RU2136306C1 - Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция - Google Patents

Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция Download PDF

Info

Publication number
RU2136306C1
RU2136306C1 RU95107153/14A RU95107153A RU2136306C1 RU 2136306 C1 RU2136306 C1 RU 2136306C1 RU 95107153/14 A RU95107153/14 A RU 95107153/14A RU 95107153 A RU95107153 A RU 95107153A RU 2136306 C1 RU2136306 C1 RU 2136306C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
protein
mannitol
alanine
lyophilisate
buffer
Prior art date
Application number
RU95107153/14A
Other languages
English (en)
Other versions
RU95107153A (ru
Inventor
Бэйол Ален (FR)
Бэйол Ален
Брель Тьерри (FR)
Брель Тьерри
Дюпен Патрис (FR)
Дюпен Патрис
Фор Филипп (FR)
Фор Филипп
Original Assignee
Санофи
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Санофи filed Critical Санофи
Publication of RU95107153A publication Critical patent/RU95107153A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2136306C1 publication Critical patent/RU2136306C1/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81—Packaged device or kit

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение может быть использовано в медицине и фармации для создания препаратов, содержащих протеины. Лиофилизат содержит буфер, аланин и маннитол. Массовое соотношение аланин : маннитол 1 : 0,1 - 1. В качестве протеина могут содержаться фермент оксидаза-урат, гормон hGH, интерлейкин - 13. В качестве буфера - фосфатный буфер. Аланин может содержаться в кристаллической форме, маннитол - в аморфной. Протеин, содержащийся в композиции, остается стабильным при комнатной температуре. Содержание воды в лиофилизате совместимо с сохранением активности протеина. 7 з.п.ф-лы, 6 табл., 5 ил.

