PT88663B

PT88663B - Processo para a preparacao de monohidrato e solvatos de um novo antibiotico de beta-lactamo

Info

Publication number: PT88663B
Application number: PT88663A
Authority: PT
Inventors: John Brennan
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1987-10-07
Filing date: 1988-10-04
Publication date: 1993-10-29
Also published as: FI884555A; RU1776260C; ZA887408B; AU2337188A; PL275092A1; HUT48883A; RO102423B1; CS270593B2; EP0311365A1; HU205112B; MX13276A; NO884417D0; PH26811A; NZ226451A; PL159766B1; DD280112A5; BG47035A3; JPH02270871A; YU46700B; YU184688A

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

Resumo

O presente invento diz respeito a um processo para a preparação de mono-hid rato cristalino e solvatos cristalinos mono (N,N'-dimeti1 formam ida) e bis (N,N¹-dimeti1formamida) de compostos de fórmula I

ELI LILLY AND COMPANY

PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE MONOHIDRATO E SOLVATOS DE UM

NOVO ANTIBIÓTICO DE B-LACTAMO

processo é caracterizado, por exemplo, por compreender o ajustamento do pH de uma solução aquosa contendo um composto de fórmula I até cerca de 2 a 7. Estes compostos são uteis no controlo de infecções bacterianas gram-positivos e gram negativos em animais de sangue quente.

Este invento diz respeito a um novo monohidrato e a solvatos de um antibiótico p-lactamo, mais particu 1armente, a um novo monohidrato cristalino e aos monoe bis-(N,N¹-dimeti1formamida)so1vatos de uma 1-carbacefa 1ospor i na.

antibiótico β-lactamo de Fórmula I

onde o asterisco indica a estereoquímica absoluta R, é um novo antibiótico potente oralmente activo. 0 antibiótico é descrito por exemplo, na Patente dos E.U. N² 4.335.211. Por questão de brevidade, a forma anidra do composto anterior serâ referida pela série Lilly número LY213735.

presente invento estâ dirigido para o monohidrato cristalino e para os mono- e bis-(N,N¹-dimeti1 formamida)so1vatos cristalinos de LY213735. Os dois últimos solvatos serão aqui referidos pósteriormente como os solvatos 'toono (DMF) e bis (DMF), respectivamente.

monohidrato cristalino LY213735 é um hidrato farmacêuticamente apresentável de LY213735. 0 monohidrato proporciona uma forma necessária de LY213735 útil na manufactura das várias forlnas de dosagem do antibiótico. Os solvatos mono(DMF) e bis(DMF) cristalinos são intermediários

-4convenientes para LY213735 em geral e para o monohid rato cristalino especificamente.

Um aspecto do presente invento está orientado para o monohidrato cristalino de LY213735. A fórmula para LY213735 está apresentada anteriormente sob a forma de Fórmula I. Mais especificamente, o invento está dirigido para o monohidrato cristalino LY213735 estando o modelo da difracção de raios (do pó registado a seguir no Quadro 1. Um aspecto relaccionado são as formulações farmacêuticas do monohidrato cristalino LY213735, cujas formulações farmacêuticas contendo monohidrato cristalino LY213735 tendo o modelo de difracção de raios X do X1 registado no Quadro 1 são preferidas.

Um outro aspecto do invento é o solvato cristalino mono(DMF) de LY213735. Uma forma preferida do solvato mono(DMF) é um composto cristalino tendo o modelo de difracção de raios X do pó registado a seguir no Quadro 2.

Ainda um outro aspecto do presente invento é o solvato cristalino bis(DMF) de LY213735. Uma forma preferida do solvato bis(DMF) é um composto cristalino que tem o modelo de difracção de raios X do pó registado no Quadro 3.

Os solvatos cristalinos mono- e bis(DMF) são intermediários convenientes para o monohidrato cristalino correspondente de LY213735. 0 monohidrato proporciona uma forma estável, fácil de manusear de LY213735, um composto que antigamente tanto era difícil de purificar como de obter numa forma farmacêuticamente apresentável.

Os solvatos e monohidratos presentes (e as composições farmacêuticas do monohidrato) incluem a forma zwiteriónica do composto de Fórmula I. Os compostos deste invento referem-se à forma cristalina ou microcristalina do monohidrato ou dos dois solvatos.

-5Por fim, o presente invento também inclui composições farmacêuticas do monohidrato cristalino LY213735, e, de preferência, domonohidrato que exiba o modelo cristalino registado a seguir no Quadro 1.

Uma forma de realização preferida do invento é um monohidrato cristalino que exibe o modelo de difracção de raios X do pó do Quadro 1:

QUADRO 1

Monohidrato d

12,99

10,76

9,11

7,43

6,65

5,75

5,24

5,06

4,87

4,74

4,41

4,30

4,13 ^I/J1 ,17 ,00 ,33 ,14 ,12 ,05 ,04 ,16 ,24 ,23 ,23 ,18 ,12

3,90	,27
3,59	,22
3,37	,53
3,20	,12
2,94	,10
2,86	,06
2,73	,06

modelo de difracção no Quadro 1 foi obtido com radiação de níquel filtrada de comprimento de onda λ = 1,5406 Ã. Os espaços interp1anares estão na coluna marcada com d e as intensidades relativas estão na coluna mar cada com I/11.

Outra forma de realização preferida do presente invento é o salvato cristalino mono(DMF) que exí be o modelo de difracção de raios X de pó estabelecido a seguir no quadro 2:

QUADRO 2

Solvato mono (DMF) d ι/η

13,18

10,90 ,12 ,00

6,80	,07
6,02	,20
5,37	,07
5,12	,10
4,90	,07
4,69	,27
4,37	,43
3,93	,25
3,57	,15
3,40	,23
3,22	,10
3,08	,05
2,85	,07
2,74	,15

Os dados radioscópicos que constam no Quadro 2 foram colectados com os mesmos parâmetro instrumentais utilizados para colectar os dados do Quadro 1.

