PL209649B1 - Odtworzony surfaktant, sposób wytwarzania odtworzonego surfaktanta oraz jego zastosowanie - Google Patents
Odtworzony surfaktant, sposób wytwarzania odtworzonego surfaktanta oraz jego zastosowanieInfo
- Publication number
- PL209649B1 PL209649B1 PL372751A PL37275103A PL209649B1 PL 209649 B1 PL209649 B1 PL 209649B1 PL 372751 A PL372751 A PL 372751A PL 37275103 A PL37275103 A PL 37275103A PL 209649 B1 PL209649 B1 PL 209649B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- popg
- dppc
- reconstituted surfactant
- surfactant
- mixture
- Prior art date
Links
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 title claims abstract description 60
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 33
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 108010007125 Pulmonary Surfactant-Associated Protein C Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102000007620 Pulmonary Surfactant-Associated Protein C Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 239000003580 lung surfactant Substances 0.000 claims abstract description 5
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 claims description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 12
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 claims description 2
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 claims 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 7
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 abstract description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 3
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 17
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 108010093965 Polymyxin B Proteins 0.000 description 5
- 108010007131 Pulmonary Surfactant-Associated Protein B Proteins 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- SBKRTALNRRAOJP-BWSIXKJUSA-N N-[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-4-amino-1-oxo-1-[[(3S,6S,9S,12S,15R,18R,21S)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-15-benzyl-3-[(1R)-1-hydroxyethyl]-12-(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxobutan-2-yl]-6-methylheptanamide (6S)-N-[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-4-amino-1-oxo-1-[[(3S,6S,9S,12S,15R,18R,21S)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-15-benzyl-3-[(1R)-1-hydroxyethyl]-12-(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxobutan-2-yl]-6-methyloctanamide sulfuric acid Polymers OS(O)(=O)=O.CC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](Cc2ccccc2)NC(=O)[C@@H](CCN)NC1=O)[C@@H](C)O.CC[C@H](C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](Cc2ccccc2)NC(=O)[C@@H](CCN)NC1=O)[C@@H](C)O SBKRTALNRRAOJP-BWSIXKJUSA-N 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 229960003548 polymyxin b sulfate Drugs 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100032617 Pulmonary surfactant-associated protein B Human genes 0.000 description 3
- 239000003570 air Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229940092456 curosurf Drugs 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 230000010349 pulsation Effects 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 229940063649 survanta Drugs 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 108010007100 Pulmonary Surfactant-Associated Protein A Proteins 0.000 description 1
- 102100027773 Pulmonary surfactant-associated protein A2 Human genes 0.000 description 1
- NRBLBEWYHRQCIG-AKVLDSKYSA-N [(2R)-3-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-2-[(Z)-octadec-9-enoxy]propyl] hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC(O)CO)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC NRBLBEWYHRQCIG-AKVLDSKYSA-N 0.000 description 1
- UYWNJNXEHSUWLE-HFWGUVFESA-N [(2R)-3-hexadecanoyloxy-2-[(Z)-octadec-9-enoxy]propyl] 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC UYWNJNXEHSUWLE-HFWGUVFESA-N 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 239000002253 acid Chemical class 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012080 ambient air Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000011363 dried mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009802 hysterectomy Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 229940025300 lidocaine injection Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002663 nebulization Methods 0.000 description 1
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 201000003144 pneumothorax Diseases 0.000 description 1
- 229920000024 polymyxin B Polymers 0.000 description 1
- 229960005266 polymyxin b Drugs 0.000 description 1
- 229940041153 polymyxins Drugs 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/785—Alveolar surfactant peptides; Pulmonary surfactant peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest odtworzony surfaktant składający się ze sztucznego peptydu i mieszaniny fosfolipidów, który może obniżać napięcie powierzchniowe na granicy faz powietrze-ciecz. Przedmiotem wynalazku jest także sposób wytwarzania odtworzonego surfaktanta oraz jego zastosowanie do wytwarzania leku do leczenia zespołu zaburzeń oddechowych (RDS) i innych chorób związanych z zaburzeniami czynności surfaktanta w płucach.
Płucny surfaktant obniża napięcie powierzchniowe pojawiające się na granicy faz powietrzeciecz wewnętrznej ścianki pęcherzyka, zapobiegając w ten sposób zapadaniu się płuc pod koniec wydechu. Niedobór surfaktanta jest zaburzeniem czynności, które dotyka zwykle wcześniaki i powoduje RDS, chorobę, którą można leczyć skutecznie za pomocą naturalnych surfaktantów ekstrahowanych z płuc zwierząt. Głównymi składnikami tych preparatów surfaktantów są fosfolipidy, takie jak 1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfocholina, znana powszechnie jako dipalmitoilofosfatydylocholina (DPPC), fosfatydylogliceryna (PG) i hydrofobowe białka B i C (SP-B i SP-C) surfaktantów. Hydrofilowe białka SP-A i SP-D surfaktantów, które są kolagenowymi lektynami typu C (zależnymi od Ca2+) i które uważa się za działające głównie w układzie obronnym gospodarza, normalnie nie występują w preparatach surfaktantów z powodu stosowanych sposobów ekstrakcji rozpuszczalnikami organicznymi. W aktualnej praktyce terapeutycznej stosuje się modyfikowane naturalne preparaty surfaktantów, uzyskane z tkanek zwierzęcych. Te preparaty składają się zwykle z wyżej wymienionych składników z wyjątkiem białek hydrofiłowych, które są usuwane po ekstrakcji rozpuszczalnikami organicznymi.
Ze względu na wady preparatów surfaktantów z tkanek zwierzęcych, takie jak złożoność procesów wytwarzania i sterylizacji oraz możliwa indukcja odpowiedzi immunologicznych, podjęto próby wytwarzania surfaktantów sztucznych.
W ścisłym znaczeniu tego słowa, sztuczne surfaktanty są mieszaninami tylko fosfolipidów albo mieszaninami fosfolipidów i innych syntetycznych lipidów. Odtworzone surfaktanty są sztucznymi surfaktantami z dodanymi hydrofobowymi białkami - albo wyizolowanymi z tkanek zwierzęcych albo otrzymanymi technikami rekombinacyjnymi -albo syntetycznymi peptydowymi pochodnymi takich białek.
Właściwości i aktywność odtworzonych surfaktantów zależy w znacznym stopniu nie tylko od składników białkowych/peptydowych, lecz także od składu mieszaniny fosfolipidów.
Aktualnie stwierdzono, że dipalmitoilofosfatydylocholina (DPPC) w mieszaninie ze specyficznymi palmitoilooleilofosfolipidami jest idealnym nośnikiem sztucznych peptydów stosowanych normalnie w odtworzonych surfaktantach jako analogi naturalnych surfaktantów biał ek SP-C i/lub SP-B. Stwierdzono zwłaszcza, że odtworzone surfaktanty zawierające analogi SP-C ujawnione w WO 00/47623 w połączeniu z DPPC i palmitoilooleilofosfolipidem, wybranym korzystnie spoś ród palmitoiloleilofosfatydylogliceryny (POPG) albo mieszaniny POPG z palmitoilooleilofosfatydylocholina (POPC) w stosunkach wagowych wynoszących od 80:20 do 60:40 obniżają napięcie powierzchniowe i lepkość otrzymanych z nich preparatów. W przeciwieństwie do tego, co podaje się w literaturze, nieoczekiwanie stwierdzono, że dodatek kwasu palmitynowego (PA) jest bezużyteczny, a co więcej w niektórych przypadkach może obniżać aktywność surfaktanta in vivo.
Zgodnie z powyższym przedmiotem niniejszego wynalazku jest odtworzony surfaktant składający się ze sztucznego peptydu i mieszaniny fosfolipidów, charakteryzujący się tym, że sztuczny peptyd jest analogiem SP-C o wzorze (I)
FeGfIPZZPVHLKR(XaB)n(XbB)n(XCB)mXdGALLΩGL (I) w którym:
X oznacza aminokwas wybrany z grupy obejmującej I, L i nL (norleucynę),
B oznacza aminokwas wybrany z grupy obejmującej K, W, F, Y i ornitynę,
Z oznacza S podstawion ą ewentualnie grupami arylowymi zawieraj ącymi 12-22 atomy węgla, które są połączone z łańcuchem bocznym poprzez wiązanie estrowe,
Ω oznacza aminokwas wybrany z grupy obejmującej M, I, L, nL, a oznacza liczbę cał kowitą od 1 do 19, b oznacza liczbę cał kowitą od 1 do 19, c oznacza liczbę cał kowitą od 1 do 21, d oznacza liczbę cał kowitą od 0 do 20, e oznacza 0 albo 1,
PL 209 649 B1 f oznacza 0 albo 1, n oznacza 0 albo 1, m oznacza 0 albo 1, n + m > 0, f > e, a (XaB)n(XbB)n(XcB)mXd jest sekwencją, która zawiera maksymalnie 22 aminokwasy, korzystnie od 10 do 22 aminokwasów, oraz mieszanina fosfolipidów składa się z dipalmitoilofosfatydylocholiny (DPPC) i palmitoilooleilofosfolipidu wybranego spośród palmitoilooleilofosfatydylogliceryny (POPG) albo jej mieszaniny z palmitoilooleilofosfatydylochliną (POPC) w stosunkach wagowych wynoszących od 80:20 do 60:40.
Korzystnie sztuczny peptyd jest analogiem SP-C o wzorze (II)
IPSSPVHLKRLKLLLLLLLLILLLILGALLΩGL (II) w którym:
Ω oznacza resztę wybraną spośród M, I i nL.
Korzystniej sztuczny peptyd jest peptydem IPSSPVHLKRLKLLLLLLLLILLLILGALLMGL (SP-C33).
Korzystnie sztuczny peptyd występuje w połączeniu z mieszaniną fosfolipidów składającą się z DPPC i POPG w stosunkach wagowych wynoszących od 75:25 do 65:35.
Korzystniej sztuczny peptyd występuje w połączeniu z mieszaniną fosfolipidów składającą się z DPPC i POPG w stosunku wagowym 68:31.
Korzystnie sztuczny peptyd występuje w połączeniu z mieszaniną fosfolipidów składającą się z DPPC, POPG i POPC w stosunku wagowym od 60:20:20 do 68:15:16.
Korzystnie odtworzony surfaktant jest w postaci roztworu, dyspersji, zawiesiny lub suchego proszku.
Przedmiot wynalazku stanowi również sposób wytwarzania odtworzonego surfaktanta jak określono powyżej, polegający na tym, że i) miesza się roztwór lub zawiesinę peptydu i fosfolipidów i ii) suszy się mieszaninę.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie odtworzonego surfaktanta jak określono powyżej do wytwarzania leku do leczenia chorób związanych z zaburzeniem czynności surfaktanta w płucach.
Korzystnie chorobą jest zespół zaburzeń oddechowych (RDS).
W rozwiązaniu według wynalazku można stosować każdy sztuczny peptydowy analog naturalnych surfaktantów białek SP-C i/lub SP-B, takich jakie są znane z WO 89/06657, WO 92/22315 i WO 95/32992.
Najkorzystniejszym peptydem według wynalazku jest podany niżej peptyd (SP-C33), w swojej nieacylowanej postaci, IPSSPVHLKRLKLLLLLLLLILLLILGALLMGL (SP-C33)
Peptydy o wzorze (I) można wytwarzać drogą konwencjonalnej syntezy peptydów albo technikami rekombinacyjnymi znanymi z WO 00/47623.
Acylowane peptydy syntezuje się korzystnie drogą reakcji peptydów z chlorkiem acylu w czystym kwasie trifluorooctowym w ciągu 10 godzin w temperaturze pokojowej, a następnie przerwania reakcji za pomocą 80% wodnego roztworu etanolu.
Aktywność odtworzonych surfaktantów według wynalazku przy zmniejszaniu napięcia powierzchniowego oceniono zarówno in vitro, jak i in vivo. W szczególności wyniki in vivo wyraźnie wskazują, że odtworzone surfaktanty według niniejszego wynalazku mogą zwiększać objętość wdychanego i wydychanego powietrza, która z kolei jest wskaźnikiem zdolności rozszerzania się płuc, w znacznie większym stopniu niż surfaktanty otrzymane ze stosowanymi powszechnie w tej dziedzinie mieszaninami DPPC, PG i PA.
Odtworzone surfaktanty według wynalazku mogą zawierać SP-B lub polimyksyny, a zwłaszcza polimyksynę B, jako analogi SP-B.
