HU201671B - Process for producing active ingredient mixture and pharmaceutical compositions comprising unsaturated fatty acids necessary for the synthesis of prostaglandins and hydroxy fatty acids in biological systems - Google Patents

Process for producing active ingredient mixture and pharmaceutical compositions comprising unsaturated fatty acids necessary for the synthesis of prostaglandins and hydroxy fatty acids in biological systems Download PDF

Info

Publication number
HU201671B
HU201671B HU872088A HU208887A HU201671B HU 201671 B HU201671 B HU 201671B HU 872088 A HU872088 A HU 872088A HU 208887 A HU208887 A HU 208887A HU 201671 B HU201671 B HU 201671B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
trp
fatty acids
hydrogen
acid
unsaturated fatty
Prior art date
Application number
HU872088A
Other languages
German (de)
English (en)
Other versions
HUT44433A (en
Inventor
Klaus Ulrich Weihmann
Original Assignee
Hoechst Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst Ag filed Critical Hoechst Ag
Publication of HUT44433A publication Critical patent/HUT44433A/hu
Publication of HU201671B publication Critical patent/HU201671B/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás prosztaglandinok és hidroxi-zsírsavak biológiai rendszerekben történő szintéziséhez szükséges telítetlen zsírsavakat tartalmazó hatóanyag keverék és gyógyszerkészítmények előállítására.
A hosszúszénláncú és többszörösen telítetlen zsírsavak, illetve észtereik és más származékaik kiindulási anyagként jelentősek a prosztaglandinok és hidroxi-zsírsavak enzimkatalizált előállításánál. így például sejtek vagy sejt homogenizátumok, illetve sejt frakciók segítségével különösen dihomogammalinolénsavból, arachidonsavból vagy eikózapenlaénsavból biokémiai majd preparatív úton állíthatók elő az egyébként csak költséges kémiai eljárással előállítható termékek. Az ilyen preparatív megoldásoknál a kívánt prosztaglandin képződés fokozását kell elérni. Ezáltal történhet, hogy ha megfelelő enzimkofaktorokat adagolunk. Az említett zsírsavakat azonban orvosi célokra is alkalmazhatjuk, például klinikailag megvizsgáljuk, hogy rendelkeznek-e a testsejtek, illetve scjlhomogcnizátumok vagy sejtfrakciók [például keratinociták vagy a véredények biopsiával nyert sejtjei, a vesevelő sejtek vagy homogenizátum(ok)] olyan képességgel, hogy az illető zsírsavat metabolizálják, illetve bizonyos biológiai hatású prosztaglandinokká alakítják. Ez esetben nem a képződött prosztaglandin egységessége a lényeges, hanem az a cél, hogy gyógyászati mennyiségű prosztaglandin képződését segítsük elő.
A jelen találmány szerint új, tartós készítményeket állítunk elő, amelyek hosszúszénláncú többszörösen telítetlen zsírsavakat tartalmaznak, és amelyek segítségével előnyösen olyan prosztaglandinokat és hidroxi-zsfrsavakat állíthatunk elő, amelyek a fenti célokra alkalmazhatók.
Ismeretes, hogy a többszörösen telítetlen zsírsavakat, például arachidonsavat, prosztaglandin szintetizáló enzimekkel, bizonyos kofaktorokkal stimulálhatjuk és ezáltal konkrét prosztaglandinok szintézisét is fokozhatjuk. így például a Biochemical Pharmacology 31 (1982) 3591 irodalmi helyen in vitro rendszert írnak le, amelyben az arachidonsavat a bárány ondóhólyagjából nyert enzim segítségével glutation és hidrokinon kofaktorok hozzáadásával vagy anélkül reagáltatják. Ugyanitt a 3595. oldalon leírják, hogy a reakciót a megadott kofaktorok gyorsítják. Egy hasonló rendszert, egy aiachidonsavból, és a nyúl vesevelőjéből kapott homogenizátum, glutationból és hidrokinonból álló rendszert írnak le a Life Sciences 26 (1980) 765-ös oldalán.
A találmány szerint a fenti célra olyan vizes készítményt állítottunk elő, amely többszörösen telítetlen zsírsavakat tartalmaz stimuláló enzim-koíaktorokkal kombinálva. Az új készítmények nemcsak újak, hanem nemvárt tulajdonságokat is mutatnak. Mint azt alább részletesen kifejtjük, ezek a stimulátorok meglepő módon kivétel nélkül megváltoztatják a zsírsav eltarthatóságát, így igen rövid időn belül lényegesen több nemkívánatos bomlási és átalakulási termék képződhet az arachidonsavból a glutationt, illetve hidrokinor.t tartalmazó arachidonsav készítményekben, mint olyan készítményeknél, amelyek ezeket az adalékokat nem tartalmazzák. Ezek a melléktermékek reakcióképesek, és nemkívánatos biológiai mcllékreakciókat válthatnak ki. Az alább közelebbről leírt saját vizsgálataink azt mutatja!;, hogy a prosztaglandin szintézis olyan keverékekkel is stimulálható, amelyek többszörösen telítetlen zsírsavakat, például arachidonsavat tartalmaznak más kéntartalmú vegyülettel, mint például a liponsavdiszulfiddal, vagy redukált tiolokkal, homociszteinnel és ciszteinnel, illetve ezek nitrogénen acilczctt származékaival együtt, miközben a találmány szerint sokkal kevesebb nemkívánatos melléktermék képződik. Ez azért meglepő, mert ezt a célt a természetben előforduló vagy a természetes vegyületekből levezethető kénvegyületekkel, például a koenzim A-val, illetve annak hasítási vagy hidrolízis termékeivel, például ciszteaminnal és panteteinnel, illetve dihidro-liponsavval, cisztinnel és mono- vagy politiol-cukorvegyülelekkel, például ditio-treitollal, illetve ditio-critrittcl nem lehet elérni. A kísérleti részben részletezzük, hogy a nemkívánt mellékreakciókat a liponsav hozzáadásával teljesen elnyomhatjuk, más találmány szerinti kéntartalmú vegyületek hozzáadásával jelentősen, de nem teljesen nyomhatjuk el.
Ismeretes, hogy az arachidonsav reakcióját, illetve bizonyos prosztaglandinok szintézisét kent nem tartalmazó anyagok hozzáadásával is elősegíthetjük, péládul a fenti idézett hidrokinon segítségével, továbbá fenollal, adrenalinnal, noradrenalinnal, troptofánnal, 5-hidroxi-triptofánnal és aszkorbinsavval. Meglepő módon most azt találtuk, hogy a többszörösen telítetlen zsírsavai;, például arachidonsav, nemkívánatos szétesése vizes közegben ezen stimulátorok hozzáadásával jelentősen gyorsítható. Például víz helyett 2-butanoí vagy piridin alkalmazásával további destabilizáló hatás érünk el, míg dimetil-szulfoxid, illetve etanol, illetve poliolok, például glicerin vagy polietilén-glikoí alkalmazásánál a nemkívánatos melléktermékek meglepő módon nem jelennek meg. A szerves oldószerek azonban azzal a hátránnyal rendelkeznek, hogy denaturálják az enzimeket, így tehát az enzimreakció előtt ezeket el kell távolítani vagy vízzel kell hígítani. Az oldószer eltávolítása után a fennmaradó maradékok, melyek telítetlen zsírsav és stimulátor elegyéből állnak, meglepő módon ismét nem stabilok. Még nem volt leírva, hogy meglepően előnyös vizes készítmények állíthatók elő tirozinnal a prosztaglandin szintézis elősegítésére. A kísérleti részben részletezzük, hogy a telítetlen zsírsavakat és tirozint vagy tirozinhoz hasonló vegyületeket tartalmazó készítmények meglepő módon teljesen stabilak.
Azonban telítetlen zsírsavból és más fent megadott stimulátorokból álló vizes elegyek, illetve oldatok teljesen stabilizálhatok, mégpedig vízoldékony vagy vízben nem oldható lipidek, vagy például emberi vagy emlős vérből előállítható proteinek, például szérumálbumin vagy globulinok, például gammaglobuüa vagy porfirintartalmú proteinek, például hemoglobin, methemoglo’oin vagy citokrom hozzáadásával. A találmány szerint vitaminok is alkalmazhatók, mégpedig az E sorozatból, valamint flavonoiílok, különösen cukortartalmú flavonoidok, például rutin vagy troxeruLin (a nomenklatúrát illetően lásd „The Merck Index” 10. kiadás, 1983. Rahway, N.J. Amerikai Egyesült Államok). Ezzel szemben a flavonrész nélküli cukrok, például ranmoglukóz, glukóz és szorbit, nem rendelkeznek stabilizáló hatással. Ciklodextrinek segítségévei azonban a találmány szerinti készítmények meglepő módon előállíthatok.
