RU2317300C2

RU2317300C2 - Производные тиофенгликозида, содержащие эти соединения лекарственные средства и их применение

Info

Publication number: RU2317300C2
Application number: RU2005103602/04A
Authority: RU
Inventors: Хайнер Гломбик; Венделин Фрик; Хуберт Хойер; Вернер Крамер; Харм Бруммерхоп; Оливер ПЛЕТТЕНБУРГ
Original assignee: Санофи-Авентис Дойчланд Гмбх
Priority date: 2002-07-11
Filing date: 2003-06-27
Publication date: 2008-02-20
Also published as: EP1523488B1; EP1964845A1; OA12880A; DK1523488T3; MEP60708A; EP1964844B1; ES2316818T3; CN1668628A; EP1964844A1; JP4511927B2; MXPA05000044A; DE50313056D1; ATE414095T1; HK1080482A1; HRP20050014A2; KR20050021452A; DE50310783D1; IL191926A0; AU2003246620B2; PE20040655A1

Abstract

Настоящее изобретение относится к производным тиофенгликозида или их фармацевтически приемлемым солям общей формулы I

где

R1, R2 - водород, (С₁-С₆)-алкил, возможно замещенный фтором или фенил,

А-(С₀-С₁₅)-алкандиил, причем один или несколько С-атомов могут быть заменены на -(С=O)-, -СН=СН-, -СН(ОН)- или -NH-;

n означает число от 0 до 4;

Cyc1 означает 5-6-членный ненасыщенный цикл, причем один С-атом может быть заменен на S;

R3, R4, R5 - водород, F, Cl, Br, J, ОН, NO₂, CN, СООН, СОО(С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₈)-алкил, (С₂-С₆)-алкенил, (С₁-С₁₂-алкокси, НО-(С₁-С₆)-алкил, S-(С₁-С₆)-алкил, O-(СН₂)₀-фенил, или

R3 и R4 вместе с соединенными с ними С-атомами образуют 5-7-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный цикл Сус2, причем 1 или 2 С-атома могут быть заменены на О,

R5 - водород.

Соединения пригодны в качестве антидиабетических средств. Описаны также лекарственное средство на основе соединений I, способ его получения и применение соединений для получения лекарственного средства для лечения диабета типа I и II. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 1 табл.

Description

Изобретение относится к замещенным производным тиофенгликозида, их физиологически приемлемым солям, а также физиологически функциональным производным.

Известны антиревматическое средство тенидап (β-D-глюкопиранозидуроновая кислота, 5-[(Z)-[1-(аминокарбонил)-5-хлор-1,2-дигидро-2-оксо-3Н-индол-3-илиденгидроксиметил-3-тиенил) (H.G.Fouda и др., СА, 1997: 165448), а также 3-амино-2-бензоил-5-глюкопиранозиламинотиофены (J.Fuentes и др. Tetrahedron Asymmetry, 9, 2517-2532 (1998)).

Задачей изобретения является получение новых соединений, с помощью которых возможно предупреждение и лечение диабета типа 1 и диабета типа 2.

Изобретение относится поэтому к соединениям формулы (I):

где

R1, R2 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, ОН, NO₂, CN, СООН, СО(С₁-С₆)-алкил, COO(C₁-C₆)-алкил, CONH₂, CONH(C₁-С₆)-алкил, CON[(C₁-C₆)-алкил]₂, (C₁-C₆)-алкил, (С₂-С₆)-алкенил, (С₂-С₆)-алкинил, (С₁-С₆)-алкоксил, НО-(С₁-С₈)-алкил, (С₁-С₆)-алкокси-(С₁-С₆)-алкил, фенил, бензил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, причем в алкильных и алкоксильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

SO₂-NH₂, SO₂NH(C₁-C₆)-алкил, SO₂N[(C₁-C₆)-алкил]₂, S-(С₁-С₆)-алкил, S-(CH₂)_o-фенил, SO-(C₁-C₆)-алкил, SO-(CH₂)_o-фенил, SO₂-(C₁-C₆)-алкил, SO₂-(CH₂)_o-фенил, причем o может означать 0-6 и фенильный остаток может быть замещен вплоть до двукратно с помощью F, Cl, Br, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, (С₁-С₆)-алкоксила, (C₁-C₆)-алкила, NH₂;

NH₂, NH-(C₁-C₆)-алкил, N((C₁-C₆)-алкил)₂, NH-(C₁-C₇)-ацил, фенил, О-(СН₂)_o-фенил, причем o может означать 0-6 и причем фенильное кольцо может быть замещено вплоть до трехкратно с помощью F, Cl, Br, J, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, (C₁-C₆)-алкоксила, (C₁-C₆)-алкила, NH₂, NH(С₁-С₆)-алкила, N-((С₁-С₆)-алкил)₂, SO₂-CH₃, COOH, COO(C₁-C₆)-алкила, CONH₂;

А означает (С₀-С₁₅)-алкандиил, причем один или несколько атомов углерода алкандиильного остатка, независимо друг от друга, могут быть заменены на -О-, -(С=О)-, -СН=СН-, -С≡С-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF₂-, -(S=O)-, -(SO₂)-, -N((C₁-C₆)-алкил)-, -N((C₁-C₆)-алкилфенил)- или -NH-;

n означает число от 0 до 4;

Сус1 означает 3-7-членный насыщенный, частично насыщенный или ненасыщенный цикл, причем один атом углерода может быть заменен на О или S;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, OH, NO₂, CN, COOH, COO(C₁-C₆)-алкил, CO(C₁-C₄)-алкил, CONH₂, CONH(C₁-C₆)-алкил, CON[(C₁-C₆)-алкил]₂, (С₁-С₈)-алкил, (С₂-С₆)-алкенил, (С₂-С₆)-алкинил, (С₁-С₁₂)-алкоксил, НО-(С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₆)-алкокси-(С₁-С₆)-алкил, причем в алкильных и алкоксильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

SO₂-NH₂, SO₂NH(C₁-C₆)-алкил, SO₂N[(C₁-C₆)-алкил]₂, S-(С₁-С₆)-алкил, S-(CH₂)_o-фенил, SO-(C₁-C₆)-алкил, SO-(CH₂)_o-фенил, SO₂-(C₁-C₆)-алкил, SO₂-(CH₂)_o-фенил, причем o может означать 0-6 и фенильный остаток может быть замещен вплоть до двукратно с помощью F, Cl, Br, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, (C₁-C₆)-алкоксила, (С₁-С₆)-алкила, NH₂;

NH₂, NH-(C₁-C₆)-алкил, N-((C₁-C₆)-алкил)₂, NH(C₁-C₇)-ацил, фенил, (СН₂)_о-фенил, О-(СН₂)_o-фенил, причем o может означать 0-6 и причем фенильное кольцо может быть замещено вплоть до трехкратно с помощью F, Cl, Br, J, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, (C₁-C₈)-алкоксила, (С₁-С₆)-алкила, NH₂, NH(С₁-С₆)-алкила, N-((С₁-С₆)-алкил)₂, SO₂-CH₃, COOH, COO(C₁-C₆)-алкила, CONH₂;

R3 и R4 вместе с соединенными с ними атомами углерода образуют 5-7-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный цикл Сус2, причем 1 или 2 атома углерода цикла также могут быть заменены на N, O или S и Сус2 может быть незамещен или замещен с помощью (С₁-С₆)-алкила, (С₂-С₅)-алкенила, (С₂-С₅)-алкинила, причем, смотря по обстоятельствам, одна группа -СН₂- может быть заменена на О, или с помощью Н, F, Cl, OH, CF₃, NO₂, CN, COO(C₁-C₄)-алкила, CONH₂, CONH(C₁-C₄)-алкила, OCF₃; и

R5 означает атом водорода;

а также к их фармацевтически приемлемым солям.

Предпочтительны соединения формулы (I), где А связан с тиенильным циклом в положении 2.

Далее, предпочтительны соединения формулы (I), где

R1, R2 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, OH, NO₂, CN, COOH, CO(C₁-C₆)-алкил, СОО(С₁-С₆)-алкил, CONH₂, CONH(C₁-C₆)-алкил, CON[(C₁-C₆)-алкил]₂, (C₁-C₈)-алкил, (С₂-С₆)-алкенил, (С₂-С₆)-алкинил, (С₁-С₆)-алкоксил, НО-(С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₆)-алкокси-(С₁-С₆)-алкил, фенил, бензил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, SO(C₁-C₆)-алкил, причем в алкильных и алкоксильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

n означает число 2 или 3;

Сус1 означает 5-6-членный насыщенный, частично насыщенный или ненасыщенный цикл, причем один атом углерода может быть заменен на О или S;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, OH, NO₂, CN, COOH, COO(C₁-C₆)-алкил, CO(C₁-C₄)-алкил, CONH₂, CONH(C₁-C₆)-алкил, CON[(C₁-C₆)-алкил]₂, (С₁-С₈)-алкил, (С₂-С₆)-алкенил, (С₂-С₆)-алкинил, (С₁-С₁₂)-алкоксил, НО-(С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₆)-алкокси-(С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₄)-алкилфенил, (С₁-С₄)-алкоксифенил, S-(C₁-C₆)-алкил, SO-(С₁-С₆)-алкил, причем в алкильных и алкоксильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

или

R5 означает атом водорода.

Особенно предпочтительны соединения формулы (I), где

R1, R2 означают атом водорода, (С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₄)-алкоксил, НО-(С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкокси-(С₁-С₄)-алкил, F, Cl, CF₃, OCF₃, OCH₂CF₃(C₁-C₄)-алкил-CF₂-, фенил, бензил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, (С₂-С₄)-алкенил, (С₂-С₄)-алкинил, СОО(С₁-С₄)-алкил;

А означает -СН=СН-СН₂- или (С₁-С₄)-алкандиил, причем одна или две группы -СН₂- также могут быть заменены на -(С=О)-, -СН=СН-, -СН(ОН)-, -NH-, -CHF-, -CF₂-, -O-;

n означает число 2 или 3;

Сус1 означает ненасыщенный цикл, причем один атом углерода может быть заменен на О или S;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, NO₂, OH, CN, (C₁-C₆)-алкил, (С₁-С₈)-алкоксил, OCF₃, OCH₂CF₃, S-(C₁-C₄)-алкил, СООН, НО-(С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкокси-(С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₂)-алкилфенил, (С₁-С₂)-алкоксифенил; или

R3 и R4 вместе означают -СН=СН-О-, -СН=СН-S-, -O-(CH₂)_p-O-, где р = 1 или 2, -О-, -CF₂-O-, -CH=CH-CH=CH-; и

R5 означает атом водорода.

