PT1284973E

PT1284973E - ''inibidores de adesão celular mediada por alfa l beta 2''

Info

Publication number: PT1284973E
Application number: PT01927050T
Authority: PT
Inventors: Ila Sircar; Nicholas Smith; Yun Feng Xie; Paul S Furth
Original assignee: Tanabe Seiyaku Co
Priority date: 2000-05-31
Filing date: 2001-04-17
Publication date: 2007-08-17
Also published as: AU5353801A; JP3924531B2; CY1106843T1; DE60129132T2; KR20030015235A; MXPA02011858A; BR0111188A; US6699888B2; CN1209358C; EP1284973A2; ATE365729T1; IL152961A0; KR100527290B1; EP1284973B1; CA2411671C; DK1284973T3; WO2001092253A3; CN1432007A; ES2284641T3; CA2411671A1

Description

DESCRIÇÃO "INIBIDORES DE ADESÃO CELULAR MEDIADA POR ALFA L BETA 2"

Campo da Invenção A presente invenção refere-se a pequenas moléculas que são inibidores potentes de adesão celular mediada por aLp2 que poderiam ser úteis para o tratamento de doenças inflamatórias.

Descrição da Técnica Relacionada A família integrina de proteínas são receptores heterodiméricos que são expressos em todos os tipos de células para mediar a ligação célulaa a célula e a adesão à matriz extracelular. A subfamília integrina β2 (CD18) é compreendida por 3 membros, integrina αι,β2 (LFA-1, CDlla/CD18), integrina 0ίΜβ2 (Mac-1, CDllb/CD18) e integrina gp 150 β2 (integrina αχβ2, CDllc/CD18), que são expressas principalmente em leucócitos (Sanchez-Madrid et al., J. Exp. Med., 158, 1785-1803 (1983)). A integrina αι,β2 é encontrada sobretudo em linfócitos T e B, enquanto que a integrina αΜβ2 está presente em neutrófilos activados, células NK e algumas células mielóides. A integrina aLp2 liga-se a moléculas de adesão intracelular ICAM-1, 2 e 3, encontradas em tipos múltiplos de células, tais como células endoteliais vasculares, células dendríticas, células epiteliais, macrófago e linfoblastos T (Dustin et al., J. Immunology, 137, 245-254 (1986)). Recentemente, foram apresentadas evidências de que a integrina ai^2 se liga a ICAM-4 e a um novo ligando 1 expresso na telecenfalina cerebral. Demonstrou-se que o domínio I da cadeia alfa é o sítio de reconhecimento principal para os seus ligandos. A adesão da integrina αι,β2 a ICAM-1 é necessária para a resposta imunológica de linfócitos-T a antigénios, residência e circulação de linfócitos, e emigração celular para sítios de inflamação (Springer, Ann. Rev. Physiol., 57, 827 (1995)).

Uma função dominante da integrina aLp2, na mediação de acontecimentos inflamatórios, é apresentada em vários modelos animais diferentes de doenças inflamatórias em que anticorpos contra a integrina α2β2 ou ICAM-1 inibem significativamente o desenvolvimento de extremos terapêuticos (Rothlein et al., Kidney International, 41, 617 (1992); ligo et al., J. Immunology, 147, 4167 (1991); Bennet et ai., J. Pharmacol. and Exp. Therapeutics, 280, 988 (1997)).

Além disso, julga-se que a subfamília integrina β2 desempenha um papel essencial em vários tipos de processos de doença inflamatória por interacção com ICAM. Demonstrou-se o suporte para a importância da integrina β2 na mediação de respostas inflamatórias pela evidência de que a migração transendotelial in vitro é nitidamente inibida por anticorpos monoclonais contra a integrina β2 ou ICAM-1 (Smith, Can. J. Physiol. Pharmacol., 71, 76 (1993)). Além disso, mostrou-se que o bloqueio da integrina ουβ2 inibe o influxo de neutrófilos em quase todos os sistemas, incluindo a pele, peritoneu, sinóvia, pulmão, rim e coração. Como um dos ligandos primários para a integrina β2, seria de esperar que o bloqueio de ICAM-1 inibisse a resposta inflamatória (Albelda et ai., The FASEB Journal, 8, 504 (1994) ) . 2

Além disso, demonstrou-se que anticorpos contra a integrina aLP2 suprimem a rejeição após transplante. 0 documento WO 94/04188 descreve a utilização de anticorpos monoclonais dirigidos contra a integrina 0^2 para todos os transplantes, incluindo doenças enxerto vs. hospedeiro ou hospedeiro vs. enxerto. É sabido, a partir do documento EP 0770613, que imidazolino-2,4-dionas que pertencem à classe de hidantoinas apresentam efeitos imunomoduladores. Além disso, Kelly et al. mostraram que a (R)-5-(4-bromobenzil)-3-(3,5-diclorofenil)-1,5-dimetilimidazolino-2,4-diona (BIRT 377) é um antagonista da adesão celular de leucócitos mediada por aLp2 (Kelly, Terrence A. et al., J. Immunol., 1999, 163(10), 5173).

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a um composto da fórmula (I):

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com um grupo carboxilo, R2a e R2b são, 3 independentemente, um átomo de hidrogénio, um átomo de halogéneo, um grupo ciano ou um grupo alcoxiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com 1-3 átomos de halogéneo, R3 é um grupo alquiloCi-6 e R4 e R5 são, independentemente, um átomo de halogéneo. 0 composto da presente invenção tem uma potente actividade inibidora contra a adesão celular mediada por aLp2 e apresenta excelentes melhorias, in vivo, contra as estados adversas provocados pela adesão celular mediada por aLp2-

Descrição Detalhada da Invenção 0 composto desejado da presente invenção pode estar na forma de isómeros ópticos com base nos seus átomos assimétricos, e a presente invenção também inclui estes isómeros ópticos e suas misturas.

Numa forma de realização da presente invenção, a configuração estérica de uma ligação não necessita de ser fixa. 0 composto da presente invenção pode ser um composto com uma configuração única ou uma mistura com várias configurações diferentes.

Numa forma de realização preferida do composto (I), R1 é átomo de hidrogénio ou um grupo alquiloCi-6, um de R2a e R2b é átomo de hidrogénio e o outro é um átomo de halogéneo, grupo ciano ou um grupo alcoxiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com 1-3 átomos de halogéneo, R3 é um grupo alquiloCi-ê e R4 e R5 são, independentemente, um átomo de halogéneo. 4

Numa forma de realização preferida adicional do composto (I), R1 é átomo de hidrogénio ou grupo metilo, um de R2a e R2b é átomo de hidrogénio e o outro é átomo de bromo, grupo ciano, um grupo alcoxiloCi_6 ou grupo trifluorometoxilo, R3 é grupo metilo, R4 e R5 são átomos de cloro.

Noutra forma de realização mais preferida do composto (I), R1 é átomo de hidrogénio ou grupo alquiloCi_6 que pode estar substituído com carboxilo ou alcoxiCi-6carbonilo, um de R2a e R2b é átomo de hidrogénio e o outro é grupo ciano ou grupo alcoxiloCi-6 que pode estar substituído com 1-3 átomos de halogéneo.

Noutra forma de realização preferida do composto (I), R1 é átomo de hidrogénio ou grupo metilo, um de R2a e R2b é átomo de hidrogénio e o outro é grupo alcoxiloCi-6 ou grupo trifluorometoxilo, R3 é grupo metilo, R4 e R5 são átomos de cloro.

Noutra forma de realização preferida do composto (I), R1 é um grupo alquiloCi-6 que está substituído com um grupo alcoxiCi-6carbonilo ou grupo carboxilo, um de R2a e R2b é átomo de hidrogénio e o outro é um átomo de halogéneo, grupo ciano ou grupo alcoxiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com 1-3 átomos de halogéneo, R3 é um grupo alquiloCi-6 e R4 e R5 são, independentemente, um átomo de halogéneo.

Numa forma de realização mais preferida do composto (I), R3 é grupo metilo e R4 e R5 são átomos de cloro. 0 composto mais preferido da presente invenção é seleccionado de: 5 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-bromobenzil)-1,5-dimetil- 2.4- imidazolidinodiona, 3-(2, 6-dicloro-4-piridil)-5-(4-propoxibenzil)-1,5-dimetil- 2.4- imidazolidinodiona, 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-etoxibenzil)-1,5-dimetil- 2.4- imidazolidinodiona, 3- (2,6-dicloro-4-piridil)-5-[4-(1,1,1- trifluorometoxibenzil)]-5-metil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-[4- (1,1,1- trifluorometoxibenzil)]-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2, 6-dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)-5-metil-2, 4- imidazolidinodiona, 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)-1,5-dimetil- 2.4- imidazolidinodiona; e um sal farmaceuticamente aceitável destes compostos. 0 composto da presente invenção tem uma potente actividade inibidora contra a adesão celular mediada por aLp2 e apresenta também excelente biodisponibilidade após administração oral, que reflecte a melhoria geral na ligação às proteínas plasmáticas e solubilidade. Assim, o composto da presente invenção apresenta excelentes melhorias, in vivo, contra estados adversos provocados por adesão celular mediada por aLP2- 6 0 composto da presente invenção pode ser clinicamente utilizado numa forma livre ou na forma dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem um sal de adição de ácido com um ácido inorgânico ou um ácido orgânico (e. g., cloridrato, sulfato, nitrato, bromidrato, metanossulfonato, p-toluenossulfonato, acetato), e um sal com uma base inorgânica, uma base orgânica ou um aminoácido (e. g., sal de trietilamina, um sal com lisina, um sal de metal alcalino, um sal de metal alcalino-terroso e semelhantes). Os sais farmaceuticamente aceitáveis também incluem um seu sal intramolecular ou um seu solvato ou hidrato. 0 composto da presente invenção pode ser formulado numa composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, como definido acima, e um veiculo ou diluente farmaceuticamente aceitável. 0 veiculo ou diluente farmaceuticamente aceitável pode ser, por exemplo, aglutinantes (e. g., xarope, goma arábica, gelatina, sorbitol, tragacanto, polivinilpirrolidona), excipientes (e. g., lactose, sacarose, amido de milho, fosfato de potássio, sorbitol, glicina), lubrificantes (e. g., estearato de magnésio, talco, polietilenoglicol, sílica), desintegrantes (e. g., amido de batata), agentes molhantes (e. g., laurilsulfato de sódio), e semelhantes. 0 composto desejado da presente invenção, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, podem ser administrados por via oral ou parentérica, e pode ser utilizado como uma preparação farmacêutica adequada. Estas preparações farmacêuticas podem estar na forma de uma preparação sólida, tais como um comprimido, um grânulo, uma cápsula e um pó, ou na forma de uma preparação líquida, tais como solução, suspensão e emulsão, 7 quando administradas por via oral. Quando administradas por via parentérica, a preparação farmacêutica pode estar na forma de supositório, uma preparação de injecção ou uma preparação intravenosa, gota a gota, utilizando água destilada para injecção, uma solução de soro fisiológico, uma solução aquosa de glucose, e etc., e uma inalação por um processo corrente. A dose do composto desejado da presente invenção, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, varia dependendo do método de administração, idade, género, peso corporal e estado de um doente mas, em geral, a dose diária é, de um modo preferido, cerca de 0,1 a 100 mg/kg/dia, de um modo particularmente preferido, 1 a 100 mg/kg/dia. O composto da presente invenção pode ser utilizado para tratar ou prevenir estados de adesão mediados por 0^2 num mamífero, tal como um humano. O composto da presente invenção pode ser utilizado para tratamento ou prevenção de várias doenças inflamatórias, tais como artrite reumatóide, asma, estados alérgicos, síndrome da insuficiência respiratória no adulto, SIDA, doenças cardiovasculares, trombose, agregação de plaquetas prejudicial, re-oclusão após trombólise, lesão por reperfusão, doenças inflamatórias cutâneas (e. g., psoríase, eczema, dermatite de contacto, dermatite atópica), osteoporose, osteoartrite, arteriosclerose (incluindo aterosclerose), doenças neoplásicas, incluindo metástase do crescimento neoplásico ou canceroso, ferida, separação da retina, Diabetes tipo I, esclerose múltipla, lúpus eritematoso sistémico (SLE), estados inflamatórios oftálmicos, doenças inflamatórias do intestino (doença de Crohn e colite ulcerosa), enterite regional, síndrome de Sjogren, e outras doenças auto-imunes. 0 composto da presente invenção também pode ser utilizado para a rejeição (i. e., rejeição crónica e rejeição aguda) após transplante, incluindo rejeição de aloenxerto (doença hospedeiro vs. enxerto) e doença enxerto vs. hospedeiro.

