AR049580A1 - Epo carbamilada y metodo para su produccion - Google Patents

Abstract

Reivindicacion 1: Un método para la produccion de una proteína de eritropoyetina carbamilada que tiene menos de aproximadamente 40% de proteína agregada y menos de aproximadamente 40% en peso de proteína sobre- y subcarbamilada, medida por espectrometría de masa ESI, donde dicho método comprende poner en contacto una cantidad de eritropoyetina con una cantidad de cianato, a una temperatura, un pH y durante un tiempo suficientes para que los grupos amina en las lisinas y los aminoácidos N-terminales de la eritropoyetina se carbamilen en al menos aproximadamente de 90%. Reivindicacion 23: Un método para la produccion de una proteína de eritropoyetina carbamilada que tiene menos de aproximadamente 3% de proteína agregada y menos de aproximadamente 40% en peso de proteína sobre- y subcarbamilada, medida por espectrometría de masa ESI, donde dicho método comprende: (a) el contacto de una cantidad de una proteína de eritropoyetina con una cantidad de cianato, a una temperatura, un pH y durante un tiempo suficientes para que al menos aproximadamente el 90% de los residuos amina en la lisina y los aminoácidos N-terminales de la eritropoyetina se carbamilen; y (b) la purificacion de la proteína de eritropoyetina carbamilada usando intercambio anionico, intercambio cationico, cromatografía de interaccion hidrofoba, cromatografía de fase inversa, cromatografía de afinidad o cromatografía de exclusion por tamano. Reivindicacion 44: Una proteína de eritropoyetina carbamilada que tiene al menos aproximadamente 90% de carbamilacion de las aminas primarias de la lisina y los aminoácidos amino terminales; menos de aproximadamente 3% de proteína agregada; y menos de aproximadamente 40% en peso de proteína sobre- y subcarbamilada, medida por espectrometría de masa ESI. Reivindicacion 61: Una composicion farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una proteína de eritropoyetina carbamilada que tiene al menos aproximadamente 90% de carbamilacion de las aminas primarias de la lisina y los aminoácidos amino terminales; menos de aproximadamente 3% de proteína agregada; y menos de aproximadamente 40% en peso de proteína sobre- y subcarbam,ilada, y un portador farmacéuticamente aceptable. Reivindicacion 76: El uso de acuerdo con la reivindicacion 75, donde la enfermedad es un accidente cerebrovascular, un evento isquémico, una lesion de la médula espinal, una lesion cerebral traumática, esclerosis multiple, esclerosis lateral amiotrofica, enfermedad de Alzheimer, esquizofrenia o neuropatía inducida por quimioterapia.