A szérumalbuminokkal végzett stabilizálás tekintetében ismert ugyan önmagában, hogy az albuminok energetikailag alacsony szinten képesek megkötni a hosszúszénláncú zsírsavakat, annál meglepőbb azonban, hogy az ily módon megkötött zsírsavak a találmány szerint előállított készítményekben mint szabad oldott zsírsa-23
HU 201 671 Β vak viselkednek, azaz enzimesen akadály nélkül reagáltathatók. Már leírták, 0ásd például Journal Of Biological Chemistry 253 (1978) 5061), hogy a prosztaglandin szintézis enzimei prosztetikus csoportokként hemet vagy más porfirineket tartalmaznak megkötve. Ehhez csak kis mennyiségű porfirin tartalmú enzimre van szükség, amelyek a hozzáadott mennyiségű telítetlen zsírsavakra nem gyakorolnak egyáltalán stabilizáló hatást. Az irodalomban nem található utalás, miszerint egy nagyobb porfirin tartalmú proteinnel az enzimkatalizált prosztaglandin szintézis elősegítését szolgáló stabilizált reagens volna előállítható.
2-22 szénatomos 3 vagy több kettőskötést tartalmazó zsírsavakból és legfeljebb 30 t% foszfolipid, például lecitin stabilizátort tartalmazó stabil készítmények a 34 197996 Al. sz. NSZK-beli közzétételi iratban szerepelnek. Ezeket a stabil készítményeket szintén alkalmazhatjuk a fent megnevezett stimulátorokkal kombinálva a találmány szerint.
A kísérleti részben részletezzük, célszerűbb azonban hogyha a 18-22 szénatomos telítetlen zsírsavakból álló készítményeket több mint 30 tömeg% foszfolipiddel, például lecitinnel elegyítjük, mert ekkor stabilabb elegyeket állíthatunk elő. Előnyös, hogyha legfeljebb 90 tömeg% foszfolipidet, előnyösen 50-80 tömeg% foszfolipidet tartalmazó készítményt alkalmazunk. A gyógyászati hatások tekintetében előnyös egy olyan készítmény, amely 18 szénatomos találmány szerinti zsírsavakat tartalmaz. Már javasoltak egy olyan készítményt diétetikumként, amely telítetlen zsírsavakat és több mint 30 tömeg% foszfolipidet tartalmaz (0 148303 Al. sz. Európai Szabadalmi Bejelentés). Ebben a bejelentésben azonban nem írták le a foszfolipidek stabilizáló hatását a telítetlen zsírsavakra. Arra sem történt utalás, hogy a jelen találmány szerinti készítmények, melyek telítetlen zsírsavakból, foszfolipidekből és stimulátorokból állnak, előnyösek lennének a jelen találmány szerinti felhasználáshoz, különösen a gyógyászat területén.
A jelen találmány szerint tehát olyan szilárd vagy folyékony keveréket vagy oldatokat állítunk elő, melyek
a) egy vagy több 18 : 2 ω-6, 20 : 4 ω-6, 22 : 5 có-6, : 3 ω-3, 20 : 5 ω-3, 22 : 6 ω-3, 18 : 3 ω-6, : 3 ω-6, 22 : 4 ω-6 vagy 22 : 4 ω-3 jelölésű zsírsavat,
b) stimulátorként részben egyidejűleg stabilizáló hatású egy vagy több következő vegyületet:
b 1) egy (I) általános képletű fenol-vegyületet ahol R2 hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, R3 hidrogénatom és R1 az alábbi csoportok egyike
OH, CO2H, CH = CH-COOII, CHOH-CHr-NHR6 - ahol R* hidrogénatom vagy CH3 vagy R’ lehet még CH2CH(COOH)-NH2, CH2CH2-R4R5 - ahol R4 hidrogénatom vagy COOH és R5 jelentése hidrogénatom vagy NH2 vagy CHzCHÍCONH^NH-CO-CHj, b 2) (II) általános képletű indol-származékot, ahol R7 hidrogénatom vagy COOH, R8 hidrogénatom vagy amincsoport, R’ hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, b3) ciszteint, N-acetil-cisztcint, glutationt vagy liponsavat b 4) a következő összetételű peptidet
Trp-Trp, Gly-Trp-Gly, Trp-Ala, Leu-Trp, Trp-Met-Asp-Phe, Leu-Trp-Met, Tyr-Tyr-Tyr-OCH3, Tyr-Trp, Cyclo-Trp-Tyr, vagy Tyr-Cys-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly.
b 5) cukortartalmú flavonoidot, előnyösen rutint, floridzint vagy narangint, vagy cukor rész nélküli flavonoidot, előnyösen narangenint ahol a telítetlen zsírsav és a stimulátor tömegaránya 50-0,1.
c) és stabilizátorként egy vagy több alábbi vegyületet vagy vegyületcsoportot:
etanol, lecitin, rutin, hemoglobin, methemoglobin, szérum-albuminok, a C sorozathoz tartozó citokrómok, cukor-lipidek, ciklodextrinek, vagy E sorozathoz tartozó vitaminok és a telítetlen zsírsav tömegaránya a stabilizátorhoz 100-0,5, szilárd vagy folyékony formában összekeverünk.
Az új eltartható készítmények biológiai rendszerekben a prosztaglandinok és a hidroxi-zsírsavak szintézisét segítik elő.
X jelentésében a fémkationok lehetnek alkálifém-kationok, például lítium, nátrium vagy kálium, vagy alkáliföldfémkationok, például magnézium- és kalcium, de lehetnek fémek kationos formái is, például alumínium, cink és vas, és ezek adott esetben citromsavval, vagy etilén-diamin-tetraecetsavval keláttá lehetnek alakítva. Aminkationként alkalmasak a primer, szekunder vagy tercieraminok kationjai. Ezek a következő aminok lehetnek: például alkil-aminok, például mono-, di- és trimetil-, illetve etil-, propil-, izopropil-, butil-, izobutil-, t-butil-, valamint N-(metil-hexil)-, N-metil-hexil- benzil-, béta-fenil-etil-amin, etilén-diamin, dietilén-triamin, pirrolidin, piperidin, morfolin, piperazin, mono-, di- és trietanol-amin, etil-dietanol-amin, N-butil-etanol-amin, trisz-(hidroxi-mctil)-aminometán stb. Megfelelő aminsők például a triptamin, cisztein sói, valamint a lizin és arginin bázikus aminsói. Megfelelő kvatemer ammóniumkationok például a tetrametil-ammónium, tetraetil-ammónium és a benzil-trimetil-ammónium. Ezeket a kationokat alkalmazhatjuk a B ,)-Bg) vegyületek anionos formáinak sóképzéséhez, de a sóképzéshez a kationos formáknál előnyös a klorid és a fluorid.
Előnyösen enzimesen reagáltatjuk a 18:2 ω-6, 20: 4 ω-6,22 : 5 ω-6,18 : 3 ω-3,20 : 5 ω-3,22 : 6 ω-3,18:3 ω-6,20:3 ω-6,22:4 ω-6 és 22:4 ω-3 megnevezésű zsírsavakat a szokásos nomenklatúrában az első szám a szénatomok számát, a kettőspont utáni szám a kettőskötések számát és az ω utáni szám az első kettőskötés helyzetét mutatja a molekula metil-végétől számítva. Bizonyos zsírsavak termékei már ismertek, és az is ismert, hogy bizonyos stimulálószerek alkalmazásával a telítetlen zsírsavak reakciójának sebessége, valamint bizonyos termékek képződése fokozható. Ahogy azt a kísérleti részben részletezzük, a jelen találmány azt teszi lehetővé, hogy bizonyos zsírsavtermékek előnyös módon fokozottabban képződjenek. Mindig a feladattól függ, hogy hogyan választjuk meg a találmány szerinti készítményt a telítetlen zsírsavak és a stimuláló fajtája és a stabilizátor szempontjából.
Ha a stimulálószereknél aminosavakról, illetve peptidekről van szó, akkor alkalmazható mind az L-, mind a D- forma, valamint a D- és L- fonnák elegye is.
Az R2 = R3 helyén hidrogénatomot és R1 helyén CH2-CH(NH2)-C02H-csoportot tartalmazó (I) általános képletű stimulátorok, valamint az ezeket tartalmazó peptidek, illetve a liponsav, melynek oldallánca rövidítve lehet, illetve a flavonoidok, különösen azzal az
HU 201 671 Β előnnyel rendelkeznek, hogy fokozzák a zsírsavak eltarthatóságát további stabilizátor hozzáadása nélkül.
