PT84841B

PT84841B - Processo para a preparacao de composicoes farmaceuticas contendo acidos gordos nao saturados apropriadas para a sintese de prostaglandinas e hidroxiacidos gordos em sistemas biologicos

Info

Publication number: PT84841B
Application number: PT84841A
Authority: PT
Inventors: Klaus-Ulrich Weithmann
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1986-05-09
Filing date: 1987-05-08
Publication date: 1990-02-08
Also published as: DK167518B1; JPS62267222A; EP0244832A3; DE3779958D1; US5043328A; EP0244832A2; AU7264187A; KR950008306B1; PT84841A; DK235687D0; ZA873299B; ATE77549T1; CA1302266C; AU603574B2; HU201671B; DE3615710A1; EP0244832B1; KR870010867A; HUT44433A; ES2051705T3

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

Certos ácidos gordos várias vezes não saturados com cadeias de comprimento longo ou os seus ésteres e outros derivados têm importância como materiais de partida para a preparação catalisada por enzimas de prostaglandinas e hidroxiácidos gordos. Assim, por exemplo, podem-se obter preparati vamente com o auxílio de células ou de homogeneizados de celu las ou de fracções de células especialmente a partir dos subs tractos de ácidos díhomogamalinolenico, de acido araquidonico ou de ácido eicosapentanoico por via bioquímica, produtos esses preparáveis apenas por processos químicos muito despendio sos. Ho caso dessas maneiras de proceder preparativas realiza -se a estimulação da formação da prostaglandinas pretendidas. Isso pode conseguir-se mediante adiçao de cofactores enzimati

- 1 cos apropriados. Mas os ácidos gordos mencionados podem-se também utilizar para fins medicionais se, por exemplo, se ensaiar clinicamente a capacidade de células de corpo, ou homogeneizados de células ou fracções de células (por exemplo, queratinócitos; células dos vasos sanguíneos obtidas por biog sia; células ou homogeneizados da medula dos rins) para metabolisarem os referidos ácidos gordos ou para reagirem de modo a obterem-se prostaglandinas com determinada actividade bioló gica. Nesses casos medicinais verifica-se a unicidade das prostaglandinas formadas mas pode-se verificar também que se estimule a formação das prostaglandinas que servem como substâncias medicinais.

A presente invenção refere-se a novas composições farmacêuticas armazenaveis que contêm ácidos gordos varias vezes não saturados de cadeia de comprimento longo, com o auxílio dos quais se podem preparar de maneira vantajosa prostaglandinas e hidroxiácidos gordos que podem ser utilizadas para as finalidades mencionadas.

já se sabe que a reacção de ácidos gordos várias vezes não saturados tais como ácido araquidónico podem ser es timulados por enzimas que sintetizam prostaglandina com o auxílio de determinados cofactores e também portanto se pode es timular a síntese completa de determinadas prostaglandinas. Por exemplo, em Biochemical Pharmacology 31 (1982) 3591 descreve-se um sistema in vitro que faz reagir o ácido araquidónico com o auxílio da enzima proveniente de testículos de car neiro com ou sem adição dos cofactores glutationa e hidroquinona. Na referida referência bibliográfica, menciona-se que a reacção é acelerada pelos meáafonados cofactores. Em Bife Sciences 26 (1980) 765 descreve-se um sistema semelhante cons tituído por ácido araquidónico, homogeneizado da medula de rins de coelho, glutationa e hidroquinona.

A Requerente descobriu que para as finalidades a cima mencionadas se podem preparar composições reagentes aquo sas que contêm os ácidos gordos várias vezes não saturados combinados com cofactores enzimáticos estimulantes. As referi, das composições são não só novas mas possuem também proprieda des inesperadas. Como se indica pormenorizadamente mais abaixo, estes agentes estimulantes alteram sem qualquer excepção a possibilidade de armazenagem dos ácidos gordos de maneira surpreendente. Eles podem, ao fim de um curto intervalo de tempo formar nitidamente mais produtos da decomposição e da alteração do ácido araquidónico de maneira inesperada no seio de composições de ácido araquidónico que contêm glutationa e hidroquinona como acontece nas composições que não contêm estes aditivos. Estes produtos secundários são muito reactivos e podem inesperadamente originar também reacções secundárias biológicas. Os respectivos ensaios mais completamente descritos abaixo mostram que a síntese das prostaglandinas pode tam bem ser estimulada por misturas que contem ácidos gordos várias vezes não saturados tais como ácido araquidónico em conjunto com outros compostos que contêm enxofre como ácido dissulfureto lipónico ou os tióis redutores homocisteína e cisteína ou os seus derivados acilados no átomo de azoto, em que de acordo com a presente invenção se formam muito menos produ tos secundários indesejados. Isso é surpreendente porque com outros compostos de enxofre que derivam de compostos existentes na natureza ou naturais, tais como coenzima A, ou os seus produtos de decomposição ou de hidrólise cisteamina e panteteína, ou o ácido dihidrolipónico, cistina e compostos de mono tiol-açúcar ou de politiol açúcar, como ditiotreitol ou ditio eritrite, não se puderam obter estes efeitos vantajosos. Na parte experimental refere-se que as reacção secundarias indesejadas podem ser suprimidas de maneira completa por adição do ácido lipónico e proponderantemente suprimidas mas não com pletamente suprimidas por adição dos outros compostos que con têm enxofre de acordo com a presente invenção.

Ja se sabe que a reacção do ácido araquidónico

ou a sístese de determinadas prostaglandinas também pode ser estimulada não só por adição de substancias que não contêm en xofre, por exemplo, como acima se citou, com o auxílio de hidroquinona mas também com fenol, adrenalina, nor adrenalina, triptofano, 5-hidroxitriptofano e ácido ascórbico. Surpreendentemente a Requerente descobriu que a decomposição indeseja da de ácidos gordos várias vezes não saturados, por exemplo, de ácido araquidónico, acelerada de maneira considerável por estes agentes estimuladores no seio de meios aquosos. A utili zação de, por exemplo, 2-butanol ou de piridina em vez de água, r actua de maneira desestabilizante adicionalmente, enquanto utilizando dimetil-sulfóxido ou etanol ou polióis tais como glicerina ou polietilenoglicol, os produtos secundários indesejados surpreendentemente nao se formam. Dissolventes orgâni cos têm o inconveniente de desnaturarem as enzimas; eles devem portanto ser eliminados da reacção enzimática ou diluídos com água. Os resíduos que se obtêm depois da eliminação do dissolvente, que consistem em uma mistura íntima de ácido gor do não saturado com agente estimulante, são surpreendentemente ainda instáveis. Até ao presente ainda não se referiu na literatura que composições farmacêuticas aquosas surpreendentemente vantajosas para a estimulação da síntese da prostaglandina com metiozina podem ser obtidas. Como se menciona na I parte experimental, as composições que contêm ácidos gordos não saturados e tirosina ou compostos semelhantes de tirosina, surpreendentemente são completamente estáveis.

