PL215159B1 - Odzywcza kompozycja farmaceutyczna uzyteczna w leczeniu raka oraz jej zastosowanie - Google Patents

Odzywcza kompozycja farmaceutyczna uzyteczna w leczeniu raka oraz jej zastosowanie

Info

Publication number
PL215159B1
PL215159B1 PL371282A PL37128203A PL215159B1 PL 215159 B1 PL215159 B1 PL 215159B1 PL 371282 A PL371282 A PL 371282A PL 37128203 A PL37128203 A PL 37128203A PL 215159 B1 PL215159 B1 PL 215159B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
lysine
proline
pharmaceutical composition
ascorbate
cancer
Prior art date
Application number
PL371282A
Other languages
English (en)
Other versions
PL371282A1 (pl
Inventor
Matthias Rath
Shrirang Netke
Aleksandra Niedzwiecki
Original Assignee
Matthias Rath
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23366808&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL215159(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Matthias Rath filed Critical Matthias Rath
Publication of PL371282A1 publication Critical patent/PL371282A1/pl
Publication of PL215159B1 publication Critical patent/PL215159B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/16—Inorganic salts, minerals or trace elements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/175—Amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/401—Proline; Derivatives thereof, e.g. captopril
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Przedmiotem wynalazku jest odżywczy preparat farmaceutyczny obejmujący kwas askorbinowy, L-lizynę, L-prolinę i co najmniej jeden związek polifenolowy wybrany z grupy obejmującej galusan epigalokatechiny, galusan epikatechiny, epigalokatechinę, epikatechinę, katechinę, oraz zastosowanie w leczeniu raka i innych nowotworów. Ujawniono farmaceutyczny preparat odżywczy EPICAN FORTE<sup>TM</sup> oraz sposób jego stosowania w zapobieganiu i leczeniu raka.