A találmány szerinti készítményben az alkalmazott telítetlen zsírsav mennyisége a kívánt alkalmazástól függ. A prosztaglandinok preparatív előállításához a ké- 5 szítmény minden kívánt mennyiségét adagolhatjuk.
A találmány szerinti reagens készítmény klinikai kémiai célra történő előállításához tehát például a sejtek vagy a sejtrészek, például vérsejtek, a vese, a tüdő, a gyomor biopsziaanyagának telítetlen zsírsavat átalakító, illetve 10 meghatározott biológiai hatású prosztaglandinokat szintetizáló tulajdonságainak vizsgálatára elegendők olyan reagens elegyek, amelyek 5 mg - 1 pg, előnyösen 100 pg -1 ng telítetlen zsírsavat tartalmaznak. A reagensek szuszpenzió, illetve például vizes, etanolos, éti- 15 lén-glikolos, polietilén-glikolos vagy glicerines oldat vagy ezen oldószerek elegyében készített oldat formájban fordulhatnak elő. Ha az oldószereket eltávolítjuk, a reagenseket elegy formájában kapjuk. A szerves oldószer eltávolítása különösen akkor szükséges, ha a rca- 20 gens elegyeket in vitro enzimkatalizált reakciókban kívánjuk felhasználni.
Önmagában ismeretesek biológiai anyagból nyerhető enzimrendszerek a prosztaglandinok előállításához. Ismert az is, hogy a biológiai anyag eredete és fajtája 25 szerint különböző prosztaglandinok szintetziálhatók.
A találmány szerint előállított reagenseket ezen proszíaglandinok előállításához alkalmazhatjuk. Ehhez a biológiai anyag oldatát, szuszpenzióját, illetve homogenizátumát a találmány szerinti készítményekkel össze- 30 keverjük és ismert módon inkubáljuk. A stimulátor megválasztásával bizonyos prosztaglandinok szintézisét egy megadott fokig irányíthatjuk. A nemkívánatos zsírsavtermékek, például a tromboxán vagy leukotrién képződését a technika állása szerint tromboxán-gátlók, 35 illetve lipoxigenáz-gátlók hozzáadásával gátolhatjuk. Amennyiben a reagensben a telítetlen zsírsav kötött formában, például észterként fordul elő, gondoskodni kell arról, hogy az enzimes reakció előtt vagy alatt a vegyületet szabad formájává alakítsuk, adott esetben a 40 biológiai anyagban egyébként is előforduló lipáz-enzimek, illetve megfelelő lipáz-enzimek segítségével, illetve megfelelő lipáz-enzimek hozzáadásával, vagy az enzimes reakció előtt ismert kémiai hidrolízissel. A képződött prosztaglandin, illetve prosztaglandinok megfelelő 45 extraháló szerekkel, például acetil-acetáttal végzett extrahálás után a kívánt prosztaglandint tiszta formában állíthatjuk elő, például ismert módon kromatografálva, például nagynyomású kromatográfiás módszerrel.
A találmány szerint előállított készítményekben a 50 komponensek mennyiségi arányai tág határokon belül változhatnak. Függnek a telítetlen zsírsav fajtájától, a használt stimulátortól, illetve stabiiizátorlól, valamint a kívánt felhasználástól. A telítetlen zsírsav (a szabad savra vonatkoztatva) és a stimulátor egymáshoz viszonyí- 55 tott tömegaránya általában 50 : 0,1, előnyösen 20 : 0,5 között változik. Az adagolt stabilizátor mennyiségét úgy méljük, hogy a szabad telítetlen zsírsavra vonatkoztatva a stabilizátor aranya kb. 0,5:100, előnyösen 1:1,5 különösen előnyösen 2 : 8-10 között legyen.
A biológiai rendszereket in vivő is kezelhetjük a gyógyászatilag alkalmas találmány szerint előállított készítményekkel és ez a kezelés előnyösebb, mint hogyha a találmány szerinti készítmény komponenseit különkülön alkalmaznánk. A készítmény szisztemikus, pél- 65 dául intravénás adagolása nem előnyös, mert a telítetlen zsírsavak metabolizálódhatnak, mielőtt elérik ahatás területét. Közvetlenül elérhetők azonban a bőr, a száj, a nyelőcső, az οσ, a szem, a bél, a gyomor, a légcső és a tüdőtraktus sejtjei.
Az ember vagy állat prosztaglandinhiányos állapotai, például a gyomor- béltraktusban, például a gyomorsav elválasztás zavaraihoz és gasztrointesztinális sérülésekhez, például fekélyekhez vezethetnek, és például a találmány szerinti készítményekkel orális formában kezelhetők ezek az állapotok. A bél enterálisan gyomorsavban nem oldódó bevonattal ellátott gyógyszerformákkal is kezelhető. Ha a cél hasmenés előidézése, például székrekedésnél, akkor a rektális gyógyászatban alkalmazott gyógyszerformákat használhatjuk, míg a szülési fájdalmak kiváltásához, például a szülés megindításához az intravaginális gyógyászatban alkalmazott gyógyszerformák jöhcUick szóba. A bőr működési zavarainál és a kötőszövet kezelésénél találmány szerinti dermális készítményeket alkalmazunk. A humán gyógyászatban az orális készítmények és kúpok előállítása úgy történik, hogy dózisegységenként 0,5 és 2000 mg, általában 21000 mg, különösen 5-250 mg legyen a telítetlen zsírtartalom. Különösen terápiarezisztens betegségeknél, például makacs székrekedésnél, dózisegységenként 6000 mg vagy még több telítetlen zsírsavat is alkalmazhatunk. Meglepő módon a találmány szerinti 18, valamint 22 szénatomos egyenes láncú zsírsavak ugyanolyan hatásosak a gyomor- bélfekélyeknél, mint a 20 szénatomot tartalmazó zsírsavak. Ez orvosi szempontból azért jelentős, mert kevesebb mellékhatást, például hasmenést váltanak ki. A megfelelő terápia például egy vagy két vagy több, előnyösen 3-8 egyszeri dózisból áll naponta, és a szükséges mennyiség az egyszeri dózisok számától, a kezelendő betegségtől függ, és egy dózis több egyidejűleg adagolt egyszeri dózisból is állhat.
Ismeretes, hogy bizonyos gyógyszerek nemkívánatos mellékhatása a gyomor- bcltraktusban gasztrointesztinális problémákhoz vezethet, amelyek a gyomor- béltraktus fekélyeit okozhatják. Az ilyen gasztrointesztinális nyálkahártya károsodások megakadályozására, illetve ezek gyógyítására szintén alkalmasak a találmány szerint előállított készítmények. A készítményekkel történő kezelés történhet a gyomor nyálkahártyát károsító gyógyszerek adagolásával egyidejűleg, azt megelőzően vagy utána. Különösen előnyös, ha a találmány szerint előállított reagenseket kombináljuk megfelelő gyógyászati készítményben a gyomor-nyálkahártya károsító gyógyszerekkel. A komponenseket külön-külön, de elegyek formájában is alkalmazhatjuk. Számos olyan gyógyszer ismert, amelyet a gyomor nehezen visel el, illetve gyomor- béltraktus fekélyét okozza. Ide tartoznak a reumaellenes szerek, például a szteroidális és nem szterodiális gyulladásgátlók, például kortikoszteroidok, például Cortison, a szalicilsav-származékok, például acetil-szalicilsav és diflunizál, vagy fenilalkánsavak, (például Piroxicam, Acemetacin.Pimetacin, Nambumeton, Carprofen, Priprofen, Fenclofenac, Sulindac, Indometacin, Fenoprofen, Tiaprofensav, Tolmecin, Flurbi60 profen, Suprofen, Indoprofen, Ibuprofen, Naproxen, Alclofenac, Ketoprofen, Diclofenac) vagy pirazolonok (például Phenylbutazon, Metamizol), vagy vémyomás< csökkentők (például Reserpin), xanlinbázisú értágítók (például Pentoxifyllin), tuberkolózisgátló szerek (pl. Rifampicin) vagy citosztatikumok (pl. Methohexat).
-4Ί
HU 201 671 Β
A gyógyászati készítmények a szokásos gyógyászati segédanyagokat, illetve hordozóanyagokat tartalmazhatják, melyeket orálisan és dermálisan például nazálisán, szubliguálisan, rektálisan és intravaginálisan hatásos gyógyszerkészítményekhez használunk. Ide tartoznak például a keményítő, a szacharóz, a kálciumszulfát, zselatin, keményítőpép, szirup, búza- és kukoricakeményítő sztearinsav, sztcarátsó, cukor, szacharin és állati takarmányozáshoz szokásos komponensek, például zsírok, szénhidrátok, proteinek és ásványi szilárd anyagok, konzerválószerek, édesítőanyagok, színezékek, ízesítőanyagok vagy szuszpendálószerek, ásványi és növényi olajok, például földimogyoró, olíva, paraffinolaj, szója, napraforgó, gyapotmagolaj, hal és szezámolaj, illetve ezen olajok frakciói, valamint ionos és nemionos felületaktív anyagok, pl. az alább részletezettek, valamintkonzerválóanyagok és gombaölőszerek, pl. parabének,klór-butanol, benzil-alkohol, fenol, timerozál, izotóniás szerek, például cukor vagy nátrium-klorid. A többszörösen telítetlen zsírsavakat polidextránra vagy poliakrilamid-, alkil-szulfát- vagy foszfátgélekre vagy alumínium-hidroxidra vagy kovasavra abszorbeálhatjuk, illetve azzal elkeverhetjük.
A bőrön keresztül történő adagolásnál a készítmények előfordulhatnak pl. vizes alkoholos vagy poliolokat tartalmazó oldatokban vagy szuszpenziókban, olajos oldatokban vagy szuszpenzióban, vagy porokban és ezt követően egy bőrön keresztül alkalmazható formába dolgozzuk be a megfelelő hordozó hozzáadása révén.
Az oldatok vagy szuszpenziók formálásához gyógyászatilag elfogadható például zsírokat, viaszokat, vazelint, paraffint tartalmazó hordozóanyagokat és segédanyagokat, valamint konzerválószercket, szuszpendáló és diszpeigálószereket, izotóniás szereket, mint például metil- és propil-parabéneket, nátrium-kloridot, polietilén-glikolokat, különösen polietilén-glikol 4000-t, nátrium-karboxi-metilcellulózt, nátrium-alginátot, polivinil-pirrolidont, szorbimakrogololeátot, etilén-oxid és zsírsavak kondenzációs termékeit, például polioxi-etilénsztearátot, vagy etilén-oxid és zsíralkoholok például heptadekaetílénoxid kondenzációs termékeit, vagy etilén-oxid és parciális észterek kondenzációs termékeit, például polioxi-etilén-szorbin-monooleátot vagy szorbitból származó hexitánokat, például polioxi-etilén-szorbitán-monoleátot használunk. Az olajos közegben készített szuszpenziók előállítása úgy történik, hogy a hatóanyagot a fent felsorolt olajokban diszpergáljuk. Ezek a szuszpenziók az abszorpciót késleltető szereket tartalmazhatnak, például alumínium-monosztearátot. Egy száraz, például fagyasztva szárított készítmény, amely a kívánt időpontban megfelelő gyógyászatilag elfogadható hordozóval keverhető össze egy további kivitelezési formát képvisel. A hatóanyag készítményei például a tabletták, kapszulák, kúpok, szirupok, oldatok, szuszpenziók, vagy elixírek gyógyászatilag elfogadható olyan segédanyagokat is tartalmaznak, amelyek erre az adagolási formára a kívánt gyógyhatás elérésére teszik képessé a készítményeket A találmány szerinti elegyeket gyógyászati segédanyagokkal, például laktózzal, keményítővel, tragantmézgával, zselatinnal, (alkummal stb. összekeverjük és kapszulává, tablettává stb. vagy a szokásos kúpmasszává dolgozzuk fel, például triglicerid alap, például Witepsol kúp anyagot állítunk elő, (H.P. Fiedler, Lexikon dér Hilfstoffe für Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiet, 1971,9. kötet, 548-50 és 632634. oldal és az intravaginális kúpok tekintetében lásd a 263026 és a 663145. sz. amerikai szabadalmi leírásokat). Adott esetben alkalmazunk még zsíralkoholokat, szilárd szénhidrogéneket, például vazelint és szilárd vazelint, telített zsírsavakat például laurinsavat, mirisztinsavat, palmitinsavat, sztearinsavat, valamint emulgeátorokat, például etoxilezett triglicerideket, polietoxilezett növényi olajokat, zsírsav cukorésztereket, szilikonokat, zselatint metil-cellulózt, hidroxi-propoxi-cellulózt, hidroxi-propil-cellulózt, polietilén-glikolokat polivinil-pirrolidont, polivinil-alkoholt, poliakrilsavat és ezek sóit, vagy összekeverhetjük vízzel, szuszpendálószerrel, szacharózzal, konzerválóanyagokkal, hidroalkoholos hordozókkal, és szuszpenzióvá, oldattá vagy elixírré dolgozzuk fel. Kívánatos lehet, hogy a telítetlen zsírsav lassan vagy késleltetve szabaduljon fel a gyógyszerkészítményből. Ezt a késleltetést felszívódást a technika állásának megfelelően érhetjük el. A biológiai közeg pH-jálól függ, hogy a késleltetett felszabadítást például polisztirollal, vagy poliakril-származékokkal (pl. Eudragit<K)) vagy például megfelelő ioncserélő kötődéssel érjük el. Enterálisan bevont készítményeket is előállíthatunk, pl. tablettát, kapszulát pirulát, golyócskákat vagy mikrogolyócskákat. Ezek a készítmények dózisegységek formájában fordulnak elő, pl. egyetlen tabletta, kapszula vagy pirulák, mikrogolyócskák vagy mikrogömböcskék formájában, melyek enterális tulajdonságokkal és hosszantartó hatással rendelkeznek. Ilyen enterálisan bevont készítmények és a bevonáshoz használt bevonatanyagok szerepelnek az irodalomban, pl. a 20 93 462 és 2196 768. sz. amerikai egyesült államcácbcli szabadalmi leírásban (cellulóz-acetát-ftalát), valamint a 28 97 121. sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban (szűrőiből és maleinsavból álló kopolimerek), valamint a 30 81 233. sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban.
Kísérleti rész:
7. módszer: A telíletlen zsírsavak eltarthatóságának vizsgálata a készítményekben
Az anyagok stabilizáló hatását a többszörösen telítetlen zsírsavakra a következő módon vizsgáltuk:
A teszt vízoldékony anyagokra
0,125 mg telítetlen zsírsavat, illetve nátriumsóját (lásd táblázatok) (nátrium-arachidonát, Fa. Sigma München, Németország) 0,05 ml vízben oldunk. Ehhez adunk 0,2 ml vizes, 2 mg stabilizátort tartalmazó oldatot, amely még tartalmazhat 2 mg stimulátort és összekeverjük az eleggyel (lásd 1. táblázat), ebből 0,1 ml-t kiveszünk, extraháljuk és analizáljuk (lásd alább). A további feldolgozás az 1. vagy 2. változat szerint történik.
1. változat vizes oldatokra órás 37 ’C-on történő inkubálás után ismét elveszünk 0,1 ml-t, extraháljuk és analizáljuk az alább részletezett módon.
2. változat szilárdelegyekre (liofilizátumok)
A tesztoldatot liofilizáljuk, a liófflizált oldatot 24 óra hosszat 37 ’C-on inkubáljuk, majd az előző vízmennyiségben oldjuk, 0,1 ml-t kiveszünk, extraháljuk és analizáljuk.
HU 201 671 Β
B teszt a vízben nem oldódó anyagokra
0,125 ml telítetlen zsírsavat (arachidonsav, 5,8,11,14,17,eikozapentaénsav, 8,11,14-eikózatriénsav, Fa. Sigma München) 0,05 ml etanolban vagy dimetil-szulfoxidban oldunk. Ehhez 0,2 ml etanolt, illetve dimetil-szulfoxidot adunk, amely 2 mg stabilizátort tartalmaz és tartalmazhat még 2 mg stimulátort (lásd 1. táblázat), azonnal elveszünk 0,1 ml-t, extraháljuk és analizáljuk. A további kezelés az 1. vagy 2. változat szerint történik.
1. változat oldatokra óra hosszat 37’C-on inkubáljuk, majd ismét 0,1 ml-t elveszünk belőle, 0,1 ml vízzel összekeverjük, extraháljuk és analizáljuk.
2. változat szilárd elegyekre
A maradék oldatot megszabadítjuk az oldószertől, 24 óra hosszat inkubáljuk 37 ’C-on, majd ismét oldjuk 0,15 ml oldószerben, 0,1 ml-t elveszünk, 0,1 ml vízzel összekeverjük, extraháljuk és analizáljuk.
Exlrakció és analízis
A kapott mintákat 0,05 ml 1,2 mólos vizes citromsavoldattal elegyítjük, kétszer extraháljuk 0,5 ml acetil-acetáttal, az acetil-acetátot az összeöntött extraktumokból eltávolítjuk és a maradékot 0,8 ml metanolban oldjuk és nagynyomású folyadékkromatográfiásán analizáljuk (Rád Pák C-18 100 x 8 mm-es oszlop, Firma Waters, Königstein, NSZK, 1,5 ml/perc, futtatószer 800 ml metanol, 200 ml víz, 0,1 ml jégecet). Az elválasztást kereskedelmi forgalomban lévő UV detektorral végezzük 206 mm-nél.
2. módszer: Prosztaglandinszintézis
0,3 ml 0,03 mól kálium-foszfát puffer (pH = 8) 0,5 mg enzimet (birkaondóhólyagocskák formájában) [Biochemistry 10 (1971) 2372] vagy belső vesevelő homogenizátumot [Life Sciences 26 (1980) 765], 2,75 pg 14-C-arachidonsavat (0,5 pCi) és 0,5 mg stimulátort és adott esetben 0,5 mg 1. táblázat szerinti stabilizátor anyagot tartalmaz. 10 percig inkubáljuk 37 C-on, az inkubálás után 0,05 ml 1,2 mólos citromsavat adunk hozzá, és kétszer extraháljuk 0,5 ml acetil-acetáttal, az összeöntött extraktumokból az oldószert eltávolítjuk, a maradékot feloldjuk 0,2 ml metanolban, 1: 1 arányban vízzel hígítjuk és nagynyomású folyadékkromatográfiásán elválasztjuk (Nukleozil C-18, 125 x 4,6 mm-es oszlop, Firma Bischoff, Leonbcrg, NSZK, futtatószer 300 ml acetonitril, 700 ml víz, 1 ml jégecet, 30 perc tiszta metanol után). Arádioaktív frakció elválasztását monitorral figyeljük (LB 504 Fa. Berthold, Wilbad, NSZK). A képződött termékeket, mint például a 6-keto-prosztglandin- F2ilf.-t, a prosztaglandin Ej-t, prosztaglandin-F^^-t, prosztaglandin D2-t ilyen feltételek mellett választjuk szét.
7. táblázat
A prosztaglandin képződés fokozása stabilizált zsírsav készítményekben
A prosztaglandin PGE2-t, PGF?.)f.-t és PGD2-t az arachidonsav termékeiként a 2. módszer segítségével analizáljuk és összprosztaglandinként az összeget 100%-ra vonatkoztatjuk. A stimulátor hozzáadás nélkül keletkezett mennyiségű összprosztaglandin felel meg f = 1-nek, és a stimulálás után keletkezett mennyiséget erre vonatkoztatjuk, f = 2 vagy f = 3 kétszeres vagy háromszoros stimulálást jelent a 2. módszer szerinti körülmények között A minta stabilitását az 1. módszerrel vizsgáltuk (jobb oldali oszlop). Adalék hozzáadása nélkül (jobb oldali oszlop: A) ilyen feltételek mellett vizes oldatban az arachidonsav 25-28%-a marad meg. A 25-28-nál magasabb értékek tehát stabilizálást és a 25-28%-nál alacsonyabb értékek destabilizálást jelentenek. Az 1. példát stimulálás nélkül hajtottuk végre. A találmány szerinti hatásokat a megfelelően jelzett példák szerinti stabilizált készítményekkel érjük el. A stabilizálás vonatkozásában vizsgált anyagok (a mennyiségeket tekintve lásd az 1. módszert) a következők voltak: A) vizes oldat stabilizátor nélkül, B) etanolos oldat további adalékok nélkül, C) piridonoldat, D) rutinnal dimetil-szulfoxiddal előre feloldva majd a dimctil-szulfoxidot leszivatva, E) megfelel a B) pontnak lecitinnel etanol leszivatva, F) mint A) lószívből kapott citochrom (Fa. Boehringer, Mannheim, NSZK), G) mint A) methemoglobinnal (humán) (Fa. Sigma, München,NSZK), H) mint A) szarvasmarhából kapott szérumalbuminnal (Fa. Calbiochem, Frankfurt, NSZK), J) mint A) vagy B) de oldószer nélkül, K) mint J) citochrom, L) mint J) humán hemoglobinnal (Fa. Behringweike, Marburg, NSZK), M) mint J) humán szérumalbuminnal (Fa. Behringwerke, Marburg, NSZK).
A találmány szerinti stabil készítmények beleértve a gyógyászati készítményeket is.
68-70. példa
Steril körülmények között 50 mg nátrium-arachidonálot 500 mg szarvasmarha szérumalbumint és 500 mg L-tirozint 10 ml kétszeresen desztillált vízben oldunk és szintén steril körülmények között egy barna üvegben tartunk. 93,5% eredetileg meglévő arachidonsavat 6 hétig tárolunk szobahőmérsékleten, majd ismét elővesszük és ezalatt az ugyanilyen nátrium-arachidonsav oldat adalékok nélkül gyakorlatilag egyáltalán nem tartalmaz már arachidonsavat (arachidonsav tartalom 0,8%-nál kisebb). Az ily módon előállított stabilizált oldatot
68. példa gyógyászati célra egy ívampullába töltjük,
69. példa mg birkaondóhólyagocskával elegyítjük, 60 percig 37 ’C-on inkubáljuk és az így keletkezett prosztaglandint extraháljuk és a 2. módszer szerint kikészítjük, vagy
70. példa a páciensek trombózisra való hajlamának klinikai-biokémiai meghatározását alkalmazzuk oly módon, hogy 0,01 ml stabilizált nátrium-arachidonát oldatot elegyítünk 1 ml lizált trombocitában dús vérplazmával, melyet ettől a pácienstől vettünk, és-30 percig inkubáljuk 25 ’C-on majd extraháljuk. A képződött prosztaglandin D2t (2. módszer) a páciens trombózisra való hajlamának értékeként használjuk.
71. példa
100 mg 5,8,11,14,17-eikózapentaénsavat és 500 mg rutint 15 ml dimetil-szulfoxidban oldunk és a dimctil-611
HU 201 671 Β
példa szám stimu- látor 7. táblázat Arachidonsav-termék 2. módszer eltarthatóság az 1. módszer szerint visszamaradó ara- chidonsav %
ÖSSZ- proszta- glandin PGE2 PGF^t, PGD2
f % % %
összehasonlító vizsgálat
stimulátor 1 83 2 15 A 26 G 90
nélkül B 100 H 100
C 13 J 0
F 97 K 100
E 90 L 85
F 98 M 100
példák a nem találmány szerinti anyagokra
2 m-krczol 0,61 98 0 2
3 fenol 0,95 77 5 18
4 L-fenilalanin 0,9 80 2 18
5 transzfahéjsav 0,9
példák a találmány szerinti (I) általános képletű vegyületekre
6 R, =-CH2-CH-NH2 1 co2h R2 = R3 = -H 5 ,5 81 2 17 A B C 91 100 67 J K M 98 100 100
7 R! = -CH2-CH2-NH2 r2=r3=-h 4 ,0 80 3 17 A 87
8 R, = -CH2-CH2-CO2H r2=r3 = h 4,5 83 1 16 A 89
9 Rí = —CH2—CH—NH2 9,4 70 14 16 A 15 F 97
1 B 97 G 96
co2h C 93 M 100
r2=-oh r3 = -h
10 Rl = -CH2-CH2-NH2 6,0 52 35 13 A 17 H 100
r2=-oh B 95 K 98
r3=-h C 9 M 100
0
11 | Rí = CH2-CH-NH-C-CH3 I (stimulálás: pozitív) A (stabilizálás pozitív)
1 conh2
12 R, = -CHOH-CHr-NH2 8,3 66 17 17 A 11 F 99
R2 = -OH B 93 G 95
r3=-h D 93 M 100
13 R, = -CHOH-CHz-NHCH, 13 70 12 18 A 9 H 97
R2 = -OH B 92 J 0
r3=-h E 94 M 100
-713
HU 201 671 Β példa stimuszám látor össz- PGEj PGF,.if. PGD2 prosztaglandin
2. módszer (folytatás) eltarthatóság az 1. módszer szerint visszamaradó arachidonsav % f %
14 Rj = -OH R2 = R3 = -H 3,2 69
15 r1=-co2h r2=-och3 r3=-h 5,1 71
16 Rj = -CO2H R2 = R3 = -H 4,5 69
17 R, = -CH=CHCO2H r2=-oh r3=-h példák a találmány szerinti (II) általános képletű vegyületekre 5,7 70
18 r7 = -G02H r8 = -nh2 r9 = -h 9,8 76
19 r7 = -CO2H r8=-nh2 R9 = -OH 10,0 79
20 R7 = -CO2II R8 = R3 = -H 5,1 82
21 r7 -co2h R8 = -H r9 =-oh 5,7 80
22 r7=-h r8 = -nh2 r9 = -oh 10,6 75
23 R7 = -H r8 = -nh2 r9 = -h példák a találmány szerinti tirozin-(Tyr) áll. triptofán-(Trp) tartalmú peptidekre 6,1 81
24 Trp-Trp 11,7 75
25 Gly-Trp-Gly 13,0 79
26 Trp-Ala 12,6 77
12 19 A D F 7 97 98 G K M 99 97 99
12 17 A 22 F 98
B 100 G 96
D 98 J 17
13 18 A 21 F 98
B 98 G 96
D 97 H 99
13 17 A 19 H 99
D 99 J 16
G 95 M 98
3 21 A D G 18 99 99 H J K 98 15 99°
3 18 A 17 E 95
B 95 F 97
D 96 G 95
2 16 A 20 J 98
E 96 M 99
B 100 H 99
3 17 A 18 G 962)
B 99 H 97
F 98 J 12
5 20 A 16 F 98
B 99 K 98
E 96 L 100
3 16 A 20 F 98
D 100 F 97
D 97° H 100
2 23 A B C 17 98 12 D F G 97 97 96
1 20 A 18 H 99
F 96 J 7
G 97 K 99
1 22 A 19 E 92
D 98 F 96
-815
HU 201 671 Β
példa szám stimu- látor ÖSSZ- proszta- glandin pge2 vissza] PGD2 naradó ara- 2. módszer (folytatás) eltarthatóság az 1. módszer szerint chidonsav %
f % % %
27 Leu-Trp 17,0 77 1 20 A 20 F 98
B 99 M 100
28 Trp-Met-Asp-Phe 11,8 73 6 20 A 17 D 97”
D 97 F 96
29 Leu-Trp-Met 10,8 69 9 22 A 18 H 99
B 99 J 7
D 97 K 100
30 Tyr-Tyr-Tyr-OCHj 5,3 75 4 11 A 94 J 98
B 98 K 100
31 Tyr-Trp 6,3 73 3 14 A 80 D 98
B 97 M 100
32 Cilo-Trp-Tyr (stimulálás: pozitív) (stabilizálás: pozitív)
példák a találmány szerinti kéntartalmú vegyületekre
33 L-cisztein 4,0 56 17 27 A B D 9 95 94” D H M 95 96 96
34 D-cisztein 3,5 63 14 23 A 13 H 97
D 96 J 5”
D 95 K 98
35 glutation 13,5 100 0 0 A 0 H 91
E 94 J 90
C 0 L 92
36 liponsav 5,5 43 49 8 A 92 G 100
E 94 J 90
F 100 L 100
37 N-acetil- 4,0 61 14 25 A 9 E 93
cisztcin B 93 F 98
D 95 G 98
38 Tyr-Cisz-Glu- (stimulálás: pozitív) M 100
Hisz-Phe-Arg-Trp-Gly nem találmány szerinti kéntartalmú vegyületek
39 ditiotreit 0,8
40 ditioeritrit 0,85
41 cisztin 1,0
42 dihidro-liponsav 1,0
43 cisz team in 0,9
44 merkapto-etanol 0,95
45 koenzim A 1,0
46 pantetein 0,95
1)-3): arachidonsav helyett 5,8,1,14,17-eikozapentaénsavat, illetve
2) : 8,11,14 eikozatriénsavat, illetve
3) : 9,12,15-linolénsavat alkalmazunk
4) : gamma-globulin (nyúl) (Calbiochem, Frankfurt)
-917
HU 201 671 Β
2. táblázat
Vitaminok, flavonoidok, ciklodextrínek és (cukor) lipid vegyületek találmány szerinti tulajdonságai. A stabilizálás kísérletben használt zsírsavakat zárójelben adjuk meg. (A= arachidonsav, E = 5,8,11,14,17 eikozapentaénsav)
Arachidonsav-termék
2. módszer
példa stimuszám lator relatív össz- proszta- PGE2 PGFMft pgd2 eltarthatóság az 1. módszer szerint visszamaradó ara- chidonsav %
f % % %
nem találmány szerinti
vitaminok
47 vitamin Qw 0,8 8 78 14 8% (A)
48 vitamin B12 6% (A)
49 vitamin C 0% (A)
találmány szerinti vitaminok
50 51 DL-alfa-tokofcrol D-alfa-toko- ferolkinon 0,5 80 5 15 87% (A) 98% (A)
találmány szerinti cukortartalmú flavonoidok 52 rutin 6 76 6 18 97% (A)
53 floridzin 3 80 2 18 96% (E) 97% (E)
54 naringin 2 83 2 15 96% (A)
55 naringenin 1,5 80 0 20 96% (A)
56 kempferol 0,5 76 11 13 98% (E)
57 kvercetin 0,3 72 18 10 92% (E)
58 katcchin 0,2 70 18 12 90% (A)
59 epikatechin 0,15 71 17 12 89% (A)
60 floretin 0,15 76 11 13 97% (A)
61 morin 0,08 54 27 19 100% (E)
Valamennyi megvizsgált flavonoid stabilizálja a többszörösen telítetlen zsírsavakat. Különösen alkalmasak a találmány szerint a cukortartalmú flavonoidok, mert fokozzák a prosztaglandinok képződését. A találmány szerinti felhasználásra in vitro a cukorrészt nem tartalmazó flavonoidok kevésbé alkalmasak, mert gátolják a prosztaglandinszintézist.
találmány szerinti ciklodextrínek
62 alfa-dextrin (ciklohexaamilóz) 60% (A)
63 beta-dextrin (cikloheptaamilóz) 90% (A) 88% (E)
64 gamma-dextrin ciklooktaamilóz 75% (A)
-1019
HU 201 671 Β elcarthatóság az 1.
módszer szerint visszamaradó arachidonsav % példa stimuszám lator
2. módszer relatív PG^ PGFM6l PGD2 összprosztaf % % % találmány szerinti lipidek (Fa. Serva, Heidelberg)
65 szacharóz palmitátsztearát7 SPS-7 91% (A) 92% (E)
66 szacharóz-palmitátsztearát 15 SPS-15 92% (A)
67 dioktil-szulfoszukcinát Na-só 94% (A)
szulfoxidot maradéktalanul leszivatjuk és a maradékot acetil-szalicilsav kristályokkal együtt (500 mg R 95, Röhm, Pharma, Darmstadt, NSZK) 0 nagyságú zselatin kapszulákba töltjük (Firma Kapsugel, Basel, Svájc).
72. példa ml kétszer desztillált vízben 1 g L-alfa-lecitint, béta, gamma-dipalmitoilt (Firma Calbiochcm GmbH, Frankfurt/Main, NSZK) 100 ml arachidonsavat, 100 ml liponsavat és 100 ml DL-alfa-tokoferol-acetátot (Firma, Aldrich, Steinheim, NSZK) elegyítünk és ultrahanggal homogenizálunk.
73. példa
170 mg búzakeményítőt, 45 mg latózt, 20 mg magnézium-sztearátot, 5 mg nátrium-arachidonátot, 10 mg triptofántés 20 mg Troxerutin-t (Fa. Aldrich, Steinheim, NSZK) megőrlünk, jól elkeverünk és tablettává préselünk.
74. példa
150 mg búzakeményitőt, 435 mg laktózt, 15 mg magnéziumsztearátot, 5 mg nátrium-araachidonátot és 15 mg liponsavat megőrléssel alaposan elkeverünk és tablettává préseljük.
75. példa mg nátrium-arachidonátot 20 mg Seroloninnal és 10 mg Hümoglobinnal (redukált, Fa. Calbiochem GmbH, Frankfurt) 3,51 bidesztillált vízben feloldunk és liofilizáljuk. A maradékot dózisegységekben kapszulákká dolgozhatjuk fel (zselatin kapszulaméret 0, Fa. Kapsugel, Basel, Svájc).
76. példa mg 8,11,14-eikózatriénsavat 50 N-acetil-ciszteint 100 mg lószívből származó Cytochrom C-vel együtt (Firma Aldrich, Steinheim, NSZK) 2 ml kétszer desztillált vízben feloldunk.
77. példa mg arachidonsavat steril körülmények között 180 mg béla-ciklodextrinnel és 60 mg 5-hidroxi-triptaminnal együtt 50 ml bidesztillált vízben felveszünk.
78la-f. példa különböző kísérletet végzünk, a, b, c, d, e, f példákban. Mindegyik esetben 1 ml etanolban 0,7 mg arachi25 donsavat oldunk és az a) esetben az elegy 1 mg, b) esetben 5 mg, c) esetben 10 mg, d) esetben 25 mg, e) esetben 50 mg, illetve í) esetben 100 mg liponsavat tartalmaz. Az etanol eltávolítása után ezeket a mintákat legalább 12 napig tarthatjuk 37 “C-on. A 2. módszer 30 szerinti meghatározás szerint a mintákban 12 nap után még 99 ± 2% arachidonsav található.
79-82. példák
0,125 mg arachidonsavat felveszünk 0,25 ml vízben, 35 amely 5,25, illetve 50, illetve 751% dimetil-szulfoxidot tartalmaz és 37 ’C-on inkubáljuk. 24 óra múlva extraháljuk és analizáljuk. Az analízis eredménye
Dimetil-szulfoxid % arachidonsav %
40 79. példa 5 54
80. példa 25 75
81. példa 50 83
82. példa 75 94
45 83. példa
ml glicerin-triacelátban 2 g arachidonsavat és 1 g Tyrosamin-t elkeverünk és 30 ’C-on ultrahangos keveréssel egyenletesen elosztjuk.

Claims (6)

1. Eljárás biológiai rendszerekben prosztaglandinok és hidroxi-zsírsavak szintézisének elősegítésére szolgáló
55 hatóanyag-keverék előállítására, azzal jellemezve, hogy a) egy vagy több 18 : 2 co-6, 20 : 4 ω-6, 22 : 5 0-6,
18 : 3 ω-3, 20 : 5 ω-3, 22 : 6 ω-3, 18 : 3 ω-6, 20 : 3 ω-6, 22 : 4 ω-6 vagy 22 : 4 ω-3 jelölésű zsírsavat,
60 b) slimulátorként részben egyidejűleg stabilizáló hatású egy vagy több következő vegyületet bl egy (1) általános képletű fenol-vegyületet ahol R2 hidrogénatom vágy hidroxilcsoport, R3 hidrogénatom és R1 az alábbi csoportok
65 egyike
-1121
HU 201 671 Β
OH, CO2H, CH = CH-COOH, CHOH-CHr-NHR6 - ahol R6 hidrogénatom vagy CH3 vagy R* lehet még CH2CH(COOH>-NH2, CH2CH2-R4R5 - ahol R4 hidrogénatom vagy COOH és R5 jelentése hidrogénatom vagy NH2 vagy CH2CH(CONH^NH-GO-CH3, b 2) (II) általános képletű indol-származékot, ahol R7 hidrogénatom vagy COOH, R‘ hidrogénatom vagy amincsoport, R9 hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, b 3) cisztent, N-acetil-ciszteint, glutationt vagy liponsavat b 4 a következő összetételű pepiidet
Trp-Trp, Gly-Trp-Gly, Trp-Ala, Leu-Trp, Trp-Met-Asp-Phe, Leu-Trp-Met, TyrTyr-Tyr-OCH3, Tyr-Trp, Cyclo-Trp-Tyr, vagy Tyr-Cys-GIu-His-Phe-Arg-Trp-Gly.
b 5 cukortartalmú flavonoidot, előnyösen rutint, floridzint vagy narangint, vagy cukor rész nélküli flavonoidot, előnyösen narangenint ahol a telítetlen zsírsav és a stimulátor tömegaránya 50-0,1.
c) és stabilizátorként egy vagy több alábbi vegyületet vagy vegyületesoportot etanol, lecitin, rutin, hemoglobin, methemoglobin, szérum-albuminok, a C sorozathoz tartozó citokrómok, cukor-lipidek, ciklodcxtrinck, vagy E sorozathoz tartozó vitaminok és a telítetlen zsírsav tömegaránya a stabilizátorhoz 100-0,5, szilárd vagy folyékony formában összekeverünk.
2. Eljárás emberi vagy állati prosztaglandinhiány-állapotot kezelő gyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerin előállított készítményt gyógyászatilag elfogadható hordozókkal összekeverjük és gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készítményeket dermálisan, orálisan, perorálisan vagy kúp formájában alkalmazható készítménnyé alakítjuk.
4. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy dózisegységenként 0,5 és 2000 mg, előnyösen
5-250 mg telítetlen zsírsavat alkalmazunk.
5. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a telítetlen zsírsavakat legalább részben retardált formában használjuk.
6. A 2. igénypont szerinti eljárás a gasztrointesztinális traktus megbetegedéseinek gyógyítására, illetve megakadályozására szolgáló gyógyszerkészítmény előállítására, azzaljellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti készítményt gyógyászatilag elfogadható hordozókkal összekeverjük és gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.
HU872088A 1986-05-09 1987-05-08 Process for producing active ingredient mixture and pharmaceutical compositions comprising unsaturated fatty acids necessary for the synthesis of prostaglandins and hydroxy fatty acids in biological systems HU201671B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19863615710 DE3615710A1 (de) 1986-05-09 1986-05-09 Zubereitungen fuer die synthese von prostaglandinen und hydroxyfettsaeuren in biologischen systemen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT44433A HUT44433A (en) 1988-03-28
HU201671B true HU201671B (en) 1990-12-28

Family

ID=6300504

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU872088A HU201671B (en) 1986-05-09 1987-05-08 Process for producing active ingredient mixture and pharmaceutical compositions comprising unsaturated fatty acids necessary for the synthesis of prostaglandins and hydroxy fatty acids in biological systems

Country Status (16)

Country Link
US (1) US5043328A (hu)
EP (1) EP0244832B1 (hu)
JP (1) JPS62267222A (hu)
KR (1) KR950008306B1 (hu)
AT (1) ATE77549T1 (hu)
AU (1) AU603574B2 (hu)
CA (1) CA1302266C (hu)
DE (2) DE3615710A1 (hu)
DK (1) DK167518B1 (hu)
ES (1) ES2051705T3 (hu)
GR (1) GR3005768T3 (hu)
HU (1) HU201671B (hu)
IE (1) IE60273B1 (hu)
IL (1) IL82459A (hu)
PT (1) PT84841B (hu)
ZA (1) ZA873299B (hu)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5334612A (en) * 1988-11-09 1994-08-02 Asta Pharma Aktiengesellschaft Pharmaceutical compositions containing as active substance sulphur-containing carboxylic acids and their use in combating retroviruses
FR2639828B1 (fr) * 1988-12-01 1993-11-05 Lvmh Recherche Utilisation du kaempferol et de certains de ses derives pour la preparation d'une composition cosmetique ou pharmaceutique
ES2033193B1 (es) * 1990-10-30 1994-01-16 Ganadera Union Ind Agro Mezcla grasa para nutricion infantil y de adultos.
