UA76074C2 - Calmophil, pharmaceutical composition for substitution therapy aimed at recovering malfunctioned surfactant system of lungs - Google Patents
Calmophil, pharmaceutical composition for substitution therapy aimed at recovering malfunctioned surfactant system of lungs Download PDFInfo
- Publication number
- UA76074C2 UA76074C2 UAA200510611A UAA200510611A UA76074C2 UA 76074 C2 UA76074 C2 UA 76074C2 UA A200510611 A UAA200510611 A UA A200510611A UA A200510611 A UAA200510611 A UA A200510611A UA 76074 C2 UA76074 C2 UA 76074C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- phospholipids
- surfactant
- heparin
- hexane
- fraction
- Prior art date
Links
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 title claims abstract description 83
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 title claims abstract description 28
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title abstract 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 title 1
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 47
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 42
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 39
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 23
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 claims abstract description 13
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 claims abstract description 13
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 claims abstract description 13
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 12
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002044 hexane fraction Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 claims description 10
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 6
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 5
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 3
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 claims description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 34
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 abstract description 20
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 abstract description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 abstract description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 abstract description 3
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 abstract description 3
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 abstract description 3
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 abstract description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 abstract description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 abstract 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 abstract 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 9
- 239000003580 lung surfactant Substances 0.000 description 9
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 8
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 8
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N docosahexaenoic acid Natural products CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 7
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 7
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 6
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 6
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 6
- KNQLISSGRPNPCR-UHFFFAOYSA-N n-(dipyridin-2-ylmethylideneamino)furan-2-carboxamide Chemical compound C=1C=COC=1C(=O)NN=C(C=1N=CC=CC=1)C1=CC=CC=N1 KNQLISSGRPNPCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 6
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 6
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 229940066294 lung surfactant Drugs 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 4
- 231100000824 inhalation exposure Toxicity 0.000 description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 3
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- -1 FA phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 2
- 210000004276 hyalin Anatomy 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 2
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 2
- FMNQRUKVXAQEAZ-JNRFBPFXSA-N (5z,8s,9r,10e,12s)-9,12-dihydroxy-8-[(1s)-1-hydroxy-3-oxopropyl]heptadeca-5,10-dienoic acid Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@@H](O)[C@H]([C@@H](O)CC=O)C\C=C/CCCC(O)=O FMNQRUKVXAQEAZ-JNRFBPFXSA-N 0.000 description 1
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000006410 Apoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083590 Apoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058490 Hyperoxia Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000442132 Lactarius lactarius Species 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- NPPQSCRMBWNHMW-UHFFFAOYSA-N Meprobamate Chemical compound NC(=O)OCC(C)(CCC)COC(N)=O NPPQSCRMBWNHMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 description 1
- 206010028974 Neonatal respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000000528 Pulmonary Surfactant-Associated Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010041520 Pulmonary Surfactant-Associated Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- XNRNNGPBEPRNAR-UHFFFAOYSA-N Thromboxane B2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1OC(O)CC(O)C1CC=CCCCC(O)=O XNRNNGPBEPRNAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004378 air conditioning Methods 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000012223 aqueous fraction Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000004044 bronchoconstricting agent Substances 0.000 description 1
- 230000003435 bronchoconstrictive effect Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000001840 cholesterol esters Chemical class 0.000 description 1
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 150000002066 eicosanoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N gamma-Linolensaeure Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N gamma-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N 0.000 description 1
- 235000020664 gamma-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002733 gamolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000222 hyperoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 231100000016 inhalation toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 239000013554 lipid monolayer Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000010525 oxidative degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000036593 pulmonary vascular resistance Effects 0.000 description 1
- 230000009711 regulatory function Effects 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 238000005320 surfactant adsorption Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід відноситься до фармацевтичної промисловості, а саме до технології одержання лікарських засобів з 2 тканин морських гідробіонтів і може бути використаний як лікувальний засіб для відновлення функцій сурфактантної системи людини при її розладах.The invention relates to the pharmaceutical industry, namely to the technology of obtaining medicines from 2 tissues of marine hydrobionts and can be used as a therapeutic agent to restore the functions of the human surfactant system in its disorders.
Аналіз сучасної інформації вказує, що сурфактант легенів є сумішшю ліпідів та білків, які синтезуються і секретуються в альвеолярній рідині епітелі«альними клітинами другого типу, що вистилають легеневі альвеоли та зменшують поверхневий натяг. Головна функція сурфактанту - зниження поверхневого натягу при стані 70 легені-повітря/рідина з утворенням поверхнево-активної плівки, яка містить ліпідний моношар, збагачений дипальмітоїлфосфатидилхоліном (ДПФХ) до (40-50)95о. ДПФХ вміщує 2-насичені ацильні ланцюги. Ліпіди з ненасиченими жирними кислотами можуть щільно пакуватись в моношари. Ненасичені ліпіди розглядаються як дуже важливі для функції сурфактанту в зв'язку з тим, що рідинність сурфактантної плівки захищає плівку від жорсткості. До складу поверхнево-активних речовин (ПАР) новонароджених дітей входять такі фракції 12 фосфоліпідів, як ДПФХ, фосфатидилетаноламін (ФЕА), фосфатидилсерин (ФС), фосфатидилгліцерид (ФГ), сфінгомієлін, (СМ), фосфатидилінозитол (ФІ), фосфатидна кислота. В складі жирних кислот рідинних фосфоліпідів найбільшу перевагу має пальмітинова кислота.Analysis of current information indicates that lung surfactant is a mixture of lipids and proteins that are synthesized and secreted in the alveolar fluid by epithelial cells of the second type that line the lung alveoli and reduce surface tension. The main function of the surfactant is to reduce the surface tension at a state of 70 lung-air/liquid with the formation of a surface-active film, which contains a lipid monolayer enriched with dipalmitoylphosphatidylcholine (DPFH) to (40-50)95o. DPFH accommodates 2-saturated acyl chains. Lipids with unsaturated fatty acids can tightly pack into monolayers. Unsaturated lipids are considered very important for surfactant function because the fluidity of the surfactant film protects the film from stiffness. The composition of surfactants (surfactants) of newborn children includes fractions of 12 phospholipids, such as DPFH, phosphatidylethanolamine (FEA), phosphatidylserine (FS), phosphatidylglyceride (FG), sphingomyelin, (SM), phosphatidylinositol (FI), phosphatidic acid. Among the fatty acids of liquid phospholipids, palmitic acid has the greatest advantage.
Оскільки ряд захворювань легенів є наслідком недостачі сурфактанту, основою специфічного проявлення відомих препаратів-сурфактантів як природних, так і штучних є заміщувальна терапія (11).Since a number of lung diseases are the result of surfactant deficiency, the basis of the specific manifestation of known surfactant preparations, both natural and artificial, is replacement therapy (11).
ДПФХ є єдиним міцним фактором зниження поверхневого натягу, який відповідає за властивості зниження поверхневого натягу легеневого сурфактанту сумісно з іншими фосфоліпідами, а також із сурфактантом апопротеїну (білкові речовини, що підсилюють адсорбцію сурфактанту). Вважається, що фосфатидилхолін (ФХ),DPFH is the only strong surface tension-lowering factor responsible for the surface-tension-lowering properties of pulmonary surfactant in concert with other phospholipids as well as apoprotein surfactant (protein substances that enhance surfactant adsorption). It is believed that phosphatidylcholine (FH),
ФЕА, ФГ і ФІ вносять значний вклад у підсилення властивостей розповсюдження та адсорбції легеневого сурфактанту. с 29 Відомо, що натуральний легеневий сурфактант включає суміш багатьох сполук, де головним є (39 дипальмітоїлФфХ, а саме 1,2-дипальмітоїл,З-гліцероФуХ - 4195, холестерол - біля 995, суміш білків - 995, ФЕА - 5905.FEA, FG and FI make a significant contribution to strengthening the spreading and adsorption properties of pulmonary surfactant. p. 29 It is known that the natural lung surfactant includes a mixture of many compounds, the main one being (39 dipalmitoylFfX, namely 1,2-dipalmitoyl, 3-glyceroFuX - 4195, cholesterol - about 995, a mixture of proteins - 995, FEA - 5905.
ФГі ФС - 496, ФІ- 296, СМ - 195, жирні кислоти - 195. Вказані компоненти можуть бути використані при дихальній недостатності, яка є супутником "респіраторного дистрес-синдрому" (РДС) у дорослих і дітей, який характеризується дефіцитом легеневого сурфактанту при захворюванні "гіалінових мембран" у новонароджених, З а також при порушеннях біосинтетичних процесів в альвеолоцитах другого типу, що виробляють сурфактант. чаFG and FS - 496, FI- 296, SM - 195, fatty acids - 195. These components can be used for respiratory failure, which is a companion of "respiratory distress syndrome" (RDS) in adults and children, which is characterized by a deficiency of pulmonary surfactant in diseases of "hyaline membranes" in newborns, as well as in disorders of biosynthetic processes in alveolocytes of the second type that produce surfactant. Cha
Пошкодження сурфактанту може викликатись як гіпоксією, так і гіпероксією, інфекцією дихальних шляхів.Surfactant damage can be caused by both hypoxia and hyperoxia, respiratory tract infection.
Широкий діапазон етіологічних факторів підкреслює актуальність проблеми недостатності сурфактанту, яка може о виникнути в любому віці, особливо в реанімаційних хворих при штучній вентиляції легенів (21. Ге)A wide range of etiological factors emphasizes the relevance of the problem of surfactant insufficiency, which can occur at any age, especially in intensive care patients with artificial lung ventilation (21. Ge)
Відомо про замісну терапію для відновлення втраченого сурфактанту тварин. В зв'язку з цим виникає необхідність одержання штучних аналогів сурфактанту на основі підбору компонентів, які подібні за складом в речовинам природного сурфактанту. Показано позитивний вплив екзогенних сурфактантів із легенів корови |З| |і амніотичної рідини |4), які вводили дітям з дихальним синдромом. При цьому не було виявлено побічних токсичних ефектів. «It is known about replacement therapy to restore the lost surfactant of animals. In this regard, there is a need to obtain artificial surfactant analogues based on the selection of components that are similar in composition to natural surfactant substances. The positive effect of exogenous surfactants from the lungs of the cow |Z| was shown |and amniotic fluid |4), which were administered to children with respiratory syndrome. At the same time, no side toxic effects were detected. "
З встановленням факту, що штучний сурфактант зменшує тяжкість захворювання дихальних розладів і З 70 попереджує захворювання, проводиться пошук і створення синтетичних сурфактантноподібних засобів для с лікування синдрому РДС. Для отримання швидкого зниження поверхневого натягу легенів можливеWith the establishment of the fact that artificial surfactant reduces the severity of respiratory disorders and C 70 prevents the disease, the search and creation of synthetic surfactant-like agents for the treatment of RDS syndrome is being conducted. It is possible to obtain a rapid decrease in the surface tension of the lungs
Із» використання ліпідної суміші, подібної легеневому сурфактанту іп мімо, яка складається з гетерогенної суміші ліпідів, що включає ДПФХ та інші фосфоліпіди з більш низькою температурою плавлення. В зв'язку з цим є актуальним і необхідним пошук фосфоліпідних сумішей природного походження, які були б близькі за своїм складом до сурфактанту і могли б використовуватися для лікування людини з недостатністю сурфактанту. і Відомо одержання штучного сурфактанту на основі ДПФХ або фосфоліпідної суміші в різних концентраціях,From" the use of a lipid mixture, similar to pulmonary surfactant and mimo, which consists of a heterogeneous mixture of lipids, including DPFH and other phospholipids with a lower melting point. In this regard, it is urgent and necessary to search for phospholipid mixtures of natural origin, which would be close in their composition to surfactant and could be used for the treatment of people with surfactant deficiency. and It is known to obtain an artificial surfactant based on DPFC or a phospholipid mixture in various concentrations,
Ге») до складу яких входять такі компоненти, як цукри, амінокислоти, спирти та жирні кислоти І|5). При клінічних і фармакологічних випробуваннях не всі штучні сурфактанти виявляють високу ефективність. о Відомо декілька синтетичних сурфактантів ("Есховум" - США (61, "Аіек" - Велика Британія), напівсинтетичні -і 20 ("Зигмапіа" - КО - США), природні ("Куросурф" - США) ГИ.Ge"), which include such components as sugars, amino acids, alcohols and fatty acids I|5). In clinical and pharmacological tests, not all artificial surfactants show high efficiency. o Several synthetic surfactants are known ("Eshovum" - USA (61, "Aiek" - Great Britain), semi-synthetic - and 20 ("Zigmapia" - KO - USA), natural ("Kurosurf" - USA) GI).
Відомий патент, де представлено застосування сумішей фосфоліпідів і нейтральних ліпідів як заміщувальноїA known patent, which presents the use of mixtures of phospholipids and neutral lipids as a substitute
Т» сурфактантної терапії різних форм РДС. Ці суміші показали значне підвищення поверхнево-активних ліпідів при використанні штучного сурфактанту |8І.T" of surfactant therapy of various forms of RDS. These mixtures showed a significant increase in surface-active lipids when artificial surfactant |8I was used.
Відомо про компонент, що забезпечує активність композицій - аналогів препаратів для заміщувальної 29 сурфактантної терапії легеневих захворювань на основі гідрованого соєвого ФХ (фосфоліпон-90ОН) як активногоIt is known about the component that ensures the activity of compositions - analogues of drugs for replacement 29 surfactant therapy of lung diseases based on hydrogenated soy FH (phospholipon-90OH) as an active
ГФ) компоненту ІФ), що забезпечує поверхнево-активні властивості препарату для заміщувальної сурфактантної терапії. о Відомо про вплив короткострокового ентерального вживання омега-3 ліпідів на жирнокислотний склад легенів макрофагів і сурфактантні фосфоліпіди, що підтверджує швидку модифікацію мембранних фосфоліпідів і 60 поліненасичених жирних кислот (ЖК) |10).HF) of the IF component), which provides surface-active properties of the drug for surfactant replacement therapy. o It is known about the influence of short-term enteral use of omega-3 lipids on the fatty acid composition of lung macrophages and surfactant phospholipids, which confirms the rapid modification of membrane phospholipids and 60 polyunsaturated fatty acids (FA) |10).
На даний час є важливі досліди, які вказують, що дефіцит есенціальних ЖК та фосфоліпідів впливає на розвиток різних захворювань і, в тому числі, свідчать про проявлення клініки захворювання легенів і недостатність сурфактанту. Це може бути пов'язано з відсутністю в організмі хворих поліненасичених ЖК та есенціальних фосфоліпідів (111. бо Існує гіпотеза, що низький рівень легеневих захворювань ескімосів є наслідком особливості харчування, в якому виявлено значний вміст ПНЖК «-3 та х-6.Currently, there are important studies that indicate that the deficiency of essential fatty acids and phospholipids affects the development of various diseases and, among other things, testify to the clinical manifestation of lung disease and surfactant deficiency. This may be due to the absence of polyunsaturated fatty acids and essential phospholipids in the body of patients (111. Because there is a hypothesis that the low level of lung diseases of Eskimos is a consequence of the peculiarity of the diet, in which a significant content of PUFA "-3 and x-6.
Імовірно, що ПНЖК переводять продукцію ейкозаноїдів на інший шлях синтезу від арахідонової кислоти.It is likely that PUFAs transfer the production of eicosanoids to another pathway of synthesis from arachidonic acid.
Таким чином, відбувається зменшення продукції бронхозвужуючих лейкотриєнів. Дослідження на тваринах показали, що додавання ейкозапентаєнової (ЕПК) або гама-ліноленової кислоти тваринам, які були під дією ендотоксинів, приводить до зменшення дії останніх на тромбоксан В-2 і підвищує стійкість легеневих судин (121. Є деякі відомості про те, що додавання ЕПК приводить до збільшення її вмісту у складі фосфоліпідів та до зменшення утворення лейкотриєнів у нейтрофілах. У зв'язку з цим захисний вплив ПНЖК при легеневих хворобах біологічно ймовірний. Результати епідеміологічних випробувань показали можливість захисних ефектів 7/0. ПНЖК проти астми у дітей і позитивні результати їх дії на бронхіти. Також показано, що споживання морських риб може захистити від епідемій та хронічних бронхітів. В останні роки омега-3 ПНЖК у вільному вигляді або в складі риб'ячого жиру використовуються для лікування деяких хвороб. Але відомо, що вільні омега-3 ПНЖК як нестабільні речовини можуть окислюватися в препаратах і в організмі при недостатності антиоксидантів. В той же час в складі фосфоліпідів ПНЖК проявляють стабільну резистентність до окислювальної деградації (ІЗ). Крім 75 цього відомо, що омега-3 ПНЖК в дієті швидко включаються в мембрани фосфоліпідів альвеолярних макрофагів, легенів і сурфактанту. Було також показано, що фосфоліпіди з омега-3 ПНЖК більш активно включаються в мембрани клітин ніж вільні ЖК - ЕПК і ДГК. При цьому омега-3 ПНЖК специфічно збільшуються в мембранних фосфоліпідах і не конкурують із зменшенням рівня арахідонової кислоти, яка є найбільш важливою омега-6 у складі ЖК фосфоліпідів у біологічних мембранах у порівнянні з ейкозапентаєновою кислотою.Thus, there is a decrease in the production of bronchoconstrictor leukotrienes. Animal studies have shown that the addition of eicosapentaenoic acid (EPA) or gamma-linolenic acid to endotoxin-exposed animals reduces the effects of the latter on thromboxane B-2 and increases pulmonary vascular resistance (121. There is some evidence that adding EPA leads to an increase in its content in the composition of phospholipids and to a decrease in the formation of leukotrienes in neutrophils. In this regard, the protective effect of PUFA in lung diseases is biologically probable. The results of epidemiological tests showed the possibility of protective effects 7/0. PUFA against asthma in children and positive their effects on bronchitis. It has also been shown that the consumption of marine fish can protect against epidemics and chronic bronchitis. In recent years, omega-3 PUFAs in their free form or as part of fish oil have been used to treat some diseases. But it is known that free omega -3 PUFAs as unstable substances can be oxidized in drugs and in the body with a lack of antioxidants. At the same time, in the composition of PUFA phospholipids show stable resistance to oxidative degradation (OS). In addition, it is known that omega-3 PUFAs in the diet are quickly incorporated into the phospholipid membranes of alveolar macrophages, lungs, and surfactant. It was also shown that phospholipids with omega-3 PUFA are more actively incorporated into cell membranes than free fatty acids - EPA and DHA. At the same time, omega-3 PUFAs specifically increase in membrane phospholipids and do not compete with the decrease in the level of arachidonic acid, which is the most important omega-6 in the composition of FA phospholipids in biological membranes compared to eicosapentaenoic acid.
В основу винаходу поставлено розробку способу одержання лікувального засобу для відновлення сурфактантної системи легенів при її розладах шляхом застосування нового способу обробки репродуктивних органів із морських гідробіонтів для одержання природного поверхнево-активного лікарського засобу на основі комплексу фосфоліпідів із омега-3 ПНЖК у структурі, що включають плазмалогенні фосфоліпіди, регуляторні коротколанцюгові пептиди та амінокислоти, якому притаманні поверхнево-активні властивості сурфактанту і сThe basis of the invention is the development of a method of obtaining a medicinal agent for restoring the surfactant system of the lungs in case of its disorders by using a new method of processing reproductive organs from marine hydrobionts to obtain a natural surface-active medicinal agent based on a complex of phospholipids with omega-3 PUFAs in a structure that includes plasmalogen phospholipids, regulatory short-chain peptides and amino acids, which has the surface-active properties of a surfactant and
Який, таким чином, виявляє позитивні властивості у якості заміщувальної терапії при розладах системи сурфактанту. Одержаний засіб забезпечує підвищення поверхневої активності та зменшення антигенних о властивостей.Which, thus, shows positive properties as a replacement therapy for disorders of the surfactant system. The obtained product provides an increase in surface activity and a decrease in antigenic properties.
Поставлена задача вирішується тим, що спосіб одержання лікувального засобу (торговельна марка - "Кальмофіл") для відновлення порушень сурфактантної системи людини, включає подрібнення сировини «ІThe set task is solved by the fact that the method of obtaining a therapeutic agent (trademark - "Kalmofil") for the restoration of violations of the human surfactant system includes the grinding of raw materials "I
Зо репродуктивних органів морських гідробіонтів (молочко, ікра головоногих молюсків - кальмарів та морських риб) у замороженому стані, екстракцію сировини етанолом, відокремлення етанольного екстракту від залишків в сировини фільтрацією, упарювання етанольного екстракту до остаточного видалення етанолу, очищення о одержаної фракції від похідних вуглеводнів, ефірів ЖК, продуктів окислення холестеролу та його ефірів перерозчиненням ліпід-білкової фракції в гексані, додаванням до гексанової фракції (5-15)95-го водного розчину ее, 10мММ Сасі» в етанолі у співвідношенні 1:5 та 1:10, відокремлення гексанового шару від спиртово-водної ї- фракції, додавання до гексанової фракції вітаміну Е до концентрації не менше 0,0595 і після упарювання гексанової фракції одержані ліпіди суспендують протягом 30-60 хвилин в фізіологічному розчині, додають гепарин у співвідношенні ПАР-.фізіологічний розчинтепарин - 1:100:(0,1-0,115), а отримані ліпосоми ліофілізують та одержують субстанцію кінцевого продукту. «From the reproductive organs of marine hydrobionts (milkfish, roe of cephalopods - squid and sea fish) in a frozen state, extraction of raw materials with ethanol, separation of the ethanolic extract from residues in the raw materials by filtration, evaporation of the ethanolic extract until the final removal of ethanol, purification of the obtained fraction from hydrocarbon derivatives, esters of fatty acids, oxidation products of cholesterol and its esters by redissolving the lipid-protein fraction in hexane, adding to the hexane fraction (5-15)95th aqueous solution of ee, 10 mM Sasi" in ethanol in a ratio of 1:5 and 1:10, separating the hexane layer from the alcohol-water fraction, adding vitamin E to the hexane fraction to a concentration of at least 0.0595, and after evaporating the hexane fraction, the obtained lipids are suspended for 30-60 minutes in a physiological solution, add heparin in the ratio of surfactant-. physiological solution, heparin - 1 :100:(0.1-0.115), and the obtained liposomes are lyophilized and the substance of the final product is obtained. "
До складу ПАР з гонад кальмарів входять: фосфоліпіди-(75-85)9о серед яких основний - ФХ, що вміщує до 8 с (27-35)96 пальмітинової кислоти, (16-17)96 ейкозапентаєнової кислоти, (17-18)90 докозагексаєнової кислоти, в й тому числі плазмалогенні фосфоліпіди (плазменілфосфатидилхолін і плазменілфосфатидилетаноламін), які «» ефективно зменшують поверхневий натяг (14), загальний холестерол (0,5-2,5)95, ефіри жирних кислот (0,1-0,5)965, вуглеводи (0,1-0,5)905, вільні ЖК (0,1-2,8)95, амінокислоти (5-7мг/мл), вітамін Е не більше гепарин (0,1-0,15390 (21.The surfactants from squid gonads include: phospholipids-(75-85)9o, the main of which is FH, which contains up to 8 s (27-35)96 palmitic acid, (16-17)96 eicosapentaenoic acid, (17-18) 90 docosahexaenoic acid, including plasmalogen phospholipids (plasmenylphosphatidylcholine and plasmanylphosphatidylethanolamine), which "" effectively reduce surface tension (14), total cholesterol (0.5-2.5)95, fatty acid esters (0.1-0, 5)965, carbohydrates (0.1-0.5)905, free fatty acids (0.1-2.8)95, amino acids (5-7mg/ml), vitamin E no more than heparin (0.1-0, 15390 (21.
При дослідженні складу компонентів сурфактанту - поверхнево-активних речовин (ПАР) з морських організмів -і виявлена їх подібність до складу ПАР, вилучених з тканин легенів (таблиця 1, 2).When studying the composition of surfactant components - surface-active substances (surfactants) from marine organisms - their similarity to the composition of surfactants extracted from lung tissues was revealed (tables 1, 2).
Ф оF o
Компоненти ПАР з морських Компоненти ПАР з їх й о ю воComponents of surfactants from marine Components of surfactants from their and o yu vo
Плазмалогени (плазменілфосфатидилетаноламін, плазменілфосфатидилхолін) 0,1-0,5 Вуглеводи б5 мкг/мл мкг/мл мг/мл гідролізаті, мкг/мл " /сурфактант/Plasmalogens (plasmenylphosphatidylethanolamine, plasmanylphosphatidylcholine) 0.1-0.5 Carbohydrates b5 μg/ml μg/ml mg/ml hydrolyzate, μg/ml " /surfactant/
Сукупність визначених авторами операцій способу, його режимів застосування схем і обробки репродуктивних тканин морських головоногих молюсків (кальмари) дозволяє одержати засіб з новим спектром 75 властивостей та вирішити поставлену задачу. Застосування операцій способу приводить до наступних переваг: - використання відходів рибної промисловості як сировини; - використання репродуктивних органів морських головоногих - молюсків (кальмарів) дозволяє одержати значний вміст фосфоліпідів з омега-3 ПНЖК, серед яких головним є ДПФХ з пальмітиновою кислотою та омега-3The set of operations of the method determined by the authors, its modes of application, schemes and processing of reproductive tissues of marine cephalopods (squid) allows to obtain a tool with a new spectrum of 75 properties and to solve the task. Application of operations of the method leads to the following advantages: - use of waste from the fishing industry as raw materials; - the use of reproductive organs of marine cephalopods - molluscs (squids) allows to obtain a significant content of phospholipids from omega-3 PUFAs, among which the main one is DPFH with palmitic acid and omega-3
ПНЖК в структурі, а також плазмалогенних фосфоліпідів (плазменілФЕА і плазменілфХ), цінних амінокислот, 2о включаючи значний вміст аргиніну, гліцину, а також глютамінової кислоти, які мають відношення до коротколанцюгових пептидів та пептидних біорегуляторів, які підвищують сурфактантноподібні властивості засобу; - за рахунок маніпуляції з перерозчиненням екстракту в гексані з додаванням водного розчину 10мММ Сасі»о в етанолі вдається видалити значну кількість ефірів холестеролу, жирних кислот та вуглеводнів, що покращує ГаPUFA in the structure, as well as plasmalogen phospholipids (plasmenylFEA and plasmanilfX), valuable amino acids, 2o including a significant content of arginine, glycine, as well as glutamic acid, which are related to short-chain peptides and peptide bioregulators that increase the surfactant-like properties of the agent; - due to the manipulation of the redissolution of the extract in hexane with the addition of an aqueous solution of 10 mM Saci»o in ethanol, it is possible to remove a significant amount of cholesterol esters, fatty acids and hydrocarbons, which improves the
Якість субстанції; - перевага нового способу полягає в тому, що одержана субстанція містить комплекс фосфоліпідів з омега-3 і)Quality of the substance; - the advantage of the new method is that the obtained substance contains a complex of phospholipids with omega-3 i)
ПНЖК, серед яких основний ДПФХ містить до (35-50)95 пальмітинової кислоти, до 2095 докозагексаєнової кислоти, (10-15)95 ЕПК, причому всі фосфоліпіди одержаного комплексу вміщують пальмітинову кислоту; - одержана субстанція містить регуляторні пептиди, амінокислоти, незначну кількість білку, в зв'язку з «І чим одержаний препарат не має побічної дії і не проявляє антигенних властивостей по відношенню до місцевих клітинних імунних реакцій в легенях про що свідчать експериментальні дослідження інгаляційного введення т препарату щурам з подальшим гістохімічним вивченням макрофагів. Число макрофагів при дії сурфактанту о протягом 1 години та 1, З, 7 діб не відрізняється від контролю. Наведені дані про відсутність антигенності препарату можуть бути обумовлені присутністю тільки невеликої домішки білку (0,1-0,5)96 в препараті, що є іш позитивним фактором. ч-PUFAs, among which the main DPFC contains up to (35-50)95 palmitic acid, up to 2095 docosahexaenoic acid, (10-15)95 EPA, and all phospholipids of the resulting complex contain palmitic acid; - the obtained substance contains regulatory peptides, amino acids, a small amount of protein, in connection with "And the obtained drug has no side effects and does not show antigenic properties in relation to local cellular immune reactions in the lungs, as evidenced by experimental studies of inhalation administration of the drug rats with further histochemical study of macrophages. The number of macrophages under the action of surfactant for 1 hour and 1, 3, 7 days does not differ from the control. The given data on the lack of antigenicity of the drug can be due to the presence of only a small admixture of protein (0.1-0.5)96 in the drug, which is a positive factor. h-
Використання вказаного способу має такі переваги: - значний вихід (до 8 90) біологічних ПАР із відходів морських організмів (репродуктивних органів кальмарів) у порівнянні з ПАР із легеневої тканини ссавців (до 1,596); « - покращення якості очистки за рахунок перерозчинення біологічних ПАР в гексані з додаванням спиртового розчину Сасі»; - с - проведення операції суспендування ліпідних компонентів для одержання ліпосом; ц - додавання до суміші ПАР гепарину, який покращує мікроциркуляцію кровообігу та стабілізує "» низькодисперсну структуру ліпосомного препарату; - наявність у фракції фосфоліпідів значної кількості плазмалогенів пояснює підвищення поверхневої активності сурфактантом з морських організмі; -І - спрощення способу одержання препарату; - одержана субстанція за рахунок фосфоліпідів з омега-3 ПНЖК в структурі має мембранно-протекторні та б імунно-модулюючі властивості, відновлює недостатність ПНЖК в організмі - докозагексаєнової і ав | ейкозапентаєнової та регулює вміст арахідонової кислоти, яка має відношення до синтезу простагландинів в організмі. і Короткострокове збагачення організму препаратом з фосфоліпідами омега-3 ПНЖК надає швидку модуляцію «з» мембранних фосфоліпідів легеневих тканин, альвеолярних макрофагів, легеневого сурфактанту.The use of this method has the following advantages: - a significant yield (up to 8 90) of biological surfactants from the waste of marine organisms (reproductive organs of squid) compared to surfactants from the lung tissue of mammals (up to 1,596); "- improvement of the quality of cleaning due to the redissolution of biological surfactants in hexane with the addition of an alcoholic solution of Sasi"; - c - carrying out the operation of suspending lipid components to obtain liposomes; c - addition of heparin to the surfactant mixture, which improves the microcirculation of the blood circulation and stabilizes the low-dispersion structure of the liposomal drug; - the presence of a significant amount of plasmalogens in the phospholipid fraction explains the increase in surface activity of the surfactant from marine organisms; -I - simplification of the method of preparation of the drug; - the obtained substance according to the number of phospholipids with omega-3 PUFAs in the structure has membrane-protective and b immune-modulating properties, restores the deficiency of PUFAs in the body - docosahexaenoic and av | eicosapentaenoic and regulates the content of arachidonic acid, which is related to the synthesis of prostaglandins in the body. and Short-term enrichment of the body a drug with omega-3 phospholipids PUFA provides rapid modulation "from" membrane phospholipids of lung tissues, alveolar macrophages, lung surfactant.
Основою створеного комплексу є фосфоліпіди, серед яких головний є ДПФХ з омега-3 ПНЖК в структурі, плазмалогенні фосфоліпіди - плазменілФХ і плазменілФЕА із значною кількістю докозагексаєнової кислоти в структурі, які ефективно зменшують поверхневий натяг і стабілізують гексагональну структуру ФЛ та покращують поверхневу активність сурфактантноподібної фосфоліпідної суміші (14). До цього комплексу входять також вільні о амінокислоти із значним вмістом лізину, аргиніну, гліцину, глютамінової кислоти, які є біологічно активними ко речовинами, вітамін Е і гепарин.The basis of the created complex is phospholipids, the main of which is DPFC with omega-3 PUFA in the structure, plasmalogenic phospholipids - plasminilFC and plasminilFEA with a significant amount of docosahexaenoic acid in the structure, which effectively reduce surface tension and stabilize the hexagonal structure of PL and improve the surface activity of the surfactant-like phospholipid mixture (14). This complex also includes free amino acids with a significant content of lysine, arginine, glycine, glutamic acid, which are biologically active co-substances, vitamin E and heparin.
Усунення новим способом одночасно значної кількості небажаних ліпідів у комплексі з білком дозволяє бо виділити субстанцію, яка за складом біологічно активних речовин має відношення до відновлення порушень функції сурфактантної системи організму і лікування легеневих захворювань, недостатності сурфактанту в організмі, хвороби гіалінових мембран новонароджених.The simultaneous elimination of a significant amount of unwanted lipids in a complex with protein by a new method makes it possible to isolate a substance whose composition of biologically active substances is related to the restoration of disorders of the body's surfactant system and the treatment of lung diseases, surfactant deficiency in the body, and diseases of the hyaline membranes of newborns.
Суть винаходу полягає в тому, що для заміщувальної терапії легеневих захворювань та при недостатності сурфактанту особливо у новонароджених вперше виділена субстанція біологічно активних речовин з морських 65 організмів (фосфоліпіди з омега-3 ПНЖК в структурі - сурфактантноподібний комплекс), яка використовується для заміщувальної терапії легеневих захворювань, що ілюструється конкретними прикладами його здійснення та результатами дослідження одержаного кінцевого продукту - субстанції препарату.The essence of the invention is that for the replacement therapy of lung diseases and in the case of insufficient surfactant, especially in newborns, a substance of biologically active substances from 65 marine organisms (phospholipids with omega-3 PUFA in the structure - a surfactant-like complex) has been isolated for the first time, which is used for the replacement therapy of lung diseases , which is illustrated by specific examples of its implementation and the results of the study of the final product obtained - the substance of the drug.
Приклад 1 100г гонад кальмарів (молочко і ікра ) подрібнюють в замороженому стані на м'ясорубці, заливають 10 об'ємами етанолу, перемішують З години в реакторі з мішалкою, далі екстракт фільтрують, випаровують у вакуумі до повного видалення спирту. Одержану фракцію перерозчинюють в гексані у співвідношенні 1:5 при температурі (25-30)2С. У гексановий розчин додають 5906-й водний розчин 10мМ Сасі» в етанолі. Осад, що містить домішки білків і нейтральних ліпідів, після відстоювання відокремлюють, а в гексановий розчин додають вітамін Е у кількості не менше 0,05965, випарюють у вакуумі та одержують ліпідну фракцію, яку суспендують 70 протягом 30 хвилин у фізіологічному розчині, додають гепарин у кількості 0,195, ліофілізують і отримують субстанцію, яку використовують для одержання лікарської форми препарату. Вихід - 8г (8905).Example 1 100 g of squid gonads (milk and roe) are crushed in a frozen state in a meat grinder, poured with 10 volumes of ethanol, stirred for 3 hours in a reactor with a stirrer, then the extract is filtered, evaporated in a vacuum until the alcohol is completely removed. The obtained fraction is redissolved in hexane in a ratio of 1:5 at a temperature of (25-30)2С. A 5906th aqueous solution of 10 mM Sasi" in ethanol is added to the hexane solution. The sediment containing impurities of proteins and neutral lipids is separated after settling, and vitamin E in the amount of at least 0.05965 is added to the hexane solution, evaporated in a vacuum and the lipid fraction is obtained, which is suspended for 30 minutes in a physiological solution, heparin is added to in the amount of 0.195, lyophilized and a substance is obtained, which is used to obtain the dosage form of the drug. Output - 8g (8905).
Приклад 2 100г ікри кальмарів подрібнюють в замороженому стані на м'ясорубці, заливають 10 об'ємами етанолу, перемішують З години в реакторі з мішалкою, далі екстракт фільтрують, випарюють у вакуумі до повного 75 видалення спирту. Одержану фракцію перерозчинюють в гексані у співвідношенні 1:10 при температурі (25-30)20. У гексановий розчин додають 1095-й водний розчин 10мМ Сасі» в етанолі. Осад, що містить домішки білків і нейтральних ліпідів, після відстоювання відокремлюють, а в гексановий розчин додають вітамін Е у кількості не менш 0,05965, випарюють у вакуумі та одержують ліпідну фракцію, яку суспендують протягом 30 хвилин у фізіологічному розчині, додають гепарин у кількості 0,1595, ліофілізують і отримують субстанцію, яку використовують для одержання лікарської форми препарату. Вихід - 7,5г (7,590).Example 2 100 g of squid roe are crushed in a frozen state in a meat grinder, poured with 10 volumes of ethanol, stirred for 3 hours in a reactor with a stirrer, then the extract is filtered, evaporated in a vacuum until the alcohol is completely removed. The obtained fraction is redissolved in hexane in a ratio of 1:10 at a temperature of (25-30)20. A 1095% aqueous solution of 10 mM Sasi" in ethanol is added to the hexane solution. The precipitate containing impurities of proteins and neutral lipids is separated after settling, and vitamin E in the amount of at least 0.05965 is added to the hexane solution, evaporated in a vacuum and the lipid fraction is obtained, which is suspended for 30 minutes in a physiological solution, heparin is added in the amount 0.1595, lyophilized and obtain a substance that is used to obtain a dosage form of the drug. Yield - 7.5g (7.590).
Приклад З 100г молочка кальмарів подрібнюють у замороженому стані на м'ясорубці, заливають 10 об'ємами етанолу, перемішують З години в реакторі з мішалкою, далі екстракт фільтрують, випарюють у вакуумі до повного видалення спирту. Одержану фракцію перерозчинюють в гексані у співвідношенні 1:5 при температурі Ге (25-30)20. У розчин гексану додають (5-15)96-й водний розчин 10мМ Сасі» в етанолі. Осад, що містить домішки (5) білків і нейтральних ліпідів, після відстоювання відокремлюють, а в розчин гексану додають вітамін Е у кількості не менш 0,0595 і випарюють у вакуумі. Одержану ліпідну фракцію суспендують протягом ЗО хвилин у фізіологічному розчині, додають гепарин у кількості 0,1595 для покращення мікроциркуляції кровообігу, одержаний розчин ліофілізують і отримують субстанцію, яку використовують для одержання лікарської форми « препарату. Вихід - 7,Ог (7905). чнExample 100 g of squid milk is crushed in a frozen state in a meat grinder, poured with 10 volumes of ethanol, stirred for 3 hours in a reactor with a stirrer, then the extract is filtered, evaporated in a vacuum until the alcohol is completely removed. The obtained fraction is redissolved in hexane in a ratio of 1:5 at a temperature of He (25-30)20. A (5-15) 96th aqueous solution of 10 mM Sasi" in ethanol is added to the hexane solution. The precipitate containing impurities (5) of proteins and neutral lipids is separated after settling, and vitamin E in the amount of at least 0.0595 is added to the hexane solution and evaporated in a vacuum. The obtained lipid fraction is suspended for 30 minutes in a physiological solution, heparin is added in the amount of 0.1595 to improve the microcirculation of blood circulation, the obtained solution is lyophilized and a substance is obtained, which is used to obtain the dosage form of the drug. Output - 7. Ohm (7905). chn
Приклад 4Example 4
Дослідження дії фосфоліпідного препарату з морських організмів як сурфактанту. | «в)Study of the action of a phospholipid preparation from marine organisms as a surfactant. | "in)
Проведення випробувань відбувалось в наступних направленнях: с - модулювання процесів інтоксикації, що призводить до порушень властивостей сурфактантної системи легенів і завершується літальним кінцем без застосування спеціальної терапії; - - застосування речовини із властивостями сурфактанту шляхом інгаляційної дії на експериментальних тваринах; - спостереження за станом тварин (кількість загиблих, показники стану сурфактантної системи легенів); « - розробка рекомендацій по застосуванню препарату, одержаного з відходів переробки кальмарів (гонади) для аерогенного впливу в умовах інтоксикації. т с При проведенні досліду вимірюють наступні показники: загибель тварин, зміни маси тіла, зниження величини ч поверхневого натягу сурфактанту легенів (сталагнометрично), кількість альвеолярних макрофагів в » трахеобронхіальному лаваші, клітинна реакція сурфактантної системи легенів, стан функції легенів за показниками об'єму піни, часу випарювання.The tests were carried out in the following directions: c - modulation of intoxication processes, which leads to violations of the properties of the surfactant system of the lungs and ends in a flying end without the use of special therapy; - - use of a substance with surfactant properties by inhalation on experimental animals; - observation of the condition of animals (number of dead, indicators of the state of the surfactant system of the lungs); "- development of recommendations for the use of the drug obtained from squid processing waste (gonads) for aerogenic effect in conditions of intoxication. t s During the experiment, the following indicators are measured: animal death, changes in body weight, decrease in the value h of the surface tension of lung surfactant (stalagnometrically), the number of alveolar macrophages in » tracheobronchial lavash, cellular reaction of the surfactant system of the lungs, the state of lung function according to indicators of foam volume , evaporation time.
В дослідах для інгаляційного впливу використовують білих щурів на звичайному раціоні. Час спостереження - за тваринами -14 діб з моменту модулювання токсичного процесу. Речовина з властивостями сурфактантуWhite rats on a normal diet are used in experiments for inhalation exposure. Observation time - for animals - 14 days from the moment of modulation of the toxic process. A substance with surfactant properties
ФО застосовується для інгаляції в 195 - та 1095-му розчині на етанолі. Кількість речовини для інгаляції не перевищує 0,25мл/хв. Розмір часток, що інгалюються, складає від 0,03 до З,Омкм. В контрольних експериментах («в встановлена відсутність інгаляційного впливу на повадки та на тривалість життя щурів з масою тіла від 185,0 -1 20 до 210,0Ог.FO is used for inhalation in a 195- and 1095-th ethanol solution. The amount of substance for inhalation does not exceed 0.25 ml/min. The size of inhaled particles ranges from 0.03 to 3.0 µm. In control experiments, it was established that there was no inhalation effect on the behavior and life expectancy of rats with a body weight from 185.0 -1 20 to 210.0Og.
В результаті застосування речовини з властивостями сурфактанту при максимальних ознаках інтоксикації без ї» застосування інших спеціальних методів антидотної терапії виживання щурів в досліджуваних групах зросло відповідно - при мепротановій, аміачній і бензиновій інтоксикаціях на 40, 35 і 50 95 (табл. 3). 5в й 11073 мл 11033, н/м 1103, н/м 11023, н/м воAs a result of the use of a substance with surfactant properties at the maximum signs of intoxication without the use of other special methods of antidote therapy, the survival of rats in the studied groups increased accordingly - with meprotan, ammonia and gasoline intoxications by 40, 35 and 50 95 (Table 3). 5v and 11073 ml 11033, n/m 1103, n/m 11023, n/m in
Контроль без дії ФАР"""| 15,2-0,66 40,1-0,3 - - - - б5Control without PAR effect"""| 15.2-0.66 40.1-0.3 - - - - b5
"- ІСТ - інгаляційна доза токсичності; 75 - ПН - поверхневий натяг; "хх - ФАР - фізіологічно активна речовина."- IST - inhalation toxicity dose; 75 - PN - surface tension; "xx - PHAR - physiologically active substance.
Токсикологічну оцінку нового препарату - штучного сурфактанту з гонад кальмару - вивчали шляхом інгаляційного введення за допомогою приладу ПАЇ!І-2 білим щурам (вагою тіла 195,6 -4,5г) та білим мишам (вагою тіла 23,4-1,7г) протягом 7 діб в інтервалах 1 година, 1, З, 7 діб. В кожну з 4 груп брали по 10 тварин. Масові концентрації аерозолю препарату в межах від 33333,Омг/м? до 666 мг/м? підтримують протягом 4 70 годин інгаляційного впливу для щурів і 2 години для мишей. До інгаляції і після неї тварини знаходяться в умовах звичайного лабораторного утримання. Клінічні досліди за станом тварин і розподілом загибелі тварин проводять протягом 14 діб з моменту інгаляційного впливу препарату. Встановлено, що для білих щурів середня летальна концентрація складає 11200,0 -606,4мг/м?, а для білих мишей 8000 4542,0мг/м3. У відповідності з вимогами ДЕСТ 12.1.007-76 препарат відноситься до З класу небезпечності при інгаляційному впливі і є 12 сполукою з помірно небезпечними властивостями (табл. 4).The toxicological evaluation of the new drug - an artificial surfactant from squid gonads - was studied by inhalation using the PAI!I-2 device to white rats (body weight 195.6-4.5g) and white mice (body weight 23.4-1.7g) for 7 days in intervals of 1 hour, 1, 3, 7 days. 10 animals were taken into each of the 4 groups. Mass concentrations of the aerosol of the drug in the range of 33333.Omg/m? to 666 mg/m? maintained for 4 70 hours of inhalation exposure for rats and 2 hours for mice. Before and after inhalation, the animals are kept under normal laboratory conditions. Clinical experiments on the condition of animals and the distribution of animal deaths are carried out within 14 days from the moment of inhalation exposure to the drug. It was established that the average lethal concentration for white rats is 11200.0 -606.4 mg/m3, and for white mice it is 8000 4542.0 mg/m3. In accordance with the requirements of DEST 12.1.007-76, the drug belongs to the 3rd class of danger when inhaled and is a 12th compound with moderately dangerous properties (Table 4).
Таблиця 4Table 4
Токсикологічна характеристика дії сурфактанту з гонад кальмаруToxicological characteristics of surfactant from squid gonads
Більше 2500 мг/к" ни сч щі 6)More than 2,500 mg/kg" 6)
З клас небезпечності за ДЕСТ 12.1.007-76C class of danger according to DEST 12.1.007-76
Фармакологічну оцінку сурфактанту, отриманого з гонад кальмару, проводять в умовах його інгаляційного «т зо введення. Концентрація препарату, який вводиться аерозольне, була кратна одній десятій середньолетальної дози для білих щурів вагою тіла 195,6 -4,5г. Дослід проводять в динаміці (1 година, 71, З, 7 діб). В групи і - брали по 10 тварин. Концентрація аерозолю препарату (1120,0-254,Змг/м3) підтримується в камері протягом 4 Га») годин інгаляційного впливу.Pharmacological evaluation of the surfactant obtained from the gonads of squid is carried out under the conditions of its inhalational administration. The concentration of the drug, which is administered by aerosol, was a multiple of one-tenth of the average lethal dose for white rats with a body weight of 195.6 -4.5 g. The experiment is conducted in dynamics (1 hour, 71, C, 7 days). In groups and - 10 animals were taken. The aerosol concentration of the drug (1120.0-254.Zmg/m3) is maintained in the chamber for 4 hours of inhalation exposure.
В умовах описаного досліду загибелі піддослідних тварин не зареєстровано. Як після інгаляції, так і ке,In the conditions of the described experiment, no deaths of experimental animals were registered. Both after inhalation and ke,
Зз5 протягом спостереження тварини відчували себе задовільно. Аерозольний вплив не приводить до наявних ча розладів з боку органів та систем (табл. 5).Зз5 during observation, the animals felt satisfactory. Aerosol exposure does not lead to existing cha disorders on the part of organs and systems (Table 5).
Таблиця 5Table 5
Стан кондиціонерної та гідродинамікорегуляторної функції « 4 З а При інгаляції сурфактанту 1,09-0,08 2,3-0,8 5,3-0,8 6,9-0,9 "» Час випарення сурфактанту, мл/хв 0,0090-0,0001| 0,030-0,001 10,050-0,002| 0,020-0,001The condition of the air conditioning and hydrodynamic regulatory function « 4 Z a When inhaling the surfactant 1.09-0.08 2.3-0.8 5.3-0.8 6.9-0.9 "» Evaporation time of the surfactant, ml/min 0 .0090-0.0001| 0.030-0.001 10.050-0.002| 0.020-0.001
При інгаляції речовини, яка має властивості сурфактанту /10,0080-0,0001 0,0070--0,0001 10,010-0,00210,0090-0,0002 -і Досліди з перевірки препарату "Кальмофіл" на поверхневий натяг та сурфактантну дію проведені б американськими дослідниками Університету (Каліфорнія, Лос-Анжелес) з препаратами - стандартами для замісної сурфактантної терапії "Зигмапіа" та "Ехозиї США. Показано близьку активність "Кальмофілу" до (ав) вказаних стандартів. При застосуванні препарату "Кальмофіл" порівняно з контролем підвищується виживання - 50 тварин. В дослідах іп мімо та іп мйго при токсичній дії окислювального стресу, індукованого гострим отруєнням ССІ,, введення препарату знижує токсичну дію метаболічної отрути, позитивно впливає на виживання чз» тварин, знижує інтенсивність перекисного окислення ліпідів (ПОЛ), корегує токсичний вплив ССІ). Дослідження іп мімо властивостей сурфактанту на недоношених кроликах з недостатністю сурфактанту, проведені в порівнянні з препаратами-стандартами "Зигмапіа" та "Ехозип", показали зниження рівня респіраторного тиску легенів (табл. б).When inhaling a substance that has the properties of a surfactant /10.0080-0.0001 0.0070--0.0001 10.010-0.00210.0090-0.0002 -and Experiments to test the drug "Kalmofil" on surface tension and surfactant effect conducted by American researchers of the University (California, Los Angeles) with drugs - standards for surfactant replacement therapy "Zygmapia" and "Echosia USA". The activity of "Kalmofil" was shown to be close to (а) the specified standards. When using the drug "Kalmofil" compared to the control increased survival - 50 animals. In the experiments of ip mimo and ip mygo with the toxic effect of oxidative stress induced by acute SSI poisoning, administration of the drug reduces the toxic effect of metabolic poison, has a positive effect on the survival of the animals, reduces the intensity of lipid peroxidation (LPO), corrects the toxic effect of SSI).Investigation of properties of surfactant in premature rabbits with surfactant deficiency, carried out in comparison with standard drugs "Zygmapia" and "Echo" zip", showed a decrease in the level of respiratory pressure of the lungs (table. b).
Ф) Таблиця 6 ке Специфічна дія лікувального засобу "Кальмофіл"F) Table 6 of the Specific effect of the therapeutic agent "Kalmofil"
Препарат Параметри вимірювання во Поверхневий натяг, |Виживання тварин при інтоксикації. Активність (АО", ПОЛ, Пік респіра торного (дин/см) Захисний індекс (одиниці) СОДУ), 96 тиску легенів "Кальмофіл" Мін. - 11,7 1,5-2,0 Іп мімо: 249511Drug Parameters of measurement in Surface tension, |Survival of animals in case of intoxication. Activity (AO", POL, Peak respiratory (dyn/cm) Protective index (units) SODU), 96 lung pressure "Kalmofil" Min. - 11.7 1.5-2.0 Ip past: 249511
Макс. - 48,5 пол-153 сОд-72 іп мійго: 65 до-5ОMax. - 48.5 pol-153 sOd-72 ip mine: 65 do-5O
-о ше 71 10 1 1 о-o she 71 10 1 1 o
Макс. - 42,3Max. - 42.3
ЗЕМ ПОН ННЯ НО НН НАНУ ННЯ й вдо 01111111 яю п я шеZEM PON NNYA NO NN NANU NNYA y do 01111111 yayu pya she
Макс. - 37,5 ше 1Max. - 37.5 to 1
Макс. - 67,5 вай 00000010 бот 1 о ло легенів "х - СОД - супероксиддисмутазна активність т Досліджуваний препарат ПАР є інтактним відносно функціональної активності та морфології макрофагів легенів. Він не виявляє антигенних властивостей відносно місцевих клітинних імунних реакцій в легенях, про що свідчить структурна та функціональна стабільність легеневих макрофагів та експериментальні досліди з інгаляційного введення препарату щурам при послідовному гістохімічному вивченні макрофагальної функції.Max. - 67.5 va 00000010 bot 1 olo lung "x - SOD - superoxide dismutase activity t The researched surfactant drug is intact with respect to the functional activity and morphology of lung macrophages. It does not reveal antigenic properties in relation to local cellular immune reactions in the lungs, as evidenced by the structural and functional stability of pulmonary macrophages and experimental experiments on inhalation administration of the drug to rats with sequential histochemical study of macrophage function.
Число макрофагів при дії сурфактанту протягом інтервалів часу 1 година, 1, З, 7 діб не відрізнялись від контрольних. Одержані дані про відсутність антигенності препарату можуть бути обумовлені присутністю лише незначної домішки білку (0,1-0,5905) в препараті, що є позитивним фактором.The number of macrophages under the action of surfactant during the time intervals of 1 hour, 1, 3, 7 days did not differ from the control ones. The obtained data on the lack of antigenicity of the drug can be due to the presence of only a small admixture of protein (0.1-0.5905) in the drug, which is a positive factor.
При використанні наведеного способу досягаються наступні переваги: - підвищується вихід ПАР з гонад кальмару - основи штучного сурфактанту (до 895) в порівнянні з ПАР, одержаних з тканин легенів телят (до 1,090) ЗІ; сч 29 - спрощується спосіб одержання цільового продукту; Го) - ефективно зменшується поверхневий натяг при наявності плазмалогенів (плазменілФЕА і плазменілфФуХ), що діють як антиоксиданти проти ліпідної пероксидації, а також як антиоксиданти ліпопротеїнів низької щільності; - вітамін Е захищає як ліпідні компоненти, так і білки сурфактанту легенів від оксидактивного окислення; - покращується мікроциркуляція кровообігу з додаванням гепарину; ЗWhen using the given method, the following advantages are achieved: - the output of surfactants from squid gonads increases - the basis of artificial surfactant (up to 895) compared to surfactants obtained from calf lung tissues (up to 1.090); Art. 29 - the method of obtaining the target product is simplified; Ho) - the surface tension is effectively reduced in the presence of plasmalogens (plasmenilFEA and plasmanilfFuH), which act as antioxidants against lipid peroxidation, as well as antioxidants of low-density lipoproteins; - vitamin E protects both lipid components and lung surfactant proteins from oxidative oxidation; - blood microcirculation improves with the addition of heparin; WITH
Зо - покращуються властивості сурфактанту при інгаляційному застосуванні завдяки додаванню іонів Са 7 на /ї- стадії очистки препарату, що сприяє кращій адсорбції сурфактанту поверхністю легень і розправленню впалих о альвеол.Зо - the properties of the surfactant during inhalation use are improved due to the addition of Ca 7 ions at the /th stage of drug purification, which contributes to better adsorption of the surfactant on the surface of the lungs and straightening of the fallen on the alveoli.
При інгаляційному введенні препарату ПАР з гонад морських організмів, одержаного за новим способом, (Се) зв Досягається наступний ефект: М - підвищується поверхнева активність легенів у тварин за рахунок зниження поверхневого натягу до нормальних показників (48,5 та 11,7дин/см); - практично не змінюється в порівнянні з контролем кількість альвеолярних макрофагів протягом досліджуваного періоду (6,5-6,91073 макрофагів в мл). «During the inhalation administration of the surfactant preparation from the gonads of marine organisms, obtained by a new method, (Se) zv The following effect is achieved: M - the surface activity of the lungs in animals increases due to a decrease in surface tension to normal values (48.5 and 11.7 dynes/cm) ; - the number of alveolar macrophages practically does not change compared to the control during the studied period (6.5-6.91073 macrophages per ml). "
Одержані результати свідчать про доцільність винаходу для подальшого застосування в практиці лікування -о с хворих. Одержаний лікувальний засіб "Кальмофіл" доцільно використовувати в ургентній токсикологічній практиці при порушенні функцій сурфактантної системи легенів. Одноразове застосування сурфактантноподібної :з» речовини з морських організмів не виявляє відхилень у нормальних тварин, а в умовах інтоксикації сприяє нормалізації порушень функції легенів: знижує інтенсивність процесів ціноутворення, нормалізує клітинну реакцію сурфактанту легенів і певним чином полегшує протікання токсичного процесу. -І Таким чином, запропонований винахід вирішує задачу одержання з гонад морських організмів лікувального засобу "Кальмофіл", до складу якого входять фосфоліпіди з омега-3 ПНЖК, плазмалогенні фосфоліпіди,The obtained results indicate the expediency of the invention for further application in the practice of treatment of -o s patients. The obtained medicinal product "Kalmofil" is expedient to use in urgent toxicological practice in case of violation of the functions of the surfactant system of the lungs. A single application of a surfactant-like substance from marine organisms does not reveal abnormalities in normal animals, and in conditions of intoxication, it contributes to the normalization of lung function disorders: it reduces the intensity of price-forming processes, normalizes the cellular reaction of lung surfactant, and in a certain way facilitates the course of the toxic process. -I Thus, the proposed invention solves the problem of obtaining the therapeutic agent "Kalmofil" from the gonads of marine organisms, which includes phospholipids with omega-3 PUFAs, plasmalogen phospholipids,
Ме регуляторні пептиди, амінокислоти, вітамін Е та гепарин. Створений комплекс біологічно активних речовин має о адаптогенні та антиоксидантні властивості. Одержаний запропонованим способом лікарський засіб "Кальмофіл" 5р Може бути застосований для відновлення функції сурфактантної системи легенів людини при її розладах шляхом - заміщувальної терапії. ї» СПИСОК ПОСИЛАНЬ: 1. ОБА 5032585 Уи1.16, 1991. 2. Березовский В.А. Возможности коррекции состояния сурфактантной системьії. Врачебное дело, 1984, Мо вв, с. 107-111. 3. КО 2198670 СІ 20.02.2003. (Ф. 4. КО 2066197 СІ 10.09.1996. ка 5. ЕР 0286011А2 12.16.88. 6. ОА 5110866 1992. 60 7. Гребенников В.А. Респираторньйй дистрессо-синдром у новорожденньх. М., 1995. 8. ДЕ 2900300 (Кейлгіпо ІМ). УР. 58222022 (Теїййп К). ЕР 110498. ОА 4312860. 9. КО 2213746 СІ 10.10.2003. 10. Раїютро ДО, Гудоп Е-Е, Спеп - Рі еї а). Рану асій сотрозйоп ої Ішпод, тасгорпаде апа зипасіапі рпозроїїріаз апйег зпогі-егт епіега! Теедіпд мий п-3 Ііріав. - І іІрідв. - 1994. - 29,9. - р. 643 - 649. 65 11. Саптпіе І, СіІіетепі М, де Шаме! ОО аї аїЇ. РНозрпоїїріій зирріетепіайоп гемегзез БепаміогаЇ апаMe regulatory peptides, amino acids, vitamin E and heparin. The created complex of biologically active substances has adaptogenic and antioxidant properties. The drug "Kalmofil" 5p obtained by the proposed method can be used to restore the function of the surfactant system of human lungs in case of its disorders by means of replacement therapy. LIST OF REFERENCES: 1. BOTH 5032585 Uy1.16, 1991. 2. Berezovsky V.A. Possibilities of correction of the state of the surfactant system. Medical case, 1984, Mo vv, p. 107-111. 3. KO 2198670 SI 20.02.2003. (F. 4. KO 2066197 SI 10.09.1996. ka 5. ER 0286011A2 12.16.88. 6. OA 5110866 1992. 60 7. Grebennikov V.A. Respiratory distress syndrome in newborns. M., 1995. 8. DE 2900300 (Keilgipo IM). UR. 58222022 (Teiyip K). ER 110498. OA 4312860. 9. KO 2213746 SI 10.10.2003. 10. Raiyutro DO, Gudop EE, Spep - Riei a). Ranu asii sotrozyop oi Ishpod, tashorpade apa zipasiapi rpozroiiriaz apyeg zpogi-egt epiega! Teedipd miy p-3 Iiriav. - And iIridv. - 1994. - 29.9. - r. 643 - 649. 65 11. Saptpie I, SiIietepi M, de Shame! OO ai aiYi. РНозрпоиириий зириетепиайоп гемегзез BepamiogaЙ apa
Бріоспетіса! акМегайопе іпдисей бу п-3 роїушпзайшгайївй їТацу асій аеїісіепсу іп отісе. 9 іріїй Кез 2000Briospetisa! akMegayope ipdysey bu p-3 roiushpzaishgayivy yTatsu asii aeiisiepsu ip otise. 9 irii Kez 2000
Маг,41(3):473-480. 12. Гевзвопв їїот (Пе віогу ої п-3 Тацу асіавз. М-3 Тацу асід5. Коїе ої роїушпзаїигаїей тТацу асідв іпMag, 41(3):473-480. 12. Gevzvopv iyot (Pe viogu oi p-3 Tatsu asiavz. M-3 Tatsu asid5. Koie oi roiiushpzaiiigaiei tTatsu asidv ip
Ішпд аівсазе. Ат .). Сіїіп. Ми. 2000, 71, (15):15-3985. 13. опа У.Н., Упоці У., Міуагама Т., Віовсі. Віоїтесппої. Віоспет. 1997,01, Мо 12. 14. М.Киаїдег, КоПескК, Риї а аїЇ. Ріазтаюдепе епПесіїмему гедисе їйе зипасе іепвіоп ої зипасіапіIshpd aivsaze. At.). Siiiip. We. 2000, 71, (15):15-3985. 13. Opa U.N., Upotsi U., Miuagama T., Viovsi. Vioitesppoi. Viospet. 1997, 01, Mo 12. 14. M. Kiaideg, KoPeskK, Ryi aiYi. Riaztayudepe epPesiimemu gedise ilye zipase iepviop oi zipasiapi
ІКе рпозрпоїїріа тіхішгев. Атег. У. РпПівіо!., 1998, у.274, 1, 1.143-148.IKe rpozrpoiiriia tikhishgev. Ateg. U. RpPivio!., 1998, u.274, 1, 1.143-148.
Claims (1)
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA200510611A UA76074C2 (en) | 2005-11-09 | 2005-11-09 | Calmophil, pharmaceutical composition for substitution therapy aimed at recovering malfunctioned surfactant system of lungs |
| CNB2006100709297A CN100457123C (en) | 2005-11-09 | 2006-03-23 | Calmophil, pharmaceutical composition and producing method |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA200510611A UA76074C2 (en) | 2005-11-09 | 2005-11-09 | Calmophil, pharmaceutical composition for substitution therapy aimed at recovering malfunctioned surfactant system of lungs |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA76074C2 true UA76074C2 (en) | 2006-06-15 |
Family
ID=37388684
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA200510611A UA76074C2 (en) | 2005-11-09 | 2005-11-09 | Calmophil, pharmaceutical composition for substitution therapy aimed at recovering malfunctioned surfactant system of lungs |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN100457123C (en) |
| UA (1) | UA76074C2 (en) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115192528B (en) * | 2022-07-01 | 2023-12-01 | 国科温州研究院(温州生物材料与工程研究所) | Lung surface active composition containing plasmalogens and preparation method thereof |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ITMI20021058A1 (en) * | 2002-05-17 | 2003-11-17 | Chiesi Farma Spa | MIXTURES OF SYNTHETIC LIPIDS OPTIMIZED FOR THE PREPARATION OF A RECONSTITUTED SURFACTANT |
-
2005
- 2005-11-09 UA UAA200510611A patent/UA76074C2/en unknown
-
2006
- 2006-03-23 CN CNB2006100709297A patent/CN100457123C/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN100457123C (en) | 2009-02-04 |
| CN1861098A (en) | 2006-11-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4603124A (en) | Surfactant and pharmaceutical compositions containing same | |
| US8337815B2 (en) | Pulmonary surfactant formulations | |
| US4338301A (en) | Lung tissue extract useful for treating hyaline-membrane disease and method for producing the extract | |
| US5853747A (en) | Therapeutic and dietetic uses of a brain phospholipid-based complex | |
| NZ224146A (en) | Pulmonary surfactant comprised of protein and lipid-fractions | |
| US4397839A (en) | Surface active material and process for preparing same | |
| EP1506234B1 (en) | Improved synthetic lipid mixtures for the preparation of a reconstituted surfactant | |
| CN101112393B (en) | Surface-active substance composition moireuphe and method for preparing the same and use thereof | |
| HU192088B (en) | Process for producing pharmaceutical composition for treating dyspnoea in consequence of lack of surface-active materials | |
| JP2003012520A (en) | Antioxidant and food and drink containing the same | |
| UA76074C2 (en) | Calmophil, pharmaceutical composition for substitution therapy aimed at recovering malfunctioned surfactant system of lungs | |
| CA2091980C (en) | Natural pulmonary surfactants and lipid extracts thereof | |
| US7033612B2 (en) | Composition and method for treating age-related disorders | |
| RU2528898C1 (en) | Hepatoprotective agent from algae | |
| CN115192528B (en) | Lung surface active composition containing plasmalogens and preparation method thereof | |
| RU2763761C1 (en) | Hepatoprotective humic agent | |
| KR20240032063A (en) | Method for Preparation of Lung Surfactant | |
| JPS58222022A (en) | Synthetic pulmonary surface active substance and remedy for respiratory distress syndrome (rds) containing the same as active constituent | |
| KR960013436B1 (en) | Natural pulmonary surfactant, method of preparation and pharmaceutical compositions | |
| JPS6361000A (en) | Lipoprotein and production thereof |