KR100902799B1 - 키마제 저해제 및 ａｃｅ 저해제를 유효성분으로 함유하는약제 - Google Patents

Abstract

본 발명의 목적은 고혈압증, 심장병 (심비대, 심부전, 심근경색 등), 뇌졸중, 신염 등의 치료에 유효한 약제를 제공하는 것이다. 본 발명은 키마제 저해제와 ACE 저해제를 병용하여 사용할 수 있는 형태의 순환기 질환 치료제, 또는 키마제 저해와 ACE 저해를 동시에 발생시키는 순환기 질환 치료법이다.

Description

키마제 저해제 및 ＡＣＥ 저해제를 유효성분으로 함유하는 약제{DRUGS CONTAINING CHYMASE INHIBITOR AND ACE INHIBITOR AS THE ACTIVE INGREDIENTS}

본 발명은 키마제 저해제 및 ACE (안지오텐신 변환효소) 저해제 양쪽을 유효성분으로 함유하는 약제, 또는 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 투여하는 예방방법 또는 치료방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로는 이 약제 또는 이 방법의, 순환기계 질환의 예방제, 치료제, 예방방법, 또는 치료방법, 또는 안지오텐신II 생성억제제 또는 억제방법에 관한 것이다. 본 발명의 약제는 그의 강력한 안지오텐신II 생성억제효과에 의해 고혈압증, 심장병 (심비대, 심부전, 심근경색 등), 뇌졸중, 또는 신염 등의 치료에 유효하다.

안지오텐신II 는 전신혈압, 체액량 등의 생체내 항상성 유지에 중요한 레닌-안지오텐신계의 주요한 인자로서 연구되어 왔다. 안지오텐신II 는 그의 강한 혈관수축작용으로 인해 고혈압성 질환에서의 원인물질로서 가장 주목받아 온 인자로, 그의 작용을 억제함으로써 순환기계 질환의 약제 치료약이 개발되어 왔다. 또한, 최근 안지오텐신II 는 증식인자로서 섬유아세포의 증식 등을 촉진시키고, 특히 심혈관계질환에서는 심근세포의 비대, 평활근세포의 유주ㆍ증식, 선유아세포의 세포내 매트릭스 생성자극, 아포토시스 유도 등 널리 세포기능의 조절에 관계되어 선유화(線維化)나 신장의 경화, 동맥경화소의 형성에서도 중요한 역할을 담당하는 것으로 생각된다. 사실, 안지오텐신II 를 생성하는 효소인 안지오텐신 변환효소 (이하, 「ACE」라고 함) 의 저해제는 순환기계 질환에서의 제 1 선택약으로 오래 사용되고 있고, 그의 유효성은 임상에서 명확해지고 있다.

한편, 이와 같은 국소 안지오텐신II 생성계의 중요성이 판명되고 있는 가운데, 인간 조직국소에서의 안지오텐신II 생성에 비(非)-ACE 의존경로가 발견되어, 특히 인간 마스트세포 키마제 (키마제) 에 의한 안지오텐신II 생성경로에 관해 주목받아 왔다. 예컨대, 경피적 관동맥형성술 (PTCA) 후의 재협착에서 ACE 저해제는 무효임을 알 수 있어 (Circulation 1992; 86: 100-110, J. Am. Coll. Cardiol 1995; 25: 362-369), 안지오텐신II 생성에 관해 ACE 이외의 생성효소의 존재가 시사되었다. 우라타 외는 인간 심장에서 안지오텐신I 로부터 안지오텐신II 를 생성하는 효소를 단리추출하고, 그 효소의 화학구조 및 유전자 클로닝으로 인간 마스트세포 키마제가 안지오텐신II 생성을 담당하는 것을 밝혔다 (J. Biol. Chem. 1990; 265: 22348-22357, J. Biol. Chem. 1991; 266: 17173-17179). 지금까지의 연구에서는 키마제는 조직결합형 마스트세포에서만 그 존재가 확인되고 있고, 조직국소에서 생리기능을 갖는 것으로 알려져 있다. 혈관벽에서 정상시의 키마제는 외막에 가장 많고, 내막에는 오히려 ACE 가 국재하고 있지만, 일단 혈관이 장해를 입으면 키마제는 외막의 재구축 및 신생내막증식에 관련되는 것으로 생각된다 (Circulation 1996; 94: 1655-1664).

이 키마제에 의한 비-ACE 의존의 안지오텐신II 생성경로는 인간에서는 다른 동물종과 비교하여 기여가 높은 것으로 다양한 보고에 의해 실증되고 있다. 예컨대, 원숭이, 개의 적출혈관에서의 안지오텐신I 첨가의 혈관수축작용은 ACE 저해제 단독에서는 30% 정도밖에 억제되지 않는 것으로 오래전부터 보고되고 있고, 세린프로테아제 저해단백인 키모스타틴의 병용에 의해 비로소 완전히 억제되는 점에서, ACE 이외의 효소에 의한 어떤 안지오텐신II 생성경로가 존재하고, 또한 설치류와 비교하여 이들 대동물에서는 비-ACE 의존 안지오텐신II 생성경로의 기여가 큰 것으로 추측되어 왔다 (J. Hypertensions 1984; 2: 277-189). 이 비-ACE 의존 안지오텐신II 생성경로는 나중에 키마제에 의한 것으로 밝혀지고, 또한 인간 심장에서의 안지오텐신II 생성은 약 80% 를 키마제가 담당한다는 보고도 있다 (Circ. Res. 1990; 66: 883-890).

인간에서 ACE 의존과 비-ACE 의존의 주요한 2 개의 안지오텐신II 생성경로를 동시에 억제하기 위해 최근 안지오텐신II 수용체 길항제가 개발되고 있다. 안지오텐신II 는 세포막 상의 안지오텐신II 수용체를 통하여 작용하는 점에서, 특히 혈관수축에 관련되는 안지오텐신II 수용체인 ATl 수용체의 길항제가 개발되고 있다 (일본 공개특허공보 평56-17073호, EP0253310호 명세서, EP0291969호 명세서, EP0324377호 명세서, 일본 공개특허공보 소63-23868호, 일본 공개특허공보 평1-1178676호, EP0323841호 명세서, 일본 공개특허공보 평1-287071호, 일본 공개특허공보 평4-364171호 등 다수). 이들 수용체 길항제의 대부분은 이미 혈압강하제로서 임상 응용되어 ACE 저해제와 동등 이상의 효과가 확인되고 있다. 그리고, 이들 수용체 길항제에 의한 ACE 의존 및 비-ACE 의존의 2 개의 안지오텐신II 를 억 제한다는 유용성이 임상상에서 검증되고 있다. 그러나, 안지오텐신II 수용체 길항제에 의해 순환기 질환의 치료상의 문제점이 모두 해결되었다고는 할 수 없다.

실제로 ATl 수용체 길항제의 대규모 임상시험이 실시되고 있어 그의 임상효과가 명확해지고 있다. 그러나, ATl 수용체 길항제의 효과로서, 특히 심부전 등의 심질환에서는 심혈관 이벤트의 재발이나 심부전의 증악(增惡)에 의한 재입원 등 환자의 QOL (Quality of Life) 을 개선하지만, 심부전환자의 총사망률 저하 자체는 ACE 저해제와 동등하여 아직 심질환의 치료상에서 만족할만한 결과에는 이르지 못하고 있다 (ELITEII 시험, Lancet 2000 355 권 1582 페이지, 아메리카 심장협회 학술집회 2000 년, 2001 년; Val-HeFT 시험, New England Journal of Medeine 2001 년 345 권, 1667 페이지, 아메리카 심장협회 학술집회 2000 년, 2001 년)

또, 최근 녹아웃 마우스의 연구에서 심장에서의 비대나 선유화에서 안지오텐신II 가 안지오텐신II 수용체인 AT2 수용체에 작용하여 증악인자가 될 수 있을 가능성을 시사하는 보고도 이루어지고 있다 (Circulation, 2001 년 104 권 247 페이지, Ichihara 외, Trends Cardiovasc Med, 2001 년 11 권 324 페이지, Inagami 외).

심질환 이외의 순환기 질환에서도 ACE 저해제나 안지오텐신II 수용체 길항제에 의해서도 혈압이 저하되지 않는 일부 고혈압환자가 존재하고 있다. 또, 폐고혈압증에서도 ACE 저해제나 안지오텐신II 수용체 길항제의 치료상 효과는 명확하지 않다.

따라서 발명자들은 지금까지 임상 응용되고 있지 않는 새로운 개념에 기초하 는 치료제ㆍ치료법을 개발하여, 이들 순환기 질환의 치료에서의 문제점을 극복하기 위해 본 발명을 제안하기에 이르렀다.

발명의 개시

본 발명의 과제는 심질환 (심비대, 심부전, 또는 심근경색 등), 뇌졸중, PTCA 후의 재협착 등의 혈관장해, 동맥경화, 신부전, 신염, 일부 고혈압증, 또는 폐고혈압증 등의 고혈압증에서의 심혈관계질환에 대한 새로운 치료약을 제공하는 것이다.

ATl 수용체 길항제가 ACE 및 비-ACE 의존의 2 개의 안지오텐신II 의 작용을 동시에 억제하는 약제이면서, 심질환영역에서 기대될 정도의 치료효과를 얻고 있지 못하는 점에 관해서는 다음과 같이 고찰할 수 있다. 즉, 이들 수용체 길항제는 ATl 수용체의 선택적인 길항제로, ATl 수용체 이외의 안지오텐신II 수용체에 대한 작용을 억제하는 것은 아니다. 사실, ATl 수용체의 길항작용에 의해 혈청중 및 조직중의 안지오텐신II 농도가 상승하는 것으로 알려져 있는 점에서, 이들 안지오텐신II 가 다른 수용체를 자극하는 것으로 추정된다. 예컨대, 안지오텐신II 수용체인 AT2 수용체는 ATl 수용체와 동일하게 중요한 작용을 갖는 것으로 생각되어 왔지만, 그의 순환기계 질환에서의 역할은 아직 불명확한 점도 많다.

전술한 심장에서의 비대나 선유화에서 안지오텐신II 가 AT2 수용체에 작용하여 증악인자가 될 수 있을 가능성을 시사하는 보고에서, AT1 수용체의 길항작용에 의해 혈청중 및 조직중의 안지오텐신II 농도가 상승하고, 이들 안지오텐신II 가 다른 수용체를 자극하는 것이 심질환 등의 순환기 질환에서는 병태증악으로 작용한다 는 가설을 부분적으로 뒷받침하는 것이다. 따라서, 만성심부전 등의 심질환은 최종적으로는 광범한 심장의 선유화와 그에 수반되는 심기능 저하에 의해 사망에 이르게 되는 것인데, 이들 심질환의 병태의 진행과정에서는 AT2 수용체를 자극하는 것은 병태증악으로 이어질 가능성이 있고, 이 AT2 수용체의 자극은 AT1 수용체 길항제가 만성심부전, 심근경색 후 심기능부전 등의 심질환에서 치료효과를 충분히 얻을 수 없는 요인인 것으로 생각된다.

또, 현재 순환기계 질환의 임상에 널리 사용되고 있는 ACE 저해제는 브라디키닌 등의 분해억제를 통하여 순환기계 질환에 대한 치료효과도 발현되는 것으로 생각되며, 안지오텐신 수용체 길항제가 완전히 ACE 저해제의 치료효과를 대체할 수 있는 것은 아니다.

또한, 키마제는 안지오텐신II 와 동일하게 강력한 혈관수축작용을 지녀 다양한 세포에 대해 증식작용을 갖는 인자인 엔도셀린을 활성화시키는 점에서 안지오텐신II 수용체 이외의 기서(機序)에 의한 순환기 질환의 병태 형성에 관여할 가능성이 있다. 또, 키마제는 염증성 사이토카인 중 하나인 IL-1β의 활성화를 통하여 심혈관장해 부위에서의 염증반응 증악이나, 피브로넥틴이나 IV 형 콜라겐의 분해, 매트릭스 프로테아제의 활성화를 통한 세포외 단백질의 분해에 기여하는 것이나, 트랜스포밍 그로스팩터β(TGFβ) 의 유리촉진을 통하여 선유아세포의 분화증식을 촉진시켜 조직선유화/조직리모델링을 촉진시키는 것으로 생각된다. 따라서, 키마제 저해제는 이들 순환기 질환에서 안지오텐신II 의 작용을 억제할 뿐만 아니라, 안지오텐신 수용체 길항제로 대체할 수 없는 광범한 약리작용을 겸비하는 유용 한 순환기 질환 치료약으로 생각된다. 그런데, 키마제 저해제로는 벤즈이미다졸 유도체 또는 그의 의학상 허용되는 염이 개시되어 있다 (WO01/53291호 명세서, WO01/53272호 명세서, WO00/03997호 명세서). 그의 화학구조를 후술한다.

또한, 발명자들는 ACE 저해제와 키마제 저해제를 동시에 투여하는 것을 실현하는 치료법 또는 치료제가 상승적인 치료효과를 기대할 수 있는 획기적인 순환기 치료법 또는 치료제가 될 것으로 생각하기에 이르렀다. 즉, 본 발명은 조직에서의 ACE 의존 및 비의존의 안지오텐신II 생성을 완전히 억제할 뿐만 아니라, AT1 수용체 길항제가 갖지 않는 ACE 저해제에 의한 브라디키닌 분해억제에 의한 치료효과도 유지하고, 또한 키마제가 갖는 인터루킨-1-β(IL-1β) 의 활성화, 매트릭스 프로테아제의 활성화, 피브로넥틴이나 IV 형 콜라겐의 분해, 트랜스포밍 그로스펙터-β(TGF-β) 의 유리촉진, 서브스턴스P 나 바소액티브 인테스티널 펩티드 (Vasoactive intestinal peptide, VIP) 의 활성화 등을 억제함으로써 순환기계 질환에서 새로운 치료제의 개념을 부여하는 것이다.

안지오텐신II 생성에 관해 병태국소(病態局所)에서는 ACE 와 키마제가 그 역할을 분담하고 있는 것으로 생각되며, PTCA 후의 재협착 등 혈관장해성 병태에서는 오히려 ACE 보다 키마제가 중요할 것으로 생각된다. 또한, 혈관 죽상 (粥狀) 동맥경화소에서의 키마제활성의 상승, 선천성 심질환의 폐혈관 병변의 진행에 키마제가 관여되는 것, 키마제에 의한 심근세포의 아포토시스 및 심선유아세포의 증식 등도 보고되고, 장해혈관이나 심장을 중심으로 한 순환기계 조직리모델링에 키마제에 의한 안지오텐신II 생성이 ACE 와 함께 관여되는 동시에 다른 역할로도 관여되 고 있는 것으로 생각된다.

따라서, ACE 에 의한 안지오텐신II 생성과 키마제에 의한 안지오텐신II 생성 양쪽 경로를 동시에 억제하여 생체내 안지오텐신II 자체의 농도를 저하시키는 것은 순환기계 질환의 치료에 유효하여 심부전, 심근경색 및 그의 예후, PTCA 등의 처치 후 혈관재협착, 폐고혈압에 수반되는 심질환, 동맥경화증, 신부전, 일부 고혈압증 등에 널리 유효할 것으로 생각된다.

본 발명자들은 키마제가 ACE 와 함께 심혈관계질환에 대해 안지오텐신II 생성을 통하여 깊게 관여되는 것에 착안하여 예의 연구를 거듭해 왔다. 인간 키마제는 설치류인 마우스 및 래트에서도 그런 유사효소가 동정되고 있지만, 이들 유사효소는 인간과 달리 안지오텐신II 생성활성과 함께 안지오텐신II 분해활성을 갖고, 설치류에서의 키마제 의존 안지오텐신II 생성경로의 기여는 인간과 비교하여 낮다. 따라서, 키마제에 의한 안지오텐신II 생성이 비교적 인간에 가까운 햄스터를 실험동물로서 사용하여 키마제에 의한 안지오텐신II 생성경로의 기여를 검토해 왔다. 또한, 인간 키마제 유전자를 마우스 수정란에 이입함으로써 인간 키마제 과잉발현 마우스를 제조하고, 이 인간형 키마제를 생성하는 유전자 재조합 동물에 의해 그 순환기계 질환에 대한 작용을 검토해 왔다.

본 발명자들은 이들 선진적인 연구결과에 기초하여 키마제 저해제와 ACE 저해제를 동시에 투여함으로써 순환기계 질환에서 매우 유효한 치료약이 될 수 있음을 발견하였다.

즉, 본 발명은 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 유효성분으로 함유하는 약제 또는 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 투여함에 따른 예방방법 또는 치료방법이다.

또 본 발명은 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 유효성분으로 함유하는 순환기 질환의 예방제 또는 치료제 또는 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 투여함에 따른 순환기계 질환의 예방방법 또는 치료방법이다.

또한 본 발명은 상기 순환기계 질환이 고혈압증, 심장병, 뇌졸중, 혈관장해, 동맥경화, 신염, 또는 신부전인 치료제 또는 치료법이다.

또한, 본 발명은 상기 심장병이 심비대, 심부전, 또는 심근경색인 순환기계 질환 치료제 또는 치료법이다.

또한 본 발명은 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 유효성분으로 함유하는 안지오텐신II 생성억제제 또는 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 투여함에 따른 안지오텐신II 생성억제방법이다.

도 1 은 혈관투과성 항진에 대한 키마제 저해제의 작용을 나타내는 도면이다.

도 2 는 햄스터 심근경색 모델에서의 약제효과를 나타내는 도면이다.

발명을 실시하기 위한 형태

본 발명은 키마제 저해제와 ACE 저해제를 유효성분으로 함유하는 약제, 순환기계 질환 치료제 또는 안지오텐신II 생성억제제, 또는 키마제 저해제와 ACE 저해제를 투여하는 치료법, 순환기계 질환 치료방법, 또는 안지오텐신II 생성억제방법이다.

본 발명에서는 키마제 저해제를 제 1 유효성분으로, ACE 저해제를 제 2 유효성분으로 사용한다.

ACE 저해제는 이미 고혈압 등의 순환기 질환에서 유용성이 확인되고 있는 약제이다. 키마제 저해제는 국소 안지오텐신II 생성을 억제함으로써 심근경색 예후 등에 유효함이 본 발명에서 확인되고 있다. 따라서, 키마제 저해제 단독으로도 순환기계 질환의 약제나 안지오텐신II 생성억제제로서 유용하다. 또한, 본 발명은 ACE 저해제와 키마제 저해제를 병용하여 사용함으로써 ACE 저해제 또는 키마제 저해제를 단독으로 사용하는 것에 비해 조직국소의 안지오텐신II 생성을 완전히 억제하고, ACE 저해제의 브라디키닌 분해억제 등의 작용을 유지하고, 또한 키마제가 매개하는 다양한 생리작용을 억제함으로써 상승적인 치료효과를 발휘하여 순환기계 질환 치료나 안지오텐신II 생성억제 등에 효과적이다.

본 발명에서의 약제는 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 동시에 또는 시간을 두고 각각 투여하는 약제이다.

본 발명에서의 약제는 키마제 저해제와 ACE 저해제를 유효성분으로 함유하고 있으면 되고, 어떤 형태의 약제여도 된다. 본 발명에서의 약제의 형태로는 예컨대 키마제 저해제와 ACE 저해제를 주성분으로 하는 합제(合劑)여도 되고, 키마제 저해제와 ACE 저해제가 합제가 아니라 독립된 약제로서의 각각의 단제(單劑)여도 되고, 키마제 저해제와 ACE 저해제가 배합된 형태이면 특별히 한정되지 않는다. 여기에서 합제란, 단일 제제에 2 개 이상의 유효성분을 배합한 것을 가리키며, 단제란 단일 제제에 단일의 특정 유효성분을 함유하는 것을 가리킨다.

키마제 저해제와 ACE 저해제의 배합제로는 예컨대 키마제 저해제의 유효성분과 ACE 저해제의 유효성분 각각의 제 (劑) 의 효과를 발휘할 수 있는 적당량을 합쳐 정제, 캡슐제, 액제 등의 제형을 제조한다. 이 때 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 합쳐 배합제로 하는 타이밍은 합제로서 제형의 제조단계에서 실시해도 되고, 투여하기 직전에 배합하는 것이어도 된다. 제조단계에서 실시하는 경우에는 예컨대 키마제 저해제와 ACE 저해제의 각각의 성분을 적당량 혼합하여 성형하거나, 한데 섞어 담으면 된다. 성형하는 방법으로는 예컨대 각각의 제를 혼합해도 되고, 층형상으로 겹쳐 쌓아도 되며 특별히 한정되지 않는다. 투여하기 직전에 배합제로 하는 경우는 예컨대 투여 직전까지는 키마제 저해제와 ACE 저해제는 각각 독립된 상태로 보존되고, 투여할 때 액체상 제를 혼합하거나, 액체상 제에 정제, 환제, 과립제, 산제, 또는 캡슐제 등의 고체 제를 용해시키거나, 과립제 또는 산제 등의 고체 제끼리를 혼합하는 방법이 있다. 직전에 혼합하기 위한 방법으로는 수작업으로 실시해도 되고, 절단하거나, 갈아 빻거나, 쪼개거나, 뽑아 내는 등 간단하게 양 제가 혼합되는 패키지를 사용해도 된다. 배합제의 형태로는 정제, 환제, 과립제, 산제, 액제, 현탁제, 시럽제, 또는 캡슐제 등의 제형이 있다.

키마제 저해제와 ACE 저해제가 각각 독립된 단제인 약제란, 키마제 저해제와 ACE 저해제로 각각 단일하게 이용할 수 있는 단제를 조합하여 이용하는 약제이다. 각각의 제의 형태는 고체 또는 액체끼리여도 되고, 고체와 액체여도 되며 특별히 한정되지 않는다.

본 발명에서의 키마제 저해제와 ACE 저해제가 키트의 형태에 있다라는 것은, 키마제 저해제와 ACE 저해제가 용이하게 준비되도록 일식(一式)으로 갖추어진 상태에 있는 형태를 말한다. 키트의 형태란 예컨대 제의 제조종료 단계에서 PTP 나 브리스터팩 등으로 동일한 패키지가 되거나, 병원이나 약국 등에서 처방될 때 동일한 봉투에 넣어져도 되며 특별히 한정되지 않는다.

또, 본 발명에서의 예방방법 또는 치료방법은 키마제 저해제와 ACE 저해제의 양 제를 투여하는 방법이면 되고, 투여방법은 특별히 한정되지 않는다. 본 발명에서의 방법은 또 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 동시에 또는 시간을 두고 각각 투여하는 방법이다.

본 발명의 키마제 저해제 및 ACE 저해제를 투여하는 방법으로는 예컨대 키마제 저해제와 ACE 저해제의 합제를 투여하는 방법, 키마제 저해제와 ACE 저해제의 독립된 단제를 준비하여 투여하는 방법, 또는 키마제 저해제와 ACE 저해제를 배합한 것을 투여하는 방법 등이 있다.

또 본 발명의 키마제 저해제 및 ACE 저해제는 동시에 투여해도 되고, 동시가 아니라 개별적으로 투여해도 된다. 동시에 투여하지 않는 경우에는 예컨대 서로 교대로 투여해도 되고, 한쪽 제를 계속해서 투여한 후 다른쪽 제를 투여해도 된다. 또, 투여횟수에 대해서는 양쪽이 동일하거나 상이해도 된다.

투여방법으로는 양쪽 모두 경구 또는 비경구여도 되고, 한쪽이 경구이고 다른쪽이 비경구여도 된다.

본 발명에서의 키마제 저해제 중에서 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 벤즈이미다졸 유도체는 제약학적으로 허용되는 담체와 함께 의약조성물로 하고, 이 의약조성물을 다양한 제형으로 성형하여 경구 또는 비경구에 의해 ACE 저해제를 함유하는 의약품조성물과 별도로 투여되는 것이 바람직하다. 또는, 적당한 ACE 저해제와의 합제 또는 배합제를 제조하여 경구 또는 비경구투여되는 것이 바람직하다.

본 발명에서 키마제 저해제와 병용하는 ACE 저해제의 투여방법 및 투여량은 질환의 종류, 투여경로, 환자의 증상, 연령, 성별, 체중 등에 따라 다르지만, 몇가지 방법을 사용할 수 있다. 예컨대 ACE 저해제와 키마제 저해제의 합제를 제조하여 동시 내복투여할 수 있다. 예컨대 ACE 저해제로서 염산테모카프릴을 사용하는 경우는 1-4㎎ 의 염산테모카프릴 및 1-10㎎ 의 키마제 저해제를 사용한 합제를 제조하여 경구로 내복투여할 수 있다. 또는, ACE 저해제와 키마제 저해제를 따로따로 정제로 제조하여 각각 투여할 수도 있다. 용법으로는 동시에 내복하는 것이 바람직하지만, 증상이나 질환상태에 맞춰 각각의 약제를 독립적으로 투여량을 조정할 수도 있다.

본 발명의 의약조성물의 제형으로는 이하와 같은 것을 들 수 있다. 예컨대 경구투여제의 경우는 정제, 환제, 과립제, 산제, 액제, 현탁제, 시럽제, 또는 캡슐제 등의 제형을 들 수 있다.

여기에서 정제의 성형방법으로는 부형제, 결합제, 및/또는 붕괴제 등의 제약학적으로 허용되는 담체를 사용하여 통상적인 방법에 의해 성형할 수 있다. 환제, 과립제, 또는 산제도 정제의 경우와 동일하게 부형제 등을 사용하여 통상적인 방법에 의해 성형할 수 있다. 액제, 현탁제, 또는 시럽제의 성형방법은 글리세린에스테르류, 알콜류, 물, 및/또는 식물유 등을 사용하여 통상적인 방법에 의해 성형할 수 있다. 캡슐제의 성형방법은 과립제, 산제, 또는 액제 등을 젤라틴 등의 캡슐에 충전함으로써 성형할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 키마제 저해제로는 상기 서술한 WO01/53291호 명세서, WO01/53272호 명세서, WO00/03997호 명세서에 개시된 하기 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 벤즈이미다졸 유도체 또는 그 의학상 허용되는 염을 사용하는 것이 바람직하다:

[화학식 (Ⅰ) 중, R¹ 및 R² 는 동일하거나 상이해도 되고, 각각 독립적으로 수소원자, 할로겐원자, 트리할로메틸기, 시아노기, 수산기, 탄소수 1∼4 의 알킬기, 탄소수 1∼4 의 알콕시기, 또는 R¹ 및 R² 는 일체가 되어 -O-CH₂-O-, -O-CH₂CH₂-O-, 또는 -CH₂CH₂CH₂- (-O-CH₂-O-, -O-CH₂CH₂ -O-, 또는 -CH₂CH₂CH₂- 의 경우, 그 탄소원자는 하나 또는 복수의 탄소수 1∼4 의 알킬기로 치환되어 있어도 됨) 를 나타낸다;

A 는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼7 의 직쇄, 환상, 또는 분지상의 알킬렌기 또는 알케닐렌기를 나타내고, 도중에 -O-, -S-, -SO₂-, -NR³- (여기에서, R³ 은 수소원자 또는 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기를 나타냄) 을 1 개 또는 복수개 함유하고 있어도 된다. 이들 기가 가질 수 있는 치환기는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기 (인접하는 2 개가 아세탈결합을 형성하고 있는 경우를 포함), 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬티오기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬술포닐기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기, 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기, 옥소기, 또는 하나 이상의 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기이다. 이들 치환기는 알킬렌기 또는 알케닐렌기의 임의의 장소에서 1 개 또는 복수개 각각 독립적으로 치환되어 있어도 된다;

E 는 -COOR³, -SO₃R³, -CONHR³, -SO₂NHR³, 테트라졸-5-일기, 5-옥소-1,2,4-옥사디아졸-3-일기, 또는 5-옥소-1,2,4-티아디아졸-3-일기 (여기에서, R³ 은 상기 정의와 동일함) 를 나타낸다;

G 는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬렌기를 나타내고, 도중에 -O-, -S-, -SO₂-, -NR³- (여기에서, R³ 은 상기 정의와 동일하다. 이들 원자 또는 원자단이 함유되는 경우는, 그것들은 직접 벤즈이미다졸환에 결합되지 않음) 을 1 개 또는 복수개 함유하고 있어도 된다. 이러한 알킬렌기가 가질 수 있는 치환기는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 직쇄 또는 분지상 의 탄소수 1∼6 의 알킬기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기 (인접하는 2 개가 아세탈결합을 형성하고 있는 경우를 포함), 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기, 또는 옥소기이다;

M 은 단결합 또는 -S(O)_m- 을 나타내고, m 은 0∼2 의 정수이다;

J 는 치환 또는 무치환의 산소원자, 질소원자, 및 황원자로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 환 상에 갖는 탄소수 4∼10 의 헤테로아릴기를 나타낸다. 단, 피리딘환은 제외한다. 이러한 헤테로아릴기가 가질 수 있는 치환기는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기 (인접하는 2 개가 아세탈결합을 형성하고 있는 경우를 포함), 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬티오기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬술포닐기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기, 치환 또는 무치환의 아닐리드기, 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기, 옥소기, COOR³ 기 (여기에서, R³ 은 상기 정의와 동일함), 또는 하나 이상의 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기이다. 이들 치환기는 환의 임의의 위치에서 1 개 또는 복수개 각각 독립적으로 치환되어 있어도 된다; 또 J 는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼6 의 직쇄, 환상, 또는 분지상의 알킬기, 치환 또는 무치환의 탄소수 4∼10 의 아릴기 {이들 기가 가질 수 있는 치환기로는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, -COOR⁴ (여기에서, R⁴ 는 수소원자 또는 탄소수 1∼4 의 알킬기 를 나타냄), 직쇄, 환상, 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬렌기, 탄소수 1∼6 의 직쇄상 또는 분지상의 알콕시기 (인접하는 2 개가 아세탈결합을 형성하고 있는 경우를 포함), 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬티오기, 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술포닐기, 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술피닐기, 탄소수 1∼6 의 아실기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기, 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기, 옥소기, 또는 하나 이상의 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기이다. 이들 치환기는 알킬렌기 또는 아릴기의 임의의 장소에서 1 개 또는 복수개 각각 독립적으로 치환되어 있어도 된다. 또, 이들 치환기는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 아실기, 트리할로메틸기, 페닐기, 옥소기, 또는 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기로 치환되어 있어도 됨} 를 나타낸다;

X 는 메틴 (-CH=) 또는 질소원자를 나타냄].

이러한 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물 중에서도 바람직한 것을 이하에 서술한다.

R¹ 및 R² 는 동일하거나 상이해도 되고, 각각 독립적으로 수소원자, 할로겐원자, 트리할로메틸기, 시아노기, 수산기, 탄소수 1∼4 의 알킬기, 탄소수 1∼4 이 알콕시기, 또는 R¹ 및 R² 는 일체가 되어 -O-CH₂-O-, -O-CH₂CH ₂-O-, 또는 -CH₂CH₂CH₂- 를 나타낸다. 이 경우, 그 탄소원자는 하나 또는 복수의 탄소수 1∼4 의 알킬기로 치환되어 있어도 된다.

R¹ 및 R² 의 탄소수 1∼4 의 알킬기로는 구체적으로는 메틸기, 에틸기, (n-,i-)프로필기, (n-,i-,s-,t-)부틸기를 들 수 있다. 보다 바람직하게는 메틸기를 들 수 있다. 탄소수 1∼4 의 알콕시기로는 구체적으로는 메톡시기, 에톡시기, (n-,i-)프로필옥시기, (n-,i-,s-,t-)부틸옥시기를 들 수 있다.

R¹ 및 R² 의 바람직한 기로는 수소원자, 할로겐원자, 트리할로메틸기, 시아노기, 수산기, 탄소수 1∼4 의 알킬기, 또는 탄소수 1∼4 의 알콕시기를 들 수 있다. 나아가서는 수소원자, 할로겐원자, 트리할로메틸기, 시아노기, 탄소수 1∼4 의 알킬기, 또는 탄소수 1∼4 의 알콕시기가 바람직하고, 수소원자, 염소원자, 불소원자, 트리플루오로메틸기, 메틸기, 메톡시기, 또는 에톡시기가 보다 바람직하고, 특히 수소원자, 메틸기, 메톡시기, 또는 에톡시기가 바람직하다.

A 는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼7 의 직쇄, 환상, 또는 분지상의 알킬렌기 또는 알케닐렌기를 나타낸다. 이러한 무치환의 탄소수 1∼7 의 직쇄, 환상, 또는 분지상의 알킬렌기로는 메틸렌기, 에틸렌기, (n-,i-)프로필렌기, 2,2-디메틸프로필렌기, (n-,i-,t-)부틸렌기, 1,1-디메틸부틸렌기, n-펜틸렌기, 또는 시클로헥실렌기 등을 들 수 있다. 바람직하게는 에틸렌기, n-프로필렌기, 2,2-디메틸프로필렌기, 또는 (n-,t-)부틸렌기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 n-프로필렌기 또는 2,2-디메틸프로필렌기를 들 수 있다. 특히 바람직하게는 n-프로필렌기를 들 수 있다. 무치환의 탄소수 1∼7 의 직쇄 또는 분지상의 알케닐렌기로는 비닐렌기, 프로페닐렌기, 부테닐렌기, 또는 펜테닐렌기 등을 들 수 있다. 이러 한 알킬렌기 또는 알케닐렌기는 도중에 -O-, -S-, -SO₂-, -NR³- (여기에서, R³ 은 수소원자 또는 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기를 나타냄) 을 1 개 또는 복수개 함유하고 있어도 되지만, 이들 원자 또는 원자단이 직접 M 에 결합되지는 않는다. 구체적으로는 에틸렌기, n-프로필레기, 또는 (n-,t-)부틸렌기 사이에 놓인 기를 들 수 있다. 더욱 구체적으로는 -CH₂OCH₂-, -CH₂OCH₂ CH₂-, -CH₂SCH₂-, -CH₂SCH₂CH₂-, -CH₂SO₂CH₂-, -CH₂ SO₂CH₂CH₂-, -CH₂NR⁴CH₂- 또는 -CH₂NR⁴CH₂CH₂- 등을 들 수 있다. 바람직하게는 -CH₂OCH₂-, -CH₂SCH₂-, 또는 -CH ₂SO₂CH₂- 를 들 수 있다.

이러한 알킬렌기 또는 알케닐렌기가 가질 수 있는 치환기는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기, 직쇄상 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기 (인접하는 2 개가 아세탈결합을 형성하고 있는 경우를 포함), 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬티오기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬술포닐기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기, 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기, 옥소기, 또는 하나 이상의 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기이다. 이들 치환기는 알킬렌기 또는 알케닐렌기의 임의의 위치에서 1 개 또는 복수개 각각 독립적으로 치환되어 있어도 된다.

A 의 치환기의 할로겐원자로는 불소원자, 염소원자, 브롬원자, 또는 요오드원자를 들 수 있다. 바람직하게는 블소원자 또는 염소원자를 들 수 있다.

A 의 치환기의 직쇄상 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기로는 구체적으로는 메틸기, 에틸기, (n-,i-)프로필기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메틸기 또는 에틸기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메틸기를 들 수 있다.

A 의 치환기의 직쇄상 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기로는 구체적으로는 메톡시기, 에톡시기, (n-,i-)프로필옥시기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸옥시기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메톡시기 또는 에톡시기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메톡시기를 들 수 있다.

A 의 치환기의 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬티오기로는 구체적으로는 메틸티오기, 에틸티오기, (n-,i-)프로필티오기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸티오기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메틸티오기 또는 에틸티오기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메틸티오기를 들 수 있다.

A 의 치환기의 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬술포닐기로는 구체적으로는 메틸술포닐기, 에틸술포닐기, (n-,i-)프로필술포닐기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸술포닐기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메틸술포닐기 또는 에틸술포닐기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메틸술포닐기를 들 수 있다.

A 의 치환기의 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실기로는 아세틸기, 에틸카르보닐기, (n-,i-)프로필카르보닐기, 또는 (n-,i-,s-,t-)카르보닐기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 아세틸기 또는 에틸카르보닐기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 아세틸기를 들 수 있다.

A 의 치환기의 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기로는 구체적으로는 아세틸아미노기, 에틸카르보닐아미노기, (n-,i-)프로필카르보닐아미노기, 또는 (n-,i-,s-,t-)카르보닐아미노기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 아세틸아미노기 또는 에틸카르보닐아미노기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 아세틸아미노기를 들 수 있다.

A 의 치환기의 트리할로메틸기로는 구체적으로는 트리플루오로메틸기, 트리브로모메틸기, 또는 트리클로로메틸기를 들 수 있다. 바람직하게는 트리플루오로메틸기를 들 수 있다.

그 중에서도 A 로서 바람직하게는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼7 의 직쇄, 환상, 또는 분지상의 알킬렌기 {도중에 -O-, -S-, -SO₂-, -NR³- (여기에서, R³ 은 상기 정의와 동일함) 을 1 개 또는 복수개 함유하고 있어도 되지만, 이들 원자 또는 원자단이 직접 M 에 결합되지는 않음} 를 들 수 있다. 바람직하게는 -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂C(=O)CH₂-, -CH₂OCH ₂-, -CH₂SCH₂-, -CH₂S(=O)CH₂-, -CH₂CF ₂CH₂-, -CH₂SO₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂CH₂-, -CH₂C(CH₃)₂CH₂-, -CH₂SO₂CH₂CH ₂-, -CH₂C(=O)CH₂CH₂-, -CH₂C(=O)(CH₃)₂CH₂-, 또는 -CH₂C(=O)C(=O)CH₂ - 등을 들 수 있다. 보다 바람직하게는 -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂C(=O)CH ₂-, -CH₂OCH₂-, -CH₂SCH₂-, -CH₂S(=O)CH ₂-, -CH₂CF₂CH₂-, -CH₂SO₂CH₂-, 또는 -CH ₂C(CH₃)₂CH₂- 를 들 수 있다. 더욱 바람직하게 는 -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, 또는 -CH₂C(CH ₃)₂CH₂- 를 들 수 있다. 특히 바람직하게는 -CH₂CH₂CH₂- 를 들 수 있다.

E 는 -COOR³, -SO₃R³, -CONHR³, -SO₂NHR³, 테트라졸-5-일기, 5-옥소-1,2,4-옥사디아졸-3-일기, 또는 5-옥소-1,2,4-티아디아졸-3-일기를 나타낸다 (여기에서, R³ 은 수소원자 또는 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기를 나타냄).

이러한 R³ 으로는 수소원자, 메틸기, 에틸기, (n-,i-)프로필기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸기 등을 들 수 있다. 바람직하게는 수소원자, 메틸기, 또는 에틸기를 들 수 있다. 특히 바람직하게는 수소원자를 들 수 있다.

그 중에서도 E 로는 바람직하게는 -COOR³, -SO₃R³, 또는 테트라졸-5-일기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 -COOR³ 을 들 수 있다. 특히 바람직하게는 -COOH 를 들 수 있다.

G 는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬렌기를 나타내고, 도중에 -O-, -S-, -SO₂- 또는 -NR³- 을 1 개 또는 복수개 함유하고 있어도 된다. 여기에서, R³ 은 상기 정의와 동일하다. 또, 이들 헤테로원자 또는 원자단이 함유되는 경우, 이들 원자 또는 원자단은 직접 벤즈이미다졸환에는 결합되지 않는다. 이러한 알킬렌기가 가질 수 있는 치환기는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기 (인접하는 2 개가 아세탈결합을 형성하고 있는 경우를 포함), 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기 또는 옥소기이다. 구체적으로는, 예컨대 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CO-, -CH₂CH ₂O-, -CH₂CONH-, -CO-, -SO₂-, -CH₂SO₂-, -CH₂S-, 또는 -CH₂CH₂S- 등을 들 수 있고, 바람직한 것으로는 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CO-, 또는 -CH₂CH₂O- 를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂- 를 들 수 있고, 특히 바람직하게는 -CH₂- 이다. 단, 여기에 예시되어 있는 기는 좌측이 벤즈이미다졸의 1 위치 (N 원자) 와 결합되어 있고, 우측이 J 와 결합되어 있다.

M 은 단결합 또는 -S(O)_m- 을 나타내고, m 은 0∼2 의 정수를 나타낸다. 바람직하게는 -S- 또는 -SO₂- 를 들 수 있다. 특히 바람직하게는 -S- 를 들 수 있다.

J 는 J¹ 또는 J² 로 표시된다.

J¹ 은 치환 또는 무치환의 (산소원자, 질소원자, 및 황원자로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 환 상에 갖는 탄소수 4∼10 의 헤테로아릴기) 를 나타낸다. 단, 피리딘환은 제외한다. J² 는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼6 의 직쇄, 환상, 또는 분지상의 알킬기, 치환 또는 무치환의 탄소수 4∼10 의 아릴기를 나타낸다. 이들은 화학적으로 합성이 가능한 것에 한정된다.

J¹ 의 무치환의 (산소원자, 질소원자, 및 황원자로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 환 상에 갖는 탄소수 4∼10 의 헤테로아릴기) 로는, 구체적으로는 푸릴기, 티에틸기, 티아졸릴기, 피리미디닐기, 옥사졸릴기, 이소옥사졸릴기, 벤조푸릴기, 벤조이미다졸릴기, 퀴놀릴기, 이소퀴놀릴기, 퀴녹살리닐기, 벤조옥사디아졸릴기, 벤조티아디아졸릴기, 인돌릴기, 벤조티아졸릴기, 벤조티에닐기, 또는 벤조이소옥사졸릴기 등을 들 수 있다. 바람직하게는 2 환식의 헤테로방향환, 더욱 바람직하게는 벤조푸릴기, 벤조이미다졸릴기, 퀴놀릴기, 이소퀴놀릴기, 퀴녹살리닐기, 벤조옥사디아졸릴기, 벤조티아디아졸릴기, 인돌릴기, 벤조티아졸릴기, 벤조티에닐기, 또는 벤조이소옥사졸릴기를 들 수 있고, 특히 바람직하게는 벤조티에닐기 또는 인돌릴기를 들 수 있다.

이러한 헤테로아릴기 또는 아릴기가 가질 수 있는 치환기는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기 (인접하는 2 개가 아세탈결합을 형성하고 있는 경우를 포함), 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬티오기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬술포닐기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기, 치환 또는 무치환의 아닐리드기, 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기, 또는 하나 이상의 할로겐원자로 치환 되어 있어도 되는 페녹시기이다. 이들 치환기는 환의 임의의 위치에서 1 개 또는 복수개 각각 독립적으로 치환되어 있어도 된다.

J¹ 의 치환기인 할로겐원자로는 불소원자, 염소원자, 브롬원자, 또는 요오드원자를 들 수 있다. 바람직하게는 불소원자 또는 염소원자를 들 수 있다.

J¹ 의 치환기인 직쇄상 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬기로는 구체적으로 메틸기, 에틸기, (n-,i-)프로필기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메틸기 또는 에틸기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메틸기를 들 수 있다.

J¹ 의 치환기인 직쇄상 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알콕시기로는 구체적으로는 메톡시기, 에톡시기, (n-,i-)프로필옥시기, (n-,i-,s-,t-)부틸옥시기, 또는 메틸렌디옥시기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메톡시기 또는 에톡시기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메톡시기를 들 수 있다.

J¹ 의 치환기인 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬티오기로는 구체적으로는 메틸티오기, 에틸티오기, (n-,i-)프로필티오기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸티오기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메틸티오기 또는 에틸티오기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메틸티오기를 들 수 있다.

J¹ 의 치환기인 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술포닐기로는 구체적으로는 메틸술포닐기, 에틸술포닐기, (n-,i-)프로필술포닐 기, 또는 (n-,i-,s-,t-)부틸술포닐기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 메틸술포닐기 또는 에틸술포닐기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 메틸술포닐기를 들 수 있다.

J¹ 의 치환기인 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실기로는 아세틸기, 에틸카르보닐기, (n-,i-)프로필카르보닐기, 또는 (n-,i-,s-,t-)카르보닐기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 아세틸기 또는 에틸카르보닐기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 아세틸기를 들 수 있다.

J¹ 의 치환기인 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기로는 구체적으로는 아세틸아미노기, 에틸카르보닐아미노기, (n-,i-)프로필카르보닐아미노기, 또는 (n-,i-,s-,t-)카르보닐아미노기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 아세틸아미노기, 에틸카르보닐아미노기를 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 아세틸아미노기를 들 수 있다.

J¹ 의 치환기인 트리할로메틸기로는 구체적으로는 트리플루오로메틸기, 트리브로모메틸기, 또는 트리클로로메틸기를 들 수 있다.

J² 는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼6 의 직쇄, 환상 또는 분지상의 알킬기, 또는 치환 또는 무치환의 탄소수 4∼10 의 아릴기를 나타낸다. 무치환의 탄소수 1∼6 의 직쇄, 환상 또는 분지상의 알킬기로는 메틸기, 에틸기, (n-,i-)프로필기, (n-,i-,s-,t-)부틸기, 시클로펜틸기, 또는 시클로헥실기 등을 들 수 있다.

J² 의 치환기로는 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, -COOR⁴ (R⁴ 는 수소원자 또는 탄소수 1∼4 의 알킬기를 나타냄), 직쇄, 환상 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 알킬렌기, 탄소수 1∼6 의 직쇄상 또는 분지상의 알콕시기 (이 경우 치환기로는 서로 인접하는 부위에서 아세탈결합되어 있어도 됨), 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬티오기, 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술포닐기, 탄소수 1∼6 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술피닐기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실기, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼6 의 아실아미노기, 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, 페닐기, 옥소기, 또는 하나 이상의 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기를 나타낸다. 이들 치환기는 알킬기 또는 아릴기의 임의의 장소에서 1 개 또는 복수개 각각 독립적으로 치환되어 있어도 된다. 이들 치환기는 또한 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 아실기, 트리할로메틸기, 페닐기, 옥소기, 또는 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기로 치환되어 있어도 된다.

그 중에서도, J² 로서 바람직하게는 치환 또는 무치환의 탄소수 4∼10 의 아릴기를 들 수 있다. 구체적으로는 다음 화학식 (ⅩⅡ), (ⅩⅢ):

[여기에서, X², X³ 및 X⁴ 는 동일하거나 상이해도 되며, 각각 독립적으로 수소원자, 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 트리할로메틸기, 트리할로메톡시기, COOR⁴ (여기에서, R⁴ 는 수소원자 또는 탄소수 1∼4 의 알킬기를 나타냄), 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알킬기, 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알콕시기, 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알킬티오기, 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술포닐기, 또는 치환 또는 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 탄소수 1∼3 의 알킬술피닐기를 나타낸다. X², X³, 및 X⁴ 의 벤젠환 또는 나프탈렌환 상의 치환위치는 한정되지 않음] 으로 표시되는 기가 바람직하다.

J² 의 치환기인 할로겐원자로는 불소원자, 염소원자, 브롬원자, 또는 요오드원자를 들 수 있다. 바람직하게는 불소원자 또는 염소원자를 들 수 있다. 트리할로메틸기로는 트리플루오로메틸기가 바람직하다. 트리할로메톡시기로는 트리플루오로메톡시기가 바람직하다. 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알킬기로는 구체적으로는 메틸기, 에틸기, 또는 (n-,i-)프로필기를 들 수 있다. 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알콕시기로는 구체적으로는 메톡시기, 에톡시기, 또는 (n-,i-)프로필옥시기 등을 들 수 있다. 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알킬티오기로는 구체적으로는 메틸티오기, 에틸티오기, 또는 (n-,i-)프로필티오기 등을 들 수 있다. 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술포닐기로는 구체적으로는 메틸술포닐기, 에틸술포닐기, 또는 (n-,i-)프로필술포닐기 등을 들 수 있다. 무치환의 탄소수 1∼3 의 직쇄 또는 분지상의 알킬술피닐기로는 구체적으로는 메틸술피닐기, 에틸술피닐기, 또는 (n-,i-)프로필술피닐기 등을 들 수 있다.

이들 J² 의 치환기는 또한 할로겐원자, 수산기, 니트로기, 시아노기, 아실기, 트리할로메틸기, 페닐기, 옥소기, 또는 할로겐원자로 치환되어 있어도 되는 페녹시기로 치환되어 있어도 된다.

화학식 (ⅩⅡ), (ⅩⅢ) 의 X², X³, 및 X⁴ 의 치환위치에 대해서는 특별히 한정되지 않지만, 보다 바람직하게는 화학식 (ⅩⅡ) 에서는 (2 위치, 3 위치) 의 조합, 또는 (2 위치, 5 위치) 의 조합이다. 화학식 (ⅩⅢ) 에서는 (4 위치, 7 위치, 8 위치), (4 위치, 6 위치, 8 위치), 또는 (6 위치, 7 위치, 8 위치) 의 조합이 바람직하다.

그 중에서도 J² 로서 바람직하게는 2-메틸페닐기, 2-에틸페닐기, 3-트리플루오로메틸페닐기, 2-에톡시페닐기, 3-메톡시페닐기, 2-클로로페닐기, 2-트리플루오로페닐기, 2,3-메틸렌디옥시페닐기, 2-메틸-3-메톡시페닐기, 2-트리플루오로메틸-3-메톡시페닐기, 2-메틸-3-트리플루오로메톡시페닐기, 2,3-디메틸페닐기, 2,3-디클로로페닐기, 2,3-디메톡시페닐기, 2,5-디메톡시페닐기, 2,5-디메틸페닐기, 2,5-디클로로페닐기, 2,5-디트리플루오로메틸페닐기, 1-나프틸기, 2-나프틸기, 8-메틸-1-나프틸기, 7-메틸-1-나프틸기, 6,8-디메틸-1-나프틸기, 또는 4,6,8-트리메틸-1-나 프틸기 등을 들 수 있다.

화학식 (Ⅰ) 에서의 X 는 -CH= 또는 질소원자를 나타내고, 바람직하게는 -CH= 를 들 수 있다.

화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물로서 바람직한 것은, 바람직한 것으로 전술한 각각의 기를 조합하여 구성되는 각종 화합물군이다. 한정할 의도는 아니지만, 그 중에서도 표 1 에 기재된 것이 바람직하다. 이 표 1 중에서 특히 바람직한 것으로는 화합물번호 2, 6, 7, 9, 10, 20, 22, 24, 26, 27, 31, 33, 43, 45, 56, 60, 62, 92, 128, 164, 182, 187, 189, 201, 202, 204, 206, 240, 또는 242 의 화합물이다.

또한, 표 1 중의 Al 및 J1∼J36 은 다음 식으로 표시되는 기이다. J1∼J36 의 「-」의 가장자리에 아무것도 기재되어 있지 않은 부분에는 「-CH₃」이 생략되어 있다.

식 중, E, G, M, m 및 X 는 상기 정의와 동일한데, 여기에서는 특히 E 가 COOH, G 가 CH₂, M 이 S (m 은 0) 또는 단결합 (표 중에서는 - 로 표기), X 가 -CH= 인 것을 대표로 기재하고 있지만, 그것들로 한정할 취지는 아니다.

본 발명에서의 키마제 저해제로서 WO00/05204호 명세서에 기재된 하기 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 것도 들 수 있다:

[화학식 (Ⅱ) 중, A 는 단(單)결합, -CO-, -COO-, -COCO-, -CONH- 또는 -SO₂- 이며, R¹ 은 치환기를 갖고 있어도 되는 저급알킬, 치환기를 갖고 있어도 되는 저급알케닐, 치환기를 갖고 있어도 되는 저급알키닐, 치환기를 갖고 있어도 되는 시클로알킬, 치환기를 갖고 있어도 되는 시클로알케닐, 또는 치환기를 갖고 있어도 되는 아릴이며, A 가 단결합, -CO-, -COCO-, R² 및 R³ 은 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 치환기를 갖고 있어도 되는 저급알킬, 치환기를 갖고 있어도 되는 저급알콕시카르보닐, 치환기를 갖고 있어도 되는 아실, 치환기를 갖고 있어도 되는 아미노, 치환기를 갖고 있어도 되는 카르바모일, 또는 치환기를 갖고 있어도 되는 아릴이며, B 는 단결합, -S-, -O-, -S-S-, -SO- 또는 -SO₂- 이며, R⁴ 는 수소, 치환기를 갖고 있어도 되는 저급알킬, 치환기를 갖고 있어도 되는 아릴, 또는 치환기를 갖고 있어도 되는 헤테로환이며, 또한 B 가 단결합, -S-, -O-, -SO- 또는 -SO₂- 인 경우, 치환기를 갖고 있어도 되는 아실이어도 됨].

화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 키마제 저해제 중, 4-[1-{[비스(4-메틸페닐)메틸]카르바모일}-3-(2-에톡시벤질)-4-옥소-아제티딘-2-일오일]벤조산은 햄스터 심근경색 모델에서의 단독적인 효과가 이미 보고되어 있어 (Life Sci 2002 년 71 권 437 페이지), 순환기 질환에서 ACE 저해제와의 병용에 의해 저명(著明)한 효과를 기대할 수 있다.

본 발명에서의 키마제 저해제로서 하기 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 WO98/09949호 명세서에 개시되어 있는 키마제 저해제를 들 수도 있다:

[화학식 (Ⅲ) 중, R⁰ 은 페닐기이며, 그의 환 상에는 하기에 정의되는 기 A 에서 선택되는 1 개 또는 그 이상의 치환기를 갖는 경우가 있다 (기 A; 기 A 는 할로겐, 니트로, 수산기, 저급알콕시기, 저급알킬기, 또는 할로게노 치환 저급알킬기를 나타냄). R¹ 은 (ⅰ) 아릴, (ⅱ) 헤테로아릴, 또는 (ⅲ) C1∼6 의 직쇄, 분지쇄 또는 환상의 알킬기이며, 각각 독립적으로 기 A 에 대해 정의된 치환기를 1 개 또는 그 이상 갖는 경우가 있다; 또는 R¹ 은 (ⅰ)∼(ⅲ) 의 기 상에 ORa, COORa, CONRbRc, NRbRc, NRbCHO, NRbCORa, SO₂ORa, SO₂Ra, CONRbSO₂Ra 및 P(O)(ORa) ₂ 로 이루어지는 기 B 에서 선택되는 1 개 또는 그 이상의 치환기를 갖는 경우가 있다 (이 중에서 Ra∼Rc 는 독립적으로 수소, 저급알킬, 또는 치환 저급알킬; 또는 Ra∼Rc 는 독립적으로 아릴(1-7C)알킬, 헤테로아릴(1-7C)알킬, 아릴 및 헤테로아릴이며, 이들 중 아릴 또는 헤테로아릴의 환 상에는 상기에 정의된 기 A 에서 선택되는 1 개 또는 그 이상, 통상 1 내지 3 개의 치환기를 갖는 경우가 있다. 또 치환 저급알킬은 치환기로서 할로겐, 니트로, 수산기에서 선택되는 원자 또는 기를 1 내지 3 개 가짐); 또는 R¹ 은 상기 (ⅰ)∼(ⅲ) 의 기 상에 하기에 정의되는 환상 기 G 를 치환기로서 1 개 또는 그 이상 갖는 경우가 있다 (환상 기 G; 환상 기 G 는 산소원자 또는 질소원자를 1 내지 3 개의 범위로 함유하는 5 또는 6 원환으로 이루어지는 복소환기를 나타내고, 치환기를 가져도 됨). R² 는 (1∼8C)알킬, 아릴(1∼7C)알킬, 헤테로아릴(1∼7C)알킬, 아릴; 또는 R² 는 상기에 정의된 기 B 또는 기 B 를 치환기로서 갖는 (1∼8C)알킬; 또는 상기에 정의된 환상 기 G 를 치환기로서 갖는 (1∼8C)알킬을 나타낸다. R³ 은 수소; 또는 R³ 은 (ⅰ) D(CH₂)_0-3 ㆍCO, (ⅱ) DㆍCOㆍEㆍCO, 또는 (ⅲ) DㆍSO₂ㆍEㆍCO 인 아실기; 또는 R³ 은 D(CH₂)_0-3 ㆍSO₂ 또는 DㆍCOㆍEㆍSO₂ 인 술포닐기 (여기에서 기 D 는 수소, C1∼6 의 직쇄, 분지쇄 또는 환상의 알킬기, 아릴기, 할로게노 저급알킬, 할로게노 저급알콕시, 아미노, 저급알콕시아미노, 할로게노 저급알킬아미노, RbRcN, RbRcNㆍO, RaO, Ra, RaOCO, RbRcNCO, RaSO₂NRb, RaS, 및 상기에 정의된 환상 기 G 를 나타낸다. 또 기 E 는 탄소수 1 내지 6 의 2 가 가교기를 나타냄); 또는 R³ 은 기 RbRcNCO 로 표시되는 우레아기; 또는 R³ 은 RbRcNㆍCS 로 표시되는 티오우레아; 또는 R³ 은 Ra 이다. X 및 Y 는 각각 독립적으로 질소원자 또는 탄소원자를 나타내고, Ra∼Rc 로 표시되는 기로 치환되어 있어도 된다. Z 는 폴리메틸렌기를 나타내고, 폴리메틸렌기 상의 수소 원자는 독립적으로 Ra, Rb 로 치환되어도 됨].

특히, 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물 중, 다음 화학식 (Ⅲ-Ⅰ) 로 나타내는 화합물은 개 심금경색 모델에서 경구투여에 의한 유효성이 보고되어 있어 (제 75 회 일본 약리학회 연회보고), 심부전, 심근경색 예후의 개선 등 순환기 질환에서 본 발명에서의 제 1 유효성분인 키마제 저해제로서의 유용성을 기대할 수 있다.

본 발명의 키마제 저해제로서 하기 화학식 (Ⅳ) 로 표시되는 WO98/18794호 명세서에 개시되어 있는 화합물도 들 수 있다:

[화학식 (Ⅳ) 중, R 은 수소원자, 알킬, -CHO, -CONH₂, -COR¹, -COOR¹, -CONHOR¹, -CONHR¹, -CONR¹R^1', -CONHSO₂R¹ , -COSR¹, -COCOR², -COCOOR², -CONHCOOR², - COCONR³R⁴, -CSXR¹, -SO₂WR¹, -SO₂NR ¹R^1', 또는 -SO₂E (상기 식 중, R¹, R^1' 은 동일하거나 상이해도 되고, 각각 독립적으로 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클 또는 헤테로사이클알킬을 나타내고, R², R³, R⁴ 는 동일하거나 상이해도 되고, 각각 독립적으로 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타내고, 또 -NR³R⁴ 는 일체가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고, X 는 단결합, -NH-, -O-, 또는 -S- 를 나타내고, W 는 단결합, -NH-, -NHCO-, -NHCOO-, 또는 -NHCONH- 를 나타내고, E 는 수산기 또는 아미노를 나타냄) 를 나타내고, R⁵, R⁶, R⁷ 은 동일하거나 상이해도 되고, 각각 독립적으로 수소원자 또는 알킬을 나타내거나, 또는 R⁵, R⁶, R⁷ 중 하나는 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 또는 헤테로아릴알케닐을, 나머지는 수소원자를 나타내고, M 은 탄소원자 또는 질소원자를 나타내고, 단 M 이 질소원자인 경우는 R⁶ 은 존재하지 않고, Y 는 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴을 나타내고, Z 는 화학식 (ⅰ), 화 학식 (ⅱ) 또는 화학식 (ⅲ):

(식 중, R⁸, R⁹ 는 동일하거나 상이해도 되고, 각각 독립적으로 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁰R^10', -NHSO₂R¹⁰, -OR¹⁰, -COOR ¹⁰, -CONHSO₂R¹⁰ 또는 -CONR¹⁰R^10' (R¹⁰, R^10' 은 동일하거나 상이해도 되고, 각각 독립적으로 수소원자, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 또는 트리플루오로메틸을 나타내고, 또 -NR¹⁰R^10' 은 일체가 되어 헤테로사이클을 나타내도 됨) 을 나타내고, A 는 -O-, -S-, 또는 -NR¹²- (R¹² 는 수소원자, 알킬, 시클로알킬, 또는 시클로알킬알킬을 나타냄) 를 나타내고, a, b, c, d 는 모두 탄소원자이거나, 또는 어느 하나가 질소원자이고 나머지가 탄소원자를 나타냄} 로 표시되는 기를 나타내고, n 은 0 또는 1 을 나타낸다. 또한, 상기 기 중, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로사이클 또는 헤테로사이클알킬은 각각 치환기를 갖고 있어도 됨)].

화학식 (Ⅳ) 로 표시되는 화합물 중, 다음 화학식 (Ⅳ-Ⅰ) 로 표시되는 화합물은 경구투여에 의한 키마제 저해활성이 마우스 알레르기 모델 등에서 보고되어 있어 (WO00/51640호 명세서, J. Med. Chem., 2001, 44 권, 1286 페이지), 순환기 질환에서 본 발명에서의 ACE 저해제와의 병용에 의한 효과를 기대할 수 있다.

현재 상기 서술한 것 이외에도 많은 키마제 저해제가 보고되어 있다. 그것들 모두 본 발명에서의 키마제 저해제로서 사용함으로써 심부전의 치료나 심근경색 예후의 개선 등 순환기 질환에서 유용한 가능성이 있다.

또, 상기 이외에 이미 제안되어 있는 키마제 저해제로는, 예컨대 WO01/322214호 명세서, WO02/18378호 명세서, WO01/122261호 명세서, WO01/32621호 명세서, WO02/122595호 명세서, 일본 공개특허공보 평11-48739호, 일본 공개특허공보 평11-1479호, 일본 공개특허공보 평10-251239호, 일본 공개특허공보 평8-208654호, 일본 공개특허공보 2001-97957호, 일본 공개특허공보 2000-95770호 등에 개시되어 있는 것이 있다.

본 발명에서 사용되는 키마제 저해제는 인간 키마제활성을 강하게 저해하는 것이다. 구체적으로는 IC₅₀ 이 1000nM 이하가 바람직하고, 더욱 바람직하게는 0.01nM 이상 1000nM 미만, 더욱 더 바람직하게는 0.05nM 이상 500nM 미만이다. 이와 같은 우수한 인간 키마제 저해활성을 갖는 약제는 ACE 저해제와의 병용에 의해 다양한 순환기계 질환에 대한 임상 응용이 가능한 예방제 및/또는 치료제로서 사용할 수 있다.

본 발명에서 키마제 저해제와 함께 사용되는 ACE 저해제로는 특별히 한정되는 것은 아니다. ACE 저해제로서 이미 임상 응용되어 그 사용법, 안전성이 확립되어 있는 것이 많이 있다. 예컨대, 알라세프릴, 염산이미다프릴, 염산퀴나프릴, 염산테모카프릴, 염산데라프릴, 염산베나제프릴, 캅토프릴, 실라자프릴, 트랜도라프릴, 페린도프릴에르부민, 말레인산에날라프릴, 또는 리시노프릴 등을 들 수 있다. 이들 ACE 저해제 모두 본 발명에서 사용할 수 있지만, 특히 바람직하게는 캅토프릴, 염산테모카프릴, 말레인산에날라프릴, 또는 리시노프릴을 들 수 있다. 단, 안전성 및 유효성이 높은 ACE 저해제이면 되고, 이들 예에 한정되지 않는다.

본 발명을 이하에 실시예에 의해 구체적으로 설명한다. 그러나, 본 발명의 범위는 이들 실시예에 의해 어떤 의미에서도 제한되지 않는다.

실시예 1 재조합 인간 마스트셀 키마제의 조제

재조합 프로형 인간 마스트셀 키마제는 우라타 외의 보고 (저널 오브 바이올러지컬 케미스트리 제 266 권, 17173 페이지, (1991 년)) 에 따라 조제하였다. 즉 인간 마스트셀 키마제를 코딩하는 cDNA 를 함유하는 재조합 배큘로바이러스를 감염시킨 곤충세포 (Th5) 의 배양액 상청액으로부터 헤파린세파로오스 (팔마시아) 에 의해 정제하였다. 또한 무라카미 외의 보고 (저널 오브 바이올러지컬 케미스트리 제 270 권, 2218 페이지, (1995 년)) 에 따라 인간 마스트셀 키마제를 활성화시킨 후, 헤파린세파로오스에 의해 정제하여 활성형 인간 마스트셀 키마제를 얻었다.

실시예 2 재조합 인간 마스트셀 키마제의 효소활성 저해측정

실시예 1 에서 얻어진 1∼5ng 의 활성형 인간 마스트셀 키마제를 함유하는 50㎕ 의 버퍼 A (0.5∼3.0M NaCl, 50mM 트리스염산, pH 8.0) 에 본 발명의 화합물을 함유하는 DMSO 용액 2 ㎕ 를 첨가한 후, 기질로서 0.5mM 숙시닐-알라닐-히스티딜-프롤릴-페닐알라닐파라니트로아닐리드 (바켐사) 를 함유하는 50㎕ 의 버퍼 A 를 첨가하여 실온에서 5 분간 반응시켰다. 흡광도 405㎚ 의 시간경과에 따른 변화를 측정하여 저해활성을 조사하였다.

그 결과, 화합물번호 24, 26, 27, 31, 33, 56, 62, 187, 200, 202, 204, 206, 240, 및 242 의 화합물에 IC₅₀=1nM 이상 10nM 미만, 화합물번호 2, 6, 9, 10, 20, 22, 43, 45, 60, 62, 92, 128, 164, 182, 및 189 의 화합물에 IC₅₀=10nM 이상 100nM 이하의 저해활성을 확인하였다.

이상과 같이 본 발명에서 사용하는 키마제 저해제의 벤즈이미다졸 유도체는 강한 키마제 저해활성을 나타낸다. 따라서, 본 발명에서 사용하는 키마제 저해제의 벤즈이미다졸 유도체는 인간 키마제가 관여되는 각종 질환의 예방 및/또는 치료에 사용되는 임상 응용이 가능한 인간 키마제활성 저해물질임이 밝혀졌다.

실시예 3 햄스터 키마제를 사용한 키마제 저해활성의 측정

햄스터 키마제는 햄스터 혀조직에서 산성 완충액으로 추출한 조정제물을 페닐-세파로오스 칼럼 (용출: 0.15M NaCl, 50mM 인산나트륨, pH 6.5, 50% 에틸렌글리콜) 및 헤파린셀룰로파인 칼럼 (용출: 0.5-2.0M NaCl) 을 사용하여 정제한 것을 사용하였다. N 말단 아미노산서열에 의해 햄스터 키마제 1 임을 확인하고, 인간 키마제와 동일한 방법에 의해 저해활성을 측정하였다. 인간 키마제에 대해 저해활성을 갖는 화합물은 모두 햄스터 키마제에 대해 저해활성을 발견하였다. 표 2 에 대표적인 실험결과로서 화합물번호 33 에 관한 햄스터 키마제의 저해정수를 나타낸다.

효소	저해정수(nM)
인간 키마제	6.2±2.2
햄스터 키마제	30.6±3.8
마우스 키마제	73.4±24.2
키모트립신	＞10000
트립신	＞10000
인간 트립타제	＞10000

이상의 결과로부터, 본 발명에서 사용되고 있는 인간 키마제 저해제는 효소선택성이 높고, 의약품으로서 매우 안전성이 높은 화합물임이 나타났다.

실시예 4 정제의 제조

1 정이 다음 조성으로 이루어지는 정제를 제조하였다.

화합물 (화합물번호 33) 5㎎

염산테모카프릴 1㎎

젖당 230㎎

감자전분 80㎎

폴리비닐피롤리돈 11㎎

스테아르산마그네슘 5㎎

화합물번호 33 의 화합물, 염산테모카프릴, 젖당, 및 감자전분을 혼합하고, 이것을 폴리비닐피롤리돈의 20% 에탄올 용액으로 균등하게 습윤시켜 20 메시의 체를 통과시켜 45℃ 에서 건조시키고, 다시 15 메시의 체를 통과시켰다. 이렇게 하여 얻어진 과립을 스테아르산마그네슘과 혼화하여 정제로 압축하였다.

실시예 5 햄스터를 사용한 키마제 저해제의 경구투여에 의한 약물 혈중농도 측정

화합물번호 33 으로 표시되는 키마제 저해제를 0.1% (w/w) 의 배합비가 되도록 MF 분말사료에 혼합한 햄스터먹이를 조제하여 햄스터에게 5 일간 주었다. 그 후, 에테르 마취하에서 복부 대동맥에서 채혈하여 혈청을 채취하고, 혈청중의 화합물 농도를 고속 액체 크로마토그래피로 측정하였다.

그 결과, 화합물번호 33 으로 표시되는 키마제 저해제의 햄스터 혈청중 미변화체 농도는 7.89±1.09μM (평균 ±S.E., N=4) 가 되어, 저해활성 강도와 비교하여 충분한 약물혈중 농도를 나타냄이 밝혀졌다.

실시예 6 햄스터 키마제 피(皮)내주사에 의한 혈관투과성 항진 모델에서의 키마제 저해제의 작용

화합물번호 33 으로 표시되는 화합물을 0.1% (w/w) 의 배합비가 되도록 분말사료에 혼합한 먹이를 5 일간 햄스터 (Syrian hamster, 수컷, 7 주령) 에게 주었다. 그 후, 에테르 마취하에서 햄스터 등의 털을 깎고, 그 피내에 햄스터 키마제를 피내주사하였다 (햄스터 키마제; 1, 0.3, 0.1㎍/부위, 및 운반제; 0.15M NaCl, 0.1㎎/㎖ BSA, 10mM Pi-Na, pH 7.0). 미리 피내주사 직전에 에반스 블루 (1% (w/v) 용액, 5㎖/㎏) 를 정맥으로부터 투여해 두고, 키마제 피내주사에 의해 생기는 청색 스폿을 정량하였다. 즉, 피내주사 30 분 후에 복부 동맥으로부터 탈혈(脫血)사망시켜 블루잉 스폿을 지표로 피부를 채취하였다. 채취된 피부를 유리시험관에 취하여 EB 추출액 (아세톤: 0.3% Na₂SO₄=7:3) 2㎖ 로 색소를 추출하고, 분광광도계에 의해 색소누출량을 비색 정량하였다 (620㎚). 결과를 도 1 에 나타낸다.

미리 키마제 저해제를 투여한 군에서는 모두 누출색소량의 감소가 확인되었다. 또, 화합물번호 33 의 화합물 이외에, 본 실험계에서 이미다졸리딘 유도체 (WO96/04248호 명세서) 의 대표적 화합물로서 하기 화학식의 화합물 A (인간 키마제 IC₅₀ 값: 9nM), 및 트리아진 유도체 (일본 공개특허공보 평8-208654호) 의 대표적 화합물로서 하기 화학식의 화합물 B (인간 키마제 IC₅₀ 값: 30nM) 를 사용하여 동일한 실험을 실시하였는데, 명확한 혈관투과성 항진에 대한 억제작용은 관찰되지 않았다.

본 검토에 의해 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물군은 키마제 저해제로서 바람직하고, 경구투여에 의해 생체내에서 키마제 저해활성을 갖는 것이 검증되었다.

실시예 7 키마제 과잉발현 마우스를 사용한 안지오텐신 유도 혈압상승 모델에서의 키마제 저해제 및 ACE 저해제의 병용효과

안지오텐신II 생성기능을 갖는 인간 키마제 유전자를 수정란에 도입하여 제조한 인간 키마제 과잉발현 마우스 (이하, TGM) 를 동물 모델로서 사용하였다. 즉, 8-10 주령의 TGM 을 사용하여 마우스 피하에 매립된 마이크로 오스모틱 펌프에 의해 안지오텐신I 을 지속 주입함으로써 (700ng/㎏/분) 지속적인 고혈압 마우스 모델을 제조하였다. TGM (n=6) 에서는 야생형 (n=8) 과 비교하여 안지오텐신I 지속주입에 의해 30mmHg 정도의 승압반응이 확인되고, 동시에 키마제 저해제 (화합물번호 33, 0.1% diet, n=7), ACE 저해제 (염산테모카프릴 2.0㎎/㎏/day, n=6), 안지오텐신 수용체 길항제 (ARB) (Valsartan, 14㎎/㎏/day, n=7) 및 키마제 저해제와 ACE 저해제의 동시투여군 (화합물 33; 0.1% diet, 염산테모카프릴; 2.0㎎/㎏/day, n=6) 에서의 강압작용을 검토하였다. 또한, n 이란 개체수이다. 그 결과, 키마제 저해제 단독 및 ACE 저해제 단독투여군에서는 컨트롤군과 비교하여 크게 승 압효과의 억제를 관찰할 수 없어, 본 동물 모델을 ACE 저해제에 의해 혈압저하작용이 관찰되기 어려운 고혈압환자와 유사 모델로 추정하였다. 본 모델에서는 동일하게 키마제 저해제 단독에서도 승압효과의 억제를 관찰할 수 없었지만, ACE 저해제와 키마제 저해제의 병용군에서는 10 일째 이후의 혈압을 거의 정상값까지 되돌려 통계적으로 유의한 억제결과를 얻었다 (P＜0.05). 또, 본 동물 모델에서는 지속적인 승압에 의해 동시에 심비대가 일어나지만, 본 모델에서의 심비대는 ACE 저해제, 안지오텐신II 수용체 길항제 (n=7), 키마제 저해제에 의해 각각 단독에서의 큰 억제는 관찰되지 않았지만, 키마제 저해제와 ACE 저해제의 병용군에서만 통계적으로 유의한 억제가 관찰되었다.

이들 실험결과로부터, ACE 저해제 및 키마제 저해제의 병용에 의해 비로소, 종래 약제에서는 유효성을 발휘할 수 없는 순환기 질환에 유효한 가능성을 나타냈다.

실시예 8 햄스터 심근경색 (MI) 모델에서의 키마제 저해제 및 ACE 저해제와의 병용효과

8 주령 수컷 시리안 햄스터를 사용하여 펜토바르비탈 마취하 (50㎎/㎏, i.p.) 에서 사지 심전도장치 및 기관내 관삽입을 실시하고, 레스피레이터 관리하 (volume: 10㎖/㎏, RR: 60/분) 에서 개흉하여 기지부 (起枝部) 2-3㎜ 에서 Left main coronary artery (LAD) 를 견사(絹絲)로 완전 결찰하였다. LAD 결찰 후, 35 일간, 키마제 저해제 (화합물번호 33, 0.1% diet), ACE 저해제 (염산테모카프릴, 10㎎/㎏/day), 또는 안지오텐신 수용체 길항제 (올메사탄, 10㎎/㎏/day) 를 각 각 단독으로 투여한 군과, ACE 저해제 및 키마제 저해제를 동시에 투여한 군에서 생존율 및 심기능의 해석을 실시하였다.

그 결과를 도 2 에 나타낸다. LAD 결착 후 30 일간의 생존율은 위약투여군이 48% 인 것에 반해 키마제 저해제, ACE 저해제, 또는 안지오텐신 수용체 길항제 (ARB) 투여군에서는 60-70% 이상의 생존율을 나타내어, 각각의 약제가 단독으로 심근경색 후의 예후 개선에 유효함을 나타냈다. 특히 키마제 저해제는 단독으로는 71% 정도의 생존율을 나타내어, 이미 임상에서 그 효과가 실증되고 있는 ACE 저해제, 안지오텐신 수용체 길항제와 동등 이상의 효과를 나타냄이 확인되었다. 또한, ACE 저해제와 키마제 저해제의 병용군에서는 이들 단독의 약제투여군과 비교하여 통계적으로 유의한 생존율의 상승을 나타냈다. LAD 결착 후 2 일째 이후 내지 35 일까지 사이에는 ACE 저해제 및 키마제 저해제의 병용투여군에 사망예가 발생하지 않고, 본 실험에서 임상에서 ACE 저해제 및 키마제 저해제를 병용함으로써 심근경색 치료에 대해 단제에 의한 유효성과 비교해도 극적으로 높은 유효성을 나타냄이 밝혀졌다.

본 발명의 키마제 저해제와 ACE 저해제의 병용에 의한 약제 또는 치료방법 또는 예방방법은, 순환기계 질환 치료제 또는 치료법은 심질환 (심비대, 심부전, 심근경색 등), 뇌졸중, PTCA 후의 재협착 등의 혈관장해, 동맥경화, 신부전, 신염, 폐고혈압증에서의 심혈관계질환, 일부 고혈압증 등의 순환기계 질환 등에 대해 효과적이다.

Claims (33)

1. 하기 화학식 1 중 어느 하나로 표시되는 키마제 저해제 및 알라세프릴, 염산이미다프릴, 염산퀴나프릴, 염산테모카프릴, 염산데라프릴, 염산베나제프릴, 캅토프릴, 실라자프릴, 트랜도라프릴, 페린도프릴에르부민, 말레인산에날라프릴 또는 리시노프릴로 표시되는 ACE 저해제를 유효성분으로 함유하는, 심비대, 심부전 또는 심근경색의 예방제 또는 치료제인 약제:

   (화학식 1)

   

   또는

   

   .
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4. 제 1 항에 있어서, 상기 키마제 저해제 및 상기 ACE 저해제를 동시에 또는 시간을 두고 각각 투여하는 약제.
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6. 제 1 항에 있어서, 상기 키마제 저해제와 상기 ACE 저해제가 합제(合劑)를 구성하는 약제.
7. 제 1 항에 있어서, 상기 키마제 저해제와 상기 ACE 저해제가 각각 독립된 단제(單劑)인 약제.
8. 제 1 항에 있어서, 상기 키마제 저해제와 상기 ACE 저해제를 함유하는 키트의 형태에 있는 약제.
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