ES2534245T3 - Formulaciones de suplemento antiviral - Google Patents

Abstract

Una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de suplemento antiviral oral para uso en el tratamiento o profilaxis de una infección por influenza A, influenza B, influenza C o por enterovirus no polio en un sujeto en necesidad de la misma, en donde dicha composición comprende una lisina, un compuesto ascórbico, un glucósido flavonoide, una treonina, taurina y una piridoxina.

Description

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DESCRIPCIÓN

Formulaciones de suplemento antiviral

Antecedentes de la divulgación

Campo de la divulgación

La divulgación provee composiciones de suplementos antivirales orales que comprenden una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una treonina, taurina y una piridoxina.

Descripción de la técnica relacionada

La influenza (la gripe) es una enfermedad respiratoria contagiosa causada por los virus de la influenza. Puede causar enfermedad de leve o severa, y en ocasiones puede conducir a la muerte. De acuerdo con el CDC, diversos subtipos del virus de la influenza circulan en todo el mundo. Se estima que hay alrededor de 306 tipos, subtipos y cepas de influenza humana conocidos, y aproximadamente 62 enterovirus no polio conocidos que causan enfermedades similares a la gripe en los humanos. Los virus de influenza tipo A y B son los responsables de las epidemias de gripe estacionales que cada año usualmente golpean de Diciembre hasta Abril. Los enterovirus no polio solamente son superados por los virus del "resfriado común", como los agentes infecciosos virales más comunes en los humanos. Es más probable que los enterovirus se presenten de Junio hasta Noviembre. Para reducir la probabilidad de contraer el virus de influenza A o B, se puede obtener una vacuna contra la gripe para proveer una medida de protección durante la temporada de gripe.

La mejor manera de prevenir la gripe es vacunándose cada año contra la gripe. Sin embargo, la vacuna solamente trabaja para la profilaxis de ciertas cepas de la influenza. De hecho, una desventaja clave de las vacunas es que son cepas específicas. Una vez que el paciente está infectado, se deben considerar otras opciones.

En los Estados Unidos hay dos clases de fármacos aprobados por la FDA para tratar o prevenir la infección por virus de la influenza: los bloqueadores del canal de iones M2 y los inhibidores de la neuraminidasa (NAIs). Los bloqueadores del canal M2 (adamantanos) tales como la amantadina y la rimantadina son efectivos contra los virus de la influenza A, pero no de los virus de influenza B puesto que carecen de la proteína M2. El uso de los bloqueadores de M2 está asociado con la aparición de mutaciones resistentes al fármaco de la proteína M2 en los virus de influenza A humana de los subtipos H3N2 y H1N1, y la resistencia se ha detectado en los virus A/H5N1. Por lo tanto, el CDC no ha recomendado su uso desde 2005 y ahora recomienda el uso exclusivo de los NAI; excepto en posibles casos de cepas resistentes al NAI. La neuraminidasa viral puede facilitar el acceso del virus a superficies celulares y ayudar a la liberación de partículas de virus recién formadas a partir de las células infectadas, para permitir la infección viral de otras células.

Si un paciente contrae una cepa del virus de la influenza A o B, los NAI tales como Relenza® (zanamivir) y Tamiflu® (oseltamivir) están disponibles solamente mediante prescripción y están destinados a ser iniciados en las primeras 48 horas después de la aparición de los síntomas. Estos fármacos NAI han demostrado reducir la duración de una típica enfermedad de siete días a aproximadamente un día. Para el tratamiento de la infección por el virus H1N1 de 2009, el CDC recomienda actualmente el uso de cualquiera de oseltamivir (Tamiflu®) or zanamivir (Relenza® ) (http://www.cdc.gov/hlnlflu/ recommendations.htm). Después de que aparecen los síntomas tanto de la influenza y los enterovirus no polio, también son tratados sintomáticamente para aliviar el malestar.

El Tamiflu® (fosfato de oseltamivir, Roche) es un fármaco de prescripción antiviral en forma de cápsulas orales o suspensiones orales aprobados para el tratamiento y profilaxis de la influenza. El fosfato de oseltamivir es un profármaco de etil éster que requiere la hidrólisis del éster para la conversión a la forma activa, el carboxilato de oseltamivir. El carboxilato de oseltamivir es un inhibidor de la neuraminidasa del virus de la influenza que afecta la liberación de partículas de virus. Se han recuperado aislados de virus de influenza A con susceptibilidad reducida al carboxilato de oseltamivir mediante paso serial de virus en cultivo celular en presencia de concentraciones crecientes de carboxilato de oseltamivir. En los estudios clínicos del tratamiento de la infección por el virus de la influenza, adquirida de forma natural, el 1.3% de aislados post-tratamiento en adultos y adolescentes y el 8.6% de aislado post-tratamiento en niños de 1 a 12 años mostró aparición de variantes de influenza con susceptibilidad reducida de la neuraminidasa en cultivo celular con carboxilato de oseltamivir. Se ha observado en el cultivo celular la resistencia cruzada entre ciertos mutantes de la influenza resistentes al zanamivir y mutantes de la influenza resistentes al oseltamivir. Durante la temporada de influenza de 2007-2008, la resistencia al oseltamivir entre los virus de la influenza A (H1N1) se incrementó significativamente por primera vez en todo el mundo (Dharan et al., Infections with Oseltamivir-resistant influenza A(H1N1) virus in the United States, JAMA 301 (10), 1034-1041 (2009)). Los virus de la influenza B con sensibilidad reducida a inhibidores de la neuraminidasa no surgen tan frecuentemente como los virus de la influenza A resistentes. Sin embargo, parece que se transmiten dentro de las comunidades y las familias (Hatakeyama et al., Emergence of influenza B viruses with reduced sensitivity to neuraminidase inhibitors. JAMA, 297:13:1492-1493 (2007)).

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Los efectos colaterales también pueden presentarse con el tratamiento con los NAI. Por ejemplo, Roche y la FDA, en marzo de 2008, informaron a los profesionales de asistencia sanitaria de eventos neuropsiquiátricos asociados con el uso de Tamiflu®, en pacientes con influenza. La etiqueta fue revisada para establecer que la influenza puede estar asociada con una variedad de síntomas neurológicos y de comportamiento los cuales puede incluir eventos tales como alucinaciones, delirio y comportamiento anormal, en algunos casos da como resultado un desenlace fatal. Estos eventos fueron reportados principalmente entre los pacientes pediátricos y frecuentemente tenía un comienzo brusco y una resolución rápida. Debido a que estos eventos fueron reportados voluntariamente durante la práctica clínica, no se pueden hacer las estimaciones de la frecuencia, pero que parecen ser poco comunes con base en los datos de uso de Tamiflu®. No obstante, debido a las cepas emergentes de influenza resistentes a los fármacos y los posibles efectos colaterales de TamifluI®, la terapia antiviral alternativa es de interés.

El Relenza® (zanamivir, GlaxoSmithKline) es un fármaco de prescripción antiviral en forma de un polvo para inhalación aprobado para el tratamiento y la profilaxis de la influenza. El zanamivir actúa como un inhibidor de neuraminidasa de la enzima de la superficie del virus de la influenza. La neuraminidasa viral puede facilitar el acceso del virus a superficies celulares y ayuda a la liberación de partículas virales recién formadas a partir de las células infectadas, para permitir la infección viral de otras células. Los virus de influenza con susceptibilidad reducida al zanamivir han sido recuperados in vitro por el paso del virus en presencia de concentraciones incrementadas del fármaco. Se han identificado recientemente virus de influenza resistentes al zanamivir con una mutación novedosa de la neuraminidasa (Hurt et al., J. Virology,83(20): 10366-10373 (Oct. 2009)).

Sigue existiendo una gran incertidumbre acerca de la utilidad de estos fármacos en una pandemia puesto que el acceso puede ser limitado y se puede desarrollar resistencia a los fármacos. Claramente, son deseables métodos alternativos de tratamiento y la profilaxis de la infección viral para ayudar a limitar el desarrollo de resistencia a los fármacos de los productos farmacéuticos antivirales conocidos.

Varias formulaciones de suplementos antivirales que comprenden diversas vitaminas y minerales son conocidos y algunos están disponibles comercialmente. Muchas de estas formulaciones son hechas de de suplementos dietarios como se definen bajo the Federal Food, Drug and Cosmetic Act, Chapter II Section 201, [21 U.S.C. § 321], paragraph ff, y así, pueden ser clasificados como suplementos dietarios en lugar de fármacos.

La US 5,626,883, Paul, divulga composiciones de ácido ascórbico que proveen potenciar la actividad del sistema inmune humano. Las composiciones Paul incluyen un ascorbato soluble en agua, un éster de ascorbilo soluble en grasa, y al menos un metabolito del ácido ascórbico seleccionado de aminoácidos básicos, subproductos metabólicos de la ruptura de ácido ascórbico, flavonoides, aminoácidos que contienen azufre, pirofosfato de tetrasodio, y glutationa.

La WO 2007/106675, Rath et al., y la patente de los Estados Unidos No. 2007/0212426, Rath et al., divulgan cada uno una composición y un método para retrasar la actividad viral y reducir la replicación viral que comprende administrar una composición que comprende polifenoles, un compuesto ascórbico, lisina y prolina.

La patente los Estados Unidos No. 7, 041,699, Netke et al., divulgan formulaciones farmacéuticas de nutrientes que comprende polifenoles y uso en el tratamiento del cáncer. Netke et al., divulgan formulaciones que comprenden un compuesto ascórbico, los aminoácidos lisina, prolina y N-acetilcisteína, y al menos un polifenol.

La WO 92/15315, Wilkinson, divulga un método para el tratamiento de una infección por herpes, que comprende administrar una composición que comprende lisina, vitamina C y hesperidina.

La Patente de los Estados Unidos No. 5,650,418, Rath y Pauling, divulgan una composición farmacéutica que consiste esencialmente de un compuesto de ascorbato y una lisina en la presencia de un vehículo farmacéutico. Rath y Pauling también divulgan un método para tratar enfermedades cardiovasculares mediante la administración de una composición que comprende un ascorbato, ácido nicotínico, una lisina, y un vehículo farmacéutico.

La EP-A-0799578 provee una preparación combinada que contiene gérmenes enriquecidos con electrolitos que son útiles para el tratamiento de pacientes que sufren de VIH. Este documento divulga una composición que comprende lisina, quercetina, treonina, taurina, vitamina B6 y diversos extractos de plantas.

La WO 2007/057748 se relaciona con el uso del calostro para la profilaxis de síntomas de influenza. Este documento enseña que los componentes más importantes en el calostro son factores inmunes y diversos factores de crecimiento, aunque el calostro también contiene pequeñas cantidades de vitamina C, vitamina B6, taurina lisina y treonina.

La ZA 200402741 se relaciona con una composición para el tratamiento y la nutrición de las personas infectadas por el virus de la inmunodeficiencia humana que comprende L-lisina, picnogenol, ácido ascórbico y piridoxina en una composición que comprende Uncaria tomentosa (Uña de Gato).

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La US 2007/134320 divulga el tratamiento de la infección por herpes con composiciones que comprenden ácido ascórbico y piridoxina, opcionalmente con lisina, con zinc, magnesio, tiamina, riboflavina, ácido pantoténico y taurina.

Se ha encontrado que una formulación antiviral novedosa que comprende una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, un taurina treonina y una piridoxina es sorprendentemente efectiva en la inhibición de la influenza A y la expresión de la neuraminidasa in vitro cuando se compara con otras formulaciones de suplementos dietarios, de la misma forma que oseltamivir .

Breve resumen de la divulgación

En una realización, la divulgación provee una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de suplemento antiviral oral para uso en el tratamiento o profilaxis de una influenza A, influenza B, influenza C o una infección por enterovirus no polio en un sujeto en necesidad del mismo, comprendiendo dicha composición una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una taurina treonina y una piridoxina. En un aspecto, la lisina es seleccionada de L-lisina, monoclorhidrato de L-lisina, diclorhidrato de L-lisina, succinato de L-lisina, glutamato de Llisina, y orotato de L-lisina. En otro aspecto, el compuesto ascórbico es seleccionado de uno o más de ácido ascórbico, ascorbato de calcio, ascorbato de magnesio, ascorbato de potasio, ascorbato de sodio, ascorbato de manganeso, ascorbato de zinc, ascorbato de hierro, ascorbato de cobre, ascorbato de boro, ascorbato de molibdeno, ascorbato de cromo, palmitato de ascorbilo, araquidonato de ascorbilo, estearato de ascorbilo, linoleato de ascorbilo, linoleneato de ascorbilo, y oleato de ascorbilo. En un aspecto adicional, el glicósido flavonoide es seleccionado de uno o más de hesperidina, rutina, naringina, y quercitrina. En un aspecto específico, el glicósido flavonoide es de aproximadamente una mezcla de 1:1 en peso de hesperidina y rutina. En un aspecto, la piridoxina es clorhidrato de piridoxina. En otro aspecto, la composición comprende adicionalmente taurina.

En un aspecto, la composición está en forma de polvo, cápsula, pastilla, trocillo, tableta, líquido, o capsuleta. En un aspecto, la composición comprende monoclorhidrato de L-lisina, ácido ascórbico, hesperidina, rutina, clorhidrato de piridoxina, treonina y taurina. En un aspecto, la composición comprende adicionalmente ascorbato de calcio, ascorbato de niacinamida, y palmitato de ascorbilo.

En un aspecto específico, una dosis individual de la composición comprende de aproximadamente 2 g a aproximadamente 3.5 g de monoclorhidrato de L-lisina; de aproximadamente 0.1 g a aproximadamente 1.5 g de ácido ascórbico; de aproximadamente 0.2 g a aproximadamente 0.8 g de hesperidina; de aproximadamente 0.1 g a aproximadamente 0.5 g rutina; de aproximadamente 0.04 g a aproximadamente 0.08 g de clorhidrato de piridoxina; de aproximadamente 0.01 g a aproximadamente 0.08 g de treonina; y de aproximadamente 0.02 g a aproximadamente 0.4 g de taurina. En otro aspecto específico, la composición comprende adicionalmente de aproximadamente 0.5 g a aproximadamente 0.75 g de ascorbato de calcio; de aproximadamente 0.1 g a aproximadamente 0.5 g de ascorbato de niacinamida; y de aproximadamente 0.01 g a aproximadamente 0.1 g de palmitato de ascorbilo. En otro aspecto específico, una dosis individual de la composición comprende de aproximadamente 3 g de monoclorhidrato de L-lisina; de aproximadamente 0.2 g a aproximadamente 1.0 g de ácido ascórbico; aproximadamente 0.3 g de hesperidina; aproximadamente 0.3 g de rutina; aproximadamente 0.05 g de clorhidrato de piridoxina; aproximadamente 0.05 g de treonina; y de aproximadamente 0.02 g a aproximadamente

0.3 g de taurina. En un aspecto específico adicional, una dosis individual de la composición comprende adicionalmente aproximadamente 0.6 g de ascorbato de calcio; 0.3 g de ascorbato de niacinamida, y aproximadamente 0.05 g de palmitato de ascorbilo.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 muestra un gráfico de concentración (uM)/respuesta para la inhibición in vitro de la infección por influenza A de células Vero cuando se trata con diversas formulaciones en un ensayo de ADN de cadena ramificada (ADNb) de sobrenadantes de células infectadas como se describe en el Ejemplo 2. Los datos representan la media (n= 3) para cada punto de datos, pero las barras de error se han omitido para claridad.

La figura 2 muestra un gráfico de concentración (uM)/respuesta para la inhibición in vitro de la infección por influenza A de células Vero cuando se tratan con diversas formulaciones en un ensayo de ADNb como se describe en el Ejemplo 2. Los datos representan la media (n= 3) para cada punto de datos; las barras de error representan el error estándar de la media (SEM).

La Figura 3 muestra la inhibición de la neuraminidasa de sobrenadantes de células Vero infectadas por influenza A in vitro mediante diversas formulaciones en el ensayo Amplex Red Neuraminidase como se describe en el Ejemplo

3. Los datos representan la media (n= 3) para cada punto de datos, pero las barras de error han sido omitidas para claridad.

La Figura 4 muestra la inhibición de la neuraminidasa de sobrenadantes de células Vero infectadas por influenza A in vitro mediante dos formulaciones en el ensayo Amplex Red Neuraminidase como se describe en el Ejemplo 3. Los datos representan la media (n= 3) para cada punto de datos; las barras de error representan el error estándar de la media (SEM).

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La Figura 5 muestra la inhibición de expresión de la metaloproteinasa de matriz 9 (MMP-9) en células Vero infectadas por la influenza A por diversas formulaciones (uM) como se describe en el Ejemplo 4. Los datos representan la media (n= 3) para cada punto de datos, pero las barras de error se han omitido para claridad.

La Figura 6 muestra la inhibición de expresión de la metaloproteinasa de matriz 9 (MMP-9) en células Vero infectadas por la influenza A por dos formulaciones como se describe en el Ejemplo 4. Los datos representan la media (n= 3) para cada punto de datos; las barras de error representan el error estándar de la media (SEM).

La Figura 7 muestra una tabla (Tabla 4) de diversas composiciones probadas en el ensayo de Neuraminidasa.

La Figura 8 muestra un gráfico de la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por virus de la influenza humana después de la exposición a carboxilato de oseltamivir, Fórmula V y diez composiciones de prueba de la Tabla 4 que contiene diversos componentes de Fórmula V.

La Figura 9 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición a carboxilato de oseltamivir, Fórmula V y, o bien lisina sola (1) o lisina con ácido ascórbico/ascorbatos (1/2; 9A).

La Figura 10 muestra la actividad de la neuraminidasa de células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición a carboxilato de oseltamivir, Fórmula V y, o bien lisina/ascorbatos /glicósidos flavonoides (1/2/3; 10A) o lisina/ascorbatos/piridoxina (1/2/4; 10B).

La Figura 11 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición a carboxilato de oseltamivir, Fórmula V y, o bien lisina/ascorbatos/treonina (1/2/5; 11A) o lisina/ascorbatos/taurina (1/2/6; 11B).

La Figura 12 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición a carboxilato de oseltamivir, Fórmula V y, o bien lisina/ascorbatos/HCl de piridoxina/treonina (1/2/4/5; 12A) o lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides/treonina (1/2/3/5; 12B).

La Figura 13 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición a carboxilato de oseltamivir, Fórmula V y, o bien lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides/HCl de piridoxina/treonina (1/2/3/4/5; 13A) o lisina/ácido ascórbico/glicósidos flavonoides/HCl de piridoxina/treonina/taurina (1/2/3/4/5/6; 13B).

Descripción detallada

La divulgación provee un uso novedoso de una composición antiviral de suplemento antiviral que comprende una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una treonina, taurina y un piridoxina. La divulgación provee una composición en la forma de polvo, cápsula, tableta, pastilla, trocillo, líquido, o capsuleta. Una realización específica divulga conocer un polvo que comprende lisina, ácido ascórbico, glicósidos flavonoides, clorhidrato de piridoxina, taurina, y treonina.

El término "paciente" o "sujeto" tal como se utiliza aquí, se refiere a un animal, por ejemplo un mamífero, tal como un humano, que es el objeto del tratamiento. El sujeto, o el paciente, pueden ser hombre o mujer.

El término "aproximadamente" tal como se utiliza aquí, se refiere a un rango numérico que es de +/-10% de la cantidad dada. Por ejemplo, el término "aproximadamente 50%" se refiere de 45% a 55%, y "aproximadamente 100 mg" se refiere de 90 mg a 110 mg.

El término "virus" que se utiliza aquí se refiere a cualquiera de un gran grupo de agentes submicroscópicas que consisten de un segmento de ADN o ARN rodeado por una capa de proteína. Los virus de influenza y los enterovirus son virus ARN. El virus es un parásito que necesita una célula anfitriona para replicarse. Puesto que los virus son incapaces de replicarse sin una célula anfitriona, no se consideran organismos vivientes en los sistemas taxonómicos convencionales. Son descritos como "vivos" cuando son capaces de replicarse y causar enfermedad. De acuerdo con lo anterior, el término "actividad viral" se refiere a cualquier estado de ser activo o cualquier acción o movimiento o animación energéticos de un virus. De acuerdo con lo anterior, el término " replicación viral" se refiere a cualquier proceso por el cual los materiales genéticos, un organismo unicelular, o un virus se reproducen o hacen una copia de sí mismos.

El término "Neuraminidasa" tal como se utiliza aquí, se refiere a una proteína neuraminidasa viral que actúa como una enzima hidrolítica que elimina el ácido siálico de las mucoproteínas y se encuentra principalmente en los microorganismos de los tractos respiratorios e intestinales. La neuraminidasa rompe los enlaces que mantienen nuevas partículas de virus en el exterior de una célula infectada. Una vez que la enzima rompe estos enlaces, esto establece nuevos virus libres que pueden infectar a otras células y propagar la infección.

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El término "inhibidor de la neuraminidasa" (NAI), tal como se usa aquí, se refiere a un fármaco o formulación que bloquea la función de la proteína neuraminidasa y por lo tanto previene que sean liberadas nuevas partículas del virus, limitando por lo tanto la propagación de la infección. Los NAI específicos incluyen oseltamivir, zanamivir, laninamivir y peramivir.

El término "células Vero" tal como se utiliza aquí, se refiere a la línea celular de riñón de mono verde africano el cual es un sistema adecuado para el aislamiento primario y el cultivo de virus de influenza A. También se sabe que las células Vero son adecuados para el aislamiento y replicación productiva del virus de influenza B.

El término "infección" tal como se utiliza aquí, se refiere a la presencia de un virus en o sobre un sujeto, el cual, si la replicación del virus fue retardada o si la actividad del virus fue reducida, daría como resultado un beneficio para el sujeto. De acuerdo con lo anterior, el término "infección" se refiere a la presencia de patógenos en cualquier sitio anatómico de un humano o animal.

El término "tratar" tal como se usa aquí, se refiere a la administración de un compuesto o composición a un sujeto para fines terapéuticos. El término "administración" incluye el suministro a un sujeto mediante cualquier método apropiado que sirva para suministrar el fármaco al sitio de la infección. La administración del fármaco puede ser oral, nasal, parental, tópica, oftálmica, o administración transdérmica o suministrar en la forma de polvo sólido, semisólido liofilizado, o formas de dosificación líquidas. Las formas de dosificación incluyen tabletas, cápsulas, trocillos, polvos, soluciones, suspensiones, supositorios, o similares, preferiblemente en formas de dosificación unitaria adecuadas para la administración sencilla de las dosificaciones precisas.

El término "suplemento antiviral" tal como se utiliza aquí incluye cualquier composición utilizada específicamente para el tratamiento o profilaxis de infecciones virales, particularmente virus de la influenza o infecciones por enterovirus no polio. Las composiciones de la divulgación pueden ser evaluadas en un aspecto mediante diversos ensayos de la neuraminidasa. En otro aspecto, las composiciones de la divulgación pueden ser evaluadas por retardar el crecimiento y la reproducción de los virus en un ensayo basado en células. En otro aspecto, las composiciones de la divulgación pueden ser evaluadas por la disminución de la duración de una infección viral en un paciente. En otro aspecto, las composiciones de la divulgación pueden ser evaluadas por la disminución de la severidad o duración de los síntomas de una infección viral en un paciente.

Tal como se utiliza aquí, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que retienen la efectividad biológica y las propiedades del ingrediente activo de la composición bioquímica, que no son de otra manera indeseables. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de sodio, potasio, calcio, magnesio, aluminio y similares.

Tal como se utiliza aquí, el término "una cantidad efectiva" se refiere a que una cantidad de una composición de la divulgación que cuando es administrada a un sujeto individual en necesidad del mismo, es suficiente para reducir la actividad y/o crecimiento del virus potenciando por lo tanto la actividad antiviral.

Tal como se utiliza aquí, el término "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a una cantidad de una composición de la divulgación que cuando se administra a un sujeto humano en necesidad del mismo, es suficiente para efectuar el tratamiento o la profilaxis para la infección por virus de la influenza, o infección por enterovirus no polio. La cantidad que es terapéuticamente efectiva dependerá del tamaño y género del paciente, la etapa y la severidad de la infección y el resultado buscado. Para un paciente y condición dada, una cantidad terapéuticamente efectiva puede ser determinada por métodos conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, en referencia al tratamiento de una infección por el virus de la influenza usando las composiciones de la presente invención, una cantidad terapéuticamente efectiva se refiere a aquella cantidad de la composición que tiene el efecto de (1) reducir el esparcimiento del virus, (2) reducir la duración de la infección, (3) reducir la inefectividad y/o, (4) reducir la severidad (o, preferiblemente, eliminar) de uno o más de otros síntomas asociados con la infección tales como, por ejemplo, fiebre, dolor de cabeza, fatiga, tos seca, dolor de garganta, dolores musculares, conjuntivitis, secreción nasal y/o congestión nasal. Tal dosis efectiva dependerá generalmente de los factores descritos más arriba. Una dosis profilácticamente efectiva es una que reduce la probabilidad de poner en contacto una infección por el virus de la influenza, o una infección por enterovirus no polio. Una dosis profilácticamente efectiva es de aproximadamente 20% a aproximadamente 100%, preferiblemente de aproximadamente 40% a aproximadamente 60%, de una dosis terapéuticamente efectiva.

En un aspecto, la administración es administración oral. Generalmente, una dosis terapéuticamente efectiva es no menos de aproximadamente 10% y no más de aproximadamente 200% de las cantidades de los ingredientes individuales listados en la Tabla 1. En ciertos aspectos, una dosis terapéuticamente efectiva para el tratamiento de una infección viral es de aproximadamente 50% a aproximadamente 150%, o de aproximadamente 80% a aproximadamente 120%, o aproximadamente 100% idéntica a la lista de componentes en la Tabla 1. En otro aspecto, una dosis terapéuticamente efectiva para el tratamiento de una infección viral en un sujeto en necesidad del mismo es administrada cada 4 a 6 horas de vigilia, o de aproximadamente dos a seis veces por día. En un aspecto adicional, una dosis terapéuticamente efectiva para la profilaxis de una infección viral en un sujeto en necesidad de la misma es administrada cada 8 a 12 horas de vigilia, o de aproximadamente una a tres veces por día.

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El término "vehículo farmacéuticamente aceptable" tal como se usa aquí significa un material, composición o vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como un agente de relleno líquido o sólido, diluyente, excipiente, solvente

o material encapsulante, involucrado en llevar o transportar las composiciones de la invención a partir de un órgano,

o porción del cuerpo, a otro órgano, o porción del cuerpo sin afectar su efecto biológico. Cada vehículo debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la composición y no ser perjudicial para el sujeto.

Los síntomas de la influenza pueden incluir fiebre, dolor de cabeza, fatiga, tos seca, dolor de garganta, dolores musculares, secreción nasal y/o congestión nasal. También se pueden presentar síntomas gastrointestinales tales como náuseas, vómitos y diarrea, pero son más comunes en niños que en adultos.

Los síntomas de los enterovirus no polio incluyen fiebre, dolores musculares, síntomas del tracto respiratorio superior, cansancio y enfermedad similar a la gripe con irritación.

Los virus se propagan de persona a persona, primariamente a través de la tos o estornudando. Las personas también pueden ser infectadas por el contacto con superficies u objetos contaminados, y luego tocándose la boca o la nariz. La mayoría de los adultos sanos pueden ser capaces de infectar a otros comenzando aproximadamente un día antes de desarrollar síntomas y hasta cinco días después de enfermarse.

Los virus de influenza son dinámicos y están evolucionando constantemente. Los virus de influenza pueden cambiar de dos maneras diferentes: la deriva antigénica y el desplazamiento antigénico. Los virus de influenza cambian constantemente por la deriva antigénica, pero el desplazamiento antigénico se produce sólo ocasionalmente. Los virus de la influenza tipo A sufren ambos tipos de cambios; los virus de influenza tipo B cambian solamente por el proceso más gradual de la deriva antigénica. La deriva antigénica se refiere a cambios pequeños y graduales que se presentan a través de mutaciones puntuales en los dos genes que contienen el material genético para producir las principales proteínas de superficie, la hemaglutinina, y la neuraminidasa. Estas mutaciones puntuales se presentan de forma impredecible y dan como resultado cambios menores en estas proteínas de superficie. La deriva antigénica produce nuevas cepas de virus que no pueden ser reconocidas por anticuerpos para las cepas de influenza anteriores.

Los humanos pueden ser infectados con virus de influenza tipos A, B y C. Influenza A, B, y C son responsables de la producción de 306 virus de influenza humana. Los subtipos de la influenza A que actualmente están circulando entre las personas en todo el mundo incluyen los virus H1N1, H1N2, y H3N2.

Con base en la experiencia global hasta la fecha, los virus de la influenza H1N1 de 2009 serán probablemente los virus de la influenza más comunes entre aquellos que circularán en la próxima temporada de gripe, particularmente aquellos que causan la influenza entre los grupos de edad más jóvenes. (CDC "Updated Interim Recommendations for the Use of Antiviral Medications in the Treatment and Prevention of Influenza for the 2009-2010 Season, September 22, 2009, http://www.cdc.gov/hlnlflu/ recommendations.htm)

Las aves silvestres son un anfitrión natural para los subtipos conocidos de los virus de influenza A. Típicamente, las aves silvestres no se enferman cuando están infectadas con el virus de la influenza aviar A. Sin embargo, las aves de corral pueden enfermarse mucho y morir a causa de la gripe aviar.

Los virus de influenza tipo A se dividen en subtipos y se nombran sobre la base de dos proteínas en la superficie del virus: la hemaglutinina (HA) y la neuraminidasa (NA). Hay 16 subtipos conocidos de HA y 9 subtipos conocidos de NA. Son posibles muchas combinaciones diferentes de proteínas HA y NA. Solamente algunos subtipos de influenza A (esto es, la "gripe española" H1N1 o la "gripe porcina", H1N2, y la "gripe de Hong Kong" H3N2) se encuentran actualmente en circulación general entre las personas. Solamente los virus de la influenza A infectan a las aves, y todos los subtipos conocidos de los virus de la influenza A pueden infectar a las aves. Sin embargo, hay diferencias genéticas sustanciales entre los subtipos de influenza A que típicamente infectan a las aves y aquellos que infectan tanto a las personas como a las aves. Se conoce que tres subtipos prominentes de los virus de la influenza A aviares infectan tanto a las aves como a las personas.

La influenza A H7 incluye varios subtipos. La infección por H7 en humanos es rara, pero puede presentarse en personas que tienen contacto directo con aves infectadas. Los síntomas pueden incluir conjuntivitis y/o síntomas respiratorios superiores. Los virus de H7 han sido asociadas con la LPAI (por ejemplo, H7N2, H7N7) y la HPAI (por ejemplo, H7N3, H7N7), y han causado una enfermedad desde leve hasta severa y fatal en los humanos.

La Influenza A H5 incluye varios subtipos conocidos, incluyendo la altamente patógena H5N1. Una cepa de H5N1 adaptada a una ave es llamada HPAI H5N1 (virus de la influenza aviar altamente patógena de tipo A del subtipo H5N1), conocido comúnmente como "influenza aviar" o "gripe aviar". Los virus de IAAP H5N1 están circulando actualmente en Asia y Europa y pueden causar enfermedades severas o la muerte. La IAAP H5N1 es considerada una potencial arma biológica agrícola. La Influenza H5N1 aviar de baja patogenicidad (LPAI H5N1), también llamada la H5N1 de "América del Norte", se presenta en las aves silvestres y causa enfermedad leve o de signos no

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evidentes en las aves y no se sabe que afecte a los seres humanos, pero es posible que sea trasmitido a las aves de corral y posiblemente mutar a una cepa altamente patogénica.

La influenza A aviar de baja patogenicidad (H9N2) fue confirmada en 1999. Se conocen varios subtipos potenciales de H9; sin embargo, la influenza A H9 rara vez se ha reportado por infectar a los humanos. Este subtipo ha sido documentado solamente en una forma de baja patogenicidad.

Los virus de influenza B se encuentran usualmente sólo en los humanos. A diferencia de los virus de la influenza A, estos virus no están clasificados de acuerdo con subtipos. Los virus de influenza B pueden causar morbilidad y mortalidad entre los humanos, pero en general están asociados con epidemias menos severas que los virus de la influenza A. Aunque los virus de la influenza tipo B pueden causar epidemias humanas, no han causado pandemias.

Los virus de influenza tipo C causan enfermedad leve en los humanos y no causan epidemias o pandemias. Estos virus no están clasificados de acuerdo con subtipos.

Los virus de influenza B y subtipos de virus de influenza A están caracterizados adicionalmente en cepas. Hay muchas cepas diferentes de virus de la influenza B y de subtipos de influenza A. Nuevas cepas de virus de la influenza aparecen y reemplazan a las cepas más viejas. Este proceso se produce a través de la deriva antigénica. Cuando surge una nueva cepa del virus de la influenza humana, la protección de anticuerpos que puede haber sido desarrollada después de la infección o la vacunación con una cepa más vieja, no puede proveer protección contra la nueva cepa.

La evidencia de que la influenza puede ser más severa en mujeres embarazadas está disponible a partir de observaciones durante las pandemias anteriores y de los estudios entre mujeres embarazadas que tenían influenza estacional. Se registró un exceso de muertes asociadas a la influenza entre mujeres embarazadas durante las pandemias de 1918-1919 y 1957-1958. Se han reportado resultados adversos de embarazo después de las pandemias de influenza anteriores, con ratas incrementadas de abortos espontáneos y parto prematuro reportados, especialmente entre mujeres con neumonía (http:// www.cdc.gov/H1Nlflu/clinician_pregnant.htm, June 30, 2009). Mujeres embarazadas y de hasta 2 semanas después del parto son consideradas en mayor riesgo de complicaciones de infección por influenza.

El oseltamivir, zanamivir, amantadina y rimantidina son medicaciones de "Embarazo Categoría C" lo que indica que no se han realizado estudios para evaluar la seguridad de estos fármacos en mujeres embarazadas. Se han reportado casos limitados de uso de amantadina para la enfermedad de la influenza severa durante el tercer trimestre. Sin embargo, se ha demostrado en estudios con animales que tanto la amantadina como la rimantadina son teratogénicas y embriotóxicas cuando son administradas en dosis sustancialmente altas. Debido a los efectos desconocidos de fármacos antivirales para la influenza en las mujeres embarazadas y sus fetos, estos cuatro fármacos deberían ser utilizados durante el embarazo solamente si el beneficio potencial justifica el riesgo potencial para el embrión o el feto (Prevention & Control of Influenza -Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) 2004. MMWR 2004 May 28; 53(RR06);1-40). No obstante, el CDC establece que los datos de riesgo-beneficio disponibles indican que las mujeres embarazadas con influenza presunta o confirmada deben recibir de forma inmediata tratamiento antiviral.

Las metaloproteinasas de matriz (MMP) son enzimas de proteínas involucradas en la ruptura de la matriz extracelular en procesos fisiológicos normales tales como la remodelación de tejidos, la reproducción y el desarrollo embrionario. Las MMP son enzimas importantes en la remodelación de tejidos, un evento clave para el desarrollo de las membranas fetales y la placenta y el establecimiento de la interfase materno-fetal durante el embarazo temprano. La mayoría de las MMP se secretan como proteínas inactivas que se activan cuando se escinden por proteinasas extracelulares. La MMP-2 (colagenasa tipo IV de 72 kDa) y la MMP-9 (gelatinasa B, colagenasa tipo IV de 92 Kd) son efectores clave en la remodelación de la matriz extracelular. Los estudios indican que la MMP-2 y la MMP-9 están presentes en el líquido celómico extra-embrionario del primer trimestre y en el líquido amniótico en todas las gestaciones. La proteína activada de MMP predominante es la forma latente de la MMP-2 que se encuentra presente en concentraciones crecientes en el líquido amniótico desde el primero hasta el segundo trimestre ((Riley et al., Secretion of matrix metalloproteinase-2, matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinases into the intrauterine compartments during early pregnancy. Molecul. Human Reprod. 5(4): 676381 (1999)). El Tamiflu® inhibe la expresión de MMP-9, como se muestra en la Figura 5, que puede contribuir a un riesgo incrementado en el embarazo.

En una realización, las composiciones de la divulgación inhiben sólo débilmente la expresión de MMP-9, que puede dar como resultado una mayor seguridad en el tratamiento de la influenza en mujeres embarazadas. Los datos se muestran en las Figuras 5 y 6. En otra realización, como se discute en el Ejemplo 5, se ha demostrado que las composiciones de la divulgación muestran inhibición no significativa de la expresión de MMP-2, lo que puede dar como resultado una mayor seguridad en el tratamiento de la influenza en mujeres embarazadas.

Los enterovirus son pequeños virus que están hechos de ácido ribonucleico (ARN) y proteínas. Este grupo incluye a los poliovirus, virus de Coxsackie, ecovirus y otros enterovirus. Hay 62 enterovirus no polio que pueden causar

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enfermedades en los seres humanos: 23 virus Coxsackie A, 6 virus de Coxsackie B y 28 ecovirus y otros 5 enterovirus.

Los enterovirus no polio son muy comunes y solamente superados por el virus del "resfriado común", llamado el rinovirus, como el agente infeccioso viral más común en los humanos. Todo el mundo sin inmunidad a un enterovirus específico está en riesgo de infección. Los brotes de enterovirus comúnmente ocurren durante el verano hasta el otoño.

La presente divulgación se desarrolló basándose en el reconocimiento de que una combinación de los suplementos de L-lisina y ácido ascórbico es algo efectiva en la reducción de la replicación viral y la reducción de la infección viral. En una realización, la divulgación provee una composición de suplemento antiviral la cual sorprendentemente, reduce adicionalmente la replicación viral e inhibe la infección viral. Específicamente, la divulgación provee una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de suplemento antiviral para uso en el tratamiento o profilaxis de una infección por influenza A, influenza B, influenza C o por enterovirus no polio en un sujeto en necesidad del mismo, comprendiendo dicha composición una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una piridoxina, taurina y treonina que se ha encontrado que han mejorado significativamente las propiedades antivirales.

En otra realización, la divulgación provee un método para reducir la severidad y duración de los síntomas de una infección por influenza en un humano mediante la administración de la composición. En esta realización, las composiciones se toman en los primeros signos de enfermedad similar a la gripe. En un aspecto, la composición es administrada cada seis horas de vigilia con agua hasta que se resuelven los síntomas. En otro aspecto, las composiciones son administradas aproximadamente cada cuatro horas después de que aparecen los primeros síntomas. En otro aspecto, la composición es administrada dos veces al día hasta que se resuelvan los síntomas.

En otra realización, la composición de la presente divulgación reduce la infección viral de influenza de las células. En un aspecto, las composiciones actúan como inhibidores de la neuraminidasa. En otro aspecto, las composiciones de la presente divulgación inhiben débilmente expresión in vitro de MMP-9.

Se sabe que la vitamina C (ácido ascórbico) es necesaria para la buena salud general en los humanos. Los humanos carecen de los mecanismos bioquímicos para sintetizar la vitamina C, por lo que deben ser suministrados en la dieta en forma de alimento o suplemento. Englard, S. and Steifter, S. "The Biochemical functions of Ascorbic Acid," Ann. Rev. Nutr. 1986. Excepto donde están presentes los errores innatos del metabolismo, tales como la cistinuria, oxalosis, y la hiperuricemia, se sabe que la vitamina C se puede tomar en megadosis sin efectos colaterales tóxicos. Véase Stanbury, J. B., Wyngaarden, J. B., Fredrickson, D. S., 1972, The metabolic basis of inherited disease. 3rd ed. McGraw Hill.

La vitamina C apoya la función del sistema inmune humano. Se cree que la vitamina C estimula el sistema inmune humano potenciando la síntesis de interferón y la actividad de linfocitos, en particular la clase de linfocitos denominada como las células asesinas naturales (NK). Sigel, B. V. & Morton, J. I. "Vitamin C and Immunity: Natural Killer (NK) cell factor" Int. J. Vitamin & Nutrition Res. 1983, 53:179-183; Lovzova, E., Savary, C. A., & Heberman, R.

B. "Induction of NK cells activity against fresh human leukemia in culture with interlukin 2" J. Immunology 1987, 138:2718-2727. Las células asesinas naturales son linfocitos que matan de forma espontánea células tumorales o infectadas por virus. Números reducidos de las células NK circulantes se han relacionado con el desarrollo y la progresión de diversas inmunodeficiencias, infecciones virales, el SIDA y el cáncer. También se cree que la vitamina C provee beneficios adicionales al actuar como un antioxidante ayudando al sistema inmune mediante la reducción de la cantidad de daño del radical libre que puede presentarse como resultado del metabolismo normal del cuerpo, así como a partir de fuentes exógenas.

Estudios han demostrado que la suplementación con vitamina C (por ejemplo, 500 mg/día) incrementa las concentraciones plasmáticas de glutationa. Johnston et al. "Vitamin C Elevates Red Blood Cell Glutathione in Healthy Adults" Am. J. Clin. Nutr. 1993, 58:103-105. Algunos datos sugieren que el glutationa antioxidante de tiol (GSH) tiene una actividad antiinfluenza in vitro e in vivo. El estrés oxidativo u otras condiciones que agotan el GSH en el epitelio de la vía oral, nasal, y las vías respiratorias superiores pueden, por lo tanto, potenciar la susceptibilidad a la infección por influenza.

Se sabe que la infección por el virus de ARN induce estrés oxidativo en las células anfitrionas. La evidencia acumulada sugiere que el estado rédox celular juega un papel importante en la regulación de la replicación y de la inefectividad viral. Algunos datos sugieren que el GSH antioxidante de tiol tiene una actividad anti-influenza in vitro e in vivo. Específicamente, se realizaron experimentos para determinar si el glutationa antioxidante de tiol (GSH) bloqueó la infección viral de la influenza en cultivos de células de riñón canino Madin-Darby o células epiteliales pequeñas de las vías respiratorias humanas. La protección contra la producción de partículas de virus activos se observó a una baja (0.05-0.1) multiplicidad de infección (MOI). Cai et al. 2003, Inhibition of influenza infection by glutathione. Free Rad. Biol. And Med. 34 (7): 928-936. También se encontró que el GSH inhibe la expresión de proteína de la matriz viral e inhibe de forma viral inducida la activación de la caspasa y la subregulación Fas. Juntos, los datos sugieren que el glutationa antioxidante de tiol (GSH) tiene una actividad anti-influenza in vitro e in vivo. El

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estrés oxidativo u otras condiciones que agotan GSH en el epitelio de las vías oral, nasal, y las vías respiratorias superiores pueden, por lo tanto, potenciar la susceptibilidad a la infección por influenza.

En una realización, las composiciones de la presente divulgación comprenden la vitamina C como una o más formas de ácido ascórbico, éster de ascorbilo o sal de ascorbato; juntos denominados compuestos ascórbico. En un aspecto, el uno o más compuestos ascórbicos se seleccionan de cualquier forma biológicamente aceptable de un ácido ascórbico, éster de ascorbilo o ascorbato incluyendo cualquiera o ambas formas solubles en agua y solubles en grasa. La forma soluble en agua de ácido ascórbico se puede seleccionar del grupo que consiste en ácido ascórbico, una sal de ion metálico mono o divalente sal biológicamente aceptable de ácido ascórbico y ascorbato de niacinamida, y mezclas de los mismos. Sales de iones metálicos adecuados de ácido ascórbico son las seleccionadas del grupo que consiste de ascorbato de calcio; ascorbato de magnesio; ascorbato de potasio; y ascorbato de sodio, bien sea solos o alguna mezcla de los mismos. Otras formas solubles en agua pueden incluir ascorbato de manganeso; ascorbato de zinc; ascorbato de hierro; ascorbato de cobre; ascorbato de boro; ascorbato de molibdeno; y ascorbato de cromo. Los ésteres de ascorbilo solubles en grasa comprenden preferiblemente ésteres de ácidos grasos de ácidos carboxílicos saturados o insaturados con palmitato de ascorbilo siendo una forma preferida. Otros ésteres solubles en grasa del ácido ascórbico que se prefieren incluyen: palmitato de ascorbilo; araquidonato de ascorbilo; estearato de ascorbilo; linoleato de ascorbilo; linoleneato de ascorbilo; y oleato de ascorbilo.

En un aspecto, la composición comprende desde aproximadamente 15% hasta aproximadamente 35% en peso, preferiblemente desde aproximadamente 20% hasta aproximadamente 30% en peso combinado de uno o más compuestos ascórbico, o equivalentes. En un aspecto específico, la composición comprende aproximadamente 25% en peso de ácido ascórbico, ascorbato de calcio, ascorbato de niacinamida, y palmitato de ascorbilo combinados. En otro aspecto, la composición comprende aproximadamente 0.5 a aproximadamente 2.0 g, preferiblemente aproximadamente 0.5 g a aproximadamente 1.5 g de peso combinado de uno o más compuestos ascórbicos por dosis. En un aspecto, ciertas composiciones comprenden aproximadamente 0.1 g a aproximadamente 1.5 g de ácido ascórbico por dosis. En otro aspecto, ciertas composiciones de la divulgación comprenden desde aproximadamente 0.5 g hasta aproximadamente 0.75 g de ascorbato de calcio por dosis. En un aspecto adicional, ciertas composiciones de la divulgación comprenden desde aproximadamente 0.1 g hasta aproximadamente 0.5 g de ascorbato de niacinamida por dosis. En otro aspecto, ciertas composiciones de la divulgación comprenden desde aproximadamente 0.01 g hasta aproximadamente 0.1 g de palmitato de ascorbilo por dosis.

La lisina es uno de los aminoácidos esenciales que se encuentran en las proteínas. Es necesario para el crecimiento adecuado de los niños y para el mantenimiento del balance de nitrógeno en los adultos. La L-lisina se metaboliza en mamíferos para dar acetil-CoA por una transaminación inicial con alfa-cetoglutarato. La lisina es esencial para la síntesis de proteínas en el cuerpo. La L-lisina desempeña un papel en la absorción de calcio, la construcción de la proteína muscular, la recuperación de una lesión, y la producción de hormonas, enzimas y anticuerpos del cuerpo. La L-lisina se sabe que se utiliza para tratar lesiones en la boca y los genitales causadas por el virus del herpes simplex, así como el herpes causado por el virus herpes zoster. Tomar suplementos de lisina puede acelerar el tiempo de recuperación y reducir la oportunidad de brotes recurrentes de la infección por el virus del herpes. Dosis de lisina generales para el tratamiento de los síntomas de la infección por el virus del herpes incluyen dosis orales divididas de aproximadamente 3 g a aproximadamente 9 g por día. Los suplementos de lisina se consideran generalmente seguros y no tóxicos. Se sugiere aproximadamente de 0.5 g a aproximadamente 1.5 g por día de lisina para prevenir las recurrencias de brotes. Griffith et al. Success of L-lysine therapy in frequently recurrent herpes simplex infection. Treatment and prophylaxis. Dermatologica. 1987;175(4):183-190. Las proteínas del virus del herpes simplex son ricas en L-arginina y los estudios de cultivo de tejidos han demostrado que cuando la relación de L-lisina a L-arginina es alta, se ha encontrado que la replicación viral y la citopatogenicidad del virus herpes simplex son inhibidas.

En una realización, las composiciones de la presente divulgación comprenden lisina. El término lisina se refiere a cualquier forma farmacéuticamente aceptable incluyendo una sal de L-lisina que incluye clorhidrato de lisina, dihidrocloruro de lisina, succinato de lisina, glutamato lisina, orotato de lisina, así como L-lisina. Otras formas aceptables de lisina incluyen derivados de lisina tales como acetato de lisina. En un aspecto, la composición comprende desde aproximadamente 40% hasta aproximadamente 80% en peso, preferiblemente desde aproximadamente 50% hasta aproximadamente 70% en peso de clorhidrato de L-lisina, o equivalente. En un aspecto específico, la composición comprende aproximadamente 60% en peso de clorhidrato de L-lisina. En un aspecto, las composiciones de la divulgación comprenden un rango de dosis individual de aproximadamente 1,000 mg a aproximadamente 5,000 mg, preferiblemente de aproximadamente 2,000 a aproximadamente 3,500 mg.

Los flavonoides son una gran familia de compuestos sintetizados por las plantas que tienen una estructura química común. Los flavonoides se dividen adicionalmente en subclases basados en la estructura química. Los flavonoides se encuentran en frutas y vegetales en la dieta. Los flavonoides conectados a una o más moléculas de azúcar son conocidos como glicósidos flavonoides, mientras que los que no están conectados a una molécula de azúcar son llamados agliconas. Con la excepción de flavanoles (catequinas y proantocianidinas), los flavonoides se presentan en las plantas y en la mayoría de los alimentos como glicósidos. Incluso después de la cocción, la mayoría de los glicósidos flavonoides alcanzan al intestino delgado intactos. Sólo agliconas de flavonoides y glicósidos flavonoides

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(unidos a la glucosa) se absorben en el intestino delgado, donde se metabolizan rápidamente para formar metabolitos metilados, glucuronidatados, o sulfatados. La capacidad de los flavonoides para quelar iones (unión) de metal parece contribuir a su actividad antioxidante in vitro. Aunque inicialmente se planteó la hipótesis de que los efectos biológicos de los flavonoides estarían relacionados con su actividad antioxidante, la evidencia disponible a partir de experimentos de cultivo celular sugiere que muchos de los efectos biológicos de los flavonoides están relacionados con su capacidad para modular las rutas de señalización celular (Williams et al., Flavonoids: antioxidants or signalling molecules? Free Radic. Biol. Med.;36(7):838-849 (2004)).

En un aspecto, las composiciones de la presente divulgación comprenden uno o más glicósidos flavonoides. Los glicósidos flavonoides pueden incluir cualquier flavonoide que está glicosilada. En un aspecto específico, las composiciones comprenden uno o más glicósidos flavonoides seleccionados de la hesperidina, rutina, naringina, y quercitrina. En un aspecto específico, las composiciones comprenden hesperidina y rutina.

En un aspecto, la composición comprende desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 20% en peso, preferiblemente desde aproximadamente 10% hasta aproximadamente 15% en peso combinado de uno o más glicósidos flavonoide, o equivalentes. En un aspecto específico, la composición comprende aproximadamente 12% en peso de complejo de hesperidina combinado y/o rutina. En un aspecto, las composiciones comprenden aproximadamente desde aproximadamente 0.2 g hasta aproximadamente 0.8 g de hesperidina por dosis individual. En otro aspecto, las composiciones comprenden desde aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.5 g de rutina por dosis.

La treonina es un aminoácido esencial que es un bloque de construcción necesario para la proteína. Promueve el crecimiento del timo, una pequeña glándula que regula muchas de las hormonas y las células vitales para la defensa inmune. Incluso una reducción moderada en la ingesta dietaria de treonina puede producir una depresión en la respuesta inmune o producción de anticuerpos. Lotan. Humoral and cellular immune response in growing rats fed a 10% gluten diet. Isr. J. Med. Sci. 1989 Aug;25(8):437-41. La investigación reciente sugiere que los efectos de treonina se relacionan con un requerimiento específico por el timo para este aminoácido y su capacidad para promover las funciones de defensa inmunes celulares. Braverman, Threonine: The Immunity Booster, The Healing Nutrients Within, 2003; 13 pp:201. En una realización, las composiciones de la presente divulgación comprenden treonina. La treonina se puede seleccionar de L-treonina o cualquier sal o derivado farmacéuticamente aceptable.

En un aspecto específico, la treonina es L-treonina. En un aspecto, la composición comprende desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 5% en peso, preferiblemente desde aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 2% en peso de L-treonina, o equivalente. En un aspecto específico, la composición comprende aproximadamente 1% en peso de L-treonina. En un aspecto, las composiciones de la divulgación comprenden desde aproximadamente 0.01 hasta aproximadamente 0.08 g de treonina por dosis.

En una realización, las composiciones de la presente divulgación comprenden piridoxina. La piridoxina es una forma de vitamina B6. La piridoxina es utilizada por el hígado para sintetizar el fosfato de piridoxal (PLP), la forma de coenzima activa. El PLP es un cofactor para la enzima aldolasa treonina que cataliza la conversión de hidroxi-N-trimetil-L-lisina a trimetilaminobutiraldehído; intermediarios en la conversión de L-lisina a L-carnitina. La deficiencia de piridoxina se conoce por producir una reducción significativa en los niveles de carnitina en plasma. Absorption and Utilization of Amino Acids, Vol. II, Mendel Friedman, CRC Press, 1989, ISBN 0849360072, Ch. III, p. 48-49. La piridoxina es una vitamina B soluble en agua que sirve como un cofactor y está involucrada en el metabolismo de proteínas, carbohidratos, y la producción de insulina y las células rojas y blancas de la sangre. La vitamina B6 es esencial en numerosas rutas bioquímicas en el sistema inmune. La deficiencia de piridoxina conduce a un deterioro de las respuestas inmunes (Trakatellis et al., 1997, Pyridoxine deficiency: new approaches in immunosuppression and chemotherapy. Postgrad. Med. J. October; 73(864): 617-622 (1997)). La vitamina B6 es usualmente segura en la ingesta de hasta 200 mg al día en adultos.

En una realización, las composiciones de la presente divulgación comprenden piridoxina. En un aspecto específico, la piridoxina es clorhidrato de piridoxina. En un aspecto, la composición comprende desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 2% en peso, preferiblemente desde aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 1.5% en peso de clorhidrato de piridoxina, o equivalente. En un aspecto específico, la composición comprende aproximadamente 1% en peso de clorhidrato de piridoxina. En un aspecto, las composiciones de la divulgación comprenden desde aproximadamente 0.04 g hasta aproximadamente 0.08 g de clorhidrato de piridoxina por dosis.

En una realización, las composiciones de la presente divulgación comprenden taurina. La taurina o ácido 2aminoetanosulfónico, es un metabolito de aminoácido que contiene azufre, cisteína. La taurina es uno de los pocos ácidos sulfónicos de origen natural conocidos. Acciones metabólicas de taurina incluyen la conjugación de ácidos biliares, la desintoxicación, la estabilización de la membrana, osmorregulación, y la modulación de los niveles de calcio celulares. La taurina es capaz de cruzar la barrera sangre-cerebro. La taurina actúa como un antioxidante y protege contra la toxicidad de diversas sustancias (Green et al., Antioxidant role and subcellular location of hypotaurine and taurine in human neutrophils. Biochimica et biophysica acta Jan 23;1073(1):91-7 (1991)). También se sabe que la taurina juega un papel en el sistema inmune. Por ejemplo, la taurina interactúa con ácido hipocloroso, producido durante el "estallido oxidante" de los macrófagos estimulados, para producir cloramina taurina (TauCl).

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Este compuesto puede tener importantes propiedades inmunomoduladoras y puede ser responsable de las propiedades que han sido atribuidos antes a la taurina. Estudios in vitro han demostrado que un incremento en la concentración de taurina a partir de concentraciones fisiológica a suprafisiológicos no tiene ningún efecto sobre la producción de citoquinas proinflamatorias por células mononucleares de sangre periférica; sin embargo, la Tau-Cl modula la síntesis de citoquinas proinflamatorias, y por lo tanto puede jugar un papel en la iniciación y propagación de la respuesta inmune ((Chorazy et al., Taurine chloramine modulates cytokine production by human peripheral blood mononuclear cells. Amino Acids. 23:407-13 (2002)). La Tau-Cl inhibe la activación del factor nuclear kB y la capacidad de producción de citoquinas proinflamatorias, produciendo un efecto anti-inflamatorio ((Huxtable RJ., Taurine past, present, and future. Adv Exp Med Biol. 403:641-50 (1996)). Aunque el nivel máximo de seguridad de la taurina dietaria no se ha establecido, se han tolerado 0.9 a 1.4 gramos por día sin efectos adversos documentados (Braverman, Taurine: The Seizure Fighter, The Healing Nutrients Within, Basic Health Publications, Inc., Laguna Beach, California, Ch.8, pp: 132-133 (2003)).

En una realización, las composiciones de la presente divulgación comprenden una taurina, o una sal farmacológicamente aceptable o derivado de la misma. En un aspecto, la composición comprende desde aproximadamente 1% hasta aproximadamente 10% en peso, preferiblemente desde aproximadamente 2% hasta aproximadamente 6% en peso de taurina, o equivalente. En un aspecto específico, la composición comprende aproximadamente 4% en peso de taurina. En un aspecto, las composiciones de la divulgación comprenden desde aproximadamente 0.02 g hasta aproximadamente 0.4 g de taurina por dosis.

Las composiciones de la presente divulgación son composiciones orales. En una realización, la composición oral puede ser en la forma de un polvo, cápsula, tableta, pastilla, líquido, o capsuleta. El polvo puede ser utilizado en un relleno de la cápsula, o se vende en un paquete de dosis individual destinado a mezclarse con un alimento tal como salsa de manzana, o puede ser una formulación en polvo efervescente vendido en un paquete de dosis individual y prevista para suspensión en un líquido. En un aspecto, la cápsula, tableta, pastilla están pensadas para la ingestión por deglución. En otro aspecto, la tableta, cápsula, o pastilla es oralmente disgregable. En un aspecto, la tableta, cápsula, pastilla o trocillo es una composición de liberación lenta. En otro aspecto, la tableta, pastilla, trocillo o cápsula es una composición de liberación inmediata. En otro aspecto, la composición oral puede ser una bebida líquida previamente empacada, en donde la formulación se suspende en un líquido con sabor. En aspectos preferidos, la composición está en la forma de una tableta, una cápsula, o un polvo destinado a mezclar con un alimento, como salsa de manzana. Aunque las composiciones de la divulgación son primariamente formas orales, se han contemplado otros modos de administración tales como formas parenterales, o supositorios anales.

Las formas de tableta, cápsula, y capsulilla de la divulgación pueden comprender, aparte de los componentes especificados anteriormente, otros diversos aditivos, tales como vehículo, aglutinante, agente disgregante, lubricante, agente espesante, surfactante, regulador de presión osmótica, electrolito, endulzante, saborizante, perfume, pigmento, regulador de pH y otros apropiadamente según se requiera.

Específicamente, los aditivos incluyen almidones tales como almidón de trigo, almidón de patata, almidón de maíz, y dextrina, azúcares tales como sacarosa, glucosa, fructosa, maltosa, xilosa, y lactosa, alcoholes de azúcar tales como sorbitol, manitol, maltitol, y xilitol, glicósidos isotransposables tales como azúcar de acoplamiento y paratinosa, vehículos tales como fosfato de calcio y sulfato de calcio, aglutinantes y espesantes tales como almidón, azúcar, gelatina, goma arábiga, dextrina, metil celulosa, polivinil pirrolidona, alcohol polivinílico, hidroxi propil celulosa, goma de xantano, pectina, goma de tragacanto, caseína, y ácido algínico, lubricantes tales como leucina, isoleucina, valina, azúcar-éster, aceite endurecedor, ácido esteárico, estearato de magnesio, talco, y macrogol, agentes disgregantes tales como avicel, CMC, CMC-Na y CMC-Ca, surfactantes tales como polisorbato y lecitina, y endulzantes tales como azúcares, alcoholes de azúcar, aspartame, alitame, otros dipéptidos, stevia, y sacarina, y puede ser utilizado en cantidades apropiadas de forma selectiva en consideración de la relación con los componentes esenciales, la propiedad de la composición, método de fabricación, etc.

En otra realización, las composiciones de la divulgación pueden comprender además opcionalmente uno o más agentes saborizantes. El agente saborizante opcional se agrega para incrementar la aceptabilidad del paciente y cumplir con el programa de dosificación recomendado. Los agentes aromatizantes que pueden usarse incluyen aquellos sabores conocidos por el experto en la técnica, tales como sabores naturales y artificiales. Estos saborizantes pueden escogerse de aceites de sabor sintéticos y agentes aromáticos y/o aceites saborizantes, oleorresinas y extractos derivados de plantas, hojas, flores, frutas, y así sucesivamente, y combinaciones de los mismos. Aceites de sabor representativos no limitantes incluyen aceite de menta verde, aceite de canela, aceite de gaulteria (salicilato de metilo), aceite de menta, aceite de clavo, aceite de laurel, aceite de anís, aceite de eucalipto, aceite de tomillo, aceite de hoja de cedro, aceite de nuez moscada, pimienta de Jamaica, aceite de salvia, macís, aceite de almendras amargas, y aceite de casia. También son saborizantes útiles, sabores artificiales, naturales y sintéticos de frutas tales como vainilla y aceites cítricos incluyendo, sin limitación, limón, naranja, lima, toronja, y esencias de frutas incluyendo manzana, pera, melocotón, uva, fresa, frambuesa, cereza, ciruela, piña, albaricoque y así sucesivamente. Estos agentes saborizantes pueden usarse en forma líquida o sólida y pueden usarse individualmente o en mezcla. Sabores utilizados comúnmente incluyen mentas tales como yerbabuena, mentol, vainilla artificial, derivados de canela, y diversos sabores de frutas, ya sea empleados individualmente o en mezcla. Pueden ser utilizados otros saborizantes útiles incluyen aldehídos y ésteres tales como acetato de cinamilo,

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cinamaldehído, citral dietilacetal, acetato de dihidrocarvilo, formiato de eugenilo, p-metilamisol y así sucesivamente. En un aspecto específico, el saborizante es aceite de menta verde. El sabor está opcionalmente presente desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 5% en peso de la composición antiviral.

Las tabletas pueden ser tabletas moldeadas o tabletas comprimidas. Los comprimidos se pueden formar por granulación en húmedo, granulación en seco y compresión directa. Estas técnicas son conocidas por una persona de experiencia en la técnica y se describen, por ejemplo, en la United States Pharmacopeia National Formulary USP XXII, 1990, pp. 1696-1697. Pueden adicionarse otras diversas vitaminas a la composición. Las tabletas pueden comprender además opcionalmente aromas o endulzantes. En un aspecto, la tableta endulzada, saborizada se utiliza como una pastilla que se disuelve en la boca. Las composiciones de la divulgación también se pueden preparar en una forma masticable o una forma efervescente. Para las preparaciones efervescentes, el método de fabricación en la divulgación es básicamente el mismo que en el método de fabricación de las preparaciones efervescentes usuales tales como tabletas efervescentes. Es decir, los componentes se pesan, se mezclan y preparan directamente por el método de compresión de polvo, método de compresión granular en seco o en húmedo, etc. Las tabletas desintegrables oralmente se describen, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 7,431,942, Shimuzu et al., la cual se incorpora aquí como referencia. Las pastillas con una base de caramelo duro se pueden preparar, por ejemplo, por las técnicas de la Patente de los Estados Unidos No. 6,316,008, Godfrey, la cual se incorpora aquí como referencia.

Una composición líquida puede comprender adicionalmente otros nutrientes. Tales composiciones líquidas pueden prepararse como se describe en la patente de los Estados Unidos No. 6,037,375, Sakamoto et al., la cual se incorpora aquí como referencia. Una composición líquida de nutriente de la divulgación contiene una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una treonina y una piridoxina como ingredientes esenciales, y se prepara de la misma manera que la comida y la bebida ordinaria, y pueden adicionarse apropiadamente otros materiales alimenticios. Pueden ser usados como materiales alimenticios particularmente preferidos, endulzantes tales como ácidos orgánicos y carbohidratos. Componentes ácidos orgánicos incluyen ácido cítrico, ácido tartárico, ácido málico y ácido succínico, y es particularmente preferible el ácido cítrico. Estos ácidos orgánicos se adicionan usualmente en un rango de 100 a 1500 mg/100 ml, preferiblemente de 250 a 800 mg/100 ml, y se puede preparar la composición del material en forma de bebida.

Se pueden utilizar opcionalmente diversos endulzantes en las formulaciones de tabletas, líquidos, cápsulas, pastillas

o trocillos de la divulgación. Ejemplos de carbohidratos y endulzantes incluyen monosacáridos tales como glucosa y fructosa, disacáridos tales como maltosa, sacarosa, otros azúcares comunes, alcoholes de azúcar tales como xilitol, sorbitol, glicerina y eritritol, polisacáridos tales como dextrina y ciclodextrina, y oligosacáridos tales como fructooligosacárido , galacto-oligosacárido y lacto-sacarosa. De los carbohidratos, se prefieren la fructosa y la glicerina como los componentes que no afectan de forma adversa al metabolismo de los lípidos,. Como oligosacárido, se prefiere la adición de lacto-sacarosa. Una composición de bebida de la divulgación puede incrementar bifidobacterias en el cuerpo o bajar los productos de putrefacción dependiendo de la mezcla de la lacto-sacarosa, de tal manera que el sistema inmune puede ser intensificado adicionalmente. Otros endulzantes incluyen endulzantes naturales como la taumatina, extracto de stevia, rebaudiósido A, ácido glicirricínico, etc., y endulzantes sintéticos como la sacarina, aspartame, etc. Estos carbohidratos también pueden ser adicionados como mezcla de carbohidratos tales como azúcar isomerizado y azúcar refinado. El endulzante está presente opcionalmente desde aproximadamente 0,1% hasta aproximadamente 5% en peso de la composición sólida. La mezcla de los carbohidratos puede ser de aproximadamente 1 a 15 g en 100 ml de la composición de bebida de la divulgación, preferiblemente de aproximadamente 3 a 12 g. El contenido del oligosacárido es de aproximadamente 0.5 a 10 g, preferiblemente de 1 a 3 g.

La composición líquida de nutrientes de la divulgación puede comprender también, además de los anteriores, diversos nutrientes, vitaminas, minerales (electrolitos), incluyendo elementos de traza, perfumes incluyendo perfumes sintéticos y perfumes naturales, materias colorantes, sabores (frutas, vainilla, chocolate, etc.), ácido péctico y sus sales, ácido algínico y sus sales, ácidos orgánicos, espesante como sustancia protectora coloidal, regulador de pH, estabilizador, conservante, glicerinas, alcoholes, y componente chispeante para bebidas carbonatadas. Además, la composición de la divulgación también puede contener zumo natural o fruta para ser presentada como bebida de fruta o bebida vegetal. Estos se pueden usar bien sea solos o en combinación de dos o más tipos. La rata de mezcla de estos aditivos no está particularmente limitada, y se selecciona generalmente en un rango de aproximadamente 0 a 20 partes en peso a 100 partes en peso de la composición de la divulgación.

Vitaminas adicionales opcionales incluyen, tiamina, niacina, palmitato de retinol, bisbentiamina, riboflavina, cianocobalamina, colecalciferol, amida del ácido nicotínico, pantotenato de calcio, ácido fólico, biotina y ditartato de colina y aquellos que pertenecen al grupo de vitamina B, bien sea, solubles en agua o solubles en grasa,

La composición de nutrientes líquidos de la divulgación se prepara mezclando estos componentes, y el método de preparación no está particularmente limitado, y todos los componentes se puede mezclar simultáneamente, pero los componentes más preferibles solubles en grasa son disueltos de forma preliminar en aceite, y los componentes solubles en agua en agua, entonces la solución se emulsiona mediante el uso de un emulsionante, de tal manera que se puede preparar la composición de la divulgación. Más preferiblemente, se agrega la solución de aceite al

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agua y un emulsionante adecuado para emulsionar, y se agrega una solución acuosa y se mezcla con la emulsión obtenida. La operación de mezcla de los componentes puede ser ejecutada bajo temperatura normal, o preferiblemente ejecutada por operación de calentamiento ligero.

La emulsificación puede ser ejecutada mediante el uso de una máquina emulsificante adecuada, por ejemplo, homomezclador u homogeneizador a alta presión, bien sea por el sistema de paso completo o por el sistema de circulación. La emulsión después de la emulsificación se filtra por el proceso convencional, y se vierte en contenedores apropiados y se esteriliza, de tal manera que se obtiene un producto de bebida deseado. La esterilización se puede efectuar por calentamiento, filtración aséptica, etc.

Para preparar la composición de la divulgación como una bebida carbonatada, se puede inyectar dióxido de carbono en el emulsionante mediante el proceso convencional. Se prefiere preparar tal bebida en el rango de presión osmótica de aproximadamente 260 a 600 mOsm/kg.

La composición líquida de la divulgación también puede prepararse en una forma efervescente. La forma efervescente debe contener, además de los componentes esenciales de la divulgación, cantidades apropiadas de carbonato de sodio y/o hidrógeno carbonato de sodio y el agente neutralizante como componentes de formación de espuma. El agente neutralizante usado aquí es un compuesto ácido capaz de generar dióxido de carbono mediante la neutralización del carbonato de sodio o del hidrógeno carbonato de de sodio. Tal compuesto incluye, por ejemplo, ácido L-tartárico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido ascórbico y otro ácido orgánico. El ácido ascórbico preferido posee tanto la acción de agente neutralizante y la acción de antioxidante.

Sorprendentemente, se ha encontrado que las composiciones de la presente divulgación inhiben la replicación del virus de la influenza A en células MDCK in vitro. El ensayo 2.0 de QuantiGene Plex utilizando la amplificación de señal ADN ramificado (ADNb) y se utilizó la tecnología de perlas de perfilación de multianalitos (xMAP®) para permitir la detección y cuantificación de ARNm de influenza A. En particular, la Fórmula V se encontró para disminuir el ARNm de la influenza A de manera más efectiva que otras formulaciones conocidas tales como la Fórmula A2. En otra realización, la divulgación provee un método para disminuir la actividad viral y/o para reducir la replicación viral que comprende tratar una célula infectada con virus con una composición que comprende una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una treonina y una piridoxina, en una cantidad efectiva.

La neuraminidasa (también conocida como sialidasa) es una enzima muy común que hidroliza residuos de ácido siálico terminales en cadenas de polisacáridos, más frecuentemente exponiendo un residuo de galactosa. Aunque la neuraminidasa se encuentra en los mamíferos, se expresa predominantemente en microorganismos tales como bacterias y virus. J. Biochem. Biophys. Methods 22, 23 (1991). El virus de la influenza de ARN de cadena negativa contiene dos glicoproteínas de superficie, la hemaglutinina (HA) y la neuraminidasa. Se cree que la neuraminidasa desempeña un papel clave en la invasión de las células objetivo y la subsecuente replicación del virus de la influenza a través de su escisión de unidades estructurales de ácido siálico de los receptores de la célula objetivo. Esta acción previene adicionalmente la interacción del virus con la célula objetivo y facilita la elución de los viriones progenie desde la célula infectada (Haskell et al., Neuraminidase inhibition and viral chemotherapy. J. Med. Chem. 13, 697 (1970); McKimm-Breschkin, Resistance of influenza viruses to neuraminidase inhibitors -a review. Antiviral Res. 47, 1 (2000)). Adicionalmente, la neuraminidasa y la HA recientemente sintetizadas en viriones también pueden contener residuos de ácido siálico que puede ser escindido por la neuraminidasa con el fin de evitar la autoagregación. También se cree que la penetración de los recubrimientos de la mucosa por el virus es potenciada por la acción hidrolítica de la neuraminidasa en la fetuina, un componente importante de estas membranas. Estas actividades esenciales hacen la neuraminidasa un objetivo importante para el desarrollo de fármacos contra la influenza. La actividad de la neuraminidasa se puede determinar mediante el uso de un kit comercialmente disponible tal como, por ejemplo, el kit de ensayo de Sondas Moleculares Amplex® Red Neuraminidase No. A22178 tal como se utiliza de acuerdo con el protocolo.

Yeo et al., investigaron el efecto de la infección por el virus de la influenza A /Beijing/353/89 (H3N2) en la expresión de la colagenasa tipo IV en dos tipos diferentes de células epiteliales (Yeo et al. Influenza A virus infection modulates the expression of type IV collagenase in epithelial cells. Arch. Virol. 144: 1361-1370 (1999)). Dependiendo de la línea celular infectada, la infección viral causada cambia en la expresión de la colagenasa tipo IV. Se estimuló en células Vero La expresión de la metaloproteinasa de matriz 9 (MMP-9; 92 kDa), pero no de la metaloproteinasa-2 de matriz (MMP-2; 72 kDa). En las células MDCK, la producción de MMP-2 se incrementó con la infección por el virus. La expresión de la MMP-9 y de la -2 por la infección por el virus de influenza A se determinaron para ser moduladas a nivel transcripcional, dependiendo de la línea celular epitelial. Por lo tanto, las formulaciones que inhiben la expresión de MMP-9 y/o MMP-2 pueden ser de algún interés, ya que pueden poseer o potenciar la actividad antiviral. Debe anotarse, sin embargo, que la fuerte inhibición de estas enzimas en el embarazo puede no ser deseable.

En una realización, ciertas composiciones de la divulgación mostraron que inhiben la neuraminidasa en una manera dependiente de la dosis, sorprendentemente mejor que las composiciones conocidas. Los resultados se muestran en las Figuras 3-6. Se encontró que la Fórmula V inhibe la neuraminidasa de manera más efectiva que otras formulaciones conocidas tales como la Fórmula A2.

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En una realización, la divulgación provee un método para disminuir la actividad viral que comprende tratar una célula infectada con el virus con una composición conocida para inhibir la actividad de la neuraminidasa y/o solamente inhibir débilmente la expresión de MMP-9, que comprende, en una cantidad efectiva, una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una treonina y una piridoxina. En un aspecto, un método para el tratamiento o profilaxis de una infección viral en un sujeto comprende la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición que comprende una lisina, un compuesto ascórbico, un glicósido flavonoide, una treonina y una piridoxina. Una ventaja clave de las composiciones de la presente divulgación es la capacidad para disminuir la actividad viral de una manera no específica de la cepa.

EJEMPLOS

Ejemplo 1. Protocolo de producción de virus

Se mantuvieron células de riñón canino Madin-Darby (MDCK) (ATCC) en un medio esencial mínimo (MEM) con sales de Earle (Gibco BRL, Grand Island, NY) suplementado con L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 g/ml de estreptomicina y 10% de suero de ternera fetal inactivado por calor, (Hyclone) y regulado por la adición de solución reguladora HEPES (pH 7.55, concentración final 10 mM, Invitrogen).

La línea celular Vero de riñón de mono verde africano (ATCC) se mantuvo en un medio esencial mínimo (MEM) con sales de Earle (Invitrogen) suplementado con L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 g/ml estreptomicina y 10% de suero de ternera fetal inactivado por calor, (Hyclone).

La cepa A/WS/33 de la influenza H1N1 (ATCC) se utilizó para generar reservas de virus de alta titulación por el paso en células de MDCK.

Ejemplo 2. Ensayo de ADNb in vitro para la actividad de ARNm de influenza A.

Células MDCK o Vero se sembraron sobre placas a 1e5/ml en un volumen de 100uL en placas de 96 pozos de cultivos de tejido tratados. Los siguientes días las células fueron infectadas con virus a una multiplicidad de infección de 10 y se midió la actividad viral. Para probar los compuestos, las células se preincubaron con el compuesto 1 hora antes de la infección.

Todas las formulaciones se realizaron por triplicado para cada concentración. Las formulaciones de prueba se muestran en el Ejemplo 5, Tabla 1. Debe anotarse que la Fórmula A1 es la fórmula efervescente para la salud de Airborne® y la Fórmula T es Tamiflu®.

Después de la incubación durante la noche, se recogieron las células, se sometieron a lisis, y los sobrenadantes se sometieron a ensayo de QuantiGene Plex 2.0 (Panomics, Inc., Fremont, CA) para el ensayo cuantitativo del ARNm de la influenza A de acuerdo con el protocolo del fabricante. El ensayo QuantiGene Plex 2.0 combina la amplificación de señal de ADN ramificado (ADNb) y las tecnologías de perlas de perfilación de multianalitos (xMAP®) para permitir la detección y cuantificación de objetivos múltiples de ARNm simultáneamente. Generalmente, este ensayo se considera más rápido que los métodos tradicionales utilizados para monitorizar la infección por influenza que típicamente requieren de 2-5 días para llevarse a cabo.

El ensayo de ADNb es un método basado en la hibridación de la cuantificación de ARN específico objetivo que amplifica la señal en lugar del ARN objetivo, utilizando sondas de ADN marcadas. El sistema QuantiGene Plex 2.0 utiliza microesferas fluorescentes (Perlas de Captura) como un soporte para capturar las moléculas de ARN específicas. La capacidad para cuantificar múltiples moléculas de ARN específico objetivo en una muestra sencilla se encuentra en el diseño de los Conjuntos de Sonda. Para cada molécula de ARN de interés, se provee un Conjunto de Sonda de oligonucleótido que contiene tres tipos de sondas sintéticas, Extensores de Captura (CEs), Extensores de Etiqueta (LEs), y Bloqueadores (BLs) que hibridan y cubren secuencias contiguas del ARN objetivo. Los CE discriminan entre las diferentes Perlas de Captura dentro del ensayo de perlas mientras que capturan, a través de la hibridación cooperativa, el ARN objetivo.

La amplificación de la señal es mediada por moléculas de amplificación de ADN que hibridan a las colas de los LE. Cada unidad de amplificación contiene sitios de hibridación múltiples para Sondas de Etiquetas biotiniladas que se enlazan a la R-Picoeritrina conjugada con estreptavidina (SAPE) La señal de fluorescencia resultante asociada con las Perlas de captura individuales se lee en un citómetro de flujo Luminex. La señal se reporta como intensidad de fluorescencia media (MFI) y es proporcional al número de moléculas de ARN objetivo presente en la muestra no tratada.

Los resultados para sobrenadantes de células Vero infectadas con la influenza A se muestran en las Figuras 1 y 2. En la Figura 1, la Fórmula V y la Fórmula 5 disminuyeron la cantidad de de ARNm de influenza A de una manera dependiente de la dosis. Aunque la Fórmula A1 disminuyó la cantidad de cantidad de ARNm de influenza A en dosis altas, se interpreta que los productos químicos efervescentes usados para regular el producto comercial de la Fórmula A1 incrementó el pH dando como resultado en la supresión por efecto del pH a las concentraciones más

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altas de la Fórmula A1. También se encontró que la A1 era citotóxica en las dosis altas. En este ensayo, la Fórmula V apareció más potente que la Fórmula A2, como se muestra en la Figura 2. Las concentraciones se expresan en concentraciones micromolares (µM).

Ejemplo 3. Ensayo Amplex® Red Neuraminidase (sialidasa) de Sondas Moleculares in vitro

El kit de ensayo Amplex® Red Neuraminidase de Sondas Moleculares No. A22178 se utilizó de acuerdo con el protocolo del fabricante.

El ensayo Amplex® Red Neuraminidase de Sondas Moleculares utiliza el Amplex Red para detectar H2O2 generado por oxidación de galactosa oxidasa de galactosa desialidada, el resultado final de la acción de la neuraminidasa. El H2O2 entonces, en presencia de peroxidasa de rábano picante (HRP), reacciona con una estequiometría 1:1 con el reactivo de Amplex Red para generar el producto de oxidación rojo fluorescente, resorufina. (Mohanty et al. A highly sensitive fluorescent micro-assay of H2O2 release from activated human leukocytes using a dihydroxyphenoxazine derivative. J. Immunol. Methods 202, 133 (1997)). La resorufina tiene máximos de absorción y emisión de fluorescencia de aproximadamente 571 nm y 585 nm, respectivamente, y puesto que el coeficiente de extinción es alto (54,000 cm-1M-1), el ensayo se puede realizar bien sea de forma fluorométrica o de forma espectrofotométrica.

Células MDCK o Vero se sembraron sobre placas a 1e5 células/ml en un volumen de 100 uL en placas de 96 pozos de cultivo de tejido tratado. Los siguientes días las células fueron infectadas con virus a una multiplicidad de infección de 10 y se midió la actividad viral. Para probar los compuestos, las células se preincubaron con el compuesto 1 hora antes de la infección. Después de la incubación durante la noche, las células se recolectaron, se sometieron a lisis, y los sobrenadantes fueron sometidos a ensayo.

Todas las formulaciones se realizaron por triplicado para cada concentración. Formulaciones de prueba se muestran en la Tabla 1. Debe anotarse que la Fórmula A1 es la fórmula efervescente para la salud Airborne® y la Fórmula T es Tamiflu®

Los resultados para sobrenadantes de células Vero infectadas con influenza A se muestran en las Figuras 3 y 4. Se demuestra que la Fórmula V es efectiva en la inhibición de la enzima de neuraminidasa de una manera dependiente de la dosis. Aunque la Fórmula A1 parecía ser activa a dosis elevadas, es probable que los productos químicos efervescentes usados para regular el producto comercial (Airborne®) incrementaron el pH en el ensayo y dieron como resultado la supresión a través de un efecto de pH solamente a las concentraciones más altas de la Fórmula A1. La Fórmula A1 también exhibió citotoxicidad a altas dosis.

Ejemplo 4. Inhibición in vitro de la metaloproteinasa de matriz 9 (MMP-9).

Se utilizó un ensayo de inmunoensayo de Quantikine humana MMP-9 (total), de R & D Systems, para cuantificar la expresión de MMP-9 en las células infectadas de acuerdo con el protocolo del fabricante

Las células Vero se sembraron sobre placas a 1e5 células/ml en un volumen de 100 uL en placas de 96 pozos tratados con cultivo de tejidos. El siguiente día las células fueron infectadas con virus a una multiplicidad de infección de 10 y se midió la actividad viral. Para probar los compuestos, las células se preincubaron con el compuesto 1 hora antes de la infección. Después de la incubación durante la noche, se recogieron las células, se sometieron a lisis, y los sobrenadantes fueron sometidos a ensayo.

Este ensayo de MMP-9 emplea la técnica cuantitativa de inmunoensayo enzimático en sándwich. Un anticuerpo monoclonal específico para MMP-9 fue previamente puesto como recubrimiento sobre una microplaca. Los estándares y las muestras se trasladan con pipeta a los pozos, y la MMP-9 es enlazada por el anticuerpo inmovilizado. Después de lavar las sustancias no enlazadas, se adiciona a los pozos un anticuerpo policlonal ligado a la enzima específica para MMP-9. Después de un lavado para eliminar el reactivo de la enzima de anticuerpo no enlazado, se adiciona una solución de sustrato a los pozos y se desarrolla el color en proporción a la cantidad de MMP-9 total (pro y/o activa) enlazada en la etapa inicial. Se detiene el desarrollo de color y se mide la intensidad del color.

Se muestran formulaciones de prueba en el Ejemplo 5, Tabla 1. Debe anotarse que la Fórmula A1 es la fórmula efervescente para la salud de Airborne® y la Fórmula T es Tamiflu®. Resultados para los sobrenadantes de células Vero infectados por la influenza A se muestran en las Figuras 5 y 6. Se interpreta que los productos químicos efervescentes usados para regular el producto comercial de la Fórmula A1 incrementaron el pH en el ensayo e interfirieron con el ensayo a través de un efecto de pH solamente en las concentraciones más altas de Fórmula A1.

La Fórmula V inhibió débilmente la expresión de MMP-9 de una manera dependiente de la dosis. La Fórmula T (Tamiflu®) exhibió una inhibición pronunciada dependiente de la dosis de la expresión de MMP-9. Se cree que la inhibición claramente más débil de la de MMP-9 expuesta en la presencia de la Fórmula V puede dar como resultado una disminución del riesgo durante el embarazo en comparación con el tratamiento de una infección viral con Tamiflu® en una mujer embarazada.

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Ejemplo 5. Inhibición in vitro de la metaloproteinasa de matriz 2 (MMP-2).

Se emplearon dos kits separados para determinar si las formulaciones de la divulgación inhiben la expresión de MMP-2. El kit ELISA de MMP-2 Calbiochem® es un inmunoensayo no isotópico para la cuantificación in vitro de la proteína MMP-2 humana en un medio de cultivo de tejido. El kit de inmunoensayo de R & D Systems Quantikine

5 MMP-2 (total) es utilizado para la determinación cuantitativa de las concentraciones activas y pro-Matriz de Metaloproteinasa 2 (MMP-2 total) en los sobrenadantes de cultivo celular. Todas las formulaciones se realizaron por triplicado utilizando cada uno de los dos kits de ensayo. Ninguna formulación de la presente divulgación inhibió significativamente la expresión de MMP-2 cuando se probaron en diversas concentraciones de hasta aproximadamente 5 µM.

10 Ejemplo 6. Formulaciones. Formulaciones en polvo.

En la Tabla 1 se muestran Ingredientes para diversas formulaciones de prueba; se muestran las cantidades para un paquete de dosis individual en polvo. Se preparó un lote de prueba para cada formulación utilizando cinco veces las cantidades mostradas. Cada ingrediente se adicionó al lote y el lote se mezcló exhaustivamente, se dividió por peso y se selló en cinco paquetes. Alternativamente, el polvo puede llenarse en cápsulas de cubierta dura.

15 Tabla 1 Formulaciones. Peso por dosis para formulación en polvo

Material

Cantidad (gramos)

Fórmula V Fórmula F

Fórmula 5 Fórmula K Fórmula A2

L-Lisina HCl

3.00 3.00 3.00 3.00 1.00

Prolina

0.75

Arginina

0.50

Treonina

0.05 0.06 0.05 0.05

Acetil-L-cisteína

0.20 0.20

Selenometionina

0.01

Ácido ascórbico

0.28 1.00 0.45 0.20 0.71

Ascorbato de calcio

0.64 0.64 0.64 0.02

Ascorbato de magnesio

0.05

Ascorbato de Niacinamida

0.30 0.42

Palmitato de ascorbilo

0.05 0.05 0.05

Extracto de té verde (90% de polifenoles)

1.0

Complejo de Hesperidina

0.30 0.33 0.30 0.30

Rutina NF

0.30 0.33 0.30 0.30

HCl de Piridoxina

0.05 0.05 0.05 0.05

Taurina

0.20 0.04 0.20

Gluconato de cobre

0.02

Gluconato de manganeso dihidratado

0.01

Pectina (87% de ácido galacturónico)

0.33

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Material

Cantidad (gramos)

Fórmula V Fórmula F

Fórmula 5 Fórmula K Fórmula A2

Peso total por paquete (g)

5.17 5.14 5.03 5.20 4.23

Ejemplo 7. Formulaciones. Formulaciones en tableta.

Las formulaciones en tableta se prepararon utilizando los ingredientes mostrados en la Tabla 2. La cantidad de ingrediente mostrado es igual a una dosis. Cinco pastillas contenían una dosis de la formulación. Se empleó una técnica de granulación húmeda y las tabletas comprimidas se recubrieron con un recubrimiento blanco mostrado en la Tabla 2. Las tabletas se secaron y se almacenaron a temperatura ambiente.

Tabla 2. Formulaciones en tableta – Cantidad por tableta.

Ingrediente

Fórmula FT (mgs) Fórmula VT (mgs)

Bioflavonoides cítricos (Hesperidina) 98%

142.97 66.60

Metocel E-5 HPMC

4.42 5.00

Monohidrato de L-Lisina

612.20 600.00

Ácido ascórbico

218.80 200.00

Rutina NF

30.00 66.00

Pectina

30.00 66.00

Piridoxina HCl USP Vit B6

13.40 10.00

Taurina

8.20 8.00

L-Treonina

12.20 12.00

Celulosa Microcristalina

200.00 200.00

Croscarmelosa de Sodio

20.00 20.00

Sílica

6.00 6.00

Estearato de Magnesio

10.00 10.00

Riboflavina Vit B2

1.50 0

Agua Purificada

Recubrimiento blanco incluyendo:

40.00 40.00

Dextrina

Dextrosa

Hipermelosa

Aceite Mineral

Polietilen Glicol

Polisorbato 80

Croscarmelosa de Sodio

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Tabla 2. Formulaciones en tableta – Cantidad por tableta.

Ingrediente

Fórmula FT (mgs) Fórmula VT (mgs)

Citrato de Sodio

Dióxido de Titanio

Total en Mgs:

1349.69 1308.82

Ejemplo 8. Datos clínicos preliminares.

Se realizó un ensayo preliminar durante un brote de influenza A. Se les dio a los sujetos la Formulación en tableta FT del Ejemplo 6, en donde 5 tabletas iguales a una dosis. Los sujetos del estudio fueron instruidos para tomar una dosis al primer signo de síntomas similares a la gripe; y repetir la dosis cada 4 a 6 horas hasta que los síntomas se resolvieron. Los sujetos se tragaron cada dosis con agua. Se completaron catorce encuestas a los pacientes. Los sujetos presentaron síntomas similares a la gripe, como se muestra en la Tabla 3. Además, algunos pacientes también mostraron síntomas adicionales de tos seca, dolor de garganta o dolor de cabeza.

Tabla 3. Encuestas clínicas preliminares.

Síntomas

Duración de

Paciente

Edad Género Cuerpo Fatiga Fiebre Síntomas

No.

F M Dolores (horas)

1

42 1 0 1 1 0 1.5

2

21 0 1 0 0 1

2

3

49 0 1 1 1 1 1.5

4

85 0 1 1 0 1 2

5

27 0 1 1 1 1 2

6

26 1 0 1 1 1 1

7

17 1 0 0 1 1 2

8

54 1 0 0 1 0 1.5

9

49 1 0 1 1 1 3.5

10

52 1 0 1 1 1 4.5

11

22 1 0 1 1 1 5

12

43 0 1 1 1 1

12

13

61 0 1 1 1 1

13

14

54 1 0 1 1 1 18

Promedio

42 8 6 11 12 12 4.97

Desviación estándar

19 5.36

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

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Ocho sujetos informaron de la resolución de los síntomas dentro de aproximadamente 2 horas después de tomar la primera dosis de la fórmula. Tres sujetos más reportaron una resolución completa de los síntomas dentro de aproximadamente 6 horas después de la primera de las dos dosis. Tres sujetos más informaron de resolución dentro de aproximadamente 18 horas después de la primera de tres a cuatro dosis.

Ejemplo 9. Dosificación profiláctica.

En un estudio anecdótico, dos sujetos que trabajan a diario en un centro de visión, se les pidió no obtener una vacuna contra la gripe la temporada pasada, pero tomar una dosis individual profiláctica diaria de Fórmula F a 40% de concentración (2 tabletas por dosis). Cada sujeto informó de que un compañero de trabajo había contraído la influenza durante este tiempo. El área en la que los sujetos viven y trabajan experimentó un importante brote de la influenza A, con dos hospitales locales prohibición visitantes durante el brote. Ningún sujeto contrajo la influenza.

Ejemplo 10. Ensayo de neuraminidasa de los componentes de formulación.

Con el fin de determinar la contribución relativa de cada componente en las composiciones de la divulgación e identificar efectos aditivos y sinérgicos, se evaluó cada componente de interés en diversas combinaciones en el ensayo de la Neuraminidasa de una manera similar al Ejemplo 3. Las composiciones de prueba se ensayaron en un ensayo in vitro para medir la actividad de la neuraminidasa sobre las células MDCK infectadas con influenza A. Las células epiteliales de Riñón Canino Madin Darby (MDCK), se obtuvieron de la ATCC (Manassus, VA) y se cultivaron como se describe por el vendedor. Las células fueron infectadas con el virus de la influenza humana (cepa A/WS/33 adaptada a TC, ATCC-1520) y se propagaron como se describió previamente. Esta cepa demuestra reacción cruzada con PR8 y virus de la influenza porcina de acuerdo con el ATCC. Para medir la actividad de la neuraminidasa, se utilizaron reservas de virus para infectar las células MDCK y la actividad de la neuraminidasa se cuantificó usando el kit de ensayo Amplex Red Neuraminidase (Invitrogen, Inc. Carlsbad CA). Brevemente, las células MDCK fueron infectadas con el virus de influenza A a 37ºC en presencia de las composiciones mostradas en la Tabla 4. Cada condición se ensayó por triplicado sobre una serie de dilución de 2 veces de 8 puntos. El método Amplex Red de cuantificación de la actividad de la neuraminidasa utiliza tres enzimas diferentes: NA, galactosa oxidasa y peroxidasa de rábano picante. Por la acción combinada (manteca) de peróxido y HRP, se oxida el Amplex Red para liberar resorufina y se lee en un espectrofotómetro a una DO a 563 nm.

Se utilizó el carboxilato de oseltamivir para comparación como un control positivo del inhibidor de la neuraminidasa estándar (NAI). El Tamiflu® (fosfato de oseltamivir) es un profármaco de etil éster que requiere la hidrólisis de éster para conversión a la forma activa, carboxilato de oseltamivir. El carboxilato de oseltamir es un inhibidor de la neuraminidasa del virus de la influenza que afecta a la liberación de partículas de virus.

La Figura 7 y la Tabla 4, muestran las diversas composiciones que fueron probados en el ensayo de neuraminidasa. En el ensayo de neuraminidasa cada composición de prueba se comparó con la Fórmula V y con el carboxilato de oseltamivir. Las Figuras 8-13 muestran la actividad de diversas composiciones en el ensayo de neuraminidasa. La concentración mostrada en el eje x de las Figuras 8-13 representa bien sea la concentración de HCl de L-lisina en cada composición de prueba y en la Fórmula V, o la concentración de carboxilato de oseltamivir.

La Figura 8 muestra una superposición de la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por virus de la influenza humana después de la exposición al carboxilato de oseltamivir, a la Fórmula V y a diez composiciones de prueba que contienen diversos componentes de Fórmula V. Los números 1-6 se utilizan para identificar los componentes principales individuales de Fórmula V. Todos los seis componentes, lisina, ácido ascórbico/ascorbatos, glicósidos flavonoides, piridoxina, treonina y taurina son necesarios para la inhibición sinérgica de actividad de la neuraminidasa.

La Figura 9 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición al carboxilato de oseltamivir, la Fórmula V y o bien lisina sola (1) o lisina con ácido ascórbico/ascorbatos (1/2; 9A). Ninguna composición de prueba es muy efectiva hasta que se emplea la mayor concentración de lisina/ascorbatos (1/2; 9B).

La Figura 10 muestra la actividad neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición al carboxilato de oseltamivir, la Fórmula V y, bien sea a la lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides (1/2/3; 10A) o a la lisina/ascorbatos/piridoxina (1/2/4; 10B). Se observa alguna disminución dependiente de la dosis en la actividad de la neuraminidasa con la formulación de lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides (1/2/3) en las cuatro concentraciones más altas. Se observa una disminución más débil dependiente de la dosis en la actividad de la neuraminidasa con la formulación de lisina/ascorbatos/piridoxina (1/2/4) en las cuatro concentraciones más altas.

La Figura 11 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición al carboxilato de oseltamivir, la Fórmula V y, bien sea a la lisina/ascorbatos/treonina (1/2/5; 11A) o a la lisina/ascorbatos/taurina (1/2/6; 11B). Se observa una disminución débil de la actividad de la neuraminidasa con lisina/ascorbatos/treonina en concentraciones más altas.

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La Figura 12 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición al carboxilato de oseltamivir, la Fórmula V y, bien sea a la lisina/ascorbatos/HCl de piridoxina/treonina (1/2/4/5; 12A) o a la lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides/treonina (1/2/3/5; 12B). La composición de lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides/treonina exhibe una disminución dependiente de la dosis en

5 la actividad de la neuraminidasa en las tres concentraciones más altas.

La Figura 13 muestra la actividad de la neuraminidasa de las células infectadas por el virus de la influenza humana después de la exposición al carboxilato de oseltamivir, la Fórmula V y, bien sea a la lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides/HCl de piridoxina/ treonina (1/2/3/4/5; 13A) o a la lisina/ácido ascórbico/glicósidos flavonoides/ HCl de piridoxina/treonina/taurina (1/2/3/4/5/6; 13B). Ambas composiciones producen una robusta disminución dependiente

10 de la dosis en la actividad de la neuraminidasa. Sin embargo, solamente la composición de lisina/ácido ascórbico/ glicósidos flavonoides/HCl de piridoxina/treonina/taurina es comparable con la Fórmula V. La Fórmula V y 1/2/3/4/5/6 difieren en el tipo de compuesto ascórbico utilizado. La Fórmula V comprende ácido ascórbico/ascorbatos mixtos como se muestra en la Tabla 1. La composición 1/2/3/4/5/6 utilizada en la Figura 13B comprende solamente el ácido ascórbico y no los ascorbatos mixtos como se muestra en la Tabla 4.

15 En este ensayo, cada uno de los seis componentes, 1/2/3/4/5/6, parece ser necesario para la supresión completa dependiente de la dosis deseada de la actividad de la neuraminidasa. La composición de lisina/ascorbatos/glicósidos flavonoides/HCl de piridoxina/treonina (1/2/3/4/5) exhibió supresión dependiente de la dosis a través del rango completo de las concentraciones probadas. Cada una de las composiciones 1/2/3; 1/2/4; y 1/2/3/5, exhibió supresión dependiente de la dosis de la actividad de la neuraminidasa en este ensayo solamente a las concentraciones más

20 altas probadas.

Claims (15)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   REIVINDICACIONES

   1.

   Una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de suplemento antiviral oral para uso en el tratamiento o profilaxis de una infección por influenza A, influenza B, influenza C o por enterovirus no polio en un sujeto en necesidad de la misma, en donde dicha composición comprende una lisina, un compuesto ascórbico, un glucósido flavonoide, una treonina, taurina y una piridoxina.

2. 2.

   La composición de la reivindicación 1, en donde la lisina se selecciona de L-lisina, monoclorhidrato de L-lisina, diclorhidrato de L-lisina, succinato de L-lisina, glutamato de L-lisina, y orotato de L-lisina.

3. 3.

   La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde el compuesto ascórbico se selecciona de uno

   o más de ácido ascórbico, ascorbato de calcio, ascorbato de magnesio, ascorbato de potasio, ascorbato de sodio, ascorbato de manganeso, ascorbato de zinc, ascorbato de hierro, ascorbato de cobre, ascorbato de boro, ascorbato de molibdeno, ascorbato de cromo, palmitato de ascorbilo, araquidonato de ascorbilo, estearato de ascorbilo, linoleato de ascorbilo, linoleneato de ascorbilo, y oleato de ascorbilo.

4. 4.

   La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el glicósido de flavonoide se selecciona de uno o más de hesperidina, rutina, naringina, y quercitrina.

5. 5.

   La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde el glicósido de flavonoide es aproximadamente una mezcla de 1:1 en peso de hesperidina y rutina.

6. 6.

   La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde la piridoxina es clorhidrato de piridoxina.

7. 7.

   La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde la composición es en una forma seleccionada del grupo que consiste de en polvo, cápsula, pastilla, trocillo, tableta, líquido o capsuleta.

8. 8.

   La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende monoclorhidrato de L-lisina, ácido ascórbico, hesperidina, rutina, clorhidrato de piridoxina, treonina, y la taurina.

9. 9.

   La composición de la reivindicación 8 que comprende además ascorbato de calcio, ascorbato de niacinamida, y palmitato de ascorbilo.

10. 10.

    La composición de la reivindicación 8, en donde una dosis individual comprende desde aproximadamente 2 g hasta aproximadamente 3.5 g de monoclorhidrato de L-lisina; desde aproximadamente 0.1 g hasta aproximadamente 1.5 g de ácido ascórbico; desde aproximadamente 0.2 g hasta aproximadamente 0.8 g de hesperidina; desde aproximadamente 0.1 g hasta aproximadamente 0.5 g de rutina; desde aproximadamente 0.04 g hasta aproximadamente 0.08 g de clorhidrato de piridoxina; desde aproximadamente 0.01 g hasta aproximadamente

11. 0.08 g de treonina; y desde aproximadamente 0.02 g hasta aproximadamente 0.4 g de taurina.

12. 11.

    La composición de la reivindicación 10 que comprende además desde aproximadamente 0.5 g hasta aproximadamente 0.75 g de ascorbato de calcio; desde aproximadamente 0.1 g hasta aproximadamente 0.5 g de ascorbato de niacinamida; y desde aproximadamente 0.01 g hasta aproximadamente 0.1 g de palmitato de ascorbilo.

13. 12.

    La composición de la reivindicación 10, en donde la dosis individual comprende aproximadamente 3 g de monoclorhidrato de L-lisina; desde aproximadamente 0.2 g hasta aproximadamente 1.0 g de ácido ascórbico; aproximadamente 0.3 g de hesperidina; aproximadamente 0.3 g de rutina; aproximadamente 0.05 g de clorhidrato de piridoxina; aproximadamente 0.05 g de treonina; y desde aproximadamente 0.02 g hasta aproximadamente 0.3 g de taurina.

14. 13.

    La composición de la reivindicación 12 que comprende además aproximadamente 0.6 g de ascorbato de calcio;

15. 0.3 g de ascorbato de niacinamida, y aproximadamente 0.05 g de palmitato de ascorbilo.

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