPO-MMT مما ينتج «(Invitrogen) cv. Prestige يحدد ترتيب الإقحام الكامل (تعريف الترتيب رقم: ©( ويقارن مع ترتيب في المنتج المستنسخ PCR يحثه nucLeotide (تعريف الترتيب رقم: 4؛).تحدد ؟ اختلافات
MMT amino acid معطية استبدالات «(G303 1>A sT2954>C T131 0—>A) هو محدد بمقارنة تعريف LS) 6171011 —Sery Tyr985—>Met <Leud37—>His | ٠ لمؤالفة تأثير amino acid لا يتوقع أي تغيرات (Vad) الترتيب رقم: 1 وتعريف الترتيب المخلق بطريقة قد تكون متعلقة بالطلب الحالي. يعتمد هذا الاستنتاج على اكتشاف أن 7 نشط يمكن إدراكه بواسطة الأجسام المضادة لمضاد protein الذي تم إظهاره هو protein
OY إ(قارن مثال 7 569-bp مما ينتج جزء (Ndel-EcoRI مع pCR2.1-TOPO-MMT بعد هذاء يقطع Yo pET19b يتم إقحام الجزء '5 في ناقل إظهار .2699-bp 3' EcoRI وجزء Ndel-EcoRI 5' ,60ع11078)؛ وفي موقع cat.no. 69677-3) Ndel-EcoRI الذي يصبح خطيا بواسطة
EcoRI من plasmid الناتج يتم إقحام جزءء 771449- bp ©" المذكور أعلاه؛ وبهذا يتولد plasmid pET19b-MMT الإظهار (الشكل ١١ (أ)). إن plasmid الإظهار هذا يشفر 17 المتصل مع الجزء الملحق His الطرفي (MGHHHHHHHHHH) N تعريف الترتيب رقم: 19( وموقع kinase معوي (550111011011611؛ تعريف الترتيب رقم: (Ve © جدول 10 المواد الأولية لتكبير ترتيب تشفير protein الذي يخص جين الشعير لأجل MMT رقم مجموعة | نهايات منتج المادة الأولية المتقدمة المادة الأولية المعكوسة المادة الأولية Wo oui) "RT-PCR ١ (ترتيب Wo To *#%(DNA **(DNA vy صب | GAATTCTAGTTGCTACCATIC | CATATGATGGCTGCGGCGGC 060 إ#إ(تعريف ACCTTAGCACC (تعريف م ا ee اح *) ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص DNA لأجل MMT (تعريف الترتيب رقم: #)؛ أي استثتاء امتداد الترتيب AATTC 5 CAT قبل وبعد codon البداية codons الإيقاف»؛ على الترتيب. **) الترتيب عند النهاية 0 من الجزءٍ المذكور في عمود 'نهايات منتج (RT-PCR كما ٠ هو محدد بواسطة مجموعة المادة الأولية. موقع Ndel تحته خط؛ codon بداية ترجمة تحته خط مزدوج. ***) ترتيب التكملة عند النهاية TV من hall المذكور في عمود " نهايات منتج RT- "PCR موقع EcoRI تحته خط؛ codon إيقاف ترجمة؛ متضمنا جزءء من موقع ECORI المبين بحروف مائلة. ٠ مثال ١١ 5 إظهار تشفير MMTs مبتورة من طفرة AY إن الجين الذي يشفر MMT من طفرة 8017 موجود في مثال 4 المبين بأنه محتوي على انتقال قاعدة GA في موقع الجديلة ©" من intron © وبهذا ينشط مواقع الجديلة الشفرية التي تؤدي إلى إظهار ١ نسخ غير طبيعية (قارن الشكل (VY (ج))؛ حيث تحتوي كل ٠٠ واحدة على codon إيقاف ناضج قبل الأوان. لتأكيد أن النسخ الطفرية تشفر MMTs غير الوظيفية؛ يتم تكبير كل إطار قراءة مفتوح مقابل ويقحم في ناقل إظهار LSE. coli هو موصوف أدناه . يلاحظ أن ¥ من النسخ
Ye (ب))؛ تشفران VY المجدولة تبادلياء تحديدا تلك التي تنتج المنتج ؟ والمنتج 9 (الشكل الإظهار لتحديد ما إذا كانت Plasmids من ١ المتماثلة. طبقا لهذاء يكفي فقط 5 الوظيفية. MMT تشفر إنزيمات 8٠67 الجينات المجدولة بصورةٍ غير طبيعية لطفرة الشعير (د)؛ فيمكن VY قارن الشكل ATT بمعرفة ترتيب منتجات الجديلة الشفرية في الطفرة الإظهار حيث تتضح تفاصيل plasmid pETI9b-MMT تكبير أجزاء الجين ذات الصلة من 0 ؛١ كما هي مدرجة في جدول OVA تستخدم مجموعة المادة الأولية .٠١ تشييده في المثال (YY من المنتج ¥ (تعريف الترتيب رقم: Sacll-BamHI من الجينات كأجزاء YF لتكبير أجزاء
PET19b- يتبادل هؤلاء لاحقا مع الجزء المقابل لأجل (YA والمنتج ؟ (تعريف الترتيب رقم: الإظهار plasmids pET19b-Line8063-Prod2 مما ينتج »))(١١ (قارن الشكل 71 (ج)). إن التفاعلات المجراة ١١ (الشكل pET19b-Line8063-Prod3 5 ؛))ب(١١ (الشكل ٠ plasmid pET19b- (جدول 6) لتوليد» V4 على نحو متواز تستخدم مجموعة مادة أولية يدرج ترتيب YA (د)؛ حيث أن تعريف الترتيب رقم: ١“ الإظهار (الشكل Line8063-Prod4 مبتور يقابل ذلك الذي يخص المنتج ؛ (قارن MMT المنتج ؛ للاستنساخ)؛ المصمم لتخليق (ب)). ١١ شكل نوع بري مع المنتجات MMT مفصلة عن amino acid (ه) يوفر مقارنة ترتيب VY شكل Yo .8 067 المبتورة التي تشفرها طفرة (Plasmid لطفرة 8057 (لتشييدات DNA جدول +: المواد الأولية لتكبير أجزاء «0 رقم نهايات منتج | المنتج النهائي (تعريف | ترتيب المادة الأولية (ترتيب ***)0(] 7 الترتيب رقم:) RT-PCR | مجموعة المادة الأولية متقدم: YA YY YV-) YA
GGCCGCGGGGCTCGAGTG VAY —V¥Y tad) (تعريف الترتيب CCGCAC (vr معكوس: GGATCCTCAAAGAATTGCT ATCTGCATAA- TTTTTGTTTGCCAGAGC
١لا ا | rein 14 لأ Yq متقدم: حي GGCCGCGGGGCTCGAGTG CTTCCGCAC (تعريف الترتيب رقم: (Vo معكوس: GGATCCTTAGCAGCCTTGT CCTGGCCGGCCTCCCATG (تعريف الترتيب رقم: (V7 *) تشير الأرقام إلى أرقام nucleotide في رقم تعريف الترتيب المقابل كما هو مدرج في العمود المجاور. **) يستخدم خط فردي لتعليم مواقع BamHI Sacil للمادة الأولية المتقدمة والمعكوسة؛ على الترتيب. تشير الخطوط التحتية المزدوجة إلى codons إيقاف. ٠ مثال VY أشكال غير نشطة من MMT مخلق لطفرة AY للتحقق من أن أشكال حذف MMT لطفرة 8017 هي أشكال غير نشطة إنزيميا؛ Jas خلايا coli .2 للسلالة 3121 على حدة مع 121190م «pET19b-MMT «plasmids pET19b-Line8063-Prod4 5 «<pET19b-Line8063-Prod3 (قارن (VV JSS وتتكاثر بعدئذ ٠ طوال الليل في © ملليلتر من وسط Luria Broth (LB) قياسي» محتوي على -ampicillin يضاف YO ,) ملليلتر من قاسم تام من كل مزرعة إلى ٠٠١ ملليلتر من 1.3 طازج» ويحضن عند ١7"مئوية حتى تصل كتافة الخلية إلى 0م016 = Lo, عند هذه النقطة؛ يضاف ٠ 5 ميكرولتر من ١ IPTG جزيئي جرامي لحث إظهار protein مغاير. بعد التحضين طوال الليل عند ١٠سمئوية. تترسب خلايا المزرع الفردية بالطرد ١ المركزي لمدة A BENT عند 5060٠0 دورة في الدقيقة»؛ ؛ “مئوية. يعاد تعليق كل كرية خلية في © مليلقر من 11:0 ثم يطبق عليها عدة دورات تجميد- إذابة؛ وتحضن في النهاية لمدة "١ دقيقة عند ١"“مئوية في وجود تقريبا You وحدة/ لتر من (Sigma, cat.no.
E8263-25KU) nuclease لتقليل لزوجة العينة. بعد الطرد المركزي الذي دام لمدة 7١ دقيقة عند 506086 دورة في الدقيقة؛ ؛ “مئوية؛ لفصل proteins القابلة للذوبان في vo الخلية (محددة بأنها متواجدة في طور سائل) من ALG proteins للذوبان (محددة بأنها موجودة
ل في شكل كرية)؛ تغسل الكرية إضافيا بإعادة تعليقها في “ ملليلتر من 11:0 المحتوي على ١ مجم من lysozyme بعد التحضين الذي مدته 0 دقائق عند درجة الحرارة المحيطة؛ تخفف العينة بإضافة ١١ ملليلتر من 11:0. تجرى © دورات غسيل- ترسيب مماثلة قبل استخلاص proteins أجسام الإدماج في الكرية مع ١ ملليلتر من مثبت أس هيدروجيني ov Tris-Cl © مللي جزيئي جرامي؛ أس هيدروجيني A محتوي على ١ urea جزيئي جرامي؛ B- mercaptoethanol © مللي جزيئي جرامي. لتقييم نشاط MMT ينقل ٠ ٠ ميكرولتر من العينات المحتوية على AL proteins للذوبان في الخلية (كما هو محدد هنا أعلاه) إلى You ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني K- Yo phosphate مللي جزيئي (aba أس هيدروجيني ؛ محتوي على AdoMet 4 مللي ٠ جزيئي جرامي؛ 146 ٠١ مللي ١ DTT eb (in مللي جزيئي جرامي؛ ١١ مجم/ ملليلتر من (BSA بعد التحضين لمدة ساعة عند ٠ *"مثوية؛ ترشح العينات؛ ويسمح بتفاعل ٠ ميكرولتر من القواسم Al) مع OPA كما هو مبين في المثال ". يلي هذا تحليل مستويات SMM كما هو موصوف في المثال المذكور؛ مع النتائج الملخصة في الشكل VE 0( . إن فقط خلاصة الخلايا المنقولة مع 1:7196-14241م تظهر ذروة مخطط كروماتوجرافي ٠١ النفس زمن الاستبقاء مقل الذروة الخاصة بمقياس SMM تبعا لهذاء إن غياب الذروات المماثلة في المخططات الكروماتوجرافية من الخلايا المنقولة مع PET19b- pET19b-Line8063-Prod4 5 Line8063-Prod3 يشيران إلى أن الطفرة 8017 ينقصها القدرة على توليد MMT النشط. تتوجه تجربة منفصلة إلى التحقق من أن الطفرة 8097 تفتقر إلى القدرة على توليد MMT ٠ نشط كامل الطول. تفصل © ميكرولتر من عينات ALE للذوبان في الخلية و١٠ ميكرولتر من عينات proteins مشتقة من الكرية لخلاصات E.coli المذكورة أعلاه بواسطة الارتحال الكهربي القياسي ويتم جسها مع جسم لمضاد MMT عديد النسخ من أرنب موجه ضد Age مضاد peptide طوله ١١ متخلف من MMT الشعير [قارن الشكل ١١ (ه) (امتداد الترتيب المعلم مع علامات نجمية)؛ يشترى مستحضر كبير ١١ ملليلتر له انجذاب منقى من جسم Yo مضاد لمضاد MMT عديد النسخ من (Project No.
L0402801K; animal No.
Invitrogen «C7511) ويستخدم في تحليلات تبقع western قياسية عند تخفيف ٠٠٠١٠١:١ (الشكل Ve (ب)» )=(
lad يتم حمل proteins المذكورة أعلاه على هلام ZY + SDS-polyacrylamide وتفصل بواسطة الارتحال الكهربي عند You فولط لمدة VO دقيقة؛ وبعد ذلك proteins Jai إلى غشاء (Immobilon-P, Millipore) polyvinylidene fluoride من خلال جهاز تبقع إلكتروني (Trans-Blot SD Semi-Dry Transfer Cell, BioRad) الذي يعمل عند 0,¥ مللي ٠ أمبير لكل سم" (أقصى فولطية ©7). توضع البقع العابرة لمدة ساعة عند © 7"مئوية في مثبت أس هيدروجيني للتثبيط x ١[ محلول ملح ثابت الأس الهيدروجيني BSA «(PBS) phosphate .]7١ يزال محلول التثبيط ويوضع الغشاء في محلول من جسم مضاد لمضاد MMT لمدة ساعة. بعد ذلك؛ يشطف الغشاء مع PBS X ١ ويحضن لمدة ساعة في محلول من alkaline phosphatase لمضاد أرنب من ماعز .(Sigma) بعد التحضين المذكور del يشطف ٠ الغشاء في (TBS ” ١ يليه رؤية شرائط protein باستخدام tetrazolium أزرق nitro 5 -5 (Sigma) bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate يشطف الهلام في النهاية في الماء لإيقاف تفاعل -phosphatase
يستخدم مستحضر من جسم مضاد لمضاد (MMT كما هو موصوف هنا أعلاه؛ لجس بقع proteins القابلة للذوبان في الخلية والمشتقة من كرية التي تخص E. coli WIA المنقولة مع pETI9b-MMT Vo (الشكل ٠4 (ب)»؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم PET19b- «('Y" Line8063-Prod3 (الشكل ٠4 (ب)»؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم "") PET19b- Line8063-Prod4 (الشكل ٠4 (ب)؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم "4" و pET19b (الشكل 4 (ب)؛ (ج)؛ الخانات التي تأخذ رقم 107( على الرغم من الاختلافات الموجودة في أنماط الربط بشريط الإجمالية من ALIEN proteins للذوبان في الخلية والمشتقة من كرية (حيث تظهر ٠ الأخيرة عموما كلطخة من شرائط protein التي fas عند قمة الهلام وتمتد للأسفل حتى قاع الهلام)؛ يتم إدراك MMT كامل الطول كشريط protein الذي يهاجر بصورة مشتركة مع protein علامة ٠١١ كيلو دالتون (الخانات التي تأخذ رقم )"٠" في خلاصات من الخلايا المنقولة مع .pET19b-MMT يتوقع أن الأشكال غير النشطة من MMT protein للخلايا المنقولة مع pET19b-Line8063-Prod3 و pET19b-Line8063-Prod4 أن تقابل الشرائط © الملطخة بشدة في منطقة البقعة بين ٠ £0 كيلو دالتون . من المذكور أن شريط protein ٠ كيلو دالتون الملطخ هو شريط غير مشتق من MMT كما أنه يظهر أيضا في خلاصات
الخلايا المقارنة الموجبة المنقولة مع الناقل -PET19b
اعتمادا على النتائج التجريبية مع الإظهار المغاير لأشكال MMT كما هو موصوف هنا diel ومصمم لتوليد أشكال MMT مخلق لأجل طفرة 8017 والشعير من نوع بري؛ يتم استنتاج أن فقط MMT نوع بري؛ ليس أشكال MMT في الطفرة المذكورة؛ هو شكل غير نشط. تبعا لهذاء تتقيد القدرة على تحفيز تحويل Met إلى SMM مصدرة أولي DMS بالشعير ٠ من النوع البري؛ كما هو مقابل إلى الطفرة 017 8. مثال ١١ أنظمة مراقبة لطفرة الشعير AY بالإضافة إلى الاختبار الحيوي الكيميائي للكشف عن لبابات الشعير في Byala 8007 (قارن المثال oY فإن JU الحالي يصف طريقة جينية مهيأة لتحديد لبابات طفرية أو ٠ منتجاتها. بالتعديلات المناسبة المعروفة للماهرين في الفن؛ قد تطبق الطريقة أيضا للكشف lee إذا تم تحضير منتج نباتي معين باستخدام طفرة الشعير 067 8. يعتمد الاختبار على التحليل للكشف عن الشكل المتعدد لأجل nucleotide الفردي (SNP) تحديدا طفرة GA عند الموضع 0716 ؟ لجين MTT في الطفرة (ATT كما هو مبين في الشكل 10 ومع سمات مجموعات المادة الأولية oligonucleotide المدرجة في جدول 7. Vo يتولد منتج PCR طوله 77/١ ما- مع الترتيب المحدد aly تعريف الترتيب رقم: 7؟- عند استخدام مجموعة المادة الأولية رقم ٠١ في التفاعل مع genomic DNA من cv.
Prestige الشعير كجزيء تركيبي؛ بينم لا يتم تكبير أي منتج عندما يعمل genomic DNA لطفرة 7 كجزيء تركيبي- في الحالة الأخيرة ببساطة بسبب عدم وجود ازدواج قاعدة بين النهاية YF من المادة الأولية المعكوسة والجزيء التركيبي (الشكل 9١لأ)).على أية حال؛ يتم الحصول Yo على منتج bp YY) PCR مع مجموعة المادة الأولية رقم 7١ في تكبير PCR مع genomic DNA لطفرة 8067 (تعريف الترتيب رقم: 4 3؛ الشكل V9 )1( لأن المادة الأولية المعكوسة لديها انسجام ترتيب كامل مع الجزيء التركيبي. تصمم مجموعة المادة الأولية رقم YY المكونة من ؛ مواد أولية مذكورة أعلاه ومدرجة لمجموعة المادة الأولية رقم 7١ و١7- اثنين لتكبير gia محتوي على طفرة ه<-03076 في جين MMT لطفرة (ATT واثنين لأجل طفرة Yo مدج-061462 في جين MMT لطفرة VE VA (تعريف الترتيب رقم: FN قارن مثال -)١١7 لمراقبة وجود جين طفري لأجل MMT المحتوي على كل من طفرات nucleotide سالفة الذكر.
Yo
يجري تجريبيا كل واحد من تكبيرات PCR المذكورة أعلاه RedTaq polymerase Jeli genomic DNA نانوجرام من ٠٠١ ,008ع:5)» مكون من cat.no.
D6063) ميكرولتر ٠
و١*-١٠٠ بيكو جزيء جرامي من كل مادة أولية من مجموعة مادة أولية خاصة (جدول 7).
بعد التكبير في جهاز تدوير PCR قياسي ١( دقيقة عند 10*مئوية؛ ثم Ve دورة من:
© 44تمئوية؛ ٠١ ثانية- ٠١ duit ثانية-77*مئوية؛ Ve ثانية؛ تنتهي مع ٠١ دقائق عند 7"مثوية)؛ إن YO ميكرولتر من قاسم تام من العينة يطبق عليه ارتحال كهربي قياسي على
هلام LY agarose كما هو مبين في الشكل Yo )=( إن PCR مع genomic DNA لأجل cv.
Prestige في وجود مجموعة المادة الأولية رقم ٠٠ ومجموعة المادة الأولية رقم YY ينتج
جزء bp - YY) DNA ولا ينتج أي أجزاء» على الترتيب. بيتما PCR مع genomic DNA
٠ لطفرة 80317 في وجود مجموعة مادة أولية رقم Yo ومجموعة مادة أولية رقم 7١ لا ينتج أي أجزاء وينتج جزء bp - YY) DNA على الترتيب. في هذه الحالات التي تكون فيها النتيجة الأخيرة هي نتائج تفاعل PCR مع genomic DNA من حبة شعير مجهولة الهوية؛ فهناك احتمالية كبيرة أن يكون DNA للجزيء التركيبي مماثلا لذلك الذي يخص الطفرة AY تشتمل الجهود الإضافية لدعم هذا الاستنتاج على تحليلات لاختبار مستويات SMM (قارن
.)4 (قارن مثال MMT ومستويات نشاط oY مثال Vo
تشتمل طريقة منفصلة للتحقق من أن الطفرة 80917 تفتقر إلى MMT على تحليل تبقع cwestern باستخدام الإجراء التقني والجسم المضاد لمضاد MMT كما هو مبين في مثال ؟. بصورة عملية؛ يتم إنبات لبابات ev.
Prestige ولبابات طفرة ATT عند ١٠“مئوية لمدة ؟
You ويلي هذا التجانس المنفصل لنوع بري واحد ولبابة طفرية واحد؛ كل منهما في al
Yo ميكرولتر من 1120. بعد الطرد المركزي عند ١7٠٠١ دورة في الدقيقة لمدة ٠١ دقائق؛ يخلط ٠ ميكرولتر من كل ale طافية مع © ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني لحمل SDS
يغلي لمدة 0 دقائق؛ يحمل على هلام «VY SDS-polyacrylamide يفصل بالارتحال الكهربي؛ يتبقع كهربيا؛ ويتم جسه في النهاية مع جسم alias لمضاد MMT عديد النسخ (الشكل Vo (د)). يتم بسهولة إدراك شريط MMT protein مميز وزنه ١٠١ كيلو دالتون في
Yo خلاصة cov.
Prestige بينما protein النشط Lelie من طفرة 80967 لا يهاجر بصورة مشتركة مع protein علامة ١١١ كيلو دالتون. طبقا لهذاء إن طريقة تحليل تبقع western المذكورة أعلاه هي طريقة مفيدة لفحص ما إذا كانت لبابات الشعير النابتة تنتج MMT أو تفتقر إلى vi هذه القدرة. قد تستخدم اختبارات جزيئية وحيوية كيميائية إضافية لتأكيد أن حبة معينة هي حبة
AY مشتقة من الطفرة
AY عن الطفرة SNP المواد الأولية لكشف iV جدول رقم نهايات المنتج النهائي | المادة الأولية المتقدمة المادة الأولية 0 (ترتيب معطى 0 -> | المعكوسة (ترتيب ١ quill مجموعة | منتج (تعريف جلا0)***» 3 « | ****(DNA V رقم:) PCR awl الأولية CATCTAGTCACTCAA | CGATTCCAGCTTCCGG vv _YATY Y. eg | ne 7 ١ (vv رقم: CATCTAGTCACTCAA | CGATTCCAGCTTCCGG vs - 1 "١ : ريف الي (تعريف التوتيب رثم TE TT 0 (YA رقم: CATCTAGTCACTCAA | CGATTCCAGCTTCCGG vi _Y AT YY : ركه ish ا يف رق ريف HT ar (va رقم: CTACGGAACAAGAG | GGCATCCAGATTCCAT 2 -١ ١ (تعريف | 01000441 (تعريف CTICAG LEAT (Af الترتيب رقم: (Av ا الترتيب رقم: (تعريف MMT من نوع بري لأجل genomic ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب )* الترتيب رقم: ؟). oo
AY لأجل 1 من الطفرة genomic ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب (** (A (تعريف الترتيب رقم: من الطفرة MMT لأجل genomic ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب )*** (VA (تعريف الترتيب رقم: VENA
PCR الترتيب عند النهاية ©" للجزء المدرج في عمود 'نهايات منتج )*+*** Ve
PCR للجزء المذكور في عمود 'نهايات منتج YF ترتيب التكملة عند النهاية )+****
vy
Ve مثال هو جين طفري في موقع الجديلة 0 من 1١6014 لطفرة الشعير MMT الجين الذي يشفر intron2 أو مستويات منعدمة إطلاقاء في SMM بعد اكتشاف المستويات المنخفضة للغاية من ٠ خلاصات لبابات الإنبات لطفرة الشعير ١٠6018 يخضع النبات إلى تحليلات تحت نفس الشروط التجريبية كتلك الموصوفة لأجل طفرة 8017 في المثال 4 أعلاه. مع هذاء تكون المادة النباتية من النوع البري في هذه الحالة هي مادة من Sebastian .7؛ كما هي مستخدمة للتوليد الطفري مع NaN; في رقعة من لبابات مشتملة على طفرة .٠60٠8 تصمم التجارب التي تحدد الطفرة؛ التي تنتج النوع الشكلي الناقص (MMT وتنفذ كما هو موصوف هنا أدناه. Ye أولاء تجرى مقارنة لترتيبات genomic DNA والمميز لأجل الجين الذي ينفذ MMT من cv. Sebastian (تعريف الترتيب رقم ٠٠ لأجل ترتيب ¢genomic DNA تعريف الترتيب رقم: VY لأجل ترتيب «cDNA تعريف الترتيب رقم: VA لأجل ترتيب cDNA المترجم؛ في كل الحالات مع الترتيبات المماثلة لهذه التي تخص cv. Sebastian كما هو موصوف في المثال A (Lia والطفرة ١6014 (تعريف الترتيب رقم: ١9 لأجل genomic call وتعريفات الترتيب ٠ أرقام: Jal Yo (YF oY) 7١ ترتيبات (cDNA مع التركيز على المناطق التي تقوم على امتداد codons البداية والإيقاف للترجمة. يحدد انتقال قاعدة GA في جزء جين محدد الترتيب لطفرة lund) £0 VA في موقع مانح جديلة مانحة موضوع مباشرة بعد ١ exon عند القاعدة الأولى من «Y intron تحديدا أكثر عند nucleotide رقم 677 -١ ومن المتوقع بالتالي أن يؤثر على معالجة RNA الأولي لنسخة الجين (الشكل (V1 7 ثانياء باستخدام مجموعة المادة الأولية ١3 (جدول ؛)؛ يهياً تفاعل RT-PCR ويجهز لتكبير منطقة الجين التي تمتد فوق exon ¥ exon * من الجين الذي يشفر MMT من cv. Sebastian والطفرة ١0٠78 (الشكل ١١ (أ)). بعد تكبير DNA إن منتجات التفاعل يتم عليها تطبيق الارتحال الكهربي لهلام agarose ويتم تصوير النتيجة في الشكل ١١(ب). بالتشابه مع ذلك الموصوف لأجل الطفرة ATF في المثال 9؛ إن RNA نوع بري من cv.Sebastian Yo ينتج جزء PCR واحد؛ المنتج © في الشكل (VT والذي يتماثل في الطول وترتيب (DNA قارن تعريف الترتيب رقم: ١٠؛ مع ذلك الذي يخص قواعد الامتداد من VET إلى TY من cDNA كامل الطول لأجل MMT الشعير من نوع بري (تعريف الترتيب رقم:
YA
تؤكد هذه النتيجة مرة أخرى أن الوصل بالجدل البديل ليس سمة لإظهار جين من نوع .)١١ بري. والذي PCR في تفاعل ٠40178 للجزيء التركيبي المنقى من الطفرة RNA ثالثاء يستخدم (تعريف ١ المنتج (YY يولد ؟ أجزاء خاصة- يشار إليها بالمنتج + (تعريف الترتيب رقم: (ج)- والتي (DT في الشكل )1١ تعريف الترتيب رقم: ( A والمنتج (YF الترتيب رقم: ٠ تكون مختلفة في الطول والترتقيب عن المنتج المكبر للجزيء التركيبي بري النوع. تقترح هذه لطفرة MMT ؟ في جين intron الملاحظة أن الطفرة الفردية في موقع الجديلة ©" من الأولي بإزالة موقع الجديلة الطبيعي؛ لكنها بدلا من ذلك mRNA تعرقل معالجة ٠0 + تنشط استخدام مواقع الجديلة الإضافية الشفرية. في هذا الصددء؛ بالنسبة لكل من المنتج بينما يحدد الموقع بالنسبة للمنتج 4 في oY intron والمنتج 7 يحدد موقع جديلة شفري في ٠ (ج) لنتائج تحديد الترتيب المذكورة أعلاه. ١6 تتوافر مقارنة بيانية في الشكل LY exon إيقاف ترجمة ناضجة قبل codons بإظهار DNA بالإضافة لهذاء تقوم تحليلات ترتيب لترقيم القاعدة الذي يغص Lida ١581-1574 عند القواعد TAG] 1 الأوان في المنتج
TAA] ١ (تعريف الترتيب رقم: ١٠١)]؛ المنتج cv. Sebastian من الشعير» genomic DNA من الشعير؛ genomic DNA طبقا إلى ترقيم القاعدة الذي يخص ١847-1784 68 عند القواعد Vo 1918-1917 عند القواعد TGA] A والمنتج ([(V1 (تعريف الترتيب رقم: ov. Sebastian (تعريف الترتيب cv. Sebastian من الشعير؛ genomic DNA طبقا لترقيم القاعدة الذي يخص
VIF OA OAT مترجمة يبنلغ طولها proteins مما ينتج »])١١ رقم: وتعريف الترتيب (VE تعريف الترتيب رقم: YY المدرجة كتعريف الترتيب رقم: camino acid (الشكل AY على الترتيب. بالتشابه مع النتائج الموصوفة أعلاه لأجل الطفرة YN رقم: ٠ عن طبيعة ald (ه) توفر بيانات (IT JEN (ه))؛ فإن التوضيحات في (IY القواعد الخاصة الداخلة في أحداث الوصل بالجدل البديل.
Yo مثال VEYA مبتورة من الطفرة MMTs الإظهار لتخليق 5 الإظهار التي توجه plasmids إن الأساس المنطقي والاستراتيجية اللذين يخصان تشييد Yo يتشابهان مع ما هو ١6018 المشتق من الطفرة MMT تخليق © نسخ مبتورة مخلقة من لأجل الطفرة 017 8. بإيجاز؛ إن هدف التجربة هو التحقق من أن ١١ موصوف في المثال
الأحداث الشاذة للوصل بالجدل التي تخص الطفرة ١540087 تولد نسخ تشفر MMTs غير التشطة. إن امتدادات الجين المخلق يجب بالتبعية أن تشفر proteins التي لها ترتيبات- المدرجة في تعريف الترتيب رقم: (YY تعريف الترتيب رقم: VE وتعريف الترتيب رقم: 77- تبين الأحداث الشاذة للوصل بالجدل التي تنتج المنتج 1 المنتج 7 والمنتج A (قارن الشكل (CECI باستخدام plasmid pET19b-MMT قارن المثال ٠ كجزيء تركيبي في ؟ PCRs قياسية متعاقبة مع مجموعة المادة الأولية أرقام YO 5 YE YY (جدول oA ينتج جزء مكبر 394-bp (تعريف الترتيب رقم: .)٠١ يتم هضم هذا بواسطة Sacll-BamHI ويرتبط مع جزء Sacll-BamHI كبير من pET19b-MMT (الشكل 7١١(أ))؛ مما يعطي plasmid PET19b- ٠ 110614086-0:006 الإظهار (الشكل VY (ب))؛ مصمم لتخليق MMT مبتور يقابل المنتج + كما يصورهِ الشكل (NT باستخدام نفس الإجراء الموصوف هنا أعلاه لأجل الجزء 44 ؟- bp لكن OY) مع مجموعة مادة أولية أرقام YE YY و16 في ؟ تكبيرات PCR متعاقبة (جدول ((A يتولد جزء bp— YY (تعريف الترتيب رقم: ١ 7)؛ والذي عند هضمه مع Sacll-BamHI يرتبط Vo .مع جز Sacll-BamHI كبير من 1217196-31417م (الشكل ١١())؛ معطيا plasmid pET19b-Line14086-Prod7 (شكل VV (ج)) Plasmide bie الإظهار هذا لتخليق 17 مبتور يقابل ذلك الذي يوفر المنتج ١ كما يصوره الشكل (YT في تجربة موازية- تجرى بطريقة مماثلة للموصوفة أعلاه لأجل PET19b-MMT لكن مع مجموعة مادة أولية أرقام YA YY (جدول —(A يتم تكبير جزء ©77- bp (تعريف الترتيب ٠ رقم: (VY والذي عند هضمه مع Sacll-BamHI يرتبط مع جزء Sacll-BamHI كبير من pET19b-MMT (الشكل VY )((« مما يعطي plasmid pET19b-Line14086-Prod8 الإظهار (الشكل 7١١٠(د)) لتخليق MMT مبتور يقابل المنتج A (قارن الشكل ١١(ب)).
2 4 io 3 w Q سر سر ار on ~= 9 34 7 2 = 8 ب < © ١ = 7 4 © J S34 J © 3 SEE 2 2594 ل - نع . ان = 3 2 0 S 9 S < 3 2 انا > < < 3 =| نا = — S ب S > | © OQ
A 3 = oe De = QO < 2 5 = 9 4 52 O = < < S| BE — < S $ <| ما O > SO Q O OQ
Z = < | 9 < ا5 S
A O تي ى ١ نب < < << < م | 0 < ol EB < & 39/2 ا S د 43 EEE: EEE 23 2 S58 5 3 = 3 = 2 3 oO > | QO | 5 < 2 < > انبا ات 3 4 | ~ ol = SS ا ١ ي OU 3 O =
Va. ص > > ١ ن ٠| ب < 22g 2.28 O 9 7 ال = 9 S38 =e 4 5 S و5833 323 = J. 1 الح << Q OQ =< ب 3 3493 23 ؟ 1 ً < — il a * 9 pI O 5 Oo < ب ب + Oo = الل < ak EEE INE S|, 2 22S 5 3 5 4 $ 2 1 AE Q ب 5 SZ oS =< 1 = 3 EN 2 N << $ QO = 1 ب Z kK: < = 31 > اث a ; SQ 3 oO : 3 * <£ S ° 5 2 3 ا ا 5 | حر )| ود ا 3 = |e 2 : <3 Z = < > إ + ج = > << QO < Of QO : < 3 ‘J جه a 0 a
Jr 3 J 3 -— >» سي 1 اي >
J 1 5 ' lo ١ 7 ع > 4 > J, > J,
Let 03 7 a ع ow < 3 373 1+ : : و ا . + 7 3 3 3 > +
<< >
EF
1 $ Oo
I 6») . < a OO ; 544% 4354 8 0 a . 3) © p= ve 3) 5 ب 5 3 oy B= 5 3 os 7 رن 2333 ] 833 Tis 218 27 و £818 8 4|595 - و 5 2S = 2
S 5 3 3 A = E 2 < <
OlE © 90 = 2/5 S % QO ~~ >» نج QQ Q 5 =
Ae - اج 9 5 ٍ ع z 35 8398 م < =| 2 S S 5:
Allg 8 = c <|E ZS 3 ب = > ب ب 3 2 5 a) OQ = OO = 1 = 0 S 4 = < 5 = S 3 8 1 Jig ] - = S = ب EN oO 1 < a 0 < =~ 3 7 S “i > بن بس 2 =
QO 1 Oo 3 : 2 S = 9 2 =
QO wT 38 SIT 8 3 5 S 3 a 1 ج = —_ ب ست = نا 7 «13% | 7 83 9 3 © © 7 = 3 = = = . = J a3 3 + 3 3 3 2 4 > 3 : < 3 OQ 0 << ا جع © 2 3 اس ِ 5 1 5 of - = 5 5 Sr
T = T= =< < 5 =< < = . 3 < ص ٍ 3 Z 2 0 أن ~ دا دا جع ! |! > لم > ل a z $ = 2
I
) — >» r ok
AY
تحته خط؛ في كل التفاعلات. Sacll يلاحظ أن نفس المادة الأولية المتقدمة؛ مع موقع )* الجزيء التركيبي تبرز DNA بالنسبة للمواد الأولية المعكوسة؛ إن امتداد ©" بدون التقسية إلى إيقاف codons تتضح بحروف مائلة؛ وتظهر BamHI بوضع خط تحتي موجي؛ إن مواقع الترجمة التكميلية بحروف سوداء ثخينة. تشير الأرقام إلى أرقام 106 في رقم تعريف الترتيب المقابل في العمود )** ° المجاور. ١١ مثال VE VA المخلق من طفرة MMT الأشكال غير النشطة لأجل حيث أن البنيات المشتقة من الطفرة 8017 المستبدلة مع تلك OY JB) يتم اتباع إجراء 051190- Linel4018-Prod6 gE. coli تتقل بكتيريا V+ VA التي تخص طفرة ٠ (أ)-(د)؛ مع VV J all) pET19b-Line14018-Prod8 s pET19b-Line14018-Prod7 المقابل المبين في الشكل 7١١(ه))- لكن التجارب التي تستبعد amino acid اصطفاف تظهر مقابل VY الموصوف في المثال MMT كجسم مضاد لمضاد western تحليلات تبقع
NEVA لأجل الطفرة MMT امتداد ترتيب غائب في جزء خاص من لهذا (VA (شكل SMM لا تظهر أن من خلاصات البكتيريا المنقولة قدرتها على توليد Vo أعلاه يمنح أساس الذي يستنتج منه أن طفرة الشعير ١١ فإن نفس النقاش الموجود بالمثال المصدر SMM غير وظيفية والتي تفتقر للقدرة الحفزية لتشكيل MMT تولد إنزيمات ٠0
DMS الأولي ١١ مثال VENA أنظمة مراقبة لأجل طفرةٍ الشعير ٠ (قارن VEYA بالإضافة إلى الاختبار الحيوي الكيميائي للكشف عن لبابات الشعير لطفرة يصف المثال الحالي طريقة جينية قد تم تصميمها لتحديد اللبابات الطفرية أو oY المتال يعتمد هذا على التحليل للكشف عن VEYA المنتجات النباتية المحضرة من طفرة الشعير ١77 عند الموضع GA تحديدا طفرة (SNP) الفردي nucleotide الشكل المتعدد لأجل ومع سمات مجموعات المادة V4 لجين 1411 في طفرة 4018٠؛ كما هو موضح في شكل Yo +A المدرجة في جدول oligonucleotide الأولية
AY
مع الترتيب المحدد بأنه تعريف الترتيب رقم: 10 عندما -121 bp طوله PCR يتولد منتج من genomic DNA تستخدم مجموعة مادة أولية رقم 4 في التفاعل مع الشعير كجزيء تركيبي؛ بينما لا يتم تكبير أي منتج عندما يعمل cv. Sebastian كجزيء تركيبي - في الحالة الأخيرة ببساطة بسبب عدم VENA من طفرة genomic DNA وجود ازدواج قاعدة بين النهاية 7 من المادة الأولية المعكوسة والجزيء التركيبي (الشكل © مع مجموعة المادة الأولية bp -١"١ PCR (ب)). على أية حال؛ يتم الحصول على منتج 4 f(T (تعريف الترتيب رقم: ٠0٠48 من طفرة genomic DNA مع PCR تكبير AY رقم .))ب(٠9 لأن المادة الأولية المعكوسة لديها انسجام ترتيب كامل مع الجزيء التركيبي (الشكل المكونة من 4 مواد أولية مذكورة أعلاه ومدرجة (VY تصمم مجموعة المادة الأولية رقم محتوي على طفرة 8ج-061462 في sha ا لمجموعة المادة الأولية رقم 74 و١7- اثنين لتكبير ٠ (أي؛ تعريف الترتيب رقم: 37)؛ واثنين لأجل طفرة ٠4018 من الطفرة MMT جين من الطفرة 80567 (أي؛ تعريف الترتيب رقم: 4 ؟؛ قارن المثال MMT في جين 03076-<8 nucleotide لمراقبة وجود جين طفري لأجل 1 المحتوي على كل من طفرات -) المذكور سالفا. ميكرولتر من ٠٠ المذكورة أعلاه كتفاعل PCR يجرى تجريبيا كل واحد من تكبيرات - ٠ genomic ناتوجرام من Yoo المكون من ¢(Sigma, cat.no. D6063) RedTaq polymerase بيكوجزيء جرامي من كل مادة أولية من مجموعة مادة أولية خاصة (جدول ٠٠١-٠١ و DNA دورة من: To دقيقة عند 15"مثوية؛ ثم ١ ( قياسي PCR بعد التكبير في جهاز تدوير .)١ دقائق عند ٠١ ثانية؛ تنتهي مع 3١ ثانية- 77"مئوية؛ Ye dps TE ثانية- ٠0 Asli ميكرولتر من قاسم تام من العينة يطبق عليه الارتحال الكهربي القياسي YO ؟لا*مئوية)؛ فإن Ye عنسمدع من DNA مع PCR كما هو مبين في الشكل 4حج) إن . LY agarose على هلام ينتج Ve ومجموعة المادة الأولية رقم YO في وجود مجموعة المادة الأولية رقم Cv. Sebastian genomic DNA مع PCR ولا ينتج أي أجزاء؛ على الترتيب. بينما bp =) YY) DNA جزء في وجود مجموعة المادة الأولية رقم 79 ومجموعة المادة الأولية رقم 30 لا ٠40948 لطفرة على الترتيب. في هذه الحالات التي تكون فيها bp =) YY DNA ينتج أي أجزاء وينتج جزء ¥@ من حبة شعير مجهولة الهوية؛ genomic DNA مع PCR النتيجة الأخيرة هي نتائج تفاعل للجزيء التركيبي مماثلا لذلك الذي يخص الطفرة DNA فهناك احتمالية كبيرة أن يكون
عم .٠08 تشتمل الجهود الإضافية لدعم هذا الاستنتاج على تحليلات لاختبار مستويات 41 (قارن مثال oY ومستويات نشاط MMT (قارن مثال 4). تشتمل طريقة منفصلة للتحقق من أن الطفرة ١6094 تفتقر إلى MMT على تحليل تبقع western باستخدام الإجراء التقني والجسم المضاد لمضاد MMT كما هو مبين في مثال 7. © بصورة عملية؛ يتم إنبات لبابات ov.
Sebastian ولبابات طفرة ١56017 عند ١٠“مئوية لمدة ؛ col ويلي هذا التجانس المنفصل لنوع بري واحد ولبابة طفرية واحد؛ كل منهما في ٠٠١ ميكرولتر من (HO بعد الطرد المركزي عند ١٠٠١ دورةٍ في الدقيقة لمدة ٠١ دقائق؛ يخلط VO ميكرولتر من كل مادة طافية مع © ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني لحمل SDS يغلى لمدة 0 دقائق؛ يحمل على هلام «VY SDS-polyacrylamide يفصل بالارتحال ٠ الكهربي؛ يتبقع كهربياء ويتم جسه في النهاية مع جسم مضاد لمضاد MMT عديد النسخ (الشكل ١١(د)) . يتم بسهولة إدراك شريط MMT protein مميز وزنه ١٠١ كيلو دالتون في خلاصة cov.
Sebastian بينما protein النشط مناعيا من طفرة ١50178 لا يهاجر بصورة مشتركة مع protein علامة ٠١8١ كيلو دالتون. طبقا لهذاء إن طريقة تحليل تبقع western المذكورة أعلاه هي طريقة مفيدة لفحص ما إذا كانت لبابات الشعير النابتة تنتج 11347 أو ٠ تفتقر إلى هذه القدرة. قد تستخدم اختبارات جزيئية وحيوية كيميائية إضافية لتأكيد أن حبة معينة هي حبة مشتقة من الطفرة NEA جدول 4: المواد الأولية لكشف SNP عن الطفرة ١55617 رقم نهايات المنتج النهائي | المادة الأولية المتقدمة | المادة الأولية المعكوسة مجموعة | ١ pe (تعريف الترتيب ١ (ترتيب معطى 0« | Veo iy) المادة PCR رقم:) ****(DNA 'Y الري(0)***+* الأولية CTACGGAACAAGAGGT | GGCATCCAGATTCCAT vo 141 Yq EEE الترتيب رقم: (BY | الترتيب رقم: (V0) CTACGGAACAAGAGGT | GGCATCCAGATTCCAT v1 -١١ v. EE الترتيب رقم: (AA الترتيب رقم: (YoY CTACGGAACAAGAGGT | GGCATCCAGATTCCAT ve -١171 vy 0 6 (تعريف 7 (تعريف
Ao apm zl
CATCTAGTCACTCAAAG | CGATTCCAGCTTCCGG ve —YAY) (تعريف AATTGCTAT | م 0 (تعريف الترتيب 1 )٠١ 4 الترتيب رقم: )٠٠١ رقم: (تعريف MMT من نوع بري لأجل genomic ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب )*
NAR الترتيب رقم: ١017 من الطفرة MMT لأجل genomic ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب )** .)١9 (تعريف الترتيب رقم:
AY لأجل 1 من الطفرة genomic ترقيم زوج قاعدة كهذا الذي يخص ترتيب (+ ° (A (تعريف الترتيب رقم:
PCR الترتيب عند النهاية ©" للجزء المدرج في عمود 'نهايات منتج )**** "PCR ترتيب التكملة عند النهاية ؟” للجزء المذكور في عمود "نهايات منتج )***** المراجع المذكورة وثاثق براءة الاختراع ٠ وآخرين. Mullis, KB. براءة الاختراع الأمريكية رقم 5187197 بواسطة وآخرين. Mullis, 16.3. براءة الاختراع الأمريكية رقم 48001949 بواسطة
Reuther,H براءة الاختراع الأمريكية رقم 4 4714 07 بواسطة وآخرين. Douma, A.C. براءة الاختراع الأمريكية رقم 1170816 بواسطة وآخرين. Breddam, K. بواسطة ١ 4700٠06 براءة الاختراع الأمريكية رقم Vo
Bisgaard- إلى Yo o/c cOVTAE منشور طلب براءة الاختراع الأمريكية رقم
Frantzen,H,et al. 17/7/8178 براءة الاختراع الأسترالية رقم
Breddam, 16. بواسطة ٠٠058/08949764 طلب براءة اختراع 001 للطلب الدولي وآخرين. ٠ النشرات الأخرى
American Association of Cereal Chemists, "Approved methods of the American
Association of Cereal Chemists." ISBN 0-913250-86-4 (1995).
تم American Society of Brewing Chemists, "Methods of analysis of the American Society of Brewing Chemists." ISBN 1-881696-01-4(1992). Bourgis, F. et al., "S-Methylmethionine plays a major role in phloem sulfur transport and is synthesized by a novel type of methyltransferase.” Plant Cell ° .1999 ,11:1485-1497 Briggs, D.E. et al., "Malting and brewing science.
Volume I Malt and sweet wort." Chapman and Hall, New York, USA.
ISBN 0412165805, 1981. Dufour, J.P., "Direct assay of S-methylmethionine using high-performance liquid chromatography and fluorescence techniques." J.
Am.
Soc.
Brew.
Chem. 44:1- Ye .6,1986 Durai, S. et al., "Zinc finger nucleases: custom-designed molecular scissors for genome engineering of plant and mammalian cells." Nucleic Acids Res. 33:5978- .2005 ,5990 European Brewery Convention, "Analytica - EBC." ISBN 3-418-00759-7 (1998). Hansen, M. et al., "Antisense-mediated suppression of C-hordein biosynthesis in Vo the barley grain results in correlated changes in the transcriptome, protein profile, and amino acid composition." J.
Exp.
Bot. 58:3987-3995, 2007. Hough, 1.5. et al. "Malting and brewing science.
Volume II Hopped wort and beer." Chapman and Hall, New York, USA.
ISBN 0412165902, 1982. Hysert, D.W. et al., "The origin and control of dimethyl sulfide and its precursor in ٠ malt." Tech.
Q.
MBAA 17:34-43, 1980. lida, S. and Terada, R., "Modification of endogenous natural genes by gene targeting in rice and other higher plants." Plant Mol.
Biol. 59:205-219, 2005. Imashuku, H., "Two new technologies for efficient and flexible wort boiling: 1. Rest before wort boiling to convert SMM to DMS; 2. Hop boiling separately from Yo wort." 3rd World Brewing Congress, Presentation 0-52, Program Book, p. 91 and attached presentation slides, 2008.
AY
Institute of Brewing, "Institute of Brewing. Methods of analysis." ISBN 0-900489- 10-3, 1997.
Kleinhofs, A. et al., "Induction and selection of specific gene mutations in
Hordeum and Pisum." Mutat. Res. 51:29-35, 1978.
Ko, S. et al., "S-Methylmethionine is both a substrate and an inactivator of 1- ° aminocyclopropane-1-carboxylate synthase." Arch. Biochem. Biophys. 421:85- 90, 2004.
Kocsic, M.G. et al., "Insertional inactivation of the methionine S-methyltransferase gene eliminates the S-methylmethionine cycle and increases the methylation ratio." Plant Physiol. 131:1808-1815,2003. Ve
Kumar, S. et al., "Gene targeting in plants: fingers on the move." Trends Plant Sci. 11:159-161,2006.
Lai, S. et al., "A splice site mutant of maize activates cryptic splice sites, elicits intron inclusion and exon exclusion, and permits branch point elucidation." Plant
Physiol.121:411-418,1999. Yo
Magquat, L.E. and Carmichael, G.G., "Quality control of mRNA function." Cell 104:173-176,2001.
McElroy, D. and Jacobsen, J., "What's brewing in barley biotechnology?"
Bio/Technology 13:245-249, 1995.
Meilgaard, M.C., "Prediction of flavour differences between beers from their ص chemical composition." J. Agric. Food Chem. 30:1009-1017, 1982.
Mendell, J.T. and Dietz, H.C., "When the message goes awry: Disease-producing mutations that influence mRNA content and performance." Cell 107:411 -414, 2002.
Mudd, S.H. and Datko, A.H., "The S-methylmethionine cycle in Lemna Yo paucicostata." Plant Physiol. 93:623-630, 1990.
AA
Nevo, E. "Origin, evolution, population genetics and resources for breeding of wild barley, Hordeum spontaneum, in the Fertile Crescent." In Shewry, P.R. (ed.): "Barley: Genetics, Biochemistry, Molecular Biology and Biotechnology," pp. 19- 43. CAB International, Wallingford, UK. ISBN 0-85198-725-7, 1992. 1992.
Pimenta, M.J. et al., "Determination of S-adenosyl-L-methionine:L-methionine S- ° methyltransferase activity by selective adsorption of [methyl->H]S- adenosylmethionine onto activated charcoal." Anal. Biochem. 225:167-169, 1995.
Phenomenex, "HPLC application." ID No.: 15992, 2006.
Ranocha, P. et al., "The S-methylmethionine cycle in angiosperms: ubiquity, antiquity and activity." Plant J. 25:575-584, 2001. Ye
Rasmussen, S.K. and Hatzack, F., "Identification of two low-phytate barley (Hordeum vulgare L.) grain mutants by TLC and genetic analysis." Hereditas 129:107-112,1998.
Robbins M.P. et al., "Gene manipulation of condensed tannins in higher plants."
Plant Physiol. 116:1133-1144, 1998. Vo
Sambrook, J. and Russell, D.W., "Molecular cloning. A laboratory manual, 3rd
Ed.", Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York,
U.S.A. ISBN30 0-87969-577-3,2001.
Scheuren, H. and Sommer, K., "Vaporescence versus boiling - Expulsion of aromatic compounds during the whole wort production.” 3rd World Brewing Yo
Congress, Presentation 0-55, Program Book, .م 92 and attached presentation slides, 2008.
Sinibaldi, R.M. and Mettler L.J., "Intron splicing and intron-mediated enhanced expression in monocots." Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 42:229-257, 1992.
Stahl, Y. et al., "Antisense downregulation of the barley limit dextrinase inhibitor Yo modulates starch granule sizes distribution, starch composition and amylopectin structure”. Plant J. 39:599-611, 2004.
قم Tagmount, A. et al., "An essential role of S-adenosyl-L-methionine:L-methionine S-methyltransferase in selenium volatilization by plants.