US5399584A (en) * 1992-05-05 1995-03-21 The Procter & Gamble Company Use of flavone derivatives for gastroprotection
US5569670A (en) * 1992-06-05 1996-10-29 Asta Medica Aktiengesellschaft Combination medications containing alpha-lipoic acid and related
CA2151820C (en) * 1993-01-15 2000-11-28 Stephen Joseph Demichele Structured lipids
GB9715444D0 (en) 1997-07-22 1997-09-24 Scotia Holdings Plc Therapeutic and dietary compositions
CA2704975A1 (en) * 1999-10-13 2001-05-31 Marco A. Chacon Therapeutic intervention to mimic the effect of caloric restriction
IL149421A0 (en) * 1999-11-02 2002-11-10 Depomed Inc Pharmaceutical compositions containing fed mode inducing agents
US6228367B1 (en) * 1999-12-22 2001-05-08 Renew Life, Inc. Food supplement formulation
CA2304906A1 (en) * 2000-04-07 2001-10-07 1411198 Ontario Limited 13-hode, a regulator of vascular biocompatibility and an inhibitor of cell hyperplasia
US7098352B2 (en) * 2001-11-16 2006-08-29 Virtus Nutrition Llc Calcium salt saponification of polyunsaturated oils
US20040048919A1 (en) * 2002-07-02 2004-03-11 Dreon Darlene M. Compositions and methods for reduction of inflammatory symptoms and/or biomarkers in female subjects
US20050164908A1 (en) * 2004-01-23 2005-07-28 Ginsberg Myron D. Neuroprotective complex for treatment of cerebral ischemia and injury
GB0403247D0 (en) 2004-02-13 2004-03-17 Tillotts Pharma Ag A pharmaceutical composition
EP1765964A4 (en) * 2004-04-30 2007-11-07 SYNTHESIS OF METALLIC SALTS OF MONOVALENT AND DIVALENT POLYUNSATURATED FATTY ACIDS
WO2006054316A1 (en) * 2004-11-16 2006-05-26 Magene Life Sciences Private Limited Method(s) of preparation, stabilization, composition, and administration of gamma-linolenic acid for brain tumors
US20070082063A1 (en) * 2005-10-11 2007-04-12 Douglas Bibus Risk assessment and correction of membrane damage of the upper GI tract
AU2009309237B2 (en) * 2008-10-31 2016-02-25 Lipid Pharmaceuticals Ehf. Fatty acids for use as a medicament
KR20130102037A (ko) * 2010-07-22 2013-09-16 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아 트립토판 유도체를 함유하는 약학 조성물
WO2013087808A1 (en) 2011-12-15 2013-06-20 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Pharmaceutical composition comprising a pyrazolopyrimidme and cyclodextrin
CN104583305B (zh) 2012-04-16 2017-09-26 罗地亚经营管理公司 含氟聚合物组合物
GB201216385D0 (en) 2012-09-13 2012-10-31 Chrysalis Pharma Ag A pharmaceutical composition
AU2014225619A1 (en) * 2013-03-06 2015-10-15 Rutgers, The State University Of New Jersey Nutritional supplement/feed formula and methods of use thereof to reduce development of Osteochondrosis Dissecans (OCD) lesions

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE237029C (hu) *
FR2197605A1 (en) * 1972-09-06 1974-03-29 Williams John Foodstuff or skin nutrient to combat cholesterolaemia - contains arachidonic acid or gamma linolenic acid or esters and salts thereof
JPS537492B2 (hu) * 1973-02-12 1978-03-18
GB1476624A (en) * 1973-05-30 1977-06-16 Cepbepe Tranquiliser medicaments
DE2813814A1 (de) * 1978-03-31 1979-10-18 Boehringer Mannheim Gmbh Hochwirksame, enteral resorbierbare pharmazeutische praeparate
IE53332B1 (en) * 1980-03-14 1988-10-26 Efamol Ltd Pharmaceutical compositions
JPS5735512A (en) * 1980-06-27 1982-02-26 Nippon Oil & Fats Co Ltd Preventive and remedy for thrombosis
JPS5813541A (ja) * 1981-07-16 1983-01-26 Kureha Chem Ind Co Ltd エイコサペンタエン酸又はドコサヘキサエン酸のシクロデキストリン包接化合物
EP0087865B1 (en) * 1982-03-01 1986-10-01 Efamol Limited Pharmaceutical composition
FR2522935A1 (fr) * 1982-03-10 1983-09-16 Chevalier Jacques Nouveaux produits a base de lait et de ses derives riches en acides gras polyinsatures et leur procede de preparation
JPS58164508A (ja) * 1982-03-26 1983-09-29 Eisai Co Ltd イソプレニルカルボン酸含有外用組成物
ATE22533T1 (de) * 1982-04-29 1986-10-15 Efamol Ltd Pharmazeutische zusammensetzung.
US4668704A (en) * 1982-08-09 1987-05-26 Regents Of The University Of California Method for protecting and healing gastro-duodenal mucosa and the liver of mammals
ATE55056T1 (de) * 1982-12-09 1990-08-15 Advanced Drug Tech Einfach absorbierbare fettsaeureemulsionen.
GB8302708D0 (en) * 1983-02-01 1983-03-02 Efamol Ltd Pharmaceutical and dietary composition
CA1218376A (en) * 1983-05-28 1987-02-24 Sekimoto, Hiroshi Compositions containing unsaturated fatty acid compounds and method of stabilizing unsaturated fatty acid compounds
CA1239587A (en) * 1983-10-24 1988-07-26 David Rubin Combined fatty acid composition for lowering blood cholestrol and triglyceride levels
DE3470277D1 (en) * 1984-01-11 1988-05-11 Von Mletzko Armin Dietetic composition
JPS60184011A (ja) * 1984-03-02 1985-09-19 Itaru Yamamoto 免疫調節剤
IT1176916B (it) * 1984-10-10 1987-08-18 Elvira Pistolesi Composizione farmaceutica o dietetica ad elevata attivita' antitrombotica e antiarteriosclerotica
JPS62187425A (ja) * 1985-10-14 1987-08-15 Michio Nakanishi リノレン酸系化合物含有組成物
DE3719097C1 (de) * 1987-06-06 1988-06-09 Fratzer Uwe Arzneimittel,enthaltend Eicosapentaensaeure und Docosahexaensaeure als ungesaettigte Fettsaeuren sowie Vitamin E

Also Published As

Publication number Publication date
DK235687D0 (da) 1987-05-08
DK167518B1 (da) 1993-11-15
EP0244832A3 (en) 1989-11-29
EP0244832A2 (de) 1987-11-11
EP0244832B1 (de) 1992-06-24
KR950008306B1 (ko) 1995-07-27
JPS62267222A (ja) 1987-11-19
DK235687A (da) 1987-11-10
GR3005768T3 (hu) 1993-06-07
US5043328A (en) 1991-08-27
HUT44433A (en) 1988-03-28
IL82459A0 (en) 1987-11-30
IL82459A (en) 1994-07-31
DE3615710A1 (de) 1987-11-26
CA1302266C (en) 1992-06-02
DE3779958D1 (de) 1992-07-30
ATE77549T1 (de) 1992-07-15
IE871203L (en) 1987-11-09
ZA873299B (en) 1987-11-02
PT84841B (pt) 1990-02-08
AU7264187A (en) 1987-11-12
AU603574B2 (en) 1990-11-22
ES2051705T3 (es) 1994-07-01
PT84841A (de) 1987-06-01
KR870010867A (ko) 1987-12-18
IE60273B1 (en) 1994-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU201671B (en) Process for producing active ingredient mixture and pharmaceutical compositions comprising unsaturated fatty acids necessary for the synthesis of prostaglandins and hydroxy fatty acids in biological systems
RU2498795C2 (ru) Способы лечения неалкогольного стеатогепатита (nash) с применением цистеаминовых продуктов
McCULLY Chemical pathology of homocysteine. II. Carcinogenesis and homocysteine thiolactone metabolism
CZ288163B6 (en) Use of curcumin (turmeric) contained particularly in Curcuma longa plant or derivatives thereof for preparing medicaments
JPH01121300A (ja) 乳汁に由来するポリペプチド成長因子
HU184219B (en) Process for producing pharmaceutical compositions of aggragati on-inhiaiting activity
JPS62265222A (ja) 細胞膜の脂質構造および機能の修飾法並びにこれに使用する製剤組成物
US5411748A (en) Prostate extract supplemented with zinc
JP2001516698A (ja) 食餌補足品としての脂肪酸
JPS60120995A (ja) 新規アミノ酸誘導体の製法
JPH06511469A (ja) 微生物のコロニー化を阻害するためへの宿主細胞リン脂質の使用
EP0146474A2 (fr) Composition nutritive contenant de l&#39;acide alpha-cétoisocaproique ou un de ses sels
JP4632480B2 (ja) チオレドキシン誘導物質
US7033612B2 (en) Composition and method for treating age-related disorders
Heim et al. Stimulation of glycoprotein and protein synthesis in isolated pig gastric mucosal cells by prostaglandins.
KR100312245B1 (ko) 필수지방산에의해킬레이트화된아연정제
Yasuda et al. Influence of a cigarette smoke extract on the hormonal regulation of platelet-activating factor acetylhydrolase in rats
EP0797444A1 (fr) Trousse pour cycle de traitement de l&#39;osteoporose
JP3061445B2 (ja) 血管拡張剤
Zurier Prostaglandins: Their potential in clinical medicine
CA2376199A1 (en) Use of verapamil and verapamil derivatives for producing medicaments with an inhibiting effect on .beta.-glucuronidase in human tissue
Moncada et al. Unstable metabolites of arachidonic acid in relation to thrombosis
Hillier et al. General introduction and practical implications of some pharmacological actions of prostaglandins, thromboxanes and their synthesis inhibitors
JP2007502811A (ja) 肥満の予防用の医薬組成物の製剤におけるコリパーゼ−リパーゼ阻害剤の使用
Shenolikar et al. Effect of feeding different levels of mustard oil in monkeys

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee