PT87454B - Processo para a preparacao de cetonas heterociclicas - Google Patents

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

Antecedentes e Sumário da Invenção

A actividade de enzimas proteolíticas do tipo elastase tem estado implicada em vários estados patológicos, J por exemplo, em artrites e em enfisemas pulmonares. Ê de espe | rar que a inibição farmacológica de uma enzima elastase evite ou melhore um estado patológico associado. Os derivados peptí dicos substituídos com tri—fluoro-metil-cetona que sao inibi dores de elastase leucócita humana sao descritos na Pedido de «V

Patente Europeia, Publicação número 189 3θ5 A2.

A presente invenção refere-se a determinadas

- i - í

N ,y

cetonas heterocíclicas que sao inibidoras da elastase leocóci ta humana (HLE)» tornando-se adequadas quando se desejam tais inibições» assim como» para instrumentos de iiivestigaÇao em farmacologia» estudos de diagnóstico e relacionados e no tratamento de doenças degenerativas de tecidos tais como» por exemplo^ enfisema pulmonar nos mamíferos· Esta invenção inclui também intermediários adequados para a síntese destas ce tonas heterocíclicas» processos para a sua preparaÇao» composiçoes farmacêuticas que contêm tais cetonas heterociclicas e métodos para a sua utilização.

Descrição da Invenção

De acordo com a presente invenção propoi nam-se compostos de fórmula I

em que o grupo -Q- ê escolhido num grupo constituído por (i) orto-fenileno» suportando opcionalmente um ou dois substituiu, tes independentemente escolhidos num grupo constituido por ha logéneo» nitro» um grupo amino de fórmula -NR*R » um grupo acilamino de fórmula —NHCOR^m» hidroxi» um grupo aciloxi de fórmula -OCORⁿ» alcoxi (C^-C^), alquilo (C^-C^), tri-fluoro-metilo» carboxi» ciano» /alcoxi (C^-C^)_7carbonilo, um grupo aminocarbonilo de fórmula -CONR^R^ (incluindo a fórmula-CONR^ quando R^P=R^)» sulfo» sulfonamido de fórmula SO^NR^R^ _e hidro xi—alquilo (C..-C )j e (ii) um grupo cis-vini leno de fórmula » X j

-C(R^a)=C(R )- em que

O **

R e R sao individual e independentemente es colhidos num grupo constituido por hidrogénio» nitro» um grupo amino de fórmula -NR®R^h» um grupo aciloxi de fórmula-OCORⁿ» alcoxi (C^-C^), alquilo (C^-C^), tri-fluoro-metilo» carboxi»

f

ciano, /alcoxi (C^-C^) 7carbonilo, um grupo amino-carbonilo de fórmula -C0NR^PR^q (incluindo a fórmula -C0NR^P2 quando R^P=R^q), um grupo hidroxi—metilo, e fcnilo suportando opcionalmente um i

ou dois subetituintes escolhidos num grupo constituído por ha í logéneo, nitro, alcoxi(C^-C^), alquilo(C^-C^) e tri-fluoro-me tiloj

R^S, R^h, R¹, R^j, R^m, R^p e R^q são individual e independentemente escolhidos num grupo constituído por hidrogénio e alquilo

Rⁿ representa alquilo (C^-C^)j

X ê escolhido num grupo constituído por oxigénio e enxofrei

A é escolhido num grupo constituído por -C0-, e —0· C0— i

L é escolhido num grupo constituído por feni leno, alcano-di-ilo(C^-Cg), alqueno-di-ilo(C^-Cg) e fenileno-alquilo(C^-C ), contendo opcionalmente uma ligaçao dupla na parte alquilo, com a condição de que um carbono incluído numa dupla ligaçao de um alqueno-di-ilo ou incluído numa dupla ligaçao opcional de um grupo fenileno-alquilo nao esteja directamente ligado a um átomo de oxigénio ou de azoto do grupo A»e

R ê escolhido num grupo constituído por acil 5

-sulfonamida de fórmula R . S(0 ).NH. CO-, acil-sulfonamida de <5 “ 5 fórmula R^CO.NH. S(0_o)-, sulfonil-ureia de fórmula R .NH. CO.ΝΗ.δίΟ^)-, sulfonil— ureia de fórmula R'^>. S (0^ ). NH. CO. NR — , e tri-fluoro—metil-sulfonamida de fórmula CF .S(0_o).NH— em que j &

R^ é escolhido num grupo constituído por alquilo (C^-C^q), tri-fluoro-metiloJ ciclo-alquilo (C^-Ο^θ)} arilo (Cg ou Ο^θ) opcionalmente substituído por 1 ou 3 membros de um grupo constituído por halogéneo, nitro, amino, di

-metil-amino, fenilo e /alquilo (C₁-C_)-carbonil 7amino» e um — x 5 grupo heterocíclico aromático definido como adiante no qual

até 3 átomos de carbono do sistema aromático podem suportar um grupo substituinte independentemente excolhido num grupo constituido por halogêneo e tri-fluoro-metilo> e ' r6 representa hidrogénio ou metilo} e os seus sais de adiçao de base farmaceuticamente aceitáveis.

«w

Nesta especificação, utilizam-se as seguintes definições, excepto se descrito de outro modo?

Halogêneo representa flóor, cloro, bromo ou iodo. ι

I

I

Grupo heterocíclico aromático significa um j !

grupo de 1 a 15 átomos de carbono e de 1 a 4 hetero-átomos ca da um dos quais ê independentemente escolhido num grupo cons- ;

i !

tituido por enxofre, azoto e oxigénio, e que forma 1 a 3 anéis j de cinco ou seis membros, em que pelo menos um deles ê aromá- | tico. Mais particularmente, um tal grupo heterocíclico aromático é um sistema de anel monociclico ou bi-ciclico ligado de 1 a 10 átomos de carbono e de 1 a 4 hetero^átomos.

Alquilo, alcano-diilo, alqueno-di-ilo, etc., referem-se a grupos lineares e ramificados.

Os radicais R , L e Q podem conter centros quirais. A presente invenção inclui compostos de fórmula I em 4 ~ que os centros quirais incluídos em R , L e Q sao de configurações R e/ou S. 0 radical L pode conter uma dupla ligaÇaoj a presente invenção inclui compostos de fórmula I em que uma li gaÇao dupla incluída em L ê de configuração E e/ou Z.

I

Os compostos desta invenção de fórmula I po- ; dem ser vistos como heterociclos tri-peptidorilos. Regra ge- !

«w «w ral, os compostos preferenciais da presente invenção sao da configuração L-amin«Scic1o que ocorre naturalmente nos centros quirais identificados por *ra fórmula I Os métodos de síntese

- 4 descritos adiante podem proporcionar uma mistura diastereomêra como um resultado da presença de produtos com as configura çoes R e S nos centros quirais identificados por na fórmula I· Embora estes diastereómeros se possam separar, tal nao é necessário. Os compostos preferenciais sao os referidos com configuração S no centro quiral identificado por # .

Como pode ser notado pelos especialistas, a actividade dos isómeros individuais nao ê a mesma, e ê, assim, preferencial utilizar o isómero mais activo. A presente inven çao inclui a mistura diastereomérica e os isómeros activos S e R.

Uma significação particular para um substituin te opcional em Q quando Q representa o_-fenileno, ou para um β b &. b substituinte opcional em R ou R quando R ou R representa feniio, ou para R^S, R^h, R¹, R^j, R^m, Rⁿ, R^P ou R⁹ quando o sub stituinte ou grupo é alquilo (C^-C^,) é, por exemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-propilo ou jt—butilo. Uma significação particular para um substituinte opcional em Q a b quando Q representa o^fenileno, ou para R ou R , ou para um ô b q b substituinte opcional em R ou R quando R ou R representa feniio quando o substituinte ou grupo ê alcoxi (C^-C^) é, por exemplo, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, 2-metil-propoxi ou _t-butoxi. Uma significação particular para um substituinte opcional em Q quando Q é ç^-fenileno ou para R^a ou R^b quando o substituinte ou grupo e /alcoxi (C^-C^) 7-carbonilo é, por exemplo, metoxi-carbonilo, etoxi-carbonilo, isopropoxi-carbonilo, ou £-buti-oxi-carbonilo. Uma significação particular pa β b ra R ou R , quando é alquilo (C^-C^) ê, por exemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, 2-metil-propilo, t-butilo, pentilo, 3“®^e'til-butilo ou hexilo. Uma significação particular para um substituinte opcional em Q quando Q ê o^-fenileno ou para um substituinte opcional em R^a ou R quando R^a ou R representa feniio, quando o substituinte é halogéneo ê, por exemplo, flúor, cloro ou bromo.

Uma significação particular para um substituin

hidroxi-alquilo (C^-C^) em Q quando Q representa o^-fenileno I é, por exemplo,, hidroxi-metilo, 2-hidroxi-etilo ou 1,1-di-me t i1-hi droxi-met ilo· m 5 5

Uma significação particular de Fc quando R^ í representa alquilo (Ο^-Ο^θ) ê, por exemplo, metilo, etilo, ί propilo, isopropilo, t_-butilo ou 4-metil-pentilo. Uma signifi i cação particular de R^ quando R^ representa ciclo-alquilo(Cy- i -Ο^θ) por ^ex®^mPÍ°’ ciclopropilo, ciclo-pentilo, ciclo-hexi lo, norborailo ou adamantilo. Uma significação particular de R^ quando R^ representa arilo (Cg ou P°r exemplo, feA* nilo ou naftilo, uma significação particular para um substituinte opcional em arilo quando o substituinte ê halogêneo ê,

A* por exemplo, flior, cloro ou bromoJ e uma significaçao particular para um substituinte opcional em arilo quando o substi tuinte á /ãlquil(C₁-C )- carbonil7amino ê, por exemplo, for- 1 5 mil-amino, acetilamino, 2-metil-propanoil-amino ou 2,2-di-me~ 5 til-propanoil-amino. Uma significação particular para R quan do R^ representa um grupo heterociclico aromático ê, por exem pio, furilo, tienilo, piridilo ou pirimidinilo} e uma signiA.

ficaÇao particular para um substituinte opcional quando o sub stituinte ê halogêneo ê, por exemplo, flúor, cloro ou bromo.

Uma significação particular para I» quando L representa fenileno é, por exemplo, ja-fenileno ou ro-fenileno. Uma significação particular para I» quando L representa alcana -(C^-Cg)-di-ilo, ê, por exemplo, metileno, etano-l,2-di-ilo, etano-l,l-di-ilo, propano-1,3-di-ilo, propano-1,2-di-ilo, pro pano-2,2-di-ilo, butano-1,4-di-ilo, 2-metil-propano-2,3-di-ilo, 2-metil-propano-l,2-di-ilo ou pentano-1,5“di-ilo. Uma J

A» significação particular para L quando L representa alqueno (Cg-CgJ-di-ilo ê, por exemplo, eteno-1,2-di-ilo, propeno-1,2—di-ilo, propeno-1,3-di-ilo, buteno-1,4-di-ilo, but-2—eno-1,4-di-ilo, penteno-1,5-di-ilo ou 3,3-di-metil-propeno-l,3“ -di-ilo. Uma significação particular para L quando L represen ta feni leno-a lqui lo (C-j-C^) ê, por exemplo, ja-fenileno-metilo ,

2- (j3-fenileno )etilo ou 2- (jj-fenileno )-2-propilo } e quando o

Ψ........

grupo fenileno-aIquilo (C-j-C^) contêm uma dupla ligaçao opcio nal, uma significaÇao particular para L ê, por exemplo, 2— (jj-fenileno )-etileno.

Uma significação mais particular para um subs tituinte opcional em Q quando Q representa o^-fenileno ê, por exemplo, cloro, di-metil-amino, acetilamino, hidroxi, acetoxi, metoxi, metilo, tri-fluoro-metilo, carboxi, ciano, metoxi-car bonilo, etoxi-carbonilo, amino-carbonilo, metil-amino-carboni ·» lo, di-metil-amino-carbonilo, amino-sulfonilo, di-metil-amino -sulfonilo ou hidroxi-metilo, incluindo hidroxi, metoxi, carboxi, metoxi-carbonilo, amino-eaebonilo e hidroxi-metilo.

Uma significaÇao mais particular para R^a ou R^ ê, por exemplo, hidrogénio, di-metil-amino, acetoxi, metoxi, metilo, tri-fluoro-metilo, ciano, metoxi-carbonilo, amino -carbonilo, meti1-amino-carbonilo, di-metil-amino-carbonilo, hidroxi-metilo, fenilo, cloro-fenilo, metoxi-fenilo ou tri-fluoro-metil-fenilo, incluindo hidrogénio.

~ 4

Uma significação mais particular para R ê r⁵.s(o2).nh.co-, r⁵.s(o2).nh.co.nr⁶-, ou cp₃so₂nh-.

** 5 >

Uma significação mais particular para R e, por exemplo, metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, ciclopentilo, fenilo, cloro-fenilo, bromo-fenilo, tri-fluoro-metil -fenilo, 1-naftilo, 2-tienilo, 2-piridilo, ou cloro-piridilo, incluindo metilo, isopropilo, fenilo e 4-cloro-fenilo.

Uma significação mais particular para R ê hi drogênio.

Uma significaÇao mais particular para A é — CO—·

Uma significaÇao mais particular para L ê,por exemplo, j3-fenileno, etano-l,2-di-ilo, eteno-l,2-di-ilo, £-feni leno-me ti lo ou 2-(]3-fenileno)etenilo , incluindo j>-fenile

- 7 _ç.,„. _V·,.

no.

As significações particulares apresentadas pa ra radicais, substituintes e as gamas sao apenas para ilustra

ÍW ** çao e nao excluem outras significações definidas ou outras si gnificaçoes dentro das gamas definidas para os radicais e sub stituintes·

A ** **

Dentro do âmbito desta invenção sao sub-grupos, incluindo aqueles em que o sistema de anel heterociclico que contém N, Q e X êí (a) um benzoxazol em que X representa oxigénio e Q representa ogfenileno como atrés definido em (i) na definição de Q} (b) um oxazol em que X representa oxigénio e Q representa cis-vinileno como atrés definido em (ii) na definição de Q} (c) um benzotiazol em que X representa enxofre e Q representa ç>-fenileno como atrés definido em (i) na definição de Qj e (d) um tiazol em que X representa enxofre e Q representa cis-vinileno como atrés definido em (ii) na definição de Q.

Uma significação de X na fórmula I de particu . , ~ 4 “ lar interesse ê oxigénio· As significações para R . L. A- na

5 fórmula I de particular interesse incluem para R í R .S(0 ).ç· zZ C “

NH. CO- e R . S(O_).NH. CO.NR - , especialmente R\s(0_o).NH.C0-j ² ~ 5 para L: ja-fenileno} e para As -C0-. Uma significaÇao de R de particular interesse ê 4-clorofenilo.

Os compostos específicos de fórmula I sao des critos nos Exemplos que acompanham a invenção· Os compostos que sao preferenciais incluem!

(i) /4-/T4-cloro-feni1)sulfonilamino-carbonil7benzoil7-L-vali1-Ν-/1-(5-hidroxi-benzoxazo1-2-i1)carboni1-2-meti1

-propil7-L~prolinamida, (i i) /5-/T4-cloro-feni1)sulfonilamino-carbonil7b enzo il7-L_

-vali1-N-/1-/5-(amino-carboni1)benzoxazo1-2-i1)carbonil-2—metil-propil/-Ir-prolinamida, e

- 8 (iii) /5-/T4-cloro-fenil)sulfonilamino-carbonil7benzoil/-L-vali1-N-/1-/5-(hi droxi-me ti1)b enzoxa zo1-2-il7carboni1-2-meti1-propil7-L-prolinamida.

Os sais dos compostos de férmula I incluem sais de adiçao de base farmaceuticamente aceitáveis tais como os derivados de hidróxidos de metais alcalinos tais como hidróxido de sódio, carbonatos e bicarbonatos de metais alcali nos, hidróxidos de alcalino-terrosos e aminas orgânicas. Tais sais podem preparar-se por dissolução de cetona heterociclica numa mistura de água e um solvente orgânico miscivel em água, «W Μ M adiçao de uma solução aquosa da base e recuperação do sal a partir da solução aquosa.

Os compostos de fórmula I podem produzir-se por processos que incluem os processos conhecidos na especialidade química para a produção de compostos heterociclicos e peptídicos estruturalmente análogos. Tais processos para o fa brico de um composto de fórmula I como atrás definido sao pro porcionados como aspectos adicionais desta invenção e sao ilus trados pelos procedimentos seguintes nos quais os significados de radicais genéricos sao os atrás definidos (e um radical de fórmula Q pode incluir um grupo de protecçao):

(A) Para um composto de fórmula I, oxidaçao de um álcool correspondente de fórmula III:

B_L — A —

Os métodos que sao adequados incluem a utilização de cloreto de oxalilo, sulfóxido de di-metilo e uma ami na terciária (ver Marx» M. et al. , J« Org. Chem», 49 > 788-793 (1984))> a utilização de anidrido acético e sulfóxido de di-metiloj a utilização de sulféxido de di-metilo, cloridrato _ 9 _

e;:

JRlp. v—

de 1—(3-di—inetil-amino—propil)—3—etil—carbo—di—imida e ácido di-cloro-acêtico em, por exemplo, tolueno (ver, por exemplo, Exemplo 19)» a utilização do complexo de triôxido de crómio piridina em cloreto de metileno, e a utilização de periodinano Dess-Martin /l,l,l-tri-acetoxi-2,l-benzoxi-odol-3(3H)-ona7 (método de Dess, D.B. et al, J> Org. Chem. , 48, 4155—56 (Ι9θ3))· Quando Q tem a significação (i) orto-fenileno e X representa oxigénio, regra geral, um oxidante preferencial ê periodinano Dese-MartinJ contudo, quando Q suporta um grupo amino-carboni lo, ê preferencial a utilização do complexo triôxido de crómio piridina ou do sulfóxido de di-metilo, cloridrato de 1-(3—di-metil-amino-propil)—3-etil—carbo-di-imida e ácido di-cloro-acático. Quando um álcool de fórmula III contém um azo to alcalino, é geralmente preferível utilizar um método alter nativo ou proteger o azoto alcalino antes da oxidaçao e desprotegê-lo depois da oxidaçao para proporcionar o composto correspondente de fórmula I.

(B) Para um composto de fórmula I em que R tem a significação r\S(0₂).NH.C0-, reacçao de um composto correspondente de fórmula IV.

em que R representa carboxi (cujo composto é referido daqui em diante como ácido de fórmula IV), com um derivado de sul fonamida de fórmula R ·SOg.NH^ na presença de um agente de desidrataçao ou reacçao de um derivado reactivo de um ácido de fórmula IV com uma sulfonamida, ou um seu sal, de fórmula R .SOg.NHg. Assim, por exemplo, um ácido livre de fórmula IV

M pode reagir com um agente de desidrataçao adequado, por exemplo, com di—ciclo—hexil-carbo-di—imida ou l—(3-di—metil—amino -propil-3-etil-carbo-di-imida, ou um seu sal cloridrato ou bromidrato, opcionalmente em conjunto com uma base organica,

72b por exemplo, 4-di-metil-amino-piridina, e com uma sulfonamida de fórmula R .SOg.NHg na presença de um solvente ou diluente adequado, por exemplo, di-cloro-metano, a uma temperatura na ama de, por exemplo, 0 a 50° C tura ambiente ou próximo dela· ama de, por exemplo, 0 a 50°C, mas, de preferência à tempera

Alteraativamente, um derivado reactivo de um ácido de fórmula IV, por exemplo, um halogeneto de ácido (tal como cloreto de ácido), anidrido ácido ou uma mistura de anidrido ácido (tal como a formada de ácido N,N-di-fenil-carbóni co e do ácido de fórmula IV por reacçao do sal de sódio do ól timo ácido com cloreto de N,N-di-fenil-carbamo-il-piridineo), pode reagir com um sal de metal alcalino (tal como sal de lítio, sódio ou potássio) da sulfonamida apropriada de fórmula R^.SO.NH, convenientemente à temperatura ambiente ou próxima e num solvente ou diluente·adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano, N,N-di-metil-formamida ou di-cloro-metano.

(C) Para um composto de fórmula I em que R tem a significação r\ CO.NH.S(0_o)-, reacçao de um composto cor “7 ~ — respondente de fórmula IV em que R tem a significaÇao H_ON.SÍOg)- com um ácido de fórmula R · COOH utilizando um mótodo semelhante ao atrás descrito na parte (B)· (D) Para um composto de fórmula I em que _w e a, tem a significaÇao R .NH.CO.NH.S(0 )-, reacçao de um composto correspondente de fórmula IV em que R' tem a significaÇao

R

HgN.S(Og)- com um isocianato de fórmula R .NCO. Por exemplo, um intermediário de fórmula IV na qual R? á H^N.S(Og)- pode tratar-se com isocianato de fenilo para proporcionar um produ to correspondente de fórmula I no qual R^ representa fenilo.

(E)Para um composto de fórmula I em que R^ tem — κ 6 ^w a significaÇao R ·S(O_).NH.CO.NR -, reacçao de um composto cor ~ 6~ respondente de fórmula IV em que R tem a significaÇao HNR com um isocianato de sulfonilo de fórmula r5.S(0_o).NC0} ou al ternativamente, para um composto em que R tem a significa11

çao H, reacçao de um composto correspondente de fórmula IV em que R? tem a significação -NCO com uma sulfonamida de fórmula r\ SÍOgJ.NHg. A reacçao pode executar-se, por exemplo, à temperatura ambiente num solvente orgânico inerte adequado-tal como tetra-hidrofurano ou di-cloro-metano.

(F) Para um composto de fórmula I em que R tem a significação CFy SCO^bNH-, reacçao de uma amina corres pondente de fórmula IV em que R? tem a significação com anidrido tri-fluoro-metano-sulfónico, por exemplo, a 0° num solvente inerte tal como di-cloro—metano· (G) Para um composto de fórmula I em que Atem a significação -CO-, ligaçao de um Scido de fórmula R -L-C00H (ou um seu derivado reactivo) com uma amino-cetona de fórmula V:

Por exemplo t a ligaçao pode executar-se utilizando cloridrato de 1—(3“di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida e 4-di-metil-amino-piridina ou 1-hidroxi-benzotriazol num solvente inerte tal como tetra-hidrofurano· De maneira semelhante, um composto de fórmula lis· que A tem a significação —NH. CO- ou —0·CO— pode preparar-se a partir duma amino-cetona correspondente de fórmula V utilizando um método semelhante ao descrito adiante para a preparaçao de um material de partida élcool de fórmula III a partir de um amino-élcool de fórmula XV.

Pode, opcionalmente, desejar-se utilizar um gru po de protecçao durante todos ou partes dos processos descritos atras} o grupo de protecçao pode, então, remover-se quando o composto final ou o material de partida necessário, se formam, por exemplo, como descrito nos Exemplos 5 e 7«

Além disso, pode executar-se a modificação de um grupo funcional de um composto de fórmula I por um método convencional para proporcionar um composto diferente de fórmu

A* la 1) tal como, por exemplo» conversão de um substituinte opcional carboxi ou alcoxi-carbonilo em Q num substituinte amino-acilo.

Além disso» para qualquer dos procedimentos anteriores» quando ê necessário um sal farmaceuticamente acei tável, pode obter-se por reacçao da forma ácida de um composto de formula 1 com uma base constituída por um catiao fisio- ί logicamente aceitável e um aniao fisiologicamente aceitável e proporcionando um catiao fisiologicamente aceitável ou por qualquer outro procedimento convencional·

Se os materiais de partida necessários para os procedimentos anteriores» nao estão comercialmente disponíveis podem fazer-se por procedimentos que sao escolhidos nas técnicas normalizadas da química heteroclclica e química peptídi ca» técnicas que sao análogas às sínteses de compostos conhecidos» estruturalmente semelhantes» e técnicas que sao análogas aos procedimentos atrás descritos ou aos procedimentos des critos nos Exemplos·

Como é evidente para um especialista» encontra-se disponível uma variedade de sequências para preparaçao dos materiais de partida· De acordo com uma das vias disponíveis, um intermediário principal de fórmula XI pode preparar-se como apresentado no Esquema I, começando com valinol (fÓr mula VII) e utilizando os intermediários de fórmulas VIII, IX e X como descrito no Exemplo 1« Alternativamente, o valinol (fórmula VII) pode ligar-se com um ácido de fórmula IX para proporcionar um álcool de fórmula XII» e um álcool de fórmula XII pode oxidar—se para proporcionar um aldeído de fórmula XI i como um intermediário principal·

Como apreeentado no Esquema II pode converter “

-se um aldeído intermediário de fórmula XI num material de partida álcool de fórmula III, um material de partida cetona de fórmula IV ou um material de partida amino-cetona de fórmu la V.

Um aldeído de fórmula XI pode reagir com, por exemplo, um cianeto de metal alcalino, tal como, por exemplo , !

j cianeto de sódio ou cianeto de potássio, para formar uma ciano-hidrina de fórmula XIII em que W representa CN. Mais prefe rencialmente, pode converter-se um aldeído de fórmula XI numa ciano-hidrina de fórmula XIII em que W representa CN por tra- tamento com acetona-ciano—hidrina, por exemplo, como descrito no Exemplo 4a. Em adiçao, pode utilizar-se cianeto de tri-metil-sililo para a transformação, sendo o grupo tri-metil-sili ! lo removido depois de se desenvolver a acidez. 0 grupo hidro- J xi de uma tal ciano-hidrina pode opcionalmente proteger-se com !

i por exemplo, um grupo acetilo ou um grupo tri—metil—sililo ou _t-b ut i 1- di-me t i 1- si 1 i lo .

