RU2766000C2 - Четырехвалентные антитела к psgl-1 и их применения - Google Patents
Четырехвалентные антитела к psgl-1 и их применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2766000C2 RU2766000C2 RU2018128812A RU2018128812A RU2766000C2 RU 2766000 C2 RU2766000 C2 RU 2766000C2 RU 2018128812 A RU2018128812 A RU 2018128812A RU 2018128812 A RU2018128812 A RU 2018128812A RU 2766000 C2 RU2766000 C2 RU 2766000C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- amino acid
- antibody
- acid sequence
- sequence
- Prior art date
Links
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 136
- 108010054395 P-selectin ligand protein Proteins 0.000 claims abstract description 115
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 102
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 98
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 98
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 98
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 63
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 60
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims abstract description 48
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 43
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 30
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 28
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 25
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims abstract description 22
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 20
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 240
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 143
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 142
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 141
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 92
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 80
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 47
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 33
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 30
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 30
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 21
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 17
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 13
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims description 12
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 11
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 10
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 claims description 8
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 8
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 claims description 8
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 7
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 claims description 7
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 claims description 5
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 5
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 5
- 206010015278 Erythrodermic psoriasis Diseases 0.000 claims description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 4
- 206010037575 Pustular psoriasis Diseases 0.000 claims description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 206010018797 guttate psoriasis Diseases 0.000 claims description 4
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 4
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 claims description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 claims description 3
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 3
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 3
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 claims description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 claims 1
- 102100034925 P-selectin glycoprotein ligand 1 Human genes 0.000 abstract description 47
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 abstract description 5
- 101710137390 P-selectin glycoprotein ligand 1 Proteins 0.000 abstract description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 101
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 73
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 46
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 42
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 40
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 39
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 38
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 38
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 35
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 34
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 34
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 32
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 31
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 30
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 30
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 28
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 28
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 28
- HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N (2s)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N 0.000 description 26
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 26
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 26
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 22
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 19
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 19
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 19
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 18
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 18
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 18
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 18
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 17
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 17
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 17
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 16
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- 108010054813 diprotin B Proteins 0.000 description 15
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 15
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 15
- CQGSYZCULZMEDE-UHFFFAOYSA-N Leu-Gln-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)N1CCCC1C(O)=O CQGSYZCULZMEDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 14
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 14
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 14
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 14
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 14
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 14
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 14
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 14
- FLMYSKVSDVHLEW-SVSWQMSJSA-N Ser-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FLMYSKVSDVHLEW-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 13
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 13
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 13
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 13
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 13
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 13
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 13
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 13
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 12
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 12
- 108010081404 acein-2 Proteins 0.000 description 12
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 12
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 12
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 12
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 12
- 230000004044 response Effects 0.000 description 12
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 12
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 11
- SFNFGFDRYJKZKN-XQXXSGGOSA-N Ala-Gln-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](C)N)O SFNFGFDRYJKZKN-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 11
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 11
- GILLQRYAWOMHED-DCAQKATOSA-N Lys-Val-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN GILLQRYAWOMHED-DCAQKATOSA-N 0.000 description 11
- BPCLGWHVPVTTFM-QWRGUYRKSA-N Phe-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O BPCLGWHVPVTTFM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 11
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 11
- QEYJFBMTSMLPKZ-ZKWXMUAHSA-N Asn-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QEYJFBMTSMLPKZ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 10
- HMIXCETWRYDVMO-GUBZILKMSA-N Gln-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HMIXCETWRYDVMO-GUBZILKMSA-N 0.000 description 10
- STHSGOZLFLFGSS-SUSMZKCASA-N Gln-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O STHSGOZLFLFGSS-SUSMZKCASA-N 0.000 description 10
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 10
- QTDBZORPVYTRJU-KKXDTOCCSA-N Phe-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O QTDBZORPVYTRJU-KKXDTOCCSA-N 0.000 description 10
- VTFXTWDFPTWNJY-RHYQMDGZSA-N Pro-Leu-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VTFXTWDFPTWNJY-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 10
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 10
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 10
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 108010017949 tyrosyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 10
- WYPUMLRSQMKIJU-BPNCWPANSA-N Ala-Arg-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O WYPUMLRSQMKIJU-BPNCWPANSA-N 0.000 description 9
- SYIFFFHSXBNPMC-UWJYBYFXSA-N Ala-Ser-Tyr Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N SYIFFFHSXBNPMC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 9
- GCTANJIJJROSLH-GVARAGBVSA-N Ala-Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](C)N GCTANJIJJROSLH-GVARAGBVSA-N 0.000 description 9
- SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Lys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 9
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 9
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 9
- RVGMVLVBDRQVKB-UWVGGRQHSA-N Gly-Met-His Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)CN RVGMVLVBDRQVKB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 9
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 9
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 9
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 9
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 9
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 9
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 9
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 9
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 9
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 9
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 9
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 9
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 9
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 9
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 9
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 8
- REAQAWSENITKJL-DDWPSWQVSA-N Ala-Met-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O REAQAWSENITKJL-DDWPSWQVSA-N 0.000 description 8
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 8
- JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 8
- JUWZKMBALYLZCK-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Asn Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JUWZKMBALYLZCK-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N Gln-Pro-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 8
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 8
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 8
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 8
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 8
- MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 8
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 8
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 8
- HAYADTTXNZFUDM-IHRRRGAJSA-N Ser-Tyr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HAYADTTXNZFUDM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 8
- XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N Thr-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 8
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 8
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 8
- -1 host cells Substances 0.000 description 8
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 8
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 8
- ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 7
- HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N Asn-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 7
- XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N Asp-Arg-Val Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 7
- QNFRBNZGVVKBNJ-PEFMBERDSA-N Asp-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N QNFRBNZGVVKBNJ-PEFMBERDSA-N 0.000 description 7
- GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N Asp-Phe-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N 0.000 description 7
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 7
- GEEXORWTBTUOHC-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Ser Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)CN=C(N)N GEEXORWTBTUOHC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 7
- CGWHAXBNGYQBBK-JBACZVJFSA-N Glu-Trp-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 CGWHAXBNGYQBBK-JBACZVJFSA-N 0.000 description 7
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 7
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 7
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- NRFGTHFONZYFNY-MGHWNKPDSA-N Leu-Ile-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NRFGTHFONZYFNY-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 7
- FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N Leu-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- ZZVUXQCQPXSUFH-JBACZVJFSA-N Phe-Glu-Trp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 ZZVUXQCQPXSUFH-JBACZVJFSA-N 0.000 description 7
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 7
- RMODQFBNDDENCP-IHRRRGAJSA-N Pro-Lys-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RMODQFBNDDENCP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 7
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 7
- YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 7
- QGMLKFGTGXWAHF-IHRRRGAJSA-N Ser-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QGMLKFGTGXWAHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 7
- XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N Ser-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 7
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 7
- NRUPKQSXTJNQGD-XGEHTFHBSA-N Thr-Cys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O NRUPKQSXTJNQGD-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 7
- GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N Thr-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 7
- VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N Thr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 7
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 7
- PMHLLBKTDHQMCY-ULQDDVLXSA-N Tyr-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PMHLLBKTDHQMCY-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 7
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 7
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 7
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 7
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 7
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 7
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 7
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 7
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 7
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 7
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 7
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LSMDIAAALJJLRO-XQXXSGGOSA-N Ala-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LSMDIAAALJJLRO-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 6
- CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N Ala-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N 0.000 description 6
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 6
- BBQIWFFTTQTNOC-AVGNSLFASA-N Cys-Phe-Gln Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N BBQIWFFTTQTNOC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MADFVRSKEIEZHZ-DCAQKATOSA-N Gln-Gln-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MADFVRSKEIEZHZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 6
- SYZZMPFLOLSMHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O SYZZMPFLOLSMHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 6
- RHRLHXQWHCNJKR-PMVVWTBXSA-N Gly-Thr-His Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 RHRLHXQWHCNJKR-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 6
- XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 6
- PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 6
- JCGMFFQQHJQASB-PYJNHQTQSA-N Ile-Val-His Chemical compound N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)O JCGMFFQQHJQASB-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 6
- PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N Lys-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 6
- UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 6
- UYAKZHGIPRCGPF-CIUDSAMLSA-N Met-Glu-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N UYAKZHGIPRCGPF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N Met-Thr-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 6
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 6
- UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 6
- OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N Ser-Asn-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- QPFJSHSJFIYDJZ-GHCJXIJMSA-N Ser-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO QPFJSHSJFIYDJZ-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 6
- FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- DOSZISJPMCYEHT-NAKRPEOUSA-N Ser-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DOSZISJPMCYEHT-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 6
- AZWNCEBQZXELEZ-FXQIFTODSA-N Ser-Pro-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AZWNCEBQZXELEZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- FZXOPYUEQGDGMS-ACZMJKKPSA-N Ser-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FZXOPYUEQGDGMS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- UDNVOQMPQBEITB-MEYUZBJRSA-N Thr-His-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O UDNVOQMPQBEITB-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 6
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 6
- YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N Thr-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N 0.000 description 6
- BVDHHLMIZFCAAU-BZSNNMDCSA-N Tyr-Cys-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O BVDHHLMIZFCAAU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 6
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 6
- VCAWFLIWYNMHQP-UKJIMTQDSA-N Val-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VCAWFLIWYNMHQP-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 6
- OACSGBOREVRSME-NHCYSSNCSA-N Val-His-Asn Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OACSGBOREVRSME-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 6
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 6
- BTRULDJUUVGRNE-DCAQKATOSA-N Ala-Pro-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O BTRULDJUUVGRNE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 5
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 5
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 5
- XSGBIBGAMKTHMY-WHFBIAKZSA-N Asn-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O XSGBIBGAMKTHMY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N Asn-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 5
- KZYSHAMXEBPJBD-JRQIVUDYSA-N Asn-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KZYSHAMXEBPJBD-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 5
- OGMQXTXGLDNBSS-FXQIFTODSA-N Glu-Ala-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O OGMQXTXGLDNBSS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- IWAXHBCACVWNHT-BQBZGAKWSA-N Gly-Asp-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IWAXHBCACVWNHT-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 5
- VLIJYPMATZSOLL-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)CN VLIJYPMATZSOLL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N Gly-Ser-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 5
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 5
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 5
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- CQGSYZCULZMEDE-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CQGSYZCULZMEDE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 5
- IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N Pro-Arg-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 5
- GOMUXSCOIWIJFP-GUBZILKMSA-N Pro-Ser-Arg Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GOMUXSCOIWIJFP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 5
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 5
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 5
- ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N Ser-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 5
- ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 5
- LABUITCFCAABSV-UHFFFAOYSA-N Val-Ala-Tyr Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(C)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LABUITCFCAABSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NHXZRXLFOBFMDM-AVGNSLFASA-N Val-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)C(C)C NHXZRXLFOBFMDM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 5
- WUFHZIRMAZZWRS-OSUNSFLBSA-N Val-Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N WUFHZIRMAZZWRS-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 5
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 5
- 239000000306 component Substances 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 5
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 5
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 108010013768 glutamyl-aspartyl-proline Proteins 0.000 description 5
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 5
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 5
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 5
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 5
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 5
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 108010052774 valyl-lysyl-glycyl-phenylalanyl-tyrosine Proteins 0.000 description 5
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 4
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- DWYROCSXOOMOEU-CIUDSAMLSA-N Ala-Met-Glu Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N DWYROCSXOOMOEU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- HTSSXFASOUSJQG-IHPCNDPISA-N Asp-Tyr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O HTSSXFASOUSJQG-IHPCNDPISA-N 0.000 description 4
- OXOQBEVULIBOSH-ZDLURKLDSA-N Cys-Gly-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OXOQBEVULIBOSH-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 4
- ROHVCXBMIAAASL-HJGDQZAQSA-N Gln-Met-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O ROHVCXBMIAAASL-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 4
- BPCLDCNZBUYGOD-BPUTZDHNSA-N Glu-Trp-Glu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 BPCLDCNZBUYGOD-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 4
- BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N Gly-Gln-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- HAOUOFNNJJLVNS-BQBZGAKWSA-N Gly-Pro-Ser Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HAOUOFNNJJLVNS-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- 101001003102 Homo sapiens Hypoxia up-regulated protein 1 Proteins 0.000 description 4
- 101000873418 Homo sapiens P-selectin glycoprotein ligand 1 Proteins 0.000 description 4
- 102000018251 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 4
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 102100020755 Hypoxia up-regulated protein 1 Human genes 0.000 description 4
- UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N L-alanyl-L-prolylglycine zwitterion Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- CHJKEDSZNSONPS-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CHJKEDSZNSONPS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- YYKZDTVQHTUKDW-RYUDHWBXSA-N Phe-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N YYKZDTVQHTUKDW-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 4
- JDMKQHSHKJHAHR-UHFFFAOYSA-N Phe-Phe-Leu-Tyr Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 JDMKQHSHKJHAHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DZZCICYRSZASNF-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 DZZCICYRSZASNF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- TUYWCHPXKQTISF-LPEHRKFASA-N Pro-Cys-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O TUYWCHPXKQTISF-LPEHRKFASA-N 0.000 description 4
- VPEVBAUSTBWQHN-NHCYSSNCSA-N Pro-Glu-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VPEVBAUSTBWQHN-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 4
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N Ser-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 4
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- DXPURPNJDFCKKO-RHYQMDGZSA-N Thr-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(O)=O DXPURPNJDFCKKO-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- NXRGXTBPMOGFID-CFMVVWHZSA-N Tyr-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NXRGXTBPMOGFID-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 4
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 4
- 108010052670 arginyl-glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 4
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 4
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 4
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 4
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 4
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 4
- YLTKNGYYPIWKHZ-ACZMJKKPSA-N Ala-Ala-Glu Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O YLTKNGYYPIWKHZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- DPNZTBKGAUAZQU-DLOVCJGASA-N Ala-Leu-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N DPNZTBKGAUAZQU-DLOVCJGASA-N 0.000 description 3
- AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- OINVDEKBKBCPLX-JXUBOQSCSA-N Ala-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OINVDEKBKBCPLX-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 3
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 3
- ZJBUILVYSXQNSW-YTWAJWBKSA-N Arg-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O ZJBUILVYSXQNSW-YTWAJWBKSA-N 0.000 description 3
- WQLJRNRLHWJIRW-KKUMJFAQSA-N Asn-His-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O WQLJRNRLHWJIRW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N Asp-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 3
- CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N Asp-Trp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 3
- 238000011537 Coomassie blue staining Methods 0.000 description 3
- TVYMKYUSZSVOAG-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O TVYMKYUSZSVOAG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N Cys-Leu-Val Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N Cys-Pro-Pro Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 3
- KCJJFESQRXGTGC-BQBZGAKWSA-N Gln-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KCJJFESQRXGTGC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N Gln-Met-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- SXFPZRRVWSUYII-KBIXCLLPSA-N Gln-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N SXFPZRRVWSUYII-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 3
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- RFDHKPSHTXZKLL-IHRRRGAJSA-N Glu-Gln-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N RFDHKPSHTXZKLL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- YHOJJFFTSMWVGR-HJGDQZAQSA-N Glu-Met-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YHOJJFFTSMWVGR-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 3
- AAJHGGDRKHYSDH-GUBZILKMSA-N Glu-Pro-Gln Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O AAJHGGDRKHYSDH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N Glu-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N 0.000 description 3
- WGYHAAXZWPEBDQ-IFFSRLJSSA-N Glu-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGYHAAXZWPEBDQ-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Pro zwitterion Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 3
- OOCFXNOVSLSHAB-IUCAKERBSA-N Gly-Pro-Pro Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 OOCFXNOVSLSHAB-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- IRJWAYCXIYUHQE-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN IRJWAYCXIYUHQE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- JSLVAHYTAJJEQH-QWRGUYRKSA-N Gly-Ser-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JSLVAHYTAJJEQH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- WNQKUUQIVDDAFA-ZPFDUUQYSA-N Ile-Gln-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N WNQKUUQIVDDAFA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 3
- DFJJAVZIHDFOGQ-MNXVOIDGSA-N Ile-Glu-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N DFJJAVZIHDFOGQ-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N Leu-Phe-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N 0.000 description 3
- MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- WSXTWLJHTLRFLW-SRVKXCTJSA-N Lys-Ala-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WSXTWLJHTLRFLW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N Lys-Asn-Gln Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N Lys-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 3
- CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N Lys-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- RKIIYGUHIQJCBW-SRVKXCTJSA-N Met-His-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O RKIIYGUHIQJCBW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- ABHVWYPPHDYFNY-WDSOQIARSA-N Met-His-Trp Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 ABHVWYPPHDYFNY-WDSOQIARSA-N 0.000 description 3
- FWAHLGXNBLWIKB-NAKRPEOUSA-N Met-Ile-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCSC FWAHLGXNBLWIKB-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 108010035766 P-Selectin Proteins 0.000 description 3
- 102100023472 P-selectin Human genes 0.000 description 3
- LLGTYVHITPVGKR-RYUDHWBXSA-N Phe-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O LLGTYVHITPVGKR-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- MMYUOSCXBJFUNV-QWRGUYRKSA-N Phe-Gly-Cys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N MMYUOSCXBJFUNV-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- SJRQWEDYTKYHHL-SLFFLAALSA-N Phe-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=CC=C3)N)C(=O)O SJRQWEDYTKYHHL-SLFFLAALSA-N 0.000 description 3
- WFHYFCWBLSKEMS-KKUMJFAQSA-N Pro-Glu-Phe Chemical compound N([C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1 WFHYFCWBLSKEMS-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N Pro-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- GMJDSFYVTAMIBF-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GMJDSFYVTAMIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N Pro-Ser-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- IURWWZYKYPEANQ-HJGDQZAQSA-N Pro-Thr-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IURWWZYKYPEANQ-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 3
- KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N Pro-Val-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- HZWAHWQZPSXNCB-BPUTZDHNSA-N Ser-Arg-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O HZWAHWQZPSXNCB-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 3
- VAUMZJHYZQXZBQ-WHFBIAKZSA-N Ser-Asn-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O VAUMZJHYZQXZBQ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- MOVJSUIKUNCVMG-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)O MOVJSUIKUNCVMG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N Ser-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N Ser-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N Ser-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- QJKPECIAWNNKIT-KKUMJFAQSA-N Ser-Lys-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O QJKPECIAWNNKIT-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- CAJFZCICSVBOJK-SHGPDSBTSA-N Thr-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAJFZCICSVBOJK-SHGPDSBTSA-N 0.000 description 3
- XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N 0.000 description 3
- DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N Thr-Gly-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 3
- IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N Thr-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 3
- ABWNZPOIUJMNKT-IXOXFDKPSA-N Thr-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ABWNZPOIUJMNKT-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 3
- DEGCBBCMYWNJNA-RHYQMDGZSA-N Thr-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O DEGCBBCMYWNJNA-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N Thr-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N 0.000 description 3
- ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N Thr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N 0.000 description 3
- QYSBJAUCUKHSLU-JYJNAYRXSA-N Tyr-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QYSBJAUCUKHSLU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- GZUIDWDVMWZSMI-KKUMJFAQSA-N Tyr-Lys-Cys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 GZUIDWDVMWZSMI-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N Val-Arg-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N Val-Asp-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- SCBITHMBEJNRHC-LSJOCFKGSA-N Val-Asp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N SCBITHMBEJNRHC-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 3
- OQWNEUXPKHIEJO-NRPADANISA-N Val-Glu-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N OQWNEUXPKHIEJO-NRPADANISA-N 0.000 description 3
- NZYNRRGJJVSSTJ-GUBZILKMSA-N Val-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NZYNRRGJJVSSTJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- BGTDGENDNWGMDQ-KJEVXHAQSA-N Val-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O BGTDGENDNWGMDQ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 3
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 3
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 3
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 3
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 3
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 3
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 108010093296 prolyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 3
- AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N prometryn Chemical compound CSC1=NC(NC(C)C)=NC(NC(C)C)=N1 AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 3
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 3
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 108010071097 threonyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 3
- 108010071635 tyrosyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 3
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 3
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 3
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 3
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical group N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- IESDGNYHXIOKRW-YXMSTPNBSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s,3r)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IESDGNYHXIOKRW-YXMSTPNBSA-N 0.000 description 2
- DIBLBAURNYJYBF-XLXZRNDBSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]hexanoyl]amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 DIBLBAURNYJYBF-XLXZRNDBSA-N 0.000 description 2
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 description 2
- WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N Ala-Ala-His Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- SDMAQFGBPOJFOM-GUBZILKMSA-N Ala-Arg-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SDMAQFGBPOJFOM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N Ala-Cys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N Ala-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Val Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(C)N)CCCCN MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FQNILRVJOJBFFC-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Asp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N FQNILRVJOJBFFC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- DYJJJCHDHLEFDW-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N DYJJJCHDHLEFDW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N Ala-Pro-Glu Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N Ala-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 2
- IYKVSFNGSWTTNZ-GUBZILKMSA-N Ala-Val-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IYKVSFNGSWTTNZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 2
- MUXONAMCEUBVGA-DCAQKATOSA-N Arg-Arg-Gln Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MUXONAMCEUBVGA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N Arg-Asp-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)CN=C(N)N PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N Arg-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N Arg-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 2
- RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N Asn-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- BVLIJXXSXBUGEC-SRVKXCTJSA-N Asn-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O BVLIJXXSXBUGEC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- LGCVSPFCFXWUEY-IHPCNDPISA-N Asn-Trp-Tyr Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CC=C(C=C3)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LGCVSPFCFXWUEY-IHPCNDPISA-N 0.000 description 2
- DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- KBQOUDLMWYWXNP-YDHLFZDLSA-N Asn-Val-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N KBQOUDLMWYWXNP-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N Asp-Leu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- LTCKTLYKRMCFOC-KKUMJFAQSA-N Asp-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LTCKTLYKRMCFOC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- RSMZEHCMIOKNMW-GSSVUCPTSA-N Asp-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O RSMZEHCMIOKNMW-GSSVUCPTSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- ZXCAQANTQWBICD-DCAQKATOSA-N Cys-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CS)N ZXCAQANTQWBICD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- SMEYEQDCCBHTEF-FXQIFTODSA-N Cys-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMEYEQDCCBHTEF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- KFYPRIGJTICABD-XGEHTFHBSA-N Cys-Thr-Val Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O KFYPRIGJTICABD-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- ALTQTAKGRFLRLR-GUBZILKMSA-N Cys-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N ALTQTAKGRFLRLR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 2
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 2
- CGVWDTRDPLOMHZ-FXQIFTODSA-N Gln-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CGVWDTRDPLOMHZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N Gln-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- SMLDOQHTOAAFJQ-WDSKDSINSA-N Gln-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SMLDOQHTOAAFJQ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N Gln-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 2
- XFAUJGNLHIGXET-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XFAUJGNLHIGXET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- XZLLTYBONVKGLO-SDDRHHMPSA-N Gln-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O XZLLTYBONVKGLO-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 2
- AQPZYBSRDRZBAG-AVGNSLFASA-N Gln-Phe-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N AQPZYBSRDRZBAG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- FNAJNWPDTIXYJN-CIUDSAMLSA-N Gln-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O FNAJNWPDTIXYJN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- GLWXKFRTOHKGIT-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GLWXKFRTOHKGIT-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N Glu-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 2
- PVBBEKPHARMPHX-DCAQKATOSA-N Glu-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O PVBBEKPHARMPHX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- HNVFSTLPVJWIDV-CIUDSAMLSA-N Glu-Glu-Gln Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HNVFSTLPVJWIDV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- MTAOBYXRYJZRGQ-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MTAOBYXRYJZRGQ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N Glu-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 2
- OQXDUSZKISQQSS-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OQXDUSZKISQQSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- CBEUFCJRFNZMCU-SRVKXCTJSA-N Glu-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CBEUFCJRFNZMCU-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- QJVZSVUYZFYLFQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O QJVZSVUYZFYLFQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- DCBSZJJHOTXMHY-DCAQKATOSA-N Glu-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DCBSZJJHOTXMHY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N Glu-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- VSVZIEVNUYDAFR-YUMQZZPRSA-N Gly-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VSVZIEVNUYDAFR-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- JRDYDYXZKFNNRQ-XPUUQOCRSA-N Gly-Ala-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN JRDYDYXZKFNNRQ-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- FMNHBTKMRFVGRO-FOHZUACHSA-N Gly-Asn-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CN FMNHBTKMRFVGRO-FOHZUACHSA-N 0.000 description 2
- GRIRDMVMJJDZKV-RCOVLWMOSA-N Gly-Asn-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GRIRDMVMJJDZKV-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 2
- PABFFPWEJMEVEC-JGVFFNPUSA-N Gly-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)CN)C(=O)O PABFFPWEJMEVEC-JGVFFNPUSA-N 0.000 description 2
- BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)CN CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N Gly-Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N Gly-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 2
- LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N Gly-Leu-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 2
- VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- NSVOVKWEKGEOQB-LURJTMIESA-N Gly-Pro-Gly Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O NSVOVKWEKGEOQB-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- HFPVRZWORNJRRC-UWVGGRQHSA-N Gly-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN HFPVRZWORNJRRC-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N Gly-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 2
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 2
- OMNVOTCFQQLEQU-CIUDSAMLSA-N His-Asn-Asp Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N OMNVOTCFQQLEQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- WMKXFMUJRCEGRP-SRVKXCTJSA-N His-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N WMKXFMUJRCEGRP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- JSQIXEHORHLQEE-MEYUZBJRSA-N His-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JSQIXEHORHLQEE-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 2
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 2
- MKWSZEHGHSLNPF-NAKRPEOUSA-N Ile-Ala-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N MKWSZEHGHSLNPF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- QQFSKBMCAKWHLG-UHFFFAOYSA-N Ile-Phe-Pro-Pro Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(NC(=O)C(N)C(C)CC)CC1=CC=CC=C1 QQFSKBMCAKWHLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 108010092694 L-Selectin Proteins 0.000 description 2
- RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N L-isoleucyl-L-alanine Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 description 2
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 2
- LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N Leu-Ala-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- CZCSUZMIRKFFFA-CIUDSAMLSA-N Leu-Ala-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O CZCSUZMIRKFFFA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- BPANDPNDMJHFEV-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BPANDPNDMJHFEV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- QLQHWWCSCLZUMA-KKUMJFAQSA-N Leu-Asp-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QLQHWWCSCLZUMA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N Leu-Gly-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 2
- BKTXKJMNTSMJDQ-AVGNSLFASA-N Leu-His-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N BKTXKJMNTSMJDQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N Leu-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- BMVFXOQHDQZAQU-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Asp Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N BMVFXOQHDQZAQU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N Leu-Pro-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- IRMLZWSRWSGTOP-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ala Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IRMLZWSRWSGTOP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N Leu-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N 0.000 description 2
- LSLUTXRANSUGFY-XIRDDKMYSA-N Leu-Trp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LSLUTXRANSUGFY-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 2
- JGKHAFUAPZCCDU-BZSNNMDCSA-N Leu-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JGKHAFUAPZCCDU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N Leu-Val-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- MPGHETGWWWUHPY-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MPGHETGWWWUHPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N Lys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N Lys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N Lys-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- SSYOBDBNBQBSQE-SRVKXCTJSA-N Lys-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SSYOBDBNBQBSQE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- XNKDCYABMBBEKN-IUCAKERBSA-N Lys-Gly-Gln Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O XNKDCYABMBBEKN-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N Lys-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- WZVSHTFTCYOFPL-GARJFASQSA-N Lys-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O WZVSHTFTCYOFPL-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 2
- CHQWUYSNAOABIP-ZPFDUUQYSA-N Met-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N CHQWUYSNAOABIP-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- WWWGMQHQSAUXBU-BQBZGAKWSA-N Met-Gly-Asn Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O WWWGMQHQSAUXBU-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- YLDSJJOGQNEQJK-AVGNSLFASA-N Met-Pro-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YLDSJJOGQNEQJK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XZFYRXDAULDNFX-UHFFFAOYSA-N N-L-cysteinyl-L-phenylalanine Natural products SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XZFYRXDAULDNFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- PUKOOSMNXKTAIC-UHFFFAOYSA-N NPPO Chemical compound NPPO PUKOOSMNXKTAIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N Phe-Asn-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- CDNPIRSCAFMMBE-SRVKXCTJSA-N Phe-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CDNPIRSCAFMMBE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- MSHZERMPZKCODG-ACRUOGEOSA-N Phe-Leu-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MSHZERMPZKCODG-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 2
- WWPAHTZOWURIMR-ULQDDVLXSA-N Phe-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WWPAHTZOWURIMR-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- BPIMVBKDLSBKIJ-FCLVOEFKSA-N Phe-Thr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BPIMVBKDLSBKIJ-FCLVOEFKSA-N 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- 208000007452 Plasmacytoma Diseases 0.000 description 2
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- LGSANCBHSMDFDY-GARJFASQSA-N Pro-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O LGSANCBHSMDFDY-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- UEHYFUCOGHWASA-HJGDQZAQSA-N Pro-Glu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 UEHYFUCOGHWASA-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- UUHXBJHVTVGSKM-BQBZGAKWSA-N Pro-Gly-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O UUHXBJHVTVGSKM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N Pro-Leu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N Pro-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 2
- PCWLNNZTBJTZRN-AVGNSLFASA-N Pro-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 PCWLNNZTBJTZRN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- OWQXAJQZLWHPBH-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OWQXAJQZLWHPBH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N Pro-Thr-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 2
- WWXNZNWZNZPDIF-SRVKXCTJSA-N Pro-Val-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 WWXNZNWZNZPDIF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- FUOGXAQMNJMBFG-WPRPVWTQSA-N Pro-Val-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FUOGXAQMNJMBFG-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 2
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- UEJYSALTSUZXFV-SRVKXCTJSA-N Rigin Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O UEJYSALTSUZXFV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- ZUGXSSFMTXKHJS-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZUGXSSFMTXKHJS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- JPIDMRXXNMIVKY-VZFHVOOUSA-N Ser-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JPIDMRXXNMIVKY-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 2
- VGNYHOBZJKWRGI-CIUDSAMLSA-N Ser-Asn-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO VGNYHOBZJKWRGI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- NIOYDASGXWLHEZ-CIUDSAMLSA-N Ser-Met-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O NIOYDASGXWLHEZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N Ser-Thr-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 2
- NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N 0.000 description 2
- JZRYFUGREMECBH-XPUUQOCRSA-N Ser-Val-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O JZRYFUGREMECBH-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N Thr-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 2
- DSLHSTIUAPKERR-XGEHTFHBSA-N Thr-Cys-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DSLHSTIUAPKERR-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- LAFLAXHTDVNVEL-WDCWCFNPSA-N Thr-Gln-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O LAFLAXHTDVNVEL-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 2
- DIPIPFHFLPTCLK-LOKLDPHHSA-N Thr-Gln-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O DIPIPFHFLPTCLK-LOKLDPHHSA-N 0.000 description 2
- LIXBDERDAGNVAV-XKBZYTNZSA-N Thr-Gln-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LIXBDERDAGNVAV-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 2
- VGYBYGQXZJDZJU-XQXXSGGOSA-N Thr-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VGYBYGQXZJDZJU-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N Thr-Glu-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 2
- LHEZGZQRLDBSRR-WDCWCFNPSA-N Thr-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LHEZGZQRLDBSRR-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 2
- KBLYJPQSNGTDIU-LOKLDPHHSA-N Thr-Glu-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O KBLYJPQSNGTDIU-LOKLDPHHSA-N 0.000 description 2
- FKIGTIXHSRNKJU-IXOXFDKPSA-N Thr-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)CC1=CN=CN1 FKIGTIXHSRNKJU-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 2
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 2
- XKWABWFMQXMUMT-HJGDQZAQSA-N Thr-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XKWABWFMQXMUMT-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- MROIJTGJGIDEEJ-RCWTZXSCSA-N Thr-Pro-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 MROIJTGJGIDEEJ-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- MFMGPEKYBXFIRF-SUSMZKCASA-N Thr-Thr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MFMGPEKYBXFIRF-SUSMZKCASA-N 0.000 description 2
- VBMOVTMNHWPZJR-SUSMZKCASA-N Thr-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VBMOVTMNHWPZJR-SUSMZKCASA-N 0.000 description 2
- LECUEEHKUFYOOV-ZJDVBMNYSA-N Thr-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O LECUEEHKUFYOOV-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 2
- FBQHKSPOIAFUEI-OWLDWWDNSA-N Thr-Trp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FBQHKSPOIAFUEI-OWLDWWDNSA-N 0.000 description 2
- BEZTUFWTPVOROW-KJEVXHAQSA-N Thr-Tyr-Arg Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N)O BEZTUFWTPVOROW-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N Trp-Asn-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 2
- VTHNLRXALGUDBS-BPUTZDHNSA-N Trp-Gln-Glu Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N VTHNLRXALGUDBS-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 2
- NLWCSMOXNKBRLC-WDSOQIARSA-N Trp-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NLWCSMOXNKBRLC-WDSOQIARSA-N 0.000 description 2
- SSSDKJMQMZTMJP-BVSLBCMMSA-N Trp-Tyr-Val Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CC=C(O)C=C1 SSSDKJMQMZTMJP-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 2
- UGFOSENEZHEQKX-PJODQICGSA-N Trp-Val-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UGFOSENEZHEQKX-PJODQICGSA-N 0.000 description 2
- NJLQMKZSXYQRTO-FHWLQOOXSA-N Tyr-Glu-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 NJLQMKZSXYQRTO-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 2
- MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N Tyr-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- RIVVDNTUSRVTQT-IRIUXVKKSA-N Tyr-Thr-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O RIVVDNTUSRVTQT-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 2
- OBKOPLHSRDATFO-XHSDSOJGSA-N Tyr-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N OBKOPLHSRDATFO-XHSDSOJGSA-N 0.000 description 2
- IQQYYFPCWKWUHW-YDHLFZDLSA-N Val-Asn-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N IQQYYFPCWKWUHW-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- VFOHXOLPLACADK-GVXVVHGQSA-N Val-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VFOHXOLPLACADK-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 2
- JXGWQYWDUOWQHA-DZKIICNBSA-N Val-Gln-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N JXGWQYWDUOWQHA-DZKIICNBSA-N 0.000 description 2
- AGKDVLSDNSTLFA-UMNHJUIQSA-N Val-Gln-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N AGKDVLSDNSTLFA-UMNHJUIQSA-N 0.000 description 2
- DJEVQCWNMQOABE-RCOVLWMOSA-N Val-Gly-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N DJEVQCWNMQOABE-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 2
- XTDDIVQWDXMRJL-IHRRRGAJSA-N Val-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N XTDDIVQWDXMRJL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- SYSWVVCYSXBVJG-RHYQMDGZSA-N Val-Leu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O SYSWVVCYSXBVJG-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- RYHUIHUOYRNNIE-NRPADANISA-N Val-Ser-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N RYHUIHUOYRNNIE-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- TVGWMCTYUFBXAP-QTKMDUPCSA-N Val-Thr-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O TVGWMCTYUFBXAP-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 2
- ZLNYBMWGPOKSLW-LSJOCFKGSA-N Val-Val-Asp Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZLNYBMWGPOKSLW-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 2
- ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N Val-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N Val-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 2
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 2
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 2
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000012761 co-transfection Methods 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 210000001513 elbow Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 2
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010000434 glycyl-alanyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010027668 glycyl-alanyl-valine Proteins 0.000 description 2
- 108010026364 glycyl-glycyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010051307 glycyl-glycyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 210000004247 hand Anatomy 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 229940124452 immunizing agent Drugs 0.000 description 2
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 2
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 2
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 2
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 2
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 2
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 2
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 239000006179 pH buffering agent Substances 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- 108010024654 phenylalanyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 108010025488 pinealon Proteins 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 102200081893 rs137854510 Human genes 0.000 description 2
- FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M rubidium chloride Chemical compound [Cl-].[Rb+] FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 210000002832 shoulder Anatomy 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010079202 tyrosyl-alanyl-cysteine Proteins 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- COEXAQSTZUWMRI-STQMWFEESA-N (2s)-1-[2-[[(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 COEXAQSTZUWMRI-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- IGXNPQWXIRIGBF-KEOOTSPTSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 IGXNPQWXIRIGBF-KEOOTSPTSA-N 0.000 description 1
- ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N (2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N 0.000 description 1
- KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N (2s)-5-hydroxypyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC1CC[C@@H](C(O)=O)N1 KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N 0.000 description 1
- 125000000979 2-amino-2-oxoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- YAXNATKKPOWVCP-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asn-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YAXNATKKPOWVCP-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N Ala-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 108010076441 Ala-His-His Proteins 0.000 description 1
- IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- OEVCHROQUIVQFZ-YTLHQDLWSA-N Ala-Thr-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OEVCHROQUIVQFZ-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N Ala-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N Arg-Asn Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- HPKSHFSEXICTLI-CIUDSAMLSA-N Arg-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HPKSHFSEXICTLI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XLWSGICNBZGYTA-CIUDSAMLSA-N Arg-Glu-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XLWSGICNBZGYTA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HPSVTWMFWCHKFN-GARJFASQSA-N Arg-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O HPSVTWMFWCHKFN-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- NGTYEHIRESTSRX-UWVGGRQHSA-N Arg-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NGTYEHIRESTSRX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N Arg-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LRPZJPMQGKGHSG-XGEHTFHBSA-N Arg-Ser-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O LRPZJPMQGKGHSG-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- XRNXPIGJPQHCPC-RCWTZXSCSA-N Arg-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)O)C(O)=O XRNXPIGJPQHCPC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- NVPHRWNWTKYIST-BPNCWPANSA-N Arg-Tyr-Ala Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NVPHRWNWTKYIST-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- XYOVHPDDWCEUDY-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XYOVHPDDWCEUDY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GXMSVVBIAMWMKO-BQBZGAKWSA-N Asn-Arg-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N GXMSVVBIAMWMKO-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- TWXZVVXRRRRSLT-IMJSIDKUSA-N Asn-Cys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O TWXZVVXRRRRSLT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- SRUUBQBAVNQZGJ-LAEOZQHASA-N Asn-Gln-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N SRUUBQBAVNQZGJ-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IQTUDDBANZYMAR-WDSKDSINSA-N Asn-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O IQTUDDBANZYMAR-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- RBOBTTLFPRSXKZ-BZSNNMDCSA-N Asn-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RBOBTTLFPRSXKZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- JWQWPRCDYWNVNM-ACZMJKKPSA-N Asn-Ser-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N JWQWPRCDYWNVNM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N Asn-Tyr-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- ODNWIBOCFGMRTP-SRVKXCTJSA-N Asp-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)CC1=CN=CN1 ODNWIBOCFGMRTP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KTTCQQNRRLCIBC-GHCJXIJMSA-N Asp-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KTTCQQNRRLCIBC-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- UZFHNLYQWMGUHU-DCAQKATOSA-N Asp-Lys-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UZFHNLYQWMGUHU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- DPNWSMBUYCLEDG-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DPNWSMBUYCLEDG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AHWRSSLYSGLBGD-CIUDSAMLSA-N Asp-Pro-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AHWRSSLYSGLBGD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N Asp-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- JSNWZMFSLIWAHS-HJGDQZAQSA-N Asp-Thr-Leu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O JSNWZMFSLIWAHS-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- SQIARYGNVQWOSB-BZSNNMDCSA-N Asp-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SQIARYGNVQWOSB-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 101710192393 Attachment protein G3P Proteins 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 102000016605 B-Cell Activating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000019260 B-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010012919 B-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 208000020925 Bipolar disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 229920002799 BoPET Polymers 0.000 description 1
- 208000018240 Bone Marrow Failure disease Diseases 0.000 description 1
- 206010065553 Bone marrow failure Diseases 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710169873 Capsid protein G8P Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 206010008479 Chest Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000002691 Choroiditis Diseases 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- NDUSUIGBMZCOIL-ZKWXMUAHSA-N Cys-Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N NDUSUIGBMZCOIL-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- VIRYODQIWJNWNU-NRPADANISA-N Cys-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VIRYODQIWJNWNU-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- XLLSMEFANRROJE-GUBZILKMSA-N Cys-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N XLLSMEFANRROJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NDNZRWUDUMTITL-FXQIFTODSA-N Cys-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NDNZRWUDUMTITL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 206010011891 Deafness neurosensory Diseases 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 208000001380 Diabetic Ketoacidosis Diseases 0.000 description 1
- 208000032131 Diabetic Neuropathies Diseases 0.000 description 1
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 208000019872 Drug Eruptions Diseases 0.000 description 1
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 1
- 102000012545 EGF-like domains Human genes 0.000 description 1
- 108050002150 EGF-like domains Proteins 0.000 description 1
- 101000895909 Elizabethkingia meningoseptica Endo-beta-N-acetylglucosaminidase F1 Proteins 0.000 description 1
- 101000895912 Elizabethkingia meningoseptica Endo-beta-N-acetylglucosaminidase F2 Proteins 0.000 description 1
- 101000895922 Elizabethkingia meningoseptica Endo-beta-N-acetylglucosaminidase F3 Proteins 0.000 description 1
- MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N Emetamine Natural products O(C)c1c(OC)cc2c(c(C[C@@H]3[C@H](CC)CN4[C@H](c5c(cc(OC)c(OC)c5)CC4)C3)ncc2)c1 MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N 0.000 description 1
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000019028 Epidermal thickening Diseases 0.000 description 1
- 206010015226 Erythema nodosum Diseases 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 206010015958 Eye pain Diseases 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010014172 Factor V Proteins 0.000 description 1
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 1
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 1
- 108010074864 Factor XI Proteins 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- 206010016717 Fistula Diseases 0.000 description 1
- DHNWZLGBTPUTQQ-QEJZJMRPSA-N Gln-Asp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N DHNWZLGBTPUTQQ-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N Gln-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- SNLOOPZHAQDMJG-CIUDSAMLSA-N Gln-Glu-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SNLOOPZHAQDMJG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N Gln-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-Lys Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ZEEPYMXTJWIMSN-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZEEPYMXTJWIMSN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XUMFMAVDHQDATI-DCAQKATOSA-N Gln-Pro-Arg Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O XUMFMAVDHQDATI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- YPFFHGRJCUBXPX-NHCYSSNCSA-N Gln-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O)C(O)=O YPFFHGRJCUBXPX-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- OSCLNNWLKKIQJM-WDSKDSINSA-N Gln-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O OSCLNNWLKKIQJM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- VLOLPWWCNKWRNB-LOKLDPHHSA-N Gln-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O VLOLPWWCNKWRNB-LOKLDPHHSA-N 0.000 description 1
- FITIQFSXXBKFFM-NRPADANISA-N Gln-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FITIQFSXXBKFFM-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N Gln-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FYBSCGZLICNOBA-XQXXSGGOSA-N Glu-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O FYBSCGZLICNOBA-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 1
- QPRZKNOOOBWXSU-CIUDSAMLSA-N Glu-Asp-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N QPRZKNOOOBWXSU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZZIFPJZQHRJERU-WDSKDSINSA-N Glu-Cys-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O ZZIFPJZQHRJERU-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CLROYXHHUZELFX-FXQIFTODSA-N Glu-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CLROYXHHUZELFX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KASDBWKLWJKTLJ-GUBZILKMSA-N Glu-Glu-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O KASDBWKLWJKTLJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YGLCLCMAYUYZSG-AVGNSLFASA-N Glu-Lys-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 YGLCLCMAYUYZSG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N Glu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- QNJNPKSWAHPYGI-JYJNAYRXSA-N Glu-Phe-Leu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QNJNPKSWAHPYGI-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- TWYFJOHWGCCRIR-DCAQKATOSA-N Glu-Pro-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O TWYFJOHWGCCRIR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N Glu-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- ALMBZBOCGSVSAI-ACZMJKKPSA-N Glu-Ser-Asn Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N ALMBZBOCGSVSAI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- QOXDAWODGSIDDI-GUBZILKMSA-N Glu-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N QOXDAWODGSIDDI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MFYLRRCYBBJYPI-JYJNAYRXSA-N Glu-Tyr-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O MFYLRRCYBBJYPI-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- ZALGPUWUVHOGAE-GVXVVHGQSA-N Glu-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZALGPUWUVHOGAE-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- PHONXOACARQMPM-BQBZGAKWSA-N Gly-Ala-Met Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O PHONXOACARQMPM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N Gly-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N Gly-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- NNCSJUBVFBDDLC-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NNCSJUBVFBDDLC-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N Gly-Ser-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- WNGHUXFWEWTKAO-YUMQZZPRSA-N Gly-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN WNGHUXFWEWTKAO-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N Gly-Val-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 1
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- MAABHGXCIBEYQR-XVYDVKMFSA-N His-Asn-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N MAABHGXCIBEYQR-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- FYVHHKMHFPMBBG-GUBZILKMSA-N His-Gln-Asp Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N FYVHHKMHFPMBBG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HIAHVKLTHNOENC-HGNGGELXSA-N His-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HIAHVKLTHNOENC-HGNGGELXSA-N 0.000 description 1
- STOOMQFEJUVAKR-KKUMJFAQSA-N His-His-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 STOOMQFEJUVAKR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- ORERHHPZDDEMSC-VGDYDELISA-N His-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N ORERHHPZDDEMSC-VGDYDELISA-N 0.000 description 1
- TVMNTHXFRSXZGR-IHRRRGAJSA-N His-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O TVMNTHXFRSXZGR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MTHDIEPOBSRDIV-ULQDDVLXSA-N His-Met-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 MTHDIEPOBSRDIV-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- ALPXXNRQBMRCPZ-MEYUZBJRSA-N His-Thr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ALPXXNRQBMRCPZ-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- ZNTSGDNUITWTRA-WDSOQIARSA-N His-Trp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZNTSGDNUITWTRA-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- 206010051125 Hypofibrinogenaemia Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- HYXQKVOADYPQEA-CIUDSAMLSA-N Ile-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HYXQKVOADYPQEA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- UAVQIQOOBXFKRC-BYULHYEWSA-N Ile-Asn-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O UAVQIQOOBXFKRC-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N Ile-Lys-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- PARSHQDZROHERM-NHCYSSNCSA-N Ile-Lys-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)O)N PARSHQDZROHERM-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N Ile-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- VZSDQFZFTCVEGF-ZEWNOJEFSA-N Ile-Phe-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O VZSDQFZFTCVEGF-ZEWNOJEFSA-N 0.000 description 1
- JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBVWMYGBVFCRBE-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DBVWMYGBVFCRBE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OIARJGNVARWKFP-YUMQZZPRSA-N Leu-Asn-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O OIARJGNVARWKFP-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N Leu-Gly-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N Leu-Leu-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AUNMOHYWTAPQLA-XUXIUFHCSA-N Leu-Met-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O AUNMOHYWTAPQLA-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- SYRTUBLKWNDSDK-DKIMLUQUSA-N Leu-Phe-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O SYRTUBLKWNDSDK-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- IDGZVZJLYFTXSL-DCAQKATOSA-N Leu-Ser-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IDGZVZJLYFTXSL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AMSSKPUHBUQBOQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N AMSSKPUHBUQBOQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 1
- SWWCDAGDQHTKIE-RHYQMDGZSA-N Lys-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SWWCDAGDQHTKIE-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- NTSPQIONFJUMJV-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NTSPQIONFJUMJV-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ODUQLUADRKMHOZ-JYJNAYRXSA-N Lys-Glu-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O ODUQLUADRKMHOZ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- ISHNZELVUVPCHY-ZETCQYMHSA-N Lys-Gly-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O ISHNZELVUVPCHY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- UETQMSASAVBGJY-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 UETQMSASAVBGJY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- FGMHXLULNHTPID-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CN=CN1 FGMHXLULNHTPID-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N Lys-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N Lys-Ser-Arg Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SQXZLVXQXWILKW-KKUMJFAQSA-N Lys-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SQXZLVXQXWILKW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N Lys-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- YFQSSOAGMZGXFT-MEYUZBJRSA-N Lys-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YFQSSOAGMZGXFT-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- RQILLQOQXLZTCK-KBPBESRZSA-N Lys-Tyr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(O)=O RQILLQOQXLZTCK-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N Lys-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- HMZPYMSEAALNAE-ULQDDVLXSA-N Lys-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O HMZPYMSEAALNAE-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 101710156564 Major tail protein Gp23 Proteins 0.000 description 1
- 102000013460 Malate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010026217 Malate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- YRAWWKUTNBILNT-FXQIFTODSA-N Met-Ala-Ala Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YRAWWKUTNBILNT-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N Met-Asn-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PNDCUTDWYVKBHX-IHRRRGAJSA-N Met-Asp-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PNDCUTDWYVKBHX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- IHRFZLQEQVHXFA-RHYQMDGZSA-N Met-Thr-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN IHRFZLQEQVHXFA-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- MFDDVIJCQYOOES-GUBZILKMSA-N Met-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N MFDDVIJCQYOOES-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100370002 Mus musculus Tnfsf14 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000005041 Mylar™ Substances 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N N-L-methionyl-L-tyrosine Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 208000007117 Oral Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108010087702 Penicillinase Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000000447 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Human genes 0.000 description 1
- 108010055817 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 description 1
- JOXIIFVCSATTDH-IHPCNDPISA-N Phe-Asn-Trp Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)N JOXIIFVCSATTDH-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N Phe-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N Phe-Ile-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N 0.000 description 1
- ONORAGIFHNAADN-LLLHUVSDSA-N Phe-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N ONORAGIFHNAADN-LLLHUVSDSA-N 0.000 description 1
- SMFGCTXUBWEPKM-KBPBESRZSA-N Phe-Leu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 SMFGCTXUBWEPKM-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- OSBADCBXAMSPQD-YESZJQIVSA-N Phe-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N OSBADCBXAMSPQD-YESZJQIVSA-N 0.000 description 1
- GRVMHFCZUIYNKQ-UFYCRDLUSA-N Phe-Phe-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GRVMHFCZUIYNKQ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- JLLJTMHNXQTMCK-UBHSHLNASA-N Phe-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JLLJTMHNXQTMCK-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- IIEOLPMQYRBZCN-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Cys Chemical compound N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O IIEOLPMQYRBZCN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=CC=C1 MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- JMCOUWKXLXDERB-WMZOPIPTSA-N Phe-Trp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 JMCOUWKXLXDERB-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical group OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010034960 Photophobia Diseases 0.000 description 1
- 206010073391 Platelet dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 208000003971 Posterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N Pro-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N Pro-Ala-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UAYHMOIGIQZLFR-NHCYSSNCSA-N Pro-Gln-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O UAYHMOIGIQZLFR-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- ZLXKLMHAMDENIO-DCAQKATOSA-N Pro-Lys-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZLXKLMHAMDENIO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N Pro-Phe-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KDBHVPXBQADZKY-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 KDBHVPXBQADZKY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KBUAPZAZPWNYSW-SRVKXCTJSA-N Pro-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 KBUAPZAZPWNYSW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SEZGGSHLMROBFX-CIUDSAMLSA-N Pro-Ser-Gln Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O SEZGGSHLMROBFX-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N Pro-Thr-Gly Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N Pro-Val-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 206010036774 Proctitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 206010038063 Rectal haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010057071 Rectal tenesmus Diseases 0.000 description 1
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 239000012722 SDS sample buffer Substances 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N SJ000285215 Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2C1CC1CC2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2CC1CC AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 208000009966 Sensorineural Hearing Loss Diseases 0.000 description 1
- QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OYEDZGNMSBZCIM-XGEHTFHBSA-N Ser-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OYEDZGNMSBZCIM-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- FIDMVVBUOCMMJG-CIUDSAMLSA-N Ser-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO FIDMVVBUOCMMJG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FTVRVZNYIYWJGB-ACZMJKKPSA-N Ser-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FTVRVZNYIYWJGB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N Ser-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- DJACUBDEDBZKLQ-KBIXCLLPSA-N Ser-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DJACUBDEDBZKLQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- PPNPDKGQRFSCAC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PPNPDKGQRFSCAC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CKDXFSPMIDSMGV-GUBZILKMSA-N Ser-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O CKDXFSPMIDSMGV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- HHJFMHQYEAAOBM-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HHJFMHQYEAAOBM-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N Ser-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N Ser-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- PYTKULIABVRXSC-BWBBJGPYSA-N Ser-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PYTKULIABVRXSC-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N Ser-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- XJDMUQCLVSCRSJ-VZFHVOOUSA-N Ser-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XJDMUQCLVSCRSJ-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- PCJLFYBAQZQOFE-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PCJLFYBAQZQOFE-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N Ser-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N Ser-Tyr-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- RCOUFINCYASMDN-GUBZILKMSA-N Ser-Val-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O RCOUFINCYASMDN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SIEBDTCABMZCLF-XGEHTFHBSA-N Ser-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SIEBDTCABMZCLF-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N Ser-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(O)=O HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010067868 Skin mass Diseases 0.000 description 1
- 241000269319 Squalius cephalus Species 0.000 description 1
- 206010042033 Stevens-Johnson syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000168 Stevens-Johnson syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 101000895926 Streptomyces plicatus Endo-beta-N-acetylglucosaminidase H Proteins 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 208000025317 T-cell and NK-cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 208000002903 Thalassemia Diseases 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010043458 Thirst Diseases 0.000 description 1
- IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N Thr-Ala-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- DFTCYYILCSQGIZ-GCJQMDKQSA-N Thr-Ala-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DFTCYYILCSQGIZ-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- LVHHEVGYAZGXDE-KDXUFGMBSA-N Thr-Ala-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O LVHHEVGYAZGXDE-KDXUFGMBSA-N 0.000 description 1
- VFEHSAJCWWHDBH-RHYQMDGZSA-N Thr-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VFEHSAJCWWHDBH-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- ODSAPYVQSLDRSR-LKXGYXEUSA-N Thr-Cys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ODSAPYVQSLDRSR-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N Thr-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N Thr-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- CYVQBKQYQGEELV-NKIYYHGXSA-N Thr-His-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O CYVQBKQYQGEELV-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- FIFDDJFLNVAVMS-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O FIFDDJFLNVAVMS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- NCXVJIQMWSGRHY-KXNHARMFSA-N Thr-Leu-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O NCXVJIQMWSGRHY-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- BDGBHYCAZJPLHX-HJGDQZAQSA-N Thr-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BDGBHYCAZJPLHX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- JLNMFGCJODTXDH-WEDXCCLWSA-N Thr-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O JLNMFGCJODTXDH-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- XSEPSRUDSPHMPX-KATARQTJSA-N Thr-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XSEPSRUDSPHMPX-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N Thr-Ser-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N)O XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- SGAOHNPSEPVAFP-ZDLURKLDSA-N Thr-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SGAOHNPSEPVAFP-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N Thr-Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N 0.000 description 1
- CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N Thr-Tyr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- LVRFMARKDGGZMX-IZPVPAKOSA-N Thr-Tyr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LVRFMARKDGGZMX-IZPVPAKOSA-N 0.000 description 1
- OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N Thr-Val-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- FYBFTPLPAXZBOY-KKHAAJSZSA-N Thr-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FYBFTPLPAXZBOY-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- QNXZCKMXHPULME-ZNSHCXBVSA-N Thr-Val-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O QNXZCKMXHPULME-ZNSHCXBVSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060872 Transplant failure Diseases 0.000 description 1
- 206010066901 Treatment failure Diseases 0.000 description 1
- XGFGVFMXDXALEV-XIRDDKMYSA-N Trp-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N XGFGVFMXDXALEV-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- LGEYOIQBBIPHQN-UWJYBYFXSA-N Tyr-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 LGEYOIQBBIPHQN-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N Tyr-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- HIINQLBHPIQYHN-JTQLQIEISA-N Tyr-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HIINQLBHPIQYHN-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N Tyr-Leu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- SINRIKQYQJRGDQ-MEYUZBJRSA-N Tyr-Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 SINRIKQYQJRGDQ-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- WURLIFOWSMBUAR-SLFFLAALSA-N Tyr-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)C(=O)O WURLIFOWSMBUAR-SLFFLAALSA-N 0.000 description 1
- VNYDHJARLHNEGA-RYUDHWBXSA-N Tyr-Pro Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 VNYDHJARLHNEGA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- AUZADXNWQMBZOO-JYJNAYRXSA-N Tyr-Pro-Arg Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AUZADXNWQMBZOO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N Tyr-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N Tyr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- JAQGKXUEKGKTKX-HOTGVXAUSA-N Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 JAQGKXUEKGKTKX-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N Tyr-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N UNPD149280 Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 101150117115 V gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 1
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 description 1
- LABUITCFCAABSV-BPNCWPANSA-N Val-Ala-Tyr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LABUITCFCAABSV-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- QHDXUYOYTPWCSK-RCOVLWMOSA-N Val-Asp-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)NCC(=O)O)N QHDXUYOYTPWCSK-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- ZQGPWORGSNRQLN-NHCYSSNCSA-N Val-Asp-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N ZQGPWORGSNRQLN-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- FBVUOEYVGNMRMD-NAKRPEOUSA-N Val-Cys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C(C)C)N FBVUOEYVGNMRMD-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- LHADRQBREKTRLR-DCAQKATOSA-N Val-Cys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LHADRQBREKTRLR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- OXVPMZVGCAPFIG-BQFCYCMXSA-N Val-Gln-Trp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N OXVPMZVGCAPFIG-BQFCYCMXSA-N 0.000 description 1
- RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N Val-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N 0.000 description 1
- UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N Val-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- ZIGZPYJXIWLQFC-QTKMDUPCSA-N Val-His-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O ZIGZPYJXIWLQFC-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 1
- WBAJDGWKRIHOAC-GVXVVHGQSA-N Val-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O WBAJDGWKRIHOAC-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N Val-Lys-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- SBJCTAZFSZXWSR-AVGNSLFASA-N Val-Met-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N SBJCTAZFSZXWSR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KISFXYYRKKNLOP-IHRRRGAJSA-N Val-Phe-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N KISFXYYRKKNLOP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- VHIZXDZMTDVFGX-DCAQKATOSA-N Val-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VHIZXDZMTDVFGX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N Val-Thr-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- QPJSIBAOZBVELU-BPNCWPANSA-N Val-Tyr-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N QPJSIBAOZBVELU-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 208000027276 Von Willebrand disease Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229940059260 amidate Drugs 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 208000002399 aphthous stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 201000004982 autoimmune uveitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000013404 behavioral symptom Diseases 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 239000012503 blood component Substances 0.000 description 1
- 229960000182 blood factors Drugs 0.000 description 1
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 description 1
- 208000027503 bloody stool Diseases 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N boldenone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 1
- 238000010504 bond cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000020670 canker sore Diseases 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 230000009920 chelation Effects 0.000 description 1
- NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N chembl557217 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 208000019069 chronic childhood arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012866 crystallographic experiment Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 125000000392 cycloalkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N cytochalasin B Chemical compound C([C@H]1[C@@H]2[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]3/C=C/C[C@H](C)CCC[C@@H](O)/C=C/C(=O)O[C@@]23C(=O)N1)=C)C)C1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N cytochalasin B Natural products C[C@H]1CCC[C@@H](O)C=CC(=O)O[C@@]23[C@H](C=CC1)[C@H](O)C(=C)[C@@H](C)[C@@H]2[C@H](Cc4ccccc4)NC3=O GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N dehydrotestosterone Natural products O=C1C=CC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N deoliosyl-3C-alpha-L-digitoxosyl-MTM Natural products CC=1C(O)=C2C(O)=C3C(=O)C(OC4OC(C)C(O)C(OC5OC(C)C(O)C(OC6OC(C)C(O)C(C)(O)C6)C5)C4)C(C(OC)C(=O)C(O)C(C)O)CC3=CC2=CC=1OC(OC(C)C1O)CC1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N dithiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N emetine Chemical compound N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N 0.000 description 1
- 229960002694 emetine Drugs 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N emetine Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N 0.000 description 1
- 239000008393 encapsulating agent Substances 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- NPUKDXXFDDZOKR-LLVKDONJSA-N etomidate Chemical compound CCOC(=O)C1=CN=CN1[C@H](C)C1=CC=CC=C1 NPUKDXXFDDZOKR-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 210000003811 finger Anatomy 0.000 description 1
- 230000003890 fistula Effects 0.000 description 1
- 238000009459 flexible packaging Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000004023 fresh frozen plasma Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 102000054767 gene variant Human genes 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 108010066198 glycyl-leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010082286 glycyl-seryl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010020688 glycylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000000474 heel Anatomy 0.000 description 1
- 208000035861 hematochezia Diseases 0.000 description 1
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 210000001624 hip Anatomy 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002727 hyperosmolar Effects 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 201000004614 iritis Diseases 0.000 description 1
- 210000001847 jaw Anatomy 0.000 description 1
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 1
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 108010091871 leucylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000011486 lichen planus Diseases 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018191 liver inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 208000018769 loss of vision Diseases 0.000 description 1
- 231100000864 loss of vision Toxicity 0.000 description 1
- 208000018555 lymphatic system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010025153 lysyl-alanyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 150000002671 lyxoses Chemical class 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 208000030247 mild fever Diseases 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 210000000282 nail Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 230000002956 necrotizing effect Effects 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 231100000862 numbness Toxicity 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000003182 parenteral nutrition solution Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229950009506 penicillinase Drugs 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 1
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 208000022530 polyphagia Diseases 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 235000020004 porter Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 description 1
- 230000004853 protein function Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229940102127 rubidium chloride Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 150000003341 sedoheptuloses Chemical class 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 231100000879 sensorineural hearing loss Toxicity 0.000 description 1
- 208000023573 sensorineural hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000013605 shuttle vector Substances 0.000 description 1
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000008137 solubility enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 208000012271 tenesmus Diseases 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 229960002372 tetracaine Drugs 0.000 description 1
- GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N tetracaine Chemical compound CCCCNC1=CC=C(C(=O)OCCN(C)C)C=C1 GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000001296 transplacental effect Effects 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- 208000012137 von Willebrand disease (hereditary or acquired) Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
- 150000003742 xyloses Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/35—Valency
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/53—Hinge
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/626—Diabody or triabody
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены варианты четырехвалентного антитела, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1. Четырехвалентные антитела содержат димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит два вариабельных домена легкой цепи и два вариабельных домена тяжелой цепи. Также предложены выделенный полинуклеотид, кодирующий антитело, включающие указанный полинуклеотид экспрессионный вектор и клетка-хозяин. Также предложен способ получения четырехвалентного антитела, включающий культивирование указанной клетки-хозяина. Кроме того, изобретение относится к фармацевтическим композициям, наборам и способам лечения опосредованных T-клетками воспалительных заболеваний или лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации, с применением указанных антител. Изобретение позволяет получать четырехвалентные антитела к PSGL-1, не зависящие от кросc-линкера/FcR-экспрессирующих клеток, которые демонстрируют повышенную эффективность по сравнению с двухвалентными антителами. 13 н. и 45 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 1 пр.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Данная заявка заявляет приоритет предварительной заявки на патент США № 62/276,806, поданной 8 января 2016 года, которая включена в данный документ посредством ссылки в полном объеме.
ПРЕДСТАВЛЕНИЕ ПЕРЕЧНЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ В ТЕКСТОВОМ ФАЙЛЕ ASCII
[0002] Содержание следующего документа в текстовом файле ASCII включено в данное описание посредством ссылки в полном объеме: машиночитаемая форма (CRF) перечня последовательностей (имя файла: 606592001340SEQLIST.TXT, дата записи:3 января, 2017 года, размер: 70 KB).
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0003] В данном документе приведены четырехвалентные антитела, которые специфически связываются с человеческим гликопротеиновым лигандом 1 P-селектина (PSGL-1), а также полинуклеотиды, векторы, клетки-хозяева, способы, фармацевтические композиции, наборы и связанные с ними применения. Эти четырехвалентные антитела могут найти применение во множестве диагностических и терапевтических способов, включая, без ограничений, лечение опосредованных T-клетками воспалительных заболеваний, трансплантации и переливания.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0004] Воспалительные реакции на инфекцию или повреждение инициируются прилипанием лейкоцитов к стенке сосуда (McEver и соавт, 1997 год, J. Clin. Invest., 100 (3):485-492). Селектин представляет собой семейство гликопротеинов, которые опосредуют первые взаимодействия лейкоцитов с эндотелиальными клетками и лейкоцитов с тромбоцитами во время воспаления. Семейство селектинов, которое состоит из L-селектина, E-селектина и P-селектина, содержит NH2-концевой домен лектина, за которым следует EGF-подобный домен, серия консенсусных повторов, трансмембранный домен и короткий цитоплазматический концевой сегмент. Лектиновые домены селектинов взаимодействуют с конкретными гликоконъюгатными лигандами с целью облегчения адгезии клеток. L-селектин, экспрессируемый на большинстве лейкоцитов, связывается с лигандами на некоторых эндотелиальных клетках и других лейкоцитах. E-селектин, экспрессируемый на активированных цитокином эндотелиальных клетках, связывается с лигандами на большинстве лейкоцитов. P-селектин, экспрессируемый на активированных тромбоцитах и эндотелиальных клетках, также связывается с лигандами на большинстве лейкоцитов.
[0005] Гликопротеиновый лиганд 1 P-селектина ("PSGL-1"), также известный как SELPLG или CD162 (кластер дифференциации162), представляет собой человеческий гликопротеиновый лиганд муцинового типа для всех трех селектинов (Constantin, Gabriela, 2004 год, Drug News Perspect., 17(9):579-585; McEver и соавт., 1997 год, J. Clin. Invest., 100 (3):485-492). PSGL-1 представляет собой дисульфид-связанный гомодимер с двумя субъединицами 120 кДа и экспрессируемый на поверхности моноцитов, лимфоцитов, гранулоцитов и в некоторых стволовых клетках CD34+. PSGL-1, вероятно, будет способствовать рекрутированию патологического лейкоцита во многих воспалительных заболеваниях, поскольку он способствует адгезионным взаимодействиям селектинов. Кроме того, показано, что PSGL-1 имеет уникальную регуляторную роль в Т-клетках. Мыши с дефицитом PSGL-1 демонстрируют повышенные пролиферативные ответы и аутоиммунность, что указывает на то, что PSGL-1 играет важную роль в подавлении ответов Т-клеток (Krystle M. и соавт. J. Immunol. 2012 год; 188:1638-1646. Urzainqui и соавт. Ann Rheum Dis 2013 год; 71:650; Pérez-Frías A, и соавт. Arthritis Rheumatol. ноябрь 2014 года; 66(11):3178-89.; Angiari и соавт. J Immunol. 2013 год; 191(11):5489-500).
[0006] Было разработано несколько антител к PSGL-1 (см., например, международные патентные заявки № WO 2005/110475, WO 2003/013603 и WO 2012/174001; Constantin, Gabriela, 2004 год, Drug News Perspect., 17(9):579-585, Chen и соавт. Blood. 2004 год; 104(10):3233-42, Huang и соавт, Eur J Immunol. 2005 год; 35(7):2239-49; и патент США № 7,604,800). Некоторые из существующих агонистических антител PSGL-1 преимущественно индуцируют апоптоз активированных Т-клеток на поздней стадии, но не других клеток, экспрессирующих PSGL-1; поэтому такие антитела могут применяться в качестве противовоспалительных терапевтических средств или применяться при трансплантациях и/или переливаниях. Однако существует потребность в улучшенных антителах к PSGL-1 с большей эффективностью in vivo, чем существующие антитела.
[0007] Все публикации, патенты и заявки на патент, которые приводятся в данном документе, тем самым включены в своем полном объеме посредством ссылки для всех целей.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0008] Для удовлетворения этой потребности в данном документе приведены четырехвалентные антитела, которые специфически связываются с человеческим PSGL-1, а также полинуклеотиды, векторы, клетки-хозяева, способы, фармацевтические композиции, наборы и связанные с ними применения. Данное описание демонстрирует, что четырехвалентные антитела, которые специфически связываются с человеческим PSGL-1, обладают большей эффективностью и активностью, чем обычные (например, двухвалентные) PSGL-1. Как таковые, эти четырехвалентные антитела могут применяться, наряду с прочим, в диагностических и/или терапевтических способах, применениях и композициях, связанных с функцией Т-клеток, таких как лечение опосредованных T-клетками воспалительных заболеваний, переливаний и/или трансплантаций.
[0009] Соответственно, в одном аспекте, в данном документе представлено четырехвалентное антитело, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1, четырехвалентное антитело, содержащее димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера включает одноцепочечный полипептид, содержащий:(a) два вариабельных домена легкой цепи (VL), при этом каждый из двух доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3; (b) два вариабельных домена тяжелой цепи (VH), при этом каждый из двух доменов VH содержит CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3; и (c) домен Fc антитела, при этом каждый из двух доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH двух доменов VH, и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к человеческому PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один из двух доменов VH содержит: (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух доменов VH содержит: (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения один или оба из двух доменов VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах реализации изобретения один или оба из двух доменов VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один из двух доменов VL содержит: (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух доменов VL содержит: (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах реализации изобретения один или оба из двух доменов VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах реализации изобретения один или оба из двух доменов VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VL двух доменов VL; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VH двух доменов VH; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VL двух доменов VL; (f) третью последовательность линкера; (g) второй домен VH двух доменов VH; (h) четвертую последовательность линкера; и (i) домен Fc антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения первая, вторая и третья последовательности линкеров каждая содержит два или более повторов аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения первая и третья последовательности линкеров имеют одинаковую последовательность и содержат два повтора SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения четвертая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VH двух доменов VH; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VL двух доменов VL; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VL двух доменов VL; (f) третью последовательность линкера; (g) второй домен VH двух доменов VH; (h) четвертую последовательность линкера; и (i) домен Fc антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VL двух доменов VL; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VH двух доменов VH; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VH двух доменов VH; (f) третью последовательность линкера; (g) второй домен VL двух доменов VL; (h) четвертую последовательность линкера; и (i) домен Fc антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения первая, вторая или третья последовательность линкера содержит два или более повторов аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения первая, вторая или третья последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, 34, 35 или 36. В некоторых вариантах реализации изобретения первая и третья последовательности линкеров имеют одинаковую последовательность, содержащую пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27. В некоторых вариантах реализации изобретения четвертая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 3. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 4. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 6.
[0010] В другом аспекте, в данном документе представлено четырехвалентное антитело, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1, четырехвалентное антитело, содержащее димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела; при этом легкая цепь антитела содержит: (i) два вариабельных домена легкой цепи (VL), при этом каждый из двух доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, (ii) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и (iii) константный домен легкой цепи (CL); при этом тяжелая цепь антитела содержит: (i) второй вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и (ii) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3); при этом первый и второй домены VH каждый содержат CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3, при этом каждый из двух доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH, и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к PSGL-1 человека. В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один из первого и второго доменов VH содержит: (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VH содержат: (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VH содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VH содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один из первого и второго доменов VL содержит: (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VL содержат: (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VL содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VL содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу: (a) первый домен VH; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VL двух или более доменов VL; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VL двух или более доменов VL; и (f) домен CL. В некоторых вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL каппа. В некоторых вариантах реализации изобретения первая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 7. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 8. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VL двух доменов VL; (b) домен CL; (c) первую последовательность линкера; (d) первый домен VH; (e) вторую последовательность линкера; и (f) второй домен VL двух доменов VL. В некоторых вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL каппа. В некоторых вариантах реализации изобретения первая последовательность линкера содержит два повтора SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 10. В некоторых вариантах реализации изобретения тяжелая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:(a) второй домен VH; и (b) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3). В некоторых вариантах реализации изобретения тяжелая цепь антитела содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 11. В некоторых вариантах реализации изобретения тяжелая цепь антитела кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 12.
[0011] В другом аспекте, в данном документе представлено четырехвалентное антитело, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1, четырехвалентное антитело, содержащее димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела; при этом легкая цепь антитела содержит: (i) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH), (ii) первый вариабельный домен легкой цепи (VL) и (iii) константный домен легкой цепи (CL); при этом тяжелая цепь антитела содержит: (i) второй вариабельный домен тяжелой цепи (VH), (ii) второй вариабельный домен легкой цепи (VL) и (iii) константный домен тяжелой цепи, содержащий первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3); при этом каждый из первого и второго доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3; при этом каждый из первого и второго доменов VH содержит CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3; при этом каждый из первого и второго доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH; и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к PSGL-1 человека. В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один из первого и второго доменов VH содержит: (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VH содержат: (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VH содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VH содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один из первого и второго доменов VL содержит: (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VL содержат: (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VL содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и/или второй домены VL содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VH; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VL; и (d) домен CL. В некоторых вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL каппа. В некоторых вариантах реализации изобретения первая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13. В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 14. В некоторых вариантах реализации изобретения тяжелая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:(a) второй домен VH; и (b) вторую последовательность линкера; (c) второй домен VL; и (d) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3). В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения тяжелая цепь антитела содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15. В некоторых вариантах реализации изобретения тяжелая цепь антитела кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 16.
[0012] В некоторых вариантах реализации любого из вышеуказанных вариантов реализации изобретения домен Fc антитела представляет собой домен Fc антитела человека. В некоторых вариантах реализации изобретения домен Fc антитела представляет собой домен Fc IgG4 человека. В некоторых вариантах реализации изобретения домен Fc IgG4 человека содержит последовательность шарнирной области, содержащую одну или более аминокислотных замен, которые приводят к уменьшению перетасовки IgG4 по сравнению с шарнирной областью IgG4, не содержащей одной или более аминокислотных замен. В некоторых вариантах реализации изобретения домен Fc IgG4 человека содержит последовательность шарнирной области, содержащую замену серина на пролин в аминокислоте 228, нумерация согласно индексу EU. В некоторых вариантах реализации любого из вышеприведенных вариантов реализации изобретения шарнирная область антитела содержит замену серина на пролин в аминокислоте 228, нумерация согласно индексу EU. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению демонстрирует усиленную индукцию апоптоза в целевой клетке (например, клетке, экспрессирующей человеческий PSGL-1 или его эпитоп) по сравнению с обычным (например, двухвалентным) антителом, имеющим один или более доменов VH или VL, общих с четырехвалентным антителом. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению демонстрирует усиленное ингибирование ГЗТ (гиперчувствительности замедленного типа) (например, в животной модели trans vivo) по сравнению с обычным (например, двухвалентным) антителом, имеющим один или более доменов VH или VL, общих с четырехвалентным антителом.
[0013] В другом аспекте данного изобретения предложен выделенный полинуклеотид, кодирующий четырехвалентное антитело по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения. В некоторых вариантах реализации изобретения выделенный полинуклеотид содержит полинуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 и 16. В другом аспекте данного изобретения предложен вектор, содержащий выделенный полинуклеотид по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения. В другом аспекте данного изобретения предложена клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения и/или вектор по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения. В другом аспекте данного изобретения предложен способ получения четырехвалентного антитела, включающий культивирование клетки-хозяина по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения, так что производится четырехвалентное антитело. В некоторых вариантах реализации изобретения способ дополнительно включает извлечение четырехвалентного антитела из клетки-хозяина.
[0014] В другом аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая четырехвалентное антитело по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения и фармацевтически приемлемый носитель. В другом аспекте данного изобретения предложен набор, содержащий четырехвалентное антитело по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения и необязательный фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых вариантах реализации изобретения набор дополнительно содержит листок-вкладыш, содержащий инструкции для введения четырехвалентного антитела с целью лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания или патологического состояния. В некоторых вариантах реализации изобретения набор дополнительно содержит листок-вкладыш, содержащий инструкции для введения четырехвалентного антитела до, одновременно с и/или после переливания или трансплантации. В другом аспекте данного изобретения предложено четырехвалентное антитело по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения для применения с целью лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания или патологического состояния. В другом аспекте данного изобретения предложено четырехвалентное антитело по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения для применения с целью лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации. В другом аспекте данного изобретения предложено применение четырехвалентного антитела по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения при изготовлении лекарственного средства с целью лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания или патологического состояния. В другом аспекте данного изобретения предложено применение четырехвалентного антитела по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения при изготовлении лекарственного средства с целью лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации. В другом аспекте данного изобретения предложен способ лечения, опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания или патологического состояния, при этом способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества четырехвалентного антитела по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения. В другом аспекте данного изобретения предложен способ лечения пациента, нуждающегося в переливании или трансплантации, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества четырехвалентного антитела по любому из вышеуказанных вариантов реализации изобретения до, одновременно с и/или после переливания или трансплантации. В некоторых вариантах реализации опосредованное Т-клетками воспалительное заболевание является аутоиммунным заболеванием. В некоторых вариантах реализации изобретения опосредованное Т-клетками воспалительное заболевание выбрано из группы, состоящей из псориаза, псориатического артрита, ревматоидного артрита, болезни Крона, анкилозирующего спондилоартрита, диабета I типа, язвенного колита, рассеянного склероза и реакции "трансплантат против хозяина" (РТПХ). В некоторых вариантах реализации изобретения псориаз представляет собой бляшковидный псориаз, хронический бляшковидный псориаз, каплевидный псориаз, обратный псориаз, пустулезный псориаз или эритродермический псориаз. В некоторых вариантах реализации изобретения трансплантация представляет собой трансплантацию ткани, выбранной из группы, состоящей из костного мозга, почки, сердца, печени, нервной ткани, легкого, поджелудочной железы, кожи и кишечника. В некоторых вариантах реализации изобретения переливание представляет собой переливание, включающее одну или более белых клеток крови, красных клеток крови и тромбоцитов.
[0015] Должно быть понятно, что одно, некоторые или все свойства различных вариантов реализации изобретения, описанных в данном документе, могут быть объединены для формирования других вариантов реализации по данному изобретению. Эти и другие аспекты изобретения будут очевидными специалисту в данной области техники.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0016] На Фиг. 1A и 1B изображены схемы, иллюстрирующие типовые четырехвалентные антитела в соответствии с некоторыми вариантами реализации изобретения. На Фиг. 1A проиллюстрированы следующие типовые форматы антител:(1) димер, состоящий из двух одноцепочечных диател слитых с доменом Fc (scDb2-Fc), изображающий последовательности линкеров: (GGGGS)5 (SEQ ID NO: 33), GGGGSAAA (SEQ ID NO: 26) и (GGGGS)2 (SEQ ID NO: 34)/(GGGGS)2G (SEQ ID NO: 35)/(GGGGS)2GG (SEQ ID NO: 36); (2) два разных формата антител, каждый из которых имеет димер двух тандемных одноцепочечных единиц вариабельных фрагментов (taFv2-Fc), изображающих идентичные последовательности линкеров для обоих форматов:(GGGGS)5 (SEQ ID NO: 33), ASTGS (SEQ ID NO: 27), GGGGSAAA (SEQ ID NO: 26); и (3) три разных формата антител, на основе одноцепочечных вариабельных фрагментов (scFv-IgG), изображающих: последовательности линкеров scFv2-LC-IgG4p (GGGGS)5 (SEQ ID NO: 33) и ASTGSG4S (SEQ ID NO: 28), последовательности линкеров LC-scFv2-IgG4p (GGGGS)2 (SEQ ID NO: 34) и (GGGGS)5 (SEQ ID NO: 33), последовательности линкеров scFv4-crlG4p (GGGGS)5 (SEQ ID NO: 33). На Фиг. 1B изображена еще одна иллюстрация трех форматов антител на основе scFv, с указанными затененными вариабельными фрагментами V2 scFv.
[0017] На Фиг. 2A-2C изображена проверка молекулярных масс и основных структур типовых четырехвалентных антител с помощью ДСН-ПААГ-электрофореза с последующим окрашиванием Кумасси синим. Изображены невосстанавливающие (Фиг. 2A и 2B) и восстанавливающие (Фиг. 2C) условия.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
[0018] В данном документе предложены четырехвалентные антитела, которые специфически связываются с человеческим PSGL-1. Данное описание основано, по меньшей мере, частично на обнаружении, описанном в данном документе, что некоторые четырехвалентные антитела к PSGL-1 демонстрируют повышенную эффективность по сравнению с исходным антителом к PSGL-1 как in vitro, так и trans vivo. Эти четырехвалентные антитела демонстрировали более высокую эффективность в индукции апоптоза и повышенную эффективность в модели trans vivo для гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), чем исходное антитело к PSGL-1. В данном документе дополнительно приведены выделенные полинуклеотиды, векторы, клетки-хозяева, фармацевтические композиции, наборы, применения и способы, связанные с четырехвалентными антителами. Например, четырехвалентные антитела по данному изобретению могут найти применение при лечении опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания или введения до, одновременно с и/или после переливания или трансплантации.