Особенно предпочтительны, далее, соединения формулы (I), где R2 означает атом водорода.

В высшей степени предпочтительны соединения формулы (I), где

R1 означает атом водорода, CF₃, (C₁-C₄)-алкил, фенил;

R2 означает атом водорода;

А означает -СН₂-, -С₂Н₄-, -С₃Н₆-, -СН(ОН)-, -(С=О)-, -СН=СН-, -СН=СН-СН₂-, -СО-СН₂-СН₂- или -СО-NH-CH₂-;

n означает число 2 или 3;

Сус1 означает ненасыщенный цикл, причем 1 атом углерода может быть заменен на S;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, J, NO₂, OH, CN, (C₁-C₆)-алкил, (С₁-С₈)-алкоксил, -О-СН₂-фенил, OCF₃, S-CH₃, COOH; или

R3 и R4 вместе означают -СН=СН-О-, -О-(СН₂)_р-О-, где р = 1 или 2, -О-CF₂-O-, -CH=CH-CH=CH-; и

R5 означает атом водорода.

Особенно предпочтительны, далее, соединения формулы (I), где

А означает -СН₂- или -СН₂-СН₂-; или

Сус1 означает фенил; или

Сус2 означает тиенил.

Далее, в особенности следует назвать соединения формулы (I), где Сус1 является монозамещенным, или Сус1 является замещенным в пара-положении, или Сус1 является замещенным в мета-положении.

Изобретение относится к соединениям формулы (I) в форме их рацематов, рацемических смесей и чистых энантиомеров, а также к их диастереомерам и их смесям.

Алкильные остатки, включая алкоксил, алкенил и алкинил, в заместителях R1, R2, R3, R4 и R5 могут быть как линейными, так и также разветвленными.

Сахаридные остатки в соединениях формулы (I) означают как L-, так и D-сахара в их альфа(α)- и бета(β)-форме, как, например, аллоза, альтроза, глюкоза, манноза, гулоза, идоза, галактоза, талоза. Следует назвать предпочтительно β-глюкозу, β-галактозу, β-аллозу и α-маннозу, особенно предпочтительно β-глюкозу, β-аллозу и α-маннозу, в высшей степени предпочтительно β-глюкозу.

Фармацевтически приемлемые соли из-за их более высокой растворимости в воде по сравнению с исходными или базовыми соединениями особенно пригодны для применений в медицине. Эти соли должны иметь фармацевтически приемлемый анион или катион. Пригодными фармацевтически приемлемыми аддитивными солями кислот предлагаемых согласно изобретению соединений являются соли неорганических кислот, таких как соляная кислота, бромоводородная кислота, фосфорная кислота, метафосфорная кислота, азотная кислота и серная кислота, а также органических кислот, как, например, уксусная кислота, бензолсульфокислота, бензойная кислота, лимонная кислота, этансульфокислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, гликолевая кислота, изетионовая кислота, молочная кислота, лактобионовая кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, метансульфокислота, янтарная кислота, п-толуолсульфокислота и винная кислота. Пригодными фармацевтически приемлемыми основными солями являются аммониевые соли, соли щелочных металлов (как натриевые и калиевые соли), соли щелочноземельных металлов (как магниевые и кальциевые соли) и соли трометамола (2-амино-2-гидроксиметил-1,3-пропандиол), диэтанол-амина, лизина или этилендиамина.

Соли с фармацевтически неприемлемым анионом, как, например, трифторацетат-анион, также входят в рамки изобретения как полезные промежуточные продукты для получения или очистки фармацевтически приемлемых солей и/или для использования в случае нетерапевтических, например, in vitro, применений.

Используемое в данном контексте понятие "физиологически функциональное производное" означает любое физиологически приемлемое производное предлагаемого согласно изобретению соединения формулы (I), например, сложный эфир, которое при введении млекопитающему, как, например, человеку, способно (прямо или косвенно) образовывать соединение формулы (I) или его активный метаболит.

К физиологически функциональным производным относятся также пролекарственные формы предлагаемых согласно изобретению соединений, как, например, описываемые Н. Okada и др., Chem. Pharm. Bull., 42, 57-61 (1994). Такие пролекарства in vivo могут метаболизироваться до предлагаемого согласно изобретению соединения. Эти пролекарства сами могут быть активными или неактивными.

Предлагаемые согласно изобретению соединения могут также находиться в различных полиморфных формах, например, в виде аморфной и кристаллической полиморфных формах. Все полиморфные формы предлагаемых согласно изобретению соединений входят в рамки изобретения и являются объектом изобретения.

В нижеследующем тексте все указания на "соединение (соединения) формулы (I)" относятся к соединению (соединениям) формулы (I), описанным выше, а также к их солям, сольватам и физиологически функциональным производным, описываемым в данном контексте.

Количество соединения формулы (I), которое необходимо для достижения желательного биологического эффекта, зависит от ряда факторов, например, от выбранного конкретного соединения, предусматриваемого применения, рода введения и клинического состояния пациента. В общем, суточная доза находится в пределах от 0,3 мг до 100 мг (обычно от 3 мг до 50 мг) в сутки на килограмм массы тела, например, 3-10 мг/кг/сутки. Внутривенная доза может составлять величину, например, в пределах от 0,3 мг/кг до 1,0 мг/кг, которую можно вводить более пригодным образом в виде инфузии в количестве от 10 нг до 100 нг на килограмм в минуту. Пригодные инфузионные растворы могут содержать, например, от 0,1 нг до 10 нг, обычно от 1 нг до 10 мг, на миллилитр. Разовые дозы могут содержать, например, от 1 мг до 10 г биологически активного вещества. Следовательно, ампулы для инъекций могут содержать, например, от 1 мг до 100 мг биологически активного вещества, а перорально вводимые разовые дозы лекарственных средств, как, например, таблетки или капсулы, могут содержать, например, от 1,0 мг до 1000 мг, обычно от 10 мг до 600 мг, биологически активного вещества. Для лечения вышеуказанных состояний соединения формулы (I) можно применять непосредственно в виде соединения, однако, предпочтительно они находятся вместе с приемлемым носителем в виде фармацевтической композиции. Носитель, естественно, должен быть приемлем, т.е. совместимым с другими компонентами композиции и не являться вредным для здоровья пациента. Носитель может представлять собой твердое вещество или жидкость или то и другое, и предпочтительно его используют вместе с соединением для получения лекарственного средства в виде разовой дозы, например, в виде таблетки, которая может содержать от 0,05 мас.% до 95 мас.% биологически активного вещества. Также могут иметься другие фармацевтически активные вещества, включая другие соединения формулы (I). Предлагаемые согласно изобретению фармацевтические композиции можно приготовлять одним из известных фармацевтических способов, которые по существу состоят в том, что компоненты смешивают с фармакологически приемлемыми носителями и/или вспомогательными веществами.

Предлагаемые согласно изобретению фармацевтические композиции представляют собой композиции, пригодные для орального, ректального, локального, перорального (например, подъязычного) и парентерального (например, подкожного, внутримышечного, интрадермального или внутривенного) введения, хотя самый пригодный способ введения в каждом отдельном случае зависит от рода и тяжести излечиваемого состояния и от используемого в каждом случае соединения формулы (I). Дражированные лекарственные формы и дражированные лекарственные формы пролонгированного действия также входят в рамки изобретения. Предпочтительны резистентные к кислоте и желудочному соку лекарственные формы. Пригодные, резистентные к желудочному соку покрытия включают ацетатфталат целлюлозы, поливинилацетатфталат, гидроксипропилметилцеллюлозофталат и анионные полимеры метакриловой кислоты и метилового эфира метакриловой кислоты.

Пригодные фармацевтические соединения для орального введения могут находиться в виде отдельных единиц готовых лекарственных форм, как, например, капсулы, капсулы с облаткой, таблетки для сосания или таблетки, которые, соответственно, содержат определенное количество соединения формулы (I); в виде порошков или гранулятов; в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкости; или в виде эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле. Эти композиции, как уже упоминалось, можно готовить любым пригодным фармацевтическим способом, который включает стадию, на которой биологически активное вещество вводят в контакт с носителем (который может состоять из одного или нескольких дополнительных компонентов). В общем, композиции получают путем равномерного и гомогенного смешения биологически активного вещества с жидким и/или твердым тонкодисперсным носителем, после чего продукт, если необходимо, формуют. Так, например, таблетки можно получать тем, что порошок или гранулят соединения прессуют или формуют, в случае необходимости, вместе с одним или несколькими дополнительными компонентами. Прессованные таблетки можно получать путем таблетирования в пригодном устройстве соединения в свободно текучей форме, как, например, порошок или гранулят, в случае необходимости, смешанного со связующим, придающим скользкость таблеткам веществом, инертным разбавителем и/или одним (несколькими) поверхностно-активным веществом и/или диспергатором. Формованные таблетки можно получать путем формования в пригодном устройстве порошкообразного, смоченного инертным жидким разбавителем соединения.

Фармацевтические композиции, которые пригодны для перорального (подъязычного) введения, включают таблетки для сосания, которые содержат соединение формулы (I) вместе со вкусовым веществом, обычно сахарозой и гуммиарабиком или трагантом, и пастилки, которые включают соединение в инертной основе, как желатина и глицерин или сахароза и гуммиарабик.

Пригодные фармацевтические композиции для парентерального введения включают предпочтительно стерильные водные композиции с соединением формулы (I), которые предпочтительно являются изотоническими с кровью предусматриваемого реципиента. Эти композиции предпочтительно вводят внутривенно, хотя введение также можно осуществлять подкожно, внутримышечно или интрадермально в виде инъекции. Эти композиции можно предпочтительно получать тем, что соединение смешивают с водой и полученный раствор делают стерильным и изотоническим с кровью. Вводимые путем инъекции композиции согласно изобретению содержат, в общем, от 0,1 мас.% до 5 мас.% активного соединения.

Пригодные фармацевтические композиции для ректального введения предпочтительно находятся в виде суппозитория с разовой дозой. Их можно получать тем, что соединение формулы (I) смешивают с одним или несколькими обычными твердыми носителями, как, например, масло какао, и образовавшуюся смесь формуют.

Пригодные фармацевтические композиции для локального применения на коже находятся предпочтительно в виде мази, крема, лосьона, пасты, спрея, аэрозоля или масла. В качестве носителей можно использовать вазелины, ланолин, полиэтиленгликоли, спирты и комбинации двух или нескольких этих веществ. Биологически активное вещество, в общем, находится в концентрации от 0,1 мас.% до 15 мас.%, например, от 0,5 мас.% до 2 мас.%, по отношению к массе композиции.

Также возможно трансдермальное введение. Пригодные фармацевтические композиции для трансдермальных применений могут находиться в виде отдельных пластырей, которые пригодны для долговременного тесного контакта с эпидермисом пациента. Такие пластыри содержат биологически активное вещество, в случае необходимости, в забуференном водном растворе, растворенным и/или диспергированным в улучшающем адгезию средстве или диспергированным в полимере. Пригодная концентрация биологически активного вещества составляет примерно 1-35%, предпочтительно примерно 3-15%. В качестве особой возможности, биологически активное вещество, как, например, описывается в Pharmaceutical Research, 2 (6), 318 (1986), может высвобождаться путем электротранспорта или электрофореза.

Объектом изобретения, далее, являются способы получения соединений общей формулы (I), которые можно получать соответственно нижеследующим реакционным схемам А, В, С, D и Е:

Способ А:

Соединение общей формулы А, причем R1 и R2 имеют вышеуказанные значения, в диметилформамиде подвергают депротонированию с помощью CsCO₃ или другого пригодного основания и затем вводят во взаимодействие с бензилбромидом, причем получают соединение общей формулы В.

Соединение В растворяют в смеси из метанола, тетрагидрофурана и воды и путем взаимодействия с гидроксидом лития превращают в соединение общей формулы С.

Соединение С с помощью N,O-диметилгидроксиламина при использовании ангидрида пропанфосфоновой кислоты или другого пригодного активирующего реагента для образования амидных связей превращают в соединение общей формулы D.

Соединение D вместе с металлоорганическим соединение общей формулы Е, причем М означает Li, MgCl, MgBr и Сус1, Сус2, n, R3, R4, R5 имеют вышеуказанные значения, растворяют в тетрагидрофуране и при охлаждении льдом смешивают с кислотой Льюиса (LA), предпочтительно тетрахлоридом олова или трихлоридом алюминия, и превращают в соединение общей формулы F.

Для отщепления простого бензилового эфира, либо соединение F растворяют в дихлорметане и подвергают взаимодействию с комплексом BBr₃ и диметилсульфида, либо соединение F растворяют в метаноле и перемешивают в атмосфере водорода в присутствии палладия-на-угле и получают соединение общей формулы G.

Соединение G путем взаимодействия с 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагидропиран-3-иловым эфиром уксусной кислоты и карбонатом калия в смеси из дихлорметана и воды превращают в соединение общей формулы Н.

Соединение Н либо сначала вводят во взаимодействие с боргидридом натрия в смеси из метанола и тетрагидрофурана и затем в этаноле в атмосфере водорода и в присутствии палладия-на-угле превращают в соединение общей формулы J, либо соединение Н растворяют в ацетонитриле и при использовании смеси из цианоборгидрида натрия и хлортриметилсилана прямо превращают в соединение общей формулы J.

Соединение J растворяют в метаноле и вводят во взаимодействие с метилатом натрия, причем получают соединение общей формулы К.

С помощью этого способа синтезируют соединения примеров 51-54.

Способ В:

Соединение общей формулы L, причем R1 и R2 имеют вышеуказанные значения, растворяют в дихлорметане и при охлаждении льдом вводят во взаимодействие с соединением общей формулы М, причем Сус1, Сус2, n, R4, R5 имеют вышеуказанные значения, с получением соединения общей формулы N.

Соединение N растворяют в дихлорметане и вводят во взаимодействие с комплексом BBr₃ и диметилсульфида и, таким образом, получают соединение общей формулы G.

Соединение Н либо сначала вводят во взаимодействие с боргидридом натрия в смеси из метанола и тетрагидрофурана и затем в этаноле в атмосфере водорода и в присутствии палладия-на-угле превращают в соединение общей формулы J, либо соединение Н растворяют в ацетонитриле и при использовании смеси из цианоборгидрида натрия и хлортриметилсилана непосредственно превращают в соединение общей формулы J.

С помощью этого способа синтезируют соединения примеров 7-34.

Способ С:

Соединение общей формулы L, причем R1 и R2 имеют вышеуказанные значения, растворяют в диметилформамиде и смешивают с фосфорилхлоридом, причем получают соединение общей формулы Р.

Соединение Р растворяют в дихлорметане и вводят во взаимодействие с комплексом BBr₃ и диметилсульфида, и получают, таким образом, соединение общей формулы Q.

Соединение Q путем взаимодействия с 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагидропиран-3-иловым эфиром уксусной кислоты и карбонатом калия в смеси из дихлорметана и воды превращают в соединение общей формулы R.

Соединение R растворяют в диоксане и с помощью метилтрифенилфосфонийбромида и карбоната калия превращают в соединение общей формулы S.

Соединение S в присутствии рутениевого катализатора (трициклогексилфосфин-[1,3-бис(2,4,6-триметилфенил)-4,5-дигидро-имидазол-2-илиден][бензилиден]рутений(IV)дихлорид) в дихлорметане путем взаимодействия с соединением общей формулы Т, причем А, Сус1, Сус2, n, R3, R4, R5 имеют вышеуказанные значения, превращают в соединение общей формулы U.

Соединение U растворяют в метаноле и вводят во взаимодействие с метилатом натрия, причем получают соединение общей формулы Х.

Альтернативно, соединение U в метаноле в атмосфере водорода и в присутствии палладия-на-угле можно превращать в соединение общей формулы V.

Соединение V растворяют в метаноле и вводят во взаимодействие с метилатом натрия, причем получают соединение общей формулы W.

Альтернативно, соединение W можно также получать путем гидрогенолиза соединения Х. Для этого соединение Х обрабатывают в метаноле и в присутствии палладия-на-угле в атмосфере водорода.

С помощью этого способа синтезируют соединения примеров 36-50.

Способ D:

Соединение общей формулы А, причем R1 и R2 имеют вышеуказанные значения, растворяют в смеси из метанола, тетрагидрофурана и воды и путем взаимодействия с гидроксидом лития превращают в соединение общей формулы Y.

Соединение Y вместе с соединением общей формулы Z, причем А, Сус1, Сус2, n, R3, R4, R5 имеют вышеуказанные значения, растворяют в тетрагидрофуране и при охлаждении льдом соединения при использовании ангидрида пропанфосфоновой кислоты или другого пригодного активирующего реагента для образования амидных связей превращают в соединение общей формулы АА.

Соединение АА путем взаимодействия с 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагидропиран-3-иловым эфиром уксусной кислоты и карбонатом калия в смеси из дихлорметана и воды превращают в соединение общей формулы ВВ.

Соединение ВВ растворяют в метаноле и вводят во взаимодействие с метилатом натрия, причем получают соединение общей формулы К.

С помощью этого способа синтезируют соединения примеров 55-58.

Способ Е:

Соединение DD путем взаимодействия с 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагидропиран-3-иловым эфиром уксусной кислоты и карбонатом калия в смеси из дихлорметана и воды превращают в соединение общей формулы ЕЕ.

Соединение ЕЕ растворяют в метаноле и смешивают с метилатом натрия в метаноле. Добавляют соединение общей формулы FF, причем А, Сус1, Сус2, n, R3, R4, R5 имеют вышеуказанные значения, и получают соединение общей формулы GG.

Соединение GG в метаноле, в атмосфере водорода и в присутствии палладия-на-угле превращают в соединение общей формулы НН.

С помощью этого способа синтезируют соединения примеров 1-6.

Другие соединения формулы (I) можно получать соответствующим образом или согласно известным способам.

Соединение (соединения) формулы (I) можно использовать также в комбинации с другими биологически активными веществами.

В качестве других биологически активных веществ для комбинированных препаратов пригодны все антидиабетические средства, которые указаны в Красном списке 2001, глава 12. Их можно комбинировать с предлагаемыми согласно изобретению соединениями формулы (I) в особенности для синергического повышения действия. Введение комбинации биологически активных веществ можно осуществлять либо путем раздельного введения биологически активных веществ пациенту, либо в форме комбинированных препаратов, где в фармацевтической композиции находятся несколько биологически активных веществ. Большинство нижеуказанных биологически активных веществ раскрыты в "USP Dictionary of USAN and International Drug Names", фармакопея США, Rockville 2001.

Антидиабетические средства включают инсулин и производные инсулина, как, например, Lantus^® (см. www.lantus.com) или HMR 1964, быстро действующие инсулины (см. патент США 6221633), производные GLP-1, как, например, такие, которые раскрыты в заявке WO-98/08871 фирмы Novo Nordisk A/S, а также орально эффективные гипогликемические биологически активные вещества. Орально эффективные гипогликемические биологически активные вещества предпочтительно включают сульфонилмочевины, бигуаниды, меглитиниды, оксадиазолидиндионы, тиазолидиндионы, ингибиторы глюкозидазы, антагонисты глюкагона, агонисты GLP-1, открыватели калиевых каналов, как, например, такие, которые раскрыты в заявках WO-97/26265 и WO-99/03861 фирмы Novo Nordisk A/S, активаторы инсулина, ингибиторы ферментов печени, которые принимают участие в стимуляции глюконеогенеза и/или гликогенолиза, модуляторы поглощения глюкозы, изменяющие жировой обмен соединения, как антигиперлипидемические биологически активные вещества и антилипидемические биологически активные вещества, соединения, способствующие уменьшению потребления пищи, агонисты PPAR и PXR и биологически активные вещества, которые воздейстуют на АТФ-зависимый калиевый канал бета-клеток.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором HMG-CoA-редуктазы, как симвастатин, флувастатин, правастатин, ловастатин, аторвастатин, церивастатин, росувастатин.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором резорбции холестерина, как, например, эзетимиб, тиквесид, памаквесид.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с агонистом PPAR-гамма, как, например, росиглитазон, пиоглитазон, JTT-501, GI 262570.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с агонистом PPAR-альфа, как, например, GW 9578, GW 7647.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с агонистом смешанных PPAR-альфа/PPAR-гамма, как, например, GW 1536, AVE 8042, AVE 8134, AVE 0847, или как описывается в заявках WO-00/64888, WO-00/64876, патенте ФРГ 10142734.4.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с фибратом, как, например, фенофибрат, клофибрат, безафибрат.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором МТР, как, например, имплитапид, BMS-201038, R-103757.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором резорбции желчной кислоты (см., например, патент США 6245744 или патент США 6221897), как, например, HMR 1741.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором СЕТР, как, например, JTT-705.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с полимерным адсорбером желчной кислоты, как, например, холестирамин, колесевелам.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с активатором рецептора LDL (см. патент США 6342512), как, например, HMR 1171, HMR 1586.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором АСАТ, как, например, авасимиб.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с антиоксидантом, как, например, ОРС-14117.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором липопротеинлипазы, как, например, NO-1886.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором АТФ-цитрат-лиазы, как, например, SB-204990.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором скваленсинтетазы, как, например, BMS-188494.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с антагонистом липопротеина(а), как, например, CI-1027 или никотиновая кислота.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором липазы, как, например, орлистат.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с инсулином.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с сульфонилмочевиной, как, например, толбутамид, глибенкламид, глипицид или глимепирид.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с бигуанидом, как, например, метформин.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с меглитинидом, как, например, репаглинид.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с тиазолидиндионом, как, например, троглитазон, циглитазон, пиоглитазон, росиглитазон или раскрытые в заявке WO 97/41097 Dr. Reddy's Research Foundation соединения, в особенности 5-[[4-[(3,4-дигидро-3-метил-4-оксо-2-хиназолинилметокси]фенил]метил]-2,4-тиазолидиндион.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором α-глюкозидазы, как, например, миглитол или акарбоза.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с биологически активным веществом, которое воздействует на АТФ-зависимый калиевый канал бета-клеток, как, например, толбутамид, глибенкламид, глипицид, глимепирид или репаглинид.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с более чем одним из вышеуказанных соединений, например, в комбинации с сульфонилмочевиной и метформином, сульфонилмочевиной и акарбозой, репаглинидом и метформином, инсулином и сульфонилмочевиной, инсулином и метформином, инсулином и троглитазоном, инсулином и ловастатином, и т.д.

Согласно другому варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с модуляторами CART (см. "Cocaine-amphetamine-regulated transcript influences energy metabolism, anxiety and gastric emptying in mice", A. Asakawa и др., M.: Hormone and Metabolic Research, 33 (9), 554-558 (2001)), антагонистами NPY, как, например, гидрохлорид {4-[(4-аминохиназолин-2-иламино)метил]циклогексилметил}амида нафталин-1-сульфокислоты (CGP 71683A), агонистами МС4 (как, например, [2-(3а-бензил-2-метил-3-оксо-2,3,3а,4,6,7-гексагидропиразол[4,3-c]пиридин-5-ил)-1-(4-хлорфенил)-2-оксоэтил]амид 1-амино-1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-карбоновой кислоты (WO 01/91752)), антагонистами орексина (как, например, гидрохлорид 1-(2-метилбензоксазол-6-ил)-3-[1,5]нафтиридин-4-илмочевины (SB-334867-A)), агонистами Н3 (соль щавелевой кислоты 3-циклогексил-1-(4,4-диметил-1,4,6,7-тетрагидроимидазо[4,5-c]-пиридин-5-ил)пропан-1-она (WO 00/63208)), агонистами TNF, антагонистами CRF (как, например, [2-метил-9-(2,4,6-триметилфенил)-9Н-1,3,9-триазафлуорен-4-ил]дипропиламин (WO 00/66585)), антагонистами CRF BP (например, урокортин), агонистами урокортина, агонистами β3 (как, например, гидрохлорид 1-(4-хлор-3-метансульфонилметилфенил)-2-[2-(2,3-диметил-1Н-индол-6-илокси)-этиламино]этанола (WO 01/83451)), агонистами MSH (меланоцит-стимулирующий гормон), агонистами ССК-А (как, например, соль трифторуксусной кислоты {2-[4-(4-хлор-2,5-диметоксифенил)-5-(2-циклогексилэтил)тиазол-2-илкарбамоил]-5,7-диметилиндол-1-ил}-уксусной кислоты (WO 99/15525)), ингибиторами повторного поглощения серотонина (как, например, дексфенфлурамин), смешанными серотонин- и норадренергическими соединениями (например, WO 00/71549), агонистами 5НТ (как, например, соль щавелевой кислоты 1-(3-этилбензофуран-7-ил)пиперазина (WO 01/09111), агонистами бомбезина, антагонистами галанина, гормоном роста (как, например, человеческий гормон роста), высвобождающими гормон роста соединениями (как трет-бутиловый эфир 6-бензилокси-1-(2-диизопропиламиноэтилкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбоновой кислоты (WO 01/85695)), агонистами TRH (см., например, Европейский патент 0462884), 2- или 3- модуляторами разрыва протеиновой связи, агонистами лептина (см., например, Lee Daniel W, Leinung Matthew C., Rozhavskaya-Arena Marina, Grasso Patricia "Leptin agonists as a potential approach to the treatment of obesity", Drugs of the Future, 20 (9), 873-881 (2001)), агонистами DA (бромкриптин, допрексин), ингибиторами липазы/амилазы (например, WO 00/40569), модуляторами PPAR (например, WO 00/78312), модуляторами RXR или агонистами TR-β.

Согласно варианту осуществления изобретения, другим биологически активным веществом является лептин (см., например, "Perspectives in the therapeutic use of leptin", Salvador Javier, Gomez-Ambrosi Javier, Fruhbeck Gema, Expert Opinion on Pharmacotherapy, 2 (10), 1615-1622 (2001)).

Согласно варианту осуществления изобретения, другим биологически активным веществом является дексамфетамин или амфетамин.

Согласно варианту осуществления изобретения, другим биологически активным веществом является фенфлурамин или дексфенфлурамин.

Согласно еще одному варианту осуществления, другим биологически активным веществом является сибутрамин.

Согласно варианту осуществления, другим биологически активным веществом является орлистат.

Согласно варианту осуществления, другим биологически активным веществом является мазиндол или фентермин.

Согласно варианту осуществления изобретения, соединения формулы (I) вводят в комбинации с балластными веществами, предпочтительно с нерастворимыми балластными веществами (см., например, Carob/Caromax^® (Zunft H.J. и др. "Carob pulp preparation for treatment of hypercholesterolemia", ADVANCES IN THERAPY, 18 (5), 230-236 (2001, сентябрь-октябрь)); Caromax представляет собой содержащий Carob продукт фирмы Nutrinova, Nutrition Specialities and Food Ingredients GmbH, Industriepark Hochst, 65926 Франкфурт-на-Майне). Комбинацию с Caromax^® можно осуществлять в виде композиции или путем раздельного введения соединений формулы (I) и Caromax^®. Caromax^® при этом также можно вводить в форме пищевых продуктов, как, например, в хлебобулочных изделиях или батончиках мюсли.

Понятно, что любая пригодная комбинация предлагаемых согласно изобретению соединений с одним или несколькими из вышеуказанных соединений и, на выбор, с одним или несколькими другими фармакологически активными веществами рассматривается как подпадающая под объем охраны настоящего изобретения.

Нижеприводимые примеры служат для пояснения изобретения, однако, без ограничения его объема охраны.

Таблица 1

Соединения формулы (I)

Пример	R1, R2	A (связывание в 2-положении тиенила)	Cyc1	R3, R4, R5	МС*
1	Н, Н	-СО-СН₂-СН₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	Ok
2	Н, Н	-СО-СН₂-СН₂-	Ph	3-O-(CH₂)₂-O-4, H	Ok
3	Н, Н	-СО-СН₂-СН₂-	Ph	3-O-CH₂-O-4, H	Ok
4	Н, Н	-СО-СН₂-СН₂-	Ph	3-CH=CH-O-4, H	Ok
5	Н, Н	-СО-СН₂-СН₂-	3-тиофен	H, H, H	Ok
6	Н, Н	-СО-СН₂-СН₂-	2-тиофен	H, H, H	Ok
7	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	Ok
8	Н, Н	-СО-	Ph	4-O-CH₃, H, H	Ok
9	Н, Н	-СН₂-	Ph	H, H, H	Ok
10	Н, Н	-СН(ОН)-	Ph	H, H, H	Ok
11	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-O-C₂H₅, H, H	Ok
12	Н, Н	-СН₂-	Ph	3-O-CH₃, 4-O-CH₃, H	Ok
13	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-O-C₇H₁₀, H, H	Ok
14	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-F, H, H	Ok
15	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-I, H, H	Ok
16	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-NO₂, H, H	Ok
17	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-CH₃, H, H	Ok
18	Н, Н	-СН₂-	Ph	3-CH₃, H, H	Ok
19	Н, Н	-СН₂-	Ph	2-CH₃, H, H	Ok
20	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-C₂H₅, H, H	Ok
21	Н, Н	-СН₂-	Ph	3-CH₃, 4-O-CH₃, 5-CH₃	Ok
22	Н, Н	-СН₂-	Ph	3-O-CF₂-O-4, H	Ok
23	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-C₃H₇, H, H	Ok
24	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-C(CH₃)₃, H, H	Ok
25	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-OH, H, H	Ok
26	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-O-CH₂-Ph, H, H	Ok
27	Н, Н	-СН₂-	3-тиофен	H, H, H	Ok
28	Н, Н	-СН₂-	2-тиофен	4-CH=CH-CH=CH-5, H	Ok
29	Н, Н	-СН₂-	Ph	3-O-CH₃, H, H	Ok
30	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-CN, H, H	Ok
31	Н, Н	-СН₂-	Ph	3-O-CH₂-O-4, H, H	ok
32	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-S-CH₃, H, H	ok
33	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-O-C₄H₉, H, H	ok
34	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-OCF₃, H, H	ok
35	Н, Н	-СН₂-	Ph	4-COOH, H, H	ok
36	Н, Н	-СН₂-CH₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
37	Н, Н	-СН=CH-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
38	Н, Н	-СН=CH-	Ph	4-F, H, H	ok
39	Н, Н	-СН=CH-	Ph	4-Cl, H, H	ok
40	Н, Н	-СН=CH-	Ph	4-O-C₂H₅, H, H	ok
41	Н, Н	-СН=CH-	Ph	4-CH₃, H, H	ok
42	Н, Н	-СН=CH-	Ph	4-OH, H, H	ok
43	Н, Н	-СН₂-CH₂-	Ph	4-F, H, H	ok
44	Н, Н	-СН₂-CH₂-	Ph	4-Cl, H, H	ok
45	Н, Н	-СН₂-CH₂-	Ph	4-O-C₂H₅, H, H	ok
46	Н, Н	-СН₂-CH₂-	Ph	4-CH₃, H, H	ok
47	Н, Н	-СН₂-CH₂-	Ph	4-OH, H, H	ok
48	Н, Н	-СН=CH-CH₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
49	Н, Н	-СН₂-CH₂-CH₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
50	Н, Н	-CH=CH-СН₂-	Ph	3-O-CH₂-O-4, H	ok
51	5-CH(CH₃)₂, Н	-СН₂-	Ph	4-О-CH₃, H, H	ok
52	5-Ph, Н	-СН₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
53	5-CH₃, Н	-СН₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
54	5-CF₃, Н	-СН₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
55	Н, Н	-CO-NH-СН₂-	Ph	H, H, H	ok
56	Н, Н	-CO-NH-СН₂-	Ph	4-O-CH₃, H, H	ok
57	Н, Н	-CO-NH-СН₂-	Ph	3-O-CH₂-O-4, H	ok
58	Н, Н	-CO-NH-СН₂-	Ph	4-O-CF₃, H, H	ok
*: Под указанием "МС ok" понимают, что снимают масс-спектр или осуществляют высокоэффективную жидкостную хроматографию с масс-спектрометрией и в полученных спектрах обнаруживают молекулярный пик М+1 (МН⁺) и/или М+18 (MNH₄ ⁺) и/или М+23 (MNa⁺).

Соединения формулы (I) отличаются благоприятными воздействиями на метаболизм глюкозы, в особенности они снижают уровень сахара в крови и пригодны для лечения диабета типа 1 и диабета типа 2. Соединения поэтому можно использовать индивидуально или в комбинации с другими, снижающими уровень сахара в крови биологически активными веществами (антидиабетическими средствами).

Соединения формулы (I) пригодны, далее, для предупреждения и лечения диабетических поздних повреждений, как, например, нефропатии, ретинопатии, невропатии, а также синдрома Х, ожирения, инфаркта сердца, периферических артериальных облитерирующих заболеваний, тромбозов, артериосклерозов, воспалений, иммунных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, как, например, СПИДа, астмы, остеопороза, рака, псориаза, болезни Альцгеймера, шизофрении и инфекционных заболеваний; предпочтительным является лечение диабета типа 1 и диабета типа 2, а также предупреждение и лечение диабетических поздних повреждений, синдрома Х и ожирения.

Активность соединений тестировали следующим образом:

Получение везикул мембран щеточной каймы из тонкой кишки кролика, крысы и свиньи

Получение везикул мембран щеточной каймы из кишечных клеток тонкой кишки осуществляли с помощью так называемого метода преципитации с использованием Mg²⁺. Соскабливали слизистую оболочку из тонкой кишки и суспендировали в 60 мл очень холодного Трис/HCl-буфера (рН 7,1)/300 мМ маннита, 5 мМ этиленбис(оксиэтиленнитрил)тетрауксусной кислоты (EGTA). После разведения до объема 300 мл с помощью очень холодной дистиллированной воды гомогенизировали при охлаждении льдом с помощью турбосмесителя (Ultraturrax) (18-Stab, IKA Werk Staufen, ФРГ) 2 раза по 1 минуте при 75% максимальной мощности. После добавления 3 мл 1 М раствора MgCl₂ (конечная концентрация 10 мМ) выдерживали в течение точно 15 минут при температуре 0^оС. За счет добавления Mg²⁺ клеточные мембраны подвергаются агрегации и осаждаются, за исключением мембран щеточной каймы. После центрифугирования в течение 15 минут при ускорении 3000 g (5000 оборотов в минуту, SS-34-ротор) осадок отбрасывают и супернатант, который содержит мембраны щеточной каймы, центрифугируют в течение 30 минут при ускорении 26700 g (15000 оборотов в минуту, SS-34-ротор). Супернатант отбрасывают, осадок снова гомогенизируют в 60 мл 12 мМ Трис/HCl-буфера (рН 7,1)/ 60 мМ маннита, 5 мМ EGTA, с помощью гомогенизатора Potter Elvejhem (Braun, Melsungen, 900 оборотов в минуту, 10 ходов). После добавления 0,1 мл 1 М раствора MgCl₂ и инкубации в течение 15 минут при температуре 0^оС снова центрифугируют в течение 15 минут при ускорении 3000 g. Супернатант затем еще раз центрифугируют в течение 30 минут при ускорении 46000 g (20000 оборотов в минуту, SS-34-ротор). Осадок обрабатывают с помощью 30 мл 20 мМ Трис/Гепес-буфера (рН 7,4)/280 мМ маннита и снова гомогенно суспендируют за счет 20 ходов в гомогенизаторе Potter Elvejhem при скорости 1000 оборотов в минуту. После центрифугирования в течение 30 минут при ускорении 48000 g (20000 оборотов в минуту, SS-34-ротор) осадок обрабатывали с помощью 0,5-2 мл Трис/Гепес-буфера (рН 7,4)/280 мМ маннита (конечная концентрация 20 мг/мл), и ресуспендировали при использовании туберкулинового шприца с иглой калибра 27.

Везикулы использовали либо непосредственно после получения для исследований маркировки или транспорта, либо хранили при температуре -196^оС порциями по 4 мг в жидком азоте.

Для приготовления везикул мембран щеточной каймы из тонкой кишки крыс 6-10 самцов крыс Wistar (выращивание на дне ящика, Aventis Pharma) умерщвляли путем цервикальной дислокации, тонкие кишки извлекали и промывали с помощью холодного изотонического раствора хлорида натрия. Кишки разрезали и слизистые оболочки соскабливали. Обработку для выделения мембран щеточной каймы осуществляли как описывается выше. Для отделения цитоскелетных частей везикулы мембран щеточной каймы из тонкой кишки крыс обрабатывали с помощью KSCN в качестве хаотропного иона.

Для приготовления мембран щеточной каймы из тонкой кишки кроликов кроликов умерщвляли путем внутривенной инъекции 0,5 мл водного раствора 2,5 мг тетракаин-HCl, 100 мг м-бутрамида и 25 мг мебезонийиодида. Тонкие кишки извлекали, промывали очень холодным физиологическим раствором хлорида натрия, замораживали в пластиковых мешках в атмосфере азота при температуре -80^оС и хранили в течение 4-12 недель. Для получения мембранных везикул замороженные кишки оттаивали при температуре 30^оС на водяной бане и затем соскабливали слизистую оболочку. Обработку мембран осуществляли как описывается выше.

Для приготовления везикул мембран щеточной каймы из свиной кишки сегменты тощей кишки свежеубитой свиньи промывали очень холодным изотоническим раствором хлорида натрия и замораживали в пластиковых мешках в атмосфере азота при температуре -80^оС. Получение мембранных везикул осуществляли как описывается выше.

Получение везикул мембран щеточной каймы из коркового слоя почки крысы

Получение везикул мембран щеточной каймы из коркового слоя почки крысы осуществляли по методу Biber и др. Почки 6-8 крыс (массой 200-250 г) извлекали и с каждой почки снимали корковое вещество в виде слоя толщиной примерно 1 мм. Почки обрабатывали с помощью 30 мл очень холодного 12 мМ Трис/HCl-буфера (рН 7,4)/300 мМ маннита и при охлаждении льдом гомогенизировали 4 раза по 30 секунд с помощью турбосмесителя (Ultraturraxstab) (градация 180 в). После добавления 42 мл очень холодной дистиллированной воды добавляли 850 мкл 1 М раствора MgCl₂. После инкубации в течение 15 минут при температуре 0^оС центрифугировали в течение 15 минут со скоростью 4500 оборотов в минуту (Sorvall SS-34-ротор). Осадок отбрасывали, супернатант центрифугировали в течение 30 минут со скоростью 16000 оборотов в минуту. После ресуспендирования осадка в 60 мл 6 мМ Трис/HCl-буфера (рН 7,4)/150 мМ маннита/2,5 мМ EGTA путем 10 ходов в гомогенизаторе Potter Elvejhem (900 оборотов в минуту) и после добавления 720 мкл 1 мМ раствора MgCl₂ инкубировали в течение 15 минут при температуре 0^оС. После центрифугирования в течение 15 минут со скоростью 4500 оборотов в минуту (SS-34-ротор) полученный в результате супернатант центрифугировали в течение 30 минут со скоростью 16000 оборотов в минуту. Супернатант гомогенизировали путем 10 ходов в 60 мл 20 мМ Трис/Гепес-буфера (рН 7,4)/280 мМ маннита и образовавшуюся суспензию затем центрифугировали в течение 30 минут со скоростью 20000 оборотов в минуту. Осадок ресуспендировали с помощью туберкулиновогго шприца с иглой калибра 27 в 20 мМ Трис/HCl-буфере (рН 7,4)/280 мМ маннита и устанавливали концентрацию протеина 20 мг/мл.

Определение поглощения глюкозы везикулами мембран щеточной каймы

Поглощение [¹⁴C]-меченой глюкозы в везикулах мембран щеточной каймы определяли по методу мембранной фильтрации. 10 мкл Суспензии везикул мембран щеточной каймы в 10 мМ Трис/HCl-буфере (рН 7,4)/300 мМ маннита при температуре 30^оС добавляли к 90 мкл раствора 10 мкМ [¹⁴C]D-глюкозы и соответствующих концентраций соответствующих ингибиторов (5-200 мкМ) в 10 мМ Трис/Гепес-буфере (рН 7,4)/100 мМ NaCl/100 мМ маннита.

После инкубации в течение 15 секунд процесс транспорта останавливали за счет добавления 1 мл очень холодного "стоп"-раствора (10 мМ Трис/Гепес-буфер (рН 7,4)/150 мМ KCl) и суспензию везикул тотчас отфильтровывали под вакуумом 25-35 мбар через мембранный фильтр из нитрата целлюлозы (0,45 мкм, диаметр 25 мм, Schleicher and Schull). Фильтр дополнительно промывали с помощью 5 мл очень холодного "стоп"-раствора. Каждую точку измерения получали двукратным или трехкратным определением. Для определения поглощения радиактивно меченых субстратов мембранные фильтры растворяли в 4 мл соответствующего сцинтиллятора (Quickszint 361, Zinsser Analytik GmbH, Франкфурт-на-Майне) и определяли радиоактивность путем измерения сцинтилляции жидкости. Определяемые значения получали путем калибровки прибора с помощью стандартных образцов и после корректуры возможно имеющейся хемилюминесценции в виде dpm (дезинтеграций в минуту).

Сравнение активностей биологически активных веществ осуществляли с помощью данных IC₂₅ (ингибирующая на 25% концентрация), которые получали путем анализа транспорта корковый слой почек - везикулы мембран щеточной каймы кролика для выбранных веществ. (Абсолютные значения могут зависеть от вида и теста).

Пример №	IC₂₅ (мкМ)
5*	13,9
6*	9,9
7*	1,1
9*	1,4
11*	1,3
13*	3,5
34*	1,0
43*	2,2
44*	0,9
45*	2,9
47*	1,6
50*	4,7
54*	1,4
56*	2,8
*: β-D-глюкоформа

Ниже подробно описывается получение соединений согласно различным примерам, остальные соединения формулы (I) получают аналогичным образом.