Uma ciano-hidrina de fórmula III em que W representa CN pode converter-se num álcool heteroclclico corres pondente de fórmula XIV, ou directamente ou por meio de um in termediário isolado utilizando um mátodo convencional. Por exemplo, a conversão de um composto de fórmula XIII em que W representa CN num composto correspondente de fórmula XIV em que Q tem a significação jo-fenileno como atrás definido, pode executar-se utilizando um procedimento semelhante ao descrito em HÓlljes, E. L. e Wagner, E. C. , J. Qrg. Chem. , (1944),

31. A conversão de um composto de fórmula XIII em que W repre senta CN num composto correspondente de fórmula XIV em que Q tem a significaÇao cis-vinileno como atrás definido pode exe- j cutar-se utilizando um procedimento semelhante ao descrito em Lora-Tomato, M. et al, Cheme. Ber., (1964), 97 , 2230, 2234 ou em Kitatani, K. et al, Tet. Lett., (1974), 1531·

Alternativamente, uma ciano-hidrina de fórmula XIII en que W representa CN pode transformar-se num imidato

- 14 ’ ' ' j

- · · . . «-*^x*^<**^,,**^t* j ' Ί de fórmula XIII em que W representa -C(NH)OR e R representa , !

por exemplo, metilo ou etilo, de preferência como seus saie , J por exemplo, sal cloridrato. Um imidato de fórmula XIII em que !

i

W representa -C(NH)OR pode transformar-se num álcool heterocí ! clico correspondente de fórmula XIV} o imidato intermediário ! pode, opcionalmente, isolar-se. A química dos imidatos foi re ** i vista em ”The Chemistry of Amidines and Imidates”, Saul Patai, ^! Ed., John Wiley and Sons, N.T., 1975» Ρ· 3θ5 e ^effl Roger, R. e ! Nielson, D. G. , Chem. Rev. , (1961), 6l, 1979· A conversão de um imidato de fórmula XIII em que W representa -C(NH)OR num ; composto correspondente de fórmula XIV em que Q tem a signifi caçao o_-fenileno como atras definido em (i) na definição de Q pode executar-se utilizando um procedimento semelhante ao des crito em King, F.E. e Acheson, R.M. , J. Chem. Soc., (1949)» I396» ou em Reid, W. et al, Liebigs Ann. Chem., (1964), 676, ll4. A conversão de um composto de fórmula XIII em que W representa -C(NH)OR num composto correspondente de fórmula XXV em que Q tem a significação cis-vinileno como atrás definido em (ii) na definição de Q e X representa oxigénio} pode execu tar-se utilizando um procedimento semelhante ao descrito em Wiley, R.H. , Chem. Rev. , (1945)» 37, 401} ou em Cornforth, J.

W., e Cornforth, R.H., J. Chem. Soc. (1947)» 96} (1953)» 93Como mais uma alternativa» um imidato de fórmula XIII em que W representa -C(NH)OR pode hidrolisar-se ao éster correspondente de fórmula XIII em que V representa—COOR Por utilização de um éster de fórmula XIII em que W represen- ^! ta -COOH (disponível por hidrólise do éster de uma maneira convencional)» ou de um diferente derivado activado de um áci do de fórmula XIII em que W representa COOH, e de um método convencional, pode preparar-se um composto correspondente de fórmula XXV. Por exemplo» para um composto de fórmula XIV em que Q representa jo-fenileno como atrás definido em (i) na de- 1 ** _ ! finiçao de Q, pode utilizar-se um método semelhante ao descri · to em Landenberg, A.» Chem. Ber. , (1876), j), 1524} em Galatis,

L. C., J. Amer. Chem. Soc., (1948), 70, 1967» em ”Heterocyclic Compounds”, Vol. 5» R.C. Elderfield, Ed., J. Wiley &

Sons, N. Y., 1957» P· 421; m Lankezma, Η. P. e Knauf, A. E.,

J. Amer. Chem. Soc. , (1931), 53, 309 e 2054} em Lankezma, H. j

P. e Vopicka E., ibid., (1936), 58, 609} ou em The Chemistry of Heterocyclic Conpounds”, Ρ· N. Presto, Ed. , (1981), 40, 6- j -12. Por exemplo, para um composto de fórmula XIV em que Q re j preeenta cis-vinileno como atrás definido em (ii) na definição de Q e X representa oxigénio, pode utilizar—se um método semelhante ao descrito em Wasserman, Η. H. e Lu, T. -J. , Tet. Lett. , (1982), 383I} em Davidson, D. et al. J. Org. Chem., (1937), ,2» 328} ou em Weigand, E.E. e Rathburn, D.W. , Synthe- i si», (1970) 648 e J. Chem. Eng. Data, (1973)» 18, 237· Por i

exemplo, para um composto de fórmula XIV em que Q representa cis-vinileno como atrás definido sob (ii) na definição de Q e X representa enxofre, pode utilizar-se um método semelhante ao descrito em Gabriel, S. , Chem. Ber. , (1910), 43, 134 e JZÔJi em Bachstez, M. , ibid. (1947), 47, 3163} ou em Wiley, R.H. et al, Org. Reactions, (1951), jS, 367·

Outra alternativa para a preparaçao de determinados compostos de fórmula XIV em que X representa enxofre é a utilização de uma tio-amida de fórmula XIII em que W representa -C5NH · Pode obter-ee uma tio-amida de fórmula XIII em que W representa —CSNH^, por exemplo, a partir de um nitri lo correspondente numa maneira convencional, tal como, por exemplo, o tratamento com ácido sulfldrico, utilizando, opcio nalmente, um catalisador alcalino, tal como, por exemplo, tri -etil-amina. Assim, por exemplo, uma tio-amida de fórmula XIII em que V representa -CSNH pode converter-se num composto cor respondente de fórmula XIV em que Q representa cis-vinileno como atrás definido em (ii) na definição de Q e X representa enxofre, utilizando um método semelhante ao descrito emSchmidt V. et al, Synthesis, (1986), 992 ou em Wiley, R. H. et al,

I

Org. Reactions, (1957), .6, 367 e 378.

Uma via diferente de um aldeído de fórmula XI para um álcool heterocíclico de fórmula XIV envolve a utilização de um reagente heterocíclico pré-formado. Por exemplo,

um reagente organo-lltio de fórmula XVI em que Y representa lítio pode reagir directamente com um aldeído de fórmula XI para proporcionar um álcool correspondente de fórmula XIV. Quando X representa oxigénio, pode ser preferencial ou neces- {

I sério utilizar um método diferente. Os reagentes de fórmula

XIV em que Y representa lítio podem preparar-se e utilizar-se ; como descrito, por exemplo, em Wasserman, Η. H. et al, Tet. Lett. , (1981), 22, 1737» em Schroeder, R· et al· Liebigs Ann. Chem., (1975)» 533» em Beraud, J. e Metzger, J. » Buli. Soc. Chem» France, (1962)» 2072} em Shirlet, D. A. e Alley, P. W. ,

J. Amer. Chem. Soc. , (1957)» £2’ ^922} em Ogura» H. e takahashi, H. , J. Org. Chem., (1974)» 39, 1374» em Justin, P. e Hoffmann, H. J., Chem. Ber., (1973)» 106» 594, e em Justi, P. e Sakriss, V, ibid., (1973)» 106, 2815.

Alternativamente, por exemplo» um reagente 2-tri-metil-sililo heterocíclico de fórmula XVI em que Y repre senta tri-metil-sililo pode condensar-se com um aldeído de fórmula XI para proporcionar um derivado o-tri-metil-sililo intermediário de um álcool correspondente de fórmula XIV. 0 álcool de fórmula XIV pode então obter-se por remoção do grupo tri-metil-sililo utilizando um procedimento convencional ·

Os reagentes de fórmula XVI em que Y representa tri-metil-sililo podem preparar-se e utilizar-se de uma maneira semelhante à descrita» por exemplo, para 4—metil—2—tri-metil—sililoxa zol, 2-tri-metil-silil-benzotiazol e 2-tri-metil-silil-tiazol em A. Dondoni, et al, Tet. Lett. , (1985), 2,6, 5^77, em A. Dondoni et al, J. Chem. Soc·, Chem. Commun., (1984), 258} e em A. Mediei et al, Tet. Lett. , (1983), 24, 2901.

Utilizando um procedimento semelhante ao descrito em Levin, J. I. e Weinreb, S. M., J. Org. Chem., (1984), 49, 4325í pode preparar-se um oxazol de fórmula XIV em que X representa oxigénio e Q representa cis-vinileno como atrás definido em (ii) na definição de Q, a partir de uma oxazolina correspondente (4,5-di-hidro-oxazol). A oxazolina pode preparar-se, por exemplo, de uma maneira convencional a partir de

um intermediário correspondente de fórmula XIII em que W representa CN, -C(NH)OR, -COOR, ou -COOH, ou por reacçao de um j reagente organo-metálico apropriado com um composto correspon i dente de fórmula XI· (As tiazolinas podem preparar-se de ma- ! neira semelhante e desidrogenarem-se para proporcionarem tia- j zóis de fórmula XIV em que X representa enxofre e Q represen- i ta cis-vinileno como definido em (ii) na definição de Q).

I

Um álcool de fórmula XIV pode converter-se ;

Λ» j num amino-álcool correspondente de fórmula XV por remoção do j i

grupo CBZ utilizando um método convencional) tal como, por ' i

exemplo, hidrogenólise sobre um catalizador de paládio em car bono a uma pressão de cerca de 3 bares e a temperatura ambien te num solvente apropriado tal como, por exemplo, etanol·

Um amino álcool de fórmula XV pode converter— -se num material de partida de fórmula III por reacçao do ami

A* no álcool de fórmula XV com um agente de acilaçao apropriado.

Por exemplo, quando A representa -CO-, os agentes de acilaçao — 4 apropriados sao derivados activados de ácidos de fórmula R · • L. COOH, por exemplo, os seus derivados activados gerados in situ quando se utilizam reagentes convencionais de ligaçao, tais como, por exemplo, cloridrato de l-(3-di-metil-amino-pro pil)-3-etil-carbo-di-imida e 1-hidroxi—benzotriazol ou 4-di-metil-amino-piridina, assim como, por exemplo, cloretos áci4 dos de fórmula R .L.COC1. Quando A representa -NH.CO-, os agentes de acilaçao apropriados incluem isocianatos de fórmula la R .L.NCO. Quando A representa -0-C0-, os agentes de acila~ 4

Çao apropriados incluem cloroformiatos de fórmula R .0.CO.Cl. Regra geral, a acilaçao executa-se num diluente ou solvente inerte, tal como di-cloro-metano, tetra-hidrofurano ou dioxano, e a uma temperatura na gama, por exemplo, de 0-60°. Uma base orgânica ou inorgânica tal como tri-etil-amina, 4-metil-morfolina, 4-di-metil-amino-piridina, carbonato de potássio ou hidróxido de sódio pode também utilizar-se convenientemente como um aceitador de ácido quando adequado.

Os materiais de partida cetonas de fórmula IV podem também obter-se a partir de um álcool intermediário de i fórmula XV como apresentado no Esquema II. Assim por exemplo, '

para um material de partida de fórmula IV em que R tem uma ΐ ~ 2 6 2 significação de R 0_C-, Η N. SO -, ou R NH- e R tem uma signi !

* <6 d* ** ί íicaÇao definida adiante, um amino álcool de fórmula XV pode converter-se num álcool correspondente de fórmula XVII utiliA* zando um método análogo ao atrás descrito para a preparaçao de um composto de fórmula III e um reagente análogo, tal como,I por exemplo R^· I» COOH, R^.LaCOCl, R »L*NCO ou R · L· 0· C0C1· As

A* sim, utilizando um processo de oxidaÇao semelhante ao descrito no processo (A), um álcool de fórmula XVII pode oxidar—se para proporcionar um material de partida cetona de fórmula IV. Um material de partida cetona de fórmula IV em que R tem uma significação de -NCO pode preparar-se a partir de uma cetona 7 correspondente de fórmula IV em que R representa carboxi por

Aí Aí utilização de uma reacçao Curtius modificada utilizando, por exemplo, di-fenil-fosforilazida e tri-etil-amina em benzeno ou tolueno a 80° (ver T. Shioiri, K. Ninomiya e S. Yamada· J. Amer· Chem. Soc. . (1972), 9¾» 6203). Um material de partida de fórmula IV em que R? tem a significação carboxi pode prepa

A» rar-se por decomposição de um éster correspondente adequado de fórmula IV em que R? tem a significação R^Z0₂C- no qual R^Z representa um grupo de protecçao ácido convenientemente removido, por exemplo, fenilo, benzilo, ou alquilo (C^-Cg) suportando opcionalmente um substituinte acetoxi, alcoxi (C^-C^) ou alquil(Cj—C^)—tio.

** z »

Uma significação particular para R e, por exemplo, metilo, etilo, propilo, jt-butilo, acetoxi—metilo, me toxi-metilo, 2-metoxi—etilo, metil-tio-metilo, fenilo ou benzilo·

Ê de notar que a decomposição de um éster de 7 z fórmula IV em que R representa R 0 C- pode realizar-se utili zando qualquer um dos vários procedimentos bem conhecidos na especialidade de química orgânica. Assim, pode executar-se,

por exemplo, por hidrólise convencional sob condiçoes ácidas ou alcalinas, ajustadas quando necessário para minimizar qual , quer remoção hidrolltica de outros grupos funcionais na molécula· Alternativamente, em determinadas circunstâncias, por I exemplo quando R representa jfc-butilo, pode ser preferencial executar a decomposição utilisando catalisadores ácidos, por ί exemplo, por tratamento de um éster de fórmula IV com, por I exemplo, ácido tri-fluoro-acético a uma temperatura de por exemplo, 0—40°C, num solvente ou diluente adequado tal como ** 2 di-cloro-metano. Em adiçao, quando R representa t.-butilo, a decomposição pode realizar-se, por exemplo, por utilização de triflato de tri-metil-sililo e depois água, de uma maneira con vencional· Ainda, em determinadas circunstâncias, por exemplo quando R^Z representa benzilo, pode ser possível executar a de composição por meios redutivos, por exemplo, pela utilizaÇao de hidrogénio a uma pressão de cerca de três bares na presença de um catalisador adequado, tal como paládio ou platina, convenientemente num carvao como um suporte.

Os materiais de partida amino cetonas de fórmula V podem obter-se a partir dos álcoois correspondentes de fórmula XIV por intermédio das cetonas correspondentes de fór mula VI. Assim, por utilização de um procedimento de oxidaçao semelhante ao atrás descrito no método (A), um álcool de fórmula XIV pode oxidar-se a uma cetona correspondente de fórmula VI, por exemplo, como descrito no Exemplo 7d e Exemplo 8b.

A remoção do grupo de protecçao N de uma cetona de fórmula VI proporciona então um material de partida amino cetona correspondente de fórmula V. 0 grupo de protecçao pode remover-se convenientemente utilizando, por exemplo, ácido tri-fluoro-me tano-sulfónico em di-cloro-metano à temperatura ambiente. Ê conveniente isolar uma amino cetona de fórmula V assim preparada como o seu sal bruto do ácido tri-fluoro-metano-sulfónico e utilizá—lo directamente para a preparaçao de um produto correspondente de fórmula I, por exemplo, como descrito no • Exemplo 7f* Se uma amino cetona de fórmula V se isola na for. ma livre da sua base, por exemplo como descrito no Exemplo 8c,

da estabilidade da base livre·

Os materiais de partida cetonas de fórmula IV podemj também) preparar-se a partir das amino cetonas corres pondentes de fórmula V utilizando métodos análogos aos descri tos anteriormente para a preparaÇao de álcoois de fórmula XVII a partir dos álcoois correspondentes de fórmula XV·

Em alternativa) análogos semelhantes aos mate riais de partida de fórmulas III) IV e V sao apresentados no Esquema III. Um valinal protegido) por exemplo CBZ-valinal po de converter-se num álcool heterocíclico protegido correspondente de fórmula XIV a por utilização de um método análogo ao atrás descrito para a conversão de um aldeído protegido de fórmula XI num álcool heterocíclico protegido de fórmula XIV. A conversão pode executar-se passo a passo através de intermediários análogos de fórmula XIII a ou directamente por utilização de um reagente heterocíclico de fórmula XVI. Um álcool de fórmula XlVa pode desproteger-se para proporcionar um amino álcool de fórmula XVa· Por ligaçao com um ácido de fórmula IX) pode converter-se um amino álcool de fórmula XVa num álcool de fórmula XIV para se utilizar como descrito no Esquema II. Alternativamente) uma amina de fórmula XVa pode ligar—se com um ácido de fórmula IXa (preparado por utilização de méto dos padrao ou métodos análogos aos atrás descritos) para proporcionar um material de partida de fórmula III) por exemplo> como descrito no Exemplo 19. Em adiçao> uma amina de fórmula XVa pode ligar-se com um ácido de fórmula IXb (preparado por utilização de métodos padrao ou métodos análogos aos atrás des critos) para proporcionar um composto de fórmula XVII) que se pode converter num material de partida de fórmula IV.

Uma aproximaçao adicional aos materiais de par tida de fórmulas IV e V) assim como aos compostos de fórmula I) envolve também a utilização de reagentes organo metálicos de fórmula XVI em que Y representa lítio) especialmente quan—

do X representa enxofre, como ilustrado no Esquema IV e Exemplo 13 e Exemplo l4. Assim, por exemplo, uma amina adequadamente protegida, Ν,Ν-valinamida di-substituida, tal como benzi loxi-carbonilo protegido, N-metoxi—N—metil—valinamida de fór mula XX, pode tratar-se com um heterociclo litiado, tal como 2-lítio-tiazol ou 2-litio-benzo-tiazol, para proporcionar uma cetona correspondente de fórmula XXI· A remoção de um grupo de protecção amino de um composto de fórmula XXI por um método convencional proporciona uma amino-cetona correspondente de fórmula XXII. Por ligaçao de um ácido de fórmula IX com uma amina de fórmula XXII, pode obter-se uma cetona correspondente de fórmula VI. Como atrás descrito, uma cetona de fórmula j VI pode converter-se num material de partida de fórmula V,que j se pode ainda converter num material de partida de fórmula IV Por ligaçao de um ácido de fórmula IXa com uma amina de fórmu la XXII, pode obter-se um produto correspondente de fórmula I De modo semelhante, por ligaçao de um ácido de fórmula IXb com uma amina de fórmula XII pode obter-se directamente um ma terial de partida correspondente· Tambám, por utilização de metodologia análoga à descrita para a conversão de uma amida de fórmula XX numa amino-cetona de fórmula XXII, podem obter-se outros compostos intermediários, tais como os de fórmula 7 6

XXIII, fórmula V e fórmula IV em que R* representa HNR -.

Como é evidente para os especialistas, a ordem dos passos nas sequências que originam os materiais de par tida e os produtos desta invenção pode ser alterada se forem · seguidas considerações apropriadas relativas aos métodos de ligaçao, racemizaÇao, métodos de desprotecçao, etc.

Medições de Inibição

A **

A potência de compostos desta invenção para actuarem como inibidores de elastase determina-se inicialmení ** I te pela capacidade de um composto desta invenção inibir a ac- j çao de elastase leucócita humana (HLE) num substrato peptídeo ! de baixo peso molecular· A potência de um inibidor calcula-se

J*' por obtenção de uma determinação cinética da constante de dis

Λ* ** sociaçao, Ki, do complexo formado a partir da interacçao do inibidor com HLE. 0 substrato utilizado foi a anilina metoxi-succinil-alanil-alanil-propil-valine-p-nitro-anilina como descrito por Nakajima, K. et al· em J. Biol. Chem., 245, 4027-4032 (1979) o por Teshima, T. et al. em J. Biol. Chem., 257, N^fi9, 5085-5091 (1982). A enzima HLE utilizada nestes estudos pode obter-se de Elastin Products de St. Louis, Mis«ouri ou pode purificar-se de acordo com Viecarelho, B. R. et al· em Preparative Biochemistry, Vol. 13, páginas 57-67, (1983), como tambám descrito no Pedido de Patente Europeia, PublicaÇao nCunero 189305 A2. A partir da HLE assim purificada, mediu-se ***** o a velocidade padrao de produção de p-nitro-anilina, a 25 C por espectrofotometria no espectro do visível a 410 nanómetros com aquisiçao dutomática de dados de um espectrofotómetro cary 210 obtido de Varian Associates. As reacçoes iniciaram-se por injecção de 10 microlitros da solução HLE num cadinho de 3 mililitros contendo 2,89 mililitros de tampao (fosfato de sódio 10 milimolar, NaCl 500 milimolar, pH 7*6), 50 microli«w tros de solução de substrato em DMSO, e 5θ microlitros de DMSO As velocidades de reacçao inicial e de estado estacionário de produção de p-nitro-anilina calcularam-se por uma adaptaÇao dos dados experimentais a uma dependência linear do tempo pelo método dos mínimos quadrados linear. Esta velocidade, de«w terminada sem inibidor presente, utilizou-se como um padrao no cálculo dos valores de Ki do inibidor.

Regra geral, as cetonas heterocíclicas da pre «W ** M sente invenção nao sao inibidores de HLE de ligaçao-Ienta”i contudo, se se verificar que as cetonas heterocíclicas sao ini bidores de HLE de ”ligaçao-lentaⁿ, executam-se métodos especiais de análise para determinar correctamente os valores de Ki para a sua inibição de HLE. (ver Williams, J. W. e Morrison, J. F. , Meth. Enz. áâ» 437 (1979) para uma descrição destes métodos). Numa experiência típica, 2,89 ml de tampao (fos fato de sódio 10 milimolar, cloreto de sódio 500 milimolar, pH 7,6), 50 microlitros de solução de inibidor em DMSO, e 5θ

microlitros de solução de substrato em DMSO adicionam-se a um cadinho de 3 mililitros· 0 cadinho tapou-se, inverte-se várias vezes para misturar o seu conteúdo e mantém-se a (25°C) num espectrofotómetro. Depois de um período de cinco minutos para ‘ permitir que a solução de reacçao atinja o equilíbrio térmico, adicionam-se 10 microlitros de solução de enzima ao cadi- ; nho para se iniciar a reacçao· Faz-se esta experiência em duplicado ou triplicado a uma concentração zero de inibidor e

A ** pelo menos tres vezes a concentrações diferentes de z«ro do inibidor· Os valores de Ki calculam-se de acordo com os méto- ; dos apresentados na referência anterior de Williams e Morri«M son. Os valores de Ki para compostos escolhidos sao inferio-7 res a 10 M· Por exemplo, o valor de Ki para o composto do

Exemplo 1 é 3,3χ10^_1θΜ.

Modelos Animais

Os modelos animais de enfisema incluem a admi nistraçao intra-traqueia (i.t.) de uma protease elastolltica para provocar uma lesão destrutiva, lentamente progressiva,

4W A» do pulmão· Estas lesões avaliam-se normalmente de algumas semanas a alguns meses depois da injúria inicial· Contudo, es- j tas proteases também induzem uma lesão que è evidente nas pri meiras horas· A primeira lesão é primeiro hemorrágica, progri de para uma lesão inflamatória ao fim das primeiras 24 horas J i

e desaparece na primeira semana depois da injúria· Para tirar ;

** J vantagem desta primeira lesão, utilizou-se o modelo seguinte!

Ratos tipo Hamster anestesiam-se primeiro li— < geiramente com Brevital· Administra-se então directamente na j traqueia, solução salina de fosfato tamponada (PBS) pH 7»4 , sozinha ou contendo 400 /ig de elastase leucócita humana (HLEX Vinte e quatro horas depois matam-se os animais e removem-se os pulmões e limpam-se cuidadosamente de tecido externo· Depois da determinação do peso húmido do pulmão, lavam-se ospul moes com PBS e determina-se o total de células brancas e vermelhas laváveis recuperadas. Os valores para os pesos húmidos

de pulmão, total de células vermelhas laváveis e total de células brancas laváveis.aumentam de uma maneira dependente da dose seguindo a administraÇao de HL£. Os compostos que sao inibidores de elastase eficazes podem evitar ou diminuir a

A» gravidade da lesão induzida pela enzima originando um peso hu

M mido de pulmão inferior e valores reduzidos para o total de células laváveis, vermelhas e brancas, relativamente à administraçao de HLE isolado· Os compostos podem ser avaliados pe la sua administraÇao com, ou a vários intervalos anteriores à administração de HLE para determinar a sua utilidade na pre*-*

A, A* vençao de uma lesão HLE. Os compostos desta invenção proporcionam reduções estatisticamente significativas no peso húmido do pulmão e no total de células laváveis em comparaçao com

HLE sozinho.

Os compostos da presente invenção que foram ensaiados apresentaram actividade em pelo menos um dos ensaios atrás descritos em Medições de Inibição ou Modelos Animais. Ê de notar que nem sempre existe uma correlação directa entre a actividade dos compostos medida como valores Ki no ensaio de Medição de Inibição e os valores reduzidos para o total de cé lulas laváveis e pesos húmidos de pulmão relativos à administraÇao de HLE sozinho, obtidos no ensaio do Modelo Animal. Re gra geral, para os compostos da presente invenção ensaiados

ÍW no Modelo Animal, nao se verificou nenhum sinal significativo de toxicidade aguda.

A*

Os compostos da presente invenção podem administrar-se a animais de sangue quente se forem necessários pa ra tratamento de uma doença degenerativa de tecido, particularmente no homem, em particular para o tratamento de enfisema. 0 modo preferencial de administraÇao pode ser por via de um eerosol, em pá ou líquido. Num aerosol em pá, os compostos desta invenção podem administrar-se da mesma maneira que sádio cromolino por intermédio de um Spinhaler” (uma marca registada), aparelho turbo-inalador obtido de Fisons Corp. de •I Bèdford, Massachusets, a uma velocidade de cerca de 0,1 a 5θ

mg por cápsula, sendo administradas diariamente 1 a 8 cápsulas para um homem médio· Cada cápsula que se utiliza no turbo -inalador contém a quantidade necessária de um composto desta invenção sendo os 20 mg remanescentes da cápsula um veiculo farmaceuticamente aceitável tal como lactose· Num aerosol líquido, os compostos da invenção administram-se a uma veiocida de de cerca de 100 a 1000 microgramas por ”sopro” ou libertaM A# çao activa de um volume padrao de propulsor· 0 aerosol líqui- j do deve administrar-se a uma velocidade de 1 a 8 sopros por dia com variaÇao nas dosagens devidas à gravidade dos estados j % ** a tratar, ao peso do paciente e a distribuição do tamanho par j ticular do aerosol, uma vez que partículas menores conseguem

Μ M j uma maior penetração no pulmão. Os propulsores, por exemplo, um hidrocarboneto fluorado ou isobutano, os contentores, vál- j vulas e accionadores para aerosois líquidos sao descritos por j L. Lachman et al. em ”The Theory and Practice of Industrial Pharmacy’', Lea e Febiger, Filadélfia (1976).