[0019] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентные антитела по данному изобретению содержат димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера содержит одноцепочечный полипептид, содержащий:(a) два вариабельных домена легкой цепи (VL), при этом каждый из двух доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3; (b) два вариабельных домена тяжелой цепи (VH), при этом каждый из двух доменов VH содержит CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3; и (c) домен Fc антитела, при этом каждый из двух доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH двух доменов VH, и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к человеческому PSGL-1. В других вариантах реализации изобретения четырехвалентные антитела по данному изобретению содержат димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела; при этом легкая цепь антитела содержит: (i) два вариабельных домена легкой цепи (VL), при этом каждый из двух доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, (ii) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и (iii) константный домен легкой цепи (CL); при этом тяжелая цепь антитела содержит: (i) второй вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и (ii) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3); при этом первый и второй домены VH каждый содержат CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3, при этом каждый из двух доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH, и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к PSGL-1 человека. В других вариантах реализации изобретения четырехвалентные антитела по данному изобретению содержат димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела; при этом легкая цепь антитела содержит: (i) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH), (ii) первый вариабельный домен легкой цепи (VL) и (iii) константный домен легкой цепи (CL); при этом тяжелая цепь антитела содержит: (i) второй вариабельный домен тяжелой цепи (VH), (ii) второй вариабельный домен легкой цепи (VL) и (iii) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3); при этом каждый из первого и второго доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3; при этом каждый из первого и второго доменов VH содержит CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3; при этом каждый из первого и второго доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH; и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к PSGL-1 человека.
I. Определения терминов
[0020] "Антитело" представляет собой молекулу иммуноглобулина, способную специфически связываться с целью, такой как углевод, полинуклеотид, липид, полипептид, и тому подобное с помощью, по меньшей мере, одного сайта распознавания антигена, расположенного в вариабельной области молекулы иммуноглобулина. Применяемый в данном документе термин охватывает не только интактные поликлональные или моноклональные антитела, но также полипептиды, содержащие их фрагменты (такие как Fab, Fab', F(ab')2, Fv); одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv), одноцепочечные диатела (scDb), единицы тандемных одноцепочечных фрагментов (scFv) (называемые taFv для тандемного scFv) и мутанты или другие их конфигурации; слитые белки, содержащие часть антитела; и любую другую модифицированную конфигурацию молекулы иммуноглобулина, которая содержит сайт распознавания антигена.
[0021] В данном контексте термин "четырехвалентное" антитело может относиться к антителу, которое содержит четыре единицы связывания VH-VL антитела, при этом каждая единица связывания VH-VL содержит домен VH антитела и домен VL антитела. В данном контексте ссылка на "мономер" четырехвалентного антитела может включать как одноцепочечные полипептиды, так и многоцепочечные полипептиды. Например, мономер может относиться к одноцепочечному полипептиду или он может относиться к единице тяжелой цепи-легкой цепи антитела, где тяжелая цепь и легкая цепь кодируются отдельными полинуклеотидами и/или образованы из объединения отдельных полипептидов.
[0022] Антитело включает антитело любого класса, такого как IgG, IgA или IgM (или их подкласса), и антитело не обязательно должно относиться к какому-либо конкретному классу. В зависимости от аминокислотной последовательности константного домена тяжелых цепей антитела, иммуноглобулины антитела можно отнести к различным классам. Существует пять основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, некоторые из которых можно дополнительно разделить на подклассы (изотипы), например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. Константные домены тяжелой цепи, соответствующие различным классам иммуноглобулинов, называются альфа, дельта, эпсилон, гамма и мю соответственно. Хорошо известны субъединичная структура и трехмерная конфигурация различных классов иммуноглобулинов.
[0023] Антитела по данному изобретению дополнительно предназначены для включения биспецифических, мультиспецифических, химерных, гуманизированных и рекомбинантно сконструированных молекул, имеющих аффинность к полипептиду, которая предоставляется по меньшей мере одной областью CDR антитела. В данной области техники известны однодоменные антитела, которые являются либо вариабельным доменом тяжелой цепи антитела, либо вариабельным доменом легкой цепи. См., например, Holt и соавт., Trends Biotechnol. 21:484-490, 2003 год. Способы получения антител, содержащих либо вариабельный домен тяжелой цепи антитела, либо вариабельный домен легкой цепи антитела, содержащих три из шести встречающихся в природе областей, определяющих комплементарность из антитела, также известны в данной области техники. См., например, Muyldermans, Rev. Mol. Biotechnol. 74:277-302, 2001 год.
[0024] В данном документе термин "моноклональное антитело" относится к антителу в значительной степени однородных антител, то есть, отдельные антитела в составе популяции являются идентичными, за исключением мутаций, происходящих по естественным причинам, которые могут присутствовать в небольших количествах. Моноклональные антитела как правило являются высокоспецифичными, поскольку они направлены против одиночного антигенного сайта. Кроме того, по сравнению с препаратами поликлональных антител, которые как правило содержат различные антитела против различных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одиночной детерминанты антигена. Определение "моноклональное" указывает на то, что антитело получено из практически однородной популяции антител; его не следует интерпретировать как требование о продукции антитела посредством какого-либо конкретного способа. Например, моноклональные антитела, которые будут применяться в соответствии с данным изобретением, могут быть получены с помощью гибридомного способа, впервые описанного Kohler and Milstein, 1975 год, Nature, 256:495, или могут быть получены с помощью методик рекомбинантных ДНК, таких как описано в патенте США № 4,816,567. Моноклональные антитела также могут быть выделены из фаговых библиотек, полученных с помощью способов, описанных, например, в McCafferty и соавт., 1990 год, Nature, 348:552-554.
[0025] Применяемый в данном документе термин "химерное антитело" относится к антителу, имеющему вариабельную область или часть вариабельной области от первого вида и константную область от второго вида. Интактное химерное антитело содержит две копии химерной легкой цепи и две копии химерной тяжелой цепи. Получение химерных антител известно в данной области техники (Cabilly и соавт. (1984 год), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:3273-3277; Harlow and Lane (1988 год), Antibodies: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory). Как правило, в этих химерных антителах вариабельная область как легкой, так и тяжелой цепей имитирует вариабельные области антител, полученных от одного вида млекопитающих, тогда как константные участки гомологичны последовательностям антител, полученных из другого. Одним явным преимуществом таких химерных форм является то, что, например, вариабельные области могут быть легко получены из известных в настоящее время источников с применением легкодоступных гибридом или В-клеток из организмов-хозяев, не являющихся человеком, в сочетании с константными областями, полученными, например, из препаратов клеток человека. В то время как вариабельная область имеет преимущество в легкости получения, и ее специфичность не зависит от ее источника, константная область, являющаяся человеческой, при введении с меньшей вероятностью вызывает иммунный ответ от человека, чем константная область из источника, не являющегося человеком. Однако данное определение не ограничивается этим конкретным примером. В некоторых вариантах реализации изобретения модификации аминокислот производятся в вариабельной и/или константной области.
[0026] В данном документе "гуманизированные" антитела относятся к формам нечеловеческих (например, мышиных) антител, которые представляют собой специфические химерные иммуноглобулины, цепи иммуноглобулина или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2, или другие антигенсвязывающие подпоследовательности антител), которые содержат минимальную последовательность, полученную из нечеловеческого иммуноглобулина. По большей части гуманизированные антитела представляют собой человеческие иммуноглобулины (реципиентное антитело), в которых остатки из области, определяющей комплементарность (CDR) реципиента заменяются остатками из CDR видов, отличных от человека (донорское антитело), таких как мышь, крыса или кролик, имеющих желаемую специфичность, аффинность и функциональную возможность. В некоторых случаях остатки Fv каркасной области (FR) человеческого иммуноглобулина заменяются соответствующими нечеловеческими остатками. Более того, гуманизированное антитело может содержать остатки, которые не обнаружены ни в реципиентном антителе, ни в импортированных CDR или каркасных последовательностях, но включены для дальнейшего улучшения и оптимизации эффективности антител. В общем, гуманизированное антитело будет содержать практически все из по меньшей мере одного и, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или практически все области CDR соответствуют таковому нечеловеческому иммуноглобулину, и все или практически все области FR являются такими, как консенсусная последовательность иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело оптимально также будет содержать по меньшей мере часть константной области иммуноглобулина или домен (например, домен Fc), обычно иммуноглобулина человека. Антитела могут иметь области Fc, модифицированные, как описано в WO 99/58572. Другие формы гуманизированных антител имеют одну или более CDR (одну, две, три, четыре, пять или шесть), которые изменяются по отношению к первоначальному антителу, которые также называются одной или более CDR, "полученными из" одного или более CDR из первоначального антитела.
[0027] Термин "человеческое антитело" означает антитело имеющее аминокислотную последовательность, соответствующую антителу, продуцируемому человеком, и/или полученному с применением любого из способов получения человеческих антител, известных в данной области техники или описанных в данном документе. Это определение человеческого антитела включает антитела, содержащие по меньшей мере один полипептид тяжелой цепи человека или по меньшей мере один полипептид легкой цепи человека. Одним из таких примеров является антитело, включающее мышиную легкую цепь и полипептиды тяжелой цепи человека. Человеческие антитела можно получить, применяя различные методики, известные в данной области техники. В одном варианте реализации изобретения человеческое антитело выбирают из фаговой библиотеки, причем эта фаговая библиотека экспрессирует человеческие антитела (Vaughan и соавт., 1996 год, Nature Biotechnology, 14:309-314; Sheets и соавт., 1998 год, PNAS, (США) 95:6157-6162; Hoogenboom and Winter, 1991 год, J. Mol. Biol., 227:381; Marks и соавт., 1991 год, J. Mol. Biol., 222:581). Человеческие антитела могут быть также получены путем введения локусов иммуноглобулина человека в трансгенных животных, например, мышей, в которых эндогенные гены иммуноглобулина были частично или полностью инактивированы. Этот подход описан в патенте США № 5,545,807; 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; и 5,661,016. В альтернативном варианте, человеческое антитело может быть получено путем иммортализации В-лимфоцитов человека, которые продуцируют антитело, направленное против целевого антигена (такие В-лимфоциты могут быть выделены у индивидуума или могут быть иммунизированы in vitro). См., например, Cole и соавт., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, ст. 77 (1985 год); Boerner и соавт., 1991 год, J. Immunol., 147 (1):86-95; и патент США № 5,750,373.
[0028] "Вариабельная область" (термин "вариабельный домен" может применяться в данном документе взаимозаменяемо) антитела относится к вариабельной области легкой цепи антитела (VL) или вариабельной области тяжелой цепи антитела (VH), как по отдельности, так и в сочетании. Вариабельные области тяжелой и легкой цепи (домены VH и VL, соответственно) каждая состоит из четырех каркасных областей (FR), связанных тремя областями, определяющими комплементарность (CDR), также известными как гипервариабельные области. CDR в каждой цепи удерживаются вместе в непосредственной близости от FR и с CDR из другой цепи способствуют образованию антигенсвязывающего сайта антител. Существует как минимум два метода определения CDR:(1) подход, основанный на межвидовый вариабельности последовательностей (то есть, Kabat и соавт. Sequences of Proteins of Immunological Interest, (5-е изд., 1991 год, National Institutes of Health, Бетесда, штат Мэриленд); и (2) подход, основанный на кристаллографических исследованиях комплексов антиген-антитело (Al-lazikani и соавт., (1997 год) J. Molec. Biol. 273:927-948)). В данном документе CDR может относиться к CDR, определенным либо подходом, либо комбинацией обоих подходов.
[0029] Ряд описаний HVR применяется и охватывается в данном документе. Области, определяющие комплементарность (CDR) по Кабату основаны на вариабельности последовательности и применяются наиболее часто (Kabat и соавт., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е Изд. Public Health Service, National Institutes of Health, Бетесда, штат Мэриленд. (1991 год)). Вместо этого, Chothia обращает внимание на локализацию структурных петель (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987 год)). HVR АтМ представляют собой компромисс между HVR по Кабату и структурными петлями по Чотии и используются программным обеспечением для моделирования антител АтМ от Oxford Molecular. "Контакт" HVR основан на анализе имеющихся комплексов кристаллических структур. Остатки от каждого из этих HVR отмечены ниже.
Петля Кабат АтМ Чотиа Контакт
L1 L24-L34 L24-L34 L26-L32 L30-L36
L2 L50-L56 L50-L56 L50-L52 L46-L55
L3 L89-L97 L89-L97 L91-L96 L89-L96
H1 H31-H35B H26-H35B H26-H32 H30-H35B (нумерация по Кабату)
H1 H31-H35 H26-H35 H26-H32 H30-H35 (нумерация по Чотиа)
H2 H50-H65 H50-H58 H53-H55 H47-H58
H3 H95-H102 H95-H102 H96-H101 H93-H101
[0030] Система нумерации по Кабату обычно применяется для названия остатка в вариабельном домене (приблизительно остатки 1-107 легкой цепи и остатки 1-113 тяжелой цепи) (например, Kabat и соавт., Sequences of Immunological Interest. 5-е Изд. Public Health Service, National Institutes of Health, Бетесда, штат Мэриленд. (1991 год)). Как правило, "система нумерации EU" или "индекс EU" применяется, когда речь идет об остатке в константной области тяжелой цепи иммуноглобулина (например, индекс EU, описанный в Kabat и соавт., выше, или и Edelman, G. M. и соавт. (1969 год) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 63:78-85).
[0031] "Fv" как применяется в данном документе, может относиться к минимальному фрагменту антитела, который содержит полный сайт распознавания и связывания антигена. Этот фрагмент обычно состоит из димера одного домена вариабельной области тяжелой цепи и одного домена вариабельной области легкой цепи в плотной, нековалентной связи. В результате фолдинга этих двух доменов получаются шесть гипервариабельных петель (по 3 петли из H и L-цепи), которые вносят аминокислотные остатки для связывания антигена и придают антигенсвязывающую специфичность к антителу. Однако даже один вариабельный домен (или половина Fv, содержащий только три HVR, специфичных для антигена), обладает способностью распознавать и связывать антиген, хотя и с более низкой аффинностью, чем весь сайт связывания.
[0032] "Константная область" (термин "константный домен" может применяться в данном документе взаимозаменяемо) антитела относится к константной области легкой цепи антитела (СL) или константной области тяжелой цепи антитела (CH), как по отдельности, так и в сочетании. Константная область антитела обычно обеспечивает структурную стабильность и другие биологические функции, такие как ассоциация цепей антител, секреция, трансплацентарная мобильность и связывание комплемента, но не вовлечена в связывание с антигеном. Аминокислотная последовательность и соответствующие последовательности экзонов в генах константной области зависят от вида, из которого они получены; однако вариации в аминокислотной последовательности, приводящие к аллотипам, относительно ограничены для конкретных константных областей внутри вида. Вариабельная область каждой цепи соединяется с константной областью посредством связывающей полипептидной последовательности. Связывающая последовательность кодируется последовательностью "J" в гене легкой цепи и сочетанием последовательности "D" и последовательности "J" в гене тяжелой цепи. В зависимости от изотипа антитела константная область тяжелой цепи может включать в себя домен CH1, шарнирную область, домен CH2, домен CH3 и/или домен CH4. В некоторых вариантах реализации изобретения константная область тяжелой цепи содержит домен CH1, шарнирную область, домен CH2 и домен CH3.
[0033] Термин "область Fc " (термин "домен Fc" может быть использован в данном документе взаимозаменяемо) в данном документе применяется для определения С-концевой области тяжелой цепи иммуноглобулина, в том числе нативной последовательности областей Fc и вариантов областей Fc. Границы области Fc тяжелой цепи иммуноглобулина могут варьироваться; в некоторых вариантах реализации изобретения область Fc может включать одну или более аминокислот шарнирной области. В некоторых вариантах реализации изобретения область Fc тяжелой цепи IgG человека имеет протяженность от аминокислотного остатка в положении 216 по EU до его карбоксильного конца. Подходящие нативные последовательности областей Fc для применения в антителах по данному изобретению включают человеческие IgG1, IgG2 (IgG2A, IgG2B), IgG3 и IgG4.
[0034] "Одноцепочечный Fv" также сокращенно обозначаемый как "sFv" или "scFv" являются фрагментами антител, которые содержат домены VH и VL антител, связанные в одну полипептидную цепь. Предпочтительно полипептид sFv дополнительно содержит полипептидный линкер между доменами VH и VL, который позволяет sFv формировать желаемую структуру для связывания антигена. Для обзора sFv см., Pluckthun в The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, том. 113, Rosenburg and Moore ред., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994 год).
[0035] Термин "диатела" относится к фрагментам антител, полученным путем конструирования фрагментов sFv (см. предыдущий параграф) с помощью коротких линкеров (например, около 5-12 остатков) между доменами VH и VL, так что достигается межцепочечное, но не внутрицепочечное спаривание доменов V, в результате чего получается двухвалентный фрагмент, то есть, фрагмент, имеющий два антигенсвязывающих сайта. Биспецифические диатела представляют собой гетеродимеры двух "кроссоверных" фрагментов sFv, в которых присутствуют домены VH and VL двух антител на разных полипептидных цепях. Диатела описаны более подробно в, например, EP 404,097; WO 93/11161; Hollinger и соавт., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993 год).
[0036] "Процент (%) идентичности аминокислотной последовательности" по отношению к последовательностям эталонных полипептидов определяют как процентное содержание аминокислотных остатков в кандидатной последовательности, идентичных аминокислотным остаткам в конкретной последовательности эталонного полипептида после выравнивания последовательностей и, при необходимости, внедрения разрывов для достижения максимальной процентной идентичности последовательности, без учета консервативных замен как части идентичности последовательностей. Выравнивание для целей определения процентной идентичности аминокислотных последовательностей можно осуществить различными способами, известными специалистам в данной области техники, например, используя общедоступное компьютерное программное обеспечение, например, программное обеспечение BLAST, BLAST-2, ALIGN или Megalign (DNASTAR). Специалисты в данной области техники могут определить соответствующие параметры выравнивания последовательностей, включая алгоритмы, необходимые для достижения максимального выравнивания по всей длине сравниваемых последовательностей.
[0037] В данном документе термин "антителозависимая клеточноопосредованная цитотоксичность" и "АЗКЦ" относится к реакции, опосредованной клетками, в которой неспецифические цитотоксические клетки, которые экспрессируют рецепторы Fc (FcR) (например, естественные клетки-киллеры (NK), нейтрофилы или макрофаги) распознают связанное антитело на целевой клетке и впоследствии вызывают лизис целевой клетки. Активность АЗКЦ молекулы, представляющей интерес может быть оценена с применением анализа АЗКЦ in vitro, такого как описанный в патенте США № 5,500,362 или 5,821,337. Эффекторные клетки, пригодные для такого анализа, включают мононуклеары периферической крови (PBMC) и NK-клетки. В качестве альтернативы или дополнения, активность АЗКЦ молекулы, представляющей интерес, можно оценить in vivo, например, на животной модели, например, согласно описанию, в публикации Clynes и соавт., 1998 год, PNAS (США), 95:652-656.
[0038] Термин "комплементзависимая цитотоксичность" или "КЗЦ" относится к лизированию цели в присутствии комплемента. Путь активации комплемента инициируется связыванием первого компонента системы комплемента (C1q) с молекулой (например, антителом) в комплексе с родственным антигеном. Для оценки активации комплемента можно выполнить анализ КЗЦ, например, как описано в публикации Gazzano-Santoro и соавт., J. Immunol. Methods, 202:163 (1996 год).
[0039] Термины "полипептид", "олигопептид", "пептид" и "белок" применяются в данном документе взаимозаменяемо для обозначения полимеров аминокислот любой длины. Полимер может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты, и в него можно встроить неаминокислоты. Термины также включают аминокислотный полимер, который был модифицирован естественным путем или путем вмешательства; например, образованием дисульфидных связей, гликозилированием, липидацией, ацетилированием, фосфорилированием или любыми другими манипуляциями или модификациями, такими как конъюгация с меченым компонентом. Также в определение включены, например, полипептиды, содержащие один или более аналогов аминокислоты (включая, например, неестественные аминокислоты и тому подобное), а также другие модификации, известные в данной области техники. Понятно, что, поскольку полипептиды по данному описанию основаны на четырехвалентном антителе, полипептиды могут встречаться в виде отдельных цепей или связанных цепей.
[0040] "Полинуклеотид" или "нуклеиновая кислота", применяемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полимерам нуклеотидов любой длины и включают ДНК и/или РНК. Нуклеотиды могут быть дезоксирибонуклеотидами, рибонуклеотидами, модифицированными нуклеотидами или основаниями и/или их аналогами или любым субстратом, который может быть включен в полимер ДНК или РНК-полимеразой. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и их аналоги. Если имеет место, то модификация структуры нуклеотида может быть внесена до или после сборки полимера. Последовательность нуклеотидов может быть прервана ненуклеотидными компонентами. Полинуклеотид может быть дополнительно модифицирован после полимеризации, например, путем конъюгации с меченым компонентом. Другие типы модификаций включают, например, "кэпы", замещение одного или более естественных нуклеотидов аналогами, межнуклеотидные модификации, такие как, например, с незаряженными связями (например, метилфосфонаты, фосфотриэфиры, фосфоамидаты, кабаматы и и тому подобное) и с заряженными связями (например, фосфоротиоаты, фосфородитиоаты и тому подобное), теми, которые содержат боковые фрагменты, такие как, например, белки (например, нуклеазы, токсины, антитела, сигнальные пептиды, ply-L-лизин и тому подобное), с интеркаляторами (например, акридином, псораленом и тому подобным), содержащими хелаторы (например, металлы, радиоактивные металлы, бор, окислительные металлы итому подобное), теми, которые содержат алкилаторы, с модифицированными связями (например, альфа-аномерные нуклеиновые кислоты и тому подобное), а также немодифицированные формы полинуклеотида(ов). Кроме того, любая из гидроксильных групп, обычно присутствующих в сахарах, может быть заменена, например, фосфонатными группами, фосфатными группами, защищена стандартными защитными группами или активирована для получения дополнительных связей с дополнительными нуклеотидами или может быть конъюгирована с твердыми носителями. 5' и 3'-концы ОН могут быть фосфорилированы или замещены аминами или частями органической кепирующей группы от 1 до 20 атомов углерода. Другие гидроксилы также могут быть производными до стандартных защитных групп. Полинуклеотиды также могут содержать аналогичные формы сахаров рибозы или дезоксирибозы, которые обычно известны в данной области техники, включая, например, 2'-O-метил-, 2'-O-аллил, 2'-фтор- или 2'-азидо-рибозу, аналоги карбоциклического сахара, α-аномерные сахара, эпимерные сахара, такие как арабиноза, ксилозы, ликсосы, пиранозные сахара, фуранозные сахара, седогептулозы, ациклические аналоги и аналогии с нуклеозидов с удаленным азотистым основанием, такие как метилрибозиды. Одна или более фосфодиэфирных связей могут быть заменены альтернативными связующими группами. Эти альтернативные связывающие группы включают, но не ограничиваются ими, варианты реализации изобретения в которых фосфат заменен на P(O)S ("тиоат"), P(S)S ("дитиоат"), (O)NR2 ("амидат"), P(O)R, P(O)OR', CO или CH2 ("формацеталь"), где каждый R или R' независимо представляет собой H или замещенный, или незамещенный алкил (1-20 C), необязательно содержащий эфирную (-O-) связь, арил, алкенил, циклоалкил, циклоалкенил или арадил. Не все связи в полинуклеотиде должны быть одинаковыми. Предыдущее описание относится ко всем полинуклеотидам, указанным в данном документе, включая РНК и ДНК.
[0041] В данном документе термин "вектор" означает конструкцию, которая способна доставлять и экспрессировать на желаемом уровне один или более ген(нов) или последовательность(и), представляющую интерес в клетке-хозяине. Примеры векторов включают, но не ограничиваются ими, вирусные векторы, векторы экспрессии голой ДНК или РНК, векторы плазмиды, космиды или фага, векторы экспрессии ДНК или РНК, связанные с катионными конденсирующими агентами, векторы экспрессии ДНК или РНК, инкапсулированные в липосомы, и определенные эукариотические клетки, такие как клетки-продуценты.
[0042] В данном документе термин "последовательность контроля экспрессии" означает последовательность нуклеиновой кислоты, которая направляет транскрипцию нуклеиновой кислоты. Последовательность контроля экспрессии может быть промотором, таким как конститутивный или индуцибельный промотор, или энхансером. Последовательность контроля экспрессии функционально связана с последовательностью нуклеиновой кислоты, подлежащей транскрибированию.
[0043] В данном документе термин "эффективная доза" или "терапевтически эффективное количество" лекарственного средства, соединения или фармацевтической композиции представляет собой количество, достаточное для получения полезных, желаемых и/или терапевтических результатов. Для профилактического применения полезные или желаемые результаты включают такие результаты, как устранение или снижение риска, уменьшение тяжести или задержку начала заболевания, включая биохимические, гистологические и/или поведенческие симптомы заболевания, его осложнения и промежуточные патологические фенотипы, возникающие при развитии заболевания. Для терапевтического применения полезные или желаемые результаты включают клинические результаты, такие как уменьшение одного или более симптомов, возникающих в результате заболевания, повышение качества жизни людей, страдающих этим заболеванием, уменьшение дозы других лекарственных средств, необходимых для лечения болезни, повышение эффекта другого лекарственного средства, например, посредством нацеливания, задержку прогрессирования заболевания и/или продление выживания. В случае лечения человека, ожидающего трансплантации, например, эффективное количество лекарственного средства может в определенной степени снизить уровень аллоантител и/или PRA у человека. В случае лечения человека, получающего трансплантацию или переливание, эффективное количество лекарственного средства может оказывать влияние и/или облегчать в какой-то мере один или более симптомов, или патологических состояний (таких как отторжение трансплантата), связанных с трансплантацией или переливанием. Эффективное количество можно вводить в одном или более введениях. Для целей данного описания эффективное количество лекарственного средства, соединения или фармацевтической композиции представляет собой количество, достаточное для проведения профилактического или терапевтического лечения прямо или косвенно. Эффективную дозу можно вводить в одном или более введениях. Для целей данного описания эффективная доза лекарственного средства, соединения или фармацевтической композиции представляет собой количество, достаточное для проведения профилактического или терапевтического лечения прямо или косвенно. Как понятно в клиническом контексте, эффективная доза лекарственного средства, соединения или фармацевтической композиции может быть достигнута или может не быть достигнута в сочетании с другим лекарственным средством, соединением или фармацевтической композицией. Таким образом, "эффективная доза" может быть рассмотрена в контексте введения одного или более терапевтических агентов, и один агент может считаться предоставленным в эффективном количестве, если в сочетании с одним или более другими агентами желательный результат может быть достигнут или достигнут.
[0044] В данном документе термин "в сочетании с" относится к применению одного способа лечения в дополнение к другому способу лечения. Таким образом, "в сочетании с" относится к применению одного метода лечения до, во время или после применения другого способа лечения индивидуума.
[0045] В данном документе термин "лечение" или "лечить" представляет собой подход для получения полезных или желаемых результатов, включая желательные клинические результаты. Полезные, желаемые и/или терапевтические клинические результаты включают, но не ограничиваются ими, одно или более из следующих: уменьшение или подавление одного или более симптомов воспаления или аутоиммунности (например, вызванных опосредованным Т-клетками воспалительным заболеванием), повышение вероятности успешного результата лечения пациента и/или уменьшение одного или более противопоказаний или вредных последствий, связанных с лечением (например, связанных с трансплантацией или переливанием), уменьшение симптомов, вызванных заболеванием, повышение качества жизни тех, кто страдает из-за болезни, уменьшение дозы других лекарственных средств, необходимых для лечения заболевания, задержку развития заболевания и/или увеличение выживаемости индивидуумов.
[0046] В данном документе термин "задержка развития болезни" означает отложение, затруднение, замедление, отставание, стабилизацию и/или отсрочку развития болезни (такой как рак). Эта задержка может быть разной продолжительности, в зависимости от истории болезни и/или индивидуума, который получает лечение. Как очевидно специалисту в данной области техники, достаточная или значительная задержка может, по сути, включать профилактику, поскольку заболевание не развивается у индивидуума. Например, симптом воспалительного заболевания, такого как опосредованное Т-клетками воспалительное заболевание, может задерживаться.
[0047] "Индивид" или "субъект" является млекопитающим, более желательно человеком. Млекопитающие также включают, но не ограничиваются ими, сельскохозяйственных животных, спортивных животных, домашних животных (таких как кошки, собаки или лошади), приматов, мышей и крыс.
[0048] В данном документе термин "специфически распознает" или "специфически связывает" относится к измеримым и воспроизводимым взаимодействиям, таким как притяжение или связывание между целью и антителом (например, полноразмерным антителом, фрагментом антитела или единицей связывания VH-VL антитела), которое является определяющим для присутствия цели в присутствии гетерогенной популяции молекул, включая биологические молекулы. Например, антитело, фрагмент антитела или единица связывания VH-VL антитела, которое специфически или предпочтительно связывается с эпитопом, представляет собой антитело, которое связывает этот эпитоп с большей аффинностью, авидностью, более легко и/или с большей продолжительностью, чем оно связывается с другими эпитопами цели или нецелевыми эпитопами. Также понятно, прочитав это определение, что, например, антитело, фрагмент антитела или единица связывания VH-VL антитела, которое специфически или предпочтительно связывается с первой целью, может или не может специфически или предпочтительно связываться со второй целью. Таким образом, "специфическое связывание" или "предпочтительное связывание" необязательно требует (хотя и может включать) исключительного связывания. Антитело, фрагмент антитела или единица связывания VH-VL антитела, которое специфически связывается с мишенью, может иметь константу ассоциации, больше чем или около 10 3 M -1 или около 10 4 M -1, иногда около 10 5 M -1 или около 10 6 M -1, в других случаях около 10 6 M -1 или около 10 7 M -1, от около 10 8 M -1 до около 10 9 M -1, или от около 10 10 M -1 до около 10 11 M -1 или выше. Для выбора антител, фрагментов антител или единиц связывания VH-VL антител, которые специфически иммунореактивны с конкретным белком, могут быть применены различные форматы иммуноанализа. Например, твердофазные иммуноанализы ИФА обычно применяются для отбора моноклональных антител, специфически иммунореактивных с белком. См., например, Harlow and Lane (1988 год) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, Нью-Йорк, для описания форматов иммуноанализа и условий, которые могут быть применены для определения специфической иммунореактивности.
[0049] "Листок-вкладыш" относится к инструкциям, обычно включенным в коммерческие упаковки лекарственных средств, которые содержат информацию о показаниях, обычно включаемых в коммерческие упаковки лекарственных средств, которые содержат информацию о показаниях, применении, дозировке, введению, противопоказаниях, других лекарственных средствах, которые должны быть объединены с упакованным продуктом, и/или предупреждениях, касающихся применения таких медикаментов, и тому подобное.
[0050] В данном документе и в прилагаемой формуле изобретения, формы единственного числа включают множественное число, если из контекста явно не следует иное. Например, ссылка на "антитело" представляет собой ссылку на от одного до многих антител, такую как молярные количества, и включает их эквиваленты, известные специалистам в данной области техники, и так далее.
[0051] Ссылка на "около" значения или параметра включает в себя (и описывает) варианты реализации изобретения по данному документу, которые направлены на это значение или параметр как таковой. Например, описание, относящееся к "около X", включает описание "X".
[0052] Подразумевается, что аспект и варианты данного описания, описанные в данном документе, включают "состоящий" и/или "состоящий в основном из" аспектов и вариаций.
II. Четырехвалентные антитела
[0053] Некоторые аспекты данного описания относятся к четырехвалентным антителам, которые специфически связываются с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает димер двух мономеров. Как описано ниже, мономеры могут быть соединены с применением любых способов, известных в данной области техники, включая без ограничения взаимодействия дикого типа между доменами или областями Fc антитела, измененные или мутированные взаимодействия между доменами или областями Fc антитела (например, с применением мутации в шарнирной области, описанной в данном документе) или других искусственных ковалентных или нековалентных взаимодействий (например, перекрестное связывание или линкер). Типовые четырехвалентные антитела и форматы антител описаны ниже и проиллюстрированы на Фиг. 1A и 1B.
[0054] Человеческий PSGL-1 можно также назвать лигандом селектина P, SELPG, CLA, CD162 или PSGL1. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению связывается с полипептидом, кодируемым геном SELPG человека, например, как описано в NCBI RefSeq Gene ID № 6404. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению связывается с полипептидом PSGL-1 человека, содержащим 15 или 16 декамерных повторов. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению связывается с полипептидом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению связывается с полипептидом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению связывается с полипептидом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31 и связывается с полипептидом, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32. Аминокислотная последовательность SEQ ID NO: 31 отображает полноразмерный человеческий PSGL-1, номер доступа GenBank™ AAA74577. 1, GL902797, а аминокислотная последовательность SEQ ID NO: 32 отображает более короткий 402 аминокислотный человеческий белок PSGL-1 (номер доступа GenBank™ XP_005269133). В конкретных вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело, описанное в данном документе, специфически связывается с человеческим PSGL-1, как определено, например, с помощью ИФА или другого антигенсвязывающего анализа, известного в данной области техники или описанного в данном документе.
[0055] В некоторых вариантах реализации изобретения домен VH и домен VL по данному изобретению образуют единицу связывания VH-VL (например, которая специфически связывает эпитоп, такой как эпитоп человеческого PSGL-1). Как описано в данном документе, единица связывания VH-VL может быть образована между доменом VH и доменом VL с применением взаимодействий VH-VL дикого типа, или единица связывания VH-VL может быть дополнительно стабилизирована с применением одной или более мутаций, или химических связей (например, дисульфидной связи, такой как дисульфидная связь vH44-vL100 вводимой цистеиновыми заменами, в домен VH и VL SEQ ID NOs:29 и 30, соответственно).
[0056] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению содержит димер двух мономеров, где каждый мономер димера содержит одноцепочечный полипептид.
[0057] В некоторых вариантах реализации изобретения полипептид с одной цепью, тяжелой цепью и/или легкой цепью по данному изобретения содержит линкерную последовательность. Можно соответствующим образом применять множество линкерных последовательностей, например, для связывания доменов VH и VL единицы связывания VH-VL, чтобы связать домен VH или VL единицы связывания VH-VL с доменом VH или VL другой единицы связывания VH-VL или связать домен VH или VL единицы связывания VH-VL с константной областью антитела, такой как домен или область Fc. В некоторых вариантах реализации изобретения линкер по данному описанию может присутствовать между доменами или областями. В некоторых вариантах реализации изобретения два домена или области по данному описанию могут быть объединены без линкера, или линкер, соединяющий два домена или области, может быть удален. Связывание таких одноцепочечных фрагментов с применением различных линкеров описано в Kortt и соавт., 1997 год, Protein Engineering, 10:423-433. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит 1-50 аминокислот. В определенных вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит 5-12 аминокислот. Типовые последовательности линкеров описаны в данном документе и проиллюстрированы на Фиг. 1A. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит один или более повторов аминокислотной последовательности ggggs (SEQ ID NO: 25). В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит один, два, три, четыре или пять повторов аминокислотной последовательности ggggs (SEQ ID NO: 25). В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, 34, 35 или 36. В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность ggggsaaa (SEQ ID NO: 26). В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность astgs (SEQ ID NO: 27). В некоторых вариантах реализации изобретения последовательность линкера по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность astgsggggs (SEQ ID NO: 28).
[0058] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению содержит димер двух одноцепочечных диател (scDb), которые могут быть необязательно слиты с константной областью антитела, такой как домен Fc.
[0059] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый мономер димера содержит одноцепочечный полипептид, содержащий (a) два вариабельных домена легкой цепи (VL), при этом каждый из двух доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, и при этом указанные два домена VL являются специфичными к человеческому PSGL-1; (b) два вариабельных домена тяжелой цепи (VH), при этом каждый из двух доменов VH содержит CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3 и при этом два домена VH специфичны к человеческому PSGL-1; и (c) домен Fc антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH двух доменов VH.
[0060] В определенных вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VL двух доменов VL; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VH двух доменов VH; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VL двух доменов VL; (f) третью последовательность линкера; (g) второй домен VH двух доменов VH; (h) четвертую последовательность линкера; и (i) домен Fc антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения первый домен VL образует единицу связывания VH-VL со вторым доменом VH, а первый домен VH образует единицу связывания VH-VL со вторым доменом VL.
[0061] В некоторых вариантах реализации изобретения первая, вторая и третья последовательности линкеров каждая содержит два или более повторов аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения первая, вторая или третья последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, 34, 35 или 36. В некоторых вариантах реализации изобретения первая и третья последовательности линкеров имеют одинаковую последовательность и содержат два повтора SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения четвертая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
[0062] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению содержит димер двух единиц тандемных одноцепочечных вариабельных фрагментов (scFv) (называемых taFv для тандемного scFv), которые могут быть необязательно слиты с константным доменом антитела, таким как домен Fc константной области тяжелой цепи.
[0063] В определенных вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VH двух доменов VH; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VL двух доменов VL; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VL двух доменов VL; (f) третью последовательность линкера; (g) второй домен VH двух доменов VH; (h) четвертую последовательность линкера; и (i) домен Fc антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения первый домен VL образует единицу связывания VH-VL со первым доменом VH, а второй домен VH образует единицу связывания VH-VL со вторым доменом VL. В других вариантах реализации изобретения каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VL двух доменов VL; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VH двух доменов VH; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VH двух доменов VH; (f) третью последовательность линкера; (g) второй домен VL двух доменов VL; (h) четвертую последовательность линкера; и (i) константный домен тяжелой цепи, содержащий домен Fc антитела.
[0064] В некоторых вариантах реализации изобретения первая и третья последовательности линкеров имеют одинаковую последовательность, содержащую пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27. В некоторых вариантах реализации изобретения четвертая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
[0065] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению содержит димер двух мономеров, где каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела.
[0066] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает легкую цепь, содержащую (i) два вариабельных домена легкой цепи (VL), при этом каждый из двух доменов VL содержит CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, и при этом два домена VL специфичны к человеческому PSGL-1, (ii) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и (iii) константный домен легкой цепи (CL); и/или тяжелую цепь, содержащую (i) второй вариабельный домен тяжелой цепи (VH), и (ii) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3). В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VH каждый содержат CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VH специфичны к человеческому PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из двух доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH.
[0067] В определенных вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VH; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VL двух или более доменов VL; (d) вторую последовательность линкера; (e) второй домен VL двух или более доменов VL; и (f) домен CL. В некоторых вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL каппа. В других вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL лямбда. В некоторых вариантах реализации изобретения первый домен VL образует единицу связывания VH-VL со первым доменом VH, а второй домен VH образует единицу связывания VH-VL со вторым доменом VL.
[0068] В некоторых вариантах реализации изобретения первая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28.
[0069] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя легкую цепь, содержащую от N-конца к С-концу:(a) первый домен VL двух доменов VL; (b) домен CL; (c) первую последовательность линкера; (d) первый домен VH; (e) вторую последовательность линкера; и (f) второй домен VL двух доменов VL. В некоторых вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL каппа. В других вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL лямбда.
[0070] В некоторых вариантах реализации изобретения первая последовательность линкера содержит два повтора SEQ ID NO: 25. В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25.
[0071] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя тяжелую цепь, содержащую от N-конца к С-концу:(a) второй из двух доменов VH; и (b) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3). В некоторых вариантах реализации изобретения домен Fc антитела содержит константный домен 2 тяжелой цепи (CH2) и константный домен 3 тяжелой цепи (CH3). В некоторых вариантах реализации изобретения первый домен VL образует единицу связывания VH-VL со первым доменом VH, а второй домен VH образует единицу связывания VH-VL со вторым доменом VL.
[0072] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя легкую цепь, содержащую (i) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и (ii) первый вариабельный домен легкой цепи (VL), и (iii) константный домен легкой цепи (CL); и/или тяжелую цепь, содержащую (i) второй вариабельный домен тяжелой цепи (VH), (ii) второй вариабельный домен легкой цепи (VL), и (iii) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3). В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из первого и второго доменов VL содержат CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VL специфичны к человеческому PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из первого и второго доменов VH содержат CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3. В некоторых вариантах реализации изобретения первый и второй домены VH специфичны к человеческому PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из первого и второго доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH.