Экспериментальная часть

Пример 1

3-(4-Метоксифенил)-1-[3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметил-тетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-ил]пропан-1-он

а) 4,5-Диацетокси-6-ацетоксиметил-2-(2-ацетилтиофен-3-илокси)-тетрагидропиран-3-иловый эфир уксусной кислоты

2 г 1-(3-Гидрокситиофен-2-ил)этанона растворяют в 120 мл дихлорметана и вместе с 6,4 г 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагиропиран-3-илового эфира уксусной кислоты, 1,4 г бензилтрибутиламмонийхлорида, 6,4 г карбоната калия и 1,2 мл воды перемешивают в течение 20 часов при температуре 22^оС. Отфильтровывают нерастворимые составные части, концентрируют и смесь сырых продуктов очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:1). Получают продукт с молекулярной массой 472,5 (С₂₀Н₂₄О₁₁S); масс-спектрометрия с химической ионизацией (МС (CI)): 473 (М+Н⁺).

b) 3-(4-Метоксифенил)-1-[3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметил-тетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-ил]пропенон

472 мг 4,5-Диацетокси-6-ацетоксиметил-2-(2-ацетилтиофен-3-илокси)тетрагидропиран-3-илового эфира уксусной кислоты растворяют в 20 мл метанола и смешивают с 5 мл 1н. раствора NaOCH₃ в метаноле. Добавляют 410 мг 4-метоксибензальдегида и перемешивают в течение 20 часов при температуре 22^оС. Смесь нейтрализуют с помощью небольшого количества разбавленного раствора хлороводорода в метаноле, концентрируют и остаток очищают хроматографически на колонке с силикагелем (дихлорметан/метанол = 6:1). Получают продукт с молекулярной массой 422,5 (С₂₀Н₂₂О₈S); масс-спектрометрия с ионизацией электронным распылением (МС (ESI)): 423 (М+Н⁺).

с) 3-(4-Метоксифенил)-1-[3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметил-тетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-ил]пропан-1-он

100 мг 3-(4-Метоксифенил)-1-[3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-ил]пропенона растворяют в 10 мл этанола и гидрируют при использовании примерно 20 мг 5%-ного палладия-на-угле в аппарате для встряхивания при слегка повышенном давлении (примерно 4 часа, контроль с помощью тонкослойной хроматографии). Отфильтровывают от катализатора, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией (SiO₂, дихлорметан/метанол = 6:1). Получают продукт с молекулярной массой 424,5 (С₂₀Н₂₄О₈S); МС (ESI): 447 (M+Na⁺).

В вышеописанной последовательности синтеза в качестве 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагидропиран-3-илового эфира уксусной кислоты используют α-D-ацетобромглюкозу. Таким образом получают гликозид примера 1 в β-D-глюко-форме. Это относится также ко всем нижеприводимым примерам. Если используют, напротив, α-D-ацетобромгалактозу, то получают гликозид в β-D-галакто-форме; если используют α-D-ацетобромаллозу, то получают гликозид в β-D-алло-форме; или если используют α-D-ацетобром-маннозу, то получают гликозид в α-D-манно-форме.

Таким же путем синтеза, описанным выше в примере 1, получают вещества нижеследующих примеров 2-6:

*: масс-спектрометрия или жидкостная хроматография/масс-спектрометрия

Указание "МС или ЖХ/МС ОК" означает, что получен молекулярный пик указанного соединения в виде М+1 (МН⁺) и/или в виде М+18 (MNH₄ ⁺) и/или М+23 (MNa⁺).

Пример 7

2-Гидроксиметил-6-[2-(4-метоксибензил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3,4,5-триол

Пример 8

(4-Метоксифенил)-[3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-ил]метанон

а) (4-Метоксифенил)-(3-метокситиофен-2-ил)метанон

К раствору 2,3 г 3-метокситиофена и 3,4 г метоксибензоилхлорида в 50 мл дихлорметана при охлаждении льдом добавляют 2,7 мл тетрахлорида олова. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Для обработки смешивают с 75 мл 2н. соляной кислоты и встряхивают трижды с дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывают по два раза с помощью 2н. раствора карбоната натрия и воды, затем растворитель удаляют в вакууме и сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:2). Получают продукт с молекулярной массой 248,3 (С₁₃Н₁₂О₃S); МС (CI): 249 (M+H⁺).

b) (3-Гидрокситиофен-2-ил)-(4-метоксифенил)метанон

993 мг (4-Метоксифенил)-(3-метокситиофен-2-ил)метанона растворяют в 20 мл безводного дихлорметана и смешивают с 7 мл комплекса трибромида бора и диметилсульфида. Смесь перемешивают при комнатной температуре вплоть до полноты превращения (контроль с помощью тонкослойной хроматографии). Затем выливают в воду и многократно встряхивают с дихлорметаном. Органическую фазу сушат, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:4). Получают продукт с молекулярной массой 234,3 (С₁₂Н₁₀О₃S); МС (CI): 235 (M+H⁺).

с) (4-Метоксифенил)-[3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-ил]метанон = Пример 8

2,8 г (3-Гидрокситиофен-2-ил)-(4-метоксифенил)метанона растворяют в 350 мл дихлорметана и смешивают с 12,64 г 3,4,5-триацетокси-6-бромтетрагидропиран-2-илметилового эфира уксусной кислоты, 15,4 г карбоната калия, 3,6 г бензилтрибутиламмоний-хлорида и, наконец, с 3 мл воды. Смесь интенстивно перемешивают при комнатной температуре в течение 20 часов. По окончании реакции фильтруют, концентрируют и остаток фильтруют через SiO₂ при использовании смеси этилацетат/гептан = 1:2. Растворитель удаляют и остаток обрабатывают с помощью примерно 300 мл метанола, смешивают с 35 мл 1н. раствора NaOCH₃ в метаноле и перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем нейтрализуют с помощью 7%-ного раствора хлороводорода в метаноле (примерно 35 мл), добавляют примерно 100 мл смеси растворителей дихлорметан/метанол/концентрированный раствор аммиака = 30:50:1 и перемешивают в течение 5 минут. После этого концентрируют, остаток обрабатывают той же смесью растворителей и раствор отделяют от нерастворимой соли. После хроматографии на силикагеле получают продукт с молекулярной массой 396,42 (С₁₈Н₂₀О₈S); МС (ESI): 397 (M+H⁺), 235 (М+Н⁺ - глюкоза).

d) 2-Гидроксиметил-6-[2-(4-метоксибензил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3,4,5-триол = Пример 7

4,1 г (4-Метоксифенил)-[3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидрокси-метилтетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-ил]метанона растворяют в 200 мл тетрагидрофурана и 20 мл метанола и смешивают с 500 мг боргидрида натрия. После полного превращения (контроль с помощью тонкослойной хроматографии; дихлорметан/метанол/ концентрированный раствор аммиака = 30:5:1; примерно 30-60 минут) смешивают с водой и трижды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом магния и концентрируют. Получают 2-{2-[гидрокси-(4-метоксифенил)метил]тиофен-3-илокси}-6-гидроксиметилтетрагидропиран-3,4,5-триол в виде сырого продукта, который можно очищать путем фильтрации через силикагель.

Все количество растворяют примерно в 800 мл безводного этанола и при встряхивании раствор насыщают аргоном. Добавляют сухой палладий-на-угле в качестве катализатора и смесь гидрируют при интенсивном встряхивании в течение 6-7 часов при температуре 22^оС и нормальном давлении. По окончании превращения отфильтровывают под вакуумом через осветляющий слоевой фильтр и растворитель удаляют в вакууме. Остаток очищают колоночной хроматографией (SiO₂, дихлорметан/метанол = 9:1). (Проявление пластин после тонкослойной хроматографии с помощью 10%-ной серной кислоты). Получают продукт с молекулярной массой 382,44 (С₁₈Н₂₂О₇S); МС (ESI): 383 (M+H⁺), 221 (М+Н⁺ - глюкоза).

Альтернативно это соединение можно получать также следующим путем:

226 мг 3,4,5-Триацетокси-6-[2-(4-метоксибензил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-2-илметилового эфира уксусной кислоты растворяют в 4 мл ацетонитрила и охлаждают на бане со льдом до температуры 0^оС. Добавляют 0,3 мл триметилхлорсилана и 151 мг цианоборгидрида натрия, баню со льдом удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляют с помощью 30 мл дихлорметана, фильтруют через целит и органическую фазу промывают с помощью 20 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и 20 мл раствора хлорида натрия. Остаток очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:2). Сырой продукт обрабатывают метанолом и смешивают с 1 мл раствора метилата натрия (10 мг/мл в метаноле). Раствор перемешивают в течение 18 часов при температуре 22^оС, смешивают с Amberlyst 15 (Н⁺-форма), разбавляют с помощью 10 мл метанола и отфильтровывают. Остаток промывают с помощью 20 мл метанола, органическую фазу концентрируют и остаток хроматографируют на силикагеле. Получают 120 мг продукта с молекулярной массой 382,44 (С₁₈Н₂₂О₇S); МС (ESI): 400 (M+NH₄ ⁺).

Получение (3-метокситиофен-2-ил)-(4-нитрофенил)метанона:

0,5 мл 3-Метокситиофена растворяют в 50 мл дихлорметана. Добавляют 968 мг 4-нитробензоилхлорида и реакционную смесь охлаждают на бане со льдом до температуры 0^оС. Затем добавляют 696 мг трихлорида алюминия и реакционную смесь перемешивают в течение 4 часов при температуре 0^оС. Реакционную смесь добавляют к 100 мл воды со льдом, перемешивают в течение 15 минут и смешивают со 100 мл дихлорметана. Органическую фазу отделяют, промывают с помощью 50 мл 0,5 М раствора гидроксида натрия и 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Затем полученную смесь очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан). Получают продукт с молекулярной массой 263,27 (С₁₂Н₉NO₄S); МС (CI): 264,25 (M+H⁺).

(3-Метокситиофен-2-ил)-(4-нитрофенил)метанон затем, как описывается, например, в примере 7, превращают в вещество примера 16.

Таким же путем получают вещества нижеследующих примеров 9-34:

Пример 35

4-[3-(3,4,5-Тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-ил-окси)тиофен-2-илметил]бензойная кислота

46 мг 4-[3-(3,4,5-Тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидро-пиран-2-илокси)тиофен-2-илметил]бензонитрила растворяют в смеси из 5 мл метанола и 2 мл 25%-ного раствора гидроксида калия и в течение 3 часов нагревают при температуре 70^оС. Раствор разбавляют с помощью 10 мл воды и нейтрализуют с помощью 2н. соляной кислоты. Полученный раствор подвергают сушке вымораживанием. Затем сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, дихлорметан/метанол/уксусная кислота/вода = 8: 2: 0,1: 0,1). Получают 45 мг продукта с молекулярной массой 396,42 (С₁₈Н₂₀О₈S); МС (ESI): 414,45 (M+NH₄ ⁺).

Пример 36

2-Гидроксиметил-6-{2-[2-(4-метоксифенил)этил]тиофен-3-илокси}-тетрагидропиран-3,4,5-триол

Пример 37

2-Гидроксиметил-6-{2-[2-(4-метоксифенил)винил]тиофен-3-илокси}-тетрагидропиран-3,4,5-триол

а) 3-Метокситиофен-2-карбальдегид

1,03 мл 3-Метокситиофена растворяют в 2,3 мл диметилформамида. При охлаждении льдом добавляют 1,06 мл фосфорилхлорида. Спустя 1 час реакционный раствор выливают на лед и раствор нейтрализуют с помощью 5 М раствора гидроксида натрия. Водную фазу экстрагируют 3 раза по 25 мл диэтиловым эфиром, объединенные органические фазы затем промывают с помощью 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Получают 840 мг продукта с молекулярной массой 142,18 (С₆Н₇О₂S); МС (ESI): 143,0 (M+H⁺).

b) 3-Гидрокситиофен-2-карбальдегид

200 мг 3-Метокситиофен-2-карбальдегида растворяют в 5 мл дихлорметана. 880 мг комплекса трибромида бора и диметилсульфида растворяют в 5 мл дихлорметана и добавляют к реакционному раствору. Раствор перемешивают в течение 18 часов. Реакционную смесь выливают в 30 мл воды и смесь экстрагируют 4 раза по 20 мл дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывают с помощью 30 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Получают 140 мг 3-гидрокситиофен-2-карбальдегида с молекулярной массой 128,15 (С₅Н₄О₂S); МС (ESI): 129,0 (М+Н⁺).

с) 4,5-Диацетокси-6-ацетоксиметил-2-(2-формилтиофен-3-илокси)-тетрагидропиран-3-иловый эфир уксусной кислоты

3,81 г 3-Гидрокситиофен-2-карбальдегида, 30,5 г 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-[5-изопропил-2-(4-метоксибензоил)-тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3-илового эфира уксусной кислоты, 37,0 г карбоната калия и 9,2 г бензилтрибутиламмонийхлорида растворяют в 850 мл дихлорметана. Добавляют 7,5 мл воды и реакционную смесь перемешивают в течение 60 часов. Раствор экстрагируют водой и насыщенным раствором хлорида натрия, органическую фазу сушат над сульфатом натрия и выпаривают в ротационном испарителе. К полученной коричневатой пене добавляют 60 мл смеси этанола с водой в соотношении 9:1 и образовавшийся мелкий осадок отфильтровывают под вакуумом. Получают продукт с молекулярной массой 458,44 (С₁₉Н₂₂О₁₁S); МС (ESI): 476 (М+NH₄ ⁺).

d) 3,4,5-Триацетокси-6-(2-винилтиофен-3-илокси)тетрагидропиран-2-илметиловый эфир уксусной кислоты

3,30 г 3,4,5-Триацетокси-6-(2-формилтиофен-3-илокси)тетрагидропиран-2-илметилового эфира уксусной кислоты растворяют в 60 мл диоксана. Добавляют 6,43 г метилтрифенилфосфонийбромида, 5,37 г карбоната калия и 0,25 мл воды и раствор кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. Раствор концентрируют и очищают колоночной хроматографией. Получают 2,89 г продукта с молекулярной массой 456,47 (С₂₀Н₂₄О₁₀S); МС (ESI): 479,10 (М+Na⁺), 474,10 (М+NH₄ ⁺).

е) 3,4,5-Триацетокси-6-{2-[2-(4-метоксифенил)винил]тиофен-3-ил-окси}тетрагидропиран-2-илметиловый эфир уксусной кислоты

148 мг 3,4,5-Триацетокси-6-(2-винилтиофен-3-илокси)тетрагидропиран-2-илметилового эфира уксусной кислоты в атмосфере аргона растворяют в 2 мл дихлорметана. Добавляют раствор 23 мг трициклогексилфосфин-[1,3-бис(2,4,6-триметилфенил)-4,5-дигидроимидазол-2-илиден][бензилиден]рутений(IV)дихлорида в 2 мл дихлорметана и раствор кипятят с обратным холодильником в течение 8 часов. Реакционный раствор концентрируют и очищают колоночной хроматографией (SiO₂, гептан/этилацетат = 2:1). Получают 132 мг продукта с молекулярной массой 562,60 (С₂₇Н₃₀О₁₁S); МС (ESI): 575,20 (М+Na⁺).

f) 2-Гидроксиметил-6-{2-[2-(4-метоксифенил)винил]тиофен-3-илокси}тетрагидропиран-3,4,5-триол = Пример 37

150 мг 3,4,5-Триацетокси-6-{2-[2-(4-метоксифенил)винил]-тиофен-3-илокси}тетрагидропиран-2-илметилового эфира уксусной кислоты суспендируют в 10 мл безводного метанола. Добавляют 1,0 мл метанольного раствора NaOCH₃ (10 мг/мл). Раствор перемешивают в течение 18 часов при температуре 22^оС. Добавляют Amberlyst 15 (Н⁺-форма) и раствор разбавляют с помощью 10 мл метанола, отфильтровывают и остаток промывают с помощью 20 мл метанола. Органическую фазу концентрируют и остаток очищают хроматографией на силикагеле. Получают 100 мг продукта с молекулярной массой 394,45 (С₁₉Н₂₂О₇S); МС (ESI): 417 (М+Na⁺), 412 (М+NH₄ ⁺).

g) 2-Гидроксиметил-6-{2-[2-(4-метоксифенил)этил]тиофен-3-илокси}тетрагидропиран-3,4,5-триол = Пример 36

50 мг 2-Гидроксиметил-6-{2-[2-(4-метоксифенил)винил]-тиофен-3-илокси}тетрагидропиран-3,4,5-триола растворяют в 10 мл метанола. Добавляют 20 мг палладия-на-активном угле и раствор перемешивают в течение 18 часов в атмосфере водорода. Катализатор отфильтровывают, промывают с помощью 60 мл метанола и органическую фазу концентрируют. Остаток хроматографируют на силикагеле (этилацетат). Получают 18 мг продукта с молекулярной массой 396,46 (С₁₉Н₂₄О₇S); МС (ESI): 419,05 (М+Na⁺), 414,10 (М+NH₄ ⁺).

Таким же путем получают вещества нижеследующих примеров 38-50.

Пример 51

2-Гидроксиметил-6-[5-изопропил-2-(4-метоксибензил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3,4,5-триол

а) Метиловый эфир 3-бензилокси-5-изопропилтиофен-2-карбоновой кислоты

1,16 г Метилового эфира 3-гидрокси-5-изопропилтиофен-2-карбоновой кислоты, который синтезируют по известному из литературы способу [H. Fiesselmann, F. Thoma, Chem. Ber., 89, 1907 (1956)], растворяют в 25 мл диметилформамида и смешивают с 2,83 г карбоната цезия и 1,72 мл бензилбромида. Реакционную смесь перемешивают в течение 72 часов при температуре 22^оС. Затем добавляют 10 мл метанола и спустя 30 минут добавляют 100 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и 50 мл воды. Смесь экстрагируют 3 раза по 70 мл диэтиловым эфиром. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:4). Получают продукт с молекулярной массой 290,4 (С₁₆Н₁₈О₃S); МС (ESI): 291 (М+Н⁺).

b) 3-Бензилокси-5-изопропилтиофен-2-карбоновая кислота

1,16 г Метилового эфира 3-бензилокси-5-изопропилтиофен-2-карбоновой кислоты растворяют в 10 мл тетрагидрофурана и 10 мл метанола и смешивают с раствором 1,7 г гидроксида лития в 10 мл воды. Реакционную смесь перемешивают в течение 72 часов при температуре 22^оС. В ротационном испарителе удаляют метанол и тетрагидрофуран. При охлаждении льдом в реакционной смеси устанавливают значение рН 4 с помощью 2 М соляной кислоты и экстрагируют 2 раза по 50 мл этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Получают продукт с молекулярной массой 276,4 (С₁₅Н₁₈О₃S); МС (ESI): 294 (М+Na⁺).

с) Метоксиметиламид 3-бензилокси-5-изопропилтиофен-2-карбоновой кислоты

860 мг 3-Бензилокси-5-изопропилтиофен-2-карбоновой кислоты растворяют в 30 мл дихлорметана и смешивают с 560 мг N,O-диметилгидроксиламингидрохлорида и 2,3 мл триэтиламина. После выдерживания в течение 15 минут при температуре 22^оС добавляют 2,3 мл 50%-ного раствора ангидрида 1-пропанфосфоновой кислоты в уксусной кислоте и перемешивают следующие 18 часов при температуре 22^оС. Реакционную смесь промывают два раза по 70 мл водой и один раз с помощью 70 мл насыщенного раствора хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Получают продукт с молекулярной массой 319,4 (С₁₇Н₂₁NO₃S); МС (ESI): 320 (М+H⁺).

d)(3-Бензилокси-5-изопропилтиофен-2-ил)-(4-метоксифенил)метанон

860 мг Метоксиметиламида 3-бензилокси-5-изопропилтиофен-2-карбоновой кислоты растворяют в 50 мл тетрагидрофурана, охлаждают на бане со льдом до температуры 0^оС и смешивают с 31,3 мл 0,5 М раствора 4-метоксифенилмагнийбромида в тетрагидрофуране. Спустя 30 минут баню со льдом удаляют и реакционную смесь нагревают до температуры 22^оС. Спустя 1 час реакционную смесь смешивают с 70 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и экстрагируют два раза по 100 мл метилацетатом. Объединенные органические фазы промывают с помощью 70 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:3). Получают продукт с молекулярной массой 366,5 (С₂₂Н₂₂О₃S); МС (ESI): 367 (М+H⁺).

е) (3-Гидрокси-5-изопропилтиофен-2-ил)-(4-метоксифенил)метанон

1,00 г (3-Бензилокси-5-изопропилтиофен-2-ил)-(4-метокси-фенил)метанона растворяют в 20 мл дихлорметана. К реакционному раствору добавляют 2,73 мл 1 М раствора комплекса трибромида бора и диметилсульфида в дихлорметане. Раствор перемешивают в течение 1,5 часов при температуре 22^оС. Реакционную смесь выливают в 50 мл воды и смесь экстрагируют 2 раза по 30 мл дихлорметаном. Объединенную органическую фазу экстрагируют 2 раза по 30 мл насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и один раз с помощью 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:4). Получают продукт с молекулярной массой 276,4 (С₁₅Н₁₆О₃S); МС (ESI): 299 (М+Na⁺).

f) 4,5-Диацетокси-6-ацетоксиметил-2-[5-изопропил-2-(4-метокси-бензоил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3-иловый эфир уксусной кислоты

380 мг (3-Гидрокси-5-изопропилтиофен-2-ил)-(4-метокси-фенил)метанона, 848 мг 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагидропиран-3-илового эфира уксусной кислоты, 1,43 г карбоната калия и 71,1 мг бензилтрибутиламмонийхлорида растворяют в 20 мл дихлорметана и добавляют 1,20 мл воды. Реакционную смесь перемешивают в течение 40 часов при температуре 22^оС. Реакционную смесь смешивают с 50 мл воды и экстрагируют 2 раза по 50 мл дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывают с помощью 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:1). Получают продукт с молекулярной массой 606,7 (С₂₉Н₃₄О₁₂S); МС (ESI): 607 (М+H⁺).

g) 4,5-Диацетокси-6-ацетоксиметил-2-[5-изопропил-2-(4-метоксибензил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3-иловый эфир уксусной кислоты

630 мг 4,5-Диацетокси-6-ацетоксиметил-2-[5-изопропил-2-(4-метоксибензоил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3-илового эфира уксусной кислоты растворяют в 30 мл ацетонитрила и охлаждают на бане со льдом до температуры 0^оС. Добавляют 1,31 мл триметилхлорсилана и 652 мг цианоборгидрида натрия, баню со льдом удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов. Реакционную смесь смешивают со 100 мл воды и экстрагируют 2 раза по 70 мл дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывают с помощью 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:1). Получают продукт с молекулярной массой 592,7 (С₂₉Н₃₆О₁₁S); МС (ESI): 593 (М+H⁺).

h) 2-Гидроксиметил-6-[5-изопропил-2-(4-метоксибензил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3,4,5-триол

450 мг 4,5-Диацетокси-6-ацетоксиметил-2-[5-изопропил-2-(4-метоксибензил)тиофен-3-илокси]тетрагидропиран-3-илового эфира уксусной кислоты растворяют в 20 мл метанола и смешивают с 0,41 мл 30%-ного метанольного раствора метилата натрия. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа при температуре 22^оС, смешивают с Amberlyst 15 (Н⁺-форма), отфильтровывают и дополнительно промывают с помощью 30 мл метанола. Раствор концентрируют. Получают продукт с молекулярной массой 424,5 (С₂₁Н₂₈О₇S); МС (ESI): 447 (М+Na⁺).

Таким же путем, исходя из известных из литературы 3-гидрокситиофен-2-карбоновых кислот [H. Fiesselmann, F. Thoma, Chem. Ber., 89, 1907-1913 (1956); M.D. Mullican и др., J. Med. Chem., 34, 2186-2194 (1991); G.M. Karp и др., Symthesis, 1078-1080 (2000)], получают соединения нижеследующих примеров 52-54:

Пример 55

Бензиламид 3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-карбоновой кислоты

а) 3-Гидрокситиофен-2-карбоновая кислота

10,0 г Метилового эфира 3-гидрокситиофен-2-карбоновой кислоты растворяют в смеси из 90 мл тетрагидрофурана и 90 мл метанола и смешивают с раствором 25,2 г гидроксида лития в 25 мл воды. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 часов при температуре 22^оС и затем в течение 6 часов при температуре 55^оС. Реакционную смесь концентрируют в ротационном испарителе до объема 50 мл, подкисляют с помощью 2 М соляной кислоты до значения рН 1 и экстрагируют 3 раза по 50 мл трет-бутилметиловым эфиром. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом магния и концентрируют. Получают продукт с молекулярной массой 144,2 (С₅Н₄О₃S); МС (ESI): 145 (М+H⁺).

b) Бензиламид 3-гидрокситиофен-2-карбоновой кислоты

1,44 г 3-Гидрокситиофен-2-карбоновой кислоты растворяют в 100 мл дихлорметана, смешивают с 2,18 мл бензиламина и 5,00 мл 50%-ного раствора ангидрида 1-пропанфосфоновой кислоты в уксусной кислоте. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при температуре 22^оС, смешивают со 100 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и экстрагируют 2 раза по 100 мл дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывают с помощью 100 мл насыщенного раствора хлорида натрия, сушат над сульфатом магния и концентрируют. Получают продукт с молекулярной массой 233,3 (С₁₂Н₁₁NO₂S); МС (ESI): 234 (М+H⁺).

с) 3,4,5-Триацетокси-6-(2-бензилкарбамоилтиофен-3-илокси)тетрагидропиран-2-илметиловый эфир уксусной кислоты

1,12 г Бензиламида 3-гидрокситиофен-2-карбоновой кислоты, 3,16 г 4,5-диацетокси-6-ацетоксиметил-2-бромтетрагидропиран-3-илового эфира уксусной кислоты, 3,30 г карбоната калия и 235 мг бензилтрибутиламмонийхлорида растворяют в 25 мл дихлорметана и добавляют 2,00 мл воды. Реакционную смесь перемешивают в течение 40 часов при температуре 22^оС. Реакционную смесь смешивают с 50 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и экстрагируют 2 раза по 50 мл дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом магния и концентрируют. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/н-гептан = 1:1). Получают продукт с молекулярной массой 563,6 (С₂₆Н₂₉NO₁₁S); МС (ESI): 564 (М+H⁺).

d) Бензиламид 3-(3,4,5-тригидрокси-6-гидроксиметилтетрагидропиран-2-илокси)тиофен-2-карбоновой кислоты

600 мг 3,4,5-Триацетокси-6-(2-бензилкарбамоилтиофен-3-илокси)тетрагидропиран-2-илметилового эфира уксусной кислоты растворяют в 40 мл метанола и смешивают с 1,40 мл 30%-ного метанольного раствора метилата натрия. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при температуре 22^оС, нейтрализуют с помощью 0,5 М раствора HCl в метаноле и концентрируют. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (SiO₂, этилацетат/метанол = 10:1). Получают продукт с молекулярной массой 395,4 (С₁₈Н₂₁NO₇S); МС (ESI): 396 (М+H⁺).

Таким же путем получают соединения нижеследующих примеров 56-58:

Claims

1. Соединения формулы (I)

где R1, R2 означают атом водорода, (С₁-С₆)-алкил или фенил, причем в алкильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

А означает (С₀-С₁₅)-алкандиил, причем один или несколько С-атомов алкандиильного остатка независимо друг от друга могут быть заменены на -(С=O)-, -СН=СН-, -СН(ОН)- или -NH-;

n означает число от 0 до 4;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, ОН, NO₂, CN, СООН, СОО(С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₈)-алкил, (С₂-С₆)-алкенил, (С₁-С₁₂)-алкокси, HO-(C₁-С₆)-алкил, S-(С₁-С₆)-алкил, причем в алкильных и алкоксильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

O-(СН₂)_O-фенил, где о может означать от 0 до 6; или

R3 и R4 вместе с соединенными с ними С-атомами образуют 5-7-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный цикл Сус2, причем 1 или 2 С-атома цикла также могут быть заменены на О и Сус2 может быть незамещен, причем, смотря по обстоятельствам, одна группа -СН₂- может быть заменена на -CF₂-; и

R5 означает атом водорода,

а также их фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединения формулы (I) по п.1, где А связан с тиенильным циклом в 2-положении.

3. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где

R1, R2 означают атом водорода, (C₁-С₆)-алкил, фенил, причем в алкильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

n означает число 2 или 3;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, ОН, NO₂, CN, СООН, СОО(С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₈)-алкил, (С₂-С₆)-алкенил, (С₁-С₁₂)-алкокси, HO-(C₁-С₆)-алкил, (С₁-С₄)-алкоксифенил, S-(С₁-С₆)-алкил, причем в алкильных и алкоксильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора; или

R3 и R4 вместе с соединенными с ними С-атомами образуют 5-7-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный цикл Сус2, причем 1 или 2 С-атома цикла также могут быть заменены на О и Сус2 может быть незамещен, причем, смотря по обстоятельствам, одна группа -СН₂-может быть заменена на -CF₂-; и R5 означает атом водорода.

4. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где

R1, R2 означают атом водорода, (С₁-С₆)-алкил, CF₃, фенил;

А означает -СН=СН-СН₂- или (С₁-С₄)-алкандиил, причем одна или две группы -СН₂- также могут быть заменены на -(С=О)-, -СН=СН-, -СН(ОН)-, -NH-;

n означает число 2 или 3;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, Br, J, NO₂, ОН, CN, (C₁-С₆)-алкил, (С₁-С₈)-алкоксил, OCF₃, ОСН₂СР₃, S-(C₁-C₄)-алкил, СООН, HO-(C₁-С₄)-алкил, (С₁-С₂)-алкоксифенил; или

R3 и R4 вместе означают -СН=СН-O-, -O-(СН₂)_р-О-, где р=1 или 2, -O-CF₂-O-, -CH=CH-CH=CH-; и

R5 означает атом водорода.

5. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где R2 означает атом водорода.

6. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где

R1 означает атом водорода, CF₃, (С₁-С₄)-алкил, фенил;

R2 означает атом водорода;

А означает -CH₂-, C₂H₄-, -С₃Н₆-, -СН(ОН)-, -(С=O)-, -СН=СН-, СН=СН-СН₂-, -СО-СН₂-СН₂- или -CO-NH-CH₂-;

n означает число 2 или 3;

Сус1 означает фенил или тиенил;

R3, R4, R5 означают атом водорода, F, Cl, J, NO₂, ОН, CN, (C₁-С₆)-алкил, (С₁-С₈)-алкоксил, -O-СН₂-фенил, OCF₃, S-СН₃, СООН; или

R3 и R4 вместе означают -СН=СН-O-, -O-(СН₂)_р-O-, где р=1 или 2, -O-CF₂-O-, -СН=СН-СН=СН-; и

R5 означает атом водорода.

7. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где А означает -СН₂- или -СН₂-СН₂-.

8. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где Cyc1 означает фенил.

9. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где Cyc1 означает тиенил.

10. Соединения формулы (I) по п.1 или 2, где Cyc1 является монозамещенным.

11. Лекарственное средство, обладающее антидиабетическим действием, содержащее одно или несколько соединений по одному или нескольким из пп.1-10.

12. Применение соединений по одному или нескольким из пп.1-10 для получения лекарственного средства для снижения уровня сахара в крови.

13. Применение по п.13 для получения лекарственного средства для лечения диабета типа 1 и диабета типа 2.

14. Способ получения лекарственного средства, содержащего одно или несколько соединений по одному или нескольким из пп.1-10, отличающийся тем, что активное вещество смешивают с фармацевтически пригодным носителем и эту смесь доводят до пригодной для введения формы.