PT1883451E - Compostos de indolo substituídos com actividade inibitória da sintetase de óxido nítrico (nos) - Google Patents

Compostos de indolo substituídos com actividade inibitória da sintetase de óxido nítrico (nos) Download PDF

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Shawn Maddaford
Jailall Ramnauth
Suman Rakhit
Joanne Patman
Paul Renton
Subhash C Annedi
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Neuraxon Inc
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Description

1
DESCRIÇÃO &quot;COMPOSTOS DE INDOLO SUBSTITUÍDOS COM ACTIVIDADE INIBITÓRIA DA SINTETASE DE ÓXIDO NÍTRICO (NOS)&quot;
Enquadramento da invenção A presente invenção compreende novos compostos de indolo substituídos possuindo actividade inibitória da sintetase de óxido nítrico (NOS), composições farmacêuticas e de diagnóstico que os contenham, e o seu uso médico, particularmente para o tratamento de acidente vascular cerebral, lesão de reperfusão, doenças neurodegenerativas, traumatismo craniano, dano neurológico associado a enxerto de bypass da artéria coronária (CABG), enxaqueca com e sem aura, enxaqueca com alodínia, dor de cabeça de tensão crónica (CTTH), dor neuropática, dor pós-acidente vascular cerebral e dor crónica. 0 óxido nítrico (NO) tem diferentes papeis tanto em processos normais e patológicos, incluindo a regulação da pressão sanguínea, na neurotransmissão e nos sistemas de defesa por macrófagos (Snyder et al., Scientific American, Maio 1992; 68) . NO é sintetizado por três isoformas de sintetase de óxido nítrico, uma forma expressa constitutivamente nas células endoteliais (eNOS), uma forma expressa constitutivamente nas células neuronais (nNOS) e uma forma expressa indutivelmente encontrada nas células macrofágicas (iNOS). Estas enzimas são proteínas homodiméricas que catalizam uma oxidação de L-arginina com 5 electrões, obtendo-se NO e citrulina. 0 papel do NO produzido por cada uma das isoformas NOS é realmente único e especial. A sobre-estimulação ou sobre-produção de isoformas individuais de NOS, em especial nNOS e iNOS, tem um papel determinante em várias doenças, incluindo choque 2 séptico, artrite, diabetes, lesão de reperfusão isquémica, dor e várias doenças neurodegenerativas (Kerwin et al., J. Med. Chem. 38: 4343, 1995), enquanto que a inibição da função de eNOS conduz a efeitos indesejados como activação elevada de glóbulos brancos e de plaquetas, hipertensão e aterogénese aumentada (Valance and Leiper, Nature Rev. Drug Disc. 2002, 1, 939) .
Os inibidores de NOS têm potencial para ser usados como agentes terapêuticos em várias doenças. Contudo, a preservação da função fisiologicamente importante da sintetase de ácido nítrico sugere ser desejável o desenvolvimento de inibidores selectivos para as isoformas, que inibam preferencialmente nNOS em relação a eNOS.
Resumo da invenção
Foi descoberto que certos compostos indolo 5- e 6-amidino substituídos são inibidores da sintetase de ácido nítrico (NOS), e inibem particularmente a isoforma nNOS. A invenção inclui um composto de fórmula:
deste, caracterizado por R1 ser H, um alquilo Ci_6 opcionalmente substituído, um alquileno-arilo Ci_4 opcionalmente substituído ou um alquilo-heterociclilo Ci-4 opcionalmente substituído; cada um de R2 e R3 ser, independentemente, H, Hal, alquilo C4-6 opcionalmente substituído, arilo C6-10 opcionalmente substituído, alquileno-arilo C4-4 opcionalmente substituído, 3 heterociclilo C2-9 com uma ligação intercalar entre os radicais, opcionalmente substituído, alquilo-heterociclilo C1-4 com uma ligação intercalar entre os radicais, opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, ou alquiloheterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; e caracterizado por o referido pró-medicamento do composto de fórmula (1) é um éster fenílico, éster alifático (C8-24) f éster acilóxidometílico, carbamato, ou um éster de aminoácido; cada R4 e R7 é, independentemente H, F, alquilo Ci_6, óxido de alquilo Ci_6; R5 é H, R5AC(NH)NH(CH2)r5 ou R5BNHC (S) NH (CH2) r5, no qual r5 é um número inteiro de 0 a 2, R5A é arilo Cê-io opcionalmente substituído, alquileno-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, alquiloheterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, tio-alquilóxido C1-6 opcionalmente substituído, tio-alquileno-arilo C1-4 opcionalmente substituído, ariloílo opcionalmente substituído ou tio-alquilo-heterociclilo Ci_4 opcionalmente substituído; R5B é um tio-alquilóxido C1-6 opcionalmente substituído, um tioalquileno-arilo C1-4 opcionalmente substituído, ou tio-alquilo-heterociclilo C1-4, caracterizado por o tio-alquilóxido representar um grupo alquilo ligado ao grupo molecular que lhe deu origem através de uma ligação de enxofre, por o tioalquilo-heterociclilo representar um grupo tio-alquilóxido substituído por um grupo heterociclilo; e R6 ser H ou R6aC (NA) NH (CH2) r6 OU R6BNHC(S)NH(CH2)r6, caracterizado por r6 ser um número inteiro de 0 a 2, R6a ser um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquiloarilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, um alquilo heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, um tioalquilenóxido C1-6 opcionalmente substituído, um tioalquiloarilo C1-4 opcionalmente substituído, um ariloílo 4 opcionalmente substituído, ou um tioalquiloheterociclilo Ci-4 opcionalmente substituído; R6B é um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquileno-arilo Ci-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, um alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, um tio-alquilóxido C1-6 opcionalmente substituído, um tio-alquilóxido C4-4, um ariloílo opcionalmente substituído, tio-alquilo-heterociclilo Ci_4 opcionalmente substituído, caracterizado por um dos R5 e R6, mas não ambos, ser H.
Em certas formulações, R1 é H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um alquileno-arilo C1-4 opcionalmente substituído, ou um alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; cada R2 e R3 ser, independentemente, H, Hal, um alquilo Ci_6 opcionalmente substituído, um arilo Cê-io opcionalmente substituído, um alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, ou um alquiloheterociclilo Ci-4 opcionalmente substituído; cada R4 como R7 é, independentemente, H, F, alquilo C1-6, ou alquilóxido C1-6; R5 é H ou R5AC (NH) NH (CH2) rb, no qual r5 é um número inteiro 0 a 2, R5a é um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquileno-arilo Ci-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, um alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, um tio-alquilóxido C1-6 opcionalmente substituído, um tio-alquileno-arilo Ci_4 opcionalmente substituído, um tio-alquilo-heterociclilo Ci_4 opcionalmente substituído; e R6 é H ou R6AC (NH) NH (CH2) r6^ no qual r6 é um número inteiro de 0 a 2, R6a é um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquileno-arilo Ci-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, um alquilo heterociclilo Ci-4 5 opcionalmente substituído, um óxido de tio-alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, um arilo tioalquilo C1-4 opcionalmente substituído, ou um tio-alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído.
Numa das formulações R6A é metilo, fluorometilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, t-butilo, tio-metóxido, tio-etóxido, tio-n-propilóxido, tio-i-propilóxido, tio-n-butilóxido, tio-i-butilóxido, tio-t-butilóxido, fenilo, benzilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-furanilo, 3-furanilo, 2-oxazolo, 4-oxazolo, 2-tiazolo, 4-tiazolo, 5-tiazolo, 2-isoxazolo, 3-isoxazolo, 4-isoxazolo, 2-isotiazolo, 3-isotiazolo e 4-isotiazolo.
Em certas formulações, um ou mais R1, R2 e R3 não são H. Numa formulação R1 é (CH2)miX1, no qual X1 é escolhido do grupo formado por:
no qual cada R1a e R1B é, independentemente H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo C6-io opcionalmente substituído, um alquileno-arilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 ou um alquilo heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; cada Rlc e R1D é, independentemente, H, OH, C02R1E, ou NR1FR1G, no qual cada R1e, R1e e R1g é, independentemente, H, alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Cê-io opcionalmente substituído, um alquileno-arilo Ci_4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9, ou um alquilo heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, ou Rlc e R1d 6 são, em conjunto com o carbono ao qual estão ligados, C=0; Z1 é NR1h, NC(0)R1h, NC(0)0R1h, NC(0)NHR1h, NC(S)R1h, NC(S)NHR1h, NS(0)2R1h, o, S, S(0), ou S (0) 2, no qual R1H é H, um alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Cô-io opcionalmente substituído, um alquileno-arilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-g, ou um alquilo- heterociclilo Ci_4; ml é um número inteiro 2 a 6; nl é um número inteiro de 1 a 4; pl é um número inteiro de 0 a 2; e ql é um número inteiro de 0 a 5,
Numa formulação adicional R2 é (CH2)m2X2, no qual X2 é escolhido a partir do grupo constituído por:
no qual cada R e R e, mdependentemente H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Ce-ιο opcionalmente substituído, um alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-g, um alquiloheterociclilo C4-4 opcionalmente substituído; cada R2C e R2D é, independentemente, H, OH, C02R2E, ou NR2FR2G, no qual cada um de R , R e R , e mdependentemente H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Οε-ιο opcionalmente substituído, um alquileno-arilo Ci-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9, ou um alquilo heterociclilo Ci-4 opcionalmente substituído, ou R2C e R2D em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados são C=0; Z2 é NR2h, NC(0)R2h, NC(0)0R2h, NC(0)NHR2h, NC(S)NHR2h, NS(0)2R2h, 0, S, S(0), ou S(0)2, no qual R2H é H, um alquilo 7
Ci-6 opcionalmente substituído, um ciclo-alquilo C3-8 opcionalmnete substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9, ou um alquilo heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m2 é um número inteiro de 0 a 6; n2 é um número inteiro de 1 a 4; p2 é um número inteiro de 0 a 2; e q2 é um número inteiro de 0 a 5,
Numa outra formulação R3 é (CH2)m3X3, no qual X3 é escolhido de um grupo constituído por:
no qual cada um de R3A e R3B é independentemente, H, alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, alquilo heterociclilo Ci-4; cada um de R3c e R3D é, independentemente, H, OH, C02R3E, ou NR3FR3G, no qual cada R , R , e R e, independentemente H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Οε-ιο opcionalmente substituído, alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-g, ou um alquilo heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, ou R3C e R3D em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados é C=0; Z3 é nr3h, NC (0) R3h, NC (0) 0R3h, NC(0)NHR3h, NC(S)R3h, NC(S)NHR3h, 0, s, S(0), ou S(0)2, gpr , no qual R e H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8, opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou um alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 a 6; n3 é um número inteiro de 1 a 4; p3 é um número inteiro de 0 a 2; e q3 é um número inteiro de 0 a 5,
Noutra formulação, R1 é (CH2)m3X1, no qual X1 é escolhido do grupo constituído por:
no qual cada um de R3C e R3D é, independentemente, H, OH, C02R3E, ou NR3fR3g, no qual cada R3E, R3E, e R3g é, independentemente H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Οε-ιο opcionalmente substituído, alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou um alquilo heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, ou R3c e R3d em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados é C=0; Z3 é NC (NH) R3h, no qual R3h é H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8, opcionalmente substituído, um arilo C6-io opcionalmente substituído, um alquilo arilo Ci_4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou um alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 a 6; n3 é um número inteiro de 1 a 4; p3 é um número inteiro de 0 a 2; e q3 é um número inteiro de 0 a 5,
Numa outra formulação adicional R2 é (CH2)m3X2, no qual X2 é escolhido do grupo constituído por: 9
* no qual cada um de R3C e R3D é, independentemente, H, OH, C02R3E, ou NR3fR3g, no qual cada R3E, R3F, e R3G é, independentemente H, um alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Οε-ιο opcionalmente substituído, alquilo arilo Ci_4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou um alquilo heterociclilo C4_4 opcionalmente substituído, ou R3C e R3D em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados é C=0; Z3 é NC (NH) R3h, no qual R3H é H, um alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8, opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquilo arilo C4_4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2_9, ou um alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 a 6; n3 é um número inteiro de 1 a 4; p3 é um número inteiro de 0 a 2; e q3 é um número inteiro de 0 a 5,
Noutra formulação adicional R3 é (CH2)m3X3, no quak X3 é escolhido de um grupo constituído por:
no qual cada um de R3C e R3D é, independentemente, H, OH, C02R3E, ou NR3FR3G, no qual cada R3E, R3F, e R3G é, independentemente H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente 10 substituído, alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou um alquilo heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, ou R3C e R3D em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados é C=0; Z3 é NC(NH)R3h, no qual R3H é H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8, opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquilo arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou um alquilo-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 a 6; n3 é um número inteiro de 1 a 4; p3 é um número inteiro de 0 a 2; e q3 é um número inteiro de 0 a 5,
Numa das formulações R2 »2JS p&amp;4
2J5 e r2J6 ger cacja um e, independentemente, alquilo C1-6; OH; óxido de alquilo C1-6; SH; óxido de tioalquilo C1-6; halogeneto; NO2; CN; CF3; OCF3; NR2JaR2Jb, no qual tanto R2Ja como R2Jb podem ser, independentemente, H ou alquilo Ci-ê; C(0)R2Jc, no qual R2Jc é H ou alquilo C1-6,· C02R2Jd, na qual R2Jd é H ou alquilo C1-6,· no qual tanto R2Je como R2Jf podem 2 Jg tetrazolilo; C (O) NR2JeR2Jf, ser, independentemente, H ou alquilo C1-6; 0C(0)R , no qual
R 2 Jg 2 Jh é alquilo Ci-6; NHC(0)R2jh, no qual Rzjn é H ou alquilo ,2 Ji j2 Jj C1-6; S03H; S (O) 2NR2J1R2Jj, no qual tanto RZU1 como RZJ] podem r&gt; ser, independentemente, H ou alquilo Ci-6; S(0)R , R2Jk é um alquilo Ci-6; e S(0)2R' C1-6, 2Jk no qual 2J1 no qual R2J1 é um alquilo 11
Numa das formulações R3 é r3J5 r3J4 r3J6_^”\_r3J3 | caracterizando-se por cada um dos R3J2, R3J3, R3J4, R3J5 e R3J6 serem, independentemente alquilo Ci-ε; OH; óxido de alquilo Ci-6; SH; óxido de tioalquilo Ci-ε; halogeneto; NO2; CN; CF3; OCF3; NR3JaR3Jb, no qual tanto R3Ja como R3jb podem ser, independentemente, H ou alquilo C1-6,· C(0)R3Jc, no qual R3Jc é H ou alquilo Ci-6; C02R3Jd, na qual R3Jd é H ou alquilo Ci-6/ tetrazolilo; C (0) NR3JeR3Jf, no qual tanto R3Je como R3Jf podem ser, independentemente, H ou alquilo Ci-6,' 0C(0)R3Jg, no qual R3jg é alquilo Ci-6,- NHC(0)R3jh, no qual R3jh é H ou alquilo C1 -6; S03H; S (0) 2NR3jlR3jj, no qual tanto R3jl como R3jj podem ser, independentemente, H ou alquilo C1-6,· S(0)R3Jk, no qual R3Jk é um alquilo Ci-6; e S(0)2R3J1, no qual R3J1 é um alquilo C&gt;6,
Numa formulação adicional da presente invenção 0 composto referido é escolhido a partir do grupo constituído por: N-(lH-indol-5-ilo)-tiofeno-2-carboxamidina; N- [1- (2- dimetilo-amino-etilo)-lH-indol-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina; N-{1-[2-(l-metilopirrolidino-2-ilo)-etilo]-lH-indol-6-ilo}-tiofeno-2-carboxamidina; N- [1- (2- pirrolidino-l-ilo-etilo)-lH-indol-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina; N-(l-fenilo-etilo-lH-indol-6-ilo)-tiofeno-2-carboxamidina; N-[3-(2-dimetilo-amino-etilo)-lH-indol-5- ilo]-tiofeno-2-carboxamidina; N-(1—{2—[2-(4-bromo-fenilo)-etilo-amino]-etilo}-lH-indol-6-ilo)-tiofeno-2-carboxamidina; (+)-N-{1-[2-(l-metilo-pirrolidino-2-ilo)- etilo]-lH-indol-6-ilo}-tiofeno-2-carboxamidina; (-)-N-{1-[2-(l-metilo-pirrolidino-2-ilo}-tiofeno-2-carboxamidina; 12 Ν-[1-(l-metilo-azepano-4-ilo)-lH-indol-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina; e N-[1-(2-piperidino-l-ilo-etilo)-lH-indol-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina.
Numa das formulações R1 ou R3 é
0 a 3, p é um número inteiro de 1 a 2, q é um número inteiro de 0 a 1, s é um número inteiro de 1 a 3, u é um número inteiro de 0 a 1, e t é um número inteiro de 5 a 7, e no qual o referido substituinte R1 ou R3 inclui de 0 a 6 ligações duplas entre átomos de carbono ou de 0 a 1 ligação dupla entre átomo de carbono e azoto.
Numa das formulações, um composto de acordo com a presente invenção inibe selectivamente a sintetase de ácido nítrico neuronal (nNOS) em detrimento da sintetase de óxido nítrico endotelial (eNOS) ou sintetase de óxido nítrico indutível (iNOS). Numa das formulações o composto de acordo com a presente invenção inibe selectivamente nNOS em detrimento de ambas as eNOS e iNOS. 0 IC50 ou valor de Ki observado para o composto quando testado é preferencialmente pelo menos 2 vezes inferior no ensaio com nNOS do que nos ensaios com eNOS e/ou com iNOS. 0 IC5o ou o valor de K± é adicionalmente preferível que seja pelo menos 5 vezes inferior. É especialmente preferível que o IC50 ou o valor de Ki seja 20, ou mesmo 50 vezes inferior. Numa das formulações, o IC50 e o valor de Ki situa-se entre 2 e 50 vezes inferior. 13
Numa das formulações, os compostos de acordo com a presente invenção têm a fórmula:
na qual X é 0 ou S.
Numa outra formulação, os compostos da presente invenção têm a fórmula:
na qual X é 0 ou S.
Num outro exemplo da presente invenção, compostos de fórmula I, nos quais R5 é R5AC (NH) NH (CH2) r5 ou R5aNHC (S) NH (CH2) r5, R6, R2, e R1 são H, e R3 é (CH2)m3X1 também se ligam aos receptores 5HTiD/ib de serotonina. 0 IC50 ou valor de Ki situa-se preferencialmente entre 10 e 0,001 micromolar. É adicionalmente preferível que o IC50 ou Ki seja inferior a 1 micromolar. É particularmente preferível que o valor de IC50 ou Ki seja inferior a 0,1,
Os compostos específicos exemplificativos são aqui descritos.
Numa formulação o composto da presente invenção é escolhido a partir do grupo constituído por: 14
15
16
Numa outra formulação, o composto da presente invenção é escolhido a partir do grupo constituído por: 17
18
A presente invenção inclui adicionalmente composições farmacêuticas incluindo um composto de acordo com a presente invenção e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
Num outro aspecto, a presente invenção inclui um medicamento contendo uma quantidade eficaz do composto da presente invenção para o tratamento de uma doença num mamifero, em particular um humano, causado pela acção da sintetase de óxido nitrico (NOS). Exemplos de doenças que podem ser evitadas ou tratadas incluem enxaqueca (com ou sem aura), dor de cabeça do tipo de tensão crónica (CTTH), enxaqueca com alodinia, dor neuropática, dor após acidente vascular cerebral, dor de cabeça crónica, dor crónica, lesão da espinal medula aguda, neuropatia diabética, neuralgia trigeminal, nefrofatia diabética, uma doença inflamatória, acidente vascular cerebral, lesão de reperfusão, traumatismo craneano, choque cardiogénico, dano neurológico associado a CABG, HCA, demência associada a Sida, neurotoxicidade, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, ALS, coreia de Hungtinton, esclerose múltipla, neurotoxicidade associada a metamfetamina, toxicodependência, tolerância, dependência, hiperalgesia, ou desmame induzida por morfina/opióide, tolerância, 19 dependência, hiperalgesia, ou privação ao etanol, epilepsia, ansiedade, depressão, disfunção de défice de atenção por hiperactividade, e psicose. Os compostos da presente invenção são particularmente úteis para o tratamento de acidente vascular cerebral, lesão de reperfusão, neurodegeneração, traumatismo craneano, dano neurológico associado a CABG, enxagueca (com ou sem aura), enxagueca com alodinia, dor de cabeça do tipo tensão crónica, dor neuropática, dor pós-acidente vascular cerebral, hiperalgesia induzida por opióides ou dor crónica. Em particular, compostos indolo 3,5-substituidos são úteis para o tratamento de enxaquecas, com ou sem aura, e CTTH.
Um composto da presente invenção pode também ser usado em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais para a prevenção ou tratamento de uma das doenças acima mencionadas. Exemplos de classes de agentes terapêuticos e alguns exemplos específicos que são úteis em combinação com um composto de acordo com a presente invenção são apresentados na Tabela 1,
Numa formulação, o medicamento inclui adicionalmente um opióide, em particular sendo o opióide referido alfentanilo, butorfanol, buprenorfina, dextromoramida, dezocina, dextroproproxifeno, codeína, dihidrocodeína, difenoxilato, etorfina, fentanilo, hidrocodona, hidromorfona, cetobemidona, loperamida, levorfanol, levometadona, meperidina, meptazinol, metadona, morfina, morfina-6-glucurónido, nalbufina, naloxona, oxicodona, oximorfina, pentazocina, petidina, piritramida, propoxilfeno, remifentanilo, sulfentanilo, tilidina ou tramadol. 20
Noutra formulação, o medicamento inclui adicionalmente um anti-depressivo.
Em particular, o anti-depressivo é (a) um inibidor selectivo da absorção de serotonina, sendo este em particular citaloprame, escitaloprame, fluoxetina, fulvoxamina, paroxetina ou sertralina; (b) um inibidor da reabsorção de nora-efedrina, em particular sendo este amitriptilina, desmetilo-amitriptilina, clomipramina, doxepina, imipramina, óxido de imipramina, trimipramina; adinazolame, amiltriptilinóxido, amoxapina, dotiepina, fluacizina, metapramina, perlapina, reboxetina, iprindolo, lofepramina, melitraceno, norclolipramina, noxiptilina, opipramol, pizotilina, propizepina, quinupramina, ou tianeptina; propizepina, quinupramina, reboxetina, ou tianeptina; (c) um inibidor selectivo da reabsorção de noradrenalina/norepinefrina, em particular sendo este atomoxetina, bupropiona, reboxetina ou tomoxetina; (d) um inibidor de dupla acção contra a reabsorção de serotonina/norepinefrina, em particular sendo este inibibor duloxetina, milnaciprano, mirtazapina, nefazodona ou venlafaxina; (e) um inibidor da oxidase de monoamina, em particular sendo este inibidor amiflamina, iproniazida, isocarboxazida, M-3-PPC (Draxis), moclobemida, pargilina, fenelzina, tranilocipromina ou vanoxerina; (f) um inibidor reversível da oxidase de tipo A de monoamina, em particular sendo este inibidor bazinaprina, befloxatona, brofaromina, cimoxatona ou clorgilina; (g) um tricíclico, em particular quando este tricíclico é amitriptilina, clomipramina, desipramina, doxepina, imipramina, maprotilina, nortriptilina, protriptilina ou trimipramina; (h) adinazolame, alaproclato, aminoptina, combinação de amitriptilina/clorodiazepóxido, atipamezol, azamianserina, bazinaprina, befuralina, bifemelano, binodalina, bipenamol, 21 21 ritanserina, sibutramina, tozalinona, trazodona, tomoxetina, roliprame, sulbutiamina, timoliberina, tofenacina, veraliprida, brofaromina, caroxazona, cericlamina, cianopramina, cimoxatona, citaloprame, clemeprol, clovoxamina, dazepinilo, deanol, demexiptilina, dibenzepina, dotiepina, droxidopa, enefexina, estazolame, etoperidona, femoxetina, fengabina, fezolamina, fluotraceno, idazoxano, indalpina, indeloxazina, iprindolo, levoprotilina, lítio, litoxetina; lofepramina, medifoxamina, metapramina, metralindolo, mianserina, milnaciprano, minaprina, mirtazapina, montirelina, nebracetam, nefopam, nialamida, nomifensina, norfluoxetina, orotirelina, oxaflozano, pinazepame, pirlindona, pizotilina, sercloremina, setiptilina, sulpirida, teniloxazina, tianeptina, tiflucarbina, tofisopame, toloxatona, viloxazina, viqualina, zimelidina ou orzometrapina.
Numa outra formulação do medicamento, este inclui um anti-epiléptico, em particular sendo este anti-epiléptico carbamazepina, flupirtina, gabapentina, lamotrigina, oxcarbazepina, feniloina, retigabina, topiramato ou valproato.
Numa outra formulação o medicamento inclui um medicamento anti-inflatamório não esteróide (ΑΙΝΕ), em particular sendo este ΑΙΝΕ acemetacina, aspirina, celecoxib, deracoxib, diclofenac, diflunisal, etenozamida, etofenamato, etoricoxib, fenoprofeno, ácido flufenâmico, flurbiprofeno, lonazolac, lornoxicame, ibuprofeno, indometacina, isoxicame, cebuzona, cetoprofeno, cetorolac, naproxeno, nabumetona, ácido niflúmico, sulindac, tolmetina, piroxicame, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, meloxicame, metamizol, mofebutazona, oxifenobutazona, parecoxib, fenidina, fenilobutazona, piroxicame, 22 propacetamol, propifenazona, rofecoxib, salicilamida, suprofeno, ácido tiaprofénico, tenoxicame, valdecoxib, 4-(4-ciclohexilo-2-metilo-oxazol-5-ilo)-2-fluoro-benzeno-sulfonamida, N-[2-(ciclohexilo-óxido)-4-nitrofenilo]metano-sulfonamida, 2-(3,4-difluorofenilo)-4-(3-hidróxido-3- metilo-butóxido)-5-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-3(2 H)-piridazinona, ou 2-(3,5-difluorofenilo)-3-[4-(metilo- sulfonilo) fenilo]-2-ciclopenteno-l-ona.
Outros agentes adicionais úteis em combinação com um composto da presente invenção, incluem anti-arrítmicos; antagonistas de canais de cálcio do tipo L sensíveis a DHP; antagonistas de canais de cálcio do tipo N sensíveis a omega-conotoxina (Ziconotida); antagonistas de canais de cálcio do tipo P/Q; antagonistas da cinase de adenosina, agonistas do receptor de adenosina Ai; antagonistas do receptor de adenosina A2a; agonistas do receptor de adenosina A3; inibidores da desaminase de adenosina; inibidores do transporte do nucleósido de adenosina; agonistas do receptor vanilóide VR1; antagonistas de substância P/NKi; agonistas do canabinóide CB1/CB2; antagonistas de GABA-B; agonistas do receptor de acetilcolina nicotínica (nAChRs); antagonistas de colecistocina B; bloqueadores de canal de sódio; um agente de abertura do canal de potássio KAtp, do canal de potássio Kvif4, do canal de potássio activado por Ca2+, do canal SK de potássio, do canal BK de potássio, do canal IK de potássio, ou do canal KCNQ2/3 de potássio (e. g. retigabina); agonistas de 5HTiA; antagonistas do muscarínico M3, agonistas do muscarínico Ml, agonista parcial/antagonista dos muscarínicos M2/M3; e anti-oxidantes. 23
Assim, uma das formulações do medicamento inclui adicionalmente um anti-ritmico, um antagonista GABA-B, ou um agonista do receptor α-2-adrenérgico.
Numa das formulações, o medicamento inclui adicionalmente um agonista de serotonina 5HTiB/d? em particular sendo o referido agonista eletriptano, frovatriptano, naratriptano, rizatriptano, sumatriptano, ou zolmitriptano.
Numa outra formulação do medicamento, este inclui um antagonista de N-metilo-D-aspartato, em particular sendo o referido antagonista amantadina; aptiganel; besonprodilo; budipina; conantocina G; delucemina; dexanabinol; dextrometorfano; dextropropoxifeno; felbamato; fluorofelbamato; gaciclidina; glicina; ipenoxazona; caitocefalina; cetamina; cetobemidona; lanicemina; licostinel; midafotel; memantina; D-metadona; D-morfina; milnaciprano; neramexano; orfenadrina; remacemida; sulfazocina; FPL-12,495 (metabolito da racemida); topiramato; ácido (aR)-a-amino-5-cloro-l-(fosfonometilo)-lH-benzimidazolo-2-propanóico; ácido 1-aminociclopentano-carboxílico; ácido [5-(aminometilo)-[[[(5S)-9-cloro-2,3,6, 7-tetrahidro-2,3-dioxo-lH-,5H-pirido[1,2,3-de]quinoxalino-5-ilo]acetilo]amino]fenóxido]-acético; ácido a-amino-2-(2-fosfono-etilo)-ciclohexanopropanóico; ácido a-amino-4-(fosfonometilo)-benzeno-acético; ácido (3E)—2— amino-4-(fosfonometilo)3-heptenóico; ácido 3—[ (1E)—2— carbóxi-2-fenileno-etilo]-4,6-dicloro-lH-indolo-2-carboxílico; sal de 8-cloro-2,3-dihidropiridazino[4,5-b]quinolina-1,4-diona-5-óxido com 2-hidróxido-N,N,N- trimetilo-etanamínio; N'-[2-cloro-5-(metilotio)fenilo]-N-metilo-N-[3-(metilotio)fenilo]-guanidina; Ν' - [2-cloro-5-(metilotio)fenilo]-N-metilo-N-[3-[(R)-metilo-sulfinilo]fenilo]-guanidina; ácido 6-cloro-2,3,4,9- 24 tetrahidro-9-metilo-2,3-dioxo-lH-indenol[1,2—to]pirazina-9-acético; (-)-6,7-dicloro-l,4-dihidro-5-[3-(metóxi-metilo)-5-(3-piridinilo)-4-H-l,2,4-triazol-4-ilo]-2,3-quinoxalinodiona; ácido 4,6-dicloro-3-[(E)-(2-oxo-l-fenilo-3-pirrolidinilideno)-metilo]-lH-indolo-2-carboxílico; ácido (2R, 4L)-rel-5,7-dicloro-l,2,3,4-tetrahidro-4-[[(fenilo-amino)carbonilo]amino]-2-quinolinocarboxílico; (3R,4S)-rel-3,4-dihidróxido-3-[4-hidróxido-4-(fenilometilo)-1-piperidinilo]-2H-l-benzopirano-4,7-diol; 2-[(2,3-dihidro-ΙΗ-indeno-l-ilo)amino]-acetamida; 1,4-dihidro-6-metilo-5-[(metilo-amino)-metilo]-7-nitro-2,3-quinoxalinodiona; ácido [2-(8,9)-dioxo-2,6-diazobiciclo-[5,2,0]non-1(7)-eno-2-ilo)etilo]-fosfórico; (2R,6S)-1,2,3,4,5,6-hexahidro-3- [(2 S)-2-metóxi-propilo]-6,11,ll-trimetilo-2,6-metano-3-benzazocina-9-ol; ácido 2-hidróxido-5- [[(pentafluorofenilo)metilo]amino]benzóico; 1- [2- (4- hidróxido-fenóxi)etilo]-4-[(4-metilofenilo)metilo]-4-piperidinol; 1-[4-(lH-imidazol-4-ilo)-3-butinilo]-4- (fenilo-metilo)-piperidina; 2-metilo-6-(fenilo-etinilo)-piridina; 3-(fosfonometilo)-L-fenilalanina; ou 3,6,7-tetrahidro-2,3-dioxo-N-fenilo-lH,5H-pirido[1,2,3-de]quinoxalino-5-acetamida.
Numa das formulações, o medicamento inclui adicionalmente um antagonista de colecistocinina B, ou um antagonista da substância P.
Numa formulação adicional, o medicamento inclui adicionalmente um composto anti-inflamatório, em particular sendo o referido composto aspirina, celecoxib, cortisona, deracoxib, diflunisal, etoricoxib, fenoprofeno, ibuprofeno, cetoprofeno, naproxeno, prednisolona, sulindac, tolmetin, piroxicame, ácido mefenâmico, meloxicame, fenilobutazona, rofecoxib, suprofen, valdecoxib, 4-(4-ciclohexilo-2- 25 metiloxazol-5-ilo)-2-fluorobenzeno-sulfonamida, N-[2- (ciclohexilóxido)-4-nitro-fenilo]metano-sulfonamida, 2-(3, 5-difluorofenilo)-3-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-2-ciclopenteno-l-ona.
Noutra formulação o medicamento inclui adicionalmente um antagonista de canal de cálcio do tipo L sensível a DHP, um antagonista de canal de cálcio do tipo N sensível a omega-conotoxina, um antagonista de canal de cálcio do tipo P/Q, um antagonista da cinase de adenosina, um inibidor da desaminase de adenosina, um inibidor do transporte do nucleósido de adenosina, um agonsita do receptor vanilóide VR1, um agonista do canabinóide CB1/CB2, um antagonista do receptor AMPA, um antagonista do receptor de cainato, um bloqueador do canal de sódio, um agonista do receptor de acetilcolina nicotínica, um agente de abertura do canal de potássio KAtp, um agente de abertura do canal de potássio Kvi,4, um agente de abertura do canal de potássio activado por Ca2+, um agente de abertura do canal de potássio SK, um agente de abertura do canal de potássio BK, um agente de abertura do canal de potássio IK, um agente de abertura do canal de potássio KCNQ2/3, um antagonista do muscarínico M3, um agonista do muscarínico Ml, um agonista parcial/antagonista do muscarínico M2/M ou um antioxidante.
Tabela 1 - Agentes terapêuticos úteis em combinação com os compostos de acordo com a presente invenção
Classe Exemplos Opióide Alfentanilo, butorfanol, buprenorfina, codeína, dextromoramida, dextropropoxifeno, dezocina, dihidrocodeína, difenoxilato, etorfina, fentanilo, hidrocodona, hidromorfona, cetobemidona, levorfanol, levometadona, metadona, meptazinol, morfina, morfina-6-glucurónido, nalbufina, naloxona, oxicodona, oximorfona, pentazocina, petidina, piritramida, remifentanilo, sulfentanilo, tilidina ou tramadol 26
Antidepressivo Citaloprame, escitaloprame, fluoxetina, fluvoxamina, (inibidor selectivo da paroxetina ou sertralina absorção serotonina) de 27
Classe (Continuação) Exemplos Antidepressivo (inibidor da reabsorção de norepinefrina) Amitriptilina, desmetilomitriptilina, clomipramina, doxepina, imipramina, óxido de imipramina, trimipramina; adinazolame, amiltriptilinóxido, amoxapina, desipramina, maprotilina, nortriptilina, protriptilina, aminoptina, butriptilina, demexiptilina, dibenzepina, dimetacrina, dotiepina, fluacizina, iprindolo, lofepramina, melitraceno, metapramina, norclolipramina, noxiptilina, opipramol, perlapina, pizotilina, propizepina, quinupramina, reboxetina ou tianeptina Antidepressivo (inibidor da reabsorção de noradrenalina/ norepinefrina) Atomoxetina, bupropiona, reboxetina ou tomoxetina Antidepressivo (inibidor de dupla acção na reabsorção de serotonina/nor epinefrina) Duloxetina, milnaciprano, mirtazapina, nefazodona, ou venlafaxina Antidepressivo (inibidor de oxidase de monoamina) Amiflamina, iproniazida, isocarboxazida, M-3-PPC (Draxis), moclobemida, pargilina, fenelzina, tranilocipromina ou vanoxerina Antidepressivo (inibidor reversível de oxidase de monoamina do tipo A) Bazinaprina, befloxatona, brofaromina, cimoxatona ou clorgilina Antidepressivo (tricíclico) Amitriptilina, clomipramina, desipramina, doxepina, imipramina, maprotilina, nortriptilina, protriptilina ou trimipramina Antidepressivo (outro) Adinazolame, alaproclato, aminaptina, combinação de amitriptilina/clorodiazepóxido, atipamezolo, azamianserina, bazinaprina, befuralina, bifemelano, binodalina, bipenamol, brofaromina, caroxazona, cericlamina, cianopramina, cimotaxona, citaloprame, clemeprol, clovoxamina, dazepinilo, deanol, demexiptilina, dibenzepina, dotiepina, droxidopa, enefexina, estazolame, etoperidona, femoxetina, fengabina, fezolamina, fluotraceno, idazoxano, indalpina, indeloxazina, iprindolo, levoprotilina, lítio, litoxetina; lofepramina, medifoxamina, metapramina, metralindolo, mianserina, milnaciprano, minaprina, mirtazapina, montirelina, nebracetame, nefopame, nialamida, nomifensina, norfluoxetina, orotirelina, oxaflozano, pinazepame, pirlindona, pizotilina, ritanserina, roliprame, sercloremina, setiptilina, sibutriamina, sulbutiamina, sulpirida, teniloxazina, tozalinona, timoliberina, tianeptina, triflucarbina, trazodona, tofenacina, tofisopame, toloxatona, tomoxetina, veraliprida, viloxazina, viqualina, zimelidina ou zometapina 28
Classe (Continuação) Exemplos Anti- epiléptico Carbamazepina, flupirtina, gabapentina, lamotrigina, oxcarbazepina, feniloína, retigabina, topiramato ou valproato medicamento anti- inflamatório não esteróide (ΑΙΝΕ) Acemetacina, aspirina, celecoxib, deracoxib, diclofenac, diflunisal, etenozamida, etofenamato, etoricoxib, fenoprofeno, ácido flufenâmico, flurbiprofeno, lonazolac, lornoxicame, ibuprofeno, indometacina, isoxicame, cebuzona, cetoprofeno, cetorolac, naproxeno, nabumetona, ácido niflúmico, sulindac, tolmetina, piroxicame, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, meloxicame, metamizol, mofebutazona, oxifenobutazona, parecoxib, fenidina, fenilobutazona, piroxicame, propacetamol, propifenazona, rofecoxib, saticilamida, suprofeno, ácido tiaprofénico, tenoxicame, valdecoxib, 4-(4-ciclohexilo-2-metiloxazol-5-ilo)-2-fluorobenzeno-sulfonamida, N- [2-(ciclohexilóxido)-4-nitrofenilo]metano-sulfonamida, 2-(3,4-difluorofenilo)-4-(3-hidróxid-3-metilobutóxido)-5-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-3-(2H)-piridazinona, ou 2-(3,5-difluorofenilo)-2-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-2-ciclopenteno-l-ona Agonista 5HT1B/1D Eletriptano, frovatriptano, naratriptano, rizatriptano, sumatriptano ou zolmitriptano Compostos anti- inflamatórios Aspirina, celecoxib, cortisona, deracoxib, diflunisal, etoricoxib, fenoprofeno, ibuprofeno, cetoprofeno, naproxeno, prednisolona, sulindac, tolmetina, piroxicame, ácido mefenâmico, meloxicame, fenilobutazona, rofecoxib, suprofeno, valdecoxib, 4-(4-ciclohexilo-2-metiloxazol-5-ilo)-2-fluorobenzeno-sulfonamida, N- [2- (ciclohexilóxido)-4-nitrofenilo]metano-sulfonamida, 2- (3,4 — difluorofenilo)-4-(3-hidróxido-3-metilobutóxido)-5-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-3(2H)-piridazinona, ou 2-(3,5-difluorofenilo)-3-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-2-ciclopenteno-l-ona 29 (Continuação)
Classe Exemplos Antagonista N- metilo-D- aspartato Amantadina; aptiganel; besonprodilo; budipina; conantocina G; delucemina; dexanabinol; dextrometorfano; dextropropoxifeno; felbamato; fluorofelbamato; gaciclidina; glicina; ipenoxazona; caitocefalina; cetamina; cetobemidona; lanicemina; licostinel; midafotel; memantina; D-metadona; D-morfina; milnacipran; neramexano; orfenadrina; remacemida; sulfazocina; FPL-12,495 (metabolito da racemida) ; topiramato; ácido (cxR)-oí-amino-5-cloro-l-(fosfonometilo)-lH-benzimidazolo-2-propanóico; ácido 1-aminociclopentano-carboxilico; ácido [5-(aminometilo)-2-[[[(5S)-9-cloro-2,3,6,7-tetrahidro-2,3-dioxo-lH-,5H-pirido[1,2,3-de]quinoxalino-5-ilo]acetilo]amino]fenóxilo] acético; ácido a-amino-2-(2-fosfono-etilo)-ciclohexanopropanóico; ácido a-amino-4-(fosfonometilo)-benzeno-acético; ácido 1-[ (1E)-2-carboxilo-2-fenilo-etenilo]-4,6-dicloro-lH-indolo-2-carboxílico; sal de óxido-5 de 8-cloro-2,3-dihidropiridazino[4,5-b]quinolino-1,4-diona com 2-hidróxilo-N,N,N-trimetilo-etano-amínio; N'-[2-cloro-5-(metilotio)fenilo]-N-metilo-N-[3- (metilotio)feniloguanidina; ácido 6-cloro-2,3,4,9-tetrahidro-9-metilo-2,3-dioxo-lH-indeno[1,2— b]pirazina-9-acético; ácido 7-clorotioquinureninico; ácido (3L,4aR,6L,8aR)-decahidro-β-(fosfonometilo)-3-isoquinolinocarboxílico; (-) -6,7-dicloro-l,4-dihidro-5-[3-(metóximetilo)-5-(3-piridinilo)-4-H-l,2,4-triazol-4-ilo]-2,3-quinoxalinediona; ácido 4,6-dicloro-3-[ (E)- (2-oxo-l-fenilo-3-pirrolidinilideno)metilo]-lH-indolo-2-carboxílico; ácido (2 R,4L)-rel-5,7-dicloro-l,2,3,4-tetrahidro-4-[ [ (fenilo-amino)carbonilo]amino]-2- quinolinocarboxílico; (3R,4L)-rel-3,4-dihidro-3-[4-hidróxilo-4-(fenilometilo)-1-piperidinilo-]-2H-1-benzopirano-4,7-diol; 2-[(2,3-dihidro-lH-indeno-2-ilo)amino]-acetamida; 1,4-dihidro-6-metilo-5-[(metilo-amino)metilo]-7-nitro-2,3-quinoxalinediona; ácido [2-(8,9-dioxo-2,6-diazobiciclo[5,2,0]non-1(7)-en-2-ilo)etilo]-fosfónico; (2R, 6L)-1,2,3,4,5,6-hexahidro-3-[(2L)-2-metóxi-propilo]-6,11,ll-trimetilo-2,6-metano-3-benzazocina-9-ol; ácido 2-hidróxilo-5-[[(pentafluorofenilo)metilo]amino]-benzóico; 1-[2- (4-hidróxilo-fenóxi)etilo]-4-[(4-metilofenilo)metilo]-4-piperidinol; 1-[4-(lH-imidazol-4-ilo)-3-butinilo]-4-(fenilometilo)-piperidina; 2-metilo-6-(fenilo-etinilo)piridina; 3-(fosfonometilo)-L-fenilalanina; ou 3,6,7-tetrahidro-2,3-dioxo-N-fenilo-lH,5H-pirido[1,2,3-de]quinoxalina-5-acetamida
Podem existir centros quirais ou assimétricos em qualquer dos compostos da presente invenção. A presente invenção comtempla os vários estereoisómeros e misturas destes. Estereoisómeros individuais de compostos de acordo com a presente invenção são preparados sinteticamente a partir de 30 reagentes disponíveis comercialmente, os quais contêm os centros quirais ou assimétricos, ou pela preparação de misturas de compostos enantioméricos seguida de resolução, processo bem conhecido de alguém com conhecimentos na área. Estes métodos de resolução são exemplificados por (1) ligação de uma mistura racémica de enantiómeros, designados (+/-), a um adjuvante quiral, separação dos diastereómeros resultantes através de recristalização ou cromatografia e libertação do produto opticamente puro a partir do adjuvante ou (2) separação directa da mistura de enantiómeros ópticos em colunas quirais de cromatografia. Os enantiómeros são aqui designados pelos símbolos &quot;R&quot;, ou &quot;L&quot;, dependendo da configuração dos substituintes em torno do átomo de carbono quiral. Alternativamente, os enantiómeros são designados por (+) ou (-), dependendo do sentido em que uma solução do enantiómero induz a rotação do plano de polarização da luz, respectivamente a favor ou contra o sentido dos ponteiros do relógio.
Isómeros geométricos podem também existir nos compostos da presente invenção. A presente invenção contempla os vários isómeros geométricos e misturas destes resultando do rearranjo dos substituintes em torno da ligação dupla carbono-carbono e designa tais isómeros como sendo da configuração Z ou E, em que o termo &quot;Z&quot; representa substituintes localizados do mesmo lado da ligação dupla carbono-carbono e o termo &quot;E&quot; representa substituintes em lados opostos da ligação dupla carbono-carbono. É também reconhecido que para estruturas nas quais são possíveis formas tautoméricas, a descrição de uma forma tautomérica é equivalente à descrição de ambas, a menos que especificado em contrário. Por exemplo, estruturas de amidina de fórmula -C(=NRq)NHRt e -C (NHRq)=NHRt, nas quais RT e RQ são 31 diferentes, são estruturas tautoméricas diferentes e a descrição de uma inclui inerentemente a outra. É entendido que substituintes e padrões de substituição dos compostos da presente invenção podem ser escolhidos por alguém com conhecimentos normais na área, para dar origem a compostos que são quimicamente estáveis e que possam ser sintetizados por técnicas conhecidas na área, bem como através dos métodos apresentados em seguida, a partir de reagentes disponíveis. Se um substituinte é ele próprio substituído com mais que um grupo, é entendido que estes grupos múltiplos podem estar ligados ao mesmo carbono, ou a carbonos diferentes, desde que resultem numa estrutura estável.
Outras caracteristicas e vantagens da invenção tornar-se-ão aparentes a partir da descrição seguinte e das reivindicações.
Definições
Os termos &quot;acilo&quot; ou &quot;alcanoilo&quot;, como usados em alternância aqui, representam um grupo alquilo, como definido aqui, ou um hidrogénio ligado ao grupo molecular parental através de um grupo carbonilo, como definido aqui, e é exemplificado por formilo, acetilo, propionilo, butanoilo e semelhantes. Exemplares de grupos acilo não substituídos incluem 2 a 7 carbonos.
Os termos &quot;Cx-y alquilo-arilo&quot; ou &quot;Cx-y alquileno-arilo&quot;, como usados aqui, representam um substituinte quimico de fórmula -RR', no qual R é um grupo alquileno de x a y átomos de carbono e R' é um grupo arilo, como definido noutro local do presente documento. De forma semelhante, com os termos &quot;Cx-y alquilo-hetero-arilo&quot; e &quot;Cx-y 32 alquileno-hetero-arilo&quot; é entendido um substituinte químico de fórmula -RR'', no qual R é um grupo alquileno de x a y átomos de carbono e R'' é um grupo heteroarilo como definido noutro local do presente documento. Outros grupos precedidos pelo prefixo &quot;alquilo&quot; ou &quot;alquileno&quot; são definidos da mesma forma. Exemplares de grupos alquileno-arilo não substituídos têm 7 a 16 carbonos. 0 termo &quot;alquileno-ciclo-alquilo&quot; representa um grupo ciclo-alquilo ligado ao grupo molecular que lhe deu origem, atráves de um grupo alquileno. 0 termo &quot;alquenilo&quot;, como usado neste documento, representa grupos monovalentes de cadeia simples ou ramificada, a menos que especif icamente referido, com 2 a 6 carbonos contendo uma ou mais ligações duplas carbono-carbono e é exemplificado por etenilo-, 1-propenilo-, 2-propenilo-, 2-metilo-, 1-propenilo-, 1-butenilo-, 2-butenilo, e semelhantes. 0 termo &quot;alquilo-heterociclilo&quot; representa um grupo heterocíclico ligado à molécula que lhe deu origem através de um grupo alquileno. Exemplos de grupos alquiloheterociclilo não substituídos têm de 3 a 14 carbonos. 0 termo &quot;óxido de alquilo&quot; representa um substituinte químico de fórmula -0R, no qual R é um grupo alquilo de 1 a 6 carbonos, a menos que especificado em contrário. 0 termo &quot;alquilóxi-alquilo&quot; representa um grupo alquilo, o qual tem um grupo alquilóxido como substituinte. Exemplos de grupos alquilóxi-alquilo não substituídos incluem 2 a 12 carbonos. 33
Os termos &quot;alquilo&quot; e o prefixo &quot;alqui&quot;, como usados aqui, incluem grupos saturados tanto de cadeia simples como de cadeia ramificada, de 1 a 6 átomos de carbono, a menos que especificamente referido em contrário. Exemplos de grupos alquilo são metilo, etilo, n- e iso-propilo, n-, sec-, iso-e tert-butilo, neopentilo, e semelhantes, e podem ser opcionalmente substituídos com um, dois, três, ou no caso de grupos com dois ou mais átomos de carbono, quatro substituintes escolhidos independentemente do grupo constituído por: (1) óxido de alquilo de um a seis carbonos; (2) alquilo-sulfinilo de um a 6 átomos de carbono; (3) alquilo-sulfonilo de um a seis átomos de carbono; (4) amino; (5) arilo; (6) arilo-óxido de alquilo; (7) ariloílo; (8) azido; (9) cardoxaldeído; (10) cicloalquilo de três a oito átomos de carbono; (11) halogeneto; (12) heterociclilo; (13) (heterociclo)óxido; (14) (heterociclo)oílo; (15) hidróxilo, (16) amino N-protegido; (17) nitro; (18) oxo; (19) espiro-alquilo com três a oito átomos de carbono; (20) óxido de tioalquilo de um a seis átomos de carbono; (21) tiol; (22) -C02RA, no qual Ra é escolhido de um grupo constituído por (a) alquilo, (b) arilo e (c) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (23) -C (O) NRbRc, no qual RB e Rc são escolhidas, independentemente, a partir do grupo formado por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo e (d) alquileno-arilo, nos quais o grupo alquileno tem um a seis átomos de carbono; (24) -SC^R0, no qual RD é escolhido a partir de um grupo constituído por (a) alquilo, (b) arilo e (c) alquileno-arilo, no qual o grupo de alquileno tem um a seis átomos de carbono; (25) -S02NRENRF, no qual RE e RF são escolhidos, independentemente, do grupo constituído por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo e (d) alquileno-arilo, 34 nos quais o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; e (26) -NRGRH, no qual cada RG e RH são escolhidos independentemente, a partir do grupo constituído por (a) hidrogénio; (b) um grupo protector de N; (c) alquilo de um a seis átomos de carbono; (d) alquenilo de dois a seis átomos de carbono; (f) arilo; (g) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (h) cicloalquilo de três a oito átomos de carbono; e (i) alquileno-ciclo-alquilo, no qual o grupo cicloalquilo tem de três a oito átomos de carbono, e o grupo alquileno tem de um a dez átomos de carbono, como a limitação de que não pode haver dois grupos ligados ao átomo de azoto através de um grupo carbonilo ou sulfonilo. 0 termo &quot;alquileno&quot;, como usado neste documento, representa um grupo hidrocarboneto divalente saturado derivado pela remoção de dois átomos de hidrogénio de um hidrocarboneto saturado de cadeia simples ou ramificada, e é exemplificado por metileno, etileno, isopropileno e semelhantes. 0 termo &quot;alquilo-sulfinilo&quot; como usado neste documento, representa um grupo alquilo ligado ao grupo molecular que lhe deu origem através de um grupo —S(0)—. Exemplares de grupos alquilo-sulfinilo não substituídos têm de 1 a 6 carbonos. 0 termo &quot;alquilo-sulfonilo&quot; como usado neste documento, representa um grupo alquilo ligado ao grupo molecular que lhe deu origem através de um grupo -SO2-. Exemplares de grupos alquilo-sulfonilo não substituídos têm de 1 a 6 carbonos. 0 termo &quot;alquileno-sulfinilo-alquilo&quot;, como usado neste documento, representa um grupo alquilo, como definido aqui, 35 tendo como substituinte um grupo alquileno-sulfinilo. Exemplares de grupos alquileno-sulfinilo-alquilo não substituídos têm de 2 a 12 carbonos. 0 termo &quot;alquileno-sulfonilo-alquilo&quot;, como usado neste documento, representa um grupo alquilo, como definido aqui, tendo como substituinte um grupo alquileno-sulfonilo. Exemplares de grupos alquileno-sulfonilo-alquilo não substituídos têm de 2 a 12 carbonos. O termo &quot;alquinilo&quot; como usado neste documento, representa grupos monovalentes de cadeia linear ou ramificada, com dois a seis átomos de carbono, contendo uma ligação tripla carbono-carbono, e são exemplificados por etinilo, 1-propinilo e semelhantes. 0 termo &quot;amidina&quot;, como usado neste documento, representa um grupo -C(=NH)NH2, 0 termo &quot;amino&quot; como usado neste documento, representa um grupo -NH2, 0 termo &quot;amino-alquilo&quot;, como usado neste documento, representa um grupo alquilo, como aqui definido, tendo um grupo amino como substituinte. 0 termo &quot;arilo&quot;, como usado neste documento, representa um sistema carbocíclico aromático mono- ou biciclico, contendo um ou dois anéis aromáticos e é exemplificado por fenilo, naftilo, 1,2-dihidronaftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, fluorenilo, indanilo, indenilo, e semelhantes, e pode ser opcionalmente substituído por um, dois, três, quatro ou cinco substituintes escolhidos independentemente a partir do grupo constituído por: (1) alcanoílo de um a seis átomos 36 de carbono; (2) alquilo de um a seis átomos de carbono; (3) óxido de alquilo de um a seis átomos de carbono; (4) alquilo de óxido de alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente de um a seis átomos de carbono; (5) alquilo-sulfinilo de um a seis átomos de carbono; (6) alquileno-sulfinilo-alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente um a seis carbonos; (7) alquilo-sulfonilo de um a seis átomos de carbono; (8) alquileno-sulfonilo-alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente de um a seis átomos de carbono; (9) arilo; (10) amino; (11) amino-alquilo de um a seis átomos de carbono; (12) heteroarilo; (13) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (14) ariloilo; (15) azido; (16) azido-alquilo de um a seis átomos de carbono; (17) carboxaldeído; (18) alquilo(carboxaldeido), no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (19) cicloalquilo de três a oito átomos de carbono; (20) alquileno-ciclo-alquilo, no qual o grupo cicloalquilo tem de três a oito átomos de carbono e o grupo alquileno tem de um a dez átomos de carbono; (21) halogeneto; (22) halogeneto de alquilo, com um a seis átomos de carbono; (23) heterociclilo; (24) óxido de heterociclilo; (25) heterocicliloílo; (26) hidróxido; (27) hidróxi-alquilo com um a seis átomos de carbono; (28) nitro; (29) nitro-alquilo de um a seis átomos de carbono; (30) amino com o grupo N protegido; (31) amino-alquilo com o grupo N protegico; (32) oxo; (33) tioalquilenóxido com um a seis átomos de carbono; (34) tioalquilenóxido-alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente um a seis átomos de carbono; (35) - (CH2) qC02RA, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e RA é escolhido do grupo constituído por (a) alquilo, (b) arilo, (c) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (36) 37 - (0¾) qC0NRBRc, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual RB e Rc são escolhidos independentemente de um grupo composto por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo, e (d) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (37) - (CH2) qS02RD, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual RD é escolhido do grupo constituído por (a) alquilo, (b) arilo, e (c) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (38) - (CH2)qS02NRERF, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual cada um de RE e Rf é, independentemente escolhido a partir do grupo constituído por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo, e (d) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (39) - (CH2) qNRGRH, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual cada um de RG e Rh é escolhido, independentemente a partir do grupo constituído por (a) hidrogénio; (b) um grupo protector de N; (c) um alquilo de um a seis átomos de carbono; (d) um alquenilo, de dois a seis átomos de carbono; (e) um alquinilo de dois a seis átomos de carbono; (f) arilo; (g) alquileno-arilo, no qual 0 grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (h) um cicloalquilo de três a oito átomos de carbono; e (i) um alquileno-ciclo-alquilo, no qual o grupo ciclo-alquilo tem de três a oito átomos de carbono, e o grupo de alquileno tem de um a dez átomos de carbono, com a limitação de que não pode haver dois grupos ligados ao átomo de azoto através de um grupo carbonilo ou grupo sulfonilo; (40) tiol; (41) perfluoroalquilo; (42) óxido de arilo; (44) óxido de cicloalquilo; (45) óxido de alquilocicloalquilo; e (46) óxido de alquileno-arilo. O termo &quot;óxido de alquileno-arilo&quot; como usado neste documento, representa um grupo alquileno-arilo ligado ao grupo molecular que lhe deu origem através de um átomo de 38 oxigénio. Exemplos de grupos de óxido de alquileno-arilo não substituídos têm de 7 a 16 átomos de carbono. 0 termo &quot;óxido de arilo&quot; representa um substituinte químico de fórmula -0R', no qual R' é um grupo arilo com 6 a 18 átomos de carbono, a menos que especificado em contrário. 0 termo &quot;ariloílo&quot; e &quot;aroílo&quot; como usados em alternância no presente documento, representam um grupo arilo que está ligado através de um grupo carbonilo ao grupo molecular que lhe deu origem. Exemplos de grupos ariloílo não substituídos têm 7 a 11 átomos de carbono. 0 termo &quot;azido&quot; representa um grupo N3, o qual pode ser representado como N=N=N. 0 termo &quot;azido-alquilo&quot; representa um grupo azida ligado através de um grupo alquilo ao grupo molecular que lhe deu origem. 0 termo &quot;heterociclilo com uma ligação intercalada&quot; representa um composto heterocíclico, como descrito aqui, tendo uma estrutura multicíclica com ligações intercalares de ponte, na qual um ou mais átomos de carbono e/ou hetero-átomos funcionam como ponte entre dois membros não adjacentes de um anel monocíclico. Um exemplo de um grupo heterocíclico com uma ligação intercalar é o grupo quinuclidinilo. 0 termo &quot;alquilo-heterociclilo com ligação intercalar&quot; representa um composto heterocíclico com uma ligação intercalar, como o descrito aqui, o qual está ligado ao grupo lhe deu origem através de um grupo alquileno. 39 0 termo &quot;carbonilo&quot;, como usado aqui, representa um grupo C(0), o qual pode também ser representado por C=0. 0 termo &quot;carboxialdeído&quot; representa um grupo CHO. 0 termo &quot;alquilo-carboxialdeído&quot; representa um grupo carboxialdeído ligado ao composto que lhe deu origem através de um grupo alquileno. 0 termo &quot;ciclo-alquilo&quot;, como usado neste documento representa um grupo hidrocarboneto cíclico monovalente não aromático, saturado ou insaturado com três a oito átomos de carbono, a menos que especificamente mencionado, e é exemplificado por ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, biciclo[2,2,1]heptilo e semelhantes. Os grupos ciclo-alquilo desta invenção podem ter opcionalmente como substituintes (1) alcanoílo com um a seis átomos de carbono; (2) alquilo com um a seis átomos de carbono; (3) óxido de alquilo com um a seis átomos de carbono; (4) alquilo de óxido de alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente um a seis átomos de carbono; (5) alquilo-sulfinilo com um a seis átomos de carbono; (6) alquilo-sulfinilo-alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente um a seis carbonos; (7) alquilo-sulfonilo de um a seis átomos de carbono; (8) alquileno-sulfonilo-alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente de um a seis átomos de carbono; (9) arilo; (10) amino; (11) amino- alquilo de um a seis átomos de carbono; (12) heteroarilo; (13) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (14) ariloílo; (15) azido; (16) azido-alquilo de um a seis átomos de carbono; (17) carboxaldeído; (18) alquilo(carboxaldeído), no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (19) 40 cicloalquilo de três a oito átomos de carbono; (20) alquileno-ciclo-alquilo, no qual o grupo cicloalquilo tem de três a oito átomos de carbono e o grupo alquileno tem de um a dez átomos de carbono; (21) halogeneto; (22) halogeneto de alquilo, com um a seis átomos de carbono; (23) heterociclilo; (24) óxido de heterociclilo; (25) heterocicliloílo; (26) hidróxido; (27) hidróxi-alquilo com um a seis átomos de carbono; (28) nitro; (29) nitro-alquilo de um a seis átomos de carbono; (30) amino com o grupo N protegido; (31) amino-alquilo com o grupo N protegido; (32) oxo; (33) tioalquilenóxido com um a seis átomos de carbono; (34) tioalquilenóxido alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente um a seis átomos de carbono; (35) -(CH2) qC02RA, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e RA é escolhido do grupo constituído por (a) alquilo, (b) arilo, (c) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (36) - (CH2) qCONRBRc, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual RB e Rc são escolhidos independentemente de um grupo composto por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo, e (d) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (37) - (CH2) qSC&gt;2RD, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual R° é escolhido do grupo constituído por (a) alquilo, (b) arilo, e (c) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (38) - (CH2)qS02NRERF, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual cada um de RE e Rf é, independentemente escolhido a partir do grupo constituído por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo, e (d) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (39) - (CH2) qNRGRH, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual cada um de Rg e Rh é escolhido, independentemente a partir do grupo constituído por (a) hidrogénio; (b) um grupo protector de 41 N; (c) um alquilo de um a seis átomos de carbono; (d) um alquenilo, de dois a seis átomos de carbono; (e) um alquinilo de dois a seis átomos de carbono; (f) arilo; (g) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (h) um cicloalquilo de três a oito átomos de carbono; e (i) um alquileno-ciclo-alquilo, no qual o grupo ciclo-alquilo tem de três a oito átomos de carbono, e o grupo de alquileno tem de um a dez átomos de carbono, com a limitação de que não pode haver dois grupos ligados ao átomo de azoto através de um grupo carbonilo ou grupo sulfonilo; (40) tiol; (41) perfluoroalquilo; (42) óxido de arilo; (44) óxido de cicloalquilo; (45) óxido de alquilocicloalquilo; e (46) óxido de alquileno-arilo.
Os termos &quot;óxido de ciclo-alquilo&quot; ou &quot;ciclo-alquilóxido&quot;, como usados aqui em alternância, representam um grupo cicloalquilo, como aqui definido, ligado através de um átomo de oxigénio ao grupo molecular que lhe deu origem. Exemplos de óxidos de ciclo-alquilo não substituídos têm de 3 a 8 átomos de carbono. O termo &quot;uma quantidade eficaz&quot; ou &quot;uma quantidade suficiente&quot; de um agente, como usado neste documento, indica que essa quantidade é suficiente para produzir efeitos benéficos ou os resultados desejados, como em resultados clínicos, e, como tal, &quot;uma quantidade eficaz&quot; depende do contexto no qual este é aplicado. Por exemplo, no contexto da administração do agente o qual é um inibidor de NOS, uma quantidade eficaz de um agente é, por exemplo uma quantidade suficiente para atingir a redução da actividade de NOS quando comparado com a resposta obtida sem a administração do agente. 42
Os termos &quot;halida&quot; ou &quot;halogeneto&quot; ou &quot;Hal&quot; ou &quot;halo&quot;, como usado neste documento, representam brometo, cloreto, iodeto ou fluoreto. 0 termo &quot;hetero-arilo&quot;, como usado neste documento, representa um subconjunto de compostos heterocíclicos, como definido aqui, os quais são aromáticos: e. g., contêm 4n+2 de electrões pi incluídos no sistema de anel mono- ou multicíclico. pirimidilo,
Os termos &quot;heterocíclicos&quot; ou &quot;heterociclilos&quot;, aqui usados em alternância representam anéis de 5, 6, ou 7 membros, a menos que especificado em contrário, contendo um, dois, três ou quatro heteroátomos independentemente seleccionados do grupo constituído por azoto, oxigénio e enxofre. O anel de 5 membros exibe de zero a duas ligações duplas e os aneis de 6 e 7 membros exibem entre zero e três ligações duplas. 0 termo &quot;heterociclo&quot; também inclui grupos bicíclicos, tricíclicos e tetracíclicos, nos quais qualquer um dos grupos heterocíclicos referidos acima está ligado a um, dois ou três aneis, independentemente escolhidos a partir do grupo formado por um anel arilo, um anel ciclohexano, um anel ciclopentano, um anel ciclopenteno, e outro anel monocíclico heterocíclico como indolilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrahidroquinolilo, benzofurilo, benzotienilo e semelhantes. Heterocíclicos incluem pirrolilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridilo, piperidinilo, homopiperidinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, isoindazoílo, triazolilo, tetrazolilo, oxadiazolilo, uricilo, tiadiazolilo, 43 tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotienilo, dihidrotienilo, dihidroindolilo, tetrahidroquinolilo, tetrahidroisoquinolilo, piranilo, dihidropiranilo, ditiazolilo, benzofuranilo, benzotienilo e semelhantes. Incluídos nos grupos heterocíclicos estão também compostos de fórmula
nos quais F' é escolhido de um grupo consistindo em -CH2-, -CH2O- e -0-, e G' é escolhido de um grupo consistindo em -C(0)- e -C (R') (R' ') ) v-, no qual cada um dos R' e R'' é, independentemente, escolhido de um grupo constituído por hidrogénio ou alquilo com um a quatro átomos de carbono, e v é um a três e inclui grupos como 1,3-benzodioxolilo, 1,4-benzodioxanilo e semelhantes. Qualquer um dos grupos heterocíclicos aqui mencionados pode ser opcionalmente substituído com um, dois, três, quatro ou cinco substituintes, independentemente escolhido de um grupo constituído por: (1) alcanoílo de um a seis átomos de carbono; (2) alquilo de um a seis átomos de carbono; (3) óxido de alquileno de um a seis átmos de carbono; (4) alquileno-óxido de alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente um a seis átomos de carbono; (5) sulfinilo de alquileno de um a seis átomos de carbono; (6) alquileno-sulfinilo de alquilo, no qual ambos os grupos, alquilo e alquileno, têm independentemente de um a seis átomos de carbono; (7) sulfonilo de alquileno, com um a seis átomos de carbono; (8) alquileno-sulfinilo de alquilo, no qual tanto os grupos alquilo e alquileno têm independentemente 1 a 6 átomos de carbono; (9) arilo; (10) amino; (11) amino-alquilo de um a seis átomos de carbono; (12) heteroarilo; (13) alquileno-arilo, no qual o grupo 44 alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (14) ariloílo; (15) azido; (16) azido-alquilo com um a seis átomos de carbono; (17) carboxaldeído; (18) alquileno(carboxaldeido), no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (19) ciclo-alquileno, de três a oito átomos de carbono; (20) alquileno-cicloalquilo, no qual o grupo cicloalquilo tem de três a oito átomos de carbono e o grupo de alquileno tem de um a dez átomos de carbono; (21) halogeneto; (22) halogeno-alquileno, de um a seis átomos de carbono; (23) heterociclilo; (24) heterociclilo)óxido; (25) (heterociclilo)oilo; (26) hidróxido; (27) hidróxialquilo de um a seis átmomos de carbono; (28) nitro; (29) nitroalquilo, de um a seis átomos de carbono; (32) oxo; (33) óxido de tioalquileno, com um a seis átomos de carbono; (30) amino N-protegida; (31) aminoalquileno N-protegido, no qual o grupo alquileno tem um a seis átomos de carbono; (32) oxo; (32) tioalquilenóxido de um a seis átomos de carbono; (34) óxido de tioalquileno alquilo, no qual os grupos alquilo e alquileno têm independentemente um a seis átomos de carbono; (35) - (CH2) qC02RA, no qual q é um número inteiro de zero a quatro, e RA é escolhido a partir de um grupo constituído por (a) alquilo, (b) arilo e (c) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem um a seis átomos de carbono; (36) - (CH2) qCONRBRc, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual RB e Rc são independentemente escolhidos do grupo constituído por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo e (d) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem um a seis átomos de carbono; (37) - (CH2) qS02RD, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual RD é escolhido de um grupo formado por (a) alquilo, (b) arilo, e (c) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (38) - (CH2) qS02NRERF, no qual q é um número inteiro de zero a 45 quatro e no qual RE e RF são, independentemente escolhidos a partir do grupo formado por (a) hidrogénio, (b) alquilo, (c) arilo ou (d) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (39) - (CH2) qNRGRH, no qual q é um número inteiro de zero a quatro e no qual RG e Rh são, independentemente seleccionados a partir do grupo formado por (a) hidrogénio; (b) um grupo N-protector; (c) alquilo de um a seis átomos de carabono; (d) alquenilo de dois a seis átomos de carbono; (e) alquinilo de dois a seis átomos de carbono; (f) arilo; (g) alquileno-arilo, no qual o grupo alquileno tem de um a seis átomos de carbono; (h) cicloalquilo de três a oito átomos de carbono; e (i) alquileno-cicloalquilo, no qual o grupo cicloalquilo tem três a oito átomos de carbono, e o grupo alquileno de um a dez átomos de carbono, com a condição de que não haja dois grupos ligados a um átomo de azoto através de um grupo carbonilo ou sulfonilo; (40) tiol; (41) perfluoro-alquilo; (42) perfluoroalquilenóxido; (43) arilóxido; (44) óxido de cicloalquileno; (45) óxido de cicloalquilo alquileno; e (46) arilo-alquilenóxido.
Os termos &quot;óxido de heterociclilo&quot; e &quot;óxido de (heterociclico)&quot;, como usados aqui em alternativa, representam um grupo heterociclico, como ai definido, ligado através de um grupo de oxigénio ao grupo molecular que lhe deu origem.
Os termos &quot;heterocicloílo&quot; e &quot;(heterociclico)oilo&quot;, como usados aqui em alternativa, representam um grupo heterociclico, como ai definido, ligado através de um grupo de carbonilo ao grupo molecular que lhe deu origem. O termo &quot;hidróxido&quot; ou &quot;hidróxilo&quot;, como usados aqui, representam um grupo -OH. 46 0 termo &quot;hidroxi-alquilo&quot;, como usado aqui, representa um grupo alquilo, como o ai definido, substituído por um a três grupos hidróxido, com a condição de que não mais que um grupo hidróxido pode estar ligado a um único átomo de carbono do grupo alquilo e é exemplificado por hidróxi-metilo, dihidróxi-propilo e semelhantes.
Os termos &quot;inibe&quot; ou &quot;suprime&quot; ou &quot;reduz&quot;, no que diz respeito a função ou actividade, como actividade de NOS, significa reduzir a função ou actividade quando comparado com as mesmas condições, com excepção de um parâmetro ou condição de interesse, ou alternativamente, quando comparado com outra condição. 0 termo &quot;amino N-protegida&quot;, como usado neste documento, refere-se a um grupo amino, como aí definido, ao qual é ligado um grupo protector de N ou protector de azoto, como aí definido.
Os termos &quot;grupo protector de N&quot; e &quot;grupo protector de azoto&quot; como usados no presente documento, representam aqueles grupos usados para proteger os grupos amino de reacções indesejáveis durante os processos sintéticos. Grupos protectores de N usados normalmente são apresentados em Greene, &quot;Protective Groups in Organic Synthesis&quot;, 3a Edição (John Wiley &amp; Sons, Nova Iorque, 1999), os quais são incorporados neste documento enquanto referência. Grupos protectores de N incluem grupos acilo, aroílo, ou carbamilo, como formilo, acetilo, propionilo, pivaloílo, t-butilo-acetilo, 2-cloro-acetilo, 2-bromo-acetilo, trifluoro-acetilo; tricloro-acetilo, ftalilo, o-nitrofenóxido-acetilo, α-clorobutirilo, benzoílo, 4-cloro-benzoílo, 4-bromobenzoílo, 4-nitrobenzoílo e auxiliares quirais como aminoácidos D, L ou D, L protegidos 47 ou desprotegidos, como alanina, leucina, fenilalanina e semelhantes; sulfonilo como benzeno-sulfonilo, p-tolueno-sulfonilo e semelhantes; grupos formadores de carbamato como benzilóxi-carbonilo, p-clorobenzilóxi-carbonilo, p-metóxibenzilóxi-carbonilo, p-nitrobenzilóxicarbonilo, 2-nitrobenzilóxi-carbonilo, p-bromobenzilóxi-carbonilo, 3,4-dimetóxi-benzilóxi-carbonilo, 3,5-dimetóxi-benzilóxi- carbonilo, 2,4-dimetóxi-benzilóxi-carbonilo, 4-metóxi-benzilóxi-carbonilo, 2-nitro-4,5-dimetóxi-benzilóxi- carbonilo, 3,4,5-trimetóxi-benzilóxi-carbonilo, 1-(p-bifenililo)-1-metilo-etóxi-carbonilo, a,a-dimetilo-3,5-dimetóxibenzilóxi-carbonilo, benzidrilóxi-carbonilo, t-butilóxi-carbonilo, diisopropilometóxi-carbonilo, isopropilóxi-carbonilo, etóxi-carbonilo, metóxi-carbonilo, alilóxi-carbonilo, 2,2,2-tricloroetóxi-carbonilo, fenóxi-carbonilo, 4-nitrofenóxi-carbonilo, fluorenilo-9-metóxi-carbonilo, ciclopentilóxi-carbonilo, adamantilóxi- carbonilo, ciclohexilóxi-carbonilo, fenilotiocarbonilo, e semelhantes, grupos arilo-alquilo como benzilo, trifenilometilo, benzilóxi-metilo, e semelhantes e grupos sililo, como trimetilo-sililo e semelhantes. Os grupos protectores de N preferidos são formilo, acetilo, benzoilo, pivaloilo, t-butilo-acetilo, alanilo, fenilo-sulfonilo, benzilo, t-butilóxi-carbonilo (Boc) e benzilóxicarbonilo (Cbz) . 0 termo &quot;nitro&quot;, como usado neste documento, representa um grupo -NO2, 0 termo &quot;oxo&quot;, como usado neste documento, representa =0. 0 termo &quot;perfluoroalquilo&quot;, como usado neste documento representa um grupo alquilo, como ai definido, no qual cada radical de hidrogénio ligado ao grupo alquilo foi 48 substituído por um radical fluoreto. Exemplos de grupos perfluoro-alquilo são trifluorometilo, pentafluoro-etilo e semelhantes. 0 termo &quot;sal farmacêuticamente aceitável&quot;, como usado neste documento, representa aqueles sais que são, no âmbito das boas práticas médicas, adequados para serem usados em contacto com tecidos de humanos e animais sem desnecessária resposta de toxicidade, irritação, alérgica e semelhantes e estão associadas a uma razoável relação benefício/risco. Sais farmacêuticamente aceitáveis são bem conhecidos no estado da técnica. Por exemplo, S. M Berge et al. Descrevem sais farmaceuticamente aceitáveis em detalhe em J. Pharmaceutical Sciences 66:1-19, 1977, Os sais podem ser preparados in situ, durante o isolamento final e purificação dos compostos de invenção ou separadamente pela reacção do grupo básico livre com um ácido orgânico adequado. Ácidos representativos para a formação de sais incluem acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benxeno-sulfonato, benzoato, bissulfato, borato, butirato, camforato, sulfonato de cânfora, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilo-sulfato, etano-sulfonato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, hemi-sulfato, heptonato, hexanoato, hidrobrometo, hidrocloreto, hidroiodeto, 2-hidróxietano-sulfonato, lactobionato, lactato, laurato, sulfato de laurilo, malato, maleato, malonato, metano-sulfonato, 2-naftaleno-sulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilopropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, toluenosulfonato, undecanoato, sais de valerato e semelhantes. Exemplos de sais de metais alcalinos ou alcalino-terrosos incluem sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio e semelhantes, bem 49 como amónio não tóxico, amónio quaternário, e catiões de amina, incluindo, mas não limitados a, amónia, tetrametilo-amónia, tetra-etilo-amónia, metilo-amina, dimetilo-amina, trimetilo-amina, tri-etilo-amina, etilo-amina e semelhantes. 0 termo &quot;pró-medicamentos famaceuticamente aceitáveis&quot; como usado neste documento, representa aqueles pró-medicamentos dos compostos de acordo com a presente invenção os quais são, no âmbito da avaliação médica razoável, adequados para o uso com tecidos humanos ou animais sem desnecessárias respostas de toxicidade, irritação, alérgicas, e semelhantes, associadas com uma relação beneficio/risco razoável, e eficazes para o uso almejado, bem como formas zwiteriónicas, quando possíveis, dos compostos de acordo com a presente invenção. 0 termo &quot;Ph&quot; como usado neste documento, representa fenilo. 0 termo &quot;pró-medicamento&quot;, como usado neste documento, representa compostos que são rapidamente transformados in vivo no composto parental de fórmula apresentada acima, por exemplo, através da hidrólise no sangue. Pró-medicamentos dos compostos de acordo com a presente invenção podem ser ésteres convencionais. Alguns ésteres comuns que já foram utilizados como pró-medicamentos, incluem ésteres fenílicos, ésteres alifáticos (C8-C24), ésteres acilóxi-metílicos, carbamatos e ésteres aminoácidicos. Por exemplo, um composto de acordo com a presente invenção que contenha um grupo OH pode ser acilado nesta posição na sua forma de pró-medicamento. Uma discussão exaustiva é apresentada em T. Higuchi e V. Stella, Pro-Drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 de A. c. S. Symposium Series, Edward B. Roche ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American 50
Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, e Judkins et al., Synthetic Communications 26(23):4351-4367, 1996, cada um dos quais é incorporado neste documento como referência.
Cada um dos termos &quot;inibe selectivamente nNOS&quot; ou &quot;um inibidor selectivo de nNOS&quot; refere-se a uma substância, como por exemplo, um composto de acordo com a presente invenção, que inibe ou se liga à isoforma nNOS mais eficazmente que à eNOS e/ou iNOS, num ensaio in vitro, como por exemplo nos ensaios descritos neste documento. A inibição selectiva pode ser expressa em termos do valor de IC50, do valor Ki, ou 0 inverso da percentagem de inibição, valor que é mais reduzido quando a substância testada num ensaio com nNOS do que quando testada com eNOS e/ou iNOS. Preferencialmente, o valor de IC50 ou Ki, é duas vezes inferior. Adicionalmente preferível é que oi valor de IC50 ou Ki seja cinco vezes inferior. Especialmente preferível é que o valor de IC50 ou Ki seja 10 ou mesmo 50 vezes inferior. O termo &quot;solvato&quot; como usado neste documento significa um composto de acordo com a presente invenção caracterizado por moléculas de um solvente adequado serem incorporadas na estrutura cristalina. Um solvente adequado é um solvente que é fisiologicamente tolerável às dosagens administradas. Exemplos de solventes adequados são etanol, água e semelhantes. Quando a água é o solvente, a molécula é referida como &quot;hidrato&quot; O termo &quot;espiro-alquileno&quot;, como usado no presente documento, representa um diradical alquileno, no qual ambas as extremidades são ligadas ao mesmo átomo de carbono do grupo parental, formando assim um grupo espirociclico. 51 0 termo &quot;sulfonilo&quot;, como usado no presente documento, representa um grupo óxido de tioalquileno substituído com um grupo heterocíclico. 0 termo &quot;heterociclilo tio-alquilo&quot;, como usado neste documento, representa um grupo óxido de tio-alquileno, com um grupo heterociclilo como substituinte. 0 termo &quot;óxido de tioalquilo&quot;, como usado neste documento representa um grupo alquilo, ligado a grupo molecular que lhe deu origem através de um grupo enxofre. Exemplos de grupos tioalquilo não substituídos têm de 1 a 6 carbonos. 0 termo &quot;tiol&quot; representa um grupo -SH.
Como usados neste documento, e como bem entendido na arte, &quot;tratamento&quot; é uma abordagem para se obter resultados benéficos ou os resultados desejados, neste caso resultados clínicos. Os resultados benéficos ou desejados podem incluir, mas não lhe estão limitados, alívio ou melhoria de um ou mais sintomas ou doenças; redução da extensão da doença, disfunção ou estado; estabilização (i. e. não pioria) do estado da doença, disfunção ou situação; prevenção da propagação da doença, disfunção ou situação; adiamento ou desaceleração da progressão da doença, disfunção ou situação; melhoria ou paliação da doença, disfunção ou situação; e remissão (tanto total como parcial), detectável ou não detectável. &quot;Tratamento&quot; também pode significar prolongamento da sobrevivência, enquanto comparado com a sobrevivência esperada com a não administração do tratamento. &quot;Tratar paliativamente&quot; a doença, disfunção ou situação significa que a dimensão e/ou as manifestações clínicas indesejáveis da doença, disfunção 52 ou situção são atenuadas e/ou o tempo de progressão da doença é feito mais lentamente ou prolongado, quando comparado com a dimensão ou tempo de progressão com a ausência de tratamento. 0 termo também inclui tratamento profilático.
Breve Descrição dos Desenhos A figura 1 é um gráfico de barras mostrando o efeito neuroprotector dos compostos 9, 12, e 18 após a exposição de células corticais de rato a NMDA. A figura 2 é um gráfico de barras mostrando o efeito neuroprotector dos compostos 9, 12, e 18, após a exposição de cortes do hipocampo de rato, a privação de glicose e oxigénio. A figura 3 é um gráfico de barras mostrando o efeito do composto 12 no influxo de Ca2+ mediado por NMDA, usando o corante fluorescente Fluo-4FF, sensível a Ca2+. A figura 4 é um gráfico de barras mostrando os efeitos do composto 12 nas correntes integrais das células nos neurónios corticais de rato, mediadas por NMDA. A figura 5 é um gráfico mostrando os resultados do ensaio de lamber a pata em rata, induzido por formalina após o tratamento com (a) veículo, (b) composto 12 a 5 mg/kg e 10 mg/kg, (c) tratamento com o inibidor não selectivo 7-nitroindazol (7 —NI) a 2,5 mg/kg e 5 mg/kg. A figura 6 é um gráfico de barras mostrando o efeito de doseamento do composto 12, no teste do fio, avaliado 1 hora após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi administrado o composto 12 ou veículo sub-cutaneamente 5 53 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veiculo. A figura 7 é um gráfico de barras mostrando o efeito de dosagem do composto 12 num teste do fio, avaliado 1 hora, após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi administrado o composto 12 ou veiculo sub-cutaneamente 5 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; *P &lt; 0,05 face a ratinhos lesionados tratados com o veiculo; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veiculo. A figura 8 é um gráfico de barras mostrando o efeito de dosagem do composto 12 num teste do fio, avaliado 4 horas, após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi administrado o composto 12 ou veículo sub-cutaneamente 5 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; *P &lt; 0,05 face a ratinhos lesionados tratados com o veículo; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veículo. A figura 9 é um gráfico de barras mostrando o efeito de dosagem do composto 12 num teste de adesão, avaliado 4 horas, após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi administrado o composto 12 ou veículo sub-cutaneamente 5 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; *P &lt; 0,05 face a ratinhos lesionados tratados com o veículo; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veículo. A figura 10 é um gráfico de barras mostrando o efeito de dosagem do composto 12 num teste de Hall, avaliado 4 horas, após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi 54 administrado o composto 12 ou veiculo sub-cutaneamente 5 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; *P &lt; 0,05 face a ratinhos lesionados tratados com o veiculo; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veiculo. A figura 11 é um gráfico de barras mostrando o efeito de dosagem do composto 12 na temperatura corporal, avaliado 1 hora após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi administrado o composto 12 ou veiculo sub-cutaneamente 5 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veiculo. A figura 12 é um gráfico de barras mostrando o efeito de dosagem do composto 12 na temperatura corporal, avaliado 4 horas após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi administrado o composto 12 ou veiculo sub-cutaneamente 5 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; *P &lt; 0,05 face a ratinhos lesionados tratados com o veiculo; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veiculo. A figura 13 é um gráfico de barras mostrando o efeito de dosagem do composto 12 na perda de peso corporal, avaliado 24 horas após uma lesão traumática cerebral em ratinhos. Foi administrado o composto 12 ou veículo sub-cutaneamente 5 minutos após a lesão. +++ P &lt; 0,001, face a ratinhos não lesionados; *P &lt; 0,05 face a ratinhos lesionados tratados com o veículo; ns: não significativo face a ratinhos lesionados tratados com veículo. A figura 14 mostra os efeitos do composto 12 (50 μΜ) na amplitude de resposta (PS) da população de células de 55 hipocampo. Os traços mostram PSs registados antes (esquerda), ou 5 minutos após ser iniciada a perfusão com 50 uM do composto 12 (direita) . Os resultados são tipicos de três experiências. Cada traço é a média de 10 potenciais de campo registados consecutivamente; estimulação a 0,03 Hz. A figura 15 mostra os efeitos do composto 12 (50 uM) na amplitude de resposta (PS) da população de células de hipocampo; cortes controlo (esquerda), cortes sujeitas a OGD (centro); e cortes sujetias a OGD em 0,3 mM de Ca2+. Cada traço é a média de 10 potenciais de campo registados consecutivamente; estimulação a 0,03 Hz. A figura 16 mostra os efeitos do tratamento com 0,3 M Ca2+, e inibidores de NOS 7-NI (100 μΜ) e composto 12, Tanto a protecção com uma baixa concentração de Ca2+ (0,3 mM) ou composto 12 (50 μΜ) evidenciam a preservação do pico de população, enquanto que o tratamento com 7-NI (100 uM) não preservou o pico de população nos cortes de hipocampo. A figura 17 mostra os efeitos de 0,3M Ca2+ (PROT), 7-NI (100 μΜ) ou composto 12 (50 μΜ) na preservação da respiração mitocondrial das cortes do hipocampo após 10 minutos de OGD. A figura 18 mostra fluogramas dos desenhos experimentais usados nos ensaios com o modelo de ligação nervosa espinal de Chung (SNL) (alodinia táctil e hiperalgesia térmica) para dor neuropática. A figura 19 mostra o efeito da administração intra-peritoneal de 30 mg/kg dos compostos 32 ( + ) e 32 (-) na reversão da hiperalgesia térmica em ratos, após a ligação 56 L5/L6 do nervo espinal (modelo de dor neuropática de Chung). A figura 20 mostra o efeito da administração intra-peritoneal de 30 mg/kg dos compostos 32 ( + ) e 32 (-) na reversão da alodinia táctil em ratos, após a ligação L5/L6 do nervo espinal (modelo de dor neuropática de Chung). A figura 21 mostra o efeito na resposta do doseamento (3 mg/kg - 30 mg/kg) do composto 12 na reversão da hiperalgesia térmica em ratos após a ligação L5/L6 do nervo espinal (modelo de dor neuropática de Chung). A figura 22 mostra o efeito na resposta do doseamento (3 mg/kg - 30 mg/kg) do composto 12 na reversão da hipertesia térmica em ratos após a ligação L5/L6 do nervo espinal (modelo de dor neuropática de Chung). A figura 23 é um gráfico de barras mostrando os efeitos de vários inibidores de NOS (intra-venoso) ou succinato de sumatriptano (sub-cutâneo) na reversão da alodinia da pata traseira em ratos, duas horas após a exposição da dura a uma sopa inflamatória.
Descrição detalhada A presente invenção inclui compostos de indolo substituídos com actividade inibitória da sintetase do óxido nítrico (NOS), composições farmacêuticas e de diagnóstico que os contenham, e o seu uso médico, particularmente enquanto compostos para o tratamento de acidente vascular cerebral, lesão de reperfusão, doenças neurodegenerativas, traumatismos craneanos, danos neurológicos associados a enxertos de bypass da artéria coronária (CABG), enxaqueca, 57 enxaqueca com alodinia, dor neuropática, dor após acidente vascular cerebral e dor crónica.
Exemplos de compostos indolo 3,5-substituidos de acordo com a presente invenção são fornecidos na tabela seguinte.
Tabela I - Compostos da presente invenção com inibição de NOS humana e constantes de inibição (os valores de IC50 são apresentados em concentrações de μΜ) seleccionadas para 5HTiD (cauda bovina) e SHTiB (córtex cerebral de rato). Todos os compostos testados são sais dihidrocloreto ou monohidrocloreto. Os compostos com uma IC50 mais reduzida são mais potentes contra a enzima NOS ou receptores 5HT1.
Compostos nNOSh eNOSh iNOSh e/n 5HT1D 5HT1B nh1JL&gt; 18 H 2,6 26 12 10 0,36 J r\ .O S' Γ NB 43 η 1,88 32,6 58 17 0,57 / «Μ 42 H 0,92 51,1 20 53 0,051 0,16 58(Continuação)
Compostos nNOSh eNOSh iNOSh e/n 5HT1D 5HT1B / rfi ^ if [f |\ NH 16 M 1,78 54 58 31 0,050 / &lt;VrrT NB 47 « 2,24 97,4 55 43 0,28 / nh y-J Vé H χΧ/ SI H 1,19 49,7 85 42 0,22 / V y—N O CX $ ' v-y NH XX / 181 H 2 31 9,9 9, 9 / r~N CUWi ' NH XA/ 56 h 0,41 15,1 5,6 37 0,87 Ν'* NH \_g ^ l / wa X^-m 59 « 12,8 86,2 7 0,29 f f\ Η Γ* &lt;JkrNvYvX Íh χΧ^ 62 H 2,43 86,2 24 0,68 / r~H\ jfX Η H S&quot;^ YrYTYÍ 64 H 14 43 3 0,056 59(Continuação)
Compostos nNOSh eNOSh iNOSh e/n 5HT1D 5HT1B / r\ vYyyÍ NH 0 H 4,8 105 22 0,048 vO ri h Ih X^X/ 70 H 5, 62 50,9 9,06 QySrvP NH UlN&gt; 73 H 2,20 43,4 19,7 / à—N NH 75 H 2,25 36,1 16,0 VD rN %{ 77 H 0,717 4,44 6,19 Hír’ S4 H 0,49 26, 9 55 H rN η γ NH 88 H 9,23 78,1 8,5 60 (Continuação)
Compostos nNOSh eNOSh iNOSh e/n 5HT1D 5HT1B / N 90 H 3,35 67,9 20,3 ST&quot; s iT Υ^τΛ NH Kj^tí 97 M 0,84 34,5 41 0,13 0,31 ΟγίγΥ^ too 1,73 32 18,5 \ ζ^\ j Y^j NH X^O 105 H 0,82 23 29 1,1 0,29 V fl ti _ rO 0 i Yvs MH 106 H 2,08 27,1 13,0 /&quot;''Ν'* /1 H 0 Y i y\ NH S*A|/ 107 H 2,52 24,9 9, 9 /*&quot;1 H C_/N s # YV\ NH 110 H 0,43 39 90 0,35 0,49 NH XsX/ 111 « 1,24 33,8 0,56 1,1 61(Continuação)
Compostos nNOSh eNOSh iNOSh e/n 5HT1D 5HT1B V CVVrs NH 114 H 3 51,4 17,1 \ NH Ki^t/ 116 H 3, 44 31,8 9,2 HN—^ CV-frf NH Ka^tí m H 0,7 40,8 58,4 125 π 0,97 105 126 m η 1,04 32,1 30,9 ^ rfi' /| H A^j °lf YY\ NH ll^k/ 127 H 2,6 66 25,3 ! __ F-^w/ O^Nv/v( NH VíXfci 134 H 2,78 143 51,4 / asV NH IJ-/ 137 H 4,68 40,1 62
Continuação)
Compostos nNOSh eNOSh iNOSh e/n 5HT1D 5HT1B CVrvT m 142 147 sumatriptano - - 0,059 0,11
Exemplos de compostos indolo 1,6-substituídos, de acordo com a presente invenção, são apresentados na tabela seguinte.
Tabela II - Compostos de acordo com a presente invenção com constantes de inibição de NOS humana (os valores IC5o são apresentados em concentrações em μΜ). Todos os compostos testados foram-no sob a forma de sais dihidrocloreto ou monohidrocloreto. Os compostos com um IC5o mais reduzido são mais potentes contra a enzima NOS.
Composto nNOSh eNOSh e/n rjQ3 crV^( 1,2 15,0 12,5 27 12 &gt;100 &gt;8,3 63(Continuação)
Composto nNOSh eNOSh e/n 3? í ò 0,49 3,8 7,8 PjA 32 ^ 0,22 19 86,4 qTÇCO 32 0,32 16 50 r jQ&gt; U*') 31 ν' —N J 0,2 24 120 rjó3 » 0 . i 0,87 37 42,5 ΜΗ S ÍSÍçj 0,7 28,3 41,1 64(Continuação)
Composto nNOSh eNOSh e/n 153 \ Z~^n &gt; 0,59 10,2 17,2 cw Vá H &gt; 1SS ) 0 1,97 11,2 5,7 jjH Cr\ Cá 1* ' &gt; 157 \ ~~~N \ 2,73 5,77 2,11 MH 0a» ; 159 ) &quot;~Ν H 1,78 9,91 5,57 m ( ^ι^Γϊ 2,3 33 14,3 168 ^ 1 õ 1,22 4,56 3,74 65 (Continuação)
Composto nNOSh eNOSh e/n cxm Vs H ) 171 \ 0,26 2,53 9,6 çW 173 J O 1,4 17 9,6 175 &gt; 0 2,4 34 14,2 : 177 ) O 1 19 19 Métodos para a preparação dos compostos de acordo com a presente invenção
Os compostos da presente invenção podem ser preparados por procedimentos análogos àqueles estabelecidos no estado da arte, por exemplo, pela sequência de reacções mostrada nos esquemas 1-12.
Um composto de fórmula IVa ou b, no qual R1, R2, R3, R4 e R7 são definidos como descrito noutro local do presente 66 documento, podem ser preparados sob as condições padrão de alquilação, pelo tratamento de um composto de fórmula lia ou Ilb, respectivamente, com um composto de fórmula III, um derivado destes adequadamente protegido, no qual R1 representa o definido acima, com a excepção de que R1 não é H, e &quot;LG&quot; é um grupo de saida, como por exemplo cloro, bromo, iodo ou sulfonato (e. g., mesilato, tosilato ou triflato). As condições para realizar a alquilação do composto de fórmula lia ou Ilb com um composto de fórmula III podem incluir, por exemplo, o aquecimento de um composto de fórmula II e um composto de fórmula III, com ou sem um solvente, opcionalmente na presença de uma base adequada (ver esquema 1). 66
Alternativamente, a produção de um composto de fórmula IVa ou iVb, ou derivado destes adequadamente protegidos, no qual R2, RJ, R4 e R7 são como definidos no presente documento para um composto de fórmula I e R1 é (CH2)mX1, no qual X1 é
R
R 1A 16
1D oa 9
s 67 com R1a, R1b, R1c, R1d, Z1, nl, pl e ql definidos como para um composto de fórmula I, envolve a reacção de um composto de fórmula Va ou Vb, no qual ml é como o definido para um composto de fórmula I e LG é um grupo de saida adequado, como por exemplo, cloro, bromo, iodo, ou sulfonato (e. g. mesilato, tosilato ou triflato) com compostos de fórmula VI, no qual X1 é como definido acima, sob condições padrão como ilustrado no esquema 2, Alternativamente, um composto de fórmula Va ou Vb, no qual LG representa um grupo aldeído, éster ou acilocloreto, pode ser reagido com um composto de fórmula VI. Quando LG é um grupo aldeído, podem ser empregues condições padrão de aminação redutiva, usando um agente redutor adequado, como NaBH4, NaBH(0Ac)3, NaCNBH4 e semelhantes, num solvente alcoólico, como etanol, para a produção de um composto de fórmula VlIIa ou VlIIb, respectivamente. A aminação redutiva pode ser executada numa única reacção ou a imina resultante da mistura de um composto de fórmula Va ou Vb com um composto de fórmula VI pode ser executada in situ, seguida da redução sequencial com um agente redutor adequado. Quando LG é um grupo cloreto de acilo ou um éster, preferencialmente um éster activo, como por exemplo, um éster de pentafluorofenilo ou um éster de hidróxi-succinimida, a reacção de um composto de fórmula Va ou Vb com um composto de fórmula X1-!!, ou um derivado deste adequadamente protegido, é seguida pela redução da amida resultante usando um agente redutor adequado, como por exemplo BH3, Os compostos de fórmulas Va ou Vb podem ser preparados usando metodologias padrão, como as descritas em WO 00/38677, 68
Um composto de fórmula IVa ou IVb, ou um derivado destes adequadamente protegido, no qual R2, R3, R4 e R7 são como o definido neste cdocumento para compostos de fórmula I; LG é um grupo de saida adequado, como por exemplo, cloro, bromo, iodo ou um sulfonato (e. g. mesilato, tosilato ou triflato); e X3 é
no qual R como o definido para um composto de fórmula I, podem ser preparados de acordo com o esquema 3, por exemplo, através do tratamento de um composto de fórmula IXa ou IXb com cloreto de oxalilo num solvente adequado, como por exemplo, éter, para produzir um composto de fórmula Xa ou Xb, respectivamente. A reacção subsequente com amina X3-H, seguida da redução com um agente redutor, como LiAlH4, de acordo com procedimentos padrão (Blair et al., J. Med. Chem. 43:4701-4710, 2000); Speeter and Anthony, J. Am.
Chem. Soc. 76:6208-6210, 1954), produz um compostos de fórmula Xla ou Xlb. 69
Esquema 3
Usando metodologias padrão como as descritas na literatura (Russell et ai., J. Med Chem. 42:4981-5001, 1999; Cooper et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 11:1233-1236, 2001; Sternfeld et al., J. Med. Chem. 42:677-690, 1999), um composto de fórmula XlVa, XlVb, XVa ou XVb, ou um derivado destes adequadamente protegido, no qual R4 e R7 são como definido noutro local deste documento; X3 é
no qual R3A, R3B, R3C, R3D, Z3, n3, p3 e q3 são como o definido noutro local deste documento; X2 é 70
no qual R2A, R2B, R2C, R2D, z2, n2, p2, e q2 são como o definido noutro local do presente documento; e LG é um grupo de saida adequado como por exemplo cloro, bromo, iodo ou triflato, pode ser preparado de acordo com o esquema 4 através do tratamento de uma amina X3-H ou X2-H com um composto de fórmula Xlla ou Xllb; ou XlIIa ou XlIIb, respectivamente, no qual Y é um grupo de saida adequado, como por exemplo cloro, bromo, iodo ou sulfonato (e. g. mesilato ou tosilato). O grupo Y pode ser preparado a partir do álcool apropriado (i. e. =OH) usando técnicas padrão.
Esquem 4
Um composto de fórmula XXIa ou XXIb, no qual LG, R4, R7, Zl, pl e ql, que são definidos como o descrito noutro local do presente documento, pode ser preparado como o ilustrado no esquema 5 através de procedimentos análogos aos descritos anteriormente (ver por exemplo, Coe et al., Tett. Lett. 37 (34):6045-6048, 1996). 71 Esquema 5 R4 m
Ma^jCH(OMe)2 ΜΟϋ calòr H
ar ft*
(XVfcl
l MeGH, H*. calor
Do mesmo modo, um composto de fórmula XXIIIa ou XlIIb, no qual LG, R4, R7, Z3, p3 e q3 são como definido noutro local do presente documento pode ser preparado a partir de um composto de fórmula XXIIa ou XXIIb, como o descrito no esquema 6, através de procedimentos análogos aos anteriormente descritos (ver por exemplo Perregaard et ai., J. Med. Chem. 35:4813-4822, 1992; Rowley et al., J. Med.
Chem. 44 :1603-1614, 2001) .
Esquema 6
Um composto de fórmula XXVa ou XXVb, no qual R1, R2, R3, R4 e R7 são como o definido para os compostos de fórmula I, pode ser preparado através da redução do grupo nitro de um composto de fórmula XXIVa ou XXIVb, respectivamente, ou de 72 um derivado destes adequadamente protegido, sob condições padrão como o ilustrado no esquema 7, Num exemplo, as condições de redução padrão incluem o uso de SnCl2 num solvente polar, como por exemplo, etanol a temperaturas de refluxo. Alternativamente, um composto de fórmula XXVa ou XXVb pode ser preparado pela hidrogenação de um composto de fórmula XXIVa ou XXIVb, respectivamente, usando um catalizador adequado, como paládio em carvão em etanol ou outro solvente ou combinação de solventes.
Como o ilustrado no esquema 8, um composto de fórmula XXVa ou XXVb pode ser também preparado pela aminação de compostos catalizada por metais, de um composto de fórmula XXVIa ou XXVIb, respectivamente, no qual LG é cloro, bromo, iodo ou triflato (Wolfe et al., J. Org. Chem. 65:1158-1174, 2000) na presença de um equivalente de amónia adequado, como imina de benzofenona, LiN(SiMe3)2, Ph3SiNH2, NaN(SiMe3)2, ou amida de litio (Huang e Buchwald, Org. Lett. 3 (21):3417-3419, 2001). Exemplos de catalizadores metálicos incluem por exemplo um catalizador de paládio coordenado com ligandos adequados. Alternativamente um grupo de saida adequado para a aminação catalizada por paládio pode ser nonaflato (Anderson, et al., J. Org. Chem. 68:9563-9573, 2003) ou ácido borónico (Antilla e Buchwald, 73
Org. Lett. 3 (13):2077-2079, 2001) quando o metal é um sal de cobre, como acetato de Cu (II), em presença de aditivos adequados, como 2,6-lutidina. Um grupo de saida preferido é bromo, em presença de um catalizador de paládio (0) ou paládio (II). Catalizadores de paládio adequados incluem tris-dibenzilideno-acetona dipaládio (Pd2dba3) e acetato de paládio (PdOAc2), preferencialmente Pd2dba3, Os ligandos adequados para paládio podem variar grandemente e pode incluir por exemplo XantPhos, BINAP, DPEphos, dppf, dppb, DPPP, (o-bifenilo)-P(t-Bu)2, (o-bifenilo)-P(Cy)2, P(t-Bu)3, P(Cy)3 e outros (Huang e Buchwald, Org. Lett. 3(21):3417— 3419, 2001). O ligando é preferencialmente P(t-Bu)3, A aminação catalizada por paládio é executada num solvente adequado, como THF, dioxano, tolueno, xileno, DME e semelhantes, a temperaturas entre a temperatura ambiente e a de refluxo.
Aminação
Os compostos de fórmula XXIXa ou XXIXb, nos quais cada R5a ou R6a são definidos como o descrito acima e Q é um grupo arilo (e. g. um grupo fenilo), um grupo arilo-alquileno Cl (e. g. grupo naftilometilo), ou um grupo alquilo (e. g. um grupo metilo), estão ou disponíveis comercialmente ou podem ser preparados através da reacção de um composto ciano de 74 fórmula XXVIIIa ou XXVIIIb com compostos que contenham tiol de fórmula XXVII. Outros exemplos desta transformação são descritos na arte (ver, por exemplo, Baati et al., Synlett 6:927-9, 1999; EP 262873 1988, Collins et al., J. Med. Chem. 41:15, 1998) .
74 Q~SH
R5A~CN HBr ou
NH^saAL^Q R^-CN 0 HBr ou
NH
Como o ilustrado no esquema 10, um composto de fórmula XXXa ou XXXb, no qual R1, R2, R3, R4, R5A, R6a ou R7 são como o definido noutro local do presente documento, pode ser preparado através da reacção de um composto de fórmula XXVa ou XXVb com um composto de fórmula XXIXa ou XXIXb, respectivamente, no qual Q é definido como acima.
Como o ilustrado no esquema 11, um composto de fórmula XXXIIa ou XXXIIb, no qual R1, R2, R3, R4 ou R7 como o 75 definido noutro local do presente documento, pode ser preparado através da reacção de um composto XXVa ou XXVb como um composto de fórmula XXXIa ou XXXIb, respectivamente, nos quais R5B ou R6B são alquilo Ci_6, arilo Ce-ior arilo-alquileno C1-4, heterociclilo C2-9, heterociclilo de alquileno C1-4, -C (0)-alquilo C1-6, -C(0)-arilo Cè-w, -C (0)-heterociclilo C2-9 ou -C (0)-heterociclilo de alquileno C1-4, A reacção pode ser executada num solvente inerte, como tetra-hidrofurano, a temperatura ambiente ou com aquecimento. Para preparar um composto de XXXIIIa ou XXXIIIb, um composto de fórmula XXXIIa ou XXXIIb, no qual a tio-ureia está ligada a um radical carbonilo, é hidrolizado sob condições padrão, como por exemplo, hidróxido de sódio aquoso em tetra-hidrofurano. 75
(XXXíilbj
Como o ilustrado no esquema 12, um composto de fórmula XXXIIIa ou XXXIIIb pode ser adicionalmente reagido com um 76 agente de alquilação, como por exemplo, R5C-LG ou R6c-LG, no qual R5c ou R6c pode ser alquilo Ci-6, ou heterociclilo de alquileno C1-4 e LG é um grupo de saída adequado, como por exemplo cloro, bromo, iodo ou sulfonato (e. g. mesilato ou tosilato).
Esquema 12
Nalguns casos, as químicas ilustradas acima podem ter de ser modificadas, por exemplo, pela utilização de grupos protectores para a prevenção de reacções acessórias devido a grupos reactivos, como grupos reactivos ligados enquanto substituintes. Isto pode ser conseguido por intermédio de grupos protectores convencionais como o descrito em &quot;Protective Groups in Organic Chemistry&quot;, McOmie, Ed. Plenum Press, 1973 e em Greene e Wuts, &quot;Protective Groups in Organic Synthesis&quot;, John Wiley &amp; Sons, 3a Edição, 1999,
Os compostos de acordo com a presente invenção, e intermediários na preparação dos compostos de acordo com a invenção, podem ser isolados a partir das suas reacções de mistura e purificadas (se necessário) usando técnicas convencionais, incluindo extracção, cromatografia, destilação e recristalização. 77 A formação de um sal do composto desejado é conseguida com o recurso a técnicas padrão. Por exemplo, um composto neutro é tratado com um ácido num solvente adequado e o sal assim formado é isolado por filtração, extracção ou qualquer outro método apropriado. A formação de solvatos dos compostos de acordo com a presente invenção varia dependendo do composto e do solvato. Em geral, os solvatos são formados pela dissolução do composto num solvente apropriado e isolando o solvato pelo arrefecimento ou adição de um anti-solvente. 0 solvato é tipicamente seco ou sujeito a azeotropia, às condições do ambiente. A preparação de um isómero óptico de um composto de acordo com a presente invenção pode ser executada pela reacção dos reagentes iniciais opticamente activos adequados sob condições de reacção às quais não seja induzida racemização. Alternativamente, enantiómeros individuais podem ser isolados pela separação a partir de uma mistura racémica usando técnicas padrão, como por exemplo cristalização fraccionada ou HPLC quiral.
Um composto de acordo com a presente invenção marcado radioactivamente pode ser preparado usando métodos padrão, conhecidos do estado da técnica. Por exemplo, tritio pode ser incorporado num composto de acordo com a presente invenção, usando técnicas padrão, como por exemplo pela hidrogenação de um precursor adequado originando um composto de acordo com a presente invenção, usando gás de tritio e um catalizador. Alternativamente, um composto de acordo com a presente invenção contendo iodeto radioactivo pode ser preparado a partir do derivado de tri-alquilo-tina correspondente (adequadamente trimetilotina) usando as 78 1 oc condições padrão de íodmação, como [ I] íodeto de sódio na presença de cloramina-T num solvente adequado, como dimetiloformamida. 0 composto de tri-alquilo-tina pode ser preparado a partir do composto haloqenado correspondente não radioactivo, adequadamente iodo, usando as condições padrão para estanilação catalizada por paládio, como por exemplo hexametilotidina na presença de tetrakis (trifenilofosfina) paládio (0) num solvente inerte, como dioxano, e a temperaturas elevadas, adequadamente 50 a 100°C.
Usos farmacêuticos A presente invenção inclui todos os usos de um composto de fórmula I, incluindo o seu uso em métodos terapêuticos, quer isoladamente quer em combinação com outras substâncias terapêuticas, o seu uso em composições para a inibição da actividade de NOS, o seu uso em ensaios de diagnóstico e o seu uso enquanto ferramentas de investigação.
Os compostos de acordo com a presente invenção têm uma actividade de inibição de NOS, e por isso são úteis para o tratamento, ou redução do risco de, doenças ou estados que são melhorados pela redução da actividade de NOS. Tais doenças ou estados incluem aqueles nos quais a sintese ou a sintese em excesso de óxido nítrico desempenha um papel contributivo.
Do mesmo modo, a presente invenção inclui um medicamento contento uma quantidade eficaz do composto de acordo com a presente invenção para o tratamento de uma doença num mamífero, em particular num humano, causada pela acção da sintetase de óxido nítrico (NOS) . Tais doenças ou estados incluem por exemplo, enxaqueca com ou sem aura, dor neuropática, dor de cabeça do tipo tensão crónica, dor 79 crónica, lesão aguda da coluna vertebral, neuropatia diabética, nefropatia diabética, uma doença inflamatória, acidente vascular cerebral, lesão de reperfusão, traumatismo craneano, choque cardiogénico, danos neurológicos associados a enxertos de bypass da artéria coronária, HCA, demência associada a SIDA, neurotoxicidade, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, esclerose lateral amilotrófica, coreia de Huntington, esclerose múltipla, neurotoxicidade induzida por metanfetamina, toxicodependência, tolerância, dependência, hiperalgesia ou privação induzida por morfina/opióide, tolerância, dependência ou privação ao etanol, epilepsia, ansiedade, depressão, disfunção de défice de atenção devido a hiperactividade e psicose. Em particular, os indolos 3,5-substituídos de acordo com a presente invenção são particularmente úteis para o tratamento da enxaqueca, com ou sem aura, dor de cabeça do tipo tensão crónica (CTTH) e para a profilaxia da enxaqueca.
Em seguida é apresentado um resumo e uma base de ligação entre a inibição de NOS e algumas destas doenças.
Enxaqueca A primeira observação por Asciano Sobrero em 1847 de que pequenas quantidades de nitroglicerina, um agente libertador de NO, causavam fortes dores de cabeça geraram a hipótese de o óxido nítrico ser o causador da enxaqueca (Olesen et al., Cephalagia 15:94-100, 1995). Agonistas serotonérgicos 5TH1D/1B, como sumatriptano, os quais são usados clinicamente no tratamento da enxaqueca, são conhecidos por prevenir o alastrar da depressão para a zona cortical em cérebros lissencefálicos e girencefálicos durante um ataque de enxaqueca, um processo que resulta na libertação generalizada de NO. Com efeito, foi demonstrado 80 que sumatriptano modifica os niveis corticais de NO artificialmente elevados na sequência da infusão de trinitato de glicerilo em ratos (Read et al., Brain Res. 847:1-8, 1999; ibid, 870(1-2):44-53, 2000). Num ensaio clinico duplamente cego aleatorizado para enxaqueca, foi observada uma taxa de 67% de resposta após uma única administração intra-venosa de hidrocloreto de L-NG metilo-arginina (L-NMMA, um inibidor de NOS). O efeito não foi atribuído à simples vasoconstrição uma vez que não foi observado qualquer efeito na velocidade na artéria cerebral média, determinada através do doppler transcraneal (Lassen et al., Lancet 349:401-402, 1997). Num estudo piloto aberto, usando um agente de procura de NO, hidroxicobalamina, foi observada uma redução de 50% na frequência de ataques de enxaqueca em 53% dos doentes e foi também observada uma redução da duração total dos ataques de enxaqueca (van der Kuy et al., Cephalagia 22(7):513-519, 2002) .
Enxaqueca com alodínia
Ensaios clínicos demonstraram que quase 75% dos doentes desenvolvem alodínia cutânea (sensibilidade exagerada de pele) durante ataques de enxaqueca e que o seu desenvolvimento durante os ataques de enxaqueca é contraproducente à acçâo anti-enxaqueca de agonistas de triptano 5HTiB/id (Burstein et al., Ann. Neurol. 47:614-624, 2000; Bursten et al., Brain, 123:1703-1709, 2000). Enquanto que a administração precoce de triptanos como sumatriptano possa terminar a dor de enxaqueca, a intervenção tardia com sumatriptano é incapaz de terminar a dor de enxaqueca ou reverter a sensibilidade exagerada de pele em doentes com enxaqueca já associada a alodínia (Burstein et al., Ann. Neurol. DOI:10,1002/lnl,10785, 2003; Burstein e Jakubowski, Ann. Neurol., 55: 27-36, 2004). O desenvolvimento da 81 sensibilização periférica e central correlaciona-se com manifestações clinicas de enxaqueca. Em doentes com enxaqueca, o latejamento ocorre 5 a 20 minutos após o inicio da dor de cabeça, ao passo que a alodinia cutânea começa entre 20 a 120 minutos após (Burstein et al., Brain, 123: 1703-1709, 2000). No rato, a sensibilização periférica induzida experimentalmente dos nociceptores meningicos ocorre entre 5 a 20 minutos após a aplicação de uma sopa inflamatória (I.S.) à dura-máter (Levy and Strassman, J. Physiol., 538:483-493, 2002), enquanto que a sensibilização central dos neurónios tribeminovasculares se desenvolve entre 20 a 120 minutos (Burstein et al., J. Neurophysiol. 79: 964-982, 1998) após a administração de I. S. Efeitos semelhantes na administração precoce ou tardia de triptanos anti-enxaqueca como sumatriptano no desenvolvimento de sensibilização central foram demonstrados no rato (Burstein and Jakubowski, ver acima). Assim, o sumatriptano precoce mas não tardio previne o aumento a longo prazo da actividade espontânea induzida por I. S. observada nos neurónios centrais trigeminovasculares (uma correlação clinica da intensidade da dor de enxaqueca). Adicionalmente, a intervenção de sumatriptano tardio em ratos não previne a sensibilização neuronal induzida por I. S. à estimulação mecânica na pele periorbital, nem diminui o limite de sensibilização ao calor (uma correlação clinica entre doentes com alodinia mecânica e térmica na área periorbital). Em contraste, sumatriptano precoce previniu I. S. de induzir a hipersensitividade tanto térmica como mecânica. Após o desenvolvimento da sensitização central, a intervenção do sumatriptano tardio reverte o crescimento dos campos receptores da dura-máter e aumenta a sensibilidade à indentação da dura-máter (uma correlação clinica a dor de latejamento aumentada, por dobrar o corpo) 82 enquanto que a intervenção precoce previne o seu desenvolvimento.
Estudos anteriores sobre compostos anti-enxaqueca como sumatriptano (Kaube et al., Br. J. Pharmacol. 109: 788-792, 1993), zolmitriptano (Goadsby et al., Pain 67: 355-359, 1996), naratriptano (Goadsby et al., Br. J. Pharmacol., 328: 37-40, 1997), rizatriptano (Cumberbatch et al., Eur. J. Pharmacol. 362: 43-46, 1998), ou L-417-604 (Cumberbatch et al., Br. J. Pharmacol. 126: 1478-1486, 1999) examinaram os seus efeitos nos neurónios trigeminovasculares centrais não sensibilizados (sob condições normais) e por isso não reflectem os seus efeitos em condições de enxaquca patofisiológicas. Enquanto que os triptanos são eficazes no fim do latejamento da enxaqueca, quer administrados precoce ou tardiamente, a acção periférica do sumatriptano é incapaz de terminar a dor de enxaqueca com alodinia no seguimento da intervenção tardia, através dos efeitos de sensitização central dos neurónios oftrigeminovasculares. As limitações dos triptanos sugerem a melhoria no tratamento da dor de enxaqueca pela utilização de medicamentos que consigam evitar a sensitização central em curso, como os compostos de acordo com a presente invenção.
Foi demonstrado que nitroglicerina sistémica aumenta os níveis de nNOS e de neurónios c-Fos-imunoreactivos (um marcador da activação neuronal) no nucleus caudalis trigerminal de rato, após 4 horas, sugerindo que NO medeia provavelmente a sensibilização central dos neurónios trigeminais (Pardutz et al., Neuroreport 11 (14): 3071-3075, 2000) . Adicionalmente, L-NAME pode atenuar a expressão de Fos no nucleus caudalis trigeminal após estimulação eléctrica prolongada (2 horas) do sino sagital superior (Hoskin et al., Neurosci Lett. 266(3): 173-6, 83 1999). Em conjunto com a habilidade de os inibidores de NOS evitarem o ataque de enxaqueca aqudo (Lassen et al., Cephalagia 18(1): 27-32, 1998), os compostos de acordo com a presente invenção, isolados ou em combinação com outros agentes anti nociceptivos, representam excelentes candidatos terapêuticos para parar a enxaqueca em doentes após o desenvolvimento de alodinia.
Dor de cabeça crónica (çtth) NO contribui para a transmissão sensorial no sistema nervoso periférico (Aley et al., J. Neurosci. 1:7008-7014, 1998) e central (Meller e Gebhart, Pain 52:127-136, 1993). Evidências experimentais substanciais indicam que a sensibilização central, gerada pelo input nociceptivo prolongado vindo da periferia, aumenta a excitabilidade dos neurónios no SNC e é causada por, ou associada a, um aumento da activação de NOS e síntese de NO (Bendtsen, Cephalagia 20:486-508, 2000; Woolf e Salter, Science 288; 1765-1769, 2000). Foi demonstrado que a infusão experimentao de um dador de NO, trinitrato glicerilo induz dor de cabeça em doentes. Num estudo duplamente cego, doentes com dor de cabeça do tipo tensão crónica recebendo N-NMMA (um inibidor de NOS) tinham uma redução significativa da intensidade da dor de cabeça (Ashina e Brendtsen, J. Headache Pain 2:21-24, 2001; Ashina et al., Lancet 243(9149):287-9, 1999). Assim, os inibidores de NOS de acordo com a presente invenção podem ser úteis para o tratamento da dor de cabeça associada a tensão crónica.
Lesão aguda da espinal medula, dor crónica ou neuropática
Nos humanos, NO evoca dor na injecção intracutânea (Holthusen and Arndt, Neurosci. Lett. 165:71-74, 1994), assim demonstrando o envolvimento directo de NO em dor. Adicionalmente, os inibidores de NOS têm pouco ou nenhum 84 efeito na transmissão e modulação da informação nociceptiva ao nível da periferia, espinal medula e supraespinal (Duarte et al., Eur. J. Pharmacol. 217:225-227, 1992; Haley et al., Neuroscience 31:251-258, 1992). Lesões ou disfunções no SNC podem levar ao desenvolvimento de sintomas de dor crónica, também conhecidos por dor central, e incluem dor espontânea, hiperalgesia, e alodínia mecânica e ao frio (Pagni, Textbook of Pain, Churchill Livingstone, Edinburgh, 1989, pp. 634-655; Tasker in: The Management of Pain, pp. 264-283, J. J. Bonica (Ed.), Lea e Feibger, Filadélfia, PA, 1990; Casey, Pain and Central Nervous System Disease: The Central Pain Syndromes, pp. 1-11 K. L. Casey (Ed.), Raven Press, Nova Iorque, 1991). Foi demonstrado que a administração sistémica (intraperitoneal) dos inibidores de NOS 7-NI e L-ΝΔΜΕ alivia os sintomas semelhantes a alodínia crónica em ratos com lesão na espinal medula (Hao e Xu, Pain 66:313-319, 1996). Os efeitos de 7-NI não estavam associados a um efeito sedativo significativo e foram revertidos por L-arginina (precursor de NO) . A manutenção da hiperalgesia térmica pensa-se ser mediada pelo óxido nítrico na espinal medula lombar e pode ser bloqueada pela administração intra-tecal de um inibidor da sintetase de óxido nítrico como L-NAME ou um inibidor solúvel da adenilato ciclase, azul de metileno (Neuroscience 50(1):7-10, 1992). Assim, os inibidores de NOS de acordo com a presente invenção podem ser úteis para o tratamento da dor crónica ou neuropática.
Neuropatia diabética O metabolito poliamínico endógeno agmatina é um metabolito de arginina que é tanto um inibidor de NOS e um antagonista do canal de N-metilo-D-aspartato (NMDA). Agmatina é eficaz tanto no modelo de ligação ao nervo espinal (SNL) de dor neuropática como também no modelo de estreptozotocina de 85 neuropatia diabética (Karadag et al., Neurosci. Lett. 399(1): 88-90, 2003). Assim compostos possuindo actividade inibitória de NOS, como por exemplo um composto de fórmula I, uma combinação de um inibidor de NOS e um antagonista de NMDA devem ser eficazes no tratamento da neuropatia diabética e outras doenças de dor neuropática.
Doenças inflamatórias e neuroinflamação
Lipopolissacárido, uma ferramenta farmacológica bem conhecida, induz inflamação em vários tecidos e activa KFkB em todas as regiões do cérebro, guando administrado intravenosamente. Também activa genes pro-inflamatórios, quando injectado localmente no striatum (Stem et al., J. Neuroimmunology, 109:245-260, 2000). Foi demonstrado recentemente que tanto o antagonista MK801 do receptor de NMDA como o inibidor selectivo de nNOS cerebral, 7-NI, reduzem a activação de NFkB no cérebro e assim revelam um papel claro para a via do glutamato e de NO na neuroinflamação (Glezer et al., Neuropharmacology 45(8):1120-1129, 2003). Assim, a administração de um composto de acordo com a presente invenção, isolado ou em combinação com um antagonista NMDA, deverá ser eficaz no tratamento de doenças derivadas de neuroinflamação.
Acidente Vascular Cerebral e lesão de reperfusão
O papel de NO na isquémia cerebral pode ser protectivo ou destructivo, dependendo da fase da evolução do processo isquémico e do compartimento celular onde é produzido NO (Dalkara et al., Brain Pathology 4:49, 1994). Enquanto que o NO produzido pela eNOS é provavelmente benéfico, actuando enquanto um vasodilatador, para melhorar a circulação sanguínea para a área afectada (Huang et al., J. Cereb. Blood Flow Metab. 16:981, 1996), o NO produzido por nNOS contribui para a deterioração metabólica inicial de penumbra isquémica, resultando em enfartes maiores (Hara et 86 al., J. Cereb. Blood Flow Metab. 16:605, 1996). A resregulaçâo metabólica que ocorre durante a isquémia e subsequente reperfusão resulta na expressão e libertação de várias citocinas que activam iNOS em váiros tipos celulares, incluindo alguns do sistema nervoso central. O NO pode ser produzido a níveis citotóxicos por parte de iNOS, e níveis mais elevados de iNOS contribuem para o dano progressivo na penumbra, resultando em enfarted maiores (Parmentier et al., Br. J. Pharmacol. 127:546, 1999). Tem sido demonstrado que a inibição de iNOS reduz o dano isquémico cerebral em ratos (Am. J. Physiol. 268:R286, 1995) .
Foi demonstrado que é observado um efeito neuroprotectivo sinergístico com a administração combinada de um antagonista de NMDA (Hocks et al., Eur. J. Pharmacol. 381:113-119, 1999). Assim, os compostos de acordo com a presente invenção, administrados isoladamente ou em combinação com antagonistas de NMDA, ou compostos possuindo actividade nNOS/NMDA mista, podem ser eficazes no tratamento de estados de acidente vascular cerebral e outras doenças neurodegenerativas.
Complicações resultantes de cirurgia de bypass da artéria coronária
Danos cerebrais e disfunções cognitivas continuam a ser a maior complicação associada a doentes sujeitos a cirurgia de bypass da artéria coronária (CABG) (Roch et al., N. Eng. J. Med. 335:1857-1864, 1996; Shaw et al., Q. J. Med. 58: 59-68, 1986) . Esta deficiência cerebral é um resultado da isquémia de microembolismo cerebral pré-operatório. Num ensaio aleatorizado do antagonista de NMDA, remacemida, os doentes mostraram uma melhoria significativa pós-operatória na capacidade de aprendizagem bem como em deficiências 87 reduzidas (Arrowsmith et al., Stroke 29:2357-2362, 1998).
Tendo em conta o envolvimento da toxicidade excitatória produzida pelo excesso de libertação de glutamato e influxo de cálcio, é esperado que um agente neuroprotector, como um composto de acordo com a presente invenção ou um antagonista NMDA, quer isolado quer em combinação, pode ter um efeito benéfico na melhoria dos resultados clinicos após CABG.
Demência associada a SIDA A infecção por HIV-1 pode dar origem a demência. A proteína da cápside gp-120 de HIV-1 mata neurónios em cultura cortical primária a níveis de reduzida picomolaridade e necessita da adição externa de glutamato e cálcio (Dawson et al., 90(8):3256-3259, 1993). Esta toxicidade pode ser atenuada pela administração de um composto de acordo com a presente invenção, quer isoladamente ou em combinação com um outro agente terapêutico, como por exemplo um antagonista de NMDA.
Exemplos de um antagonista de NMDA úteis para qualquer uma das combinações de acordo com a presente invenção incluem aptoganel; besonprodilo; budipina; conantocina G; delucemina; dexanabinol; felbamato; fluorofelbamato; gaciclidina; glicina; ipenoxazona; caitocefalina; lanicemina; licostinelo; midafotel; milnaciprano; neramexano; orfenadrina; remacemida; topiramato; ácido (aR)-a-amino-5-cloro-l-(fosfonometilo)-lH-benzimidazol-2-propanóico; 1-(fosfonometilo)-lH-benzimidazolo-2- propanóico; ácido 1-aminociclopentano-carboxílico; ácido [5-(aminometilo)-2-[[[(5L)-9-cloro-2,3,6, 7-tetrahidro-2,3-dioxo-ΙΗ-,5H-pirido[1,2,3-de]quinoxalino-5-ilo)-benzeno-acético; ácido a-amino-2-(2-fosfono-etilo)- ciclohexanopropanóico; ácido a-amino-4-(fosfonometilo)- 88 benzenoacético; ácido (3E)-2-amino-4-(fosfonometilo)-3-heptenóico; ácido 3- [ (1E)-2-carbóxi-2-fenilo-etilo]-4, 6-dicloro-lH-indolo-2-carboxílico; sal de óxido-5 de 8-cloro- 2.3- dihidropiridazino[4,5-b]quinolino-1,4-diona com 2-hidróxi-N,N,N-trimetilo-etano-amina; N- [2-cloro-5- (metilotio)fenilo]-N-metilo-N-[3-(metilotio)fenilo] -guanidina; Ν' -[2-cloro-5-(metilotio)fenilo]-N-metilo-N- [3-[(R)-metilo-sulfinilo]fenilo]-guanidida; ácido 6-cloro-2,3,4,9-tetrahidro-9-metilo-2,3-dioxo-lH-indeno[1,2- b]pirazino-9-acético; ácido 7-clorotio-quinurénico; ácido (3L, 4aR, 6L,8aR)-decahidro-6-(fosfonometilo)-3-isoquinolinocarboxílico; (-)-6,7-dicloro-l,4-dihidro-5-[3-(metóximetilo)-5-(3-piridinilo)-4-H-l, 2,4-triazol-4-ilo]- 2.3- quinoxalinodiona; ácido 4,6-dicloro-3-[(E)-(2-oxo-l- fenilo-3-pirrolidinilideno)metilo]-lH-indolo-2-carboxilico; ácdio (2R,4L)-rel-5,7-dicloro-l,2,3,4-tetrahidro-4- [[(fenilo-amino)carbonilo]amino]-2-quinolinocarboxilico; (3R, 4L)-rel-3,4-dihidro-3-[4-hidróxi-4-(fenilometilo)-1-piperidinilo-]-2H-l-benzopirano-4,7-diol; 2-[(2,3-dihidro-lH-indeno-2-ilo)amilo]-acetamida; 1,4-dihidro-6-metilo-5-[(metiloamino)metilo]-7-nitro-2,3-quinoxalinodiona; ácido [2-(8, 9-dioxo-2,6-diazobiciclo[5.2.0]non-1(7)-eno-2- ilo)etilo]-fosfónico; (2R,2L)-1,2,3,4,5,6-hexahidro-3- [(2L)-2-metóxipropilo]-6,11,ll-trimetilo-2,6-metano-3-benzazocino-9-ol; ácido 2-hidróxi-5- [[(pentafluorofenilo)metilo]amino]-benzóico; 1- [2- (4- hidróxifenóxi)etilo]-4-[(4-metilofenilo)metilo]-4-piperidinol; 1-[4-(lH-imidazol-4-ilo)-3-butinilo]-4- (fenilo-metilo)-piperidino; 2-metilo-6-(fenilo-etinilo)-piridina; 3-(fosfonometilo)-L-fenilalanina; e 3,6,7-tetrahidro-2,3-dioxo-N-fenilo-lH,5H-pirido[1,2,3-de]quinoxalina-5-acetamida ou aqueles descritos na patente US número 6,071,966; 6,034,134; e 5,061,703. 89
Choque cardiogénico 0 choque cardiogénico (CS) é a principal causa de morte de doentes com enfarte agudo do miocárdio que é consistente com niveis mais elevados de NO e citocinas inflamatórias. Niveis elevados de NO e peroxinitrito têm muitos efeitos, incluindo uma inibição directa na contractabilidade do miocárdio, na supressão da respiração mitocondrial no miocárdio, alteração no metabolismo da glicose, redução da resposividade a catacolamina, e indução da vasodilatação sistémica (Hochman, Circulation 107:2998, 2003). Num ensaio clinico em 11 doentes com choque persistente, a administração do inibidor de NOS L-NMMA resultou no aumento da produção de urina e da pressão sanguínea e numa taxa de sobrevivência de 72 % até 30 dias (Cotter et al., Circulation 101:1258-1361, 2000). Num ensaio aleatorizado com 30 doentes, foi relatado que L-NAME reduziu a mortalidade dos doentes de 67% para 27% (Cotter et al., Eur. Heart. J. 24 (14); 1287-95, 2003). Do mesmo modo, a administração de um composto de acordo com a presente invenção, quer isoladamente ou em combinação com outro agente terapêutico, pode ser útil no tratamento do choque cardiogénico.
Ansiedade e depressão
Estudos recentes em ratos e ratinhos no teste de natação forçada (FST) indicam que os inibidores de NOS têm actividade anti-depressiva em ratinho (Harkin et al., Eur. J. Pharm. 371:207-213, 1999) e que o seu efeito é mediato por um mecanismo dependente de serotonina (Harkin et al., Neuropharmacology 44(5):616-623, 1993). O composto 7-NI demonstra actividade anxiolítica em ratos, avaliado através do teste do labirinto-avançado (Yildiz et al., Pharmacology, Biochemistry and Behaviour 65:199-202, 2000), enquanto que o inibidor selectivo de nNOS, TRIM, é eficaz 90 tanto no modelo FST de depressão como no teste do
compartimento claro-escuro para ansiedade (Volke et al., Behavioral Brain Research 140(1-2):141-7, 2003). A administração de um composto de acordo com a presente invenção a um indivíduo doente, quer isoladamente quer em combinação com outro agente terapêutico, como por exemplo um antidepressivo, pode ser útil para o tratamento da ansiedade ou depressão.
Disfunção de défice de atenção por hiperactividade A atenção não selectiva (NSA) a estímulos ambientais em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e em ratos Naples de baixa excitabilidade (NHE) tem sido usada como um modelo animal para a disfunção de défice de atenção por hiperactividade (ADHD) (Áspide et al., Behav. Brain Res. 95(1):23-33, 1998). Estes animais geneticamente modificado mostram episódios aumentados de recuo, que têm durações mais curtas que o observado em animais normais. Uma injecção única de L-NAME a 10 mg/kg resultou num aumento da duração do recuo. Do mesmo modo, usando o composto mais neuronalmente selectivo 7-NINA, foi observado um aumento da duração do recuo após a rápida administração (i. p.), enquanto o dosagem única de libertação lenta ou uma dosagem múltipla de libertação lenta (s. c. em DMSO) resultaram no efeito oposto. Assim, a administração de um composto de acordo com a presente invenção pode ser úteil no tratamento de ADHD.
Psicose A fenciclidina (PCP) é um bloqueador não competitivo do canal NMDA que produz efeitos secundários comportamentais em humanos e mamíferos, consistentes com os observados em doentes com psicose. Em dois modelos animais de psicose, o inibidor selectivo de nNOS, AR-R17477 antagonizou a 91 hiperlocomoção induzida por PCP e a deficiência, induzida por PCP, na inibição do sobressalto como resposta aum estimulo acústico (Johansson et al., Pharmacol. Toxicol. 84(5):226-33, 1999). Estes resultados sugerem o involvimento de nNOS na psicose. Por isso, a administração de um composto de acordo com a presente invenção a um indivíduo doente pode ser útil para o tratamento desta ou de outras doenças ou disfunções relacionadas.
Traumatismo craneano 0 mecanismo de lesão neurológica em doentes com traumatismo craneano é semelhante ao do acidente vascular cerebral e está relacionado com o influxo de cálcio excitotóxico derivado da libertação excessiva de glutamato, stress oxidativo, e produção de radicais livres a partir da disfunção mitocondrial e inflamação (Drug &amp; Market Development 9(3):60-63, 1998). Os animais tratados com inibidores da sintetase de óxido nítrico, como 7-NI e 3-bromo-7-nitroindazol, mostraram uma melhoria nas deficiências neurológicas após lesões cerebrais traumáticas experimentais (TBI) (Mesenge et al., J. Neurotrauma 13:209— 14, 1996) . A administração de um composto de acordo com a presente invenção a um indivíduo doente pode também ser útil para o tratamento dos danos neurológicos derivados de lesões por traumatismo craneano.
Paragem cardíaca hipotérmica A paragem cardíaca hipotérmica (HCA) é uma técnica usada para a protecção de danos isquémicos durante a cirurgia cardíaca, quando o cérebro está sensível a danos durante o período de interrupção do fluxo sanguíneo. Vários agentes neuroprotectores têm sido usados como agentes adjuvantes durante HCA e é previsto que a redução da produção de óxido nítrico durante HCA resulte em melhorias da função 92 neurológica. Esta assunção é baseada em estudos anteriores que mostraram que a excitotoxicidade causada por glutamato desempenha um papel nas lesões neurológicas induzidas por HCA (Redmond et al., J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 107:776-87, 1994; Redmond et al., Ann. Thorac. Surg. 59:579-84, 1995) e que NO medeia a toxicidade excitatória associada a glutamato (Dawson and Snyder, J. Neurosci. 14:5147-59, 1994). Num estudo de 32 cães sujeitos a 2 horas de HCA a 18 °C, foi mostrado que um inibidor de NOS neuronal reduzia a produção de NO cerebral, reduzindo significativamente a necrose neuronal, e resultando numa função neurológica superior face aos controlos (Tseng et al., Ann. Thorac. Surg. 67:65-71, 1999). A administração de um composto de acordo com a presente invenção pode também ser útil para a protecção dos doentes contra danos isquémicos durante cirurgias cardíacas.
Neurotoxicidade e doenças neurodeqenerativas A disfunção mitocondrial, a toxicidade excitatória do glutamato, o dano oxidatio induzido por radicais livres parecem ser a patogénese subjacente a muitas doenças neurodegenerativas, incluindo esclerose lateral amiotrófica (ALS), doença de Parkinson (PD), doença de Alzheimer (AD), e doença de Huntington (HD) (Schulz et al., Mol. Cell. Biochem. 174(1-2):193-197, 1997; Beal, Ann. Neurol. 38:357-366, 1995) e NO é um dos mediadores primários destes mecanismos. Por exemplo, foi demonstrado por Dawson et al., em PNAS 88(14):6368-6371, 1991, que inibidores de NOS como 7-NI e L-NAME evitam a toxicidade neurológica provocada por N-metilo-D-aspartato e aminoácidos excitatórios relacionados. (a) Doença de Parkinson 93
Estudos também demonstraram que NO desempenha um papel importante na neurotoxicidade associada a l-metilo-4-fenilo-1,2,3,6-tetrahidropiridina (MP-TP), um modelo animal usualmente usado para doença de Parkinson (Matthews et al., Neurobiology of Disease 4: 114-121, 1997). MPTP é convertido em MPP+ por MAO-B e é rapidamente absorvido pelo transportador da dopamina para o interior da mitocôndria de neurónios contendo dopamina com a subsequente activação de nNOS, resultando na morte neuronal. Ratinhos mutantes, sem o gene nNOS, mas com o gene eNOS, exibem lesões reduzidas na substantia nigra após a injecção de MPP+ no striatum. Em estudos em primatas, 7-NI desempenha um efeito profundo de neuroprotecção e anti-parkinsonismo após a exposição a MPTP (Hantraye et al., Nature Med. 2:1017-1021, 1996) como também foi o caso para o inibidor inespecifico L-NAME (T. S. Smith et al., Neuroreport 1994, 5, 2598-2600). (b) Doença de Alzheimer (AD) A patologia de AD está associada à formação de placas de beta-amilóide infiltradas com microglia activada e astrócitos. Quando a microglia de rato cultivada é exposta a beta-amilóide, há uma proeminente libertação de óxido nítrico da microglia, especialmente quando em presença de interferão-gamma (Goodwin et al., Brain Research 692 (1-2):207-14, 1995). Em culturas neuronais corticais, o tratamento com inibidores da sintetase do óxido nítrico confere neuroprotecção contra a toxicidade derivada da exposição a beta-amilóide humana (Resink et al., Neurosci Abstr. 21:101, 1995). Consistente com a hipótese do glutamato na toxicidade excitatória em doenças neurodegenerativas, foi observado que o antagonista fraco de NMDA, amantadina, aumenta a esperança de vida de doentes com PD (Uitti et al., Neurology 46(6):1551-6, 1996). Num estudo preliminar, controlado com placebo, de doentes com 94 demência do tipo vascular ou do tipo Alzheimer, o antagonista memantina NMDA foi associado a uma melhoria nos resultados dos doentes geriátricos em impressão clinica global de melhoria e na escala de avaliação comportamental (Winblad and Poritis, Int. J. Geriatr. Psychiatry 14:135-46, 1999). (c) Esclerose lateral amiotrófica A esclerose lateral amiotrófica (ALS) é uma doença neurodegenerativa fatal, caracterizada pela morte selectiva dos neurónios motores. Cada vez mais dados sugerem que a patogénese de ALS se deve à insuficiente remoção do glutamato através do transportador do glutamato, e a distribuição especifica dos receptores AMPA, permeáveis ao Ca2+ nos neurónios motores espinais, indica uma neurotoxicidade associada a glutamato. É encontrada uma imunoreactividade aumentada contra nNOS no espinal medula (Sasaki et al., Acta Heuropathol. (Berl) 101(4):351-7, 2001) e nas células da glia (Anneser et al., Exp. Neurol. 171(2):418-21, 2001) de doentes com ALS, implicando NO como um importante factor na patogénese de ALS. (d) Coreia de Huntington A patogénese da coreia de Huntington (HD) originada a partir de uma mutação na proteína Htt está ligada à toxicidade excitatória, stress oxidativo e apoptose, em todos os quais, o excesso de NO desempenha um papel claro (Peterson et al., Exp. Neurol. 157:1-18, 1999). O dano oxidativo é uma das maiores consequências de defeitos no metabolismo energético e está presente nos modelos de HD após a injecção com toxinas excitatóriase inibidores mitocondriais (A. Petersen et al., Exp. Neurol. 157:1-18, 1999). Esta disfunção mitocondrial está associada na doença de Huntington a uma perda neuronal selectiva e progressiva 95 (Brown et al., Ann. Neurol. 41:646-653, 1997). O NO pode afectar directamente o complexo IV da cadeia respiratória mitocondrial (Calabrese et al., Neurochem. Res. 25:1215-41, 2000). Os neurónios espinais médios do striatum parecem ser o lavo primário para a geração da disfunção motora em HD. A hiperfosforilação e activação dos receptores de NMDA nestes neurónios provavelmente participa na geração da disfunção motora. Foi mostrado clinicamente que o antagonista NMDA amantadina melhora as discinesias semelhantes a coreia na doença de Huntington (Verhagen Metman et al., Neurology 59:694-699, 2002). Tendo em consideração o papel de nNOS na neurotoxicidade mediada por NMDA, é expectável que inibidores de nNOS, especialmente aqueles com actividade mista contra nNOS/NMDA, ou combinaçãos de compostos com actividade contra nNOS e NMDA possam ser úteis na atenuação e melhoria dos efeitos e ou progressão da coreia de Huntington. Por exemplo, o pretratamento de ratos com 7-nitro-indazol atenua as lesões do striatum resultantes da injecção de malonato, uma lesão que dá origem a uma condição semelhante à coreia de Huntington (Hobbs et al., Ann. Rev. Pharm. Tox. 39:191-220, 1999). No modelo de ratinho transgénico R6/1 de HD exprimindo uma versão mutada do exão 1 de htt humana, exibindo uma repetição de 116 CAG, ratinhos às 11, 19 e 35 semanas exibem um aumento progressivo da peroxidação lipidica com níveis normais de superóxido dismutase (SOD) às 11 semanas, semelhantes a ratinhos do tipo selvagem (WT); um nível máximo às 19 semanas, acima do observado em ratinhos selvagem e correspondente à fase precoce de progressão da doença; e finalmente, níveis decrescentes às 35 semanas, inferiores aos observados para os ratinhos selvagens (Pérez-Sevriano et al., Brain Res. 951:36-41, 2002). O aumento da actividade de SOD é atribuível a um mecanismo neuroprotector compensatório, com os níveis decrescentes às 96 35 semanas correspondendo ao falhanço do mecanismo de neuroprotecçâo. Concomitantemente com os niveis de SOD, os níveis de NOS dependente de cálcio foram os mesmos às 11 semanas tanto para os ratinhos selvagens como R6/1, mas aumentaram significativamente às 19 semanas e caíram às 35 semanas, nos ratinhos R6/1 relativamente aos ratinhos selvagens de controlo. Os níveis de expressão de nNOS também aumentaram dramaticamente em relação aos controlos às 19 semanas mas foram significativamente reduzidos em relação aos controlos às 35 semanas. Não foram observadas diferenças significativas nos níveis de expressão de eNOS, nem foi possível detectar a proteína de iNOS durante a progressão da doença. A expressão fenotípica progressiva da doença, determinada pelo aumento da perda de peso, comportamento de prisão de pés, e movimentos horizontais e verticais, são consistentes com mudanças na actividade de NOS e na expressão de nNOS. Finalmente, os efeitos da administração de L-NAME a ratinhos tanto R6/2 HD transgénicos e selvagens, mostraram melhorias a nível do comportamento de prisão de pés a uma dose de 10 mg/kg, sendo este semelhante aos controlos, o qual piorou com a dose mais elevada de 500 mg/kg (Deckel et al., Brain Res. 919 (1):70-81, 2001). Uma melhoria significativa no aumento de peso em ratinhos HD foi também observada à dosagem de 10 mg/kg, mas este diminuiu, em relação aos controlos, a níveis de dose elevados de L-NAME. Estes resultados demonstram que a administração de uma dos apropriada de um inibidor de NOS, como por exemplo um composto de acordo com a presente invenção, pode ser benéfico para o tratamento de HD. (e) Esclerose múltipla (MS) A esclerose múltipla é uma doença inflamatória desmielinizante do sistema nervoso central involvendo 97 citocinas e outros mediadores inflamatórios. Muitos estudos sugerem que Noe o seu derivado reactivo peroxinitrito estão implicados na patogénese de MS (Acar et al., J. Neurol. 250(5):588-92, 2003; Calabrese et al., Neurochem. Res. 28(9):1321-8, 2003). Em encefalomielite autoimune experimental (EAE), um modelo de MS, os níveis de nNOS estão ligeiramente aumentados na espinal medula de ratos EAE e o tratamento com 7-nitroindazol resulta num atraso significativo no desenvolvimento de paralisia EAE (Shin, J. Vet. Sei. 2 (3) :195-9, 2001) . (f) Neurotoxicidade induzida por metamfetamina A metamfetamina é neurotóxica por destruir as terminações nervosas de dopamina in vivo. Foi demonstrado que a neurotoxicidade induzida por amfetamina pode ser atenuada pelo tratamento com inibidores de NOS in vitro (Sheng et al., Ann. N. Y. Acad. Sei. 801:174-186, 1996) e em modelos animais in vivo (Itzhak et al., Neuroreport 11(13):2943-6, 2000) . Do mesmo modo, o inibidor selectivo de nNOS, AR-17477AR, a 5 mg/kg s. c. em ratinho, foi capaz de evitar a perda, induzida por metamfetamina, da proteína neurofilamentosa NF68 do cérebro de ratinho e evitar a perda de dopamina e ácido homovanílico (HVA) no striatum (Sanchez et al., J. Neurochem. 85(2):515-524, 2003). A administração de um composto de acordo com a presente invenção, quer isoladamente quer em combinação com outro agente terapêutico, como por exemplo um antagonista de NMDA, pode ser útil na protecção ou tratamento de qualquer uma das doenças neurodegenerativas aqui descritas. Adicionalmente, os compostos de acordo com a presente invenção podem ser testados em ensaios padrão usados para avaliar a neuroprotecção (ver por exemplo, Am. J. Physiol. 268:R286, 1995). 98
Dependências químicas e toxicodependências (e. g.
Dependências de drogas, álcool e nicotina)
Um passo essencial no processo de recompensa induzido por drogas e dependências é a regulação da libertação de dopamina a partir dos neurónios dopaminérgicos mesolímbicos. A aplicação crónica de cocaína altera a expressão de proteínas chaca no controlo do nível sináptico de dopamina, o transportador de dopamina (DAT). (a) dependência da cocaína
Estudos demonstraram que os animais se auto-administram estimulantes intravenosos com regularidade e que a dopamina é crítica para os seus efeitos de dependência.
Recentemente, foi mostrado que neurónios contendo NO co-localizam com dopamina em áreas do striatum e da área de tegumento ventral e que NO pode modular a libertação de dopamina (DA) associada ao estimulante. A administração de antagonistas do receptor de dopamina Dl diminui os níveis de marcação de NADPH-diaforase no striatum, um marcador de actividade de NOS, enquanto que antagonistas de D2 produzem o efeito contrário. L-arginina, o substrato de NOS, é também um potente modulador da libertação de DA. Adicionalmente, múltiplos agentes geradores de NO aumentam o influxo de DA ou inibem a reabsorção in vitro e in vivo. Foi demonstrado que L-NAME altera significativamente o mecanismo de dependência da cocaína pela diminuição da quantidade de auto-administração e pelo aumento do tempo de inter-resposta entre injecções de cocaína sucessivas (Pudiak e Bozarth, Soc. Neurosci. Abs. 22:703, 1996). Isto indica que a inibição de NOS pode ser útil no tratamento da dependência de cocaína. 99 (b) Sintomas de tolerância e privação/desmame induzidas por morfina/opióide
Existem muitas evidências suportando o papel das vias de tanto NMDA como NO na dependência de opióides em animais adultos e juvenis. Roedores adultos ou neonatais injectados com sulfato de morfina desenvolvem desmame comportamental após precipitação com naltrexona. Os sintomas de desmame após a iniciação da naltrexona podem ser reduzidos pela administração de inibidores de NOS, como 7-NI ou L-NAME (Zhu e Barr, Psychopharmacology 150(3):325-336, 2000). Num estudo relacionado, foi demonstrado que o inibidor mais selectivo de nNOS, 7-NI, atenuava mais os sintomas induzidos pelo desmame de morfina, incluindo mastigação, salivação e efeitos genitais, que os compostos menos selectivos (Vaupel et al., Psychopharmacology (Berl.) 118 (4) :361-8, 1995) . (c) tolerância e dependência de etanol
De entre os factores que influenciam a dependência de álcool, a tolerância aos efeitos de etanol é um componente importante, por favorecer a bebida exagerada de bebidas alcoólicas (Lê e Kiianmaa, Psychopharmacology (Berl.) 94:479-483, 1988). Num estudo com ratos, a tolerância ao etanol pode evoluir rapidamente para descoordenação motora e hipotermia e pode ser bloqueada pela a administração i. c. v. de 7-NI sem alterar as concentrações de etanol no cérebro (Wazlawik e Morato, Brain Res. Buli. 57(2):165-70, 2002) . Noutros estudos, a inibição de NOS com L-NAME (Rezvani et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 50:265-270, 1995) ou por injecção i. c. v. de antisense de nNOS (Naassila et al., Pharmacol. Biochem, Behav. 67:629-36, 2000), reduziu o consumo de etanol nestes animais. 100 A administração de um composto de acordo com a presente invenção, quer isoladamente quer em combinação com qualquer outro agente terapêutico, como por exemplo um antagonista NMDA, pode ser útil para o tratamento das dependências químicas e de drogas.
Epilepsia A co-administração de 7-NI com certos anti-convulsores, como carbamazepina, mostra um efeito protector sinergístico contra ataques com origem na amígdala em ratos, a concentrações que não alteram o desempenho na rota-rod (Borowicz et al., Epilepsia 41(9):112-8, 2000. Assim, um inibidor de NOS, como por exemplo, um composto de acordo com a presente invenção, quer isoladamente quer em combinação com outro agente terapêutico, como por exemplo um agente anti-epiléptico, pode ser útil para o tratamento da epilepsia ou uma disfunção similar. Exemplos de agentes anti-epilépticos úteis em combinação com a presente invenção incluem carbamazepina, gabapentina, lamotrigina, oxcarbazepina, feniloína, topiramato e valproato.
Nefropatia diabética A excreção urinária de subprodutos de NO está aumentada em ratos diabéticos, após tratamento com estreptozotocina e foi sugerido que a síntese aumentada de NO está envolvida na hiperfiltração diabética glomerular. A isoforma neuronal nNOS é expressa no hansa de Henle e na mucula densa do rim e a inibição desta isoforma, usando 7-NI, reduz a filtração glomerular sem afectar a pressão das arteríolas renais ou o fluxo sanguíneo renal (Sigmon et al., Gen. Pharmacol. 34(2):95-100, 2000). Tanto o inibidor de NOS não selectivo L-NAME como o inibidor selectivo de nNOS 7-NI normalizaram a hiperfiltração renal em animais diabéticos (Ito et al., J. Lab. Clin. Med. 138(3):177-185, 2001). Por isso, a 101 administração de um composto de acordo com a presente invenção pode ser útil para o tratamento da nefropatia diabética.
Formulações de combinação e usos das mesmas
Adicionalmente às formulações descritas acima, um ou mais compostos de acordo com a presente invenção podem ser usados em combinação com outros agentes terapêuticos. Por exemplo, um ou mais compostos de acordo com a presente invenção podem ser combinados com outro adicional inibidor de NOS. Exemplos de inibidores úteis para este objectivo incluem, sem se limitarem a estes, aqueles compostos descritos na patente US 6,231,747; pedidos de patente US números de série 09/127,158, 09/325,480, 09/403,177, 09/802,086, 09/826,132, 09/381,887, 10/476,958, 10/483,140, 10/484,960, 10/678,369, 10/819,853, 10/938,891; pedidos de patente internacionais número WO 97/36871, WO 98/24766, WO 98/34919, WO 99/10339, WO 99/11620, e WO 99/62883.
Num outro exemplo, um ou mais compostos de acordo com a presente invenção podem ser combinado com um agente antiarritmia. Exemplos de agentes antiarritmia incluem, sem se limitarem a estes, lidocaina e mixiletina.
Os agonistas GABA-B, agonistas do receptor α-2-adrenérgico, antagonistas de colecistoquinina, agonista de 5HTiB/id ou antagonistas de CGRP podem também ser usados com um ou mais compostos de acordo com a presente invenção. Exemplos não limitativos de agonistas do receptor α-2-adrenérgico incluem clonidina, lofexidina e propanolol. Exemplos não limitativos de antagonistas de colecistoquinina incluem L-365,260; LI-988; LY262691; S0509, ou aqueles descritos na patente US 5,618,811. Exemplos não limitativos de agonistas de 5HTib/id que podem ser usados em combinação com um 102 composto de acordo com a presente invenção incluem dihidroegotamina, eletriptano, frovatriptano, naratriptano, rizatriptano, sumatriptano ou zolmitriptano. Exemplos não limitativos de antagonistas de CGRP que podem ser usados em combinação com um composto de acordo com a presente invenção incluem análogos de quinino como os descritos na publicação internacional WO 9709046, antagonistas não peptidicos como os descritos na publicações internacionais números WO 0132648, WO 0132649, WO 9811128, WO 9809630, WO 9856779, WO 0018764, ou outros antagonistas como as SB—(+)— 273779 ou BIBN-4096BS.
Antagonistas da substância P, também conhecidos por antagonistas do receptor NKi, são também úteis em combinação com um ou mais compostos de acordo com a presente invenção. Exemplos de inibidores úteis para este fim incluem, sem se limitarem a estes, aqueles compostos descritos nas patentes US número 3,862,114, 3,912,711 4,472,305, 4,481,139, 4,680,283, 4,839,465, 5,102,667 5,162,339, 5,164,372, 5,166,136, 5,232,929, 5,242,944 5,300,648, 5,310,743, 5,338,845, 5,340,822, 5,378,803 5,410,019, 5,411,971, 5,420,297, 5,422,354, 5,446,052 5,451,586, 5,525,712, 5,527,811, 5,536,737, 5,541,195 5,594,022, 5,561,113, 5 ,576,317, 5, 604,247, 5, 624,950, 5,635,510 ; e nas publicações internacionais números WO 90/05525, WO 91/09844, WO 91/12266, WO 92/06079, WO 92/12151, WO 92/15585, WO 92/20661, WO 92/20676, WO 92/21677, WO 92/22569, WO 93/00330, WO 93/00331, WO 93/01159, WO 93/01160, WO 93/01165, WO 93/01169, WO 93/01170, WO 93/06099, WO 93/10073, WO 93/14084, WO 93/19064, WO 93/21155, WO 94/04496, WO 94/08997, WO 94/29309, WO 95/11895, WO 95/14017, WO 97/19942, WO 97/24356, WO 97/38692, WO 98/02158, e WO 98/07694; patentes europeias números EP 284942, 327009, 333174, 336230, 103 360390, 394989, 428434, 429366, 443132, 446706, 484719, 499313, 512901, 512902, 514273, 514275, 515240, 520555, 522808, 528495, 532456, e 591040.
Classes adequadas de agentes anti-depressivos que podem ser usadas em combinação com um composto de acordo com a presente invenção incluem, sem se limitarem a estes, inibidores da reabsorção de norepinefrina, inibidores selectivos da reabsorção de serotonina (SSRIs), inibidores selectivos da reabsorção de noradrenalina/norepinefrina (NARIs), inibidores da oxidase de monoamina (MAOs), inibidores reversíveis da oxidase de monoamina (RIMAs), inibidores de dupla acção na reabsorção de serotonina/noradrenalina (SNRls), antagonistas de α-adrenoreceptores, antidepressivos noradrenérgicos e serotonérgicos específico (NaSSAs), e anti-depressivos atípicos.
Exemplos não limitativos de inibidores de reabsorção de norepinefrina incluem aminas terciárias tricíclicas e aminas secundárias tricíclicas, como por exemplo adinazolame, aminoptina, amitriptilina, amoxapina, butriptilina, clomipramina, demexiptilina, desmetilamitriptilina, desipramina, dibenzepina, dimetacrina, doxepina, dotiepina, femoxetina, fluacizina, imipramina, óxido de imipramina, iprindolo, lofepramina, maprotilina, melitraceno, metapramina, norclolipramina, nortriptilina, noxiptilina, opipramol, perlapina, pizotifeno, pizotilina, propizepina, protriptilina, quinupramina, tianeptina, trimipramina, trimipramino-amiltriptilinóxido bem como sais farmaceuticamente aceitáveis destes. 104
Exemplos não limitativos de inibidores selectivos da reabsorção de serotonina incluem por exemplo, fluoxetina, fluvoxamina, paroxetina e sertralina, bem como sais farmaceuticamente aceitáveis destes.
Exemplos não limitativos de inibidores selectivos da reabsorção de noradrenalina/norepinefrina incluem, por exemplo atomoxetina, bupropiona; reboxetina e tomoxetina.
Exemplos não limitativos de inibidores selectivos da oxidase de monoamina incluem, por exemplo isocarboxazida, fenezina, tranilocipromina e selegilina bem como sais farmaceuticamente aceitáveis destes. Outros inibidores de oxidase de monoamina úteis em combinação com os compostos de acordo com a presente invenção incluem clorgilina, cimoxatona, befloxatona, brofaromina, bazinaprina, BW-616U (Burroughs Wellcome), BW-1370U87 (Burroughs Wellcome), CS-722 (RS-722) (Sankyo), E-2011 (Eisai), harmina, harmalina, moclobemida, PharmaProjects 3975 (Hoechst), RO 41-1049 (Roche), RS-8359 (Sankyo), T-794 (Tanabe Seiyaku), toloxatona, K-Y 1349 (Kalir e Youdim), LY-51641 (Lilly), LY-121768 (Lilly), M&amp;B 9303 (May &amp; Baker), MDL 72394 (Marion Merrell), MDL 72392 (Marion Merrell), sercloremina e MO 1671, bem como sais farmaceuticamente aceitáveis destes. Inibidores reversíveis da oxidase de monoamina que podem ser usados em conjunto com os compostos da presente invenção incluem por exemplo, moclobemida e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.
Exemplos não limitativos de bloqueadores de dupla acção na reabsorção de serotonina/norepinefrina incluem por exemplo, duloxetina, milnaciprano, mirtazapina, nefazodona e venlafaxina. 105
Exemplos não limitantes de outros anti-depressivos que podem ser usados num método de acordo com a presente invenção incluem adinazolame, alaproclato, aminoptina, combinação de amitriptilina/clordiazepóxido, atipamezol, azamianserina, bazinaprina, befuralina, bifemelano, binodalina, bipenamol, brofaromina, caroxazona, cericlamina, cianopramina, cimoxatona, citaloprame, clemeprol, clovoxamina, dazepinilo, deanol, demexiptilina, dibenzepina, dotiepina, droxidopa, enefexina, estazolame, etoperidona, fengabina, fezolamina, fluotraceno, idazoxano, indalpina, indeloxazina, levoprotilina, litoxetina; medifoxamina, metralindolo, mianserina, minaprina, montirelina, nebracetame, nefopame, nialamida, nomifensina, norfluoxetina, orotirelina, oxaflozano, pinazepame, pirlindona, ritanserina, roliprame, sercloremina, setiptilina, sibutramina, sulbutiamina, sulpirida, teniloxazina, tozalinona, timoliberina, tiflucarbina, tofenacina, tofisopame, toloxatona, veraliprida, viqualina, zimelidina, e zometrapina, bem como sais farmaceuticamente aceitáveis destes, e erva de St. John's wort, ou Hypencium perforatum, ou extractos desta.
Num outro exemplo, os opióides podem ser usados em combinação com um dos compostos de acordo com a presente invenção. Exemplos de opióides úteis para este fim incluem, sem serem limitativos a estes, alfentanilo, butorfanol, buprenorfina, dextromoramida, dezocina, dextropropoxifeno, codeina, dihidrocodeína, difenoxilato, etorfina, fentanilo, hidrocodona, hidromorfona, cetobemidona, loperamida, levorfanol, levometadona, meperidina, meptazinol, metadona, morfina, morfina-6-glucurónido, nalbufina, naloxona, oxicodona, oximorfona, pentazocina, petidina, piritramida, propoxilfeno, remifentanilo, sulfentanyilo, tilidina, e tramadol. 106
Num outro exemplo adicional, compostos anti-inflamatórios, como por exemplo agentes esteróides ou medicamentos anti-inflamatórios não esteróides (AINEs), podem ser usados em combinação com um ou mais compostos de acordo com a presente invenção. Os exemplos não limitativos de agentes esteróides incluem prednisolona e cortisona. Exemplos não limitativos de ΑΙΝΕ's incluem acetemacina, aspirina, celecoxib, deracoxib, diclofenac, diflunisal, etenozamida, etofenamato, etoricoxib, fenoprofeno, ácido flufenâmico, flurbiprofeno, lonazolac, lornoxicame, ibuprofeno, indometacina, isoxicame, cebuzona, cetoprofeno, cetorolac, naproxeno, nabumetona, ácido niflúmico, sulindac, tolmetina, piroxicame, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, meloxicame, metamizol, mofebutazona, oxifenobutazona, parecoxib, fenidina, fenilobutazona, piroxicame, propacetalmol, propifenazona, rofecoxib, salicilamida, suprofeno, ácido tiaprofénico, tenoxicame, valdecoxib, 4-(4-ciclohexilo-2-metilóxazol-5-ilo)-e-ilo-2-fluorobenzeno-sulfonamida, N-[2-(ciclohexilóxi)-4- mitrofenilo]metano-sulfonamida, 2- (3,4-difluorofenilo)-4-(3-hidróxi-3-metilobutóxi)-5-[4-(metilo-sulfonilo) fenilo] -3 (2H)-piridazinona, e 2-(3,5-difluorofenilo)-3-[4- (metilosulfonilo)fenilo]-2-ciclopenteno-l-ona). Os compostos de acordo com a presente invenção também podem ser usados em combinação com acetaminofeno.
Qualquer uma das combinações acima pode ser usada para o tratamento apropriado da doença, disfunção ou estado. Exemplos de utilizações de combinações de um composto de acordo com a presente invenção e um outro agente terapêutico são descritas abaixo. 107
Combinações de inibidores de NOS e opióides em dor crónica e neuropática
Lesões de nervos podem originar estados de dor anormais, conhecidos como dor neuropática. Alguns dos sintomas clínicos incluem alodínia táctil (respostas nociceptivas a estímulos mecânicos normalmente inócuos), hiperalgesia (aumento da intensidade da dor em resposta a estímulos normalmente dolorosos), e dor espontânea. A ligação do nervo espinal (SNL) em ratos é um modelo animal para o estudo de dor neuropática que produz dor espontânea, alodínia, e hiperalgesia, análogos aos sintomas clínicos observados nos doentes humanos (Kim and Chung, Pain 50:355-363, 1992; Seltzer, Neurosciences 7:211-219, 1995). A dor neuropática pode ser particularmente insensível ao tratamento com opióides (Benedetti et al., Pain 74:205-211, 1998) e é ainda considerada ser relativamente refractária aos analgésicos opiáceos (MacFarlane et al., Pharmacol. Ther. 75:1-19, 1997; Watson, Clin. J. Pain 16:S49-S55, 2000). Apesar de o aumento da dose poder ultrapassar a redução de eficácia dos opiáceos, este está limitado ao aumento dos efeitos secundários e tolerância. A administração de morfina é conhecida por activar o sistema de NOS, o que limita a acção analgésica desta molécula (Machelska et al., NeuroReport 8:2743-2747, 1997; Wong et al., Br. J. Anaeth. 85:587, 2000; Xiangqi e Clark, Mol. Brain Res. 95:96-102, 2001). Contudo, foi demonstrado que a administração sistémica de morfina e L-NAME podem atenuar a alodínia mecânica e ao frio a doses abaixo do limite ao qual nenhum dos medicamentos é eficaz, quando administrado isoladamente (Ulugol et al., Neurosci. Res. Com. 30(3):143-153, 2002) . O efeito da co-administração de L-NAME na analgesia de morfina parece ser mediada por nNOS, uma vez que L-NAME perde a sua capacidade de potenciar a analgesia 108 por administração de morfina em ratinhos mutantes deletados para nNOS (Clark e Xiangqi, Mol. Brain Res. 95:96-102, 2001) . Uma melhoria da analgesia foi demonstrada em modelos de movimento da cauda (tail-flick) e de pressão da pata, quando foi coadministrado L-NAME ou 7-NI com um agonista selectivo tanto do receptor opióide mu, como do delta ou do kappa (Machelska et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 282:977-984, 1997).
Apesar de os opióides serem uma terapêutica importante para o tratamento de dor moderada a severa, adicionalmente aos habituais efeitos secundários que limitam a sua utilidade, o surgimento algo paradoxal de hiperalgesia induzida por opióides pode na realidade contribuir para tornar os doentes mais sensíveis à dor e potencialmente agravar a sua dor (Angst e Clark, Anesthesiology, 2006, 104 (3), 570-587; Chu et al., J. Pain 2006, 7(1) 43-48). O desenvolvimento de tolerância e hiperalgesia induzida por opiáceos é consistente com o aumento dos níveis de produção de NO no cérebro. A reduzida resposta analgésica aos opióides é devida a uma resposta hiperalgésica sobreactivada, induzida por NO (Heinzen e Pollack, Brain Res. 2004, 1023, 175-184).
Assim, a combinação de um inibidor de nNOS com um opióide (por exemplo, as combinações referidas acima) podem melhorar a analgesia em dor neuropática e impedir o desenvolvimento de tolerância aos opiáceos e hiperalgesia induzida por opiáceos.
Combinações de antidepressivos-inibidores de NOS para dor crónica, dor neuropática, dor de cabeça crónica ou enxaqueca
Muitos antidepressivos são usados para o tratamento de dor neuropática (McQuay et al., Pain 68:217-227, 1996) e 109 enxaqueca (Tomkins et al., Am. J. Med. 111:54-63, 2001), e actuam via o sistema serotonérgico ou noradrenérgico. O NO funciona como um neuromodulador destes sistemas (Garthwaite e Boulton, Annu. Rev. Physiol. 57:683, 1995). Foi demonstrado que 7-NI potência a libertação de noradrenalina (NA) pelo agonista do receptor de acetilcolina nicotínico via o transportador de NA (Kiss et al., Neuroscient Lett. 215:115-118, 1996). Foi demonstrado que a administração local de antidepressivos, como paroxetina, tianeptina e imipramina diminuem os níveis de NO no hipocampo (Wegener et al., Brain Res. 959:128-134, 2003). É possível que NO desempenhe um papel importante no mecanismo pelo qual os antidepressivos são eficazes para o tratamento da dor e da depressão, e que uma combinação de um inibidor de nNOS em conjunto com o um anti-depressivo, como por exemplo as combinações aqui descritas acima, irá produzir melhores tratamentos.
Combinações de um agonista de serotonina 5HTib/id/if ou antagonista de CGRP e de um inibidor de NOS em enxaqueca. A administração de glicerilo trinitrato (GTN), um dador de NO, induz dores de cabeça imediatas em indivíduos normais e resulta em ataques de enxaqueca retardados em doentes sofrendo de enxaquecas regulares, com um período latência de 4 a 6 horas (Iversen et al., Pain 38:17-24, 1989) . Em doentes com ataques de enxaqueca, os níveis de CGRP (o péptido relacionado com o gene da calcitonia), um potente vasodilatador, na artéria carótida correlaciona-se com o início e com o fim do ataque da enxaqueca (Durham, Curr Opin Investig Drugs 5(7):731-5, 2004). Sumatriptano, um medicamento contra a enxaqueca tendo afinidade para os receptores 5HTiB, 5HTiD e 5HTiF, reduz a dor de cabeça imediata induzida por GTN e em paralelo, contrai as artérias cerebrais e extracerebrais (Iversen and Olesen, 110
Cephalagia 13 (Suppl 13):186, 1993). O medicamento anti-enxaqueca rizatriptano também reduz os níveis plasmáticos de CGRP a seguir à redução da dor de enxaqueca (Stepien et al., Neurol. Neurochir. Pol. 37(5):1013-23, 2003). Tanto NO como CGRP foram assim relacionados como a causa da enxaqueca. Foi demonstrado que os agonistas de serotonina 5HT1B/1D bloqueiam a cadeia de sinalização de NO através do receptor de NMDA, em cortes de córtex cerebral (Strosznajder et al., Cephalagia 19(10):859, 1999). Estes resultados sugerem que uma combinação de um composto de acordo com a presente invenção e um agonista selectivo ou não selectivo para 5HTiB/id/if ou um antagonista de CGRP, como as combinações acima descritas, deverão ser úteis para o tratamento da enxaqueca.
Composições farmacêuticas
Os compostos de acordo com a presente invenção são preferencialmente formulados em composições farmacêuticas para a administração em indivíduos humanos numa forma de administração biologicamente compatível, e adequada para a administração in vivo. Do mesmo modo, noutro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica contendo o composto de acordo com a presente invenção numa mistura com um diluente ou excipiente adequado.
Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser usados na sua forma de base livre, sob a forma de sais, solvatos e como pro-medicamentos. Todas as formas destes compostos são objecto da presente invenção. Em concordância com os métodos de acordo com a presente invenção, os compostos descritos ou sais, solvatos, ou pro-medicamentos dos mesmos podem ser administrados a doentes sob uma variedade de formas, dependendo da via de administração escolhida, como o conhecido dos especialistas. Os compostos 111 de acordo com a presente invenção podem ser administrados, por exemplo, por via oral, parentérica, bucal, sublingual, nasal, rectal, em forma de pensos, bombas ou transdérmica e as composições farmacêuticas são formuladas em concordância. A administração parentérica inclui os modos de administração intravenoso, intraperitoneal, subcutâneo, intramuscular, transepitelial, nasal, intrapulmonar, intratecal, rectal e tópico. A administração parentérica pode ser executada por uma infusão continua durante um período de tempo definido.
Um composto de acordo com a presente invenção pode ser administrado oralmente, por exemplo, com um diluente inerte ou com um excipiente assimilável comestível, ou pode ser envolvido em cápsulas de gelatina de invólucro duro ou mole, ou pode ser comprimido em comprimidos, ou pode ser incorporado directamente na alimentação. Para uma administração terapêutica oral, um composto de acordo com a presente invenção pode ser incorporado com um excipiente e usado sob a forma de comprimidos ingeríveis, comprimidos da boca, drageias, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, bolachas e semelhantes.
Um composto de acordo com a presente invenção pode também ser administrado parentericamente. Soluções de um composto de acordo com a presente invenção podem ser preparadas em água adequadamente misturadas com um tensoactivo, como hidróxipropilocelulose. As dispersões podem também ser preparadas em glicerol, polietileno glicóis líquidos, DMSO e misturas destes com ou sem álcool, e em óleos. Sob condições normais de armazenamento e utilização, estas preparações podem conter um preservante para evitar o crescimento de microrganismos. Os procedimentos convencionais e os ingredientes para a selecção e preparação de formulações adequadas são descritas, por 112 exemplo, em Pharmaceutical Sciences (2003, 20a Edição) de Remington e em The United States Pharmacopeia: The National Formulary (USP 24 NF 19), publicado em 1999.
As formas farmacêuticas aceitáveis para uso injectável incluem soluções aquosas ou dispersões estéreis e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções injectáveis ou dispersões estéreis. Em todos os casos a forma deve ser estéril e deve ser fluida na medida em que facilita a sua administração por intermédio de uma seringa.
As composições para administração nasal podem ser convenientemente formuladas sob a forma de aerossóis, gotas, géis e pós. As formulações de aerossol incluem tipicamente uma solução ou suspensão fina da substância activa num solvente, aquoso ou não aquoso, fisiologicamente aceitável, e são normalmente usados em quantidades de dose única ou multidose, sob a forma estéril num contentor selado, o qual pode ter a forma de um cartucho ou ser novamente cheio por intermédio de um aparelho de atomização. Em alternativa, o contentor selado pode ser um aparelho de dispensa unitário, como um inalador nasal de dose única ou um dispensador de aerossol adaptado a uma valvúla de medição, o qual é suposto ser desperdiçado após a sua utilização. Nas formas em que a dosagem inclui um dispensador de aerossol, estas irão incluir um propulsor, o qual pode ser um gás comprimido, como ar comprimido ou um propulsor orgânico, como fluoroclorohidrocarboneto. As formas de doseamento do aerosol podem também ser sob a forma de um atomizador de bomba.
As composições adequadas para a administração bucal ou sublingual incluem comprimidos, drageias e pastilhas, nas quais o ingrediente activo é formulado com um excipiente, 113 como açúcar, acácia, goma arábica, ou gelatina e glicerina. As composições para a administração rectal são conveninentemente preparadas sob a forma de supositórios contendo uma base convencional de supositório, como manteiga de cacau.
Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser administrados a um animal, isoladamente ou em combinação com excipientes farmaceuticamente aceitáveis, como o referido acima, sendo a proporção dos mesmos determinada pela solubilidade e natureza química do composto, via de administração escolhida e prática farmacêutica padrão. A dosagem dos compostos de acordo com a presente invenção, e/ou compostos contendo um composto de acordo com a presente invenção, podem variar dependendo de vários factores, como as propriedades farmacodinâmicas dos compostos; o modo de administração; a idade, saúde e peso do recipiente; a natureza e extensão dos sintomas; a frequência do tratamento, e o tipo do tratamento adicional, se algum existir; e da taxa de remoção do composto no animal a ser tratado. Um especialista pode determinar a dosagem apropriada com base nos factores acima referidos. Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser administrados inicialmente numa dosagem adequada que precise de ser ajustada como o necessário, dependendo da resposta clínica. Em geral, são obtidos resultados satisfatórios quando os compostos de acordo com a presente invenção são administrados a um humano à uma dose diária de 0,05 mg e 3000 mg (medido na sua forma sólida). Uma dose preferida situa-se no intervalo entre 0,05-500 mg/kg, sendo preferível entre 0,5-50 mg/kg. 114
Um composto de acordo com a presente invenção pode ser usado isoladamente ou em combinação com outros agentes que tenham actividade contra NOS, ou em combinação com outros tipos de tratamento (os quais podem ou não inibir NOS) para o tratamento, prevenção e/ou redução do risco de acidente vascular cerebral, dor neuropática ou enxaqueca, ou outras disfunções que possam beneficiar da inibição de NOS. Em tratamentos combinatórios, as dosagens de um ou mais dos compostos terapêuticos podem ser reduzidas face às dosagens normais quando administrados isoladamente. Neste caso, as dosagens dos compostos quando combinadas devem conferir um efeito terapêutico.
Adicionalmente aos usos terapêuticos acima referidos, um composto de acordo com a presente invenção pode também ser usado em ensaios de diagnóstico, ensaios de rastreio e como uma ferramenta de pesquisa.
Em ensaios de diagnóstico, um composto de acordo com a presente invenção pode ser útil na identificação ou detecção da actividade de NOS. Para tal utilização, o composto pode ser marcado radioactivamente (como descrito noutro local do presente documento) e posto em contacto com a população de células de um organismo. A presença da marcação radioactiva nas células pode indicar actividade de NOS.
Nos ensaios de rastreio, um composto de acordo com a presente invenção pode ser usado para identificar outros compostos que inibam NOS, por exemplo, como medicamentos de primeira geração. Enquanto ferramentas de pesquisa, os compostos de acordo com a presente invenção podem ser úteis em ensaios enzimáticos e ensaios para o estudo da localização da actividade de NOS. Tal informação pode ser útil, por exemplo para o diagnóstico e monitorização de 115 estados de doença ou da sua progressão. Nestes ensaios, um composto de acordo com a presente invenção pode também ser marcado radioactivamente.
Os exemplos seguintes não limitativos são ilustrativos da presente invenção:
Exemplo 1: Preparação do Composto 4
\ hidrólise U -------......w.
m (a) Preparação do composto 2: lH-indolo-5-ilo-amina (composto 1, 100 mg, 0,757 mmol) foi dissolvido em tetrahidrofurano anídrico (4,5 mL) num frasco pequeno, purificado com árgon. Adicionou-se isotiocianato de benzilo (123 mg, 0, 757 mmol), gota a gota, e a reacçâo foi agitada à temperatura ambiente em meio argónico durante 60 horas. Adicionou-se 3-(dietilenotriamina)propilo- sílica gel funcional (0,5 g), mantendo a agitação por mais 30 minutos. A solução foi então filtrada utilizando como eluentes acetato de etilo/hexano 3:7, O produto (composto 2, 90 mg, 40,3% rendimento) foi obtido por purificação numa coluna de cromatografia de sílica gel (30% acetato de etilo/hexano); 1H NMR (CDCls) δ: 6,59 (s, 1H) , 7,25-7,26 (m, 2H) , 7,51 (s, 1H), 7,54-7, 66 (m, 3H), 7,93 (m, 3H), 8,32 (br s, 1H), 9,15 (s, 1H) , 12,50 (s, 1H) . (b) Preparação do composto 3: l-benzilo-3-(lH-indolo-5-ilo)-tio-ureia, (composto 2, 90 mg, 0,305 mmol) foi 116 dissolvido em tetrahidrofurano anídrico (5 mL) num frasco pequeno, purificado com árgon. 0 recipiente da reacção foi equipado com um condensador e colocado num banho de óleo pré-aquecido a 60°C. Foi adicionada uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 2M (0,6 mL) e a reacção foi agitada até refluxo durante 4 horas. Esta preparação resultou no composto 3 (22 mg, 38,0% rendimento). (c) Preparação do composto 4: (lH-indolo-5-ilo)-tio-ureia (composto 3, 22 mg, 0,116 mmol) foi dissolvido em DMF (2,5 mL). Esta solução foi misturada em meio argónico e, simultaneamente, foi adicionado iodeto de etilo (18,1 mg, 0,116 mmol) gota-a-gota. Adicionou-se carbonato de potássio (48,01 mg, 0,347 mmol) e a reacção foi agitada durante 20 horas à temperatura ambiente. A reacção foi tratada com água (5 mL) e diclorometano (20 mL) e decantada. A camada orgânica foi filtrada a seco (MgSCU) e concentrada, originando o composto 4,
Exemplo 2: Preparação do Composto 5
(a) Preparação do composto 5: lH-indolo-5-ilo-amina (Composto 1, 59 mg, 0,45 mmol) e bromidrato de éster fenilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (142,7 mg, 0,47 mmol) foram dissolvidos em etanol absoluto (2,0 mL) num recipiente seco, purificado com árgon. A reacção foi misturada em meio argónico à temperatura ambiente durante 17 horas. A solução foi dissolvida em éter dietilico (20 mL) , formando-se um precipitado bronzeado, que foi recolhido, lavado com éter e seco por sucção, resultando na 117 produção do composto 5 sob a forma de um sólido bronzeado (121,4 mg, HBr sal, 84% rendimento); XH NMR (DMSO-d6) δ: 10,9 (s, 1H, NH), 7,74 (d, 1H, J=3,4 Hz), 7,63 (d, 1H, J=4,88 Hz), 7,35 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,29 (s, 1H), 7,12 (t, 1H, J=4,88 Hz), 7,03 (s, 1H) , 6,69 (d, 1H, J=8,3 Hz), 6,35 (br s, 2H), 6,35 (s, 1H).
Exemplo 3: Preparação do Composto 9
(a) Preparação do composto 7: 6-nitroindolo (composto 6, 95 mg, 0,59 mmol) e hidrocloreto de l-(2-cloroetilo) pirrolidina (100 mg, 0,59 mmol) foram dissolvidos em DMF (3 mL) num frasco purificado com árgon. A reacção foi colocada num banho de óleo pré-aquecido a 50°C e agitada em meio argónico na presença de carbonato de potássio (244 mg, 1,77 mmol), durante 24 horas. Após arrefecimento, o frasco da reacção foi colocado num banho de gelo e a reacção diluída com água gelada (10 mL) e acetato de etilo. A reacção foi decantada sendo a camada orgânica recolhida e lavada duas vezes com salmoura. As soluções de lavagem foram combinadas e re-extraídas com Acetato de etilo. Os extractos orgânicos foram combinados e secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados até se obter um óleo amarelo. O produto foi colocado em metanol (2 mL), acidificado com HCl a 2n (15 mL) e filtrado para remover todo o material insolúvel. A reacção foi evaporada 118 até secar e o óleo residual colocado em elevado vácuo durante a noite para obter um sólido amarelo (composto 7, 63 mg, 41,2% rendimento); ΧΗ NMR (CDCI3; livre de bases) δ: 8,37 (s, 1H) , 8,02 (dd, 1H, J=2,0, 8,5 Hz), 7,64 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,46 (d, 1H, J=3,2 Hz), 6,59 (d, 1H, J=3,2 Hz), 4,34 (t, 2H, J=6,9 Hz), 2,92 (t, 2H, J=6,9 Hz), 2,56 (m, 4H) , 1,82-1,74 (m, 4H); MS (APCI + ) 260,0 (M+l) . (b) Preparação do composto 8: 6-nitro-l-(2-pirrolidino-l- ilo-etilo)-1H indolo (composto 7, 63 mg, 0,243 mmol) foi colocado num frasco pequeno, purificado com árgon, equipado com condensador e agitador magnético. Foi adicionado etanol absoluto desnaturado (5 mL), seguido de hidrato de cloreto de estanho (II) (202 mg, 1,07 mmol). A solução foi aquecida até refluxo num banho de óleo durante 1 hora. Após arrefecimento, a mistura foi diluída com Acetato de etilo (10 mL) e solução aquosa 3M de hidróxido de sódio, seguindo-se uma lavagem com salmoura. Os extractos orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados para obtenção de um óleo castanho. O produto foi purificado numa coluna de cromatografia de sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano), resultando 0 composto 8 como um óleo castanho (51,6 mg, 92,6% rendimento); XH NMR (CDC13) δ: 7,34 (d, III, J=8,5
Hz), 6,93 (d, 1H, J=3,2 Hz), 6,66 (s, 1H), 6,56 (dd, 1H, J=8,5, 2,0 Hz), 4,17 (t, 2H, J=7,3 Hz), 2,90 (t, 2H, J=7,3 Hz), 2,57 (m, 4H) , 1,83-1,76 (m, 4H); MS (ESI + ) : 230 (M+l). (c) Preparação do composto 9: 1-(2-pirrolidino-l-ilo- etilo)-lH-indolo-6-ilo amina (composto 8, 51,6 mg, 0,225 mmol) e bromidrato de éster fenílico do ácido tiofeno-2-carboximidotióico (68 mg, 0,225 mmol) foram dissolvidos em metanol (4 mL) num frasco pequeno, purificado com árgon. A reacção foi agitada em meio argónico durante 21 horas à 119 temperatura ambiente. 0 solvente foi evaporado e o produto purificado através de uma coluna de cromatografia de sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) até obtenção do composto 9 como um óleo castanho (86 mg, &gt;100% rendimento, nota: o produto é hidroscópico); 2H NMR (CDC13; 200 MHz) δ: 7,57 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,43-7,40 (m, 2H) , 7,09-7,05 (m, 2H) , 6,99 (s, 1H) , 6,78 (dd, 1H, J=l,6, 8,1 Hz), 6,44 (d, 1H, J=3,2 Hz), 4,88 (brs, 2H, NH2), 4,22 (t, 2H, J=7,7 Hz), 2,87 (t, 2H, J=7,7 Hz), 2,55 (br s, 4H) , 1,78 (m, 4H).
Exemplo 4: Preparação do Composto 12
(a) Preparação do composto 10: 6-nitroindolo (composto 6, 315,3 mg, 1,94 mmol), carbonato de potássio (804 mg, 5,82 mmol), e hidrocloreto de cloreto de 2-dimetilo-aminoetilo (363 mg, 2,52 mmol) foram dissolvidos em DMF (4 mL) num frasco purificado com árgon. A reacção foi colocada em banho de óleo pré-aquecido a 50°C e agitada em meio argónico durante 21,5 horas. A mistura foi transferida para outro frasco a que foi adicionada uma alíquota de hidrocloreto de cloreto de 2-dimetilo-aminoetilo (363 mg, 2,52 mmol). Este frasco foi selado e a mistura aquecida por mais 24 horas. Depois de arrefecida até à temperatura ambiente, a reacção foi decantada e diluída com Acetato de etilo (25 mL) e água gelada (30 mL) . As camadas foram separadas, sendo a camada orgânica lavada mais duas vezes com água gelada (2 x 20 mL) . Os extractos orgânicos foram 120 secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados para obtenção de um sólido. O produto resultante foi purificado, utilizando uma coluna de cromatografia de sílica gel (1:1 acetato de etilo/hexano para eluir o material inicial, seguida de 5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano), até obtenção do composto 10, como um óleo amarelo (96,5 mg, 23% rendimento); 1H NMR (CDCI3) δ: 8,35 (s, 1H) , 7,99 (dd, 1H, J=1,6, 8,9 Hz), 7,64 (d, J=8,9 Hz), 7,46 (d, 1H, J=2,8 Hz), 6,59 (d, 1H, J=2,8 Hz); MS (APCI + ) 234 (M+l) . (b) Preparação do composto 11: dimetilo-[2-(6-nitro-indolo-1-ilo)-etilo] amina (composto 10, 74,3 mg, 0,339 mmol) e hidrato de cloreto de estanho (II) (267 mg, 1,41 mmol) foram colocados num frasco pequeno purificado com árgon e equipado com um condensador e um agitador magnético. Foi adicionado etanol desnaturado (5 mL) . A solução foi aquecida até refluxo num banho de óleo durante 3 horas. A mistura foi diluída com acetato de etilo (20 mL) e solução aquosa de hidróxido de sódio a 3M. A reacção foi decantada e a camada orgânica recolhida. Esta foi lavada mais duas vezes com solução aquosa de hidróxido de sódio a 3M (2 x 20 mL) . A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto foi purificado numa coluna de cromatografia de sílica gel para obter o composto 11 como um óleo negro (33,5 mg, 48,6% rendimento); XH NMR (CDCI3) δ: 7,39 (d, 1H, J=8,5 Hz), 6,93 (d, 1H, J=3,2 Hz), 6,64 (s, 1H), 6,57 (d, 1H, J=8,5 Hz), 6,37 (d, 1H, J=3,2 Hz), 4,13 (t, 2H, J=7,3 Hz), 2,72 (t, 2H, J=7,3 Hz), 2,31 (s, 6H) . (c) Preparação do composto 12: 1-(2-dimetilo-amina-etilo)-lH-indolo-6-ilo amina (composto 11, 33 mg, 0,162 mmol) e bromidrato de éster fenílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (53 mg, 0,178 mmol) foram dissolvidos em 121 metanol num frasco pequeno, purificado com árgon. A reacção foi agitada em meio argónico durante 27 horas, à temperatura ambiente. 0 solvente foi evaporado e o resíduo purificado via coluna de cromatografia de sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obter um sólido castanho, que foi recristalizado em acetato de etilo e hexano, resultando no composto 12 (17,8 mg, 35,2% rendimento); NMR (DlVISO-d^) δ: 7,74 (d, 1H, J=3,l Hz), 7,60 (d, 1H, J=5,0 Hz), 7,45 (d, 1H, J=8 Hz), 7,24 (d, 1H, J=2,7 Hz), 7,11 (t, 1H, J=3,9 Hz), 6,91 (s, 1H), 6,59 (d, 1H, J=8 Hz), 6,34 (m, 3H), 4,19 (t, 2H, J=6,7 Hz), 2,59 (t, 2H, J=6,7 Hz), 2,20 (s, 6H) .
Exemplo 5: Preparação do Composto 15
(a) Preparação do composto 13: 1-(2-dimetilo-amina-etilo)-lH-indolo-6-ilo amina (composto 11, 311,4 mg, 1,532 mmol) foi suspenso em tetrahidrofurano anídrico (5 mL) num frasco purificado com árgon. A adição de isotiocianato de benzilo (0,25 mL, 1,84 mmol) levou à completa dissolução da amina. A solução castanha resultante foi agitada à temperatura ambiente em meio argónico durante 24 horas. A reacção foi terminada com 3-(dietilenotriamina)propilo-sílica gel functional (482 mg), agitada por mais 2 horas, filtrada e concentrada. O produto resultante foi purificado via coluna de cromatografia de sílica gel (3,5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obtenção do composto 13 (180,1 mg, 32,1% rendimento); 1E NMR (CDC13) δ: 2,31 (s,6H), 2,70-2,77 (d, 2H), 4,20-4,27 (d, 2H) , 6, 49-6, 50 (s, 1H) , 7,19-7,26 122 (m, 1H), 7, 54-7, 63 (m, 5H) , 7,89-7,93 (m, 2H) , 8,14 (s, 1H) . (b) Preparação do composto 14: l-benzoílo-3-[1-(2-etilo-dimetilo-amino)-lH-indolo-6-ilo]-tioureia (composto 13, 133,6 mg, 0,365 mmol) foi dissolvido em tetrahidrofurano anidrico (3 mL) . Adicionou-se solução aquosa 2N de hidróxido de sódio (0,37 mL) num frasco purificado com árgon. A mistura foi aquecida até refluxo num banho de óleo, durante a noite. Após arrefecimento, a mistura foi diluída com água destilada (20 mL) e Acetato de etilo (50 mL) e decantada. A fase aquosa foi removida e a fase orgância recolhida. A fase aquosa foi re-extraída três vezes com acetato de etilo (3 x 20 mL) . As fracções orgânicas foram combinadas e secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas produzindo o composto 14 (45,2 mg, 47% rendimento). (c) Preparação do composto 15: [1-(2-dimetilo-amina-etilo)- lH-indolo-6-ilo]-tioureia (composto 14, 45,2 mg, 0,172 mmol) foi dissolvido em DMF desidratado (0,5 mL) adicionando-se iodoetano (20 μΐ, 0,19 mmol). O frasco foi equipado com um bujão plástico e selado com parafilme, e a mistura de reacção agitada à temperatura ambiente durante 26 horas. A solução foi diluída com acetato de etilo (20 mL) resultando num precipitado. Após a adição de solução aquosa 3N de hidróxido de sódio (2 mL) , a mistura foi decantada. A camada orgânica foi recolhida e a camada aquosa extraída com acetato de etilo (20 mL) . As fracções orgânicas foram combinadas, secas sobre Sulfato de sódio, filtradas e condensadas. O produto foi purificado via coluna de cromatografia de sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano). O produto purificado foi dissolvido em metanol (2 mL) e foi adicionado 1M HC1 (2 123 mL) . Por evaporação do solvente obteve-se o composto 15 como um óleo amarelo (6,1 mg, 10,9% da quantidade de sal de diclorohidrato).
Exemplo 6: Preparação do Composto 18
(a) Preparação do composto 17: Colocou-se [2-(5-bromo-lH-indolo-3-ilo)-etilo]-dimetilo-amina (composto 16, 372,4 mg, 1,394 mmol) (Slassi et al., patente número US 5 998 438) num frasco purificado com árgon, seco na chama, equipado com condensador e agitador magnético. Foi adicionado tetrahidrofurano anidrico (10 mL) seguido de tris (dibenzilideno-acetona) dipaládio (0) (63,8 mg, 0,05 eq) e tributilfosfina (0,42 mL, 0,139 mmol). A mistura foi agitada durante 5 minutos à temperatura ambiente.
Adicionou-se Litio bis(trimetilsilil)amida (4,2 mL, 4,2 mmol) e a solução resultante foi refluxada por 6 horas e seguidamente agitada à temperatura ambiente durante 15 horas. Esta solução castanha foi terminada adicionando 1M HC1 (3 mL) . A reacção foi agitada por 15 minutos, a que se seguiu nova adição de 1M HC1 (3 mL) para garantir a acidez da solução. A mistura foi decantada e diluída com água destilada (20 mL) . A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2 x 20 mL) . Por adição de solução aquosa de hidróxido de sódio a 3M (3 mL), a fase aquosa tornou-se básica sendo novamente extraída com acetato de etilo (3 x 20 mL). Os extractos orgânicos foram combinados e secos 124 sobre sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados produzindo o composto 17 sob a forma de um óleo acastanhado (209,6 mg, 74,1% rendimento); ΧΗ NMR (CD3OD) 5: 2,52-2,55 (s, 6H), 2,86-2,89 (d, 2H), 2, 90-2,99 (d, 2H) , 6,70-6,72 (d, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 7,16-7,18 (d, 1H); MS: 204,0 (M+l). (b) Preparação do composto 18: 3-(2-Dimetilo-amina-etilo)-lH-indolo-5-il amina (composto 17, 210 mg, 1,033 mmol) e tiofeno-2-carboximidotioico bromohidrato éster do ácido fenil (434 mg, 1,446 mmol) foram dissolvidos em etanol grau reagente (19 mL) num frasco pequeno, purificado com árgon. A reacção foi agitada em meio argónico, durante 21 horas à temperatura ambiente, e arrefecida num banho de água gelada. Lentamente, adicionou-se éter dietilico (50 mL) mantendo uma agitação vigorosa para obter um precipitado amarelo-claro. Este precipitado amarelo foi recolhido por filtração em vácuo e lavado com éter. Secou-se a amostra em vácuo, durante a noite a 110°C, originando o composto 18 como um sal de bromohidrato (327,5 mg, 83% rendimento). Para formar o sal de HC1, o bromohidrato foi dissolvido em água (20 mL) e decantado, tornando-se básico pela adição de solução aquosa de hidróxido de sódio a 2N (3 mL). A mistura foi extraída com diclorometano (3 x 20 mL) . Os extractos orgânicos foram combinados e secos sobre sulfato de magnésio, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado através de uma coluna de cromatografia de sílica gel (5-10% 2M NH3 em metanol/90-95% diclorometano) resultando numa base livre sob a forma de um óleo castanho. Este óleo foi dissolvido em metanol (5 mL) e adicionou-se 1M de HC1 aquoso (3 mL) . O solvente foi removido e o óleo seco em elevado vácuo, produzindo o composto 18 como um sal de clorohidrato (87,5 mg, 30,2 % rendimento); 1H NMR (base livre, CDC13) δ: 2,31(s, 6H), 2,57-2, 65 (t, 2H) , 2,85-2,92 125 (t, 2H), 6,79-6,85 (dd, 1H), 6, 94-6, 95 (d, 1H), 7,03-7,08 (t, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,19-7,22 (d, 1H) , 7,39-7,41 (t, 2H) , 8,61 1 (s, 1H); MS: 313,0 (M+l).
Exemplo 7: Preparação do Composto 24
(a) Preparação do composto 19: Colocou-se hidreto de sódio em óleo (60% em peso, 1,088 g) num frasco seco, purificado com árgon, equipado com um septo e um agitador magnético. Lentamente, foi adicionado DMF (Aldrich sure seal™, 50 mL) ao frasco gelado. Após junção do solvente, adicionaram-se, durante 10 minutos porções de 6-nitroindolo (composto 6, 4,01 g, 24,7 mmol). A agitação decorreu por mais 15 minutos, seguinodo-se a adição de bromoacetato de etilo (3 mL, 27,2 mmol) através de uma seringa. A solução foi agitada à temperatura ambiente por 26 horas e terminada com água destilada (200 mL). O precipitado amarelo formado foi recolhido por filtração. Este precipitado foi lavado com água (4 x 100 mL) e o sólido seco sob pressão reduzida 126 produzindo o composto 19 (5,94 g, 97% rendimento); 1H NMR (CDC13) δ: 8,25 (d, 1H, J=l,5), 8,05 (dd, 1H, J=l,5, 9), 7,70 (d, 1H, J=9), 7,38 (d, 1H, J=3,3), 6,68 (d, 1H, J=3,3), 4,93 (s, 2H), 4,26 (q, 2H, J=7,2), 1,30 (t, 1H, J=7,2). (b) Preparação do composto 20: Éster etílico de ácido (6-nitro-indolo-l-ilo)- acético (composto 19, 503 mg, 2,026 mmol) foi dissolvido em tolueno seco (30 mL). A mistura foi arrefecida a -78°C num banho de gelo seco - acetona em meio argónico e o material inicial começou a precipitar. Uma solução de DIBAL em tolueno (1,5 mL, 1,1 eq) foi adicionada lentamente, pela lateral do frasco, tornando a mistura homogénea. A agitação continuou por mais 2 horas a -78° C. A reacção foi terminada com metanol (1 mL) adicionado-se em seguida Tartarato de potássio e sódio saturado (20 mL) . A mistura foi decantada e diluída com Acetato de etilo (20 mL) . A fase orgânica foi lavada com Tartarato de potássio sódio (20 mL) e 20 mL de salmoura e adicionou-se 20 mL de Acetato de etilo para separar a emulsão. As camadas foram separadas e a fase orgânica lavada com salmoura (20 mL) , seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada sobre pressão reduzida por forma a obter um sólido amarelo. O sólido foi dissolvido em Diclorometano, pré-absorvido em sílica gel (5 g) , e purificado por cromatografia, utilizando uma coluna compacta de sílica gel, de 10 cm de altura e 3 de diâmetro, e um sistema de eluentes de Acetato de etilo e hexano (30:70 - 2 volumes de coluna, 1:1 - 2 volumes de coluna) produzindo o composto 20, (366,5 mg, 88,6% rendimento); NMR (CDC13) δ: 5,04 (s, 2H) , 6,71- 6,73 (d, 1H), 7,36-7,37 (d, 1H), 7,68-7,73 (d, 1H), 8,02- 8,07 (d, 1H), 8,18 (s, 1H), 9,79 (s, 1H); MS (APCI modo negativo): 203,2, 127 (c) Preparação do composto 21: (6 nitro-indolo-l-ilo) -acetaldeído (composto 20, 86,5 mg, 0,424 mmol) foi colocado num frasco pequeno, purificado com árgon. Adicionou-se uma solução de 4-bromofenetilo-amina (127 mg, 0,636 mmol) em metanol seco (3 mL) . A solução foi agitada por 4,5 horas, seguida da adição de hidreto triacetoxibórico de sódio (179 mg, 0,848 mmol). A solução foi agitada à temperatura ambiente por mais 24 horas. A mistura foi concentrada, o residuo colocado em água destilada (5 mL) e Acetato de etilo (15 mL) , e a mistura bifásica decantada. A camada aquosa foi lavada com Acetato de etilo (15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secas sobre MgS04, filtradas, e concentradas sobre pressão reduzida. O produto foi dissolvido em CH2CI2 e absorvido em sílica, que foi subsequentemente seca e colocada no topo de uma coluna de sílica gel. A eluição da coluna com 4:6 Acetato de etilo/hexano, seguida da adição de 2,5% 2M NH3 em metanol/ 97% diclorometano, produziu o composto 21 sob a forma de um sólido castanho (129,9 mg, 79% rendimento); NMR (CDCI3) δ: 2,64-2,71 (t, 2H), 2,75-2,86 (t, 2H), 3, 03- 3,12 (t, 2H), 4,27-4,33 (t, 2H), 6,57-6,58 (d, 1H), 6, 93- 6,98 (d, 2H), 7,31-7,39 (t, 3H), 7,64-7,68 (d, 1 H), 8, 00- 8,05 (dd, 1H), 8,34 (s, 1H); MS: 388,0, 390, 0 (M+l). (d) Preparação do composto 22: [2-(4-bromo-fenilo)-etilo] -[2-(6-nitro-indolo-l-ilo)-etilo] amina (composto 21, 53,5 mg, 0,138 mmol) foi dissolvido em THF anídrico (2 mL) e arrefecido num banho de gelo. Adicionou-se uma solução de B0C2O (90 mg, 0,41 mmol) em THF (2 mL) e em seguida 2N NaOH aquoso (0,41 mL) . A solução foi agitada à temperatura ambiente por 20,5 horas. Foi diluída com água (20 mL) e acetato de etilo (20 mL) e decantada. A camada aquosa foi novamente extraída com acetato de etilo (20 mL) e os extractos orgânicos combinados secos sobre MgS04, filtrados 128 e concentrados para produzir o composto 22 como um óleo amarelo (62,9 mg, 99% rendimento); 1R NMR (CDCI3) δ: 8,28 (brs, 1H) , 8,00 (d, 1H, J=2,0, 8,9), 7,65 (d, 1H, J=8,9), 7,38-7,25 (m, 3H) , 7,0-6,8 (m, 2H) , 6,6(d, 1H, J=3,2), 4,36-4,24 (m, 2H) , 3,44 (m, 2H) , 3,20 (m, 1H) , 2,91 (m, 1H) , 2,68 (m, 1H) , 2,47 (m, 1H) , 1,40 (s, 4,5H), 1,30 (4,5-) [nota: foram observados isómeros conformacionais de Boc] . (e) Preparação do composto 23: Colocou-se éster tert-butílico de ácido [2-(4-bromo-fenilo)-etilo]-[2-(6-nitro-indolo-l-ilo)-etilo]-carbâmico (composto 22, 58,7 mg, 0,128 mmol) num frasco pequeno, purificado com árgon e equipado com condensador e agitador magnético. Adicionou-se cloreto de estanho (II) dihidratado (143,8 mg, 0,637 mmol) seguido de etanol absoluto (10 mL) . A solução foi aquecida até refluxo num banho de óleo por 24 horas, e em seguida foi arrefecida à temperatura ambiente. A reacção foi diluída com acetato de etilo (50 mL) e decantada. Adicionou-se solução aquosa 3N de hidróxido de sódio e recolheu-se a fase orgânica. Esta foi lavada novamente com NaOH a 3N (20 mL) , a que se seguiram duas lavagens com salmoura (2 x 20mL). A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para obtenção de um óleo castanho, que foi purificado utilizando cromatografia em sílica gel, produzindo o composto 23 como um óleo amarelo-claro (28,3 mg, 48% rendimento); : XH NMR (CDCI3 ) δ: 7,40 -7,37 (m, 3H), 6, 95 -6,7 (m, 3H), 6, 6-6, 5 (m, 2H) , 6,35 (d, 1H, J=3,2 Hz) , CO 1—1 -3,95 (m, 2H) , 3 ,61 (brs, 2H) , 3,44- 3,32 (m, 2H) , 3 ,13- 3,07 (m, 1H) 1 PO Oh CM 2,78 (m, 1H) , 2,62 (m, 1H) , 2,42 (m, 1H) , 1,44 (s, 9H) . (f) Preparação do composto 24: éster tert-butílico de ácido [2-(6-amino-indolo-l-ilo)-etilo]-[2-(4-bromo-fenilo) - 129 etilo]-carbâmico (composto 23, 24,5 mg, 0,053 mmol) e bromidrato de éster fenílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (24 mg, 0,080mmol) foram dissolvidos em etanol (2 mL) num frasco pequeno, purificado com árgon. A reacção foi agitada em meio argónico por 20 horas, à temperatura ambiente. Juntou-se reagente adicional (8 mg, 0,027 mmol) para assegurar a completa conversão do material inicial, continuando a agitação por mais 24 horas. O solvente foi evaporado e o produto purificado através de uma coluna de cromatografia de silica gel (2-5% 2M NH3 em metanol/98-95% diclorometano) O produto foi dissolvido em CH2CI2 (2 mL) e adicionou-se 1M HC1 em éter (2 mL) , agitando à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado para obtenção do composto 24 (5,7 mg, 21,4% rendimento).
Exemplo 8: Preparação do composto 27
H2N
(a) Preparação do composto 25: Adicionou-se uma porção de hidreto de sódio (60% em suspensão oleica; 68 mg, 1,70 mmol) a uma solução gelada de 6-nitroindolo (250 mg, 1,54 mmol) em DMF (8 mL) . A solução vermelho-escuro resultante foi agitada a esta temperatura durante 30 minutos, a que se seguiu a adição de (2-cloro-etilo)-benzeno (0,60 mL, 2,31 mmol). A mistura de reacção foi então aquecida a 110°C por 5 horas. Findo este tempo, adicionou-se carbonato de potássio (426 mg, 3,08 mmol) e 2-cloroetilobenzeno (0,30 mL, 2,31 mmol), e a mistura foi aquecida a 110°C por 17 horas. Removeu-se a mistura do banho, diluiu-se com água 130 (20 mL) e extraiu-se com acetato de etilo (100 mL) . A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada obtendo-se um residuo castanho. O resíduo foi sujeito a cromatografia em sílica gel utilizando acetato de etilo/hexano (10%:90%), produzindo o composto 25 (310 mg, 76% rendimento); XH NMR (DMSO dg) δ: 8,42 (s, 1H) , 7,88 (dd, 1H, J=l, 5, 8,9 Hz), 7,71-7,69 (m, 2H) , 7,24-7,16 (m, 5H) , 6,61 (d, 1H, J=2,8 Hz), 4,60 (t, 2H, J=7,0 Hz), 3,10 (t, 2H, J=7,0 Hz) . (b) Preparação do composto 26: Aqueceu-se até refluxo uma solução de 6-nitro-l-feniletilo-lH-indolo (composto 25, 235 mg, 0,88 mmol) e dihidrato de cloreto de estanho (II) (995 mg, 4,41 mmol) em etanol absoluto (10 mL), num frasco pequeno, purificado com Árgon e equipado com condensador e agitador magnético. A solução foi agitada por 6 horas e arrefecida até à temperatura ambiente. Diluiu-se a reacção com uma solução aquosa de hidróxido de sódio a IN e decantou-se. Adicionou-se acetato de etilo (100 mL) e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de magnésio e filtrada através de um bloco de sílica gel. O filtrado foi concentrado e purificado via coluna de cromatografia de sílica gel (1:1 acetato de etilo:hexano) produzindo o composto 26 (180 mg, 86,6%); XH NMR (DMSO-dg) δ: 7,32-7,17 (m, 6H) , 6,90 (d, 1H, J=3 Hz), 6,63 (s, 1H), 6,42 (dd, 1H, J=l,l, 8,5 Hz), 6,14 (d, 1H, J=3, Hz), 4,19 (t, 2H, J=7,3 Hz), 3,01 (t, 2H, J=7,3 Hz); MS (APCI + ) : 237,0 (M+l). (c) Preparação do composto 27: Uma mistura de 1-fenilo- etilo-lH-indolo-6-ilo-amina (composto 26, 100 mg, 0,42 mmol) e bromidrato de éster fenílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (254 mg, 0,85 mmol) foi dissolvida em 131 etanol anídrico (4 mL) e agitada em meio argónico por 66 horas, à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi concentrada, diluida com acetato de etilo (50 mL), e tratada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (10 mL) e água (20 mL) . A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada, e concentrada produzindo um residuo castanho, que foi purificado via cromatografia em coluna de silica gel (5% 2M NH3 em metanol/95% diclorometano). O produto foi dissolvido em metanol (10 mL) , adicionou-se 1M HC1 aquoso (2 mL) e agitou-se à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado produzindo o composto 27, sob a forma de um sólido amarelo (65 mg, 40,5% rendimento); 1H NMR (base livre em CD3OD) δ: 7,66 (d, 1H, J=3,8 Hz), 7,58 (d, 1H, J=4,8 Hz), 7,53 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,20-7,13 (m, 4H), 7,08-7,06 (m, 2H), 6,99 (d, 1H, J=3,0 Hz), 6,73 (dd, 1H) , 6,36 (d, 1H, J=3,0 Hz), 4,36 (t, 2H, J=7,0 Hz), 3,09 (t, 2H, J=7,0 Hz); MS (APCI+): 346,4 (M+l).
Exemplo 9: Preparação dos compostos 32 e 33
(a) Preparação dos compostos 28 e 29: 6-Nitroindolo (1,545 g, 9,52 mmol), clorohidrato de 2-(2-cloroetilo)-1-metilopirrolidina (2,28 g, 12,4 mmol), e carbonato de 132 potássio em pó (2,55 g, 18,5 mmol), foram colocados num frasco de duas bocas, purificado com árgon. Foi adicionado DMF (20 mL, Aldrich Sure Seal™) e a mistura foi aquecida a 65°C, num banho de óleo, durante 46 horas. Foi adicionada nova quantidade de clorohidrato de 2-(2-cloroetilo)-1-metilopirrolidina (0,3 eq), continuando o aquecimento por mais uma hora. A solução foi arrefecida à temperatura ambiente e diluída com água (50 mL) e acetato de etilo (50 mL) . As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etilo (2 x 50 mL) . Os extractos orgânicos foram combinados, lavados com salmoura (2 x 50 mL), e extraídos com solução 1M HC1 (20 mL, 15 mL e 10 mL) . As fracçóes ácidas foram combinadas, tornadas básicas por adição de IN NaOH, extraídas com Acetato de etilo, lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de magnésio. A amostra foi filtrada, concentrada, e o óleo amarelo resultante foi purificado via cromatografia em sílica (5% 2M amónia/ metanol em diclorometano) produzindo o composto 28 (1,087 g, 4,16 mmol, 43,7% rendimento); 1H NMR (CDCI3) δ: 1,43-1,67 (m, 1H), 1,71-1,97 (m, 4H), 2,12-2,32 (m, 6H), 3,06- 3,10 (m, 1H), 4,24-4,32 (m, 2H), 6,62-6,63 (d, 1H) , 7,42- 7,43 (d, 1H), 7, 66-7, 68 (d, 1H) , 8,01-8,04 (dd, Hz), 8,36-8,37 (d,lH); MS (positivo): 274,0(M+1); e um produto re- arranjado (composto 29, óleo castanho, 255 mg) ; 2H NMR (CDCI3) δ: 8,39 (s, 1H) , 8,02 (dd, 1H, J=l,5, 6,6 Hz), 7,66 (d, 1H, J=6, 6 Hz), 7,55 (d, 1H, J=2,3 Hz), 6,62 (d, 1H, J=2,3 Hz), 4,72-4,65 (hepteto, 1H), 2,83-2,66 (m, 4H), 2,46 (s, 3H), 2,32-2,15 (m, 5H) , 2,03-1,95 (m, 1H) , 1,90-1,80 (m, 1 H); MS (positivo): 274,5 (M+l).
Resolução de enantiómeros: Foi adicionada, em espiral, uma solução de ácido L-dibenzoílo-tartárico (2,46 g, 0,5 eq) em etanol anídrico (60 mL) a uma solução do composto racémico 28 (3,76 g, 13,76 mmol) em etanol anídrico (60 mL). A 133 solução resultante, amarelo ligeiramente opaco, foi arrefecida por 24 horas a 1°C. 0 precipitado amarelo foi recolhido por filtração em vácuo, lavado com etanol frio e éter, e seco em elevado vácuo durante a noite, rendendo 4,1 g de um sólido granuloso amarelo. 0 filtrado foi concentrado obtendo-se um resíduo. Ambos, precipitado e residuo, foram convertidos, paralelamente, em bases livres como se descreve em seguida: o enantiómero em bruto foi particionado em acetato de etilo e água e o pH ajustado a 8 adicionando bicarbonato de sódio saturado. A fase aquosa foi extraída mais duas vezes com acetato de etilo. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de magnésio, filtrados e concentrados. 0 resíduo foi seco em elevado vácuo durante 3 horas a 75°C, seguindo-se nova secagem durante a noite à temperatura ambiente. Ambos os enantiómeros resultaram como óleos castanhos; enantiómero-L, composto 28 (-) (2,42 g da fracção cristalina utilizando ácido L-dibenzoílotartárico); [ad] 20(metanol)=-12,950°; e enantiómero-D, composto 28( + ) (resíduo filtrado, 1,229 g), [ad] 20 (metanol)=+25,4160 . Enriquecimento do enantiómero-L: o enantiómero-L (composto 28 (-), 2,42 g, 6,88 mmol) foi dissolvido em etanol (37 mL) e foi adicionada uma solução de ácido L-dibenzoílotartárico (1,232 g, 3,44 mmol) em etanol (37 mL), em espiral, resultando numa solução levemente opaca amarelo-alaranjada. A solução foi mantida à temperatura ambiente por 1 hora e posteriormente a 1°C durante a noite. O sólido foi recolhido por filtração, lavado com etanol, seguindo-se uma lavagem com éter, e seco em elevado vácuo à temperatura ambiente, por 3 horas, rendendo 2,75 g de um sólido amarelo, Ponto de fusão 99-110°C. O sólido foi re-cristalizado em etanol quente (70 mL de volume total) e arrefecido até à temperatura ambiente, seguindo-se um arrefecimento a 1°C por 44 horas. O sólido foi recolhido 134
por filtração, lavado com etanol frio e com éter dietílico, e seco em elevado vácuo obtendo-se um sólido amarelo (1,55 g, Ponto de fusão 99-110°C) . 0 sólido foi particionado em Acetato de etilo (100 mL) e água (50 mL) e o pH ajustado a 8-9 utilizando solução saturada de bicarbonato de sódio. As camadas foram separadas e a camada aquosa extraída com Acetato de etilo (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio e concentradas até obtenção de um óleo castanho. O óleo foi seco em elevado vácuo à temperatura ambiente, durante a noite, produzindo o enantiómero do composto 28(-) (0,969 g); [ad] 2o (metanol)=-38, 64°; ΧΗ NMR (CDC13) δ: 1,59-1,47 (m, 1H), 2,00-1,79 (m, 4H), 2,24-2,15 (m 3H), 2,31 (s, 3H), 3,13-3,08 (m, 1H), 4,35-4,19(m, 2H), 6,60 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,41 (d, 1H, J=3,2 Hz), 7,65(d, 1H, J=8,8 Hz), 7,99 (dd, 1H, J=8,93, 1,91 Hz), 8,35 (s, 1H).
Enriquecimento do D-enantiómero: Semelhante ao enriquecimento do L-enantiómero, o composto 28(+) foi preparado usando ácido D-(+)-dibenzoilo-tartárico rendendo 0,898 g de óleo castanho; [oíd] 20 (metanol) =+40, 52° ,-½ (CDCI3) δ: 8,34 (d, 1H , J=1 ,5 Hz), 8, 1 (1H, dd, J= OO , 7, 66 (d, 1H, J=8, 7 Hz) , 7,40 (d, 1H , J=3 Hz) , (d, 1H, J=3 Hz), 4,37-4, 19 (m, , 2H) , 3,12- -3,07 (m, 1H), (s, 3H) , 2, 28-2,15 (m, 3H) , 2,02-1,70 (m, 4H) , 1,59- (m, 1H) . (b) Preparação do composto 30: 1-[2-(1-metilo-pirrolidino-2-ilo)-etilo]-6-nitro-lH-indolo racémico (composto 28, 727 mg, 2,66 mmol) e dihidrato de cloreto de estanho (II) (2,017 g, 10,67 mmol) foram colocados num frasco pequeno, equipado com condensador e agitador magnético. Adiciou-se etanol absoluto (10 mL) e a solução foi aquecida até refluxo num banho de óleo, durante 24 horas, seguindo-se o 135 seu arrefecimento a temperatura ambiente. A mistura foi diluida com acetato de etilo (50 mL) e decantada. Foi adicionada uma solução aquosa 3N de hidróxido de sódio (50 mL) e a fracção orgânica foi recolhida. O precipitado presente no decantador foi removido pela camada aquosa. A fase orgânica foi lavada mais duas vezes com NaOH a 3N (20 mL), seguindo-se duas lavagens com salmoura (2 x 20 mL) . A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada obtendo-se um óleo negro, que foi purificado numa coluna de cromatografia de silica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para produzir o composto racémico 30 (472,3 mg, 73% rendimento) como um óleo acastanhado; 1H NMR (CDC13) δ: 1,41-1,59 (m, 1H), 1,71-1,79 (m, 3H), 1, 86- -1,98 (m, 1H) , 2,05-2,16 (m, 3H), 2,29 (s, 3H) , 3,03' -3,06 (t, 1H), 3,63 (bs, 2H, -NH2), 4,00-4,08 (m, 2H) , 6, 35-6,36 (d, 1H) , 6, 54-6, 55 (d, 1H) 6, 56-6, 57 (d, 1H), 6,90-6,91 (d, 1H), 7,38-7,40 (d, 1H).
Preparação do composto 30(-): A um frasco purificado com árgon contendo 1-[2-(l-metilo-pirrolidino-2-ilo)-etilo]-6-nitro-lH-indolo enantiomericamente resolvido (composto 28 (-), 969 mg, 3,545 mmol) e um agitador magnético, adicionou-se etanol anidrico (75 mL) . Mantendo a agitação, foram adicionadas, rapidamente, porções de paládio sobre carbono (10%, 283 mg, 0,266 mmol), sendo a atmosfera evacuada e substituída por hidrogénio utilizando um sistema balão/aspirador. O sistema foi evacuado 3 vezes para garantir que não restava nenhum oxigénio residual. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A atmosfera de hidrogénio foi substituída por Árgon via operação purgação/enchimento, a mistura filtrada através de celite, e o sólido lavado com etanol absoluto (25 mL) . O frasco colector foi selado e purificado com árgon e usado 136 em bruto na reacção seguinte para síntese do composto 32(-) .
Preparação do composto 30(+): Semelhante à preparação do composto 30(-) a partir do composto 28(-), o composto 28 ( + ) (870 mg, 3,183 mmol) foi utilizado na preparação do composto 30(+). Após filtração em celite, a solução em bruto do composto 30(+) em etanol foi utilizada na preparação do composto 32(+) opticamente puro. Preparação do composto 31: de forma semelhante à da preparação do composto 30 a partir do composto 28, o composto 31 foi sintetizado a partir do composto 29 (190 mg, 0,695 mmol). Após filtração em celite, a solução em bruto do composto 31 foi usada directamente na preparação do composto 33. (c) Preparação do composto racémico 32: 1-[2-(1-metilo- pirrolidina-2-ilo)-etilo]-lH-indolo-6-ilo-amina (composto 30, 47, 9 mg, 0,197 mmol) foi dissolvido em etanol (3 mL) num frasco pequeno, purificado com árgon. Foi adicionado bromohidrato de éster fenílico de ácido tiofeno-2- carboximidotióico (76,9 mg, 0,256 mmol) e a solução foi agitada à temperatura ambiente por 48 horas. O solvente foi evaporado e o produto purificado numa coluna de cromatografia de sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obter a base livre do composto 32 como um óleo amarelo (52,5 mg, 75% rendimento). A base livre foi dissolvida em metanol (2 mL), tratada com 1M HC1 e seguidamente evaporada até secar produzindo o sal de HC1 do composto 32 sob a forma de um sólido avermelhado (salmão) (54,8, 95,1% rendimento); 1H NMR (base livre, CDC13) δ: 1,67-1,78(m, 1H), 1,93-1,98(m, 2H), 2,04-2,19(m, 4H), 2,26 (s, 3H) , 3, 00-3, 05(t, 1H) , 4,05-4,12 (m, 2H) , 4,86 (s, 2H) , 6, 43-6, 44 (d,1H) , 6, 76-6, 78 (d,lH), 6,96(s,lH), 137 7.02- 7,03 (d,1H) , 7,05-7,07(t,lH) , 7,40-7,41 (d, 2H), 7,52-7,57 (d, 1H); MS (positivo): 353,2 (M+l).
Preparação do composto 32(-): A um frasco purificado com árgon contendo 1-[2-(l-metilo-pirrolidina-2-ilo)-etilo]-1H-indolo-6-ilo-amina enantiomericamente resolvida e em bruto (composto 30(-), 3, 545 mmol) em etanol anidrico (100 mL) , foi adicionado um agitador magnético, seguindo-se a adição de hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (1,213 g, 1,2 eq) . Após agitação durante 24 horas à temperatura ambiente, foi adicionado mais reagente tiofeno (0,202 g, 0,2 eq) . 18 horas depois, a reacção foi concentrada e o residuo particionado em acetato de etilo (100 mL) , água (50 mL) , e bicarbonato de sódio saturado (50 mL). A camada aquosa foi analisada, sendo o seu pH de 8. A camada aquosa foi extraida mais duas vezes com acetato de etilo e os orgânicos combinados e lavados sucessivamente com bicarbonato de sódio saturado e salmoura, filtrados, e concentrados para obter um óleo laranja-acastanhado (1,56 g). O produto bruto foi purificado numa coluna de cromatografia (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) com 17 aliquotas de 100 mL para obter o composto 32 (-) como um óleo amarelo (0,63 g) .
Obteve-se o sal de HCl dissolvendo o produto em diclorometano anidrico (10 mL) e adicionando 1M HCl em éter (5,36 mL, 3 eq) em meio argónico; NMR (base livre, CDC13) δ: 1,50-1,52 (m, 1H) , 1, 67-1,82 (m, 4H) , 1,92-1,95 (m, 1H), 2,07-2,15 (m, 3H) , 2,28 (s, 3H) , 3,06 (t, 1H) , 4.02- 4,12 (m, 2H) , 4,87 (s, 2H), 6,45-6,46 (d, 1H), 6,78- 6,81 (d, 1H) , 6,98 (s, 1H) , 7, 04-7,05 (d, 2H) , 7,43-7,45 (d, 2H) , 7,57-7,59 (d, 1H); MS (positivo): 353, 5 (M+l).
Preparação do composto 32 ( + ) : Semelhante à preparação do composto 32 (-), 0 composto 30 ( + ) foi usado na preparação 138 do composto 32 ( + ) como um óleo amarelo (0,715 g) que foi convertido num sal de clorohidrato com excesso de 1M HC1 em éter ; 2h NMR (base livre, CDCI3) δ: 1,49- 1,57 (m, 1H) , 1,71- -1,82 (m, 4H), 1,89- -1,95 (m, 1H) , 2,07- -2,15 (m, 3H) , 2,29 (s, 3H) , 3,04- 3,06 (t, 1H), 4,07- -4,15 (m, 1H) , 4,87 (s, 2H) , 6, 45- 6, 46 (d, 1H), 6,78- 6,81 (d, 1H) , 6, 98 (s, 1H) , 7,04 -7,09 (m, 2 H), 7,43-7,45 • (d, 2H) , 7,57 -7,59 (d, 1H); MS (positivo): 353,5 (M+l).
Preparação do composto 33: de forma semelhante à preparação do composto 32 a partir do composto 30, o composto 31 foi utilizado para preparar a base livre do composto 33 sob a forma de um sólido rosa-pálido (107 mg, 0,304 mmol). O sal de clorohidrato foi preparado dissolvendo o sólido em bruto (107 mg) em diclorometano anidrico (5 mL) , seguindo-se a adição de 1M HC1 em éter (3 eq., 0,91 mL) . O sólido verde-pálido/bege, que precipitou de imediato, foi recolhido e lavado com uma pequena quantidade de diclorometano e seco em elevado vácuo para obter o sal de clorohidrato sob a forma de um sólido castanho-pálido (92 mg como diclorohidrato) ; 1H. NMR (sal HC1, DMSO-d6) δ: 11,55 (brs, 1H), 11,18 (brs, 1H), 9,74 (brs, 1H), 8,74 (brs, 1H), 8,18 (m, 2H), 7, 77-7, 70 (m, 3H) , 7,40 (3 linha m, 1H), 7,06 (d, 1H, J=7,8 Hz), 6,62 (s, 1H), 4, 94-4,77 (m, 1H) , 3,48-3,17 (m, 4H), 2,78 (s, 3H), 2,26-1,95 (m, 6H); MS (pos): 353,5,
139 (a) Preparação do composto 34: éster etílico de ácido (6-nitro-indolo-l-ilo)-acético (composto 19, 3,06 g, 12,3 mmol) foi dissolvido em THF (60 mL, Aldrich Sure Seal™) . A solução foi arrefecida a -78°C num banho de acetona-gelo seco, em meio argónico, e adicionou-se uma solução de DIBAL em tolueno (18,9 mL, 2,3 eq), lentamente, pela lateral do frasco. A reacção foi agitada por 44,5 horas à temperatura ambiente, após as quais a solução castanha foi terminada com a adição de hidróxido de sódio a 3N (20 mL) . A mistura foi transferida para um decantador e diluída com Acetato de etilo (50 mL) e água (20 mL) . As camadas foram agitadas, separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etilo (20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 mL) , secos sobre sulfato de magnésio, tratados com carvão vegetal, filtrados e concentrados para obter um sólido amarelo-acastanhado (2,10 g) . O produto bruto foi dissolvido em acetato de etilo, pré-absorvido em sílica gel, e purificado numa coluna de cromatografia de sílica gel (3:7 Acetato de etilo e hexano), produzindo o composto 34 sob a forma de um sólido amarelo (1,18 g, 61% rendimento). (b) Preparação do composto 35: Colocou-se 2-(6-nitro-indolo-l-ilo)-etanol (composto 34, 1,1791 g, 5,72 mmol) num pequeno frasco purificado com árgon e dissolveu-se em THF seco (20 mL) . Foi adicionada trietilo-amina (1,6 mL, 1,5 eq) , seguida de cloreto de metanosulfonilo (0,63 mL, 1,43 eq). Um precipitado começou a formar-se imediatamente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente em meio argónico por 48 horas. A reacção foi concentrada produzindo um sólido amarelo. Foram adicionados DMF (15 mL) e piperidina (10 mL) e a solução foi aquecida a 110°C e agitada por 21 horas. Esta solução amarelo-escuro foi arrefecida até à temperatura ambiente, transferida para um decantador e 140 diluída com água (75 mL) e acetato de etilo (25 mL) . A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (3 x 25 mL) e as camadas orgânicas combinadas lavadas com salmoura (3 x 25 mL) . A fase orgânica foi então tratada com 1M ácido clorídrico (50 mL) , resultando um precipitado amarelo. O precipitado foi removido por filtração e o filtrado foi tratado com mais ácido clorídrico (25 mL). As camadas foram separadas após agitação, e a fase aquosa tornada básica por adição de solução 10% hidróxido de sódio. A mistura leitosa foi extraída com acetato de etilo (3 x 20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados. O produto foi purificado numa coluna de cromatografia de sílica gel (2,5% 2M NH3 em metanol/97,5% diclorometano), seguindo-se a re-cristalização em etanol para produzir o composto 35 sob a forma de um sólido amarelo (1,029 g, 66% rendimento); 1H NMR (CDCI3) δ: 8,37 (s, 1H) , 7,98 (dd, 1H, J=l,67, 8,8 Hz), 7,62 (d, 1H, J=8,8 Hz), 7,44 (d, 1H, J=3,3 Hz), 7,25 (s, 1H) , 6,56 (d, 1H, J=3,0 Hz), 4,28 (t, 2H, J=6,7 HZ), 2,70 (t, 2H, J=6, 7 Hz), 2,43 (t, 4H, J=4,9 Hz), 1,59-1,55 (m, 4H), 1,45-1,40 (m, 2H). (c) Preparação do composto 36: 6-nitro-l-(2-piperidino-l-ilo-etilo)-lH-indolo (composto 35, 1,029 g, 3,76 mmol) e 10% de paládio sobre carbono (111 mg) foram colocados num frasco grande, purificado com árgon. Foi adicionado etanol absoluto (20 mL) e a atmosfera foi substituída por hidrogénio utilizando um sistema balão/aspirador. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 18,5 horas. A solução foi tratada com carvão vegetal, filtrada através de celite (camada de 2 cm) e lavada com etanol absoluto (30 mL). O frasco foi selado e purificado com árgon e usado em bruto na reacção seguinte. 141 (d) Preparação do composto 37: à solução em bruto de 1-(1-(2-piperidino-l-ilo-etilo)-lH-indolo-6-ilo-amina (composto 36, 3,76 mmol) em etanol absoluto (50 mL) foi adicionado bromidrato de éster fenilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (1,185 g, 1,05 eq) . A reacção foi agitada em meio argónico, por 24 horas, à temperatura ambiente. Adicionou-se outro 0,1 eq de reagente de tiofeno e a reacção foi agitada por mais 24 horas. O solvente foi evaporado e o óleo diluído com uma pequena quantidade de etanol (&lt;5 mL), seguindo-se a adição de éter dietílico para obter um precipitado amarelo. O sólido foi isolado por filtração em elevado vácuo para formar o composto 37 com sal de HBr (983, 2 mg quantidade obtida). A base livre foi obtida dissolvendo o sólido em água (35 mL) e adicionando IN hidróxido de sódio (10 mL) . O produto foi extraído em acetato de etilo (2 x 30 mL). Os orgânicos combinados foram secos sobre MgS04, filtrados, e concentrados para produzir o composto 37 sob a forma de um sólido amarelo-claro (708 mg); ΧΗ NMR (CDC13) δ: 7,57 (d, 1H, J=8,3), 7,43 (m,2 H), 7,09 (m, 2H), 6,99 (s, 1H) , 6,79 (d, 1H, J=7,6), 6,44 (d, 1H, J=3,0), 4,87 (brs, 2H), 4,20, (t, 2H, J=7,5), 2,71 (t, 2H, J=7,6), 2,45 (brs, 4H), 1,62-1,58 (m, 6H) 1,46-1,40 (m, 2H) .
Exemplo 11: Preparação de N- (3-(1-metilo-l,2,3,6- tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (42) e N- (3-(l-metilopiperidino-4-ilo)-1H-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (43): 142
3-(1-metilo-l,2,3,6 -tetrahidro-piridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (39). Uma solução de 5-nitroindolo (38) (0,5 g, 3,083 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com pirrolidina (0,77 mL, 9,250 mmol) e N-metilo-4-piperidona (0,75 mL, 6,mmol) à temperatura ambiente. A solução resultante foi refluxada por 2 dias. A reacção foi trazida até à temperatura ambiente, o sólido foi filtrado, lavado com etanol (2x5 mL) e seco para obter o composto (39) (0,591 g, 75%). O sólido decompôs-se a 215°C; 2H NMR (DMSO-d6) δ 2,29 (s, 3H), 2,50-2,59 (m, 4H) , 3, 06-3, 08 (m, 2H) , 6,17 (brs, 1H) , 7,55 (d, 1H,J=9,0 Hz), 7,66 (s, 1H) , 8,01 (dd, 1H, J=2,1, 9,0 Hz), 8,68 (d, 1H,J=2,1 Hz), 11,86 (brs, 1H) . W-[3-(1-metilo-l, 2,3, 6 - tetrahidro-piridino-4-ilo)-1H- indolo-5-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina (40) e N-[3-(l-metilo-piperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina (41): Uma solução do composto 39 (0,4 g,
1,554 mmol) em metanol seco (5 mL) foi tratada com Ra-Ni (0,1 g) e, seguidamente, com hidrato de hidrazina (0,48 mL, 15,546 mmol), a temperatura ambiente. A solução resultante foi agitada em 65 °C durante 3 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, o sólido foi filtrado numa camada de celite e lavado com metanol: CH2C12 (1:1, 2 x 10 mL) . A camada orgânica combinada foi evaporada e o produto bruto 143 foi purificado numa coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 1:9) para obter uma amina livre (0,35 g, quantitativo) sob a forma de espuma. Uma solução da amina (0,18 g, 0,791 mmol) em etanol seco (10 mL) foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,45 g, 1,583 mmol) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada por 24h. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (100 mL) . O sólido foi dissolvido em sol. sat. NaHC03: CH2C12 (50 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com CH2C12 (2 x 30 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (15 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado numa coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95 a 1:9) para obter os compostos 40 (0,165 g, 62%) e 41 (0,02 g, 8%). Composto 40: sólido, ponto de fusão: 203-205 °C; NMR (DMSO-dd) δ 2,26 (s, 3H) , 2,50-2,56 (m, 4H) , 3,00-3,02 (m, 2H), 6,04 (s, 1H), 6,23 (brs, 1H), 6,66 (dd, 1H, J=l,2, 8,8 Hz), 7,09 (dd, 1H, J= 3,9, 5,1Hz), 7,21 (s, 1H) , 7,31 (dd, 2H, J=2,4, 5,4Hz) , 7,59 (d, 1H, J=4,2Hz), 7,71 (d, 1H, J=3,6Hz),10,93 (s,lH); ESI-MS m/z (%): 337 (M+, 100);
Composto 41: Sólido, ponto de fusão 148-150 °C; XH NMR (DMSO-dé&gt;) δ 1, 62-1,79 (m, 2H) , 1, 90-1, 94 (m, 2H) , 2,04-2,12 (m, 2H), 2,23 (s, 3H) , 2, 63-2,72 (m, 1H) , 2,86-2,89 (m, 2H), 6,28 (brs, 1H), 6,63 (dd, 1H, J=l,8, 8,7 Hz), 6,98 (s, 1H) , 7,02 (d, 1H, J=2,1 Hz), 7,09 (dd, 1H, J= 3,9, 5,1 Hz), 7,27 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,59 (d, 1H, J=5,l Hz), 7,71 (d, 1H, j=3,6 Hz), 10,60 (s, 1H); ESI-MS m/z (%) : : 339 (M+, 100) . 144
Sal de Diclorohidrato de N- [3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidro-piridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo]-tiofeno-2-carboxiamidina (42): Uma solução do composto 40 (0,1555 g, 0,460 mmol) em etanol (5 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (1,5 mL), à temperatura ambiente, e agitada por 1 h. O produto foi re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 42 (0,13 g, 69%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 215-218 °C.
Sal de Diclorohidrato de N- [3-(l-metilo-piperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo]tiofeno-2-carboxiamidina (43): Uma solução do composto 41 (0,015 g, 0,044 mmol) em etanol (3 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (0,13 mL), à temperatura ambiente, e agitada por 1 h. O produto foi re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 43 (0,012 g, 67%) sob a forma de espuma.
Exemplo 12 : N- (3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (46) e N-(3-(l-metilopiperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (47) : 145
3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidro-piridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (39): Ver detalhes experimentais no exemplo 11, N-[3-(1-Metilo-l, 2,3,6-tetrahidro-piridino-4-ilo)-1H-indolo-5-ilo]furano-2-carboxiamidina (44) e N-[3-(1-metilo- piperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo]furano-2-carboxiamidina (45) : Uma solução do composto 39 (0,4 g, 1,554 mmol) em metanol seco (5 mL) foi tratada com Ra-Ni (0,1 g), e, seguidamente, com hidrato de hidrazina (0,48 mL, 15,546 mmol) à temperatura ambiente. A solução resultante foi agitada a 65°C por 3 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, o sólido foi filtrado numa camada de celite e lavado com metanol: CH2CI2 (1:1, 2 x 10 mL) . A camada orgânica combinada foi evaporada e o produto bruto foi purificado numa coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 1:9) para obter uma amina livre (0,35 g, quantitativo), sólida. Uma solução da amina (0,17 g, 0,747 mmol) em etanol seco (10 mL) foi tratada com bromohidrato furano-2-carbimidotioato benzilico (0,44 g, 1,495 mmol), à temperatura ambiente, e agitada por 24h. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (100 mL) . O sólido foi dissolvido em sol. sat. NaHC03: CH2CI2 (50 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com CH2CI2 (2 x 30 mL) . A camada combinada de 146 CH2CI2 foi lavada com salmoura (15 mL) e seca (Na2S04) . 0 solvente foi evaporado e o produto bruto foi purificado numa coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95 a 1:9) para obter os compostos 44 (0,16 g, 67%) e 45 (0,02 g, 8%). Composto 44: Sólido, ponto de fusão: 161-163 °C; NMR (DMSO~d6) δ 2,28 (S, 3H), 2,50-2,57 (m, 4H), 3,03-3,05 (m, 2H), 6,04 (s, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,73 (d, 1H, J=8,l Hz), 7,15 (s, 1H), 7,31-7,34 (m, 3H), 7,82 (s, 1H), 10,99 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 321 (M+, 100). Composto 45: Sólido, Ponto de fusão: 85-87°C; 1E NMR (DMSO-d6) δ 1,81-1,90 (m, 2H), 1,99-2,03 (m, 2H), 2,40-2,60 (m, 5H), 2,81-2,88 (m, 1H), 3,12-3,15 (m, 2H), 6,81 (s, 1H) , 6,93 (d, 1H, J=8,4Hz), 7,20 (s, 1H), 7,41-7,47 (m, 3H), 7,58 (brs, 1H), 8,09 (s, 1H) , 11,01 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 323 (M+, 100).
Sal de diclorohidrato de N-[3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidro-piridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo]-furano-2-carboxiamidina (46) : Uma solução do composto 44 (0,145 g, 0,452 mmol) em etanol (5 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (1,35 mL), à temperatura ambiente, e agitada por 1 h. O produto foi re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 46 (0,135 g, 76%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 212-215°C. 147
Sal de diclorohidrato de N-[3-(l-metilo-piperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo]furano-2-carboxiamidina (47): Uma solução do composto 45 (0,015 g, 0,046 mmol) em etanol (2 mL) foi tratada com IN HCl em éter (0,14 mL), à temperatura ambiente, e agitada por 1 h. O produto foi re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 47 (0,01 g, 56%) sob a forma de espuma.
Exemplo 13: N-((3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4- ilo)-lH-indolo-5-ilo)metilo)tiofeno-2-carboximidamida (51):
3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-carbonitrilo (49): A um frasco de fundo redondo purificado com árgon, equipado com agitador magnético, e contendo uma solução laranja de 5-ciano-indolo (48) (250 mg, 1,76 mmol) dissolvido em etanol absoluto (10 mL), foram adicionados l-metilo-4-piperidona (0,43 mL, 3,50 mmol) e pirrolidina (0,44 mL, 5,27 mmol). O recipiente de reacção foi equipado com um condensador e transferido para um banho de óleo, previamente aquecido a 80°C. A reacção foi agitada a esta temperatura por 44 horas. Findo este tempo, e como não restava qualquer material inicial (TLC 5% 2M NH3 em metanol/ 95% CH2C12), a reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, seguindo-se um arrefecimento adicional no frigorífico. Como não se formou precipitado, a reacção foi concentrada sob pressão reduzida para obter um óleo laranja. O óleo foi re-dissolvido em etanol (20 mL) e o solvente removido em pressão reduzida. Este processo foi 148 repetido, e o resíduo final foi tratado com etanol e deixado a refrigerar por 2 horas. O precipitado que se formou foi recolhido por filtração em vácuo e lavado com hexano (205 mg de sólido amarelo-pálido, composto 49, 48, 7%) XH NMR (DMSO) δ 11, 90 (brs , NH) , 8,51 (s, 1H) , 7,80 (s, 1H) , 7,77-7,74 (d, J=8,7 Hz, 1H) , 7,68-7,65 (d, J=8,1 Hz, 1H) , 6,41 (s, 1H), 3, 53 (s, 2H) , 3,27-3,26 (d, J=2,4 Hz, Hz, 2H) , 3H) . 2,79-2,77 (d, J=4,5 Hz, 2H) , 2,72-2,71 (d, J=1,5 (3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)metanoamina (50): A um frasco de fundo redondo purificado com árgon, equipado com condensador e agitador magnético, e contendo 49 (105
mg, 0,442 mmol) foi adicionado hidreto de alumínio-lítio (34 mg, 0,896 mmol) seguido de THF absoluto (5 mL) . Uma pequena quantidade de gás foi produzida. Quando a solução deixou de borbulhar, a reacção foi transferida para um banho de óleo, aquecido a 85°C. A reacção foi agitada a esta temperatura durante 18 horas. A reacção foi então arrefecida até à temperatura ambiente e terminada com água (0,1 mL), 3N NaOH (0,1 mL) e água (0,3 mL), nesta sequência, seguindo-se a filtração em celite. A camada de celite foi lavada com THF e o filtrado foi concentrado para obtenção de um óleo amarelo, composto 50 (106 mg, 99%) . 1R N MR (DMSO) δ 10, 95 (brs , NH) 7,74 (s, 1H) , 7 ,32-7, 31 (d, J= =2, 4Hz, 1H) , 7, 30-7,27 (d, J= = 8,4Hz, 1H) , 7, Γ- 1 co o 05 (d, J= =8, 1Hz, 1H) , 6, cn \—1 1H) , 3, 77 (s, 2H) , 3, 29 (s r 2H) , 3, 06 -3,05 (d, J= 2,7Hz, 2H) , 2, 57-2,56 (d, J= =4,5Hz f 2H) , 2, 51 -2,50 (d, C-i II 1—1 ,2Hz, 2H), 2, 29 (s, 3H) , 1, 75 (brs, 2NH) .
Dihidrocloreto de N- ((3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridina-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)metilo)tiofeno-2-carboximidamida (51) 149
Um frasco purificado com árgon e equipado com um agitador magnético, contendo uma solução do composto 50 (58 mg, 2,55 mmol) e hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióco (145 mg, 5,08 mmol) em etanol absoluto (5 mL) , foi agitado à temperatura ambiente por 41 horas. Quando todo o material inicial havia reagido (20% 2M NH3 em metanol/ 80% CH2CI2), a reacção foi concentrada, sob pressão reduzida, até estar seca. O resíduo foi particionado em acetato de etilo (10 mL) e 3N NaOH (10 mL), seguindo-se a sua transferência para um decantador. A fase aquosa foi extraída mais duas vezes com Acetato de etilo (2 x 10 mL) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados para obter um sólido amarelo-pálido (35 mg) . O produto foi absorvido em sílica gel e purificado numa coluna de cromatografia (25-50% 2M NH3 em metanol/ CH2CI2) para obter um sólido amarelo-pálido (23 mg). O produto foi colocado em metanol e tratado com 1M HCl em éter. A reacção foi agitada por 25 minutos e em seguida concentrada até secar, sob pressão reduzida. O resíduo foi colocado em etanol (3 mL) e diluído com éter (35 mL) até se obter um precipitado que foi recolhido por filtração. O precipitado foi lavado com éter (2 x 10 mL) e seco em elevado vácuo. Rendimento: 17 mg de sólido amarelo-pálido, composto 51 (21%). 2H NMR (base livre em DMSO-dh) δ 11,04 (brs, NH), 7,86 (s, 1H), 7,68-7,67 (d, J=3,9 Hz, 1H) , 7,64 (s, 1H) , 7, 36-7, 35 (d, J=2,7
Hz, 1H), 7,32 (s, 1H) , 7,15-7,14 (d, J=l,2 Hz, 1H) , 7,13- 7,11 (t, J=4,2 Hz, 1H), 6,13 (s, 1H) , 4,47 (s, 2H) , 3,31 (s, 2H), 3,05-3,04 (d, J=2,7 Hz, 2H), 2,58-2,56 (d, J=4,5
Hz, 2H), 2,29 (s, 3H); ESI-MS m/z (%): 351 (M+, 100).
Exemplo 14: N-(3-(3-(dimetilo-amino)propilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboxiamidamida (56): 150
3-(5-bromo-lH-indolo-3-ilo)-N, N-dimetilopropanamida (53): A um frasco de fundo redondo de 250 mL, purificado com Árgon, equipado com um agitador magnético, e contendo uma solução amarela de ácido 5-bromo-indolo-3-propiónico (52) (3,00 g, 11,19 mmol), hidrocloreto de 1-[3-(dimetilo- amino)propilo]-3-etilcarbodi-imida (2,36 g, 12,31 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (1,51 g, 11,17 mmol) e clorohidrato de dimetilo-amina (912 mg, 11,19 mmol) em DMF (20 mL) , foi adicionada trietilo-amina (4,7 mL, 25,83 mmol) resultando na formação de um precipitado. A reacção foi monitorizada por TLC (1:1 acetato de etilo:hexano) . Após 2 horas, a agulha purificada em árgon foi removida e foi adicionado mais clorohidrato de dimetilo-amina (0,3 eq) . 20 horas depois, a TLC revelou o consumo total do material de reacção inicial. A reacção foi diluída com água (40 mL) e acetato de etilo (40 mL). A reacção foi transferida para um decantador e o produto extraído para a camada orgânica. Esta foi extraída novamente com água (20 mL), para remover o DMF, seguida de 2N NaOH (20 mL) e salmoura (15 mL) . A camada orgânica amarela foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para obter um sólido branco-rosa. O produto foi purificado numa coluna de cromatografia de sílica gel (9:1 acetato de etilo/hexano). Rendimento: 1,407 151 g de composto 53 puro, 1H NMR (DMSO) δ 11,00 (brs, NH), 7,68-7,67 (d, 1H, J=l,5), 7,31-7,28 (d, 1H, J=8,4Hz), 7,72-7,14 (td, 2H, J=l,8, 8,4Hz), 2,93-2,81 (m, 8 H), 2,64- 2,59 (t, J=7,5 Hz, 2H). 3-(5-Bromo-lH-indolo-3-ilo)-N, N-dimetilopropano-l-amina (54) : A um frasco de fundo redondo de 250 mL purificado com árgon, equipado com condensador e agitador magnético, contendo 53 (1,283 g, 4,35 mmol) foi adicionado hidreto de aluminio-litio (412 mg, 10,86 mmol). Após adição de tetrahidrofurano anídrico (15 mL) formou-se um gás. O frasco foi colocado num banho de óleo, aquecido a 65°C, e agitado por 16 horas em meio argónico. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e terminada com água (1,1 mL), 3N hidróxido de sódio (1,7 mL) e água (3,3 mL), nesta sequência. A mistura foi filtrada para remover o sólido branco e o filtrado amarelo-pálido foi concentrado para obter um óleo amarelo-pálido. A secagem em elevado vácuo produziu um sólido amarelo-pálido, o composto 54, Rendimento: 1,193 g de sólido amarelo-pálido (97,5%). 1E NMR (DMSO) δ 7,65-7, 64 (d, 1H, J=l, 5), 7,30-7,27 (d, 1H, J=8,7Hz), 7,167 (s, 1H), 7,14-7,09 (q, 1H, J=6,9, 8,4 Hz), 2,67-2,62 (t, J=7,5, 2H) , 2,25- 2,20 (t, J=7,5 Hz, 2H) , 2,12 (s, 8H). 3-(3-(Dimetilo-amino)propilo)-lH-indolo-5-amina (55):
Para um frasco purificado em árgon equipado com um agitador magnético, contendo 54 (324 mg, 1,15 mmol) foi canulada uma solução de Pd2(dba)3 (53 mg, 0,058 mmol) e solução de tri-t-butilofosfina (0,34 mL, 10%, 0,11 mmol) em THF seco (8 mL). O frasco foi equipado com um condensador e foi adicionada uma solução de 1M hexametilodi-silano de litio em THF (3,45 mL, 3,45 mmol). A reacção foi colocada sobre 152 uma placa térmica e aquecida até refluxo. A reacção foi agitada a esta temperatura por 16 horas. A TLC (10% 2M amónia em metanol, 90% diclorometano) revelou que todo o material inicial tinha reagido. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e terminada com 1M ácido clorídrico aquoso (15 mL) . A reacção acídica foi extraída com acetato de etilo (3x 10 mL). A fase aquosa foi basifiçada com 3N hidróxido de sódio (8 mL) e particionada em Acetato de etilo (3 x 10 mL). Os orgânicos foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de magnésio e tratados com carvão vegetal. Após filtração em celite, concentração e nova secagem em elevado vácuo obteve-se um óleo amarelo-escuro. A purificação do produto foi efectuada utilizando uma coluna de cromatografia de sílica gel (5-10% 2m amónia em metanol, 95-90% diclorometano). Rendimento: 162 mg de um óleo castanho, contendo o composto 55 (65%). NMR (CDCI3) δ 7,76 (brs, NH) , 7,17-7,14 (d, 1H, J=8,4Hz), 6,92-6,90 (dd, 2H, J=2,1, 4,5Hz), 6,67-6,64 (dd, 1H, J=2,l, 8,4 Hz), 2,73-2,68 (t, J=7,5, 2H), 2,41- 2,36 (t, J=7,5Hz, 2H), 2,26 (s, 8H). N-(3-(3-(dimetilo-amino)propilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (56): A um frasco de fundo redondo purificado com árgon, contendo 55 (340 mg, 1,56 mmol), foi adicionado hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (669 mg, 2,35 mmol). Os dois compostos foram suspensos em etanol absoluto (10 mL) e agitados à temperatura ambiente por 16 horas. A TLC (10% amónia em metanol, 90% diclorometano) revelou que toda a a mina havia reagido. A reacção foi diluída com éter (80 mL) e o leve precipitado amarelo foi recolhido por filtração em vácuo. O precipitado foi lavado com éter (50 mL) e transformou-se num óleo no filtro poroso. Foi utilizado etanol para eluir o produto através do filtro 153 para um frasco de fundo redondo (50 mL) . O frasco foi equipado com um agitador magnético e adicionou-se DOWEX-66 (5,5 g) . A reacção foi agitada por 2 horas e filtrada. O filtrado foi concentrado para produzir uma espuma amarela. O produto foi purificado usando uma coluna de cromatografia de sílica gel (5-10% 2M amónia em metanol, 95-90% diclorometano) para obter um óleo amarelo. O óleo foi colocado em metanol (5 mL) e agitado durante a adição de 1M ácido clorídrico em éter (3 mL). Após agitação por 2 horas, a reacção foi concentrada no evaporador rotativo. A espuma amarela resultante foi seca na linha de elevado vácuo. Rendimento: 347 mg de espuma amarela, composto 56, 1H NMR(DMSO) δ 11,44 (brs, 1H), 11,26 (s, 1H), 10,62 (bs, 1H) , 9,66 (bs, 1H), 8,61 (bs, 1H), 8,18-8,17 (d, 2H, J=4,2 Hz), 7,65 (s, 1H), 7,54-7,51 (d, J=8,7 Hz, 1H) , 7,41-7,36 (q, 2H, J=4,5 Hz), 7,13-7,09 (dd, J=l,2, 8,7 Hz, 1H) , 3,10- 3,04 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,79- 2,74 (t, J=7,5 Hz, 2H) , 2,72 (s, 6H), 2,05 (m, 2H). ESI-MS m/z (%): 327 (M+, 100).
Exemplo 15: Preparação de N-((3-(2-(dimetilo-amino)etilo)-lH-indolo-5-ilo)metilo)tiofeno-2-carboximidamida (59).
3-(2-(Dimetilo-amino)etilo)-lH-indolo-5-carbonitrilo (57): [2-(5-Bromo-lH-indolo-3-ilo)-etilo]-dimetilo-amina (16) (500,0 mg, 1,872 mmol) (Patente N° US 5 998 438) foi colocado num frasco seco em estufa e purificado com árgon, equipado com um agitador magnético. Sequencialmente, foram adicionados cianeto de zinco (395,0 mg, 3,368 mmol, 1,8 154 equivalentes), zinco em pó (14,7 mg, 0,225 mmol, 0,12 equivalentes) e tris(dibenzilideno-acetona)dipaládio (0) (42,9 mg, 0,0468 mmol, 0,025 equivalentes), seguindo-se a adição de N,N-dimetiloformamida anidrica (15 mL). Uma solução de tri-t-butilofosfina em hexano (10% peso, 189,0 mg, 280 μΐ, 0,05 mmol equivalentes) foi adicionada e a mistura agitada por 15 minutos, à temperatura ambiente, e depois aquecida num banho de óleo a 60°C, por 30 minutos. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, as misturas foram transferidas para um decantador e diluidas com água destilada (15 mL) . A fase aquosa foi extraida com acetato de etilo (3 x 30 mL). Os extractos orgânicos foram combinados e secos sobre sulfato de magnésio, filtrados e concentrados. O residuo foi purificado via cromatografia em coluna de silica gel (10% 2M NH3 em metanol/90% diclorometano) obtendo-se 3-(2-(dimetilo-amino)etilo)-1H-indolo-5-carbonitrilo (57) como um residuo amarelo (150 mg, 37,6% rendimento). NMR (DMSO) δ: 2,21 (s, 6H), 2,54 (m, 2H) , 2,84 (t, 2H), 7,36-7,41 (m, 2H) , 7,49 (d, 1H) , 8,07 (s, 1H), 11,38 (brs, 1H). 2-(5-(Aminometilo)-lH-indolo-3-ilo)-N,N-dimetilo-etano-amina (58):
Colocou-se hidreto de aluminio-litio (40,0 mg, 1,055 mmol, 1,5 equivalentes) num frasco seco em estufa e purificado com árgon, equipado com agitador magnético e condensador. Foi adicioando éter dietilico anidrico (5 mL) e iniciada a agitação. Num outro frasco seco, dissolveu-se 3— (2 — dimetilo-amino-etilo)-lH-indolo-5-carbonitrilo (57) (150,0 mg, 0,703 mmol, 1,0 equivalente) numa mistura de éter dietilico anidrico (5 mL) e tetrahidrofurano anidrico (5 mL) . Esta solução foi adicionada gota a gota à solução de hidreto de aluminio-litio e a mistura resultante aquecida até refluxo. Após 30 minutos, a reacção foi arrefecida até 155 à temperatura ambiente e terminada com água destilada (50 μΐ) , solução aquosa 3N hidróxido de sódio (75 μΐ) e água destilada (150 μΐ), nesta sequência. A solução foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado numa coluna de cromatografia de sílica gel (10-15-20% 2M NH3 em metanol/ 90-85-80% diclorometano) para produzir 2-(5-(aminometilo)-lH-indol-3-ilo)-N,N-dimetiletanoamina (58) como um resíduo amarelo-pálido (73 mg, 47,8% rendimento). 1H NMR (DMSO) δ: 2,2 1 (s, 6H), 2,53 (m, 2H) , 2,78 (t, 2H) , 3,79 (s, 2H) , 7,02-7,05 (d, 1H), 7,09 (s, 1H) , 7,24 (d, 1H) , 7,44 (s, 1H) , 10,66 (brs, 1H) . MS: 218 (M+l), 201 (M+1-NH3) . N-((3-(2-(Dimetiloamino)etilo)-lH-indolo-5- ilo)metilo)tiofeno-2-carboximidamida (59): [2 — (5— aminometilo-lH-indolo-3-ilo)-etilo]-dimetilo-amina (58) (70 mg, 0,322 mmol) e hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (160,7 mg, 0,564 mmol, 1,75 equivalentes) foram dissolvidos em etanol anídrico (5 mL) num frasco pequeno, purificado com árgon. A reacção foi agitada em meio argónico por 20 horas à temperatura ambiente, findas as quais se removeu o solvente. O resíduo bruto foi dissolvido em água (10 mL) e transferido para um decantador, onde foi basificado (pH 9-10) através da adição de solução aquosa de IN hidróxido de sódio. A mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 20 mL) . Os extractos orgânicos combinados foram lavados com água destilada e salmoura, secos sobre sulfato de magnésio, filtrados e concentrados para produzir um composto bruto, livre de bases. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (10-25% 2M NH3 em metanol/ 90-75% diclorometano) para obter a base livre como um resíduo incolor/branco (36 mg, 34,3 % rendimento). A base livre foi dissolvida em metanol (5 mL) e foi adicionado 1M HC1 em éter dietílico (3 equivalentes) . O solvente foi removido e 156 o óleo seco em elevado vácuo produzindo um sal dihidroclorídrico de N- ((3-(2-(dimetilo-amino)etilo) -1H-indolo-5-ilo) metilo)tiofeno-2-carboximidamida (59). XH NMR (base livre, DMS0-d6) δ: 2,21 (s, 6H), 2,53 (m, 2H), 2,79 (t, 2H), 4,39 (s, 2H), 7,06-7,10 (m, 3H) , 7,26 (d, 1H) , 7,51 (s, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,60 (d, 1H), 10,65 (brs, 1H). MS: 327 (M+l).
Exemplo 16:_N- (3-(l-etilopiperino-4-ilo)-lH-indolo-5- ilo)tiofeno-2-carboximidamida (62) .
3-(1-etilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (60):
Uma solução de 5-nitroindolo (38) (0,5 g, 3,083 mmol) em etanol seco (15 mL) foi tratada com pirrolidina (0,65 mL, 9,250 mmol) e N-etilo-4-piperidona (0,8 mL, 6,167 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada por 3 dias. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente evaporado. O composto bruto foi purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95), e lavado com éter (3 x 10 mL) para obter o composto 60 (0,35 g, 42%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusãol88-190 °C; NMR (DMSO-dd) δ: 1,07 (t, 3H, J=7,2 Hz), 2,41-2,50 (m, 4H) , 2,63 (t, 2H, J=5,1 Hz), 3,10-3,15 (m, 2H) , 6,18 (s, 1H) , 7,55 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,65 (s, 1H) , 8,01 (dd, 1H, J=2,1, 9,0 Hz), 8,69 (d, 1H,J=2,1 Hz), 11,86 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 272 (M+, 100). 157 Ν-(3-(l-etilopiperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (61):
Uma solução de 3-(1-etilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (60) (0,1 g, 0,368 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com 10% Pd-C (0,02 g), purificada com gás de hidrogénio e agitada por 4 horas em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão). O sólido foi filtrado através de uma camada de celite e lavado com etanol seco (2 x 5 mL) . A camada combinada de etanol foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,21 g, 0,737 mmol) e agitada por 24 h à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (100 mL) . O sólido foi filtrado e dissolvido em solução saturada de NaHCOs: CH2CI2 (50 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com CH2CI2 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (15 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o composto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter N- (3- (l-etilopiperidino-4-ilo)-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (61) (0,085 g, 66%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 150-152 °C; NMR (DMSO-cfh) δ 1,01 (t, 3H, J= 6,9 Hz), 1,59-1,75 (m, 2H) , 1,90-2,05 (m, 4H) , 2,35 (q, 2H), 2,65-2,73 (m, 1H), 2,94- 2.97 (m, 2H), 6,23 (brs, 1H), 6,62 (dd, 1H, J=l,2, 8,4 Hz), 6.97 (s, 1H), 7,02 (d, 1H, J=2,l Hz), 7,09(t, 1H, J=4,2 Hz), 7,26 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,58 (d, 1H, J=5,4 Hz), 7,70 (d, 1H, J=3,6 Hz), 10,59 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 353 (M+, 100) .
Sal de dihidrocloreto de N-(3-(l-etilopiperidino-4-ilo)-1H-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (62):
Uma solução de N-(3-(l-etilopiperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (61) (0,07 g, 0,198 mmol) em 158 etanol (2 mL) foi tratada com IN HCl em éter (0,59 mL, 0,595 mmol) à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado após agitação durante 15 min e o composto bruto foi re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 62 (0,067 g, 80%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 254-256 °C.
Exemplo 17, Jf-(3-(1-metilo-l, 2,3, 6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo-carbamotio-ilo)benzamida (64) .
3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (39):
Os detalhes experimentais foram discutidos no Exemplo 11, N-(3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo-carbamotioilo)benzamida (63). Uma solução do composto 3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (39) (1,0 g, 3, 886 mmol) em metanol seco (20 mL) foi tratada com Raney-Ni (0,3 g) e seguidamente com hidrato de hidrazina (1,21 mL, 38,866 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi agitada a 65°C por 2 h. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e a mistura filtrada através de uma camada de celite para remover o sólido. A camada de celite foi lavada com metanol (2 x 10 mL). A fracção orgânica combinada foi evaporada e o material bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter uma amina livre, 3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridina-4-ilo)-lH-indolo-5-amina (0,78 g, 88%), sob a forma de um sólido. Uma solução da amina (0,78 g, 3,431 mmol) em acetona (20 mL) foi tratada com isotiocianato de benzoilo (0,53 mL, 3,946 159 mmol), à temperatura ambiente, e a mistura resultante foi agitada durante a noite. 0 solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 63 (1,23 g, 92%) sob a forma de um sólido, mp 182-184 °C; 2H NMR (DMSO-déi) δ 2,28 (s, 3H) , 2,50-2,58 (m, 4H) , 3,00-3,10 (m, 2H) , 6,09 (s, 1H), 7,26 (d, 1H, J= 7,8 Hz), 7,40 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,44 (d, 1H, J=2,l Hz), 7,54 (t, 2H, J=7,5 Hz), 7,66 (t, 1H, J= 7,2 Hz), 7,99 (d, 2H, J=7,5 Hz), 8,15 (s,
1H) , 11,24 (s, 1H) , 11,48 (s, 1H) , 12,58 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 391 (M+, 76), 289 (74), 348 (100).
