JPS6277390A - プロアントシアニジンａ２の製法、医薬組成物およびそれらの治療用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はブロアントシアニジンＡ２、すなわち式＋１１
で表わされる８、１４−メタノ−２Ｈ，１４Ｈ−１−ベ
ンゾピラノ［７，８−ｄ〕−（：１．１ベンゾジオキソ
クン−３，５，１１，１３，１５−ペント−ルー２．８
−ビス（３，４−ジヒドロキシフェニル）３．４−ジヒ
ドロ（２Ｒ−（２α、５α、８β、１４β。

１５Ｒ））の製法、薬理作用および治療上の用途に関す
る。

従来技術 この化合物は一般に二水和物として単離され、その構造
は核磁気共鳴（Ｃｈｅｍ、Ｃｏｍｍｕｎ、　５１　Ｆ３
　。

１９７５を参照）および円二色性（Ｐｅｒ）ｃｉｎ　ｌ
　。

２５７５　、１９７９を参照）に基づいて定められた。

初めに、それはマｏ　＝　ｘ　（Ａｅｓｃｕｌｕｓ　ｈ
ｉｐｐｏｃａｓｔａ−ｎｕｍ）＋７）種子の皮から発見
された（　ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ、　、　４
２９　、１９６６　）が今や本発明者うｉＣヨリ同じ木
の枝および皮層から単離された。マロニエの実の皮層や
皮は、ブロアントシアニジンＡ２のほかに、（−二ピカ
テキン、エスクロシト、フラキシンおよびタンニンやフ
ロバフエンのような高分子物質を営んでいる。ブロアン
トシアニジンＡ２を単離する方法は、目的とする成分よ
りも一般に−ｉｉ？：′ＩＡに含まれ且つブロアントシ
アニジンＡ２ときわめて類似した極性を有するこれらの
化合物の存在を考慮しなければならない。

発明の横取 本発明は、１つの面によれば、プロアント７アニジンＡ
２ｂ″−価値ある栄学的性質、特に齢す貝形成剤、細胞
保護剤、抗潰瘍剤、静脈増強剤、血管保画剤および抗脂
質過酸化剤としての性質を有するという発見に関する。

従って、本発明の１つの面はブロアントシアニジンＡ２
の医薬としての使用に関する。この棟の使用は、例えば
有効量のプロアンドンアニジンＡ２？：患者に投与する
ことから成る、瘢痕形成作用および／または細胞保欣作
用および／または血管保岐作用および／または抗αを瘍
作用および／または静脈増強作用および７才たは抗脂質
過酸化作用を誘起する方法において具体化される。また
、この釉の使用は、医薬組成物の製造へのブロアントシ
アニジンＡ２の産業的応用において具体化さｆする。

こうして、本発明の別の面によれは、ブロアントシアニ
ジンＡ２を治療上の投与に適した剤形とする（例えば、
ブロアントシアニジンＡ２をｇ学的に受容される希釈剤
または担体と混合する）ことから成Ｚ、医薬組成物の製
法が提供される。本発明はまたブロアントシアニジンＡ
２および薬学的に受容される希釈剤または担体な含有す
る医薬組成物を提供する。

本発明による医薬組成物は意図する投与方法に適した常
用剤形のいずれであってもよく、例えばカプセル剤、錠
剤、乳剤、糖衣錠、経口投与用溶液剤または懸濁剤、注
射剤、座剤、膣用ペッサリー、軟膏剤、乳剤、粉末剤ｔ
、ｃとであり得る。

本組成物はビル粉、タルク、乳糖、シリカ、ステアリン
酸アマグネシウム、酸化亜鉛、ラノリン、風味料１着色
料および香料のような慣用賦形剤を含んでいてもよい。

後述する薬理試験に示されるように、ブロアントシアニ
ジンＡ２は当分時で使用される既知薬物よりも優ハた治
療過程に対する促進作用を有し、また例えば悪化した毛
細血管透過性や毛細血管ぜい弱性の症状を正常化しうる
静脈増強作用を有することが見出された。ブロアントシ
アニジンＡ２はとりわけ冑潰瘍や十二指腸潰瘍の治療に
有用な抗潰瘍剤として、あるいは非ステロイド系消炎剤
り″一原因で起こる障害を予防するのに有用な細胞保護
剤として有効である。それらはまた価値ある抗脂質過酸
化作用を有する。

本発明はさらに、マロニエから得られる植物組織を低級
（すなわちＣ１−４）アルカメール（好ましくシまメタ
ノール）またはケトン〔好ましくは低級脂肪族（０５−
５）ケトン、例えばアセトン〕からなる溶剤（場合によ
り水を含んでいてもよい）で抽出し、得られる抽出物か
らブロアントシアニジンＡ２を単離することから成るブ
ロアントシアニジンＡ２の製法を提供する。、得られた
抽出物は場合により次の諸工程にかけられろ： ＋ａｌ　　濃縮： （ｂ）水不混和性有機浴剤（フロアント７アニジンＡ２
を本貿的に溶解しない）を使用てろことによる無極性物
質の抽出； （ｃ）　　水不混和性溶剤（プロアントノアニシンＡ２
を浴Ｈする）を使用することによるブロアントシアニジ
ンＡ２の抽出。

工、Ｗ＋Ｃ＋からの生成物はカラムクロマトグラフィー
および／または結晶化、好ましくは両方、好ましくはク
ロマトグラフィ一工程のあとに結晶化工程、を行うこと
により精製される。

有利には、植物組織は枝および／または皮層からの材料
であるｂ″−１実の皮ｊ―および皮も使用できる。

抽出物は濃縮して溶剤を除去する。純粋な有機溶剤で抽
出する場合、濃縮残留物はＭ製工程において液体／液体
向流抽出法により水不混和性有機溶剤での抽出が可能と
なるような開会の水で希釈する。両方の場合において、
＆７製工程前に、濃縮物を濾過し℃存在しうる固体成分
を除く。

この方法で得られる溶液にＮａＧｔ、　ＮＨ，Ｃｒｔお
よび（ＮＨ９）２Ｓｏ、のような塩を添加する。いろい
ろなれ類の１便分子タンニン系物質を除（ために遇心分
離にかけ、その後得られた溶液は水不混和性溶剤（例え
はハロゲン化炭化水素やその他の有機溶剤）を用いて向
流法により抽出して、脂肪質および樹脂質物質ならびに
その他の望ましくない親油性？Ｉ質な除く。次いで、得
られた溶液を酢酸エチルまたは水不混和性アルカノール
のような溶剤で抽出して、高い選択率でブロアントシア
ニジンＡ２を抽出する。

その後、水相を除き（ポリフェノール類り″−除かれる
）、合わせた有機抽出物を５０℃より低い温度で真空濃
縮し℃シロップ様稠度とする。この残留物を水または水
−アセトンまたは水−アルコール溶液から直接結晶化さ
せるとブロアントシアニジンＡ２が得られる。別法とし
て、この残留物をアセトンで希釈し、オリゴマーおよび
ポリマー物質を除くためにシリカゲルのカラムにかけ、
その後溶剤の濃縮および結晶化を行うことにより高純度
の１０アントンアニジンＡ２を得ることができる。

本発明方法に従って得られる生成物は、その融点および
比旋光度〔α〕ＤならびＩｃＭｓ、ＮＭＲ，ＵＶおよび
ＩＲのような分光学的テークにより同定しうる。

多数の薬理試験におい℃示すようＶＣ、ブロアントシア
ニジンＡ２はこの治療分野で使用される既知薬物よりも
優れた治療過程に対する促進作用、および悪化した毛細
血管透過性および毛細血管せい弱性の症状を正常化する
静脈増強作用を有−ｆることｂ１明らかになった。さら
に、ブロアントシアニジンＡ２は強力な抗脂質過酸化作
用を有−することが見出された。

薬理試験 次の試験はブロアントシアニジンＡ２の選択すれた薬理
特性を示すものである。

１、急性粗性 プロアント７アニジンＡ２の急性毒性は、マウスとラッ
トに経口および腹腔内投与することにより６（１］定し
た。その結果を表１ＶＣ示す。

表　１ マウス　　　　軸　口　　　　＞６（１０）０組肚内　
　　　＞６（１０）０ ラット　　　　経　口　　　　〉６０ロ０汀褪井゛と内
　　　　　　＞５（１０ ）０プロアント／アニジンＡ２は経口投与およびＩＪ５
）腔内投与後に＋ｉあな急性毒性を示さないことｂ？−
わかる。本化合物はまた局所に投与する場合ごく弱い急
性前件を示すにてぎない。

ブロアントシアニジンＡ２の治療作用は、文献Ｃモー　
）　ｙ　（Ｍｏｒｔｏｎ　Ｊ、Ｊ、Ｐ、）　ｌ−１のＡ
ｒｃｈ、Ｉｎｔ。

Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎ、　、　１９６　、１１７　、
１９７．２を参照〕に広く記載される方法に従って、正
當動物とステロイド処１４により治療過程が其えた動物
との両者にｋＪ所的にまた）！経口的ＶＣ投与すること
により証明される。

表２および表３はラットを用いて行った実験の結果を示
す。この結果から、負偽面の減少に対す２）本化＠物の
効果的な作用が明らかで夛する。センテラ・了ジアチカ
（Ｃｅｎｔｅｌｌａ　ａｓｉａ↑；１ｃａ）から得もれ
るトリテルペン分画（ＣＡＴＳ）は、ヨーロッパのｌ］
々で広く使用さｒる公知の屹・殻形成剤または治應剤で
あり、この試験の比較梨物１として選ばれた。

治癒過程に対する促進作用はさらに他の方法、例えば薬
物処置マウスの搬痕を破壊するのに要する力を対応する
対照の力と比較して測定することにより立証された。使
用した方法は／ツクスス（５ｉｘｔｈ　）ら（７）　Ａ
ｒｚｎｅｉｍ、　Ｆｏｒｓｃｈ、　１８　、１４６０　
。

１９６８に記載されるものであった。その結果を表４に
示す。

６、血管増強作用 治癒作用のほかに、プロアント７アニジンＡ２はまた毛
細血管透過性および毛細血管抵抗を修正することによる
血管増強作用を有している。毛細血管抵抗ｋｉチー？−
０７−（Ｃｈａｒｌｉｅｒ、Ｒ，）らのＡｒｃｈ、　Ｉ
ｎｔ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、Ｂｉｏｃｈ、　７１−１−１
９６５に記載の方法により評価した。ラットにおける悪
化した毛細血管ぜい弱性（ビタミン欠乏症による）の症
状に対してプロアント７アニジンＡ　２６；及ｆｆす保
岐作用に関するデータを表５に示す。

４、抗潰瘍作用 ブロアントシアニジンＡ２は、表６に示すデータから明
らかなように、潰瘍株数試験において活性であることが
証明された。この抗ｌ！！を瘍作用はその治癒作用およ
び微小循環保設作用の結果であると考えらねる。

５、抗脂質過酸化作用 ブロアントシアニジンＡ２はサエード（５ａｅｅｄＳ、
Ａ、　）らのＢｉｏｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、Ｔｒａｎｓ　
９．４４２−４４３．１９８１　　に記載の方法により
ラット脳ホモジネートに対する抗脂運過酸化作用を、ま
たヤー（、Ｊｈａ　Ｈ，Ｃ，）ら（７）　Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　３４　。

：１５６７−１５６９．１９８５に記載の方法によりラ
ット肝ミクロソームに対する上記作用を°ｉｎ　ｖｉｔ
ｒｏ″で検定した。ブロアントシアニジンＡ２は、表７
のデータかられかるように、ＭＤＡ（マロンジアルデヒ
ド）形成を強く阻害し、さらにＮＡＤＰＨ消費に対する
低い阻害作用と共に価値ある抗脂質過酸化作用を有する
ことｂ；明らかになった。この作用はラット脳“ｅｘ　
ｖｉｖｏ″試験において確かめられた。

臨床上の用途 前配檗坤字的性質に基づいて、ブロアントシアニジンＡ
２はｉｂな剤形で、例えはとこずれ、静脈瘤、静脈うつ
而の治療に、または外傷性熱傷や裂傷による広い皮膚面
にわたる傷の治艙に使用することができる。また、それ
は治忙の過程を促進するために胃潰亀や一二脂腸潰瘍の
治療に、あるいは非ステロイド系消炎剤により生じる障
害の予防に使用しうる。

カプセル剤１錠剤、軟膏、無水ゲル剤、粉末剤、薬びん
などの固体および液体製剤が本生成物の臨床試験のため
に製造された。これらの製剤の成人のだめの一日分の投
与量は、治療しようとする病理学的症状のタイプに応じ
て１（１０）〜２（１０）０ｍ９７日の範囲でありうる
。

次＋７）実施例はブロアントシアニジンＡ２の製法およ
び適当な製剤へのその処方例を示すものであるが、これ
らは本発明を伺ら限定するものではない。

実施例１−マロニエＬの皮層からのブロアントシアニジ
ン ％の８０　ｖ／ｖ　％水性メタノールで予め匿うせたも
の）をｉ　ｏｏｏｚのスタティック（５ｔａｔｉｃ　）
パーコレーターに装填した。この植物材料を４０［’１
ｔの８０ｖ／ｖ％水性メタノールで弱い還流下に４時間
抽出した。

別に４つの抽出を５５０ｔの８０％水性メタノールを用
いて実施し、これらの浸出液を合わせて５０℃より低い
温度で１５０ｔになるまで真空濃縮した。この濃縮物を
１２０ｔのメタノールで希釈し、遠心して不必要な物質
から成る沈釦物質（５に９）を除いた。

澄んだ液体は２（１０）ｔのクロロホルム（これにより
１．５縁の脂肪質物質が除去される）５次いで４５０ｔ
の酢酸エチルによる向流抽出法にかけた。

水相を除去し、−万有様相は１５縁の無水Ｎａ２ＳＯ４
で脱水後真空下で濃縮乾固した。この残留物（８ｋｇ）
に１６１のアセトンを加え、完全に溶解するまで弱い還
流下に加熱した。この溶液を１６ｔの水で希釈し、アセ
トンを兵空蒸貿により除去した。

−晩ｋ　Ｉｔｉ　後、１５に２の粗製ブロアントシアニ
ジンＡ２が結晶化し、６ｔの５０％水性アセトンから再
結晶した。

１．６縁のブロアントシアニジンＡ２ｂ−得うれ、こ４
を水から再結晶して真壁Ｔ’６０℃で４８時間乾燥する
と１次の特性を有する１、　１　ｋｇの純粋な生成物が
得ろねた。

融点〉３（１０）℃；〔α）Ｄ＋６３．２１（Ｃ＝アセ
トン中２％）；　ＭｅＯＨ中２７９　ｎｍでのＥ、％：
　１３８．５　；ｍ／ｅ５７６１ＣＭ＋； 元素分析（Ｃ３０Ｈ２４０１２”　２Ｈ２０とし′Ｃ）
：計算値　Ｃ，５８，７６％；Ｈ，４，５７％実測値　
Ｃ，５８，７１％；Ｈ，４，６３％実施例２−マロニエ
ｙＬの皮層からのブロアントマロニエの皮層１５０？を
実施例１Ｖｃ記載の方法によりスタティックパーコレー
ターで抽出した。

合わせた浸出液を５０℃より低い温度で５（１０）１に
なるまで真空洟縮した。濁った濃縮物に撹拌しながら”
３　Ｄ　ＫｇのＮａＣｚを加え、これを５５℃の温度に
維持した。たくさんの沈殿物が形成され、これをデカン
テーションおよび冷＃：庫内に一晩放置後遠心して除い
た。Ｑんだ溶液は１（１０）ｔのｎ　−ヘキサンで２回
抽出した。月ａ肪質物質を含むヘキサン相を除去し、一
方水相は５０ｔの酢酸エチルで６回抽出した。Ｎａ２５
Ｏ，で脱水後、有機抽出物を真空下で濃縮乾固した。２
．４ｋｆの残留物をＺ５ｔの沸騰水に溶解し、濾過して
不溶性残留物を除いた。このろ液を冷蔵庫内に一晩放置
して１．４陽の粗製ブロアントシアニジンＡ２を得た。

この物質を５０％酢酸水溶液から再結晶し、濾過後納晶
質固体を水で十分に洗って酢酸を完全に除去した。この
生成物を真空下６０℃で４８時間乾燥して、実施例１の
生成物と同じ特性を有する１、　２１Ｗの純粋生成物を
得た。

実施例５−クロマトグラフ法による・プロアント７実施
例２の方法で得ら１また５縁の酢酸エチル抽出物を／４
５乾固し、６ｔの無水アセトンに溶解して、ヘキサン／
アセトン８：２の混合溶剤で安定化しり６　Ｄ　ｋｙｇ
　１７）　７　＋Ｊ　：／７ゲｋ　（０，０２〜０．２
ｍ　）を含むクロマトグラフィーカラムに吸着された。

アセトン溶液を完全に吸着させた後、七〇カラムをアセ
トン／ヘキサン１：１の混合溶剤で溶離した。

クマリン、（＠エピカテキンおよびその他の不純物を含
むカラムのトップ画分を捨て、プロアント７アニジンＡ
２を含む両分を回収した。

合わせた画分を１％の活性炭で脱色し、濃縮乾固した。

残留物を１０倍容蓋のＨ２Ｏがら結晶化させ、乾燥しＣ
１，４５にの純粋なブロアントシアニジンＡ２を得た。

処方例 実施例４−ブロアントシアニジンＡ２カプセル剤の製法 ２（１０）ηのカプセルはそれぞれ次の成分を含む：ブ
ロアントシアニジンＡ２　１１（１０）Ｉｎ乳糖　　　
　　　９５９ シリカ粉末　　　　　　　　　　　３Ｉｎ９ステアリン
酸マグネシウム　　　　１〜タルク　　　　　　　　　
　　　　　１ｍｑ実旅例５−プロアントノアニシンＡ２
含有粉末剤の文法 １（１０）ｚの粉末剤はそれぞれ次の成分を含む：ブロ
アントシアニジンＡ２　　　 ２ｇラノリン　　　　　　　　　　　　８を酸化亜鉛　
　　　　　　　　　　１０１ラベンダーエツセンス　　
　　　　１１沈降シリカ　　　　　　　　　　　４Ｆ澱
粉　　　　　　１５ｇ

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. （１）ブロアントシアニジンＡ２および薬学的に受容さ
   れる賦形剤を含有する医薬組成物。
2. （２）瘢痕形成作用、細胞保護作用、抗潰瘍作用、静脈
   増強作用、血管保護作用または抗脂質過酸化作用を誘起
   するための治療用薬剤としてのブロアントシアニジンＡ
   ２の使用。
3. （３）有効量のブロアントシアニジンＡ２を投与するこ
   とから成る、瘢痕形成作用、細胞保護作用、抗潰瘍作用
   、静脈増強作用、血管保護作用または抗脂質過酸化作用
   を誘起する方法。
4. （４）ブロアントシアニジンＡ２を経口、非経口または
   局所投与に適した剤形とすることから成る医薬組成物の
   製法。
5. （５）ブロアントシアニジンＡ２を薬学的に受容される
   賦形剤と混合することから成る特許請求の範囲第４項記
   載の製法。
6. （６）マロニエ（Ａｅｓｃｕｌｕｓ　ｈｉｐｐｏｃａｓ
   ｔａｎｕｍ）から得られる植物組織を低級アルカノール
   またはケトンからなる溶剤で抽出し、得られる抽出物か
   らブロアントシアニジンＡ２を単離することから成るブ
   ロアントシアニジンＡ２の製法。
7. （７）溶剤はさらに水を含む特許請求の範囲第６項記載
   の製法。
8. （８）得られた抽出物は次の工程： （ａ）濃縮； （ｂ）ブロアントシアニジンＡ２を本質的に溶解しない
   水不混和性有機溶剤による無極性物質の抽出； （ｃ）ブロアントシアニジンＡ２を溶解する水不混和性
   溶剤によるブロアントシアニジンＡ２の抽出； を行う特許請求の範囲第６項または第７項記載の方法。
9. （９）工程（ｃ）からの生成物はクロマトグラフィーお
   よび／または結晶化により精製する特許請求の範囲第８
   項記載の方法。
10. （１０）工程（ｂ）で使用する溶剤はクロロホルムであ
    る特許請求の範囲第８項または第９項記載の方法。
11. （１１）工程（ｃ）で使用する溶剤は酢酸エチルである
    特許請求の範囲第８〜１０項のいずれか１項に記載の方
    法。