Description

Opis wynalazku
Dziedzina wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest odżywcza kompozycja farmaceutyczna użyteczna w leczeniu raka oraz jej zastosowanie. Bardziej konkretnie, odżywcza kompozycja farmaceutyczna zawiera skuteczną ilość polifenoli do leczenia raka. Kompozycja ma zastosowanie do wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia raka i/lub chorób zapalnych.
Tło wynalazku
Rak jest jedną z wiodących przyczyn śmierci w uprzemysłowionym świecie. Nie istnieje żadne swoiste i przyczynowe leczenie raka a umieralność z powodu raka znajduje się wśród najwyższych ze wszystkich chorób. Najpowszechniej stosowane leczenia - chemioterapia i radioterapia - nie odróżniają tkanki zdrowej od raka i towarzyszą im poważne skutki uboczne. Tak więc istnieje potrzeba selektywnego leczenia raka.
Jeden z kluczowych mechanizmów, który stosują komórki rakowe w celu rozprzestrzeniania się i dokonywania przerzutów w ciele, obejmuje enzymatyczny rozkład otaczających tkanek łącznych. Podejścia terapeutyczne do opanowywania tego procesu za pomocą specyficznych leków nie były skuteczne i obecnie nie ma żadnych dostępnych środków do opanowywania przerzutów raka. Obecne protokoły leczenia z chemioterapią i radioterapią skupiają się na rozpadzie komórki rakowej w ciele i nie odnoszą się do przerzutów. Ponadto, leczenia te są toksyczne, niespecyficzne i towarzyszą im poważne skutki uboczne. Chemioterapia i radioterapia niosą ryzyko rozwoju nowych raków, a przez niszczenie tkanki łącznej w ciele mogą ułatwiać inwazję raka.
W celu wzrostu i rozprzestrzeniania się w innych częściach ciała, komórki rakowe uszkadzają macierz pozakomórkową przez różne metaloproteinazy macierzowe (MMP) i plazminę, których działania zostały skorelowane z agresywnością wzrostu nowotworu. Rath i Pauling (1992) postulowali, że środki odżywcze takie jak aminokwas, lizyna i kwas askorbinowy mogą działać jak naturalne inhibitory proteolizy macierzy pozakomórkowej i jako takie mają one potencjał, aby modulować wzrost i rozprzestrzenianie się nowotworu. Te środki odżywcze mogą wykorzystywać swój potencjał przeciwnowotworowy poprzez wiele mechanizmów, wśród nich przez hamowanie MMP i przez wzmacnianie tkanki łącznej otaczającej komórki rakowe (efekt „otorbienia nowotworu).
Opis patentowy USA nr 5,962,517 ujawnia kompozycję farmaceutyczną do innego wskazania medycznego (leczenie trądziku). Ujawniona kompozycja obejmuje składnik zmniejszający trądzik, co najmniej jeden spośród korzenia łopianu, korzenia szczawiu żółtego lub kompozycję opartą na katechinie; oraz składnik poprawiający stan komórek skóry obejmujący metal przejściowy. Nie wykazano, że ujawniona kompozycja ma jakąkolwiek korzystną wartość w leczeniu i/lub zapobieganiu rakowi.
PCT WO 00/76492 ujawnia preparat odżywczy do łagodzenia choroby, który zawiera związek katechinowy. Jednakże wykazano, że biodostępność związków katechinowych jest bardzo niska (Chen L., Lee M.J., Yang C.S. Drug Metab. Dispos. 25: 1045-1050 (1997); Yang C.S., Chen L., Lee M.J., Balentine D.A., Kuo M.C., Schantz S. Cancer Epidemol. Biomark. Prev. 7: 351-35 (1998); Bell J.R., Donovan J.L., Wong R.,Waterhouse H., German J.B., Walzem R.L., Kasim K. Am. J. Clin. Nutr. 71: 103-108 (2000); Sherry Chow H.H., Cai Y., Alberts D.S., Hakim I., Dorr R., Shahi F., Crowell J.A., Yang S.C., Hara H. Cancer Epidemol. Biomark. Prev. 10: 53-58 (2001)), a PCT WO 00/76492 nie ujawnia środków zwiększających biodostępność, jak jest to wymagane w leczeniu i/lub zapobieganiu rakowi.
Opis patentowy EP 1 195 159 ujawnia kompozycję do zapobiegania i leczenia raka obejmującą kwas askorbinowy, L-lizynę, L-prolinę i bioflawonoidy z cytrusów. W odróżnieniu od kompozycji zastrzeganej w obecnym zgłoszeniu wynalazku, kompozycja opisana w EP 1 195 159 nie zawiera wcale N-acetylocysteiny.
Demeule i in. ujawniają, że katechiny z zielonej herbaty mogą mieć wpływ hamujący na metaloproteinazę macierzową. Nie istnieje żadna sugestia lub pouczenie odnośnie tego, jak stosować katechiny w leczeniu i/lub zapobieganiu rakowi. Wobec faktu, że biodostępność polifenoli u ludzi jest bardzo niska, niskie stężenie katechiny w tkance znacznie zmniejsza wartość terapeutyczną polifenoli, w tym galusanu epigalokatechiny (EGCG). Istnieje stała potrzeba znalezienia lepszej odżywczej kompozycji farmaceutycznej zawierającej polifenole, która jest skuteczna w leczeniu chorób nowotworowych i innych chorób w tym chorób zapalnych.
Istnieje potrzeba bezpiecznych i skutecznych naturalnych podejść, które można stosować do opanowywania procesu rozprzestrzeniania się raka w ciele. Istnieje również potrzeba środka zapobiePL 215 159 B1 gawczego przeciw rozwijaniu się u człowieka raków lub łagodnych nowotworów i środek taki mógłby być stosowany u pacjentów bez ryzyka skutków ubocznych związanych z leczeniem. Odżywcze kompozycje farmaceutyczne stały się popularne, ponieważ w ostatnim czasie wzrasta zachorowalność na raka. Zapotrzebowanie na taką kompozycję będzie kontynuowane i prawdopodobnie wzrośnie.
Streszczenie wynalazku
W jednym z aspektów wynalazku jego przedmiotem jest odżywcza kompozycja farmaceutyczna użyteczna w leczeniu raka, zawierająca:
- związek askorbinowy;
- związek L-lizynowy;
- związek L-prolinowy; i
- co najmniej jeden związek polifenolowy wybrany z grupy obejmującej galusan epigalokatechiny, galusan epikatechiny, epigalokatechinę, epikatechinę i katechinę, która ponadto zawiera N-acetylo-cysteinę, gdzie związek askorbinowy, związek L-lizynowy, związek L-prolinowy i N-acetylocysteina wzmacniają działanie związku polifenolowego w blokowaniu rozrostu i przerzutu raka.
Korzystnie, związek askorbinowy jest wybrany z grupy obejmującej kwas askorbinowy, farmaceutycznie dopuszczalne sole askorbinianowe, estry askorbinianowe i/lub ich mieszaniny. Korzystnie, farmaceutycznie dopuszczalną solą askorbinianową jest askorbinian wapnia lub askorbinian magnezu. Bardziej korzystnie, estrem askorbinianowym jest palmitynian askorbylu. Korzystnie, związek lizynowy jest wybrany z grupy obejmującej chlorowodorek lizyny i farmaceutycznie dopuszczalne sole lizyny. Korzystnie, związek prolinowy jest wybrany z grupy obejmującej chlorowodorek proliny i farmaceutycznie dopuszczalne sole proliny.
W korzystnym wariancie wykonania, odżywcza kompozycja farmaceutyczna w dalszej kolejności zawiera pierwiastek śladowy wybrany z grupy obejmującej selen, miedź, mangan, wapń i magnez.
W innym wariancie wykonania, obecna odżywcza kompozycja farmaceutyczna w dalszej kolejności zawiera aminokwas, zwłaszcza argininę.
W korzystnym wariancie wykonania wynalazku odżywcza kompozycja farmaceutyczna zawiera: związek askorbinowy, wapń, magnez, polifenole, N-acetylo-cysteinę, L-lizynę, L-prolinę, L-argininę, selen, miedź i mangan.
W jednym z wariantów wykonania kwas askorbinowy stanowi związek wybrany z grupy obejmującej kwas askorbinowy, askorbinian wapnia, askorbinian magnezu i palmitynian askorbylu.
W innym wariancie wykonania, obecny wynalazek dostarcza odżywczej kompozycji farmaceutycznej obejmującej 250 mg kwasu askorbinowego, 250 mg askorbinianu wapnia, 250 mg askorbinianu magnezu, 250 mg palmitynianu askorbylu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 1000 mg lizyny, 750 mg proliny, 500 mg argininy, 30 μg selenu, 2 mg miedzi i 1 mg manganu.
W innym wariancie wykonania, obecny wynalazek dostarcza odżywczej kompozycji farmaceutycznej obejmującej 25 mg kwasu askorbinowego, 25 mg askorbinianu wapnia, 25 mg askorbinianu magnezu, 25 mg palmitynianu askorbylu, 200 mg polifenoli, 10 mg N-acetylo-cysteiny, 50 mg lizyny, 25 mg proliny, 50 mg argininy, 1 μg selenu, 20 μg miedzi i 50 μg manganu.
W innym wariancie wykonania, obecny wynalazek dostarcza odżywczej kompozycji farmaceutycznej obejmującej 5000 mg kwasu askorbinowego, 5000 mg askorbinianu wapnia, 5000 mg askorbinianu magnezu, 5000 mg palmitynianu askorbylu, 5000 mg polifenoli, 1500 mg N-acetylo-cysteiny, 5000 mg lizyny, 3000 mg proliny, 3000 mg argininy, 200 μg selenu, 9 mg miedzi i 10 mg manganu.
W innym wariancie wykonania, obecny wynalazek dostarcza odżywczej kompozycji farmaceutycznej obejmującej 250 mg kwasu askorbinowego, 250 mg askorbinianu wapnia, 250 mg askorbinianu magnezu, 250 mg palmitynianu askorbylu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 1000 mg lizyny, 750 mg proliny, 500 mg argininy, 100 μg selenu, 2 mg miedzi, 1 mg manganu, 500 mg wapnia i 400 mg magnezu.
W innym wariancie wykonania, obecny wynalazek dostarcza odżywczej kompozycji farmaceutycznej obejmującej 250 mg kwasu askorbinowego, 250 mg askorbinianu wapnia, 250 mg askorbinianu magnezu, 250 mg palmitynianu askorbylu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 1000 mg lizyny, 750 mg proliny, 500 mg argininy, 100 μg selenu, 2 mg miedzi, 1 mg manganu, 500 mg wapnia, 400 mg magnezu i 200 mg bioflawonoidów z owoców cytrusowych.
W jeszcze innym wariancie wykonania, odżywcza kompozycja farmaceutyczna użyteczna w leczeniu raka, obejmuje: L-lizynę, L-prolinę, L-argininę, kwas askorbinowy, wapń, magnez, polifenole, N-acetylo-cysteinę, selen, miedź i mangan.
PL 215 159 B1
W jeszcze innym wariancie wykonania, obecny wynalazek dostarcza odżywczej kompozycji farmaceutycznej obejmującej 1000 mg L-lizyny, 750 mg L-proliny, 500 mg L-argininy, 710 mg kwasu askorbinowego, 22 mg wapnia, 50 mg magnezu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 30 μg selenu, 2 mg miedzi i 1 mg manganu.
W innym aspekcie przedmiotem wynalazku jest zastosowanie odżywczej kompozycji według wynalazku do wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia raka. Korzystnie, rak jest wybrany z grupy obejmującej czerniaka, raka sutka, raka okrężnicy, raka płuc i raka mózgu.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie odżywczej kompozycji według wynalazku do wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia choroby zapalnej. Korzystnie chorobą zapalną jest zapalenie kości i stawów.
Krótki opis rysunków
Fig. 1 przedstawia hamujący wpływ polifenoli, askorbinianu, proliny i lizyny na zachowanie migracyjne komórek ludzkiego raka sutka.
Fig. 2 przedstawia hamujący wpływ polifenoli, askorbinianu, proliny i lizyny na zachowanie migracyjne komórek ludzkiego raka okrężnicy.
Fig. 3 przedstawia hamujący wpływ polifenoli, askorbinianu, proliny i lizyny na zachowanie migracyjne komórek czerniaka ludzkiego.
Fig. 4 przedstawia hamujący wpływ polifenolu, askorbinianu, proliny i lizyny na apoptozę komórek czerniaka ludzkiego.
Fig. 5 przedstawia hamujący wpływ kwasu askorbinowego, proliny, lizyny i różnych ilości EGCG na rozrost komórek czerniaka ludzkiego (A 2058).
Fig. 6 przedstawia hamujący wpływ EGCG na rozrost komórek ludzkiego raka sutka (MDA-MB 231).
Fig. 7 przedstawia wpływ uzupełnienia pożywki podstawowej kwasem askorbinowym, proliną, lizyną, różnymi ilościami EGCG na rozrost komórek ludzkiego raka sutka (MDA-MB 231).
Fig. 8 przedstawia wpływ uzupełnienia pożywki podstawowej kwasem askorbinowym, proliną, lizyną i różnymi ilościami EGCG na rozrost komórek ludzkiego raka okrężnicy (HCT 116).
Fig. 9 przedstawia wpływ uzupełnienia pożywki podstawowej kwasem askorbinowym, proliną, lizyną i różnymi ilościami EGCG na ekspresję metaloproteinaz macierzowych (MMP) w komórkach czerniaka ludzkiego.
Fig. 10 przedstawia wpływ uzupełnienia pożywki podstawowej kwasem askorbinowym, proliną, lizyną i różnymi ilościami EGCG na inwazję komórek ludzkiego raka sutka (MDA-MB 231) przez Matrigel.
Fig. 11 przedstawia wpływ uzupełnienia pożywki podstawowej kwasem askorbinowym, proliną, lizyną i różnymi ilościami EGCG na inwazję komórek ludzkiego raka okrężnicy (HTC 116) przez Matrigel.
Fig. 12 przedstawia wpływ uzupełnienia pożywki podstawowej kwasem askorbinowym, proliną, lizyną i różnymi ilościami EGCG na zmniejszenie liczby komórek dokonujących inwazji w przypadku komórek czerniaka ludzkiego (A 2058).
Szczegółowy opis wynalazku
Używane tutaj określenie „lizyna stosuje się wymiennie z „L-lizyną, „proliną stosuje się wymiennie z „L-proliną, „arginina stosuje się wymiennie z „L-argininą; „witamina C stosuje się wymiennie z „kwasem askorbinowym i może obejmować sole askorbinianowe lub estry askorbinianowe. „MMP odnosi się do metaloproteinaz macierzowych; np. MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-8, MMP-9, MMP-10, MMP-11 itd. „EGCG odnosi się do (-)-3-galusanu epigalokatechiny, który jest głównym składnikiem polifenolowym obecnym w zielonej herbacie. „NHDF odnosi się do normalnie występujących u człowieka fibroblastów skórnych, w tym chondrocytów ludzkich i ludzkich komórek zrębowych.
Korzystnie, związek askorbinianowy jest wybrany z grupy obejmującej kwas askorbinianowy, sole askorbinianowe i estry askorbinianowe. Korzystnie, lizyna oznacza chlorowodorek lizyny lub farmaceutycznie dopuszczalne sole lizyny. Korzystnie, prolina oznacza chlorowodorek proliny lub farmaceutycznie dopuszczalne sole proliny.
Związki polifenolowe są wyciągami z zielonej herbaty. Są one również znane jako katechiny. Polifenole są obecne w zielonej herbacie i sugerowano, że chronią przed wieloma chorobami, w tym rakiem (Mukhtar H., Ahmed N. Am. J. Clin. Nutr. 71:1698S-1702S (2000)). Doustne podawanie zielonej herbaty wzmacniało hamujące nowotwór działanie doksorubicyny u myszy. Potencjalne przeciwr a kowe działanie katechin może odnosić się do ich wpływu na wiele czynników zaangażowanych w rozrost komórek rakowych i ich przerzuty. Wiadomo, że katechiny powodują zatrzymanie cyklu koPL 215 159 B1 mórkowego w komórkach raka ludzkiego (Ahmad N., Feyes D.K., Nieminen A.L., Agarwal R., Mukhtar H.J. Natl. Cancer Inst. 89: 1881-1886 (1997)). Polifenolowa frakcja z zielonej herbaty chroni również przed zapaleniem i cytokinami wywoływanymi przez nowotwory.
Związki polifenolowe są obecne jako 30% suchej masy w zielonej herbacie. Obejmują one flawanole, flawanodiole, flawonoidy i kwasy fenolowe. Flawanole są najliczniejsze wśród polifenoli w zielonej herbacie i są powszechnie znane jako katechiny. W zielonej herbacie występują cztery główne katechiny: 1) (-)-epikatechina, 2) (-)-3-galusan epikatechiny, 3) (-)-epigalokatechina i 4) (-)-3-galusan epigalokatechiny (EGCG). Wśród katechin, EGCG jest głównym składnikiem polifenolowym obecnym w zielonej herbacie. EGCG jest silnym związkiem przeciwutleniającym i można mu przypisywać właściwość przeciwnowotworowego działania zielonej herbaty. Donoszono, że działanie związków katechinowych zapobiegające przerzutom zachodzi przez niedopuszczanie do procesu angiogenezy (Cao Y., Cao R. Nature 398:381 (1999)). Wykazano również, że EGCG zakłóca aktywność urokinazy (aktywator u-plazminogenu) (Jankun J., Selman S.H., Swiercz R., Skrzypczak J.E. Nature: 387-567 (1997)), jednego z enzymów najczęściej wyrażanych w rakach ludzkich. EGCG jest korzystnym związkiem polifenolowym.
Korzystnie, związek polifenolowy jest wybrany z grupy obejmującej galusan epigalokatechiny, galusan epikatechiny, epigalokatechinę, epikatechinę, katechinę i inne farmaceutycznie dopuszczalne sole polifenolowe i/lub ich mieszaniny.
Jednym z głównych celów terapeutycznych obecnego zgłoszenia patentowego jest zapobieganie trawieniu macierzy pozakomórkowej i jej odtwarzanie. Kwas askorbinowy lub jego sól (tj. askorbinian) jest niezbędny do syntezy kolagenu, elastyny i innych kluczowych molekuł macierzy pozakomórkowej.
Korzystnie, kombinację kwasu askorbinowego, proliny i lizyny stosuje się, aby wzmocnić przeciwnowotworowe działanie związków polifenolowych. Bardziej korzystnie, kombinacja wzmacnia związki polifenolowe obejmujące galusan epigalokatechiny, galusan epikatechiny, epigalokatechinę, epikatechinę, katechinę w taki sposób, że związek polifenolowy jest skuteczny w zmniejszaniu inwazji komórek rakowych lub całkowicie blokuje inwazję.
Bez ograniczania jakąkolwiek teorią, obecna odżywcza kompozycja farmaceutyczna zawiera mieszaninę składników obejmujących polifenole, i stwierdzono, że mieszanina ta działa skutecznie w blokowaniu procesów rozrostu i przerzutów. Twórcy wynalazku stwierdzili, że obecna odżywcza kompozycja znacznie zmniejsza inwazję komórek rakowych lub blokuje przerzuty komórek rakowych całkowicie. Tak więc, kompozycja ta skutecznie zapobiegała rozprzestrzenianiu się tych komórek rakowych. Zastosowanie terapeutyczne zastrzeganej kompozycji jest skutecznym, selektywnym i bezpiecznym leczeniem raka sutka, okrężnicy i innych narządów. Korzystnie, ujawniona odżywcza kompozycja farmaceutyczna może zawierać dwa spośród składników, które są związane kowalencyjnie.
Skuteczność kompozycji odżywczej wzmacnia się przez włączenie związków, o których wiadomo, że mają korzystne działanie ujemne na wzrost i inwazyjność raka i innych nowotworów, obejmujących L-argininę i/lub związki zawierające argininę. W szczególności, stosuje się N-acetylo-cysteinę. Korzystnie stosuje się sól selenu, sól miedzi i sól manganu, które są skuteczne w zapobieganiu i leczeniu raka i innych nowotworów. Kompozycja ta może również obejmować jeden lub więcej związków potrzebnych jako koenzym w cyklu Krebsa, łańcuchu oddechowym lub dla innych funkcji metabolicznych komórek w ilości skutecznej do zapobiegania i leczenia raka i innych nowotworów.
Obecna odżywcza kompozycja farmaceutyczna może być podawana pacjentowi w postaci kapsułek, tabletek, proszków, pigułek, wstrzyknięć, wlewów, inhalacji, czopków lub innych farmaceutycznie dopuszczalnych nośników i/lub środków dostarczania dla zapobiegania i leczenia raka i innych nowotworów. Korzystnie, odżywcza kompozycja farmaceutyczna jest podawana jako kapsułki, tabletki lub proszki. Bardziej korzystnie podaje się ją jako kapsułki.
Obecną odżywczą kompozycję farmaceutyczną można stosować do zapobiegania i leczenia raka i innych nowotworów u wybranego pacjenta, przy czym nowotwór lub rak jest umiejscowiony w sutku, jajnikach, szyjce macicy lub innych narządach żeńskiego układu rozrodczego, płucu, wątrobie, skórze, układzie pokarmowym, mózgu, kościach lub innych narządach ciała. Korzystnie, kompozycję stosuje się w przypadku raka płuc i raka mózgu.
Obecną odżywczą kompozycję farmaceutyczną można również stosować do zapobiegania i leczenia chorób zakaźnych, miażdżycy naczyń, nawrotu zwężenia, innych chorób sercowo-naczyniowych i chorób zapalnych. Korzystnie, chorobą zapalną jest zapalenie kości i stawów.
Aktywacja plazminy za pośrednictwem MMP:
PL 215 159 B1 rozważa się fakt, że lizyna wywiera wpływ na działanie MMP za pośrednictwem mechanizmu plazminy, chociaż nie wyklucza się innych mechanizmów. MMP są wydzielane jako proenzymy i w ich aktywacji pośredniczy częściowo plazmina, a jej uzupełnienie wymaga aktywnej postaci MMP-3. Mechanizm aktywacji różnych MMP opisany szczegółowy przez Nagase (1997) wskazuje, że MMP-3 wymaga również przekształcenia plazminogenu w jego aktywną postać, plazminę. Aktywne centrum wiązania plazminogenu posiada miejsca, do których specyficznie przyłącza się lizyna. Dlatego lizyna może zakłócać aktywowanie plazminogenu do plazminy przez aktywator plazminogenu (Rath i Pauling, 1992), przez wiązanie z aktywnymi miejscami plazminogenu. Kwas traneksamowy, syntetyczny analog lizyny stosowano do hamowania proteolizy indukującej plazminę przez ten mechanizm.
Ponieważ aktywowanie plazminy jest niezbędne do indukowania kilku MMP tkankowych, lizyna może zakłócać przekształcanie plazminogenu w plazminę i dzięki temu może ona hamować aktywowanie prawie wszystkich MMP. Dodatkowo, EGCG może wywierać hamujący wpływ na rozkład macierzy pozakomórkowej przez hamowanie MMP-2.
Inwazja raka i rola macierzy:
Możliwe jest również oddziaływanie na inwazję macierzy przez komórki rakowe przez podniesienie stabilności i wytrzymałości tkanki łącznej otaczającej komórki rakowe, i przyczynienie się do „otorbienia nowotworu. Wymaga to optymalizowania syntezy i struktury włókienek kolagenowych, dla której niezbędne jest hydroksylowanie reszt hydroksyproliny i hydroksylizyny we włóknach kolagenowych. Kwas askorbinowy może być niezbędny do hydroksylowania tych aminokwasów. Kwas askorbinowy i L-lizyna normalnie nie są wytwarzane przez organizm ludzki; dlatego niższy od optymalnego poziom tych substancji odżywczych możliwy jest w różnych stanach patologicznych jak też wskutek nieodpowiednich diet. Chociaż prolina może być syntezowana z argininy, w stanach patologicznych może mieć miejsce ujemne oddziaływanie na jej syntezę i/lub hydroksylowanie. Wykazano, że, jako taka, zawartość hydroksyproliny w tkance nowotworu przerzutowego jest dużo mniejsza niż w tkance nowotworu nieprzerzutowego (Chubainskaia i inni, 1989). Różne leki, które zmniejszały przerzuty, podnosiły również zawartość hydroksyproliny w tkankach (Chubinskaia i inni, 1989). Stwierdzono, że zawartość hydroksyproliny w moczu u pacjentów z rakiem jest wyższa niż u osób zdrowych lub osób nie mających raka (Okazaki i inni, 1992). Wszystkie te dane sugerują ujemny wpływ komórek rakowych na metabolizm proliny i możliwy uwarunkowany niedobór proliny u pacjentów z rakiem.
Pacjenci z rakiem mogą mieć niedostateczny poziom kwasu askorbinowego. Kwas askorbinowy może być cytotoksyczny dla linii komórek złośliwych i ma działanie przeciwprzerzutowe. Obecny wynalazek ujawnia, że połączenie kwasu askorbinowego, proliny, lizyny i co najmniej jednego związku polifenolowego ma przeciwrozrostowy i przeciwprzerzutowy wpływ na obrzeża komórek rakowych. Korzystnie, obecny odżywczy preparat farmaceutyczny jest skuteczny wobec komórek czerniaka, raka sutka i raka okrężnicy. Najbardziej korzystnie, obecny preparat farmaceutyczny jest skuteczny wobec komórek ludzkiego raka okrężnicy.
Związki polifenolowe (katechiny):
EGCG stanowi jedną z katechin w wyciągu z zielonej herbaty i może powodować wzrost działania hamującego wobec komórek raka ludzkiego. Dokładny leżący u podstaw mechanizm jest niejasny. Obecny wynalazek ujawnia zaskakującą synergię w przypadku odżywczego preparatu farmaceutycznego obejmującego kwas askorbinowy, prolinę i lizynę oraz co najmniej jeden związek polifenolowy, w skutecznym blokowaniu rozrostu i przerzutów komórek rakowych.
Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według obecnego wynalazku skutecznie blokuje inwazję raka sutka, okrężnicy, skóry (czerniaka) i innych postaci raka. Składniki obecne w preparacie odżywczym są naturalnie występującymi związkami; a kiedy stosuje się je w zastrzeganym zakresie, jak ujawniony w zgłoszeniu, nie wykazują żadnych toksycznych skutków ubocznych. Tak więc, kompozycja ta może być również stosowana profilaktycznie, tj. jako skuteczne zapobieganie rakowi i innym nowotworom w organizmie.
Ponieważ komórki wirusowe i inne inwazyjne mikroorganizmy stosują podobne proteazy jak komórki rakowe do rozprzestrzeniania infekcji w ciele, kompozycję zastrzeganą w niniejszym zgłoszeniu można stosować do skutecznego zapobiegania i leczenia chorób wirusowych i innych chorób zakaźnych.
Podobny mechanizm aktywacji metaloproteinaz macierzowych, który stosują komórki rakowe do inwazji macierzy, przyczynia się również do destabilizacji płytek miażdżycowych prowadzącej do zawału serca i udaru. Dlatego, kompozycję zastrzeganą w niniejszym zgłoszeniu można również stosoPL 215 159 B1 wać do skutecznego zapobiegania i leczenia miażdżycy tętnic, nawrotu zwężenia i innych powikłań sercowo-naczyniowych.
Aktywacja metaloproteinaz macierzowych, którą stosują komórki rakowe do inwazji na macierz jest kluczowym elementem w różnych stanach zapalnych. Dlatego, kompozycję zastrzeganą w niniejszym zgłoszeniu można również stosować do skutecznego zapobiegania i leczenia chorób, takich jak reumatoidalne zapalenie stawów, rozedma płuc, alergie, zapalenie kości i stawów i innych stanów, które obejmują aspekty zapalne.
Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według obecnego wynalazku może być dostarczana pacjentowi w postaci tabletek, pigułek, wstrzyknięć, wlewów, inhalacji, czopków lub innych farmaceutycznie dopuszczalnych nośników i/lub sposobów dostarczania.
P r z y k ł a d y
Działanie kwasu askorbinowego, lizyny, proliny i co najmniej jednego związku polifenolowego zbadano pod względem ich potencjału przeciwrozrostowego i przeciwinwazyjnego wobec różnych linii komórek raka ludzkiego. Bardziej szczegółowo, zbadano jeden ze składników wyciągu z zielonej herbaty (tj. galusan epigalokatechiny (EGCG)).
Materiały i metody
Komórki ludzkiego raka sutka MDA-MB-231, komórki ludzkiego raka okrężnicy HCT 116, szczep komórek czerniaka ludzkiego A2058 otrzymano z ATCC. Naturalne ludzkie fibroblasty skóry otrzymano z GIBCO. Gdzie nie wskazano, stosowano pożywki otrzymane z ATCC.