Description

Изобретение относится к фармацевтически приемлемой композиции, находящейся в форме лиофилизата и содержащей протеин в качестве действующего начала. Эта композиция стабильна при 25oC и может быть переведена в жидкую форму путем добавки растворителя. Ее можно вводить парентерально человеку или животному или использовать в анализирующем наборе.
Известно, что составы таких композиций обладают значительным разрушающим воздействием на протеины в процессе лиофилизации, а также сильно влияют на их стабильность в лиофилизированной форме. Конкретные переменные композиции, влияющие на эти свойства, представляют собой главным образом pH, количество присутствующих солей, тип и количество экципиентов, выбранный тип криозащиты, а также выбранные температуру, давление и продолжительность операций замораживания, сублимации и высушивания. Эти различные переменные влияют также на физическое состояние полученного лиофилизата, а именно аморфное стеклообразное, аморфное мягкое, кристаллическое или их сочетание.
Роль каждой из этих переменных исследовалась в отдельности, но их синергический эффект еще плохо выяснен (Pikai M.J., Dellermann K.M., Roy M.Z., Riggin M.N., Fhe effects of formulation variables on the stability of freeze-dried Human Growth Hormone, Pharm. Research, 1991, 8, N4, 427-236).
Имеющаяся информация о влиянии аминокислот и многоатомных спиртов на свойства лиофилизируемых растворов или лиофилизатов позволяет сделать следующие заключения.
Преимущества и недостатки, связанные с присутствием аминокислот, маннитола, кристаллической или аморфной фаз, перечислены ниже.
Преимущества, связанные с присутствием аминокислот.
Показано, что наличие глицина в лиофилизате индуцирует кристаллизацию молекул, присутствующих в растворе, в процессе стадии замораживания во время лиофилизации (Korey D. J. , Schwartz J. B., Effects of excipients on the cristallization of pharmaceutical compounds during lyophylization, J. Parenteral Sci. Tech., 1989, 43, 2, 80-83).
Эта кристаллизация действующего начала, однако, маловероятная в случае протеинов, позволяет улучшить его стабильность.
Кроме того, аланин в кристаллизованной форме препятствует созданию лиофилизата в процессе сублимации и высушивания и позволяет получать лиофилизат с более высокой удельной поверхностью, что позволяет достичь более быстрого его высыхания (Pikai M.J., Freeze-drying of proteins, Biopharm. 26 - 30 октября 1990).
Недостатки, связанные с присутствием аминокислот.
Добавка аминокислоты к сахару или многоатомному спирту, находящемуся в лиофилизирующем растворе, обычно вызывает снижение температуры стеклоперехода сахара (te Booy MPWH de Ruiter R.A., de Meere ALJ, Evaluation of the physical stability of freeze-dried sucrose containing formulations by differential scanning calorimetry, Pharm. Research, 1992, 9, 109-114).
Однако снижение температуры стеклоперехода обычно сопровождается ухудшением стабильности лиофилизата (Frauks Z., Freeze-drying; from empiricism to predictability. Cryo-Letters, 1990, 11, 93-110).
Преимущества, связанные с присутствием маннитола.
Наличие маннитола в аморфной форме в присутствии протеина гарантирует наличие некристаллизационной воды, связанной с протеином, в процессе замораживания, и таким образом препятствует денатурации протеина. Кроме того, наличие многоатомных спиртов стабилизирует протеины от терморазрушений за счет гидрофобных взаимодействий (Back J.F., Oakenfull D., Smith M.B., Increased thermal stability of proteins in the presense of sugars and polyols, Biochemistry, 1979, 18, 23, 5191-96).
Недостатки, связанные с присутствием маннитола.
Известно, что маннитол не позволяет сохранять активность фермента при 37oC в противоположность лактозе (Ford A.W., Dawson P.J., The effect of carbo-Rydrate additives in the freeze-drying of alkaline phosphatase, J. Pharm. Pharmacol., 1993, 45 (2), 86 - 93).
Преимущества, связанные с присутствием кристаллической фазы.
Наличие кристаллизованного растворенного вещества в замороженном растворе благоприятствует стабилизации протеинов в процессе высушивания (Carpenter J.F., and Crowe J.H., Modes of stabilization of a protein by organic solutes during dessication, Cryobiology, 1988, 25, 459 - 470).
Недостатки, связанные с присутствием кристаллической фазы.
Показано, что потеря активности лиофилизированного протеина прямо связана со степенью кристалличности криозащищающей молекулы (Izutsu K.I., Joshioka S. , Terao T., Decreased protein-stabilizing effects of cryoprotectants due fo crystallization, Pharm. Research. 1993, 10, N 8, 1232 - 1237).
В лекарственных средствах, содержащих протеины, следует избегать кристаллизации экципиентов (Hermansky M., Pesak M., Zyophilization of drugs. VI Amorphous and Crystalline forms. Cesk. Farm., 1993, 42 (2), 95 - 98).
Преимущества, связанные с присутствием аморфной фазы.
Наличие добавок, находящихся в аморфном состоянии, стабилизирует активность некоторых ферментов пропорционально концентрации добавки (Izufzu K.I., Joshioka S. , Terao T. Decreased protein-stabilizing effects of cryoprotectants due to crystallization, Pharm. Research, 1993, 10, N 8, 1232 - 1237).
Криозащитный эффект экципиентов объясняется аморфным состоянием глицина в полученном лиофилизате (Pikai M.J., Dellermann K.M., Roy M.Z., Riggin M.N. , The effects of formulation variables on the stability of freeze-dried Human Growth Hormone, Pharm. Research, 1991, 8, N 4, 427 - 436).
Недостатки, связанные с присутствием аморфной фазы.
В присутствии только одной твердой аморфной фазы лиофилизат оседает при температурах выше температуры стеклоперехода в процессе замораживания.
В мягкой аморфной фазе разрушительные химические реакции имеют намного более высокую кинетику, чем в кристаллической фазе.
Таким образом, обзор научной литературы позволяет сделать вывод о противоречивом характере влияния экципиентов на стабилизацию протеинов. Нет никакой единой теории о связи между структурой лиофилизата и его стабильностью. Кроме того, не описывается роль многоатомных спиртов и аминокислот, взятых в отдельности или в сочетании друг с другом, в зависимости от совокупности их общих свойств, однако были получены противоречивые результаты в зависимости от изучаемых протеинов и используемых количеств экципиентов.
