RU2006101561A - Способы обнаружения болезни альцгеймера - Google Patents

Claims (38)

1. Способ диагностики или прогноза болезни Альцгеймера у лица, отличающийся тем, что он включает по меньшей мере одну стадию обнаружения наличия полиморфизма гена АВСА2.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что он включает по меньшей мере одну стадию обнаружения наличия содержащегося в незначительном количестве аллеля полиморфизма гена АВСА2, генетически ассоциированного с болезнью Альцгеймера.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что он включает по меньшей мере одну стадию обнаружения наличия содержащегося в незначительном количестве аллеля полиморфизма rs908832 гена АВСА2.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что вышеуказанные стадии обнаружения осуществляют исходя из биологических образцов.

5. Способ диагностики или прогноза болезни Альцгеймера у лица по п.4, отличающийся тем, что вышеуказанными биологическими образцами являются образцы, включающие ядросодержащие клетки.

6. Способ диагностики или прогноза болезни Альцгеймера у лица по п.4 или 5, отличающийся тем, что вышеуказанными биологическими образцами являются образцы крови, спермы или волос.

7. Способ диагностики или прогноза болезни Альцгеймера у лица по п.1, отличающийся тем, что вышеуказанные стадии обнаружения наличия или отсутствия ДНК, несущей полиморфизм, осуществляют способами полимеразной цепной реакции (PCR), гибридизации, переноса на мембрану по методу Саузерна, рестрикции с помощью нуклеаз, анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (RFLP) или прямого секвенирования, или их комбинацией.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что он включает

a) экстракцию ДНК вышеуказанного лица,

b) амплификацию вышеуказанной выделенной ДНК с помощью праймеров, способных амплифицировать последовательность, соответствующую полиморфизму rs908832 гена АВСА2, и

c) обнаружение наличия по меньшей мере одного из аллелей полиморфизма rs908832 гена АВСА2 в амплифицированной ДНК.

9. Способ по п.8, отличающийся тем, что стадия амплификации b) включает полимеразную цепную реакцию (PCR).

10. Способ по п.8, отличающийся тем, что амплифицированную ДНК, несущую содержащийся в незначительном количестве аллель полиморфизма rs908832, отличают от амплифицированной ДНК, не несущей этого аллеля, с помощью способа с использованием активности 5'-нуклеазы ДНК-полимеразы I (TaqMan).

11. Способ по п.8, отличающийся тем, что амплифицированную ДНК, несущую содержащийся в незначительном количестве аллель полиморфизма rs908832, отличают от амплифицированной ДНК, не несущей этого полиморфизма, путем анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (RFLP).

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что рестрикционные фрагменты получают путем рестрикции амплифицированной ДНК с помощью фермента рестрикции до миграции в геле агарозы, переноса на мембрану по методу Саузерна и гибридизации.

13. Способ обнаружения полиморфизма rs908832 гена АВСА2, включающий определение нуклеотида в положении 2185 транскрипта, кодирующего белок АВСА2.

14. Способ анализа биологических образцов, взятых у лица, отличающийся тем, что

a) определяют генотип гена АВСА2 и

b) конвертируют полученные данные для прогнозирования риска развития болезни Альцгеймера у вышеуказанного лица и эффективности терапевтического лечения, предусматриваемого для этого заболевания.

15. Праймер, позволяющий осуществлять амплификацию содержащегося в незначительном количестве аллеля полиморфизма rs908832.

16. Праймер по п.15, содержащий примерно 15-30 смежных нуклеотидов последовательности SEQ ID №3.

17. Праймер по п.16, отличающийся тем, что он имеет последовательность SEQ ID №6.

18. Праймер по п.15, содержащий примерно 15-30 смежных нуклеотидов последовательности, комплементарной SEQ ID №3.

19. Праймер по п.18, отличающийся тем, что он имеет последовательность SEQ ID №7.

20. Зонд, содержащий примерно 12-17 смежных нуклеотидов последовательности, комплементарной SEQ ID №3.

21. Зонд по п.20, отличающийся тем, что он имеет последовательность SEQ ID №8.

22. Зонд, содержащий примерно 12-17 смежных нуклеотидов последовательности, комплементарной SEQ ID №4.

23. Зонд по п.22, отличающийся тем, что он имеет последовательность SEQ ID №9.

24. Праймеры и зонды, комплементарные праймерам и зондам по любому из пп.16-23.

25. Набор или комплект для диагностики или прогноза болезни Альцгеймера, отличающийся тем, что он включает различные компоненты, необходимые для осуществления обнаружения наличия или отсутствия ДНК, несущей содержащийся в незначительном количестве аллель полиморфизма rs908832.

26. Набор по п.25, отличающийся тем, что он включает пару праймеров по любому из пп.15-19.

27. Трансгенные животные, исходные клеточные линии и линии клеток, образующиеся путем дифференцировки из этих исходных клеточных линий, в геном которых встроена по меньшей мере одна последовательность геномной экзогенной ДНК, несущей содержащийся в незначительном количестве аллель полиморфизма rs908832 гена АВСА2.

28. Трансгенные животные по п.27, отличающиеся тем, что их выбирают из млекопитающих, исключая человека.

29. Способ получения трансгенных животных, исходных клеточных линий и линий клеток, образующихся путем дифференцировки из этих исходных клеточных линий, по любому из пп.27 и 28, отличающийся тем, что он включает генерацию трансгенных животных, исходных клеточных линий и линий клеток, образующихся путем дифференцировки из этих исходных клеточных линий, включающих содержащийся в незначительном количестве аллель полиморфизма rs908832 человеческого гена АВСА2.

30. Применение трансгенных животных, исходных клеточных линий и линий клеток, образующихся путем дифференцировки из этих исходных клеточных линий, по любому из пп.27 и 28, для тестирования активности агентов или способов, предназначенных для профилактики и/или лечения болезни Альцгеймера.

31. Клетка, экстрагированная из трансгенных животных, таких как указанные по любому из пп.27 и 28.

32. Применение клетки по п.31 в целях выявления соединений, предназначенных для лечения болезни Альцгеймера.

33. Применение соединения или смеси соединений, известных своей активностью против болезни Альцгеймера, в целях получения лекарственного средства для лечения пациента, пораженного болезнью Альцгеймера, у которого до лечения обнаружено наличие содержащегося в незначительном количестве аллеля полиморфизма rs908832 гена АВСА2.

34. Применение по п.33, отличающееся тем, что заболевание относится к типу ранней болезни Альцгеймера.

35. Способ селекции соединения, предназначенного для введения индивиду с заболеванием, ассоциированным с содержащимся в незначительном количестве аллелем полиморфизма rs908832 гена АВСА2, отличающийся тем, что он включает

а. по меньшей мере одну стадию обнаружения наличия содержащегося в незначительном количестве аллеля полиморфизма rs908832 гена АВСА2 в биологическом образце вышеуказанного индивида и

b. селекцию соответствующего соединения, если имеется вышеуказанный аллель.

36. Способ по п.35, отличающийся тем, что заболеванием, ассоциированным с содержащимся в незначительном количестве аллелем полиморфизма rs908832, является болезнь Альцгеймера.

37. Способ селекции соединения, предназначенного для введения индивиду с болезнью Альцгеймера, отличающийся тем, что он включает

а. по меньшей мере одну стадию обнаружения наличия содержащегося в незначительном количестве аллеля полиморфизма rs908832 гена АВСА2 в биологическом образце вышеуказанного индивида и

b. селекцию соответствующего соединения, если имеется вышеуказанный аллель.

38. Способ лечения болезни Альцгеймера, отличающийся тем, что он включает по меньшей мере одну стадию обнаружения наличия содержащегося в незначительном количестве аллеля полиморфизма rs908832 гена АВСА2 у лица и введение соединения или смеси соединений, известных своей активностью против болезни Альцгеймера, лицу, имеющему содержащийся в незначительном количестве аллель полиморфизма rs908832 гена АВСА2.