PL179240B1 - Stabilny, liofilizowany srodek dopuszczalny farmaceutycznieoraz roztwór do iniekcji podskórnych, dozylnych lub domiesniowych PL PL PL - Google Patents
Stabilny, liofilizowany srodek dopuszczalny farmaceutycznieoraz roztwór do iniekcji podskórnych, dozylnych lub domiesniowych PL PL PLInfo
- Publication number
- PL179240B1 PL179240B1 PL95308416A PL30841695A PL179240B1 PL 179240 B1 PL179240 B1 PL 179240B1 PL 95308416 A PL95308416 A PL 95308416A PL 30841695 A PL30841695 A PL 30841695A PL 179240 B1 PL179240 B1 PL 179240B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- protein
- mannitol
- alanine
- lyophilisate
- amorphous
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
1. Stabilny, liofilizowany srodek dopuszczalny farmaceutycznie, zawierajacy proteine, bufor, mannit i aminokwasy, znamienny tym, ze zawiera alanine i mannit w stosunku R = masa mannitu/masa alaniny zawartym pomiedzy 0,1 a 1. 9. Roztwór do iniekcji podskórnych, dozylnych lub domiesniowych, dla ludzi lub zwierzat, zawie- rajacy jalowy, dopuszczalny farmaceutycznie roz- puszczalnik, przeciwbakteryjny srodek konserwujacy oraz liofilizat proteiny zawierajacy bufor, mannit i aminokwas, znamienny tym, ze zawiera alanine i mannit w stosunku R=masa alaniny/masa mannitu za- wartym pomiedzy 0,1 a 1. FIG. 2 PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazkujest także roztwór do iniekcji podskórnych, dożylnych lub domięśniowych, dla ludzi lub zwierząt, zawierający jałowy, dopuszczalny farmaceutycznie rozpuszczalnik, przeciwbakteryjny środek konserwujący oraz liofilizat proteiny zawierający bufor, mannit i aminokwas, charakteryzujący się tym, że zawiera alaninę i mannit w stosunku R=masa alaniny/masa mannitu zawartym pomiędzy 0,1 a 1.
Roztwór ten może zawierać inne dopuszczalne farmaceutycznie zaróbki, znane z techniki, jak na przykład korozpuszczalniki, środki konserwujące, antyutleniacze lub czynniki chelatujące.
Korzystnie roztwórjako proteinę zawiera hormon, zwłaszcza ludzki hormon wzrostu hGH (hormon wzrostu człowieka), enzym, zwłaszcza moczan oksydazy lub cytokinę, zwłaszcza interleukinę-13, zaś jako bufor korzystnie zawiera bufor fosforanowy.
Korzystny jest rozpuszczalnik wybrany z wody destylowanej, 0,9% wodnego roztworu chlorku sodu i 5% roztworu wodnego glukozy.
Proteina bilogicznie aktywna (lub bioaktywna), o której mowa w niniejszym wynalazku, może być polipeptydem glukozowanym lub nie, naturalnym, syntetycznym, półsyntetycznym lub kombinacją takąjak stosowana w praktyce klinicznej lub laboratoryjnej. W szczególności omawiana proteina może być na przykład hormonem jak hormon wzrostu, korzystnie hormon wzrostu człowieka (hGH), hormon luteinowym (LH-RH), gonadotropiną. Proteina może być również enzymem, na przykład enzymem trombolitycznym takimjak urokinaza, pro-urokinaza, streptokinaza, stafilokinaza, aktywatorem tkankowym plazminogenu (tPA) lub enzymem takim jak fosfataza, sulfataza, acylo-transferaza, mono-aminooksydaza, moczan oksydazy. Także, proteina o której mowa według wynalazku może być cytokiną, jak na przykład interleukina-2 (IL-2), interleukina -4 (IL-4) interleukina-6 (IL-6) lub interleukina-13 (IL-13). Inną klasą protein objętych wynalazkiem są na przykład antyciała, imunoglobuliny, imunotoksyny. Peptydy takie jak cholecystokinia (CCK), substancja P, neurokinina A, neurokinia B, neurotensina, neuropeptyd Y, eledoizyna, bombezyna mogą stanowić składniki według wynalazku.
Proteinąbiologicznie aktywnąjest korzystnie hGH (ludzki hormon wzrostu), moczan oksydazy lub interleu.kina-13.
Hormon wzrostu człowieka jest proteiną złożoną z jednego łańcucha polipeptydowego o 191 aminokwasach z dwoma mostkami disiarczkowymi pomiędzy pozostałościami cysteiny 53 i 165, a pozostałościami cysteiny 182 i 189.
Moczan oksydazy jest enzymem, który utlenia kwas moczowy do alantoiny i jest ekstrahowany z biomasy Aspergillus flavus (Labourer etal., Bull. Soc. Chimj. Biol. 1968,50, 811-825). Od ponad 20 lat jest używany również do leczenia hiperurycemii.
ANDc kodujący dla tej proteiny został niedawno klonowany i poddawany ekspresji w E. coli (Legoux R et al., J. ofBiol. Chem., 1992-267,12,8565-8570) Aspergillus flavus et Saccharomyces cerevisiae. Enzym jest tetramerem posiadającym identyczne grupy o masie molekularnej rzędu 32000. Monomer, złożony zjednego łańcucha polipeptydowego o 301 aminokwasach, nie posiada mostków disiarczkowych i jest acetylowany na grupie N-końcowej.
Interleukina-13 jest cytokiną złożoną z jednego łańcucha polipeptydowego o 112 aminokwasach z dwoma mostkami disiarczkowymi (Minty i inni, Nature, 1993, 362, 248-250).
Uzyskanie współistnienia fazy amorficznej (mannit+proteina) z faząalaniny krystalicznej jest niezależne od obecności i stężenia roztworu buforowego korygującego pH roztworu, ale zależy od poprzednio zdefiniowanego stosunku R.
W celu zaproponowania środka proteinowego powszechnie dostępnego jako czynnik terapeutyczny, niezbędne jest przygotowanie go w formie wystarczająco stabilnej, aby utrzymać jego aktywność biologiczną pomiędzy momentem wytworzenia a czasem zastosowania. Na przykład, hGH został spreparowany na bardzo liczne sposoby, takiejak przedstawiono w opisach
179 240 lub następujących zgoszeniach patentowych: US 5,096,885; WO 89/09614; WO 92/17200·
Au-30771/89; WO 93/19773; WO 93/19776. ’
Środki, według wynalazku, mogąbyć przechowywane w temperaturze otoczenia, podczas gdy środki zawierające te proteiny, obecnie dostępne handlowo, muszą być przechowywane w temperaturze od 2°C do 8°C.
Dla większości przypadków postać farmaceutyczna jest liofilizowana, zamrożoną lub w roztworze. Zawiera proteinę, roztwór buforowy, glicynę, argininę, mannit, cynk, środki powierzchniowo czynne, dekstran, EDTA lub inne zarobki, ale nigdy połączenie alanina/mannit o stosunku masowym R zawartym pomiędzy 0,1 a 1. Formy liofilizowane lub zamrożone są stosowane dla utrzymania integralności biochemicznej i aktywności biologicznej cząsteczki. Środki liofilizowane powinny być odtworzone przed zastosowaniem przez dodanie sterylnego, farmaceutycznie dopuszczalnego rozpuszczalnika, jak woda destylowana, roztwory wodne chlorku sodu o stężeniu, 0,9% lub glukoza o stężeniu 5% lub wszystkie inne rozpuszczalniki fizjologicznie dopuszczalne, zawierające lub nie środki konserwujące antybakteryjne, takie jak alkohol benzylowy, fenol lub metakrezol.
Środek stabilny w temperaturze otoczenia, aż do jego odtworzeniajest szczególnie korzystny do podawania ambulatoryjnego jak w przypadku hGH w postaci fiolek lub w postaci dawek wielokrotnych.
Środek w ten sposób przygotowany może być również dołączony do zestawu dozującego.
Kompozycjąkorzystną, według wynalazku, jest więc liofilizat. Liofilizat tenjest otrzymywany przez liofilizację z roztworu.
Procedura otrzymywania tego środka obejmuje etapy mieszania, rozpuszczania, filtracji i liofilizacji.
Skład roztworu poddawanego liofilizacji jest następujący:
Proteina, roztwór buforowy farmaceutycznie dopuszczalny dla uregulowania pH, alanina, mannit o stosunku masowym R=masa mannitu/masy alaniny, zawartym pomiędzy 0,1 a 1, woda dla przygotowania roztworu do wstrzyknięć.
Roztwór do liofilizowania przygotowuje się w sposób następujący:
Roztwór proteinyjest otrzymywany na kolumnie żelowo-filtracyjnej i zawiera roztwór buforowy utrzymujący pH na poziomie równoważnym ze stabilnością proteiny. Do roztworu tego dodaje się żądaną ilość buforu, alaniny, mannitu i wody w taki sposób, aby rozpuścić wszystkie składniki. Roztwór jest filtrowany w sposób sterylny i przenoszony do pojemników, korzystnie fiolek lub kapsułek. Liofilizację roztworu prowadzi się następująco:
Roztwór przechodzi cykl zamrażania, następnie sublimacji i suszenia, przystosowany do objętości poddawanej liofilizacji oraz do zbiornika zawierającego roztwór. Korzystnie wybiera się szybkość zamrażania około -2°C/mn w liofilizatorze Usifroid(France) typu SMH15 lub SMJ100 lub SMH2000.
Czas, temperatura i ciśnienie suszenia liofilizatu sądostosowane do objętości roztworu liofilizowanego i ilości wody pozostającej w liofilizacie.
Wyczerpujące informacje na temat techniki otrzymywania środków gotowych do wstrzyknięć sądo dyspozycji techników w Pharmaceutical Sciences, 1985,17- te wydanie lub w William Na & Poili GP, The lyophilization of pharmaceuticals : przeglądzie literatury, J. Parenteral Sci. Tech., 19^^^, 38, (2), 48-59 lub w Franks F., Freeze-diying: from enpiricism to predictability, Cryo-letters, 1990,11, 93-110.
Otrzymuje się więc liofilizat, w którym alanina znajduje się wpostaci krystalicznej, a mannit w amorficznej postaci. Liofilizat może być przechowywany w temperaturze 25°C bez utraty aktywności biologicznej proteiny, którą zawiera.
Dla zilustrowania niniejszego wynalazku, oceniono wybrane przykładowo proteiny hGH lub moczanu oksydazy. Tak więc kilka roztworów zawierających hGH lub moczan oksydazy jako proteiny biologicznie aktywne, bufor fosforanowy o różnych stężeniach, o pH = 7 dla roztworów zawierających hGH (o 4 UI/0,5 ml) i pH = 8 dla tych, które zawierały moczan oksydazy
179 240 (o 30 UAE/ml, samego mannitu, samej alaniny lub mieszaniny alanina/ mannit) zostało przygotowanych, zliofilizowanych i zanalizowanych.
Kompozycje są opisane szczegółowo w przykładach tabeli 1 i 2 poniżej. Metody analizy, jak również czasy i temperatury uzyskiwania stabilności są również podane poniżej.
Tabela 1
W tabeli 1, poniżej podano badane kompozycje zawierające moczan oksydazy.
Nr zestawu | mg Mannitu | mg Alaniny | R | Bufor fosforanowy pH=8; mM | Moczan oksydazy UAE(1) |
1 | 33,0 | 0,0 | +^ | 50 | 30 |
2 | 27,7 | 6,9 | 4 | 30 | 30 |
3 | 20,8 | 10,4 | 2 | 30 | 30 |
4 | 13,6 | 13,6 | 1,000 | 40 | 30 |
5 | 10,2 | 15,3 | 0,67 | 40 | 30 |
6 | 7,3 | 16,0 | 0,46 | 40 | 30 |
7 | 7,3 | 16,2 | 0,45 | 30 | 30 |
8 | 9,5 | 21,0 | 0,45 | 50 | 30 |
9 | 4,6 | 18,3 | 0,25 | 40 | 30 |
10 | 2,5 | 20,0 | 0,125 | 40 | 30 |
11 | 0,0 | 16,0 | 0 | 50 | 30 |
(1) : UAE oznacza jednostkę aktywności enzymatycznej
Tabela 2
W tabeli 2 poniżej, podano badane kompozycje zawierające hGH.
Nr zestawu | mg Mannitu | mg Alaniny | R | Bufor fosforanowy pH=7;mM | hGH UI’ |
12 | 12,5 | 0,0 | +00 | 2,50 | 4 |
13 | 20,0 | 2,5 | 8 | 1,95 | 4 |
14 | 12,5 | 6,5 | 2 | 0,00 | 4 |
15 | 12,5 | 6,5 | 2 | 2,50 | 4 |
16 | 12,5 | 13,0 | 1 | 2,50 | 4 |
17 | 4,7 | 10,5 | 0,45 | 1,95 | 4 |
18 | 0,0 | 6,5 | 0 | 2,50 | 4 |
(’); UI Jednostka Międzynarodowa
Dla określenia różnych parametrów stosowano następujące metody analityczne:
Zawartość dimerów i substancji pokrewnych o wyższej masie cząsteczkowej:
Zawartość dimerów i substancji pokrewnych o wyższej masie cząsteczkowej była określana chromatograficznie (SEC-HPLC) przy zastosowaniu kolumny Superose 12 (Pharmacia, Ref.
17-0538-01). Produkt był eluowany roztworem buforowym fosforanu amonu o pH = 7,0 (1,38 g
179 240 diwodorofosforanu amonu w 1 litrze wody, korekta pH roztworu na wartość pH=7,0' za pomocą stężonego amoniaku 0,4 ml/minutę). Detekcję prowadzono przy 220 nm. (Zawartość tę podano w wynikach analitycznych jako procent oligomerów + polimerów).
Zawartość dimerów i substancji o wyższej masie cząsteczkowej można również oznaczać metodą opisanąw monografii Farmakopea Europejska „Somatropine pour preparation injectable” ze stycznia 1994.
Oznaczanie miana proteiny metodą chromatograficzną z odwróconą fazą.
Wyrażono w mgfiolkę i oznaczono metodą chromatograficzną z odwróconą fazą na kolumnie C18-300A - 25 cm, średnicy 4,6 mm (Synchrom, Ref. CR 103-25). Produkt eluowano 35 minut w sposób stopniowy, stosując fazę ruchomą, przechodząc od 75 części objętościowych wody do 0,1% kwasu trifluorooctowego (obj./obj.) (TFA) i 25 objętości acetonitrylu do 0,08% TFA (obj./obj.) do 30 objętości wody do 0,1%o TfA i 70 objętości acetonitrylu do 0,08% TFA. Przy przepływie 1 ml na minutę oznaczenie wykonuje się przy 220 nm.
Oznaczanie aktywności enzymatycznej moczanu oksydazy.
Aktywność enzymatyczną moczanu oksydazy, wyrażoną w UAE, oznaczano spektrofotometrycznie w zbiorniku termostatowanym w temperaturze 30°C śledząc znikanie kwasu moczowego przy 292 nm według Legoux R, Delpech Bruno, Dumont X, Guillemont JC, Ramond P, Shire D, Caput D, Ferrara P, Loison G, J. Biol. Chem., 1992,267 (12), 8565-8570.
Zmętnienie odtworzonych roztworów składników rozpuszczonych
Zmętnienie liofilizatów zawierających hGH w roztworze oznaczano spektrofotometrycznie (Ph.Eur.2(I)V. 619) przy 500 nm na spektrofotometrze Perkin Elmer 554. Wyniki sapodane w Jednostkach Absorbancji x 1000.
Zmętnienie liofilizatów zawierających moczan oksydazy w roztworze jest oznaczane turbidymetrem Ratio Hach 18900-00. Wyniki zmętnienia podano w Nefelometrycznych Jednostkach Zmętnienia (NTU) zdefiniowanych w: Standard Methods for examination of water and waste water wydane przez American Public Health Association.
Stopień opalescencji jest również oznaczany według metody Farmakopea Europejska (II) V. 6, porównując próbkę badaną z zawiesiną wzorcową.
Badania organoleptyczne liofilizatów
Badanie prowadzono wzrokowo, biorąc pod uwagę zabarwienie liofilizatu, jego strukturę (zapadniętąlub nie), oraz ewentualne przesunięcie pomiędzy skorupką a miąszem liofilizatu.
Dyfraktometria Promieni X na proszku
Analiza dyfraktometryczna Promieni X na lioflizatach jest wykonywana na dyfraktometrze Siemens^ D500 TT; źródło: CuKa l; Generator: 40 KV, 25 mA; Monochromator tylny; szczeliny: 1/1/1/0,16/0,6; próbki na podłożu pyreksowym; Zakres zamiatania: od 4° do 40° na minutę 2 teta Bragga.