Surfaktant można wytwarzać drogą mieszania roztworów lub zawiesin peptydów i fosfolipidów, a następnie suszenia mieszaniny. Jeżeli jest to konieczne, to wysuszoną mieszaninę można ponownie zawieszać, dyspergować albo podawać jako taką pacjentom, którzy wymagają leczenia niedoboru surfaktantów.
W przypadku podawania surfaktanta w postaci aerozolu konieczne będzie łączenie małych cząstek surfaktanta z odpowiednim obojętnym propelentem. Zakresem niniejszego wynalazku są objęte i inne postacie podawania, takie jak parowanie lub nebulizacja trwałych roztworów/zawiesin surfaktanta.
PL 209 649 B1
Wynalazek ilustrują bardziej szczegółowo następujące przykłady.
Przykłady
Sekcja doświadczalna Materiały
1,2-Dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfocholinę (DPPC), 1-palmitoilo-2-oleilo-sn-glicero-3-fosfocholinę (POPC), 1-palmitoilo-2-oleilo-sn-glicero-3-fosfoglicerynę (POPG), fosfatydyloglicerynę jaja (PG), kwas palmitynowy (PA) i siarczan polimyksyny B (PxB) stosowano do wytwarzania następujących mieszanin lipidowych w następujących stosunkach wagowych: DPPC/PG/PA - 68:22:9, DPPC/POPG/PA
- 68:22:9, DPPC/POPC/POPG - 60:20:20, DPPC/POPG/POPC/PA - 57:19:19:5, DPPC/POPC/POPG
- 68:16:15 i DPPC/POPG - 68:31.
SP-C33 syntezowano i oczyszczano w sposób opisany w WO 00/47623.
Wytwarzanie surfaktantów syntetycznych
SP-C33 i lipidy w stosunkach wagowych peptyd/lipid 0, 02:1 mieszano w chloroformie/metanolu (98:2 objętościowo), rozpuszczalniki odparowywano, a następnie otrzymane warstewki peptyd/lipid uwadniano w 150 mM NaCl, drogą powtarzającej się sonikacji, przy stężeniu lipidów 80 lub 35 mg/ml. Próbki surf aktanta stosowane do analizy w surf aktometrze z pulsującym pęcherzykiem rozcieńczano w roztworze soli fizjologicznej do stężeń roboczych (10 mg/ml surfaktanta). W niektórych doświadczeniach dodawano PxB do końcowego stężenia 2% (wagowo) stężenia lipidów. Surfaktant, który zawierał SP-C33 w DPPC/PG/PA (68:22:9) dawał bardzo gęste zawiesiny przy stężeniu 80 mg/ml i był bardzo trudny do podawania zwierzętom doświadczalnym.
Dwa bardzo dobrze znane modyfikowane naturalne surfaktanty, Curosurf (Chiesi Farmaceutici) i Survanta (Abbott) podawano zgodnie z instrukcjami producenta. Curosurf zawieszano przy stężeniu 80 mg/ml i podawano w ilości 2,5 ml/kg masy ciała, natomiast Survanta zawieszano przy stężeniu 25 mg/ml i podawano w ilości 4 ml/kg masy ciała.
Doświadczenia z pulsującym pęcherzykiem
Dynamiczne właściwości powierzchniowe surfaktantów SP-C33 z i bez 2% (wagowo) PxB oceniano za pomocą surfaktometru z pulsującym pęcherzykiem. W przypadku tych doświadczeń surfaktant zawieszano w roztworze soli fizjologicznej przy stężeniu 10 mg/ml i analizowano w temperaturze 37°C. Wrażliwość względem hamowania badano drogą dodawania 40 mg/ml albuminy do zawiesiny surfaktanta. Pęcherzyki pozostające w łączności z otaczającym powietrzem wytwarzano w komorze do badań z tworzywa sztucznego, zawierającej w przybliżeniu 20 ul próbki płynu. Promień pęcherzyka poddawano oscylacji z szybkością 40 cykli/min od maksimum 0,55 do minimum 0,40 mm, co odpowiada 50% cyklicznej kompresji powierzchni. Wartości napięcia powierzchniowego przy minimalnej i maksymalnej wielkości pęcherzyków (ymin, ymaks) zapisywano w ciągu 5-minutowych pulsacji.
Doświadczenia in vivo
Mieszaniny surfaktanta oznaczono u przedwcześnie urodzonych królików, otrzymanych poprzez histerektomię w wieku ciążowym 27 dni (termin porodu: 31 dni).
Zwierzęta poddawano tracheotomii przy urodzeniu, trzymano w pudełkach do pletyzmografii w temperaturze 37°C i poddawano wentylowaniu równolegle z 100% powietrza przy częstości 40 oddechów/min i 50% czasem wdechu. Leczone zwierzęta otrzymywały poprzez kaniulę tchawiczą 2,5 ml/kg albo 4 ml/kg powyższego preparatu surfaktanta. Mioty zwierząt, które nie dostawały żadnego preparatu surfaktanta, były wykorzystywane jako kontrole. Po zakropieniu surfaktanta ciśnienie maksymalne podnoszono najpierw do 35 cm H2O na minutę ułatwiając rozprowadzenie surfaktanta w płucach, a następnie obniżano do 25 cm H2O. Następnie zwierzęta poddawano wentylowaniu za pomocą maksymalnego ciśnienia 25 cm H2O w ciągu 15 minut, po czym ciśnienie obniżano najpierw do 20 cm H2O w ciągu 5 minut, a następnie do 15 cm H2O w ciągu 5 minut, po czym podnoszono je ponownie do 25 cm H2O w ciągu 5 minut. Objętości oddechowe mierzono w przedziałach 5-minutowych za pomocą pneumotachografu połączonego z każdym pudełkiem pletyzmografu.
Pod koniec ustalonego okresu wentylowania zwierzęta uśmiercano drogą domózgowego wstrzyknięcia lidokainy, po czym otwierano ich brzuch i badano położenie przepony jako dowodu odmy opłucnowej.
P r z y k ł a d 1
Aktywność powierzchniowa SP-C33 in vitro w różnych mieszaninach lipidów
Dynamiczne właściwości powierzchniowe 2% (wagowo) SP-C33 W DPPC/PG/PA (68:22:9),
DPPC/POPC/POPG (60:20:20), DPPC/POPC/POPG (68:16:15) i DPPC/POPG (68:31) oceniano za pomocą surfaktometru z pulsującym pęcherzykiem, który wykazywał (Ymin < 2 mN/m po 5-minutowej
PL 209 649 B1 pulsacji w przypadku wszystkich mieszanin i Ymaks < 40 mN/m dla wszystkich mieszanin z wyjątkiem
SP-C33 w DPPC/PG/PA (68:22:9), dla której Ymaks wynosiła 48 mN/m.
P r z y k ł a d 2
Optymalny efekt in vivo bez PA
W celu oceny stosowności kompozycji lipidowej porównywano wpływ in vivo SP-C33 w mieszaninach DPPC/PG/PA (68:22:9), DPPC/POPG/PA (68:22:9) i DPPC/POPG (68:31). SP-C33 w DPPC/POPG (68:31) wykazywał większy wpływ niż dwie inne mieszaniny. Dane wskazywały na wyraźny wzrost objętości oddechowych po leczeniu za pomocą SP-C33 w DPPC/POPG (68:31). Wykazywały one także, że gdy zawartość DPPC i lipidów kwasowych jest stała, to obecność PA zmniejsza efekt leczenia. Ujemny wpływ PA na aktywność in vivo surfaktanta opartego na SP-C33 potwierdza się dalej wpływem (VT=12 przy 15 minutach i VT=14 przy 25 minutach) SP-C33 w DPPC/POPC/POPG/PA (57:19:19:5), który jest nieznacznie mniejszy niż wpływ SP-C33 w DPPC/POPC/POPG (60:20:20).
Claims (10)
- Zastrzeżenia patentowe1. Odtworzony surfaktant składający się ze sztucznego peptydu i mieszaniny fosfolipidów, znamienny tym, że sztuczny peptyd jest analogiem SP-C o wzorze (I)FeGfIPZZPVHLKR(XaB)n(XbB)n(XcB)mXdGALLΩGL (I) w którym:X oznacza aminokwas wybrany z grupy obejmującej I, L i nL (norleucynę),B oznacza aminokwas wybrany z grupy obejmującej K, W, F, Y i ornitynę,Z oznacza S podstawioną ewentualnie grupami arylowymi zawierającymi 12-22 atomy węgla, które są połączone z łańcuchem bocznym poprzez wiązanie estrowe,Ω oznacza aminokwas wybrany z grupy obejmującej M, I, L, nL, a oznacza liczbę całkowitą od 1 do 19, b oznacza liczbę całkowitą od 1 do 19, c oznacza liczbę całkowitą od 1 do 21, d oznacza liczbę całkowitą od 0 do 20, e oznacza 0 albo 1, f oznacza 0 albo 1, n oznacza 0 albo 1, m oznacza 0 albo 1, n + m > 0, f > e, a (XaB)n(XbB)n(XcB)mXd jest sekwencją, która zawiera maksymalnie 22 aminokwasy, korzystnie od 10 do 22 aminokwasów, oraz mieszanina fosfolipidów składa się z dipalmitoilofosfatydylocholiny (DPPC) i palmitoilooleilofosfolipidu wybranego spośród palmitoilooleilofosfatydylogliceryny (POPG) albo jej mieszaniny z palmitoilooleilofosfatydylochliną (POPC) w stosunkach wagowych wynoszących od 80:20 do 60:40.
- 2. Odtworzony surfaktant według zastrz. 1, znamienny tym, że sztuczny peptyd jest analogiem SP-C o wzorze (II)IPSSPVHLKRLKLLLLLLLLILLLILGALLΩGL (II) w którym:Ω oznacza resztę wybraną spośród M, I i nL.
- 3. Odtworzony surfaktant według zastrz. 2, znamienny tym, że sztuczny peptyd jest peptydem IPSSPVHLKRLKLLLLLLLLILLLILGALLMGL (SP-C33).
- 4. Odtworzony surfaktant według zastrz. 1-3, znamienny tym, że sztuczny peptyd występuje w połączeniu z mieszaniną fosfolipidów składającą się z DPPC i POPG w stosunkach wagowych wynoszących od 75:25 do 65:35.
- 5. Odtworzony surfaktant według zastrz. 4, znamienny tym, że sztuczny peptyd występuje w połączeniu z mieszaniną fosfolipidów składającą się z DPPC i POPG w stosunku wagowym 68:31.
- 6. Odtworzony surfaktant według zastrz. 1-3, znamienny tym, że sztuczny peptyd występuje w połączeniu z mieszaniną fosfolipidów składającą się z DPPC, POPG i POPC w stosunku wagowym od 60:20:20 do 68:15:16.PL 209 649 B1
- 7. Odtworzony surfaktant wedł ug zastrz. 1-6, znamienny tym, ż e jest w postaci roztworu, dyspersji, zawiesiny lub suchego proszku.
- 8. Sposób wytwarzania odtworzonego surfaktanta jak określono w zastrz. 1-6, znamienny tym, że i) miesza się roztwór lub zawiesinę peptydu i fosfolipidów i ii) suszy się mieszaninę.
- 9. Zastosowanie odtworzonego surfaktanta jak okreś lono w zastrz. 1-7 do wytwarzania leku do leczenia chorób związanych z zaburzeniem czynności surfaktanta w płucach.
- 10. Zastosowanie według zastrz. 9, znamienne tym, że chorobą jest zespół zaburzeń oddechowych (RDS).
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT2002MI001058A ITMI20021058A1 (it) | 2002-05-17 | 2002-05-17 | Miscele di lipidi sintetici ottimizzate per la preparazione di un surfattante ricostituito |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL372751A1 PL372751A1 (pl) | 2005-08-08 |
| PL209649B1 true PL209649B1 (pl) | 2011-09-30 |
Family
ID=11449919
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL372751A PL209649B1 (pl) | 2002-05-17 | 2003-05-12 | Odtworzony surfaktant, sposób wytwarzania odtworzonego surfaktanta oraz jego zastosowanie |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7511011B2 (pl) |
| EP (1) | EP1506234B1 (pl) |
| JP (1) | JP4883906B2 (pl) |
| KR (1) | KR101028927B1 (pl) |
| CN (1) | CN100347193C (pl) |
| AT (1) | ATE353919T1 (pl) |
| AU (1) | AU2003233320B2 (pl) |
| CA (1) | CA2486152C (pl) |
| CY (1) | CY1106667T1 (pl) |
| DE (1) | DE60311798T2 (pl) |
| DK (1) | DK1506234T3 (pl) |
| EA (1) | EA007928B1 (pl) |
| ES (1) | ES2282627T3 (pl) |
| HR (1) | HRP20041058B1 (pl) |
| IL (2) | IL165239A0 (pl) |
| IT (1) | ITMI20021058A1 (pl) |
| MA (1) | MA27960A1 (pl) |
| MX (1) | MXPA04011369A (pl) |
| NZ (1) | NZ536606A (pl) |
| PL (1) | PL209649B1 (pl) |
| PT (1) | PT1506234E (pl) |
| SI (1) | SI1506234T1 (pl) |
| TN (1) | TNSN04219A1 (pl) |
| UA (1) | UA79609C2 (pl) |
| WO (1) | WO2003097695A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA200409215B (pl) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ITMI20021058A1 (it) * | 2002-05-17 | 2003-11-17 | Chiesi Farma Spa | Miscele di lipidi sintetici ottimizzate per la preparazione di un surfattante ricostituito |
| RU2380356C2 (ru) | 2003-03-24 | 2010-01-27 | Актимис Фармасьютикалз, Инк. | Производные 2-фенокси и 2-фенилсульфонамида с ссr3 антагонистической активностью для лечения астмы и других воспалительных или иммунологических заболеваний |
| EP1481665A1 (en) * | 2003-05-30 | 2004-12-01 | CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. | Novel lipid mixtures for synthetic surfactants |
| UA76074C2 (en) * | 2005-11-09 | 2006-06-15 | O V Palladin Inst Of Biochemis | Calmophil, pharmaceutical composition for substitution therapy aimed at recovering malfunctioned surfactant system of lungs |
| MX343064B (es) * | 2006-10-13 | 2016-10-24 | Chiesi Farm Spa | Tensioactivos reconstituidos que tienen propiedades mejoradas. |
| EP2142196A4 (en) * | 2007-03-29 | 2010-06-30 | Nat Jewish Health | SURFACTANTLIPIDS, COMPOSITIONS AND THEIR USE |
| EP1997502A1 (en) * | 2007-06-01 | 2008-12-03 | CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. | Reconstituted surfactants having improved properties |
| EP2022798A1 (en) | 2007-08-09 | 2009-02-11 | CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. | Synthetic pulmonary surfactant peptides |
| US8287887B2 (en) | 2008-04-02 | 2012-10-16 | The University Of Tokushima | Antigen-and-drug vehicle comprising synthetic peptide, and mucosal vaccine using the same |
| US8399406B2 (en) * | 2009-06-05 | 2013-03-19 | Chiesi Farmaceutici S.P.A. | Reconstituted surfactant composition containing analogs of surfactant protein B (SP-B) and surfactant protein C (SP-C) |
| AR082644A1 (es) * | 2010-08-30 | 2012-12-19 | Hoffmann La Roche | Tetranectina-apolipoproteina a-i, particulas lipidicas que la contiene y utilizacion de la misma relacionado con el metabolismo de los lipidos y las enfermedades cardiovasculares |
| CA2838070A1 (en) | 2011-08-25 | 2013-02-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Shortened tetranectin-apolipoprotein a-i fusion protein, a lipid particle containing it, and uses thereof |
| KR102122088B1 (ko) | 2012-11-21 | 2020-06-12 | 키에시 파르마슈티시 엣스. 피. 에이. | 재구성된 폐 계면활성제 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0706374B1 (en) * | 1993-06-30 | 1997-12-10 | Genentech, Inc. | Method for preparing liposomes |
| AU2322097A (en) * | 1996-03-27 | 1997-10-17 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Lyophilized pulmonary surfactant peptide compositions |
| IT1308180B1 (it) * | 1999-02-12 | 2001-12-07 | Chiesi Farma Spa | Peptidi sintetici aventi la capacita' di diminuire la tensionesuperficiale e loro impiego nella preparazione di un surfattante |
| AU2001245848A1 (en) * | 2000-03-15 | 2001-10-23 | Advanced Research And Technology Institute | Oral tolerance induction by collagen to prevent allograft rejection |
| JP2003530356A (ja) * | 2000-04-12 | 2003-10-14 | アルタナ ファルマ アクチエンゲゼルシャフト | 急性肺疾患の予防又は早期治療のための肺表面活性物質の新規使用 |
| ITMI20021058A1 (it) * | 2002-05-17 | 2003-11-17 | Chiesi Farma Spa | Miscele di lipidi sintetici ottimizzate per la preparazione di un surfattante ricostituito |
| EP1997502A1 (en) | 2007-06-01 | 2008-12-03 | CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. | Reconstituted surfactants having improved properties |
| EP2022798A1 (en) | 2007-08-09 | 2009-02-11 | CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. | Synthetic pulmonary surfactant peptides |
-
2002
- 2002-05-17 IT IT2002MI001058A patent/ITMI20021058A1/it unknown
-
2003
- 2003-05-12 ES ES03727469T patent/ES2282627T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-12 SI SI200330756T patent/SI1506234T1/sl unknown
- 2003-05-12 HR HRP20041058AA patent/HRP20041058B1/hr not_active IP Right Cessation
- 2003-05-12 WO PCT/EP2003/004937 patent/WO2003097695A1/en not_active Ceased
- 2003-05-12 MX MXPA04011369A patent/MXPA04011369A/es active IP Right Grant
- 2003-05-12 IL IL16523903A patent/IL165239A0/xx unknown
- 2003-05-12 DK DK03727469T patent/DK1506234T3/da active
- 2003-05-12 JP JP2004506367A patent/JP4883906B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-12 AU AU2003233320A patent/AU2003233320B2/en not_active Expired
- 2003-05-12 DE DE60311798T patent/DE60311798T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-12 AT AT03727469T patent/ATE353919T1/de active
- 2003-05-12 PL PL372751A patent/PL209649B1/pl unknown
- 2003-05-12 US US10/512,869 patent/US7511011B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-12 NZ NZ536606A patent/NZ536606A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-05-12 PT PT03727469T patent/PT1506234E/pt unknown
- 2003-05-12 CA CA2486152A patent/CA2486152C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-12 EA EA200401385A patent/EA007928B1/ru unknown
- 2003-05-12 KR KR1020047018528A patent/KR101028927B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-12 CN CNB038112531A patent/CN100347193C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-12 EP EP03727469A patent/EP1506234B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-12-05 UA UA20041109233A patent/UA79609C2/uk unknown
-
2004
- 2004-11-11 TN TNP2004000219A patent/TNSN04219A1/en unknown
- 2004-11-16 IL IL165239A patent/IL165239A/en active IP Right Grant
- 2004-11-16 MA MA27946A patent/MA27960A1/fr unknown
- 2004-11-17 ZA ZA200409215A patent/ZA200409215B/xx unknown
-
2007
- 2007-04-26 CY CY20071100558T patent/CY1106667T1/el unknown
-
2008
- 2008-03-06 US US12/043,177 patent/US7842664B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7842664B2 (en) | Synthetic lipid mixtures for the preparation of a reconstituted surfactant | |
| KR101516443B1 (ko) | 개선된 특성을 가지는 재구성된 계면활성제 | |
| KR101668137B1 (ko) | 계면 활성 단백질 ｂ (ｓｐ－ｂ) 및 계면 활성 단백질 ｃ (ｓｐ－ｃ)의 유사체를 함유하는 개량된 재구성 계면 활성제 조성물 | |
| EP0055041B1 (en) | Composition for curing respiratory diseases | |
| JP2007513180A (ja) | 喘息の処置および予防 | |
| WO1995015980A1 (en) | Novel synthetic peptide, lung surfactant containing the same, and remedy for respiratory distress syndrome | |
| KR101721309B1 (ko) | 계면활성 단백질 ｂ(ｓｐ－ｂ) 및 계면활성 단백질 ｃ(ｓｐ－ｃ)의 유사체를 포함하는 합성 폐 계면활성제 조성물 | |
| HK1079221B (en) | Improved synthetic lipid mixtures for the preparation of a reconstituted surfactant | |
| KR101784651B1 (ko) | 계면활성 단백질 ｂ(ｓｐ－ｂ) 및 계면활성 단백질 ｃ(ｓｐ－ｃ)의 유사체를 포함하는 합성 폐 계면활성제 조성물 | |
| HK1140420B (en) | Reconstituted surfactants having improved properties | |
| HK1185274B (en) | Reconstituted surfactants having improved properties | |
| HK1185274A1 (en) | Reconstituted surfactants having improved properties | |
| JP2003502441A (ja) | サーファクタントタンパク質ｃエステル |