PT2305689E - A síntese de ecteinascidinas de ocorrência natural e compostos relacionados - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO

A SÍNTESE DE ECTEINASCIDINAS DE OCORRÊNCIA NATURAL E COMPOSTOS RELACIONADOS

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a processos de síntese, compostos obtidos com estes processos e a sua utilização como agentes antitumorais. Em particular, refere-se a processos de síntese para produzir compostos de ecteinascidina de ocorrência natural e análogos relacionados, incluindo novos intermediários que formam uma parte de tais processos de síntese.

Além disso, a presente invenção refere-se a novas indicações não reveladas anteriormente dos análogos de ecteinascidina. A invenção é limitada ao assunto conforme foi definido nas reivindicações; a seguinte descrição é sujeita a esta limitação.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A Patente US N° 5.089.273 descreve novas composições de matéria extraída do invertebrado marinho tropical, Ecteinascidia turbinata, e designadas no mesmo como ecteinascidinas 729, 743, 745, 759A, 759B e 770. Estes compostos são úteis como agentes antibacterianos e/ou antitumorais em mamíferos. A ecteinascidina 743 está a passar por ensaios clínicos como um agente antitumoral. 1 ΕΡ2305689Β1

A disponibilidade limitada de material natural tem resultado na procura por investigação de métodos alternativos de síntese para os compostos naturais e análogos relacionados.

Um processo de síntese para produzir compostos de ecteinascidina é descrito na Patente US 5.721.362. 0 método reivindicado envolve muitas etapas, havendo 38 Exemplos, cada um, que descrevem uma ou mais etapas na sequência de síntese para chegar na ecteinascidina 743.

Processos de síntese mais curtos para produzir Ecteinascidina 743 são descritos no documento WO 0069862 e documento WO 0187895 e envolvem a utilização de cianosafracina B como material de partida.

No entanto, existe ainda uma necessidade de proporcionar vias de síntese a outras ecteinascidinas, em particular para proporcionar caminhos mais económicos aos agentes antitumorais conhecidos tais como ET-729, bem como permitir a preparação de novos compostos.

Compostos sintéticos de ecteinascidina são conhecidos de vários depósitos de PCT anteriores, incluindo, por exemplo, documento WO 0018233, documento WO 0177115, documento WO 0187894, documento WO 0187895, documento WO 99 51238, e documento WO 9846080. Todas estas memórias 2 ΕΡ2305689Β1 descritivas de patente são incorporadas especificamente por referência, especialmente para a orientação que dão no projeto e sintese de compostos de ecteinascidina. Em particular, revelam relações de estrutura-atividade que podem ser aplicadas aos compostos da presente invenção. Veja-se também J. Am. Chem. Soc., 1996, vol. 118, N° 38, páginas 9017-9023 para os compostos de ecteinascidina. Os compostos sintéticos e as ecteinascidinas naturais têm um sistema de anel fusionado: ΕΡ2305689Β1 17

Em muitas ecteinascidinas, existe uma ponte 1,4

Com as através do sistema de anel fusionado ecteinascidinas naturais, a ponte 1,4 é, algumas vezes, uma ponte 1,4-espiroamina, como, por exemplo, em ecteinascidina 729, 736 ou 743.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Num aspeto, a presente invenção proporciona compostos de ecteinascidina quinona que têm um grupo quinona no anel E. Tais compostos são tipicamente da fórmula (Ab):

(Ab) 3 ΕΡ2305689Β1 onde Ra, Rb, R5, R7, R8, R21, X e o anel E são como foram definidos, o enxofre na ponte 1,4 pode ser oxidado, e R12b é como foi definido para R12 ou R12a.

Estes compostos de quinona são de especial interesse para a sua atividade, notavelmente a atividade de ecteinascidina 637 quinona. Podem ser feitos por meio da oxidação de um composto de ecteinascidina que tem um anel E que é fenólico, como, por exemplo, em ecteinascidina 743 com um anel 16-metil, 17-metoxi, 18-hidroxi fenilo para o anel E. Outros substituintes podem ser utilizados. Agentes oxidantes adequados incluem sal de Fremy.

Num aspeto relacionado, a presente invenção proporciona um processo para preparar ecteinascidina 729 e compostos relacionados que tem um hidrogénio na posição N-12. Para esta finalidade, a presente invenção proporciona um processo que compreende proporcionar uma ecteinascidina com um substituinte na posição N-12, e remover esse substituinte. Depois disso, o grupo N-H na posição 12 pode ser derivatizado, por exemplo, com um grupo R12a. A invenção também proporciona um processo que é uma modificação do processo para preparar um produto de ecteinascidina como descrito no documento dos presentes inventores WO 0187895. Assim, a presente invenção proporciona um processo para preparar um composto de ecteinascidina em que uma ponte 1,4 é formada usando um composto de precursor de anel 1 -lábil, 10-hidroxi, 12-protegido, 18-protegido hidroxi, di-6,8-enona fusionado. A ponte 1,4 pode ser uma espiroamina, por exemplo, como em ecteinascidina 729, mas não precisa ser tal grupo. Tipicamente, a ponte 1,4 é da fórmula: -(1)CH2-X-C (=0)-c (Ra) (Rb)-s(4)- 4 ΕΡ2305689Β1 onde o -CH2- é na posição 1 e o -S- é na posição 4, do composto de ecteinascidina, com os grupos X, Ra e Rb sendo como no presente documento definido.

Como uma parte relacionada desta invenção, a invenção proporciona um composto de ecteinascidina que é da fórmula (A) :

em que:

Ra e Rb juntamente com o carbono ao qual são unidos formam um grupo -C(=0)-; um grupo -CH (Rc) - onde Rc é OX1 ou N (X7X2) onde o ou cada X1, X2 é independentemente H, -C(=0)R', hidrocarbilo substituído ou não substituído; ou um anel espiro; R5 é -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo; R7 é -OCH3 e R8 é -OH ou R7 e R8 juntos formam um grupo -0-CH2-O-; R12 é um grupo protetor; R21 é -H, -OH ou -CN; X é -NH- ou -0-; anel E é da fórmula:

5 ΕΡ2305689Β1 onde R18 é -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo; e o enxofre na ponte 1,4 pode ser oxidado. A ponte 1,4 pode ser omitida, especialmente para os novos compostos de quinona. Nesse caso, o substituinte na posição 1, R1, pode ser como no documento dos presentes inventores WO 0187894. O grupo protetor em N-12 pode ser removido para dar um hidrogénio, e opcionalmente substituído com outro substituinte para dar outros compostos desta invenção. Exemplos de tais compostos derivatizados incluem aqueles onde o grupo em N-12 é alquilo tal como metilo ou etilo, especialmente metilo, ou é acilo, especialmente acetilo.

Com relação a isso, a presente invenção proporciona ainda compostos de fórmula (Aa):

(Aa) onde Ra, Rb, R5, R7, R8, R21, X e o anel E são como foram definidos, o enxofre na ponte 1,4 pode ser oxidado, e R12a é hidrogénio, hidrocarbilo substituído ou não substituído, ou acilo substituído ou não substituído, mas não é preferentemente metilo.

Em outro aspeto, a presente invenção proporciona compostos de ecteinascidina que têm uma ponte 1,4 onde o oxigénio β à posição 1 é substituído por um isóstero. 6 ΕΡ2305689Β1

Isósteros adequados incluem -NH-.

Assim, de acordo com a presente invenção, proporcionam-se compostos de ecteinascidina unidos por ponte 1,4 em que a ponte 1,4 é da fórmula: - (1) CH2-X-C (=0)-C (Ra) (Rb)-S(4)-onde o -CH2- é na posição 1, e o -S- é na posição 4, do composto de ecteinascidina, com o grupo X sendo NH, e Ra e Rb sendo como no presente documento definido.

Tais compostos incluem aqueles da fórmula (Ac):

onde Ra, Rb, R5, R7, R8, R12b, R21, e o anel E são como foram definidos e o enxofre na ponte 1,4 pode ser oxidado.

Estes compostos podem ser preparados por um processo desta invenção que é uma modificação do processo de documento WO 0187895, com um substituinte 1-lábil que é adequadamente um grupo de fórmula: -CH2-NProt2-C(=0)-CHNProt2-S-H onde Prot1 e Prot2 são grupos protetores de amina.

Os grupos protetores podem então ser removidos 7 ΕΡ2305689Β1 separadamente ou juntos, e os respetivos átomos de azoto derivatizados conforme for apropriado.

Procedimentos adequados podem ser vislumbrados à luz da descrição no documento WO 0187894, documento WO 0187895, documento WO 0177115, que são incorporados no presente documento por meio de referência específica.

FORMAS DE REALIZAÇÃO PREFERIDAS

Os compostos de quinona desta invenção são preferentemente feitos por um processo que envolve a oxidação de uma ecteinascidina que tem um fenol para o anel E, onde a função hidroxi do fenol é na posição 18 e pode ser substituída.

Tal reação ser de acordo com o seguinte esquema:

Alternativamente, os compostos de quinona desta invenção podem ser feitos por meio da modificação dos procedimentos de síntese conhecidos a partir dos pedidos de patente anteriores dos presentes inventores e que começam a partir de safracina B ou um composto relacionado. Em particular, a presente invenção proporciona um processo com base no que foi revelado no documento dos presentes inventores WO 0069862 onde o anel E é um anel de quinona no material de partida, e o anel E não é convertido no sistema de fenol, como mencionado no fundo da página impressa 24 do 8 ΕΡ2305689Β1 documento WO 00699862. A ponte 1,4 não precisa estar presente nos compostos de quinona.

Nos compostos desta invenção com uma ponte 1,4, exemplos preferidos do grupo formado por Ra e Rb juntamente com o carbono ao qual são unidos incluem: -C(=0) -CHNH2 ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo; -CHOH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo; um grupo de fórmula:

R R

R onde Rd e X1 sao como foram definidos; um grupo de fórmula:

onde Rd e X1 sao como foram definidos.

R d e X1 nestes grupos são preferentemente escolhidos a 9 ΕΡ2305689Β1 partir de hidrogénio ou hidrocarbilo, hidrocarbiloxi ou hidrocarboilo, R', OR', -(C=0)R' substituído ou não substituído, especialmente hidrogénio, alquilo ou alcoxi não substituído ou substituído, alquenilo não substituído ou substituído, alquinilo substituído ou não substituído, arilo não substituído ou substituído, aralquilo não substituído ou substituído; preferentemente hidrogénio, alquilo ou alcoxi, mais preferentemente hidrogénio, metilo ou metoxi, o mais preferível ambos hidrogénio.

Definições preferidas incluem aquelas que dão um grupo de fórmula:

onde Rd e X1 são como foram definidos; ou um grupo de fórmula:

onde Rd e X1 são como foram definidos.

Em particular, Ra e Rb podem ser escolhidos para dar um grupo de fórmula: 10 ΕΡ2305689Β1

Onde Ra e Rb juntamente com o carbono ao qual são unidos formam um grupo -CHNH2 ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo, o grupo pode ser da fórmula -CHNHXi ou -CHN(X!X2), onde Xlr X2 é H, C(=0)R', C1-C18 alquilo substituído ou não substituído, C2-Ci8 alquenilo substituído ou não substituído, C2-Ci8 alquinilo substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, ou um grupo protetor. Definições preferidas incluem hidrogénio, acilo tal como acetilo ou um grupo protetor.

Um de Ra ou Rb é com frequência hidrogénio e o outro é preferentemente H; - NHCOalquilo, particularmente onde o alquilo tem até 16 átomos de carbono, tal como 1,4, 7, 15 átomos de carbono e pode ser halo substituído opcionalmente perhalosubstituído; -NHalquilCOOH particularmente onde o alquilo tem até 4 átomos de carbono; protegido NHCOCH (NH2) CH2SH onde o NH2 e/ou o SH são protegidos; NHbiotina; -NHarilo; -NH(aa)y onde aa é um aminoácido acilo e y é adequadamente 1, 2 ou 3 e em que qualquer NH2 é opcionalmente derivatizado ou protegido, como com um grupo amida terminal ou um grupo Doc; ftalimido formado -NX2-; alquilo preferentemente que tem 1 a 4 átomos de carbono; arilalquenilo, especialmente cinamoilo que pode ser substituído como com 3-trifluorometilo;

Exemplos preferidos do grupo Ra ou Rb incluem NHAc, NHCO (CH2) 2COOH, NHCOCH (NHAloc) CH2SFm, NHCO (CH2) i4CH3, NHTFA, NHCO (CH2) 2CH3, NHCOCH2CH (CH3) 2, NHCO (CH2) 6CH3, NHBiotina, NHBz, NHCOCin, NHCO-(p- F3C)-Cin, NHCOVal-NH2, NHCOVal-N- 11 ΕΡ2305689Β1

Ac, NHCOVal-N-COCin, NHCOVal-Ala- NH2, NHCOVal-Ala-N-Ac, NHCOAla-NH2, OH, OAc, NHAc, NHCO (CH2) 2COOH, NHCOCH (NHAloc) CH2SFm, NHCOCH (NH2) CH2SFm, NFt, NH- (m-C02Me) -Dz, NHCO (CH2) i4CH3, NMe2, NHTFA, NHCO (CH2) 2CH3, NHCOCH2CH (CH3) 2, NHCO (CH2) 6CH3, NHAloc, NHTroc, NHBiotina, NHBz, NHCOCin, NHCO-(P-F3C)- Cin, NHCOVal-NH2, NHCOVal-N-Ac, NHCOVal-N- COCin, NHCOVal-Ala-NH2, NHCOVal-Ala-N-Ac, NHCOVal-Ala-N-COCin, NHCOAla-NH2, NHCOAla-N-Ac, NHCOA- la-N-COCin, OH, OAc, NHAc, NHCO(CH2) 2COOH, NHCOCH(NHAloc)CH2SFm, Nft, juntamente com grupos similares onde o número de átomos de carbono é variado ou o aminoácido é mudado ou outra mudança deste tipo é feita para dar um grupo similar.

Onde Ra e Rb juntamente com o carbono ao qual são unidos formam um grupo -CHOH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo, o grupo pode ser da fórmula -CHOXi, onde X2 é como foi definido.

Outros exemplos preferidos incluem OH, OAc, OCOCF3, OCOCH2CH2CH3, OCO (CH2) 6CH3, OCO (CH2) i4CH3, OCOCH=CHPh, oso2ch3 juntamente com grupos similares onde o número de átomos de carbono é variado ou grupos substituintes diferentes são introduzidos ou outra mudança deste tipo é feita para dar um grupo similar. 0 enxofre na ponte 1,4 pode ser oxidado para dar, por exemplo, um grupo -S(=0)-.

Onde a ponte 1,4 não está presente, o grupo na posição 1, R1, é adequadamente um grupo aminometileno opcionalmente protegido ou derivatizado, ou um grupo hidroximetileno opcionalmente protegido ou derivatizado; e o grupo na posição 4, R4, é tipicamente hidrogénio. 12 ΕΡ2305689Β1 R1 é adequadamente um grupo hidrofóbico e que assim não possui amino livre, hidroxi ou outra função hidrofílica. Tipicamente, R1 é um grupo - CH2-NH2-CO-R', onde R' é como foi definido, mas preferentemente tem um comprimento de cadeia linear de menos de 20 átomos, mais preferentemente menos de 15 ou 10 átomos, onde um 1,4-fenilo é contado como um comprimento de cadeia de quatro átomos e considerações similares aplicam-se a outros grupos cíclicos (por exemplo, 1,2-ciclohexilo é comprimento de cadeia de dois), e a cadeia linear de menos de 10, 15 ou 20 átomos podem, por si mesmos, ser substituídos. Em particular, os dados sugerem que há um equilíbrio a ser alcançado entre não ter tal grupo Ra-CO- e ter um grupo grande volumoso.

Em compostos particularmente preferidos, o grupo R1 é acilado num grupo -NH2, e, por exemplo, derivados de N-acilo podem ser formados a partir de grupos -CH2NH2 e -CH2-NH-aa, onde aa é aminoácido. Os derivados de acilo podem ser derivados de N-acilo ou N-tioacilo do mesmo. Os grupos de acilo podem ser de fórmula -CO-R', onde R' é como foi definido e é escolhido para cumprir com os critérios indicados. Grupos de acilo adequados incluem alanilo, arginilo, aspartilo, asparagilo, cistilo, glutamilo, glutaminilo, glicilo, histidilo, hidroxiprolilo, isoleucilo, leucilo, lisilo, metionilo, fenilalanilo, prolilo, serilo, treonilo, tironilo, triptofilo, tirosilo, valilo, bem como outros grupos de aminoácido de acilo, que podem ser L- ou D-. Tais grupos de aminoácido de acilo são preferidos derivatizados nos grupos amino para dar hidrofobicidade.

Numa variação, o grupo R1 é um derivatizado hidroximetileno grupo. Considerações similares aplicam-se como com o grupo aminometileno derivatizado. 13 ΕΡ2305689Β1

Num aspeto preferido, pelo menos um de R5, R18 e R' no grupo Rd é selecionado a partir de hidrogénio, R', C=OR', ou COOR', onde R' é alquilo ou alquenilo opcionalmente substituído, os substituintes opcionais são escolhidos a partir de halo, amino incluindo amino derivado de aminoácido, arilo ou heterocíclico. R5 é preferentemente -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo. Em particular, pode ser um grupo -OXi.

Particularmente preferido para R5 é um grupo aciloxi, especialmente um grupo acetiloxi. Outros exemplos incluem cinamoiloxi e heptanoiloxi. R7 é -OCH3 e R8 é -OH ou mais preferentemente R7 e R8 juntos formam um grupo -0-CH2-0-. R12 é um grupo protetor para o átomo de azoto da função amina. Grupos protetores adequados para tais aminas incluem carbamatos, amidas, e outros grupos protetores, tais como alquilo, arilalquilo, sulfo- ou halo-arilalquilo, halo alquilo, alquilsililalquilo, arilalquilo, cicloalquilalquilo, alquilarilalquilo, heterociclilalquilo, nitroarilalquilo, acilaminoalquilo, nitroarilditioarilalquilo, dicicloalquilcarboxamidoalquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilalquenilo, nitroarilalquenilo, heterociclilalquenilo, heterociclilo, hidroxiheterociclilo, alquilditio, alcoxi- ou halo- ou alquilsulfinilo arilalquilo, heterciclilacilo, e outros carbamatos, e alcanoilo, haloalcanoilo, arilalcanoilo, alquenoilo, heterociclilacilo, aroilo, arilaroilo, haloaroilo, nitroaroilo, e outras amidas, bem como alquilo, alquenilo, alquilsililalcoxialquilo, alcoxialquilo, cianoalquilo, heterociclilo, alcoxiarilalquilo, cicloalquilo, nitroarilo, arilalquilo, alcoxi- ou hidroxi-arilalquilo, e muitos 14 ΕΡ2305689Β1 outros grupos. Tais grupos podem opcionalmente ser substituídos. Exemplos adicionais são dados nas memórias descritivas de patenteS anteriores dos presentes inventores.

Uma classe preferida de compostos compreende um composto de ecteinascidina em que o grupo protetor de N-12 R12 é escolhido a partir de haloalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilalquileno, haloalquilarilalquileno, acilo, haloacilo, opcionalmente halo alcoxialquilo, opcionalmente halo ou alquilo arilalquenilacilo, alquenilacilo, carbonato, carbamato, arilalquilo, alquenilo, anidrido ácido e aminoácido.

Especialmente preferido é um composto de ecteinascidina em que o grupo protetor de N-12 R12 é escolhido a partir de alilo, acetilo, trifluoroacetilo, 2,2,2-trichloroetoxicarbonilo, isovalerilcarbonilo, trans-3- (trifluorometil)cinamoilcarbonilo, heptafluorobutirilcarbonilo, decanoilcarbonilo, trans-cinamoilcarbonilo, butirilcarbonilo, 3-cloropropionilcarbonilo, cinamoilcarbonilo, 4-metilcinamoilcarbonilo, hidrocinamoilcarbonilo, ou trans-hexenoilcarbonilo, ou alanilo, arginilo, aspartilo, asparagilo, cistilo, glutamilo, glutaminilo, glicilo, histidilo, hidroxiprolilo, isoleucilo, leucilo, lisilo, metionilo, fenilalanilo, prolilo, serilo, treonilo, tironilo, triptofilo, tirosilo, valilo, ou outro grupo de aminoácido de acilo, ftalimido ou outro grupo amido cíclico. R18 é adequadamente como definido para R5, embora a definição mais preferida seja hidroxi. R21 é -H, ou mais preferentemente -OH ou -CN. 0 anel E é da fórmula: 15 ΕΡ2305689Β1

onde R18 é -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo e é adequadamente da fórmula -OXi. Exemplos além de -OH incluem cinamoiloxi.

Xi ou X2 quando um grupo protetor de amina, e Prot1 e Prot2 podem ser como definido para R12, e referência é feita ao documento WO 0187895 para mais informação.

Xi quando um grupo protetor de hidroxi, e Prot3 pode ser grupos protetores conhecidos para uma função hidroxi. Os grupos protetores adequados para grupos hidroxi incluem éteres e ésteres, tais como alquilo, alcoxialquilo, ariloxialquilo, alcoxialcoxialquilo, alquilsililalcoxialquilo, alquiltioalquilo, ariltioalquilo, azidoalquilo, cianoalquilo, cloroalquilo, heterociclico, arilacilo, haloarilacilo, cicloalquilalquilo, alquenilo, cicloalquilo, alquilarilalquilo, alcoxiarilalquilo, nitroarilalquilo, haloarilalquilo, alquilaminocarbonilarilalquilo, alquilsulfinilarilalquilo, alquilsililo e outros éteres, e arilacilo, carbonato de aril alquilo, carbonato alifático, carbonato de alquilsulfinilarilalquilo, carbonato de alquilo, carbonato de aril haloalquilo, carbonato de aril alquenilo, carbamato de arilo, alquil fosfinilo, alquilfosfinotioilo, aril fosfinotioilo, sulfonato de aril alquilo e outros ésteres. Tais grupos podem opcionalmente ser substituídos. Exemplos adicionais são dados nas memórias descritivas de patentes anteriores dos presentes inventores. 16 ΕΡ2305689Β1

Cada grupo R' é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, N02, NH2, SH, CN, halogénio, =0, C(=0)H, C(=0)CH3, C02H, C02CH3, Ci-C6 alquilo, alquinilo, alquenilo, arilo, aralquilo e heterocíclico. Definições preferidas incluem H, acilo, alquilo, especialmente H e alcanoilo ou cinamoilo.

Compostos preferidos desta invenção incluem aqueles que cumprem com um ou mais das seguintes definições: R1 é -CH2NH2 ou -CH20H, ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo (para isso especialmente veja-se documento WO 0187894, incorporado por meio de referência especifica nesse ponto para o seu ensinamento de R1 e assim todos os ensinamentos no documento WO 0187894 sobre R1 forma parte do presente texto) e R4 é -H; ou R1 e R4 juntos formam um grupo de fórmula (II), (III), (IV) , (V) ou (VI) em que X é 0, NH ou NR e Y é 0, S ou S=0 e R é um grupo protetor de azoto e R' é H ou OH ou OMe ou Me.

R5 é -OH, -OAc ou -OAlilo ou -OCinamoilo ou -OOctanoilo; R7 e R8 juntos formam um grupo -0-CH2-0-; R12b é H, alquilo, haloalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilalquileno, haloalquilarilalquileno, acilo, haloacilo, carbonato, carbamato, arilalquilo, alquenilo e aminoácido. Preferentemente R12b é H, metilo, alilo, acetilo, trifluoroacetilo, 2,2,2- tricloroetoxicarbonilo, isovalerilcarbonilo, trans-3-(trifluorometil)cinamoilcarbonilo, 17 ΕΡ2305689Β1 heptafluorobutirilcarbonilo, decanoilcarbonilo, trans-cinamoilcarbonilo, butirilcarbonilo, 3-cloropropionilcarbonilo, cinamoilcarbonilo, 4-metilcinamoilcarbonilo, hidrocinamoilcarbonilo, ou trans-hexenoilcarbonilo, ou alanilo, arginilo, aspartilo, asparagilo, cistilo, glutamilo, glutaminilo, glicilo, histidilo, hidroxiprolilo., isoleucilo, leucilo, lisilo, metionilo, fenilalanilo, prolilo, serilo, treonilo, tironilo, triptofilo, tirosilo, valilo, bem como outros grupos de aminoácido de acilo menos comuns, bem como ftalimido e outveras amidas cíclicas.

Anel E é da fórmula:

Substituintes de halogénio adequados nos compostos da presente invenção incluem F, Cl, Br e I.

Os grupos alquilo preferentemente têm de 1 a 24 átomos de carbono. Uma classe mais preferida de grupos alquilo tem 1 a cerca de 12 átomos de carbono, ainda mais preferentemente 1 a cerca de 8 átomos de carbono, ainda mais preferentemente 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e o mais preferível 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Outra classe mais preferida de grupos alquilo tem de 12 a cerca de 24 átomos de carbono, ainda mais preferentemente 12 a cerca de 18 átomos de carbono, e o mais preferível 13, 15 ou 17 átomos de carbono. Metilo, etilo e propilo incluindo isopropilo são grupos alquilo particularmente preferidos nos compostos da presente invenção. Como é usado no presente documento, o termo alquilo, a não ser que de outro modo modificado, refere-se a ambos grupos cíclico e não 18 ΕΡ2305689Β1 cíclico, embora grupos cíclicos compreenderão pelo menos três membros do anel de carbono.

Os grupos alquenilo e alquinilo preferidos nos compostos da presente invenção têm uma ou mais ligações insaturadas e de 2 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferentemente 2 a cerca de 8 átomos de carbono, ainda mais preferivelmente 2 a cerca de 6 átomos de carbono, ainda mais preferivelmente 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono.

Os termos alquenilo e alquinilo como é usado no presente documento referem-se a ambos os grupos cíclicos e não cíclicos, embora grupos não cíclicos lineares ou ramificados sejam geralmente mais preferidos.

Os grupos alcoxi preferidos nos compostos da presente invenção incluem grupos que têm uma ou mais ligações de oxigénio e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferentemente de 1 a cerca de 8 átomos de carbono, e ainda mais preferentemente 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e o mais preferível 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono.

Os grupos alquiltio preferidos nos compostos da presente invenção têm uma ou mais ligações tioéter e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferentemente de 1 a cerca de 8 átomos de carbono, e ainda mais preferentemente 1 a cerca de 6 átomos de carbono. Os grupos alquiltio que têm 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono são particularmente preferidos.

Os grupos alquilsulfinilo preferidos nos compostos da presente invenção incluem aqueles grupos que têm um ou mais grupos sulfóxido (SO) e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferentemente de 1 a cerca de 8 átomos de carbono, e ainda mais preferentemente 1 a cerca de 6 átomos 19 ΕΡ2305689Β1 de carbono. Os grupos alquilsulfinilo que têm 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono são particularmente preferidos.

Os grupos alquilsulfonilo preferidos nos compostos da presente invenção incluem aqueles grupos que têm um ou mais grupos sulfonilo (S02) e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferentemente de 1 a cerca de 8 átomos de carbono, e ainda mais preferentemente 1 a cerca de 6 átomos de carbono. Os grupos alquilsulfonilo que têm 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono são particularmente preferidos.

Os grupos aminoalquilo preferidos incluem aqueles grupos que têm um ou mais grupos de amina primária, secundária e/ou terciária, e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferentemente 1 a cerca de 8 átomos de carbono, ainda mais preferentemente 1 a cerca de 6 átomos de carbono, ainda mais preferentemente 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Grupos de amina secundária e terciária são geralmente mais preferidos que frações de amina primária.

Os grupos heterocíclicos incluem grupos heteroaromáticos e heteroaliciclicos. Grupos heteroaromáticos adequados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos selecionados a partir de átomos de N, 0 ou S e incluem, por exemplo, coumarinilo incluindo 8-coumarinilo, quinolinilo incluindo 8-quinolinilo, piridilo, pirazinilo, pirimidilo, furilo, pirrolilo, tienilo, tiazolilo, oxazolilo, imidazolilo, indolilo, benzofuranilo e benzotiazol. Grupos heteroaliciclicos adequados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos selecionados a partir de átomos de N, 0 ou S e incluem, por exemplo, grupos tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, piperidinilo, morpholino e pirrolindinilo. 20 ΕΡ2305689Β1

Os grupos arilo carbocíclicos adequados nos compostos da presente invenção incluem compostos de anel único e múltiplo, incluindo compostos de anel múltiplo que contêm grupos arilo separados e/ou fusionados. Grupos arilo carbocíclicos típicos contêm 1 a 3 anéis separados ou fusionados e de 6 a cerca de 18 átomos de carbono do anel. Grupos arilo carbocíclicos especificamente preferidos incluem fenilo incluindo fenilo substituído, tal como fenilo 2-substituído, fenilo 3-substituído, fenilo 2,3-substituído, fenilo 2,5-substituído, fenilo 2,3,5-substituído e 2,4,5-substituído, incluindo onde um ou mais dos substituintes de fenilo é um grupo de arraste de eletrão tal como halogénio, ciano, nitro, alcanoilo, sulfinilo, sulfonilo e similares; naftilo incluindo 1-naftilo e 2-naftilo; bifenilo; fenantrilo; e antracilo.

Os grupos preferidos de acilo são R'-CO- incluindo alquil-CO, alquenil-CO, alquinil-CO, aril-CO, heterocíclico-CO, entre outros.

Referências no presente documento a grupos substituídos nos compostos da presente invenção referem-se à fração especificada que pode ser substituída numa ou mais posições disponíveis por um ou mais grupos adequados como mencionado acima, por exemplo, halogénio tal como fluoro, cloro, bromo e iodo; ciano; hidroxilo; nitro; azido; alcanoilo tal como um grupo Cl-6 alcanoilo tal como acilo e similares; carboxamido; grupos alquilo incluindo aqueles grupos que têm 1 a cerca de 2 átomos de carbono ou de 1 a cerca de 6 átomos de carbono e mais preferentemente 1-3 átomos de carbono; grupos alquenilo e alquinilo incluindo grupos que têm uma ou mais ligações insaturadas e de 2 a cerca de 12 carbono ou de 2 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos alcoxi que tem aqueles que têm uma ou mais ligações de oxigénio e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou 1 a 21 ΕΡ2305689Β1 cerca de 6 átomos de carbono; ariloxi tal como fenoxi; grupos alquiltio incluindo aquelas frações que têm uma ou mais ligações tioéter e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou de 1 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinilo incluindo aquelas frações que têm uma ou mais ligações sulfinilo e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou de 1 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinilo incluindo aquelas frações que têm uma ou mais ligações sulfonilo e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou de 1 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos aminoalquilo tais como grupos que têm um ou mais átomos de N e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou de 1 a cerca de 6 átomos de carbono; arilo carbocíclico que tem 6 ou mais carbonos, particularmente fenilo (por exemplo, R sendo uma fração de bifenilo substituído ou não substituído); e aralquilo tal como benzilo.

Os grupos R' preferidos estão presentes em grupos de fórmula R', COR' ou OCOR' e incluem alquilo ou alquenilo, que pode ser substituído numa ou mais posições disponíveis por um ou mais grupos adequados, por exemplo, halogénio tal como fluoro, cloro, bromo e iodo, especialmente ω-cloro ou perfluoro; grupos aminoalquilo tais como grupos que têm um ou mais átomos de N e de 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou de 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e especialmente incluindo aminoácido, notavelmente glicina, alanina, arginina, asparagina, ácido asparagínico, cisteína, glutamina, ácido glutâmico, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina ou valina, formas especialmente protegidas de tais aminoácidos; arilo carbocíclico que tem 6 ou mais carbonos, particularmente fenilo; e aralquilo tal como benzilo; grupos heterocíclicos incluindo heteroalicíclico e grupos heteroaromáticos, especialmente com 5 a 10 átomos do anel dos quais 1 a 4 são heteroátomos, 22 ΕΡ2305689Β1 mais preferentemente grupo heterocíclicos com 5 ou 6 átomos do anel e 1 ou 2 heteroátomos ou com 10 átomos do anel e 1 a 3 heteroátomos, os grupos heterocíclicos opcionalmente sendo substituídos com um ou mais dos substituintes permitidos para R' e especialmente amino tal como dimetilamino ou com ceto.

Os derivados de acilo tais como -CO-R' podem ser derivados de N-acilo ou N-tio acilo dos mesmos, bem como amidas cíclicas. Os grupos de acilo podem ilustrativamente ser alcanoilo, haloalcanoilo, arilalcanoilo, alquenilo, heterociclilacilo, aroilo, arilaroilo, haloaroilo, nitroaroilo, ou outros grupos de acilo. R' ou grupo similar de um acilo pode ser vários grupos tais como alquilo, alcoxi, alquileno, arilalquilo, arilalquileno, aminoácido acilo, ou heterociclilo, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxialquilo, alcoxi, arilo, ariloxi, heterociclilo, heterocyciloxi, alquilo, amino ou amino substituído. Outros agentes de acilação incluem isotiocianatos, tais como isotiocianatos de arilo, notavelmente isocianato de fenilo. Os grupos alquilo, alcoxi ou alquileno adequadamente têm 1 a 6 ou 12 átomos de carbono, e pode ser linear, ramificado ou cíclico. Os grupos arilo são tipicamente fenilo, bifenilo ou naftilo. Os grupos heterciclilos podem ser aromáticos ou parcialmente ou completamente insaturados e adequadamente têm 4 a 8 átomos do anel, mais preferentemente 5 ou 6 átomos do anel, com um ou mais heteroátomos selecionados a partir de azoto, enxofre e oxigénio.

Sem ser exaustivo, grupos R' típicos em grupos de acilo incluem alquilo, haloalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilalquileno, haloalquilarilalquileno, acilo, haloacilo, arilalquilo, alquenilo e aminoácido. Por exemplo, R'-CO- pode ser acetilo, trifluoroacetilo, 2,2,2- 23 ΕΡ2305689Β1 tricloroetoxicarbonilo, isovalerilcarbonilo, trans- 3- (trifluorometil)cinamoilcarbonilo, heptafluorobutirilcarbonilo, decanoilcarbonilo, trans-cinamoilcarbonilo, butirilcarbonilo, 3- cloropropionilcarbonilo, cinamoilcarbonilo, 4- metilcinamoilcarbonilo, hidrocinamoilcarbonilo, ou trans-hexenoilcarbonilo, ou alanilo, arginilo, aspartilo, asparagilo, cistilo, glutamilo, glutaminilo, glicilo, histidilo, hidroxiprolilo, isoleucilo, leucilo, lisilo, metionilo, fenilalanilo, prolilo, serilo, treonilo, tironilo, triptofilo, tirosilo, valilo, bem como outros grupos de aminoácido de acilo menos comuns, bem como ftalimido e outras amidas cíclicas.

Uma classe de compostos preferidos desta invenção inclui compostos desta invenção que têm um ou mais dos seguintes substituintes: R1 e R4 formam uma ponte como foi definido, ou R1 é como foi definido e R4 é hidrogénio. R5 é hidrogénio; alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; C(=0)R', onde R' é alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 24 átomos de carbono, especialmente 1 a 8 ou 12 a 18 átomos de carbono; haloalquilo, mais preferentemente o-cloro- ou perfluoro- alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, especialmente ω-cloroetilo ou perfluorometilo, etilo ou propilo; alquilo heterocíclico, mais preferentemente um alquilo de 1 a 6 átomos de carbono com um substituinte ω-heterocíclico adequadamente que tem 5 a 10 átomos do anel e 1 a 4 heteroátomos, incluindo heteroalicíclico fusionado com 3 hetero átomos, tais como biotina; aminoalquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, especialmente 2 átomos de carbono, 24 ΕΡ2305689Β1 com um grupo ω-amino opcionalmente protegido, por exemplo, com alcoxicarbonilo tal como (CH3) 3C-0-C=0- ou outro grupo protetor; arilalguileno, especialmente cinamoilo; alguileno, especialmente vinilo ou alilo; aralguilo, tal como benzilo; ou C(=0)0R', onde R' é alguilo, mais preferentemente alguilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquilo especialmente ramificado; alquenilo, mais preferentemente alilo; R12 é hidrogénio, metilo, ou um grupo protetor incluindo alcoxicarbonilo tal como (CH3) 3C-0-C=0-. R18 quando estiver presente é hidrogénio; alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; (C=0)R', onde R' é alcoxi, especialmente com um grupo alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 24 átomos de carbono, preferentemente 1 a 8 ou 12 a 18 átomos de carbono; haloalquilo, mais preferentemente perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, especialmente perfluorometilo, etilo ou propilo; arilalquileno, especialmente cinamoilo; alquilo heterocíclico, mais preferentemente um alquilo de 1 a 6 átomos de carbono com um substituinte ω heterocíclico adequadamente que tem 5 a 12 átomos do anel e 1 a 4 heteroátomos, incluindo fusionado heterocíclico com 3 átomos do anel, tal como biotina; alquilo heterocíclico, com preferentemente 1 átomo de carbono no grupo alquilo, e mais preferentemente metilo heteroaliciclico com 5 a 10 átomos do anel e 1 a 4 átomos do anel, especialmente heterocíclico fusionado com 1 a 4 heteroátomos, tais como dimetilaminocoumarina ou coumarina; alquileno, especialmente alilo; aralquilo, tal como benzilo; (C=0)OR', onde R' é alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; alquileno, especialmente vinilo ou alilo; aralquilo, tal como 25 ΕΡ2305689Β1 benzilo.

Rd é 0C(=0)R', onde R' é alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 24 átomos de carbono, preferentemente 1 a 8 ou 12 a 18 átomos de carbono; haloalquilo, mais preferentemente ω-cloro- ou perfluoro- alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, especialmente ω-cloroetilo ou perfluorometilo, etilo ou propilo; aralquilo, tal como benzilo ou fenetilo; arilalquileno, especialmente cinamoilo; aminoalquilo, especialmente aminoácido, mais especialmente protegido aminoácido, incluindo cisteinina protegida, notavelmente Fm-S CH2CH(NHBOC)-cis ou alanina protegida, notavelmente (CH3) 3C-0-C=0-ala; alquilo heterocíclico, mais preferentemente um alquilo de 1 a 6 átomos de carbono com um substituinte ω-heterociclico adequadamente que tem 5 a 12 átomos do anel e 1 a 4 heteroátomos, incluindo fusionado heterocíclico com 3 átomos do anel, tal como biotina; alquilo heterocíclico, com preferentemente 1 átomo de carbono no grupo alquilo, e mais preferentemente metilo heteroaliciclico com 5 a 10 átomos do anel e 1 a 4 átomos do anel, especialmente fusionado heterocíclico com 1 a 4 heteroátomos, tais como coumarina ou dimetilaminocoumarina; 0(C=0)0R', onde R' é alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; alquileno, especialmente vinilo ou alilo; aralquilo, tal como benzilo; 0P=0(OR' ) 2, onde R' é benzilo. X1 é hidrogénio; alquilo, mais preferentemente alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; (C=0)OR', onde R' é alquileno, especialmente vinilo. R21 é hidrogénio, hidroxi, ou ciano.

Compostos com mudanças em R5 são parte desta invenção, especialmente grupos éster, Ri = R'CO-, com R' um grupo 26 ΕΡ2305689Β1 alifático ou aromático longo.

Existem compostos que têm boas propriedades de ADME (absorção-distribuição-metabolismo-excreção) que são um bom indicativo de farmacocinética.

Num aspeto relacionado desta invenção, os compostos têm uma ou mais das seguintes caracteristicas: R1 é -CH2-N (R' ) 2 ou -CH2-OR' , onde cada R' é H; alquil-C0-; haloalquil-CO-; cicloalquilalquil- C0-; haloalquil-O-CO-; arilalquil-CO-; arilalquenil-CO-; heteroaril-CO-; alquenil-CO-; alquenilo; aminoácido acilo; ou um grupo protetor; R5 é acetilo ou outro acilo. Preferentemente tem pelo menos 4, 5 ou 6 átomos de carbono, por exemplo, até 18 ou 24 átomos de carbono. Substituintes adequados incluem ésteres COR', onde R' é alquilo, alquenilo, com frequência com um ou mais substituintes. Alquilo, substituído alquilo, alquenilo e arilalquenilo são preferidos, com substituintes adequados incluindo arilo, heterocíclico. Outras definições para R5 incluem ésteres de fórmula COR' derivados de um aminoácido, opcionalmente um aminoácido protegido. R18 é hidroxi ou é OR' , OCOR' ou OCOOR' onde R' é um substituinte com algum volume. Tais substituintes volumosos incluem aqueles com grupos de cadeia ramificada, grupos insaturados ou grupos cíclicos incluindo grupos aromáticos. Assim, alquilo ramificado, cicloalquilo, alquenilo ramificado, arilo, heteroaromático e grupos relacionados são preferidos para inclusão dentro da estrutura do substituinte R18. Preferentemente o número total de átomos de carbono é 2 a 24, mais preferentemente 6 a 18 átomos de carbono. Tipicamente, R18 é um éster, éter ou carbonato, sendo 27 ΕΡ2305689Β1 de fórmula OCOR', OR' ou OCOOR'.

Rd é hidroxi ou metoxi. Alternativamente, é OR', OCOR' ou OCOOR' onde R' é um substituinte com algum volume. Tais substituintes volumosos incluem aqueles com grupos de cadeia ramificada, grupos insaturados ou grupos cíclicos incluindo grupos aromáticos. Assim, alquilo ramificado, cicloalquilo, alquenilo ramificado, arilo, heteroaromático e grupos relacionados são preferidos para inclusão dentro da estrutura do substituinte. Preferentemente, o número total de átomos de carbono é 2 a 24, mais preferentemente 6 a 18 átomos de carbono.

Sem ser exaustivo, outra classe de compostos preferidos desta invenção têm uma ou mais das seguintes definições: R21 é H, -CN ou -OH, mais especialmente -OH ou -CN. R5 é preferentemente H ou acetilo; arilalquilo, especialmente benzilo; alquil-CO- (alquilo sendo até 25 átomos de carbono, tal como até 17, 19 ou 21 átomos de carbono e preferentemente um número ímpar de átomos de carbono correspondente a um ácido carboxílico de ácido gordo de número par de átomos de carbono ou então um número baixo de átomos de carbono tais como 1 a 6) especialmente CH3- (CH2) n-C0- onde n é, por exemplo, 1, 2, 4, 6, 12, 14 ou 16; haloalquil-CO-, especialmente trifluorometilcarbonilo; arilalquil-CO-, especialmente benzil-CO-; arilalquenil-CO-, especialmente cinamoil-C0-; mais especialmente R1 é H, acetilo ou cinamoilo. R12 é H; alquilo, especialmente metilo; alquil-O-CO-, especialmente t-butil-O-CO- ou alquenil-O-CO-, especialmente alil-O-CO-. R18 é preferentemente H ou acetilo; alquilo (alquilo sendo 1 a 6 átomos de carbono) , especialmente C to C3 alquilo; alquenilo, especialmente alilo; arilalquilo, 28 ΕΡ2305689Β1 especialmente benzilo; alquil-CO- (alquilo sendo até 25 átomos de carbono, tal como até 17, 19 ou 21 átomos de carbono e preferentemente um número impar de átomos de carbono correspondente a um ácido carboxilico de ácido gordo de número par de átomos de carbono ou então um número baixo de átomos de carbono tais como 1 a 6) especialmente CH3- (CH2) n-CO- onde n é, por exemplo, 1,2.4,6.12,14 ou 16 e derivados do mesmo, como em Biotina-(CH2) 4-C0-; arilalquenil-CO-, especialmente cinamoil- C0-; alquil-O-CO-, especialmente t-butil-O-C0-; arilalquil-O-CO-, especialmente benzil-O-CO-; alquenil-O-CO, especialmente alil-O-CO-.

Rd é preferentemente OH, O-acetilo, O-alquilo (alquilo sendo 1 a 6 átomos de carbono) especialmente Ci a C3 alquilo; O-alquenilo, especialmente alilo; arilalquil-0-, especialmente benzilo; alquil-CO-O- (alquilo sendo até 25 átomos de carbono, tal como até 17, 19 ou 21 átomos de carbono e preferentemente um número impar de átomos de carbono correspondente a um ácido carboxilico de ácido gordo de número par de átomos de carbono ou então um número baixo de átomos de carbono tais como 1 a 6) especialmente CH3- (CH2) n_C0-0- onde n é, por exemplo, 1, 2, 4, 6, 12, 14 ou 16 e derivados do mesmo, como em Biotina-(CH2) 4-COO-; haloalquil-CO-O-, especialmente trifluorometilcarbonilo; aminoácido acilo ou um derivado do mesmo, como em FmSCH2CH (NHBOC) C0-0-; arilalquenil-COO-, especialmente cinamoil-CO-O-; alquil-0-C0-0-, especialmente terc-butil-O-CO-O-; alquenil-O-CO-O-, especialmente alil-0- C0-0-; arilalquil-O-CO-O-, especialmente benzil-0-C0-0-; grupo protetor como em P0(0Bn)2; mais especialmente R4 é OH, aciloxi como cinamoiloxi. X1 é H ou alquilo (alquilo sendo 1 a 6 átomos de carbono) e R5 é mais especialmente H ou C2 to C3 alquilo. 29 ΕΡ2305689Β1 0 processo que compreende proporcionar uma ecteinascidina com um substituinte na posição N-12, e remover esse substituinte, é tipicamente levado a cabo usando um composto de ecteinascidina com um grupo N-12 metilo. Exemplos de tais compostos encontram-se nos pedidos de patente PCT publicados e copendentes dos presentes inventores em relação a compostos de ecteinascidina. Estes pedidos são incorporados no presente documento na sua totalidade por meio de referência especifica. A remoção do grupo N-12 metilo pode ser alcançada usando procedimentos de desmetilação conhecidos.

Dentro da generalidade desta reação também se incluem o processo onde o substituinte é um grupo protetor, e o grupo protetor é removido. 0 grupo N-H na posição 12 pode ser derivatizado com um grupo R12a. Exemplos adequados são como foram definidos para Rd com a exceção de hidrogénio. Exemplos preferidos incluem acilo, especialmente alquil-CO-; alquenilo, especialmente alilo; ou alquil-O-CO-, especialmente tBOC. 0 processo para preparar ecteinascidina 729 e compostos relacionados pode ser modelado nos procedimentos de síntese dados no documento WO 0187895. Tipicamente, o processo pode utilizar um composto de partida com um grupo metilo em N-12, que é substituído por um grupo protetor.

Por exemplo, de acordo com um processo desta invenção, um composto de fórmula (B): 30 ΕΡ2305689Β1 OMe

onde R21 é como foi definido, e Prot3 é um grupo protetor, é submetido a conversão de -CH2NH2 na posição 1 a -CH2OH, proteção do -CH2OH na posição 1, proteção do -OH na posição 18, remoção do grupo metilo na posição 12, desproteção da posição 5, formação de uma 10-hidroxi-di-6,8-enona, proteção da posição 12, remoção do grupo protetor na posição 1, formação de um grupo lábil na posição 1 preparado para dar uma ponte 1,4, formação da ponte 1,4, desproteção da posição 18, modificação opcionalmente da ponte 1,4, remoção do grupo protetor na posição 12, e modificação adicional opcionalmente da estrutura. 0 -CH2OH na posição 1 é protegido, por exemplo, com um grupo terc-butildifenilsililoxi. 0 -OH na posição 18 é protegido, por exemplo, com um grupo metoxietoximetilo. A posição 12 é protegida, por exemplo, com um grupo alilo. Um grupo lábil na posição 1 é tipicamente formado usando um reagente de fórmula: -CH2-X'-C(=0)-CHNProt2-SH, onde X' é -0- ou -NProt1-, e Prot1 e Prot2 são como foram definidos. A ponte 1,4 pode ser modificada, como, por exemplo, por meio da remoção da proteção de - NProt1- para dar -NH- que pode então ser derivatizado ainda, desproteção de -NProt2- a -NH- e conversão opcionalmente a -C(=0)- que 31 ΕΡ2305689Β1 pode então ser derivatizado ainda, dando assim a série de possibilidades para a ponte 1,4 definida pela fórmula dada -(1)CH2-x-C (=0) -C (Ra) (Rb) -S (4)-.

Exemplos de modificações adicionais que podem ser levadas a cabo na estrutura incluem um ou mais de alteração do 1-subst ituinte tal como conversão de um grupo 21 nitrilo a um grupo 21-hidroxi. Alteração do 5-substituinte, alteração do 18- substituinte, oxidação do enxofre na ponte 1,4, adição de um substituinte na posição 12, e conversão de anel E a uma quinona.

PORMENORES ADICIONAIS DA INVENÇÃO

Os intermediários 1 e 16 (denotados como intermediários 21 e 36 respetivamente nos pedidos de patente WO 0069862 e WO 0187895) são úteis para a preparação de outros compostos de ecteinascidina como foi pormenorizado no presente documento. Também outros análogos de quinona relacionados são descritos no presente documento a partir dos intermediários 16 e 18 (denotados como intermediário 35 nos pedidos de patente WO 0069862 e WO 0187895).

Em particular, a partir do intermediário 1 é possivel sintetizar o composto de ocorrência natural de ecteinascidina ET729. 32 ΕΡ2305689Β1

De maneira similar, a partir do intermediário 16 é possível sintetizar os compostos de ocorrência natural ET594, ET745 e ET759B (via ET7 7 0 e ET743 como intermediários)) e as quinonas relacionadas a ET594 e ET736, respetivamente. A quinona relacionada a ET637 é obtida a partir do intermediário 18.

Et-594-quinona Et-736 Et-736-quinona 33 ΕΡ2305689Β1 AcHN AcHN Me. O'

Ó ÕH \_0 ÕH

Et-637

Et-637-quinona A síntese de ET729 é descrita no presente documento; a presente invenção é também direcionada na preparação de novos análogos de ET729' a partir do intermediário 12 seguindo uma sequência de síntese similar.

Num aspeto adicional da presente invenção, o intermediário 1 é usado na síntese de uma nova família de análogos de ecteinascidina (tal como 77) em que a ponte 1,4 inclui uma ligação de amida ao invés da ligação de lactona encontrado em ET-743.

I 77

Assim de acordo com a presente invenção, proporcionam-se derivados de ecteinascidina que têm uma ligação de amida ao invés da ligação de lactona encontrada em ET-743, ou que não possuem a ponte. A definição dos novos compostos exclui os compostos de ecteinascidina conhecidos. Os novos compostos incluem aqueles no quadro no final desta memória descritiva, e análogos dos mesmos. Os análogos podem diferir por um ou mais substituintes daqueles 34 ΕΡ2305689Β1 exemplificados nos documentos dos presentes inventores WO0187894, WO0187895 ou W00069862, e geralmente estão dentro das relevantes fórmulas dadas nos documentos dos presentes inventores WO0187894, WO0187895 ou W00069862.

Assim, uma fórmula geral para os compostos desta invenção obtém-se por meio da identificação de um novo composto na presente memória descritiva, especialmente o quadro, e generalização de acordo com as definições do resto da molécula com base numa fórmula geral dos pedidos anteriores. As definições preferidas dadas nos depósitos de WO anteriores dos presentes inventores então também se aplicarão.

Os métodos de síntese da presente invenção proporcionam os primeiros métodos para a preparação de ET729, ET594, ET745 e ET759B; e as quinonas relacionadas de ET594, ET637, ET736 e o análogo de lactama unido por ponte de ET743 e intermediários relacionados. Além disso, a presente invenção proporciona os primeiros métodos de síntese para a preparação de análogos diferentes de ET729.

Tais vias de síntese podem proporcionar vias mais económicas aos agentes antitumorais conhecidos, bem como permitir a preparação de novos compostos ativos.

Materiais de partida adequados para os novos processos de síntese incluem compostos relacionados com os alcaloides naturais bis(tetrahidroisoquinolina). Tais materiais de partida podem ser preparados a partir das diferentes classes de saframicina e antibióticos de safracina disponíveis de caldos de cultura diferentes como foi pormenorizado nos pedidos de patente WO 0187894 e WO 0187895 ou por outros processos de síntese ou bioquímicos. 35 ΕΡ2305689Β1

Num aspeto particular, a presente invenção é direcionada na utilização do Intermediário 1 (intermediário 21 nos pedidos de patente WO 0187894 e WO 0187895) num novo processo de síntese para a preparação de ecteinascidina 729 como é pormenorizado no Esquema I. 36 ΕΡ2305689Β1

Esquema I OMô

OMe HO. JL Mb

OMe

Me

OMe

OMu

ÇPMe MEMQ^ ,Me 0 nu JL OMe

OMe

13

Reagentes: a) NaN02, AcOH, THF b) TBDPSCI, Im, DMAP, DMF; c) MEMC1, NaH, THF/H20; d) m-CPBA, TEA, TFFA, DCM; e) HSnBu3, AcOH, (PPh3) 2PdCl2, DCM; f) (PhSeO) 20, DCM; g) CS2C03, AlilBr, DMF; h) TBAF, THF; i) Derivado de cisteína, EOC.HCI, DMAP, D1PEA, DCM; j) DMSO; Tf20, DIPEA, t-BuOH, t-Butil-tetrametil guanidina, Ac20, DCM; k) p-TsOH, CHC13; 1) iodeto de N-metil piridin-4-carboxialdeído, DBU, ácido oxálico; m) 3-hidroxi-4-metoxi-fenetil amina, sílica gel, EtOH; n) HSnBu3, (PPh3) 2PdCI2, AcOH, DCM; o) AgN03, CH3CN, H20 37 ΕΡ2305689Β1

Em geral, a conversão do Intermediário 1, ou um composto relacionado, a um produto de ecteinascidina tal como ET729 envolve as seguintes transformações: (a) Conversão do NH2 a OH por meio da reação, por exemplo, com nitrito de sódio em ácido acético. (b) Proteção do OH primário e o fenol E-anel. (c) Desmetilação da amina secundária unida por ponte seguido por desproteção e oxidação do fenol A-anel e subsequente alilação da amina unida por ponte. (d) Desproteção e esterificação do álcool primário com uma cadeia lateral de cisteína protegida para dar o intermediário 10. (e) Criação do anel unido por ponte por meio da reação de ciclização (para dar 11) e subsequentes reações de desproteção de N e 0 para dar o intermediário 12. (f) Introdução do resíduo de dopamina por meio de transaminação e reações de Pictect-Spengler para dar o intermediário 14. (g) Remoção do grupo protetor de N alilo e conversão do CN a OH.

Portanto, em resumo, é agora possível transformar o intermediário 1 (obtenível a partir de cianosafracina B) em ET- 72 9, que tem como resultado a primeira abordagem de síntese a esta ecteinascidina de ocorrência natural. A alta funcionalidade dos compostos intermediários necessita a utilização de grupos protetores para o fenol E-anel, a cadeia lateral de cisteína, o azoto unido por ponte e o álcool primário com a finalidade de prevenir reações secundárias indesejadas.

Como tal, uma série de intermediários alternativos pode ser gerada dependente da seleção particular de grupos 38 ΕΡ2305689Β1 protetores. A utilização de outras estratégias de grupo protetor não pormenorizadas é também parte desta invenção.

Num aspeto adicional, a presente invenção proporciona novos processos para a conversão do intermediário 16 (denotado como intermediário 36 nos pedidos de patente WO 0069862 e WO 0187895) nos compostos de ecteinascidina de ocorrência natural ET594, ET745 e ET759B como é pormenorizado no Esquema 2. O intermediário 16 é obtido a partir do intermediário 1 como descrito nos pedidos de patente mencionados acima, e tem a mesma estrutura do intermediário 13 de esquema 1 com -Me ligado a N ao invés de -Alilo.

Esquema 2

CuCJ, THF, Η*0 AgNOj CHjCN/H20

AgNOj CHíCN/HjO

HCOOH MeOM

39 ΕΡ2305689Β1

Em mais pormenores, tais processos envolvem as seguintes conversões. (a) Geração de ET594 a partir do intermediário 16 numa etapa única por meio da conversão do grupo CN num grupo OH. (b) Sintese de ET745 a partir de ET743 (obtido em duas etapas a partir do intermediário 16) por meio da clivagem redutora da funcionalidade de álcool secundário. (c) Geração de ET759B a partir do intermediário 16 em três etapas que envolvem a formação de ET770 seguida por meio da oxidação e conversão do grupo nitrilo num grupo hidroxi.

Assim, a presente invenção também proporciona novos métodos simples para produzir os compostos de ecteinascidina de ocorrência natural ET594, ET745 e ET759B a partir do intermediário 16 (obtenível a partir de cianosafracina B).

Além disso, a presente invenção proporciona um processo para a síntese dos derivados de quinona de ET594, ET637 e ET736 a partir do intermediário 16 (denotado como intermediário 36 nos pedidos de patente WO 0187894 e WO 0187895) e intermediário 18 (denotado como intermediário 35 nos pedidos de patente WO 0069862 e WO 0187895) . (Esquema 3) . 40 ΕΡ2305689Β1

Esquema 3

NH2

21 NO(SOdK)2 acetona } ΚΗ2Ρθή/ Na2HP04

20

CuCf. THF, H20

22

CuC!, THF. H20

N0(S04K)2 scetoriõ t kh2po4/ Na2HP04

41 ΕΡ2305689Β1

Em mais pormenores, tais processos envolvem as seguintes conversões. (a) Geração de ET637-quinona a partir do intermediário 18 em três etapas que envolvem a formaçao do intermediário 19 por meio da acetilação do grupo amina, seguida por meio da oxidação do anel fenólico e conversão do grupo nitrilo num grupo hidroxilo. (b) Sintese de ET594-quinona em duas etapas a partir do intermediário 16 através de uma reação de oxidação do anel fenólico e conversão do grupo nitrilo num grupo hidroxilo. (c) Sintese de ET736-quinona em três etapas a partir do intermediário 16 que envolve a introdução da fração de triptamina para gerar o intermediário 22, reação de oxidação e conversão do grupo nitrilo num grupo hidroxilo.

Assim, a presente invenção proporciona métodos novos e curtos para produzir os derivados oxidados dos compostos de ecteinascidina de ocorrência natural Et594, ET637 e ET736 a partir dos intermediários 16 e 18 (ambos obteníveis a partir de cianosafracina B).

Numa forma de realização adicional e seguindo a sequência de síntese de ET729, a presente invenção proporciona processos para produzir novos e diferentes análogos de ET729 a partir do intermediário 12. Os métodos preferidos de produção dos compostos de fórmula I, II e III são descritos a seguir nos seguintes esquemas de reação com exemplos de grupos substituintes típicos. 42 ΕΡ2305689Β1

43 ΕΡ2305689Β1

Esquema 4

V-ο HSnBu3 (PPh3)2PdCI2

HSnBUaIPPhaJzPdClz

CuCI

44 ΕΡ2305689Β1

Em geral, a conversão do Intermediário 12 ou 13, a diferentes análogos de ET729 envolve as seguintes transformações: (a) Reações de acilação através dos procedimentos diferentes descritos na parte experimental, reações de dealilação em N-12 e interconversão do grupo nitrilo no grupo hidroxilo. 0 composto 40 é um exemplo do intermediário com grupos substituintes típicos em que duas reações consecutivas de acilação ocorreram, seguidas pelas duas últimas etapas descritas acima. (b) Geração de composto 35 a partir do intermediário 30 numa etapa única por meio da reação de acetilação em N-12 . (c) Síntese de composto 43 a partir do composto 13 pela reação de dealilação e conversão do grupo nitrilo no grupo hidroxilo com CuCl. 45 ΕΡ2305689Β1 Esquema 5

SJ 54

Em mais pormenores, tais processos envolvem as seguintes transformações a partir do intermediário 13. (a) Geração do intermediário 46 partir do composto 14 por meio da em duas proteção etapas a do grupo 46 ΕΡ2305689Β1 hidroxilo como carbonato de Boc e desacetilação em C-5 com KOH. (b) Síntese de compostos 53 e 54 a partir do intermediário 46 seguindo a mesma sequência de síntese: Reação de acilação em C-5 com cloreto de cinamoilo ou ácido octanoico, desproteção do grupo carbonato, reação de dealilação em N-12 e finalmente conversão do grupo nitrilo no grupo hidroxilo. (c) Síntese de diferentes análogos de ET729 a partir do intermediário 13 que envolve três etapas: introdução da fração de triptamina, reação de dealilação e conversão do grupo nitrilo no grupo hidroxilo.

Esquema 6

Em mais pormenores, o esquema 6 descreve a síntese de composto 67 e 68 a partir do intermediário 14 e ET729, respetivamente.

Numa forma de realização adicional, a presente invenção proporciona um processo para a síntese de uma nova família de compostos de ecteinascidina em que a ligação de lactona da ponte 1,4 de ET743 e intermediários relacionados é substituída com uma ligação de amida, como é 47 ΕΡ2305689Β1 pormenorizado no Esquema 7. 48 ΕΡ2305689Β1

Esquema 7

76 76 77

Em mais pormenores, o intermediário 1 (intermediário 21 nos pedidos de patente WO 0069862 e WO 0187895) pode ser convertido a tais compostos através da seguinte sequência de etapas: (a) Introdução de um fragmento de cisteina protegida numa etapa única por meio do acoplamento com a funcionalidade de amina primária do intermediário 1. (b) Manipulações de grupo protetor e uma reação de oxidação para gerar o intermediário 72. (c) Ciclização para gerar a estrutura de ponte de lactama desejada seguida por desproteção da amina primária. (d) Finalização da síntese através de transaminação, reação de Pictect-Spengler e conversão do nitrilo num grupo hidroxilo. 49 ΕΡ2305689Β1

Assim, esta invenção proporciona um processo para a síntese de uma grande família de compostos relacionados com ET743 em que a ligação de lactona da estrutura de ponte foi substituída por uma ligação de lactama.

Como o perito na especialidade apreciará prontamente, os esquemas de reação descritos no presente documento podem ser modificados e/ou combinados de várias formas, e as sequências alternativas de etapas e os compostos gerados a partir das mesmas são parte desta invenção.

Assim, por estas e outras vias, é possível transformar cianosafracina B num número de intermediários e derivados com potencial atividade terapêutica antitumoral. Estes intermediários podem ser feitos a partir de compostos já descritos, ou usando vias alternativas.

NOVOS COMPOSTOS ATIVOS

Encontrou-se adicionalmente que certos dos compostos da invenção que se prepararam inicialmente como intermediários têm atividade excecional no tratamento de cancros, tais como leucemias, cancro do pulmão, cancro do cólon, cancro renal e melanoma.

Assim, a presente invenção proporciona um método de tratamento de qualquer mamífero, notavelmente um ser humano, afetado por cancro que compreende administrar ao indivíduo afetado uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou uma composição farmacêutica do mesmo. A presente invenção também se refere a preparações farmacêuticas, que contêm como ingrediente ativo um composto ou compostos da invenção, bem como os processos 50 ΕΡ2305689Β1 para a sua preparaçao.

Exemplos de composições farmacêuticas incluem qualquer sólido (comprimidos, pílulas, cápsulas, grânulos, etc.) ou líquido (soluções, suspensões ou emulsões) com composição adequada ou administração oral, tópica ou parentérica, e podem conter o composto puro ou em combinação com qualquer portador ou outros compostos farmacologicamente ativos. Estas composições podem precisar ser estéreis ao serem administradas parentericamente. A administração dos compostos ou composições da presente invenção pode ser por qualquer método adequado, tal como infusão intravenosa, preparações orais, administração intraperitoneal e intravenosa. Prefere-se que tempos de infusão de até 24 horas sejam usados, mais preferentemente 2-12 horas, com 2-6 horas o mais preferido. Tempos curtos de infusão que permitem que o tratamento seja levado a cabo sem uma estância durante a noite em hospital são especialmente desejáveis. No entanto, a infusão pode ser 12 a 24 horas ou mesmo por mais tempo se for requerido. A infusão pode ser levada a cabo em intervalos adequados de desde 2 até 4 semanas. As composições farmacêuticas contendo compostos da invenção podem ser administradas por lipossoma ou encapsulação em nanoesfera, em formulações de libertação sustentada ou por outros meios de administração padrão.

A dosagem correta dos compostos variará de acordo com a formulação particular, o modo de aplicação, e o situs particular, hospedeiro e tumor a ser tratado. Outros fatores como idade, peso corporal, sexo, dieta, tempo de administração, taxa de excreção, condição do hospedeiro, combinações de fármaco, sensibilidades de reação e gravidade da doença serão levados em consideração. A 51 ΕΡ2305689Β1 administração pode ser levada a cabo continuamente ou periodicamente dentro da dose máxima tolerada.

Os compostos e composições desta invenção podem ser usados com outros fármacos para proporcionar uma terapêutica de combinação. Os outros fármacos podem formar parte da mesma composição, ou ser proporcionados como uma composição separada para a administração ao mesmo tempo ou um tempo diferente. A identidade do outro fármaco não é particularmente limitada, e candidatos adequados incluem: a) fármacos com efeitos antimitóticos, especialmente aqueles que se direcionam elementos citoesqueléticos, incluindo moduladores de microtúbulos tais como fármacos de taxano (tal como taxol, paclitaxel, taxotere, docetaxel) , podofilotoxinas ou alcaloides de vinca (vincristina, vinblastina); b) fármacos antimetabolito tais como 5-fluorouracil, citarabina, gencitabina, análogos de purina tais como pentostatina, metotrexato); c) agentes alquilantes tais como mostardas de azoto (tais como ciclofosfamida ou ifosfamida); d) fármacos que se direcionam a ADN tal como os fármacos de antraciclina adriamicina, doxorubicina, farmorubicina ou epirubicina; e) fármacos que se direcionam a topoisomerases tais como etopósido; f) hormonas e agonistas ou antagonistas de hormona tais como estrogénios, antiestrogénios (tamoxifeno e compostos relacionados) e androgénios, flutamida, leuprorelina, goserelina, ciprotrona ou octreótido; g) fármacos que se direcionam a transdução de sinal em células tumorais incluindo derivados de anticorpo tais como herceptina; h) fármacos alquilantes tais como fármacos de 52 ΕΡ2305689Β1 platina (cisplatina, carbonplatina, oxaliplatina, paraplatina) ou nitrosoureias; i) fármacos que afetam potencialmente a metástase de tumores tais como inibidores de metaloproteinase de matriz; j) terapêutica génica e agentes antissense; k) terapêuticas com anticorpos; l) outros compostos bioativos de origem marinha, notavelmente as didemninas tais como aplidina; m) análogos de esteroide, em particular dexametasona; n) fármacos anti-inflamatórios, em particular dexametasona; e o) fármacos antieméticos, em particular dexametasona. A presente invenção também se refere aos compostos da invenção para utilização num método de tratamento, e à utilização dos compostos na preparação de uma composição para o tratamento de cancro.

EXEMPLOS A presente invenção é ilustrada pelos seguintes exemplos. PARTE EXPERIMENTAL Exemplo 1

OMe OMe

53 ΕΡ2305689Β1

Uma solução de 1 (9,84 g, 18,97 mmol) em THF (569 ml) e H20 (285 ml) foi arrefecida a 0 °C com um banho de gelo. Então, NaN02 (1,96 g, 28,45 mmol) e 90 % de AcOH aq. (18,97 ml, 0,33 mol) foram adicionados a 0 °C e a mistura foi agitada a 23 °C durante 18 h. Após o arrefecimento da reação até 0 °C, uma solução de bicarbonato de sódio saturada aquosa (300 ml, pH básico) e diclorometano (500 ml) foram adicionados. Após extração, a fase aquosa foi extraída adicionalmente com diclorometano (2 x 300 ml) . Os extratos orgânicos combinados foram secos em sulfato de sódio e evaporado até a secura sob pressão reduzida. O sólido bruto foi então dissolvido em MeOH (379 ml), e NaOH a 1 M (38 ml) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada a 23 °C durante 4 h. Após diluição com EtOAc (600 ml) a 0 °C, a camada orgânica foi lavada com uma mistura de água (400 ml) e, uma solução de bicarbonato de sódio saturada aquosa (100 ml, pH básico) . Após extração, a fase aquosa foi extraída adicionalmente com EtOAc (3 x 300 ml) . Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SC>4, filtrados e concentrados a vácuo. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (Si02, Hex:EtOAc gradiente de 3:1 a 2:1) para propiciar 2 (4,55 g, 46 %) como um sólido branco. Rf: 0,33 (Hex:EtOAc 1:1). 3H RMN (300 MHz, CDC1 3) 6,48 (s, 1H) , 6, 15 -6, 02 (m , 1H) , 5, 92 (d , 1H) , 5,86 (d , 1H) , 5,77 (s, 1H) , 5,39 (dd , 1H) , 5,26 (dd, 1H), , 4,24-4 ,15 (m, 3H) , 4, 04 (d, 1H) , 3, 97 (t, 1H) , 3, 74 ( s, 3H) , 3,64 (dt, 1H) , 3,4 3 (dd, 1H) , 3,3 i8-3,34 (m, 2H) , 3, 31 (t, 1H) , , 3,22 (dd, 1H) ( , 3, 10 (dd, 1H) , 2,49 (d, 1H) , 2, 34 (s, 3H) , 2,24 (s, 3H) , 2,11 (s, 3H) , 1,88 (dd, 1H) . 13C RMN (75 MH z, CDC13 ) 148,6 , 146 ,7, 144,4, 143, 0, 138,9, 133, 9, 130, 2, 129,1, 121,1, 120, 9, 117,7, 117, 4, 116,8, 113, 3, 112, 3, 101,1, 74,3, 63,7, 60, 6, 60, 1, 58 ,1, 56, 9, 56, 7 , 55,4, 41 ,7, 26,2 , 25,7, 15,7, r 9, 3. ESI- MS m/ z : Calcd. para C 29H33N hOe: 519,! 39. Encontrado 54 ΕΡ2305689Β1 (M+l)+: 520,3

Exemplo 2 OMe

TBDPSCI, (m, DMAP, DMF OH OMe

OTBDPS 3 2 A uma solução de 2 (9,33 g, 0,018 mol), em DMF anidro (40 ml, 0,45 M) foi adicionado a 23 °C imidazol (3,05 g, 0,045 mol) e DMAP (219 mg, 0,0018 mol) . A solução foi arrefecida a 0 °C e TBDPSCI (7,0 ml, 0,027 mol) foi gota a gota adicionado sob atmosfera de árgon. A mistura de reação foi deixada a alcançar 23 °C e deixada nesta temperatura durante 1 hora e 15 minutos. Após este tempo, água (350 ml) e uma mistura de acetato de etilo/hexano (3:2, 250 ml) foram adicionados. A fase orgânica foi separada, seca em sulfato de sódio e filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/ hexano em gradiente de 15:85 a 2:3) para propiciar 3 (11,8 g, 87 %) como um sólido amarelo.

Rf: 0,36 (acetato de etilo/hexano 2:3) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,55 (d, 2H) , 7,41-7,22 (m, 8H) , 6,45 (s, 1H) , 6,18-6,02 (m, 1H) , 6,78 (s, 2H) , 6,61 (s, 1H) , 5,35 (d, 1H), 5,21 (d, 1H) , 4,42 (d, 1H) , 4,18 (m, 2H) , 4,05 (m, 2H) , 3,78 (s, 3H) , 3,64 (dd, 1H) , 3,41-3,31 (m, 2H) , 3,29-3, 20 (m, 2H) ; 3,02 (dd, 1H) , 2,70 (d, 1H) , 2,30 (s, 3H) , 2,28 (s, 3H) , 2,08 (s, 3H) , 2,02 (dd, 1H) , 0,90 (s, 9H) . 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : δ 148, 69, 146, 94, 144,33, 142,90, 139,35, 135,98, 135,67, 134,27, 133,56, 55 ΕΡ2305689Β1 132,94, 131,49, 129,84, 129,70, 128,59, 127,79, 127,73, 122,13, 121,24, 118,94, 117,61, 117,55, 113,22, 112,04, 101, 12, 74,52, 68,24, 61,89, 60, 93, 59,29, 57, 68, 57, 06, 55, 73, 42,01, 26, 93, 26, 79, 25, 84, 19, 19, 16, 07, 9, 56. ESI-MS m/z: Calcd. para C45H51N3O6SÍ: 757,3. Encontrado (M+Na)+: 780,3.

Exemplo 3 O Me

MEMCI, NaH THF/H20 OMe

A uma solução do intermediário 3 (11,75 g, 0,016 mol) em THF/H20 (113 ml / 0,31 ml, 0,14 M) foi adicionado MEM-cloreto (3,0 ml, 0,026 mol). A solução foi arrefecida a 0 °C e hidreto de sódio (930 mg, 0, 023 mol) foi adicionado porção a porção (1 hora e 15 minutos para a adição) . A mistura de reação foi deixada a 0 °C sob atmosfera de Árgon durante 1 hora. Após este tempo, a água (150 ml) foi adicionada e a fase aquosa foi extraída com diclorometano (2x 150 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida para propiciar o intermediário 4 (13,4 g, 100 %) como um sólido amarelo. Este composto é usado para a seguinte etapa sem purificação, etilo/hexano 1 :2) Rf: 0, 32 (acetato de XH-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,58 (d, 2H) , 7, 38 (m, 6H), 7,27 (m, 2H) , 6,70 (s, 1H), 6,18-6,02 (m, 1H) t 5, 75 (s, 1H), 5,60 (s, 1H) , 5,40 (d, 1H) , 5,28 (d, 1H) t 5,24 (d, 1H), 5,19 (d, 1H), 4,50 (s largo, 1H), 4,38 (s largo, 1H), 4,20- 56 ΕΡ2305689Β1 3, 97 (m, 4H) , 3, 85 (m, 1H) , 3,70 (s, 3H) , 3, 58 (m, 3H) , 3, 38 (s, 3H) , 3, 38 (m, 2H) , 3,22 (m, 2H) , 3, C )2 (dd, 1H) , 2, 70 (d, 1H) , 2, 38 (s, 3H) , 2,24 (s, 3H) , 2, 05 (s, 3H) , 1, 93 (dd , 1H) , 0, 84 (s, 9H) . 13C-RMN 1 (75 MHz t CDCI3) : δ 14 8,76, 148 ,60, 148, , 4 9 , 139 ,29, 135, 87, 135,63 t 134 , 18, 133 ,23, 132, 89, 130, 85, 130 ,49, 12 9, 89, 129,77 t 127 , 82, 127 ,73, 125, 45, 121, 76, 118 ,45, 117,55, 113,23 , 111, 97, 101, 13, 98,49, 95 , 79, 74,26, 71,98, 71,95, 69,57, 67,44, 67,37, 66, 95, 61, 32, 59,85, 59,18, 59,10, 57,50, 57, 16, 55, 58, 41, 69, 29, 87, 26, 83, 26,83, 26,12, 19,05, 16, 07, 9, 46. ESI-MS m/ z : Calcd. para C49H59N3O8SÍ: 845,4. Encontrado (M+l)+: 846,3.

Exemplo 4

A uma solução do intermediário 4 (2,51 g, 0,003 mol) em diclorometano anidro (25 ml, 0,12 M) foi adicionado a -20 °C sob atmosfera de Árgon m-CPBA (1,33 g, 0,006 mol). A solução foi deixada a alcançar -10 °C durante 25 minutos, TEA (4,14 ml, 0,03 mol) foi adicionado e a mistura de reação foi deixada a 0 °C, finalmente TFAA (6,29 ml, 0,045 mol) foi gota a gota adicionado e a solução mantida a 0 °C durante 30 minutos. Após este tempo, a água foi adicionada e a fase aquosa foi separada, seca em sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em 57 ΕΡ2305689Β1 coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:4 a 6:1 e lavagens finais com metanol) para propiciar o intermediário 5 (2,1 g, 85 %) como um sólido amarelo.

Rf: 0,19 (acetato de etilo/hexano 1:1) ^-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,55 (d, 2H) , 7,45-7,28 (m, 8H) , 6, 70 (s, 1H) , 6, 14 -6,02 (m, 1H) , 5, 81 (d, 1H), 5, 67 (d, 1H) , 5, 43- -5, 35 (m, 2H) , 5,26 (m, 2H) , 5, 03 (s largo , 1H) , 4,73 (s largo, 1H) , 4, 68 (m, 1H) , 4,22 -4, 09 (m, 3H) , 3,81 (s largo, 2H) , 3, 73 (s, , 3H) , 3, 61 (dd, 1H) , 3,53 (s largo, 4H) , 3,46- -3,28 (m, 2H) , 3,34 (s, 3H) , 2, 97 (d, 1H) , 2,25 (s, 3H) , 2 . .11 (s, 3H), 1, 95 (dd, 1H) , 0,94 (s, 9H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C48H57N308Si: 831,4. Encontrado (M+Na)+: 832,3.

Exemplo 5OMe OMe

A uma solução do intermediário 5 (5,9 g, 7,09 mmol) , (PPh3)2PdCl2 (399 mg, 0,57 mmol), ácido acético (2,03 ml, 35,47 mmol) em diclorometano anidro (45 ml, 0,16 M) foi gota a gota adicionado a 23 °C hidreto de tributilestanho (6,7 ml, 24,83 mmol). A mistura de reação foi deixada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 35 minutos. A mistura de reação foi vertida em coluna (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:4 a 8:1) para propiciar o intermediário 6 (3,97 g, 71 %) como um sólido amarelo. Rf: 0,17 (acetato de etilo/hexano 1:1) 58 ΕΡ2305689Β1 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7,57(d, 2H) , 7,43- -7,24 (m, 8H) , 6, 68 (s, 1H), 5, 73 (d, 1H) , 5, 58 (d, 1H) , 5, 47 (d, 1H) , 5,22 (d, 1H), 4, 54 (d, 1H) , 4,47 (d, 1H) , 4,14 (m, 1H) , 4,04 (dd, 1H) , 3 , 94 (m, 1H) , 3, 73 -3, 65 (m, 4H) , 3, 70 (s, 3H) , 3, 39 (s, 3H ) , 3, 38- -3, 30 (m, 2H) , 3, 25 (m, 1H) , 3, 11 (dd, 1H) ; 2,91 (d, 1H) , 2,24 (s, 3H) , 2, 06 (s, 3H) , 1, 84 (dd, 1H) , 0, 91 (s, 9H) . ESI- -MS m/ z: Calcd. para C45H5 3N308S i: 791,4 1. Encontrado (M+Na)+: 814,3.

Exemplo 6

A uma solução do intermediário 6 (l,87g, 2,36 mmol) em diclorometano anidro (20 ml, 0,12 M) foi gota a gota adicionado a -15 °C sob atmosfera de Árgon uma solução de anidrido benzenoseleninico (1,82 g, 3,53 mmol) em diclorometano anidro (20 ml) . A solução foi deixada a -15 °C durante 25 minutos. A mistura de reação foi diluída com diclorometano, e uma solução saturada de bicarbonato de sódio foi adicionada a -10 °C. A fase aquosa foi extraída com diclorometano, as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto da reação foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:6 a 6:1) para propiciar o intermediário 7 (1,53 g, 80 %) como um sólido amarelo e como uma mistura de isómeros 3:1 por 1H-RMN. 59 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,24 (acetato de etilo/hexano 2 : D 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7 , 64 (dd, , 6H) , 7,57 (d, 2H) , -J O I -J 25 (m, 12H) , 6,65 (s, 1H) , 6, 53 (s , 1H) , 5, 65 (s, 1H) , 5, 42 (s, 1H) , 5,25 (s, 1H) , 5, 23 (s , 1H) , 5,22 (m, 1H) , 5, 19 (d, 1H), 5,11 (d, 1H) , 5, 06 (d , 1H) , 4,80 (s, 1H) , 4, 73 (s, 1H) , 4,43 (d, 1H) , 4, 36 (m , 1H) , 4,32 (m, 1H) , 4, 25 (d, 1H) , 3,97 (dd, 1H) ; 3, 89 (s, 3H) , 3,86- 3,77 (m, 4H) , 3,74- 3, 60 (m, 4H) , 3,59 (s , 3H) , 3,55- 3,48 (m, 4H) , 3, 38-3,35 (m, 2H), 3,34 (s, 3H) , - 3, ,31 (s, 3H), 3 ,18- 3,03 (rr 1, 2H) , 2,96 (dd, 1H) , 2,73 (d, 1H) , 2,57 (d, 1H) , 2,21 (s d 3H) , 2,14 (s, 3H) , 2,17-1, 86 (m, , 2H) , 1,75 (s, 3H) , i, 70 (s, 3H) , 1,07 (s, 9H), 0,99 (s, 9H) . 13C-RMN (75 MHz , CDC13) : δ 201,05, 197, 78, 160 ,43 r 158,64, 148 , 81, 147 ,84, 146,88 , 146,70, 140, 01, 137 , 97 r 135,99, 135 , 97, 135 ,79, 133,64 , 133,00, 132, 80, 131 , 33 r 131,25, 130 , 61, 130 ,41, 130,05 , 129, 98, 129, 91, 129 ,04 r 127,95, 127 , 91, 127 ,77, 127,60 , 125, 98, 125, 82, 117 , 38 r 117,26, 113 ,51, 111 ,22, 104,5C ), 104,37, 101 ,39 , 100,55, 98,16, 95 , 84, 92, 51, 73, 09, 71,96, 71 , 94, 71, 92, 70, 48 , 69,67 , 69 , 60, 67, 65, 66,99, 64, 65, 60 , 68, 60, 23. 60, 12 , 60,02 , 59 ,35, 59, 26, 59,24, 59,22, 59 ,19, 59, 03, 56, 81 , 56,44 , 50 ,30, 49, 99, 49,73, 49,61, 43 ,24, 36, 30, 31, 30 , 27,10 , 19 ,57, 19, 23, 16,03, 16,01, 7,55 , 7,27. ESI -MS m/z: Calcd. para C4Í )H53N309Si: 807,4. Encontrado (M+l)+: 808,3. 60 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 7

A uma solução do intermediário 7 (3,78 g, 4,68 mmol) em DMF anidro (30 ml, 0,16 M) foi adicionado a 23 °C e sob atmosfera de Árgon carbonato de césio (5,35 g, 16,39 mmol) e brometo de alilo (2,03 ml, 23,42 mmol). A mistura de reação foi deixada a 23 °C durante 16 horas, arrefecida a 0 °C e ácido acético adicionado gota a gota para destruir o excesso de base. A solução foi diluída com diclorometano e uma solução saturada de bicarbonato de sódio foi gota a gota adicionado. A fase aguosa foi extraída com diclorometano, as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. 0 material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de hexano/acetato de etilo em gradiente de 100/0 a 2: 1) para propiciar 0 intermediário 8 (3, 62 g, 91 %) 1 como um sólido amarelo. Rf: 0,40 (acetato de etilo/hexano 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7,65 (m, 3H) , 7,43 -7,28 (m, 7H) , 6,54 (s, 1H) , 5,88 (m, 1H) , 5,31- -5, 10 (m, 2H) , 5,24 (S, 1H) , 5,19 (s, 1H) , 5,12 (d, 1H) , 5, 02 (d, 1H) , 4,47 (d, 1H) , 4,34 (dd, 1H), 3,99 (dd, 1H) , 3, 93- 3,86 (m, 2H), 3 ,81- 3,73 (m, 2H) , 3, 62-3,53 (m, 2H) , 3, 61 (s, 3H) , 3,41 (m, 1H) , 3,37 (s, 3H) , 3,23 (m, 1H) , 3, 08- 2, 97 (m, 2H) , 2,79 (ddd, 2H) , 2,39 (d, 1H), 2,24 -1, 95 (m, 1H) , 2,17 (s, 3H) , 1,71 (s, 3H), 1,07 (s, 9 H) 1. ESI-MS m/ z : Calcd. para C48H57N3O9S1: 847,4. Encontrado (M+l)+: 848,2. 61 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 8 ΕΡ2305689Β1 OMe

TBAF, THF Me ΟΜθ

OH 9 A uma solução do intermediário 8 (942 mg, 1,11 mmol) em THF anidro (10 ml, 0,1 M) e sob atmosfera de Árgon foi adicionado gota a gota TBAF (3,33 ml, 3,33 mmol) a 23 °C. A mistura de reação foi deixada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 2 horas e 20 minutos. A solução foi diluída com acetato de etilo e uma solução saturada de salmoura foi adicionado. A fase orgânica foi separada, seca em sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/ hexano em gradiente de 1:2 a 2:1) para propiciar o intermediário 9 (461 mg, 68 %) como um sólido amarelo. Rf: 0,26 (acetato de etilo/hexano 2:1) 1H-RMN (300 MH z, CDC13) : δ 6 >, 66 (s, 1H) , 6, 60 (: 3, 1H) , 5, 88 -5, 80 (m, 1H) , , 5, 81 (s, 3H) , 5, 80 (s, 3H) , 5 ,20 (d, 2H) , 5, 12 (d, 1H) , 5,07 (d, 1H) , 4, 12 (m, 1H) , 4 ,07 (m, 1H) , 3, 91-3,67 (m, • 4H) , 3, 85 (s, . 3H) , 3,59- -3,49 ( m, 4H) , 3,41 (d l largo, 1H) , 3,34 (m, 1H) , 3,: 31 (s, 3H) , 3 i, 24 (dt, 1H) , 3, 09 (dd, 1H) , 2,86 (ddd, , 2H), 2 , 53 (d, 2H) , 2 , 18 (s, 3H) , 2, 05 (d, 2H), 1,75 (s, 3H) . 13c-rmn (75 MHz, ( 3DC13 ) : δ 198, 81, 159,04 , i 49,01, 148, 23, 140 , 94 , 1 35,34, 131 ,42, 130, 99, 125,74 , 123,58, 117, 99, 117 ,21 , 1 11,06, 104 ,41, 101, 86, 98,52, 71, ,86, 70,57, 69, , 43, 62, 25, 60, 63 r 59 ,22, 59, 1 9, 58,46, 56, 68, 56 ,22, 55, 74, 51, 89, 36,57 r 25 ,79, 15,98, 7,52. 62 ΕΡ2305689Β1 ESI-MS m/z: Calcd. para C32H39N3O9: 609, 3. Encontrado (M+Na)+: 632,3.

Exemplo 9

A uma solução do intermediário 9 (1,43 g, 2,34 mmol) e derivado de cisteina (1,40 g, 3,51 mmol) em diclorometano anidro (20 ml, 0,12 M) , foi adicionado a 23 °C EDC.HC1 (1,12 g, 5,85 mmol), DMAP (144 mg, 1,17 mmol) e DIPEA (0,24 ml, 1,36 mmol). A mistura de reação foi deixada sob atmosfera de Árgon durante 2 horas. Uma solução saturada de bicarbonato de sódio foi adicionada e a fase aquosa foi extraída com diclorometano, as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:4 a 2:1) para propiciar o intermediário 10 (1,42 g, 61 %, alguma parte do material de partida foi recuperada) como um sólido amarelo e como uma mistura de 4 isómeros. Rf: 0,26 (acetato de etilo/hexano 2:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,70 (d, 8H) , 7, 66-7,58 (m, 8H) , 7,37-7,23 (m, 16H), 6,59 (s largo, 2H), 6,49 (s, 1H), 6,47 (s, 1H) , 5, 87-5, 79 (m, 4H) , 5, 69, 5, 67, 5, 65 (s largo, 6H) , 5,56 (s, 2H) , 5,38-4, 97 (m, 20H) , 4,61-4,37 (m, 12H) , 4,18- 3,85 (m, 28H), 3,78 (s, 3H) , 3,77-3, 66 (m, 2H) , 3,59 (s, 63 ΕΡ2305689Β1 ΕΡ2305689Β1 3H) , 3, 58 (s, 3H), 3, 58 (s, 3H) , 3,53 (m, 8H) , 3,35 (m, 2H) , 3, 35 (s, 3H), 3, 35 (s, 3H) , 3,32 (s, 3H) , 3,31 (s, 3H) , 3, 21- 2,55 (m, 36H) , 2,43-2, 30 (m, 4H) , 2,17 (s, 6H) , 2,12 (s, 3H) , 2,10 (s, 3H) , 1,74, 1,74, 1,73 (s, 12H), 1,22 (s, 36H) . ESI-MS m/ z : Calcd. para C54H62 :N40i2S: 990,4 . Encontrado (M+l)+: 991,2.

Exemplo 10 OMe

OMe N'Bu 4) X Μθ2Ν NMe2

1) DMS0,Tf20

2) DIPEA 3) *BuOH 5) Ac20, CH2CI2 0 balão de reação foi flambado duas vezes, purgado a vácuo/Árgon diversas vezes e mantido sob atmosfera de Árgon para a reação. A uma solução de DMSO (43,0 ml) em CH2CI2 anidro (4,0 ml) foi adicionado gota a gota anidrido triflico (20,3 ml) a -78 °C. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 20 minutos, então uma solução de 10 (isómero maior) (60 mg, 0,06 mmol) em CH2C12 anidro (2,0 ml) a -78 °C foi adicionado via cânula. Durante a adição a temperatura foi mantida a -78 °C em ambos os balões. A mistura de reação foi agitada a -40 °C durante 35 minutos. Após este tempo, 'Pr2Net (160 ml) foi adicionado gota a gota e a mistura de reação foi mantida a 0 °C durante 45 minutos. Então 1BuOH (57 ml) e guanidina (96 ml) foram adicionados gota a gota e a mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 40 minutos. Após este tempo, anidrido acético (86 ml) foi adicionado gota a gota e a mistura de reação foi mantida a 23 °C durante 1 hora mais. Então a mistura de 64 ΕΡ2305689Β1 ΕΡ2305689Β1 uma solução As camadas filtradas e reação foi diluída com CH2C12 e lavado com saturada aquosa de NH4C1, NaHC03 e NaCl. orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, concentradas. 0 resíduo foi purificado por uma cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:4 a 1:1) para propiciar 11 (34 mg, 67 %) como um sólido amarelo pálido.

Rf: 0,43 (acetato de etilo/hexano 1:1) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6,7! 9 (s, 1H) , 6,08 (d, 1H), 5, 98 (d, 1H) , 5,92- 5, 82 (m, 1H) , 5,32 (d, 1H) , 5, 18 1 [m, 1H) , 5,17 (d ., 1H) , 5, 12 (d, 1H) , 5, 01 (d, 1H) , 4,62 1 [d, 1H) , 4,52 (s largo, 1H) , 4,41 (d, 1H) , 4,28 (m, 2H) , < 1,20 (d, 1H), 4, 14 (dd, 1H) , 3, 91 (oct, . 2H) , 3,76 (s, 3H), : 3, 59 (t, 2H), 3, 54 (m, 1H) , 3,44 (d, 1H) , 3,37 (s, 3H) , 3,00 (m, 2H), 2, 90-2,72 (m, 3H), 2,37- -2,24 (m, 1H) , 2,31 1 (s, 3H) , 2,29 (s , 3H), 2 ,02 ( s, 3H), 1, 45 (s, 9H). 13c-rmn (75 MHz , CDCI3) : δ 17 C 1,89, 168,86, 1 55, 36, 149 ,40, 148,60, 145,97 , 141 ,19, 140, 64, 135,47, 131,65, 131 ,15, 125,54, 125,24 , 120 ,68, 118, 18, 118,09, 1] -3,78, 113 ,54, 102,21, 98,33, 79, 95, 71, 93, 69,35, 61, 60, 60,60, 60 ,44, 59,93, 59,39, 59,30 , 55, 90, 54, 1- 4, 54,03, 51,18, 41 , 95, 33, 06, ! 28,72, 2 8,45, 23,93, 20 ,59, 16,11, 14, 42, 9, 83 . ESI- MS m/z: Calcd. para C42H52N4Oi2S : 836,3. Encontrado (M+l)+: 837,1 65 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 11

A uma solução do intermediário 11 (29 mg, 0,035 mmol) em CHC13 (1 ml, 0,03 M) foi adicionado a 23 °C p-TsOH (40 mg, 0,21 mmol) . A mistura de reação foi deixada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 15 horas. A reação foi diluída com diclorometano e uma solução saturada de bicarbonato de sódio foi adicionada. A fase aquosa foi extraída com diclorometano, as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:4 a 2:1 1 e lavagens finais com metanol) para propiciar o intermediário 12 (16 mg, 71 %) como um sólido amarelo. Rf: 0,07 (acetato de etilo/hexano 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,52 (s, 1H) , 6,07 (d, 1H) , 5,98 (d, 1H) , 5, 85 (m, 1H) , 5,13-5,06 (m, 2H) , 5, 01 (d, 1H) , 4,52 (s largo, 1H) , 4,33 > (d, 1H) # . 4,2 ! 6 (: 3, 1H), 4, 19 (d, 1H) , 4, 12 (m, LH) , 3, 77 (s, 3H), 3, 53 (d largo, 1H) , 3,40 (d, 1H) , 3,28 (m, 1H) , 2,95-2,75 (m, 4H) , 2,30 (s, 3H) , 2,28 (s , 3H), 2 ,21 (s largo, 2H), 2, 03 (s, 3H) . 13c-rmn (75 MHz , CDCI3) : δ 174,59, 168 , 91, 147,85 , 145 ,86, 143, 10, 141,22 , 140, 56, 135,21, 131, 27, 129, 53, 121 , 11, 120, 72, 118,93 , 1 18,30, 114,01, 113 ,54, 102,15 1, 61 ,55, 66 ΕΡ2305689Β1 60,44, 60,30, 59,73, 59,53, 56,09, 54,22, 53,31, 52,07, 41,95, 34,58, 24,23, 20,82, 15,89, 9,86. ESI-MS m/z: Calcd. para C33H36N4O8S: 648,2. Encontrado (M+l)+: 649,1

Exemplo 12

A uma solução do sal de piridínio (211 mg, 0,85 mmol) em DMF (2,3 ml) foi adicionado a 23 °C uma solução do intermediário 12 (55 mg, 0,085 mmol) em diclorometano (2,9 ml, 0,016 M concentração final). A mistura de reação foi deixada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 4 horas e 15 minutos, então DBU (13 ml, 0,085 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 15 minutos. Após este tempo uma solução saturada de ácido oxálico (2 ml) foi adicionada, e a mistura de reação foi deixada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 30 minutos. A mistura de reação foi arrefecida a 0 °C, foi diluída com Et20 e uma solução saturada de bicarbonato de sódio foi adicionada até que alcançasse pH = 5. A fase aquosa foi extraída com Et20 (x4), basificada posteriormente com mais bicarbonato de sódio e extraída com mais Et20 (x4) . As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente 67 ΕΡ2305689Β1 acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:2 a propiciar o intermediário 13 (28 mg, 51 %) como amarelo.

Rf: 0,66 (acetato de etilo/hexano 2:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,49 (s, 1H) , 6,11 (d, 2:1) para um sólido 1H) , 6,01 > (m, 3H) , 4,20 (dd, 2,88-2,67 , 2,04 (s, Encontrado (d, 1H) 00 00 LO -5,77 (m, 1H) , 5,70 (S, 1H) , O LO 4,66 (s largo, 1H), 4,40 (s, 1H) , 4,36 (d, 1H) , 1H) , 4, 17 (d, 1H), 3,75 (s, 3H) , 3,55 (m, 2H) , (m, 5H) , 2,56 (d, 1H), 2, 32 (s , 3H) , 2,25 (s, 3H) 3H) . ES I-MS m/ z: Calcd. para c33h33 ;N309S : 647 , 1. (M+l ) +: 648, 1 68 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 13 ΕΡ2305689Β1

A uma solução do intermediário 13 (26 mg, 0,04 mmol) e derivado de dopamina (24 mg, 0,14 mmol) em EtOH (0,7 ml, 0,06 M) foi adicionado a 23 °C sílica gel (56 mg) . A mistura de reação foi deixada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 15 horas. O solvente da reação foi eliminado sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:1 a 4:1) para propiciar o intermediário 14 (30 mg, 94 %) como um sólido amarelo pálido. Rf: 0,37 (acetato de etilo/hexano 2:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,60 (s, 1H) , 6,46 (s, 1H) , 6,44 (s, 1H), 6, 04 (d, 1H) , 5, 96 (d, 1H) , 5,94-5,80 (m, 1H) , 5,73 (s, 1H) , 5,48 (s largo, 1H) , 5, 11 (m, 2H) , 5, 02 (d, 1H), 4,57 (s largo, 1H) , 4,36 (d, 1H) , 4,33 (s, 1H) , 4, 19 (d, 1H) , 4,11 (dd, 1H) , 3,78 (s, 3H) , 3, 61 (s, 3H) , 3, 55 (m, 1H) , 3, 50 (d, 1H9, 3, 09 (m, 1H) , 2,99-2,74 (m, 5H) , 2,59 (m, 1H) , 2,47 (dt , 1H) , 2,32 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) , 2,23-2,13 (m, 2H) , 2,04 (s, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C42H44N4OioS : 796,3. Encontrado (M+l)+: 797,2 69 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 14

A uma solução do intermediário 14 (30 mg, 0,038 mmol), (PPh3)2PdCÍ2 (3 mg, 0, 003 mmol), ácido acético (11 ml, 0,188 mmol) em diclorometano anidro (1 ml, 0,04 M) foi adicionado gota a gota a 23 °C e sob atmosfera de Árgon HSnBu3 (36 ml, 0,13 mmol) . A mistura de reação foi deixada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 20 minutos. Após este tempo a mistura de reação foi vertida em coluna (misturas de eluente de diclorometano/metanol em gradiente de 100/0 a 30:1 para propiciar o intermediário 15 (12 mg, 42 %) como um sólido amarelo pálido. Alguma parte do material de partida (17 mg) foi isolada impurifiçada com traços de derivados de butilestanho.

Rf: 0,22 (diclorometano/metanol 20 : 1) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6, 62 (s, 1H) , - 6, 47 (s, 1H) , 6, 44 (s, 1H) , 6,06 (d, 1H), 5 ,98 (d, , 1H), 5, 03 (d, , 1H) , 4, 57 (s largo, 1H), 4,50 (d, 1H) , 4, 34 (s, 1H) , 4, 20 (d, 1H) , 4, 15 (dd, 1H) , 3, 85 (d, 1H) , 3,7 8 (S, 3H) , 3, 62 (s, 3H) , 3, 52 (d, 1H) , 3, 15- 2, 95 (m, 3H) , 2 ,77 (m, 1H) t 2, 60 (m, 1H) , 2,46 (dt , 1H) , 2,35 (d, 1H) r 2,31 (s, 3H) t 2,26 (s, 3H) , 2,15 (d, 1H), 2,04 (s, 3H). 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : δ 172,84, 172,12, 145, 98, 145, 60, 144,77, 144,53, 142,98, 141,59, 140,36, 131,49, 129,81, 129,36, 125,84, 124,60, 121,57, 121,32, 118,34, 114,33, 114, 17, 109, 99, 102,10, 64,79, 61,46, 60, 66, 60, 17, 59, 25, 59, 01, 55,40, 48, 84, 47,86, 42, 13, 39, 87, 29, 00, 28,33, 70 ΕΡ2305689Β1 20, 67, 16, 01, 9, 97. ESI-MS m/z: Calcd. para C39H40N4O10S: 756,2. Encontrado (M+l)+: 757,3.

Exemplo 15

A uma solução do intermediário 15 (12 mg, 0,016 mmol) em acetonitrilo (0,66 ml) foi adicionado a 23 °C água (0,44 ml, 0,015 M, concentração final) e AgN03 (81 mg, 0,47 mmol) . A mistura de reação foi deixada sob atmosfera de Árgon a 23 °C durante 23 horas. A reação foi diluída com diclorometano e uma solução saturada de bicarbonato de sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio foi adicionada. A fase aquosa foi extraída com diclorometano e as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto Et-729 foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (eluente diclorometano/metanol em gradiente de 100/0 a 3:1) para propiciar o produto final (8,3 mg, 70 %) como um sólido branco. Rf: 0,07 (diclorometano/metanol 95:5) 1H-RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 6,59 (s, 1H) , 6,44 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,13 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 5,20 (d, 1H), 4,73 (s, 1H) , 4,58 (d, 2H) , 4,26 (d, 1H) , 4,13 (dd, 1H) , 3,80 (d largo, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,67 (d, 1H) , 3,59 (s, 3H) , 3,22-3,02 (m, 3H) , 2,78 (m, 1H) , 2,59 (m, 1H) , 2,42 (m, 2H) , 2,31 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,05 (m, 1H), 2,04 (s, 3H). 13C-RMN (75 MHz, CD3OD) : δ 173, 52, 170,26, 148, 13, 147,01, 71 ΕΡ2305689Β1 146, 92, 146, 86, 145, 04, 142, 67, 141, 95, 132, 04, 129, 28, 125,79, 122,77, 122,42, 121,40, 116,29, 115,89, 111,63, 103,54, 90,94, 65,53, 61,80, 60,38, 58,23, 57,23, 55,76, 47,35, 43, 15, 40,70, 28,85, 27,79, 20,49, 16, 07, 9, 38. ESI-MS m/z: Calcd. para C38H4iN30iiS: 747,2. Encontrado (M+l)+: 748,1

Exemplo 16

A uma solução de composto 16 (0,5 g, 0,80 mmol) , 3- hidroxi-4-metoxi-fenetil amina (924 mg, 2,8 mmol) em álcool etílico foi adicionada a 23 °C sílica gel (1 g). A mistura de reação foi agitada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 16 horas. Após este tempo o solvente é eliminado sob pressão reduzida e o material bruto da reação é purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/cloreto de metileno em gradiente de 1:2 a 100 % em acetato de etilo, lavagens finais em cloreto de metileno/álcool metílico 9:1) para propiciar Et-770 (564 mg, 91 %) como um sólido amarelo pálido. 1H- -RMN (300 MHz, CDC13) : 6, 60 (s, 1H) , 6,47 (s 1H) , 6, 45 (s, 1H) , 6, 05 (s, 1H) , 5,98 (S, 1H) , 5, 02 (d 1H) , 4,57 (sl, 1H) , 4,32 (sl, 1H), 4,28 (d, 1H) , 4, 18 (d 1H) , 4,12 (dd, 1H) , 3, 78 (s, 3H), 3,62 (s, 3H) , 3, 50 (d 1H) , 3,42 (m, 1H) , 3, 10 (ddd, 1H), 2,94 (m, 2H) , 2, 79 (m 1H) , 2, 61 (m, 1H) , 2,47 (m, 1H) , 2,35 (m, 1H) , 2,32 (s 72 ΕΡ2305689Β1 3Η) , 2,27 (s, 3H) , 2,20 (s, 3H) , 2,09 (m, 1H) 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C40H42N4O10S: 770,7. (M+H)+: 771,2 , 2,04 (s, Encontrado 73 ΕΡ2305689Β1 Exemplo 17

m-CPBA DCM

A uma solução de Et-770 (45 mg, 0,058 mmol.) em CH2C12 (3 ml, 0,03 M) foi adicionado a 0 °C sob atmosfera de Árgon m-CPBA (15,1 mg, 0,087 mmol). A reação foi agitada a 0 °C durante 30 minutos, então uma solução de bicarbonato de sódio saturada aquosa foi adicionada, então a fase aquosa foi extraida com CH2C12, as camadas orgânicas secas em sulfato de sódio e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (eluente: acetato de etilo/hexano 3: 1) para propiciar composto 17 (45,6 mg, 99 %). Rf: 0,18 (acetato de etilo/hexano 2 : 1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) 1 : δ 6, 63 (s, 1H) ; 6 ,51 (s, 1H) ; 6 ,47 (s, 1H) ; 6,19 (s, 1H); 6, 05 (s, 1H); 6, 00 (s, 1H) ; 4, 66 (d, 1H) ; 4, 61 (d, 1H); 4, 30-4,28 (m, 1H) ; 4, 19 (s, 1H) ; 4 ,07 (s, 1H) ; 3,82 (s, 1H); 3,73 (d, 1H); 3, 65 (d, 1H) ; 3, 60 (s, 3H) ; 3, 43 (d, 1H); 3, 04-2, 95 (m, 2H) ; 2, , 88- 2,81 (m , 1H) ; 2,72-2, 55 (m, 3H); 2, 48-2,41 (m, 1H) ; 2, 30 (s, 3H) ; 2 ,25 (s, 3H) ; 2,23 (s, 3H); 2,05 (s, 3H). 13c- -RMN (75 MHz, CDCI3) : δ 172,0, K 59,: 2, 148, 2, 146 ,8, 146 ,3, 145,1, 144,8, 142,3, 140,8, 130, 8, 129, 6, 129 ,5, 124 ,5, 122,6, 120,2, 120,0, 117,8, 1 14, 6, 111, 8, 109 ,5, 102 ,4, 70, 9, 67, 8, 61, 8, 61,7, 60, 9, 60, 6, , 6C >,o, 55 ,3, 54, 9, 54,7, 41 ,9, 40,0 , 29, 9, 29, 1, 25, 0, 21,i 0, 1 6,2, 10 ,3 ESI -MS m/ z : Calcd. Ρ3.ΙΓ3. C40H42N4O11S · 7 86,: 2 . Encontrado (M+Na)+ : 809,3 * 74 ΕΡ2305689Β1 Exemplo 18

A uma solução de composto 17 (45 mg, 0,057 mmol) em CH3CN/H20 (6 ml/ 2 ml, 0,007 M) foi adicionado a 23 °C AgN03 (287,1 mg, 1,71 mmol). A mistura de reação foi agitada sob atmosfera de Árgon e protegida da luz durante 24 horas. A reação foi diluída com CH2CI2 e extinta com uma solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio e uma solução saturada aquosa de salmoura 1:1. A fase aquosa foi extraída com CH2C12, as camadas orgânicas foram secas em sulfato de sódio e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash para propiciar Et-759B (23,2 mg, 52 %) como um sólido amarelo pálido e alguma parte do material de partida (18,7 mg, 42 %) foi recuperado.

Rf: 0,36 (CH2Cl2/MeOH 8:0,5) 1H-RMN (300 MHz , CDCI3) : δ 6, 65 (s, 1H) ; 6,48 (s, 1H) ; 6 ,43 (s, 1H) ; 6, 20 ( s, 1H) ; 6 ,04 (d, 1H ); 5,97 (s, 1H) ; : 4, 78 (s, 1H) ; 4, 70 (d, 1H) ; 4,55 (d, 1H) ; 4,36 1 (d, 1H) ; 4,0 17-3 , 98 (m, 1H) ; 3 , 83 (s, 3H) ; 3,77 (d, 1H) ; 3 ;, 69- -3, 63 (m , 1H) ; 3, 61 (s , 3H) ; 3,4 6 (d, 1H) ; 3,22 (d, 1H) ; 3,06 -2, 82 (m, 4H) ; 2, 66-2,43 (m, , 4H) ; 2,31 (s, 3H) ; 2 ,26 (s, 3H) ; 2 ,21 (s, 3H) ; 2 ,04 (s, 3H) . 13C-RMN (75 MHz, CDCI3) : δ 171 , 9, 169, 3, 148 ,0, 146 , 9, 1< 15,0, 144, 7, 142 ,2, 141, 0, 130 ,7, 130, 1, 129 , 6, 124 , 9, 123,0, 120, 9, 120 , 1, 114, 6, 113 ,7, 109, 5, 102, r 2 , 82, 9, 67, 9, 63,1, 61,8, 60,5 , 57 ,7, 57 , 6, 55, 9 , 55,3, 55, 1, 41,7, 40, 0, 29,9 , 29,2, 24, 7, 21 L, 0, 16 , 1, 75 ΕΡ2305689Β1 14,3, 10,2. ESI-MS m/z: Calcd. para C39H43N3O12S: 777, 84. Encontrado (M- H2O +H) + : 760,2

Exemplo 19

A uma solução de composto 16 (100 mg, 0,16 mmol) em THF/H20 (4,26 ml/ 1,06 ml, 0,03 M) foi adicionado a 23 °C sob atmosfera de Árgon CuCl (79,5 mg, 0,80 mmol). A reação foi agitada a 23 °C sob atmosfera de Árgon e protegida da luz durante 24 horas. A reação foi diluída com CH2C12, extinta com uma solução saturada aquosa de cloreto de amónio. A fase aguosa foi separada e a fase orgânica foi lavada com uma solução saturada aguosa de bicarbonato de sódio. A fase aquosa foi extraída com CH2C12, as camadas orgânicas foram secas em sulfato de sódio e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (eluente CH2Cl2/MeOH 60:1) para propiciar Et-594 (70 mg, 71 %) como um sólido amarelo. Rf: 0,44 (CH2Cl2/MeOH 60:1) 1H-RMN (30i 0 MHz, CDCI3) : δ i 5, 53 (s, 1H) ; 6 ,49 (s, 1H) ; 6, 07 (s, 1H) ; 6 , 05 (s, 1H); 5 ,98 (s, 1H) ; 5, 94 (s, 1H) ; 5,71 (s, 2H) ; 5, 18 (d, 1H) ; 5,12 (d, 1H) ; 4, 85 ( :s, 1H) ; 4, 77 (s, 1H) 4,55 -4, 36 (m, 3H); 4,17 -4, 11 (m, 4H) ; 3, 77 (s, 3H) ; 3, 75 (s, 3H) ; 3 , 58 (d, 1H); 3 ,47 (s, 4H) ; 3, 19 (s, 2H) ; 3,07 (s, 3H) ; 2, 87- 2,54 : (m, 6H) ; 2, 31 (S, 3H) ; 2, 30 (s, 3H) ; 2,28 (s, 3H) ; : 2,23 (s, 3H); 2, 18-2 , 05 (m, 2H) ; 2,15 1 (s, 3H) ; 76 ΕΡ2305689Β1 2,11 (s, 3H); 2,05 (s, 3H) ; 1,98 (s, 3H) . ESI-MS m/z:

Calcd. para C30H32N2O10S: 612,1. Encontrado (M-H20 +H)+: 595,5

Exemplo 20

A uma solução de Et—770 (1,25 g, 1,62 mmol) em CH3CN/H20 (64, 8 ml/ 43,2 ml, 0,015 M) foi adicionado a 23 °C AgN03 (8,27 g, 1,71 mmol). A mistura de reação foi agitada sob atmosfera de Árgon e protegida da luz durante 24 horas. A reação foi diluída com CH2C12 e extinta com uma solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio e uma solução saturada aquosa de salmoura 1:1. A fase aquosa foi extraída com CH2C12, as camadas orgânicas foram secas em sulfato de sódio e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. 0 material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (CHCl3/EtOAc/MeOH em gradiente de 49:49:2 a 48:40:12) para propiciar Et—743 (1,09 g, 88 %) como um sólido amarelo e alguma parte do material de partida (75 mg, 6 %) foi recuperado. Rf: 0,2 (CHCl3/EtOAc/MeOH 49:49:2) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : 86, 60 (s, 1H) , 6,46 (s, 1H) , 6,44 (s, 1H) , 6,02 (d, 1H) , 5,94 (d largo, 1H) , 5,13 (d, 1H) , 4,81 (s largo, 1H), 4,50 (s largo, 1H), 4,49 (s largo, 1H), 4,16 (dd, 1H) , 4,04 (dd, 1H) , 3,79 (s, 3H) , 3,61 (s, 3H) , 3,57 (d largo, 1H) , 3,22 (largo, d, 1H) , 3,12 (ddd, 1H) , 77 ΕΡ2305689Β1 2,87 (s largo, 1H), 2,85 (s largo, 1H), 2,80 (m, 1H) , 2,60 (ddd, 1H) , 2,47 (ddd, 1H) , 2,38 (s largo, 1H) , 2,26 (s, 3H), 2,18 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : 8172, 6, 168,3, 147,7, 145, 1, 144,4, 143.0, 141,3, 140,5, 131,5, 129,2, 126,1, 121,9, 120,9, 118.0, 116,0, 114,0, 112,5, 109,8, 101,6, 82,1, 64,7, 61,3, 60.3, 57,8, 56, 0, 55, 1, 54, 9, 42,2, 41,4, 39,7, 28,8, 24,0, 20.4, 15,8, 9,6. ESI-MS m/z: Calcd. para C39H43N3O11S: 761,3. Encontrado (M - H20 + H) +: 744,4

Exemplo 21

A uma solução de Et—743 (25 mg, 0,03 mmol) em álcool metílico (1,5 ml, 0,02 M) foi adicionado a 23 °C ácido fórmico (11 ml, 0,3 mmol). A solução foi agitada a 23 °C durante 6 horas, então o solvente foi eliminado sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (CHCl3/EtOAc/MeOH 49:49:2) para propiciar Et-745 (15,8 mg, 64 %).

Rf: 0,17 (CHCl3/EtOAc/MeOH 49:49:2) 1H-RMN (300 MH z, CDCI3) : δ 6 ,61 (s, 1H) , 6, 49 (S, 1H) , 6 ,42 (s, 1H) , 6, 00 (d, , 1H), 5 ,95 (d, 1H) , 5, 10 (d, , 1H) , 4,50 (s largo, 1H) , 4, 38 (d, 1H), 4, 09 (dd, 1H) , 3, 79 (s, 3H) , 3 , 60 (s, 3H) , 3 , 38 -3, 21 (m, 3H) , 3 ,17- 2, 81 (m r 5H) , 2,71 (m, 1H), 2, 52 (m, 2H), 2,41 (d , 1H) , 2,33 (s r 3H) , 2,24 (s, 78 ΕΡ2305689Β1 3H) , 2, 22 (s, 3H) , 2, 12 (m, 1H), 2 , 02 (s, 3H) . 13C_ RMN (75 MHz, CDC1 3) · δ 172 :,43, 168 ,19 , 147, 72, 144, 79, 144 ,60, 144,50, 142, 64, 141, 03, 139, 77, 131, 61, 128, 61, 126 ,07, 122,09, 120, 50, 118, 51, 115, 41, 114, 50, 112, 63, 109 , 94, 101,41, 64,2( 5, 64,06, 62, 21, 60, 83, 6C 1,01, 55, 00, 42, 39, 41,76, 40,78, 39,29, 31,39, 2 )9,50, 28 ,53, 25, 45, 22, 45, 20,30, 15 ,62, 13 , 92, 9 ,48. ESI -MS m/ z : Calcd. para C39H43N3O10S: 745,3 . Encontrado (M + H) +: 74 6, 2

Exemplo 22

A uma solução de composto 18 (520,8 mg, 0,84 mmol) em CH2C12 (17 ml, 0,05M) sob Árgon a temperatura ambiente, foi adicionado anidrido acético (0,08 ml, 0,88 mmol). A reação foi agitada durante 30 min e então extinta com uma solução saturada aquosa de NaHC03. A camada aquosa foi extraida com CH2C12 e a camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia flash (hexano/EtOAc, 1:2, 2:5, 1:3,) dá o composto puro 19 (96 %) · Rf: 0, 2 (Hexano /acetato de et. ilo 2 :3) 1H-RMN (300 MHz, CDCI3 O : δ 6,56 (s, 1H) , 6,04 (dd, , 2H) , 5,78 (s , 1H) , 5,52 (dl , 1H) , 5, 02 (d , 1H), 4,58 (ddd , 1H), 4,53 (s 1, 1H) , 4,27-4, 25 (m, 2H) , 4, 19-4,15 (m, 2H) , 3,77 (S, 3H) , 3,44 -3,43 (m, 2H) , 2, 92 -2, 90 (m, 2H) , 2,36-2,02 (m, 2H) , 2,36 (s, 3H), 2,30 1 (s, 3H ) , 2,16 (s, 3H) , 2, 02 (s, 3H) , 1, 88 (s, 3H) . 13c-rmn (75 MHz, CDC1 3) : δ 170, 5, 168, 8, 168, 4, 148,1, 145, 8, 143,1, 141,0, 140,3, 130, 7, 129, 9, 129, 0, 120,3, 79 ΕΡ2305689Β1 119,0, 117,9, 113,5, 102,0, 61,3, 54,7, 54,5, 51,9, 41,8, 41,4, 32,4, 9,5. ESI-MS m/z: Calcd. para C33H36' (Μ + H)+: 665,2 60,3, 23,7, N4O9S : 60.2, 59,3, 58, 9, 22,8, 20,4, 16,0, 664.2. Encontrado 80 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 23 ΕΡ2305689Β1

N0(S04K)2, acetona KH2P04/Na2HP04

A uma solução de composto 19 (100 mg, 0,15 mmol) em acetona (15 ml, 0,01M) foi adicionada uma solução de sal de Fremy (141 mg, 0,52 mmol) numa solução de tampão de KH2PO4 / Na2HP04 (15 ml, 0,035M). Após 24 h a 23 °C a mistura de reação foi extraída com CH2C12 e seca em Na2S04. Cromatografia (hexano/acetato de etilo 1 :2) dá o composto puro 20 (101 mg, 99 %).

Rf: 0,38 (Hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (30 0 MHz , CDCI3) : δ 6, 10 (d, 1H) ; 6, 01 (d, 1H) ; 5, 68 (d, 1H) ; 4, 98 (d, 1H); 4,54-4, 50 (m, 1H) ; 4,43 (s, 1H) ; 4,21 (s, 1H) ; 4,15-4,07 (m, 3H) ; 4,09 (s, 3H) ; 3,47 (s, 1H) ; 3,42 (d, 1H) ; 2,88- -2,78 (m, 2H) ; 2,47 (d, 1H) ; 2,25 (s, 3H) ; 2,22- 2,18 (m, 1H); 2, 18 (s, 3H) ; 2,02 (s, 3H) ; 2,01 (s, 3H) ; 1,87 (s , 3H) . ESI-MS m/ z : Calcd. para C33H3, 4N4O10S : 678 ,2. Encont rado (M + H) +: 679, 1 81 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 24 ΕΡ2305689Β1

A uma solução de composto 20 (100 mg, 0,14 mmol) em THF / H20 4:1 (5, 6 mg, 0, 009M) foi adicionado CuCl (145 mg, 1,47 mmol). Após 24 h a 23 °C a reação foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, e lavada com salmoura e uma solução saturada aquosa de NaHC03, diluída e extraída com CH2C12. A camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatograf ia (CH2Cl2/MeOH 32 :1) dá o composto puro ET- 637-quinona (60 mg, 61 %) · Rf: 0,54 (CH2C1 2/MeOH 32 : 1) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6, 0 7 (d, 1H) ; ! 5, 97 (d, : 1H); 5,72 (d, 1H) ; 5, 08 (d, 1H) ; 4, 71 (s, 1H) ; 4 , 52- -4,33 (m, 3H); 4,08 (s , 3H) ; 4,08-4,01 ( m, 3H) ; 3,53 (d, 1H) ; 3,24 (d, 1H); 2, 83-2 , 69 (m, 2H) ; 2 ,46- -2,33 (m, 1H) ; 2,24 (s, 3H); 2,16 (s , 3H) ; 2 ,02 (s, 3H) ; : 2, 00 (s , 3H) ; 1,8 7 (s, 3H) . 13c-rmn (75 MH z, CDC1 3) : δ 175,5 , 162, 6, 162,2 , 150,0, 138,9, 134, 2, 133,7, 130, 9, 129,9, 119 , 9, 111,7 , 107,5, 94,9, 7! 5,2, 55, 3, 53,6, 50, -4, 48,6, 46, 0, 45, 8, 34 , 1, 33,6, 26,8, 22,6, 15,9, 13,4, 12,7 ESI-MS m/z: Calcd. para C32H35N30iiS : 669,2. Encontrado (M - H20 + H)+: 652,1 Exemplo 25 82

ΕΡ2305689Β1 Q Me C

16 Q NO(S04K)2, acetona -*- Me KH2P04/Na2HP04 O»

'0 Me V-o CN 21 A uma solução de composto 16 (100 mg, 0,16 mmol) em acetona (16 ml, 0,01M) foi adicionada uma solução de sal de Fremy (151 mg, 0,56 mmol) numa solução de tampão de KH2PO4 / Na2HP04 (16 ml, 0,035M) . Após 24 h a 23 °C a mistura de reação foi extraída com CH2C12 e seca em Na2S04.

Cromatografia (hexano /acetato de etilo 1:1) dá o composto puro 21 (79 mg, 78 %).

Rf: 0,3 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 6,12 (d, 1H) ; 6,03 (d, 1H) ; 5,05 (d, 1H) ; 4,48 (s, 1H) ; 4,28 (d, 1H) ; 4,24 (s, 1H) ; 4,20- 4,16 (m, 1H) ; 4,05-4, 00 (m, 1H) ; 3,98 (s, 3H) ; 3,59 (t, 1H) ; 3,38 (d, 1H) ; 3,35 (d, 1H) ; 2,84-2, 64 (m, 2H) ; 2,40- 2,27 (m, 1H) ; 3,30 (s, 3H) ; 2,18 (s, 3H) ; 2,03 (s, 3H) ; 2,02 (s, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C3iH29N3OioS: 635, 2.

Encontrado (M + H)+: 636,1

Exemplo 26

O

21

CuCl, THF, HzO

Et-594-quinona 83 ΕΡ2305689Β1 A uma solução de composto 21 (79 mg, 0,12 mmol) em THF/H20 4:1 (4, 4 ml, 0, 009M) foi adicionado CuCl (123 mg, 1,24 mmol). Após 24 h a 23 °C a reação foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, e lavada com salmoura e uma solução saturada aquosa de NaHCCg, diluída e extraída com CH2C12. A camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia (CH2Cl2/MeOH 32:1) dá o composto puro Et-594-quinona (45 mg, 59 %) . Rf: 0,6 (CH2Cl2/MeOH 32: 1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,10-5,97 (m, 4H) ; 5,12 (d, 1H) ; 5, 05 (d, 1H) ; 4,74- 4, 63 (m, 2H) ; 4,43- 4,26 (m, 2H); 4,22- 4, 11 (m, 2H) ; 4,06 (s, 6H) ; 4,05- -3, 91 (m, 2H); 3,82-3,71 (m, 2H) ; 3, 55- -3,20 (m, 2H) ; 3, 03 (s, 4H) ; 2,75-2,62 (m, 2H) ; 2,56 -2,42 (m, 2H) ; 2,35 -2,23 (m, 2H) ; 2,29 (s, 3H) ; 2,27 (s, 3H) ; 2, 18 (s, 3H) ; 2,17 (s, 3H) ; 2,03 (s, 3H) ;

2, 02 (s, 3H) ; 2 O O (s, 3H) ; 1 ,98 (s, 3H) . 13c- -RMN (75 MH z, CDC1 3) : δ 187,6, 187, 2, 186,3, 186, 1 170 ,0 , 169, 3, 158 ,5, 158, 4, 156,5, 146, 6, 146, 6, 142, 0 141 , 9 , 140, 9, 140 ,7, 137, 4, 137,1, 136, 7, 129, 7, 129, 4 118 , 6 , 117, 9, 110 ',7, 115, 1, 114, 9 , 102 ,5, 102,4, 92, 4 83, 0, 82,7, 65, 3, 64,6, 60, 7, 60,6, 58,8, 58, 5, 58,1, 57, 5 57, 4, 56,0, 55, 8, 55, 1, 53, 7, 53,3, 53,1, 52, 6, 42,6, 42, 4 40, 9, 40,8, 35, 5, 35,2, 29, 9, 20, 9, 20,8, 20, 2, 9,9, 9,8 ESI -MS m/z: Calcd. para C3c )H3C )N2OnS: 626,2 . Encontrado (M H20 + H) +: 609,1 Exemplo 27

84 ΕΡ2305689Β1 A uma solução de composto 16 (75 mg, 0,12 mmol) em ácido acético (1,5 ml, 0,08 M) sob Árgon a 23 °C foi adicionado triptamina (68 mg, 0,42 mmol) . A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 24 h e então o ácido acético foi evaporado. Uma solução saturada aguosa de NaHC03 foi adicionada e a mistura foi extraída com CH2C12. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04. Cromatografia flash (hexano/etil-acetato 1:1) dá o composto puro 22 (90 mg, 99 %).

Rf: 0,4 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,74 (s, 1H) ; 7,38 (d, 1H) ; 7,25 (d, 1H) ; 7,08(t, 1H) ; 7,00(t, 1H) ; 6, 66 (s, 1H) ; 6,22(d, 1H) ; 6, 02 (d, 1H) ; 5,79(s, 1H) ; 5,08(d, 1H) ; 4,55(s, 1H) ; 4,32(s, 1H) ; : 4,27(d, 1H); 4,21 (s, 1H); 4,1 .9 (d , 1H); 3 , 81 ( s, 3H) ; : 3, 44-3, , 40 (m, 2H) ; 3,18-2,78(m, 4H) ; 2,7 1-2,51(m , 3H) ; 2,37 (s, 3H) ; 2,26 (s, 3H) ; 2,21 (s, 3H); 2 ,06 (s, 3H) 13 c- RMN (75 MHz , CDC13) : δ 171,7, 168,9, 148 ,2, 145,9, 143, 2, 141, 3, 140, 5, 135,7, 130,8, 130, 6, 129, 5, 127,0, 122, 2, 120, 9, 120, 8, 119,5, 118,6, 118,4, 113, 8, 111,1, 110, 5, 102, 2, 62,5 , 61,5, 60,8, 60,5, 59,7, 55,9 , 54,8, 42, 1, 41,7, 4 0,0, 39, 5, 29, 9, 24,0, 21,7, 20,8, 16, 1, 9,9. ESI- -MS m/ z : Calcd. para C4iH4iN508S: 763,3, . Encontrado (M + H)+: 764,2 Exemplo 28

85 ΕΡ2305689Β1 A uma solução de composto 22 (100 mg, 0,13 mmol) em acetona (13 ml, 0,01M) foi adicionada uma solução de sal de Fremy (122 mg, 0,45 mmol) numa solução de tampão de KH2PO4 / Na2HP04 (13 ml, 0,035M). Após 24 h a 23 °C a mistura de reação foi extraída com CH2CI2 e seca em Na2S04. Cromatografia (hexano/acetato de etilo 1:1) dá o composto puro 23 (85 mg, 85 %) Rf : 0,4 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz , CDCI3) : δ 7,76 (s, 1H) ; 7,39 (d, 1H); 7,24 (d, 1H) ; 7,09 (ddd, 1H); 7,01 (ddd, 1H); 6,22 (d, 1H) ; 6,02 (d, 1H) ; 4, 98 (d, 1H); 4,44 (s, 1H) ; 4,22 ( s, 1H); 4,19- 4, 18 (m , 1H) 3, 13 (d, 1H) ; 4,11 (s, 3H) ; 4,04 (d, 1H); 3,48 (s, 1H) ; 3,39 (d, 1H) ; 3,16-3,09 (m, 1H) ; 2,8 8-2,78 (m, 2H) ; 2, 70-2,47 (m, 5H) ; 2,23 (s, 3H); 2,21 (s, 3H); 2,08 (s, 3H) ; 2,05 (s, 3H). ESI-MS m/z: Calcd. para ChiHsgNsOgS: 777,3. Encontrado (M + H)+: 778,2 86 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 29 ΕΡ2305689Β1

A uma solução de composto 23 (85 mg, 0,10 mmol) em CH3CN/H20 3:2 (5, 8 ml, 0, 009M) foi adicionado AgNC>3 (549 mg, 3,27 mmol). Após 24 h a 23 °C a reação foi extinta com uma mistura 1:1 de uma solução saturada aguosa de salmoura e NaHC03, agitada durante 10 min e diluida e extraída com CH2C12. A camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia (CH2Cl2/MeOH 32 :1) dá o composto puro ΕΤ-736-quinona (40 mg, 50 %)

Rf: 0,6 (CH2Cl2/MeOH 32 :1) 1H-RMN (300 MH z, CDCI3) : δ 7,5 '1 (s, 1H) ; 7 ,39 (d, 1H) r 7,26 (d, 1H) ; 7,10 (ddd, 1H); 7, 01 (ddd , 1H); € i, 22 (d, : 1H) r 6, 01 (d, 1H) ; 5,12 (d, 1H); 4, 76 (s, 1H); 4, . 42- 4,37 (m í 2H) ; 4,1 1-4, 04 (m, 2H) 4,10 ( s, 3H) ; 3, 56 (s, 1H); 3,35- -3, 1 1 (m, 2H) ; 2, 85-2,65 ) (m, 3H); 2, , 60- -2,36 : (m, 4H) ; 2,23 (s r 3H) ; 2,1 9 (s ' -3H); 2,09 (s, 3H) ; 2 , 05 (s, 3H). 13c- -RMN (75 MHz, CDCI3) : δ 186, ( 5, 182, 8, 170, 9 r 1 69,0, 157 ,1, 146,1, 141,7, 1 40, 9, 137, 5, 136, 9, 135, 7 r 1 30, 6, 128 ,2, 127,0, 122,4, 1 19, 2, 119, 4, 118, 7, 115, 3 r 1 11,2, 82, 7, 62,9, 62 ,8, 60,9, 58, 6, 57,7 , 55,9, 53, 3, 41, ,5, 41,1, 40, 9, 4 0,3, 29 ,9, 22,0, 20, 8, 20,0 , 14,4, 9, 9 , 9,1 ESI -MS m/z : Calcd. para C4c )Η4οΝ4Οιο2 d 768,3 . Enconti :ado (M - H20 + H) +: 751,2 87 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 30

A uma solução de composto 12 (99,1 mg, 0,15 mmol) em CH2C12 (3 ml, 0,05M) sob Árgon a 23 °C, foi adicionado anidrido acético (0,015 ml, 0,16 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 45 min e então extinta com uma solução saturada aquosa de NaHC03. A camada aquosa foi extraída com CH2C12 e a camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia flash (hexano/EtOAc, em gradiente de 3:2 a 1:2) dá o composto puro 24 (97 mg, 91 %) . Rf: 0,3 (hexano/acetato de etilo 3 :2) 1H-RMN (300 MHz , CDCI3) : δ 6,54 (s, - 1H) , 6, 02 (d, 2H) , 5 , 96 (s, 1H) , 5 i, 89- 5,76 (m, 1H), 5,52 (d, 1H) , 5, 11 -4, 99 (m, 3H) , 4, . 58-' 4,55 (m, 1H), 4, , 52 (m, 1H) , 4,33 (d, 1H) , 4 ,26 (S, 1H) i , 4 ,18 (s, 1H), 4, 16 (d, 1H) , 3,74 (s, 3H) , 3 ,54 (dl, 1H) , 3,41 (d, 1H) , 2 , 94 -2,7: L (m, 4H) , 2,30 -2, 25 (m, 1H) , 2, , 30 (s, 3H) , 2,25 ( s, 3H) , 2,10 (d, 1H) , 2, 00 (s, 3H) , 1, 87 (s, 3H) . 13c-rmn (75 MHz , CDC1 3) : δ 170, 5, 168 ,8, 168, 4, 147 ,8, 145, 7, 143, 0, 140, 9, 14 0,3, 134, 8, 131 ,1, 129, 0, 120 ,3, 120, 1, 119, 4, 118, 1, 11 7,8, 113, 4, 113 ,3, 101, 9, 61, 2, 60,3, 60,2, 59, ,4, 59,1, 55,7, , 53 ,0, 51 ,8, 51,7 , 4 1,7, 32, 4, 2 3,8, 22, 8, 20,4 , 16,0 , 9,5 • ESI- MS m/ z : Calcd. para C3 5H38· N4O9S : 690, 2. Encont rado (M + H) +: 69 '1,5 88 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 31

A uma solução de composto 12 (130 mg, 0,20 mmol) em CH2C12 (3 ml, 0,03M) sob atmosfera de Árgon foi adicionado anidrido trifluoroacético (0,057 ml, 0,40 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 30 min a 23 °C, então diluída com CH2C12, lavada com uma solução saturada aquosa de NaHCC>3 e a fase orgânica seca em Na2S04· Cromatograf ia flash (hexano/EtOAc, 3:2) dá o composto puro 25 (104 mg, 73 %).

Rf: O ·> Oh co (hexano/acetato de et ilo 1 : 1) 1H-RMN (3l 3 0 MHz , CDC13) : δ 6,55 (s, 1H) , 6, 41 (d, 1H) , 6, 09 (d, 1H) , 5, 99 (d, 1H) ; 5, 90- 5,77 (m, 1H) ; 5,72 (s, 1H) , 5, 12 -5, 03 (m, 3H) , 4, 60 (bp, 1H) , 4,54· -4,51 (m, 1H) , 4,34 (dd, 1H) , 4,33 (s, 1H) ; 4,21 (dd, 1H) , 4,19 (d, 1H) ; 3,73 (s, 3H) , 3,57- 3,55 (m, 1H) , 3,44 (d, 1H) ; 2,87 -2,71 (m, 4H) , 2,43 -2,38 (m, 1H) , 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2 :, 11- 2,04 (m, 1H) ; 2 , 02 (s, 3H) . ESI- MS m/ z: Calcd. para C35H35F 3n4o9s : 744 1,2. Encont .rado (M + H)+: 745,5 89 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 32 ΕΡ2305689Β1

A uma solução de composto 12 (60 mg, 0,09 mmol) em CH2CI2 (3,2 ml, 0,03M) sob atmosfera de Árgon foram adicionados piridina (0,008 ml, 0,09 mmol) e cloreto de palmitoilo (0,03 ml, 0,09 mmol) . A mistura de reação foi agitada durante 30 min a 23 °C, então diluída com CH2C12 e lavada com uma solução saturada aquosa de NaHCCh. A fase orgânica foi seca em Na2SC>4. Cromatograf ia flash (hexano/EtOAc, 3:2) dá o composto puro 26 (71 mg, 90 %) .

Rf: 0,62 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (30 0 MHz , CDCI3) : δ 6, 55 (s, 1H) , 6, 08 (d, 1H) r 5, 98 (d, 1H) r 5,89- 5, 77 (m, 1H) ; 5,75 (s, 1H) ; 5,47 (d / 1H) , 5, 11 (d, 1H) ; 5,07 (d, 1H) ; 5, 02 (d, 1H) , 4, 62 -4, 58 (m, 1H) , 4, 53 (s, 1H) , 4,34 (d, 1H) , 4,28 (s, 1H) , 4, 19 (d, 1H) ; 4, 17 (dd, 1H) ; 3,76 (s , 3H) , 3,55 (d, 1H) , 3, 43 (d, 1H) ; 2, 96- -2,72 (m, 4H) , 2,32 ( s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,14- 1, 98 (m, 1H) ; 2,02 (s, 3H) , 1 , 62-1,56 (m, 2H) , 1,32-1,28 (m, 24H) , 0,87 (t, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C49H66N4O9S : 886,5. Encontrado (M + H)+: 887,9 90 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 33 ΕΡ2305689Β1

A uma solução de composto 12 (65 mg, 0,1 mmol) em CH2C12 (1,6 ml, 0,06M) sob atmosfera de Árgon foram adicionados piridina (0,009 ml, 0,11 mmol) e cloreto de propionilo (0, 009 ml, 0,11 mmol) . A mistura de reação foi agitada durante 15 min a 23 °C então diluída com CH2C12 e lavada com uma solução saturada aquosa de NaHC03. A fase orgânica foi seca em Na2SC>4. Cromatograf ia flash (hexano/EtOAc em gradiente de 1:1 a 1:2) dá o composto puro 27 (41 mg, 59 %).

Rf: 0, • 66 i [hexano/acetato de et ilo 1 :4) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6,55 (s , 1H) , 6, 08 (d, 1H), 5, 98 (d, 1H) ; 5, 90- 5,77 (m, 1H) ; 5,51 - (d, 1H) , 5,12 (d, 2H) , 5, 03 (d, 2H) , 4,61-4,54 (m, 2H) , 4,36 (d, 1H), 4,29 (s, 1H) , 4,16 (dd, 2H) , 3,7 6 (s, 3H) , 3,55 (d, 1H), 3,43 (d, 1H) , 2,89 -2,76 (m, 5H) , 2,31 (s, 3H) , 2 ,24 (s, 3H), 2 , 15- 2,04 (m, 2H) , 2,02 (s, 3H) , 1, 10 (t, 3H) . ESI-MS m/ z : Calcd . para C36 H40N4O9S: 7 04,3. Encontrado (M 4 H)4: 705, 6 91 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 34

ΕΡ2305689Β1 h2n. Μθ C

V_o CN 12

OH O

EDC.HCl, DIPEA, DCM

Mi

'—O CN 28 A uma solução de composto 12 (64 mg, 0,1 mmol) em CH2C12 (2 ml, 0,05M) sob atmosfera de Árgon foram

adicionados ácido de coumarina (23 mg, 0,13 mmol), DIPEA (0,05 ml, 0,15 mmol) e EDC.HCl (60 mg, 0,15 mmol) . A mistura de reação foi agitada sob atmosfera de Árgon a 23 °C durante 4 horas, então diluída com CH2C12, lavada com uma solução saturada aquosa de NaHC03. A fase orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia flash (hexano/EtOAc, 1:1) dá o composto puro 28 (40 mg, 49 %) . Rf: 0,5 (hexano/acetato de etilo 1 :2) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,98 (d, 1H) , 7, 69-7, 62 (m, 2H) , 7,44 (7,33 (m, 2H) , 6,65 (s, 1H) , 6,10 (s, 1H) , 5,99 (s, 1H) , 5, 89-5, 80 (m, 1H) , 5,60 (d, 1H) , 5,11 -5,05 (m, 4H) , 4,69 (dd, 1H), 4,59 (sl, 1H), 4,35-416 (m, 5H), 3,67 (3H), 3,58 (d, 1H) , 3,45 (d, 2H) , 2, 93-2, 62 (m, 5H) , 2,27 (s, 3H) , 2,13 (s, 3H) , 2,03 (s, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C43H40N4OnS; 820,2. Encontrado (M + H)+: 821,8 92 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 35 ΕΡ2305689Β1

A uma solução de composto 25 (40 mg, 0,05 mmol) em CH2C12 (1,5 ml, 0,03M) sob atmosfera de Árgon foram adicionados Et3N (0,035 ml, 0,24 mmol) e cloreto de cinamoilo (27,7 mg, 0,016 mmol) . Após 30 min a 23 °C, a reação foi diluída com CH2C12, lavada com uma solução saturada aquosa de NaHC03 e a fase orgânica seca em Na2S04· Cromatografia flash (hexano/EtOAc, 3:2) dá o composto puro 29 ( 46 mg, , 99 %) · Rf : 0,5 i (hexano/acetato de eti lo 2:1) 1H-RMN (3 C )0 MHz, CDC13) : δ 7 ,93 (d, 1H) ; 7, 62 -7, 59 (m, 2H) ; 7,46 -7,44 (m, 3H) ; 6, 91 (s , 1H) , 6, 63 (d, 1H) r 6, 44 (d, 1H) , 6, 11 (d, 1H) , 6, 01 (d, 1H) ; 5, 84- 5, 71 (m, 1H); 5 ,19- 5, 05 (m, 3H) , 4, 59- -4,53 (m, - 1H) , 4,35 (s, 1H) r 4,25- 4,21 (m, 2H) ; 4, 00 (d, 1H) , 3,7 1 (s, 3H) , 3, 64- -3, 62 (m, 1H) , 3,49 (d, 1H) ; 2, 95- 2, 88 (m, 3H) , 2,77- 2, 70 (m, 1H) ; 2 , 52- 2,48 (m, 1H) , 2,36 (s, 3H) , 2,30 (s, 3H) , 2, 14- -2,04 (m, 1H) ; 2,06 (s, 3H) . ESI- MS m/z: Calcd. para C4 :4H, 41F3N4Oi0S: 874, 3. Encontrado (Μ + H) i +: 875, 6

Procedimento experimental geral para a síntese de compostos 30, 32, 32, 33 e 34: Reação de dealilação A uma solução de material de partida em CH2C12 (0,04M) foram adicionados (PPh3)2PdCl2 (0,08 equiv) e ácido acético 93 ΕΡ2305689Β1 (5 equiv). HSnBu3 (quantidade inicial 8 equiv) foi adicionado gota a gota a 23 °C e sob atmosfera de Árgon Adicional HSnBu3 (final quantidade 48 equiv) foi adicionado gota a gota durante a reação tempo (1 hora to 1 hora e 45 min) . Após este tempo, a solução foi vertida numa coluna. Cromatografia flash (misturas hexano/acetato de etilo) dá os compostos puros.

Exemplo 36

Rf: 0,3 (hexano/acetato de etilo 2 :5) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6,57 (s, 1H) , 6,0 4 (d, 2H) , 5,51 (d, 1H), 5, , 03 (d, 1H) , 4,60-4, 57 (m, 1H) , 4,52 (bp, 1H) , 4,47 (d, 1H) , 4,2 7 (s, 1H), 4, 19- 4, 15 (m, 2H) , 3, 84 (dl, 1H) , 3,75 (s, 3H) , 3,43 (d, 1H) , 3,07 (s, 1H) , 2, 96 (q, 1H) , 2,34-2,27 (m , 1H) , 2,30 ( s, 3H) , 2,27 (s, 3H) , 2,13 (d, 1H), 2, 02 ( s, 3H) , 1, r 87 (s, 3H) ESI -MS m /z: Calcd. para C32H3 4N4O9S l 650, 2 . Encont] rado (M + H :) +: 651,4 Exemplo 37

94 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,3 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6, 54 (s, 1H) , 6, 40 (d, 1H), 6, 10 (d, 1H) , 6, 00 (d, 1H) ; 5, 05 (d, r 1H) , 4, 60 (bp, 1H), 4 : , 5 4 4,51 (m, 1H) , 4,48 (d, 1H) , 4, 32 (s, 1H) ; 4,22 (dd, 1H) , 4,19 (d, 1H) ; 3,86 -3, 84 (m, 1H) ; 3,73 (s , 3H) , 3,46 (d, 1H) ; 2, 99 -2, 98 (m, 2H) , 2,44-2 ,39 (m, 1H) , 2,29 (s, 3H) , 2,26 (s, 3H), 2,13- 2, 08 (m, 1H) ; 2 , 03 (s, 3H). ESI-MS m/ z :

Calcd. para C32H31F3N409S: 704,2. Encontrado (M + H)+: 705,6 Exemplo 38

Rf: 0,4 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6, 57 (s, 1H) , 6,09 (d, 1H) , 5, 99 (d, 1H) , 5,78 (s, 1H) ; 5,47 (d, 1H) , 5,03 (d, 1H) ; 4 , 62- 4, 60 (m, 1H) , 4,53 (s, 1H) , 4,47 (d, 1H) , 4,28 (s, 1H) , 4,19 (d, 1H) ; 4,17 (dd, 1H) ; 3, 85 (d, 1H) ; 3,76 (s, 3H) , 3,44 (d, 1H) ; 3,11 -2, 91 (m, 2H) , 2,31 (s, 3H) , 2,28 (s, 3H) , 2,16 -1, 96 (m, 3H) ; 2,02 (s, 3H) , 1, 62- -1,56 (m, 2H) , 1,38 -1,28 (m, 24H), 0,87 (t, 3H) . ESI-: MS m/ z: Calcd. para C46H 62N4O9S : 846, r4. Encontrado (M + H)+: 847,0 95 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 39 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,2 (hexano/acetato de etilo 1:1) -RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,57 (s, 1H) , 6, 01 (s, 1H) , 5, 74 (d, 1H), 5,52 (d, 1H) , 5, 10- -4,83 (m, 2H) r 4, 61- -4,54 (m , 1H) , 4,48 (d, 1H) , 4,34- 4, 15 (m, 4 H) , 3, 76 (s, 3H) , 3, 59-3, 34 (m, 3H) , 3, 10 05 OD CN 1 (m, 3H) , 2,30 (s r 3H) , 2,29 (s , 3H) , 2,12 (dd, 2H) , 2,03 (s, 3H), 1, 10 (t, : 3H) ESI-MS m/z: Calcd. para C33H36N409S: 664,2. Encontrado (M + H) + : 6 65,6

Exemplo 40

Rf: 0,4 (hexano/acetato de etilo 1 : 1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,93 (d, 1H) ; 7, 62-7,59 (m, 2H) ; 7,46-7,44 (m, 3H) ; 05 co -J (s, 1H) , 6,65 (d, 1H) ; 6,43 (d, 1H) , 6,12 (d, 1H) , 6, 03 (d, 1H) ; 5, 03 (d, 1H) ; 4,56-4,49 96 ΕΡ2305689Β1 (m, 1H), 4,35 (s, 1H), 4,23-4,1 (m, 3H); 3,72 (s, 3H), 3,49 (d, 1H) ; 3,19-2,90 (m, 3H) , 2,52-2,43 (m, 1H) , 2,30 (s, 3H), 2,147-2,08 (m, 1H); 2,06 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). ESI-MS m/z: Calcd. para C41H37F3N4O10S: 834,2. Encontrado (M + H)+: 836, 0

Exemplo 41

A uma solução de composto 30 (25 mg, 0,04 mmol) em CH2C12 (0,8 ml, 0,05M) sob atmosfera de Árgon foi adicionado a 23 °C anidrido acético (0,005 ml, 0,042 mmol). Após 1 h a 23 °C mais anidrido acético foi adicionado (0,005 ml, 0,042 mmol). A reação foi agitada durante 4 h mais e então extinta com uma solução aquosa saturada de NaHCC>3. A camada aquosa foi extraída com CH2CI2 e a camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatograf ia flash (hexano/EtOAc, em gradiente de 2:5 a 1:5,) dá o composto puro 35 (24 mg, 90 %) Rf: 0,15 (hexano/ acetato de etilo 2 : 7) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,56, 6,54 (2s, 1H) , 6,36, 6,15-6,00 (m, 3H) , 5,52-5, 42 (m, 1,6H), 5,29-5, 25 (m, 0,6H), 5,07-5,01 (m, 1H), 4,71-4,58 (m, 2,4H), 4,30-4,16 (m, 3,4H) , 3, 76, 3, 74 (2s, 3H) , 3,41-3,13 (m, 3H) , 2,40-2,35 (m, 1H) , 2,13 (d, 1H) , 2,28, 2,27, 2,19, 2, 07, 2,02, 1, 98, 1,87, 1,86 (8s, 15H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C34H36N4O10S: 692,2. Encontrado (M + H)+: 693,3 97 ΕΡ2305689Β1

Procedimento experimental geral para a sintese de compostos 36, 32, 38, 39, 40 e 41: Conversão do grupo nitrilo em grupo hidroxilo. A uma solução de material de partida em THF/H20 4:1 (0,03 M) foram adicionados 10 equiv. de CuCl. A reação foi agitada durante 24 h protegida da luz. Após este tempo, a reação foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1 e diluída com CH2CI2. A fase orgânica é lavada com salmoura e uma solução saturada aquosa de NaHC03 e a fase aquosa extraída com CH2C12. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04. Cromatografia flash (misturas CH2Cl2/MeOH) dá os compostos puros.

Exemplo 42

Me 75%

Me

Rf 0,11 (CH2Cl2/MeOH 30 :1) -RMN (3C )0 MH z, CD 3OD) : δ 6,56 (s, 1H) , 6,05 (d, 2H) , 5,23 (d r 1H) r 4,71 (s, 1H) , 4,51 (m, 1H) , 4,50- -4,40 (m, 2H) , 4, 14 -4, 11 (m, 2H) , 3,71 (s, 3H), 3,62-3,60 (m, 1H) , 3, 52- 3, 50 (m, 1H) , 3, 00 (d, 2H) , 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H) , 2, 28 -2, 05 (m, 2H) , 2,00 (s, 3H), 1, ,90 (s, 3H) • ESI-MS m/z: Calcd. para C31H35N3O10S: 641,2. Encontrado (M -H20 + H) + : 624,3 98 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 43 ΕΡ2305689Β1

Rf: i 0,35 (CH2Cl2/MeOH 16 : 1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,55 (s , 1H) ; 6,49-6,47 (m, 1H) ; 6, 07 (d, 1H) ; 5,97 (d, 1H) ; 5, 18 (d, 1H) ; 4,83 (s, 1H) ; 4,52 -4,49 (m, 2H) ; 4,35 (sa, 1H) ; 4, 15- -4,08 (m, 2H) ; 3, 73 (s, 3H); 3, 60-3,45 (m, 2H) ; 2, 96 -2,85 (m, 2H) ; 2,47 -2, 39 (m, 1H); 2, 29 (s, 3H) ; 2,27 (s, 3H) ; 2,17 -2,08 (m, 1H) ; 2,02 (s, 3H) • 13C-RMN (75 MHz, CDCI3) : δ 169, 1 0, 156,4, 156, 1, 146, 0, 142, 9, 141, 3, 141,1, 131,8, 130, 1, 129,0, 121, 7, 120, 8, 115, 1, 114, 6, 102,1, 81 ,1, 68,4, 62,2, 60, 4, 57 ,2, 56, 1, 53, 1 , 42,5, 32,1, 32,0, 29, 6, 28, 1, 22, ,9, 20,7, 14,3 , 9 ,8 ESI- MS m/z: Calcd. para C3iH32 F 3N3O 10S: 695,2. Encontrado (M -h2o + H) + : 678,4 99 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 44

Rf: 0,4 (CH2Cl2/MeOH 16 :1) 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 6, 57 (s , 1H) ; 6,06 i (d, 1H) ; 5 , 96 (d, 1H) ; 5,53 (d, 1H); 5,15 (d, 1H) ; 4 ,78 (s, 1H) ; 4, 59- 4,56 (ir 1, 1H) ; 4,48-4,42 (m, 1H) ; 4,35 (d, 1H) ; 4,07 (dd, 1H) ; 3, 98 (dd, 1H) ; 3,76 (s, 3H) ; 3, 60- 3,57 (m, 1H) ; 3 , 52 (d, 1H) ; 3,02- -2,79 (m, 2H) ; 2,31 (s, 3H); 2,28 (s , 3H) ; 2,17 -2, 05 (m, 1H); 2,01 (s, 3H) ; 1,70-1 , 63 (m, 2H) , 1, 36- 1,24 (m , 24H), 0,87 (t, 3H) . 13c-rmn (75 MHz, CDCI3) : δ 172, : 2, 170 ,7, 146,1, 145 ,8, 142, 9, 141,2, 141,0, 132,1, 129, 2, 125,5, 125,0, 121 ,4, 121, 0, 115,4, 112,8, 102,0, 81,2, 61,8, 60, 6, 57,0, 56 , 1, 52,0 , 51,3, 48 ,1, 42,4, 36, 6, 32,5 , 32,1, , 30, 0, 29,9, 29 ,8, 29,7 , 29,6, 28 ,0, 27,4, 25, 6, 22, 9 , 20,8, , 16, 2, 14,3, 9, 8 ESI-MS m/z: Calcd. para C45H63N3O10S: 837,4. Encontrado (M - H20 + H)+: 820,8 100 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 45 ΕΡ2305689Β1 Ο

Me 28%

Me

Rf: 0,22 (CH2Cl2/MeOH 5:1) RMN (30 0 MHz, CDC13) : δ 6,58 (s, 1H) ; 6, 07 (s, 1H) ; 5, 97 (s, 1H) ; 5,76 (sl, 1H) ; 5,57 (d, 1H) ; 5,16 (d, 1H) ; 4,79 (s, 1H) ; 4, 60 -4,35 (m, 4H) ; 4,08 (d, 1H) ; 3,76 (s, 3H) ; 3,64-3,50 (m, 2H) ; 3, 00 (d, 1H) ; 2,84 (dd, 1H) ; 2,30 (s, 3H) ; 2,28 (s, 3H);2, 35-2, 28 (m, 1H) 2,17 -2,04 (m, 3H) ; 2,01 (s, 3H) ; 1,10 (t, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C32H37N3O10S: 655,2. Encontrado (M -H20 + H)+: 638,4

Exemplo 4 6

Rf: 0,35 (CH2Cl2/MeOH 16:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,94 (d, 1H) ; 7, 62-7,59 (m, 2H) ; 7,46-7,44 (m, 3H) ; 6,87 (s, 1H) , 6,65 (d, 1H) ; 6,45 (d, 101 ΕΡ2305689Β1 1H) , 6,09 (d, 1H) , 6, 00 (d, 1H) ; 5, 15 (d, ih; I ; 4,83 (S, 1H) ; 4,52- -4,49 (m, 2H) ; 4,35 (sa, 1H) ; 4, 15 -4, 0 8 (m, 2H) ; 3,73 (s, 3H) ; 3, 60- -3, 45 (m, 2H) ; 2 , 96-2 , 85 (m, 2H) ; 2 ,47- 2,39 (m, 1H) ; 2,29 (s, 3H) ; 2,27 (s, 3H) ; 2, 17-2,08 (m, 1H) ; 2,02 (s, 3H) . ESI- -MS m/z : Calcd. para C 4oH38F3N3O11S : 825,2. Encontrado (Μ -H20 + H)+: 809,5 Exemplo 47

Rf: 0,2 (CH2Cl2/MeOH 60:1) RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,58 (s, 1H) , 6, 02 (d, 2H) , 5,83-5, 69 (m, 1H) , 5, 69 (s, 1H) , 5,59 (d, 1H) , 5, 17- 4,96 (m, 3H) r 4,78 (s, 1H) , 4,57 -4,53 (m, 1H) , 4,47 -4 , 25 (m, 3H) , 4, 09 (dd, 1H) , 3,77 (s, 3H) , 3,47 (d, 1H) , 3, 34- 3,31 (m, 1H) r 2, 92- -2,73 (m, 4H) , 2,32- -2,27 (m, 1H) , 2 , 32 (s, 3H) , 2, 27 (s, 3H) , 2,14 (d, 1H) , 2,01 (s, 3H) , 1 , 88 (s, 3H) . esi-: MS m/ z: Calcd. para C34H39 .N3O10S : 681 ,2. Encontrado (M -h2o + H) +: 6 64,6 102 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 48

A uma solução de composto 13 (39 mg, 0,06 mmol) em CH2CI2 (1,5 ml, 0, 040 M) foram adicionados (PPh3)2PdCl2 (3,4 mg, 0,004 mmol), ácido acético (0,02 ml, 0,30 mmol) e finalmente HsnBu3 (0,05 ml, 0,2 mmol). Após 30 min a 23b °C a reação foi vertida numa coluna. Cromatografia (hexano/ acetato de etilo em . gradiente de 4:1 a . 1:2) dá c 1 composto puro 42 (31 mg, 86 %) · Rf: 0, 38 (hexano/acetato de etilo 3:4) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,58 (s, 1H) ; 6,51 (s, 1H) ; 6, 11 (d, 1H) ; 6,08 (d, 1H) ; 6,02 (d, 1H) ; 5, 99 (d, 1H) ; 5,78 (sa, 2H) ; 5,10 (d, 1H) ; 5, 05 (d, 1H) ; 4, 65 (s, 1H) ; 4,54 (s, 1H) ; 4,50 (d, 1H) ; 4 ,47 (d, 1H ); 4, 40 (s, 1H) ; 4,2 6 (s, 1H) ; 4, 24 (s, 1H) ; 4,20 (s, 1H); 4, 18 (d, : 1H) ; 4,01 (dd, 1H) ; 3, 87-3,81 (m, 2H) ; 3,76 (s, 3H) ; 3,74 (s, 3H) ; 3,56 (d, 1H) ; 3,42 (d, 1H) ; 3,13-2 ,81 (m, 6H) ; 2,57 (d, 2H) ; 2,32 (s , 3H) ; 3,31 (s, 3H) ; 2 :, 28 (s, 3H) ; 2,24 (s, 3H) ; 2,19 -2, 15 (m, 1H); 2,04 (s, 3H) ; 2 ,03 ( s, 3H) • ESI- MS m/z: Calcd. para C30H29N3O9S : 607 ,2. Encont rado (M + H) +: 60 8,3 103 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 49

ΕΡ2305689Β1 ο Me C

Me '—Ο CN 42

CuCI,THF/H20 Ο Me. O'

^—o OH 43 A uma solução de composto 42 (30 mg, 0,05 mmol) em THF / H20 4:1 (1,7 ml, 0, 009M) foi adicionado CuCI (49 mg, 0,5 mmol) . Após 24 h a 23 °C a mistura de reação foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4C1, diluída com CH2C12 e lavada com salmoura e uma solução saturada aquosa de NaHC03 e a fase aquosa foi extraída com CH2C12. A camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatograf ia (CH2Cl2/MeOH 16:1) dá o composto puro 43 (3 mg, 10 %).

Rf: 0,2 (CH2Cl2/MeOH 16:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,58 (s, 1H) ; 6,05 (d, 1H) ; 5,96 (d, 1H) ; 5,78 (sa, 1H) ; 5,17 (d, 1H) ; 4,78 (s, 1H) ; 4,51- 4,35 (m, 3H) ; 4,07 (dd, 1H) ; 4,00 (m, 2H) ; 3,77 (s, 3H) ; 3, 64-3,53 (m, 2H) ; 3, 07-2,80 (m, 3H); 2,31 (s, 3H) ; 2,17- 2,10 (m, 1H); 2,02 (s, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C29H3oN2OioS : 598,2. Encontrado 583,1 (M+ - H20+Me)

Exemplo 50

14 44 45 104 ΕΡ2305689Β1 A uma solução de composto 14 (414 mg, 0,5 mmol) em CH2C12 (9,5 ml, 0,032M) sob Árgon foram adicionados Boc20 (113 mg, 0,5 mmol) e piridina (0,04 ml, 0,5 mmol). Após 2 h a 23 °C mais Boc20 (113 mg, 0,5 mmol) e piridina (0,04 ml, 0,05 mmol) foram adicionados. Boc20 adicional (113 mg, 0,5 mmol) e piridina (0,04 ml, 0,05 mmol) foram adicionados após 3 h. Tempo de reação total: 6 horas. A mistura de reação foi extinta com uma solução saturada aguosa de NaHC03, a fase aquosa foi extraída com CH2C12 e as camadas orgânicas secas em Na2S04. Cromatograf ia flash (hexano/acetato de etilo 1:1) dá os compostos puros 44 (365 mg, 78 %) e 45 (105 mg, 20 %).

Composto 44

Rf: 0,5 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,68 (s, 1H) ; 6,59 (s, 1H) ; 6,57 (S, 1H) ; 6, 03 (d, 1H) ; 5, 96 (d, 1H) ; 5,93 -5,80 (m, 1H) ; 5,73 (s, 1H) ; 5,13-5,07 (m, 2H) ; 5,00 (d, 1H) ; 4,55 (s, 1H) ; 4,36 (d, 1H) ; 4,32 (s, 1H); 4,18 (d, 1H) ; 4,09 (dd, 1H) ; 3, 78 (s, 3H); 3,58 (s, 3H) ; 3,57-3,49 (m, 2H) ; 3,14- 3, 05 (m, 1H) ; 2,98-2,76 (m, 4H) ; 2,68-2,59 (m, 1H); 2,50- 2,45 (m, 1H) ; 2,35-2,14 (m, 2H) ; 2,31 (s, 3H) ; 2,26 (s, 3H) ; 2, 02 (s, 3H) ; 1,50 (s, 9H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C47H52N4Oi2S: 896, 3. Encontrado (M + H)+: 897,0 Composto 45

Rf: 0,6 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (30 0 MHz , CDC13) : δ 6, 92 (s, 1H) ; 6, 68 (s, 1H) r 6, 55 (S, 1H) f 6, 03 (d, 1H) ; 5, 96 (d, 1H) ; 5,87- -5,75 (m r 1H) ; 5,22 -5, 07 (m, 2H) ; 5, 00 (d, 1H) ; 4,55 (s, 1H) ; 4, 33 (s, 1H) ; 4, 18 (d, 1H) ; 4, 10 (dd, 1H) ; 4,06 (d, 1H) ; 3, 80 (s, 3H) ; 3, 58 (s, 3H) r 3,52 (d, 1H) ; 3, 12- -3, 00 (m, 1H) ; 2, 93 -2, 75 (m, 105 ΕΡ2305689Β1 4Η) ; 2, 68- -2,58 (m, 1H); 2,51-2,46 (m, 1H); 2,32 (s, 3H); 2,31 (s, 3H) ; 2,27- 2,23 (m, 2H) ; 2,05 (s, 3H) ; 1,50 (s, 9Η) ; 1,49 (s, 9H) . ESI-MS m/z: Calcd . para C52 H60N4O14S : 9 9 6,4 . Encontrado (M + H)+: 997,7 106 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 51

A uma solução de composto 44 (275 mg, 0,30 mmol) em THF / H20 2:1 (15 ml, 0,027M) foi adicionada uma solução aquosa de KOH (4 ml, 1,1 M) . A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 2 h. Após este tempo a reação foi extinta com salmoura e extraida com CH2CI2. A camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia (hexano/ acetato de etilo 1:1) dá o composto puro 46 (216 mg, 82 %).

Rf: ( 0,48 (hexano/acetato de et ilo 1 : 1) 1H-RMN (3( OO MHz, CDCI3) : δ 6,7 0 (s, 1H) ; 6,59 (s, 1H) ; 6, 55 (S, 1H) ; 6,25 (s, 1H) ; 5, 95 (d, 1H) ; 5 >,89 (d, 1H) ; 5 ,87- 5,77 (m, 1H) ; 5,72 (s, 1H) ; 5, 10- -5, 03 (m, 2H) ; 4, 99 (d, 1H) ; 4,49 (d, 1H); 4,38 -4,36 (m, 2H) ; 4,17 (d, 1H) ; 4,05 (dd, 1H) ; 3,68 (s, 3H) ; 3,59- -3,53 (m, 2H) ; 3,56 (s, 3H) ; 3, 13 -3, 04 (m, 1H) ; 2, 99 -2,71 (m, 4H) ; 2,68-2,46 (m, 3H) ; 2,40 (d, 1H); 2,30 (s, 3H) ; 2, 16 (s i, 3H) ; 1,50 (s, 9H) . ESI- MS m/ z: Calcd. para C45H50N4O11S : : 854, ,3. Encontrado (M + H) +: 855,6 107 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 52 ΕΡ2305689Β1

A uma solução de composto 46 (108 mg, 0,13 mmol) em CH2C12 (4 ml, 0,032M) sob atmosfera de Árgon a 23 °C foram adicionados piridina (0,02 ml, 0,26 mmol) e o cloreto de cinamoilo (21 mg, 0,13 mmol) . A mistura de reação foi deixada durante 2 horas a 23 °C e extinta após este tempo com uma solução saturada aquosa de NaHC03, a fase aquosa extraída com CH2C12 e as camadas orgânicas secas em Na2S04. Cromatografia flash (hexano/acetato de etilo 2:1) dá o composto puro 47 (53 mg, 43 %) Rf: 0,67 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (30 0 MHz , CDCI3) : 5 7,8 8 (d, 1H) ; 7,59 1 ΟΊ (m, 2H) ; 7,44 -7, 39 1 (m, 3H) ; 6,71 (s, 1H) ; 6,589 (d, 1H) ; 6, 58 (s, 1H) ; 6, 54 (s, 1H) ; 6,06 (d, 1H) ; 5, 97 (d, 1H) ; 5, 92- 5,79 (m, 1H) r 5 ,46 (s, 1H) ; 5, 13- -5, 05 (m, 2H) ; 5, 01 (d, 1H) ; 4,57 (s r 1H) ; 4,37 -4,34 (m, 2H) ; 4,20 (s, 1H) ; 4, 11 (d, 1H) ; 3, 61 (s, 3H) ; 3,55 (d, 2H) ; 3,45 (s, 3H) ; 3, 15- 3,09 (m, 1H) r 2 , 96- 2, 62 (m, 4H) ; 2,51- -2,31 (m, 3H) ; 2,25 (s, 3H) ; 2, 09 (s, 3H) ; 1,51 (s, 9H) ESI-MS m/2 :: Calcd. para C55H5 6N4O 12S : 984 ,4. Encont rado (M + H) +: 986, 0 108 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 53

A uma solução de composto 46 (108 mg, 0,13 mmol) em CH2C12 (4 ml, 0,032M) sob atmosfera de Árgon foram adicionados ácido octanoico (0,02 ml, 0,13 mmol), DMAP (31 mg, 0,26 mmol) e EDC.HC1 (48 mg, 0,26 mmol). A reação foi agitada a 23 °C durante 2 h. Após este tempo a mistura de reação foi diluída com CH2C12, lavada com salmoura e a camada orgânica seca em Na2S04· Cromatografia flash (hexano/acetato de etilo 2:1) dá o composto puro 48 (86 mg, 69 %) .

Rf: 0,85 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (30 0 MHz , CDCI3) : 5 6,6 8 (s, 1H) ; 6,58 (s, 1H) ; 6, 56 (s, 1H) f 6, 03 (d, 1H) ; 5, 95 (d, 1H) ; 5, 93- -5,79 (m, 1H) ; 5, 65 (s r 1H) ; 5,13 -5, 07 (m, 2H) ; 5, 00 (d, 1H) ; 4,53 (d, 1H) ; 4, 36- -4,32 (m, 2H) ; 4, 17 (d, 1H) ; 4,09 (dd, 1H) ; 3, 76 (s, 3H) r 3,58 (s, 3H) ; 3,57- -3,50 (m, 2H) ; 3, 14 -3, 06 ( m, 1H) ; 2, 97 -2,75 (m, 4H) ; 2, 68 -2,45 (m, 3H) ; 2,35 -2,14 ( m, 2H) ; 2, 31 (s, 3H) ; 2,01 (s, 3H) ; 1,75- -1,71 (m, 2H) ; 1, 50 (s, 9H) r 1,36- -1,24 (m, 10H) j : 0, £ 59 (t , 3H) . ES I-MS m/ z : Calcd. ] pcUTcL C53H54N4O 12S: s >80,4 . Encontrado (M + H) + : 982 ,0 109 ΕΡ2305689Β1 Exemplo 54

Uma solução de composto 47 (38 mg, 0,03 mmol) em

CH2C12/H20/TFA 2:1:3,3 (3,1 ml, 0,013M) foi agitada a 23 °C durante 64 h. A mistura de reação foi neutralizada com uma solução saturada aguosa de NaHC03, extraída com CH2C12 e as camadas orgânicas secas em Na2SC>4. Cromatograf ia flash (hexano/acetato de etilo 3:2) dá o composto puro 49 (34 mg, 99 %) .

Rf: 0,56 (hexan o/acetato de et ilo 1 : 1) 1H-RMN (3( D0 MHz , CDC13) 1 : δ 7,8 6 (d, 1H) ; 7,58 -7, 54 (m, 2H) ; 7,46 -7,44 (m, 3H) ; 6, 57 (d, 1H) ; 6, 55 (s, 1H) ; 6,49 (s, 1H) ; 6, 45 ' (s, 1H) ; 6, 07 (d, 1H) ; 5, 99 (d, 1H) ; 5,90- 5 ,79 (m, 1H) ; 5, 42 (s, ih; 1; 5, 13- -5, 04 (m, 2H) ; 5,03 (d, 1H) ; 4, 60 (s, 1H) ; 4, 37 -4, 34 (m, 2H) ; 4,23- -4,20 (m, 2H) ; 4 ,13 (d, 1H) ; 3, 64 (s, 3H) r 3, 55 (d, 2H); ; 3, 44 (s, 3H) ; 3 ' r 15- 3,06 (m, 1H) ; 2, 97 -2, 11 (m, 4H) ; 2, 64- -2,34 (m, 4H) ; 2 ,24 (s, 3H) ; 2, 09 (s, 3H) . ESI-MS m/ z: Calcd. para C 4 9H4 gN 4 OiqS : 884,3. Encontrado (M + H)+: 885,0 Exemplo 55

110 ΕΡ2305689Β1

Uma solução de composto 48 (65 mg, 0,06 mmol) em CH2C12/H20/TFA 2:1:3,3 (5,3 ml, 0,013M) foi agitada a 23 °C durante 64 h. A mistura de reação foi neutralizada com uma solução saturada aquosa de NaHC03, extraída com CH2C12 e a camada orgânica seca em Na2S04. Cromatografia flash (hexano/acetato de etilo 3:2) dá o composto puro 50 (57 mg, 99 %) .

Rf: 0,64 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : δ 6,59 (s, 1H) ; 6, 47 (s, 1H) r 6, 43 (s, 1H) r 6, 04 (d, 1H) ; 5, 96 (d, 1H) ; 5, 91- -5, 80 (m í 1H) ; 5, 64 (s r 1H) ; 5, 14 -5, 07 (m, 2H) ; 5, 00 (d, 1H) ; 4, 55 (d, 1H) ; 4, 36- -4,33 (m, 2H) ; 4,20 (d, 1H) ; 4, 11 (dd, 1H) r 3, 77 (s, 3H) r 3, 62 (s, 3H) ; 3, 58 -3, 50 (m, 2H) ; 3, 12 -3, 07 (m, 1H) ; 2, 98- -2,76 (m, 4H) ; 2, 63 -2,43 (m, 3H) ; 2, 36 -2, 10 (m, 2H) ; 2, 31 (s, 3H) ; 2, 02 (s, 3H) ; 1,73- 1, 65 (m, 2H) ; 1 ,34- 1,20 (m, 10H) ; 0, 89 (t, 3H). ESI-MS 1 m/z : Calcd para c48h5i sn4o ioS : 880 ,4. Encontrado (M + H)+: 882, 0

Sintese de compostos 51 e 52 seguindo o procedimento experimental geral para as reações de dealllação

Exemplo 56

Rf: 0,26 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H RMN (300 MHz, CDC13): : 7,87 (d, 1H) ; 7,59 -7,54 (m, 4H) ; 7,51 -7,44 (m, 6H) ; 6,60- -6,43 (m, 8H) ; 6,07 (d, 2H) ; 5, 97 (d, 2H) ; 5, 03 (d, 2H) ; 4,59 (s, 2H) ; 4,50 (d, 1H) ; 4 ,37- 4,34 (m, 2H) ; 4,: 23-4,09 (m, 4H) ; 3,84 (d, 2H) ; 3,65 (s, 111 ΕΡ2305689Β1 3H) ; 3,64 (s, 3H) ; 3, 61 (s, 6H) ; 3,57- -3, 52 (m, 2H) ; 3 ,43- 3,40 (m, 2H) ; 3, 14- 2, 97 (m, 6H) ; 2, 93- -2, 80 (m, 6H) ; 2 , 68- 2,58 (m, 2H) ; 2,48- -2,20 (m, 4H) ; 2,2 9 (s, 3H) ; 2,2 3 (s, 3H) ; 2,09 (s, 3H) ; 1, 94 (s, 3H) . ESI- -MS m/ z : Calcd. para C46H4 4N4O10S: 844 ,3. Encontrado (M + H) +: 84 15, 0

Rf: 0,36 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) 8: 6,61 (s, 1H) ; 6,47 (s, 1H) ; 6,43 (s, 1H); 6,05 (d, 1H); 5,97 (d, 1H); 5,72 (s, 1H); 5,02 (d, 1H) ; 4,55 (d, 1H) ; 4, 50 (d, 1H) ; 4,33 (s, 1H) ; 4,19 (d, 1H) ; 4,11 (dd, 1H) ; 3 ,85 (d, 1H) ; : 3,76 (s, 3H) ; 3,61 (s, 3H) ; 3,52 (d, 1H) ; 3, 14-2,97 (m, 3H) ; 2, 81 -2,7 6 (m, 1H) ; 2, 67 -2,48 (m, 3H) ; 2,43-2,33 (m, 1H) ; 2 , 30 (s, 3H) ; 2 ,17- 2, 09 (m, 1H) ; 2, 02 (s , 3H) ; 1,74 -1,70 (m, 2H) ; 1,38- 1,20 (m, 10H) ; 0,89 (t, 3H) ESI-MS m/ z : Calcd . para: C45H52N4* SioS : 840,3 Encontrado (M + H)+: 841,1

Procedimento experimental geral para a síntese de compostos 53 e 54. Interconversão do grupo nitrilo no grupo hidroxilo. A uma solução de material de partida em CH3CN/H20 3:2 (0,015M) foi adicionado AgN03 (30 equiv) . Após 24 h a 23 °C, a reação foi extinta com uma mistura 1:1 de soluções saturadas aquosas de salmoura e NaHC03, agitada durante 10 min, diluida e extraida com CH2CI2. A camada orgânica foi 112 ΕΡ2305689Β1 seca em Na2S04. Cromatografia (misturas de CH2Cl2:MeOH) dá os compostos puros 53 e 54.

Exemplo 58

Rf: 0,46 (CH2Cl2/MeOH 8:0,5) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,87 (d, 1H) ; 7,59-7,54 (m, 4H) ; 7,51-7,44 (m, 6H) ; 6,60-6,43 (m, 8H) ; 6, 05 (d, 2H) ; 5, 97 (d, 2H) ; 5, 14 (d, 2H) ; 4,87 (s, 2H) ; 4,54-4,37 (m, 4H) ; 4,06-4,02 (m, 2H) ; 3,74-3,60 (m, 4H) ; 3, 64 (s, 3H) ; 3, 63 (s, 3H) ; 3, 61 (s, 3H) ; 3,48 (s, 3H) ; 3,48-3,43 (m, 2H) ; 3,18-3,01 (m, 6H) ; 2,91-2,83 (m, 6H) ; 2,70-2,58 (m, 2H) ; 2,49-2,22 (m, 4H) ; 2,29 (s, 3H) ; 2,24 (s, 3H) ; 2,08 (s, 3H); 1,93 (s, 3H). 13C-RMN (75 MHz, CDCI3) : δ 145,7, 144, 6, 144,5, 131,1, 129,4, 129,0, 128 , 9, 128,5, 127,1 , 126,7, 125, 0, 121,6, 117,3, 114,9, 114, 2, 110,0, 101,9, 81,5, 68,4, 61,4, 60, 6, 57,3, 56,2, 55,3, 51,4, 48,0,42,4, 40, 0, 38, 9, 37,3, 36,0, 33,0, 32,1, 32,0, 31,2, 30,5, 29, 6, 29, 1, 27, 6, 27,3, 23, 9, 23,2, 22, 9, 20,0, 16,0, 14,4, 11,2, 9,8 ESI-MS m/ z : Calcd. para: C45H45N3O11S: 835,3. Encontrado (M + H)+: 836,0 113 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 59 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0 ,31 (CH2C1 2/MeOH 8:0, 5) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) 8 : 6 ,60 (s, 1H) ; 6,45 (s, 1H) ; 6,42 (s, 1H) ; 6,02 (d, 1H); 5, 95 (d, 1H) ; 5, 12 (d, 1H) ; 4, 83 (s, 1H) ; 4,52 (d, 1H); 4,45 (s, 1H) ; - 4,40- -4, 36 (m, 1H) ; 4,06- 3, 99 (m, 2H) ; 3,76 (s, 1H) ; 3,63- -3, 60 (m, 2H) ; 3, 61 (s, 3H) ; 3,46 (d, 1H) ; 3,15· -3,00 (m, 3H) ; 2, 90- -2,77 (m , 2H) ; 2, 63- -2,49 (m, 3H); 2,43- 2,35 (m, 1H); 2, 30 (s, 3H) ; 2,18- 2,06 (m, 1H) ; 2,00 (s, 3H) ; 1,74- -1,70 (m, 2H) ; 1,34-1,20 (m, 10H) ; 0, 89 (t, 3H) ESI- MS m/ z : Calcd. para: C44H53 N3OnS : 831 .,3 Encontr ado (M + H ) +: 832,0

Procedimento experimental geral para a introdução da fração de triptamina, reação de Pictect-Spengler; síntese de compostos 55, 56, 57 e 58. A uma solução de composto 13 em ácido acético (0,5 10” 4M) sob atmosfera de Árgon a 23 °C foi adicionado o reagente triptamina. A mistura de reação foi agitada durante 24 h a 23 °C (para os compostos 57 e 58 temperatura de reação 60 °C) e então o ácido acético foi evaporado. Uma solução saturada aquosa de NaHC03 foi adicionado e a mistura foi extraída com CH2CI2 e as camadas orgânicas foram secas em Na2S04. Cromatografia flash (misturas de hexano/acetato de etilo) dá os compostos puros. 114 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 60 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,45 (hexano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,74 (s, 1H) ; 7,38 (d, 1H) ; 7,24 (d, 1H) ; 7,09 (t, 1H) ; 7,00 (t, 1H) ; 6,66 (s, 1H) ; 6,22 (d, 1H) ; 6,01 (d, 1H) ; 5, 94- -5, 80 (m, 1H) ; 5,78 (s, 1H); 5, 15- 5, 07 (m, 3H) ; 4,56 (s, 1H) ; 4,37 (d, 1H) ; 4,33 (s, 1H) ; 4, 23 (d, 1H) ; 4,19 (dd, 1H) ; 3, 80 (s, 3H) ; 3,55 (d, 1H) ; 3, 44 (d, 1H) ; 3, 17- -2,80 (m, 6H) ; 2,71 -2,52 (m, 3H) ; 2,37 (s, 3H); 2,25 (s, 3H); 2,06 (s, 3H). ESI-MS m/z: Calcd. para C43H43N5O8S: 789,3. Encontrado (M + H)+: 790,0 115 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 61

Rf: 0,18 (Hex/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7 ,65 (s, 1H) ; 7, 11 (d, 1H); 6, 81 (d, 1H) ; 6,73 (dd, 1H) ; 6, 6 6 (s, 1H) ; 6,19 (d, 1H) ; 5, 99 (d, 1H) ; 5, 92 -5, 83 (m, 1H) ; 5,78 (s, 1H) ; 5,15-5,06 (m, 3H) ; 4,55 (s, 1H) ; 4,36 (d, 1H); 4, 32 (s , 1H) ; 4,22(d, 1H) ; 4, 18 (dd, 1H) ; 3,81 (s, 3H) ; 3,79 (s, 3 H) ; 3,54 (d, 1H) ; 3,44 (d, 1H) ; 3,16- -3, 03 (m, 2H); 2,96-2 ,78 (m, 4H) ; 2 , 65- 2,50 (m, 3H) ; 2,38 (s, 3H); 2,25 (s , 3H) ; 2,05 (s, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C44H45N5O9S: 819,3. Encontrado (M + H)+: 820,5

Exemplo 62

1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,72 (s, 1H); 6, 88 (d, 1H) ; 6, 65 (d, 1H) ; 6,60 (d, 1H) ; 6,52 (dd, 1H) ; 6, 10 (s, 1H) ; 5, 94 116 ΕΡ2305689Β1 (S, 1H) ; 5,94-5,81 (m, 1H); 5, 82 (s, 1H) ; 5 ,14- -5, 03 (m, 3H) ; 4,53 (s, 1H); 4,35 (d, 1H); 4, 2 9 (s , 1H) f 4,20(d, 1H) ; 4, 17 (dd, 1H) ; 3, 80 (s, 3H); 3, 53 (d, 1H) ; 3 ,41 (d, 1H) ; 3,09 -3, 01 (m, 2H) ; 2, 91 -2,72 (m f 5H) ; 2,56- -2, , 51 (m, 2H) ; 2,37 (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,03 (s , 3H) • esi-: MS m/ z : Calcd. para C43H43N5O 9S : 805, 3. Encontrado (M + Η) + : 8 0 6,5 Exemplo 63

Rf: 0,48 (Hex/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13; 1 : δ 7 ,66 (s, 1H) ; 7 \—1 (S, 1H) ; 7 ,13 (d, 1H) ; 6,91 (d, 1H); 6 , 66 (S, 1H) ; 6,21 (s, 1H) ; 6, 00 (s, 1H) ; 5, 92-5,81 (m, 1H) ; 5, 8 0 (s, 1H); 5, 15- -5,06 (m, 3H) ; 4,55 (s , 1H) ; 4,37 (d, 1H) ; 4,32 (s , ih); 4,21(d, 1H) ; 4 ,16 (d, 1H) ; 3, 81 (s, 3H) f 3,54 (d, 1H) ; 3,43 (d, 1H) ; 3 r 17- 3, 03 (m, 2H) ; 2,96-2, 77 (m , 5H) ; K3 05 CO 1 N) 42 (m, 4H) ; 2 ,37 (s, 3H) ; 2,25 (s, 3H); 2 ,06 (s, 3H) • ESI- MS m/z: Calcd. para C44 H45N508S: 803,3. Encontrado (M + H)+: 804,4 Síntese de compostos 59, 60, 61 e 62 seguindo o procedimento experimental geral para as reações de dealilação 117 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 64 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,21 (Hex/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13 ) : δ 7, 74 (s, 1H); 7,38 (d, 1H) ; 7,24 (d, 1H) ; 7, 09 (t, 1H); 7, 00 (t, 1H) ; 6,68 (s, 1H) ; 6,23 (d, 1H) ; 6, 02 (d, 1H) ; 5 ,10 (d, 1H) ; 4,55 (s, 1H) ; 4,51 (d, 1H) ; 4, 33 (s, 1H) ; 4, 23 (d, 1H) ; 4,19 (dd, 1H) ; 3, 84 (d, 1H) ; 3, 80 (s, 3H) ; 3, 45 (d, 1H) ; 3,25-2,79 (m, 6H) ; 2 ,71- 2,53 (m, 3H) ; 2,36 (s, 3H) ; : 2,26 (s, 3H) ; 2,07 (s, 3H) . ESI- MS m/ z : : Calcd. para C40H 39NSO8S : 749,3. Encontrado (M + H) +: 749,9

Exemplo 65

1H) ; 7, 12 (d, 1H) ; 6, 81 1H) ; 6,20 (s, 1H) ; 6, 00

Rf: 0,15 (Hex/acetato de etilo 1:2) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,65 (s, (d, 1H) ; 6,73 (dd, 1H) ; 6,67 (s, 118 ΕΡ2305689Β1 (S, 1H) ; 5 O co (d, 1H) ; 4, 55 (S, 1H); 4, 49 (d, 1H) ; 4,31 (s, 1H) ; 4,31- -4, 16 (m , 2H) r 3, 83 (d, 1H) ; 3, 80 (s, 3H) ; 3,79 (s, 3H) ; 3,44 (d, . 1H) r 3, 24-3 ,11 (m, 2H) ; 3, 03 -2, 94 (m, 1H) ; 2,83- -2,80 (m , 1H) r 2, 65-2 , 50 (m, 4H) ; 2,36 (s, 3H) ; 2,26 (s, 3H) ; 2 ,06 (s r 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C4iH41N509S : 779, ,3. Encontrado (M + H) + : 780,0

Exemplo 66

Rf: 0,10 (Hex/acetato de etilo 1:2) 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7, 67 (s, 1H) ; 6,93 (d, 1H) ; 6,66 (s, 2H) ; 6 , 55 (dd , 1H) ; 6,15 (s, 1H) ; 5, 98 (s, 1H) ; 5,06 (d, 1H) ; 4, 53 (s, 1H); 4, r 4 8 (d, 1H) ; 4, 29 (s, 1H) ; 4,19 (d, 1H) ; 3, 82 (d, 1H) ; 3,78 (s, 3H) ; 3,42 (d, 1H) ; 3,22- 2, 96 (m, 5H) ; 2 ,76- -2,73 (m, 2H) ; 2,57- -2,43 ; (m, 3H) ; 2,35 (s, 3H) ; 2, 25 (s, 3H) ; 2,04 (s, 3H) . ESI- MS m/: z: Calcd. para C40H39N5C * 9 S : 765 ,3. Encontrado (Μ + H) + : 766,4 119 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 67

Rf: 0,35 (Hex/acetato de etilo 1:2) 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7,63 (s, 1H) ; 7,26 (s, 1H) ; 7,15 (d, 1H) ; 6 , 91 (d, 1H) ; 6, 68 (s , 1H) ; 6,22 (d, 1H) ; CM O (d, 1H) ; 5, 09 (d, 1H) ; 4, 55 (s, 1H) ; 4,50 (d, 1H) ; 4,32 (s, 1H) ; 4, 22 (d, 1H) ; 4, 18 (dd, 1H) ; 3, 83 (d, 1H) ; 3, 80 (s, 3H) ; 3, 44 (d, 1H) ; 3, 25- -3, 10 (m, 3H) ; 3 , 03- -2, 94 (m, 1H) ; 2,83 -2, 77 (m, 1H) ; 2, 66- 2,51 (m, 4H) ; 2, r 37 (s, 3H) ; 2,36 (s, 3H) ; 2 ,26 (s, 3H) ; 2, 07 (s , 3H) • ESI- MS m/ z : Calcd . para C41H41N5O8S: 763, 3 . Encontrado (M + H)+: 764,0

Procedimento experimental geral para a sintese de compostos 63, 64, 65, 66 e 67. Interconversão do grupo nitrilo no grupo hidroxilo. A uma solução de material de partida em CH3CN/H20 3:2 (0,015 M) foi adicionado AgN03 (30 equiv) . Após 24 h a 23 °C, a reação foi extinta com uma mistura 1:1 de soluções saturadas aquosas de salmoura e NaHC03 agitado durante 10 min, diluído e extraído com CH2CI2. A camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia (misturas de CH2Cl2:MeOH) deu composto puros 63, 64, 65, 66 e 67. 120 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 68 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,13. (CH2Cl2/MeOH 16 : 1) 1H-RMN (300 MHz, CDC1 3) : S 7, 72 (s, 1H) ; 7,38 (d, 1H) ; 7 ,24 (d, 1H) ; 7,09 (t, 1H) r 7,00 (t, 1H) ; 6, 68 (s, 1H); 6, 21 (d, 1H) ; 6,00 (d, 1H) ; 0 >,21 (d, 1H) ; 4, 85 (s, 1H); 4,53-4 , 38 (m, 3H) ; 4,13-4,08 (m, 2H) ; 3, 80 (s, 3H) ; 3,64-3, 57 (m, 3H) ; 3,17-3, 08 (m, 2H) ; 2,91-2,82 (m, 2H) ; 2,69-2, 54 (m, 3H) ; 2,36 (s, 3H); 2 ,25 (s, 3H) ; 2 , 08 (s, 3H) . 13C-RMN (75 MHz , CDC13) : S 171,7 f 146, 0 , 145,7, 142,8, 141,4, 140 , 9, 135 ,7, 132,0, 131,1, 129,5, 127,1 , 125,0, 124,6, 122 , 1, 121 ,8, 121,5, 119,4, 118,6, 115,7 , 111,2, 110,4, 102 ,0, 81, 7, 62, 6, 62, 1, 60, 6, 57,2, , 56,1, 51, 4, 48, 1, 42,6, 40 ,0, 39, 4, 29, 9, 27,4, 21, 8, 20,8, , 16,0, 9, 9 ESI -MS m/z: Calcd. para C39H4 0N4O9S l 740, 3. Encontrado (M - h2o + H) + : 723,0

Exemplo 69

121 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,36 (CH2Cl2/MeOH 8:1) 1H-RMN (300 MHz , CDC13) : 5 7, 60 (s, 1H) ; 7, 12 (d, 1H) r 6, 81 (d, 1H); 6,74 (dd, 1H) ; 6,68 (s, 1H) ; 6,19 (s, 1H) r 6, 00 (dd, 1H); 5,20 (d, 1H); 4,84 (s, 1H) ; 4,53- -4,37 (m r 3H) ; 4, 12 -4,07 (m, 2H) ; 3,80 (s, 3H) ; 3,78 (s, 3H) ; 3,60 -3, 53 (m, 3H) ; 3,18- 3, 11 (m, 2H) ; 2, 90- -2,79 (m, 2H) ; 2,66 -2, 49 (m, 3H); 2,36 (s, : 3H); 2,25 (s, 3H) ; 2, 05 (s, 3H) . 13 C-RMN (75 MHz, CDC1 3) · 5 171,7; 168, 9 ); 154 :,0; 146,1; 145, 7; 142, 9; 141,4; 140, 9; 134,0; 131, 9; 130,9; 129, 6; 129, 3; 127, 4; 124,5; 121, 8; 121,5; 115, 7; 113,1; 111,9; 110, i; 102, 1; 100,6; 81,7 ; 62,6; 62,0; 60, 6; 57,1 ; 56,1; 51, 4; 48,0 ; 42,6; 40, 1; 39,4; 29,9; 27,4, ; 21,8 ; 20, 8; 16,0; 9, 9 • ESI- MS m/z: Calcd. pcLlTcL C40H42 n4o10s : 770, 3. Encontrado (M - h2o + H)+: 753, 2 122 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 7 0 ΕΡ2305689Β1

Rf: 0,15 (CH2Cl2/MeOH 8 : D 1H-RMN (300 MHz , CDCI3) : δ 7,59 (s, 1H) ; 7,03 (d, 1H) ; 6 ,72 (d, 1H); 6, 68 (t, 1H) ; 7, 00 (t, 1H) ; 6, 68 (s, 1H) ; 6 , 61 (dd , 1H) ; 6 ,18 (s, 1H) ; 5 , 97 (s, 1H) ; 5,20 (d, 1H) ; 4 ,84 (s, 1H); 4, 52- 4,36 (m, 3H) ; 4, 12- 1 0 {£> (m, 2H) ; 3, 80 (s, 3H) ; 3,60-3 ,48 (m, 3H) ; 3 ,16 -3, 10 (m, 3H) ; 2, 91 -2, 77 (m, 2H) ; 2,57-2, 43 (m, 3H) ; 2,36 (s, 3H); 2, 2 6 (s , 3H) ; 2 !,05 (s, 3H) . 13c-rmn (75 MHz, CDC13 ) : δ 171 ,7; 169,2; 149, 6; 146 ,1; 142 ,8; 141, 3; 141, 0; 132, i; 132, 0; 131,1; 131, 0; 129 , 6; 129 ,0; 127, 7; 124, 6; 121, 8; 121, 5; 115,7; 113, i; 111 ,7; 109 ,8; 103, 4; 102, 1; 81 ,7; : 68,3; 62,0; 60, 6 i; 57 , i; 56 , i; 51, co o 42, 5; 40,0; 39, 2; 32,1; : 27,4 ; 20, 8; 16,0; 9, 9. ESI -MS m/z: Calcd. para C39H40 n4o10s : 756, r3. Encontrado (M - h2o + H)+: 739, 0 123 ΕΡ2305689Β1 Exemplo 71

1H-RMN (300 MHz, CDC13) : S 7,61 (s, 1H) ; 7,14 (s, 1H) ; 7,13 (d, 1H) ; 6,91 (d, 1H) ; 6,66 (s, 1H) ; 6,20 (s, 1H) ; 6,01 (d, 1H) ; 5,19 (d, 1H) ; 4,85 (s, 1H) ; 4,54-4,40 (m, 3H) ; 4,12- 4,08 (m, 2H) ; 3,80 (s, 3H) ; 3,62 (d, 2H) ; 3,54 (m, 1H) ; 3,17-3,08 (m, 2H) ; 2, 90-2,78 (m, 2H) ; 2, 64-2,47 (m, 3H) ; 2,37 (s, 3H) ; 2,36 (s, 3H) ; 2,25 (s, 3H) ; 2,06(s, 3H) . 13C- RMN (75 MHz, CDC13) : S 171,7; 168,9; 146,2; 145,7; 142,9; 141,4; 140,9; 134,1; 132,4; 132,3; 131,2; 129,6; 128,6; 127,3; 123,7; 121,7; 121,4; 118,4; 115,7; 113,1; 110,8; 109,9; 102,1; 81,6; 62,0; 60,6; 56,1; 51,4; 48,0; 42,5; 39,4; 32,1; 29,2; 28,1; 27,3; 21,8; 20,8; 16,0; 13,8; 9,9. ESI-MS m/z: Calcd. para C40H42N4O9S: 754,3. Encontrado (M -H20 + H) +: 737,3

Exemplo 72

124 ΕΡ2305689Β1 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : S 6, ,62 (s, 1H) , 6, 47 (s, 1H) , 6, 45 (s, 1H) , 6 , 03 (s, 1H), 5, • 95 (s, 1H) , 5,78 (m, 1H) , 5,67 (s, 1H) , 5, 38 (m, 1H) , . 5, 14 (d, 2H) , 5 , 05 i [sl, 1H) , 4, 99 (sl, 1H) , 4, 83 (sl, 1H) , 4,49 (sl, 1H), 4,28 (sl, 1H) , 4,05 (d, 1H) , 3, .79 (s, 3H) , 3,61 (s , 3H) , 3, 57 (m, 1H) , 3, 35 (m, 1H) , 3, . 12 (m, 1H) , 2,85 (m , 4H) , 2, 60 (m, 2H) , 2,51 (m, 1H) , 2, 32 (s, 3H) , 2,26 (s, 3H), 2, 18 (m , 4H) , 2, 03 (s, 3H) ESI -MS m/ z : Calcd. para C41H 45N3O11S: 787, 8. Encontrado (M - H20 + H )+: 770 ,4

Exemplo 73

Uma solução de Et-729 (19,9 mg, 0,03 mmol) numa solução metanólica de KOH (5,21 ml, 0,95 mmol, 0,1817M) foi agitada sob árgon a 23 °C. Após lha reação foi diluída com CH2C12 e extraída. A camada orgânica foi seca em Na2S04. Cromatografia dá o composto puro.

Rf: 0,18 (CH2Cl2/MeOH 10:1) 1H-RMN (300 MHz , CD3OD): δ 6, 61 (s, 1H); : 6,3 9 (s, 1H) ; 6,33 (S, 1H) ; 6, 03 (s, 1H); 5, 88 (s, 1H); 5-45- -5,44 (m, 1H) ; 5, 13 (d, 1H) ; 4,81 (s, 1H) ; 4,71-6,67 (m, 2H) ; 4,30 (d, 1H) ; 4, 08 (dd, 1H) ; 3,92 (d, 1H); 3,79 (d, 1H) ; 3, 73 (s, 3H) , 3, 55 (s, 3H); 3,18-3 , 05 (m, 3H); 2, 83-2, 79 (m , 1H) ; 2- 70-2 , 56 (m, 1H) ; 2,38 (d, 1H) ; 2,30 (s, 3H) ; 2, 20 (d, 1H) ; 2,14 (s, 3H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C36H39N3OioS : 705, 2.

Encontrado (M -H20 + H)+: 688,4 125 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 74 ΕΡ2305689Β1

A uma solução do intermediário 1 (1,17 g, 2,26 mmol) e derivado de cisteina (0,9g, 2,26 mmol) em diclorometano anidro (45 ml, 0,05M) foi adicionado a 23 °C sob atmosfera de Árgon EDC.HC1 (0,87 g, 4,52 mmol) e DMAP (0,55 g, 4,52 mmol). A mistura de reação foi deixada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 1 hora. Uma solução de bicarbonato de sódio saturada aquosa foi adicionada e a fase aquosa foi extraída com diclorometano, as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de diclorometano/metanol em gradiente de 100:0 a 80:1) para propiciar o intermediário 69 (1,43 g, 70 %) como um sólido amarelo. Rf: 0,5 (diclorometano/MeOH 60:1) 1H-RMN (CDCla, 300 MHz) 8 7, 63 (d, 2H) , 7,47 (dd, 2H) , 7,34 (m, 2H) , 7,23 (m, 2H), 6, 35 (s , 1H) , 6,09 (d, 1H) , 5, 91 (m, 2H) , 5, 85 (d, 1H) , 5, 62 (m, 1H) , 5, 58 (s, 1H) , 5, 30 (dd, 1H) , 5, 20 (dd, 1H ), 4,15 (d, 1H) , 4,06 -3, 91 (m, 4H) , 3, 78 (dd, 1H) , 3,69 (t largo, 1H) , 3,49 (s, 3H) , 3, 44 (m, 2H) , 3, 30 (d, 1H), 3,1 8 (dd, 1H) , 3, 07 (m, 3H) , 2, 81 (m, 2H) , 2,29 -2, 21 (m, 1H) , 2,22 (s, 3H) , 2,15 (s, 3H) , 2,08 (s, 3H) , 1, 45 (s, 9H) , 1,44 ( ;m, 1H ) . 13c-rmn (CDCla, 75 MHz) 8 169 , 95, 154, 83, 148,77 , 146 ,74, 145, 06, 144,li K 142, 48, 141, 30, 141,22, 138,49, , 134 ,24, 126 ΕΡ2305689Β1 131 ,47, 128,76 t 127, 46, 127, 33, 126 KO co f 12 6,76, 124, 36 124 ,09, 121,29 r 121, 08, 119, 82, 119 , 62 r 11 00 o co 116, 76 116 ,41, 112,89, 1 12,4 4, 101,03 , 7 9 , 65, 73 f 4 6, 60 ,38, 58, 76 57, 85, 56,21, 55 ,27, 51,76, 46, 6 6, 41, 4 9 r 38, ,59, 34, 48 33, 85, 31,55, 28 ,37, \—1 C\] 24, 2 9, 22, 6 1 r 15, , 51, 14, 08 9,53. ESI-MS m/z: Calcd. para CsiHsvNsOgS: 899,4. Encontrado (M+H)+: 900,4.

Exemplo 75

A uma solução do intermediário 69 (1,37 g, 1,52 mmol) em anidro acetonitrilo (8 ml, 0,19 M) foi adicionado a 0 °C sob atmosfera de Árgon DIPEA (5,31 ml, 30,4 mmol), MEMC1 (2,59 ml, 22,8 mmol) e DMAP (18,63 mg, 0,15 mmol). A mistura de reação foi deixada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 5 horas. Uma solução saturada aquosa de cloreto de amónio foi adicionada, a fase aquosa foi extraída com diclorometano, as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (eluente acetato de etilo/hexano 2:3) para propiciar o intermediário 70 (1,38 g, 92 %) como um sólido amarelo.

Outra fração com 130 mg foi isolada após coluna como uma mistura de material de partida e composto 70 numa razão de 2:1. Rf: 0,48 (acetato de etilo/hexano 2:3) 127 ΕΡ2305689Β1 1H-RMN (CDC13, 300 MHz) : δ 7,62 (d, 2H) , 7,50 (d, 1H) , 7,40 (t, 1H) , 1 ',33 (m, 2H) , 7,21 (m , 2H) , 6,55 ( S, 1H), 6 O co (d, 1H) , 5, 97 (m, 1H) , 5, 95-5,86 (m, 1H), 5, 84 (d, 1H), 5,66 (d largo, 1H) , 5 ,31 (dd ., 1H) , 5 ,21 (dd, 1H) , 5, 14 (d, 1H), 5,04 (d, 1H) , 4,16 (d, 1H) , 4,06- -3, 92 (m , 3H) , 3 ,87 (m, 2H) , 3, 73 (m, 4H) , 2 3,54 (m, 2H) , 3,41 (s , 3H) , 3 ,34 (s, 3H) , 3, 30 (m, 2H) , 3 ,20 (dd, 1H) , 3, 04 (ir 1, 3H) , 2 , 82 (m, 2H) , 2, 27 (m, 1H) , 1 3,24 (s, 3H) , 2,09 (s , 3H) , 2 ,07 (s, 3H) , 1, 49 (s, 9H) , 1, 43 (m, 1H). 13c- -RMN (CDCI3, 75 MHz): δ 170 ,19, 155, : 14, 148,96, 148, 83, 148 ,31, 145,37, 145, 23, 144, 43, 141,61, 141,55, 138, 70, 134 ,42, 131,13 , 131,02, 127,76 , 127 ',59, 127 ,23, 127, 127, 01, 125 ,58, 124,58, 124, 27, 123, 93, 121,42, 120,09, 119, 88, 118 ,29, 116,82, 113 ,03, 112 ,68, 101, 31, 98,34, 95, 88, 92, 55, 79 , 97, 73, 50, 71,98, 71,88, 69 ,54 , 67,68 r 67, 01, 59, 73, 59 ,27, 58, 94, 58,27, 5 6, 86, 56 , 35 , 55,52 r 51, 90, 46, 95, 41 ,63, 38, 37, 34,87, 33, 67, 28 , 65 , 26,70 t 24, 47, 15, 83, 9, 73. ESI- -MS m/z: Calcd. para C55 h65n5o10s 1 987 ,4.

Encontrado (M+l)+: 988,6. A uma solução do intermediário 70 (1,38 g, 1,39 mmol) em diclorometano anidro (36 ml, 0,04 M) foi adicionado a 23 °C sob atmosfera de Árgon, (PPh3)2PdCl2 (0,11 g, 8 % em peso), ácido acético (0,39 ml, 6,98 mmol) e hidreto de tributilestanho (1,31 ml, 4,88 mmol). A mistura de reação

Exemplo 76

OMe

128 ΕΡ2305689Β1 foi deixada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 30 minutos, diluída com hexano e vertida em coluna (misturas de eluente acetato de etilo/hexano em gradiente de 0:100 a 3:2) para propiciar o intermediário 71 (1,16 g, 87 %) como um sólido amarelo.

Rf: 0,28 (acetato de etilo/hexano 1:1) 1H-RMN (CDCI3, 300 MHz) : δ 7, 69 (t, 2H) , 7,54 (t, 2H) 7,39- 7,23 (m 4H) , 6, 61 (s ;, 1H), 5,98 (m, r 1H) , 5,96 (s, 1H) 5, 87 (s, 1H) , 5, 80 (s, 1H) , 5,39 (t, 2H) , 5,21 (d, 1H) 4, 11 (m, 3H) , 4, 01 (m, 1H) , 3, 92 (m, 3H) , 3, 66 (s, 3H) 3, 55 (m, 2H) , 3,39 (s, 3H) , 3, 37 (m, 3H) , 3,26- -3, 12 (m 4H) , 2, 90 (d, 1H) , 2, 88 (m, 1H) , 2,78 : (d, 1H) , 2,27 (s 3H) , 2,15 (s, 3H) , 2, 06 (s, 3H) , 1,73 (dd, 1H) , 1,39 (s 9H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C52H61N5O10S: 947,4. Encontrado (M+l)+: 948,8.

Exemplo 77

A uma solução de composto 71 (39 mg, 0,041 mmol) em anidro CH2C12 (1,2 ml, 0,03M) foi adicionado a -10 °C sob atmosfera de Árgon uma solução de anidrido benzenoselenínico (21,14 mg, 0,041 mmol) em anidro CH2C12 (0,6 ml) . A mistura de reação foi agitada a -10 °C sob atmosfera de Árgon durante 30 minutos. A reação foi diluída com CH2C12 e extinta com uma solução saturada aquosa de 129 ΕΡ2305689Β1 bicarbonato de sódio, a fase aquosa foi extraída com CH2CI2 e as camadas orgânicas foram secas em sulfato de sódio. 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida e o material bruto da reação foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash para propiciar composto 72 (33 mg, 83 %) como um sólido amarelo pálido e uma mistura de isómeros em razão 1,3:1 por 1H-RMN. ΕΡ2305689Β1 Exemplo 78

1) DMS0,Tf20 2) DIPEA 3) *BuOH N'Bu 4> JL Me2N NMez 5) Ac20, CH2CI2 OMe

Rf: 0,21 e 0,11 (acetato de etilo/hexano 2: 1) 1H-RMN (CDCI3, 300 MHz) 8 i 7,74 1 (d, 4H) , 7,70 -7, 62 (m, 4H) , 7,39 (t, 4H) , 7,31 (t, 4H) , 6,72 (m, 2H) , 6,61 (s, 1H) , 6,46 (s, 1H) , 5,78 (s, 1H) , 5,77 (s, 1H) , 5, 61 (s, 1H) , 5,58 (s, 1H) , 5,38 (d largo, 1H) , 5,23 (d, 1H) , 5, 12 (d, 2H) , 5, 04 (d, 1H) , 4,83 (s, 1H) , 4,41 (s, 1H) , 4,11 (m, 2H) , 4,03 (m, 4H) , 3, 90- -3,86 (m, 2H) , 3 i, 86 (s, 3H), 3 !, 78- 3,71 (m, 5H) , 3,55 (m, 6H) , 3,52 (s, 3H) , 3,38 (s, 3H) , 3,35 (s, 3H) , 3,27 (m, 4H) , 3, 12 (m, 3H) , 2,81 (m, 6H) , 2,44 (m, 4H) , 2,26 (s, 3H) , 2,22 (s, 3H) , 2, 14 (s, 3H) , 2,14- 2,10 (m, 2H) , 2,04 (s, 3H) , 1,78 (s, 3H) , 1,77 (s, 3H) , 1,39 (s, 9H) , 1,34 (s, 9H) . ESI-MS m/ z: Calcd. para C52H61N5O11S: 963,4. Encontrado (M+l)+: 964, 9. O balão de reação foi flambado duas vezes, purgado a vácuo/Árgon diversas vezes e mantido sob atmosfera de Árgon para a reação. A uma solução de DMSO (220,8 ml) em anidro 130 ΕΡ2305689Β1 CH2C12 (20,7 ml) foi adicionado gota a gota anidrido tríflico (104,7 ml) a -78 °C. A mistura de reação foi

agitada a -78 °C durante 20 minutos, então uma solução de 72 (300 mg, 0,31 mmol) em CH2C12 anidro (10,4 ml) a -78 °C foi adicionada via cânula. Durante a adição a temperatura foi mantida a -78 °C em ambos os balões. A mistura de reação foi agitada a -40 °C durante 35 minutos. Após este tempo, Pr2NEt (812,9 ml) foi adicionado gota a gota e a mistura de reação foi mantida a 0 °C durante 45 minutos. Então 1BuOH (293,4 ml) e guanidina (534,9 ml) foram adicionados gota a gota e a mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 40 minutos. Após este tempo, anidrido acético (441,1 ml) foi adicionado gota a gota e a mistura de reação foi mantida a 23 °C durante 1 hora mais. Então a mistura de reação foi diluída com CH2C12 e lavada com uma solução saturada aquosa de NH4C1, NaHC03 e NaCl. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por uma cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de acetato de etilo/hexano em gradiente de 1:4 a 1:1) para propiciar 73 (160 mg, 64 %) como um sólido amarelo pálido.

Rf: 0,13 (acetato de etilo/hexano 1:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,76 (s, 1H) , 6,06 (d, 1H) , 5,98 (s, 1H) , 5,32 (d, 1H) , 5,17 (d, 1H) , 4,81 (s, 1H) , 4,48 (s largo r 1H) , 4, 36 (d largo, 1H) , 4, 18 (s, 1H) , 3,95 -3, 82 (m, 3H) , 3, 75 (S, 3H) , 3,72-3,68 (m, 1H) , 3,59-3,52 (m r 4H) , 3, 37 (s t 3H) , 3,36 (s, 3H) , 2, 96 (m, 2H) , 2,56 (d largo, 1H) , 2, 29 (s, 3H) , 2,28 (s, 3H) , 2, 19 (s, 3H), 1, 98 (s, 3H), 1,69 (m, 1H), 1,42-1,37 (m, 1H), 1,38 (s, 9H). ESI-MS m/z: Calcd. para C4oH5iN5OiiS : 809,3. Encontrado (M+l)+: 810,2 131 ΕΡ2305689Β1

A uma solução do intermediário 73 (169 mg, 0,21 mmol) em CHC13 (11 ml, 0,02 M) foi adicionado a 23 °C p-TsOH (243 mg, 1,25 mmol). A mistura de reação foi deixada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 14 horas. A reação foi diluída com diclorometano e uma solução saturada de bicarbonato de sódio foi adicionada. A fase aquosa foi extraída com diclorometano, as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de cloreto de metileno/álcool metílico em gradiente de 100:0 a 9:1) para propiciar o intermediário 74 (123 mg, 95 como um sólido laranja.

Rf 0,1.7 (cloreto de metileno/álcool metílico 95 :5) 1H-RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 6, 81 1—1 6, 06 (d, 1H) , 6,00 (d, 1H) , (d, 2H) , 4 ,17 (s, 1H), 4, 04 (d, 1H 1H) , 3, 39 (d, 1H) 00 1—1 00 (m, 1H) , 1H) , 2, 57 (m, 1H) , 2,33 (s, 3H) , 3H) , 1, 97 (s, 3H) O 00 1—1 (d, 1H) . C31H35N5C >7S: 621 ,2. Encontrado (M+l) 6,81 (s largo, 1H) , 6,49 (s, 132 ΕΡ2305689Β1

Exemplo 80

A uma solução do sal de piridínio (285 mg, 1,14 mmol) em DMF (6 ml) foi adicionado a 23 °C uma solução do intermediário 74 (71 mg, 0,114 mmol) em diclorometano (6 ml, 0,01 M concentração final). A mistura de reação foi deixada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 4 horas e 15 minutos, então DBU (0,17 ml, 1,14 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 15 minutos. Após este tempo uma solução saturada de ácido oxálico (11 ml) foi adicionada, e a mistura de reação foi deixada a 23 °C sob atmosfera de Árgon durante 30 minutos. A mistura de reação foi arrefecida a 0 °C, foi diluída com Et20 e uma solução saturada de bicarbonato de sódio foi adicionada até que alcançasse pH = 5. A fase aquosa foi extraída com Et20 (x4), basificada posteriormente com mais bicarbonato de sódio e extraída com mais Et20 (x4). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente cloreto de metileno/álcool metílico em gradiente de 100:0 a 20: 1) para propiciar o intermediário 75 (38 mg, 55 %) como um sólido amarelo. Rf: 0,7 e 0,5 (cloreto de metileno/álcool metílico 8:1) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : 8 (isómero maior) 6,49 (s, 1H) , 133 ΕΡ2305689Β1 6, 06 (d, 1H), 6,01 (d, 1H) , 5,78 (s, 1H) , 4,55 (s, 1H) 4,37- 4,23 (m, 3H) , 4,05 (d, 1H) , 3, 80 (s, 3H) , 3, 65 (d 1H) , 3,40 (d largo, 1H), 3,06-3,00 (m, 2H) , 2,66 (dd, 2H) 2,34 (s, 3H), 2,29 (s, 3H) , 2,18 (s , 3H) , 1, 99 (s, 3H) . ESI MS m/z: Calcd. para C31H32N4O8S: 620,2. Encontrado (M+l)+: 621,1

Exemplo 81

A uma solução do intermediário 75 (23 mg, 0,037 mmol) em ácido acético (1,3 ml) foi adicionado após 1 hora derivado de dopamina (25 mg, 0,10 mmol). A mistura de reação foi deixada a 23 °C e sob atmosfera de Árgon durante 50 horas. 0 solvente da reação foi eliminado sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com CH2C12, lavado com uma solução saturada aguosa de bicarbonato de sódio. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio, o solvente foi eliminado sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (misturas de eluente de CH2C12/acetato de etilo em gradiente de 100:0 a 1:2) para propiciar o intermediário 76 (18 mg, 63 %) como um sólido amarelo pálido e uma mistura de isómeros. Rf: 0,26 (CH2Cl2/acetato de etilo 1:3) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,54 (s, 1H) , 6,48 (d, 1H) , 6,43 (s, 1H), 6,08 (d, 1H) , 6,06 (d, 1H) , 6,04 (d, 1H) , 6,01 (d, 1H), 5,80 (s, 1H), 5,75 (s, 1H) , 5,41 (m, 1H) , 4,60-4,16 (m, 7H) , 4,04 (m, 2H) , 3,80 (s, 3H) , 3,79 (s, 3H) , 3,77 (s, 134 ΕΡ2305689Β1 3H) , 3,76 (s, 3H) , 3, 65 (d, 2H) , 3,42 (m, 2H) , 3, 07- 00 C\] 1 (m, 5H) , 2,70 (d, 2H) , 2,61-2,47 (m, 4H) , 2,36 (s, 3H) , 2,34 (s, 3H) , 2,31 (s, 3H) , 2, 19 (s, 3H) , 2, 16 (s, 3H) , 2, 04 (s, 3H) , 2,00 (s, 3H) , 1, 99 (s, 3H) , 1,66 (m, 2H) . ESI-MS m/z: Calcd. para C40H43N5O9S: 769, 3. Encontrado (M+l)+: 770,0.

Exemplo 82

A uma solução do intermediário 76 (7 mg, 0,009 mmol) em acetonitrilo (0,6 ml) foi adicionado a 23 °C água (0,4 ml, 0,015 M, concentração final) e AgN03 (46 mg, 0,27 mmol) . A mistura de reação foi deixada sob atmosfera de Árgon a 23 °C durante 31 horas. A reação foi diluida com diclorometano e uma solução saturada de bicarbonato de sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio foi adicionada. A fase aquosa foi extraída com diclorometano e as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna flash (eluente diclorometano/acetato de etilo em gradiente de 1/9 a 100 % em acetato de etilo) para propiciar o produto final 77 (4 mg, 58 %) como um sólido amarelo pálido.

Rf: 0,17 (diclorometano/acetato de etilo 1:9) 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 6,54 (s, 1H) , 6,20 (m, 1H) , 6,03 (d, 1H), 6,01 (d, 1H) , 5,72 (s, 1H) , 5,41 (s largo, 1H) , 135 ΕΡ2305689Β1 4, 65 (s largo, , 1H) , 4,40 -4, 29 (m, 3H), 4 ,16 (d, 2H) , 3, 83 (m, 1H) , 3,77 (s, 3H), 3, 76 (s, 3H) , 3,49 (s, 1H) , 3,21 (m, 2H) , 2, 94 (m, 4H) , 2,66 (d , 1H) , 2,51 (d, 2H) , 2,36 (m, 2H) , 2, 31 (s, 6H) , 2,17 (s, 3H), 2, ,00 (s, 3H) . ESI-MS m/ z :

Calcd. para C39H44N4O10S: 760, 3. Encontrado (M-H20+1)+: 743,0

BIOENSAIOS PARA RASTREIO ANTITUMORAL A finalidade destes ensaios é interromper o crescimento de uma cultura de célula tumoral "in vitro" por meio uma exibição continuada das células à amostra a ser testada.

LINHAS DE CÉLULAS

Nome N° deEspécie Tecido ATCC Características P-388 CCL-46 ratinho fluido de ascite neoplasma linfoide K-562 CCL-243 ser humano leucemia eritroleucemia (efusão pleural) A-549 CCL-185 ser humano pulmão carcinoma de pulmão "NSCL" SK-MEL-2 8 HTB-72 ser humano melanoma melanoma maligno HT-29 HTB-38 ser humano cólon adenocarcinoma de cólon L0V0 CCL-229 ser humano cólon adenocarcinoma de cólon LoVo-Dox ser humano cólon adenocarcinoma de cólon (MDR) SW620 CCL-228 ser humano cólon adenocarcinoma de cólon (metástase de nódulo linfático) DU-145 HTB-81 ser humano próstata carcinoma de próstata, recetores de não androgénio LNCaP CRL-1740 ser humano próstata adenocarcinoma de próstata, com recetores de androgénio SK-BR-3 HTB-30 ser humano mama adenocarcinoma de mama, Her2/neu+, (efusão pleural) MCF-7 HTB-22 ser humano mama adenocarcinoma de mama, (efusão pleural) MDA-MB- 231 HTB-26 ser humano mama adenocarcinoma de mama, Her2/neu+, (efusão pleural) 136 ΕΡ2305689Β1 IGROV-1 ser humano ovário IGROV-ET ser humano ovário SK-OV-3 HTB-77 ser humano ovário OVCAR-3 HTB-161 ser humano ovário HeLa CCL-2 ser humano colo do útero HeLa-APL CCL-3 ser humano colo do útero A-498 HTB-44 ser humano rim PANC-1 CRL-1469 ser humano pâncreas HMEC1 ser humano endotélio adenocarcinoma do ovário adenocarcinoma do ovário, caracterizado como ET-743 células resistentes adenocarcinoma do ovário (ascite maligno) adenocarcinoma do ovário carcinoma epiteloide do colo do útero carcinoma epiteloide do colo do útero, caracterizado como aplidina células resistentes carcinoma do rim carcinoma epiteloide do pâncreas 1°.- Inibição de crescimento celular por meio da contagem de células.

Esta forma do ensaio utiliza multiplacas de 24 poços de 16 mm de diâmetro (Bergeron, 1984; Schroeder, 1981). As linhas de células tumorais utilizadas são: P-388 (ATCC CCL 46), cultura de suspensão de um neoplasma linfoide de um ratinho DBA/2; A-549 (ATCC CCL 185), cultura de monocamada de um carcinoma de pulmão humano; HT—29 (ATCC HTB-38), cultura de monocamada de um carcinoma de cólon humano; MEL— 28 (ATCC HTB-72), cultura de monocamada de um melanoma humano e DU-145 (ATCC HTB-81), cultura de monocamada de um carcinoma de próstata humano.

As células foram mantidas, em fase logarítmica de crescimento em Meio Essencial Mínimo de Eagle, com Sais Balanceados de Eagle, com aminoácidos não essenciais, com 2,0 mM de L-Glutamina, sem bicarbonato de sódio (EMEM/neaa) , suplementado com Soro Fetal Bovino (FCS) a 10 %, 10~2 M. bicarbonato de sódio e 0,1 U/l de penicilina G + 137 ΕΡ2305689Β1 0,1 g/1 sulfato de estreptomicina. Para as experiências, as células são colhidas a partir de culturas subconfluentes usando tripsina e ressuspensas em meio fresco antes de colocar em placas.

As células P-388 foram semeadas em poços de 16 mm de diâmetro a 1 x 104 células por poço em alíquotas de 1 ml de EMEM a 5 % de FCS contendo diferentes concentrações da amostra a ser testada. Um conjunto separado de culturas sem fármaco foi semeado como controlo de crescimento, para assegurar que as células permanecessem em fase exponencial de crescimento. Todas as determinações são levadas a cabo em duplicata. Após três dias de incubação a 37 °C, 5 % de CO2 numa atmosfera húmida a 98 %, um IC50 aproximadamente foi determinado por meio da comparação do crescimento em poços com fármaco ao crescimento em poços de controlo.

As células A-549, HT-29, MEL-28 e DU-145 foram semeadas em poços de 16 mm de diâmetro a 1 x 104 células por poço em aliquotas de 1 ml de EMEM a 5 % de FCS contendo diferentes concentrações da amostra a ser testada. Um conjunto separado de culturas sem fármaco foi semeado como controlo de crescimento, para assegurar que as células permanecessem em fase exponencial de crescimento. Todas as determinações são levadas a cabo em duplicata. Após três dias de incubação a 37 °C, 5 % de CO2 numa atmosfera húmida a 98 % as células foram coradas com cristal violeta a 0,1 %. Um IC50 aproximadamente foi determinado por meio da comparação do crescimento em poços com fármaco ao crescimento em poços de controlo.

Para quantificar a atividade, após o tempo de incubação, as células são tripsinizadas e contadas num Contador Coulter ZM. Todas as contagens (células puras por poço), representam a média de poços em duplicata. % G, 138 ΕΡ2305689Β1 percentagem de crescimento em relação a culturas sem fármaco. Os resultados destes ensaios são usados para gerar curvas de dose-resposta a partir dos quais valores de IC50 mais precisos são determinados (concentração de amostra que produz 50 % de inibição de crescimento celular).

Os resultados obtidos podem predizer a utilidade de um certo fármaco como um potencial tratamento de cancro. Para esta técnica, os compostos que mostram valores de IC50 menores que lg/ml são selecionados para continuar com estudos posteriores. Os dados de IC50 permitem predizer que não somente se um fármaco poderia ser citostático, mas também se poderia ter um potencial em termos de redução de tumor. 2°.- Inibição de células crescimento por meio de ensaio colorimétrico.

Um tipo colorimétrico de ensaio, usando reação de sulforodamina B (SRB) foi adaptado para uma medição quantitativa de crescimento celular e viabilidade [seguindo a técnica descrita por Filip Skehan, et al. (1990), New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening, J. Natl. Câncer Inst., 82:1107-1112]

Esta forma do ensaio utiliza microplacas de cultura de células de 96 poços de 9 mm de diâmetro (Faircloth, 1988; Mosmann, 1983) . A maior parte das linhas de células é obtida de Coleção Americana de Culturas Celulares (ATCC) derivada de diferentes tipos de cancro humano.

As células são mantidas em RPMI 1640 a 10 % de FBS, suplementado com 0,1 g/1 penicilina e 0,1 g/1 de sulfato de estreptomicina e então incubadas a 37 °C, 5 % de C02 e 98 % de humidade. Para as experiências, as células foram 139 ΕΡ2305689Β1 colhidas de culturas subconfluentes usando tripsina e ressuspensas em meio fresco antes de colocar em placas.

As células são semeadas em placas de microtitulação de 96 poços, a 5 x 103 células por poço em aliquotas de 195 ml de meio, e são deixadas que se unam à superfície da placa por meio do crescimento em meio livre de fármaco durante 18 horas. Depois disso, as amostras são adicionadas em aliquotas de 5 ml num intervalo de 10 a 10~8 mg/ml, dissolvidas em DMSO/EtOH/PBS (0,5:0,5:99). Após 48 horas de exposição, o efeito antitumoral é medido pela metodologia de SRB: as células são fixas por meio da adição de 50 ml de ácido tricloroacético (TCA) frio a 50 % (p/vol) e incubação durante 60 minutos a 4 °C. As placas são lavadas com água desionizada e secas. Uns cem ml de solução de SRB (0,4 % p/vol em 1 % de ácido acético) são adicionados a cada poço de microtitulação e incubados durante 10 minutos a temperatura ambiente. SRB não ligado é removido por meio da lavagem com 1 % de ácido acético. As placas são secas ao ar e o corante ligado é solubilizado com tampão Tris. Densidades óticas são lidas num leitor de placas de espetrofotometria automático num comprimento de ondas único de 490 nm.

Os valores para média +/- DP de dados de poços em triplicata são calculados. Alguns parâmetros para respostas celulares podem ser calculados: GI = inibição de crescimento, TGI = inibição total de crescimento (efeito citostático) e LC = destruição de células (efeito citotóxico).

Os resultados obtidos podem predizer a utilidade de um certo fármaco como um potencial tratamento de cancro. Para esta técnica, os compostos que mostram valores de GI50 menores que 10 mg/ml são selecionados para continuar com 140 ΕΡ2305689Β1 estudos posteriores. Os dados de GI50 permitem predizer que não somente poderia um fármaco ser citostático, mas também poderia ter um potencial em termos de redução de tumor. Dados de Atividade (Molar) IC50 16 19 p388 1,63E-08 7,53E-10 a54 9 1,63E-08 7,53E-10 ht2 9 1,63E-08 7,53E-10 me 12 8 1,63E-08 7,53E-10 dul4 5 7,53E-10 A549 HT2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCF MB231 H—MEC—1

LNCAP

GI50 TGI LC5q GIso TGI LC5q GI50 TGI LC50 GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI 1, 6, 1, 1, 1,1, 1__ 53E-06 6, 07E-06 1, 92E-05 9, 11E-06 1, 92E-05 1, 92E-05 1, 2__ 33E-07 4, 39E-06 1, 11E-06 1, 0 6E-06 4, 42E-05 1, 92E-05 1, 3 18E-06 30E-05 32E-05 01E-06 23E-05 32E-05 4 2,36E-06 8,27E-06 1,18E-05 5,91E-07 1,18E-06 1,18E-05 5 7,21E-07 2,40E-06 8,41E-06 4,81E-07 1,20E-06 6,01E-06 6, 1, 1, 1, 1,1, 6 65E-06 26E-05 26E-05 25E-05 26E-05 26E-05 5, 1, 6, 61E-07 5, 15E-06 1, 07E-06 5, 98E-07 27E-06 31E-06 5, 1, 1, 67E-07 8, 07E-06 3, 92E-06 1, 97E-07 13E-06 92E-05 4, 7, 34E-07 5, 47E-07 1, 92E-07 11E-06 141 ΕΡ2305689Β1 lc50 1,29E-06 2,76E-06 SK-0V3 GI50 TGI lc50 IGROV GI50 9,01E-07 2,59E-06 1,92E-05 9,26E-07 2,26E-06 1,82E-05 TGI lc50 142 ΕΡ2305689Β1

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX

HELA

HELA-APL GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI lc50 9,70E-07 1,92E-05 1,92E-05 1,01E-06 3,96E-06 1,92E-05 3,61E-07 7,99E-07 1,77E-06 8,87E-07 4,36E-06 1,92E-05 9,32E-07 4,00E-06 1,92E-05 6,17E-06 1,92E-05 1,92E-05 1,08E-06 2,84E-06 1,81E-05 7,17E-07 1,63E-06 7,51E-06 1,06E-06 1,92E-05 1,92E-05 7,78E-07 1,75E-06 1,92E-05 5,16E-07 1,22E-06 4,79E-06 8,90E-07 3,26E-06 1,92E-05 5,33E-07 1,07E-06 1,92E-06 9,24E-07 1,92E-05 1,92E-05 7,63E-07 1,45E-06 9,80E-06 4,79E-07 8,44E-07 1,49E-06 A54 9 HT2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 1,3,6, 9,2, 5, 7 87E-06 51E-06 61E-06 18E-07 40E-06 4 6E—0 6 8__ 1,18E-05 1, 1,18E-05 1, 1,18E-05 1, 7,82E-0 6 1, 1,18E-05 1, 1,18E-05 1, 9__ 64E-05 1, 64E-05 1, 64E-05 1, 64E-05 1, 64E-05 1, 64E-05 1, 10__ 01E-03 1, 01E-03 1, 01E-03 1, 01E-03 1, 01E-03 1, 01E-03 1, 11__ 19E-05 3, 19E-05 6, 19E-05 1, 19E-05 5, 19E-05 1, 19E-05 1, 12 38E-07 24E-07 16E-06 03E-07 27E-06 54E-05 1,1,1, 19E-05 3, 19E-05 6, 19E-05 1, 50E-07 03E-07 03E-06 1,1,1, 19E-05 5, 19E-05 1, 19E-05 4, 35E-07 02E-06 22E-06 143 ΕΡ2305689Β1

MCF MB231 H—MEC—1

LNCAP SK-0V3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX

HELA

HELA-APL GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 2,15E-06 4, 0 6E—0 6 7,63E-06 5,1,1, 84E-06 19E-05 19E-05 8,25E-08 2,51E-07 7,11E-07 1,1,1,1,1,1,1,1,1, 4,1,1,1,1,1,1,1,1,1, -U1,1,1,1,1,1, 19E-05 2, 19E-05 4, 19E-05 1, 19E-05 6, 19E-05 1, 19E-05 3, 25E-07 86E-07 05E-06 35E-07 07E-06 82E-06 19E-05 19E-05 19E-05 76E-06 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 19E-05 2,56E-07 5,01E-07 9,79E-07 1,10E-07 2,51E-06 1,54E-05 4,72E-07 9,53E-07 4,07E-06 3,99E-07 8,08E-07 3,21E-06 5,04E-07 9,71E-07 1,22E-05 3,44E-07 6,21E-07 1,12E-06 2,44E-07 4,72E-07 9,14E-07 144 ΕΡ2305689Β1 Α549 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCP MB 2 31 H—MEC—1

LNCAP SK-OV3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 GI50 GI50 *TSfc GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 3, 3, 13 94E-06 94E-06 14 2,23E-06 2,23E-06 15 2,00E-09 2,00E-09 17 2,29E-08 2,29E-08 1,1, 18 61E-07 61E-07 20 2,52E-08 2,52E-08 6,1,1, 02E-06 54E-05 54E-05 1,6,1, 77E-06 39E-06 25E-05 I, 4,8 4E-10 3, 5,35E-09 8, 3, 13E-0 6 1, 91E-08 60E-08 27E-05 g,wi*ee g 8,04E-08 6, 6,43E-07 5, 8,04E-05 6, 50E-09 36E-08 67E-06 2,45E-08 4,71E-08 9,11E-08 1,59E-08 3,99E-08 1,47E-06 4,1,1, 74E-06 3, 54E-05 1, 54E-05 1, 00E-06 5, 25E-05 1, 25E-05 4, 56E-10 32E-08 44E-06 7,28E-09 2,28E-08 5,89E-08 2,59E-08 5,63E-08 1,22E-07 2,77E-07 5,76E-07 1,20E-06 5,22E-09 1,45E-08 9,83E-08 145 ΕΡ2305689Β1

21 22 23 24 Α549 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCF MB231 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 3,6,1,4, 8, 1, 45E-06 15E-06 10E-05 0 6E—0 6 8 6E-0 6 57E-05 2,67E-08 5,90E-08 1,31E-07 2,97E-08 8,25E-08 1,31E-05 6,06E-08 2,11E-07 7,85E-07 5,12E-08 2,15E-07 1,29E-05 2,19E-08 4,62E-08 9,74E-08 5,17E-09 1,39E-08 1,45E-05 9, 3,1,1,8,1, 25__ 27E-07 1, 45E-06 1, 15E-05 1, 64E-06 1, 57E-06 1, 39E-05 1, 26 16E-05 16E-05 16E-05 16E-05 16E-05 16E-05 3, 5, 9, 02E-06 3, 35E-06 5, 49E-06 1, 02E-08 55E-08 02E-07 2,47E-07 4,60E-07 8,57E-07 2,01E-08 4,27E-08 9,09E-08 6,1, 5, 32E-07 1, 77E-06 1, 65E-06 1, 16E-05 16E-05 16E-05 3,6,1, 40E-06 07E-06 09E-05 2,9 6E-0 8 5, 8,6 8E-0 8 1, 1,31E-06 4, 85E-08 43E-07 45E-06 2,78E-08 5,23E-08 1,25E-07 8,61E-0 7 1, 2,2 0E-0 6 1, 6,57E-0 6 1, 16E-05 16E-05 16E-05 146 ΕΡ2305689Β1 H—MEC—1

LNCAP SK-0V3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX

HELA

HELA-APL GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI lc50 2,58E-06 4,72E-06 8,64E-06 6,15E-09 2,11E-08 5,50E-08 1,53E-07 3,18E-07 6,57E-07 8,40E-09 2,53E-08 6,44E-08 3,23E-07 7,57E-07 2,55E-06 3,82E-06 1,16E-05 1,16E-05 3,81E-06 7,17E-06 1,35E-05 3,56E-06 6,51E-06 1,19E-05 3,85E-06 7,33E-06 1,39E-05 3,52E-06 7,76E-04 1,57E-05 3,21E-06 6,62E —0 6 1,37E-05 3,30E-06 6,20E-06 1,16E-05 4,88E-06 1,24E-05 1,57E-05 3,40E-06 5,90E-06 1,02E-05 3,24E-06 5,98E-06 1,11E-05 1,91E-08 4,46E-08 1,04E-07 5,22E-08 1,04E-07 1,31E-07 5,77E-09 2,23E-08 1,20E-07 5,92E-09 4,24E-08 8,40E-07 2,96E-08 7,38E-08 8,54E-07 2,03E-08 4,11E-08 9,65E-08 8,74E-08 5,24E-07 1,31E-05 3,32E-08 5,66E-08 1,58E-07 2,11E-08 4,44E-08 9,35E-08 3,50E-07 6,27E-07 1,13E-06 4,56E-07 7,60E-07 1,26E-06 1,31E-08 8,77E-08 6,45E-07 2,03E-08 7,33E-08 1,40E-06 5,09E-07 1,26E-06 1,29E-05 2,76E-07 5,22E-07 9,83E-07 6,61E-07 7,46E-06 1,29E-05 3,82E-08 6,60E-08 1,14E-07 3,56E-08 6,03E-08 1,02E-07 8,21E-09 3,18E-08 1,10E-07 2,95E-08 6,20E-08 1,30E-07 2,48E-08 6,38E-08 2,69E-07 4,07E-09 1,71E-08 9,38E-08 3,01E-08 9,19E-08 1,45E-05 2,61E-08 8,21E-08 1,45E-05 1,15E-07 1,74E-06 1,45E-05 2,03E-08 4,76E-08 1,12E-07 2,03E-08 4,65E-08 1,07E-07 6,60E-07 1,43E-06 8,01E-06 1,61E-06 4,41E-06 1,21E-05 5,55E-07 1,06E-06 8,64E-06 3,16E-07 7,75E-07 3,78E-06 1,37E-06 3,90E-06 1,10E-05 9,38E-07 3,16E-06 9,27E-06 9,04E-07 3,77E-06 1,39E-05 1,50E-06 3,48E-06 8,11E-06 9,39E-07 2,78E-06 7,69E-06 6,84E-06 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 4,23E-06 9,20E-06 1,16E-05 2,30E-06 4,94E-06 1,06E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 1,16E-05 2 7 28 29 30 31 32 A5 4 9 GI50 6,26E-08 2,06E-07 1,89E-06 5,25E-08 1,63E-07 2,27E-06 4,80E-06 1,14E-05 1,14E-05 3,47E-09 1,05E-08 8,90E-08 1,83E-09 5,97E-09 9,21E-08 2,38E-06 4,29E-06 7,70E-06 TGI LC50 HT2 9 GI50 7,56E-08 1,42E-06 1,42E-05 7,65E-08 2,05E-06 1,22E-05 1,14E-05 1,14E-05 1,14E-05 2,03E-09 1,35E-08 1,54E-05 1,97E-09 1,62E-08 3,68E-06 3,48E-06 6,10E-06 1,07E-05 TGI lc50 GI50 SW-620 TGI LC50 147 ΕΡ2305689Β1 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCP MB231 H—MEC—1

LNCAP SK-OV3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50 6,14E-08 1,34E-07 5,94E-07 5, 1,6, 68E-08 3, 35E-07 1, 92E-07 1, 74E-06 1, 14E-05 3, 14E-05 1, 09E-09 6 6E-0 9 07E-08 8,32E-10 2,54E-09 8,06E-09 2,41E-06 4,14E-06 7,13E-06 7,55E-08 8,48E-07 1,42E-05 2,61E-08 6,46E-08 2,61E-07 4,07E-08 1,02E-07 1,02E-06 1,65E-07 3,87E-07 9,15E-07 5,58E-08 1,97E-07 1,05E-06 2,17E-08 5,66E-08 2,06E-07 9,25E-08 1,45E-06 1,42E-05 8,04E-08 2,36E-07 7,07E-07 4,31E-07 1,42E-05 1,42E-05 3, 1, 1, 58E-08 27E-06 22E-05 2,30E-06 7,93E-06 1,14E-05 2,63E-09 7,44E-09 1,41E-05 4,44E-10 9,51E-10 2,23E-06 2,48E-06 4,83E-06 9,39E-06 2,29E-08 8, 5,04E-08 6, 1,11E-07 1, í 78E-07 9, 07E-06 1, 14E-05 1, 68E-08 4, 20E-07 1, 47E-07 9, 19E-10 1, 63E-08 3, 07E-08 6, 77E-06 36E-06 41E-06 4,90E-08 1,55E-07 1,57E-06 1,38E-07 3,52E-07 8,98E-07 4,73E-08 1,64E-07 1,22E-06 2,83E-08 1,35E-07 2,69E-06 5,92E-08 1,97E-07 1,22E-05 6,63E-08 2,12E-07 6,87E-07 3,62E-07 1,22E-06 1,22E-05 2,19E-06 1,14E-05 1,14E-05 3,12E-06 1,14E-05 1,14E-05 8,89E-07 7,98E-06 1,14E-05 6,29E-07 3,90E-06 1,14E-05 6,55E-06 1,14E-05 1,14E-05 6,95E-10 3,32E-09 2,31E-07 2,54E-08 8,24E-08 1,54E-05 5,27E-10 2,29E-09 2,67E-07 3,12E-10 2,49E-09 9,51E-06 2,89E-09 1,55E-08 1,54E-05 4,13E-10 1,07E-09 1,26E-08 1,97E-06 3,91E-06 7,74E-06 2,91E-09 7,49E-09 2,09E-06' 3,96E-10 1,22E-09 6,07E-08 2,85E-06 5,24E-06 9,67E-06 2,63E-07 1,6 6E —0 6 7,52E-06 2,85E-06 1,14E-05 1,14E-05 4,09E-06 1,14E-05 1,14E-05 2,00E-09 8,07E-09 1,54E-05 2,07E-07 2,07E-06 1,54E-05 2,26E-10 7,92E-10 1,26E-07 6,94E-07 2,20E-06 6,81E-06 8,07E-10 6,6 8E —0 9 1,77E-06 6,88E-10 3,49E-09 1,82E-06 9,05E-09 1,48E-06 7,21E-06 2,56E-06 4,75E-06 8,79E-06 1,89E-06 3,76E-06 7,39E-06 8,02E-07 2,48E-06 6,7 6E—0 6 148 ΕΡ2305689Β1 HELA GI50 9,78E-08 2,75E-07 7,86E-07 3,86E-08 7,55E-08 2,89E-07 6,30E-06 1,14E-05 1,14E-05 1,15E-09 4,53E-09 2,17E-08 6,78E-10 2,04E-09 1,12E-08 2,53E-07 4,18E-07 6,89E-07 TGI lc50 GI50 9,51E-08 5,59E-08 4,29E-06 1,86E-09 5,76E-10 3,39E-08 HELA-APL TGI 3,04E-07 1,30E-07 1,14E-05 5,50E-09 1,96E-09 6,05E-08 lc50 9,51E-07 6,82E-07 1,14E-05 1,95E-08 9,9 6E-0 9 1,08E-07 Α5 4 9 ΗΤ2 9 GI5q TGI LC5q GI5q TGI lc50 33 2,62E-08 6,24E-08 1,49E-07 1,73E-08 2,71E-07 9,81E-06 5, 1, 6, 6, 1, 1, 34 53E-08 84E-07 11E-07 20E-08 65E-07 6 4E —0 6 35 2,93E-06 5,9 6E-0 6 1,21E-05 6,02E-07 48,18E-06 1,44E-05 36 5,56E-09 2,29E-08 8,38E-08 2,73E-09 1,17E-08 1,56E-05 37 2,64E-08 7,13E-08 8,75E-07 2,90E-08 2,62E-07 1,05E-05 38 4,73E-07 1,42E-06 4,71E-06 6.5 3E-07 1.6 7E-06 4.7 3E-06 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCF MB231 H—MEC—1

LNCAP SIC-0V3

IGROV GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 1, 3, 9, 28E-08 3, 67E-08 6, 79E-08 1, 27E-08 3, 03E-08 8, 11E-07 3, 90E-07 1, 63E-07 4, 19E-06 8, 84E-09 01E-09 71E-09 1,41E-08 3,42E-08 8,21E-08 2,72E-07 4,83E-07 8,60E-07 8, 1, 4, 02E-09 5, 56E-08 9, 41E-06 5, 11E-08 5, 87E-08 1, 37E-08 1, 70E-07 3, 20E-06 9, 03E-05 1, 58E-09 55E-09 04E-05 7,50E-09 1,48E-08 4,43E-06 2,86E-07 5,64E-07 1,11E-06 2, 5,1, 86E-09 2, 64E-09 5, 11E-08 1, 20E-08 1, 21E-08 3, 47E-07 8, 89E-07 4, 97E-07 1, 34E-07 5, 60E-10 37E-09 06E-09 2,86E-09 5, 26E-09 9,6 7E-0 9 3,38E-07 5,18E-07 7,96E-07 9, 4, 1, 85E-08 26E-07 58E-06 2,92E-08 5,83E-08 1,17E-07 4, 1, 8, 20E-07 1, 69E-06 3, 63E-06 1, 12E-09 79E-09 04E-08 7,24E-09 2,63E-08 1,81E-06 3,81E-07 7,86E-07 4,18E-06 149 ΕΡ2305689Β1 GI50 8,95E-08 2,30E-06 2,77E-08 2,99E-08 3,65E-07 IGROV-ET TGI 2,62E-07 6,35E-06 7,17E-08 1,04E-07 6,75E-07 lc50 8,60E-07 1,44E-05 1,56E-05 5,71E-06 1,48E-06 GI50 4,83E-09 1,27E-08 3,96E-07 2,87E-09 4,15E-09 1,94E-07 SK-BR3 TGI 1,39E-08 7,01E-08 1,10E-06 6,65E-09 1,01E-08 4,57E-07 lc50 3,85E-07 6,26E-07 9,35E-06 1,54E-08 4,01E-07 1,07E-06 GI50 5,49E-09 1,62E-08 1,93E-07 2,46E-10 5,05E-09 1,93E-07 K562 TGI 1,59E-07 4,50E-08 1,13E-06 7,OOE-IO 1,37E-08 5,1OE-O 7 LC50 2,83E-06 1,46E-07 9,77E-06 5,11E-09 7,37E-07 1,54E-06 GI50 1,99E-08 5,11E-08 4,71E-07 2,82E-09 3,09E-08 6,16E-07 PANC-1 TGI 1,22E-07 1,23E-07 1,41E-06 9,72E-09 9,57E-08 1,38E-06 LC50 4,51E-06 8,41E-07 1,44E-05 2,60E-06 2,69E-06 4,50E-06 GI50 1,99E-08 2,87E-08 5,64E-07 2,12E-09 1,62E-08 3,58E-07 LOVO TGI 5,36E-08 5,32E-08 2,14E-06 5,91E-09 1,18E-07 7,93E-07 lc50 1,45E-07 9,86E-08 1,44E-05 1,56E-08 6,4 OE-O 6 2,51E-06 GI50 3,67E-07 1,40E-07 5,75E-06 2,46E-07 8,68E-08 1,54E-06 LOVO-DOX TGI 9,40E-07 4,10E-07 1,44E-05 1,09E-06 8,97E-07 3,08E-06 lc50 5,90E-06 1,20E-05 1,44E-05 1,56E-05 6,9 6E —0 6 6,15E-06 GI50 5,02E-09 3,35E-08 3,96E-07 1,46E-09 4,04E-09 3,17E-07 HELA TGI 1,61E-08 6,24E-08 8,37E-07 3,85E-09 8,55E-09 5,45E-07 LC50 9,69E-08 1,16E-07 3,39E-06 9,82E-09 4,73E-08 9,35E-07 GI50 5,24E-09 3,39E-08 4,58E-07 1,85E-09 7,1OE-O 9 2,95E-07 HELA-APL TGI 1,91E-08 6,05E-08 1,09E-06 4,30E-09 2,06E-08 5,49E-07 LC50 1,15E-07 1,08E-07 5,92E-06 1,00E-08 7,7 OE-O 8 1,02E-06 39 40 41 42 43 44 Α5 4 9 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145 GI5q TGI LCso GI50 TGI LC50. GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50 8,49E-09 4,51E-08 1,49E-06 5,34E-09 1,97E-07 3,77E-06 3,03E-09 5,43E-09 9,7 6E-0 9 3,52E-09 9,85E-09 2,01E-06 1, 4,1, 3,1, 3, 95E-07 47E-07 03E-06 37E-07 05E-06 84E-06 4,31E-08 7,35E-08 1,25E-07 4,27E-08 1,20E-07 1,47E-05 5,74E-08 1,47E-07 2,37E-06 3,97E-08 1,31E-07 1,65E-05 2,61E-08 6,21E-08 1,48E-07 2,42E-08 1,90E-07 1,67E-05 2,74E-08 5,67E-08 4,70E-07 3,88E-08 1,54E-06 1,11E-05 1, 3,6, 62E-07 3, 34E-07 6, 88E-07 1, 37E-08 3, 45E-08 5, 23E-07 1, 01E-08 9, 68E-08 3, 07E-07 9, 09E-09 27E-08 10E-08 2,34E-08 4,59E-08 9,01E-08 5,1,1, 63E-06 60E-07 63E-06 4,53E-08 7,55E-08 2,74E-07 3,74E-08 8,25E-08 2,47E-07 1,36E-08 6,70E-08 2,92E-06 2,34E-08 7,19E-08 1,11E-05 150 ΕΡ2305689Β1

MCF MB231 H—MEC—1

LNCAP SK-0V3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX

HELA

HELA-APL GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 7,35E-10 2,49E-09 6,73E-09 4,81E-08 1,62E-07 5,09E-07 9,50E-10 3,14E-08 9,28E-08 5,9 6E-0 9 2,24E-08 6,37E-08 6,58E-09 2,02E-08 8,87E-08 4,53E-09 2,04E-08 4,80E-08 3,13E-09 7,47E-09 5,26E-07 4,19E-08 8,86E-08 2,44E-06 2,68E-09 6,98E-09 5,57E-08 1,06E-09 5,58E-09 6,98E-07 4,91E-09 1,47E-08 2,36E-06 3,72E-09 9,00E-09 9,71E-07 3,26E-07 9,12E-07 4,12E-06 2,84E-09 5,6 9E-0 9 1,14E-08 2,76E-09 5,20E-09 9,82E-09 9,13E-08 3,17E-07 1,28E-06 2,89E-07 5,33E-07 9,80E-07 4,26E-08 9,76E-08 5,24E-07 4,14E-08 1,31E-07 7,76E-07 3,21E-07 7,47E-07 2,57E-06 2,13E-07 5,52E-07 1,68E-06 3,54E-07 8,10E-07 2,79E-06 1,11E-07 2,76E-07 6,61E-07 1,53E-07 3,448-07 7,75E-07 1,57E-08 4,37E-08 1,21E-07 4,18E-08 8,71E-08 1,47E-05 3,23E-08 7,22E-08 3,52E-07 2,04E-08 5,05E-08 1,25E-07 3,77E-08 1,00E-07 1,47E-05 3,78E-08 9,40E-08 1,47E-05 2,70E-07 1,18E-06 1,47E-05 2,86E-08 6,63E-08 1,53E-07 2,80E-07 1,02E-06 1,65E-05 1,78E-08 5,96E-08 6,94E-07 3,90E-08 1,15E-08 5,27E-06 3,77E-08 7,26E-08 2,93E-06 5,15E-07 1,44E-06 1,65E-05 1, 4, 3, 6, 3, 5, 5, 2, 1, 3, 1, 8, 06E-08 96E-08 84E-07 85E-08 69E-07 80E-06 83E-09 42E-08 64E-07 11E-09 38E-08 95E-07 2,29E-08 8,27E-08 2,15E-06 2,82E-08 5,81E-08 1,20E-07 3,01E-08 6,31E-08 1,32E-07 2,81E-08 6,25E-08 1,39E-07 3,46E-08 6,70E-08 1,30E-07 3, 8, 1, 4, 1 , 9, 3, 1, 12E-08 67E-08 67E-05 23E-07 15E-06 67E-05 39E-09 99E-08 45E-07 2,41E-08 7,32E-08 4,23E-07 3,26E-08 7,80E-08 1,11E-05 4,92E-08 4,43E-07 1,11E-05 3, 27E-09 1,19E-08 7,61E-08 7,97E-09 7,79E-08 1,11E-05 7,52E-08 3,44E-07 1,11E-05 3,39E-08 1,43E-07 1,11E-05 2,97E-07 9,19E-07 1,11E-05 2,02E-08 4,20E-08 8,75E-08 2,50E-08 5,96E-08 3,52E-07 45 46 47 48 49 50 GI50 1,62E-07 2,89E-08 1,02E-05 8, 10E-06 1,84E-07 3,76E-06 A54 9 TGI 4,13E-07 6,18E-08 1,02E-05 1,02E-05 4,31E-07 1,13E-05 LC50 1,50E-06 2,77E-06 1,02E-05 1,02E-05 1,01E-06 1,13E-05 151 ΕΡ2305689Β1 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCF MB231 H—MEC—1

LNCAP SK-OV3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50 8,36E-08 1,41E-06 1,00E-05 1,17E-07 2,85E-07 6,89E-07 3,59E-08 1,03E-07 1,00E-05 3,83E-09 1,73E-08 5,15E-08 5,69E-08 3,92E-07 1,00E-05 8,65E-08 4,97E-07 1,00E-05 2,83E-09 7,56E-09 1,33E-07 1,76E-08 1,50E-07 1,00E-05 2,29E-07 1,24E-06 1,00E-05 4,2 9E-0 8 1, 1,17E-0 7 1, 1,17E-0 5 1, 02E-05 6, 02E-05 1, 02E-05 1, 71E-06 02E-05 02E-05 1,94E-07 5,88E-07 1,13E-05 8,90E-06 1,13E-05 1,13E-05 2,9 6E-0 8 8, 5,64E-08 1, 1,0 7E-0 7 1, 70E-06 3, 02E-05 1, 02E-05 1, 19E-06 02E-05 02E-05 1,81E-07 3,56E-07 7,01E-07 2,53E-06 8,36E-06 1,13E-05 2,34E-0 8 4, 4,9 6E-0 8 1, 1,0 5E-0 7 1, 12E-06 2, 02E-05 6, 02E-05 1, 55E-06 26E-06 02E-05 1,07E-07 1,25E-06 1,13E-05 1,80E-06 9,18E-04 1,13E-03 1,47E-08 2,96E-08 5,92E-08 4,49E-07 2,92E-06 1,02E-05 1,67E-06 3,24E-06 6,31E-06 4,05E-08 1,75E-07 4,42E-07 9,48E-07 3,68E-06 1,13E-05 2,99E-08 7,24E-08 1,17E-05 2,85E-07 1,35E-06 1,17E-05 1,86E-08 5,32E-08 2,47E-07 2,30E-08 6,48E-08 4,25E-06 6,19E-08 3,98E-07 1,17E-05 4,22E-06 1,02E-05 1,02E-05 4,92E-06 1,02E-05 1,02E-05 3,01E-07 1,37E-06 1,02E-05 1,73E-07 2,32E-06 1,02E-05 1,02E-05 1,02E-05 1,02E-05 3,52E-06 1,02E-05 1,02E-05 3,72E-06 1,02E-05 1,02E-05 6,82E-07 4,00E-06 1,02E-05 5,15E-07 2,73E-06 1,02E-05 4,42E-06 1,02E-05 1,02E-05 1,65E-07 4,32E-07 1,13E-06 2,80E-07 6,16E-07 1,13E-05 4,96E-08 1,86E-06 1,13E-05 3,77E-08 3,11E-07 5,10E-06 1,79E-07 5,64E-07 3,92E-06 2,42E-06 1,13E-05 1,13E-03 3,29E-06 1,13E-05 1,13E-05 1,31E-05 1,13E-05 1,13E-05 8,91E-07 1,13E-05 1,13E-05 2,45E-06 1,13E-05 1,13E-05 152 ΕΡ2305689Β1 GI50 1,30E-07 5,53E-08 9,16E-06 4,01E-06 2,50E-07 4,94E-06 LOVO TGI 2,83E-07 3,04E-07 1,02E-05 1,02E-05 4,71E-07 1,13E-05 lc50 6,14E-07 1,17E-05 1,02E-05 1,02E-05 8,90E-07 1,13E-05 GI50 4,79E-07 4,26E-07 1,02E-05 1,02E-05 6,72E-07 1,01E-05 LOVO-DOX TGI 3,14E-06 1,35E-06 1,02E-05 1,02E-05 1,13E-05 1,13E-05 lc50 1,00E-05 1,17E-05 1,02E-05 1,02E-05 1,13E-05 1,13E-05 GI50 1,64E-08 2,64E-08 4,10E-06 2,17E-06 1,89E-07 3,75E-06 HELA TGI 3,62E-08 5,01E-08 1,02E-05, 5,11E-06 4,18E-07 1,13E-05 LC50 7,97E-08 9,74E-08 1,02E-05 1,02E-05 9,29E-07 1,13E-05 GI50 2,84E-08 2,77E-08 3,74E-06 1,87E-06 1,82E-07 3,11E-06 HELA-APL TGI 1,21E-07 5,20E-08 1,02E-05 3,83E-06 3,57E-07 1,13E-05 LC50 7,83E-07 9,78E-08 1,02E-05 7,87E-06 7,01E-07 1,13E-05 Α5 4 9 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 GI50 51 2,85E-09 6,5 9E-0 9 5,42E-07 5,24E-09 2,37E-06 1,18E-08 2,71E-09 4,64E-09 7,94E-09 5,24E-09 5,24E-09 52 8,01E-09 5,78E-08 9,73E-07 6,14E-09 2,25E-06 7,78E-06 53 3,34E-09 8,17E-09 2,21E-06 4,33E-09 1,83E-08 2,74E-06 54 2,02E-08 6,63E-08 6,36E-07 2,99E-08 1,23E-07 1,20E-05 55 56 6,84E-08 2,86E-07 1,22E-06 3,02E-08 6,87E-08 7,05E-07 4,07E-09 1,55E-08 5,27E-08 4,92E-09 4,92E-09 2,21E-09 4,00E-09 7,20E-09 1,55E-08 3,61E-08 8,39E-08 7,57E-08 1,81E-06 1,27E-05 8,86E-08 2,65E-07 6,98E-07 4,88E-08 5,71E-07 1,20E-05 2,63E-08 4,90E-08 9,14E-08 3,58E-09 3,58E-09 3,76E-09 3,76E-09 5,90E-08 5,90E-08 4,10E-08 4,10E-08

MCF MB231 H—MEC—1

LNCAP GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 2,31E-09 3,96E-09 6,82E-09 2,39E-09 1, 4,66E-09 3, 9,06E-09 8, 87E-09 95E-09 33E-09 7,42E-09 2,93E-08 1,09E-07 1,71E-08 1, 3,60E-08 2, 7,57E-08 6, 22E-08 88E-08 77E-08 153 ΕΡ2305689Β1 SK-0V3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX

HELA

HELA-APL GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI lc50 3,35E-09 6,45E-09 1,18E-04 4,36E-08 1,18E-07 1,18E-05 5,05E-09 3,44E-07 1,18E-05 3,15E-09 7,75E-09 6,53E-07 3,53E-09 7,73E-09 5,20E-07 3,93E-09 8,86E-09 1,18E-05 3,52E-07 1,18E-05 1,18E-05 3,43E-09 6,63E-09 1,55E-08 3,49E-09 6,18E-09 1,09E-08 7,32E-09 4,33E-08 3,06E-06 3,95E-08 1,19E-07 8,53E-06 6,18E-09 2,58E-07 1,19E-05 4,51E-09 2,13E-08 8,06E-08 2,15E-08 6,24E-08 6,10E-07 9,17E-09 2,96E-08 8,57E-08 2,73E-07 1,19E-05 1,19E-05 5,98E-09 2,25E-08 1,85E-06 7,05E-09 2,14E-08 9,23E-08 2,74E-09 6,72E-09 2,74E-06 1,02E-08 1,40E-06 6,45E-06 2,95E-09 2,99E-08 1,82E-06 1,54E-09 1,30E-08 5,83E-07 3,36E-09 1,01E-08 1,44E-06 3,82E-09 8,54E-09 2,94E-06 5,79E-08 1,45E-06 5,24E-06 3,12E-09 7,55E-09 8,39E-08 2,99E-09 1,22E-08 3,89E-08 6,5 6E-0 9 3,94E-08 3,37E-06 3,70E-08 1,20E-07 1,20E-05 1,27E-08 1,54E-07 1,20E-05 1,88E-09 5,18E-09 2,70E-06 2,30E-08 6,48E-08 5,31E-06 3,85E-09 1,44E-08 1,20E-05 3,38E-07 1,20E-05 1,20E-05 2,19E-08 6,41 E-08 3,76E-07 1,33E-08 1,43E-07 4,59E-07 6,92E-08 2,71E-07 1,58E-06 2,48E-07 6,24E-07 4,18E-06 5,84E-08 2,72E-07 1,04E-06 1,48E-07 1,90E-06 1,27E-05 1,51E-07 3,56E-07 8,37E-07 3,33E-07 2,57E-06 1,27E-05 1,48E-07 3,63E-07 8,87E-07 1,11E-07 3,23E-07 9,15E-07 3,42E-08 6,93E-08 1,06E-06 4,02E-08 7,97E-08 1,20E-05 5,71E-09 1,86E-08 4,22E-07 6,89E-09 8,68E-08 1,20E-05 9,02E-08 9,53E-07 1,20E-05 2,30E-08 4,82E-08 1,01E-07 3,33E-07 1,33E-06 1,20E-05 2,718-08 5,31E-08 1,04E-07 2,59E-08 5,83E-08 2,04E-07 57 58 59 60 61 62 A54 9 GI50 TGI lc50 3,74E-08 1,01E-07 1,50E-06 2,16E-07 5,17E-07 1,24E-06 1,59E-08 4,85E-08 2,73E-07 3,60E-09 1,31E-08 7,60E-08 2,43E-08 5,01E-08 1,04E-07 4,56E-09 1,65E-08 3,34E-07 HT2 9 GI50 TGI lc50 4,46E-08 4,38E-06 1,22E-05 2,97E-07 1,54E-06 1,24E-05 3,83E-09 1,60E-08 4,28E-06 2,28E-09 1,31E-08 1,28E-05 6,58E-09 1,40E-06 1,31E-05 4,03E-09 2,83E-07 1,25E-05 SW-620 GI50 TGI LC50 MEL —2 8 GI50 TGI lc50 2,93E-08 5,56E-08 1,06E-07 2,41E-07 4,69E-07 9,69E-07 3,56E-09 1,10E-08 3,04E-06 1,91E-09 4,27E-09 9,55E-09 6,19E-09 1,88E-08 6,07E-08 2,46E-09 4,92E-09 9,78E-09 OVCAR GI50 TGI LC50 154 ΕΡ2305689Β1 Α498 DU145

MCK MB 2 31 H—MEC—1

LNCAP SK-0V3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX

HELA

HELA-APL GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 5,21E-08 1,22E-05 1,22E-05 4,68E-08 8,88E-08 1,24E-05 4,09E-09 1,02E-08 1,64E-06 1,80E-09 1,36E-06 7,13E-06 5,14E-09 9,34E-09 7,97E-06 3,30E-09 1,04E-08 3,59E-06 1,51E-08 3,23E-08 6,93E-08 2,88E-08 6,60E-08 6,48E-06 2,52E-07 5,44E-07 1,17E-06 6,42E-09 3,18E-08 3,82E-07 8,82E-09 8,88E-08 1,22E-05 5,29E-08 1,34E-06 1,22E-05 8,59E-08 2,74E-07 8,77E-07 7,74E-07 6,22E-06 1,22E-05 2,68E-08 5,64E-08 1,12E-07 2,23E-08 5,05E-08 1,15E-07 2,99E-08 7,16E-08 2,40E-07 1,03E-09 2,67E-09 6,43E-09 4,15E-10 1,42E-09 5,03E-09 1,17E-09 2,94E-09 6,92E-09 3,01E-09 5,03E-09 8,40E-09 9,39E-08 3,05E-07 1,04E-06 1,88E-07 4,22E-07 9,49E-07 2,09E-08 7,56E-08 2,55E-06 2,64E-08 9,42E-08 1,24E-05 3,79E-07 1,27E-06 1,24E-05 1,39E-07 2,85E-07 5,81E-07 4,83E-07 2,26E-06 1,24E-05 3,94E-08 7,08E-08 1,65E-07 6,10E-08 1,90E-07 1,16E-06 3,01E-09 7,33E-09 1,10E-07 4,48E-09 1,07E-07 3,04E-06 1,80E-09 9,83E-09 3,29E-06 4,76E-09 4,23E-08 3,75E-06 5,80E-09 2,33E-08 1,19E-06 1,23E-07 7,09E-07 3,93E-06 2,44E-09 5,08E-09 1,06E-08 3,32E-09 7,6 9E-0 9 5,92E-08 1,38E-09 4,03E-09 1,18E-08 2,09E-08 5,31E-08 2,89E-06 4,31E-10 1,22E-09 4,22E-08 8,09E-10 1,32E-08 8,57E-06 3,31E-09 1,19E-08 1,28E-05 3,27E-09 8,23E-09 2,90E-06 1,63E-07 7,57E-07 1,28E-05 1,03E-09 3,41E-09 1,28E-08 1,37E-09 3,58E-09 9,27E-09 4,82E-09 9,64E-09 5,25E-07 2,25E-07 7,12E-07 4,77E-06 4,28E-09 9,00E-09 2,45E-07 2,59E-09 6,55E-09 3,90E-06 2,66E-08 6,95E-08 2,92E-06 1,01E-09 4,74E-09 1,03E-07 2,56E-09 8,62E-09 6,42E-07 4,69E-09 1,54E-08 1,31E-05 1,71E-08 7,09E-08 8,23E-06 1,94E-09 1,10E-08 6,02E-06 3,86E-09 1,35E-08 4,75E-06 5, 03E-09 1,79E-08 1,54E-06 4,1,1, 3,6,1, 95E-07 76E-06 31E-05 56E-09 49E-09 18E-08 2,98E-09 5,60E-09 1,05E-08 1,36E-07 5,58E-07 1,31E-05 2,37E-09 5,11E-09 1,10E-08 2,30E-09 4,88E-09 1,03E-08 155 ΕΡ2305689Β1 Α54 9 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCP MB 2 31 H—MEC—1

LNCAP SK-0V3

IGROV

IGROV-ET GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI lc50 63 2,40E-08 6,14E-08 2,73E-07 9,17E-09 3,27E-07 1,35E-05 5, 3,1, 3,1,1, 64 19E-09 66E-08 12E-06 58E-09 32E-08 30E-05 65 2,29E-08 5,60E-08 3,13E-07 4,51E-09 1,96E-07 1,32E-05 66 7,62E-09 3,97E-08 8,74E-07 5,86E-09 1,81E-07 1,32E-05 67 3,27E-08 6,87E-08 7,97E-07 3,79E-08 1,02E-07 1,19E-05 2,1,6,6,1,1, 68 81E-08 13E-07 29E-06 6 6E-0 9 50E-08 42E-05 5,64E-09 1,70E-08 5,26E-08 2,65E-09 6,24E-09 2,05E-08 3,78E-09 1,08E-08 4,20E-08 5,34E-09 1,89E-08 7,45E-08 2,04E-08 4,53E-08 1,00E-07 5,1, 5, 45E-09 57E-08 21E-08 3,48E-09 7,24E-09 4,40E-06 2,89E-09 1,53E-07 1,30E-05 2,63E-09 6,45E-09 4,77E-06 3,39E-09 1,60E-09 3,86E-06 3,59E-08 7,54E-08 3,50E-06 4,1,1, 68E-09 50E-09 42E-05 2,86E-09 5,36E-09 1,00E-08 5,40E-09 1,50E-08 4,49E-09 7,59E-08 5,37E-07 1,33E-05 1,02E-09 2,67E-09 6,12E-09 8,75E-10 2,54E-09 6,16E-09 1,99E-09 3,83E-09 7,39E-09 3,00E-09 9,00E-09 3,74E-08 1, 3, 59E-09 70E-09 64E-09 1, 4,1, 3,1,8, 78E-09 41E-09 09E-08 48E-08 71E-07 30E-06 4,07E-09 1,14E-08 2,99E-06 7,60E-08 4,06E-07 3,30E-06 2,99E-09 6,76E-09 1,60E-07 3,83E-08 1,79E-07 5,59E-06 3,12E-08 7,86E-08 6,85E-07 2,68E-08 6,27E-08 2,68E-06 3,8, 3,2,1,8, 94E-09 01E-09 51E-08 90E-07 6 6E —0 6 63E-06 156 ΕΡ2305689Β1 GI50 3,93E-09 7,17E-10 2,97E-09 6,50E-09 8,71E-09 7,20E-09 SK-BR3 TGI 8,98E-09 1,50E-07 7,66E-09 3,31E-07 3,74E-08 1,53E-07 lc50 1,98E-07 1,30E-05 2,09E-07 1,32E-05 2,84E-07 1,42E-05 GI50 3,86E-09 8,60E-10 1,22E-09 4,33E-09 3,39E-08 2,65E-09 K562 TGI 7,92E-09 4,71E-09 1,39E-08 1,25E-08 3,97E-08 6,6 OE-O 9 LC50 6,34E-07 8,12E-07 7,80E-06 4,84E-07 2,09E-06 2,34E-07 GI50 4,60E-09 2,46E-09 3,99E-09 4,57E-09 2,74E-08 3,90E-09 PANC-1 TGI 1,74E-08 1,09E-08 1,23E-08 2,34E-08 9,27E-08 1,28E-08 lc50 4,27E-06 1,30E-05 4,25E-06 6,40E—0 6 2,78E-06 2,07E-06 GI50 8,63E-09 4,15E-09 6,78E-09 5,27E-09 2,86E-08 1,20E-08 LOVO TGI 5,48E-08 1,03E-08 3,69E-08 2,09E-08 7,30E-08 4,8 OE-O 8 lc50 1,35E-05 1,25E-05 2,96E-06 4,35E-06 1,06E-05 1,93E-06 GI50 3,98E-07 3,20E-07 3,99E-07 3,70E-07 3,68E-07 4,72E-07 LOVO-DOX TGI 1,09E-06 2,76E-06 1,05E-06 1,89E-06 9,75E-07 1,42E-05 lc50 1,35E-05 1,30E-05 1,32E-05 1,32E-05 1,27E-05 1,42E-05 GI50 3,16E-09 2,40E-09 2,34E-09 2,41E-09 3,02E-08 4,0OE-O 9 HELA TGI 6,29E-09 4,89E-09 4,82E-09 4,68E-09 6,74E-08 7,06E-09 LC50 1,25E-08 1,00E-08 9,99E-09 9,07E-09 3,95E-07 1,24E-08 GI50 1,10E-08 2,39E-09 2,00E-09 3,05E-09 2,97E-08 3,81E-09 HELA-APL TGI 3,98E-08 4,80E-09 4,10E-09 6,24E-09 6,47E-08 5,32E-09 lc50 1,50E-07 9,63E-09 8,46E-09 1,27E-08 3,27E-07 1,04E-08 Α54 9 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCP GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 5,2,1,1,1, 69__ 57E-06 5, 23E-05 5, 57E-05 5, 11E-06 1, 11E-06 1, 11E-05 5, 70 0 6E —0 6 06E-05 06E-05 01E-05 01E-05 06E-05 71 2,11E-06 1,05E-05 3,16E-05 5,27E-06 5,27E-06 5,27E-05 5,1, 4,1,1, 5, 72__ 19E-08 3, 04E-07 6, 15E-06 1, 04E-06 5, 04E-06 1, 19E-06 1, 73__ 25E-06 2, 05E-06 7, 13E-05 1, 65E-06 5, 23E-05 1, 23E-05 1, 74 6 4E —0 6 09E-06 61E-05 32E-07 61E-06 61E-05 157 ΕΡ2305689Β1

75 76 77 ET729 ET594 ET770 Α5 4 9 GI50 TGI LC50 8,89E-07 4,01E-06 1,27E-05 4,13E-07 8,40E-07 4,65E-06 3,01E-07 7,28E-07 3,65E-06 1,82E-08 5,71E-08 1,34E-06 4,90E-08 1,31E-07 6,54E-07 3, 24E-09 6, 98E-09 5, 20E-06 ΗΤ2 9 GI50 TGI lc50 3,30E-07 9,33E-07 1,61E-05 6,27E-07 1,30E-06 1,30E-05 1,89E-07 9,08E-07 1,31E-05 2,05E-09 1,91E-08 1,34E-05 4,90E-08 9,80E-08 1,63E-06 5, 86E-09 1,30E-08 1,30E-05 SW-620 GI50 TGI lc50 3,27E-08 9,80E-08 3,27E-06 158 ΕΡ2305689Β1 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCF MB231 H—MEC—1

LNCAP SK-OV3

IGROV

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX GI50 TGI LC5q GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LÇso. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI lc50 2,79E-07 1,64E-06 1,61E-05 2,38E-07 5,49E-07 1,27E-06 6,31E-08 1,75E-07 7,56E-07 7,52E-10 2,11E-09 7,07E-09 4,92E-07 1,34E-06 1,30E-05 3,01E-07 1,16E-06 1,31E-05 5,68E-10 3,17E-09 1,34E-05 3, 6, 1, 3, 1, 1, 8, 3, 1, 3, 8, 1, 3, 9, 3, 3, 1, 1, 27E-08 54E-08 31E-07 27E-08 14E-07 63E-05 17E-08 27E-07 14E-05 27E-08 17E-08 63E-07 27E-08 80E-08 27E-06 27E-08 14E-07 63E-06 2,63E-09 5,34E-09 1,08E-08 4,16E-09 3,20E-08 1,30E-05 4, 8, 2, 5, 1, 1, 1, 6, 5, 5, 9, 1, 66E-08 07E-08 57E-07 47E-07 90E-06 30E-05 97E-07 48E-07 25E-06 13E-07 24E-07 30E-06 4,35E-08 7,10E-08 1,18E-07 4,39E-07 4,86E-06 1,31E-05 5,80E-08 2,72E-07 6,32E-06 6,52E-07 1,70E-06 1,31E-05 3,69E-10 8,68E-10 3,77E-09 1,48E-09 3,06E-09 6,34E-09 2, 1, 1, 6, 4, 1, 69E-08 30E-07 30E-05 95E-07 97E-06 30E-05 1,66E-08 1,01E-07 1,31E-05 4,18E-07 2,72E-06 1,31E05 4,13E-10 9,86E-10 7,45E-09 2,54E-08 6,19E-08 1,34E-05 3,98E-10 8,60E-10 7,11E-09 5,99E-10 2,97E-09 2,74E-06 1,05E-09 5,32E-09 1,34E-06 2,74E-07 6,83E-07 1,30E-06 2,6 6E-0 6 8,13E-06 1,30E-05 2,41E-07 9,17E-07 1,31E-05 9,29E-07 5, 66E-06 1,31E-05 2,01E-09 6,50E-09 1,34E-05 2,05E-07 6,98E-07 1,34E-05 3,32E-09 8,51E-09 1,30E-05 1,21E-08 4.6 OE —0 6 1,30E-05 9,86E-10 9,48E-08 1,30E-05 1,65E-09 8,02E-09 6.6 3E —0 6 5,53E-09 1,15E-07 1,30E-05 3,09E-09 5,93E-09 1,14E-08 7,41E-08 1,30E-05 1,30E-05 159 ΕΡ2305689Β1 HELA GI50 TGI lc50 3,33E-10 6,75E-10 1,78E-09 5,09E-09 1,26E-08 1,86E-07 HELA-APL GI50 TGI LC50 3,41E-10 6,79E-10 1,58E-09 2,96E-09 6,01E-09 1,22E-08 ΕΤ637- ΕΤ594- ΕΤ736- Α549 ΗΤ2 9 SW-620 MEL-28

OVCAR A498 DU145

MCP MB231 H—MEC—1

LNCAP SK-OV3

IGROV GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50. GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 ET743 2,52E,09 5,51E-09 1,21E-08 3,41E-09 1,11E-08 1,31E-05 ET745 7,43E-07 4,77E-06 1,34E-05 5,22E-07 2,65E-06 1,34E-05 ET759B 2, 62E-08 6, 13E-08 7,02E-07 4,19E-08 2,29E-06 1,29E-05 quinona 4,42E-09 1,09E-08 5,15E-08 3,32E-09 7,78E-09 2,26E-06 quinona 2,35E-06 4,91E-06 1,03E-05 6,53E-07 1,71E-06 1,63E-05 quinona 2,56E-08 5,29E-08 1,09E-07 5,12E-08 1,28E-07 1,30E-05 7,42E-10 3,06E-09 1,12E-08 6,02E-07 2,21E-06 8,62E-06 1,97E-08 4,91E-08 1,23E-07 2,96E-09 5,34E-09 9,61E-09 4,13E-07 7,38E-07 1,32E-06 1,23E-07 3,00E-07 7,18E-07 6,18E-10 1,29E-09 4,33E-06 9,03E-09 6,88E-08 1,31E-05 2,30E-10 5,29E-10 1,22E-09 1,31E-09 1,30E-08 1,31E-05 5,79E-10 2,60E-09 1,03E-08 4,88E-07 2,67E-06 1,34E-05 6,34E-07 3,67E-06 1,34E-05 6,52E-07 2,39E-06 9,81E-06 1,32E-06 5,48E-06 1,34E-05 7,74E-07 3,26E-06 1,34E-05 3,91E-07 3,20E-06 1,19E-05 4,64E-09 1,67E-08 5,22E-08 2,29E-08 6,52E-08 1,00E-05 3,74E-09 6,30E-09 1,53E-08 1,99E-06 5,39E-06 1,46E-05 4,51E-08 7,63E-08 1,29E-07 1,78E-09 3,64E-09 7,44E-09 2,76E-09 5,80E-09 1, 21E-08 2,74E-07 4,98E-07 9,01E-07 4,52E-07 9,58E-07 3,64E-06 2,48E-08 4,46E-08 7,99E-08 6,71E-08 2,15E-07 7,35E-07 160 ΕΡ2305689Β1

IGROV-ET SK-BR3 K562 PANC-1

LOVO

LOVO-DOX

HELA

HELA-APL GI50 TGI LC5q GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 GI50 TGI LC50 4,29E-09 7,86E-09 1,86E-08 4,79E-10 1,72E-09 8,57E-09 3,47E-10 6,05E-10 1,06E-09 1,59E-09 6,34E-09 3,99E-08 1,56E-09 4,23E-09 1,14E-08 2,95E-08 1,10E-07 1,31E-05 3,70E-06 8,45E-06 2,34E-05 6,29E-07 3,15E-06 1,34E-05 5,82E-08 2,73E-07 1,71E-06 5,37E-09 1,16E-08 8,81E-08 3,42E-08 6,91E-08 1, 39E-07 7,58E-10 2,67E-09 8,51E-09 8, 3,1,1, ' 9,1,5, 1, 1,6, 1, 1, 84E-07 6, 90E-06 3, 34E-05 1, 32E-06 3, 22E-06 1, 34E-05 1, 55E-06 3, 34E-05 6, 34E-05 1, 25E-06 1, 34E-05 6, 34E-05 1, 00E-09 5, 79E-08 1, 29E-05 1, 55E-08, 3, 22E-07 8, 10E-05 3, 27E-07 3, 21E-08 8, 18E-07 6, 66E-10 97E-09 44E-08 72E-09 24E-09 42E-09 98E-09 51E-09 08E-06 92E-07 25E-07 29E-05 2,13E-08 6,42E-08 5,27E-07 3,59E-08 1,02E-07 1,04E-06 2,62E-07 9,62E-07 9,00E-08 2,24E-09 4,88E-09 1,06E-08 2,39E-09 5,12E-09 1,09E-08 4,37E-06 9,11E-06 1,63E-05 3,02E-07, 5,93E-07 1,16E-06 1, 37E-07 4,78E-07 1, 62E-06 1,58E-06 4,86E-06 1,49E-05 7,59E-07 2,91E-06 1,63E-05 6,27E-06 1,31E-05 1,63E-05 3,43E-07 6,20E-07 1,12E-06 3,98E-07 6,74E-07 1,14E-06 5,10E-07 7,82E-07 1, 20E-06 5,33E-09 1,13E-08 1,92E-07 4,96E-09 1, 37E-08 1,05E-07 3,94E-07 9,57E-07 1,30E-05 2,65E-07 5,96E-07 1,30E-06 7,47E-07 3,28E-06 1,30E-05 3,32E-06 6,14E-06 1,14E-07 5,55E-08 7,84E-08 1,11E-07 161 ΕΡ2305689Β1

REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para a conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento de Patente Europeia. Embora tenha sido tomado muito cuidado na compilação das referências, não se poderão excluir erros e omissões e o IEP nao assume qualquer responsabilidade neste sentido.

Documentos de Patente citados na descrição • US 5089273 A [0003] • US 5721362 A [0005] • WO 0069862 A [0006] [0027] [0083] [0088] [0098] [0102] [0110] • WO 0187895 A [0006] [0008] [0013] [0022] [0024] [0052] [0079] [0083] [0088] [0092] [0093] [0098] [0102] [0110] • WO 0018233 A [0008] • WO 0177115 A [0008] [0024] • WO 0187894 A [0008] [0016] [0024] [0055] [0088] [0092] [0093] [0102] • WO 9951238 A [0008] • WO 9846080 A [0008] • WO 00699862 A [0027]

Literatura não relacionada com patentes referida na descrição: • J.Am.Chem.Soc., 1996, vol. 118 (38), 9017-9023 [0008] • PHILIP SKEHAN et al. New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening. J. Natl. Câncer Inst., 1990, vol. 82, 1107-1112 [0275]

Lisboa, 23 de Maio de 2014 162

Claims (14)

1. ΕΡ2305689Β1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto de fórmula: Rb ,Ra OCH3 "\ CH3 .s tjt Me^ R7' R8 R21 em que Ra e Rb juntamente com o carbono ao qual são unidos formam um grupo de fórmula:

   onde cada X1 é independentemente selecionado a partir de hidrogénio ou R', OR' , -(C=0)R' substituído ou não substituído, alquilo substituído ou não substituído, alcoxi substituído ou não substituído, alquenilo substituído ou não substituído, alquinilo substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, e aralquilo substituído ou não substituído; em que R' é selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, NO2, NH2, SH, CN, halogénio, C(=0)H, C(=0)CH3, C02H, C02CH3 Cl-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, arilo, aralquilo e heterocíclico; onde Rd é um R', OR', -(C=0)Rf substituído ou não substituído, alquilo substituído ou não substituído, alcoxi substituído ou não substituído, alquenilo substituído ou não substituído, alquinilo substituído ou 1 ΕΡ2305689Β1 não substituído, arilo substituído ou não substituído, ou aralquilo substituído ou não substituído; em que R' é selecionado a partir do grupo que consiste em OH, NO2, NH2, SH, CN, halogénio, C (=0) H, C(=0)CH3, C02H C02CH3. Cl-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, arilo, aralquilo e heterocíclico; R7 é -0CH3 e R8 é -OH ou R7 e R8 juntos formam um grupo -0-CH2-0-; R12a é hidrogénio, acilo, alquenilo, ou alquil-O-CO-; R21 é -H, -OH ou -CN; X é -0- ou -NH-; R5 e R18 são -OXi, em que cada X3 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogénio e um grupo acilo; em que os substituintes opcionais são selecionados a partir do grupo que consiste em halogénio, ciano, hidroxilo, nitro, azido, grupos C1-6 alcanoilo, carboxamido, grupos alquilo, grupos alquenilo, grupos alquinilo, grupos alcoxi, grupos ariloxi, grupos alquiltio, grupos alquilsulfinilo, grupos alquilsulfonilo, grupos aminoalquilo, grupos arilo substituídos ou não substituídos, e grupos aralquilo substituídos ou não substituídos; e o grupo alquilo substituído ou não substituído é um grupo CI-C12 alquilo substituído ou não substituído; o grupo alquenilo substituído ou não substituído é um grupo C2-Ci2 alquenilo substituído ou não substituído; o grupo alquinilo substituído ou não substituído é um grupo C2-Ci2 alquinilo substituído ou não substituído; o grupo alcoxi substituído ou não substituído é um grupo C1-C12 alcoxi substituído ou não substituído; o grupo arilo substituído ou não substituído é um grupo C6-Ci8 arilo substituído ou não substituído; o grupo heterocíclico é um grupo heterocíclico que tem 5 2 ΕΡ2305689Β1 a 10 átomos do anel dos quais 1 a 4 são heteroátomos; o grupo acilo é selecionado a partir de alquil-CO, alquenil-CO, alquinil-CO, aril-CO e heterocíclico-CO, em que alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo e heterociclico são como foram definidos acima; o grupo aralquilo é um grupo C1-C12 alquilo substituído com um grupo C6-Ci8 arilo; e o grupo cicloalquilo é um grupo C3-Ci2 cicloalquilo substituído ou não substituído.
2. 2. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que cada X1 em:

   é, independentemente, hidrogénio ou Ci~Ce alquilo.
3. 3. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que Rd é Ci-C6 alquilo substituído ou não substituído, Ci-Cõ alcoxi substituído ou não substituído, C2-C6 alquenilo substituído ou não substituído, C2-C6 alquinilo substituído ou não substituído, C6-Ci8 arilo substituído ou não substituído, ou aralquilo substituído ou não substituído em que o grupo aralquilo é um grupo C1-C12 alquilo substituído com um grupo Cõ-Cis arilo.
4. 4. Um composto de acordo com a reivindicação 3, em que Rd é Ci-C6 alquilo ou Ci-C6 alcoxi.
5. 5. Um composto de acordo com a reivindicação 4, em que Rd é metilo ou metoxi.
6. 6. Um composto de acordo com qualquer reivindicação 3 ΕΡ2305689Β1 anterior, em que R7 e R8 juntos formam um grupo -0-CH2-0-.
7. 7. Um composto de acordo com qualquer reivindicação anterior, em que R12a é hidrogénio, Ci-C6 alquil-CO-, alilo, ou t-BOC.
8. 8. Um composto de acordo anterior, em que R21 é -OH ou
9. 9. Um composto de acordo anterior, em que R5 é um grupo com qualquer reivindicação CN. com qualquer reivindicação aciloxi.
10. 10. Um composto de acordo com a reivindicação 9, em que R5 é acetiloxi.
11. 11. Um composto de acordo com qualquer reivindicação anterior, em que R18 é OH.
12. 12. Um composto de acordo com a reivindicação 1, de fórmula: ou

    4 ΕΡ2305689Β1 13. Um composto fórmula:

    Me de acordo com a reivindicação 1, de

    Me
13. 14. Uma composição farmacêutica que compreende um composto como foi definido em qualquer reivindicação anterior, e um portador farmacêutico. 5 ΕΡ2305689Β1
14. 15. Um composto como foi definido em qualquer das reivindicações 1 a 13 ou uma composição farmacêutica como foi definida na reivindicação 14 para utilização no tratamento de cancro. Lisboa, 23 de Maio de 2014 6