RU2002133236A

RU2002133236A - Новая фармацевтическая композиция

Info

Publication number: RU2002133236A
Application number: RU2002133236/15A
Authority: RU
Inventors: Аполон ПАПАДИМИТРИОУ
Original assignee: Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date: 2000-05-15
Filing date: 2001-05-08
Publication date: 2004-06-27

Claims

1. Жидкая фармацевтическая композиция, содержащая протеин эритропоэтин, многозарядный неорганический анион в фармацевтически приемлемом буфере, пригодном для поддержания значения рН в растворе в диапазоне от приблизительно 5,5 до приблизительно 7,0, и необязательно один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов.

2. Композиция по п.1, представляющая собой водный раствор.

3. Композиция по пп.1 и 2, представляющая собой изотонический раствор.

4. Композиция по пп.1-3, где анион представляет собой многозарядный анион сильной неорганической кислоты.

5. Композиция по пп.1-4, где анион выбирают из группы, включающей сульфат, цитрат или фосфат.

6. Композиция по пп.1-5, где анион представляет собой сульфат.

7. Композиция по п.6, содержащая от 10 до 200 ммол./л сульфата.

8. Композиция по пп.1-7, где значение рН составляет от 5,8 до 6,7.

9. Композиция по п.8, где значение рН составляет от 6,0 до 6,5.

10. Композиция по п.9, где значение рН составляет приблизительно 6,2.

11. Композиция по пп.1-10, где буфер выбирают из группы, включающей фосфатный буфер или аргинин/Н₂SO₄/Na₂SO₄-буфер.

12. Композиция по п.11, где буфер представляет собой 10-50 миллимолярный фосфатный буфер.

13. Композиция по пп.1-12, где композиция содержит один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов.

14. Композиция по п.13, где один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов выбирают из группы, включающей фармацевтически приемлемые солей, разбавители, растворители и консерванты.

15. Композиция по пп.13 и 14, где фармацевтически приемлемые эксципиенты выбирают из группы, включающей агенты для поддержания тоничности, полиолы, антиоксиданты и неионогенные поверхностно-активные вещества.

16. Композиция по пп.13-15, где фармацевтически приемлемый эксципиент представляет собой полиол.

17. Композиция по п.16, где полиол выбирают из группы, включающей маннит, сорбит, глицерин, трегалозу и сахарозу.

18. Композиция по п.17, где полиол представляет собой маннит.

19. Композиция по пп.13-18, содержащая антиоксидант.

20. Композиция по п.19, где антиоксидант представляет собой метионин.

21. Композиция по пп.13-20, содержащая до 1 ммоля/л CaCl₂.

22. Композиция по пп.15-22, где неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80, полисорбат 20 или плуроник F68.

23. Композиция по п.22, где неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой плуроник F68.

24. Композиция по п.22 или 23, где композиция содержит до 1% (мас./об.) неионогенного поверхностно-активного вещества.

25. Композиция по любому из пп.22-24, где композиция содержит до 0,1% (мас./об.) неионогенного поверхностно-активного вещества.

26. Композиция по пп.1-25, где протеин эритропоэтин представляет собой человеческий эритропоэтин.

27. Композиция по п.26, где протеин эритропоэтин экспрессируют с помощью эндогенной активации гена.

28. Композиция по пп.26-27, где протеин эритропоэтин имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1 или в SEQ ID NO:2

29. Композиция по пп.26-28, где протеин имеет последовательность человеческого эритропоэтина, модифицированную путем добавления от 1 до 6 сайтов гликозилирования.

30. Композиция по пп.26-28, где протеин эритропоэтин имеет последовательность человеческого эритропоэтина, модифицированную путем модификации, выбранной из группы, включающей

Asn³⁰, Thr³²,

Asn⁵¹, Thr⁵³,

Asn⁵⁷, Thr⁵⁹,

Asn⁶⁹,

Asn⁶⁹, Thr⁷¹,

Ser⁶⁸, Asn⁶⁹Thr³²,

Val⁸⁷Asn⁸⁸, Thr⁹⁰,

Ser⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰,

Ser⁸⁷Asn⁸⁸Gly⁸⁹Thr⁹⁰,

Ser⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰Thr⁹²,

Ser⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰Ala¹⁶²,

Asn⁶⁹Thr⁷¹Ser⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰,

Asn³⁰Thr³²Val⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰,

Asn⁸⁹Ile⁹⁰Thr⁹¹,

Ser87Asn⁸⁹Ile⁹⁰Thr⁹¹,

Asn¹³⁶Thr¹³⁸,

Asn¹³⁸Thr¹⁴⁰,

Thr¹²⁵ и

Pro¹²⁴Thr^125.

31. Композиция по пп.26-30, где последовательность человеческого эритропоэтина модифицируют путем перегруппировки по меньшей мере одного сайта гликозилирования.

32. Композиция по п.31, где перегруппировка включает делецию любого из N-связанных сайтов гликозилирования человеческого эритропоэтина и добавление N-связанного сайта гликозилирования в положение 88 последовательности человеческого эритропоэтина.

33. Композиция по п.31, где гликопротеин имеет последовательность человеческого эритропоэтина, модифицированную путем модификации, выбранной из группы, включающей

Gln²⁴Ser⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰,

Gln³⁸Ser⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰ и

Gln⁸³Ser⁸⁷Asn⁸⁸Thr⁹⁰.

34. Композиция по пп.26-33, где указанный в любом из пунктов протеин эритропоэтин является пэгилированным.

35. Композиция по п.34, где протеин эритропоэтин представляет собой конъюгат, где конъюгат включает гликопротеин эритропоэтин, имеющий по меньшей мере одну свободную аминогруппу и обладающий биологической активностью in vivo, обусловливающей увеличение производства ретикулоцитов и эритроцитов клетками костного мозга, и выбранный из группы, включающей человеческий эритропоэтин и его аналоги, которые имеют последовательность человеческого эритропоэтина, модифицированную добавлением от 1 до 6 сайтов гликозилирования или перегруппировкой по меньшей мере одного сайта гликозилирования, этот гликопротеин ковалентно связан с “n” поли(этиленгликольными) группами формулы -CO-(CH₂)_x-(OCH₂CH₂)_m-OR, где радикал -СО каждой поли(этиленгликольной) группы образует амидную связь с одной из этих аминогрупп, R обозначает (низш.)алкил, х = 2 или 3, m = 450-900, n = 1-3, и n и m выбирают таким образом, чтобы молекулярная масса конъюгата за вычетом молекулярной массы протеина эритропоэтина составляла от 20 до 100 кДа.

36. Композиция по п.35, содержащая протеин эритропоэтин формулы

P-[NHCO-(CH₂)_x-(OCH₂CH₂)_m-OR]n (I)

где m, n, x и R имеют указанные выше значения;

Р представляет собой остаток гликопротеина без n аминогрупы(п), которая(ые) образуют амидную(ые) связь(и) с поли(этиленгликольной(ыми)) группой(ами).

37. Композиция по п.36, где в формуле (I) x = 2, m = 650 - 750, n = 1 и R обозначает метил.

38. Композиция по п.34, где протеин эритропоэтин представляет собой конъюгат, причем конъюгат содержит гликопротеин эритропоэтин, имеющий по меньшей мере одну свободную аминогруппу и обладающий биологической активностью in vivo, вызывающей увеличение производства ретикулоцитов и эритроцитов клетками костного мозга, и который выбирают из группы, включающей человеческий эритропоэтин и его аналоги, имеющие первичную структуру человеческого эритропоэтина, модифицированную путем добавления 1-6 сайтов гликозилирования, где гликопротеин ковалентно связан с одной-тремя (низш.)алкоксиполи(этиленгликольными) группами, причем каждая поли(этиленгликольная) группа ковалентно связана с гликопротеином с помощью линкера формулы -C(O)-X-S-Y с фрагментом С(O) линкера, в результате чего образуется амидная связь с одной из аминогрупп, Х обозначает (CH₂)_k- или -CH₂(O-CH₂-CH₂)_k-, k = 1-10, Y обозначает

или

средняя молекулярная масса каждого поли(этиленгликольного) фрагмента составляет от приблизительно 20 до приблизительно 40 кДа и молекулярная масса конъюгата составляет от приблизительно 51 до приблизительно 175 кДа.

39. Конъюгат по п.38 формулы

где n = 1 - 3;

m = 450 - 900;

R обозначает (низш.)алкил;

Х обозначает -(CH₂)_k- или -CH₂(O-CH₂-CH₂)_k-;

Р обозначает остаток гликопротеина эритропоэтина без аминогруппы или групп, образующих амидную связь с X.

40. Конъюгат по п.39 формулы

где H = 1 - 3;

m = 450 - 900;

R обозначает (низш.)алкил;

Х обозначает -(CH₂)_k- или -CH₂(O-CH₂-CH₂)_k-;

41. Композиция по пп.1-40, содержащая от 10 до 10000 мкг протеина эритропоэтина на миллиметр.

42. Композиция по пп.1-41, содержащая от 10 до 10000 мкг протеина эритропоэтина на миллиметр, 10-200 ммол./л сульфата и 10-50 ммол./л фосфата, рН 6,0-6,5.

43. Композиция по п.42, содержащая до 20 мМ метионина, 1-5% (мас./об.) полиола, до 0,1% (мас./об.) плуроника F68 и необязательно до 1 мМ CaCl₂.

44. Композиция по п.42 или 43, содержащая 10-10000 мкг протеина эритропоэтина на миллиметр, 40 ммол./л сульфата, 10 ммол./л фосфата, 3% (мас./об.) маннита, 10 мМ метионина, 0,01% (мас./об.) плуроника F68, рН 6,2.

45. Композиция по пп.1-41, содержащая 10-10000 мкг протеина эритропоэтина на миллиметр, 10-100 мол./л NaCl, 10-50 ммол./л фосфата, рН 6,0-7,0, необязательно 1-5% полиола.

46. Композиция по п.45, содержащая до 20 мМ метионина, до 0,1% плуроника F68 и необязательно 7,5 мкмол./л CaCl₂.

47. Композиция по п.45 или 46, содержащая 10-10000 мкг протеина эритропоэтина на миллиметр, 100 ммол./л NaCl, 10 мМ метионина, 0,01% плуроника F68 и 10 ммол./л фосфата, рН 7,0.

48. Композиция по пп.1-41, содержащая 10-10000 мкг протеина эритропоэтина на миллиметр, 10-50 ммол./л аргинина, рН 6,0-6,5, 10-100 ммол./л сульфата натрия.

49. Композиция по п.48, содержащая до 20 мМ метионина, до 0,1% плуроника F68, необязательно до 1 мкмол./л CaCl₂ и необязательно 1-5% полиола.

50. Композиция по п.48 или 49, содержащая 10-10000 мкг протеина эритропоэтина на миллиметр, 40 ммол./л аргинина, рН 6,2, 30 ммол./л сульфата натрия, 3% маннита, 10 мМ метионина, 0,01% плуроника F68, необязательно 1 ммол./л CaCl₂.

51. Композиция по пп.1-41, содержащая 25-2500 мкг/мл эритропоэтина, и а) 10 мМ фосфата натрия/калия, 100 мМ NaCl, рН 7,0 или б) 10 мМ фосфата натрия, 120 мМ сульфата натрия, рН 6,2 или в) 10 мМ фосфата натрия, 40 мМ сульфата натрия, 3% маннита, рН 6,2 или г) 10 мМ фосфата натрия, 40 мМ сульфата натрия, 3% маннита, 10 мМ метионин, 0,01% плуроника F68, рН 6,2 или д) 40 мМ аргинина, 30 мМ сульфата натрия, 3% маннита, рН 6,2 или е) 40 мМ аргинина, 30 мМ сульфата натрия, 3% маннита, рН 6,2, 0,01% плуроника F68, рН 6,2.

52. Композиция по пп.1-51, где количество эритропоэтина составляет 50, 100, 400, 800 или 2500 мкг/мл.

53. Композиция по п.52, содержащая 10 мМ фосфата натрия, 40 мМ сульфата натрия, 3% маннита, 10 мМ метионина, 0,01% плуроника F68, рН 6,2.

54. Композиция по п.52, содержащая 40 мМ аргинина, 30 мМ сульфата натрия, 3% маннита, 10 мМ метионина, 0,01% плуроника F68, рН 6,2.

55. Композиция по пп.1-54, представляющая собой лиофилизат или высушенный распылением порошок.

56. Способ получения композиции по любому из пп.1-54, предусматривающий смешение протеина эритропоэтина с раствором, содержащим несущий много отрицательных зарядов анион и необязательно один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов.

57. Применение композиции по любому из пп.1-54 для приготовления лекарственных средств, которые можно применять для лечения и предупреждения заболеваний, связанных с анемией у пациентов с хронической почечной недостаточностью (ХПН), больных СПИДом и/или для лечения раковых больных, подвергающихся химиотерапии.

58. Способ лечения и предупреждения заболеваний, сопровождающихся анемией у пациентов с хронической почечной недостаточностью (ХПН), больных СПИДом и раковых больных, подвергающихся химиотерапии, предусматривающий стадию введения пациенту композиции по любому из пп.1-54.

59. Устройство для местного и системного непрерывного введения композиции по любому из пп.1-54.

60. Изобретение как оно описано выше.