Mas também se pode estabilizar completamente mis, turas aquosas ou soluções aquosas de ácido gordo não saturado e de outros agentes estimulantes acima mencionados por adição de lípidos solúveis em água ou emulsionáveis em água ou de proteínas que, por exemplo, se podem preparar a partir de san gue humano ou de sangue de animais mamíferos como albumina do soro ou globulinas como gammaglobulina ou proteínas que contêm porfirina como hemoglobina, metemoglobina ou citocrome. De acordo com a presente invenção são também apropriadas vita minas da série E assim como flavonóides, em especial aqueles

com uma parte de açúcar, por exemplo, Rutina ou Troxerutina (para a nomenclatura veja-se The Merck índex” 10® . Edição 1983, Rahway, N.J., USA), enquanto pelo contrário açúcares sem a parte de flavona como ramnoglucose, glucose e sorbite não estabilizam. Mas surpreendentemente também podem-se prepa rar as composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção com o auxílio de ciclodextrinas.

No que diz respeito a estabilização com albumina de soro sabe-se na realidade que as albuminas podem ligar-se a ácidos gordos com o comprimento de cadeia comprida ao nível baixo de energia mas é surpreendente que os ácidos gordos ligados desta forma se comportem nas composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção como ácidos gordos dissolvi dos livres, isto é, que possam ser feitos reagir enzimaticamente de maneira não impeditiva. Também já se referiu (veja-se por exemplo Journal of Biological Chemistry 253 (1978) 5061), que as enzimas da síntese da prostaglandina Ham e ouΛ/ Z tras porfirinas estão ligadas como grupos prosteticos. Mas pa ra esse efeito são necessárias apenas quantidades mínimas de enzimas que contêm porfirina que não têm qualquer actividade de estabilização sobre as quantidades adicionadas de ácido gordo não saturado. Na literatura não se encontra qualquer in dicação de que, com uma grande parte das proteínas que contêm porfirina, se pode preparar um reagente estabilizado para estimular a síntese da prostaglandina catalisada enzimaticamente.

As composições estáveis que contêm ácidos gordos com 20 a 22 átomos de C com respectivamente 3 ou mais ligações duplas e como agentes estabilizadores até 30% era peso de fosfolípidos, por exemplo, lecitina, são descritas na Patente Alemã DE 34 197996 Al. Essas composições farmacêuticas estáveis podem usar-se igualmente em combinação com os agentes es timulantes já mencionados de acordo com a presente invenção.

to conveniente que às composições farmacêuticas de ácidos gor dos não saturados com 18 ate 22 átomos de C se misture mais do que 30% em peso de fosfolípido, por exemplo, lecitina porque então se obtêm misturas mais estáveis. É vantajosa uma composição farmacêutica que contem ate 90% em peso de fosfoli pido, de preferência, 50 a 80% em peso de fosfolípido. Em vir tude da sua actividade medicinal prefere-se uma composição que contém os ácidos gordos com 18 átomos de C de acordo com a presente invenção. Uma composição farmacêutica que contém ácidos gordos não saturados com uma porção maior do que 30% em peso de fosfolípidos já foi reivindicada como produto dietético (Patente Europeia 0 148303 Al). Os efeitos de estabili zação dos fosfolípidos sobre os ácidos gordos não saturados não são mencionados na Patente Europeia ΞΡ 0 0148303 A. Nela não se encontra também qualquer referência ao facto de que as composições farmacêuticas reivindicadas no presente pedido de patente que consistem em ácidos gordos não saturados, fosfoli pidos e agentes estimulantes sejam vantajosamente apropriadas para as utilizações reivindicadas no presente pedido de paten te, especialmente para as utilizações medicinais reivindicadas.

São portanto objecto da presente invenção misturas ou soluções de substâncias solidas ou liquidas que contêm

A) um ou mais ácidos gordos não saturados, caracterizados por conterem três até cinco ligações duplas colocadas isoladamente e 18 até 22 átomos de carbono colocados em cadeia linear, que podem ser metilados ou etilados num ou dois átomos de carbono nas posições 2, 3, 4, 16, 17, 18, 19 ou 20, sob a forma de ácidos carboxilicos livres com o grupo terminal -COgH ou sob a forma de um radical amida de acido carboxilico ou -OOgX em que X significa um grupo de protec, ção eliminável em condições acidas com por exemplo um radi cal alquilo, por exemplo, um radical etilo ou propilo ou um 1-lisofosfolípido ou 2-lisofosfolípido, por exemplo, 2- 6 -

-lisolecitina ou um oatião metálico ou um catião amina ou a forma catiónica duma resina de permuta de iões,

B) como agentes estimulantes e com actividade parcialmente es tabilizadora simultânea, um ou mais compostos dos seguintes grupos:

B^) um composto fenólico da fórmula (I)

R·

OH

3 na qual os radicais R e Ir significam grupos hidroxilo ou η átomos de hidrogénio e R^x significa o radical -OH, -CO^H,

= -H ou -COpH , R⁵ = -H ou -¾ e R⁶ = -H, -CH_q ou -0₉Η_ς, B₂) um derivado de indol da fórmula (II)

II na qual significa um átomo de hidrogénio ou um grupo g Λ / q

-COOH, R significa um atomo de hidrogénio ou -NHrj e R^ . - £

significa um átomo de hidrogénio ou -OH, cisteína ou homocisteína ou ácido lipónico, cujo radica alquilo acíclico pode ser encurtado ate quatro grupos de metileno,

- 7 B^) um peptido que consiste no máximo em 10 aminoácidos, em que um ou mais dos aminoácidos pode ser substituído respectivamente por um dos compostos de acordo com B^) até b₃),

B^) um composto de acordo com B^) até B^) que pode possuir um grupo alcanoilo em C-^-C^ num átomo de N,

Bg) um derivado de flavona que é substituído por pelo menos um grupo hidroxilo que pode possuir um radical de açúcar,

B₇) wn^sal das foxraas iónieas dos compostos de acordo com Β_χ) ate Bg) e eventualmente

Βθ) um composto de ácido carboxílico de acordo com B^) até

By) que pode ser esterifiçado com um radical alcóxi ou es tá presente sob a forma de carboxamida que pode ser monoalquilado ou dialquilado;

C) como agentes estabilizadores, um ou vários compostos dos seguintes grupos de compostos.·

C-jP dimetilsulfóxido, álcool etílico, glicerina, etilenoglicol, polietilenoglicol ou triacetato de glicerina,

Cg) fosfolípidos, lípidos de açúcar, ciclodextrinas, proteínas por exemplo, os que se podem preparar a partir de sangue humano ou de animais mamíferos ou vitaminas da série Ξ, sob a forma de uma composição armazenavel para a síntese de prostaglandinas e de hidroxiácidos gordos em sistemas biológicos.

Como catiões metálicos X podem-se utilizar por exemplo os catiões dos metais alcalinos como lítio, sódio e po tássio e dos metais alcalino-terrosos como magnésio e cálcio mas também formas catiónicas de outros metais como alumínio, zinco e ferro, eventualmente quelatizados com ácido oítrico, ácido etilenodiaminotetracético e semelhantes. Como catiões de amina interessam os catiões de aminas primárias, secundárias e terciárias como as alquilaminas, por exemplo, mono-,

di- e trimetil- ou -etil, -propil-, -isopropil-, -butil-, -is£ butil-, -t-butil-, assim como N-(metil-hexil)-, N-metil-hexil, benzil-, β -fenil-etilamina, etilenodiamina, dietilenotriamina, pirrolidina, piperidina, morfolino, piperazino, mono-, di- e trietanolamina, etildietanolamina, N-butiletanolamina, tris-(hidroximetil)-aminometano e semelhantes, são sais de amina apropriados por exemplo os sais da triptamina, cisteína assim como os sais básicos de amina da lisina e da arginina. Os catiões amónio quarternário apropriados são por exemplo um ív Z Z dos catioes tetrametilamonio, tetraetilamonio e benziltrimetilamonio. Estes catiões podem também ser utilizados para a formação do sal das formas aniónicas dos compostos de acordo com B^) até B_g), ao passo que para a formação de sais das for mas catiónicas são preferidos cloreto e fluoreto.

De preferência, fazem-se reagir enzimaticamente os ácidos gordos com as seguintes designações 18:2 vJ-6, 20f :4uU-6, 22:50/-6, 18:3u/-3, 20:5u/-3, 22:6uJ-3, 18:3^-6, 20:3U/-6, 22:4^-6 e 22:4u/3, em que na nomenclatura o primei ro numero significa o número de átomos de carbono; o numero depois dos dois pontos significa o número das ligações duplas; e o número depois do u/ significa a posição da primeira liga ção dupla que se encontra a partir da extremidade de metilo da molécula. Os produtos de determinados ácidos gordos são já conhecidos e sabe-se igualmente ainda que, por utilização de determinados agentes estimulantes, se pode aumentar a velocidade da reacção do ácido gordo não saturado assim como a formação de determinados produtos. Como se indica mais pormenori zadamente na parte experimental, a presente invenção possibilita estimular de maneira vantajosa a formação de determinados produtos de ácidos gordos. Depende assim completamente do estabelecimento dos objectivos que se pretende atingir a maneira como se escolhe a composição da formulação de acordo com a presente invenção relativamente ao tipo do ácido gordo não saturado, ao tipo do agente estimulante mas também ao tipo do agente estabilizador usado.

Sempre que como agentes estimulantes se escolham aminoácidos ou peptidos, podem-se utilizar tanto as formas L como as formas D assim como as misturas das formas D e L.

Os agentes estimulantes da formula (I) com R = = R- = -H e R = -CHg-CHÍNHg J-COgH, assim como os peptidos que contêm estes ácidos ou acido lipónico, cujas cadeias laterais podem ser encurtadas, assim como flavonoides, têm a vantagem especial de aumentarem a possibilidade de armazenagem dos áci dos gordos mesmo sem a adição cie outros agentes estabilizado> res.

As quantidades dos ácidos gordos não saturados a utilizar nas composições farmacêuticas de acordo com a presen te invenção dependem também da utilização pretendida. Para a obtenção preparativa de prostaglandinas pode dividir-se em porções todas as quantidades desejáveis da composição farmacêutica. Para a preparação de composições reagentes de acordo com a presente invenção que servem para a utilização nos tratamentos clínico-quimicos ou seja por exemplo para o ensaio da capacidade de células ou de componentes de células tais co mo células sanguíneas ou material de biopsia dos rins, dos pulmões, do estômago, etc., em reagir e formar ácidos gordos não saturados ou sintetizar prostaglandinas com determinada acçao biologica bastam as misturas reagentes de acordo com a presente invenção que contêm 5 mg até 1 pg, de preferência, 100 jig até 1 ng de ácido gordo não saturado. Os reagentes podem encontrar-se sob a forma de suspensão ou de solução por exemplo em água, etanol, etilenoglicol, polietilenoglicóis ou glicerina ou misturas destes dissolventes. Depois de se elimi nar o dissolvente, os reagentes encontram-se sob a forma de misturas. A eliminação dos dissolventes orgânicos é especialmente necessária para a utilização das misturas de reagentes na realização de reacções catalisadas por enzimas in vitro.

Os sistemas enzimáticos que se podem obter a par- 10

f tir de material biologico para a preparaçao de prostaglandinas são em si conhecidos. Também se sabe que, de acordo com o z tipo e a origem do material biologico se podem sintetizar diversas prostaglandinas. Os reagentes de acordo com a presente invenção podem ser utilizados para a preparação destas prosta glandinas. Para esse efeito, mistura-se uma solução ou uma suspensão ou um homogeneizado do material biológico com as composições de acordo com a presente invenção e incuba-se a mistura procedendo de maneira conhecida. Por escolha do estimulante pode controlar-se a síntese de determinadas prostaglandinas dentro uma certa proporção. Os produtos de ácidos gordos indesejados tais como tromboxano ou leucotrianos podem ser inibidos por adição de inibidores de tromboxano e inibido res de lipoxigenase de acordo com o estado actual da técnica. Se o ácido gordo não saturado do reagente se encontra sob a fornia ligada, por exemplo, como éster, então existe a preocupação de transformá-lo na forma livre antes ou durante a reac Z çao enzimatica, eventualmente por meio de enzimas da lipase existentes no material biológico ou por adição de lipase-enzi mas apropriadas ou já antes da reacção enzimatica por hidroli se química mediante os processos conhecidos. Depois da extrac ção da prostaglandina formada ou das prostaglandinas formadas com o auxílio de um agente de extracção apropriado, por exemJ pio, acetato de etilo, pode obter-se a prostaglandina pretendida sob a forma pura, por exemplo, por processos cromatográficos conhecidos como cromatografia em fase líquida sob eleva da pressão. As proporções entre as quantidades dos componentes de acordo com a presente invenção nas composições podem variar dentro de largos limites. Eles dependem do tipo do áci do gordo não saturado, do agente estimulante ou do agente estabilizador empregado e também da utilização prevista. A proporção em peso entre o ácido gordo não saturado (expresso como ácido livre) e o agente estimulante está em geral compreendida entre 50 e 0,1, de preferência, entre 20 e 0,5. A quantida de do agente estabilizador adicionado é determinada de tal mo do que a sua proporção em peso expressa em relação ao ácido

gordo livre não saturado está compreendida entre cerca de 0,5 e 100, de preferência, entre 1 e 15 e, em especial, entre 2 e cerca de 8 ate 10.

Os sistemas biológicos podem ser tratados também ”in vivo” com as formulações de açodo com a presente invenção medicinalmente apropriadas e, na realidade, de maneira mais vantajosa do que é possível com os componentes individuais das composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção. Na verdade, uma administração sistémica (por exemplo, por via intravenosa) das composições de acordo com a presente invenção não é revestida de interesse porque os ácidos gordos não saturados podem ser metabolizados antes de atingirem o lo cal de actuação. Pelo contrário, podem ser atingidas directamente por exemplo as células da pele, da boca, do esófago, do nariz, dos olhos, do estômago e do intestino e do canal respi ratório e brônquios.

Os estados de deficiência de prostaglandina em se. res humanos ou animais por exemplo, no canal estômago-intesti nos, que por exemplo originam uma secreção do suco gástrico perturbada ou lesões gastro-intestinais (úlceras), podem ser tratadas por exemplo utilizando as composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção sob a forma de formas de me dicamentos oMs (perorais). 0 intestino pode também ser trata do com formas de medicamentos revestidos entéricamente (insolúveis no suco gástrico). Se se pretender conseguir a soltura das fezes por exemplo no caso de prisão de ventre, podem-se também usar as formas de medicamentos para a terapia rectal enquanto para a eliminação das dores por exemplo para se iniciar o processo do parto, se podem utilizar formas de medicamentos apropriadas para a terapia intravaginal. Perturbações da função da pele e da zona dos tecidos que fica por baixo de la podem ser tratadas por composições farmacêuticas dérmicas de acordo com a presente invenção. As composições para administraçao por via oral e os supositorios para a terapia em se

res humanos são formadas de tal modo que por unidade de dosagem elas contenham entre 0, 5 e 2000 mg, em geral, entre 2 e 1000 mg e de preferência entre 5 e 250 mg. Nas doenças especialmente resistentes a terapia, por exemplo, no caso de prisões de ventre persistentes, prevê-se também a utilização de uma unidade de dosagem com até 6000 mg ou mais de ácido gordo não saturado.

Surpreendentemente, os ácidos gordos de cadeia li near de acordo com a presente invenção com 18 e também ainda os ácidos gordos com 22 átomos de 0 são igualmente produtos terapêuticos activos para as úlceras do estômago-intestinos tal como os que contêm 20 átomos de C. Este facto tem uma grande importância medicinal porque originam poucas acções se cundárias como diarreia. Uma terapia apropriada consiste por exemplo na administração de uma, duas ou mais, de preferência, três ete seis dosagens unitarias por dia com a substância de acordo com a presente invenção, em que a quantidade necessária depende do numero das unidades de dosagens iguais e também da doença a tratar e uma dosagem por exemplo pode consistir também em várias unidades de dosagem individuais administradas simultaneamente.

Sabe-se que, como actividades secundárias indesejáveis de determinados medicamentos, podem verificar-se incom patibilidades gastro-intestinais que originam úlceras gastro-intestinais. Para inibição ou para a terapia desses danos da mucosa gastro-intestinal são igualmente apropriadas as composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção. 0 tra tamento com as composições farmacêuticas pode fazer-se tanto antes como também simultaneamente ou ainda depois da administração dos medicamentos que atacam as mucosas. É especialmente vantajoso combinar os reagentes de acordo com a presente invenção com os medicamentos que atacam as mucosas do estorna go de maneira a obter-se uma formulação farmacêutica apropria da. Neste caso, os componentes podem encontrar-se tanto sob a forma compartimentada como também sob a forma de mistura. Conhecem-se inúmeros medicamentos que originam lesões gastro-in testinais ou incompatibilidades com o estômago. Eles compreen dem agentes anti-reumáticos (anti-flogísticos esteróides e não esteróides) e também corticosteróides (por exemplo, Gorti sona), derivados do ácido salicilico (por exemplo, acido acetilsalicílico, Diflunisal) ou ácidos fenilalcanóicos (por exemplo, Piroxicam, Acemetacin, Pimetacin, Hambumeton, Carprofen, Priprofen, Fenclofenac, Sulindac, Indometacin, Fenoprofen, ácido tiaprofénioo, Tolmetin, Flurbiprofen, Suprofen, In doprofen, Tbuprofen, ITaproxen, Alclofenac, Ketoprofen, Diclofenac) ou pirazolonas (Penilbutazona, Metamizol), e ainda medicamentos para diminuir a pressão do sangue (por exemplo, Re. serpina), agentes vasodilatadores à base de xantina (por exem pio, pentoxifilina), agentes anti-tuberculoses (por exemplo, Rifampicin) ou agentes citostáticos (por exemplo, Methohexat),

As composições de acordo com a presente invenção utilizadas medicinalmente como preparados farmacêuticos podem conter as substâncias auxiliares e veiculares farmaceuticamen te usuais que são apropriadas para medicamentos activos para a administração por via oral e dérmica (por exemplo, também nasal, sub-lingual, rectal e intra-vaginal). Eles compreendem por exemplo amido, sacarose, sulfato de cálcio, gelatina, pas. ta de amido, xarope, amido de trigo e de milho, acido esteári co, estearatos, açúcar, sacarina, componentes nutritivos para animais tais como gorduras, hidratos de carbono, proteínas e substancias sólidas minerais; agentes conservantes, agentes edulcorantes, agentes corantes, agentes apaladantes ou agentes auxiliares da suspensão, óleos de origem mineral e vegetal com óleo de amendoim, azeite, óleo de nachtkerzen”, soja, girassol, algodão, peixe e sésamo ou fracções destes óleos, assim como agentes detergentes ionicos e também não ionicos (por exemplo, como se descreve mais adiante), substâncias con servantes e agentes anti-fungicos como parabenes, clorobutanol, álcool benzílico, fenol, Timerosal, agentes isotónicos

- 14 como açúcar ou cloreto de sodio. Os ácidos orgânicos varias vezes não saturados podem também ser adsorvidos em polidextra no ou geles de poliacrilamida, de alquil-sulfato ou de alquil -fosfato ou em hidróxido de aluminio ou acido silisico, ou ser misturados com eles.

As composições apropriadas para a administração por via dérmica são, por exemplo, soluções ou suspensões aquo sas, alcoólicas ou que contêm poliois, soluções ou suspensões oleosas, pós para o subsequente processamento de modo a obter -se uma forma utilizável dermicamente após a adição do veiculo necessário. As soluções ou suspensões são formuladas com os agentes auxiliares e veiculares farmaceuticamente necessários, que por exemplo, contêm gorduras, ceras, vaselinas ou parafina e com agentes conservantes, agentes auxiliares da suspensão e dispersantes e agentes isotonicos comp por exemplo metil-parabenes e propil-parabenes, cloreto de sódio, polietilenoglicóis, em especial, polietilenoglicol 4000, sal de sódio de carboximetilcelulose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, oleato de sorbimacrogol, produtos de condensação de óxido de etileno com ácidos gordos, por exemplo, estearato de polioxietileno ou com álcoois gordos como por exemplo heptadecaetilenoxicetanol ou com ésteres parciais como por exemplo monooleato de polioxietileno-sorbite ou hexitanos que derivam de sorbite como por exemplo monooleato de poliexietileno-sorbitano. Preparam-se suspensões em meios oleosos dispersando a substância activa nos óleos acima mencionados. Estas suspensões podem conter substancias que prolongam a absorção como por exemplo monoestearato de alumínio. Uma composição farmacêutica seca, por exemplo, liofilizada que se pode misturar com um veículo farmacêutico apropriado no momento pretendido representa uma outra forma de realização. Os preparados contendo a substância activa como por exemplo comprimidos, cápsulas, supositórios, xaropes, soluções, suspensões e elixi res contêm as substâncias auxiliares farmacêuticas qne tornam os preparados apropriados para estas formas de administração e se obterem as acções medicinais pretendidas. As misturas de

acordo com a presente invenção são misturadas com as substâncias auxiliares farmacêuticas tais como lactose, amido, goma de acácia, gelatina, talco e semelhantes e processadas de maneira a obterem-se cápsulas, comprimidos e formas semelhantes ou massas para supositórios correntes por exemplo as que são à base de trigliceridos como por exemplo massas para supositó rios de Witepsol (H.P. Piedler, Lexikon der Hilfsstoffe fúr Pharmazie, Kosmetik und. angrenzende Gebiet, 1971, Volume 9, pág. 548-50 e 632-634) ou para supositórios intra-vaginais (Patente Norte-Americana N^s 263026 e Patente Norte-Americana Ns 663145); eventualmente álcoois gordos; hidrocarbonetos sólidos como vaselina ou parafina solida; ácidos gordos saturados como ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, áci do esteárico; agentes emulsionantes como trigliceridos etoxilados, óleos vegetais polietoxilados; esteres de açúcar de ácidos gordos; silicon.es; gelatina; metilcelulose; hidroxiproZ poxicelulose; hidroxipropilcelulose; polietilenoglicois; poli vinilpirrolidona; álcool polivinílico; ácido poliacrílico e os seus sais contendo ou com água, agentes auxiliares da suspensão, sacarose, agentes conservantes ou agentes veiculares hidro-álcoolicos e as misturas transformadas em suspensões, soluções ou elixires. Pode pretender-se que 0 ácido gordo não saturado se liberte lentamente ou retarâadamente a partir da composição farmacêutica. Uma tal libertação retardada pode conseguir-se procedendo de maneira correspondente ao estado actual da técnica. Depende do valor do pH do meio biológico 0 facto de se conseguir realizar a libertação retardada com por exemplo poliestireno ou derivados de ácidos poliacrílico (Eudragit ^)) ou por exemplo por ligação a uma resina permutado, ra de iões apropriada. Podem-se também preparar composições farmacêuticas recobertas entericamente tais como comprimidos, cápsulas, pílulas, esferas ou micro-esferas. Elas têm a forma de unidades de dosagem, por exemplo, a forma de comprimido ou de cápsula individual ou a forma de um conjunto de pilulas, z micro-esferas ou micro-gotas que possuem propriedades entéricas e actuação prolongada. Essas composições farmacêuticas re

cobertas entericamente e as substancias de recobrimento nelas utilizadas são descritas na literatura, por exemplo, nas memo rias descritivas da Patente Norte-Americana N⁹ 20 93 462 e da Patente Norte-Americana N⁹ 21 96 768 (acetato-ftalato de celu lose), da Patente Norte-Americana N⁹ 28 97 121 (copolímeros de estireno e de ácido maleico), da Patente Norte-Americana N⁹ 30 81 233 e outras.

Parte Experimental

Método 1: Ensaio da possibilidade de armazenagem dos ácidos gordos não saturados nas composições farmacêuticas

Ensaia-se a actividade de estabilização das substâncias sobre oa ácidos gordos várias vezes nao saturados pro. cedendo da seguinte forma:

Ensaio A para as substancias solúveis em água

Dissolve-se 0,125 mg do acido gordo não saturado ou do seu sal de Na (vejam-se as tabelas) (araquidonato de so dio, Pa. Sigjna Munchen, Alemanha) em 0,05 ml de agua. A esta solução adiciona-se 0,2 ml de solução aquosa que contem 2 mg de agente estabilizador e adicionalmente 2 mg de agente estimulante, mistura-se (veja-se Tabela 1), retira-se imediatamen te uma amostra com 0,1 ml, extraí-se e analisa-se (veja-se adiante). Podem-se usar outros procedimentos de acordo com a Modificação 1 ou a Modificação 2.

Modificação 1 para soluções aquosas

Depois de incubação a 37°0 durante 24 horas retira-se novamente 0,1 ml, extrai-se e analisa-se (veja-se mais adiante).

Modificação 2 para misturas sólidas (liofilizadas)

Liofiliza-se a solução de ensaio, incuba-se o lio

filizado a 37 °C durante 24 horas e, em seguida, dissolve-se na quantidade prévia de água, retira-se uma amostra de 0,1 ml, extraí-se e analisa-se (ver mais abaixo).

Ensaio B para as substâncias não solúveis em água

Dissolve-se 0,125 mg de ácido gordo não saturado (ácido araquidonico; ácido 5,8,11,14,17-eicosapentanoicoj áci do 8,11,14-eicosatriencico, Fa. Sigma, Munchen) em 0,05 ml de etanol ou sulfoxido de dimetilo. A essa solução adiciona-se 0,2 ml de etanol (ou de sulfóxido de dimetilo) que contém 2 mg de agente estabilizador e pode conter adicionalmente 2 mg do agente estimulante (veja-se Tabela 1), retira-se imediatamente 0,1 ml e extraí-se e analisa-se como se refere mais abaixo. 0 tratamento posterior realiza-se procedendo de acordo com a Modificação 1 ou a Modificação 2.

Modificação 1 para soluções

Depois de uma incubação de 24 horas a 37°C retira -se de novo uma amostra de 0,1 ml, mistura-se com 0,1 ml de água, extraí-se e analisa-se.

Modificação 2 para misturas sólidas

Elimina-se o dissolvente da solução restante, incuba-se a 37°C durante 24 horas, dissolve-se de novo em 0,15 ml de dissolvente, retira-se uma amostra de 0,1 ml, mistura-se com 0,1 ml de água, extrai-se e analisa-se.

Extracção e análise

Misturam-se as amostras obtidas com 0,05 ml de sç> lução aquosa 1,2 molar de ácido citrico, extraí-se por duas vezes com 0, 5 ml de acetato cte’ aceÈLo de cada vez, elimina-se o acetato de acetilo dos extractos depois de reunidos, e dissolve-se o resíduo em 0,8 ml de metanol e analisa-se por cro• matografia em fase liquida de alta pressão (HPBC) (coluna Rad

Pak C-18 100 x 8 mm àa Pa. Waters, Konigstein, Alemanha, 1,5 ml/minutos; agente diluente 800 ml de metanol, 200 ml de água e 0,1 ml de ácido acético glacial). Controla-se a separação com um detector de ultra-violetas à venda no comércio a 206 mm.

Método 2; Síntese da prostaglandina

Mistura-se 0, 3 ml de tampão de fosfato de potássio de pH = 8,0 com 0,5 mg de enzima (sob a forma de vesículas de testículos de carneiro) (Biochemistry 10 (1971) 2372) ou de homogeneizado da medula interior dos rins (Bife Sciences 26 (1980) 765), 2,75 jug de ácido araquidonico de C 14 (0,5 |uCi) e 0, 5 mg de agente estimulante e eventualmente 0,5 mg de substância estabilizante (veja-se Tabela 1). Depois de 10 minutos de incubação a 37 °C, in.terrompe-se a reacção com 0,05 ml de solução 1,2 molar de ácido cítrico, extraí-se por duas vezes com 0, 5 ml de acetil-acetato de cada vez, elimina·

-se o dissolvente dos extractos depois de reunidos, dissolve-se o resíduo em 0,2 ml de metanol, diluí-se na proporção de 1 í 1 com água e separa-se por HPLC (coluna Nucleosil 0-18,

125 x 4,6 mm, Pa. Bischoff, Leonberg, Alemanha; agente diluen te 300 ml de acetolitrilo, 700 ml de água, 1 ml de ácido acético glacial e depois de 30 minutos metanol puro). A. separação das fracções radioaotivas é seguida com um monitor (LB 504 da Pa. Berthold, Wildbad, Alemanha). Os produtos formados tais como por exemplo ó-ceto-prostaglandina-Fgaifa» prostaglandina Eg, prostaglandina-F_2a]_f_a> prostaglandina Dg, são se paradas nestas condições.

Tabela 1

Estimulação da formação de prostaglandina em composições farmacêuticas contendo ácidos gordos est: bilizadas

Determinou-se quantitativamente as quantidades de

- 19 prostaglandina PGEg, ^®2alfa ^e obtidas como produtos do ácido araquidónico com o auxilio do método 2 e a soma é desig nada como prostaglandina total” e considerada como 100%. A quantidade de prostaglandina total obtida sem adição de agente estimulante foi designada f=l; as quantidades obtidas depois de estimulação são designadas F=2 ou F=3 e significam correspondentemente uma estimulação dupla ou tripla nas condi ções do Método 2, A estabilidade da amostra foi ensaiada com o auxílio do Método 1 (coluna da direita). Sem a utilização de adições (coluna da direita: A) permanecem nestas condições em solução aquosa 25 - 28% do ácido araquidónico. Valores maiores do que 25 - 28% significam portanto uma estabilização; valores inferiores a 25 - 28% correspondem a uma desestabilização. 0 Exemplo IP 1 realizou-se sem utilização de agentes estimulantes. Os efeitos de acordo com a presente invenção ob têm-se com as composições estabilizadas dos exemplos correspondentemente designados. As substâncias ensaiadas relativamente à sua estabilização (as quantidades são indicadas no Me todo 1) foram: A) solução aquosa sem adição de agentes estabi lizantes; B) solução etanólica sem qualquer outra adição; 0) solução de piridina; D) com .Rutina pré-dissolvida em sulfóxido de dimetilo e depois com sulfóxido de dimetilo eliminado; E) tal como B) com lecitina e etanol eliminado; F) como A) com citocromo proveniente do coração de cavalo (Pa. Boehringer, Mannheim, Alemanha); G) como A) com metamoglobina (humana) (Fa. Sigma, Múnchen, Alemanha); H) como A) com albumina de soro de vitela (Fa. Calbiochem, Frankfurt, Alemanha); J) como A) ou B), muito embora se tenha eliminado o dissolvente; K) como J) com citocromo c., L) como J) com hemoglobina (huma na) (Fa. Behringwerke, Behringwerke, Marburg, Alemanha); M) como J) com albumina de soro humano (Fa. Behringwerke, Marburg, Alemanha).

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Coenzima A 1,0

1) - 3): Em vez de ácido araquidónico empregou-se 1) acido

5, 8,11,14,17-eicosapentanóico e 2) ácido 8,11,14-eicosatrianóico e 3) ácido 9,12,15-linolénico.

4) Gama-globulina de lebre (Fa. Calbiochem, Frankfurt)

Tabela 2

Ensaios das propriedades de acordo com a presente invenção de vitaminas, flavonoides, ciclodextrinas e compostos de açúcar-lípidos. Os ácidos gordos utilizados na experiência de estabilização sao indicados dentro de parêntesis (A = ácido araquidónico; E = ácido 5,8,11,14,17-eicosapentanóico)

Produto de ácido araquidónico

Exem Agente Prosta pio estimulante glandi N⁹ . na total re 1ativa (Método 2)

PGE^ ^^2alfa ^s^QUilização (0 de ácido gordo não saturado que se mantém de acordo com o Metodo 1)

Vitaminas não de acordo com a pre sente invenção

47) Vitamina Q10 0,8 8

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48) Vitamina B12 (A) (A)

49) Vitamina C	1 0% (A)
Vitaminas de acordo com a presente invenção 50) DL-alfa-Tocoferol					78%	(A)
51) D-alfa-Tocofe-
ril-quinona Flavonóides que contêm açúcar de acordo com a presente in venção	0,5	80	5	15	98%	(A)
52) Rutina	6	76	6	18	97% 96%	(A) (B)
53) Riloridizina	3	80	2	18	97%	(B)
54) Naringina Flavonoides sem o agrupamento de açúcar de acordo com a presente invenção	2	83	2	15	96%	(A)
55) Naringenina	1,5	80	0	20	96%	(A)
56) Kampferol	0,5	76	11	13	98%	(Ξ)
57) Quercetina	0,3	72	18	10	92%	(Ξ)

58)	Catequina	0,2	70	18	12	90$	(A)
59)	Epicatequina	0,15	71	17	12	89$	(A)
60)	Hiloretin	0,15	76	11	13	97$	(A)
61)	Morina	0,08	54	27	19	100$	(E)

Todos os flavonóides ensaiados estabilizam os ácidos gordos várias vezes não saturados. De acordo com a presente invenção, os flavonóides que contêm açúcar são especialmente apropriados porque estimulam a formação da prostaglandina. Especialmente para a utilização ”in vitro” de acordo com a presente invenção são utilizados os flavonóides sem parte de açúcar li geiramente menos apropriados porque inibem a síntese da prostaglandina.

Ciclodextrinas de acor do com a presente invenção

62) alfa-Dextrina (Ciclo-hexamilose)

63) beta-Dextrina (Ciclo-heptamilose)

64) gamma-Dextrina (Cicloctamilose)

Lipidos (Pa. Serva, Heidelberg)

65) Palmitato estearato de sacarose 7 SPS-7

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66) Palmitato estearato de sacarose 15 SPS-15

67) Sulfossuccinato de dioetilo

Sal de Na

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Exemplos de composiçoes estáveis de acordo com a presente invenção incluindo composições farmacêuticas

Exemplos 68) até 70)

Em condições estéreis dissolvem-se 50 mg de araquidonato de sódio, 500 mg de albumina de soro de vitela e 500 mg de L-tirosina em 10 ml de água bidestilada e, igualmente em condições estéreis, guarda-se num frasco castanho. Depois de 6 semanas de armazenagem ã temperatura ambiente, encontram -se ainda 93, 5% do ácido araquidónico originariamente existen te, enquanto a mesma solução de araquidonato de sódio sem adi tivos ao fim deste tempo não continha já ácido araquidónico (teor <0, 8 %). A solução estabilizada preparada desta forma z e ) Exemplo 68) embalada numa ampola bebivel para finalidades medicinais;

Exemplo 69) misturada com 15 mg de vesículas seminais de carneiro, incubada a 37°C durante 60 minutos e a prostaglandina formada foi imediatamente extraída e separada por cromatografia preparativa como se descreveu Método 2; ou

Exemplo 70) utilizada para a determinação clinica-bioquímica da tendência para a formação de tromboses em pacientes para o que se mistura 0,01 ml desta soluz çao de araquidonato de sodio estabilizada com 1 ml de plasma de sangue enriquecido em plaquetas li sado e, depois de 30 minutos d.e incubação a 25°C,

extraído. A prostaglandina Dg formada (Método 2) serve como una medida para a tendência para a trombose dos pacientes.

Exemplo 71) em 15 ml de sulfoxido de dimetilo introduzem-se 100 mg de ácido 5,8,11,14,17-eicosapentanóico e 500 ml de Rutina, elimina-se completamen.te o sulfóxido de dimetilo e transforma-se o resíduo em conjunto com cristais de ácido acetilsalicílico (500 mg de R 95 D, Rohm Pharma, Darmstadt, Alemanha) em cápsulas de gelatina do tamanho 0 (Pa. Kapsugel, Basel, Suiça).

Exemplo 72) em 10 ml de água bidestilada introduzem-se sob agitação 1 g de L-alfa-lecitina, beta, gama-dipalmitoilo (Pa. Oalbiochem GmbH, Prankfurt/Main, Ale manha), 100 mg de ácido araquid,ónico, 100 mg de ácido lipónico e 100 mg de acetato de DL-alfa-toco ferol (Pa. Aldrich, Steinheim, Alemanha) e homoge neiza-se por meio de tratamento com ultra-sons.

Exemplo 73) moem-se 170 ml de amido de trigo, 450 mg de lacto, se, 20 mg de estearato de magnésio, 5 mg de araquidonato de sódio, 10 mg de triptofano e 20 mg

Troxerutin (Pa. Aldrich, Steinheim, Alemanha), mistura-se intimamente e transforma-se em compri· midos por prensagem.

Exemplo 74) misturam-se intimamente por moagem 150 mg de amido de trigo, 435 mg de lactose, 15 mg de estearato de magnésio, 5 mg de araquidonato de sódio e 15 mg de ácido lipónico e transforma-se em compri midos por prensagem.

Exemplo 75) em 3,5 ml de água bidestilada dissolvem-se 10 mg de araquidonato de sódio com 20 mg d.e serotonina e 100 mg de hemoglobina (reduzida, Pa. Oalbiochem

GmbH, Prankfurt, Alemanha), e liofiliza-se a solu ção. D resíduo pode ser processado em unidades de

- 34 dosagem embaladas em cápsulas (cápsulas de gelati na do tamanho 0,Fa. Kapsugel, Basel, Suiça).

Exemplo 76) em 2 ml de agua tomam-se 15 mg de acido 8,11,14-eicosatrianóico com 50 mg de N-acetil-cisteina e 100 mg de citocromo c de coração de cavalo (Fa. Aldrich, Steinheim, Alemanha).

Exemplo 77) em condiçoes estereis, em 50 ml de água (bidestila da) tomam-se, 40 mg de ácido araquidónico com 180 mg de beta-ciclodextrina e 60 mg de 5-hidroxitri^ tamina.

Exemplo 78 a-f) preparam-se 6 misturas a, b, c, d, e, f que em 1 ml de etanol contêm respectivamente 0,7 mg de acido araquidónico e a) 1, b) 5, c) 10, d) 25,

e) 50 ou f) 100 mg de ácido lipónico. Depois de se eliminar o etanol, estas misturas podem manter -se pelo menos durante 12 dias a 37°C. A determinação de acordo com o Método 2 demonstrou a presença das misturas depois de 12 dias de ainda 99 í 2% de ácido araquidónico.

Exemplo 79) - 82) toma-se 0,125 mg de ácido araquidónico em 0,25 ml de água que contém respectivamente 5 ou 25 ou 50 ou 75$ em peso de sulfóxido de dimetilo e incuba-se a 37°D. Depois de 24 horas, realiza-se a extracção e a análise. Uma análise tipica demonstrou os seguintes valores

		% de sulfóxido de dimetilo	% de ácido araquidónico
Exemplo	79)	5	54
Exemplo	80)	25	75
Exemplo	81)	50	83
Exemplo	82)	75	94

Exemplo 83) em 5 ml de triacetato de glicerina dissolvem-se sob agitação 2 g de ácido araquidónico assim como 1 g de tirosina e mistura-se uniformemente a 30°C por tratamento com ultra-sons.

Claims

Processo para a preparação de composiçoes farmacêuticas contendo ácidos gordos não saturados apropriadas para a síntese de prostaglandinas e hidroxiacidos gordos em sis. temas biológicos e para o tratamento de estados de deficiência de prostaglandina em seres humanos ou animais, em especial, para o tratamento ou profilaxia de doenças do canal gas. trointestinal, caracterizado por se incorporar

A) um ou mais ácidos gordos não saturados com três a cinco li gações duplas isoladas e com 18 a 22 átomos de carbono cons tituindo uma cadeia linear que pode ser metilada ou etilada num ou dois átomos de C das posições 2, 3, 4, 16, 17, 18, 19 ou 20, sob a forma de ácido carboxílico livre com o grupo -COgH na extremidade da cadeia ou sob a forma de car boxamida ou -GO_?X em que X significa um grupo de protecção eliminavel em condiçoes acidas ou um grupo 1-lisofosfolipi do ou 2-fosfolípido ou um catião metálico ou de amina ou a forma catiónica duma resina permutadora de iões com

B) como agente estimulante com simultaneamente actividade esta bilizadora, um ou mais compostos dos seguintes grupos:

B^) um composto fenólico da fórmula I

- 36 «» *
2 3 no qual os radicais R e R significam grupos hidroxilo ou η * hidrogénio e κ significa o radical -OH, -C0₂H, -CHg-COOH, -CH=C0₂H, -CHg-CHR^R⁵, -CHOH-GH₂-NH-R , em que R.^ = —H ou -C0₂H e R⁵ = -H ou 1¾ e R⁶ = -H, -CHg ou -CgHg,

B₂) um derivado de indol da fórmula II

II
7 ^z 8 na qual R significa hidrogénio ou -COOH, R significa hiz Q ^z drogenio ou ~NH₂ e R significa hidrogénio ou OH,

Bg) cisteína, homocisteína ou ácido lipóico cujo radical alquilo acíclico pode ser encurtado até quatro grupos metile no,

B^) um peptido que consiste em dez aminoácidos no máximo, em que um ou mais aminoácidos são substituídos respectivamente por um dos compostos B^) B₂)ou B^),

Bg) um composto aminado de acordo B^)até B^) em que um átomo de N pode serrsubstituido por um grupo alcanoilo em

Bg) um derivado de flavona que é substituído por no mínimo um grupo hidroxilo que pode possuir um radical de açúcar,

Βγ) um sal das formas iónicas dos compostos de acordo B^) a Bg) e eventualmente

Βθ) um composto de ácido carboxilico de acordo com B^) a Βγ) que pode ser esterificado com um radical alcoxi ou encontrar-se sob a forma de carboxamida que pode ser monoalquilada ou dialquilada; e com

C) como agente estabilizador, um ou mais compostos dos seguin tes grupos

C^) dimetilsulfoxido, etanol, poliois ou ésteres de poliois,

Cg) fosfolípidos, açúcar-lípidos, oiclodextrinas, proteínas, citocrómios da série C ou vitaminas da série E e com uma substância veicular sólida ou líquida, de preferência numa proporção em peso entre o ácido gordo não saturado (expresso como ácido livre) e o agente estimulante compreendida entre 20 e 0,5 e numa proporção em peso entre o ácido gordo não saturado compreendida entre cerca de 1 e cerca de 15· l Processo de acordo com a Mvindicação 1, caracte- rizado pelo facto de os poliois ou os ésteres de poliois a em pregar como agentes estabilizadores do grupo C^) serem glicerina, etilenoglicol ou triacetato de glicerilo.

Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte. rizado pelo facto de, como ácidos gordos de grupo A), se empregarem ácidos gordos 18:2 uj -6, 20:4 -6, 22:5^-$, 18:

:3u/ -3, 20:5 -3, 22:6 \k/-3, 18:3 -6, 20:3^-6, 22:4^-6 ou 22:4W-3 ; como agentes estimulantes do grupo B), compostos

2 3 z j da fórmula I, em que .ív e R-= hidrogénio e significa o ra dical -CHg-CHÍNHgJ-COOH ou peptidos que contêm esses compostos, ou ácido lipóico cuja cadeia lateral pode ser encurtada até 4 grupos CHg ou um derivado de flavona e não ser necessária a adição dum agente estabilizador do grupo C).

- 4a -

Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte rizado pelo facto de os agentes estabilizadores do grupo C) serem betadextrina, lecitina, proteínas preparáveis a partir de sangue humano ou de mamíferos ou citocrómios da série 0.

- 5^S -

Processo de acordo com as reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo facto de, como derivados de flavona conten. do açúcar, se empregarem Rutina ou Troxerutina.

—6s —

Processo de acordo com a reivindicação 4, caracte rizado pelo facto de, como agentes estabilizadores do grupo C) se empregarem hemoglobina, met-hemoglobina, globulin.a ou albumina de soro.

_ 7a _

Processo de acordo com as reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo facto de, como ácidos gordos do grupo A) se empregar ácido araquidonico, ácido 5, 8,11,14,17-eicosapen.tanóico, ácido 8,11,14-eicosatrienoico ou ácido 9,12,15-linolénico.

Processo de acordo com as reivindicações 1 a 7,

- 39 caracterizado pelo facto de a proporção em peso entre o acido gordo não saturado do grupo A) e o agente estimulante do grupo B) estar compreendida entre 50 e 0,1.

Processo de acordo com a reivindicação 8, caracte rizado pelo facto de a proporção em peso entre o ácido gordo não saturado e o agente estimulante estar compreendida entre 20 e 0, 5·

- 106 Processo de acordo com as reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo facto de a proporção em peso entre o ácido não saturado do grupo A) e o agente estabilizador do grupo 0) estar compreendida entre 100 e 0,5.

- lia Processo de acordo com a reivindicação 10, caracte rizado pelo facto de a proporção em peso entre o ácido não sa turado e o agente estabilizador estar compreendida entre 15 e

1.

- 12§ _

Processo de acordo com as reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo facto de se conferir à composição farmacêu tica uma forma apropriada para administração dérmica, oral, perorai ou como supositórios.

- 13^a Processo de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo facto de, por unidade de dosagem unitária, a • · 4 composição farmacêutica possuir entre 0, 5 e 2000 mg, de preferência» entre 5 θ 250 mg de ácido gordo não saturado.

A requerente declara que o primeiro pedido desta patente foi depositado na Republica Federal Alemã, em 9 d.e Maio de 1986, sob o n^s P 36 15 710.4.