Analiza termiczna różnicowa
Badania liofilizatów metodą analizy termicznej różnicowej wykonuje się w następujących warunkach:
Aparat: DSC 7 Perkin Elmer; cechowanie Ind i Ołów; pobieranie próbki: od 5 mg do 10 mg w kapsułkach 50 μ; temperatura początkowa: 10°C; szybkość grzania: 10°C/min; temperatura końcowa: 300°C.
Formy hGH zdezamidowane
Procentową zawartość form zdezamidowancyh oznacza się metodą chromatografii amonitowej (AEX-HPLC) stosując kolumnę amonitową (Pharmacia mono-Q HR 5/5, ref. 17-0546-01). Elucję prowadzi się roztworem A (13,8 g) diwodorofosforanu amonu w 1000 ml wody; pH=7 korygowane stężonym amoniakiem i wodąjako roztworem B, stosując następujący program: 5% roztworem A przez 2 minuty, następnie 15% roztworem A przez 5 minut, następnie 5 0% roztworem A przez 20 minut i na zakończenie 100% roztworem A przez 5 minut i utrzymuje się ten ostatni roztwór przez 5 minut. Elucja hGH (ok. 15 minut) i form zdezamidowanych badana jest przy 220 nm. Przepływ wynosi 1 ml na minutę.
Uzyskane tymi różnymi metodami wyniki analityczne są opisane poniżej.
179 240
Zawartość dimerów i substancji pokrewnych o wyższym ciężarze cząsteczkowym
Zawartość oligomerów plus polimerów w liofilizatach zawierających 4 UI hGH odtworzonych w 0,5 ml wody, została oznaczona w funkcji stosunku R (wykres 1). Wykres 1 wykazuje, że minimalnązawartość oligomerów plus polimerów w roztworach uzyskuje się, gdy Rjest zawarte pomiędzy 0,1 a 1, z tym, że wartość 0,1 została interpolowana z krzywej.
Tytułem przykładu uzupełniającego zbadano stabilność w temperaturze 25°C i 35°C dwóch zestawów hGH o 4UI i 8UI. Po sześciu miesiącach przechowywania ich stabilność jest doskonała.
W tabelach 3 i 4 poniżej, przedstawiono zawartość procentową oligomerów i polimerów i form zdezamidowanych po różnym czasie i różnych temperaturach w porównaniu z normami Farmakopea Europejska. W tych tabelach R = 0,45.
Tabela 3
Zestaw 4UI/fiolkę
Norma Pharmacopee Europeenne | Czas 0 | Przy 25°C | Przy 35°C | ||
3 miesiące | 3 miesiące | 6 miesięcy | |||
Oligomery i polimery % | 6,0 | 1,0 | 1,9 | 3 | 3,3 |
Formy zdezamidowane % | 6,6 | 1,3 | 1,9 | 2,8 | 3,9 |
Oznaczenie w mg/fiolkę | - | 1,58(*) | 1,61(*) | 1,540 | 1,550 |
(*): Miano zmienia się nieznacznie w czasie ze względu na dokładność metody oznaczania (± 5%).
Tabela 4
Zestaw 8UI/fiolkę
Norma Pharmacopee Europeenne | Czas 0 | Przy 25°C | Przy 35°C | |||
3 miesiące | 6 miesięcy | 3 miesiące | 6 miesięcy | |||
Oligomery i polimery % | 6,0 | 1,0 | 1,5 | 1,2 | 1,7 | 2,2 |
Formy zdezamidowane % | 6,6 | 1,0 | 1,5 | 1,95 | 2,2 | 3,3 |
Oznaczenie w mg/fiolkę | - | 3,0(*) | 3,00 | 2,93(*) | 2,950 | 2,940 |
(*): Miano zmienia się nieznacznie w czasie ze względu na dokładność metody oznaczania (± 5%).
Oznaczanie aktywności enzymatycznej moczanu oksydazy
Aktywność enzymatycaiąliofilizatów zawierających 30 UAE moczanu oksydazy odtworzonego w 1 ml wody określano w funkcji stosunku R po 1 miesiącu w temperaturze 35°C (Wykres 2). Wykres 2 wskazuje, że początkowa aktywność enzymatyczna moczanu oksydazy jest zachowana po 1 miesiącu w temperaturze 35°C, dla R zawartego pomiędzy 0,4 a 1.
Tytułem przykładu uzupełniającego, środek dla którego R=0,45 lub R = 0,67 jest doskonale stabilny po 3 miesiącach w temperaturze 25°C (Aktywność końcowa bliska 100% tej o czasie zero).
Zmętnienie odtworzonych roztworów składników rozpuszczonych
Zmętnienie liofilizatów zawierających 4 UI hGH odtworzonych w 0,5 ml wody zostało oznaczone w funkcji stosunku R (Wykres 3). Wykres 3 wskazuje, ze zmętnienie minimalne roztworów uzyskuje się dla R zawartego pomiędzy wartością 0 a 1,5.
Zmętnienie liofilizatów zawierających 30 UAE moczanu oksydazy odtworzonego w 1ml wody, zostało oznaczone w funkcji stosunku R (Wykres 4). Wykres 4 wskazuje, że zmętnienie minimalne roztworów uzyskuje się dla R zawartego pomiędzy 0,2 a 1.
Badania organoleptyczne liofilizatów
Badania organoleptyczne każdego liofilizatu zawierającego 4 UI hGH lub 30 UAE moczanu oksydazy lub żadnej proteiny i zmienne ilości buforu fosforanowego, zostały przeprowadzone w funkcji stosunku R i są zebrane w tabeli 5. Tabela 5 wskazuje, że liofilizaty posiadaj ą zadawalające własności organoleptyczne dla R zawartego pomiędzy 0,125 a 1,7. Własności te nie zmieniają się w czasie.
Tabela 5
Badania organoleptyczne liofilizatów i zaróbek krystalicznych w funkcji R = masa mannitu/masa alaniny
R | Badania organoleptyczne | Zaróbki krystaliczne Dyfrakcja promieni X |
+00 | Zapadnięty | Mannit |
10 | Zapadnięty | Mannit + Alanina |
6,469 | Zapadnięty | Mannit + Alanina |
5 | Zapadnięty | Mannit + Alanina |
4,014 | Zapadnięty | Mannit + Alanina |
2 | Zapadnięty | Mannit + Alanina |
1,705 | dobry | Mannit + Alanina |
1,-402 | dobry | Mannit + Alanina |
1,25 | dobry | Mannit + Alanina |
1,097 | dobry | Mannit + Alanina |
1 | dobry | Alanina |
0,667 | dobry | Alanina |
0,456 | dobry | Alanina |
0,456 | dobry | Alanina |
0,451 | dobry | Alanina |
0,452 | dobry | Alanina |
0,251 | dobry | Alanina |
0,125 | dobry | Alanina |
0 | Przesunięcie faz | Alanina |
Dyfrakcja promieni X
Wyniki analizy dyfrakcyjnej promieni X na uzyskanych proszkach liofilizatów zawierających mieszaniny Alanina/Mannit w stosunkach od 0 do + to są podane w tabeli 5.
Uzyskane dyfraktogramy wykazują, że dla R zawartego pomiędzy 0 a 1, pojawiiająsię tylko prążki sieci krystalicznej alaniny, poza tym odchylenie linii bazowej dyfraktogramu wskazuje
179 240 na obecność fazy amorficznej utworzonej przez mannit. Przy wzroście R wzrasta ilość fazy amorficznej wynikającej z obecności mannitu. Dla R> 1 mannit także krystalizuje.
Dla R zawartego pomiędzy 0 a 1, uzyskuje się fazę amorficzną utworzoną przez mannit i fazę krystaliczną utworzoną przez alaninę.
Analiza termiczna różnicowa
Temperatura zeszklenia liofilizatów zawierających 4 UI hGH lub 30 UAE moczanu oksydazy łub żadnej proteiny i zmienne ilości buforu fosforanowego, określono w funkcji odwrotności stosunku R(Wykres 5). Wykres 5 wskazuje, że maksymalna uzyskana temperatura zeszklenia dla liofilizatów zawierających mieszaniny alaniny i mannitu jest uzyskiwana dla wartości (1/R)>1, to znaczy dla R zawartego pomiędzy 0 a 1.
To temperatura zeszklenia liofilizatu wskazuje na maksymalnątemperaturę stabilności liofilizatu. Maksymalnątemperaturę stabilności liofilizatu otrzymano dla R zawartego pomiędzy 0 a 1.
Formy zdezamidowane
Uzyskane wyniki na zestawach 4UI i 8UI wykazują słabą ewolucję, którajest dopuszczalna w porównaniu z normami z monografii somatropiny Pharmacopee Europeenne, co pozwala przypuszczać, że środek ten będzie wystarczająco stabilny w temperaturze 25°C.
W konkluzji dowiedziono, że każda oceniana własność liofilizatu posiada wartość optymalną dla pewnego zakresu wartości R, co zostało podsumowane poniżej:
% Oligomerów+Polimerów (stabilność hGH) | R pomiędzy 0,1 a 1 |
Aktywność enzymatyczna moczanu oksydazy po 1 mies. przy temp. 35°C | R pomiędzy 0,4 a 1 |
Zmętnienie roztworów hGH | R pomiędzy 0 a 1,5 |
Zmętnienie roztworów moczanu oksydazy | R pomiędzy 0,2 a 1 |
Wygląd liofilizatów | R pomiędzy 0,125 a 1,7 |
Sama alanina krystaliczna | R pomiędzy 0 a 1 |
Maks. temp. zeszklenia | R pomiędzy 0 a 1 |
Każde kryterium analityczne (% oligomerów + polimerów, stabilność hGH, aktywność enzymatyczna moczanu oksydazy po 1 miesiącu przy temp. 35°C, zmętnienie roztworów hGH zmętnienie roztworów moczanu oksydazy, wygląd liofilizatów, sama alanina krystaliczna, maksymalna temperatura zeszklenia) definiuje optymalny zakres szczególny dla każdej własności. Aby otrzymać odpowiedni środek określa się korzystny zakres R, to znaczy 0,1 <R< 1. Następujące przykłady ilustrują wynalazek nie ograniczając jego zakresu.
Przykładl i Konfekcjonowanie kompozycji liofilizatu hGH o 4UI do odtworzenia w 0,5 ml wody PPI.
Składniki | Skład jednostkowy (mg) |
hGH | 4 UI |
Alanina | 10,5 mg |
Mannit | 4,77 mg |
12. hydrat fosforan disodowy | 0,7 mg |
Woda do przygotowania wstrzyknięć | 0,5 ml QSP |
Fiolka z białego szkła typ 1 - 3 ml | 1 |
Zamknięcie z szarego chlorobutylu | 1 |
Kapsel aluminiowy niebieski typu Flip-off o średnicy 13 mm | 1 |
179 240
Przykład II: Konfekcjonowanie kompozycji liofilizatu hGH o 8UI do odtworzenia w 1 ml wody PPI.
Składniki | Skład jednostkowy (mg) |
hGH | 8 UI |
Alanina | 21 mg |
Mannit | 9,54 mg |
12. hydrat fosforan disodowy | 1,4 mg |
Woda do przygotowania wstrzyknięć | 1 ml QSP |
Fiolka z białego szkła typ 1 - 3 ml | 1 |
Zamknięcie z szarego chlorobutylu | 1 |
Kapsel aluminowy niebieski typu Flip-off o średnicy 13 mm | 1 |
Przykład III: Konfekcjonowanie kompozycji liofilizatu hGH o 18 UI do odtworzenia w 1 ml wody PPI.
Składniki | Skład jednostkowy (mg) |
hGH | 18 UI |
Alanina | 21 mg |
Mannit | 9,54 mg |
12. hydrat fosforan disodowy | 1,4 mg |
Woda do przygotowania wstrzyknięć | 1,0 ml QSP |
Fiolka z białego szkła typ 1 - 3 ml | 1 |
Zamknięcie z szarego chlorobutylu o średnicy 13 mm | 1 |
Kapsel aluminiowy z wieczkiem o średnicy 13 mm | 1 |
Przykład IV: Liofilizaty hGH dla preparatu do wstrzyknięcia o 8 UI w 1 ml
TEMPERATURA °C | X | 5 | 25 | 35 | 5 | 25 | 35 | ||
CZAS W DNIACH | 0 | 90 | 90 | 90 | 180 | 180 | 180 | ||
Rodzaj kontroli | Stosowane metody | Normy | Wyniki | Wyniki | Wyniki | Wyniki | Wyniki | Wyniki | Wyniki |
CHARAKTERYSTYKA
Wygląd | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna |
179 240
IDENTYFIKACJA
hGH | Faza odwrócona | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna |
Chromatografia ekskluzyjna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna |
PRÓBY
Formy zdeamidowane | Wymiana amonitowa | <6,5% | 1,0% | 1,0% | 1,5% | 2,2% | 1,5% | 1,95% | 3,3% |
Dimery i substancje pokrewne | Chromato- grafia ekskluzyjna | <6,0% | 1,0% | 0,75% | 1,5% | 1,7% | 0,8% | 12% | 2,2% |
Formy obcięte | Elektrofo- reza | <2,0% | <2,0% | <2,0% | <2,0% | <2,0% | <2,0% | <2,0% | <2,0% |
Proteiny pokrewne | Elektrofo- reza | Zgodna(1) | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna |
Zawartość wody | <1,5% | 0,45 | 0,41 | 0,68 | 0,73 | 0,47 | n.b.(2) | n.b.(2 |
Oznaczanie | Faza | 2,93 do | 3,0 | 3,1 | 3,0 | 2,95 | 2,96 | 2,93 | 2,94 |
w mg/fiolkę | odwrócona | 3,24 |
Badanie Wygląd | Farmakopea Europejska | <zaw. II | <zaw. U | <zaw.II | <zaw. II | <zaw. II | |||
Farmakopea Europejska | Bezbarwny | Bezbarw- ny | Bezbarw- ny | Bezbarw- ny | Bezbarw- ny | ||||
Oznaczanie pH | 6,5 do 7,5 | 6,94 | 7,02 | 7,03 | 7,01 | ||||
Rozpuszczanie | <przy 1 mn | <przy 1 mn | <przy 1 mn | <przy 1 mn | <przy 1 mn |
(1) : Brak pasm dodatkowych innych niż śladowe występujące we wzorcu lub ślady oligomerów hGH.
(2) : n.b. = niebadano
Przykład V: Liofilizat hGH dla preparatu do wstrzyknięcia o 4 UI w 0,5 ml
Temperatura °C | X | 5 | 25 | 35 | 5 | 35 | ||
Czas w dniach | 0 | 90 | 90 | 90 | 180 | 180 | ||
Rodzaj kontroli | Stosowane metody | Normy | Wyniki | Wyniki | Wyniki | Wyniki | Wyniki | Wyniki |
CHARAKTERYSTYKA
Wygląd | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna J Zgodna | Zgodna |
179 240
IDENTYFIKACJA
hGH | Faza odwrócona | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna |
Chromatografia ekskluzyjna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna |
PRÓBY
Formy dezamidowane | Wymiana amonitowa | <6,5% | 1,3% | 1,0% | 1,9% | 2,8% | 1,3% | 3,9% |
Dimery i substancje pokrewne | Chromatografia ekskluzyjna | < 6,0% | 1,0% | 0,6% | 1,9% | 3,0% | 1,0% | 3,3% |
Formy obcięte | Elektroforeza | < 2,0% | <2,0% | < 2,0% | < 2,0% | <2,0% | <2,0% | < 2,0% |
Proteiny pokrewne | Elektroforeza | Zgodna 0) | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna | Zgodna |
Zawartość wody | < 15% | 0.65 | 0,58 | 0,97 | 0,93 | 0,81 . | n.b.(2) |
Oznaczanie | Faza | 1,50 do | 1,58 | 1,57 | 1,61 | 1,54 | 1,56 | 1,55 |
w mg/fiolkę | odwrócona | 1,70 |
OD' | TWORZONY SKŁADN | IK ROZPUSZCZONY | ||||||
Badanie | Farmakopea Europejska | <zaw. Π | <zaw. II | <zaw. II | <zaw. II | <zaw. II | <zaw. Π | <zaw. II |
Wygląd | Farmakopea Europejska | Bezbarwny | Bezbarwny | Bezbarwny | Bezbarwny | Bezbarwny | Bezbarwny | Bezbarwny |
Oznaczanie pH | 6,5 do 7,5 | 7,01 | 7,22 | 6,96 | 6,99 | 7,06 | 7,00 | |
Rozpuszczanie | <przy 1 mn | <przy 1 mn | <przy 1 mn | <przy 1 mn | <pizy 1 mn | <przy 1 mn | <przy 1 mn |
(1) : Brak pasm dodatkowych innych niż śladowe występujące we wzorcu lub ślady oligomerów hGH.
(2) : n.b. = nie badano
Przykład VI: Wyniki analityczne po rocznej stabilizacji w temperaturze 5°C hGH'o 18UI
Opalescencja (UA..xl0'3) | pH | Zawartość wody | Formy zdezamidowane | Oligomery + Polimery | |
Normy | <20 | < 1,5% | <5% | <6% | |
t = 0 | 1 | 7,9 | 0,33% | 1,36% | 0,63% |
1 mies. | 1 | S | 0,29% | - | - |
3 mies. | 3 | 7,83 | 0,32% | 1,25% | 0,45% |
6 mies. | 4 | - | 1,03% | 1,4% | 0,5% |
12 mies. | 7 | - | 1,19% | 1,15% | 1,11% |
Dla zestawionych wyników, R = 0,45
179 240
Przykład VII: Wyniki analityczne po 3 miesiącach stabilizacji w temperaturze 25°C hGH o 18UI
Opalescencja (U.A.xł0‘O | pH | Zawartość wody | Formy zdezamidowane | Oligomery + Polimery | |
Normy | <20 | <1,5% | <5% | <6% | |
t = 0 | 1 | 7,9 | 0,33% | 1,36% | 0,63% |
1 mies. | 3 | 7,72 | 0,35% | - | - |
3 mies. | 9 | 7,65 | 0,54% | 1,37% | 0,85% |
Dla zestawionych wyników, R = 0,45
Przykład VIII: Skład liofilizatów mocznika oksydazy przy 30 UAE/fiolkę
Kompozycja | Odtworzone roztwory składników rozpuszczonych | |||||||
Przezroczystość Farmakopea Europejska | Zabarwienie Farmakopea Europejska | |||||||
t=0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | t=0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | |||
5°C | 25°C | 5°C | 25°C | |||||
Mannit 7,3 mg + L Alanina 16,2 mg Na2HPO4 30 mM | <=i | <=I | I-H | I-III | bezbarwne | bezbarwne | bezbarwne | bezbarwne |
Mannit 20, 8 mg + L Alanina 10,4 mg Na2HPO4 30 mM | <I | >=m | <n | II-I | bezbarwne | bezbarwne | bezbarwne | bezbarwne |
Mannit 27,7 mg + L Alanina 6,9 mg Na2HPO421 mM | <m | >IV | = III | >IV | bezbarwne | bezbarwne | bezbarwne | bezbarwne |
Przykład VIII (c.d. 1):
Kompozycja | pH odtworzonego roztworu składnika rozpuszczonego | Aktywność enzymatyczna UAE/fiolkę | Zawar- tość wody % | ||||||
t=0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | t=0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | ||||
5°C | 25°C | 5°C | 25°C | ||||||
Mannit 7,3 mg + L Alanina 16,2 mg Na2HPO4 30 mM | 7,96 | 7,96 | 7,91 | 7,93 | 32,9(*) | 30,0(*) | 30,2(*) | 33,3(*) | 3,2 |
Mannit 20,8 mg + L Alanina 10,4 mg Na2HPO4 30 mM | 8,03 | 8,05 | 8,01 | 8,01 | 28,1(*) | 22,5 | 32,0(*) | 22,7 | 2,8 |
Mannit 27,7 mg + L Alanina 6,9 mg Na2HPO4 21 mM | 8,04 | 8,06 | 8,00 | 8,03 | 28,7(*) | 23,0 | 31,2(*) | 20,5 | 2,1 |
(*) Miano nie zmienia się znacznie, ze względu na dokładność metody oznaczania (±10%)
179 240
Przykład IX: Wyniki stabilności liofilizatów moczanu oksydazy o 30UAE/fiolkę po czasie 1 miesiąca w temperaturze 35°C i po 3 miesiącach w temperaturze 5°C, 25°C i 35°C
Kompozycja | Odtworzony roztwór składnika rozpuszczonego | ||||||||
Przezroczystość Farmakopea Europejska | Zabarwienie Farmakopea Europejska | ||||||||
t =0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | t=0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | ||||
5°C | 25°C | 5°C | 25°C | 35°C | |||||
Na2HPO4 40 mM Alanina 14,15 mg Mannit 14,15 mg | I-II | = IV | I-U | =n | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne |
Na2HPO4 40 mM Alanina 15,9 mg Mannit 10,6 mg | I-II | II-UI | <I | = I | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne |
Na2HPO4 40 mM Alanina 16 mg Mannit, 7,3 mg | I-II | IU-IV | = I | <I | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne |
Na2HPO4 40 mM Alanina 18,9 mg Mannit 4,72 mg | I-n | <IV | <I | i-n | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne |
Na2HPO4 40 mM Alanian 20 mg Mannit 2,5 mg | U-Π | <IV | n-ni | >IV | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne | bezbar- wne |
Przykład IX (c.d. 1)
Kompozycja | pH odtworzonego roztworu składnika rozpuszczonego | Zawartość wody | |||
t = 0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | |||
5°C | 25°C | ||||
Na2HPO4 40 mM Alanina 14,15 mg Mannit 14,15 mg | 8,01 | 8,01 | 8,04 | 8,02 | - |
Na2HPO4 40 mM Alanina 15,9 mg Mannit 10,6 mg | 8,00 | 7,97 | 8,02 | 8,01 | - |
Na2HPO4 40 mM Alanina 16 mg Mannit 7,3 mg | 7,99 | 7,98 | 8,02 | 8,00 | 2,0% |
Na2HPO4 40 mM Alanina 18,9 mg Mannit 4,72 mg | 7,96 | 7,94 | 7,97 | 7,96 | - |
Na2HPO4 40 mM Alanina 20 mg Mannit 2,5 mg | 7,96 | 7,93 | 7,96 | 7,95 | - |
179 240
Przykład IX (c.d. 2)
Kompozycja | Aktywność enzymatyczna UAE/fiolkę | |||
t = 0 | 1 miesiąc 35°C | 3 miesiące | ||
5°C | 25°C | |||
Na2HPO4 40 mM Alanina 14,15 mg Mannit 14,15 mg | 30,3 (*) | 23,2 | 29.8 (*) | 30,5 () |
Na2HPO4 40 mM Alanina 15,9 mg Mannit 10,6 mg | 29,7(() | 28,9 (*) | 30,9 (*) | 29,8 (*) |
Na2HPO4 40 mM Alanina 16 mg Mannit 7,3 mg | 29,2 (*) | 26,8 (*) | 30,3 (*) | 30,0 (*) |
Na2HPO4 40 mM Alanina 18,9 mg Mannit 4,7 2 mg | 30,1 (*) | 20,5 | 30,1 (♦) | 30,5 (() |
Na2HPO4 40 mM Alanina 20 mg Mannit 2,5 mg | 29,4 0) | 17,9 | 29,4 (() | 25,7 |
(*) : Miano zmienia się nieznacznie z czasem ze względu na dokładność metody oznaczania (± 10%)
179 240
Aktywność enzymatyczna (UAE)
R=Mannit / Alanina (wag/wag)
FIG.2
179 240
R= Mannit / Alanina (wag/wag)
179 240
Zmętnienie (NTU)
R- Mannit / Alanina (wag/wag)
FIG. 4
179 240
/R ^alanina / mannit
179 240
R=Mannit/Alanina (wag/wag)
FIG. 1
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz.
Cena 4,00 zł.
Claims (14)
- Zastrzeżenia patentowe1. Stabilny, liofilizowany środek dopuszczalny farmaceutycznie, zawierający proteinę, bufor, mannit i aminokwasy, znamienny tym, że zawiera alaninę i mannit w stosunku R=masa mannitu/masa alaniny zawartym pomiędzy 0,1 a 1.
- 2. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako proteinę zawiera hormon, enzym lub cytokinę. ,
- 3. Środek według zastrz. 2, znamienny tym, że jako hormon zawiera ludzki hormon wzrostu hGH.
- 4. Środek według zastrz. 2, znamienny tym, że jako enzym zawiera moczan oksydazy.
- 5. Środek według zastrz. 2, znamienny tym, że jako cytokinę zawiera interleukinę-13.
- 6. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera alaninę w postaci krystalicznej, a mannit w postaci amorficznej.
- 7. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że liofilizat składa się z fazy amorficznej i fazy krystalicznej, faza amorficzna w większości jest utworzona z mannitu i proteiny, faza krystaliczna w większości jest utworzona z alaniny.
- 8. Środek według zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, że jako bufor zawiera bufor fosforanowy.
- 9. Roztwór do iniekcji podskórnych, dożylnych lub domięśniowych, dla ludzi lub zwierząt, zawierający jałowy, dopuszczalny farmaceutycznie rozpuszczalnik, przeciwbakteryjny środek konserwujący oraz liofilizat proteiny zawierający bufor, mannit i aminokwas, znamienny tym, że zawiera alaninę i mannit w stosunku R=masa alaniny/masa mannitu zawartym pomiędzy 0,1 a 1.
- 10. Roztwór według zastrz. 9, znamienny tym, że proteinę stanowi hormon, enzym lub cytokina.
- 11. Roztwór według zastrz. 10, znamienny tym, że jako hormon zawiera ludzki hormon wzrostu hGH.
- 12. Roztwór według zastrz. 10, znamienny tym, żejako enzym zawiera moczan oksydazy.
- 13. Roztwór według zastrz. 10, znamienny tym, żejako cytokinę zawiera interleukinę-13.
- 14. Roztwór według zastrz. 10, znamienny tym, że zawiera rozpuszczalnik wybrany z wody destylowanej, 0,9% wodnego roztworu chlorku sodu i 5% roztworu wodnego glukozy.Wynalazek niniejszy dotyczy środka farmaceutycznie dopuszczalnego, występującego w formie liofilizatu i zawierającego proteinę jako składnik aktywny. Środek ten jest stabilny w temperaturze 25°C i może być odtworzony w formie ciekłej przez dodanie rozpuszczalnika. Może być podawany doustnie ludziom lub zwierzętom lub stosowany w zestawie do dozowania. Wynalazek dotyczy także roztworu do iniekcji podskórnych, dożylnych i domięśniowych, zawierającego proteinę jako składnik aktywny.Wiadomo, że sposób wytwarzania ma znaczący wpływ na degradację protein w trakcie liofilizacjijak również bardzo silny wpływ na ich stabilność w formie liofilizowanej. Różne zmienne sposobu wytwarzania, które mają wpływ na te parametry to głównie pH, ilość występujących soli, rodzaj i ilość zarobek, typ wybranej krioprotekcji jak również temperatura, ciśnienie i czas operacji zamrażania, sublimacji i wybranego suszenia. Te różne zmienne wpływająna stan fizy179 240 czny otrzymanego liofilizatu, to znaczy: amorficzny szklisty, amorficzny miękki, krystaliczny lub kombinację tych stanów.Rola każdej z tych zmiennych była badana niezależnie, ale ich efekt synergetycznyjest wciąż niejasny (Pikal MJ., Dellermann KM., Roy ML. Riggin MN., The effects of formulation variables on the stability of freeze-dried Human Growth Hormone, Pharm. Research., 1991,8, Nr 4,427-436).Przegląd bibliografi dotyczącej wpływu aminokwasów i polioli na własności roztworów do liofilizowania lub liofilizatów prowadzi do następujących wniosków:Zalety i wady wynikające z obecności aminokwasów; mannitu w fazie krystalicznej lub fazie amorficznej są zebrane poniżej;Zalety związane z obecnością aminokwasówWykazano, że obecność glicyny w liofilizacie pobudza krystalizację cząstek obecnych w roztworze na etapie zamrażania procesu liofilizacji (Korey DJ., Schwartz JB, Effects of excipients on the cristallization of pharmaceutical compounds during lyophylization, J. Parenteral Sci. Tech., 1989,43,2,80-83). Krystalizacja składnika aktywnego, mimo że mało prawdopodobna w przypadku protein zwiększa ich stabilność.Alanina w formie krystalicznej powstrzymuje opadanie liofilizatu w trakcie sublimacji i suszenia i pozwala na otrzymanie liofilizatu o dużej powierzchni właściwej i w ten sposób pozwala na szybsze wysuszenie(Pikal MJ., Freeze-drying of proteins, Biopharm. 26-30 październik 1990).Wady związane z obecnością aminokwasówDodatek aminokwasu do cukru lub poliolu z roztworu poddawanego liofilizacji ma na ogół wpływ na obniżenie temperatury zeszklenia cukru. (Booy MPWM Ruiter RA., Meere ALJ., Evaluation of the phisical stability of freeze-dried sucrose containing formulations by differential scanning calorimetry, Pharm. Research., 1992,9,109-114). Otóż, obniżenie temperatury zeszklenia jest na ogół synonimem zmniejszenia stabilności liofilizatu (Franks F., Freezedrying; from empiricism to predictability, Cryo-letters, 1990.77,93-110).Korzyści związane z obecnością mannituObecność mannitu w formie amorficznej zawierającej proteinę zapewnia obecność wody niekrystalicznej związanej z proteiną w trakcie zamarzania i powstrzymuje denaturację białka. Ponadto obecność polioli chroni proteiny przed degradacją termiczną przez oddziaływanie hydrofobowe (Back JF, Oakenfull D., Smith MB., Increased thermal stability of proteins in the presence of sugars and polyols, Biochemistry, 197S^, 18,23,5191-96).Wady związane z obecnością mannituStwierdzono, że mannit nie pozwala na zachowanie aktywności enzymu w temperaturze 37°C w przeciwieństwie do laktozy. (Ford AW, Dawson PJ., The effect of carbohydrate additives in the freeze-drying of alkaline phosphatase, J. Pharm. Pharmacol., 1993, 45 (2), 86-93).Korzyści związane z obecnościąfazy krystalicznejObecność wykrystalizowanego składnika rozpuszczalnego w roztworze zamrożonym jest sposobem stabilizacji protein podczas suszenia (Carpenter JF. &Crowe JH., Modes of stabilization of protein by organic solutes during dessiccation, Cryobiology, 1988,25, 459-470).Wady związane z obecnościąfazy krystalicznejWykazano, że utrata aktywności proteiny liofilizowanej jest bezpośrednio związana ze stopniem krystaliczności cząstki krioprotekcyjnej(Izutsu KL, Yoshioka S., Terao T., Decreased protein-stabilizing effects of cryoprotectants due to crystllization., Pharm. Research. 1993,10, Nr 8, 1232-1237).W preparatach medycznych zawierających proteiny powinno unikać się krystalizacji zarobek, według: (Hermansky M., Pesak M., Lyophilization of drugs. VI Amorphous and Cristalline forms Cesk. Farm., 17^7^:^, 42, (2), 95-98).179 240Korzyści związane z obecnościąfazy amorficznejObecność dodatków w stanie amorficznym stabilizuje aktywność pewnych enzymów proporcjonalnie do stężenia dodatków, według (Izutsu KL, Yoshioka S., Terao T., Pharm. Research1993,10, Nr 8,1232-1237).Krioprotekcyjny efekt zarobek przypisuje się amorficznemu stanowi glicyny w otrzymanym liofilizacje (Pikal MJ., Dellermann KM., Roy ML. RigginMN., The effects offormulation variables on the stability of freeze-dried Human Growth Hormone, Pharm. Research., 1991,8, Nr 4,427-436).Wady związane z obecnościąfazy amorficznejW obecności tylko samej, stałej fazy amorficznej liofilizat zapada się w trakcie zamrażania w temperaturach wyższych od temperatury zeszklenia.Wewnątrz miękkiej fazy amorficznej reakcje chemicznej degradacji są kinetycznie dużo szybsze niż wewnątrz fazy krystalicznej.Podsumowując, wyczerpujący przegląd literatury naukowej dotyczącej wpływu zarobek na stabilizację protein, pozwala znaleźć informacje sprzeczne o ich właściwościach. W żadnej teorii na temat relacji pomiędzy strukturą liofilizatu a jego stabilnością nie ma jednomyślności. Także rola polioli i aminokwasów pojedynczych lub połączonych, nie została opisana według zestawu ogótóych własności, ale została opisana ze sprzecznymi wynikami w zależności od badanych protein i stosowanych ilości zaróbek.I tak teraz, w sposób nieoczekiwany odkryto efekt synergetyczny mannitu i alaniny na stabilizację liofilizowanych protein. Wykazano, że ten efekt synergetyczny występuje tylko w zakresie względnych stężeń każdego z nich. Efekt optymalny jest ograniczony stosunkiem R, który oznacza stosunek masa maninitu/masy alaniny obecnych w liofilizacie, zawarty pomiędzy 0,1 a 1, zwłaszcza pomiędzy 0,2 a 0,8.Ponadto wykazano, że dla R zawartego pomiędzy 0,1 a 1:Liofilizat składa się fazy amorficznej i fazy krystalicznej.Faza amorficzna jest w większości utworzona z mannitu i proteiny.Faza