RU2312863C2 - Тоник для роста волос - Google Patents
Тоник для роста волос Download PDFInfo
- Publication number
- RU2312863C2 RU2312863C2 RU2004133555/04A RU2004133555A RU2312863C2 RU 2312863 C2 RU2312863 C2 RU 2312863C2 RU 2004133555/04 A RU2004133555/04 A RU 2004133555/04A RU 2004133555 A RU2004133555 A RU 2004133555A RU 2312863 C2 RU2312863 C2 RU 2312863C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- compound
- group
- wnt
- mhz
- ppm
- Prior art date
Links
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 title abstract description 49
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 title abstract description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 204
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 34
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 14
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims abstract description 12
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 claims description 6
- 101150109862 WNT-5A gene Proteins 0.000 abstract description 124
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 36
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 26
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 22
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 9
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 318
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 108
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 93
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 82
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 82
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 60
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 59
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 53
- CSCPPACGZOOCGX-WFGJKAKNSA-N acetone d6 Chemical compound [2H]C([2H])([2H])C(=O)C([2H])([2H])[2H] CSCPPACGZOOCGX-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 51
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 49
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 47
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 41
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 36
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 35
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 32
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 26
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 24
- 235000015961 tonic Nutrition 0.000 description 24
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 22
- 230000006870 function Effects 0.000 description 22
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 22
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 21
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 21
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 21
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 19
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 19
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 18
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 18
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 18
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 18
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 18
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 18
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 17
- VYGYNVZNSSTDLJ-HKCOAVLJSA-N monorden Natural products CC1CC2OC2C=C/C=C/C(=O)CC3C(C(=CC(=C3Cl)O)O)C(=O)O1 VYGYNVZNSSTDLJ-HKCOAVLJSA-N 0.000 description 17
- AECPBJMOGBFQDN-YMYQVXQQSA-N radicicol Chemical compound C1CCCC(=O)C[C@H]2[C@H](Cl)C(=O)CC(=O)[C@H]2C(=O)O[C@H](C)C[C@H]2O[C@@H]21 AECPBJMOGBFQDN-YMYQVXQQSA-N 0.000 description 17
- 229930192524 radicicol Natural products 0.000 description 17
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 17
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 15
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000003324 growth hormone secretagogue Substances 0.000 description 14
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 13
- -1 hydroxyimino group Chemical group 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 12
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 12
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 12
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 12
- 102000013814 Wnt Human genes 0.000 description 11
- 108050003627 Wnt Proteins 0.000 description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 11
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 10
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 10
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 10
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 10
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 10
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 9
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 9
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 8
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 8
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 8
- 241000282566 Macaca arctoides Species 0.000 description 7
- 102000043366 Wnt-5a Human genes 0.000 description 7
- 108700020483 Wnt-5a Proteins 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 7
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 7
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 7
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 7
- KPZSTOVTJYRDIO-UHFFFAOYSA-K trichlorocerium;heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.Cl[Ce](Cl)Cl KPZSTOVTJYRDIO-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 7
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 6
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 6
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 229940124563 hair growth stimulant Drugs 0.000 description 6
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 6
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 6
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 6
- 241000754833 Pochonia chlamydosporia Species 0.000 description 5
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 5
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 5
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 5
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 210000000442 hair follicle cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 4
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 4
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 4
- KKHFRAFPESRGGD-UHFFFAOYSA-N 1,3-dimethyl-7-[3-(n-methylanilino)propyl]purine-2,6-dione Chemical compound C1=NC=2N(C)C(=O)N(C)C(=O)C=2N1CCCN(C)C1=CC=CC=C1 KKHFRAFPESRGGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MHSLDASSAFCCDO-UHFFFAOYSA-N 1-(5-tert-butyl-2-methylpyrazol-3-yl)-3-(4-pyridin-4-yloxyphenyl)urea Chemical compound CN1N=C(C(C)(C)C)C=C1NC(=O)NC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=NC=C1 MHSLDASSAFCCDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XFJBGINZIMNZBW-CRAIPNDOSA-N 5-chloro-2-[4-[(1r,2s)-2-[2-(5-methylsulfonylpyridin-2-yl)oxyethyl]cyclopropyl]piperidin-1-yl]pyrimidine Chemical compound N1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1OCC[C@H]1[C@@H](C2CCN(CC2)C=2N=CC(Cl)=CN=2)C1 XFJBGINZIMNZBW-CRAIPNDOSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- 241001002196 Pochonia Species 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 241000082085 Verticillium <Phyllachorales> Species 0.000 description 3
- 101150077398 WNT-1 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000052547 Wnt-1 Human genes 0.000 description 3
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004414 alkyl thio group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 210000001061 forehead Anatomy 0.000 description 3
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 3
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 3
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical class [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 3
- RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N thiophenol Chemical compound SC1=CC=CC=C1 RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N (1r,2r,4r)-2-(4-bromophenyl)-n-[(4-chlorophenyl)-(2-fluoropyridin-4-yl)methyl]-4-morpholin-4-ylcyclohexane-1-carboxamide Chemical compound C1=NC(F)=CC(C(NC(=O)[C@H]2[C@@H](C[C@@H](CC2)N2CCOCC2)C=2C=CC(Br)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N 0.000 description 2
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 2
- GCTFTMWXZFLTRR-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-amino-n-[3-(difluoromethoxy)-4-(1,3-oxazol-5-yl)phenyl]-4-methylpentanamide Chemical compound FC(F)OC1=CC(NC(=O)[C@H](N)CC(C)C)=CC=C1C1=CN=CO1 GCTFTMWXZFLTRR-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-[6-amino-8-[(4-phenylphenyl)methylamino]purin-9-yl]-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound C=1C=C(C=2C=CC=CC=2)C=CC=1CNC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N 0.000 description 2
- VIJSPAIQWVPKQZ-BLECARSGSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-acetamido-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4,4-dimethylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(C)=O VIJSPAIQWVPKQZ-BLECARSGSA-N 0.000 description 2
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 2
- YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N (4R)-5-[(6-bromo-3-methyl-2-pyrrolidin-1-ylquinoline-4-carbonyl)amino]-4-(2-chlorophenyl)pentanoic acid Chemical compound CC1=C(C2=C(C=CC(=C2)Br)N=C1N3CCCC3)C(=O)NC[C@H](CCC(=O)O)C4=CC=CC=C4Cl YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 2
- VUEGYUOUAAVYAS-JGGQBBKZSA-N (6ar,9s,10ar)-9-(dimethylsulfamoylamino)-7-methyl-6,6a,8,9,10,10a-hexahydro-4h-indolo[4,3-fg]quinoline Chemical compound C1=CC([C@H]2C[C@@H](CN(C)[C@@H]2C2)NS(=O)(=O)N(C)C)=C3C2=CNC3=C1 VUEGYUOUAAVYAS-JGGQBBKZSA-N 0.000 description 2
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000006376 (C3-C10) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 2
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 2
- WGFNXGPBPIJYLI-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluoro-3-[(3-fluorophenyl)sulfonylamino]-n-(3-methoxy-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl)benzamide Chemical compound C1=C2C(OC)=NNC2=NC=C1NC(=O)C(C=1F)=C(F)C=CC=1NS(=O)(=O)C1=CC=CC(F)=C1 WGFNXGPBPIJYLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VCUXVXLUOHDHKK-UHFFFAOYSA-N 2-(2-aminopyrimidin-4-yl)-4-(2-chloro-4-methoxyphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide Chemical compound ClC1=CC(OC)=CC=C1C1=C(C(N)=O)SC(C=2N=C(N)N=CC=2)=N1 VCUXVXLUOHDHKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(2-cyclopropylethoxy)-9-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-1h-phenanthro[9,10-d]imidazol-2-yl]-5-fluorobenzene-1,3-dicarbonitrile Chemical compound C1=C2C3=CC(CC(C)(O)C)=CC=C3C=3NC(C=4C(=CC(F)=CC=4C#N)C#N)=NC=3C2=CC=C1OCCC1CC1 PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FMKGJQHNYMWDFJ-CVEARBPZSA-N 2-[[4-(2,2-difluoropropoxy)pyrimidin-5-yl]methylamino]-4-[[(1R,4S)-4-hydroxy-3,3-dimethylcyclohexyl]amino]pyrimidine-5-carbonitrile Chemical compound FC(COC1=NC=NC=C1CNC1=NC=C(C(=N1)N[C@H]1CC([C@H](CC1)O)(C)C)C#N)(C)F FMKGJQHNYMWDFJ-CVEARBPZSA-N 0.000 description 2
- TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 2-amino-9-[(2R,3S,4S,5R)-4-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-ynyl-1H-purine-6,8-dione Chemical compound NC=1NC(C=2N(C(N(C=2N=1)[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H]1O)F)CO)=O)CC#C)=O TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010035563 Chloramphenicol O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 101000904460 Encephalitozoon cuniculi (strain GB-M1) Probable glycerol-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 101100210338 Evasterias troschelii WNT-8 gene Proteins 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710140951 Frizzled-5 Proteins 0.000 description 2
- 102100039818 Frizzled-5 Human genes 0.000 description 2
- 101000993347 Gallus gallus Ciliary neurotrophic factor Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine hydrochloride Chemical compound Cl.ON WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Chemical compound C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical compound C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000269368 Xenopus laevis Species 0.000 description 2
- 101100264062 Xenopus laevis wnt5a gene Proteins 0.000 description 2
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 2
- PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N [(3r,4ar,5s,6s,6as,10s,10ar,10bs)-3-ethenyl-10,10b-dihydroxy-3,4a,7,7,10a-pentamethyl-1-oxo-6-(2-pyridin-2-ylethylcarbamoyloxy)-5,6,6a,8,9,10-hexahydro-2h-benzo[f]chromen-5-yl] acetate Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(O[C@](C)(CC(=O)[C@]2(O)[C@@]2(C)[C@@H](O)CCC(C)(C)[C@@H]21)C=C)C)OC(=O)C)C(=O)NCCC1=CC=CC=N1 PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 125000000676 alkoxyimino group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 2
- 230000019552 anatomical structure morphogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 2
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 2
- 229940125851 compound 27 Drugs 0.000 description 2
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 2
- 229940125844 compound 46 Drugs 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- 229940126545 compound 53 Drugs 0.000 description 2
- 229940127113 compound 57 Drugs 0.000 description 2
- 229940125900 compound 59 Drugs 0.000 description 2
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 2
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 2
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000031774 hair cycle Effects 0.000 description 2
- 125000003453 indazolyl group Chemical group N1N=C(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- YDCHPLOFQATIDS-UHFFFAOYSA-N methyl 2-bromoacetate Chemical compound COC(=O)CBr YDCHPLOFQATIDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IOMMMLWIABWRKL-WUTDNEBXSA-N nazartinib Chemical compound C1N(C(=O)/C=C/CN(C)C)CCCC[C@H]1N1C2=C(Cl)C=CC=C2N=C1NC(=O)C1=CC=NC(C)=C1 IOMMMLWIABWRKL-WUTDNEBXSA-N 0.000 description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 2
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 2
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 2
- 239000012521 purified sample Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- FDBYIYFVSAHJLY-UHFFFAOYSA-N resmetirom Chemical compound N1C(=O)C(C(C)C)=CC(OC=2C(=CC(=CC=2Cl)N2C(NC(=O)C(C#N)=N2)=O)Cl)=N1 FDBYIYFVSAHJLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1N1[N+](C=2C=CC(I)=CC=2)=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=N1 JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 229960000716 tonics Drugs 0.000 description 2
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N (1R,3R)-3-[[3-bromo-1-[4-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)phenyl]pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl]amino]-N,1-dimethylcyclopentane-1-carboxamide Chemical compound BrC1=NN(C2=NC(=NC=C21)N[C@H]1C[C@@](CC1)(C(=O)NC)C)C1=CC=C(C=C1)C=1SC(=NN=1)C ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N 0.000 description 1
- UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N (1R,9R,10S,11R,12R,15S,18S,21R)-10,11,21-trihydroxy-8,8-dimethyl-14-methylidene-4-(prop-2-enylamino)-20-oxa-5-thia-3-azahexacyclo[9.7.2.112,15.01,9.02,6.012,18]henicosa-2(6),3-dien-13-one Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](O)[C@@]23C(C1=C)=O)C[C@H]2[C@]12C(N=C(NCC=C)S4)=C4CC(C)(C)[C@H]1[C@H](O)[C@]3(O)OC2 UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N 0.000 description 1
- AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N (1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-6-[(3-chlorophenyl)methyl]-12,19-difluoro-11-hydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-9,13-dimethyl-6-azapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosa-14,17-dien-16-one Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2[C@H]3[C@]([C@]4(C=CC(=O)C=C4[C@@H](F)C3)C)(F)[C@@H](O)C[C@@]2([C@@]1(C1)C(=O)CO)C)N1CC1=CC=CC(Cl)=C1 AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N 0.000 description 1
- GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N (1s,2s,3r,4r)-3-[[5-chloro-2-[(1-ethyl-6-methoxy-2-oxo-4,5-dihydro-3h-1-benzazepin-7-yl)amino]pyrimidin-4-yl]amino]bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxamide Chemical compound CCN1C(=O)CCCC2=C(OC)C(NC=3N=C(C(=CN=3)Cl)N[C@H]3[C@H]([C@@]4([H])C[C@@]3(C=C4)[H])C(N)=O)=CC=C21 GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N 0.000 description 1
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 1
- IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N (2r)-n-[(2s,3r)-4-[[(4s)-6-(2,2-dimethylpropyl)spiro[3,4-dihydropyrano[2,3-b]pyridine-2,1'-cyclobutane]-4-yl]amino]-3-hydroxy-1-[3-(1,3-thiazol-2-yl)phenyl]butan-2-yl]-2-methoxypropanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](C)OC)[C@H](O)CN[C@@H]1C2=CC(CC(C)(C)C)=CN=C2OC2(CCC2)C1)C(C=1)=CC=CC=1C1=NC=CS1 IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N 0.000 description 1
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N (2s)-n-[(3s,4s)-5-acetyl-7-cyano-4-methyl-1-[(2-methylnaphthalen-1-yl)methyl]-2-oxo-3,4-dihydro-1,5-benzodiazepin-3-yl]-2-(methylamino)propanamide Chemical compound O=C1[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC)[C@H](C)N(C(C)=O)C2=CC(C#N)=CC=C2N1CC1=C(C)C=CC2=CC=CC=C12 STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N 0.000 description 1
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 1
- UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N (3ar,5s,6s,7r,7ar)-5-(difluoromethyl)-2-(ethylamino)-5,6,7,7a-tetrahydro-3ah-pyrano[3,2-d][1,3]thiazole-6,7-diol Chemical compound S1C(NCC)=N[C@H]2[C@@H]1O[C@H](C(F)F)[C@@H](O)[C@@H]2O UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N 0.000 description 1
- OOKAZRDERJMRCJ-KOUAFAAESA-N (3r)-7-[(1s,2s,4ar,6s,8s)-2,6-dimethyl-8-[(2s)-2-methylbutanoyl]oxy-1,2,4a,5,6,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl]-3-hydroxy-5-oxoheptanoic acid Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CCC(=O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H](C)C[C@@H]21 OOKAZRDERJMRCJ-KOUAFAAESA-N 0.000 description 1
- HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N (3r,4r)-3-azaniumyl-5-[[(2s,3r)-1-[(2s)-2,3-dicarboxypyrrolidin-1-yl]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxo-4-sulfanylpentane-1-sulfonate Chemical compound OS(=O)(=O)CC[C@@H](N)[C@@H](S)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)CC)C(=O)N1CCC(C(O)=O)[C@H]1C(O)=O HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N 0.000 description 1
- MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M (3r,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-5-[methyl-[(1r)-1-phenylethyl]carbamoyl]-4-propan-2-ylpyrazol-3-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound C1([C@@H](C)N(C)C(=O)C2=NN(C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C2C(C)C)C=2C=CC(F)=CC=2)=CC=CC=C1 MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M 0.000 description 1
- OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M (3r,5r)-7-[3-(4-fluorophenyl)-8-oxo-7-phenyl-1-propan-2-yl-5,6-dihydro-4h-pyrrolo[2,3-c]azepin-2-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound O=C1C=2N(C(C)C)C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C(C=3C=CC(F)=CC=3)C=2CCCN1C1=CC=CC=C1 OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M 0.000 description 1
- STPKWKPURVSAJF-LJEWAXOPSA-N (4r,5r)-5-[4-[[4-(1-aza-4-azoniabicyclo[2.2.2]octan-4-ylmethyl)phenyl]methoxy]phenyl]-3,3-dibutyl-7-(dimethylamino)-1,1-dioxo-4,5-dihydro-2h-1$l^{6}-benzothiepin-4-ol Chemical compound O[C@H]1C(CCCC)(CCCC)CS(=O)(=O)C2=CC=C(N(C)C)C=C2[C@H]1C(C=C1)=CC=C1OCC(C=C1)=CC=C1C[N+]1(CC2)CCN2CC1 STPKWKPURVSAJF-LJEWAXOPSA-N 0.000 description 1
- 125000004844 (C1-C6) alkoxyimino group Chemical group 0.000 description 1
- DEVSOMFAQLZNKR-RJRFIUFISA-N (z)-3-[3-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-1,2,4-triazol-1-yl]-n'-pyrazin-2-ylprop-2-enehydrazide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(C(F)(F)F)=CC(C2=NN(\C=C/C(=O)NNC=3N=CC=NC=3)C=N2)=C1 DEVSOMFAQLZNKR-RJRFIUFISA-N 0.000 description 1
- 125000005923 1,2-dimethylpropyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 1
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 1
- MPPPKRYCTPRNTB-UHFFFAOYSA-N 1-bromobutane Chemical compound CCCCBr MPPPKRYCTPRNTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNDIARAMWBIKFW-UHFFFAOYSA-N 1-bromohexane Chemical compound CCCCCCBr MNDIARAMWBIKFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYNYIHKIEHGYOZ-UHFFFAOYSA-N 1-bromopropane Chemical compound CCCBr CYNYIHKIEHGYOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 2-(1-adamantyl)-n-[2-[2-(2-hydroxyethylamino)ethylamino]quinolin-5-yl]acetamide Chemical compound C1C(C2)CC(C3)CC2CC13CC(=O)NC1=CC=CC2=NC(NCCNCCO)=CC=C21 FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVCMGAUPZIKYTH-VGHSCWAPSA-N 2-acetyloxybenzoic acid;[(2s,3r)-4-(dimethylamino)-3-methyl-1,2-diphenylbutan-2-yl] propanoate;1,3,7-trimethylpurine-2,6-dione Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O.CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C.C([C@](OC(=O)CC)([C@H](C)CN(C)C)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 VVCMGAUPZIKYTH-VGHSCWAPSA-N 0.000 description 1
- YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 2-amino-9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-8-(6-aminopurin-9-yl)-9,18-difluoro-3,12-dihydroxy-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-yl]-1H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC2=C(N=CN2[C@@H]2O[C@@H]3COP(S)(=O)O[C@@H]4[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@@H]3F)O[C@H]([C@H]4F)N2C=NC3=C2N=CN=C3N)C(=O)N1 YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 0.000 description 1
- NPRYCHLHHVWLQZ-TURQNECASA-N 2-amino-9-[(2R,3S,4S,5R)-4-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-ynylpurin-8-one Chemical compound NC1=NC=C2N(C(N(C2=N1)[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H]1O)F)CO)=O)CC#C NPRYCHLHHVWLQZ-TURQNECASA-N 0.000 description 1
- MGADZUXDNSDTHW-UHFFFAOYSA-N 2H-pyran Chemical compound C1OC=CC=C1 MGADZUXDNSDTHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- RSIWALKZYXPAGW-NSHDSACASA-N 6-(3-fluorophenyl)-3-methyl-7-[(1s)-1-(7h-purin-6-ylamino)ethyl]-[1,3]thiazolo[3,2-a]pyrimidin-5-one Chemical compound C=1([C@@H](NC=2C=3N=CNC=3N=CN=2)C)N=C2SC=C(C)N2C(=O)C=1C1=CC=CC(F)=C1 RSIWALKZYXPAGW-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 241000195940 Bryophyta Species 0.000 description 1
- JQUCWIWWWKZNCS-LESHARBVSA-N C(C1=CC=CC=C1)(=O)NC=1SC[C@H]2[C@@](N1)(CO[C@H](C2)C)C=2SC=C(N2)NC(=O)C2=NC=C(C=C2)OC(F)F Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)(=O)NC=1SC[C@H]2[C@@](N1)(CO[C@H](C2)C)C=2SC=C(N2)NC(=O)C2=NC=C(C=C2)OC(F)F JQUCWIWWWKZNCS-LESHARBVSA-N 0.000 description 1
- 0 C*C(C(*)[C@](*)CC(*)C(Cc1c(*)c(*)cc(O*)c1C(O[C@](C)C1)=O)=O)C(*)C1(*)S Chemical compound C*C(C(*)[C@](*)CC(*)C(Cc1c(*)c(*)cc(O*)c1C(O[C@](C)C1)=O)=O)C(*)C1(*)S 0.000 description 1
- PKMUHQIDVVOXHQ-HXUWFJFHSA-N C[C@H](C1=CC(C2=CC=C(CNC3CCCC3)S2)=CC=C1)NC(C1=C(C)C=CC(NC2CNC2)=C1)=O Chemical compound C[C@H](C1=CC(C2=CC=C(CNC3CCCC3)S2)=CC=C1)NC(C1=C(C)C=CC(NC2CNC2)=C1)=O PKMUHQIDVVOXHQ-HXUWFJFHSA-N 0.000 description 1
- 102000004657 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinase Type 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010003721 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinase Type 2 Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 1
- 229940126639 Compound 33 Drugs 0.000 description 1
- 229940127007 Compound 39 Drugs 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101710140946 Frizzled-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100021265 Frizzled-2 Human genes 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 1
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 1
- 101001066129 Homo sapiens Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020864 Hypertrichosis Diseases 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 239000012448 Lithium borohydride Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- LVDRREOUMKACNJ-BKMJKUGQSA-N N-[(2R,3S)-2-(4-chlorophenyl)-1-(1,4-dimethyl-2-oxoquinolin-7-yl)-6-oxopiperidin-3-yl]-2-methylpropane-1-sulfonamide Chemical compound CC(C)CS(=O)(=O)N[C@H]1CCC(=O)N([C@@H]1c1ccc(Cl)cc1)c1ccc2c(C)cc(=O)n(C)c2c1 LVDRREOUMKACNJ-BKMJKUGQSA-N 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 1
- QOVYHDHLFPKQQG-NDEPHWFRSA-N N[C@@H](CCC(=O)N1CCC(CC1)NC1=C2C=CC=CC2=NC(NCC2=CN(CCCNCCCNC3CCCCC3)N=N2)=N1)C(O)=O Chemical compound N[C@@H](CCC(=O)N1CCC(CC1)NC1=C2C=CC=CC2=NC(NCC2=CN(CCCNCCCNC3CCCCC3)N=N2)=N1)C(O)=O QOVYHDHLFPKQQG-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 1
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 description 1
- ZCQWOFVYLHDMMC-UHFFFAOYSA-N Oxazole Chemical compound C1=COC=N1 ZCQWOFVYLHDMMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000819472 Rattus norvegicus Frizzled-2 Proteins 0.000 description 1
- 241000905985 Rotiferophthora Species 0.000 description 1
- PNUZDKCDAWUEGK-CYZMBNFOSA-N Sitafloxacin Chemical compound C([C@H]1N)N(C=2C(=C3C(C(C(C(O)=O)=CN3[C@H]3[C@H](C3)F)=O)=CC=2F)Cl)CC11CC1 PNUZDKCDAWUEGK-CYZMBNFOSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 102000006757 Wnt Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010047118 Wnt Receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000031712 Wnt receptor signaling pathway, planar cell polarity pathway Effects 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N [(1s,3r,4ar,7s,8s,8as)-3-hydroxy-8-[2-[(4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-7-methyl-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=C[C@H]2C[C@@H](O)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)CC1C[C@@H](O)CC(=O)O1 LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N 0.000 description 1
- SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N [(2R)-1-[[4-[(3-phenylmethoxyphenoxy)methyl]phenyl]methyl]pyrrolidin-2-yl]methanol Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC=1C=C(OCC2=CC=C(CN3[C@H](CCC3)CO)C=C2)C=CC=1 SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N 0.000 description 1
- XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N [3-(3'-methoxyspiro[adamantane-2,4'-dioxetane]-3'-yl)phenyl] dihydrogen phosphate Chemical compound O1OC2(C3CC4CC(C3)CC2C4)C1(OC)C1=CC=CC(OP(O)(O)=O)=C1 XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSVZGWAJIHWNQK-UHFFFAOYSA-N [3-(hydroxymethyl)-2-bicyclo[2.2.1]heptanyl]methanol Chemical compound C1CC2C(CO)C(CO)C1C2 YSVZGWAJIHWNQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N [[(2R,3S,4R,5S)-5-(2,6-dioxo-3H-pyridin-3-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [[[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-fluoro-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H]([C@H](O)[C@@H]2O)C2C=CC(=O)NC2=O)[C@H](O)[C@@H](F)[C@@H]1O SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N 0.000 description 1
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000003668 acetyloxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)O[*] 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 208000004631 alopecia areata Diseases 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 125000005577 anthracene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- UUWSLBWDFJMSFP-UHFFFAOYSA-N bromomethylcyclohexane Chemical compound BrCC1CCCCC1 UUWSLBWDFJMSFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 125000004106 butoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004063 butyryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 1
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 1
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 1
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 1
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 229940127204 compound 29 Drugs 0.000 description 1
- 229940125878 compound 36 Drugs 0.000 description 1
- 229940125807 compound 37 Drugs 0.000 description 1
- 229940127573 compound 38 Drugs 0.000 description 1
- 229940126540 compound 41 Drugs 0.000 description 1
- 229940125936 compound 42 Drugs 0.000 description 1
- 229940127271 compound 49 Drugs 0.000 description 1
- 229940126179 compound 72 Drugs 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.[Cu+2].[O-]S([O-])(=O)=O JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000006783 corn meal agar Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000006547 cyclononyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000640 cyclooctyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- BJXYHBKEQFQVES-NWDGAFQWSA-N enpatoran Chemical compound N[C@H]1CN(C[C@H](C1)C(F)(F)F)C1=C2C=CC=NC2=C(C=C1)C#N BJXYHBKEQFQVES-NWDGAFQWSA-N 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- GWNFQAKCJYEJEW-UHFFFAOYSA-N ethyl 3-[8-[[4-methyl-5-[(3-methyl-4-oxophthalazin-1-yl)methyl]-1,2,4-triazol-3-yl]sulfanyl]octanoylamino]benzoate Chemical compound CCOC(=O)C1=CC(NC(=O)CCCCCCCSC2=NN=C(CC3=NN(C)C(=O)C4=CC=CC=C34)N2C)=CC=C1 GWNFQAKCJYEJEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 230000008175 fetal development Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 1
- 239000010440 gypsum Substances 0.000 description 1
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004919 hair shaft Anatomy 0.000 description 1
- KDCIHNCMPUBDKT-UHFFFAOYSA-N hexane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.CCCCCC KDCIHNCMPUBDKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000003707 hexyloxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 102000047486 human GAPDH Human genes 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000035990 intercellular signaling Effects 0.000 description 1
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000002510 isobutoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000003253 isopropoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(O*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N isoxazole Chemical compound C=1C=NOC=1 CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N methane;palladium Chemical compound C.[Pd] UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIQQIJXGUZVEBB-UHFFFAOYSA-N methanol;propan-2-one Chemical compound OC.CC(C)=O NIQQIJXGUZVEBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZBELDPMWYXDLNY-UHFFFAOYSA-N methyl 9-(4-bromo-2-fluoroanilino)-[1,3]thiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carboximidate Chemical compound C12=C3SC(C(=N)OC)=NC3=CC=C2N=CN=C1NC1=CC=C(Br)C=C1F ZBELDPMWYXDLNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011929 mousse Nutrition 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229940060184 oil ingredients Drugs 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N ombitasvir Chemical compound COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NC1=CC=C([C@H]2N([C@@H](CC2)C=2C=CC(NC(=O)[C@H]3N(CCC3)C(=O)[C@@H](NC(=O)OC)C(C)C)=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)C(C)(C)C)C=C1 PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N 0.000 description 1
- 229940056211 paraffin Drugs 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 229940066842 petrolatum Drugs 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002572 propoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- KOUKXHPPRFNWPP-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2,5-dicarboxylic acid;hydrate Chemical compound O.OC(=O)C1=CN=C(C(O)=O)C=N1 KOUKXHPPRFNWPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PBMFSQRYOILNGV-UHFFFAOYSA-N pyridazine Chemical compound C1=CC=NN=C1 PBMFSQRYOILNGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- JOPPJXPSNQPPOK-UHFFFAOYSA-N s-phenyl 2-chloroethanethioate Chemical compound ClCC(=O)SC1=CC=CC=C1 JOPPJXPSNQPPOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 125000005920 sec-butoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005922 tert-pentoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 229930192474 thiophene Natural products 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q7/00—Preparations for affecting hair growth
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D313/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one oxygen atom as the only ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/08—Bridged systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/70—Biological properties of the composition as a whole
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Dermatology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Birds (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биологически активному соединению, применимому в медицине и косметологии для изготовления средств, способствующих росту волос. Соединение представлено формулой (I), где R1 и R2 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, C1-6-алкильную группу или С2-6-алканоильную группу; Х представляет собой атом водорода или атом галогена; R3a и R3b являются разными, и каждый из них представляет собой атом водорода или гидроксильную группу; и R4, R5, R6, R7, R8 и R9 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, атом галогена или С2-6-алканоилоксигруппу, или указанные группы, которые являются смежными, вместе образуют π связь или эфирную связь, или R5 и R8 или R5 и R9 вместе образуют эфирную связь. Техническим реультатом является расширение арсенала химических соединений, обладающих активностью ингибирования продукции WNT-5A и стимулирующих рост клеток сосочков дермы. 8 ил., 4 табл.
Description
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к промотору роста клеток сосочков дермы, к стимулятору роста волос и к тонику для роста волос. Более конкретно, оно относится к промотору роста клеток сосочков дермы, к стимулятору роста волос и к тонику для роста волос, включающему в качестве активного ингредиента ингибитор функции WNT-5A. Кроме того, настоящее изобретение относится к способу скрининга промотора роста клеток сосочков дермы, основанному на эффекте ингибирования функции WNT-5A.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Волосяные фолликулы человека состоят из эпителиальных и мезенхимальных клеток дермы, таких как кератиноциты, клетки сосочков дермы, фибробласты и сальные клетки, и цикл роста волос (цикл развития волоса) контролируется через взаимодействия между этими клетками. Стержневая структура волоса формируется посредством пролиферации/дифференцировки (кератинизации) фолликулярных кератиноцитов. Сосочки дермы регулируют пролиферацию, дифференцировку и апоптоз этих фолликулярных кератиноцитов и, таким образом, играют ключевую роль в контроле цикла развития волоса. Поэтому при разработке стимулятора роста волос/тоника для роста волос, важно исследовать действие на клетки сосочков дермы. Однако молекулярный механизм, регулирующий способность клеток сосочков дермы к пролиферации и способность контролировать цикл роста волос, до настоящего времени оставался практически не выясненным.
С другой стороны, WNT-5A представляет собой секреторный гликопротеин, относящийся к семейству WNT. Семейство WNT включает около 20 видов молекул, встречающихся в широком ряде организмов, от нематод до млекопитающих. Известно, что эти WNT являются важными межклеточными сигнальными молекулами, регулирующими формирование позвоночника и формирование органов на стадии развития плода (Annu. Rev. Cell Dev. Biol., 14, 59-88 (1998); Genes & Dev. 11, 3286-3305 (1997)). У человека существует 10 видов рецепторов WNT, которые являются Frizzled семиканальными трансмембранными рецепторами (Annu. Rev. Cell Dev. Biol., 14, 59-88 (1998), Genes & Dev., 11, 3286-3305 (1997)). В зависимости от комбинаций связи WNT-Frizzled существует 3 типа пути сигнальной трансдукции (т.е., путь WNT/β-катенин, путь PCP и путь WNT/Ca2+) (Annu. Rev. Cell Dev. Biol., 14, 59-88 (1998)).
В последние годы было выяснено, что путь WNT/β-катенин является фундаментальным для формирования волосяных фолликул (Genes & Dev., 8, 2691-2703 (1994); Cell, 95, 605-614 (1998); Dev. Biol., 207, 133-149 (1999); Genes & Dev., 14, 1181-1185 (2000); Cell, 105, 533-545 (2001)). В 1988 была получена трансгенная мышь со стабилизированным β-катенином в коже. Сообщалось, что такая мышь демонстрировала повышенный de novo фолликулярный морфогенез, и в результате это приводило к гипертрихозу (Cell, 95, 605-614 (1998)). В 2000 году было сообщение, что сигнальный путь WNT/β-катенин играет важную роль в поддержании активности сосочков дермы, индуцирующих рост волос (Genes & Dev., 14, 1181-1185 (2000)).
Однако было выяснено, что сигнальная трансдукция от WNT-5A опосредована не путем WNT/β-катенин, а путем Ca2+ (Dev. Biol., 182, 114-120 (1997); Curr. Biol., 9, 695-698 (1999)), и до настоящего времени не было никаких сообщений относительно взаимосвязи между WNT-5A и фолликулярным морфогенезом.
Кроме того, сообщалось, что дупликация эмбрионной оси индуцируется инъекцией мРНК WNT-5A Xenopus laevis вместе с мРНК Frizzled 5 человека в эмбрион Xenopus laevis на ранней стадии развития (Science, 275, 1652-1654 (1997)), тогда как дупликация оси, индуцированная инъекцией мРНК WNT-1 или WNT-8, ингибируется посредством WNT-5A (J. Cell Biol., 133, 1123-1137 (1996)), и что WNT-5A Xenopus laevis связывается с Frizzled 2 крысы и активирует CamKII (Ca2+/калмодулин-зависимая протеинкиназа II) и PKC (протеинкиназа II) через путь Ca2+ (Curr. Biol., 9, 695-698 (1999)). Однако физиологическое значение этого до сих пор остается неизвестным, и не было никаких сообщений относительно взаимосвязи между WNT-5A и стимуляцией роста волос/промотированием роста волос.
РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Целью настоящего изобретения является разработка способа скрининга с использованием молекулы, регулирующей пролиферацию клеток сосочков дермы, промотора роста клеток сосочков дермы и стимулятора роста волос, а также тоника для роста волос на основе новой функции.
Для достижения этих целей авторы настоящего изобретения провели интенсивные исследования. В результате они обнаружили, что WNT-5A является высоко экспрессируемым в клетках сосочков дермы и что WNT-5A связан с пролиферирующей способностью клеток сосочков дермы. В результате последующих исследований на основании этого открытия авторы, кроме того, обнаружили, что рост клеток сосочков дермы может быть существенно активирован и такие части фолликул, как волосяные луковицы могут быть увеличены путем ингибирования функции WNT-5A, таким образом, было создано настоящее изобретение.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к промотору роста клеток сосочков дермы, который включает соединение, обладающее активностью ингибирования функции WNT-5A.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к промотору роста клеток сосочков дермы, который включает соединение, обладающее активностью ингибирования продукции WNT-5A.
Еще в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению, представленному формулой (I):
где R1 и R2 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, C1-6-алкильную группу или С2-6-алканоильную группу;
X представляет собой атом водорода или атом галогена;
R3a и R3b являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода или гидроксильную группу; и
R4, R5, R6, R7, R8 и R9 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, атом галогена или С2-6 алканоилокси группу, или указанные группы, которые являются смежными, вместе образуют π связь или эфирную связь, или R5 и R8, или R5 и R9 вместе образуют эфирную связь.
Еще в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к промотору роста клеток сосочков дермы, который включает соединение, представленное формулой (II):
где R1 и R2 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, C1-6-алкильную группу или С2-6-алканоильную группу;
X представляет собой атом водорода или атом галогена;
R3c и R3d являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, гидроксильную группу или С1-6-алкоксигруппу, или R3c и R3d вместе образуют оксогруппу, гидроксииминогруппу или С1-6-алкоксииминогруппу; и
R4, R5, R6, R7, R8 и R9 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, атом галогена или С2-6-алканоилоксигруппу, или указанные группы, которые являются смежными, вместе образуют π связь или эфирную связь, или R5 и R8, или R5 и R9 вместе образуют эфирную связь.
В следующем варианте осуществления настоящее изобретение относится к промотору роста клеток сосочков дермы, включающему соединение, представленное формулой (IX):
где R1a и R2a являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, C1-6-алкильную группу, C2-6-алканоильную группу,
группу, представленную формулой (CH2)pCO-Y-R10 (где Y представляет собой атом кислорода или атом серы; R10 представляет собой атом водорода, C1-6-алкильную группу или замещенную или незамещенную арильную группу; и p имеет значение 0 или 1),
группу, представленную формулой (CH2)qR11 (где R11 представляет собой замещенную или незамещенную циклоалкильную группу или замещенный или незамещенный C2-10 гетероцикл; и q имеет значение 0 или 1), или
группу, представленную формулой COR12 (где R12 представляет собой замещенную или незамещенную арильную группу или замещенный или незамещенный C2-10-гетероцикл);
X представляет собой атом водорода или атом галогена;
R3e и R3f являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, C1-6-алкоксигруппу или С1-6-алканоилоксигруппу, или R3e и R3f вместе образуют оксогруппу, гидроксиимино группу или С1-6-алкоксииминогруппу; и
R4a, R5a, R6a, R7a, R8a и R9a являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, атом галогена или
группу, представленную формулой Z-R13 (где Z представляет собой атом кислорода или атом серы; и R13 представляет собой C1-6-алкильную группу, C1-6-алканоильную группу или замещенную или незамещенную арильную группу), или
указанные группы, которые являются смежными, вместе образуют π связь или эфирную связь, или
R5a и R8a или R5a и R9a вместе образуют эфирную связь; и
R6b представляет собой атом водорода, или вместе с R3e или R3f образует эфирную связь.
В следующем варианте осуществления настоящее изобретение относится к стимулятору роста волос или к тонику для роста волос, содержащему в качестве активного ингредиента указанный выше промотор роста клеток сосочков дермы.
В следующем варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу скрининга промотора роста клеток сосочков дермы, который включает отбор вещества, ингибирующего функцию WNT-5A.
И в еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу отбора вещества, ингибирующего функцию WNT-5A, который представляет собой способ скрининга промотора роста клеток сосочков дермы, включающий следующие стадии (a)-(c):
(a) стадию культивирования клеток, экспрессирующих WNT-5A человека, в среде, к которой добавлено испытываемое соединение;
(b) стадию лизинга клеток, экспрессирующих WNT-5A человека, культивированных на стадии (a), для экстракции РНК и определения количества мРНК WNT-5A; и
(c) стадию сравнения количества мРНК WNT-5A, определенного на стадии (b).
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг. 1 показывает картину электрофореза, демонстрирующую, что мРНК WNT-5A экспрессируется в клетках сосочков дермы.
Фиг. 2 показывает картину электрофореза, демонстрирующую, что испытываемые соединения вызывают снижение количества мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы.
Фиг. 3 показывает график, демонстрирующий, что испытываемые соединения обладают активностью промотора роста клеток сосочков дермы.
Фиг. 4 показывает картину электрофореза, демонстрирующую снижение количества мРНК WNT-5A в органной культуре кожи обезьяны.
Фиг. 5 показывает результаты PCNA-окрашивания в телогенных и анагенных волосяных фолликулах в органной культуре кожи обезьяны.
Фиг. 6 показывает гистограммы, демонстрирующие, что Соединение 7 увеличивает диаметр волосяной луковицы в органной культуре кожи обезьяны.
Фиг. 7 показывает гистограммы, демонстрирующие, что Соединение 3 увеличивает диаметр волосяной луковицы в органной культуре кожи обезьяны.
Фиг. 8 показывает фотографии кожи до и после применения испытываемого соединения в течение 6 месяцев в испытании роста волос у медвежьего макака (Macaca arctoides).
ЛУЧШИЙ СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Далее настоящее изобретение описывается более подробно.
<Соединение, ингибирующее функцию WNT-5A>
Термин "соединение, ингибирующее функцию WNT-5A" (далее в некоторых случаях называется "ингибитор функции WNT-5A"), в настоящем изобретении означает соединение, ингибирующее связывание WNT-5A с рецептором WNT-5A, или соединение, ингибирующее продукцию WNT-5A, предпочтительно соединение, ингибирующее продукцию WNT-5A.
Было подтверждено, что WNT-5A, являющийся секреторным гликопротеином, принадлежащим к семейству WNT, экспрессируется в организме человека, мыши, крысы, Xenopus laevis и т.д. С точки зрения применения в качестве лекарственного средства, соединение, ингибирующее функцию WNT-5A человека (SEQ ID NO:1), является предпочтительным.
Соединение, ингибирующее связывание WNT-5A с рецептором WNT-5A, означает соединение, которое действует на WNT-5A или рецептор WNT-5A и, таким образом, ингибирует связывание WNT-5A с рецептором WNT-5A, регулируя тем самым трансдукцию сигнала, осуществляемую WNT-5A, предпочтительно представляет собой соединение, регулирующее трансдукцию сигнала через Ca2+ путь. Примеры таких соединений включают антагонист рецептора WNT-5A. Конкретные примеры рецептора WNT-5A включают Frizzled 5 человека (SEQ ID NO:4) и Frizzled 2 крысы (SEQ ID NO:6). Хотя такое соединение может быть как пептидным, так и непептидным, непептидный ингибитор является предпочтительным, имеет преимущество более длительного действия. Соединение может быть отобрано при помощи системы скрининга, использующей меченый WNT-5A и рецептор WNT-5A, и предпочтительно имеет ИК50, равную 30 мкМ или меньше, и более предпочтительно ИК50, равную 10 мкМ или меньше.
Соединение, ингибирующее продукцию WNT-5A, означает соединение, ингибирующее экспрессию гена WNT-5A. Хотя такое соединение может быть как пептидным, так и непептидным, непептидный ингибитор является предпочтительным, имеет преимущество более длительного действия. Соединение может быть выбрано с использованием в качестве показателя снижения количества белка WNT-5A (SEQ ID NO:1) или количества мРНК WNT-5A (SEQ ID NO:2), и предпочтительно имеет ИК50, равную 30 мкМ или меньше, и более предпочтительно 10 мкМ или меньше, как определено в испытании с использованием нуклеиновокислотного зонда в соответствии с методом Hartley et al. (Drug Metabolism and Disposition, 28(5), 608-616 (2000); Пример испытания 4, описанный ниже).
Соединения, представленные формулами (I), (II) и (IX), являются особенно предпочтительными.
В соединениях, представленных формулами (I), (II) и (IX), C1-6-алкильная группа означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, и примеры такой группы включают метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, бутильную группу, изобутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную группу, 2-этилпропильную группу, гексильную группу и т.д.
C1-6-алканоильная группа означает линейную или разветвленную алканоильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, и примеры таких групп включают ацетильную группу, пропионильную группу, бутирильную группу, трет-бутирильную группу и т.д.
Группа C1-6-алкокси означает линейную или разветвленную алкоксигруппу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, и примеры таких групп включают метоксигруппу, этоксигруппу, пропоксигруппу, изопропоксигруппу, бутоксигруппу, изобутоксигруппу, втор-бутоксигруппу, трет-бутоксигруппу, пентилоксигруппу, изопентилоксигруппу, неоизопентилоксигруппу, трет-пентилоксигруппу, 1-метилбутоксигруппу, 2-метилбутоксигруппу, 1,2-диметилпропоксигруппу, гексилоксигруппу, изогексилоксигруппу и т.д.
Группа C1-6-алкоксиимино означает линейную или разветвленную алкоксииминогруппу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, и примеры таких групп включают N-метоксииминогруппу, N-этоксииминогруппу, N-пропоксииминогруппу, N-изопропоксииминогруппу, N-бутоксииминогруппу, N-изобутоксииминогруппу, N-пентилоксииминогруппу, N-гексилоксииминогруппу и т.д.
Группа C1-6-алканоилокси означает линейную или разветвленную алканоилоксигруппу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, и примеры таких групп включают ацетоксигруппу, пропионилоксигруппу, пивалоилоксигруппу и т.д.
C3-10-циклоалкильная группа означает циклоалкильную группу, содержащую от 3 до 10 атомов углерода, и примеры таких групп включают циклопропильную группу, циклобутильную группу, циклопентильную группу, циклогексильную группу, циклогептильную группу, циклооктильную группу, циклононильную группу и т.д.
Примеры замещенной C3-10-циклоалкильной группы включают циклоалкильную группу, где атом(атомы) водорода в циклоалкильной группе является/являются замещенным(ми) по меньшей мере одной группой, выбранной из группы, состоящей из атома галогена, замещенной или незамещенной C1-10-алкильной группы, гидроксильной группы, C1-5-гидроксиалкильной группы, карбоксильной группы, меркаптогруппы, индолильной группы, C1-5-алкилтиогруппы, аминогруппы, амидогруппы и C1-5-алкоксигруппы.
Примеры арильной группы включают фенильную группу, нафтильную группу, антраценовую группу и т.д.
Примеры замещенной арильной группы включают арильные группы, в которых атом(атомы) водорода в арильной группе является/являются замещенным(ми) по меньшей мере одной группой, выбранной из группы, включающей замещенную или незамещенную C1-10-алкильную группу, гидроксильную группу, C1-5-гидроксиалкильную группу, карбоксильную группу, меркаптогруппу, индазолильную группу, индолильную группу, C1-5-алкилтиогруппу, цианогруппу, нитрогруппу, аминогруппу, амидогруппу, ацетиламиногруппу и C1-5-алкоксигруппу.
Примеры C2-10-гетероцикла включают фуран, пиррол, тиофен, оксазол, изоксазол, тиазол, имидазол, пиразол, пиран, пиридин, пиперидин, пиридазин, пиримидин, пиразин, хинолин и т.д.
Примеры замещенного C2-10-гетероцикла включают гетероцикл, в котором атом(атомы) водорода в гетероцикле является/являются замещенным(ми) по меньшей мере одной группой, выбранной из группы, включающей атом галогена, замещенную или незамещенную
C1-10-алкильную группу, гидроксильную группу, C1-5-гидроксиалкильную группу, карбоксильную группу, меркаптогруппу, индазолильную группу, индолильную группу, C1-5-алкилтиогруппу, цианогруппу, нитрогруппу, аминогруппу, амидогруппу и C1-5-алкоксигруппу.
Эфирная связь означает -O-, формулу -(CH2)m-O-(CH2)n- (где m и n каждый означает целое число от 1 до 3, и алкиленовые группы в формуле могут быть замещены алкильной группой(ами)), или формулу -O-(CH2)m-O- (где m означает целое число от 1 до 3, и алкиленовые группы в формуле могут быть замещены алкильной группой(ами)).
Примеры комбинаций смежных групп, которые могут образовывать π связь или эфирную связь, включают (R4 и R5), (R5 и R6), (R6 и R7), (R7 и R8) и (R8 и R9) (то же относится и к R4a - R9a в формуле (IX)).
Из соединений, представленных формулой (IX), соединение, представленное формулой (I), является предпочтительным, а соединение, в котором R3a представляет собой атом водорода и R3b представляет собой гидроксильную группу, является более предпочтительным. С точки зрения стабильности соединения, предпочтительными являются соединения, представленные формулами (IIa), (IIb) и (IIc).
Соединение формулы (II), где (R4 и R5) и (R6 и R7) образуют π связь:
(где R1, R2, R3c, R3d, R8, R9 и X определены выше).
Соединение формулы (II), где (R4 и R5) образуют π связь и R6 и R7 представляют собой атом водорода:
(где R1, R2, R3c, R3d, R8, R9 и X определены выше).
Соединение формулы (II), где R4, R5, R6 и R7 представляют собой атом водорода:
(где R1, R2, R3c, R3d, R8, R9 и X определены выше).
Из соединений, представленных формулой (IX), соединение, в котором R3e и R6b, взятые вместе, образуют эфирную связь, а (R3f и R4a) и (R5a и R6a) образуют π связь (например, Соединение 77, и т.д.), являются предпочтительными, поскольку они эффективно ингибируют экспрессию мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы и промотируют рост клеток сосочков дермы.
Из соединений, представленных формулой (IX), соединение, в котором R1a и R2a представляют собой (CH2)pCO-Y-R10 (где Y представляет собой атом кислорода или атом серы; R10 представляет собой атом водорода, C1-6-алкильную группу или замещенную или незамещенную арильную группу; и p имеет значение 0 или 1) (например, Соединение 52 и т.д.), и соединение, в котором R1a и R2a представляют собой COR12 (где R12 представляет собой замещенную или незамещенную арильную группу или замещенный или незамещенный гетероцикл) (например, Соединение 58 и т.д.), являются предпочтительными, поскольку они эффективно ингибируют экспрессию мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы и промотируют рост клеток сосочков дермы.
Также соединение, в котором R7a представляет собой Z-R13 (где Z представляет собой атом кислорода или атом серы; и R13 представляет собой C2-6 алканоильную группу или замещенную или незамещенную арильную группу) (например, Соединение 53 и т.д.), является предпочтительным, поскольку такие соединения эффективно ингибируют экспрессию мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы и промотируют рост клеток сосочков дермы.
Соединение, представленное формулой (II), можно получить, например, путем сочетания следующих способов получения.
Схема реакций 1
(где R1, R2, R3c, R3d, R8, R9 и X определены выше).
Соединение, представленное формулой (III), подвергают реакции гидрирования в присутствии катализатора, такого как палладий на углероде, в органическом растворителе (например, этилацетате, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире, этиловом спирте, метиловом спирте и т.д.) с получением соединения, представленного формулой (IV) или (IV'), или смеси этих соединений. Соединения формул (IV) и (IV') можно разделить и очистить обычным методом разделения, таким как колоночная хроматография.
Схема реакций 2
(где R1, R2, R4, R5, R6, R7, R8, R9 и X определены выше).
Осуществляют взаимодействие соединения формулы (V) с восстановителем, таким как борогидрид калия, борогидрид натрия или борогидрид лития, если это необходимо, также в присутствии соли, такой как LiCl, MgCl2, CeCl3, CaCl2 или NiCl, в органическом растворителе (например, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире, этиловом спирте, метиловом спирте, и т.д.) при температуре в пределах -20 до 100°C, предпочтительно при температуре от 0 до 20°C, с получением соединения формулы (VI). Соединение формулы (VI) можно разделить и очистить обычным методом разделения, таким как колоночная хроматография.
Схема реакций 3
(где R1, R2, R3c, R3d, R4, R5, R6, R7 и X определены выше).
Соединение формулы (VII) обрабатывают кислотой или основанием в подходящем органическом растворителе (например, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире, этаноле, метаноле и т.д.) с получением соединения формулы (VIII).
Соединения, представленные формулой (IX) (1, 60-78), получают путем культивирования штамма Pochonia chalamydosporia var. chlamydosporia TF-0480 в среде, содержащей различные питательные вещества, в основном, в соответствии с методами, обычно используемыми для получения продуктов ферментации.
В качестве среды в основном используют жидкую среду, при этом такая среда содержит источник углерода, источник азота и неорганическую соль, необязательно, вместе с витаминами, соединениями-предшественниками и противопенным агентом, и pH доводят примерно до уровня около 7. Источник углерода включает глюкозу, декстрин, глицерин, крахмал и т.д., которые могут использоваться отдельно или в виде смеси этих веществ. Источник азота включает мясной экстракт, овсяную муку, дрожжевой экстракт, соевую муку, полипептон, раствор замоченной кукурузы, мочевину, соль аммония и т.д., которые могут использоваться отдельно или в виде смеси этих веществ. Неорганическая соль включает монофосфат калия, сульфат магния, хлорид натрия, карбонат кальция и т.д., которые могут использоваться отдельно или в виде смеси этих веществ. Противопенный агент, который может быть использован, включает Adekanol или силиконовое соединение. В качестве метода культивирования подходящими являются методы аэробного культивирования, такие как культивирование со встряхиванием или культивирование с аэрацией-взбалтыванием. Культивирование осуществляют при pH 4-10 и при температуре в пределах от 25 до 35°C в течение 2-5 дней, предпочтительно при 25-28°C в течение 3 дней.
Полученные таким способом при помощи культуральной среды соединения 1 и 60-78 могут быть выделены в соответствии с методами, обычно используемыми для сбора продуктов ферментации. Например, следующие методы являются эффективными. А именно, после завершения культивирования культуральный фильтрат получают центрифугированием или фильтрацией. Затем его адсорбируют при помощи полистирольной смолы, такой как DIAION HP-20 (товарное наименование, изготовитель Mitsubishi Chemical) и элюируют органическим растворителем, таким как низший спирт или ацетон. Клетки экстрагируют органическим растворителем, таким как низший спирт или ацетон. Затем клеточный экстракт и элюат из адсорбирующей смолы объединяют и концентрируют при пониженном давлении. К оставшейся водной фазе добавляют для экстракции органический растворитель, такой как этилацетат, хлороформ или н-бутанол, и экстракт концентрируют. Полученный остаток снова растворяют в органическом растворителе, таком как бензол, этилацетат, ацетон, метанол или хлороформ, и затем подвергают колоночной хроматографии на силикагеле, гель-фильтрационной колоночной хроматографии, хроматографии на колонке, заполненной ODS, для обращенно-фазового разделения и высокоэффективной жидкостной хроматографии для очистки и выделения соединения по настоящему изобретению.
Штамм, продуцирующий активный ингредиент в соответствии с настоящим изобретением, является новым штаммом, который был впервые выделен из почвы авторами настоящего изобретения. Микроорганизм был назван "Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia TF-0480" и был депонирован как в "FERM BP-8332" в International Patent Organism Depository, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology.
Микробиологические свойства этого штамма следующие.
1) Рост на среде
Данный микроорганизм хорошо растет в различных средах на агаровых пластинах и показывает хорошее или умеренное спорообразование в испытываемых средах. В Таблице 1 обобщены характеристики колоний, образованных после культивирования при 26°C в течение 2 недель на различных средах. Цвет указан в соответствии с кодами цвета, предложенными A. Kornerup et al., Dizionario dei colori, Musterschmidt (1978).
Таблица 1 | |
Среда | Результаты наблюдения за колониями невооруженным глазом |
PDA*-1 | Показывает относительно хороший рост и спорообразование. Диаметр колонии: 23-28 мм. Шерстистые и несколько конусообразные колонии с войлочным центром и небольшими радиальными морщинками. Несколько неправильной формы периферия (оконечность колонии). Секретируют бледный светло-желтый [3A6] пигмент в среду. Цвет поверхности колонии: белый [1A1] на периферии и бледно-желтый [4A3] в центре. Цвет обратной стороны: красновато-желтый [4A6] на периферии и желтовато-коричневый [5D8] в центре. Иррегулярное или радиальное растрескивание агаровой среды. |
OMA*-2 | Показывает хороший рост и спорообразование. Диаметр колонии: 48-50 мм. Несколько тонкие и шерстистые колонии с войлочным центром и промежуточной частью. Относительно правильной формы периферия. Не секретируют никакого пигмента. Цвет поверхности колонии: белый [1A1] на периферии и бледно-желтый [3A4] в центре. Цвет обратной стороны: светло-желтый [3А4], такой же, как на поверхности. |
CMA*-3 | Показывает хороший рост и умеренное спорообразование. Диаметр колонии: 47-51 мм. Тонкие и войлочные колонии. Относительно правильной формы периферия. Не секретируют никакого пигмента в среду. Цвет поверхности колонии/цвет обратной стороны: с обеих сторон от белого [1A1] до желтовато-белого [1А2]. |
MA*-4 | Показывает относительно хороший рост и спорообразование. Диаметр колонии: 26-27 мм. Толстые и шерстистые колонии с войлочным центром. Относительно правильной формы периферия. Секретируют слегка красновато-желтый [4А7] пигмент в среду. Цвет поверхности колонии: белый [1A1] на периферии и бледно-желтый [4А3] в центре. Цвет обратной стороны: светло-оранжевый [5А4] на периферии, коричневый [7E8] в центре и оранжевый [6B7] в промежуточной части. |
SA*-5 | Показывает относительно хороший рост и спорообразование. Диаметр колонии: 23-28 мм. Шерстистые и несколько конусообразные колонии с войлочным центром. Несколько неправильной формы периферия и небольшие радиальные морщинки. Секретируют красновато-желтый [4А7] пигмент в среду. Цвет поверхности колонии: белый [1A1] на периферии и оранжевато-белый [5А2] в других частях. Цвет обратной стороны: светло-оранжевый [5А4] на периферии и в центре и коричневый [7Е8] в других частях. Иррегулярное или радиальное растрескивание агаровой среды. |
LCA*-6 | Показывает хороший рост и умеренное спорообразование. Диаметр колонии: 42-44 мм. Тонкие войлочные до слегка шерстистых колонии. Относительно правильной формы периферия. Не секретируют никакого пигмента в среду. Цвет поверхности колонии/цвет обратной стороны: с обеих сторон белый [1A1]. |
*-1: среда картофельного агара с декстрозой (E-MF21, изготовитель Eiken Chemical Co., Ltd.).
