RU2718055C2

RU2718055C2 - Производные 1,3-дигидроимидазол-2-тиона для применения в лечении легочной артериальной гипертензии и повреждения легкого

Info

Publication number: RU2718055C2
Application number: RU2015120164A
Authority: RU
Inventors: ДА СИЛЬВА Патрисио Мануэль Виэйра Араужо СОАРЕС; Мария Жуан Маседо да Сильва БОНИФАСИО
Original assignee: Биал - Портела и Кa, С.А.
Priority date: 2012-11-14
Filing date: 2013-11-14
Publication date: 2020-03-30
Also published as: ES2693025T3; MX2015005910A; CY1120953T1; TR201815850T4; RS57874B1; US20150299172A1; LT2919780T; KR102259938B1; CN105025895B; PL2919780T3; EP2919780B1; DK2919780T3; JP6373275B2; SI2919780T1; HRP20181651T1; US20190241545A1; EP2919780A1; MX355422B; AU2013345494A1; JP2016504286A

Abstract

Изобретение относится к применению (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1H-имидазол-2(3H)-тиона или его фармацевтически приемлемой соли, возможно в комбинации по меньшей мере с одним другим активным фармацевтическим ингредиентом, выбранным из антагонистов эндотелина и аналогов простациклина, для лечения легочной артериальной гипертензии. Также изобретение относится к способу лечения легочной артериальной гипертензии, основанному на применении (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1H-имидазол-2(3H)-тиона или его фармацевтически приемлемой соли. Технический результат: разработан новый терапевтический подход в лечении легочной артериальной гипертензии. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл., 2 пр.

Description

Настоящее изобретение относится к новым терапевтическим подходам, касающихся следующего класса соединений формулы I:

где R₁, R₂ и R₃ являются одинаковыми или разными и обозначают атомы водорода, атомы галогена, группу алкил, алкиларил, алкилокси, гидрокси, нитро, амино, алкилкарбониламино, алкиламино или диалкиламино; R₄ обозначает водород, алкил, -алкиларил или -алкилгетероарил; X обозначает CH₂, атом кислорода или атом серы; n представляет собой 1, 2 или 3 при условии, что когда n равен 1, X не является CH₂; и их отдельным (R)- и (S)-энантиомерам или смесям энантиомеров и их фармацевтически приемлемым солям.

Согласно первому аспекту настоящего изобретения предлагается соединение формулы I:

для применения в лечении легочной артериальной гипертензии (РАН), где R₁, R₂ и R₃являются одинаковыми или разными и обозначают атомы водорода, атомы галогена, группу алкил, алкиларил, алкилокси, гидрокси, нитро, амино, алкилкарбониламино, алкиламино или диалкиламино; R₄ обозначает водород, алкил, -алкиларил или -алкилгетероарил; X обозначает CH₂, атом кислорода или атом серы; n представляет собой 1, 2 или 3 при условии, что когда n равен 1, X не является CH₂; и соединение формулы I включает свои отдельные (R)- и (S)-энантиомеры или смеси энантиомеров и их фармацевтически приемлемые соли. Соединение формулы I можно применять само по себе или в комбинации с другим активным фармацевтическим ингредиентом. В одном воплощении X представляет собой О.

В другом воплощении по меньшей мере один из R₁, R₂ и R₃ представляет собой фтор. Предпочтительно, по меньшей мере два из R₁, R₂ и R₃представляют собой фтор, а оставшийся представляет собой водород.

Если не определено иначе, в этом описании изобретения термин «алкил» (применяемый отдельно или в комбинации с другими группировками) обозначает углеводородные цепи, прямые или разветвленные, содержащие от одного до шести атомов углерода, возможно замещенных арилом, алкокси, галогеном, группами алкоксикарбонил или гидроксикарбонил; термин «арил» (применяемый отдельно или в комбинации с другими группировками) обозначает фенильную или нафтильную группу, возможно замещенную алкилокси, галогеном или нитрогруппой; термин «галоген» обозначает фтор, хлор, бром или йод; и термин «гетероарил» обозначает гетероароматическую группу, где гетероатомы выбраны из O, N или S. Кроме того, термины «алкокси» и «алкилокси» являются взаимозаменяемыми, если не указано иначе.

Предпочтительно гетероарильная группа представлена посредством возможно замещенной ароматической гетероциклической системы колец из вплоть до 10 атомов, содержащей от одного до четырех гетероатомов, выбранных из N, O или S. Соответственно гетероарил представляет собой гетерофенильную группу, и гетерофенил содержит от 1 до 4 гетероатомов, каждый гетероатом является независимо выбранным из O, N или S. Соответственно гетероарил представляет собой гетеронафтильную группу, и гетеронафтил содержит от 1 до 4 гетероатомов, или каждый гетероатом является независимо выбранным из O, N или S. Примеры предпочтительных ароматических гетероциклов из вплоть до 10 атомов включают бензимидазол, бензофуран, бензотиофен, бензоксазол, бензотиазол, карбазол, циннолин, фуран, имидазол, индол, индазол, изоиндол, изохинолин, изоксазол, изотиазол, оксазол, оксадиазол, оксатриазол, оксатиазолидин, феназин, фенотиазин, феноксазин, фталазин, птеридин, пурин, пуран, пиразин, пиразол, пиридазин, пиридин, пиримидин, пиррол, хинолин, хиноксалин, хиназолин, тетразол, тиофен, тиадиазол, тиазол, тиопиран, триазин и триазол во всех их изомерных конфигурациях, но не ограничиваются ими. Эти гетероциклы могут быть незамещенными. Альтернативно, эти гетероциклы можно замещать один или несколько раз посредством C₁-C₆-алкила, C₁-C₆-алкокси, СООН, SO₃H, CONH₂, SO₂NH₂, CONH₂, SO₂NH₂, тиола, гидроксила, нитро, циано, фтора, хлора, брома, йода, CF₃или OCF₃.

В одном воплощении соединение формулы I имеет формулу IA,

где R₁, R₂ и R₃ являются одинаковыми или разными и обозначают атомы водорода, атомы галогена, группу алкил, алкиларил, алкилокси, гидрокси, нитро, амино, алкилкарбониламино, алкиламино или диалкиламино; R₄ обозначает водород, группу алкил или -алкиларил; X обозначает CH₂, атом кислорода или атом серы; n представляет собой 1, 2 или 3 при условии, что когда n равен 1, X не является CH₂. Таким образом, в настоящем изобретении предлагается соединение формулы IA для применения в лечении легочной артериальной гипертензии (РАН), где соединение формулы IA включает свой (R) или (S) энантиомер, или смесь (R) и (S) энантиомеров, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры.