krystaliczna składa się w większości z alaniny.Przyjmuje się hipotezy, że dla R zawartego pomiędzy 0,1 a 1:Wytworzona faza amorficzna kriochroni proteiny podczas zamrażania.Faza krystaliczna utrwala strukturę liofilizatu i zapobiega jego zapadaniu.To ten nieoczekiwany efekt synergetyczny pomiędzy współistniejącymi fazami amorficzną i krystaliczną stabilizuje liofilizowaną proteinę. Niniejszy wynalazek wykorzystuje uzyskiwanie tego efektu dla korzystnych stosunków R.Tak więc przedmiotem wynalazku jest stabilny, lifilizowany środek dopuszczalny farmaceutycznie, zawierający skuteczne ilości proteiny aktywnej biologicznie, bufor o pH optymalnym dla stabilizacji proteiny, manniti aminokwasy. Środek zgodnie z wynalazkiem charakteryzuje się tym, że zawiera alaninę i mannit w stosunku R = masa mannitu/masa alaniny zawartym pomiędzy 0,1 a 1.Proteina zawarta w środku pozostaje stabilna w formie liofilizowanej. Rozpuszczanie uzyskanego liofilizatujest szybkie i całkowite. Liofilizat nie ma wyglądu zapadniętego, a ilość zawartej w nim wody jest taka, że nie wpływa na obniżenie aktywności proteiny.Środek ten może zawierać inne dopuszczalne farmaceutycznie zarobki, znane z techniki, jak na przykład korozpuszczalniki, środki konserwujące, antyutleniacze lub czynniki chelatujące.Korzystnie środek jako proteinę zawiera hormon, zwłaszcza ludzki hormon wzrostu hGH (hormon wzrostu człowieka), enzym, zwłaszcza moczan oksydazy lub cytokinę, zwłaszcza interleukinę-13, zaś jako bufor korzystnie zawiera bufor fosforanowy.Środek korzystnie zawiera alaninę wpostaci krystalicznej, a mannit w postaci amorficznej.Korzystnie liofilizat składa się z fazy amorficznej i fazy krystalicznej, faza amorficzna w większości jest utworzona z mannitu i proteiny, faza krystaliczna w większości jest utworzona z alaniny.179 240Środek ma więc postać stałego liofilizatu, zawierającego proteinę kriochronionąw trakcie zamrażania przez stałąfazę amorficzną utworzonązasadniczo z proteiny i mannitu, która to faza amorficzna współistnieje wewnątrz liofilizatu uzyskanego po sublimacji i wysuszeniu roztworu zamrożonego z fazą krystaliczną utworzoną głównie przez alaninę.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR9405486A FR2719479B1 (fr) | 1994-05-04 | 1994-05-04 | Formulation stable lyophilisée comprenant une protéine: kit de dosage. |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
PL308416A1 PL308416A1 (en) | 1995-11-13 |
PL179240B1 true PL179240B1 (pl) | 2000-08-31 |
Family
ID=9462880
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PL95308416A PL179240B1 (pl) | 1994-05-04 | 1995-04-28 | Stabilny, liofilizowany srodek dopuszczalny farmaceutycznieoraz roztwór do iniekcji podskórnych, dozylnych lub domiesniowych PL PL PL |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5763409A (pl) |
EP (1) | EP0682944B1 (pl) |
JP (1) | JP2948125B2 (pl) |
KR (1) | KR100273053B1 (pl) |
CN (1) | CN1088583C (pl) |
AT (1) | ATE178484T1 (pl) |
AU (1) | AU694763B2 (pl) |
CA (1) | CA2148537C (pl) |
CZ (1) | CZ286195B6 (pl) |
DE (1) | DE69508837T2 (pl) |
DK (1) | DK0682944T3 (pl) |
ES (1) | ES2131781T3 (pl) |
FI (1) | FI117321B (pl) |
FR (1) | FR2719479B1 (pl) |
GR (1) | GR3030146T3 (pl) |
HU (1) | HU220220B (pl) |
IL (1) | IL113578A (pl) |
MX (1) | MX9502034A (pl) |
NO (1) | NO320364B1 (pl) |
NZ (1) | NZ272045A (pl) |
PL (1) | PL179240B1 (pl) |
RU (1) | RU2136306C1 (pl) |
SI (1) | SI0682944T1 (pl) |
TW (1) | TW397687B (pl) |
ZA (1) | ZA953596B (pl) |
Families Citing this family (56)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6267958B1 (en) | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
CN102416176A (zh) * | 1995-07-27 | 2012-04-18 | 基因技术股份有限公司 | 稳定等渗的冻干蛋白质制剂 |
US6685940B2 (en) | 1995-07-27 | 2004-02-03 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
DE19539574A1 (de) * | 1995-10-25 | 1997-04-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Zubereitungen und Verfahren zur Stabilisierung biologischer Materialien mittels Trocknungsverfahren ohne Einfrieren |
FR2740686B1 (fr) | 1995-11-03 | 1998-01-16 | Sanofi Sa | Formulation pharmaceutique lyophilisee stable |
EP0852951A1 (de) * | 1996-11-19 | 1998-07-15 | Roche Diagnostics GmbH | Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern |
FR2768341B1 (fr) * | 1997-09-18 | 2000-04-14 | Lab Francais Du Fractionnement | Composition pharmaceutique placebo lyophilisable destinee a imiter un medicament, notamment a base de proteines ou de polypeptides |
EP0913177A1 (de) * | 1997-11-03 | 1999-05-06 | Roche Diagnostics GmbH | Verfahren zur Herstellung trockener, amorpher Produkte enthaltend biologisch aktive Materialien mittels Konvektionstrocknung, insbesondere Sprühtrocknung |
EP0913178A1 (en) * | 1997-11-03 | 1999-05-06 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the manufacture of dry, amorphous products comprising biologically active material by means of convection drying and products obtainable by the process |
EP1071465A1 (en) * | 1998-03-18 | 2001-01-31 | Ronai, Peter | Amorphous glasses for stabilising sensitive products |
EP1154796B1 (en) * | 1999-02-22 | 2007-06-20 | University of Connecticut | Novel albumin-free factor viii formulations |
IL149355A0 (en) * | 1999-10-28 | 2002-11-10 | Inst Neftechimicheskogo Sintez | Polypeptide corporation |
US6653062B1 (en) | 2000-07-26 | 2003-11-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Preservation and storage medium for biological materials |
DE60139339D1 (de) | 2000-11-07 | 2009-09-03 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Stabilisierte interferonzusammensetzungen |
US6887462B2 (en) * | 2001-04-09 | 2005-05-03 | Chiron Corporation | HSA-free formulations of interferon-beta |
AU2002350622B2 (en) * | 2001-10-24 | 2006-09-14 | Pari Pharma Gmbh | Kit for the preparation of a pharmaceutical composition |
US7309468B2 (en) | 2002-05-13 | 2007-12-18 | Becton, Dickinson And Company | Protease inhibitor sample collection system |
US6803046B2 (en) * | 2002-08-16 | 2004-10-12 | Bracco International B.V. | Sincalide formulations |
JP2008500942A (ja) * | 2003-01-08 | 2008-01-17 | カイロン コーポレイション | 組織因子経路インヒビターまたは組織因子経路インヒビター改変体を含有する安定化凍結乾燥組成物 |
GB0304636D0 (en) * | 2003-02-28 | 2003-04-02 | Britannia Pharmaceuticals Ltd | Pharmaceutical composition for nasal delivery |
DE10333317A1 (de) * | 2003-07-22 | 2005-02-17 | Biotecon Therapeutics Gmbh | Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA) |
GB0404586D0 (en) * | 2004-03-01 | 2004-04-07 | Britannia Pharmaceuticals Ltd | Improvements in or relating to organic materials |
US11229746B2 (en) | 2006-06-22 | 2022-01-25 | Excelsior Medical Corporation | Antiseptic cap |
WO2008057550A2 (en) * | 2006-11-07 | 2008-05-15 | Sanofi Pasteur Biologics Co. | Stabilization of vaccines by lyophilization |
US7951368B2 (en) * | 2007-06-25 | 2011-05-31 | Amgen Inc. | Compositions of specific binding agents to hepatocyte growth factor |
GB0715285D0 (en) * | 2007-08-06 | 2007-09-12 | Britannia Pharmaceuticals Ltd | Improvements in or relating to powdered medicaments for nasal delivery |
US9078992B2 (en) | 2008-10-27 | 2015-07-14 | Pursuit Vascular, Inc. | Medical device for applying antimicrobial to proximal end of catheter |
BRPI0921429B1 (pt) | 2008-11-07 | 2022-07-12 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Formulação farmacêutica liofilizada estável, e, método para preparar um fator liofilizado estável |