W badaniach rozrostu komórek każde badanie przeprowadzono w ośmiu równoległych próbach. W analizie inwazyjności każde badanie przeprowadzono w trzech lub czterech doświadczeniach równoległych.
Badania rozrostu komórek
W badaniach tych wyhodowano 5x104 komórek raka sutka na pożywce Liebovitza z 10% płodową surowicą cielęcą (FBS) na płytkach o 24 studzienkach. Stosowano pożywkę jako taką (podstawową) lub z określonymi substancjami dodatkowymi. Płytki inkubowano w inkubatorze z obiegiem powietrza (bez dodatkowego CO2) przez cztery dni. Komórki raka okrężnicy HCT116 wyhodowano na pożywce McCoy'a 5A i trzymano w inkubatorze z obiegiem powietrza z 5% CO2. Pod koniec okresu inkubacji pożywkę usunięto, a komórki w studzienkach przemyto PBS, a następnie inkubowano przez 3 godziny z barwnikiem MTT. Do każdej studzienki dodano dimetylosulfotlenek (DMSO, 1 ml). Płytki z DMSO pozostawiono w temperaturze pokojowej przez 15 minut delikatnie mieszając, a następnie zmierzono gęstość optyczną (OD) roztworu w każdej studzience przy 550 nm. Przyjęto, że OD550 roztworu DMSO w studzience jest wprost proporcjonalna do liczby komórek. OD550 leczenia, które nie zawierało żadnej substancji dodatkowej (podstawową) przyjęto za 100.
Badania inwazji przez Matrigel
Badania przeprowadzono stosując wkładki Matrigel (Becton Dickinson) w odpowiednich płytkach o 24 studzienkach. Fibroblasty posiano i wyhodowano w studzienkach płytki stosując DMEM.
Kiedy fibroblasty zrosły usunięto pożywkę i zastąpiono ją 750 μΐ pożywki wyznaczonej do leczenia. Komórki raka (5x104) zawieszone w 250 μΐ pożywki uzupełnionej substancjami odżywczymi wyszczególnionymi w projekcie doświadczenia posiano na wkładce w studzience. A zatem, zarówno pożywka na wkładce jak i w studzience zawierała te same substancje dodatkowe. Płytki z wkładkami inkubowano (w inkubatorze z obiegiem powietrza dla komórek MDA-MB-231 oraz w inkubatorze z 5% CO2 dla komórek raka okrężnicy i komórek czerniaka) przez 18 - 20 godzin. Po inkubacji usunięto pożywkę ze studzienek. Komórki na górnej powierzchni wkładek delikatnie usunięto bawełnianym wacikiem. Komórki, które przeniknęły przez błonę Matrigel i przemieściły się na dolną powierzchnię Matrigel zabarwiono barwnikiem HemaColor (EM Sciences) i policzono wizualnie pod mikroskopem. Wyniki poddano analizie ANOVA i zbadano wszystkie możliwe pary dla poziomu istotności przy p<0,05.
Pożywki w różnych badaniach uzupełniono kwasem askorbinowym, proliną, lizyną i EGCG w stężeniach jak wskazano.
Zymografia żelatynazowa
Zymografię żelatynazową wykonano w odlanym wcześniej 10% żelu poliakryloamidowym Novex (Invitrogen) w obecności 0,1% żelatyny. Wprowadzono pożywkę (20 μθ i wykonano SDSPAGE przy użyciu bufora buforowym tris-glicyny SDS. Po elektroforezie żele przemywano 5% Triton X-100 przez 30 minut i zabarwiono. Równolegle poddano elektroforezie wzorce białkowe i określono przybliżone masy cząsteczkowe.
PL 215 159 B1
P r z y k ł a d 1
Komórki raka sutka MDA-MB 231 (ATCC) posiano na wkładce Matrigel w ulepszonej komorze Matrigel Invasion Chamber (BD). Do studzienki dodano kondycjonowaną pożywkę z prawidłowych ludzkich fibroblastów skóry (Clonetics) uzupełnioną różnymi środkami (jak wskazano na Fig. 1). Komorę inkubowano przez 24 godziny i policzono komórki, które dokonały inwazji na błonę Matrigel i migrowały na dolną powierzchnię błony. Dane te przedstawiają hamujące działanie galusanu epigalokatechiny i kombinacji kwasu askorbinowego, proliny i lizyny na inwazję i migrację przez Matrigel komórek ludzkiego raka sutka MDA-MB 231.
P r z y k ł a d 2
Komórki ludzkiego raka okrężnicy posiano na wkładce Matrigel w ulepszonej komorze Matrigel Invasion Chamber (BD). Do studzienki dodano kondycjonowaną pożywkę z prawidłowych ludzkich fibroblastów skóry (Clonetics) uzupełnioną różnymi czynnikami (jak wskazano na Fig. 2). Komorę inkubowano przez 24 godziny i policzono komórki, które dokonały inwazji na błonę Matrigel i migrowały na dolną powierzchnię błony. Dane te pokazują hamujące działanie galusanu epigalokateciny i kombinacji kwasu askorbinowego, proliny i lizyny na inwazję i migrację przez Matrigel komórek ludzkiego raka okrężnicy HCT116.
P r z y k ł a d 3
Komórki czerniaka ludzkiego A2058 (ATCC) posiano na wkładce Matrigel w ulepszonej komorze Matrigel Invasion Chamber (BD). Do studzienki dodano kondycjonowaną pożywkę z prawidłowych ludzkich fibroblastów skóry (Clonetics) uzupełnioną różnymi środkami. Komorę inkubowano przez 24 godziny i policzono komórki, które dokonały inwazji na błonę Matrigel i migrowały na dolną powierzchnię błony. Dane te pokazują hamujące działanie galusanu epigalokateciny i kombinacji kwasu askorbinowego, proliny i lizyny na inwazję i migrację przez Matrigel komórek czerniaka ludzkiego A2058.
P r z y k ł a d 4
W doświadczeniu tym komórki czerniaka ludzkiego A2058 (ATCC) posiano na wkładce Matrigel w ulepszonej komorze Matrigel Invasion Chamber (BD) w obecności:
A: kondycjonowanej pożywki z prawidłowych ludzkich fibroblastów skóry (Clonetics) oraz
B: tej samej pożywki uzupełnionej różnymi środkami odżywczymi jak wskazane w legendzie do Fig. 4. Po 24 godzinach inkubacji, komórki które dokonały inwazji na błonę Matrigel i migrowały na dolną powierzchnię błony zbadano pod mikroskopem i policzono.
Dane te pokazują apoptotyczny wpływ galusanu epigalokatechiny i kombinacji kwas askorbinowy + prolina + lizyna na A2058. A: komórki czerniaka ludzkiego w pożywce z tkanki. B: komórki czerniaka ludzkiego w pożywce z tkanki zawierającej kwas askorbinowy (100 μΜ), prolinę (140 μΜ), lizynę (400 μΜ) i EGCG (20 μg/ml). Spostrzeżenie: komórki zostały zniszczone.
P r z y k ł a d 5
Badanie rozrostu komórek rakowych
Komórki czerniaka A2058
Figura 5 przedstawia wpływ 10, 20 i 50 μg/ml EGCG bez dodatku i z dodatkiem lizyny, proliny i kwasu askorbinowego na rozrost komórek czerniaka. Ani lizyna, prolina i kwas askorbinowy ani EGCG w ilości 10 i 20 μg/ml nie miały żadnego wpływu na rozrost komórek. Jednak, EGCG w ilości 50 μg/ml znacząco zmniejszył liczbę komórek do 30%. Podobny skutek zaobserwowano z lizyną, proliną i kwasem askorbinowym.
Komórki raka sutka MDA-MB-231
W doświadczeniach tych, podstawową pożywkę uzupełniono 0, 10, 20, 50, 100 lub 200 μg/ml EGCG (Figura 6). Wyniki pokazują, że uzupełnienie podstawowej pożywki 50, 100 i 200 μg/ml EGCG znacząco zmniejszyło liczbę komórek do 66,1% ± 5,3%, 33,6% ± 2% i 29,6% ± 0,8% odpowiednio w porównaniu z próbkami porównawczymi bez substancji dodatkowych. Stężenia EGCG w pożywkach komórkowych do 20 μg/ml nie miały żadnego znaczącego działania hamującego na rozrost komórek.
Zbadano również wpływ kwasu askorbinowego, lizyny, proliny i różnych stężeń EGCG na rozrost komórek raka. Figura 7 pokazuje nieistotne zmniejszenie liczby komórek do 86,1% ± 1,93% z kwasem askorbinowym, lizyną i proliną. Dalszy dodatek 20, 50 i 100 μg EGCG do tej kombinacji znacząco zmniejszył liczbę komórek do 74% ± 5,8%, 64,8% ± 1,6% i 22% ± 5% odpowiednio w porównaniu z grupą porównawczą.
Komórki raka okrężnicy HCT116
Podczas gdy nie wykazano działania hamującego kwasu askorbinowego, proliny i lizyny na rozrost komórek raka okrężnicy, kombinacja kwasu askorbinowego, proliny i lizyny z 20 μg/ml EGCG
PL 215 159 B1 znacząco zmniejszyła liczbę komórek do 69% ± 0,5% (Figura 8). Wysoki poziom EGCG w tej kombinacji (50 μg/ml) drastycznie zmniejszył liczbę komórek do 4,6% ± 0,3%.
Przeciwrozrostowe działanie kombinacji odżywczych stosowanych w tych badaniach zmieniało się wraz z rodzajem komórek rakowych. W przypadku komórek raka sutka kombinacja kwasu askorbinowego, proliny i lizyny z EGCG miała lepsze działanie przeciwrozrostowe, niż gdy te składniki odżywcze stosowano oddzielnie. W przypadku komórek czerniaka i raka okrężnicy wystawionych na działanie kombinacji kwasu askorbinowego, proliny i lizyny nie wywierała ona wpływu na ich rozrost. Jednak, połączenie tych składników odżywczych z 20 μg/ml EGCG spowodowało znaczące zmniejszenie liczby komórek raka okrężnicy, ale nie zmniejszyło komórek czerniaka. Wydaje się, że komórki raka okrężnicy są bardziej wrażliwe niż komórki raka sutka i komórki czerniaka, przynajmniej na kombinację kwasu askorbinowego, proliny, lizyny i EGCG. Rozrost komórek raka okrężnicy został prawie zupełnie zredukowany (4,6%), gdy podano kwas askorbinowy, prolinę i lizynę z 50 μg/ml EGCG.
P r z y k ł a d 6
Badania zymografu żelatynazowego
Wpływ EGCG na komórki czerniaka z kombinacją podstawową i z uzupełnieniem w postaci kwasu askorbinowego, proliny i lizyny na ekspresję MMP przedstawiono na Figurze 9 za pomocą zymografi żelatynazowej. Komórki czerniaka przedstawiały dwa pasma odpowiadające MMP-2 i MMP-9. Kombinacja kwasu askorbinowego, lizyny i proliny nie miała żadnego wpływu na ekspresję pasm MMP. Jednak EGCG hamował ekspresję zarówno MMP-2 jak i MMP-9 w sposób zależny od dawki. Intensywność pasm dla kombinacji podstawowej i kombinacji kwasu askorbinowego, lizyny i proliny była taka sama.
P r z y k ł a d 7
Badania inwazji i migracji na macierz pozakomórkową
Zbadano hamujące działanie kombinacji kwasu askorbinowego, proliny i lizyny stosowanych oddzielnie i razem z różnymi stężeniami EGCG. Zbadano wpływ tych kombinacji na macierz pozakomórkową stosując przygotowane macierze Matrigel, zwykle używane do oceny potencjału inwazyjnego różnych linii komórek rakowych.
Komórki raka sutka MDA-MB-23I
Figura 10 przedstawia wyniki inwazji na Matrigel komórek raka sutka inkubowanych w obecności kwasu askorbinowego, proliny i lizyny. Inwazja komórek rakowych inkubowanych w kombinacji kwasu askorbinowego, proliny i lizyny została zmniejszona do 48,1% ± 22,1% w porównaniu z komórkami inkubowanymi w pożywkach bez substancji dodatkowych. W pożywkach uzupełnionych jedynie 20 μg/ml EGCG liczba komórek dokonujących inwazji zmniejszyła się do 69,5% ± 27,4%. Całkowite zahamowanie inwazji na macierz przez komórki raka sutka osiągnięto w obecności wyższych stężeń EGCG (50 μg/ml i 100 μg/ml).
W innej serii badań, uzupełnienie pożywek 100 μΜ kwasu askorbinowego zmniejszyło inwazję o 36%. Uzupełnienie kwasem askorbinowym i 140 μΜ proliny dalej zmniejszyło inwazję o 47%. Zastosowanie jako uzupełnienie 40 μΜ lizyny oprócz kwasu askorbinowego i proliny dalej zmniejszyło inwazję do 67%; lizyna przedstawia liniową odpowiedź przy wzmacnianiu działania kwasu askorbinowego i proliny do poziomu 800 μΜ.
Figura 10 również pokazuje, że kombinacja kwasu askorbinowego, proliny i lizyny zarówno jak i 20 μg/ml EGCG była skuteczna w całkowitym zatrzymaniu inwazji komórek rakowych przez macierz pozakomórkową. Kombinacja ta umożliwiła osiągnięcie maksymalnego hamującego wpływu na inwazję komórek rakowych bez konieczności stosowania wysokich stężeń pojedynczych substancji odżywczych. Jako takie, kwas askorbinowy, prolina i lizyna razem z EGCG umożliwiły całkowite zatrzymanie inwazji na macierz komórek raka sutka przy niższym poziomie EGCG (20 μg/ml).
Komórki raka okrężnicy HCT116
Figura 11 pokazuje, że kombinacja kwasu askorbinowego, proliny i lizyny znacząco zmniejszyła inwazję komórek raka okrężnicy do 67,2% ± 3,7%. EGCG stosowany pojedynczo w ilości 20 μg/ml zmniejszył inwazję do 44,9% ± 3,3%, podczas gdy kombinacja kwasu askorbinowego, proliny i lizyny i 20 μg/ml EGCG miała działanie synergiczne zmniejszające inwazję komórek raka okrężnicy do 24,9% ± 4,6%.
Komórki czerniaka A2058
Figura 12 pokazuje, że kombinacja kwasu askorbinowego, proliny i lizyny była skuteczna w zmniejszaniu liczby komórek dokonujących inwazji do 88,2% ± 4%, jednak spadek ten nie był staty10
PL 215 159 B1 stycznie istotny. Połączenie tych substancji odżywczych jedynie z 20 μg/ml EGCG było skuteczne w zmniejszeniu liczby komórek dokonujących inwazji do zera.
Wyniki pokazują, że zastosowanie kwasu askorbinowego, proliny i lizyny z EGCG umożliwiło uzyskanie radykalnego zmniejszenia liczby komórek dokonujących inwazji i migrujących przez błonę Matrigel przy niższych poziomach EGCG. Inwazję zredukowano do zera stosując tak niski poziom jak 20 μg/ml EGCG z kwasem askorbinowym, proliną i lizyną przy komórkach raka sutka i komórkach czerniaka. Korzyści w postaci wyników kombinacji nie były tak spektakularne w przypadku komórek raka okrężnicy jak te uzyskane w przypadku komórek raka sutka. Poziom EGCG musiał wynosić 50 μg/ml, aby uzyskać 90% zmniejszenie inwazji przez te komórki. W badaniach tych nie zaobserwowano żadnej zmiany w ekspresji MMP w komórkach czerniaka, chociaż EGCG ma hamujące działanie na ich ekspresję w zależności od dawki.
Te serie badań zdecydowanie wykazują, że obecny odżywczy preparat farmaceutyczny obejmujący kwas askorbinowy, prolinę, lizynę i co najmniej jeden związek polifenolowy wywiera skuteczny przeciwrozrostowy i przeciwinwazyjny wpływ na komórki rakowe.
P r z y k ł a d 8
Zilustrowano wytwarzanie następujących odżywczych preparatów farmaceutycznych (Tabele 1-5) i preparatu EPICAN FORTE™ (Tabela 6). Stwierdzono, że preparaty te, obejmujące kwas askorbinowy, prolinę, lizynę i co najmniej jeden związek polifenolowy, są skuteczne w blokowaniu inwazji komórek rakowych oraz przerzutów komórek rakowych.
T a b e l a 1 Preparat 1
Substancje biochemiczne Ilość %
Kwas askorbinowy 250 mg 5,6
Askorbinian wapnia 250 mg 5,6
Askorbinian magnezu 250 mg 5,6
Palmitynian askorbylu 250 mg 5,6
Polifenole 1000 mg 22,5
N-Acetylo-cysteina 200 mg 4,5
Lizyna 1000 mg 22,5
Prolina 750 mg 16,8
Arginina 500 mg 11,2
Selen 30 pg < 0,01
Miedź 2 mg 0,04
Mangan 1 mg 0,02
mg = miligramy pg = mikrogramy „%” odnosi się do % wagowego pojedynczego składnika w całkowitej wadze preparatu
T a b e l a 2 Preparat 2
Substancje biochemiczne Ilość %
Kwas askorbinowy 25 mg 5,7
Askorbinian wapnia 25 mg 5,7
Askorbinian magnezu 25 mg 5,7
Palmitynian askorbylu 25 mg 5,7
Polifenole - 50% 200 mg 46,0
N-Acetylo-cysteina 10 mg 2,3
Lizyna 50 mg 11,5
PL 215 159 B1 cd. tabeli 2
Prolina 25 mg 5,7
Arginina 50 mg 11,5
Selen 1 μg < 0,001
Miedź 20 μg < 0,001
Mangan 50 μg < 0,001
mg = miligramy pg = mikrogramy „%” odnosi się do % wagowego pojedynczego składnika w całkowitej wadze preparatu
T a b e l a 3 Preparat 3
Substancje biochemiczne Ilość %
Kwas askorbinowy 5000 mg 13,3
Askorbinian wapnia 5000 mg 13,3
Askorbinian magnezu 5000 mg 13,3
Palmitynian askorbylu 5000 mg 13,3
Polifenole - 100% 5000 mg 13,3
N-Acetylo-cysteina 1500 mg 4,0
Lizyna 5000 mg 13,3
Prolina 3000 mg 8,0
Arginina 3000 mg 8,0
Selen 200 μg < 0,001
Miedź 9 mg 0,02
Mangan 10 mg 0,002
mg = miligramy pg = mikrogramy „%” odnosi się do % wagowego pojedynczego składnika w całkowitej wadze preparatu
T a b e l a 4 Preparat 4
Substancje biochemiczne Ilość %
Kwas askorbinowy 250 mg 4,7
Askorbinian wapnia 250 mg 4,7
Askorbinian magnezu 250 mg 4,7
Palmitynian askorbylu 250 mg 4,7
Polifenole - 98% 1000 mg 18,7
N-Acetylo-cysteina 200 mg 3,7
Lizyna 1000 mg 18,7
Prolina 750 mg 14,0
Arginina 500 mg 9,3
Selen 100 μg < 0,002
Miedź 2 mg 0,04
Mangan 1 mg 0,02
Wapń 500 mg 9,3
Magnez 400 mg 7,5
mg = miligramy pg = mikrogramy „%” odnosi się do % wagowego pojedynczego składnika w całkowitej wadze preparatu
PL 215 159 B1
T a b e l a 5 Preparat 5
Substancje biochemiczne Ilość %
Kwas askorbinowy 250 mg 4,5
Askorbinian wapnia 250 mg 4,5
Askorbinian magnezu 250 mg 4,5
Palmitynian askorbylu 250 mg 4,5
Polifenole - 98% 1000 mg 18
N-Acetylo-cysteina 200 mg 3,6
Lizyna 1000 mg 18
Prolina 750 mg 13,5
Arginina 500 mg 9
Selen 100 pg < 0,002
Miedź 2 mg < 0,04
Mangan 1 mg < 0,02
Wapń 500 mg 9
Magnez 400 mg 7,2
Bioflawonoidy z owoców cytrusowych 200 mg 3,6
mg = miligramy pg = mikrogramy „%” odnosi się do % wagowego pojedynczego składnika w całkowitej wadze preparatu T a b e l a 6 Preparat EPICAN FORTETM
Dawka: 6 kapsułek (zalecane stosowanie: dwie kapsułki trzy razy dziennie najlepiej z posiłkami)
6 kapsułek zawiera: Ilość na dawkę % zapotrzebowania dziennego
L-Lizyna 1000 mg
L-Prolina 750 mg
L-Arginina 500 mg
Witamina C (jako kwas askorbinowy, askorbinian wapnia, askorbinian magnezu i palmitynian askorbylu) 782 mg 1180%
Wapń (z askorbinianu wapnia) 22 mg 2%
Magnez (z askorbinianu magnezu) 50 mg 12%
Standardowy wyciąg z zielonej herbaty (liść) (80% polifenolu - 800 mg) bezkofeinowy 1000 mg
N-Acetylo-cysteina 200 mg
Selen (z L-selenometioniny) 30 mg 43%
Miedź (z glicynianu miedzi) 2 mg 100%
Mangan (z cytrynianu manganu) 1 mg 50%
mg = miligramy pg = mikrogramy
EPICAN FORTETM jest nazwą znaku towarowego w rozpatrywanym zgłoszeniu USA.
Inne składniki: kapsułki z wetetarianu (hydroksypropylometyloceluloza), ditlenek krzemu, celuloza i stearynian magnezu.
P r z y k ł a d 9
Oddziaływanie preparatu EPICAN FORTE™ na komórki raka ludzkiego
PL 215 159 B1
Zbadano oddziaływanie EPICAN FORTE™ na komórki raka ludzkiego. Zbadano parametry przerzutowe takie jak ekspresja metaloproteinaz macierzowych (MMP) za pomocą zymografii żelatynazowej, zdolność do inwazji przez Matrigel i rozrost/wzrost za pomocą analizy MTT. Protokoły dla tych analiz opisano szczegółowo jak wyżej. Użyto kilku linii komórek raka ludzkiego: raka skóry - komórki czerniaka 2058, raka wątroby - komórki HepG2, włókniakomięsaka - komórki HT 1080, raka okrężnicy - HCT 116, raka sutka ER+/-MCF-7 i raka sutka ER-/-MDA-MB-231.
Następujące tabele (Tabele 7 i 8) zestawiają wyniki:
Oddziaływanie EPICAN FORTE™ na rozrost/wzrost linii komórek raka ludzkiego:
T a b e l a 7. Dawki lecznicze EPICAN FORTE™ ^g/ml): Procent dawki porównawczej
Komórki rakowe 0 10 50 100 500 1000
Czerniaka 100% 98 - 105 - 50
HepG2 100% 92 - 138 - 85
HT-1080 100% 100 - 97 80 63
Okrężnicy (HCT 116) 100% 119 125 141 120 106
MCF-7 100% 93 88 92 97 77
MDA-MB-231 100% 103 - 82 - 25
T a b e l a 8: Dawki lecznicze EPICAN FORTE™ ^g/ml): Procent zahamowania
Komórka rakowa 0 10 50 100 500 1000
Czerniaka 0% 80 98 100 - -
HepG2 0% 15 25 50 95 100
HT-1080 0% 90 - 50 70 100
Okrężnicy (HCT 116) 0% 20 50 80 100 -
MDA-MB-231 0% 50 - 98 - -
MCF-7 Nieinwazyjna
Oddziaływanie EPICAN FORTE™ na ekspresję metaloproteinaz macierzowych (MMP) przez linie komórek raka ludzkiego:
Komórki czerniaka: Komórki czerniaka przedstawiały dwa pasma na zymografie żelatynazowym odpowiadające MMP-2 i MMP-9. EPICAN FORTE™ zahamował ekspresję MMP-2 i -9 w sposób zależny od dawki. Ekspresja MMP-2 i -9 została istotnie zahamowana przy stężeniu EPICAN FORTE™
100 μο/ml i praktycznie niewykrywalna przy stężeniu 1000 μg/ml.
Komórki HepG2: Tak jak komórka czerniaka, komórka HepG2 również wyrażała dwa pasma odpowiadające MMP-2 i MMP-9. EPICAN FORTE™ zahamował ekspresję MMP-2 i -9 przy stężeniu 500 i 1000 μg/ml.
Włókniakomięsak HT-1080: Komórki HT-1080 przedstawiały dwa pasma dla MMP-2 i -9. EPICAN FORTE™ również zahamował ekspresję obu pasm w sposób zależny od dawki. Zauważono bardzo słabe pasma przy stężeniu 500 i 1000 μg/ml.
Rak okrężnicy HCT 116: Komórki raka okrężnicy przedstawiały tylko jedno pasmo na zymografie odpowiadające MMP-2, które całkowicie znikło przy stężeniu 100 μg/ml.
MCF-7 i MDA-MB-231: Te linie komórek rakowych nie tworzyły żadnych pasm MMP przy badanym stężeniu, które były podobne do innych linii komórek rakowych.
Inwazja MDA-MB-231 przez Matrigel została zahamowana o 50, 60 i 95%, odpowiednio przez 10, 50 i 100 pg/ml EPICAN FORTE™. EPICAN FORTE™ nie był toksyczny wobec MDA-MB-231 przy 10 μο/ml, wykazywał słabą toksyczność przy 100 μο/ml. Jednak, przedstawiał znaczącą toksyczność przy 1000 μg/ml. Ani MMP-2 ani MMP-9 nie zostały wyrażone przez zymografię. Natomiast EPICAN FORTE™ nie był toksyczny wobec MCF-7 nawet przy 500 μg/ml i przedstawiał słabą toksyczność przy 1000 μg/ml. MCF-7 nie był inwazyjny i nie wyrażał aktywności MMP.
PL 215 159 B1
EPICAN FORTE™ hamuje ekspresję MMP-2 i MMP-9 w sposób zależny od dawki. Ekspresja
MMP-2 i MMP-9 została znacząco zahamowana przez stężenie 100 μg/ml EPICAN FORTE™ i była praktycznie niewykrywalna przy stężeniu 100 μg/ml. EPICAN FORTE™ stosowany w stężeniach 10 i 100 μg/ml nie wpływał znacząco na żywotność komórek, a przy 100 μg/ml wykazywał toksyczność w zakresie 10 - 40 procent, w zależności od typu komórek. Inwazja komórek czerniaka, komórek MDA-MB-231 oraz współhodowli komórek czerniaka z NHDF przez Matrigel została znacząco zmniejszona w sposób zależny od dawki. Inwazja komórek HT-1080 przez Matrigel została zahamowana o 10%, 50%, 70% i 100%, odpowiednio przy 10, 100, 200 i 1000 μg/ml. Co ciekawe, EPICAN FORTE™ nie był toksyczny wobec komórek HT-1080 przy 100 μg/ml. Wyniki te pokazują, że EPICAN FORTE™ jest bardzo skuteczny wobec różnych linii komórek rakowych, a także we współhodowlach. Obserwacje te ujawniają, że EPICAN FORTE™ może dostarczać naturalnej bazy terapeutycznej, która czyni go wartościowym i obiecującym kandydatem do leczenia raków ludzkich.
P r z y k ł a d 10
Oddziaływanie EPICAN FORTE™ na linie prawidłowych komórek ludzkich
Zbadano oddziaływanie EPICAN FORTE™ na linie prawidłowych komórek ludzkich. Zastosowano parametry podobne do tych dla linii komórek rakowych; mianowicie zymografię dla ekspresji MMP, inwazję przez Matrigel i rozrost/wzrost za pomocą analizy MTT. Użyto kilku prawidłowych ludzkich fibroblastów skóry (NHDF), w tym chondrocytów ludzkich i ludzkich komórek zrębowych.
Następujące tabele (Tabele 9, 10 i 11) podsumowują oddziaływanie EPICAN FORTE™ na rozrost/wzrost, inwazję przerzutową i wytwarzanie MMP w prawidłowych komórkach ludzkich:
T a b e l a 9. Oddziaływanie EPICAN FORTE™ na rozrost/wzrost prawidłowych komórek ludzkich. Dawki lecznicze EPICAN FORTE™ ^g/ml): Procent kontroli
Komórki prawidłowe 0 10 50 100 500 100
NHDF 100% 118 - 135 - 90
Chondrocyty 100% 113 - 148 76 82
Komórki zrębowe 100% 100 116 115 98 64
T a b e l a 10. Oddziaływanie EPICAN FORTE™ na inwazję przez Matrigel prawidłowych komórek ludzkich. Dawki lecznicze EPICAN FORTE™ ^g/ml): Procent zahamowania
Komórki prawidłowe 0 10 50 100 200 1000
NHDF 0% 67% 89% 100% - -
Chondrocyty 0% 45% 85% 95% 100% -
Komórki zrębowe 0% 0% - 95% 100% -
Oddziaływanie EPICAN FORTE™ na ekspresję metaloproteinaz macierzowych (MMP) przez prawidłowe komórki ludzkie podsumowano następująco:
NHDF: NHDF wyrażały tylko jedno pasmo na zymografie odpowiadające MMP-2, które faktycznie znikło przy stężeniu 1000 μg/ml EPICAN FORTE™.
Chondrocyty: Chondrocyty również przedstawiały tylko jedno pasmo odpowiadające MMP-2. EPICAN FORTE™ zahamował ekspresję MMP-2 w sposób zależny od dawki. Ekspresja MMP-2 została znacząco zahamowana przy stężeniu 100 μg/ml EPICAN FORTE™ i całkowicie znikła przy stężeniu 200 pg/ml EPICAN FORTE™.
Komórki zrębowe: Komórki zrębowe również przedstawiały tylko jedno pasmo odpowiadające MMP-2. EPICAN FORTE™ zahamował ekspresję MMP-2 w sposób zależny od dawki. Zauważono bardzo słabe pasmo przy stężeniu 50 i 100 μg/ml, którego nie wykryto przy stężeniu 200 i 500 μg/ml.
W skrócie, wyniki wskazują, że EPICAN FORTE™ hamuje ekspresję MMP-2 w sposób zależny od dawki. Ekspresja MMP-2 została znacząco zahamowana przy stężeniu 100 μg/ml EPICAN FORTE™ i praktycznie nie wykryta przy stężeniu 200 μg/ml. Dodatkowo, stwierdzono również, że inwazja chondrocytów przez Matrigel została zahamowana o 50%, 85% i 95% przy 10 μg/ml, 100 μg/ml i 200 μg/ml. Przy 500 μg/ml inwazja została całkowicie zredukowana do 0%.
EPICAN FORTE™ nie był toksyczny wobec chondrocytów nawet przy stężeniu 200 μg/ml. W rzeczywistości, EPICAN FORTE™ wywierał wpływ na rozrost komórek, 70% wzrost rozrostu komórek przy 200 μg/ml, 70 % więcej od dawki porównawczej. Zauważono słabe oddziaływanie toksyczne tylko przy 500 μg/ml. Wyniki te pokazują, że EPICAN FORTE™ jest skuteczny w hamowaniu ekspresji
PL 215 159 B1
MMP-2, i że EPICAN FORTE™ stanowi nowy przeciwzapalny preparat odżywczy jako naturalne podejście do hamowania wytwarzania MMP i rozkładu macierzy pozakomórkowej w zapaleniu kości i stawów oraz innych zaburzeń pokrewnych, w tym nadmiernego rozkładu tkanki chrzęstnej.
Chociaż właśnie dopiero rozpoczęto prowadzenie badań in vivo preparatu EPICAN FORTE, doniesiono o dwóch przypadkach potwierdzających przydatność EPICAN FORTE jako leku do leczenia raka.
Pacjentkę z rozpoznanym guzem mózgu bezskutecznie leczono chemio- i radioterapią, z końcem kwietnia 2002 leczenia zaniechano. Przypadkiem zaczęto ją leczyć EPICAN FORTE, stosując zalecane dawkowanie. Pod koniec sierpnia 2002 MRTS wykazały, że guz znikł.
U pacjenta w wieku 64 lat mającego znacznie podniesiony poziom markera nowotworowego PSA w maju 2002 (59,9 μg/l) rozpoznano przerzutowego raka gruczołu krokowego wzdłuż naczyń chłonnych aorty. Rozpoczął leczenie preparatem EPICAN FORTE, stosując zalecane dawkowanie. Trzy miesiące później poziom PSA spadł do 0,9 μg/1. Kontrolna tomografia komputerowa (CT) na koniec października 2002 wykazała, że poprzednio widoczny przerzut na naczynia chłonne nie był już dostrzegalny, a jego gruczoł krokowy miał normalną wielkość.