*-2: 1/2-Разбавленная агаровая среда на отваре из овсяной муки (изготовитель Difco, получена путем 1/2-разбавления агара Bacto на отваре из овсяной муки и добавления агара с получением конечной концентрации агара 2%).
*-3: Агаровая среда на отваре из овсяной муки (изготовитель Difco, Corn meal agar).
*-4: Солодовая агаровая среда (Nakase, T., 6th ed., pp,617, Japan Collection of Microorganisms, the Institute of Physical and Chemical Research, Saitama, 1995)
*-5: Агаровая среда Сабуро (изготовитель Eiken Chemical Co., Ltd., E-MF03)
*-6: Агаровая среда Миуры (Miura, K. and M. Kudo, Trans. Mycol. Soc. Japan, 11, 116-118 (1970))
2) Морфология
Колонии, образованные после культивирования штамма на агаровой среде на отваре из овсяной муки при 26°C в течение 14 дней, наблюдали под оптическим микроскопом. В результате, наблюдали образование фиало-конидий. Образование одной конидия-образующей клетки (фиалиды) или 2-4 мутовчатых фиалид происходило непосредственно на гифе. Конидиофоры нельзя было четко отличить от вегетативных гиф. Происходило образование множества конидий на переднем крае фиалиды с образованием вязкой массы. Фиалида имела форму конусообразного цилиндра и ровную и бесцветную поверхность. Ее длина составляла 13-15 мкм, а толщина на конце 0,8-1,7 мкм. Конидии имели элипсообразную форму или форму полусфер (редко) и большинство из них имели слегка выступающее основание. Конидии имели ровную и бесцветную поверхность и размер 2,2-5,0×1,8-2,8 мкм. Образование единственной бледно-желтой и многоклеточной хламидоспоры (диктиохламидоспоры) происходило на поверхности среды или на конце короткого ростка гифы на среде. Также происходило образование в среде небольшого количества диктиохламидоспор. Эти диктиохламидоспоры имели размер 14-20×12-22 мкм. При продолжении культивирования в течение одного месяца или дольше не наблюдали никакого телеоморфа.
3) Физиологические свойства
(1) Пределы температуры роста и оптимальная температура
В агаровой среде Сабуро при pH 6,0 этот штамм растет в температурных пределах 15-31°C, и оптимальная температура составляет от 25 до 27°C.
(2) Пределы значений pH для роста и оптимальное значение pH
В жидкой среде YpSs при 26°C этот штамм растет в пределах значений pH 3-10, и оптимальное значение pH составляет от 5 до 7.
4) Аэробный/анаэробный: аэробный.
На основании описанных выше морфологических характеристик и свойств культуры, характеристики этого штамма сравнивали с различными известными видами, о которых сообщалось в (1) K.H. Domsch et al., Compendium of soil fungi, Vol. 1, IHW-Verlag (1980) и (2) G.L. Barron, The Genera of Hyphoomycetes from soil, Williams & Wilkins (1968) и т.д. В результате было обнаружено, что этот штамм является очень схожим с неполным видом, известным под классификационными названием Verticillium chlamydosporia или Diheterospora chlamydosporia, и поэтому, вероятно, относится к этому виду. В (3) R. Zare, W. Gams and H.C. Evans, A revision of Verticillium section Prostrata. V. The genus Pochonia, with notes on Rotiferophthora, 73, 1-2, p51-86 (2001), этот вид был молекулярно систематически повторно исследован и, в свою очередь, назван как относящийся к роду Pochonia, как к подходящему для него роду. Более того, предлагается назвать такой вид, образующий несвязанные конидии типа Verticillium, как штамм по настоящему изобретению, вариантом Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia.
На основании этих данных, этот штамм был назван "Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia TF-0480".
<Промотор роста клеток сосочков дермы>
Термин "промотор роста клеток сосочков дермы", как он использован в настоящем изобретении, означает лекарственное средство или реагент, обладающие действием по увеличению количества клеток сосочков дермы.
Промотор роста клеток сосочков дермы по настоящему изобретению характеризуется тем, что он основан на действии по ингибированию функции WNT-5A. Поскольку WNT-5A ингибирует функции молекул класса WNT-1 (WNT-1, WNT-8 и т.д.), которые являются активаторами пути WNT/β-катенина, рост клеток сосочков дермы контролируется регулированием функции WNT-5A или регулированием экспрессии WNT-5A. Поэтому, даже соединения, имеющие совершенно разные структуры (например, Соединение 24, Соединение 79, Соединение 7 и т.д.), обладают отличным действием промотирования роста клеток сосочков дермы, если эти соединения обладают отличным эффектом ингибирования функции WNT-5A.
Рост клеток можно измерить методом, хорошо известным специалистам в данной области. Примеры методов измерения включают подсчет жизнеспособных клеток с использованием подходящего проявляющего цвет субстрата, и метод поглощения [3H]-тимидина. В качестве, проявляющего цвет субстрата предпочтительно используют соли тетразолия, такие как MTT, MTS и XTT и Alamar Blue.
<Стимулятор роста волос/тоник для роста волос>
Термин "стимулятор роста волос или тоник для роста волос", как он использован в настоящем изобретении, означает продукты, предназначенные для индуцирования роста волос, промотирования роста волос, предотвращения алопеции и т.д. В случае использования стимулятора роста волос и тоника для роста волос по настоящему изобретению в качестве лекарственных средств, объект изобретения включает улучшение или профилактику гнездной алопеции и алопеции мужского типа.
Эффекты стимулятора роста волос и тоника для роста волос по настоящему изобретению достигаются посредством действия по промотированию роста клеток сосочков дермы путем ингибирования функции WNT-5A. На основании механизма этой функции, способность к росту клеток, подавленная в сосочках дермы на участке алопеции, повышается и образуется хорошо развитая дермальная сосочковая ткань. Поэтому ожидается, что стимулятор роста волос/тоник для роста волос по настоящему изобретению должны быть эффективными против симптомов, на которые, как было установлено, известные в настоящее время стимуляторы роста волос и тоники для роста волос оказывают слабое действие.
Кроме того, ожидается, что может быть достигнут синергический эффект путем объединения стимулятора роста волос и тоника для роста волос по настоящему изобретению с другими стимуляторами роста волос и тониками для роста волос, обладающими другими функциональными свойствами.
Стимулятор роста волос/тоник для роста волос по настоящему изобретению можно вводить различными дозами и в различных лекарственных формах, в зависимости от конкретных соединений.
В случае введения соединения, представленного формулой (IX), путем нанесения (лосьон, мазь, гель и т.д.), его можно вводить, например, при дозе 0,0001-10% масс., предпочтительно 0,001-5% масс., и более предпочтительно 0,001-1% масс., хотя доза варьирует в зависимости от типа и лекарственной формы тоника для роста волос. В случае перорального введения (порошок, таблетка или капсула) соединения, представленного формулой (IX), взрослому мужчине, суточная доза предпочтительно составляет от 1 до 100 мг/кг.
Хотя лекарственные формы для стимулятора роста волос и тоника для роста волос по настоящему изобретению конкретно не ограничены, в случае наружного применения предпочтительно обеспечение стимулятора роста волос/тоника для роста волос по настоящему изобретению, содержащего в виде активного ингредиента ингибитор продукции WNT-5A (например, соединение формулы (IX)), в форме водорастворимой композиции. Такую водорастворимую композицию можно получить с использованием различных добавок (увлажнитель, загуститель, консервант, антиоксидант, отдушка, краситель и т.д.), обычно используемых для получения лекарственных средств, квази-лекарственных средств или косметических средств, при условии, что они не оказывают негативного влияния на эффект настоящего изобретения. Стимулятор роста волос и тоник для роста волос по настоящему изобретению могут быть предоставлены в виде композиций для ухода за волосами, таких как тоник для волос, масло для волос, мусс или гель для волос или мази.
В случае использования стимулятора роста волос и тоника для роста волос по настоящему изобретению в виде жидких препаратов, такой препарат получают в виде водного раствора, неводного раствора, суспензии, липосом или эмульсии, которые получают путем растворения ингибитора продукции WNT-5A (например, соединения формулы (IX)) в дистиллированной воде, подходящем буфере, таком как фосфатный буфер, физиологическом солевом растворе, таком как физиологический солевой раствор, раствор Рингера или раствор Locke, этаноле или глицерине, объединенными с традиционно используемым поверхностно-активным веществом и т.д., с последующей стерилизацией. Такие препараты применяют местно путем нанесения жидкого препарата на волосистую часть головы. Альтернативно, такой препарат можно наносить при помощи струйной форсунки, как в случае спрея.
В случае использования стимулятора роста волос и тоника для роста волос по настоящему изобретению в виде полутвердых препаратов, ингибитор продукции WNT-5A (например, соединение формулы (IX)) смешивают с жиром, маслом, ланолином, вазелином, парафином, воском, гипсом, смолой, пластиком, глицерином, высшим спиртом, глицерином, водой, эмульгатором, суспендирующим средством и т.п. с получением препарата для наружного применения (мазь, крем и т.д.), который можно применять местно.
В случае использования стимулятора роста волос и тоника для роста волос по настоящему изобретению в виде твердых препаратов, ингибитор продукции WNT-5A (например, соединение формулы (IX)) смешивают с подходящей добавкой(ами) с получением препарата для наружного применения, такого как дуст или порошок. Альтернативно, возможно получение твердого препарата, который растворяют или суспендируют в растворителе перед применением и наносят на волосистую часть головы.
В случае перорального применения, предпочтительно смешивание ингибитора продукции WNT-5A (например, соединения формулы (IX)) с фармацевтически приемлемым носителем (наполнителем, связующим, разрыхлителем, отдушкой, корригентом, эмульгатором и т.д.), разбавителем, средством, способствующим растворению и т.п., и обработка полученной лекарственной композиции обычным способом с получением таблетки, капсулы, гранул, дуста, сиропа, суспензии, раствора и т.д.
Такие препараты можно получать с использованием традиционных приемов формулирования.
<Способ скрининга>
Настоящее изобретение, кроме того, относится к способу скрининга промотора роста клеток сосочков дермы, который включает отбор соединения, ингибирующего функцию WNT-5A.
Отбор соединения, ингибирующего функцию WNT-5A (далее в некоторых случаях называемого "ингибитор функции WNT-5A"), означает, например, отбор (т.е., скрининг) ингибитора продукции WNT-5A, или отбор антагониста рецептора WNT-5A.
В качестве испытываемых веществ, используемых в способе скрининга по настоящему изобретению, можно использовать любые вещества. А именно, тип испытываемых веществ не ограничивается, и это могут быть низкомолекулярные соединения, соединения, содержащиеся в натуральном экстракте, или синтетические пептиды. Это также может быть библиотека соединений или комбинаторная библиотека. Библиотека соединений может быть составлена способом, хорошо известным специалистам. Альтернативно, можно использовать коммерчески доступную библиотеку соединений. С точки зрения использования в качестве лекарственного средства, соединение, подвергаемое скринингу, предпочтительно имеет молекулярную массу 3000 или меньше. С точки зрения обеспечения нанесения/перорального введения, низкомолекулярное соединение, имеющее молекулярную массу 600 или меньше, является предпочтительным.
(1) Способ скрининга антагониста рецептора WNT-5A
В способе скрининга антагониста рецептора WNT-5A, определить, образуется или нет связь между белком WNT-5A и рецептором WNT-5A, можно при помощи меченого белка WNT-5A и рецептора WNT-5A путем определения и измерения метки. Примеры метки включают радиоизотоп (32P, 33P, 131I, 125I, 3H, 14C, 35S и т.д.), фермент (щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена и т.д.), флуоресцентное вещество (флуоресцеинизотиоцианат и т.д.) и т.д. Эти вещества могут быть коммерчески доступны, и мечение можно осуществлять известными методами.
Конкретный пример системы анализа in vitro осуществляют в бесклеточной системе. Более конкретно, либо белок WNT-5A, либо рецептор WNT-5A связывают с подложной, а второе соединение и испытываемое вещество добавляют к нему. После инкубации реакционную смесь промывают и определяют или измеряют связывание другого белка с белком, связанным с подложкой.
Примеры подложки, с которой связывается белок, включают нерастворимые полисахариды, такие как агароза, декстран и целлюлозы; синтетические смолы, так как полистирол, полиакриламид и силикон; и т.д. Более конкретно, можно использовать коммерчески доступные шарики и пластинки, полученные из этих веществ.
(2) Способ скрининга соединения, ингибирующего продукцию WNT-5A
Соединение, ингибирующее продукцию WNT-5A, можно скринировать с использованием в качестве показателя количества мРНК WNT-5A или количества белка WNT-5A. Также возможно связывание репортерного гена с областью промотора гена WNT-5A и определение количества экспрессии. В качестве промотора гена WNT-5A предпочтительно используют промотор, представленный SEQ ID NO:3.
Примеры репортерного гена включают ген GFP (зеленого флуоресцентного белка), ген GUS (β-глюкуронидазы), ген LUC (люциферазы) и ген CAT (ацетилтрансферазы хлорамфеникола).
Когда в качестве показателя используют количество экспрессии мРНК WNT-5A, например, используют клетки, эксперссирующие WNT-5A человека, и к ним добавляют испытываемое вещество. После культивации в инкубаторе в течение нескольких часов при 37°C в атмосфере 5% CO2-95% воздуха, клетки лизируют и РНК экстрагируют. Затем количество мРНК WNT-5A измеряют при помощи, например, ОТ-ПЦР. Таким образом, может быть определено вещество, обладающее активностью снижения количества мРНК WNT-5A. Праймеры, используемые в ПЦР, конкретно не ограничены при условии, что они являются специфическими для мРНК WNT-5A, и они могут быть сконструированы из последовательности мРНК WNT-5A. Предпочтительные примеры включают прямой праймер AATGTCTTCC AAGTTCTTCC TAGTGGC (SEQ ID NO:8) и обратный праймер GATGTCGGAA TTGATACTGG CA (SEQ ID NO:9).
Когда в качестве показателя используют количество белка WNT-5A, например, используют клетки, экспрессирующие WNT-5A человека, и к ним добавляют испытываемое вещество. После культивирования в инкубаторе в течение нескольких часов при 37°C в атмосфере 5% CO2-95% воздуха, клетки лизируют, используя культуральную среду, и белок экстрагируют. Затем количество белка WNT-5A измеряют методом ELISA (твердофазный иммуно-ферментный анализ) или т.п. Таким образом, может быть определено вещество, обладающее активностью по снижению количества экспрессии мРНК WNT-5A.
Далее настоящее изобретение описывается подробно со ссылкой на Примеры испытания, представленные ниже; однако, настоящее изобретение не ограничивается этим.
Пример 1 (Соединения 3 и 4)
Радицикол (Соединение 1: 10,8 г) растворяли в этилацетате (140 мл) и добавляли к нему 5% палладий на углероде (мокрого типа) (255 мг) с последующей заменой водородом (1 атм) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 час. После фильтрации палладия на углероде, фильтрат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали очистке хроматографией на силикагеле и элюировали смесью н-гексан:этилацетат (2:1) с получением целевого Соединения 4 (3,43 г), или элюировали смесью н-гексан:этилацетат (3:2) с получением целевого Соединения 3 (4,14 г).
Пример 2 (Соединения 7 и 8)
Соединение 3 (602,5 мг) растворяли в метаноле (13 мл) и добавляли к нему гептагидрат хлорида церия (III) (2,14 г) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем к раствору при охлаждении льдом медленно добавляли борогидрид натрия (180 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 5 минут. После добавления к реакционному раствору насыщенного раствора дигидрофосфата натрия (40 мл) смесь разбавляли водой (40 мл) и органический растворитель отгоняли при пониженном давлении. Оставшийся водный слой экстрагировали этилацетатом (300 мл × 2). Полученный этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Затем остаток подвергали грубой очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (20 см × 20 см, толщина 1,0 мм, проявляющий растворитель хлороформ:метанол = 93:7, элюировали этилацетатом). Полученный грубо очищенный продукт затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 65:35) с получением целевых соединений (Соединение 7: 144,9 мг, Соединение 8: 13,8 мг).
Пример 3 (Соединения 9 и 10)
Соединение 4 (26,5 мг) растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли к нему гептагидрат хлорида церия (III) (100 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем к раствору при охлаждении льдом медленно добавляли борогидрид натрия (60 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. После добавления к реакционному раствору насыщенного раствора дигидрофосфата натрия смесь разбавляли водой (20 мл) и органический растворитель отгоняли при пониженном давлении. Оставшийся водный слой экстрагировали этилацетатом (30 мл × 2). Полученный этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. После этого остаток подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (20 см × 20 см, толщина 0,25 мм, проявляющий растворитель хлороформ:метанол = 94:6, элюировали этилацетатом) с получением целевых соединений (Соединение 9: 5,7 мг, Соединение 10: 8,8 мг).
Пример 4 (Соединение 5)
Радицикол (91,5 мг) растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли к нему гептагидрат хлорида церия (III) (88 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 10 минут. Затем к раствору при охлаждении льдом медленно добавляли борогидрид натрия (60 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. После добавления к реакционному раствору насыщенного раствора дигидрофосфата натрия (20 мл) смесь разбавляли водой (20 мл) и органический растворитель отгоняли при пониженном давлении. Оставшийся водный слой экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Полученный этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Остаток подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (20 см × 20 см, толщина 0,5 мм, проявляющий растворитель хлороформ:метанол = 9:1, элюировали этилацетатом) с получением целевого Соединения 5 (27,2 мг).
Пример 5 (Соединение 2)
Радицикол (15,3 мг) растворяли в пиридине (1,5 мл) и добавляли к нему уксусный ангидрид (4 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 6,5 час. После добавления к реакционному раствору ледяной воды (20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (20 мл). Этилацетатный слой промывали водой (20 мл × 2) и сушили над безводным сульфатом натрия и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Остаток подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (20 см × 20 см, толщина 0,5 мм, проявляющий растворитель хлороформ:метанол = 95:5, элюировали этилацетатом) с получением целевого Соединения 2 (18,5 мг).
Пример 6 (Соединение 11)
Радицикол (19,0 мг) растворяли в диметилсульфоксиде (1 мл) и добавляли карбонат калия (3 мг) и метилиодид (4 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 6,5 час. После добавления к реакционному раствору воды (20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (20 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Остаток подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (20 см × 20 см, толщина 0,5 мм, проявляющий растворитель хлороформ:метанол = 95:5, элюировали этилацетатом) с получением целевого Соединения 11 (15,3 мг).
Пример 7 (Соединения 16, 17, 19 и 23)
Радицикол (930 мг) растворяли в 1,4-диоксане (14 мл) и добавляли к нему 1н раствор хлористоводородной кислоты (12 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 час. После разбавления водой (40 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Остаток подвергали грубой очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (20 см × 20 см, толщина 1,0 мм, проявляющий растворитель хлороформ:метанол:н-гексан = 5:1:5, элюировали этилацетатом). Полученный грубо очищенный продукт затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали градиентом смеси вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 70:30 до 40:60) с получением целевых соединений (Соединение 16: 11,4 мг, Соединение 17: 19,4 мг, Соединение 19: 32,6 мг, Соединение 23: 103,7 мг).
Пример 8 (Соединения 12 и 13)
Радицикол (232,6 мг) растворяли в 1,4-диоксане (4 мл) и добавляли к нему 1н раствор хлористоводородной кислоты (1 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. После нейтрализации 1н раствором гидроксида натрия, растворитель отгоняли при пониженном давлении. Затем концентрат растворяли при помощи 20 мл метанола. Полученный раствор фильтровали через ватную пробку, и метанол отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 65:35) с получением целевых соединений (Соединение 12: 42,6 мг, Соединение 13: 10,4 мг).
Пример 9 (Соединение 18)
В 5 мл диметилформамида по каплям при охлаждении льдом вводили 1 мл оксихлорида фосфора и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Полученный раствор медленно, при охлаждении льдом, добавляли к раствору радицикола (98,5 мг) в диметилформамиде (4 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 24 час. Затем реакционный раствор разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали водой (100 мл × 3). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (20 см × 20 см, толщина 0,5 мм, проявляющий растворитель хлороформ:метанол = 94:6, элюировали этилацетатом) с получением целевого соединения (Соединение 18: 61,8 мг).
Пример 10 (Соединения 14 и 15)
Радицикол (378 мг) растворяли в 1,4-диоксане (4 мл) и добавляли к нему 1н раствор хлористоводородной кислоты (1 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 20 минут. После нейтрализации 1н раствором гидроксида натрия растворитель отгоняли при пониженном давлении. Затем концентрат растворяли при помощи 20 мл метанола. Полученный раствор фильтровали через ватную пробку, и метанол отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 70:30) с получением целевых соединений (Соединение 14: 10,7 мг, Соединение 15: 9,9 мг), одновременно с Соединением 12 (40,6 мг).
Пример 11 (Соединения 20, 21 и 22)
Соединение 3 (96,3 мг) растворяли в 1,4-диоксане (2 мл), добавляли к нему 1н раствор хлористоводородной кислоты (2,5 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 16 час. После нейтрализации 1н раствором гидроксида натрия растворитель отгоняли при пониженном давлении. Затем концентрат растворяли при помощи 20 мл метанола. Полученный раствор фильтровали через ватную пробку, и метанол отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 45:55) с получением целевых соединений (Соединение 20: 9,3 мг, Соединение 21: 22,0 мг, Соединение 22: 26,2 мг).
Пример 12 (Соединения 25 и 26)
Соединение 7 (34 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (2 мл) и добавляли гидроксид калия (3 мг) и метилиодид (500 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 4,5 час. После добавления к реакционному раствору воды (20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (20 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (38:62) с получением двух фракций. Каждую фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 25 (6,4 мг, 39 мин) и Соединения 26 (14,5 мг, 29 мин).
Пример 13 (Соединение 27)
Соединение 7 (55 мг) растворяли в пиридине (1 мл) и добавляли к нему уксусный ангидрид (3 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 17 час. После добавления к реакционному раствору воды (50 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (60:40). Полученные фракции концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 27 (64,7 мг, 18 мин).
Пример 14 (Соединения 28 и 29)
Соединение 8 (131 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (2 мл) и добавляли гидроксид калия (3 мг) и метилиодид (2 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 7 час. После добавления к реакционному раствору воды (40 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (40 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (38:62). Таким образом, получали 2 фракции и концентрировали при пониженном давлении с получением, соответственно, Соединения 28 (14,2 мг, 52 мин) и Соединения 29 (31,7 мг, 37 мин).
Пример 15 (Соединение 30)
Соединение 8 (72 мг) растворяли в пиридине (2 мл) и добавляли к нему уксусный ангидрид (2 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 17 час. После добавления к реакционному раствору воды (50 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (53:47). Полученные фракции концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 30 (45,5 мг, 30 мин).
Пример 16 (Соединение 31)
Радицикол (10,8 г) растворяли в этилацетате (140 мл) и добавляли к нему 5% палладий на углероде (мокрого типа) (255 мг) с последующим замещением водородом (1 атм) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 час. После фильтрации палладия на углероде, фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали очистке хроматографией на силикагеле [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)] и элюировали смесью н-гексан:этилацетат (2:1) с получением Соединения 4 (3,43 г), или элюировали смесью н-гексан:этилацетат (3:2) с получением Соединения 3 (4,14 г). Часть (500 мг) фракции (3,08 г) между Соединением 3 и Соединением 4 растворяли в небольшом количестве N,N-диметилформамида и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (38:62). Таким образом, получали 2 фракции и концентрировали при пониженном давлении с получением, соответственно, Соединения 3 (177,8 мг) вместе с Соединением 31 (20,7 мг, 23 мин).
Пример 17 (Соединения 32, 33 и 34)
Радицикол (11,9 г) растворяли в этилацетате (160 мл) и добавляли к нему 5% палладий на углероде (мокрого типа) (300 мг). После продувки водородом (1 атм) смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 час. После фильтрации палладий на углероде фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали очистке хроматографией на силикагеле [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)] и элюировали смесью н-гексан:этилацетат (2:1) с получением Соединения 4, или элюировали смесью н-гексан:этилацетат (3:2) с получением Соединения 3. Кроме того, фракцию, которую элюировали смесью н-гексан:этилацетат (1:1), концентрировали при пониженном давлении с получением грубо очищенного продукта (936 мг). Полученный грубо очищенный продукт растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (34:66) с получением трех фракций. Каждую фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 32 (17,4 мг, 17 мин), Соединения 33 (49,4 мг, 18 мин) и Соединения 34 (347,4 мг, 21 мин).
Пример 18 (Соединение 35)
Радицикол (210 мг) растворяли в пиридине (4 мл) и добавляли к нему гидрохлорид гидроксиламина (180 мг) при комнатной температуре с последующим нагреванием до 40°C и перемешиванием в течение 2,5 час. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду (100 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (80 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали очистке препаративной хроматографией на силикагеле [Silica Gel 60 F254 (товарное наименование, изготовитель Merck), толщина 0,5 мм] с использованием в качестве проявляющего растворителя смеси хлороформ-метанол (90:10). Фракцию, показывающую значение Rf 0,65, собирали, экстрагировали этилацетатом и затем концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 35 (40,0 мг).
Пример 19 (Соединения 36, 37, 38 и 39)
Радицикол (11,9 г) растворяли в этилацетате (160 мл) и добавляли к нему 5% палладий на углероде (мокрого типа) (300 мг) с последующим замещением водородом (1 атм) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 час. После фильтрации палладия на углероде фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали очистке хроматографией на силикагеле [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)] и элюировали смесью н-гексан:этилацетат (2:1). Полученную фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением фракции (1537 мг), включающей Соединение 4 в качестве основного компонента. Эту фракцию растворяли в метаноле (21 мл)/тетрагидрофуране (7 мл), и добавляли гептагидрат хлорида церия (III) (2130 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем к раствору при охлаждении льдом медленно добавляли борогидрид натрия (790 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционный раствор разбавляли водой (30 мл) и значение pH доводили до нейтрального путем добавления 1н раствора хлористоводородной кислоты с последующим дополнительным разбавлением водой (30 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2). Полученный этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении с получением смолистого вещества (1,46 г). Полученное вещество растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке с силикагелем [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)] (400 мл), которую подготавливали смачиванием н-гексаном. Затем успешно осуществляли элюирование смесью растворителей н-гексан-этилацетат. После элюирования Соединения 4 смесью н-гексан-этилацетат (2:1) остаток элюировали смесью н-гексан-этилацетат (3:2) с получением путем концентрирования при пониженном давлении каждой из фракций - фракции (1) (190 мг) и фракции (2) (398 мг). Фракцию (1) растворяли в небольшом количестве тетрагидрофурана и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (35:65) с получением трех фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 9 (87,2 мг) вместе с Соединением 36 (11,3 мг, 20 мин) и Соединением 38 (10,1 мг, 25 мин). Фракцию (2) растворяли в небольшом количестве тетрагидрофурана и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии при тех же условиях, что и фракцию (1), с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 37 (19,8 мг, 25 мин) и Соединения 39 (23,2 мг, 27 мин).
Пример 20 (Соединения 40 и 41)
Соединение 7 (61 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл) и добавляли гидроксид калия (5 мг) и 1-бромбутан (1 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3,5 час. После добавления к реакционному раствору воды (20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) с градиентом (60:40) до (90:10) с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 40 (25,6 мг, 33 мин) и Соединения 41 (21,4 мг, 40 мин).