В одном воплощении X представляет собой О.

В одном воплощении n представляет собой 2 или 3.

В другом воплощении по меньшей мере один из R₁, R₂ и R₃ представляет собой фтор.

В одном воплощении соединение формулы IA представляет собой (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (соединение А), возможно, в форме соли. Соединение A соответственно представляет собой гидрохлорид (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона.

В одном воплощении соединение формулы I имеет формулу IB

где R₁, R₂ и R₃являются одинаковыми или разными и обозначают водород, галоген, группу алкил, нитро, амино, алкилкарбониламино, алкиламино или диалкиламино; R₄ обозначает -алкил-арил или -алкил-гетероарил; X обозначает CH₂, атом кислорода или атом серы; n представляет собой 2 или 3. Таким образом, в настоящем изобретении предложено соединение формулы IB для применения в лечении легочной артериальной гипертензии (РАН), где соединение формулы IA включает свой (R) или (S) энантиомер, или смесь (R) и (S) энантиомеров, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры.

В предпочтительном воплощении п равен 2.

В еще одном предпочтительном воплощении X представляет собой О.

Предпочтительно R₄ обозначает -CH₂-арил или -CH₂-гетероарил.

В одном воплощении арильная группа R₄ является незамещенной.

Арильная группа R₄ может предпочтительно представлять собой фенил.

Желательно, чтобы один из R₁, R₂ и R₃ представлял собой водород, а остальные представляли собой фтор.

Соединение формулы I может быть представлено в виде (R) или (S) энантиомера или в виде смеси (R) и (S) энантиомеров в любых пропорциях, включая рацемическую смесь. Наиболее предпочтительно, что соединение формулы IA и формулы IB состоит из (R)-энантиомера.

Соединение может быть соответствующим образом представлено в форме гидрохлоридной соли. Однако, принимая во внимание вторичную алифатическую аминогруппу, специалисту в области техники будет очевидно, что другие соли кислоты могут быть получены и войдут в объем заявленного изобретения.

В одном воплощении соединение формулы IB имеет формулу B:

В.

Таким образом, в настоящем изобретении предложено соединение формулы B для применения в лечении легочной артериальной гипертензии (РАН), где соединение формулы B включает свой (R) или (S) энантиомер, смесь своих (R) и (S) энантиомеров и их фармацевтически приемлемые соли.

Соединение формулы B может быть представлено в виде (R) или (S) энантиомера или в виде смеси (R) и (S) энантиомеров в любых пропорциях, включая рацемическую смесь. Предпочтительно, соединение формулы B представлено в виде R-энантиомера, (R)-B (соединение В):

Соединение формулы B (или (R)-B) соответствующим образом представлено в виде гидрохлоридной соли. Однако, принимая во внимание вторичную алифатическую аминогруппу, специалисту будет очевидно, что другие соли кислоты могут быть получены и войдут в объем заявленного изобретения.

Ясно, что термин «соединения формулы I» при использовании в данном описании изобретения охватывает соединения формул I, IA, IB, В и (R)-B, а также соединение А.

Конкретные соединения формулы I для применения в лечении легочной артериальной гипертензии включают:

(S)-5-(2-аминоэтил)-1-(1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(S)-5-(2-аминоэтил)-1-(5,7-дифтор-1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-хроман-3-ил-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-гидроксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(8-гидроксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-метоксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(8-метоксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-фторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(8-фторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,7-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(S)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,7,8-трифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-хлор-8-метоксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-метокси-8-хлорхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-нитрохроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(8-нитрохроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-[6-(ацетиламино)хроман-3-ил]-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-аминометил-1-хроман-3-ил-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-аминометил-1-(6-гидроксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-гидрокси-7-бензилхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-аминометил-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(3-аминопропил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(S)-5-(3-аминопропил)-1-(5,7-дифтор-1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R,S)-5-(2-аминоэтил)-1-(6-гидрокситиохроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R,S)-5-(2-aминoэтил)-1-(6-мeтoкcитиoxpoмaн-3-ил)-1,3-дигидpoимидaзoл-2-тион;

(R)-5-(2-бензиламиноэтил)-1-(6-метоксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-5-(2-бензиламиноэтил)-1-(6-гидроксихроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-1-(6-гидроксихроман-3-ил)-5-(2-метиламиноэтил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-5-(2-метиламиноэтил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион;

(R)-1-хроман-3-ил-5-(2-метиламиноэтил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион; или

(R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион.

Соединения, приведенные выше, соответствующим образом могут быть представлены в форме фармацевтически приемлемой соли, предпочтительно в форме гидрохлоридной соли.

В одном воплощении предложен (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемая соль, обычно гидрохлоридная соль, для применения в лечении легочной артериальной гипертензии. Предпочтительно, предложена гидрохлоридная соль (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона для применения в лечении легочной артериальной гипертензии. (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемую соль можно применять в комбинации с одним или более чем одним активным фармацевтическим ингредиентом, как описано ниже.

В одном воплощении предложен (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемая соль, обычно гидрохлоридная соль, для применения в лечении легочной артериальной гипертензии. Предпочтительно, предложен (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлорид) для применения в лечении легочной артериальной гипертензии. (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемую соль можно применять в комбинации с одним или более чем одним активным фармацевтическим ингредиентом, как описано ниже.

Получение соединений формулы I описано в WO 2004/033447 и WO 2008/136695.

Сделана ссылка на "Guidelines for the diagnosis and treatment of pulmonary hypertension" (European Heart Journal (2009) 30, 2493-2537) для подробного описания определения, классификации, патологии и патологических признаков РАН.

Обычно легочная гипертензия представляет собой группу заболеваний, характеризующихся прогрессирующим повышением резистентности легочных сосудов, которое приводит к правожелудочковой недостаточности и преждевременной смерти. Ее можно определить по среднему давлению в легочной артерии, превышающему 25 мм рт.ст. в состоянии покоя.

