RU2000100316A

RU2000100316A - Композиции фитазы с высокой активностью

Info

Publication number: RU2000100316A
Application number: RU2000100316/13A
Authority: RU
Inventors: Рудольф Каролус Мария БАРЕНДСЕ; Габриэль Маринус Хенрикус Местерс; Карл Сидониус Мария АНДЕЛА
Original assignee: Дсм Н.В.
Priority date: 1997-06-04
Filing date: 1998-06-04
Publication date: 2002-01-27

Claims

1. Способ получения водной жидкости, включающей фитазу, где способ включает
(a) культивирование в водной среде микроорганизма рода Aspergillus или Trichoderma, имеющего гетерологичный ген фитазы, контролируемый промотором глюкоамилазы (для Aspergillus) или целлобиогидролазы (для Trichoderma), в условиях, которые позволяют экспрессироваться рекомбинантной фитазе, где среда включает в качестве пищи для микроорганизма усваиваемый источник углерода и усваиваемый источник азота;
(b) фильтрацию водной среды для удаления микроорганизмов, что дает водный фильтрат; и
(c) обработку фильтрата из (b) с помощью ультрафильтрации, что дает водную жидкость с концентрацией фитазы по меньшей мере 14000 FTU/г (фитазных единиц на г).

2. Способ по п. 1, в котором микроорганизм представляет собой Aspergillus niger, Aspergillus oryzae или Trichoderma reesei.

3. Способ по п. 1 или 2, в котором микроорганизм не обладает геном глюкоамилазы (AG) или не экспрессирует его.

4. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором микроорганизм обладает множественными копиями гена фитазы.

5. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором водная жидкость является по существу свободной от такаамилазы.

6. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором по существу все источники углерода и азота в среде были усвоены микроорганизмами перед фильтрацией в (b).

7. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором водная жидкость является свободной от источников углерода и/или азота.

8. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором фитаза экспрессируется в микроорганизме с сигнальной последовательностью глюкоамилазы.

9. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором ни водный фильтрат, ни водная жидкость не подвергаются кристаллизации и/или стадии обесцвечивания.

10. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором полученная водная жидкость обладает активностью фитазы 18000 FTU/г или более.

11. Водная жидкость, получаемая с помощью способа в соответствии с любым предшествующим пунктом, включающая фитазу в концентрации по меньшей мере 14000 FTU/г.

12. Водная жидкость по п. 11, которая происходит из культуральной среды, в которой экспрессировалась фитаза.

13. Способ получения гранулированного материала, содержащего фитазу, пригодный для применения в корме для животных, причем способ включает обработку твердого носителя, включающего по меньшей мере 15 (вес. /вес. )% съедобного углеводного полимера, и водную жидкость по п. 11 или 12 для получения гранул, содержащих фитазу.

14. Способ по п. 13, включающий смешивание водной жидкости и носителя и перемешивание полученной смеси.

15. Способ по п. 14, в котором гранулы затем сушат.

16. Способ по п. 13 или 14, причем способ включает
a) смешивание водной жидкости, содержащей фитазу, с твердым носителем;
b) механическую переработку смеси, полученной в а), для получения содержащих фермент гранул; и
c) высушивание содержащих фермент гранул, полученных в b).

17. Способ по п. 15, в котором переработка включает экструзию, брикетирование, высокоскоростное гранулирование, вальцовку, агломерацию в псевдоожиженном слое или их сочетание.

18. Содержащий фитазу гранулированный материал, получаемый способом по любому из пп. 13 - 17.

19. Гранулированный материал, включающий сухие гранулы, образованные из фитазы и твердого носителя, который включает по меньшей мере 15 (вес. /вес. )% съедобного углеводного полимера.

20. Гранулированный материал по п. 19, в котором гранулы включают по меньшей мере один двухвалентный катион.

21. Гранулированный материал по п. 19 или 20, в котором гранулы включают одно или более гидрофобное, образующее гель или не растворимое в воде соединение(ния).

22. Гранулированный материал по п. 21, в котором гидрофобное, образующее гель или не растворимое в воде соединение включает производное целлюлозы, поливиниловый спирт (PVA) или съедобное масло.

23. Гранулированный материал по п. 22, в котором производное целлюлозы представляет собой гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или гидроксиэтилцеллюлозу, и/или съедобное масло представляет собой соевое масло или рапсовое масло.

24. Гранулированный материал по любому из пп. 19 - 23, который дополнительно включает эндоксиланазу и/или β-глюканазу.

25. Гранулированный материал по любому из пп. 19 - 24, в котором носитель включает крахмал.

26. Гранулированный материал по любому из пп. 19 - 25, в котором фитаза отличается от устойчивой к нагреванию (термостабильной) фитазы.

27. Гранулированный материал по любому из пп. 19 - 26, в котором фитаза представляет собой фитазу гриба.

28. Композиция по любому из пп. 19 - 27, в которой фитаза гриба происходит их видов Aspergillus или Trichoderma.

29. Способ получения корма для животных, премикса или полуфабриката корма для животных, причем способ включает смешивание гранулированного материала, содержащего фитазу, как указано в любом из пп. 19 - 28, с одним или более веществом(вами) или ингредиентом(тами) корма для животных.

30. Способ по п. 29, в котором смесь вещества (веществ) корма и композиции или гранулированного материала обрабатывают паром, брикетируют и необязательно сушат.

31. Композиция, включающая гранулированный материал по любому из пп. 19 - 28 и/или содержащий фитазу гранулированный материал с активностью по меньшей мере 6000 FTU/г.

32. Композиция по п. 31, которая представляет собой съедобную пищевую композицию,
33. Композиция по п. 32, которая представляет собой корм для животных.

34. Композиция по п. 32 или 33, которая включает брикеты из одного или более пищевого(вых) вещества(веществ) или ингредиента(тов), смешанные с гранулированным материалом в соответствии с любым из пп. 19 - 27.

35. Композиция по любому из пп. 31 - 34, которая представляет собой корм для животных или заранее приготовленную смесь, или полуфабрикат корма для животных, получаемая с помощью способа в соответствии с п. 29 или 30.

36. Способ стимуляции роста животного, причем этот способ включает кормление животного по диете, которая включает гранулированный материал, как указано в любом из пп. 19 - 27, или композицию, как указано в любом из пп. 31 - 35.

37. Применение гранулированного материала, как указано в любом из пп. 19 - 21, в корме для животных или в качестве компонента корма для животных, или применение его в диете для животных.

38. Применение композиции, включающей в качестве носителя для фитазы по меньшей мере 15 (вес. /вес. )% съедобного углеводного полимера, для улучшения стабильности фитазы при брикетировании.