Ainda outra forma de realização preferida do invento é uma forma cristalina do solvato bis(DMF) que exibe os dados de difracção radioscópica em pó registados no Quadro 3 seguinte:

-8QUADRO 3

Solvato bis(DMF) d 1/^

20,1	,03
12,44	1 ,00
10,27	,07
8,58	,08
6,91	,03
6,60	,05
6,23	,08
5,43	,13
4,74	,09
4,41	,09
4,19	,40
3,62	,05
3,52	, 05
3,39	,03
3,34	,03
3,14	,10
3,02	,07
2,86	,06

Os dados radioscópicos que constam do Quadro 3 foram colectados com os mesmos parâmetros instrumen tais que foram utilizados para colectar os dados no Quadro 1.

-9Um aspecto ainda deste invento é uma formulação farmacêutica compreendendo como ingrediente activo um monohidrato cristalino do composto de Fórmula (I) associado a um ou mais portadores veículos, ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em particular, estas composições farmacêuticas são úteis para o controlo de infecções bacterianas gram-positivas e gram-negativos em animais de sangue quente e compreendem um portador veículo ou excipiente adequados e uma quantidade farmacêuticamente eficiente do monohidrato LY213735.

No que diz respeito às composições para a administração oral (tais como, comprimidos e cápsulas), o termo portador, veículo ou excipiente adequados significa excipientes comuns, tais como, agentes ligantes, por exemplo, xarope, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, polivini1pirrolidina (Povidone), metilcelulose, eti lcelulose , carboximeti1 celulose de sódio, hidroxipropiimetilcelulose, sacarose, e amido; agentes de enchimento e portadores, por exemplo, amido de milho, gelatina, lactose, sacarose, celulose microcristalina, caulino, manitol, fosfato de dicálcio, cloreto de sódio, e ácido algínico, desintegradores, tais como, sódio de croscame lose, celulose microcristalina, amido de milho, glicolato de sódio amido, ácido algínico e agentes humidificantes mutáveis, tais como, sulfato de sódio laurilo; e lubrificantes, tais como, estearato de magnésio e outros estearatos metálicos, ácido esteárico, silicone, fluido, talco, ceras, óleos e sílica coloidal. Também podem ser usados agentes aromatizantes, tais como, hortelã-pimenta, óleo de gaultéria, aroma de cereja ou outros afins. Pode ser desejável adicionar-se um agente corante a fim de tornar a forma de dosagem esteticamente agradável na aparência ou de ajudar a identificar o produto. Os comprimidos também podem ser revestidos por métodos bem conheci dos na técnica da especialidade.

As composições farmacêuticas do presente invento também podem apresentar-se na forma de preparações orais liquidas, as quais podem ser quer a) suspen-10-

sões, soluções, emulsões ou xaropes aquosos ou oleosos; quer b) um pó seco para ser reconstituído com água ou com outro veículo adequado antes de usar. Quando utilizadas em conjunção com tais preparações orais líquidas, o termo portador, veículo ou excipiente adequados significa aditivos convencionais, tais como agentes de suspensão, tais como, acácia, metil celulose, hidroxietil celulose, carboximetil celulose, celulose com carboximetilo (Avicel*^), goma de xantano, ou amido; adoçantes, tais como, sacarose, xarope, glicose, sacarina, sorbitol, ou aspartano; agentes humidificantes, tais como, lauril sulfato de sódio, óleo de silicone, os vários surfactantes P1uromics ,, ou glicerina; preservativos, tais como, benzoatos de metilo, propilo, ou de butilo p-hidroxi, ou ácido sórbico; tintas, aromas e sais, tais, como, cloreto de sódio, ácido cítrico, óleo de gaultéria ou citrato de sódio; e águas, óleos e ésteres, tais como, óleo de amêndoa, óleo de coco fraccionado, óleo de castor hidrogenado, lecitina, estearato de alumínio e afins.

A composição farmacêutica também pode ter emprego intravenoso (IV). Especificamente , pode ser dissolvido uma forma solúvel em água do composto monohidrato em um dos fluidos intravenosos normalmente utilizados e é administrado por infusão. Quando é utilizado em conjunção com composições para o emprego IV, o termo portador, veículo ou excipiente adequados significa tais fluidos como salmoura fisiológica, solução de Ringer ou solução de dextrose a 5%.

As composições tópicas podem ser formuladas com portador, veóculos ou excipientes adequados, tais como, bases hidrofóbicas ou hidrofί1icas . Tais bases incluem unguentos, cremes ou loções.

As composições farmacêuticas veterinárias do composto monohidrato cristalino podem ser administradas nos alimentos ou na água bebível dos animais domésticos. Alternativamente, os compostos podem ser formulados sob a forma de preparação intramamárias com portador, veículos ou exci-

-11pientes adequados, tais como, bases de libertação prolongada ou rápida.

composto monohidrato cristalino de Fórmula I também pode ser formulado em forma de unidade de dosagem em frascos estéreis, bolsas de plásticos estéreis contendo um orifício com uma membrana, ou ampolas estéreis, hermeticamente seladas.

A quantidade do composto monohidrato por unidade de dosagem pode variar de cerca de 100 miligramas até cerca de 10 gramas.

Uma quantidade terapêuticamente eficiente do monohidrato cristalino é de aproximadamente 2,5 mg até cerca de 70 mg de composto por quilograma de peso de corpo por dose. Esta quantidade geralmente totaliza cerca de 1 grama até cerca de 5 gramas por dia para um ser humano adulto.

A dose pode ser administrada em uma única dose diária ou em múltiplas doses por dia. 0 regime de tratamento com as formulações presentes podem exigir a administração durante períodos extensos de tempo, por exemplo, durante vários dias ou durante duas até três semanas. A quantidade administrada por dose ou a quantidade total administrada dependerá de tais factores como a natureza e a gravidade da infecção, a idade e o estado geral de saúde do paciente, e a tolerância ao composto de monohidrato tanto da parte do pacier^ te como do microorganismo ou microorganismos envolvidos na infecção.

Um grupo preferido de formulações farmacêuticas são as formulações que compreendem um portador, veículo ou excipiente adequados e o monohidrato cristalino que exibe o modelo de raios X do Quadro 1, anterior.

-12Este invento também proporciona um processo para preparar o monohidrato cristalino do composto de Fórmula (I), o qual compreende o ajustamento do pH de uma solução aquosa contendo um composto de Fórmula (I) até cerca de 2 a 7.

monohidrato cristalino pode ser feito a partir quer do solvato mono(DMF) ou bis(DMF). Por exemplo, o solvato bis (DMF), junto com tetrassódio EDTA e uma pequena quantidade de ácido clorídrico concentrado, são combinados em água. Depois da suspensão ter formado uma solução, a solução é arrefecida (até aproximadamente lO^C) e o pH é subido lentamente (pela adição de uma base, tal como, trieti1amina ) até que se forma uma suspensão (de preferência, pH 3,6). 0 sólido suspenso (o qual é o monohidrato) é colectado por filtração, lavado e seco de modo usual. Alternativamente, o composto mono(DMF) pode ser convertido no monohidrato sob condições semelhantes àquelas para a conversão do solvato bis(DMF). Depois da adição da base, o pH da solução mono(DMF) sobe, de preferência, até um pH mais alto do que o pH do bis(DMF) (por exemplo um pH de 5,8) para uma quantidade semelhante de base.

Este invento também proporciona um processo para a preparação do solvato cristalino bis-(N,N'-dimetilformamida) do composto de Fórmula (I), o qual compreende a reacção de um composto 7p-amino da Fórmula (II)

o(II) onde R, é um grupo protector de carboxi com um agente de acila-13ção de fórmula , nhr^{2 h}°^C/t ^x onde X é um grupo separável e R é um grupo protector, em DMF seguida de desprotecção.

solvato bis(DMF) pode resultar da acilação de um composto 7p-amino (núcleo) de Fórmula (II)

(II) em seguida, da remoção do grupo protector de carboxi representado anteriormente sob a forma de R^ 0 núcleo e a sua síntese estão revelados na Patente dos E.U. N^Q 4.734.494.

grupo protector de carboxi R₁ de Fórmula II é um grupo prot'ector de carboxi convencional e, de preferência, um que não é estericamente retardado. Exemplos de

-14tais grupos são o grupo benzilo e os grupos benzilo substituídos, tais como, 4-metoxibenzi1 o, 4-nitrobenzi1 o, 4-meti1benzilo, 3,5-dimeti1benzi1 o, e 4-c1orobenzi1 o; grupos sililo, tais como, um grupo tria 1qui1si1i1 o (em particular, trimeti1si1i1 o) e grupos ha 1 o-substituído alquilo, tais como, os grupos 2,2,2-tricloroetilo, 2,2,2-tribromoeti1 o e 2-iodoetilo. Um grupo éster preferido é o benzilo ou um grupo de éster benzilo substituído (tal como, o grupo p-nitrobenzi1 o).

Em particular, a acilação do composto de núcleo p-nitrobenzi1 o (R^ = paranitrobenzi1 o tem lugar em DMF arrefecido (por exemplo, -20^eC). 0 agente de acilação, um derivado activado de 2-(R)-2-(p-hidroxifeni1)-2-aminoacético ácido é adicionado ao DMF arrefecido. Um agente de acilação preferido é um composto de Fórmula (III)

(III)

A solução de reacção é arrefecido, e quando III é o agente de acilação, são adicionados em sucessão rápida, ácido metanossulfónico dimetilbenzilamina e cloroformato de metilo. A solução é agitada e mantida a uma temperatura muito baixa (aproximadamente -50^Q), em seguida, o éster pNB do núcleo é adicionado sob agitação. A reacção é agitada a temperatura baixa (por exemplo, -45^eC) até que a reacção de acilação fica substancialmente completa (conforme determinado

-15por meios convencionais, tal como, cromatografia de camada fina. A mistura é, em seguida, aquecida lentamente e aproximadamente —10 —C e os reagentes para a remoção dos grupos protectores de amino e carboxi (tais como, água, ácido clorídrico concentrado, e limalha de zinco para o éster pNB são adicionados lentamente enquanto que a temperatura inicial da solução se manteve. A solução é agitada à temperatura ambiente até que a reacção fique completa. No caso em que R^ seja o éster pNB, o pH é subido (por exemplo para 29) pela adição de uma base, tal como, trietilamina, e o resíduo de zinco resultante é removido por filtração. 0 pH é subido gradualmente até que se forme uma suspensão branca e o pH permanece estável sem a adição de base (tipicamente à volta de pH 5,6). A mistura é espalhada com LY 213735 a cerca de pH 4,6 a fim de induzir a cristalização). A fase sólida da suspensão é colectada por filtração. 0 bolo do filtro húmido é suspenso em uma mistura de 90:10 de 9:1 de DMF/H2O e a solução é efectuada com ácido clorídrico concentrado. A solução é arrefecida e 0 pH subiu em pequenos aumentos com uma base (trietilamina) até se formou uma suspensão e 0 pH da solução estabilizou com adições posteriores de base (por exemplo, um pH de aproximadamente 5,7). Os cristais são colectados de novo por filtração e são secos a fim de dar 0 solvato bis(DMF).

Alternativamente, 0 solvato bis (DMF) pode ser feito a partir de uma solução concentrada de DMF do solvato mono (DMF). Especificamente, é adicionado anti-solvente (de preferência, acetonitri10) em volume igual à solução concentrada DMF e a mistura é arrefecido (por exemplo, até 0^QC). 0 precipitado sólido bis(DMF) é colectado por filtração como anteriormente. Este invento também proporciona um processo para a preparação do solvato cristalino bis(N,N¹-dimeti1formamida) do composto de Fórmula (I), 0 qual compreende a adição de um anti-solvente a uma solução concentrada de DMF contendo 0 solvato mono(DMF) do composto de Formula )I).

-160 solvato mono(DMF) muitas vezes resulta da reacção de acilação utilizado para fazer o solvato bis(DMF). Por isso, este invento também proporciona um processo para preparar o solvato cristalino mono(N,N¹-dimeti1formamida) do composto de Formula (I), o qual compreende a reacção de um composto 7B-amino de Fórmula (II)

(II)

onde R₁ ção de	é um grupo fórmula	protector de carboxi com um agente de acila-
	^H°-Z	____ NHR²
	_TF ^x --- o

onde X é um grupo separável e R é um grupo protector, em DMF seguida de desprotecção.

Uma outra maneira de fazer o solvato mono(DMF) requer a suspensão do solvato bis (DMF) numa quantidade mínima de 9:1 de DMFiH^O frios, em seguida, a fei-

-17tura de solução com a quantidade mínima de ácido (tal como, ácido clorídrico concentrado). 0 pH da solução é subido, lentamente, com base (tal como, trietilamina) até que se forme uma suspensão ligeira (tipicamente à volta de pH 3,0). A suspensão é filtrada (a qual remove o cloreto de trieti1amónio) , em seguida, o pH do filtrado é subido lentamente até cerca de 5 a 6, de preferência, 5,8) pela adição de base. Os cristais (DMF) são colectados por filtração e secos. Como tal, este invento também proporciona um processo para preparar o solvato mono(N,N'-dimetilformamida) do composto de Fórmula (I) conforme foi definido anteriormente, o qual compreende o ajustamento do pH de uma solução do solvato bis(DMF) do composto da Fórmula (I) em DMFrágua (9:1, v:v) até cerca de 5 a 6.

Existem muitos métodos alternativos para a acilação do composto do núcleo (Fórmula II) para dar LY213735. LY213735 obtido a partir destes métodos alternativos podia ser convertido em um dos dois solvatos DMF presentes por suspensão do composto de produto acilado em uma mistura de água/DMF, em seguida, a feitura da solução com ácido e indução da precipitação com base, conforme foi descrito anteriormente. Os métodos de acilação para LY213735 são semelhantes aos métodos para a acilação do ácido 6-aminopenici1âmico , ácido 7-aminodesacetoxicefalosporânico, e ácido 7-aminocafa 1osporânico. Um método de acilação é combinar simplesmente o núcleo de 7p-amino com um cloreto ácido com brometo ácido na presença de um eliminador ácido. 0 cloreto ácido ou o brometo áci do podem ser formados in situ. Outro método é combinar o núclec 7p-amino com a forma de ácido carboxílico livre da cadeia seundária (ou o seu sal ácido) e um agente de condensação. Agentes de condensação adequados incluem, N,N'-dissubstituído carbodiiminas, tais como, N,N'-diciclohexilcarbodiimida, Ν,Ν'-dietilcarbodiimida, N,N¹-di-(n-propi1)carbodiimida, N,N'-di-(iso-pro pi 1 )carbodiimida , N,N'-dia 1i1carbodiimid a , N,N¹-bis(p-dimeti 1 aminofenil)carbodiimida, N-etil-N'-(4-etilmorfoliníl)carbodiimida, e afins. Outros agentes de condensação de carbodiimida adequados são revelados por Sheehar na Patente dos E.U. N^?.

-182.983,892, e por Hofmann et a 1 , na Patente dos Estados Uni dos No.3,065,224. Também podem ser utilizados azoletos, como agentes de condensação, tais como, N,N¹-carboni1 diimidazo1e e N,N'-tioni1 diimidazole. Podem ser utilizados agentes desidratantes, tais como, oxicloreto fosforo, os a 1coxiaceti1e nos e os sais 2-halogenopiridínio (tais como, 2-c1oropiridinio metilo iodeto, 2-fluoropiridinio metilo iodeto, e afins) para acoplar com o núcleo de 7B-amino.

Um outro método de acilação re quer, em primeiro lugar, a conversão da forma de ácido carbo xílico livre (ou o sal correspondente) da cadeia de acilo se cundário no derivado de éster activo correspondente, o qual é, por sua vez utilizado para acilar o núcleo. 0 derivado de éster activo é formado por esterificação da forma de ácido livre com grupos, tais como, p-nitrofenol, 2,4-dinitrofenol, trielorofenol, pentac1orofeno1, 2-cIoro-4,6-dimetoxitri£ zeno, N-clorossuccinimido, N-cloro maleico imida, N-cloroftalimida, 1-hidroxi- 1H-benzotiazole ou 1-hidroxi-6-c1 oro-1Hbenzotiazo 1e. Os derivados de éster activo também podem ser anidro misturados, os quais são formados com grupos, tais como, metoxicarbon i 1 o , etoxicarbon i 1 o , i so-butox i carbon i 1 o , trj_ c1orometi1carboni1 o, e iso-but-2-i1carboni1 o, e o ácido carboxílico da cadeia de acilo secundário. Os anidros mistura dos são sintetizados por acilação do ácido carboxílico da C£ deia de acilo secundária.

Alternativamente, o núcleo de 7p-amino por ser acilado com o derivado N-etoxicarboni1-2-etoxi- 1,2-dihidroquinolina (EEDQ) da cadeia de acilo secundária. Em geral, a forma de ácido livre da cadeia de acilo secundária e EEDQ são feitas reagir num solvente orgânico p£ lar, inerte, (tal como, tetrahidrofurano , acetonitri1 o , e afins). 0 derivado EEDQ resultante é utilizado i n s itu para acilar o núcleo de 7£-amino.

Ainda um outro método de acilação dos compostos de 7p-amino requer o emprego de um processo assistido do ponto de vista enzimático. Um tal processo é descrj_ to em Hashimoto et a 1., Patente dos E.U. N⁹ 4.335.211, publicada em 15 de Junho de 1982, incorporado aqui por referência.

Os grupos protectores de amino e carboxi são demovidos por métodos bem conhecidos na técnica da especialidade. Exemplo das condições para a remoção destes dois tipos de grupos protectores podem ser encontrados em trabalhos normalizados sobre o assunto, tais como, E. Haslam Protective Groups in Organic Chemistry, J. G. W. McOmie, Ed., Plenum Press, Nova Iorque, N.I. 1973, capítulos 2 e 5, e T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Nova Iorque, N.I., 1981, Capítulos 5 e 7, respectivamente.

Também podem ser encontrados exemplos de processos para a remoção dos grupos protectores de amino e carboxi na Secção Experimental. Por exemplo, o grupo protector de t-butoxicarboni1 amino foi removido com ácido trifluo roacético e o grupo protector de p-nitrobenzi1 carboxi foi removido por hidrogenélise.

Nas preparações e Exemplos que se seguem, os termos dimetiIformamida, espectros de ressonância magnética nuclear, são abreviados por DMF e r.m.n., respectivamente.

Em conjunção com os aspectos de r.m.n., são utilizados as seguintes abreviaturas : s é singuleto, d é dupleto, dd é dupleto de dupletos, t é tripleto, q é quarteto, e m é multipleto, respectivamente.

Os aspectos de r.m.n. foram obtidos num instrumento Eléctrico Geral QE - 300 300 MHz. As pocas químicas são expressas em valoresè (partes por milhão descen-

dentes a partir de tetrameti1si1 ano).

Secção Experimental

EXEMPLO 1

Solvato LY213735 Bis(DMF)

A» Acilação

Foi arrefecido DMF (81,2 ml) até -20^?C, em seguida, foi adicionado sódio 2-(R)-2-(p-hidroxifeni1)-2-(((Z)-meti1 but-2-en-2-i1oato)amino)acetato (5,70 g, 19,84 mmol) de modo a dar uma suspensão branca. A suspensão foi arrefecida até aos -45^ÕC (o pH da solução foi aproximadamente de 7,5). Foi adicionado ácido metanossulfónico (17,1%, 3,08 mmol, 0,2 ml) à suspensão seguido imediatamente de adição de dimetilbenzi lamina (2%, 0,054 ml, 0,37 mmol) e cloroformato de metilo (1,42 ml, 18,4 .mmol), mantendo-se sempre a temperatura da suspensão abaixo de -45⁹C. A suspensão foi agitada durante um período adicional de 50 minutos a uma temperatura que flutuou entre -50⁹ e -45²C. Foi adicionado p-nitrobenzi1

7-(R)-7-amino-3-cloro-3-(1-carbodetiacefem)-4-carboxilato (6,33 g, 18,4 mmol, dissolvido em DMF (20 ml) à suspensão, enquanto que a temperatura da suspensão se manteve abaixo dos -45⁹C. A suspensão foi agitada durante um período adicional de 1,5 hora, em seguida, foi aquecida durante um período de 10 minutos até 0⁹C de modo a dar o produto acilado.

-21B. Desprotecção

Α solução proveniente de A (Acilação) anterior, foram adicionados água (6,48 ml), ácido clorídrico concentrado (11,6 ml) e limalha de zinco (3,34 g, 51,05 mmol , 2,83 equivalentes) enquanto que manteve a mistura entre 0 a 10^QC. A mistura da reacção foi agitada à temperatura ambiente durante aproximadamente 5 horas, produzindo uma solução com uma cor verme 1 ha-1aranja e um pH de 3,8. Foi introduzido ácido clorídrico concentrado adicional (8,9 ml) e a mistura de reacção foi agitado durante um período adicional de 15 minutos a aproximadamente 20⁵C. A mistura de reacção foi arrefecida até aos 15^?C e o pH da mistura foi subindo de 0,99 para 2,9 pela adição de trietilamina (aproximadamente 14 ml). A mistura foi agitada durante 15 minutos, em seguida, foi filtrada através de papeis e filtros de vidro, os quais foram lavados com DMF (10 ml). 0 filtrado foi colocado num frasco limpo, foi arrefecido até aos 15-C, e o pH de solução foi lavado até 4,6 pela adição de trietilamina. A solução foi espalhada com cristais de LY213735. A solução espalhada foi agitada durante 30 minutos, em seguida, o pH foi levado até 5,6 pela adição de trietilamina. A mistura a desenvolver-se foi agitada durante 35 minutos em seguida, foi filtrada, o sólido colectado foi seco in vacuo a temperatura ambiente durante 3 dias afim de dar o solvato LY213735 bis(DMF). (2,99 g, rendimento de 34%).

LY213735 bis(DMF) foi suspenso em água, 9:1 DMF:água (30 ml) e o pH da suspensão foi levado até 1,1 pela adição de ácido clorídrico concentrado. A suspensão foi agitada durante aproximadamente 10 minutos até que se formou uma solução. 0 pH da solução foi subindo lentamente até 5,6 pela adição de trietilamina, enquanto que a temperatura da solução se manteve a 5⁹C. Depois de atingir o pH 5,6, a mistura foi agitada durante 30 minutos e foi filtrada. 0 sólido colectado foi seco in vácuo à temperatura ambiente durante 24

-22horas para dar o solvato cristalino LY213735 bis(DMF).r.m.n.: (300 MHz , D₂O/DC1) 5 :8,1 (s, 7H) (excesso de DMF); 7,6 (2H, d); 7,1 (2H, d); 6,5 (1H, d); 6,3 (1H, s); 4,0 (1H, m); 3,1 (25H (DMF), s); 2,9 (27H (DMF), s); 2,6 (2H,m).

EXEMPLO 2

Solvato LY213735 mono(DMF)

A. Acilação

Sob uma atmosfera de azoto, foi suspenso sódio 2-(R)-2-(p-hidroxifeni1)-2-(((Z)-meti1 but-2-en-2-i1oato)-amino)acetato (40,57 g, 141,2 mmol) em DMF (578 ml) que tinha sido arrefecido até aos -20²C. A suspensão foi ainda arrefecida até aos -45²C e foram adicionados com uma seringa ácido metanossulfónico (0,33 ml, 5,14 mmol), amina de dimeti1benzi10 (0,14 ml, 2,69 mmol), e cloroformato de metilo (10,62 ml, 137,4 mmol). Durante a adição, a temperatura da solução de DMF foi mantida numa gama entre -45^QC e -50²C. A sus^ pensão resultante foi agitada durante um período adicional de 15 minutos a 50 minutos p-nitrobenzi1 7-(R)-7-amino-3-cloro-3-(1-carbadetiacefem)-4-carboxi1 ato (128,4 mmol em DMF (em 190 ml)), e a mistura de reacção resultante foi, em seguida, agitada a -45^QC durante 2 horas. A mistura de reacção foi aque cida até aos -10⁹C durante um período de 20 minutos para dar uma solução do produto acilado, protegido de carboxi.

B. Desprotecção e Cristalização

-23A solução do parágrafo A anterior, foram adicionados durante um período de 15 minutos, água (48,8 ml), ácido clorídrico concentrado (87,3 ml) e limalha de zinco (25,18 g, 385,2 mmol), enquanto que a temperatura da mistura de reacção se manteve entre 0 e cerca de 10⁹C. Foi adicionada uma porção final de ácido clorídrico concentrado (63,3 ml) à solução e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 4,75 horas. A solução foi arrefecida até aos 15-C, o pH foi ajustado até 2,9 pela adição de trietilamina (aproximadamente 100 ml), e a mistura foi agitada durante um período adicional de 15 minutos. A mistura foi filtrada para recuperar o resíduo de zinco, em seguida, o filtrado foi arrefecido até aos 15⁹C e o pH do filtrado foi subido até 4,6 pela adição de trietilamina. A mistura foi espalhada com a forma não-solvatada de LY213735 e agitada durante 15 minutos. A suspensão crescente foi lentamente tratada com trietilamina (1 gota em cada 3 segundos) a fim de obter um pH de 5,65. A suspensão resultante foi agitada durante vários minutos. Foi adicionada trietilamina adicional para fazer subir o pH da suspensão até 5,866. A suspensão espessa resultante foi agitada durante 20 minutos, durante cujo tempo o pH estabilizou a 5,833. A suspensão foi filtrada através de Papel de Whatman N⁹ 1, e o sólido colectado foi seco in vacuo durante a noite, à temperatura ambiente de modo a dar uma massa húmida de 46,49 g.

bolo húmido foi suspenso em 9:1 de DMF:água (452 ml) e o pH da suspensão foi ajustado até 1,1 com ácido clorídrico concentrado (14 ml), resultando numa solução. Depois da solução ter sido formada e o pH de solução se ter estabilizado, a solução foi filtrada através de um Papel de Whrtman N⁹ 1. 0 filtrado foi arrefecido até 5⁹C e o pH foi subido até 5,2 com a adição de trietilamina. A mistura foi agitada durante aproximadamente 30 minutos, começando na altura em que uma suspensão se começou a formar, em primeiro lugar.

-24A mistura foi agitada durante aproximadamente 30 minutos, começando na altura em que a uma suspensão se começou a formar, em primeiro lugar. Durante aqueles trinta minutos, o pH da mistura desceu até 4,4 e, depois, voltou de novo a 5,7 com trietilamina (um total de 22 ml). A suspensão foi agitada até que o pH ficou relativamente estável, em seguida, foi agitada. 0 sólido colectado foi lavado com 9:1 de DMF: água (20 ml). 0 sólido lavado foi seco in vacuo, à temperatura ambiente, sob um fluxo de azoto durante a noite, a fim de se produzir uma massa de 1,83 g, 27,9% do solvato cristalino LY213735 mono (DMF). r.m.n.: (300 MHz, D₂O/DC1)£ : 7,94 (1H, s, (DMF)); 7,24 (2H, d); 6,94 (2H, d); 5,14 (2H, d); 3,94 (1H, m); 2,97 (3H, s(DMF)); 2,89 (3H, s(DMF)); 2,50 (2H, m); e 2,61 (1H, m).

