RU96118916A

RU96118916A - Способ получения иммуноглобулинов из фракций, которые образуются при фракционировании человеческой плазмы крови

Info

Publication number: RU96118916A
Application number: RU96118916/14A
Authority: RU
Inventors: Амштутц Ханспетер; Георг Лерх Петер; Моргенталер Жан-Жак
Original assignee: Роткройцштифтунг Центральлабораториум Блутшпендединст СРК
Priority date: 1995-09-22
Filing date: 1996-09-23
Publication date: 1999-02-20

Claims

1. Способ получения иммуноглобулинового препарата с высоким титром, отличающийся тем, что осуществляют последовательно следующие стадии: а) фракционирование плазмы крови из пула плазмы, при котором отделяют по меньшей мере фракцию, которая может быть использована в промышленности и которая содержит по существу поликлональный иммуноглобулин G, причем получают по меньшей мере одну остаточную фракцию, б) получение раствора протеина из компонентов протеина, которые содержатся в полученной в стадии а) остаточной фракции или в ее подфракциях, в) полученный в результате протеиновый раствор по меньшей мере один раз подвергают аффинной хроматографии с иммобилизованными лигандами по меньшей мере одного лигандного типа, причем специфические протеины плазмы связываются с лигандами, и отделяют связанные протеины плазмы, которые в качестве активных компонентов переводят в иммуноглобулиновый препарат с высоким титром.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что фракционирование плазмы крови осуществляют в промышленном масштабе, причем остаточная фракция представляет собой отходы.

3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что остаточная фракция согласно стадии а) представляет собой осадок или осадок на фильтре и протеиновые компоненты растворяют тем, что осадок или осадок на фильтре обрабатывают с помощью водного буферного раствора с ионной силой < 5 M и рН-значением 3,0-9,0 при получении раствора или суспензии.

4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что буферный раствор представляет собой фосфатный буфер, трис-HCl-буфер или цитратный буфер.

5. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что буферный раствор содержит детергент, один или несколько ингибиторов протеазы и/или соль.

6. Способ по любому из пп. 3-5, отличающийся тем, что раствор или суспензию фильтруют или предварительно обрабатывают адсорбентом, таким как гидроксид алюминия, или адсорбентом, который содержит D EAE-группы.

7. Способ по любому из пп. 3-5, отличающийся тем, что раствор или суспензию смешивают с сульфатом аммония, полиэтиленгликолем или этанолом с образованием осадка, причем надосадочную жидкость или осадок обрабатывают далее.

8. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что остаточная фракция согласно стадии а) представляет собой надосадочную жидкость и получение протеинового раствора осуществляют путем фильтрации и концентрирования, например, путем диафильтрации.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что надосадочную жидкость фильтруют или предварительно обрабатывают адсорбентом, как гидроксид алюминия, или адсорбентом, который содержит D EAE-группы.

10. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что иммобилизованные лиганды являются природными или рекомбинантными, вирусными, бактериальными или клеточными антигенами.

11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что лиганды выбирают из группы антигенных детерминантов Haemophilus influengab, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus agalactial, Streptococcus pneumoniae, Stretococcus pyoqenes, Tetanus Toxin, Staphylococcus aureus toxic shock Toxin, вируса гепатита A, вируса гепатита В, вируса гепатита С, вируса ветряной оспы и опоясывающего лишая, цитомегаловируса, распираторного синцитиального вируса, парво-вируса В 19, вируса простого герпеса 1 и вируса простого герпеса 2, Tollurut - вируса, а также потенциальных человеческих антигенов CD2, CD3, CD4, CD5, CD28, CD40, CD72 1CAM, LFA-1, LFA-3, ДНК и фосфолипидов.

12. Способ по пп. 10 или 11, отличающийся тем, что лиганды модифицируют путем мутагенеза или химическими или физическими способами.

13. Способ по любому из пп. 1-12, отличающийся тем, что полученный иммуноглобулиновый препарат с высоким титром состоит только из иммуноглобулинов класса G или A или M, или из любых их комбинаций.

14. Способ по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что полученный иммуноглобулиновый препарат с высоким титром подвергают вирусной инактивации и в случае необходимости стабилизируют добавлением стабилизатора, такого как альбумин, аминокислоты или углеводы, и/или продукт лиофилизируют.

15. Способ по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что полученный иммуноглобулиновый препарат с высоким титром переводят в фармацевтически приемлемый продукт, например, в препарат, вводимый внутривенно, внутримышечно или топически.

16. Способ получения иммуноглобулинового препарата с высоким титром, отличающийся тем, что осуществляют последовательно следующие стадии: а) получают протеиновый раствор из протеиновых компонентов получаемой при фракционировании плазмы крови остаточной фракции или ее подфракцией, б) полученный в результате протеиновый раствор по меньшей мере один раз подвергают аффинной хроматографии с иммобилизованными лигандами по меньшей мере одного лигандного типа, причем специфические протеины плазмы связываются с лигандами, и отделяют связанные протеины плазмы, которые в качестве активных компонентов переводят в иммуноглобулиновый препарат с высоким титром.