Claims (17)

1. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna użyteczna w leczeniu raka, zawierająca:
- związek askorbinowy;
- związek L-lizynowy;
- związek L-prolinowy; i
- co najmniej jeden związek polifenolowy wybrany z grupy obejmującej galusan epigalokatechiny, galusan epikatechiny, epigalokatechinę, epikatechinę i katechinę, znamienna tym, że ponadto zawiera N-acetylo-cysteinę, gdzie związek askorbinowy, związek L-lizynowy, związek L-prolinowy i N-acetylocysteina wzmacniają działanie związku polifenolowego w blokowaniu rozrostu i przerzutu raka.
2. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 1, znamienna tym, że związek askorbinowy jest wybrany z grupy obejmującej kwas askorbinowy, farmaceutycznie dopuszczalne sole askorbinianowe, estry askorbinianowe i/lub ich mieszaniny.
3. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 2, znamienna tym, że farmaceutycznie dopuszczalną solą askorbinianową jest askorbinian wapnia i/lub askorbinian magnezu.
4. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 2 albo 3, znamienna tym, że estrem askorbinianowym jest palmitynian askorbylu.
5. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według któregokolwiek z poprzednich zastrz., znamienna tym, że związek lizynowy jest wybrany z grupy obejmującej chlorowodorek lizyny i farmaceutycznie dopuszczalne sole lizyny.
6. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według któregokolwiek z poprzednich zastrz., znamienna tym, że związek prolinowy jest wybrany z grupy obejmującej chlorowodorek proliny i farmaceutycznie dopuszczalne sole proliny.
7. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według któregokolwiek z poprzednich zastrz., znamienna tym, że ponadto zawiera pierwiastek śladowy wybrany z grupy obejmującej selen, miedź, mangan, wapń i magnez.
8. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według któregokolwiek z poprzednich zastrz., znamienna tym, że ponadto zawiera dalszy aminokwas, zwłaszcza argininę.
9. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według któregokolwiek z poprzednich zastrz., znamienna tym, że zawiera: związek askorbinowy, wapń, magnez, polifenole, N-acetylo-cysteinę, L-lizynę, L-prolinę, L-argininę, selen, miedź i mangan.
10. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 9, znamienna tym, że związek askorbinowy jest wybrany z grupy obejmującej kwas askorbinowy, askorbinian wapnia, askorbinian magnezu i palmitynian askorbylu.
11. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 9 albo 10, znamienna tym, że kompozycja zawiera
PL 215 159 B1
a) 250 mg kwasu askorbinowego, 250 mg askorbinianu wapnia, 250 mg askorbinianu magnezu, 250 mg palmitynianu askorbylu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 1000 mg lizyny, 750 mg proliny, 500 mg argininy, 30 pg selenu, 2 mg miedzi i 1 mg manganu;
b) 25 mg kwasu askorbinowego, 25 mg askorbinianu wapnia, 25 mg askorbinianu magnezu, 25 mg palmitynianu askorbylu, 200 mg polifenoli, 10 mg N-acetylo-cysteiny, 50 mg lizyny, 25 mg proliny, 50 mg argininy, 1 pg selenu, 20 pg miedzi i 50 pg manganu;
c) 5000 mg kwasu askorbinowego, 5000 mg askorbinianu wapnia, 5000 mg askorbinianu magnezu, 5000 mg palmitynianu askorbylu, 5000 mg polifenoli, 1500 mg N-acetylo-cysteiny, 5000 mg lizyny, 3000 mg proliny, 3000 mg argininy, 200 pg selenu, 9 mg miedzi i 10 mg manganu;
d) 250 mg kwasu askorbinowego, 250 mg askorbinianu wapnia, 250 mg askorbinianu magnezu, 250 mg palmitynianu askorbylu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 1000 mg lizyny, 750 mg proliny, 500 mg argininy, 100 pg selenu, 2 mg miedzi, 1 mg manganu, 500 mg wapnia i 400 mg magnezu;
e) 250 mg kwasu askorbinowego, 250 mg askorbinianu wapnia, 250 mg askorbinianu magnezu, 250 mg palmitynianu askorbylu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 1000 mg lizyny, 750 mg proliny, 500 mg argininy, 100 pg selenu, 2 mg miedzi, 1 mg manganu, 500 mg wapnia, 400 mg magnezu i 200 mg bioflawonoidów cytrusowych.
12. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według dowolnego z zastrz. 9 do 10, znamienna tym, że kompozycja zawiera 1000 mg L-lizyny, 750 mg L-proliny, 500 mg L-argininy, 710 mg kwasu askorbinowego, 22 mg wapnia, 50 mg magnezu, 1000 mg polifenoli, 200 mg N-acetylo-cysteiny, 30 pg selenu, 2 mg miedzi i 1 mg manganu.
13. Odżywcza kompozycja farmaceutyczna według dowolnego z zastrz. 9 do 12, znamienna tym, że polifenole są wybrane z grupy obejmującej galusan epigalokatechiny, galusan epikatechiny, epigalokatechinę, epikatechinę, katechinę i inne farmaceutycznie dopuszczalne sole polifenoli i/lub ich mieszaniny.
14. Zastosowanie odżywczej kompozycji, jak określono w którymkolwiek z zastrz. 1 do 13 do wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia raka.
15. Zastosowanie według zastrz. 14, znamienne tym, że rak jest wybrany z grupy obejmującej czerniaka, raka sutka, raka okrężnicy, raka płuc i raka mózgu.
16. Zastosowanie odżywczej kompozycji, jak określono w którymkolwiek z zastrz. 1 do 13 do wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia choroby zapalnej.
17. Zastosowanie według zastrz. 16, znamienne tym, że chorobą zapalną jest zapalenie kości i stawów.
PL371282A 2002-01-11 2003-01-13 Odzywcza kompozycja farmaceutyczna uzyteczna w leczeniu raka oraz jej zastosowanie PL215159B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US34814302P 2002-01-11 2002-01-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL371282A1 PL371282A1 (pl) 2005-06-13
PL215159B1 true PL215159B1 (pl) 2013-10-31