De um modo preferido, o composto da presente invenção pode ser utilizado para tratamento ou prevenção de psoriase, artrite reumatóide, doenças inflamatórias do intestino (doença de Crohn e colite ulcerosa), lúpus eritematoso sistémico, dermatite atópica, síndrome de Sjogren e rejeição após transplante (rejeição de aloenxerto e doença enxerto vs. hospedeiro).

De acordo com a presente invenção, o composto (I) desejado pode ser preparado pelos seguintes métodos: Método A:

De entre o composto (I) desejado, um composto da fórmula (I-a) :

(I-a) 9 em que os símbolos são os mesmos, como definido acima, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pode ser preparado por (1) ciclização do composto da fórmula (II):

em que 0Rb é um grupo hidroxilo ou um grupo hidroxilo protegido e os outros símbolos são os mesmos como definidos acima, e (2) conversão do composto ciclizado resultante num seu sal farmaceuticamente aceitável por um método corrente, se desejado.

Quando OR6 é um grupo hidroxilo protegido, o grupo protector pode ser seleccionado dos grupos protectores correntes para um grupo carboxilo (i. e., um grupo alquiloCi-6, grupo benzilo) . A ciclização pode ser realizada por um método de condensação corrente. Por exemplo, a ciclização do composto (II) pode ser realizada na presença de um ácido, ou de uma base, num solvente adequado. 10 0 ácido pode ser seleccionado de ácidos orgânicos (i. e., ácido p-toluenossulfónico e ácido trifluoroacético) e ácidos inorgânicos (i. e., ácido clorídrico, ácido sulfúrico e ácido nítrico). A base pode ser seleccionada de bases correntes, tal como alcóxido de metal alcalino (e. g., NaOEt, NaOMe). 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção de ciclização, por exemplo, CH2C12, THF, DMF, álcoois (metanol, etanol, etc.) ou uma sua mistura. A reacção é realizada a uma temperatura de 0 °C até ao ponto de fusão do solvente, de um modo preferido, a 50 °C até 100 °C. A ciclização do composto (II) também é realizada na presença de um reagente de condensação, com ou sem uma base, num solvente adequado ou sem um solvente. O reagente de condensação pode ser seleccionado de S0C12 e reagentes de condensação correntes que podem ser utilizados para uma síntese peptídica, por exemplo, BOP-C1, reagente BOP, DCC, EDC ou CDI. A base pode ser seleccionada de uma base orgânica (e. g., DIEA, DMAP, DBU, Et3N) , um hidreto de metal alcalino (e. g., NaH, LiH) , um carbonato de metal alcalino (e. g., Na2C03, K2C03), um hidrogenocarbonato de metal alcalino (e. g., NaHC03, KHC03) , uma amida de metal alcalino (e. g., NaNH2) , um alcóxido de metal alcalino (e. g., NaOMe, KOMe) , um sal de alquiloCi-6 de metal alcalino (e. g., n-BuLi, t-BuLi), um hidróxido de metal alcalino (e. g., NaOH, KOH), um hidróxido de metal alcalino-terroso (e. g., Ba(OH)2), e semelhantes. 11 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção de ciclização, por exemplo, CH2C12, THF, DMF ou uma sua mistura. A reacção é realizada a uma temperatura de 0 °C até à temperatura ambiente, de um modo preferido, à temperatura ambiente. Método B:

De entre o composto (I) desejado, um composto da fórmula (I-b):

(I-b) em que R11 é um grupo alquiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com grupo carboxilo e os outros símbolos são os mesmos, como definido acima, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pode ser preparado por: (1) alquilação do composto (I-a), (2) hidrólise do composto resultante, se necessário, e 12 (3) conversão do composto resultante num seu sal farmaceuticamente aceitável por um método corrente, se também desejado. (1) Reacção de Alquilação A reacção de alquilação pode ser realizada por reacção do composto (I-a) com o composto da fórmula (III):

Rn-K (III) em que X é um grupo abandonante e R11 é o mesmo como definido acima. 0 grupo abandonante X pode ser seleccionado de grupos abandonantes correntes, tais como um átomo de halogéneo (e. g., cloro, bromo, iodo) e um grupo alquilsulfoniloxilo ou um grupo arilsulfoniloxilo (e. g., grupo metilsulfoniloxilo, grupo p-tolilsulfoniloxilo). A reacção de alquilação pode ser realizada na presença de uma base, num solvente adequado. A base pode ser seleccionada de bases correntes, tais como hidreto de metal alcalino (i. e., NaH, KH), alcóxido de metal alcalino (i. e., NaOMe, NaOEt) e amida de metal alcalino (i. e., NaNH2, LDA, KHMDS) . 13 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção de condensação, por exemplo, DME, THF, DMF, HMPA ou uma sua mistura. A reacção é realizada a uma temperatura de -78 °C até à temperatura ambiente. (2) Reacção de Hidrólise 0 composto (I-b), em que R11 é um grupo alquiloCi_6 substituído com grupo carboxilo, pode ser preparado por hidrólise do composto (I-b), em que R11 é um grupo alquiloCi-6 substituído com grupo alcoxiCi-êCarbonilo. A hidrólise pode ser realizada por um processo habitual, por exemplo, por tratamento do composto com uma base num solvente adequado. A base pode ser seleccionada de bases inorgânicas correntes, tais como LiOH, NaOH e KOH. 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção de hidrólise, por exemplo, THF, MeOH, EtOH, H20 ou uma sua mistura. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de -78 °C até 50 °C, de um modo preferido, a uma temperatura de 0 °C até à temperatura ambiente. 14

Método C

De entre o composto (I) desejado, o composto da fórmula (I-c): R21

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R21 é um grupo alcoxiloCi-6 e os outros símbolos são os mesmos, como definido acima, pode ser preparado por alquilação de um composto da fórmula (I-d):

em que os símbolos são os mesmos, como definido acima, e conversão no sal farmaceuticamente aceitável, se desejado. 15 A reacção de alquilação pode ser realizada de um modo semelhante ao descrito no Método B (1) utilizando um alcanoCi-6 halogenado adequado (e. g., iodeto de metilo, brometo de benzilo) na presença de uma base (e. g., Et3N, DIEA, NaHC03, KHCO3, Na2C03, K2C03, KHCO3, CsC03) , a uma temperatura de 0 °C até 50 °C, num solvente orgânico (e. g., CH2C12, THF, DMF, CH3CN, tolueno). O composto (I), em que R2a e/ou R2b são grupos hidroxilo, pode ser preparado pela desmetilação do composto (I) , em que R2a e/ou R2b é grupo metoxilo. A reacção de desmetilação pode ser realizada por um método corrente, por exemplo, um tratamento com BBr3 ou HBr, a uma temperatura de -78 °C até 50 °C, num solvente adequado (e. g., AcOH, água). O composto de partida da fórmula (II) pode ser preparado pelo seguinte esquema:

Esquema 1.

16 (No Esquema 1, os símbolos são os mesmos, como definido acima.) Passo 1: 0 composto (VII) pode ser preparado por reacção do composto (VIII) com pivalaldeído. A reacção pode ser realizada na presença, ou ausência, de um ácido ou um sal ácido, num solvente adequado ou sem um solvente. 0 ácido pode ser seleccionado de ácido inorgânico corrente, tais como HC1, H2SO4. 0 sal ácido pode ser seleccionado de um sal de um ácido inorgânico forte e uma base inorgânica fraca, tal como MgSC>4. 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção, por exemplo, tolueno, DME, DMF, THF, CH2C12 ou uma sua mistura. A reacção pode ser realizada, por exemplo, a uma temperatura de 0 °C até à temperatura ambiente.

Passo 2: 0 composto (IV) pode ser preparado por 1) reacção do composto (VII) com o composto (VI), e 2) hidrólise do composto resultante. A reacção do composto (VII) e do composto (VI) pode ser realizada na presença de uma base, num solvente adequado, ou sem um solvente. A base pode ser seleccionada de bases correntes, tais como alcóxidos de metal alcalino (e. g., t-BuOK, MeONa, EtONa) e amidas de metal alcalino (e. g., LDA, NaNH2) . 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção de acoplamento, por exemplo, tolueno, DME, DMF, THF, CH2C12 ou uma sua mistura. A reacção pode ser realizada, por exemplo, a uma temperatura de -78 °C até 50 °C, de um modo preferido, a uma temperatura de -10 °C até 0 °C. A hidrólise pode ser realizada na presença de um ácido, num solvente adequado ou sem um solvente. O ácido pode ser seleccionado de ácido inorgânico corrente, tais como HNO3, HC1, e 17 H2SO4. 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção, por exemplo, tolueno, DME, DMF, THF, CH2CI2 ou uma sua mistura. A reacção pode ser realizada, por exemplo, a uma temperatura de 0 °C até à temperatura ambiente.

Passo 3: 0 composto (II) pode ser preparado por reacção do composto (IV) com o composto (V). A reacção pode ser realizada na presença, ou ausência, de uma base num solvente adequado ou sem um solvente. A base pode ser seleccionada de bases inorgânicas correntes, tais como K2C03, Na2C03 e NaHC03, e bases orgânicas correntes, tais como piridina, Et3N, iPr2EtN, anilina e N,N-dimetilanilina. 0 solvente pode ser seleccionado de qualquer um que não perturbe a reacção de acoplamento, por exemplo, tolueno, DME, DMF, THF, CH2C12 ou uma sua mistura. A reacção de acoplamento pode ser realizada, por exemplo, a uma temperatura de -78 °C até 50 °C, de um modo preferido, a uma temperatura de 0 °C até à temperatura ambiente.

Na presente descrição e nas reivindicações, o grupo alquiloCi-6 significa um grupo alquilo de cadeia linear ou cadeia ramificada que tem 1 a 6 átomos de carbono, por exemplo, grupo metilo, grupo etilo, grupo propilo, grupo isopropilo, grupo butilo, grupo isobutilo, etc., de um modo preferido, um que tem 1 a 4 átomos de carbono. O alcoxiloCi-6 significa um grupo alcoxilo de cadeia linear ou cadeia ramificada que tem 1 a 6 átomos de carbono, por exemplo, grupo metoxilo, grupo etoxilo, grupo propoxilo, grupo isopropoxilo, grupo butoxilo, isobutiloxilo, etc., de um modo preferido, um que tem 1 a 4 átomos de carbono. 18

Abreviaturas

AcOEt: Acetato de etilo (= EtOAc) BSA: Albumina de soro bovino DMF: Dimetilformamida DCM: Diclorometano DIEA: Diisopropiletilamina DMSO: Sulfóxido de dimetilo Et: Etilo EtOH: Etanol HBSS: Solução salina equilibrada de Hank HMPA: Hexametilfosforamida HSA: Albumina de soro humano KHMDS: Hexametildissilazida de potássio (= Bis(trimetilsilil)amida de potássio LDA: Diisopropilamida de litio Me: Metilo MeOH: Metanol 19 n-Bu : n-Butilo

Ph: Fenilo t-Bu: terc-butilo THF: Tetra-hidrofurano

Tf: Trifluorometanossulfonilo TFA: Ácido trifluoroacético 0 composto da presente invenção é exemplificado pelos seguintes exemplos mas sem a limitar. 20

Exemplos

Exemplo 1: 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)-5- metil-2,4-imidazolidinodiona nh2 HC1

NEU OEt 0 Me3CCHO X'0* MgS04,CH2Cl2 1

1) t-BuOK, CN

2) HClalM

CN

NaOEt

EtOH

Cl

Passo-1. 0 sal cloridrato de éster etílico da L-alanina (15 g) foi dissolvido em H20 (60 mL) . Foi adicionado NEt3 (10,9 g) à solução sob agitação. A solução foi deixada a agitar durante 30 minutos, à temperatura ambiente, e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SC>4, filtradas e evaporadas para dar 9,5 g de éster etílico de L-alanina. O produto foi utilizado directamente no passo seguinte. MS: 118 (MH+) .

Passo-2. O éster etílico de L-alanina (9 g) , do passo-1, foi dissolvido em 150 mL de CH2C12 anidro, a solução foi arrefecida até 0 °C. Foi adicionado, à solução, MgSCU (10,17 g) 21 seguido de adição de pivalaldeído (6,95 g) . A mistura reaccional foi deixada a aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi evaporado para dar 11,2 g de éster etílico de N-neopentilideno-L-alanina. 0 produto foi utilizado no passo seguinte sem mais purificação. MS: 186 (MH+) .

Passo-3. Foi adicionado brometo de 4-cianobenzilo (4,6 g) a uma solução do composto obtido do passo 3 (4 g) em tolueno anidro (40 mL) . A mistura resultante foi arrefecida até -10 °C. Foi adicionado t-BuOK (2,9 g) em porções mantendo a temperatura a 0 °C. A mistura reaccional foi agitada a essa temperatura durante 4 horas. A mistura foi dividida entre Et0Ac/H20. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e concentradas. Foi adicionado, ao residuo, HC1 a 1 M (40 mL) e a mistura resultante foi deixada a agitar durante a noite. Foi adicionado EtOAc e a mistura reaccional foi deixada a agitar durante 30 minutos. A fase orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc adicional. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H20. O pH da solução aquosa combinada foi ajustado a aproximadamente 8 com NaHC03 sólido e a mistura foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SC>4, filtradas e concentradas para dar 2-amino-2-(4-cianobenzil)propanoato de etilo que foi utilizado directamente no passo seguinte. MS: 233 (MH+) .

Passo-4. Foi adicionado isocianato de 2,6-dicloro-4-piridilo (1 g) a uma solução do composto obtido do passo-3 (1,35 g) em CH2C12 anidro (10 mL) , mantida a 0 °C. A mistura reaccional foi deixada a aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura foi dividida entre Et0Ac/H20. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, 22 filtradas e concentradas para dar éster etílico do ácido 2- (4-cianobenzil)-5-(2,6-dicloro-4-piridil)-2-metilhidantóico. 0 produto foi utilizado directamente no passo seguinte. MS: 421 (MH+) .

Passo-5. Foi adicionado NaOEt (0,16 g) a uma solução do composto do passo-4 (1 g) em EtOH anidro (10 mL) a 0 °C. A solução amarela foi então aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. O EtOH foi evaporado e o resíduo foi dividido entre Et0Ac/H20. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel para dar o composto em epígrafe. (850 mg). MS: 375 (MH+) .

Exemplo 2: 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-Cianobenzil)-1,5-Dimetil-2,4-imidazolidinodiona

Foram adicionados, a um vaso reaccional, o composto obtido no Exemplo 1 (400 mg) e t-BuOK (180 mg) e, em seguida, fez-se passar um fluxo de N2. A mistura foi arrefecida até 0 °C e foi adicionado THF (10 mL). A mistura reaccional foi agitada a 0 °C, durante 20 minutos, seguido pela adição de Mel (454 mg). A mistura reaccional foi agitada a 0 °C durante 3 horas e, 23 finalmente, à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura foi extraída com Et0Ac/H20. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas. 0 produto foi purificado por TLC prep para dar o composto em epígrafe (310 mg) MS: 389 (MH+) .

Exemplo 3: 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)-5- metil-1-(5-etoxicarbonilpentil)-2,4-imidazolidinodiona

CN CN

0 composto obtido no Exemplo 1 (154 mg) foi tomado em 2 mL de DMF anidro. A solução foi arrefecida até 0 °C e foi adicionado NaH (25 mg, 60% em óleo) . A mistura resultante foi agitada durante 20 minutos a 0 °C. Foi adicionado, gota a gota, 6-bromo-hexanoato de etilo (140 mg) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura reaccional foi extraída com Et0Ac/H20. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas. O produto foi purificado por TLC preparativa para dar o composto em epígrafe (180 mg). MS: 517 (MH+) . 24

Exemplo 4: (R)-3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)- 5-metil-2,4-imidazolidinodiona

CN

Cl

Alanina

Passo-1: 0 éster etílico de a-metil-4-cianofenilalanina 1 foi preparado de acordo com a metodologia descrita no documento WO 98/39303.

Passo-2. Foi adicionado HC1 (1 M em Et20, 7 mL) a uma solução do composto obtido acima (770 mg) em DCM (5 mL) e a mistura reaccional foi agitada, à temperatura ambiente, durante 18 horas. A mistura reaccional foi então concentrada in vacuo para dar o sal de HC1 de éster etílico de a-Metil-4- cianofenilalanina (880 mg).

Passo-3. Foi adicionado, a uma solução do composto obtido acima em H20 (30 mL) , uma solução de KH2P04 (1,4 g) em H20 (30 mL) . A esta, foi adicionado Lipase L (Cândida Lipolytica, Sigma Aldrich, 1,4 g) e o pH da suspensão foi ajustado a 6,40 utilizando KOH a 1 N. O prgresso de hidrólise de éster a ácido foi monitorizado por HPLC (A = TFA a 0,1% em H20, B = TFA a 0,1% em MeCN; B a 15% até B a 55% durante 20 minutos) com o ácido a eluir em primeiro (t = 5,8 minutos) seguido do éster (t = 10 minutos) . O pH foi mantido a 6,40 pela adição de mais 25 quantidades de KOH a 1 N até que a HPLC indicou a razão de éster:ácido igual a 1:1.

Após 31 horas, foi adicionado NaHCC>3 sólido para levar o pH a 7,4 e a suspensão foi agitada com tolueno (100 mL) e filtrada através de celite. A camada aquosa foi separada e lavada com DCM (2 x 200 mL) e os orgânicos combinados secos sobre MgS04. Foi filtrado e o filtrado foi concentrado para proporcionar Éster etílico de (R)-a-metil-4-cianofenilalanina (340 mg).

Passo 3: Foi adicionado, sob N2 a 0 °C, isocianato de 2,6-dicloro-4-piridilo (305 mg) puro a uma solução do composto obtido acima (340 mg) em DCM (10 mL) . A mistura reaccional foi então aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 4 horas após o que foi concentrada in vacuo para dar éster etílico do ácido (R)-2-(4-cianobenzil)-5-(2,6-dicloro-4-piridil)-2-metil-hidantóico (680 mg).

Passo-4. Após passar um fluxo de N2, o composto obtido acima foi dissolvido em EtOH seco (10 mL) e foi adicionado NaOEt (60 mg) . Após agitação durante 3 horas, foram adicionados água (10 mL) e EtOAc (10 mL) e a mistura foi agitada. A fase aquosa foi então separada e lavada com EtOAc (3 x 10 mL) e os orgânicos combinados foram secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo. A purificação por cromatografia líquida (EtOAc/Hexano 1/1) deu o composto em epígrafe (410 mg). MS (m/z) = 375 (M). 26

Exemplo 5: 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)-5- metil-1-(5-carboxipentil)-2,4-imidazolidinodiona

0 composto obtido no Exemplo 3 (100 mg) foi dissolvido numa mistura de THF/MeOH (3 pL/l mL) . Foi adicionado uma solução de LiOH (25 mg em 1 mL H20) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. O pH da mistura foi ajustado a 3-4 utilizando HC1 a 1 M e a mistura foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e concentradas. O produto foi purificado por TLC preparativa para dar o composto em epígrafe (80 mg) . MS: 489 (MH+) . 27

Exemplo 6: (R)-3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)- 1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona

CN

Cl 0 composto obtido no Exemplo 4 (340 mg) e KOtBu (132 mg) foram pesados para dentro de um vaso seco e com um fluxo de N2. O vaso foi colocado num banho de gelo e foi adicionado THF seco (9 mL). Após agitação durante 15 minutos, foi adicionado Mel (0,17 mL) e a mistura reaccional foi aquecida até à temperatura ambiente. Após agitação durante 1 hora, foram adicionados água (10 mL) e EtOAc (10 mL) e a mistura foi agitada. A fase aquosa foi então separada e lavada com EtOAc (3 x 10 mL) e os orgânicos combinados foram secos sobre MgSCh, filtrados e concentrados in vácuo para dar um sólido branco. A purificação por cromatografia liquida (EtOAc/Hexano = 1/1) deu o composto em epígrafe (260 mg). MS (m/z) = 389 (M). O excesso enantiométrico (e.e.) foi determinado como sendo > 99% por HPLC quiral (0,5 mg/mL em MeOH, 3 yL, Chiracel OD#ODOOCE-11030, 250 x 4,6 mm, gradiente isocrático, Hexano/IPA). 28

Exemplo 7 : (R)-3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-bromobenzil)- 5-metil-2,4-imidazolidinodiona 0 composto em epígrafe foi preparado de um modo análogo ao descrito para o Exemplo 4, utilizando éster etílico de a-Metil-4-bromofenilalanina, que foi preparado de acordo com a metodologia descrita no documento WO 98/39303. MS (m/z): 430 (MH).

Exemplo 8: (R)-3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-bromobenzil)- 1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona O composto em epígrafe foi preparado de um modo análogo ao descrito para o Exemplo 6. MS (m/z): 443 (MH). O excesso enantiomérico (e.e.) foi determinado como sendo > 99% por HPLC quiral (0,5 mg/mL em MeOH, 3 μL, Chiracel OD#ODOOCE-11030, 250 x 4,6 mm, gradiente isocrático,

Hexano/IPA). 29

Exemplo 9 (Referência): 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-hidroxibenzil)-5-metil-2,4-imidazolidinodiona

Passo-1. Foi adicionado Et3N (2,47 g) a uma solução do composto 1 (3 g) em H20 (20 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 2 horas. A solução foi extraída várias vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas à secura. 0 sólido branco resultante (composto 2) foi utilizado tal qual sem purificação.

Passo-2. Foi adicionada uma solução de isocianato de 3,5-dicloro-4-piridilo (0,9 g) em CH2CI2 (5 mL) a uma solução do composto obtido do passo-1 (1 g) em CH2C12 anidro (15 mL) contendo DMF (5 mL), a 0 °C. A mistura reaccional foi deixada a aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura foi dividida entre Et0Ac/H20. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e concentradas 30 para dar éster metílico do ácido 2-(4-hidroxibenzil)-5-(2,6-dicloro-4-piridil)-2-metilhidantóico (composto 3). 0 produto foi utilizado directamente no passo seguinte. MS: 398 (MH+) .

Passo-3. Foi adicionado NaOEt (0,39 g) a uma solução do composto do passo-2 (2,26 g) em EtOH anidro (15 mL) , a 0 °C. A solução amarela foi então agitada a 0 °C durante 5 horas e aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. O EtOH foi evaporado e o resíduo foi dividido entre Et0Ac/H20. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/hexanos 1/1) para dar o composto em epígrafe (1,4 g). MS: 366 (MH+) .

Exemplo 10: 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-metoxibenzil)- 1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona OMe

Cl O composto em epígrafe foi obtido por metilação do composto do Exemplo 9 seguindo o processo semelhante ao Exemplo 2. MS: 394 (MH+) . 31

Exemplo 11 (Referência): 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-hidroxibenzil)-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona

OH

Cl

Foi adicionado, gota a gota, BBr3 (1,14 mL, 1 M em CH2CI2) a uma solução do composto do Exemplo 10 (0,15 g) em CH2C12 a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 30 minutos e, em seguida, agitada durante mais 30 minutos à temperatura ambiente. A reacção foi parada com água e dividida entre EtOAc e água. A solução aquosa foi extraída com EtOAc e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (EtOAc/Hexanos 1/1) para dar 0,125 g do composto em epígrafe. MS: 380 (MH+) . 32

Exemplo 12: 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-i- propoxibenzil)-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona

Foi adicionado tBuOK (0,022 g) a uma solução do composto do Exemplo 11 (0,06 g) em THF (3 mL) e a solução foi agitada durante 5 minutos. Foi adicionado 2-iodopropano (0,054 g) e a mistura reaccional foi refluxa durante 1,5 horas. A mistura foi dividida entre EtOAc/água e a camada de EtOAc foi seca (Na2S04) filtrada e evaporada. O residuo foi purificado por TLC preparativa (EtOAc/Hexanos 1/1) para dar o composto em epígrafe. MS: 422 (MH+) .

Os seguintes compostos foram preparados de um modo semelhante ao Exemplo 12. 33

Tabela 1

Exemplo 15: 3-(2,6-Dicloro-4-piridil)-5-(4-etoxi-3- fluorobenzil)-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona

Foi adicionado, a uma solução do composto do Exemplo 14 (0,24 g) em CH3CN (15 mL) , triflato de 3,5-dicloro-l-fluoropiridínio (0,38 g) e a mistura foi refluxa durante 30 horas. A mistura foi concentrada e purificada por HPLC para dar o composto desejado. MS m/z 426 (MH+) . 34

Exemplo 16: 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4- (1,1,ltrifluorometoxibenzil)]-5-metil-2,4-imidazolidinodiona 0 composto em epígrafe foi preparado de um modo semelhante ao Exemplo 1. MS: 434 (MH+) ; pf. 151,2 °C.

Exemplo 17: 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-[4- (1,1,ltrifluorometoxibenzil)1-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona 0 composto em epígrafe foi obtido por metilação do composto do Exemplo 16 seguindo o procedimento semelhante ao Exemplo 2. MS: 448 (MH+) ; pf. 113,7 °C.

Exemplo 18: 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-fluorobenzil)]- 5-metil-2,4-imidazolidinodiona 0 composto em epígrafe foi preparado de um modo semelhante ao Exemplo 1. MS: 368 (M+); pf. 221,1 °C.

Exemplo 19: 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-bromobenzil)]-5-metil-2,4-imidazolidinodiona 0 composto em epígrafe foi preparado de um modo semelhante ao Exemplo 1. MS: 429 (MH+) . 35

Exemplo 20: 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-bromobenzil)]- 1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona 0 composto em epígrafe foi obtido por metilação do composto do Exemplo 19 seguindo o processo semelhante ao Exemplo 2. MS: 443 (MH+) .

Protocolo de Adesão Celular

Adesão Celular A proteína ICAM-l»Fc recombinante foi construída a partir dos 5 domínios extracelulares de ICAM-1 humano e a fusão com a região constante de IgG humano. A ICAM-l*Fc foi purificada por cromatografia de afinidade de Proteína A e armazenada em alíquotas a -20 °C. A ICAM-l*Fc imobilizada foi preparada por diluição da proteína em PBS pH 7,5, transferência de 100 pL/poço para placas Falcon Probind III e incubação durante a noite a 4 °C. Os poços revestidos com BSA serviram como uma medida de fundo de adesão não específica. As placas lavadas foram bloqueadas com uma solução de ovalbumina a 0,25% em PBS durante 1 h a 37 °C. As células Jurkat, lavadas com HBSS, foram suspensas a uma concentração final de 2,5 x 106/mL em tampão de adesão TBSg (Tris a 24 mM pH 7,4, NaCl a 0,14 M, KC1 a 2,7 mM, glucose a 2 mM, HSA a 0,1%. Foi adicionado um volume de 100 pL de células às placas revestidas com ICAM-1·Fc, bloqueadas e lavadas, que continham 100 pL de tampão de placa (TBSg, MgCl2 a 10 mM, DMSO a 2%) . A adesão foi durante 1 ha 37 °C. As células não aderentes foram removidas utilizando o lavador de placas EL404 (BioTek Instruments; Highland Park, Vt.). O número de células aderentes foi quantificado por medida da actividade enzimática de N-acetil-hexosaminidase endógena utilizando o substrato de enzima 36 p-nitrofenol-N-acetil-b-D-glucoseaminida, pNAG. A quantidade de p-nitrofenol libertado foi medida por leitura da densidade óptica, a 405 nm, utilizando um espectrofotómetro de percurso vertical para quantificar a ligação celular (VMAX Kinetic Microplate Reader, Molecular Devices, Menlo Park, CA) . Para os estudos de competição, os compostos de solução de reserva com DMSO a 100% foram diluídos, em tampão de placa, a 2 vezes a concentração de ensaio necessária, antes da transferência para a placa revestida com ICAM-l.Fc e diluição em série.

Lisboa, 6 de Agosto de 2007 37

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Composto da fórmula (I) :

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com um grupo carboxilo, R2a e R2b são, independentemente, um átomo de hidrogénio, um átomo de halogéneo, um grupo ciano ou um grupo alcoxiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com 1-3 átomos de halogéneo, R1 2 é um grupo alquiloCi-6 e R3 e R4 são, independentemente, um átomo de halogéneo. 1 1 Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquiloCi-6, um de R2a e R2b é 2 um átomo de hidrogénio e o outro é um átomo de halogéneo, 3 um grupo ciano ou um grupo alcoxiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com 1-3 átomos de halogéneo, R2 é 4 um grupo alquiloCi-6 e R3 e R4 são, independentemente, um átomo de halogéneo.
3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que R1 é um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, um de R2a e R2b é um átomo de hidrogénio e o outro é um átomo de bromo, um grupo ciano, um grupo alcoxiloCi-6 ou um grupo trifluorometoxilo, R3 é um grupo metilo, R4 e R5 são um átomo de cloro.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é seleccionado de: 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-bromobenzil)-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2, 6-dicloro-4-piridil)-5-(4-propoxibenzil)-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-etoxibenzil)-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2, 6-dicloro-4-piridil)-5-[4-(1,1,1-trifluorometoxibenzil)]-5-metil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2, 6-dicloro-4-piridil)-5-[4- (1,1,1-trifluorometoxibenzil)]-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)-5-metil-2,4-imidazolidinodiona, 3-(2,6-dicloro-4-piridil)-5-(4-cianobenzil)-1,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona; e 2 um sal farmaceuticamente aceitável destes compostos.
5. Processo para preparar um composto da fórmula (i-a):

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R2a, R2b, R3, R4 e R5 são os mesmos, como definido na reivindicação 1; que compreende ciclizar o composto da fórmula (II):

em que OR6 é um grupo hidroxilo ou um grupo hidroxilo protegido e os outros simbolos são os mesmos, como definido na reivindicação 1, e conversão no seu sal farmaceuticamente aceitável, se necessário. 3 6. Processo para preparar um composto da fórmula (I-b):

O

(l-b) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R11 é um grupo alquiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com grupo carboxilo; R2a, R2b, R3, R4 e R5 são os mesmos, como definido na reivindicação 1; que compreende (1) alquilar um composto da fórmula (I-a):

(l-a) em que os símbolos são os mesmos, como definido na reivindicação 1, (2) hidrolizar o composto resultante, se necessário, e 4 (3) conversão no sal farmaceuticamente aceitável, se ainda desejado.
7. Processo para preparar um composto da fórmula (I-c): R21 (Οι

(l-c) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R11 é um grupo alquiloCi-6 que pode estar opcionalmente substituído com um grupo carboxilo; R21 é um grupo alcoxiloCi_6 que pode estar opcionalmente substituído com 1 a 3 átomos de halogéneo; R3, R4 e R5 são os mesmos, como definido na reivindicação 1; que compreende alquilar um composto da fórmula (I-d): OH

5 em que os símbolos são os mesmos, como definido acima, e conversão no sal farmaceuticamente aceitável, se necessário.
8. Composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, como anteriormente apresentado em qualquer uma das reivindicações 1-4, em mistura com um veículo ou diluente terapeuticamente aceitável.
9. Utilização do composto como apresentado em qualquer uma das reivindicações 1-4 no fabrico de uma preparação farmacêutica útil para o tratamento ou prevenção de estado mediado por adesão de aLp2 num mamífero.
10. Utilização de acordo com a reivindicação 9, em que a referido estado é seleccionado de artrite reumatóide, asma, estados alérgicos, sindrome da insuficiência respiratória no adulto, SIDA, doenças cardiovasculares, trombose, agregação de plaquetas prejudicial, re-oclusão após trombólise, lesão por reperfusão, doenças inflamatórias cutâneas, osteoporose, osteoartrite, arteriosclerose, doenças neoplásicas, ferida, separação da retina, Diabetes tipo I, esclerose múltipla, lúpus eritematoso sistémico, estados inflamatórios oftálmicos, doenças inflamatórias do intestino, enterite regional, Sindrome de Sjogren e rejeição após transplante. 6
11. Utilização de acordo com a reivindicação 10, em que a referida doença é seleccionada de psoriase, artrite reumatóide, doenças inflamatórias do intestino (doença de Crohn, colite ulcerosa), lúpus eritematoso sistémico, dermatite atópica, Sindrome de Sjogren, rejeição após transplante (rejeição de aloenxerto e doença enxerto vs. hospedeiro). Lisboa, 6 de Agosto de 2007 7