[0073] В некоторых вариантах реализации изобретения легкая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:(a) первый домен VH; (b) первую последовательность линкера; (c) первый домен VL; и (d) домен CL. В некоторых вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL каппа. В других вариантах реализации изобретения домен CL представляет собой домен CL лямбда.
[0074] В некоторых вариантах реализации изобретения первая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25.
[0075] В некоторых вариантах реализации изобретения тяжелая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:(a) второй из двух доменов VH; и (b) вторую линкерную последовательность; (c) второй из двух доменов VL; и (d) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3). В некоторых вариантах реализации изобретения домен Fc антитела содержит константный домен 2 тяжелой цепи (CH2) и константный домен 3 тяжелой цепи (CH3).
[0076] В некоторых вариантах реализации изобретения вторая последовательность линкера содержит пять повторов SEQ ID NO: 25.
[0077] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или более доменов VH, содержащих одну или более CDR, выбранных из (i) CDR-H1, содержащего аминокислотную последовательность SFGMH (SEQ ID NO: 17); (ii) CDR-H2, содержащего аминокислотную последовательность YINGGSSTIFYANAVKG (SEQ ID NO: 18); и (iii) CDR-H3, содержащего аминокислотную последовательность YASYGGGAMDY (SEQ ID NO: 19). В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или более доменов VH, содержащих (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению представляет собой димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит два домена VH, причем каждый домен VH, содержит одну или более CDR, выбранных из (i) CDR-H1, содержащего аминокислотную последовательность SFGMH (SEQ ID NO: 17); (ii) CDR-H2, содержащего аминокислотную последовательность YINGGSSTIFYANAVKG (SEQ ID NO: 18); и (iii) CDR-H3, содержащего аминокислотную последовательность YASYGGGAMDY (SEQ ID NO: 19). В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению представляет собой димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит два домена VH, причем каждый домен VH, содержит (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19.
[0078] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VH, содержащих аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах реализации изобретения a четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя мономер, содержащий два домена VH, причем каждый домен VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VH, содержащих аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах реализации изобретения a четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя мономер, содержащий два домена VH, причем каждый домен VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29.
[0079] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VH, содержащих последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя два домена VH, причем каждый домен VH содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах реализации последовательность VH, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот SEQ ID NO: 23.
[0080] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VH, содержащих последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя два домена VH, причем каждый домен VH содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах реализации последовательность VH, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот SEQ ID NO: 29.
[0081] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или более доменов VL, содержащих одну или более CDR, выбранных из (i) CDR-L1, содержащего аминокислотную последовательность RSSQSIVHNDGNTYFE (SEQ ID NO: 20); (ii) CDR-L2, содержащего аминокислотную последовательность KVSNRFS (SEQ ID NO: 21); и (iii) CDR-L3, содержащего аминокислотную последовательность FQGSYVPLT (SEQ ID NO: 22). В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или более доменов VL, содержащих (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность RSSQSIVHNDGNTYFE (SEQ ID NO: 20); (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность KVSNRFS (SEQ ID NO: 21); и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность FQGSYVPLT (SEQ ID NO: 22). В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению представляет собой димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит два домена VL, причем каждый домен VL содержит одну или более CDR, выбранных из (i) a CDR-L1, содержащего аминокислотную последовательность RSSQSIVHNDGNTYFE (SEQ ID NO: 20); (ii) CDR-L2, содержащего аминокислотную последовательность KVSNRFS (SEQ ID NO: 21); и (iii) CDR-L3, содержащего аминокислотную последовательность FQGSYVPLT (SEQ ID NO: 22). В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению представляет собой димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит два домена VL, причем каждый домен VL содержит (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность RSSQSIVHNDGNTYFE (SEQ ID NO: 20); (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность KVSNRFS (SEQ ID NO: 21); и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность FQGSYVPLT (SEQ ID NO: 22).
[0082] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VL, содержащих аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах реализации изобретения a четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя мономер, содержащий два домена VL, причем каждый домен VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VL, содержащих аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах реализации изобретения a четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя мономер, содержащий два домена VL, причем каждый домен VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30.
[0083] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VL, содержащих последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя два домена VL, причем каждый домен VL содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах реализации последовательность VL, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот SEQ ID NO: 24.
[0084] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя один или боле доменов VL, содержащих последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя два домена VL, причем каждый домен VL содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах реализации последовательность VL, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот SEQ ID NO: 30.
[0085] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя одноцепочечный полипептид, содержащий последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1, 3 или 5. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит два одноцепочечных полипептида, причем каждый одноцепочечный полипептид содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1, 3 или 5. В некоторых вариантах реализации последовательность одноцепочечного полипептида, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот SEQ ID NO: 1, 3 или 5. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя два одноцепочечных полипептида, причем каждый содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1, 3 или 5.
[0086] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя одноцепочечный полипептид, содержащий последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную одноцепочечному полипептиду, кодируемому полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 2, 4 или 6. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит два одноцепочечных полипептида, причем каждый одноцепочечный полипептид содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную одноцепочечному полипептиду, кодируемому полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 2, 4 или 6. В некоторых вариантах реализации последовательность одноцепочечного полипептида, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот в одноцепочечном полипептиде, кодируемом полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 2, 4 или 6. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя два одноцепочечных полипептида, причем каждый кодируется полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 2, 4 или 6.
[0087] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя полипептид легкой цепи, содержащий последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7, 9 или 13. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и каждая легкая цепь содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7, 9 или 13. В некоторых вариантах реализации последовательность полипептида легкой цепи, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот SEQ ID NO: 7, 9 или 13. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, где каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела, и каждая легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 9 или 13.
[0088] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя полипептид легкой цепи, содержащий последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную полипептиду легкой цепи, кодируемому полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 8, 10 или 14. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и каждая легкая цепь содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную полипептиду легкой цепи, кодируемому полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 8, 10 или 14. В некоторых вариантах реализации последовательность полипептида легкой цепи, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот в полипептиде легкой цепи, кодируемом полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 8, 10 или 14. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, где каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела, и каждая легкая цепь содержит полипептид легкой цепи, кодируемый полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 8, 10 или 14.
[0089] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя полипептид тяжелой цепи, содержащий последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 11 или 15. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и каждая тяжелая цепь содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 11 или 15. В некоторых вариантах реализации последовательность полипептида тяжелой цепи, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот SEQ ID NO: 11 или 15. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, где каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела, и каждая тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 или 15.
[0090] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя полипептид тяжелой цепи, содержащий последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную полипептиду тяжелой цепи, кодируемому полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 12 или 16. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, причем каждый мономер содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и каждая тяжелая цепь содержит последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную полипептиду тяжелой цепи, кодируемому полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 12 или 16. В некоторых вариантах реализации последовательность полипептида тяжелой цепи, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции по сравнению с эталонной последовательностью, однако антитело к человеческому PSGL-1, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации замещены, вставлены и/или удалены в общей сложности от 1 до 10 аминокислот в полипептиде тяжелой цепи, кодируемом полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 12 или 16. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению включает в себя димер двух мономеров, причем каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела, и каждая тяжелая цепь содержит полипептид легкой цепи, кодируемый полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:12 или 16.
[0091] Данное изобретение охватывает модификации описанных в данном документе антител или полипептидов, включая функционально эквивалентные антитела, которые не оказывают существенного влияния на их свойства и варианты, которые имеют повышенную или уменьшенную активность и/или аффинность. Модификация полипептидов является обычной практикой в данной области техники и не нуждается в подробном описании в данном документе. Примеры модифицированных полипептидов включают полипептиды с консервативными заменами аминокислотных остатков, одной или более делециями или добавлениями аминокислот, которые не оказывают значительного вредного влияния на функциональную активность, или применяют химические аналоги.
[0092] Вставки в аминокислотную последовательность включают N- и/или C-концевые гибриды длиной от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или более остатков, а также вставки одного или более аминокислотных остатков внутри последовательности. Примеры концевых вставок включают антитело с N-концевым остатком метионина или антитело, слитое с меткой эпитопа. Другие вставочные варианты молекулы антитела включают слияние с N- или C-концом антитела фермента или полипептида, что увеличивает период полувыведения антитела из сыворотки крови.
[0093] Варианты замен имеют по меньшей мере один удаленный аминокислотный остаток в молекуле антитела, и другой остаток вставленный на его место. Сайты, представляющие наибольший интерес для мутагенеза с применением замещений, включают гипервариабельные области, но также предполагают изменения FR. Консервативные замены показаны в таблице ниже под заголовком "консервативные замены". Если такие замены приводят к изменению биологической активности, то могут быть введены более существенные изменения, обозначенные как "типовые замены" в таблице ниже или, как описано далее ниже, применительно к аминокислотным классам, а продукты скринированы.
Аминокислотные замены
Исходный остаток | Консервативные замены | Типовые замены |
Ala (A) | Val | Val; Leu; Ile |
Arg (R) | Lys | Lys; Gln; Asn |
Asn (N) | Gln | Gln; His; Asp, Lys; Arg |
Asp (D) | Glu | Glu; Asn |
Cys (C) | Ser | Ser; Ala |
Gln (Q) | Asn | Asn; Glu |
Glu (E) | Asp | Asp; Gln |
Gly (G) | Ala | Ala |
His (H) | Arg | Asn; Gln; Lys; Arg |
Ile (I) | Leu | Leu; Val; Met; Ala; Phe; Норлейцин |
Leu (L) | Ile | Норлейцин; Ile; Val; Met; Ala; Phe |
Lys (K) | Arg | Arg; Gln; Asn |
Met (M) | Leu | Leu; Phe; Ile |
Phe (F) | Tyr | Leu; Val; Ile; Ala; Tyr |
Pro (P) | Ala | Ala |
Ser (S) | Thr | Thr |
Thr (T) | Ser | Ser |
Trp (W) | Tyr | Tyr; Phe |
Tyr (Y) | Phe | Trp; Phe; Thr; Ser |
Val (V) | Leu | Ile; Leu; Met; Phe; Ala; Норлейцин |
[0094] Существенные модификации биологических свойств антитела осуществляются путем выбора замен, которые существенно различаются по их влиянию на поддержание (а) структуры полипептидного остова в области замещения, например, в виде складчатого слоя или спиральной конформации, (b) заряда или гидрофобности молекулы в целевом сайте или (в) объема боковой цепи. Остатки естественного происхождения делятся на группы, основанные на общих свойствах боковой цепи:
(1) Неполярные: Норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) Полярные без заряда: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) Кислые (отрицательно заряженные): Asp, Glu;
(4) Основные (положительно заряженные): Lys, Arg;
(5) Остатки, влияющие на ориентацию цепи: Gly, Pro; и
(6) Ароматические: Trp, Tyr, Phe, His
[0095] Неконсервативные замены производятся путем замены представителя одного из этих классов на представителя другого класса.
[0096] Любой остаток цистеина, не участвующий в поддержании правильной конформации антитела, также можно заменить, обычно серином, для улучшения окислительной стабильности молекулы и предотвращения неправильного перекрестного связывания. И наоборот, цистеиновая связь(и) может быть добавлена к антителу для улучшения его стабильности, в частности когда антитело является фрагментом антитела, таким как фрагмент Fv. Типичные цистеиновые мутации описаны в данном документе (например, мутация G44C домена VH SEQ ID NO: 29 или мутация Q10°C домена VL SEQ ID NO: 30).
[0097] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению содержит домен Fc антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения домен Fc антитела представляет собой домен Fc человека. В определенных вариантах реализации изобретения домен Fc антитела представляет собой домен Fc IgG4 человека.
[0098] В некоторых вариантах реализации изобретения модифицируют один или более аминокислотных остатков в константной области тяжелой цепи и/или константной области легкой цепи антитела. Например, могут быть модифицированы аминокислотные остатки антител, описанные в Примерах. В некоторых вариантах реализации изобретения область Fc антител модифицирована для усиления или уменьшения активности АЗКЦ и/или КЗЦ антител. См., Shields и соавт., J. Biol. Chem. 276:6591-6604 (2001 год); Presta и соавт., Biochem. Soc. Trans. 30:487-490 (2002 год).
[0099] В некоторых вариантах реализации изобретения область Fc антител модифицируется для улучшения образования и/или стабильности димера или для уменьшения гетерогенности димера (например, перетасовки). Было продемонстрировано, что мутация серин на пролин в положении 241 с применением нумерации Кабата (Kabat и соавт. 1991 год, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Пятое издание, U. S. Министерство здравоохранения и социальных служб США, NIH Publication № 91-3242) или в позиции 228 с применением индекса EU (Edelman и соавт., 1969 год, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 63(1):78-85) в шарнирной области человеческого IgG4 приводит к значительному уменьшению образования внутрицепочечной дисульфидной связи, что приводит к уменьшению молекул "полу-антител" IgG4 и уменьшенной гетерогенности/перетасовке молекул IgG4 (Bloom и соавт., 1997 год, Protein Sci, 6:407- 415; Angal и соавт., 1993 год, Molecular Immunology, 30(1):105-108)). Также опубликованы сообщения о том, что эта мутация шарнира может уменьшить перетасовку IgG4 и увеличить период полувыведения молекул IgG4 in vivo (Labrijn, и соавт., 2009 год, Nat Biotechnol 27:767-771; Stubenrauch, и соавт., 2010 год, Drug Metab Dispos 38:84-91). Van der Neut Kolfschoten и соавт., сообщали, что домен CH3 IgG4, а не шарнир кора, преимущественно участвует в реакции обмена Fab-фрагментами (см., Van der Neut Kolfschoten и соавт., 2007 год, Science, 317:1554-1557 ("Van der Neut Kolfschoten") на стр. 1555, col. 2). Van der Neut Kolfschaten сообщил, что обмен домена CH3 IgGl на домен CH3 IgG4 активировал обмен фрагментом Fab для IgGl, в то время как обмен домена CH3 IgG4 аннулировал обмен фрагментом Fab для IgG4 (см., стр. 1555 и Фиг. 2D).
[0100] В конкретном варианте реализации изобретения в данном документе представлены четырехвалентные антитела, которые специфически связываются с PSGL-1 и которые содержат одну или более аминокислотных замен в шарнирной области IgG4, при этом указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент сохраняет специфическое связывание с указанным PSGL-1 и при этом перетасовка IgG4 снижается по сравнению с антителом, содержащим шарнирную область IgG4, не содержащую указанную одну или более аминокислотных замен. В конкретном варианте реализации изобретения шарнирная область IgG4 содержит только одну аминокислотную замену. Примером "шарнирной области человеческого IgG4" является область тяжелой цепи антитела IgG4 между доменами CHI и CH2, как указано в Angal и соавт., 1993 год, Molecular Immunology, 30(1):105-108.
[0101] В конкретном варианте реализации изобретения снижение перетасовки IgG4 определяют путем обнаружения более низкого количества молекул полуантитела или обмена молекулами "плечей", полученных из описанного в данном документе антитела, которые содержат одну или более аминокислотных замен в шарнирной области по сравнению с количеством молекул полуантитела или обмена молекулами "плечей", полученных из молекулы IgG4, содержащей шарнирную область IgG4, не содержащую указанную одну или более аминокислотных замен. Любой известный в данной области техники анализ может быть применен для определения образования полуантител и молекул биспецифических антител. См., например, Van der Neut Kolfschoten и соавт., 2007 год, Science, 317:1554-1557, для примеров анализов для выявления продукции биспецифических антител.
[0102] В конкретном варианте реализации изобретения в данном документе представлены четырехвалентные антитела, которые специфически связываются с PSGL-1 и включают домен Fc IgG4 человека, содержащий аминокислотную замену серина на пролин в аминокислотном положении 228 тяжелой цепи, пронумерованной в соответствии с индексом EU (также известное как положение 241 с применением нумерации Кабата).
[0103] Модификации включают также гликозилированные и негликозилированные полипептиды, а также полипептиды с другими посттрансляционными модификациями, такими как, например, гликозилирование различными сахарами, ацетилирование и фосфорилирование. Антитела гликозилируются в консервативных положениях в их константных областях (Jefferis and Lund, 1997 год, Chem. Immunol. 65:111-128; Wright and Morrison, 1997 год, TibTECH 15:26-32). Олигосахаридные боковые цепи иммуноглобулинов влияют на функцию белка (Boyd и соавт., 1996 год, Mol. Immunol. 32:1311-1318; Wittwe and Howard, 1990 год, Biochem. 29:4175-4180) и внутримолекулярное взаимодействие между частями гликопротеина, которое может влиять на конформацию и представляет собой трехмерную поверхность гликопротеина (Hefferis and Lund, выше; Wyss and Wagner, 1996 год, Current Opin. Biotech. 7:409-416). Олигосахариды могут также применяться для нацеливания данного гликопротеина на определенные молекулы на основе конкретных распознающих структур. Сообщалось также, что гликозилирование антител влияет на антителозависимую клеточную цитотоксичность (АЗКЦ). В частности, клетки СНО с регулируемой тетрациклином экспрессией β(1,4)-N-ацетилглюкозаминилтрансферазы III (GnTIII), катализирующие гликозилтрансферазой образование биссектирующего N-ацетилглюкозамина (GlcNAc), как сообщается, улучшают активность АЗКЦ (Umana и соавт. 1999 год, Mature Biotech. 17:176-180).
[0104] Гликозилирование антител обычно является либо N-связанным, либо O-связанным. N-связанное относится к присоединению углеводного фрагмента к боковой цепи аспарагинового остатка. Трипептидные последовательности аспарагин-X-серин, аспарагин-X-треонин и аспарагин-X-цистеин, где X представляет собой любую аминокислоту, кроме пролина, являются последовательностями распознавания для ферментативного присоединения углеводного фрагмента к боковой цепи аспарагина. Таким образом, присутствие любой из этих трипептидных последовательностей в полипептиде создает потенциальный сайт гликозилирования. O-связанное гликозилирование относится к присоединению одного из сахаров N-ацетилгалактозамина, галактозы или ксилозы к гидроксиаминокислоте, чаще всего к серину или треонину, хотя также могут быть применены 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин.
[0105] Добавление сайтов гликозилирования к антителу обычно осуществляют путем изменения аминокислотной последовательности таким образом, чтобы она содержала одну или более описанных выше трипептидных последовательностей (для сайтов N-связанных сайтов гликозилирования). Изменение может также быть сделано добавлением, или замещением, одного или более остатков серина или треонина в последовательность исходного антитела (для сайтов с O-связанным гликозилированием).
[0106] Профиль гликозилирования антител также может быть изменен без изменения лежащей в их основе нуклеотидной последовательности. Гликозилирование во многом зависит от клетки-хозяина, применяемой для экспрессии антитела. Поскольку тип клеток, применяемый для экспрессии рекомбинантных гликопротеинов, например, антител, в качестве потенциальной терапии редко является нативной клеткой, можно ожидать изменений в профиле гликозилирования антител (см., например, Hse и соавт., 1997 год, J. Biol. Chem. 272:9062-9070).
[0107] В дополнение к выбору клеток-хозяев факторы, которые влияют на гликозилирование при рекомбинантном продуцировании антител, включают в себя режим роста, состав культуральной среды, плотность культуры, оксигенацию, рН, схемы очистки и тому подобное. Предложены различные способы изменения профиля гликозилирования, достигнутого в конкретном организме-хозяине, включая введение или сверхэкспрессирование определенных ферментов, участвующих в производстве олигосахаридов (патенты США № 5,047,335; 5,510,261; и 5,278,299). Гликозилирование или определенные типы гликозилирования могут быть ферментативно удалены из гликопротеина, например, с использованием эндогликозидазы H (Эндо H), N-гликозидазы F, эндогликозидазы F1, эндогликозидазы F2 или эндогликозидазы F3. Кроме того, рекомбинантная клетка-хозяин может быть генетически сконструированной, чтобы быть дефектной при производстве некоторых типов полисахаридов. Эти и подобные методы хорошо известны в данной области техники.
[0108] В некоторых вариантах реализации изобретения антитело по данному изобретению модифицировано с применением методов связывания, известных в данной области техники, включая, но не ограничиваясь ими, ферментативные средства, окислительное замещение и хелатирование. Модификации могут применяться, например, для прикрепления меток для иммуноанализа.
[0109] Четырехвалентное антитело или полипептид по данному изобретению могут быть конъюгированы (например, связаны) с агентом, таким как терапевтический агент или метка. Примерами терапевтических агентов являются радиоактивные фрагменты, цитотоксины и химиотерапевтические молекулы.
[0110] Четырехвалентное антитело (или полипептид) по данному изобретению может быть связано с меткой, такой как флуоресцентная молекула, радиоактивная молекула, фермент или любые другие метки, известные в данной области техники. Применяемый в данном документе термин "метка" относится к любой молекуле, которая может быть выявлена. В определенном варианте реализации изобретения антитело может быть помечено путем введения радиоактивно меченной аминокислоты. В определенном варианте реализации изобретения биотиновые фрагменты, которые могут быть обнаружены помеченным авидином (например, стрептавидином, содержащим флуоресцентный маркер или ферментативную активность, которые могут быть обнаружены оптическими или колориметрическими методами) могут быть присоединены к антителу. В некоторых вариантах реализации изобретения метка может быть включена или присоединена к другому реагенту, который, в свою очередь, связывается с антителом, представляющим интерес. Например, метка может быть включена или присоединена к антителу, которое, в свою очередь, специфически связывает антитело, представляющее интерес. В некоторых вариантах реализации изобретения метка или маркер также могут быть терапевтическими. Могут быть применены различные способы маркировки полипептидов и гликопротеинов, известные в данной области техники. Некоторые общие классы меток включают, но не ограничиваются ими, ферментативные, флуоресцентные, хемилюминесцентные и радиоактивные метки. Примеры меток для полипептидов включают, но не ограничиваются ими, следующие: радиоизотопы и радионуклеотиды (например,3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I или 131I), флуоресцентные метки (например, флуоресцеин-изотиоцианат (FITC), родамин, люминофоры на основе комплексов лантанидов или фикоэритрин (PE)), ферментативные метки (например, пероксидазу хрена, β-галактозидазу, люциферазу, щелочную фосфатазу, глюкозооксидазу, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназу, алкогольдегидрогеназу, малатдегидрогеназу, пенициллиназу или люциферазу), хемилюминесцентные, биотинильные группы, предопределенные полипептидные эпитопы, распознаваемые вторичным репортером (например, последовательности пары лейциновой застежки, сайты связывания вторичных антител, металлосвязывающие домены или метки эпитопа). В некоторых вариантах реализации изобретения метки прикрепляются с помощью спейсерных групп различной длины для уменьшения потенциальных стерических несоответствий.
[0111] Основываясь на приведенном в данном документе описании, четырехвалентное антитело по данному изобретению может быть испытано в соответствии со множеством in vitro и in vivo анализов, известных в данной области техники. Такие анализы могут включать, например, анализы связывания, направленные на способность четырехвалентного антитела или его фрагмента связывать представляющий интерес эпитоп или полипептид (например, человеческий PSGL-1 или его эпитоп) или функциональные анализы, направленные на одно или более функциональных свойств четырехвалентного антитела или его фрагмента.
[0112] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению может быть проверено на активность связывания с человеческим PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения связывание четырехвалентного антитела с человеческим PSGL-1 или его эпитопом может быть протестировано в анализе связывания in vitro. В данной области техники известны различные анализы связывания. Такие анализы связывания могут представлять собой клеточные анализы (например, испытание способности четырехвалентного антитела связывать клетку, экспрессирующую PSGL-1 человека или его эпитоп) или они могут быть на основе полипептидов (например, испытание способности четырехвалентного антитела связывать PSGL-1 человека или его эпитоп). В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению испытывают на связывание с клеткой, экспрессирующей человеческий PSGL-1 (например, клеткой Sp2, как показано в примере ниже) с помощью проточной цитометрии, FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer - метода резонансного переноса энергии флуоресценции), гистохимических анализов и тому подобного. Другие подходящие анализы связывания могут включать, без ограничения, равновесные методы (например, ферментный иммуносорбентный анализ (ИФА), радиоиммуноанализ (RIA), анализ Biacore™, непрямой анализ связывания, анализ конкурентного ингибирования, резонансный перенос энергии флуоресценции (FRET), иммунопреципитацию, гель-электрофорез и хроматографию (например, гель-фильтрацию).
[0113] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению может быть проверено на один или более функциональных анализов для функционирования PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению может быть проверено на индукцию апоптоза в клетке(клетках), экспрессирующих PSGL-1 человека. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению демонстрирует усиленную индукцию апоптоза в целевой клетке (например, клетке, экспрессирующей человеческий PSGL-1 или его эпитоп) по сравнению с обычным (например, двухвалентным) антителом, имеющим один или более доменов VH или VL, общих с четырехвалентным антителом (например, исходным антителом). Как показано в данном документе, четырехвалентные антитела по данному изобретению проявляют большую эффективность в индуцировании апоптоза в целевых клетках, чем исходные антитела, имеющие общий домен VH и/или VL. Анализы апоптоза описаны в данной области техники и могут быть легко выполнены специалистом в данной области техники (см., например, Muppidi, J., Porter, M. and Siegel, R. M. 2004 год. Measurement of Apoptosis and Other Forms of Cell Death. Current Protocols in Immunology. 59:3. 17. 1-3. 17. 36). Выбранные анализы для обнаружения апоптоза (например, окрашивание аннексином V или пропидиум иодидом) приведены в качестве примеров выше. Термин "индуцировать" или "индуцирование" означает начало или увеличение апоптоза выше контрольного уровня. Апоптоз активированных Т-клеток может индуцироваться на около 10%, около 20%, около 30%, около 40%, около 50%, около 60%, около 70%, около 80%, около 90%, около 100%, около 125%, около 150% или более по сравнению с контролем (например, апоптоз активированных Т-клеток в отсутствие описанных в данном документе антител или в присутствии неспецифического антитела).
[0114] Т-клетки и линии Т-клеток, которые подходят для применения в описанных в данном документе анализах, относящихся к активности PSGL-1, легко доступны (например, ARR, DU. 528, Юркат, H-SB2, RPMI 8402, CML-T1, Karpas 45, KE-37/SKW-3, SUP-T1, SUP-T3, MOLT 3/4, P12-Ichikawa, PF-382, CCRF-CEM, HPB-ALL, K-T1, TALL- 1, MOLT 16/17, TALL- 104, DND-41, Loucy, MOLT 13, Peer/Bel3, HUT 78/H9, HUT 102, MT- 1, DEL, JB6, Karpas 299, SU-DHL1, 12H5, 3D054. 8, 3DO11. 10, 8D051. 15 или 3D018. 3) или могут быть легко идентифицированы с применением способов, известных в данной области техники (см., например, Thornton, A. M. 2003 год. Fractionation of T and B Cells Using Magnetic Beads. Current Protocols in Immunology. 55:3. 5A. l-3. 5A. i l., Hathcock, K. 2001 год. T Cell Enrichment by Cytotoxic Elimination of B Cells and Accessory Cells. Current Protocols in Immunology. 00:3. 3. 1-3. 3. 5., Horgan, K., Shaw, S. and Boirivant, M. 2009 год. Immunomagnetic Purification of T Cell Subpopulations. Current Protocols in Immunology. 85:7. 4. 1-7. 4. 9., и Kanof, M. E. 2001 год. Purification of T Cell Subpopulations. Current Protocols in Immunology. 00:7. 3. 1-7. 3. 5). В конкретных вариантах реализации изобретения клетки или клеточные линии для применения в анализах пролиферации клеток могут экспрессировать PSGL-1, эндогенно или рекомбинантно. Клетки или клеточные линии для применения в анализах жизнеспособности клеток могут экспрессировать PSGL-1, эндогенно или рекомбинантно, и проявляют изменения в жизнеспособности клеток в ответ на лиганд PSGL-1 или связывание антитела к PSGL-1. Клетки или клеточные линии для применения в анализах апоптоза могут экспрессировать PSGL-1, эндогенно или рекомбинантно, и проявляют изменения в апоптозе в ответ на лиганд PSGL-1 или связывание антитела к PSGL-1. Предпочтительно клетки или клеточные линии являются человеческими (например, ARR, DU. 528, Юркат, H-SB2, RPMI 8402, CML-Tl, Karpas 45, KE-37/SKW-3, SUP-Tl, SUP-T3, MOLT 3/4, P12-Ichikawa, PF-382, CCRF-CEM, HPB-ALL, K-Tl, TALL-1, MOLT 16/17, TALL-104, DND-41, Loucy, MOLT 13, Peer/Bel3, HUT 78/H9, HUT 102, MT-1, DEL, JB6, Karpas 299 или SU-DHL1).
[0115] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению может быть протестировано на ингибирование гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению демонстрирует усиленное ингибирование ГЗТ (гиперчувствительности замедленного типа) (например, в животной модели trans vivo) по сравнению с обычным (например, двухвалентным) антителом, имеющим один или более доменов VH или VL, общих с четырехвалентным антителом (например, исходным антителом). Как показано в данном документе, четырехвалентные антитела по данному изобретению проявляют большую эффективность при ингибировании ГЗТ в модели отека лапки мышей trans vivo, чем исходные антитела, имеющие общий домен VH и/или VL. Анализы ГЗТ описаны в данной области техники и приведены в качестве примера ниже и могут быть легко выполнены специалистом в данной области техники. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело по данному изобретению может проявлять активность ингибирования ГЗТ, которое может быть увеличено на около 10%, около 20%, около 30%, около 40%, около 50%, около 60%, около 70%, около 80%, около 90%, около 100%, около 125%, около 150%, около 200%, около 300%, около 400%, около 500%, около 600% или более по сравнению с контролем (например, ингибирование ГЗТ с помощью обычного или двухвалентного антитела, такого как исходное антитело).
III. Полинуклеотиды, векторы, клетки-хозяева и продуцирование антител
[0116] В данном изобретении также предложены полинуклеотиды, содержащие полинуклеотид, кодирующий любое из четырехвалентных антител и/или полипептидов, описанных в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения полипептиды содержат последовательности вариабельных областей легкой цепи и тяжелой цепи. В некоторых вариантах реализации изобретения полинуклеотид представляет собой выделенный полинуклеотид (например, выделенный из клетки-хозяина или из одного, или более различных полинуклеотидов).
[0117] В данном документе представлены полинуклеотиды, кодирующие любые четырехвалентные антитела или полипептидные составляющие (например, мономеры, такие как одноцепочечные полипептиды, тяжелые цепи антитела и/или легкие цепи антитела), описанные в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения полинуклеотид по данному изобретению кодирует полипептидную последовательность, выбранную SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15 и 17-31. В некоторых вариантах реализации изобретения полинуклеотид по данному изобретению содержит полинуклеотидную последовательность, выбранную SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 и 16. В некоторых вариантах реализации изобретения полинуклеотид по данному изобретению содержит один или более интронов. В других вариантах реализации изобретения полинуклеотид по данному изобретению не содержит интрон, например, кДНК или процессированную последовательность мРНК.
[0118] Специалистам в данной области техники понятно, что в результате вырожденности генетического кода существует много нуклеотидных последовательностей, которые кодируют описанный в данном документе полипептид. Некоторые из этих полинуклеотидов имеют минимальную гомологию с нуклеотидной последовательностью любого нативного гена. Таким образом, полинуклеотиды, которые различаются в зависимости от различных применений кодонов, являются специально предусмотренными данным изобретением. Кроме того, аллели генов, содержащих полинуклеотидные последовательности, представленные в данном документе, входят в объем данного изобретения. Аллели представляют собой эндогенные гены, которые изменяются в результате одной или более мутаций, таких как делеции, добавления и/или замены нуклеотидов. Полученная мРНК и белок могут, но не обязательно, иметь измененную структуру или функцию. Аллели могут быть идентифицированы с применением стандартных методов (таких как гибридизация, амплификация и/или сравнение последовательностей базы данных).
[0119] Также в данном документе представлены полинуклеотиды, которые оптимизированы, например, путем оптимизации кодонов/РНК, замены гетерологичными сигнальными последовательностями и элиминацией элементов нестабильности мРНК. Способы получения оптимизированных нуклеиновых кислот, кодирующих четырехвалентное антитело или его полипептид для рекомбинантной экспрессии путем введения изменений кодонов и/или элиминации ингибиторных областей в мРНК, могут быть осуществлены путем адаптации методов оптимизации, описанных, например, в патентах США № 5,965,726; 6,174,666; 6,291,664; 6,414, 132; и 6,794,498, соответственно. Например, потенциальные сайты сплайсинга и элементы нестабильности (например, элементы, богатые на A/T или A/U) в РНК могут быть мутированы без изменения аминокислот, кодируемых последовательностями нуклеиновой кислоты, с целью повышения стабильности РНК для рекомбинантной экспрессии. Эти изменения используют вырожденность генетического кода, например, используя альтернативный кодон для идентичной аминокислоты. В некоторых вариантах реализации изобретения может быть желательным изменить один или более кодонов для кодирования консервативной мутации, например, подобной аминокислоты с аналогичной химической структурой и свойствами и/или функцией в качестве исходной аминокислоты. Такие способы могут увеличить экспрессию четырехвалентного антитела к PSGL-1 или его полипептида по отношению к экспрессии бивалентного антитела к PSGL-1 или его полипептида, кодируемого полинуклеотидами, которые не были оптимизированы. Кроме того, полинуклеотидные последовательности могут быть сконструированы так, чтобы соответствовать предпочтительному использованию кодонов в клетке-хозяине, например, использованию кодонов E. coli или использованию кодонов CHO.
[0120] Оптимизированная полинуклеотидная последовательность, кодирующая описанное в данном документе четырехвалентное антитело или его полипептид, может гибридизоваться с неоптимизированной полинуклеотидной последовательностью, кодирующей четырехвалентное антитело или его полипептид, описанное в данном документе. В конкретных вариантах реализации изобретения оптимизированная нуклеотидная последовательность, кодирующая описанное в данном документе четырехвалентное антитело или его полипептид, гибридизуется в условиях высокой жесткости с неоптимизированной полинуклеотидной последовательностью, кодирующей четырехвалентное антитело или его полипептид, описанное в данном документе. В конкретном варианте реализации изобретения оптимизированная нуклеотидная последовательность, кодирующая описанное в данном документе четырехвалентное антитело или его полипептид, гибридизуется в условиях высокой, средней или низкой жесткости гибридизации с неоптимизированной нуклеотидной последовательностью, кодирующей четырехвалентное антитело или его полипептид, описанное в данном документе. Информация о условиях гибридизации была описана, см., например, в публикации заявки на патент США № 2005/0048549 (например, параграфы 72-73), содержание которой включено в данной документ во всей полноте посредством ссылки.
[0121] Полинуклеотиды по данному изобретению могут быть получены с применением химического синтеза, рекомбинантных способов или ПЦР. Способы химического синтеза полинуклеотида хорошо известны в данной области техники и не нуждаются в подробном описании в данном документе. Специалист в данной области техники может применять предоставленные в данном документе последовательности и коммерческий синтезатор ДНК для получения желаемой последовательности ДНК.
[0122] Для получения полинуклеотидов с применением рекомбинантных способов, полинуклеотид, содержащий желаемую последовательность, может быть вставлен в подходящий вектор, и вектор, в свою очередь, может быть введен в подходящую клетку-хозяина для репликации и амплификации, как дополнительно описано в данном документе. Полинуклеотиды могут быть вставлены в клетки-хозяева любыми способами, известными в данной области техники. Клетки трансформируют путем введения экзогенного полинуклеотида путем прямого поглощения, эндоцитоза, трансфекции, с применением плазмиды F или электропорации. После введения экзогенный полинуклеотид может поддерживаться внутри клетки в виде неинтегрированного вектора (такого как плазмида) или интегрироваться в геном клетки-хозяина. Амплифицированный таким образом полинуклеотид можно выделить из клетки-хозяина способами, хорошо известными в данной области техники. См., например, Sambrook и соавт. (1989 год).
[0123] В альтернативном варианте, ПЦР позволяет воспроизводить последовательности ДНК. Технология ПЦР хорошо известна в данной области техники и описана в патентах США № 4,683,195; 4,800,159; 4,754,065; и 4,683,202, а также ПЦР: The Polymerase Chain Reaction, Mullis и соавт. изд., Birkauswer Press, Boston (1994 год).
[0124] Данное изобретение также обеспечивает векторы (например, клонирующие векторы или экспрессионные векторы), содержащие последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую любой из полипептидов (включая антитела), описанных в данном документе. Подходящие клонирующие векторы могут быть сконструированы в соответствии со стандартными методами или могут быть выбраны из большого количества клонирующих векторов, доступных в данной области техники. Хотя выбранный клонирующий вектор может варьироваться в зависимости от клетки-хозяина, предназначенной для применения, полезные клонирующие векторы, как правило, обладают способностью к саморепликации, могут обладать одной целью для конкретной эндонуклеазы рестрикции и/или могут нести гены для маркера, который может применяться при отборе клонов, содержащих вектор. Подходящие примеры включают плазмиды и бактериальные вирусы, например, pUC18, pUC19, Bluescript (например, pBS SK+) и его производные, mpl8, mpl9, pBR322, pMB9, ColE1, pCR1, RP4, ДНК фагов и "челночные" векторы, такие как pSA3 и pAT28. Эти и многие другие клонирующие векторы доступны от коммерческих поставщиков, таких как BioRad, Strategene и Invitrogen.
[0125] Экспрессионные векторы обычно являются реплицируемыми полинуклеотидными конструкциями, которые содержат полинуклеотид в соответствии с данным изобретением. Экспрессионный вектор может реплицироваться в клетках-хозяевах либо в виде эпистолы, либо как интегральная часть хромосомной ДНК. Подходящие экспрессионные векторы включают, но не ограничиваются ими, плазмиды, вирусные векторы, включая аденовирусы, аденоассоциированные вирусы, ретровирусы, космиды и экспрессионный вектор(ы), описанные в публикации PCT №WO 87/04462. Компоненты вектора могут включать, но не ограничиваются ими, одно или более из следующего: сигнальную последовательность; источник репликации; один или более маркерных генов; и подходящие контролирующие транскрипцию элементы (такие как промоторы, энхансеры или терминаторы). Для экспрессии (то есть, трансляции) обычно требуются один или более контролирующих транскрипцию элементов, таких как сайты связывания рибосомы, сайты инициации трансляции или стоп-кодоны.
[0126] Способы получения антител и полипептидов, полученных из антител, известны в данной области техники и описаны в данном документе. Хорошо известные способы могут быть применены для идентификации антител к PSGL (например, антител которые специфически связываются с человеческим PSGL-1), из которых вариабельные домены (например, домены VH и/или VL) могут быть применены в четырехвалентных антителах по данному изобретению. Типовые антитела к человеческому PSGL-1, а также способы скрининга, продуцирования и очистки таких антител описаны в международной патентной заявке № WO 2012/174001.
[0127] Дополнительные антитела к человеческому PSGL-1 могут быть идентифицированы с применением способов, известных в данной области техники, таких как те, что описаны в международной патентной заявке № WO 2012/174001 и выше. Например, моноклональные антитела могут быть получены с применением гибридомной технологии, такой как описанные Kohler and Milstein (1975 год), Nature, 256:495. В гибридомном методе мышь, хомяк или другое подходящее животное-хозяин обычно иммунизируют иммунизирующим агентом (например, клеткой, экспрессирующей человеческий PSGL-1 или его фрагмент) для индукции выработки лимфоцитов, которые продуцируют или способны продуцировать антитела, которые специфически связываются с иммунизирующим агентом. В альтернативном варианте, лимфоциты могут быть иммунизированы in vitro. Затем лимфоциты сливают с иммортализованной линией клеток с применением подходящего фактора, вызывающего слияние клеток, такого как полиэтиленгликоль, с образованием гибридомной клетки (Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, Academic Press, (1986 год) стр. 59-1031). Иммортализованные линии клеток обычно представляют собой трансформированные клетки млекопитающих, в частности миеломные клетки грызунов, кроликов, быков или клетки человеческого происхождения. Как правило применяют линии клеток миеломы крысы или мыши. Клетки гибридомы можно культивировать в подходящей культуральной среде, которая желательно содержит одно или более веществ, которые ингибируют рост или выживание неслитых, иммортализованных клеток. Например, если исходным клеткам не хватает фермента, гипоксантин гуанинфосфорибозилтрансферазы (HGPRT или HPRT), культуральная среда для гибридом обычно включает гипоксантин, аминоптерин и тимидин ("среда ГАТ"), которые предотвращают рост клеток с дефицитом HGPRT.
[0128] Желательными иммортализованными клеточными линиями являются те, которые эффективно сливаются, поддерживают стабильную экспрессию антител на высоком уровне выбранными продуцирующими антитела клетками и чувствительны к среде, такой как среда ГАТ. Более желательными иммортализованными клеточными линиями являются линии миеломы мыши, которые могут быть получены, например, из Salk Institute Cell Distribution Center, Сан-Диего, штат Калифорния и Американской коллекции типовых культур, Манассас, штат Виргиния. Клеточные линии миеломы человека и гетеромиеломы мышь-человек также описаны для производства человеческих моноклональных антител (Kozbor, J. Immunol. (1984 год), 133:3001; Brodeur и соавт., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, Marcel Dekker, Inc., Нью-Йорк, (1987 год) стр. 51-63).
[0129] Культуральную среду, в которой культивируют гибридомные клетки, можно затем анализировать на присутствие моноклональных антител. Антитело может быть подвергнуто скринингу на предмет специфического связывания с полипептидом ORP150 (например, связывание с эпитопом во внеклеточном домене полипептида ORP150), полученным или экспрессированным на клеточной поверхности плазмоцитомы, множественной миеломы, колоректального рака, рака желудка или пищевода, или опухолевых клеток. Для скрининга могут применяться раковые клетки или полипептид ORP150 (или его фрагмент, содержащий внеклеточный домен полипептида ORP150). Например, для скрининга могут применяться клетки RPMI8226, U266, NCI-H929, L363, Colo205, DLD-1, HT29, SNU-1, Kato-III или CE146T. Полипептид, содержащий аминокислоты 673-800, 701-800, 673-752 или 723-732 SEQ ID NO: 17, также может применяться для скрининга.
[0130] В некоторых вариантах реализации изобретения специфичность связывания моноклональных антител, продуцируемых клетками гибридомы, определяется иммунопреципитацией или анализом связывания in vitro, таким как радиоиммунологический анализ (RIA) или ферментный иммуносорбентный анализ (ИФА). Такие методы и анализы известны в данной области техники. Аффинность связывания моноклонального антитела может, например, определяться с помощью анализа Scatchard Munson and Pollard (1980 год), Anal. Biochem., 107:220.
[0131] После идентификации желаемых клеток гибридомы клоны могут быть субклонированы путем процедуры предельного разведения и выращены с помощью стандартных способов (Goding, выше). Подходящие культуральные среды для этой цели включают, например, среду Игла в модификации Дульбекко или среду RPMI-1640. В альтернативном варианте, клетки гибридомы можно выращивать in vivo в виде асцита у млекопитающего.
[0132] Моноклональные антитела могут быть получены путем культивирования клеток гибридомы, и антитела, секретируемые клетками гибридомы, могут быть дополнительно выделены или очищены. Антитела могут быть выделены или очищены от культуральной среды или асцитной жидкости обычными процедурами очистки иммуноглобулинов, такими как, например, хроматография на носителе белок A-сефароза или хроматография с гидроксиапатитом, гель-электрофорез, диализ или аффинная хроматография.
[0133] Четырехвалентные антитела или полипептиды по данному изобретению могут быть получены путем скрининга библиотеки антител или полипептидов для отбора антител или полипептидов, которые связываются с человеческим PSGL-1, например, экспрессируются на клеточной поверхности клетки. Могут применяться библиотеки фагового дисплея антитела, известные в данной области техники. В некоторых вариантах реализации изобретения антитела в библиотеке (например, "отображаемые" на фаге) являются одноцепочечными фрагментами Fv (scFv) или фрагментом Fab. В некоторых вариантах реализации изобретения антитела в библиотеке (например, "отображаемые" на фаге) являются однодоменными антителами. Например, однодоменное антитело может полностью или частично содержать вариабельный домен тяжелой цепи или полностью, или частично содержать вариабельный домен легкой цепи антитела. В некоторых вариантах реализации изобретения антитела в библиотеке представляют собой человеческие антитела. Идентифицированные антитела могут дополнительно проверяться на их способности индуцировать гибель клеток (например, апоптоз) и/или связывать PSGL-1 человека с применением способов, известных в данной области техники и описанных в данном документе.
[0134] Четырехвалентные антитела по данному изобретению могут быть получены способами рекомбинантной ДНК, такими как описанные в патентах США № 4,816,567 и 6,331,415. Например, ДНК, кодирующая вариабельную или константную область любого из четырехвалентных антител по данному изобретению (или одноцепочечных полипептидов, полипептидов тяжелой или легкой цепи, которые являются их составляющими), может быть легко выделена и секвенирована с применением обычных процедур (например, с применением олигонуклеотидных зондов, которые способны специфически связываться с генами, кодирующими тяжелые и легкие цепи мышиных антител). Клетки гибридомы по данному изобретению служат в качестве предпочтительного источника такой ДНК. После выделения ДНК может быть помещена в экспрессионные векторы, которые затем трансфицируют в клетки-хозяева, такие как клетки COS обезьян, клетки яичника китайского хомячка (CHO) или клетки миеломы, которые иным способом не производят белок иммуноглобулина для синтеза моноклональных антител в рекомбинантных клетках-хозяевах. ДНК также может быть модифицирована, например, путем замещения кодирующей последовательности на константные домены тяжелой и легкой цепей человека вместо гомологичных мышиных последовательностей (патент США № 4,816,567) или путем ковалентного присоединения к кодирующей последовательности иммуноглобулина всей или части кодирующей последовательности для неиммуноглобулинового полипептида. Такой неиммуноглобулиновый полипептид может быть заменен на константные домены антитела по данному изобретению или может быть заменен вариабельными доменами одного антигенсвязывающего активного центра антитела по данному изобретению для создания химерного двухвалентного антитела.
[0135] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентные антитела по данному изобретению экспрессируются двумя экспрессионными векторами. Например, каждый экспрессионный вектор может экспрессировать один мономер димера по данному изобретению (например, одноцепочечный полипептид или полипептид тяжелой, или легкой цепи антитела). В альтернативном варианте, оба мономера димера по данному изобретению экспрессируются одним экспрессионным вектором.
[0136] Обычно экспрессионный вектор имеет транскрипционные и трансляционные регуляторные последовательности, которые получены из вида, совместимого с клеткой-хозяином. Кроме того, вектор обычно несет определенный ген(ы), который(которые) способен обеспечивать отбор по фенотипу в трансформированных клетках.
[0137] Широкое разнообразие рекомбинантных экспрессионных систем вектор-хозяин для эукариотических клеток является известным и может быть применено в данном изобретении. Например, Saccharomyces cerevisiae или обычные пекарские дрожжи наиболее часто применяются среди эукариотических микроорганизмов, хотя имеется ряд других штаммов, таких как Pichia pastoris. В качестве хозяев могут также применяться клеточные линии, полученные из многоклеточных организмов, такие как Sp2/0 или яичник китайского хомячка (CHO), которые доступны из ATCC. Типичными векторными плазмидами, подходящими для трансформации эукариотических клеток, являются, например, pSV2neo и pSV2gpt (ATCC), pSVL и pSVK3 (Pharmacia) и pBPV-1/pML2d (International Biotechnology, Inc.).
[0138] Эукариотические клетки-хозяева, применяемые в данном документе, представляют собой, например, клетки гибридомы, миеломы, плазмоцитомы или лимфомы. Однако другие эукариотические клетки-хозяева могут быть соответствующим образом применены, если клетки-хозяева млекопитающих способны распознавать транскрипционные и трансляционные последовательности ДНК для экспрессии белков; процессировать лидерный пептид путем расщепления лидерной последовательности и секреции белков; и обеспечивать посттрансляционные модификации белков, например, гликозилирование.
[0139] Соответственно, данное описание относится к клеткам-хозяевам (например, эукариотическим клеткам-хозяевам), которые трансформируются рекомбинантными экспрессионными векторами, содержащими конструкции ДНК, описанные в данном документе, и которые способны экспрессировать четырехвалентные антитела или полипептиды по данному изобретению. В некоторых вариантах реализации изобретения трансформированные клетки-хозяева по данному изобретению содержат по меньшей мере одну конструкцию ДНК, содержащую полинуклеотид по данному изобретению, или полинуклеотид, экспрессирующий мономер, димер или четырехвалентное антитело по данному изобретению, а также транскрипционные и трансляционные регуляторные последовательности, которые расположены относительно кодирующих последовательностей ДНК для непосредственной экспрессии антител или полипептидов.
[0140] Любые клетки-хозяева, способные сверхэкспрессировать гетерологичную ДНК, могут быть применены с целью выделения генов, кодирующих антитело, полипептид или белок, представляющие интерес. Неограничивающие примеры клеток-хозяев млекопитающих включают, но не ограничиваются ими, клетки COS, HeLa и CHO. См., также публикацию PCT №WO 87/04462. Подходящие клетки-хозяева, не относящиеся к млекопитающим, включают клетки прокариот (такие как E. coli или B. subtillis) и дрожжей (такие как S. cerevisae, S. pombe или K. lactis).
[0141] Клетки-хозяева, применяемые в данном изобретении, могут быть трансформированы различными способами с помощью стандартных процедур трансфекции, хорошо известных в данной области техники. К числу стандартных процедур трансфекции, которые могут быть применены, относятся методы электропорации, слияния протопластов и методы осаждения фосфатом кальция. Такие методы в общем описаны в F. Toneguzzo и соавт. (1986 год), Mol. Cell. Biol., 6:703-706; G. Chu и соавт., Nucleic Acid Res. (1987 год), 15:1311-1325; D. Rice и соавт., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1979 год), 79:7862-7865; и V. Oi и соавт., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1983 год), 80:825-829. Векторы, содержащие представляющие интерес полинуклеотиды, могут быть введены в клетку-хозяина любым из ряда подходящих средств, включая электропорацию, трансфекцию с использованием хлорида кальция, хлорида рубидия, фосфата кальция, DEAE-декстрана или других веществ; баллистическую трансфекцию; липофекцию; и инфекцию (например, где вектор является инфекционным агентом, таким как вирус коровьей оспы). Выбор вводящихся векторов или полинуклеотидов часто зависит от особенностей клетки-хозяина.
[0142] В случае двух экспрессионных векторов, два экспрессионных вектора могут переноситься в клетку-хозяина один за другим отдельно или вместе (совместный перенос или котрансфекция).
[0143] Данное изобретение также обеспечивает способ получения антител или полипептидов, который включает культивирование клетки-хозяина, содержащей экспрессионный вектор(ы), кодирующий антитела или полипептиды, и выделение антител или полипептидов из культуры способами, хорошо известными специалисту в данной области техники.
[0144] Кроме того, желаемые антитела могут быть получены в трансгенном животном. Подходящее трансгенное животное может быть получено в соответствии со стандартными способами, которые включают микроинъекцию в яйцеклетки соответствующих экспрессионных векторов, перенос яйцеклеток в псевдобеременную самку и выбор потомка, экспрессирующего желаемое антитело.
[0145] Данное изобретение также относится к химерным четырехвалентным антителам, которые специфически связывают PSGL-1 человека. Например, вариабельные и константные области четырехвалентного антитела относятся к отдельным видам. В некоторых вариантах реализации изобретения вариабельные области как тяжелой цепи, так и легкой цепи происходят из описанных в данном документе мышиных антител. Химерное антитело по данному изобретению может быть получено способами, хорошо известными в данной области техники. См., например, патент США № 6,808,901; патент США № 6,652,852; патент США № 6,329,508; патент США № 6,120,767; и патент США № 5,677,427, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки. В общем, химерное антитело может быть получено путем получения кДНК, кодирующих вариабельные области тяжелой и легкой цепей антител, вставки кДНК в экспрессионный вектор, который после введения в эукариотические клетки-хозяева экспрессирует химерное антитело по данному изобретению. Желательно, чтобы экспрессионный вектор содержал функционально полную константную последовательность тяжелых или легких цепей, так что любая вариабельная последовательность тяжелых или легких цепей может быть легко вставлена в экспрессионный вектор.
[0146] Данное изобретение обеспечивает гуманизированное четырехвалентное антитело, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1. Гуманизированное антитело, как правило, представляет собой человеческое антитело, в котором остатки из CDR заменяются остатками из CDR видов, не относящихся к человеку, таких как мышь, крыса или кролик, обладающих желаемой специфичностью, аффинностью и функциональной возможностью. В некоторых случаях остатки каркаса Fv человеческого антитела заменяются соответствующими нечеловеческими остатками.
[0147] Существует четыре общих этапа гуманизации моноклонального антитела. В их число входят:(1) определение нуклеотидной и предсказанной аминокислотной последовательности легких и тяжелых вариабельных доменов начального антитела, (2) проектирование гуманизированного антитела, то есть, определение того, какую область каркаса антитела использовать во время процесса гуманизирования, (3) фактические методики/технические приемы гуманизирования и (4) трансфекция и экспрессия гуманизированного антитела. См., например, патенты США № 4,816,567; 5,807,715; 5,866,692; 6,331,415; 5,530,101; 5,693,761; 5,693,762; 5,585,089; 6,180,370; и 6,548,640. Например, константная область может быть сконструирована таким образом, чтобы больше походить на человеческие константные области, во избежание иммунного ответа, в случае если антитело применяется в клинических испытаниях и лечении людей. См., например, патенты США № 5,997,867 и 5,866,692.
[0148] Важно, чтобы антитела были гуманизированы с сохранением высокой аффинности к антигену и другим благоприятным биологическим свойствам. Для достижения этой цели гуманизированные антитела могут быть получены путем анализа исходных последовательностей и различных концептуальных гуманизированных продуктов с применением трехмерных моделей исходных и гуманизированных последовательностей. Трехмерные модели иммуноглобулинов обычно доступны и знакомы специалистам в данной области техники. Доступны компьютерные программы, которые иллюстрируют и отображают вероятные трехмерные конформационные структуры выбранных последовательностей кандидатных иммуноглобулинов. Проверка этих изображений позволяет анализировать вероятную роль остатков в функционировании последовательности кандидатного иммуноглобулина, то есть, анализировать остатки, которые влияют на способность кандидатного иммуноглобулина связывать его антиген. Таким образом, остатки FR могут быть выбраны и объединены из консенсуса и последовательности импорта, так что достигается желательная характеристика антитела, такая как повышенная аффинность к целевому антигену(нам). Как правило, остатки CDR непосредственно и наиболее существенно влияют на связывание антигена. Гуманизированные антитела могут также содержать модификации в шарнирной области для улучшения одной или более характеристик антитела.
[0149] В другом альтернативном варианте антитела могут быть подвергнуты скринингу и созданы рекомбинантно с помощью технологии фагового дисплея. См., например, патенты США № 5,565,332; 5,580,717; 5,733,743 и 6,265,150; и Winter и соавт., Annu. Rev. Immunol. 12:433-455 (1994 год). В альтернативном варианте, технология фагового дисплея (McCafferty и соавт., Nature 348:552-553 (1990 год)) может быть применена для получения человеческих антител и фрагментов антител in vitro, из хранилищ гена вариабельных (V) доменов иммуноглобулина у неиммунизированных доноров. Согласно этой технологии, гены домена V антитела клонируются в рамке в основной или минорный ген белка оболочки нитевидного бактериофага, такого как M13 или fd, и отображаются как функциональные фрагменты антител на поверхности фаговой частицы. Поскольку нитевидная частица содержит одноцепочечную копию ДНК фагового генома, отборы, основанные на функциональных свойствах антитела, также приводят к отбору гена, кодирующего антитело, проявляющее эти свойства. Таким образом, фаг имитирует некоторые из свойств В-клетки. Фаговый дисплей может выполняться в различных форматах; для обзора см., например, Johnson, Kevin S. and Chiswell, David J., Current Opinion in Structural Biology 3, 564-571 (1993 год). Для фагового дисплея можно применять несколько источников сегментов гена V. Clackson и соавт., Nature 352:624-628 (1991 год) выделили разнообразные антитела к оксазолону из небольшой случайной комбинаторной библиотеки генов V, полученных из селезенки иммунизированных мышей. Можно создать набор генов V от неиммунизированных человеческих доноров, а антитела к разнообразному набору антигенов (включая аутоантигены) можно выделить по существу применяя методы, описанные Марк и соавт., J. Mol. Biol. 222:581-597 (1991 год), или Griffith и соавт., EMBO J. 12:725-734 (1993 год). В естественном иммунном ответе гены антител накапливают мутации с высокой скоростью (соматическая сверхмутация). Некоторые из внесенных изменений дадут более высокую аффинность, и В-клетки, демонстрирующие высокоаффинный поверхностный иммуноглобулин, предпочтительно реплицируются и дифференцируются во время последующей антигенной стимуляции. Этот естественный процесс можно имитировать, используя метод, известный как "перетасовка цепи". Marks и соавт., Bio/Technol. 10:779-783 (1992 год)). В этом способе аффинность "первичных" человеческих антител, полученных с помощью фагового дисплея, может быть улучшена путем последовательной замены генов области V тяжелой и легкой цепей из хранилищ встречающихся в природе вариантов (репертуаров) генов домена V, полученных от неиммунизированных доноров. Этот метод позволяет получать антитела и фрагменты антител с аффинностью в диапазоне пМ-нМp. Стратегия создания очень больших хранилищ фаговых антител (также известная как "мать-все-библиотек") была описана Waterhouse и соавт., Nucl. Acids Res. 21:2265-2266 (1993 год). Генная перетасовка может также применяться для получения человеческих антител из антител грызунов, где человеческое антитело имеет подобные аффинности и специфичности к начальному антителу грызунов. В соответствии с этим способом, который также упоминается как "эпитопный импринтинг", ген домена V тяжелой или легкой цепи антител грызунов, полученных методом фагового дисплея, заменяется репертуаром генов домена V человека, создавая таким образом химеры грызун-человек. Отбор антигена приводит к выделению вариабельных областей человека, способных восстанавливать функциональный антигенсвязывающий сайт, то есть, эпитоп регулирует (запечатлевает) выбор партнера. Когда процесс повторяется с целью замены оставшегося домена V грызуна, получают человеческое антитело (см., Публикацию PCT №WO 93/06213, опубликованную 1-го апреля 1993 года). В отличие от традиционной гуманизации антител грызунов с помощью пересадки CDR, этот метод обеспечивает полностью человеческие антитела, которые не имеют каркасных остатков или остатков CDR происходящих из грызунов. Очевидно, что, хотя вышеупомянутое обсуждение относится к гуманизированным антителам, общие принципы, которые обсуждаются, применимы для модифицирования антител с целью применения, например, у собак, кошек, приматов, лошадей и коров.
[0150] В некоторых вариантах реализации антитело представляет собой полностью человеческое антитело. Нечеловеческие антитела, которые специфически связывают антиген, могут быть применены для получения полностью человеческого антитела, которое связывается с этим антигеном. Например, квалифицированный специалист может использовать метод замены цепи, в котором тяжелая цепь нечеловеческого антитела, коэкспрессируется с экспрессионной библиотекой, экспрессирующей различные легкие цепи человека. Полученные гибридные антитела, содержащие одну легкую цепь человека и одну нечеловеческую тяжелую цепь, затем подвергают скринингу на связывание антигена. Легкие цепи, которые участвуют в связывании антигена, затем коэкспрессируются с библиотекой тяжелых цепей антител человека. Полученные человеческие антитела еще раз скринируют на связывание антигена. Такие методы, как этот, дополнительно описаны в патенте США 5,565,332. Кроме того, антиген может быть применен для инокуляции животного, которое является трансгенным на гены иммуноглобулина человека. См., например, патент США 5,661,016.
[0151] Данное описание также обеспечивает биспецифические антитела. Биспецифическое антитело имеет специфичности связывания по меньшей мере для двух разных антигенов (включая различные эпитопы). В некоторых вариантах реализации изобретения биспецифическое антитело по данному изобретению включает в себя два или более разных домена VH и/или VL, которые специфически связывают PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения два или более разных домена VH и/или VL специфически связывают один и тот же эпитоп PSGL-1. В некоторых вариантах реализации изобретения два или более разных домена VH и/или VL специфически связывают различные эпитопы PSGL-1, которые могут быть или не быть перекрывающимися эпитопами.
[0152] Биспецифическое антитело (моноклональное антитело, которое имеет специфичности связывания по меньшей мере двух разных антигенов) может быть получено с применением описанных в данном документе антител. Способы получения биспецифических антител известны в данной области техники (см., например, Suresh и соавт., 1986 год, Methods in Enzymology 121:210). Традиционно рекомбинантное продуцирование биспецифических антител было основано на коэкспрессии двух пар легкой цепи-тяжелой цепи иммуноглобулина, причем две тяжелые цепи имели разную специфичность (Millstein and Cuello, 1983 год, Nature 305, 537-539). В некоторых вариантах реализации изобретения биспецифическое четырехвалентное антитело может быть получено с применением способов, представленных в качестве примера выше.
[0153] Согласно одному из подходов создания биспецифических антител, вариабельные домены антител с желаемой специфичностью связывания (сайты, связывающие антитело-антиген) слиты с последовательностями константного домена иммуноглобулина. В некоторых вариантах реализации изобретения слияние осуществляется с константным доменом тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащим, по меньшей мере, часть областей шарнира, СН2 и СН3. В некоторых вариантах реализации изобретения первая константная область тяжелой цепи (CH1), содержащая сайт, необходимый для связывания легкой цепи, присутствует, по меньшей мере, в одном из слияний. ДНК, кодирующие слияния тяжелой цепи иммуноглобулина и, при желании, легкой цепи иммуноглобулина, вставляют в отдельные экспрессионные векторы и котрансфицируют в подходящий организм-хозяин. Это обеспечивает большую гибкость в регулировании взаимных пропорций трех полипептидных фрагментов в вариантах реализации изобретения, когда неравные соотношения трех полипептидных цепей, применяемых в конструкции, обеспечивают оптимальные выходы продукта. Однако, является возможным вставить кодирующие последовательности для двух или всех трех полипептидных цепей в один экспрессионный вектор, в случае если экспрессия по меньшей мере двух полипептидных цепей в равных соотношениях приводит к высоким выходам продукта или в случае если соотношения не имеют особого значения.
[0154] Гетероконъюгатные антитела, содержащие два ковалентно присоединенных мономера или антитела, также лежат в пределах объема данного изобретения. Такие антитела применялись для нацеливания клеток иммунной системы на нежелательные клетки (патент США № 4,676,980) и для лечения ВИЧ-инфекции (Публикации PCT №WO 91/00360 и WO 92/200373; и EP 03089). Гетероконъюгатные антитела могут быть получены с применением любых подходящих способов перекрестного связывания. Подходящие сшивающие агенты и способы хорошо известны в данной области техники и описаны в патенте США № 4,676,980.
[0155] Некоторые аспекты данного описания относятся к вариабельным доменам антител и/или фрагментам антител, например, которые могут быть применены в качестве компонента четырехвалентного антитела, описанного в данном документе. Фрагменты антитела могут содержать активную область связывания антител, такую как фрагменты Fab, F(ab')2, scFv, Fv и тому подобное. Различные способы, известные в данной области техники, могут быть применены для получения и/или выделения фрагментов антител, которые могут быть включены в четырехвалентное антитело по данному изобретению, например, с помощью стандартных рекомбинантных методов, известных в данной области техники, на основе концепций, описанных в данном документе.
[0156] Могут быть получены одноцепочечные фрагменты Fv, такие как описанные в Iliades и соавт., 1997 год, FEBS Letters, 409:437-441. Связывание таких одноцепочечных фрагментов с применением различных линкеров описано в Kortt и соавт., 1997 год, Protein Engineering, 10:423-433. В данной области техники хорошо известны различные методы рекомбинантного получения и манипулирования антителами. Такие фрагменты могут быть получены из моноклональных антител, описанных в данном документе, с применением методов, хорошо известных в данной области техники (Rousseaux и соавт. (1986 год), в Methods Enzymol., 121:663-69 Academic Press).
[0157] Способы получения фрагментов антител хорошо известны в данной области техники. Например, фрагмент антитела может быть получен ферментативным расщеплением антител с пепсином для получения фрагмента 100 кДа, обозначенного как F(ab')2. Этот фрагмент может быть дополнительно расщеплен с применением восстанавливающего агента на основе тиола и, необязательно, блокирующей группы на сульфгидрильные группы, образующиеся в результате расщепления дисульфидных связей, с получением моновалентных фрагментов Fab' 50 кДа. В альтернативном варианте, ферментативное расщепление с применением папаина дает сразу два моновалентных фрагмента Fab и непосредственно фрагмент Fc. Эти способы описаны, например, в патентах США № 4,036,945 и 4,331,647 и в ссылках, содержащихся в них, причем эти патенты включены в данный документ посредством ссылки. Также, см., Nisonoff и соавт. (1960 год), Arch Biochem. Biophys. 89:230; Porter (1959 год), Biochem. J. 73:119; Smyth (1967 год), Methods in Enzymology 11:421-426. В альтернативном варианте, Fab может быть получен путем вставки ДНК, кодирующей Fab антитела, в экспрессионный вектор для прокариот или экспрессионный вектор для эукариот и введения данного вектора в прокариота или эукариота для экспрессии Fab.
IV. Способы и применения
[0158] Некоторые аспекты данного изобретения относятся к способам и применениям четырехвалентных антител, описанных в данном документе. Эти способы и применения основаны, по меньшей мере частично, на свойствах четырехвалентных антител, как описано в данном документе, включая, без ограничения, их повышенное количество доменов связывания эпитопа, потенциал для меньшей зависимости от перекрестного связывания in vitro и/или in vivo, дифференциальную активность индукции апоптоза (например, клеток, экспрессирующих PSGL-1 человека), и/или улучшенную эффективность in vivo или trans vivo.
[0159] Как описано в данном документе, известно, что PSGL-1 участвует в воспалении и биологии Т-клеток. Четырехвалентные антитела по данному изобретению, которые специфически связываются с PSGL-1 человека, могут найти применение, помимо всего прочего, при лечении индивидуумов с заболеваниями, связанными с функцией Т-клеток (например, опосредованное Т-клетками воспалительное заболевание) или индивидуумов, нуждающихся в медицинских процедурах, которые могут приводить к воспалительным процессам, таким как иммунологические реакции, или для которых такие патологические состояния контролируются заранее (например, трансплантация или переливание).
[0160] В некоторых вариантах реализации изобретения заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой опосредованное Т-клетками воспалительное заболевание. Неограничивающие примеры расстройств и заболеваний, которые можно лечить, либо один или более симптомов которых могут быть устранены или предотвращены при применении четырехвалентных антител, описанных в данном документе, включают псориаз, болезнь Крона, анкилозирующий спондилоартрит, артрит (включая ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, остеоартрит и псориатический артрит), сахарный диабет, рассеянный склероз, энцефаломиелит, миастению, системную красную волчанку, аутоиммунный тиреоидит, дерматит (включая атопический дерматит и экзематозный дерматит), синдром Шегрена, афтозную язву, ирит, конъюнктивит, кератоконъюнктивит, диабет I типа, воспалительные заболевания кишечника, язвенный колит, астму, аллергическую астму, кожную красную волчанку, склеродермию, вагинит, проктит, лекарственную сыпь, обратимую лепрозную реакцию, узловатую лепрозную эритему, аутоиммунный увеит, аллергический энцефаломиелит, острую некротизирующую геморрагическую энцефалопатию, идиопатическую двустороннюю прогрессирующую нейросенсорную тугоухость, апластическую анемию, истинную эритроцитарную анемию, идиопатическую тромбоцитопению, полихондрит, гранулематоз Вегенера, хронический активный гепатит, синдром Стивенса-Джонсона, идиопатическую стеаторею, красный плоский лишай, болезнь Грейвса, реакцию "трансплант против хозяина" (РТПХ), саркоидоз, первичный билиарный цирроз, задний увеит, интерстициальный фиброз легких, аллергические реакции, такие как атопическая аллергия, СПИД и T-клеточные новообразования, такие как лейкозы или лимфомы. В некоторых вариантах реализации изобретения заболевание является аутоиммунным заболеванием.
[0161] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой бляшковидный псориаз. Бляшковидный псориаз или вульгарный псориаз является наиболее распространенной формой псориаза и характеризуется возвышенными эритематозными бляшками на коже, с четкими краями, покрытыми серебристым чешуйкой. Существует предрасположенность очагов поражения затрагивать разгибательные поверхности конечностей, пояснично-крестцовый отдел и кожу головы. Соответствующие гистопатологические данные включают значительную воспалительную клеточную инфильтрацию дермы и эпидермиса, увеличение количества расширенных сосудов и существенное утолщение эпидермиса с нарушенной дифференциацией кератиноцитов и гиперкератозом. Примерно треть пациентов с бляшковидным псориазом классифицируются как имеющие болезнь средней или тяжелой степени тяжести и, следовательно, являются кандидатами на терапию, выходящую за рамки только местного лечения.
[0162] В другом варианте реализации изобретения, болезнь, которую лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой хронический бляшковидный псориаз. Симптомы хронического бляшковидного псориаза включают, но не ограничиваются ими, единичные или множественные возвышенные покрасневшие пятна на коже, варьирующие от размера монеты до большего размера, на любой части тела, включая, но не ограничиваясь, колени, локти, пояснично-крестцовый отдел, кожу головы и ногти.
[0163] В другом варианте реализации изобретения, болезнь, которую лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой каплевидный псориаз. Симптомы каплевидного псориаза включают в себя, но не ограничиваются ими, высыпания на коже чешуйчатых бляшек каплеобразной формы, сопровождаемые инфекцией, такой как стрептококковая инфекция горла.
[0164] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой обратный псориаз. Симптомы обратного псориаза включают, но не ограничиваются ими, гладкие, обычно влажные участки кожи, красные и воспаленные, которые, в отличие от связанного с бляшковидным псориазом образования чешуек, расположены в одной или более из следующих частей тела: подмышках, пахе, зоне под грудью, а также в других складках кожи вокруг половых органов и ягодиц.
[0165] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой пустулезный псориаз. Симптомы пустулезного псориаза включают, но не ограничиваются ими, заполненные гноем пузырьки, которые различаются по размеру и месторасположению, но главным образом встречаются на руках и ногах.
[0166] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой эритродермический псориаз. Симптомы эритродермического псориаза включают, но не ограничиваются ими, периодическое обширное пылающее покраснение кожи и, скорее, слущивание чешуек пластами, а не мелкими хлопьями. Покраснение и слущивание кожи часто сопровождаются сильным зудом и болью, увеличением частоты сердечных сокращений и колеблющейся температурой тела.
[0167] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой ревматоидный артрит. Симптомы ревматоидного артрита включают в себя, но не ограничиваются ими, усталость, потерю аппетита, небольшой жар, опухшие железы, слабость, боль в суставах запястий, локтей, плеч, бедер, колен, лодыжек, пальцев ног, челюсти, руках, пальцах и/или шее, утренняя скованность, боль в груди при дыхании (плеврит), жжение, зуд и выделения из глаз, узелки под кожей, онемение, покалывание или жжение в руках и ногах.
[0168] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой болезнь Крона. Симптомы болезни Крона включают в себя, но не ограничиваются ими, спастическую боль в животе (область живота), лихорадку, усталость, потерю аппетита, боль при дефекации (тенезмы), постоянный водянистый понос, необъяснимое снижение массы тела, запор, воспаление глаз, свищи (обычно вокруг ректальной области, может вызвать дренаж гноя, слизи или стула), боли в суставах, воспаление печени, язвы во рту, ректальное кровотечение и кровавый стул, узелки или раны (язвы) на коже и опухшие десны.
[0169] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой анкилозирующий спондилоартрит. Симптомы анкилозирующего спондилоартрита включают, но не ограничиваются ими, частые боли и жесткость в нижней части спины и ягодицах, позвоночнике и/или шее; а также боль и чувствительность, распространяющиеся на ребра, лопатки, боковые поверхности таза и бедра, бедра и пятки; воспаление глаза (иридоциклит и увеит), вызывающее покраснение, боль в глазах, потерю зрения, "мушки" перед глазами и светобоязнь; усталость; и тошноту.
[0170] В другом варианте реализации изобретения, заболевание или расстройство, которое лечили в соответствии с описанными в данном документе способами, представляет собой сахарный диабет. Симптомы сахарного диабета включают, но не ограничиваются ими, потерю веса, полиурию (частое мочеиспускание), полидипсию (повышенную жажду), многофагию (повышенный голод), сердечно-сосудистые заболевания, диабетическую ретинопатию, диабетическую невропатию, гиперосмолярное некетотическое состояние и диабетический кетоацидоз.
[0171] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело или композицию по данному изобретению можно вводить индивидууму до, одновременно с и/или после трансплантации. Например, как описано более подробно ниже, четырехвалентное антитело или композиция по данному изобретению может быть введена для увеличения вероятности благоприятного результата лечения, снижения вероятности неблагоприятного результата и/или облегчение или предотвращения симптомов, или неблагоприятных результатов, возникающих до, одновременно с или после завершения трансплантации.
[0172] Как применимо в данном документе, лечение индивидуума, нуждающегося в трансплантации, может относиться к одному или более терапевтическому воздействию и профилактическим или превентивным мерам (например, увеличивающим вероятность благоприятного результата лечения, такого как выживаемость трансплантата, функция трансплантата, или снижение вероятности неблагоприятного результата, например неблагоприятного ответа на лечение, или патологического состояния, которое снижает вероятность того, что благоприятное лечение, такое как трансплантация, произойдет). Лечение может включать, без ограничения, облегчение или предотвращение патологических состояний и симптомов, связанных с расстройством или патологическим состоянием, и/или проблем или патологических состояний, которые препятствуют или ограничивают доступ индивидуума к вариантам лечения расстройства или патологического состояния, таких как сенсибилизация, повышенная чувствительность, высокий уровень панельных реактивных антител (PRA - panel reactive antibodies) и/или наличие уже существующих аллогенных антител, что ограничивает доступность трансплантатов человеку, ожидающему трансплантации. Те, кто нуждается в лечении, включают тех, кто уже имеет расстройство или патологическое состояние, а также тех, у кого расстройство или патологическое состояние должны быть предотвращены. Лечение расстройства или патологического состояния может подавлять иммуноопосредованные осложнения, связанные с расстройством или патологическим состоянием, устранять симптомы расстройства или патологического состояния, уменьшать степень тяжести расстройства или патологического состояния, изменять динамику развития расстройства или патологического состояния и/или устранить или излечить основное расстройство или патологическое состояние.
[0173] Например, успешное лечение индивидуума, ожидающего трансплантации, включает, но не ограничивается этим, снижение уровня аллогенных антител, снижение панельных реактивных антител (PRA), что позволяет индивидууму иметь больше совместимых доноров, увеличивая вероятность или возможность индивидуума получить трансплантат, сократить период ожидания индивидуумом трансплантата, снизить чувствительность индивидуума, снизить риск возникновения связанных с трансплантацией симптомов или патологических состояний (таких как иммуноопосредованные осложнения, как описано ниже) или любую их комбинацию.
[0174] Например, успешное лечение индивидуума, которому предоставляется трансплантация, включает, но не ограничивается этим, защиту и поддержание трансплантированного органа или ткани в течение длительного времени, которое включает в себя контроль, реверсию, облегчение, задержку или предотвращение одного или более симптомов или нежелательных патологических состояний, связанных с трансплантацией органов, таких как иммуноопосредованные осложнения, включая, но не ограничиваясь ими, продуцирование донор-специфических аллогенных антител (DSA - donor-specific alloantibodies), РТПХ, антитело-опосредованное отторжение (АОО), сверхострое отторжение трансплантата, хроническое отторжение трансплантата, недостаточность трансплантата и отторжение трансплантата, измеряемые по функциональным или гистологическим признакам симптома или патологического состояния. Лечение, способное контролировать расстройство или патологическое состояние (например, отторжение трансплантата), может включать лечение, замедляющее развитие патологического процесса, когда оно начинается после того, как наблюдаются функциональные или гистологические признаки расстройства или патологического состояния (например, отторжения трансплантата). Дополнительно, лечение, способное обратить вспять заболевание или патологическое состояние (например, отторжение трансплантата), может включать лечение, которое, когда начинается после того, как наблюдаются функциональные или гистологические признаки заболевания или патологического состояния (например, отторжения трансплантата), обращает вспять патологический процесс и восстанавливает функциональные и гистологические показатели ближе к норме. Лечение, способное "задерживать развитие" расстройства или патологического состояния (например, отторжение трансплантата), может включать отложение, затруднение, замедление, отставание, стабилизацию и/или отсрочку развития расстройства или патологического состояния (например, отторжения трансплантата). Эта задержка может быть разной продолжительности, в зависимости от истории болезни и/или индивидуума, который получает лечение. Как очевидно специалисту в данной области техники, достаточная или значительная задержка может, по сути, заключать в себе профилактику в том смысле, что у индивидуума, например, индивидуума, подверженного риску развития расстройства или патологического состояния, не развивается расстройство или патологическое состояние.
[0175] В некоторых вариантах реализации изобретения трансплантация по данному изобретению может представлять собой трансплантацию одной или более ткани, или органов, включая, но не ограничиваясь ими, костный мозг, почку, сердце, печень, нервную ткань, легкое, поджелудочную железу, кожу и кишечника (например, тонкий и/или толстый кишечник, а также любые его подткани).
[0176] В дополнение к этому, четырехвалентные антитела являются пригодными для профилактики и/или лечения определенных расстройств и заболеваний, связанных с или вызванных (полностью или частично) повышением пролиферации и/или количества активированных Т-клеток по отношению к пролиферации и/или количеству активированных Т-клеток у здоровых индивидуумов или индивидуумов, не имеющих конкретного расстройства или заболевания. Неограничивающие примеры расстройств и заболеваний, которые могут быть предотвращены и/или вылечены применением четырехвалентных антител, описанных в данном документе, включают реакцию "трансплантата против хозяина" и случаи отторжения при трансплантации (включая отторжение при трансплантации с применением аллогенных или ксеногенных тканей), такие как трансплантация костного мозга, трансплантация печени, трансплантация почек или трансплантация любого органа или ткани.
[0177] В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело или композицию по данному изобретению можно вводить индивидууму до, одновременно с и/или после переливания. Например, как описано более подробно ниже, четырехвалентное антитело или композиция по данному изобретению может быть введена для увеличения вероятности благоприятного результата лечения, снижения вероятности неблагоприятного результата и/или облегчение или предотвращения симптомов, возникающих до, одновременно с или после завершения переливания.
[0178] Как применимо в данном документе, лечение индивидуума, нуждающегося в переливании, может относиться к одному или более терапевтическому воздействию и профилактическим или превентивным мерам (например, увеличивающим вероятность благоприятного результата лечения, такого, как замена или добавление компонентов/клеток крови, или снижение вероятности неблагоприятного результата, такого, как неблагоприятный ответ на лечение, неэффективность лечения или иммунологическая реакция, или патологическое состояние, которое снижает вероятность того, что благоприятное лечения, такое как переливание, произойдет). Лечение может включать, без ограничения, облегчение или предотвращение патологических состояний и симптомов, связанных с расстройством или патологическим состоянием, и/или проблем или патологических состояний, которые мешают или ограничивают доступ индивидуума к вариантам лечения расстройства или патологического состояния. Те, кто нуждается в лечении, включают тех, кто уже имеет расстройство или патологическое состояние, а также тех, у кого расстройство или патологическое состояние должны быть предотвращены. Лечение расстройства или патологического состояния может подавлять иммуноопосредованные осложнения, связанные с расстройством или патологическим состоянием, устранять симптомы расстройства или патологического состояния, уменьшать степень тяжести расстройства или патологического состояния, изменять динамику развития расстройства или патологического состояния и/или устранить или излечить основное расстройство или патологическое состояние.