Sal de hidrocloreto de N-(3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilocarbamotioilo)-benzamida (64) : Uma solução do composto 63 (0,08 g, 0,204 mmol) em metanol (5 mL) foi tratada com IN HCl em éter (0,6 mL, 0,614 mmol) à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado em vácuo depois de agitado por 15 minutos e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 64 (0,075 g, 80%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusãol97-199 °C.
Exemplo 18: Preparação de etilo 3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo carbamimidotioato (67) :
J
66 160 Ν-(3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo-carbamotioílo)benzamida (63): A síntese foi descrita no exemplo 17, 1-(3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tioureia (65): Uma solução do composto 63 (1,12 g, 2,868 mmol) em THF (20 mL) foi tratada com 2N NaOH (3,1 mL, 6,309 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada por 5 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente evaporado. O produto bruto foi diluído em água (20 mL) e acetato de etilo (20 mL) . O precipitado sólido foi filtrado, lavado com água (10 mL), EtOAc (10 mL) e éter (2 x 10 mL) e seco em vácuo para obter o composto 65 (0,65 g, 79%). Ponto de fusão: 209-211°C; NMR (DMSO-d6) δ 2,27 (s, 3H) , 2,50-2,56 (m, 4H) , 3,00-3,08 (m, 2H) , 6,05 (s, 1H) , 6,98 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,32-7,40 (m, 3H), 7,67 (s, 1H) , 9,51 (s, 1H), 11,15 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 287 (M+, 71), 249 (46), 244 (100).
Etilo-3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo) -1H-indolo-5-ilo-carbamimidotioato (66) : Uma solução do composto 65 (0,2 g, 0,698 mmol) em acetona (10 mL) foi tratada com iodoetano (0,33 mL, 4,189 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante refluxada por 4 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente foi evaporado. O produto bruto foi diluído com solução saturada de NaHC03 (20 mL) e o composto foi extraído para CH2CI2 (3 x 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (15 mL) e seca (Na2S04) . A evaporação do solvente e a purificação do composto bruto por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) permitiu obter o composto 66 (0,055 g, 25%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 77-79°C; 1tt NMR (DMSO-d6·) δ 1,20-1,30 (m, 3H) , 2,28 (s, 3H), 2,50-2,57 (m, 4H), 2,90-2,96 (m, 2H), 3,02- 161 3,06 (m, 2H) , 5, 98-6, 04 (m, 2H), 6, 60-6,63 (m, 1H), 7,17-7,35 (m, 4H), 10,90 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 315 (M+, 66), 311 (78), 249 (100).
Sal de dihidrocloreto de etilo 3-(1-metilo-l,2,3,6- tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo carbamimidotioato (67): Uma solução do composto 66 (0,05 g, 0,159 mmol) em metanol (5 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (0,47 mL, 0,477 mmol), à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado em vácuo, após agitação por 15 min, e o produto bruto foi re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 67 (0,04 g, 66%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 190-192°C.
Exemplo 19: N-(3-(l-benzoílo-piperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (70) o X Ή ra
(4-(5-Nitro-lH-indolo-3-ilo)-5,6-dihidropiridino-l(2h)-ilo) (fenilo)-metanona (68) :
Uma solução de 5-nitroindolo (38) (0,5 g, 3,083 mmol) em etanol seco (15 mL) foi tratada com pirrolidina (0,77 mL, 9,250 mmol), l-benzoílo-4-piperidona (1,0 g, 4,0 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada por 3 dias. A reacção arrefeceu à temperatura ambiente e o sólido foi filtrado. O produto foi lavado com etanol frio (2 x 10 mL) e seco em vácuo para obter o composto 68 (1,05 162 g, 98%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 280-282 °C; XH NMR (DMSO-dH) δ 2,55-2,61 (m, 2H) , 3, 54-3, 58 (m, 1H), 3,86-3, 90 (m, 1H) , 4,15-4,34 (m, 2H) , 6,14-6,30 (m, 1H) , 7,39-7,55 (m, 5H) , 7,67 (d, 1H, J= 9,6 Hz), 7,72 (s, 1H), 8,03 (d, 1H, J=8,1 Hz), 8,70-8, 78 (m, 1H) , 11,94 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 348 (M+, 100), 276 (83), 244 (40).
Sal de dihidrocloreto de N-(3-(l-benzoílopiperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (70): Uma solução do composto 1 (0,2 g, 0,575 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com Pd-C (0,02 g), purificada com gás de hidrogénio e agitada durante a noite (14 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão). A mistura de reacção foi filtrada em celite e lavada com etanol seco (2x5 mL) . A camada combinada de etanol foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,32 g, 1,157 mmol) e a mistura resultante foi agitada por 24 h à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (50 mL). O sólido foi particionado em solução saturada de NaHCCh: CH2CI2 (40 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com CH2CI2 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (10 mL) e foi seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o composto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 69 (0,07 g, 28%) como uma base livre. Sólido,
Ponto de fusão: 135-137°C; XH NMR (DMSO-d6) δ 1,57-1,65 (m, 2H) , 1,89 -2, 06 (m, 2H) , 2,92- 3, 08 (m, 2H) , 3,18- 3,25 (m, 1H) , 3,64 -3, 69 (m, 1H) , 4,58- 4, 64 (m, 1H), 6,22 (s, 1H), 6, 63 (d, 1H, - J~- =8,7 Hz) , 7,01 -7 ,10 (m, 3H) , 7,27 (d, 1H, J= 8, 4 Hz) , v ,40- -7,45 ) (m, 6H) , 7, 58 (d, 1H, J-- =4,8 Hz), 7,70 (d, 1H, J= 3 ,6 Hz) , 10, 65 (s r 1H) ; ESI-MS m/ z (%) : 429 (M+,100), 412 (46). Uma solução do composto 69 (0,06 g, 0,140 mmol) em metanol (3mL) foi tratada com IN HC1 em éter 163 (0,42 mL, 0,420 mmol) e agitada por 30 min, à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o composto em bruto foi re-cristalizado a partir de metanol/éter para obter o composto 70 (0,053 g, 76%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusãol80-183 °C.
Exemplo 20: M-(3-(piridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (73)
H 73 3-(1-benzilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (71):
Uma solução de 5-nitroindolo (38) (1,0 g, 6,167 mmol) em etanol seco (20 mL) foi tratada com pirrolidina (1,54 mL, 18,501 mmol) e N-benzil-4-piperodona (2,2 mL, 12,3 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada por 4 dias. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente foi evaporado. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 71 (0,925 g, 45%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 168-170°C; ^ NMR (DMSO-d6) δ 2,51-2,55 (m, 2H) , 2,66 (t, 2H, J=5,4Hz), 3,12-3,18 (m, 2H) , 3,60 (s, 2H), 6,17 (s, 1H) , 7,23-7, 38 (m, 5H) , 7,55 (d, 1H, J=9,0Hz), 7,65 (s, 1H), 8,01 (dd, 1H, J=2,l, 164 8,7Hz), 8,68 (d, 1H, J=2,1 Hz), 11,87 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 334 (M+, 100) .
Sal de dihidrocloreto de N-(3-(piridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (73): Uma solução do composto 71 (0,3 g, 0,899 mmol) , em metanol seco (5 mL) , foi tratada com Pd-C (0,03 g) e HC02NH4 (0,28 g, 4, 499 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada por 24 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada través de uma camada de celite e lavada com metanol (2 x 15 mL) . A camada combinada de metanol foi evaporada e o produto em bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter a amina intermediária. Uma solução de amina, em etanol seco (10 mL) , foi tratada com hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,51g, 1,7999 mmol), e a mistura resultante foi agitada por 24 h, à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (50 mL) . O sólido foi dissolvido em solução saturada NaHC03: CH2C12 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (15 mL) e foi seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 72 (0,04 g, 14%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 112-115°C; NMR (DMSO-c?6) δ 6,39 (brs, 1H), 6,76 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,10 (dd, 1H, J=3,6-4,9
Hz), 7,41-7,44 (m, 2H) , 7,61 (d, 1H, J=4,8 Hz), 7,68 (d, 2H, J= 6,3 Hz), 7,74 (d, 1H, J= 2,7 Hz), 7,96 (d, 1H, J= 2,7
Hz), 8,49 (d, 2H, J=6,0 Hz), 11,53 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 319 (M+, 100) . Uma solução de base livre do composto 72 (0,035 g, 0,109 mmol) em metanol (3 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (0,32 mL, 0,329 mmol) e agitada por 30 min, à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o 165 composto 73 (0,031 g, 72%) como um sal dihidroclórico, sólido, Ponto de fusão: 183-185°C.
Exemplo 21: Metilo-3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo-carbamimidotioato (75)
1-(3-(1-Metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tioureia (64):
Ver detalhes experimentais no Exemplo 17.
Metilo-3-(1-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-1H-indolo-5-ilo-carbamimidotioato (74) : Uma solução do composto 64 (0,2 g, 0, 698 mmol), em acetona (10 mL), foi tratada com iodometano (0,26 mL, 4,189 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada durante a noite (14 h). A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente evaporado. O produto bruto foi diluído com uma solução saturada de NaHCCb (10 mL) e o composto foi extraído com CH2CI2 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (10 mL) e seca (Na2S04&gt; . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 74 (0,04 g, 19%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 260-162 °C; 1H NMR (DMSO-d6·) δ 2,29 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,50-2,59 (m, 4H), 3,06 (brs, 2H), 6,01 (s, 1H), 6,64 (brs, 1H), 7,22-7,30 (m, 3H), 10,91 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 301 (M+, 36), 285 (55), 258 (66), 242 (100) . 166
Sal de dihidrocloreto de metilo-3-(l-metilo-l,2,3, 6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo-carbamimidotioato (75): Uma solução do composto 74 (0,035 g, 0,116 mmol) em metanol (3 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (0,34 mL, 0,349 mmol), à temperatura ambiente. O solvente agitado por 15 minutos, evaporado em vácuo e seco para obter o composto 75 (0,03 g, 70%) como um semi-sólido.
Exemplo 22: N-(3-(1-(imino(tiofeno-2-ilo)metilo)piperidino-4-ilo) -lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidantida (77)
3-(1-Benzilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (71): Ver detalhes experimentais no Exemplo 20. N-(3-(1-(imino(tiofeno-2-ilo)metilo)piperidino-4-ilo)-1H-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (76) : Uma solução do composto 71 (0,17 g, 0,509 mmol), em etanol seco (5 mL) , foi tratada com Pd-C (0,02 g), purificada com gás de hidrogénio e agitada durante a noite (14 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão) . A mistura de reacção foi filtrada através de uma camada de celite e lavada com etanol (2x5 mL). A camada combinada de etanol foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,32 g, 1,019 mmol) e a mistura resultante foi agitada por 24 h, à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (50 mL). O sólido foi dissolvido numa mistura de solução saturada de NaHCCb e CH2CI2 (40 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com CH2CI2 (2 x 167 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (10 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 77 (0,06 g, 27%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 115-117°C; ΧΗ NMR (DMSO-d6) δ 1,66-1,77 (m, 2H), 1,99-2,03 (m, 2H), 3,04-3,16 (m, 3H), 3,97-4,01 (m, 2H), 6,23 (brs, 1H) , 6,64 (dd, 1H, J=1,2, 8,4 Hz), 7,03 (s, 1H), 7,07-7,10 (m, 2H), 7,17 (t, 1H, J= 3,9 Hz), 7,28 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,43 (d, 1H, J= 3,9 Hz), 7,58 (d, 1H, J=4,5 Hz), 7,71 (d, 1H, J=3,6 Hz), 7,78 (d, 1H, J=4,5 Hz), 10,65 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 434 (M+, 47), 325 (100), 242 (34).
Sal de dihidrocloreto de N-(3-(1-(imino(tiofeno-2-ilo)metilo)piperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (77): Uma solução do composto 76 (0,055 g, 0,115 mmol) em metanol (3 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (0,34 mL, 0,345 mmol) e agitada por 30 min. à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 77 (0, 051 g, 80%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 123-125 °C.
Exemplo 23: N-(3-(4-(metiloamino)ciclohexilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (84): 168
83 84 5-Nitro-3-(1,4-dioxo-aspiro[4,5]dec-7-en-8-ilo)-lH-indolo (78): Uma solução de 5-nitroindolo (38) (0,2 g, 1,233 mmol) , em metanol seco (5 mL) , foi tratada com KOH (0,56 g) , à temperatura ambiente. Após agitação por 10 min., foi adicionado cetal de 1,4-ciclohexanodiona monoetileno (0,48 g, 3,083 mmol) e a solução resultante foi refluxada por 36 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente evaporado. O produto bruto foi diluído em água (25 mL) e extraído com acetato de etilo (2 x 25 mL) . A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com salmoura (20 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o material bruto purificado por cromatografia instantânea em coluna (Acetato de etilo) para obter o composto 78 (0,25 g, 68%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 175-177°C; 1H NMR (CDCls) δ 1,91 (t, 2H, J= 6,6Hz), 2,49 (brs, 2H) , 2,49-2,66 (m, 2H) , 3, 96-4, 00 (m, 4H) , 6,12 (t, 1H, J= 3,9 Hz), 7,22 (d, 1H, J=2,4 Hz), 7,32 (d, 1H, J=8,7 Hz), 8,05 (dd, 1H, 169 J= 2,1, 9,0 Hz), 8,36 (brs, 1H) , 8,78 (d, 1H, j=2,l Hz); ESI-MS m/z (%): 301 (M+, 100). 4-(5-Nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enona (79): Uma solução do composto 78 (0,1 g, 0,332 mmol), em acetona (5 mL), foi tratada com 10% HC1 aquoso (5 mL), à temperatura ambiente, e agitada por 6 h. A acetona foi evaporada e o produto bruto foi basificado utilizando solução de NH4OH (20 mL) . O produto foi extraído para CH2CI2 (2 x 20 mL) , lavado com salmoura (10 mL), e seco (NaS04) . A camada de CH2CI2 foi evaporada para obter o composto 79 (0,075 g, 88%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 210-212°C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 2,59 (t, 2H, J=6,9 Hz), 2,90 (t, 2H, J=6,6 Hz), 3,11-3,12 (m, 2H) , 6,24 (t, 1H, J= 3,6 Hz), 7,57 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,76 (d, 1H, J=2,l Hz), 8,03 (dd, 1H, J=2,l, 9,0 Hz), 8,71 (d, 1H, J=2,l Hz), 11, 95 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 257 (M+, 100). N-Metilo-4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enamina (80) : Uma solução do composto 79 (0,07 g, 0,273 mmol), em 1,2-dicloroetano (3 mL), foi tratada com AcOH (0,015 mL, 0,273 mmol) e clorohidrato de metilo-amina (0,018 g, 0,273 mmol), NaBH(OAC)3 (0,086 g, 0,409 mmol), à temperatura ambiente, e agitada durante a noite (14 h) . A reacção foi basificada com 2N NaOH (25 mL) e o produto foi extraído em acetato de etilo (2 x 20 mL). A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com salmoura (15 mL), e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e 0 produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 1:9) para obter o composto 80 (0,074 g, quantitativo) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 208-210°C; XH NMR (DMSO-d6) δ 1,44-1,53 (m, 1H) , 1,97-2,01 (m, 2H) , 2,35 (s, 3H) , 2,40-2,57 (m, 3H), 2,60-2,70 (m, 1H), 6,13 (brs, 1H), 7,54 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,63 (s, 1H) , 8,00 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 170 8,67 (s, 1H) , 11,85 (brs, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 272 (M+, 100) . tert-butilo-metilo(4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enilo)carbamato (81): Uma solução do composto 80 (0,1 g, 0,368 mmol), em 1,4-dioxano seco (3 mL) , foi tratada com EtjN (0,1 mL, 0,737 mmol) seguido de (Boc)20 (0,084 g, 0,387 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi agitada durante a noite (16 h). O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (EtOAc:hexano, 1:1) para obter o composto 81 (0,135 g, quantitativo) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 224-226 ° C; 2H NMR (DMSO-dU) δ 1,42 (s, 9H), 1,81-1,87 (m, 2H) , 2,29-2,45 (m, 2H) , 2, 60-2,70 (m, 2H), 2,74 (s, 3H) ,4,10-4,16 (m, 1H), 6,17 (brs, 1H), 7,55 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,66 (s, 1H) , 8,01 (dd, 1H, J=2,4, 9,0 Hz), 8,68 (d, 1H, J=2,1 Hz), 11,87 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 394 (M.Na+, 100), 316 (44), 272 (82). tert-butilo-4-(5-amino-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enilo(metilo)carbamato (82):
Uma solução do composto 81 (0,5 g, 1,364 mmol) em 2M NH3 em metanol (20 mL) foi tratada com Pd-C (0,05 g) e excitada com gás de hidrogénio. A reacção foi agitada, à temperatura ambiente, durante a noite (16 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão). A solução foi filtrada utilizando uma camada de celite e lavada com CH2CI2: metanol (1:1, 3 x 20 mL). O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (EtOAc: Hexano, 1:1) para obter o composto 82 (0,46 g, quantitativo), sob a forma de um sólido, com diastereómeros na razão 1:2, XH NMR (DMSO-d6) δ 1,38, 1,41 (2 s, 9H), 1,46-1,84 (m, 6H), 2,02-2,17 (m, 2H) , 2,53-2,57 (m, 1H) , 2,60-2,72 (2s, 3H), 3, 82-3, 85 (m, 1H), 4,41 (brs, 2H) , 6, 42-6, 50 (m, 1H) , 6, 66-6, 68 (m, 1H) , 6,85- 171 6, 87, 6, 99-7,06 (2m, 2H), 10,23, 10,28 (2s, 1H); ESI-MS m/z (%): 366 (M.Na+,8), 344 (MH+, 10), 288 (100). tert-butilometilo(4-(5-(tiofeno-2-carboximidamido)-1H-indolo-3-ilo)ciclohexilo)carbamato (83): Uma solução do composto 82 (0,44 g, 1,281 mmol), em etanol seco (20 mL) , foi tratada com hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,73 g, 2,562 mmol), à temperatura ambiente, e agitada por 24 h. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (100 mL) . O sólido foi dissolvido em solução saturada de NaHCCb: CH2CI2 (50 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com CH2CI2 (2 x 25 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada, com salmoura (20 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 83 (0,425 g, 73%), sob a forma de espuma, numa razão 1:2 de diastereómeros. 1H NMR (DMSO-d6) δ 1,38-1,56 (m, 11H) , 1,64-1,82 (m, 4H) , 2,06- 2,18 (m, 2H) , 2,62-2,70 (m, 4H) , 3, 80-3, 90 (m, 1H) , 6,27 (brs, 1H), 6,62-6,66 (m, 1H), 6,95-7,11 (m, 3H), 7,22-7,29 (m, 1H), 7,59 (d, 1H, J=5,l Hz), 7,71 (d, 1H, J= 3,6 Hz), 10,59, 10,63 (2s, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 453 (MH+, 100).
Sal de dihidrocloreto de N-(3-(4-(metilo- amino)ciclohexilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (84): O composto 83 (0,2 g, 0,441 mmol) foi tratado com solução IN HC1, à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada por 2 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada, e lavada com água (5 mL) . O solvente foi evaporado e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composoto 84 (0 ,175 g, 94%) sob a forma de um sólido, na razão 1:2 de diastereómeros. 1R NMR (DMSO-d6) δ 1,52-1,56 (m, 2H), 1,81- 172 2,16 (m, 6H) , 2,50 (s, 3H), 2, 75-2, 80 (m, 1H), 3,00-3,05 (m, 1H), 7,08 (d, 1H, J=8,l Hz), 7,24-7,40 (m, 2H) , 7,50 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,70-7,72 (m, 1H) , 8,15-8,19 (m, 2H) , 8,58 (brs, 1H) , 9,19 (brs, 2H) , 9,65 (brs, 1H) , 11,21, 11,26 (2s, 1H), 11,43 (s, 1H) / ESI-MS m/z (%) : 353 (MH+ para base livre, 100) 322 (85) ; ESI-HRMS calculada para C20H25N4S (MH+ para base livre), calculado: 353,1808; Observado: 353,1794,
Exemplo_24j_N- (3- (piperidino-4-ilo) -lH-indolo-5- ilo)tiofeno-2-carboximidamida (88)
tert-Butilo-4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)-5, 6-dihidropiridino-1(2H)-carboxilato (85): Uma solução de 5-nitroindolo (38) (2,0 g, 12,334 mmol) , em etanol seco (20 mL) , foi tratada com pirrolidina (3,08 mL, 37,002 mmol) seguida de N-Boc-4-piperidona (4,91 g, 24,668 mmol), à temperatura ambiente e a solução resultante foi refluxada por 3 dias. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, o solvente evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (acetato de etilo:hexano, 1:3) para obter o composto 85 (4,2 g, quantitativo) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 210-212 °C; XH NMR (DMSO-dé&gt;) δ 1,36-1,43 (m, 11H) , 3,57 (t, 2H, J=5,7 Hz), 4,08 (s, 2H) , 6,20 (s, 1H), 7,56 (d, 1H, J= 9,0 Hz), 7,71 (s, 1H) , 8,02 (dd, 1H, J=2,l, 9,0 Hz), 8,71 (d, 1H, J=2,l Hz), 11,93 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 366 (M.Na+, 100), 288(52). 173 tert-Butilo-4-(5-amino-lH-indolo-3-ilo)piperidino-1-carboxilato (86): Uma solução do composto 85 (0,5 g, 1,456 mmol) , em 2M NH3 em metanol (15 mL), foi tratada com Pd-C (0,05 g) e excitada com gás de hidrogénio. A reacção foi agitada em atmosfera de hidrogénio, durante a noite. A solução foi filtrada através de uma camada de celite e lavada com metanol: CH2CI2 (1:1, 2 x 20 mL) . A camada orgânica combinada foi evaporada para obter o composto 86 (0,46 g, quantitativo) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 205-207 ° C; XH NMR (DMSO-dU) δ 1,41-1,53 (m, 11H) , 1,87-1,91 (m, 2H) , 2,73-2,85 (m, 3H) , 4,03-4,07 (m, 2H) , 4,43 (s, 2H) , 6,45 (dd, 1H, J=l,8, 8,4 Hz), 6,69 (d, 1H, J=l,5 Hz), 6,90 (d, 1H, j=2,4 Hz), 7,01 (d, 1H, J=8,4 Hz), 10,28 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 338 (M.Na+, 23), 316 (MH+,11), 216 (100) . tert-butilo-4-(5-(tiofeno-2-carboximidamido)-lH-indolo-3-ilo)piperidino-l-carboxilato (87): Uma solução do composto 86 (0,45 g, 1, 426 mmol), em etanol seco (25 mL), foi
tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,81 g, 2,853 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi agitada por 24 h. O solvente foi evaporado, e o produto bruto diluído com solução saturada de NaHC03 (25 mL) e CH2CI2 (50 mL) . A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com CH2CI2 (2 x 25 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 mL), e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 3:97) para obter o composto 87 (0,6 g, quantitativo) sob a forma de espuma. ΧΗ NMR (DMSO-d6) δ 1,40-1,56 (m, 11H), 1,90-1,94 (m, 2H), 2, 86-2, 94 (m, 3H) , 4,02-4,06 (m, 2H) , 6,26 (s, 1H) , 6,64 (dd, 1H, J=l,2, 8,4Hz), 6,99 (s, 1H) , 7,05 (d, 1H, J=l, 8 Hz), 7,09 (dd, 1H, J= 3,6, 4,9 Hz), 7,27 (d, 1H, 174
10,63 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 425 (MH+, 100).
Sal de dihidrocloreto N- (3-(piperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (88):Uma solução do composto 87 (0,3 g, 0,706 mmol) foi tratada com solução IN HC1 (20 mL) e refluxada por 2 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o sólido foi filtrado e lavado com água (5 mL) . A camada de água foi evaporada e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 88 (0,29 g, 72 %) , sob a forma de um sólido.
Decomposição a 230°C. 1H NMR (DMSO-dH) δ 1,90-2,10 (m, 4H) , 3,00-3,13 (m, 3H) , 3,31-3,35 (m, 2H) , 7,11 (d, 1H, J=8,7
Hz), 7,28 (d, 1H, J=l,8 Hz), 7,39 (t, 1H, J=4,5 Hz), 7,53 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,77 (s, 1H) , 8,16-8,20 (m, 2H) , 8,58 (s, 1H), 9,18 (brs, 2H), 9,68 (s, 1H), 11,29 (s, 1H), 11,49 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 325 (MH+, base livre, 100), 242 (34), 163 (70); HRMS calculado para C18H21N4S (MH+);
Calculado: 325,1494; Obtido: 325,1481,
Exemplo 25: Jf-(3-(8-metilo-8-azobiciclo[3,2,l]oct-3-en-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (90):
3-(8-Metilo-8-azobiciclo[3,2,1]oct-3-en-3-ilo)-5-nitro-lH-indolo (89): Uma solução de 5-nitroindolo (38) (0,5 g,
3,083 mmol), em ácido acético glaciar (10 mL), foi tratada com tropinona (0,85 g, 6,617 mmol), seguida de 2M H3PO4 em ácido acético glaciar (5 mL) , a 100 °C, e a solução resultante foi agitada à mesma temperatura por 24 h. A 175 reacção foi trazida à temperatura ambiente, vertida para uma solução gelada de 10% NH4OH (50 mL) e o produto foi extraído em CH2CI2 (2 x 25 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (15 mL), e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em sílica gel (2M NH3 em metanol: CH2C12, 1:9) para obter o composto 89 (0,27 g, 31%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 234-236°C; ΧΗ NMR (DlVISO-dól δ I, 51-1,60 (m, 1H), 1,79-1, 86 (m, 1H) , 1,95-2,14 (m, 4H) , 2,32 (s, 3H), 2,76-2,83 (m, 1H) , 3,43 (t, 1H, J=5,4 Hz), 6,31 (d, 1H, J=5,1 Hz), 7,54 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,61 (s, 1H) , 8,01 (dd, 1H, J=2,1, 9,0 Hz), 8,68 (d, 1H, J=2,4 Hz), II, 86 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 284 (MH+,100). N-(3-(8-Metilo-8-azobiciclo[3,2,1]oct-3-en-3-ilo)-1H-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (90): Uma solução do composto 89 (0,25 g, 0,882 mmol), em etanol seco (10 mL) , foi tratada com Pd-C (0,025 g) , e excitada com gás de hidrogénio. A reacção foi agitada em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão), durante a noite (14 h). O sólido foi filtrado através de uma camada de celite e lavado com etanol (2x5 mL) . A camada combinada de etanol foi tratada com hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,5 g, 1,764 mmol), à temperatura ambiente, e agitada por 24 h. O etanol foi evaporado, o material bruto basificado com solução saturada de NaHC03 (20 mL) e o produto extraído com CH2C12 (2 x 25 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (15 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (2M NH3 em metanol: CH2C12, 1:9) para obter o composto 90 (0,14 g, 44%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 93-95°C; ΧΗ NMR (DMSO-d6) δ 1, 60-1,65 (m, 1H) , 1,84-1, 90 (m, 1H) , 2,02-2,26 (m, 4H), 2,41 (s, 3H), 2,83- 176 2,89 (m, 1H), 3, 46-3, 55 (m, 1H) , 6,20 (brs, 2H) , 6,67 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,10 (s, 1H), 7,23-7,31 (m, 3H), 7,60-7,72 (m, 2H), 10,99 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 363 (MH+, 65), 182 (100), 119 (48); ESI-HRMS calculado para C21H23N4S (MH+) ,
Calculado: 363,1633; Observado: 363,1637.
Exemplo 26: (R)-N-(3-((l-Metilopirrolidino-2-ilo)metilo)- lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (97):
i. msw$r'm Éter
5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-lH-indolo (92) (Macor et al. J. Org. Chem. 1994, 59(24), 7496): A um frasco de fundo redondo de 250 mL, purificado com árgon, contendo um agitador magnético e uma solução de 5-aminoindolo (91) (15,00 g, 113 mmol) em tolueno anidrico (50 mL) , foi adicionada acetonilacetona (25,4 mL, 216 mmol, 1,9 eq) . O frasco foi equipado com uma armadilha Dean-Stark com reservatório de 10 mL, preenchido com tolueno. A parte mais elevada do frasco e o braço condensador da armadilha foram envolvidos em papel de alumínio e o recipiente de reacção colocado num banho de óleo, pré-aquecido a 125 °C. Esta solução castanho-escuro foi agitada num fluxo contínuo de árgon, a esta mesma temperatura, durante 45 minutos, seguindo-se a drenagem do reservatório de solvente da aramadilha. Após 4 h, a TLC (5% acetato de etilo, 95% hexano) revelou que a reacção estava terminada. A reacção foi arrefecida, gradualmente, à temperatura ambiente durante a noite. A reacção foi vertida sobre uma camada de 177 sílica gel e o solvente retirado por filtração em vácuo. A sílica foi lavada com hexano (200 mL) . Um precipitado começou a formar-se, quase de imediato, no filtrado. A sílica foi lavada novamente com uma solução 6% de éter dietílico, 94% hexano (800 mL) . Foram recolhidos cristais em ambas as lavagens, e os filtrados foram combinados. A camada de sílica foi lavada com éter (150 mL) e o fitrado combinado com as lavagens. Os filtrados combinados foram concentrados para se obter um óleo castanho. O óleo foi purificado no Biotage SP-1 (0-8% éter em hexano) . A TLC revelou que todos os produtos eram idênticos (sólidos brancos) pelo que foram combinados. (Rendimento: 17,10 g de sólido branco, composto 92 (72%). 1H NMR (CDCI3) δ: 8,26 (bs, NH) , 7, 48-7, 48 (d, 1H, J=l,2 Hz), 7,46-7, 43 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,31-7,29 (t, 1H, J=2,7 Hz), 7,04 -7,00 (dd, 1H, J=2,1, 8,4 Hz), 6,61 (s, 1H) , 5,92 (s, 2H) , 2,05 (s, 6H) . MS-ESI m/z (%): 211 (M+, 100). (R)-benzilo-2-(5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-lH-indolo-3-carbonilo)pirrolidino-l-carboxilato (94) (Macor et al. J. Org. Chem. 1994, 59(24), 7496): a) Formação de (R)-benzilo-2-(clorocarbonilo)pirrolidino-l-carboxilato (93): A um frasco de fundo redondo purificado com árgon, contendo N- (benziloxicarbonilo)-D-prolina (10,00 g, 40,1 mmol), foi adicionado diclorometano anídrico (120 mL) . A reacção translúcida foi tratada com DMF (0,5 mL) e cloreto de oxalilo (5,25 mL, 60,2 mmol) foi adicionado, gradualmente, produzindo efervescência. A reacção foi agitada à temperatura ambiente em meio argónico por 4 horas. A reacção foi concentrada sob pressão reduzida, e seca durante a noite em elevado vácuo para se obter um óleo. O material foi utilizado no passo seguinte. 178 b) A um frasco de fundo redondo de 500 mL, purificado com árgon e equipado com um agitador magnético, contendo 93 (16,86 g, 80,2 mmol) foi adicionado benzeno anídrico (100 mL) . A solução foi colocada num banho de água gelada e agitada por 10 minutos. Uma solução 3N de brometo de etilo-magnésio em éter dietilico (28 mL, 84 mmol) foi adicionada lentamente, por uma cânula, durante 5 minutos. A reacção foi agitada num banho de água gelada por 2 horas, tornando-se a sua coloração vermelho-escuro. A reacção foi transferida para um decantador e tratada com solução saturada de bicarbonato de sódio (50 mL) e acetato de etilo (50 mL). A camada aquosa tornou-se leitosa e translúcida. A adição de mais solução de bicarbonato de sódio (30 mL) não permitiu a dissolução do precipitado; no entanto, a camada de separação entre as fases tornou-se mais óbvia. A camada aquosa foi removida, e a camada orgânica retirada por decantação como uma solução amarela. A camada aquosa foi filtrada para remover o sólido, e o solvente incolor resultante foi particionado mais duas vezes com acetato de etilo (2 x 30 mL) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de magnésio e filtrados. O filtrado foi concentrado para obter um óleo amarelo. O óleo foi tratado com éter (100 mL) . Após agitação por 15 minutos, formou-se um sólido branco. A reacção foi agitada por 1 h. O precipitado que se formou foi recolhido por filtração em vácuo e seco em elevado vácuo. Foi purificado por filtração através de uma camada de sílica gel, utilizando, como eluentes, éter, seguido de acetato de etilo. Rendimento: 9,5, g de sólido branco, composto 94 (a partir do precipitado). 1H NMR (CDC13) δ: 9, 54, 9,20 (2s, 1H), 8,29-8,28 e 8,15-8,15 (2d, 1H, J=l,2 Hz), 7,81-7,80 e 7,76-7,75 (2d, 1H, J=2,7 Hz), 7,42-7,30 (m, 4H), 7,13-6,93 (m, 3H) , 5,90 (bs, 2H), 5,25-4,97 (m, 3H), 3,80-3,58 (m, 179 2Η) , 2,41-2,20 (m, 1H) , 2,16-1,88 (m, 2H) , 2,04-1, 99 (d, 8H), 1,64 (m, 1H). MS-ESI m/z (%): 442(M+, 100). (R)-5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-3-(1-metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo (95) (Macor et al. J. Org. Chem.1994, 59(24), 7496): A um frasco de fundo redondo, purificado com árgon, contendo um agitador magnético e uma solução de hidreto de aluminio-litio (1,93 g, 50,9 mmol) em THF anidrico (20 mL) , foi adiconada uma solução de 94 (5,00 g, 11,3 mmol) em THF anidrico (30 mL). O frasco foi equipado com um condensador e colocado num banho de óleo. A reacção foi aquecida a 75°C e agitada até refluxo em meio argónico por 4,5 h. A reacção foi considerada completa, por TLC (10% 2M NH3 em metanol, 90% CH2CI2) , e foi gradualmente arrefecida até à temperatura ambiente. A reacção foi ainda arrefecida colocando o frasco num banho de água gelada, seguindo-se a adição de porções adequadas de decahidrato de sulfato de sódio sólido (20 g). A reacção foi diluída com água fria (50 mL) seguida da acetato de etilo (50 mL) , e a mistura foi agitada em meio argónico por 17 horas. A reacção foi transferida para um decantador. A camada aquosa foi extraída mais duas vezes com acetato de etilo. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio e concentrados após decantação para obter um óleo amarelo. O produto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (10% 2M NH3 em metanol, 90% CH2CI2) para obter o produto desejado bem como para recuperar algum do material inicial. Rendimento: 1,827 g de sólido branco, composto 95 (52,5%). NMR (CDCI3) δ: 8,26 (bs, 1H) , 7,45-7,44 (d, 1H, J=l,5 Hz), 7,41-7,38 (d, 1H, 8,7 Hz), 7,13-7,12 (d, 1H, J=2,l Hz), 7,02-6,99 (dd, 1H, J=l,8, 8,1 Hz), 5,92 (bs, 2H), 3,49 (s, 1H), 3,20-3,12 (m, 2H), 2,68-2,61 (q, 1H, J=9,3, 14,1 Hz), 2,52-2,40 (m, 1H) , 2,44 (s, 3H) , 2,28-2,19 (q, 1H, 180 3,49 J=9, 17,1 Hz), 2,05 (bs, 6H), 1,89 - 1,56 (m, 4H). MS-ESI m/z (%) : 308 (M+, 100) . (R)-3-((l-metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-amina (96) (Macor et al. J. Org. Chem. 1994, 59(24), 7496): A um frasco de fundo redondo, purificado com árgon, equipado com um agitador magnético e contendo uma solução amarela de 95 (1,80 g, 5,85 mmol) em 2-propanol anidrico (50 mL) e água (15 mL), foi adicionada uma porção de clorohidrato de
hidroxilamina sólido (8,14 g, 117,1 mmol). Adicionou-se trietilo-amina (8,15 mL, 58,5 mmol), através de uma seringa, e o frasco foi equipado com um condensador. O frasco foi colocado num banho de óleo e aquecido até refluxo. A reacção foi agitada em refluxo, em meio argónico, por 5 horas. A TLC (10% 2M NH3 em metanol, 90% CH2CI2) revelou que algum material inicial ainda estava presente. A reacção foi arrefecida à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reacção foi levada novamente a refluxo e agitada por mais 2 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e foram adicionadas pastilhas de hidróxido de sódio (2,34 g, 58,5 mmol), lentamente. A reacção foi agitada vigorosamente por 17,5 horas, e a solução laranja tornou-se amarela com um precipitado branco. A reacção foi filtrada em celite, seguindo-se a lavagem da celite com 2-propanol (40 mL) e a concentração do filtrado. O resíduo foi purificado em coluna de cromatografia (10% 2M NH3 em metanol, 90% CH2CI2) utilizando uma camada de sílica gel, com cerca de 10 cm de diâmetro e 15 cm de altura, para obter um óleo laranja. Este produto foi particionado em salmoura (5 mL) e acetato de etilo (20 mL). A camada orgânica foi seca com sulfato de sódio anidrico antes de ser decantada. A concentração permitiu a obtenção de um óleo laranja, composto 96 (815 mg, 60%) . 181
Dihidrocloreto de (J?)-N-(3-((l-metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (97): A um frasco de fundo redondo, purificado com árgon, foram adicionados 96 (350 mg, 1,53 mmol) e hidroiodeto de metilo tiofeno-2-carbimidotioato (870 mg, 3,05 mmol) seguidos de etanol absoluto (10 mL). A reacção foi agitada por 18 horas à temperatura ambiente utilizando um agitador magnético. A TLC (10% 2M amónia em metanol/ 90% diclorometano) revelou que toda a amina inicial havia reagido. A reacção foi tratada com éter (70 mL) e o precipitado amarelo resultante foi recolhido por filtração em vácuo e lavado com éter. O precipitado foi retirado do filtro por lavagem com uma solução IN de hidróxido de sódio (10 mL), seguida de acetato de etilo (20 mL). Este filtrado foi transferido para um decantador e, após agitação, a fase aquosa foi removida. Os orgânicos foram recolhidos, e a fase aquosa lavada mais duas vezes com acetato de etilo (2 x 10 mL). As fracções orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas para obter um óleo amarelo. O produto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (5-10% 2M amónia em metanol/ 95-90% diclorometano) para obter um óleo amarelo. O produto purificado foi dissolvido em diclorometano anídrico (5 mL) e tratado com 1M de ácido clorídrico em éter (5 mL). Após agitação durante 30 minutos, recolheu-se o precipitado por filtração em vácuo. O precipitado foi lavado com éter e seco sob sucção seguida de elevado vácuo para produzir o composto 97 (470 mg de um sólido amarelo, 74,7%; 1 . 1 H NMR (DMSO -d6) δ: 10,587 (s, 1H), 7, 71- -7, 70 (d, J=3 Hz, 1H), 7 r 59-7, , 58 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7, 28- 7, 25 (d, J=8,4 Hz, 1H) , 7,11- 7,10 (d, J=4,5 Hz, 1H), 7, 07- -7, 06 (d, J=1,5 Hz, 1H), 6,93 (s, 1H), 6,64- 6,62 (d, J=8 ,1 Hz 1 r 1H), 6,21 (bs, - 2H), 3,18- -3,16 (d, J=5 Hz, 1H), 3, 03- -2, 94 (m, 182 2Η) , 2,44-2,33 (m, 4H) , 2,14-2,05 (m, 1H) , 1,71-1,30 (m, 4H). ESI-MS m/z (%): 339 (M+l, 100).
Exemplo 27: N- (3-(4-(metilo-amino)ciclohex-l-enilo)-1H- indolo-5-ilo)tioneno-2-carboximidamida (100)
\
Mi
tert-Butilo-metilo(4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enilo)carbamato (81):
Para detalhes da síntese ver o Exemplo 23. tert-Butilo-4-(5-amino-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enilo(metilo)carbamato (98):
Uma solução do composto 81 (0,5 g, 1,346 mmol) em metanol seco (20 mL) foi tratada com hidrato de hidrazina (0,41 mL, 13,461 mmol), seguido de Raney-Ni (0,1 g), e a mistura resultante foi refluxada por 30 min. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada numa camada de celite e lavada com CH2CI2: metanol (1:1, 3 x 20 mL) . A camada orgânica combinada foi evaporada e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (EtOAc:hexano, 1:1) para obter o composto 98 (0,43 g, 94%) sob a forma de espuma. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 1,38-1,41 (m, 11H), 1,76-1,86 (m, 2H) , 2,14-2,42 (m, 2H), 2,73 (s, 3H), 4,05-4,15 (m, 1H) , 4,49 (s, 2H), 6,00 (brs, 1H), 6,48 (dd, 1H, J=l,8, 8,2 Hz) , 6,99 (d, 1H, J=1,5 Hz) , 7,05 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,16 183 (d, 1H, J=2,7 Hz), 10,60 (S, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 364 (M+Na+, 7), 342 (MH+, 11), 286 (100). tert-Butilo-metilo(4-(5-(tiofeno-2-carboximidamido)-1H-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enilo)carbamato (99): Uma solução do composto 98 (0,415 g, 1,215 mmol) em etanol seco (20 mL) foi tratada com hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,693 g, 2,430 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi agitada por 24 h. O solvente foi evaporado e o produto bruto diluído com solução saturada de NaHCC&gt;3 (25 mL) e CH2C12 (50 mL) . A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com CH2C12 (2 x 25 mL) . A camda orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 99 (0,37 g, 68%) sob a forma de espuma. NMR (DMSO-dól δ: 0,85 (t, 1H, J=7,2
Hz), 1,20-1,26 (m, 1H) , 1,40 (s, 9H) , 1,77-1,87 (m, 2H) , 2,22-2,40 (m, 2H) , 2,72 (s, 3H) , 4,06-4,16 (m, 1H) , 6,06 (s, 1H), 6,28 (brs, 1H), 6,66 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,10 (t, 1H, J=4,2 Hz), 7,22 (s, 1H) , 7,25-7,32 (m, 2H) , 7,60 (d, 1H, J=4,8 Hz), 7,72 (d, 1H, J=3,3 Hz),10,94 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 451 (MH+,100). N-(3-(4- (metilo-amino)ciclohex-l-enilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (100) : Uma solução do composto 99 (0,35 g, 0,776 mmol) foi tratada com 20% TFA em CH2C12 (20 mL) a 0 °C, mantendo-se a agitação por 1 h à mesma temperatura. O solvente foi evaporado, 0 produto bruto diluído com 10% NH3 aq. (15 mL) e 0 produto resultante extraído com CH2C12 (3 x 20 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (10 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto 184 purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 1:9) para obter 0 composto 100 (0,2 g, 74%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 167-169°C; XH NMR (DMSO-d6) δ: 1,39-1,47 (m, 2H) , 1,88-1, 96 (m, 3H) , 2,33 (s, 3H) , 2,40-2,46 (m, 1H) , 2,57-2,61 (m, 1H) , 6,01 (s, 1H) , 6,19 (brs, 2H) , 6,65 (dd, 1H, J=l,5, 8,2 Hz), 7,09 (dd, 1H, J=4,2, 4,9 Hz), 7,20 (s, 1H) , 7,28-7,31 (m, 2H) , 7,59 (d, 1H, J=4,2 Hz), 7,71 (d, 1H, J=3,3 Hz), 10,8 7(s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 351(MH+, 66), 320(54), 160(63), 119(100); ESI-HRMS calculado para C20H23N4S (MH+) , Calculado: 351,1654;
Observado: 351,1637.
Exemplo 28: (S)-N-(3-((l-metilopirrolidino-2-ilo)metilo)- lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (105) :
a) 5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-lH-indolo (92): ver detalhes experimentais no Exemplo 26, b) (L)-benzilo-2-(5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-1H-indolo-3-carbonilo)pirrolidino-l-carboxilato (102) : (Macor et al., J. Org. Chem. 1994, 59(24), 7496). De forma semelhante à síntese de 94, Exemplo 26, o composto 102 foi isolado sob a forma de espuma branca (4,35 g, 49%). XH NMR (CDCI3) δ: 9,46, 9,12 (2s, 1H) , 8,28-8,28 e 8,16-8,16 (2d, 1H, J=1,2 Hz), 7,86-7,85 e 7,78-7,77 (2d, 1H, J=2,7 Hz), 7,44-7,34 (m, 4H), 7,14-6,96 (m, 3H), 5,90 (bs, 2H) , 5,25-4,97 (m, 3H), 3,80-3,58 (m, 2H), 2,41-2,20 (m, 1H), 2,16- 185 1,88 (m, 2H), 2, 04-1, 99 (d, 8H) , 1,64 (m, 1H) . MS-ESI m/z (%): 442 (M+, 100). (L)-5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-3-((1-metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo (103): (Macor et al. J. Org. Chem. 1994, 59(24), 7496). De forma semelhante à síntese de 95, Exemplo 26, o composto 103 foi isolado sob a forma de uma espuma branca, 1,26 gramas (44%). XH NMR (CDCls) δ 8,11 (bs, 1H), 7,45-7,44 (d, 1H, J=l,5 Hz), 7,41- 7,38 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,12-7,11 (d, 1H, J=2,l Hz), 7,03- 6.99 (dd, 1H, J=l,8, 8,1 Hz), 5,92 (bs, 2H), 3,18-3,09 (m, 2H), 2, 65-2,57 (q, 1H, J=9,3, 14,1 Hz), 2,42 (s, 4H) , 2,28-2,19 (q, 1H, J=9, 17,1 Hz), 2,05 (s, 6H) , 1, 89 -1,56 (m, 4H) . (L)-3-(l-metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-amina (104). De forma semelhante à síntese de 96, Exemplo 26, o composto 104 foi isolado como um óleo castanho, 149 mg (86%). XH NMR (CDCI3) é consistente com a literatura prévia (Macor et al. J. Org. Chem. 1994, 59(24), 7496). (L)-N-(3-((l-Metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (105) : De forma semelhante à síntese de 97, Exemplo 26, o tratamento de 105 com hidroiodeto de metilo tiofeno-2-carbimidotioato em etanol originou, após purificação, o produto final sob a forma de um sólido laranja (62 mg, 77%). XH NMR (HC1 sal) (DMSO-d6) (11,45 (d, J=19,8 Hz, 1H) , 10,89 (m, 1H) , 9,69 (bs, 1H) , 8,63 (bs, 1H), 8,19-8,17 (d, J=4,2 Hz, 2H), 7,72-7,69 (m, 1H), 7,56-7,53 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,48-7,47 (d, J=l,5 Hz, 1H), 7,41-7,38 (t, J=4,5 Hz, 1H), 7,17-7,14 (d, J=8,4 Hz, 1H) , 3,58 (m, 2H) , 3, 43-3, 37 (m, 1H) , 3,17 (s, 1H) , 3,11- 2.99 (m, 2H) , 2,81-2,80 (d, J=4,8 Hz, 3H) , 2,10-1,70 (m, 186 5Η) , 1,28-1,23 (m, 3H), 0, 90- 0,85 (m, 2H). ESI-MS: MH+=339 (100) .
Exemplo 29: Preparação de (R)-N- (3-((l-Metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (106)
106 (R)-3-((l-Metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-amina (96) : Ver detalhes experimentais no Exemplo 26, (R)-N-(3-((l-Metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carbozimidamida (106): De forma semelhante ao composto 97, Exemplo 26, utilizando bromohidrato de benzilofurano-2-carbimidotioato, foi produzido o composto titulado 106 (sólido castanho, 86 mg, 51,8% rendimento). 1H NMR (DMSO-dh) δ: 10,68 (s, 1H) , 7,84 (s, 1H) , 7,31-7,28 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H) , 7,11 (s, 1H) , 7,07-7,06 (d, J=2,7 Hz, 1H), 6,74-6,71 (d, J=6,9 Hz, 1H) , 6,65 (s, 1H) , 3,18-3,16 (d, J=4,5 Hz, 1H) .
Exemplo_30j_Dihidrocloreto_de_(L) -N- (3- ((1- metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (107):
107 104 187 (L)-3-((l-Metilopirrolidino-2-ilo)metilo)-lH-indolo-5-amina (104): Ver detalhes experimentais no Exemplo 28,
Dihidrocloreto de (L)-N-(3-((l-metilopirrolidino-2- ilo)metilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carbozimidamida (107):
De forma semelhante ao composto 105, Exemplo 28, utilizando bromohidrato de benzilofurano-2-carbimidotioato, foi produzido o composto titulado 107, sob a forma de um sólido laranja-pálido (63 mg, 25%). ΧΗ NMR (di-HCl sal) (DMSO-d6) δ: 11,60 (s, 1H), 11,41-11,40 (d, J=l,2 Hz, 1H), 11,09 (bs, 1H) , 9,71 (bs, 1H) , 8,66 (bs, 1H) , 8,25 (s, 1H) , 7, 99- 7,97 (d, J=3, 6 Hz, 1H) , 7,70 (s, 1H) , 7, 55- -7,52 (d, J=8, 7 Hz, 1H) , 7,48- -7,47 (d, J=l, 8 Hz, 1H) , 7,13- -7,10 (dd, J=l, 8, 9 Hz, 1H) , 6,94- 6, 92 (dd, J=l, 2 !, 3,6 i Hz, 1H), 3,74 (m, 3H), 3, 61 -3,54 (m, 3H), : 3,17 i (s, 1H), 3, 43-3, 37 (dd, J= =4,8, 13,8 Hz, 1H) , 3,17 (s, 2H), 3,12- -2,98 (m, 2H), 2,80 -2,79 (d, J=4, 5 Hz, 3H) , 2,10 -1,70 (m, 5H) , 1,28- 1,23 (m, 3H) , 0 ,90- 0,85 (m, 2H).
Exemplo 31: M-(3-(l-metilopirrolidino-3-ilo)-lH-indolo-5- ilo) tiofeno-2-carboximidamida_(110)_e_N- (3- (1- metilopirrolidino-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (111):
111 188 a) N-benzilo-3- (l-metilopirrolidino-3-ilo) -lH-indolo-5-amina (108): Macor, J. E. et al. J. Med. Chem., 37, 2509-2512, (1994). (b) N-benzilo-3-(l-metilopirrolidino-3-ilo)-lH-indolo-5-amina (110): W-benzilo-3-(l-metilopirrolidino-3-ilo)-1H-indolo-5-amina 108, (500 mg, 1,637 mmol) foi dissolvida em etanol anidrico (10 mL) num frasco seco, purificado com árgon. Hidróxido de paládio húmido, 20% peso em carbono (560 mg, 0,796 mmol) foi rapidamente adicionado e a atmosfera do frasco substituída por hidrogénio de um balão, através de uma bomba de vácuo. A atmosfera do frasco foi substituída mais duas vezes por hidrogénio e a mistura agitada em atmosfera de hidrogénio, à temperatura ambiente. Após 48 horas, a cromatografia em camada fina num sistema de solventes (10% 2M NH3 em methanol/ 90% diclorometano) mostrou a conversão de cerca de 80-85% da mistura em 109, 3-(l-metilopirrolidino-3-ilo)-lH-indolo-5-amina. A mistura foi filtrada através de uma camada de celite, para remover os compostos insolúveis, a camada foi lavada com etanol anidrico (10 mL), e o solvente evaporado e o composto seco, brevemente, numa bomba de vácuo. A amina em bruto foi dissolvida em etanol anidrico (20 mL) e dividida sequencialmente em duas porções. Metade da solução etanólica de 109 (10 mL) foi colocada num frasco pequeno, purificado com árgon, equipado com um agitador magnético. Hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (350 mg, 1,227 mmol) foi adicionado ao frasco e a reacção foi agitada em meio argónico à temperatura ambiente por 96 horas, findas as quais o solvente foi evaporado e o resíduo particionado em H20 e Acetato de etilo; foi adicionada solução 1M de hidróxido de sódio para ajustar o pH a 9, A mistura foi transferida para um decantador e a camada orgânica recolhida. A camada aquosa foi ainda extraída com acetato de etilo e as camadas 189 orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas; o resíduo foi purificado por cromatografia em sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano para 15% 2M NH3 em metanol/ 85% diclorometano) para produzir o sólido amarelo-pálido 110 (96 mg, 36,2% rendimento); 1H NMR (DMSO-dd) δ: 10,59 (brs, 1H), 7,71( d, 1H, J=3,2 Hz), 7,59 (d, 1H, J=5,l Hz), 7,27 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,14-7,05 (2xm, 2H), 7,02 (s, 1H) , 6,64 (dd, 1H, J=8,3, 1,5 Hz), 6,27 (brs, 2H) , 3,56-3,45 (m, 1H) , 2,93 (t, 1H, J=8,4 Hz), 2,72-2, 65 (m, 1H) , 2,58-2,50 (m, 2H) , 2,31 (s, 3H), 2,28-2,15 (m, 1H), 1,98-1,86 (m, 1H) ; MS(ESI+) : 325(M+l, 100%). ESI-HRMS calculado para CHNS (MH+): 325,1488, Observado: 325,1481. c) N-(3-(l-metilopirrolidina-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (111): A metade restante da solução etanólica de 109 (10 mL, ver acima) foi colocada num frasco pequeno, purificado com árgon, equipado com um agitador magnético. Foi adicionado bromohidrato de benzil furano-2-carbimidotioato (366 mg, 1,227 mmol) ao frasco e a reacção foi agitada em meio argónico, à temperatura ambiente, por 24 horas, findas as quais o solvente foi evaporado e o resíduo particionado em H20 e Acetato de etilo; o pH foi ajustado a 9 adicionando solução 1M de hidróxido de sódio. A mistura foi ainda extraída com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas, concentradas e o resíduo purificado por cromatografia em sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano para 20% 2M NH3 em
metanol/ 80% diclorometano) para produzir uma espuma amarelo-pálido 111 (170 mg, 67,4% rendimento); 1R NMR (DMSO-dh) δ: 10,61 (brs, 1H) , 7,80 (s, 1H) , 7,27 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,17-7,04 (2xm, 3H) , 6,68 (d, 1H, J=8,2 Hz), 6,62 (s, 1H), 6,40 (brs, 1H) , 3, 55-3, 44 (m, 1H) , 2,94 (t, 190 1Η, J=8,3 Hz), 2,74-2,66 (m, 1H), 2,59-2,50 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,28-2,16 (m, 1H) , 1, 97-1,86 (m, 1H) ; MS (ESI + ) : 309 (M+l, 100%) . ESI-HRMS calculado para Ci8H2iN4o (MH+) : 309,1717, Observado: 309,1709,
Exemplo 32: N- (3-(4-(dimetilo-amino)ciclohex-l-enilo)-1H-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (114):
H H 113 H4 5-nitro-3-(1,4-diozaspiro[4,5]dec-7-en-8-ilo)-lH-indolo (78): Uma solução de 5-nitroindolo (38) (3,0 g, 18,501 mmol) em metanol seco (50 mL) foi tratada com KOH (5,6 g) à temperatura ambiente. Após agitação por 10 min., foi adicionado monoetileno de 1,4- ciclohexanodiona ketal (7,22 g, 46,253 mmol) e a solução resultante foi refluxada por 36 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente evaporado. O produto bruto foi diluído em água (50 mL) e o precipitado sólido foi filtrado e lavado com água (2 x 10 mL) . O precipitado foi seco em vácuo para obter o composto 78 (4,7 g, 85%) sob a forma de um sólido. Consultar o Exemplo 23 para ver os dados espectrais. 4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enona (79): Uma solução do composto 78 (4,7 g, 15,650 mmol), em acetona (50 mL) , foi tratada com 10% HC1 aq. (50 mL) , à temperatura ambiente, e agitada durante a noite (14 h) . A acetona foi 191 evaporada e o produto bruto basificado utilizando uma solução aquosa 10% NH4OH (100 mL). O precipitado foi filtrado e lavado com solução 10% NH4OH (2 x 10 mL) e água (2 x 10 mL) . O produto foi seco em vácuo para obter o composto 79 (4,0 g, quantitativo) sob a forma de um sólido. Para ver os dados espectrais, consultar o Exemplo 23, N, N-dimetilo-4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enamina (112) : Uma solução do composto 79 (1,0 g, 3, 902 mmol) em 1,2-dicloroetano seco (10 mL) foi tratada com clorohidrato de N, N-dimetil amina (0,31 g, 3,902 mmol), AcOH (0,22 mL, 3,902 mmol) e NaBH(OAc)3 (l,24g, 5,853 mmol), à temperatura ambiente, e a mistura resultante foi agitada durante a noite (14 h). A reacção foi diluída com IN NaOH (30 mL) e o produto foi extraído em acetato de etilo (2x 50 mL) . A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com salmoura (20 mL), e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 1:9) para obter o composto 112 (0,73 g, 66%) sob a forma de um sólido castanho. Ponto de fusão 234-236 °C; 2H NMR (DMSO-d6·) δ 1,43-1,57 (m, 1H) , I, 98-2,06 (m, 1H) , 2,12-2,23 (m, 7H) , 2,39-2, 62 (m, 4H) , 6,15 (t, 1H, J=l, 5 Hz), 7,54 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,62 (s, 1H) , 8,00 (dd, 1H, J=2,l, 9,0 Hz), 8,67 (d, 1H, J=2,l Hz), II, 82 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 286 (MH+, 100). 3-(4-(dimetilo-amino)ciclobex-l-enilo)-lH-indolo-5-amina (113) : Uma solução do composto 112 (0,21g, 0,735 mmol) em metanol seco (5 mL) foi tratada com Ra-Ni (0,05 g) seguida de hidrato de hidrazina (0,22 mL, 7,359 mmol), à temperatura ambiente. A reacção foi colocada num banho de óleo pré-aquecido e refluxada por 5 min. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada em celite e lavada com metanol (2 x 10 mL) . O solvente foi evaporado e o 192 produto bruto purificado numa coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 1:9) para obter 0 composto 113 (0,185 g, quantitativo), sob a forma de espuma. Ponto de fusão 63-65°C; *Η NMR(DMSO-d6) δ 1,40-1,52 (m, 1H), 1,97-2,02 (m, 1H), 2, 08-2, 57 (m,llH), 4,47 (s, 2H) , 5,99 (brs, 1H) , 6,47 (dd, 1H, j=l,8, 8,4 Hz), 6,99 (d, 1H, J=0,9 Hz), 7,04 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,13 (d, 1H, J=2,4 Hz), 10,55 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 256 (MH+, 100),211 (41). N-(3-(4-(dimetilo-amino)ciclohex-l-enilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (114): Uma solução do composto 113 (0,18 g, 0,704 mmol) em etanol seco (10 mL), foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,4 g, 1,409 mmol) à temperatura ambiente, e agitada por 24h. O solvente foi evaporado, o produto bruto diluído com solução saturada de NaHCC&gt;3 (20 mL) , e o produto foi extraído em CH2CI2 (2 x 25 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada em salmoura (20 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 1:9) para obter 0 composto 114 (0,24 g, 90%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 113-115°C; ΧΗ NMR (DMSP-d6) δ 1,42-1,53 (m, 1H) , 1, 97-2,02 (m, 1H) , 2,08-2,22 (m, 8H) , 2,31-2,60 (m, 3H) , 6,03 (s, 1H) , 6,21 (brs, 2H), 6,65 (dd, 1H, J=l,2, 8,4 Hz), 7,09 (t, 1H, J=4,2 Hz), 7,20 (s, 1H) , 7,28-7,31 (m, 2H), 7,58 (d, 1H, J=4,5
Hz), 7,71 (d, 1H, J=2,7 Hz), 10,88 (s, 1H) ; ESI-MSm/z (%) :
365 (MH+,39), 320(38), 183(76), 160(100); ESI-HRMS calculado para C21H25N4S (MH+) , Calculado: 365,1813;
Observado: 365,1794,
Exemplo 33: N- (3-(4-(dimetilo-amino)ciclohexilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (116): 193 193 Ν
Κ X
1« Ν, N-dimetilo-4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enamina (112) : Os detalhes experimentais e dados espectrais estão descritos no Exemplo 32, N-(3-(4-(dimetilo-amino)ciclohexilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (116): Uma solução do composto 112 (0,43 g, 1,506 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com 10% Pd-C (0,04 g) , e excitada com gás de hidrogénio à temperatura ambiente. A reacção foi agitada à mesma temperatura, numa atmosfera de hidrogénio (pressão de balão), durante a noite (14 h) . A reacção foi filtrada através de uma camada de celite e lavada com etanol seco (2 x 5 mL) . A camada de etanol combinada foi tratada com hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2- carboximidotióico (0,85 g, 3,013 mmol), à temperatura ambiente, e agitada por 24 h. O solvente foi evaporado e o material bruto diluido com solução saturada de NaHC03 (20 mL) ; o produto foi extraído com CH2CI2 (2x 25 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada em salmoura (20 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 1:9) para obter o composto 116 (0,4 g, 72%, em dois passos) sob a forma de um sólido amarelo. Ponto de fusão 104-1060C; 1H NMR (DMSO-d6) δ: 1, 39-1,60 (m, 3H) , 1,66-1,72 (m, 1H), 1, 82-1, 94 (m, 3H) , 2,05-2,08 (m, 1H) , 2,23 (s, 3H) , 2,34 (s, 3H), 2,64-2,71 (m, 1H) , 2,91-2,96 (m, 1H) , 6,48 (brs, 1H) , 6,64 (dd, 1H, J=l,5, 8,4 Hz), 6, 99-7,05 (m, 2H) , 7,10 (t, 1H, J=4,2 Hz), 7,27 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,60 194 (d, 1H, J= 5,4 Hz), 7,71 (d, 1H, J= 3,3 Hz), 10,57 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 367 (MH+,31), 322 (18),184 (100); ESI-HRMS calculado para C21H27N4S (MH+) , Calculado:367,1965; Observado: 367,1950,
Exemplo 34: N-(3-(4-(etilo-amino)ciclohexilo)-H-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (121):
4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enona (79): Ver detalhes experimentais completos e dados espectrais no Exemplo 23, W-etilo-4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enamina (117): Uma solução do composto 79 (1,0 g, 3, 902 mmol) , em 1,2-dicloroetano seco (10 mL), foi tratada com clorohidrato de etilo-amina (0,31 g, 3,902 mmol), ácido acético glacial (0,22 mL, 3,902 mmol) e NaBH(OAc)3 (1,24 g, 5,853 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura resultante foi agitada durante a noite (14 h) . A reacção foi diluída com IN NaOH (30 mL) e o produto extraído em acetato de etilo (2 x 50 195 mL). A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com salmoura (20 mL), e seca (Na2SC&gt;4) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 1:9) para obter o composto 117 (1,08 g, 97%) sob a forma de um sólido amarelo-escuro. Ponto de fusão 177-179°C; aH NMR (DMSO-d6) δ: 1,03 (t, 3H, J= 6,9 Hz), 1,39-1,52 (m, 2H), 1, 94-2,00 (m, 2H), 2,40-2,80 (m, 3H), 3,16 (s, 2H) , 4,07 (brs, 1H) , 6,13 (s, 1H) , 7,54 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,62 (s, 1H) , 8,00 (dd, 1H, J=2,4, 9,0 Hz), 8,67 (d, 1H, J=2,4 Hz), 11,83 (brs, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 286 (MH+, 100). tert-butilo-etilo(4-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)ciclohex-3-enilo)carbamato (118): Uma solução do composto 117 (l,05g, 3, 679 mmol) em 1,4-dioxano seco (20 mL) foi tratada com Et3N (1,02 mL, 7,359 mmol) seguido de (Boc)20 (0,84 g, 3,863 mmol), à temperatura ambiente, e a solução resultante foi agitada durante a noite (14 h). O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 1:1) para obter o composto 118 (1,1 g, 78%) sob a forma de um sólido amarelo. Ponto de fusão 217-219°C; 2H NMR (DMSO-dh) δ 1,09 (t, 3H, J=6,9 Hz), 1,42 (s, 9H) , 1,83-1, 96 (m, 2H) , 2,27-2,43 (m, 2H), 2,56-2,62 (m, 2H), 3,14-3,18 (m, 2H), 4,05 (brs, 1H), 6,16 (s, 1H) , 7,55 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,64 (s, 1H) , 8,01 (dd, 1H, j=2,l, 8,7 Hz), 8,67 (d, 1H, J=2,l Hz), 11,85 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 408 (M+Na, 95), 386 (MH+, 9), 330 (73), 286 (100) . tert-butilo-4-(5-amino-lH-indolo-3- ilo)ciclohexilo(etilo)carbamato (119): Uma solução do composto 118 (0,55 g, 1,427 mmol), em 2M NH3 em metanol (10 mL) , foi tratada com Pd-C (0,05 g) e lavada com gás de hidrogénio. A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante a noite (16 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão 196 de balão). A solução foi filtrada através de celite, com lavagens em metanol (2 x 10 mL). O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 2,5: 97,5) para obter o composto 119 (0,43 g, 84%) sob a forma de um sólido na razão 2:3 de diasterisómeros. 1H NMR (DMSO-c?6) δ: 0, 99-1, 07 (21, 3H, J=7,2, 6,6 Hz), 1,37-1,51 (m, 11H) , 1,63-1,78 (m, 4H) , 2.01- 2,18 (m, 2H) , 2, 98-3, 04 (m, 1H) , 3,11-3,17 (m, 2H) , 3,68-3,80 (m, 1H), 4,52 (brs, 2H), 6,44-6,47 (m, 1H), 6,66- 6,70 (m, 1H), 6,86-6,88, 6,99-7,06 (2m, 2H), 10,23-10,27 (2s, 1H); ESI-MS m/z (%): 380 (M+Na, 6), 358 (MH+, 5), 302 (100), 258 (54); ESI-HRMS calculado para C21H32N3O2 (MH+),
Calculado: 358,2507; Observado: 358,2489. tert-Butilo-etilo(4-(5-(tiofeno-2-carboximidamido)-1H-indolo-3-ilo)ciclohexilo)carbamato (120): Uma solução do composto 119 (0,4 g, 1,119 mmol) em etanol seco (20 mL) , foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,63 g, 2,239 mmol) à temperatura ambiente, e agitada por 24h. O solvente foi evaporado, diluído com solução saturada de NaHC03 (20 mL) e o produto foi extraído em CH2CI2 (2x 25 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada em salmoura (20 mL), e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 120 (0,4 g, 60%) sob a forma de um sólido amarelo na razão 2:3 de cis-trans diasterisómeros. NMR (DMSO-d6) δ 0, 98-1,08 (m, 3H) , 1,38-1,56 (m, 11H), 1,68-1,85 (m, 4H), 2,05-2,18 (m, 2H), 3.02- 3,17 (m, 3H), 3,70-3,76 (m, 1H), 6,31 (brs, 2H), 6,62- 6,67 (m, 1H), 6,96-7,01 (m, 1H), 7,09-7,11 (m, 1H), 7,22-7,30 (m, 2H), 7,60 (d, 1H, J=5,l Hz), 7,70-7,72 (m, 1H) , 10, 59-10,62 (2s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 467 (MH+,100). 197 Ν-(3-(4-(etilo-amino)ciclohexilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (121): 0 composto 120 (0,26 g, 0,557 mmol) foi tratado com solução aquosa IN HC1, à temperatura ambiente, e a solução resultante foi refluxada por 2 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada e lavada com água (5 mL) . O solvente foi evaporado e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 121 (0,23 g, 94%) sob a forma de um sólido, na razão 2:3 de diasterisómeros. 1H NMR (DMSO-d6) δ I, 22-1,29 (m, 3H), 1, 53-1, 62 (m, 2H), 1,80-2,16 (m, 6H), 2,74-3,23 (m, 4H) , 7,08 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 7,24-7,52 (m, 3H) , 7,68-7,72 (m, 1H) , 8,14-8,18 (m, 2H) , 8,59 (s, 1H) , 8, 97-9,09 (m, 2H) , 9,64 (s, 1H) , 11,20-11,27 (2s, 1H) , II, 42 (s, 1H); ESI-MS m/z (%) : 367 (MH+ para base livre, 18), 322 (100), 184(19), 119 (39); ESI-HRMS calculado para C21H27N4S (MH+, base livre), calculado: 367,1959; observado: 367,1950,
Exemplo 35: N-(3-(l-azobiciclo[2,2,2]oct-2-en-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (125), N- (3-(quinuclidino-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (126) e N-(3-(quinuclidino-3-ilo)-1H-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (127):
&lt;v NH
12$
SUS7 198
(a) 3-(5-nitro-lH-indolo-3-ilo)-1-azobiciclo[2,2,2]oct-2-eno 1 (122): Schiemann et al. Pat E.U.A. App. US2004/012935 AI (b) N-(3-(1-azobiciclo[2,2,2]oct-2-en-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (125) e N-(3-(quinuclidino-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (126): 3—(5—
Nitro-lH-indolo-3-ilo)-1-azobiciclo[2,2,2]oct-2-eno (composto 122, 250 mg, 0,928 mmol) foi dissolvido em metanol anidrico (10 mL) num frasco seco, purificado com árgon. Adicionou-se, rapidamente, paládio 10% peso em carvão activado (49,2, mg, 0,0463 mmol) e a atmosfera do frasco foi substituída por hidrogénio de um balão, utilizando uma bomba de vácuo. A atmosfera foi substituída mais duas vezes e a mistura agitada numa atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente. Após 17 h, a cromatografia de camada fina num sistema de solventes (20% 2M NH3 em metanol/ 80% diclorometano) mostrou o consumo completo do material inicial 122, e a mistura de 2 novos produtos; composto 2,3-(1-azobiciclo[2,2,2]oct-2-en-3-ilo)-lH-indolo-5-amina (123) e 3,3-(quinuclidino-3-ilo)-1H-indolo-5-amina (124) na razão 60/40 em TLC. A mistura foi filtrada num bloco de celite para remover os insolúveis, o bloco foi lavado com metanol anidrico (10 mL) e a solução das duas aminas foi dividida em duas porções. Metade da solução metanólica de 123 e 124 foi colocada num frasco pequeno, purificado com árgon, e equipado com um agitador magnético. Adicionou-se hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (172 g, 0,603 mmol) ao frasco e a reacção foi agitada em meio argónico, à temperatura ambiente, por 24h. Findo este tempo, o solvente foi evaporado e o resíduo particionado em H2O e acetato de etilo. Adicionou-se solução 1M de hidróxido de sódio para ajustar o pH a 9, A mistura foi transferida para um 199
decantador e a camada orgânica foi recolhida. A camada aquosa foi ainda extraída com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas, concentradas e o resíduo purificado via cromatografia em sílica gel (10% 2M NH3 em metanol/ 90% diclorometano para 20% 2M NH3 em metanol/ 80% diclorometano), originando 2 produtos; o sólido amarelo pálido 125 (50 mg, 31,0% rendimento); 1H NMR(DMSO) δ: 11,37 (brs, 1H) , 7,75 (d, 1H, J=2,7 Hz), 7,72 (d, 1H, J=2,5 Hz), 7,65 (d, 1H, J=3,8 Hz), 7,40 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,19 (m, 1H) , 7,15-7,12 (m, 1H) , 6,84 (s, 1H) , 6, 79-6,76 (m, 1H), 6,50 (brs, 2H), 2,97-2,81 (m, 3H) , 1,99-1,86 (m, 2H) , 1,73-1, 60 (m, 2H) ; MS(ESI + ) : 349(M+l, 40%). ESI-HRMS calculado para C2oH2iN4S (MH+) : 349, 1495.