RU2011126338A (ru) * | 2008-11-28 | 2013-01-10 | Эбботт Лэборетриз | Стабильные композиции антител и способы их стабилизации |
NZ599783A (en) * | 2009-11-03 | 2013-10-25 | Grifols Therapeutics Inc | Composition and use for alpha-1 proteinase inhibitor |
EP3257525A3 (en) * | 2009-12-22 | 2018-02-28 | Celldex Therapeutics, Inc. | Vaccine compositions |
RU2448156C1 (ru) * | 2011-03-17 | 2012-04-20 | Эспосито Трейдинг Лтд | Способ получения лиофилизированной субстанции |
RU2448158C1 (ru) * | 2011-03-24 | 2012-04-20 | Эспосито Трейдинг Лтд | Способ получения препарата фортелизин, обладающего фибринолитическими свойствами, и его применение для лечения инфаркта миокарда |
CA2841832C (en) | 2011-07-12 | 2019-06-04 | Pursuit Vascular, Inc. | Device for delivery of antimicrobial agent into a trans-dermal catheter |
DK2760998T3 (en) * | 2011-11-22 | 2017-04-24 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc | Devices with dried reagents for reconstitution as calibration and / or quality control solutions, and methods of preparation and use thereof |
US20140017318A1 (en) * | 2012-07-10 | 2014-01-16 | Kevin O'Connell | Method to produce a medicinal product comprising a biologically active protein and the resulting product |
US9314519B2 (en) | 2012-08-21 | 2016-04-19 | Intervet Inc. | Liquid stable virus vaccines |
US9393298B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-07-19 | Intervet Inc. | Liquid stable bovine virus vaccines |
US9480739B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-11-01 | Intervet Inc. | Bovine virus vaccines that are liquid stable |
AR097762A1 (es) | 2013-09-27 | 2016-04-13 | Intervet Int Bv | Formulaciones secas de vacunas que son estables a temperatura ambiente |
US10987425B2 (en) | 2013-09-27 | 2021-04-27 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Liquid formulation of long-acting human growth hormone immunoglobulin conjugate |
AR099470A1 (es) | 2014-02-17 | 2016-07-27 | Intervet Int Bv | Vacunas de virus de aves de corral líquidas |
TWI670085B (zh) | 2014-02-19 | 2019-09-01 | 荷蘭商英特威國際公司 | 液體穩定之豬病毒疫苗 |
US10046156B2 (en) | 2014-05-02 | 2018-08-14 | Excelsior Medical Corporation | Strip package for antiseptic cap |
JP6822978B2 (ja) | 2015-05-08 | 2021-01-27 | アイシーユー・メディカル・インコーポレーテッド | 治療薬のエミッタを受け入れるように構成された医療用コネクタ |
WO2016201202A1 (en) | 2015-06-11 | 2016-12-15 | Attwill Medical Solutions Inc. | Medical devices, systems, and methods utilizing antithrombin-heparin compositions |
PL3525865T3 (pl) | 2016-10-14 | 2023-02-06 | Icu Medical, Inc. | Nasadki dezynfekcyjne dla łączników medycznych |
WO2018204206A2 (en) | 2017-05-01 | 2018-11-08 | Icu Medical, Inc. | Medical fluid connectors and methods for providing additives in medical fluid lines |
US11110063B2 (en) | 2017-08-25 | 2021-09-07 | MAIA Pharmaceuticals, Inc. | Storage stable sincalide formulations |
US11541221B2 (en) | 2018-11-07 | 2023-01-03 | Icu Medical, Inc. | Tubing set with antimicrobial properties |
US11541220B2 (en) | 2018-11-07 | 2023-01-03 | Icu Medical, Inc. | Needleless connector with antimicrobial properties |
US11534595B2 (en) | 2018-11-07 | 2022-12-27 | Icu Medical, Inc. | Device for delivering an antimicrobial composition into an infusion device |
US11517732B2 (en) | 2018-11-07 | 2022-12-06 | Icu Medical, Inc. | Syringe with antimicrobial properties |
US11400195B2 (en) | 2018-11-07 | 2022-08-02 | Icu Medical, Inc. | Peritoneal dialysis transfer set with antimicrobial properties |
US11433215B2 (en) | 2018-11-21 | 2022-09-06 | Icu Medical, Inc. | Antimicrobial device comprising a cap with ring and insert |
EP4255552A1 (en) | 2020-12-07 | 2023-10-11 | ICU Medical, Inc. | Peritoneal dialysis caps, systems and methods |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5822445B2 (ja) * | 1982-07-08 | 1983-05-09 | 株式会社 ミドリ十字 | 安定な固体の人血漿コリンエステラ−ゼ製剤の製法 |
US5037644A (en) * | 1986-10-27 | 1991-08-06 | Cetus Corporation | Pharmaceutical compositions of recombinant interleukin-2 and formulation processes |
US5096885A (en) * | 1988-04-15 | 1992-03-17 | Genentech, Inc. | Human growth hormone formulation |
JPH0296536A (ja) * | 1988-09-29 | 1990-04-09 | Green Cross Corp:The | プラスミノゲン乾燥製剤 |
DE59007142D1 (de) * | 1990-01-18 | 1994-10-20 | Cereria Amos Sgarbi Spa | Grablicht. |
US5192743A (en) * | 1992-01-16 | 1993-03-09 | Genentech, Inc. | Reconstitutable lyophilized protein formulation |
SE9201073D0 (sv) * | 1992-04-03 | 1992-04-03 | Kabi Pharmacia Ab | Protein formulation |
DE4239877C1 (de) * | 1992-11-27 | 1994-03-17 | Boehringer Ingelheim Int | Stabilisierte Superoxid-Dismutase (SOD)-Zusammensetzung |
-
1994
- 1994-05-04 FR FR9405486A patent/FR2719479B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-04-26 CZ CZ19951081A patent/CZ286195B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-04-28 PL PL95308416A patent/PL179240B1/pl unknown
- 1995-04-28 JP JP7106227A patent/JP2948125B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-02 ES ES95401012T patent/ES2131781T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-02 EP EP95401012A patent/EP0682944B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-02 AT AT95401012T patent/ATE178484T1/de active
- 1995-05-02 NZ NZ272045A patent/NZ272045A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-05-02 DE DE69508837T patent/DE69508837T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-02 US US08/432,839 patent/US5763409A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-02 AU AU17774/95A patent/AU694763B2/en not_active Expired
- 1995-05-02 IL IL11357895A patent/IL113578A/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-05-02 SI SI9530241T patent/SI0682944T1/xx unknown
- 1995-05-02 DK DK95401012T patent/DK0682944T3/da active
- 1995-05-02 MX MX9502034A patent/MX9502034A/es unknown
- 1995-05-03 NO NO19951724A patent/NO320364B1/no not_active IP Right Cessation
- 1995-05-03 RU RU95107153/14A patent/RU2136306C1/ru active
- 1995-05-03 TW TW084104433A patent/TW397687B/zh not_active IP Right Cessation
- 1995-05-03 HU HU9501276A patent/HU220220B/hu unknown
- 1995-05-03 FI FI952119A patent/FI117321B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-05-03 CA CA002148537A patent/CA2148537C/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-04 CN CN95104797A patent/CN1088583C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-04 ZA ZA953596A patent/ZA953596B/xx unknown
- 1995-05-04 KR KR1019950011157A patent/KR100273053B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-05-06 GR GR990401232T patent/GR3030146T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
PL179240B1 (pl) | Stabilny, liofilizowany srodek dopuszczalny farmaceutycznieoraz roztwór do iniekcji podskórnych, dozylnych lub domiesniowych PL PL PL | |
US7074763B2 (en) | Stable formulations of nerve growth factor | |
US7244426B2 (en) | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent | |
CA2037884C (en) | Stabilized gonadotropin containing preparations | |
JPH05331071A (ja) | カルシトニン遺伝子関連ペプチド類の凍結乾燥組成物および安定化法 | |
US6152897A (en) | Syringe | |
AU659997B2 (en) | Stable pharmaceutical compositions containing a fibroblast growth factor | |
US5714458A (en) | Stable pharmaceutical compositions containing a fibroblast growth factor | |
US5384132A (en) | Stabilized gonadotropin containing preparations | |
US5270057A (en) | Stabilized gonadotropin containing preparations |