[0179] В некоторых вариантах реализации изобретения переливание представляет собой переливание, включающее одну или более белых клеток крови, красных клеток крови и тромбоцитов. В некоторых вариантах реализации изобретения переливание включает цельную кровь или один или более препаратов крови, включая, без ограничения, белые клетки крови, красные клетки крови, тромбоциты, свежезамороженную плазму, криопреципитат или факторы свертывания крови, антитела и/или кровезаменители. Типовые патологические состояния, которые могут поддаваться лечению с переливанием (например, переливанием крови или препарата крови), включают, без ограничения, кровоизлияния или кровопотери, пониженный гематокрит или гемоглобин (например, анемия), серповидно-клеточную болезнь, талассемию, добавление крови во время или после хирургических процедур, заболевание сердца, травматическое повреждение, дефицит одного или более факторов крови (например, гемофилию, болезнь фон Виллебранда, гипофибриногенемию или дефицит фактора II, V, VII, IX, X или XI), патологические состояния, требующие добавления фибриногена (например, заболевание печени, переливание крови и тому подобное), недостаточность костного мозга, нарушения функции тромбоцитов, тромбоцитопению, иммунодефицит (например, в результате терапии или болезни) и тому подобное. Описания практических подходов, дозировки, ответов, показаний к применению и приготовлений, связанных с переливаниями, можно найти, например, в Сборнике руководств Американского Красного Креста по практике переливания крови.
[0180] Введение четырехвалентного антитела или полипептида в соответствии с описанными в данном документе способами может быть непрерывным или прерывистым, в зависимости от, например, физиологического состояния реципиента, является ли цель введения терапевтической или профилактической, и других факторов, известных квалифицированным практикам. Введение антитела или полипептида, по сути, может быть непрерывным в течение предварительно выбранного периода времени или может быть разделено на серии доз.
[0181] Дозировка и частота введения четырехвалентного антитела, описанного в данном документе, или его фармацевтической композиции вводятся в соответствии со способами для профилактики и/или лечения при минимизации побочных эффектов. Точная дозировка четырехвалентного антитела, описанного в данном документе для введения конкретному субъекту, или его фармацевтической композиции, может быть определена практикующим врачом в свете факторов, связанных с субъектом, который требует лечения. Факторы, которые могут быть приняты во внимание, включают степень тяжести заболевания, общее состояние здоровья субъекта, возраст и вес субъекта, диету, время и частоту введения, сочетание(я) с другими терапевтическими агентами или лекарственными средствами, чувствительность к реакции, и толерантность/ответ на терапию. Дозировка и частота введения четырехвалентного антитела, описанного в данном документе, или его фармацевтической композиции могут быть скорректированы с течением времени, чтобы обеспечить достаточные уровни антитела или антигенсвязывающего фрагмента, полученного из антитела, или для поддержания желаемого эффекта.
[0182] Точная доза, которая будет использоваться в лекарственной форме, также будет зависеть от способа введения и серьезности воспалительного заболевания или расстройства, и должна определяться в соответствии с суждением практикующего врача и обстоятельствами каждого пациента.
[0183] Эффективные дозы могут быть экстраполированы из кривых доза-эффект, полученных из систем испытаний in vitro или на животных моделях.
[0184] В одном варианте осуществления любая из описанных в данном документе композиций формулируется для введения внутрибрюшинными, внутривенными, подкожными или внутримышечными инъекциями, или другими формами введения, такими как оральное, через слизистую, посредством ингаляции, подъязычный, и тому подобное. В одном варианте реализации изобретения парентеральное введение, характеризующееся инъекцией либо подкожно, либо внутримышечно, либо внутривенно, также рассматривается в данном документе. Инъекционные лекарственные средства могут быть приготовлены в обычных формах либо в виде жидких растворов или суспензий, твердых форм, пригодных для создания раствора или суспензии в жидкости перед инъекцией, или в виде эмульсий. Инъекционные лекарственные средства, растворы и эмульсии также содержат один или более вспомогательных веществ. Подходящими вспомогательными веществами являются, например, вода, физиологический раствор, декстроза, глицерин или этанол. Кроме того, при необходимости, фармацевтические композиции, которые нужно вводить, могут также содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие агенты, рН-буферные агенты, стабилизаторы, усилители растворимости и другие подобные агенты. Другие способы введения могут включать: введение в кишечник, внутримозговое введение, назальное введение, внутриартериальное введение, внутрисердечное введение, внутрикостную инфузию, интратекальное введение, внутривенную инфузию, подкожную имплантацию или инъекцию, внутримышечное введение, ректальный способ введения, внутривагинальное введение, внутрижелудочное введение, внутритрахеальное введение, внутрилегочное введение и внутрибрюшинное введение. Приготовления для парентерального введения включают стерильные растворы, готовые для инъекции, стерильные сухие растворимые продукты, такие как лиофилизированные порошки, готовые к смешиванию с растворителем непосредственно перед применением, включая стерильные суспензии, готовые для инъекции, стерильные сухие нерастворимые продукты, готовые к объединению с носителем непосредственно перед применением, и стерильные эмульсии. Растворы могут быть либо водными, либо неводными. При внутривенном введении подходящие носители включают физиологический раствор или фосфатно-солевой буферный раствор (ФСБ), воду и растворы, содержащие загустители и солюбилизирующие агенты, такие как глюкоза, полиэтиленгликоль и полипропиленгликоль, и их смеси.
[0185] В другом варианте реализации изобретения данное изобретение также предусматривает введение композиции, содержащей антитела или полипептиды по данному изобретению, конъюгированные с другими молекулами, такими как детектируемые метки, или терапевтические или цитотоксические агенты. Агенты могут включать, но не ограничиваются ими, радиоизотопы, токсины, токсоиды, воспалительные агенты, ферменты, антисмысловые молекулы, пептиды, цитокины и химиотерапевтические агенты. Способы конъюгирования антител с такими молекулами обычно известны специалистам в данной области техники. См., например, Публикации PCT WO 92/08495; WO 91/14438; WO 89/12624; патент США № 5,314,995; и EP 396,387.
[0186] В одном варианте реализации изобретения композиция содержит антитело или полипептид, конъюгированный с цитотоксическим агентом. Цитотоксические агенты могут включать любые агенты, которые вредны для клеток. Типовый класс цитотоксических агентов, которые могут быть конъюгированы с антителами или фрагментами, может включать, но не ограничивается ими, паклитаксол, цитохалазин В, грамицидин D, бромистый этидий, эметин, митомицин, этопозид, тенипозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидроксиантрациндион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин D, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол, пуромицин и их аналоги или гомологи.
V. Фармацевтические композиции
[0187] Данное изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим четырехвалентные антитела или полипептиды, описанные в данном документе, и фармацевтически приемлемый носитель или наполнители. Фармацевтические композиции могут найти применение, например, в способах, применениях и/или наборах по данному изобретению.
[0188] Фармацевтически приемлемые носители или наполнители известны в данной области техники и являются относительно инертными веществами, которые облегчают введение фармакологически эффективного вещества. Например, наполнитель может придавать форму или консистенцию, или действовать как разбавитель. Подходящие наполнители включают, но не ограничиваются ими, стабилизирующие агенты, смачивающие и эмульгирующие агенты, соли для изменения осмолярности, инкапсулирующие агенты, буферы и усилители проникновения через кожу. В некоторых вариантах реализации изобретения четырехвалентное антитело, описанное в данном документе, находится в жидкой фармацевтической композиции. Жидкие фармацевтически приемлемые композиции могут быть получены, например, путем растворения, диспергирования или иного смешивания антитела, описанного в данном документе, в носителе, таком как, например, вода, физиологический раствор, водный раствор декстрозы, глицерин, гликоли, этанол и тому подобное, с целью образования раствора или суспензии. При желании, фармацевтическая композиция, подлежащая введению, может также содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие агенты, эмульгирующие агенты, солюбилизирующие агенты и рН-буферные агенты и тому подобное. Наполнители, а также составы для парентеральной и непарентеральной доставки лекарственного средства изложены в Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20-е Изд. Mack Publishing (2000 год).
[0189] Фармацевтические композиции предназначены для введения людям и животным в виде единичных дозированных форм, таких как стерильные парентеральные растворы или суспензии, содержащие подходящие количества четырехвалентного антитела, описанного в данном документе. Четырехвалентное антитело, в одном варианте реализации изобретения, составлено и введено в виде единичных дозированных форм или в виде многодозовых форм. Единичные дозированные формы, применяемые в данном документе, относятся к физически дискретным единицам, подходящим для людей и животных, и упакованных по отдельности, как известно в данной области техники. Каждая единичная доза содержит предопределенное количество антитела или антигенсвязывающего фрагмента, полученного из антитела, достаточное для получения желаемого терапевтического эффекта в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем, наполнителем или разбавителем. Примеры единичных дозированных форм включают ампулы и шприцы. Единичные дозированные формы можно вводить в виде фракций или в виде множества фракций. Многократная дозированная форма представляет собой множество идентичных единичных дозированных форм, упакованных в один контейнер, который должен вводиться в виде отдельных единичных дозированных форм. Примеры многократных дозированных форм включают флаконы или бутылки объемом 0,47 л или 3,785 л. Следовательно, многократная дозированная форма представляет собой множество единичных дозированных форм, которые не разделены в упаковке.
[0190] Концентрация четырехвалентного антитела в фармацевтической композиции будет зависеть от, например, физико-химических характеристик антитела или антигенсвязывающего фрагмента, полученного из антитела, схемы применения и вводимого количества, а также других факторов, известных специалистам в данной области техники. В некоторых вариантах реализации изобретения фармацевтические композиции обеспечивают дозу от около 0,001 мг до около 100 мг четырехвалентного антитела на килограмм массы тела в день. Фармацевтические единичные дозированные формы могут быть приготовлены для обеспечения от около 0,001 мг до около 100 мг и/или комбинации других необязательных основных ингредиентов на единицу дозированной формы.
[0191] В некоторых вариантах реализации изобретения данное изобретение обеспечивает четырехвалентные антитела и композиции (такие как описанные в данном документе фармацевтические композиции) для применения в любом из способов, описанных в данном документе, независимо от того, применяются ли они в качестве лекарственного средства и/или применяются для изготовления лекарственного средства.
VI. Наборы
[0192] Некоторые аспекты данного изобретения относятся к наборам или изделиям, которые содержат четырехвалентное антитело по данному изобретению. Необязательно, описанные в данном документе наборы могут содержать один или более фармацевтически приемлемых носителей, таких как типовые носители, описанные в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения набор по данному изобретению включает фармацевтическую композицию по данному изобретению. Наборы, описанные в данном документе, могут найти применение, например, в способах или применениях по данному изобретению.
[0193] Наборы могут необязательно предоставлять дополнительные компоненты, такие как буферы и интерпретирующую информацию. Как правило, набор содержит контейнер и этикетку или листок-вкладыш(и) внутри или соединенные с контейнером. Контейнеры могут представлять собой одноразовые дозы, многоразовые дозы (например, мультидозовые упаковки) или субъединичные дозы. Инструкции, поставляемые в наборах по данному изобретению, обычно представляют собой инструкции на этикетке или листок-вкладыш (например, лист бумаги, включенный в набор), но также приемлемы машиночитаемые инструкции (например, инструкции, которые хранятся на магнитном или оптическом диске).
[0194] В некоторых вариантах реализации изобретения наборы дополнительно включают листок-вкладыш, содержащий инструкции по введению четырехвалентного антитела с целью лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания. В некоторых вариантах реализации изобретения наборы дополнительно включают листок-вкладыш, содержащий инструкции по введению четырехвалентного антитела до, одновременно с и/или после переливания или трансплантации.
[0195] Наборы по данному изобретению находятся в подходящей упаковке. Подходящая упаковка включает, но не ограничивается ими, флаконы, бутылки, банки, гибкую упаковку (например, герметичные майларовые или пластиковые пакеты) и тому подобное. Также рассматриваются упаковки для применения в сочетании с конкретным устройством, таким как ингалятор, устройство для назального введения (например, аэрозольный ингалятор) или инфузионное устройство, такое как мини-насос. Набор может иметь стерильное входное отверстие (например, контейнер может быть пакетом раствора для внутривенного введения или флаконом, имеющим пробку, прокалываемую иглой для подкожной инъекции). Контейнер может также иметь стерильное входное отверстие (например, контейнер может быть пакетом раствора для внутривенного введения или флаконом, имеющим пробку, прокалываемую иглой для подкожной инъекции). По меньшей мере один активный агент в композиции представляет собой четырехвалентное антитело или полипептид, описанный в данном документе. Контейнер может дополнительно содержать второй фармацевтически активный агент. В некоторых вариантах реализации изобретения набор может дополнительно включать любой другой материал или устройство, пригодные для лечения (например, переливания или трансплантации), включая, без ограничения, один или более контейнеров, систем для внутривенных инфузий, стерилизующих средств или оборудования, катетеров, шприцев и тому подобного.
ПРИМЕРЫ
[0196] Изобретение будет более понятным со ссылкой на следующие примеры. Однако они не должны рассматриваться как ограничивающие объем изобретения. Понятно, что примеры и варианты реализации изобретения, описанные в данном документе, предназначены только для иллюстративных целей и различные модификации или изменения в свете этого будут предложены специалистам в данной области техники и должны быть включены в сущность и сферу применения данной заявки и объем прилагаемой формулы изобретения.
Пример 1: Производство и характеристика четырехвалентных антител к PSGL-1
[0197] Гликопротеиновый лиганд 1 P-селектина (PSGL-1) экспрессируется в самых разных гемопоэтических клетках, включая популяции миелоидных, лимфоидных, дендритных и CD34+ стволовых клеток (см., например, Spertini и соавт. 1996 год, J Cell Biol. 135(2):523-31). Ранее были идентифицированы некоторые мышиные антитела, специфичные к PSGL-1 и способные индуцировать апоптоз в Т-клетках. Среди этих мышиных антител антитело (h15A7), которое не мешало взаимодействию между P-селектином и PSGL-1, что необходимо для эффективной локализации Т-клеток и нейтрофилов для нацеливания на воспалительные ткани, было выбрано для клинических исследований и изменено на гуманизированную легкую цепь каппа, содержащую моноклональное антитело IgG4, чтобы минимизировать АЗКЦ и КЗЦ на клетках, экспрессирующих PSGL-1 (см., например, в патенте США № 7,604,800). Впоследствии h15A7 был дополнительно сконструирован для получения h15A7H, который имеет мутацию SER228PRO в шарнирной области h15A7 (международная патентная заявка № WO 2012/174001). Эта мутация была введена для того, чтобы уменьшить перетасовку антител, межмолекулярный обмен между антителами IgG4 in vivo. Исследования in vitro показали, что h15A7/h15A7H преимущественно индуцирует апоптоз активированных Т-клеток на поздней стадии, но не других клеток, экспрессирующих PSGL-1. Не желая привязываться к теории, считается, что механизм действия h15A7H, по-видимому, зависит, по меньшей мере частично, от перекрестного связывания молекул PSGL-1 человека, которое опосредуется крос-линкером антитела in vitro и, возможно, клетками, экспрессирующими FcR in vivo.
[0198] Пример, представленный далее, описывает разработку нескольких четырехвалентных антител, полученных из h15A7H, не зависящих от кросc-линкера/FcR-экспрессирующих клеток (Фиг. 1A & 1B). Не желая привязываться к теории, четырехвалентные антитела могут обладать преимуществами по сравнению с h15A7H для клинических исследований, например, лечения опосредованных T-клетками воспалительных заболеваний. Данные результаты показывают, что четырехвалентные антитела h15A7H демонстрируют повышенную эффективность по сравнению с исходным антителом h15A7H как in vitro, так и trans vivo.
Методы
Клетки и реактивы
[0199] Sp2/0-Ag14 (ATCC®CRL-1581TM) и Sp2/0-hPSGL-1 культивировали в 90% DMEM (GIBCO®, Cat. №11965-092 TM) с добавлением 10% ФБС (GIBCO®, Cat. № 26140-079), 100 Ед/мл пенициллина/100 мкг/мл стрептомицина (GIBCO®, Cat. №15140) и 1 мM пирувата натрия (GIBCO®, Cat. №11360).
[0200] Антитело h15A7H было описано в международной патентной заявке № WO 2012/174001. Четырехвалентные антитела h15A7H, используемые в исследовании, были получены из стабильной клеточной линии CHO Flp-In, очищены с помощью аффинной хроматографии на основе связывания с белком A и поддерживались в фосфатно-солевом буфере Дульбекко (GIBCO® Cat. №21600-069)/0,02% Твин-20 (JT Baker® X251-07). Человеческий IgG4p/κ в качестве нерелевантного антитела для изотипического контроля был получен из клеток Flp-In CHO. 12H5. 5 представляет собой антиидиотипическое антитело IgG1 мыши к h15A7/h15A7H.
Животные
[0201] Самки мышей B6 в возрасте 6-8 недель были получены от BioLASCO Taiwan Co., Ltd, Тайбэй, Тайвань. Все мыши поддерживались в свободных от специфической патогенной микрофлоры условиях. Все исследования на животных проводились в соответствии с положениями Институционального комитета по содержанию и использованию лабораторных животных.
Конструирование вариантов четырехвалентного антитела к PSGL-1
scDb
2
-Fc
[0202] scDb2-Fc (Фиг. 1A, слева) включало 2 домена одноцепочечных диател (scDb), слитых параллельно с N-концами Fc IgG4 человека с мутацией в шарнирной области для минимизации обмена полуантител in vivo. Каждый домен scDb содержал не только доменную последовательность VL-VH- VL- VH, но также линкер (G4S1)5 (SEQ ID NO:33) между VH и VL и два идентичных линкера (например, SEQ ID NO:34) между VL и VH. Несколько scDb-Fc с указанными линкерами различной длины были созданы для оптимизации
taFv
2
-Fc
[0203] taFv2-Fc (Фиг. 1A, посередине) включало в себя 2 тандемных одноцепочечных блока вариабельного фрагмента (scFv) (называемый taFv для тандемного scFv), слитых параллельно N-концами Fc IgG4 человека с мутацией в шарнирной области для минимизации обмена полуантител in vivo. Для построения taFv использовались три различных типа scFv, включая версии v2 (VH-VL), v3 (VL-VH) и v4 (VL-VH), содержащие линкер (G4S1)5 (SEQ ID NO:33) между VH и VL. Среди них v2 и v4 были структурно ограниченными путем образования дисульфидной связи VH44-VL100. Дисульфидная связь VH44-VL100 была введена в scFv в ориентациях VL-VH и VH-VL для повышения конформационной стабильности (см. SEQ ID NO:29 и 30). Каждый taFv имел либо последовательные v2-v3, либо последовательные v4-v2 scFv к PSGL-1 с линкером ASTGS (SEQ ID NO:27) между двумя scFv.
scFv-IgG
[0204] Для создания 3-х вариантов scFv-IgG4p применяли ограниченную посредством дисульфидной связи версию v2 scFv к PSGL-1 (Фиг. 1A, справа), включая scFv4-crIgG4p, scFv2-LC-IgG4p и LC-scFv2-IgG4p. scFv4-crIgG4p имело 4 блока scFv, слитых параллельно с N-концами как константных областей легкой цепи каппа, так и тяжелой цепи IgG4p (crIgG) без линкера. scFv2-LC-IgG4p имело 2 блока scFv, слитых параллельно с N-концами константных областей легких цепей каппа IgG h15A7H с линкером ASTGSG4S (SEQ ID NO:28) между ними, тогда как LC-scFv2-IgG4p имело 2 блока scFv, слитых параллельно с С-концами константных областей легких цепей каппа IgG h15A7H с линкером (G4S)2 (SEQ ID NO:34) между ними. Легкие цепи форматов LC-scFv2 IgG4p и scFv2-LC IgG4p были отдельно субклонированы в вектор pcDNA5/FRT, который кодировал интактную последовательность тяжелой цепи h15A7H для экспрессии антител. На Фиг. 1B изображена другая диаграмма данных форматов четырехвалентного антитела с затененными вариабельными фрагментами.
[0205] кДНК всех четырехвалентных антител клонировали в вектор pcDNA5/FRT (Invitrogen™, Cat. №V6010-20) для экспрессии четырехвалентных антител.
Получение стабильных клеточных линий, экспрессирующих варианты четырехвалентного антитела к PSGL-1
[0206] Варианты четырехвалентного антитела к PSGL1 стабильно экспрессировались и продуцировались в клетках CHO Flp-In (Invitrogen™, Cat. №R708-07). Последовательности кДНК вариантов четырехвалентного антитела были вставлены в вектор pcDNA5/FRT (Invitrogen™, Cat. №V6010-20) совместно трансфицировали с pOG44 (Invitrogen™, Cat. № V6005-20) в соответствии со стандартной процедурой, предоставленной поставщиком. Культуральные супернатанты сформированных клеточных линий собирали и очищали с помощью шариков протеин-A-сефарозы (GE Healthcare™, Cat. №17-5280-04). Для определения качества антител, очищенные белки анализировали как с помощью ДСН-ПААГ-электрофореза, так и с помощью эксклюзионной хроматографии.
ДСН-ПААГ-электрофорез в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях (электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия)
[0207] Очищенные четырехвалентные антитела к PSGL-1 подвергали электрофорезу в 10% восстанавливающих и невосстанавливающих ДСН полиакриламидных гелях. Для восстанавливающих ДСН полиакриламидных гелей 2 мкг антитела смешивали с 5Х ДСН буфером для образцов (300 нМ Трис, pH 6,8, 10% ДСН, 50% глицерина, 5% 2- меркаптоэтанола и 0,06% бромфенолового синего) и кипятили в течение 10 мин при 100°C перед загрузкой. Для невосстанавливающих ДСН полиакриламидных гелей 2 мкг антител смешивали с 5X невосстанавливающим буфером для образцов (300 нМ Трис, pH 6,8, 10% ДСН, 50% глицерина и 0,06% бромфенолового синего) и кипятили в течение 10 мин при 100°C перед загрузкой. Восстановленные и невосстановленные образцы белка загружали в те же ДСН-полиакриламидные гели, где проводили электрофорез. Окрашивание Кумасси синим использовалось для обнаружения белков на геле после электрофореза.
Анализ связывания вариантов четырехвалентного антитела к PSGL-1
[0208] Клетки Sp2/0, трансфицированные человеческим PSGL-1 (Sp2/0-hPSGL1), использовали в качестве линии клеток, экспрессирующих PSGL-1. Клетки Sp2/0-hPSGL1 центрифугировали при 1200 об/мин в течение 5 мин. Клеточную массу ресуспендировали в FACS-буфере (ФСБ, содержащий 1% ФБС) и пипетировали в 96-луночный планшет (1×105 клетки/ лунка). В каждую лунку добавляли 100 мкл супернатантов, содержащих гуманизированные 15A7H(h15A7H)/четырехвалентные антитела, и их инкубировали в течение 60 мин при 4 °C. Клетки промывали три раза холодным FACS-буфером и затем инкубировали с 100 мкл мышиного антитела к IgG человека4 pFc'-PE (SouthernBiotech Cat. №. 9190-09) при концентрации 1 мкг/мл в течение 60 мин при 4°C. Затем клетки трижды промывали холодным FACS-буфером и анализировали с помощью анализа FACS. Все проточные цитометрические анализы проводили на проточном цитометре BD-LSR (Becton Dickinson) с применением программного обеспечения Cell Quest.
Анализ апоптоза вариантов четырехвалентного антитела к PSGL-1
[0209] 1×105 клеток Sp2/0-hPSGL1 высевали в лунки 96-луночных планшетов. Аликвоты очищенных четырехвалентных и контрольных антител к PSGL-1 в концентрациях титрования были свежеприготовленными и добавлялись в каждую лунку. Для анализа клеточного апоптоза обработанные клетки выдерживали при 37 °C в течение 6 ч перед анализом FACS.
[0210] Для анализа клеточного апоптоза применялся набор для детекции апоптоза Annexin-V-FITC (Strong Biotech, Cat. №AVK250) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, обработанные клетки собирали и ресуспендировали в 100 мкл буфера для связывания с Annexin V, содержащем 0,5 мкл Annexin V-FITC, при комнатной температуре. После 15-минутной инкубации в темноте клетки дважды промывали 200 мкл буфера для связывания с Annexin V. Перед анализом FACS добавляли по 1 мкл пропидиум иодида (PI) на образец. Все проточные цитометрические анализы проводили на проточном цитометре BD-LSR (Бектон Дикинсон) с использованием программного обеспечения Cell Quest. Annexin V позитивные и/или PI-позитивные клетки считаются апоптотическими клетками.
Выделение мононуклеарных клеток периферической крови человека (МКПК, РВМС - peripheral blood mononuclear cells)
[0211] 500 мл цельной крови собирали у здоровых доноров, которые ранее тестировались как пациенты с удовлетворительным ответом на столбняк. Кровь центрифугировали при 1500 об/мин в течение 6 мин. Верхний слой плазмы выкидывали, а остальную кровь разбавляли эквивалентным объемом ФСБ. Разведенную цельную кровь осторожно добавляли через слой фиколла (GE, Ficoll Plaque Plus, Cat #17-1440-02) и центрифугировали при 2400 об/мин в течение 15 минут при комнатной температуре. Лейкоцитарную пленку, содержащую мононуклеарные клетки, собирали и три раза промывали ФСБ, чтобы минимизировать загрязнение тромбоцитами. Клетки ресуспендировали в ФСБ и оставляли на льду перед применением.
Гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) trans-vivo
[0212] 8-10×106 клетки МКПК, вместе с 0,25LF единиц диализованного в ФСБ столбнячного анатоксина (АС, Kuo Kwang, Cat № K4103-11) или ФСБ, вводили в конечном объеме 50 мкл в заднюю лапку самки мышей B6. Во всех экспериментах применяли мышей в возрасте от 6 до 8 недель. Толщина ноги была измерена до и через 24 часа после инъекции с применением индикаторного толщиномера. Значение, полученное до инъекции, вычиталось из значения, полученного после инъекции, чтобы получить фактическую толщину лапы. Все значения измерений были зарегистрированы в миллиметрах (мм). h15A7H и четырехвалентные антитела h15A7H, титрованные в ФСБ, внутривенно вводили в указанных дозах мышам B6 за один час до введения МКПК и АС. ФСБ применяли в качестве контрольного носителя. Испытывали 2 или 4 лапы (1 или 2 мыши) на лечение. Образцы плазмы собирали через 24 часа после введения Ат для проверки концентрации вариантов антитела. Процент ингибирования толщины лапы рассчитывали следующим образом:100 X (Δ толщина лапыноситель - Δ толщина лапыАт)/(Δ толщина лапыноситель - Δ толщина лапытолько МКПК).
ИФА для определения концентрации антител в плазме мыши
[0213] 96-луночные микротитровальные планшеты были покрыты антиидиотипическим антителом 12H5. 5 при 0,5мкг/мл в буфере для покрытия ИФА (30 мМ Na2CO3/100 мМ NaHCO3) при 4°C в течение ночи. Затем планшеты блокировали 200 мкл/лунка 0,5% БСА в ФСБ в течение 1 часа при комнатной температуре и промывали 3 раза промывочным буфером ИФА (0,05% Твин-20 в ФСБ), с последующим добавлением 50 мкл/лунка калибровочного стандарта или образцов. Калибровочные стандарты при серийном разбавлении были сперва получены в плазме нормальной мыши. Калибровочный стандарт или образцы предварительно разбавляли 1000X в растворе для разведения (0,1% БСА и 0,05% Твин-20 в ФСБ), чтобы получить конечную концентрацию 0,1% мышиной плазмы в растворах для разведения до дозирования в планшеты. Последующие разведения, в случае необходимости, были приготовлены с использованием растворов для разведения, содержащих 0,1% плазмы нормальной мыши. После 1 ч инкубации при комнатной температуре и 5 раз промывки с помощью промывочного буфера ИФА, вторичное антитело мыши к IgG4 человека4 pFc'-HRP (SouthernBiotech Cat. №9190-05; разбавление 1:15000) добавляли при 50 мкл/лунку и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 часа. Планшеты затем промывали 5 раз промывочным буфером ИФА с последующим добавлением субстрата ТМБ для проявления цвета. Реакции останавливали с помощью 0,5 н H2SO4, и измеряли значение оптической плотности при 450 нм в микротитрационном планшет-ридер (Molecular Device VERSAmax).
Результаты
ДСН-ПААГ-электрофорез гуманизированных 15A7H четырехвалентных антител в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях
[0214] Как изображено на Фиг. 2A-2C, ДСН-ПААГ-электрофорез с последующим окрашиванием Кумасси синим применяли для проверки молекулярного веса и базовой структуры четырехвалентных антител к PSGL-1 в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях. V2-V3, V4-V2 и LH10-g4pFc h15A7H в невосстанавливающих условиях дали основную полосу белка с молекулярной массой около 150 кДа (Фиг. 2A). В тех же условиях scFv2-LC IgG4p, LC-scFv2 IgG4p и scFv4-crIgG4p h15A7H дали основную полосу белка с молекулярной массой около 200 кДа (Фиг. 2B).
[0215] В восстанавливающих условиях V2-V3, V4-V2 и LH10 g4pFc h15A7H показали одну полосу с ожидаемой молекулярной массой около 75 кДа, тогда как и scFv2-LC, и LC-scFv2 h15A7H показали две основные полосы с одинаковой молекулярной массой около 50 кДа (Фиг. 2C). Одной из полос являлся слитый белок scFv-LC или LC-scFv, а другой - тяжелая цепь h15A7H дикого типа. scFv4-crIgG4p также показал две основные полосы, одна представляла собой слитый белок scFv-CH1-шарнир-CH2-CH3 (около 62,5 кДа), а другая - scFv-каппа-слитый белок (около 37,5 кДа) (Фиг. 2C). В качестве контроля, h15A7H давал единую полосу с ожидаемой молекулярной массой 150 кДа в невосстанавливающих гелях (Фиг. 2A и 2B) и две основные полосы (тяжелая цепь:50 кДа, легкая цепь:25 кДа) в восстанавливающих условиях (Фиг. 2C).
Связывание гуманизированных вариантов четырехвалентного антитела 15A7H с SP2/O-hPSGL-1 и SP2/O
[0216] Связывающую способность четырехвалентных антител h15A7H оценивали в клетках PSGL-1 SP2/O человека. Четырехвалентное антитело h15A7H положительно связывалось с SP2/O-hPSGL-1, но не с исходной SP2/O клеткой, лишенной антигена hPSGL-1 (ниже в таблице А). Дополнительно, h15A7H дикого типа и все четырехвалентные антитела h15A7H дали аналогичную активность связывания на SP2/O-hPSGL-1 (таблица A). Эти результаты показали, что четырехвалентные антитела h15A7H сохраняют связывающую реакционную способность к молекуле hPSGL-1.
Таблица А. Активность связывания (измеренная по средней интенсивности флуоресценции) гуманизированных четырехвалентных антител 15A7H к SP2/O-hPSGL-1 и SP2/O.
SP2/O-hPSGL-1 | SP2/O | |||||||
(мкг/мл) | 3 | 1 | 0,3 | 0,1 | 3 | 1 | 0,3 | 0,1 |
h15A7H | 4667 | 6400 | 5943 | 3410 | 17 | 26 | 8 | 8 |
LH10-g4pFc h15A7H | 4627 | 6677 | 5410 | 2902 | 19 | 18 | 31 | 30 |
V2-V3-g4pFc h15A7H | 4535 | 6260 | 5731 | 3156 | 33 | 22 | 26 | 17 |
scFv2-LC-IgG4p h15A7H | 4382 | 5744 | 7060 | 5543 | 24 | 12 | 11 | 24 |
V4-V2-g4pFc h15A7H | 4923 | 6779 | 6454 | 3953 | 23 | 20 | 21 | 14 |
scFv4-crIgG4p h15A7H | 5938 | 6013 | 4637 | 2640 | 30 | 28 | 18 | 8 |
LC-scFv2-IgG4p h15A7H | 6026 | 5822 | 3477 | 3042 | 24 | 23 | 25 | 3 |
hIgG4p (контроль) | 28 | НВ | НВ | НВ | 33 | НВ | НВ | НВ |
НВ: Не выполнено
Апоптоз клеток SP2/O-hPSGL-1in vitro , индуцированный гуманизированными четырехвалентными антителами 15A7H
[0217] Индукцию апоптоза оценивали с помощью окрашивания Annexin V и/или PI в клетках SP2/O-hPSGL-1 после инкубации с h15A7H или четырехвалентным антителом. Как показано ниже в таблице B, исходное антитело h15A7H не индуцирует апоптоз в клетках SP2/O-hPSGL-1 при тестируемой концентрации 0,5 и 0,0625 мкг/мл в отсутствие крос-линкера. При тестируемых концентрациях 0,5 мкг/мл все четырехвалентные антитела h15A7H индуцировали апоптоз (в пределах от 18 до 36%). При самой низкой тестируемой концентрации (0,0625 мкг/мл) 3 из 6 четырехвалентных антител h15A7H, LH10-g4pFc, V2-V3-g4pFc и scFv2-LC-IgG4p, индуцировали апоптоз в 12-16% клеток, тогда как V4-V2-g4pFc, scFv4-crIgG4p и LC-scFv2-IgG4p h15A7H не индуцируют гибель клеток SP2/O-hPSGL-1 при такой низкой дозе. Эти данные наглядно демонстрируют, что все четырехвалентные антитела h15A7H обладают способностью индуцировать апоптоз, но некоторые четырехвалентные антитела делают это с большей эффективностью.
Таблица В Апоптоз клеток SP2/O-hPSGL-1in vitro, индуцированный гуманизированными четырехвалентными антителами 15A7H.
% Апоптоза
(фон субстрата, n=4) |
0,5 мкг/мл | 0,0625 мкг/мл | ||
среднее значение | СО | среднее значение | СО | |
h15A7H | 2,75 | 3,95 | 1,5 | 3,32 |
LH10-g4pFc h15A7H | 26,75 | 11,32 | 11,75* | 5,50 |
V2-V3-g4pFc h15A7H | 26,5 | 5,69 | 13,5* | 5,45 |
scFv2-LC-IgG4p h15A7H | 23,75 | 9,00 | 15,5* | 5,69 |
V4-V2-g4pFc h15A7H | 30 | 4,55 | 0,5 | 3,00 |
scFv4-crIgG4p h15A7H | 35,75 | 7,63 | 1,75 | 2,87 |
LC-scFv2-IgG4p h15A7H | 18 | 9,83 | 0,5 | 4,20 |
СО: Стандартное отклонение
* P-значение T-теста <0,05 (по сравнению с обработкой V4-V2-g4pFc, scFv4-crIgG4p и LC-scFv2-IgG4p).
Эффективность h15A7H и четырехвалентных антител h15A7H при ингибировании ответа ГЗТ у мышей B6
trans-vivo
[0218] Описанные выше четырехвалентные антитела h15A7H и h15A7H были испытаны на их эффективность при ингибировании ответа ГЗТ у мышей B6 trans vivo. Антитело h15A7H вводили внутривенно мышам в дозах 10 и 1 мг/кг, тогда как четырехвалентные антитела вводили внутривенно мышам в дозах 1 и 0,3 мг/кг. Эксперименты проводили с использованием МКПК от четырех разных доноров, и % ингибирования был рассчитан для оценки ингибирующей эффективности in vivo.
[0219] Как показано ниже в таблице C, антитело h15A7H может ингибировать набухание лапы в среднем на 93% при дозе 10 мг/кг. Эффект ингибирования снижался до 23% при низкой дозе 1 мг/кг. Что касается четырехвалентных антител 15A7H, то такие варианты, как LH10-g4p Fc, V2-V3-g4pFc и scFv2-LC-IgG4p h15A7H, оставались эффективными в ингибировании даже при дозах 1 или 0,3 мг/кг (с ингибированием 59-76%).
Таблица С. Влияние h15A7H и четырехвалентных антител h15A7H на ГЗТ trans-vivo.
% ингибирования при 10 мг/кг | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 3 | Эксп. 4 | Среднее значение | СОС |
h15A7H | 71 | 104 | 82 | 116 | 93 | 10,2 |
% ингибирования при 1 мг/кг | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 3 | Эксп. 4 | Среднее значение | СОС |
h15A7H | 15 | 28 | 18 | 32 | 23 | 4,0 |
LH10-g4pFc h15A7H | 75 | 51 | 109 | 69 | 76 | 12,1 |
V2-V3-g4pFc h15A7H | 29 | 33 | 100 | 91 | 63 | 18,7 |
scFv2-LC-IgG4p h15A7H | 53 | 34 | 104 | 93 | 71 | 16,3 |
V4-V2-g4pFc h15A7H | НВ | НВ | 11 | 44 | 27 | 16,5 |
scFv4-crIgG4p h15A7H | 14 | 2 | -18 | 6 | 1 | 6,8 |
LC-scFv2-IgG4p h15A7H | -17 | 16 | 14 | 29 | 10 | 9,8 |
% ингибирования при 0,3 мг/кг | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 3 | Эксп. 4 | Среднее значение | СОС |
LH10-g4pFc h15A7H | 28 | 73 | 109 | 50 | 65 | 17,2 |
V2-V3-g4pFc h15A7H | 24 | 47 | 127 | 80 | 69 | 22,3 |
scFv2-LC-IgG4p h15A7H | 74 | 24 | 66 | 73 | 59 | 11,8 |
V4-V2-g4pFc h15A7H | НВ | НВ | -16 | 11 | -2 | 13,7 |
scFv4-crIgG4p h15A7H | 2 | 9 | -7 | 6 | 3 | 3,6 |
LC-scFv2-IgG4p h15A7H | -4 | 19 | 5 | 15 | 9 | 5,2 |
НВ: не выполнено; СОС: стандартная ошибка среднего
[0220] Уровни h15A7H и четырехвалентных антител h15A7H в плазме также измеряли через 24 часа после в/в введения (таблица D). Все антитела демонстрировали уровни в плазме около 6513-9025 нг/мл при 1 мг/кг, за исключением V4-V2-g4pFc, которое не обнаруживалось после 24 часов циркуляции in vivo. Не желая связывать себя теорией, считается, что эти результаты могут указывать на то, что разница в эффективности среди h15A7H и четырехвалентных вариантов может быть в основном обусловлена различиями в способности индуцировать апоптоз, как показано в таблице B.
Таблица D. Концентрации h15A7H и h15A7H четырехвалентных антител в плазме мышей B6.
Конц. (нг/мл) при 10 мг/кг | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 3 | Эксп. 4 |
Сред
нее значе ние |
СОС |
h15A7H | 103411 | 100189 | 104471 | 110820 | 104723 | 2227 |
Конц. (нг/мл) при 1 мг/кг | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 3 | Эксп. 4 |
Сред
нее значе ние |
СОС |
h15A7H | 9087 | 8578 | 8316 | 10118 | 9025 | 398 |
LH10-g4pFc h15A7H | 5698 | 7333 | 6335 | 6686 | 6513 | 508 |
V2-V3-g4pFc h15A7H | 6488 | 8173 | 6982 | 6478 | 7030 | 576 |
scFv2-LC-IgG4p h15A7H | 5766 | 7082 | 7452 | 5979 | 6570 | 786 |
V4-V2-g4pFc h15A7H | - | - | НПКО (<100) |
НПКО (<100) |
- | - |
scFv4-crIgG4p h15A7H | 6156 | 6924 | 5997 | 6353 | 6358 | 292 |
LC-scFv2-IgG4p h15A7H | 7323 | 8432 | 9014 | 9006 | 8444 | 535 |
Конц. (нг/мл) при 0,3 мг/кг | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 3 | Эксп. 4 |
Сред
нее значе ние |
СОС |
LH10-g4pFc h15A7H | 1419 | 1853 | 1906 | 1793 | 1743 | 160 |
V2-V3-g4pFc h15A7H | 1567 | 2284 | 2202 | 2065 | 2029 | 239 |
scFv2-LC-IgG4p h15A7H | 1344 | 1968 | 2112 | 1632 | 1764 | 241 |
V4-V2-g4pFc h15A7H | - | - | НПКО (<100) |
НПКО (<100) |
- | - |
scFv4-crIgG4p h15A7H | 1256 | 1909 | 1772 | 1668 | 1651 | 205 |
LC-scFv2-IgG4p h15A7H | 1765 | 2493 | 2325 | 2356 | 2235 | 225 |
НПКО: ниже предела количественного определения; СОС: стандартная ошибка среднего
[0221] Таким образом, эти данные показывают, что различные четырехвалентные антитела h15A7H обладают дифференциальными способностями индукции апоптоза in vitro, которые коррелируют с дифференциальными способностями ингибирования ответа ГЗТ на мышиной модели ГЗТ trans vivo. Те четырехвалентные антитела, которые имели более высокую эффективность индукции апоптоза, показали повышенную эффективность по сравнению с h15A7H на модели ГЗТ trans-vivo. Эти результаты указывают на то, что некоторые из этих четырехвалентных вариантов h15A7H могут иметь потенциальные преимущества перед h15A7H для дальнейших клинических исследований.