Methylation of selenomethionine to selenium-methyl-L-selenium-methionine, the precursor of volatile selenium." Plant Phys. 130:847-856, 2002. Thanbichler, M. et al., "S-Methylmethionine metabolism in Escherichia coli."J. 8 Bacteriol. 181:662-665, 1998. Tzfira, T. and White, C., "Towards targeted mutagenesis and gene replacement in plants." Trends Biotechnol. 23:567-569, 2005. von Bothmer, R. "The wild species of Hordeum: Relationships and potential use for Improvement of cultivated barley." In Shewry, P.
R. (ed.): "Barley: Genetics, ٠١ Biochemistry, Molecular Biology and Biotechnology," pp. 3-18. CAB International, Wallingford, UK.
ISBN 0-85198-725-7, 1992. Wu, J. et al., "Nonsense-mediated mRNA decay (NMD) silences the accumulation of aberrant trypsin proteinase inhibitor mRNA in Nicotiana attenuata." Plant J. Vo .2007 ,51:693-706 جدول :٠١ قائمة الترتيب cv. الشعير من cDNA Nucleic acid ١ رقم:
«Haruna Nijo يمتد فوق codons البداية والإيقاف في جين «cDNA -MMT إطار
قراءة مفتوح لأجل MMT
يستخلص ill من GenBank برقم وصول AB028870
رقم: Protien Y الترتيب الذي يخص MMT
cv.
Haruna الشعير من
Nijo مترجم من تعريف q. wes cv. الشعير من DNA Nucleic acid رقم: ؟ genomic ترتيب «Prestige البداية codons يمتد فوق
MMT والإيقاف في جين cv. الشعير من cDNA Nucleic acid رقم: ؛ codons فوق Jia «Prestige البداية والإيقاف في جين من cDNA ترتيب MMT إطار القراءة المفتوح لأجل
MMT
الشعير معاد cDNA Nucleic acid o رقم: tev. Prestige استنساخه من معاد استنساخه من cDNA إطار القراءة المفتوح لأجل الذي يمتد فوق MMT البداية والإيقاف في 98 لكن محتوي MMT جين على ؟ طفرات (قارن مثال مستخدم لأجل الإظهار .)٠ الشعير MMT المغاير لأجل -E. coli في الشعير MMT الترتيب لأجل Protein + رقم: المترجم cov. Prestige من . 4 من تعريف الترتيب رقم: تريب لأجل 7 من Protein 7: رقم «cv. Prestige الشعير» مترجم من تعريف الترتيب
رقم: ©؛ يستخدم لتخليق er || رقم: 8 DNA Nucleic acid الشعير من الطفرة 7 الترتيب Genomic لأجل MMT الذي يمتد فوق 08 البداية والإيقاف في جين MMT رقم: 4 Nucleic acid ترتيب جزءِ RT-PCR المكبر من cv.
Prestige الشعير» طبقا للمنتج ١ في الشكل "١(ب) )2 رقم: Nucleic acid ٠١ ترتيب جزء RT-PCR المكبر من طفرة الشعير AY طبقا للمنتج ؟ في الشكل "ا(ب)» (ج) رقم: Protein ١١ ترتيب مترجم كامل Bide من RNA مجدول بطريقة خاطئة من الطفرة 8057 RNA المذكور يعمل كجزيء تركيبي في تكبير RT-PCR مما يوفر المنتج ؟ في الشكل ١١(ب)؛ )© رقم: Nucleic acid ١١ ترتيب جزء RT-PCR المكبر من طفرة الشعير AY مقابل المنتج AY الشكل "ا(ب)» (ج). رقم: Protien ٠١ ترتيب مترجم كامل مشتق من RNA المجدول بطريقة ay خاطئة من طفرة الشعير المذكور RNA يعمل 7 كجزيء تركيبي في تكبير مما يوفر المنتج ؟ RT-PCR 2) S(T في الشكل المكبر RT-PCR ja ترتيب Nucleic acid VE رقم: ATTY من طفرة الشعير الذي يقابل المنتج ؛ في (ج). (Yds ترتيب مترجم كامل مشتق من Protien ١١ رقم: المجدول بطريقة RNA 860577 خاطئة من الطفرة المذكور كجزيء RNA يعمل RT-PCR تركيبي في تكبير ض مما يوفر المنتج ؛ في الشكل 2) (=) cv. الشعير من DNA Nucleic acid ١١ رقم: الترتيب «Sebastian
MMT لأجل Genomic codons الذي يمتد فوق البداية والإيقاف في جين
MMT cv. الشعير من cDNA Nucleic acid ١١ رقم: cDNA ترتيب 2 لإطار القراءة المفتوح لأجل يمتد فوق A MMT البداية والإيقاف في 95
MMT جين ay cv. الشعير من MMT ترتيب Protien ١8 رقم: المترجم من (Sebastian
AY تعريف الترتيب رقم: الشعير من الطفرة @DNA Nucleic acid 14 رقم: Genomic الترتيب ٠08 الذي يمتد فوق MMT لأجل البداية والإيقاف في 98
MMT جين المكبر RT-PCR ترتيب جزء Nucleic acid Yo رقم: الشعيرء cv.Sebastian من الذي يقابل المنتج © في الشكل ١١(ب) (ج). المكبر RT-PCR ea ترتيب Nucleic acid YY رقم: VENA من طفرة الشعير الذي يقابل المنتج 7 في الشكل 16 )=( (ج). ترتيب بطريقة كامل المشتق Protien YY رقم: المجدول بطريقة RNA من VE VA خاطئة من الطفرة المذكور كجزيء RNA يعمل RT-PCR تركيبي في تكبير في الشكل idl مما يوفر (2) (1 المكبر RT-PCR ea ترتيب Nucleic acid YY رقم: NEVA من طفرة الشعير في ١ الذي يقابل المنتج 2) of) الشكل
RNA مجدول بطريقة خاطئة من طفرة الشعير 46178 يعمل RNA المذكور كجزيء تركيبي في تكبير RT-PCR مما يوفر المنتج ١ في الشكل 7( )2 رقم: Nucleic acid Yo ترتيب جزءء RT-PCR المكبر من طفرة الشعير VEDA الذي يقابل المنتج 4 في الشكل ١١(ب)» )3( رقم: 16 ام ترتيب مترجم كامل مشتق من RNA مجدول بطريقة خاطئة من طفرة الشعير VENA يعمل RNA المذكور كجزيء تركيبي في تكبير RT-PCR مما يوفر المنتج / في الشكل الب (ج) رقم: Nucleic acid YV جزء Sacll-BamHI من المنتج 2 (الشكل (IY (ج))- مع موقع BamHI مقحم مباشرة بعد codon إيقاف الترجمة- لتشييد plasmid pET19b- Line8063-Prod2 الإظهار (قارن الشكل ٠١١ (ب)). رقم: Sacll-BamHI a Nucleic acid YA من المنتج ¥ (الشكل (VY (ج))- مع مرقع BamHI
مقحم مباشرة بعد codon إيقاف الترجمة- لتشييد plasmid pET19b- Line8063-Prod3 الإظهار (قارن الشكل ١١ (ج)) (مماتل لتعريف الترتيب رقم: (YY رقم: Nucleic acid YA جزء Sacll-BamHI من المنتج ؛ (الشكل (QI Y (ج))- مع موقع BamHI مقحم مباشرة بعد codon إيقاف الترجمة- لتشييد plasmid pET19b- Line8063-Prod4 الإظهار (قارن الشكل ١١ (د)). رقم: Nucleic acid ٠١ جزء Sacll-BamHI من المنتج ١ (الشكل ١١ (ب)؛ (ج))- مع موقع BamHI مقحم مباشرة بعد codon إيقاف الترجمة- لتشييد plasmid pET19b- Line14018-Prod6 الإظهار (قارن الشكل ١١٠(ب)). رقم: Nucleic acid 7١ جزء Sacll-BamHI من المنتج ١ (الشكل ٠١ (ب)؛ (ج))- مع موقع BamHI مقحم مباشرة بعد codon إيقاف الترجمة- لتشييد plasmid pET19b- Line14018-Prod7 الإظهار (قارن الشكل ٠١ (ج)).
a من Sacll-BamHI جزء Nucleic acid YY رقم: (الشكل 1" (ب)؛ A المنتج BamHI (ج))- مع مرقع codon مقحم مباشرةٍ بعد إيقاف الترجمة- لتشييد plasmid pET19b- الإظهار Line14018-Prod8 .))د(١ ١7 (قارن الشكل متولد من PCR جزء Nucleic acid YY رقم: cv. من genomic DNA مكبر باستخدام (Prestige 9٠ مجموعة مادة أولية رقم )7 (قارن جدول أذ م" : Nucleic acid ve قا JR Hela PCR جرء ad) من الطفرة genomic DNA باستخدام a (AY
YY مجموعة مادة أولية رقم )7 (قارن جدول مثو لد م" PCR دم Nucleic acid Yo قا رقم: جزء مدولد من cv. من genomic DNA باستخدام Sa «Sebastian
Yq مجموعة مادة أولية رقم (2 (قارن جدول ذء 06 متولد م" Nucleic acid veld رقم : جزء مدولد من من طفرة genomic DNA مكبر باستخدام VEYA
Ya مجموعة مادة أولية رقم )4 (قارن جدول
Nucleic acid مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: os TV الترتيب genomic الذي يشفر 1 الشعير. Nucleic acid مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: ‘os . YA الترتيب genomic الذي يشفر 1 الشعير. Nucleic acid مادة أولية متقدمة لتكبير a YA الترتيب genomic الذي يشفر الشعير. Nucleic acid ~ مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: 56 الترتيب genomic الذي يشفر 1 الشعير. Nucleic acid مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: Co ١ الترتيب genomic الذي يشفر 1 الشعير. Nucleic acid مادة أولية متقدمة لتكبير رقم: 7 Lo الترتيب genomic الذي يشفر 1 الشعير. Nucleic acid 2 مادة أولية معكوسة لتكبير رقم . . J الترتيب genomic الذي يشفر 1 الشعير. Nucleic acid مادة أولية معكوسة لتكبير رقم: EE الترتيب genomic الذي يشفر الشعير. Nucleic acid مادة أولية معكوسة لتكبير رقم: £0 Lo الترتيب genomic الذي يشفقر 1 الشعير. مادة أولية معكوسة لتكبير رقم: 1 aA الذي يشفر genomic الترتيب الشعير. 1 أولية معكوسة لتكبير sale Nucleic acid fy رقم الذي يشفر genomic الترتيب . pill MMT مادة أولية معكوسة لتكبير Nucleic acid EA رقم: الذي يشفر genomic الترتيب . الشعير 1 مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid £4 رقم: MMT يشفر cDNA ترتيب الشعير. أولية متقدمة لتكبير sala Nucleic acid 5٠ رقم: MMT يشفر cDNA ترتيب الشعير. مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid 0) رقم: MMT يشفر cDNA ترتيب الشعير. مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid oY رقم: MMT يشفر cDNA ترتيب الشعير. مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid oF رقم: MMT يشفر cDNA ترتيب الشعير. مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid of رقم: MMT يشفر cDNA ترتيب الشعير. مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid 20 رقم: MMT يشفر cDNA ترتيب
ee | رقم: 51 Nucleic acid مادة أولية متقدمة لتكبير cDNA in يشفر MMT الشعير. رقم: Nucleic acid OV مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير. رقم: Nucleic acid OA مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير. رقم: 04 Nucleic acid مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير. رقم: 60 Nucleic acid مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير. رقم: Nucleic acid +١ مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير. رقم: 67 Nucleic acid مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير. رقم: 7+ Nucleic acid مادة أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير. رقم: 64 ala Nucleic acid أولية معكوسة لتكبير ترتيب cDNA يشفر MMT الشعير.
Yoo
Nucleic acid 10 رقم: الوصل بالجدل البديل لجين الشعير. MMT يشفر >
Nucleic acid 176 رقم: الوصل بالجدل البديل لجين الشعير. MMT ا يشفر
Nucleic acid TV رقم: عن الوصل بالجدل البديل الشعير. MMT ا لجين يشفر
Nucleic acid A رقم: عن الوصل بالجدل البديل . الشعير MMT ا لجين يشفر ض ماد أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid Vv) ٍ = الذي يشفر ترتيب Protien ٍ
MMT جين الشعير مادة أولية معكوسة لتكبير Nucleic acid VY رقم: الذي يشفر ترتيب 08
MMT ا جين الشعير ض رقم: آلا a ER
Reni Ea 8057 من طفرة DNA أجزاء Nucleic acid خلأ sa الب
٠١١ مادة أولية متقدمة لكشة Nucleic acid VY رقم و
AY عن طفرة SNP مادة أولية متقدمة كذ Nucleic acid VA رقم AY عن طفرة SNP iC] مادة أولية متقدمة Nucleic acid Va رقم: AY عن طفرة SNP 23) مادة أولية متقدمة Nucleic acid Av رقم: AY عن طفرة SNP لكشة i مادة أولية Nucleic acid AY رقم: 8017 عن طفرة SNP مادة أولية معكوسة لكشة Nucleic acid AY رقم: AY عن طفرة SNP لكشة i مادة أولية Nucleic acid AY : رقم AY عن طفرة SNP أكضة A oS مادة أولية Nucleic acid AS : رقم عن طفرة تيم SNP >: ماد أولية متقدمة Nucleic acid Ao رقم: من طفرة DNA أجزاء ٠ ne ay fa Nucleic acid AT: a8 رقم : مادة أولية معكوسة لتكبير من طفرة DNA أجزاء ١٠ >: ماد أولية متقدمة Nucleic acid AY رقم ب من طفرة DNA أجزاء ١٠١ ا sf. Nucleic acid AA د معكوسة لتكبير all رقم : مادة من طفرة DNA أجزاء
٠ مادة أولية متقدمة لتكبي Nucleic acid Ad رقم: من طفرة DNA أجزاء ٠6 مادة أولية معكوسة لتكبي Nucleic acid 10 رقم: من طفرة DNA أجزاء ٠ مادة أولية متقدمة لتكبي Nucleic acid 1) رقم: من طفرة DNA أجزاء :ا مادة أولية معكوسة لتكبير Nucleic acid 57 رقم: من طفرة DNA أجزاء ا مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid 17 رقم: من طفرة DNA أجزاء YEA مادة أولية معكوسة لتكبير Nucleic acid q¢ رقم من طفرة DNA أجزاء ما مادة أولية متقدمة لتكبير Nucleic acid 40 رقم: من طفرة DNA أجزاء YEA أولية معكوسة لتكبير sale Nucleic acid 17 رقم: من طفرة DNA أجزاء ٠١ مادة أولية متقدمة لكشف Nucleic acid AV رقم: ١٠5٠8 عن طفرة SNP مادة أولية متقدمة لكشف Nucleic acid IA رقم: ١٠٠18 عن طفرة SNP
٠١
رقم: 44 Nucleic acid مادة أولية متقدمة لكشة SNP عن طفرة ١55178
رقم: Nucleic acid ٠٠١ مادة أولية متقدمة لكشة SNP عن طفرة ١618
رقم: Nucleic acid ٠١١ مادة أولية معكوسة 2.380 SNP عن طفرة ١6178
رقم: Nucleic acid ٠١١ مادة أولية معكوسة لكشة SNP عن طفرة ١6178
رقم: Nucleic acid Vo مادة أولية معكوسة لكشة SNP عن طفرة ١٠١٠68
رقم: Nucleic acid ٠١ مادة أولية معكوسة لكشة SNP عن طفرة ١56178
AR
قائمة الترتيب
Carlsberg Breweries A/S >١٠١<
Heineken Technical Services B.V. منخفضة DMS مشروبات مشتقة من الشعير وملت مع مستويات >١١< 1600000 >٠٠١< ٠١: >< ٠,4 إصدار Patentln <VV > ١ > ٠< ات >" ١ <
DNA <Y\)Y> الشعير cv. Haruna Nijo >17 ١< ١ >. .< atggetgegg cggeggeggga cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠ geggegtacg gegeegecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠٠٠ gaggecagge ggetectegg cgeegtgega cggegetteg cegeeggegg cecggeegeg ٠ gggctegagt gettecgeac cttccactte cgeatccacg acgtegtect cgacceccac ٠6 ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatettc ٠ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgca £Y gaaaagtggt gcccttcgaa ggtttatggt ctggatataa acccaagacc tatcaagatt ¢ Ae gcatggataa acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg ٠8 gaggggaaaa cattgcttga cagagtcgaa ttctatgaat ctgatcttct ttcttactgt ٠ agagataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat tcttaacccc ٠ aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt ctigtactcc VY. ttgagcaact actgtgetct ccagggtttt gttgaggacc aatttggect cgggttgatt VA. gctecgggetg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtettat ggtattcaac ٠ atgggaggcc ggecaggaca aggtgtetgt gagegectat ttcttcgeeg tggatttege 8 atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgecg acacagacat ctcegettta ٠
١٠١.
gttgaaattg agaaaaatag ccggcatcge ttcgagttct ttatggatct 1 ٠ cagcctgtgt gtgegegeac ageatgggea الممدعتدمما ctggtggecg 0161 ٠١ getttgtetg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtgaagaa aatatttgag ٠ ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agctcectcg atttgtcett tgatgatgat ٠٠٠ tctgttgetg atgaaaaaat tectttecta geatacctag ctagtttett gcaagagaat ٠ aagtctaatc cttgtgagec tccagetgga tgtttaaatt tccggaatct tgttgetgga ٠١٠ tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgttgttgt gttcccatee YYA cgtgetgttg caatcgaaaa tgetcttegg ttgttctcac ctggacttge aattgttgac ٠8 gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa tggttaacat ctttagcaat tgaggaaagt Youu aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠٠ gagttgatca ggaaactgaa gccccaggtt — gttgttactg geatggetca gtttgaggcet ٠١٠ atcaccagtg ctgctttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg ticecgatta 1 As ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctgc caagctcaaa tggtgtattg 8 aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag YA.» aatcaggttt ~~ attctgatct ggaagttget tttgctatct ctgaagatcc aactgtttat ٠ aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata cttcigtgat cagccagcac Yay. tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg geatttcaaa ttggtgaccg gceatccacaa ١ AA caagagagag aacctgcaga agtgatatct aaggagatga tagggttttc aagttcagct ٠١8 215160906066 tagaaggagce tgagtttttc gttcctggtt ccatggaatc cggtgtcata ٠ catatggatc tggaccgcag cttcttgeca gtaccttetg cagtaaacge ctccattttc ١٠٠ gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaactg atgtccgttc cagcattcag 1٠ cagctggtga aagatagcta tggtttctca geaggeggtg cttctgaaat tatatacggg 10 aacacctgtc tcgegctett caacaagctt gttctttget geatgcaaga acagggeace YY ٠8 ttgettttce ccttgggaac caacgggeat tatgtcaacg cagcaaagtt tgtgaatgea ١٠85 accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggcttca agatcgaacc aagtgetcta 1٠ gecgacacac tagagaaggt gtctcageeg tgggtetata 1116186666 cacaatcaac YoY. cctactgget tectgtacag tgacgacgat atagcagage tgetttetgt ctgtgegaca 06 tacggagcca gggtggtegat agatacctcc tcetctggtc tggagtteca agecacegge Y1¢
١ tgcagccagt ggaatttgga aagatgtctt tctaatgtca agtcttcaaa gecctegtte 1٠8 tccgttgtce tgetcggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg ٠ tttctgatta tgagcgactc gtecttggtt gacacafttt acagtttcec aagcettgagt YA ١ cggecacaca geacgttgaa عللاعدعماو aggaagcetgt tgggtcttaa gaaccagaag YAA. gatcagcatt tctctgatct catecttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgecgac Y 44 cagttgatca agatgcttga gagetgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate 9.٠ tcgatgcttg caaaaccgac المعماودي ggcaaatcge tcaaggtgga 48م Yelle ggcaagetgg acagccacaa catgagggaa gecctcetga ggtccaccgg getgtgeatt YY Ye agcagcageg ggtggacagg ggtgecggac tactgeeget tcagctttge tetggagage YA. ggcgacttcg accgggecat ggagtgeate geecggttca gggagetggt ccttggtgge YY ٠8 ggtgctaagg tgaatggtag caactag yyy ١ <YY.>
Yo AA > ١<
PRT <Y\)Y> الشعير ev. Haruna Nijo <YYY>
Y <يءع> Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ 5 ١ ٠ ١ o
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Ye Yo 7١
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $e $0 val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
On 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His no Ye Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln GIn Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
AO 9. q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu
Yeo ١٠١ ٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu
٠١ ١١ VY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠١ \Yo ١٠8
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Pro Ile Lys Ile
Yeo ١٠ yoo "٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro ١١5 لاا ١75 lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg val Glu Phe Tyr
YAS YAo V4.
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١5 Yoo Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala 7٠ 7١١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. YYo Yéo
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yé¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yl. Yio YV.
Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly د دا YAO
Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Yao Yoo
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu
Y.o 7,١ Yio YY.
Val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp
Yyo 7 7١
Leu Val Gly Asp ماه Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met
Yeo Yio Yo.
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser val Tyr Ser Cys Gln
Yoo Yi. Yio
Leu Arg Gln Pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
TV. دا YA
Gly Phe His Glu Val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp مم7 Ya. Yao ف
٠١
Ser Val Ala Asp Glu Lys Ile Pro Phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe £0 ٠ ١١
Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro Cys Glu pro pro Ala Gly Cys Leu ٠ د gy.
Asn Phe Arg Asn Leu val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile (yo 4 م Pro Leu Thr Pro Asp Asn Val Val Val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala £0. دم ra
Ile Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp ¢lo Lv. tyo EA
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala م 86 م [le Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr Val Ile Glu Ala
Oa 0.0 oY.
Pro Arg Gln Ser Asp Leu Leu lle Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys Pro ه١ oY. ovo
Gln Val Val Val Thr Gly Met Ala Gin Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala oy. ovo of
Ala Phe val Asn Leu Leu Ser Val Thr Lys Asp Val Gly Ser Arg Leu o¢o 00, ooo oT.
Leu Leu Asp Ile Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser oto ov. ovo
Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA ديه 094.
Ala Ile Leu Cys Gly Leu Val Lys Asn Gln val Tyr Ser Asp Leu Glu odo Tew 1.0
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr val Tyr Lys Ala Leu Ser ٠ ولي “٠
Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser Val Ile Ser Gln His
Ye 17 yo 6
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe فاه Ile Gly Asp 1¢0 10. 100
Arg His Pro Gin Gln Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu 1٠ le vs
Met Ile Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu
<١ vo TA دغ Phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 14. 140 Va
Asp Arg Ser Phe Leu Pro Val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe .لا ال٠ Vio VY.
Glu Ser Phe Val Arg Gln Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arg ألا 76 هلا
Ser Ser Ile Gln مله Leu Val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly \& Veo Yo.
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
Yoo 7٠ Yio
Lys Leu Val Leu Cys Cys Met Gln Glu Gln Gly Thr Leu Leu Phe Pro لال Yvo YA
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr Val Asn Ala Ala Lys Phe Val Asn Ala دالا Va. 0ل Ave
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu ميم AY Ayo
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp val
AY + AYo AY
Tyr Ile Ser Gly Pro Thr Ile Asn Pro Thr Gly Phe Leu Tyr Ser Asp
AYo Ags Ago
Asp Asp lle Ala Glu Leu Leu Ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
AO Aoo ATs
Val Val Ile Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Ato INE AVo AN
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn Val Lys Ser Ser
AAO ف Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu
Quen 4.0 ٠
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١١ ٠ Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser
Y. Yo 44
Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn Gln Lys q¢0o 0. qo00 4
١٠
Asp Gln His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu عله Lys Glu Thr Leu Lys av. ve
Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Met Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp
AA مم 44.