РАН была клинически классифицирована ВОЗ (Всемирная Организация Здравоохранения) на 5 групп, согласно причине заболевания, и симптомы могут отличаться в зависимости от «группы» заболевания. Однако «общие» симптомы являются следующими:

- Затруднения дыхания или одышка (главный симптом)

- Утомление

- Головокружение

- Опухание лодыжек или голеней (отек)

- Синеватые губы и кожа (цианоз)

- Боль в груди

- Учащенный пульс и учащенное сердцебиение Клиническая классификация РАН была выполнена и описана в Simonneau G et al in "Updated клинические classification of pulmonary hypertension", J Am Coll Cardiol 2009; 54: S43-S54. РАН классифицировали следующим образом:

Клиническая классификация легочной артериальной гипертензии (ЛАГ):

1.1 Идиопатическая

1.2 Наследственная

1.2.1 Рецептор костного морфогенетического белка II типа (BMPR2)

1.2.2 Активин-рецептороподобная киназа-1 (ALK1), эндоглин (в присутствии или в отсутствие наследственной геморрагической телеангиэктазии)

1.2.3 Неизвестная

1.3 Индуцированная лекарственными средствами и токсинами

1.4 Ассоциированная с (Ассоциированная РАН, АРАН)

1.4.1 Заболеваниями соединительной ткани

1.4.2 ВИЧ-инфекцией

1.4.3 Портальной гипертензией

1.4.4 Врожденным заболеванием сердца

1.4.5 Шистосомозом

1.4.6 Хронической гемолитической анемией

1.5 Персистирующая легочная гипертензия новорожденного

Также ВОЗ была предложена следующая классификация по функциональной оценке:

Функциональный класс	Симптоматический профиль
1	Пациенты с легочной гипертензией, но без обусловленного ей ограничения физической активности. Обычная физическая активность не вызывает одышку или утомление, боль в груди или предобморочное состояние
II	Пациенты с легочной гипертензией, приводящей к незначительному ограничению физической активности. Они чувствуют себя комфортно в состоянии покоя. Обычная физическая активность вызывает чрезмерную одышку или утомление, боль в груди или предобморочное состояние
III	Пациенты с легочной гипертензией, приводящей к заметному ограничению физической активности. Они чувствуют себя комфортно в состоянии покоя. Активность, которая меньше обычной, вызывает чрезмерную одышку или утомление, боль в груди или предобморочное состояние
IV	Пациенты с легочной гипертензией с неспособностью осуществлять любую физическую активность без симптомов. У этих пациентов обнаруживаются признаки недостаточности правого желудочка сердца. Одышка и/или утомление могут присутствовать даже в состоянии покоя. Дискомфорт увеличивается при любой физической активности

В одном воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в частности к (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиону или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиону (гидрохлоридной соли), самому по себе или в комбинации с одним или более из других активных фармацевтических ингредиентов (API), для применения в лечении одного или более чем одного из приведенных выше классов РАН. РАН можно определять по среднему значению давления в легочной артерии, превышающему 25 мм рт.ст. в состоянии покоя.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в частности к (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиону или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиону (гидрохлоридной соли), самому по себе или в комбинации с одним или более чем одним другим фармацевтическим ингредиентом, для применения в лечении одного или более чем одного из приведенных выше классов РАН. РАН можно определять по среднему значению давления в легочной артерии, превышающему 25 мм рт.ст. в состоянии покоя.

При использовании в данном описании изобретения термин «лечение» и варианты, такие как «лечить» или «лечащийся», относятся к любому режиму, который может приносить пользу человеку или животному. Лечение может быть применимо к уже имеющемуся заболеванию, или может быть профилактическим (превентивное лечение). Лечение может включать целебные, облегчающие или профилактические эффекты. Лечение также может включать в себя исцеление, облегчение или предупреждение симптомов, ассоциированных с расстройством, а не действие на основную причину расстройства. Лечение при помощи соединения формулы I в комбинации с одним из соединений других классов включает одновременное и последовательное введение двух или более лекарственных средств.

Предполагаемые полезные терапевтические эффекты соединений формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона (гидрохлоридной соли), в лечении легочной артериальной гипертензии были описаны выше. Очевидно, что соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлоридная соль), также могут оказывать полезные терапевтические эффекты в лечении состояний, ассоциированных с РАН, например, состояний, при которых проявляется повреждение легкого. Такие состояния включают затруднения дыхания, одышку, утомление, головокружение, опухание лодыжек или голеней (отек), синеватые губы и кожа (цианоз), боль в груди, учащенный пульс и учащенное сердцебиение. Лечение таких состояний при помощи соединений формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона, или их фармацевтически приемлемых солей образует другой аспект настоящего изобретения. Таким образом, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении повреждения легкого. Соответствующим образом, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении одного или более чем одного из следующих состояний: затруднения дыхания, одышки, утомления, головокружения, опухания лодыжек или голеней (отека), синеватых губ и кожи (цианоз), боли в груди, учащенного пульса и учащенного сердцебиения.

Клинические исследования могут быть выполнены с целью демонстрации терапевтической эффективности соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона (гидрохлоридной соли) самого по себе или в комбинации с одним или более чем одним из других активных фармацевтических ингредиентов, в лечении РАН. Предпочтительно, клиническое исследование представляет собой рандомизированное контролируемое исследование; где исследование соответствующим образом представляет собой двойное слепое испытание.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ лечения легочной артериальной гипертензии, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона, или их фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, субъекту, нуждающемуся в этом, возможно в комбинации с другим API, таким как один из перечисленных ниже. РАН можно определять по среднему значению давления в легочной артерии, превышающему 25 мм рт.ст. в состоянии покоя.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ лечения повреждения легкого, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона, или их фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, субъекту, нуждающемуся в этом, возможно в комбинации с другим API, таким как один из перечисленных ниже. Соответствующим образом, в настоящем изобретении предлагается способ лечения одного или более чем одного из следующих состояний: затруднения дыхания, одышка, утомление, головокружение, опухание лодыжек или голеней (отека), синеватые губы и кожа (цианоз), боль в груди, учащенный пульс и учащенное сердцебиение, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона, или их фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, человеку, нуждающемуся в этом, возможно в комбинации с другим API, таким как один из перечисленных ниже.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона, или их фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, возможно в комбинации с другим API, таким как один из перечисленных ниже, в изготовлении лекарственного средства для лечения легочной артериальной гипертензии. РАН можно определять по среднему значению давления в легочной артерии, превышающему 25 мм рт.ст. в состоянии покоя.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона, или их фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, возможно в комбинации с другим API, таким как один из перечисленных ниже, в изготовлении лекарственного средства для лечения повреждения легкого. Соответствующим образом, в настоящем изобретении предлагается применение соединения формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона, или их фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, возможно в комбинации с другим API, таким как один из перечисленных ниже, в изготовлении лекарственного средства для лечения одного или более чем одного из следующего: затруднения дыхания, одышки, утомления, головокружения, опухания лодыжек или голеней (отека), синеватых губ и кожи (цианоз), боли в груди, учащенного пульса и учащенного сердцебиения.

Соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемая соль, для применения соответствующим образом, как описано выше, может быть изготовлено в виде фармацевтической композиции, возможно в комбинации с другим API, таким, как один из перечисленных ниже.

Для получения фармацевтических композиций соединений формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиона или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона (гидрохлоридной соли), инертные фармацевтически приемлемые носители смешивают с активными соединениями. Фармацевтически приемлемые носители могут представлять собой твердое вещество или жидкость. Препараты в твердой форме включают порошки, таблетки, диспергируемые гранулы и капсулы. Твердый носитель может представлять собой одно или более чем одно вещество, которое также может действовать в качестве разбавителя, вкусового ароматизатора, солюбилизатора, смазывающего вещества, суспендирующего агента, связующего вещества или разрыхлителя; он также может представлять собой материал для инкапсулирования.

Предпочтительно, фармацевтическая композиция представляет собой стандартную лекарственную форму, например упакованную композицию, упаковку, содержащую отдельные части композиции, такие как пакетированные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулы. Дозировки могут варьировать в зависимости от потребности пациента, степени тяжести заболевания и конкретного применяемого соединения. Для удобства общую суточную дозировку можно разделять и вводить по частям в течение дня. Предполагают, что введение один или два раза в сутки будет наиболее подходящим.

Когда соединение формулы I представляет собой форму Соединения В ((R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион), доза Соединения B находится в диапазоне от примерно 10 мг/сутки до примерно 50 мг/сутки, предпочтительно в диапазоне от примерно 15 мг/сутки до примерно 45 мг/сутки, более предпочтительно в диапазоне от примерно 20 мг/сутки до примерно 40 мг/сутки, наиболее предпочтительно в диапазоне от примерно 25 мг/сутки до примерно 35 мг/сутки, обычно примерно 30 мг/сутки. Предпочтительно, соединение B находится в форме единственной ежедневной дозировки. Таким образом, в настоящем изобретении также предлагается фармацевтическая композиция, содержащая Соединение B в количестве, описанном выше, для применения в лечении РАН. РАН можно определять по среднему значению давления в легочной артерии, превышающему 25 мм рт.ст. в состоянии покоя.

Композиция может дополнительно содержать другой активный фармацевтический ингредиент. Подходящие активные ингредиенты описаны в WO 2007/081232 и WO 2008/136695.

Соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлоридная соль), можно применять в сочетании с другим активным фармацевтическим ингредиентом, то есть с одним или более чем одним из других классов соединений. Соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлоридная соль), можно применять для одновременного или последовательного введения. Для одновременного введения соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлоридную соль), можно включать в ту же самую композицию в виде композиции с фиксированной дозой, как отмечено выше, или можно вводить в виде двух отдельных композиций. Подходящие активные ингредиенты описаны в WO 2007/081232 и WO 2008/136695.

Обычно другой активный ингредиент выбирают из следующих одного или более чем одного классов:

диуретики; бета-адренергические антагонисты; альфа-2-адренергические агонисты; альфа-1-адренергические антагонисты; двойные бета- и альфа-адренергические антагонисты; блокаторы кальциевых каналов; активаторы калиевых каналов; антиаритмические препараты; ингибиторы АПФ (ангиотензин-превращающий фермент); антагонисты ангиотензиновых (например, АТ1) рецепторов; ингибиторы ренина; препараты для снижения уровня липидов, ингибиторы вазопептидазы; нитраты; антагонисты эндотелина/ингибиторы эндотелиновых рецепторов; ингибиторы нейтральной эндопептидазы; антиангиотензиновые вакцины; сосудорасширяющие препараты; ингибиторы фосфодиэстеразы; сердечные гликозиды; серотониновые антагонисты; агенты, действующие на ЦНС; сенсибилизаторы кальция; ингибиторы HMG (гидроксиметилглутарил) СоА-редуктазы; антагонисты вазопрессина; антагонисты аденозинового A1 рецептора; агонисты атриального натрийуретического пептида (ANP); хелатирующие агенты; рецептор кортикотропин-высвобождающего фактора; агонисты глюкагоноподобного пептида-1; ингибиторы натрий-калиевой АТФазы; расщепители поперечных связей конечных продуктов повышенного гликолизирования (AGE); смешанные ингибиторы неприлизин/эндотелин-превращающего фермента (NEP/ECE); агонисты (например, алпрозалам) ноцицептивного рецептора (ORL-1); ингибиторы ксантиоксидазы; агонисты бензодиазепина; активаторы сердечного миозина; ингибиторы химазы; усилители транскрипции эндотелиальной синтазы оксида азота (ENOS); и ингибиторы нейтральной эндопептидазы, такие как тиорфан, в особенности антагонисты ангиотензиновых рецепторов, ингибиторы фосфодиэстеразы и ингибиторы эндотелиновых рецепторов.

В изобретении также предусматривается применение непикастата с классами соединений, описанных выше.

Другой активный ингредиент можно выбирать из одного или более чем одного из следующих:

эпопростенол (например, инъецируемый в течение длительного времени через внутривенный (в/в) катетер), илопрост (например, ингалируемый), бозентан, амбрисентан, ситаксентан, силденафил, таладафил, амлодипин, фелодипин, дилтиазем, нифедипин, никардипин изосорбида динитрат, изосорбида-5-мононитрат, варфарин, каптоприл, эналаприл, лизиноприл, беназеприл, фозиноприл, трандолаприл, хинаприл, рамиприл, периндоприл, зофеноприл, цилазаприл, имидаприл, лозартан, кандесартан, олмесартан, ирбесартан, эпросартан, телмисартан, валсартан, ацетазоламид, дихлорфенамид, метазоламид, фуросемид, этакриновая кислота, торасемид (торсемид), азосемид (аксосемид), пиретанид, трипамид, гидрохлортиазид, хлортиазид, бендрофлуметиазид, метиклотиазид, политиазид, трихлорметиазид, хлорталидон, индапамид, метолазон, хинетазон, амилорид, триамтерен, спиронолактон, канренон, калия канреноат и эплеренон. Соответствующим образом один из указанных выше других активных ингредиентов комбинируют с соединением формулы I, в частности с (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тионом или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тионом (гидрохлоридной солью).

Другие АФИ, применяемые в лечении легочной артериальной гипертензии, также можно комбинировать с соединением формулы I.

В одном воплощении соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлорид), применяют в комбинации с антагонистом эндотелина. Соответствующим образом антагонист эндотелина представляет собой бозентан, ситаксентан или амбрисентан.

В одном воплощении соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлорид), применяют в комбинации с аналогом простациклина. Соответствующим образом аналог простациклина выбирают из эпопростенола (например, инъецируемый в течение длительного времени через внутривенный (в/в) катетер), илопроста (например, ингалируемого), трепростинила и берапроста.

В одном воплощении соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлорид), применяют в комбинации с ингибитором фосфодиэстеразы 5 типа (PDE-5). Соответствующим образом ингибитор PDE-5 выбирают из силденафила и таладафила.

В одном воплощении соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион (гидрохлорид), применяют в комбинации с блокатором кальциевых каналов (ССВ). Соответствующим образом ССВ выбирают из нифедипина, дилитиазема, амлодипина и фелодипина.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион, или их фармацевтически приемлемую соль, как описано выше, и антагонист эндотелина. Соответствующим образом антагонист эндотелина представляет собой бозентан. Фармацевтическая комбинация также может включать один или более чем один инертный фармацевтически приемлемый носитель.

В одном воплощении предложена фармацевтическая комбинация, содержащая соединение формулы IA или его фармацевтически приемлемую соль, как описано выше, и антагонист эндотелина. Предпочтительно, комбинация содержит (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона гидрохлорид и антагонист эндотелина. Более предпочтительно, комбинация содержит (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона гидрохлорид и бозентан. Фармацевтическая комбинация также может включать один или более чем один инертный фармацевтически приемлемый носитель.

В одном воплощении предложена фармацевтическая комбинация, содержащая соединение формулы IB или его фармацевтически приемлемую соль, как описано выше, и антагонист эндотелина. Предпочтительно, соединение формулы IB представляет собой соединение формулы (R)-B. Более предпочтительно, комбинация содержит (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион и антагонист эндотелина. Наиболее предпочтительно, комбинация содержит (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион и бозентан.

Фармацевтическая комбинация также может включать один или более чем один инертный фармацевтически приемлемый носитель.

Предпочтительно фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию соединения формулы I и другой активный фармацевтический ингредиент, представлена в стандартной лекарственной форме, например, в форме упакованной композиции, где упаковка содержит обособленные количества композиции, такие как пакетированные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Предпочтительно соединение формулы I в комбинации с другим активным фармацевтическим ингредиентом представлена в форме ежедневной дозировки, то есть стандартную лекарственную форму, подлежащую введению один раз в день.

Когда соединение формулы IB представляет собой форму соединения В ((R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион), тогда доза соединения B может находиться в диапазоне от примерно 10 мг/сутки до примерно 50 мг/сутки, предпочтительно в диапазоне от примерно 15 мг/сутки до примерно 45 мг/сутки, более предпочтительно в диапазоне от примерно 20 мг/сутки до примерно 40 мг/сутки, наиболее предпочтительно в диапазоне от примерно 25 мг/сутки до примерно 35 мг/сутки, обычно примерно 30 мг/сутки. Когда соединение B комбинируют с бозентаном, тогда доза бозентана может находиться в диапазоне от примерно 50 мг/сутки до примерно 350 мг/сутки, предпочтительно в диапазоне от примерно 75 мг/сутки до примерно 325 мг/сутки.

Доза бозентана в фармацевтической композиции, содержащей комбинацию соединения B и бозентана, может находиться в диапазоне от примерно 80 мг/сутки до примерно 120 мг/сутки, наиболее предпочтительно в диапазоне от примерно 90 мг/сутки до примерно 110 мг/сутки, обычно примерно 100 мг/сутки. Таким образом, в одном воплощении дозировки соединения B и бозентана могут составлять: соединение B в диапазоне от примерно 10 мг/сутки до примерно 50 мг/сутки; и бозентан в диапазоне от примерно 80 мг/сутки до примерно 120 мг/сутки.

Доза бозентана в фармацевтической композиции, содержащей комбинацию Соединения B и бозентан, могут находиться в диапазоне от примерно 280 мг/сутки до примерно 320 мг/сутки, наиболее предпочтительно в диапазоне от примерно 290 мг/сутки до примерно 310 мг/сутки обычно примерно 300 мг/сутки. Таким образом, в одном воплощении дозировки соединения B и бозентана могут составлять: соединение B в диапазоне от примерно 10 мг/сутки до примерно 50 мг/сутки; и бозентан в диапазоне от примерно 280 мг/сутки до примерно 320 мг/сутки.

Предпочтительно, соединение B и бозентан представлены в форме ежедневной дозировки. Таким образом, в настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение B и бозентан в количествах, описанных выше, для применения в лечении РАН. РАН можно характеризовать по среднему давлению в легочной артерии, превышающему 25 мм рт.ст. в состоянии покоя

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I, в частности (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион или (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тион или его фармацевтически приемлемую соль, как описано выше и ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа (PDE-5). Соответствующим образом ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа (PDE-5) представляет собой силденафил. Фармацевтическая комбинация также может включать один или более чем один инертный фармацевтически приемлемый носитель.

В одном воплощении предложена фармацевтическая комбинация, содержащая соединение формулы IA или его фармацевтически приемлемую соль, как описано выше, и антагонист эндотелина. Предпочтительно, комбинация содержит (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона гидрохлорид и ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа (PDE-5). Более предпочтительно, комбинация содержит (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона гидрохлорид и силденафил. Фармацевтическая комбинация также может включать один или более чем один инертный фармацевтически приемлемый носитель.

В одном воплощении предложена фармацевтическая комбинация, содержащая соединение формулы IB или его фармацевтически приемлемую соль, как описано выше, и антагонист эндотелина. Предпочтительно, соединение формулы IB представляет собой соединение формулы (R)-B. Более предпочтительно, комбинация сожержит (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион и ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа (PDE-5). Наиболее предпочтительно, комбинация содержит (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тион и силденафил. Фармацевтическая комбинация также может включать один или более чем один инертный фармацевтически приемлемый носитель.

Далее приведено описание прилагаемых Фигур, на которых:

На Фиг. 1 представлена схема исследования, описанного ниже.

На Фиг. 2 представлены кривые выживания Каплан-Майера, начиная от суток введения МСТ, начальное количество крыс n=20 в каждой группе животных.

На Фиг. 3 представлены кривые выживания Каплан-Майера, начиная от от суток введения МСТ, начальное количество крыс n=20 в каждой группе животных, за исключением группы MCT+Bos300 (n=10).

На Фиг. 4 представлены соотношения массы сердца к массе тела (BW) (Фиг. 4а) и индекс Фультона (Fulton index) (RV/LF+S) (Фиг. 4б), полученные для крыс, лечившихся МСТ

, MCT+Bos300

, MCT+Bos100

МСТ+соединение В

, МСТ+соединение B+Bos100

, SHAM (о) и SHAM+соединение В

, через 28 дней после введения МСТ или носителя (Sham). Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка, n=4-14. Значимое отличие от МСТ (*P<0,05) или от Sham и Sham+соединение В (# P<0,05).

На Фиг. 5 представлены соотношения массы правого желудочка (RV) (Фиг. 5а) и левого желудочка плюс перегородка (LV/S) к массе тела (BW) (Фиг. 5б), полученные для крыс, лечившихся МСТ

, MCT+Bos300

, MCT+Bos100

, МСТ+соединение В

, МСТ+соединение B+Bos100

, SHAM (о) и SHAM+соединение В

, через 28 дней после введения МСТ или носителя (Sham). Данные представляют собой средние значения±стандартная ошибка, n=4-14. Значимое отличие от МСТ (*P<0,05) или от Sham и Sham+соединение В (# Р<0,05).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследования in vivo

Одной из наиболее часто применяемых животных моделей повреждения легкого является монокроталиновая (МСТ) модель легочной артериальной гипертензии. Введение МСТ, который метаболизируется в печени до реакционно-способного метаболита дегидромонокроталина, приводит к синдрому, характеризующемуся острым повреждением легкого, интерстициальным фиброзом легких, некротическим легочным артериитом, легочной гипертензией, гипертрофией правого желудочка (RV), миокардитом и веноокклюзионным заболеванием печени.

МЕТОДИКА ЭКСПЕРИМЕНТА

Подготовка монокроталиновой (МСТ) модели легочной артериальной гипертензии

Протокол для использования представляет собой стандартный протокол (Curr. Protoc. Pharmacol. 46: 5.56.1-5.56.11 (2009) John Wiley & Sons Inc). 6-7 недельным крысам (150-200 г) вводят подкожно МСТ 60 мг/кг, и в течение начальных 3-4 недель, как правило, развивается патология у животных, которые умирают в течение последующих 2 недель (5ая -6ая неделя). Снижение потребления корма и воды на 50% считается свидетельствующим о серьезном патологическом состоянии, достаточным для проведения исследования.

План эксперимента

Два исследования проводили раздельно, и анализ комбинаций выполняли в ходе двух исследований. Каждое исследование заключается в схеме, представленной на Фиг. 1.

Соединение В относится к (R)-5-(2-бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1Н-имидазол-2(3Н)-тиону (то есть соединению (R)-B, как показано выше). Структура является следующей:

(R)-B = соединение B

Группы, подвергающиеся лечению, для каждого исследования были следующими.

Соединение B получали от Bial - Portela & Са., S.A. Монокроталин получали от Sequoia Research Products Limited. Бозентан (CAS №157212-55-0) получали от APICHEM.

Используемые сокращения:

а. Bos = Бозентан

б. Bos100 = Бозентан 100 мг/кг

в. Bos300 = Бозентан 300 мг/кг

г. LV+S = Левый желудочек + перегородка

д. МСТ = Монокроталин

е. RV = Правый желудочек

План эксперимента для обоих исследований был один и тот же, с животными, рандомизированными в семь групп: пять групп, каждая из которых содержит по 10 животных (МСТ, MCT+Bos300, MCT+Bos100, МСТ+Соединение B, МСТ+Соединение B+Bos100), и 2 группы, каждая из которых содержит по 6 животных (SHAM и SHAM+ Соединение В).

Детали эксперимента описаны более подробно ниже; вкратце, сначала крысам давали соединения, смешанные с кормом, соединение B (30 мг/кг/сутки) для групп МСТ+соединение В и SHAM+соединение В, бозентан (300 мг/кг/сутки) для группы MCT+Bos300, бозентан (100 мг/кг/сутки) для группы MCT+Bos100, соединение В+бозентан (30+100 мг/кг/сутки) для группы МСТ+соединение B+Bos100, и соединения не давали группам МСТ и SHAM. Животным из групп МСТ вводили МСТ, а животным из групп SHAM вводили носитель. Через двадцать восемь дней выживших животных умерщвляли, ткани изымали и взвешивали. В течение всего периода эксперимента наблюдали за потреблением корма, воды и массой животных. Отношения массы органа к массе тела (BW) вычисляли для оценки гипертрофии органа. Индекс RV/LV+S вычисляли в качестве индекса гипертрофии RV. В каждом исследовании использовали n=10 животных для каждой группы, обработанной МСТ, и для групп, не получающих МСТ, использовали n=6. Животных из группы MCT+Bos300 из Исследования 1 не принимали во внимание в комбинированном анализе выживания, поскольку здесь неожиданно присутствовал эффект более высокой смертности по сравнению с группой МСТ. Однако выживших животных из этой группы принимали во внимание в анализе сердечного ремоделирования.

Объемы для ведения: 3 мл/кг для подкожного введения.

Условия хранения: вещества подлежат хранению согласно условиям, определенным в соответствующем сертификате анализа.

Получение и анализ данных

Получение исходных данных выполняли при помощи Gilson UniPointTM System Software version 5.11. Анализ всех данных выполняли, используя Prism 5 для Windows software, version 5.02 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA).

Статистический анализ

Все данные представлены в виде среднее значение ± стандартная ошибка (стандартная ошибка среднего), если не иначе указано. Различия между лечебными группами анализировали посредством одностороннего дисперсионного анализа и апостериорного критерия множественного сравнения Ньюмана-Кейлса. Значение P<0,05 считали статистически значимым.

Кривые выживания получали посредством анализа выживаемости Каплана-Майера, и сравнивали, используя логарифмический ранговый критерий (Mantel Сох).

Исследование 1 - дополнительные подробности

Животным давали порошкообразный корм в течение адаптационного периода 3-5 суток перед началом лечения. Крысам давали соединения, смешанные с кормом (порошкообразный рацион), начиная с -2 суток. Через сорок восемь, в нулевые сутки, животным из групп G1-G5 вводили подкожно МСТ (60 мг/кг), в то время как оставшимся группам (G6 и G7) давали носитель вместо МСТ. Обработку продолжали в течение 28 суток. За потреблением корма, воды и массой животных наблюдали в течение всей продолжительности эксперимента.

На 28 сутки выживших животных умерщвляли и после этого изымали и взвешивали ткани/органы: печень, почки, легкие, сердце и селезенку. Бедренные кости удаляли и измеряли. Сердце рассекали на правый желудочек, левый желудочек+перегородка и их также взвешивали. Вычисляли отношение массы органа к массе тела (BW), а также отношение массы органа к длине бедренной кости. Индекс RV/LV+S представляет собой индекс гипертрофии RV. Уровень катехоламинов оценивали только в правом желудочке и левом желудочке+перегородка.

Шестинедельных самцов крыс Wistar (151-187 г) получали от Harlan (Spain). Крыс содержали по 5 в клетке, в контролируемых условиях среды (12-часовой цикл свет/темнота и комнатная температура 22±1°C).

Все группы животных кормили порошкообразным кормом, группам МСТ (G1, n=10) и SHAM (G6, n=6) давали нормальный корм, а всем остальным группам давали корм, смешанный с соединениями: в группе MCT-Bos300 (G2, n=10) получали корм с 300 мг/кг/сутки бозентана, в MCT-Bos100 (G3, n=10) получали корм с 100 мг/кг/сутки бозентана, в МСТ-1058 (G4, n=10) получали корм с 30 мг/кг/сутки BIA 5-1058, в MCT-1058-Bos100 (G5, n=10) получали корм с 100 мг/кг/сутки бозентана плюс 30 мг/кг/сутки BIA 5-1058, и в SHAM-1058 (G7, n=6) получали корм с 30 мг/кг/сутки BIA 5-1058.

Через сорок восемь часов группам животных 1-5 вводили МСТ (60 мг/кг), а группам 6 и 7 вводили подкожно носитель в объеме 3 мл/кг.

МСТ получали растворением до 300 мг/кг в 1 М HCI, нейтрализацией при помощи 1 н. NaOH и разбавлением до 20 мг/мл стерильной водой.

Потребление воды и корма для каждой клетки и массы отдельных животных измеряли дважды в неделю.

Животных содержали при лечении в течение 28 суток после введения МСТ. Животных, которые выжили за это время, анестезировали при помощи пентобарбитала 60 мг/кг, введенного внутрибрюшинно, и подвергали изыманию тканей и органов.

Целую селезенку, целую печень, левую почку и легкие удаляли, очищали и взвешивали. Сердце удаляли, очищали от предсердий и сосудистой ткани и взвешивали. Затем правый желудочек отсекали от остальной части сердца (левого желудочка + перегородки), и то и другое взвешивали и помещали в пробирки, содержащие 0,2 М РСА. Бедренные кости удаляли, очищали и измеряли длину при помощи штангенциркуля.

Вычисляли отношения массы органа к массе тела и массы органа к длине бедренной кости, а также отношение массы правого желудочка к массе левого желудочка + перегородки.

Ткани оставляли в 0,2 М РСА (хлорная кислота) на 24 часа в темноте при 4°C и затем замораживали при -80°C. Уровни катехоламинов измеряли в правом желудочке и левом желудочке+перегородке.

Целую селезенку, целую печень, левую почку и легкие удаляли, очищали и взвешивали. Сердце извлекали, очищали от предсердий и сосудистой ткани и взвешивали. Затем правый желудочек отсекали от остальной части сердца (левого желудочка + перегородки) и то и другое взвешивали и помещали в пробирки, содержащие 0,2 М РСА. Бедра удаляли, очищали и измеряли длину при помощи кронциркуля.

Вычисляли отношения массы органа к массе тела и массы органа к длине бедра, а также отношение массы правого желудочка к массе левого желудочка + перегородки.

Ткани оставляли в 0,2 М РСА (перхлорная кислота) на 24 часа в темноте при 4°C и затем замораживали при -80°C. Катехоламины измеряли в правом желудочке и левом желудочке+перегородке.

Количественное определение катехоламинов

Реагенты и материалы: все реагенты получали от Sigma-Aldrich. Колонки для SPE (твердофазная экстракция), картридж Sep-Pak® Vac Alumina А 1 см³/100 мг 50-300im 100/модуль получали от Waters.

Ткани: ткани, замороженные в 0,2 М РСА, размораживали, жидкую фазу удаляли и фильтровали через 0,22 мкм фильтры Spin-X (Corning Costar) путем центрифугирования в микроцентрифуге в течение 10 минут со скоростью примерно 5000 об/мин при 4°C. Норадреналин и дофамин определяли количественно в фильтратах посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (HPLC-ED).

Система для исследования: Gilson HPLC-ED 142

Способ исследования: хроматографические условия представляли собой:

Исследование 2 - дополнительные подробности

Животным давали порошкообразный корм в течение адаптационного периода 3-5 суток перед началом лечения. Крысам давали соединения, смешанные с кормом (порошкообразный рацион), начиная с -2 суток. Через сорок восемь часов, в нулевые сутки, животным из групп G1-G5 вводили подкожно МСТ (60 мг/кг), в то время как оставшимся группам (G6 и G7) давали носитель вместо МСТ. Массу животных, потребление корма и воды измеряли дважды в неделю и за животными регулярно наблюдали на предмет наличия каких-либо признаков заболевания. Смертность регистрировали, и на 28 сутки выживших животных умерщвляли, извлеченные органы взвешивали и бедренные кости удаляли и измеряли.

Взвешенные органы представляли собой: печень, почки, легкие, сердце и селезенку. Сердце рассекали на правый желудочек, левый желудочек+перегородка и их также взвешивали. Вычисляли отношение массы органа к массе тела (BW), а также отношение массы органа к длине бедренной кости. Индекс RV/LV+S представляет собой индекс гипертрофии RV.

Крыс поселяли группами по 5 особей в макролоновые клетки с древесными опилками и со свободным доступом к рациону в виде порошкового корма (Code 113 - SAFE, 89290 Augy, France) и водопроводной воде. В клетках для животных поддерживали 12-часовой цикл свет/темнота (с 07.00 до 19.00 часов) при контролируемой температуре окружающей среды 22±1°C.

Лечение при помощи соединения в корме начинали на сутки -2: для групп G4 и G7 BIA 5-1058 (30 мг/кг/сутки), для группы G2 бозентан (300 мг/кг/сутки), для группы 3 бозентан (100 мг/кг/сутки), для группы 5 BIA 5-1058+бозентан (30+100 мг/кг/сутки). Оставшимся животным (группы G1 и G6) давали нормальный корм для крыс. Через сорок восемь часов, в нулевые сутки, животным из групп G1-G5 вводили подкожно МСТ (60 мг/кг/3 мл). Группам G6 и G7 давали носитель вместо МСТ. Лечение продолжали в течение 4 недель.

МСТ растворяли до 300 мг/кг в 1 н. HCl, нейтрализовали при помощи 1 н. NaOH и разбавляли до 20 мг/мл при помощи стерильной воды.

За потреблением корма, воды и массой животных наблюдали в течение всего эксперимента. Потребление воды и корма измеряли для каждой клетки дважды в неделю. Массы отдельных животных определяли дважды в неделю.

Животных содержали для лечения в течение 28 суток после введения МСТ. Животных, которые выжили на это время, анестезировали при помощи пентобарбитала 60 мг/кг, введенного внутрибрюшинно, и подвергали изыманию ткани и органа.

Целую селезенку, целую печень, обе почки и легкие удаляли, очищали и взвешивали. Сердце извлекали, очищали от предсердий и сосудистой ткани и взвешивали. Затем правый желудочек отсекали от остального сердца (левого желудочка + перегородки) и то и другое взвешивали. Бедренные кости удаляли, очищали и измеряли длину при помощи кронциркуля.

Вычисляли отношения массы органа к массе тела и массы органа к длине бедра, а также отношение правого массы желудочка к массе левого желудочка + перегородки.

Тест Ирвина

Тест Ирвина (Irwin S. Psycopharmacologia 1968: 13; 222-57) представляет собой систематический метод для оценки и выставления баллов поведенческого и физиологического состояния грызунов. За животными наблюдают согласно стандартизированному набору наблюдений с целью обнаружения нейроповеденческих, нейровегетативных или психотропных признаков или нейротоксических эффектов. Всего оценивают в баллах 30 параметров, используя стандартизированный метод, на основании метода, описанного Irwin, 1968. Эти параметры распределяются следующим образом: 16 пунктов для поведенческого профиля, 9 пунктов для неврологического профиля и 5 пунктов для вегетативного профиля, как представлено в Таблице 1 ниже:

Результаты

Кривые выживания (смотри Фиг. 2 и 3) ясно показывают, что комбинация соединения B (30 мг/кг/сутки) и бозентана (100 мг/кг/сутки) значимо (P<0,05) увеличивала число животных, которые пережили 28 суток периода наблюдения, по сравнению с группой МСТ. Незначительное увеличения выживаемости также наблюдали для группы МСТ+соединение B, перенесенное параллельно посредством сдвига вправо кривой выживания. Не наблюдали никаких явных преимуществ по отношению к лечению при помощи бозентана с 300 или 100 мг/кг/сутки по сравнению с группой МСТ.

Таким образом, применение соединения B самого о себе приводило к более высоким показателям выживаниемости по сравнению с применением бозентана самого по себе. Кроме того, комбинированное применение соединения B и бозентана приводило к синергическому эффекту на показатели выживаемости.

В группах SHAM отсутствовали умершие животные.

Как показано на Фиг. 4а, 4b, 5а и 5b, соединение B, взятое само по себе или в комбинации с бозентаном, значительно снижало сердечный индекс, RV и индекс Фультона (где индекс Fulton представляет собой отношение массы правого желудочка (RV) к массе левого желудочка (LV) плюс перегородка, то есть RV/LV+S) по сравнению с группой МСТ; величина снижения была выше в присутствии комбинации соединения B+Bos100, чем при лечении другими препаратами. Бозентан 300 мг/кг/сутки значительно снижал RV и индекс Фультона по сравнению с группой МСТ.

Все группы, которым вводили МСТ, обладали значимо более высоким сердечным индексом, RV, LV+S и индексом Фультона по сравнению с группами SHAM и SHAM+соединение В.

Что касается ремоделирования сердца, заметное и статистически значимое снижение гипертрофии правого желудочка наблюдали в группе МСТ+соединение B+Bos100 по сравнению с группой МСТ, это снижение было аналогично тому, которое наблюдали в группе MCT+Bos300. Значимое снижение гипертрофии правого желудочка также наблюдали в группах MCT+Bos100 и МСТ+соединение В.

Таким образом, соединение B, взятое само по себе или в комбинации с бозентаном проявляет полезные эффекты по отношению к повреждению легкого, особенно к легочной артериальной гипертензии.

ПРИМЕРЫ СИНТЕЗА

Пример 1

(R)-5-аминометил-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиона гидрохлорид

Перемешиваемую смесь (R)-6,8-дифторхроман-3-иламина гидрохлорида (0,22 г, 1,0 ммоль), трет-бутилового эфира [3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-2-оксопропил]карбаминовой кислоты (0,33 г, 1,1 ммоль), тиоцианата калия (0,11 г, 1,1 ммоль) и уксусной кислоты (0,3 мл, 5,0 ммоль) в этилацетате (3 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов, охлаждали до комнатной температуры, затем промывали раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом магния и упаривали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь этилацетат-петролейный эфир. Полученное масло (0,23 г) растворяли в этилацетате(2 мл) сразу после добавления 2 М раствора HCl в этилацетате (2 мл, 4 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Осадок удаляли фильтрацией и промывали этилацетатом с получением кристаллов с температурой плавления 192°C (разложение).

Пример 2

К (R)-5-(2-аминоэтил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1,3-дигидроимидазол-2-тиону (2,36 г, 7,58 ммоль) и бензальдегиду (0,85 мл, 8,34 ммоль) в смеси метанола (15 мл) и дихлорметана (15 мл) порциями добавляли цианоборогидрид натрия (0,67 г, 10,66 ммоль) при 20-25°C. Смесь перемешивали в течение 64 часов, гасили 1 н. HCl (12 мл) при перемешивании с последующим добавлением 3 н. NaOH (12 мл). Смесь экстрагировали при помощи DCM (дихлорметан) (100 мл), органическую фазу промывали рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали досуха. Остаток очищали на колонке с силикагелем при помощи этилацетата и смеси этилацетата с метанолом (9:1) в качестве элюентов. Фракции, содержащие продукт, собирали, упаривали при пониженном давлении до приблизительно 20 мл, затем охлаждали на льду. Осадок собирали, промывали смесью этилацетат-петролейный эфир (1:1), сушили на воздухе. Выход составлял 1,25 г (41%), продукт имел температуру плавления 188-90°C (2-пропанол-DСМ).

Очевидно, что изобретение можно модифицировать в объеме прилагаемой формулы изобретения.

Claims

1. Применение соединения, которое представляет собой (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1H-имидазол-2(3H)-тион или его фармацевтически приемлемую соль, возможно в комбинации по меньшей мере с одним другим активным фармацевтическим ингредиентом, выбранным из антагонистов эндотелина и аналогов простациклина, для лечения легочной артериальной гипертензии.

2. Применение по п.1, где соединение представляет собой гидрохлоридную соль (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1H-имидазол-2(3H)-тиона.

3. Применение по п.1, где соединение представляет собой (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1H-имидазол-2(3H)-тион.

4. Применение по любому из пп.1-3, где по меньшей мере один другой активный фармацевтический ингредиент представляет собой один или более чем один ингредиент, выбранный из следующего перечня: эпопростенол, илопрост, трепростинил, берапрост, бозентан, амбрисентан и ситаксентан.

5. Способ лечения легочной артериальной гипертензии, включающий введение терапевтически эффективного количества (R)-5-(2-(бензиламино)этил)-1-(6,8-дифторхроман-3-ил)-1H-имидазол-2(3H)-тиона или его фармацевтически приемлемой соли субъекту, нуждающемуся в этом.