[0222] Хотя, для ясности понимания, вышеприведенные варианты реализации изобретения были описаны более подробно посредством иллюстрации и примера, описания и примеры не должны толковаться как ограничивающие объем данного изобретения.
ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ
Все полипептидные последовательности представлены от N-конца к С-концу, если не указано другое. Все полинуклеотидные последовательности представлены от 5' до 3', если не указано другое. Три CDR в каждой цепи подчеркнуты, а области линкера показаны строчными буквами.
Аминокислотная последовательность LH10-g4pFc h15A7H (SEQ ID NO: 1)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGQGTKVEIKggggsggggsEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKGLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsggggsggggsggggsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGQGTKVEIKggggsggggsEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKGLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsaaaESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
Последовательность кДНК LH10-g4pFc h15A7H (SEQ ID NO: 2)
GACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTCAAGGCACCAAGGTGGAAATCAAAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctGAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTCAAGGCACCAAGGTGGAAATCAAAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctGAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggaggcggaggttccgcggccgcaGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCACCATGCCCAGCACCTGAGTTCCTGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAGGCTAACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAATGA
Аминокислотная последовательность V2-V3-g4pFc h15A7H (SEQ ID NO: 3)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsggggsggggsggggsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIKastgsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGQGTKVEIKggggsggggsggggsggggsggggsEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKGLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsaaaESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
Последовательность кДНК V2-V3-g4pFc h15A7H (SEQ ID NO: 4)
GAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGTGTCTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTTGTGGCACCAAGGTGGAAATCAAAgcttcaaccggttcaGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTCAAGGCACCAAGGTGGAAATCAAAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggaggcggaggttccgcggccgcaGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCACCATGCCCAGCACCTGAGTTCCTGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAGGCTAACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAATGA
Аминокислотная последовательность V4-V2-g4pFc h15A7H (SEQ ID NO: 5)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIKggggsggggsggggsggggsggggsEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSastgsEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsggggsggggsggggsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIKggggsaaaESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
Последовательность кДНК V4-V2-g4pFc h15A7H (SEQ ID NO: 6)
GACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTTGTGGCACCAAGGTGGAAATCAAAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGTGTCTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAgcttcaaccggttcaGAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGTGTCTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTTGTGGCACCAAGGTGGAAATCAAAggaggcggaggttccgcggccgcaGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCACCATGCCCAGCACCTGAGTTCCTGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAGGCTAACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAATGA
Аминокислотная последовательность легкой цепи scFv2-LC-IgG4p h15A7H (SEQ ID NO: 7)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsggggsggggsggggsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIKastgsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Последовательность кДНК легкой цепи scFv2-LC-IgG4p h15A7H (SEQ ID NO: 8)
GAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGTGTCTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTTGTGGCACCAAGGTGGAAATCAAAgcttcaaccggttcaggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTCAAGGCACCAAGGTGGAAATCAAACGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG
Аминокислотная последовательность легкой цепи LC- scFv2-IgG4p h15A7H (SEQ ID NO: 9)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGECggggsggggsEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsggggsggggsggggsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIKAAAHHHHHHHHHH
Последовательность кДНК легкой цепи LC- scFv2-IgG4p h15A7H (SEQ ID NO: 10)
GACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTCAAGGCACCAAGGTGGAAATCAAACGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTggtggaggcggttcaggcggaggtggctctGAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGTGTCTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTTGTGGCACCAAGGTGGAAATCAAAGCGGCCGCACATCATCATCATCATCACCACCACCACCACTAG
Аминокислотная последовательность тяжелой цепи scFv2-LC-IgG4p h15A7H и LC- ScFv2 -IgG4p h15A7 (SEQ ID NO: 11)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKGLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
Последовательность кДНК тяжелой цепи scFv2-LC-IgG4p h15A7H и LC- scFv2 -IgG4p h15A7 (SEQ ID NO: 12)
GAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAGCTTCCACCAAGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACGAAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCACCATGCCCAGCACCTGAGTTCCTGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAGGCTAACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAATGA
Аминокислотная последовательность легкой цепи scFv4-crIgG4p h15A7H (SEQ ID NO:13)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsggggsggggsggggsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Последовательность кДНК легкой цепи scFv4-crIgG4p h15A7H (SEQ ID NO:14)
GAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGTGTCTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTTGTGGCACCAAGGTGGAAATCAAACGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG
Аминокислотная последовательность тяжелой цепи scFv4-crIgG4p h15A7H (SEQ ID NO:15)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSSggggsggggsggggsggggsggggsDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIKASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
Последовательность кДНК тяжелой цепи scFv4-crIgG4p h15A7H (SEQ ID NO:16)
GAAGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGAAGCTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGCCAGGCTCCAGGGAAGTGTCTCGAGTGGGTCGCATACATTAATGGTGGCAGTAGTACCATCTTCTATGCAAACGCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAATGCCAAGAACACCCTGTACCTGCAAATGAATTCTCTGAGGGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGATATGCTAGTTACGGAGGGGGTGCTATGGACTATTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACAGTCTCCTCAggtggaggcggttcaggcggaggtggctctggcggtggcggatccggaggcggaggttccggaggtggcggaagtGACATTCAGATGACCCAATCTCCGAGCTCTTTGTCTGCGTCTGTAGGGGATAGGGTCACTATCACCTGCAGATCTAGTCAGAGCATTGTACATAATGATGGAAACACCTATTTTGAATGGTACCAACAGAAACCAGGAAAGGCACCCAAGCTTCTCATCTATAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGTGTCCCATCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACACACTTCACCCTCACCATCTCTTCTCTGCAGCCGGAGGATTTCGCAACCTATTACTGTTTTCAAGGTTCATATGTTCCTCTCACGTTCGGTTGTGGCACCAAGGTGGAAATCAAAGCTTCCACCAAGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACGAAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCACCATGCCCAGCACCTGAGTTCCTGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAGGCTAACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAATGA
Аминокислотная последовательность CDR-H1 h15A7H (SEQ ID NO: 17)
SFGMH
Аминокислотная последовательность CDR-H2 h15A7H (SEQ ID NO: 18)
YINGGSSTIFYANAVKG
Аминокислотная последовательность CDR-H3 h15A7H (SEQ ID NO: 19)
YASYGGGAMDY
Аминокислотная последовательность CDR-L1 h15A7H (SEQ ID NO: 20)
RSSQSIVHNDGNTYFE
Аминокислотная последовательность CDR-L2 h15A7H (SEQ ID NO: 21)
KVSNRFS
Аминокислотная последовательность CDR-L3 h15A7H (SEQ ID NO: 22)
FQGSYVPLT
Аминокислотная последовательность VH h15A7H (SEQ ID NO: 23)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKGLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSS
Аминокислотная последовательность VL h15A7H (SEQ ID NO: 24)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGQGTKVEIK
Аминокислотная последовательность повторений последовательности линкера (SEQ ID NO: 25)
ggggs
Аминокислотная последовательность линкера с Fc (SEQ ID NO: 26)
ggggsaaa
Аминокислотная последовательность линкера taFv (SEQ ID NO: 27)
astgs
Аминокислотная последовательность линкера легкой цепи scFv (SEQ ID NO: 28)
astgsggggs
Аминокислотная последовательность VH G44C h15A7H (SEQ ID NO: 29)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPGKCLEWVAYINGGSSTIFYANAVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYASYGGGAMDYWGQGTLVTVSS
Аминокислотная последовательность VL Q10°C h15A7H (SEQ ID NO: 30)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSIVHNDGNTYFEWYQQKPGKAPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCFQGSYVPLTFGCGTKVEIK
Аминокислотная последовательность PSGL-1 человека (SEQ ID NO: 31)
MPLQLLLLLILLGPGNSLQLWDTWADEAEKALGPLLARDRRQATEYEYLDYDFLPETEPPEMLRNSTDTT
PLTGPGTPESTTVEPAARRSTGLDAGGAVTELTTELANMGNLSTDSAAMEIQTTQPAATEAQTTQPVPTE
AQTTPLAATEAQTTRLTATEAQTTPLAATEAQTTPPAATEAQTTQPTGLEAQTTAPAAMEAQTTAPAAME
AQTTPPAAMEAQTTQTTAMEAQTTAPEATEAQTTQPTATEAQTTPLAAMEALSTEPSATEALSMEPTTKR
GLFIPFSVSSVTHKGIPMAASNLSVNYPVGAPDHISVKQCLLAILILALVATIFFVCTVVLAVRLSRKGH
MYPVRNYSPTEMVCISSLLPDGGEGPSATANGGLSKAKSPGLTPEPREDREGDDLTLHSFLP
Аминокислотная последовательность более короткого варианта PSGL-1 человека (SEQ ID NO: 32)
MPLQLLLLLILLGPGNSLQLWDTWADEAEKALGPLLARDRRQATEYEYLDYDFLPETEPPEMLRNSTDTT
PLTGPGTPESTTVEPAARRSTGLDAGGAVTELTTELANMGNLSTDSAAMEIQTTQPAATEAQTTPLAATE
AQTTRLTATEAQTTPLAATEAQTTPPAATEAQTTQPTGLEAQTTAPAAMEAQTTAPAAMEAQTTPPAAME
AQTTQTTAMEAQTTAPEATEAQTTQPTATEAQTTPLAAMEALSTEPSATEALSMEPTTKRGLFIPFSVSS
VTHKGIPMAASNLSVNYPVGAPDHISVKQCLLAILILALVATIFFVCTVVLAVRLSRKGHMYPVRNYSPT
EMVCISSLLPDGGEGPSATANGGLSKAKSPGLTPEPREDREGDDLTLHSFLP
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> LIN, Rong-Hwa
LIN, Shih-Yao
TSAI, Yu-Ying
<120> ЧЕТЫРЕХВАЛЕНТНЫЕ АНТИТЕЛА К PSGL-1 И
ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
<130> 606592001340
<150> 62/276,806
<151> 2016-08-01
<160> 36
<170> FastSEQ для Windows версии 4,0
<210> 1
<211> 746
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 1
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
115 120 125
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
130 135 140
Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg
145 150 155 160
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asn Gly Gly
165 170 175
Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
180 185 190
Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
195 200 205
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr
210 215 220
Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
245 250 255
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr
260 265 270
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile
275 280 285
Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn Asp Gly Asn Thr Tyr
290 295 300
Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
305 310 315 320
Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
325 330 335
Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
340 345 350
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Tyr Val Pro Leu
355 360 365
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser
370 375 380
Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu
385 390 395 400
Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
405 410 415
Thr Phe Ser Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
420 425 430
Gly Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe
435 440 445
Tyr Ala Asn Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala
450 455 460
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
465 470 475 480
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met
485 490 495
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
500 505 510
Gly Ser Ala Ala Ala Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys
515 520 525
Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
530 535 540
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
545 550 555 560
Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp
565 570 575
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
580 585 590
Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
595 600 605
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
610 615 620
Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
625 630 635 640
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu
645 650 655
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
660 665 670
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
675 680 685
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
690 695 700
Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn
705 710 715 720
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
725 730 735
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
740 745
<210> 2
<211> 2241
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 2
gacattcaga tgacccaatc tccgagctct ttgtctgcgt ctgtagggga tagggtcact 60
atcacctgca gatctagtca gagcattgta cataatgatg gaaacaccta ttttgaatgg 120
taccaacaga aaccaggaaa ggcacccaag cttctcatct ataaagtttc caatcgattt 180
tctggtgtcc catccaggtt tagtggcagt gggtctggga cacacttcac cctcaccatc 240
tcttctctgc agccggagga tttcgcaacc tattactgtt ttcaaggttc atatgttcct 300
ctcacgttcg gtcaaggcac caaggtggaa atcaaaggtg gaggcggttc aggcggaggt 360
ggctctgaag tgcaactggt ggagtctggg ggaggcttag tgcagcctgg aggaagcttg 420
agactctcct gtgcagcctc tggattcact ttcagtagct ttggaatgca ctgggttcgc 480
caggctccag ggaagggact cgagtgggtc gcatacatta atggtggcag tagtaccatc 540
ttctatgcaa acgcagtgaa gggccgattc accatctcca gagataatgc caagaacacc 600
ctgtacctgc aaatgaattc tctgagggct gaggacacgg ccgtgtatta ctgtgcaaga 660
tatgctagtt acggaggggg tgctatggac tattggggcc aaggcaccct ggtcacagtc 720
tcctcaggtg gaggcggttc aggcggaggt ggctctggcg gtggcggatc cggaggcgga 780
ggttccggag gtggcggaag tgacattcag atgacccaat ctccgagctc tttgtctgcg 840
tctgtagggg atagggtcac tatcacctgc agatctagtc agagcattgt acataatgat 900
ggaaacacct attttgaatg gtaccaacag aaaccaggaa aggcacccaa gcttctcatc 960
tataaagttt ccaatcgatt ttctggtgtc ccatccaggt ttagtggcag tgggtctggg 1020
acacacttca ccctcaccat ctcttctctg cagccggagg atttcgcaac ctattactgt 1080
tttcaaggtt catatgttcc tctcacgttc ggtcaaggca ccaaggtgga aatcaaaggt 1140
ggaggcggtt caggcggagg tggctctgaa gtgcaactgg tggagtctgg gggaggctta 1200
gtgcagcctg gaggaagctt gagactctcc tgtgcagcct ctggattcac tttcagtagc 1260
tttggaatgc actgggttcg ccaggctcca gggaagggac tcgagtgggt cgcatacatt 1320
aatggtggca gtagtaccat cttctatgca aacgcagtga agggccgatt caccatctcc 1380
agagataatg ccaagaacac cctgtacctg caaatgaatt ctctgagggc tgaggacacg 1440
gccgtgtatt actgtgcaag atatgctagt tacggagggg gtgctatgga ctattggggc 1500
caaggcaccc tggtcacagt ctcctcagga ggcggaggtt ccgcggccgc agagtccaaa 1560
tatggtcccc catgcccacc atgcccagca cctgagttcc tggggggacc atcagtcttc 1620
ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 1680
gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc 1740
gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt 1800
gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 1860
aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 1920
cagccccgag agccacaggt gtacaccctg cccccatccc aggaggagat gaccaagaac 1980
caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 2040
gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac 2100
ggctccttct tcctctacag caggctaacc gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat 2160
gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca gaagagcctc 2220
tccctgtctc tgggtaaatg a 2241
<210> 3
<211> 756
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 3
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
130 135 140
Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val
145 150 155 160
Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His
165 170 175
Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
180 185 190
Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val
195 200 205
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr
210 215 220
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln
225 230 235 240
Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile
245 250 255
Lys Ala Ser Thr Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
260 265 270
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser
275 280 285
Gln Ser Ile Val His Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln
290 295 300
Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn
305 310 315 320
Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
325 330 335
His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr
340 345 350
Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly
355 360 365
Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
370 375 380
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
385 390 395 400
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser
405 410 415
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Gly
420 425 430
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
435 440 445
Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val Lys
450 455 460
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
465 470 475 480
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
485 490 495
Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
500 505 510
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ala Ala Glu
515 520 525
Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu
530 535 540
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
545 550 555 560
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
565 570 575
Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
580 585 590
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
595 600 605
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
610 615 620
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser
625 630 635 640
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
645 650 655
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
660 665 670
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
675 680 685
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
690 695 700
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr
705 710 715 720
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
725 730 735
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
740 745 750
Ser Leu Gly Lys
755
<210> 4
<211> 2271
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 4
gaagtgcaac tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggaggaag cttgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agctttggaa tgcactgggt tcgccaggct 120
ccagggaagt gtctcgagtg ggtcgcatac attaatggtg gcagtagtac catcttctat 180
gcaaacgcag tgaagggccg attcaccatc tccagagata atgccaagaa caccctgtac 240
ctgcaaatga attctctgag ggctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagatatgct 300
agttacggag ggggtgctat ggactattgg ggccaaggca ccctggtcac agtctcctca 360
ggtggaggcg gttcaggcgg aggtggctct ggcggtggcg gatccggagg cggaggttcc 420
ggaggtggcg gaagtgacat tcagatgacc caatctccga gctctttgtc tgcgtctgta 480
ggggataggg tcactatcac ctgcagatct agtcagagca ttgtacataa tgatggaaac 540
acctattttg aatggtacca acagaaacca ggaaaggcac ccaagcttct catctataaa 600
gtttccaatc gattttctgg tgtcccatcc aggtttagtg gcagtgggtc tgggacacac 660
ttcaccctca ccatctcttc tctgcagccg gaggatttcg caacctatta ctgttttcaa 720
ggttcatatg ttcctctcac gttcggttgt ggcaccaagg tggaaatcaa agcttcaacc 780
ggttcagaca ttcagatgac ccaatctccg agctctttgt ctgcgtctgt aggggatagg 840
gtcactatca cctgcagatc tagtcagagc attgtacata atgatggaaa cacctatttt 900
gaatggtacc aacagaaacc aggaaaggca cccaagcttc tcatctataa agtttccaat 960
cgattttctg gtgtcccatc caggtttagt ggcagtgggt ctgggacaca cttcaccctc 1020
accatctctt ctctgcagcc ggaggatttc gcaacctatt actgttttca aggttcatat 1080
gttcctctca cgttcggtca aggcaccaag gtggaaatca aaggtggagg cggttcaggc 1140
ggaggtggct ctggcggtgg cggatccgga ggcggaggtt ccggaggtgg cggaagtgaa 1200
gtgcaactgg tggagtctgg gggaggctta gtgcagcctg gaggaagctt gagactctcc 1260
tgtgcagcct ctggattcac tttcagtagc tttggaatgc actgggttcg ccaggctcca 1320
gggaagggac tcgagtgggt cgcatacatt aatggtggca gtagtaccat cttctatgca 1380
aacgcagtga agggccgatt caccatctcc agagataatg ccaagaacac cctgtacctg 1440
caaatgaatt ctctgagggc tgaggacacg gccgtgtatt actgtgcaag atatgctagt 1500
tacggagggg gtgctatgga ctattggggc caaggcaccc tggtcacagt ctcctcagga 1560
ggcggaggtt ccgcggccgc agagtccaaa tatggtcccc catgcccacc atgcccagca 1620
cctgagttcc tggggggacc atcagtcttc ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc 1680
atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc 1740
gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 1800
cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 1860
gactggctga acggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc 1920
atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag agccacaggt gtacaccctg 1980
cccccatccc aggaggagat gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 2040
ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 2100
aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caggctaacc 2160
gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct 2220
ctgcacaacc actacacaca gaagagcctc tccctgtctc tgggtaaatg a 2271
<210> 5
<211> 756
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 5
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser
130 135 140
Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
145 150 155 160
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg Gln
165 170 175
Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser
180 185 190
Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
195 200 205
Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
210 215 220
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly
225 230 235 240
Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
245 250 255
Ser Ala Ser Thr Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly
260 265 270
Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly
275 280 285
Phe Thr Phe Ser Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly
290 295 300
Lys Cys Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile
305 310 315 320
Phe Tyr Ala Asn Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
325 330 335
Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
340 345 350
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala
355 360 365
Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
370 375 380
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
385 390 395 400
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
405 410 415
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser
420 425 430
Ser Gln Ser Ile Val His Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr
435 440 445
Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser
450 455 460
Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly
465 470 475 480
Thr His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala
485 490 495
Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys
500 505 510
Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ala Ala Glu
515 520 525
Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu
530 535 540
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
545 550 555 560
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
565 570 575
Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
580 585 590
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
595 600 605
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
610 615 620
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser
625 630 635 640
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
645 650 655
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
660 665 670
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
675 680 685
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
690 695 700
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr
705 710 715 720
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
725 730 735
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
740 745 750
Ser Leu Gly Lys
755
<210> 6
<211> 2271
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 6
gacattcaga tgacccaatc tccgagctct ttgtctgcgt ctgtagggga tagggtcact 60
atcacctgca gatctagtca gagcattgta cataatgatg gaaacaccta ttttgaatgg 120
taccaacaga aaccaggaaa ggcacccaag cttctcatct ataaagtttc caatcgattt 180
tctggtgtcc catccaggtt tagtggcagt gggtctggga cacacttcac cctcaccatc 240
tcttctctgc agccggagga tttcgcaacc tattactgtt ttcaaggttc atatgttcct 300
ctcacgttcg gttgtggcac caaggtggaa atcaaaggtg gaggcggttc aggcggaggt 360
ggctctggcg gtggcggatc cggaggcgga ggttccggag gtggcggaag tgaagtgcaa 420
ctggtggagt ctgggggagg cttagtgcag cctggaggaa gcttgagact ctcctgtgca 480
gcctctggat tcactttcag tagctttgga atgcactggg ttcgccaggc tccagggaag 540
tgtctcgagt gggtcgcata cattaatggt ggcagtagta ccatcttcta tgcaaacgca 600
gtgaagggcc gattcaccat ctccagagat aatgccaaga acaccctgta cctgcaaatg 660
aattctctga gggctgagga cacggccgtg tattactgtg caagatatgc tagttacgga 720
gggggtgcta tggactattg gggccaaggc accctggtca cagtctcctc agcttcaacc 780
ggttcagaag tgcaactggt ggagtctggg ggaggcttag tgcagcctgg aggaagcttg 840
agactctcct gtgcagcctc tggattcact ttcagtagct ttggaatgca ctgggttcgc 900
caggctccag ggaagtgtct cgagtgggtc gcatacatta atggtggcag tagtaccatc 960
ttctatgcaa acgcagtgaa gggccgattc accatctcca gagataatgc caagaacacc 1020
ctgtacctgc aaatgaattc tctgagggct gaggacacgg ccgtgtatta ctgtgcaaga 1080
tatgctagtt acggaggggg tgctatggac tattggggcc aaggcaccct ggtcacagtc 1140
tcctcaggtg gaggcggttc aggcggaggt ggctctggcg gtggcggatc cggaggcgga 1200
ggttccggag gtggcggaag tgacattcag atgacccaat ctccgagctc tttgtctgcg 1260
tctgtagggg atagggtcac tatcacctgc agatctagtc agagcattgt acataatgat 1320
ggaaacacct attttgaatg gtaccaacag aaaccaggaa aggcacccaa gcttctcatc 1380
tataaagttt ccaatcgatt ttctggtgtc ccatccaggt ttagtggcag tgggtctggg 1440
acacacttca ccctcaccat ctcttctctg cagccggagg atttcgcaac ctattactgt 1500
tttcaaggtt catatgttcc tctcacgttc ggttgtggca ccaaggtgga aatcaaagga 1560
ggcggaggtt ccgcggccgc agagtccaaa tatggtcccc catgcccacc atgcccagca 1620
cctgagttcc tggggggacc atcagtcttc ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc 1680
atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc 1740
gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 1800
cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 1860
gactggctga acggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc 1920
atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag agccacaggt gtacaccctg 1980
cccccatccc aggaggagat gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 2040
ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 2100
aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caggctaacc 2160
gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct 2220
ctgcacaacc actacacaca gaagagcctc tccctgtctc tgggtaaatg a 2271
<210> 7
<211> 486
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
130 135 140
Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val
145 150 155 160
Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His
165 170 175
Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
180 185 190
Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val
195 200 205
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr
210 215 220
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln
225 230 235 240
Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile
245 250 255
Lys Ala Ser Thr Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr
260 265 270
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile
275 280 285
Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn Asp Gly Asn Thr Tyr
290 295 300
Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
305 310 315 320
Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
325 330 335
Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
340 345 350
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Tyr Val Pro Leu
355 360 365
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
370 375 380
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
385 390 395 400
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
405 410 415
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
420 425 430
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
435 440 445
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
450 455 460
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
465 470 475 480
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
485
<210> 8
<211> 1461
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 8
gaagtgcaac tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggaggaag cttgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agctttggaa tgcactgggt tcgccaggct 120
ccagggaagt gtctcgagtg ggtcgcatac attaatggtg gcagtagtac catcttctat 180
gcaaacgcag tgaagggccg attcaccatc tccagagata atgccaagaa caccctgtac 240
ctgcaaatga attctctgag ggctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagatatgct 300
agttacggag ggggtgctat ggactattgg ggccaaggca ccctggtcac agtctcctca 360
ggtggaggcg gttcaggcgg aggtggctct ggcggtggcg gatccggagg cggaggttcc 420
ggaggtggcg gaagtgacat tcagatgacc caatctccga gctctttgtc tgcgtctgta 480
ggggataggg tcactatcac ctgcagatct agtcagagca ttgtacataa tgatggaaac 540
acctattttg aatggtacca acagaaacca ggaaaggcac ccaagcttct catctataaa 600
gtttccaatc gattttctgg tgtcccatcc aggtttagtg gcagtgggtc tgggacacac 660
ttcaccctca ccatctcttc tctgcagccg gaggatttcg caacctatta ctgttttcaa 720
ggttcatatg ttcctctcac gttcggttgt ggcaccaagg tggaaatcaa agcttcaacc 780
ggttcaggag gtggcggaag tgacattcag atgacccaat ctccgagctc tttgtctgcg 840
tctgtagggg atagggtcac tatcacctgc agatctagtc agagcattgt acataatgat 900
ggaaacacct attttgaatg gtaccaacag aaaccaggaa aggcacccaa gcttctcatc 960
tataaagttt ccaatcgatt ttctggtgtc ccatccaggt ttagtggcag tgggtctggg 1020
acacacttca ccctcaccat ctcttctctg cagccggagg atttcgcaac ctattactgt 1080
tttcaaggtt catatgttcc tctcacgttc ggtcaaggca ccaaggtgga aatcaaacga 1140
actgtggctg caccatctgt cttcatcttc ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga 1200
actgcctctg ttgtgtgcct gctgaataac ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg 1260
aaggtggata acgccctcca atcgggtaac tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc 1320
aaggacagca cctacagcct cagcagcacc ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa 1380
cacaaagtct acgcctgcga agtcacccat cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc 1440
ttcaacaggg gagagtgtta g 1461
<210> 9
<211> 499
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 9
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser
210 215 220
Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu
225 230 235 240
Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
245 250 255
Thr Phe Ser Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
260 265 270
Cys Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe
275 280 285
Tyr Ala Asn Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala
290 295 300
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
305 310 315 320
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met
325 330 335
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
340 345 350
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
355 360 365
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
370 375 380
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser
385 390 395 400
Gln Ser Ile Val His Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln
405 410 415
Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn
420 425 430
Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
435 440 445
His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr
450 455 460
Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys Gly
465 470 475 480
Thr Lys Val Glu Ile Lys Ala Ala Ala His His His His His His His
485 490 495
His His His
<210> 10
<211> 1500
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 10
gacattcaga tgacccaatc tccgagctct ttgtctgcgt ctgtagggga tagggtcact 60
atcacctgca gatctagtca gagcattgta cataatgatg gaaacaccta ttttgaatgg 120
taccaacaga aaccaggaaa ggcacccaag cttctcatct ataaagtttc caatcgattt 180
tctggtgtcc catccaggtt tagtggcagt gggtctggga cacacttcac cctcaccatc 240
tcttctctgc agccggagga tttcgcaacc tattactgtt ttcaaggttc atatgttcct 300
ctcacgttcg gtcaaggcac caaggtggaa atcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360
ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420
ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480
tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540
agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600
gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgtggt 660
ggaggcggtt caggcggagg tggctctgaa gtgcaactgg tggagtctgg gggaggctta 720
gtgcagcctg gaggaagctt gagactctcc tgtgcagcct ctggattcac tttcagtagc 780
tttggaatgc actgggttcg ccaggctcca gggaagtgtc tcgagtgggt cgcatacatt 840
aatggtggca gtagtaccat cttctatgca aacgcagtga agggccgatt caccatctcc 900
agagataatg ccaagaacac cctgtacctg caaatgaatt ctctgagggc tgaggacacg 960
gccgtgtatt actgtgcaag atatgctagt tacggagggg gtgctatgga ctattggggc 1020
caaggcaccc tggtcacagt ctcctcaggt ggaggcggtt caggcggagg tggctctggc 1080
ggtggcggat ccggaggcgg aggttccgga ggtggcggaa gtgacattca gatgacccaa 1140
tctccgagct ctttgtctgc gtctgtaggg gatagggtca ctatcacctg cagatctagt 1200
cagagcattg tacataatga tggaaacacc tattttgaat ggtaccaaca gaaaccagga 1260
aaggcaccca agcttctcat ctataaagtt tccaatcgat tttctggtgt cccatccagg 1320
tttagtggca gtgggtctgg gacacacttc accctcacca tctcttctct gcagccggag 1380
gatttcgcaa cctattactg ttttcaaggt tcatatgttc ctctcacgtt cggttgtggc 1440
accaaggtgg aaatcaaagc ggccgcacat catcatcatc atcaccacca ccaccactag 1500
<210> 11
<211> 447
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 11
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 12
<211> 1344
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 12
gaagtgcaac tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggaggaag cttgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agctttggaa tgcactgggt tcgccaggct 120
ccagggaagg gactcgagtg ggtcgcatac attaatggtg gcagtagtac catcttctat 180
gcaaacgcag tgaagggccg attcaccatc tccagagata atgccaagaa caccctgtac 240
ctgcaaatga attctctgag ggctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagatatgct 300
agttacggag ggggtgctat ggactattgg ggccaaggca ccctggtcac agtctcctca 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 1260
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 1320
ctctccctgt ctctgggtaa atga 1344
<210> 13
<211> 364
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
130 135 140
Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val
145 150 155 160
Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His
165 170 175
Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
180 185 190
Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val
195 200 205
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr
210 215 220
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln
225 230 235 240
Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile
245 250 255
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
260 265 270
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
275 280 285
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
290 295 300
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
305 310 315 320
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
325 330 335
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
340 345 350
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
355 360
<210> 14
<211> 1095
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 14
gaagtgcaac tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggaggaag cttgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agctttggaa tgcactgggt tcgccaggct 120
ccagggaagt gtctcgagtg ggtcgcatac attaatggtg gcagtagtac catcttctat 180
gcaaacgcag tgaagggccg attcaccatc tccagagata atgccaagaa caccctgtac 240
ctgcaaatga attctctgag ggctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagatatgct 300
agttacggag ggggtgctat ggactattgg ggccaaggca ccctggtcac agtctcctca 360
ggtggaggcg gttcaggcgg aggtggctct ggcggtggcg gatccggagg cggaggttcc 420
ggaggtggcg gaagtgacat tcagatgacc caatctccga gctctttgtc tgcgtctgta 480
ggggataggg tcactatcac ctgcagatct agtcagagca ttgtacataa tgatggaaac 540
acctattttg aatggtacca acagaaacca ggaaaggcac ccaagcttct catctataaa 600
gtttccaatc gattttctgg tgtcccatcc aggtttagtg gcagtgggtc tgggacacac 660
ttcaccctca ccatctcttc tctgcagccg gaggatttcg caacctatta ctgttttcaa 720
ggttcatatg ttcctctcac gttcggttgt ggcaccaagg tggaaatcaa acgaactgtg 780
gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc 840
tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg 900
gataacgccc tccaatcggg taactcccag gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac 960
agcacctaca gcctcagcag caccctgacg ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa 1020
gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac 1080
aggggagagt gttag 1095
<210> 15
<211> 584
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 15
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
130 135 140
Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val
145 150 155 160
Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His
165 170 175
Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
180 185 190
Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val
195 200 205
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr
210 215 220
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln
225 230 235 240
Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile
245 250 255
Lys Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser
260 265 270
Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp
275 280 285
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr
290 295 300
Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr
305 310 315 320
Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys
325 330 335
Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
340 345 350
Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala
355 360 365
Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
370 375 380
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
385 390 395 400
Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val
405 410 415
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
420 425 430
Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
435 440 445
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly
450 455 460
Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
465 470 475 480
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr
485 490 495
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
500 505 510
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
515 520 525
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
530 535 540
Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe
545 550 555 560
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
565 570 575
Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
580
<210> 16
<211> 1755
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 16
gaagtgcaac tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggaggaag cttgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agctttggaa tgcactgggt tcgccaggct 120
ccagggaagt gtctcgagtg ggtcgcatac attaatggtg gcagtagtac catcttctat 180
gcaaacgcag tgaagggccg attcaccatc tccagagata atgccaagaa caccctgtac 240
ctgcaaatga attctctgag ggctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagatatgct 300
agttacggag ggggtgctat ggactattgg ggccaaggca ccctggtcac agtctcctca 360
ggtggaggcg gttcaggcgg aggtggctct ggcggtggcg gatccggagg cggaggttcc 420
ggaggtggcg gaagtgacat tcagatgacc caatctccga gctctttgtc tgcgtctgta 480
ggggataggg tcactatcac ctgcagatct agtcagagca ttgtacataa tgatggaaac 540
acctattttg aatggtacca acagaaacca ggaaaggcac ccaagcttct catctataaa 600
gtttccaatc gattttctgg tgtcccatcc aggtttagtg gcagtgggtc tgggacacac 660
ttcaccctca ccatctcttc tctgcagccg gaggatttcg caacctatta ctgttttcaa 720
ggttcatatg ttcctctcac gttcggttgt ggcaccaagg tggaaatcaa agcttccacc 780
aagggcccat ccgtcttccc cctggcgccc tgctccagga gcacctccga gagcacagcc 840
gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 900
ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 960
tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacgaagac ctacacctgc 1020
aacgtagatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga gagttgagtc caaatatggt 1080
cccccatgcc caccatgccc agcacctgag ttcctggggg gaccatcagt cttcctgttc 1140
cccccaaaac ccaaggacac tctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac gtgcgtggtg 1200
gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc cagttcaact ggtacgtgga tggcgtggag 1260
gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagttca acagcacgta ccgtgtggtc 1320
agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaacggca aggagtacaa gtgcaaggtc 1380
tccaacaaag gcctcccgtc ctccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc 1440
cgagagccac aggtgtacac cctgccccca tcccaggagg agatgaccaa gaaccaggtc 1500
agcctgacct gcctggtcaa aggcttctac cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc 1560
aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgctggactc cgacggctcc 1620
ttcttcctct acagcaggct aaccgtggac aagagcaggt ggcaggaggg gaatgtcttc 1680
tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cacagaagag cctctccctg 1740
tctctgggta aatga 1755
<210> 17
<211> 5
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 17
Ser Phe Gly Met His
1 5
<210> 18
<211> 17
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 18
Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 19
<211> 11
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 19
Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 20
<211> 16
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 20
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15
<210> 21
<211> 7
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 21
Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 22
<211> 9
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 22
Phe Gln Gly Ser Tyr Val Pro Leu Thr
1 5
<210> 23
<211> 120
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 23
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 24
<211> 112
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 24
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 25
<211> 5
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 25
Gly Gly Gly Gly Ser
1 5
<210> 26
<211> 8
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 26
Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ala Ala
1 5
<210> 27
<211> 5
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 27
Ala Ser Thr Gly Ser
1 5
<210> 28
<211> 10
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 28
Ala Ser Thr Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 29
<211> 120
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 29
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Asn Gly Gly Ser Ser Thr Ile Phe Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Ser Tyr Gly Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 30
<211> 112
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 30
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser Tyr Val Pro Leu Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 31
<211> 412
<212> ПРТ
<213> Homo Sapiens
<400> 31
Met Pro Leu Gln Leu Leu Leu Leu Leu Ile Leu Leu Gly Pro Gly Asn
1 5 10 15
Ser Leu Gln Leu Trp Asp Thr Trp Ala Asp Glu Ala Glu Lys Ala Leu
20 25 30
Gly Pro Leu Leu Ala Arg Asp Arg Arg Gln Ala Thr Glu Tyr Glu Tyr
35 40 45
Leu Asp Tyr Asp Phe Leu Pro Glu Thr Glu Pro Pro Glu Met Leu Arg
50 55 60
Asn Ser Thr Asp Thr Thr Pro Leu Thr Gly Pro Gly Thr Pro Glu Ser
65 70 75 80
Thr Thr Val Glu Pro Ala Ala Arg Arg Ser Thr Gly Leu Asp Ala Gly
85 90 95
Gly Ala Val Thr Glu Leu Thr Thr Glu Leu Ala Asn Met Gly Asn Leu
100 105 110
Ser Thr Asp Ser Ala Ala Met Glu Ile Gln Thr Thr Gln Pro Ala Ala
115 120 125
Thr Glu Ala Gln Thr Thr Gln Pro Val Pro Thr Glu Ala Gln Thr Thr
130 135 140
Pro Leu Ala Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr Arg Leu Thr Ala Thr Glu
145 150 155 160
Ala Gln Thr Thr Pro Leu Ala Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr Pro Pro
165 170 175
Ala Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr Gln Pro Thr Gly Leu Glu Ala Gln
180 185 190
Thr Thr Ala Pro Ala Ala Met Glu Ala Gln Thr Thr Ala Pro Ala Ala
195 200 205
Met Glu Ala Gln Thr Thr Pro Pro Ala Ala Met Glu Ala Gln Thr Thr
210 215 220
Gln Thr Thr Ala Met Glu Ala Gln Thr Thr Ala Pro Glu Ala Thr Glu
225 230 235 240
Ala Gln Thr Thr Gln Pro Thr Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr Pro Leu
245 250 255
Ala Ala Met Glu Ala Leu Ser Thr Glu Pro Ser Ala Thr Glu Ala Leu
260 265 270
Ser Met Glu Pro Thr Thr Lys Arg Gly Leu Phe Ile Pro Phe Ser Val
275 280 285
Ser Ser Val Thr His Lys Gly Ile Pro Met Ala Ala Ser Asn Leu Ser
290 295 300
Val Asn Tyr Pro Val Gly Ala Pro Asp His Ile Ser Val Lys Gln Cys
305 310 315 320
Leu Leu Ala Ile Leu Ile Leu Ala Leu Val Ala Thr Ile Phe Phe Val
325 330 335
Cys Thr Val Val Leu Ala Val Arg Leu Ser Arg Lys Gly His Met Tyr
340 345 350
Pro Val Arg Asn Tyr Ser Pro Thr Glu Met Val Cys Ile Ser Ser Leu
355 360 365
Leu Pro Asp Gly Gly Glu Gly Pro Ser Ala Thr Ala Asn Gly Gly Leu
370 375 380
Ser Lys Ala Lys Ser Pro Gly Leu Thr Pro Glu Pro Arg Glu Asp Arg
385 390 395 400
Glu Gly Asp Asp Leu Thr Leu His Ser Phe Leu Pro
405 410
<210> 32
<211> 402
<212> ПРТ
<213> Homo Sapiens
<400> 32
Met Pro Leu Gln Leu Leu Leu Leu Leu Ile Leu Leu Gly Pro Gly Asn
1 5 10 15
Ser Leu Gln Leu Trp Asp Thr Trp Ala Asp Glu Ala Glu Lys Ala Leu
20 25 30
Gly Pro Leu Leu Ala Arg Asp Arg Arg Gln Ala Thr Glu Tyr Glu Tyr
35 40 45
Leu Asp Tyr Asp Phe Leu Pro Glu Thr Glu Pro Pro Glu Met Leu Arg
50 55 60
Asn Ser Thr Asp Thr Thr Pro Leu Thr Gly Pro Gly Thr Pro Glu Ser
65 70 75 80
Thr Thr Val Glu Pro Ala Ala Arg Arg Ser Thr Gly Leu Asp Ala Gly
85 90 95
Gly Ala Val Thr Glu Leu Thr Thr Glu Leu Ala Asn Met Gly Asn Leu
100 105 110
Ser Thr Asp Ser Ala Ala Met Glu Ile Gln Thr Thr Gln Pro Ala Ala
115 120 125
Thr Glu Ala Gln Thr Thr Pro Leu Ala Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr
130 135 140
Arg Leu Thr Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr Pro Leu Ala Ala Thr Glu
145 150 155 160
Ala Gln Thr Thr Pro Pro Ala Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr Gln Pro
165 170 175
Thr Gly Leu Glu Ala Gln Thr Thr Ala Pro Ala Ala Met Glu Ala Gln
180 185 190
Thr Thr Ala Pro Ala Ala Met Glu Ala Gln Thr Thr Pro Pro Ala Ala
195 200 205
Met Glu Ala Gln Thr Thr Gln Thr Thr Ala Met Glu Ala Gln Thr Thr
210 215 220
Ala Pro Glu Ala Thr Glu Ala Gln Thr Thr Gln Pro Thr Ala Thr Glu
225 230 235 240
Ala Gln Thr Thr Pro Leu Ala Ala Met Glu Ala Leu Ser Thr Glu Pro
245 250 255
Ser Ala Thr Glu Ala Leu Ser Met Glu Pro Thr Thr Lys Arg Gly Leu
260 265 270
Phe Ile Pro Phe Ser Val Ser Ser Val Thr His Lys Gly Ile Pro Met
275 280 285
Ala Ala Ser Asn Leu Ser Val Asn Tyr Pro Val Gly Ala Pro Asp His
290 295 300
Ile Ser Val Lys Gln Cys Leu Leu Ala Ile Leu Ile Leu Ala Leu Val
305 310 315 320
Ala Thr Ile Phe Phe Val Cys Thr Val Val Leu Ala Val Arg Leu Ser
325 330 335
Arg Lys Gly His Met Tyr Pro Val Arg Asn Tyr Ser Pro Thr Glu Met
340 345 350
Val Cys Ile Ser Ser Leu Leu Pro Asp Gly Gly Glu Gly Pro Ser Ala
355 360 365
Thr Ala Asn Gly Gly Leu Ser Lys Ala Lys Ser Pro Gly Leu Thr Pro
370 375 380
Glu Pro Arg Glu Asp Arg Glu Gly Asp Asp Leu Thr Leu His Ser Phe
385 390 395 400
Leu Pro
<210> 33
<211> 25
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 33
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25
<210> 34
<211> 10
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 34
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 35
<211> 11
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 35
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10
<210> 36
<211> 12
<212> ПРТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 36
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
1 5 10
<---
Claims (89)
1. Четырехвалентное антитело, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1, где указанное четырехвалентное антитело содержит димер двух мономеров, при этом каждый мономер указанного димера содержит одноцепочечный полипептид, содержащий от N-конца к C-концу:
(a) первый вариабельный домен легкой цепи (VL);
(b) первую линкерную последовательность;
(c) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH);
(d) вторую линкерную последовательность;
(e) второй домен VL;
(f) третью линкерную последовательность;
(g) второй домен VH;
(h) четвертую линкерную последовательность; и
(i) домен Fc антитела,
при этом каждый из первого и второго доменов VL содержит (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22; при этом каждый из первого и второго доменов VH содержит (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19; где первый домен VL формирует единицу связывания VH-VL со вторым доменом VH и первый домен VH формирует единицу связывания VH-VL со вторым доменом VL, и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к человеческому PSGL-1.
2. Четырехвалентное антитело по п. 1, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 23.
3. Четырехвалентное антитело по п. 1, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 29.
4. Четырехвалентное антитело по п. 1, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 24.
5. Четырехвалентное антитело по п. 1, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 30.
6. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, что первая, вторая и третья линкерные последовательности каждая содержит два или более повтора аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 25 или первая, вторая и третья линкерные последовательности содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, 34, 35 или 36.
7. Четырехвалентное антитело по п. 6, отличающееся тем, что первая и третья линкерные последовательности имеют одинаковую последовательность и содержат два повтора SEQ ID NO: 25.
8. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-7, отличающееся тем, что вторая линкерная последовательность содержит пять повторов SEQ ID NO: 25.
9. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-8, отличающееся тем, что четвертая линкерная последовательность содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
10. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-9, отличающееся тем, что каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 1.
11. Четырехвалентное антитело по п. 10, отличающееся тем, что каждый из двух одноцепочечных полипептидов кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2.
12. Четырехвалентное антитело, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1, где указанное четырехвалентное антитело содержит димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера включает в себя одноцепочечный полипептид, содержащий от N-конца к C-концу:
(a) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH);
(b) первую линкерную последовательность;
(c) первый вариабельный домен легкой цепи (VL);
(d) вторую линкерную последовательность;
(e) второй домен VL;
(f) третью линкерную последовательность;
(g) второй домен VH;
(h) четвертую линкерную последовательность; и
(i) домен Fc антитела,
при этом каждый из первого и второго доменов VL содержит (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22; при этом каждый из первого и второго доменов VH содержит (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19; и при этом каждый из первого и второго доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH, и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к человеческому PSGL-1.
13. Четырехвалентное антитело по п. 12, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 23.
14. Четырехвалентное антитело по п. 12, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 29.
15. Четырехвалентное антитело по п. 12, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 24.
16. Четырехвалентное антитело по п. 12, отличающееся тем, что каждый из двух доменов VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 30.
17. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 12-16, отличающееся тем, что первая и третья линкерные последовательности имеют одинаковую последовательность, содержащую пять повторов SEQ ID NO: 25.
18. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 12-17, отличающееся тем, что вторая линкерная последовательность содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27.
19. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 12-18, отличающееся тем, что четвертая линкерная последовательность содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
20. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 12-19, отличающееся тем, что каждый из двух одноцепочечных полипептидов содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 3.
21. Четырехвалентное антитело по п. 20, отличающееся тем, что каждый из двух одноцепочечных полипептидов кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 4.
22. Четырехвалентное антитело, которое специфически связывается с человеческим PSGL-1, где указанное четырехвалентное антитело содержит димер двух мономеров, при этом каждый мономер димера содержит тяжелую цепь антитела и легкую цепь антитела;
при этом легкая цепь антитела содержит от N-конца к С-концу:
(i) первый вариабельный домен тяжелой цепи (VH),
(ii) первую линкерную последовательность,
(iii) первый вариабельный домен легкой цепи (VL),
(iv) вторую линкерную последовательность,
(v) второй домен VL и
(vi) константный домен легкой цепи (CL);
при этом тяжелая цепь антитела содержит:
(i) второй домен VH и
(ii) константную область тяжелой цепи, содержащую первый домен константной области тяжелой цепи (CH1), шарнирную область антитела, второй домен константной области тяжелой цепи (CH2) и третий домен константной области тяжелой цепи (CH3);
при этом каждый из первого и второго доменов VL содержит (i) CDR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) CDR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21; и (iii) CDR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22; при этом каждый из первого и второго доменов VH содержит (i) CDR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; (ii) CDR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18; и (iii) CDR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19; и при этом каждый из первого и второго доменов VL образует единицу связывания VH-VL с соответствующим доменом VH первого и второго доменов VH, и при этом каждая из двух единиц связывания VH-VL специфична к человеческому PSGL-1.
23. Четырехвалентное антитело по п. 22, отличающееся тем, что каждый первый и второй домены VH содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 23.
24. Четырехвалентное антитело по п. 22, отличающееся тем, что каждый первый и второй домены VH содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 29.
25. Четырехвалентное антитело по п. 22, отличающееся тем, что каждый первый и второй домены VL содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 24.
26. Четырехвалентное антитело по п. 22, отличающееся тем, что каждый первый и второй домены VL содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 30.
27. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 22-26, отличающееся тем, что домен CL представляет собой домен CL каппа.
28. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 22-27, отличающееся тем, что первая линкерная последовательность содержит пять повторов SEQ ID NO: 25.
29 Четырехвалентное антитело по любому из пп. 22-28, отличающееся тем, что вторая линкерная последовательность содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28.
30. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 22-29, отличающееся тем, что легкая цепь антитела содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 7.
31. Четырехвалентное антитело по п. 30, отличающееся тем, что легкая цепь антитела кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 8.
32. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 22-31, отличающееся тем, что тяжелая цепь антитела содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 или аминокислотную последовательность, имеющую последовательность по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 11.
33. Четырехвалентное антитело по п. 32, отличающееся тем, что тяжелая цепь антитела кодируется полинуклеотидом, содержащим полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 12.
34. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-33, отличающееся тем, что домен Fc антитела представляет собой домен Fc антитела человека.
35. Четырехвалентное антитело по п. 34, отличающееся тем, что домен Fc антитела представляет собой домен Fc IgG4 человека.
36. Четырехвалентное антитело по п. 35, отличающееся тем, что домен Fc IgG4 человека содержит последовательность шарнирной области, содержащую одну или более из аминокислотных замен, которые приводят к уменьшению перетасовки IgG4 по сравнению с шарнирной областью IgG4, не содержащей одной или более аминокислотных замен.
37. Четырехвалентное антитело по п. 35 или 36, отличающееся тем, что домен Fc IgG4 человека содержит последовательность шарнирной области, содержащую замену серина на пролин в аминокислоте 228, нумерация согласно индексу EU.
38. Выделенный полинуклеотид, кодирующий четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-37.
39. Выделенный полинуклеотид по п. 38, отличающийся тем, что указанный выделенный полинуклеотид содержит полинуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 и 16.
40. Экспрессионный вектор, содержащий выделенный полинуклеотид по п. 38 или 39.
41. Клетка-хозяин для экспрессии полинуклеотида, кодирующего четырехвалентное антитело, содержащая полинуклеотид по п. 38 или 39 или вектор по п. 40.
42. Способ получения четырехвалентного антитела, включающий культивирование клетки-хозяина по п. 41 таким образом, что продуцируется четырехвалентное антитело.
43. Способ по п. 42, дополнительно включающий выделение четырехвалентного антитела из клетки-хозяина.
44. Фармацевтическая композиция для лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания или лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации, содержащая эффективное количество четырехвалентного антитела по любому из пп. 1-37 и фармацевтически приемлемый носитель.
45. Набор для лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания или лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации, содержащий четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-37 и необязательный фармацевтически приемлемый носитель.
46. Набор по п. 45, дополнительно содержащий листок-вкладыш, содержащий инструкции по введению четырехвалентного антитела с целью лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания.
47. Набор по п. 45, дополнительно содержащий листок-вкладыш, содержащий инструкции для введения четырехвалентного антитела до, одновременно с и/или после переливания или трансплантации.
48. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-37 для применения с целью лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания.
49. Четырехвалентное антитело по любому из пп. 1-37 для применения с целью лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации.
50. Применение четырехвалентного антитела по любому из пп. 1-37 при изготовлении лекарственного средства для лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания.
51. Применение четырехвалентного антитела по любому из пп. 1-37 при изготовлении лекарственного средства с целью лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации.
52. Способ лечения опосредованного Т-клетками воспалительного заболевания, где указанный способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества четырехвалентного антитела по любому из пп. 1-37.
53. Способ лечения индивидуума, нуждающегося в переливании или трансплантации, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества четырехвалентного антитела по любому из пп. 1-37 до, одновременно с и/или после переливания или трансплантации.
54. Набор по п. 46, четырехвалентное антитело по п. 48, применение по п. 50 или способ по п. 52, отличающиеся тем, что опосредованное Т-клетками воспалительное заболевание представляет собой аутоиммунное заболевание.
55. Набор по п. 46, четырехвалентное антитело по п. 48, применение по п. 50 или способ по п. 52, отличающиеся тем, что опосредованное Т-клетками воспалительное заболевание выбрано из группы, состоящей из псориаза, псориатического артрита, ревматоидного артрита, болезни Крона, анкилозирующего спондилоартрита, диабета типа I, язвенного колита, рассеянного склероза, аллергии, атопического дерматита, астмы, Т-клеточной неоплазии и реакции "трансплантат против хозяина" (РТПХ).
56. Набор, четырехвалентное антитело, применение или способ по п. 55, отличающиеся тем, что псориаз представляет собой бляшковидный псориаз, хронический бляшковидный псориаз, каплевидный псориаз, обратный псориаз, пустулезный псориаз или эритродермический псориаз.
57. Набор по п. 47, четырехвалентное антитело по п. 49, применение по п. 51 или способ по п. 53, отличающиеся тем, что трансплантация представляет собой трансплантацию ткани, выбранной из группы, состоящей из костного мозга, почки, сердца, печени, нервной ткани, легкого, поджелудочной железы, кожи и кишечника.
58. Набор по п. 47, четырехвалентное антитело по п. 49, применение по п. 51 или способ по п. 53, отличающиеся тем, что переливание представляет собой переливание, включающее (содержащее) одно или более из белых клеток крови, красных клеток крови и тромбоцитов.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662276806P | 2016-01-08 | 2016-01-08 | |
US62/276,806 | 2016-01-08 | ||
PCT/US2017/012621 WO2017120534A1 (en) | 2016-01-08 | 2017-01-06 | Tetravalent anti-psgl-1 antibodies and uses thereof |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2018128812A RU2018128812A (ru) | 2020-02-10 |
RU2018128812A3 RU2018128812A3 (ru) | 2020-05-21 |
RU2766000C2 true RU2766000C2 (ru) | 2022-02-07 |
Family
ID=59274077
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018128812A RU2766000C2 (ru) | 2016-01-08 | 2017-01-06 | Четырехвалентные антитела к psgl-1 и их применения |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US10472422B2 (ru) |
EP (1) | EP3400239B1 (ru) |
JP (1) | JP7078536B2 (ru) |
KR (1) | KR20180117102A (ru) |
CN (1) | CN108713026B (ru) |
AU (1) | AU2017206074B2 (ru) |
BR (1) | BR112018013912A2 (ru) |
CA (1) | CA3010601A1 (ru) |
ES (1) | ES2880731T3 (ru) |
IL (1) | IL260289B (ru) |
MX (1) | MX2018008144A (ru) |
NZ (1) | NZ743815A (ru) |
RU (1) | RU2766000C2 (ru) |
SG (1) | SG11201805557SA (ru) |
TW (1) | TWI753875B (ru) |
WO (1) | WO2017120534A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201804328B (ru) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20150119848A (ko) | 2012-12-21 | 2015-10-26 | 바이오얼라이언스 씨.브이. | 친수성 자기-희생 링커 및 그것의 포합체 |
CN106661124A (zh) | 2014-06-20 | 2017-05-10 | 荷商台医(有限合伙)公司 | 抗叶酸受体α(FRA)抗体‑药物缀合物及其使用方法 |
KR20180117102A (ko) | 2016-01-08 | 2018-10-26 | 바이오얼라이언스 씨.브이. | 사가 항-psgl-1 항체 및 이들의 용도 |
US11306150B2 (en) | 2017-01-11 | 2022-04-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Method of identifying a P-selectin glycoprotein ligand-1 (PSGL-1) antagonist |
BR112019019108A2 (pt) | 2017-03-14 | 2020-04-22 | Five Prime Therapeutics, Inc. | anticorpos, ácido nucleico, composições, célula, métodos para preparar de um anticorpo, para tratar um sujeito com câncer, para tratar uma doença infecciosa, para tratar uma inflamação, para identificar um ab, para melhorar a eficácia antitumoral de um ab, para melhorar a farmacocinética de um anticorpo, para seleção de um anticorpo, para melhorar a eficácia de anticorpos, para isolar anticorpos e para detectar vista em uma amostra |
KR20210152472A (ko) * | 2019-03-11 | 2021-12-15 | 메모리얼 슬로안 케터링 캔서 센터 | Cd22 항체 및 이를 사용하는 방법 |
AU2019456113A1 (en) * | 2019-07-11 | 2022-03-03 | Wuhan Yzy Biopharma Co., Ltd. | Tetravalent symmetric bispecific antibody |
JP2023504530A (ja) * | 2019-12-05 | 2023-02-03 | アーベル リミテッド | TriAx抗体の組成、その製造方法及び使用方法 |
IL312683A (en) * | 2021-11-17 | 2024-07-01 | Altrubio Inc | Methods for using anti-PSGL-1 antibodies in combination with JAK inhibitors to treat T-cell-mediated inflammatory diseases or cancer |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004002528A1 (en) * | 2002-07-01 | 2004-01-08 | Savient Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for therapeutic treatment |
RU2407539C2 (ru) * | 2003-09-15 | 2010-12-27 | Эбдженомикс Кооператиф У.А. | Модуляторы р-селектин гликопротеин лиганда 1 |
WO2012174001A1 (en) * | 2011-06-13 | 2012-12-20 | Abgenomics Cooperatief U.A. | Anti-psgl-1 antibodies and uses thereof |
US20150183870A1 (en) * | 2004-05-10 | 2015-07-02 | Abgenomics Cooperatief U.A. | Anti-psgl-1 antibodies |
Family Cites Families (136)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4036945A (en) | 1976-05-03 | 1977-07-19 | The Massachusetts General Hospital | Composition and method for determining the size and location of myocardial infarcts |
US4331647A (en) | 1980-03-03 | 1982-05-25 | Goldenberg Milton David | Tumor localization and therapy with labeled antibody fragments specific to tumor-associated markers |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US5807715A (en) | 1984-08-27 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin |
US6808901B1 (en) | 1984-09-03 | 2004-10-26 | Celltech R&D Limited | Production of chimeric antibodies |
US4754065A (en) | 1984-12-18 | 1988-06-28 | Cetus Corporation | Precursor to nucleic acid probe |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
GB8601597D0 (en) | 1986-01-23 | 1986-02-26 | Wilson R H | Nucleotide sequences |
US4800159A (en) | 1986-02-07 | 1989-01-24 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences |
US6548640B1 (en) | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
US6893625B1 (en) | 1986-10-27 | 2005-05-17 | Royalty Pharma Finance Trust | Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
WO1989012624A2 (en) | 1988-06-14 | 1989-12-28 | Cetus Corporation | Coupling agents and sterically hindered disulfide linked conjugates prepared therefrom |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US5047335A (en) | 1988-12-21 | 1991-09-10 | The Regents Of The University Of Calif. | Process for controlling intracellular glycosylation of proteins |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
IE63847B1 (en) | 1989-05-05 | 1995-06-14 | Res Dev Foundation | A novel antibody delivery system for biological response modifiers |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
WO1991000360A1 (en) | 1989-06-29 | 1991-01-10 | Medarex, Inc. | Bispecific reagents for aids therapy |
US6329508B1 (en) | 1989-09-07 | 2001-12-11 | Alkermes, Inc. | Transferrin receptor reactive chimeric antibodies |
KR0162259B1 (ko) | 1989-12-05 | 1998-12-01 | 아미 펙터 | 감염성 병변 및 염증성 병변을 검출 및 치료하기 위한 키메라 항체 |
US5314995A (en) | 1990-01-22 | 1994-05-24 | Oncogen | Therapeutic interleukin-2-antibody based fusion proteins |
EP0521985B1 (en) | 1990-03-20 | 1997-09-24 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Chimeric antibodies with receptor binding ligands in place of their constant region |
US5198560A (en) | 1990-04-27 | 1993-03-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Cytotoxic bicyclo[7.3.1]tridec-4-ene-2,6-diyne compounds and process for the preparation thereof |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
DE69127627T2 (de) | 1990-08-29 | 1998-02-19 | Genpharm Int | Produktion und Nützung nicht-menschliche transgentiere zur Produktion heterologe Antikörper |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
AU660297B2 (en) | 1990-11-09 | 1995-06-22 | Stephen D. Gillies | Cytokine immunoconjugates |
ES2113940T3 (es) | 1990-12-03 | 1998-05-16 | Genentech Inc | Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas. |
US5278299A (en) | 1991-03-18 | 1994-01-11 | Scripps Clinic And Research Foundation | Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds |
WO1992020373A1 (en) | 1991-05-14 | 1992-11-26 | Repligen Corporation | Heteroconjugate antibodies for treatment of hiv infection |
DK0590058T3 (da) | 1991-06-14 | 2004-03-29 | Genentech Inc | Humaniseret heregulin-antistof |
GB9115364D0 (en) | 1991-07-16 | 1991-08-28 | Wellcome Found | Antibody |
AU669124B2 (en) | 1991-09-18 | 1996-05-30 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Process for producing humanized chimera antibody |
WO1993006213A1 (en) | 1991-09-23 | 1993-04-01 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
ES2136092T3 (es) | 1991-09-23 | 1999-11-16 | Medical Res Council | Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados. |
AU3144193A (en) | 1991-11-21 | 1993-06-15 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Controlling degradation of glycoprotein oligosaccharides by extracellular glycosisases |
AU3178993A (en) | 1991-11-25 | 1993-06-28 | Enzon, Inc. | Multivalent antigen-binding proteins |
US5733743A (en) | 1992-03-24 | 1998-03-31 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
US6174666B1 (en) | 1992-03-27 | 2001-01-16 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA |
US6214345B1 (en) | 1993-05-14 | 2001-04-10 | Bristol-Myers Squibb Co. | Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates |
WO1996004925A1 (en) | 1994-08-12 | 1996-02-22 | Immunomedics, Inc. | Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells |
US6265150B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-07-24 | Becton Dickinson & Company | Phage antibodies |
CA2233936A1 (en) | 1995-10-03 | 1997-04-10 | The Scripps Research Institute | Cbi analogs of cc-1065 and the duocarmycins |
WO1997032850A1 (en) | 1996-03-08 | 1997-09-12 | The Scripps Research Institute | Mcbi analogs of cc-1065 and the duocarmycins |
NZ332960A (en) | 1996-05-31 | 2000-05-26 | Scripps Research Inst | tetrahydro-cyclopropan[c]benz[e]-indol-4-one and tetrahydro-cyclopropan[c]benzo[e]-indole derivatives and medicaments |
DE69825048D1 (de) | 1997-05-22 | 2004-08-19 | Scripps Research Inst | Analoga von duocarmycin and cc-1065 |
US6262271B1 (en) | 1997-10-14 | 2001-07-17 | The Scripps Research Institute | ISO-CBI and ISO-CI analogs of CC-1065 and the duocarmycins |
GB9809951D0 (en) | 1998-05-08 | 1998-07-08 | Univ Cambridge Tech | Binding molecules |
US20020106728A1 (en) | 2000-06-20 | 2002-08-08 | Genentech, Inc. | NS4 nucleic acids and polypeptides and methods of use for the treatment of body weight disorders |
US6762020B1 (en) | 1999-03-15 | 2004-07-13 | Protein Design Labs, Inc. | Methods of diagnosing breast cancer |
DE19926154A1 (de) | 1999-06-09 | 2000-12-14 | Ktb Tumorforschungs Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer injizierbaren Arzneimittelzubereitung |
US7090843B1 (en) | 2000-11-28 | 2006-08-15 | Seattle Genetics, Inc. | Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof |
US20070258987A1 (en) | 2000-11-28 | 2007-11-08 | Seattle Genetics, Inc. | Recombinant Anti-Cd30 Antibodies and Uses Thereof |
EP1243276A1 (en) | 2001-03-23 | 2002-09-25 | Franciscus Marinus Hendrikus De Groot | Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs |
US20030083263A1 (en) | 2001-04-30 | 2003-05-01 | Svetlana Doronina | Pentapeptide compounds and uses related thereto |
US7256257B2 (en) | 2001-04-30 | 2007-08-14 | Seattle Genetics, Inc. | Pentapeptide compounds and uses related thereto |
US6884869B2 (en) | 2001-04-30 | 2005-04-26 | Seattle Genetics, Inc. | Pentapeptide compounds and uses related thereto |
KR100607612B1 (ko) | 2001-06-20 | 2006-08-02 | 제넨테크, 인크. | 종양의 진단 및 치료를 위한 방법 및 이를 위한 조성물 |
US20040116333A1 (en) | 2001-08-03 | 2004-06-17 | Rong-Hwa Lin | Modulators of P-selectin glycoprotein ligand 1 |
US7744888B2 (en) | 2001-08-03 | 2010-06-29 | Abgenomics Cooperatief U.A. | Methods of modulating T cell or natural killer cell activity with anti-P-selectin glycoprotein ligand 1 antibodies |
US7091186B2 (en) | 2001-09-24 | 2006-08-15 | Seattle Genetics, Inc. | p-Amidobenzylethers in drug delivery agents |
US7591994B2 (en) | 2002-12-13 | 2009-09-22 | Immunomedics, Inc. | Camptothecin-binding moiety conjugates |
US8877901B2 (en) | 2002-12-13 | 2014-11-04 | Immunomedics, Inc. | Camptothecin-binding moiety conjugates |
EP1571968A4 (en) | 2002-04-16 | 2007-10-17 | Genentech Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR DIAGNOSIS AND TREATMENT OF TUMORS |
DK1507556T3 (en) | 2002-05-02 | 2016-09-12 | Wyeth Holdings Llc | Calicheamicin derivative-carrier conjugates |
US20090068178A1 (en) | 2002-05-08 | 2009-03-12 | Genentech, Inc. | Compositions and Methods for the Treatment of Tumor of Hematopoietic Origin |
US20040202665A1 (en) * | 2002-07-01 | 2004-10-14 | Janette Lazarovits | Compositions and methods for therapeutic treatment |
DK1545613T3 (da) | 2002-07-31 | 2011-11-14 | Seattle Genetics Inc | Auristatinkonjugater og deres anvendelse til behandling af cancer, en autoimmun sygdom eller en infektiøs sygdom |
US7705045B2 (en) | 2002-11-14 | 2010-04-27 | Syntarga, B.V. | Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers |
US8420086B2 (en) | 2002-12-13 | 2013-04-16 | Immunomedics, Inc. | Camptothecin conjugates of anti-CD22 antibodies for treatment of B cell diseases |
US9068234B2 (en) | 2003-01-21 | 2015-06-30 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods and agents for screening for compounds capable of modulating gene expression |
US7332164B2 (en) | 2003-03-21 | 2008-02-19 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Heterobifunctional polymeric bioconjugates |
US20050069955A1 (en) * | 2003-06-30 | 2005-03-31 | Daniel Plaksin | Antibodies and uses thereof |
MXPA06000252A (es) | 2003-06-30 | 2006-12-15 | Bio Technology General Israel | Anticuerpos y usos de los mismos. |
KR101520209B1 (ko) | 2003-11-06 | 2015-05-13 | 시애틀 지네틱스, 인크. | 리간드에 접합될 수 있는 모노메틸발린 화합물 |
CA2556027C (en) | 2004-02-12 | 2015-11-24 | Morphotek, Inc. | Monoclonal antibodies that specifically block biological activity of a tumor antigen |
EP1718667B1 (en) | 2004-02-23 | 2013-01-09 | Genentech, Inc. | Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates |
AU2005232371B2 (en) | 2004-03-23 | 2010-10-14 | Complex Biosystems Gmbh | Polymeric prodrug with a self-immolative linker |
ES2549077T3 (es) | 2004-04-07 | 2015-10-22 | Genentech, Inc. | Espectrometría de masas de conjugados de anticuerpos |
RU2412945C2 (ru) | 2004-05-11 | 2011-02-27 | Эбдженомикс Кооператиф У.А. | Эпитопы, индуцирующие гибель т-клеток |
US7691962B2 (en) | 2004-05-19 | 2010-04-06 | Medarex, Inc. | Chemical linkers and conjugates thereof |
ES2579805T3 (es) | 2004-09-23 | 2016-08-16 | Genentech, Inc. | Anticuerpos y conjugados modificados por ingeniería genética con cisteína |
JP2006241109A (ja) * | 2005-03-04 | 2006-09-14 | Paion Deutschland Gmbh | ヒトPセレクチンおよびDSPAα1に対する抗体を含む融合タンパク質 |
WO2008020827A2 (en) | 2005-08-01 | 2008-02-21 | Biogen Idec Ma Inc. | Altered polypeptides, immunoconjugates thereof, and methods related thereto |
WO2007103288A2 (en) | 2006-03-02 | 2007-09-13 | Seattle Genetics, Inc. | Engineered antibody drug conjugates |
EP2446904B1 (en) | 2006-05-30 | 2015-04-29 | Genentech, Inc. | Anti-CD22 antibodies, their immunoconjugates and uses thereof |
BRPI0712850A8 (pt) | 2006-06-07 | 2018-05-02 | Bioalliance Cv | anticorpos que reconhecem um epitopo contendo carboidrato em cd-43 e cea expressados em células cancerígenas e métodos de uso dos mesmos |
US8273787B2 (en) | 2006-09-15 | 2012-09-25 | Onconova Therapeutics, Inc | Activated cytotoxic compounds for attachment to targeting molecules for the treatment of mammalian disease conditions |
GB0619291D0 (en) | 2006-09-29 | 2006-11-08 | Ucb Sa | Altered antibodies |
WO2008070593A2 (en) | 2006-12-01 | 2008-06-12 | Seattle Genetics, Inc. | Variant target binding agents and uses thereof |
TWI412367B (zh) | 2006-12-28 | 2013-10-21 | Medarex Llc | 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物 |
WO2008098788A2 (en) | 2007-02-16 | 2008-08-21 | Ktb Tumorforschungsgesellschaft Mbh | Receptor and antigen targeted prodrug |
EP2050764A1 (en) * | 2007-10-15 | 2009-04-22 | sanofi-aventis | Novel polyvalent bispecific antibody format and uses thereof |
RU2528738C2 (ru) | 2007-12-18 | 2014-09-20 | Биоэллаенс К.В. | Антитела, узнающие углеводсодержащий эпитоп на cd43 и сеа, экспрессируемых на раковых клетках и способы их применения |
AU2009205995B2 (en) | 2008-01-18 | 2014-04-03 | Medimmune, Llc | Cysteine engineered antibodies for site-specific conjugation |
US8742076B2 (en) | 2008-02-01 | 2014-06-03 | Genentech, Inc. | Nemorubicin metabolite and analog reagents, antibody-drug conjugates and methods |
JP2012519711A (ja) | 2009-03-06 | 2012-08-30 | アジェンシス,インコーポレイテッド | 24p4c12タンパク質に結合する抗体薬物結合体(adc) |
KR20180056805A (ko) | 2009-06-04 | 2018-05-29 | 노파르티스 아게 | IgG 콘쥬게이션을 위한 자리의 확인 방법 |
BRPI1015234A2 (pt) | 2009-06-22 | 2018-02-20 | Medimmune Llc | regiões fc projetadas para conjugação sítio específica. |
GB0920127D0 (en) | 2009-11-17 | 2009-12-30 | Ucb Pharma Sa | Antibodies |
KR102287474B1 (ko) | 2010-02-24 | 2021-08-06 | 이뮤노젠 아이엔씨 | 엽산염 수용체 1 항체와 면역접합체 및 이들의 용도 |
ES2430567T3 (es) | 2010-04-15 | 2013-11-21 | Spirogen Sàrl | Pirrolobenzodiacepinas y conjugados de las mismas |
NO3056203T3 (ru) | 2010-04-21 | 2018-05-12 | ||
EP2579897A1 (en) | 2010-06-08 | 2013-04-17 | Genentech, Inc. | Cysteine engineered antibodies and conjugates |
BR112013001847A2 (pt) * | 2010-08-24 | 2016-05-31 | Hoffmann La Roche | anticorpo biespecífico, método de preparação do anticorpo biespecífico, do anticorpo biespecífico trivalente, métodos e composição farmacêutica |
EP3498303A1 (en) | 2011-02-15 | 2019-06-19 | ImmunoGen, Inc. | Methods of preparation of conjugates |
IL281714B2 (en) | 2011-04-01 | 2023-11-01 | Immunogen Inc | Methods for increasing the effectiveness of FOLR1 cancer therapy |
US8852599B2 (en) | 2011-05-26 | 2014-10-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Immunoconjugates, compositions for making them, and methods of making and use |
CN103648532A (zh) | 2011-06-21 | 2014-03-19 | 伊缪诺金公司 | 具有肽连接子的新型美登木素生物碱衍生物及其偶联物 |
JP2015502397A (ja) | 2011-12-23 | 2015-01-22 | ファイザー・インク | 部位特異的コンジュゲーションのための操作された抗体定常領域、ならびにそのための方法および使用 |
WO2013103800A1 (en) | 2012-01-06 | 2013-07-11 | Bioalliance C.V. | Anti-transferrin receptor antibodies and methods using same |
JP6239598B2 (ja) | 2012-05-15 | 2017-11-29 | ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッドSorrento Therapeutics, Inc. | 薬物複合体、複合体形成方法、およびその使用 |
US9056141B2 (en) | 2012-05-31 | 2015-06-16 | Synchem, Inc. | Thiol-ene click chemistry for drug conjugates |
MX2015000315A (es) | 2012-07-09 | 2015-07-06 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-cd22 e inmunoconjugados. |
HUE048574T2 (hu) | 2012-07-12 | 2020-08-28 | Hangzhou Dac Biotech Co Ltd | Sejthez kötõdõ molekulák citotoxikus szerekkel képzett konjugátumai |
CN112587671A (zh) | 2012-07-18 | 2021-04-02 | 博笛生物科技有限公司 | 癌症的靶向免疫治疗 |
WO2014057118A1 (en) | 2012-10-12 | 2014-04-17 | Adc Therapeutics Sarl | Pyrrolobenzodiazepine-anti-cd22 antibody conjugates |
KR102356017B1 (ko) | 2012-12-13 | 2022-01-27 | 이뮤노메딕스, 인코오포레이티드 | 개선된 효능 및 감소된 독성을 위한 항체 및 sn-38의 면역컨쥬게이트의 투약 |
US9107960B2 (en) | 2012-12-13 | 2015-08-18 | Immunimedics, Inc. | Antibody-SN-38 immunoconjugates with a CL2A linker |
KR20150119848A (ko) | 2012-12-21 | 2015-10-26 | 바이오얼라이언스 씨.브이. | 친수성 자기-희생 링커 및 그것의 포합체 |
WO2014107024A1 (ko) | 2013-01-03 | 2014-07-10 | 셀트리온 | 항체-링커-약물 결합체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물 |
KR102447350B1 (ko) | 2013-02-08 | 2022-09-23 | 노파르티스 아게 | 면역접합체의 제조를 위한 항체의 변형에 사용되는 특정 부위 |
JP6847388B2 (ja) | 2013-03-15 | 2021-03-31 | レゲネロン ファーマシューティカルス,インコーポレーテッド | 生物活性分子、そのコンジュゲート、及び治療用途 |
US20140363454A1 (en) | 2013-06-06 | 2014-12-11 | Igenica Biotherapeutics, Inc. | Antibody-Drug Conjugates, Compositions and Methods of Use |
DK3024851T3 (en) | 2013-07-25 | 2018-08-06 | Cytomx Therapeutics Inc | MULTI-SPECIFIC ANTIBODIES, MULTI-SPECIFICALLY ACTIVABLE ANTIBODIES, AND METHODS FOR USING IT |
AU2015205509B2 (en) | 2014-01-10 | 2019-08-15 | Byondis B.V. | Duocarmycin ADCs showing improved in vivo antitumor activity |
CN106661124A (zh) | 2014-06-20 | 2017-05-10 | 荷商台医(有限合伙)公司 | 抗叶酸受体α(FRA)抗体‑药物缀合物及其使用方法 |
WO2015196089A1 (en) | 2014-06-20 | 2015-12-23 | Bioalliance C.V. | Anti-cd22 antibody-drug conjugates and methods of using thereof |
JP2017525755A (ja) | 2014-06-20 | 2017-09-07 | アブジェノミクス インターナショナル インコーポレイテッド.Abgenomics International Inc. | Her2抗体−薬物抱合体 |
KR20180117102A (ko) | 2016-01-08 | 2018-10-26 | 바이오얼라이언스 씨.브이. | 사가 항-psgl-1 항체 및 이들의 용도 |
-
2017
- 2017-01-06 KR KR1020187022663A patent/KR20180117102A/ko not_active Application Discontinuation
- 2017-01-06 CA CA3010601A patent/CA3010601A1/en active Pending
- 2017-01-06 US US15/400,888 patent/US10472422B2/en active Active
- 2017-01-06 WO PCT/US2017/012621 patent/WO2017120534A1/en active Application Filing
- 2017-01-06 BR BR112018013912-2A patent/BR112018013912A2/pt unknown
- 2017-01-06 EP EP17736478.3A patent/EP3400239B1/en active Active
- 2017-01-06 RU RU2018128812A patent/RU2766000C2/ru active
- 2017-01-06 TW TW106100473A patent/TWI753875B/zh active
- 2017-01-06 JP JP2018535399A patent/JP7078536B2/ja active Active
- 2017-01-06 IL IL260289A patent/IL260289B/en unknown
- 2017-01-06 MX MX2018008144A patent/MX2018008144A/es unknown
- 2017-01-06 SG SG11201805557SA patent/SG11201805557SA/en unknown
- 2017-01-06 NZ NZ743815A patent/NZ743815A/en unknown
- 2017-01-06 CN CN201780015768.8A patent/CN108713026B/zh active Active
- 2017-01-06 ES ES17736478T patent/ES2880731T3/es active Active
- 2017-01-06 AU AU2017206074A patent/AU2017206074B2/en active Active
-
2018
- 2018-06-27 ZA ZA2018/04328A patent/ZA201804328B/en unknown
-
2019
- 2019-09-26 US US16/584,356 patent/US20200277395A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-05-24 US US17/328,895 patent/US20220112302A1/en not_active Abandoned
-
2023
- 2023-03-13 US US18/183,066 patent/US20240084028A1/en active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004002528A1 (en) * | 2002-07-01 | 2004-01-08 | Savient Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for therapeutic treatment |
RU2407539C2 (ru) * | 2003-09-15 | 2010-12-27 | Эбдженомикс Кооператиф У.А. | Модуляторы р-селектин гликопротеин лиганда 1 |
US20150183870A1 (en) * | 2004-05-10 | 2015-07-02 | Abgenomics Cooperatief U.A. | Anti-psgl-1 antibodies |
WO2012174001A1 (en) * | 2011-06-13 | 2012-12-20 | Abgenomics Cooperatief U.A. | Anti-psgl-1 antibodies and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
HUANG CHIU-CHEN et al., A novel apoptosis-inducing anti-PSGL-1 antibody for T cell-mediated diseases, Eur. J. Immunol., 2005, Volume 35, Issue 7, pp.2239-2249. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2017206074B2 (en) | 2023-09-07 |
BR112018013912A2 (pt) | 2018-12-18 |
ZA201804328B (en) | 2022-12-21 |
JP7078536B2 (ja) | 2022-05-31 |
EP3400239A4 (en) | 2019-08-14 |
RU2018128812A (ru) | 2020-02-10 |
NZ743815A (en) | 2023-06-30 |
EP3400239B1 (en) | 2021-06-02 |
SG11201805557SA (en) | 2018-07-30 |
MX2018008144A (es) | 2018-11-09 |
CN108713026B (zh) | 2023-01-06 |
CN108713026A (zh) | 2018-10-26 |
IL260289B (en) | 2022-08-01 |
ES2880731T3 (es) | 2021-11-25 |
WO2017120534A1 (en) | 2017-07-13 |
US20240084028A1 (en) | 2024-03-14 |
TWI753875B (zh) | 2022-02-01 |
KR20180117102A (ko) | 2018-10-26 |
US10472422B2 (en) | 2019-11-12 |
US20220112302A1 (en) | 2022-04-14 |
TW201726732A (zh) | 2017-08-01 |
IL260289A (en) | 2018-07-31 |
AU2017206074A1 (en) | 2018-07-12 |
RU2018128812A3 (ru) | 2020-05-21 |
US20200277395A1 (en) | 2020-09-03 |
CA3010601A1 (en) | 2017-07-13 |
EP3400239A1 (en) | 2018-11-14 |
JP2019503686A (ja) | 2019-02-14 |
US20170198052A1 (en) | 2017-07-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2766000C2 (ru) | Четырехвалентные антитела к psgl-1 и их применения | |
US11820820B2 (en) | Antibody capable of blocking CD47-SIRPa interaction and application thereof | |
KR102003754B1 (ko) | Pd-l1 항체와 이를 이용한 치료 및 진단 | |
KR101740615B1 (ko) | 인간 cgrp 수용체 결합 단백질 | |
EP1959014B9 (en) | Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof | |
DK2370468T3 (en) | Anti-cMet antibody | |
JP6405242B2 (ja) | Mica結合剤 | |
KR20190136064A (ko) | 항-ilt4 항체 및 항원-결합 단편 | |
KR20100015804A (ko) | Cd154에 특이적으로 결합하는, 항체, 항체 유도체 및 항체 단편을 포함하는 결합 단백질, 및 그의 용도 | |
TW200524958A (en) | Specific binding agents to hepatocyte growth factor | |
KR20200044899A (ko) | 암의 치료 및 진단을 위한 tim-3 길항제 | |
CN109195987A (zh) | 针对IL7受体胞外域的α链的非拮抗性抗体及其在癌症治疗中的应用 | |
EP3344655B1 (en) | Use of anti-cd40 antibodies for treatment of lupus nephritis | |
US20220372137A1 (en) | Antibodies and methods of use | |
US11912777B2 (en) | Antibodies binding TNFR2 and uses thereof | |
RU2803460C2 (ru) | Гуманизированное антитело против pd-1 и его применение |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant |