RU2440819C2 - Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения - Google Patents
Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2440819C2 RU2440819C2 RU2008135020/13A RU2008135020A RU2440819C2 RU 2440819 C2 RU2440819 C2 RU 2440819C2 RU 2008135020/13 A RU2008135020/13 A RU 2008135020/13A RU 2008135020 A RU2008135020 A RU 2008135020A RU 2440819 C2 RU2440819 C2 RU 2440819C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- extract
- plectranthus amboinicus
- solvent
- plectranthus
- pharmaceutical composition
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Obesity (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине. Осуществляют контактирование сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus. Затем его концентрируют с получением концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus и обрабатывают методом разделения перемешиванием. Производят разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем, объединение разведенного неочищенного экстракта с абсорбирующей смолой и перемешивание абсорбирующей смолы и разведенного неочищенного экстракта. После этого жидкую часть отбрасывают и экстрагируют смолу растворителем с декантированием экстракта. Затем проводят повторные стадии экстрагирования с уменьшением полярности растворителя. Экстракт Plectranthus amboinicus обладает активностью против кожных нарушений. Фармацевтическая композиция обладает акивностью против кожных нарушений, включает терапевтически активное количество экстракта Plectranthus amboinicus и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель. Изобретение позволяет упростить способ и повысить эффективность продуктов. 7 н. и 7 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к способу получения экстрактов трав, используемых в китайской медицине. В частности, настоящее изобретение относится к применению твердожидкостного разделения в сочетании со специальной обработкой для массового производства растительного экстракта для лечения кожных нарушений, включая стимуляцию заживления ран, особенно у больных диабетом.
Уровень техники
Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng, произрастающий в Малайзии и Индии, представляет собой декоративное лекарственное растение, обычно культивируемое в простых семьях. Лекарственной частью Plectranthus amboinicus является надземная часть. Plectranthus amboinicus известен также как кубинский ореган, индийский бурачник, индийская мята, мексиканская мята, мексиканский ореган или испанский тимьян. Индийцы используют Plectranthus amboinicus как душистое вещество для тканей, а англичане обнаружили его приятный аромат, когда импортировали ткани для шалей из Индии в 1820-е годы. Когда листья Plectranthus amboinicus кладут прямо в одежду, это имеет не только ароматический эффект, но также предохраняет одежду от порчи молью. Считают, что это полезно для дезинфекции, повышения полового возбуждения и предупреждения укусов насекомых. Кроме того, Plectranthus amboinicus можно использовать для лечения укусов ядовитых змей и облегчения таких симптомов, как головная боль, метеоризм, тошнота, диарея и повышение температуры. Более того, масло Plectranthus amboinicus является популярными духами в Азии, и его используют в ароматерапии для улучшения регенерации эпителия, лечения акне и облегчения симптомов экземы, эпидермофитии стопы и сухой трескающейся кожи. Более того, Plectranthus amboinicus представляет собой хороший транквилизатор и афродизиак, который может уменьшить тревогу и усилить половое желание.
Различные варианты применения Plectranthus amboinicus описаны в периодических журналах широкого профиля, но в литературе редко встречаются научные исследования Plectranthus amboinicus. Опубликованная патентная заявка США №2006/0099283 А1 раскрывает сок из листьев Plectranthus amboinicus, предназначенный для лечения рака и/или опухоли. Заявка на патент США с серийным номером 11/605178, относящаяся к настоящему изобретению, предусматривает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество неочищенных экстрактов/экстрактов Plectranthus amboinicus и терапевтически эффективное количество экстрактов Centella asiatica Urban.
Centella asiatica Urban (щитолистник) представляет собой растение, в естественных условиях произрастающее в прибрежных районах Мадагаскара и Индийского океана. Лекарственной частью Centella asiatica Urban семейства Apiaceae является целое высушенное растение. Centella asiatica Urban известна также как европейская водяная мята, готу кола, кола, индийский щитолистник, индийский женьшень, трава "конское копыто", пегага, мандукапарни, тигриная трава, "широкий лист" или тоно. Сотни лет считали, что Centella asiatica Urban используют в традиционной медицине Азии для улучшения заживления ран. Экстракты Centella asiatica Urban включают два основных соединения: азиатикозид и мадекассовую кислоту. Экстракты Centella asiatica Urban используют для лечения ожогов и травм и предупреждения послеоперационных спаек; способы получения экстрактов Centella asiatica Urban описаны в ряде патентных заявок. Например, патент США №4318906 и CN 1353972A раскрывают медицинское применение Centella asiatica Urban в качестве единственного активного ингредиента; патенты США №№6475536, US 6267996, а также CN 1313124А, CN 93110425.4 и CN 1089497А раскрывают применение Centella asiatica Urban в комбинации с другими веществами для косметического препарата, лечения ожогов или получения мази для лечения травм, и патенты США №№5834437, US 6417349, а также CN 1194154А раскрывают способы получения экстрактов Centella asiatica Urban.
Принятые способы разделения, предназначенные для выделения компонентов из смеси, включают контактирование смеси с неионной абсорбирующей смолой, такой как DIAION® HP20, DIAION® HP20SS, Sepabeads® SP207 (Mitsubishi Chemical Corporation), Amberlite™ XAD-2 (Rohm and Hass company), Amberlite™ XAD-4 и т.п. Стадии включают упаковку неионной абсорбирующей смолы в разделительную колонку, введение смеси в колонку и элюцию колонки растворителем. Когда данный способ используют для обработки большого количества смеси, он является очень трудоемким и условия элюции нелегко контролировать.
Сок из листьев, согласно опубликованной патентной заявке США №2006/0099283 А1, получают измельчением и удалением фрагментов и/или остатков тканей; различные фракции сока из листьев разделяют с помощью фильтрующих центрифуг.
Экстракты Plectranthus amboinicus, согласно заявке на патент США с серийным номером 11/605178, получают с использованием серии растворителей с различными полярностями с целью элюции экстрактов с хроматографической колонки. Данный способ является сложным и трудоемким. Все еще существует необходимость разработки способа получения активных ингредиентов Plectranthus amboinicus в больших количествах.
Неожиданно обнаружено, что способ на основе перемешивания может заместить традиционный способ разделения на колонке и его можно использовать для массового производства экстрактов Plectranthus amboinicus. Способ на основе перемешивания является быстрым, и условия элюции можно легко контролировать. Более того, экстракты Plectranthus amboinicus, полученные разделением путем перемешивания, более эффективны, чем экстракты, полученные колоночным хроматографическим разделением.
Раскрытие изобретения
Одна из целей настоящего изобретения состоит в разработке способа получения неочищенного экстракта и/или экстрактов Plectranthus amboinicus.
Другой целью настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции для лечения кожных нарушений (включая стимуляцию заживления ран у больных диабетом), включающей терапевтически эффективное количество неочищенных экстрактов и/или экстрактов Plectranthus amboinicus. Фармацевтическая композиция может далее включать терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urbans.
Еще одной целью настоящего изобретения является получение перевязочного материала для ран, содержащего фармацевтическую композицию, соответствующую данному изобретению.
Следующая цель настоящего изобретения состоит в разработке способа лечения кожного нарушения, включающего введение фармацевтической композиции, соответствующей данному изобретению.
Настоящее изобретение детально описано в последующих разделах. Другие признаки, цели и преимущества настоящего изобретения легко можно обнаружить в детальных описаниях и формуле изобретения.
Краткое описание чертежей
На фигуре 1 показан хроматографический спектр экстракта Plectranthus amboinicus (PA-W4), изготовленного с помощью разделения смешиванием. Спектр был определен с помощью обращеннофазовой ВЭЖХ при детектировании на длине волны 270 нм.
На фигуре 2 показан хроматографический профиль Plectranthus amboinicus (PA-C4), изготовленный с помощью разделения колоночной хроматографией. Спектр был определен с помощью обращеннофазовой ВЭЖХ при детектировании на длине волны 270 нм.
На фигуре 3 показано закрытие ран у мышей с индуцированным стрептозотоцином (STZ) диабетом. Группа 1: на раны наносили мазь, содержащую 1% Centella asiatica Urbans экстрактов (S1); группа 2: на раны наносили CGS-21680 (10 мкг/мл); группа 4: на раны наносили Regranex; группа 5: на раны наносили DCB-WH1-C (мазь, включающая 1% S1 и 0,25% PA-C4); группа 6: на раны наносили DCB-WH1-W (мазь, включающая 1% S1 и 0,25% PA-W4).
На фигуре 4 показано закрытие ран у мышей с индуцированным стрептозотоцином диабетом. Группа 1: на раны наносили плацебо (мазь без лекарственного средства); группа 2: на раны наносили мазь, содержащую 1% Centella asiatica Urbans экстрактов (S1); группа 3: на раны наносили мазь, включающую 0,25% PA-W4; группа 4: на рану наносили DCB-WH1-W (мазь, включающую 1% S1 и 0,25% PA-W4); группа 5: на раны наносили мазь, содержащую 1% PA-W4.
Осуществление изобретения
Пока в данном контексте не определено иначе, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, будут иметь значения, которые обыкновенно имеют в виду под ними обычные специалисты в области техники. Значение и объем терминов должны быть ясными; однако в случае какой-либо возможной неоднозначности определения, представленные в данном контексте, имеют приоритет относительно любого словаря или определения во внешнем источнике.
Как используют в соответствии с настоящим описанием, следует иметь в виду, что следующие термины, пока не указано иначе, имеют следующие значения.
Термин "кожные нарушения", как используют в данном контексте, включает раны и язвы. В одном варианте осуществления кожные нарушения включают порезы, рваные раны, ссадины, колотые раны или другие подобные кожные повреждения, предпочтительно раны больных диабетом; язвы, включая пролежни.
Термин "лечение" или "стимуляция", как используют в данном контексте, означает улучшение симптомов.
Термин "пациенты", как используют в данном контексте, означает животных, в частности млекопитающих. В одном предпочтительном варианте осуществления термин "пациенты" означает "человек".
Термин "терапевтически эффективное количество", как используют в данном контексте, относится к количеству фармацевтической композиции, используемой в виде монотерапии или в комбинации с другими лекарственными средствами для лечения нарушений, которые проявляют терапевтическую эффективность.
Термин "носитель" или "фармацевтически приемлемый носитель" относится к разбавителям, наполнителям, акцепторам или аналогам, которые хорошо известны обычным специалистам в области изготовления фармацевтических композиций.
Термин "экстракты Centella asiatica Urban" означает экстракты высушенных целых растений Centella asiatica Urban, в которых основные активные компоненты включают азиатикозид и мадекассовую кислоту. Предпочтительно, когда он является лекарственным компонентом, имеющимся на рынке, который в основном включает азиатикозид и мадекассовую кислоту, и его чистота составляет больше чем 70%.
Термин "неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus" означает экстракт, полученный из надземной части Plectranthus amboinicus, и неочищенный экстракт можно далее сконцентрировать.
Термин "экстракт Plectranthus amboinicus" означает экстракт, полученный из неочищенного экстракта путем дальнейшего разделения(ий).
Термин "высокополярный растворитель" означает растворитель, который имеет самую высокую полярность среди растворителей, используемых в способе получения. Высокополярный растворитель включает, но без ограничения перечисленным, воду, метанол, этанол или смесь двух или более перечисленных растворителей.
Термин "низкополярный растворитель" означает растворитель, который имеет самую низкую полярность среди растворителей, используемых в способе получения. Низкополярный растворитель включает, но без ограничения перечисленным, хлороформ, изопропанол, ацетон, этилацетат, смесь двух или более из предшествующих растворителей с одним или более растворителей, которые имеют более высокую полярность.
Термин "растворитель повышенной полярности" означает растворитель, который имеет полярность ниже, чем высокополярный растворитель, используемый в способе получения, но выше, чем полярность растворителя средней полярности, используемого в способе получения. Растворители повышенной полярности можно получить смешиванием высокополярного растворителя с растворителем, имеющим более низкую полярность, в соотношении (об.:об.) от приблизительно 30:70 до приблизительно 70:30, предпочтительно от приблизительно 60:40 до приблизительно 40:60.
Термин "растворитель средней полярности " означает растворитель, который имеет полярность ниже, чем у растворителя повышенной полярности, используемого в способе получения, но выше, чем у низкополярного растворителя, используемого в способе получения. Растворители средней полярности можно получить смешиванием высокополярного растворителя с растворителем, имеющим более низкую полярность, в соотношении (об.:об.) от приблизительно 30:70 до приблизительно 5:95, предпочтительно от приблизительно 15:85 до приблизительно 5:95.
Пока из контекста не следует иначе, термины в единственном числе будут включать множественное число и термины во множественном числе будут включать единственное число.
Способы получения
Настоящее изобретение характеризуется использованием разделения твердое вещество-жидкость (разделение путем перемешивания) в комбинации со специальной обработкой для массового получения экстрактов Plectranthus amboinicus ускоренным образом с более высоким выходом. Разделение путем перемешивания включает перемешивание абсорбирующей смолы, такой как DIAION, в экстракте Plectranthus amboinicus и выделение различных фракций из экстрактов Plectranthus amboinicus с помощью различных стадий разделения с использованием различных растворителей. Кроме повышенной производительности, экстракт Plectranthus amboinicus, полученный способом, соответствующим настоящему изобретению, более эффективен, чем полученный колоночным хроматографическим разделением.
Соответствующий настоящему изобретению способ получения экстрактов Plectranthus amboinicus включает стадии:
- контактирования сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;
- концентрирования неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus и
- обработки концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus с использованием способа разделения путем перемешивания с получением экстракта Plectranthus amboinicus.
Согласно настоящему изобретению способ разделения путем перемешивания включает следующие стадии:
(a) разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем, смешивание разведенного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus с абсорбирующей смолой и перемешивание абсорбирующей смолы и разведенного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;
(b) удаление жидкой части, экстракцию смолы дистиллированной водой и сбор первого экстракта;
(c) экстракцию смолы растворителем повышенной полярности и сбор второго экстракта;
(d) экстракцию смолы растворителем средней полярности и сбор третьего экстракта и
(e) экстракцию смолы растворителем низкой полярности и сбор четвертого экстракта.
В одном предпочтительном варианте осуществления способ получения экстрактов Plectranthus amboinicus включает стадии:
1) контактирования сухих листьев Plectranthus amboinicus экстрагирующим листья растворителем в течение от приблизительно 30 до приблизительно 100 часов с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;
2) концентрирование неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus;
3) разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем и смешивание разведенного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus с абсорбирующей смолой путем перемешивания в течение от приблизительно 10 до приблизительно 30 часов;
4) удаление жидкой части;
5) погружение смолы в дистиллированную воду в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением первого экстракта (PA-W1);
6) смешивание и перемешивание смолы с растворителем повышенной полярности в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением второго экстракта (PA-W2);
7) смешивание и перемешивание смолы с растворителем средней полярности в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением третьего экстракта (PA-W3);
8) смешивание и перемешивание смолы с низкополярным растворителем в течение от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов с получением четвертого экстракта (PA-W4).
Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, растворитель, экстрагирующий листья, выбран, но без ограничения перечисленными, из воды и спиртов. В предпочтительном варианте осуществления спирт представляет собой этанол. Соотношение объема растворителя, экстрагирующего листья, и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 6:1 до приблизительно 15:1, предпочтительно приблизительно 10:1.
Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, экстракт листьев, полученный на стадии 1, можно сконцентрировать любым из принятых способов концентрирования растворов, например с использованием роторного испарителя, понижающего давление.
Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, абсорбирующая смола выбрана, но без ограничения перечисленным, из DIAION® HP20, DIAION® HP20SS, Sepabeads® SP207, Amberlite™ XAD-2, Amberlite™ XAD-4 и т.п., предпочтительно серии DIAION®. В одном предпочтительном варианте осуществления абсорбирующая смола представляет собой DIAION® HP20. Кроме того, смола DIAION® HP20 может быть предварительно обработана метанолом.
Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, соотношение объема высокополярного растворителя и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно от приблизительно 5:1; соотношение объема растворителя повышенной полярности и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно приблизительно 5:1; соотношение объема растворителя средней полярности и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно приблизительно 5:1, и соотношение объема низкополярного растворителя и массы сухих листьев Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1, предпочтительно приблизительно 5:1.
Согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, период экстракции на стадии 1 составляет от приблизительно 30 до приблизительно 100 часов, предпочтительно от приблизительно 50 до приблизительно 80 часов и наиболее предпочтительно больше чем приблизительно 72 часа. Период абсорбции на стадии 3 составляет от приблизительно 10 до приблизительно 30 часов, предпочтительно от приблизительно 17 до приблизительно 25 часов и наиболее предпочтительно больше чем приблизительно 20 часов. Период экстракции на стадии 5 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час. Период экстракции на стадии 6 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час. Период экстракции на стадии 7 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час. Период экстракции на стадии 8 составляет от приблизительно 1 до приблизительно 7 часов, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 4 часов и наиболее предпочтительно приблизительно 1 час.
Более того, согласно способу, соответствующему настоящему изобретению, перемешивание проводят при скорости от приблизительно 3 до приблизительно 15 об/мин, предпочтительно от приблизительно 5 до приблизительно 10 об/мин и наиболее предпочтительно 7 об/мин.
Способ, соответствующий настоящему изобретению, представляет собой высокоэффективный способ массового получения экстрактов Plectranthus amboinicus. Способ приблизительно в пять раз быстрее способов колоночного хроматографического разделения с целью экстракции активных фракций из Plectranthus amboinicus.
Фармацевтические композиции
Настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus, полученного способом разделения, соответствующим настоящему изобретению. Другой вариант осуществления, соответствующий настоящему изобретению, предусматривает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus, полученного способом разделения, соответствующим настоящему изобретению, в комбинации с терапевтически эффективным количеством экстракта Centella asiatica Urban.
Фармацевтическую композицию, соответствующую настоящему изобретению, можно нанести местно на раны, и она может быть приготовлена в виде спрея или препарата, отличного от спрея. Форма спрея включает спрей или раствор; форма, отличная от спрея, может быть полутвердой или твердой, предпочтительно твердой формой, имеющей кинематическую вязкость больше, чем у воды. Подходящие препараты включают, но без ограничения перечисленным, суспензии, эмульсии, кремы, мази, линименты и т.п. При необходимости их можно стерилизовать или смешивать с любыми фармацевтически приемлемыми носителями, такими как стабилизаторы, смачивающие агенты и т.п. Предпочтительно, когда фармацевтическая композиция, соответствующая изобретению, приготовлена в виде мазей, в которых предпочтительные фармацевтически приемлемые носители включают, но без ограничения перечисленным, высшие жирные кислоты, воски, липиды, глицерин, высшие спирты или синтетические липиды. Фармацевтическая композиция, соответствующая настоящему изобретению, независимо от формы, в которой она приготовлена, может далее включать смягчающие вещества, отдушки или красители с целью повышения приемлемости для различных вариантов применения.
Терапевтически эффективные количества неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban раскрыты в USSN 11/605178, патенте США №4318906, CN 1353972A, патенте США №6475536, патенте США №6267996, CN 1313124А, CN 93110425.4 и CN 1089497А, в связи с чем описания заявок включены в данном контексте посредством ссылки во всей полноте.
Фармацевтические композиции, соответствующие настоящему изобретению, могут быть получены обычными специалистами в области техники при использовании принятых способов. Один вариант осуществления, соответствующий настоящему изобретению, включает способ получения мази, включающий следующие стадии:
- нагревание мазевой основы в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения;
- добавление размягченной мазевой основы в свою очередь в химический стакан, содержащий замороженный обезвоженный неочищенный экстракт и/или экстракт Plectranthus amboinicus;
- доводка количества мазевой основы и неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus для приготовления мази с неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus и
- хранение мази при 4°С в холодильнике.
Содержание неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus составляет приблизительно от 1% до 15% по массе мази. Содержание экстракта Plectranthus amboinicus составляет приблизительно от 0,1% до 5% по массе мази.
Другой вариант осуществления настоящего изобретения включает способ получения мази, включающий следующие стадии:
- нагревание мазевой основы в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения;
- добавление размягченной мазевой основы в свою очередь в химический стакан, содержащий замороженные обезвоженные неочищенные экстракты и/или экстракт Plectranthus amboinicus для приготовления мази с неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus;
- однородное перемешивание мази с неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus и экстрактом Centella asiatica Urban для приготовления мази с экстрактом Centella asiatica Urban и неочищенным экстрактом и/или экстрактом Plectranthus amboinicus и
- хранение мази при 4°С в холодильнике.
Содержание неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 0,5% до приблизительно 5% по массе мази, и содержание экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 20% по массе мази. Содержание экстракта Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 0,05% до приблизительно 2% по массе мази, и содержание экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 20% по массе мази. Соотношение масс неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 1:40 до приблизительно 1:4. Соотношение масс экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 1:60 до приблизительно 1:4.
Согласно настоящему изобретению мазь, содержащая четвертый экстракт Plectranthus amboinicus (PA-W4), полученный способом разделения путем перемешивания, представленным в изобретении, и мазь, содержащая PA-W4 в комбинации с экстрактом Centella asiatica Urban, показывает более высокую эффективность в плане стимуляции заживления ран, чем мазь, содержащая экстракт Centella asiatica Urban в виде монокомпонента, мазь, содержащая экстракты Plectranthus amboinicus, полученные традиционным колоночным хроматографическим способом разделения, в комбинации с экстрактом Centella asiatica Urban или другими принятыми лекарственными препаратами для стимуляции заживления ран (показано в примерах ниже). Количества четвертого экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban в мази составляют приблизительно по меньшей мере 0,01% и приблизительно по меньшей мере 0,1% по массе, соответственно. Предпочтительно, когда количество четвертого экстракта Plectranthus amboinicus составляет от приблизительно 0,01% до приблизительно 5%, более предпочтительно от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%, наиболее предпочтительно от приблизительно 0,25% до приблизительно 1% по массе мази. Количество экстракта Centella asiatica Urban составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, более предпочтительно от приблизительно 0,5% до приблизительно 9%, наиболее предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 3% по массе мази. Предпочтительно, когда соотношение масс четвертого экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica составляет от приблизительно 1:60 до приблизительно 1:4.
Применение
Фармацевтические композиции, соответствующие настоящему изобретению, можно использовать для лечения нарушений, включая, но без ограничения перечисленным, раны и язвы. В одном предпочтительном варианте осуществления данные нарушения представляют собой обычные травмы и пролежни, более предпочтительно рану у больного диабетом.
У специалистов в области техники не должно быть трудностей в выборе подходящих путей и доз для лекарственных препаратов. Согласно настоящему изобретению предпочтительным путем является местное применение. Доза будет зависеть от природы и состояния нарушения, возраста и состояния здоровья пациента, пути введения и любого предшествующего лечения. Специалисты в области техники должны знать, что доза может варьировать в зависимости от возраста, размера, состояния здоровья субъекта и других подобных факторов.
Фармацевтические композиции, соответствующие настоящему изобретению, можно удобно использовать для изготовления перевязочного материала для ран, включающего терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта и/или экстракта Plectranthus amboinicus и необязательно терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urban, причем указанный перевязочный материал для ран включает, но без ограничения перечисленным, повязку с липким слоем, наклейку пластыря и т.п.
Следующие примеры представлены, чтобы помочь специалистам в области техники в практической реализации настоящего изобретения. Даже в таком случае примеры не следует истолковывать как необоснованно ограничивающие настоящее изобретение, поскольку обычными специалистами в области техники могут быть сделаны модификации и изменения в вариантах осуществления, обсуждаемых в данном контексте, не выходя из сущности и объема настоящего раскрытия изобретения.
ПРИМЕРЫ
Материалы
А. Мазевая основа
Мазевую основу (основу бетаметазоновой мази), используемую в примерах, приобретают в фирме Sinphar, Taiwan. Мазевую основу используют для получения мазей, включающих экстракт Centella asiatica Urban и/или экстракты Plectranthus amboinicus, а также в качестве плацебо в биологических анализах.
В. CGS-21680
CGS-21680 (Sigma, номер партии 093K4615) представляет собой лекарственный препарат, проходящий клинические испытания для заживления ран. 5 мг CGS-21680 вводят в 500 мл дистиллированной воды для получения раствора 10 нг/мл CGS-21680. Раствор CGS-21680 используют в качестве сравнительного лекарственного препарата в примерах.
С. Regranex
0,01% гель Regranex включает бекаплермин, рекомбинантный фактор роста, выделенный из человеческих тромбоцитов (fh-PDGF-BB), в концентрации 100 мкг/г (0,01%). Он представляет собой одобренный FDA (Управление по контролю за продуктами и лекарствами) лекарственный препарат для лечения глубоких невропатических диабетических ножных язв. Regranex используют в качестве сравнительного лекарственного препарата в примерах.
D. Экстракт Centella asiatica Urban и содержащая его мазь
Способ получения экстракта Centella asiatica Urbans и активный компонент в фармацевтической композиции, соответствующей настоящему изобретению, хорошо известны обычным специалистам в области экстракции растительных лекарственных средств. Предпочтительный способ включает:
- экстракцию Centella asiatica путем экстракции этанолом при нагревании с обратным холодильником в течение 2 часов и ее повторение 2-3 раза;
- конденсацию жидкостей этанольного экстракта с целью получения экстрактов;
- восстановление этанольных экстрактов, смешивание и растворение экстрактов в воде;
- экстракцию раздельно петролейным эфиром, хлороформом, этилацетатом и затем водой, насыщенной н-бутанолом;
- восстановление растворителя н-бутанольных экстрактов при пониженном давлении с целью получения кремообразной субстанции и растворение субстанции в маленьком количестве метанола;
- добавление безводного ацетона, нескольких объемов, к раствору для осаждения желтоватого неочищенного общего глюкозида, сушку и взвешивание осадков;
- добавление маленького количества метанола для растворения неочищенного общего глюкозида, смешивание надлежащим образом с силикагелем и сушку смеси;
- влажную упаковку колонки силикагелем для хроматографии и нагрузку силикагеля образцом;
- элюцию хлороформом, метанолом и водой (однородная смесь 16:6:1) и поочередный сбор 18 компонентов, причем каждый компонент представляет собой 50 мл и компоненты подвергают тонкослойной хроматографии при нанесении пятном с целью сравнения с известными контролями;
- объединение компонентов 9-15, концентрирование и последующую очистку на колонке с использованием хлороформа, метанола и воды (однородная смесь 14:6:1) для элюции и
- концентрирование этих же компонентов и повторную кристаллизацию метанолом с целью получения азиатикозида в виде игольчатых кристаллов белого цвета.
Кроме того, лекарственная субстанция экстракта Centella asiatica Urbans, содержащая азиатикозид и мадекассовую кислоту чистотой больше чем 70%, имеется на рынке. Коммерческий продукт Очищенный экстракт Centella asiatica можно приобрести на фирме NuLiv Science, Inc., Taiwan. Мазь с 1% экстрактом Centella asiatica Urban (S1) получают следующим образом:
- нагревают мазевую основу в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения;
- смешивают 99 г размягченной мазевой основы с 1 г экстракта Centella asiatica Urban (S1);
- хранят мазь при 4°С в холодильнике.
Мазь с 1% S1 используют в примерах в качестве сравнительного лекарственного препарата.
Е. Экстракты Plectranthus amboinicus
Экстракты Plectranthus amboinicus, используемые в биологических анализах, готовят способом получения, соответствующим настоящему изобретению (способ разделения путем перемешивания), и способом колоночного хроматографического разделения. Детали получения описаны в следующих примерах получения.
Пример 1. Получение экстрактов Plectranthus amboinicus разделением путем перемешивания
Способ
800 г сухих листьев Plectranthus amboinicus погружают в 95% спирт, объем которого в десять раз превосходит общую массу сухих листьев, на 72 часа, и затем фильтруют экстракт листьев. Процедуру экстракции повторяют. Два экстракта листьев смешивают, получая неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus, и неочищенный экстракт концентрируют с помощью роторного испарителя с пониженным давлением (Heidolph LABOROTA 4000, серия Eleya N-N) для уменьшения объема неочищенного экстракта до приблизительно 5% от исходного объема (т.е. до приблизительно половины исходной массы сухих листьев).
Неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus разбавляют высокополярным растворителем до объема, в десять раз превышающего исходный. Разбавленный неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus вносят в контейнер, похожий на ведро, содержащий смолу DIAION® HP20, которую предварительно обрабатывают с использованием метанола. Смолу и экстракт в контейнере перемешивают со скоростью 3-10 об/мин в течение ночи. Затем жидкость выливают из контейнера. Дважды дистиллированную воду объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, добавляют в контейнер. Смолу погружают в воду, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Собранную жидкость (PA-W1) концентрируют и сушат, получая 2,4 г сухого продукта с выходом 0,3%.
Затем растворитель повышенной полярности объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, вносят в контейнер со смолой. Смолу погружают в растворитель, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Процесс повторяют дважды. Экстрагированные жидкости смешивают (PA-W2) и затем концентрируют и сушат, получая 4 г сухого продукта с выходом 0,5%.
Затем растворитель средней полярности объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, вносят в контейнер со смолой. Смолу погружают в растворитель, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Процесс повторяют дважды. Экстрагированные жидкости смешивают (PA-W3) и затем концентрируют и сушат, получая 6 г сухого продукта с выходом 0,75%.
Затем низкополярный растворитель объемом, в пять раз превышающим общую массу сухих листьев, вносят в контейнер со смолой. Смолу погружают в растворитель, перемешивая время от времени в течение одного часа, и собирают жидкость. Процесс повторяют дважды. Экстрагированные жидкости смешивают (PA-W4) и затем концентрируют и сушат, получая 7,52 г сухого продукта с выходом 0,94%.
Пример 2. Получение экстрактов Plectranthus amboinicus колоночным хроматографическим способом разделения
Смолу DIAION массы, идентичной массе сухих листьев Plectranthus amboinicus, погружают в метанол и упаковывают в хроматографическую колонку. Затем упакованную смолу DIAION промывают 1-2-кратным объемом метанола относительно общей массы смолы DIAION и затем промывают дважды дистиллированной водой объемом, в пять-шесть раз превышающим общую массу смолы DIAION.
800 г сухих листьев Plectranthus amboinicus погружают в 95% спирт, объем которого в десять раз превосходит общую массу сухих листьев, на 24 часа. После фильтрации листья снова погружают в 95% спирт, объем которого в десять раз превосходит общую массу сухих листьев, на 24 часа. Жидкости экстракта Plectranthus amboinicus смешивают и концентрируют с помощью роторного испарителя с пониженным давлением для уменьшения объема до приблизительно 2-3% от исходного объема.
Экстракт, полученный на предшествующих стадиях, разбавляют дистиллированной водой и нагружают на колонку со смолой DIAION. Колонку элюируют высокополярным растворителем объемом, в десять раз превышающим общую массу сухих листьев. Элюированную фракцию (РА-С1) собирают, и выход составляет 0,38%.
Затем колонку элюируют растворителем повышенной полярности объемом, в пять-десять раз превышающим общую массу сухих листьев.
Элюированную фракцию (РА-С2) собирают, и выход составляет 0,5%. Колонку снова элюируют растворителем средней полярности объемом в пять-десять раз превышающим общую массу сухих листьев. Элюированную фракцию (РА-С3) собирают, и выход составляет 0,78%.
Наконец, колонку элюируют низкополярным растворителем объемом, в пять-десять раз превышающим общую массу сухих листьев. Элюированную фракцию (РА-С4) собирают, и выход составляет 0,67%.
Пример 3. Анализ композиции экстрактов Plectranthus amboinicus
Приборы и оборудование
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) Spectra System/Thermo.
Насос: Spectra-Physics P4000.
Детектор: UV/VIS Spectra-PhysicsSpectra System UV600OLP.
Автоматический пробоотборник: Thermo Separation Products AS3500.
Пакет программ: Thermo Separation Products ChromQuest System.
Контроллер: Thermo Separation Products SN4000.
Условия для жидкой фазы ВЭЖХ.
Хроматографическая колонка: Phenomenex, 4,6×250 нм, Luna 5 мкм диоксид кремния (2).
Скорость потока: 1,0 мл/мин. Предел давления: 250 кг-сила/см2.
Количество образца: 10 мкл.
Условия PDA: Период отбора образца: 0,64 с.
Интервал длины волны: 190-370 нм.
Каналы: 270,320 нм.
Профиль элюции:
| Время (мин) | ||||
| Подвижная фаза | 0 | 15 | 45 | 50 |
| н-гексан | 95% | 85% | 30% | 95% |
| Этилацетат | 5% | 15% | 70% | 5% |
Хроматографический спектр экстракта PA-W4, полученного разделением путем перемешивания, и экстракта РА-С4, полученного колоночным хроматографическим разделением, представлены на Фигурах 1 и 2, соответственно. PA-W4 имеет пики ВЭЖХ в следующее время удерживания:
| Пик | Время удерживания (мин) |
| 1 | 5,5 |
| 2 | 9,6 |
| 3 | 20,0 |
| 4 | 22,5 |
| 5 | 23,5 |
| 6 | 24,8 |
| 7 | 27,7 |
| 8 | 27,8 |
| 9 | 28,6 |
| 10 | 28,9 |
| 11 | 29,7 |
| 12 | 31,0 |
| 13 | 31,9 |
| 14 | 36,6 |
| 15 | 37,8 |
Пример 4. Получение мазей, содержащих экстракты Plectranthus amboinicus, и мазей, содержащих экстракт Centella asiatica Urban (S1) и экстракты Plectranthus amboinicus
Отмеряют подходящие количества мазевой основы, экстракта PA-W4 и экстракта РА-С4. Мазевую основу предварительно нагревают в водяной бане при приблизительно 50°С до размягчения и добавляют в химические стаканы, содержащие экстракт PA-W4 и экстракт РА-С4 для получения мазей 0,25% PA-W4 и мази 0,25% РА-С4. Соотношение масс мазевой основы и экстрактов Plectranthus amboinicus составляет 99,75:0,25. Затем полученные мази смешивают с экстрактом Centella asiatica Urban (S1) в соотношении масс 99:1 для получения мази DCR-WH1-W (1% S1+0,25% PA-W4) и мази DCR-WH1-C (1% S1+0,25% РА-С4).
Биологические анализы
Пример 5. Эксперименты на животных в отношении закрытия ран у крыс с диабетом
Эксперименты на животных
Индукция у животных высокого уровня сахара в крови
Крысам с массой тела более 300 г вводят стрептозотоцин (STZ, 65 мг/кг, внутрибрюшинно) с целью индукции высокого уровня сахара в крови. Крыс с успешно индуцированным высоким уровнем сахара в крови (более 300 мг/дл) отбирают для проведения тестов на закрытие ран через два месяца после появления синдромов высокого уровня содержания сахара в крови.
Травматические хирургические вмешательства у животных с диабетом
1. Животных с высоким уровнем содержания сахара с массой тела ниже чем 300 г исключают и остальных случайным образом делят на 6 групп.
2. Животных анестезируют пентобарбиталом и удаляют шерсть на хирургическом поле (в области спины). Затем области хирургического вмешательства и инструменты стерилизуют перед операцией 75% спиртом.
3. Кожу в областях середины спины (4, 6 и 8 см от средней точки между двумя лопатками) вырезают (полной толщины), используя режущее по кругу лезвие диаметром 1 см.
Измерение ран, нанесение тестируемых материалов и предупреждение расчесывания ран
1. Перед ранами помещают стандартную линейку и делают фотографии.
2. На каждую рану наносят тонкий слой тест-материалов, приготовленных в виде мазей, и 0,05 мл раствора CGS-21680.
3. Раны покрывают марлей и надевают колпачки на шею крыс.
Тест-материалы наносят крысам два раза в день (утром и вечером) и измеряют раны в каждой точке времени.
После окончания экспериментов регенерированные участки кожи берут для биохимического и гистологического анализа.
Анализ области раны
Когда делают фотографии, перед ранами помещают стандартную линейку. Длину ран стандартизируют в соответствии со шкалой стандартной линейки на фотографиях перед анализом ран с помощью пакета программ обработки изображений Image-Pro (Media Cybernetics, Inc.), чтобы избежать ошибок, обусловленных различными расстояниями при фотографировании.
Данные анализа и статистика
Площади трех ран на спинах крыс анализируют с помощью Image-Pro. Площади ран в день нуль представляют собой исходные площади ран. Исходные площади ран за вычетом площадей в различные точки времени делят на исходные площади ран, чтобы получить процент закрытия ран. Среднее по трем результатам в процентах закрытия ран для каждой крысы представляет закрытие раны каждой крысы. Для каждого из тест-материалов используют от четырех до семи крыс/группу. Данные представляют как среднее ± стандартная ошибка (SEM). р-значение результатов теста рассчитывают с помощью t-критерия при использовании пакета программ по статистике sigma statis (Systat software Inc.). P<0,05 означает, что имеется существенное различие, и его отмечают * на статистических графиках или в таблицах. Р<0,01 означает, что имеется очень существенное различие, и его отмечают ** на статистических графиках или в таблицах. Р<0,001 означает, что имеется чрезвычайно существенное различие, и его отмечают *** на статистических графиках или в таблицах.
Пример 6. Сравнение эффективностей 1% S1, CGS-21680, Regranex, DCB-WH1-C и DCB-WH1-W в отношении закрытия ран у крыс с индуцированным STZ диабетом
Целью данного примера является сравнение эффективности композиции, соответствующей настоящему изобретению, и композиции из коммерчески доступных продуктов в отношении закрытия ран. Эксперименты по закрытию ран на животных проводят в соответствии с примером 5. В день 0, 4, 6, 8, 10 и 12 после лечения плацебо (Группа 1), мазью 1% S1 (Группа 2), CGS-21680 (Группа 3), Regranex (Группа 4), DCB-WH1-C (Группа 5) и DCB-WH1-W (Группа 6) измеряют площади ран во всех экспериментальных группах и рассчитывают проценты закрытия ран и значения CT50 (время, необходимое для 50% закрытия раны). Результаты представлены на фигуре 3 и в таблице 1. Р-значения парного сравнения процентов закрытия ран в экспериментальных группах показаны в таблице 2.
| Таблица 1 | |||||||
| Проценты закрытия ран и СТ50 экспериментальных групп, леченных плацебо, 1% мазью S1, CGS-21680, Regranex, DCB-WH1-C и DCB-WH1-W | |||||||
| Группы | Тест-материалы | Процент закрытия раны (%) | CT50 (день) | ||||
| День 4 | День 6 | День 8 | День 10 | День 12 | |||
| 1 | Плацебо | -99,6±13,3 | -107,6±10,5 | -45,14±13 | 19,9±5,3 | 61,5±3,1 | 11,4 |
| 2 | 1% S1 | -62,7±6,0 | -51,4±6,0 | -18,2±9,7 | 45,2±5,9 | 77,7±2,3 | 10,3 |
| 3 | CGS-2168 | -21,3±4,8 | -27,38±3,2 | -2,4±4,1 | 46,7±6,0 | 71,7±2,4 | 10,3 |
| 4 | Regranex | -21,0±10,4 | 2,7±8,1 | 1,46±6,7 | 59,9±2,6 | 78,0±4,8 | 9,7 |
| 5 | DCB-WH1-C | -19,2±7,0 | -13,6±6,7 | 18,3±6,6 | 59,9±2,9 | 84,8±3,0 | 9,5 |
| 6 | DCB-WH1-W | 4,1±2,9 | 22,3±2,7 | 56,0±2,5 | 84,5±1,8 | 93,9±0,7 | 7,65 |
| Таблица 2 | ||||
| Р-значения парного сравнения процентов закрытия раны в экспериментальных группах | ||||
| День | Группа относительно Группы | Р-значения | ||
| 4 | 2 | 3 | 0,000289 | *** |
| 4 | 2 | 4 | 0,0054565 | ** |
| 4 | 2 | 5 | 0,0004544 | *** |
| 4 | 2 | 6 | 0,000001203 | *** |
| 4 | 3 | 4 | 0,9788 | |
| 4 | 3 | 5 | 0,5697 | |
| 4 | 3 | 6 | 0,00075098 | *** |
| 4 | 4 | 5 | 0,7119 | |
| 4 | 4 | 6 | 0,0276 | * |
| 4 | 5 | 6 | 0,0157 | * |
| 6 | 2 | 3 | 0,0055961 | ** |
| 6 | 2 | 4 | 0,00039598 | *** |
| 6 | 2 | 5 | 0,001875 | ** |
| 6 | 2 | 6 | 0,0000005765 | *** |
| 6 | 3 | 4 | 0,0049146 | ** |
| 6 | 3 | 5 | 0,0947 | |
| 6 | 3 | 6 | 0,000000339 | *** |
| 6 | 4 | 5 | 0,1504 | |
| 6 | 4 | 6 | 0,0356 | * |
| 6 | 5 | 6 | 0,0005663 | *** |
| 8 | 2 | 3 | 0,1659 | |
| 8 | 2 | 4 | 0,1454 | |
| 8 | 2 | 5 | 0,0113 | * |
| 8 | 2 | 6 | 0,000023634 | *** |
| 8 | 3 | 4 | 0,62 | |
| 8 | 3 | 5 | 0,0238 | * |
| 8 | 3 | 6 | 0,0000002486 | *** |
| 8 | 4 | 5 | 0,1087 | |
| 8 | 4 | 6 | 0,000016991 | *** |
| 8 | 5 | 6 | 0,00031843 | *** |
| 10 | 2 | 3 | 0,8675 | |
| 10 | 2 | 4 | 0,0954 | |
| 10 | 2 | 5 | 0,0509 | |
| 10 | 2 | 6 | 0,000084357 | *** |
| 10 | 3 | 4 | 0,1274 | |
| 10 | 3 | 5 | 0,0740 | |
| 10 | 3 | 6 | 0,00011665 | *** |
| 10 | 4 | 5 | 0,9934 | |
| 10 | 4 | 6 | 0,000055221 | *** |
| 10 | 5 | 6 | 0,000026694 | *** |
В день 4 проценты закрытия ран в Группах 3, 4, 5 или 6 существенно выше, чем в Группах 1 и 2 (Р<0,01), и процент закрытия ран в Группе 6 даже существенно выше, чем в Группах 3, 4 и 5 (Р<0,05). В день 6 проценты закрытия ран в Группах 3, 4, 5 или 6 существенно выше, чем в Группах 1 и 2 (Р<0,01 и Р<0,001, соответственно), и процент закрытия ран в Группе 6 даже существенно выше, чем в Группах 3, 4 или 5 (Р<0,05 или Р<0,001). В день 8 проценты закрытия ран в Группах 5 и 6 существенно выше, чем в Группах 2 (Р<0,05), и процент закрытия ран в Группе 6 даже существенно выше, чем в Группах 3, 4 и 5 (Р<0,001). В день 10 процент закрытия ран в Группе 6 существенно выше, чем в других группах (Р<0,001). CT50 для Групп 1-6 составляют 11,4, 10,3, 10,36, 9,4, 9,5 и 7,65 дней, соответственно.
Подводя итог, мазь DCB-WH1-W, соответствующая настоящему изобретению, имеет эффективность, превышающую другие тест-материалы, т.е. мазевую основу, мазь 1% S1, CGS-21680, Regranex и DCB-WH1-C.
Пример 7. Сравнение эффективностей 1% S1, 0,25% PA-W4, DCB-WH1-W и 1% PA-W4 в отношении закрытия ран у крыс с диабетом, индуцированным STZ
Целью данного примера является сравнение эффективности DCB-WH1-W с эффективностью ее активных ингредиентов в отношении закрытия ран. Тест-материалы представляют собой плацебо (Группа 1), мазь 1% S1 (Группа 2), мазь 0,25% PA-W4 (Группа 3), DCB-WH1-W (Группа 4) мазь 1% PA-W4 (Группа 5). Эксперименты по закрытию ран на животных проводят в соответствии с примером 5. В день 0, 4, 6, 9, 11 и 13 после лечения тест-материалами измеряют площади ран во всех экспериментальных группах и рассчитывают проценты закрытия ран и значения СТ50. Результаты представляют на фигуре 4 и в таблице 3. Р-значения парного сравнения процентов закрытия ран в экспериментальных группах показаны в таблице 4.
| Таблица 3 | ||||||
| Проценты закрытия ран и CT50 экспериментальных групп, леченных плацебо, 1% мазью S1, 0,25% мазью PA-W4, DCB-WH1-W и 1% мазью PA-W4 | ||||||
| Группы | Тест-материалы | Процент закрытия раны (%) | CT50 (день) | |||
| День 4 | День 9 | День 11 | День 13 | |||
| 1 | Плацебо | -65,07±9,5 | -19,6±13,4 | 35,7±11,1 | 79,8±4,9 | 11,7 |
| 2 | 1% S1 | -62,55±8,9 | 16,8±7,5 | 59,1±5,1 | 93,2±1,7 | 10,6 |
| 3 | 0,25% PA-W4 | -46,1±13,8 | 29,9±9,8 | 77,9±2,3 | 95,2±1,0 | 9,9 |
| 4 | DCB-WH1-W | -3,51±1,7 | 59,7±6,6 | 87,9±3,1 | 97,42±1,0 | 8,25 |
| 5 | 1% PA-W4 | -16,5±10,9 | 62,2±7,4 | 88,45±3,3 | 98,59±0,8 | 8,25 |
| Таблица 4 | ||||
| Р-значения парного сравнения процентов закрытия раны в экспериментальных группах | ||||
| День | Группа относительно Группы | Р-значения | ||
| 4 | 1 | 2 | 0,8505 | |
| 4 | 1 | 3 | 0,2822 | |
| 4 | 1 | 4 | 0,0001 | *** |
| 4 | 1 | 5 | 0,0047 | ** |
| 4 | 2 | 4 | 0,3391 | |
| 4 | 2 | 5 | 0,0001 | *** |
| 4 | 2 | 6 | 0,0052 | ** |
| 4 | 3 | 5 | 0,0094 | ** |
| 4 | 3 | 6 | 0,1015 | |
| 4 | 4 | 6 | 0,1874 | |
| 9 | 1 | 3 | 0,0714 | |
| 9 | 1 | 4 | 0,0239 | * |
| 9 | 1 | 5 | 0,0004 | *** |
| 9 | 1 | 6 | 0,000965 | *** |
| 9 | 2 | 4 | 0,3126 | |
| 9 | 2 | 5 | 0,0010 | ** |
| 9 | 2 | 6 | 0,00159 | ** |
| 9 | 3 | 5 | 0,0173 | * |
| 9 | 3 | 6 | 0,0274 | * |
| 9 | 4 | 6 | 0,8053 | |
| 11 | 1 | 3 | 0,0847 | |
| 11 | 1 | 4 | 0,0041 | ** |
| 11 | 1 | 5 | 0,0008 | *** |
| 11 | 1 | 6 | 0,00244 | ** |
| 11 | 2 | 4 | 0,0075 | ** |
| 11 | 2 | 5 | 0,0003 | *** |
| 11 | 2 | 6 | 0,0012 | ** |
| 11 | 3 | 5 | 0,0073 | ** |
| 11 | 3 | 6 | 0,02011 | * |
| 11 | 4 | 6 | 0,5970 | |
| 13 | 1 | 3 | 0,0271 | * |
| 13 | 1 | 4 | 0,0117 | * |
| 13 | 1 | 5 | 0,0092 | ** |
| 13 | 1 | 6 | 0,00727 | ** |
| 13 | 2 | 4 | 0,3247 | |
| 13 | 2 | 5 | 0,0444 | * |
| 13 | 2 | 6 | 0,0199 | * |
| 13 | 3 | 5 | 0,0800 | |
| 13 | 3 | 6 | 0,02141 | * |
| 13 | 4 | 6 | 0,56224 | |
В день 4 проценты закрытия ран в Группах 4 или 5 существенно выше, чем в Группах 1 и 2 (Р<0,01). В день 9 проценты закрытия ран в Группах 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 1 (Р<0,001), Группе 2 (Р<0,01) и Группе 3 (Р<0,05), и процент закрытия ран в Группе 3 также существенно выше, чем в Группе 1 (Р<0,05). В день 11 проценты закрытия ран в Группах 3, 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 2 (Р<0,01), и проценты закрытия ран в Группах 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 3 (Р<0,05). В день 13 процент закрытия ран в Группах 4 и 5 существенно выше, чем в Группе 1 (Р<0,01) и Группе 2 (Р<0,05), и процент закрытия ран в Группе 5 существенно выше, чем в Группе 3 (Р<0,05). Отсутствует существенная разница между группами 4 и 5 в дни 4, 9, 11 и 13. СТ50 для Групп 1-5 составляют 11,7, 10,6, 9,9, 8,25 и 8,25 дней, соответственно.
Подводя итоги, эффективность мази, включающей 1% PA-W4 (мазь 1% PA-W4), в отношении закрытия ран эквивалентна эффективности мази DCB-WH1-W (1% S1+0,25% PA-W4). Мази 1% PA-F4 и DCB-WH1-W, соответствующие настоящему изобретению, обладают более высокой эффективностью относительно мазевой основы, мази 1% S1 и мази 0,25% PA-W4.
Claims (14)
1. Способ получения экстрактов Plectranthus amboinicus, включающий контактирование сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем с получением неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus, который затем концентрируют с получением концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus, который обрабатывают методом разделения перемешиванием, включающим разведение концентрированного неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus высокополярным растворителем, объединение разведенного неочищенного экстракта с абсорбирующей смолой и перемешивание абсорбирующей смолы и разведенного неочищенного экстракта, после чего жидкую часть отбрасывают и экстрагируют смолу растворителем с декантированием экстракта, затем проводят повторные стадии экстрагирования с уменьшением полярности растворителя.
2. Способ по п.1, в котором для экстракции абсорбирующей смолы используют следующие растворители, перечисленные по мере убывания полярности: растворитель высокой полярности, растворитель повышенной полярности, растворитель средней полярности и растворитель низкой полярности.
3. Экстракт Plectranthus amboinicus, обладающий активностью против кожных нарушений, полученный способом по п.1.
4. Экстракт по п.3, который характеризуется следующими пиками в условиях высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (по времени удерживания в мин): 5,5, 9,6, 20,0, 22,5, 23,5, 24,8, 27,7, 27,8, 28,6, 28,9, 29,7, 31,0, 31,9, 36,6, 37,8; при этом указанную ВЭЖХ проводят посредством хроматографической колонки Phenomenex, 4,6×250 мм, Luna 5 мкм с диоксидом кремния (2) при скорости потока 1,0 мл/мин, предельном давлении 250 кг-сил/см2 и количестве образца 10 мкл, образцы отбирают с периодичностью 0,64 с, поглощения детектируют в интервале длин волн 190-370 нм в каналах 270 и 320 нм, а элюцию проводят н-гексаном в этилацетате от 95 до 85 об.% 15 мин, от 85 до 30 об.% 30 мин, от 30 до 95 об.% 5 мин.
5. Неочищенный экстракт Plectranthus amboinicus, обладающий активностью против кожных нарушений, полученный при контактировании сухих листьев Plectranthus amboinicus с экстрагирующим листья растворителем либо при концентрировании неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus.
6. Фармацевтическая композиция, обладающая акивностью против кожных нарушений, включающая терапевтически активное количество экстракта Plectranthus amboinicus по п.3 и выборочно фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
7. Композиция по п.6, которая дополнительно включает терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urban.
8. Композиция по п.7, в которой соотношение масс экстракта Plectranthus amboinicus и экстракта Centella asiatica Urban составляет от 1:60 до 1:4.
9. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью против кожных нарушений, включающая терапевтически эффективное количество неочищенного экстракта Plectranthus amboinicus по п.5 и выборочно фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
10. Композиция по п.9, которая дополнительно включает терапевтически эффективное количество экстракта Centella asiatica Urban.
11. Перевязочный материал для ран, включающий фармацевтическую композицию по любому из пп.6-10.
12. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.6-10 при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения.
13. Применение по п.12, в котором кожное нарушение представляет собой общую травму или пролежни.
14. Применение по п.12, в котором кожное нарушение представляет собой раны у больного диабетом.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US11/847,220 | 2007-08-29 | ||
| US11/847,220 US8449924B2 (en) | 2007-08-29 | 2007-08-29 | Process for the preparation of plant extracts for treating skin disorders and enhancing healing of wounds |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008135020A RU2008135020A (ru) | 2010-03-10 |
| RU2440819C2 true RU2440819C2 (ru) | 2012-01-27 |
Family
ID=40070574
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008135020/13A RU2440819C2 (ru) | 2007-08-29 | 2008-08-29 | Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8449924B2 (ru) |
| EP (1) | EP2030626B1 (ru) |
| JP (1) | JP5086111B2 (ru) |
| KR (1) | KR100983754B1 (ru) |
| CN (1) | CN101375933B (ru) |
| MY (1) | MY160153A (ru) |
| RU (1) | RU2440819C2 (ru) |
| TW (1) | TWI335225B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2750286C2 (ru) * | 2016-07-17 | 2021-06-25 | Ваннесс Биотек Ко., Лтд | Состав для местного применения, стимулирующий заживление ран |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8443580B2 (en) | 2009-07-31 | 2013-05-21 | Agco Corporation | Baler pickup for collecting biomass from a combine harvester |
| AU2011237703A1 (en) | 2010-04-06 | 2012-10-11 | Heliae Development, Llc | Selective extraction of proteins from freshwater or saltwater algae |
| WO2011127127A2 (en) | 2010-04-06 | 2011-10-13 | Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University | Extraction with fractionation of oil and co-products from oleaginous material |
| US8115022B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-02-14 | Heliae Development, Llc | Methods of producing biofuels, chlorophylls and carotenoids |
| US8475660B2 (en) | 2010-04-06 | 2013-07-02 | Heliae Development, Llc | Extraction of polar lipids by a two solvent method |
| US8313648B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-11-20 | Heliae Development, Llc | Methods of and systems for producing biofuels from algal oil |
| US8211309B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-07-03 | Heliae Development, Llc | Extraction of proteins by a two solvent method |
| US8211308B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-07-03 | Heliae Development, Llc | Extraction of polar lipids by a two solvent method |
| US8308951B1 (en) | 2010-04-06 | 2012-11-13 | Heliae Development, Llc | Extraction of proteins by a two solvent method |
| US8273248B1 (en) | 2010-04-06 | 2012-09-25 | Heliae Development, Llc | Extraction of neutral lipids by a two solvent method |
| US8202425B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-06-19 | Heliae Development, Llc | Extraction of neutral lipids by a two solvent method |
| CN103079573B (zh) | 2010-06-10 | 2016-06-15 | 梧桐生物技术私人有限公司 | 用于由积雪草制备高纯度积雪草苷组合物的方法及其应用方法 |
| FR2964570A1 (fr) * | 2010-09-09 | 2012-03-16 | Burgundy | Procede de preparation d'un extrait de centella asiatica |
| US8365462B2 (en) | 2011-05-31 | 2013-02-05 | Heliae Development, Llc | V-Trough photobioreactor systems |
| USD661164S1 (en) | 2011-06-10 | 2012-06-05 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
| USD679965S1 (en) | 2011-06-10 | 2013-04-16 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
| USD682637S1 (en) | 2011-06-10 | 2013-05-21 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
| WO2013075116A2 (en) | 2011-11-17 | 2013-05-23 | Heliae Development, Llc | Omega 7 rich compositions and methods of isolating omega 7 fatty acids |
| TWI501772B (zh) * | 2011-11-22 | 2015-10-01 | Oneness Biotech Co | 具抗關節炎活性的到手香精萃物 |
| TWI663982B (zh) * | 2013-09-03 | 2019-07-01 | 合一生技股份有限公司 | 到手香萃取物用於製備具抗微生物功效組合物之用途 |
| US10376488B2 (en) * | 2014-09-05 | 2019-08-13 | ONENESS BIOTECH CO., Ltd | Use of flavonoids in manufacturing compositions for wound healing |
| KR20200047220A (ko) | 2018-10-27 | 2020-05-07 | 장정훈 | 창상, 당뇨병성 족부/손 궤양 또는 버거씨병 치료용 약학 조성물 |
| KR102072948B1 (ko) | 2019-08-06 | 2020-02-04 | 주식회사 씨엔엘바이오텍 | 염증치료용 약학적 발효 조성물 |
| WO2023274123A1 (en) * | 2021-06-28 | 2023-01-05 | Oneness Biotech Co., Ltd. | Methods for preparation of plectranthus amboinicus extracts |
| WO2023227087A1 (en) * | 2022-05-27 | 2023-11-30 | Oneness Biotech Co., Ltd. | Plectranthus amboinicus extract for use in inhibiting immune responses |
| KR20240100576A (ko) | 2022-12-22 | 2024-07-02 | 코스맥스 주식회사 | 수국 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 보습 증진 또는 피부 상처 개선용 화장료 조성물 |
| WO2024159451A1 (en) * | 2023-02-01 | 2024-08-08 | Oneness Biotech Co., Ltd. | Plectranthus amboinicus extract for use in scar cosmesis |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2459661A1 (fr) * | 1979-06-25 | 1981-01-16 | Phybiocit Laboratoires | Nouvelle composition medicamenteuse a base de plantes, et procede de preparation |
| JPS6281325A (ja) * | 1985-10-07 | 1987-04-14 | Maruzen Kasei Kk | エスシンの精製法 |
| JPH0314572A (ja) * | 1989-06-12 | 1991-01-23 | Norin Suisansyo Yasai Chiyagiyou Shikenjo | 植物体のカテキン類の製造方法 |
| CN1049122C (zh) | 1993-01-11 | 2000-02-09 | 李厚清 | 复方外伤软膏 |
| CN1067976C (zh) * | 1994-12-03 | 2001-07-04 | 东国制药株式会社 | 积雪草酸衍生物及其制备方法和包含该衍生物的皮科制剂 |
| JPH0978062A (ja) * | 1995-09-18 | 1997-03-25 | Lion Corp | 抗酸化剤 |
| US6267996B1 (en) * | 1996-10-17 | 2001-07-31 | Indena S.P.A | Pharmaceutical and cosmetic formulations with antimicrobial activity |
| KR100228873B1 (ko) * | 1997-03-24 | 1999-11-01 | 강재헌 | 센텔라아시아티카에서 분리한 아시아티코사이드와 마테카소 사이드의 수용성 추출물을 함유한 간세포 및 항간섬유화 치료제 |
| CN1194154A (zh) | 1997-03-24 | 1998-09-30 | 东国制药株式会社 | 自积雪草的积雪草苷和羟基的积雪草苷和羧基积雪草苷的水溶性提取物及其分离方法 |
| CN1137681C (zh) | 2000-11-21 | 2004-02-11 | 国家医药管理局上海医药工业研究院 | 积雪甙防粘膜及制备方法 |
| CN1127970C (zh) | 2001-03-14 | 2003-11-19 | 周华国 | 一种治疗烧伤的药膏及其制备方法 |
| JP2003055248A (ja) * | 2001-06-04 | 2003-02-26 | Marukin Chuyu Co Ltd | アンジオテンシン変換酵素阻害剤 |
| JP2004059482A (ja) * | 2002-07-29 | 2004-02-26 | Masahiro Sakanaka | 組織再生促進剤 |
| US20060099283A1 (en) * | 2004-11-10 | 2006-05-11 | We Gene Technologies, Inc. | Leaf juice of plectranthus amboinicus for treating cancer and/or tumor |
| TWI361074B (en) * | 2005-12-22 | 2012-04-01 | Dev Center Biotechnology | Plant extracts for enhancing healing of wounds,and the preparation process and use thereof |
| EP1925310B1 (en) * | 2006-11-24 | 2015-03-25 | Development Center For Biotechnology | Plant extracts from Plectranthus and Centella for treating skin disorders and accelerating wound healing in diabetic patients |
-
2007
- 2007-08-29 US US11/847,220 patent/US8449924B2/en active Active
- 2007-10-18 EP EP07118802.3A patent/EP2030626B1/en active Active
- 2007-11-15 MY MYPI20072012A patent/MY160153A/en unknown
- 2007-11-30 CN CN2007101882803A patent/CN101375933B/zh active Active
- 2007-11-30 KR KR1020070123636A patent/KR100983754B1/ko active IP Right Grant
- 2007-12-03 TW TW096145943A patent/TWI335225B/zh active
-
2008
- 2008-01-22 JP JP2008011804A patent/JP5086111B2/ja active Active
- 2008-08-29 RU RU2008135020/13A patent/RU2440819C2/ru not_active Application Discontinuation
-
2013
- 2013-04-29 US US13/872,723 patent/US9872879B2/en active Active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2750286C2 (ru) * | 2016-07-17 | 2021-06-25 | Ваннесс Биотек Ко., Лтд | Состав для местного применения, стимулирующий заживление ран |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2009057361A (ja) | 2009-03-19 |
| EP2030626B1 (en) | 2016-04-20 |
| US20090060985A1 (en) | 2009-03-05 |
| US8449924B2 (en) | 2013-05-28 |
| KR20090022998A (ko) | 2009-03-04 |
| TWI335225B (en) | 2011-01-01 |
| US9872879B2 (en) | 2018-01-23 |
| EP2030626A1 (en) | 2009-03-04 |
| CN101375933B (zh) | 2011-10-12 |
| MY160153A (en) | 2017-02-28 |
| KR100983754B1 (ko) | 2010-09-24 |
| US20130309337A1 (en) | 2013-11-21 |
| TW200908990A (en) | 2009-03-01 |
| CN101375933A (zh) | 2009-03-04 |
| RU2008135020A (ru) | 2010-03-10 |
| JP5086111B2 (ja) | 2012-11-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2440819C2 (ru) | Способ получения экстрактов plectranthus amboinicus, экстракт, полученный этим способом, и фармацевтическая композиция на его основе, неочищенный экстракт plectranthus amboinicus и фармацевтическая композиция на его основе, перевязочный материал на основе упомянутых композиций и упомянутые композиции в качестве средства при изготовлении лекарственного средства для лечения кожного нарушения | |
| TWI501772B (zh) | 具抗關節炎活性的到手香精萃物 | |
| KR101863739B1 (ko) | 치매를 예방하고/하거나 치료하기 위한 약물의 제조에서의 진세노사이드-rg3의 용도 및 약물 | |
| US8247004B2 (en) | Plant extracts for treating skin disorders and enhancing healing of wounds for diabetic patients | |
| JPS6277390A (ja) | プロアントシアニジンａ２の製法、医薬組成物およびそれらの治療用途 | |
| KR101802355B1 (ko) | 감귤류 과피 추출물을 포함하는 피부 조직 재생용 조성물 | |
| EP1925310B1 (en) | Plant extracts from Plectranthus and Centella for treating skin disorders and accelerating wound healing in diabetic patients | |
| KR100530843B1 (ko) | 동충하초 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물 | |
| DK2845624T3 (en) | Devil's mucoadhesive extracts (harpagophytum procumbens) and their applications | |
| JP3977889B2 (ja) | 蕎麦殻抽出物を有効成分とする薬剤 | |
| JP2544239B2 (ja) | 血管拡張剤 | |
| CN113181240B (zh) | 构树根皮在制备治疗特应性皮炎的药物上的应用 | |
| EP2207559A2 (en) | Wound-healing agent containing momordicae semen extract | |
| JP2005320312A (ja) | 霍山デンドロビーコーリイス抽出物及びその調製方法 | |
| JP6469518B2 (ja) | 血管新生促進剤 | |
| CN108853373A (zh) | 一种治疗皮肤湿疹的膏剂及其制备方法 | |
| KR20030035851A (ko) | 식물 추출물을 포함하는 항균제 조성물 | |
| Pawar et al. | THE COMPARISON OF IN-VITRO ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY OF ABELMOSCHUS ESCULENTUS & CAMELLIA SINENSIS | |
| TW202317167A (zh) | 製備到手香萃取物的方法 | |
| CN118304335A (zh) | 马齿苋提取物的提取方法、提取物卡波姆凝胶制法及应用 | |
| WO2013046813A1 (ja) | 生体防御機能因子の発現亢進剤 | |
| WO2003035093A1 (en) | Antibacterial composition comprising plant extract |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20100318 |
|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20110401 |