Family

ID=23366808

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL371282A PL215159B1 (pl) 2002-01-11 2003-01-13 Odzywcza kompozycja farmaceutyczna uzyteczna w leczeniu raka oraz jej zastosowanie

Country Status (27)

Country Link
US (2) US7041699B2 (pl)
EP (1) EP1465614B1 (pl)
JP (1) JP2005519055A (pl)
KR (1) KR20040073559A (pl)
CN (1) CN100377706C (pl)
AT (1) ATE382343T1 (pl)
AU (1) AU2003235762B2 (pl)
BR (1) BR0302672A (pl)
CA (1) CA2471932A1 (pl)
DE (1) DE60318387T2 (pl)
EE (1) EE200400032A (pl)
ES (1) ES2298519T3 (pl)
HK (1) HK1086489A1 (pl)
HR (1) HRP20040704A2 (pl)
HU (1) HUP0500498A3 (pl)
IL (1) IL162646A0 (pl)
LT (1) LT5240B (pl)
LV (1) LV13248B (pl)
MX (1) MXPA04006717A (pl)
NO (1) NO20033950L (pl)
NZ (1) NZ533737A (pl)
PL (1) PL215159B1 (pl)
RU (1) RU2301666C2 (pl)
UA (1) UA80692C2 (pl)
WO (1) WO2003057201A2 (pl)
YU (1) YU75003A (pl)
ZA (1) ZA200405075B (pl)

Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9034310B2 (en) * 2002-02-21 2015-05-19 Stephen B. Cantrell Interferon-statin combination cancer therapy
US7115283B2 (en) * 2003-05-06 2006-10-03 Access Business Group International Llc Preparations for sustained release of nutraceuticals and methods of controllably releasing nutraceuticals
US20040253319A1 (en) * 2003-06-11 2004-12-16 Shrirang Netke Pharmaceutical compositions and method for alleviating side-effects of estrogen replacement therapy
MXPA06002534A (es) * 2003-09-05 2006-06-20 Matthias Rath Composicion farmaceutica que comprende i.a. vitamina c, magnesio, extracto de te verde para retardar enfermedades cardiovasculares.
US20050176674A1 (en) * 2004-02-09 2005-08-11 Friesen Kim G. Composition and method for use in cartilage affecting conditions
US8377904B2 (en) 2004-02-09 2013-02-19 Hill's Pet Nutrition, Inc. Composition and method for use in cartilage affecting conditions
KR100601080B1 (ko) * 2004-08-26 2006-07-19 가톨릭대학교 산학협력단 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트를 유효성분으로 하는류마티스성 관절염 치료제
JP5156392B2 (ja) 2005-02-03 2013-03-06 トポターゲット ユーケー リミテッド Ｈｄａｃ阻害剤を用いる併用療法
BRPI0520221A2 (pt) 2005-04-11 2009-04-22 Matthias Rath uso de uma composiÇço nutriente que compreende polifenàis de chÁ verde para tratamento de osteossarcoma
WO2006108429A1 (en) * 2005-04-11 2006-10-19 Matthias Rath Nutrient composition for treating sarcoma and prostate cancer
EA018982B1 (ru) 2005-05-13 2013-12-30 Топотаргет Юкей Лимитед Фармацевтические составы, содержащие ингибиторы деацетилазы гистонов
EP1924257A4 (en) * 2005-07-26 2012-08-08 Mitsui Norin Kk STABILIZED 3-HYDROXYFLAVAN COMPOSITIONS AND METHOD THEREFOR
WO2007033356A2 (en) * 2005-09-14 2007-03-22 Mitsui Norin Co., Ltd Compositions and methods for green tea catechins for modification of detoxification enzymes
WO2007054719A2 (en) * 2005-11-10 2007-05-18 Topotarget Uk Limited Histone deacetylase (hdac) inhibitors (pxdlol) for the treatment of cancer alone or in combination with chemotherapeutic agent
US20070212426A1 (en) * 2006-03-10 2007-09-13 Matthias Rath Composition and method of retarding viral activity and reducing viral replication
WO2007147128A2 (en) 2006-06-16 2007-12-21 Summa Health System Non-toxic anti-cancer drug combining ascorbate, magnesium and a naphthoquinone
GB0615781D0 (en) * 2006-08-09 2006-09-20 Coressence Ltd Prebiotic composition
US20080114054A1 (en) * 2006-11-14 2008-05-15 Rath Microbes Compositions and methods for reducing antimicrobial resistance of microbes
US8617544B2 (en) * 2007-05-01 2013-12-31 Richard L. Kozlenko Compositions and methods for controlling lipid metabolism
GB0710536D0 (en) 2007-06-01 2007-07-11 Veritron Ltd Plant extract and its therapeutic use
CA2700173C (en) * 2007-09-25 2016-10-11 Topotarget Uk Limited Methods of synthesis of certain hydroxamic acid compounds
GB0725077D0 (en) * 2007-12-21 2008-01-30 Univ Murcia Antifolate com[ounds for the treatment of melanoma
CN102083428A (zh) * 2008-03-07 2011-06-01 顶标公司 采用长时间连续输液Belinostat进行治疗的方法
RU2395281C2 (ru) * 2008-09-04 2010-07-27 Всеволод Иванович Киселев Фармацевтическая композиция для лечения диспластических процессов шейки матки
ES2534245T3 (es) 2008-11-04 2015-04-20 Vymedic, Llc Formulaciones de suplemento antiviral
US8677463B2 (en) * 2008-12-05 2014-03-18 At&T Intellectual Property I, Lp System and method for managing multiple sub accounts within a subcriber main account in a data distribution system
JP2009143928A (ja) * 2008-12-26 2009-07-02 Kyushu Univ ガロイルカテキン類の抗酸化活性の促進方法
GB0900555D0 (en) * 2009-01-14 2009-02-11 Topotarget As New methods
CN101874822A (zh) * 2009-04-27 2010-11-03 玫琳凯有限公司 植物性抗痤疮制剂
IT1397522B1 (it) * 2009-12-21 2013-01-16 Solartium Entpr Ltd Uso di una combinazione per il trattamento dell'osteoartrosi
GB201015784D0 (en) 2010-09-20 2010-10-27 Bionature E A Ltd Anti-cancer compounds
EP2793848B1 (en) 2011-12-19 2019-06-26 Mary Kay, Inc. Navy bean extract to whiten the skin and improve skin tone
RU2522547C1 (ru) * 2012-11-12 2014-07-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии имени Н.Н. Петрова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Фармакологическая геропротекторная композиция и способ ее получения
US20140154702A1 (en) * 2012-11-30 2014-06-05 Endocyte, Inc. Methods For Treating Cancer Using Combination Therapies
JP2016519092A (ja) * 2013-03-18 2016-06-30 デンタルメッド ファーム ホールディング リミテッド 組成物におけるｎ−アセチルシステイン誘導体とクランベリーポリフェノールとの組み合わせ、並びに歯周疾患及びインプラント周囲炎を予防及び処置するための方法
BE1023772B9 (fr) * 2013-05-17 2017-08-02 Valore Composition a base d'un complexe de (+)-catechine et d'acide amine pour le traitement et la prevention du cancer
IN2013MU01528A (pl) * 2013-07-26 2015-06-26 Tata Memorial Ct
GB2520794A (en) * 2013-07-26 2015-06-03 Tata Memorial Ct Plant poly-phenol and copper (II) mediated degradation of DNA and RNA
KR102323049B1 (ko) 2014-03-10 2021-11-05 마리 케이 인코포레이티드 피부 라이트닝 조성물
BE1022579A9 (fr) * 2014-11-10 2016-10-06 Valore Composition antimétastatique comprenant au moins un composé de type flavanol
CN105061533B (zh) * 2015-09-18 2018-02-09 福州大学 六甲氧基二氢黄酮‑鼠李糖基‑鼠李糖苷及其应用
CN106138036A (zh) * 2016-04-29 2016-11-23 陈西敬 抗坏血酸棕榈酸酯在制备抗肿瘤药物中的应用
CA3228010A1 (en) * 2016-10-03 2018-04-12 Houn Simon Hsia Compositions and methods for enhancing cancer radiotherapy
CN111479577A (zh) 2017-06-13 2020-07-31 夏滉 用于增强癌症放疗的组合物和方法
US12029765B2 (en) 2017-06-13 2024-07-09 Houn Simon Hsia Compositions and methods for treating cancer
KR20200079229A (ko) 2017-06-13 2020-07-02 호운 사이먼 샤 암 화학요법을 강화시키기 위한 조성물 및 방법
CN111529709A (zh) * 2020-06-03 2020-08-14 北京易思腾翻译服务有限公司 一种可用于体重控制且可逆转动脉粥样硬化的组合物
WO2022124386A1 (en) * 2020-12-07 2022-06-16 L' Oreal Composition comprising ascorbic acid and cyclic amino acid
IT202200010592A1 (it) * 2022-05-23 2023-11-23 Neilos S R L “Composizione nutraceutica o farmaceutica per l’infertilità maschile”

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4243363A1 (de) * 1992-12-21 1994-06-23 Ulrich Dr Med Kuebler Behandlungsverfahren für Hauttrockenheit
US5962517A (en) * 1997-01-31 1999-10-05 Murad; Howard Pharmaceutical compositions and methods for treating acne
US5817695A (en) * 1997-12-24 1998-10-06 Pellico; Michael A. Nutritional product with high fat, low carbohydrate and amino acid imbalance
EP0938897A1 (en) * 1997-12-26 1999-09-01 Japanese Foundation For Cancer Research Telomerase inhibitor
AT407821B (de) * 1998-03-24 2001-06-25 Franz Dr Stueckler Mittel auf der basis von naturstoffen
AU4043900A (en) * 1999-03-30 2000-10-16 Purdue Research Foundation Compositions containing tea catechins as cancer specific proliferation inhibitors
KR20020016833A (ko) 1999-06-15 2002-03-06 뉴트리-로직스, 인크. 발병 감소에 유용한 영양 제제, 관련 치료 방법 및 성분스크리닝 방법
US6299925B1 (en) * 1999-06-29 2001-10-09 Xel Herbaceuticals, Inc. Effervescent green tea extract formulation
US6448030B1 (en) * 2000-02-18 2002-09-10 University Of Nevada-Las Vegas Method for predicting the efficacy of anti-cancer drugs
EP1195159B1 (en) * 2000-10-09 2006-05-31 Rath, Matthias, Dr. med. Therapeutic combination of ascorbate with lysine and arginine for prevention and treatment of cancer
WO2007076492A2 (en) 2005-12-28 2007-07-05 Sandisk Corporation Methods and systems for writing non-volatile memories for increased endurance

Also Published As

Publication number Publication date
NZ533737A (en) 2006-02-24
DE60318387D1 (de) 2008-02-14
US7041699B2 (en) 2006-05-09
LT5240B (lt) 2005-07-25
MXPA04006717A (es) 2004-11-10
HUP0500498A2 (hu) 2005-08-29
AU2003235762B2 (en) 2008-10-02
HRP20040704A2 (en) 2004-10-31
LV13248B (en) 2005-06-20
US20030170319A1 (en) 2003-09-11
KR20040073559A (ko) 2004-08-19
EP1465614B1 (en) 2008-01-02
EE200400032A (et) 2004-04-15
WO2003057201A3 (en) 2004-03-11
NO20033950L (no) 2003-11-10
UA80692C2 (en) 2007-10-25
NO20033950D0 (no) 2003-09-05
CN100377706C (zh) 2008-04-02
RU2301666C2 (ru) 2007-06-27
ATE382343T1 (de) 2008-01-15
WO2003057201A2 (en) 2003-07-17
EP1465614A2 (en) 2004-10-13
YU75003A (sh) 2006-08-17
HK1086489A1 (en) 2006-09-22
BR0302672A (pt) 2004-02-25
HUP0500498A3 (en) 2013-01-28
JP2005519055A (ja) 2005-06-30
ES2298519T3 (es) 2008-05-16
PL371282A1 (pl) 2005-06-13
AU2003235762A1 (en) 2003-07-24
ZA200405075B (en) 2006-07-26
IL162646A0 (en) 2005-11-20
LT2004076A (en) 2005-02-25
DE60318387T2 (de) 2008-12-18
US20060142212A1 (en) 2006-06-29
CN1731989A (zh) 2006-02-08
CA2471932A1 (en) 2003-07-17
RU2004124384A (ru) 2005-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL215159B1 (pl) Odzywcza kompozycja farmaceutyczna uzyteczna w leczeniu raka oraz jej zastosowanie
Kanwar et al. Recent advances on tea polyphenols
Agarwal et al. Anti-angiogenic efficacy of grape seed extract in endothelial cells
Papageorgiou et al. Antioxidant treatment and endothelial dysfunction: is it time for flavonoids?
Roomi et al. Antitumor effect of nutrient synergy on human osteosarcoma cells U-2OS, MNNG-HOS and Ewing's sarcoma SK-ES. 1.
Roomi et al. Effect of a nutrient mixture on matrix metalloproteinase-9 dimers in various human cancer cell lines
Roomi et al. In vitro and in vivo effects of a nutrient mixture on breast cancer progression
WO2006108430A1 (en) Nutrient composition comprising green tea polyphenols for treating osteosarcoma
Roomi et al. In vivo and In vitro effect of a nutrient mixture on human hepatocarcinoma cell line SK-HEP-1
Roomi et al. Inhibition of cell invasion and MMP production by a nutrient mixture in malignant liposarcoma cell line SW-872
Dziabowska-Grabias et al. Antioxidant Therapy in Inflammatory Bowel Diseases. Antioxidants 2021, 10, 412
Roomi et al. Inhibitory effects of a nutrient mixture on human testicular cancer cell line NT 2/DT matrigel invasion and MMP activity
EP1888061A1 (en) Nutrient composition for treating sarcoma and prostate cancer
JP2008509877A (ja) 通常、ビタミンｃ、マグネシウム、緑茶抽出物を含む心血管系疾患を抑制するための医薬調合物
Roomi et al. Vitamin C in Health: Scienti� ic focus on its anti-cancer ef� icacy
Roomi et al. In vivo and in vitro antitumor effect of nutrient synergy on human osteosarcoma cell line MNNG-HOS
Roomi et al. Inhibition of growth and expression of inflammation mediators in human leukemic cell line U-937 by a nutrient mixture
Akhila et al. Molecular docking studies of flavonoid's pattern of inhibition against Wnt/β-catenin signaling
Room et al. Antitumor effect of nutrient synergy on human osteosarcoma cells U-2OS, MNNG-HOS and Ewing's sarcoma SK-ES. 1
KR20080016548A (ko) 육종 및 전립선암 치료용 영양제 조성물
CN101180049A (zh) 治疗肉瘤和前列腺癌的营养性组合物
KR20080016547A (ko) 골육종 치료용 녹차 폴리페놀을 포함하는 영양제 조성물
Roomi et al. In vitro anticarcinogenic effect of a nutrient mixture on human rhabdomyosarcoma cells
Roomi et al. GGGGGGS GGG GG LL GGGG GGL GLLLLL GGG GLS INFLAMMarion MEDIATORS IN HUMAN LEUKEMIC CELL LINE aS000 GGG G GGaGGLLGGG GG LLLLS
Roomi et al. CELLS IN C57BL/6 MICE BY A NUTRIENT MIXTURE CONSISTING OF ASCORBIC ACID, LYSINE, PROLINE, ARGININE, AND GREEN

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification