PT1362855E - Compostos de beta-lactama, processo para a sua preparação eagentes de diminuição do colesterol sérico que os contêm - Google Patents

Description

ΕΡ 1 362 855/ΡΤ DESCRIÇÃO "Compostos de beta-lactama, processo para a sua preparação e agentes de diminuição do colesterol sérico que os contêm"

Campo do invento

Este invento refere-se a novos compostos de β-lactama, a um método de fabrico desses compostos e a um agente hipocolesterolémico sérico que contém esses compostos.

Antecedentes do invento A hipercolesterolemia é um factor de risco para a doença cardíaca aterosclerótica. A doença cardíaca aterosclerótica representa a principal causa de morte e morbilidade cardiovascular no mundo ("Lipid Research Clinics Program", J. Am. Med. Assoe., 1984, 251, 351 ou 365). Recentemente, foram utilizados em clínica inibidores de HMG-CoA redutase como agentes hipocolesterolémicos. Os inibidores de HMG-CoA reductase mostraram possuir uma potente actividade hipocolesterolémica sérica, no entanto, são também apontados como possuidores de efeitos secundários adversos (Mevacor em Physician's Desk Reference, 49th Ed, Medicai Economics Date Production Company, 1995, 1584) . Deste modo, desejam-se agentes hipocolesterolémicos séricos potentes e seguros.

Foi referido que os glicósidos naturais possuem actividade hipocolesterolémica sérica (M.A. Farboodniay Jahromi et al., J. Nat. Prod., 1993, 56, 989., K.R. Price, "The Chemistry and Biological Significance of Saponins in Foods and Feeding Stuffs", CRC Criticai Reviews in Food Science and Nutrition, CRC Press, 1987, 26, 27). Considera-se que esses glicósidos reduzem os níveis de colesterol sérico devido à inibição da absorção de colesterol no intestino delgado (P.A. McCarthy et al., J. Med. Chem., 1996, 39, 1935). Adicionalmente, alguns compostos de β-lactama são referidos pela sua actividade hipocolesterolémica (S.B. Rosenblum et al., J. Med. Chem., 1998, 41, 973, B. Ram et al., Indian J. Chem., 1990, 29B, 1134. USP 4893597). 2 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Os compostos de β-lactama possuem eles próprios uma fraca actividade inibidora sobre a absorção do colesterol, e além disso o glucurónido dos compostos de β-lactama são mais potentes do que as β-lactamas progénies. No processo de absorção, os compostos de β-lactama sofrem rapidamente glucuronidação no intestino delgado após administração oral e os derivados de glucurónido resultantes são segregados através do canal biliar para o intestino delgado. Esses derivados conjugados de ácido β-lactama-O-glucurónico estão situados na camada mucósica no intestino delgado, um local de acção, e inibem a absorção de colesterol (M. van Heek et al., Brit . J. Pharmacol., 2000, 129, 1748; J. Pharmacol. Exp. Ther., 1997, 283, 157). Devido aos compostos de β-lactama supramencionados mostrarem actividade hipocolesterolémica no intestino delgado através de derivados conjugados de β-lactama-O-glucuronato, foram sintetizadas as actividades hipocolesterolémicas desses compostos que incorporam glucose ou derivados de ácido glucurónico (W.D. Vaccaro et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 313). No entanto, considera-se que as ligações O-glucosídicas nestes compostos são facilmente hidrolizadas com a glicosidase que existe no intestino delgado após a administração oral, e supõe-se que as actividades hipocolesterolémicas desses compostos no intestino delgado serão reduzidas. Pensando que o local activo dessas β-lactamas é a camada mucosidica no intestino delgado, são necessários melhores inibidores de absorção de colesterol para actuarem apenas no intestino delgado com elevada eficácia e longa duração. Espera-se que os inibidores ideais de absorção de colesterol não sejam absorvidos no intestino delgado e eliminados sem absorção no intestino delgado de forma a reduzir os efeitos secundários após a absorção no intestino delgado. O principal objectivo do presente invento é o fornecimento de novos agentes hipocolesterolémicos possuindo uma porção β-lactama e C-glicósido nas moléculas, que é estável ao metabolismo por glicosidase e a hidrólise com ácidos ou bases. Nomeadamente, o objectivo do presente invento é o fornecimento de moléculas hibridas com β-lactama e C-glicósido como agentes hipocolesterolémicos. 3 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Em WO 9716455 divulgam-se principalmente β-lactama-O-glicósidos e, numa concretização, β-lactama-C-glicósidos, que diferem dos compostos do presente pedido devido aos substituintes na porção tetra-hidropirano.

Descrição detalhada do invento

Pensámos que os compostos híbridos de β-lactama e C-glicósido são metabolicamente estáveis contra a glicosidase e a hidrólise com ácidos e bases (R.J. Linhald et al., Tetrahedron, 54, 9913-9959, 1998) . Em primeiro lugar, espera-se que os compostos de β-lactama e C-glicósido sejam estáveis contra a glicosidase existente no intestino delgado e que esses híbridos sejam possíveis de localizar na camada de mucosa no intestino delgado por muito tempo. Em segundo lugar, pensámos que esses compostos fossem pouco absorvidos na camada de mucosa no intestino delgado, por conseguinte os efeitos secundários iriam ser reduzidos. Na tentativa de encontrar novos compostos de β-lactama que possuíssem actividade hipocolesterolémica sérica, verificámos que os compostos de fórmula geral (I) são excelentes agentes hipocolesterolémicos.

Nomeadamente, os compostos do presente invento possuem a seguinte fórmula geral (I):

[onde: Ai, A3 e A4 são átomos de hidrogénio, átomos de halogéneo, grupos alquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, grupos alcoxi possuindo de um a cinco átomos de carbono, -COORi, uma fórmula (b) que se segue: 4 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 4 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

(b) (onde: Ri é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo que possui de um a cinco átomos de carbono) ou uma fórmula (a) que se segue:

R3 r2 (onde: R2 é um grupo -CH2OH, um grupo -CH20C(0)-Ri ou um grupo -C02-Ri; R3 é um grupo -OH ou um grupo -0C(0)-Ri; R4 é - (CH2) kR5 (CH2) 1- (k e 1 são inteiros 0 ou 1 ou mais; k+1 é 10 ou um inteiro menor); R5 significa ligação (ligação simples (-), -CH=CH-, -OCH2-, grupo carbonilo ou -CH(OH)-).

Um de Αχ, A3 e A4 na fórmula (I) deve ser o grupo na fórmula (a) supramencionada. A2 é uma cadeia alquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, uma cadeia alcoxi possuindo de um a cinco átomos de carbono, uma cadeia alcenilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, uma cadeia hidroxialquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono ou uma cadeia carbonilalquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, n, p, q ou r são 0, 1 ou 2] ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Além disso, este invento refere-se a um método para fabricar os compostos de fórmula geral (I) e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Este invento refere-se também a um agente hipocolesterolémico sérico contendo os compostos de formula geral (I) e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Adicionalmente, este invento refere-se a um agente hipocolesterolémico sérico de terapia de combinação dos compostos de fórmula geral (I) e inibidores de β-lactamase.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis deste invento são mencionados do seguinte modo. Como sal mineral básico, são mencionados os sais de sódio ou de potássio de fórmula geral (I). Como sais de ácido orgânico, são mencionados os de ácido 5 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ succínico, ácido maleico, ácido toluenossulfónico ou ácido tartárico. Os compostos de fórmula geral (I) podem ser administrados por via oral isoladamente ou em combinação com transportadores ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis. Estes podem ser administrados oralmente na forma de pós, granulados, comprimidos, cápsulas por técnicas farmacêuticas padrão e também por via parentérica na forma de administrações intra-rectais, supositórios e injecções. A dosagem varia de 0,01-1000 mg por dia e é administrada numa única dose ou em várias doses. No entanto, as variações ocorrerão necessariamente dependendo das condições, idade e peso corporal do receptor. Adicionalmente, a actividade hipocolesterolémica sérica é promovida na combinação com os compostos de fórmula geral (I) e inibidores de β-lactamase.

Os inibidores de β-lactamase tais como o ácido clavulânico são uma droga que inibe para degradação do anel β-lactama por bactérias.

Os compostos são exemplificados como segue: (1) (4S*,3R*)-4-{4-[(2 S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2fí-piran-2-il]fenil}-l-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (2) (4S*,3R*)-4-(4-{[(2S,5S,3R, 4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2H-piran-2-il]metil}fenil)-1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (3) (3 S,2R,4R,5R,6R)-2-[(4-{(4S*,3R*)-1-(4-Fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-2-oxoazetidina-4-il}fenil)-metil]-4,5-diacetiloxi-6-(acetoximetil)per-hidro-2H-piran-3-ilacetato (4) (4S*,3R*)-4-(4-([(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2f?-piran-2-il] metil}fenil)-l-(4-clorofenil)-3-(3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (5) (4S*,3R*)-4-(4-([(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2H-piran-2-il]metil}fenil)-1-(4-metoxifenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (6) (3S,2R,4R,5R,6R)-2-[(4-{(4S*,3R*)-1-(4-MetOxifenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-2-oxoazetidina-4-il}fenil)-metil]-4,5-diacetiloxi-6-(acetoximetil)per-hidro-2H-piran-3-ilacetato 6 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (7) (4S*,3R*)-4-(4-([(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2i7-piran-2-il]metil}-fenil)-l-(4-metilfenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (8) (3S,2R,4R,5R,6R)-2-[(4-{(4S*,3R*)-1-(4-Metilfenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-2-oxoazetidina-4-il}fenil)metil]- 4.5- diacetiloxi-6- (acetoximetil) per-hidro-2fí-piran-3-ilacetato (9) (4S*,3R*)-4-(4-([(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2fí-piran-2-il] metil}fenil)-l-fenil-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (10) (3S,2R,4R,5R,6R)-2-[(4-{(4S*,3R*)-1-fenil-3-[3-(4- fluorofenil)propil]-2-oxoazetidina-4-il}fenil)metil]- 4.5- diacetiloxi-6- (acetoximetil) per-hidro-2/í-piran-3-il-acetato (11) (4S*,3R*)-4-(4-{[(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2i7-piran-2-il] metil}fenil)-l-(4-fluorofenil)-3-[3-(fenil)propil]azetidina-2-ona (12) (4S*,3R*)-4-(4-([(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2fí-piran-2-il] metil}fenil)-l-(4-fluorofenil)-3-[2-(4-fluorofenoxi)etil]azetidina-2-ona (13) (3S,2R,4R,5R,6R)-2-[(4-{(4S*,3R*)-1-(4-Fluorofenil)-3-[2-(4-fluorofenoxi)etil]-2-oxoazetidina-4-il}fenil)-metil]-4,5-diacetiloxi-6-(acetoximetil)per-hidro-2H-piran-3-ilacetato (14) (4S*,3R*)-4-(4-([(4S,5S,2R,3R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2i7-piran-2-il] metoxi }fenil)-l-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (15) (4S*,3R*)-4-(4-([(4S,5S,2R,3R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2i7-piran-2-il] metoxi} f enil) -1-(4-fluorofenil)-3-[2-(4-fluorofenoxi)etil]azetidina-2-ona (16) (4S*,3R*)-4-(4-([(4S,5S,2R,3R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2fí-piran-2-il] metoxi }fenil)-l-fenilmetil-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (17) Ácido (2S,3S,4R,5R,6R)-6-[4-((4S*,3R*)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-2-oxoazetidina-4-il}-fenil)metil] -3, 4,5-tri-hidroxiper-hidro-2i7-piran-2-carboxilico (18) Éster etílico do ácido 2-{4-[(4S*,3R*)-4-{[(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2fí-piran-2-il]metil}fenil-3-[3-(4-fluorofenil)-propil]-2-oxoazetidinil]fenoxi}-2-metilpropiónico 7 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (19) Ácido 2-{4-[(4S*,3R*)-4-{[(5S,2R,3R,4R, 6R)-3,4, 5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil )per-hidro-2ií-piran-2-il] metil}-fenil-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-2-oxoazetidinil]- fenoxi}-2-metilpropiónico (20) Éster etílico do ácido 2—{4—[(4S*,3R*)-4-{[(5S,2R,3R,4R, 6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2fí-piran-2-il]metil}fenil-3-[3-(4-metilfenil)propil]-2-oxoazetidinil]fenoxi}-2-metilpropiónico (21) Ácido 2-(4-[(4S*,3R*)-4-{[(5S,2R,3R,4R, 6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6- (hidroximetil)per-hidro-2£f-piran-2-il] -metil}fenil-3-[3-(4-metilfenil)propil]-2-oxoazetidinil]-fenoxi}-2-metilpropiónico (22) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2íf-piran-2-il] metiljfenil) -1- (4-fluoro-fenil)azetidina-2-ona (23) (4S,3R) -3- [ (3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2fí-piran-2-il] metil }f enil)-l-fenilazetidina-2-ona (24) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2fí-piran-2-il]metil}fenil) -1- (4-metilfenil) -azetidina-2-ona (25) (4S,3R) -4-(4-{[(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6- (hidroximetil) per-hidro-2il-piran-2-il] metil} f enil) -1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (26) (4S,3R)-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6- (hidroximetil)per-hidro-2tf-piran-2-il]metil}fenil) -1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropil]azetidina-2-ona (27) (4S,3R)-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R, 6R)-3,4, 5-Tri-hidroxi-6- (hidroximetil) per-hidro-2íf-piran-2-il] metil} f enil) -1-fenil-3-[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropil]azetidina-2-ona (28) (4S,3R)4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2/í-piran-2-il] metil} f enil) -1- (4-metilfenil)-3-[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropil]azetidina-2-ona (29) Ácido 4-[(4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil] -4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6- (hidroximetil)per-hidro-2/í-piran-2-il]metil}fenil) -2-oxoazetidinil]benzóico 8 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (30) Ácido 4-[ (4S,3R)-4-(4-{ [(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4, 5-tri- hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2ií-piran-2-il]metil}-fenil)-3-[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropil]-2-oxoazetidinil]benzóico (31) Ácido 4-[(4S,3R)-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3, 4,5-tri- hidroxi-β-(hidroximetil)per-hidro-2íí-piran-2-il]metil}-fenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-2-oxoazetidinil]-benzóico (32) 3-[(2E)-3-(4-Fluorofenil)-2-propenil](4S,3R)-4-(4- {[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2íí-piran-2-il] metil }fenil) -1-(4-fluorofenil)-azetidina-2-ona (33) (4S,3R)-4-{4-{[(2S,5S,3R,4R, 6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2fí-piran-2-il] fenil}-l- (4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona (34) (4S,3R)-4-{4-{[(2S,5S,3R,4R, 6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2fí-piran-2-il] fenil}-l - (4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropil]azetidina-2-ona (35) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]—4—{4— {[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)- per-hidro-2fí-piran-2-il] fenil}-l - (4-fluorofenil) -azetidina-2-ona (36) (4S,3R)—3—[(3 S)—3 —(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]—4 — {4 — {[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2íí-piran-2-il] fenil}-l - (4-metilfenil) -azetidina-2-ona (37) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4- [(2 S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2il-piran-2-il] -1-f enilazetidina-2-ona (38) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-1-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2íí-piran-2-il] metil}fenil)-l - (4-fluorofenil) -azetidina-2-ona (39) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-{[(2S, 5S,3R,4R, 6R)-3, 4,5-Tri-hidroxi-6- (hidroximetil) per-hidro-2/í-piran-2-il] metil} -fenil)-3-hidroxipropil]-l-fenil-4-(4-fluorofenil)-azetidina-2-ona (40) (4R*,3R*)-4-(4-{[(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6- (hidroximetil) per-hidro-2fí-piran-2-il] metil}fenil)-3-[3-(4—fluorofenil)propil]-1-(4-fluorofenil)azetidina-2-ona 9 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (41) 3-((3S)-3-Hidroxi-3-fenilpropil)-(4S,3R)-4-(4- {[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2/í-piran-2-il] me til} f enil) -1-fenilazetidina-2-ona (42) Éster etílico do ácido 4-[3-((3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-(4S,3R)—4—(4—{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6- (hidroximetil)per-hidro-2ií-piran-2-il]metil}fenil)-2-oxoazetidinil]benzóico (43) 4—(4—{[(5S,2r,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil )per-hidro-2fí-piran-2-il]metil}fenil) — (4S, 3R) —1— (4 — metilfenil)-3-[3-(4-fluorofenoxi)etil]azetidina-2-ona (44) 3-(3-Fenilpropil)-(4S,3R)-4-(4-{[(5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6- (hidroximetil) per-hidro-2/í-piran-2-il] -metil} fenil)-1-fenilazetidina-2-ona (45) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2fí-piran-2-il] etenojfenil) -1- (4-fluorofenil) -azetidina-2-ona (46) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil )per-hidro-2fí-piran-2-il] etil}fenil) -1-(4- fluorofenil)azetidina-2-ona (47) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4, 5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2ií-piran-2-il] -l-propen-3-il}fenil-1-(4-fluorofenil)azetidina-2-ona (48) (4S,3R)-3-[(3 S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil )per-hidro-2H-piran-2-il]propil}fenil-1-(4-fluorofenil) azetidina-2-ona (49) 3-((3S)-{4-[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-Tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2h-piran-2-il]fenil}-3-hidroxipropil) (4S,3R)-1,4-his(4-fluorofenil)azetidina-2-ona (50) (4S,3R)-3-[(3 S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4, 5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2/í-piran-2-il] metoxipropil-3-il} f enil-1-(4-fluorofenil)azetidina-2-ona (51) (4S,3R)-3-[(3 S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil-)per-hidro-2h-piran-2-il]metoxi-2-propen-3-il}fenil-1-(4-fluorofenil)azetidina-2-ona 10 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (52) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)-per-hidro-2/í-piran-2-il] -l-buten-4-il}fenil-1- (4- fluorofenil)azetidina-2-ona (53) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4, 5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2H-piran-2-il] butil} f enil-1- (4- fluorofenil)azetidina-2-ona (54) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4, 5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil )per-hidro-2i7-piran-2-il] -l-penten-5-il}f enil-1- (4-fluorofenil)azetidina-2-ona (55) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4, 5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil ) per-hidro-2íf-piran-2-il ] pentil }f enil-1- (4-f luorofenil) azetidina-2-ona (56) (4S,3R)-3-[(3S)-3-(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4, 5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil ) per-hidro-2#-piran-2-il ] etil-2-il]fenil-l-fenil-azetidina-2-ona (57) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil) per-hidro-2H-piran-2-il] etil-2-il}fenil-1-(4-metilfenil)azetidina-2-ona (58) (4S,3R)—3—[(3S)—3—(4-Fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(carboxil)per-hidro-2fí-piran-2-il] etil-2-il}fenil-l-(fenil) azetidina-2-ona

Apresenta-se a preparação tipica dos compostos em conformidade com o invento. Os compostos que apresentam rotação específica são preparados quer na forma de composto opticamente activo, quer separados como compostos opticamente activos pelos métodos adequados e determinada a rotação especifica.

Os compostos de fórmula geral (I) podem ser obtidos do seguinte modo. 11 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 Estrutura p.f. (°C) [a] 25d (C,solv.) 1 ΟΗ ΗΟ»„,^%λΟΗ IJIF 89-90 -40.4 (C=0.5, MeOH) 2 OH HO*., X ,λΟΗ íio-m 56-58 -33.2 (€=0.5, MeOH) 3 OAc AtO,, „ΟΑε J^Y^qA^OAc / 4 OH HO, 1 ,ΟΗ fY^O-LoH ^ 0-¾ v-· Cl 76-78 5 OH H0,„, X ,λ0Η jff40I^0H ronc; ° 0 ^ OMe 73-75 / / / 12 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

13 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 Estrutura | [α]250 (C,solv.) 11 0» ΗΟ,,.,^1 *0« (τχ; 0 XX, 74-75 -™~~^7 12 QH HO, X ,,ΟΗ 65-67 ° UF ! -40.4 (C=0.5, CHCb) 13 ΟΑ« ^UJOAC ο £T^o^OAc ^ Αχ 64-66 / 14 ΟΗ ΗΟ,,Χ,λΟΗ ο^0Η ^ 0 XX, 61-62 / 15 ΟΗ HO,, X ,,,ΟΜ °·^Χ Q-S,·' 0Η F0XrC 0 χχ 64-65 / 14 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 r ·>>>- —------------------------------ · ·· Estrutura p.f. (°C) [oí] 25d (C,solv.) 16 OH HOw l/OH ^y 0^1 β'-'ν- 0H 73-75 / / OH HO/,. JL ,,QH ~7 17 ryv-, /0 0 °°* JJ 105-106 / 18 OH HOujUoH xh£C r 0 ϊ νΊ »Jrvc^ 73-74 / 19 OH H0'.. A.»oh ° COjH 170-172 20 OH NO/, JL .vOH λ^οΧ^ομ jonzz o ° CO;B 76-78 / 15 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 Estrutura J [a] 25d (C,solv.) 21 ΟΗ } ΗΟ„ ί*ΟΗ ίΥ rV 161-} 62 / 22 OH hq. oh OH 1 1 } 15-117 ^ ° nt -71.3 (0=0.3, MeOH) 23 OH ί}0Λ.Ι .0Η OH 0Λ^ OH Λ? 0¾ 104-106 -Π0 (0=0,5, MeOH) 24 25 OH H<\ JL sOH OH 102-104 -58,0 (C-0.3, MeOH) OH HOLvQH ^C oX^ oh 67-69 -62.8 (C=0.5, MeOH) 16 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

17 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 Estrutura p.f. | [a] 25d (°C) l (C,solv.) 31 ΟΗ η7Α.οη Λ^οη ΧΓχγ 0 Tl 97-99 7 32 OH ííVX JL.QH í í 0'^· liq -39.3 (00.8, MeOH) 33 OH »0,..X ,,OH OH JL A ✓ il.ji 0 COOH -JLJ A n ^ ° χχ 82-84 -47.6 (00.5, MeOH) 34 OH M<\JL λ°η . I ji qh 0 O'^' 83-85 35 OH H0·^ λ .,ΟΗ „„ Λ i, 1 .OH OH JTjr^ ^ N j-s. ^ 0 xx 8Í-83 / 18 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 Estrutura p.f. (°C) [α]250 (C,solv.) 36 ΟΗ oh °Κ 79-8! 3? 36 ΟΗ X ,λΟΗ Γ jOt 80-82 200-20! / ΟΗ oh 0 -693 {€=03, MeOH) 39 oh T^yyv ο ^ /**< )·ί ΟΗ u Í! ] ΗΟ Λ—( t^A-_ ΗΟ ΟΗ 126-128 -42,66 {€=03, MeOH) 40 ΟΗ HQY*V'0H ζγ<0Χ^0Η JJ J-N. 0 χχ 78-80 19 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 41 Estrutura p.f. (°C) [α] 25d (C,solv.) ΟΗ *0, * 0„ oh ^0 νίΟ 110*112 -67.2 (€=0.5, MeOH) 42 43 ΟΗ Hr\. Α, ,"θπ ΟΗ |í:V^v0iv^0H rí^° "ό. co,a 56*58 -92.0 (€=0,3, MeOH) ΟΗ ηο·4 JL Λο« ^ ° χχ, 96*98 -40,4 (C=0.5, CHCh) 44 ΟΗ hq-,, j. λοη ] 4 οΓ'ν' 84-86 -41.3 (€=0.3, MeOH) 45 J ΟΗ hxJL*oh ΟΗ °Η 84-86 -64,0 (€=0.25, MeOH) 20 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 Estrutura p.f. (°C) [α] 25d (C,solv.) 46 ΟΗ ηολ. I λ0Η ΟΗ 153-155 -54.66 (00.25, MeOH) 47 ΟΗ Η<\ JI *ΟΗ ΟΗ IíO''''V*H. J__-ΟΗ 72-74 -33.6 (01.0, MeOH) 48 ΟΗ ΗΟΙ,ΟΗ oh ιΐίγ^^0Λν^ΟΗ 81-83 -21.8 (01.0, MeOH) 49 ΟΗ ^ .F ΗΟ^""^0» ^F HO ΟΗ 111-113 -20.0 (00,35, MeOH) 50 «*JO ΟΗ tf^-0-Y0H ^ 0 "0, 61-63 -48.6 (00.14, MeOH) 21 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ν. 0 Estrutura p.f. (°C) [a] 25d (C,solv.) 51 ΟΗ •Α. Χ.,ΟΗ ^ 0 0F 65-67 -42,8 (0=0,25, MeOH) 52 ΟΗ Α, Χ,.,οη rtu λΛ/\ i Ι,ΟΗ ^ °Γνορ 79-81 *33.2 (C=1.0, MeOH) 53 ΟΗ Μ\ X ,,,ΟΗ .u X JL -OH ΟΗ Χ^κ'"" q^V' 'JX%, SI-83 -29.4 (C=0.5, MeOH) 54 OH HQ-, X „*OH r ** AX 69-71 j -38.6 (C-0.35, MeOH) 55 OH H<\,X ,,λΟΗ OH |^V^-^x^^0Xv,0H 66-68 -42.9 <0=0.35, MeOH) 22 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ N. 0 Estrutura p.f. (°C) [a]25D (C,solv.) 56 OH m\ X .,vOH OH °H 82-84 -49.2 (0=1.0, MeOH) 57 OH ηο^,Χ,λΟη 116-118 -76.0 (00.3, MeOH) 58 OH ho„ A λοη oh COOH 110-112 -403 (00.7, MeOH) Método 1 (1) (a) Em caso de R4 ser -CH2- nos compostos de fórmula geral (I), o composto é preparado pelas seguintes reacções.

Utiliza-se como material de partida, o composto (1-2) obtido por uma reacção de tetrabenzil-glucuronolactona (1-1) com reagente de Tebbe (T.V. Rajanbabu et al., J. Org. Chem. 1986, 51, 5458) . Submete-se o composto (1-2) a reacção de acoplamento de Suzuki com o composto (1-3) (C.R. Johnsone et al., Synlett 1997, 1406) seguido de desililação para produzir o composto (1-4) OBn OBn

1-1 1-2 OBn I) 9-BBN(9-borabiciclo- [3,3,l]nonano il) PdCMdppf), KjPOd ÍKl/rt IIOTBAF 1-3

(TBAF- Fluoreto de n-tetrabutilamónio) 23 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (b) Ο composto (1-5) é obtido por oxidação do grupo hidroxilo do composto (1-4) para obter o composto aldeido (1-5) . 23 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ OBn

MnOj CH Cí3 OH OBn

(c) Condensam-se o composto aldeido (1-5) e o composto amina (1-6) na presença de um peneiro molecular e de ácido p-toluenossulfónico para obter o composto (1-7). OBn

0 composto imina (1-7) e o composto (1-8) são submetidos a reacção de Staudinger fazendo refluxar na presença de base para produzir um composto de β-lactama. Nesta reacção, quando a tri-n-butilamina é utilizada como base, obtém-se o composto de trans β-lactama. Quando se utiliza como base a LDA (di-isopropilamida de litio), obtém-se o composto cis^-lactama.

Para além disso, pode-se também obter o composto de β-lactama assimétrico por adição de um ligando quiral na mistura de reacção (A.M. Hafez et al., Org. Lett. 2000, 2 (25), 3963-3965). Subsequentemente, obtém-se por hidrogenação catalítica o composto desbenzilado (1-9). 24 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ ΟΒη

(d) Ο composto (1-10) é obtido por acetilação do composto (1-9) . OH OAc

(2) No caso de R4 ser -CH2- nos compostos de fórmula geral (I), o composto é preparado através das seguintes reacções.

Faz-se reagir o composto (1-11) com reagente de Grignard (1-12) para produzir o composto (1-13) (M.F. Wong et ai., J. Carbohydr. Chem. 1996, 15(6), 763 ; C.D. Hurd et ai., J. Am. Chem. Soc. 1945, 67, 1972 ; H. Togo et ai., Synthesis 1998, 409) . Em alternativa, faz-se reagir o composto (1-11) com reagente de Grignard (1-12) seguido de desidroxilação com hidreto de trietilsililo. O grupo hidroxilo formado é convertido num grupo rejeitado como o grupo tosilo ou halogéneo e faz-se reagir o composto resultante com base para produzir o composto olefina. A seguir, o composto (1-13) é obtido por hidrogenação do composto olefina. O composto (1-13) é convertido em reagente de Grignard com metal magnésio e feito reagir com DMF (dimetilformamida) para produzir o composto (1-14). O composto (1-15) é obtido através da reacção de reagente de Grignard do composto (1-13) com gelo seco (C02) . 25 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

X - ΟΒιϊ ΟΒπ (R'áq «η W“ 8nG Βη ΒγΜ^ 1 Μ| Br Μ2

08η Βη δη

1-1 08« J)

Η) Bujm, BíyGEij ou M3 POCI3, base, depois H2, Pd/c 0 composto (1-14) e o composto (1-15) que são obtidos conforme foi anteriormente mencionado são os compostos intermediários de síntese da fórmula geral (I) em conformidade com o Método l-(l)-(c) e (d). Método 2 (1) No caso de R4 ser uma ligação directamente estabelecida nos compostos de fórmula geral (I), o composto é preparado através das seguintes reacções.

Faz-se reagir tetrabenzilglucuronolactona (1-1) com o composto (2-1) seguido de reacção com Et3SiH e BF3-Et20 para proporcionar o composto (2-2) (J.M. Lancelin et al., Tetrahedron Lett. 1983, 24, 4833). 0 composto (2-2) é o composto intermediário de síntese de fórmula geral (I) em conformidade com o método 1—(1)—(b), (c), e (d).

(2) No caso de R4 ser uma ligação estabelecida directamente nos compostos de fórmula geral (I), o composto é preparado através das seguintes reacções. 26 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ο composto (2-4) é obtido através da reacção do composto (1-11) com reagentes de Grignard (2-3) (F. Marquez et al., An. Quim., Ser. C. 1983, 79(3), 428). 26 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

0 composto (1-14) é obtido por conversão do grupo metilo do composto (2-4) em composto aldeído (P.S. Portoghese et al., J. Med. Chem. 2000, 43, 2489). OBn ΒηΟ,Λ ,*OBn

OBn

1) NBS

OBn OBn 2) NaHCOj. DMSO

OBn CHO'^(R3)q M4 O composto (2-2) é obtido por redução do composto (1-14) com NaBH4. OBn OBn

Método 3 (1) No caso de R4 ser -OCH2- nos compostos de fórmula geral (I), o composto é preparado através das seguintes reacções: (a) O composto (3-1) preparado pelo método conhecido (D. Zhai et al., J. Am. Chem. Soc. 1988, 110, 2501; P. Allevi et al., J. Carbohydr. Chem. 1993, 12(2), 209) é submetido a reacção de Mitsunobu com o composto (3-2) para proporcionar o composto (3-3). 27 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ ΟΒη ΒηΟ,

(b) Ο composto (3-4) é obtido por redução do grupo metiléster do composto (3-3) em grupo álcool com LiAlH4.

o composto (3-4) é o composto intermediário de síntese de fórmula geral (I) em conformidade com o método l-(l)-(b), (c), e (d) . Método 4

No caso de um de Ai, A3, e A4 ser o composto seguinte nos compostos de fórmula geral (I), o composto é preparado através das seguintes reacções:

Faz-se reagir o composto (4-1) com alquiléster do ácido 2-bromoisoláctico (4-2) na presença de K2CO3 seguido de hidrogenação para produzir o composto de fórmula geral (I) . Em alternativa, o composto (4-3) é obtido por hidrólise com hidróxido de lítio e seguido de desprotecção para proporcionar o composto de fórmula geral (I).

Desprotecção OH 0 COjR, (R=OH) Fórmula geral (I)

X 28 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 5

No caso de R2 ser -C02H nos compostos de fórmula geral (I), o composto é preparado através das seguintes reacções: 0 composto (5-1) é oxidado com TEMPO (2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi, radical livre) para produzir o composto (5-2) .

OH

Método 6 0 composto (6-3) é obtido através da reacção do composto (6-1) e (6-2). 0 composto (6-3) é oxidado no composto sulfona seguido de reacção de Ramberg-Backlund (P.S. Bélica et. al., Tetrahedron Lett. 1998, 39, 8225; F.K. Griffin et al., Tetrahedron Lett. 1998, 39, 8179) para proporcionar o composto (6-4). 0 composto (6-4) é hidrogenado seguindo-se uma reacção com TBAF para proporcionar o composto (1-4). 0 composto (1-4) pode ser utilizado como materiais de síntese para obter a fórmula geral (I) em conformidade com o método 1. ιτγ'·' OBn 6-1 OBn OBn

1) H2, Pd-C

1) mCPBA

HS' O 6-2 OBn 2) CBr2 F2 KOH-A12Oj í-BtOH

2) TBAF OBn

29 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 7 (1) No caso de R3 ser -OH- e -0C(0)Ri nos compostos de fórmula geral (I), os compostos são preparados através das seguintes reacções. 0 composto (7-3) é obtido por glicosidação do composto (7-1) com o composto (1-11) na presença de ácido de Lewis (BF3-Et20, SnCl4, AgOTf-Cp2Hf Cl2, etc) (R.R. Schmidt et al., Synthesis 1993, 325) . A reacção prossegue em 2 passos, o primeiro passo é a O-glicosidação e o segundo passo é o rearranjo do O-glicósido para C-glicósido. Para além disso, o composto (7-3) pode ser convertido no composto (7-4) por esterificação do grupo hidroxilfenólico. Os compostos (7-3) e (7-4) podem ser utilizados como materiais de sintese para obter a fórmula geral (I) em conformidade com o método 1 e 3.

7-3 (2) No caso de R3 ser -OH- e -0C(0)Ri nos compostos de fórmula geral (I), os compostos são preparados através das seguintes reacções: 0 composto (7-6) obtido pelo mesmo procedimento do método 7-(l) é desprotegido para obter o composto (7-7). Um do grupo hidroxilo do composto é triflatado, seguido pela reacção de monóxido de carbono para originar o composto (7-3) (R.E.

Dolle et al., Chem. Commun. 1987, 904). O composto (7-3) é utilizado como material de partida de formula geral (I) em conformidade com o método 7-(1), 1 e 3. 30 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Ο composto (7-3) é também obtido pela mesma reacção de acoplamento do composto (7-11) com o composto (1-11) para obter o composto (7-12) seguido de reacção de Haloform do grupo acetilo para obter o composto (7-3) (S. Kajigaeshi et al., Synthesis 1985, 674). OBn

MI . íl T Ácido de Lewis + —-- Ac Ac 'Ml BnO (Ac= * COCHj)

(3) No caso de R3 ser -OH- e -0C(0)Ri nos compostos de fórmula geral (I), os compostos são preparados através da seguinte reacção: O composto (7-10) é obtido pela C-glicosidação do arilo dos compostos (7-9) em conformidade com o método 7—(1). O composto (7-10) é utilizado como material de partida de fórmula geral (I) em conformidade com o método 8.

OBti

(onde Z é o mesmo como mencionado acima.) 31 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 8 Métodos preparativos dos compostos opticamente activos (I) (a) A benzilação do grupo hidroxi de D-p-hidroxifenil-glicina (8-1) proporciona o composto (8-2) usando o método de E. Wunsch (Chem. Ber. 1958, 91, 543). OH 1) NaOH, H20 OBn ίΐΊ 2) C11SO4 |p*| 1 3) BnBr, NaOH, MeOH 4) 0.5N HCI N C02H H2N 8-1 8-2 0 composto (8-3) é obtido pela protecção do grupo amina do composto (8-2) com o grupo BOC. OBn OBn

0 composto (8-3) é convertido no composto (8-4) por homologação (W.W. Ogilvie et ai., Bioorg. Med. Chem. 1999, 7, 1521) . Depois, o composto (8-5) é obtido pela desprotecção do grupo Boc do composto (8-4).

8-3

1) CICO2 *Bu, EI3N, THF 2) CH2N2 / Et2Q 3) AgOBz, EtjN 4) BnBr, DBU

8-4 OBn 1) HCI / EtOH 2) 1M K2CO?aq

8-5 A ciclização do composto (8-5) proporciona a β-lactama (8-6) usando o método de W.W. Ogilvie (W.W. Ogilvie et ai., Bioorg. Med. Chem. 1999, 7, 1521). 32 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ ΟΒη

Ο composto (8-5) é também obtido pelo método que se segue, na forma do composto opticamente activo.

Nomeadamente, o composto (8-9) é obtido pela reacção do composto (8-7) com os derivados aminoácidos opticamente activos (8-8) na presença de catalisador ácido. 0 composto (8-9) é reduzido directamente ao composto (8-11). 0 composto (8-11) é também obtido através de uma redução de olefina (ex. NaHB(OAc)3, NaBH4) e tratado com ácido forte (ex. HCO2H, Et3SiH) (C. Cimarell et al., J. Org. Chem. 1996, 61, 5557) ou hidrogenolise. 0 composto (8-11) proporciona o composto (8-5) através de uma reacção de troca de éster com BnOH. 0 composto (8-5) pode ser convertido ao composto (8-6) pelo mesmo método que o mencionado anteriormente.

0 composto de β-lactama (8-6) é N-alquilado pelo método de D.M.T. Chan (Tetrahedron Lett. 1998, 39, 2933), seguido de desbenzilação para proporcionar o composto (8-12).

n Cu (Oac>2 mí 2) H2 / Pd-C

33 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Ο composto (8-13) é obtido por reacção de acoplamento de Suzuki do composto (8-12) e o derivado de glucose (1-2) em conformidade com o método de C.R. Johnson (C.R. Johnson et al., Synlett 1997, 1406). 33 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ OBn

O composto (8-13) reage com LDA, seguido de C-alquilação com acrilato de metilo para proporcionar o composto (8-14) .

A conversão do grupo éster do composto (8-14) no cloreto ácido, e o acoplamento com o composto (8-15) usando o método de Negishi origina o composto (8-16). OBn

OBn

O composto (8-16) é desbenzilado para o composto (8-17) e seguido de redução assimétrica do grupo cetona do composto (8-17) pelo método de E.J. Corey (E.J. Corey et al., J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 7925). 34 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ ΟΒη ΟΗ

(b) 0 composto (8-13) reage com LDA, seguido pela reacção com o composto (8-20) para proporcionar o composto (8-21). O composto (8-22) é obtido por hidrogenação do composto (8-21). OBn

H; Pd-C OBn

HO*.

OH ^ OH

No caso de Αχ na fórmula geral (I) ser o composto seguinte: R3

Rj R: por exemplo, em conformidade com o método 8, o composto 39 é preparado a partir do seguinte composto (8-23) que corresponde ao composto (8-15) . 35 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ ΟΒη

ΒηΟ/,. Λ\ΟΒη -Λ^° 8-23

No caso de Α4 na fórmula geral (I) ser o seguinte composto:

por exemplo, em conformidade com o método 8, o composto 38 é preparado a partir do seguinte composto (8-24) que corresponde ao composto (8-12). OBn

8-24 0 composto (8-25) é também obtido por separação enzimática de um composto racémico (S.J. Faulconbridge et al.f Tetrahedron Lett., 2000, 41, 2679). O composto (8-25) pode ser convertido na fórmula geral (2) através de acoplamento de Suzuki, conforme foi anteriormente mencionado.

Br

Método 9 Método preparativo dos compostos opticamente activos (II) O composto (9-1) é condensado com o composto (9-2) para proporcionar o composto (9-3) através do método de K. Tomioka 36 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (Κ. Tomioka et al., J. Chem. Soc., Chem. Commun. 1999, 715). O composto de formula geral (I) é obtido pela desprotecção do composto (9-3). 0 composto (9-3) é também obtido pela reacção do éter sililenólico com ácido de Lewis em vez do composto (9-1) . 36 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ λ^α, λ- M LiO^A, + OCHEtj

A,

(I) Método 10 Método preparativo dos compostos opticamente activos (III) O composto (10-1) é condensado com o composto (9-2) para proporcionar o composto (10-4) pelo método E.J. Corey (E.J. Corey et al., Tetrahedron Lett. 1991, 32, 5287). O composto de fórmula geral (I) é obtido pela desprotecção do composto (10-4).

37 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 11 Método preparativo dos compostos opticamente activos (IV)

Faz-se reagir (R)-(+)-2,10-canforsultama (11-1) com ácido clorídrico (11-2) e obtém-se o composto (11-3) . 0 composto (11-5) é obtido através da reacção de acoplamento do composto (11-3) e do composto (11-4) na presença de ácidos de Lewis (TÍCI4, BF3-OEt2) . Faz-se reagir o composto (11-5) com BSA, seguido de reacção com TBAF (fluoreto de n-tetra-butilamónio) para proporcionar o composto de β-lactama (11-6).

0 composto obtido (11-6) é convertido no composto (8-15) pelo mesmo método que o método 8.

0 composto (11-6) pode ser utilizado como material de partida do composto de fórmula geral (I), em conformidade com o método 8. Para além disso, quando é utilizado o composto (11-7) em vez do composto (11-4), pode ser obtido pelo mesmo método o composto (11-8) que corresponde ao composto (11-6). 38 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

T1CI4. Ti (oipr)4, DIPEA. CH2C1, 2) BSA 3) TBAF

0 composto (11-9) pode ser obtido a partir do composto (11-8) pelo mesmo método que 0 indicado no método 7.

OBn

Ácido de Lewis OBn

0 composto (11-9) pode ser utilizado como material de partida de fórmula geral (I), em conformidade com o método 8. Método 12 0 composto (11-6) é submetido a reacção de Heck com o composto (12-1) preparado pelo método referido (M. Yokoyama et al., Synthesis 1998, 409) e obtém-se o composto (12-2) (R. F. Heck et al., J. Am. Chem. Soc. 1968, 90, 5518). O composto (12-2) pode ser utilizado como material de partida de fórmula geral (I), em conformidade com o método 8.

OBn

O composto (12-3) é obtido por hidrogenação do composto (12-2). O composto (12-3) pode ser utilizado como material de partida de fórmula geral (I), em conformidade com o método 8.

39 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ ΟΒη Me02cv/</, Ιί C

Hj, Pd-C

ΟΒη MeOjC^*, 12- C

Método 13 A C-glicosidação do composto (13-1) com o composto (1-11) (R6 é -Me, -Br, ou -CH2OTBS) proporciona o composto (13-2) na presença de ácido de Lewis (BF3-OEt2, ZnCl2, AgOTf) . (K.C.

Nicolaou et ai., J. Chem. Soc., Chem. Comm. 1984, 1153). O R6 do composto (13-2) é convertido em aldeído através do mesmo método que o método 1-(1)-(6), 1-(2), ou 2-(2). 0 composto obtido pode ser utilizado como material de partida de fórmula geral (I), em conformidade com o método 1.

Método 14 0 composto (14-1) é submetido a reacção de acoplamento, tal como a reacção de acoplamento de Suzuki e a reacção de Grignard (Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2000, 4415), ou alquilação na presença de base. Após a desprotecção, é obtido o composto (14-3).

Método 15 O composto (15-1) que é preparado pelo método de L. Dheilly (L. Dheilly et al., Carbohydr. Res. 1992, 224, 301) é 40 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ convertido no composto (15-2) por redução e halogenação. O composto (15-2) é transformado nos reagentes organo-metálicos (reagente de Grignard, reagente organozinco), seguido de reacção de acoplamento com o composto (15-3) na presença de catalisadores de paládio ou níquel. Depois, o composto (15-4) é obtido por ciclização. 2) Halogenação

1) Redução OBn ΒθΟ„Α,νΟδη MeOOC,Ri0Iv.OBn 15-1 OBb Ciclização

Método 16 O composto (16-1) pode ser obtido por reacção de Heck usando o composto (12-1) e o composto (15-3) segundo o mesmo método 12. O composto (16-1) é convertido à fórmula geral (I) em conformidade com o método 17.

Método 17 O composto (17-1) é tratado com hidróxido de lítio para remover canforsultama e obter o composto (17-2). (A canforsultama pode ser recolhida e reutilizada). Depois, o 41 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ composto (17-2) é ciclizado com P0C13 no solvente tal como diclorometano ou dicloroetano para produzir a fórmula geral (I) . 0 composto de fórmula geral (I) é também obtido utilizando os reagentes de condensação tais como o DCC (1,3-diciclo-hexicarbodi-imida) ou DEPC (Dietilfosforilcianeto) em diclorometano ou dmf na presença de base. Ainda, o composto de fórmula geral (I) é também obtido usando reagente de Mitsunobu, DEAD (Dietilazodicarboxilato) ou DIAD (Di-isopropilazodicarboxilato) com Bu3P ou Ph3P ou reagindo com (PyS)2 ou após reagir com cloreto de 2,6-dicloro-benzoilo ou cloreto de 2,4,6-triclorobenzoilo na presença de NaH e tratando com base como a solução de NaOH e obtida a fórmula geral (I) . 41 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ CR,)„ mp

Ou o composto (17-2) é esterificado no composto (17-3), seguido de reacção de base tal como a LDA, LiHMDS {bis(trimetilsilil)amida de litio), NaHMDS {bis(trimetil-silil)amida de sódio), NaH, t-BuOK, em solvente tal como o THF para produzir a fórmula geral (I) . A fórmula geral (I) é também obtida por uma reacção de reagente de Grignard tal como EtMgBr, t-BuMgBr com composto (17-3). Aplicando a mesma reacção ao composto (17-1), é obtido o composto de fórmula geral (I).

«J><| (R3í £L- Esterificação * r A« R?0.

Ciclização (R, é Me, Et) Fórmula geral (I) j* Αλ 0¾ 42 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 18 Ο composto (18-2) é obtido por oxidação com Se02 do composto (18-4) ou oxidação com Pd(OAc)2-benzquinona-HC104 do composto (18-4), depois uma redução assimétrica do grupo cetona do composto (18-2) proporcionado no composto (18-3) . 0 composto (18-3) é também obtido por hidroboração do composto (18-4) . Quando é utilizado um redutor de borano quiral, a hidroboração prossegue estereosselectivamente.

Nas fórmulas que estão descritas entre o método 1 e o método 18, Ai, A2, A4, R3, FU, p, q, r, e Z são conforme foi anteriormente referido, e R6 é -CH=CH2, -CH2OH. k é inteiro ^1, 1 é 0 ou um inteiro ^1, k+1 é um inteiro ^10. 43 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 19 43 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Br (Rj)n Ο Ο

19-1 (Rs)»

Redução α4 assimétrica catalítica

19-2 CRj)n β-lactamização o

R £ 19-5 Catalisador de Pd ou catalisador de Ni (R7 é um grupo -OAc ou um grupo -OBn) 0 composto (19-2) é obtido por redução assimétrica do composto (19-1). Como reduções assimétricas, são utilizados os catalisadores de metais de transição (R. Noyori et al., j. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 5856) . Após a conversão do grupo hidroxi do composto (19-2) num grupo rejeitado, o composto resultante sofre ciclização para dar o composto (19-3). Ou o composto (19-3) é obtido directamente por reacção de Mitsunobu a partir do composto (19-2). O composto (19-3) é submetido a reacção de Heck com o composto (12-1), depois a ligação dupla formada é hidrogenada para originar o composto (19-4). Ou o composto (19-3) é submetido a reacção de acoplamento de Negishin (T. Hayashi et al., J. Am. Chem. Soc. 1984, 106, 158-163; A. Saiga et al.r Tetrahedron Lett. 2000, 41, 4629-4632; C. Dai et al., J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, 2719-2724) com o composto (19-5) para obter o composto (19-4). O composto (19-4) pode ser utilizado como material de sintese da fórmula geral (I) em conformidade com o exemplo 8. 44 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 20 Síntese do Composto (19-3)

{R3)n (Rs)n 104

Redução assimétrica

Sr

mn

< NH O

204 0*3>*> Br c

(Rj)» (R3)n 1) Hidrólise do grupo éster 2) β-lactamização 0 composto imina (20-1) é submetido a redução assimétrica para obter o composto (20-2) em conformidade com o exemplo 19. O grupo éster do composto (20-2) é hidrolizado no composto ácido carboxílico correspondente e o ácido carboxílico obtido é submetido a β-lactamização utilizando o reagente de condensação (por exemplo DCC) para originar o composto (19-3). O composto (19-3) é também obtido por β-lactamização do composto (20-2) usando EtMgBr, por exemplo. O composto (19-3) pode ser utilizado o material de síntese da fórmula geral (I) em conformidade com o exemplo 19. 45 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Método 21 Síntese do Composto (21-10)

Faz-se reagir o composto (19-1) com uma base, seguida da adição de composto (21-1) para gerar o composto (21-2) . O composto (21-2) é convertido no composto (21-4) por redução assimétrica ou no composto (21-5) por reacção com o composto (21-3) .

Faz-se reagir o composto (21-4) com o composto (21-3) para proporcionar o composto (21-6) . Subsequentemente, o ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 4β composto (21-6) é acoplado ao composto de açúcar (21-1 ou 19-5) para originar o composto (21-8), depois é obtido o composto de β-lactama (21-10).

Por outro lado, depois é obtido o composto (21-7) por redução assimétrica do composto (21-5) e o composto (21-7) é obtido por acoplamento com o composto de açúcar (12-1 ou 19-5) para gerar o composto (21-9). O composto (21-10) é também obtido por β-lactamização do composto (21-9). O composto (21— 10) pode ser o material de síntese da fórmula geral (I).

Agentes hipocolesterolémicos utilizando o hamster hiper-colesterolémico

Separaram-se hamsters em grupos com 3 animais por grupo e alimentaram-se com uma dieta CE-2 contendo 0,5% de colesterol (CLEA Japan Inc.) durante 4 ou 7 dias. Alimentou-se o grupo de dieta normal com CE-2 padrão durante a experiência. Diariamente, administrou-se por via oral cada composto ou veiculo (0,2 ml de óleo de milho) por 100 g de peso corporal durante 4 ou 7 dias a partir do dia em que se iniciou a dieta com colesterol elevado. 20 h após a administração final, colheram-se amostras de sangue da aorta abdominal de animais não alimentados sob anestesia com dietiléter. Mediu-se o colesterol sérico por método enzimático, usando o E-test de colesterol Wako (Wako Pure Chemical Industries) . A actividade dos compostos de teste expressa-se na percentagem de redução do composto de teste, com base na comparação do colesterol total elevado tratado apenas com a dieta de colesterol elevado sem tratamento. Avaliaram-se os compostos de teste com o valor de rotação óptica, nos compostos 1-58, como compostos quirais. Os resultados encontram-se no quadro que se segue. Cada valor no quadro mostra a percentagem de variação e o valor negativo indica a acção hipocolesterolémica positiva. 47 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 47 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ Quadro 13 N. ° Composto de Teste (mg/kg) Dia de Dosagem Colesterol Sérico (%) 2 3 7 -120 13 20 4 -28 15 20 4 -21 23 3 7 - 177 24 3 7 - 156 28 3 7 -130 33 3 4 -67 38 10 4 -2 45 3 4 -136 46 3 4 -147 49 10 4 -55 56 0,3 4 1 00 ►Ê* O 57 0,3 4 -81,3 Teste de estabilidade biológica

Para avaliar a estabilidade biológica de C-glicósido, compararam-se as estabilidades biológicas do derivado de C-alilo (A) e o do derivado de O-alilo (B) contra uma α-Ν-acetil-D-galactosaminidase como glicosidase segundo o método de Mark von Itzstein (Org. Lett., 1999, 1, 443-446). Fórmula química 69

cHNJ-acetil galactosaminidase

Sem reacção

Of-N-acetil galactosaminidase

'·>< OH NHAc

CHjQH

Enzima: a-N-acetil-galactosaminidase 0,32 Unidades (1,69 unidades/ml de tampão de citrato de sódio 0,5 M contendo 0,1% de BSA)

Solvente: 0,6 ml de tampão de ácido cítrico (pH=3) 48

ΕΡ 1 362 S55/PT

Temperatura: 35°C

Procedimento: Dissolveu-se o substrato (2 mg) em tampão de ácido citrico (0,6 ml) e juntou-se a-N-acetil-galactosaminidase (0,32 unidades). Determinou-se o espectro de RMN em intervalos de tempo constantes e determinaram-se os teores dos substratos que restaram.

Os resultados dos substratos que restaram encontram-se no Quadro 14.

Quadro 14 tempo substraíb'-^ 2 4 6 8 10 12 .. Ί71 B 89 79 68 5? 50 45 40 22 A 100 100 100 100 o o 100 100 100 A partir dos resultados anteriores verifica-se que 78% do derivado de O-alilo (B) foi claramente hidrolizado após 24 h. O derivado de C-alilo (A), a ligação éter substituída pela ligação C-C, não foi afectado pela enzima conforme o esperado e não se observou formação de degradação após 24 h.

EXEMPLO

Proporcionam-se os seguintes exemplos.

Referência 1 4—(4—{[(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroxi-metil)-per-hidro-2H-piran-2-il-]metil}fenil)-(4S*, 3S*)-1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]azetidina-2-ona

OH

2 49 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Referência 1-a Síntese do composto (1-4)

Adicionou-se 50 ml de 9-BBN (solução de tetra-hidro-furano a 0,5 M) a uma solução do composto (1-2) (5,37 g) em tetra-hidrofurano (70 ml) e fez-se refluxar a mistura durante 5 h, arrefeceu-se até à temperatura ambiente e adicionou-se fosfato de potássio 3 M (10 ml) à mistura, à temperatura ambiente, durante 15 minutos. À mistura de reacção adicionou-se uma solução de 4-(t-butildimetilsilil-oximetil)bromo-benzeno (3,01 g) e PdCl2 (dppf) (0,73 g) em N,N-dimetil-formamida (100 ml). Agitou-se a mistura durante 18 horas. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro, e concentrou-se a pressão reduzida. Juntou-se ao resíduo fluoreto de tetrabutilamónio (solução de tetra-hidrofurano 1,0 M) (15 ml). Agitou-se a mistura durante 3 horas e extractou-se com acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro, e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/2) para originar 3,58 g (2 passos, 56%) do composto (1-4).

Massa (ESI) m/z: 662 (M + H20)+ IR (KBr): 3430 cm"1 1H-RMN (CDC13) : 2,71 (d, J= 8,8 Hz, J= 13,2 Hz), 3,13 (d, J= 2,4 Hz, J= 14,2 Hz), 3,32-3,36 (m, 2H), 3,45-3,50 (m, 1H), 3,60-3,74 (m, 4H), 4,48-4,68 (m, 6H), 4,80-4,95 (m, 4H), 7,18-7,37 (m, 24H).

Reference 1-b Síntese do composto (1-5)

Adicionou-se dióxido de magnésio (9,65 g) a uma solução do composto (1-4) (3,6 g) em clorofórmio (22,0 ml) e fez-se refluxar a mistura durante 2 horas, e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Filtrou-se a mistura através de uma almofada de Celite e evaporou-se para originar 3,46 g (97%) do composto (1-5) na forma de um cristal incolor.

Massa (ESI) m/z: 660 (M + H20)+ IR (KBr) : 1692 cm"1 1H-RMN (CDCI3) : 2,77 (d, J= 8,8 Hz, J=14,2 Hz), 3,16-3,20 (m, 1H), 3,32-3,36 (m, 2H), 3,49 (dt, J= 2,0 Hz, J=9,3 Hz), 50 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 3,61-3,66 (m, 3Η), 3,72 (t, J= 8,8 Hz), 4, 46-4, 67 (m, 4H) , 4,81-4,97 (m, 4H) , 7,18-7,41 (m, 22H) , 7,74 (d, J= 8,3Hz), 9,95 (s, 1H).

Exemplo 1 (I) Adicionou-se peneiro molecular (3,46 g), uma quantidade catalítica de ácido p-toluenossulfónico e p-fluoroanilina (0,61 ml), a uma solução do composto (1-5) (3,46 g) em tolueno (54,0 ml). Fez-se refluxar a mistura durante 1,5 h e filtrou-se. Removeu-se o solvente a pressão reduzida e submeteu-se o resíduo à reacção a seguir sem purificação. (II) Adicionou-se tributilamina (5,1 ml) e cloreto de 5-(4-fluorofenil)pentanoilo (1,16 g) a uma solução do composto obtido anteriormente em tolueno (54,0 ml). Após a mistura, fez-se refluxar a mistura durante 15 h e adicionou-se ácido clorídrico 1 N (15 ml) à mistura e deixou-se agitar a mesma durante 15 minutos. Separou-se a camada orgânica e lavou-se com solução saturada de bicarbonato de sódio, salmoura e secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo à reacção seguinte sem purificação. (iii) Submeteu-se a solução do composto obtido anteriormente em metanol-tetra-hidrofurano (5/1) (6 ml) a hidrogenação à temperatura ambiente durante 5 h na presença de 10% de paládio em carbono (200 mg) . Após a remoção do catalisador, evaporou-se a mistura de reacção e submeteu-se o resíduo a cromatografia em sílica gel (clorofórmio/metanol = 10/1) para originar 64 mg (26%) do composto 2.

Massa (ESI) m/z: 554 (M + H)+ IR (KBr): 3376, 1737, 1503, 1218 cm-1 1H-RMN (CD3OD): 1,82-1,98 (m, 4H), 2,65-2,78 (m, 3H), 3,09-3,39 (m, 7H), 3,64 (d, J= 5,4 Hz, J= 12,2 Hz), 3,77-3,81 (m, 1H), 4,94-4,98 (m, 1H), 6,98-7,05 (m, 4H), 7,18-7,22 (m, 2H), 7,30-7,33 (m, 4H), 7,38 (d, J=7,8 Hz, 2H).

Exemplo 2 Síntese do Composto 3 4—(4 — {[(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-triacetoxi-6-(acetoximetil)-per-hidro-2H-pirano-2-il]metil}fenil)-(4S*,3S*)-1-(4-fluoro- 51 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ fenil)-3-[3-(4—fluorofenil)propil]azetidina-2-ona 51 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ OAc

Adicionou-se trietilamina (0,77 ml), anidrido acético (0,49 ml) e uma quantidade catalítica de 4-dimetilamino-piridina, a uma solução do composto 2 (600 mg) em dicloro- metano (11,0 ml). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 16 h. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia de coluna de sílica-gel (acetato de etilo /hexano = 1/2) para originar 600 mg (77%) do composto 3.

Massa (ESI) m/z: 722 (M + H)+ IR (KBr): 1749, 1506, 1380, 1221, 1029 cm"1 1H-RMN (CDCls) : 1, 82-1, 84 (m, 4H) , 1,93 (s, 3H), 1,97 (s, l, 5 H), 1,98 (s, 1,5 H), 1,99 (s, 1,5 H) , 2,00 (s, 1,5 H) , 2.02 (s, 3H), 2,61-2,64 (m, 2H), 2,79-2,82 (m, 2H), 3,07-3,08 m, 1H), 3,56-3,69 (m, 2H), 4,02-4,23 (m, 2H), 4,58 (d, J=2,4 Hz), 4,89-4,95 (m, 1H), 5,03 (t, J=9,3 Hz), 5,17 (t, J= 9.3 Hz), 6,90-7,007 (m, 4H), 7,08-7,12 (m, 2H), 7,18-7,24 (m, 6H) .

Referência 2 Síntese do composto (2-2) Álcool 4-(2,3,4,6-tetra-o-benzil-p-D-glucopiranosil)benzilo

A 7,31 g de tetrabenzilgluconolactona adicionou-se, gota a gota, a -78°C, o anião de lítio, preparado a partir de 6,66 g de p-(t-butildifenilsililoximetil)bromobenzeno e 10 ml de n-butil-lítio (solução de hexano 1,57 M) a -78°C. Agitou-se a 52 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ mistura durante 2 h e extractou-se com acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo à reacção seguinte sem purificação. A uma solução do composto obtido anteriormente em diclorometano (26 ml) adicionou-se trietilsilano (0,82 ml) e complexo trifluoreto de boro-éter dietílico (0,33 ml) a -50°C. Agitou-se a mistura durante 1,5 h. Adicionou-se solução de bicarbonato de sódio. Agitou-se a mistura durante 1 h, e depois extractou-se com éter. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro, e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel para originar 1,48 g (15%) do composto (2-2). IR (KBr) : 3388, 1452, 1362, 1210, 1068, 1026 crrT1 1H-RMN (CDC13) : 3,49-3,81 (m, 4H) , 4, 04-4, 96 (m, 13H), 6,92-6,95 (m, 2H), 7, 09-7, 76 (m, 2H) .

Referência 3-a Éster metílico de ácido 4-(2,3,4,6-tetra-o-benzil^-D-glucopiranosil)metoxibenzóico

MeOOC OBn

Adicionou-se di-isopropilazodicarboxilato (0,3 ml) a uma solução do composto (3-1) (555 mg), p-hidroxibenzoato de metilo (153 mg) e trifenilfosfina (394 mg) em tetra-hidro-furano (5,0 ml). Agitou-se a mistura durante 22 h e concentrou-se a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/ hexano = 1/3) para originar 180 mg (26%) do composto (3-a). IR (puro): 1713, 1605, 1434, 1359, 1248, 1164 cm-1 ^-RMN (CDCI3) : 3, 49-3, 77 (m, 7H), 3,89 (s, 3H), 4,07-4,11 (m, 1H), 4,19-4,22 (m, 1H), 4,51-4,60 (m, 4H), 4,82-4,89 (m, 2H), 4,94 (s, 2H), 6,87 (d, J= 8,8 Hz, 2H) , 7,15-7,36 (m, 20H), 7,96 (d, J= 8,8 Hz, 2H). 53 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Referência 3-b Álcool 4-(2,3,4,6-tetra-o-benzil-p-D-glucopiranosil)- metoxibenzílico OBn

OH

Adicionou-se 180 mg do composto (3—a) em 5 ml de éter, a 0°C, a uma suspensão de 10 mg de hidreto de alumínio-lítio em 5 ml de éter. Após 15 minutos de agitação da mistura à temperatura ambiente, adicionou-se água (2,0 ml) e solução de hidróxido de sódio a 15% (0,5 ml) e filtrou-se a suspensão resultante através de uma almofada de Celite. Após a remoção do solvente, purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de silica gel (acetato de etilo/hexano = 1/1) para originar 160 mg (93%) do composto (3-b).

Massa (ESI) m/z: 684 (Μ + H + Na)+ IR (puro) : 3442 cm-1 1H-RMN (CDC13): 1,56 (s, 1H), 3,49-3,53 (m, 1H), 3,60-3,77 (m, 6H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,20-4,23 (m, 1H), 4,52-4,61 (m, 6H), 4,85 (ABq, j= 11,2 Hz, 2H) , 4,93 (s, 2H) , 6,88 (d, J= 8,8 Hz, 2H), 7,15-7,36 (m, 22H).

Referência 3-c Síntese do composto (1-14) 4-(2,3,4,6-tetra-o-benzil-p-D-glucopiranosil)benzaldeído OBn

(I) Adicionou-se NBS (0,9 mg) and benzoilperóxido (0,05 g) a uma solução do 4-(2,3,4,6-tetra-o-benzil^-D-glucopiranosil)tolueno (0,3 g) em tetracloreto de carbono 54 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ (3 ml). Fez-se refluxar a mistura durante 2 h. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, adicionou-se éter (30 ml) à mistura. Separaram-se os sais resultantes por filtração por sucção. Concentrou-se o filtrado e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/8). (II) Adicionou-se bicarbonato de sódio (45 mg) a uma solução de bromo (224 mg) obtida anteriormente em dimetilsulfóxido (3 ml). Após a agitação da mistura à temperatura ambiente durante 1 hora e a 100°C durante 4 h, extractou-se a mistura com acetato de etilo (30 ml). Lavou-se a camada orgânica com salmoura, e secou-se sobre sulfato de sódio anidro. A remoção do solvente a pressão reduzida originou o composto (1-14) (2 passos, 26%).

Massa (m/z): 436 (M+), 394, 307, 273, 245, 214, 163, 135, 105, 77, 51 (BP) IR (puro) : 2914, 1641, 1437, 1257, 1017, 954, 708 cm-1 1H-RMN (CDC12, 400 MHz) δ: 1, 96, 1, 97, 2, 06 (12H, cada, s), 3, 75-5, 40 (7H, m), 7, 96, 8, 02 (4H, ABq), 10,06 (1H, s).

Exemplo 3 Ácido 2—(4—[4—[(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6- (hidroximetil)-per-hidro-2H-piran-2-iljmetil]fenil)-(4S*,3R*)-1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-2- oxazetidineil)-fenoxi-2-metilpropanóico

OBn OH

(I) Adicionou-se 2-bromo-2-metilpropionato de etilo (0,77 ml) e carbonato de potássio (0,97 g) a uma solução do composto (4-4) (3,19 g) em acetona (22,0 ml). Fez-se refluxar a mistura durante 40 h, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/3) . (II) Submeteu-se a hidrogenação uma solução do composto 18 (2,93 g) obtido anteriormente em etanol-tetra-hidrofurano (1/1) (40 ml) à temperatura ambiente durante 3 h na presença ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 5 5 de 10% de paládio em carbono (0,3 g) . Após a remoção do catalisador, evaporou-se o filtrado. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/metanol = 10/1) para originar 1,21 g (2 passos, 51,8%) do composto 18.

Adicionou-se hidróxido de lítio (50 mg) a uma solução do composto 18 (400 mg) em tetra-hidrofurano-água (5/1) (3 ml).

Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 8 horas e adicionou-se ácido clorídrico 1 N para ajustar o pH para 3. Extractou-se a mistura com acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/metanol = 5/1) para originar 377 mg (3 passos, 51,0%) do composto 19.

Massa (ESI) m/z: 636 (M-H)“ IR (KBr): 3400, 1722, 1503 cm"1 ^-RMN (CD3OD): 1,53 (s, 6H), 1,81-1,95 (m, 4H), 2,65-2,68 (m, 2H), 2,72-2,78 (m, 1H), 3,09-3,41 (m, 7H), 3,62-3,66 (m, 1H), 3,77-3,82 (m, 1H) , 4,81 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 6,85 (d, J= 9,3 Hz, 2H), 6,97-7,02 (m, 2H), 7,18-7,22 (m, 4H), 7,30 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 7,38 (d, J= 8,3 Hz, 2H)

Exemplo 4 Síntese de Composto 17 Ácido 6-[(4 — {(2S*,3S*)1(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluoro-fenil)propil]-4-oxoazetidina-2-il}-(2S,3S,4R,5R,6R)-3, 4, 5-tri-hidroxiper-hidro-2H-piran-2-carboxílico

OH

17 56 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Adicionou-se solução saturada de bicarbonato de sódio (6,6 ml) e hipoclorito de sódio (6,6 ml) a uma mistura do composto 2 (300 mg), 2,2,6,6-tetrametil-l-piperodiniloxi, radical livre (10 mg) e brometo de potássio (10 mg) em acetonitrilo (6,6 ml). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 h e depois extractou-se com acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia em coluna de silica gel (clorofórmio/metanol = 10/1) para originar 90 mg (29,4%) do composto 17.

Massa (ESI) m/z : 566 (Μ-ΗΓ IR (KBr): 3388, 1737, 1509 cnT1 1H-RMN (CD3OD) : 1,82-1,97 (m, 4H), 2,65-2,68 (m, 2H) , 2,71~2,79 (m, 1H), 3,12-3,24 (m, 3H), 3,34-3,52 (m, 3H) , 3,62-3,68 (m, 1H), 4,84 (d, J= 2 , 0 Hz, 1H), 6,98 -7,05 (m, 4H), 7,18- 7,21 (m, 2H), 7,29-7,37 1 ;m, 6H) .

Referência 4-a Síntese do Composto (8-2) D-p-Benziloxifenilglicina OBn

Adicionou-se uma solução de sulfato de cobre (12,5 g) em água (100 ml) a uma solução de D-p-hidroxifenilglicina (16,7 g) em hidróxido de sódio 2 N (50 ml). Agitou-se a mistura a 60°C durante 1 h. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, adicionou-se hidróxido de sódio 2 N (50 ml), metanol (50 ml), brometo de benzilo (13,0 ml). Agitou-se a mistura à temperatura durante 20 h. Colheram-se por sucção os sais resultantes, lavaram-se com água e acetona e dissolveu-se o resíduo em ácido clorídrico 1 N (300 ml) e 57 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 h. Colheram-se por sucção os sais resultantes, lavaram-se com água e acetona e secaram-se para originar 13,18 g (51,3%) do composto (8-2).

Massa m/z: 212 (M-45)+, 122, 91 (base), 65 IR (KBr): 3022, 1587, 1509, 1389, 1248, 1008 cnT1 1H-RMN (CD3OD) : 5,07 (s, 1H), 5,16 (s, 2H), 7,12 (d, J= 6,8 Hz, 2H), 7,34-7,48 (m, 5H), 7,45 (d, J= 6,8 Hz, 2H)

Referência 4-b Síntese do Composto (8-3) D-p-Benziloxifenil-N-(t-butoxicarbonil)glicina OBn

Adicionou-se trietilamina (16,4 ml) e di-t-butil-dicarbonato (13,5 ml) a 0°C a uma solução do composto (8-2) (12,53 g) em tetra-hidrofurano-água (140 ml). Após agitação da mistura durante 4 h à temperatura ambiente, concentrou-se a mistura a pressão reduzida. Adicionou-se o resíduo com solução de ácido cítrico a 10% até pH 4 e extractou-se com acetato de etilo (100 mlx3) . Lavou-se a camada orgânica com água (100 mlx3), salmoura (100 ml) e secou-se (Na2S04) . Após a remoção do solvente orgânico a pressão reduzida, obteve-se 17,4 g (quantitativa) do composto (8-3).

Massa m/z: 357 (M+), 331, 301, 283, 256, 212, 148, 120, 91 (base). IR (KBr): 3298, 2968, 1791, 1656, 1608, 1506, 1452, 1392, 1242, 1161 cm"1. 1H-RMN (CDCI3) : 1,23 (s, 9H), 5,05 (s lg., 3H), 6,94 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 7,32-7,41 (m, 8H). 58 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Referência 4-c Síntese do Composto (8-a) (3 S)-3-[4-(benziloxi)fenil]-3-[(t-butoxi)carbonilamino]-propionato de benzilo

Adicionou-se trietilamina (5,9 ml) e isobutilcloroformato (5,8 mL) a 0°C a uma solução do composto (8-3) (14,4 g) em tetra-hidrofurano (80 ml). Depois de se agitar a mistura durante 40 minutos, adicionou-se solução de diazometano em éter, preparada a partir de N,N-dimetilnitroso-ureia (30,0 g) e solução de hidróxido de potássio a 40% (100 ml). Agitou-se a mistura durante 1,5 h e depois extinguiu-se com ácido acético. Adicionou-se éter (100 ml) e água (100 ml) à mistura. Lavou-se a camada orgânica separada com solução saturada de Na2C03 (100 mlx2), salmoura (100 mL), secou-se (Na2S04) e evaporou-se. A uma solução do resíduo em tetra-hidrofurano (80 ml) - água (100 ml) adicionou-se uma solução de benzoato de prata (0,93 g) em trietilamina (8,3 ml). Após a agitação da mistura à temperatura ambiente durante 2 h, diluiu-se a mistura com éter (100 ml). Lavou-se a solução de éter com ácido clorídrico a 10% (50 mlx2), água (100 mlx4), salmoura (50 ml), secou-se e (Na2S04) concentrou-se. Adicionou-se DBU (7,0 ml) e benzilbrometo (5,7 ml) a uma solução do resíduo em acetonitrilo (80 ml). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 4 h e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se o extracto de acetato de etilo sucessivamente com solução de ácido cítrico a 10% (50 mlx2), Na2C03 saturada (100 ml), salmoura (100 ml), secou-se (Na2S04) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/2) para originar 10,35 g (55,7%) do composto (8-4).

Massa m/z: 461 (M+), 404, 360, 314, 270, 212, 180, 121, 91, 57 (base) . IR (KBr) : 3394, 2956, 1731, 1689, 1500, 1290, 1224, 1149 cnT1. 59 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 1H-RMN (CDC13) : 1,51 (s, 9Η) , 2,89-3,12 (m, 2Η), 5,10 (s, 4H), 5,09-5,13 (m, 1H), 6,99 (d, J= 8,8 Hz, 2H), 7,30-7,54 (m, 12H).

Referência 4-d Síntese do Composto (8-5)

Cloridrato de (3S)-3-amino-[4-(benziloxi)fenil]propionato de benzilo OBn

8-5

Adicionou-se ácido clorídrico a 17% em etanol (10 ml) a uma solução do composto (8-4) (3,00 g) em acetato de etilo (30 ml) . Agitou-se a mistura durante 3 h e concentrou-se a pressão reduzida. Adicionou-se acetato de etilo - hexano (1/4) ao resíduo para cristalizar. Filtraram-se os cristais resultantes e secaram-se para originar 2,46 g (95,2%) do composto (8-5) .

Massa m/z: 361 (M-36,5)+, 344, 270, 147, 121, 91 (base), 65. IR (KBr): 3016, 2908, 1725, 1581, 1512, 1299, 1245, 1185 cm-1. 1H-RMN (CDCI3) : 3,05 (d, J= 6,4 Hz, J= 18,3 Hz, 1H), 3,27 (d, J= 6,4 Hz, J= 16,8 Hz, 1H), 4,64-4,65 (m, 1H), 4,94-5,03 (m, 4H), 6,89 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,15-7,41 (m, 12H), 8, 77-8, 78 (m, 3H) .

Referência 4-e Síntese do Composto (8-6) (4S)—4—[4—(benziloxi)fenil]azetidina-2-ona

8-6 60 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ A uma suspensão do composto (8-5) (6,48 g) em acetato de etilo, adicionou-se água (15 ml) e solução de carbonato de potássio 1 M para a tornar alcalina. Extractou-se a mistura com acetato de etilo (30 mlx2). Lavou-se a camada orgânica com salmoura (50 ml), secou-se (Na2S04) e evaporou-se. A uma solução do resíduo em benzeno (60 ml) juntou-se trietilamina (3,6 ml) e clorotrimetilsilano (2,7 ml). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 14 h e filtrou-se através de um almofada de Celite. Evaporou-se o filtrado a pressão reduzida e dissolveu-se o resíduo em éter (65 ml) e adicionou-se uma solução de cloreto de t-butilmagnésio 2M em éter (10,7 ml) a 0°C e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 h e depois adicionou-se sucessivamente, a 0°C, solução saturada de cloreto de amónio (50 ml), acetato de etilo (50 ml) e ácido clorídrico a 10% (50 ml). Após a agitação da mistura resultante à temperatura ambiente durante 1 h, extractou-se a camada de água com acetato de etilo. Lavaram-se os extractos de acetato de etilo combinados com água (50 ml), NaHC03 saturado (50 ml), e salmoura (50 ml), secaram-se (Na2S04) e evaporaram-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/acetona = 10/1) para originar o composto objectivo na forma de um sólido bruto. Purificou-se este sólido lavando com acetato de etilo-hexano para originar 2,50 g (60,7%) do composto (8-6).

Massa m/z: 253 (M+), 162, 91 (base), 65. IR (KBr) : 3184, 1749, 1698, 1540, 1410, 1248, 1100 crtf1. ^-RMN (CDC13) : 2,84-2,88 (d, J= 1,0 Hz, J= 2,4 Hz, J= 15,1 Hz, 1H), 3,39-3,44 (d, J= 2,4 Hz, J= 5,4 Hz, J= 14,8 Hz, 1H), 4,68 (d, J= 4,9 Hz, J= 14,9 Hz, 1H), 5,08 (s, 2H), 6,09 (s lg., 1H), 6,97 (d, J= 2,9 Hz, J= 7,8 Hz, 2H), 7,28-7,44 (m, 7H) .

Referência 4-f Síntese de (4S)-4-[4-(benziloxi)fenil]-1-(4-fluorofenil)-azetidina-2-ona

61 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ A uma solução do composto (8-6) (1,00 g) em diclorometano (10 ml) adicionou-se trietilamina (0,8 ml), ácido 4-fluoro-fenilborónico (1,11 g) e acetato de cobre (0,75 g) . Fez-se refluxar a mistura durante 48 h e evaporou-se a pressão reduzida. Efectuou-se a partição do resíduo por acetato de etilo (50ml) e água (50 ml). Extractou-se a camada aquosa com acetato de etilo (50 mlx3). Lavaram-se sucessivamente os extractos de acetato de etilo combinados com água (50 ml), ácido clorídrico a 10% (50 ml), solução saturada de bicarbonato de sódio (50 ml), e salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (benzeno/éter = 12/1) para originar um sólido, que foi recristalizado a partir de acetato de etilo - hexano para originar 1,06 g (77,3%) do composto objectivo (8-26).

Massa m/z: 347 (M+), 256, 210, 137, 91 (base), 65 IR (KBr): 1731, 1620, 1506, 1380, 1242 cnf1 1H-RMN (CDCls): 2,93 (d, J= 3,0 Hz, J= 15,2 Hz, 1H), 3,52 (d, J= 5,4 Hz, J= 15,2 Hz, 1H), 4,93 (d, J= 2,4 Hz, J= 5,4 Hz, 1H), 5,05 (s, 2H), 6,90-6,99 (m, 4H), 7,24-7,43 (m, 9H).

Referência 4-g Síntese do Composto (8-27) (4 S)—1—(4-fluorofenil)-4-(hidroxifenil)azetidina-2-ona

Submeteu-se a hidrogenação, à temperatura ambiente, durante 9 h, uma solução do composto 8-26 (2, 00 g) obtido no passo anterior, referência 4-f, em acetato de etilo-metanol (50 ml), na presença de 5% de paládio em carbono (0,20 g) . Após a remoção do catalisador através de uma almofada de Celite, evaporou-se o solvente e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/acetona = 10/1) para originar 1,36 g (91,9%) do composto (8-27).

Massa m/z: 257 (M+), 214, 120 (base), 91, 58. 62 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ IR (KBr): 3106, 1707, 1620, 1503, 1453, 1383, 1257, 1218 cm-1. 1H-RMN (CDC13) : 2,93 (d, J= 2,4 Hz, J= 15,7 Hz, 1H) , 3,53 (d, J= 5,9 Hz, J= 15,2 Hz, 1H), 4,94 (d, J= 2,9 Hz, 5,4 Hz, 1H), 5,22 (s, 1H), 6,85 (d, J= 8,3 Hz, 2H) , 6,93 (s, J= 8,8 Hz, 2H), 7,23-7,27 (m, 4H).

Referência 4-h Síntese de 4-[(2S)-1-(4-fluorofenil)-4-oxoazetidina-2-il]-feniltrifluorometanossulfonato

A uma suspensão do composto (8-27) (0,35 g) em dicloro- metano (10 ml), adicionou-se piridina (0,12 ml) e anidrido trifluorometanossulfónico (0,26 ml) a 0°C. Agitou-se a mistura durante 1 hora e verteu-se para água fria em gelo (20 ml) . Extractou-se a mistura resultante com acetato de etilo (30 mlx2). Lavaram-se os extractos de acetato de etilo combinados com ácido clorídrico a 10% (20 ml), solução saturada de bicarbonato de sódio (40 ml), salmoura (30 ml), secaram-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporaram-se.

Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/3) para originar 0,48 g (90,7%) do composto objectivo (8-28).

Massa m/z: 389 (M+), 347, 252, 214, 186, 137, 119 (base), 69. IR (KBr): 1734, 1509, 1416, 1383, 1248, 1212, 1131, 900 crrf1. 1H-RMN (CDCI3) : 2,94 (d, J=2, 5 Hz, J= 15,2 Hz, 1H), 3,16 (d, J= 5,9 Hz, J= 15,2 Hz, 1H), 5,04 (d, J= 2,5 Hz, J= 5,4 Hz, 1H), 6,98 (t, J= 8,8 Hz, 2H) , 7,21-7,25 (m, 2H), 7,31 (d, J= 2,0 Hz, J= 6,8 Hz, 2H), 7,45 (d, J= 2,2 Hz, J= 6,8 Hz, 2H). 63 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Referência 4-i Síntese de composto (8-29) (4S)—4—[4—((2S,5S,3R,4R,6R)-6-[(benziloxi)metil]-3,4,5-tribenziloxi}per-hidro-2H-piran-2-il]metil)fenil]-1-(4-fluorofenil)azetidina-2-ona OBn

A uma solução do composto (8-28) (0,32 g) em tetra-hidrofurano (4,1 ml), adicionou-se 9-BBN 0,5 M em tetra-hidrofurano (3 ml) e fez-se refluxar a mistura durante 6 h. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, adicionou-se à mistura solução 3 M de fosfato de potássio (0,6 ml), tetra-hidrofurano (4,7 ml), o composto obtido na referência 4-h (0,22 g) e PdCl2 (dppf) (0, 042 g) e agitou-se a mistura resultante a 50°C durante 16 h. Adicionou-se água (30 ml) e acetato de etilo (30 ml) à mistura e filtrou-se a mistura resultante através de uma almofada de Celite. Extractou-se o filtrado com acetato de etilo (30 mlx2). Lavaram-se os extractos combinados de acetato de etilo com água (30 mlx2) e salmoura (30 ml), secaram-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporaram-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/4) para originar 0,209 g (45,4%) do composto (8-29).

Massa (ESI) m/z: 800 (M + Na (23) ) + . IR (KBr): 2896, 1746, 1509, 1377, 1095, 1068, 750 ctT1 . 1H-RMN (CDC13) : 2,69-2,75 (d, J= 7,8 Hz, J= 14,7 Hz, 1H) , 2,89 (d, J= 2,5 Hz, J= 15,1 Hz, 1H), 3,12 (d, J= 1,5 Hz, J= 14,2 Hz, 1H), 3,30-3,37 (m, 2H), 3,46-3,53 (m, 2H), 3,59-3,74 (m, 8H), 4, 45-4, 64 (m, 4H), 4,81-4,94 (m, 5H), 6,90 (t, J= 8,8 Hz, 2H), 7,19-7,35 (m, 26H). 64 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Referência 4-j Síntese do Composto (8-30) 3-{(4S, 3R)—4—[4—{(2S,5S,3R,4R,6R)-6-(benziloximetil)-3,4,5-tribenziloxi}per-hidro-2H-piran-2-il]metil}fenil] -1-(4-fluorofenil)oxoazetidina-3-il}propionato de metilo OBn

A uma solução de di-isopropilamida de lítio 2M (1,3 ml) em tetra-hidrofurano (3 mL), juntou-se uma solução do composto (8-29) (1,00 g) em tetra-hidrofurano (1,5 ml) a -78°C e agitou-se a mistura durante lhe adicionou-se uma solução de acrilato de metilo (0,132 g) em tetra-hidrofurano (2 ml) à mistura. Agitou-se a mistura resultante durante 0,5 h e extinguiu-se a mistura com solução saturada de cloreto de amónio (30 ml) e extractou-se com acetato de etilo (60 mlx2). Lavaram-se os extractos combinados de acetato de etilo com água (50 ml), secaram-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporaram-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/4) para originar 0,793 g (71,8%) do composto (8-30).