EXEMPLO 3

Monohidrato LY213735 a partir do solvato bis(DMF)

Foram combinados água (16,4 ml) e uma solução de etilenodiaminatetraacetato tetrassódio (EDTA) (0,03 g) em ácido clorídrico concentrado (0,8 ml) e, em seguida, foi adicionado o solvato LY213735 bis(DMF). A suspensão resultante foi agitada até que se formou uma solução. Foi adicionado carvão vegetal (Darco®, o,o3 g) e a suspensão foi agitada durante 10 minutos, a 15^SC e, em seguida, foi filtrado (R) através de uma almofada auxiliar de filtração HYFLO . 0 bolo do filtro foi lavado com água (3 ml). 0 filtrado (mais a solução de lavagem) foi arrefecida até aos 10-C. 0 pH do filtrado arrefecido foi levado até 3,6 pela adição de trietilamina de modo a dar uma suspensão branca espessa. A suspensão foi agi-

-25tada durante 2 horas e foi filtrada. 0 bolo do filtro foi lavado com água fria, em seguida, foi seco in vacuo à temperatura ambiente durante a noite a fim de dar 1,05 g do monohidrato cristalino LY213735: Karl Fischer: 3,13% de água; r.m.n.: (300 MHz, D₂O/DC1 ) : 7,03 (2H, d); 6,6 (2H, d); 5,0 (1H, d);

4,95 (1H, s); 3,6 (1H, m); 2,1 (2H, m); 1,0 (2H, m); 0,94 (1H, t); raio X: (Os parâmetros e modelo da difracção de raios X do pó estão apresentados anteriormente no Quadro 1)

Análise Calculada para

Teoria:

C, 50,07; H, 4,73; N, 10,95

Encontrado: C, 50,20; H, 5,02; N, 11,17.

EXEMPLO 4

Solvato LY21 3735 Mono(DMF) a partir do solvato bis(DMF) corre_s pondente

Uma mistura dos compostos de solvato mono (N ' , N-d imet i lf ormamida) e solvato b i s (N, N '-d i met i 1 f o_r mamida) (um total de 70,64 g) foi combinada na quantidade mínima de DMF(250 ml). A suspensão foi arrefecida até entre 10 e 15^QC. 0 pH da suspensão arrefecida foi ajustado até 1,1 pela adição de ácido clorídrico concentrado. A suspensão acidificada foi agitada até que foi obtida uma solução. 0 pH da solução foi lentamente ajustado até 5,8 com trietilamina agitando sempre a solução muito lentamente (aproximadamente 1 rotação por segundo). A suspensão resultante foi agitada lentamente durante 15 minutos enquanto que o pH se manteve entre 5,7 e 5,8, em seguida foi filtrado. 0 bolo do filtro foi lavado com aceta

-26to de etilo e foi seco in vacuo durante a noite para produzir 47,3 g do solvato cristalino LY213735 mono(DMF). Karl Fischer: 8,72% de água; r.m.n.: (300 MHz, D₂O/DC1) : 7,9 (1/2H, s(DMF)) 7,4 (2H, d); 6,75 (2H, d); 5,45 (1H, d); 4,6 (1H, s); 3,75 (1H, m); 2,75 (2H, s(DMF)); 2,4 (2H, s(DMF)); 2,55 (2H, m); 1,45 (2H, m); raio X: (Os parâmetros e modelo radioscópicos da difracção de raio X do pó para este composto estão apresentados anteriormente em conjunto com o Quadro 2).

EXEMPLO 5

Monohidrato LY213735 a partir do solvato mono(DMF) correspondente

Foram combinados água desionizada (300 ml), eti1enodiaminatetraacetato de sódio (EDTA) (0,52 g,

1,2 mmol), e ácido clorídrico concentrado (14,2 ml) e agitados em primeiro lugar, à temperatura ambiente, em seguida, foram arrefecidas até 15^SC. Foi adicionado o solvato LY213735 mono (DMF) (47,0 g, 0,107 mole) á solução e a suspensão resultante tornou-se uma solução depois de 10 minutos aproximados de agi-

R tação. Foi adicionado carvão vegetal (Darco , 0,5 g) e, em seguida, a suspensão foi agitada durante 10 minutos a uma temperatura entre cerca de 15^s e 20^QC. A suspensão foi filtrada através de almofada a filtração de 0,5 polegada do auxiliar

D do filtro HYFLO . 0 bolo do filtro foi lavado com água (aproximadamente 60 ml). 0 filtrado (Combinado é a solução de lavagem) foi arrefecido até 15^SC e o pH foi subido lentamente (0,1 unidade por 5 minutos) até 1,7 pela adição de trietilamina. A solução turva foi agitada durante aproximadamente 10 minutos para dar uma suspensão branca espessa. A suspensão foi agita-

-27da durante uns outros 45 minutos. 0 pH da suspensão foi, então, subida lentamente até 3,5 pela adição de trieti1amina . 0 pH da suspensão continuou a subir espontaneamente até 5,8, após o que foram adicionados várias gotas de ácido clorídrico concentrado para estabilizar o pH a 5,75. A suspensão foi agitada durante 1,5 hora a este pH 5 ,75, enquanto que a temperatura da suspensão se manteve entre cerca de 13 e cerca de 16^QC, depois, foi filtrado. 0 bolo do filtro foi lavado com água (60 ml) e foi seco in vacuo à temperatura ambiente durante a noite para dar 36,06 g de um sólido branco.

filtrado proveniente de filtração final do paragrafo anterior, foi diluído com acetonitrilo (400 ml), refrigerado durante a noite para produzir uma susper^ são branca. A suspensão foi filtrada e seca in vacuo durante a noite para produzir 2,48 g de um sólido branco.

Os dois lotes de sólidos brancos (provenientes do primeiro e segundo parágrafos anteriores) foram combinados em água (200 ml). A suspensão resultante foi agitada a aproximadamente 10⁹C durante 1 hora e foi filtrada. 0 bolo do filtro foi lavado com água (aproximadamente 50 ml), foi seco in vacuo durante a noite à temperatura ambiente para produzir 28,39 g do monohidrato cristalino LY213735: análise de Karl Fischer: 2,6% de água.

r.m.n.: ( 300 MHz, D₂0/DCl) £ : 7,20 (2H, d); 6,75 (2H, d); 5,1 (1H, d); 5,0 (1H, s); 3,7 (1H, m); 2,7 (1/3H, s); 2,35 (2H, m); 1,05 (2H, m):

-28Câpsulas de gelatina dura são preparadas uti1izando-se os seguintes ingredientes:

Quantidade (mg/câpsu1 as)

Monohidrato cristalino LY213735200

Pó de amido fluidificante200

Modelo de amido fluidificante com silicone a 55Í50

Estearato de magnésio2,5

Os ingredientes anteriores são misturados e metidos em cãpsulas de gelatina dura em quantidades de 452,5 mg.

EXEMPLO 7

Uma fórmula de comprimido é prepa rado utilizando-se os ingredientes abaixo indicados:

-29Quantidade (mg/Comprimido)

Monohidrato cristalino LY213735

200

Celulose, microcristalina

200

Dióxido de silicone, fumado

Acido esteárico

Os componentes são ligados e comprimidos a fim de formar comprimidos, cada um, 415 mg.

EXEMPLO 8

Supositórios contendo cada um 200 mg de ingrediente activo são feitos como se segue:

Monohidrato cristalino LY213735 200 mg

Glicéridos de ácido gordo saturados 2000 mg ingrediente activo é passado através de uma peneira dos E.U. de malha N⁵ 60 e é suspenso nos glicéridos de ácido gordo saturados previamente fundidos, tendo-se utilizado o calor mínimo necessário. A mistura é, em seguida, vazada num molde de supositórios de capacidade nominal de 2 g e é deixada a arrefecer.

-30EXEMPLO 9

Suspensão aquosa pronta a usar

200 mg/5 ml

Monohidrato cristalino LY213735		210	mg
Celulose com carboximetilcelulose de	sódio	95	mg
Sacarose		1 ,85	¹ g
Parafens		3	mg
Emulsão de silicone		2,5	mg
PIuron ico		5	mg
Aroma		2	mg
Corante		0,5	mg
Agua purificada	q. b.	até 5	m 1

Os ingredientes são peneirados.

Os parafens são dissolvidos em água quente purificada e, de pois de arrefecimento, são adicionados os outros ingredientes. E adicionada água purificada suficiente para produzir o volume requerido. A suspensão pode, -então, ser passada através de um moinho coloide ou homogeneizador para produzir uma dispersão mais elegante.

EXEMPLO 10

Suspensão para Reconstituição

Monohidrato cristalino LY213735

Sacarose

Goma de xantano

Amido modificado

Emu1 são de si 1 icone

Lauril sulfato de sódio

Met i1ce1u1ose

Aroma

210 mg g

mg mg mg ,5mg mg ,5mg

Tinta

Os ingredientes são peneirados e misturados num misturador adequado, tal como, um misturador (5) de anéis duplos, de núcleo duplo, do tipo Nauta ou de fita. Para constituir e produzir o volume requerido é adicionado um volume suficiente de água purificada.

Claims

REIVINDICAÇÕES:

1^â. - Processo para a preparação do monohidrato cristalino do composto de Fórmula (I) (I) caracterizado por compreender o ajustamento do pH de uma solução aquosa contendo um composto de fórmula (I) até cerca de 2 a 7.
2-. - Processo para a preparação do solvato mono (N , N¹-dimeti1formamida)crist a 1ino do composto de Fórmu1 a (I) (I) caracterizado por compreender a reacção de um composto 7p-amino de fórmula (II) (II) onde R₁ é um grupo protector de carboxi com um agente de acilacão de fórmula _ NHR² ^H0-V/T ^x

2 onde X é um grupo separável e R é um grupo protector, sem DMF (dimeti1formamida) seguida de desprotecção.
3-. - Processo para a preparação do solvato mono (N,N'-dimetilformamida) cristalino, do composto de Fórmula (I), conforme foi definido na Reivindicação 2, caracterizado por compreender o ajustamento do pH de uma solução do solvato bis (DMF) do composto de Fórmula (I), conforme

-34foi definido na Reivindicação 1 em DMF: água (9:1, v:v) até cerca de 5 a 6.
4-. - Processo para a preparação do solvato bis (N,N'-dimetilformamida) cristalino do composto de Fórmula (I) caracterizado por compreender a reacção de um composto 7j3-amino de Fórmu1 a 11 (II) onde R¹ é um grupo protector de carboxi com um agente de acilação de fórmula

NHR^J

Ο

X

2 onde X é um grupo separável e R é um grupo protector, em DMF seguida de desprotecção.
5^a. - Processo para a preparação do solvato bis (N,N¹-dimeti1 formam ida) cristalino do composto de fórmula (I), conforme foi definido na Reivindicação 4, caracterizado por compreender a adição de um anti-solvçnte a uma solução concentrada de DMF contendo o solvato mono (DMF> do composto de Fórmula (I), conforme foi definido na Reivindicação 2.