Observado: 349,1481; e o sólido amarelo-pálido 126 (65 mg, 40,1% rendimento); &quot;’ή NMR (DMSO) δ: 10,72 (brs, 1H), 7,71 (d, 1H, J=3,4 Hz), 7,59 (d, 1H, J=5,2 Hz), 7,30-7,25 (2xm, 2H), 7,09 (dd, 1H, J=5,2, 3,8 Hz), 6,92 (s, 1H), 6,65 (dd, 1H, J=8,3, 1,5 Hz), 6,20 (brs, 2H), 3,32-3,19 (m, 2H), 3,05-2,99 (m, 2H), 2,95-2,90 (m, 2H), 2,84-2,72 (m, 1H) , 1, 98-1,79 (2xm, 2H), 1,72- 1,57 (m, 2H), 1,37-1,26 (m, 1H) ; MS(ESI + ) : 351(M+l, 10%), 176 (M++ duplamente carregado, 100%). ESI-HRMS calculado para C2oH23N4S (MH+) : 351,1651, Observado: 351,1637. N-(3-(quinuclidino-3-ilo)-lH-indolo-5-ilo)furano-2-carboximidamida (127):
Uma solução contendo 123 e 124 (10 mL, 0, 465 mmol) em metanol (ver acima) foi colocada num frasco pequeno, purificado com árgon e equipado com um agitador magnético. Bromohidrato de benzilofurano-2-carbimidotioato (207 mg, 0, 696 mmol) foi adicionado ao frasco e a reacçâo foi agitada em meio argónico, à temperatura ambiente, por 48 horas, findas as quais o solvente foi evaporado e o resíduo particionado em H20 e acetato de etilo. O pH foi ajustado a 200 9, com o recurso a uma solução 1M hidróxido de sódio. A mistura foi transferida para um decantador e a camada orgânica foi recolhida. A camada aquosa foi ainda extraida com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas, concentradas e o resíduo purificado duas vezes via cromatografia em sílica gel (10% 2M NH3 em metanol/ 90% diclorometano para 20% 2M NH3 em metanol/ 80% diclorometano) , originando o sólido 127, de cor bege (51 mg, 32,9% rendimento); XH NMR (DMSO) δ: 10,76 (brs, 1H) , 7,79 (s, 1H), 7,31-7,28 (2xm,2H), 7,09 (brs, 1H), 6,99 (s, 1H) , 6,70 (d, 1H), 6,61 (s, 1H), 3,47-3,27 (m, 2H), 3,09-2,95 (2xm, 4H), 2,85-2,79 (m, 1H), 1,97-1,81 (2 xm, 2H), 1,78-1,58 (2xm, 2H), 1,44-1,33 (m, 1H); MS (ESI+): 335(M+l, 20%), 168 (M++ duplamente carregado, 100%) . ESI- HRMS calculado para C2oH23N40 (MH+) : 335, 1866, Observado: 335,1882.
Exemplo_36j_N-(3- (3-fluoro-l-metilo-l, 2,3,6- tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (134):
m 134 201 tert-butilo-4-(trimetilo-sililoxi)-5,6-dihidropiridino-1(2H)-carboxilato (129):
Uma solução do composto 128 (6,0 g, 30,112 mmol) em DMF seco (12 mL) foi tratada com cloreto de trimetilo-sililo (4,58 mL, 36,135 mmol) e Et3N (10,07 mL, 72,271 mmol) à temperatura ambiente (Atenção: Ocorre espumação), e a solução resultante foi agitada a 80 °C por 16h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e diluída com hexano (100 mL) . A camada de hexano foi lavada com uma solução fria saturada de NaHC03 (3 x 20 mL), e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna (EtOAc:hexano, 1:9) para obter o composto 129 (4,53 g, 55%) como um líquido com recuperação máxima do material inicial (2,6 g) . 1H NMR é comparável com a literatura (J. Med Chem. 1999, 42, 2087-2104). tert-butilo-3-fluoro-4-oxopiperidino-l-carboxilato (130):
Uma solução do composto 129 (4,5 g, 16,578 mmol) em
acetonitrilo seco (175 mL), foi tratada com Selectfluor™ (6,46 g, 18,236 mmol) à temperatura ambiente, e a solução resultante foi agitada por 75 min. à mesma temperatura. A reacção foi diluída com acetato de etilo (500 mL) , lavada com salmoura não saturada (300 mL, água: salmoura saturada 1:1), salmoura saturada (100 mL) e seca (Na2SC&gt;4) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (acetato de etilo para 5% metanol em acetato de etilo) para obter o composto 130 (3,18 g, 88%), como um xarope. NMR (CDC13) δ: 1,50 (s, 9H), 2,46-
2,64 (m, 2H), 3,20-3,37 (m, 2H), 4,13-4,20 (m, 1H), 4,44-4,48 (m, 1H), 4,72-4,77, 4, 88-4,93 (2m, 1H) . ΧΗ NMR comparável com a literatura (J. Med. Chem. 1999, 42, 2087— 2104) . 202 3-(3-Fluoro-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (131): Uma solução de 5-nitroindolo (38) (1,0 g,
6,167 mmol) em ácido acético glacial (10 mL) a 90°C, foi tratada com o composto 130 (1,33 g, 6,167 mmol) em AcOH glacial (5 mL) e 1M H3P04 em AcOH glacial (5 mL) , e a solução resultante foi agitada à mesma temperatura por 16h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, vertida para uma solução aquosa fria de 15% amónia (100 mL) e o produto extraído em acetato de etilo (2 x 50 mL). A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com salmoura (25 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 1:99 a 5:95) para obter o composto 131 (0,75g, 47%) sob a forma de um sólido amarelo. Ponto de fusão: 205-207 ° C; NMR (DMSO-d6) δ 2,35 (brs, 1H), 2,86-3,06 (m, 1H) , 3,19-3,26 (m, 1H) , 3, 35-3, 58 (m, 2H) , 5,28 (d, 1H, J=4 9,5 Hz), 6, 53-6, 56 (m, 1H) , 7,58 (d, 1H, J=8,7
Hz), 7,74 (s, 1H) , 8,02 (dd, 1H, J=2,4, 9,0 Hz), 8,68 (d, 1H, J=2,4 Hz), 11,94 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%) : 262 (MH+, 100), 233 (50). 3-(3-fluoro-l-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo) -5-nitro-lH-indolo (132):
Uma solução do composto 131 (0,2 g, 0,765 mmol) em metanol seco (5 mL) foi tratada com formaldeído (0,07 mL, 0,918 mmol, 37% em água), AcOH (0,1 mL, 1,913 mmol) e NaBH3CN (0,057 g, 0,918 mmol) a 0 °C. A mistura resultante foi trazida à temperatura ambiente e agitada por 3h. A reacção foi basificada com IN NaOH (25 mL) e o produto extraído em acetato de etilo (2 x 25 mL). A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com salmoura (20 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 1:99 a 1:9) para obter o composto 132 (0,2 g, 95%) sob a forma de 203 um sólido amarelo. Ponto de fusão: 94-96°C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 2,32 (s, 3H), 2, 48-2, 63 (m, 1H), 2,78-2,87 (m, 1H) , 3,03-3,12 (m, 1H) , 3, 38-3,48 (m, 1H) , 5,45 (d, 1H, J=48,9 Hz), 6,48-6, 50 (m, 1H) , 7,58 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,75 (s, 1H) , 8,03 (dd, 1H, J=2,l, 9,0 Hz), 8,68 (d, 1H, J=2,l Hz), 11,96 (s, 1H); ESI- MS m/z (%): 276 (MH+, 100). 3-(3-fluoro-l-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-1H-indolo-5-amina (133):
Uma solução do composto 132 (0,175 g, 0,635 mmol) em metanol seco (5 mL) foi tratada com hidrato de hidrazina (0,198 mL, 6,357 mmol) seguido de Ra-Ni (~0,05 g) à temperatura ambiente. A reacção foi colocada num banho de óleo pré-aquecido e refluxada por 2 min. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada através de celite e lavada com metanol (3 x 10 mL) . A camada combinada de metanol foi evaporada e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 133 (0,07 g, 45%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 176-178°C; XH NMR (DMSO-d6) δ 2,30 (s, 3H), 2,40-2,56 (m, 1H) , 2,73-2,83 (m, 1H) , 2,99-3,08 (m, 1H) , 3,30-3,42 (m, 1H) , 4,51 (s, 2H) , 5,37 (d, 1H, J=48,9 Hz), 6,22-6,26 (m, 1H) , 6,51 (dd, 1H, J=l,8, 8,5
Hz), 6,97 (d, 1H, J=l,8 Hz), 7,08 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,27 (t, 1H, J=1,8 Hz), 10,72 (s, 1H); ESI-MS m/z (%) : 246 (MH+, 12), 203 (100) . N-(3-(3-fluoro-l-metilo-l, 2,3, 6-tetrahidropiridino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (134): Uma solução do composto 133 (0,062 g, 0,252 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,144 g, 0,505 mmol) à temperatura ambiente e agitada por 20h. O solvente foi evaporado, o produto bruto diluído com solução saturada de 204
NaHC03 (20 mL) e o produto foi extraído em CH2CI2 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (15 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 0:100 a 5:95) para obter o composto 134 (0,052 g, 58%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 127-129 &quot;C; XH NMR (DMSO-d6) δ 2,29 (s, 3H) , 2,42-
2,57 (m, 1H), 2,72-2,81 (m, 1H), 3,00-3,09 (m, 1H), 3,32-3,42 (m, 1H), 5,41 (d, 1H, J=49,2 Hz), 6, 30-6, 40 (m, 3H) , 6,69 (dd, 1H, J=l,2, 8,4 Hz), 7,10 (t, 1H, J= 3,9 Hz), 7,22 (s, 1H), 7,34 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,42 (s, 1H), 7,60 (d, 1H, J=4,8 Hz), 7,73 (d, 1H, J=2,7 Hz), 11,05 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 355 (MH+, 100), 335(21), 312(33); ESI-HRMS calculado para C19H20FN4S (MH+) , Calculado: 355,1391; Observado: 355,1387,
Exemplo 37: N-(3-(3-fluoro-l-metilopiperidino-4-ilo)-1H- indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (137):
/
•N
3-(3-fluoro-l-metilo-l,2,3,6-tetrahidropiridino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (132):
Ver detalhes experimentais completos no Exemplo 36, 3-(3-fluoro-l-metilopiperidino-4-ilo)-5-nitro-lH-indolo (135): Uma solução do composto 132 (0,22 g, 0,799 mmol) em 205 TFA (5 mL) foi tratada com trietilsilano (0,22 mL, 1,438 mmol) à temperatura ambiente e agitada por 4 h. A reacção foi cuidadosamente transferida para uma proveta contendo solução saturada de NaHCC&gt;3 (50 mL) e o produto foi extraído em acetato de etilo (2 x 20 mL) . A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com salmoura (10 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 2,5:97,5) para obter os trans-diasteroisómeros (mistura de enatiómeros) do composto 135 (0,102 g, 46%), como sólidos. Ponto de fusão: 105-107°C; XH NMR (DMSO-d6) δ 1,80-1,96 (m, 2H), 2,02-2,15 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,78- 2,81 (m, 1H) , 2,98-3, 09 (m, 1H) , 3,16-3,21 (m, 1H) , 4,62 (dddd, 1H, J=48, 6, 4,8, 9,9, 9,9 Hz), 7,50-7,54 (m, 2H) , 7,98 (dd, 1H, J=2,1, 9,0 Hz), 8,54 (d, 1H, J=2,l Hz), 11,71 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 278 (MH+, 100). 3-(3-fluoro-l-metilopiperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-amina (136) : Uma solução do composto 135 (0,09 g, 0,324 mmol) em metanol seco (3 mL) foi tratada com hidrato de hidrazina (0,1 mL, 3,245 mmol) seguida de Ra-Ni (~0,05 g) à temperatura ambiente. A reacção foi colocada num banho de óleo pré-aquecido e refluxada por 5 min. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada em celite e lavada com metanol (2 x 10 mL). A camada combinada de metanol foi evaporada e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 136 (0,08 g, quantitativo) como um semi-sólido. 1H NMR (DMSO-d6) δ 1,78-1,86 (m, 2H), 1,95-2,07 (m, 2H), 2,26 (s, 3H), 2, 69-2, 78 (m, 2H), 3,11-3,17 (m, 1H), 4,41 (s, 2H) , 4,68 (dddd, 1H, J=4,5, 9,9, 9,9, 48,7 Hz), 6,45 (dd, 1H, J=2,1, 8,5 Hz), 6,71 (d, 1H, J=l,5 Hz), 6, 93-7,04 (m, 2H) , 10,36 (s, 1H) ; ESI-MS m/z (%): 248 (MH+, 100). 206 Ν-(3-(3-fluoro-l-methilopiperidino-4-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (137): Uma solução do composto 136 (0,07 g, 0,283 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,16 g, 0,566 mmol) à temperatura ambiente e agitada durante a noite (16 h) . O solvente foi evaporado, o produto bruto diluido com solução saturada de NaHCCU (25 mL) e o produto foi extraído em CH2CI2 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (15 mL) e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 137 (0,09 g, 90%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 115-117°C; XH NMR (DMSO-d6) δ 1,79-2,09 (m, 4H), 2,26 (s, 3H), 2,74-2,90 (m, 2H), 3,13-3,17 (m, 1H) , 4,68 (dddd, 1H, J=4,8, 9,6, 9,6, 48,5 Hz), 6,23 (brs, 2H) , 6,65 (d, 1H, J=8,l Hz), 6,99 (s, 1H) , 7,09 (t, 1H, J= 4,2 Hz), 7,17 (d, 1H, J=l,5 Hz), 7,28 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,59 (d, 1H, J=5,l
Hz), 7,70 (d, 1H, J=3,3 Hz), 10,72 (s, 1H); ESI-MS m/z (%): 357 (MH+, 100), 179 (52); ESI-HRMS calculado para C19H22FN4S (MH+), Calculado: 357,1547, Observado: 357,1543.
Exemplo 38: Jf-(3-(1,2,3,5,8,8a-hexahidroindolizino-7-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (142): OB 2.2NHCÍ
Hexahidroindolizino-7(1H)-ona (140): Preparado de acordo com WO 0000487A1, US 5 874 427, WO 0017198A1, 207 3-(1,2,3,5,8,8a-Hexahidroindolizino-7-ilo)-5-nitro-lH-indolo (141) :
Uma solução do composto 38 (0,4 g, 2,466 mmol) em metanol seco (5 mL) foi tratada com KOH (1,12 g) a 0°C e foi agitada à temperatura ambiente por 10 min. Foi adicionado o composto 140 (0,44 g, 3,206 mmol) em metanol (5 mL) e a mistura resultante foi refluxada por 30 h. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente evaporado. O produto bruto foi diluído em água (20 mL) e o produto extraído em CH2CI2 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (15 mL) e seca (Na2S04). O solvente foi evaporado e 0 produto bruto re-cristalizado a partir de etanol para obter 0 composto V (0,2 g, 29%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 205-207°C; 1R NMR (DMSO-d6) δ I, 41-1,52(m, 1H), l,70-l,80(m, 2H), l,98-2,15(m, 2H), 2,20- 2,40(m, 2H), 2,61-2,72(m, 1H), 2,86-2,91(m, 1H) , 3,10- 3,15(m, 1H), 3, 66(dd, 1H, J=4,2,16,5Hz),6,20(s,1H),7,55(d, 1H, J=9,0Hz) , 7, 67(s, 1H) , 8, 01(dd,lH, J=l,8,9,0Hz),8,69(d,1H, J= 2,1Hz), II, 87 (s, 1H); ESI-MS (m/z, %) 284 (MH+, 100). N-(3-(1,2,3,5,8,8a-hexa-hidroindolizino-7-ilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (142) : Uma solução do
composto 141 (0,12 g, 0, 423 mmol) em metanol seco (5 mL) foi tratada com Ra-Ni (~0,05 g) e hidrato de hidrazina (0,13 mL, 4,235 mmol) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi refluxada por 2 min. num banho de óleo pré-aquecido. A reacção foi trazida à temperatura ambiente, filtrada em celite e lavada com metanol (2 x 20 mL) . A camada combinada de metanol foi evaporada e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em MeOH: CH2CI2, 95:5) para obter 3-(1,2,3,5,8,8a-hexa-hidroindolizino-7-ilo)-lH-indolo-5-amina, (0,087 g, 81%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 208-210°C; 2Η NMR 208 (DMSO-d6) δ 1,33-1,48 (m, 1H), 1,67-1,79 (m, 2H), 1,94-2,13 (m, 2H) , 2,16-2,26 (m, 2H) , 2,58-2,65 (m, 1H) , 2,85 (d, 1H, J=15,6 Hz), 3,08-3,17 (m, 1H) , 3,59 (dd, 1H, j=4,5, 15,7 Hz), 4,49 (s, 2H), 6,01 (d, 1H, J=4,5 Hz), 6,48 (dd, 1H, J=1,8, 9,1 Hz), 7,01 (d, 1H, J=l,5 Hz), 7,05 (d, 1H, J=8,4
Hz), 7,17 (d, 1H, J=2,7 Hz), 10,60(s, 1H) ; ESI-MS (m/z, %) 254 (MH+, 62), 185 (100). Uma solução da amina (0,053 g, 0,209 mmol) em etanol seco (3 mL) foi tratada com hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,12 g, 0,418 mmol), à temperatura ambiente, e a solução foi agitada por 24 h. O solvente foi evaporado, o produto bruto diluído com solução saturada de NaHCCb (20 mL) e o produto foi extraído em CH2CI2 (2 x 20 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (15 mL) e seca (Na2SC&gt;4) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (2M NH3 em MeOH: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 142 (0,06 g, 79%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão: 122-124&quot;C; XH NMR (DMSO-d6) δ 1,38-1,46 (m, 1H), 1,70-1,78 (m, 2H) , 1,93-2,12 (m, 2H) , 2,20-2,28 (m, 2H) , 2, 62-2,72 (m, 1H) , 2,83 (d, 1H, J=15,9 Hz), 3,07-3,13 (m, 1H) , 3,59 (dd, 1H, J=4,5, 16,0 Hz), 6,07 (d, 1H, J= 3,9 Hz), 6,22 (brs, 2H) , 6,66 (d, 1H, J=8,l Hz), 7,09 (dd, 1H, J=3,9, 4,9 Hz), 7,22 (s, 1H), 7,30-7,32 (m, 2H) , 7,58 (d, 1H, J=4,5 Hz), 7,71 (d, 1H, J=2,7 Hz), 10,92 (s, 1H); ESI-MS (m/z, %) 363 (MH+, 20), 294 (100), 182 (15); ESI-HRMS calculado para C21H23N4S (MH+) , calculado: 363, 1655; observado: 363, 1637.
Exemplo 39: (R)-N-(3-(2-(l-metilopirrolidino-2-ilo)etilo)- lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (147): 209
Preparação de 5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-lH-indolo (92) : Ver detalhes experimentais no exemplo 26,
Preparação de (L)-benzilo2-(2-cloro-2-oxoetilo)pirrolidino-1-carboxilato (143): i) Formação de ácido (L)-2-(1- (benziloxicarbonilo)pirrolidino-2-ilo)acético: A um frasco de reacção equipado com um agitador magnético foi adicionado clorohidrato de L-B-homoprolina (250 mg, 1,51 mmol) sob a forma de um sólido branco. O frasco foi fechado com um septo e uma tampa/rolha, e colocado num banho de água gelada. Foi adicionada solução 2N de hidróxido de sódio, sendo o sal dissolvido para formar uma solução castanha. O septo foi perfurado com 2 seringas: uma contendo cloroformato de benzilo (280 μΐ, 1,96 mmol) e outra com 1,1 mL de 2N hidróxido de sódio (2,20 mmol). Uma 3a agulha foi adicionada para aliviar a pressão. Os dois líquidos foram adicionados alternadamente, pouco de cada vez, para manter o pH constante. Após a adição de todos os reagentes, a reacção foi agitada por 2 horas num banho de água gelada. A reacção foi transferida para um decantador e adicionou-se éter (5 mL) . A camada de éter foi removida, e a camada aquosa acidificada até pH 3 por adição de 1M HC1 aquoso, seguindo-se a extracção em acetato de etilo (3x5 mL) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, decantados e concentrados 210 para obter um óleo amarelo. Rendimento: 264 mg (66%) . 1R NMR (DMSO-d6) δ 12,22 (bs, 1H), 7,35 (m, 5H), 5,07 (s, 2H) , 4,05-4,02 (t, J=7,2 Hz, 2H), 3,32-2,63 (m, 1H), 2,31-2,28 (m, 1H), 1,99 (s, 2H) , 1, 90-1,68 (m, 4H) , 1,20-1,15 (t, J=7,2 Hz, 1H) . ii) A um frasco de fundo redondo purificado com árgon, equipado com um agitador magnético, foi adicionado ácido (L) -2-(1-(benziloxicarbonilo)pirrolidino-2-ilo) acético (235 mg, 0,893 mmol) seguido do diclorometano anidrico (5 mL) . A reacção foi tratada com DMF anidrico (2 gotas ~5 μΐ) . O fluxo de árgon foi interrompido, e o frasco de reacção equipado com um balão. Foram adicionadas duas porções de cloreto de oxalilo (0,12 mL, 1,38 mmol), causando efervescência. A reacção foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas, antes de ser concentrada até secar sob pressão reduzida e posteriormente seca em elevado vácuo durante a noite.
Preparação de (L)-benzilo-(2-(5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-lH-indolo-3-ilo)-2-oxoetilo)pirrolidino-1- carboxilato (144) : Semelhante à sintese do composto 94, Exemplo 26, o composto 144 foi isolado sob a forma de um sólido amarelo (240mg, 59%). ΧΗ NMR (CDC13)5: 8,72 e 8,44(2s, 1H) , 8,26 e 8,11 (2m, 1H), 7,45-7,39 (m, 7H), 7,44-7,34 (m, 4H) , 7,11-7,09 (d, 1H, J=7,8 Hz), 5,89 (bs, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,36 (m, 1H), 3,49 (s, 1H) , 3,50-3,41 (m, 2H) , 2,03 (s, 6H) , 2,00- 1,90 (m, 5H), MS-ESI m/z (%): 456 (M+, 100).
Preparação de (R)-5-(2,5-dimetilo-lH-pirrolo-l-ilo)-3-(2-(l-metilopirrolidino-2-ilo)etilo)-lH-indolo (145): A um frasco de fundo redondo purificado com árgon, equipado com um agitador magnético, contendo uma solução de 144 (210 mg, 0,461 mmol) em THF anidrico (5 mL), foi adicionado hidreto 211 de alumínio-lítio (79 mg, 2,08 mmol). O frasco foi equipado com condensador e colocado num banho de óleo. A reacção foi aquecida a 75 °C e agitada em refluxo, em meio argónico, por 4,5 horas. Através de TLC (10% 2M NH3 em MeOH, 90% Ch2Cl2) a reacção revelou-se completa e foi arrefecida gradualmente até à temperatura ambiente. A reacção foi terminada pela adição de água (0,2 mL), 3N hidróxido de sódio (0,3 mL) e água (0,6 mL) , filtrada em celite e particionada com acetato de etilo (10 mL). A camada aquosa foi extraída mais duas vezes com acetato de etilo (2 x 10 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio e concentrados após decantação para obter um óleo castanho. O produto foi purificado em coluna de cromatografia de sílica gel (1:1 Acetato de etilo/hexano a 5% 2M NH3 em MeOH, 95% CH2CI2) para obter o produto desejado como um óleo amarelo, composto 145, Rendimento: 105 mg (71%). λΕ NMR (CDCI3) δ 8,09 (bs, 1H), 7,44-7,43 (d, 1H, J=l,5 Hz), 7,41-7,38 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,08 (d, 1H, J=2,1 Hz), 7,03-7,00 (dd, 1H, J=l,8, 8,1 Hz), 5.91 (bs, 2H) , 3,49 (s, 1H), 3,15-3,10 (m, 2H), 2,86-2,65 (m, 3H), 2,34 (s, 4H) , 2,03 (bs, 6H) , 1, 90 -1,52 (m, 4H) . MS-ESI (m/z, %) 322 (M+, 100)
Preparação de (R) -3-(2-(l-metilopirrolidino-2-ilo)etilo)-lH-indolo-5-amina (146): A um frasco de fundo redondo purificado com árgon, equipado com um agitador magnético, e contendo uma solução amarela de 145 (94 g, 0,292 mmol) em 2-propanol anídrico (6 mL) e água (2mL), foi adicionada uma porção de cloro-hidrato de hidroxilamina (406 mg, 5,84 mmol). Com uma seringa adicionou-se trietilo-amina (407 μΐ, 2.92 mmol) e o frasco foi equipado com um condensador. O frasco foi colocado num banho de óleo e aquecido até refluxo. A reacção foi agitada em refluxo sobre árgon por 6 h. A TLC (10% 2M NH3 em MeOH, 90% Ch2Cl2) revelou que a 212 reacção estava completa, pelo que esta foi arrefecida até à temperatura ambiente. Adicionou-se, lentamente, pastilhas de hidróxido de sódio (120 mg, 3,0 mmol) . A reacção foi agitada vigorosamente durante a noite. Após filtração em celite, a reacção foi eluida do bloco de celite com 2-propanol (40 mL) e o filtrado absorvido em sílica gel. O produto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (5-10% 2M NH3 em MeOH, 90% CH2CI2) com cerca de 15 mm de diâmetro por 30 mm de altura, para obter um sólido laranja. Este produto foi particionado em salmoura (5 mL) e acetato de etilo (10 mL) . A camada orgânica foi seca com sulfato de sódio anídrico antes de ser decantada. A sua concentração originou um óleo laranja, o composto 146, Rendimento: 48 mg de óleo laranja (68%). 1H NMR (DMSO-d6) δ 10, 19 (s, 1H), 7,02-6,99 (d, J=5,4 Hz, 1H), 6,90-6,89 (d, J=2 ,1 Hz, 1H), 6,64-6,63 (d, J=l,5 Hz, 1H), 6,47-6,43 (dd, i—1 II •o ,8, 8,7 Hz, 1H), 4,42 (bs,lH),2,97-2,90 (m, 1H), 2,59 (m, 2H) , 2,20 (s, 3H) , 2, 05-1,97 (m, 4H), 1,69-1,40 (m, 4H) .
Preparação de dihidrocloreto (R)—N—(3—(2—(1— metilopirrolidino-2-ilo)etilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carbozimidamida (147):
Num frasco de fundo redondo purificado com árgon foi colocado 146 (40 mg, 0,164 mmol) e hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (94 mg, 0,329 mmol), seguidos de etanol absoluto (3 mL) . A reacção foi agitada utilizando um agitador magnético, por 60 horas à temperatura ambiente. Uma TLC (10% 2M amónia em metanol/ 95% diclorometano) revelou que toda a amina inicial tinha reagido. A reacção foi tratada com éter (50 mL). O precipitado amarelo resultante foi recolhido por filtração em vácuo e lavado com éter. O precipitado foi eluído do filtro utilizando metanol. O resíduo foi concentrado e 213 purificado por cromatografia em coluna de silica gel (5-10% 2M amónia em metanol/ 95-90% diclorometano) para obter um óleo amarelo. O produto purificado foi dissolvido em metanol anidrico (3 mL) e tratado com 1M ácido clorídrico em éter (5 mL). Após agitação por 30 minutos, o precipitado foi recolhido por filtração em vácuo. O precipitado foi lavado com éter, seguindo-se a lavagem do filtro com metanol. O filtrado foi concentrado e seco em elevado vácuo. Rendimento: 21 mg de sólido amarelo, composto 147 (30%). Ponto de fusão 212 °C. ΧΗ NMR (MeOD-d3) δ 8,09 (brs, 2H) , 7,76 (s, 1H) , 7,59 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,41 (brs, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,19 (d, 1H, J=8,7 Hz), 3,67 (brm, 1H), 3,19 (brm, 1H), 3,1-2,8 (brm, 2H) , 2,91 (s, 3H) , 2,46 (brm, 2H), 2,2-1,8 (brm, 5H) . MS (TOF+) : Cálculo exacto para C20H25N4S: 353,1794 (MH+), encontrado: 353,1782,
Exemplo 40: Preparação de hidrocloreto de N-[1-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina (151)
1-(3-cloropropilo)-6-nitro-lH-indolo (148): Hidreto de sódio (1,96 g, 49,337 mmol, 60% suspenso em óleo mineral) foi tratado com DMF (60 mL), seguido de 6-nitroindolo (6) (2,0 g, 12, 334 mmol) em DMF (20 mL), por um período de 5 min a 0°C. Após agitação durante 15 min, a solução foi tratada com 1-cloro-iodopropano (3,9 mL, 37,002 mmol), e a 214 reacção trazida à temperatura ambiente e agitada por 3 h. A reacção foi terminada por adição de salmoura saturada (80 mL) e água (80 mL) e arrefecida a 0°C. O sólido foi filtrado, lavado com água (50 - 75 mL) e seco para obter o produto bruto. Este foi re-cristalizado a partir de tolueno quente (10 mL)/ hexano (5 mL) para obtenção do composto 148 (2,637 g, 90%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 85-87 ° C; 1H-NMR (CDC13) δ 2,28-2,36 (m, 2H) , 3,46 (t, 2H, J=5,7 Hz), 4,45 (t, 2H, J=6,6 Hz), 6,62 (d, 1H, J=2,7 Hz), 7,43 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,66 (d, 1H, J=8,7 Hz), 8,02 (dd, 1H, J=l, 8, 7,9 Hz), 8,36 (d, 1H, J= 0,9 Hz). 1- (3-morfolino-4-ilo-propilo)-6-nitro-lH-indolo (149): Uma solução do composto 148 (2,35 g, 9,845 mmol) em CH3CN seco (40 mL) foi tratada com K2CO3 (13,6 g, 98,458 mmol), Kl (16,3 g, 98,458 mmol) e morfolina (8,58 mL, 98,458 mmol) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi refluxada durante a noite (15 h). A reacção foi trazida à temperatura ambiente e o solvente foi evaporado. A mistura foi diluída em água (100 mL) e extraída com acetato de etilo (2 x 50 mL). A camada combinada de acetato de etilo foi lavada com água (25 mL) e salmoura (20 mL), e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado em pressão reduzida e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna (EtOAc: 2M NH3 em metanol/CH2Cl2, 1:1) para obter o composto 149 (2,85 g, quantitativo) como um xarope. 1H-NMR (CDCI3) δ 1,97-2,06 (m, 2H), 2,23 (t, 2H, J=6,3 Hz), 2,38 (brs, 4H), 3,75 (t, 4H, J=4,5 Hz), 4,33 (t, 2H, J= 6,6 Hz), 6,59 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,39 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,64 (d, 1H, J=8,7 Hz), 8,00 (dd, 1H, J=1,8, 8,7 Hz), 8,42 (brs, 1H). N-[1-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-tiofeno-
2- carboxamidina (150): Uma solução do composto 149 (2,0 g, 6,912 mmol) em etanol absoluto (20 mL) foi tratada com Pd-C 215
(0,25 g), excitada com gás de hidrogénio e agitada durante a noite (15 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão). A mistura de reacção foi filtrada num bloco de celite e lavada com etanol absoluto (2 x 20 mL) . A camada combinada de etanol foi tratada com hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (3,94 g, 13,824 mmol) e a mistura resultante foi agitada durante a noite (16 h), à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (250 mL) . O sólido foi dissolvido em solução saturada NaHC03: CH2C12 (100 mL, 1:1) . A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com CH2C12 (2 x 50 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (25 mL) e seca (Na2SC&gt;4) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 150 (2, 348 g, 92%) sob a forma de espuma. 1H-NMR (DMSO-d6) δ 1,83-1,91 (m, 2H), 2,19 (t, 2H, J=6,6 Hz), 2,30 (brs, 4H), 3,56 (t, 4H, J=4,8 Hz), 4,14 (t, 2H, J=6,6 Hz), 6, 34-6, 35 (m, 3H) , 6,58 (dd, 1H, J=l,2, 8,2
Hz), 6,95 (brs, 1H) , 7,09 (dd, 1H, J= 3,9, 5,1 Hz), 7,21 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,44 (d, 1H, J=8,l Hz), 7,59 (d, 1H, J= 3,9 Hz), 7,72 (dd, 1H, J=0,9, 3,6 Hz).
Sal de hidrocloreto de N-[l-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina (151) : Uma solução do composto 150 (0,65 g, 1,1763 mmol) em metanol (5 mL) foi tratada com IN HC1 em éter (5,3 mL, 5,291 mmol) a 0°C. A reacção foi trazida à temperatura ambiente e agitada por 30 min. O solvente foi evaporado e o produto bruto foi re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 151 (0,66 g, 85%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 100-105 °C. ESI-MS m/z (%): 369 (M+, 100). 216
Exemplo 41: Preparação de dihidrocloreto de N-(l-(3-(dietilo-amino)propilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (153)
Preparação de l-(3-cloropropilo)-6-nitro-lH-indolo (148) : procedimento descrito no Exemplo 40, (Rendimento: 796,6 mg, superior a 100%)
Preparação de N,N-dietilo-3-(6-nitro-lH-indolo-l- ilo)propano-l-amina (152): A reacção foi efectuada como descrito no exemplo 40, usando dietilo-amina como nucleófilo. O produto foi purificado por cromatografia em coluna de silica gel (2,5 - 5% 2M amónia em metanol, 97,5 - 95% diclorometano). Rendimento: 145,1 mg de composto 152 como um óleo amarelo-escuro (83,9%). 1H-NMR (CDCls) δ 8,37 (s,lH), 8,02-7,99 (dd, J=2,l, 9 Hz, 1H), 7, 66-7,63 (d, J=8,7 Hz, 1H) , 7,43-7,42 (d, J=3 Hz, 1H) , 6, 60-6,58 (d, J=3Hz, 1H) , 4,32-4,27 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,57-2,50 (q, J=7,l Hz, 4H), 2,43-2,39 (t, J=6,6 Hz, 2H) , 2,07-1,98 (quinteto, J=6,6 Hz, 2H), 1,03-0,99 (t, J=6,9Hz, 6H) .
Preparação de resina de troca iónica de amberlina, usada para a produção da base livre: A um funil de Buchner vulgar de 100 mL, adicionou-se resina de troca iónica Amberlite IRA-900 (15,25 g, aprox 15 mmol) suspensa em água (50 mL) . O funil foi sujeito a vácuo para compactar o sólido. Este foi lavado com água (50 mL) e o solvente removido por filtração em vácuo. Uma solução de 10% hidróxido de sódio 217 (12,5 g, em 100 mL) foi preparada e adicionada à resina em porções de 25 mL. Após cada adição, a resina foi agitada com uma vareta por 30 s, antes de ser colocada em vácuo. Depois das 5 lavagens básicas, a resina foi lavada com água, em porções de 50 mL, até o pH se tornar neutro (aprox. 400 mL de água), como revelado por papel indicador de pH. A resina foi seca em vácuo por 2 minutos. Utilizou-se etanol desnaturado (2 x 50 mL) para lavar a resina, em agitação, seguido de etanol absoluto (3 x 50 mL). O produto final foi seco em elevado vácuo por 15 minutos. Rendimento: 12,95 g de um granulado amarelo.
Preparação de dihidrocloreto N-(1-(3-(dietilo-amino)propilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (153): A reacção decorreu como descrito no Exemplo 40, composto 150, Após o isolamento do sal de Cl por precipitação, este foi dissolvido em etanol. Adicionou-se resina de Amberlite (3,00 g) à solução, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. A reacção foi diluida com acetato de etilo (30 mL) e filtrada. O filtrado foi concentrado para obter um óleo amarelo. O material foi absorvido em silica gel e purificado por cromatografia em coluna de silica gel (5% 2M amónia em metanol, 95% diclorometano). Por análise 1H-NMR, detectou-se que o óleo amarelo resultante era o produto desejado, composto 152, O óleo foi dissolvido em diclorometano anidrico (5 mL) e transferido para um frasco de reacção purificado com árgon. A solução foi tratada com ácido hidroclórico 1M em éter (3 mL) e o sal lubrificado de imediato. A reacção foi agitada por 10 minutos e filtrada. O frasco e o filtro foram lavados com acetato de etilo e o filtrado descartado. O óleo amarelo-acastanhado que permaneceu no frasco de reacção foi dissolvido em metanol e a solução vertida pelo filtro. O filtro foi lavado com 218 metanol e todos os orgânicos combinados e concentrados para obter um óleo amarelo. Secagem adicional em elevado vácuo produziu um óleo amrelo, o composto 153, Rendimento: 80,1 mg de óleo amarelo. 1H-NMR (DMSO-d6) δ 7,74-7,73 (d, J=3,3 Hz, 1H), 7,61-7,60 (d, J=4,5 , 1H), 7,47-7,44 (d, J=8,l Hz, 1H), 7,27 (s, NH), 7,22-7,21 (d, J=3 Hz, 1H) , 7,11-7,08 (t, J=4,8 Hz, 1H) , 6,92 (s, 1H) , 6, 60-6, 57 (dd, J=l,2, 8,4 Hz, 1H) , 6, 34-6, 33 (d, J=3 Hz, 2H) , 4,16-4,12 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,46 (s, 4H), 2,36-2,31 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,93-1,83 (quinteto, J=6,7 Hz, 2H) , 1,67 (s, 4H) de peso molecular 353.
Exemplo 42: Preparação de dihidrocloreto de N-(1-(3-(pirrolidino-l-ilo)propilo-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (155)
Preparação de 1-(3-cloropropilo)-6-nitro-lH-indolo (148):
Procedimento descrito no Exemplo 40 (Rendimento: 796,6 mg, superior a 100%)
Preparação de 1-(3-cloropropilo)-6-nitro-lH-indolo (154) :
Reacção descrita no Exemplo 40, utilizando pirrolidina como nucleófilo. O produto foi purificado numa coluna de cromatografia de silica gel (2,5 - 5% 2M amónia em metanol, 97,5 - 95% diclorometano). Rendimento: 148,1 mg de composto 154 sob a forma de um óleo amarelo-escuro. 2Η- NMR (CDCI3) δ 8,43 (s, 1H), 8,02-7,98 (dd, J=2,l , 9 Hz, 1H), 7,66-7,63 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,43-7,42 (d, J=3 Hz, 1H), 6,60-6,59 (d, J=3,3 Hz, 1H), 4,36-4,31 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,49 (bs, 4H), 219 2,41-2,37 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,10- 2,01 (quinteto, J=6,7
Hz, 2H), 1,85 -1,81 (m, 4H) .
Preparação de dihidrocloreto de N-(1-(3-(pirrolidino-1-ilo)propilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (155): A reacção decorreu como descrito no Exemplo 40, composto 150, Após o isolamento do sal de Hl por precipitação (193,5 mg), este foi dissolvido em etanol. Adicionou-se à solução resina de Amberlite tratada (3,00 g), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. A reacção foi diluída com acetato de etilo (30 mL) e filtrada. O filtrado foi concentrado para se obter um óleo amarelo. O material foi absorvido em sílica gel e purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (5-10% 2M amónia em metanol, 95-90% diclorometano). Por análise 1H-NMR, detectou-se que o óleo amarelo resultante era o produto desejado, composto 154, O óleo foi dissolvido em diclorometano anídrico (5 mL) e transferido para um frasco de reacção purificado com árgon. A solução foi tratada com ácido hidroclórico 1M em éter (3 mL) e o sal lubrificado de imediato. A reacção foi agitada por 10 minutos e filtrada. O frasco e o filtro foram lavados com acetato de etilo e o filtrado descartado. O óleo amarelo-acastanhado que permaneceu no frasco de reacção foi dissolvido em metanol e a solução vertida pelo filtro. O filtro foi lavado com metanol e todos as fases orgânicas foram combinadas e concentradas para se obter um óleo amarelo. Secagem adicional em elevado vácuo produziu um sólido amarelo, o composto 155, Rendimento: 116 mg de um sólido amarelo. 1H-NMR (DMSO-dH) δ 7,73-7,72 (d, J=3,6Hz, 1H) , 7, 60-7,59 (d, J=4,5 Hz, 1H) , 7,46-7,43 (d, J=8,l Hz, 1H) , 7,21-7,20 (d, J=3 Hz, 1H) , 7,11-7,08 (t, J=4,8 Hz, 1H) , 6,92 (s, 1H) , 6,60-6,57 (dd, J=l,2, 8,4Hz, 1H), 6,34-6,33 (d, J=3Hz, 2H), 4,16-4,12 (t, J=6, 9 Hz, 2H) , 2,46 (s, 4H) , 2,36-2,311 (t, 220 J=6,6 Hz, 2H), 1,93-1,83 (quinteto, J=6,7 Hz, 2H), 1,67 (s, 4H). MW 353,
Exemplo 43: Preparação de dihidrocloreto de N—(1—(3— (dimetilo-amino)propilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (157)
Preparação de 1-(3-cloropropilo)-6-nitro-lH-indolo (148):
Procedimento descrito no Exemplo 40 (Rendimento: 796,6 mg, superior a 100%)
Preparação de N,N-dimetilo-3-(6-nitro-lH-indolo-l-ilo)propano-l-amina (156):
Reacção descrita no Exemplo 40, utilizando dimetilo-amina como nucleófilo. O produto foi purificado numa coluna de cromatografia de silica gel (2,5 - 5% 2M amónia em metanol, 97,5 - 95% diclorometano). Rendimento: 121,4 mg de composto 156 como um óleo amarelo-escuro (88,3%). 1H-NMR(CDCI3) δ 8,41-8,40 (d, J=1,8 Hz, 1H) , 8,02-7, 99 (dd, J=2,l, 9 Hz, 1H) , 7, 66-7, 63 (d, J=8,7 Hz, 1H) , 7, 43-7,42 (d, J=3 Hz, 1H), 6,60-6,59 (d, J=3,3 Hz, 1H), 4,33-4,29 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,23-2,19 (m, 8H), 2,43 (s, 3H), 2,05-1,96 (quinteto, J=6,7 Hz, 2H).
Preparação de dihidrocloreto de N-(1-(3-(dimetilo-amino) propilo) -lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (157) : A reacção decorreu como descrito no Exemplo 40, composto 150, Após o isolamento do sal de Hl por precipitação (186,6 mg), este foi dissolvido em etanol. Adicionou-se resina de Amberlite tratada (3,00 g) à 221 solução, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. A reacção foi diluída com acetato de etilo (30 mL) e filtrada. O filtrado foi concentrado para obter um óleo amarelo. O material foi absorvido em sílica gel e purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (5-10% 2M amónia em metanol, 95-90% diclorometano). O sal de hidrocloreto formou-se usando o procedimento descrito no Exemplo 40, composto 151 Rendimento: 61,7 mg de composto 157 sob a forma de um sólido amarelo-alaranjado. 1H-NMR (DMSO-dd) δ 7, 74-7,73 (d, J=3,9 Hz, 1H) , 7,61-7,59 (d, J=4,5Hz, 1H), 7,46-7,43 (d, J=8,l Hz, 1H) , 7,21-7,20 (d, J=3 Hz, 1H), 7, 11-7, 09 (t, J=4,8 Hz, 1H) , 6,91 (s, 1H) , 6, 60-6,58 (d, J=8,1 Hz, 1H) , 6, 35-6, 34 (d, J=3Hz, 3H), 4,14-4,10 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,19-2,15 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,12 (s, 6H), 1,89-1,80 (quinteto, J=6,7 Hz, 2H) , 1,75 (s, 2H) . ESI-MS m/z (%) : 327 (M+, 100) .
Exemplo 44: Preparação de dihidrocloreto de N- (1-(3-(metilo-amino)propilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (159)
Preparação de 1-(3-cloropropilo)-6-nitro-lH-indolo (148):
Procedimento descrito no Exemplo 40 (Rendimento: 796,6 mg, superior a 100%)
Preparação de N-metilo-3-(6-nitro-lH-indolo-l-ilo)propano-1-amina (158) :
Reacção descrita no Exemplo 40, utilizando metilo-amina como nucleófilo. O produto foi purificado numa coluna de 222 cromatografia de sílica gel (2,5 - 5% 2M amónia em metanol, 97,5 - 95% diclorometano). Rendimento: 91,7 mg de composto 158 como um óleo amarelo-escuro (94,1%). 1H-NMR(CDC13) δ 8,40-8,39 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,02-7, 99 (dd, J=2,l , 9Hz, 1H) , 7,66-7, 63 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,42-7,41 (d, J=3 Hz, 1H), 6,60-6,59 (d, J=3,3 Hz, 1H), 4,36-4,31 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,59-2,54 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,07-1,98 (quinteto, J=6,7 Hz, 2H)
Preparação de dihidrocloreto de N-(1-(3-(metilo-amino)propilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (159) : A reacção decorreu como descrito no Exemplo 40, composto 150, Após o isolamento do sal de Hl por precipitação (121,9 mg), este foi dissolvido em etanol. Adicionou-se resina de Amberlite tratada (3,00 g) à solução, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 35 minutos. A reacção foi diluída com acetato de etilo (15 mL) e filtrada. O filtrado foi concentrado para obter um óleo amarelo. O material foi absorvido em sílica gel e purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (5-10% 2M amónia em metanol, 95-90% diclorometano) . O sal de hidrocloreto formou-se usando o procedimento descrito no Exemplo 40 para o composto 151, Rendimento: 87,2 mg do composto 159 sob a forma de um sólido amarelo-alanranjado. 1H-NMR (DMSO-d6) δ 7,74-7,73 (d, J=3,6 Hz, 1H) , 7,61-7,59 (d, J=4,5 Hz, 1H), 7,46-7,43 (d, J=8,l Hz, 1H), 7,21-7,20 (d, J=3 Hz, 1H), 7,11-7,09 (t, J=4,8 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 6, 60-6,57 (dd, J=l,2 , 8,4 Hz, 1H) , 6, 34-6, 33 (d, J=3 Hz, 2H), 4,17-4,12 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,46-2,41 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,87-1,83 (quinteto, J=6,7 Hz, 2H). ESI-MS m/z (%): 327 (M+, 100). 223
Exemplo 45: Preparação de N-(2-benzilo-l-(2-(1- metilopirrolidino-2-ilo)etilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (164)
Preparação do composto 160: 6-nitroindolo (6) (1,0 g, 6,167 mmol) foi sujeito às condições descritas em Organic Syntheses, Coll. Vol. 6, p 104 e o produto bruto suspenso em hexano em ebulição, filtrado e seco para obter o composto 160, 1H-NMR (CDC13) δ 8,29 (m, 1H) , 8,02 (dd, 1H, J=1,9, 8,8 Hz), 7,68 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,41 (d, 1H, J=3,l Hz), 7,31 (m, 3H) , 7,13, (m, 2H), 6,65 (d, 1H, J=3,0 Hz), 5,40 (s, 2H). MS (ESI+): 253 (M+l, 100%).
Preparação do composto 161: Uma solução de l-benzilo-6-nitro-lH-indolo (composto 160, 0,5 g, 1,982 mmol) foi tratada com ácido polifosfórico como descrito em Synthetic Communications, 27 (12), 2033-2039 (1997) e o produto bruto purificado via coluna de cromatografia de silica gel (2:8 acetato de etilo: hexano) para obter o composto 161 (115 mg, 23,0%); 1H-NMR (CDC13) δ 8,25-8,10 (2x,2H),7,99 (dd, 1H, J=2,1, 8,9 Hz), 7,56 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,45-7,12 (m, 5H) , 6,44 (d, 1H, J=l,6 Hz), 4,19 (s, 2H) . MS (ESI + ) : 253 (M+l, 100%).
Preparação do composto 162: 2-benzilo-6-nitro-lH-indolo (composto 161, 110 mg, 0,436 mmol), clorohidrato de 2-(2- 224 cloroetilo)-1-metilopirrolidina (88,3 mg, 0,479 mmol), e carbonato de potássio em pó (180,8 mg, 1,308 mmol) foram colocados num frasco purificado com árgon. Adicionou-se DMF (5 mL, Aldrich sure seal™) e a mistura foi aquecida a 65 °C num banho de óleo por 20 horas. A solução foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com água (10 mL) e acetato de etilo (25 mL) . As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etilo (2 x 25 mL) . Os extractos orgânicos foram combinados, e o produto bruto resultante foi purificado utilizando cromatografia em coluna de sílica gel, eluindo com porções de 10-15 mL do sistema de solventes (2,5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obter um resíduo amarelo, 162 (47 mg, 29,7% rendimento); 1H-NMR (CDCI3) δ 8,25 (s, 1H), 8,00 (dd, 1H, J=l, 9, 8,8 Hz), 7,55 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,37-7,17 (m, 5H) , 6,36 (S, 1H) , 4,19 (d, 2H, J=3,4 Hz), 4,12 (m, 2H) , 3,12 (m,lH), 2,26 (s,3H), 2,20 (m,lH), 2,01-1,85 (m, 2H), 1,84-1, 66 (m, 2H) , 1,63-1,40 (m, 3H) ; MS (ESI+) : 274,5 (M+l, 100%).
Preparação do composto 164: 2-benzilo-l-(2-(1- metilopirrolidina-2-ilo)etilo)-6-nitro-lH-indolo (composto 162, 40 mg, 0,110 mmol) foi dissolvido em etanol anídrico (5 mL) num frasco seco, purificado com árgon. Adicionou-se, rapidamente, paládio 10% em carbono activado (11,7 mg, 0,011 mmol) e a atmosfera do frasco foi substituída por hidrogénio de um balão através de uma bomba de vácuo. A atmosfera foi substituída duas vezes mais, e a mistura agitada numa atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente. Após 3 horas, uma cromatografia em camada fina num sistema de solventes (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) mostrou a completa conversão em composto
163, 2-benzilo-l-(2-(l-metilopirrolidina-2-ilo)etilo)-6-nitro-lH-indolo-6-amina, que foi usado sem isolamento. A 225
mistura foi filtrada através de um bloco de celite para remover insolúveis, o bloco foi lavado com etanol anidrico (5 mL) e a solução etanólica da amina 163 foi colocada num frasco pequeno, purificado com árgon e equipado com um agitador magnético. Adicionou-se hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (40,8 mg, 0,143 mmol) ao frasco e a reacção foi agitada em meio argónico por 48 horas à temperatura ambiente. Uma porção adicional de hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,3 eq) foi adicionada e a agitação continuou por mais 18 horas. Uma nova porção de hidroiodeto de éster metilico de ácido tiofeno-2-carboximidotióico (0,3 eq) foi adicionada e a agitação continuou por outras 18 horas, findas as quais a mistura foi concentrada e o resíduo purificado por cromatografia em sílica gel (2,5% 2M NH3 em metanol/ 97,5% diclorometano a 5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obter um óleo amarelo do composto 164 (38 mg, 78,0% rendimento); 1H-NMR (CDC13) δ 7,72 (d, 1H, J=3,2 Hz), 7,59 (d, 1H, J=4,7 Hz), 7,38 (d, 1H, J=8,1 Hz), 7,35-7,20 (m, 5H), 7,09 (m, 1H), 6,77 (s, 1H) , 6,56 (d, 1H, J=7,4 Hz), 6,36 (brs, 2H), 6,14 (s, 1H) , 4,14 (s, 2H), 3,96 (t, 2H, J=7,9 Hz), 2,94-2,86 (m, 1H), 2,09 (s, 3H) , 2, 06-1,94 (m, 2H) , 1,89-1,78 (m, 1H), 1,69-1,51 (m, 3H), 1,45-1,35 (m, 2H); MS (ESI+): 443 (M+l, 70%), 219 (100%).
Exemplo 46: Preparação de N-(1-(4-(lH-imidazolo-1- ilo)butilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (168) 226
Preparação do composto 165: A hidreto de sódio (0,987 g, 24, 68 mmol) contido num frasco de 100 mL purificado com árgon e equipado com um agitador magnético e atmosfera argónica, foi adicionado DMF anidrico (10 mL), e a mistura foi arrefecida a 0°C num banho de gelo. Uma solução de 6-nitroindolo (6) (1,00 g, 6,17 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionada lentamente à mistura de NaH e, quando a adição terminou, o banho foi removido e a reacção agitada à temperatura ambiente por ~5 min. Num segundo frasco, seco na estufa e purificado com argon, equipado com um agitador magnético, foi colocado l-cloro-4-iodo-butano (2,26 mL, 18,51 mmol) e DMF (10 mL). A solução de indolo foi adicionada através de uma cânula à solução de clorobutano, num período de 10 minutos e a mistura foi agitada à temperatura ambiente. Após 20 minutos a reacção foi colocada num banho de gelo e terminada com salmoura (10 mL) . A reacção foi diluída com acetato de etilo e água e transferida para um decantador. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com EtOAc. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados para obter um óleo castanho. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (20% acetato de etilo/ 80% hexano) para obter 227 o composto 165 (1,52 g, 97,6% rendimento); 1H-NMR (DMS0-d6) δ 8,57 (d, 1H, J=l, 8 Hz), 7, 93-7,88 (m, 1H) , 7,84 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,75-7,72 (m, 1H), 6,67 (d, 1H, J=3,0 Hz), 4,39 (t, 2H, J=7,0 Hz), 3,66 (t, 2H, J=6,6 Hz), 1,95-1,82 (m, 2H), 1,73-1,64 (m, 2H); MS (ESI+): 253 (M+l, 100%).
Preparação do composto 166: A um frasco de 50 mL, seco e purificado em árgon, equipado com agitador magnético e condensador, foram adicionados os sólidos lH-imidazolo (0,673 g, 9,893 mmol), iodeto de potássio (1,642 g, 9,893 mmol) e carbonato de potássio (1,367 g, 9,893 mmol). 1— (4 — clorobutilo)-6-nitro-lH-indolo (composto 165, 0,250 g, 0, 989 mmol) em solução de acetonitrilo (5 mL) foi adicionado ao frasco e a agitação foi iniciada. A mistura foi aquecida a 50°C, por 16 horas, e depois aquecida em refluxo, por 4 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluida com diclorometano (10 mL) e filtrada através de um bloco de celite. O bloco foi lavado com diclorometano e a solução concentrada para produzir um sólido em bruto, amarelo. O produto foi purificado por cromatografia em coluna de silica gel usando o sistema de solventes (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obter um resíduo amarelo, 0 composto 166 (182 mg, 64,7% rendimento) f 1H-NMR (DMSO-d6) δ 'tr1 LO 00 (d, 1H, J=l, 5 Hz) , 7, 94 -7,88 (m, 1H) , 7,81 (d, 1H, J=3, 0 Hz) , 7, 74-7, ,72 (m, 1H) , 7,59 1 Is, 1H) , 7,12 (s, 1H) , 6,86 (s, 1H), 6 , 66 (d, 1H, J=3, 0 Hz) , 4, 35 (t , 2H, J=6, 4 Hz) , 3, 97 (t, 2H, J=6 ,4 Hz) , 1,76 -1,61 ( m, 4H) ; MS (ESI+) : 307 (M + Na, 100%) .
Preparação do composto 168: 1-(4-(lH-imidazolo-1-ilo)butilo)-6-nitro-lH-indolo (composto 166, 145 mg, 0,510 mmol) foi dissolvido em etanol anídrico (7 mL) num frasco seco, purificado com árgon. Adicionou-se, rapidamente, paládio 10% em carbono activado (54,2 mg, 0,051 mmol) e a 228 atmosfera do frasco foi substituída por hidrogénio de um balão através de uma bomba de vácuo. A atmosfera foi substituída mais duas vezes e a mistura agitada numa atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente. Após 3 horas, uma cromatografia em camada fina num sistema de solventes (10% 2M NH3 em metanol/ 90% diclorometano) mostrou a completa conversão em composto 167, 1—(4—(1H— imidazolo-l-ilo)butilo)-6-nitro-lH-indolo-6-amina, que foi usado sem isolamento. A mistura foi filtrada através de um bloco de celite para remover insolúveis, o bloco foi lavado com etanol anídrico (7 mL) e a solução etanólica da amina 167 foi colocada num frasco pequeno, purificado com árgon e equipado com um agitador magnético. Adicionou-se hidroiodeto de éster metílico de ácido tiofeno-2- carboximidotióico (189,1 mg, 0,663 mmol) ao frasco e a reacção foi agitada em meio argónico, por 20 horas, à temperatura ambiente. Findo este tempo, a solução foi diluída com éter dietílico (100 mL) resultando na formação de um sólido viscoso que não poderia ser isolado por filtração. Assim sendo, o produto foi lavado do funil com metanol, combinado com o filtrado e evaporado com os solventes, deixando um resíduo bruto. Este foi particionado em H20 e acetato de etilo e adicionou-se solução 3M de hidróxido de sódio até ajustar o pH a 9, A mistura foi transferida para um decantador e a camada orgânica foi recolhida. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas, e o resíduo purificado por cromatografia em sílica gel (2,5% 2M NH3 em metanol/ 97,5% diclorometano a 5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obter um sólido amarelo, composto 168 (101 mg, 54,5% rendimento); 1H-NMR (DMSO-dh) δ 7,74 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,60 (d, 1H, J=5,2 Hz), 7,56 (s, 1H) , 7,45 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,21 (d, 229 1Η, J=3,0 Hz), 7,13-7,06 (m, 2H), 6,92 (s, 1H), 6,85 (s,
1H), 6,59 (d, 1H, J=8,0 Hz), 6,42-6,30 (br, 2xm, 3H), 4,17-4,06 (m, 2H) , 3, 99-3, 92 (m, 2H) , 1,75-1,58 (m, 4H) ; MS (ESI+) : 364 (M+l, 100%) .
Exemplo 47: Preparação de N-(1-(4-(dimetilo-amino)butilo)-lH-indolo-6-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (171)
Preparação do composto 165: 1- (4-clorobutilo)-6-nitro-lH-indolo: Ver exemplo 46 para descrição dos detalhes experimentais e dados espectrais.
