RU2367459C2 - Способ получения экстракта из гинкго билоба и экстракт гинкго билоба - Google Patents

Способ получения экстракта из гинкго билоба и экстракт гинкго билоба Download PDF

Info

Publication number
RU2367459C2
RU2367459C2 RU2007143632/15A RU2007143632A RU2367459C2 RU 2367459 C2 RU2367459 C2 RU 2367459C2 RU 2007143632/15 A RU2007143632/15 A RU 2007143632/15A RU 2007143632 A RU2007143632 A RU 2007143632A RU 2367459 C2 RU2367459 C2 RU 2367459C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
weight
solution
water
extract
ppm
Prior art date
Application number
RU2007143632/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2007143632A (ru
Inventor
Клеменс ЭРДЕЛЬМАЙЕР (DE)
Клеменс ЭРДЕЛЬМАЙЕР
Германн ХАУЭР (DE)
Германн ХАУЭР
Эгон КОХ (DE)
Эгон Кох
Фридрих ЛАНГ (DE)
Фридрих Ланг
Original Assignee
Биопланта Арцнаймиттель Гмбх
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Биопланта Арцнаймиттель Гмбх filed Critical Биопланта Арцнаймиттель Гмбх
Publication of RU2007143632A publication Critical patent/RU2007143632A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2367459C2 publication Critical patent/RU2367459C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/16—Ginkgophyta, e.g. Ginkgoaceae (Ginkgo family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A23L33/11—Plant sterols or derivatives thereof, e.g. phytosterols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

Изобретение относится к фармацевтике, медицине и пищевой промышленности. Получение экстракта из гинкго билоба, имеющего пониженное содержание 4'-O-метилпиридоксина и/или бифлавонов включает следующие стадии: а) экстракцию листьев гинкго билоба с применением ацетона, содержащего воду, или алканола, содержащего 1-3 атома углерода и содержащего воду, или безводного металла, b) выделение органического растворителя путем концентрации раствора до содержания, 10% по весу, с возможной добавкой на конечных стадиях перегонки воды; c) разбавление оставшегося водного раствора водой до содержания твердых веществ от 5 до 25% по весу, охлаждение до температуры ниже 25°С и выдержку до образования осадка, d) обработку оставшегося водного раствора сульфатом аммония и последующей экстракцией по меньшей мере один раз с помощью метилэтилкетона или смеси метилэтилкетона и ацетона, e) концентрирование полученного экстракта и разбавление его смесью этанол-вода с получением раствора, содержащего 50% по весу воды и 50% по весу этанола, и с содержанием твердых веществ равных 10% по весу, f) обработку раствора соединением свинца или нерастворимым полиамидом, g) экстракцию отфильтрованного раствора с помощью алифатического или циклоалифатического растворителя с точкой кипения от 60 до 100°С, h) концентрирование оставшегося водно-спиртового раствора с последующей обработкой сульфатом аммония и экстракцией метилэтилкетоном и этанолом, i) концентрирование полученной органической фазы до содержания твердых веществ, равного от 50 до 70% по весу, k) растворение концентрата в водном спирте, содержащем 1-3 атома углерода, и возможного фильтрования, l) фильтрац�

