RU2420308C2 - Стабилизированные композиции ил-21 - Google Patents
Стабилизированные композиции ил-21 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2420308C2 RU2420308C2 RU2007144057/15A RU2007144057A RU2420308C2 RU 2420308 C2 RU2420308 C2 RU 2420308C2 RU 2007144057/15 A RU2007144057/15 A RU 2007144057/15A RU 2007144057 A RU2007144057 A RU 2007144057A RU 2420308 C2 RU2420308 C2 RU 2420308C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sequence
- sulfate
- seq
- amino acids
- composition
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 83
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 claims abstract description 130
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 108
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 30
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 20
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 5
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 claims description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 2
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 claims 2
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 claims 2
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 claims 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 30
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 30
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 29
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 26
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 24
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 20
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 20
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 19
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 19
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 19
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 19
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 13
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 12
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 9
- -1 for example Substances 0.000 description 9
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 9
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 8
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 8
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 7
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 7
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 7
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 7
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 6
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 5
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 3
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 201000011436 Ossifying Fibroma Diseases 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 206010016629 fibroma Diseases 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000001783 Adamantinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000005748 Aggressive Fibromatosis Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005262 Chondroma Diseases 0.000 description 1
- 208000005243 Chondrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 208000008334 Dermatofibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010057070 Dermatofibrosarcoma protuberans Diseases 0.000 description 1
- 206010059352 Desmoid tumour Diseases 0.000 description 1
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 208000034715 Enchondroma Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- 208000007569 Giant Cell Tumors Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 206010019695 Hepatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 101001010621 Homo sapiens Interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000004527 Interleukin-21 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017411 Interleukin-21 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010024612 Lipoma Diseases 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical class [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-O Methylammonium ion Chemical compound [NH3+]C BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000005890 Neuroma Diseases 0.000 description 1
- 208000001715 Osteoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010068771 Soft tissue neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046798 Uterine leiomyoma Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- INOFRQXSEWFFJO-UHFFFAOYSA-N azanium butylazanium sulfate Chemical class [NH4+].S(=O)(=O)([O-])[O-].C(CCC)[NH3+] INOFRQXSEWFFJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011132 calcium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 208000002458 carcinoid tumor Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 208000011654 childhood malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000005217 chondroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 238000011424 computer programming method Methods 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000013632 covalent dimer Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000001938 differential scanning calorimetry curve Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-O ethylaminium Chemical compound CC[NH3+] QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000003885 eye ointment Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 201000010260 leiomyoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000010033 lipoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 206010024627 liposarcoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000013178 mathematical model Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 208000011645 metastatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N naphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C21 KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 description 1
- 230000000683 nonmetastatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000003899 penis Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 1
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O triethylammonium ion Chemical compound CC[NH+](CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024719 uterine cervix neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000007954 uterine fibroid Diseases 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 210000003905 vulva Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000016804 zinc Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/04—Sulfur, selenium or tellurium; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и фармакологии и представляет собой фармацевтическую композицию, обладающую активностью IL-21, содержащую IL-21 и сульфат, где последовательность IL-21 выбрана из группы, состоящей из SEQ ID No:1, аминокислот с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1, аминокислот с №32 по №162 последовательности SEQ ID No:1, SEQ ID No:2 и варианта любой из них, имеющего степень идентичности, по меньшей мере, 80%, а сульфат представляет сульфат-ионы (SO4 2-) в концентрации от 10 мМ до 150 мМ. Изобретение обеспечивает стабилизацию структуры IL-21 и повышение стабильности композиций, содержащих IL-21. 4 н. и 19 з.п. ф-лы, 12 ил., 1 табл.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к композициям, например к фармацевтическим композициям, содержащим IL-21 и сульфат, и к способам стабилизации IL-21, причем способ включает добавление сульфата к раствору, содержащему указанный пептид.
Уровень техники
Впервые IL-21 был раскрыт в WO 00/53761. Пептид-предшественник представляет собой пептид с 162 аминокислотными остатками, последовательность которых в указанной заявке раскрыта как SEQ ID No:2. Для удобства в настоящей заявке эта последовательность повторена как SEQ ID No:1. Первоначально предполагалось, что зрелый пептид - это пептид, состоящий из аминокислот с №32 по №162 в последовательности SEQ ID No:1; однако позднее (WO 04/112703) предположили, что на самом деле зрелый пептид состоит из аминокислот с №30 по №162.
IL-21 - это цитокин, способный активировать В-клетки, Т-клетки и клетки - естественные киллеры (клетки NK); и было высказано предположение, что IL-21 и его варианты и аналоги как лекарственные средства эффективны в лечении различных форм рака (WO 00/53761 и WO 03/103589).
Обычно пептиды в жидкой форме нестабильны в течение продолжительных периодов времени, и предпринято большое количество исследований для разработки рецептур фармацевтических пептидов, которые удовлетворяли бы требованиям к стабильности фармацевтических композиций. Изготовление содержащих пептиды стабильных фармацевтических композиций нетривиально, и поэтому сохраняется задача поиска путей для получения стабильных рецептур, содержащих IL-21. Цель настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить такие стабильные рецептуры или композиции с альтернативными или улучшенными свойствами.
WO 04/112703 раскрывает, что, например, последовательность аминокислот с №30 по №162 из SEQ ID No:1 может быть выделена методами, включающими осаждение пептида высокими концентрациями сульфата аммония.
WO 04/055168 раскрывает, что клетки, трансфицированные вектором, содержащим полинуклеотид, кодирующий аминокислоты с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1 с дополнительным N-концевым метионином, можно выращивать в среде, содержащей сульфат аммония.
В международной заявке WO 2004DK000686 (опубликованной как WO 05/35565) раскрывается применение сульфата меди в качестве катализатора в реакции между функционализованным полиэтиленгликолем (ПЭГ) и функционализованным IL-21 с получением «ПЭГилированного» (связанного с ПЭГ) IL-21.
Сущность изобретения
Заявители настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что присутствие ионов сульфата (SO4 2-) стабилизирует структуру IL-21 и повышает стабильность композиций, содержащих IL-21. В соответствии с этим, в одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает композицию, в частности фармацевтическую композицию, содержащую IL-21 и ионы сульфата, при условии, что в указанной композиции не присутствуют никакие ионы аммония (NH4 +) в молярном количестве, равном удвоенному молярному количеству сульфата.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает композицию, в частности фармацевтическую композицию, содержащую IL-21 и ионы сульфата, при условии, что в указанной композиции не присутствуют никакие ионы аммония (NH4 +) в молярном количестве, равном удвоенному молярному количеству сульфата, и при условии, что композиция не содержит меди.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает способ стабилизации содержащей IL-21 композиции, при котором к указанной композиции добавляют сульфат.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает способ сворачивания (фолдинга) или повторного сворачивания (рефолдинга) IL-21, при котором к развернутому или частично свернутому IL-21 добавляют сульфат.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает способ очистки IL-21, при котором хроматографический материал приводят в контакт с композицией, содержащей IL-21 и сульфат.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает способ кристаллизации IL-21, при котором к композиции, содержащей IL-21, добавляют сульфат.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения, при котором эффективное количество фармацевтической композиции по настоящему изобретению вводят нуждающемуся в этом пациенту.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к применению IL-21 и сульфата в приготовлении лекарственного средства.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую IL-21 и ионы сульфата.
Подписи к чертежам
Фиг.1: Связывание 1-анилиннафталин-6-сульфоновой кислоты (ANS) с IL-21 при различных значениях рН. Все пробы содержали 0,05 мг/мл (3,2 мкмоль) IL-21, 10 мМ буфер (состав буфера и рН указаны на чертеже) и, если указано, 50 мМ Na2SO4. Непосредственно перед измерением добавляли 16 мкМ ANS.
Фиг.2: Спектры кругового дихроизма (КД) в дальней УФ области IL-21 при рН 2,0 в фосфатном буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.3А: Спектры КД в дальней УФ области IL-21 при рН 5,3 в гистидиновом буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.3Б: Спектры КД в дальней УФ области IL-21 при рН 5,3 в ацетатном буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.4: Спектры КД в дальней УФ области УФ IL-21 при рН 6,0 в фосфатном буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.5: Спектры КД в дальней УФ области УФ IL-21 при рН от 2,0 до 6,0 без добавления сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.6: Спектры КД в дальней УФ области УФ IL-21 при рН от 2,0 до 6,0 при добавлении 50 мМ сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.7: Спектры КД в ближней УФ области IL-21 при рН 2,0 в фосфатном буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг 8А: Спектры КД в ближней УФ области IL-21 при рН 5,3 в гистидиновом буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.8Б: Спектры КД в ближней УФ области IL-21 при рН 5,3 в ацетатном буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.9: Спектры КД в ближней УФ области IL-21 при рН 6,0 в фосфатном буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата. Концентрация белка 10 мг/мл.
Фиг.10: Капиллярная дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) IL-21 при рН 5,3 в гистидиновом буфере в присутствии добавленного 50 мМ сульфата и без сульфата.
Фиг.11: Данные таблицы 1, представленные в виде графика.
Фиг.12: Спектры КД в ближней УФ области IL-21 при рН 2 в фосфатном, сульфатном, ацетатном и формиатном буферах при 50 мМ. Концентрация белка 2 мг/мл.
Определения
Термин «терапевтически эффективное количество» соединения, как он использован здесь, обозначает количество, достаточное для лечения, ослабления или частичной задержки клинических проявлений данного заболевания и его осложнений. Достаточное для достижения этой цели количество определяется как «терапевтически эффективное количество». Для каждой задачи эффективные количества будут зависеть от, например, тяжести заболевания или вызванных заболеванием нарушений, а также от веса, пола, возраста и общего состояния индивидуума. Следует понимать, что определение подходящей дозировки можно осуществить обычным опытным путем, конструируя матрицу значений и тестируя различные позиции матрицы. Все это соответствует обычной квалификации обученного врача или ветеринара.
Термины «лечение» (treatment) или «воздействие» (treating), как они использованы здесь, означают оказание помощи пациенту с целью противодействовать болезненному состоянию, такому как заболевание или расстройство. Подразумевается, что термин включает полный спектр лечебных воздействий для данного болезненного состояния, от которого страдает пациент, таких как введение активного соединения для ослабления симптомов или осложнений, для задержки развития заболевания, расстройства или болезненного состояния, для ослабления или облегчения симптомов и осложнений и/или для лечения или ликвидации заболевания, расстройства или болезненного состояния, а также для предотвращения болезненного состояния, причем предотвращение следует понимать как оказание помощи пациенту с целью противодействовать заболеванию, болезненному состоянию или расстройству, которое включает введение активных соединений для предотвращения начального появления симптомов или осложнений. Подлежащим лечению пациентом предпочтительно является млекопитающее, в особенности человеческое существо, но это могут быть также животные, такие как: собаки, кошки, коровы, овцы и свиньи. Тем не менее следует понимать, что терапевтические режимы и профилактические (предупредительные) режимы представляют различные аспекты изобретения.
Описание изобретения
В этом контексте подразумевается, что IL-21 обозначает:
а) пептид с последовательностью, как она определена в SEQ ID No:1;
б) пептид с последовательностью, определенной аминокислотами с №32 по №162 в SEQ ID No:1;
в) пептид с последовательностью, определенной аминокислотами с №30 по №162 в SEQ ID No:1; или
г) вариант любого из а), б) и в).
Под вариантом понимается соединение, полученное замещением одного или более из аминокислотных остатков в последовательности IL-21 другой природной или неприродной аминокислотой; и/или добавлением в последовательность IL-21 одной или более из природных или неприродных аминокислот; и/или удалением из последовательности IL-21 одного или более из аминокислотных остатков, причем за каждым из этих этапов может по усмотрению следовать дополнительная модификация одного или более из аминокислотных остатков. В частности, такие замещения являются консервативными в том смысле, что один аминокислотный остаток замещается другим аминокислотным остатком из той же самой группы, то есть другим аминокислотным остатком с похожими свойствами. Аминокислоты на основании их свойств удобно разделить на следующие группы: основные аминокислоты (такие как аргинин и лизин), кислотные аминокислоты (такие, как глутаминовая кислота и аспарагиновая кислота), полярные аминокислоты (такие как глутамин, цистеин, гистидин и аспарагин), гидрофобные аминокислоты (такие, как лейцин, изолейцин, пролин, метионин и валин), ароматические аминокислоты (такие как фенилаланин, триптофан, тирозин) и малые аминокислоты (такие как глицин, аланин, серин и треонин).
В одном из вариантов осуществления изобретения указанный вариант имеет степень идентичности с а), б) или в) по меньшей мере 80%, такую как по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%. В частности, указанные варианты имеют по меньшей мере 20% (по меньшей мере 40%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%) активности а), б) или в), как она определена здесь в анализе 1.
Термин «идентичность», как известно в данной области, относится к родству последовательностей двух или более пептидов, определяемому путем сопоставления последовательностей. В данной области «идентичность» означает также степень родственности последовательностей пептидов, определяемая числом совпадений верениц из двух или более аминокислотных остатков. «Идентичность» соответствует проценту идентичных совпадений с наименьшей из двух или более последовательностей, выровненных с введением разрывов (если они есть), проанализированных с помощью конкретной математической модели или компьютерной программы (то есть «алгоритмов»). Идентичность родственных белков можно легко рассчитать с помощью известных методов. Такие методы включают (но не ограничиваются ими) методы, описанные в «Computational Molecular Biology», под ред. Lesk A.M. Oxford University Press, New York, 1988; «Biocomputing: Informatics and Genome Projects». Под ред. Smith D.W. Academic Press, New York, 1993; «Computer Analysis of Sequence Data», Part 1. Под ред. Griffin A.M. and Griffin H.G. Humana Press, New Jersey, 1994; «Sequence Analysis in Molecular Biology». Под ред. von Heinje G. Academic Press, 1987; «Sequence Analysis Primer». Под ред. Gribskov M. and Devereux J.M.Stockton Press, New York, 1991; и Carillo и др. // SIAM J. Applied Math. 1988. Т.48. С.1073.
Предпочтительные методы определения идентичности разработаны так, чтобы дать наибольшее совпадение между тестируемыми последовательностями. Методы определения идентичности описаны в общедоступных компьютерных программах. Предпочтительные методы компьютерного программирования для определения степени идентичности двух последовательностей включают пакет программ GCG, в том числе GAP (Devereux и др. // Nucl. Acid. Res. 1984. Т.12. С.387); Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, Wis.), BLASTP, BLASTN и FASTA (Altschul и др. // J. Mol. Biol. 1990. Т.215. С.403-410). Программу BLASTX можно получить из National Center for Biotechnology Information (NCBI) и других источников (BLAST Manual, Altschul и др. NCB/NLM/NIH Bethesda, Md. 20894; Altschul и др., см. выше). Для определения идентичности можно также использовать хорошо известный алгоритм Smith Waterman.
Например, при использовании компьютерного алгоритма GAP (Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, Wis.), два белка, для которых необходимо определить процент идентичности последовательностей, выравнивают для оптимального совпадения их соответственных аминокислот («совпадающая протяженность», как она определена алгоритмом). В сочетании с этим алгоритмом используют штраф на введение разрыва (gap opening penalty) (который рассчитывают как 3-кратное значение средней диагонали; «средняя диагональ» - среднее значение диагонали в используемой матрице сравнения; «диагональ» представляет собой показатель (score) или число, приписываемое каждому полному совпадению аминокислот с помощью конкретной матрицы сравнения) и штраф на удлинение разрыва (gap extension penalty) (который обычно представляет собой 1/10 штрафа на введение разрыва), а также матрицу сравнения, такую как РАМ 250 или BLOSUM 62. В алгоритме используется также стандартная матрица сравнения (см. Dayhoff и др. «Atlas of Protein Sequence and Structure», vol. 5, supp.3 (1978) для матрицы сравнения РАМ 250; Henikoff и др. // Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1992. Т.89. С.10915-10919 для матрицы сравнения BLOSUM 62).
Далее следуют предпочтительные параметры для сравнения белковых последовательностей:
Алгоритм: Needleman и др. // J. Mol. Biol. 1970. Т.48. С.443-453 (1970); матрица сравнения: BLOSUM 62 от Henikoff и др. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. Т.89. С.10915-10919; штраф за ведение разрыва: 12; штраф за длину разрыва: 4: порог подобия: 0.
Программа GAP применима с указанными выше параметрами. Указанные выше параметры являются параметрами по умолчанию для сравнения пептидов (без штрафа за конец разрыва) с помощью алгоритма GAP.
В одной из реализаций изобретения вариант получают добавлением до пяти аминокислот (как одной, двух, трех, четырех или пяти) к любой из указанных выше последовательностей а), б) и в), в особенности к их N-концевой части. Конкретное упоминание относится к в) (то есть к аминокислотам с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1) с дополнительным метионином, добавленным к N-концу, SEQ ID No:2.
Изобретение также охватывает композиции по настоящему изобретению, содержащие обсужденные выше варианты IL-21, которые были дополнительно модифицированы, например, ковалентной пришивкой к ПЭГ или к липофильному заместителю (например, как описано в WO 05/035565).
В одном из вариантов осуществления изобретения композиции по настоящему изобретению не содержат аммония в молярном количестве, которое равно удвоенному молярному количеству сульфатов. Поскольку аммоний является кислотой, его количество будет зависеть от рН раствора; при высоких значениях рН аммоний будет присутствовать в форме аммиака (NH3). Следует понимать, что в данном контексте количество аммония должно быть рассчитано как суммарное количество аммиака и аммония. Подобным же образом количество сульфата зависит от рН. При низких значениях рН сульфат присутствует в протонированной форме (HSO4 -). Следует понимать, что в данном контексте количество сульфата должно быть рассчитано как суммарное количество сульфата и протонированной формы.
В одном из вариантов осуществления изобретения композиции по настоящему изобретению не содержат аммония. Подразумевается, понятно, что это означает отсутствие в композициях по настоящему изобретению меди более следовых количеств.
Используемый в настоящем изобретении ион сульфата в принципе происходит из любой сульфатной соли. Определенные отрасли промышленности могут, конечно, иметь специальные требования к указанным солям, которые также следует выполнять. В качестве примера, в фармацевтической промышленности может требоваться, чтобы сульфатная соль была фармацевтически приемлемой солью. Фармацевтически приемлемые сульфатные соли включают соли металлов, такие как сульфаты лития, натрия, цинка, кальция, калия и магния, и алкилированные аммонийные соли, такие как сульфаты метиламмония, диметиламмония, триметиламмония, этиламмония, триэтиламмония, оксиэтиламмония, диэтиламмнония, бутиламмония и тетраметиламмония. Некоторые из указанных выше солей существуют более чем в одной форме, так как содержат разные количества кристаллизационной воды. Все эти формы могут быть использованы в настоящем изобретении, и особое упоминание сделано относительно сульфата натрия.
В одном из вариантов осуществления изобретения композиции по настоящему изобретению не содержат меди. Подразумевается, понятно, что это означает отсутствие в композициях по настоящему изобретению меди более следовых количеств.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую IL-21 и сульфат.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую IL-21 и сульфат, при условии, что аммиак не присутствует в молярном количестве, равном удвоенному молярному количеству сульфата.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую IL-21 и сульфат, при условии, что аммиак не присутствует в молярном количестве, равном удвоенному молярному количеству сульфата, и при дополнительном условии, что композиция не содержит меди. Кроме IL-21 и сульфата, указанная фармацевтическая композиция может также содержать другие известные в данной области вспомогательные вещества, такие как буферы, консерванты, изотонические агенты, хелатирующие агенты, стабилизаторы, аминокислотные основания, достаточные для снижения образования агрегатов белка в ходе хранения композиции, поверхностно активные вещества, увлажняющие агенты, эмульгаторы, антиоксиданты, наполняющие агенты, ионы металлов, маслянистые носители, белки (например, человеческий сывороточный белок, желатин или белки) и цвиттер-ионы. Применение этих вспомогательных веществ хорошо известно специалисту в данной области и описано, например, в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th edition, 2000.
В одном из вариантов осуществления изобретения композиции по настоящему изобретению не содержат аммония. Подразумевается, понятно, что это означает отсутствие в композициях по настоящему изобретению меди более следовых количеств.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить в различных лекарственных формах, таких как, например, растворы, суспензии, эмульсии, микроэмульсии, множественные эмульсии, губки, мази, пасты, пластыри, таблетки, покрытые таблетки, промывания, капсулы (например, твердые желатиновые капсулы и мягкие желатиновые капсулы), свечи, ректальные капсулы, капли, гели, распыляемые вещества, порошки (например, лиофилизованные порошки), аэрозоли, лекарственные формы для вдыхания, глазные капли, глазные мази, глазные промывания, маточные суппозитории, маточные кольца, маточные мази, инъекционные растворы, преобразующиеся in situ растворы (например: гелеобразующие in situ, застывающие in situ, осаждающиеся in situ, кристаллизующиеся in situ), растворы для вливания и имплантаты.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить нуждающимся в таком лечении пациентам различными путями, такими как, например, в язык, под язык, в щеку, в рот, перорально, в желудок и кишечник, интраназально, внутрилегочно (например, через бронхи и альвеолы или комбинируя эти пути), в кожу, через кожу, вагинально, ректально, в глаза (например, через конъюнктиву), через мочеточники и парентерально. Парентеральное введение может быть осуществлено путем подкожной, внутримышечной, внутрибрюшинной или внутривенной инъекции с помощью шприца, по усмотрению с помощью шприца-ручки (pen-like). В качестве альтернативы, парентеральное введение может быть осуществлено с помощью насоса для вливания. Другим выбором может быть композиция по настоящему изобретению, которая может быть раствором или суспензией для введения в форме интраназально или внутрилегочно распыляемого вещества. Как еще один выбор, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть также приспособлена для черескожного введения (например, с помощью безыгольной инъекции или через накладку, по усмотрению электрофоретическую накладку) или для введения через слизистую оболочку (например, в щеку).