Preparação do composto 169: A um frasco de 50 mL, seco na estufa e purificado em argon, equipado com agitador magnético e condensador, foram adicionados os sólidos clorohidrato de dimetilo-amina (0,806 g, 9,893 mmol), iodeto de potássio (1,642 g, 9,893 mmol) e carbonato de potássio (1,367 g, 9, 893 mmol). 1-(4-clorobutilo)-6-nitro-lH-indolo (composto 165, 0,250 g, 0,989 mmol) em solução de acetonitrilo (5 mL) foi adicionado ao frasco e a agitação foi iniciada. A mistura foi aquecida a 50 °C por 16 horas. A reacção foi diluída com 3-4- mL de acetonitrilo anídrico, devido à perda de algum solvente, e depois aquecida até refluxo por 8 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente 230 durante o fim-de-semana. Após 88 horas, a reacção foi diluída com diclorometano (10 mL) e filtrada através de um bloco de celite. O bloco foi também lavado com diclorometano e a solução foi concentrada para obtenção de um sólido bruto, amarelo. O produto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel usando o sistema de solventes (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano a 10% 2M NH3 em metanol/ 90% diclorometano) para obter 2 produtos: o mais importante como um óleo amarelo, composto 169 (100 mg, 38,8% rendimento); 1H-NMR (DMSO-dí) δ 8,54 (d, 1H, J=l,5 Hz), 7,93-7,88 (m, 1H) , 7,83 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,74-7,71 (m, 1H), 6,66 (d, 1H, J=3,0 Hz), 4,34 (t, 2H, J=7,l Hz), 2,18 (t, 2H, J=7,0 Hz), 2,06 (s, 6H), 1,78 (quinteto, 2H, J=7,5 Hz), 1,36 (quinteto, 2H, J=7,5); MS (ESI+): 262 (M+l, 100%).
Preparação do composto 171: N,N-dimetilo-4-(6-nitro-lH-indolo-l-ilo)butano-l-amina (composto 169, 88mg, 0,337mmol) foi dissolvido em etanol anídrico (5 mL) num frasco seco, purificado com árgon. Adicionou-se, rapidamente, paládio 10% em carbono activado (35,8 mg, 0,033 mmol) e a atmosfera do frasco foi substituída por hidrogénio de um balão através de uma bomba de vácuo. A atmosfera foi substituída mais duas vezes e a mistura agitada numa atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente. Após 3 horas, uma cromatografia em camada fina num sistema de solventes (10% 2M NH3 em metanol/ 90% diclorometano) mostrou a completa conversão em composto 170, 1-(4-(lH-dimetilo-amino)butilo)-lH-indolo-6-amina, que foi usado sem isolamento. A mistura foi filtrada através de um bloco de celite para remover insolúveis, o bloco foi lavado com etanol anídrico (5 mL) e a solução etanólica da amina 170 foi colocada num frasco pequeno, purificado com árgon e equipado com um agitador magnético. Adicionou-se hidroiodeto de éster metílico de 231 ácido tiofeno-2-carboximidotióico (124,9 mg, 0,438 mmol) ao frasco e a reacção foi agitada em meio argónico, por 20 horas, à temperatura ambiente. Findo este tempo, a solução foi diluida com éter dietilico (100 mL) resultando na formação de um sólido viscoso que não poderia ser isolado por filtração. Assim sendo, o produto foi lavado do funil com metanol, combinado com o filtrado e evaporado com os solventes, deixando um resíduo bruto. Este foi particionado em H20 e acetato de etilo e adicionou-se solução de hidróxido de sódio 3M até ajustar o pH a 9. A mistura foi transferida para um decantador e a camada orgânica foi recolhida. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas e o resíduo purificado por cromatografia em sílica gel (5% 2M NH3 em metanol/ 95% diclorometano) para obter um óleo amarelo, composto 171 (102 mg, 89,0% rendimento); 1H-NNM (DMSO-dé&gt;) δ 7,73 (d, 1H, J=3,4 Hz), 7,60 (d, 1H, J=5,1 Hz), 7,45 (d, 1H, J=8,2 Hz), 7,22 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,13-7,06 (m, 1H) , 6,91 (s, 1H) , 6,58 (d, 1H, J=8,2 Hz), 6, 39-6,28 (bar, 2xm, 3H), 4,10 (t, 2H, J=6,9 Hz), 2,16 (t, 2H, J=7,0 Hz), 2,05 (s, 6H), 1,73 (quinteto, 2H, J=7,5 Hz), 1,37 (quinteto, 2H, J=7,5 Hz); MS (ESI + ) : 341 (M+l, 100%).
Exemplo 48: Preparação de dihidrocloreto de N-[1-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-tiofeno-3-carboxamidina (173)
232 l-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-6-nitro-lH-indolo(149): Ver detalhes experimentais no Exemplo 40.
Sal de dihidrocloreto N-[l-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-tiofeno-3-carboxamidina (173) : Uma solução do composto 149 (0,25 g, 0,864 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com Pd-C (0,025 g), excitada com gás de hidrogénio e agitada durante a noite (15 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão). A mistura de reacção foi filtrada num bloco de celite e lavada com etanol seco (2 x 20 mL) . A camada combinada de etanol foi tratada com hidrobrometo de éster benzilico de ácido tiofeno-3-carboximidotióico (0,54 g, 1,728 mmol) e a mistura resultante foi agitada durante a noite (16 h), à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (100 mL) . O sólido foi dissolvido em solução saturada NaHCOs: CH2C12 (50 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com CH2C12 (2 x 30 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (20 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado numa coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 172 como uma base livre. Espuma, 1H-NMR (DMSO-d6) δ 1,83-1,92 (m, 2H) , 2,19 (t, 2H, j= 6,9 Hz), 2,30 (brs, 4H) , 3,56 (t, 4H, J= 4,5 Hz), 4,13(t, 2H, j=6,9
Hz), 6,05 (brs, 2H) , 6,34 (d, 1H, J= 3,0 Hz), 6,57 (d, 1H, J=8,4 Hz), 6,93 (brs, 1H), 7,20 (d, 1H, j=3,3 Hz), 7,44 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,54 (dd, 1H, J=2,7, 4,8 Hz), 7,63 (d, 1H, J=5,4 Hz), 8,12 (dd, 1H, J=l,2, 3,0 Hz); ESI-MS (m/z, %) : 369 (M+, 100) . Uma solução desta base livre em metanol (5 mL) foi tratada com 1M HC1 em éter (2,6 mL, 2,592 mmol) e agitada por 30 min, à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 172 (0,287 g, 75%) com um sólido. Ponto de fusão 105-108 °C. 233
Exemplo 49: Preparação de dihidrocloreto de N-[1-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-furano-2-carbozamidina (175) 233
1-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-6-nitro-lH-indolo (149): ver detalhes experimentais no Exemplo 40.
Sal de dihidrocloreto de N-[1-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-furano-2-carboxamidina (175): Uma solução do composto 149 (0,25 g, 0,864 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com Pd-C (0,025 g), purificada com gás de hidrogénio e agitada durante a noite (15 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão). A mistura de reacção foi filtrada num bloco de celite e lavada com etanol seco (2 x 20 mL). A camada combinada de etanol foi tratada com hidrobrometo de benzilo-furano-2-carboximidotioato (0,51 g, 1,728 mmol) e a mistura resultante foi agitada durante a noite (16 h), à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto precipitado com éter (100 mL) . O sólido foi dissolvido em solução saturada NaHC03: CH2CI2 (50 mL, 1:1) . A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraida com CH2CI2 (2 x 30 mL) . A camada combinada de CH2CI2 foi lavada com salmoura (20 mL) , e seca (Na2S04) . O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2CI2, 5:95) para obter o composto 174 como uma base livre. Espuma; 1H-NMR (DMSOdH) δ 1,83-1, 92 (m, 2H) , 2,19 (t, 2H, J=6,9 Hz), 2,30 (brs, 4H), 3,56 (t, 4H, J=4,2 Hz), 4,13 (t, 2H, J=6,9 234
Hz), 6,00-6,20 (m, 2H), 6,33 (d, 1H, J=3,0 Hz), 6,55-6,62 (m, 2H), 6,98 (brs, 1H), 7,09 (d, 1H, j= 3,3 Hz), 7,20 (d, 1H, J=3,0 Hz), 7,43 (d, 1H, J=8,1 Hz), 7,78 (brs, 1H); ESI-MS (m/z, %): 353 (M+, 100). Uma solução desta base livre em metanol (5 mL) foi tratada com 1M HC1 em éter (2,6 mL, 2,592 mmol) e agitada por 30 min, à temperatura ambiente. O solvente foi evaporaddo e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 175 (0,262 g, 71%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 87-90°C.
Exemplo 50: Preparação de dihidrocloreto N-[l-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-furano-3-carboxamidina (177)
1-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-6-nitro-lH-indolo (149) : Ver detalhes experimentais no Exemplo 40.
Sal de dihidrocloreto de N-[l-(3-morfolino-4-ilo-propilo)-lH-indolo-6-ilo]-furano-3-carboxamidina (177) :
Uma solução do composto 149 (0,25 g, 0,864 mmol) em etanol seco (5 mL) foi tratada com Pd-C (0,025 g), excitada com gás de hidrogénio e agitada durante a noite (15 h) em atmosfera de hidrogénio (pressão de balão) . A mistura de reacção foi filtrada num bloco de celite e lavada com etanol seco (2 x 20 mL) . A camada combinada de etanol foi tratada com hidrobrometo de benzilo furano-3-carboximidotioato (0,51 g, 1,728 mmol) e a mistura resultante foi agitada durante a noite (16 h), à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o produto 235 precipitado com éter (100 mL) . O sólido foi dissolvido em solução saturada NaHCC&gt;3: CH2CI2 (50 mL, 1:1). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com CH2C12 (2 x 30 mL) . A camada combinada de CH2C12 foi lavada com salmoura (20 mL), e seca (Na2S04). O solvente foi evaporado e o produto bruto purificado em coluna de cromatografia (2M NH3 em metanol: CH2C12, 5:95) para obter o composto 176 como uma base livre. Espuma; 1H-NMR (DMSO-dH) δ 1,85-1,91 (m, 2H) , 2,19 (t, 2H, J= 6,6 Hz), 2,30 (brs, 4H) , 3,56 (t, 4H, J=4,2 Hz), 4,13 (t, 2H, J=6,3 Hz), 6, 00-6, 07 (m,2H), 6,34 (d, 1H, J=3,0 Hz) ,6,56 (d, 1H, j= 7,8 Hz), 6, 90-6, 92 (m, 2H) ; 7,20 (d, 1H, J= 3,0 Hz), 7,43 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,70 (brs, 1H), 8,22 (brs, 1H); ESI-MS (m/z, %): 353 (M+, 100). Uma solução desta base livre, em metanol (5 mL) foi tratada com 1M HC1 em éter (2,6 mL, 2,592 mmol) e agitada por 30 min., à temperatura ambiente. O solvente foi evaporaddo e o produto bruto re-cristalizado a partir de etanol/éter para obter o composto 177 (0,282 g, 78%) sob a forma de um sólido. Ponto de fusão 95-98 °C.
Exemplo 51: Preparação de dihidrocloreto de N-(3-(3-morfolinopropilo)-lH-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (181) :
Preparação de morfolinopropanamida (178): 3-(5-bromo-lH-indolo-3-ilo)-N· 236 A um frasco purificado com árgon, equipado com um agitador magnético, foi adicionado ácido 5-bromo-indolo-3-propiónico (52) (542 mg, 2,02 mmol), clorohidrato de 1-[3-(dimetilo-amino)propilo]-3-etilcarbodi-imida (426 g, 2,22 mmol) e 1-hidroxibenzotriazol (273 mg, 2,02 mmol). Adicionou-se DMF anidrico (5 mL), seguido de morfolina (0,18 mL, 2,06 mmol) e trietilo-amina (0,65 mL, 4,66 mmol). A reacção foi agitada por 21,5 horas à temperatura ambiente. A reacção foi diluída com água gelada (10 mL) e acetato de etilo (10 mL) , transferida para um decantador e o produto extraído para a camada orgânica. A fase aquosa foi extraída outras duas vezes com acetato de etilo (2 x 10 mL) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (10 mL), secos sobre sulfato de magnésio, filtrados e concentrados para se obter um óleo castanho. A secagem em elevado vácuo que se seguiu, permitiu obter um sólido laranja pálido, composto 178, Rendimento: 541 mg sólido laranja (79,4%) 1H NMR (DMSO) δ 11,00 (br s, NH), 7, 68-7, 67 (d, 1H, J=l,5 Hz), 7,31-7,28 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,72-7,14 (td, 2H, J=l,8, 8,4 Hz), 2,93-2,81 (m, 8 H), 2,64-2,59 (t, J=7,5 Hz, 2H).
Preparação de 4-(3-(5-bromo-lH-indolo-3-ilo)propilo)morfolina (179): A um frasco purificado com árgon, equipado com um agitador magnético, contendo o composto 178 (518 mg, 1,54 mmol) foi adicionado hidreto de alumínio-lítio (146 mg, 3,84 mmol), seguido de tetrahidrofurano anidrico (15 mL) . O frasco foi colocado num termobloco metálico e aquecido até refluxo. Após agitação em refluxo por 21 horas, a reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente. A reacção arrefecida foi terminada com água (0,15 mL) , hidróxido de sódio a 3N (0,25 mL), e água (0,45 mL), nesta sequência. A reacção foi filtrada em celite, para remover o sólido branco, e o filtrado amarelo pálido foi concentrado para se obter um 237 óleo amarelo-pálido. A secagem em elevado vácuo permitiu a obtenção de um sólido amarelo-pálido, o composto 179, Rendimento: 407 mg de sólido amarelo-pálido (82%) 1H NMR (CDC13) δ 7,99 (s, 1H) , 7,75 (s, 1H) , 7,28-7,20 (m, 1H) , 6,99 (s, 1H) , 3,76-3,73 (t, J=4,5 Hz, 4H) , 2,77-2,72 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,46- 2,39 (m, 6H), 1,94-1,91 (m, 2H).
Preparação de 3-(3-morfolinopropilo)-lH-indolo-5-amina (180): A um frasco purificado com árgon, equipado com um agitador magnético, foi adicionada uma solução do composto 179 (407 mg, 1,26 mmol) em THF anidrico (8 mL) . A solução laranja foi tratada com Pd2(dba)3 sólido (58 mg, 0,063 mmol), o que resultou num mistura de reacção vermelho-escuro. Adicionou-se uma solução de Tri-t-butilofosfina (10%, 0,37 mL, 0,13 mmol) e a reacção foi agitada à temperatura ambiente por 5 minutos. Uma solução 1M de litio bis(trimetilo-sili)amida em THF (3,78 mL, 3,78 mmol) foi adicionada, e esta solução amarelo-acastanhada foi colocada num termobloco metálico e aquecida até refluxo. A reacção foi agitada a esta temperatura por 16 horas. A TLC (10% 2M amónia em metanol, 90% diclorometano) revelou que todo 0 material inicial tinha reagido. A reacção foi arrefecida à temperatura ambiente e terminada com 1M ácido clorídrico aquoso (15 mL). A reacção ácida foi extraída com acetato de etilo (3 x 10 mL). A fase aquosa foi basificada com hidróxido de sódio a 3N (8 mL) e particionada em acetato de etilo (3 x 10 mL). Os orgânicos foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de magnésio, e tratados com carvão vegetal. A filtração em celite, concentração e secagem em elevado vácuo originou um óleo amarelo-escuro. A purificação do produto foi efectuada por cromatografia em coluna de sílica gel (5-10% 2M amónia em metanol, 95-90% diclorometano). Rendimento: 102 mg de óleo castanho, composto 180 (31,2%). 238 NMR (CDCI3) δ 7,72 (brs,NH), 7,17-7,14 (d,lH,J=8,4 Hz), 6,92-6,89 (dd, 2H , J=2,l, 4,5 Hz), 6,67-6,64 (dd, J=2,l, 8,4 Hz, 1H) , 3, 77-3, 74 (t, J=4,5 Hz, 4H) , 2,74-2,69 (t, J=7,5, 2H), 2,49- 2,43 (m, 6H), 1,97-1,89 (m, 2H).
Preparação de hidrocloreto de N-(3-(3-morfolinopropilo)-1H-indolo-5-ilo)tiofeno-2-carboximidamida (181) : A um frasco purificado com árgon, equipado com um agitador magnético, foi adicionada uma solução de 180 (28 mg, 0,108 mmol) em etanol absoluto (3 mL). Adicionou-se hidro-iodeto de metilo-tiofeno-2-carbimidotioato (62 mg, 0,217 mmol) na forma de sólido amarelo, numa porção. A reacção foi agitada à temperatura ambiente por 17 horas. De acordo com a TLC (10% 2M amónia em metanol, 90% dicloroetano), a reacção estava completa. A reacção foi diluída com éter (15 mL) e o sólido que se precipitou foi recolhido por filtração em vácuo. O precipitado foi lavado com éter (100 mL). O produto foi recolhido lavando o filtro com metanol (10 mL) e recolhendo 0 filtrado. O filtrado foi novamente colocado no frasco de reacção e foi adicionado DOWEX-66 (3g). A reacção foi agitada por 2 horas. A reacção foi filtrada e o filtrado concentrado para obtenção de um sólido castanho. O sólido foi colocado em diclorometano (10 mL) e particionado com bicarbonato de sódio saturado (2 mL) . A fase orgânica foi tratada com salmoura, seca sobre sulfato de magnésio e filtrada. O filtrado foi tratado com 1M ácido clorídrico em éter (3 mL) . Após agitação por 1 hora, a reacção foi concentrada no evaporador rotativo. O sólido amarelo resultante foi seco numa linha de elevado vácuo. Rendimento: 45 mg de sólido amarelo, composto 181 (96%). 1H NMR(DMSO) δ 10,91 (brs, 1H) , 7,96 (s, 2H) , 7,42-7,39 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,36 (s, 1H), 7,29-7,25 (t, J=4,5 Hz, 1H) , 7,24 (s, 1H) , 6, 92-6, 89 (d, J=8,7 Hz, 1H) , 3,58 (s, 4H) , 239 2,72-2,67 (t, J=7,5 Hz, 2H) , 2,38 (m, 6H) , 1,83-1,78 (m, 2H) . MS (ESI+): 369 (MH+, 100%) .
Ensaios de Inibição in vitro NOS
Os compostos de fórmula I de acordo com a presente invenção apresentaram inibição selectiva da isoforma neuronal de NOS (nNOS). A eficácia dos compostos na inibição preferencial de nNOS sobre iNOS e/ou eNOS podem ser examinada por um perito na matéria, utilizando por exemplo, os métodos descritos nos Exemplos 11a e 11b, incluídos abaixo.
Exemplo 52a: Ensaios enzimáticos de nNOS (rato), eNOS (bovino) e iNOS (murino)
As isoformas de NOS utilizadas neste exemplo eram enzimas recombinantes expressas em E. coli. nNOS de rato foi expressa e purificada como descrita anteriormente (Roman et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 92 8428-8432, 1995). A isoforma eNOS de bovino foi isolada como mencionada (Martasek et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 219: 259-365,1996), e o macrófago iNOS de murino expresso e isolado de acordo com o procedimento de Hevel et al. (J. Biol. Chem. 266: 22789 - 22791, 1991). Os valores de IC50 e percentagem de inibição foram determinados em condições de medida de velocidade inicial usando o teste de captura de hemoglobina previamente descrito (Hevel and Marletta, Methods Enzymol. 133: 250-258, 1994). Neste teste, óxido nítrico e oxihemoglobina reagem para formar methemoglobina, que foi detectada a 401 nm (e=19 700 M“1cm'1) num espectrofotómetro Perkin-Elmer Lamda lOUV/vis. Os testes foram realizados utilizando diferentes concentrações dos compostos. As misturas de teste para nNOS e eNOS continham 10 mM L-arginina, 1,6 mM CaCl2, 11,6 mg/mL calmodulina, 100 mM NADPH, 6,5 mM BH4 e 3 mM oxihemoglobina em 100 mM HEPES (pH 7,5). As misturas de teste para iNOS continham 10 mM de 240 L-arginina, 100 mM NADPH, 6,5 mM BH4 e 3mM oxihemoglobina em 100 mM Hepes (pH 7,5). Todos os testes foram efectuados num volume final de 600 μΐ e foram iniciados com enzima. Os resultados para os compostos exemplares da presente invenção são mostrados na Tabela 2a. Estes resultados demonstram a selectividade dos compostos da presente invenção para a inibição de nNOS.
Tabela 2a. Inibição selectiva de NOS pelos compostos da presente invenção.
Composto nNOS rato(yM) iNOS murino (μΜ) eNOS bovino (μΜ) 4 29, 6 46,9 164 5 57,6 - 643 9 9,4 29,2 12 8,8 109 211 15 2,3 56 51,1 18 3,3 43,5 248 24 3,7 213,3 103 27 14,6 159,2 &gt;300 32 4,1 67,2 6,2
Exemplo 52b: Ensaio enzimático de nNOS (humano), eNOS (humano) e iNOS (humano) NOS recombinante induzível humano (iNOS), NOS constitutivo endotelial humano (eNOS) ou NOS constitutivo neuronal humano (nNOS) foram produzidos em células Sf9 infectadas com Baculovírus (ALEXIS). A actividade de NO sintase foi determinada em método radiométrico, medindo a conversão de [3H]L-arginina em [3H]L-cirulina. Para medir iNOS, adicionaram-se 10 μΐ de enzima a 100 μΐ de 100 mM HEPES, pH 7,4, contendo lmM CaCl2, 1 mM EDTA, lmM ditiotreitol, 1 μΜ FMN, 1 μΜ FAD, 10 μΜ de tetrahidrobiopterina, 120 μΜ NADPH, e 100 nM CaM. Para medir eNOS ou nNOS, adiciounou-se 10 μΐ de enzima a 100 μΐ de 40 mM HEPES, pH =7,4, contendo 2,4 mM CaCl2, lmM MgCl2, lmg/mL BSA, lmM EDTA, lmM ditiotreitol, ΙμΜ FMN, 1 μΜ FAD, 10 μΜ tetrahidrobiopterina, lmM NADPH, e 1,2 μΜ CaM. 241
Para medir a inibição enzimática, adicionou-se 15 μΐ de solução de uma substância de teste à solução de ensaio enzimático, seguindo-se um tempo de pré-incubação de 15 min à temperatura ambiente. A reacção foi iniciada por adição de 20 μΐ de L-arginina contendo 0,25 μ Ci de [3H] arginina/mL e 24 μΜ de L-arginina. 0 volume total da reacção de mistura foi de 150 μΐ em todos os poços. As reacções ocorreram a 37 °C por 45 min. A reacção foi interrompida por adição de 20 μΐ de tampão gelado contendo 100 mM HEPES, 3 mM EGTA, 3 mM EDTA, pH =5,5, [3H]L-citrulina foi separada por DOWEX (resina de troca-iónica DOWEX 50 W X 8-400, SIGMA) e o DOWEX foi removido por centrifugação a 12 OOOg durante 10 min. Uma alíquota de 70 μΐ do sobrenadante foi adicionada a 100 μΐ do fluido de cintilação e as amostras foram contadas num contador de liquido de cintilação (1450 Microbeta Jet, Wallac) . A actividade especifica de NOS foi descrita como a diferença entre a actividade recuperada da solução de teste e a observada numa amostra de controlo contendo 240 mM do inibidor de L-NMMA. Todos os testes foram efectuados, no minimo, em duplicado. Os desvios-padrão foram de 10% ou menos. Os resultados para os compostos exemplares desta invenção apresentam-se na Tabela 2b. Estes resultados demonstram, novamente, a selectividade dos compostos da presente invenção na inibição de nNOS.
Tabela 2b. Inibição selectiva de NOS humano pelos compostos de acordo com a presente invenção.
Composto nNOS humano (μΜ) iNOS humano (μΜ) eNOS humano (μΜ) 12 1,2 60 15 18 2,6 12 26 27 12 320 &gt;100 32 ( + ) 0,32 72,8 16 32(-) 0,2 72,6 24 37 0,49 21 3,8
Estudos de neuroprotecção 242
Os efeitos neurotóxicos do glutamato, pela activação de receptores de NMDA e afluxo de Ca2+, contribuem para a degeneração neuronal em diversas doenças neurológicas (Choi, J. Neurobiol. 23:1261, 1992; Dingledine et al.,
Trends Pharmacol. Sei. 11:334-338, 1990; Meldrum and
Garthwaite, Trends Pharmacol. Sei. 11:379-387, 1990). Por conseguinte, compostos que previnam a morte celular associada à activação de receptores de NMDA directamente, via antagonismo de NMDA (Exemplo 12-15), ou indirectamente, através do bloqueio da síntese de NO mediada por NMDA, são candidatos a agentes neuroprotectores para o tratamento de doenças neurodegenerativas.
Exemplo 53: Neuroprotecção de células corticais de rato contra provocação com NMDA
De acordo com um procedimento anteriormente descrito (Tremblay et al., J Neurosci. 20(19): 7183-92, 2000), os compostos de teste foram adicionados a culturas neuronais corticais de rato, por um período de pré-incubação de 60 minutos, seguindo-se a sua exposição, por 30 minutos, a 25 μΜ NMDA em tampão. Após 24 h, as culturas foram tratadas com iodeto de propídio e a % de morte celular determinada e comparada com a de culturas controlo. Como evidencia a Figura 1, os compostos 9, 12 e 18, protegeram as células neurais de morrerem após provocação com NMDA, indicando a sua eficácia como agentes neuroprotectores.
Exemplo 54: Neuroprotecção em cortes de hipocampo de rato após privação de oxigénio-glucose (OGD)
Dado que durante ataque, isquémia e trauma, o cérebro é privado de oxigénio e nutrientes, a OGD representa uma afronta mais &quot;fisiológica&quot; para as culturas corticais e é, por isso, um modelo relevante de neuroprotecção. Culturas neuronais foram expostas a 90 minutos de hipóxia num tampão 243 livre de glucose, com e sem o composto 9, 12 ou 18, Um período de pré-incubação com o composto 12 foi utilizado nas culturas tratadas com este composto. Após 24 horas, a morte celular foi determinada com iodeto de propídio. Como demonstra a Figura 2, uma concentração de 25 μΜ do composto 12 protegeu os neurónios contra os 90 minutos de exposição a OGD, indicando a sua eficácia como agente neuroprotector.
Exemplo 55: Efeitos do composto 12 no afluxo de Ca2+ induzido por NMDA
Para medir a concentração intracelular de [Ca2+]i em culturas neuronais, as células foram carregadas com a tinta fluorescente FLUO-4FF, sensível a [Ca2+] . A fluorescência foi determinada num leitor de placas antes e depois da aplicação de NMDA (25 μΜ), durante 15 minutos. O NMDA induz uma elevação rápida e transitória de [Ca2+]i. Como mostra a Figura 3, o composto 12 levou a uma inibição dependente da dose (10-50 μΜ) do afluxo de Ca2+ induzido por NMDA, indicando a sua eficácia como antagonista de NMDA e como agente neuroprotector.
Exemplo 56: Efeitos do composto 12 nas correntes que percorrem toda a célula, induzidas por NMDA, em neurónios corticais de rato
Os efeitos do composto 12 nas correntes que percorrem toda a célula, induzidas por NMDA, em neurónios corticais de rato foram examinados de acordo com os procedimentos descritos na literatura (Mealing et al. J Pharmacol Exp Ther. 2001 297 (3), 906-14). Como evidencia a Figura 4, o composto 12 bloqueou efectivamente as correntes induzidas por NMDA nos neurónios corticais integrais de rato, num modo dependente da dose, demonstrando a sua eficácia como antagonista de NMDA e como agente neuroprotector. 244
Exemplo 57: Efeitos dos inibidores de NOS no lambimento da pata, induzido por formalina, em ratos
Hiperalgesia e inflamação induzidas por formalina: Num modelo experimental de nocicepção inflamatória continuada, associada a modificações intracelulares de longa duração do processamento nociceptivo a nivel da espinal medula, ratos ou ratinhos foram sujeitos a uma injecção subplantar de formalina numa pata (Chapman et al., Brain Res. 697: 258 — 261, 1995; Meller and Gebhart, Pain 52: 127-136, 1993). Existem duas fases distintas de comportamento nociceptivo expontâneo: à primeira fase (fase I), que dura cerca de 5 minutos, segue-se uma segunda fase (fase II), com duração aproximada de 40 minutos, caracterizada por agitação persistente ou lambimento da pata injectada (Fu et al., Neuroscience 101(4): 1127-1135, 2000). Períodos mais longos após a injecção de formalina resultam no desenvolvimento de alodínia e hiperalgesia (1-4 semanas). Foi demonstrado anteriormente que 7-NI exibe a actividade anti-nociceptiva em ratinhos sem aumentar a pressão sanguínea (Moore et al., Br. J. Pharmacol. 102:198-202, 1992). Assim, compostos que possuam actividade inibidora de nNOS devem ser eficazes no tratamento da dor inflamatória e nos sintomas de dor neuropática de alodinia e hiperalgesia, resultantes da inflamação.
Os compostos de teste, incluindo o composto 12 e 7-NI, foram dissolvidos em 1% DMSO / 2% Tween 80 / 0,9% NaCl. Ratinhos fêmea ou macho derivados de IRC, com peso 23+ 2 g foram alojados em jaulas A.PEC® e mantidos num ambiente controlado de temperatura (22 °C - 24 °C) e humidade (60% -80%), em ciclos de luminosidade-escuridão de 12h, durante 1 semana, antes de serem usados. Foi garantido o livre acesso a ração e água. As substâncias testadas foram administradas intraperonealmente a 6 grupos de 5 ratinhos derivados de 245 IRC, com peso 23 + 2 g, 30 minutos antes da injecção subplantar de formalina (0,02 mL, 1%). A redução do tempo de lambimento da pata traseira induzido por formalina foi registado no periodo de 20 a 30 minutos seguinte (Fase II). Como mostra a Figura 5, a administração do composto 12 e de 7-NI resultou numa redução da frequência de lambimento da pata nos ratinhos sujeitos aos testes, indicando a eficácia deste composto como tratamento para a dor.
Exemplo 58: Efeito neuroprotector do composto de fórmula 12 numa lesão traumática cerebral (TBI) num modelo de ratinho
Teste de Lesão Traumática Cerebral: Antes da experiência, foram fornecidas água e ração ad libidum a ratinhos suiços macho (Iffa Credo, France) , com peso entre 21 e 24 g. O modelo Lesão Traumática Cerebral (TBI) usado na experiência foi o modelo de lesão de cabeça fechada descrito por Hall (J. Neurosurg. 62: 882-887, 1985) e modificado de acordo com Mésenge (J. Neurotrauma 13: 209-214, 1996). Seguraram-se os ratinhos pela pele dorsal do pescoço e a cabeça foi posicionada sob o dispositivo de lesão, com o queixo assente firmemente na base do dispositivo. O peso lesionador foi então libertado, caindo livremente até embater num metal impactante colocado no topo da cabeça do ratinho. Um peso de 50 g caindo 24 cm resulta num impacto de 1200 g/cm. A lesão causou inconsciência imediata, avaliada pela perda de reflexo de endireitamento e de todo o reflexo de dor. A perda de consciência durou 2-5 min. 20-30% dos ratinhos morreram nos primeiros segundos pós-traumáticos. Nos ratinhos que sobreviveram não se verificaram mortalidade adiada nem prostração, estando os animais de teste a comer e a beber de forma semelhante aos de controlo. 246
Avaliação de Défice Neurológico: Efectuaram-se exames neurológicos cegamente lh, 4h e 24h depois de TBI em ratinhos não-lesionados, tratados com o composto 12, em ratinhos de controlo tratados apenas com o meio, e em ratinhos lesionados tratados com o composto 12, 0 estado sensório-motor foi avaliado cegamente por um teste de aderência e um teste de corda, como descrito por Hall (J. Neurosurg., 62: 882-887, 1985). Cada ratinho foi agarrado pela cauda e colocado numa corda tensa com 60 cm de comprimento, suspensa em duas barras verticais 40 cm acima de uma mesa acolchoada. A aderência foi pontuada como o tempo (em segundos) que o ratinho permaneceu na corda, num máximo de 30 segundos. O teste da corda, pontuado de 0 (severamente debilitado) a 5 (normal) avaliou a forma como os ratinhos se mantinham e se moviam na corda, segundo os seguintes critérios: 0 - ratinhos cairam durante o período de avaliação de 30 segundos; 1 - ratinhos mantiveram-se na corda durante o período de avaliação de 30 segundos, usando apenas uma pata; 2 - ratinhos mantiveram-se na corda usando as 4 patas, pelo menos 5 segundos; 3 - ratinhos mantiveram-se na corda usando as 4 patas e a cauda, pelo menos 5 segundos; 4 - ratinhos mantiveram-se na corda usando as 4 patas e a cauda e movimentaram-se, pelo menos 5 segundos; e 5 - ratinhos alcançaram uma das barras verticais durante o período de avaliação de 30 segundos.
Uma hora após TBI, não se observaram melhorias significativas nas pontuações do teste da corda (Figura 6, Tabela 3) ou nas pontuações de Hall (Figura 7, Tabela 4) nos ratinhos controlo nem nos ratinhos tratados. No entanto, 4 horas após TBI, houve uma melhoria significativa nas pontuações da corda (Figura 8, Tabela 5) para os grupos tratados com 3 e 6 mg/kg e na pontuação de aderência para o grupo de tratamento com 3 mg/kg, e uma tendência para 247 melhoria no grupo de 6 mg/kg (Figura 9, Tabela 6) . Uma melhoria significativa na pontuação de Hall foi observada para o grupo tratado com 6 mg/kg, 4 horas após o TBI (Figura 10, Tabela 7). Uma tendência para a melhoria, embora não significativa, foi observada nas pontuações dos testes da corda, aderência e Hall nos grupos tratados relativamente aos grupos controlo, 24 horas após uma dose s.c. única do composto 12, Estes resultados indicam o efeito neuroprotector do composto 12 após lesão cerebral traumática.
Temperatura corporal e perda de peso: Registaram-se a temperatura corporal e a perda de peso nos ratinhos lesionados, nos lesionados e tratados e nos controlo, 1, 4 e 24 horas após a lesão. Uma hora depois da TBI, observou-se uma diminuição significativa da temperatura corporal dos ratinhos lesionados, não existindo diferenças entre os ratinhos tratados e os controlo (Figura 11, Tabela 8) . 4 horas após a TBI, os animais não tratados tinham uma temperatura corporal significativamente elevada de 37,1°C, sendo a temperatura corporal média dos ratinhos tratados semelhante à dos ratinhos não lesionados (Figura 12, Tabela 9) . Às 24 horas após lesão, os ratinhos controlo e os tratados com dose baixa (1 mg/kg) apresentavam uma temperatura corporal inferior à dos ratinhos não lesionados ou lesionados e tratados com 3 ou 6 mg/kg. 24 horas após a TBI, os ratinhos lesionados sofreram uma perda de peso significativamente elevada relativamente aos ratinhos não lesionados (Figura 13, Tabela 10). No entanto, observou-se uma melhoria significativa no peso corporal nos ratinhos do grupo tratado com 3 mg/kg. A redução da massa corporal e da taxa de crescimento são fenómenos secundários caracteristicos associados com trauma cerebral agudo, 248 parcialmente devidos ao hipercatabolismo do tecido cerebral danificado (J.L. Pepe and C.A. Barba, J. Head Trauma Rehabil. 14: 462-474, 1999; Y.P. Tang et al. J. Neurotrauma 14: 851-862, 1997). Assim, uma redução na perda de peso corporal é também indicação do efeito neuroprotector do composto 12 após lesão traumática cerebral.
Exemplo 59: Neuroprotecção em cortes hipocâmpicos CAI após OGD
As preparações de cortes cerebrais são ferramentas valiosas para estudar os mecanismos subjacentes à neurotoxicidade e para avaliar o potencial protector de novos agentes neuroprotectores terapêuticos. Por exemplo, foi demonstrado que inibidores de óxido nítrico atenuam os danos induzidos por OGD (Izumi et al., Neuroscience Letters 210:157-160,1996) e bloqueiam o pré-condicionamento anóxico (Centeno et al., Brain Research 836:62-69,1999) em cortes hipocâmpicos agudos em rato. As preparações de cortes permitem um controlo preciso do ambiente neuronal, e manipulações iónicas e farmacológicas impossíveis in vivo. O modelo de corte hipocâmpico é particularmente útil no estudo da neurotoxicidade induzida por isquémia, uma vez que os neurónios CAI estão entre os mais sensíveis a lesões neuronais. Além disso, os cortes do hipocampo preservam as interacções fisiológicas neuroalgliais celulares e os circuitos sinápticos, e retêm a sua viabilidade funcional por mais de 6h. A estimulação ortodrómica da entrada colateral de Schaffer nos neurónios no CAI, e a subsequente medição dos potenciais de campo junto aos corpos celulares piramidais dos neurónios CAI, tem sido o método de eleição para avaliar a viabilidade deste modelo (ver Figura 14). A lesão cerebral pode ser medida em secções cerebrais incubando secções frescas de cérebro em cloreto de 2,3,5- 249 trifeniltetrazolio (TTC) . O TTC, que é incolor, é reduzido pela succinato desidrogenase mitocondrial, em tecidos vivos, a um produto formazan vermelho. Combinações de fotografia ou digitalização e análise de imagem são depois utilizadas para medir a área de tecido normal (vermelho) e danificado (não colorido) na superfície de cada corte e estimar a extensão da lesão. A técnica de coloração com TTC foi aperfeiçoada por membros do Experimental Stroke Group no IBS (anfitriã do estudo: Universidadde de Ottawa, Canada) utilizando um solvente para extrair o produto formazan colorido das secções de tecido e medi-lo num espectrofotómetro, obtendo assim uma medida simples e objectiva da lesão (Preston and Webster, J. Neurosci. Meth. 94(2): 187-92, 1999).Watson et al. (J. Neurosci. Meth. 53: 203-208, 1994) demonstraram a correlação entre o produto da reacção de TTC e a amplitude do grampo da população. Uma versão modificada da técnica de Preston e Webster foi aplicada aos cortes de hipocampo, juntamente com medições do potencial de campo da amplitude de grampo da população, para avaliar os efeitos neuroprotectores dos compostos de acordo com a presente invenção como, por exemplo, o composto 12.
Preparação dos cortes: Ratos macho Wistar, 180-200 g, foram anestesiados com halotano e decapitados. Os seus cérebros foram removidos e colocados em fluido espinal cerebral artificial (ACSF) a 0,5°C, nos 60 s após a decapitação. A composição do ACSF foi (em mM); 127 NaCl, 2 KC1, 1,2 KH2PO4, 26 NaHC03, 2 MgS04, 2 CaCl2, 10 glucose, equilibrada com 95% 02/ 5% C02, pH 7,4, Os cérebros foram hemi-seccionados e os hipocampos dissecados e seccionados em fatias espessas de 400 μΜ usando um cortador de tecido Mcllwain (Mickle Laboratory Engineering Co., Gomshall, GB). O seccionamento foi iniciado a aproximadamente 1 mm da 250 extremidade rostral do hipocampo e recolheram-se cerca de 12 cortes de cada hipocampo. Os cortes foram distribuídos em grupos, de forma rotacional, para que cada grupo contivesse cortes de todas as regiões seccionadas do hipocampo. Os cortes hipocâmpicos foram colocados em plataformas de rede de nylon, em câmaras de incubação tipo interface (6-8 cortes por plataforma; 1 plataforma por câmara), por 90 minutos a 35 °C. O ACSF nestas câmaras, e a atmosfera sobre ele, foram continuamente gaseados com 95% O2/ 5% C02, Por vezes, após um período de estabilização inicial de 60 minutos, os cortes receberam um tratamento de pré-provocação, transferindo os cortes nas suas plataformas de rede de nylon para uma outra câmara, onde foram incubados durante 30 minutos no ACSF apropriado. Os cortes que foram sujeitos a 10 minutos de privação de oxigénio-glucose (OGD) foram transferidos nas suas plataformas de rede de nylon para câmaras de incubação contendo ACSF anóxico, com pouca glucose (4 nM). O ACSF nestas câmaras, e a atmosfera sobre ele, foram continuamente gaseados com 95% N2/ 5% CO2, Após estes 10 minutos de provocação, as plataformas que suportam os cortes foram devolvidas às câmaras de incubação originais e aí mantidas por um período de 4 h.
Grupos de tratamento: Para cada experiência foram utilizados três grupos de controlo: controlo vivo (4 h após provocação falsificada), controlo morto (4 h após 10 min de sujeição a OGD), e controlo protecção (4 h após 10 min de sujeição a OGD em 0,3 mM Ca, com 30 min de pré-incubação). Nas experiências em que os cortes controlo vivo não sobreviveram, os cortes controlo morto não morreram, ou os cortes controlo protecção não foram significativamente melhores que aqueles no grupo controlo morto todos os resultados foram rejeitados. 251 (a) Preservação dos potenciais de campo evocados: A eficácia da transmissão sináptica nestes cortes foi avaliada usando técnicas electrofisiológicas. Os cortes foram transferidos para uma câmara de registo de interface (Haas et ai., J. Neurosci. Meth.l: 323-325, 1979) e perfundidos a uma taxa de 1 mL/min a 35,0 +0,5 °C. Os potenciais de campo ortodrómicos foram evocados estimulando os colaterais de Schaffer com um eléctrodo bipolar concêntrico de tungsténio. A estimulação consistiu em pulsos de corrente constante de 2 s de duração separados por intervalos de 30 s. Os potenciais evocados (EP) foram registados no CAI do estrato piramidal usando micropipetas de vidro (2-5 megaohms) contendo 150 mM NaCl. A amplitude do grampo da população (PS) foi medida a partir da deflecção descendente, desde o pico até ao ponto médio entre 2 picos positivos. A amplitude de PS foi optimizada ajustando o eléctrodo de registo no corte, geralmente a uma profundidade de cerca de 50 μΜ. Nos cortes em que a PS foi inferior a 3mV de amplitude, foram efectuadas uma 2a e, se necessário, uma 3a tentativa de obtenção de uma PS mais robusta, re-colocando o eléctrodo de registo no CAI, A maior amplitude PS destas tentativas de registo múltiplas foi catalogada.
Nos cortes de controlo, a amplitude PS não foi afectada por 50 μΜ de composto 12 (Figura 14; controlo à esquerda, composto 12 à direita). Na figura 15, os traços mostram os PS registados nos cortes controlo (esquerda), cortes sujeitos a OGD (meio) e cortes sujeitos a OGD em 0,3 mM Ca2+. Cada traço corresponde à media de 10 potenciais de campo registados consecutivamente; estimulação de 0,03 Hz. Cortes de 252
hipocampo não sujeitos a uma provocação OGD (controlo vivo) mostraram uma amplitude PS de 3,5 + 0,5 mV (n=12) . Os cortes expostos a 10 min. OGD (controlo morto) mostraram voleios de fibra, mas não PSs (n=5), enquanto cortes expostos à mesma provocação mas incubados em 0,3mM Ca2+ 30 minutos antes e durante a provocação (controlo protecção) mostraram amplitude PS de 1,4 + 0,3 mV (n=3) (Figura 16).
Cortes incubados apenas em 0,05% DMSO (concentração máxima do meio usada para 7-NI) e expostas a OGD, como grupos de tratamento, não mostraram amplitudes PS significativamente diferentes das do grupo controlo morto. Cortes incubados com 100 μΜ 7-NI mostraram voleios de fibras mas não PSs (n=3). Cortes tratados com 50 μΜ de composto 12 mostraram amplitudes PS de 2,1 + 1,5 mV (n=3). Todos estes resultados indicam o efeito neuroprotector do composto 12. (b) Preservação da actividade metabólica mitocondrial pelo composto 12 usando coloração TTC: Cortes de hipocampo expostos a 10 min. OGD (controlo morto) (n=5 grupos de 4-5 cortes) retiveram 25 + 5% da absorvância de cortes não submetidos a uma provocação (controlo vivo - normalizado a 100%), enquanto cortes pré-incubados em 0,3 mM de cálcio 30 min. antes e durante o OGD (n=5) retiveram 107 + 27% da sua absorvância (controlo protecção) . Os cortes incubados apenas em 0,05% DMSO (a concentração máxima do meio usado para 7-NI) e expostos a OGD, como os grupos tratados com o composto, não mostraram absorvâncias significativamente diferentes das do grupo controlo morto (dados não apresentados). Cortes tratados com 100 μΜ 7-NI (n=5) retiveram 81 + 18% da sua absorvância, enquanto cortes tratados com 50 μΜ do composto 12 (n=8) retiveram 92 + 18% da sua absorvância (ver Figura 17) . Estes 253 resultados indicam, mais uma vez, o efeito neuroprotector do composto 12.
Exemplo 60: Eficácia nos modelos preditivos de estados de dor tipo neuropàtica A eficácia dos compostos de acordo com a presente invenção para o tratmento de dor neuropàtica foi avaliada usando modelos animais normalizados, preditivos de actividade anti-hiperalgésica e anti-alodínia, induzida por uma variedade de métodos, cada um descrito mais detalhadamente abaixo. (a) Modelo Chung de dor tipo neuropàtica induzida por lesão: Os esquemas experimentais para o ensaio modelo SNL de ligação de nervo espinal de Chung para dor neuropàtica são mostrados na Figura 18, Realizou-se uma lesão em ligações nervosas de acordo com o método descrito por Kim e Chung (Kim and Chung, Pain 50: 355-363, 1992). Esta técnica produz sinais de disestesias neuropáticas, incluindo alodinia táctil, hiperalgesia termal e protecção da pata afectada. Os ratos foram anestesiados com halotano e as vértebras das regiões L4 a S2 foram expostas. Os nervos espinais da L5 e L6 foram expostos, cuidadosamente isolados, e unidos firmemente com uma sutura de seda 4-0 distai ao DRG. Depois de se assegurar a estabilidade homestática, as feridas foram suturadas, e os animais recuperaram em jaulas individuais. Ratos falsamente operados foram preparados de forma idêntica com excepção da ligação dos nervos espinais das L5/L6, Todos os ratos que exibiam sinais de deficiência motora foram eutanizados. Após um período de recuperação da intervenção cirúrgica, os ratos mostraram elevada sensibilidade a estímulos dolorosos e normalmente não dolorosos. 254
Após injecção de uma dose normalizada (10 mg/kg) IP de acordo com o procedimento publicado, verificou-se um evidente efeito anti-hiperalgésico dos compostos nNOS selectivos 32(-), 32 ( + ) (ver Figura 19) e 12 (ver figura 21). A administração dos compostos 32(-), 32(+), e 12 a animais de teste resultou também na reversão da hipertesia táctil (ver figuras 21 e 22, respectivamente). Foi observada uma diferença evidente entre os dois enantiómeros do composto 32 neste modelo de dor neuropática.
Exemplo 61: Modelo experimental de enxaqueca.
Animais. Ratos Sprague Dawley macho (275-300 g) foram comprados à Harlan Sprague Dawley (Indianapolis, IN) . Os animais tiveram livre acesso a comida e água. Os animais foram mantidos em ciclos de 12 h de luz (7h às 19h) e 12 h de escuridão (19h às 7h) . Todos os procedimentos estão de acordo com as políticas e recomendações da Associação Internacional para o Estudo da Dor, com as orientações e normas de utilização de animais de laboratório dos Institutos Nacionais de Saúde, e foram aprovados pelo Comité de Tratamento e Uso de Animais da Universidade do Arizona.
Preparação cirúrgica
Canulação da enxaqueca: Ratos macho Sprague Dawley foram anestesiados com ketamina/xilazina (80 mg/kg, i.p.), o topo da cabeça foi rapado usando um tosquiador de roedores (Oster Golden A5 com lâmina tamanho 50), e a área rapada foi limpa com betadine e 70% etanol. Os animais foram colocados num aparelho estereotáxico (Stoelting modelo 51600) e a temperatura corporal interna foi mantida a 37 °C usando uma almofada de aquecimento colocada sob os animais. Na zona da cabeça rapada e limpa foi feita uma incisão de 2 cm utilizando um bisturi com lâmina #10 e qualquer 255 sangramento foi limpo utilizando cotonetes de algodão esterilizadas. A localização das suturas ósseas bregma e mediana foram identificadas como referências e, usando uma broca de mão, fez-se um pequeno furo de 1 mm de diâmetro, sem romper a dura, mas com profundidade suficiente para a expôr. Dois furos adicionais (1 mm de diâmetro) a 4-5 mm de distância do local anterior, foram efectuados para montar os parafusos de aço inoxidável (Small Parts #A-MPX-080-3F) que seguram a cânula através de qual se colocará um caldo inflamatório para induzir a enxaqueca experimentalmente. Uma cânula intra-cerebroventricular (ICV) modificada (Plastics One #C313G) foi colocada no furo sem penetrar na ou através da dura. A ICV foi modificada cortando-a a 1 mm de distância do fundo dos tópicos de plástico usando uma ferramenta Dremel e uma lima para remover qualquer rebarba de aço. Quando a cânula modificada estava montada, colocou-se acrilico dentário em volta da cânula de enxaqueca e os parafusos de aço para garantir que a cânula estava em segurança. Quando o acrilico dentário secou (i.e., após 10-15 min) prendeu-se a tampa da cânula no topo, para evitar a penetração de contaminantes na cânula, e a pele foi suturada usando sutura de seda 3-0, Os animais receberam uma injecção de antibiótico (Amicacina C, 5mg/kg, i.m.) e foram removidos da estrutura estereotáxica e recuperaram da anestesia numa almofada aquecida. Os animais foram colocados numa jaula limpa, separada, por um período de recuperação de 5 dias.
Injecções. Injecções subcutâneas: As injecções subcutâneas (s.c.) foram realizadas segurando o animal manualmente e inserindo uma agulha descartável de calibre 25 numa seringa descartável de 1 cc na região abdominal do animal, assegurando que a agulha se mantinha entre o músculo e a pele do animal. As injecções dos compostos foram efectuadas 256 num período de 5 segundos e foram registadas como positivas pelo desenvolvimento de uma bolsa na pele, no local da injecção. A distribuição oral foi conseguida usando uma agulha de gavagem de calibre 18 numa seringa 1 cc.
Injecções na cânula de enxaqueca: Uma cânula de injecção (Plastics One, C313L cortada para encaixar nas cânulas ICV modificadas) , ligada a uma seringa Hamilton de 25 μΐ (1702SN) por um tubo de tigon (Cole-Palmer, 95601-14), foi usada para injectar 10 μΐ de solução de mediadores inflamatórios na dura.
Teste de comportamento. Antes do dia da cirurgia da enxaqueca, colocaram-se animais ingénuos em câmaras de acrílico com fundo de fio metálico (1 cm2), suspensas (30 cm de comprimento x 15 cm de largura x 20 cm de altura), e aclimatizaram-se os animais às câmaras de teste por 30 minutos.
Limiares de sensibilidade da pata traseira a estímulos tácteis, não-nocivos, em ratos
Os limiares de retirada da pata em estímulos tácteis foram determinados em resposta a sondas com filamentos calibrados von Frey (Stoelting, 58011) . Os filamentos von Frey foram aplicados perpendicularmente à superfície plantar da pata traseira do animal, até que esta curvasse ligeiramente, e mantidos por 3 a 6 segundos. Uma resposta positiva foi indicada por uma retirada brusca da pata. O limiar de 50% de retirada da pata foi determinado pelo método não-paramétrico de Dixon (1980) . Uma sonda inicial equivalente a 2,0 g foi aplicada; em caso de resposta negativa, o estímulo era aumentado um incremento, enquanto uma resposta positiva resultava no decréscimo de um incremento. O estímulo foi aumentado incrementalmente até se obter uma 257 resposta positiva, e seguidamente diminuído até se observar uma resposta negativa. Este método &quot;acréscimo-decréscimo&quot; foi repetido até se determinarem três modificações no comportamento. 0 padrão de respostas positivas e negativas foi classificado. 0 limiar de 50% de retirada da pata foi determinado como (10[xf+kM])/10 000, em que Xf=valor do último filamento de von Frey utilizado, k=valor Dixon para o padrão positivo/negativo, e M =diferença média (log) entre estímulos. Apenas os animais não previamente expostos com patamares de 11 a 15 g foram usados na experiência; Quinze gramas foi usado como o valor máximo. Os limiares de retirada da pata foram testados novamente cinco dias após cirurgia da enxaqueca, usando a habituação e o procedimento de von Frey mencionados acima. Os dados foram convertidos em % &quot;antialodínia&quot; usando a fórmula. % actividade =100 x (Valor pós-enxaqueca - valor de linha de base) / (15 g -valor de linha de base). Apenas os animais que não demonstraram diferenças na sua hipersensibilidade táctil comparados aos seus valores pré-cirugia de enxaqueca, foram usados em todos os estudos.
Após estabelecer os limiares de linha de base de retirada da pata, os animais foram retirados das câmaras de teste, a tampa da cânula de enxaqueca foi removida e os animais receberam uma injecção de uma mistura de mediadores inflamatórios (1 mM Histamina, 1 mM 5-HT [Serotonina], 1 mM Bradiquinina, 1 mM PGF2), ou de meio a 10 μΐ volume, via cânula de enxaqueca durante 5 a 10 segundos. O cocktail de mediadores inflamatórios (IM) foi feito de fresco no dia de cada experiência. A tampa da cânula de enxaqueca foi substituída, os animais foram recolocados nas câmaras de testes a que correspondiam, e os limiares de retirada da pata foram medidos em intervalos de 1 hora durante 6 horas. Os dados foram convertidos em % &quot;anti-alodínia&quot; através da 258 fórmula: % actividade =100 x (valor pós-lM - valor de linha de base pré-IM)/(15 g - valor linha de base pré-IM).
Dados de compostos seleccionados da invenção, obtidos com este modelo, são mostrados na figura 23, A aplicação de um caldo inflamatório (IS) na dura resultou numa diminuição do limiar de retirada da pata após estímulo com filamentos de von Frey. A administração de succinato de sumatriptano (1 mg/kg s.c.) 5 minutos antes da adição do caldo resultou na prevenção do desenvolvimento de alod+inia na pata traseira, como medido duas horas após administração do IS. De forma semelhante, o inibidor NOS não-selectivo L-NMMA (10 mg/kg i.v.) ou 42 e 97 (6 mg/kg i.v.) 10 minutos antes da adição de IS previne o desenvolvimento de alodínia da pata traseira. Assim, inibidores NOS não-selectivos como L-NMMA, ou inibidores nNOS mais selectivos (e.g., composto 97) or uma mistura de compostos nNOS/5HTiD/iB (e. g., composto 42) deveriam ser eficientes no tratamento da enxaqueca.
Exemplo 62: Ensaios de ligação Serotonina 5HTiD/iB
Ensaios de ligação 5-HTiD (rádio-ligando agonista) foram realizados usando membranas caudadas de bovino, de acordo com os métodos de Heuring e Peroutka (J. Neurosci 1987, 7: 894-903,) . Foram realizados ensaios de ligação de 5-HTiB (córtex cerebral de rato) (rádio-ligando agonista) de acordo com o método de Hoyer et al. (Eur. J. Pharmacol. 1995, 118: 1-12). Para o objectivo de análise de resultados, definiu-se o ligando especifico para cada receptor como a diferença entre o total ligado e o ligado não-específico, determinada na presença de um excessso de ligando não classificado. Os resultados expressam-se como uma percentagem do controlo específico ligante obtida na presença de compostos de teste. Valores de IC5o (concentração que causa uma inibição de metade do controlo de ligação específica) e coeficientes de Hill (nH) foram 259 determinados por regressão não-linear das curvas de competição, usando a equação de ajustamento de curvas de Hill, e as constantes de inibição (Ki) foram calculadas a partir da equação de Cheng Prusoff (Ki =IC5o/ (1+ (L/KD)), onde L =concentração de rádio-ligando no ensaio, e KD =afinidade do rádio-ligando para o receptor.
Outras incorporações
Embora a presente invenção tenha sido descrita com referência aos que são presentemente considerados os exemplos preferenciais, deve ser tido em conta que a invenção não se limita aos exemplos apresentados. Pelo contrário, a invenção tem a intenção de cobrir diversas modificações e arranjos equivalentes incluídos no âmbito das reivinidicações anexadas.
Outras incorporações são referidas nas reivindicações.
Lisboa, 23 de Fevereiro de 2011

Claims (5)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto de fórmula:
•R' (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste ou um pro-medicamento deste, caracterizado por, R1 ser H, um alquilo opcionalmente substituído Ci-6, um alquiarilo opcionalmente substituído C1-4, ou um alqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; tanto R2 como R3 são independentemente H, Hal, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquiarilo Ci_4 opcionalmente substituído, um heterociclilo com uma ligação intercalar C2-9 opcionalmente substituído, um alquiheterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, ou um alqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; e caracterizado por o pró-medicamento referido do composto de fórmula (I) ser um éster fenílico, um éster alifático (Cs-24) r um éster acilóxi-metílico, carbamato ou um éster aminoacídico; tanto R4 e R7 poderem ser independentemente H, F, alquilo C1-6, ou óxido de alquilo Ci-ε; substituído, substituído, substituído, substituído, R5 ser H, R5aC (NH)NH (CH2) r5 OU R5BNHC (S) NH (CH2) r5, no qual r5 é um número inteiro de 0 a 2, R5A é um arilo C6-io opcionalmente substituído, um alquiarilo Ci_4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente um alqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente um óxido de tioalquilo C1-6 opcionalmente um tioalquiarilo C1-4 opcionalmente um ariloílo opcionalmente substituído, um 2 5b tioalquil-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; R ser um tioalquióxido C1-6 opcionalmente substituído, um tioalquiarilo Ci_4 opcionalmente substituído, ou um tioalqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, caracterizado por tioalquióxido representar um grupo alquilo ligado através de uma ligação de enxofre ao grupo molecular que lhe deu origem, caracterizado por tioalqui-heterociclilo representar um grupo tioalquióxido substituído com um grupo heterocíclico; e por R6 ser H, ou R6AC (NH) NH (CH2) r6 ou R6BNHC (S) NH (CH2) r6, no qual r6 é um número inteiro de 0 a 2, R6A é um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um arilo Ce-ιο opcionalmente substituído, um alquilarilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-g opcionalmente substituído, um alqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, um óxido de tioalquilo Ci-6 opcionalmente substituído, um tioalquiarilo C1-4 opcionalmente substituído, um ariloílo opcionalmente substituído, um tioalquil-heterociclilo Ci_4 opcionalmente 5B ser um tioalquióxido C1-6 opcionalmente R tioalquilarilo C1-4 opcionalmente um tioalquil-heterociclilo C1-4 arilo C6-10 opcionalmente opcionalmente opcionalmente opcionalmente opcionalmente substituído; substituído, um substituído, ou opcionalmente substituído; R6B ser um opcionalmente substituído, um alquiarilo C1-4 substituído, um heterociclilo C2-9 substituído, um alquil-heterociclilo C1-4 substituído, um tioalquióxido C1-6 substituído, um tioalquilarilo C1-4 substituído, um ariloílo opcionalmente substituído, ou um tioalquil-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, no qual tanto R5 e R6 poderem ser H, mas não ambos em simultâneo.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por,
3 R ser H, um alquilo opcionalmente substituído Ci-6, um alquiarilo opcionalmente substituído C1-4, ou um alqui- heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; tanto R2 como R1 serem independentemente H, Hal, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquiarilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, um alquiheterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; tanto R2 3 e R4 poderem ser independentemente H, F, alquilo C1-6, ou óxido de alquilo C1-6,· 5Βλ R° ser H, R5AC(NH)NH(CH2)r5 ou R3tíNHC (S) NH (CH2) r5, no qual r5 um número inteiro de 0 a 2, R' 5A um arilo Ce-ic opcionalmente opcionalmente opcionalmente opcionalmente opcionalmente opcionalmente opcionalmente substituído, um alquilarilo C1-4 substituído, um heterociclilo C2-9 substituído, um alquil-heterociclilo C1-4 substituído, um óxido de tioalquilo Ci-6 substituído, um tioalquilarilo C1-4 substituído, um tioalquil-heterociclilo C1-4 substituído; R5 ser H, ou R6AC(NH)NH(CH2)r6 ou R6bNHC (S) NH (CH2) r6, no qual r6 é um número inteiro de 0 a 2, R6a é um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquilarilo C1-4 opcionalmente substituído, um heterociclilo C2-9 opcionalmente substituído, um alquiheterociclilo C1-4 opcionalmente substituído, um óxido de tioalquilo C1-6 opcionalmente substituído, um tioalquiarilo C1-4 opcionalmente substituído, um tioalquiheterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; 1 Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, 2 caracterizado por R5A ser tiometóxido, tioetóxido, tio-n- 3 propilóxido, tio-i-propilóxido, tio-n-butilóxido, tio-i- 4 3-tienilo, 2-furanilo, 3-furanilo, 2-oxazol, 4-oxazol, 5 butilóxido, tio-t-butilóxido, fenilo, benzilo, 2-tienilo, 4 2-tiazol, 4-tiazol, 5-tiazol, 2-isoxazol, 3-isoxazol, 4-isoxazol, 2-isotiazol, 3-isotiazol e 4-isotiazol.
4. Composto de acordo com a reinvindicação 1 ou 2, caracterizado por R6A ser metilo, fluorometilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, t-butilo, tiométoxido, tioetóxido, tio-n-propilóxido, tio-i-propilóxido, tio-n-butilóxido, tio-i-butilóxido, tio-t-butilóxido, fenilo, benzilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-furanilo, 3-furanilo, 2-oxazol, 4-oxazol, 5-oxazol, 2-tiazol, 4-tiazol, 5-tiazol, 2-isoxazol, 3-isoxazol, 2-isotiazol, 3-isotiazol e 4-isotiazol.
5. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por um ou mais dos grupos R1, R2 e R3 não serem H. 2, do
6. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou caracterizado por R1 ser (CH2)mi&gt;w no qual X1 é escolhido grupo constituído por: Í R1C _ «IA R , s-bL H .
|t c no qual tanto R1a como R1B serem, independentemente, H, OH, C02R1E, ou NR1fR1g, no qual tanto R1E, R1F e R1G, serem independentemente H, alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3_8 opcionalmente substituído, arilo Cê-io opcionalmente substituído, alquil-arilo Ci-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou alquil-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído ou Rlc e R1D em conjunto com o carbono ao qual estão ligados serem C=0; Z1 ser NH1h, NC(0)R1h, NC(0)0R1h, NC(0)NHR1h, NC(S)R1h, NC(S)NHR1h, NS(0)2R1h, o, S, S(0), ou S(0)2, no qual R1H é H, 5 um alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alquil-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9 ou um alquil-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; ml é um número inteiro de 2 a 6; nl é um número inteiro de 1 a 4; pl é um número inteiro de 0 a 2; e ql é um número inteiro de 0 a 5.
7. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por R2 ser (CH2)m2X2; no qual X2 é escolhido do grupo constituído por:
no qual tanto R2a como R2b serem, independentemente, H, alquilo C1-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3-8 opcionalmente substituído, arilo C6-io opcionalmente substituído, alquil-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou alquil-heterociclilo Ci_4 opcionalmente substituído tanto R como R serem, mdependentemente, H, OH, CO2R , ou NR2fR2g, no qual tanto R2E, R2f e R2G, serem independentemente H, alquilo C1-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3-8 opcionalmente substituído, arilo C6-10 opcionalmente substituído, alquil-arilo Ci_4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou alquil-heterociclilo Ci_4 opcionalmente substituído ou R2C e R2D em conjunto com o carbono ao qual estão ligados serem C=0; Z2 ser NR2h, NC(0)R2h, NC (0) 0R2h, NC(0)NHR2h, NC(S)R2h, NC(S)NHR2h, NS(0)2R2H, o, S, S(0), ou S(0)2, no qual R2h é H, um alquilo Ci_6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo C6-io opcionalmente 6 substituído, um alqui-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9 ou um alqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m2 é um número inteiro de 0 a 6; n2 é um número inteiro de 1 a 4; p2 é um número inteiro de 0 a 2; e q2 é um número inteiro de 0 a 5.
8. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por R3 ser (CH2)m3X3, no qual X3 é escolhido a partir do grupo constituído por: 'tj , uÇFyo _ % ( e j. no qual tanto R3a como R3B serem, independentemente, H, alquilo C1-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3-8 opcionalmente substituído, arilo C6-10 opcionalmente substituído, alqui-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou alqui-heterociclilo Ci_4 opcionalmente substituído tanto R3c como R3D serem, independentemente, H, OH, C02R3E, ou NR3fR3g, no qual tanto R3E, R3F e R3G, serem independentemente H, alquilo C1-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3-8 opcionalmente substituído, arilo C6-10 opcionalmente substituído, alquil-arilo Ci_4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-g, ou alquil-heterociclilo Ci-4 opcionalmente substituído ou R3C e R3D em conjunto com o carbono ao qual estão ligados serem C=0; Z3 ser NR3h, NC(0)R3h, NC(0)0R3h, NC(0)NHR3h, NC(S)R3h, NC(S)NHR3h, NS(0)2R3H, 0, S, S(0), ou S(0)2, no qual R3H é H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alqui-arilo Ci_4 opcionalmente substituído, 7 heterociclilo C2-9 ou opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 n3 é um número inteiro de 1 p3 é um número inteiro de 0 q3 é um número inteiro de 0 um alqui-heterociclilo C1-4 a 6; a 4; a 2; e a 5.
9. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por R1 ser (CH2)m3X1, no qual X1 é escolhido a partir do grupo constituído por:
no qual tanto R3c como R3D serem, independentemente, H, OH, C02R3E, ou NR3fR3g, no qual tanto R3e, R3f e R3g, serem independentemente H, alquilo C1-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3-8 opcionalmente substituído, arilo Cê-io opcionalmente substituído, alqui-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou alqui-heterociclilo Ci_4 opcionalmente substituído ou R e R em conjunto com o carbono ao qual estão ligados serem C=0; Z3 ser NC (NH) R3h, no qual R3H é H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Cê-io opcionalmente substituído, um alqui-arilo Ci_4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9 ou um alqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 a 6; n3 é um número inteiro de 1 a 4; p3 é um número inteiro de 0 a 2; e q3 é um número inteiro de 0 a 5, 8
10. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por R2 ser (CH2)m3X2, no qual X2 é escolhido do grupo constituído por:
no qual tanto R3c como R3D serem, independentemente, H, OH, C02R3e, ou NR3fR3g, no qual tanto R3E, R3F e R3G, serem independentemente H, alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3-8 opcionalmente substituído, arilo Cô-io opcionalmente substituído, alqui-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou alqui-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído ou R3c e R3d em conjunto com o carbono ao qual estão ligados serem C=0; Z3 ser NC(NH)R3h, no qual R3H é H, um alquilo C1-6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo C6-10 opcionalmente substituído, um alqui-arilo Ci-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9 ou um alqui-heterociclilo Ci-4 opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 a 6; n3 é um número inteiro de 1 a 4; p3 é um número inteiro de 0 a 2; e q3 é um número inteiro de 0 a 5,
11, Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por R3 ser (CH2)m3X3, no qual X3 é escolhido do grupo constituído por:
no qual 9 tanto R3c como R3d serem, independentemente, H, OH, C02R3e, ou NR3fR3g, no qual tanto R3E, R3F e R3G, serem independentemente H, alquilo Ci-6 opcionalmente substituído, ciclo-alquilo C3-8 opcionalmente substituído, arilo Cê-io opcionalmente substituído, alquil-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9, ou alquil-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído ou R3c e R3D em conjunto com o carbono ao qual estão ligados serem C=0; Z3 ser NC (NH) R3h, no qual R3H é H, um alquilo Ci_6 opcionalmente substituído, um cicloalquilo C3-8 opcionalmente substituído, um arilo Cê-io opcionalmente substituído, um alquil-arilo C1-4 opcionalmente substituído, heterociclilo C2-9 ou um alquil-heterociclilo C1-4 opcionalmente substituído; m3 é um número inteiro de 0 a 6; n3 é um número inteiro de 1 a 4; p3 é um número inteiro de 0 a 2; e q3 é um número inteiro de 0 a 5, 12. Composto de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por R2 ser r2J5 ^2J6 μ RZJ2 a no qual cada R2J2, R2J3, R2J4, r2j5 e r2j6 ^ independentemente, alquilo Ci-ε; OH, óxido de alquilo Ci-ε; SH; óxido de tioalquilo Ci-ε; halogeneto; NO2; CN; CF3; OCF3; NR2jaR2jb, em que cada R2Ja e R2Jb é independentemente H ou alquilo Ci-6; C (0) R2Jc, no qual R2Jc é H ou alquilo Ci_6, C02R2Jd, no qual R2Jd é H ou alquilo C1-6; tetrazolilo; C (0) NR2JeR2Jf, no qual cada R2Je e R2Jf é independentemente H ou alquilo Ci-β; OC (0) R2Jg, no qual R2Jg é um alquilo Ci-6; NHC(0)R2Jh é H ou alquilo Ci-6; S03H; S (0) 2NR2jiR2jj, no qual tanto R2ji e R2jj 10 são independentemente H ou alquilo Ci-6; S(0)R2jk, no qual R2Jk é um alquilo Ci-ε; e S(0)2R2J1, onde R2J1 é alquilo Ci-6,
13. Composto de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por R3 ser
no qual cada R3J2, R3J3, R3J4, R3J5 e R3J6 é, independentemente, alquilo Ci_6; OH, óxido de alquilo Ci-6; SH; óxido de tioalquilo Ci-6; halogeneto; N02; CN; CF3; OCF3; NR3JaR3Jb, em que cada R3Ja e R3Jb é independentemente H ou alquilo Ci-6,’ C (O) R3Jc, no qual R3Jc é H ou alquilo Ci-6, C02R3Jd, no qual R3jd é H ou alquilo Ci-ε; tetrazolilo; C (O) NR3jeR3jf, no qual cada R3je e R3jf é independentemente H ou alquilo Ci-6/ 0C(0)R3Jg, no qual R3Jg é um alquilo Ci-6; NHC(0)R3Jh é H ou alquilo Ci-6; S03H; S (0) 2NR3JiR3Jj, no qual tanto R3Ji e R3Jj são independentemente H ou alquilo Ci_6; S(0)R3Jk, no qual R3Jk é um alquilo Ci-6/ e S(0)2R3J1^ onde R3J1 é alquilo Ci-6,
14. Um composto, seleccionado a partir do grupo formado por: 2-etilo-l-(lH-indolo-5-ilo)-isotio-ureia; N-(1H- indolo-5-ilo)-tiofeno-2-carboxamidina; N-[1-(2-dimetilo-amino-etilo)-lH-indolo-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina; N-{1-[2-(l-metilo-pirrolidino-2-ilo)-etilo]-lH-indolo-6-ilo}-tiofeno-2-carboxamidina; 1-[1-2-diamino-etilo-amino-etilo)-lH-indolo-6-ilo)-tiofeno-2-carboxamidina; N-[3- (2-dimetilo-amino-etilo)-lH-indolo-5-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina; N-(1—{2—[2-(4-bromo-fenilo)-etiloamino]-etilo}-lH-indol-b-ilo)-tiofeno-2-carboxamidina; (+)-N-{1-[2-(l-metilo-pirrolidina-2-ilo)-etilo]-lH-indolo-6-ilo}-tiofeno-2-carboxamidina; (-)-N-(1-[2-(1-metilo-pirrolidina-2-ilo)-etilo]-lH-indolo-6-ilo)-tiofeno-2-carboxiamidina; 11 Ν-[1-(l-metilo-azepano-4-ilo)-lH-indolo-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina; e N-[1-(2-piperidino-l-ilo-etilo)-lH-indol-6-ilo]-tiofeno-2-carboxamidina.
15. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R1 ou R3 ser
no qual Z é NRX, sendo Rx metilo, 0 é um número inteiro de 0 a 3, p é um número inteiro de 1 a 2, q é um número inteiro de 0 a 2, r é um número inteiro de 0 a 1, s é um número inteiro de 1 a 3, u é um número inteiro de 5 a 7 e caracterizado por os referidos substituintes R1 ou R3 apresentarem 0 a 6 ligações duplas carbono-carbono ou 0 a 1 ligações duplas carbono-azoto.
16. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o referido composto inibir selectivamente a sintetase de óxido nítrico (nNOS), em detrimento da sintetase de óxido nítrico endotelial (eNOS) ou a sintetase de óxido nítrico indutível (iNOS).
17. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado por o referido composto inibir selectivamente nNOS em relação a tanto eNOS como a iNOS.
18. Composto de acordo com as reivindicações 1 ou 2, de fórmula:
H7 k5 caracterizado por X ser 0 ou S.
19. Composto de acordo com as reivindicações 1 ou 2, de fórmula:
13
14
21. Composto de acordo com a reinvindicação 1, escolhido a partir do grupo formado por:
15
22. Uma composição farmacêutica incluindo um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
23. Um medicamento contendo uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1 para o tratamento 16 de uma doença de mamíferos, em particular humana, causada pela actividade da sintetase de óxido nítrico (NOS).
24. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por a referida doença ser enxaqueca (com ou sem aura), dor de cabeça do tipo tensão crónica (CTTH), enxaqueca com alodínia, dor neuropática, dor após acidente vascular cerebral, dor de cabeça crónica, dor crónica, lesão aguda da coluna vertebral, neuropatia diabética, neuralgia trigeminal, nefropatia diabética, uma doença inflamatória, acidente vascular cerebral, lesão de reperfusão, traumatismo craneano, choque cardiogénico, danos neurológicos associados a enxertos de bypass da artéria coronária, adenomas hepáticos cancerígenos, demência associada a SIDA, neurotoxicidade, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, esclerose amiotrófica lateral, coreia de Huntington, esclerose múltipla, neutotoxicidade induzida por metamfetamina, toxicodependência, tolerância, dependência de, hiperalgesia devido a ou privação de, dependência, hiperalgesia, ou privação induzida por morfina/opióide, tolerância, dependência, ou privação face ao etanol, epilepsia, ansiedade, depressão, doença de défice de atenção por hiperactividade, ou psicose, em particular caracterizada por a referida doença ser acidente vascular cerebral, lesão de reperfusão, neurodegeneração, traumatismo craneano, danos neurológicos associados a enxertos de bypass da artéria coronária, enxaqueca (com ou sem aura), enxaqueca com alodínia, dor de cabeça do tipo tensão crónica, dor neuropática, dor pós-acidente vascular cerebral, hiperalgesia induzida por opióide, ou dor crónica.
25. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por o referido composto ser um indolo 3,5- 17 substituído e a referida doença ser enxaqueca ou dor de cabeça do tipo tensão crónica.
26. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por o referido medicamento incluir adicionalmente um opióide, em particular caracterizado por este ser alfentanilo, butorfanol, buprenorfina, dextromoramida, dezocina, dextropropoxifeno, codeína, dihidrocodeína, difenoxilato, etorfina, fentanilo, hidrocodona, hidromorfona, cetobemidona, loperamida, levorfanol, levometadona, meperidina, meptazinol, metadona, morfina, morfina-6-glucurónido, nalbufina, naloxona, oxicodona, oximorfona, pentazocina, petidina, piritramida, propoxilofeno, remifantanilo, sulfentanilo, tilidina ou tramadol.
27. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este incluir adicionalmente um anti-depressivo.
28. Medicamento de acordo com a reivindicação 27, caracterizado por o referido anti-depressivo ser (a) um inibidor selectivo da reabsorção da serotonina, em particular caracterizado por este ser citaloprame, escitaloprame, fluoxetina, fluvoxamina, paroxetina ou sertralina. (b) um inibidor da reabsorção de norepinefrina, em particular caracterizado por este ser amitriptilina, desmetilo-amitriptilina, clomipramina, doxepina, imipramina, óxido de imipramina, trimipramina; adinazolame, amiltriptilinóxido, amoxapina, desipramina, maprotilina, nortriptilina, protriptilina, aminoptina, butriptilina, demexiptilina, dibenzepina, dimetacrina, dotiepina, fluacizina, iprindolo, 18 lofepramina, melitraceno, metapramina, norclolipramina, noxiptilina, opipramol, perlapina, pizotilina, propizepina, quinupramina, reboxetina, ou tianeptina. (c) inibidor da reabsorção de noradrenalina/norepinefrina, em particular caracterizado por este ser atomoxetina, bupropriono, reboxetina ou tomoxetina. (d) um inibidor de dupla função na reabsorção de serotonina/norepinefrina, em particular caracterizado por o referido inibidor ser duloxetina, milnaciprano, mirtazapina, nefazodona ou venlafaxina. (e) um inibidor de oxidade de monoamina, em particular caracterizado por o referido composto ser amiflamina, iproniazida, isocarboxazida, M-3-PPC (Draxis), moclobemida, pargilina, fenelzina, tranilocipromina, ou vanoxerina. (f) um inibidor reversível de oxidase do tipo A, em particular caracterizado por o referido inibidor ser bazinaprina, befloxatona, brofaromina, cimoxatona ou clorgilina. (g) um tricíclico, em particular caracterizado por este ser amitriptilina, clomipramina, desipramina, doxepina, imipramina, maprotilina, nortriptilina, protriptilina ou trimipramina. (h) adinazolame, alaproclato, aminoptina, combinação de amitriptilina/clorodiazepóxido, atipamezolo, azamianserina, bazinaprina, befuralina, bifemelano, binodalina, bipenamol, brofaromina, caroxazona, cericlamina, cianopramina, cimoxatona, citaloprame, clemeprol, clovoxamina, dazepinilo, deanol, demexiptilina, dibenzepina, dotiepina, droxidopa, enefexina, estazolame, etoperidona, femoxetina, fengabina, fezolamina, fluotraceno, idazoxano, indalpina, indeloxazina, iprindolo, levoprotilina, 19 litio, litoxetina; lofepramina, medifoxamina, metapramina, metralindolo, mianserina, milnaciprano, minaprina, mirtazapina, montirelina, nebracetame, nefopame, nialamida, nomifensina, norfluoxetina, orotirelina, oxaflozano , pinazepame, pirlindona, pizotilina, ritanserina, roliprame, sercloremina, stiptilina, sibutramina, sulbutiamina , sulpirida, teniloxazina , tozalinona , timoliberina, , tianeptina, tiflucarbina , trazodona , tofenacina, tofisopame, toloxatona, tomoxetina, veraliprida, viloxazina, viqualina, zimelidina ou orzometrapina.
29. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este incluir adicionalmente um anti-epiléptico, em particular caracterizado por este ser carbamazepina, flupirtina, gabapentina, lamotrigina, oxcarbazepina, feniloina, retigabina, topiramato ou valproato.
30. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este incluir adicionalmente uma substância não esteróide com actividade anti-inflamatória (ΑΙΝΕ), sendo este em particular acemetacina, aspirina, celecoxib, deracoxib, diclofenac, diflunisal, etenozamida, etofenamato, etoricoxib, fenoprofeno, ácido flufenâmico, flurbiprofeno, lonazolac, lomoxicame, ibuprofeno, indometacina, isoxicame, cebuzona, cetoprofeno, cetorolac, naproxeno, nabumetona, ácido niflúmico, sulindac, tolmetina, piroxicame, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, meloxicame, metamizol, mofebutazona, oxifenobutazona, parecoxib, fenidina, fenilbutazona, piroxicame, propacetamol, propifenazona, rofecoxib, salicilamida, suprofeno, ácido tiaprofénico, tenoxicame, valdecoxib, 4-(4-ciclohexilo-2-metilo-oxazolo-5-ilo) -2- 20 fluorobenzeno-sulfonamida, N-[2-(ciclohexilóxi)-4- nitrofenilo]metano-sulfonamida, 2- (3,4-difluorofenilo)-4-(3-hidróxido-3-metilobutóxido)-5-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-3(2H)-piridazinona, ou 2-(3,5- difluorofenilo)-3-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-2-ciclopenteno-l-ona).
31. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este incluir adicionalmente um anti-arrítmico, um antagonista de GABA-B ou um agonista do receptor α-2-adrenérgico.
32. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este incluir adicionalmente um agonista do receptor de serotonina 5HT1D, em particular por este ser eletriptano, frovatriptano, naratriptano, rizatriptano, sumatriptano, ou zolmitriptano.
33. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este incluir adicionalmente um antagonista N-metilo-D-aspartato, em particular por este ser amantadina; aptiganel; besonprodil; budipina; conantocina G; delucemina; dexanabinol; dextrometorfano; dextropropoxifeno; felbamato; fluorofelbamato; gaciclidina; glicina; ipenoxazona; caitocefalina, cetamina, cetobemidona; lanicemina, licostinel; midafotel; memantina; D-metadona; D-morfina; milnaciprano; neramexano; orfenadrina; remacemida; sulfazocina; FPL-12,495 (metabolito racemida); topiramato; ácido (aR)-a-amino-5-cloro-1-(fosfonometilo)-lH-benzimidazolo-2-propanóico; ácido 1-aminociclopentano-carboxilico; ácido [5-(aminometilo)-2-[[[(5L)-9-cloro-2,3,6,7-tetrahidro-2,3-dioxo-ΙΗ-,5H-pirido[1,2,3-de]quinoxalino-5- ilo]acetilo]amino]fenóxido]-acético; ácido a-amino-2-(2- 21 fosfono-etilo)-ciclohexanopropanóico; ácido a-amino-4- (fosfonometilo)-benzenoacético; ácido (3E)-2-amino-4-(fosfonometilo)-3-heptenóico; ácido 3-[ (1E)-2-carbóxi-2- fenilo-etenilo]-4,6-dicloro-lH-indolo-2-carboxílico; sal de óxido-5 8-cloro-2,3-dihidropiridaziono[4,5-b]quinolino-1,4-diona com 2-hidróxi-N,N,N-trimetilo-etanaminio; Ν'-[2-cloro-5-(metilotio)fenilo]-N-metilo-N-[3- (metilotio)fenilo]guanidina; N'-[2-cloro-5- (metilotio)fenilo]-N-metilo-N-[3-[(R)-metilo-sulfinilo]fenilo]-guanidina; ácido 6-cloro-2,3,4,9-tetrahidro-9-metilo-2,3-dioxo-lH-indeno[1,2-b]pirazino-9-acético; ácido 7-clorotioquinurénico; ácido (3L,4aR,6L,8aR)-decahidro-β-(fosfonometilo)-3-isoquinolinocarboxílico; (-)-6,7-dicloro-l, 4-dihidro-5-[3-(metóxi-metilo)-5-(3-piridinilo)-4-H-l,2,4-triazol-4-ilo]-2,3-quinoxalinodiona; ácido 4,6-dicloro-3-[(E)-(2-oxo-l-fenilo-3-pirrolidinilineno)metilo]-lH-indolo-2-carboxilico; (3R,4L)-rel-3,4-dihidro-3-[4-hidróxido-4-(fenilometilo)-1-piperidinilo]-2H-l-benzopirano-4,7-diol; 2-[(2,3-dihidro-lH-indeno-2-ilo)amino]-acetamida; 1, 4-dihidro-6-metilo-5-[(metiloamino)metilo]-7-nitro-2,3-quinoxalinodiona; ácido [2-(8,9-dioxo-2,6-diazobiciclo[5,2,0]non-1- (7)eno-2-ilo)etilo]-fosfónico; (2R,6L)-1,2,3,4,5,6-hexahidro-3- [(2L)-2-metóxipropilo]-6,11,ll-trimetilo-2,6-metano-3-benzazocina-9-ol; ácido 2-hidróxilo-5- [[(pentafluorofenilo)metilo]amino]-benzóico; 1- [2- (4- hidróxilofenóxi)etilo]-4-[(4-metilofenilo)metilo]-4-piperidinol; 1-[4-(lH-imidazol-4-ilo)-3-butinilo]-4- (fenilometilo)-piperidina; 2-metilo-6-(feniloetinilo)- piridina; 3-(fosfonometilo)-L-fenilalanina; ou 3,6,7-tetrahidro-2,3-dioxo-N-fenilo-lH,5H-pirido[1,2,3-de] quinoxalina-5-acetamida. 22
34. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este medicamento incluir um antagonista de colecistocinina B, ou um antagonista da substância P.
35. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este medicamento incluir adicionalmente um composto anti-inflamatório, em particular por este ser aspirina, celecoxib, cortisona, deracoxib, diflunisal, etoricoxib, fenoprofeno, ibuprofeno, cetoprofeno, naproxeno, prednisolona, sulindac, tolmetina, prioxicame, ácido mefenâmico, meloxicame, fenilbutazona, rofecoxib, suprofeno, valdecoxib, 4-(4-ciclohexilo-2-metiloxazol-5-ilo)-2-fluorobenzeno-sulfonamida, N-[2-(ciclohexilóxi)-4-nitrofenilo]metano-sulfonamida, 2-(3,4-difluorofenilo)-4-(3-hidróxido-3-metilobutóxido)-5-[4-metilo- sulfonilo)fenilo]-3(2H)-piridazinona, ou 2-(3,5- difluorofenilo)-3-[4-(metilo-sulfonilo)fenilo]-2-ciclopenteno-l-ona.
36. Medicamento de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por este medicamento incluir um antagonista de canal de cálcio do tipo L sensível a DHP, um antagonista de canal de cálcio do tipo N sensível a omega-conotoxina, um antagonista de canal de cálcio do tipo P/Q, um antagonista da cinase de adenosina, um agonista do receptor de adenosina Ai, um antagonista do receptor de adenosina A2a, um agonista do receptor de adenosina A3, um inibidor da desaminase de adenosina, um inibidor do transporte do nucleósido de adenosina, um agonista do receptor vanilóide VR1, um agonista do canabinóide CB1/CB2, um antagonista do receptor AMPA, um agente de abertura do canal de potássio KAtp, um agente de abertura do canal de potássio Kvi,4, um agente de abertura do canal de potássio activado por Ca2+, um agente de abertura do canal de potássio SK, um agente de 23 abertura do canal de potássio BK, um agente de abertura do canal de potássio IK, um agente de abertura do canal de potássio KCNQ2/3, um antagonista muscarinico M3, um agonista muscarinico Ml, um agonista parcial/antagonista muscarinico M2/M3, ou um antioxidante. Lisboa, 23 de Fevereiro de 2011 1/23 Figura 1 Protecçào d« culturas corticaiS pelos compostos! 9 (lo), .12 íl«i}, e 18 (!£} após exposição a MMDA % mos:t.® celular.
Cor.cen tração 2/23 Figura 2 Frotaeçâo das células do hipocampo da privação da de morte
&amp; xo- .&lt;&amp;* tfp' o^% tf!9 o^° ^φβψς0&gt; ** .n**·*** QídPíf Oic Condição (composto Ic d o composto »; composto IcL è o composto 12? a o composto I£ ê ô composto 1.8} 3/23 Figura 3 Inibição do influxo de çàioio mediado por MD&amp; por ráriass concentrações do composto 12
4/23 Figura 4
{composto Id é o composto 12) 5/23
{composto Id é o composto 12} 6/23 Fioura 6 £| ratinhos não lesionados (n~15) Π ratinhos lesionados+veiculo (n~15)
j-ujã j£ iKáfsí.ht-o oom«k. &lt;âos3raçit«?m cio cTOpsstr- 1‘ci no 4o XX.&amp; avw.à x Λιΐϊ^ν Λ Ηο.ΐίΛ ?χ$ιάν» λ 1»,»Αο *i.*taoxmÁ.fc»S. &lt;t« «5τ^&lt;ο·»λ«?χ dto» . ires .„. Círt|ã:ís-£ Xci ΰύ Vôicíxi.Xi&amp;v j?&lt;&gt;&gt;:.$»«* ss . &lt;ai. Tíllr* OpO« Z«fíS*.0, l*15) s &quot;f1ffP * Ι'.ΡΟΙ vsfôus ratinhos hão l&amp;HiQhadóS RSsis sspiíiísino· vS/$tfsratinhos lesionados tratados com veículo n Steèto. ci«s fiôi nuscdi^nís p&amp;drião fu&amp;i&amp;utatit.. ratinhos não lesionados 15 43±D,d ratinhos lesrenadoa+veículo 15 03 f &amp;2 W ratinhas l«eíôr^s*C^st:&lt;J41 íftg&amp;g 15 02*0.1 ns ratinhos lesionaâts+Ojfst .143 pg/feg 15 Qi fOd 08 ratinhas ..lesionados'# Cspst 14
5 PS^Í! 15 0,340,3 ns M * . vtT íifhito' 'co«l ci çio^tfiíj^tWt ciç&gt; !£&lt;3 rx£i C.ÍO 3fTXo iil Xvxtâ-td ft *»&lt;&gt;:«;* ««.£&gt;&lt;&gt;» x'&lt; ,l»í&gt;A« 4;x^tw&lt;x&amp;te&amp;jc;:i« ^♦t&amp;xíKvwoN'.*, &lt;&amp;&lt;&gt;*&lt; **&lt;ϊ&amp;ϊϊΛΦ*·«· ••Cttvpsrfc Xdt ·«*«. •voXoíaÍ.p· £oa;*h\ st &gt; &lt;$., $.· rnáhri &amp;$*&amp;« Iorão „ fffP « Ο,ΟΟΤVâ^ifS ratinhos hão lesionados rs : s|c si^iíicsU» v&amp;m$ ratinhos lesionados tratados com veículo (o composto Id é o composto 12} 7/23 Figura 7 H xatinhs aio lesionados1 ía*15) ΓΊ ratinhos lesionados f veículo -MS).
Fiaurs. 7 Sf*iae &lt;$« s»ii wsíiswfò 4¾ &lt;#$$*;··'!&lt;«$» '.· ^ Ua^aàSisa «MdwMUisi sa xásíbíi*, OfspSíSí £&lt;t í*i :;&amp;&lt;fei*Ustsaa« e,o, 5 feia apSa à I «vàa fffP c 0.001 vems ratinhos oâo lesionados fíéiitóí sis^aístir* ratinhos lesionados· * vsiajla o Tôs£« da Hall f &amp;«&lt;áià-Tia j* &lt;?\.y, v.mÀ4ítc&lt;::y .ratinhos;não lesionados n fedèos ratinhos iesionaáesif veiculo 1« 2,l'±'â.;2 ,fíf ?&amp;fcirthés: Í»»íí&gt;m-&gt;s4a« * 0M£&gt;sfc |£j( ^ 15 1J?±04ps raipirthvís i*&gt;ss, :&gt;&gt;&gt;&amp;£** * ÇSk^s^ tíl P ÍTíQlJkQ} 11 2.otô3ns atátiftfras' lés&amp;6&amp;a?£a&amp; * Csqp&amp;t íd (δ ÍTSJj/k-g) 1® 2.1 à 04 ns . !&amp;$£* XV .&lt;£s -síe sajfSv l&lt;k a» T&amp;áto &amp;&amp; Hai,* ãv&amp;ías^ Xh l^sãvv ivi;jiw&gt;, £^pst £3 £oi áí^iíiistsaíiw »%«·; $-.jrí» &amp;pòs a 1δ.»ϋ&lt;3 fffP &lt; 0.00H«f^í«iâiiaàôÈ não ieí|«sâdbs ns i ato ;a^iíicau»o veagòS'ratMos lesionados * vúoxb (O composto M é o composto 12). 8/23 Figu ra 8 &lt;s D 0 Ή SM .-&quot;v
-M Λ &lt;5 ratinhos aâo lesionados ín^XS) ratinhos lesionados .+ veícsalo (n&quot;15) J Ό
Figm t Efeito de dosagas do C*ç&gt;sfc Id co fio avaliado ihôi-as spòs a lesfe tramátíc» craneasa m. «tattos. 2aç*t Id foi adsMstiáds,.s,c, 5 siíi spòs â lasso,. fffP&lt; 0,001 ysísas ratinhos não lesionados *P'« aes vermratinhos lesionados * veiculo ns: sfe iip&amp;sati*s ysms ratinhos lesionados + veículo r» 5*e&gt;5t.&gt;v c-ç f iç: sjsíiiectíiX íct.p. (linidÃ-d-eã: ãiír&amp;ifcx&amp;Ei&amp;s) ratinhos nào lesionados 18 4J±01 ratinhos lesionados * veícalo IS 0.3 ±0.1 tft Éâtir.,io3 lesionados * ®st 10 (1019¾¾} IS 0.3 i 0,2 ns ía&amp;sfcôs iésionafe i ®ç&amp;'Mpfngfc0 1S 1;.S±Ô.S * ratinhos iesicaa&amp;s * c»s i Id (6 mgíkg} 1S 1.7 ± 0.6 * sabeia v. Efeito # dçssgM ds capai íd m Jeste do fie avaliado 4-tos após a-Xesàs traasátiça rnseasa «st riúahos. Qspst Io foi sMnisixaào s.o, § aís s^ós s ksào. ttt?* c.Gòi vsrsns ratinhos nio lesionados *P« ô,CSms/s.ratinhos· lesionados t meuls os:s&amp;s signifisati-ío wsus ratinhos lesionados + veículo (O composto Id à o composto 12} 9/23 Figura 9 ratinhos saio lesionados (jfIS}
□ tatiife lesionados f Véktilô ín~15) || ratinhos lesionados t ospst lá (n~iS) r» ratinhos nlo lesionadcs 15 motos ratinhos lesionados 4 veíeslo 15 14.5*3.2 ttt ratinhos issionade-s 4 osgst lál mg/tS 15 1314 i 2Mm ratinhos lesionados + cspst ícUmglkg 15 21J9 ± 2^ * ratiahos buátm^i + ^pst id 6 mgikgi 15 κ '·' :!« ί:ΐί:;.·ί:|:: :-:í 14:¾ ;ds&gt; .õífeíi.y-i.. .·: :::&gt;-.:&gt; : --:--:::¾ .·: ií-íf-Si: &gt;:&lt;:: -. Cw:&gt;i:-:: :·:! ·:::: ··.·· S .5:&gt;«-·&gt;.« .·;:. :&gt; :::- : .-:- : -:·::::: :':. tffP &lt; 0.001 versas ratinhos nào lesionados *P&lt;?0.05 W?#fS'ra?iahos lesi&amp;aados tiatadcs sesmojis nsi »s« sigMíiúiívs VemiS íátiiíhM· lesionadas batadas vsiçsle
?.ί&lt;Γα:::ϊ 9: Sr-:::/::-:;: ;‘fc: :-:i:·:: \'Wpí:;Í: ::: :::: ; : :: :::: .·: .!·. : ::::::..:, -o:'·:::: .: ÍS-SS-í ír.ssítôvigS· iííiarw-i::;: SSi ^ϊΐΐί&amp;ϊ-ί., ÇispsH Si! ;;y v»i':.:ii.U: íSí.aiS ^Οί:Οΐί:;:·:':\.ί'·:ί«4&gt;:ί S,C. :: kííVj a iv.sâa. fffP&lt; 0.001 v&amp;ms ratinhos nao lesionados * P&lt;ÕB5 váràlS íatMw iesimdos tratades mma# ns ;·»*&gt; siirmficstíiíi «BfsttèiatMes lasissades testados coa mcelo CO composto I&lt;d é o composto 12) 10/23 Figura 10 M íatinks nào lesionados Cjí~151 D míiúm lesionados t meulô (n=i5l
Γ:'Λ 15- efeito fe Ktesagsas tte erapst Id eo teste de feli, aValistfe· 4 hoeas apòs a leste tsaamèties! sraaeaoa sík ratinlso. O cajwt Id · velcsfe fora»' afciaistradas s, c. S aifc apôs sa lesão. ftfP« 0.001 veraa/s.ratinhos nlo.lesionados * P* 0.05 mws-iitíÉstè Imm&amp;m f «í«bíô ns : fe« si^ifisatiw ν»«5»«'·ϊ»ί1ώ68 jesioiiacfcs * wkuis n '£aate 4« tt»Úaedians £ d_. p» (u«X4ãííq a &amp;xhi· ti-àí-d. á.«) ratinhos m lesionados 1§ 5.8 ±0.1 íâtife Im«afa t mmh 15 2.7 ±03 tft ratinhos lesionados 4 csptid- 1 mgftg 1S 2.?i0.4rts satishas lesionadas fesptid ãBtgífcg 15 5,8 ±0.4 ns rsti&amp;w IssioBaáos t ufstid. 8«g/kg 15 3,040.1 * Ta5»la· VIX &lt;àc &lt;sss&amp;st lú íís d* «ali. ivalzíwte 4 h^as após a iesãs ·ϊ»ι 0 ç.Mpst Xd ΐ&gt; ν&gt;5Λ·-^&gt;!.ο £·μ&gt;λ xctotj ítj ^:í.r«&lt;i&lt;js a.· ç.- ó wã)i apóa &gt;a Χϋ&amp;άΦ,; fffP &lt; 0.001 versus ratinhos nla lesionados * p« 0.06 v6fâis íatisaes leáesâòss 4 misíík ns;nfc siçritíisatíve v&amp;m$ rtóisáos lesíáMchs 4 «icdo (O composto Xá é o composto 12) 11/23 Figura 11 I ratinhos nàs lesionados (»45} o ratinhos lesionados + veículo (n-15)
eiguE-a li: Efeito de dosagemde C&amp;ípst Xá ».a temperatura corporal, avaliado :i. hora apos a lesâ® trauMâtica eraaeaaa de ratinho. p CMpisfc M 9 o veíoela fora» adRinistrad&amp;s s- c. 5 «ir: após a lerão. ttfp &lt; o.OBi vs*si«rrâfciah&lt;&gt;s mõ lêsíonsáos ns ;,nsa; giçttiíícatívc mrsvsz&amp;iíúiQs lesionados * .veículo « Terrier atura corporal; mediana ~ d ,p, (gC) ratinhos mo lesionados 15 3S.S±0.0S ratinhos lesionados 4- veíealo 1§ ististo IssicMàs t orei M1 mgftg m 34,4 *0.3? ns ratinhos lesionados * ofst Id 3 mgfkg 15 MJ £442 «5 ratinhos lêsíosados t ®pst M S mgíhg 15 34JtÔ-34 *$ Tabela VXTI Efeito de dosagem do Cropst íd na temperatura corporal, avaliado 1 hora após a lesão teauraiitãea crartéasia d® ratinho. O Ciíçpafc Id s o vaiçúlo fetais administrados s, e, 5 mia apàs a lesfe. tttp&lt; 0.001 versas ratinhos são lesionados re-afc/tógrófimiw vwsussãtínhos lesionados * Yiíouk {O composto Id é o composto 12) 12/23 Figura 12 H ratiéos uso Issiosate (8=151 O ratinhos lesionados 4 têicslo fn=l$) 11 ratinhos lesionados 4 ofst Id (n=iSJ
FigtiKà 12; SííivO :&lt;? dcassÇ·®::: do çtapst ,;d a* tosíporíósi^d corpsífai í-valiodo ho&gt;:i;o spód &lt;; teaíla· ΐ va;»&gt;:òí icd &lt;:í:3;;ssv::&gt;. «fi: 'isdiorjv % ódoot Tíi (ai ν·ϊaod,íd Íoífíí;: !KÍ:síftààdo'ãdf'ó í-,:v. 0 »}iw a;Ca;. d Àdaàí:. fP &lt; QG5 if«s«s»ràtiitó nâo ksicBades * p&lt; oos rnsus^ii^m Manados 4 mmk as't ^ MsraustatiÉos lesionados 4 váeád n Teropsarafcura oorporal meíilaxya .±ã,p. £&quot;' C} xúMm m lesionados 1S metoji ntinks losiosados 4 monio 16 37,1+ 0,« t ratlÉca ksíosiès 4 sfst lá (1 16 36,7 i 0,14· * ratinhes lesionados 1 cspst Idp mgfm\ 13 3S.7+0.17 * lÊMm lesionados + «st Idc^msacio 16 36.6 ± 0.12 ns 'Fsfcft.i.a IX.: f.tó dãfíCÇjS «a ίϊΚί ρί( ΐ. ! d -U;: t.íí-ídp·Íí.V.ÍJ.ΐ';A Wí.VJVííS.t «Sai Í.í:d;&gt; ·' :.:.:: . a- a :( : : : ad: : : a::: ':: : (Cá:-. O : : d Ou ’á': : : :' fof;;3W í;dsd.:'!is:.'::í;d&lt;'&gt;a íi.d. 5 ::(::: ajCx ai .Iííííã*·. f pç 0.05 veraus-ratishes sàc issicnados *? &lt; 0.05 -mau® ratMos lesionados * wioaio fts: .*» «ipf&amp;atiw wstèt» ratinhos Issionaàcs 4 wiculo (O composto Id § ô composto 12} 13/23 'Figura 13 H ratinhos não lesíaMáos (n=IS) Ί S 8, J. 3 a i | s' â i* 8. □ ratinhos lesionados * veiculo (&amp;=1S) §§ ratinhos lesionados * Cs»t lá (η=1δ) ttt —t
Wígnm 13; Sfels» 4* 4o aapsv ·Κ1 n» pcrds da peso cQxeor«i, •svalisdç 24 horss .·.·;:···'..:·: issàv· ·:: r ·.·:;· rxtiíihc, 0 csspxt 2d OU VΛ1 ΐΟχϋΚ áàSXKi/StiáádS; S&lt;;^ S JSix agòs X ièsâ-0. fffP&lt; Qflot wsys ratinhos filo lesionados ** F «0 01 vsrsus ratinhos lesionados f vèicdo n$ :-m s^h^ve wswsrstMos lesionados 4 veiculo n . geíd«..d».p«eo corporsi: raedxaaa ± d-p- íg) ratinhos não lesionados 15 a ,04 0.2 ratinhos lesionados t veículo 14 5,6 ±5$ ftf ratinhos lesionados * &amp;pst Id{t mgíRg) 15 S ,540.3 m ratinhos ièá«a&amp;s t G$st II Pmgíkgí 15 3.94Q.S ** ratinhos lesionados * fâfst It{Smg$8| 15 5,0 ±OJ srjs íábels. X ; ifísito áft dcsagos; do císpsi Xd no parda da peso corporal,, so-ííii.ads·; 2-5 ósr«s após lesão Çr&amp;um&amp;tics osso-sana ers saelnbo·. O cspaç Ja c'4: psIcbíXís foras- ãddfsfs.fcBdóds a-c. ,S s',ir&gt; saóa a feseo. tff p « 0,001 v&amp;m ratinhes não lesionados ” P «0,01 versas ratinhos lesionados * veículo m: aro rifiifisa^ wsas ratinhos leaiôfiaáas * veiculo {O çpmpQsdp lá. è α composto 12J 14/23 Figura 14 Efeito do composto 12 na amplitude de pico de população em células CAI
Figura 14,- a) asçpeMaímostra Ό pico &lt;3® população em células CM normais do hipocampo após o estimulo dos colaterais de Schaffer com impulsos de 2 milisegundos. h) Aplicação do composto 12 (direita) não modifica os potenciais' de campo normais nas células GAl normais. 15/23 Figura 15 Efeito do composto 12 na amplitude do pico de população et» células GÃl após a exposição de OGD
Figura 15; a) esquerda, SS m eélclss controla, b) castro, PS após 10 aisctos do όθβ íjfioxte das eéigias de controle}. endireita; £&quot;S ea eéinlas protegidas de 000 (as caltilas da controlo sobrevivam} s 0,3 »M dê 03^. &gt; Οο d r~f 5*ao δ4* J 3 v 1 * 0' 16/23 Figura 16
r-Ni id vivos mortos PROT Fico d® População (O composto Id é o composto 12) 17/23 Figura 17
Vivos Mortos PRDT 7~N1 1d Coloração do TTC (0 composto Id é o composto 12} 18/23 Figura 18 Modelo de Modídia Táctil de Cbang por SUL t«-7~i8diss t®**0eáa l«Ssaa í®3O,SÔ,S0&lt; 320. ÍSO&amp;240j»íií
ívttpO* ΐ-&gt; J£Wf vis &gt;ν.ί:^Α\ΐλ , «1 5^?wÃcl5 ο£βίλο£ο do r.oy/^s !ii/íi£:
&quot;ΤΤΗΓ&quot; S«?(» &lt;í·' aJMxni.» t:Ãotit ussnSs íi i Mwntas tie van ?'r.:y· i:sj.5.l:í-;«:c:t Modelo do Hiperalgesia Térmica de Chmg por SSX ijjts í=-36«itt t-30,6¾ W, 120&amp; ]80 wi.
X £ ΞΏΕ 1 feâeiifiiçáv &lt;âa j Àdsjur.iíitiricso ás&gt; j 1 íl&lt;&lt; ,'its J Jsas«iss»· Ííe f âCtafcsrc çv.ír via j rj»t» vísifãs as» «*ur* íK | sskoç&amp;ís &lt;àa, psta l1®' ! | C-OMC1 iMíiiadVí ds çaioy 19/23 Figura 19
Composto 1i{-) é o composto 32{-}; composto li{+) é o composto 32(+1 20/23 Figura 20 &amp; lí Reversão da alodínia táctil por lí{+} (“) apôs ligação do nervo espinal
Θ ' 1 i 1 Composto li(~) é o composto 32 {·-} ; composto li{t) é o composto 32( + ) 21/23 2X 0 composto I&lt;i reverte a hiperaigesia térmica em ratos com SNL L5/.L6 X.atênà±a na remoção da pata (seg)
Tempo (minutos) após injeeção i. p. (0 composto Xd ê o composto 12) 22/23 Figura 22 Composto Id reverte a Mperestesia em ratos com SNI, 1.5/1,6 Limít&amp; de remoção da pata. (g)
(0 composto Id c o composto 12) 23/23 Figura 23 Bloqueio da alodínia induzida pela sopa inflamatória (IS) pelos inibidores de MOS e sumatripfcano , 2 horas após aplicação Limite de privação &lt;g&gt;
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Families Citing this family (143)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0400895D0 (en) * 2004-01-15 2004-02-18 Smithkline Beecham Corp Chemical compounds
PE20060373A1 (es) 2004-06-24 2006-04-29 Smithkline Beecham Corp Derivados 3-piperidinil-7-carboxamida-indazol como inhibidores de la actividad cinasa de ikk2
KR20130136010A (ko) 2005-04-13 2013-12-11 네우렉슨 인코포레이티드 Ｎｏｓ 저해 활성을 갖는 치환된 인돌 화합물
US8063071B2 (en) 2007-10-31 2011-11-22 GlaxoSmithKline, LLC Chemical compounds
US7605122B2 (en) * 2005-07-29 2009-10-20 Millennium Medical Spa Human chorionic gonadotropin (hCG) formulations for facilitating weight loss and body contouring
WO2007024944A1 (en) * 2005-08-25 2007-03-01 Schering Corporation Imidazole derivatives as functionally selective alpha2c adrenoreceptor agonists
EA017915B1 (ru) * 2006-02-07 2013-04-30 Х. Лундбекк А/С Kcnq-открыватели калиевых каналов, применяемые для лечения или ослабления симптомов шизофрении
JP5350219B2 (ja) * 2006-04-13 2013-11-27 ニューラクソン，インコーポレーテッド Ｎｏｓ阻害活性を有する１，５および３，６−置換インドール化合物
CA2649454A1 (en) * 2006-04-13 2007-10-25 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Methods of modeling migraine pain and identifying candidate compounds for the treatment of migraine
CA2681764A1 (en) * 2007-03-23 2008-10-02 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Methods of modeling migraine pain and identifying candidate compounds for the treatment of migraine
AR065804A1 (es) 2007-03-23 2009-07-01 Smithkline Beecham Corp Compuesto de indol carboxamida, composicion farmaceutica que lo comprende y uso de dicho compuesto para preparar un medicamento
US8173813B2 (en) * 2007-03-23 2012-05-08 Neuraxon, Inc. Quinolone and tetrahydroquinolone and related compounds having NOS inhibitory activity
EP2018854A1 (en) * 2007-07-27 2009-01-28 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Novel combinations of neramexane for the treatment of neurodegenerative disorders
EP2220074A4 (en) * 2007-11-16 2012-01-04 Neuraxon Inc 3,5-SUBSTITUTED INDOL COMPOUNDS WITH NOS AND NOREPINEPHRINE RECOVERY-HEMDERING EFFECT
WO2009064505A1 (en) * 2007-11-16 2009-05-22 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Methods for treating visceral pain
NZ586082A (en) * 2007-11-16 2013-03-28 Neuraxon Inc Indole compounds and methods for treating visceral pain
UA105182C2 (ru) * 2008-07-03 2014-04-25 Ньюрексон, Інк. Бензоксазины, бензотиазины и родственные соединения, которые имеют ингибирующую nos активность
EP2322223A4 (en) * 2008-07-23 2012-08-22 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd THERAPEUTIC AGENT AGAINST MIGRAINE
US9891219B2 (en) * 2008-10-10 2018-02-13 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for treating neuromyelitis optica (NMO) by administration of eculizumab to an individual that is aquaporin-4 (AQP4)-IgG autoantibody positive
US8198268B2 (en) * 2008-10-31 2012-06-12 Janssen Biotech, Inc. Tianeptine sulfate salt forms and methods of making and using the same
KR101204108B1 (ko) * 2009-02-09 2012-11-22 주식회사 지엔티파마 5-벤질아미노살리실산 유도체 또는 이의 염의 의약 용도
JP2012520257A (ja) 2009-03-10 2012-09-06 グラクソ グループ リミテッド Ｉｋｋ２阻害剤としてのインドール誘導体
WO2011158108A2 (en) 2010-06-16 2011-12-22 Purdue Pharma L.P. Aryl substituted indoles and the use thereof
EP2415471A1 (en) * 2010-08-03 2012-02-08 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. Use of sigma ligands in opioid-induced hyperalgesia
CN103237790B (zh) * 2010-09-29 2014-12-03 爱思开生物制药株式会社 新型甲基环己烷衍生物及其用途
CN103561573A (zh) 2011-04-26 2014-02-05 印第安纳大学研究与技术公司 酪氨酸磷酸酶及其在调节参与结核分枝杆菌之病理学的酶的活性中的用途
US9181185B2 (en) 2011-10-31 2015-11-10 Purdue Pharma L.P. Heteroaryl compounds as sodium channel blockers
RU2475479C1 (ru) * 2011-12-23 2013-02-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации "Медицинский радиологический научный центр" (ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России) Вазоконстрикторное средство
US20140051718A1 (en) * 2012-04-16 2014-02-20 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and Methods Comprising Celecoxib or Related Compounds and Dextromethorphan
US8652527B1 (en) 2013-03-13 2014-02-18 Upsher-Smith Laboratories, Inc Extended-release topiramate capsules
WO2014139388A1 (en) * 2013-03-14 2014-09-18 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel indole derivatives useful as anti-diabetic agents
US9101545B2 (en) 2013-03-15 2015-08-11 Upsher-Smith Laboratories, Inc. Extended-release topiramate capsules
US10874664B2 (en) 2013-11-05 2020-12-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11590124B2 (en) 2013-11-05 2023-02-28 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9474731B1 (en) 2013-11-05 2016-10-25 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11123343B2 (en) 2013-11-05 2021-09-21 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11253492B2 (en) 2013-11-05 2022-02-22 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11534414B2 (en) 2013-11-05 2022-12-27 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10799497B2 (en) 2013-11-05 2020-10-13 Antecip Bioventures Ii Llc Combination of dextromethorphan and bupropion for treating depression
US11439636B1 (en) 2013-11-05 2022-09-13 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10894046B2 (en) 2013-11-05 2021-01-19 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11478468B2 (en) 2013-11-05 2022-10-25 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10894047B2 (en) 2013-11-05 2021-01-19 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10966974B2 (en) 2013-11-05 2021-04-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11311534B2 (en) 2013-11-05 2022-04-26 Antecip Bio Ventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11357744B2 (en) 2013-11-05 2022-06-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11617747B2 (en) 2013-11-05 2023-04-04 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11141416B2 (en) 2013-11-05 2021-10-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10898453B2 (en) 2013-11-05 2021-01-26 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11090300B2 (en) 2013-11-05 2021-08-17 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10813924B2 (en) 2018-03-20 2020-10-27 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion and dextromethorphan for treating nicotine addiction
US20160324807A1 (en) 2013-11-05 2016-11-10 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9457023B1 (en) 2013-11-05 2016-10-04 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US9763932B2 (en) 2013-11-05 2017-09-19 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10940124B2 (en) 2019-01-07 2021-03-09 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9402843B2 (en) 2013-11-05 2016-08-02 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods of using threohydroxybupropion for therapeutic purposes
US10966942B2 (en) 2019-01-07 2021-04-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11524007B2 (en) 2013-11-05 2022-12-13 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9867819B2 (en) 2013-11-05 2018-01-16 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11213521B2 (en) 2013-11-05 2022-01-04 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11969421B2 (en) 2013-11-05 2024-04-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11426370B2 (en) 2013-11-05 2022-08-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9707191B2 (en) 2013-11-05 2017-07-18 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11253491B2 (en) 2013-11-05 2022-02-22 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11298351B2 (en) 2013-11-05 2022-04-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11185515B2 (en) 2013-11-05 2021-11-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11596627B2 (en) 2013-11-05 2023-03-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10966941B2 (en) 2013-11-05 2021-04-06 Antecip Bioventures Ii Llp Bupropion as a modulator of drug activity
US20160361305A1 (en) 2013-11-05 2016-12-15 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods comprising bupropion or related compounds for sustained delivery of dextromethorphan
US11426401B2 (en) 2013-11-05 2022-08-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9861595B2 (en) 2013-11-05 2018-01-09 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10945973B2 (en) 2013-11-05 2021-03-16 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11273133B2 (en) 2013-11-05 2022-03-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10512643B2 (en) 2013-11-05 2019-12-24 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11576877B2 (en) 2013-11-05 2023-02-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as modulator of drug activity
US11229640B2 (en) 2013-11-05 2022-01-25 Antecip Bioventures Ii Llc Combination of dextromethorphan and bupropion for treating depression
US11510918B2 (en) 2013-11-05 2022-11-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11364233B2 (en) 2013-11-05 2022-06-21 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11129826B2 (en) 2013-11-05 2021-09-28 Axsome Therapeutics, Inc. Bupropion as a modulator of drug activity
US11576909B2 (en) 2013-11-05 2023-02-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10864209B2 (en) 2013-11-05 2020-12-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11433067B2 (en) 2013-11-05 2022-09-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11571399B2 (en) 2013-11-05 2023-02-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11571417B2 (en) 2013-11-05 2023-02-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10772850B2 (en) 2013-11-05 2020-09-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11020389B2 (en) 2013-11-05 2021-06-01 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11147808B2 (en) 2013-11-05 2021-10-19 Antecip Bioventures Ii Llc Method of decreasing the fluctuation index of dextromethorphan
US11207281B2 (en) 2013-11-05 2021-12-28 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11344544B2 (en) 2013-11-05 2022-05-31 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10105327B2 (en) 2013-11-05 2018-10-23 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphane and related pharmacodynamic effects
US11007189B2 (en) 2013-11-05 2021-05-18 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11197839B2 (en) 2013-11-05 2021-12-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9968568B2 (en) 2013-11-05 2018-05-15 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10688066B2 (en) 2018-03-20 2020-06-23 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion and dextromethorphan for treating nicotine addiction
US11298352B2 (en) 2013-11-05 2022-04-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11382874B2 (en) 2013-11-05 2022-07-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10780064B2 (en) 2019-01-07 2020-09-22 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11058648B2 (en) 2013-11-05 2021-07-13 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11273134B2 (en) 2013-11-05 2022-03-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10786469B2 (en) 2013-11-05 2020-09-29 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10980800B2 (en) 2013-11-05 2021-04-20 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11123344B2 (en) 2013-11-05 2021-09-21 Axsome Therapeutics, Inc. Bupropion as a modulator of drug activity
US11497721B2 (en) 2013-11-05 2022-11-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11541021B2 (en) 2013-11-05 2023-01-03 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11065248B2 (en) 2013-11-05 2021-07-20 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10933034B2 (en) 2013-11-05 2021-03-02 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9457025B2 (en) 2013-11-05 2016-10-04 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods comprising bupropion or related compounds for sustained delivery of dextromethorphan
US11419867B2 (en) 2013-11-05 2022-08-23 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11291638B2 (en) 2013-11-05 2022-04-05 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10874665B2 (en) 2013-11-05 2020-12-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11291665B2 (en) 2013-11-05 2022-04-05 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11096937B2 (en) 2013-11-05 2021-08-24 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US20200338022A1 (en) 2019-01-07 2020-10-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11285146B2 (en) 2013-11-05 2022-03-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US20220233470A1 (en) 2013-11-05 2022-07-28 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11234946B2 (en) 2013-11-05 2022-02-01 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9700528B2 (en) 2013-11-05 2017-07-11 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11541048B2 (en) 2013-11-05 2023-01-03 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9408815B2 (en) 2013-11-05 2016-08-09 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11517543B2 (en) 2013-11-05 2022-12-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10080727B2 (en) 2013-11-05 2018-09-25 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11617728B2 (en) 2013-11-05 2023-04-04 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11191739B2 (en) 2013-11-05 2021-12-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10105361B2 (en) 2013-11-05 2018-10-23 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11285118B2 (en) 2013-11-05 2022-03-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10874663B2 (en) 2013-11-05 2020-12-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10881657B2 (en) 2013-11-05 2021-01-05 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9198905B2 (en) 2013-11-05 2015-12-01 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for reducing dextrorphan plasma levels and related pharmacodynamic effects
MA40759A (fr) 2014-09-26 2017-08-01 Pfizer Modulateurs de rorc2 de type pyrrolopyridine substitué par un méthyle et trifluorométhyle et leurs procédés d'utilisation
RU2599102C2 (ru) * 2014-12-31 2016-10-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ") Способ количественного определения лекарственных средств
AR110963A1 (es) 2017-02-07 2019-05-22 Dae Woong Pharma Compuestos heterocíclicos, su método de preparación y composición farmacéutica que los comprende
RU2663465C1 (ru) * 2017-10-05 2018-08-06 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр радиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ радиологии" Минздрава России) Способ фармакологической защиты от ионизирующих излучений
US10925842B2 (en) 2019-01-07 2021-02-23 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
KR20220137085A (ko) 2020-02-04 2022-10-11 마인드셋 파마 인크. Cns 장애의 치료를 위한 세로토닌성 사이키델릭 작용제로서의 3-피롤리딘-인돌 유도체
EP4129293A4 (en) * 2020-03-27 2024-04-03 Kyoto University INHIBITOR OF NERVE CELL DEGENERATION
EP4132920A1 (en) * 2020-04-09 2023-02-15 Disarm Therapeutics, Inc. Indazole derivatives as inhibitors of sarm1
RU2744571C1 (ru) * 2020-04-10 2021-03-11 Общество с ограниченной ответственностью "ВладМиВа"(ООО "ВладМиВа") Дифармакофорные соединения ноотропно-анальгетического действия и способ их получения
WO2022197719A1 (en) * 2021-03-15 2022-09-22 Tonix Pharmaceuticals Holding Corp. Tianeptine oxalate and naloxone combination for the treatment of major depressive disorder
WO2023044556A1 (en) * 2021-09-24 2023-03-30 Enveric Biosciences Canada Inc. Aminated psilocybin derivatives and methods of using
CN113717091B (zh) * 2021-09-28 2023-03-10 南京医科大学 一类吲哚衍生物及其制备方法和应用
US11717518B1 (en) 2022-06-30 2023-08-08 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion dosage forms with reduced food and alcohol dosing effects
US11730706B1 (en) 2022-07-07 2023-08-22 Antecip Bioventures Ii Llc Treatment of depression in certain patient populations
CN117338772B (zh) * 2023-11-22 2024-04-09 徐州医科大学 一种药物组合物及其在制备用于预防和/或治疗重性抑郁障碍的药物中的应用

Family Cites Families (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2460947A1 (fr) * 1979-07-13 1981-01-30 Roussel Uclaf Nouveau derives n-substitues du tetrahydropyridinyl-indole, leurs sels, procede de preparation, application a titre de medicaments et compositions les renfermant
ZW19381A1 (en) * 1980-08-12 1983-03-09 Glaxo Group Ltd Heterocyclic compounds
BE889931A (fr) * 1980-08-12 1982-02-11 Glaxo Group Ltd Derives indoliques, leur preparation et leurs applications en tant que medicaments
GR79215B (pt) 1982-06-07 1984-10-22 Glaxo Group Ltd
HU196752B (en) 1983-12-06 1989-01-30 Glaxo Group Ltd Process for production of medical compositions containing indole-derivatives and these compounds
GB8332437D0 (en) 1983-12-06 1984-01-11 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB8419575D0 (en) 1984-08-01 1984-09-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
US5234942A (en) * 1984-10-19 1993-08-10 Ici Americas Inc. Heterocyclic amides and leucotriene antagonistic use thereof
US5270333A (en) 1986-01-28 1993-12-14 Glaxo Group Limited Indole derivatives
EP0253190B1 (en) 1986-07-16 1992-12-30 ENIRICERCHE S.p.A. Partially retro-inverted tuftsin analogues, method for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
US4879295A (en) 1986-09-27 1989-11-07 Sawai Pharmaceutical Co., Ltd. N-tetrazolyl thiazolecarboxyamide derivatives and their use
DE3831888A1 (de) * 1988-09-20 1990-03-29 Troponwerke Gmbh & Co Kg Arzneimittel zur behandlung von apoplexia cerebri
US5200410A (en) * 1988-09-20 1993-04-06 Troponwerke Gmbh & Co. Medicaments for the treatment of cerebral apoplexy
IL96891A0 (en) 1990-01-17 1992-03-29 Merck Sharp & Dohme Indole-substituted five-membered heteroaromatic compounds,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
RU2160736C2 (ru) 1990-06-07 2000-12-20 Зенека Лимитед Производные индола и их физиологически приемлемые соли и сольваты, способы их получения, лекарственное средство для лечения или профилактики клинических состояний, для которых показан прием агониста "5-нт1-подобного" рецептора, и способ его получения
GB9013845D0 (en) 1990-06-21 1990-08-15 Glaxo Group Ltd Process
TW263508B (pt) 1991-02-12 1995-11-21 Pfizer
DK0619805T3 (da) 1991-11-25 2000-06-05 Pfizer 5-(Hetero-eller carbocyclylamino)-indolderivater, deres fremstilling og anvendelse som 5-HT1-agonister
DE69214633T2 (de) 1992-06-19 1997-05-22 Agfa Gevaert Nv Thermisch übertragbare fluoreszierende Verbindungen
ES2055651B1 (es) 1992-07-20 1995-03-01 Vita Invest Sa Procedimiento para la obtencion de nuevas amidinas derivadas de 3-aminoetilindoles.
IL106445A (en) 1992-07-30 1998-01-04 Merck Sharp & Dohme History of 1,2,4-Trans-Triazole 4-Transform, Preparation and Pharmaceutical Preparations Containing Them
JPH06212151A (ja) 1993-01-14 1994-08-02 Toyo Ink Mfg Co Ltd 有機エレクトロルミネッセンス素子
US5468768A (en) 1994-01-06 1995-11-21 Bristol-Myers Squibb Company Antimigraine derivatives of indolylcycloalkanylamines
CZ288897A3 (cs) * 1995-03-20 1998-02-18 Eli Lilly And Company V poloze 5-substituovaný 3-(1,2,3,6-tetrahydropyridin-4-yl)indol a 3-(piperidin-4-yl)indol a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
BR9509985A (pt) 1995-12-12 1998-11-03 Omeros Med Sys Inc Solução para irrigação e método para inibição de dor inflamação e esparmo
US5846982A (en) 1996-06-14 1998-12-08 Eli Lilly And Company Inhibition of serotonin reuptake
GB9619284D0 (en) 1996-09-16 1996-10-30 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
WO1998011895A1 (en) 1996-09-18 1998-03-26 Eli Lilly And Company A method for the prevention of migraine
KR20000069131A (ko) * 1996-11-25 2000-11-25 데이비드 엠 모이어 알파-2 아드레날린수용체 아고니스트로서 유용한 구아니디닐 헤테로사이클 화합물
US5998438A (en) * 1996-11-26 1999-12-07 Allelix Biopharmaceuticals, Inc. 5-cyclo indole compounds
US6090839A (en) 1996-12-23 2000-07-18 Merck & Co., Inc. Antidiabetic agents
EP0875513A1 (en) * 1997-04-14 1998-11-04 Eli Lilly And Company Substituted heteroaromatic 5-HT 1F agonists
US6166030A (en) 1997-05-05 2000-12-26 Astra Aktiebolag Compounds
US6380201B1 (en) 1997-08-05 2002-04-30 Eli Lilly And Company Methods of treating or ameliorating the symptoms of common cold or allergic rhinitis with serotonin 5-HT1F agonists
US6277870B1 (en) 1998-05-04 2001-08-21 Astra Ab Use
AU4831899A (en) 1998-06-30 2000-01-17 Eli Lilly And Company 5-HT1F agonists
US6562809B1 (en) 1998-09-18 2003-05-13 Nps Allelix Corp. 3-bicycloindole compounds
US6255334B1 (en) 1998-10-30 2001-07-03 Pfizer Inc 5HT 1 receptor agonists and metoclopramide for the treatment of migraine
EP1140074A1 (en) 1998-12-23 2001-10-10 NPS Allelix Corp. Indole and indolizidine derivatives for the treatment of migraine
JP2000280626A (ja) 1999-03-31 2000-10-10 Fuji Photo Film Co Ltd 画像記録媒体
GB9919411D0 (en) 1999-08-18 1999-10-20 Zeneca Ltd Chemical compounds
SE9903997D0 (sv) 1999-11-03 1999-11-03 Astra Ab New compounds
EP1303483B1 (en) * 2000-08-21 2008-04-23 Pacific Corporation Novel thiourea derivatives and the pharmaceutical compositions containing the same
WO2002072549A1 (en) * 2001-03-12 2002-09-19 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Functionalized heterocycles as modulators of chemokine receptor function and methods of use therefor
IL158300A0 (en) * 2001-04-27 2004-05-12 Bristol Myers Squibb Co Bisarylimidazol derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
DE10121215A1 (de) * 2001-04-30 2002-10-31 Merck Patent Gmbh Dihydro-imidazo[4,5-e]indol- und 7H-Pyrrolo[3,2-f]chinoxalin Derivate als nikotinische Acetylcholinrezeptor Liganden und/oder serotonerge Liganden
ES2187300B1 (es) * 2001-11-14 2004-06-16 Laboratorios Del Dr. Esteve, S.A. Derivados de sulfonamidas, su preparacion y su aplicacion como medicamentos.
SE0104248D0 (sv) 2001-12-14 2001-12-14 Astrazeneca Ab Method of treatment
JP2005526079A (ja) 2002-03-15 2005-09-02 サイプレス バイオサイエンス， インコーポレイテッド 内蔵痛症候群を処置するためのｎｅおよび５−ｈｔ再取り込み阻害剤
FR2837711B1 (fr) 2002-03-28 2005-05-06 Agronomique Inst Nat Rech Utilisation de la lactobacillus farciminis pour la prevention ou le traitement de pathologies digestives
US7365069B2 (en) * 2002-04-10 2008-04-29 Bexel Pharmaceuticals Inc. Pyrimidone derivatives
AU2003257300B2 (en) 2002-08-07 2010-01-21 Neuraxon Inc. Amino benzothiazole compounds with NOS inhibitory activity
GB0223367D0 (en) 2002-10-09 2002-11-13 Astrazeneca Ab Therapeutic treatment
ES2222828B1 (es) 2003-07-30 2006-04-16 Laboratorios Del Dr. Esteve, S.A. Derivados de 1-sulfonilindoles, su preparacion y su aplicacion como medicamentos.
US7767817B2 (en) 2003-09-05 2010-08-03 Binghe Wang Water soluble boronic acid fluorescent reporter compounds and methods of use thereof
WO2005033079A1 (ja) * 2003-09-30 2005-04-14 Eisai Co., Ltd. ヘテロ環化合物を含有する新規な抗真菌剤
JP2005129430A (ja) 2003-10-27 2005-05-19 Konica Minolta Holdings Inc 光電変換材料用半導体、光電変換素子及び太陽電池
JP2005200915A (ja) * 2004-01-15 2005-07-28 Nice Corp 集合住宅における住戸構造
ITTO20040125A1 (it) * 2004-03-01 2004-06-01 Rotta Research Lab Nuove amidine eterocicliche inibitrici la produzione di ossido d'azoto (no) ad attivita' antinfiammatoria ed analgesica
WO2005090282A1 (en) 2004-03-12 2005-09-29 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Androgen receptor modulator compounds and methods
US20050256182A1 (en) 2004-05-11 2005-11-17 Sutter Diane E Formulations of anti-pain agents and methods of using the same
KR20130136010A (ko) * 2005-04-13 2013-12-11 네우렉슨 인코포레이티드 Ｎｏｓ 저해 활성을 갖는 치환된 인돌 화합물
JP5350219B2 (ja) 2006-04-13 2013-11-27 ニューラクソン，インコーポレーテッド Ｎｏｓ阻害活性を有する１，５および３，６−置換インドール化合物
WO2009064505A1 (en) 2007-11-16 2009-05-22 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Methods for treating visceral pain
NZ586082A (en) 2007-11-16 2013-03-28 Neuraxon Inc Indole compounds and methods for treating visceral pain
EP2220074A4 (en) 2007-11-16 2012-01-04 Neuraxon Inc 3,5-SUBSTITUTED INDOL COMPOUNDS WITH NOS AND NOREPINEPHRINE RECOVERY-HEMDERING EFFECT
WO2010132072A1 (en) 2009-05-15 2010-11-18 Neuraxon, Inc Treatment or prevention of migraine by dosing at aura

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