Description

Данное изобретение относится к усовершенствованному многостадийному способу получения экстракта из гинкго билоба, имеющего пониженное содержание 4'-O-метилпиридоксина и/или бифлавонов, при этом уменьшение их содержания осуществляется путем фильтрования через адсорбирующую смолу и/или ионообменник, при этом вещества, которые должны быть удалены, задерживаются смолой. Данное изобретение относится также к экстракту, полученному из гинкго билоба, имеющему пониженное содержание 4'-O-метилпиридоксина и/или бифлавонов, который получается способом согласно данному изобретению, а также к его применению.
Уже в течение десятилетий экстракты из листьев гинкго билоба применяются в качестве лекарственного препарата. В настоящее время они используются для лечения различных видов деменции и ее симптомов, а также нарушений церебрального и периферического кровообращения. Ингредиентами, с которыми связана эффективность, являются лактоны терпенов (гинкголиды А, В, С и билобалид), а также гликозиды флавонов (кверцетин, кемпферол и изорамнетин). Листья гинкго билоба содержат также компоненты, которые не влияют на желательную эффективность, но которые могут отвечать за риски и побочное действие. Кроме неполярных ингредиентов растений, таких как гинкголевые кислоты, этими компонентами являются 4'-O-метилпиридоксин и бифлавоны. Таким образом, в экстракте гинкго, который является эффективным и в то же самое время безопасным, как это только возможно, приводящим к наименьшим побочным эффектам, эти соединения не должны содержаться.
4'-O-метилпиридоксин может вызвать появление симптомов отравления, таких как конвульсивные судороги и потеря сознания. Это соединение называется также гинкготоксином. Бифлавоны, содержащиеся в гинкго, могут быть иммунотоксичными и могут вызывать контактную аллергию. Эти бифлавоны, содержащиеся в гинкго, преимущественно представляют собой аментофлавон, билобетин, гинкгетин, изогинкгетин и скьядопитизин.
4'-O-метилпиридоксин
Figure 00000001
Бифлавоны
Figure 00000002
Аментофлавон: R1=R2=R3=Н
Билобетин: R1=R3=Н, R2=ОСН3
Гинкгетин: R3=Н, R1=R2=ОСН3
Изогинкгетин: R1=Н, R2=R3=ОСН3
Скьядопитизин: R1=R2=R3=ОСН3
Способы уменьшения содержания 4'-O-метилпиридоксина и одновременно бифлавонов, а также получаемые при этом экстракты уже описаны в ЕР 1037646 В1. Согласно этому источнику 4'-O-метилпиридоксин удерживается с помощью кислого катионообменника, а бифлавоны адсорбируются на активированном угле. Предпочтительно, эти стадии осуществляются после "обработки раствора соединением свинца или нерастворимым полиамидом". Способ по патенту ЕР 1037646 В1 основан на методе, первоначально описанном в DE 3940091 С2.
В ЕР 1037646 В1 уменьшение содержания бифлавонов и 4'-O-метилпиридоксина осуществляется на стадии, когда соли свинца и соли аммония содержатся в таком довольно большом количестве, что нужно применять повышенное количество ионообменника.
Кроме того, уменьшение содержания бифлавонов и 4'-O-метилпиридоксина описано и заявляется только как уменьшение комбинации этих веществ. Однако в зависимости от пределов, которые возможно будут установлены в будущем, и с учетом требования наименьшей модификации состава экстракта возможно будет желательным удаление только бифлавонов или только 4'-O-метилпиридоксина.
Кроме того, содержание 4'-O-метилпиридоксина менее 50 м.д. (ч/млн) и бифлавонов менее 100 м.д., которое указано в ЕР 1037646 В1, является все еще сравнительно высоким. Поскольку в ЕР 1037646 В1 не описан сравнительный пример, действительная степень очистки, достигнутая в примерах 2 и 3, не указана в этом источнике.
Таким образом, цель данного изобретения состоит в создании способа получения экстрактов гинкго, имеющих низкое содержание 4'-O-метилпиридоксина и/или низкое содержание бифлавонов, который не имеет недостатков, указанных выше и, в особенности,
- предусматривает применение легко регенерируемых и/или очень недорогих адсорбентов,
- обеспечивает содержание 4'-O-метилпиридоксина менее 20 м.д., предпочтительно менее 10 м.д. и особенно предпочтительно менее 2 м.д. и/или содержание бифлавонов менее 20 м.д., предпочтительно менее 10 м.д. и особенно предпочтительно менее 5 м.д. и
- приводит к получению экстрактов, имеющих содержание флавоноидов, равное от 20 до 30% по весу (особенно предпочтительно от 22,0 до 27,0%), лактонов терпенов от 4,5 до 8,5% по весу (особенно предпочтительно от 5,0 до 7,0%, предпочтительно содержание гинкголидов А, В и С от 2,8 до 3,4% и содержание биобалида от 2,6 до 3,2%), содержание гинкголевых кислот максимум 5 м.д., при этом указанное содержание флавоноидов равно от 22,0 до 27,0%, лактонов терпенов от 5,0 до 7,0% (из них 2,8-3,4% составляют гинкголиды А, В и С 2,6-3,2% составляет биобалид) и содержание гинкголевых кислот (максимум 5 м.д.) соответствуют требованиям German Pharmacopoeia 2003 ("Deutsches Arzneibuch", DAB).
В соответствии с DAB флавоноиды определяют в виде кверцетина, кемпферола и изорамнетина после кислого гидролиза и затем рассчитывают как гликозиды флавоноидов.
Эта цель может быть достигнута путем отделения бифлавонов при помощи адсорбирующей смолы и/или отделения 4'-O-метилпиридоксина при помощи кислых ионообменников.
Для того чтобы получить экстракты согласно данному изобретению, предпочтительно осуществить следующий способ, согласно которому стадии a)-i), а также стадия m) уже по существу описаны в DE 3940091 С2, этот способ включает:
a) экстракцию листьев гинкго билоба при температуре, равной 20-100°С, предпочтительно 40-60°С, с применением ацетона, содержащего воду, в количестве 20-90% по весу, алканола, содержащего от 1 до 3 атомов углерода (метанола, этанола, н-пропанола и изопропанола), также содержащего воду, в количестве 20-90% по весу или безводного метанола при соотношении лекарство: растворитель, равном от 1:4 до 1:20, предпочтительно от 1:5 до 1:10;
b) отделение органического растворителя путем его выпаривания до содержания максимум 10% по весу (предпочтительно максимум 5% по весу), при этом во время конечных стадий отгонки может быть добавлена вода;
c) разбавление оставшегося водного раствора водой до содержания твердых веществ, равного от 5 до 25% по весу (предпочтительно от 15 до 20% по весу), охлаждение раствора до температуры ниже 25°С (предпочтительно около 10-12°С) и выдержку оставшегося водного раствора до образования осадка;
d) обработку оставшегося водного раствора сульфатом аммония (предпочтительно до содержания до 40% по весу, особенно предпочтительно 25-35% по весу) и последующую экстракцию раствора по меньшей мере один раз с применением метилэтилкетона или смеси метилэтилкетона и ацетона (предпочтительно в соотношении от 9:1 до 4:6, в частности 6:4);
e) концентрирование полученного экстракта (предпочтительно до содержания твердых частиц, равного 50-70% по весу) и разбавление экстракта смесью этанола и воды с целью получения раствора, содержащего 50% по весу воды и 50% по весу этанола и с содержанием твердых частиц, равным 10% по весу;
f) обработку раствора соединением свинца (предпочтительно ацетатом свинца, гидроокисью ацетата свинца, нитратом свинца или водной суспензией гидроокиси свинца) до изменения цвета от коричневого до темно-коричневого или нерастворимым полиамидом (предпочтительно полиамидом 6, полиамидом 6,6 или сшитым поливинилпирролидоном (повидоном));
g) экстракцию отфильтрованного раствора при помощи алифатического или циклоалифатического растворителя, имеющего точку кипения от 60 до 100°С;
h) концентрирование оставшегося водно-спиртового раствора, последующую обработку раствора сульфатом аммония и экстрацию раствора метилэтилкетоном и этанолом (раствор предпочтительно концентрируют при пониженном давлении до содержания этанола около 5% максимально, сульфат аммония добавляют до содержания 20% по весу, экстракцию осуществляют растворителем с соотношением от 8:2 до 5:5, предпочтительно 6:4);
i) концентрацию полученной органической фазы, до содержания твердых частиц от 50 до 70% по весу;
k) растворение концентрата в водном этаноле, содержащем 1-3 атома углерода, и необязательное фильтрование продукта;
l) фильтрацию через смолу-адсорбент и/или ионообменник, при этом вещества, которые должны быть удалены, остаются на смоле, и
m) сушку концентрата (предпочтительно при максимальной температуре от 60 до 80°С) при пониженном давлении с получением сухого экстракта, имеющего содержание воды менее 5%.
Преимущество способа согласно данному изобретению состоит в том, что стадию уменьшения содержания осуществляют в конце способа. Таким образом, необходимо применять меньшее количество ионообменника и при этом достигается особенно низкое содержание 4'-O-метилпиридоксина и/или бифлавонов. Предпочтительные смолы-адсорбенты на стадии l) представляют собой смолы на основе необязательно замещенных стиролов / дивинилбензолов, такие как Diaion НР-20, НР-21 или Sepabeads SP-207 и SP-850. Предпочтительные ионообменники являются сильнокислыми ионообменниками, такими как Merck I или Amberlite IR-120. Стадия фильтрации возможно включает обычное промывание растворителем. Водный спирт на стадии k) представляет собой водный метанол, этанол, н-пропанол или изопропанол с содержанием 20-90%, соответственно, предпочтительно водный этанол, особенно предпочтительной является концентрация равная 40-60% по весу.
Предметом настоящего изобретения являются также экстракты, предпочтительно сухие экстракты, которые получаются способом по данному изобретению и которые характеризуются содержанием:
- менее 20 м.д., предпочтительно менее 10 м.д. и в особенности менее 2 м.д. 4'-O-метилпиридоксина и/или
- менее 20 м.д., предпочтительно менее 10 м.д. и в особенности менее 5 м.д. бифлавонов.
Кроме того, предмет данного изобретения составляют экстракты, в особенности сухие экстракты, которые получаются по способу по данному изобретению и которые характеризуются содержанием:
- 20-30% по весу, предпочтительно 22,0-27,0% по весу флавоноидов,
- 4,5-8,5% по весу, предпочтительно 5,0-7,0% по весу терпеновых лактонов и
- менее 10 м.д., предпочтительно менее 5 м.д. гинкголевых кислот.
Еще одним предметом данного изобретения являются также экстракты, предпочтительно сухие экстракты, которые получаются способом по данному изобретению и которые характеризуются содержанием:
- 20-30% по весу, предпочтительно 22,0-27,0% по весу флавоноидов,
- 2,5-4,5% по весу гинкголидов А, В и С в общем, предпочтительно 2,8-3,4% по весу гинкголидов А, В и С в общем,
- 2,0-4,0% по весу, предпочтительно 2,6-3,2% по весу билобалида,
- менее 10 м.д., предпочтительно не более 5 м.д. гинкголевых кислот и
- менее 20 м.д., предпочтительно менее 10 м.д., особенно предпочтительно менее 2 м.д. 4'-O-метилпиридоксина и/или
- менее 20 м.д., предпочтительно менее 10 м.д. и особенно предпочтительно менее 5 м.д. бифлавонов.
Согласно European Pharmacopoeia (Европейской Фармакопее) сухие экстракты обычно содержат сухой остаток, составляющий по меньшей мере 95% по весу.
Экстракты согласно данному изобретению могут применяться в виде порошков, гранул, таблеток, драже (таблеток с покрытием) или капсул, предпочтительно перорально.
Для того чтобы приготовить таблетки, экстракт смешивают с подходящими фармацевтически приемлемыми адъювантами, такими как лактоза, целлюлоза, двуокись кремния, кроскармелоза и стеарат магния, и прессуют в таблетки, которые могут быть снабжены подходящим покрытием, например, на основе гидроксиметилцеллюлозы, полиэтиленгликоля, пигментов (таких как двуокись титана, окись железа) и талька. Экстракт по данному изобретению помещают в капсулы, возможно с добавлением адъювантов, таких как стабилизаторы, наполнители и т.п. Доза экстракта, принимаемая в день, составляет 10-2000 мг, предпочтительно 50-1000 мг и в особенности предпочтительно 100-500 мг.
Еще одним предметом данного изобретения являются лекарственные препараты, пищевые продукты и другие препараты, содержащие эти экстракты, возможно в сочетании с другими веществами, такими как активные ингредиенты и/или фармацевтически приемлемые адъюванты.
Термин "пищевой продукт", используемый в данном описании, относится к диетическим пищевым продуктам, диетическим добавкам, а также к медицинским пищевым продуктам и диетическим добавкам.
Примеры
Приготовление раствора экстракта, используемого в примерах 1 и 2, а также в сравнительных примерах 1 и 2.
Высушенные листья гинкго билоба подвергали экстракции при температуре около 50°С, используя семикратное количество по отношению к их весу (вес/вес) (то есть отношение лекарство - растворитель равно 1:7) смеси ацетон/вода 60/40 (вес/вес) (стадия а)).
Органический растворитель отделяли от экстракта (стадия в)) и оставшийся концентрированный водный раствор разбавляли водой до содержания твердых частиц, равного примерно 10% по весу. Раствор охлаждали до температуры около 12°С при перемешивании и полученный осадок удаляли (стадия с)). К оставшемуся водному раствору добавляли примерно 30% по весу сульфата аммония и полученный раствор подвергали экстракции смесью метилэтилкетона и ацетона в отношении 6:4 (стадия d)).
Полученный экстракт концентрировали и полученный таким образом экстракт разбавляли водой и этанолом, получали раствор, содержащий 50% по весу воды и 50% по весу этанола, с содержанием твердых частиц около 10% по весу (стадия е)). Раствор отфильтровывали и добавляли в фильтрат водный раствор ацетата гидроокиси свинца (стадия f).
После фильтрации оставшийся водно-спиртовой раствор экстрагировали гептаном (стадия g)).
Затем водно-спиртовой раствор концентрировали при пониженном давлении до содержания этанола, равного 5%, и добавляли сульфат аммония до получения его содержания, равного примерно 20% по весу в расчете на количество воды. Полученный раствор экстрагировали смесью метилэтилкетона и этанола в отношении 6:4 (стадия h)).
Полученную органическую фазу концентрировали (содержание твердых частиц около 55% по весу) (стадия i)). Затем полученный продукт разбавляли этанолом и водой, получали раствор с содержанием этанола около 75% и с содержанием твердых частиц, равным около 15% (стадия k)).
Пример 1: экстракт гинкго с пониженным содержанием 4'-O-метилпиридоксина
1249 г раствора экстракта, полученного в соответствии со способом, описанным выше, разбавляли водой до содержания этанола около 40% (вес/вес) и пропускали 50 мл (что соответствует 0,28 мл/г сухого экстракта) через Amberlite IR-120 (сильнокислый ионообменник) (колонка: примерно 2×16,5 см; поток: около 8 мл/мин) (стадия 1)), затем промывали 200 мл 50%-ного этанола (вес/вес). Полученный раствор концентрировали в роторном испарителе и сушили в вакууме при 50°С (стадия m)): 179,4 г.
Как можно видеть из следующей Таблицы, было достигнуто содержание 4'-O-метилпиридоксина, равное 0,4 м.д. без существенного изменения состава ингредиентов, которое релевантно по отношению к эффективности.
Сравнительный пример 1: экстракт гинкго без уменьшения содержания на стадии 1) по данному изобретению
98,4 г раствора экстракта, примененного в примере 1, концентрировали путем выпаривания и сушили под вакуумом при 50°С: 14,7 г.
Пример 2а: экстракт гинкго с пониженным содержанием бифлавонов
500 г раствора экстракта, полученного в препаративном примере, описанном выше, разбавляли водой до содержания этанола около 40% (вес/вес) и 400 мл (что соответствует 5,7 мл/г сухого экстракта) пропускали через Sepabeads SP-850 (смола-адсорбент) (колонка: примерно 4×32 см; поток: около 8 мл/мин) (стадия 1)), затем промывали примерно 2 л 40%-ного этанола (вес/вес) в общем. 10% полученного раствора (259,3 г) концентрировали в роторном испарителе и сушили при замораживании (стадия m)); 6,92 г оставшиеся 90% раствора применяли в примере 2b).
Как видно из следующей Таблицы, было достигнуто содержание бифлавона менее 1 м.д. без существенного изменения состава ингредиентов, что релевантно по отношению к эффективности.
Пример 2b: экстракт гинкго с пониженным содержанием 4'-O-метилпиридоксина
90% раствора, полученного в примере 2а) (2334,1 г) в количестве 25 мл (что соответствует 0,40 мл/г сухого экстракта) пропускали через Amberlite IR-120 (сильнокислый ионообменник) (колонка: примерно 1,5×11 см; поток: около 10 мл/мин) (стадия 1)), затем промывали 100 мл 40%-ного этанола (вес/вес). Полученный раствор концентрировали в роторном испарителе и сушили при замораживании (стадия m)): 61,67 г.
Как можно видеть из следующей Таблицы, было достигнуто содержание 4'-O-метилпиридоксина, равное 0,4 м.д., и содержание бифлавонов менее 1 м.д. соответственно, без существенного изменения ингредиентов, что релевантно в отношении эффективности.
Сравнительный пример 2: экстракт гинкго без уменьшенного содержания примесей на стадии 1) по данному изобретению.
50 г раствора экстракта, использованного в примере 2а, концентрировали путем выпаривания и сушили при замораживании: 7,05 г.
Сравнительный пример 3: экстракт гинкго с уменьшением содержания бифлавонов и 4'-O-метилпиридоксина после обработки соединением свинца (стадия f)) в соответствии с ЕР 1037646 В1.
Высушенные листья гинкго билоба (лекарство) экстрагировали при температуре около 50°С, используя семикратное по отношению к их весу количество (вес/вес) (то есть отношение лекарство - растворитель 1:7) смеси ацетон/вода 60/40 (вес/вес). Органический растворитель отделяли от экстракта и оставшийся концентрированный водный раствор разбавляли водой до содержания твердых веществ около 10% по весу, охлаждали до температуры около 12°С при перемешивании и удаляли полученный осадок.
Около 30% по весу сульфата аммония добавляли к водному раствору и полученный раствор экстрагировали смесью метилэтилкетона и ацетона в отношении 6:4.
Полученный экстракт концентрировали и полученный таким образом концентрат разбавляли водой и этанолом, получали раствор, содержащий 50% по весу воды и 50% по весу этанола, и с содержанием твердых частиц около 10% по весу. Раствор фильтровали, в фильтрат добавляли водный раствор ацетата гидроокиси свинца и снова отфильтровывали (стадия f)).
150 мл полученного таким образом раствора (порция сухого экстракта: 7,1%, содержание этанола: около 50%) перемешивали с 2,5 г (что соответствует 0,17 к/г конечного продукта) активного углерода в течение 30 мин при комнатной температуре. Фильтрат помещали в колонку с 4,2 мл (что соответствует 0,28 мл/г конечного продукта) сильнокислого катионообменника (Merck I). Колонку с ионообменником промывали 4×5 мл EtOH (50%).
Соединенные элюаты экстрагировали, встряхивая с 3×70 мл н-гексана. Фаза этанол/вода концентрировалась в роторном испарителе и разбавляли водой до 100 г. Полученный таким образом раствор экстракта экстрагировали 1×40 мл, 2×30 мл и 1×20 мл смеси метилэтилкетона: этанол в отношении 3: 2, для достижения разделения фаз добавляли 15 г сульфата аммония.
Органическую фазу перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре после добавления 25 г сульфата аммония. Нерастворившийся сульфат аммония, а также образовавшуюся фазу разделяли. Раствор экстракта концентрировали в роторном испарителе при температуре 50°С и сушили под вакуумом при температуре 60°С: 14,8 г.
Как можно увидеть из данных в следующей Таблице, содержание 4'-O-метилпиридоксина составило 52 м.д., содержание бифлавонов - 31,3 м.д. и, таким образом, согласно данному изобретению по сравнению с примером 2b) достигаются гораздо более высокое содержание и худшие результаты уменьшения содержания этих компонентов.
Определение содержания флавоноидов, терпеновых лактонов и гинкголевых кислот, указанных в Таблице 1, проводили в соответствии с DAB.
Количественное определение 4'-O-метилпиридоксина осуществляли методом ЖХВР и методом флуоресценции после обогащения при помощи картриджей Sep Рак Plus С18 с последующим обогащением при помощи карриджей Bond Elut LRC-SC{, при этом применяли колонку Phenomenex Prodigy 5 мк ODS - 3 ЖХВР и градиент трифторуксусная кислота (pH 2): метанол=9:1 (об/об)→метанол.
Определение содержания бифлавонов, указанных в Таблице 1, осуществляли методом ЖХВР и УФ-обнаружения при длине волны 340 нм при помощи колонки Nova Рак С18 с градиентом вода: ацетонитрил 9:1 (об./об.)+0,3% по объему фосфорной кислоты (85%)→ацетонитрил+0,3% по объему фосфорной кислоты.
В каждом случае результаты калибровали, используя эталонные вещества, имеющие высокую, определенную степень чистоты.
Figure 00000003

Claims (13)

1. Способ получения экстракта из гинкго билоба, имеющего пониженное содержание 4'-O-метилпиридоксина и/или бифлавонов, включающий следующие стадии:
a) экстракции листьев гинкго билоба с применением ацетона, содержащего воду, или алканола, содержащего 1-3 атома углерода и содержащего воду, или безводного метанола,
b) выделение органического растворителя путем концентрации раствора до содержания, равного 10% по весу максимально, с возможной добавкой на конечных стадиях перегонки воды;
c) разбавления оставшегося водного раствора водой до содержания твердых веществ от 5 до 25% по весу, охлаждения до температуры ниже 25°С и выдержки до образования осадка,
d) обработки оставшегося водного раствора сульфатом аммония и последующей экстракции по меньшей мере один раз с помощью метилэтилкетона или смеси метилэтилкетона и ацетона,
e) концентрирования полученного экстракта и разбавление его смесью этанол-вода с получением раствора, содержащего 50% по весу воды и 50% по весу этанола, и с содержанием твердых веществ, равных 10% по весу,
f) обработки раствора соединением свинца или нерастворимым полиамидом,
g) экстракции отфильтрованного раствора с помощью алифатического или циклоалифатического растворителя с точкой кипения от 60 до 100°С,
h) концентрирования оставшегося водно-спиртового раствора с последующей обработкой сульфатом аммония и экстракцией метилэтилкетоном и этанолом,
i) концентрирования полученной органической фазы до содержания твердых веществ, равного от 50 до 70% по весу,
k) растворения концентрата в водном спирте, содержащем 1-3 атома углерода, и возможного фильтрования,
l) фильтрации через смолу - адсорбент на основе возможно замещенных стиролов/дивинилбензолов, для снижения содержания бифлавонов и/или сильнокислый ионообменник для снижения содержания 4'-O-метилпиридоксина, при этом вещества, которые должны быть удалены, остаются в смоле, и
m) сушки концентрата при пониженном давлении с получением сухого экстракта, содержащего воду в количестве менее 5%.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что водный спирт на стадии к) представляет собой водный этанол.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что водный этанол содержится в количестве от 40 до 60% по весу.
4. Экстракт из листьев гинкго билоба, предназначенный для лечения деменции и нарушений кровообращения, полученный способом по п.1, характеризующийся тем, что он содержит:
менее 10 м.д. 4'-O-метилпиридоксина и/или
менее 20 м.д. бифлавонов, выбранных из группы, содержащей аментофлавон, билобетин, гинкгетин, изогинкгетин и скиадопитазин.
5. Экстракт по п.4, отличающийся тем, что он содержит менее 2 м.д. 4'-O-метилпиридоксина.
6. Экстракт по п.4 или 5, отличающийся тем, что он содержит менее 10 м.д. бифлавонов.
7. Экстракт по п.4 или 5, отличающийся тем, что он содержит менее 5 м.д. бифлавонов.
8. Экстракт по п.4, отличающийся тем, что он содержит:
20-30% по весу флавоноидов, выбранных из группы, содержащей гликозиды кверцетин, кемпферол и изорамнетин,
4,5-8,5% по весу терпеновых лактонов и
менее 10 м.д. гинкголевых кислот.
9. Экстракт по п.4, отличающийся тем, что он содержит:
22,0-27,0% по весу флавоноидов, выбранных из группы, содержащей гликозиды кверцетин, кемпферол и изорамнетин,
5,0-7,0% по весу терпеновых лактонов и
максимум 5 м.д. гинкголевых кислот.
10. Экстракт по п.4, отличающийся тем, что он содержит:
22,0-27,0% по весу флавоноидов, выбранных из группы, содержащей гликозиды, кверцетин, кемпферол и изорамнетин,
2,8-3,4% по весу гинкголидов А, В и С в общем,
2,6-3,3 по весу билобалида и
максимум 5 м.д. гинкголевых кислот.
11. Применение экстракта по любому из пп.4-10 для изготовления лекарственного средства или пищевого продукта.
12. Лекарственное средство, предназначенное для лечения деменции и нарушений кровообращения, характеризующееся наличием в своем составе экстракта гинкго по любому из пп.4-10.
13. Пищевой продукт, характеризующийся наличием в своем составе экстракта гинкго по любому из пп.4-10.
RU2007143632/15A 2005-05-03 2006-04-28 Способ получения экстракта из гинкго билоба и экстракт гинкго билоба RU2367459C2 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102005020685 2005-05-03
DE102005020685.9 2005-05-03
DE102005061948.7 2005-12-23
DE102005061948A DE102005061948A1 (de) 2005-05-03 2005-12-23 Verbessertes Verfahren zur Herstellung von 4'-O-Methylpyridoxin- und/oder Biflavon-armen Ginkgoextrakten

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007143632A RU2007143632A (ru) 2009-06-10
RU2367459C2 true RU2367459C2 (ru) 2009-09-20

Family

ID=36693938

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007143632/15A RU2367459C2 (ru) 2005-05-03 2006-04-28 Способ получения экстракта из гинкго билоба и экстракт гинкго билоба

Country Status (26)

Country Link
US (2) US20060251746A1 (ru)
EP (1) EP1868625B1 (ru)
JP (2) JP4304230B2 (ru)
KR (1) KR100933721B1 (ru)
CN (2) CN104189025A (ru)
AR (1) AR054270A1 (ru)
AT (1) ATE401903T1 (ru)
AU (1) AU2006243378B2 (ru)
BR (1) BRPI0611093B1 (ru)
CA (1) CA2606843C (ru)
DE (2) DE102005061948A1 (ru)
DK (1) DK1868625T3 (ru)
DO (1) DOP2006000091A (ru)
ES (1) ES2310408T3 (ru)
JO (1) JO2523B1 (ru)
MX (1) MX2007013398A (ru)
MY (1) MY143650A (ru)
NZ (1) NZ563818A (ru)
PE (1) PE20061296A1 (ru)
PL (1) PL1868625T3 (ru)
PT (1) PT1868625E (ru)
RU (1) RU2367459C2 (ru)
SI (1) SI1868625T1 (ru)
TW (1) TWI376230B (ru)
UA (1) UA84519C2 (ru)
WO (1) WO2006117169A1 (ru)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3446696A1 (de) 2007-12-21 2019-02-27 Dr. Willmar Schwabe GmbH & Co. KG Verwendung eines extraktes aus blättern von ginkgo biloba
EP2494979B1 (de) 2011-03-04 2019-03-27 Dr. Willmar Schwabe GmbH & Co. KG Verwendung von Extrakten aus Blättern von Ginkgo biloba zur Prävention und Therapie von Komplikationen nach operativer Arteriosklerose-Behandlung sowie von Folgeerscheinungen der Arteriosklerose
MX341428B (es) 2011-04-27 2016-08-18 Dr Willmar Schwabe Gmbh & Co Kg Tableta de liberacion controlada de extracto de ginkgo biloba y procedimiento para su obtencion.
DE102014202318B4 (de) 2014-02-10 2016-10-06 Dr. Willmar Schwabe Gmbh & Co. Kg Verbessertes Verfahren zur Herstellung von Ginkgoextrakten
CN103919768B (zh) * 2014-03-30 2016-03-16 吴静 一种含有异银杏双黄酮和白果内酯的药物组合物及其制剂
CN107509997B (zh) * 2017-09-08 2021-02-26 南京林业大学 一种基于内源糖苷酶酶解结合树脂吸附脱除白果致毒成分的方法及其制备的产品和应用
CN107647407A (zh) * 2017-11-14 2018-02-02 宜昌东方昌绿茶业有限公司 一种从银杏茶中提取黄酮素的方法
CN113491721B (zh) * 2020-03-19 2022-05-31 江苏得乐康生物科技有限公司 一种脱除银杏叶提取物中银杏毒素的方法
CN115894424B (zh) * 2023-01-06 2023-05-12 中日友好医院(中日友好临床医学研究所) 新型双黄酮类化合物及其制备方法、药物组合物和应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2627387B1 (fr) 1988-02-24 1992-06-05 Fabre Sa Pierre Procede d'obtention d'un extrait de feuilles de ginkgo biloba
GB8822004D0 (en) * 1988-09-20 1988-10-19 Indena Spa New extracts of ginkgo biloba & their methods of preparation
DE3940091A1 (de) * 1989-12-04 1991-06-06 Schwabe Willmar Gmbh & Co Extrakt aus blaettern von ginkgo biloba, verfahren zu seiner herstellung und den extrakt enthaltende arzneimittel
JP3518882B2 (ja) 1993-11-12 2004-04-12 ダイセル化学工業株式会社 イチョウエキス及びその製造法
DE19756848C2 (de) * 1997-12-19 2003-01-16 Schwabe Willmar Gmbh & Co Extrakte aus Blättern von Ginkgo biloba mit vermindertem Gehalt an 4'-O-Methylpyridoxin und Biflavonen
US20040076691A1 (en) * 2002-01-16 2004-04-22 David Haines Anti-inflammatory formulations
CN1251675C (zh) * 2004-02-10 2006-04-19 张正生 一种注射用银杏达莫粉针剂及其制备方法
CN100451013C (zh) * 2004-04-21 2009-01-14 徐州技源天然保健品有限公司 一种从卷柏中提取穗花杉双黄酮提取物的生产工艺

Also Published As

Publication number Publication date
JO2523B1 (en) 2010-03-17
EP1868625A1 (en) 2007-12-26
DE602006001949D1 (de) 2008-09-04
CN101175505A (zh) 2008-05-07
AU2006243378A1 (en) 2006-11-09
US20060251746A1 (en) 2006-11-09
AR054270A1 (es) 2007-06-13
KR20070112271A (ko) 2007-11-22
CA2606843C (en) 2010-05-25
US20080286391A1 (en) 2008-11-20
SI1868625T1 (sl) 2008-12-31
TW200716149A (en) 2007-05-01
UA84519C2 (ru) 2008-10-27
US8642099B2 (en) 2014-02-04
CN104189025A (zh) 2014-12-10
PL1868625T3 (pl) 2009-01-30
WO2006117169A1 (en) 2006-11-09
DOP2006000091A (es) 2007-01-31
BRPI0611093B1 (pt) 2018-01-16
JP4304230B2 (ja) 2009-07-29
RU2007143632A (ru) 2009-06-10
BRPI0611093A2 (pt) 2010-08-10
AU2006243378B2 (en) 2008-03-20
JP2008540354A (ja) 2008-11-20
PT1868625E (pt) 2008-09-22
PE20061296A1 (es) 2007-01-06
EP1868625B1 (en) 2008-07-23
NZ563818A (en) 2009-11-27
KR100933721B1 (ko) 2009-12-24
ES2310408T3 (es) 2009-01-01
DK1868625T3 (da) 2008-11-10
MY143650A (en) 2011-06-30
TWI376230B (en) 2012-11-11
JP2009173663A (ja) 2009-08-06
ATE401903T1 (de) 2008-08-15
MX2007013398A (es) 2007-12-07
CA2606843A1 (en) 2006-11-09
DE102005061948A1 (de) 2006-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2367459C2 (ru) Способ получения экстракта из гинкго билоба и экстракт гинкго билоба
CA1337973C (en) Extracts of ginkgo biloba and their methods of preparation
JP2017505334A (ja) イチョウ抽出物を製造するための改良法
JP3808494B2 (ja) プロアントシアニジン高含有物の製造方法
RU2356563C1 (ru) Способ получения экстракта гинкго билоба, экстракт, полученный этим способом, и его применение
JP2002519383A (ja) 水溶性の天然植物乾燥抽出物、殊にテルペノイド及びフラボン配糖体の高含分を有するイチョウ抽出物
KR20060069885A (ko) 프로안토시아니딘 고함유물의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
TK4A Correction to the publication in the bulletin (patent)

Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL: 26-2009 FOR TAG: (73)