В настоящее время заявителем было обнаружено, что имеется синергическое воздействие маннитола и аланина на стабилизацию лиофилизированных протеинов. Доказано, что это синергическое воздействие существует только в области относительных концентраций каждого из этих экципиентов. Оптимальный эффект имеет место для соотношения R, где R обозначает отношение: масса маннитола/масса аланина, присутствующих в лиофилизате, в интервале значений 0,1 - 1, особенно 0,2 - 0,8.
Кроме того, показано, что при R = 0,1 - 1: лиофилизат образован аморфной фазой и кристаллической фазой; аморфная фаза большей частью образована маннитолом и протеином; кристаллическая фаза в большинстве своем образована аланином.
Эффект стабилизации протеинов объясняется согласно предложенным гипотезам тем, что в указанном интервале соотношений: образованная аморфная фаза криозащищает протеин в процессе замораживания; кристаллическая фаза фиксирует структуру лиофилизата и позволяет устранить его разрушение.
Этот неожиданный синергический эффект, возникающий при сосуществовании аморфной фазы и кристаллической фазы, стабилизирует лиофилизированный протеин.
Настоящее изобретение относится таким образом к лиофилизированным формам композиций, содержащим эффективное количество биологически активного протеина, буфер для доведения pH оптимального значения для стабилизации протеина, аланин и маннитол, причем эти два последних экципиента находятся в массовом соотношении R = масса маннитола/масса аланина, составляющем 0,1 - 1. Протеин, содержащийся в вышеуказанной композиции, остается стабильным в лиофилизированной форме. Полученный лиофилизат быстро и полностью растворяется. Внешний вид лиофилизата не нарушен и содержание в нем воды совместимо с сохранением активности протеина.
В эту композицию могут быть введены другие фармацевтически приемлемые и хорошо известные специалисту экципиенты, например сорастворители, консерванты, антиоксиданты или хелатирующие агенты.
Более конкретно настоящее изобретение касается стабилизированных протеинсодержащих лиофилизатов, содержащих главным образом протеин, криозащищенный твердой аморфной фазой, и маннитол, причем эта аморфная фаза в лиофилизате, полученном после сублимации и высушивания замороженного раствора, существует одновременно с кристаллической фазой, образованной главным образом аланином.
Биологически активный протеин, который используют согласно настоящему изобретению, может представлять собой гликозилированный или нет природный, синтетический, полусинтетический или рекомбинантный полипептид такой, который используют в клинической или лабораторной практике. Более конкретно, вышеуказанным протеином может быть, например, гормон, как гормон роста, предпочтительно человеческого роста (hGH); гормон желтого тела (лютеиновый гормон) (LH-RH); гонадотропин. Протеин также может представлять собой фермент, например тромболитический фермент, такой как урокиназа, проурокиназа, стрептокиназа, стафилокиназа, тканевый активатор плазминогена (tPA), или такой фермент, как фосфатаза, сульфатаза, ацил-трансфераза, моноамино-оксидаза, оксидаза-урат.
Протеин согласно настоящему изобретению может также представлять собой цитокин, например интерлейкин-2 (IL-2), интерлейкин-4 (IL-4), интерлейкин-6 (IL-6) или интерлейкин-13 (IL-13). Другой класс протеинов согласно настоящему изобретению включает, например, антитела, иммуноглобулины, иммунотоксины. Пептиды, такие как холецистокинин (CCK), вещество P, нейрокинин A, нейрокинин B, нейротензин, нейропептид Y, эледоизин, бомбезин, могут вводить в композиции согласно настоящему изобретению.
Предпочтительным биологически активным протеином является hGH (или человеческий гормон роста), оксидаза-урат или интерлейкин-13.
Человеческий гормон роста представляет собой протеин, образованный одной полипептидной цепью из 191-й аминокислоты с двумя дисульфидными мостиками между цистеиновыми остатками 53 и 165 и цистеиновыми остатками 182 и 189.
Оксидаза-урат представляет собой фермент, который окисляет мочевую кислоту в аллантоин и экстрагируется из биомассы Aspergillus flavus (Zaboureur и др., Bull. Soc. Chim. Biol., 1968, 50, 811 - 825).
Этот фермент используют для лечения гиперурикемии в течение последних двадцати лет.
кДРНК (кодирующая дезоксирибонуклеиновая кислота), кодирующая этот протеин, недавно была клонирована и экспрессирована в E. coli (LEGOUX R. и др., J. of Biol. Chem., 1992, 267, 12, 8565 - 8570); Aspergillus flavus и Saccharomyces cerevisiae.
Фермент представляет собой тетрамер с идентичными субъединицами молекулярных масс, близких к 3200. Мономер, образованный одной полипептидной цепью из 301-й аминокислоты, не содержит дисульфидных мостиков и ацетилирован на N-конце.
Интерлейкин-13 представляет собой цитокин, образованный одной полипептидной цепью из 112 аминокислот с двумя дисульфидными мостиками (Minty и др., Nature, 1993, 362, 248 - 250).
Сосуществование аморфной (маннитол + протеин) фазы с кристаллической аланиновой фазой не зависит от наличия и концентрации буфера, регулирующего pH раствора, но зависит от вышеуказанного соотношения R.
Для получения протеинсодержащих композиций, которые можно было бы предложить для широкого использования в качестве терапевтических средств, необходимо выпускать их в достаточно стабильном состоянии, чтобы сохранить их биологическую активность между моментом изготовления и моментом использования. Например, композицию на основе гормона роста hGH можно получать многочисленными способами, например, описанными в следующих патентах или заявках на патенты: патент США 5 096 885; ВОИС 89/09614; ВОИС 92/17200; патент Австралии 30771/89; ВОИС 91/19773; ВОИС 93/19776.
Композиции согласно изобретению могут храниться при комнатной температуре, тогда как композиции, содержащие эти протеины и имеющиеся в настоящее время в продаже, нужно хранить при температурах 2 - 8oC.
В большинстве случаев выпускаемой фармацевтической формой является лиофилизированная, замороженная или форма раствора. Они содержат протеин, буфер, глицин, аргинин, маннитол, цинк, поверхностно-активные агенты, декстран, ЭДТК или другие экципиенты, но никогда не содержит комбинацию аланин/маннитол в массовом соотношении R = 0,1 - 1. (EP 0178665, US 5266310, EP 0396777, US 4992419).
Лиофилизированные или замороженные формы используются для сохранения биохимической целостности и биологической активности молекулы. Лиофилизированные формы перед использованием нужно разбавлять с помощью стерильных фармацевтически приемлемых растворителей, таких как дистиллированная вода, водные 0,9%-ные растворы хлорида натрия или водные 5%-ные растворы глюкозы, или любой другой физиологически приемлемый растворитель, возможно содержащий антибактериальные консерванты, такие как бензиловый спирт, фенол или мета-крезол.
Композиция, стабильная при комнатной температуре до момента ее разведения, особенно предпочтительна для амбулаторного лечения, как в случае гормона hGH, она выпускается в форме флакона или в форме многоразовой ручки шприца.
Такие виды упаковки могут также входить в дозировочный набор.
Согласно настоящему изобретению предпочтение отдается лиофилизованной форме композиции. Этот лиофилизат получают путем лиофилизации из раствора.
Способ получения этой композиции включает стадии смешения, растворения, фильтрации и лиофилизации.
Состав лиофилизируемого раствора следующий: протеин, фармацевтически приемлемый буфер для регулирования pH, аланин, маннитол, причем массовое соотношение R = масса маннитола/масса аланина составляет 0,1 - 1; вода для инъекцируемого препарата.
Лиофилизируемый раствор готовят следующим образом.
Раствор протеина получают на колонке гель-фильтрации, он содержит буфер, поддерживающий pH-значение в области, совместимой со стабильностью протеина.
В этот раствор добавляют желаемое количество буфера, аланина, маннитола и воды для растворения всех экципиентов. Раствор отфильтровывают в стерильных условиях и распределяют по емкостям, предпочтительно флаконам.
Лиофилизацию растворов проводят следующим образом.
Раствор подвергают циклу замораживания, затем сублимации и высушивания с учетом лиофилизируемого объема и емкости, в которой содержится раствор. Предпочтительно выбирают скорость замораживания, близкую к 2oC/мин в лиофилизаторе Usi-froid (Франция) типа SMH15, или SMJ 100, или SMH2000.
Время, температуру и давление высушивания лиофилизата выбирают в зависимости от объемов лиофилизируемого раствора и желательного содержания остаточной воды в лиофилизате.
Полная информация о способах приготовления инъекцируемых формулировок дается для специалиста в Remington's Pharmaceutical Sciences, 1985, 17-e издание; или в William N.A. and Polli J.P., The lyophilization of pharmaceuticals: литературный обзор. J.Parenteral Sci: Tech., 1984, 38 (2), 48-59: или в Franks J., Freeze-drying: from empiricism to predictability, Cryo-Letters, 1990, 11, 93-110.
Получают лиофилизат, в котором аланин находится в кристаллизованной форме, а маннитол - в аморфной форме. Лиофилизат можно хранить при 25oC без ухудшения биологической активности протеина.
Настоящее изобретение иллюстрируется на примерах с протеином hGH или оксидазы-урата. Так готовят несколько растворов, содержащих hGH или оксидазу-урат в качестве биологически активного протеина, фосфатный буфер различных концентраций с pH 7 для растворов, содержащих hGH (с 4 UI/0,5 мл), и с pH 8 для растворов, содержащих оксидазу-урат (с 30 UAE/мл); только маннитол, только аланин и смесь аланин/маннитол, затем их лиофилизируют и анализируют.
Составы описываются подробно в примерах табл. 1 и 2, представленных ниже. Методы анализа, а также время и температуры сохранения устойчивости описываются ниже.
Аналитические методы, которые используют для определения различных параметров, следующие.
Содержание димеров и родственных веществ с более высокими молекулярными массами.
Содержание димеров и родственных веществ с более высокими молекулярными массами определяют путем эксклюзивной хроматографии (SEC-HPLC), используя колонку SUPERO SE 12 (Pharmacia, реф. 17-0538-01). Продукт элюируют с помощью буферного раствора фосфата аммония с pH 7,0 (1,38 г дигидрофосфата аммония в 1 литре воды при доведении pH-значения до 7 с помощью концентрированного раствора аммиака с дебитом 0,4 мл/мин). Сбор данных осуществляют при 220 нм (это содержание, приведенное в результатах анализа, выражается в процентах /олигомеров + полимеров).
Содержание димеров и веществ с более высокой молекулярной массой также можно определять по методу, описанному в монографии Европейской фармакопеи "Somatropine pour preparation nizectable", январь 1994 г.
Количественное определение протеина путем хроматографии с обратной фазой.
Выражаемое в мг на флакон количество протеина определяют с помощью хроматографии с обратной фазой, используя колонку C18-300 ангстрем длиной 25 см, диаметром 4,6 мм (SYNCHROM, реф. CR 103-25). Продукт элюируют в течение 35 минут градиентным методом при использовании мобильной фазы, пропуская от 75 объемов воды с 0,1% трифторуксусной кислоты (по объему) (ТФК) и 25 объемов ацетонитрила с 0,08% ТФК (по объему) до 30 объемов воды с 0,1% ТФК и 70 объемов ацетонитрила с 0,08% ТФК. Дебит составляет 1 мл в минуту и определение осуществляют при 220 нм.
Количественное определение ферментативной активности оксидазы-урата.
Ферментативную активность оксидазы-урата в UAE определяют с помощью спектрофотометрии в термостатируемой кювете при 30oC, по исчезновению полосы мочевой кислоты при 292 нм, согласно Legoux R., Delpech Brunc, Dumont X., Guillemout J. C. , Ramond P., Shire D., Caput D., Ferrara P., Loison G., J. Biol, Chem., 1992, 267 (12), 8565-8570.
Мутность растворов растворенных веществ.
Мутность растворов, содержащих hGH лиофилизатор, определяют путем спектрофотометрии (Ph. Eur, 2(1), т. 619) при 500 нм на спектрофотометре Perkin Elmer 554. Результаты представлены в единицах поглощения х 1000.
Мутность растворов, содержащих оксидазу-урат в лиофилизате, определяют с помощью турбидиметра Ratio Hach 18900-00. Результаты определения мутности выражают в нефелометрических единицах мутности (NTU), определяемой согласно: Standard mefhods for examination of wafer and wastewafer de l'American Public Healfh Association.
Степень опалесценции также определяют по методу, указанному в Европейской Фармакопее (II), т. 6, путем сравнения анализируемого образца с контрольной суспензией.
Органолептические критерии лиофилизатов.
Эти критерии изучают визуально, принимая во внимание цвет лиофилизата, его структуру (разрушена или нет), а также наблюдают за возможным фазовым смещением между наружным слоем и сердцевиной лиофилазата.
Рентгеновский структурный анализ порошка.
Рентгеновский структурный анализ лиофилизатов осуществляют на дифрактометре СИМЕНС D 500 ТТ: источник: CuKα1; генератор: 40 кВ, 25 мА; экранированный монохроматор; щели: 1/1/1/0,16/0,6; отбор образцов на пирексовом носителе; область сканирования (развертки): 4 - 40o в минуту в виде 2 тета Bragg.
Дифференциальный термический анализ.
Исследование лиофилизатов с помощью дифференциального термического анализа осуществляют в следующих условиях:
аппаратура: DSC 7 Perkin Elmer; эталонирование: индий и свинец,
отбор пробы: между 5 и 10 мг в капсуле емкостью 50 мкл;
начальная температура: 10oC; скорость нагрева 10oC в минуту;
конечная температура: 300oC.
Дезамидированные формы hGH.
Процент дезамидированных форм определяют путем анионообменной хроматографии (AEX - HPLC), используя анионообменную колонку (PHARMACIA моно-Q HR 5/5, реф. 17-0546-01). Элюирование осуществляют с помощью раствора А (13,8 г дигидрофосфата аммония в 1000 мл воды; pH=7, доводимое с помощью концентрированного раствора аммиака) и воды в качестве раствора B, используя следующую программу: 5% раствора A в течение 2-х минут; затем пропускание с 15% раствора A в течение 5 минут; после этого пропускание с 50% раствора A в течение 20 минут; наконец, пропускание со 100% раствора A в течение 5 минут и поддерживание этого последнего раствора в течение 5 минут. За элюированием hGH (пропускание около 15 минут) и дезамидированных форм наблюдают при 220 нм. Дебит составляет 1 мл в минуту.
Результаты этих различных методов анализа представлены ниже.
Содержание димеров и родственных веществ с более высокой молекулярной массой.
Содержание суммы олигомеров с полимерами в лиофилизатах, включающих 4UI hGH, поглощенных 0,5 мл воды, определяют в зависимости от соотношения R (фиг. 1). На фиг. 1 показано, что минимальное содержание олигомеров с полимерами в растворах получают при R = 0,1 - 1, причем величина 0,1 получается путем интерполяции кривой.
В качестве дополнительного примера, наблюдают за стабильностью при 25oC и 35oC двух партий: hGH с концентрацией 4UI и 8UI. Их стабильность превосходная после хранения в течение 6 месяцев.
В нижеприведенных табл. 3 и 4 указываются содержания в процентах олигомеров и полимеров, дезамидированных форм в различное время и при разных температурах по сравнению с нормами Европейской Фармакопеи. В этих таблицах R = 0,45.
Определение ферментативной активности оксидазы-урата.
Ферментативную активность лиофилизатов, содержащих 30 UAE оксидазы-урата, поглощенных 1 мл воды, определяют в зависимости от соотношения R спустя 1 месяц при 35oC (см. фиг. 2). На фиг. 2 показано, что начальная ферментативная активность оксидазы-урата сохраняется спустя 1 месяц при 35oC при R = 0,4 - 1.
В качестве дополнительного примера состав с R = 0,45 или R = 0,67 совершенно стабилен спустя 3 месяца при 25oC (остаточная активность близка к 100% активности во время нуль).
Мутность растворенных форм лиофилизата.
Мутность растворов лиофилизатов, содержащих 4 UI hGH, поглощенных 0,5 мл воды, определяют в зависимости от соотношения R (см. фиг. 3). На фиг. 3 показано, что минимальная мутность растворов достигается при R = 0 - 1,5.
Мутность растворов лиофилизатов, содержащих 30 UEA оксидазы-урата, поглощенных 1 мл воды, определяют в зависимости от соотношения R (см. фиг. 4). На фиг. 4 показано, что получаемая минимальная мутность растворов достигается при R = 0,2 - 1.
Органолептические критерии лиофилизатов.
Органолептические критерии каждого лиофилизата, содержащего 4 UI hGH или 30 UEA оксидазы-урата или не содержащего никакого протеина и изменяемые содержания фосфатного буфера, определяют в зависимости от значения R и эти параметры приводятся в табл. 5. В табл. 5 показано, что лиофилизаты обладают удовлетворительными органолептическими критериями при R = 0,125 - 1,7. Эти характеристики не изменяются в зависимости от времени.
Дифракция рентгеновских лучей (X-лучей).
Результаты рентгеноструктурного анализа порошковой формы полученных лиофилизатов, содержащих смеси аланина с маннитолом в соотношениях R, изменяющихся от 0 до + ∞, представлены в табл. 5.
Полученные дифрактограммы показывают, что при R = 0 - 1 проявляются одни линии кристаллической решетки аланина, более того, отклонение от базовой линии дифрактограммы указывает на наличие аморфной фазы, образованной маннитолом. Чем выше значение R, тем более значительной становится аморфная фаза за счет маннитола. Для R > 1 маннитол также кристаллизуется.
Для R = 0 - 1 получают аморфную фазу, образованную маннитолом, и кристаллическую фазу, образованную аланином.
Дифференциальный термический анализ.
Температуры стеклоперехода лиофилизатов, содержащих 4 UI hGH или 30 UAE оксидазы-урата или не содержащих никакого протеина, и изменяемые содержания фосфатных буферов определяют в зависимости от инверсии соотношения R (см. фиг. 5). На фиг. 5 показано, что максимальная температура стеклоперехода, получаемая в случае лиофилизатов, содержащих смеси аланина с маннитолом, достигается при (I/R) > 1, т.е. при R = 0 - 1.
Температура стеклоперехода лиофилизата представляет собой максимальную температуру стабильности лиофилизата. Максимальная температура стабильности лиофилизата, следовательно, достигается для R = 0 - 1.
Дезамидированные формы.
Результаты, полученные с партиями 4 UI и 8 UI, показывают очень незначительные изменения, которые совместимы с нормами монографии по соматропину Европейской Фармакопеи. Эти результаты позволяют полагать, что этот состав достаточно стабилен при 25oC.
В заключение, обнаружено, что каждое свойство лиофилизатов, является оптимальным для интервала значений R, который в общем виде соответствует табл. 6.
Каждый аналитический критерий /% олигомеры + полимеры, стабильность hGH, ферментативная активность оксидазы-урата спустя 1 месяц при 35oC, мутность растворов hGH, мутность растворов оксидазы-урата, внешний вид лиофилизатов, один кристаллический аланин, максимальная температура стеклоперехода дает конкретный оптимальный интервал для каждого свойства. Для того чтобы получить приемлемый состав, определяют предпочтительный интервал R, т.е. 0,1 < R < 1.
Примеры, приведенные в конце описания, иллюстрируют изобретение, не ограничивая его объема охраны.

Claims (8)

1. Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция, содержащая буфер, аланин и маннитол, отличающаяся тем, что массовое соотношение аланин : маннитол составляет 1:0,1-1.
2. Стабилизированная протеинсодержащая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве протеина она содержит гормон, фермент или цитокин.
3. Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что в качестве протеина она содержит гормон hGH.
4. Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что в качестве протеина она содержит фермент оксидаза - урат.
5. Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что в качестве протеина она содержит цитокин интерлейкин - 13.
6. Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит аланин в кристаллической форме, а маннитол - в аморфной.
7. Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит аморфную фазу, образованную маннитолом и протеином, и кристаллическую фазу, образованную аланином.
8. Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве буфера она содержит фосфатный буфер.
RU95107153/14A 1994-05-04 1995-05-03 Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция RU2136306C1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9405486 1994-05-04
FR9405486A FR2719479B1 (fr) 1994-05-04 1994-05-04 Formulation stable lyophilisée comprenant une protéine: kit de dosage.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU95107153A RU95107153A (ru) 1997-11-27
RU2136306C1 true RU2136306C1 (ru) 1999-09-10

Family

ID=9462880

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU95107153/14A RU2136306C1 (ru) 1994-05-04 1995-05-03 Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция

Country Status (25)

Country Link
US (1) US5763409A (ru)
EP (1) EP0682944B1 (ru)
JP (1) JP2948125B2 (ru)
KR (1) KR100273053B1 (ru)
CN (1) CN1088583C (ru)
AT (1) ATE178484T1 (ru)
AU (1) AU694763B2 (ru)
CA (1) CA2148537C (ru)
CZ (1) CZ286195B6 (ru)
DE (1) DE69508837T2 (ru)
DK (1) DK0682944T3 (ru)
ES (1) ES2131781T3 (ru)
FI (1) FI117321B (ru)
FR (1) FR2719479B1 (ru)
GR (1) GR3030146T3 (ru)
HU (1) HU220220B (ru)
IL (1) IL113578A (ru)
MX (1) MX9502034A (ru)
NO (1) NO320364B1 (ru)
NZ (1) NZ272045A (ru)
PL (1) PL179240B1 (ru)
RU (1) RU2136306C1 (ru)
SI (1) SI0682944T1 (ru)
TW (1) TW397687B (ru)
ZA (1) ZA953596B (ru)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001030373A1 (fr) * 1999-10-28 2001-05-03 Institut Neftekhimicheskogo Sinteza Imeni A.V.To Pchieva Rossiiskoi Akademii Nauk (Inkhs Ran) Composition polypeptidique
WO2012125066A1 (ru) * 2011-03-17 2012-09-20 Эспосито Трейдинг Лтд. Способ получения лиофилизированной субстанции
WO2012134332A1 (ru) * 2011-03-24 2012-10-04 Эспосито Трейдинг Лтд. Способ получения фибринолитического препарата и его применение для лечения инфаркта миокарда

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US6685940B2 (en) 1995-07-27 2004-02-03 Genentech, Inc. Protein formulation
JPH11510170A (ja) * 1995-07-27 1999-09-07 ジェネンテック インコーポレーテッド タンパク質の処方
DE19539574A1 (de) * 1995-10-25 1997-04-30 Boehringer Mannheim Gmbh Zubereitungen und Verfahren zur Stabilisierung biologischer Materialien mittels Trocknungsverfahren ohne Einfrieren
FR2740686B1 (fr) 1995-11-03 1998-01-16 Sanofi Sa Formulation pharmaceutique lyophilisee stable
EP0852951A1 (de) * 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
FR2768341B1 (fr) * 1997-09-18 2000-04-14 Lab Francais Du Fractionnement Composition pharmaceutique placebo lyophilisable destinee a imiter un medicament, notamment a base de proteines ou de polypeptides
EP0913177A1 (de) * 1997-11-03 1999-05-06 Roche Diagnostics GmbH Verfahren zur Herstellung trockener, amorpher Produkte enthaltend biologisch aktive Materialien mittels Konvektionstrocknung, insbesondere Sprühtrocknung
EP0913178A1 (en) * 1997-11-03 1999-05-06 Boehringer Mannheim Gmbh Process for the manufacture of dry, amorphous products comprising biologically active material by means of convection drying and products obtainable by the process
WO1999047174A1 (en) * 1998-03-18 1999-09-23 Cambridge Biostability Limited Amorphous glasses for stabilising sensitive products
CA2362927C (en) * 1999-02-22 2011-07-12 University Of Connecticut Novel albumin-free factor viii formulations
US6653062B1 (en) 2000-07-26 2003-11-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Preservation and storage medium for biological materials
JP4129178B2 (ja) * 2000-11-07 2008-08-06 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド 安定化されたインターフェロン組成物
US6887462B2 (en) * 2001-04-09 2005-05-03 Chiron Corporation HSA-free formulations of interferon-beta
WO2003035030A1 (en) * 2001-10-24 2003-05-01 Pari Gmbh Kit for the preparation of a pharmaceutical composition
CA2484876C (en) 2002-05-13 2011-11-22 Becton, Dickinson And Company Protease inhibitor sample collection system
US6803046B2 (en) * 2002-08-16 2004-10-12 Bracco International B.V. Sincalide formulations
JP2008500942A (ja) * 2003-01-08 2008-01-17 カイロン コーポレイション 組織因子経路インヒビターまたは組織因子経路インヒビター改変体を含有する安定化凍結乾燥組成物
GB0304636D0 (en) * 2003-02-28 2003-04-02 Britannia Pharmaceuticals Ltd Pharmaceutical composition for nasal delivery
DE10333317A1 (de) * 2003-07-22 2005-02-17 Biotecon Therapeutics Gmbh Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA)
GB0404586D0 (en) * 2004-03-01 2004-04-07 Britannia Pharmaceuticals Ltd Improvements in or relating to organic materials
US11229746B2 (en) 2006-06-22 2022-01-25 Excelsior Medical Corporation Antiseptic cap
CN106890144A (zh) 2006-11-07 2017-06-27 赛诺菲巴斯德生物制剂有限责任公司 冻干法稳定疫苗
EP2170268A2 (en) * 2007-06-25 2010-04-07 Amgen, Inc. Compositions of specific binding agents to hepatocyte growth factor
GB0715285D0 (en) * 2007-08-06 2007-09-12 Britannia Pharmaceuticals Ltd Improvements in or relating to powdered medicaments for nasal delivery
US9078992B2 (en) 2008-10-27 2015-07-14 Pursuit Vascular, Inc. Medical device for applying antimicrobial to proximal end of catheter
JP5779780B2 (ja) 2008-11-07 2015-09-16 バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ 第ｖｉｉｉ因子製剤
EP2350649A4 (en) * 2008-11-28 2012-11-14 Abbott Lab STABLE ANTIBODY COMPOSITIONS AND METHODS FOR STABILIZING THE SAME
PL2496246T3 (pl) * 2009-11-03 2018-09-28 Grifols Therapeutics Llc Kompozycja, sposób i zestaw dla inhibitora proteinazy alpha-1
CN102762224A (zh) * 2009-12-22 2012-10-31 塞尔德克斯医疗公司 疫苗组合物
CN103796704B (zh) 2011-07-12 2016-12-07 博讯瓦勒公司 用于将抗微生物剂递送到经皮导管中的装置
CN103917643B (zh) * 2011-11-22 2020-06-05 西门子医疗保健诊断公司 包含用于复原为校准和/或质量控制溶液的干燥试剂的设备，及其生产和使用方法
US20140017318A1 (en) * 2012-07-10 2014-01-16 Kevin O'Connell Method to produce a medicinal product comprising a biologically active protein and the resulting product
US9314519B2 (en) 2012-08-21 2016-04-19 Intervet Inc. Liquid stable virus vaccines
US9393298B2 (en) 2013-03-15 2016-07-19 Intervet Inc. Liquid stable bovine virus vaccines
US9480739B2 (en) 2013-03-15 2016-11-01 Intervet Inc. Bovine virus vaccines that are liquid stable
AR097762A1 (es) 2013-09-27 2016-04-13 Intervet Int Bv Formulaciones secas de vacunas que son estables a temperatura ambiente
RU2683823C2 (ru) 2013-09-27 2019-04-02 Ханми Фарм. Ко., Лтд. Препарат гормона роста человека длительного типа
AR099470A1 (es) 2014-02-17 2016-07-27 Intervet Int Bv Vacunas de virus de aves de corral líquidas
TWI670085B (zh) 2014-02-19 2019-09-01 荷蘭商英特威國際公司 液體穩定之豬病毒疫苗
EP3294404A4 (en) 2015-05-08 2018-11-14 ICU Medical, Inc. Medical connectors configured to receive emitters of therapeutic agents
CA2989110A1 (en) 2015-06-11 2016-12-15 Attwill Medical Solutions Inc. Medical devices, systems, and methods utilizing antithrombin-heparin compositions
CA3040277A1 (en) 2016-10-14 2018-04-19 Icu Medical, Inc. Sanitizing caps for medical connectors
WO2018204206A2 (en) 2017-05-01 2018-11-08 Icu Medical, Inc. Medical fluid connectors and methods for providing additives in medical fluid lines
US11110063B2 (en) 2017-08-25 2021-09-07 MAIA Pharmaceuticals, Inc. Storage stable sincalide formulations
US11400195B2 (en) 2018-11-07 2022-08-02 Icu Medical, Inc. Peritoneal dialysis transfer set with antimicrobial properties
US11541221B2 (en) 2018-11-07 2023-01-03 Icu Medical, Inc. Tubing set with antimicrobial properties
US11541220B2 (en) 2018-11-07 2023-01-03 Icu Medical, Inc. Needleless connector with antimicrobial properties
US11517732B2 (en) 2018-11-07 2022-12-06 Icu Medical, Inc. Syringe with antimicrobial properties
US11534595B2 (en) 2018-11-07 2022-12-27 Icu Medical, Inc. Device for delivering an antimicrobial composition into an infusion device
WO2020106985A1 (en) 2018-11-21 2020-05-28 Pursuit Vascular, Inc. Antimicrobial device comprising a cap with ring and insert
EP4255552A1 (en) 2020-12-07 2023-10-11 ICU Medical, Inc. Peritoneal dialysis caps, systems and methods

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5822445B2 (ja) * 1982-07-08 1983-05-09 株式会社 ミドリ十字 安定な固体の人血漿コリンエステラ−ゼ製剤の製法
US5037644A (en) * 1986-10-27 1991-08-06 Cetus Corporation Pharmaceutical compositions of recombinant interleukin-2 and formulation processes
US5096885A (en) * 1988-04-15 1992-03-17 Genentech, Inc. Human growth hormone formulation
JPH0296536A (ja) * 1988-09-29 1990-04-09 Green Cross Corp:The プラスミノゲン乾燥製剤
DE59007142D1 (de) * 1990-01-18 1994-10-20 Cereria Amos Sgarbi Spa Grablicht.
US5192743A (en) * 1992-01-16 1993-03-09 Genentech, Inc. Reconstitutable lyophilized protein formulation
SE9201073D0 (sv) * 1992-04-03 1992-04-03 Kabi Pharmacia Ab Protein formulation
DE4239877C1 (de) * 1992-11-27 1994-03-17 Boehringer Ingelheim Int Stabilisierte Superoxid-Dismutase (SOD)-Zusammensetzung

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001030373A1 (fr) * 1999-10-28 2001-05-03 Institut Neftekhimicheskogo Sinteza Imeni A.V.To Pchieva Rossiiskoi Akademii Nauk (Inkhs Ran) Composition polypeptidique
WO2012125066A1 (ru) * 2011-03-17 2012-09-20 Эспосито Трейдинг Лтд. Способ получения лиофилизированной субстанции
WO2012134332A1 (ru) * 2011-03-24 2012-10-04 Эспосито Трейдинг Лтд. Способ получения фибринолитического препарата и его применение для лечения инфаркта миокарда

Also Published As

Publication number Publication date
HU9501276D0 (en) 1995-06-28
KR100273053B1 (ko) 2000-12-01
AU1777495A (en) 1995-11-16
IL113578A0 (en) 1995-08-31
FR2719479B1 (fr) 1996-07-26
FI952119A (fi) 1995-11-05
JP2948125B2 (ja) 1999-09-13
AU694763B2 (en) 1998-07-30
PL179240B1 (pl) 2000-08-31
DK0682944T3 (da) 1999-10-18
ES2131781T3 (es) 1999-08-01
ZA953596B (en) 1996-11-04
US5763409A (en) 1998-06-09
CA2148537A1 (en) 1995-11-05
CZ286195B6 (cs) 2000-02-16
DE69508837T2 (de) 1999-11-04
PL308416A1 (en) 1995-11-13
NO320364B1 (no) 2005-11-28
EP0682944A1 (fr) 1995-11-22
GR3030146T3 (en) 1999-08-31
FI117321B (fi) 2006-09-15
FR2719479A1 (fr) 1995-11-10
NO951724L (no) 1995-11-06
IL113578A (en) 1999-10-28
CN1116522A (zh) 1996-02-14
FI952119A0 (fi) 1995-05-03
SI0682944T1 (en) 1999-08-31
EP0682944B1 (fr) 1999-04-07
KR950031103A (ko) 1995-12-18
CZ108195A3 (en) 1996-02-14
JPH0853361A (ja) 1996-02-27
HU220220B (hu) 2001-11-28
HUT72325A (en) 1996-04-29
DE69508837D1 (de) 1999-05-12
CN1088583C (zh) 2002-08-07
CA2148537C (en) 2002-07-16
ATE178484T1 (de) 1999-04-15
NZ272045A (en) 1996-02-27
MX9502034A (es) 1997-02-28
TW397687B (en) 2000-07-11
NO951724D0 (no) 1995-05-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2136306C1 (ru) Стабилизированная протеинсодержащая лиофилизированная композиция
US7074763B2 (en) Stable formulations of nerve growth factor
AU713383B2 (en) Stable freeze-dried pharmaceutical formulation
US7311908B2 (en) Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent
Kreilgaard et al. Effects of additives on the stability of Humicola lanuginosa lipase during freeze‐drying and storage in the dried solid
CA2037884C (en) Stabilized gonadotropin containing preparations
US5384132A (en) Stabilized gonadotropin containing preparations
US5270057A (en) Stabilized gonadotropin containing preparations
MXPA04004459A (es) Composiciones liofilizadas de anticuerpo monoclonal.
AU2004201694B2 (en) Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent
Jones The effects of pharmaceutically relevant excipients—sucrose, Tween 20, dextran, and benzyl alcohol—on the physical stability of model protein pharmaceutics
AU2006200638A1 (en) Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent

Legal Events

Date Code Title Description
RH4A Copy of patent granted that was duplicated for the russian federation

Effective date: 20060306

PD4A Correction of name of patent owner