PT1015596E - Protaínas de fusão compreendendo as protaínas tat e/ou nef do vih-1 - Google Patents
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- REIVINDICAÇÕES 1. Composição vacinai que compreende uma proteína compreendendo a) uma proteína Tat integral do VIH ou uma Tat com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Tat mutada a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ou uma Tat mutada como definido pela SEQ ID N°. 23, ligada a (i) uma proteína ou parceiro de fusão lipoproteico ou (ii) uma proteína Nef integral do VIH ou uma Nef com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Nef a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido; ou b) uma proteína Nef integral do VIH ou uma Nef com uma extremidade histidina no C-terminal, ou Nef a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ligada a (i) uma proteína ou parceiro de fusão lipoproteico ou (ii) uma proteína Tat integral do VIH ou Tat com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Tat mutada a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ou uma Tat mutada como definido por na SEQ ID N°. 23; ou c) uma proteína Nef integral do VIH ou Nef com uma extremidade histidina no C-terminal, ou Nef a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ligada a uma proteína Tat integral do VIH ou Tat com uma extremidade histidina em C-terminal, ou uma Tat mutada a qual sofreu deleção, 1 adição ou substituição de um aminoácido, ou uma Tat mutada como definido por na SEQ ID N°. 23, e uma proteína ou parceiro de fusão lipoproteico, em mistura com um excipiente farmaceuticamente aceitável. Composição como reivindicado na reivindicação 1 compreendendo uma proteína de fusão Tat-Nef ou seu derivado. Composição como reivindicado na reivindicação 1 compreendendo uma proteína de fusão Nef-Tat ou seu derivado. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 3 em que a lipoproteína é a proteína D de Haemophilus Influenza B ou seu derivado.
- 5. Composição como reivindicado na reivindicação 4 em que o parceiro de fusão compreende entre 100-130 aminoácidos da N terminal da proteína D de Haemophilus Influenza B.
- 6. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, em que a proteína Tat é fundida a uma proteína Nef do VIH e a um parceiro de fusão.
- 7. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que a proteína possui uma extremidade histidina. 2
- 8. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 7 em que a proteina é uma proteína de fusão Nef-Tat ou seu derivado e é carboximetilada.
- 9. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, compreendendo adicionalmente um adjuvante.
- 10. Composição como reivindicado na reivindicação 9, em que o adjuvante é um adjuvante de indução TH1.
- 11. Composição como reivindicado na reivindicação 9 ou 10 o qual adjuvante compreende monofosforilo lípido A ou um seu derivado tal como monofosforilo lípido A 3-des-O-acilado.
- 12. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 9 a 11 compreendendo adicionalmente um adjuvante de saponina.
- 13. Composição como reivindicado na reivindicação 11 ou reivindicação 12 a qual compreende adicionalmente uma emulsão de óleo em água e tocoferol.
- 14. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 9 a reivindicação 13 em que o adjuvante compreende 3D-MPL., QS21 e uma emulsão de óleo em água de tocoferol, esqualeno e Tween 80™.
- 15. Composição como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 14 compreendendo ainda gpl60 do VIH ou o seu derivado gpl20. 3
- 16. Proteína compreendendo uma proteína Tat integral do VIH ou Tat com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Tat mutada a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ou uma Tat mutada como definido pela SEQ ID N°. 23, ligada a uma proteína Nef integral do VIH ou Nef com uma extremidade histidina no C-terminal, ou Nef a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, em orientação Nef-Tat ou Tat-Nef. 17. Ácido nucleico codificando uma proteína da reivindicação 16.
- 18. Hospedeiro transformado com um ácido nucleico da reivindicação 17.
- 19. Hospedeiro como reivindicado na reivindicação 18 em que o hospedeiro é E. coli ou Pichia pastoris.
- 20. Método de produção de uma proteína da reivindicação 16, compreendendo proporcionar um hospedeiro como reivindicado na reivindicação 18 ou 19, expressão da referida proteína e recuperação da proteína.
- 21. Método de preparação de uma proteína compreendendo (a) uma proteína Tat integral do VIH ou Tat com uma extremidade histidina no C-terminal, ou Tat mutada a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ou uma Tat mutada como definido pela SEQ ID N°. 23, ligada a (i) uma proteína ou parceiro de fusão lipoproteico ou (ii) uma proteína Nef integral do VIH ou uma Nef com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Nef a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido; ou (b) uma 4 proteína Nef integral do VIH ou uma Nef com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Nef a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ligada a (i) uma proteína ou parceiro de fusão lipoproteico ou (ii) uma proteína Tat integral do VIH ou uma Tat com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Tat mutada a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ou uma Tat mutada como definido pela SEQ ID N°. 23/ ou (c) uma proteína Nef integral do VIH ou uma Nef com uma extremidade histidina no C-terminal, ou uma Nef a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ligada a uma proteína Tat integral do VIH ou uma Tat com uma extremidade histidina em C terminal, ou uma Tat mutada a qual sofreu deleção, adição ou substituição de um aminoácido, ou uma Tat mutada como definido pela SEQ ID N°. 23, e uma proteína ou parceiro de fusão lipoproteico, em Pichia pastoris método o qual compreende as etapas de transformação de Pichia pastoris com ADN codificando a referida proteína, expressão da referida proteína e recuperação da proteína.
- 22. Método da revindicação 21 em que a proteína é uma proteína de fusão Nef-Tat ou seu derivado e o método compreende ainda uma etapa de carboximetilação realizado sobre a proteína expressa.
- 23. Método de produção de uma vacina, compreendendo misturar a proteína de qualquer uma das reivindicações 20 a 22 com um diluente farmaceuticamente aceitável.
- 24. Método da reivindicação 23 compreendendo ainda a adição de gp!60 do VIH ou o seu derivado gp!20. 5
- 25. Método das reivindicações 20 a 24 compreendendo ainda a adição de um adjuvante, particularmente um adjuvante de indução TH1.
- 26. Proteína Nef-Tat-His ou Nef Tat Mutante His ou polinucleotídeo possuindo a sequência de aminoácidos ou ADN mostrada nas SEQ ID Nos. 12, 13, 16, 17, 20, 21, 24 or 25. Lisboa, 25 de Outubro de 2006 6
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