В фармацевтических композициях по настоящему изобретению, содержащих IL-21 и сульфат, IL-21 может содержаться в количествах до 500 мг/мл. В частности, IL-21 может содержаться в концентрациях вплоть до или равных 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или 100 мг/мл. IL-21 стабилизируется при концентрациях сульфата свыше 1 мМ, таких как свыше 5 мМ, таких как свыше 7 мМ, таких как свыше 10 мМ, таких как свыше 20 мМ. Фактически сульфат может содержаться в концентрациях вплоть до 500 мМ, таких как вплоть до 150 мМ, таких как вплоть до 75 мМ, таких как вплоть до 50 мМ. Верхний предел концентрации сульфата определяется растворимостью выбранной сульфатной соли. Во многих применениях настоящего изобретения желательно иметь изотоническую или близкую к изотонической фармацевтическую композицию. В одном из вариантов осуществления изобретения изотоничность фармацевтической композиции составляет от 20% до 120%.
В одном из вариантов осуществления изобретения концентрация сульфата составляет от приблизительно 1 до приблизительно 100 мМ. В одном из вариантов осуществления изобретения концентрация сульфата составляет от приблизительно 20 до приблизительно 100 мМ. В других вариантах осуществления изобретения концентрация сульфата выбрана из группы, состоящей из приблизительно 1 мМ, приблизительно 5 мМ, приблизительно 10 мМ, приблизительно 15 мМ, приблизительно 20 мМ, приблизительно 25 мМ, приблизительно 30 мМ, приблизительно 35 мМ, приблизительно 40 мМ, приблизительно 45 мМ, приблизительно 50 мМ, приблизительно 55 мМ, приблизительно 60 мМ, приблизительно 65 мМ, приблизительно 70 мМ, приблизительно 75 мМ, приблизительно 80 мМ, приблизительно 85 мМ, приблизительно 90 мМ, приблизительно 95 мМ и приблизительно 100 мМ.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может также быть, например, не изотонической, и может подразумеваться, что перед введением она может быть сделана изотонической, например, путем разбавления. Для этого может быть необходима поставка более концентрированных фармацевтических композиций, которые затем перед введением превращаются в изотонические, например, врачом или пациентом.
В одном из вариантов осуществления изобретения к композициям по настоящему изобретению добавляют хлорид. В частности, может добавляться до 150 мМ хлорида.
В фармацевтических композициях по настоящему изобретению значение рН предпочтительно находится между 2 и 8, и для фармацевтических композиций с рН между 4 и 6, с таким как, например, 5,3, делается специальное указание.
Пример композиции по настоящему изобретению состоит из 10 мг/мл пептида, определенного последовательностью SEQ ID No:2, 10 мM Na2SO4 и гистидина в качестве буфера при рН 5,3.
Вклад конкретного вспомогательного вещества в стабильность фармацевтических композиций обычно оценивают, приготавливая испытуемую композицию (in casu композицию по настоящему изобретению) и референсную композицию (in casu такую же композицию, но без сульфата). Затем обе композиции хранят при контролируемых условиях, например: 2 недели при 40°С, 2 месяца при 25°С или 6 месяцев при 5°С. После хранения подходящим методом анализа измеряют в обеих композициях остаточную активность представляющего интерес пептида. Для содержащей IL-21 композиции может быть использован анализ агрегации, описанный здесь в примере 11. Могут быть также применены другие методы анализа, в которых измеряется количество/активность IL-21 или продуктов деструкции.
Один из примеров осуществления настоящего изобретения относится к применению сульфата для содействия сворачиванию или повторному сворачиванию IL-21 из состояния развернутого или частично развернутого IL-21. В частности, добавление ионов сульфата может повышать скорость сворачивания или обеспечивать правильное сворачивание. Если IL-21 продуцируется при выращивании определенных микроорганизмов, которые не обеспечивают правильного сворачивания пептидов, пептиды могут экспрессироваться в тельцах включения, содержащих развернутые или частично развернутые пептиды. После разрушения указанных телец включения правильно свернутый пептид может быть получен в процессах, включающих добавление сульфатных ионов.
Присутствие сульфатных ионов приводит к получению более компактной и стабильной структуры IL-21. Это можно использовать при хроматографической очистке IL-21, чтобы изменить профиль хроматографического элюирования пептида, и, в особенности, чтобы получить более узкий и лучше разрешенный элюируемый пик. Полезное действие добавления сульфата можно видеть при различных типах хроматографии, таких как ионообменная хроматография (катионообменная хроматография и анионообменная хроматография), хроматография на основе гидрофобных взаимодействий и гель-проникающая хроматография. Более узкий элюируемый пик удобен в ситуациях, когда необходимо разделение близко элюирующихся пиков, но это также удобно вообще, так как элюируемый пик можно собрать в меньшем объеме, что упрощает и удешевляет дальнейшую окончательную обработку. Согласно настоящему изобретению, сульфат присутствует в концентрации по меньшей мере вблизи 3 мМ, в такой как по меньшей мере вблизи 7 мМ, в такой как по меньшей мере вблизи 10 мМ. Фактически ожидается, что верхний предел концентрации сульфата определяется только растворимостью применяемой сульфатной соли. В случае использования сульфата натрия как источника сульфата это специально указывается.
Значение рН при хроматографических процессах по настоящему изобретению может быть в пределах от 1 до 10, такое как от 2 до 9, такое как от 3 до 8, такое как от 4 до 7, такое как от 5 до 6.
В данной области известно много хроматографических материалов, примеры включают материал для анионообменной хроматографии, материал для катионообменной хроматографии, материал для хроматографии на основе гидрофобных взаимодействий и материал для гель-проникающей хроматографии.
Структура, которая лучше определена, легче кристаллизуется, и поэтому настоящее изобретение предлагает также использование сульфата для улучшения кристаллизации IL-21. В данном контексте «улучшением» может быть повышение скорости кристаллизации или получение кристаллов, более подходящих, например, для рентгеноструктурного анализа.
Было высказано предположение, что IL-21 полезен для лечения различных типов рака или опухолевых заболеваний или расстройств. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рака, причем способ включает введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества композиции по настоящему изобретению, содержащей IL-21 и сульфат. Конкретное упоминание сделано относительно метастазирующей злокачественной меланомы, карциномы почечных клеток, рака яичников, рака малых клеток легких, рака клеток, не являющихся малыми клетками легких, рака груди, рака прямой и толстой кишки, рака простаты, рака поджелудочной железы, рака мочевого пузыря, рака пищевода, рака шейки матки, внутриматочного рака, лимфомы и лейкоза.
В более специфических аспектах изобретения понятно, что термины «опухолевые расстройства», «рак» относятся ко всем формам опухолевого роста клеток, включая как кистозные, так и плотные опухоли, опухоли костей и мягких тканей, включая как доброкачественные, так и злокачественные опухоли, включая опухоли анальной ткани, желчных протоков, мочевого пузыря, клеток крови, костей, вторичные опухоли костей, кишечника (прямой и толстой кишки), мозга, мозга (вторичные), груди, груди (вторичные), карциноиды, опухоли шейки матки, детские типы рака, опухоли глаз, пищевода, головы и шеи, саркому Капоши, опухоли почек, гортани, лейкоз (острый лимфобластоидный), лейкоз (острый миелоидный), лейкоз (хронический лимфолейкоз), лейкоз (хронический миелолейкоз), лейкоз (другие типы), опухоли печени, печени (вторичные), легких, легких (вторичные), лимфатических узлов (вторичные), лимфому (типа Ходжкина), лимфому (не типа Ходжкина), меланому, мезотелиому, миелому, опухоли яичников, поджелудочной железы, пениса, простаты, кожи, саркомы мягких тканей, опухоли желудка, яичек, щитовидной железы, первичные опухоли неизвестного происхождения, опухоли влагалища, вульвы, матки.