Massa (ESI) m/z: 864 (M + 1)+. IR (KBr): 2854, 1740, 1509, 1452, 1362, 1215, 1140, 1098 cnT1. 1H-RMN (CDC13) : 2,19-2,23 (m, 2H), 2, 47-2,59 (m, 2H), 2,72 (d, J= 8,8 Hz, j= 14,6 Hz, 1H), 3,04-3,13 (m, 2H), 3,30-3,37 (m, 2H), 3,42-3,48 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,61-3,74 (m, 4H), 4, 47-4, 63 (m, 5H) , 4,81-4,94 (m, 4H) , 6,90 (t, J= 8,8 Hz, 2H), 7,15-7,35 (m, 26H). 65 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Referência 4-k Síntese do Composto (8-31) (4S, 3R)—4—[4—({(2S,5S,3R,4R,6R)-6-(benziloxi)metil}-3,4,5-tribenziloxi)per-hidro-2H-piran-2-il]metil)fenil]-1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropil]azetidina-2-ona OBn

A uma solução do composto (8-30) (1,75 g) em tetra-hidrofurano-metanol (20 ml), adicionou-se água (5 ml) e hidróxido de lítio (0, 084 g) . Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 4 h. Acidificou-se a mistura de reacção por adição de ácido clorídrico a 10% e extractou-se com acetato de etilo (30 mlx3). Concentraram-se os extractos combinados de acetato de etilo a pressão reduzida, passou-se o resíduo através de uma pequena coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/1) para originar o produto bruto que se submeteu à reacção seguinte sem outra purificação. A uma solução do composto obtido anteriormente em diclorometano (8,4 ml), adicionou-se cloreto de oxalilo 2 M (0,84 ml) em diclorometano e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 16 h. A remoção do solvente orgânico originou o cloridrato bruto. A uma suspensão de cloreto de zinco (0,368 g) em tetra-hidrofurano (8 ml) adicionou-se brometo de 4-fluorofenilmagnésio, preparado a partir de magnésio (0,084 g) e 4-bromofluorobenzeno (0,47 g) em tetra-hidrofurano (8 ml) . Agitou-se a mistura à temperatura ambiente, durante 1 h, e adicionou-se tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0,068 g) a 10°C. Após a agitação da mistura durante 5 minutos, adicionou-se o cloridrato obtido anteriormente em tetra-hidrofurano (7 ml) . Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 1 h, e depois extinguiu-se com ácido clorídrico a 10% (20 ml) . Extractou-se a mistura com acetato de etilo (50 mlx2). Lavou-se a camada orgânica com água (50 mlx2) e salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e 66 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ evaporou-se. Purificou-se ο resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/5) para originar 0,910 g (73,7%) do composto (8-31).

Massa (ESI) m/z: 551 (M + Na (23) + 1)+. IR (KBr): 2920, 1746, 1690, 1610, 1310, 1280, 1240, 1100 cm"1. 1H-RMN (CDCI3) : 2,23- -2,42 (m, 2H), 2, 72 (d, J= 8,8 Hz, J= 14,7 Hz, 1H), 3,09-3,74 (m, 11H), 4,46-4,63 ( m, 4H), 4,66 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 4,81-4,94 (m, 4H), 6,91 (t, J= = 8,8 Hz, 2H), 7,11 (t, J= 8,3 Hz, 2H), 7,33' < co |T 26 H), 7,96 -8,00 (m, 2H).

Exemplo 5 Síntese do Composto (5) (4S,3R)4—(4 — {[(2 S,5 S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2H-piran-2-il]metiljfenil)-1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropil]azetidina-2-ona

OH

A uma solução do composto (8-31) (0,27 g) em dicloro- metano (5,4 ml) juntou-se borotribrometo 1M em diclorometano (1,8 ml) a -78°C e agitou-se a mistura durante 1 h. Verteu-se a mistura para gelo-água (30 ml) e extractou-se com clorofórmio (30 mlx3). Lavaram-se os extractos combinados de clorofórmio sucessivamente com água (50 ml), solução saturada de bicarbonato de sódio (50 ml), e salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/metanol = 8/1) para originar 0,147 g (89,1%) do composto (26).

Massa (ESI) m/z: 568 (M + 1)+. IR (KBr): 3400, 2902, 1737, 1680, 1596, 1506, 1386, 1224, 1152, 1134, 1086 cm-1. 1H-RMN (CD3OD): 2,28-2,34 (m, 2H), 2,74 (d, J= 8,3 Hz, J= 14,6 Hz, 1H), 3,09-3,39 (m, 10H), 3,64 (d, J= 5,3 Hz, j= 67 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 11,7 Hz, 1Η), 3,78 (d, J= 2,4 Hz, J= 11,7 Hz, 1H) , 4,95 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 7,01-7,05 (m, 2H), 7,22-7,26 (m, 2H), 7,27-7,38 (m, 6H), 8,06-8,10 (m, 2H) .

Exemplo 6 Síntese do Composto (22) 3-[(3 S)-3-(4-fluorofenil)-3-hidroxipropil]-(4 S,3R)-4(4-([(2S, 5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi(hidroximetil)per-hidro-2H-piran-2-il]metil}fenil)-1-(4-fluorofenil)azetidina-2-ona

A uma solução do composto (8-32) (0,061 g) em dicloro- metano (0,6 ml), adicionou-se o composto (26) (0,115 g) em diclorometano (2,8 ml) a -20°C e agitou-se a mistura durante 2 h. Extinguiu-se a mistura por adição de metanol (2 ml) e agitou-se durante 1 h. Adicionou-se acetato de etilo (30 ml) e ácido clorídrico a 10% (30 ml) e extractou-se a mistura resultante com acetato de etilo (30 mlx3). Lavou-se a camada orgânica com água (30 mlx3) e salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/metanol = 10/1) para originar 0,089 g (77,1%) do composto (22).

Massa (ESI) m/z: 570 (M + 1)+. IR (KBr): 3370, 2902, 1725, 1506, 1389, 1218, 1083, 1011 cnT1. 1H-RMN (CD3OD): l,í )8~1, 99 (m, 4H), 2, 76 (d, . J= cn 00 Hz , J= 14, 2 Hz, 1H), 3,09-3 ,40 (m, 7H), 3 ,64 (d, J= 5,4 Hz, J= 11, 5 Hz, 1H), 3,79 (d, J= 2,0 Hz, J= 11, 7 Hz, 1H) , 4, 65 (dt, J= 4,8 Hz , J= 6,4 Hz, 1H), 4,85 (d, J= = 2, ,0 Hz, 1H) , 7, 00- 7, 09 (m, 4H), 7,29- 7,40 (m, 8H) . 68 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Exemplo 7 Síntese do composto (8-33) (4S,3R)-4-[4-{(2S,5S, 3R,4R,6R)-6-[(Benziloxi)metil]-3,4,5-tribenziloxi}per-hidro-2H-piran-2-il]metil}fenil)-1-(4-fluoro-fenil)-3-[(2E)-3-(4-fluorofenil)-2-propenil]azetidina-2-ona OBn

A uma solução do composto (8-29) em tetra-hidrofurano (3 ml) adicionou-se di-isopropilamida de lítio 2 M (0,6 ml) em tetra-hidrofurano a -78°C e agitou-se a mistura durante 30 minutos. Adicionou-se à mistura 1,8 ml de dmpu (1,3-dimetil-3,4-5,6-tetra-hidro-2(1H)-pirimidinona) e agitou-se a mistura durante 30 minutos. À mistura de reacção juntou-se 4-fluoro-cinamilbrometo (0,111 g) em tetra-hidrofurano (1,5 mL) e agitou-se a mistura resultante durante 30 minutos. Extinguiu-se a mistura de reacção com uma solução saturada de cloreto de amónio (30 ml) e extractou-se com acetato de etilo (50 mlx2). Lavou-se a camada orgânica sucessivamente com água (50 mlx3), salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/5) para originar 0,253 g (64,4%) do composto (8-33).

Massa (ESI) m/z: 934 (M + Na (23))+. IR (KBr): 2890, 1746, 1509, 1383, 1359, 1224, 1137, 1098 cm-1. ^-RMN (CDC13) : 2,63-2,88 (m, 3H), 3,12 (d, J= 1,9 Hz, J= 14.7 Hz, 1H), 3,20-3,38 (m, 4H), 3,47-3,48 (m, 1H), 3,59-3,74 (m, 5H) , 4,45-4, 63 (m, 4H), 4,65 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 4,81-4,94 (m, 4H) , 6,12 (dt, J= 6,8 Hz, J= 14,6 Hz, 1H), 6,45 (d, J= 14,7 Hz, 1H), 6,90 (t, J= 8,8 Hz, 2H) , 6,95 (t, J= 8.7 Hz, 2H), 7,14-7,35 (m, 28H). 69 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ

Exemplo 8 Síntese do composto (25) 4-(4-([(5S,2R,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroxi-metil)per-hidro-2H-piran-2-il]metil}fenil)-(4S, 3R)-1-(4-fluorofenil)-3-[3-(4-fluorofenil)propil]-azetidina-2-ona

OH

OH

Submeteu-se uma solução do composto (8-33) (0,23 g) em metanol-tetra-hidrofurano (10 ml) a hidrogenação à temperatura ambiente durante 5 h na presença de 5% de paládio em carbono (0,115 g). Após a remoção do catalisador através de uma almofada de Celite, evaporou-se o solvente. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/metanol = 9/1) para originar 0,113 g (81,1%) do composto (25).

Massa (ESI) m/z: 554 (M + 1)+ IR (KBr): 3394, 2908, 1737, 1506, 1386, 1218, 1089 cnT1 1H-RMN (CD3OD) : 1, 88-1, 95 (m, 4H), 2,66 (t, J= 7,3 Hz, 2H), 2,75 (d, J= 8,3 Hz, J= 14,2 Hz, 1H), 3,09-3,40 (m, 7H), 3,64 (d, J= 5,8 Hz, J= 11,7 Hz, 1H), 3,78 (d, J= 2,5 Hz, J= 11,7 Hz, 1H), 4,91 (d, J= 2,0 Hz, 1H) , 6,97-7, 04 (m, 4H) , 7,18-7,33 (m, 6H), 7,38 (d, J= 8,3 Hz, 2H). Síntese do Composto (11-3) 5-(4-aza-10,10-dimetil-3-dioxo-3-tiatriciclo [5,2,1,1,51 — decano-4-il)-5-oxopentanoate de metilo

O 11-3 70 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ A uma solução de (R)- ( + )-2,10-canforsultama (0,89 g) em tolueno (14 ml) adicionou-se hidreto de sódio (0,182 g) a 0°C e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 20 minutos. Adicionou-se 5-cloro-5-oxo-valerato de metilo (0,816 g) à mistura de reacção e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 1 h. Extinguiu-se a mistura de reacção por adição de cloreto de amónio saturado (40 ml) e extractou-se com acetato de etilo (50 mlx2). Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio anidro e evaporou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/acetona = 40/1, depois acetato de etilo/hexano = 1/2) para originar 1,30 g (91,8%) do composto (11-3).

Massa m/z: 343 (M+), 312, 279, 129 (base), 101. IR (KBr): 2944, 1720, 1689, 1440, 1413, 1389, 1335, 1215, 1050 cm-1. ^-RMN (CD3OD) : 0,97 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,35-1,41 (m, 2H), 1,87-2,12 (m, 7H), 2,39 (t, J= 8,3 Hz, 2H), 2,78 (t, J= 7,4 Hz, 2H), 3,46 (q, J= 4,4 Hz, 2H), 3,67 (m, 3H), 3,85-3,88 (m, 1H) .

Referência 5-b Síntese do Composto (11-10) (4R)—4 — {(1S) — (4-bromofenil-[(4-fluorofenil)amino]metil)-5-(4-aza-10,10-dimetil-3-dioxo-3-tiatriciclo[5,2,1,1,5]-decano-4-il)-5-oxo-pentanoato de metilo

Juntou-se tetraisopropóxido de titânio (0,2 ml) a 0°C a uma solução de tetracloreto de titânio (0,23 ml) em diclorometano (10 ml) e agitou-se a mistura durante 5 minutos. Adicionou-se o composto (11-3) (0,65 g) em diclorometano (3,5 ml) à mistura e agitou-se durante 5 minutos. Adicionou-se di-isopropiletilamina (0,72 ml) à 71 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ mistura e agitou-se durante lhe depois arrefeceu-se até -20°C. Adicionou-se (1Z)-l-aza-2-(4-bromofenil)-1-(4- fluorofenil)eteno (1,15 g) em diclorometano (3,5 ml) a -20°C e agitou-se a mistura resultante durante 3 h. Extinguiu-se a mistura de reacção por adição sucessiva de ácido acético (1 ml) em diclorometano (5 ml) e ácido clorídrico a 10% (30 ml), e extractou-se com acetato de etilo (50 mlx2) . Lavou-se a camada orgânica sucessivamente com água (50 ml), solução saturada de bicarbonato de sódio (50 ml), salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio/acetona = 50/11 depois acetato de etilo/hexano = 1/2) para originar 0,708 g (61,1%) do composto (11-10).

Massa m/z: 622 (M + 2)+, 620 (M+), 343, 278, 200, 135, 95. IR (KBr): 3376, 2944, 1734, 1683, 1509, 1437, 1269, 1131, 1059, 1008 cm-1. 1H-RMN (CDC13) : 0,95 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,24-1,39 (m, 2H), 1,60-2,04 (m, 5H), 2,28-2,33 (m, 2H), 3,45-3,57 (m, 3H), 3,62 (s, 3H) , 3,79-3,91 (m, 1H) , 4,56 (t, J= 9,3 Hz, 1H) , 4,95 (d, J= 10,2 Hz, 1H), 6,34-6,38 (m, 2H), 6,71-6,76 (m, 2H), 7,17 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 7,41 (d, J= 8,3 Hz, 2H).

Referência 5-c Síntese do composto (11-11) 3-{(4S,3R)-4-(4-bromofenil)-1-(4-fluorofenil)-2-oxo-azetidina-3-il}propionato de metilo

Adicionou-se BSA (N,O-bístrimetilsililacetamida, 0,41 g) a 50°C a uma solução do composto (11-10) (0,52 g) em tolueno (10 ml) e agitou-se a mistura durante 30 minutos. Juntou-se fluoreto de tetrabutilamónio 1M (0,84 ml) em tetra-hidrofurano e agitou-se a mistura resultante a 50°C durante 3h. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, extinguiu- 72 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ se a mistura com metanol (1 ml). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e depois adicionou-se ácido clorídrico a 10% (15 ml). Extractou-se a mistura com acetato de etilo (50 mlx2). Lavou-se a camada orgânica sucessivamente com água (50 ml), solução saturada de bicarbonato de sódio (50 ml), e salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/3) para originar 0,227 g (66,7%) do composto (11-11).