Ala val Gly cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala 440 ١٠ ٠ ٠ 2
Tyr Ile Gly Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu ٠١١ ٠١١ YoY ٠ هت ٠
Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu
YoY ٠١ ٠١ o ٠ o
Cys lle Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val pro Asp Tyr Cys Arg
Yo ٠١6 ٠١٠ ٠ هت ٠
Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu ٠١٠ ٠١ ٠١
Qo ٠ o
Cys Ile Ala Arg phe Arg Glu Leu Val Leu Gly Gly Gly Ala Lys ٠١ ٠١ ٠١ . هت ٠
Val Asn Gly Ser Asn ٠ o 7 >7٠٠< 1091 > ١<
DNA <Y\Y> الشعير cv. prestige <YVYY> ١ <ي.ع> atggetgegg cggeggggga cgiggaggeg tiectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠
١١ geggegtacg gegecgeecaa ggecgtgetg gageggeteg aggegeegge 6 ١٠١ gaggccagge ggetectegg cgecgtgega cggegettcg ccgecggegg cecggeegeg YA gggctcgagt gettccgeac cttecacttc cgeatccacg acgtegtect cgacceecac Yeo ctccaaggtt gcceggecce ttcectacac accegttgtc gacccgeate tetttegeeg Yoo atctggecgt caaaagcacg cggettggta gaaatcaage ctgeaatcct gatccgttta Yi. tggctggeca gtcgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tctctaatct ١ ctacctgacc atataccgag ttggttttet ttettettgt ttccgtattt gtgtagtttt ¢A. ttettttctt tcgagceatga tgttctttga attaatgcgt accagactcc agtaattcga 68 cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa tttataacac aacgaggctt tgatcaagtg ٠٠ gtttatgtag aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta ttteccaaca ٠ attttgatgg cctctaagea tcctgtagtc atgtctactg tgtaagetac agatttattic ٠ atgtctatgt gtaagctgea aatggagaga aaagctatct atttggttgt tccagettgt ٠ tctttggcag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaagcac gacaaatgag ٠8 tggggcaage atgctgeccaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggeatgt ٠ tatctttttt tttceettet actcagtttc ttctttggga gaacaatcct actcaaccta 47» taatcataag aataaaagca agacagatga gtgctgcaga ctattggcat atataacaac ٠ taaataggac atctgtccge tatatcttta ~~ gttaataatt gtatatagac gcagtctttg ٠٠١ tgctggaaaa actgcaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ٠٠ cttetttgtt ~~ acgttttgtg tgcataaagc attaacttct gtetttagtt ggcgeagegg ٠٠ taaaaacacc ~~ cattgcttaa tattttattt gctttccgta gcttgataaa atttcaactg ٠١٠ cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠ ccagaagact ggtcattcac عدععما10 ggtctcaacc ggeatccaga ttecatcttc ١ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgeca ٠ gaaaagtggt gcccttcgaa ggttggecace ftettgttccg tagatattta tcttatcteg ٠٠٠ tttgttgcaa acatgggacc tgcagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠ cttttaggtg tctgccagta gtetgetggt ggtctaattt tcttggtata cctgatgecg ٠١١ tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggcaa ggcattacca ccacatattg titctacaat ٠١٠ gctgaacaat tgctctectt tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgea ccttagtagt YV¢
١٠١ ttaagccaca aataccageg #الممقعاقة gtttgcagtc agcettggeat 001 YA gagccttggt tgttcttttg aaggtttatg gtctggatat aaacccaaga gctatcaaga ٠ ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggtctccca atctatgatg YAY. cggaggggaa aacattgctt gacagagtcg aattctatga atctgatctt ctttcttact ٠٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggtcag ١8 gtttttacca ~~ atttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat 88018 ٠ ttaatatctg cctttcagat 1014266606 aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact 7١" gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc المصعيدي actgtgetct ccaggtgagt YYY. tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgtta ctaaatggtt acccatgtca ٠ gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttct YY ٠8 atcctgaaat tgactttaca atgcttgttc ataatctget tacgaaatat gegtttgaac ٠8 atttctcttt #عماعتاف) catgtggtca gacctttata taagaaaatg aagtttttgt ١٠ agaaataatg tatgctttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtet YoY. aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag ١ ggggttagca gtccaaatcc acctcaagtt caacctattg لللاممفقاقه ggtcttacaa 18 cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca gictttccta taaaaatgtc 48 ٠ tggaattatt aacagcggta tttattttta ~~ ccctgtttaa tttttteett tgctaaaaga 1٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY. getgattgta cgattccage tteeggttgt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgetge ٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa ١11٠6 gggatatctg tgataaagcc tagtggtctt atggtattca acatgggagg ccggecagga ١٠٠ caaggtgtct gtgagecgeet atttctacge cgtggatttc geatcaataa getctggeaa Yo» acaaaaatta tgcaggtagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt YY» ttccatgcca gcaacageat tatatcetgg ttagaggaat atgcetcttca tgttgcacac 2٠ caatcttcag ctgggectag aattttcatc taccggetta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtetttg caggetgetg acacagacat ٠٠ ctecgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttcgagfttet ttatggatet ؟؟ ٠ tgttggggat cagcctgtgt gtgegegeac ageatgggea tacatgaaat ctggtggeeg YEV «
١٠١ catttcacat ~~ gctttgtctg عاهعمامقاع tcaacttcgc cageccaace 1 YEA actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat aataatttgg 74 agaatttcag 8 tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcagcag ٠٠ ctcectegat ttgtectttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttcctage ٠ atacctagct agtttettge aagagaataa gtctaatcct tgtgagectc cagcetggatg YVY. tttaaatttc cggaatcttg ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac ٠ tcctgatgta agacttggtg عمععاتماه acaattatgt ttgeftatta gaaattcata 6 agatcaacct atttgatgct tctcacgtat gcttcatgtg acacttcett ttcctetggt 18 gcaccagaat gttgttgtgt tcccatcccg tgetgttgeca atcgaaaatg ctetteggtt Yai. gttctcacct ggacttgeaa ttgttgacga acacctaacc agacacttge ccaagcaatg ٠ gttaacatct ttagcaattg aggtactttg accgatactc ccctetttet ttetgtgttt € vA ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagtt atgctgacaa gaatttcgat ¢ ١٠ gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca 8 7 tcgaagcacc acgccaatca gatttgetga ttgagttgat caggaaactg aagcectcagg EY. ttgttgttac tggeatgget cagtttgagg ctatcaccag tgetgettte gtgaacttat ARE taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatttcagaa catctggaat €Y A. tgtctagtct gccaagctca aatggtgtat tgaaatatct tgetgggaag acectgectt 48 cacatgeggc tatattgtgt ~~ ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagcctgaac £0. + tctagttgaa ctgttgtgeca tactatatag aatatcttga cttttatatg tactttagaa £07. acactgttta aatgtactca tttetttttg cttcatttta cttgcaggtt tattctgatc ٠ tggaagttgc ttttgctatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta £TA. ttgagctatt ggaaggacat actictgtga tcagccagea ctattatggt tgtettttec 78 atgagetget ggeatttcaa attggtgacc ggeatccaca acaagaggta aacatggett €A geetetteca gttetceate tcactcagtt ctgtccacaa ggtgecgaat gatctgttca ٠ agtggacact cccctcagca cgggeaaget agtccatgaa tttggattag ttecctetta 4٠ getgggtact tcgattacac cacaatgage tcctcaacgt ggtctggttt atgtttttca £€4A tgttttccet ctaatgtttg gttgetcttt ttcagagaga acctgcagaa gtgatatcta 5 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccct agaaggaget — gagttttteg 0٠
١6 ttcctggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgeage ttettgecag © ٠١٠ taccttctge agtaaacgcc 160811662 aaagttttgt tcgtcagaac 21686188 © YY. ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcagc agcetggtgaa agatagctat ggttictcag © YA. caggeggtge ttctgaaatt atatacggga acacctgtct cgegetctte aacaagcttg © Yeo ttctttgctg catgcaagaa cagggeacct tgettttece cttgggaace aacgggeatt © م acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt © £1 caggcttcaa gatcgaacca agtgctctag ccgacacact agagaaggtg tctcageegt 8 Yo gggtctatat ttctggeecc acaatcaacc ctactggett cctgtacagt gacgacgata 05 Ae tagcagaget getttetgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect © 16 cctetggtct ggagttccaa gecaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtettt لاه ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegttct ccgttgtect getcggagag ctgtectttg © Vi. agctgaccac ggcetgggett gatttcgggt ttctgattat gagegactcg tccttggttg ٠ acacatttta cagtttccca agcttgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca مغيض ggaagcetgtt gggtcttaag aaccagaagg atcageattt ctctgatetc atccttgage © 44 agaaggagac gttgaagaat cgtgccgace agttgatcaa ggtatgeett ttgggatatc Teen ctgtgtttag ~~ getctetgtt ttettccect gatcagetet cegatecect tacatcctta Te ggctaatttc agtacttcaa gtttgecacg catttctgac atattcttic ctettgtttt ١٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgcett gagagetgeg getgggacge tgtgggctge 1٠ catggcggea tctcgatget tgecaaaaccg accgectaca ttggeaaatc getcaaggtg 1 ٠ gacggetttg agggcaaget ggacagecac aacatgaggg aageccteet gaggtecace ٠ gggctgtgea ttagcagcag cgggtggaca ggggtgecgg actactgeeg cttcagettt 177٠ getetggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tcgeecggtt cagggagetg 8 ١ gicettggtg geggtgctaa ggtgaatggt 8 104 >١'٠< <٠ا "> الت
DNA <Y\Y> الشعير cv. prestige 7؟> ١< ا
١١٠ atggetgegg cggegggega cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge 086 1. geggegtacg gegeegecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee Ye. gaggecagge ggeteetegg cgecgtgega cggegettcg ccgeeggegg ceeggeegry YA. gggctcgagt gettcegecac cttccactte cgeatccacg acgtegiect cgacceccac Yeo ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatctic Yi. agggataaga cagtagcaga getgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgea ١ gaaaagtggt gecccttcgaa ggtttatggt ممتمادوياه acccaagagc 161 EA gcatggataa acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg © ¢ gaggggaaaa cattgettga cagagtcgaa ttctatgaat ctgatctict ttcttactgt ٠ agagataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat fcttaaccee 11. aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt ctigtactce VY. ttgagcaact actgtgetct ccagggtttt gttgaggace aatttggeet cgggttgatt YA getcgggetg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtettat ggtaticaac AEs atgggaggce ggecaggaca aggtgtetgt gagegectat ttctacgeeg tggatticge Qe atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgetg acacagacat — ctcegettta ٠ gitgaaattg agaaaaatag عععاتمعديو ttcgagttct عأعتدوعياما 1 ٠١ cagectgtgt gtgegegeac agceatgggea tacatgaaat ctggtggecg catttcacat ٠١٠ getttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtgaagaa aatatttgag ٠ ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agctcecetcg atttgtcctt tgatgatgat ٠٠٠ tetgttgctg atgaaaaaat tcctttccta geatacctag ctagtttctt gcaagagaat ٠٠ aagtctaatc cttgtgagcc tccagctgga tgfttaaatt tccggaatct tgttgctgga ٠١ tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgtigttgt gttcecatce ٠ cgtgetgttg caatcgaaaa tgetettcgg ttgttctcac ctggacttge aattgttgac ٠8 gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa tggttaacat ctttagcaat tgaggaaagt Youu aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠ gagttgatca ggaaactgaa gcctcaggtt gttgttactg geatggetca gtttgagget YY. atcaccagtg ctgetttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg ttcecgatta ٠
١ ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctgc caagctcaaa عاتماقاعع1 VV. aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag YA aatcaggttt attctgatct ggaagttget tttgctatct ctgaagatce aactgtttat ٠ aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata cttctgtgat 6 ٠١١ tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg geatttcaaa ttggtgaccg 0816068088ع ١ AA. caagagagag aacctgcaga agtgatatct aaggagatga tagggttttc aagttcaget ١ atgtccaccc tagaaggage tgagtttttc ~~ gttcctggtt ccatggaatc cggtgtcata ١٠ catatggatc tggaccgcag cttettgeca gtaccttetg cagtaaacgce ctccattttc YY» gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaaccg atgtccgtic cagcattcag YYY cagctggtga aagatageta tggtttctca geaggeggtg — cttctgaaat tatatacggg YYA. aacacctgtc tcgegetett caacaagett gttetttget geatgecaaga acagggeace ٠8 ttgettttec ccttgggaac caacgggeat tacgtcaacg cagcaaagit tgtgaatgca 68 accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggcttca agatcgaacc aagtgetcta Y£7 « gcecgacacac tagagaaggt gtctcageeg tgggtetata 1016606066 cacaatcaac ١٠ cctactgget teetgtacag tgacgacgat atagcagage tgctttctgt ctgtgcgaca ١68 tacggagcca gggtggtgat agatacctec 16010188616 tggagttcca agecacegge ٠8 tgcagccagt ggaatttgga aagatgtctt tctaatgtca agtcttcaaa gecetegtte 178 tcegttgtee tgetcggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg ٠ tttctgatta tgagegactc gtccttggtt gacacatttt acagtttccc aagcttgagt YAY. cggecacaca geacgttgaa gtacacgttc aggaagetgt tgggtcttaa gaaccagaag ١ gatcagcatt tctctgatct catccttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgecgac ٠6 cagitgatca agacgcttga gagetgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate ٠ tcgatgettg caaaaccgac cgectacatt ggcaaatcge tcaaggtgga cggetttgag ١٠ ggcaagetgg acagecacaa catgagggaa gecctectga ggtccaccgg getgtgeatt ؟ ٠٠ agcagcagcg ggtggacagg ggtgeecggac tactgeeget tcagetttge tetggagage YVYA ggcgacttcg accgggecat ggagtgeatc geccggttca ggagetggt cettggtgge YY E ggtgctaagg tgaatggtag caactag yyy هه <Y\V\.>
لا YYiy >" ١< ١< ؟> DNA ev. prestige >7 ١١< الشعير <u> 0 atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠ geggegtacg gegeegecaa ggecgtgetg gageggetcg aggegeegge cacgegtgea ١١ gaggcecgte ggeteetegg cgeegtgega cgtegttttg cageagglgg tecageegeg YA gggctegagt gettecgeac cttccacttc cgeatccacg acgtegtect cgacceecac Yeo ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggeatccaga ttccatcttc Yi. agggataaga cagtagcaga getgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcactigea ٠ acccaagage 0161 EA ممتعادوعياه gaaaagtggt gcccttcgaa ggtttatggt gcatggataa ~~ acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg © 2 gaggggaaaa cattgcttga cagagtcgaa ttctatgaat ctgatcttct ttcttactgt ٠ agggataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat tcttaaccee ٠ أ aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactec ١ VA. اللمعتاوجععنه ttgagcaact actgtgctct ccagggtttt gttgaggacc aatttggect gctcgggctg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtettat ggtattcaac ٠6 atgggaggcc ggeecgggea aggtgtetgt gagegectat ttettcgeeg tggatticge Qe atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgecg acacagacat ctcegettta ٠ gttgaaattg agaaaaatag ccggeatcge ttcgagttct ttatggatet tgttggggat ٠ cagectgtgt gtgegegeac agcatgggea tacatgaaat ctggtggecg catttcacat |) «A getttgtetg tgtatagetg tcaacttcge cageccaacc aggtgaagaa aatatttgag ١٠ ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agcteccteg atttgtcctt tgatgatgat ٠١٠ tetgttgetg atgaaaaaat tcctttccta geatacctag ctagtttctt gcaagagaat ٠١٠ aagtctaatc cttgtgagec tccagetgga tgtttaaatt tccggaatca tgttgetgga ١ tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgttgttgt gttcccatce YVA cgtgctgttg caatcgaaaa tgetcttegg ttgttctcac ctggacttge aattgttgac ٠٠8
لا ctttagcaat tgaggaaagt ١٠١ لمعممااوعا gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠٠ gagttgatca ggaaactgaa gccccaggtt — gtigitactg geatggetca gtttgagget ١١٠ atcaccagtg ctgctttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg tteccgatta A. ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctge caagetcaaa — tggtgtattg ٠ aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag ٠ aatcaggttt atfctgatct ggaagttget tttgctatct ctgaagatce aactgtttat YA. aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata cttctgtgat cagecageac YAY. tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg gcatttcaaa ttggtgaccg gcatccacaa ٠ aaggagatga tagggtttic 1081 ١8 المتقامدياعهة caagagagag aacctgcaga atgtccaccc tagaaggagce tgagtttttc ~~ gttcctggtt ccatggaatc cggtgtcata ١٠ catatggatc tggaccgcag cttcttgecca gtaccttetg cagtaaacge ctccatttte ١٠٠٠ gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaactg atgtcegtic cagcattcag ١7١ cagctggtga aagatagcta tggtttctca geaggeggtg cttctgaaat tatatacggg ٠ aacacctgtc tegegetett caacaagcett gttctttgct geatgcaaga acagggeace YY ٠6 ttgcttttcc ccttgggaac caacgggeat tatgtcaacg cagcaaagit tgtgaatgca Yeon accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggettca agatcgaacc aagtgetcta 1٠ gcegacacac tagagaaggt gtctcagecg tgggtetata tttetggeec cacaatcaac YOY « cctactgget tcctgtacag tgacgacgat atagcagage tgctttetgt ctgtgegaca Yo A tacggageca gggtggtgat agatacctcc tectetggte tggagttcea agecacegge YU € tgcagccagt ggaatttgga aagatgictt tctaatgtca agtcttcaaa gecctegtte 1٠٠ tcegttgtee tgetcggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg ٠ tttctgatta tgagegactc gtcettggtt gacacatttt acagtttccc aagettgagt YAY. cggeeacaca geacgttgaa gtacactttc aggaagetgt tgggtcttaa gaaccagaag YAA gatcageatt tctctgatct catccttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgeegac 16 cagttgatca agatgcttga gagctgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate ٠ tcgatgettg caaaaccgac cgectacatt agcaaatcge tcaaggtgga cggetttgag ١٠ ggcaagctgg acagccacaa catgagggaa gecctectga ggtccaccgg getgtgeatt ١٠٠
١٠ agcagcagcg ggtggacagg ggtgeeggac tactgecget 10801066 6 YYA. ggcgacttcg accgggecat ggagtgeatc geccggttca gggagetggt ccttggtgga 7" ggtgctaagg tgaatggtag caactag yyy 1 > ٠١<
Yo AA ؟> ١<
PRT <Y\Y> الشعير cv. prestige >7 ١١< “2 <..ء)؛> Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln \ ° " Vo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg \K Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo 2 ¢o val Arg Arg Arg phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ox 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His lo Ya Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 9. q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ١ ٠١٠ ١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠ ٠١ ‘Yo
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١ ‘Yo ١٠٠
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile
Yeo You ‘Yoo ١١٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro ٠١٠ دلا ا
Ile Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YA. YAo ٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp
VY. 40 Yoo Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn pro Asn Pro Glu Ala ٠ ١١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser ¥Yo 7 7 6ل Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe val Glu Asp Gln Phe Gly
Y¢o You Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yi. Yio YY.
Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly د YA. YAo
Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Ydo ١
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu ٠.٠ 7٠ Yio ry. val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp 7١ YY. 7٠
Leu Val Gly Asp Gln Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met 7٠ Yeo Yo.
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser Val Tyr Ser Cys Gln
Yoo Yi. Yio
Leu Arg Gln Pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
TV. م YA
Gly Phe His Glu Val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp مي Ya. م كن
Ser Val Ala Asp Glu Lys ع1 Pro Phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe 0 A to
Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro cys Glu Pro Pro Ala Gly Cys Leu £Y ١ EY.
Asn Phe Arg Asn Leu Val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile (yo 4 م Pro Leu Thr Pro Asp Asn Val Val Val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala to. too £7. lle Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp
EV. دلا EA
١7١
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala م 86 ¢q0
Ile Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr Val Ile Glu Ala
Ou 0.0 oY.
Pro Arg Gin Ser Asp Leu Leu Ile Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys Pro ه١ oY. oYo
Gln Val val Val Thr Gly Met Ala Gln Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala oy. هه 0%.
Ala Phe Val Asn Leu Leu Ser Val Thr Lys Asp Val Gly Ser Arg Leu o¢o 00. دده 2٠
Leu Leu Asp Ile Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser ofo oY. oYo
Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA ديه 09.
Ala Ile Leu Cys Gly Leu val Lys Asn Gln Val Tyr Ser Asp Leu Glu odo Ten 1.0
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr Val Tyr Lys Ala Leu Ser ٠ Ye 7٠
Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser val Ile Ser Gln His vo 1 17 6
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe Gln Ile Gly Asp “١22ه 10. 00
Arg His Pro Gln Gln Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu
Tt 116 We
Met Ile Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu lve TA دغ Phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 14. 140 Yau
Asp Arg Ser Phe Leu Pro Val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe
Vio ال٠ Vio AK
Glu Ser Phe Val Arg Gln Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arq هلا ل هلا
Ser Ser Ile Gln Gln Leu val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly ملا م لا Yo.
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
١١
Yoo vi. vio
Lys Leu val Leu Cys Cys Met Gln Glu Gln Gly Thr Leu Leu Phe Pro للا yve YA
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr Val Asn Ala Ala Lys Phe Val Asn Ala
YAo va. Yao Ave
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu
Avo AY Ao
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp Val
AY» AYo AY
Tyr Ile Ser Gly pro Thr Ile Asn Pro Thr Gly Phe Leu Tyr Ser Asp
AY 0 AEs Ago
Asp Asp lle Ala Glu Leu Leu ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
AO. Aoo AT.
Val Val Ile Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Ato AV AVo AA
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn Val Lys Ser Ser
AAO Ads Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu
Qu q.0 1
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١١ 4 Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser 7. 17٠ 4
Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn Gln Lys م 0. q00 ف Asp ماه His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu Gln Lys Glu Thr Leu Lys qo av. ve
Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Thr Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp
AA aA0 44.
Ala val Gly Cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala 44¢ You ٠ ٠ o
Tyr Ile Gly Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu ٠١١ ٠١١ ٠١ ٠ 2 ٠
١١
Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu ٠١ ٠١ ٠١ هت ٠ هت Cys Ile Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val Pro Asp Tyr Cys Arg
AER ٠6 ١٠١٠ ٠ 5 ٠
Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu ١٠١٠ ٠١ ٠ o ٠ o
Cys lle Ala Arg Phe Arg Glu Leu Val Leu Gly Gly Gly Ala Lys
YeoV YoV ٠ ٠ 2 ٠
Val Asn Gly Ser Asn ٠ o ؟> لا ٠١<
Yo AA ؟> ١<
PRT <Y\Y> الشعير cv, prestige >7 ١١<
Y >.
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ هه ٠١ yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Y. Yo 79١
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo 2 ¢o
Val Arg Arg Arg phe Ala Ala Gly Gly pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
On oo Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp val Val Leu Asp Pro His دلا ولا As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao a. 0
١
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠. ١٠١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠١ YY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١٠ ٠١١ ١8
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile
Yeo You Yoo ٠٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro
Vie VV دل lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YA. YAo ٠8
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp do Yoo ٠١٠
Arg Ile val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ٠ ١١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. YYo ٠6
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu عله Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Y¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yl. Yio لال Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly دلا YA دم val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly phe Arg Ile Asn Lys Leu
Yq. Ydo Toe
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu 9. YY. Yio YY. val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp
YYo YY. YYyo
Leu val Gly Asp Gln Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met
Yeu Veo You
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser Val Tyr Ser Cys Gin
Yoo v1. Yio
Leu Arg Gln pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
١١٠ 1٠ Yvo YA.
Gly Phe His Glu val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp عم va. Yao ف Ser Val Ala Asp Glu Lys Ile Pro Phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe §.0 ٠٠ ١١
Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro Cys Glu Pro Pro Ala Gly Cys Leu
A ¢Yo ٠
Asn Phe Arg Asn His Val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile ١ 6 8
Pro Leu Thr Pro Asp Asn val val Val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala £0. too 8٠
Ile Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp to EV ف دلاء
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala مد 86 5
Ile Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr Val Ile Glu Ala
Ou 0.0 oY.
Pro Arg Gln ser Asp Leu Leu Ile Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys Pro oye oY. oYo
Gln Val Val Val Thr Gly Met Ala Gln Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala ov. oyo 0%.
Ala Phe Val Asn Leu Leu Ser val Thr Lys Asp Val Gly Ser Arg Leu o0¢o 00. 000 oT
Leu Leu Asp Ile Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser ofo oY. داه Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA ممه 4
Ala Ile Leu Cys Gly Leu Val Lys Asn ماه Val Tyr Ser Asp Leu Glu oqo Teo 1.0
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr Val Tyr Lys Ala Leu Ser ٠ 1٠٠ Ye.
Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser Val Ile Ser Gln His
Yo 19 ve 16
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe Gln Ile Gly Asp 1¢0 10. R00
١77
Arg His Pro Gln ماه Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu 11 16 Wa
Met Ile Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu ve TA Ae phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 168 140 Yoo
Asp Arg Ser Phe Leu Pro Val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe
Y.o0 ال٠ دالا VY.
Glu Ser Phe Val Arg عله Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arg ه ألا VY. دلا Ser Ser Ile Gln Gln Leu Val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly معلا معلا You
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
Yoo Ya. Yio
Lys Leu val Leu Cys Cys Met Gln Glu Gln Gly Thr Leu Leu Phe pro
YY. هلإلا YA
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr Val Asn Ala Ala Lys Phe Val Asn Ala
YAo Va. 75 Ae
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu
Avo AY Ayo
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp val
AY» AYo AY
Tyr lle Ser Gly Pro Thr Ile Asn pro Thr Gly Phe Leu Tyr Ser Asp دام Ags Ago
Asp Asp Ile Ala Glu Leu Leu Ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
AO» Aco ATs
Val val Ile Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Alle INE AVo AA
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn Val Lys Ser Ser
AAO AQ. Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu ue 9.0 4
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١٠ 4٠ Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser
فا AA Yo 4 Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn Gln Lys to 0. qo00 1. Asp Gln His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu Gln Lys Glu Thr Leu Lys qo av. ve Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Met Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp AA Ao 86 Ala Val Gly Cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala ٠ ٠ 440 ٠ 2 Tyr lle Ser Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu ٠١١ ٠١١ ٠١ ٠ هت ٠ Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu YoY ٠ ٠١ o ٠ o Cys lle Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val Pro Asp Tyr Cys Arg Yo ٠١6 ٠١٠ . هت ٠ Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu Yeo ٠١ ٠ م o ٠ Cys Ile Ala Arg Phe Arg Glu Leu Vai Leu Gly Gly Gly Ala Lys ٠١ ٠١ ٠١ ٠ ° ٠ val Asn Gly Ser Asn ٠ هت ٠< > / ولق الح ١< ؟> DNA ١< > شعير» طفرة AY
ا <> "م atggetgegg cggeggggga cgtggageeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠ geggegtacg gegeegecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠ gaggccagge ggeteetegg cgecgtgega cggegetteg ccgeeggegg ceeggecgeg YA gggctcgagt gettecgeac cttceacttc cgeatccacg acgtegtect cgacceecac ٠ ctccaaggtt geccecggeeee tteectacac accegttgte gaccegeate tetttcgeeg Yoo atctggecgt caaaagcacg cggettggta gaaatcaage ctgcaatcct gatcegttta Yl. tggctggeca gtcgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tetctaatct ٠ ctacctgacc atataccgag ttggttttct ttettettgt ttccgtattt gtgtagtttt EA. ttettttctt tcgagcatga tgttetttga attaatgegt accagactcc agtaattcga 8 cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa tttataacac aacgaggett tgatcaagtg ٠ gtttatgtag ~~ aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta tttcccaaca ٠ attttgatgg cctctaagca tcctgtagtc atgtctactg tgtaagctac agatttatic VY. atgtctatgt gtaagctgca aatggagaga aaagctatct atttggttgt tccagettgt VA. tctttggcag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaagcac gacaaatgag AE tggggcaage atgetgccaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggcatgt Qe tatctttttt tttcccttet actcagtttc ttctttggga gaacaatcet actcaaccta 0 taatcataag aataaaagca agacagatga gtgctgcaga ctattggcat atataacaac ٠ taaataggac atctgtccge tatatcttta gttaataatt gtatatagac gcagtctttg ٠ tgetggaaaa actgceaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ١٠ cttetttgtt acgttttgtg tgcataaage attaacttct gtctttagtt ggcgeagegg ٠٠ taaaaacacc cattgcttaa tattttattt — gctttccgta gcttgataaa atttcaactg ٠١ ٠ cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaace ggcatccaga ttccatcttc ١ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgeacttgea ٠٠ gaaaagtggt gcccttcgaa ggttggeace ftettgttccg tagatattta tcttatcteg ٠٠ tttgttgcaa acatgggacc tgeagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠٠ cttttaggtg tctgccagta gtctgetggt ggtctaattt tcttggtata cctgatgeeg ١٠
١ tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggecaa ggeattacca ccacatattg titctacaat ٠ gctgaacaat tgctcteett tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgea ccttagtagt YVé ttaagccaca aataccagcg aatcaaatta gtttgcagtc agcettggeat tacctiactt YA gagccttggt tgttcttttg aaggtttatg gtctggatat aaacccaaga gctatcaaga ١ As ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggtctccca atctatgatg Yay. cggaggggaa aacattgett gacagagtcg aattctatga atctgatctt ctttcttact ٠٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggicag ١8 gtttttacca ~~ afttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat 816 ٠ ttaatatctg cctttcagat tcttaacccc aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact ١٠ gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc ttgagcaact actgtgetct ccaggtgagt YYY. tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgtta ctaaatggtt acccatgtca 10 gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttct YY ٠ atcctgaaat tgactttaca atgcttgttc ataatctgct tacgaaatat 6م16 ٠ atttctettt tccttgtagg catgtggtca gacctttata taagaaaatg aagtttttgt ١ ٠ agaaataatg tatgctttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtet Yo \K aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag ١ ggggttagca ععلممعماعو acctcaagtt caacctattg cataactttt ggtcttacaa 1١٠ cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca gtctttccta taaaaatgtc tgetggaata ٠ tggaattatt aacagcggta tttattttta ccctgtttaa ttttttectt tgctaaaaga 11٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY. gctgattgta cgattccage tteeggttgt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgetge 1٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctegggttga ttgetcggge tgttgaagaa 16 gggatatctg tgataaagcc tagtggtctt atggtattca acatgggagg ccggecagga ٠ caaggtgtct gtgagcgect atttctacge cgtggatttc geatcaataa getetggeaa ٠ acaaaaafta tgcagatagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt ٠٠ ttccatgeca gcaacageat tatatcetgg ttagaggaat atgetcttca tgttgeacac 7٠٠ caatcttcag ctgggcctag aattttcatc taccggetta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtctttg caggetgetg acacagacat YY»
YY ctccgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttegagttet ttatggatet 7٠ tgttgggeat cagcctgtgt gtgegegeac agcatgggea 0 ctggtggeeg 7٠٠ catttcacat gctttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtacctat YEA actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat 8م 74 agaatttcag gtgaagaaaa tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcagcag 11٠ ctcectcgat ttgtectttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttcctage 111٠6 atacctagct agtttcttgc aagagaataa gtctaatcet 1618886016 038 YVY. tttagatttc cggaatcttg ~~ ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac 1٠ tcctgatgta agacttggtg ~~ tctattgect aca'attatgt ttgettatta gaaattcata 1 agatcaacct atttgatgct tctcacgtat gcttcatgtg acacttectt ttectetggt Yao gcaccagaat gttgttgtgt tcccatcceg tgetgttgea atcgaaaatg ماه Yau. gttctcacct ggacttgcaa ttgttgacga acacctaacc agacacttgc ccaagcaatg EY gttaacatct ~~ ttagcaattg aggtactitg accgatactc cectetttct ttetgtgttt € + A ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagit atgctgacaa gaatttcgat 8 gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca 8ع ٠ tcgaagcacc acgccaatca gatttgctga ttgagttgat caggaaactg 8 71٠ ttgttgttac tggeatgget cagtttgagg ctatcaccag tgetgettte gtgaacttat ١٠ taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatttcagaa catctggaat 0 tgtctagtct gccaagetca aatggtgtat tgaaatatct tgctgggaag accetgecett 6 cacatgcggc tatattgtgt ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagectgaac 4+3 tctagttgaa ctgttgtgea tactatatag aatatcttga cttttatatg ~~ tactttagaa £07. acactgttta aatgtactca tttctttttg ~~ cttcatttta cttgcaggtt tattctgatc 5٠ tggaagttge ttttgetatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta 0٠ ttgagctatt ggaaggacat acttctgtga tcagccagea ctattatggt tgtcttttcc ¢VE atgagctget ggeatttcaa attggtgacc ggcatccaca acaagaggta aacatggett EA geetettcca gtictecate tcactcagtt ctgtccacaa ggtgecgaat gatctgttca EAT agtggacact cccctcagea cgggeaaget agtccatgaa tttggattag ftecctetta €4Y getgggetact tegattacac cacaatgage tectcaacgt ggtetggttt atgittitca ٠
YY tgttttccet ctaatgtitg gttgctettt ttcagagaga acctgcagaa gtgatatcta 6 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccet agaaggaget | gagtttttcg © ٠ ttcetggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgeage 11011860686 © ١٠ taccttctge agtaaacgcc tccattttcg aaagttttgt tcgtcagaac atcactgatt © YY. ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcage agcetggtgaa agatagetat ggttictcag © YA caggeggtge tictgaaatt atatacggga acacctgtct cgegetettc aacaagettg 6 ttetttgetg catgcaagaa cagggeacct tgettttece cttgggaace aacgggeatt © Ea acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt © ٠ caggcttcaa gatcgaacca عماعامعاعة ccgacacact agagaaggtg 1016826061 8 Ye ggetctatat ttetggeeee acaatcaacc ctactggett cctgtacagt gacgacgata 08 Ae tagcagagct getttctgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect © 16 cctetggtct ممه عاتجمعع gecaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtcttt اه ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegttct ccgttgteet getcggagag ctgtectttg 0٠ agctgaccac ggctgggett gatttcgggt ttetgattat gagegactcg tecttggttg ٠ acacatttta cagtttccca agettgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca OAA« ggaagcetgtt gggltcttaag aaccagaagg — atcageattt ctctgatctc atccttgage 6 agaaggagac gttgaagaat cgtgccgacc agttgatcaa ggtatgeett ttgggatate ٠٠ ctgtgtttag ~~ gctetetgtt ttcttcecet gatcagetet ccgatcecet tacatectta ١٠ ggctaatttc agtacttcaa gtttgecacg catttctgac atattctttc ctettgtttt ١٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgett gagagetgeg getgggacge tgtgggetge 1٠ catggcggea tctcgatget tgcaaaaccg accgectaca ttggeaaatc gcetcaaggtg yen gacggctttg agggcaaget ggacagecac aacatgaggg aagceectect gaggtecace 1 Yoo gggctgtoca ttagcageag cgggtggaca ggggtgcegg actactgecg cttcagettt 1٠ getctggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tcgeceggit cagggagetg 14 gtecttggtg geggtgetaa ggtgaatggt agcaactag 14 ><
AAY ؟> ١<
DNA ؟> ١<
الشعير cv. prestige >7 ١١< qd >). gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg catggataaa 8 To aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgegg aggggaaaac attgettgac ١٠١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt ٠ gatcgeattg ttggatgcat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag Yeo attgtaactg aaaattcaag tgaggagttc ttgtactcct tgageaacta ctgtgetcte Yoo cagggttttg ttgaggacca atttggectc gggttgattg ctcgggetgt tgaagaaggg i. atatctgtga taaagcctag tggtcttatg gtattcaaca tgggaggecg gccaggacaa AR ggtgtetgtg agegectatt tettcgecgt ggatttegea tcaataaget ctggeaaaca EA aaaattatgc aggctgetga cacagacatc tccgetttag ttgaaattga gaaaaatage © 2 cgacatcget tcgagttctt المتموعتما gttggggatc agectgtgtg tgegegeaca Ten gcatgggcat acatgaaatc tggtggecge atttcacatg ctttgtctgt gtatagetgt 1٠ caacttcgcc agcccaacca ggtgaagaaa atatttgagt tecttaaaga cggattecat YY. gaagtcagca gctcectega tttgtecttt gatgatgatt ctgttgetga tgaaaaaatt VA. cetttcctag catacctage tagtttcttg caagagaata agtctaatcc ttgtgageet ٠6 ccagctggat ~~ gfttaaattt ccggaatctt gttgetggat tt AAY ٠١ > ٠<
Yo AQ > ١<
DNA <Y\Y>
AY طفرة ¢ ped > ١< ١٠١ >. gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg catggataaa 48 Te aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgegg aggggaaaac attgcettgac ١٠١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt ٠ gatcgcattg ttggatgcat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag Yéo attgtaactg aaaattcaag tgaggagttc ttgtactcct tgagcaacta ctgtgetcte Yoo caggftttgt tgaggaccaa tttggectcg ggttgattge tcgggcetgtt gaagaaggga ٠ tatctgtgat aaagcctagt ggtcttatgg tattcaacat gggaggeegg ccaggacaag EY gtgtctgtga gegectattt ctacgecgtg gatttcgeat caataagetc tggcaaacaa EA aaattatgca gatagcaatt cttcgagtga ctagatgtta actaatccca gtgtttttcc 6 atgccagcaa cagcafttgta tectggttag aggaatatge tcttcatgtt gcacaccaat ٠ cttcatctgg acctggaatt ttcatctacc ggettacatt tttacattac agaaccaatt 1. tttgttgagg atcattacca actagttggg tctttgeagg ctgetgacac agacatctee VY. gctttagtte aaattgagaa aaatagccga catcgeticg agttctttat ~~ ggatcttgtt VA. ggggatcage ctgtgtgtge gegeacagea tgggeataca tgaaatctgg tggecgeatt Ag tcacatgett tgtctgtgta tagetgtcaa cttcgecage ccaaccaggt gaagaaaata A tttgagttcc ttaaagacgg attccatgaa gtcagcaget | ccctegattt gtectttgat a1. gatgattctg ttgctgatga aaaaattcct ttcctageat acctagetag tttetigeaa ٠ gagaataagt ctaatccttg tgagcctcca getggatgtt 18 gaatcttgtt ٠ getggattt ١٠4
VY > ٠٠<
Yio ><
DNA <Y\Y>
AY شعير»؛ طفرة <VIY>
YY >...
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln \ ° ١ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Y ٠ أ 2 Y ٠
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $e ¢o
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ou 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His
Ye Yo Ae
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 1. {0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu
١٠7 ٠ ٠١ ١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠٠ VY \Yo
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠ ١١١ ١8
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala lle Lys Ile
Véo You yoo ٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro
Vo ٠ ١70
Ile Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YA YAO ٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١٠0 You .لا Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn pro Asn Pro Glu Ala 7٠ ١٠ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. vo vi.
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yéo You Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Ye. Yio YV.
Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly د YA. YAo val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Ydo Yoo
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ile Ala Ile Leu
Y.o 7١ Yio ١١ > ٠< q00 >7١١<
DNA ؟> ١<
AY شعيرء طفرة >7 ١<
VY >..< gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg 8ه ممعادوعياده To
‘Yo aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgcgg aggggaaaac attgettgac ١١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt YA gatcgeattg ttggatgeat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag ٠ attgtaactg aaaattcaag tgaggagtic ttgtactcct tgagcaacta ctgtgetete AK caggttttgt tgaggaccaa titggcetcg ggttgattge tcgggetgit gaagaaggga Yi. tatctgtgat aaagcctagt ggtcttatgg tattcaacat gggaggecgg ccaggacaag ٠ gtgtctgtga gegectattt ctacgeegtg gatttcgeat caataagetc tggcaaacaa EA aaattatgca gatagcaatt cttcgagtga ctagatgtta actaatccca gtgtttttcc 68 atgccagecaa cageattgta tcctggetge tgacacagac atctecgett tagttgaaat 1٠ tgagaaaaat agccgacatc gcttcgagtt ctttatggat cttgttgggg 1000 1. gtgtgcgege acageatggg catacatgaa atctggtgge cgeatttcac atgettigtc ألا tgtgtatage عتامممعاعا gccagcccaa ccaggtgaag — aaaatatttg agttccttaa YA agacggattc catgaagtca gcagetcect cgatttgtec tttgatgatg attetgtige AE tgatgaaaaa attcctttcc tagcatacct agctagtttc ttgcaagaga ataagtctaa Qe tecttgtgag cctecagetg gatgtttaaa tttccggaat cttgtigetg gattt 9400 ١١ >١7 ٠<
Yio > ١<
PRT <Y\Y>
AY ؟> شعير»؛ طفرة ١<
VV >...
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys دا ١ ° ٠١ yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Ye Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo ¢w ¢o
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys 04 00 Te
Phe Arg Thr Phe His phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His lo Ve veo As
١77
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 4 qo
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١5 ١٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١١ ١٠١ ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser He Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠١٠ ١١٠ ٠
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile
Vio You yoo ٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro
Vio VV. د lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg val Glu Phe Tyr
YA ميا ٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ١5 Yoo Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ٠ Yio YY»
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser ye 9 7 Yt.
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Y¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Yi. Yio YV. pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ذا YA ع Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Yqo 7٠
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ile Ala Ile Leu 7.٠ 7٠ Yio
YE <YY.>
AY <YYY>
DNA ؟> ١<
AY شعير» طفرة >7١ ١<
وا
VE <..ع> gtttatggtc tggatataaa cccaagagct atcaagattg 6م111 مممتدععاد To aatgcactag acgacgatgg tctcccaatc tatgatgegg aggggaaaac attgcetigac ١١ agagtcgaat tctatgaatc tgatcttctt tcttactgta gagataacaa gatagaactt ٠٠ gatcgcattg ttggatgcat accacagatt cttaacccca atccagagge aatgtcaaag 6 attgtaactg aaaattcaag tgaggagttc ttgtactcct tgagcaacta ctgtgcetcte Yoo caggttttgt tgaggaccaa tttggeetcg ggttgattge tcgggetgtt gaagaaggga Yi. tatctgtgat aaagcctagt ggtcttatgg tattcaacat gggaggccgg ccaggacaag ١ gctgetgaca cagacatctc cgcetttagtt gaaattgaga aaaatagecg 166 EA gagttcttta tggatcttgt tggggatcag cctgtgtgtg cgegeacage atgggeatac © 2 atgaaatctg gtggecgeat ttcacatget ttgtctgtgt atagetgtca 18 Ten cccaaccagg tgaagaaaat afttgagttc cttaaagacg gattccatga agtcageage 11٠ tccctegatt tgtectttga tgatgattct gttgetgatg aaaaaattcc tticctagea ا Ye tacctagcta gtttcttgca agagaataag tctaatcctt gtgagectce agetggatgt VA ttaaatttcc ~~ ggaatcttgt tgctggattt AY
Yo >١٠ ١<
YAQ >" ١ <
PRT <V\Y>
AY 7؟> شعيرء طفرة ١<
YO <§ a>
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gin ١ ° ٠١ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala val Leu Glu Arg
Y. Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo 2 to val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys oa co Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His lo دلا ولا As
YYA
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 4 q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١ ١٠١
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١٠٠ ١٠١١ ‘Yo
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys
YY. \Yo ١٠6
Pro Ser Lys Val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn Pro Arg Ala Ile Lys Ile yéo You yoo 1٠٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro ١5 ٠ دل lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg val Glu Phe Tyr
YAS YAo ١٠
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١50 Yoo Y.0
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ١٠ ١ YY.
Met Ser Lys Ile Val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo 9 YYo 6
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu ماه Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yé¢o Yo. Yoo
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser Val Ile Lys
Ya. Yio لأ Pro Ser Gly Leu Met val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly ذا YA معلا Cys ٠١ > ٠< [41 >؟7١١<
DNA <Y\Y> الشعير cv. Sebastian >17 ١١< ٠١ >< atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg ttectggegg cgtgecagge gtegggegac Te geggegtacg gegecgecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegecgge cacgegegee ٠٠
اكد gaggccagge ggetectegg cgeegtgega cggegeticg cecgeeggegg ceeggecgeg YA gggctcgagt gettcegeac cttceactte cgeatccacg acgtegtect cgacceecac ٠ ctccaaggtt gcceggeeee ttcectacac accegttgtc gacccgeatc 18 79. ctgeaatcct gatcegttta 1. عع مدمتمممع atctggecgt caaaagcacg cggcettggta tggctggeca gtcgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tetctaatct ١ ctacctgacc atataccgag ttggttttct ttettettgt ttccgtattt gtgtagtttt ٠ ttettttctt tcgagcatga tgttctttga attaatgegt accagactcc agtaattcga 8 cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa titataacac aacgaggett tgatcaagtg Teo gtttatgtag aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta tttcccaaca ٠ attttgatgg cctctaagca tcctgtagtc atgtctactg tgtaagctac agatttatic YY. atgtctatgt gtaagctgca aatggagaga aaagctatct atttggttgt tccagcettigt YA tctttggcag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaageac gacaaatgag AE tggggcaage atgctgecaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggcatgt Qo tatetttitt tttcccttct actcagttte ttctttggga gaacaatcct actcaaccta ) ٠8 taatcataag aataaaagca agacagatga gtgetgcaga ctattggcat atataacaac ٠ A taaataggac atctgtccgce tatatcttta ~~ gttaataatt gtatatagac gcagtetttg ٠١ tgctggaaaa actgcaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ٠ cttctttgtt acgttttgtg tgcataaage attaacttct gtctttagtt ggegeagegg ٠٠ taaaaacacc cattgcttaa tattttattt gctttccgta gcettgataaa atttcaactg ٠١ cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠ ggtctcaacc ggeatccaga 1166810116 ١ YA عدععماه ccagaagact ggtcattcac agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgcacttgea Yes gadaagtggt gccecttcgaa ggttggeace tettgticcg tagatattta tcttatcteg ٠٠ tttgttgcaa acatgggacc tgcagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠٠ cttttaggtg tctgccagta gtetgetggt ggtctaattt tcttggtata cctgatgeeg ٠٠ tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggcaa ggcattacca ccacatattg tttctacaat 1 As gctgaacaat tgctctectt tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgea ccttagtagt 8 ttaagccaca aataccagcg —aatcaaatta gtttgecagtc agettggeat taccttactt ٠
٠ 2601 tgttcttttg aaggtttatg لمتدوعاماع aaacccaaga gctatcaaga YAR. ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggictccea atctatgatg ٠٠ cggaggggaa aacattgctt gacagagtcg aattctatga atctgatett ctttcttact ٠2٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggtcag ٠١ gittttacca ~~ atttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat caaaatgcce ٠٠ ttaatatctg ~~ cctttcagat tcttaacccc aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact ١٠١ gaaaattcaa gtgaggagit cttgtactcc ttgagcaact actgtgetet ccaggtgagt YY Ye. tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgtta ctaaatggit acccatgtca ١٠ gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttet ١ 8 atcctgaaat tgactttaca atgcettgttc ataatctget tacgaaatat gegtttgaac ٠8 atttctcttt tccttgtagg catgtggtca gacctttata 48 aagtttttgt ٠ agaaataatg ~~ tatgetttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtct YoY. aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag ١8 gggettagca gtccaaatcc acctcaagtt caacctattg cataactttt ggtcttacaa 116 cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca مامعتتاماع taaaaatgtc tgetggaata يكلا tggaattatt 38 tttattttta ~~ ccctgtttaa ttttttectt tgctaaaaga 1٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY» gctgattgta cgattccage ttccggtigt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgetge ٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa ١16 gggatatctg tgataaagcc tagtggtctt atggtattca acatgggagg ccggecagga ٠ caaggtgtct gtgagegeet atttctacge cgtggatttc gcatcaataa gcetctggeaa Yolo acaaaaatta tgcaggtagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt ٠١ ttccatgeca gcaacageat tatatcctgg ttagaggaat atgcetcttca tgttgcacac ٠ caatcttcag ctgggectag aattttcatc taccggctta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtctttg caggetgetg acacagacat ٠٠ ctccgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttcgagttct ttatggatct 1 tgttggggat cagcctgtgt gtgegegeac agceatgggea tacatgaaat ctggtggecg 7٠ catttcacat getttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtacctat YEA.
٠١ actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat aataatttgg 18 agaatttcag gtgaagaaaa tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcageag ٠٠ cteectegat ttgtcctttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttcctage 1٠ atacctagcet agtttcttgc aagagaataa gtctaatcct tgtgagectc cagetggatg 7٠ tttaaatttc عالمتمدوعي ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac 1 tcctgatgta agacttggtg tctattgect acaattatgt ttgcttatta gaaattcata 8 agatcaacct atttgatget tctcacgtat gcttcatgtg acacttectt ttectetggt ١ Qe gcaccagaat gttgttgtgt tcccatcceg tgetgttgea atcgaaaatg ctetteggtt V a. gttctcacet ggacttgcaa ttgttgacga acacctaacc agacacttge ccaagcaatg 5 gttaacatct ttagcaattg aggtactttg accgatacte ccctetttet ttetgtgttt € «A ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagtt atgctgacaa gaatticgat 46 gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca gtaactgtaa ٠٠ tcgaagcacc acgccaatca gatttgetga ttgagttgat caggaaactg aagcctcagg ٠ ttgttgttac tggcatggct cagtttgagg ctatcaccag tgetgetttc gtgaacttat ٠ taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatticagaa catctggaat ¢YA. tgtctagtct gccaagctca aatggtgtat tgaaatatct tgctgggaag accctgeett 446 cacatgcggc tatattgtgt ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagectgaac ٠٠8 tctagttgaa ctgttgtgca tactatatag aatatcttga cttttatatg tactttagaa 50٠ acactgttta aatgtactca tttetttttg cttcatttta cttgcaggtt tattctgatc 51٠ tggaagttec ttttgctatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta £1A.« ttgagctatt ggaaggacat acttctgtga tcagccageca ctattatggt tgtettttcc ٠8 atgagetget ggeatttcaa attggtgacc ggeatccaca acaagaggta aacatggett ٠ geetettcca gttctccate tecactcagtt ctgiccacaa ggtgecgaat gatetgttca ٠ agtggacact cccctcagea cgggecaaget agtccatgaa tttggattag ttcectetta €4Y gctgggtact tcgattacac cacaatgagc tcctcaacgt ggtctggtit atgtttttca £49A. tgttttceet ctaatgtttg gttgctettt ttcagagaga acctgcagaa gtgatatcta ٠8 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccct agaaggaget — gagtttttcg 0٠ ttcctggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgecage ttettgecag 0٠
١7 taccttctge agtaaacgec tccattttcg aaagttttgt tcgtcagaac atcactgatt ٠٠ ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcage agctggtgaa agatagetat ggtttctcag 0٠ caggcggtge ttctgaaatt atatacggga acacctgtet cgegetettc aacaagettg ٠ ttetttgetg catgcaagaa cagggeacct tgcttttcce cttgggaace aacgggeatt 8 acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt ٠ caggcttcaa gatcgaacca agtgetctag ccgacacact agagaaggtg tctcagecgt 0٠ gggtctatat ttetggecce acaatcaace ctactggett cetgtacagt gacgacgata 0ه tagcagagct getttetgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect 07 ¢ cctetggtct ggagttccaa geccaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtettt OV es ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegtict cegttgteet getcggagag ctgtectttg 0٠ agctgaccac ggetgggcett gatttcgggt ttctgattat gagcgactcg tccttggttg 0٠ acacatttta cagtttccca agcttgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca 0AA. ggaagetgtt gggtcttaag aaccagaagg — atcageattt ctctgatctc atecttgage 6 agaaggagac gttgaagaat cgtgccgacc agttgatcaa ggtatgectt ttgggatatc ٠٠ ctgtgtttag ~~ gctctetgtt ttctteccect gatcagetet ccgatceeet tacatcctta ١٠ ggctaatttc agtacttcaa gtttgecacg catttetgac atattctttc ctettgtttt ١٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgctt gagagcetgeg getgggacge tgtgggetge 1 catggcggca tctcgatget tgcaaaaccg accgectaca ttggcaaatc getcaaggtg ١٠ gacggctttg agggcaagct ggacagccac aacatgaggg aageccteet gaggtccace ١٠ gggctgtgea ttagcagcag cgggtggaca ggggtgccgg actactgecg cttcagettt 17٠ getetggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tegeceggtt cagggagetg 1٠٠ gtecttggte geggtgctaa ggtgaatggt agcaactag 104
VY > ٠١< ت١ >" ١
DNA <Y\Y> الشعير cv. Sebastian <YYY>
VV <ي.ع> atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg tiectggegg cgtgecagge gtegggegac ٠٠
١١ geggegtacg gegeecgecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠ gaggccagge ggctectegg cgecgtgega cggegetteg ccgeeggegg cecggeegeg ٠ gggctcgagt gettcegeac cttccacttc cgeatccacg acgtegtect cgacecceac ٠٠ ctccaaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatcttc ٠ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgeacttgca ٠ gaaaagtggt gcccttcgaa ggtttatggt ctggatataa acccaagage tatcaagatt ٠ gcatggataa acctttactt gaatgcacta gacgacgatg gtctcccaat ctatgatgeg 6 gaggggaaaa cattgcttga cagagtcgaa ttctatgaat — ctgatcttct ttettactgt ٠ agagataaca agatagaact tgatcgcatt gttggatgca taccacagat tcttaaccce ٠ aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc YY. ttgagcaact actgtgctct ccagggtttt gttgaggacc aatttggeet cgggttgatt 2 getcgggetg ttgaagaagg gatatctgtg ataaagecta gtggtcttat ggtattcaac A € atgggaggce ggccaggaca aggtgtetgt gagegectat ttctacgecg tggatttcge ٠8 atcaataagc tctggcaaac aaaaattatg caggetgetg acacagacat ctccgettta ٠ gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcgc ttcgagttct ttatggatct tgttggggat ٠٠ cagcctgtgt gtgegegeac agceatgggea tacatgaaat ctggtggeeg catttcacat ٠ getttgtctg tgtatagetg tcaacttcge cageccaace aggtgaagaa aatatttgag ٠١٠ ttccttaaag acggattcca tgaagtcage agctcecteg atttgtectt tgatgatgat ٠١٠٠ tctgttgetg atgaaaaaat tcctttccta gcatacctag ctagtttctt gcaagagaat ٠ ٠ aagtctaatc cttgtgagee tccagetgga tgtttaaatt tccggaatct tgttgetgga ٠١ ٠ tttatgaaga gttaccacca catcccatta actcctgata atgttgttgt gttcccatece YYA cgtgetgitg caatcgaaaa tgetcticgg ttgtictcac ctggacttge aattgttgac ٠8 gaacacctaa ccagacactt gcccaagcaa tggttaacat ctttagcaat tgaggaaagt ٠٠٠ aaccatgcta aagatacagt aactgtaatc gaagcaccac gccaatcaga tttgetgatt ٠١ gagttgatca ggaaactgaa gcctcaggtt gttgttactg gcatggetca gtttgagget YY.» atcaccagtg ctgctttcgt gaacttatta agtgtaacga aagatgttgg ttccegatta ٠٠ ttactagata tttcagaaca tctggaattg tctagtctge caagctcaaa tggtgtattg ١ ٠6
Yee aaatatcttg ctgggaagac cctgecttca catgeggeta tattgtgtgg cttagttaag ٠ aatcaggttt attctgatct ggaagttgct tttgctatct ctgaagatce aactgtttat AT» aaggcattgt cacaaactat tgagctattg gaaggacata ctictgtgat cagccageac ) ay. tattatggtt ~~ gtcttttcca tgagetgetg gcatttcaaa ttggtgaccg gcatccacaa ١ QA caagagagag aacctgcaga agtgatatct aaggagatga tagggtittc aagttcaget ١٠8 atgtccaccc tagaaggagce tgagtttttc ~~ gttectggtt ccatggaatc cggtgtcata ١٠ catatggatc tggaccgeag cttcttgcca gtaccttctg cagtaaacge ctceatttte ٠ gaaagttttg ttcgtcagaa catcactgat tctgaaaccg atgtcegtic cagcattcag YY Ye. cagctggtga aagatageta tggtttctca geaggeggtg cttctgaaat tatatacggg 8 aacacctgtc tcgegetett caacaagett gttetttget geatgcaaga acagggeace ٠6 ttgettttec ccttgggaac caacgggeat tacgtcaacg cagcaaagit tgtgaatgeca 68 accaccttga ctattccaac gaaggcagat tcaggetica agatcgaacc aagtgetcta ٠ gcegacacac tagagaaggt gtctcagecg tgggtetata titctggeee cacaatcaac YO» cctactgget tectgtacag tgacgacgat atagcagage tgctttetgt ctgtgegaca “٠ tacggageca gggtggtgat agatacctcc tcetctggtc tggagttcca agecacegge YU ¢ tgcagccagt ggaatttgga aagatgtctt tctaatgtca agtcttcaaa geectegttc 18 tcegttgtce tgcteggaga getgtecttt gagetgacca cggetggget tgattteggg 7٠ tttctgatta tgagcgactc gtccttggtt gacacatttt acagtttccc aagcttgagt YAY. cggecacaca geacgttgaa gtacacgttc aggaagetgt tgggtcttaa gaaccagaag ٠ gatcagecatt tctctgatct catccttgag cagaaggaga cgttgaagaa tcgtgeegac ٠8 cagttgatca agacgcttga gagctgegge tgggacgetg tgggetgeca tggeggeate ٠٠٠ tcgatgettg caaaaccgac cgectacatt ggeaaatcge tcaaggtgga cggetttgag Yo. ggcaagetgg acagecacaa catgagggaa gecctcetga ggtccaccgg getgtgeatt ٠٠ agcagcageg ggtggacagg ggtgecggac tactgeeget tcagetttge tetggagage Y YA ggcgacttcg accgggecat ggagtgeatc geecggttca gggagetggt cettggtgge YY ¢ ggtgctaagg tgaatggtag caactag 77١
YA >< ٠١غ > ١<
٠
PRT <Y\Y> الشعير cv. Sebastian <YYY>
YA >.
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ هه ٠ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg ١ Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo م ف
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys oO 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp val Val Leu Asp Pro His “0 ولا Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao 4 {0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١ YY.
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١١ YY. ١١٠
Gly cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١٠ ١١١ Yeo
Pro Ser Lys val Tyr Gly Leu Asp Ile Asn pro Arg Pro Ile Lys Ile ١٠٠ Yo. yoo "٠
Ala Trp Ile Asn Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Asp Asp Asp Gly Leu Pro 110 ٠ ١ lle Tyr Asp Ala Glu Gly Lys Thr Leu Leu Asp Arg Val Glu Phe Tyr
YAS YAO ١
Glu Ser Asp Leu Leu Ser Tyr Cys Arg Asp Asn Lys Ile Glu Leu Asp ٠١5 You Y.o
Arg Ile Val Gly Cys Ile Pro Gln Ile Leu Asn Pro Asn Pro Glu Ala ٠ ١٠ YY.
Met Ser Lys Ile val Thr Glu Asn Ser Ser Glu Glu Phe Leu Tyr Ser
YYo YY. YYo Yéo
Leu Ser Asn Tyr Cys Ala Leu Gln Gly Phe Val Glu Asp Gln Phe Gly
Yéo You Yoo
YE
Leu Gly Leu Ile Ala Arg Ala Val Glu Glu Gly Ile Ser val Ile Lys
Yl. Yio لأ Pro Ser Gly Leu Met Val Phe Asn Met Gly Gly Arg Pro Gly Gln Gly بلا دلا YAo
Val Cys Glu Arg Leu Phe Leu Arg Arg Gly Phe Arg Ile Asn Lys Leu
Ya. Yqo You
Trp Gln Thr Lys Ile Met Gln Ala Ala Asp Thr Asp Ile Ser Ala Leu
Y.o 7٠ Yio YY. val Glu Ile Glu Lys Asn Ser Arg His Arg Phe Glu Phe Phe Met Asp 7١ YY. Yyo
Leu Val Gly Asp Gln Pro Val Cys Ala Arg Thr Ala Trp Ala Tyr Met
Yio Vio Yo.
Lys Ser Gly Gly Arg Ile Ser His Ala Leu Ser val Tyr ser Cys Gln
Yoo Ye. Yio
Leu Arg Gln Pro Asn Gln Val Lys Lys Ile Phe Glu Phe Leu Lys Asp
YV. د YA
Gly Phe His Glu val Ser Ser Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asp Asp Asp عي va. Yao 6
Ser val Ala Asp Glu Lys Ile Pro phe Leu Ala Tyr Leu Ala Ser Phe $40 tA دا Leu Gln Glu Asn Lys Ser Asn Pro Cys Glu Pro Pro Ala Gly Cys Leu
EY. و ey.
Asn Phe Arg Asn Leu Val Ala Gly Phe Met Lys Ser Tyr His His Ile ٠ 4 م Pro Leu Thr Pro Asp Asn val val val Phe Pro Ser Arg Ala Val Ala $0 دم ٠
Ile Glu Asn Ala Leu Arg Leu Phe Ser Pro Gly Leu Ala Ile Val Asp م1 ٠ ¢vo EA
Glu His Leu Thr Arg His Leu Pro Lys Gln Trp Leu Thr Ser Leu Ala م 8 0
Ile Glu Glu Ser Asn His Ala Lys Asp Thr Val Thr val Ile Glu Ala
Ove 0.0 0).
Pro Arg Gln Ser Asp Leu Leu Ile Glu Leu Ile Arg Lys Leu Lys pro داه oY. oYo
Gln val val Val Thr Gly Met Ala Gln Phe Glu Ala Ile Thr Ser Ala
٠ oY. ده Of
Ala Phe Val Asn Leu Leu Ser val Thr Lys Asp val Gly Ser Arg Leu هه 00. 000 oT.
Leu Leu Asp lle Ser Glu His Leu Glu Leu Ser Ser Leu Pro Ser Ser ovo ov. ovo
Asn Gly Val Leu Lys Tyr Leu Ala Gly Lys Thr Leu Pro Ser His Ala
OA OAC 09.
Ala Ile Leu Cys Gly Leu Val Lys Asn Gln val Tyr Ser Asp Leu Glu odo 8١ “١.
Val Ala Phe Ala Ile Ser Glu Asp Pro Thr Val Tyr Lys Ala Leu Ser
TY. 1٠ أ Gln Thr Ile Glu Leu Leu Glu Gly His Thr Ser Val Ile Ser عله His
Ye 1٠ Yo 16
Tyr Tyr Gly Cys Leu Phe His Glu Leu Leu Ala Phe Gln Ile Gly Asp هه“ 06“ همي“
Arg His Pro Gln Gln Glu Arg Glu Pro Ala Glu Val Ile Ser Lys Glu 11: م We
Met lle Gly Phe Ser Ser Ser Ala Met Ser Thr Leu Glu Gly Ala Glu vo TA TA0
Phe Phe Val Pro Gly Ser Met Glu Ser Gly Val Ile His Met Asp Leu 14. 140 Vo
Asp Arg Ser Phe Leu pro val Pro Ser Ala Val Asn Ala Ser Ile Phe
Yo ل٠ Yio YY.
Glu Ser Phe Val Arg Gln Asn Ile Thr Asp Ser Glu Thr Asp Val Arg هآلا YY. هل Ser Ser Ile Gln ماه Leu Val Lys Asp Ser Tyr Gly Phe Ser Ala Gly 76 م لا You
Gly Ala Ser Glu Ile Ile Tyr Gly Asn Thr Cys Leu Ala Leu Phe Asn
Yoo Ya. Yio
Lys Leu val Leu Cys Cys Met Gln Glu ماه Gly Thr Leu Leu Phe Pro
VV. بالا هلالا
Leu Gly Thr Asn Gly His Tyr val Asn Ala Ala Lys Phe val Asn Ala
YAo va. 0ل I)
Thr Thr Leu Thr Ile Pro Thr Lys Ala Asp Ser Gly Phe Lys Ile Glu
Avo AY» Ayo
YEA
Pro Ser Ala Leu Ala Asp Thr Leu Glu Lys Val Ser Gln Pro Trp val
AY» AYo AY
Tyr Ile Ser Gly Pro Thr Ile Asn Pro Thr Gly phe Leu Tyr Ser Asp دام Ags Ago
Asp Asp Ile Ala Glu Leu Leu Ser Val Cys Ala Thr Tyr Gly Ala Arg
Ao. Aco Ae val Val 11 Asp Thr Ser Ser Ser Gly Leu Glu Phe Gln Ala Thr Gly
Avo AVY» AYo AAS
Cys Ser Gln Trp Asn Leu Glu Arg Cys Leu Ser Asn val Lys Ser Ser
AAO Ads Ado
Lys Pro Ser Phe Ser Val Val Leu Leu Gly Glu Leu Ser Phe Glu Leu
Qe q.0 ٠
Thr Thr Ala Gly Leu Asp Phe Gly Phe Leu Ile Met Ser Asp Ser Ser ١٠ 4٠ Yo
Leu Val Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Pro Ser Leu Ser Arg Pro His Ser av. yo 44
Thr Leu Lys Tyr Thr Phe Arg Lys Leu Leu Gly Leu Lys Asn ماه Lys ف 55 04 م
Asp ماه His Phe Ser Asp Leu Ile Leu Glu Gln Lys Glu Thr Leu Lys av. ave
Asn Arg Ala Asp Gln Leu Ile Lys Met Leu Glu Ser Cys Gly Trp Asp
AA aA0 4.
Ala val Gly Cys His Gly Gly Ile Ser Met Leu Ala Lys Pro Thr Ala ٠ You ٠ 2
Tyr Ile Gly Lys Ser Leu Lys Val Asp Gly Phe Glu Gly Lys Leu ٠١١ ٠١١ ٠١ ٠ هت .
Asp Ser His Asn Met Arg Glu Ala Leu Leu Arg Ser Thr Gly Leu ٠ YoY ٠١ o ٠ Qo
Cys lle Ser Ser Ser Gly Trp Thr Gly Val Pro Asp Tyr Cys Arg 6 ٠6 ٠١٠ . o ٠
١4
Phe Ser Phe Ala Leu Glu Ser Gly Asp Phe Asp Arg Ala Met Glu ٠١٠ ٠١ ٠١ 2 ٠ 5
Cys Ile Ala Arg Phe Arg Glu Leu Val Leu Gly Gly Gly Ala Lys ٠١ ٠١ ٠ ٠ 2 ٠
Val Asn Gly Ser Asn ٠ ٠١ > ٠٠< 1¢09 > ١<
DNA > ١< ١46178 شعيرء طفرة > ١<
V4 >..< atggetgegg cggeggggga cgtggaggeg 1002:6266 cgtgecagge gtegggegac ٠٠ geggegtacg gegeecgecaa ggeegtgetg gageggeteg aggegeegge cacgegegee ٠ gaggccagge ggctectegg cgeegtgega cggegcetteg cegeeggegg cecggeegeg ٠٠ gggetegagt gettcecgeac cttecacttc cgeatccacg acgtegteet cgaccecccac ١6 ctccaaggtt geecggeeee tteectacac accegttgte gaccegeate tetttcgeeg ٠ atctggeegt caaaagcacg cggcettggta gaaatcaage ctgeaatcet gatcegttta ٠ tggctggeca gtecgatcagt aatttggeca taactggagt ataaccttgg tctctaatct ٠ ctacctgacc atataccgag ttggttttct ticttettgt ttecgtattt gtgtagtitt EA. ttettttett tcgagcatga tgttctttga attaatgegt accagactcc agtaattcga 068 cattttgaat tttggcgagt gttcttggaa tttataacac aacgaggett tgatcaagtg ٠ gtttatgtag aggagtgttt ttgttcttgt gcaccgtata caattctcta tttcccaaca ٠ attttgatgg cctctaagca tcctgtagtc atgtctactg tgtaagetac agatttattc ١ atgtctatgt gtaagctgca aatggagaga aaagctatct — atttggttgt tccagettgt ٠٠ tctttggeag aacaatcctg cccatcctat caccataagt ataaaagcac gacaaatgag ٠ tggggcaage atgctgecaa getaatacac gacataaget acatattttg aggggeatgt 4.
Yo. tatctttttt tttccettct actcagtttc ttctttggga gaacaatcct actcaaccta ) ٠8 taatcataag aataaaagca agacagatga gtgctgcaga ctattggcat atataacaac ٠٠ taaataggac atctgtcege tatatcttta ~~ gttaataatt gtatatagac gcagtetttg ٠١٠ tgctggaaaa actgcaacta aatattttct ~~ tacattatat ggaatctggg tgtgatatga ١٠ cttetttgtt ~~ acgttttgtg tgcataaage attaacttct gtetttagtt ggcgecagegg ٠١٠٠ taaaaacacc cattgcttaa tattttattt gctttccgta gcttgataaa atttcaactg ٠١٠ cttctaggat tccagcaaag aaagaagcta acaatgatgg agatacccag cattttcatt ٠١ ٠ ccagaagact ggtcattcac tttctacgag ggtctcaacc ggcatccaga ttccatcttc ١١ agggataaga cagtagcaga gctgggatgt ggcaatggtt ggatatccat tgeacttgeca ٠8 gaaaagtgot gcccttcgaa gattggeacc tettgttceg tagatattta tcttatcteg ٠٠٠ tttgttgcaa acatgggacc tgcagaagtt agacatttac tcaggttact ttatatgaaa ٠٠ cttttaggtg tctgccagta gtctgetggt ggtctaattt tettggtata cctgatgeeg ٠٠١ tcgagcatat tgctttcaaa ttttgggcaa ggcattacca ccacatattg tttctacaat ١١ gctgaacaat tgcetctectt tgaaaggaag aaaaacaaga atgacatgca ccttagtagt ١ ttaagccaca aataccagcg — aatcaaatta gtttgcagtc agettggeat taccttactt ٠٠ gagccttggt tgttettttg aaggtttatg gtctggatat aaacccaaga gctatcaaga YAT « ttgcatggat aaacctttac ttgaatgcac tagacgacga tggtctccca atctatgatg ٠ cggaggggaa aacattgctt gacagagtcg aattctatga atctgatctt ctttcttact ٠ gtagagataa caagatagaa cttgatcgca ttgttggatg cataccacag gtacggtcag ٠١٠8 gtttttacca ~~ atttcctgtg aatggggatt atagtcgatc agaacttgat caaaatgeec ١٠٠ ttaatatctg ~~ cctttcagat tcttaacccc aatccagagg caatgtcaaa gattgtaact ٠٠ gaaaattcaa gtgaggagtt cttgtactcc ttgagcaact actgtgetct ccaggtgagt ١١ ٠ tgagatctat ttaaactcaa gccattcagt ttacctgita ctaaatggtt acccatgtca ٠ gagtctccaa atctttttct tttctcaaac agcaaagaga gaagaaaact tttaagttct YY ٠8 atcctgaaat tgactttaca atgcttgttc ataatctgct tacgaaatat gegtttgaac ١258 atttctettt tccttgtagg catgtggtca gacctttata taagaaaatg aagtttttgt ١٠ agaaataatg tatgctttgt acttatgaca tggttccacc agtataatca atttaagtct ١٠٠ aggtagttag gaacctagga tggagagcac cgacagtgta taatatatat atgtcgatag “٠ yo)
ggggttagca gtccaaatcc acctcaagtt caacctattg — cataactttt ggtcttacaa 18 cctgtatgga caaatgtgat cagcacccca gtctttecta taaaaatgtc tgetggaata 1١٠٠ tggaattatt 28 tttattttta قاع ttttttectt tgetaaaaga 1٠ atgataatcc ttatgccacg aggttacatt gtattactca agtcaatatt tgttactatg YAY. gctgattgta cgattccage tteeggttgt taattttgtt atgtttgtga actttgctgc “٠ attcagggtt ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa YQ ¢ gggatatctg tgataaagcc tagtggtett atggtattca acatgggagg ccggecagga ٠٠ caaggtgtct gtgagegect atttctacge cgtggatttc gcatcaataa getctggcaa ١٠ acaaaaatta tgcaggtagc aattctttga gtgactagat gttaactaat cccagtgttt ١٠٠ ttccatgeca gcaacagcat tatatcetgg ttagaggaat atgetcttca tgttgcacac ٠٠ caatcttcag ctgggcectag aattttcatc taccggetta catttttaca ttacagaacc YY ¢ aatttttgtt gaggatcatt accaactagt tgggtctttg caggetgetg acacagacat ١١٠٠ ctccgettta gttgaaattg agaaaaatag ccgacatcge ttegagttct ttatggatet ؟؟ ٠ tgttgggeat cagccetgtgt gtgegegeac ageatgggea tacatgaaat ctggtggeeg ٠ catttcacat gctttgtctg tgtatagetg tcaacttcgc cagcccaacc aggtacctat YEA « actctctgat tagatcttta caacaataat atagtaatgt caggaataat aataatttgg Yo ¢. agaatttcag gtgaagaaaa tatttgagtt ccttaaagac ggattccatg aagtcageag ٠٠ cteectegat ttgteetttg atgatgattc tgttgetgat gaaaaaattc ctttectage 1٠ atacctagct ~~ agtttcttgc aagagaataa gtctaatcct tgtgagectc cagetggatg 1١٠ tttaaatttc cggaatcttg ttgctggatt tatgaagagt taccaccaca tcccattaac ١١٠ tcctgatgta agacttggtg tctattgect acaattatgt ttgettatta gaaattcata YAS agatcaacct atttgatgct tctcacgtat gcttcatgtg acacttcett ttectetggt ¥4 . » gcaccagaat gttgttgtgt tcccatceccg tgetgttgea عتمم عاد ctettcggtt ٠ gttctcacct ggacttgcaa ttgttgacga acacctaacc agacacttgc ccaagcaatg ٠ gttaacatct ttagcaattg aggtactttg accgatactc ccctetttct ttetgtgttt € « As ggaactgtgg aaaatacatg tgttctgtga agaaaaagtt atgctgacaa gaatttcgat 58 gttattgcca ttcttctaaa tttcaggaaa gtaaccatge taaagataca gtaactgtaa ٠٠ tcgaagcacc acgccaatca gatttgetga ttgagttgat caggaaactg aagcctcagg ٠ yoy ttgttgttac tggeatgget cagtttgagg ctatcaccag tgetgetttc gtgaacttat 2 ٠ taagtgtaac gaaagatgtt ggttcccgat tattactaga tatttcagaa catctggaat £Y A. tgtctagtct gccaagetca aatggtgtat tgaaatatct tgctgggaag accctgectt 468 cacatgcggce tatattgtgt ggcttagtta agaatcaggt gtgtgtcaat cagcctgaac ٠٠ tctagttgaa ctgttgtgca tactatatag aatatcttga cttttatatg tactttagaa 50٠ acactgttta aatgtactca tttctttttg ~~ cttcatttta cttgeaggtt tattctgatc 4٠٠ tggaagttge ~~ ttttgctatc tctgaagatc caactgttta taaggcattg tcacaaacta 41 ttgagctatt ggaaggacat acttctgtga tcagccagea — ctattatggt tgtettttce €VE atgagctget ggcatttcaa attggtgacc ggeatccaca acaagaggta aacatggett ٠ geetettcca gttetccate tcactcagtt ctgtccacaa ggtgecgaat gatetgttca ٠ agtggacact cccctcagca cgggcaaget agtccatgaa tttggattag tteectetta £€4Y getgggtact tcgattacac cacaatgage tectcaacgt ggtetggttt atgtttttca ٠ tgttttcect ctaatgtttg gttgctettt ttcagagaga acctgcagaa — gtgatatcta 8 aggagatgat agggttttca agttcagcta tgtccaccct agaaggaget — gagtttttcg 0٠ ttcctggttc catggaatcc ggtgtcatac atatggatct ggaccgcage ttettgeccag ه٠ taccttctge agtaaacgcc tccattttcg aaagttttgt tcgtcagaac atcactgatt oYY ctgaaaccga tgtccgttcc agcattcage agcetggtgaa agatagctat ggtttctcag 0 caggeggtge tictgaaatt atatacggga acacctgtct cgegetettc aacaagettg oY ٠8 ttctttgetg catgcaagaa cagggeacct tgcttttcee cttgggaace aacgggeatt ©¢€ « « acgtcaacgc agcaaagttt gtgaatgcaa ccaccttgac tattccaacg aaggcagatt ٠8 caggcttcaa gatcgaacca agtgcetctag ccgacacact agagaaggtg tctcagecgt 0٠ gggtctatat ttctggecee acaatcaacc ctactggett cctgtacagt gacgacgata ده tagcagaget getttetgtc tgtgegacat acggagecag ggtggtgata gatacctect ٠ cctetggtct ggagttccaa gecaccgget geagecagtg gaatttggaa agatgtettt 00٠ ctaatgtcaa gtcttcaaag ccctegttct cegttgtect getcggagag ctgtectttg ٠ agctgaccac ggctgggctt gatttcgget ttctgattat gagcgactcg tecttggttg ٠ acacafttta cagtttccca agcttgagtc ggccacacag cacgttgaag tacacgttca “٠ ggaagcetgtt gggtcttaag aaccagaagg atcageattt ctetgatctc atecttgage 6
٠١١ agaaggagac gttgaagaat cgtgccgacc agttgatcaa ggtatgectt ttgggatatc ٠٠ ctgtgtttag ~~ gctctctgtt ticttccect gatcagetct 088160066 tacatectta ٠١٠ ggctaatttc agtacttcaa gtttgccacg catttctgac atattctttc ctettgtttt ٠٠٠ attttcctgt gatgtgatga acagacgcett gagagetgeg getgggacge tgtgggetge 1٠ catggcggeca tctcgatget tgcaaaaccg accgectaca ttggcaaatc gctcaaggtg ١1 gacggctttg agggcaagct ggacagccac aacatgaggg aagecctcct gaggtccace 1٠ gggctgtgeca ttagcagcag cgggtggaca ggggtgecgg actactgeeg cttcagettt 17 ٠ getctggaga geggegactt cgaccgggee atggagtgea tcgeceggtt cagggagetg 1٠ gteettggatg geggtgctaa ggtgaatggt agcaactag 1509 ٠١ ؟> ٠١<
TAA > ١<
DNA ؟> ١ < الشعير cv. sebastian >١7 ١١ <
Yo <§0a> aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccagcattt tcattccaga "٠ agactggtca ttcactttct acgagggtct caaccggecat ccagaticca tettcaggga ٠٠ taagacagta gcagagctgg gatgtggecaa tggttggata tccattgecac ttgecagaaaa ٠٠ gtggtgcect tcgaaggttt atggtctgga tataaaccca agagctatca agattgeatg ١6 gataaacctt tacttgaatg cactagacga cgatggtctc ccaatctatg atgcggaggg ٠ gaaaacattg cttgacagag tcgaattcta tgaatctgat cttetttctt actgtagaga ٠ taacaagata gaacttgatc gcattgttgg atgcatacca cagattctta accccaatce £Y agaggcaatg tcaaagattg taactgaaaa ttcaagtgag gagttcttgt actccttgag ¢A. caactactgt gctctccagg — gttttgttga ggaccaattt ggectegggt tgattgetcg © ¢ ggctgttgaa gaagggatat ctgtgataaa gcctagtggt — cttatggtat tcaacatggg ٠٠ aggccggeca ggacaaggtg tetgtgageg cctatttctt cgecgtggat ttcgcatcaa ٠٠ taagctctgg caaacaaaaa ttatgcag TAA
YY >١٠< ٠١.٠.١ <YVY>
ٍ ١:
DNA ؟> ١<
VEYA طفرة ¢ ye d >7١ ١<
YY <g> aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccagcattt tcattccaga To agactggtca ttcactttct acgagggtct caaccggcat ccagattcca tcttcaggga ٠ taagacagta gcagagctgg gatgtggecaa tggttggata tccattgeac ttgcagaaaa ٠٠ gtggtgccet tcgaagattg geacctettg ttccgtagat atttatctta ~~ tctegtttgt ١٠6 tgcaaacatg ggacctgecag aagttagaca tttactcagg ttactttata ~~ tgaaactttt ٠٠ aggtgtctgc cagtagtctg ctggtggtct aattttcttg gtatacctga tgcegtcgag ٠ catattgctt ~~ tcaaattitg ggcaaggcat taccaccaca tattgtttct acaatgctga ٠٠ acaattgctc tcctttgaaa ggaagaaaaa caagaatgac atgcacctta gtagtttaag ¢A« ccacaaatac cagcgaatca aaftagtttg cagtcagett ggeattacet tacttgagee © ¢ ttggttgttc ttttgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagetat caagattgca ٠ tggataaacc tttacttgaa tgcactagac gacgatggtc tcccaatcta tgatgeggag 1٠ gggaaaacat tgcttgacag agtcgaattc tatgaatctg atcttetttc ttactgtaga VY. gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct taaccccaat VA. ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg aggagttett gtactecttg ٠ agcaactact gtgetetcca gggttttgtt gaggaccaat ttggectegg gttgattget ٠8 cgggetgttg aagaagggat atctgtgata aagcctagtg — gtettatggt attcaacatg ٠ ggaggecgge caggacaagg tgtetgtgag cgectatttc ttcgeegtgg atttegeatc ٠٠ aataagctct ggcaaacaaa aattatgcag ٠١
YY > ٠٠<
YAT >١7 ١<
PRT > ١5617 شعيرء طفرة >77 ١١<
YY >..<
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp Val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gin ١ 2 ٠ yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala val Leu Glu Arg
Yoo
Y ٠ Y 2 "1 ٠
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $e £0
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ow دهت Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His lo Ye Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao q. 40
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ١ «٠. ١ «0 ١ ١ ٠
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr Val Ala Glu Leu ١١٠١ ١٠١ ١١ ©
Gly Cys Gly Asn Gly Trp lle Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ٠١٠ ١١١ ١
Pro Ser Lys Ile Gly Thr Ser Cys Ser Val Asp Ile Tyr Leu Ile Ser
Yeo You Yoo Ye.
Phe val Ala Asn Met Gly Pro Ala Glu Val Arg His Leu Leu Arg Leu
Yio VV. دلا Leu Tyr Met Lys Leu Leu Gly val Cys ماه YA. ميا YY >؟٠٠< اللا >١7 ١١<
DNA <Y\Y>
YE شعيرء طفرة ل > ١ ١١<
YY <.ءع> aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccagcattt tcattccaga Te agactggtca ttcactttct acgagggtct caaccggeat ccagattcca tcttcaggga ٠٠ taagacagta gcagagcetgg gatgtggeaa tggttggata tccattgecac ttgcagaaaa ٠٠ gtggtgeect tcgaagattg geacctcttg 1 atttatctta ~~ tctcgtttgt ٠ tgcaaacatg ggacctgcag aagttagaca tttactcagg tttatggtct ggatataaac ٠٠ ccaagagcta tcaagattgc atggataaac ctttacttga atgcactaga cgacgatggt ٠
١٠١ ctcccaatct atgatgegga ggggaaaaca ttgettgaca gagtcgaatt ctatgaatct ٠٠ gatcttcttt ~~ cttactgtag agataacaag atagaacttg atcgeattgt tggatgcata ٠ ccacagattc ttaaccccaa tccagaggcea atgtcaaaga ttgtaactga aaattcaagt 08 gaggagttct tgtactcctt gagcaactac tgtgetctec agggttitgt tgaggaccaa ٠ tttggectcg ggttgattge tcgggetgtt gaagaaggga tatctgtgat aaagectagt 1٠ ggtcttatgg tattcaacat gggaggccgg ccaggacaag — gtgtetgtga gegectattt VY cttcgecgtg gatttcgeat caataagctc tggcaaacaa aaattatgea ع Yvy ٠ > ٠٠< نما > ١<
PRT <Y\Y> ١٠١ 7؟> شعيرء طفرة ١ <
Y ¢ < ¢ ve
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys Gln ١ 5 ١ ٠ ١ Oo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala Val Leu Glu Arg
Y. Yo Ya
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
Yo $a to val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
Ow ده Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val val Leu Asp Pro His 2 Oo 7 ٠ Y 0 A ٠
Leu عات Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
AO 9. 40
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ١ ١٠١ YY
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr val Ala Glu Leu ١١١ YY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Trp Ile Ser Ile Ala Leu Ala Glu Lys Trp Cys ١١ ١١٠ Yeo
Pro Ser Lys lle Gly Thr Ser Cys Ser val Asp Ile Tyr Leu Ile Ser
Yeo You Yoo ٠٠
١٠دال
Phe Val Ala Asn Met Gly Pro Ala Glu Val Arg His Leu Leu Arg Phe
Vio ٠ ١١5
Met val Trp Ile
YA
Yo <Y¥V).> 16 >١7اا<
DNA ؟> ١< ١٠5517 شعير» طفرة >١7 ١١<
Yo <u> aggattccag caaagaaaga agctaacaat gatggagata cccageattt tcattccaga To agactggtca ttcactttct acgagggtet caaccggeat ccagattcca tcttcaggga ٠٠٠ taagacagta gcagagetgg gatgtggeaa tggtttatgg tctggatata aacccaagag YA.
Ctatcaagat tgcatggata aacctttact tgaatgcact agacgacgat ggtctceccaa Y¢o fctatgatge ggaggggaaa acattgettg acagagtcga attctatgaa tctgatctte ٠ tttcttactg tagagataac aagatagaac ttgatcgcat tgttggatge ataccacaga ٠ ticttaaccc caatccagag gcaatgtcaa agattgtaac tgaaaatica agtgaggagt ٠ tctigtactc cttgagcaac tactgtgetc tccagggttt tgttgaggac caatttggee ٠٠ fcgggttgat tgcteggget gttgaagaag تدع gataaagcct agtggtetta o¢. tggtattcaa catgggagee cggecaggac aaggtgtetg tgagegecta tttcttcgee ٠ gtggatttcg catcaataag ctctggcaaa caaaaattat 088 1 1١ > ٠١< ٠١١ > ١١<
PRT >" ١١< ١5517 شعيرء طفرة >١7 ١١< ١ >..<
Met Ala Ala Ala Ala Gly Asp val Glu Ala Phe Leu Ala Ala Cys 2 ١ 5 ٠١ Yo
Ala Ser Gly Asp Ala Ala Tyr Gly Ala Ala Lys Ala val Leu Glu Arg
Yo. Yo Ye
Leu Glu Ala Pro Ala Thr Arg Ala Glu Ala Arg Arg Leu Leu Gly Ala
٠١
Yo $a to
Val Arg Arg Arg Phe Ala Ala Gly Gly Pro Ala Ala Gly Leu Glu Cys
On 00 Te
Phe Arg Thr Phe His Phe Arg Ile His Asp Val Val Leu Asp Pro His lo Ye Yo As
Leu Gln Gly Phe Gln Gln Arg Lys Lys Leu Thr Met Met Glu Ile Pro
Ao q. q0
Ser Ile Phe Ile Pro Glu Asp Trp Ser Phe Thr Phe Tyr Glu Gly Leu ٠ ٠١ ١١
Asn Arg His Pro Asp Ser Ile Phe Arg Asp Lys Thr val Ala Glu Leu ١١١ YY. ١١٠
Gly Cys Gly Asn Gly Leu Trp Ser Gly Tyr Lys Pro Lys Ser Tyr Gln \ Y ٠ ١ 2 ١ ¢ ٠
Asp Cys Met Asp Lys Pro Leu Leu Glu Cys Thr Arg Arg Arg Trp Ser
Veo You Yoo ٠١٠
Pro Asn Leu
YV > ٠<
YAY > ١<
DNA >7 ١ < صناعى < Y \ + <YY.> ١ جزء من المنتج Sacll BamHI <YYY>
YV >. ggccgeggge ctegagtget tccgeacett ccacttccge atccacgacg tegtectcga Te cccccaccte caaggattce agcaaagaaa gaagcetaaca atgatggaga tacccageat ٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccggc atccagattc ٠٠ catcttcagg gataagacag tagcagaget gggatgtggc aatggttgga tatccattge ٠ acttgcagaa aagtggtgcc cttcgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagetat ٠ caagattgca tggataaacc tttacttgaa tgcactagac gacgatggtc tcccaatcta ٠ tgatgcggag ggoaaaacat tgettgacag agtcgaattc 18 atcttetttc £Y « ttactgtaga gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct ٠
١١4 taaccccaat ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg aggagtictt © 2 gtactccttg agcaactact gtgetctcca gggttttgtt gaggaccaat ttggectegg Ten gttgattgct cgggctgttg aagaagggat atctgtgata aagectagtg — gtcttatggt 1. attcaacatg ggaggecgge caggacaagg tgtetgtgag cgectatttc tacgeegigg YY. atttcgcatc ~~ aataagctct ggcaaacaaa aattatgeag atagcaattc tttgaggatc VA
Cc YAN ٠١< تكلا YAY > ١< DNA ؟> ١< <١١؟ > صناعي <YY.> Sacll BamHI <YYY> جزء من المنتج ؟ ا ggeegegggg ctegagtget tecgeacctt ccacttcege atccacgacg 008 To ccccecaccte caaggattcc agcaaagaaa gaagctaaca atgatggaga tacccageat ١ Ye tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc ٠٠ catcttcagg gataagacag tagcagagcet gggatgtgge aatggttgga tatccattge ٠ acttgcagaa aagtggtgec cttcgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagctat Yoo caagattgca tggataaacc tttacttgaa tgcactagac gacgatggic 8م Yi. tgatgcggag gggaaaacat tgcttgacag agtcgaattc tatgaatetg atcttcttte ٠ ttactgtaga gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct EA taaccccaat ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg aggagttctt o¢. gtactccttg agcaactact gtgctctcca gggttttgtt gaggaccaat ttggectegg ٠٠ gttgattget cgggcetgttg aagaagggat atctgtgata aagectagtg — gtcttatggt 17. attcaacatg ggaggecgge caggacaagg tgtetgtgag cgectatttc tacgeegtgg VY» atttcgcatc ~~ aataagctct ggcaaacaaa aattatgcag atagcaattc tttgaggatc YA.
Cc YAN
Ya >؟٠٠<
٠١٠ .لا >7١١<
DNA ؟> ١< صناعي >” ١< <YY.> 6 جزء من المنتج Sacll BamHI <YYY>
Yq <ي.ع> ggecgegggg ctegagtget tecgeacett ccacttecge atccacgacg 8 1. عات caaggattcc agcaaagaaa gaagcetaaca atgatggaga tacccageat ٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc YA catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge aatggttgga tatccattge Yeo acttgcagaa aagtggtgec cttcgaaggt ttatggtctg gatataaacc caagagctat Yoo caagattgca tggataaacc ftftacttgaa tgcactagac gacgatggtc tcccaatcta 1. tgatgcggag gggaaaacat tgettgacag agtcgaattc tatgaatctg atcttcttte ٠ ttactgtaga gataacaaga tagaacttga tcgcattgtt ggatgcatac cacagattct EA taaccccaat ccagaggcaa tgtcaaagat tgtaactgaa aattcaagtg —aggagttctt 08 gtactccttg agcaactact gtgetcteca gggttttgtt gaggaccaat ttggeetegg ٠ gttgattget cgggetgttg aagaagggat atctgtgata aagectagtg gtcttatggt 7. attcaacatg ggaggccgge caggacaagg ctgctaagga tec YoY ٠١ > ٠٠< 64 ><
DNA <Y\Y> صنا عي >” ١١< <YY.> جزء من المنتج أ Sacll BamHI <YYY>
Ye >< ggecegegggg ctegagtget tcegeacctt ccacttecge 2160008066 008 Te cccecaccte caaggattce agcaaagaaa gaagcetaaca atgatggaga tacccagcat ٠٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccggc atccagatic yA.
٠١ catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge aatggttgga 10166266 ٠8 acttgcagaa aagtggtgec cttcgaagat tggeacctct tgticcgtag atatttatct ٠٠ tatctcgttt gttgcaaaca tgggacctge agaagttaga catttactca ggttacttta ٠ tatgaaactt ttaggtgtct gccagtaggg 216 8:
YY > ٠٠< 7 <yyy>
DNA 7؟> ١ < صناعي >١١١< <YY.>
V جزء من المنتج Sacll BamHI <YYY>
YY >. ggeegegggg ctegagtget tecgeacctt ccactteege atccacgacg tegtectega Te cccccaccte caaggattcc agcaaagaaa gaagctaaca atgatggaga tacccageat Ye tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc ٠٠ catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge aatggttgga tatccattge ٠٠8 acttgcagaa aagtggtgee cttcgaagat tggcacctct tgticcgtag atatttatct ٠٠ tatctcgttt gttgcaaaca tgggacctge agaagttaga catttactca ggtttatggt ٠ ctggatataa ggatce 171
YY >" ٠٠<
YYo ><
DNA ؟> ١< صناعي >< <YY.>
A جزء من المنتج Sacll BamHI <YYY>
YY <¢ve> ggcegeggge ctegagtget tecgeacctt ccacttcege atccacgacg tegtectega To ccceccacctc caaggattcc agcaaagaaa gaagctaaca atgatggaga tacccageat ٠ tttcattcca gaagactggt cattcacttt ctacgagggt ctcaaccgge atccagattc ٠٠٠
١ catcttcagg gataagacag tagcagagct gggatgtgge ةفاعوالاقلا ggtctggata Yo taaacccaag agctatcaag attgcatgga taaaccttta cttgaatgca ctagacgacg Yao atggtctccc aatctataag gatcc 7١ ١7 > ٠<
YVY > ١٠<
DNA ؟> ١< .بن الشعير Prestige >7 ١١<
YY <م.> cgattccagc 2 taattttgtt دعاعتناعتة actttgctge 1 To ttgttgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetecggge tgttgaagaa gggatatetg ١٠١ tgataaagec tagtggtctt #مالماوعاة acatgggagg ccggecagga 1 YA. gtgagcgect atttctacge cgtggatttc gcatcaataa getctggeaa acaaaaatta Yeo tgcaggtagc ~~ aattctttga gtgactagat g 7
Ye <yy.> الا > ١٠<
DNA ؟> ١<
AY ؟> الشعير طفرة ١<
YE >..< cgattccage ttecggttgt taattttgtt ~~ atgtttgtga actttgctge attcagggtt Te ttottgagga ccaatttgge ctcgggttga ttgetcggge tgttgaagaa gggatatctg ١١ tgataaagcc tagtggtett atggtattca acatgggagg ccggecagga caaggtgtct YA gtgagcgeet atttctacge cgtggatttc geatcaataa gctctggcaa acaaaaatta Yo tgcagatagc ~~ aattctttga gtgactagat g YV)
Yo <¥).>
YYY ><
DNA ؟> ١< الشعير cv. sebastian >17 ١<
Vo >) ..< ggcatccaga ttccatcttc agggataaga cagtagcaga gctgggatgt 1 Te ggatatccat tgeacttgca gaaaagtggt gceccttcgaa ggttggeace tetigttecg ١٠١ t ١7١ ١ > ٠٠< ١7١ <YVY>
DNA <Y\Y> الشعير cv. sebastian <Y)Y>
YU <g> ggcatccaga ttccatcttc agggataaga cagtagcaga getgggatgt ggcaatggtt Ta ggatatccat tgeacttgca gaaaagtggt geccttcgaa gattggeace tettgttecg ١١ tag ١١١
YV > ٠١<
Yo ؟> ١<
DNA ؟> ١< صناعي >< <YY.> أولي PCR <YYY>
YV <¢ve> atggcetgegg cggeggggga cgtgg Yo
YA <YY.>
YY > ١<
DNA ؟> ١< صناعي >< <YY.> أولي PCR <YYY>
YA >. aggattccag caaagaaaga age YY 1 > ٠٠<
Y¢ >١١<
DNA <Y\Y> صناعي <YYY> <YYV.> أولي PCR <YYY>
Ya <g> gattcttaac cccaatccag aggce Y¢ gr >١7٠<
Yo ؟> ١<
DNA <Y\Y> صناعي <YYYV> <YY.> أولي PCR <YYY>
Sv <g> ggettttgtt gaggaccaat ttgge Yo ١٠ <YVY.>
YY ><
DNA <Y\Y> صناعي <YYY> <YY.> أولي PCR <YYY> ٠ <g> tgctgetttc gtgaacttat t ص 7 >١٠< 7 > ١٠
DNA ؟> ١< صناعي >< <YY.>
Yo أولي PCR <YYY>
EY <g> catatggatc tggaccgcag cttett Yi
EY <YY.>
Yo > ١<
DNA ؟> ١< صناعي >< <YY.> أولي PCR <YYY>
EY >..< ccttcgaagg geaccacttt tctge Yo 6 <YY.>
Yo ؟> ١<
DNA ؟> ١< صناعي >” ١١< <YYV.> أولي PCR <YYY> £8 <g> ctggagagca cagtagttge tcaag Yo to <YVY.>
Yo > ١<
DNA ؟> ١ < صناعي >١١ ١< <YY.> أولي PCR <YYY> $0 <¢va> ctgcataatt tttgtttgee agage Yo £1 <YY).>
Y¢ > <ا DNA ؟> ١< صناعي <YYY> <YY.> أولي PCR <YYY> £1 <g> tacaccattt gagcttggca gact Y¢ ا >١٠٠<
Y¢ ><
DNA <Y\Y> صناعي >١١ ١< <YY.> أولي PCR <YYY>
EY <g> aaaatggagg cgtttactge agaa AR?
EA <YY>
YV > ١٠<
DNA <Y\Y> صناعي >< <YY.> أولي PCR <YYY>
EA <g> ctagttgcta ccattcacct tagcacc Yv £4 <YY.>
Yo ؟> ١<
DNA ؟> ١< صناعي >؟١١< <YY.> yay أولي PCR <YYY> £4 <g> atggetgegg cggegggeea 088 Yo or <YY >
Yo >؟١<
DNA <Y\Y> صناعي <YIY> <YYV.> أولي PCR <YYY>
Or <¢va> atggetgegg cggeggggea 88 Yo 0) <Y\.>
Yo ؟> ١ <
DNA > < صناعي > ؟١١< <YY.> أولي PCR <YYY> 0) >. atggetgegg cggeggggga cgtgg Yo oY >" ٠٠<
Yo 7؟> ١<
DNA <Y)Y> صناعي >١١١< <YY.> أولي PCR <YYY> oF <.ي..ع> atggetgegg cggegggega 888 Yo oy <Y).>
حا Yo >< ١< ؟> DNA >١7 ١< صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي OV <¢ va> atggetgegg cggeggggga cgteg ve <Y\Y.> 0% ١< ؟> Yo DNA >7 ١< ١< ؟> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي ل {¢< 08 ggctectcgg cgeegtgega cggcg Yo <Y\.> 00 Yo >١7 ١< DNA <Y\Y> ١١< ”> صناعي <YVY.> PCR <YYY> أولي .> 00 ggctectegg cgeegtgega cggcg Yo on <Y\).> Yo <Y\Y\> DNA <Y\Y> <> صناعي <YY.>
أولي PCR ><
Of > <ر. ggetectegg 021668 cggeg Yo oY >< ٠١ <YVY>
DNA ؟> ١ < صناعي > ١١< <YY.> أولي PCR <YYY>
OV > <ي. gtacgcegeg 66025 Ye
OA > ٠١<
Yo > ١٠<
DNA <Y\Y> صناعي > ؟١١'< <YY.> أولي PCR <YYY>
ON > wv e> ccgeeggegg cgaagegecg \K 084 <Y\)Y.>
Yo <YYY>
DNA <Y\Y> صناعي >” ١< <YY.> أولي PCR <YYY> 04 <¢va> gtgcggaage actcgagecc ١ ٠١ > ٠٠<
٠
Ye >١7 ١<
DNA ؟> ١< صناعي >” ١١< <YY.> أولي PCR <YYY>
Te >). 5155215252 728 ١ 1) > ٠٠< 1 >"١ا<
DNA 7؟> ١ < صناعي >١7 ١< <YY.> أولي PCR <YYY> 1١ <€ee> cttggaggte ggggtegage acgacg 71
TY > ٠٠<
Ye > ١ا<
DNA > ١< صناعي >< <YY > أولي PCR <YYY> 1١ >< gtocggaage 0168206 ١ 17 > ٠٠<
Ye <YYY>
DNA <Y\Y> صناعي >" ١<
YY) أولي PCR <YYY> 17 >..< cgtggatgeg 8 ve 1¢ <YYV.>
YU >؟7١<
DNA ؟> ١< صناعي > ١< <YY.> أولي PCR <YYY> ٠1 <u> ctiggaggtg ggggtlcgage acgacg 571 > ٠٠< 1١ > ١<
DNA ؟> ١< ؟> صناعي ١١< <YY.> أولي PCR <YYY> <ي. > م“ gtttatggtc tggatataaa cccaag Yi 17 <YV.>
YY ><
DNA ؟> ١< صناعي >” ١< <YY.> أولي PCR <YYY> 11 > ..< aggattccag caaagaaaga age yy
TV <YY.>
‘YY
Yo >؟١<
DNA <Y\Y> صناعي >”١١< <YY.> أولي PCR <YYY>
TY >. <ء 23312600868 acaagattec ggaaa Yo
TA <YY.>
Yo > ١<
DNA ؟> ١< صناعي >< <YYV.> أولي PCR <YYY>
TA > حي ctgcataatt tttgtttgee agagc Yo 14 >7٠٠< ١١ > <ا PRT > ١< ؟> صناعي ١< <YY.>
His Tag <YYY> 19 <g>
Met Gly His His His His His His His His His His ١ 2 ٠١ .لا <YY.>
YY >؟١<
PRT >< صناعي >" ١<
ل <YY > <VY 7 موضع Enterokinase Ye >62 Ser Ser Gly His Ile Asp Asp Asp Asp Lys His ١ ° ) YY <YY.> YY >< DNA <Y\Y> <> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي <..ءع> VY نص catatgatgg ctgcggegge gggggacgtg g YY <YY.> YY > ١١< ١< ؟> DNA <> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي YY <g> gaattctagt ~~ tgctaccatt caccttagca cc YY YY > ٠< <١ا ؟> YV ١١< ؟> DNA <> صناعي <YY.> ٍْ PCR <YYY> أولي VY >...
YV¢ ggecgegggg ctegagtgcet tccgeac ف غلا <YY.> £1 >؟١ا<
DNA ؟> ١< صناعي >”١١< <YY.> أولي PCR <YYY>
VE >. ggatcctcaa agaattgcta tetgceataat tittgtttge cagagc £1
Yo >١١ <
YV > <ا DNA ؟> ١< صناعي > ؟١١< <YY.> أولي PCR <YYY>
Yo >). ggccgegggg ctegagtgct tccgeac ا كلا > ٠١<
YY > <ا DNA ؟> ١< صناعي >١١ ١< <YY.> أولي PCR <YYY> كلا <g> ggatecttag cagecttgtc ctggeeggee tcecatg vv
YY >< 14 > ١<
DNA <Y\Y> vo ؟> صناعي < <YY.> أولي PCR <YYY>
YY > حي .ع cgattccage ttceggttg Va
VA > ٠١< ٠١ ؟> ١١<
DNA ؟> ١< ؟> صناعي ١< <YY.> أولي PCR <YYY>
VA > ..< cgattccage ttccggttg 3 كلا > ٠١< 14 > ١<
DNA ؟> ١< ؟> صناعي ١< <YY.> أولي PCR <YYY>
Va >... cgaticcage ticeggttg 1
Av > ٠<
YY ><
DNA > ١< ؟> صناعي ١< <YY.> أولي PCR <YYY> مي .> يم ggcatccaga ttccatctte ag YY
AY > ٠٠< 11 >" ١<
DNA > ١< >”١< صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي AY <g> catctagtca ctcaaagaat tgetac A
AY > ٠< 1١ > ١< DNA <Y\Y> <> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي AY >..< catctagtca ctcaaagaat tgetat 71
AY > ٠< 1١ ؟> ١ا< DNA <Y\Y> <؟١ ؟> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي AY <€vo> catctagtca ctcaaagaat tgctat 93
AE ><
YY >" ١<
DNA <Y\Y>
فاخا >١١ ١< صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي AE >. ctacggaaca agaggtgeca at YY
Ao > ٠٠< YV ؟> ا٠< DNA ؟> ١< ١١< > صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي .> عم 4 ctegagtget tccgeac vv
AT ؟> ٠< 17 > ١< DNA <Y\Y> <> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي AT >. cgagataaga taaatatcta cggaacaaga ggtgccaatc ttcgaaggge accactttic + 186 i) AY > ٠< YV > <ا DNA ؟> ١< صناعي >”١١< <YY.> أولي PCR <YYY>
YVYA
AY > حي ggeecgegggg ctegagtact tccgeac ل AN > ٠٠< .لا >١<
DNA ؟> ١< صناعي >” ١١< >١7 7١< أولي PCR <YYY>
AN > حب aacctgagta aatgtctaac ttctgeaggt cccatgtttg caacaaacga gataagataa Te atatctacgg Ya ؟> كم ٠<
YV >" <ا DNA ؟> ١< صناعي <Y\Y> <YY.> أولي PCR <YYY> كم >. ggeegegggg مه tcegeac ل Qe >< 17 > ١<
DNA <Y\Y> صناعي >” ١< <YY.> أولي PCR <YYY>
Qe <fee> ggatcectac tggeagacac ctaaaagtt catataaagt aacctgagta aatgtctaac Te ttetge "1
١ > ٠<
YY ؟> ١<
DNA <Y\Y> صناعي >” ١< <YY.> أولي PCR <YYY> 1) <g> ggecgegggg ctegagtget tcegeac يض 7 >؟٠< كي 7<
DNA ؟> ١١< صناعي >؟١١< <YY > أولي PCR <YYY>
AY <¢ve> ggatccttat atccagacca faaacctgag taaatgicta acttctge بم 7 >؟7٠٠<
YY ؟> ١<
DNA <Y\Y> <؟> صناعي <YY > أولي PCR <YYY> 7 >... ggcegegggg ctegagtget tccgeac للا 4 <Y\V.>
Ae <YYY>
DNA <Y\Y> صناعي ><
حا <YY.> PCR <YYY> أولي ...> aggtttatcc 1 gatagetctt gggtttatat ccagaccata aaccattgcc Te acatcccage tetgetactg Ae >7٠٠< 40 YY > ١٠< DNA <Y\Y> ١١< ”> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي qo >... لا ggecgegggg ctegagtget tccgeac >7٠ 1 Av >< DNA <Y\Y> >”١١< صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي AN <g> ggatccttat agattgggag accatcglcg tctagtgcat tcaagtaaag gtttatccat “16. gcaatcttga 8 Ae Vv > ٠< ١< ؟> YV ١< ؟> DNA ١١< > صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي
YAN
AY >. ggcatccaga ttccatctte ag ا AA >7٠<
YV > ا٠<
DNA <Y\Y> ١١< ”> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي GA <¢ ve > ggcatccaga ttecatcttc ag Yv 14 >< YY <YVYV> DNA >7 ١< >١١ ١< صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي 94 <g> ggcatccaga ttecatettc ag YY
Yeo > ٠١< ٠١ 7؟> ١< DNA > ١< <> صناعي <YY.> PCR <YYY> أولي ٠١١. >. ١2 cgattccage ttceggttg 8
Yo) > ٠<
YY > ١<
YAY
DNA ؟> ١< صناعي >١١ 75 <YY.> أولي PCR <YYY>
Yeo) >. ctacggaaca agaggtgeca ac YY ٠١١ > ٠<
YY >" ١<
DNA > ١< صناعي >١7 ١< <YY > أولي PCR <YYY> ٠١١ <ي.> ctacggaaca agaggtgcca at YY ٠١١ > ٠١<
YY ><
DNA 7؟> ١ < صناعي >” ١< <YY.> أولي PCR <YYY> ٠١١ <gee> ctacggaaca agaggtgeca at YY ٠١: >7٠< 7 >" <ا DNA ؟> ١< صناعي >< <YY.> أولي PCR <YYY>
YAY
١٠١ >< catctagtca ctcaaagaat tgctat 97
Claims (1)
- YAS عناصر_الحماية-١ ١ مشروب (beverage) غير كحولي محضر من نبات شعير «(barley plant) أو جزء منه؛ ١" حيث يحتوي المشروب (beverage) المذكور على مستوى من dimethyl sulfide (DMS) أقل " من Yo جزء بالبليون ومستوى S-methyl-L-methionine (SMM) أقل من ٠١ جزء بالبليون؛ ؛ وحيث يحمل نبات الشعير (barley plant) المذكور أو جزء منه؛ طفرة (mutation) في الجين (gene) © تشفر MMT meyhionines-methyl-transferase مما يسبب فقد كلي لنشاط MMT ١ ؟- المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لعنصر الحماية ٠؛ حيث يكون المشروب (beverage) ١" المذكور هو مشروب (beverage) ملت .(malt)١ ©- المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ١ و7؛ حيث " _يكون المشروب (beverage) هو مشروب (beverage) ملت متخمر غير كحولي.١ 4- المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية السابقة؛ حيث " يحتوي المشروب (beverage) على ٠١ Jil أجزاء بالبليون من DMS=o) المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية EL حيث Y يحتوي المشروب (beverage) على أقل من١٠ أجزاء بالبليون S-methyl-L-methionine (SMM) Y¥١ +- المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية i) حيث ١" يحتوي المشروب (beverage) على Jil من ٠١ أجزاء بالبليون من DMS وأقل من ٠١ أجزاء " بالبليون SMM؛ - -١7 المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية السابقة؛ حيث © يحتوي المشروب على أقل من © أجزاء بالبليون DMS وأقل من © أجزاء في البليون SMM١ +- المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى 7 حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة (mutation) في موقع جديلة من الجين (gene) الذي يشفر MMT١ 4- المشروب (beverage) غير الكحولي Lida لأي من عناصر الحماية ١ إلى A حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة (mutation) في الجين (gene) الذي يشفر " 1201 متواجدة داخل موقع الجديلة من intronمم -٠١ ١ المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى 5؛ حيث Y يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة (mutation) في الجين (gene) الذي يشفر " 11111 وهي طفرة متواجدة داخل موقع الجديلة م" من ia intron طفرةٍ G—>A (mutation) ؛ للقاعدة 0“ الطرفية من .intron -١١ ١ المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى Ve حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على الطفرة (mutation) في الجين (gene) الذي " يشفر MMT وهي طفرة متواجدة داخل موقع الجديلة © من intron منتقاة من المجموعة ؛ المتكونة من introns ؟ 5 0. TY المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى ١٠١ حيث ؟_يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على الطفرة (mutation) في الجين (gene) الذي 7 يشفر MMT وهي طفرة G>A (mutation) للقاعدة رقم TY من تعريف الترتيب رقم: 3. VY) المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى ٠١ حيث ١" يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة (mutation) في الجين (gene) الذي يشفر ¥ 112411 هي طفرة GA (mutation) للقاعدة رقم ١577 من تعريف الترتيب رقم: AT -١4 ١ المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى OF حيث " يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة (mutation) تنتج جين (gene) يشفر شكل TF مبتور من MMT يشتمل على جزء Nm bib من MMT النوع البري الترتيبات الإضافية ؛ الطرفية-© غير الموجودة في 71 نوع بري؛ حيث يشتمل الجزء المذكور الطرفي N على 0 506 في المعظم؛ متخلف N= (8k amino acid من تعريف الترتيب رقم: 6. -١٠ ١ المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى NEV Y حيث يحضر المشروب من نبات شعير مشتمل على طفرة (mutation) تدخل codon إيقاف " ناضج قبل الأوان في الجبين (gene) الذي يقفر MMT -١١ ١ المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لعنصر الحماية VE حيث يحضر المشروب " _من نبات شعير مشتمل على codon إيقاف ينتج جين (gene) يشفر أي من الأشكال المبتورة "من MMT طبقا لعنصر الحماية .١6 -١7 ١ المشروب (beverage) غير الكحولي طبقا لأي من عناصر الحماية ١ إلى VY حيث VY يحضر المشروب من نبات شعير ينتقى نبات الشعير من مجموعة متكونة من نباتات تسمىYAR من أكتوبر ٠١ المودع عند 8100 في "Hordeum vulgare, Line 8063 «(barley) wd’ 7 ونسل النباتات من ذلك. PTA-9543 تحت اسم Yo oA Hid - ؛ مطحونة للاستخدام في مشروب غير كحولي يشتمل (malt composition) تركيبة ملت -١١ ١ طفرة في (barley plant) معالج؛ حيث يحمل نبات الشعير (barley plant) على نبات شعير " MMT يسبب الفقد الكلي في cmethionine S-methyltransferase (MMT) جين يشفر ¥ ؛ الوظيفي. للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لعنصر (composition malt) تركيبة الملت -١4 ١ المذكور هو لبابة (barley plant) المذكور من نبات الشعير all حيث يكون A الحماية " -((kernels) <UL) (kernel) " للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد (composition malt) تركيبة الملت -٠١ ١ مجفف (malt) هي ملت (malt) حيث تكون تركيبة الملت Fo إلى ١8 ".من عناصر الحماية في آتون. " للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد (composition malt) تركيبة الملت -7١ ١ ٠٠١ على (malt composition) تشتمل تركيبة الملت Gus Yo إلى ١8 من عناصر الحماية "حر. DMS "جز بالبليون في المعظم من للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد (composition malt) تركيبة الملت YY ١ على (malt composition) حيث تشتمل تركيبة الملت FY إلى ١8 من عناصر الحماية " SMM جزء بالبليون في المعظم من ٠٠٠١ " للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد (composition malt) ؟7- تركيبة الملت ١ جزء في ٠٠00 حيث تشتمل تركيبة الملت في المعظم على YY إلى ١8 "من عناصر الحماية SMM جزء في البليون ٠٠٠١ حر وفي المعظم DMS البليون ¥ للاستخدام في مشروب غير كحولي محضرة (Wort composition) تركيبة ورت - 4 ١ أو جزء منه؛ حيث يحمل نبات الشعير طفرة في الجين «(barley plant) باستخدام نبات شعير " 0 الوظيفي؛ MMT عصنلدمنطاء» يسبب الفقد الكلي في S-methyltransferase (MMT) يشفر ¥ ؛ باستخدام تركيبة ملت محضرة من نبات الشعير المذكور أو جزء منه؛ أو خلطات من ذلك.YAY للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لعنصر (Wort composition) ©؟- تركيبة الورت ١ الحماية 4 7؛ حيث يجري إنتاج تركيبة الورت باستخدام الهريس في درجة حرارة لا تتجاوز " ال ف ا لعنصري lh للاستخدام في مشروب غير كحولي (Wort composition) تركيبة الورت -7١ ١ حيث تغلي تركيبة الورت بحد أقصى £0 دقيقة. YO إلى YE الحماية " للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد (Wort composition) تركيبة الورت —YY ١ المذكور من النبات المذكور هو لبابة gall حيث يكون YT إلى YE "من عناصر الحماية (لبابات (باعد»). (kernel) " للاستخدام في مشروب غير كحولي طبقا لأي واحد (Wort composition) 8؟- تركيبة الورت ١ (malt حيث تكون تركيبة الملت المذكورة هي تركيبة ملت TY إلى YE "من عناصر الحماية من IY إلى ١8 طبقا لأي واحد من عناصر الحماية من composition) ¥ إلى ١ غير الكحولي طبقا لأي واحد من عناصر الحماية من (beverage) المشروب -74 ١ طبقا (malt composition) المذكور من تركيبة ملت (beverage) يحضر المشروب Cus (VY X طبقا لأي (Wort composition) إلى أو تركيبة ورت ١8 لأي واحد من عناصر الحماية 7 JA ؛ واحد من عناصر الحماية ؛ ؟ إلى للاستخدام في مشروب غير كحولي منتقى من المجموعة (plant product) منتج نبات =e) وخلاصات (barley) خلاصات شعير (malt) أشربة ملت (barley) المتكونة من أشربة شعير " حيث يحضر منتج النبات من نبات شعير يحمل طفرة في الجين يشفر (malt) ملت " الوظيفي. MMT يسبب الفقد الكلي في emethionine S-methyltransferase (MMT) ¢ ٠١ غير كحولي محتوي على أقل من (beverage) لإنتاج مشروب (method) طريقة -؟١ ١ حيث تشتمل الطريقة المذكورة على خطوات: (DMS جزء في البليون من " أو أجزاء منه؛ حيث «(barley plant) أ تحضير تركيبة مشتملة على نبات شعير OY و9 إلى ١ يكون نبات الشعير كما هو محدد في أي من عناصر الحماية ¢(beverage) في شكل مشروب )١( إنتاج التركيبة Lid ° جزء في ٠0 غير كحولي محتوي على أقل من (beverage) حيث يتم الحصول على مشروب 1 DMS البليون ١YAA حيث تكون الطريقة المذكورة هي طريقة 7١ طبقا لعنصر الحماية (method) الطريقة -*7 ١ DMS جزءٍ في البليون ٠١ ا لإنتاج مشروب غير كحولي يحتوي على أقل من " إلى 7؛ حيث تشتمل 9١ طبقا لأي واحد من عناصر الحماية (method) “7-الطريقة ١ للاستخدام في مشروب غير (malt composition) على تحضير تركيبة ملت (i) الخطوة " المذكور. (barley plant) كحولي من لبابات نبات الشعير F حيث تشتمل إنتاج FY إلى 9١ طبقا لأي واحد من عناصر الحماية (method) 4؛- الطريقة ١ غير كحولي على خطوة تهريس؛ وبذلك تنتج تركيبة (beverage) التركيبة في شكل مشروب " 11ه117). composition) ورت طبقا لعنصر الحماية 4 ؛ حيث تجري خطوة الهريس باستخدام (method) ©؟- الطريقة ١ ا"مئوية. ٠ هريس في درجة حرارة لا تتجاوز " حيث تشتمل Fo طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ١؟ إلى (method) +؟- الطريقة ١ غير كحولي على خطوة تهريس وخطوة (beverage) خطوة إنتاج التركيبة في شكل مشروب " -(Wort composition) ترشيح ورت وخطوة تطهير؛ وبذلك تنتج تركيبة ورت ¥ حيث معالجة التركيبة في FT إلى VE الطريقة طبقا لأي واحد من عناصر الحماية YY) غير كحولي تشمل خطوة غليان الورت المذكورة؛ حيث يغلي الورت (beverage) مشروب ١ المذكور في المعظم £0 دقيقة. YF حيث تشتمل FY طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ؛؟ إلى (method) الطريقة ~YA ١ غير كحولي على تخمر الورت المذكور. (beverage) خطوة إنتاج التركيبة في شكل مشروب " للاستخدام في مشروب (malt composition) لإنتاج تركيبة ملت (method) 4؟- طريقة ١ حيث ¢ ya DMS جزءٍ في البليون في المعظم من Yoo غير كحولي تشمل (beverage) VY تشتمل الطريقة المذكورة على خطوات: v7 حيث يكون نبات الشعير هو نبات شعير كما هو ped) توفير لبابات من نبات 1 t AY و9 إلى ١ محدد في أي واحد من عناصر الحماية 2 تقع اللبابات المذكورة؛ Lj 1 تن إنبات اللبابات المنقوعة تحت شروط مسبقة التحديد؛ 7 معالجة اللبابات النابتة بالتسخين؛ Liv Aا 4 وبذلك تنتج تركيبة ملت (malt composition) للاستخدام في مشروب غير كحولي تشمل ٠٠١ ٠ جزءٍ في البليون في المعظم من DMS حر. ١ 46- طريقة (method) لتحضير نبات شعير (barley plant) للاستخدام في مشروب غير " كحولي يحمل طفرة (mutation) في الجين (gene) الذي يشفر MMT مما يسبب فقد كامل " لنشاط MMT حيث تشتمل الطريقة على خطوات: i ¢ تكوين طفرة (mutation) في نباتات الشعير (barley plants) و/أو لبابات الشعير «(barley Kernels) ° و/أو أجنة الشعير (barley embryos) و/أو خلايا الشعير (barley cells) 1 و/أو نسيج الشعير (barley tissue) وبذلك نحصل على جيل ل شعير SIMO Ld A نمو نباتات الشعير (barley plants) الطفرية المذكورة؛ اللبابات؛ LOAN 9 الأنسجة و/أو الأجنة sad جيلين على الأقل؛ وبذلك نحصل على نباتات شعير (barley plants) Ve مع جيل Mx حيث X هو عدد صحيح > ؟؛ و iii ١١ الحصول على عينة من نباتات شعير Mx (barley plants) المذكورة؛ و iv " تحديد مستوى SMM في العينة المذكورة؛ و Ly VY انتقاء نباتات لا يمكن تحديد نشاط ¢SMM و vi Ve ترتيب جزءٍ على الأقل من جين MMT (gene) و vii yo انتقاء نباتات تحمل طفرة (mutation) في جين {MMT (gene) ١١ وبذلك ينتج نبات شعير (barley plant) يحمل طفرة (mutation) في الجين (gene) الذي يشفر MMT ١" مما يسبب فقد كامل لنشاط MMT
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DKPA200801708 | 2008-12-03 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SA109300713B1 true SA109300713B1 (ar) | 2014-09-11 |
Family
ID=41137843
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SA109300713A SA109300713B1 (ar) | 2008-12-03 | 2009-12-05 | مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة |
Country Status (29)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9834760B2 (ar) |
EP (1) | EP2373154B1 (ar) |
JP (1) | JP5774997B2 (ar) |
KR (1) | KR101769525B1 (ar) |
CN (1) | CN102291982B (ar) |
AP (1) | AP3392A (ar) |
AR (1) | AR074430A1 (ar) |
AU (1) | AU2009321894B2 (ar) |
BR (1) | BRPI0922349B8 (ar) |
CA (1) | CA2744836C (ar) |
CL (1) | CL2011001307A1 (ar) |
EA (1) | EA029777B1 (ar) |
ES (1) | ES2586616T3 (ar) |
HK (1) | HK1162852A1 (ar) |
HR (1) | HRP20160874T1 (ar) |
HU (1) | HUE030303T2 (ar) |
IL (1) | IL213324A (ar) |
LT (1) | LT2373154T (ar) |
MX (1) | MX2011005619A (ar) |
MY (1) | MY187926A (ar) |
NZ (1) | NZ593605A (ar) |
PL (1) | PL2373154T3 (ar) |
PT (1) | PT2373154T (ar) |
SA (1) | SA109300713B1 (ar) |
SG (1) | SG171940A1 (ar) |
UA (1) | UA105197C2 (ar) |
UY (1) | UY32282A (ar) |
WO (1) | WO2010063288A2 (ar) |
ZA (1) | ZA201104844B (ar) |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9587210B2 (en) | 2008-12-03 | 2017-03-07 | Carlsberg Breweries A/S | Energy saving brewing method |
EA031578B1 (ru) | 2010-06-03 | 2019-01-31 | Карлсберг Брюириз А/С | Способ получения напитка на основе ячменя |
MA51532A (fr) * | 2016-07-01 | 2020-11-11 | Carlsberg Breweries As | Boissons à base de céréale raffinée |
RU2733294C1 (ru) | 2016-11-18 | 2020-10-01 | Балтика Брюэрис - Парт Оф Зе Карлсберг Груп | Способ получения зернового солода и солодовый продукт, полученный таким способом |
JP7116536B2 (ja) * | 2017-10-17 | 2022-08-10 | サッポロビール株式会社 | ビールテイスト飲料、ビールテイスト飲料の製造方法及びビールテイスト飲料の高級感を改善する方法 |
UA128208C2 (uk) | 2017-12-28 | 2024-05-08 | Карлсберг А/С | Спосіб одержання водного екстракту зернової культури та спосіб одержання напою |
JP7359768B2 (ja) | 2017-12-28 | 2023-10-11 | カールスバーグ アグシャセルスガーブ | 改善された細胞壁特性を有する穀類植物 |
RS65522B1 (sr) | 2017-12-28 | 2024-06-28 | Carlsberg As | Brzi postupci za pripremu ekstrakata žitarica |
MX2020006849A (es) | 2017-12-28 | 2020-11-11 | Carlsberg As | Cebada con actividad enzimatica hidrolitica incrementada. |
WO2019207063A1 (en) | 2018-04-25 | 2019-10-31 | Carlsberg A/S | Barley based beverages |
CN112345654A (zh) * | 2019-08-06 | 2021-02-09 | 红塔烟草(集团)有限责任公司 | 一种基于色谱指纹图谱识别油斑烟污染源的方法 |
IL296009A (en) * | 2020-03-02 | 2022-10-01 | Carlsberg As | Barley plants with high borderline dextrinase activity |
CN112795545B (zh) * | 2021-01-29 | 2022-04-12 | 浙江大学 | 大麦HvHMT3基因及其应用 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8813249D0 (en) * | 1988-06-04 | 1988-07-06 | Carlsberg As | Method of brewing beer |
US5242694A (en) * | 1992-02-18 | 1993-09-07 | G. Heileman Brewing Company, Inc. | Process for brewing low carbohydrate near beer |
AU653472B2 (en) * | 1992-05-14 | 1994-09-29 | Joe White Maltings Limited | Malt production |
GB9722027D0 (en) | 1997-10-17 | 1997-12-17 | Melica Hb | Methods |
US6326184B1 (en) * | 1998-09-15 | 2001-12-04 | Carlsberg A/S | Method of producing a composite fermented beverage using genetically modified yeast strains |
WO2000049157A2 (en) | 1999-02-22 | 2000-08-24 | University Of Florida | Compositions and methods for altering sulfur content in plants |
DK1346030T3 (da) * | 2000-12-29 | 2012-02-13 | Heineken Tech Services | Byg med lavt indhold af lipoxygenase 1 |
US6660915B2 (en) * | 2000-12-29 | 2003-12-09 | Anna Christina Douma | Low lipoxygenase 1 barley |
WO2002088301A2 (en) | 2001-05-02 | 2002-11-07 | Gavish Galilee Bio Applications Ltd. | Increased methionine in transgenic plants expressing mutant cystathionine gamma-synthase |
WO2004011591A1 (en) | 2002-07-25 | 2004-02-05 | Novozymes A/S | Mashing process |
JP4113795B2 (ja) | 2003-03-25 | 2008-07-09 | サッポロビール株式会社 | 大麦リポキシゲナーゼ−1遺伝子、大麦の選抜方法、麦芽アルコール飲料用原料及び麦芽アルコール飲料の製造方法 |
US7420105B2 (en) * | 2004-03-11 | 2008-09-02 | Carlsberg A/S | Barley for production of flavor-stable beverage |
DE202007005281U1 (de) * | 2007-04-11 | 2007-07-05 | Hertel, Marcus, Dipl.-Ing. | Vorrichtung zur Niedertemperaturwürzekochung |
-
2009
- 2009-12-01 EA EA201170739A patent/EA029777B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-12-01 PL PL09771493T patent/PL2373154T3/pl unknown
- 2009-12-01 NZ NZ593605A patent/NZ593605A/xx unknown
- 2009-12-01 UA UAA201108391A patent/UA105197C2/ru unknown
- 2009-12-01 LT LTEP09771493.5T patent/LT2373154T/lt unknown
- 2009-12-01 PT PT97714935T patent/PT2373154T/pt unknown
- 2009-12-01 AR ARP090104615A patent/AR074430A1/es active IP Right Grant
- 2009-12-01 AP AP2011005761A patent/AP3392A/xx active
- 2009-12-01 MX MX2011005619A patent/MX2011005619A/es active IP Right Grant
- 2009-12-01 ES ES09771493.5T patent/ES2586616T3/es active Active
- 2009-12-01 AU AU2009321894A patent/AU2009321894B2/en active Active
- 2009-12-01 JP JP2011538836A patent/JP5774997B2/ja active Active
- 2009-12-01 HU HUE09771493A patent/HUE030303T2/en unknown
- 2009-12-01 BR BRPI0922349A patent/BRPI0922349B8/pt active IP Right Grant
- 2009-12-01 WO PCT/DK2009/050315 patent/WO2010063288A2/en active Search and Examination
- 2009-12-01 UY UY0001032282A patent/UY32282A/es active IP Right Grant
- 2009-12-01 EP EP09771493.5A patent/EP2373154B1/en active Active
- 2009-12-01 MY MYPI2011002520A patent/MY187926A/en unknown
- 2009-12-01 KR KR1020117015363A patent/KR101769525B1/ko active IP Right Grant
- 2009-12-01 CN CN200980155247.8A patent/CN102291982B/zh active Active
- 2009-12-01 CA CA2744836A patent/CA2744836C/en active Active
- 2009-12-01 US US13/132,765 patent/US9834760B2/en active Active
- 2009-12-01 SG SG2011040474A patent/SG171940A1/en unknown
- 2009-12-05 SA SA109300713A patent/SA109300713B1/ar unknown
-
2011
- 2011-06-02 IL IL213324A patent/IL213324A/en active IP Right Grant
- 2011-06-02 CL CL2011001307A patent/CL2011001307A1/es unknown
- 2011-06-30 ZA ZA2011/04844A patent/ZA201104844B/en unknown
-
2012
- 2012-04-11 HK HK12103567.3A patent/HK1162852A1/zh unknown
-
2016
- 2016-07-14 HR HRP20160874TT patent/HRP20160874T1/hr unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SA109300713B1 (ar) | مشروبات شعير ومشروبات مشتقة من الملت مع مستويات ثنائي ميثل سلفيد (dms) منخفضة | |
JP6007174B2 (ja) | エネルギーを節約した醸造法 | |
BRPI0508554B1 (pt) | Bebida à base de planta de cevada que apresenta mutação no gene lox-1, bem como métodos para produzir bebida com qualidades organolépticas estáveis, composição de malte sem atividade de lox-1 e planta de cevada que apresenta mutação no gene lox-1 | |
EA028532B1 (ru) | Ячмень с уменьшенной липоксигеназной активностью | |
JP5004402B2 (ja) | 低リポキシゲナーゼ1オオムギ | |
US20170183611A1 (en) | Energy saving brewing method | |
Wei et al. | Effect of high temperature on the enzymatic activities and transcriptional expression of starch debranching enzyme (DBE) multiple isoforms in developing rice endosperms | |
HU228383B1 (en) | Overexpression of phosphoenolpyruvate carboxylase | |
JP2000508537A (ja) | 新規植物ステロイド5αレダクターゼ、DET2 |