Опухоли мягких тканей включают доброкачественную моносомную невриному, десмоидную фиброму, липобластому, липому, лейомиому матки, саркому паренхиматозных клеток, дерматофибросаркому, саркому Эвинга, внескелетную слизеподобную хондросаркому, слизеподобную липосаркому, хорошо дифференцированную липосаркому, альвеолярную рабдомиосаркому и синовиальную саркому.
Специфические опухоли костей включают неокостеневающую фиброму, однополостной кистоз костей, энхондрому, аневризматический кистоз костей, остеобластому, хондробластому, хондромиксофиброму, окостеневающую фиброму и адамантиному, опухоль гигантских клеток, фиброзную дисплазию, саркому Эвинга, эозинофильную гранулему, остеосаркому, хондрому, хондросаркому, злокачественную фиброзную гистоцитому и метастазирующую карциному.
Лейкозы относятся к типам рака белых клеток крови, вырабатываемых костным мозгом. Они включают (но не ограничиваются ими) 4 главных типа лейкозов: острый лимфобластоидный (ALL), острый миелобластоидный (AML), хронический лимфоцитарный (CLL) и хронический миелоидный (CML).
Кроме того, возможно терапевтическое применение IL-21 при раке на различных неметастатических и метастатических стадиях, таких как: «стадия 1» (локализованная) (ограниченная органом возникновения), «стадия 2» (региональная), «стадия 3» (экстенсивная) и «стадия 4» (рак с обширной диссеминацией).
IL-21 использовался также в лечении вирусных инфекций, таких как: вирус гепатита В, вирус гепатита С, вирус иммунодефицита человека, респираторно-синцитиальный вирус, вирус Эпштейна-Барр, вирус гриппа, цитомегаловирус, вирус герпеса и тяжелый острый респираторный синдром.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к применению IL-21 и сульфата в производстве лекарственного средства для лечения рака. Специально упомянуты типы рака из приведенного выше списка.
Все ссылки, в том числе на публикации, патентные заявки и патенты, здесь цитированные, включены сюда ссылкой во всей их полноте и в такой же степени, как если бы каждая ссылка была индивидуально и конкретно указана как включенная ссылкой, и были приведены здесь во всей полноте (в максимальной разрешенной законодательством степени), независимо какого-либо сделанного здесь в другом месте отдельно предоставленного включения конкретных документов.
Использование в английском тексте неопределенных и определенного артиклей и единственного и множественного числа в контексте описания настоящего изобретения следует толковать как охватывающее как единственное, так и множественное число, если только здесь не указано иное или если это не противоречит явно содержанию. Например, слово «соединение» следует понимать как относящееся к различным «соединениям» настоящего изобретения или конкретного описанного аспекта, если не указано иное.
Если не указано иное, все приведенные здесь точные величины представляют соответствующие приближенные величины (например, все точные приведенные для примера величины, приведенные на основании конкретного фактора или измерения, могут считаться также как представляющие результат соответствующего приближенного измерения, модифицированный в этом случае добавкой «приблизительно»).
Подразумевается, что приведенное здесь описание любого аспекта или аспекта изобретения с применением терминов «включающий», «имеющий» или «содержащий» со ссылкой на элемент или элементы относится к подобному аспекту или аспекту изобретения, которое «состоит из», «по существу состоит» или «в основном включает» этот конкретный элемент или конкретные элементы, если не указано иное или если это не противоречит явно содержанию (например, следует понимать, что композиция, описанная здесь как содержащая конкретный элемент, описана также как композиция, состоящая из этого элемента, если не указано иное или если это не противоречит явно содержанию).
Анализ 1
Активность IL-21 можно анализировать в клеточном биотестировании на мышиных клетках Baf3, стабильно трансфицированных для экспрессии человеческого IL-21 R вместе со сцепленной с Stat люциферазной репортерной конструкцией. Клетки Baf3 эндогенно экспрессируют компонент gc активного комплекса рецептора IL-21. Репортерную линию клеток Baf3/hIL-21R перед стимуляцией заставляли голодать в среде без IL-3 в течение 18 ч. Для вычисления концентрации 50% действия (IC50) можно получить кривые дозовой зависимости от концентрации белка IL-21. Клетки Baf3 описаны в работе Palacios R. // Nature. 1984. Т.309. №5964. С.126-31, их получают в банке клеток Cell Bank в RIKEN BioResource Center (http://www2.brc.riken.ip/lab/cell/detail.cgi?cell no=RCB0805).
Примеры
В следующих примерах под IL-21 подразумевают пептид, идентифицированный последовательностью SEQ ID No:2.
Пример 1. Флуоресценция ANS
ANS (1-анилиннафталин-8-сульфоновая кислота) связывается с гидрофобными центрами белков. Усиление интенсивности флуоресценции указывает на увеличение связывания молекул ANS с белком. В свою очередь это указывает на меньшую структурированность молекулы, поскольку в менее структурированном белке доступно большее число гидрофобных центров. Более слабая интенсивность флуоресценции является индикатором более компактной структуры белка, в котором снижено количество гидрофобных центров, доступных для связывания ANS.
Все пробы содержали 0,05 мг/мл (3,2 мкМ) IL-21, 10 мМ буфер (конкретный буфер и значения рН указаны на чертеже) и, если указано, 50 мМ Na2SO4. Непосредственно перед измерением добавляли 16 мкМ ANS.
Спектры флуоресценции ANS регистрировали с помощью флуоресцентного спектрофотометра Varian Cary Eclipse Fluorescence Spectrophotomete, снабженного термостатированной ячейкой (Varian Cary Single cell Peltier accessory). Были использованы следующие установочные параметры и режимы флуоресцентного спектрофотометра.
Возбуждение образцов осуществляли при 390 нм. Щель и для возбуждения, и для эмиссии была 5 нм, фотоумножитель был установлен на режим «high», была задана температура 20°С. Спектры эмиссии регистрировали в диапазоне 400-700 нм. Для каждого образца регистрировали и усредняли 3 спектра.
Длину волны максимума эмиссии (λmax) определяли расчетом первой производной спектра эмиссии после вычитания соответствующей базовой линии.
Представленные на фиг.1 данные показывают спектры ANS при связывании с IL-21 при различных значениях рН и в различных буферах. Данные ясно показывают, что с повышением рН IL-21 приобретает более компактную структуру. Примечательно, что добавление сульфата существенно повышает компактность структуры IL-21. Из этого сделан вывод, что сульфат стабилизирует структуру IL-21.
Пример 2. Круговой дихроизм (КД) в дальней УФ области
Спектры КД белков в дальней УФ области отражают асимметрию пептидных связей, которая в свою очередь отражает вторичную структуру белка. Спектры в дальней УФ области белков с преобладающей α-спиральной конформацией характеризуются двумя разрешенными минимумами при 208 и 222 нм, положительным пиком в области 190-195 нм и точкой перехода от отрицательной к положительной эллиптичности выше 172 нм. При различных значениях рН было исследовано влияние сульфата на вторичную структуру IL-21.
Спектры регистрировали с помощью спектрополяриметра Jasco РТС-4238, снабженного блоком контроля температуры. Показанные спектры являются усреднением трех спектров, полученных регистрацией с шагом 0,1 нм и временем ответа 4 с при скорости сканирования 20 нм/мин. Спектры регистрировали в диапазоне от 180 до 250 нм. Для вычитания нулевой линии регистрировали «пустые» спектры. Концентрация белка была равна 10 м/мл.
На фиг.2 показаны спектры при рН 2 в фосфатном буфере в присутствии сульфата и без сульфата. При рН 2 без сульфата IL-21 находится в равновесной форме между α-спиралью и статистическим клубком. Однако добавление сульфата способствует образованию α-спиральной конформации. Фигуры 3 и 4 показывают, что в особенности при рН 5,3, но также и при рН 6,0, добавление сульфата приводит к увеличению пиков в области 190-195 нм, что указывает на повышение содержания α-спиральной структуры. Данные из фигур 2-4 представлены также на фигурах 5 и 6, причем на фиг.5 показаны спектры КД в дальней УФ области IL-21 при рН 2-6 без сульфата, а на фиг.6 показаны спектры КД в дальней УФ области IL-21 в том же интервале рН с добавлением сульфата. Сравнение фигур 5 и 6 ясно показывает, что добавление сульфата делает вторичную структуру IL-21 более однородной в широком интервале значений рН.
Таким образом, сделан вывод, что добавление сульфата к композициям с IL-21 повышает содержание α-спиралей в структуре IL-21 в широком интервале значений рН.
Пример 3. Круговой дихроизм (КД) в ближней УФ области
КД в ближней УФ области отражает третичную структуру белка. Чем выше амплитуда спектров в ближней УФ области, тем больше степень образования третичной структуры белка. Спектры IL-21 в ближней УФ области регистрировали в интервале значений рН от 2 до 6 в различных буферах в присутствии сульфата и без добавления сульфата.
Спектры регистрировали с помощью спектрополяриметра Jasco РТС-4238, снабженного блоком контроля температуры. Показанные спектры являются усреднением трех спектров, полученных регистрацией с шагом 0,1 нм и временем ответа 4 с при скорости сканирования 20 нм/мин. Спектры регистрировали в диапазоне от 250 до 350 нм. Для вычитания нулевой линии регистрировали «пустые» спектры. Концентрация белка была равна 10 м/мл, за исключением опытов, представленных на фиг.12, где концентрация белка была 2 мг/мл.
На фиг.7 показаны спектры КД в ближней УФ области IL-21 в концентрации 10 мг/мл при рН 2 (фосфатный буфер) с добавлением 50 мМ сульфата и без добавления сульфата. Представленные на чертеже данные ясно показывают, что добавление сульфата повышает степень образования третичной структуры IL-21.
На фиг.8А показаны спектры КД в ближней УФ области IL-21 в концентрации 10 мг/мл при рН 5,3 (гистидиновый буфер) с добавлением 50 мМ сульфата и без добавления сульфата. Представленные на чертеже данные ясно показывают, что добавление сульфата повышает степень образования третичной структуры IL-21. На фиг.8Б показаны спектры КД в ближней УФ области IL-21 в концентрации 10 мг/мл при рН 5,3 (ацетатный буфер) с добавлением 50 мМ сульфата и без добавления сульфата. Представленные на чертеже данные ясно показывают, что добавление сульфата повышает степень образования третичной структуры IL-21. Из данных, представленных на фигурах 8А и 8Б, очевидно, что добавление сульфата повышает степень образования третичной структуры IL-21 независимо от состава буфера.
На фиг.9 показаны спектры КД в ближней УФ области IL-21 в концентрации 10 мг/мл при рН 6,0 (фосфатный буфер) с добавлением 50 мМ сульфата и без добавления сульфата. Представленные на чертеже данные показывают, что наблюдается небольшое, но достоверное повышение степени образования третичной структуры IL-21 при этом значении рН.
На фиг.12 показаны спектры КД в ближней УФ области IL-21 в концентрации 2 мг/мл при рН 2 в различных буферах. Спектры КД для содержащего сульфат буфера разительно отличаются от других спектров с переходом от слабого отрицательного к намного более положительному КД.
Пример 4. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК)
Дифференциальная сканирующая калориметрия измеряет разворачивание или температуру плавления белка. Хорошо разрешенный узкий пик является свидетельством компактной и определенной структуры и структурной компактности белка, тогда как широкий пик свидетельствует о намного более рыхлой структуре.
Капиллярную ДСК проводили с помощью калориметра Microcal VP-DSC. Образцы сканировали в интервале температур от 10°С до 110°С при скорости сканирования 3°С/мин. Прогон образца поводили с его индивидуальным буфером для сравнения. Из спектров образцов вычитали референсные кривые буфер-буфер, чтобы получить окончательные характерные спектры образцов. Образцы содержали 10 мг/мл IL-21, 10 мМ гистидина при рН 5,3 и там, где указано, 50 мМ Na2SO4.
Приведенные на фиг.10 данные показывают, что добавление сульфата к IL-21 приводит к появлению пика на термограмме ДСК. Это указывает на то, что сульфат повышает структурную компактность IL-21.
Пример 5. Приготовление растворимой рецептуры с 10 мг/мл IL-21 при рН 5,3 с 10 мМ гистидина
Рабочий раствор IL-21 2,4% (вес к объему) объединяли с рабочим раствором гистидина 1,52% (вес к объему). Устанавливали рН раствора 5,3 добавлением HCl и NaOH, добавляли воду, чтобы разбавить рецептуру до конечного объема. Рецептуру стерилизовали фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и разливали в стерилизованные флаконы в асептических условиях.
Пример 6. Приготовление 4 растворимых рецептур с 10 мг/мл IL-21 при рН 5,3 с 10 мМ гистидина и различными количествами сульфата натрия (3, 10, 50 и 150 мМ)
Рабочий раствор IL-21 2,4% (вес к объему) объединяли с рабочим раствором гистидина 1,52% (вес к объему). Добавляли рабочий раствор сульфата натрия 10,6% (вес к объему). Устанавливали рН раствора 5,3 добавлением HCl и NaOH, добавляли воду, чтобы разбавить рецептуру до конечного объема. Рецептуру стерилизовали фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и разливали в стерилизованные флаконы в асептических условиях.
Процедуру повторяли 4 раза, добавляя различные количества рабочего раствора сульфата натрия.
Пример 7. Приготовление растворимой рецептуры с 10 мг/мл IL-21 при рН 5,3 с маннитом 4,7% (вес к объему) и гистидином 10 мМ
Рабочий раствор IL-21 2,4% (вес к объему) объединяли с рабочим раствором маннита 23,6% (вес к объему) и рабочим раствором гистидина 1,52% (вес к объему). Устанавливали рН раствора 5,3 добавлением HCl и NaOH, добавляли воду, чтобы разбавить рецептуру до конечного объема. Рецептуру стерилизовали фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и разливали в стерилизованные флаконы в асептических условиях.
Пример 8. Приготовление растворимых рецептур с 10 мг/мл IL-21 при рН 5,3 с маннитом 4,7% (вес к объему), гистидином 10 мМ и различными количествами сульфата натрия (3, 10, 50 и 150 мМ)
Рабочий раствор IL-21 2,4% (вес к объему) объединяли с рабочим раствором маннита 23,6% (вес к объему) и рабочим раствором гистидина 1,52% (вес к объему). Добавляли рабочий раствор сульфата натрия 10,6% (вес к объему). Устанавливали рН раствора 5,3 добавлением HCl и NaOH, добавляли воду, чтобы разбавить рецептуру до конечного объема. Рецептуру стерилизовали фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и разливали в стерилизованные флаконы в асептических условиях.
Процедуру повторяли 4 раза, добавляя различные количества рабочего раствора сульфата натрия.
Пример 9. Приготовление растворимых рецептур с 10 мг/мл IL-21 при рН 5,3 с гистидином 10 мМ, сульфатом натрия 50 мМ и различными количествами хлористого натрия (50 и 150 мМ)
Рабочий раствор IL-21 2,4% (вес к объему) объединяли с рабочим раствором гистидина 1,52% (вес к объему) и рабочим раствором хлористого натрия 4,38% (вес к объему). Добавляли рабочий раствор сульфата натрия 10,6% (вес к объему). Устанавливали рН раствора 5,3 добавлением HCl и NaOH, добавляли воду, чтобы разбавить рецептуру до конечного объема. Рецептуру стерилизовали фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и разливали в стерилизованные флаконы в асептических условиях.
Процедуру повторяли 2 раза, добавляя различные количества рабочего раствора хлористого натрия.
Пример 10. Приготовление растворимых рецептур с 10 мг/мл IL-21 при рН 5,3 с маннитом 4,7% (вес к объему), гистидином 10 мМ, сульфатом натрия 50 мМ и различными количествами хлористого натрия (50 и 150 мМ)
Рабочий раствор IL-21 2,4% (вес к объему) объединяли с рабочим раствором маннита 23,6% (вес к объему), рабочим раствором гистидина 1,52% (вес к объему) и рабочим раствором хлористого натрия 4,38% (вес к объему). Добавляли рабочий раствор сульфата натрия 10,6% (вес к объему). Устанавливали рН раствора 5,3 добавлением HCl и NaOH, добавляли воду, чтобы разбавить рецептуру до конечного объема. Рецептуру стерилизовали фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и разливали в стерилизованные флаконы в асептических условиях.
Процедуру повторяли 2 раза, добавляя различные количества рабочего раствора хлористого натрия.
Пример 11. Стабильность при хранении
Флаконы, содержащие рецептуры из примеров с 5 по 11, выдерживали при различных температурах: 37°С, 25°С, 15°С, 5°С и -20°С. В различные моменты времени отбирали пробы для анализа. Содержание «агрегатов» (в том числе ковалентных димеров и других высокомолекулярных примесей) в рецептурах с IL-21 определяли с помощью гель-проникающей ВЭЖХ на колонке TSK. Процент агрегатов рассчитывали как отношение общей площади пиков, элюирующихся до главного пика IL-21, к полной площади пиков в пределах объема элюирования.
Результаты для образцов, хранившихся в течение 1 месяца при 37°С, нормированные по данным для взятой для сравнения рецептуры из примера 5 (то есть рецептуры без сульфата или маннита) приведены в таблице 1. Данные представлены также на фиг.11.
Данные из таблицы 1 (или представленные на фиг.11) показывают, что сульфат повышает стабильность IL-21 при хранении. Данные показывают также, что это положительное действие зависит от концентрации сульфата. Более того, данные показывают, что хлорид также повышает стабильность при хранении и что этот эффект также зависит от концентрации хлорида. Наконец, данные показывают, что при добавлении к композиции с IL-21 и сульфата, и хлорида достигается аддитивное действие. Таким образом, установлено, что действие сульфата на структуру IL-21, продемонстрированное в биофизических опытах, раскрытых в примерах 1-4, находит отражение в повышении стабильности композиций с IL-21.
Claims (23)
1. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью IL-21, содержащая IL-21 и сульфат, где последовательность IL-21 выбрана из группы, состоящей из SEQ ID No:1, аминокислот с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1, аминокислот с №32 по №162 последовательности SEQ ID No:1, SEQ ID No:2 и варианта любой из них, имеющего степень идентичности по меньшей мере 80%, а сульфат представляет сульфат-ионы (SO4 2-) в концентрации от 10 мМ до 150 мМ.
2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит аминокислоты с №32 по №162 последовательности SEQ ID No:1.
3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит аминокислоты с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1.
4. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит последовательность SEQ ID No:1.
5. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит последовательность SEQ ID No:2.
6. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-5, отличающаяся тем, что подлежащая введению пациенту композиция является изотонической.
7. Композиция по любому из пп.1-6, содержащая хлорид.
8. Композиция по любому из пп.1-6, отличающаяся тем, что указанная композиция не содержит аммония.
9. Композиция по любому из пп.1-6, отличающаяся тем, что указанная композиция не содержит меди.
10. Композиция по п.1, содержащая 10 мг/мл IL-21, 10 мМ Na2SO4 и гистидин в качестве буфера при рН 5,3.
11. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит аминокислоты с №32 по №162 последовательности SEQ ID No:1.
12. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит аминокислоты с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1.
13. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит последовательность SEQ ID No:1.
14. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что последовательность IL-21 содержит последовательность SEQ ID No:2.
15. Способ стабилизации фармацевтической композиции, при котором к IL-21 добавляют сульфат-ионы, в результате чего получается фармацевтическая композиция по пп.1-14.
16. Способ лечения рака, при котором нуждающемуся в этом пациенту вводят терапевтически эффективное количество композиции по любому из пп.1-14.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанный рак выбран среди карциномы почечных клеток, рака толстой и прямой кишки, меланомы и лимфомы не типа Ходжкина.
18. Применение IL-21 и сульфата в приготовлении лекарства для лечения рака, где последовательность IL-21 выбрана из группы, состоящей из SEQ ID No:1, аминокислот с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1, аминокислот с №32 по №162 последовательности SEQ ID No:1, SEQ ID No:2 и варианта любой из них, имеющего степень идентичности по меньшей мере 80%, а сульфат представляет сульфат-ионы (SO4 2-) в концентрации от 10 мМ до 150 мМ.
19. Применение согласно п.18, отличающееся тем, что указанный рак выбран среди карциномы почечных клеток, рака толстой и прямой кишки, меланомы и лимфомы не типа Ходжкина.
20. Применение по любому из пп.18 или 19, отличающееся тем, что последовательность IL-21 содержит аминокислоты с №32 по №162 последовательности SEQ ID No:1.
21. Применение по п.20, отличающееся тем, что последовательность IL-21 содержит аминокислоты с №30 по №162 последовательности SEQ ID No:1.
22. Применение по п.21, отличающееся тем, что последовательность IL-21 содержит последовательность SEQ ID No:1.
23. Применение по любому из пп.18 или 19, отличающееся тем, что последовательность IL-21 содержит последовательность SEQ ID No:2.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP05104887.4 | 2005-06-06 | ||
EP05104887 | 2005-06-06 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011103126/10A Division RU2011103126A (ru) | 2005-06-06 | 2011-01-31 | Стабилизированные композиции il-21 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2007144057A RU2007144057A (ru) | 2009-07-20 |
RU2420308C2 true RU2420308C2 (ru) | 2011-06-10 |
Family
ID=36952849
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007144057/15A RU2420308C2 (ru) | 2005-06-06 | 2006-06-06 | Стабилизированные композиции ил-21 |
RU2011103126/10A RU2011103126A (ru) | 2005-06-06 | 2011-01-31 | Стабилизированные композиции il-21 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011103126/10A RU2011103126A (ru) | 2005-06-06 | 2011-01-31 | Стабилизированные композиции il-21 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20090047239A1 (ru) |
EP (1) | EP1890723A2 (ru) |
JP (1) | JP2008542430A (ru) |
KR (1) | KR20080019025A (ru) |
CN (1) | CN101189024A (ru) |
AU (1) | AU2006256802A1 (ru) |
BR (1) | BRPI0611251A2 (ru) |
CA (1) | CA2611200A1 (ru) |
MX (1) | MX2007015039A (ru) |
RU (2) | RU2420308C2 (ru) |
WO (1) | WO2006131515A2 (ru) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9878012B2 (en) | 2010-05-18 | 2018-01-30 | Neumedicines, Inc. | IL-12 formulations for enhancing hematopoiesis |
CN117645661A (zh) * | 2022-09-02 | 2024-03-05 | 北京志道生物科技有限公司 | 一种聚乙二醇修饰的il-21衍生物及其应用 |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS60126084A (ja) * | 1983-12-13 | 1985-07-05 | Toyo Jozo Co Ltd | グリセロリン酸オキシダーゼの安定化法 |
US4876241A (en) * | 1987-05-22 | 1989-10-24 | Armour Pharmaceutical Company | Stabilization of biological and pharmaceutical products during thermal inactivation of viral and bacterial contaminants |
IL86417A (en) * | 1987-05-22 | 1992-09-06 | Armour Pharma | Process for the inactivation of pathogens in biological or pharmaceutical material by mixing with aqueous solution containing a sugar(alcohol)and neutral salts as stabilizers |
US5494662A (en) * | 1992-04-27 | 1996-02-27 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Stimulator for bone formation |
US7198789B2 (en) * | 1998-03-17 | 2007-04-03 | Genetics Institute, Llc | Methods and compositions for modulating interleukin-21 receptor activity |
US6946261B1 (en) * | 1998-11-20 | 2005-09-20 | Migenix Inc. | Efficient methods for producing anti-microbial cationic peptides in host cells |
US6307024B1 (en) * | 1999-03-09 | 2001-10-23 | Zymogenetics, Inc. | Cytokine zalpha11 Ligand |
US20030096355A1 (en) * | 1999-07-09 | 2003-05-22 | Ke Zhang | Isolation, identification and characterization of ymkz5, a novel member of the TNF-receptor supergene family |
TR200401573T4 (tr) * | 2000-02-29 | 2004-08-23 | Pfizer Products Inc. | Stabilize edilmiş granülosit koloni uyarıcı faktör |
US6929932B2 (en) * | 2001-11-05 | 2005-08-16 | Zymogenetics, Inc. | IL-21 antagonists |
JP2005521640A (ja) * | 2001-11-13 | 2005-07-21 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | Apo−2リガンド/TRAIL製剤 |
US20050063947A1 (en) * | 2002-03-27 | 2005-03-24 | Patrick Hwu | Method for treating cancer in humans |
PT1531850E (pt) * | 2002-06-07 | 2012-05-07 | Zymogenetics Inc | Utilização de il-21 e anticorpo monoclonal para tratar cancros sólidos |
AU2003277446A1 (en) * | 2002-10-17 | 2004-05-04 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii | Microencapsulation and sustained release of biologically active polypeptides |
ES2334127T3 (es) * | 2002-12-13 | 2010-03-05 | Zymogenetics, Inc. | Produccion de il-21 en huespedes procariotas. |
DE602004029173D1 (de) * | 2003-10-10 | 2010-10-28 | Novo Nordisk As | Il-21-derivate |
EP1753458A4 (en) * | 2004-05-19 | 2009-07-22 | Wyeth Corp | MODULATION OF IMMUNOGLOBULIN PRODUCTION AND ATOPIC DISORDERS |
-
2006
- 2006-06-06 AU AU2006256802A patent/AU2006256802A1/en not_active Abandoned
- 2006-06-06 RU RU2007144057/15A patent/RU2420308C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-06-06 EP EP06763524A patent/EP1890723A2/en not_active Withdrawn
- 2006-06-06 JP JP2008515206A patent/JP2008542430A/ja active Pending
- 2006-06-06 BR BRPI0611251-0A patent/BRPI0611251A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2006-06-06 CN CNA2006800198872A patent/CN101189024A/zh active Pending
- 2006-06-06 CA CA002611200A patent/CA2611200A1/en not_active Abandoned
- 2006-06-06 WO PCT/EP2006/062920 patent/WO2006131515A2/en active Application Filing
- 2006-06-06 KR KR1020077030580A patent/KR20080019025A/ko not_active Application Discontinuation
- 2006-06-06 US US11/916,674 patent/US20090047239A1/en not_active Abandoned
- 2006-06-06 MX MX2007015039A patent/MX2007015039A/es active IP Right Grant
-
2011
- 2011-01-31 RU RU2011103126/10A patent/RU2011103126A/ru not_active Application Discontinuation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1890723A2 (en) | 2008-02-27 |
MX2007015039A (es) | 2008-01-24 |
US20090047239A1 (en) | 2009-02-19 |
WO2006131515A3 (en) | 2007-04-12 |
CN101189024A (zh) | 2008-05-28 |
WO2006131515A2 (en) | 2006-12-14 |
CA2611200A1 (en) | 2006-12-14 |
KR20080019025A (ko) | 2008-02-29 |
JP2008542430A (ja) | 2008-11-27 |
RU2007144057A (ru) | 2009-07-20 |
BRPI0611251A2 (pt) | 2010-12-07 |
AU2006256802A1 (en) | 2006-12-14 |
RU2011103126A (ru) | 2012-08-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2879387T3 (es) | Proteínas de dominio de armazón a base de fibronectina que se unen a miostatina | |
ES2620111T3 (es) | Análogos de glucagón | |
ES2759931T3 (es) | Formulaciones líquidas farmacéuticas estables de la proteína de fusión TNFR:Fc | |
ES2249933T3 (es) | Formulacion autoestable de peptido 1 tipo glucagon. | |
ES2662501T3 (es) | Derivados de amilina | |
BR112013031268B1 (pt) | Polipeptídeos | |
JP2007504178A (ja) | 安定なペプチドの製剤 | |
JP2003535106A (ja) | グルコース検知性インスリン誘導体からの、インスリンのグルコース依存性放出 | |
US8475784B2 (en) | IL-21 variants | |
JP7442595B2 (ja) | ミオスタチンに結合するフィブロネクチンベースの足場ドメインタンパク質の安定製剤 | |
JPH06228199A (ja) | 血液脳関門通過可能なペプチド結合体 | |
JP2002515445A (ja) | 細胞毒性活性を有する医薬品調製のためのhmg蛋白質の使用 | |
JP2003501479A (ja) | 薬 剤 | |
RU2420308C2 (ru) | Стабилизированные композиции ил-21 | |
US20210268117A1 (en) | Methods of generating a pegylated il-11 composition | |
JP2007533298A (ja) | Il−21の誘導体 | |
US20210024928A1 (en) | C/ebp alpha sarna compositions and methods of use | |
US7589063B2 (en) | Molecules which promote hematopoiesis | |
WO2018210919A1 (en) | Glp-1 compositions and uses thereof | |
JP6527996B2 (ja) | Fgf活性に影響を与えるジペプチド | |
TW387896B (en) | Novel dipeptide and tripeptide mimic compounds for treating Parkinson's disease | |
JP2024523280A (ja) | Ghr結合ペプチドおよびそれを含む組成物 | |
Pereira et al. | Peptide-based therapeutics: challenges and solutions | |
JP2002338599A (ja) | 血中滞留性が向上した生理活性タンパク質およびその調製方法 | |
JP2018065765A (ja) | 医療用タンパク質とポリアミノ酸の複合体、安定化方法およびその用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL: 16-2011 FOR TAG: (73) |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120607 |