PT1809328E

PT1809328E - Composição de mano-oligossacárido para diminuição da gordura corporal

Info

Publication number: PT1809328E
Application number: PT5734832T
Authority: PT
Inventors: Ichiro Asano; Shigeyoshi Fujii; Katsuhito Mutoh; Izumi Takao; Kazuto Ozaki; Kenichi Nakamuro; Toshiyuki Matsushima
Original assignee: Kraft Foods Global Brands Llc; Ajinomoto General Foods Inc
Priority date: 2004-09-17
Filing date: 2005-04-14
Publication date: 2013-04-08
Also published as: RU2007114280A; SI1809328T1; AU2005290262B2; PL1809328T3; DK1809328T3; US20080213425A1; JP2006083127A; CA2580652A1; ES2404694T3; KR20070083684A; CN101087621A; KR101203778B1; EP1809328A4; UA92898C2; WO2006036208A1; IL181858A0; EP1809328A1; EP1809328B1; CN101087621B; BRPI0515411A

Description

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DESCRIÇÃO

"COMPOSIÇÃO DE MANO-OLIGOSSACÁRIDO PARA DIMINUIÇÃO DA GORDURA CORPORAL" A invenção presente diz respeito à utilização de composições de mano-oligossacáridos e a alimentos e bebidas que contenham mano-oligossacáridos para diminuir a gordura corporal e em particular a gordura abdominal. Os mano-oligossacáridos podem ser produzidos por hidrólise de materiais contendo mananos e podem ser incorporados em alimentos e bebidas.

ESTADO DA TÉCNICA

Nos últimos anos, a utilização de dietas ociden-talizadas, a falta de exercício e um maior stress têm resultado em maiores aumentos de peso e em obesidade. O excesso de peso e a obesidade são factores de risco para doenças tais como a hiperglicemia, a hipertensão e a diabetes. Têm sido proporcionadas dietas de remediação para limitar o aumento de peso e para tratar a obesidade. Muitas destas dietas remediais são produtos naturais ou são derivadas de produtos naturais. A indústria do café é um exemplo de uma indústria que processa e produz grandes quantidades de produtos 2 ΡΕ1809328 naturais. Os fabricantes de café solúvel e de café enlatado descarregam grandes quantidades de café mordo gasto. Estes residuos são na sua maior parte incinerados ou descartados como efluente industrial. Os grãos de café e os residuos de café resultantes contêm β-manano insolúvel em água. Os mano-oligossacáridos (MOS) provenientes da hidrólise do manano do café são oligossacáridos não digeríveis. A invenção presente utiliza manano para proporcionar composições que têm o efeito de diminuir a gordura.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

De acordo com a invenção presente proporciona-se uma composição que inclui um monossacárido cujo grau de polimerização é de 2 a 10 unidades de monossacárido, em que pelo menos 60 por cento, em peso, dos monossacáridos sejam manose, para utilização na diminuição das razões de gordura no corpo ou da gordura abdominal num ser humano. A composição de mano-oligossacáridos pode ser adicionada a composições alimentares, em particular a bebidas, e consumida por via oral. A administração dos mano-oligossacáridos é eficaz para diminuir a gordura corporal total, tal como expressa pelas razões de gordura corporal, em pelo menos 4 %, preferivelmente 4 % a 8 %, a gordura abdominal em pelo menos 10 %, preferivelmente 10 % a 15 %, originando perda de peso.

Preferivelmente pelo menos 70 por cento, em peso, 3 ΡΕ1809328 dos monossacáridos são manose, e de preferência pelo menos 80 por cento, em peso, dos monossacáridos são manose. O mano-oligossacárido também pode incluir um ou mais monossacáridos tais como glucose, galactose, frutose e misturas destes. A composição de mano-oligossacárido pode ser incorporada em alimentos, bebidas, rações, remédios e cosméticos. A composição de mano-oligossacáridos pode ser proporcionada sob a forma de um hidrolisado que se forma por hidrólise de um material com manano. 0 material com manano pode provir de fontes que incluam grãos de café crus, grãos de café torrados, café mordo gasto, bagaço de copra, flocos de copra, coco, palmeira Haura, fios, konjak, lirio, narcisos, alcaçuz, goma de alfarroba, goma de guar, e misturas de todos estes. Num aspecto importante, a fonte do material com manano é proveniente de materiais de café e em particular de café moido gasto. Foram descritas composições de manano derivadas de goma de guar e eficazes como agentes de diminuição de massa corporal em Takahashi, H. et al., Comp. Biochem. Physiol. Vol. 107A, No. 1, págs. 255-260, 1994 . 0 hidrolisado contendo mano-oligossacáridos pode ser produzido utilizando métodos de hidrólise tais como uma hidrólise ácida, uma hidrólise térmica, uma hidrólise enzimática, uma hidrólise por fermentação microbiológica, e combinações destes métodos. Pode levar-se a cabo uma hidrólise térmica a uma temperatura de 200°C a 220°C, preferivelmente a 210°C. Os hidrolisados podem ser descorados, desodorizados e/ou concentrados levando ao contacto o 4 ΡΕ1809328 hidrolisado com carvão activado, com resinas adsorventes, resinas de permuta iónica, membranas de permuta iónica, e combinações de todas estas.

Quando o mano-oligossacárido é apresentado numa composição de um alimento, a composição do alimento pode incluir pelo menos 1 grama de mano-oligossacárido por 100 gramas de composição de alimento. Podem incorporar-se os mano-oligossacáridos numa variedade de alimentos sólidos e/ou de bebidas. Num aspecto importante, incorporam-se os mano-oligossacáridos em café. A composição de mano-oligossacárido pode ser produzida por um método que inclua hidrolisar-se um material com manano, numa quantidade suficiente para se formar um hidrolisado contendo mano-oligossacáridos, em que cada mano-oligossacárido possua um grau de polimerização de entre 2 e 10 monossacáridos, com pelo menos 60 por cento, em peso, destes monossacáridos sendo manose, preferivelmente sendo 70 por cento, em peso, dos monossacáridos manose, e de preferência sendo 80 por cento, em peso, dos monossacáridos manose. 0 material com manano pode ser proveniente de grãos de café crus, grãos de café torrados, café moido gasto, bagaço de copra, flocos de copra, coco, palmeira Huacra, fios, konjak, lirios, narcisos, alcaçuz, goma de semente de alfarroba, goma de guar, e misturas destes. Uma fonte preferida do material manano é café moido gasto. O hidrolisado contendo mano-oligossacáridos é produzido recorrendo a um método de hidrólise tal como uma 5 ΡΕ1809328 hidrólise ácida, uma hidrólise térmica, uma hidrólise enzimática, uma hidrólise por fermentação microbiana, e misturas destas. Um método de hidrólise preferido inclui a hidrólise térmica. Pode desodorizar-se o hidrolisado resultante, descorar-se e/ou concentrar-se, recorrendo a carvão activado, resinas de adsorção, resinas de permuta iónica, membranas de permita iónica, e combinações destes. Pode utilizar-se o hidrolisado resultante como composição aquosa ou pode secar-se ou liofilizar-se.

