PL87735B1 - Phthalide penicillin ester intermediates[USRE29650E] - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wydarzania nowych estrów penicyliny a zwlaszcza estru ftali¬ dylowego kwasu 6-/D/-/a-aminofenyloacetamido/- penicylanowego i jego dopuszczalnych w farmacji soli addycyjnyclh z kwasem.

Kwas 6-/D/-/a-aminofenyloacetamido/-penicyla- nowy znajduje szerokie zastosowanie jako antybio¬ tyk o duzym zakresie dzialaniia. iPrzy podawaniu doustnym nie ulega on jednak calkowitej absorpcji w krazacej krwi, co w prak¬ tyce lekarskiej bywa uwazane za ceche nieko¬ rzystna. Przeprowadzane sa zatem próby znalezie¬ nia takiej pochodnej tego kwasu, która dawalaby wyzsze stezenia macierzystej penicyliny we krwi przy podawaniu doustnym niz to bylo mozliwe dla tej penicyliny jako takiej.

Sposobem wedlug wynalazku wytwarza sie nowy ester kwasu 6-/D/-/a-aminofenyloacetamido/penicy- lanowego oraz jego soli addycyjnej z kwasem ko¬ rzystnie chlorowodorku o wzorze 1 dajacy wyso¬ kie stezenie surowicy macierzystej penicyliny przy podawaniu doustnym.

Mozna jednak stosowac inne nieorganiczne i or¬ ganiczne kwasy, a zwlaszcza te, które stosuje sie do otrzymywania soli samego kwasu 6-/D/-/a-ami- nofenyloacetamido/penicylanowego. Ponadto, zwia¬ zek wytwarzany sposobem wedlug wynalazku two¬ rzy sole z innymi kwasami penicylanowymi, jak np. z 3-/2'-chloro-6'-fluorofenylo/-5-metylo-4-izoksazo- lilopenicylina.

Sposób wedlug wynalazku polega na reakcji estru ftalidylowego kwasu 6-aminopenicilanowego lub jego pochodnej sililowej z izomerem /D/ po¬ chodnej N-acylowej zwiazku o ogólnym wzorze 2, w którym X oznacza grupe aminowa, zabezpieczo¬ na grupe aminowa lub grupe, która mozna prze¬ prowadzic w grupe aminowa, usuniecie grupy sili¬ lowej /jesli taka wystepuje/ na drodze hydrolizy lub alkoholizy, oraz, jesli X nie oznacza grupy amino¬ wej, reakcje tej grupy do grupy aminowej w wa¬ runkach obojetnych lub kwasnych.

Termin „Pochodna sililowa" estru ftalidylowego kwasu 6-aminopenicylanowego oznacza produkt re¬ akcji pomiedzy esterem ftalidylowym kwasu 6-ami¬ nopenicylanowego i czynnikiem sililujacym, takim jak haloitrójalkilosilan, dwuhalodwualkiiosilan, ha- lotrójalkilosilan, dwiuhaiodwiualkoksysilan lub od¬ powiedni arylo- lub aryloalkilosilan i takie zwiazki jak np. heksametylodwusilazan. Na ogól najlepsze sa halotrójalkilosilany, a zwlaszcza trój metylochlo- rosilan. Sililowe pochodne estru ftalidylowego kwa¬ su 6-aminopenicylanowego sa bardzo wrazliwe na wilgoc i zwiazki hydroksylowe. Po reakcji z reak¬ tywna pochodna zwiazku o ogólnym wzorze 2, gru¬ pe sililowa iposredniej pochodnej acylowej mozna usunac na drodze hydrolizy lub alkoholizy.

