RU2531936C2 - Средство, предназначенное для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания и для образования регуляторных т-клеток - Google Patents
Средство, предназначенное для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания и для образования регуляторных т-клеток Download PDFInfo
- Publication number
- RU2531936C2 RU2531936C2 RU2010149999/15A RU2010149999A RU2531936C2 RU 2531936 C2 RU2531936 C2 RU 2531936C2 RU 2010149999/15 A RU2010149999/15 A RU 2010149999/15A RU 2010149999 A RU2010149999 A RU 2010149999A RU 2531936 C2 RU2531936 C2 RU 2531936C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hil
- mutein
- cells
- regulatory
- wild
- Prior art date
Links
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 title claims abstract description 39
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 32
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 14
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 title description 16
- 101100506090 Caenorhabditis elegans hil-2 gene Proteins 0.000 claims abstract description 125
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims abstract description 35
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims abstract description 21
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 claims abstract description 12
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 102000055277 human IL2 Human genes 0.000 claims abstract description 10
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 9
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 9
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 7
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims abstract description 5
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 claims abstract description 4
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 claims abstract description 3
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 claims description 53
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 claims description 53
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 claims description 53
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 39
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 22
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 20
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 13
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 claims description 9
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 claims description 9
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 claims description 8
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 claims description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 7
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 claims description 6
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 claims description 6
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 claims description 6
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 6
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 claims description 6
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 5
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 5
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 3
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 claims description 3
- HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N Everolimus Chemical compound C1C[C@@H](OCCO)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N 0.000 claims description 3
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 claims description 3
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 3
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 claims description 3
- 229960004669 basiliximab Drugs 0.000 claims description 3
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 claims description 3
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 claims description 3
- 229960002806 daclizumab Drugs 0.000 claims description 3
- 229960005167 everolimus Drugs 0.000 claims description 3
- 229960000556 fingolimod Drugs 0.000 claims description 3
- KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N fingolimod Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(CCC(N)(CO)CO)C=C1 KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 claims description 3
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims description 3
- RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N mycophenolate mofetil Chemical compound COC1=C(C)C=2COC(=O)C=2C(O)=C1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N 0.000 claims description 3
- 229960004866 mycophenolate mofetil Drugs 0.000 claims description 3
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 claims description 3
- 229940083410 myfortic Drugs 0.000 claims description 3
- 229940096112 prednisol Drugs 0.000 claims description 3
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 claims description 3
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 claims description 3
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 claims description 3
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 claims description 3
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 25
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 abstract description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 51
- 108700025316 aldesleukin Proteins 0.000 description 47
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 47
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 40
- 229940087463 proleukin Drugs 0.000 description 32
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 22
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 20
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 20
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 19
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 17
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 13
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 10
- 238000011161 development Methods 0.000 description 9
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 8
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 5
- 229960005027 natalizumab Drugs 0.000 description 5
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 102100036301 C-C chemokine receptor type 7 Human genes 0.000 description 3
- 101000716065 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 7 Proteins 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108010006886 Vitrogen Proteins 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 150000001508 asparagines Chemical class 0.000 description 2
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 150000002309 glutamines Chemical class 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- SNTGWXAZMZPJPH-UHFFFAOYSA-N 1-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxypyrrolidine-2,5-dione Chemical compound O=C1CCC(=O)N1ON1C(=O)CCC1=O SNTGWXAZMZPJPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 6-carboxyfluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=C(C(=O)O)C=C21 BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000031212 Autoimmune polyendocrinopathy Diseases 0.000 description 1
- 102100036465 Autoimmune regulator Human genes 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 101000928549 Homo sapiens Autoimmune regulator Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 1
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102100022430 Melanocyte protein PMEL Human genes 0.000 description 1
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010027458 Metastases to lung Diseases 0.000 description 1
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101001092200 Mus musculus RNA binding protein fox-1 homolog 3 Proteins 0.000 description 1
- 208000029726 Neurodevelopmental disease Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 1
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 1
- 206010053395 Progressive multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000032384 Severe immune-mediated enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 208000001974 autoimmune enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 208000023652 chronic gastritis Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000001010 compromised effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical class N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000011469 lymphodepleting chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 231100000683 possible toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 206010036807 progressive multifocal leukoencephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015347 renal cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 108091007466 transmembrane glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/2013—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
- A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/462—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells
- A61K39/4621—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells immunosuppressive or immunotolerising
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/46433—Antigens related to auto-immune diseases; Preparations to induce self-tolerance
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464454—Enzymes
- A61K39/464456—Tyrosinase or tyrosinase related proteinases [TRP-1 or TRP-2]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/46449—Melanoma antigens
- A61K39/464491—Melan-A/MART
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/46449—Melanoma antigens
- A61K39/464492—Glycoprotein 100 [Gp100]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
- C12N5/0637—Immunosuppressive T lymphocytes, e.g. regulatory T cells or Treg
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K2039/55527—Interleukins
- A61K2039/55533—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/572—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 cytotoxic response
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
- C12N2501/2302—Interleukin-2 (IL-2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/11—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from blood or immune system cells
Abstract
Группа изобретений относится к медицине и касается применения мутеина человеческого интерлейкина-2 (мутеин hIL-2), имеющего аминокислотную замену аспарагина в положении 88 на аргинин или на глицин, или на изолейцин и/или замену аспарагиновой кислоты в положении 20 на гистидин или на изолейцин, или на тирозин и/или замену глутамина в положении 126 на лейцин для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания и для образования регуляторных Т-клеток в живом организме. Группа изобретений обеспечивает хорошую переносимость и низкую токсичность средства. 5 н. и 7 з.п. ф-лы, 10 табл., 10 ил.
Description
Настоящее изобретение относится к средству, предназначенному для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания, средству, предназначенному для образования регуляторных Т-клеток (TReg) в организме, и к различным способам, в которых применяют средства, предлагаемые в изобретении.
Аутоиммунные заболевания характеризуются избыточной реакцией иммунной системы на эндогенную ткань. Иммунная система ошибочно распознает эндогенную ткань в качестве чужеродных тел, которые подлежат уничтожению. Это приводит к серьезным воспалительным реакциям, повреждающим органы, в которых это имеет место. Важную роль в распознавании различий между эндогенными и экзогенными структурами играют Т-лимфоциты или Т-клетки, которые «обучаются» в тимусе связываться («причаливать») только с эндогенными молекулами клеточной поверхности, так называемыми молекулами главного комплекса гистосовместимости (ГКГ), и в результате быть толерантными к эндогенным структурам. Эти процессы обозначают как «клональная делеция» и «клональная селекция». В процессе начальной селекции в тимусе выживают только те Т-клетки, которые обладают способностью распознавать молекулы ГКГ на мембранах эндогенных клеток, однако при этом их связывание не является столь сильным, чтобы оно могло приводить к активации Т-клеток. Все Т-клетки, которые не могут связываться или распознавать эндогенные молекулы ГКГ, элиминируются. При клональной делеции, которая также имеет место в тимусе, происходит элиминация тех Т-клеток, которые могут «безошибочно» распознавать молекулы ГКГ и обладают способностью к сильному связыванию с эндогенными молекулами ГКГ, в результате чего они могут активироваться, что может приводить, в конце концов, к деструкции эндогенных клеток. Этот процесс представляет собой один из механизмов, которыми располагает иммунная система, предназначенных для защиты «своего» и уничтожения «чужого» (экзогенного).
При аутоиммунных заболеваниях поведение группы Т-клеток становится аномальным. Помимо того, что они еще сохраняют функциональную способность осуществлять защиту от экзогенных молекул и организмов, они приобретают также способность атаковать эндогенную структуру. Органы или ткани воспринимаются как экзогенные. Это может иметь различные последствия: если поражаются жизненно важные структуры, то аутоиммунное заболевание может приводить к фатальному концу. Иммунная система направляет свое защитное действие на эти структуры, запускаются клеточные, а также гуморальные защитные реакции и образуются аутоантитела, в результате чего с течением времени пораженные органы прекращают свою функцию. Наиболее часто происходит ослабление иммунной системы и организм становится чувствительным ко всем типам болезней. В некоторых обстоятельствах нарушается также распознавание экзогенных структур и в результате более не может эффективно предотвращаться распространения перерожденных раковых клеток, и пораженный организм становится более чувствительным к инфекционным болезням. В процессе развития заболевания клетки иммунной системы разрушают эндогенные структуры, в то время как механизмы восстановления организма пытаются по мере возможности осуществлять регенерацию поврежденных частей органа. Как правило, без лечения эта ошибочная атака защитной системы продолжается на протяжении всей жизни или вплоть до полного разрушения структуры-мишени.
Несмотря на интенсивные исследования, точные причины аутоиммунных заболеваний пока остаются неясными. Известные гипотезы базируются на предположении, что аутоиммунные заболевания возникают в результате генетической предрасположенности, например связаны с присутствием молекул ГКГ определенных типов, в сочетании с внешними стимулами. Если в организме пораженного индивидуума присутствуют указанные генетически обусловленные факторы, а также если они имеют место в сочетании с наличием неблагоприятных факторов окружающей среды, таких как сильный стресс, инфекции, беременность и т.д., то это может приводить к возникновению аутоиммунных заболеваний.
Иммунная система состоит из различных клеток, которые обладают способностью уничтожать инфекционные агенты, которые могут внедряться в организм. Механизм иммунного ответа включает активацию специализированных клеток и приобретение эффекторных функций, таких как цитотоксичность определенных Т-клеток, которые экспрессируют так называемый трансмембранный гликопротеин CD8, и которые поэтому обозначают как CD8+-Т-клетки.
Регуляторные Т-клетки (TReg), которые ранее обозначали также как супрессорные Т-клетки, представляют собой специализированную подгруппу Т-клеток. Им присуща функция подавления активации иммунной системы и, как следствие, они обладают способностью регулировать аутотолерантность (толерантность к «своему») иммунной системы. В результате в здоровом организме они препятствуют возникновению аутоиммунных заболеваний. Описаны различные популяции TReg, включая популяции, которые экспрессируют белки CD4, CD25 и Foxp3, и которые обозначают как CD4+CD25 Foxp3+-Т-клетки. Кроме того, известны TReg, которые экспрессируют CD4 и Foxp3, но не экспрессируют CD25, так называемые CD4+CD25-Foxp3+-Т-клетки.
У Lan с соавторами («Regulatory T cells: development, function and role in autoimmunity», Autoimmun. Rev. 4(6), 2005, cc.351-363) описана мышиная модель, с использованием которой установлено, что истощение регуляторных CD4+CD25+-Т-клеток приводит к спонтанному развитию аутоиммунных заболеваний.
У Chatila T.A. («Role of regulatory Т cells in human diseases», 116(5), 2006, cc.949-959) приведены данные о том, что врожденный дефицит регуляторных CD4+CD25+-T-клeтoк из-за мутации в гене, который кодирует белок Foxp3, способствует развитию аутоиммунных заболеваний.
Известен обзор, касающийся регуляторных Т-клеток, в журнале «Nature Immunology», который опубликован в марте 2005 г.
Аутоиммунные заболевания лечат в зависимости от пораженного органа. При этом основным принципом этиотропной терапии является подавление активности иммунной системы путем введения иммунодепрессантов, например кортизона. Эти субстанции характеризуются множеством системных побочных действий и взаимодействий, в связи с чем предпринимались попытки создания новых лекарственных средств, обладающих способностью специфически влиять на механизмы, которые участвуют в проявлении заболевания. Примерами таких лекарственных средств являются натализумаб и инфликсимаб. Натализумаб представляет собой моноклональное антитело и избирательный ингибитор IgG4, молекулы адгезии, которая локализована на поверхности лейкоцитов. Натализумаб ингибирует миграцию лейкоцитов к очагу воспаления и его применяют для лечения чрезвычайно агрессивных форм связанного с образованием бляшек прогрессирующего рассеянного склероза. Инфликсимаб представляет собой химерное моноклональное антитело к фактору некроза опухоли α (TNFα), который играет основную роль в аутоиммунных воспалительных реакциях. Инфликсимаб применяют при ревматоидном артрите, болезни Крона, болезни Бехтерева и псориазе.
Ehrenstein с соавторами («Compromised function of regulatory T cells in rheumatoid arthritis and reversal by anti-TNFα therapy», J. Exp.Med., т.200, №.3, 2004, cc.277-285) продемонстрировали, что моноклональное антитело к TNFα, т.е. инфликсимаб, может повышать эффективность лечения ревматоидного артрита.
Аналогичное предположение высказано Nadkarni с соавторами («Ariti-TNFα therapy induces a distinct regulatory T cell population in patients with rheumatoid arthritis via TGF-β», JEM, т.204, 2007, cc.33-39).
Bresson с соавторами предложили лечение диабета типа I путем совместного введения специфического антитела к CD3ε и пептида проинсулина.
Vandenbark с соавторами («Therapeutic vaccination with a trivalent T-cell receptor (TCR) peptide vaccine restores deficient FoxP3 expression and TCR recognition in subjects with multiple sclerosis», Immunology, т.123, 2008, cc.66-78) описали улучшение контроля автореактивного ответа при рассеянном склерозе после вакцинации пациентов определенными TCR-пептидами.
Хотя указанные новые субстанции обладают очень специфическим действием, при их применении могут возникать серьезные побочные действия, например возможно возникновение прогрессирующей мультифокальной лейкоэнцефалопатии. По этой причине всего лишь через 3 месяца после его первой регистрации в США натализумаб был вновь изъят из продажи. Стоимость этих новых активных субстанций является очень высокой. В настоящее время стоимость 300 мг натализумаба составляет порядка 2000.00 евро. Стоимость 200 мг инфликсимаба примерно 1700.00 евро.
С учетом вышесказанного задачей настоящего изобретения являлось создание новой фармацевтической композиции, предназначенной для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания, которая максимально лишена недостатков, известных в данной области. В частности, предлагается фармацевтическая композиция, которая отличается хорошей переносимостью и низкой токсичностью.
Еще одной задачей настоящего изобретения является создание средства, предназначенного для образования регуляторных Т-клеток (TReg) в организме.
Эти проблемы решаются с помощью мутеина человеческого интерлейкина 2 (мутеин hIL-2) или его участка, или фрагмента, пронумерованного в соответствии с hIL-2 дикого типа и имеющего аминокислотную замену по меньшей мере в одном из положений 20, 88 или 126.
При создании изобретения неожиданно было установлено, что указанный мутеин hIL-2 или его участок обладает высоким терапевтическим потенциалом, который можно использовать для лечения и профилактики аутоиммунных заболеваний. Так, например, при создании изобретения удалось продемонстрировать на различных экспериментальных препаратах, что мутеин hIL-2 избирательно индуцирует образование в организме регуляторных Т-клеток, таких как CD4+CD25+Foxp3+и CD4+CD25-Foxp3+.
При создании изобретения неожиданно было установлено, что мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, характеризуется существенно более высокой активностью в отношении регуляторных Т-клеток, чем hIL-2 дикого типа. Это наиболее ярко проявляется при применении в высоких концентрациях.
Касательно мутеина hIL-2, предлагаемого в изобретении, в WO 99/60128 описано, что он связывается с большей аффинностью с трехцепочечным рецептором IL-2 (IL-2Rαβγ), чем с двухцепочечным рецептором IL-2 (IL-2Rβγ). При создании настоящего изобретения впервые установлено, что по сравнению с hIL-2 дикого типа мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, индуцирует, но, как неожиданно было установлено при создании изобретения, обладает также способностью усиливать образование регуляторных Т-клеток, в которых отсутствует α-субъединица рецептора IL-2 (CD25) (CD4+CD25-Foxp3+). Указанная субпопуляция участвует также в подавлении активации иммунной системы и в результате в регуляции аутотолерантности иммунной системы. В результате мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, характеризуется существенно более высокой эффективностью в качестве активной субстанции, предназначенной для лечения аутоиммунных заболеваний, чем hIL-2 дикого типа.
При создании изобретения продемонстрировано также, что мутеин hIL-2 индуцирует образование cd8-позитивных регуляторных Т-клеток, таких как CD3+CD4-CD25+Foxp3+ и CD3+CD4-CD25-Foxp3+ (данные не представлены), которые играют решающую роль в подавлении аутоиммунных заболеваний.
Кроме того, мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, обладает дополнительным преимуществом по сравнению С hIL-2 дикого типа, поскольку он избирательно активирует Т-клетки в отличие от естественных клеток-киллеров (NK-клетки), и в результате характеризуется пониженным профилем токсичности и повышенным терапевтическим индексом. В результате мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, существенно лучше переносится, чем hIL-2 дикого типа (см. WO 99/60128).
Кроме того, с учетом цитотоксичности CD3+CD8+CD45RO+-T-клeтoк, при создании изобретения впервые неожиданно было установлено, что в отличие от hIL-2 дикого типа мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, не оказывает воздействие или оказывает лишь небольшое воздействие на пролиферацию cd8-позитивных цитотоксических Т-клеток, которые обозначают также как «несенсибилизированные, центральные клетки памяти, недифференцированные (клетки-предшественники)» и «окончательно дифференцированные» CD8-T-клетки. Это является преимуществом, поскольку считается, что цитотоксические CD8+-Т-клетки могут быть ответственны за стойкие хронические воспалительные процессы при аутоиммунных заболеваниях (ср. Liu и др., Multiple Sclerosis, 13, 2007, с.149 и Haegele и др., Neuroimmunol, 183, 2007, с.168). Таким образом, по сравнению с hIL-2 дикого типа мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, дополнительно препятствует интенсификации этой воспалительной реакции, вызываемой CD8+-Т-клетками, что является еще одним его преимуществом с позиций переносимости.
При создании изобретения установлено также, что мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, может стимулировать также антигенспецифическую активность иммунных клеток. Преимуществом этого является то, что с помощью мутеина hIL-2 избирательно стимулируют специфические для заболевания иммунные клетки и тем самым ограничивают системное действие иммунной терапии. В результате при введении мутеина hIL-2 предотвращают также индукцию других заболеваний.
Кроме того, с помощью мышиной модели сахарного диабета типа I при создании изобретения было установлено также, что путем обработки мутеином hIL-2, предлагаемым в изобретении, можно предупреждать возникновение аутоиммунного заболевания.
Таким образом, полностью решена задача, положенная в основу изобретения.
Согласно изобретению под человеческим интерлейкином 2 «дикого типа» (hIL-2 дикого типа) подразумевают полипептид или белок, аминокислотная последовательность которого состоит из 133 аминокислот, которые присутствуют во встречающемся в естественных условиях человеческом IL-2 (без сигнального пептида, который состоит из дополнительных 20 аминокислот на N-конце). hIL-2 дикого типа можно экспрессировать как в естественных условиях, так и получать методом рекомбинации. Аминокислотная последовательность hIL-2 дикого типа описана у Fujita и др., PNAS USA 80, 1983, сс.7437-7441, как в виде последовательности, включающей дополнительный N-концевой метионин, который обязательно должен присутствовать, когда белок экспрессируют в Е.coli в виде внутриклеточной фракции, так и в виде последовательности без N-концевого метионина. Аминокислотная последовательность hIL-2 дикого типа описана в прилагаемом перечне последовательностей в виде SEQ ID No. 1. Нуклеотидная последовательность кДНК, которая кодирует hIL-2, описана в прилагаемом перечне последовательностей в виде SEQ ID No. 2.
Согласно изобретению под «мутеином» человеческого интерлейкина 2 (мутеин hIL-2) подразумевают полипептид или белок, в котором по сравнению с hIL-2 дикого типа осуществлены определенные замены. Идентификация положений, в которых осуществлены замены, основана на положениях аминокислот в последовательности hIL-2 дикого типа, в качестве которой можно применять, например, SEQ ID No. 1. Таким образом, аланин (А) локализован в положении 1, пролин (Р) в положении 2, треонин (Т) в положении 133 и т.д. Остаток аспарагиновой кислоты (D) в положении 20 («D20») можно заменять, например, на остаток изолейцина (I) или гистидина (Н), получая тем самым мутеины IL-2, которые обозначают как hIL-2-D20I и hIL-2-D20H соответственно.
Очевидно, что в мутеине hIL-2, предлагаемом в изобретении, можно осуществлять замены в нескольких из указанных положений 20, 88 или 126, получая в результате комбинированные мутанты, которые особенно пригодны для лечения аутоиммунного заболевания или для индукции регуляторных Т-клеток.
Согласно изобретению мутеин hIL-2 может представлять собой также модифицированный полипептид, например гликозилированный мутеин hIL-2. Гликозилированные мутеины hIL-2 описаны, например, в заявках на патент США 09/310026 и 10/051657, которые включены в настоящее описание в качестве ссылки.
Согласно изобретению под «участком» или «фрагментом» мутеина hIL-2 подразумевают полипептид, в котором по сравнению с мутеином hIL-2 отсутствует(ют) одна или несколько аминокислот на N- и/или С-конце, но который все еще обладает достаточной биологической активностью мутеина hIL-2, позволяющей применять его согласно изобретению для лечения и/или профилактики аутоиммунных заболеваний. Указанная активность рассматривается как достаточная, если участок или фрагмент обладает активностью, составляющей по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 60%, более предпочтительно по меньшей мере 70%, более предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 95% от активности мутеина hIL-2, в отношении индукции регуляторных Т-клеток. Активность мутеина hIL-2 можно легко оценивать методами, известными специалисту в данной области. Такой метод описан, например, в WO 99/60128, примеры 3-5. Указанная публикация включена в настоящее описание в качестве ссылки.
Согласно изобретению предпочтительно, если замены в указанных положениях не представляют собой консервативные замены, при которых одну аминокислоту заменяют на другую аминокислоту, которая обладает сходными биохимическими свойствами.
Так, является предпочтительным, чтобы замена в положении 20 не представляла собой замену аспарагиновой кислоты (D) на глутаминовую кислоту (Е). Предпочтительно, чтобы замена в положении 88 не представляла собой замену аспарагина (N) на аланин (А), пролин (Р), глицин (G), глутамин (Q), серин (S) или треонин (Т). Кроме того, предпочтительно, чтобы замена в положении 126 не представляла собой замену глутамина (Q) на аланин (А), пролин (Р), глицин (G), аспарагин (N), серин (S) или треонин (Т). Эти замены не изменяют или лишь незначительно изменяют биологическую активность по сравнению с активностью hIL-2 дикого типа.
Кроме того, предпочтительным является, если в указанных положениях не осуществляют замен, интродуцирующих сайты межмолекулярных перекрестных сшивок или «неправильных» связей посредством дисульфидных мостиков.
Поэтому замена в мутеине hIL-2, предлагаемом в изобретении, в положении 20 предпочтительно не представляет собой замену аспарагиновой кислоты (D) на аргинин (R), аспарагин (N), аспарагиновую кислоту (D), цистеин (С), глутаминовую кислоту (Е), глицин (G), лейцин (L), лизин (К), фенилаланин (F), пролин (Р), треонин (Т) или триптофан (W). Замена в положении 88 предпочтительно не представляет собой замену аспарагина (N) на аспарагиновую кислоту (D), цистеин (С), глутамин (Q), триптофан (W) или пролин (Р). Замена в положении 126 предпочтительно не представляет собой замену глутамина (Q) на аланин (А), гистидин (Н), триптофан (W), цистеин (С), глутамин (Q), глутаминовую кислоту (Е) или лизин (К).
Мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, можно получать любым приемлемым методом, известным в данной области. Такие методы предусматривают конструирование последовательности ДНК, которая кодирует мутеин IL-2, предлагаемый в изобретении, и которая, например, включает нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID No. 2, и экспрессию этой последовательности в приемлемом хозяине. Этот метод позволяет получать мутеины, предлагаемые в изобретении, в рекомбинантной форме. Однако мутеин, предлагаемый в изобретении, можно получать также химическим синтезом и методом рекомбинантной ДНК. Получение мутеина, предлагаемого в изобретении, подробно описано в WO 99/60128, варианты осуществления изобретения 1 и 2, которые включены в настоящее описание в качестве ссылки.
Наиболее предпочтительный согласно изобретению мутеин hIL-2, в котором в положении 88 аспарагин (N) заменен на аргинин (R) (hIL-2-N88R), доступен специалисту в данной области под названием BAY50-4798 (см. Shanafelt и др., «A T-cell-selective interleukin 2 mutein exhibits potent antitumor activity and is well tolerated in vivo», Nat. Biotechnol., т.18, 2000, cc.1197-1202). Аминокислотная последовательность hIL-2-N88R описана в прилагаемом перечне последовательностей в виде SEQ ID No. 3.
При создании изобретения неожиданно было установлено, что в данной области отсутствуют сведения о такой активности мутеина IL-2.
Так, в WO 99/60128 описан мутеин hIL-2-N88R, который может избирательно активировать Т-клетки в отличие от естественных клеток-киллеров и обладает способностью уменьшать образование метастазов в легком.
В WO 02/00243 описана стабильная, содержащая гистидин, свободная от альбумина препаративная форма мутеина hIL-2-N88R.
В US 2002/0164300 описан гликозилированный вариант мутеина hIL-2-N88R.
Применение мутеина hIL-2, предлагаемого в изобретении, для целенаправленного лечения и/или профилактики аутоиммунных заболеваний или для избирательной активации регуляторных Т-клеток в организме ранее не было описано и оно не является очевидным, исходя из существующего уровня техники.
Даже для человеческого IL-2 дикого типа отсутствуют соответствующие сведения.
Van der Vliet с соавторами («Effects of the administration of high-dose interleukin-2 on immunoregulatory cell subsets in patients with advanced melanoma and renal cell cancer», Clin. Cancer Res., т.13, 2007, cc.2100-2108) продемонстрировали, что при введении IL-2 в высоких дозах его терапевтическая эффективность в отношении лечения опухолей снижается.
Ahmadzadeh и Rosenberg («IL-2 administration increases CD4+CD25hiFoxp3+ regulatory Т cells in cancer patients», Blood, т.107, 2006, cc.2409-2414) предложили осуществлять повышение терапевтической эффективности человеческого IL-2 дикого типа в отношении имеющих опухоли пациентов путем элиминации у пациентов регуляторных Т-клеток. Однако от этого подхода предложено отказаться в связи с его не перспективностью (см. Powell и др., «Inability to mediate prolonged reduction of regulatory Т cells after transfer of autologous CD25-depleted PBMC and interleukin-2 after lymphodepleting chemotherapy», J. Immunother., т.30, 2007, cc.438-447).
Antony и Restifo («CD4+CD25+Т regulatory cells, immunotherapy of cancer, and interleukin-2», J. Immunother., т.28, 2005, cc.120-128), указали на еще меньшую перспективность IL-2 в качестве иммунотерапевтического агента и даже предположили, что введение IL-2 может индуцировать аутоиммунитет.
Knoechel с соавторами («Sequential development of interleukin 2-dependent effector and regulatory Т cells in response to endogenous systemic antigen», JEM, т.202, 2005, cc.1375-1386) высказали аналогичный взгляд и даже предложили использовать антагонист IL-2, т.е. ингибитор механизмов IL-2, для лечения ранней фазы аутоиммунных заболеваний.
Таким образом, из существующего уровня техники не является очевидным решение, предлагаемое в изобретении.
Так, при создании изобретения было установлено также, что терапевтическое действие мутеина hIL-2 можно изменять в зависимости от показания и применяемой концентрации. Применение hIL-2 в высоких концентрациях может оказаться целесообразным для лечения аутоиммунных заболеваний, но противопоказано для лечения опухолевых заболеваний.
Применение, предлагаемое в изобретении, является предпочтительным, если используют следующие замены: аспарагин в положении 88 заменяют на аргинин (hIL-2-N88R) или на глицин (hIL-2-N88G), или на изолейцин (hIL-2-N881); и/или используют следующие замены: аспарагиновую кислоту в положении 20 заменяют на гистидин (hIL-2-D20H) или на изолейцин (hIL-2-D20I), или на тирозин (hIL-2-D20Y); или используют следующую замену: глутамин в положении 126 заменяют на лейцин (hIL-2-Q126L).
Преимущество такого подхода состоит в том, что применяют мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, отличительным признаком которого является его способность специфически избирательно активировать Т-клетки в отличие от естественных клеток-киллеров, и поэтому он обладает высоким терапевтическим потенциалом и низкой токсичностью. Эти свойства предпочтительных мутеинов hIL-2, предлагаемых в изобретении, описаны в WO 99/60128, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки.
Согласно изобретению является предпочтительным, если мутеин hIL-2 или его фрагмент несут по меньшей мере одну дополнительную аминокислотную замену в любом положении кроме положений 20, 88 или 126, в результате чего указанный имеющий дополнительную замену мутеин hIL-2 или указанный имеющий дополнительную замену его участок или фрагмент имеет аминокислотную последовательность, которая идентична по меньшей мере на 80%, предпочтительно на 85%, более предпочтительно на 90%, более предпочтительно на 95%, наиболее предпочтительно на 99% аминокислотной последовательности мутеина hIL-2 или его участка или фрагмента, который не имеет дополнительных замен по сравнению с hIL-2 дикого типа за исключением замены по меньшей мере в одном из положений 20, 88 или 126.
Преимуществом такого подхода является возможность получения альтернативных первичных структур, которые в некоторых случаях легче синтезировать, чем мутеин hIL-2, который, кроме замены по меньшей мере в одном из положений 20, 88 или 126, полностью соответствует hIL-2 дикого типа. Для получения полипептида, обладающего биологической активностью мутеина hIL-2 или его участка, и соответственно лекарственного средства, предназначенного для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания, не является абсолютно необходимым получать полипептид, аминокислотная последовательность которого идентична на 100% аминокислотной последовательности мутеина hIL-2 или его участка, предлагаемого в изобретении. Наоборот, достаточным является наличие соответствующего высокого процента идентичности, если связанная с этим умеренная потеря активности является допустимой, но предпочтительно сохраняется по меньшей мере 50, 60, 70, 80, 90, 95 или 99% активности. Указанные величины идентичности относятся к участку мутеина hIL-2, предлагаемого в изобретении, который состоит из≥10 аминокислот. Степень гомологии можно легко определять с помощью методов, известных специалисту в данной области, например, путем анализа с использованием программы BLAST или модуля MegAlign программы Lasergene фирмы DNAStar Inc.
Согласно изобретению предпочтительным является также, если дополнительная аминокислотная замена в любом из положений кроме положений 20, 88 или 126 представляет собой консервативную аминокислотную замену.
Преимущество такого подхода состоит в том, что получают дополнительные варианты мутеина hIL-2, предлагаемого в изобретении, которые характеризуются достаточно высокой активностью, что позволяет применять их для лечения и/или профилактики аутоиммунных заболеваний или для индукции регуляторных Т-клеток в организме. Специалисту в данной области известно, что консервативные замены не оказывают никакого воздействия или оказывают лишь незначительное воздействие на вторичную или третичную структуру мутеина. Указанные консервативные замены включают замены, описанные Dayhoff в «The Atlas of Protein Sequence and Structure», т.5, изд-во Natl. Biomedical Research. Например, аминокислоты, которые принадлежат к одной из следующих групп, можно заменять друг на друга, т.е. использовать для консервативной замены:
- аланин (А), пролин (Р), глицин (G), аспарагин (N), серин (S), треонин (Т);
- цистеин (С), серин (S), тирозин (Y), треонин (Т);
- валин (V), изолейцин (I), лейцин (L), метионин (М), аланин (А), фенилаланин (F);
- лизин (К), аргинин (R), гистидин (Н);
- фенилаланин (F), тирозин (Y), триптофан (W), гистидин (И); и
- аспарагиновая кислота (D), глутаминовая кислота (Е).
Средство, предлагаемое в изобретении, предназначенное для индукции образования регуляторных Т-клеток в организме, предпочтительно представляет собой фармацевтическую композицию, которая содержит фармацевтически приемлемый носитель.
Преимущество такого подхода состоит в том, что средство уже имеет форму, пригодную для непосредственного введения в организм, предпочтительно в человеческий организм.
Фармацевтически приемлемые носители хорошо известны в данной области (см. Row и др., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5-ое изд., изд-во Pharmaceutical Press and American Pharmacists′ Association, 2006; Bauer и др., Lehrbuch der pharmazeutischen Technologie, Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft mbH Stuttgart, 1999). Наиболее предпочтительная препаративная форма описана в WO 02/00243, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки. Эта препаративная форма не содержит альбумин и стабилизацию мутеина hIL-2 или его участка осуществляют с помощью гистидина. Предпочтительно конечное лекарственное средство содержит следующие компоненты в указанных концентрациях: мутеин hIL-2 или его участок = 0,1-5 мг/мл; гистидин = 0,08-1,6 мас.%; NaCl = 0-0,9 мас.%; сахароза = 1-10 мас.%; глицин = 0-0,3 мас.%, и имеет значение рН, составляющее примерно 5-6,5.
Согласно конкретному варианту осуществления изобретения фармацевтическая композиция содержит также иммунодепрессант.
С учетом высокой эффективности мутеина hIL-2, предлагаемого в изобретении, саму фармацевтическую композицию можно применять для монотерапии в качестве единственного средства для лечения и/или профилактики аутоиммунных заболеваний. Такой препарат, предназначенный для монотерапии, содержит мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, в качестве единственной активной субстанции. В этом контексте фармацевтически приемлемые носители, растворители (буферы, вода и т.д.), добавки и т.д. не относятся к активным субстанциям.
Преимущество такого подхода состоит в том, что терапевтический индекс лекарственного средства, предлагаемого в изобретении, дополнительно повышают путем включения стандартного иммунодепрессанта.
Предпочтительно иммунодепрессант выбирают из группы, включающей глюкокортикоид, в том числе декортин, преднизол; азатиоприн; циклоспорин А; микофенолята мофетил; такролимус; глобулин к Т-лифоцитам, антитела к CD3, включая муромонаб; антитела к CD25, включая базиликсимаб и даклизумаб; антитела к TNF-α, включая инфликсимаб и адалимумаб; азатиоприн; метотрексат; циклоспорин; сиролимус; эверолимус; финголимод; селлцепт (CellCept); мифортик и циклофосфамид.
Преимущество такого подхода состоит в том, что применяют иммунодепрессант, для которого продемонстрирована терапевтическая активность при аутоиммунных заболеваниях и использование которого является достаточно распространенным в данной области.
Кроме того, предпочтительно, если аутоиммунное заболевание выбирают из группы, включающей: сахарный диабет типа I, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, хронический гастрит, болезнь Крона, базедова болезнь, болезнь Бехтерева, псориаз, тяжелая псевдопаралитическая миастения, аутоиммунный гепатит, APECED (аутосомальная полиэндокринопатия-кандидоз-эктодермальная дистрофия), синдром Черджа-Стросс, неспецифический язвенный колит, гломерулонефрит, синдром Гийена-Барре, тироидит Хашимото, лихен-склероз, системную красную волчанку, PANDAS (педиатрическое аутоиммунное нейропсихическое расстройство), ревматическую лихорадку, саркоидоз, синдром Шегрена, синдром «негнущегося человека», склеродерму, грануломатоз Вегенера, витилиго, аутоиммунную энтеропатию, синдром Гудпасчера, дерматомиозит, полимиозит, аутоиммунную аллергию, астму и аутоиммунную реакцию после трансплантаций органов.
Преимущество такого подхода состоит в том, что получают лекарственное средство, которое можно применять для лечения и/или профилактики наиболее важных аутоиммунных заболеваний.
Следующим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания, которая содержит мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, или его фрагмент.
Особенности и преимущества, а также определение понятий, которые описаны касательно применения, предлагаемого в изобретении, относятся также к фармацевтической композиции, предлагаемой в изобретении.
Следующим объектом настоящего изобретения является средство, предназначенное для образования регуляторных Т-клеток (TReg) в организме, которое содержит мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, или его фрагмент.
Преимущества и особенности, а также определение понятий, которые описаны касательно применения, предлагаемого в изобретении, относятся также к средству, предлагаемому в изобретении.
Другими объектами настоящего изобретения являются способы, предназначенные для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания организма и для образования регуляторных Т-клеток (TReg) в организме, каждый из которых заключается в том, что осуществляют следующие стадии, на которых: (а) создают мутеин человеческого интерлейкина 2 (мутеин hIL-2) или его фрагмент, (б) вводят мутеин hIL-2 или его фрагмент в организм и (в) при необходимости повторяют стадии (а) и (б), при этом мутеин hIL-2 или его фрагмент представляет собой мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, или его фрагмент.
Организм предпочтительно представляет собой млекопитающее, более предпочтительно человеческий организм.
Особенности и преимущества, а также определение понятий, которые описаны касательно применения, предлагаемого в изобретении, относятся также к вышеуказанным способам, предлагаемым в изобретении, предназначенным для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания в организме и для образования регуляторных Т-клеток (TReg) в организме.
Следующим объектом настоящего изобретения является способ образования регуляторных Т-клеток (TReg) in vitro, заключающийся в том, что осуществляют следующие стадии, на которых: (а) создают мутеин человеческого интерлейкина 2 (мутеин hIL-2) или его фрагмент, (б) приводят в контакт мутеин hIL-2 или его фрагмент с мононуклеарными клетками периферической крови (РВМС) и (в) при необходимости повторяют стадии (а) и (б), при этом мутеин hIL-2 или его фрагмент представляет собой мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, или его фрагмент.
Приведение в контакт hIL-2 или его фрагмента с РВМС можно осуществлять в любой среде, пригодной для культивирования РВМС.
Особенности и преимущества, а также определение понятий, которые описаны касательно применения, предлагаемого в изобретении, относятся также к вышеуказанному способу, предлагаемому в изобретении, предназначенному для образования регуляторных Т-клеток (TReg) in vitro.
Следующим объектом настоящего изобретения является способ лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания в организме, заключающейся в том, что осуществляют следующие стадии, на которых: (а) создают мутеин человеческого интерлейкина 2 (мутеин hIL-2) или его фрагмент, (б) приводят в контакт мутеин hIL-2 или его фрагмент с мононуклеарными клетками периферической крови (РВМС), полученными из первого организма, (в) инкубируют мутеин hIL-2 или его фрагмент с РВМС для получения клеточной популяции, которая содержит регуляторные Т-клетки (TReg), и (г) интродуцируют клеточную популяцию во второй организм, при этом мутеин hIL-2 или его фрагмент представляет собой мутеин hIL-2, предлагаемый в изобретении, или его фрагмент.
Первый организм и второй организм предпочтительно имеют идентичную группу крови, особенно предпочтительно, если первый и второй организмы являются идентичными организмами или индивидуумами.
Преимущество настоящего изобретения состоит в том, что при интродукции или реинфузии клеточной популяции не возникают нежелательные иммунные реакции на клетки, и поэтому для способа характерны очень незначительные побочные действия.
Особенности и преимущества, а также определение понятий, которые описаны касательно применения, предлагаемого в изобретении, относятся также к вышеуказанному способу, предлагаемому в изобретении, предназначенному для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания организма.
Очевидно, что особенности, указанные выше, и те, которые будут объяснены ниже, без отклонения от объема настоящего изобретения можно использовать не только в конкретном указанном сочетании, но и в других комбинациях или индивидуально.
Ниже изобретение пояснено более детально на основе конкретных примеров, которые даны только для иллюстрации вариантов осуществления изобретения и не ограничивают объем изобретения. При этом сделана ссылка на прилагаемые чертежи, на которых показано:
на фиг.1 - результаты исследований на здоровых людях, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина, индуцирует увеличение количества регуляторных CD4+CD25+Fохр3+-Т-клеток в большей степени;
на фиг.2 - результаты исследований на здоровых людях, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина, индуцирует увеличение количества регуляторных CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк в большей степени;
на фиг.3 - результаты исследований на страдающих меланомой пациентах, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина, индуцирует увеличение количества регуляторных CD4+CD25+Foxp3+-Т-клеток в большей степени;
на фиг.4 - результаты исследований на страдающих меланомой пациентах, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина, индуцирует увеличение количества регуляторных CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк в большей степени;
на фиг.5 - результаты исследований на страдающих рассеянным склерозом пациентах, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина, индуцирует увеличение количества регуляторных CD4+CD25+Foxp3+-T-клeтoк в большей степени;
на фиг.6 - результаты исследований на страдающих рассеянным склерозом пациентах, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина, индуцирует увеличение количества регуляторных CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк в большей степени;
на фиг.7 - результаты исследований на страдающих рассеянным склерозом пациентах, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина, индуцирует увеличение количества цитотоксических CFSElow/CD3+CD8+CD45RO+-T-клeтoк в меньшей степени;
на фиг.8 - результаты исследований на здоровых людях, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R при его применении в дозах, равных или более низких, чем дозы пролейкина индуцирует увеличение количества цитотоксических CFSElow/CD3+CD8+CD45RO+-T-клeтoк в меньшей степени;
на фиг.9 - результаты исследований на мышиной модели диабета типа I, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R по сравнению с hIL-2 дикого типа обусловливает большее повышение содержания (в процентах) РохР3+-клеток в популяции CD4+-клeтoк (А). Кроме того, указанные CD4+FохР3+-клетки характеризуются более высоким уровнем экспрессии CD25 (Б);
на фиг.10 - результаты исследований на мышиной модели диабета типа I, свидетельствующие о том, что hIL-2-N88R в отличие от hIL-2 дикого типа предупреждает развитие диабета.
Варианты осуществления изобретения
1. Материал и методы
1.1 Выделение РВМС из цельной крови для применения в анализах in vitro
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) из организмов здоровых индивидуумов, страдающих меланомой пациентов или страдающих рассеянным склерозом (PC) пациентов выделяют из крови с использованием среды для разделения лимфоцитов (Histopaque, фирма Sigma Aldrich). Для этой цели две пробирки с кровью (7 или 10 мл), полученной из организма одного и того же здорового индивидуума или пациента, переносят в стерильную 50-миллилитровую пробирку и доводят объем до 30 мл с помощью среды RPMI 1640 (фирма InVitrogen, №14190-69). Затем 30 мл разведенной крови наслаивают на 15 мл раствора с непрерывным градиентом плотности (плотность = 1,077; Histopaque, фирма Sigma Aldrich, №10771).
После центрифугирования при 400 g в течение 40 мин при 20°С без встряхивания собирают два «содержащих лейкоциты кольца» и переносят в стерильную 50-миллилитровую пробирку и отмывают дважды забуференным фосфатом физиологическим раствором (ЗФР; фирма In Vitrogen, №14190-169). В случае загрязнения эритроцитами осуществляют лизис RBC («эритроциты»); к клеточному дебрису добавляют 2 мл раствора для лизиса RBC и осуществляют инкубацию в течение 2 мин при осторожном перемешивании при комнатной температуре с последующей процедурой отмывки с использованием большего объема полной среды (RPMI 1640 с 10% фетальной телячьей сыворотки).
Количество живых лейкоцитов определяют путем окрашивания методом исключения трипанового синего (фирма In Vitrogen, №15250-061) и с использованием гемоцитометра (FisherBioblock A2759B).
1.2 Мечение с использованием флуоресцентной метки CFSE
После подсчета клетки отмывают дважды ЗФР и ресуспендируют в ЗФР в концентрации 1×106 клеток/мл. Добавляют CFSE (фирма In Vitrogen, №С1157) в конечной концентрации 0,5 мкМ. После 10-минутной инкубации в темноте при 37°С меченные с помощью CFSE клетки отмывают трижды свежей полной средой при 4°С и ресуспендируют в полной среде в концентрации 1×106 клеток/мл для посева.
1.3 Стимуляция РВМС in vitro
РВМС либо оставляют без стимуляции, либо стимулируют hIL-2 дикого типа (пролейкин) или hIL-2-N88R (BAY 50-4798; лот №PR312C008) с добавлением пула синтетических пептидов, которые получают из специфических для меланомы белков gp100, TRP-2, MART-1 и тирозиназы или из белка MOG, специфического для рассеянного склероза (PC), каждый пептид добавляют в конечной концентрации 2,5 мкМ (пептид, специфический для меланомы) или 30 мкг/мл (пептид, специфический для PC), или без добавления указанного пула пептидов.
Добавляют стимулятор и пептид, получая 23 следующих варианта:
| Таблица 1 | |||
| Варианты стимуляции РВМС | |||
| Вариант | Стимулятор | Конечная концентрация | |
| 1 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-11 м | без добавления пептидов |
| 2 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-11 м | с добавлением пептидов |
| 3 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-9 м | без добавления пептидов |
| 4 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-9 м | с добавлением пептидов |
| 5 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-8 м | без добавления пептидов |
| 6 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-8 м | с добавлением пептидов |
| 7 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №PR312C008) |
10-7 м | без добавления пептидов |
| 8 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-7 м | с добавлением пептидов |
| 9 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-6 м | без добавления пептидов |
| 10 | hIL-2-N88R (BAY 50-4798; №РR312С008) |
10-6 м | с добавлением пептидов |
| 11 | hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 м | без добавления пептидов |
| 12 | hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 м | с добавлением пептидов |
| 13 | hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-9 м | без добавления пептидов |
| 14 | hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-9 м | с добавлением пептидов |
| 15 | hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-8 м | без добавления пептидов |
| 16 | hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-8 м | с добавлением пептидов |
| 17 | hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-7 м | без добавления пептидов |
| Вариант | Стимулятор | Конечная концентрация | |
| 18 | hlL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-7 м | с добавлением пептидов |
| 19 | hlL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-6 м | без добавления пептидов |
| 20 | hlL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-6 м | с добавлением пептидов |
| 21 | ФГА | 5 мкг/мл | |
| 22 | без стимуляции | ||
| 23 | только пептид | с добавлением пептидов |
Затем клетки культивируют в течение 6 дней при 37°С в атмосфере, содержащей 5% СО2.
1.4 Анализ пролиферации и фенотипирование с использованием проточного цитометра FC500
Окрашивание клеток флуоресцентномеченными антителами к расположенным на клеточной поверхности молекулам-маркерам позволяет изучать пролиферацию определенных подгрупп лимфоцитов (клетки памяти и маркеры активации, см. таблицу 2). Иммуноокрашивание с использованием меченных флуорохромом (РЕ: фикоэритрин, ECD: РЕ-техасский красный, АРС: аллофикоцианин, РС7: РЕ-Су7) антител осуществляют до начала культивирования и после культивирования в течение 6 дней с использованием стимуляторов.
В день 6 первые два окрашивания (1 и 1изо) осуществляют с использованием клеток, не меченных с помощью CFSE (CFSE: сукцинимидиловый эфир карбоксифлуоресцеиндиацетата); другие окрашивания осуществляют с использованием меченных с помощью CFSE клеток.
| Таблица 2 | ||||
| Схема окрашивания РВМС | ||||
| РЕ | ECD | АРС | РС7 | |
| 1 | CD25 | CD45 | Foxp3 | CD4 |
| 1изо | CD25 | CD45 | крысиный IgG2a | CD4 |
| 2 | CD127 | CD45 | CD25 | CD4 |
| 3 | CD3 | CD45 | CD25 | CD8 |
| 4 | CD16 | CD56 | CD3 | |
| 5 | CCR7 | CD3 | CD45RA | CD4 |
| РЕ | ECD | АРС | PC7 | |
| 6 | CCR7 | CD3 | CD45RA | CD8 |
| 7 | CD8 | CD3 | CD45RO | CD4 |
| РЕ | ECD | АРС | PC7 | |
| 1 | CD25 | CD3 | Foxp3 | CD4 |
| 1изо | CD25 | CD3 | крысиный IgG2a | CD4 |
| 2 | CD8 | CD3 | CD25 | CD4 |
| 3 | CCR7 | CD3 | CD45RA | CD4 |
| 4 | CD8 | CD3 | CD45RO | CD4 |
CD25-PE, Рохр3-АРС и крысиный IgG2a-APC получают от фирмы eBiosciences; CD25-APC, CD45RA-APC и CD45RO-APC от фирмы BD Biosciences. Все другие антитела получают от фирмы Beckman-Coulter, Франция.
1.5 Мышиная модель диабета типа I
12-недельных мышей линии NOD («диабет, не сопровождающийся ожирением») обрабатывают ежедневно мутеином hIL-2 или hIL-2 дикого типа. Применяемых в качестве отрицательного контроля животных обрабатывают аналогичным образом физиологическим соляным раствором (соляной раствор). Обрабатываемые группы состоят из 3-5 животных. Мышам вводят в дни 0-15 мутеин hIL-2 или hIL-2 дикого типа в дозе, составляющей 5К- или 25К-единиц. Начиная со дня 17, количество интерлейкина в группах, обработанных дозой, составляющей 5К-единиц, повышают до 100 К-единиц (6,112 мкг). Обработку животных дозой, составляющей 25К-единиц, оставляют без изменений. Введение последней дозы осуществляют в день 31. В параллельном эксперименте со дня 0 по день 31 осуществляют обработку фиксированной дозой, составляющей 25К-единиц. Для выявления диабета осуществляют мониторинг уровней глюкозы в моче. Сбор образцов крови мышей осуществляют в день 17 и день 30. Образцы анализируют с помощью FACS, используя окрашивание антителами к CD4, к CD25 и к FохР3, и определяют процентное содержание FохР3+-клеток среди CD4+-T-клeтoк и среднюю интенсивность флуоресценции (MFI), характеризующую экспрессию CD25 на CD4+FoxP3+-клетках.
2. Результаты
2.1 Индукция регуляторных Т-клеток с помощью hIL-2-N88R
В качестве приемлемой системы in vitro для оценки воздействия мутеинов, предлагаемых в изобретении, применяли мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС). РВМС состоят из Т-клеток (~ 75% CD4- и CD8-позитивных клеток) и В- и NK-клеток (~ 25% позитивных клеток), и поэтому они представляют собой клеточную популяцию, в достаточной степени соответствующую иммунной системе.
РВМС, полученные из организма 6 здоровых индивидуумов (10 клеток/мл), стимулировали IL-2 дикого типа (пролейкин) или IL-2-N88R [BAY 50-4798, лот №PR312C008 («ВАY №С008»)] в концентрациях от 10-11 до 10-6 М или в качестве положительного контроля неспецифическим митогеном фитогемагглютинином («ФГА») в концентрации 5 мкг/мл или только культуральной средой («Med»). В день 0 и на шестой день после стимуляции определяли содержание регуляторных CD4+CD25+Foxp3+-Т-клеток в популяции CD3+-лимфоцитов. Результаты представлены на фиг.1 и ниже в таблице 3.
| Таблица 3 | ||||
| Процентное содержание CD3+CD4+CD25+Foxp3+-T-клeтoк после стимуляции; средние значения, полученные для 6 здоровых индивидуумов; С.К.О. - среднеквадратичное отклонение |
||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 1,367 | 2,060 | |
| день 6 | Med | 0,683 | 0,741 | |
| hIL-2-N88R (BAY#C008) ##1C008) |
10-11 м | 1,483 | 1,017 | |
| 10-9 м | 1,783 | 1,153 | ||
| 10-8 м | 3,267 | 1,596 | ||
| 10-7 м | 6,483 | 2,642 | ||
| 10-6 м | 5,200 | 2,375 | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 м | 2,183 | 1,030 | |
| 10-9 м | 3,067 | 1,255 | ||
| 10-8 м | 3,600 | 1,330 | ||
| 10-7 м | 4,600 | 1,992 | ||
| 10-6 м | 4,967 | 2,199 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 1,400 | 1,081 | |
| только пептиды | 1,340 | 0,680 | ||
Из этого эксперимента следует, что hIL-2-N88R в концентрациях 10-7 М и 10-6 М приводил к значительной индукции субпопуляции регуляторных CD4+CD25+Foxp3+-T-клeтoк. При этом индукция оказалась существенно выше, чем при стимуляции РВМС с помощью hIL-2 дикого типа.
С использованием второго препарата исследовали увеличение субпопуляции регуляторных CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк после стимуляции hIL-2-N88R в сравнении с hIL-2 дикого типа. Результаты представлены на фиг.2 и ниже в таблице 4.
| Таблица 4: | ||||
| Процентное содержание CD3+CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк после стимуляции; средние значения, полученные для 6 здоровых индивидуумов | ||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 0,317 | 0,402 | |
| день 6 | Med | 0,133 | 0,151 | |
| hIL-2-N88R (BAY#C008) #1C008) |
10-11 м | 0,200 | 0,141 | |
| 10-9 м | 0,320 | 0,179 | ||
| 10-8 м | 0,517 | 0,354 | ||
| 10-7 м | 0,917 | 0,601 | ||
| 10-6 м | 5,250 | 3,141 | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 м | 1,000 | 1,864 | |
| 10-9 м | 0,717 | 0,293 | ||
| 10-8 м | 1,000 | 0,429 | ||
| 10-7 м | 1,433 | 0,403 | ||
| 10-6 м | 2,533 | 0,903 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 0,700 | 1,715 | |
| только пептиды | 0,160 | 0,089 | ||
И в этом случае установлено также, что стимуляция hIL-2-N88R приводила к значительному увеличению субпопуляции регуляторных CD4+CD25-Foxp3+-Т-клеток, при этом при использовании мутеина в концентрации 10-6 М обнаружена существенно более высокая стимуляция по сравнению со стимуляцией с помощью hIL-2 дикого типа.
2.2 hIL-2-N88R индуцирует регуляторные Т-клетки в организме страдающих меланомой пациентов
Далее исследовали, может ли мутеин hIL-2 N88R, предлагаемый в изобретении, стимулировать также антигенспецифическую активность иммунных клеток. Для этой цели РВМС (106 клеток/мл), полученные из организма трех страдающих меланомой пациентов, стимулировали hIL-2-N88R (BAY 50-4798, лот №РR312С008) или hIL-2 дикого типа (пролейкин) в концентрациях от 10-11 до 10-6 М в присутствии ассоциированного с меланомой пула пептидов (Pept) или без них с использованием 5 мкг/мл ФГА или только культуральной среды. Затем оценивали субпопуляции регуляторных CD4+CD25+Foxp3+-T-клeтoк и CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк соответственно. Результаты представлены на фиг.3 и в таблице 5 и на фиг.4 и в таблице 6 соответственно.
| Таблица 5 | ||||
| Процентное содержание CD3+CD4+CD25+Foxp3+-T-клeтoк после стимуляции; средние значения, полученные для трех страдающих меланомой пациентов | ||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 2,800 | 2,052 | |
| день 6 | Med | 1,133 | 0,839 | |
| hIL-2-N88R (BAY#C008) |
10-11 М | 1,833 | 1,185 | |
| 10-11 М+Pept | 2,467 | 0,666 | ||
| 10-9 M | 3,000 | 1,015 | ||
| 10-9M+Pept | 3,033 | 0,379 | ||
| 10-8 M | 3,600 | 0,819 | ||
| 10-8M+Pept | 5,567 | 2,499 | ||
| 10-7 M | 6,100 | 0,458 | ||
| 10-7M+Pept | 6,233 | 0,058 | ||
| 10-6 M | 7,533 | 2,413 | ||
| 10-6M+Pept | 8,533 | 3,225 | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 М | 2,767 | 0,751 | |
| 10-11 М+Pept | 2,500 | 0,985 | ||
| 10-9 M | 3,333 | 0,802 | ||
| 10-9M+Pept | 3,433 | 1,102 | ||
| 10-8 M | 4,133 | 0,862 | ||
| 10-8M+Pept | 3,633 | 1,002 | ||
| 10-7 M | 4,367 | 1,201 | ||
| 10-7M+Pept | 4,300 | 0,755 | ||
| 10-6 M | 6,667 | 1,405 | ||
| 10-6M+Pept | 5,600 | 1,323 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 1,400 | 0,346 | |
| только пептиды | 1,667 | 1,060 | ||
| Таблица 6 | ||||
| Процентное содержание CD3+CD4+CD25-Foxp3+-Т-клеток после стимуляции; средние значения, полученные для трех страдающих меланомой пациентов | ||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 0,567 | 0,643 | |
| день 6 | Med | 0,133 | 0,231 | |
| hIL-2-N88R (BAY#C008) |
10-11 М | 0,267 | 0,462 | |
| 10-11 М+Pept | 0,333 | 0,252 | ||
| 10-9 M | 0,300 | 0,265 | ||
| 10-9M+Pept | 0,500 | 0,300 | ||
| 10-8 M | 0,500 | 0,265 | ||
| 10-8M+Pept | 0,800 | 0,700 | ||
| 10-7 M | 0,900 | 0,436 | ||
| 10-7M+Pept | 0,677 | 0,306 | ||
| 10-6 M | 4,100 | 1,682 | ||
| 10-6M+Pept | 3,200 | 1,646 | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 М | 0,267 | 0,208 | |
| 10-11 М+Pept | 0,200 | 0,100 | ||
| 10-9 M | 0,967 | 0,603 | ||
| 10-9M+Pept | 0,967 | 0,451 | ||
| 10-8 M | 1,633 | 1,002 | ||
| 10-8M+Pept | 1,400 | 0,624 | ||
| 10-7 M | 1,400 | 0,656 | ||
| 10-7M+Pept | 1,533 | 0,702 | ||
| 10-6 M | 2,733 | 1,861 | ||
| 10-6M+Pept | 2,600 | 1,473 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 0,000 | 0,000 | |
| только пептиды | 0,200 | 0,100 | ||
В этом эксперименте установлено, что введение hIL-2-88R приводит также к значительному увеличению регуляторных Т-клеток у страдающих меланомой пациентов. В этом случае установлено, что при использовании мутеина в концентрациях 10-7 М и 10-6 М субпопуляция CD4+CD25+Foxp3+-T-клeтoк и при использовании мутеина в концентрации 10-6 М субпопуляция CD4+CD25-Foxp3+-Т-клеток оказались существенно более крупными, чем при стимуляции соответствующими концентрациями IL-2 дикого типа (пролейкин).
2.3 hIL-2-N88R индуцирует регуляторные Т-клетки в организме страдающих рассеянным склерозом пациентов
Далее исследовали, может ли мутеин hIL-2 N88R, предлагаемый в изобретении, стимулировать также антигенспецифическую активность иммунных клеток. Для этой цели РВМС (10 клеток/мл), полученные из организма двух страдающих рассеянным склерозом пациентов, стимулировали hIL-2-N88R (BAY 50-4798, лот №РR312С008) или hIL-2 дикого типа (пролейкин) в концентрациях от 10-11 до 10-6 М в присутствии ассоциированного с рассеянным склерозом пула пептидов или без них с использованием 5 мкг/мл ФГА или только культуральной среды. Затем оценивали субпопуляции регуляторных CD4+CD25+Foxp3+-T-клeтoк и CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк соответственно. Результаты представлены на фиг.5 и в таблице 7 и на фиг.6 и в таблице 8 соответственно.
| Таблица 7 | ||||
| Процентное содержание CD3+CD4+CD25+Foxp3-Т-клеток после стимуляции; средние значения, полученные для двух страдающих рассеянным склерозом пациентов | ||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 0,95 | 0,21 | |
| день 6 | Med | 3,55 | 1,91 | |
| hIL-2-N88R (BAY#C008) |
10-11 М | 3,8 | 0,99 | |
| 10-11 М+Pept | 4,2 | 2,40 | ||
| 10-9 M | 6,1 | 2,40 | ||
| 10-9M+Pept | 9,05 | 5,02 | ||
| 10-8 M | 9,75 | 2,19 | ||
| 10-8M+Pept | 11,15 | 3,32 | ||
| 10-7 M | 11,95 | 5,30 | ||
| 10-7M+Pept | 9,9 | 1,70 | ||
| 10-6 M | 7,9 | 1,41 | ||
| 10-6M+Pept | 9,3 | 1,41 | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 М | 6,3 | 2,55 | |
| 10-11 М+Pept | 8,8 | 4,10 | ||
| 10-9 M | 8,25 | 0,49 | ||
| 10-9M+Pept | 8,45 | 1,20 | ||
| 10-8 M | 8,15 | 2,47 | ||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 0,95 | 0,21 | |
| 10-8M+Pept | 9,55 | 3,04 | ||
| 10-7 M | 8,8 | 3,39 | ||
| 10-7M+Pept | 8,8 | 3,25 | ||
| 10-6 M | 9,45 | 0,78 | ||
| 10-6M+Pept | 7,6 | 1,84 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 5,5 | 3,68 | |
| только пептиды | 3,95 | 2,19 | ||
| Таблица 8 | ||||
| Процентное содержание CD3+CD4+CD25-Foxp3+-Т-клеток после стимуляции; средние значения, полученные для двух страдающих рассеянным склерозом пациентов | ||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 0,35 | 0,35 | |
| день 6 | Med | 0,14 | 0,14 | |
| hIL-2-N88R (BAY #C008) |
10-11 М | 0,28 | 0,28 | |
| 10-11 М+Pept | 0,14 | 0,14 | ||
| 10-9 M | 0,07 | 0,07 | ||
| 10-9M+Pept | 0,07 | 0,07 | ||
| 10-8 M | 0,28 | 0,28 | ||
| 10-8M+Pept | 0,00 | 0,00 | ||
| 10-7 M | 0,14 | 0,14 | ||
| 10-7M+Pept | 0,14 | 0,14 | ||
| 10-6 M | 4,10 | 4,10 | ||
| 10-6M+Pept | 2,90 | 2,90 | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 М | 0,00 | 0,00 | |
| 10-11 М+Pept | 0,07 | 0,07 | ||
| 10-9 M | 0,07 | 0,07 | ||
| 10-9M+Pept | 0,00 | 0,00 | ||
| 10-8 M | 0,14 | 0,14 | ||
| 10-8M+Pept | 0,14 | 0,14 | ||
| 10-7 M | 0,28 | 0,28 | ||
| 10-7M+Pept | 0,21 | 0,21 | ||
| 10-6 M | 0,07 | 0,07 | ||
| 10-6M+Pept | 0,85 | 0,85 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 0,07 | 0,07 | |
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 0,35 | 0,35 | |
| только пептиды | 0,07 | 0,07 | ||
В этом эксперименте установлено, что введение hIL-2-88R приводит также к значительному увеличению регуляторных Т-клеток у страдающих рассеянным склерозом пациентов. В этом случае установлено, что при использовании мутеина в концентрациях 10-8 М и 10-7 М субпопуляция CD4+CD25+Foxp3+-Т-клеток и при использовании мутеина в концентрации 10-6 М субпопуляция CD4+CD25-Foxp3+-T-клeтoк оказались существенно более крупными, чем при стимуляции соответствующими концентрациями IL-2 дикого типа (пролейкин).
2.4 ML-2-N88R индуцирует лишь минимальную пролиферацию цитотоксических CD8+-Т-клеток у пациентов, страдающих рассеянным склерозом, и у здоровых индивидуумов
Изучали также стимуляцию цитотоксических центральных CD8+-Т-клеток памяти. Для этой цели РВМС, полученные из организма здоровых индивидуумов или страдающих рассеянным склерозом пациентов, обрабатывали согласно методу, описанному в разделе 2.3. Определяли процентное содержание CFSElow/CD3+CD8+CD45RO+-T-клeтoк. Результаты представлены на фиг.7 и в таблице 9 и на фиг.8 и в таблице 10.
| Таблица 9 | ||||
| Процентное содержание CFSElow/CD3+CD8+CD45RO+-T-клeтoк после стимуляции; средние значения, полученные для двух страдающих рассеянным склерозом пациентов | ||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день О | 2,45 | 1,06 | |
| день 6 | Med | 0,95 | 0,21 | |
| hIL-2-N88R (BAY #C008) |
10-11 М | 1,3 | 0,57 | |
| 10-11 М+Pept | 1,2 | 1,13 | ||
| 10-9 M | 3,55 | 2,47 | ||
| 10-9M+Pept | 0,5 | 0,14 | ||
| 10-8 M | 3,3 | 1,41 | ||
| 10-8M+Pept | 1,2 | 0,71 | ||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 0 | день 0 | 2,45 | 1,06 | |
| день 6 | 10-7 M | 10,5 | 7,50 | |
| 10-7M+Pept | 9,1 | 0,71 | ||
| 10-6 M | 22,9 | 9,76 | ||
| 10-6M+Pept | 1 | 0,28 | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-11 М | 5,2 | 7,35 | |
| 10-11 М+Pept | 3,1 | 0,28 | ||
| 10-9 M | 14,3 | 15,56 | ||
| 10-9M+Pept | 19,45 | 2,90 | ||
| 10-8 M | 36,5 | 1,98 | ||
| 10-8M+Pept | 41,85 | 2,47 | ||
| 10-7 M | 54,8 | 8,49 | ||
| 10-7M+Pept | 54,85 | 12,94 | ||
| 10-6 M | 58,05 | 1,06 | ||
| 10-6M+Pept | 98,2 | 0,85 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 0,55 | 0,07 | |
| только пептиды | 2,45 | 1,06 | ||
| Таблица 10 | ||||
| Процент CFSElow/CD3+CD8+CD45RO+-T-клeтoк после стимуляции; средние значения, полученные для трех здоровых индивидуумов | ||||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| день 6 | Med | 0,23 | 0,23 | |
| hIL-2-N88R (BAY #C008) |
10-11 М | 0,27 | 0,06 | |
| 10- 11 М+Pept |
1,73 | 2,23 | ||
| 10-9 M | 0,43 | 0,23 | ||
| 10-9M+Pept | 0,80 | 0,72 | ||
| 10-8 M | 2,13 | 1,86 | ||
| 10-8M+Pept | 2,07 | 1,17 | ||
| 10-7 M | 3,83 | 4,02 | ||
| 10-7M+Pept | 5,77 | 6,30 | ||
| 10-6 M | 17,43 | 17,31 | ||
| 10-6M+Pept | 17,87 | 12,97 | ||
| 10-11 М | 1,53 | 1,23 | ||
| 10-11 М+Pept | 2,37 | 2,57 | ||
| 10-9 M | 18,20 | 23,35 | ||
| Варианты | Среднее значение | С.К.О. | ||
| hIL-2 дикого типа (пролейкин) | 10-9M+Pept | 16,93 | 10,96 | |
| 10-8 M | 43,30 | 36,72 | ||
| 10-8M+Pept | 37,80 | 20,80 | ||
| 10-7 M | 38,53 | 25,53 | ||
| 10-7M+Pept | 32,37 | 20,90 | ||
| 10-6 M | 37,93 | 27,66 | ||
| 10-6M+Pept | 30,83 | 21,51 | ||
| ФГА | 5 мкг/мл | 96,07 | 1,79 | |
| только пептиды | 1,83 | 1,59 | ||
При исследовании с использованием крови страдающих рассеянным склерозом, а также здоровых индивидуумов, установлено, что отличие от hIL-2 дикого типа обработка с помощью hIL-2-N88R приводила лишь к небольшой пролиферации центральных CD8+-Т-клеток памяти при всех изученных концентрациях.
2.5 Обработка мутеином hIL-2 препятствует развитию диабета типа I при изучении на животной модели
По сравнению с обработкой hIL-2 дикого типа обработка NOD-мышей с помощью hIL-2-N88R приводила к более значительному повышению процентного содержания FохР3+-клеток в популяции CD4+-клеток (фиг.9 (А)). Кроме того, для этих CD4+FoxP3+-позитивных клеток характерен более высокий уровень экспрессии CD25 (фиг.9 (Б)). На фиг.10 продемонстрировано, что в отличие от обработки с помощью hIL-2 дикого типа обработка с помощью hIL-2-N88R мышей, применяемых в качестве модели диабета типа I, препятствовала развитию диабета у всех мышей в группе животных, которых обрабатывали мутеином.
3. Заключение
Эксперименты, проведенные при создании изобретения, четко продемонстрировали, что с учетом их способности осуществлять индукцию регуляторных Т-клеток (TReg) мутеины hIL-2, предлагаемые в изобретении, и их участки представляют собой субстанции, которые можно применять для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания или для индукции TReg в организме и для образования TReg in vitro. При создании изобретения это продемонстрировано не только in vitro, но также и in vivo.
Claims (12)
1. Применение мутеина человеческого интерлейкина-2 (мутеин hIL-2), пронумерованного в соответствии с hIL-2 дикого типа и имеющего аминокислотную замену по меньшей мере в одном из положений 20, 88 или 126, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания, отличающееся тем, что осуществляют замену аспарагина в положении 88 на аргинин (hIL-2-N88R) или на глицин (hIL-2-N88G), или на изолейцин (hIL-2-N88I) и/или осуществляют замену аспарагиновой кислоты в положении 20 на гистидин (hIL-2-D20H) или на изолейцин (hIL-2-D20I), или на тирозин (hIL-2-D20Y) и/или осуществляют замену глутамина в положении 126 на лейцин (hIL-2-Q126L).
2. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное средство дополнительно содержит иммунодепрессант.
3. Применение по п.2, отличающееся тем, что иммунодепрессант выбран из группы, включающей: глюкокортикоид, в том числе декортин, преднизол; азатиоприн; циклоспорин A; микофенолята мофетил; такролимус; глобулин к Т-лимфоцитам, антитела к CD3, включая муромонаб; антитела к CD25, включая базиликсимаб и даклизумаб; антитела к TNF-α, включая инфликсимаб и адалимумаб; азатиоприн; метотрексат; циклоспорин; сиролимус; эверолимус; финголимод; селлцепт (CellCept); мифортик и циклофосфамид.
4. Применение по одному из предыдущих пунктов, отличающееся тем, что аутоиммунное заболевание выбрано из группы, включающей: сахарный диабет типа I, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, меланому и системную красную волчанку.
5. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное средство содержит фармацевтически приемлемый носитель.
6. Лекарственное средство, предназначенное для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания, отличающееся тем, что содержит мутеин hIL-2, предназначенный для применения по одному из пп.1-5.
7. Применение мутеина человеческого интерлейкина-2 (мутеин hIL-2), пронумерованного в соответствии с hIL-2 дикого типа и имеющего аминокислотную замену по меньшей мере в одном из положений 20, 88 или 126, для получения средства, предназначенного для образования регуляторных Т-клеток (TReg) в живом организме, отличающееся тем, что осуществляют замену аспарагина в положении 88 на аргинин (hIL-2-N88R) или на глицин (hIL-2-N88G), или на изолейцин (hIL-2-N88I) и/или осуществляют замену аспарагиновой кислоты в положении 20 на гистидин (hIL-2-D20H) или на изолейцин (hIL-2-D20I), или на тирозин (hIL-2-D20Y) и/или осуществляют замену глутамина в положении 126 на лейцин (hIL-2-Q126L).
8. Применение по п.7, отличающееся тем, что средство представляет собой лекарственное средство и содержит фармацевтически приемлемый носитель.
9. Применение по п.8, отличающееся тем, что лекарственное средство дополнительно содержит иммунодепрессант.
10. Применение по п.9, отличающееся тем, что иммунодепрессант выбран из группы, включающей: глюкокортикоид, в том числе декортин, преднизол; азатиоприн; циклоспорин A; микофенолята мофетил; такролимус; глобулин к Т-лимфоцитам, антитела к CD3, включая муромонаб; антитела к CD25, включая базиликсимаб и даклизумаб; антитела к TNF-α, включая инфликсимаб и адалимумаб; азатиоприн; метотрексат; циклоспорин; сиролимус; эверолимус; финголимод; селлцепт; мифортик и циклофосфамид.
11. Средство, предназначенное для образования регуляторных Т-клеток (TReg) в живом организме, отличающееся тем, что содержит мутеин hIL-2, предназначенный для применения по одному из пп.7-10.
12. Способ образования регуляторных Т-клеток (TReg) in vitro, заключающийся в том, что осуществляют следующие стадии, на которых:
(а) создают мутеин человеческого интерлейкина 2 (мутеин hIL-2),
(б) приводят в контакт мутеин hIL-2 с мононуклеарными клетками периферической крови (РВМС) и
(в) при необходимости повторяют стадии (а) и (б),
отличающийся тем, что мутеин hIL-2 представляет собой мутеин hIL-2, предназначенный для применения по одному из пп.7-10.
(а) создают мутеин человеческого интерлейкина 2 (мутеин hIL-2),
(б) приводят в контакт мутеин hIL-2 с мононуклеарными клетками периферической крови (РВМС) и
(в) при необходимости повторяют стадии (а) и (б),
отличающийся тем, что мутеин hIL-2 представляет собой мутеин hIL-2, предназначенный для применения по одному из пп.7-10.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE102008023820.1 | 2008-05-08 | ||
| DE102008023820A DE102008023820A1 (de) | 2008-05-08 | 2008-05-08 | Mittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe einer Autoimmunerkrankung und zur Bildung von Regulatorischen T-Zellen |
| PCT/EP2009/003076 WO2009135615A2 (de) | 2008-05-08 | 2009-04-28 | Mittel zur behandlung und/oder prophylaxe einer autoimmunerkrankung und zur bildung von regulatorischen t-zellen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010149999A RU2010149999A (ru) | 2012-06-20 |
| RU2531936C2 true RU2531936C2 (ru) | 2014-10-27 |
Family
ID=41152787
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010149999/15A RU2531936C2 (ru) | 2008-05-08 | 2009-04-28 | Средство, предназначенное для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания и для образования регуляторных т-клеток |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US20110150826A1 (ru) |
| EP (1) | EP2288372B1 (ru) |
| JP (2) | JP5651583B2 (ru) |
| KR (3) | KR101554056B1 (ru) |
| CN (2) | CN110935025A (ru) |
| AR (1) | AR071756A1 (ru) |
| AT (1) | ATE544465T1 (ru) |
| AU (1) | AU2009244039B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0912411B8 (ru) |
| CA (1) | CA2723761C (ru) |
| CL (1) | CL2009001099A1 (ru) |
| CY (1) | CY1112469T1 (ru) |
| DE (1) | DE102008023820A1 (ru) |
| DK (1) | DK2288372T3 (ru) |
| ES (1) | ES2378957T3 (ru) |
| HR (1) | HRP20120296T1 (ru) |
| IL (3) | IL209128A (ru) |
| MX (1) | MX2010012214A (ru) |
| PE (1) | PE20091967A1 (ru) |
| PL (1) | PL2288372T3 (ru) |
| PT (1) | PT2288372E (ru) |
| RU (1) | RU2531936C2 (ru) |
| SI (1) | SI2288372T1 (ru) |
| TW (1) | TWI510622B (ru) |
| UA (1) | UA102099C2 (ru) |
| UY (1) | UY31816A (ru) |
| WO (1) | WO2009135615A2 (ru) |
| ZA (1) | ZA201008129B (ru) |
Families Citing this family (53)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102008023820A1 (de) | 2008-05-08 | 2009-11-12 | Aicuris Gmbh & Co. Kg | Mittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe einer Autoimmunerkrankung und zur Bildung von Regulatorischen T-Zellen |
| CA2749539C (en) | 2009-01-21 | 2022-07-19 | Amgen Inc. | Compositions and methods comprising interleukin-2 mutants for treating inflammatory and autoimmune diseases |
| US8846098B2 (en) | 2009-07-10 | 2014-09-30 | University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Artificial cell constructs for cellular manipulation |
| US11090363B2 (en) | 2009-07-10 | 2021-08-17 | University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education | Vasoactive intestinal peptide release from microparticles |
| CU23734A1 (es) * | 2009-11-27 | 2011-11-15 | Centro Inmunologia Molecular | Polipéptidos inmunomoduladores derivados de la il-2 con actividad antagonista de esta citocina útiles en la terapia del cáncer y enfermedades infecciosas crónicas |
| WO2012012737A2 (en) * | 2010-07-23 | 2012-01-26 | The University Of Toledo | Stable tregs and related materials and methods |
| CU23923B1 (es) * | 2010-11-12 | 2013-07-31 | Ct De Inmunología Molecular | Polipéptidos derivados de la il-2 con actividad agonista |
| ES2811624T3 (es) | 2011-03-11 | 2021-03-12 | Hopitaux Paris Assist Publique | Régimen de dosificación de IL-2 para tratar lupus eritematoso sistémico |
| EP2683395B1 (en) | 2011-03-11 | 2018-08-01 | Assistance Publique - Hôpitaux de Paris | Use of low dose il-2 for treating type 1 diabetes |
| US20140044675A1 (en) | 2012-08-10 | 2014-02-13 | Roche Glycart Ag | Interleukin-2 fusion proteins and uses thereof |
| CN109324190A (zh) | 2012-12-11 | 2019-02-12 | 艾伯特叶史瓦大学爱因斯坦医学院 | 高通量受体:配体鉴定方法 |
| MA39250B1 (fr) | 2014-02-06 | 2018-09-28 | Hoffmann La Roche | Protéines hybrides de l'interleukine-2 et leurs utilisations |
| SG11201700629TA (en) * | 2014-08-11 | 2017-02-27 | Delinia Inc | Modified il-2 variants that selectively activate regulatory t cells for the treatment of autoimmune diseases |
| UA126270C2 (uk) | 2015-04-10 | 2022-09-14 | Емджен Інк. | Мутеїни інтерлейкіну-2 для росту регуляторних t-клітин |
| US20170204154A1 (en) | 2016-01-20 | 2017-07-20 | Delinia, Inc. | Molecules that selectively activate regulatory t cells for the treatment of autoimmune diseases |
| KR20180133198A (ko) * | 2016-05-04 | 2018-12-13 | 암젠 인크 | T-조절 세포의 증식을 위한 인터류킨-2 뮤테인 |
| US11339201B2 (en) | 2016-05-18 | 2022-05-24 | Albert Einstein College Of Medicine | Variant PD-L1 polypeptides, T-cell modulatory multimeric polypeptides, and methods of use thereof |
| US11505591B2 (en) | 2016-05-18 | 2022-11-22 | Cue Biopharma, Inc. | T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof |
| US11077172B2 (en) * | 2016-11-08 | 2021-08-03 | Delinia, Inc. | IL-2 variants for the treatment of psoriasis |
| CN116970060A (zh) | 2016-12-22 | 2023-10-31 | 库尔生物制药有限公司 | T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法 |
| US11851471B2 (en) | 2017-01-09 | 2023-12-26 | Cue Biopharma, Inc. | T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof |
| AU2018215558B2 (en) * | 2017-02-03 | 2023-05-25 | University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Oncolytic virus therapy |
| CA3056630A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Pandion Therapeutics, Inc. | Targeted immunotolerance |
| EP3596118A4 (en) | 2017-03-15 | 2021-04-07 | Cue Biopharma, Inc. | PROCESSES FOR MODULATING AN IMMUNE RESPONSE |
| CA3064435A1 (en) | 2017-05-24 | 2018-11-29 | Pandion Therapeutics, Inc. | Targeted immunotolerance |
| KR102164417B1 (ko) | 2017-09-15 | 2020-10-13 | 주식회사 카인사이언스 | 치료제로서의 펩타이드의 용도 |
| KR102219926B1 (ko) | 2017-09-15 | 2021-02-25 | 주식회사 카인사이언스 | 치료제로서의 펩타이드의 용도 |
| US10946068B2 (en) | 2017-12-06 | 2021-03-16 | Pandion Operations, Inc. | IL-2 muteins and uses thereof |
| US10174091B1 (en) | 2017-12-06 | 2019-01-08 | Pandion Therapeutics, Inc. | IL-2 muteins |
| JP2021506291A (ja) | 2017-12-19 | 2021-02-22 | ゼンコア インコーポレイテッド | 改変されたｉｌ−２ ｆｃ融合タンパク質 |
| WO2019131964A1 (ja) * | 2017-12-27 | 2019-07-04 | 協和発酵キリン株式会社 | Ｉｌ－２改変体 |
| EP3737689A4 (en) | 2018-01-09 | 2021-12-01 | Cue Biopharma, Inc. | MULTIMERIC T CELL-MODULATING POLYPEPTIDES AND METHOD OF USING THEREOF |
| EP3752178A1 (en) | 2018-02-16 | 2020-12-23 | Iltoo Pharma | Use of interleukin 2 for treating sjögren's syndrome |
| MX2020009975A (es) | 2018-03-28 | 2020-10-12 | Bristol Myers Squibb Co | Proteinas de fusion interleucina-2/receptor alfa de interleucina-2 y metodos de uso. |
| WO2020007937A1 (en) | 2018-07-03 | 2020-01-09 | Iltoo Pharma | Use of interleukin-2 for treating systemic sclerosis |
| WO2020035482A1 (en) | 2018-08-13 | 2020-02-20 | Iltoo Pharma | Combination of interleukin-2 with an interleukin 1 inhibitor, conjugates and therapeutic uses thereof |
| TW202034945A (zh) | 2018-12-21 | 2020-10-01 | 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 | 一種人白細胞介素２變體或其衍生物 |
| WO2020163782A2 (en) * | 2019-02-08 | 2020-08-13 | The Uab Research Foundation | Immunotherapy for the treatment and prevention of inflammatory bowel disease |
| EP3958887B1 (en) * | 2019-04-23 | 2023-11-01 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) | Medical uses for inducing or restoring immune tolerance |
| JP7137696B2 (ja) | 2019-05-14 | 2022-09-14 | プロヴェンション・バイオ・インコーポレイテッド | １型糖尿病を予防するための方法および組成物 |
| BR112021023345A2 (pt) | 2019-05-20 | 2022-02-01 | Pandion Operations Inc | Imunotolerância com alvo em madcam |
| CN110642934B (zh) * | 2019-09-10 | 2022-08-23 | 中国医学科学院北京协和医院 | 靶向调节t细胞的长效白介素-2及其在治疗自身免疫病中的应用 |
| JP2023505590A (ja) | 2019-12-12 | 2023-02-09 | イルトゥー・ファルマ | インターロイキン２キメラ構築物 |
| KR102653906B1 (ko) | 2020-01-14 | 2024-04-03 | 신테카인, 인크. | 편향된 il2 뮤테인 방법 및 조성물 |
| MX2022013208A (es) | 2020-05-12 | 2022-11-14 | Cue Biopharma Inc | Polipeptidos multimericos moduladores de linfocitos t y metodos de uso de estos. |
| KR102219927B1 (ko) | 2020-05-20 | 2021-02-24 | 주식회사 카인사이언스 | 치료제로서의 펩타이드의 용도 |
| KR102219928B1 (ko) | 2020-06-26 | 2021-02-24 | 주식회사 카인사이언스 | 치료제로서의 펩타이드의 용도 |
| KR20230097094A (ko) | 2020-10-29 | 2023-06-30 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 질환의 치료를 위한 융합 단백질 |
| WO2022120224A1 (en) * | 2020-12-04 | 2022-06-09 | Visterra, Inc. | Methods of using interleukin-2 agents |
| CN112843222B (zh) * | 2021-01-21 | 2023-01-31 | 暨南大学 | Ankrd22蛋白在制备治疗或延缓自身免疫性疾病的产品中的应用 |
| AU2022320553A1 (en) | 2021-07-30 | 2024-02-01 | Yunquan Biotechnology (Beijing) Co., Ltd. | Human interleukin-2 variant and use thereof |
| WO2023057588A1 (en) | 2021-10-06 | 2023-04-13 | Iltoo Pharma | Interleukin 2 chimeric constructs with targeting specificy to inflamed tissues |
| WO2024056154A1 (en) | 2022-09-12 | 2024-03-21 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Interleukin-2 for use in treating autism spectrum disorder |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999060128A1 (en) * | 1998-05-15 | 1999-11-25 | Bayer Corporation | Il-2 selective agonists and antagonists |
| WO2005086798A2 (en) * | 2004-03-05 | 2005-09-22 | Chiron Corporation | Improved interleukin-2 muteins |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6955807B1 (en) * | 1998-05-15 | 2005-10-18 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | IL-2 selective agonists and antagonists |
| US6348192B1 (en) | 1999-05-11 | 2002-02-19 | Bayer Corporation | Interleukin-2 mutein expressed from mammalian cells |
| US6689353B1 (en) | 2000-06-28 | 2004-02-10 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Stabilized interleukin 2 |
| US20060057651A1 (en) * | 2000-12-08 | 2006-03-16 | Bowdish Katherine S | Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof |
| JP2005507870A (ja) * | 2001-08-13 | 2005-03-24 | ユニバーシティ・オブ・サザン・カリフォルニア | 低毒性のインターロイキン−２突然変異体 |
| PT1454138E (pt) * | 2001-12-04 | 2012-03-28 | Merck Patent Gmbh | Imunocitoquinas com seletividade modulada |
| US20060121029A1 (en) * | 2002-08-30 | 2006-06-08 | Hiroshi Shiku | Method and composition for regulating the activity of regulatory t cells |
| DE60326002D1 (de) * | 2002-10-22 | 2009-03-12 | Waratah Pharmaceuticals Inc | Behandlung von diabetes. |
| CN1953767B (zh) * | 2004-01-08 | 2011-03-16 | 加利福尼亚大学董事会 | 调节t细胞抑制自身免疫 |
| DE202005001888U1 (de) * | 2005-02-07 | 2005-07-28 | Chiron Corp., Emeryville | Zusammensetzung, die Interleukin-2 und Natriumdodecylsulfat umfaßt |
| WO2009061853A2 (en) | 2007-11-05 | 2009-05-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Mutant interleukin-2 (il-2) polypeptides |
| DE102008023820A1 (de) | 2008-05-08 | 2009-11-12 | Aicuris Gmbh & Co. Kg | Mittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe einer Autoimmunerkrankung und zur Bildung von Regulatorischen T-Zellen |
-
2008
- 2008-05-08 DE DE102008023820A patent/DE102008023820A1/de not_active Withdrawn
-
2009
- 2009-04-28 UA UAA201014444A patent/UA102099C2/ru unknown
- 2009-04-28 JP JP2011507816A patent/JP5651583B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2009-04-28 AU AU2009244039A patent/AU2009244039B2/en not_active Ceased
- 2009-04-28 AT AT09741834T patent/ATE544465T1/de active
- 2009-04-28 PT PT09741834T patent/PT2288372E/pt unknown
- 2009-04-28 BR BRPI0912411A patent/BRPI0912411B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2009-04-28 KR KR1020107026580A patent/KR101554056B1/ko active IP Right Grant
- 2009-04-28 KR KR1020167020193A patent/KR20160092048A/ko not_active Application Discontinuation
- 2009-04-28 CA CA2723761A patent/CA2723761C/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-04-28 MX MX2010012214A patent/MX2010012214A/es active IP Right Grant
- 2009-04-28 EP EP09741834A patent/EP2288372B1/de active Active
- 2009-04-28 CN CN201911154127.8A patent/CN110935025A/zh active Pending
- 2009-04-28 KR KR1020157013806A patent/KR101687506B1/ko active IP Right Grant
- 2009-04-28 SI SI200930229T patent/SI2288372T1/sl unknown
- 2009-04-28 WO PCT/EP2009/003076 patent/WO2009135615A2/de active Application Filing
- 2009-04-28 DK DK09741834.7T patent/DK2288372T3/da active
- 2009-04-28 CN CN2009801266762A patent/CN102088996A/zh active Pending
- 2009-04-28 RU RU2010149999/15A patent/RU2531936C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-04-28 ES ES09741834T patent/ES2378957T3/es active Active
- 2009-04-28 PL PL09741834T patent/PL2288372T3/pl unknown
- 2009-05-07 UY UY0001031816A patent/UY31816A/es not_active Application Discontinuation
- 2009-05-07 CL CL2009001099A patent/CL2009001099A1/es unknown
- 2009-05-07 TW TW098115067A patent/TWI510622B/zh not_active IP Right Cessation
- 2009-05-07 PE PE2009000635A patent/PE20091967A1/es not_active Application Discontinuation
- 2009-05-08 AR ARP090101665A patent/AR071756A1/es not_active Application Discontinuation
-
2010
- 2010-11-04 IL IL209128A patent/IL209128A/en active IP Right Grant
- 2010-11-08 US US12/941,885 patent/US20110150826A1/en not_active Abandoned
- 2010-11-12 ZA ZA2010/08129A patent/ZA201008129B/en unknown
-
2012
- 2012-03-08 CY CY20121100236T patent/CY1112469T1/el unknown
- 2012-04-03 HR HR20120296T patent/HRP20120296T1/hr unknown
-
2014
- 2014-09-08 JP JP2014182422A patent/JP2015038084A/ja active Pending
-
2015
- 2015-06-26 US US14/752,726 patent/US9616105B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2017
- 2017-02-05 IL IL250435A patent/IL250435A0/en unknown
- 2017-02-22 US US15/439,845 patent/US10086046B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2017-02-22 US US15/439,866 patent/US20170173117A1/en not_active Abandoned
- 2017-08-02 IL IL253790A patent/IL253790A0/en unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999060128A1 (en) * | 1998-05-15 | 1999-11-25 | Bayer Corporation | Il-2 selective agonists and antagonists |
| WO2005086798A2 (en) * | 2004-03-05 | 2005-09-22 | Chiron Corporation | Improved interleukin-2 muteins |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| TANG Q et al" vitro-expanded antigen-specific regulatory T cell suppress autoimmune diabetes", J.Exp. Med., jun 7, 199(11):1455-65. * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2531936C2 (ru) | Средство, предназначенное для лечения и/или профилактики аутоиммунного заболевания и для образования регуляторных т-клеток | |
| US10000573B2 (en) | Monoclonal antibody and a method thereof | |
| JP2013512200A (ja) | Ｉｌ−２に由来する免疫調節ポリペプチド並びに癌及び慢性感染症の治療におけるその使用 | |
| MXPA06010655A (es) | Citocina inmunosupresora. | |
| KR20190134832A (ko) | 종양 형성 치료방법 | |
| WO2014055413A2 (en) | A method of providing cellular therapy using modified natural killer cells or t lymphocytes | |
| TW201825122A (zh) | 用精胺酸耗盡劑進行之組合癌症免疫療法 | |
| AU2005298245A1 (en) | A thymus-specific protein | |
| US8153120B2 (en) | Methods for inducing a natural killer (NK) cell-mediated immune response and for increasing NK cell activity | |
| Flores et al. | IL‐Y, a synthetic member of the IL‐12 cytokine family, suppresses the development of type 1 diabetes in NOD mice | |
| US9624469B2 (en) | Regulatory immune cells with enhanced targeted cell death effect | |
| US11981743B2 (en) | Monoclonal antibody and a method thereof | |
| EP3958887B1 (en) | Medical uses for inducing or restoring immune tolerance | |
| KR102445492B1 (ko) | 신규한 펩타이드를 포함하는 자연살해세포 대량증식용 조성물 및 이를 이용한 자연살해세포 대량증식방법 | |
| JP2018524301A (ja) | マルチペプチド組成物 | |
| CZ205496A3 (cs) | Farmaceutický prostředek k léčení rakoviny, způsob jeho výroby a použití IL-10 k výrobě léčiv k antagonizaci blokády cytotoxiciny vyvolané IL-2 endogenním IL-4 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200429 |