RU2010128247A - Синтез инсулинотропных пептидов с помощью комбинированных твердофазных и растворных методик - Google Patents

Синтез инсулинотропных пептидов с помощью комбинированных твердофазных и растворных методик Download PDF

Info

Publication number
RU2010128247A
RU2010128247A RU2010128247/10A RU2010128247A RU2010128247A RU 2010128247 A RU2010128247 A RU 2010128247A RU 2010128247/10 A RU2010128247/10 A RU 2010128247/10A RU 2010128247 A RU2010128247 A RU 2010128247A RU 2010128247 A RU2010128247 A RU 2010128247A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
amino acid
residues
seq
peptide fragment
sequence
Prior art date
Application number
RU2010128247/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Линь ЧЭНЬ (US)
Линь ЧЭНЬ
Ён-Квэй ХАН (US)
Ён-Квэй ХАН
Кристофер Р. РОБЕРТС (US)
Кристофер Р. Робертс
Original Assignee
Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch)
Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch), Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг filed Critical Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch)
Publication of RU2010128247A publication Critical patent/RU2010128247A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Способ получения инсулинотропного пептида, включающий следующие стадии: ! а) получение первого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 5) ! Z-QAAKEFIAWLVKX35-B', ! в которой X35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток, ! Z представляет собой N-концевую защитную группу, В' представляет собой -ОН, ! а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, ! б) сочетание в растворе первого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 6) ! Z-QAAKEFIAWLVKX35R-NH2, ! в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-, ! Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток, ! а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, ! в) удаление N-концевой защитной группы с целью получения третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 6) ! Z-QAAKEFIAWLVKX35R-NH2, ! в которой Z представляет собой водород, ! Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток, ! а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, ! г) получение четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 7) ! Z-TFTSDVX17-18YLEG-B', ! в которой X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток, !Z представляет собой N-концевую защитную группу, ! В' представляет собой -ОН, ! а один

Claims (29)

1. Способ получения инсулинотропного пептида, включающий следующие стадии:
а) получение первого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 5)
Z-QAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой X35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу, В' представляет собой -ОН,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
б) сочетание в растворе первого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 6)
Z-QAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
в) удаление N-концевой защитной группы с целью получения третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 6)
Z-QAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
г) получение четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 7)
Z-TFTSDVX17-18YLEG-B',
в которой X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой -ОН,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
д) сочетание в растворе четвертого пептидного фрагмента с третьим пептидным фрагментом с целью получения пятого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
е) удаление N-концевой защитной группы с целью получения шестого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 14)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
ж) получение седьмого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 9)
Z-HX8EX10-B',
в которой X8 и X10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой -ОН,
а Н и Е оба необязательно включают защиту боковой цепи, и
з) сочетание в растворе седьмого пептидного фрагмента с шестым пептидным фрагментом с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
2. Способ получения инсулинотропного пептида по п.1, включающий следующие стадии:
а) получение первого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 5)
Z-QAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой X35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
б) сочетание в растворе первого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 6)
Z-QAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
в) удаление N-концевой защитной группы с целью получения третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 6)
Z-QAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
г) получение четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 7)
Z-TFTSDVX17-18YLEG-B',
в которой X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
д) сочетание в растворе четвертого пептидного фрагмента с третьим пептидным фрагментом с целью получения пятого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
е) удаление N-концевой защитной группы с целью получения шестого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
ж) получение седьмого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 9)
Z-HX8EX10-B',
в которой X8 и X10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
а Н и Е оба необязательно включают защиту боковой цепи, и
з) сочетание в растворе седьмого пептидного фрагмента с шестым пептидным фрагментом с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
3. Способ по п.1 или 2, дополнительно включающий следующие стадии:
и) удаление N-концевой защитной группы инсулинотропного пептида с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, и
к) введение получаемого на стадии и) инсулинотропного пептида во взаимодействие с кислотой для снятия защиты с аминокислотных боковых цепей с целью получения инсулинотропного пептида со снятой защитой, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 11)
Z-HX8EX10TFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
а X8, X10 и X35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки.
4. Способ по п.1 или 4, в котором инсулинотропный пептид со снятой защитой характеризуется аминокислотной последовательностью (SEQ. ID No. 12)
HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-NH2.
5. Способ получения инсулинотропного пептида, включающий следующие стадии:
а) получение первого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 5)
Z-QAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой X35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой твердофазную смолу,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
б) снятие N-концевой защитной группы с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 5)
Z-QAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой Z представляет собой водород,
В' представляет собой твердофазную смолу,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
в) получение в растворе третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 7)
Z-TFTSDVX17-18YLEG-B',
в которой X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,,
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой -ОН,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
г) сочетание третьего пептидного фрагмента, находящегося в растворе, со вторым пептидным фрагментом, находящимся на твердой фазе, с целью получения четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 13)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAK.EFIAWLVKX35-B',
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой твердофазную смолу,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
д) удаление четвертого пептидного фрагмента из твердофазной смолы и сочетание в растворе четвертого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения пятого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
е) удаление N-концевой защитной группы с целью получения шестого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
ж) получение седьмого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 9) Z-HX8EX10-В', в которой Х8 и Х10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные,
необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
а Н и Е оба необязательно включают защиту боковой цепи, и
з) сочетание в растворе седьмого пептидного фрагмента с шестым пептидным фрагментом с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2, в которой
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
6. Способ получения инсулинотропного пептида по п.5, включающий следующие стадии:
а) получение первого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 5)
Z-QAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой X35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой твердофазную смолу,
и один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
б) снятие N-концевой защитной группы с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 5)
Z-QAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой Z представляет собой водород,
В' представляет собой твердофазную смолу,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
в) получение в растворе третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 7)
Z-TFTSDVX17-18YLEG-B',
в которой X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
г) сочетание третьего пептидного фрагмента, находящегося в растворе, со вторым пептидным фрагментом, находящимся на твердой фазе, с целью получения четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 13)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой твердофазную смолу,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
д) удаление четвертого пептидного фрагмента из твердофазной смолы и сочетание в растворе четвертого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения пятого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
е) удаление N-концевой защитной группы с целью получения шестого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
ж) получение седьмого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 9)
Z-HX8EX10-B',
в которой Х8 и Х10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
а Н и Е оба необязательно включают защиту боковой цепи, и
з) сочетание в растворе седьмого пептидного фрагмента с шестым пептидным фрагментом с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
X8, X10 и X35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
7. Способ по п.5 или 6, дополнительно включающий следующие стадии:
и) удаление N-концевой защитной группы инсулинотропного пептида с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
X35 Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, и
к) введение получаемого на стадии и) инсулинотропного пептида во взаимодействие с кислотой для снятия защиты с аминокислотных боковых цепей с целью получения инсулинотропного пептида со снятой защитой, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 11)
Z-HX8EX10TFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой
Z представляет собой водород,
а Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки.
8. Способ по п.5 или 6, в котором инсулинотропный пептид со снятой защитой характеризуется аминокислотной последовательностью (SEQ. ID No. 12)
HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-NH2.
9. Способ получения инсулинотропного пептида, включающий следующие стадии:
а) получение первого пептидного фрагмента или его аналога, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 13)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой -ОН,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
б) сочетание в растворе первого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
в) удаление N-концевой защитной группы с целью получения третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2, в которой
Z представляет собой водород,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
г) получение четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 9)
Z-HX8EX10-B',
в которой X8 и X10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой -ОН,
а Н и Е оба необязательно включают защиту боковой цепи, и
д) сочетание в растворе четвертого пептидного фрагмента с третьим пептидным фрагментом с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2, в которой
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
10. Способ получения инсулинотропного пептида по п.9, включающий следующие стадии:
а) получение первого пептидного фрагмента или его аналога, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 13)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35-B',
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
б) сочетание в растворе первого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
в) удаление N-концевой защитной группы с целью получения третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 8)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
г) получение четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 9)
Z-HX8EX10-B',
в которой X8 и X10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой -ОН,
а Н и Е оба необязательно включают защиту боковой цепи, и
д) сочетание в растворе четвертого пептидного фрагмента с третьим пептидным фрагментом с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х8, X10 и X35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
11. Способ по п.9 или 10, дополнительно включающий следующие стадии:
и) удаление N-концевой защитной группы инсулинотропного пептида с целью получения инсулинотропного пептида, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
X35 X8, X10 и X35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, и
к) введение получаемого на стадии и) инсулинотропного пептида во взаимодействие с кислотой для снятия защиты с аминокислотных боковых цепей с целью получения инсулинотропного пептида со снятой защитой, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 11)
Z-HX8EX10TFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
а Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки.
12. Способ по п.9 или 10, в котором в котором инсулинотропный пептид со снятой защитой характеризуется аминокислотной последовательностью (SEQ. ID No. 12) HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-NH2.
13. Пептид с аминокислотной последовательностью (SEQ. ID NO. 14)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKAib-B',
в которой Z выбрана из Н- и Fmoc-,
В' представляет собой -ОН или твердофазную смолу,
X17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
14. Пептид по п.13, в котором псевдопролиновый дипептидный остаток является псевдопролиновым остатком Ser-Ser.
15. Пептид с аминокислотной последовательностью (SEQ. ID NO. 15)
Z-TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKAibR-NH2, в которой
Z выбрана из Н- и Fmoc-,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
16. Пептид по п.15, в котором псевдопролиновый дипептидный остаток является псевдопролиновым остатком Ser-Ser.
17. Способ получения инсулинотропного пептида, включающий следующие стадии:
а) получение первого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 16)
Z-FIAWLVKX35-B',
в которой X35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
В' представляет собой твердофазную смолу,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
б) расщепление связи первого пептидного фрагмента, полученного на стадии а), с твердофазной смолой с целью получения в растворе первого пептидного фрагмента вида (SEQ ID NO. 16)
Z-FIAWLVKX35-B', в котором
В' представляет собой -ОН,
в) сочетание в растворе первого пептидного фрагмента с аргининамидом с целью получения второго пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 17)
Z-FIAWLVKX35R-NH2, в которой
Z представляет собой N-концевую защитную группу,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи,
г) удаление N-концевой защитной группы с целью получения третьего пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 17)
Z-FIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
18. Способ получения инсулинотропного пептида, включающий следующие стадии:
а) получение пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 18)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKE-B',
в которой Х8 и Х10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой твердофазную смолу,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, и
б) расщепление связи пептидного фрагмента, полученного на стадии а), с твердофазной смолой с целью получения в растворе пептидного фрагмента вида (SEQ ID NO. 18)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKE-B',
в котором В' представляет собой -ОН.
19. Способ по п.17, дополнительно включающий следующие стадии:
д) получение четвертого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 18)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKE-B',
в которой Х8 и Х10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
В' представляет собой твердофазную смолу,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи, и
е) расщепление связи четвертого пептидного фрагмента, полученного на стадии д), с твердофазной смолой с целью получения в растворе четвертого пептидного фрагмента вида (SEQ ID NO. 18)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKE-B',
в котором В' представляет собой -ОН.
20. Способ по п.19, дополнительно включающий следующую стадию:
ж) сочетание в растворе четвертого пептидного фрагмента с третьим пептидным фрагментом с целью получения пятого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу,
Х8 и Х10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
21. Способ по п.20, дополнительно включающий следующую стадию:
з) удаление N-концевой защитной группы с целью получения шестого пептидного фрагмента, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 10)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
Х8 и Х10 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
22. Способ по п.21, дополнительно включающий следующую стадию:
и) введение полученного на стадии з) инсулинотропного пептида во взаимодействие с кислотой для снятия защиты с аминокислотных боковых цепей с целью получения инсулинотропного пептида со снятой защитой, включающего аминокислотную последовательность (SEQ ID NO. 11)
Z-HX8EX10TFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой водород,
а Х8, Х10 и Х35 представляют собой независимые друг от друга ахиральные, необязательно пространственно затрудненные аминокислотные остатки.
23. Способ по любому из пп.17-22, в которой инсулинотропный пептид со снятой защитой характеризуется аминокислотной последовательностью (SEQ. ID No. 12) HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-NH2.
24. Пептид с аминокислотной последовательностью (SEQ. ID NO. 18)
Z-HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKE-В',
в которой Z выбрана из Н- и Fmoc-,
В' представляет собой -ОН или твердофазную смолу,
Х17-18 представляет собой псевдопролиновый дипептидный остаток,
а один или несколько остатков данной последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
25. Пептид согласно п.24, в котором псевдопролиновый дипептидный остаток является псевдопролиновым остатком Ser-Ser.
26. Пептид с аминокислотной последовательностью (SEQ ID NO. 17)
Z-FIAWLVKX35R-NH2,
в которой Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-, и
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
27. Пептид согласно п.26, в котором Х35 представляет собой Aib.
28. Пептид с аминокислотной последовательностью (SEQ ID NO. 16)
Z-FIAWLVKX35-B',
в которой В' является твердофазной смолой или -ОН,
Z представляет собой N-концевую защитную группу Fmoc-,
Х35 представляет собой ахиральный, необязательно пространственно затрудненный аминокислотный остаток,
а один или несколько остатков таковой последовательности необязательно включают защиту боковой цепи.
29. Пептид согласно п.28, в котором Х35 представляет собой Aib.
RU2010128247/10A 2007-12-11 2008-12-02 Синтез инсулинотропных пептидов с помощью комбинированных твердофазных и растворных методик RU2010128247A (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US723807P 2007-12-11 2007-12-11
US61/007,238 2007-12-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2010128247A true RU2010128247A (ru) 2012-01-20

Family

ID=40755926

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010128247/10A RU2010128247A (ru) 2007-12-11 2008-12-02 Синтез инсулинотропных пептидов с помощью комбинированных твердофазных и растворных методик

Country Status (17)

Country Link
US (1) US8227571B2 (ru)
EP (1) EP2222695A2 (ru)
JP (1) JP2011506376A (ru)
KR (1) KR20100102652A (ru)
CN (1) CN101903400B (ru)
AR (1) AR069608A1 (ru)
AU (1) AU2008334783A1 (ru)
BR (1) BRPI0820765A2 (ru)
CA (1) CA2707132A1 (ru)
CL (1) CL2008003660A1 (ru)
IL (1) IL205932A0 (ru)
MX (1) MX2010006044A (ru)
PE (1) PE20091214A1 (ru)
RU (1) RU2010128247A (ru)
TW (1) TWI374890B (ru)
WO (1) WO2009074483A2 (ru)
ZA (1) ZA201003849B (ru)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2344519B1 (en) * 2008-11-07 2016-09-28 The General Hospital Corporation C-terminal fragments of glucagon-like peptide-1 (glp-1)
CN102414220A (zh) * 2009-05-01 2012-04-11 霍夫曼-拉罗奇有限公司 使用固相和液相组合技术的促胰岛素肽合成
US20110313131A1 (en) 2010-06-21 2011-12-22 Christelle Carl Reversed phase hplc purification of a glp-1 analogue
US20120157382A1 (en) 2010-12-21 2012-06-21 Siegfried Krimmer Pharmaceutical glp-1 compositions having an improved release profile
EP2694530B1 (en) 2011-04-05 2018-02-14 Curara AB Novel peptides that bind to types of mhc class ii and their use in diagnosis and treatment
WO2013006692A2 (en) 2011-07-06 2013-01-10 The General Hospital Corporation Methods of treatment using a pentapeptide derived from the c-terminus of glucagon-like peptide 1 (glp-1)
WO2014077801A1 (en) 2012-11-13 2014-05-22 Ipsen Pharma S.A.S. Purification process for preparing highly pure taspoglutide
CN104936610A (zh) 2012-11-13 2015-09-23 益普生制药股份有限公司 Glp-1类似物的纯化方法
BR112015017183A2 (pt) 2013-01-28 2017-07-11 Solae Llc polipeptídeo isolado, produto e método de permissão da liberação de cck
HUE034308T2 (en) 2013-03-21 2018-02-28 Sanofi Aventis Deutschland Preparation of hydantoin-containing peptide products
US10450343B2 (en) 2013-03-21 2019-10-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Synthesis of cyclic imide containing peptide products
GR20140100479A (el) * 2014-09-23 2016-05-05 Novetide, Ltd., Συνθεση λιραγλουτιδης
CN111566123A (zh) * 2017-10-04 2020-08-21 佩特雷化学和生物制药学实验室有限公司 胰高血糖素样肽的制备方法
KR20200001546A (ko) * 2018-06-27 2020-01-06 주식회사 시선바이오머티리얼스 Pna 올리고머의 제조방법

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69926061T2 (de) * 1998-03-23 2006-06-01 Trimeris Inc. Verfahren und zusammensetzungen zur peptidsynthese (t-20)
US6903186B1 (en) * 1998-12-07 2005-06-07 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S Analogues of GLP-1
US6469136B1 (en) * 1999-07-07 2002-10-22 Trimeris, Inc. Methods and composition for peptide synthesis
CN1918177A (zh) * 2003-12-18 2007-02-21 诺和诺德公司 新型glp－1化合物
CA2552526A1 (en) * 2004-01-08 2005-07-21 Theratechnologies Inc. Glucagon-like peptide-1 analogs with long duration of action
EP1833843B1 (en) * 2004-12-30 2009-10-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Synthesis of peptide t-20 using peptide intermediate fragments
EP1856142B1 (en) * 2004-12-30 2009-08-12 F. Hoffmann-Roche AG Synthesis of peptide t-1249 using peptide intermediate fragments
WO2006069727A2 (en) * 2004-12-30 2006-07-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Synthesis of peptide t-20 using peptide intermediate fragments
AP2007004227A0 (en) * 2005-05-05 2007-12-31 Cadila Healthcare Ltd Novel compounds as GLP-1 agonists
DK1987052T3 (da) * 2006-02-08 2011-08-15 Lonza Ag Syntese af glucagonlignende peptider
BRPI0713575A2 (pt) * 2006-06-23 2013-02-13 Hoffmann La Roche mÉtodo para preparar um peptÍdeo insulinotràpico, fragmento de peptÍdeo, peptÍdeo ou uma contraparte do mesmo
JP5473925B2 (ja) * 2007-10-27 2014-04-16 コーデン ファーマ コロラド インコーポレイテッド 固相および溶液相の組み合わせ技法を使用するインスリン分泌性ペプチドの合成

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0820765A2 (pt) 2015-06-16
CN101903400B (zh) 2013-12-18
TW200927756A (en) 2009-07-01
PE20091214A1 (es) 2009-08-14
TWI374890B (en) 2012-10-21
AU2008334783A1 (en) 2009-06-18
US8227571B2 (en) 2012-07-24
JP2011506376A (ja) 2011-03-03
EP2222695A2 (en) 2010-09-01
CN101903400A (zh) 2010-12-01
KR20100102652A (ko) 2010-09-24
CA2707132A1 (en) 2009-06-18
ZA201003849B (en) 2011-04-28
CL2008003660A1 (es) 2010-01-04
WO2009074483A3 (en) 2010-05-14
MX2010006044A (es) 2010-06-23
WO2009074483A2 (en) 2009-06-18
US20090292108A1 (en) 2009-11-26
AR069608A1 (es) 2010-02-03
IL205932A0 (en) 2010-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2010128247A (ru) Синтез инсулинотропных пептидов с помощью комбинированных твердофазных и растворных методик
Kawakami et al. Peptide thioester preparation based on an NS acyl shift reaction mediated by a thiol ligation auxiliary
RU2009101969A (ru) Синтез инсулинотропных пептидов
RU2013118446A (ru) Способ производства дегареликса и его промежуточных соединений
CN102164608A (zh) 制备普兰林肽的方法
AR062065A1 (es) Anticuerpo humanizado
JP2002505672A (ja) 水溶液中における保護されていないか又はｎ−末端システインで保護されたペプチドの固相での自然化学連結
RU2013147468A (ru) Сайт-специфически монопегилированные аналоги эксендина и способ их получения
RU2014130277A (ru) Способ синтеза терапевтических пептидов
Sharma et al. Tandem thiol switch synthesis of peptide thioesters via N–S acyl shift on thiazolidine
Mahindra et al. Microwave-assisted solution phase peptide synthesis in neat water
CN102414220A (zh) 使用固相和液相组合技术的促胰岛素肽合成
CN105085634A (zh) 一种地加瑞克的制备方法
AR073654A1 (es) Proceso para la sintesis del (aib8,35) hglp-1(7-36) -nh2
WO2013042129A1 (en) Improved process for preparation of bivalirudin
CA3034810C (en) In-situ solvent recycling process for solid phase peptide synthesis at elevated temperatures
DK1771463T3 (da) Fremgangsmåde til peptidsyntese
US20170369524A1 (en) In-situ Solvent Recycling Process for Solid Phase Peptide Synthesis at Elevated Temperatures
CN102702343A (zh) 一种固相合成替莫瑞林的方法
Hosken et al. Methionyl sequences in low-sulphur proteins of wool
RU2021106349A (ru) Жидкофазные пути для гексапептидов wnt
El-Agnaf et al. The synthesis of some peptides related to the amyloid β peptide 25–35: Use of N-(2-hydroxy-4-methoxybenzyl) protection
UA36558U (en) Process for the hexapeptide preparation
Ten Kortenaar et al. Synthesis of cytochrome c-(66-104) nonatriacontapeptide and analogues
RU2218347C2 (ru) Способ получения тридекапептида и пентапептид для его получения

Legal Events

Date Code Title Description
FA94 Acknowledgement of application withdrawn (non-payment of fees)

Effective date: 20131223