Grupa X w zwiazku o ogólnym wzorze 2 ozna¬ cza grupe aminowa zabezpieczona grupe aminowa lub grupe, z której mozna otrzymac grupe ami¬ nowa. 87 73587 735 3 4 Przykladami zabezpieczonej grupy aminowej sa: protonowana grupa aminowaj to Jest X-oznacza NH,+, która mozna po reakcji acylowania przepro¬ wadzic w wolna grupe aminowa przez prosta ne¬ utralizacje, grupa benzyloksykarbonyloaminowa, to jest X oznacza NH.002CH*Ph, lub podstawione grupy benzyloksykarbonyloaminowe, które mozna z kolei przeprowadzic w grupe NH2 na drodze ka¬ talitycznego uwodornienia oraz rózne grupy, z któ¬ rych po reakcji acylowania mozna wytwarzac gru¬ pe aminowa na drodze hydrolizy w obecnosci kwa¬ su w lagodnych warunkach. Na ogól nie stosuje sie hydrolizy w warunkach alkalicznych gdyz hy- drolizuje wówczas grupa ftalidylowa.

Przykladami grupy X, która mozna nastepnie na drodze._hydxoliay--y%obecnosci kwasu w lagodnych warunkach przeprowadzic do grupy aminowej sa grupy enaminowe o ogólnym wzorze 3 i ich od¬ miany tautomeryczne oraz grupy a-hydroksy- arylideliowle o ogólnym wzorze 4 lub ich, odmiany tautomeryczne. We wzorze 3, R1 oznacza nizsza -grupe alkilowa, R* oznacza atom wodoru lub lacznie z grupa R1 oznacza pierscien karbo- cykliczny oraz R* oznacza nizsza grupe alkilowa, arylowa lub nizsza grupe alkoksylowa. We wzorze 4, Z oznacza reszte podstawionego lub niepodsta- wionego pierscienia benzenowego lulb naftalenowe¬ go.

*¦ Przykladem grupy X, która po reakcji acylowa¬ nia estru ftalidylowego kwasu 6-aminopenfcylano- wego przy uzyciu reaktywnej pochodnej o ogól¬ nym wzorze 2 mozna przeprowadzic do grupy ami¬ nowej, jest grupa azydowa. W tym przypadku, koncowa konwersje do grupy NH2 mozna prze¬ prowadzac na drodze katalitycznego uwodornienia lub elektrolitycznej redukcji.

Zgodnie z powyzszym sposobem stosuje sie re¬ aktywna pochodna N-acylowa kwasu o ogólnym wzorze 2. Wybór reaktywnej pochodnej zalezy o- czywiscie od chemicznych wlasnosci alfa podstaw- nika X. I tak, jesli X oznacza grupe, trwala w obecnosci kwasu, taka jak protonowana grupa minowa NH*, lub grupa azydowa, czesto dogodne jest przeprowadzenie kwasu o wzorze 2 w halo¬ genek kwasowy. Na kwas dziala sie wówczas na przyklad chlorkiem tionylu lub piejciochlorkiem fostforu.

Reagentów takich nie nalezy jednak stosowac gdy X oznacza grupe nietrwala w obecnosci kwa¬ su, typu igrupy o ogólnym wzorze 3 liulb 4. W taikich przypadkach czesto dogodne jest zastosowanie mie¬ szanego bezwodnika. Do tego celu szczególnie uzy¬ teczne sa bezwodniki kwasów alkoksymrówkowych, które otrzymuje sie korzystnie dzialajac odpowied¬ nim chloromrówczanem alkilu na sól kwasu o wzorze 2 z metalem alkalicznym lub z trzeciorze¬ dowa amina, w bezwodnym srodowisku w tempe¬ raturze pokojowej lub nizszej.

Innymi, reaktywnymi pochodnymi N-acylowymi kwasu o wzorze 2 sa reaktywne produkty posrednie powstajace in situ w reakcji z karbodwuimidem lub karbonylodwuimidazolem.

Stosowany zgodnie ze sposobem wedlug wyna¬ lazku ester ftalidylowy kwasu 6-aminopenicylano- wego mozna wytwarzac, chociaz ze slaba wydaj¬ noscia, przez bezposrednie sprzezenie kwasuj$-ami- nopenicylanowego z 3-bromoftalidem w obecnosci zasady. Sposób ten nie jest jednak calkowicie za* dowalajacy gdyz w pewnej mierze wystepuje epi- meryzacja przy weglu 6.

Ester ftalidylowy kwasu 6-aminopenicylanowe¬ go jest równiez nowym zwiazkiem wytwarzanym sposobem wedlug wynalazku. Ester ftalidylowy kwasu 6-aminopenicylanowego mozna otrzymywac ze znacznie lepsza wydajnoscia na drodze reakcji N-zabezpieczonej pochodnej kwasu 6-aminopenicy¬ lanowego, np. pochodnej trójfenylornetylowej, z 3-bromoftalidem, a nastepnie przez usuniecie grupy zabezpieczajacej, np. na drodze hydrolizy w obec¬ nosci kwasu w lagodnych warunkach w przypadku pochodnej trójfenylometylowej.

Alternatywna grupe N-zabezpieczonych kwasów 6-aminopenicylanowych stanowia kwasy C-acylo- aminopenicylanowe. Metody usuwania grupy 6-acy- lowej z ibenzylopenkyliny i fenoksymetylopenicyli- ny opisano w brytyjskim opisie patentowym nr 1189 022. Zgodnie z tymi metodami, na kwas 6-acyloaminopenicylanowy dziala sie pieciochlor- kiem fosforu w celu utworzenia wiazania chloro- iminowego przy atomie azotu w grupie 6-amidowej, nastepnie na iminochlorek dziala sie alkoholem z wytworzeniem iminoeteru i wiazanie iminowe hy- drolizuje sie uzyskujac ester kwasu 6-aminopenicy¬ lanowego. W tym przypadku mozna wyjsc z estru ftalidylowego penicyliny G lub penicyliny V /do¬ trzymywanej na przyklad na drodze reakcji soli sodowej lub potasowej penicyliny z 3-bromoftali¬ dem/ i oderwac grupe acylowa wraz z lancuchem bocznym w celu uzyskania kwasu 6-aminopenicy¬ lanowego.

Zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalaz¬ ku sa dobrze akceptowane przez organizm i naj¬ korzystniej podaje sie je doustnie w dowolnej po¬ staci kwasnej soli addycyjnej. Zazwyczaj podaje sie je w polaczeniu z odpowiednimi, dopuszczalnymi w farmacji nosnikami. Zawartosc zwiazku wytwo¬ rzonego sposobem wedlug wynalazku w takich mie¬ szankach moze wynosic od 1—&5fy> wagowych w przeliczeniu na ciezar mieszanki. Mieszanka taka moze wystepowac w postaci proszku sluzacego do przygotowania syropu, tabletek, kapsulek lub dra¬ zetek lub w dowolnej, innej typowej postaci.

Wytwarzane sposobem wedlujg wynalazku estry lub jego sole mozna dogodnie podawac w1 dawkach jednostkowych zawierajacych ilosc odpowiadajaca od 0,025 g do 1 g kwasu 6-/D/-/fc-arciinofenyloace- tamido/penicylanowego, a najlepiej ilosc równowaz¬ na od 0,1 do 0,7 g kwasu penicylanowego. Dogodna moze sie okazac dawka jednostkowa zawierajaca ilosc równowazna 250—500 mg macierzystemu kwa¬ sowi penicylanowemu. Dzienne dawki zaleza od stanu pacjenta lecz na ogól wlasciwa jest dawka 1 do 3 g estru wytworzonego sposobem wedlug wynalazku w przeliczeniu na macierzysty kwas penicylanowy.

Ester ftalidylowy kwasu 6-/D/-/a-aminofenylo- acetamido/penicylanowego, wytworzony sposobem wedlug wynalazku jest dobrze absorbowany przez ludzi i zwierzeta przy podawaniu doustnym. Uzy¬ skuje sie wówczas wysokie stezenie kwasu macie- 40 45 50 5587 735 rzystego 6-/D/-/a-aminofenyloacetamido/!penicyla- nowego w surowicy.

Wynalazek ilustruja nastepujace przyklady: Przyklad I. Ester ftalidylowy kwasu 6-ami¬ nopenicylanowego.

Sposób 1. Mieszanine 10,8 g, to jest 0,05 mola, kwasu 6-aminopenicylanowego i 6,9 ml, to jest 0,05 mola, trójetyloaminy w 20 ml suchego aceto¬ nu miesza sie w ciagu 0,5 godziny w temperaturze otoczenia. Mieszanine chlodzi sie do temperatury 0°C, dodaje sie roztwór 10,65 g, to jest 0,05 mola, 3-foromoftalidu w 20 ml suchego acetonu i uzyska¬ na, zólta mieszanine miesza sie w ciagu 5 godzin w temperaturze otoczenia. Nastepnie mieszanine re¬ akcyjna rozciencza sie 150 ml suchego eteru i prze¬ sacza sie. Klarowny, zólty przesacz przemywa sie 100 ml In roztworu kwasnego weglanu sodowego i IGO nil nasyconego roztworu solanki. Do klarow¬ nego, zóltego, suchego przesaczu dodaje sie roz¬ twór 9,5 ;g, to jest 1 równowaznik, monohydratu kwasu p-toluenosulfonowego w 150 ml suchego ace¬ tonu i z roztworu natychmiast krystalizuje sól kwasu p-toluenosulfonowego estru ftalidylowego kwasu epi-6-aminopenicylanowego.

Izomer 6-a/trans/: widmo NMIR //ODj/gSO/ — 8=7,84 /s, 4H, protony aromatyczne ftalidu/, 8=7,58 /s,lH, O0.O. CH/, 8=7,30 /q, 4H, protony aromatyczne sulfonianu/, 8=5,35 /d, 1H, proton C—5, J — 2 Hz/, 8=4,89 /s, 1H, proton C—3/, 8=4,70 /d, 1H, proton C—6 J=2 Hz/, 8=2,30 /s, 3H, CH8/, 5=1,48 /d, 16H, Grupy gem-dwumemtylowa/, widmo w podczerwieni /KBr/ wykazuje silne pasma przy 1780, 12110, 1170, 1010, 970, 682 i 574 cm"1.

Z oleju pozostajacego z lugu macierzystego uzy¬ skuje sie niewielka iloscia 5%, wzglednie czystej próbki naturalnego izomeru cis estru ftalidylowego kwasu 6-aminopenicylanowego w postaci soli z kwasem p-toluenosulfonowym na drodze powtarza¬ nej krystalizacji frakcjonowanej izomeru 6-a/trans/ z mieszaniny acetonu i eteru w stosunku 3:1. Izo¬ mer 6-P/cIs/: widmo NMR //CD8/^SO/ — 8=7,84 /s, 4H, protony aromatyczne ftalidu/, 8=7,58 /s, 1H, OO.O.CH/, 8=7,30 /q, 4H, protony aromatyczne siarczanu/, S^SO /d, 1H, proton C—6, J — 4 Hz/, 8=5,14 /d, 1H, 0—6 proton, J — 4 Hz/, 8=4,68 /s, 1H, proton C—3/, 8=2,27 /s, 3H, CH8/, 8=1,53 /d, 6H, grupy gam-dwumetylowe/; widmo w pod¬ czerwieni /KBr/ wykazuje silne pasma przy 1780, 121&, 1170, 1O10, 970, 6182 i 574 cm-1.

Sposób 2. Roztwór 9,8 g, to jest 0y02 mola, kwasu 6-trójifenylometyloamlnopenicylanowego w 100 ml suchego acetonu oziebia sie do temperatury 0°C.

Nastepnie dodaje sie 2,9 mg, to jest 0,02 mola, trójetyloaminy i roztwór 4,1 g, to jest 0,02 mola, 3^bromoftalidu w 20 ml suchego acetonu i miesza¬ nine reakcyjna miesza sie w ciagu 2 godzin w temperaturze 0°C, a potem-1 godzine w tempera¬ turze otoczenia. Wyiracony bromek trójetyloamino- wy odsacza sie, przesacz odparowuje sie, rozpuszcza w 150 ml octanu etylu i dwukrotnie przemywa sie porcjami po 150 ml zimnego 2°/« roztworu kwas¬ nego weglanu sodowego i po 100 ml wody z lodem.

Warstwe octanu etylu suszy sie nad bezwodnym siarczanem magnezu i po usunieciu rozpuszczalni¬ ka pod próznia otrzymuje sie bialy, bezpostaciowy osad estru ftalidylowego kwasu 6-trójfenylometylo/ aminopenicylanowego. Widmo NIMR //CDt/tSQ/: 8=7,4 /20H, szeroki singlet z mniejszym shoulderen% przy 8=7,80, protony aromatyczne i OO.O.CH—/, 8=4,41 /m, 2H, protony fMaktomu/, 8=4,15 /szeroki singlet, 1H, proton C—3/, 8=1,38 /d, 6H, grupy gem-dwumetylowe/. Widmo w podczerwieni /KBr/ wykazuje silne pasma przy 1745, 980, 750 i 708 cm^1.

Na 5,9 ig, to jest 0,01 mola estru ftalidylowego io kwasu 6-trójfenylometyloaminopenicylanowego w 200 ml acetonu zawierajacego 0,2°/o wody dziala sie 1,9 g, (to jest 0,01 mola, monohydratu kwasu p-toluenosulfonowego. Mieszanine .pozostawia sie na okres 2 godzin w temperaturze pokojowej, do- daje sie 0,25 ml wody i dodajac powoli 250 ml eteru naftowego o temperaturze wrzenia 40 do 60°C wytraca sie p-toluenosulfonian estru ftalidy¬ lowego kwasu 6-aminopenicylanowego. Osad od¬ sacza sie i po kilkukrotnym przemyciu eterem naftowym uzyskuje surowa sól kwasu p-tolueno¬ sulfonowego. Próbke krystalizuje sie z mieszaniny acetonu i eteru z 85% wydajnoscia. Widmo NMR //CD8/^SO//: 8=7,84 /s, 4H, protony aromatyczne ftalidu/, 8=7,58 /s, 1H, —OO.O.CH—/, 8=7,30 /q, 44,9, protony aromatyczne sulfonianu/, 8=5,50 /d, 1H, p-laktam, J — 4 Hz/, 8=5,14 /d, 1H, 0-laktam, J — 4 Hz/, 5=4,68 /s, 1H, proton C—3/, 8=2,27 /s, 3H, CH8/, 8=1,53 /d, 6H, grupy gem-dwu)metyIo¬ we/. Wartosci oznaczone: C—52,32, H—4,60, N—4,94 i S—12,27. Wartosci obliczone dla C^H^NjS^Oe — C^53,0B, H^4,61, N^5,39 i S^12,31.

Sposób 3. Ester ftalidylowy benzylojpenicyliny ,0 g, to jest 10,054 mola, soli potasowej benzy- lopenicyliny rozpuszcza sie w 50 ml suchego dwu- metyloformamidu i chlodzi sie do temperatury 0°C.

Roztwór ten miesza sie i dodaje sie do niego jednorazowo 11,5 g to jest 0,054 mola, 3-bromofta- lidu w 20 ml suchego dwumetyloformamidu. Mie¬ szanine reakcyjna pozostawia sie do ogrzania do 40 temperatury pokojowej i miesza sie jeszcze w cia¬ gu 2 godzin. Nastepnie, mieszanine wylewa sie do 600 ml wody z lodem i miesza sie energicznie Bialy osad zbiera sie i starannie przemywa woda.

Po wysuszeniu, substancje krystalizuje sie z gora- 45 cego alkoholu izopropylowego I otrzymuje sie ,5 g, to jest z wydajnoscia 41,99/t bialego, krysta¬ licznego produktu o temperaturze topnienia 167 do 169°C. Widmo w podczerwieni /Nujol/ wykazuje miedzy innymi silne pasma przy 1770, 1678, 1524 so i 970 cm-1. Widmo NMiR //GDj/^SO/DjO/ wyka¬ zuje piki przy: 8=7,88 /m 4H, protony aromatycz¬ ne ftalidu/, 8=7,61 /s, 1H, CO.O. CH—/, 8=T,28 /s, 5H, protony aromatyczne/, 8=5,55 /m, 2H, P-laktam/, 8=4,55 /s, 1H, proton C8/, 6=3,5/6 /s, 55 2H, PhCH2CO/, 8=1,53 /d, 6H, grupy gem-dwume¬ tylowe/. Czystosc okreslona przy uzyciu hydroksy¬ loaminy wynosi 109,2Q/«. Wartosci oznaczone: C-^01,55, H-^4,90, N— 5,87, S^6,72, Wartosci obli¬ czone dla C^H^NsSO,,: C—61,80, H—4,72, N—6,02, «o s—6,86. 11fi g to jest 0,025 mola, estru ftalidylowego ben»^ zylopenicyliny rozpuszcza sie w 250 ml suchego dwuchlorku metylenu i oziebia sie do temperatury -J2f5°C. Dodaje sie 5,60 ml, to jest 0,025 mola, 85 N-metylomorfoliny, a nastepnie w ciagu 5 minut87 735 8 wprowadza sie roztwór 6,0 g pieciochlórku fosforu w 150 ml dwuchlorku metylenu. Mieszanine miesza sie w ciagu 0,5 godziny, przy czym temperatura wzrasta do 0°C i [powstaje jasnozólte zabarwienie.

Mieszanine chlodzi sie ponownie do temperatury —25°C i dodaje sie -5,60 ml N-metylomorfoliny w suchym metanolu, tak aby uzyskac powolny rów¬ nomierny wzrost temperatury do okolo —10°C.

Mieszanine miesza sie jeszcze w ciagu 2 godzin w temperaturze —"5 do 0°C, po czym energicznie mie¬ szajac dodaje sie 400 ml wody i dodatkiem rozcien¬ czonego roztworu wodorotlenku sodowego zwieksza sie jednoczesnie pH mieszaniny z 1,2 do 6,0. Or¬ ganiczna warstwe oddziela sie, przemywa woda i nasycona solanka oraz przesacza sie na bibule po¬ krytej krzemionka.

Do organicznej warstwy, mieszajac, dodaje sie roztwór 4/75 g, to jest 0y025 mola, monohydratu kwasu p-toluenosulfonowego w 100 ml acetonu, a nastepnie wprowadza sie eter az do zmetnienia roztworu. Roztwór pozostawia sie na noc w tem¬ peraturze 0°C i zbiera sie z niego 7,0 g ibialego, krystalicznego osadu p-toluenosulfonianu estru ftalidylowegó kwasu 6-aminopenicylanowego. Po zatezenhi przesaczu otrzymuje sie 2,5 g drugiego rzutu produktu. W sumie uzyskuje sie 0,5 g, to jest z wydajnoscia 7i3,4%, 'produktu. Widmo NMR //CDa/gSO/: 6=7,84 /s, 4H, protony aromatyczne ftalidu/, 8=7,56 /s, 1H, —CO.O. CH/, 8=7,30 /s, 4H, protony aromatyczne sulfonianu/, 8=5,50 /d, 1H, P-lalktam, J-^4 Hz/, 8=5,14 /d, 1H, 0-laik!ta(m, J—4 Hz/, 8=4,08 M, 1H, proton C3/, 8=2,27 /s, 3H, CH,—/,¦ 8=1^53 /d, 6H, grupy gem-dwu»metylowa/.

Wartosci oznaczone C-h52,50, H—4,62, N-^4,08, S— —^Il2y34. Wartosci obliczone dHa C^Hg^N^aPs: C— —53,08, N-^61, N—&&9 i S—12,31.

Przyklad II. Otrzymywanie estru ftalidylo- wego ampicyliny-przez sprzezenie estru ftalidylo- wego kwasu 6-aminopenicylanowego z mieszanym bezwodnikiem kwasu a-aminofenylooctowego, za¬ bezpieczonego enamiria/schemat 1/. ,4 g p-toluenosulfonianu estru ftalidylowegó kwasu 6-aminopenicylanowego rozprowadza sie w 60 ml octanu etylu i w ciagu 20 minut miesza sie energicznie z 135 ml In roztworu kwasnego wegla¬ nu sodowego w temperaturze otoczenia. Organicz¬ na warstwe oddziela sie, przemywa 100 ml wody zawierajacej 2% /5 ml/ kwasnego weglanu sodo¬ wego, suszy sie nad bezwodnym siarczanem mag¬ nezu, przesacza sie i utrzymuje w temperaturze —15°C.

Do tej mieszaniny dodaje sie 2 ml chloromrów- czanu etylu i 2 ikrople pirydyny w temperaturze —15°C, miesza sie ja w ciagu 10 minut w tempe¬ raturze —15 do ^20°C i otrzymuje sie roztwór ,4 g mieszanego ibezwodnika soli sodowej kwasu D/-/^N-/l-metoksy,kai^bonyloprópenylo-2/-a-amino- fenylooctowego w 30 ml octanu etylu. Do tego roztworu dodaje sie roztwór estru ftalidylowegó kwasu 6-aminopenicylanowego w octanie etylu, mieszanine miesza sie w ciagu 15 minut w tem¬ peraturze —15°C oraz w ciagu kolejnych 45 minut, juz bez chlodzenia.

Dodaje sie 75 ml wody, 10 ml 2n kwasu solnego i mieszanine reakcyjna miesza sie energicznie w ciagu 25 minut, powoli, mieszajac, wprowadza sie 250 ml eteru naftowego o temperaturze wrzenia 60 do 80°C. Wodna warstwe oddziela sie, nasyca chlorkiem sodowym i wydzielony olej ekstrahuje" sie dwoma porcjami po 100 ml octanu etylu oraz suszy sie nad bezwodnym siarczanem magnezu.

Roztwór przesacza sie, zateza pod próznia do 1/4 objetosci, dodaje sie powoli ca 250 ml suchego eteru i zbiera sie 4,8 g, to jest z wydajnoscia 40%, bialego bezpostaciowego osadu chlorowodorku estru ftali¬ dylowegó ampicyliny, który starannie przemywa sie eterem. Piróba z hydroksyloamina wskazuje 76,1%. Oznaczenie jodonietryczne — 77,5%, zawar¬ tosc chloru — 7,07% /wartosc teoretyczna — 6,85%/.

Przyklad III. Okreslono szybkosc hydrolizy estru ftalidylowegó kwasu 6-/D/-/a-aminofenylo- acetamidopenicylanowego /HC1/ przez inkubacje estru w ilosci równowaznej 5 \ng /ml kwasu 6-D/- -/a-aminofenyloacetamido/penicylanowego w bufo¬ rze fosforanu potasowego o pH—7,0 /M/20/, w 90% krwi ludzkiej i 90% krwi ma^p saimiri. Hy¬ drolize estru badano równiez w jednorodnej mie¬ szaninie jelita cienkiego malpy saimiri przy steze¬ niu odpowiadajacym 100 g/ml kwasu 6-/D/-a-ami- nofenyloacetamido/penicylanowego. Przed próba, mieszaniny reakcyjne rozcienczono do dawki rów¬ nowaznej 5,0 jig/ml macierzystego kwasu penicyla- nowego. Jednorodna mieszanine tkanki przygoto¬ wuje sie przez homogenizacje przemytego jelita cienkiego malpy saimiri w czterokrotnej wagowo ilosci buforu fosforanu potasowego /M/20/. W celu uzyskania mieszaniny reakcyjnej do próby, prepa¬ rat rozciencza sie jeszcze dziesieciokrotnie. Wszyst¬ kie mieszaniny poddawano inkubacji w tempera¬ turze 37°C. Po inkubacji ester wydzielano z mie¬ szaniny elektroforetycznie. Próbki mieszaniny re- 40 akcyjnej o objetosci 5 fil oraz wzorca kwasu 6-/D/- -/a-aminofenyloacetamido/penicylanowego naklada¬ no na plytki z zelu skrobia — agar o pH—5,5 utrzymywanym buforem.

Pomiedzy plytkami w ciagu 20 minut utrzymy- 45 wano róznice potencjalów 15 V/cm. Przy tej war¬ tosci pH macierzysty kwas penicylanowy pozostaje blisko punktu wyjsciowego, a kazdy ester prze¬ mieszcza sie w kierunku katody. Ilosc macierzy¬ stego kwasu penicylanowego wystepujacego w mie¬ szaninie reakcyjnej oznaczano przez rozwarstwienie plytek zelowych przy uzyciu odzywczego agaru szczepionego Sarcina lutea NCTC 8340 i inkutoowa- nego w ciagu 16 godzin w temperaturze 30°C.

Mierzono strefy zahamowania powstale w wyniku zastosowania badanej ampicyliny i wzorca oraz obliczano ilosc macierzystego kwasu penicylanowe- 55 go powstajacego w reakcjach.

Wyniki przedstawiono w tabeli: 5087735 9- Srodowisko; w którym prowadzono hydrolize Kwas /pH=2,0/ Bufor wodny /pH-7,0/ Krew ludzka /pH-7,0/ Krew malp salmiri /pH-7,0/ Jelito cienkie malpy salmiri Stopien hydrolizy /w procentach/ do (kwasu 6-/D^/a-amtootfenyk>-acetamido/- /penicylanowego w temperaturze 37°C 3 minuty 0 50 78 80 8 minut 0 62 84 84 i 15 minut 0 80 00 92 minut 0 84 100 100

Claims (3)

Zastrzezenia patentowe

1. Sposób wytwarzania esttru ftalidylowego kwa- 20 su 6-/D/-/a-aminofenyioaeetamido/penicylanowego o wzorze 1 i jego soli addycyjnych z kwasem, znamienny tym, ze ester ftalidylowy kwasu 6-ami- nopenicylanowego lub jego pochodna sililowa pod¬ daje sie reakcji z izomerem /D/ N-acylowej po- 25 chodnej zwiazku o ogólnym wzorze 2, w którym X oznacza grupe aminowa, zabezpieczona grupe aminowa lub grupe, która mozna przeprowadzic w giupe aminowa, przy czym jesli wystepuje grupa sililowa usuwa sie ja na drodze hydrolizy lub al- ao koholizy, oraz, jesli X oznacza zabezpieczona gru¬ pe aminowa przeprowadza sie te grupe w grupe aminowa w warunkach kwasnych lub obojetnych.

2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze stosuje sie zwiazek o wzorze 2, w którym X ozna¬ cza grupe o ogólnym wzorze 3, w którym R1 ozna¬ cza nizsza grupe alkilowa, R* oznacza atom wodoru albo lacznie z grupa R1 zamyka pierscien karbo- cykliczny a R1 oznacza nizsza grupe alkilowa, ary- lowa lub nizsza grupe alkoksylowa.

3. Sposób wedlug zastrz. 1, mwmjenny tym, ze jako N-acylowa pochodna zwiazku o wzorze 2 sto¬ suje sie halogenek kwasowy lub mieszany bezwodnik.87 735 (D) >—CH-CO-NH-CH-CH NH, c CO-N *CH, ¦CH ¦CO- WZÓR 1 -O CK o' r \ CH —COOH R1 I R—C*CnN- 2 I I II V WZÓR 2 WZÓR 3 WZÓR 4 • \_',s_ CH — C02Nq OCH, (D) f )> CH—CO.O.CO.OC2H5 CH3-C/NkH J II CH O OCH3 (HZOR^pH 25 CHCONH CH3-C^ I OCH o CO. Schemat \ Bltik 2268/76 ar. 110 egz. A4 Cena 10 zl