Massa m/z : 407 (M + 2)+, 405 (M+), 270, 208, 169, 129 (base), 95. IR (KBr): 2938, 1758, 1503 , 1440, 1371, 1233, 1101 cm-1. ^-RMN (CDC13) : 2,21- 2,56 (m, 2H), 2,49-2,61 (m, 2H), 3,08-3,12 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 4,66 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 6,92-6,97 (m, 2H), 7,18-7 ,22 (m, 4H), 7,51 (d, J= 1,9 Hz, J= 6,3 Hz, 2H).

Referência 6 Síntese do composto (12-4) 3-{(4S,3R)—4—[4—(3—{(2S,5S,3R,4R,6R)-6-(benziloximetil)- 3,4,5-(tribenziloxi)per-hidro-2H-piran-2-il}-l-propen)fenil]-1-(4-fluorofenil)oxoazetidina-3-il]propionato de metilo OBn

Adicionou-se tri-o-tolilfosfina (43 mg) e acetato de paládio (16 mg) a uma solução do composto (11-11) (575 mg) e de 3-(2,3,4,6-tetra-o-benzil-p-D-glucopiranosil)-1-propeno (1,2 g) em trietilamina (5 ml). Agitou-se a mistura a 100°C durante 13 h. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo (50 ml) e lavou-se a camada de acetato de etilo com ácido clorídrico a 10%, salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio anidro e 73 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ evaporou-se. Purificou-se ο resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/4) para originar 1,1 g (87,0%) do composto (12-4).

Este composto pode ser utilizado como composto intermediário para a síntese do composto representado pela fórmula geral (I) nas referências 4-1, 4-j, e 4-k, e exemplos 5, 6, 7 e 8.

Massa (ESI) m/z: 890 (M + 1)+. IR (puro) : 3016, 2896, 1741, 1503, 1371, 1215, 1092, 831, 74 7 cnT1. 1H-RMN (CDC13) : 2,23 (q, J= 7,8 Hz, 2H) , 2, 44-2,60 (m, 4H), 3,11 (m, 1H), 3,33-3,44 (m, 3H), 3,58-3,75 (m, 4H), 3,66 (s, 3H), 4,54-4, 94 (m, 9H), 6,38 (m, 2H), 6,91-7,32 (m, 28H) .

Referência 7 Síntese do composto 50 (4S,3R)-3-[(3 S)— 3 —(4-fluorofenil)-3-hidroxipropil]-4-(4-{[(2 S,5S,3R,4R,6R)-3,4,5-tri-hidroxi-6-(hidroximetil)per-hidro-2H-piran-2-il]metoxipropil-3-il}fenil-1-(4-fluoro-fenil)azetidina-2-ona

OH

HO*. X aOH A uma suspensão de hidreto de sódio (4,5 mg) em DMF (N,N-dimetilformamida, 1 ml), adicionou-se 2,3,4,6-o-tetrabenzil-l-desoxi-p-D-glucopiranosil-metanol (62 mg) em DMF (3 ml) a 0°C, e agitou-se a mistura durante 20 minutos. Agitou-se (4S,3R)-4-[4-(3-bromopropil)fenil]-3-[(3S)-(4-fluorofenil)-3-hidroxipropil]-2-azetidina-2-ona (57 mg) em DMF (3 ml) e a mistura resultante à temperatura ambiente durante 2 h. Verteu-se a mistura de reacção para água fria em gelo (20 ml) e extractou-se com acetato de etilo (30 mlx2). Lavou-se a camada orgânica com água (30 mlx2) e salmoura (40 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporou-se. Submeteu-se uma solução de resíduo em tetra-hidrofurano-metanol (1/1) (10 74 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ ml) a hidrogenação à temperatura ambiente durante 9 h na presença de 5% de paládio em carbono (50 mg). Após a remoção do catalisador, evaporou-se o solvente. Purificou-se o residuo por cromatografia em coluna de silica gel (clorofórmio/metanol = 10/1) para originar 43 mg (61,2%) do composto 50.

Massa (ESI) m/z: 628 (M + 1)+. IR (puro): 3388, 2902, 1734, 1509, 1389, 1218, 1080 cnT1. 1H-RMN (CD3OD) : 1, 87-1, 97 (m, 6H) , 2,73 (t, J= 7,4 Hz, 2H), 3,10-3,5 (m, 1H), 3,12-3,39 (m, 5H), 3,52-3,57 (m, 2H), 3,53-3, 69 (m, 2H) , 3,78 (d, J= 2,0 Hz, J= 10,7Hz, 1H), 3,87 (d, J= 1,0 Hz, J= 10,5 Hz, 1H), 4,64 (t lg., 1H), 4,85 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 7,00-7,09 (m, 4H), 7,27-7,37 (m, 6H).

Exemplo 9

Sintese do Composto 19-9 (4S)—4—(4—{[(2S,5S,3R,4R,6R)-6-(benziloxi)metil-3,4,5-tribenziloxi]per-hidro-2H-piran-2-il}etil-fenil)-l-fenil-azetidina-2-ona

C

Referência 8-a

Sintese do Composto (19-6) (3R)-3-(4-Bromofenil)-3-hidroxi-N-fenilpropanamida

19-6

Juntou-se o catalisador RuCl2[(S)-BINAP] (dicloro[(S)- (-) -2,2'-bis-(difenilfosfino)-1,1'-binaftil]ruténio(II)) (12 mg) a 75 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ uma solução de 3-(4-bromofenil)-3-oxo-N-fenilpropanoamida (950 mg) em etanol-diclorometano (3:1, 4 ml). Submeteu-se a mistura a hidrogenação catalítica assimétrica a 100°C, durante 6 h numa atmosfera a 5 atm de H2. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, concentrou-se a mistura. Corrigiram-se os cristais resultantes e secaram-se para originar 725 mg (76% de rendimento, 99% de rendimento assimétrico e.e.) do composto (19-6) . P.f. = 210-212 °C.

[a]D: +33,0 (c = 1,0, THF).

Massa m/z: 319 (M+), 183, 157, 135, 93 (base), 65. IR (KBr): 3316, 1614, 1599, 1530, 1443, 1368, 1065, 693 cm-1. 1H-RMN (DMSO) : 2,69 (dd, J= 4,4 Hz, J= 14,2 Hz, 1H) , 2,77 (dd, J= 8,8 Hz, J= 14,2 Hz, 1H) , 5,16 (η, 1H), 5,69 (d, J= 4,4 Hz, 1H), 7,14 (t, J= 7,3 Hz, 1H), 7,40 (d, J= 7,8 Hz, 2H), 7,46 (d, J= 8,3 Hz, 2H) , 7,64 (d, J= 8,3 Hz, 2H) , 7,69 (d, J= 7,8 Hz, 2H) .

Referência 8-b Síntese do composto (19-7) (4 S)-4-(4-Bromofenil)-1-fenil-azetidina-2-ona

19-7 A uma solução do composto (19-6) (500 mg) em tetra-hidrofurano (7 ml) adicionou-se DIAD (diisopropilazo-dicarboxilato) (0,67 ml) e PPh3 (479 mg) a -78°C. Aqueceu-se lentamente a mistura até à temperatura ambiente e agitou-se durante 4 h. Concentrou-se a mistura, e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/5 a 1/2) para originar 260 mg (55,2%) do composto 19-7. P.f. = 113-115 °C.

[a]D: -146,0 (c= 1,0, CHC13) .

Massa m/z: 301 (M+), 260, 184, 103, 77 (base). 76 ΕΡ 1 362 855/ΡΤ IR (KBr) : 1728, 1599, 1485, 1377, 1149, 828, 750 crrf1. ^-RMN (CDC13) : 2,91 (dd, J= 2,9 Hz, J= 15,1 Hz, 1H), 3,56 (dd, J= 5,4 Hz, J= 15,1 Hz, 1H), 4,98 (dd, J= 2,4 Hz, J= 5,9 Hz, 1H), 7,04-7,52 (m, 9H). Síntese do Composto (19-9)

Adicionou-se o composto (19-8) (1,0 g), a uma solução de

Zn(Cu) (106 mg) em tetra-hidrofurano-HMPA (3:1, 4 ml) e fez-se refluxar a mistura durante 3 h. Adicionou-se à mistura, a 0°C, acetato de paládio (1,7 mg) e 2-(di-t-butil-fosfino)bifenilo (4,4 mg). Após 5 minutos juntou-se o composto (19-7) (223 mg) e aqueceu-se a mistura até à temperatura ambiente. Adicionou-se HC1 aquoso a 10% (50 ml) e acetato de etilo (30 ml) à mistura e filtrou-se. Extractou-se o filtrado com acetato de etilo (50 mlx2). Lavou-se a camada orgânica com água (50 ml) e salmoura (50 ml), secou-se sobre sulfato de sódio anidro e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etilo/hexano = 1/4) para originar 480 mg (84,3%) do composto (19-9). P.f. = 95-97°C.

[a]D: -61,2 (c= 1,0, CHC13) . ESI-MS (m/z): 796 (M+Na)\ 774 (M+l)+. IR (KBr): 2854, 1749, 1599, 1497, 1452, 1371, 1212, 1068 cm"1. 1H-RMN (CDCI3) : 1,71-1,75 (m, 1H), 2,04-2,10 (m, 1H), 2,63 -2, 74 (m, 1H), 2, 81- 2, 87 (m, 1H), 2 , 94 (dd, J= 2,4 Hz, J= 15,1 Hz, 1H), 3,18-3 ,22 (m, 1H) , , 3,29 (t, J= 13, ] L Hz, 1H), 3,36 -3,40 (m, 1H), 3, 53 (dd, J= 5 ,9 Hz, J= 15,1 Hz, 1H), 3,59- 3, 75 (m, 4H), 4,55-4, 66 (m, 4H), 4,80-4 ,88 (m, 4H), 4, 96-4,98 (m, 1H), 7,02 (t, J= 6,8 Hz, 1H), 7,14-7 337 (m, 28H) . 77

ΕΡ 1 362 855/PT

Efeito do invento

Este invento refere-se a novos compostos de β-lactama que são metabolicamente e hidroliticamente estáveis contra β-glicosidases, ácidos e bases e que possuem C-glicosidos nas moléculas e exibem forte efeito de diminuição de colesterol plasmático e que são úteis como agentes hipolipidémicos plasmáticos.

Lisboa,

Claims (7)

1. ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 1/4 REIVINDICAÇÕES 1. Compostos híbridos de β-lactama e C-glucósido da seguinte fórmula geral (I):

   onde Ai, A3 e A4 são átomos de hidrogénio, átomos de halogéneo, grupos alquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, grupos alcoxi possuindo de um a cinco átomos de carbono, -COORi, uma seguinte fórmula (b): (b) —vC02Rl H3CXH3 onde Ri é um átomo de hidrogénio ou um grupo alguilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, ou uma fórmula seguinte:

   (a) onde R2 é um grupo -CH2OH, um grupo -CH20C(0)-Ri ou um grupo -C02-Ri, R3 é um grupo -OH ou um grupo -0C(0)-Ri, R4 é um grupo - (CH2) kR5 (CH2) 1-, onde k e 1 são 0 ou 1 ou mais inteiros, k+1 é 10 ou um inteiro inferior, R5 significa ainda ligação e é uma ligação simples -, -CH=CH-, -OCH2-, um grupo carbonilo ou -CH(OH)-, e um de Alr a3 e A4 na fórmula (I) tem de ser o grupo anteriormente mencionado na fórmula (a), A2 é ainda uma cadeia alquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, uma cadeia alcoxi possuindo de um a cinco átomos de carbono, uma ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 2/4 cadeia alcenilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, uma cadeia hidroxialquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono ou uma cadeia carbonilalquilo possuindo de um a cinco átomos de carbono, n, p, q ou r são 0, 1 ou 2, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
2. 2. Método de preparação de compostos de fórmula geral (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, que compreende as reacções de Staudinger ou Mannich dos compostos de fórmula geral (II)

   (II) onde Ai, a2, R3 e p são definidos como anteriormente; X é um grupo rejeitado tal como um átomo de halogéneo ou derivado de sultama opticamente activa, e os compostos de fórmula geral (III)

   (III) onde A3, A4, R3, n, q e r são definidos como anteriormente.
3. 3. Método de preparação de compostos de fórmula geral (I) e seus compostos farmaceuticamente aceitáveis, que compreende a reacção dos compostos de fórmula geral (IV) (Rs)q -A3 0 N- (IV) ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 3/4 onde η, q, r, Α3, Α4 e R3 são definidos como anteriormente, e os compostos de fórmula geral (V)

   Mp (V) onde Ai, a2, p, X and R3 são definidos como anteriormente, na presença de base.
4. 4. Método de preparação de compostos de fórmula geral (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, que compreende a β-lactamização dos compostos de fórmula geral (VI)

   (Rs)r onde n, p, q, r, A3, a2, A3, A4 e R3 são definidos como anteriormente, e Y é derivado de sultama opticamente activo, para produzir os compostos de fórmula geral (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
5. 5. Método de preparação de compostos de fórmula geral (VII) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis

   (VI I) (R3)r ΕΡ 1 362 855/ΡΤ 4/4 onde Ai, Α2, Α4, R2, R3, η, ρ, q e r são definidos como anteriormente; R7 é uma ligação simples -, -CH=CH-,-OCH2-, k é 1 ou maior inteiro, 1 é 0 ou 1 ou maior inteiro, k+1 é 10 ou menor inteiro; que compreende a reacção de acoplamento dos compostos de fórmula geral (VIII)

   onde Ai, A2, A4, R3, n, p, q e r são definidos como anteriormente; Z é um grupo rejeitado tal como um átomo de halogéneo ou triflato; k é 0 ou um inteiro de 1 a 10, e os compostos de fórmula geral (IX)

   (IX) Rí-(CH2^ o Ra onde R2 e R3 são definidos como anteriormente, Rg é um átomo de halogéneo, -CH=CH2, -CH2OH.
6. 6. Agentes hipocolesterolémicos séricos que contêm os compostos de fórmula geral (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
7. 7. Agentes hipocolesterolémicos séricos que contêm os compostos de fórmula geral (I) e inibidores de β-lactamase em combinação. Lisboa