Пример 21 (Соединения 42 и 43)
Соединение 7 (67 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл) и добавляли гидроксид калия (5 мг) и 1-бромгексан (1 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3,5 час. После добавления к реакционному раствору воды (20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) с градиентом (60:40) до (90:10) с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 42 (24,9 мг, 38 мин) и Соединения 43 (32,9 мг, 53 мин).
Пример 22 (Соединение 44)
Соединение 7 (62 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл) и добавляли гидроксид калия (5 мг) и 1-бромпропан (1 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1,5 час. После добавления к реакционному раствору воды (20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) с градиентом (45:55) до (85:15). Полученную фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 44 (45,3 мг, 38 мин).
Пример 23 (Соединение 45)
Соединение 7 (64 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл) и добавляли гидроксид калия (5 мг) и 2-(бромметил)циклогексан (2 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 7 час. После добавления к реакционному раствору воды (20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) с градиентом (65:35) до (85:15). Полученную фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 45 (24,7 мг, 70 мин).
Пример 24 (Соединение 46)
Соединение 7 (200 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (10 мл) и добавляли к нему бромистоводородную кислоту (5 мл) с последующим перемешиванием при 110°C в течение 6 час. После добавления к реакционному раствору этилацетата (150 мл) смесь промывали гидрокарбонатом натрия (150 мл × 2). Этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в небольшом количестве метанола и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) с градиентом (38:62) до (50:50). Полученную фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 46 (17,0 мг, 18 мин).
Пример 25 (Соединение 47)
Соединение 62 (154 мг) растворяли в этилацетате (5 мл), и добавляли к нему 5% палладий на углероде (мокрого типа) (30 мг) с последующим замещением водородом (1 атм) и перемешивали при комнатной температуре в течение 90 минут. После фильтрации палладия на углероде фильтрат отгоняли при пониженном давлении с получением Соединения 47 (134,8 мг).
Пример 26 (Соединение 48)
Соединение 61 (211 мг) растворяли в этилацетате (11 мл), и добавляли к нему 5% палладий на углероде (мокрого типа) (42 мг) с последующим замещением водородом (1 атм) и перемешивали при комнатной температуре в течение 90 минут. После фильтрации палладия на углероде фильтрат отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток (184 мг) подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии [Silica Gel 60 F254 (товарное наименование, изготовитель Merck), 20 см × 20 см, толщина 0,5 мм] с использованием в качестве проявляющего растворителя смеси хлороформ-метанол (95:5). Фракцию со значением Rf 0,5 собирали, экстрагировали этилацетатом и затем концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 48 (159,7 мг).
Пример 27 (Соединения 49 и 50)
Соединение 61 (233 мг) растворяли в метаноле (10 мл)/тетрагидрофуране (2 мл) и добавляли к нему гептагидрат хлорида церия (III) (754 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем к раствору при охлаждении льдом медленно добавляли борогидрид натрия (236 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 5 минут. После разбавления реакционного раствора водой (30 мл) добавляли 1н водный раствор хлористоводородной кислоты (3 мл) для доведения значения pH до нейтрального и смесь снова разбавляли водой (30 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2). Полученный этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении с получением белого порошка (267 мг). Затем полученный порошок растворяли в небольшом количестве воды и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (45:55) с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 49 (49,3 мг, 19 мин) и Соединения 50 (184,6 мг, 21 мин).
Пример 28 (Соединение 51)
Соединение 62 (191 мг) растворяли в метаноле (10 мл)/тетрагидрофуране (4 мл) и добавляли гептагидрат хлорида церия (III) (641 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем к раствору при охлаждении льдом медленно добавляли борогидрид натрия (216 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 10 минут. После разбавления реакционного раствора водой (30 мл) добавляли 1н водный раствор хлористоводородной кислоты (3 мл) для доведения значения pH до нейтрального и смесь снова разбавляли водой (30 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2). Полученный этилацетатный слой сушили над безводным сульфатом натрия, и затем этилацетат отгоняли при пониженном давлении с получением бесцветного маслянистого вещества (182 мг). Затем полученное масло растворяли в небольшом количестве метанола и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (30:70). Полученную фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 51 (137,3 мг, 29 мин).
Пример 29 (Соединение 52)
Радицикол (205 мг) растворяли в ацетоне (10 мл) и добавляли S-хлорацетилтиофенол (330 мг) и карбонат калия (310 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1,5 час. Затем к реакционному раствору добавляли воду с последующим экстракцией этилацетатом. После промывки насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушки над безводным сульфатом магния экстракт сушили при пониженном давлении. Затем остаток подвергали грубой очистке методом колоночной хроматографии на силикагеле (20 г, этилацетат:н-гексан = 1:2). Полученный грубо очищенный продукт затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 65:35) с получением Соединения 52 (105 мг).
Пример 30 (Соединение 53)
Радицикол (406 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (6 мл) и добавляли триэтиламин (57,6 мг) и тиофенол (260 мг) с последующим перемешиванием при охлаждении льдом в течение ночи. Затем к реакционному раствору добавляли разбавленную хлористоводородную кислоту с последующей экстракцией этилацетатом. После промывки последовательно водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушки над безводным сульфатом магния экстракт сушили при пониженном давлении. Часть 238 мг полученного остатка затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 65:35) с получением Соединения 53 (46,0 мг).
Пример 31 (Соединения 54 и 55)
Радицикол (378 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (6 мл) и добавляли триэтиламин (56,4 мг) и тиоуксусную кислоту (163 мг) при охлаждении льдом с последующим перемешиванием при охлаждении льдом в течение ночи. Затем к реакционному раствору добавляли разбавленную хлористоводородную кислоту с последующей экстракцией этилацетатом. После промывки последовательно водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушки над безводным сульфатом магния экстракт сушили при пониженном давлении. Часть 238 мг полученного остатка затем подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 65:35) с получением Соединения 54 (49,0 мг) и Соединения 55 (15,7 мг).
Пример 32 (Соединение 56)
Радицикол (131 мг) растворяли в ацетоне (10 мл) и добавляли метилбромацетат (219 мг) и карбонат калия (183 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3 час. Затем к реакционному раствору добавляли разбавленную хлористоводородную кислоту с последующей экстракцией этилацетатом. После промывки насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушки над безводным сульфатом магния экстракт сушили при пониженном давлении. Затем полученный остаток перекристаллизовывали из этилацетата с получением Соединения 56 (81,8 мг).
Пример 33 (Соединение 57)
Соединение 7 (116 мг) растворяли в ацетоне (10 мл) и добавляли метилбромацетат (330 мг) и карбонат калия (276 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3 дней. Затем к реакционному раствору добавляли разбавленную хлористоводородную кислоту с последующей экстракцией этилацетатом. После промывки насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушки над безводным сульфатом магния экстракт сушили при пониженном давлении. Затем полученный остаток перекристаллизовывали из этилацетата с получением Соединения 57 (27,7 мг).
Пример 34 (Соединение 58)
Радицикол (103 мг) растворяли в N,N-диметилформамиде (6 мл) и добавляли никотиновую кислоту (190 мг), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (270 мг) и 4-диметилпиридин (37,7 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3,5 час. Затем к реакционному раствору добавляли воду с последующей экстракцией этилацетатом. После промывки насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушки над безводным сульфатом магния, экстракт сушили при пониженном давлении. Затем полученный остаток перекристаллизовывали из ацетона-воды с получением Соединения 58 (94,5 мг).
Пример 35 (Соединение 59)
Соединение 56 (312 мг) растворяли в метаноле (60 мл), и добавляли к нему смесь гидроксида калия (206 мг)-воды (20 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 15 минут. Затем к реакционному раствору добавляли разбавленную хлористоводородную кислоту с последующей экстракцией этилацетатом. После промывки насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушки над безводным сульфатом магния экстракт сушили при пониженном давлении. Затем полученный остаток подвергали очистке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (20 φ × 250 мм, YMC-Pack Pro C18, элюировали смесью вода (к которой была добавлена уксусная кислота, pH 3,5):ацетонитрил = 65:35) с получением Соединения 59 (10,6 мг).
Пример 36 (Соединения 60, 61, 62, 63, 68 и 70)
В асептическую жидкую среду (pH 6), содержащую 2,0% глюкозы, 4,0% маннита, 2,0% овсяной муки, 0,4% дрожжевого экстракта, 0,001% гептагидрата сульфата железа (II), 0,001% гептагидрата сульфата цинка (II), тетрапентагидрата сульфата 0,001% марганца (II) и 0,0005% пентагидрата сульфата меди (II), инокулировали штамм Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia TF-0480, который затем культивировали в этой среде при встряхивании при температуре 26°C в течение 72 часов. Используя сосуд емкостью 50 л, в асептическую среду, имеющую такую же композицию, как среда, используемая в посевной культуре, инокулировали 300 мл среды, содержащей посевную культуру, и затем культивировали в этой среде при аэрации-взбалтывании при температуре 26°C в течение 144 часов. После завершения культивирования, культуру центрифугировали для отделения клеток от надосадочной жидкости. Надосадочную жидкость адсорбировали при помощи 1,5 л HP-20 (изготовитель Mitsubishi Chemical), промывали водой и затем элюировали 3 л метанола. Элюат концентрировали при пониженном давлении, и полученный водный слой экстрагировали этилацетатом. Этилацетатный слой дегидратировали над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого вещества в виде сиропа (60 г).
Часть (30 г) экстракта культуры растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке c силикагелем [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)] (1600 мл), подготовленной путем смачивания н-гексаном. Затем последовательно осуществляли элюирование смесями н-гексан-этилацетат с получением фракции (130 мг), которую элюировали при соотношении растворителей в смеси н-гексан-этилацетат (4:1), фракций (1) (1,88 г) и (2) (780 мг), которые элюировали при соотношении (2:1), и фракции (3,56 г), которую элюировали при соотношении (1:2). Фракции (130 мг), которые элюировали при соотношении н-гексан:этилацетат (4:1), растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (55:45) с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 63 (23,5 мг, 20 мин) и Соединения 70 (4,8 мг, 24 мин). Фракцию (1,88 г), которую элюировали при соотношении с н-гексан:этилацетат (2:1), перекристаллизовывали из ацетона (30 мл) с получением Соединения 61 (277 мг). Фракцию элюата (2) (780 мг) подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии [Silica Gel 60 F254 (товарное наименование, изготовитель Merck), 20 см × 20 см, толщина 1 мм] с использованием в качестве проявляющего растворителя смеси н-гексан-ацетон (3:2). Фракцию, имеющую значение Rf 0,4, собирали, экстрагировали этилацетатом и затем концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 60 (80,3 мг). Затем фракцию (3,56 г), которую элюировали при соотношении н-гексан:этилацетат (1:2), растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке c силикагелем [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)] (880 мл), подготовленной смачиванием хлороформом. Затем последовательно осуществляли элюирование смесью растворителей хлороформ-метанол с получением фракции (926 мг), элюция которой происходила при соотношении хлороформ:метанол (98:2). Затем эту фракцию перекристаллизовывали из смеси ацетон-метанол (1 мл/3 мл) с получением Соединения 62 (339 мг). Фракцию (1,42 г), которую элюировали при соотношении хлороформ:метанол (97:3), подвергали очистке колоночной хроматографией с использованием Sephadex LH-20 (товарное наименование, изготовитель Amersham Pharmacia Biotech) (метанол, 900 мл), а затем методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] и с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (30:70). Полученную фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 68 (4,5 мг, 21 мин).
Пример 37 (Соединения 64, 65, 71, 72 и 76)
Часть (30 г) экстракта культуры, полученного как описано в Примере 36, растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке c силикагелем (700 мл) [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)], подготовленной смачиванием хлороформом. Затем последовательно осуществляли элюирование смесью растворителей хлороформ-метанол. Фракцию, которую элюировали при соотношении хлороформ:метанол (93:7), разделяли на две части, т.е., фракции (1) (156 мг) и (2) (164 мг). Фракцию (1) растворяли в небольшом количестве метанола и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (30:70) с получением четырех фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 64 (35,4 мг, 21 мин), Соединения 72 (13,7 мг, 27 мин), Соединения 71 (6,6 мг, 29 мин) и Соединения 65 (4,1 мг, 33 мин). Фракцию (2) подвергали очистке методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии в тех же условиях, и полученные фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 71 (3,7 мг) вместе с Соединением 76 (4,5 мг, 20 мин).
Пример 38 (Соединения 69 и 74)
Экстракт культуры (39,5 г), полученный как описано в Примере 36, растворяли в н-гексане (300 мл × 2). Образованный таким образом осадок фильтровали и растворитель удаляли. Полученный осадок (8,1 г) растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке c силикагелем (650 мл) [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)], подготовленной смачиванием хлороформом. Затем последовательно осуществляли элюирование смесью растворителей хлороформ-метанол с получением фракции (318 мг), элюция которой происходила при соотношении хлороформ:метанол (88:12). Эту фракцию разделяли в небольшом количестве метанола и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (30:70) с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 74 (15,3 мг, 19 мин) и Соединения 69 (8,0 мг, 38 мин).
Пример 39 (Соединение 66)
Экстракт культуры (39,5 г), полученный как описано в Примере 36, растворяли в н-гексане (300 мл × 2). Образованный таким образом осадок фильтровали и растворитель удаляли. Полученный осадок (8,1 г) растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке c силикагелем [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)] (650 мл), подготовленной смачиванием хлороформом. Затем последовательно осуществляли элюирование смесью растворителей хлороформ-метанол с получением фракции (1,5 мг), элюция которой происходила при соотношении хлороформ:метанол (100:0). Затем эту фракцию подвергали очистке на колонке с силикагелем (620 мл), используя смесь растворителей н-гексан-этилацетат, с получением фракции (321 мг), которую элюировали при соотношении н-гексан:этилацетат (2:1). Полученную фракцию растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (с градиентом от 45:55 до 70:30) с получением Соединения 66 (14,4 мг, 34 мин).
Пример 40 (Соединения 73, 77 и 78)
Экстракт культуры (500 г), полученный как описано в Примере 36, растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке c силикагелем (6000 мл) [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)], подготовленной смачиванием хлороформом. Затем последовательно осуществляли элюирование смесью растворителей хлороформ-метанол. Таким образом, получали фракцию (57 г), элюция которой происходила при соотношении хлороформ:метанол (95:5). Часть (18 г) этой фракции затем подвергали очистке на колонке с силикагелем (800 мл), используя смесь растворителей н-гексан-этилацетат. Фракцию, которую элюировали при соотношении н-гексан:этилацетат (2:1), разделяли на 2 части, т.е., фракции (1) (126 мг) и (2) (985 мг). Фракцию (1) растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (55:45). Полученную фракцию концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 78 (13,4 мг, 26 мин). С другой стороны, фракцию (2) подвергали очистке методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (45:55) с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 73 (38,1 мг, 10 мин) и Соединения 77 (67,2 мг, 26 мин).
Пример 41 (Соединения 67 и 75)
Экстракт культуры (500 г), полученный как описано в Примере 36, растворяли в смеси растворителей хлороформ-метанол (4:1) и адсорбировали на колонке c силикагелем (6000 мл) [Silica Gel 60 (товарное наименование, изготовитель Merck)], подготовленной смачиванием хлороформом. Затем последовательно осуществляли элюирование смесью растворителей хлороформ-метанол. Таким образом, получали фракцию (57 г), элюция которой происходила при соотношении хлороформ:метанол (95:5). Часть (18 г) этой фракции затем подвергали очистке на колонке с силикагелем (800 мл), используя смесь растворителей н-гексан-этилацетат, с получением фракции, которую элюировали при соотношении н-гексан:этилацетат (1:2). Эту фракцию растворяли в небольшом количестве ацетона и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии [колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-343 (20 φ × 250 мм), детекция: УФ-абсорбция при 254 нм, скорость потока: 10 мл/мин] с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила-воды (pH 3,5, уксусная кислота) (40:60) с получением двух фракций. Каждую из этих фракций концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 67 (17,4 мг, 11 мин) вместе с полуочищенным образцом (23,9 мг). Этот полуочищенный образец подвергали очистке методом препаративной тонкослойной хроматографии [Silica Gel 60 F254 (товарное наименование, изготовитель Merck), 20 см × 20 см, толщина 0,5 мм] с использованием в качестве проявляющего растворителя смеси хлороформ-метанол (90:10). Фракцию, имеющую значение Rf 0,5, собирали, экстрагировали этилацетатом и затем концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 75 (4,3 мг).
В Таблице 2 представлены соединения, синтезированные и очищенные, как описано выше в Примерах, и данные этих соединений.
Соед.№ | Структура | 1 Н-ЯМР | 13 С-ЯМР |
1 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,48 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,83 (ддд, J=15,3, 9,6, 3,7 Гц, 1H), 2,33 (дт, J=15,3, 3,7 Гц, 1H), 2,94 (дт, J=9,6, 3,0 Гц, 1H), 3,19 (с, 1H), 3,86 (д, J=16,5 Гц, 1H), 4,51 (д, J=16,5 Гц, 1H), 5,41 (секстет, J=3,7 Гц, 1H), 5,78 (дд, J=9,8, 3,0 Гц, 1H), 6,05 (д, J=15,9 Гц, 1H), 6,15 (т, J=9,8 Гц, 1H), 6,45 (с, 1H), 7,48 (дд, J=15,9, 9,8 Гц, 1H) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 18,5 (кв), 36,3 (т), 46,3 (т), 55,8 (д), 56,1 (д), 71,2 (д), 103,4 (д), 108,0 (с), 116,1 (с), 130,1 (д), 130,5 (д), 135,0 (д), 135,7 (с), 139,6 (д), 158,2 (с), 161,2 (с), 168,9 (с), 199,1 (с) | |
2 | (CDCl3, 500 МГц) δ ч/млн: 1,51 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,54 (ддд, J=14,6, 8,5, 3,7 Гц, 1H), 2,24 (с, 3H), 2,31 (с, 3H), 2,38 (дт, J=14,6, 3,7 Гц, 1H), 2,99 (дт, J=8,5, 3,7 Гц, 1H), 3,49 (кв, J=1,8 Гц, 1H), 3,91 (д, J=15,9 Гц, 1H), 4,04 (д, J=15,9 Гц, 1H), 5,37 (дкв, J=6,7, 3,7 Гц, 1H), 5,74 (дд, J=11,0, 3,7 Гц, 1H), 6,03 (д, J=16,5 Гц, 1H), 6,12 (т, J=11,0 Гц, 1H), 7,02 (с, 1H), 7,45 (дд, J=16,5, 11,0 Гц, 1H) | (CDCl3, 125 МГц) δ ч/млн: 18,6 (кв), 20,6 (кв), 20,7 (кв), 37,1 (т), 45,1 (т), 55,0 (д), 55,4 (д), 70,8 (д), 117,8 (д), 126,3 (с), 126,5 (с), 129,9 (д), 130,6 (д), 133,6 (с), 136,1 (д), 139,1 (д), 146,6 (с), 148,7 (с), 163,8 (с), 167,5 (с), 168,1 (с), 195,6 (с) | |
3 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,21 (м, 1H), 1,41 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,81 (дт, J=15,9, 4,3 Гц, 1H), 1,97 (ддд, J=15,9, 4,9, 2,4 Гц, 1H), 2,23 (м, 1H), 2,35 (ддд, J=14,0, 7,3, 2,4 Гц, 1H), 2,48 (дд, J=7,3, 3,7 Гц, 1H), 2,52 (дт, J=9,8, 2,4 Гц, 1H), 2,74 (секстет, J=2,4 Гц, 1H), 4,27 (д, J=18,3 Гц, 1H), 4,40 (д, J=18,3 Гц, 1H), 5,21 (дкв, J=6,1, 4,3 Гц, 1H), 6,05 (дд, J=15,9, 1,2 Гц, 1H), 6,48 (с, 1H), 6,85 (ддд, J=15,9, 11,0, 4,3 Гц, 1H) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 17,8 (кв), 29,2 (т), 30,9 (т), 36,4 (т), 45,1 (т), 56,0 (д), 57,6 (д), 72,1 (д), 103,5 (д), 106,3 (с), 116,3 (с), 130,1 (д), 136,1 (с), 148,0 (д), 158,8 (с), 163,4 (с), 170,3 (с), 197,0 (с) | |
4 | (CDCl3/CD3OD, 500 M Гц) δ ч/млн: 1,02 (м, 1H), 1,32 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,36 (м, 1H), 1,41 (м, 2H), 1,64 (м, 1H), 1,77 (ддд, J=15,5, 6,4, 2,7 Гц, 1H), 1,92 (ддд, J=14,0, 7,0, 3,0 Гц, 1H), 2,04 (ддд, J=15,5, 5,5, 4,3 Гц, 1H), 2,34 (м, 2H), 2,53 (дт, J=8,8, 3,0 Гц, 1H), 2,68 (м, 1H), 4,02 (д, J=18,3 Гц, 1H), 4,25 (д, J=18,3 Гц, 1H), 5,15 (двойной кв, J=6,4, 2,7 Гц, 1H), 6,37 (с, 1H) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 18,6 (кв), 22,1 (т), 23,2 (т), 30,8 (т), 36,1 (т), 40,3 (т), 46,5 (т), 54,8 (д), 57,6 (д), 70,8 (д), 103,1 (д), 106,4 (с), 115,6 (с), 135,6 (с), 158,2 (с), 162,2 (с), 169,6 (с), 208,0 (с) | |
5 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,41 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,95 (дд, J=16,1, 5,5 Гц, 1H), 2,50 (ддд, J=16,1, 7,6, 3,0 Гц, 1H), 2,97 (квинтет, J=3,0 Гц, 1H), 3,18 (дд, J=12,8, 4,0 Гц, 1H), 3,28 (м, 1H), 3,73 (дд, J=12,8, 10,4 Гц, 1H), 4,52 (септет, J=4,0 Гц, 1H), 5,21 (м, 1H), 5,31 (дд, J=11,3, 5,5 Гц, 1H), 5,78~5,90 (м, 3H), 6,35 (с, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,1 (кв), 36,0 (т), 40,0 (т), 56,0 (д), 57,2 (д), 70,3 (д), 72,7 (д), 103,5 (д), 108,6 (с), 115,9 (с), 127,4 (д), 129,3 (д), 130,7 (д), 139,0 (с), 139,1 (д), 159,0 (с), 162,8 (с), 171,2 (с) | |
7 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,19 (м, 1H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,85 (ддд, J=15,5, 5,5, 2,4 Гц, 1H), 1,95 (м, 1H), 2,01 (м, 1H), 2,16 (м, 1Н), 2,27 (ддд, J=15,5, 6,7, 3,0 Гц, 1Н), 2,50 (дт, J=9,1, 3,0 Гц, 1Н), 2,85 (квинтет, J=3,0 Гц, 1Н), 3,23 (дд, J=12,5, 5,5 Гц, 1Н), 3,63 (дд, J=12,5, 9,4 Гц, 1Н), 4,33 (квинтет, J=5,5 Гц, 1Н), 5,07 (двойной квинтет, J=6,7, 2,4 Гц, 1Н), 5,28 (дд, J=15,5, 5,5 Гц, 1Н), 5,38 (ддд, J=15,5, 12,5, 5,5, 1Н), 6,32 (с,1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,2 (кв), 29,5 (т), 31,3 (т), 37,0 (т), 40,2 (т), 58,3 (д), 59,6 (д), 70,9 (д), 71,8 (д), 103,4 (д), 109,3 (д), 115,9 (д), 129,1 (д), 133,2 (д), 140,0 (д), 159,2 (с), 163,0 (с), 171,8 (с) | |
8 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,27 (м, 1H), 1,35 (д, J=6,1 Гц, 3H), 2,02 (м, 1H), 2,03 (м, 1H), 2,05 (м, 1H), 2,17 (м, 1H), 2,20 (м, 1H), 2,86 (дд, J=5,8, 3,0 Гц, 1Н), 2,92 (дт, J=8,5, 3,0 Гц, 1Н), 3,25 (дд, J=12,8, 5,5 Гц, 1Н), 3,30 (дд, J=12,8, 9,8 Гц, 1Н), 4,43 (м, 1Н), 4,93 (двойной секстет, J=6,1, 1,8 Гц, 1Н), 5,37 (дд, J=15,5, 4,0 Гц, 1H), 5,64 (дт, J=15,5, 6,1 Гц, 1H), 6,41 (с,1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,4 (кв), 28,8 (т), 31,2 (т), 36,8 (т), 39,7 (т), 56,8 (д), 57,6 (д), 69,5 (д), 70,6 (д), 103,3 (д), 114,7 (с), 114,9 (с), 129,7 (д), 133,4 (д), 138,5 (с), 157,3 (с), 158,2 (с), 169,5 (с) | |
9 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,11 (м, 1H), 1,43 (м, 1H), 1,45 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,48 (м, 1H), 1,52 (м, 1H), 1,57 (м, 1H), 1,74 (ддд, J=15,5, 7,3, 2,4 Гц, 1Н), 2,09 (двойной квинтет, J=14,3, 2,4 Гц, 1Н), 2,36 (ддд, J=15,5, 7,3, 2,4 Гц, 1Н), 2,71 (дт, J=9,4, 2,4 Гц, 1Н), 3,03 (дт, J=7,3, 2,4 Гц, 1H), 3,21 (дд, J=7,3, 1,8 Гц, 2H), 3,88 (м, 1H), 5,20 (двойной квинтет, J=6,4, 2,4 Гц, 1Н), 6,38 (с, 1Н) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,0 (кв), 25,2 (т), 25,8 (т), 32,2 (т), 36,8 (т), 38,0 (т), 39,9 (т), 58,2 (д), 60,5 (д), 71,4 (д), 72,8 (д), 103,0 (д), 112,3 (с), 115,3 (с), 139,7 (с), 158,0 (с), 160,1 (с), 171,1 (с) | |
10 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,29 (м, 1H), 1,35 (м, 2H), 1,38 (м, 2H), 1,40 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,50 (м, 1H), 1,57 (м, 1H), 1,94 (м, 1H), 2,37 (м, 1H), 2,81 (дт, J=7,3, 2,4 Гц, 1Н), 2,88 (дт, J=7,3, 2,4 Гц, 1H), 2,98 (дд, J=13,4, 5,5 Гц, 1Н), 3,15 (дд, J=13,4, 7,2 Гц, 1Н), 3,82 (квинтет, J=6,1 Гц, 1H), 5,12 (двойной секстет, J=6,1, 2,4 Гц, 1H), 6,39 (с, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,5 (кв), 23,5 (т), 24,6 (т), 30,2 (т), 35,1 (т), 37,8 (т), 39,2 (т), 57,1 (д), 59,1 (д), 72,2 (д), 72,3 (д), 102,9 (д), 114,6 (с), 115,9 (с), 138,5 (с), 156,6 (с), 156,8 (с), 169,8 (с) | |
11 | (CDCl3, 500 МГц) δ ч/млн: 1,50 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,61 (ддд, J=14,6, 8,6, 3,7 Гц, 1Н), 2,40 (дт, J=14,6, 3,7 Гц, 1Н), 3,02 (дт, J=8,6, 1,8 Гц, 1Н), 3,40 (ушир.т, J=1,8 Гц, 1Н), 3,75 (д, J=15,9 Гц, 1H), 3,83 (с, 3H), 3,89 (с, 3H), 3,95 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 5,35 (дкв, J=6,7, 3,7 Гц, 1Н), 5,69 (дд, J=10,4, 4,3 Гц, 1Н), 6,07 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 6,12 (т, J=10,4 Гц, 1H), 6,45 (с, 1H), 7,48 (дд, J=15,9, 10,4 Гц, 1H) | (CDCl3, 125 МГц) δ ч/млн: 18,6 (кв), 37,3 (т), 45,2 (т), 55,5 (д), 55,6 (д), 56,3 (кв), 56,4 (кв), 70,2 (д), 95,5 (д), 115,5 (с), 117,9 (с), 130,2 (д), 131,0 (д), 132,4 (с), 135,6 (д), 138,6 (д), 156,3 (с), 156,9 (с), 166,0 (с), 196,4 (с) | |
12 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,42 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,89 (ддд, J=15,2, 9,1, 3,6 Гц, 1Н), 2,03 (дд, J=15,2, 7,0 Гц, 1Н), 3,66 (д, J=16,2 Гц, 1Н), 3,99 (дд, J=9,1, 5,8 Гц, 1Н), 4,21 (д, J=16,2 Гц, 1Н), 5,12 (дд, J=10,0, 5,8 Гц, 1Н), 5,38 (дкв, J=6,4, 3,6 Гц, 1Н), 5,75 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 5,95 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,17 (т, J=11,0 Гц, 1H), 6,46 (с, 1H), 7,21 (дд, J=16,1, 11,0 Гц, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,3 (кв), 38,2 (т), 45,7 (т), 60,6 (д), 70,9 (д), 72,6 (д), 103,9 (д), 114,3 (с), 116,3 (с), 130,8 (д), 132,6 (д), 134,6 (с), 138,1 (д), 141,1 (д), 156,9 (с), 157,0 (с), 168,1 (с), 199,8 (с) | |
13 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,46 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,96 (ддд, J=14,0, 10,4, 3,0 Гц, 1Н), 2,12 (ддд, J=14,0, 9,8, 3,0 Гц, 1Н), 3,76 (д, J=15,3 Гц, 1Н), 3,88 (дт, J=9,8, 3,0 Гц, 1Н), 4,73 (д, J=15,3 Гц, 1H), 5,00 (дд, J=9,8, 3,0 Гц, 1H), 5,27 (м, 1H), 6,00 (д, J=15,9 Гц, 1H), 6,02 (т, J=9,8 Гц, 1H), 6,14 (т, J=9,8 Гц, 1H), 6,46 (с, 1Н), 7,18 (дд, J=15,9, 9,8 Гц, 1Н) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,8 (кв), 40,6 (т), 44,5 (т), 60,4 (д), 71,0 (д), 72,1 (д), 104,1 (д), 113,8 (с), 115,7 (с), 127,6 (д), 131,7 (д), 135,4 (с), 138,6 (д), 139,1 (д), 157,8 (с), 158,6 (с), 168,5 (с), 198,7 (с) | |
14 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,42 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,87 (ддд, J=15,3, 9,2, 3,7 Гц, 1Н), 1,95 (дд, J=15,3, 6,7 Гц, 1Н), 3,63 (д, J=15,9 Гц, 1H), 3,80 (м, 1H), 4,18 (д, J=15,9 Гц, 1H), 4,78 (дд, J=8,5, 6,1 Гц, 1H), 5,40 (м, 1H), 5,73 (дд, J=11,0, 8,5 Гц, 1H), 5,90 (д, J=15,9 Гц, 1H), 6,14 (т, J=11,0 Гц, 1H), 6,41 (с, 1H), 7,30 (дд, J=15,9, 11,0 Гц, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,4 (кв), 37,8 (т), 45,8 (т), 71,2 (д), 71,9 (д), 72,0 (д), 103,8 (д), 114,3 (с), 116,6 (с), 130,0 (д), 131,5 (д), 134,7 (с), 142,4 (д), 142,9 (д), 156,7 (с), 156,9 (с), 168,4 (с), 200,2 (с) | |
15 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,44 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,83 (ддд, J=14,6, 9,8, 3,0 Гц, 1Н), 2,10 (ддд, J=14,6, 9,8, 3,0 Гц, 1Н), 3,64 (дт, J=9,8, 3,0 Гц, 1Н), 3,87 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 4,53 (д, J=15,9 Гц, 1H), 4,56 (м, 1H), 5,45 (м, 1H), 5,94 (дд, J=10,4, 7,3 Гц, 1Н), 5,96 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 6,12 (т, J=10,4 Гц, 1H), 6,44 (с, 1H), 7,36 (дд, J=15,9, 10,4 Гц, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 21,0 (кв), 39,3 (т), 44,5 (т), 69,5 (д), 71,2 (д), 72,7 (д), 104,0 (д), 113,0 (с), 115,9 (с), 127,2 (д), 131,3 (д), 135,8 (с), 140,6 (д), 143,7 (д), 158,2 (с), 158,9 (с), 168,7 (с), 199,5 (с) | |
16 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,29 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,70 (ддд, J=11,6, 10,4, 2,4 Гц, 1Н), 2,17 (дт, J=11,6, 6,1 Гц, 1Н), 4,01 (д, J=18,9 Гц, 1H), 4,05 (м, 1H), 4,34 (д, J=18,9 Гц, 1H), 5,01 (м, 1H), 5,46 (д, J=9,8 Гц, 1H), 5,82 (дд, J=15,3, 9,8 Гц, 1H), 6,02 (т, J=11,0 Гц, 1Н), 6,10 (дд, J=15,3, 11,0 Гц, 1Н), 6,30 (т, J=11,0 Гц, 1H), 6,45 (с, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,6 (кв), 42,3 (т), 42,4 (т), 62,9 (д), 70,4 (д), 71,5 (д), 103,8 (д), 115,0 (с), 116,4 (с), 126,2 (д), 127,6 (д), 133,4 (с), 134,8 (д), 140,8 (д), 156,5 (с), 156,6 (с), 169,4 (с), 201,0 (с) | |
17 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,38 (с, 3H), 1,39 (с, 3H), 1,46 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,87 (дд, J=16,1, 9,1 Гц, 1Н), 2,08 (ддд, J=16,1, 5,8, 1,8 Гц, 1Н), 3,73 (дд, J=9,1, 5,8 Гц, 1Н), 3,85 (д, J=16,4 Гц, 1Н), 4,38 (д, J=16,4 Гц, 1Н), 4,71 (т, J=9,1 Гц, 1Н), 5,65 (м, 1Н), 5,78 (дд, J=11,3, 9,1 Гц, 1Н), 6,03 (д, J=16,1 Гц, 1Н), 6,32 (т, J=11,3 Гц, 1Н), 6,47 (с, 1Н), 7,83 (дд, J=16,1, 11,3 Гц, 1Н) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 21,8 (кв), 27,2 (кв), 27,3 (кв), 34,5 (т), 45,9 (т), 70,3 (д), 75,9 (д), 78,9 (д), 103,8 (д), 110,1 (с), 111,0 (с), 116,2 (с), 130,3 (д), 131,3 (д), 136,6 (с), 138,7 (д), 142,2 (д), 158,8 (с), 160,3 (с), 169,1 (с), 200,4 (с) | |
18 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,52 (д, J=6,4 Гц, 3H), 2,02 (ддд, J=14,9, 9,1, 4,0 Гц, 1Н), 2,09 (дд, J=14,9, 6,4 Гц, 1Н), 3,79 (д, J=16,1 Гц, 1Н), 4,20 (д, J=16,1 Гц, 1Н), 5,23 (дд, J=10,0, 5,8 Гц, 1Н), 5,34 (дт, J=6,4, 4,0 Гц, 1Н), 5,39 (дд, J=8,8, 5,8 Гц, 1Н), 5,73 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 6,00 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,16 (т, J=11,0 Гц, 1H), 6,48 (с, 1H), 7,18 (дд, J=16,1, 11,0 Гц, 1Н), 8,02 (с, 1Н) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,0 (кв), 35,4 (т), 45,4 (т), 56,8 (д), 70,0 (д), 73,3 (д), 103,6 (д), 114,0 (с), 115,1 (с), 130,9 (д), 133,1 (д), 133,6 (с), 135,6 (д), 139,2 (д), 156,3 (с), 156,4 (с), 160,6 (д), 167,3 (с), 198,8 (с) | |
19 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,25 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,74 (ддд, J=15,3, 10,4, 7,9 Гц, 1Н), 2,01 (д, J=15,3 Гц, 1Н), 2,49 (дд, J=14,6, 3,0 Гц, 1Н), 3,11 (дд, J=14,6, 12,2 Гц, 1Н), 3,81 (т, J=7,9 Гц, 1H), 3,92 (д, J=17,7 Гц, 1H), 3,97 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,39 (дд, J=7,9, 1,8 Гц, 1H), 4,61 (д, J=12,2 Гц, 1H), 5,11 (м, 1H), 5,83 (дт, J=10,4, 1,8 Гц, 1H), 5,91 (дт, J=10,4, 1,8 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H), 9,97 (ушир.с, 1H), 10,35 (ушир.с, 1H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,8 (кв), 37,8 (т), 43,3 (т), 46,0 (т), 56,1 (д), 69,2 (д), 72,1 (д), 72,6 (д), 102,2 (д), 112,3 (с), 115,0 (с), 126,9 (д), 131,6 (д), 131,8 (с), 154,0 (с), 154,7 (с), 167,2 (с), 202,8 (с) | |
20 | (CDCl3, 500 МГц) δ ч/млн: 1,40 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,77 (ддд, J=10,4, 7,9, 1,5 Гц, 1H), 1,91 (м, 1H), 2,04 (м, 1H), 2,13 (м, 1Н), 2,23 (дд, J=12,5, 7,3 Гц, 1Н), 2,42 (дд, J=14,6, 4,9 Гц, 1Н), 2,73 (дд, J=15,5, 11,3 Гц, 1Н), 3,04 (дд, J=14,6, 4,6 Гц, 1Н), 3,30 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 3,91 (ддд, J=10,4, 7,9, 1,5 Гц, 1Н), 4,13 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 4,42 (секстет, J=4,6 Гц, 1Н), 4,94 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 5,26 (секстет, J=6,4 Гц, 1H), 6,60 (с, 1H), 11,9 (ушир.с, 1H) | (CDCl3, 125 МГц) δ ч/млн: 20,6 (кв), 27,2 (т), 28,7 (т), 42,5 (т), 45,3 (т), 50,4 (т), 58,6 (д), 72,3 (д), 78,1 (д), 81,3 (д), 103,8 (д), 107,4 (с), 114,5 (с), 135,8 (с), 156,3 (с), 164,1 (с), 170,3 (с), 206,1 (с) | |
21 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,20 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,41 (м, 1H), 1,66 (м, 1H), 1,70 (м, 1H), 1,75 (м, 1H), 2,13 (д, J=13,4 Гц, 1H), 2,16 (дд, J=11,0, 2,7 Гц, 1H), 2,22 (м, 1H), 2,57 (т, J=11,0 Гц, 1Н), 3,28 (т, J=9,8 Гц, 1Н), 3,42 (ддд, J=11,6, 9,8, 4,6 Гц, 1Н), 3,51 (дт, J=11,0, 2,7 Гц, 1Н), 4,13 (д, J=19,2 Гц, 1Н), 5,05 (двойной секстет, J=6,1, 1,8 Гц, 1Н), 5,31 (ушир.д, J=19,2 Гц, 1Н), 6,33 (с, 1Н) | (CDCl3/CD3OD, 125 M Гц) δ ч/млн: 20,8 (кв), 32,4 (т), 34,1 (т), 37,9 (т), 47,3 (т), 47,9 (т), 57,5 (д), 74,4 (д), 76,2 (д), 81,7 (д), 102,8 (д), 107,6 (с), 115,0 (с), 134,7 (с), 157,3 (с), 161,3 (с), 170,5 (с), 207,0 (с) | |
22 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,30 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,75 (дд, J=11,6, 5,5 Гц, 1H), 1,80 (д, J=14,6 Гц, 1H), 1,99 (м, 1H), 2,18 (м, 2H), 2,54 (ушир.с, 2H), 2,85 (ушир.с, 2H), 3,82 (м, 1H), 3,91 (ушир.с, 1H), 4,42 (ушир.с, 1H), 5,15 (м, 1H), 6,43 (с, 1H) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 21,4 (кв), 27,0 (т), 28,7 (т), 35,8 (т), 46,9 (т), 46,9 (т), 58,6 (д), 68,2 (д), 74,1 (д), 77,0 (д), 103,2 (д), 107,0 (с), 115,5 (с), 134,8 (с), 158,0 (с), 162,1 (с), 170,9 (с), 205,0 (с) | |
23 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,26 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,44 (ддд, J=14,6, 7,9, 3,0 Гц, 1Н), 2,16 (д, J=12,8 Гц, 1Н), 2,37 (дд, J=14,6, 5,5 Гц, 1Н), 2,76 (дд, J=14,6, 4,9 Гц, 1Н), 3,20 (м, 1H), 3,71 (д, J=18,3 Гц, 1H), 3,90 (д, J=18,3 Гц, 1H), 4,21 (дт, J=9,8, 1,8 Гц, 1H), 4,88 (д, J=6,7 Гц, 1H), 5,01 (ушир.с, 1H), 5,20 (септет, J=3,7 Гц, 1Н), 5,89 (дт, J=6,1, 1,8 Гц, 1Н), 6,00 (дт, J=6,1, 1,8 Гц, 1H), 6,50 (с, 1H), 9,97 (с, 1H), 10,47 (ушир.с, 1H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,2 (кв), 37,6 (т), 45,1 (т), 48,3 (т), 69,7 (д), 70,3 (д), 83,3 (д), 88,4 (д), 102,4 (д), 111,7 (с), 115,3 (с), 129,3 (д), 130,0 (д), 130,2 (с), 154,4 (с), 154,7 (с), 166,4 (с), 203,8 (с) | |
25 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,22 (дт, J=17,0, 9,1 Гц, 1H), 1,43 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,98 (м, 1H), 2,00 (м, 1H), 2,06 (м, 1H), 2,21 (м, 1Н), 2,33 (ддд, J=15,8, 7,0, 3,0 Гц, 1Н), 2,50 (дт, J=9,4, 1,8 Гц, 1H), 2,83 (м, 1H), 3,35 (дд, J=12,5, 6,1 Гц, 1H) 3,89 (дд, J=12,5, 9,8 Гц, 1H), 3,94 (с, 3H), 4,43 (м, 1H), 5,16 (двойной квинтет, J=6,7, 2,4 Гц, 1Н), 5,36 (дд, J=15,2, 4,3 Гц, 1Н), 5,53 (дддд, J=15,2, 6,7, 4,3, 1,8 Гц, 1Н), 6,58 (с, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,2 (кв), 29,3 (т), 31,1 (т), 36,5 (т), 40,3 (т), 56,9 (кв), 57,2 (д), 58,3 (д), 70,6 (д), 70,7 (д), 100,2 (д), 108,0 (с), 116,4 (с), 127,9 (д), 133,4 (д), 140,4 (с), 160,4 (с), 164,5 (с), 171,8 (с) | |
26 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,09 (м, 1H), 1,40 (ддд, J=14,6, 8,6, 3,0 Гц, 1H), 1,46 (д, J=6,7 Гц, 3H), 2,10-2,20 (м, 3H), 2,31 (ддд, J=14,6, 6,7, 3,7 Гц, 1Н), 2,69 (дт, J=9,2, 1,8 Гц, 1Н), 2,73 (дд, J=13,4, 5,5 Гц, 1Н), 2,83 (ддд, J=8,6, 3,7, 1,8 Гц, 1Н), 3,28 (дд, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 3,84 (с, 3H), 3,94 (с, 3H), 4,49 (дд, J=13,4, 6,7 Гц, 1H), 5,18 (двойной квинтет, J=6,7, 3,0 Гц, 1H), 5,52 (дд, J=15,9, 6,7 Гц, 1H), 5,58 (м, 1H), 6,75 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,8 (кв), 28,7 (т), 33,3 (т), 39,0 (т), 40,8 (т), 56,1 (д), 56,7 (кв), 56,8 (кв), 58,0 (д), 71,5 (д), 73,0 (д), 96,5 (д), 115,1 (с), 119,9 (с), 130,2 (д), 135,7 (д), 136,1 (с), 156,9 (с), 157,4 (с), 167,2 (с) | |
27 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,15 (м, 1H), 1,47 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,48 (ддд, J=15,3, 7,9, 3,0 Гц, 1H), 1,94 (с, 3H), 2,13-2,23 (м, 3H), 2,23 (с, 3H), 2,30 (ддд, J=15,3, 7,9, 4,3 Гц, 1H), 2,34 (с, 3H), 2,71 (дт, J=9,2, 2,4 Гц, 1Н), 2,88 (ддд, J=7,9, 3,7, 1,8 Гц, 1Н), 3,05 (дд, J=14,0, 4,9 Гц, 1H), 3,51 (дд, J=14,0, 7,9 Гц, 1H), 5,30 (двойной квинтет, J=6,7, 2,4 Гц, 1H), 5,53 (дд, J=14,6, 7,3 Гц, 1H), 5,55 (м, 1H), 5,74 (дт, J=14,6, 6,7 Гц, 1Н), 7,16 (с, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,8 (кв), 20,4 (кв), 20,6 (кв), 20,9 (кв), 28,0 (т), 32,9 (т), 37,4 (т), 38,9 (т), 56,2 (д), 57,7 (д), 72,8 (д), 74,7 (д), 118,6 (д), 126,0 (с), 129,0 (с), 130,0 (д), 134,1 (д), 136,1 (с), 147,6 (с), 149,2 (с), 165,5 (с), 168,4 (с), 168,7 (с), 169,9 (с) | |
28 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,17 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,53 (дт, J=14,0, 5,5 Гц, 1H), 1,62 (м, 2H), 1,66 (дд, J=14,0, 6,7 Гц, 1H) 2,25 (м, 2H), 2,68 (дт, J=5,5, 2,4 Гц, 1H), 2,80 (м, 1H), 2,99 (дд, J=17,1, 10,4 Гц, 1Н), 3,28 (дд, J=17,1, 3,7 Гц, 1Н), 3,92 (квинтет, J=6,1 Гц, 1H), 3,98 (с, 3H), 5,13 (ддд, J=10,4, 3,7, 3,0 Гц, 1H) 5,76 (дд, J=15,3, 6,7 Гц, 1H), 6,02 (дт, J=15,3, 6,7 Гц, 1H), 6,60 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 23,9 (кв), 29,4 (т), 31,5 (т), 32,1 (т), 42,3 (т), 56,6 (д), 57,1 (кв), 58,0 (д), 65,8 (д), 79,3 (д), 99,9 (д), 102,9 (с), 112,0 (с), 128,2 (д), 135,8 (д),, 138,9 (с), 162,1 (с), 164,0 (с), 170,0 (с) | |
29 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,22 (м, 1H), 1,33 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,93 (м, 1H), 1,96 (м, 2H), 2,15 (дд, J=9,8, 3,0 Гц, 1H), 2,18 (м, 1H), 2,76 (дд, J=5,5, 3,7 Гц, 1H), 2,84 (дт, J=7,9, 2,4 Гц, 1H), 3,09 (дд, J=12,8, 10,4 Гц, 1Н), 3,18 (дд, J=12,8, 4,3 Гц, 1Н), 3,88 (с, 3H), 3,96 (с, 3H), 4,52 (м, 1H), 4,81 (квинтет, J=6,1 Гц, 1H), 5,32 (ддд, J=16,5, 3,0, 1,2 Гц, 1H), 5,72 (м, 1H), 6,78 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,4 (кв), 28,6 (т), 30,8 (т), 36,7 (т), 40,4 (т), 55,3 (д), 56,4 (д), 56,7 (кв), 56,8 (кв), 68,6 (д), 69,4 (д), 96,8 (д), 115,6 (с), 118,9 (с), 128,8 (д), 133,2 (д), 137,1 (с), 158,0 (с), 158,6 (с), 167,7 (с) | |
30 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,27 (м, 1H), 1,40 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,96 (м, 1H), 1,98 (с, 3H), 2,03-2,10 (м, 3H), 2,11 (м, 1H), 2,27 (с, 3H), 2,34 (с, 3H), 2,75 (дт, J=7,9, 2,4 Гц, 1H), 2,81 (м, 1H), 3,35 (дд, J=14,0, 6,7 Гц, 1H), 3,55 (дд, J=14,0, 8,5 Гц, 1H), 5,09 (двойной квинтет, J=6,7, 2,4 Гц, 1Н), 5,42 (дд, J=15,9, 4,9 Гц, 1Н), 5,57 (дд, J=12,8, 6,7 Гц, 1Н), 5,69 (ддт, J=15,9, 6,7, 1,2 Гц, 1Н), 7,18 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,8 (кв), 20,4 (кв), 20,9 (кв), 20,9 (кв), 27,5 (т), 30,9 (т), 36,3 (т), 37,2 (т), 55,4 (д), 56,1 (д), 71,2 (д), 71,2 (д), 119,2 (д), 126,6 (с), 128,1 (с), 128,5 (д), 133,2 (д), 136,9 (с), 148,7 (с), 149,7 (с), 165,2 (с), 168,3 (с), 169,0 (с), 169,7 (с) | |
31 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,31 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,66 (м, 2H), 2,10 (дддд, J=14,6, 4,9, 3,7, 3,0 Гц, 1Н), 2,53 (ддд, J=14,0, 6,7, 3,7 Гц, 1Н), 2,60 (дт, J=7,9, 3,0 Гц, 1Н), 2,69 (дт, J=9,2, 3,0 Гц, 1Н), 2,81 (дд, J=12,2, 7,3 Гц, 1Н), 3,14 (дд, J=12,2, 7,9 Гц, 1Н), 4,06 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 4,22 (д, J=18,3 Гц, 1H), 5,18 (м, 1H), 5,28 (ддд, J=15,3, 7,3, 6,7 Гц, 1H) 5,40 (ддд, J=15,3, 7,9, 7,3 Гц, 1Н), 6,38 (с, 1Н) | (CDCl3/CD3OD, 125 M Гц) δ ч/млн: 18,9 (кв), 33,8 (т), 36,2 (т), 45,4 (т), 45,8 (т), 53,7 (д), 58,2 (д), 71,5 (д), 103,1 (д), 107,6 (с), 115,6 (с), 125,9 (д), 129,2 (д), 135,2 (с), 157,8 (с), 161,0 (с), 169,1 (с), 205,6 (с) | |
32 | (CDCl3, 500 МГц) δ ч/млн: 1,40 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,63 (м, 2H), 1,79 (ддд, J=14,9, 6,4, 3,0 Гц, 1Н), 1,89 (ддд, J=14,9, 7,6, 6,4 Гц, 1Н), 2,20 (м, 2H), 3,04 (дд, J=12,5, 7,6 Гц, 1H), 3,16 (дд, J=12,5, 7,6 Гц, 1H) 3,78 (ддд, J=6,7, 6,4, 5,2 Гц, 1Н), 4,48 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 4,59 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 5,33 (двойной квинтет, J=6,4, 3,0 Гц, 1Н), 5,47 (дт, J=15,2, 7,6 Гц, 1Н), 5,60 (ддд, J=15,2, 7,6, 7,0 Гц, 1Н), 6,53 (с, 1H) | (CDCl3, 125 M Гц) δ ч/млн: 20,6 (кв), 28,0 (т), 35,3 (т), 42,1 (т), 45,1 (т), 46,4 (т), 66,4 (д), 71,7 (д), 103,7 (д), 108,5 (с), 115,2 (с), 123,5 (д), 135,2 (д), 135,8 (с), 156,0 (с), 161,2 (с), 168,0 (с), 205,0 (с) | |
33 | (CDCl3, 500 МГц) δ ч/млн: 1,42 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,86 (м, 2H), 2,04 (м, 1H), 2,20 (м, 1H), 2,29 (м, 1Н), 2,32 (м, 1H), 2,40 (м, 1H), 2,73 (ддд, J=13,4, 8,8, 3,0 Гц, 1Н), 3,60 (ддд, J=6,7, 6,4, 5,8 Гц, 1Н), 4,24 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,38 (д, J=17,7 Гц, 1H), 5,41-5,50 (м, 3H), 6,50 (с, 1H) | (CDCl3, 125 M Гц) δ ч/млн: 20,3 (кв), 22,4 (т), 34,6 (т), 41,1 (т), 41,4 (т), 47,4 (т), 69,3 (д), 71,2 (д), 103,8 (д), 107,8 (с), 115,1 (с), 126,5 (д), 131,1 (д), 136,1 (с), 156,7 (с), 161,9 (с), 168,8 (с), 207,8 (с) | |
34 | (CDCl3, 500 МГц) δ ч/млн: 1,24 (м, 2H), 1,32 (м, 1H), 1,44 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,46 (м, 2H), 1,60 (м, 2H), 1,69 (м, 1H), 1,84 (ддд, J=15,3, 6,7, 3,0 Гц, 1Н), 1,95 (ддд, J=15,3, 7,3, 5,5 Гц, 1Н), 2,32 (ддд, J=15,9, 9,2, 3,7 Гц, 1Н), 2,58 (ддд, J=15,9, 8,5, 3,0 Гц, 1Н), 3,71 (ддд, J=6,7, 6,1, 5,5 Гц, 1Н), 4,33 (д, J=17,7 Гц, 1Н), 4,51 (д, J=17,7 Гц, 1H), 5,47 (двойной квинтет, J=6,7, 2,4 Гц, 1H), 6,54 (с, 1H) | (CDCl3, 125 МГц) δ ч/млн: 20,3 (кв), 22,0 (т), 22,8 (т), 25,2 (т), 34,9 (т), 40,6 (т), 42,3 (т), 46,5 (т), 66,4 (д), 71,4 (д), 103,8 (д), 107,9 (с), 115,3 (с), 136,2 (с), 156,3 (с), 161,7 (с), 168,3 (с), 207,9 (с) | |
35 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,52 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,57 (м, 1H), 2,41 (м, 1H), 3,01 (ддд, J=9,2, 3,7, 1,8 Гц, 1H), 3,34 (м, 1H), 3,79 (д, J=15,9 Гц, 1H), 3,90 (д, J=15,9 Гц, 1H), 5,29 (двойной квинтет, J=6,7, 3,7 Гц, 1H), 5,56 (дд, J=10,4, 3,0 Гц, 1H), 6,16 (м, 1H), 6,43 (с, 1H), 6,83 (д, J=15,9 Гц, 1H), 7,22 (дд, J=15,9, 11,0 Гц, 1H) | (CDCl3, 125 МГц) δ ч/млн: 18,6 (кв), 36,2 (т), 38,1 (т), 56,6 (д), 57,0 (д), 72,3 (д), 103,4 (д), 114,6 (с), 116,2 (с), 121,9 (д), 130,8 (д), 132,5 (д), 132,8 (д), 135,5 (с), 154,8 (с), 156,7 (с), 157,1 (с), 169,0 (с) | |
36 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,29 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,37 (ддд, J=14,6, 9,2, 2,4 Гц, 1H), 2,01 (м, 1H), 2,16 (м, 2H), 2,19 (м, 1Н), 2,50 (ддд, J=14,0, 7,3, 3,0 Гц, 1Н), 2,79 (дд, J=14,0, 3,0 Гц, 1Н), 2,85 (ддд, J=5,5, 3,0, 2,4 Гц, 1Н), 3,01 (дт, J=9,2, 2,4 Гц, 1H), 3,23 (дд, J=14,0, 10,4 Гц, 1H), 3,93 (м, 1H) 5,22 (дсекстет, J=6,7, 2,4 Гц, 1Н), 5,35 (дт, J=15,3, 7,3 Гц, 1Н), 5,52 (дт, J=15,3, 7,9 Гц, 1Н), 6,26 (с, 1Н) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,3 (кв), 33,1 (т), 36,4 (т), 37,1 (т), 39,4 (т), 54,6 (д), 59,4 (д), 70,1 (д), 70,5 (д), 102,0 (д), 111,8 (с), 113,7 (с), 127,6 (д), 129,8 (д), 138,1 (с), 155,8 (с), 157,7 (с), 169,4 (с) | |
37 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,22 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,27 (ддд, J=14,0, 6,7, 1,8 Гц, 1Н), 1,90 (дд, J=12,2, 11,6 Гц, 1Н), 2,07 (ддд, J=14,0, 11,0, 3,0 Гц, 1Н), 2,40 (м, 2H), 2,45 (дд, J=14,6, 3,0 Гц, 1Н), 2,66 (дд, J=14,0, 11,0 Гц, 1Н), 2,81 (м, 1H), 2,88 (кв, J=2,4 Гц, 1H), 4,05 (м, 1H), 5,17 (ддд, J=15,3, 9,8, 4,9 Гц, 1Н), 5,53 (ддд, J=15,3, 10,4, 4,9 Гц, 1Н), 6,21 (с, 1H) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,1 (кв), 32,7 (т), 37,0 (т), 38,2 (т), 38,8 (т), 54,4 (д), 59,4 (д), 67,7 (д), 69,9 (д), 102,0 (д), 112,7 (с), 114,4 (с), 127,5 (д), 129,8 (д), 136,1 (с), 154,9 (с), 155,1 (с), 169,8 (с) | |
38 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,44 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,84 (дт, J=15,9, 4,9 Гц, 1H), 1,96 (м, 1H), 2,04 (дт, J=15,9, 3,7 Гц, 1H), 2,18 (м, 1Н), 2,41 (ддд, J=14,0, 10,4, 3,7 Гц, 1Н), 2,55 (ддд, J=14,0, 7,3, 2,4 Гц, 1Н), 2,74 (дт, J=9,2, 2,4 Гц, 1Н), 2,96 (м, 1H), 3,30 (дд, J=13,4, 9,8 Гц, 1H), 3,39 (дд, J=13,4, 4,9 Гц, 1H) 3,78 (двойной квинтет, J=6,1, 3,7 Гц, 1H), 5,37 (м, 1H), 5,52 (дд, J=10,4, 7,9 Гц, 1Н), 5,70 (ддд, J=10,4, 5,5, 4,9 Гц, 1Н), 6,38 (с, 1H) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 18,6 (кв), 30,1 (т), 36,4 (т), 36,6 (т), 38,8 (т), 55,4 (д), 56,8 (д), 71,2 (д), 72,1 (д), 102,6 (д), 107,4 (с), 115,6 (с), 124,2 (д), 130,7 (д), 138,8 (с), 157,3 (с), 161,7 (с), 170,2 (с) | |
39 | (CDCl3/CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,08 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,52 (дд, J=14,2, 6,7 Гц, 1H), 1,57 (ддд, J=14,2, 5,5, 4,9 Гц, 1H), 2,18 (т-подобный, J=4,9 Гц, 2H), 2,42 (м, 2H), 2,66 (м, 1H), 2,68 (м, 1H), 2,75 (ддт, J=14,0, 5,5, 2,4 Гц, 1Н), 3,05 (ддд, J=17,1, 9,2, 3,0 Гц, 1Н), 3,84 (секстет, J=6,1 Гц, 1H), 4,40 (ддкв, J=6,1, 5,5, 3,7 Гц, 1H), 5,49 (м, 2H) 6,28 (с, 1H) | (CDCl3/CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 22,7 (кв), 29,7 (т), 34,6 (т), 37,5 (т), 40,5 (т), 55,9 (д), 57,4 (д), 65,5 (д), 77,7 (д), 101,1 (с), 102,0 (д), 110,8 (с), 126,4 (д), 129,0 (д), 137,9 (с), 160,1 (с), 162,0 (с), 169,4 (с) | |
40 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,98 (т, J=7,3 Гц, 3H), 1,21 (м, 1H), 1,42 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,54 (дт, J=15,3, 7,3 Гц, 2H), 1,81 (дт, J=15,3, 6,7 Гц, 2H), 2,00 (м, 2H), 2,05 (м, 1H), 2,21 (м, 1H), 2,34 (ддд, J=15,9, 6,7, 3,0 Гц, 1Н), 2,50 (дт, J=9,8, 1,8 Гц, 1Н), 2,85 (м, 1H), 3,35 (дд, J=12,8, 6,1 Гц, 1H), 3,90 (дд, J=12,8, 9,8 Гц, 1H) 4,12 (т, J=6,7 Гц, 2H), 4,44 (м, 1H), 5,15 (двойной квинтет, J=6,7, 2,4 Гц, 1H), 5,35 (дд, J=15,9, 4,3 Гц, 1Н), 5,53 (ддд, J=15,9, 4,3, 1,8 Гц, 1Н), 6,55 (с, 1H), 11,9 (ушир.с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 14,0 (кв), 19,8 (т), 20,3 (кв), 29,3 (т), 31,1 (т), 31,7 (т), 36,5 (т), 40,3 (т), 57,2 (д), 58,3 (д), 69,7 (т), 70,5 (д), 70,6 (д), 100,8 (д), 107,8 (с), 116,7 (с), 127,8 (д), 133,4 (д), 140,4 (с), 159,9 (с), 164,5 (с), 171,8 (с) | |
41 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,92 (т, J=7,3 Гц, 3H), 0,97 (т, J=7,3 Гц, 3H), 1,07 (м, 1H), 1,38 (ддд, J=14,6, 9,2, 3,0 Гц, 1H), 1,45 (д, J=6,1 Гц, 2H), 1,46 (д, J=7,3 Гц, 3H), 1,53 (дт, J=15,3, 7,3 Гц, 2H), 1,68 (дт, J=14,6, 6,7 Гц, 2H), 1,79 (дт, J=15,3, 6,1 Гц, 2H), 2,12-2,20 (м, 3H), 2,33 (ддд, J=14,6, 7,3, 3,7 Гц, 1Н), 2,71 (м, 1Н), 2,73 (дд, J=9,2, 6,1 Гц, 1H), 2,83 (м, 1H), 3,29 (дд, J=13,4, 7,3 Гц, 1H), 4,04 (т, J=6,1 Гц, 2H), 4,12 (т, J=6,1 Гц, 2H), 4,48 (квинтет, J=6,1 Гц, 1H), 5,18 (двойной квинтет, J=7,3, 2,4 Гц, 1Н), 5,54 (дд, J=15,9, 6,1 Гц, 1Н), 5,59 (дд, J=15,9, 11,0 Гц, 1Н), 6,71 (с, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 14,0 (кв*2), 19,8 (т*2), 19,9 (кв), 28,6 (т), 31,9 (т*2), 33,6 (т), 39,1 (т), 41,0 (т), 56,1 (д), 57,9 (д), 69,3 (т), 69,6 (т), 71,5 (д), 73,3 (д), 98,1 (д), 115,3 (с), 120,1 (с), 130,2 (д), 136,0 (д), 136,0 (с), 156,2 (с), 156,8 (с), 167,4 (с) | |
42 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,90 (т, J=7,3 Гц, 3H), 1,22 (м, 1H), 1,33-1,39 (м, 4H), 1,42 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,52 (м, 2H), 1,83 (дт, J=15,3, 6,7 Гц, 2H), 1,99 (м, 2H), 2,05 (м, 1H), 2,21 (м, 1H), 2,33 (ддд, J=16,5, 7,3, 3,7 Гц, 1Н), 2,50 (дт, J=9,2, 1,8 Гц, 1Н), 2,83 (м, 1H), 3,36 (дд, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 3,90 (дд, J=12,2, 9,8 Гц, 1H) 4,12 (т, J=7,9 Гц, 2H), 4,55 (м, 1H), 5,15 (дкв, J=6,7, 1,8 Гц, 1H), 5,35 (дд, J=15,3, 3,7 Гц, 1Н), 5,53 (ддд, J=15,3, 4,3, 1,8 Гц, 1Н), 6,55 (с, 1H), 11,90 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 14,2 (кв), 20,3 (кв), 23,2 (т), 26,3 (т), 29,3 (т), 29,5 (т), 31,1 (т), 32,2 (т), 36,5 (т), 40,3 (т), 57,2 (д), 58,3 (д), 70,0 (т), 70,5 (д), 70,6 (д), 100,9 (д), 107,8 (с), 116,7 (с), 127,8 (д), 133,4 (д), 140,4 (с), 159,9 (с), 164,5 (с), 171,8 (с) | |
43 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,88 (т, J=7,3 Гц, 3H), 0,90 (т, J=7,3 Гц, 3H), 1,07 (м, 1H), 1,31 (м, 4H), 1,35 (м, 4H), 1,38 (м, 1H), 1,43 (м, 2H), 1,46 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,51 (м, 2H), 1,69 (дт, J=14,8, 6,7 Гц, 2H), 1,81 (дт, J=15,2, 6,1 Гц, 2H), 2,11-2,21 (м, 3H), 2,34 (ддд, J=14,6, 7,3, 3,7 Гц, 1Н), 2,71 (дд, J=7,3, 1,8 Гц, 1H), 2,73 (дд, J=13,4, 5,5 Гц, 1H), 2,83 (м, 1H), 3,29 (дд, J=13,4, 7,3 Гц, 1Н), 4,03 (т, J=6,1 Гц, 2H), 4,11 (т, J=6,1 Гц, 2H), 4,49 (дд, J=12,5, 5,5 Гц, 1H), 5,18 (двойной квинтет, J=6,1, 2,4 Гц, 1Н), 5,54 (дд, J=15,9, 6,1 Гц, 1Н), 5,59 (дд, J=15,9, 4,9 Гц, 1H), 6,71 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 14,2 (кв×2), 19,9 (кв), 23,2 (т×2), 26,3 (т), 26,4 (т), 28,6 (т), 29,8 (т), 29,9 (т), 32,2 (т×2), 33,6 (т), 39,1 (т), 41,0 (т), 56,1 (д), 57,9 (д), 69,6 (т), 69,9 (т), 71,5 (д), 73,3 (д), 98,1 (д), 115,3 (с), 120,1 (с), 130,2 (д), 136,0 (д), 136,0 (с), 156,2 (с), 156,8 (с), 167,4 (с) | |
44 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,97 (т, J=7,3 Гц, 3H), 1,05 (т, J=7,3 Гц, 3H), 1,08 (м, 1H), 1,38 (ддд, J=14,0, 8,5, 2,4 Гц, 1H), 1,46 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,71 (дт, J=13,4, 7,3 Гц, 2H), 1,82 (дт, J=13,4, 7,3 Гц, 2H), 2,11-2,20 (м, 3H), 2,33 (ддд, J=14,6, 7,3, 3,6 Гц, 1H), 2,71 (дт, J=7,9, 2,4 Гц, 1H), 2,73 (дд, J=13,4, 5,5 Гц, 1Н), 2,82 (ддд, J=8,5, 3,6, 2,4 Гц, 1Н), 3,30 (дд, J=13,4, 7,3 Гц, 1Н), 3,99 (т, J=6,1 Гц, 2H), 4,07 (т, J=6,1 Гц, 2H), 4,49 (квинтет, J=6,1 Гц, 1H), 5,18 (двойной квинтет, J=6,1, 2,4 Гц, 1Н), 5,54 (дд, J=15,9, 6,1 Гц, 1Н), 5,59 (дд, J=15,9, 5,5 Гц, 1Н), 6,70 (с, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 10,8 (кв×2), 19,9 (кв), 23,2 (т×2), 28,6 (т), 33,6 (т), 39,1 (т), 41,0 (т), 56,1 (д), 57,9 (д), 71,1 (т), 71,3 (т), 71,5 (д), 73,3 (д), 98,1 (д), 115,4 (с), 120,1 (с), 130,2 (д), 136,0 (д), 136,0 (с), 156,2 (с), 156,7 (с), 167,4 (с) | |
45 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,06 (м, 1H), 1,07-1,34 (м, 10H), 1,39 (ддд, J=14,6, 8,6, 2,4 Гц, 1H), 1,47 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,63-1,85 (м, 10H), 1,90 (м, 2H), 2,11-2,21 (м, 3H), 2,34 (ддд, J=14,6, 7,9, 4,3 Гц, 1Н), 2,70 (м, 1Н), 2,73 (дд, J=13,4, 5,5 Гц, 1Н), 2,83 (ддд, J=8,6, 3,7, 1,8 Гц, 1Н), 3,30 (дд, J=13,4, 7,3 Гц, 1Н), 3,84 (д, J=6,1 Гц, 2H), 3,91 (д, J=6,7 Гц, 2H), 4,49 (дд, J=12,5, 5,5 Гц, 1H), 5,19 (двойной квинтет, J=6,1, 2,4 Гц, 1Н), 5,53 (дд, J=15,9, 6,7 Гц, 1Н), 5,55 (дд, J=15,9, 5,5 Гц, 1Н), 6,70 (с, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,0 (кв), 26,5 (т×2), 27,2 (т×2), 28,5 (т), 30,2 (т×2), 30,3 (т×2), 30,4 (т×2), 33,6 (т), 38,6 (д), 38,7 (д), 39,1 (т), 41,0 (т), 56,2 (д), 57,9 (д), 71,6 (д), 73,3 (д), 74,8 (т), 75,1 (т), 97,9 (д), 115,3 (с), 119,9 (с), 130,1 (д), 136,0 (д), 136,0 (с), 156,3 (с), 156,9 (с), 167,5 (с) | |
46 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,38 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,92 (ддд, J=14,6, 9,2, 3,7 Гц, 1H), 2,05 (м, 1Н), 2,08 (м, 1H), 2,18 (ддд, J=14,6, 9,8, 3,0 Гц, 1H), 2,28 (м, 1H), 2,38 (м, 1H), 3,30 (м, 1H), 3,45 (дд, J=12,2, 9,2 Гц, 1H), 4,10 (дд, J=9,2, 3,7 Гц, 1H), 4,25 (дд, J=9,2, 3,7 Гц, 1H), 4,37 (м, 1H), 5,30 (м, 1H), 5,31 (м, 1H), 5,61 (ддд, J=15,9, 9,2, 6,7 Гц, 1Н), 6,43 (с, 1Н) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,7 (кв), 32,9 (т), 32,2 (т), 40,0 (т), 42,9 (т), 61,4 (д), 67,8 (д), 71,4 (д), 71,6 (д), 103,5 (д), 111,5 (с), 115,6 (с), 129,6 (д), 133,6 (д), 138,3 (с), 158,5 (с), 160,8 (с), 171,0 (с) | |
47 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,08 (м, 1H), 1,40 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,49 (м, 2H), 1,52 (м, 1Н), 1,62 (м, 1Н), 1,87 (ддд, J=15,5, 5,5, 2,4 Гц, 1Н), 1,96 (м, 1Н), 2,14 (ддд, J=15,5, 6,4, 4,0 Гц, 1Н), 2,49 (м, 2H), 2,59 (дт, J=9,1, 2,4 Гц, 1Н), 2,78 (ддд, J=5,5, 4,0, 2,4 Гц, 1Н), 3,70 (д, J=17,4 Гц, 1H), 4,32 (д, J=17,4 Гц, 1H), 5,21 (двойной квинтет, J=6,4, 2,4 Гц, 1H), 6,24 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,28 (д, J=2,4 Гц, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,4 (кв), 22,8 (т), 24,2 (т), 31,8 (т), 37,0 (т), 40,8 (т), 50,5 (т), 55,4 (д), 57,7 (д), 71,2 (д), 102,8 (д), 106,4 (с), 113,6 (д), 140,7 (с), 163,2 (с), 166,1 (с) 171,5 (с), 207,7 (с) | |
48 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,31 (м, 1H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,32-1,36 (м, 7H), 1,43 (м, 1H), 1,53 (ддд, J=9,2, 7,3, 2,4 Гц, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,85 (м, 1H), 2,54 (ддд, J=18,3, 5,5, 3,7 Гц, 1H), 2,77 (ддд, J=18,3, 11,0, 3,7 Гц, 1Н), 3,79 (д, J=17,7 Гц, 1Н), 4,61 (д, J=17,7 Гц, 1Н), 5,15 (дкв, J=6,7, 3,7 Гц, 1Н), 6,19 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,30 (д, J=2,4 Гц, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 21,2 (кв), 22,4 (т), 23,3 (т), 23,8 (т), 24,6 (т), 27,4 (т), 35,2 (т), 39,4 (т), 50,5 (т), 74,4 (д), 102,6 (д), 106,3 (с), 113,8 (д), 140,9 (с), 163,0 (с), 166,4 (с), 172,2 (с), 207,0 (с) | |
49 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,37 (д, J=6,1 Гц, 3H), 2,02 (м, 2H), 2,12 (м, 2H), 2,29 (ддд, J=14,0, 7,3, 6,1 Гц, 1Н), 2,56 (ддд, J=14,0, 6,1, 3,7 Гц, 1Н), 3,23 (дд, J=15,3, 5,5 Гц, 1Н), 3,25 (дд, J=15,3, 5,5 Гц, 1H), 4,25 (кв, J=6,1 Гц, 1H), 5,23 (двойной квинтет, J=6,1, 3,7 Гц, 1Н), 5,27 (дд, J=15,9, 6,1 Гц, 1Н), 5,28 (дд, J=15,9, 8,5 Гц, 1Н), 5,39 (дд, J=15,9, 6,1 Гц, 1Н), 5,43 (дд, J=15,9, 6,7 Гц, 1Н), 6,24 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,53 (д, J=2,4 Гц, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,5 (кв), 31,1 (т), 32,2 (т), 38,3 (т), 42,4 (т), 72,8 (д), 73,4 (д), 102,0 (д), 107,4 (с), 112,6 (д), 127,0 (д), 130,6 (д), 133,3 (д), 134,5 (д), 144,4 (с), 162,2 (с), 164,6 (с), 171,2 (с) | |
50 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,39 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,94 (м, 1H), 2,09 (м, 1H), 2,12 (м, 2H), 2,29 (дт, J=15,3, 6,7 Гц, 1H), 2,67 (ддд, J=15,3, 7,3, 3,7 Гц, 1Н), 2,85 (дд, J=13,4, 6,1 Гц, 1Н), 3,72 (дд, J=13,4, 7,3 Гц, 1Н), 4,17 (дд, J=11,0, 7,3 Гц, 1Н), 5,20 (ддд, J=15,3, 6,1, 3,7 Гц, 1Н), 5,22 (кв, J=6,7 Гц, 1Н), 5,33 (дд, J=15,3, 4,3 Гц, 1H), 5,35 (ддд, J=15,3, 11,0, 5,5 Гц, 1H), 5,43 (ддд, J=15,3, 9,2, 7,3 Гц, 1Н), 6,23 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,50 (д, J=2,4 Гц, 1H), 9,05 (ушир.с, 1H), 11,87 (ушир.с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,5 (кв), 31,0 (т), 31,9 (т), 37,8 (т), 43,4 (т), 73,3 (д), 75,0 (д), 102,0 (д), 105,9 (с), 112,1 (д), 126,4 (д), 128,3 (д), 133,8 (д), 135,0 (д), 145,5 (с), 162,8 (с), 166,2 (с), 172,4 (с) | |
51 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,23 (ддт, J=14,0, 9,2, 3,7 Гц, 1H), 1,40 (д, J=6,1 Гц, 3H), 2,05 (м, 1H), 2,11 (м, 2H), 2,13 (м, 1H), 2,25 (м, 1H), 2,57 (дт, J=9,2, 2,4 Гц, 1H), 2,74 (дд, J=12,2, 6,7 Гц, 1H), 2,91 (дд, J=6,1, 2,4 Гц, 1H), 3,77 (дд, J=12,2, 7,9 Гц, 1Н), 4,13 (дд, J=12,8, 6,7 Гц, 1Н), 5,16 (двойной квинтет, 6,1, 1,8 Гц, 1Н), 5,43 (дд, J=15,9, 4,9 Гц, 1Н), 5,54 (ддд, J=15,9, 4,9, 1,2 Гц, 1Н), 6,20 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,30 (д, J=2,4 Гц, 1Н) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,9 (кв), 29,4 (т), 31,8 (т), 36,9 (т), 43,2 (т), 58,2 (д), 58,9 (д), 70,5 (д), 74,9 (д), 102,5 (д), 106,2 (с), 113,3 (д), 129,7 (д), 133,3 (д), 144,6 (с), 163,5 (с), 166,4 (с), 172,6 (с) | |
52 | (ДМСО-d6, 500 МГц) (вращ.изомер примерно 1:1) δ ч/млн: 1,39 (д, J=6,7 Гц, 1,5H), 1,41 (д, J=6,7 Гц, 1,5H), 1,50-1,57 (м, 1,0H), 2,28 (дт, J=14,6, 3,7 Гц, 0,5H), 2,37 (дт, J=14,0, 3,7 Гц, 0,5H), 3,01 (дт, J=7,9, 3,0 Гц, 0,5H), 3,13 (дт, J=8,6, 2,4 Гц, 0,5H), 3,35 (м, 0,5H), 3,38 (м, 0,5H), 3,63 (д, J=15,9 Гц, 0,5H), 3,76 (д, J=16,5 Гц, 0,5H), 3,78 (с, 4H), 3,85 (д, J=15,9 Гц, 0,5H), 3,97 (д, J=16,5 Гц, 0,5H), 5,17 (м, 0,5H), 5,20 (м, 0,5H), 5,70 (дд, J=11,0, 4,9 Гц, 0,5H), 5,74 (дд, J=11,0, 3,7 Гц, 0,5H), 6,04 (д, J=15,9 Гц, 0,5H), 6,09 (д, J=16,5 Гц, 0,5H), 6,22 (т, J=11,6 Гц, 0,5H), 6,25 (т, J=10,4 Гц, 0,5H), 6,54 (с, 0,5H), 6,70 (с, 0,5H), 7,18 (м, 2H), 7,28-7,38 (м, 7H), 7,42 (д, J=7,9 Гц, 2H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) (вращ.изомер примерно 1:1) δ ч/млн: 18,1 (кв), 18,2 (кв), 34,7 (т), 34,9 (т), 36,3 (т), 36,4 (т), 44,6 (т), 44,9 (т), 54,2 (д×2), 55,0 (д), 55,1 (д), 69,6 (д), 70,8 (д), 109,4 (д), 110,1 (д), 119,4 (с×2), 119,5 (с×2), 125,8 (д), 126,5 (д), 127,7 (д×2), 128,4 (д×2), 129,0 (д×2), 129,1 (д×2), 129,6 (д), 129,7 (д), 130,5 (д×2), 133,1 (д), 134,5 (с), 136',1 (д), 136,2 (д), 138,2 (д), 138,4 (д), 146,6 (с), 146,7 (с), 154,9 (с), 155,3 (с), 163,8 (с×2), 166,1 (с), 167,8 (с), 170,5 (с×2), 195,4 (с), 195,8 (с) | |
53 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,22 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,31 (ддд, J=14,0, 8,5, 2,4 Гц, 1Н), 2,24 (ддд, J=14,0, 9,8, 3,7 Гц, 1Н), 2,94 (ддд, J=8,5, 4,3, 2,4 Гц, 1Н), 2,99 (д, J=7,9 Гц, 2H), 3,05 (дд, J=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 3,61 (т, J=8,5 Гц, 1Н), 3,84 (д, J=1,8 Гц, 2H), 5,08 (дкв, J=6,7, 2,4 Гц, 1Н), 5,55 (дд, J=15,3, 8,5 Гц, 1H), 5,84 (дт, J=15,3, 7,9 Гц, 1H), 6,48 (с, 1H), 7,25 (т, J=7,3 Гц, 1H), 7,31 (т, J=7,3 Гц, 2H), 7,40 (т, J=7,3 Гц, 2H), 9,91 (с, 1H), 10,39 (с, 1H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,0 (кв), 37,3 (т), 43,5 (т), 45,1 (т), 52,2 (д), 54,6 (д), 59,3 (д), 70,3 (д), 102,2 (д), 112,0 (с), 115,0 (с), 126,9 (д), 127,2 (д), 128,9 (д×2), 130,6 (д), 131,2 (д×2), 132,0 (с), 133,5 (с), 154,0 (с), 154,6 (с), 166,9 (с), 203,1 (с) | |
54 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,22 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,30 (ддд, J=14,6, 8,5, 2,3 Гц, 1Н), 2,23 (ддд, J=14,6, 10,4, 3,7 Гц, 1Н), 2,35 (с, 3H), 3,00 (м, 2H), 3,07 (дд, J=15,3, 7,3 Гц, 1H), 3,11 (дд, J=7,9, 1,8 Гц, 1H), 3,76 (т, J=7,9 Гц, 1H), 3,87 (с, 2H), 5,10 (дкв, J=6,1, 3,7 Гц, 1Н), 5,63 (дд, J=15,3, 7,9 Гц, 1Н), 5,91 (ддд, J=15,3, 7,9, 7,3 Гц, 1H), 6,48 (с, 1H), 9,91 (с, 1H), 10,37 (с, 1H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,1 (кв), 30,6 (кв), 37,3 (т), 43,4 (т), 45,2 (т), 48,1 (д), 55,3 (д), 58,0 (д), 70,2 (д), 102,2 (д), 112,1 (с), 115,0 (с), 127,2 (д), 130,0 (д), 132,0 (с), 153,9 (с), 154,6 (с), 166,9 (с), 193,6 (с), 203,0 (с) | |
55 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,22 (д, J=5,5 Гц, 3H), 1,30 (м, 1H), 2,08 (м, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,58 (м, 1H), 3,06 (ушир.с, 1H), 3,20 (дд, J=18,3, 4,9 Гц, 1Н), 3,71 (дд, J=18,3, 11,0 Гц, 1Н), 3,98 (ушир.д, J=3,7 Гц, 2H), 4,80 (д, J=10,4 Гц, 1H), 5,13 (кв-подобный, J=5,5 Гц, 1Н), 5,17 (дд, J=11,0, 10,4 Гц, 1Н), 5,67 (дт, J=11,0, 4,9 Гц, 1H), 6,49 (с, 1H), 9,87 (с, 1H), 10,39 (с, 1H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,3 (кв), 30,6 (кв), 37,8 (т), 40,4 (т), 40,8 (д), 44,2 (т), 52,9 (д), 58,8 (д), 70,2 (д), 102,3 (д), 112,0 (с), 114,6 (с), 126,1 (д), 126,7 (д), 132,5 (с), 154,4 (с), 154,7 (с), 167,2 (с), 193,9 (с), 203,8 (с) | |
56 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,10 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,15-1,24 (м, 1H), 2,04 (дт, J=14,0, 3,1 Гц, 1H), 2,79 (дт, J=6,1, 2,4 Гц, 1H), 2,97 (с, 1H), 3,10-3,20 (м, 1H), 3,33 (с, 3H), 3,35 (с, 3H), 3,56 (д, J=15,9 Гц, 1H), 4,55 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,63 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,60-4,68 (м, 2H), 4,86-4,92 (м, 1H), 5,38 (дд, J=10,4, 4,9 Гц, 1H), 5,75 (д, J=15,9 Гц, 1H), 5,89 (т, J=10,4 Гц, 1H), 6,46 (с, 1H), 7,00-7,06 (м, 1H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 18,1 (кв), 36,4 (т), 44,7 (т), 51,8 (кв), 51,9 (кв), 54,8 (д), 54,9 (д), 65,3 (т), 65,4 (т), 70,4 (д), 98,6 (д), 114,6 (с), 118,6 (с), 129,7 (д), 130,4 (д), 131,7 (с), 136,4 (д), 138,3 (д), 154,2 (с), 154,6 (с), 165,0 (с), 168,3 (с), 168,4 (с), 195,0 (с) | |
57 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,66-0,73 (м, 1Н), 1,02 (ддд, J=14,7, 9,2, 2,4 Гц, 1H), 1,11 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,76-1,84 (м, 3H), 1,98 (ддд, J=1,7, 7,3, 4,3 Гц, 1Н), 2,28 (дд, J=13,4, 6,1 Гц, 1Н), 2,41 (д-подобный, J=9,2 Гц, 1Н), 2,50 (ддд, J=8,5, 3,7, 2,4 Гц, 1Н), 2,86 (дд, J=13,4, 7,3 Гц, 1Н), 3,38 (с, 3H), 3,42 (с, 3H), 3,94-3,98 (м, 1H), 4,52 (с, 2H), 4,68 (с, 2H), 4,78 (ддд, J=13,4, 6,7, 2,4 Гц, 1H), 5,08-5,18 (м, 2H), 6,36 (с, 1H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,1 (кв), 27,5 (т), 32,1 (т), 37,6 (т), 39,0 (т), 51,8 (кв), 51,9 (кв), 55,0 (д), 56,8 (д), 65,4 (т), 65,5 (т), 70,9 (д), 71,5 (д), 97,8 (д), 114,5 (с), 119,3 (с), 128,9 (д), 134,9 (с), 135,2 (д), 153,4 (с), 154,2 (с), 165,9 (с), 168,4 (с), 168,5 (с) | |
58 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,86-0,95 (м, 1Н), 0,93 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,84 (дт, J=14,7, 3,7 Гц, 1Н), 2,73 (дт, J=7,9, 3,1 Гц, 1H), 2,97 (с, 1H), 3,60 (д, J=15,9 Гц, 1H), 3,87 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 4,76-4,83 (м, 1Н), 5,44 (дд, J=10,4, 4,3 Гц, 1Н), 5,78 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 5,94 (т, J=10,4 Гц, 1Н), 7,00 (дд, J=15,9, 10,4 Гц, 1Н), 7,35 (дт, J=7,9, 4,9 Гц, 2H), 7,54 (с, 1H), 8,10 (дт, J=7,9, 1,8 Гц, 1H), 8,17 (дт, J=7,9, 1,8 Гц, 1Н), 8,60 (дт, J=4,3, 1,2 Гц, 2H), 8,88 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 8,94 (д, J=2,4 Гц, 1Н) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 18,1 (кв), 36,2 (т), 44,5 (т), 54,3 (д), 54,8 (д), 71,7 (д), 119,0 (д), 123,8 (с), 124,0 (с), 124,3 (д), 124,4 (д), 126,0 (с), 127,3 (с), 129,6 (д), 130,4 (д), 133,6 (с), 136,5 (д), 137,6 (д), 137,8 (д), 138,5 (д), 146,5 (с), 148,1 (с), 150,5 (д), 150,7 (д), 154,8 (д), 154,9 (д), 162,2 (с), 163,0 (с), 163,2 (с), 194,7 (с) | |
59 | (ДМСО-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 0,93 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,42-1,50 (м, 1H), 2,23-2,40 (м, 1H), 2,79-2,84 (м, 1H), 2,94 (с, 1H), 3,26-3,33 (м, 2H), 4,32 (с, 2H), 4,48 (с, 2H), 4,86-4,94 (м, 1H), 5,34-5,46 (м, 1H), 5,65 (д, J=16,5 Гц, 1H), 6,06 (т, J=10,4 Гц, 1H), 6,37 (с, 1H), 6,70 (дд, J=16,5, 11,0 Гц, 1H), 12,60 (ушир.с, 2H) | (ДМСО-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,7 (кв), 36,0 (т), 44,1 (т), 59,6 (д), 59,7 (д), 65,7 (т), 65,9 (т), 70,8 (д), 99,8 (д), 115,1 (с), 118,6 (с), 130,1 (д), 130,8 (с), 131,7 (д), 132,0 (д), 132,8 (д), 154,1 (с), 166,2 (с), 169,0 (с), 169,1 (с), 169,3 (с), 199,0 (с) | |
60 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,60 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,85 (ддд, J=14,9, 8,5, 3,7 Гц, 1Н), 2,44 (дт, J=14,9, 3,7 Гц, 1Н), 3,12 (дт, J=8,5, 2,7 Гц, 1Н), 3,32 (квинтет, J=2,7 Гц, 1Н), 3,56 (д, J=14,0 Гц, 1Н), 4,97 (д, J=14,0 Гц, 1Н), 5,83 (дд, J=10,7, 2,7 Гц, 1Н), 5,97 (д, J=16,1 Гц, 1Н), 6,28 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 6,29 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 6,30 (ддд, J=11,3, 10,7, 1,5 Гц, 1Н), 7,83 (ддд, J=16,1, 11,3, 1,5 Гц, 1Н), 9,16 (ушир.с, 1H), 10,94 (ушир.с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 18,9 (кв), 36,9 (т), 43,9 (т), 55,7 (д), 56,0 (д), 72,0 (д), 102,8 (д), 106,0 (с), 110,1 (д), 130,6 (д), 131,7 (д), 137,2 (д), 140,3 (с), 141,6 (д), 162,9 (с), 165,5 (с), 170,4 (с), 198,9 (с) | |
61 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,23 (д, J=6,4 Гц, 3H), 2,04 (м, 1H), 2,12 (м, 1H), 2,12-2,25 (м, 3H), 2,39 (дт, J=10,4, 3,0 Гц, 1H), 3,50 (д, J=15,2 Гц, 1H), 3,90 (д, J=15,2 Гц, 1H), 5,09 (двойной секстет, J=6,4, 3,0 Гц, 1Н), 5,29 (ддд, J=15,2, 7,0, 4,3 Гц, 1Н), 5,31 (ддд, J=15,2, 7,6, 4,9 Гц, 1Н), 5,86 (д, J=16,1 Гц, 1Н), 6,09 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,20 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,64 (ддд, J=16,1, 7,6, 6,4 Гц, 1H), 9,92 (ушир.с, 1H), 10,27 (ушир.с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,2 (кв), 30,3 (т), 30,4 (т), 37,9 (т), 45,2 (т), 71,0 (д), 101,4 (д), 108,8 (д), 110,3 (с), 128,3 (д), 129,7 (д), 131,2 (д), 136,6 (с), 148,2 (д), 159,5 (с), 160,2 (с), 168,4 (с), 196,6 (с) | |
62 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,19 (м, 1H), 1,37 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,63 (ддд, J=16,1, 5,2, 4,0 Гц, 1Н), 2,06 (дт, J=16,1, 4,0 Гц, 1Н), 2,27 (м, 1H), 2,29 (м, 1H), 2,47 (дд, J=8,8, 4,6 Гц, 1H), 2,51 (дт, J=9,4, 2,7 Гц, 1Н), 2,80 (ддд, J=5,5, 4,0, 2,7 Гц, 1Н), 3,65 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,65 (д, J=17,7 Гц, 1H), 5,18 (м, 1H), 6,02 (д, J=15,8 Гц, 1H), 6,24 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,27 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,91 (ддд, J=15,8, 11,0, 4,6 Гц, 1H), 9,23 (ушир.с, 1H), 11,91 (ушир.с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 18,1 (кв), 29,8 (т), 31,8 (т), 37,0 (т), 48,2 (т), 55,7 (д), 57,0 (д), 72,5 (д), 102,8 (д), 105,9 (с), 113,9 (д), 131,9 (д), 141,3 (с), 148,6 (д), 163,4 (с), 167,1 (с), 171,9 (с), 196,9 (с) | |
63 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,36 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,50 (м, 2H), 1,59 (м, 2H), 2,03 (м, 1H), 2,10 (м, 1H), 2,30 (дт, J=14,0, 5,5 Гц, 1H), 2,49 (м, 2H), 2,56 (ддд, J=14,0, 3,7, 3,0 Гц, 1H), 3,56 (д, J=17,1 Гц, 1H), 4,36 (д, J=17,1 Гц, 1Н), 5,28 (двойной квинтет, J=6,7, 3,7 Гц, 1Н), 5,45 (дд, J=15,9, 5,5 Гц, 1Н), 5,48 (дд, J=15,9, 5,5 Гц, 1Н), 6,24 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,31 (д, J=2,4 Гц, 1H), 9,19 (ушир.с, 1H), 11,76 (ушир.с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,1 (кв), 22,9 (т), 26,0 (т), 33,0 (т), 38,1 (т), 41,1 (т), 50,4 (т), 73,5 (д), 102,7 (д), 106,2 (с), 113,2 (д), 125,8 (д), 135,2 (д), 140,9 (с), 163,1 (с), 166,4 (с), 171,8 (с), 207,3 (с) | |
64 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,26 (дд, J=12,2, 9,2 Гц, 1H), 1,44 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,76 (д, J=15,9 Гц, 1H), 2,54 (д, J=12,2 Гц, 1H), 2,61 (д, J=9,2 Гц, 1H), 2,87 (ушир.с, 1H), 4,36 (д, J=18,3 Гц, 1H), 4,36 (м, 1H), 4,53 (д, J=18,3 Гц, 1H), 5,21 (ушир.с, 1H), 6,14 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 6,46 (с, 1Н), 6,82 (дд, J=15,9, 9,2 Гц, 1Н) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 18,0 (кв), 37,4 (т), 41,2 (т), 45,7 (т), 55,4 (д), 56,8 (д), 70,5 (д), 73,4 (д), 104,3 (д), 107,8 (с), 116,8 (с), 129,4 (д), 137,2 (с), 150,6 (д), 160,0 (с), 164,2 (с), 171,3 (с), 198,5 (с) | |
65 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,19 (д, J=6,4 Гц, 3H), 2,16 (ддд, J=14,3, 7,6, 6,7 Гц, 1Н), 2,25 (дт, J=12,8, 8,2 Гц, 1Н), 2,36 (ддд, J=12,8, 7,3, 3,4 Гц, 1Н), 2,47 (ддд, J=14,3, 6,7, 3,7 Гц, 1Н), 4,10 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,14 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,24 (м, 1H), 5,20 (м, 1H), 5,23 (дд, J=15,5, 6,1 Гц, 1H), 5,38 (дт, J=15,5, 7,6 Гц, 1H), 5,80 (д, J=15,8 Гц, 1H), 6,35 (с, 1H), 6,69 (дт, J=15,8, 8,2 Гц, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 18,9 (кв), 38,0 (т), 40,8 (т), 45,8 (т), 72,6 (д), 73,5 (д), 104,1 (д), 109,6 (с), 116,7 (с), 126,3 (д), 132,1 (д), 136,6 (с), 137,1 (д), 146,1 (д), 159,9 (с), 162,3 (с), 170,7 (с), 198,7 (с) | |
66 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,28 (д, J=6,4 Гц, 3H), 2,15 (м, 2H), 2,24 (м, 1H), 2,28 (м, 2H), 2,57 (ддд, J=14,6, 8,2, 4,3 Гц, 1H), 4,10 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,33 (д, J=17,7 Гц, 1H), 5,23 (дд-подобный, J=15,2, 7,3 Гц, 1Н), 5,36 (ддд, J=15,2, 8,8, 5,8 Гц, 1Н), 5,37 (дкв, J=6,4, 3,7 Гц, 1H), 5,81 (д, J=15,5 Гц, 1H), 6,57 (с, 1H), 6,65 (дт, J=15,5, 7,3 Гц, 1H), 9,85 (ушир.с, 1H), 11,46 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 18,1 (кв), 31,8 (т×2), 37,3 (т), 46,2 (т), 73,4 (д), 103,8 (д), 108,4 (с), 116,1 (с), 127,7 (д), 131,0 (д), 133,0 (д), 138,0 (с), 147,3 (д), 158,8 (с), 163,5 (с), 170,7 (с), 195,2 (с) | |
67 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,42 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,85 (м, 2H), 3,12 (с, 3H), 3,70 (д, J=16,4 Гц, 1H), 3,86 (м, 1H), 4,20 (д, J=16,4 Гц, 1Н), 4,41 (дд, J=7,9, 4,6 Гц, 1Н), 5,36 (секстет, J=6,4 Гц, 1Н), 5,70 (дд, J=10,0, 9,7 Гц, 1Н), 5,90 (д, J=16,4 Гц, 1H), 6,29 (дд, J=11,3, 10,0 Гц, 1H), 6,43 (с, 1H), 7,29 (дд, J=16,4, 11,3 Гц, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,4 (кв), 37,9 (т), 45,8 (т), 57,4 (кв), 70,1 (д), 71,0 (д), 82,0 (д), 103,6 (д), 114,4 (с), 116,2 (с), 131,7 (д), 132,5 (д), 135,1 (с), 140,8 (д), 142,5 (д), 157,0 (с), 157,2 (с), 168,1 (с), 200,2 (с) | |
68 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,28 (д, J=6,7 Гц, 3H), 2,24 (ддд, J=12,8, 7,3, 4,3 Гц, 1Н), 2,34 (дт, J=14,0, 8,5 Гц, 1Н), 2,48 (ддд, J=14,0, 7,3, 4,9 Гц, 1Н), 2,65 (ддд, J=14,0, 7,3, 4,3 Гц, 1Н), 3,98 (д, J=16,5 Гц, 1Н), 4,04 (д, J=16,5 Гц, 1Н), 4,41 (квинтет, J=4,9 Гц, 1H), 5,37 (м, 1H), 5,38 (м, 1H), 5,52 (дт, J=15,3, 7,9 Гц, 1Н), 5,89 (д, J=15,9 Гц, 1Н), 6,29 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,31 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,73 (ддд, J=15,9, 8,5, 7,3 Гц, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 18,7 (кв), 37,2 (т), 40,7 (т), 48,3 (т), 72,1 (д), 72,8 (д), 102,8 (д), 106,6 (с), 113,2 (д), 125,2 (д), 132,5 (д), 137,6 (д), 141,2 (с), 144,9 (д), 163,0 (с), 165,8 (с), 171,0 (с), 196,8 (с) | |
69 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,37 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,65 (м, 1H), 1,75 (м, 1H), 1,91 (м, 1H), 2,00 (дд, J=15,3, 7,9 Гц, 1H), 2,10 (ддд, J=15,3, 7,9, 3,0 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 2,30 (ддд, J=19,5, 6,7, 3,0 Гц, 1Н), 2,58 (ддд, J=19,5, 10,4, 3,0 Гц, 1Н), 4,12 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 4,23 (дт, J=7,9, 3,0 Гц, 1Н), 4,42 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 5,24 (дд, J=15,3, 7,9 Гц, 1Н), 5,45 (квинтет, J=6,7 Гц, 1Н), 5,50 (ддд, J=15,3, 10,4, 4,3 Гц, 1Н), 6,45 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,5 (кв), 21,0 (т), 32,4 (т), 40,2 (т), 43,1 (т), 47,3 (т), 71,2 (д), 71,8 (д), 104,0 (д), 109,0 (с), 116,6 (с), 133,0 (д), 134,4 (д), 137,2 (с), 159,8 (с), 163,4 (с), 171,5 (с), 208,5 (с) | |
70 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,38 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,46 (м, 1Н), 1,59 (м, 2H), 1,65 (м, 1H), 2,02 (м, 1H), 2,10 (м, 1H), 2,34 (дт, J=14,6, 6,1 Гц, 1H), 2,52 (м, 1H), 2,56 (м, 2H), 4,09 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,48 (д, J=17,7 Гц, 1H), 5,34 (двойной квинтет, J=6,7, 3,0 Гц, 1Н), 5,49 (д, J=15,3, 5,5 Гц, 1Н), 5,50 (дд, J=15,3, 5,5 Гц, 1Н), 6,54 (с, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 19,1 (кв), 23,0 (т), 26,3 (т), 32,8 (т), 38,3 (т), 41,4 (т), 46,9 (т), 73,8 (д), 103,7 (д), 108,4 (с), 115,9 (с), 125,8 (д), 135,4 (д), 137,9 (с), 158,8 (с), 163,3 (с), 171,0 (с), 206,0 (с) | |
71 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,34 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,56 (дт, J=13,4, 1,8 Гц, 1Н), 2,15 (дт, J=12,1, 4,3 Гц, 1Н), 2,96 (дд, J=14,0, 5,5 Гц, 1Н), 3,27 (дд, J=14,0, 6,1 Гц, 1Н), 3,81 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 4,65 (дт, J=11,0, 4,3 Гц, 1Н), 4,68 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 4,78 (ддд, J=12,1, 6,1, 1,8 Гц, 1Н), 5,26 (т, J=11,0 Гц, 1Н), 5,78 (дт, J=15,3, 6,1 Гц, 1Н), 6,04 (дд, J=15,3, 11,0 Гц, 1H), 6,15 (т, J=11,0 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,6 (кв), 44,0 (т), 44,6 (т), 45,2 (т), 65,4 (д), 71,6 (д), 104,0 (д), 114,3 (с), 115,9 (с), 128,4 (д), 129,0 (д), 130,5 (д), 133,9 (д), 135,1 (с), 157,3 (с), 157,7 (с), 168,7 (с), 206,3 (с) | |
72 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,34 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1,73 (ддд, J=14,0, 10,0, 3,4 Гц, 1Н), 2,20 (ддд, J=14,0, 11,6, 5,5 Гц, 1Н) 3,06 (дд, J=15,5, 8,2 Гц, 1Н), 3,29 (ддд, J=15,5, 6,7, 1,8 Гц, 1Н), 3,91 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 4,14 (секстет, J=5,5 Гц, 1Н), 4,48 (д, J=18,3 Гц, 1H), 5,03 (дкв, J=6,1, 3,4 Гц, 1H), 5,64 (м, 1H), 5,65 (м, 1H), 6,10 (дд, J=14,9, 10,7 Гц, 1H), 6,18 (т, J=10,7 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,6 (кв), 42,5 (т), 42,7 (т), 45,0 (т), 71,3 (д), 71,8 (д), 104,1 (д), 113,4 (с), 116,0 (с), 124,9 (д), 128,2 (д), 132,1 (д), 135,8 (с), 136,9 (д), 157,9 (с), 158,5 (с), 168,9 (с), 208,3 (с) | |
73 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,40 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,43 (м, 1H), 1,60 (м, 1H), 1,77 (м, 1H), 1,80 (м, 1H), 1,89 (м, 1H), 1,99 (м, 1H), 2,10 (м, 1H), 2,43 (м, 1H), 2,69 (м, 1H), 2,83 (м, 1H), 3,75 (м, 1H), 4,17 (д, J=18,3 Гц, 1H), 4,25 (д, J=18,3 Гц, 1H), 5,25 (двойной квинтет, J=6,7, 3,0 Гц, 1H), 6,42 (с, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,2 (кв), 31,5 (т), 37,8 (т), 38,3 (т), 39,6 (т), 47,5 (т), 55,2 (д), 55,7 (д), 68,2 (д), 72,6 (д), 104,0 (д), 110,0 (с), 116,1 (с), 136,5 (с), 159,2 (с), 162,4 (с), 170,8 (с), 209,2 (с) | |
74 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,36 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,75-1,84 (м, 2H), 2,03 (ддд, J=15,3, 7,3, 1,8 Гц, 1Н), 2,10 (ддд, J=15,9, 7,9, 3,0 Гц, 1Н), 2,29 (ддд, J=19,5, 6,7, 3,0 Гц, 1Н), 2,54 (ддд, J=19,5, 9,8, 3,0 Гц, 1Н), 3,92 (секстет, J=4,9 Гц, 1Н), 4,08 (д, J=17,7 Гц, 1Н), 4,27 (дт, J=9,8, 2,4 Гц, 1Н), 4,37 (д, J=17,7 Гц, 1Н), 5,33 (дд, J=15,3, 8,5 Гц, 1Н), 5,43 (дд, J=15,3, 8,5 Гц, 1Н), 5,49 (квинтет, J=6,7 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 20,6 (кв), 29,3 (т), 38,0 (т), 43,2 (т), 47,4 (т), 70,9 (д), 71,7 (д), 73,7 (д), 104,1 (д), 108,1 (с), 116,6 (с), 134,6 (д), 135,1 (д), 137,3 (с), 159,9 (с), 163,9 (с), 171,6 (с), 207,7 (с) | |
75 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,58 (ддд, J=15,5, 7,3, 4,3 Гц, 1H), 1,74 (м, 1Н), 1,91 (м, 1H), 1,94 (м, 1H), 2,05 (м, 1H), 2,18 (дт, J=15,5, 2,4 Гц, 1H), 2,40 (дд, J=15,5, 4,0 Гц, 1Н), 2,65 (дд, J=15,5, 10,0 Гц, 1Н), 3,42 (ддд, J=10,0, 7,3, 2,4 Гц, 1H), 3,58 (м, 1H), 3,85 (д, J=18,3 Гц, 1H) 4,27 (д, J=18,3 Гц, 1H), 4,38 (ддд, J=13,4, 6,7, 3,0 Гц, 1H), 5,32 (м, 1H) 5,98 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,14 (д, J=2,4 Гц, 1Н) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 19,0 (кв), 29,2 (т), 31,5 (т), 41,1 (т), 47,9 (т), 52,7 (т), 72,9 (д), 73,0 (д), 77,2 (д), 83,0 (д), 102,9 (д), 108,2 (с), 113,0 (д), 139,2 (с), 163,2 (с), 165,1 (с), 171,8 (с), 208,6 (с) | |
76 | (CD3OD, 500 МГц) δ ч/млн: 1,52 (д, J=6,1 Гц, 3H), 1, 65 (ддд, J=14,6, 8,5, 3,7 Гц, 1Н), 2,43 (дт, J=14,6, 3,7 Гц, 1Н), 3,06 (дт, J=8,5, 2,4 Гц, 1H), 3,35 (м, 1H), 3,64 (дд, J=12,2, 3,7 Гц, 1H), 3,68 (дд, J=12,2, 3,7 Гц, 1Н), 3,92 (д, J=16,5 Гц, 1Н), 4,01 (д, J=16,5 Гц, 1Н), 4,08 (дд, J=6,7, 3,0 Гц, 1Н), 4,17 (дд, J=6,7, 3,0 Гц, 1H), 4,22 (дд, J=6,7, 4,9 Гц, 1H), 5,38 (м, 1H), 5,64 (д, J=4,9 Гц, 1Н), 5,75 (дд, J=10,4, 4,3 Гц, 1Н), 6,06 (д, J=15,9 Гц, 1H), 6,20 (т, J=10,4 Гц, 1H), 6,85 (с, 1H), 7,57 (дд, J=15,9, 10,4 Гц, 1H) | (CD3OD, 125 МГц) δ ч/млн: 18,7 (кв), 37,9 (т), 46,3 (т), 56,5 (д), 56,8 (д), 63,1 (т), 71,0 (д), 72,3 (д), 73,5 (д), 88,4 (д), 103,3 (д), 105,3 (д), 117,1 (с), 117,2 (с), 130,9 (д), 131,7 (д), 134,4 (с), 137,2 (д), 140,7 (д), 156,6 (с), 157,8 (с), 168,4 (с), 199,1 (с) | |
77 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,38 (ддд, J=14,0, 9,2, 3,7 Гц, 1H), 1,40 (д, J=6,1 Гц, 1Н), 2,13 (дд, J=15,3, 7,9 Гц, 1Н), 2,38 (ддд, J=14,0, 11,0, 4,3 Гц, 1Н), 2,75 (ддд, J=8,5, 3,7, 1,8 Гц, 1Н), 2,94 (ддд, J=8,5, 3,7, 2,4 Гц, 1Н), 3,24 (дд, J=15,3, 3,7 Гц, 1Н), 4,24 (д, J=15,3 Гц, 1H), 4,58 (д, J=15,3 Гц, 1H), 5,15 (двойной секстет, J=6,1, 3,7 Гц, 1Н), 5,50 (ушир.д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,17 (ушир.д, J=2,4 Гц, 1Н), 6,52 (с, 1Н) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 20,5 (кв), 28,6 (т), 32,1 (т), 38,3 (т), 54,9 (д), 56,5 (д), 72,3 (д), 103,6 (д), 107,3 (д), 108,3 (д), 113,7 (с), 114,7 (с), 137,6 (с), 150,4 (с), 151,7 (с), 156,4 (с), 156,9 (с), 168,3 (с) | |
78 | (Ацетон-d6, 500 МГц) δ ч/млн: 1,38 (д, J=6,1 Гц, 3H), 2,25 (дт, J=13,7, 10,7 Гц, 1Н), 2,39 (дд, J=13,7, 4,6 Гц, 1Н), 3,18 (д, J=7,3 Гц, 2H), 4,17 (д, J=14,3 Гц, 1H), 4,58 (д, J=14,3 Гц, 1H), 5,40 (м, 1Н), 5,42 (двойной квинтет, J=6,1, 1,8 Гц, 1Н), 5,61 (ддд, J=15,2, 10,4, 4,6 Гц, 1Н), 5,86 (д, J=3,0 Гц, 1Н), 6,08 (д, J=3,0 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H) | (Ацетон-d6, 125 МГц) δ ч/млн: 21,1 (кв), 27,9 (т), 31,4 (т), 39,9 (т), 71,7 (д), 103,2 (д), 106,4 (д), 107,1 (д), 113,5 (с), 114,4 (с), 128,3 (д), 131,7 (д), 138,8 (с), 151,7 (с), 151,9 (с), 156,2 (с), 156,7 (с), 167,0 (с) |
Пример испытания 1
Экспрессия мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы:
Клетки сосочков дермы человека, которые были закуплены у фирмы Toyobo, культивировали в MEM (Invitrogen), содержащей 12% FBS. Клетки волосяных фолликул человека отделяли от волос в соответствии со способом Arase et al. (J. Dermatol. Sci., 2, 66-70 (1991)) и культивировали с использованием KGM-2 (Sanko Junyaku).
Клетки сосочков дермы в пассаже 5 и клетки волосяных фолликул в пассаже 2 высевали в 10-см чашку с получением плотности 2×106 клеток/лунка и культивировали в течение 2 ночей. После удаления среды клетки промывали PBS(-) и всю РНК экстрагировали при помощи реагента TRIzol (Invitrogen). Используя 50 нг от всего количества РНК, 0,4 мкМ праймеров, специфических к WNT-5A или глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназе (GAPDH) [WNT-5A прямой: AATGTCTTCC AAGTTCTTCC TAGTGGC (SEQ ID NO:8), WNT-5A обратный: GATGTCGGAA TTGATACTGG CA (SEQ ID NO:9), GAPDH прямой: ACCACAGTCC ATGCCATCAC (SEQ ID NO:10) и GAPDH обратный: TCCACCACCC TGTTGCTGTA (SEQ ID NO:11)], и SUPERSCRIPT One-Step RT-PCT с PLATINUM Taq (Invitrogen), осуществляли ОТ-ПЦР в соответствии с протоколом, прилагаемым к SUPERSCRIPT One-Step RT-PCT с PLATINUM Taq. Вкратце, синтез первой цепи осуществляли при 50°C в течение 30 минут в реакционной системе общим объемом 25 мкл. После нагревания до 94°C в течение 2 минут, каждый фрагмент кДНК амплифицировали в 23 или 20 циклах, при этом каждый цикл включал 30 секунд при 94°C, 30 секунд при 55°C и 30 секунд при 72°C.
Каждый реакционный раствор подвергали электрофорезу в 1,5% агарозном геле и окрашивали бромидом этидия. Результаты представлены на Фиг. 1.
В случае использования РНК, извлеченной из клеток сосочков дермы (DPC), наблюдали замечательную амплификацию фрагмента кДНК в 23-цикловой ПЦР при использовании WNT-5A-специфических праймеров. В случае использования РНК, выделенной из клеток волосяных фолликул (HFC), никакого продукта амплификации не наблюдали в аналогичных условиях.
Пример испытания 2
Измерение активности по снижению количества мРНК WNT-5A:
Клетки сосочков дермы человека, которые были закуплены у фирмы Toyobo, культивировали в MEM (Invitrogen), содержащей 12% FBS.
Клетки сосочков дермы в пассаже 5 высевали в 12-луночный планшет с получением плотности 1,6×105 клеток/лунка и культивировали в течение ночи. Затем среду заменяли средой, к которой не было добавлено никакого соединения, или средой, содержащей Соединение 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9 или 24, и культивирование продолжали еще в течение 24 часов. После завершения культивирования каждую среду удаляли и клетки промывали PBS(-). Затем всю РНК экстрагировали при помощи реагента TRIzol (Invitrogen). Используя 50 нг от всего количества РНК, 0,4 мкМ праймеров, специфических к WNT-5A или GAPDH [WNT-5A прямой: AATGTCTTCC AAGTTCTTCC TAGTGGC (SEQ ID NO:8), WNT-5A обратный: GATGTCGGAA TTGATACTGG CA (SEQ ID NO:9), GAPDH прямой: ACCACAGTCC ATGCCATCAC (SEQ ID NO:10) и GAPDH обратный: TCCACCACCC TGTTGCTGTA (SEQ ID NO:11)], и SUPERSCRIPT One-Step RT-PCT с PLATINUM Taq (Invitrogen), осуществляли ОТ-ПЦР в соответствии с протоколом, прилагаемым к SUPERSCRIPT One-Step RT-PCT с PLATINUM Taq. Вкратце, синтез первой цепи осуществляли при 50°C в течение 30 минут в реакционной системе общим объемом 25 мкл. После нагревания до 94°C в течение 2 минут, фрагмент кДНК WNT-5A или GAPDH амплифицировали в 23 или 20 циклах, при этом каждый цикл включал 30 секунд при 94°C, 30 секунд при 55°C и 30 секунд при 72°C.
Каждый реакционный раствор подвергали электрофорезу в 1,5% агарозном геле и окрашивали бромидом этидия. Результаты представлены на Фиг. 2.
В 23-цикловой ПЦР с использованием WNT-5A-специфических праймеров амплификация фрагментов кДНК WNT-5A заметно уменьшалась в культурах с соединениями в сравнении с культурой, к которой не добавляли никакого соединения.
В 20-цикловой ПЦР с использованием GAPDH-специфических праймеров, с другой стороны, не наблюдали никакого изменения в количестве амплифицированных фрагментов кДНК, независимо от присутствия или отсутствия соединений.
Пример испытания 3
Испытание активности по промотированию роста клеток сосочков дермы:
Клетки сосочков дермы человека, которые были закуплены у фирмы Toyobo, культивировали в MEM (Invitrogen), содержащей 12% FBS.
Клетки сосочков дермы в пассаже 5 высевали в 96-луночный планшет для сфероидальной культуры с получением a плотности 1,5×104 клеток/лунка и культивировали в течение ночи. Затем среду заменяли средой, к которой не было добавлено никакого соединения, или средой, содержащей Соединение 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9 или 24, и культивирование продолжали еще в течение 72 часов. После завершения культивирования клетки подсчитывали, используя набор для подсчета клеток (Wako Pure Chemicals). За пять часов до завершения культивирования к каждой среде добавляли реагент WST-1 в количестве 1/10 от количества среды и затем по окончании культивирования измеряли оптическую плотность (О.П. 450 нм/620 нм) среды. Положительную корреляцию между количеством клеток и оптической плотностью наблюдали в пределах от 0,25 до 4×104 клеток/лунка.
В результате было выяснено, что соединение, обладающее активностью по снижению количества мРНК WNT-5A, обладает активностью промотирования роста клеток сосочков дермы (Фиг. 3). На этой Фиг. каждое цифровое значение представляет собой среднее значение для 6 лунок (контрольная группа) или 3 лунок (группы испытания). Для сравнения контрольной группы с группами испытания использовали t-критерий Стьюдента:
*: P<0,05, **: P<0,01, ***: P<0,001.
Описанные выше Примеры испытаний показывают, что WNT-5A экспрессируется в клетках сосочков дермы человека, количество мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы снижается при использовании соединения по настоящему изобретению, и соединение, обладающее активностью снижения количества мРНК WNT-5A, обладает активностью промотирования роста клеток сосочков дермы.
Пример испытания 4
Активность соединений (Таблица 2) по снижению количества мРНК WNT-5A (определение количества мРНК методом QuantiGene)
Клетки сосочков дермы человека, которые были закуплены у фирмы Toyobo, культивировали в MEM (Invitrogen), содержащей 12% FBS.
Клетки сосочков дермы в пассаже 5 высевали в 96-луночный планшет с получением плотности 1×104 клеток/лунка и культивировали в течение ночи. Затем среду заменяли средой, к которой не было добавлено никакого соединения, или средой, содержащей соединения, и культивирование продолжали еще в течение 24 часов. После завершения культивирования количество мРНК WNT-5A или GAPDH измеряли, используя набор QuantiGene High Volume Kit (Bayer Medical), методом амплификации сигнала разветвленной ДНК (рДНК) (Drug Metabolism and Disposition, 28(5), 608-616(2000)). В соответствии с протоколом, прилагаемым к набору QuantiGene High Volume Kit, клетки лизировали, используя Lysis Mixture, и лизисный раствор добавляли к чашке для улавливания микроорганизмов. Затем добавляли набор зондов, специфических к WNT-5A или GPDH, и давали прореагировать при 53°C в течение 20 часов. После промывки чашки при помощи 0,1×SSC, содержащего 0,03% лаурилсульфат, добавляли зонд для амплификации, включающий рДНК, и давали прореагировать при 46°C в течение 1 часа. После промывки чашки добавляли зонд для мечения, меченный щелочной фосфатазой, и давали прореагировать при 46°C в течение 1 часа. После промывки чашки добавляли субстрат Lumi-Phos Plus и давали прореагировать при 46°C в течение 30 минут. Затем измеряли флуоресценцию, используя WALLAC 1420ARVOSX.
Был сконструирован набор WNT-5A-специфических зондов на основе последовательности кодирующей области мРНК WNT-5A человека. В качестве распространителей захвата (CEs) использовали 10 зондов (SEQ ID NO:12-21); в качестве распространителей метки (LEs) использовали 31 зонд (SEQ ID NO:22-52) и в качестве блокаторов использовали 9 зондов (SEQ ID NO:53-60).
В качестве набора GAPDH-специфических зондов использовали набор зондов рДНК для GAPDH человека (XenoTech LLC, B0960).
Количества мРНК WNT-5A и GAPDH выражали в относительных величинах (%) по отношению к контролю, где не было добавления соединения, и концентрацию соединения, при которой количество мРНК уменьшалось наполовину (ИК50), рассчитывали как показатель активности по снижению количества мРНК WNT-5A для соответствующего соединения.
Таблица 3 показывает эффект соединений на количество мРНК WNT-5A и GDPH. Каждое цифровое значение в таблице представляет собой среднее значение для 2 лунок. Эти соединения снижали количество мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы. Значение ИК50 для наиболее активного соединения составило 0,12 мкМ. При ИК50 концентрации каждого соединения для подавления мРНК WNT-5A, не наблюдалось никакого снижения количества мРНК GAPDH, измеренного в это же время.
Таблица 3 | ||
ИК 50 (мкМ) | ||
Соединение № | WNT-5A | GAPDH |
1 | 0,20 | 28,25 |
2 | 0,39 | 26,41 |
3 | 3,16 | 57,95 |
4 | 3,46 | >30 |
5 | 3,47 | >30 |
7 | 4,07 | >120 |
18 | 0,63 | 6,58 |
24 | 4,74 | 21,07 |
35 | 0,46 | 4,29 |
38 | 6,42 | >120 |
52 | 0,12 | 13,47 |
53 | 0,12 | 45,45 |
54 | 2,37 | >30 |
55 | 0,74 | >30 |
58 | 0,50 | 79,95 |
65 | 8,28 | 109,16 |
68 | 10,69 | 50,63 |
73 | 9,37 | >120 |
76 | 8,56 | 55,94 |
77 | 8,13 | >120 |
79 | 0,90 | 38,16 |
Пример испытания 5
Активность соединений по промотированию роста клеток сосочков дермы (Таблица 2):
Клетки сосочков дермы человека, которые были закуплены у фирмы Toyobo, культивировали в MEM (Invitrogen), содержащей 12% FBS.
Клетки сосочков дермы в пассаже 5 высевали в 96-луночный планшет для сфероидальной культуры с получением плотности 1,5×104 клеток/лунка и культивировали в течение ночи. Затем среду заменяли средой, к которой не было добавлено никакого соединения, или средой, содержащей соединение, и культивирование продолжали еще в течение 72 часов. После завершения культивирования клетки подсчитывали, используя набор для подсчета клеток (Wako Pure Chemicals). За пять часов до завершения культивирования к каждой среде добавляли реагент WST-1 в количестве 1/10 от количества среды и затем по окончании культивирования измеряли оптическую плотность (О.П. 450 нм/620 нм) среды. Положительную корреляцию между количеством клеток и оптической плотностью наблюдали в пределах от 0,25 до 4×104 клеток/лунка.
Таблица 4 показывает эффект соединений, обладающих активностью снижения количества мРНК WNT-5A на рост клеток сосочков дермы. В этой таблице каждое цифровое значение представляет собой среднее значение для 6 лунок (контрольная группа) или 3 лунок (группы испытания). Для сравнения контрольной группы с группами испытания использовали t-критерий Стьюдента:
*: P<0,05, **: P<0,01, ***: P<0,001.
Каждое из соединений, обладающих активностью снижения количества мРНК WNT-5A, показало замечательную активность промотирования роста клеток сосочков дермы при концентрации 16 мкМ. Каждое из соединений 1, 2, 18, 35, 52, 53 и 58 показало сильную активность по снижению количества мРНК WNT-5A (т.е., ИК50 ниже, чем 1 мкМ), а также показало значительную активность по промотированию роста при 1 мкМ.
Таблица 4 | |||
Соед.№ | Δ О.П. 450 нм/620 нм (% от контроля | ||
1 | 4 | 16 (мкМ) | |
1 | 132,9±11,6*** | 183,7±12,1*** | 144,7±13,0*** |
2 | 142,6±10,1*** | 167,3±8,5*** | 241,0±25,3*** |
3 | 92,9±1,6 | 92,9±9,9 | 244,2±33,4*** |
4 | 97,4±24,4 | 148,2±4,9*** | 180,2±6,9*** |
5 | 110,2±45,0 | 174,7±29,2*** | 236,4±26,4*** |
7 | 82,6±3,9 | 169,7±10,4*** | 194,8±12,7*** |
18 | 115,6±9,0* | 147,1±11,3*** | 210,9±25,9*** |
24 | 108,2±6,9 | 104,3±10,5 | 119,7±3,7** |
35 | 160,8±3,5*** | 181,6±3,7*** | 158,6±18,3*** |
38 | 103,5±2,6 | 89,6±7,3 | 124,9±5,1** |
52 | 124,5±1,0*** | 143,2±9,5*** | 197,0±5,4*** |
53 | 126,6±14,3** | 149,5±12,8*** | 184,4±3,6*** |
54 | 80,0±2,4 | 97,1±5,6 | 135,0±0,9*** |
55 | 89,0±1,8 | 126,9±7,2*** | 175,6±9,8*** |
58 | 123,3±1,8*** | 150,4±9,4*** | 217,4±14,5*** |
65 | 92,1±6,7 | 87,6±8,7 | 141,0±5,3*** |
73 | 91,7±5,7 | 81,2±7,8 | 205,6±9,2*** |
76 | 80,0±5,6 | 77,1±7,0 | 120,7±6,3* |
77 | 81,6±4,4 | 86,3±5,0 | 180,8±21,7*** |
79 | 87,5±9,9 | 98,6±3,6 | 120,0±4,1** |
*: p<0,05, **: p<0,01, ***: p<0,001
Пример испытания 6
Уменьшение количества мРНК WNT-5A в органной культуре кожи обезьяны
Кожу спины обезьяны Cynomolgus (Macaca fascicularis) (самцы возраста 6 лет) собирали и разделяли на кусочки (5 мм × 8 мм) под стереоскопическим микроскопом. Затем каждый кусок ткани кожи культивировали в среде Е William (Invitrogen), к которой не добавляли никакого соединения или добавляли Соединение 7 или Соединение 3 и которая содержала 10 мкг/мл инсулина (Sigma) и 10 нг/мл гидрокортизона (Kurabo).
На 11-й день культивирования волосяные фолликулы отделяли от каждого куска ткани кожи и экстрагировали всю РНК при помощи реагента TRIzol (Invitrogen). Используя части по 200 нг от общего количества РНК, по 0,4 мкМ праймеров, специфических к WNT-5A или глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназе (GAPDH) [WNT-5A смысловой: AATGTCTTCC AAGTTCTTCC TAGTGGC (SEQ ID NO:8), WNT-5A антисмысловой: GATGTCGGAA TTGATACTGG CA (SEQ ID NO:9), GAPDH смысловой: ACCACAGTCC ATGCCATCAC (SEQ ID NO:10) и GAPDH антисмысловой: TCCACCACCC TGTTGCTGTA (SEQ ID NO:11)], и SUPERSCRIPT One-Step RT-PCT с PLATINUM Taq (Invitrogen), осуществляли ОТ-ПЦР в соответствии с протоколом, прилагаемым к SUPERSCRIPT One-Step RT-PCT с PLATINUM Taq. Вкратце, синтез первой цепи осуществляли при 50°C в течение 30 минут в реакционной системе общим объемом 25 мкл в соответствии с протоколом, прилагаемым к SUPERSCRIPT One-Step RT-PCT с PLATINUM Taq. После нагревания до 94°C в течение 2 минут, фрагмент кДНК WNT-5A или GPDH амплифицировали в 40 или 30 циклах, при этом каждый цикл включал 30 секунд при 94°C, 30 секунд при 55°C и 30 секунд при 72°C.
Каждый реакционный раствор подвергали электрофорезу в 1,5% агарозном геле и окрашивали Cyber Green (Takara). Результаты представлены на Фиг. 4.
В 40-цикловой ПЦР с использованием WNT-5A-специфических праймеров количество амплифицированного фрагмента кДНК WNT-5A заметно снижалось в культуре при добавлении Соединения 7 или Соединения 3 в сравнении с культурой, к которой не добавляли никакого соединения.
В 30-цикловой ПЦР с использованием GAPDH-специфических праймеров, с другой стороны, не наблюдалось никакого изменения количества амплифицированного фрагмента кДНК, независимо от присутствия или отсутствия соединений.
Пример испытания 7
Увеличение пролиферативных клеточно-нуклеарный антиген(PCNA)-положительных клеток в органной культуре кожи обезьяны:
Кожу спины обезьяны Cynomolgus (Macaca fascicularis) (самцы возраста 6 лет) собирали и разделяли на кусочки (5 мм × 8 мм) под стереоскопическим микроскопом. Затем каждый кусок ткани кожи культивировали в среде Е William (Invitrogen), к которой не добавляли никакого соединения или добавляли Соединение 7 или Соединение 3 и которая содержала 10 мкг/мл инсулина (Sigma) и 10 нг/мл гидрокортизона (Kurabo).
На 30-й день культивирования каждый кусочек кожи фиксировали с использованием 10% нейтрализованного формалина при комнатной температуре. Готовили срез, погруженный в парафин. После добавления 1% BSA-содержащего PBS давали выстояться при комнатной температуре в течение 30 минут и затем кипятили в 0,1 M растворе цитратного буфера. Затем осуществляли взаимодействие с анти-PCNA антителом (Dako Japan, 200-кратное разбавление) при 4°C в течение ночи и затем осуществляли взаимодействие с биотинилированным анти-мышиным IgG антителом. Затем осуществляли взаимодействие со стандартным набором ABC (vector) и воздействовали веществом AEC (Sigma) для проявления цвета.
В результате, наблюдали положительную реакцию в клетках в волосяных фолликулах и эпидермальном базальном слое. В фолликулах наблюдали сильно заметное увеличение количества PCNA-положительных клеток в сосочках дермы и верхнем слое кожи, как в телогенных, так и анагенных волосяных фолликулах (Фиг. 5).
Пример испытания 8
Увеличение диаметра волосяной луковицы в органной культуре кожи обезьяны:
Кожу спины обезьяны Cynomolgus (Macaca fascicularis) (самцы возраста 6 лет) собирали и разделяли на кусочки (5 мм × 8 мм) под стереоскопическим микроскопом. Затем каждый кусок ткани кожи культивировали в среде Е William (Invitrogen), к которой не добавляли никакого соединения или добавляли Соединение 7 или Соединение 3 и которая содержала 10 мкг/мл инсулина (Sigma) и 10 нг/мл гидрокортизона (Kurabo).
На 30-й день культивирования все фолликулы, содержащиеся в каждом кусочке ткани кожи, отделяли, и диаметр луковиц измеряли под стереоскопическим микроскопом.
Результаты представлены на Фиг. 6 и 7. На этих фигурах каждое цифровое значение представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка (S.E.) диаметра луковиц всех фолликул, содержащихся в каждом кусочке ткани кожи. Для сравнения контрольной группы с группами испытания использовали t-критерий Стьюдента:
*: P<0,05.
На этих фигурах также представлены гистограммы, показывающие распределение диаметра луковиц. Все фолликулы, содержащиеся в каждом кусочке ткани кожи, распределены на группы по диаметру луковиц, как показано на фигурах, и количество фолликул в каждой группе представляет собой относительную величину (%) от общего числа фолликул, выделенных их куска ткани. Фиг. 6 показывает эффект, достигаемый после культивирования в присутствии Соединения 7. После культивирования в присутствии Соединения 7 в течение 30 дней средний диаметр луковиц фолликул, содержащихся в кусочке ткани кожи, был значительно больше, чем у контрольной группы, где не добавляли никакого соединения. Как показывает дистрибуция, контрольная группа, к которой не добавляли никакого соединения, показала наибольшее число фолликул в группе с диаметром 140 мкм или больше, но меньше чем 170 мкм, тогда как группа, к которой добавляли Соединение 7, показала наибольшее число фолликул в группе с диаметром 170 мкм или больше, но меньше чем 200 мкм. Доля фолликул с диаметром луковицы 170 мкм или больше в группе, которой не добавляли никакого соединения, составила 57,6%, тогда как эта доля в группе, которой добавляли Соединение 7, увеличивалась до 82,4%.
С другой стороны, Фиг. 7 показывает эффект, достигаемый после культивирования в присутствии Соединения 3. Аналогично случаю с Соединением 7, после культивирования в присутствии Соединения 3 в течение 30 дней средний диаметр луковиц фолликул, содержащихся в кусочке ткани кожи, был значительно больше, чем у контрольной группы, которой не добавляли никакого соединения. Как показывает дистрибуция, контрольная группа, к которой не добавляли никакого соединения, показала наибольшее число фолликул в группе с диаметром 140 мкм или больше, но меньше чем 170 мкм, тогда как группа, которой добавляли Соединение 3, показала наибольшее число фолликул в группе с диаметром 200 мкм или больше, но меньше чем 230 мкм. Доля фолликул с диаметром луковицы 170 мкм или больше в группе, которой не добавляли никакого соединения, составила 55,8%, тогда как эта доля в группе, которой добавляли Соединение 7, увеличивалась до 74,5%.
Пример испытания 9
Испытание роста волос у медвежьих макак:
На лоб медвежьих макак (Macaca arctoides) (самцы возраста 14 лет), страдающих алопецией, наносили 1 мл лосьона, содержащего 0,3% Соединения 7, раз в день в течение 6 месяцев по 5 раз в неделю. До начала применения участок алопеции в области лба помечали татуировкой. Часть кожи, включающую татуировку, фотографировали до начала применения и после применения в течение 6 месяцев.
На Фиг. 8 представлены увеличенные фотографии кожи до и после применения лосьона, содержащего Соединение 7, в течение 6 месяцев. До применения наблюдали много волос, представляющих собой тонкий пушок. На этом же участке после применения в течение 6 месяцев, наоборот, уменьшилось количество тонкого пушка и увеличилось количество толстых у основания волос. То есть, подтверждается, что алопеция в области лба у медвежьих макак явно уменьшалась при применении лосьона, содержащего Соединение 7, в течение 6 месяцев.
Результаты приведенных выше Примеров испытаний показывают, что WNT-5A экспрессируется в клетках сосочков дермы человека, количество мРНК WNT-5A в клетках сосочков дермы человека уменьшается при применении соединения по настоящему изобретению, и соединение, обладающее активностью по снижения количества мРНК WNT-5A, обладает активностью промотирования роста клеток сосочков дермы.
Также показано, что соединение по настоящему изобретению вызывает снижение количества мРНК WNT-5A также и в органной культуре кожи обезьяны, это соединение вызывает замечательное увеличение количества положительных к PCNA-окрашиванию пролиферативных клеток, как в телогенных, так и в анагенных волосяных фолликулах, и это соединение увеличивает размер луковиц фолликул.
Кроме того, показано, что соединение по настоящему изобретению обладает эффектом уменьшения алопеции у медвежьих макак, которые являются животной моделью алопеции мужского типа.
Таким образом, можно сказать, что соединение, промотирующее рост клеток сосочков дермы, будет повышать способность роста клеток, которая была понижена в сосочках дермы в фолликулах на участке алопеции и, таким образом, способствует образованию хорошо развитой ткани сосочков дермы, промотируя, тем самым, рост волос.
ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ
Ингибитор функции WNT-5A, например, соединение, обладающее активностью снижения количества мРНК WNT-5A, или его фармацевтически приемлемая соль обладает активностью промотирования роста клеток сосочков дермы и, поэтому, является полезным в качестве стимулятора роста волос/тоника для роста волос с новым функциональным механизмом.
Настоящее изобретение предлагает совершенно новую идею использования соединения, ингибирующего функцию WNT-5A, в качестве средства уменьшения или предотвращения алопеции, которое было до сих пор неизвестно, и скрининг такого соединения, ингибирующего функцию WNT-5A, является полезным для разработки нового стимулятора роста волос/тоника для роста волос.
Claims (1)
- Соединение, представленное формулой (I)где R1 и R2 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, C1-6-алкильную группу или С2-6-алканоильную группу;Х представляет собой атом водорода или атом галогена;R3а и R3b являются разными, и каждый из них представляет собой атом водорода или гидроксильную группу; иR4, R5, R6, R7, R8 и R9 являются одинаковыми или разными, и каждый из них представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, атом галогена или С2-6-алканоилоксигруппу, или указанные группы, которые являются смежными, вместе образуют π связь или эфирную связь, или R5 и R8 или R5 и R9 вместе образуют эфирную связь.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2002115529 | 2002-04-17 | ||
JP2002-115529 | 2002-04-17 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004133555A RU2004133555A (ru) | 2005-06-10 |
RU2312863C2 true RU2312863C2 (ru) | 2007-12-20 |
Family
ID=29243425
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004133555/04A RU2312863C2 (ru) | 2002-04-17 | 2003-04-17 | Тоник для роста волос |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20050182129A1 (ru) |
EP (1) | EP1498104A4 (ru) |
JP (1) | JPWO2003086334A1 (ru) |
CN (1) | CN1652743A (ru) |
CA (1) | CA2482940A1 (ru) |
RU (1) | RU2312863C2 (ru) |
WO (1) | WO2003086334A1 (ru) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008179540A (ja) * | 2005-01-07 | 2008-08-07 | Noevir Co Ltd | 細胞分化、発生、増殖を制御する物質および該物質を含む細胞分化・発生・増殖調節剤 |
KR20070120559A (ko) * | 2005-03-29 | 2007-12-24 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실베니아 | 새로운 모낭 생성 방법, 탈모 치료 방법 및 체모 제거 방법 |
US7815903B2 (en) * | 2005-06-22 | 2010-10-19 | Aligarh Muslim University | Process for commercial production of biopesticides |
US7601852B2 (en) * | 2006-05-11 | 2009-10-13 | Kosan Biosciences Incorporated | Macrocyclic kinase inhibitors |
CN103539769B (zh) * | 2006-08-11 | 2016-03-16 | 斯特拉斯堡大学 | 用作激酶抑制剂和hsp90抑制剂的大环化合物 |
MX2010007755A (es) * | 2008-01-15 | 2010-12-21 | Univ Strasbourg | Sintesis de lactonas de acido resorcilico utiles como agentes terapeuticos. |
US20110190237A1 (en) * | 2008-01-15 | 2011-08-04 | Nexgenix Pharmaceuticals | Macrocyclic Prodrug Compounds Useful as Therapeutics |
AU2009217315B2 (en) * | 2008-02-21 | 2014-09-04 | Oncosynergy, Inc. | Macrocyclic prodrug compounds useful as therapeutics |
EP2483259A1 (en) * | 2009-09-28 | 2012-08-08 | Universite De Strasbourg | Irreversible inhibitors useful for the treatment of kinase-related pathologies |
US8846723B2 (en) | 2010-07-29 | 2014-09-30 | Eastman Chemical Company | Esters of O-substituted hydroxy carboxylic acids and preparations thereof |
US8613940B2 (en) | 2010-09-03 | 2013-12-24 | Eastman Chemical Company | Carbonate derivatives as skin care |
US8329938B2 (en) | 2011-02-21 | 2012-12-11 | Eastman Chemical Company | Hydroxyalkanoic acid and hydroxyalkanoice acid oligomer esters of retinol |
CN102265877B (zh) * | 2011-07-22 | 2013-01-23 | 中国科学院华南植物园 | β-雷琐酸大环内酯在有害螺类防治中的用途 |
CN117379543A (zh) * | 2017-08-20 | 2024-01-12 | 加州大学董事会 | 治疗青光眼的Wnt5a的调节 |
KR20230098211A (ko) | 2020-10-30 | 2023-07-03 | 닛산 가가쿠 가부시키가이샤 | 지질펩티드와 자당에스테르를 포함하는 조성물 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3239345A (en) * | 1965-02-15 | 1966-03-08 | Estrogenic compounds and animal growth promoters | |
FR96016E (fr) * | 1966-06-29 | 1972-05-19 | Commercial Solvents Corp | Composé utilisable comme supplément alimentaire pour les animaux. |
US3687982A (en) * | 1971-03-09 | 1972-08-29 | Commercial Solvents Corp | Separation of mixed diastereoisomers of zearalanol |
GB9225396D0 (en) * | 1992-12-04 | 1993-01-27 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
US5795910A (en) * | 1994-10-28 | 1998-08-18 | Cor Therapeutics, Inc. | Method and compositions for inhibiting protein kinases |
JPH09202781A (ja) * | 1996-01-25 | 1997-08-05 | Sankyo Co Ltd | ラディシコール誘導体 |
EP1267616B1 (en) * | 2000-03-31 | 2007-08-08 | The General Hospital Corporation | Methods of increasing hair growth by wnt polypeptide |
ATE328888T1 (de) * | 2000-08-25 | 2006-06-15 | Sloan Kettering Inst Cancer | Radicicol und monocillin und ihre analogen und ihre anwendungen |
-
2003
- 2003-04-17 WO PCT/JP2003/004884 patent/WO2003086334A1/ja active Application Filing
- 2003-04-17 US US10/511,632 patent/US20050182129A1/en not_active Abandoned
- 2003-04-17 CA CA002482940A patent/CA2482940A1/en not_active Abandoned
- 2003-04-17 RU RU2004133555/04A patent/RU2312863C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-04-17 CN CNA038113252A patent/CN1652743A/zh active Pending
- 2003-04-17 JP JP2003583359A patent/JPWO2003086334A1/ja active Pending
- 2003-04-17 EP EP03717623A patent/EP1498104A4/en not_active Withdrawn
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ХЕЙМС Б., ХИГГИНС С. (ред.) Транскрипция и трансляция. Методы. - М.: Мир, 1987, с. 277-362. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1652743A (zh) | 2005-08-10 |
AU2003227410A1 (en) | 2003-10-27 |
CA2482940A1 (en) | 2003-10-23 |
EP1498104A1 (en) | 2005-01-19 |
WO2003086334A1 (fr) | 2003-10-23 |
EP1498104A4 (en) | 2006-05-03 |
RU2004133555A (ru) | 2005-06-10 |
US20050182129A1 (en) | 2005-08-18 |
JPWO2003086334A1 (ja) | 2005-08-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2312863C2 (ru) | Тоник для роста волос | |
JP3153212B2 (ja) | イソクロマン化合物およびその製造方法 | |
JPH08175990A (ja) | Pi3キナーゼ阻害剤とその製造法 | |
JP2007291075A (ja) | 新規化合物ステレニン及びその製造方法 | |
US5443972A (en) | Process to prepare leustroducsins | |
JP3807784B2 (ja) | 新規ペプチド、その製法、それを含有する細胞周期阻害剤 | |
US5994412A (en) | Bis-aryl ethers, compositions containing such compounds and methods of treatment | |
US8952140B2 (en) | Compound amycolose derivative, method for producing the same, and use of the same | |
JP3786461B2 (ja) | 新生理活性物質 | |
JP2001031564A (ja) | テロメレース阻害剤 | |
KR20050109958A (ko) | Gm-95 물질을 함유하는 항종양 효과 증강제, 항종양용조합 제제 및 항종양제 | |
CN102746220A (zh) | 新颖吡啶生物碱、其制备方法及这些吡啶生物碱的用途 | |
KR100427411B1 (ko) | 아스퍼질러스 속 F70609(KCTC18055P)와 β-글루코시다제 저해제 | |
JP3078806B2 (ja) | 抗真菌ラクトン化合物 | |
KR20220022111A (ko) | 항산화 및 신경보호 활성을 갖는 마크로사이클 | |
WO2001046451A1 (fr) | Migrastatine, procede de production et compositions medicales correspondants | |
JPH0725880A (ja) | Pi3キナーゼ阻害剤及びその製造法 | |
KR100663188B1 (ko) | 신규한 헵타트리에노산으로 치환된 이중환 케톤 유도체 및이를 포함하는 약제학적 조성물 | |
JPH11130795A (ja) | Ym−175201物質 | |
JPH07112995A (ja) | 化合物tan−1711,その製造法および用途 | |
CN113939519A (zh) | 促进毛发生长的新化合物及包含它们的组合物 | |
JP2000500646A (ja) | パピラシル酸、調製のための方法及び生物活性物質のためのシントンとしての使用 | |
JPH11246469A (ja) | ナフタセンジオン誘導体 | |
JPH10168009A (ja) | ビナフタレン誘導体 | |
JPH09143119A (ja) | セスキテルペン誘導体およびその製造方法並びにそれを有効成分とするicam−1発現抑制剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090418 |