A# í

Alternativamente, o modo de administraçao po- I de ser oral ou parentérica incluindo depósito sub-cutâneo por ί í

intermédio de uma bomba osmótica. Os compostos desta invenção I i

podem formular-se convencionalmente numa forma de dosagem oral; ou parentérica por mistura de cerca de 10 a 2^0 mg por unida- | l

de de dosagem com veículo convencional, excipiente, ligante, i i

conservante, estabilizador, aromatizante ou o equivalente co- i mo exigido pela prática farmacêutica aceite, por exemplo, como descrito na Patente dos U.S. NQ 3·755·340. Para administra çao parentérica, deve dar-se uma injecçao de 1 a 10 ml intraA ( venosa, intra-muscular ou subcutânea, contendo cerca de 0,02 i mg a 10 mg/kg de peso do corpo de um composto desta invenção, j *** I a 4 vezes ao dia. A injecçao deve conter um composto desta ! invenção numa solução ou suspensão isotónica estéril opcional | mente com um conservante tal como fenol ou um agente solubili zante tal como ácido etileno-di-amino-tetra-acêtico (EDTA). !

ι

A invenção ê agora ilustrada pelos seguintes J ~ ί exemplos nao-limitativos nos quais, excepto se referidos de í

outro rnodoí (i) as temperaturas sao apresentadas em graus Celcius (C), as operações executaram-se à temperatura ambiente» isto ê» a uma temperatura na gama de 18-25°} (ii) a evaporaçao do solvente executou-se uti lizando um evaporador rotativo sob pressão reduzida (6OO-4OOO pascais) 4»5-30 mm Hg) com uma temperatura de banho até 60°) (iii) a cromatografia intermitente executou-se em Merck Kieselgei (Art 93θ5) /obtido de E. Merck» Darmstadt» R. F. da Alemanha 7} se ê indicado •'sílica gel ácida·'» utilizou-se material preparado por encomenda por J. T. Baker Chemical Co., Phillipsburg, N. J. USA» e com um pH de cerca de 6 quando se fluidizou em água» a cromatografia de camada fina (TLC) executou—se em placas de 0,25 mm de sílica gel GHLF, Analtech (Art 21521), obtidas de Analtech, Newark» DE, USA} (iv) regra geral, as reacções sao seguidas por TLC e os tempos de reacçao apresentam-se apenas para ilustraÇao» (v) os pontos de fusão sao nao corrigidos e (d) indica decomposição} os pontos de fusão apresentados sao os obtidos para os materiais preparados como descrito} o poli morfismo pode originar o isolamento de materiais com diferen tes pontos de fusão em algumas preparações} (vi) todos os produtos finais foram purificados essencialmente por TLC e têm espectro de ressonância magnética nuclear (RMN) e dados microanalíticos satisfatórios} (vii) as produçoes sao apresentadas apenas pa

A* A# A* ra ilustração e nao sao necessariamente as que se podem obter por desenvolvimento atento dos - processos} se era necessário mais material repetiram-se as preparações} (viii) quando apresentados, os dados de RMN, sao na forma de valores delta para os maiores protoes de dia—

gnóstico, dados em partes por milhão (ppm) relativamente ao tetra-metil-silano (IMS) como um padrao interno, determinados a 80 MHz ou 25θ MHz utilizando CDCl^, DMSO—d^ ou CD^OD como solvente} utilizam-se abreviaturas convencionais para a forma do sinal, por exemplo! s, simpletoj d, dupleto; m, multipieto;

M br, faixa; etc, em adiçao Ar” significa um grupo ou sinal aromático;

(ix) as pressões reduzidas sao dadas como pres soes absolutas em pascais (Pa), as outras pressões sao dadas como pressões manomêtricas em bares;

(x) os símbolos químicos têm os seus significados normais; utilizaram-se também as seguintes abreviaturas: min (minutos), hr (horas), v (volume), p (peso); p.f. (ponto de fusão), 1 /íitro(s) 7, ml (mililitros), g /grama(s) 7, mg » ™ * «M /mi ligrama(s)_7i

M A* (xi) as proporçoes de solvente sao dadas em volume: volume (v/v)} as proporçoes de sólidos sao dadas em peso: peso (p/p).

(xii) 0 espectro de massa (E.M.) executou-se com uma energia de electrao de 70 electroes-volt num processo de ionizaçao química utilizando uma sonda de exposição direcAf ta; quando apresentados, apenas sao referidos os picos dez por cento do pico de base e superiores; e (xiii) quando se apresentam dados de cromatografia líquida de pressão elevada (HPLC), o t^ (tempo de retenção) é dado em min, Q (caudal) é dado em ml/min, a Col A é uma coluna analítica ODS (4,6 mm x 25 cm) Zorbax (uma marca registada) e a Col B é uma coluna analítica C-8 (4,6 mm x 35 cm) Phenomenex (uma marca registada) Zorbax.

NOMENCLATURA: Para uniformidade e clareza, sempre que possível utilizam-se nomes tipo sequência amino-ácido». Regra ge ral,uma identificação estereoquimica de um centro quiral com (S) indica que se calcula que o produto contêm pelo menos 95%

- 28 ekíUns—,, i4nMí.

do isómero S no centro indicado} a ausência de uma identifica çao estereoquimica num centro quiral indica uma mistura de isó meros que nao e necessariamente 1:1 no centro indicado.

Exemplo 1 (S )-/?-/“ (4- c loro- f eni 1) sulfoni 1- amino- ca rboni l7fe enzoil7-1#-valil-N-/I-(2-benzoxazolil)carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula I» heterociclo contendo X» N e Q = 2-benzoxazolilo, A=CO, L=£-fenileno, R^=R⁵.S(0₂>.NH.CO-, R^-CIC^).

a* N-benzi1-oxi-carbonil-L-valinol.

Adicionou-se cloroformiato de benzilo (91»θ & 95% de pureza) gota a gota durante um período de 1 hr a uma solução pré-arrefecida (0°) de L-valinol (5θ»0 g) θ tri-etil-amina (6θ»θ g) em clorofórmio (1500 ml). Agitou-se a mistura ** o % de reacçao durante 1 hr a 0 e depois permxtiu-se aquecer a temperatura ambiente durante 2 hr. Depois evaporou-se a mistu ra de reacçao, adicionou-se acetato de etilo (1500 ml) ao reΛ ** A ** síàuo} e lavou-se a solução organica com NaOH IN e solução sa lina> secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou—se o resíduo resultante por cromatografia intermitente» utilizando um gradiente passo a passo de óterihexano (lí5) seguido por éter» para proporcionar o produto (91»4 g) como um sólido ceroso branco} TLC» Rf=0»23» hexano?éter (5θ^:5θ)·

b. N—b enzi1-oxi-ca rboni1-L-valina1

Adicionou-se uma solução de di—metil-sulfóxido (107)2 g) em cloreto de metileno (150 ml) gota a gota durante 0)5 hr a uma solução prê-arrefecida (-60°)» agitada de cloreto de oxalilo (87»1 g) em cloreto de metileno (800 ml) sob uma atmosfera de azoto. A temperatura da mistura subiu a -45· Aqueceu-se então a mistura de reacçao a -3θ · Adicionau-se uma solução do produto do Exemplo la (8l»5 g) em cloreto

de metileno (300 ml) gota a gota durante 45 min a -30°. Agi·*» o tou-ee a mistura de reacçao durante 5θ min a -25 , arrefeceu-se a -40 e adicionou-se uma solução de di-isopropil-etil-amina (177»4 g) em cloreto de m tileno (250 ml) gota a gota durante 45 min a -40°. Agitou-se a mistura de reacçao durante 1 hr que se aqueceu atê à temperatura ambiente· A mistura de reacçao diluiu-se com cloreto de metileno (1500 ml), e lavou-se a fase orgânica com HC1 IN e evaporou-se para proporcionar o produto (98 g) como um ôleo verde que se utilizou imediatamente sem purificação adicional} TLC, Rf=O,48, hexano! :êter (50*50)·

c. N-benzil-oxi-carbonil-L-valinal di-etil-acetal

Adicionaram-se orto-formiato de tri-etilo (508 g), etanol absoluto (800 ml) e êcido ^-tolueno-sulfônico mono -hidratado (5>0 g) a uma porção do produto do Exemplo lb (8l g). Agitou—se a mistura durante 10 min à temperatura ambiente e depois evaporou-se. Dissolveu-se o resíduo resultante em éter, lavou-se com NaHCO^ aquoso saturado, secou—se (NagSO^), e evaporou—se para proporcionar um produto bruto que se purificou por cromatografia intermitente utilizando um gradiente passo a passo de hexano através de misturas de cloreto de metileno ihexano a acetato de etilo:cloreto de metileno (3θ·7θ) para proporcionar o priduto (84,7%) como um ôleo amarelo péli do} TLC, Rf»0,21, cloreto de metileno:éter de petróleo (5θ*5θ)

d. L-valinal di-etil-acetal (fórmula VIII)

Agitou-se uma mistura do produto preparado utilizando o método do Exemplo lc (l47»8 g) e 10% de paládio em carbono (10 g) em acetato de etilo (1500 ml), sob (ibar) atê se consumirem 2500 ml de H . Interrompeu-se a reacçao duas vezes, durante este período, e adicionou-se 10% de paládio em carbono (10 g). Filtrou-se então a mistura de reacçao atrav*es de um enchimento de terra de diatomáceas. Adicionouse 10% de paládio em carbono (10 g) e agitou-se _{de novo a mijS}

tura de reacçao sob H atê se consumirem 10,92 litros de H ·

Filtrou-se a mistura de reacçao através de terra de diatomáceas e concentrou-se o filtrado sob vácuo para proporcionar oe o produto (78,8 g) como um éleo amarelo pálido} = +7»8. j

e. Éster metílico de benzil-oxi-carbonil-L-valii-L-prolina

I i

Adicionou-se hidrato de 1-hidroxi-benzotriazol (483,3 g) a uma solução arrefecida (0-5°) de N-benzil-oxi -carbonil-L-valina (450,0 g) em N,Ν-di-metil-formamida (3»θ I litros)} e agitou-se a mistura de reacçao durante 20 min, seguida de adiçao de uma massa fluida de cloridrato de ester me tílico de L-prolina (296,4 g) e tri-etil-amina (186,6 g) em í

N,N-di-metil-formamida (1,5 litros). Depois de se arrefecer a mistura resultante a 0 , adicionou-se cloridrato de l-(3-di !

-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (377,6 gt 1,97 mo- J les) em N,N-di-metil-formamida (500 ml). Agitou-se a mistura j de reacçao a 0-5° durante 3 hr e então permitiu-se aquecer gra í dualmente à temperatura ambiente. Continuou-se a agitaçao du- j rante 65 hr, e filtrou-se a mistura e evaporou-se. Fraccionou j

-se o resíduo entre éter e HC1 IN, e removeu-se o precipitado ;

que se formou, por filtraçao. Depois separou-se a camada de éter} lavou-se com água, NaHCO^ aquoso saturado e solução sa- j lina} secou-se (MgSO.)} e evaporou-se. Purificou-se o éster ' bruto por cromatografia intermitente utilizando uma eluiçao j em gradiente de cloreto de metileno, depois metanol:cloreto 1 de metileno (1:99), (2,5^79,5) e, finalmente, (5^!95)· Fez-se de novo a cromatografia do material impuro da primeira coluna j ** ¹ utilizando um gradiente de eluiçao de cloreto de metileno:hexano (1:3)» cloreto de metileno, e, finalmente, metanol:clore to de metileno (2:98). As cromatografias combinadas proporcio { naram o éster (596,9 g, 92%) como um éleo incolor} TLC, R_f= i «0,45-0,00, metanol: cloreto de metileno (5^;95), E.M. , 111/0=363-j (M+1, base), 319» 255» 130» 91. ΐ

Análise para ^Cx9^H26^N2°5*^0,2^^H2°

Calculado : C, 62,19» Η, 7,28} N, 7,68

Encontrado: C, 62,195 H, 7,12} N, 7,51 í ΐ£^τν '' ·· --· •7·>5.':^νΐ·.·,;,·: (•».k*rtuiv2,í'·'——».. —····

f. Benzil-oxi-carbonil-Ir-valil-L-prolina (Fórmula IX) j

Adicionou-se NaOH IN (1,80 litros) a uma solu çao do produto do Exemplo le (595>θ g) em metanol (4,8 litros) e agitou-se a solução durante 18 hr. Evaporou-se o metanol, e i acidificou-se a camada aquosa (pH 2) com HC1 IN e extraiu-se j com cloreto de metileno. Lavaram-se os extractos orgânicos com solução salina, secaram-se (Na^SO^) e evaporaram-se para proporcionar o ácido (520,2 g, 90%) como um sólido branco, anall ticamente puro} E.M. m/e=349 (M+l, base), 305, 24l, 206, 116, 91.

Análise para ^ει8^Η24^Ν2θ5’

Calculado 5 C, 61,11} H, 7,01} N, 7,92 Encontrado: C, 61,12} H, 6,86} N, 7>68

g. (S)-Benzil-oxi-carbonil-L-valil-N-/l-(di-etoxi-metil)-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula X)

Adicionou-se uma porção de cloroformiato de isobutilo (57»8 g) a uma solução do produto do Exemplo If (154,3 g) e 4-metil-morfolina (42,8 g) em tetra-hidrofurano seco (280 ml) a -20°. Depois de agitaçao durante 10 min, arrefeceu-se a mistura a -40° e adicionou-se amino—acetal prepa rado como descrito no Exemplo 1, partes a-d (74,2 g) em tetra -hidrofurano (700 ml). Permitiu-se aquecer a mistura à temperatura ambiente e agitou-se durante 16 hr antes de se·filtrar e evaporar. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo} lavou -se com HC1 IN, NaHCO^ aquoso saturado e solução salina} secou-se (NagSO^)} e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente eluido com um gradiente de cio reto de metileno, e depois acetato de etilo:cloreto de metile no (4:96), (8:92), (25:75)» (5Ο^:5θ)» θ» finalmente, acetato de etilo para proporcionar 156 g do produto. Fez—se de novo a cromatografia das fracções impuras numa cromatografia líquida de alta pressão (Waters Prep 5θθ HPLC utilizando 2 películas de sílica gel), eluido com acetato de atilo:cloreto de meti^eno ’ P^ara proporcionar um adicional de 22 g de produto} TLC,

1

R_f=O,47, acetato de etiloícloreto de metileno (25^75)·

h. (S)-Benzil-oxi-carboni 1-L-vali 1-N-(l-formil-2-metil-propil)—L-prolinamida (Fórmula XI).

«w

Adicionou-se uma solução do produto do Exemplo lg (16,97 g) em acetona (800 ml) a uma solução de HC1 con centrada (45 ml) em água (2,6 litros), e agitou-se a solução a temperatura ambiente durante 16 hr. Adicionou-se acetato de etilo e extraiu-se a camada aquosa com acetato de etilo. Seca ram—se os extractos orgânicos (MgSO^) e evaporaram-se para proporcionar 12,8 g de óleo amarelado} TLC, R^e0,6l, acetato de etilo.hexanos (4íl)} E.M. , m/e«432 (M+l, base), 199· h-1. Um mátodo preferencial para conversão do produto acetal do Exemplo lg no produto aldeido do Exemplo lh á como se segue:

Adicionou-se ácido p-tolueno-sulfónico (360 mg) a uma solução agitada do produto acetal do Exemplo lg (18,80 g) em acetona (800 ml) sob azoto. Agitou-se a mistura 23 hr e evaporou-se o solvente. Diluiu-se o resíduo com aceta to de etilo e lavou-se (bicarbonato de sódio saturado, solução salina), secou-se (Na₂S0^) e evaporou-se para proporcionar 15,68 g (97%) do produto aldeido do Exemplo lh} TLC, R^= =0,48, acetonaíhexanos (45*55)» E.M, m/e= 46O(M+29), 433(M+2), 432(m+l), 331» 199.

i. BenziI-oxi-carboni1-L-vali1-N-/1-(ciano-hidroxi-meti1)-2-metil-propil7-L-prolinamida (FÓrmula XIII, W=CN).

Adicionou-se KCN sólido (7,74g, 119 mmoles) a uma solução do produto do Exemplo lh, (12,8 g) em tetra-hidro furano (150 ml) e água (128 ml). Agitou-se a mistura resultan te durante 4,5 hr, e, então, fraccionou-se entre acetato de etilo e água· Extraiu-se a camada aquosa com acetato de etilo} lavaram-se as camadas orgânicas combinadas com NaHCO^ aquoso

saturado e solução salina, secaram-se (KgCO^/NagSO^ a 10% (p/p) e evaporaram-se para proporcionar l4,0 g de ciano-hidri na bruta} TLC, R^.=0,17, acetona !hexanos (1:3)·

M i-1. Um processo alternativo, preferencial para a preparaçao do produto do Exemplo li ê descrito no Exemplo 4a j· Benzi1-oxi-carboniI-L-vali1-N-/1-(2-benzoxazoli1)hidroxi-metil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula XIV, heteroM ciclo contendo X, N e Q«2-benzoxazolilo).

Adicionou-se uma solução de cloreto de acetilo (9»5θ ml) em éter (15 ml) a uma solução de etanol absoluto (10,8 ml) em éter (33 ml) a 0° durante um período de 20 min.

** o

Depois de agitaçao a 0 durante 15 min adicionais, adicionou-se o produto do Exemplo li (utilizado sem purificação adicio nal) (7,70 g) em clorofórmio (15 ml) e agitou-se a solução a 0° durante 16 hr. Evaporaram-se os solventes, dissolveu-se o residuo em etanol absoluto (80 ml), e adicionou-se 2-amino-,fe nol (1,83 g). Depois de se aquecer a 60° durante 3 hr, dissol veu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com NaOH IN e solução salina, secou-se (K^CO^/Na^SO^ a 10% (p/p)) e evaporou-se· Fez a cromatografia intermitente do produto bruto, eluido com acetona!hexanos (3^:17), para proporcionar 3 fracΜ Λ# çoes de espuma amarelada! fraççao um, TLC, F^=0,30> acetona· :hexano (3!17), EM, m/e=55l(M+l), um isÓmero, 136 mg)} fracçao dois, TLC, R_f=0,25-0,17, acetonaÍhexano (3!17), os quatro isómeros, 1,77 gi fracçao 3» TLC, R_f=0,17-0,08, acetonaShexano (3:17), três isómeros, 2,45 g.

k. L-vali1-N-/!-(2-benzoxazolil)hidroxi-metii-2-metil-propil7—L-prolinamida (Fórmula XV), heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo) ·

Hidrogenou-se uma mistura de 10% de paládio em carbono (300 mg, 50% água) e do produto do Exemplo 1j, fra cçao três (2,45 g) em etanol (100 ml), num agitador a 3»4 bar

durante 6 hr, depois do que se adicionou uma quantidade adicional de paládio em carbono (300 mg) e se hidrogenou a mistu ra durante mais 3 hr. Filtrou-se a mistura através de terra de diatomáceas e evaporou-se o solvente. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo, extraiu-se em HC1 IN e lavou-se a ca mada aquosa ácida com acetato de etilo, alcalinizado com NaOH IN e, exttaiu-se com acetato de etilo. Evaporou-se o solvente orgânico para proporcionar 1,40 g (76%) de sólido. R_f«0,0-0,15» metanol:clorofórmio (1:19), E.M, m/e=471 (M+l), 399·

1. /4-/~(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7-L-vali 1-Ν-/Ϊ-(2-benzoxazolil )hidroxi-meti 1-2-meti 1-propi JL-7-L-prolinamida (Fórmula III, heterociclo contendo X, N e Q= =2—benzoxazo li lo , A=CO, Laja-fenileno , R^=r\ S(0₂).NH· CO-, r⁵«4-cic₆h₄).

Adicionou-se 1-(3-di-metil-amino-propil)~3

-etil-carbo-di-imida (710 mg) a uma solução do produto do Exemplo lk (1,38 g), A-hidroxi-benzo-tri-azol (983 mg) e ácido 4-/T4-cloro-fenil)sulfonil-amino—carbonil7benzoico (ver partes

Ml n e o adiante) (1,12 g) em tetra-hidrofurano (18 ml)} e agitou-se a solução a temperatura ambiente durante lo hr. Fraccionou-se a mistura entre água e acetato de etilo) lavou-se a fase orgânica com HC1 IN e solução salina, secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetato de etiloléterίácido acético (60:40J2 gota (ml), para proporcionar 1.2 g de sólido} TLC, R_fs0'42, metanol:clorofórmio:ácido acético (5^:95^JI gota/ml)}

E.M., m/e=738(M+l), 421, 318.

Análise para C^H^qCIN^OqS. l,4H₂0:

calculado : C, 56,64} H, 5*65} N, 9,17 encontrado: C, 56,97» H, 5»39> N,8,67

m. (S)-/5-/~(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7“ -L-vali1-Ν-/Ϊ-(2-benzoxazoli1)carboni1-2-meti1—propi]_7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2/ f*

-benzoxazolilo, A=CO, L=]3-fenileno, R =R .S(0 ).NH. C0-,

r⁵=4-c₆H₄).

Adicionou-se ácido tri-fluoro-acótico (0,712 ml) a uma solução do produto de Exemplo 1, parte 1 (1,15 g) θ periodinano Dess-Martin (2,65 g) em cloreto de metileno (15 ml)) e agitou-se a solução a temperatura ambiente durante 16 hr. Fraccionou-se a suspensão resultante entre acetato de eti lo e HC1 IN. lavou-se a solução organica com duas porçoes de Na^O !NaHC0 ^a<J^uoso saturado iíl (p/p), NaHCO^ aquoso saturado e solução salina) secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o peoduto bruto por cromatografia intermitente elui— dó com tetra-hidrofurano:cloreto de metileno!ácido acético (2,5·97»5*1) gota/ml) para proporcionar 889 mg de sólido. Exe cutou-se uma segunda purificação utilizando cromatografia intermitente em sílica gel ácida, eluido com metanol:clorofórmio (2,5·97»5)» para proporcionar o composto do título (701 mg) como um sólido) TLC, R_f=0,47, acetato de etiloíhexanos: íácido acético (65:35·’! gota/ml), HPLC, t_R=9»27, Col B, Q=4, água5acetonitrilo:tetra-hidrofurano:ácido tri-fluoro-acático (55!35!15!0,l)) E.M, m/e=736 (M+l), 718, 421, 298.

Análise para C^H^ClI^OgS. 1,25^0!

Calculado : C, 56,12) H, 5,47) N, 9,09 Encontrado! C, 56,24) H, 5jO7» N, 8,74 intermediário ácido benzoico utilizado para a ligeçao na parte 1. pode preparar-se como se segue:

n: 4-/”(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoato de 1,1· -di-metil-etilo.

Equipou-se um fradco de 5 litros de fundo redondo com 3 aberturas com um agitador mecânico e entrada de azoto. Colocou-se cloreto de metileno (2 litros) no frasco de reacçao e adicionaram-se sequencialmente éster mono-V-butilico do ácido tereftálico (127»5 g), 4-di-metil—amino-piridina (70,06 g) e 4-cloro-benzeno-sulfonamida (110,04 g), utilizando cloreto de metileno (400 ml) para arrastar os sólidos. Adi

cionou-se cloridrato de 1-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida em porçoes durante 10 min utilizando cloreto de metileno (100 ml) para arrastar o sólido. Depois de se agi tar durante a noite, à temperatura ambiente, a mistura de reac çao evaporou-se atÓ à secura· Fraccionou-se o resíduo entre acetato de etilo e água. Lavou—se a solução organica com ácido cítrico aquoso a 20% (p/v), NaHCO^ aquoso saturado e solução salina} secou-se (Na^SO^)} e evaporou-se num sólido branco. Depois de se secar num forno de vácuo a 5θ°» obteve-se o éster (277 g, 100%) num estado suficientemente puro para se utilizar directamente no passo seguinte} TLC, R^.stO,43, metanol íclorofórmio (15í85)· (Foi possível uma purificaÇao adicio nal por recristalizaçao a partir de etanol/água» p.f. superior a 300°).

0. Acido 4-/”*(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoico

Equipou-se um frasco de 3 litros de fundo redondo com 3 aberturas com um agitador mecânico e um tubo de secagem de CaCl . Adicionou-se ácido tri-fluoro-acêtico (1300 g) e arrefeceu-se a 0 , e adicionou-se o produto do Exemplo 1» (79,5 g)· Inicialmente, o sólido dissolvido, proporcionou uma solução clara. Depois de 10-15 min, formou-se um precipitado pesado do produto} e tornou-se difícil agitar a mistura de reacçao. Foi essencial uma agitaçao vigorosa com o agitaA ** dor mecânico para levar a reacçao a completar-se. Agitou-se a mistura de reacçao a 0-5° durante 1 hr antes de se verter em 1500 ml de gelo/água e agitou-se durante 2 hr. Filtrou-se o sólido resultante e secou-se. 0 sólido branco (6l,5 g, 91%) obtido recristalizou-se a partir de l600 ml de etanol absoluto/1600 ml de -agua para proporcionar o ácido benzoico (54 g, 80%) como agulhas brancas} p. f. 286-288°} TLC, R^.=0,7, metanol: clorofórmio:ácido acético (10:9θίΐ)·

Exemplo 2 • /4-(meti1-sulfoni1-amino-carboni1)benzoil7-L~vali1-Ν-/Ϊ-(2- 37 -benzoxazoli1)carboni1-2-meti1-propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo, A=CO, L=j,-fenileno, R⁴«R⁵. S(0_o).NH. CO-, R⁵=CH ).

......... *........... .3 .......................- ...........-......

a· (IS )-/5- (1,1-di-metil-etoxi) carbonil-benzoilT-L-valil-N-/!-(2-benzoxazolil)hidroxi-metil-2-metil-propil7-lr*pro linami da (Fórmula XVII, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazo li lo , R⁷. L. A»4-/” ( CH^ ) ^COC^C^CO ) .

Adicionou-se cloridrato de l-(3—di-metil-amino-propiD-3-etil-carbo-di-imida (510 mg) a uma solução do produto preparado pelo método do Exemplo Ik /õ material prepa rado de acordo com o método do Exemplo l.i e obtido na forma (IS) tratou-se de acordo com o procedimento do Exemplo Ik e obteve-ee na forma (1S37 (1,00 g), 1-hidroxi—benzo-triazol. (720 mg), e éster mono-jt-butílico do écido tereftélico (560 mg) em tetra-hidrofurano (5 ml) a 0 } permitiu-se a solução aquecer à temperatura ambiente e agitou-se durante l6 hr· Fra ccionou-se a mistura entre égua e acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica com HC1 IN (duas vezes), bicarbonato de sódio saturado (duas vezes) e solução salina, secou-se (MgSO^) e evaporou-se· Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetona:hexano (4:6), para proporcio nar o produto (1,08 g, 73%) como um sólido; TLC, R_f.=0,7, acetona! hexano (45:55)} EM, m/e=621 (M+l), 649, 622, 565, 318.

Anélise para ^C34^H44^N4^O7-°’^4íí2^Oí

Calculado : C, 65,03} H, 7,19} N, 8,92 Encontrado! C, 65,06} H, 7,05} N, 8,72

b. (S)-/5-(1,1-di-metil-etoxi)carbonil-benzoil7-E“Valil-N-/l-(2-benzoxazolil)carbonil-2-metil~propii7-L-prolinamida (Fórmula IV, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo R⁷.L.A.»4-/T CH₃)₃COCO7C₆H^CO) .

Adicionou-se élcool t—butilico (0,030 ml) a uma solução do produto do Exaplo 3a (200 mg) e periodinano Dess-Martin (4l0 mg) em cloreto de metileno (5 ml) e agitou-se a

solução à temperatura ambiente durante 16 hr· Fraccionou-se a solução resultante entre acetato de etilo e Na^S^O^íNaHCO^ sa turado líl. Separou-se a fase orgânica e lavou-se com NagS^O^ :NaHCO^ saturada l!l (duas vezes) e solução salina, secou-se /S₂CO₃:Na₂SO₄ (1:2, pip)7 e evaporou-se· Purificou-se o produ to bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetona!

!hexanos (II 3) para proporcionar o produto (l6l mg, 80%) como um sólido} TLC, R =0,35» acetona!hexanoβ (1í3)} HPLC, t =7»86 X K

Col A, Q«+, água»acetonitrilo (4θ:6θ) EM, m/e=6l9 (M+l), 563» 316, 304, 204, 120, II5.

Análise para C^H^N^O?. 0,4^0!

Calculado : C, 65,24} H, 6,89} N, 8,95 Encontrado! C, 65,26} H, 6,74} N, 8,84

c. (4-carboxi-benzoi1)-L-vali1-N-/1-(2-benzoxazoli1)carboni1- 2-me til-pro pi l7-I^-pro linami da (Fórmula IV, heterociclo contendo X, N e Q=2—benzoxazolilo, · L. A=4—(HOOC)C^H^CO).

Agitou-se uma solução do produto do Exemplo 3b (770 mg) em ácido tri-fluoro-acético (5 ml) à temperatura ambiente durante 2 hr· Depois evaporou-se o solvente. Diluiu-se o óleo residual com éter e evaporou-se a solução resultante. Colocou-se então o óleo castanho sob alto vácuo durante 48 hr. Purificou-se o ácido bruto (agora uma espuma) por cromatografia intermitente, eluido com acetonaihexano:ácido acético (4θί6θί1) para proporcionar o produto (680 mg, 96%) como um sólido amarelo} TLC, R_f,»0,23, a cetona! hexano! ácido acético (4:6ί1 gota/ml)} EM, m/e=563 (M+l), 545» 316, 298, 248, 245» 220, 204, 149, 148, 120.

Análise para C^^H^^N^O^.O^NaOH. O,55H₂Oí

Calculado ! C, 62,07} H, 6,13} N, 9,65 Encontrado! C, 61,70} H, 5>95» N, 9,92

d. /5-(metil-sulfonil-amino-carbonil)benzoii7-1*-vali 1-N-/I-(2-b enzoxa zoli1)carboni1-2-meti1-propil7-L-prolinami da (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo,

A=00, L=£-fenileno, Ãr⁵.S(O ).NH. CO-, R⁵«CH ).

3

Adicionou-se cloridrato de 1-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (78 mg) a uma solução do pro duto do Exemplo 3c (200 mg), 4-di-metil-amino-piridina (58 mg), e metano-sulfonamida (37 mg) em cloreto de metileno (2 ml), e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante l6 hr. Depois evaporaram-se os solventes, fraccionou-se o resíduo entre acetato de etilo e HC1 IN. Separou-se a camada orgâ nica, lavou-se com HC1 IN, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Pu rificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetato de etiloíêteríácido acético (2O:8OJl) para proporcionar o produto (74,2 mg, 32%) como um sólido} TLC,

R„«0,10, éteriácido acético (lOOíl)} HPLC, ΐ„=6,Ο3, Col B,

I K

Qa2, água·acetonitriloίtetra-hidrofuranoiácido tri-fiuoro-acfc tico (55ί35·Ί3··Ο»ΐ)» E.M, m/e=640(M+l), 622, 326, 325, 316, 298, 247» 201.

Análise para C H N^gS.OjÔC^COgHJ

Calculado : C, 56,93» Η» 5,89} N, 10,18 Encontrado· C, 57»22} Η, 5»97» N, 9»79

Exemplo 3 (S)-/5-(f eni1-sulfoni1-amino-carboni1 )benzoil/-L-vali1-N-/1-(2-benzoxazolil)carbonil-2-metil-propil7~L-proIinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo, A«CO, Lag—fenileno, R^»R^.S(0^).NH.CO—, R^»C^H^)·

a. Acido 4-(fenil-sulfonil-amino-carbonil)benzoico.

Utilizando procedimentos semelhantes aos descritos no Exemplo 1 partes n e 0, excepto que se utilizou ben zeno-sulfonamida em vez de 4-cloro—benzeno-sulfonamida, obteve—se ácido benzoico como um sólido} p. f. 259-261°.

b. (IS)— /5 — (feni1— sulfoniI—amino— carboni1)benzoil/-L-vaIi1—N—/1—(2-benzoxa zoli1)hi droxi-meti1-2-meti i-propil7-L-prolinamida (Fórmula III, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzo xazolilo, A=C0, L=g-fenileno , R^=R^.S(02)»NH.C0-,

- 40 I

'TU;

Adicionou-se cloridrato de l-(3-di-metil-ami- J no-propil)-3-etil-carbo-di-imida (140 mg) a uma solução do pro [ t

duto do Exemplo lk (290 mg)» 1-hidroxi-benzotriazol (200 mg), ; e ácido 4-(fenil-sulfonil-amino-carbonil)benzoico (179 mg) em J tetra-hidrofurano (4 ml)} e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante l6 hr. Fraccionou-se a mistura entre água e acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com NaHCO^ saturado (3 vezes) e solução salina, secou—se (MgSO^) e evaporou-se. Combinaram-se as camadas aquosas, acidificaram-se a pH 1 com HC1 concentrado» e extraiu-se com clorofórmio. Secou-se a fase clorofórmio /KgCO^iNa^SO^ (1S2, píp)_/ e evaporou-se. 0 pro ! duto bruto obtido das soluçoes de acetato de etilo e clorofór } mio combinou-se e purificou-se por cromatografia intermitente» eluido com acetonaihexanos!ácido 2cético (45^j55^:1)j para proporcionar o produto (27θ mg, 60%) como um sólido} R^.=0,15, acetona í hexano : ácido acético (3Ο·7θ·1 gota/ml), E.M. , m/e=7O4 (M+l), 686, 287, 346, 318, 316, 300, 158, 120.

Análise para C^H^I^OgS.0,όΟΗ^Ο^:

Calculado : C, 58,79} H, 6,03} N, 9,07 Encontrado: C, 59»H} H, 6,02} N, 8,68

c. (S )-/5- ( feniI-sulfonil-amino- carbonil)benzoil/-L-valil-N—/1—(2-benzoxazolil)carboni1-2-metil-propil/-l-prolinamida (fórmula I» heterocicio contendo X, N e Q=2-benzoxazo- j li lo, A=cO, L=£-feni leno, R⁴=R⁵. S(0₂).NH.C0-, ΐΛ^Η ).

Adicionou-se ácido tri-fluoro-acético (0,09 ml) a uma do produto do Exemplo 4b (270 mg) e periodinano Dess-Martin (490 mg) em cloreto de metileno (5 ml) e agitou- j -se a solução a temperatura ambiente durante 16 hr. Diluiu-se j a solução resultante com acetato de etilo e lavou-se (4 vezes com 4:1 de solução salinaíNa^^^ :Na₂NCO₃ saturado (i:i), uma vez com solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Puri ficou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, elui do com acetona:hexanos:ácido acético (4θ:6θ:ΐ). 0 sólido obti !

• do desta coluna purificou-se ainda por cromatografia intermi- j . tente em sílica gel ácida eluido com clorofórmio para propor- I

cionar o composto do titulo (152 mg, 57%) como um sé li do j TLC,

R =0,23, acetonaíhexanosíácido acético (4o:bO:i); HPLC, t = x K =10,09, Col B, Q=2, água: acetonitrilo:tetra-hidrofurano:áeido tri-fluoro-acêtico (55 S 35 · J· 5 · 0 > 1) > E.M. , m/e=7O2 (M+l), 326, 299» 298, 297» 136.

Análise para C ₆H ^0^.0,75 NaOH. 0,25^0:

Calculado : C, 5θ>72; H, 5,51} N, 9?51 Encontrado: C, 5δ?38» H, 5?345 N, 9j28

Exemplo 4 (S)-/4-/^-(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil/benzoil/-l-valil-N-/l-(5-metoxi-benzoxazol-2-il)carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Férmula I, heterociclo contendo X, N e Q= “ 5 =5-ro®toxi-benzoxazol-2-ilo , A=CO, L=j>-fenileno , R =R³.S(0₂).

. NH. CO-, R⁵=4-C1C₆H^).

a. (IS)-benziloxi-carboni 1-L-va li l-N-/l-(ciano-hidroxi-metil)-! -2-metil-propil/-L-prolinamida (Férmula XIII, W=CN).

í

Um procedimento alternativo, preferencial para preparaÇao do produto do Exemplo li como se segue: Secou- i -se sob vácuo um frasco de 250 ml de fundo redondo com agita- !

i dor, e purgou-se com azoto. Carregou-se o frasco com di-clo- i ro—metano (120 ml) e a seguir adicionou-se aldeído preparado I como descrito no Exemplo Ih (17»7 g) e tri-etil—amina (3»4 ml).' Adicionou-se acetona ciano-hidrina (11,0 ml) numa porção. Agi- j tou-se a mistura de reacÇao durante 21 hr. Diluiu-se a mistu- |

A* A» ra de reacçao com di-cloro-metano. Lavou-se esta solução cui- dadosemente (duas vezes com cloreto de aménio saturado, uma vez com solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se o sol ! vente. 0 produto bruto dissolveu—se em acetato de etilo, lavou-se (uma vez com cloreto de aménio saturado, uma vez com solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Aqueceu-se a espuma resultante a 50 sob vacuo durante quatro dias para proporcionar 18,90 g (100%) de produto: TLC, R^=0,31j acetonaíhexanos (4θ:6θ).

- 42 f ί

b. Cloridrato de (lS)-benziIoxi-carbonil-L-vaiil-N-/3-etoxi-2-hidroxi-3-imino-l-(1-metil-etil)propil7-L-prolinamida (Fórmula XIII, W=C(NH)OR, R=C H ).

Adicionou-se cloreto de acetilo (87,7 ml) gota j i

a gota durante 25 min a uma solução agitada de etanol (79,4 ml) em clorofórmio (80 mi) a 0° sob azoto· Adicionou-se o pro duto do Exemplo 4a (l8,8l g) em clorofórmio (80 ml) e agitou-se a reacçao a 0° durante 4 hr· Evaporaram-se os solventes para proporcionar o produto (20,89 g)j TLC, depois fraccionou-se uma allquota entre acetato de etilo e NaOH IN para i formar o imino-êter livre, H ^,=0,45, metanol:clorofórmio (7,5^:

c. 2-amino—4—metoxi—fenol

Hidrogenou-se uma mistura de 10% (p/p) de pa- i ládio em carbono (200 mg) e 4-metoxi-2-nitro-fenol (3,0 g) em J etanol (100 ml), num agitador a 3,4 bares durante 24 hr. Filtrou-se a mistura através de terra de diatoméceas e evaporou- ί -se para proporcionar o produto (2,3 g), TLC, R^=0,6l, meta- j noi:clorofórmio (i:9)i E.M, m/e=170 (M+l), 164, 152 (base),

124. |

d. (IS)-benziloxi-carbonil-L-vaIil-N-/I-(hidroxi )-(5-metoxi-benzoxazol-2-il)metil-propil/-L-prolinamida (Fórmula XIV, heterociclo contendo X, N e Q=5-metoxi-benzoxazol-2-ilo) .

Aqueceu-se uma solução agitada do imidato do

Exemplo 4b (6,35 g) e 2-amino-4-metoxi-fenol (1,525 g) em eta nol seco (40 ml) durante 8 hr a 60° sob azoto. Dissolveu-se a ί mistura em acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN, bicarbonato de sódio saturado, solução salina), secou-se (KgCO^/NagSO^ a 10% (p/p)), e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do produto bruto eluido com acetonaihexanos (3O^J7O) para proporcionar o produto (983 mg). Combinaram-se as fracçoes misturadas, evaporaram-se e fez-se a cromatografia intermitente elui

- 43 «MW- . ..·-------- . . .«/>

do com acetonaíhexanos (35^;65) para proporcionar produto adicional (588 mg), TLC, 1^.=0,28, acetona:hexanos (4θ:6θ)} E.M. , , m/e=(M+2), 581 (M+l), 563, 473) 331) 261, 195, 107, 91, 79, 7CU

e. (lS)-L-valil-N-/l—(hidroxi)-(5“HJetoxi-benzoxazol-2-il)me- ί til-2—metil-propil/-L-prolinainida (Fórmula XV, heterociclo i contendo X, N e Q=5-metoxi-benzoxazol-2-ilo).

Hidrogenou-se uma mistura de 10% (p/p) de pa- ! ládio em carbono (300 mg) e do produto do (1)54 g) em etanol (100 ml), num agitador a 3)4 bares durante 4 hr, de pois do que se filtrou a mistura através de terra de diatomáceas e evaporou-se o solvente. Re-dissolveu-se o residuo em etanol (100 ml), adicionou-se 10% de paládio em carbono (0,69 g) e hidrogenou-se a mistura num agitador a 3)4 bares durante [ 4 hr. Filtrou—se então a mistura através de terra de diatomá— ' ceas e evaporou-se o solvente para proporcionar 990 mg (83%) de sélido} R^=0,G, metanolίclorofórmio (1:19)} E.M., m/e=475 (M+29), 447 (M+l), 429, 348, 234, 233) 197) l80, 179) 178, !

155) 150, 100, 72, 70. i

f. (lS)“/Ç-/^_(4-cloro-fenil)sulfonil-carbonil7benzoil/-L-valil-N-/l-(hidroxi)(5-metoxi-benzoxazol-2-iI)metil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula III, heterociclo contendo X, N e Q»5-nietoxi-benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=£-fenileno, r⁴=r⁵.s(o2).nh.co-, r⁵=4-cicóh₄).

í

Adicionou-se cloridrato de I— (3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (470 mg) a uma solução do pro duto do Exemplo 4e (990 mg), 1-hidroxi-benzotriazol (33O mg), e do produto do Exemplo 1 parte o (83O mg) em tetra-hidrofura no (7 ml)} e agitou-se a solução à temperatura ambiente duran

A» Ο I te 16 hr· Armazenou-se então a mistura de reacçao a — 7θ du— rante 36 hr. Diiuiu-se a mistura de reacçao com acetato de etilo, lavou-se (bicarbonato de sódio saturado, HC1 IN, solução salina) secou-se (N.SO^, e evaporou-se. Purificou-se o ! produto bruto por cromatografia intermitente eluido como ace- 44 i

tona:clorofórmio:ácido acético (20:80:1) para proporcionar o i produto (976 mg) como um sólido J TLC, R^.=0,25, acetonaί cloro- j fórmio.ácido acético (35*65*1)» E.M. , m/e=768 (M+l), 752, 75-1» '

750» 423, 422, 421, 402, 377, 348, 33O.

Análise para C H, ClN_cO_nS. 1,8 CBLCOJHí 37 **2 3 y 32

Calculado : C, 55,975 H, 5,63; N, 8,16 Encontrado: C, 56,l4; H, 5*76; N, 7,95

g. (S)-/4-/“ (4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil/-L-vali1-N-/1-(5-metoxi-b enzoxazo1-2-i 1)-carboni1-2-metil-propil7-“b-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, ’ 4

N e Q=5-metoxi-benzoxazo1-2-ilo, A=CO, Lsg-fenileno, R s j R⁵.S(O2).NH. C0-, R⁵=4-C1C6H₄).

Adicionou-se jt-butanol (0,ll6 ml) a uma solu- j çao do produto do Exemplo 4f (947,6 mg) e periodinano Dess- i -Martin (1,57 g) em di-cloro-metano (6 ml), e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 21 hr· Diluiu-se a suspensão ·resultante com acetato de etilo e lavou-se (2 vezes

I com Na„S 0 saturado:NaHC0 saturado 1:1, uma vez com HC1 IN, •w i solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se 1 o produto bruto por cromatografia intermitente eluido com ace tona ihexano: ácido acético (5O.’5O:l) para proporcionar o produ to (703 mg) como um sólidoj TLC, V^o ,47, acetato de etilo:he xanos.’ácido acético (65:35*1)5 E.M. , m/e=766 (M+l), 750, 749, 748, 422, 421, 329, 328, 327, 326, 249, 23I.

Análise para C^H^CIN^S. 1,ΙΗ^Ο. 1,

Calculado : C, 55,26; H, 5,51» N, 8,22 Encontrado: C, 55,16; H, 5,20; N, 8,08

Exemplo 5 (5)-/4-/^-(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil/-L-valil-N-/l-(5-hidroxi-benzoxazol-2-il)carboni1-2-meti1-pro— pil/-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=5-hidroxi-benzoxazol-2-iIo, A=CO, L=jo-fenileno, R =R . S(0₂). NH.CO-, R⁵=4-CiC H,).

_6,..4.,,,--——

Adicionou-se tribrometo de boro (3,55 ml» 1,0

M em di-cloro-metano) a uma solução do produto do Exemplo 4g j (680 mg) em di-cloro-metano (5 ml) a 0° e permitiu-se aquecer à temperatura ambiente. Depois de 3 horas, frzccionou-se a mis tura de reacçao entre acetato de etilo e HC1 IN. Lavou-se a camada de acetato de etilo (solução salina), secou-se (MgSO^),: e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente eluido com metanol:clorofórmio:ácido acético (1: 98:1) para proporcionar o produto (236 mg, 35%) como um sólido amarelo} TLC, R_f=0,28, metanol: clorofórmio:ácido acético (5:94:1); HPLC, t =6,75» Col A, Q=3, água:acetonitrilo:tetra-hidrofurano:ácido tri—f luoro-acêtico (55^5*15*0,1); E.M. , m/e=752 (M+l), 734, 421, 377, 342, 314 (base). | i

Análise para** C ₆H gClN^S. 0,2 CHClyO^ CH^COOH.-1,5^0: Calculado : C, 53,^3» H, 5,20} N, 8,53 Encontrado: C, 53>65> H, 4,96; N, 8,37

Exemplo 6 /5-/ (4-cloro-fenil)sulfinil-amino-carbonil/benzoil/-L-valil- j -N-/1-/5-(amino-carboni1)benzoxa zo1-2-i1)carboni1-2-meti1-pro j pil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e

Q=5-(amino-carbonil)benzoxazol-2-ilo, A=C0, L=jJ-fenileno, R = R⁵. S(02).NH. C0- , R⁵=4-C1C6H₄).

a. 3-amino-4-hidroxi-benzamida·

Agitou-se vigorosamente uma solução de ácido

3-amino-4-hidroxi-benzoico (7,73 g) em cloreto de tionilo (96 ml), sob azoto a 40° durante uma hora· Removeu-se o cloreto de tionilo por destilação sob pressão reduzida e suspendeu-se o sólido resultante em tolueno (350 ml). Borbulhou-se NH^ ani dro na mistura de reacçao durante 45 minutos. Filtrou-se a mis tura através de terra de diatomáceas e lavou-se cuidadosamen- ί te a massa do filtro com acetona até o filtrado fresco ficar ~ j claro. Evaporou-se a solução de acetona, e fez-se a cromato- ;

t grafia intermitente do produto bruto eluido com acetona:cloro !

I b

fórmio (1*1) para proporcionar o produto (1,2 g) como um sÓli do j TLC, R^.»0,17 acetona:clorofórmio (6θ:4θ)ί E.M. , m/e=I93 (M+l), l8l (M+29)5 153 (M+l), 136, 110.

b. (IS )-benzil-oxi-carbonil-L-iíalil-N-/l-/5-amina-carbonil)benzoxazol-2-il7hidroxi-metil-2-metiI-propil/-L-proIinamida (Fórmula XIV, heterociclo contendo X, N e Q=5-(amino-carbonil)-benzoxazol-2-ilo).

Aqueceu-se uma solução agitada do imidato do

Exemplo 4b (3,81 g) e 3-amino-4-hidroxi-benzamida (l,00g) em etanol seco (28 ml) durante 2 hr a 60° sob azoto, Dissoiveu-se a mistura em acetato de etilo, lavou-se (duas vezes com água, uma vez com bicarbonato de sódio saturado, solução sali na), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do produto bruto eluido com acetona:clorofórmio (6θί4θ) para proporcionar o produto (936 mg), TLC, R^= 0,42, tetra-hidrofurano:clorofórmio (75*25)} E.M. , m/e=b22 (11+29)5 595 (M+2), 594 (M+l), 5055 478} 477.

Análise para C^H^N^O?. 2 ,ΟΗ^θ *

Calculado JC}59,13i H, 6,88} N, 11,12 Encontrado: C, 59,18} H, 6,35} N, 11,04

c. (IS)-L-valil-N-/l-/5-(amino—carbonil)benzoxazol-2-il/hidro xi-metil-2—metil—propil7—l*-prolinamida (Fórmula XV, hetero ciclo contendo X, N e Q=5-(amino-carboni1 )benzoxazol-2-i!o).

Hidrogenou-se uma mistura de 10% (p/p) de paládio em carbono (750 mg) e do produto do Exemplo 6b (0,920 g) em etanol (150 ml) num agitador a 3s4 bares durante 4 hr depois do que se filtrou a mistura através de terra de diato- ** máceas e se evaporou o sáivente. Re-dissolveu-se, então, o re sídiào em metanol e evaporou-se para proporcionar o produto (68O mg, 100%) como um sólido} TLC R^=0,0, metanol:clorofórmio (5*95)} E.M., m/e= 46o(M+l), 247, 2255 198, 197, 196, 154, 1255 91.

- 47 d. (IS )-/5-/ (4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil/-benzoil/-L-vali1-N-/1-/5-(amino-carboni1)benzoxazo1-2-i i/hi droxi-metil-2-metil-propil/-L-prolinamida (Fórmula XII, heterociclo contendo X, N e Q=5-(amino-carbonil)benzoxazoI-2-ilo, A=CO, L=g—fenileno, R^=R⁵.S(0_g).NH.CO-, R^ã-ClC^ ).

Adicionou-se cloridrato de i-(3-di-metil-amino-propil)-3-etii-carbo-di-imida (292 mg) a uma solução do produto do Exemplo 6c (670 mg), 1—hidroxi-benzotriazol (206 mg), e do produto do Exemplo 1-parte ο (507 mg) em tetra-hidrofurano (5 ml)j e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 16 hr. Diluiu-se a mistura de-reacçao com acetato de etilo e lavou-se três vezes com água destilada, uma vez com bicarbonato de sódio saturado, e uma vez com solução salina· Lavou-se o bicarbonato e acidificou-se a pH i e extraiu-se três vezes com acetato de etilo. Lavaram-se as fases orgânicas combinadas com solução salina, secaram-se (Na^SO^), θ eva poraram-se. Fez-se a cromatografia intermitente do produto bruto eluindo com tetra-hidrofurano:clorofórmio:ácido acético ’ (70:30:1)· Filtrou-se o material resultante através de sílica ’ gel eluido com tetra-hidrofurano:clorofórmio:ácido acético (30:70:0 a 30:70:1 a 100:0:i) para proporcionar o produto (350 mg) como um sólido; TLC, R^=O,55, tetra-hidrofurano:clorofórmio:ácido acético (80:20:1); E.M. , m/e=247> 197, 163·

e. /4-/”(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7-L-va- ; li1-Ν-/Ϊ-(5-(amino-carboniI)benzoxazo1-2-i1)carbonii-2-me- j til—propilT-L-prolinamida (FÓrmula I, heterociclo contendo X, N e Qe5-(amino-carbonil)benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=£-fenileno, R^=R⁵.S(02).NH.CO-, R⁵=4-C1C6H₄).

Adicionou-se piridina (0,522 ml) a uma suspen sao de trióxido de crómio (261 mg) em di-cloro-metano seco (27 ml) , e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 30 min. Adicionou-se terra de diatomáceas (0,5 g) à mistura que se agitou durante mais 5 min. Adicionou-se o produto do Exeroplo 6d (340 mg) em di-metil-formamida seca (1,5 ml) e j zntHtrWrfV’* *'· permitiu-se a agitaçao da mistura durante 3»5 hr· Filtrou-se a suspensão resultante através de terra de diatomáceas e eva- ! porou-se. Lixiviou-se o resíduo com clorofórmio e filtrou-se através de terra de diatomáceas· (A utilizaÇao de metanol para lixiviação ê preferencial)· Repetiu-se este processo seis vezes· Combinaram-se os filtrados e evaporaram-se. Fez-se a cromatografia intermitente do sólido resultante eluido com te tra-hidrofurano:clorofórmio:ácido acético (55^:45:l)· Filtrou-se o sólido resultante através de sílica gel, eluido primeiro com clorofórmio depois com tetra-hidrofurano:ácido acético (99íl)· Fez-se de novo a cromatografia intermitente do sólido resultante eluido com tetra-hidrofurano:hexanos:ácido acético (6o:4o:l) para proporcionar o produto (37,5 mg)} TLC, metanol:clorofórmio:ácido acético (10:90:1)} HPLC, t^=7,23»

Col A, Q=l, água:acetonitrilo:tetra-hidrofuranoiácido tri-flu oro-acético (55*35i15í0,1)} E.M. , m/e=777(M+l), 7Ó1, 421, 342,J 341, 340, 339, 192.

Análise para C^H^CIN^S. 0, 9° H^O. i,0CH COgH:

Calculado : C, 54,755 H, 5>28j N, 9,82 Encontrado: C, 55>θ7> H, 5,41} N, 9>57

Exemplo 7 j j

I /5-/™(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7-L-valiI-N-/l-/5-(hidroxi-metil)benzoxazol-2-il7carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e

Q=5-(hidroxi-metil)benzoxazol-2-iio, A=CO, L=£-fenileno, R = =r⁵.s(o2).nh. co-, r⁵=4-cic6h₄).

a. Álcool 3“arolno-4-hidroxi-benzilico j

Hidrogmnou-se uma mistura de 10% (p/p) de paládio em carbono (5,25 g) e álcool 4-hidroxi-3-nitro-benzílico (25>0 g) em etanol (1,3 litros), num agitador a 3j4 bares durante 23 hr, depois do que se filtrou a mistura através de ' terra de diatomáceas e se evaporou. Fez-se a cromatografia in • termitente do residuo, eluido com metanolίclorofórmio (0:100

a 10:9θ), para proporcionar o produto (11,92 g, 60%) como um sólido vermelho) TLC, R_fl=0,l4, metanol:clorofórmio (5*95)>

E.M., m/e=l40(M+i), 139? 138» 123» 122, 110.

b. (lS)-benzil-oxi-carbonil-Ir-valil-N-/Í-(hidroxi)-/5-(hidroxi-me t i1) benzoxazo1-2-i1/met i1-2-me ti1-propil7-L-prolinami da (Fórmula XIV, heterociclo contendo X, N e Q=5“(hidroxi-metil)benzoxazol-2-ilo )·

Aqueceram-se o produto do Exemplo 4b (3>θ g) ; e o álcool preparado de acordo com Exemplo 7a (0,771 g) em 5 etanol absoluto (20 ml) a 65° durante 20 hr4 dissolveu-se a í mistura em acetato de etilo, lavou-se (NaOH IN, solução sali- ;

I na), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do produto bruto eluido com acetonaíhexanos (55· :45) para proporcionar o produto (858 mg) como um sólido bran co) TLC, R^e0,2ó, acetonaíhexanos (3*2)) E.M. , m/e=58l(M+l), 563, 501, 473» 455.

Análise para C^H^qN^O?. 1,25 HgO:

Calculado : C, 61,73» Η, 7»10) N, 9»29 {

Encontrado: C, 6l,8l) H, 6,86) N, 9»O9 j i

c. (IS )-benzil-oxi~carbonil-L-valil-N-/l-/5-/(_fc-butil-di-meti1-sili1-oxi)meti1/b enzoxszo1-2-il/-hi droxi—meti1-2-metil-propil7-L~prolinamida (Fórmula XIV, heterociclo conten do X, N e Q=5-/“(_t-butil-di-metil-silil-oxi)metil7benzoxazol-2-iIo). í

Agitou-se uma solução do produto do Exemplo 7b i (736 mg), de cloreto de t-butil-di-metil-sililo (380 mg), 4-di-metil-amino-piridina (7»8 mg), e tri-etil-amina (0,37 mi) em di-cloro-metano (10 ml) à temperatura ambiente durante 16 !

A# A* hr. Dissolveu-se então a solução em acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN, bicarbonato de sódio saturado, solução salina), t

secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto J • por cromatografia intermitente, eluido com acetonaíhexanos . (1:3), para proporcionar o produto (715 mg» 82% como um sóii50 ti* do leve amarelo} TLC, R^=0,46, acetonaíhexanos (2:3)} E.M. , m/e=695(M+l), 579, 587, 563, 455·

Análise para C^H^N^O^Si.0,25 H^O:

Calculado : C, 63,54} H, 7,85} N, 8,01 Encontrado: C, 63,44} H, 7,75» N, 7,54

d. (S)-benzil-oxi-carbonil-L-valil-N-/l-/5“(,t-butil-di-metil— sililoxi )metil7benzoxazol-2-il7carboniI-2-metil-propil/' -L-prolinamida (Fórmula VI, heterociclo contendo X, N e i Q=5-/~ (jt-butil-di-metil-sililoxi )metil7benzoxazol-2-ilo).

Adicionou-se álcool terc-butilico (0,068 ml) a uma solução do produto do Exemplo 7c (500 mg) e periodinano

Dess-Martin (1,22 g) em di-cloro-metano (5 ml) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 16 hr. Fraccionou-se a suspensão resultante entre acetato de etilo e uma solução de

Na„S 0 saturado:NaHC0 saturado UI, separaram-se as camadas 223 3 „ e lavou-se a camada acetato de etilo (uma vez com uma solução i

de Na_nS_n0, saturado: NaHC0„ saturado, UI, duas vezes com

2 3 3 j

NaHCO^ saturado, uma vez com solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente eluido com acetonaíhexanos (1:3) para proporcionar o produto (448 mg, 90%) como um sólido branco} TLC, R^= l =0,54, acetona-hexanos (2:3)i HPLC, t_R=6,l8, Col A, Q=2, água: i :acetonitrilo (1:9)» E.M., m/e=6O3(M+l, base), 677, 635, 585, j

460. j !

Análise para C^H^N^O^Si.0,25 ^Η2^0ί ΐ

Calculado : C, 63,72} H, 7,59} N, 8,03 j

Encontrado: C, 63,84} H, 7,455 N» 7,70

e. Benzil-oxi-carbonil-Ir-valil-N-/l-/5“(hidroxi-metil)benzoxa zol-2-il7carbonii-2-metil“propil7-L-prolinamida (Fórmula | VI, heterociclo contendo X, N e Q=5-(hidroxi-metil)benzoxa zol—2-ilo). i

Adicionou-se fluoreto de tetra-butil-amónio (1,2 ml de solução 1M em tetra-hidrofurano) a uma solução do

produto do Exemplo 7d (4l8 mg) em tetra-hidrofurano (5 ml).

Agitou-se a solução vermelha resultante à temperatura ambien- j o !

te durante 10 min e armazenpu-se a 5 durante 16 hr. Fraccio!

nou-se a solução vermelha entre acetato de etilo e HC1 IN, e lavou-se a camada de acetato de etilo (bicarbonato de sódio saturado, solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Pu rificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente elui i

do com acetona .'hexanos (35*65) seguida de uma segunda purifi- i caçao por cromatografia intermitente eluido com metanol!cloro j fórmio (2,5!97,5) para proporcionar o produto (183 mg, 53%) !

como um sólido branco» TLC, R^=O,52, acetonaíhexanos (3·2), HPLC, t_R»6,27» Col A, Qxl, água:acetonitrilo (4θ:6θ)} E.M. , m/e«579(M+l), 561, 33I, 225) 197) 91 (base).

Análise para C^H^gN^O?· 1,0 HgO:

Calculado i C, 62,40} H, 6,76} N, 9,39 Encontrado! C, 62,23} H, 6,40} N, 9,14

f. /?-/ (4-cloro-fenil)sulfonil—amino-carbonil/benzoii7-L-valil-N-/l-/5“(hídroxi-metii)benzoxazol-2-iI/carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=5~(hidroxi-metil)benzoxazol— 2— ilo, A=CO, L=j3-feni leno, R^=R⁵.£(0₂).-NH.CO-, R^-ClCgH^).

Adicionou-se ácido tri-fluoro-metano-sulfônico (0,l40 ml) a uma solução de material preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 7e (182 mg) em di-cloro-metano (8 ml), agitou-se durante 15 min, e evaporou-se. Dissolveu-se o resíduo em tetra-hidrofurano (10 ml) e tratou-se com 4-di-metil-amino-piridina (293 mg), o produto do Exemplo 1 parte o (II3 mg), e cloridrato de l-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (66,5 mg), e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 hr. Fraccionou-se a mistura - entre HC1 IN e aceta- , to de etilo} lavou-se a fase acetato de etilo (HC1 IN, solu- j çao salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente eluido com metanol: clorofórmioίácido acético (1,5^:97»5^:1»0) para proporcionar o produto (77 mg» 32%) como um sólido leve amarelo} TLC,

1^=0)28) metanol:clorofórmio:ácido acético (5^:94:1)i _} m/e=766(M+l), 758,592, 562, 421, 346, 328.

Análise para C^H^CIN^S. ±,0 HgO.1,0 CH^COOH:

Calculado : C, 55,48} H, 5,49; N, 8,29 Encontrado: C,55,42} H, 5,33i N, 8,77

Exemplo 8 (S)-/?-/“(4-cloro-feni1)sulfoni1-amino-carbonil/benzoi1/-L-V li1-N—/1-/5-(metoxi— carboni1)benzoxa zo1-2-i l7carboni1—2-meti -propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, Ne Qas5~(metoxi-carbonil)-benzoxazol-2-ilo , A=CO, L=jo-f eni leno , R^»R⁵.S(02).NH.CO-, R⁵b4-C1C6H^).

11— 13,

a. (IS)-benzil-oxi-carbonil-L-valil-N-/I-(hidróxi)-/5-(metoxi -carbonil)benzoxazol-2-il7metil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula XIV, heterociclo contendo X, N e Q=5~(metoxi -carbonil)benzoxazol-2-ilo).

Aqueceu-se uma solução agitada do imidato do

Exemplo 4b (5,47 g) e 4-carbo-metoxi-2-amino-fenol (5,10 g) em etanol seco (50 ml) durante 3 hr a 60° sob azoto. Dissolveu-se a mistura em acetato de etilo, lavou—se (HC1 IN, NaOH IN três vezes, solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do produto bruto, eluido com acetona:hexanos (30:70), para proporcionar (2,210g do produto} TLC, R^.=0,l8, acetonaíhexanos (35:65)} E.M. , 649 (M+4l), 637(M+29), 61KM+3), 6lO(M+2), 6O9ÍM+1), 591, 501. Análise para ^c32^H4o^N4°8·^0,35 CH^O^H^

Calculado : C, 62,73, H, 6,74} N, 8,76 Encontrado: C, 62,71» H, 6,73» N, 8,67

b. (S)-b»nzil-oxi-carbonil-L-valil-N-/l-/5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2~il7carbonil-2—metil-propil7-L-prolinamida (Fôr mula VI, heterociclo contendo X, N e Q=5-(metoxi-carboniI)benzoxazol-2-ilo ).

Adicionou—se t-butanol (0,340 ml) a uma soiu- ; çao do produto do Exemplo 8a (2,70 g) e periodinano Dess-Mar- i «V !

tin (4,62 g) em di-cloro-metano (20 ml) e agitou-se a solução ; a temperatura ambiente durante 22 hr· Diluiu—se a suspensão resultante com acetato de etilo e lavou-se (3 porçoes de Na_S_o0 saturado:NaHC0 saturado 1:1, solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente eluido com acetona:hexano (25:75) para proporcionar 2,20 g de sólido} TLC, R^.=0,21, acetona: hexanos (30:70); E.M., m/e=635(M+29), 608ÍM+2), 6O7(M+l),

374, 331» 91. !

i

Análise para Ο^Η^θΝ^Οθ. 0,50 HgO:

Calculado : C, 62,43» H, 6,38; N, 9,10 Encontrado: C, 62,43) H, 6,24} N, 8,91

c. (S)-L-valil-N-/I-/5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-il7car- j bonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula V, heteroci- | cio contendo X, N e Q=5-(metoxi-carbonil)-bnnzoxazol-2-ilo).

Adicionou-se, gota a gota,ácido tri-fluoro-me tano-sulfónico a uma solução agitada do produto do Exemplo 8b i (5OO mg) em di—cloro—metano (4 ml) sob azoto. Depois de 5 min : verteu-se a mistura de reacçao em água destilada (100 ml) e ! extraiu-se três vezes com di-cloro-metano. Ajustou-se a camada aquosa a pH 8 com NaHCO^ e lavou-se três vezes com di-cloro-metano. Tratou-se a fase aquosa com NaOH IN (50 ml) e lavou-se mais uma vez com di-cloro-metano. Combinaram-se as fases organicas lavadas, secaram-se (NagSO^) e evaporaram-se pn pa proporcionar 185 mg (48%) de uma espuma branca} TLC, R s 0,22, metanol:clorofórmio (5·95)·

d. (S)-/4-/(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7-L-valil-N-/l-/5-(metoxi-carbonil)banzoxazol-2-il7carbonil -2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo con tendo X, N e Q=5-(metoxi-carbonil)benzoxazol—2-ilo, A=CO, L=£-f enileno , R^=R⁵. SÍOgbNH. C0- , R⁵=4-C1C₆H^ ) .

I

Adicionou-se cloridrato de l-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (l6o mg) a uma solução do pro duto do Exemplo 8c (I85 mg), 1-hidro-benzotriazol (110 mg), e do produto do Exemplo 1 parte o (280 mg) em tetra-hidrofurano (3 ml) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 16 hr. Diluiu-se a mistura de reacçao com acetato de etilo, lavou-se (três vezes com HCl IN, solução salina), secou-se (MgSO.), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por croί matografia intermitente eluido com acetona:di-cloro-metano: :ácido acético (20:80:1 gota/ml) para proporcionar l60 mg de sólido} R^,=0,36, metanol: clorofórmio: ácido acético (5*95*1 &o ta/ml)} HPLC, t^xI5,84, Col A, água:acetonitrilo:tetra-hidrofurano^ácido tri-fluoro—acético (55·35·Ι5·Ο»ΐ), Q=2} E.M. , m/e=684(M+29), 656(M+l), 375, 374, 356, 355, 354, 352, 302,

283, 260, 259, 178, 168.

Análise para C^gH^ClN^^S. 1,0 HgO.1,0 CH^CO^:

Calculado : C, 55>O7} H, 5,3U N, 8,03 Encontrado: C, 55,05» H, 5,13» N, 8,06

Exemplo 9 j

!

(S)-/5-/(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carhonii/benzoil7-L-vali1-N-/1-/6-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-il7carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (FÓrmula I, heterociclo contendo j

X, N e Qx6— (metoxi-carbonil)benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=j3-fenileno, R^«R^{2 * * 5},S(0_o).NH.C0-, R⁵x4-C1C,-H. ).

o + _ i

a. (IS)-benzil-oxi-carbonil-L-valil-N-/I-(hidroxi)-/B-(metoxi ] -carboni1)benzoxazo1-2-i1/meti1-2-meti1-propil7-L-prolinamida (Fórmula XIV, heterociclo contendo X, N e Qx6~(metoxi j -carbonil)benzoxazol-2-ilo). :

A*

Aqueceu-se uma solução sob agitaçao de imidato preparado como descrito no Exemplo 4b (1,00 g) e 5-carbo-meto xi-2-amino-fenol (930 mg) em etanol seco (9 ml) durante 4 hr a 60° sob azoto. Dissoiveu-se a mistura em acetato de etilo,

- 55 ie>w

lavou-se (duas vezes com NaOH IN, solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do j produto bruto, eluido com acetonaihexanos (35^:θ5), para proporcionar 300 mg do produto} TLC, R ^.=0,50, acetonaihexanos (,45:55)} E.M. , m/e=6lO(M+2), 6O9ÍM+1).

i

b. (S)—benzil-oxi—carboni1-L-vali1-N-/1-/5-(metoxi-carbonil)- !

benzoxazol-2-il7carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fór mula VI, heterociclo contendo X,N e Q=6-(metoxi-carbonil)- | benzoxazol-2-ilo). j ί

i

Adicionou-se V-butanol (0,050 ml) a uma solu- !

í çao do produto do Exemplo 9a, (300 mg) e periodinano Dess-Mar tin (630 mg) em di-cloro-metano (3 ml) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 17 hr. Diluiu-se a suspensão resultante com acetato de etilo e lavou-se (tres porçoes de ^Na2^2°3 ^saturadoÍNaHCO^ 1S1, solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou—se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetonaíhexano (30:70), para proporcionar um sólido que se dissolveu em acetonitrilo (3θ ml) e se tratou com 3θ0 mg de carvao activado. Agitou-se a mistura durante 10 min, filtrou-se e evaporou-se para proporcionar 257 mg do produto} TLC, R_f.=O,49, acetona ihexanos (4θ:6θ)} E.M. , m/e=635(M+29), 6θ8(Μ+2), 6O7(M+1).

Análise para ^c-j2^H38^N4^O8* θ’5^Η2^0ί ;

Calculado : C, 62,43} H, 6,38} N, 9,10 ;

Encontrado: C, 62,62; H, 6,28} N, 8,94 í !

í i

c. Sal do ácido (S)-L-valil-N-/l-/6-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-il7carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula V, j heterociclo contendo X, N e Q=6-(metoxi-carbonil)benzoxa- í zol-2-ilo ).

Adicionou-se ácido tri-fluoro-metano-sulfónico (0,15 ml), gota a gota, a uma solução agitada do produto do Exemplo 9b, (210 mg) em di-cloro-metano (1,5 ml) sob azoto.

/V

Depois de 40 min evaporou-se a mistura de reacçao. Colocou-se

- 56 1 ι

o sólido resultante sob vácuo durante uma hora e utilizou-se directamente no Exemplo 9d , adiantei TLC, R„=0,00 acetonaíhe

-- _f xanos (25:75), E.M., m/e=244, 242, 235, 195, 189, 186, l8l, j 178, 121, 105, 93, 92, 91, 79.

d. (S)-/3-/ (4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7-L- va li 1-Ν-/Ϊ-/Ί5- (met oxi-carboni 1) benzoxa zo 1- 2-i l7carboni 1 · -2-metil-propii7-”L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo con tendo X, N e Q=6-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-ilo, A=CO, Larg-fenileno , R^=R⁵. S(C>₂).NH. CO- , R^-CIC^). |

Adicionou-se cloridrato de l-(3-di-metil-ami- !

A· ί no-propil)-3-etil-carbo-di-imida (75 mg) a uma solução do pro j duto do Exemplo 9c, anterior, i-hidroxi-benzo-triazoi (50 mg) { e ácido 4-/(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoico j (I30 mg) em cloreto de metileno (2 ml) e tetra—hidrofurano í

(2 ml) a que se seguiu a adiçao de 4-metil-morfolina (0,04l ml) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante f6 hr. Adicionou-se 4-metil-morfolina adicional (0,04l ml) à mistura de reacçao e agitou-se a reacçao durante mais 7 hr. Diluiu-se a mistura de reacçao com acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN (três vezes), solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetona:cloreto de metileno:ácido acético (30:7θ^!ΐ), para proporcionar um sólido (l60 mg) que se purifi cou de novo por cromatografia intermitente, utilizando um gra j diente de eluiçao de acetona:cloreto de metileno:ácido acéti- !

i co (5θθ ml de 0:100:1; 900 ml de 10:90:1} depois 50:50:1), pa j “ I ra proporcionar o composto do título (71,6 mg): TLC, R^,=0,17, acetona:clorofórmio: ácido acético (10:90:i), HPLC, t^=15,84, Col A, Q=2, água:acetonitrilo:tetra-hidrofurano ·’ácido tri-flu i oro-acético (55*35*15*0,1)} E.M., m/e=794(M+l),778, 777, 776, 1

423, 422, 421, 384, 374, 357, 356, 355, 354, 259.

Análise para ^C38^H40^C1N5°10^S·^{1ίθ H}2°*^{1í5 CH}3^CO2^Hí !

Calculado : C, 54,57} H, 5,36} N, 7,76 j

Encontrado: C, 54,34} H, 5:19} N, 7,81

Exemplo 10 (S)-/?-/“ (4-cloro-feni1)sulionil-amino-carbonil7benzoil-L-valil-N-/l-(5-carboxi-benzoxazo1-2-il)carboni1-2-metil-propi1/-L-prolinamida (Fórmula I, heterocicio contendo X, N e Q=54 5 / \

-carboxi-benzoxazol—2-ilo, A=CO, Laja-feni leno, R =R .SÍOg).— NH.CO-, R⁵»4-C1C₆H^).

a» (IS)-benzii-oxi-carbonil-L-valil-N-/l-(5-carboxi-benzoxaM zol-2-il)hidroxi-metil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula XIV, heterocicio contendo X, Ne Q=5-carboxi-benzoxazo 1-2-il)·

Μ A»

Aqueceu-se uma solução sob agitaçao de imidato preparado como no Exemplo 4b (3,00 g) e ácido 3-amino-4-hi droxi-benzoico (2,55 g) etanol seco (25 ml), durante 1,5 hr a 60° sob azoto, depois do que se adicionaram uma quantida de adicional de imidato (2.00 g) e amino-fenol (1,85 g). Aque ceu-se a mistura durante mais 8,25 hr. Dissolveu-se a mistura em acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN (duas vezes), solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do produto bruto, eluido com acetonaihexanosί ácido acético (50:50:1), para proporcionar o produto (33θ mg), TLC, R_í>=0,19, acetona:hexanos:ácido acético (50:50:1)} E.M. , m/e=595(M+D , 577.

b. (IS)—L-valil-N-/l—(5-carboxi-benzoxazoI—2—il)—hidroxi-me— til-2-metil-propil)-L-prolinamida (Fórmula XV, heterocicio contendo X, N e Q=5-carboxi-benzoxazo1-2-il).

Hidrogenou-se uma mistura de 10% de paládio em carbono (1,50 g) e do produto de Exemplo 10a (2,90 g) em etanol (100 ml), num agitador a 3,4 bares durante 3 hr, depois do que se filtrou a mistura através de terra de diatomáceas e evaporou-se o solvente para proporcionar o produto (1,95 g)} TLC, R^,=0,0, metanol: clorofórmio: ácido acético (5’·95'·1)ί EM·,

m/e«46l(M+l), 443, 331» 319» 290» 265, 248, 232, 225» 198, '

197» 196, 154. j

c. (1S )-/5-/^-(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil/-L-valil-N-/l-(5-carboxi~benzoxazol-2-il)hidroxi-metil-2~ j -metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula III, heterociclo con i tendo N e Q=5-carboxi-benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=j3-feni- í leno, R =R⁵.S(02).NH.CO-, R⁵=4-C1C6H^). j i

Adicionou-se cloro-formiato de isobutilo (0>34 ! ml) gota a gota durante três min. a uma solução agitada, -40° de ácido 4-/~(4-cloro-feniI)sulfonil-amino-carbonil/benzoico (850 mg) e 4-metil-morfolina (0,58 mi) em tetra-hidrofurano seco (12 mi). Agitou-se a mistura durante 30 min depois do que se adicionou o produto do Exemplo 10b (800 mg) em di-metil-formamida (9 ml), gota a gota, a mistura de reacçao. Permitiu-se aquecer lentamente a reacçao à temperatura ambiente durante a noite. Diluiu-se a mistura resultante com acetato de etilo, lavou-se (duas vezes com HC1 IN, uma vez com solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do material bruto, eluido com acetona! cloreto de metileno!ácido acético (3O!7O!l), para proporcionar o produto (570 mg)} TLC, R =0,28, acetona:cloreto de meti

I — I lenoíácido acético (42ί6θί1)} E.M. , m/e=782(M+l), 764, 423,

421, 377, 193» 191. j

d. (S)-/5-/^-(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil/benzoil-L- í -vali1-N-/1-(5“carboxi-b enzoxa zo1-2-i1)carboni1-2-met i1-propil7-L-prolinamida (FÓrmula I, heterociclo contendo X, “ 4 i

N e Q = 5-carboxi-benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=j>-ienileno, R = i =r⁵.s(o2).nh.co-, r⁵=4-cic6h₄). ^!

Adicionou-se t-butanoi (0,070 ml) a uma solução do produto do Exemplo 10c (560 mg) e periodinano Dess-Mar ' tin (910 mg) em di-cloro-metano seco (3 mi) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 21 hr. Diluiu-se a suspensão ·resultante com acetato de etilo, lavou-se (Na S 0 me59 -

tade saturado (três vezes)), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetonaidi-cloro—metanoíácido acético (30:70:1), para proporcionar o composto do título (100 mg)} TLC, R^=0,28, metanol: clorofórmio: ácido acético (5^:955l)j E.M. , m/e=78l(M+J),

764, 763, 762, 423, 421, 342, 341} HPLC, t =10,43, Col A, Q=2,

H água:acetonitrilo:tetra-hidrofurano:ácido tri-fluoro-acêtico (55!35ί15:0,1)·

Análise para C^H θΟΙΝ^θβ.0,50 H₂0.1,50 C^COgHJ Calculado : C, 54,64} H, 5,16} N, 7,96 Encontrado: C, 54,64} H, 5,30} N, 7,73·

Exemplo 11 /5-(isopropil-sulfonil-amino-carbonil)benzoil/-L-vali1-N-/I-(2-benzoxazolil)carboni1-2-meti1-propil/-L-prolinamida (Fór mula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo, A=CO,

L-p— feni leno, R⁴=R⁵.S(O ).NH. CO-, R⁵-CH(CH ) ).

.......... _ ________ . M— Λ, Λ......— ............. ......

a· 4—(isopropil-sulfonil-amino-carbonil)benzoato de _t-butilo.

Adicionou—se cloridrato de 1—( 3—di—metil—ami- 1 n«-propil)-3-etiI~carbo~di-imida (198 mg) a uma mistura sob agitaçao de ácido 4-(t-butoxi-carbonil)benzoico (195 mg), 2-propano-sulfonamida (98 mg) e 4-di-metil-amino-piridina (126 mg) em di-cloro-metano (3,7 ml). Agitou-se a mistura durante a noite, diluiu-se com acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN, so luçao salina), secou-se (MgS04), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com ace tonaíhexanos (75^:25), para proporcionar o produto (193 mg)} j

TLC,R_f=0,64, acetonaihexanos (75525)} E.M., m/e=356(M+29), 33O(M+3), 329ÍM+2), 328(M+1), 272, 223, 222, 205, 204, 166.

b. Acido 4—(isopropil-sulfonil-amino-carbonil)-benzoico

Adicionou-se ácido tri-fluoro-acêtico (5 ml) ao produto do Εχ_βηιρχ_ο χχ₉ (193 mg). Agitou-se a solução resul

- 60 rt-f ._.,+··· tante 6,5 hr, depois evaporou-se. Re-dissolveu-se o oroduto bruto em éter e evaporou-se (quatro vezes). 0 produto bruto adicionou-se, então, a um volume de hexanos e evaporou-se (duas vezes) para proporcionar o produto (214 mg)} TLC, R^.=O,29, acetona : hexanos: ácido acético (5Ο·'5Ο·ΐ)ί E.M. , m/e=272 (M+l), 166, 148, 115, 109, 95·

c. /5-( isopropil—sulfoni1-amino—carbonil)benzoi1/-L-vali1—N— m

-/1-(2-benzoxazolil)hidroxi-meti1-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula III), heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxalolilo, R⁴=R⁵.S(O2).NH.CO-, R⁵=CH(CH^)g).

Adicionou-se cloridrato de l-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (l66 mg) a uma solução agita da do produto do Exemplo Ik (362 mg), do produto do Exemplo 11b (214 mg) e 1-hidroxi-benzotriazol (117 mg) em di-cloro—me tano (3 ml), e agitou-se a mistura durante a noite. Diluiu-se a mistura de reacçao com acetato de etilo, lavou—se (HCi IN (trés vezes)), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com te tra-hidrofuranoihexanosíácido acético (65^J35^;l) para proporcionar o produto (215 mg)} TLC, R^.=O,44, acetona : hexanos ί ácido acético (75S25·!)» E.M. , m/e=ó71(M+2), 67O(M+i), 653, 652, 353, 319, 318, 3θ0, 249, 231, 204, 124, 120.

d. /5-(isopropii-sulfonii-amino-carboniI)benzoil7-L-vali1-N-1— (2-benzoxazo li 1) carboni 1-2-met i I-propi l7-I*-pro linami da (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo, Lxg-fenileno, R^=R⁵.S(O2).NH.CO-, R⁵=CH(CH^)g).

Adicionou-se periodinano Dess-Martin (4θ8 mg)

Aí . .

a uma solução agitada do produto do Exemplo 11c (215 mg) e t-butanol (0,09 ml) em di-cloro-metano (3 ml). Agitou-se a sus

Aí pensão resultante durante a noite· Filtrou—se a mistura de re acçao e evaporou-se o solvente. Filtrou-se o óleo resultante através de sílica gel com acetonaίhexanos (65:35) para propor cionar 4θ4 mg do produto bruto. Purificou-se este produto bru

I

I to por cromatografia intermitente eluido com tetra-hidrofurat no:hexanos:ácido acético (55^J45:i) e dissolveu-se o sólido re > sultante em di-cloro-metano (5 ml) e tratou-se com carbono descorante (15 mg)· Filtrou-se a suspensão e evaporou-se o sol j vente para proporcionar o produto (130 mg)} TLC, R^.asO,67, me- I tanol:clorofórmio:ácido acético (5^!95^:1)} HPLC, t_K=9,5O, Col j B, Q»2, água·acetonitrilo:tetra—hidrofurano:ácido tri—fluoro— I -acético (55·35·15·θíI)i E.M., m/e«696(M+29), 669ÍM+2), 668 (M+l), 651, 650, 353, 317, 316, 309, 299, 298, 297, 296, 201. Análise para C^H^N^OqS. 0,85 HgO:

Calculado : C, 58,02} H, 6,30} N, 10,25 Encontrado: C, 58,29} H, 6,17} N, 9,67·

Exemplo 12 /5-/~ (4-cloro- f eni1)su1foni1-amino-ca rbonil7b enzo i17-L-vali1—N—/1-(2 -oxazolil)carbonil—2-metii—propil7-L-prolinamida (Fór !

I mula I, heterociclo contendo X, N e Q»2-oxazolilo, A=CO, L=£~ J -fenileno, R⁴»R⁵. S(O₂).NH. CO-, R⁵«4-010^). ί a· 2-tri-metiI-silil-oxazol

Adicionou-se n-butil-lltio (28,5 ml de uma so luçao a -78° de oxazol (5,0 g) em éter (150 ml). Agitou-se a solução resultante a -78° durante 3° min, a que se seguiu a adiçao de cloreto de tri-metil-sililo (7,86 g), e permitiu-se aquecer a mistura à temperatura ambiente. Destilou-se a mistu ra de reacçao e reeolheu-se a fracçao com um ponto de ebuii«* o çao de cerca de 130 para proporcionar 2-tri-metil-silil-oxazol (5,12 g)} E.M., m/e=l42(M+l), 91, 73·

b. (IS)-benziloxi-carboni1-L-vali1-Ν-/Ϊ-(2-oxazolil)hidroxi-metil-2-metil-propil7-D~prolinamida (Fórmula XIV, heterociclo contendo X, N e Q=2-oxazolilo)·

Aqueceu-se uma solução do aldeido (de formula

XI) preparado de uma maneira semelhante à descrita no Exemplo

Ih (7,4 g) e do produto do Exemplo 12a (4,84 g) em tolueno (10 ml) a 80° durante 24 hr e a 6o° durante mais 14 hr. Evapo

Ml raram-se os solventes, e dissolveu-se o residuo em tetra-hidrofurano (5θ ml) e tratou-se com HC1 IN (5 ml) e agitou-se durante 3θ min. Dissolveu-se a mistura em acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN, bicarb nato de sódio saturado, solução sali na), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o material bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetonaíhexa nos (30*70), para proporcionar o produto (4,57 g), TLC, R^= =0,31, metanol:clorofórmio (5*95)i E.M·, m/e=50l(M+l), 483^

393*

Análise para W°6^: I

Calculado i 62,38} H, 7,25} N, 11,19 Encontrado: C, 62,52} H, 7,22} N, 10,18

c. (S )-benzil-oxi-carbonil-L-valil-N-/2-metil-l-/~ (2-oxazolil)carbonil7propil7-L-prolinamida (Fórmula VI, heterociclo contendo X, N e Q=2-oxazolilo).

Adicionou-se t-butanol (0,83 ml) a uma solução do produto do Exemplo 12b (4,4 g) e periodinano Dess-Martin (15 g) em di-cloro-metano (150 ml) e agitada durante ló hr.

A»

Fraccionou-se a suspensão resultante entre Na^SgO^ saturado: NaHCO^ saturado (i:l) e acetato de etilo. Lavou-se a solução de acetato de etilo (Na^SgO^ ^{Saturado ÍIÍa}^^COg saturado (líl), , NaHCOsaturado, solução salina), secou-se (MgSO^), e evapo- j rou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia intermitente eluido com acetonaÍhexanos (35^;65), para proporcionar 4,8 g de sólido. Dissolveu-se este sólido em acetato de etilo, lavou-se (Na_S 0 saturadoíNaHCO saturado (Hl), NaHCO satura do, solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se para pro porcionar o produto como uma espuma branca (3,74 g)} TLC, R_f ^!=O,32, acetona íhexanos (4θϊ6θ)} E.M. , m/e=499(M+l) , 266.

Análise para ^C26^H34^N4°6^!

Calculado í C, 62,64} H, 6,87; N, 11,24 Encontrado! C, 62»3θ» H, 6,74} N, 11,01

d. /5-/ (4-cloro-fenil)suifonii-amino-carbonii7benzoil-L-vali 1-N-/1-(2-oxa zoli1)carboni1-2-meti1-propil7-L-prolinamida (Fórmula I» heterociclo contendo X, N e Q=2-oxazolilo, L=£-fenileno, R^»R⁵.S(02).NH.CO-, R⁵=4-CiC6H₄).

Adicionou—se ácido tri—fluoro—metano-sulfónico (0,89 ml) a uma solução do produto do Exemplo 12c (1,0 g) em di-cloro-metano (15 ml) e agitou-se durante 10 min, evapo raram-se os solventes e colocou-se o resíduo sob alto vácuo durante 20 min. Dissolveu-se o resíduo em tetra-hidrofurano (40 ml) e tratou-se com cloridrato de l-(3-di-metil-amino-pro pil)-3-etil-carbo-di-imida (429 mg), ácido 4-/~(4-cloro-fen.il)sulíoni1-amino-carbonil7benzoico (800 mg) e 4-di-metil-amino-piridina (1,97 g)· Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 16 hr, dissolveu-se em acetato de etilo, lavou-se (HC1, IN, NaHCO^ saturado, solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou—se. Purificou-se o material bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetonaíhexanosíácido acético (lOíÇOíl a 20:80:i), para proporcionar o produto (93θ ml))

TLC, Rf=0,40, metanolíciorofórmio:ácido acético (5·95í1)) HPLC t =7,35» Col A, Q=2, águaíacetonitrilo:tetra-hidrofurano:áciJfck do trifluoro-acêtico (55·35·15^;0,I)) E.M., m/e=686(M+l) , 668, 393» 377, 266, 248.

Análise para C H gClN^OgS. 0,5 ^0.1,0 C^COOH:

Calculado : C, 54,07) H, 5,475 N, 9,27 Encontrado: C, 53,78) H, 5,33) N, 9,25.

Exemplo 13 /5—/” (4- c loro- f eni 1) sulfoni 1—amino- carboni l7b enzoi l7-L-vali 1-N-/1-(2-b enzo-tiazo1)carboni1-2-meti1-propil/-L-prolinami da (Fórmula I» heterociclo contendo X, N e Q=2-benzo—tiazolilo, A=CO, L=£-fenileno, R⁴=R⁵.S(02).NH.C0-, R⁵=4-ClCgH4).

a · NjX-Benzi 1-oxi- carboni 1-N-me toxi-N-met i I-va linami da·

A*

Arrefeceu-se uma solução de cloridrato de 1- 64 -

-(3-di-nietil-amino-pro pil )-3-etil-carbo-di-imida (Ι9?θ7 g) em di-cloro-metano (5θθ wD a “Ιθ · A esta solução adicionou-se

1-hidroxi-benzotriazol (13,44 g) e 4—metil-morfolina (11,5 ml): Adicionou-se uma solução de N-(benzil-oxi-carbonii)-L-valina (25»O g) em di-cloro-metano (200 ml) gota a sota à mistura de

AZ AZ reacçao. Depois de se terminar a adiçao, aqueceu—se a mistura à temperatura ambiente e agitou-se durante 0,5 hr antes de se arrefecer a 10°. Adicionou-se uma mistura de cloridrato de N-metil-O-metil-hidroxilamina (9»7 g) e 4-metil-morfolina (11»5 ml) em di-cloro-metano (150 ml) gota a gota a uma mistura de

AZ AZ reacçao agitada. Aqueceu-se a reacçao a temperatura ambiente

Ar com agitaçao durante a noite. Evaporou-se a mistura e fraccio nou-se o resíduo entre água e acetato de etilo. Lavou-se a ca mada orgânica (HC1 a 10%, NaHCO^ saturado, solução salina), secou-se (MgSO^), evaporou-se e secou-se durante a noite sob alto vácuo para proporcionar o produto como uma goma (26,25 g) que solidificou num congeladorJ TLC: R^.=O?57» cloroférmioMetanol (40:1); E.M., m/e=295(M+l), 234, 187, 162, 152, 119·

b. (S)-1-(2-benzo-tiazolil)-2-(benzi1-oxi-carbonil)amino-3-met i1-1-but anona·

Arrefeceu-se éter seco (5 ml) a -78^o e adicio nou-se n-butil-lítio (6,0 ml de solução 2,54 M em hexanos).

Adicionou—se uma solução éter seco (15 ml) de benzotiazol (1,83 g) rapidamente, gota a gota· Continuou-se a agitaçao a -78° durante 10 min. Adicionou-se por meio de uma cânula uma solução éter (10 ml) de amida preparada de acordo com o proce

A» dimento do Exemplo 13a e utilizada sem purificação (2.00 g),e

AZ O *** permitiu-se aquecer a mistura de reacçao a 3θ com agitaçao zv durante 1 hr. Temperou-se a mistura de reacçao vertendo-a em NaHCl saturado e extraiu-se com acetato de etilo. Secaram-se os extractos (Na^SO^) e evaporaram-se para proporcionar uméleo az amarelo. A purificação por cromatografia intermitente, eluida com hexano:acetato de etilo (10:1), proporcionou o produto co mo um vidro amarelo (0,98 g)} TLC, R_f.=O,67, hexano :acetato de etilo (2:1)} E.M. m/e=368(M+l), 20b, 191» lb2, 135? 91 (base).

- 65 c. 2-Amino-l-(2-benzotiazolil)-3-metii-l-butanona

Dissolveu-se o material preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 13b (0,94 g) numa mistura de dl -cloro-metano (20 ml) e anisol (l ml) sob azoto. Adicionou-se ácido tri-fluoro-metano-sulfônico (1 mi) e agitou-se a reacΜ M çao durante 10 min. Diluiu-se a reacçao com di-cloro-metano e extraiu-se com água. Lavaram-se os extractos aquosos com di-cloro-metano, lavaram-se a pH=8 com NaHCO^ saturado e extrai ram-se com di-cloro-metano. Secou-se a solução organica (NagSO^) e evaporou-se para proporcionar um óleo amarelo (0,50 g)} TLC, 11^=0,36, hexano*acetato de etilo (2*1).

d. Benzi1-oxi-carboni1—L-vali1-Ν-/Ϊ—(2-benzotiazolii)carbonil -2-metil-propil7“L-prolinamida (Fórmula VI, heterociclo con tendo X, N e Q=2-benzotiazo JLilo).

Tratou-se uma solução di-cloro-metano de mate rial preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 13c e utilizado sem purificaÇao (0,5 g), 1-hidroxi-benzo-triazoi (0,58 g) e produto preparado de acordo c m o método do Exemplo lf (0,74 g) c m cloridrato de l-(3-di-metil-amino-propii)-3-etil-carbo-di-imida (0,47 g)je agitou-se a mistura de reac çao sob azoto durante 15 hr. Diluiu-se a mistura de reacçao com di-cloro-metano, lavou-se (NaHCO^ saturado, HC1 a 10%), secou-se (NagSO^) e evaporou-se para proporcionar um óleo ama relo (1,48 g)j TLC, R_f.=Ó,93» clorofórmioímetanol (50*1); E.M. , m/e=565(M+l, base), 332, 331·

e. L-valii-N-/l-(2-benzotiazoli1)carboni1-2-metil-propil7-E~ -prolinamida (Fórmula V, heterociclo contendo X, Ne Q=2-benzo-tiazolilo).

Desprotegeu-se a amida preparada de acordo com «w o procedimento do Exemplo l3d e utilizada sem purificaÇao (1,20 g), utilizando um procedimento semelhante ao procedimen to do Exemplo 13c para proporcionar o produto como um óleo

(0,34 g, 37%); TLC; R_f=O,34, clorofórmioímetanol (iO:i).

f. /5-/” (4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil/-L-va1Í1-N-/1-(2-benzotiazolilo)carbonil-2-metil-propil/-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzo tiezolilo, A=CO) L=f)-fenileno, R⁴=R⁵,S(CO Í.NH.CO-, R⁵=4-cic₆h₄).

Combinaram-se a amina prepa»da de acordo com o procedimento do Exemplo 13e e utilizada sem purificação (0,34 g), l-hidroxi-benzo-triazol (0,21 g) e ácido 4-/ (4-clo ro-fenil)sulfonil-amino-carbonil/benzoico (0,27 g), em di-clo ro-metano (12 ml) e tratou-se a suspensão com cloridrato de l-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (0,17 g)· Continuou-se a agitaçao durante 7,5 hr. Diluiu-se a reacçao com acetato de etilo e lavou-se (NaHCO^ saturado, HC1 a 10%), secou-se (Na^SO^) e evaporou-se para proporcionar uma espuma oleosa· A purificação por cromatografia intermitente, eluida com hexanosíacetato de etilo: ácido acético (50:50:1,5), proporcionou o produto como um sólido branco (0,32 g)} TLC, R^= =0,29, hexanos:acetato de etilo: ácido acético (50:50:1,5) HPLC, t_D=26, Col A, Q=2, água:acetonitrilo:ácido tri-fiuoro-acético (55535*15*0,1); E.M., m/e=752(M+l), 423, 421, 393, 377, 342, 332, 315, 314 (base), 313, 312, 136.

Análise para C^H^gClN^O^S^ 0,3 CH^COOH:

Calculado : C, 57,07; H, 5,13; N, 9,09 Encontrado: C, 57,325 H, 5,455 N, 8,?6

Exemplo 14 (S)-/?-/(4-clo ro-feni1)sulfoni1-amino-carboni1/benzo i i7-L-valil-N-/2-meti1-1-(2-tiazoli1)carbonil-propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-riazolilo,

A=CO, L=£- f eni leno , R^=R⁵. S(C>₂).NH. CO-, R^-ClCgH^ ) .

a. (S)-2-( benzi1-oxi-carbonil)amino-3-meti1-1-(2-1iazolil)-l-butanona·

- 67 rsnwpAmprr#

(0,3¾ g, 37%) i TiXi P_f«0»3l» ciorefáraio:«etanol (10:1).

f· (*-dlero-fa»ll)eulfonil-eeino-carbonil7baneoii7-lí*valil-*-/I-( 3—bcnsot teso λ i lo )aarbani 1-2-aet i 1-propi l7-íz«prollnaaida (Fáraula I» heterociclo contendo λ, N e Q« 2-benzo tiaselllo, A.C0, Utg-feiillono* P*-P⁵,S(CO₂). MH. C0-, F⁹»4Coablnaran-se · ealne prapaadn do acordo co» o proaadiaanto 4o · «Ulisoda ao» jp u j~JL C JL no (0,3¾ g), 1—bidroxl—benzo—triasol (0,21 g) · ácido 4—/**(4—elo ro~feHil}sttlfeall*aalae-eerbenil?beaaeleo (0,37 g), ·« di»clo ro-aote»o (13 al) o tratou-aa a anaponsão co« cloridrato da 1—( 3—di-aatil—aaino—propll)—>-eti 1—carbo-dí—i«itía (0,17 ê)* Continuou-aa a agitação durante 7*5 br· Liluiu-aa a reacçao 00a acetato do etilo o leveu-ae (baHCO^ aaturado, HC1 a 10%), secou-sc (ffa^SO^) a araporou-aa para proporcionar una espuma alaosa· A purificação por croaatografia interaitente, aluída aoa banaaoalaaatato da atilo: ácido acático ($0:50:1,5), proporcionou o produto cone ua cálido branco (0,32 *,)» Too, »0,2$, bananoa:acatato do etilo: ácido acático ($0:50:1,5) UPLC, tp«Sá, Col A, Q»2» água:acetonitrilo:ácido tri-fluoro-acático (55»35*l>:0,l)i K.M., a/a«753(M+l), 433, 421, 393, 377, 3*2» 332» 315, 31* (base), 313» 312. 13*.

Análise para ^c36^H3e^C1,í5⁰7^S2*⁰’^{3 CH}3^C00Hí

Calculado t C, 57,07» «, 5U3» %» 9»0$

Encontrado: €, 57,32» ^w» 5»*5» *» 8,7* (33*^$·.^* ( 4- cloro- fanil) aul £ oni 1-aaíne-ear bani l7ban»oil7* L» -vali1-b-^l-aati1-1-( 3-ti aso li 1 )carboni i-propil7-b-pro linawi· da (Fáraula I, heterociclo contando X» K a q«2~riasollla, A»CO, Uyfaallano, Ρ*«ΐΛ&(0₂)·ΝΜ.€0-, b^aá-ClC^)· a· (33— 3-(baanil-oxí-carbonii)aaino-3-»at 11-1-(3-tiasolil)-l* —butanona· á7

Adicionou-se n-butil-lítio (6,6 ml de uma soluçao 2,1o M em hexano) a uma solução arrefecida (—35 ) de ti azol (1,23 ml) em tetra-hidrofurano seco (40 ml) durante 3min Agitou-se a mistura de reacçao castanha escura na gama de tem peraturas de -3θ° a -25° durante 10 min. Adicionou-se uma soluçao de material preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 13a e utilizado sem purificaÇao (1,7 g) em tetra-hidrofurano seco (15 ml), rapidamente durante 1 min. Continuou-se a agitaçao a 30 durante 15 min. Temperou-se a mistura ver tendo—a em NaH^Cl saturado (100 ml), e extraíram-se os orgâni cos em acetato de etilo. Lavaram-se os extractos (NaHCO^ satu rado), secaram-se (Na^SO^) e evaporaram-se para proporcionar um óleo castanho. A purificação por cromatografia de coluna, intermitente, eluida com hexanoíacetato de etilo (2:i), proporcionou o produto como um óleo amarelo (l,8l g, 98%)} TLC, R_f=O,45, hexano:acetato de etilo (2·!)} E.M·, m/e=319(M+l, ba se), 275·

b. (S)-2-amino-3-meti1-1-(2-tiazolil)-l-butanona.

Dissolveu-se a cetona preparada de acordo com o procedimento do Exemplo 14a (1,8 g) em di-cloro-metano (30 ml) e tratou-se com ácido tri-fluoro-metano-sulfónico (2,5 mi) numa porção única, e agitou-se a reacçao à temperatura ambien te durante 5 min. Diluiu-se a mistura com -di-cloro-metano e extraiu-se com água. Levou-se a fase aquosa a pH alcalino com NaHCO^ saturado e depois extraiu-se com di-cloro-metano. Seca ram-se os extractos (Na^SO^) e evaporaram-se para proporcionar o produto como um óleo amarelo escuro (0,78 g, 75%), TLC, R^=0,7» clorofórmioímetanol (10íl)} E.M., m/e=l85(M+l, base), 167, 140.

c. (S)-benzi1-oxi-carboni1-L-vali1-N-/2-meti1-1-(2-tiazol)carbonil-propil7-L-prolinamida (Fórmula VI, heterociclo con tendo X, N e Q=2-tiazoliIo).

Dissolveu-se amino-cetona preparada de acordo

com o procedimento do Exemplo l4b (0,73 g) em di-cloro-metano (25 ml). Adicionaram-se à solução, sequencialmente, benzil-oxi-carbonil-L-vali1-L-prolina (ΐ,3θ g), 1-hidroxi-benzotriazol (1.07 g) e cloridrato de 1-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (0,76 g). Agitou-se a mistura durante a noite à temperatura ambiente sob azoto. Diluiu—se a mistura de reaeçao com di-cloro-metano, lavou-se (NaHCO^ saturado,HC1 a 10%), secou-se (NagSO^) e evaporou-se para proporcionar um óleo amarelo (2,5 g)· A purificação por cromatografia intermi tente, eluida com hexano:acetato de etilo (i:i) proporcionou o produto como uma espuma sólida (1,61 g)} TLC, R_p=0,3, hexanoíacetato de etilo (1:1)} E.M. , m/e=515(M+l, base), 407, 33-1-, 282, 91.

Análise para C^H^N^O^S. 0,5 H^O:

Calculado i C, 59,64} H, 6,74} N, 10,70 Encontrado: C, 59,56} H, 6,54} N, 10,42

d. Sal do ácido (S)-L-valil-N-/2-metil-I~(2-tiazolil)carboniI -propil7-L-prolinamida—tri—fluoro-metano—sulfÓnico (Fórmula V, heterociclo contendo X, N e Q=2-tiazolilo).

Dissolveu-se a cetona preparada de acordo com ⁰ Exemplo 14c (0,51 g) cm di-cloro-metano (15 ml) e tratou-se com ácido tri-fluoro-metano-sulfónico (0,44 ml) numa porção única. Agitou-se a mistura de reacçao à temperatura ambiente durante 15 min. A evaporaçao e secagem-sob alto vácuo proporcionou uma goma branca (1,17 g, mais do que 100%). 0 peso de produto bruto em excesso à produção de 100% considerou-se ser ácido tri-fiuoro-metano-sulfónico.

e. (S)-/4-/^- (4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7-L-valil-N-/2-meti1-1-(2-tiazolilo)cnrboni1-propii7-L-prolinamida (Formula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-tiazo lilo, A=CO , Lsrg-fenileno , R^sR^.féO^Í.NK. C0-, R^s^-CIC^H^. )·

Dissoiveram-se amino-cetona bruta preparada de acordo com o procedimento do Exemplo l4d e utilizada sem

- 69 ίΑΜΪΗ»** purificaÇao (1,14 g), 1-hidroxi-benzo-tiazoi (0,13 g), ácido

4-/ (4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil/benzoico (0,34 g)e

4-metil-morfolina (0,59 ml) em tetra-hidrofurano e tratou-se a mistura com cloridrato de 1-(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida. Agitou-se a mistura durante a noite sob azoto. A evaporaçao proporcionou um resíduo que se fraccionou en tre água e acetato de etilo. Lavou-se a fase organica (HCI a 10%, água, solução salina), secou-se (MgSO^) e evaporou-se. A cromatografia intermitente, eluida com clorofórmioímetanol: ácido acético (100i2,5^;0>5)j proporcionou o produto como uma espuma branca (0,50 g). Uma segunda purificaÇao (o mesmo sistema de solvente do anterior) produziu o produto do título co mo uma espuma branca (0,43 g)i TLC, Κ^=Ο,35> clorofórmioímeta nolíácido acético (100:2,5:0,5), E.M., m/e=7O2 (³⁵Cl-M+l),

283, 282 (base), 120} HPLC, t_R=8,54, Col A, Q=2, águaíacetoni trilo:tetra-hidrofurano:ácido tri-fluoro-acêtico (55^:35^:15^JOA)

Exemplo 15 (S)- /5-/N·-(feni1-sulfoni1)urei do7benzo il7-L-vali1-Ν-/Ϊ-(2-benzoxazoil)carbonil-2-metil-propil7-L-proiinamida (Fórmula 1} heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazoilo, A=C0, Lsjj-fenileno, R⁴»R⁵,S(O₂).NH.CO.NR⁶-, R^sC^, R⁶=H).

a. Acido 4-/Ν'(fenil-sulfonil)ureido/benzoico.

Adicionou-se isocianato de fenil-sulfonilo (4,65 g) a uma solução agitada de ácido p-amino-benzoico (3j48 g) e 4-metil-morfolina (2,75 ml) em tetra-hidrofurano destila do (110 ml). A mistura de reacçao, que se aqueceu ligeiramente depois da adiçao, agitou-se durante 18 hr, diluiu-se com HCI IN, e extraiu-se com cloreto de metileno. Lavaram-se os extractos orgânicos (HCI IN (duas vezes), solução salina), se caram—se (NagSO^), filtraram-se e evaporaram-se para proporcionar um sólido amarelado. Triturou-se este sólido com éter e filtrou-se para proporcionar o produto como um sólido branco (5»26 g, 65%)} TLC, !?£=(),25» metanol: clorofórmio: ácido acê

tico (5ί95ίΐ)» E.M. , 32KM+1), 3θ3» 277» 257» 184, 164, ΐ6θ, 159, 158, 141, ΐ4θ, 139, 138, ,37» 120, 94.

b. (S )-Benzil-oxi-carbonil-L-valil-N-/l-( 2-benzoxazoil)hidroxi-metil-2-metil-propil/-I/-prolinamida (Fórmula XIV, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazoilo)·

Adicionou-se cloreto de acetilo (46,5 ml) gota a gota, durante 25 min a uma solução agitada de etanol (4¾ ml) em clorofórmio (44 ml). Agitou-se a mistura durante mais 10 min. Adicionou-se ciano-hidrina preparada como descrito no Exemplo 4a (10,0 g), à mistura, seguida de um volume adicional de clorofórmio (44 mi). Agitou-se a mistura de reacçao a 0° durante 3 hr e evaporaram-se os solventes para proporcionar uma espuma branca que se dissolveu em etanol (100 ml). A esta solução etanólica adicionou-se 2-aminofenoi (7,l4 g), e aqueceu-se a mistura castanha resultante a 60 com agitaÇao sob azoto durante 45 min. Arrefeceu—se a mistura de reacçao, diluiu-se com éter, lavou-se (NaOH IN (5 vezes), solução sali na), secou-se (NagSO^/K^CO^ (2:1 v/v)), e evaporou-se para se obter uma espuma castanha (10,3 g). Purificou—se o material bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetonaíhexa nos (35·65), para proporcionar o produto (4,92 g)} TLC,

0,24, metanol:clorofórmio (5*95), E.M., m/e=551(M+l), 331»

148, 108, 91·

Análise para Ο^θΗ^θΝ^Ο^. 0,50 HgO

Calculado : C, 64,39} H, 7,02} N, 10,01 Encontrado: C, 64,29» H, 6,87» N, 9,86

c. (IS )-L-vali 1-/1-( 2-benzoxazoiil )-hidroxi-metil-2-metil-pro pil7-L-prolinamida (Fórmula XV, heterociclo contendo X, N < Qs2-benzoxazoli lo.

Hidrogenou-se uma mistura de 10% (p/p) de paládio em carbono (800 mg, 5θ% (p/p) água) e do produto do Exem pio 15b (4,90 g) em etanol (250 ml) num agitador a 3,4 bares durante 2 hr, depois do que se adicionou uma porção adicional do catalisador (0,500 g)· Hidrogenou-se a mistura num agitador a 3,4 bares durante mais 2 hr, filtrou-se através de ter ra de diatomáceas e evaporou-se para proporcionar o produto como um sólido (3,67 g, 99%)} TLC, R^=0,42, metanol-clorofórmio (5*95)} E.M. , m/e=445(M+29), 4l8(M+2), 4l7(M+l).

d. (IS )-/5-/N’-( fenil-sulfonil) ur ei do7b enzo i l7-L-va li 1—N— /1—

-(2-b enzoxazoli1)hi droxi-met i i-2-m et i1-prop il7-L-prolinami da (Fórmula III, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazo lilo, A«CO, L=p-fenileno, R^=R⁵. S ( 0_o ). NH. CO^NR⁶-, R⁵=C.H_, , ^{2 b 5} R =H).

Adicionou-se cloridrato de 1-(-3-di-metil-ami no-propil)-3-etil-carbo-di-imida (190 mg) a uma solução do pro duto do Exemplo 15c (380 mg), 1-hidroxi-benzotriazol (140 mg) e ácido 4-/S'-(fenii-sulfonil)ureido7henzoico (320 mg) em di-metil-formamida (5 ml) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 16 hr. Diluiu-se a mistura de-reacçao comace tato de etilo, lavou-se (HC1 IN (três vezes), solução salina) secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Fez-se a cromatografia inter mitente do produto bruto, eluido com acetato de etiloϊclorofórmio ί ácido acético (50:50:1) para proporcionar o produto co mo um sólido (460 mg)j TLC, R_f>=0,l4, metanol: clorofórmio i ácido acético (5*95*1)·

Análise para C^^H^^N^OgS.1,0 HgO.1,0 CH^COgH:

Calculado : C, 57,17} H, 6,31} N, 10,51 Encontrado: C, 58,39} H, 6,33} N, 9,95·

e. (S )-/?-/!?’ -( fenil-sulfonil )ureido7benzoil7-L-valil-N-/l-(2-b enzoxa zoli1)carboni1-2-met i1-propil7-L-prolinami da (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo, A=CO, L=£-fenileno, R^=R⁵.S(02>.NH.CO.NR⁶-, R⁵=C6H₅» R⁶=H).

Adicionou-se periodinano Dess-Martin (440 mg) a uma solução de t-butanol (0,048 ml) e do produto do Exemplo 15d, (37O mg) em cloreto de metileno seco (2,5 ml). A mistura

A» escurecu imediatamente e permitiu—se a agitaÇao durante 22 hr·

^SSE.;?

Diluiu-se a suspensão resultante com cloreto de metileno, lavou-se (tio-sulfato de sódio saturado/bicarbonato de sódio UI (v/v) (3 vezes), solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se para proporcionar 450 mg de óleo bruto· Fez-se a croma tografia intermitente do óleo, eluido com acetato de etiloídi -cloro-metanoίácido acético (5OJ5OS1), depois fez-se de novo cromatografia utilizando o mesmo sistema para proporcionar o composto do título (91 mg)} TLC, 19^.=0,22, acetato de etiloídi -cloro-metanoíácido acético (5θ:5θ:l) } HPLC, t_T.=8,46, Col B, Q=2, águaíacetonitriloítetra-hidrofuranoíácido tri-fluoro-acê tico (55:35:15:0,1); E.M. , m/e=64O, 317, 316, 298, 245, 219, 197, 120.

Análise para C^H^NgOgS. 1,0 ^0.2,0 CH^CO^í

Calculado í C, 56,20; H, 5,89» N, 9,83.

Encontrado: C, 56,08} H, 5,93» N, 9,33·

Exemplo 16 (S)-/5-^3í’ —/” (4-cloro— feni1)sulfonil7urei do7b enzo il7-L-vali1-N-/1—(2-b enzoxa zoli1)carboni1-2-me t i1-propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2-benzoxazolilo, AeCO, L=£- feni leno, R⁴»R⁵. S(Og). NH. CO.NR⁶-, R⁵=4-CiCgH₄, R⁶=IÍ.

a. Acido 4-/R·/ (4-cIoro-fenil)sulfonil7ureido7benzoico.

Adicionou-se isocianato de cloro-feni1-sulfonilo (4,25 «) a uma solução agitada de ácido p—amino-benzoico (2,68 g) e 4-metil-morfolina (2,15 ml) em tetra-hidrofurano destilado (90 ml). A mistura de reacçao, que se aqueceu lenta mente depois da adiçao, agitou-se durante 18 hr. Acidificou-se a mistura de reacçao com HC1 IN, e formou-se um precipita do floculento. Extraiu-se a mistura com cloreto de metileno,

Μ M retirando-se muito do precipitado. A evaporaçao da solução de cloreto de metileno e a trituração do sólido resultante com éter proporcionou 1,25 g He um sólido branco. Lixiviou-se o precipitado sólido original com metanol, e evaporou-se a so- 73 luçao resultante para proporcionar um sólido branco que se tri turou com êter para proporcionar mais 4,90 g (produção total 5,15 g, 98%) de sólido branco} TLC, R^=0,21, metanol:clorofôr mioíácido acético (5:95*1)} E.M., m/e=355(M+l), 220,219, 2l8, 192, 177, 175, 164, 139, 138, 120, 94.

b. (IS)-/5-/N’-/~(4-cloro-fenil)sulfonil7ureido7benzoil7“L-valil-N-/l-(2-benzoxazolil7hidroxi-metil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula III, heterociclo contendo X, N e Q=2-faenzoxazolilo , A=CO, L=£-fenileno , S( 0^ ). NH.CONR% r⁵=4-cic₆h₄, r⁶=h).

Adicionou—se cloridrato de 1—(3-di—metil—amino-propil)-3-*etil-carbo-di-imida (210 mg) a uma solução do produto do Exemplo 15c (360 mg), 4-di-metil-amino-piridina (I30 mg), e ácido 4-/5-N·-/ (4-cloro-fenil)sulfonil7ureido/benzoico (5θ7 mg) em tetra-hidrofurano (5 ml)} e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante durante 16 hr. DiluiuA* .

-se a mistura de reacçao com acetato de etilo, lavou-se (agua destilada (3 vezes), HC1 IN, bicarbonato de sódio saturado, solução salina). Acidificou-se o lavado de bicarbonato a pH=l e lavou-se três vezes com acetato de etilo lavaram-se as fases organicas combinadas (solução salina) secaram-se ), e evaporaram-se. Fez-se a cromatografia intermitente do produ to bruto, eluido com tetra-hidrofurano:clorofórmio:ácido acético (70:30·!)· Filtrou-se o material resultante através de síli ca gel utilizando tetra-hidrofurano:clorofórmioíácido acê tico (3Ο·7Οί1 a 100:0:1) para proporcionar o produto (350 mg) como um sólido} TLC, R^=0,55, tetra-hidrofurano:clorofórmio: ácido acético (80:20:1)} E.M., m/e=247, 197, 163·

Análise para C^H^CIN^S.4,0 H₂0.5,0 CH^CO^:

Calculado : C, 48,94} H, 6,03} N, 7,29 Encontrado: C, 48,64} H, 5,16} N, 7,53·

c. (S)-/5—/Ν'-f(4-cloro-fenil)sulfonil7ureido7benzoil7-L-valil-N-/l-(2-benzoxazolil)carbonil—2-metil-propil7~L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q=2—benzoxa

zolilo, A=C0, L=£-íenileno, R⁴=R⁵.S(0 ).NH.CO.NR⁶-, R⁵=4-C1c₆h₄, r⁶=h).

Adicionou-se periodinano Dess-Martin (5θθ mg) a uma solução de t-butanol (0,055 ml) e do produto do Exemplo 16b (44O mg) em cloreto de metileno seco (3 ml). A mistura es

AZ cureceu imediatamente e permitiu-se a agitaçao durante 22 hr.

AZ

Diluiu-se a suspensão resultante com acetato de etilo, lavou-se (tio-sulfato de sódio saturadoíbicarbonato de sódio líl (v/v) (3 vezes)), secou-se (MgSO^), e evaporou-se para proporcionar 570 mg de um óleo. Fez-se a cromatografia intermitente deste éleo, eluido com acetona:cloreto de metileno: ácido acêti co (60:40:1), para proporcionar o composto do titulo (95 mg); TLC, R_f=0,50> metanol:cloroférmio:ácido acético (10:90^;l)i

HPLC, t =14,68, Col B, Q=2, água:acetonitrilo:tetra-hidrofura rí noiácido tri-fluoro-acêtico (55:35·15»0>1)» E.M., m/e=317» 316, 219? 192, 120.

Análise para C θΗ^CIN^S. 1,0 CH COgH:

Calculado : C, 56,26; H, 5,34; N, 10,36.

Encontrado: C, 56,23; Η, 5,50; N, 10,59Exemplo 17 (S)-/5-/5J’ -/ (4-cloro-fenil)sulfonil7ureido7benzoil7-L-valil-N-/I-/5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-il7carbonil-2-metil-propil7-lr-prolinamida (Férmula I, heterociclo contendo X, Ne

Q=5-(metoxi-carbonil)-benzoxazol-2-ilo , A=CO, L=jg-f enileno, rBr⁵.s(o2).conr⁶, r⁵=4cic6h₄, r⁶=h).

a. (S)-L-valiΙ—Ν-/Ϊ-/5-(metoxi-carboni1)benzoxazol-2-il7carbo nil-2-metil-propil7L-prolinam±da (Férmula V, heterociclo contendo X, N e Q=5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-ilo).

Adicionou-se ácido tri-fluoro-metano-sulfénico (0,73 ml) gota a gota a uma solução agitada do produto do Exemplo 8b (1,00 mg) em cloreto de metileno (8 ml) sob azoto.

Depois de 10 min diluiu-se a mistura de reacçao com di-cloro-metano e lavou-se três vezes com água destilada· Ajustou-se o pH da solução resultante a pH o por adiçao de uma solução de bicarbonato de sódio saturado (25 ml). Extraiu-se vigorosa mente a solução alcalina com di-cloro-metano, seis vezes. Adi cionou-se cloreto de sódio (10 g) a camada aquosa remanescente, e extfcaiu-se duas vezes com di-cloro-metano. Combinaram-se todos os extractos orgânicos, secaram-se (NagSO^) e evapo raram-se para proporcionar o produto (620 mg)} TLC, R^,=0,20, metanol;clorofórmio, (5·95)·

b. (S)-/5-/R’-/ (4-cloro-fenil)sulfonil7ureido7benzoil7-L-valil-N- /1-/5-( metoxi-carboni1)b enzoxa zo1-2-il7ca rboni1-2-me til-propil7-L~prolinamida (Fórmula I, heterocicio contendo X, N e Q=»5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=j>-fe nileno, R⁴«R⁵.S(02).NH.CO.NR⁶, R⁵=4-C1C6H₄, R⁶=H).

Adicionou-se cloridrato de 1—(3—di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (100 mg), a uma solução do produto do Exemplo 17a (225 mg), 1-hidroxi-benzotriazol (70 mg), e ácido 4-/R·-/”(4-cloro-fenil)sulfonil7ureido7benzoico (190 mg) em di-cloro-metano (3 ml) e agitou-se a solução à tem peratura ambiente durante 16 hr. Diluiu-se a mistura de reacçao com acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN (3 vezes), solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com acetona! cloreto de metileno:ácido acético (10:90:1), para proporcionar o composto do título (271 mg) como um sólido} TLC, R styl.4, acetona·di—cloro—metano 5 ácido acético (20:8021)} HPLC, t^a 13,47, Col A, Q=2, água:acetonitrilo:tetra-hidrofurano:ácido tri-fluoro-acêtico (55^:35^:15,1)} E.M., m/e=699, 374, 245, 219, 197, 178, 120.

Análise para ^C38^H44^C1N6°1O^S·³’⁷ ^0.0,70 C^COgH:

Calculado : C, 51,55} H, 5,62} N, 9,15 Encontrado: C, 51,40} H, 4,97} N, 9,48.

Exemplo 18

/5-/- (tri-fluoro-meti1-sulfoni1)amino/benzoil7-L-vali1-N-·/1-/5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-il7carboni1-2-metil-propil/·

-L-prolinamida (Fórmula X, heterociclo contendo X, N e Q=5“

-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-i!o, A»CO, L=j>-feni leno, R = »CF ·S(O-).NH^).

a. 4-/”(tri-fluoro-metil-sulfonil)amino benzoato de etilo.

Adicionou-se anidrido tri-fluoro-metano-suifó nico (4,1 ml) gota a gota a uma solução pré-arrefecida (0°) de p-amino-benzoato de etilo (3,3 g) em di-cloro-metano (50 ml) sob azoto. Agitou-se a mistura de reacçao durante 1 hr a 0°, e depois permitiu-se aquecer â temperatura ambiente e agi tou-ee durante 1 hr. Depois evaporou-se a mistura de reacçao, adicionou-se acetato de etilo (125 ml) ao resíduo} e lavou-se a solução orgânica resultante (HC1 IN, depois solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia intermitente, eluido com clorofórmioímetanol (95*5)> para proporcionar o produto como um pó branco (1,27 g)} TLC, R_f*O,37, clorofórmioímetanol (90:10).

b. Acido 4-/~(tri-fluoro-metil-sulfonil)amino/benzoico.

Adicionou—se uma solução de NaOH IN (8,4 mi) a uma solução agitada do produto do Exemplo 18a (1,25 g) em metanol (25 ml). Adicionou-se água (2 ml), e agitou-se a mistura de reacçao durante a noite. Depois destilou-se metanol sob vácuo de aspiraçao de água, e diluiu-se o resíduo aquoso resultante com água (20 ml). Lavou—se a solução aquosa com acetato de etilo, acidificou-se (pH 2) com HC1 IN, e extraiu-se com acetato de etilo (total=40 ml). Secou-se a fase orgânica (MgSO^) e evaporou-se para proporcionar o produto como um pó branco (1,05 g)} TLC, R^=0,4, clorofórmio: metanolíácico acético (96:6:0,2).

c. (S)-L—vali1-N-/1-/5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2—i2/carbo

nil— 2-meti 1-propi l7-lr-pro linami da (Fórmula V, heterociclo con tendo X, N e Q«5“(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-ilo)·

Adicionou-se ácido tri-fluoro-metano-sulfónico (0,53 ml), gota a gota, a uma solução agitada do produto do Exemplo 8b (750 mg) em cloreto de metileno (5 ml) sob azo— to. Depois de 20 min diluiu-se a mistura de reacçao com di-cloro-metano e lavou-se três vezes com água destilada. Adicionou-se cloreto de sódio (5 g) às camadas aquosas combinadas e ajustou-se a solução resultante a pH 8 por adiçao ds uma solução de bicarbonato de sódio saturado (20 ml). Extraiu-se vigorosamente a solução alcalina com di-cloro-metano, oito ve zes. Corabinaram-se as camadas organicas, secaram-se (Npj^SO^) e evaporaram-se para proporcionar o produto (420 mg)} TLC, R^,=0,28, metanol: clorofórmio (5^:95)·

d. /4-/”(tri-fluoro-metil-sulfonil)amino7benzoil7-L-vaIil-N-/1-/5-(metoxi-carbonil)benzoxazol-2-il7carbonil-2-metil-propil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X,

N e Q=5~(^metoxi-carbonii)benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=p-fenile 4 no, R «CF .S(O_).NH.-).

&

Adicionou-se cloridrato de l-(3-di-metil—amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (240 mg) a uma solução da pro duto do Exemplo 18c (420 mg), 4-di-metil-amino-piridina (110 mg), e ácido 4-/~(tri—fluoro-metil-sulfonil)amino7benzoico (340 mg) em tetra-hidrofurano (3 ml)} e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante l6 hr. Diluiu—se a mistura de re acça· com acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN (3 vezes), solu çao salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Purificou-se o produto bruto por cromatografia intermitente, eluido com meta nolsclorofórmioíácido acético (20í80:l), para proporcionar o composto do título (33θ mg) como um sólido} TLC, Ρ^=0,5θ, meta nol:clorofórmio!ácido acético (5595·!)} HPLC, t »15,61, Col A, águaίacetonitrilo}tetra-hidrofuranoíácido acético (55^:35^ÍI5^: :0,1), Q=2, E.M. , m/e=752(M+29), 724(M+1), 706, 374, 356, 35-U 323.

Análise para C H _rF NO S.0,60 H_n0.0,80 CH_oC0_oH:

36 3 5 9 2 32

Calculado : C, 5D57, H, 5,20} N, 8,95 Encontrados C, 5I,29i H, 5,075 N, 8,97·

Exemplo 19

S-/4-/ (-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil/-L-valil

-N-/1-/5-(amino-carboni1)b enzoxa zo1-2-i1)carboni1-2-meti 1-pro pil7-L-prolinamida (Fórmula I, heterociclo contendo X, N e Q= 4 =5-(amino-carbonil)-benzoxazol-2-ilo , A=CO, Lsja- feni leno , R = =r⁵.s(o2).nh.co-, r⁵s=4-cic6h₄).

Método A

Dissolveu-se o material preparado como descri to no Exemplo 6 e estimado conter pelo menos 95% do diastereó mero—(S) (200 mg) em clorofórmio quente (15 ml)₅ filtrou—see diluiu-se a um volume total de 25 ml com o clorofórmio quente. Adicionou-se tolueno (5 ml) até a solução se tornat nebulosa e adicionaram—se algumas gotas de clorofórmio que originou uma

A* M solução clara· Permitiu-se arrefecer lentamente a solução. De pois de 4 dias, removeu-se o sobrenadante por filtração e secou-se o sólido cristalizado sob azoto para proporcionar 101 mg de sólido branco} p. f. I65-I8O⁰} /^,7^=-73,2° (ca2,5,

CH^OH).

Método B

a. Éster b-butílico de benzi1-oxi-carboni1-L-vali1-L-prolina

Colo caram-se N-b enzi1-oxi-carboni1-L-valina (121,3 g), 1-hidroxi-benzotriazol (130,5 g) e di-metil-formamida seco (DMF) (800 ml), num frasco de 5 litros, com 3 aberturas, equipado com um agitador mecânico, termómetro, e um tu bo de secagem de sulfato de cálcio, sob atmosfera de azoto. Arrefeceu-se a mistura a 0° durante 15 min e adicionou-se ês79 I

ter jt-butílico de prolina (86,6 g) em DMF seco (800 ml), gota ' a gota, a uma velocidade rápida durante 2 hr enquanto se man** o teve a temperatura da mistura de reacçao a 0 . Adicionou-se , então, di-cloro-hexil-carbo-di-imida (109,4 g) em DMF seco (400 ml), numa porção, à mistura de reacçao. Agitou-se a reacçao a 0° durante 3 hr,*permitiu-se aquecer gradualmente atem peratura ambiente durante 1 hr, e agitou-se durante 48 hr, de pois do que se verificou que a reacçao estava completa, por

TLC /R_f=O,55, clorofórmio ί acetato de etilo (85^15) 7· Arrefe*» ceu-se a mistura de reacçao em gelo/agua e filtrou-se fria pa ra remover a di-ciclo-hexil-ureia precipitada. Evaporou-se o DMF utilizando uma bomba mecânica de vácuo e a uma temperatura de banho de 40°. Diluiu—se o óleo remanescente com acetato de etilo (2 litros), arrefeceu-se, e filtrou-se de novo, para •W remover mais di-ciclo-hexil-ureia. Lavou-se a solução de acetato de etilo (20% (p/v) de solução de ácido cítrico (duas ve zes), solução saturada de cloreto de sódio, solução saturada de bicarbonato de sódio (duas vezes), e solução saturada de cloreto de sódio), secou-se (MgSO^), e evaporou-se para proporcionar éster t—butílico de benzil—oxi—carbonil—L-valil-L-prolina bruto como um óleo cor de âmbar (208,3 g, 100%).

!

b. Éster t-butílico de L-valil-prolina !

A# - 9

Colocou—se uma solução de ester _t—butílico de i benzil-oxi-carbonil-L-valil-L-prolina (51,ô g) dissolvida em / \ *** i etanol absoluto (1 litro) numa garrafa de hidrogenaçao de 2 I litros. Purgou-se a mistura de reacçao com azoto, e adicionou | -se catalisador de 10% (p/p) de paládio em carbono (10 g, 50% ! (p/p) água)· Colocou-se a reacçao num grande aparelho agitador e agitou-se â temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogénio (3,4 bares). Depois de 1 hr interrompeu-se a entra

- ** ί da de hidrogénio. Verificou-se a mistura de reacçao por TLC /clorofórmio:acetato de etilo (85^15)7 e mostrou que continha j material de partida considerável (R^=O,55)· Adicionou-se cata lisador fresco (10 g), e colocou-se a reacçao de novo no aparelho durante mais 4 hr, ponto em que se interrompeu a entra80 ί

da de hidrogénio. A TLC da mistura de reacçao mostrou ausência completa de material de partida. Filtrou-se a mistura de reacçao através de um enchimento de terra de diatomáceas, e «M lavou-se a massa do filtro com etanol. A evaporaÇao do etanol da solução condensada originou um óleo amarelo nebuboso. Dissolveu-se este óleo em éter (1 litro), filtrou-se para remover uma pequena quantidade de precipitado (di-ciclo-hexil-ureia) e evaporou-se para proporcionar éster jt-butílico de L-valil-L-prolina bruto como um óleo amarelo (32,1 g, 93%)·

c. Éster t-butílico de /5-/(4-cloro-fenil) sulfonil—amino-car bonil7benzoil7-L-valil-L-prolina.

Adicionou-se 4-di-metil-amino-piridina (l6,4 g) a uma solução de acido 4-/”(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoico (45,6 g) em cloreto metileno (250 ml). Agi tou-se a mistura 15 min antes de se adicionarem, sucessivamen te, a amina do Exemplo 19b (39,9 g) em di-cloro-metano (250 ml) e 1—(3-di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (28,3 g). Agitou-se a mistura de reacçao 16 hr e adicionaram-se ami na adicional (1,1 g) e carbo-di-imida (1,5 g) à mistura de j

AZ +4 i reacçao. Depois de mais 3 hr, evaporou-se a reacçao para pro- ₍ i

porcionar um xarope cinzento, espesso. Dissolveu-se em aceta- ^! to de etilo, lavou-se (ácido cítrico a 20% p/p (3 vezes), so- ^! luçao salina (4 vezes)), secou-se (MgSO^.), e evaporou-se. Fez ' -se a cromatografia intermitente do material bruto, eluido com metanol:cloreto de metileno (gradiente: 0:1 (1,5 litros),2:98 (1,5 litros), 4:96 (1,5 litros), 5*95 (4 litros)), para proporcionar éster .t-butílico de /5-/(4-cloro-fenil)sulfonil- j -amino-carbonil7benzoil7-L-valil-L-prolina (65,5 g, 73%) como uma espuma branca} TLC, R^=0,50, metanol:di-cloro-metano-ácido acético (2:98)1).

d. /?-/”(4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoilo7-L-va lil-L-prolina (Fórmula IXa, A=CO, L=p-f eni leno , R^=R³. S(Q. ). ; NH. CO-, R'M-ClCgH^).

Dissolveu-se o produto do Exemplo 19c (65,5 g) ' em ácido tri-fluoro-acêtico (200 ml) com agitaçao sob uma atmosfera de azoto a 0°. Depois de uma hora a mistura de reac | çao arrefeceu-se a -15 durante lo hr, depois do que se verteu a reacçao em gelo/água (2 litros) com agitaçao vigorosa. Filtrou-se o precipitado, lavou-se com três porçoes de água fria e secou-se o produto bruto em ácido tri—fluoro-acético (200 ml) e agitou-se à temperatura ambiente l8 hr. Verteu-se a mistura de reacçao em gelo/água (1,5 litros) com agitaçao vigorosa. Filtrou-se o precipitado e secou—se sob alto vácuo para proporcionar o ácido (59,7 g)i TLC, R^.=0,05í metanolíclo rofórmioíácido acético (5^:95^;l)· Para purificaÇao adicional, dissolveram-se o ácido anterior (59,7 g) θ óxido de cálcio (6,25 g) em água (50θ ml) e tetra-hidrofurano (500 ml), e aque ceram—se a 55-60° durante 0,5 hr. Depois de arrefecimento à

M temperatura ambiente, concentrou-se a mistura sob pressão reduzida· Decantou-se a fase aquosa do resíduo gomoso e liofili zou-se para proporcionar um pó amarelo-branco (47,3 g)· Cristalizou-se este material a partir de metanol:água e converteu -se de novo na forma livre do acido por dissolução em agua e tratamento da solução com HC1 IN (pH 2) e filtraçao do sólido ί precipitado.

e. N-Benzil-oxi-carbonil-L-valinal

Adicionou-se ácido p-tolueno-sulfónico mono1

-hidratado (1,0 g) a uma solução do produto do Exemplo lc (27,5 I g) em acetona (1,7 litros) e agitou-se a solução resultante durante 28 hr. Evaporaram-se os solventes, e dissolveu-se o resíduo em éter, lavou-se (NaHCO^ saturado (3 vezes), solução salina)), secou-se (MgSO^) e evaporou-se para proporcionar o aldeído (20,6 g)j TLC, R^=O,48, metanol:clorofórmio (5*95)}

E.M., m/e»236(M+l), 192, 91.

f. (3S)-3-(benzil-oxi-carbonil)amino-2-hidroxi-4-metil-pentano-nitrilo (Fórmula XlIIa, W=CN).

Secou-se um frasco de 500 ml de fundo redondo com agitador, sob vácuo e purgou-se com azoto. Carregou-se o frasco com cloreto de metileno (265 ml) a que se seguiu a adi ção do produto aldeído do Exemplo 19e (20,6 g) e tri-etil-ami na (7,40 ml). Adicionou-se acetona ciano-hidrina (24,0 ml) nu ma porção. Agitou-se a mistura de reacçao durante 6 hr e evaporou—se o solvente. Dissolveu—se o produto bruto em éter, la vou-se (água (3 vezes), solução salina), secou-se (MgSO^), e evaporou-se. Fez-se a cromatografia intermitente do óleo bruto resultante, eluido com cloreto de metilenoímetanolíNH^OH (99!l!0,1) para proporcionar a ciano-hidrina (18,0 g, 78%) co mo um sólido amarelo, TLC, R_f.=O,53, acetona!hexanos (50:50).

g. (2S)-2-/”(benzi1-oxi-carbonil)amino-l-hidroxi-3-meti1-butil7benzoxazol-5—carboxamida (Fórmula XlVa, heterociclo con tendo X, N e Q«5--(amino-carbonil)benzoxazol-2-ilo)·

Secou-se um frasco de 1 litro com agitador, sob vácuo e purgou-se com azoto. Carregou-se o frasco com cio reto de acetilo recentemente destilado (98,0 ml) e clorofórmio (100 ml) e arrefeceu-se num banho de gelo. Adicionou-se etanol (89,0 ml) gota a gota durante 45 min, mantendo a tempe ratura abaixo de 15°· Depois de arrefecimento a 5°, adicionou -se uma soluçao do produto do Exemplo 19f (12,0 g) em clorofórmio (100 ml), gota a gota, durante 10 min. Permitiu—se a ** agitaçao da mistura de reacçao durante 2 hr num banho de gelo e evaporou-se o solvente a 0° para proporcionar uma espuma acastanhada (l4,l g, 100%)} TLC, depois de se fraccionar uma alíquota entre acetato de etilo e NaHCO^ saturado para tomar a forma livre de imino-êter, R^=0,40, acetona!hexanos (50:5°)} E.M., m/e=3O9(M+l). Dissolveu-se esta espuma em etanol absolu to (23O ml) e adicionou-se 3-amino-4-hidroxi-benzamida (7,30 g). Fez-se o refluxo da mistura durante 1,5 hr e evaporou-se o solvente para proporcionar um sólido castanho. Dissolveu-se o residuo sólido em 500 ml de acetato de etilo, lavou-se (HC1 IN, saturado com NaCl, NaHCO^ saturado/NaCl, solução salina), secou-se (MgSO ) e evaporou-se. Dissolveu-se este resíduo em

metanol) adsorveu-se em terra de diatomáceas, e fez—se a cromatografia intermitente, eluido com acetonaíhexanos (50:50), para proporcionar o álcool (7,15 g, 39%) como um sólido acastanhado} TLC, R^xOjll, acetonaíhexanos (5θ·5θ), E.M., m/e«29O, 246.

h. (2S)-(2-amino-l-hidroxi-3-metil-butil)benzoxazol-5-carboxa mida (FÓrmula XVa, heterociclo contendo X, N e Qx5-(amino-carbonil)benzoxazol-2-ilo)·

Hidrogenou-se uma mistura de 10% (p/p) de paládio em carbono (1,26 g, 50% (p/p) água), e do produto do Exemplo 19& (5,θθ g), em etanol (63 ml) num agitador a 3,4 ba res durante 18 hr. Filtrou-se a mistura através de terra de diatomáceas e evaporou-se o solvente para proporcionar a amina (3,13 g, 95%) como um sólido acastanhado} TLC, R^x0,20, cloreto de metileno:metanoϋΝΗ^ΟΗ (95^:5^:θ,5)ί E.M., m/ex264 (M+l).

i. (IS)-/?-/” (4-cloro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil-L-vali1-N-/1-/5-(amino-carboni1)b enzoxazo1-2-il7hi droxi- | —metil—2—meti1-propil7—L-prolinamida (FÓrmula III, hetero— ·

ciclo contendo X, N e Qx5-(amino-carbonil)benzoxazol-2-ilo, A»CO, Lxj>—fenileno , R^=R⁵. S(C>2).NH. CO- , R⁵=4-C1C6H^).

Adicionou-se cloridrato de l-(3-di-metiI-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (1,57 g) a uma solução do pro · duto do Exemplo 19h (1,57 g), 1-hidroxi-benzotriazol (,01 g)e o produto ácido do Exemplo 19d (4,00 g) em di-metil-formamida (75 ml) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 60 hr. Evaporou-se o solvente e lavou—se o óleo castanho com ί HCl IN saturado com NaCl, formando um precipitado acastanhado. Depois filtrou—se o precipitado e removeu-se uma porção do só í lido (75O mg), dissolveu-se o precipitado bruto em metanol, adsorveu-se em terra de diatomáceas e purificou—se por cromatografia intermitente, eluido com cloreto de metileno:metanol: NH^OH (gradiente 85:15:1 a 70:30:1), para proporcionar o álcool (3,58 g, 59%) como um sólido acastanhado} TLC, R χθ,22, cio í £ — í

^jiTk'ú

reto de metileno:metanolíácido acético (90:10:0,2), E.M. , m/2 =421.

j. (S)-/5-/“ (4-cIoro-fenil)sulfonil-amino-carbonil7benzoil7-L·-vali 1-N-/1-/5-( amino-carboni1)benzoxazo1— 2—i1)carboni1— -2-metil-propil/-Ir-prolinamida (Fórmula I, heterociclo con tendo X, N e Q=5-(amino-carbonil)benzoxazol-2-ilo, A=CO, L=£-fenileno, R⁴«R⁵. S(02).NH. CO-, R⁵«4-C1C6H^).

Adicionou—se ácido di—cloro—acético (8,2 mg, 0,0052 ml) a uma solução de álcool preparado de uma maneira semelhante ao descrito no Exemplo 19i, anterior, (50 mg) e cio ridrato de l-(3“di-metil-amino-propil)-3-etil-carbo-di-imida (183 mg) em sulfóxido de di-metilo (1,0 ml) e tolueno (1,0 ml).

A* Λ»

Permitiu-se a agitaçao da mistura durante lo hr, e, então, adi cionou-se mais ácido di-cloro-acêtico (0,011 ml) e continuou-se a agitaçao durante mais 24 hr. Dissolveu-se a mistura de reacçao em clorofórmio, lavou—se (HC1 IN, solução salina), se cou-se (MgSO^), e evaporarasb.se os solventes para proporcionar o composto do título (42 mg).

Claims (5)

1. REIVINDICAÇÕES _ lâ _

   Processo para a preparaçao de um composto de fórmula geral ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que o grupo -Qé seleccionado de entre um grupo que consiste em (i) orto-fenileno, que suporta opcionalmente um ou dois substi tuintes independentemente seleccionados de um grupo que consiste em halogéneo, nitro, um grupo amino de fórmula -NR*R , um grupo acilamino de fórmula -NHCOR^m, hidroxi, um grupo acilo xi de fórmula -OCORⁿ, alcoxi (C^-C^), alquilo (C^-C^), trifluorometilo, carboxi, ciano, /alcoxi (C^-C^) 7carbonilo, um grupo amiçocarbonilo de fórmula -CONR^pR^q (que a fórmula -C0NR^P2 quando R^P«R^q), sulfo, sulfonamido de fórmula SO NR¹R'^ e hidro— xi-alquilo (C^-C^)} e (ii) um grupo eis-vinileno de fórmula -C(R^aJjsCÍR^)- em que cada R^a e R^ ê independentemente seleccionado do grupo que con ** t çç h siste em hidrogenaÇao, nitro, um grupo amino de fórmula -NR^eR , um grupo aciloxi de fórmula -OCORⁿ, alcoxi (C^-C^), alquilo (C^-Cg), trifluorometilo, carboxi, ciano, /alcoxi (0^-0^)^7carbonilo, um grupo amino-carbonilo de fórmula -C0NR^PR^q (que inclui a fórmula -CONR^p quando R^p=R^q) um grupo hidroximetilo,! e fenilo que suporta opcionalmente um ou dois substituintes es ; colhidos de um grupo que consiste em halogéneo, nitro, alcoxi , (C^-C^)alquilo (C^-C^) e trifluorometilo} cada R^S, R*¹, R*, R, R^m, R^Pe R^q ê independentemente selecciona do de um grupo que consiste ^em hidrogénio e alquilo ^i^)}!

   90 I

   --=-

   Rⁿ ê alquilo (C^C^ ); um grupo que consiste em oxigénio e X é seleccionado de fre j A é seleccionado de um grupo que consiste em -CO-, -NH. 0. CO-: L é seleccionado de um grupo que consiste em fenileno,

   diilo (C^.-C^), alquenodiilo (C -C^), fenileno-alquilo (C^-C_) “a, contendo opcionalmente uma dupla ligaÇao na parte alquilo, na «w ** condição de que um carbono incluído na dupla ligaÇao de um al *# quenodiilo ou incluido numa dupla ligaÇao opcional de um grupo fenileno-alquilo nao esteja directamente ligado a um átomo de oxigénio ou azoto do grupo A) e κ ê seleccionado de um grupo que consiste numa acil-sulfonae mi da de fórmula R .S(0 ).NH. CO-, uma acil-sulfonamida de fórc “ c mula R · CO. NH. S(0_)—, uma sulfonilureia de fórmula R .NH.CO·2 _ zNH.S(0₂)-, uma sulfonilureia de fórmula R · S(O₂).NH. CO.NR-, e uma trifluoro-metil-sulfonamida de fórmula CF„.S(O ).NH-em que e 3 «

   R'' ê seleccionado de um hrupo que consiste em alquilo (C^— C^^} trifluorometilo, ciclo-alquilo (C^-Ο^θ), arilo (C^ e °P“ cionalmente substituído por 1 a 3 membros do grupo que consis te em halogêneo, nitro, amiiio, dimetilamino, hidroxi, meti Io, trifluorometilo, carboxi, fenilo e /ãlquil (C^-C^)-carbonil7amino} e um grupo aromático heterocíclico no qual até 3 átomos de carbono do sistema aromático podem suportar um grupo substituinte independentemente seleccionado de um grupo que consiste em halogêneo e trifluorometilo} e

   R^ ê hidrogénio ou metilo caracterizado por

   A) para um composto de fórmula I, oxidar—se um álcool correspondente de fórmula 111

   R'^?. S(0₂).NH. CO-, fazer-se reagir um composto correspondenIII

   91 te de fórmula IV

   -··'· —^ϊϊλϊ,,ν.

   IV em que

   R’ ê carboxi (cujo composto é designado, daqui em diante, como ”ácido de fórmula IV”) com um derivado de sulfonamida de fór mula R . SOg.NHg na presença de um agente de desidrataÇao ou fa zer reagir um derivado reactivo de um ácido de fórmula IV com uma sulfonamida, ou um sal correspondente, de fórmula r⁵,so₂·NH } ² 4 (B-l) para um composto de.fórmula I em que R tem o valor e

   R .S(0 ).NH.CO-, fazer-se reagir um derivado reactivo de um ácido da referida fórmula IV com um sal de metal alcalino de uma sulfonamida seleccionada de fórmula R^.SOg.NH^ num solven te ou diluente adequado}

   4 5

   C) para um composto de fórmula I em que R tem o valor R ·CO.

   NH.S(O_)-, fazer-se reagir um composto correspondente da refe ² 7 * rida fórmula IV na qual R* tem o valor HgN.S(0₂)- com um ácido de fórmula R^.COOH}

   4 5

   D) para um composto de fórmula I em que R tem o valor R ·ΝΗ. CO.NH. S(0 )-, fazer-se reagir um composto correspondente da
2. 2 7 fórmula IV referida na qual R' tem o valor HgN.S(0₂)- com um isocianato de fórmula R⁵.NCO}

   E) para um composto de fórmula I em que R^ tem o valor R^.S(0_).NH.CO.NR^-, fazer-se reagir um composto correspondenre ² 7 6 da referida fórmula IV na qual R^Z tem o valor HNR - com um ς

   sulfonil-isocianato de fórmula R ·S(O_rt).NCOi “ 4 5 (E-l) para um composto de fórmula I em que R tem o valor R .6 6

   S(O_).NH.CO.NR -, em que R ê hidrogénio, fazer-se reagir um ² 7 composto correspondente de fórmula IV referida na qual R* tem c

   o valor -NCO com uma sulfonamida de fórmula R .S(0 ).NH }

   4 z

   F) para um composto de fórmula I em que R tem o valor CF^.S(0 ).NH-, fazer-se reagir uma amina correspondente da referi

   7 “* da fórmuala IV na qual R' tem o valor HgN- com anidrido trifluoro-metano-sulfónico}

   92 —

   G) para um composto de fórmula I em que A tem o valor —CO, ligar-se um acido de fórmula R -Ir-COOH (ou um derivado reacti vo correspondente) com uma amino-cetona da fórmula V e depois,quando ê necessário um sal farmaceuticamente aceitável, fazer-se reagir uma forma ácida do composto de fórmula I com uma base para proporcionar um catiao fisiologicamente acei tável.

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por um substituinte opcional, quando Q é orto-fenileno, ser seleccionado de um grupo que consiste em flúor, cloro, bromo, nitro, um grupo amino de fórmula NR®R^h, um grupo acilamino de fórmula -NHCOR^m, hidroxi, um grupo aciloxi de fórmula -OCORⁿ, metoxi, etoxi, propoxi, idopropoxi, .t-butoxi, metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-propilo, ^fc-butilo, trifluoro-metilo, carboxi, ciano, metoxi-carbonilo, etoxi—car bonilo, t-butoxi-carbonilo, um grupo amino-carbonilo de fórmu la -CONR^PR% sulfo, sulfonamido de fórmula S0₂NR¹R^J, hidroxi-metilo, 2-hidroxi—etilo e 1,1-dimeti1-hidroxi-metilo, em que cada R®, R^h· R*, R^, R™, R^P e R^q ê independentemente seleccio nado de um grupo que consiste em hidrogénio, metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-propilo e t.-butilo e Rⁿ ê seleccionado de um grupo que consiste em metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-propil- e t-butilo} cada R e R ê independentemente seleccionado de um grupo que consiste em hidrogênio, nitro, um grupo amino de fórmula -NR^R , um grupo aciloxi de fórmula -OCORⁿ, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi t.93 -

   Ç^SaeHBSBSE,, butoxi, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, 2-metil-propilo, t-butilo, trifluoro-metilo, carboxi, ciano, metoxi-carbonilo, etoxi-carbonilo, ,t-butoxi-carbonilo, um grupo ami no-carbonilo de fórmula CONR^PR% hidroximetilo e feniio em que o feniio opcionalmente suporta um ou dois substituintes escolhidos de um grupo que consiste em flúor, cloro, bromo, nitro, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, t—butoxi, metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-propilo, t-butilo, e trifluorome tilo em que cada R®, R » R^P e R^ é independentemente seleccio nado de um grupo que consiste em hidrogénio, metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-propilo e t-butilo, e Rⁿ é selec cionado de um grupo que consiste em metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-propilo e t-butilo}

   R ser seleccionado de um grupo que consiste em metilo, etilo, propilo, isopropilo, .t-butilo» 4-metil-pentilo, trifluoro metilo, ciclopropilo, ciclopentilo, ciclohexilo» norbomilo, adamantilo, feniio, naftilo (no qual um substituinte opcional no feniio ou naftilo ê flúor- Cloro, bromo, nitro, amino, dimetilamino, hidroxi, metilo, trifluorometilo, carboxi, feniio, formilamino, acetilamino, 2-metil-propanoilamino ou 2,2-dimetil-propanoil-amino) furilo, tienilo, piridilo e pirimidinilo opcionalmente substituído no grupo aromático heterocíclico por flúor, cloro, bromo ou trifluorometilo} e

   L ser seleccionado de um grupo que cohsiste em jp-fenileno, m-fenileno, metileno, etan-l,2-diilo, etan-1»1-diilo, propan-1,
3. 3-diilo, propan-1,2-diilo» propan-2,2-diilo, butan-l,
4. 4-diilo, 2-metil-propan—2,3”diilo, 2-metilpropan-1,2-diilo, pentan-l,5-diilo, eten-1,2-diilo, propen-1,2-diilo, propen-1,3-diilo, buten-1,4-diilo, but-2-en-l,4-diilo, penten-1,5-diilo, 3,3~dimetilpropen-l, 3-diilo , £-fenileno-metilo , 2-(j3-fenileno)etilo, 2-(ja-fenileno )-2-propilo e 2-(j3-fenileno)etenilo.

   - 3^a Processo de acordo com a reivindicação 2, cara cterizado por um subetituinte opcional em Q, quando Q ê o-fenileno, ser cloro, dimetilamino, acetilamino, hidroxi, acetoxi, metoxi, metilo, trifluorometilo, carhoxi, ciano, metoxi-carbonilo, etoxi-carbonilo, amino-carbonilo, metilamino-carbonilo, dimetilamino-carbonilo, amino—sulfonilo, dimetilamino -carbonilo, amino-sulfonilo, dimetilamino-sulfonilo ou hidroximetilo 5 cada R^a e R^b ser independentemente seleccionado de um grupo que consiste em hidrogénio, dimetilamino, acetoxi, metoxi,metilo, trifluorometilo, ciano, metoxi-carbonilo, amino-carboni Io, metil-a»ino-carbonilo, dimetilamino-carbonilo, hidroximetilo, fenilo, clorofenilo, metoxi-fenilo, e trifluoro-metilfe nilo }

   R⁴ ser R⁵.S(O_).NH.CO-, R⁵.S(0.).NH.CO.NR⁶-, ou CF SO NH -} e & * j 5

   R⁵ ser seleccionado de um grupo que consiste em metilo, etilo isopropilo, ciclopropilo, ciclopentilo, fenilo, clorofenilo, bromofenilo, trifluorometil-fenilo, 1-naftilo, 2—tienilo, 2-piridilo e cloro-piridilo}

   R⁶ ser hidrogénio}

   A ser -CO—} e

   L ser js-fenileno, etano-l,2-diilo, eten-l,2-diilo, ja-fenileno-metilo ou 2-(]>-fenileno) etenilo.

   - 4a Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por um substituinte opcional em Q ser hidroxi, me toxi, carboxi, metoxi-carbonilo, amino-carbonilo ou hidroxi-metilo}

   R^a e R^ serem hidrogénio}

   R^ ser metilo} isopropilo, fenilo ou 4-cloro-fenilo} e L ser ja-fenileno.

   - 5a 95 -

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto seleccionado de um grupa que inclui um benzoxazol em que X ê oxigénio e Q é orto-fenileno, um oxazol em que X ê oxigénio e Q é um grupo cis-vinile no de fórmula -C(R^a)»C(R^)-, um benzotiazol em que X ê enxofre e Q ê orto-fenileno, e um tiazol em que X ê enxofre e Q um grupo cis-vinileno de fórmula -C(R^a)=C(R^)- e em que um gru po orto-fenileno pode opcionalmente suportar um ou dois substi tuintes independentemente seleccionados de um grupo que consiste em halogéneo, nitro, um grupo amino, de fórmula -NR®R , hidroxi, acetoxi, alcoxi (C^-C^), alquilo (C^-C^), trifluorometilo, carboxi, /alcoxi (C^—C^) /carbonilo, sulfo e uma sulfonamida de fórmula SO^NR^R*³, e em que cada R^a e R^ é indepen dentemente seleccionado de um grupo que consiste em hidrogénio, nitro, um grupo amino de fórmula -NR^sR^h, alcoxi (C^-C^), alquilo (C^-Cg), trifluorometilo, carboxi, ciano, /alcoxi (C^-C^) 7 carbonilo, e fenilo suportando opcionalmente um ou dois substituintes escolhidos de um grupo que consiste em halogéneo, nitro, alcoxi alquilo (C^-C^) e trifluorome tilo, cada R , R , R¹ e R^J ê independentemente seleccionado de um grupo que consiste em hidrogénio e alquilo (C^-C^)j A é seleccionado de um grupo que consiste em -CO-, -NH.CO- e -O.COJ

   L é seleccionado de um grupo que consiste em fenileno, alcano-diilo (C^-Cg), alquenodiilo ^e fenileno-alquilo (C^-C^), contendo opcionalmente uma dupla ligaÇao na parte al quilo, na condição de que uma dupla ligaÇao de um alquenodi#* ilo ou uma dupla ligaÇao opcional de um grupo fenileno-alquilo nao esteja directamente ligada a um átomo de oxigénio ou de azoto do grupo Aj e

   R é seleccionado de um grupo que consiste em acil—sulfonami— da de fórmula r\ S(0₂).NH. CO-, acilsulfonamida de fórmula r\ S(O_rt).NH.CO-, acilsulfonamida de fórmula r\ CO.NH. S(0 )-» ² 5 ² sulfonilureia de fórmula R .NH.CO.NH.S(0 )- e sulfonilureia c 6 ² de fórmula R · S(0 ).NH. CO.NR - em que
5. 5 \ R^ ê seleccionado de um grupo que consiste em alquilo (C^—C^, trifluorometilo, ciclo-alquilo (CyC₁₀), arilo (Cg e C-^θ) opcionalmente substituído por 1 a 3 membros seleccionados de um grupo que consiste em halogêneo, nitro, amino, dimetilamino, hidroxi, metilo, trifluorometilo, carboxi, fenilo e /alquil (C.—C_) carboni l7amino> e um grupo aromático heterocí clico no 15 qual até 3 átomos de carbono do grupo aromático heterocíclico pode suportar um grupo substituinte independentemente seleccionado de um grupo que consiste em halogêneo e trifluorometi lo } e

   A hidrogénio ou metilo} e sais de adiçao de base farmaceuticamente aceitáveis correspondentes·

   Processo de acordo com a reivindicação 1, ca— racterizado por se obter um composto seleccionado de um grupo que consiste em»

   a) um benzoxazol em que X ê oxigénio e Q_;ê ja-fenileno como de finido em i) na definição de Q}

   b) um oxazol em que X é oxigénio e Q é cis-vinileno como defi nido em ii) na definição de Q}

   c) um benzotiazol em que X ê enxofre e Q ê o.-fenileno como de finido em i) na definição de Q} e

   d) um tiazol em que X é enxofre e Q é cis-vinileno como defiA* ·* nido em ii) na definição de Q, e sais de adiçao de base farmaceuticamente aceitáveis correspondentes.

   _ 7a Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1, 2, 3, 5 e 6 caracterizado por X ser oxigénio} R ser

   R⁵.S(O_n).NH.CO- ou R⁵.S(0 ).NH.CO.NR⁶-} L ser p-fenileno} A ² 5 ² ser —CO—} e R? ser 4—clorofenilo.

   97 ~

   - 8b Processo de acordo com a reivindicação 4, ca4 5 racterizado por X ser oxigénio» R ser R^.S(O ).NH.CO-} L ser e fenileno» A ser -CO-} e R^ ser 4-clorof enilo.

   - 9^a A*

   Processo de acordo com a reivindicação 1» caracterizado por se obter um composto seleccionado de um grupo que consiste em!

   i) /4-/™(4-clorofenil)sulfonilamino-carbonil7benzoil7-L-valil-N-/l(5-hidroxi-benzoxazol-2-il)carboni1-2-metiI-propil7-L-prolinamida} ii) /4-/” (4-clorofenil)sulfonilamino-carbonil7benzoil7-L-vali1-N-/1- /5-(amino-carboni1)b enzoxa zo1-2-iI)carboni1-2«» «M

   -meti1-propil7-L-prolinamida} e iii) (4-clorofenil)sulfonilamino—carbonil7benzoi l7-L-vali 1-N- /Ϊ-/5-(hi droxime t i1)b enzoxa zo1-2-il7carboni1-2-metilpropil7-L-prolinamida} e sais de adiçao de base farma ceuticamente aceitáveis correspondentes.

   - 10a Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um sal com uma base que forma um ca** \ * tiao fisiologicamente aceitavel.

   - lia —

   Processo para a preparaçao de uma composição

   - 98 farmacêutica caracterizado por se incorporar uma quantidade, que inibe a elastase dos leucócitos, de um composto de fórmula I ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, quando pre parado de acordo com a reivindicação 1 em associaçao com um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

   A requerente declara que os primeiros pedidos desta patente foram apresentados no Reino Unido em 11 de Maio de 19Ô7, e em 11 de Fevereiro de 19θ&, sob os n^s 87IIO5O e 8803206, respectivamente.