Pode administrar-se o mano-oligossacárido por via oral a uma taxa de entre 1 e 10 gramas ao dia, preferivelmente de entre 2 e 8 gramas ao dia, e mais preferivelmente de entre 3 a 6 gramas ao dia, como parte de uma composição alimentar, tal como por exemplo uma bebida tal como café.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS A Figura 1 ilustra alterações da área relativa abdominal total de gordura calculadas a partir de fotografias de varrimentos em tomografia computadorizada, num grupo de controlo e num grupo a MOS. A Figura 2 ilustra alterações da área relativa abdominal subcutânea de gordura num grupo de controlo e num grupo a MOS. A Figura 3 ilustra alterações da área relativa 6 ΡΕ1809328 abdominal visceral de gordura num grupo de controlo e num grupo a MOS. A Figura 4 mostra o efeito de MOS sobre a lipase pancreática. A Figura 5 ilustra o efeito de MOS sobre os teores em triacilgliceróis no plasma humano após administração oral de uma dieta com elevado teor em gordura.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA São proporcionadas composições cuja utilização origina efeitos de diminuição de gordura e que podem ser consideradas possuidoras de uma funcionalidade fisiológica na diminuição da obesidade. As composições são de oligos-sacáridos que incluem sobretudo unidades de manose. Estes oligossacáridos baseados em manose ou mano-oligossacáridos são não carcinogénicos, e têm baixas calorias; eles são utilizados selectivamente pela microflora intestinal, suprimem os elevados teores lipídicos intestinais, e promovem a adsorção de minerais.

Definições São proporcionados mano-oligossacáridos que são oligossacáridos. Tal como se utiliza neste documento, "oligossacáridos" refere-se a polímeros de monossacáridos com um grau de polimerização (DP) de entre 2 e 10, mais 7 ΡΕ1809328 preferivelmente um DP de 2 a 9, e mais preferivelmente ainda um DP de 2 a 6.

Os mano-oligossacáridos incluirão amiúde uma pluralidade de oligossacáridos com graus diferentes de polimerização.

Material com Manano

Tal como se utiliza neste documento, "manano" refere-se a polissaccáridos que incluam residuos do monossacárido manose. Os residuos de manose podem assumir a forma de D-manose, galactomanano, glucomanano, e misturas destes. Os polissacáridos incluindo manose podem ser inteiramente formados por residuos do monossacárido manose ou podem ser uma combinação de residuos do monossacárido manose com os de outros monossacáridos, tais como, por exemplo, galactose, glucose e frutose.

Podem produzir-se mano-oligossacáridos pela hidrólise de manano. Incluem-se nas fontes de manano os grãos de café crus, os grãos de café torrados, o café mordo gasto, o bagaço de copra, os flocos de copra, coco, palmeira Huacra, fios, konjak, lirio, narcisos, alcaçuz, goma de semente de alfarroba, goma de guar, e as misturas destes. O bagaço de copra e os flocos de copra podem ser obtidos de coco. A palmeira Huacra das Abreacea Sul-Africanas (Palmae), o manano do inhame, e o manano do ΡΕ1809328 inhame Chinês proporcionam todas elas uma fonte de material com manano.

Num aspecto importante, os grãos de café torrados ou crus e o café moido gasto que resta depois de se extrair o café são fontes preferidas de manano. Podem utilizar-se quaisquer tipos de grãos de café de uma origem qualquer. Incluem-se nos exemplos de café que se podem utilizar, os Arábica, Robusta, Liveria e outros semelhantes. Pode utilizar-se um único tipo de café ou misturas de diferentes tipos de cafés. Também se podem utilizar grãos de café com qualidade inferior, ou dimensão, incluindo aqueles que possuam valor comercial menor ou nulo. Noutro aspecto importante, pode obter-se o manano a partir dos residuos de extracção de café provenientes de tratamentos de extracção de café torrado e moido nos processos convencionais de produção de café liquido e de café instantâneo.

Hidrólise do Material com Manano

Pode levar-se a cabo a hidrólise do material com manano utilizando métodos de hidrólise que podem incluir hidrólise ácida, hidrólise térmica, hidrólise enzimática, hidrólise por fermentação microbiana, e misturas destas. Os métodos de hidrólise utilizando ácido e/ou altas temperaturas estão descritos nos Pedidos de Patente Japonesa Nos. Sho 61-96947 e Hei 02-200147. Além disto, estão descritos métodos de hidrólise ácida na Patente U.S. 9 ΡΕ1809328 Ν°. 4.508.745 e métodos de hidrólise a alta temperatura na EP 0 363.529.

Pode hidrolisar-se café gasto moido num reactor com ou sem ácido e com ou sem pressão. Também se pode levar a cabo a hidrólise em qualquer outro recipiente adequado para este objectivo de processamento, tal como por exemplo, um reactor em pistão. A hidrólise é eficiente para se hidrolisar manano que possa ter um DP de entre 10 e 40 ou maior, a oligossacáridos com um DP de 2 a 10.

Pode levar-se a cabo a hidrólise enzimática suspendendo material com manano num meio aquoso e adicio-nando-lhe enzimas apropriados comercialmente disponíveis, tais como por exemplo, celulase e pode levar-se a cabo a hidrólise enzimática utilizando condições reaccionais padrão conhecidas por qualquer indivíduo com conhecimentos médios na técnica.

Também se pode utilizar a fermentação microbiana para hidrolisar material com manano. Pode formular-se o material com manano com micro-organismos que produzem enzimas capazes de hidrolisar manano. Podem utilizar-se os micro-organismos que produzem enzimas tais como a celulase e a hemicelulase. Um exemplo de um micro-organismo apropriado são os Basidiomyceta.

Os hidrolisados resultantes do material com ma- 10 ΡΕ1809328 nano podem ser usados tal e qual ou serem mais purificados com carvão activado, resinas de adsorção, resina de permuta iónica, membranas de permuta iónica, e as suas combinações. A descoloração e/ou a desodorização de hidrolisados pode ser conseguida levando ao contacto o hidrolisado com carvão activado ou com qualquer outro tipo de material semelhante de resina de adsorção. Pode conduzir-se a dessalinização e a desacidificação utilizando resinas de permuta iónica e/ou membranas de permuta iónica. Também se podem utilizar combinações destes métodos. Pode conduzir-se uma purificação adicional a teores de dosagem superiores quando o hidrolisado se destina a ser utilizado em determinados tipos de alimentos ou bebidas.

Testes Clínicos

Em testes levados a cabo com preparações de MOS, tanto a massa corporal como o perímetro abdominal tendiam a diminuir nos grupos a MOS às 12 semanas, em comparação com os valores de partida. Em média, as perdas de massa corporal variavam entre 0,5 e 1,0 kg, e o perímetro da cintura diminuiu entre 1,5 e 3,0 cm. As razões da massa corporal por DEXA diminuíram entre 4 % e 8 % nos grupos a MOS às 12 semanas, em comparação com os valores iniciais, e eram significativamente diferentes do grupo a placebo no final do período de observação. A área total de gordura abdominal e a área de gordura visceral determinadas por varrimento em tomografia computadorizada diminuíram significativamente nos grupos a MOS em comparação com o grupo a 11 ΡΕ1809328 placebo às 12 semanas, com diminuições das medições de gordura de em média 10 % a 15 %, a partir do inicio do estudo. A caracterização da gordura por um varrimento em

tomografia computadorizada mede numa base relativa demonstrando as alterações significativas na região abdominal. Os resultados mostraram que as bebidas de café contendo MOS diminuíam as razões de gordura corporal em seres humanos que, ao longo do tempo, podem reflectir-se numa menor massa corporal.

Embora não se pretenda que seja considerada nenhuma dependência em relação a uma teoria qualquer, uma diminuição da gordura abdominal pode ser devida a uma ou mais das seguintes razões: (1) o ácido propiónico, que é um produto da fermentação intestinal de MOS, pode suprimir a sintese de ácidos gordos no figado, (2) os MOS podem inibir a absorção dos lipidos no intestino delgado provocando uma acumulação de gordura a metabolizar no corpo e (3) a excreção de gordura através do volume fecal pode aumentar diminuindo deste modo a gordura abdominal.

EXEMPLOS EXEMPLO 1: Ensaios Clínicos com MOS - Estudo 1

1.Preparação de MOS

Hidrolisa-se café moído gasto num reactor mantido a uma temperatura de 220°C. Descora-se o produto hidroli- 12 ΡΕ1809328 sado com carvão activado em pó (Umehachi; Taihei Chemicals, Osaka), e dessaliniza-se com resina de permuta catiónica (SKIB; Mitsubishi Chemicals, Tokyo) e com resina de permuta aniónica (WA30; Mitsubishi Chemicals). Eliminam-se os mo-nossacáridos utilizando cromatografia sobre carvão activado e um gradiente em passos de água e 10,0 % (em volume) de etanol. Concentra-se a solução purificada num evaporador rotativo e liofiliza-se. Utiliza-se a mistura de MOS (grau de polimerização dp2: 21,2 %, dp3: 22,2 %, dp4: 21,2 %, dp5: 16,2 % e dp6 ou mais: 19,2 %) para um teste clinico. 2. Bebidas do Teste

As composições de bebidas de café são como se segue.

Tabela 1

g/100 mL Café de Controlo Café MOS sólidos de café \—1 \—1 1, 1 edulcorante artificial 0,017 0, 017 MOS -- 1, 0 sólidos de xarope de milho 1,0 --

Embala-se a bebida de café numa garrafa de 900 mL em PET (poli (tereftalato de etileno) ) . A bebida em teste contém 1 g de MOS em 100 mL. Cada sujeito ingere 300 mL da bebida de café em teste (contendo 3,0 g de MOS) ao dia. Adicionam-se sólidos de xarope de milho à bebida de café de 13 ΡΕ1809328 controlo a título de placebo, em vez de MOS. Preparam-se as bebidas de café em teste de modo a possuírem mesmo teores de sólidos de café, de modo a que não haja nenhuma diferença de sabor entre elas. Ambas as bebidas também são preparadas de modo a igualizar os seus conteúdos em cafeína, uma vez que se sabe que a cafeína aumenta o consumo energético. 0 teor em cafeína é respectivamente de 45,4 mg/100 mL no café de controlo e de 46,8 mg/100 mL no café em teste. 3. Horário dos Sujeitos e dos Testes.

Este estudo é concebido como um estudo duplamente cego, controlado com placebo. Os voluntários são submetidos a um exame médico e físico. Recolhem-se amostras de sangue em jejum para análise dos lípidos do sangue.

Seleccionam-se trinta voluntários (15 do sexo masculino e 15 do sexo feminino). Eles pertencem todos à categoria 1 de obesos (25 kg/m2 < BMI < 30 kg/m2) de acordo com a classificação dos obesos pela Sociedade Japonesa para o Estudo da Obesidade, e à categoria dos hipercoleste-rolémicos (teor total em colesterol no soro > 180 mg/100 mL) . Eles são repartidos por dois grupos considerando os níveis em BMI e colesterol total no soro através de um médico não relacionado com este estudo.

Passado um período de observação de uma semana, administra-se diariamente aos sujeitos uma bebida de café 14 ΡΕ1809328 durante 12 semanas. Eles vão à clínica no dia inicial, passadas 4, 8 e 12 semanas. Em cada uma das visitas à clínica, eles são sujeitos a um exame médico e físico. Recolhem-se amostras de sangue e de urina em jejum, e medem-se as áreas de gordura abdominal utilizando varrimento tomográfico computadorizado (CT-scan).

Os sujeitos medem 300 mL de bebida de café (com MOS ou com Placebo), usando um copo de medição, e bebem-no diariamente sem lhe adicionar leite nem nata. O período de ingestão não é fixo. Os sujeitos recebem instruções de gue ao longo do estudo eles não deverão alterar de modo nenhum as suas dietas habituais. Além disto, eles são impedidos de consumir alimentos e remédios que possam influenciar os teores em lípidos no sangue. Em cada uma das visitas à clínica, é-lhes solicitado que não comam nem bebam nada excepto que podem beber água a partir das 9:00 da manhã e até se completarem os seus exames. 4. Registo dos Dados da Dieta

Proporcionam-se aos sujeitos balanças para se pesarem, câmaras fotográficas descartáveis e um pedómetro. Os sujeitos têm que registar todas as suas refeições, incluindo alimentos consumidos entre as refeições, o peso de cada prato, têm que tirar fotografias de todas as refeições e que contar o número de passos andados por dia durante 3 dias antes de visitar a clínica. Calcularam-se os nutrientes ingeridos a partir dos registos das refeições e 15 ΡΕ1809328 das suas fotografias, utilizando um programa adicionado ao Microsoft Excel "Excel Eiyou-kun ver.3.0" (Kenpakusya; Tokyo, Japão). Os voluntários também registam diariamente o seu consumo de álcool. 5. Exames Físicos

Conduzem-se exames fisicos para se registar a altura e o peso corporal, os perímetros na anca e na cintura e a espessura da gordura subcutânea. Mediram-se os perímetros na anca e na cintura na altura de uma exalação e na posição erecta, de acordo com o método da Japan Society for the Study of Obesity (Tokunaga et ai., Int. J. Obesity, 7, 437-445(1983)). Mediu-se a espessura da gordura subcu tânea braquial e sub-escapular utilizando uma craveira. Calculou-se o índice de Massa Corporal (BMI) utilizando a equação seguinte: BMI (Kg/m2)= [Massa Corporal (Kg)] / [Altura Corporal (m)]2. 6. Medição da Área de Gordura Abdominal

Levam-se a cabo determinações da gordura abdominal por varrimento CT utilizando o método de Tokunaga (Int. J. Obesity, 7, 437-445(1983)). Todos os varrimento CT forma feitos num CT-W450 (Hitachi Medico Inc., Japan). Obtêm-se as fotografias por raios-X utilizando uma voltagem de tubo: 12 0 kV, corrente de tubo: 90 mA; nível de janela: 0; e largura de janela: 1.000. Determinam-se as áreas gordas totais, áreas de gordura subcutânea e áreas de 16 ΡΕ1809328 gordura visceral a partir das fotografias por CT utilizando como instrumento de gordura visceral um programa para PC "Fat Scan ver. 2" (N2 System Inc., Japão). 7. Análise de Sangue A análise de sangue neste estudo incluia células brancas do sangue, células vermelhas do sangue, hemoglobina, MCV, MCH, MCHC e plaquetas. Proteína total, razão A/G, albumina, bilirrubina total, AST (GOT) , ALT (GPT), ALP, LFH, γ-GTP, colesterol total, colesterol de HDL, colesterol de LDL, triacilgliceróis, ácido úrico, azoto de ureia no sangue, creatinina, Na, K, Cl, Ca, IP, Mg, açúcar no sangue em jejum, lípidos totais, ácidos gordos não esterifiçados, peróxidos de lípidos, HbAic e insulina, que se medem utilizando testes bioquímicos do sangue. 8. Análise Estatística

Os resultados da análise são apresentados sob a forma de valores médios com erros padrão. Analisam-se as comparações dos valores médios dentro de cada grupo utilizando o teste t emparelhado quanto à diferença entre dados conforme a distribuição normal e analisam-se utilizando o teste de níveis assinados de Wilcoxon quando a diferença entre os dados não era conforme uma distribuição normal. As variâncias das áreas de gordura durante o período do teste são apresentadas sob a forma de valores relativos em comparação com os dados na semana 0. Sujeitam- 17 ΡΕ1809328 se as diferenças entre os valores médios entre os dois grupos a uma análise de variância, e depois calculam-se utilizando quer o teste t de Student, quer o teste t de Welch. Consideraram-se significativos valores de P < 0,05. 9. Dieta Durante o Período do Teste

Conduz-se uma análise estatística sobre 29 sujeitos divididos em doi8s grupos: um grupo com 15 sujeitos aos quais se administrou a bebida de controlo (doravante denominado "grupo de controlo"); e outro grupo com 14 sujeitos aos quais se administrou a bebida que incluía MOS (doravante denominado o "grupo em teste"). Excluiu-se um sujeito do grupo em teste devido ao perfil extraordinariamente irregular da sua dieta durante o período do teste. Os registos da administração mostram que a taxa de consumo foi de 99,9 % para o grupo de controlo e de 99,7 % para o grupo em teste, indicando não existir uma diferença significativa entre ambos os grupos. Não foi reconhecido nenhum consumo significativo de álcool nem de medicamentos durante o período do teste. Os resultados da investigação da dieta revelaram que existia pouca diferença significativa entre as dietas durante o período do teste para ambos os grupos. A quantidade de energia administrada diariamente ± o erro padrão foi de 1997 ± 77 kcal/dia para o grupo de controlo e de 2066 ± 72 kcal/dia para o grupo em teste. O nível de exercício, tal como indicado pelos pedómetros, indicava não existirem diferenças significativas em nenhum dos grupos durante o período do teste. 18 ΡΕ1809328 10. Efeitos Colaterais Não se observaram efeitos colaterais significativos relacionados com a administração das bebidas em teste e relativas ao estado fisico dos sujeitos, em nenhuma altura durante o periodo do teste. Nas consultas médicas não foram identificados quaisquer sintomas sujectivos/objec-tivos nem feitas observações de anormalidades devidas à administração das bebidas durante o período do teste. 11. Medições Fisicas

Tabela 2 Caracteristicas dos sujeitos antes da ingestão da bebida em teste

Grupo Total Masculino Feminino NO. do sujeito Controlo 15 7 8 MOS 14 7 7 Idade anos Controlo 55,7±2,8 53, 1±14,1 57,9±7,2 MOS 49,6+2,9 46,0±11,5 53,1+9,8 Altura cm Controlo 157,2±2,1 163,2±5,8 151,9±5,7 MOS 160,3+2,3 167,5±1,8 153,2±5,8 Peso kg Controlo 66,9±1,8 71,8±6,3 62,5±4,8 MOS 69,2±2,0 74,5±3,9 63,9±6,5 BMI kg/m2 Controlo 27,0±0,2 26,9±0,8 27,1±1,0 MOS 26,9±0,4 26,6±1,4 27,1±1,4 ΡΕ1809328 19 (continuação)

Grupo Total Masculino Feminino Temperatura °C Controlo 36,2±0,1 36,3±0,3 36,1+0,5 Corporal MOS 36,0±0,1 36,1±0,4 35,8+0,4 Cintura cm Controlo 86,3±1,2 89,1±2,6 83,8+4,7 MOS 86,5+1,5 88,6+4,2 84,4+6,1 Anca cm Controlo 96,8±1,0 96,1±3,3 97,4+4,2 MOS 97,8±0,9 97,3±2,3 98,2+4,1 Espessura de gordura cm Controlo 1,8±0,1 1,4±0,4 2,1+0,3 subcutânea braquial MOS 1,7±0,1 1,4±0,1 2,0+0,2 Espessura de gordura cm Controlo 2,3±0,2 2,7±1,1 2,0+0,3 subcutânea subescapular MOS 2,3±0,1 2,3±0,3 2,3+0,3 SBPa mm de Hg Controlo 127,5±4,4 128,1±15,6 127,0+19,4 MOS 131,8+3,3 132,9+11,8 130,7+13,6 SEP0 mm de Hg Controlo 79,9±2,3 81,6+9,7 78,4+8,6 MOS 82,4±2,3 84,3+8,6 80,4+9,9 Pulso pulsa- Controlo 69,3±2,2 67,1+6,9 71,3+9,8 ções/min MOS 67,8±1,6 67,7+6,6 67,9+5,6

Os valores são apresentados como médias e erros padrão. aTensão sanguínea sistólica bTensão sanguínea diastólica_ Não se observou nenhuma diferença significativa entre o grupo de controlo e o grupo em teste. As alterações das dimensões medidas durante o periodo em teste estão indicadas adiante. 20 ΡΕ1809328

Tabela 3 Alteração do itens dos exames físicos durante o período de administração 0 semanas 4 semanas 8 semanas 12 semanas Peso (kg) Controlo 66,9±1,8 66,3+1,8 66,5+1,9 66,3+1,9 MOS 69,2+2,0 68,8+1,9 68,6+2,0 68,7+2,0 EMI (kg/rf) Controlo 27,0+0,2 26,8+0,3 26,9+0,3 26,8+0,3 MOS 26,9+0,4 26,7+0,3 26,6+0,4 26,7+0,3 Cintura (cm) Controlo 86,3+1,2 85,6+1,3* 85,1+1,2** 85,1+1,4* MOS 86,5+1,5 86,0+1,4 85,1+1,6 84,8+1,5* Anca (cm) Controlo 96,8+1,0 96,4+1,0* 96,5+1,0 96,2+1,1 MOS 97,8+0,9 97,6+0,9 96,4+1,2 96,1+1,2 Espessura de gordura Controlo 1,8+0,1 1,8+0,1 1,8+0,1 1,8+0,1 subcutânea braquial (cm) MOS 1,7+0,1 1,7+0,1 1,8+0,1 1,7+0,1 Espessura de gordura Controlo 2,3+0,2 2,4+0,2 2,4+0,2 2,3+0,2 subcutânea subescapular (cm) MOS 2,3+0,1 2,3*0,1 2,3+0,1 2,2*0,1,* Os valores são apresentados como médias e *,** Significativamente diferentes em respectivamente a p<0,05 p <0,01. : erros padrão, relação a antes da ingestão às 0 semanas, Não havia nenhuma diferença significativa em peso, BMI ou gordura subcutânea na parte média do lado da extensão braquial em ambos os grupos. A diminuição da dimensão da cintura para ambos os grupos era estatisticamente significativa quando comparada com valores de antes da administração das bebidas, no entanto não se identificou nenhuma diferença significativa entre os dois grupos. A espessura da gordura subcutânea perto da dorsal subescapular para o grupo em teste era significativamente menor (p<0,05) na 12a semana, em comparação com a do inicio da administração, mas não existia nenhuma diferença significativa entre os dois grupos. Consideraram-se as diferenças entre os grupos como sendo minimas e insignificantes. 21 ΡΕ1809328

12.Área de Gordura Abdominal por Varrimento em CT

Excluíram-se um sujeito do grupo de controlo e um sujeito do grupo em teste da análise da secção cruzada de lípidos, uma vez que não se conseguiram obter imagens de varrimento CT perfeitas devido às grandes dimensões das suas cinturas. Levou-se a cabo a análise estatística sobre 27 sujeitos, 14 do grupo de controlo e 13 do grupo em teste. A alteração da área de gordura abdominal durante o período em teste está indicada na Tabela 4.

Tabela 4 Alterações das áreas de gordura abdominal durante a administração 0 semanas 4 saranas 8 semanas 12 semanas valor de p cu teste JSNCWV pera medições repetirias (Be-ríccb do teste) Area total da gordura Ccntrolo Δ (das 0 S) 274,5+11 263+12,5 -11,3+7,1 261111,6 -13,816,8 265,5111,1 -8,916,1 (ai) MOS Δ (das 0 S) 281,5+19,1 266,3+19,8 -15,2+7,7 251,0121,6** -30,5+4,4 248,9119,2** -32,6!5,4tt 0,00003 Área da Ccntrolo 181,6+12,3 169,8+13,0 171,4112, S* 174,6113,1 gordura Δ (das 0 S) ± -11,715,7 -10,114,3 -7,016,0 subcutânea MOS 173,4+15,1 166,1115,1 156,7115,7** 154,5114,8** 0,00024 (cri) Δ (das 0 S) ± -7,314,4 -16,813,7 -18,913,3 Área da Ccntrolo 92,9+8,4 93,116,6 89,218,3 91,019,7 gordura Δ (das 0 S) ± 0,414,4 -3,714 -9,016,1 visceral (ai) MOS Δ (das 0 S) 108111 ± 100+10,8 -7,915,2 94,4111,3**" -13,712,9 94,4111,9** -13,713,9t 0,01928

Os valores são apresentados ααηο nédias e erros padrão. *,** Significativamente diferentes em relação a antes da ingestão às 0 semanas, respectivamente a p<0,05 e p <0,01. t,tt Significativarrente diferentes em relação ao grupo de controlo re^ectivarrente a p<0,05, p<0,01._ _ 22 ΡΕ1809328 Não se identificou nenhuma diferença significativa entre os grupos em termos de área total de gordura, área de gordura subcutânea e área de gordura visceral, no principio da administração (semana 0). Durante o periodo em teste para a análise da área de gordura, a área de gordura subcutânea do grupo de controlo diminuiu significativamente na 8a semana (p<0,05), em comparação com o inicio da administração. No grupo em teste, observou-se uma diminuição significativa (p<0,01) na 8a e na 12a semanas, em relação à área total de gordura, à área de gordura subcutânea e à área de gordura visceral. A diminuição observada no grupo a MOS desde antes da ingestão na semana 0 era maior do que para o grupo de controlo. O grupo em teste mostrava claramente valores significativamente inferiores para a área total de gordura na 8a semana (p<0,05) e na 12a semana (p<0,01), em comparação com os do grupo de controlo (Fig.l). O grupo em teste também demonstrava uma diminuição significativa da área de gordura subcutânea e da área de gordura visceral na 12a semana (p<0,05 para ambas), em comparação com o grupo de controlo. (Figs. 2 & 3) 13. Resultados do Teste de Sangue

Excluíram-se dois sujeitos do grupo em teste das análises de sangue, porque tomaram o pequeno-almoço e bebidas sem álcool a partir das 9:00 da manhã na visita da 12a semana à clínica. As alterações dos valores no exame de sangue durante o período do teste estão indicadas na Tabela 23 ΡΕ1809328 5, e as alterações dos valores nos exames bioquímicos do sangue estão indicadas na Tabela 6.

Tabela 5 Resultados dos testes de sangue durante o período de administração

Gfcma ncamal Unidade Grupo 0 semanas 4 sanarias 8 semanas 12' semanas Células brancas do sangue 3500-9700 /pL Controlo MOS 655311015 674811721 654411156 649011608 631311483 641511658 630311279 6872+1279 Células vermelhas do sangue M438 - 577 E376- 516 xlOVpL Controlo MOS 464,9140,5 486,6132,3 468,5142,6 487,4131,1 457,1140,4* 473,1134,1* 460,9138,6 475,3138,6** Hemoglobina M13.6-18.3 Eli.2-15.2 g/100 rriL Controlo MOS 14,1711,52 14,9210,95 14,2911,63 14,8210,90 14,0011,48 14,7010,96* 14,1211,43 14,3811,45** Hematóurito Mí 0.4-51.9 H34.3-45.2 o. o Controlo MOS 44,2914,39 45,9412,92 44,6114,69 46,3112,55 43,3114,60** 45,1912,68 43,5914,15* 44,8114,15* MCV M83-101 E80-101 fL Controlo MOS 95,313,7 94,413,5 95,213,0 95,013,4 94,713,9 95,212,6 94.613.3 94.413.3 MCH M28.2-34.7 E26.4-34.3 P8 Controlo MOS 30,4711,37 30,6910,84 30,4611,31 30,4510,96 30,61+1,28 30,9510,74 30.6211.19 30.6711.19 MZBC M31.8-36.4 K31.3-36.1 Q, O Controlo MOS 32,0111,47 32,5010,91 32,0210,71 32,0111,01 32,3510,51 32,5310,59 32.3810.79 32.3410.79 Plaquetas 14.0.37.9 xlOVpL Controlo MOS 24,3214,43 23,0214,85 25,0915,41 23,8514,54 23,3213,99 22,5814,82 24.3314.87 23.3614.87 Os valores são apresentados ccmo médias e erros padrão. *, ** SignificativarrBnte diferentes em relação a antes da ingestão às 0 semanas, reqpectivamente a p<0,05 e s p <0,01. 24 ΡΕ1809328

Tabela 6 Resultados dos testes bioquímicos do sangue durante o período de administração

Gama nantial Unidade Grupo 0 semanas 4 semanas 8 semanas 12 semanas Proteína total 6,5-8,2 Controlo g/100 ml MOS 7,48±0,09 7,53±0,09 7,46+0,33 7,51+0,19 7,33+0,33** 7,53+0,26 7,34+0,28** 7,40+0,28 Pazão A/G 1,30-2,00 Controlo MOS 1,45±0,19 1,51±0,18 1,43+0,16 1,44+0,15 1,45+0,16 1,45+0,17 1,49+0,16 1,48+0,16 Albumina 3,7-5,5 Controlo g/100 rriL MOS 4,41+0,24 4,50+0,19 4,38+0,24 4,42+0,24 4,33+0,22* 4,44+0,29 4,37+0,14 4,41+0,14* Bilirrubina total 0,2-1,0 Controlo mg/100 rriL MOS 0,79+0,22 0,72+0,20 0,71+0,21 0,67+0,18 0,74+0,24 0,74+0,22 0,79+0,25 0,81+0,25 AST (GDT) 10-40 Controlo U/l MOS 25,9+9,9 22,8+101 25,0+9,2 20,4+7,0 25,0+8,2 22,5+7,6 24,6+7,0 23,3+7,0 ALT (GPT) 5-45 Controlo U/L MOS 28,1+16,7 28,3+17,8 28,1+19,0 25,2+9,7 25,5+11,4 25,8+13,2 28,1+11,7 28,0+11,7 ALP 104-338 Controlo U/L MOS 238,7+64,4 214,3+55,5 245,9173,6 223,3+52,8 228,4+65,3 209,2+52,6 228,5+64,2 208,1+64,2 LDH 120-245 Controlo U/L MOS 205,5125,5 206,3+50,7 210,3+29,0 201,6+41,2 215,1+25,4** 210,6+43,6 202,2+23,8 196,6+23,8* y -GTP Ml 6-73 (E8-32) Controlo U/L MOS 37,2+27,1 38,7+21,7 39,9128,9 36,2120,2 35,6+23,2 32,1+15,1* 41,9+30,6 39,0+30,6 T-colesterol 150-219 Controlo mg/100 rriL MOS 236,9128,2 223,2+30,3 235,3+22,8 233,3+32,7 233,9+30,2 219,4+30,6 243,5+26,6 224,5+26,6 HDL-Col M40-80 F40-90 Controlo mg/100 rriL MOS 52,8+11,7 56,6+13,3 52,5+13,2 55,0+17,6 52,5+12,7 56,1+13,1 51,3+13,7 54,7+13,7 LDL-Cõl 70-139 Controlo mg/100 rriL MOS 163,1+30,3 151,3126,0 151,3126,5 152,2123,8 157,4+28,5 146,4+28,7 156,8+23,0 141,8+23,0* Triacilgliceróis 50-149 Controlo 127,5+56,6 153,0+100,7 146,8+70,0 142,3+84,9 mg/100 rriL MOS 105,9+52,5 139,0+77,5 119,3+52,2 113,2+84,9 25 ΡΕ1809328

No início da administração (semana 0), não se identificou nenhuma diferença significativa entre os dois grupos em nenhum dos itens do exame do sangue e dos exames bioquímicos do sangue. Para os itens inspeccionados relativos aos lípidos do soro do sangue, os resultados dos exames do sangue e dos exames bioquímicos do sangue do grupo em teste mostram uma diminuição significativa do colesterol de LDL do início da administração para a 12a semana (p<0,05). Embora não se houvesse identificado nenhuma diferença significativa entre os dois grupos, o grupo em teste tinha uma tendência para demonstrar valores mais pequenos para a concentração total em colesterol (p<0,054) e para o colesterol de LDL (p <0,062) na 12a semana, em comparação com os do grupo de controlo. Embora em comparação com o início da administração existissem diversas variações estatisticamente significativas para itens diferentes dos relacionados com os lípidos do soro humano, essas variações estavam adentro da gama normal. EXEMPLO 2: Efeito do Café Líquido Contendo Mano-oligossacáridos

Analisou-se em mais pormenor o conjunto de dados provenientes de sujeitos do teste no Exemplo 1 que apresentavam valores de BMI>26,4 (2 do sexo masculino e 5 do sexo feminino). Depois de beberem café líquido contendo MOS, a massa corporal, a razão de lípidos corporal e o BMI diminuíram significativamente tal como se lista na tabela. Mostra-se portanto que o café líquido contendo MOS (a 3 26 ΡΕ1809328 g/300 mL) tem os efeitos de diminuição das gorduras corporais ou anti-obesidade em seres humanos.

Tabela Efeitos de tomar Café liquido contendo MOS sobre a massa corporal, a razão de gorduras corporais e o BMI

Bsríodo de ingestão 0 semanas 4 sanarias 8 semanas 12 sanarias iyfessa Corporal (kg) 68,8±8,1 68,0+7,5 67,912,2* 67,8+2,2* Razão de gordura Corporal (%) 35,4±4,5 33,7+4,5** 32,3+1,3* 33,8+1,1* HYH 27,8+0,7 27,5+0,8 27,5+0,3* 27,4+0,3° ** significativarrBnte ar relação a antes da ingestão (p<0,01) * significativamente diferente ar relação a antes da ingestão (p<0,05) □ significativarrBnte diferente ar relação a antes da ingestão (p<0,10) EXEMPLO 3: Ensaios Clínicos com MOS - Estudo 2

Este estudo é semelhante ao estudo descrito no Exemplo 1 excepto que se utilizam duas doses de MOS (MOS 3,0 ou 6,0 gramas/dia). Todas as medições são as mesmas que as descritas no Exemplo 1, com a adição de adsorciometria dual de energia de raios X (DEXA).

Este estudo foi concebido como um teste controlado por placebo, duplamente cego. Os voluntários sujeitam-se a um exame médico e fisico. Obtém-se uma amostra de sangue em jejum para análise dos lípidos do soro antes do início do estudo.

Seleccionam-se setenta e dois voluntários (36 do sexo masculino; 36 do sexo feminino) como sujeitos para o teste. Categorizam-se os voluntários como obesos de 27 ΡΕ1809328 categoria 1 (25 kg/m2 < BMI < 30 kg/m2) de acordo com a classificação de obesidade pela Japan Society for the Study of Obesity. Eles são divididos em três grupos considerando o BMI e as razões iniciais de gordura corporal por um doutor não relacionadas com este estudo.

Depois de um período de observação de uma semana, administra-se aos sujeitos a bebida de café durante 12 semanas. Os sujeitos medem 300 mL de bebida de café (MOS ou Placebo) medindo a chávena e bebem-na nos diversos dias sem se adicionar leite nem nata. Toma-se a bebida com uma refeição. Os sujeitos são instruídos de que ao longo do estudo eles não devem alterar as suas dietas habituais de modo nenhum. Além disto, eles não podem consumir alimentos nem remédios que influenciam os teores dos lípidos do sangue.

Os sujeitos visitam a clínica no dia 0, e depois passadas 4, 8 e 12 semanas. Em cada visita à clínica, solicita-se que não comam nem bebam excepto água de beber, a partir das 9 da manhã e a até estarem completados os exames. Em cada visita, os sujeitos sofrem um exame médico e um exame físico. Medem-se as razões de gordura corporal por absorciometria dual de energia de raios X (DEXA) . Além disto, no dia 0 e às 12 semanas, obtêm-se amostras de sangue em jejum e de urina, e medem-se a áreas de gordura abdominal utilizando varrimento por tomografia computacional (CT-scan).

Os resultados do estudo 2 presente são parcialmente semelhantes aos resultados do estudo 1 (Exemplo 1) . 28 ΡΕ1809328

As perdas de massa corporal total, no perímetro da cintura, nas razões de gordura corporal, de gordura abdominal e de gordura visceral ocorrem todas η o grupo a MOS. Além disto, o valor total da gordura corporal determinado por DEXA diminui em média 6 % no grupo a MOS às 12 semanas, em comparação com o inicio do estudo, e é significativamente diferente em relação ao do grupo de controlo. Não se observam respostas relacionadas com a dosagem com base no trabalho experimental até à data. EXEMPLO 4: Efeito de MOS sobre a Actividade da Lipase Pancreática

Prepararam-se composições de MOS tal como se indica no Exemplo 1. A distribuição de DP da composição de mano-oligossacáridos (MOS) utilizada neste exemplo foi DPI: 2,4 %; DP2: 2 6,6 %; DP3: 2 0,2 %; DP4: 17,8 %; DP5: 10,9 %; DP6: 8,9 %; DP7: 6,0 %; DP8: 3,6 %; DP9: 1,9 %; e DP10: 1,7 %. O conteúdo em resíduos de manose na cadeia de açúcares era de 90 %.

Medição da actividade da lipase pancreática

Determinou-se a actividade da lipase medindo a taxa de libertação de ácido oleico da trioleína. Em suma, sonicou-se uma suspensão de trioleína (80 mg), fosfatidil-colina (10 mg) e ácido taurocólico (5 mg) em 9 mL de tampão de ácido IV-tris(hidroximetil)metil-2-aminoetanossulfónico 0,1 M (TES) (pH 7,0) contendo NaCl 0,1 M, durante 5 minutos. Incubou-se esta suspensão de substrato sonicada 29 ΡΕ1809328 (100 pL) com 50 pL (10 unidades) de lipase pancreática e com 100 pL de diversas concentrações de solução de MOS durante 30 minutos a 37 °C num volume final de 250 pL. Determinou-se a quantidade de ácido oleico que se libertara pelo método normal. Adicionou-se a mistura em incubação a aliquotas de 3 mL de uma mistura a 1:1 (em volume) de clorofórmio com n-heptano contendo 2 % (em volume) de metanol e extraida por agitação dos tubos na horizontal durante 10 minutos, removendo-se por sucção a fase superior aquosa. Adicionou-se então reagente de cobre (1 mL) à fase orgânica inferior. Agitou-se o tubo durante 10 minutos, centrifugou-se a mistura a 2.000 g durante 10 minutos, e trataram-se 0,5 mL da fase orgânica superior, que continha sais de cobre dos ácidos gordos livres que se haviam extraido, com 0,5 mL de batocuproina a 0,1 % (em peso/vo-lume) em clorofórmio contendo 0,05 % (em peso/volume) de 3(2)-t-butil-4-hidroxianisole. Mediu-se então a absorvância a 480 nm. Exprimiu-se a actividade da lipase por mL de reacção e por hora. Tal como se ilustra na Figura 4, os MOS inibiam a actividade da lipase pancreática de um modo dependente da dose, a concentrações de 1-5 mg/mL; a 5 mg/mL, a inibição era de cerca de 70 %. Estes resultados in vitro sugerem que os MOS são um agente forte que inibe a absorção de lipidos. EXEMPLO 5: Triacilgliceróis no Plasma Após Ingestão de uma Dieta com Teor Elevado de Gordura num estudo em Seres Humanos

Dividiram-se por dois grupos dez voluntários 30 ΡΕ1809328 saudáveis humanos (todos do sexo masculino) e adoptou-se uma concepção duplamente cega de um estudo cruzado. Administrou-se a cada um dos grupos MOS ou placebo na primeira fase. Passada 1 semana, na segunda fase administrou-se (placebo ou MOS) em vice-versa. Jejuam-se os voluntários de um dia para o outro e administra-se-lhes 200 g de uma dieta com elevado teor em gordura constituída por sopa de puré de milho com manteiga e banha (40 g de conteúdo em gordura) com ou sem MOS (3 g). Obtêm-se amostras de sangue venoso antes e depois (1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h e 6 h) da administração oral e leva-se a cabo a determinação de triacilgliceróis. Tal como se ilustra na Figura 5, o aumento de triacilgliceróis no plasma foi significativamente suprimido passadas 3 horas da administração. A ingestão de MOS em dieta com elevado teor em gordura era eficaz em diminuir os aumentos dos teores plasmáticos pós-prandiais em triacilgliceróis. Estes resultados sugerem que a ingestão de MOS é eficaz para diminuir a absorção de gordura pelo corpo humano. EXEMPLO 6: Efeito dos Mano-oligossacáridos sobre as Razões de Gordura Corporal

Investigou-se o efeito de MOS sobre as razões de gordura corporal em seres humanos utilizando sujeitos Japoneses saudáveis (6 do sexo masculino e 7 do sexo feminino). Um grupo constituído por 6 sujeitos tomou 1,0 g/dia de MOS. Um segundo grupo constituído por sete sujeitos tomou 3,0 g/dia de MOS. fez-se a avaliação com base nas alterações da razão de gordura corporal. Analisou- 31 ΡΕ1809328 se a razão de gordura corporal utilizando uma metodologia baseada na impedância eléctrica. Na tabela adiante mostram-se os resultados do efeito da ingestão de MOS sobre a razão de gordura no corpo.

Depois de tomar MOS, a razão de gordura corporal diminuiu tal como se mostra na tabela adiante. Mostrou-se assim que os MOS (a 1,0 g/dia e a 3,0g/dia) apresenta um efeito de diminuição da gordura corporal em seres humanos.

Alteração da Razão de Gordura Corporal em Seres Humanos (%) MOS a 1,0 g/dia MOS a 3,0 g/dia N 6 7

Inicial 2 semanas 4 semanas_ * significativamente ingestão (p< 0,05) 31,1±5,9 30,714,4 30,115,1 diferente em 31,414,3 31,214,7 _30,314,7* relação a antes da EXEMPLO 7: Efeito de Café Líquido Contendo Mano-oligossacáridos

Investigou-se o efeito de café liquido contendo MOS sobre a massa corporal de seres humanos e sobre a razão da gordura corporal em seres humanos recorrendo a dez sujeitos saudáveis voluntários Japoneses e utilizando as mesmas amostras de café contendo MOS que se descreveram no Exemplo 6. Os sujeitos consumiram o café liquido contendo MOS e beberam 900 mL de café liquido por dia durante 4 semanas (isto é, 3 garrafas/dia para no total 9 g de 32 ΡΕ1809328 MOS/dia) . A avaliação foi feita com base na alteração da massa corporal, na razão de gorduras no corpo e do BMI, tal como no Exemplo 6. A tabela adiante mostra os resultados do efeito da ingestão do café liquido contendo MOS sobre a massa corporal, a razão de gorduras no corpo e o BMI.

Depois de se beber café liquido contendo MOS, os valores da massa corporal, da razão de gorduras no corpo e do BMI diminuíam significativamente tal como se mostra na Tabela. Mostra-se assim portanto que o café liquido contendo MOS tem o efeito de diminuir a gordura corporal ou anti-obesidade, em seres humanos.

Efeitos de Café Líquido Contendo MOS Sobre a Massa Corporal, A Razão de Gordura Corporal e o BMI 0 semanas 2 semanas 4 semanas Massa corporal kg 59,5±12,2 58,9±12,0* 59,1112,2* Razão de Gordura Corporal o 0 24,2±4,3 23,8±4,8 23,414,6* BMI 24,4±2,9 22,212,9* 22,213,0* n - 10, * significativamente diferente em relação a antes da ingestão (p<0,05)

Lisboa, 28 de março de 2013

Claims

ΡΕ1809328 1 REIVINDICAÇÕES 1. Uma composição que inclua um mano-oligos- sacárido com um grau de polimerização de 2 a 10 monossacáridos, em que pelo menos 60 por cento, em peso, dos monossacáridos sejam manose, para utilização na diminuição das razões de gordura no corpo ou da gordura abdominal num ser humano.
2. Uma composição de mano-oligossacárido para utilização de acordo com a Reivindicação 1, em que a composição de mano-oligossacárido seja administrada por via oral a uma taxa de entre 1 e 10 gramas ao dia.
3. Uma composição de mano-oligossacárido para utilização de acordo com a Reivindicação 1 ou a 2, incluindo também pelo menos um monossacárido seleccionado de entre o conjunto constituído por glucose, galactose, frutose, e as suas combinações.
4. Uma composição de mano-oligossacárido para utilização de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 3, em que a composição de mano-oligossacárido seja um hidrolisado proporcionado pela hidrólise de um material com manano. Lisboa, 28 de março de 2013