PL183601B1 - Ulepszone środki terapeutyczne, nowe pochodne 1-beta-D-arabinofuranozylocytozyny - Google Patents
Ulepszone środki terapeutyczne, nowe pochodne 1-beta-D-arabinofuranozylocytozynyInfo
- Publication number
- PL183601B1 PL183601B1 PL96324690A PL32469096A PL183601B1 PL 183601 B1 PL183601 B1 PL 183601B1 PL 96324690 A PL96324690 A PL 96324690A PL 32469096 A PL32469096 A PL 32469096A PL 183601 B1 PL183601 B1 PL 183601B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- ara
- elaidate
- stearoyl
- cells
- oleoyl
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 17
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 title description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical class O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims abstract description 168
- 125000003696 stearoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 20
- 125000001124 arachidoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 18
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 18
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 18
- 125000002811 oleoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 15
- 125000004016 elaidoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 11
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 53
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 38
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 28
- ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-M elaidate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC([O-])=O ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-M 0.000 description 27
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 26
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 23
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 19
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 19
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 19
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 17
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- DRTQHJPVMGBUCF-CCXZUQQUSA-N arauridine Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 14
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 14
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 12
- -1 nucleoside triphosphate Chemical class 0.000 description 12
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 11
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 10
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 8
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 8
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 7
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 7
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 6
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 6
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 6
- FLFGNMFWNBOBGE-FNNZEKJRSA-N Elacytarabine Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](COC(=O)CCCCCCC/C=C/CCCCCCCC)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 FLFGNMFWNBOBGE-FNNZEKJRSA-N 0.000 description 5
- 101000979342 Homo sapiens Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Proteins 0.000 description 5
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 5
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 5
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 5
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 5
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 5
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 5
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 5
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 5
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 5
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 5
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 4
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 4
- 101000599862 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 3 Proteins 0.000 description 4
- 102100037871 Intercellular adhesion molecule 3 Human genes 0.000 description 4
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 4
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 4
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000003076 Angiosarcoma Diseases 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000001258 Hemangiosarcoma Diseases 0.000 description 3
- 206010060860 Neurological symptom Diseases 0.000 description 3
- 102100023050 Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Human genes 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 3
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 3
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 3
- BITHHVVYSMSWAG-KTKRTIGZSA-N (11Z)-icos-11-enoic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCC(O)=O BITHHVVYSMSWAG-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- BWLBGMIXKSTLSX-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyisobutyric acid Chemical compound CC(C)(O)C(O)=O BWLBGMIXKSTLSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 208000015021 Meningeal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 2
- 108010015012 dCMP deaminase Proteins 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 2
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 229940108623 eicosenoic acid Drugs 0.000 description 2
- BITHHVVYSMSWAG-UHFFFAOYSA-N eicosenoic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCCC(O)=O BITHHVVYSMSWAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N elaidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 2
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 2
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000022006 malignant tumor of meninges Diseases 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 210000002418 meninge Anatomy 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 235000021281 monounsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 2
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 2
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVKGVBZZSJFQLM-UHFFFAOYSA-N 1-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea Chemical compound NC(=O)N(N=O)CCCl NVKGVBZZSJFQLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxycytosine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004255 Butylated hydroxyanisole Substances 0.000 description 1
- 239000004322 Butylated hydroxytoluene Substances 0.000 description 1
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011749 CBA mouse Methods 0.000 description 1
- 206010061809 Cervix carcinoma stage 0 Diseases 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 102100026846 Cytidine deaminase Human genes 0.000 description 1
- 108010031325 Cytidine deaminase Proteins 0.000 description 1
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- 206010059282 Metastases to central nervous system Diseases 0.000 description 1
- 206010027457 Metastases to liver Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- SHBAKEKBTCPUFI-OUJCMCIWSA-N [(2r,3s,4s,5r)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl hexadecanoate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 SHBAKEKBTCPUFI-OUJCMCIWSA-N 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 229940053200 antiepileptics fatty acid derivative Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 235000019282 butylated hydroxyanisole Nutrition 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043253 butylated hydroxyanisole Drugs 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- 229940095259 butylated hydroxytoluene Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 201000010897 colon adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009615 deamination Effects 0.000 description 1
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004672 ethylcarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000013383 initial experiment Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000004561 lacrimal apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 1
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 1
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 208000020470 nervous system symptom Diseases 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 208000016691 refractory malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000009121 systemic therapy Methods 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000440 toxicity profile Toxicity 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/052—Imidazole radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/056—Triazole or tetrazole radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
Abstract
1 . Nowe pochodne 1 - ß-D-arabinofuranozylocytozyny o wzorze (I) w którym R1 i R2 niezaleznie oznaczaja atom wodoru, elaidoil, oleoil, stearoii, ei kozenoil (cis lub trans) lub eikozanoil, przy czym gdy R1 i R2 oznaczaja atom wodoru, ole- oil, elaidoil, stearoii lub eikozanoil, to wówczas maja one rózne znaczenie, R1 ma znacze- nie inne niz atom wodoru gdy R2 oznacza oleoil lub stearoii, a R2 ma znaczenie inne niz atom wodoru gdy R1 oznacza elaidoil, oleoil, stearoii lub eikozanoil. PL PL PL PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku są pewne pochodne nukleozydowe o doskonałych, jak się okazało, właściwościach w leczeniu nowotworów.
Pochodnymi nukleozydowymi są estry Ι-β-D-arabinofuranozylocytozyny (Ara-C) o wzorze A:
OH (A)
Ara-C jest znana także jako cytosar.
Ara-C od dłuższego czasu jest znana jako środek terapeutyczny w leczeniu przypadków ostrej białaczki szpikowej, ale wykazywała ograniczoną skuteczność w leczeniu guzów litych (Fre i wsp., Cancer Res. 29 (1969), 1325-1332; Davis i wsp., Oncology, 29 (1974), 190-200; Cullinan i wsp., Cancer Treat. Rep. 61 (1977), 1725-1726). Jednakże nawet w leczeniu białaczki Ara-C znalazła jedynie ograniczone zastosowanie z powodu bardzo krótkiego połowicznego okresu biologicznego oraz wysokiej toksyczności.
Mając na celu przezwyciężenie tych trudności wielu badaczy wytworzyło i przebadało pochodne Ara-C będące prolekami. Na przykład Hamamura i wsp. przebadali 3'-acylowe i 3',5’-diacylowe pochodne Ara-C (J. Med. Chem. 19 (1976) No. 5, 667-674). Autorzy ci wytworzyli i poddali badaniom liczne pochodne Ara-C zawierające nasycone lub nienasycone ugrupowania estrowe o 2 - 22 atomach węgla, oraz odkryli, że wiele z tych związków wykazywało wyższą niż sam macierzysty nukleozyd skuteczność w leczeniu białaczki L1210 u myszy.
Praca Hamamura i wsp., jak również inne prace nad analogami Ara-C będącymi prolekami, była cytowana przez Hadfielda i wsp. w Advances In Pharmacology and Chemotherapy, 20, 1984, str. 21-67. Przy omawianiu 5'-estrów Ara-C autorzy dochodzą do^następujących wniosków (strona 27):
............chociaż wiele z tych związków wydaje się działać w wysoce skutecznych postaciach depot Ara-C u myszy, nie wykazano ich analogicznego działania u ludzi.
Jakkolwiek prace nad prolekami na podstawie Ara-C, w tym pochodnymi 3’- i 5'- acylowymi (patrz np. Rubas i wsp. w Int. J. Cancer, 37, 1986, str. 149-154; wspomniani autorzy badali liposomalne postacie między innymi 5'-oleilo-Ara-C w leczeniu białaczki L1210 i czerniaka BI 6), do chwili obecnej żaden z tych leków nie jest stosowany w praktyce klinicznej.
Mechanizm działania Ara-C polega na jego enzymatycznym rozpoznawaniu jako 2'deoksyrybozydu i następnie fosforylacji do trifosforanu nukleozydu, który konkuruje z normalnym CTP o wbudowanie w DNA. Grupa 2'-hydroksylowa stanowi zawadę przestrzenną dla rotacji zasady pirymidynowej wokół wiązania nukleozydowego. Zasady poliarabinonukleotydowe nie mogą przyjąć właściwego ułożenia przestrzennego, jak ma to miejsce w przypadku zasad polideoksynukleotydowych. Ara-C hamuje naprawę i syntezę DNA poprzez
183 601 zwalnianie zarówno procesu wydłużania łańcucha, jak i ruchu nowo zreplikowanego DNA przez związany z macierzą aparat replikacyjny. Mechanizm działania Ara-C powoduje „niezrównoważony wzrost” dzielących się komórek. Ara-C oddziaływuje na komórki znajdujące się w fazie S cyklu komórkowego. W celu trwałego zahamowania syntezy DNA i w końcu doprowadzenia do śmierci komórki niezbędne jest, aby Ara-C była obecna w wystarczająco wysokim stężeniu w ciągu co najmniej jednego cyklu komórkowego.
Głównym powodem, dla którego Ara-C nie jest stosowana w leczeniu guzów litych, jest właśnie szybkie usuwanie aktywnego leku z komórek rakowych i osocza. Najwyraźniej nie jest możliwe osiągnięcie znaczącego wewnątrzkomórkowego poziomu leku w tkankach nowotworowych, nawet jeżeli dany nowotwór jest wrażliwy na Ara-C in vitro. Zaskakująco przedłużony okres połowicznego rozpadu i zmieniona dystrybucja tkankowa produktów według wynalazku będzie miała ogromne znaczenie dla działania terapeutycznego tych produktów.
Obecnie odkryto, jak to przedstawiono na fig. 7, 8 i 9, że 3'- i 5'-0-estry Ara-C i pewnych nasyconych i nienasyconych kwasów tłuszczowych nieoczekiwanie wykazują skuteczne działanie przeciwko różnym nowotworom, w przeciwieństwie do samej Ara-C, jak również innych mono- i diestrów.
Wynalazcy uważają, że powszechnie stosowany model badawczy (wstrzykiwanie komórek białaczkowych do jamy brzusznej myszy i podawanie dootrzewnowe) jest bardziej porównywalny z modelem in vitro niż z rzeczywistą sytuacją kliniczną i mógł przez to ukryć szczególnie cenne właściwości wybranych estrów Ara-C, stosowanych zgodnie z wynalazkiem, co omówiono poniżej.
Dokładniej, 3'- i 5'-O-estry, stosowane zgodnie z wynalazkiem, są estrami Cis lub C2o nasyconych i mononienasyconych kwasów tłuszczowych.
Estry stosowane zgodnie z wynalazkiem mogą być zatem przedstawione wzorem I:
nh2
OR, (I) w którym podstawniki Ri i R2 są niezależnie wybrane spośród atomu wodoru oraz C^ i C2o nasyconych i mononienasyconych grup acylowych, przy czym Ri i R2 nie mogą równocześnie oznaczać atomów wodoru.
Podwójne wiązanie w mononienasyconych grupach acylowych może mieć konfigurację cis lub trans, jakkolwiek efekt terapeutyczny może być odmienny w zależności od zastosowanej konfiguracji.
Pozyga wiązania podwójnego w mononienasyconych grupach acylowych również wydaje się wpływać na działanie związku. Obecnie zaleca się stosowanie estrów zawierających podwójne wiązanie w pozycji ω-9. (W nomenklaturze systemu ω pozycja (ω) podwójnego wiązania mononienasyconego kwasu tłuszczowego jest liczona od końcowej grupy metylowej, tak więc np. kwas eikozenowy (C2q:1, ω-9) zawiera 20 atomów węgla w łańcuchu, a jedyne podwójne wiązanie jest utworzone pomiędzy 9 a 10 atomem węgla, licząc od metylu na końcu łańcucha). Dlatego zaleca się stosowanie estrów Ara-C i kwasu oleinowego (Cig:l,
183 601 ω-9, cis), kwasu elaidynowego (Ci8:l, ω-9, trans), kwasu eikozenowego (C2o:l, ω-9, cis) i (C2o:l, ω-9, trans), kwasu stearynowego (Cis:0) oraz kwasu eikozanowego (C2o:O)·
Zarówno 3'-O- i 5'-O- monoestry, jak i 3', 5'-O-diestry można stosować w leczeniu różnych nowotworów zgodnie z wynalazkiem, lecz ogólnie są korzystne 5'-O-monoestry. 3',5'-Odiestry będą prawdopodobnie użyteczne w tych przypadkach, gdy korzystne będą właściwości lipofilowe tych związków, np. wchłanianie i wychwyt w tkankach tłuszczowych.
Związki o wzorze (I), w którym Ri i R2 niezależnie oznaczają atom wodoru, elaidoil, oleoil, stearoil, eikozenoil (cis lub trans) i eikozanoil, przy czym Ri i R2 nie mogą równocześnie oznaczać atomów wodoru, oleili lub stearoili, Ri nie może oznaczać atomu wodoru gdy R2 oznacza oleoil lub stearoil, a R2 nie może oznaczać atomu wodoru gdy Ri oznacza elaidoil, oleił lub stearoil, są nowymi związkami dotychczas nie opisanymi w stanie techniki.
Te nowe związki o wzorze (I) dokładniej zdefiniowano w poniższej tabeli A, w której podano znaczenie Ri i R2.
Tabela A
| Ri | R: |
| atom wodoru | elaidoil |
| atom wodoru | eikozenoil (cis) |
| atom wodoru | eikozenoil (trans) |
| eikozenoil (cis) | atom wodoru |
| eikozenoil (trans) | atom wodoru |
| eikozenoil (cis) | eikozenoil (cis) |
| eikozenoil (trans) | eikozenoil (trans) |
| eikozenoil (cis) | eikozenoil (trans) |
| eikozenoil (trans) | eikozenoil (cis) |
| eikozenoil (cis) | elaidoil |
| eikozenoil (trans) | elaidoil |
| elaidoil | eikozenoil (cis) |
| elaidoil | eikozenoil (trans) |
| eikozenoil (cis) | oleoil |
| eikozenoil (trans) | oleoil |
| oleoil | eikozenoil (cis) |
| oleoil | eikozenoil (trans) |
| eikozanoil | eikozanoil |
| eikozanoil | stearoil |
| stearoil | eikozanoil |
| elaidoil | stearoil |
| eikozenoil (cis) | stearoil |
| eikozenoil (trans) | stearoil |
| elaidoil | eikozanoil |
| eikozenoil (cis) | eikozanoil |
| eikozenoil (trans) | eikozanoil |
| stearoil | oleoil |
| oleoil | stearoil |
183 601
Czynnikiem ograniczającym stosowanie Ara-C jest jej rozkład przez deaminazę cytydynową i deaminazę monofosforanu deoksycytydyny (dCMP) do nieaktywnych metabolitów. Niespodziewanie odkryto, że monoestry według wynalazku są substratami nie poddającymi się działaniu tych inaktywujących enzymów. Różnica ta może wskazywać, że te pochodne estrowe są lepsze niż sama Ara-C w układowym lub miejscowym leczeniu nowotworów złośliwych, a zwłaszcza złośliwych nowotworów układu siateczkowo-śródbłonkowego i ośrodkowego układu nerwowego.
Jasno to wykazano w przedstawionym na fig. 10, 11 i 12 modelu przerzutów białaczkowych do mózgu, szczególnie w przypadku bardziej agresywnych chłoniaków z limfocytów B, przedstawionym na fig. 11, że sama Ara-C nie wykazywała działania.
W klinicznym leczeniu białaczki szpikowej gwałtowna inaktywacja Ara-C jest kompensowana stałą infiizją leku przez 5-7 dni dla osiągnięcia względnie stałego poziomu terapeutycznego Ara-C. Wykazano, że po dożylnym podaniu szczurom równomolowych ilości znakowanej promieniotwórczo Ara-C i 5'-elaidynianu Ara-C osiągnięto korzystną zmianę szybkości metabolizmu i profilu wydalania. Jak widać z tabeli 1 i fig. 20, w wyniku podania 5’elaidynianu Ara-C uzyskuje się wyższe wartości stężenia zarówno w osoczu, jak i w pełnej krwi, a także wolniejsze przekształcanie do Ara-U. Deaminacja estrów Ara-C według wynalazku do Ara-U, np. w przypadku podania elaidynianu, jest znacznie zwolniona, a podczas gdy poziom Ara-C i Ara-U w osoczu jest poniżej zdolności wykrywania w 48 godzin po podaniu czystej Ara-C, to oba te związki można wciąż ilościowo oznaczyć w 72 godziny po podaniu 5'-elaidynianu Ara-C. Jak widać z tabeli 2, całkowita ilość wydalonego Ara-U (AUC, 0-72h) jest taka sama w przypadku obu podawanych związków. W sytuacji klinicznej te wyniki są odzwierciedlone przez szersze okno czasowe terapeutycznego stężenia Ara-C we krwi. W modelu białaczki in vivo zilustrowanym na fig. 13 porównano Ara-C i 5'-elaidynian; podobne działanie przeciwnowotworowe Ara-C osiągnięto przy podaniu 1/20 molowej dawki estru.
Jeżeli profil toksyczności pochodnych estrowych będzie podobny jak w przypadku Ara-C, poprawa wskaźnika terapeutycznego powinna być tego samego rzędu (x 20) wielkości co poprawa dawki/efektu.
W leczeniu białaczek i innych chorób układu siateczkowo-śródbłonkowego (RES) niezmiernie ważną rzeczą jest oczywiście okno czasowe stężenia aktywnego leku w osoczu, ale bardzo ważnymi elementami będą także umiejscowienie aktywnego związku w tkankach należących do RES (wątrobie, śledzionie, płucach, ścianie jelita oraz wolnych komórkach żernych obecnych np. w szpiku kostnym i pełnej krwi). Zaobserwowano (fig. 21 i tabela 1), że poprzez dożylne podawanie równomolowych ilości Ara-C i 5'-elaidynianu Ara-C, stężenie aktywnego leku w tkankach należących do RES jest znacząco wyższe i utrzymuje się znacznie dłużej w przypadku podawania pochodnej estrowej. Profil dystrybugi i metabolizm został bardziej szczegółowo zbadany, a wyniki dla wątroby przedstawiono na fig. 19. Terapeutycznie znaczący poziom Ara-C utrzymuje się co najmniej przez 72 godziny po podaniu pochodnej estrowej. Umożliwia to leczenie pierwotnego raka wątroby lub przerzutów do tego narządu z okrężnicy/odbytnicy, sutka, czerniaka lub innych postaci raka. Leczenie może mieć postać monoterapii, może być też paliatywnym/wspomagającym leczeniem w połączeniu z leczeniem operacyjnym, radioterapią lub innym rodzajem chemioterapii.
Obserwuje się również podwyższone stężenie Ara-C w innych tkankach, co w połączeniu z mniejszą objętością dystrybucji może otworzyć drogę zastosowaniu estrów Ara-C w leczeniu tych postaci raka, w przypadku których nie stosuje się Ara-C.
Ponadto nieoczekiwanie odkryto, że estry według wynalazku (fig. 15) w znacznym stopniu stymulowały aktywację NFkappaB, podczas gdy Ara-C nie wykazywała takiego działania. Stymulacja ta jest efektem biologicznym nie spotykanym podczas stosowania innych chemioterapetyków, a w szczególności znanych leków cytostatycznych. Mogłoby to sugerować, że estry Ara-C według wynalazku wpływają stymulujące na pewne czynniki immunologiczne, co z kolei mogłoby tłumaczyć zdumiewającą poprawę działania przeciwrakowego.
183 601
Mogłoby to mieć istotne znaczenie w leczeniu chorób nowotworowych związanych z komórkami immunokompetentnymi, jak w przypadku białaczek i chłoniaków.
Istotnym problemem współczesnej chemioterapii w przypadku raka jest rozwój opornych komórek rakowych. Odkryto (fig. 7-9), że pochodne Ara-C według wynalazku wykazują takie samo działanie wobec komórek opornych na cisplatynę (NHIK 3025/DDP) i komórek opornych na MDR (A549), jak wobec odpowiednich nieopomych linii komórkowych. Uważa się, że powodem tego jest fakt, że te pochodne nie są substratami dla komórkowych mechanizmów usuwających lek z komórki, takich jak „pompa gp 120 MDR”, odpowiedzialna za zjawisko oporności na wiele leków.
Cis i C20 mono- i diestry Ara-C można stosować zgodnie z wynalazkiem w leczeniu wielu guzów nowotworowych. Odkryto szczególnie obiecujący wpływ na guzy mózgu, takie jak glejaki, oraz przerzuty z innych guzów, takich jak mięsaki i raki, a także białaczkę. Obecnie glejaki leczy się chirurgicznie, radioterapią i cytostatykami, np. N,N-cis(2-chloroetylo)-Nnitrozomocznikiem (BCNU). Rokowanie podczas takiego leczenia jest jednakże bardzo słabe.
Korzystne działanie estrów Ara-C według wynalazku zaobserwowano także w leczeniu nowotworów dających przerzuty, takich jak raki, mięsaki i czerniaki.
Zakres wynalazku oraz istotne i korzystne cechy wynalazku zdefiniowano w załączonych zastrzeżeniach patentowch.
Efekty biologiczne
Preparat micelarny
Preparat micelarny (1 mg/ml) wytworzono poprzez zmieszanie w stosunku wagowym 1:1 estru Ara-C (w DMSO) i lecytyny (w metanolu) w sterylnej wodzie.
Test tworzenia klonów w agarozie1
Wykonano biopsję u pacjenta i materiał biopsyjny bezzwłocznie umieszczono w podłożu wzrostowym. Tkankę guza poddano mechanicznej desegregacji i wybrano żywe komórki. Dodano badanej substancji chemioterapetycznej, BCNU (w wodzie) i Ara-C oraz estrów Ara-C (w micelach) i hodowano komórki w miękkim podłożu agarozowym. Dwadzieścia cztery godziny przed zakończeniem hodowli (7 dni) dodano 3H tymidyny. Aktywność badanej substancji określano przez pomiar liczby impulsów na minutę z użyciem licznika scyntylacyjnego.
*G Unsgaard i wsp., Acta Neurochir (Wien) (1988) 91; 60-66.
Figura 1. Wyniki uzyskano w próbach z glejakiem pobranym od pacjenta. Taki sam profil odpowiedzi zaobserwowano w przypadku 8 innych biopsji glęjaka. Wykres przedstawia porównanie Ara-C oraz jej 3'-elaidynianu i 5'-elaidynianu in vitro. Wyniki przedstawiono jako procentowe zwalczenie w stosunku do prób kontrolnych. Wartość 50% (CD50) przyjęto jako obiecującą w odniesieniu do zastosowania w terapii w przypadku tej konkretnej linii komórek rakowych. Warto tutaj zaznaczyć, że do uzyskania CD50 potrzebne jest 101’5 wyższe stężenie Ara-C w porównaniu do jej elaidynianów.
Figura 2. Przedstawia ona wyniki uzyskane w próbach z takim samym glejakiem co na fig. 1. Na wykresie porównano wyniki stosowania napromieniania i chemioterapii (BCNU). Dawka promieniowania konieczna dla uzyskania CD50 wyższa niż 10 gręjów (Gy) nie ma praktycznego zastosowania w terapii. Porównawszy fig. 1 i 2 widać, że stężenie BCNU potrzebne dla uzyskania CD50 jest około 10 razy większe od wymaganego stężenia estrów Ara-C, ale porównywalne jak w przypadku samej Ara-C.
Figura 3. Wyniki uzyskano po biopsji pobranej z ogniska przerzutu czerniaka do mózgu. Różnica pomiędzy Ara-C a 3'- i 5'-elaidynianami nie jest tak wyraźnie zaznaczona jak w przypadku glęjaka, ale wciąż pozostaje około 10 razy większa.
Figura 4. Przedstawia ona aktywność BCNU w stosunku do linii komórkowej czerniaka. W porównaniu z estrami Ara-C, BCNU musi być obecny w stężeniu 1 χ 102 wyższym, aby osiągnąć CD50.
Figura 5. Wykres ten przedstawia wyniki uzyskane w przypadku przerzutu raka (płuca) do mózgu. Te komórki rakowe są bardziej odporne na chemioterapię, ale różnica pomiędzy Ara-C i estrami Ara-C nadal jest widoczna.
183 601
Figura 6. Przedstawione tutaj wyniki uzyskano w próbach zwalczania przerzutu raka (płuca) do mózgu i są one podobne do podanych uprzednio wyników uzyskanych w przypadku innych linii komórkowych.
Biorąc pod uwagę te badania różnych typów komórek wydaje się, że istnieje wyraźna różnica aktywności pomiędzy estrami Ara-C, samą Ara-C i BCNU. Wzmocnienie 1 χ 102 jest bardzo obiecującym klinicznie parametrem. Odkrycie to wskazuje, że 5'-estry są nieco bardziej aktywne niż 3'-estry.
Inaktywacja komórek - zdolność tworzenia kolonii
W badaniach użyto kilku związków i oceniono inaktywację komórek, mierzoną jako spadek zdolności tworzenia kolonii. Stosowane komórki pochodziły z linii komórkowych utworzonych z komórek ludzkiego raka szyjki macicy in situ, NHIK 3025, NHIK 3025/DDP, odmiany cis-DDP-opomej tych samych komórek lub komórek A549 (ludzki rak płuca). Komórki poddano działaniu badanego związku przez okres od 4 do 24 godzin. Badane związki podawano w postaci roztworu micelamego. Liczbę kolonii obliczano po około 12 dniach inkubacji.
Figura 7. Wykres ten przedstawia porównanie badanych związków: Ara-C, 5'elaidynianu Ara-C, 5’-stearynianu Ara-C, 5'-eikozenianu Ara-C i 5'-petrozelinianu Ara-C in vitro. Wyniki podano jako dawkę potrzebną dla zmniejszenia przeżywalności komórek o 90% w stosunku do kontrolnych, nietraktowanych komórek. Jak widać na wykresie, po podaniu estrów obserwuje się znacząco większą inaktywację komórek NHIK 3025 w porównaniu z samą Ara-C. Czynnik modyfikujący dawkę na poziomie 10% przeżywalności jest w zakresie od 3 do 5 dla estrów Ara-C w porównaniu z Ara-C, co oznacza, że w przypadku Ara-C dawka konieczna dla osiągnięcia podobnie zmniejszonej zdolności tworzenia kolonii jest od 3 do 5 razy większa niż w przypadku estrów tego związku.
Figura 8. Przedstawione tutaj wyniki uzyskano po 4 godzinnym traktowaniu komórek NHIK 3025/DDP. Obserwowany zwiększony efekt działania 5'-elaidynianu Ara-C w stosunku do efektu Ara-C jest podobny do zwiększenia efektu działania obserwowanego w przypadku komórek NHIK 3025. Zwiększony efekt nie zależy od oporności na cis-DDP.
Figura 9. Wykres przedstawia wyniki uzyskane in vitro w przypadku badania zdolności tworzenia kolonii przez komórki A549 (ludzkie komórki raka płuc) w celu porównania badanych związków: Ara-C, 5'-elaidynianu Ara-C, 5'-stearynianu Ara-C, 5'-eikozenianu Ara-C i 5'petrozelinianu Ara-C. Komórki poddawano działaniu związków przez 24 godziny. Największą inaktywację zaobserwowano w przypadku stearynianu Ara-C-5', ale podwyższone działanie widoczne było także w przypadku elaidynianu i petrozelinianu.
Ludzkie komórki chtoniaka B linii Raji - zrakowacenie opon miękkich u nagich szczurów
Zastosowanym modelem jest model guza u nagich szczurów, rozwijający się w oponach miękkich. 1x10° komórek chłoniaka B linii Raji wstrzyknięto do płynu mózgowordzeniowego przez zbiornik móżdżkowo-rdzeniowy (cistema magna, c.m.) 4-5 tygodniowym nagim szczurom. Neurologiczne objawy rozwijają się u takich zwierząt po 12 -14 dniach przy braku leczenia. Znieczulonym zwierzętom podawano lek domózgowo stosując 3 lub 4 wstrzyknięcia wielkoobjętościowe po 40 μΐ do zbiornika móżdżkowo-rdzeniowego. Leczenie rozpoczęto 1 dnia po wszczepieniu komórek. Badanymi związkami były 5’-elaidynian Ara-C (w micelach) i Ara-C. Ara-C podawano zarówno w maksymalnej tolerowanej dawce (MTD), jak i w dawce równomolowej w stosunku do 5'-elaidynianu Ara-C. U zwierząt kontrolnych (którym podano NaCI), a także w przypadku podawania pustych liposomów (micele bez estrów Ara-C), objawy ze strony ośrodkowego układu nerwowego rozwijały się po około 14 dniach.
Figura 10. Trzy wstrzyknięcia wielkoobjętościowe elaidynianu Ara-C w 1, 2 i 4 dniu wydłużyły okres bezobjawowy o 135% w porównaniu z Ara-C, z przeciętnym przesunięciem średniego dnia śmierci z 13 na 30,5 dzień, jak widać na fig. 10. Jeden szczur przeżył ponad 70 dni i uznano go za wyleczonego. W przeprowadzonej 76 dnia sekcji nie stwierdzono widocznych guzów. Wydłużenie okresu wolnego od objawów choroby jest znaczniejsze niż w przy
183 601 padku wyników uzyskanych za pomocą innych, alternatywnych środków terapeutycznych badanych w porównywalnych modelach różnych typów guzów u ludzi.
Figura 11. Przedstawiono na niej krzywe przeżywalności z dodatkowego eksperymentu na nagich szczurach, którym wszczepiono komórki Raji do mózgu, leczonych 4 dawkami (wstrzyknięcie wielkoobjętościowe). Do zbiornika móżdżkowo-rdzeniowego podawano raz dziennie dawkę leku (wstrzyknięcie wielkoobjętościowe) w dniu 1, 2, 3 i 4. Podobnie jak w poprzednim eksperymencie, nie zaobserwowano żadnych efektów w przypadku Ara-C, ani podczas podawania maksymalnej tolerowanej dawki Ara-C (MTD), ani dawki równomolonej w stosunku do elaidynianu Ara-C. Wyniki uzyskane dla grupy otrzymującej elaidynian Ara-C były nawet bardziej zaskakujące niż w poprzednim eksperymencie. 3 z 5 szczurów wciąż żyły i nie miały objawów choroby w 70 dniu. Uznano je za wyleczone. Jest to najbardziej obiecujące. 5/6 szczurów kontrolnych zmarło w 13 dniu. U szóstego kontrolnego szczura nie obserwowano wstecznego odpływu płynu mózgowo-rdzeniowego do strzykawki po wstrzyknięciu komórek guza ani objawów neurologicznych po 70 dniach. Zgodnie ze standardowymi procedurami zwierzę to wyłączono z wyników badania.
Komórki chłoniaka ludzkiego Moli 4 - zrakowacenie opony miękkiej u nagich szczurów
Stosowanym modelem jest model guza u nagich szczurów dla badania wzrostu guza w oponach miękkich. Do płynu mózgowo-rdzeniowego wstrzyknięto przez zbiornik móżdżkowo-rdzeniowy (c.m.) 10° komórek chłoniaka T linii Molt 4-5 tygodniowym nagim szczurom. U zwierząt nieleczonych objawy neurologiczne rozwijają się po 20 - 22 dniach. Znieczulonym zwierzętom podawano lek domózgowo w 4 iniekcjach wielkoobjętościowych po 40 pl do zbiornika móżdżkowo-rdzeniowego. Leczenie rozpoczęto pierwszego dnia po wszczepieniu komórek. Badanymi związkami były 5’-elaidynian Ara-C (w micelach) i Ara-C. Ara-C podawano zarówno w maksymalnej tolerowanej dawce (MTD), jak i w dawce równomolowej w stosunku do 5'-elaidynianu Ara-C. U zwierząt kontrolnych (którym podano NaCl) objawy ze strony ośrodkowego układu nerwowego rozwijały się po około 20 dniach.
Figura 12. Przedstawiono tutaj przeżywalność w funkcji czasu dla szczurów, którym wstrzyknięto domózgowo komórki chłoniaka Molt 4, leczonych przez czterokrotne podawanie leków do zbiornika móżdżkowo-rdzeniowego. W tym początkowym eksperymencie moment śmierci był opóźniony w przypadku zwierząt otrzymujących elaidynian Ara-C w stosunku do zwierząt leczonych Ara-C i zwierząt kontrolnych. Liczby zwierząt w grupach wynosiły: kontrola (7), elaidynian Ara-C (3), Ara-C (5).
Model białaczki z zastosowaniem komórek ludzkiego chłoniaka B linii Raji
Myszom SCJD podano dożylnie 1 χ 106 komórek ludzkiego chłoniaka B linii Raji. Myszy leczono 7, 9, 11, 13 i 15 dnia po wstrzyknięciu komórek nowotworowych elaidynianem Ara-C w dawce 20 mg/kg dziennie, Ara-C w dawce 200 mg/kg dziennie lub nie leczono, pozostawiając tę grupę jako grupę kontrolną. U zwierząt na skutek wzrostu guza rozwijało się porażenie tylnych łap. Średni dzień śmierci zwierząt leczonych w różnym trybie leczenia podano na fig. 13.
Figura 13. Przedstawiono tutaj średnią przeżywalność myszy SCID, którym wstrzyknięto dożylnie komórki ludzkiego chłoniaka B linii Raji, leczonych następnie przez jedno wstrzyknięcie leku dziennie, wykonywane 7, 9, 11, 13 i 15 dnia, a podawanym lekiem był elaidynian Ara-C lub Ara-C w porównaniu z próbą kontrolną bez leku. Dawka wynosiła 20 mg/kg w przypadku elaidynianu Ara-C i 200 mg/kg w przypadku Ara-C. Przy zachowaniu równomolowości, 20 krotnie zmniejszona dawka elaidynianu Ara-C w porównaniu z dawką Ara-C zwiększyła średnią przeżywalność w porównaniu z grupą kontrolną i zwierzętami leczonymi Ara-C. Liczba zwierząt w każdej grupie wynosiła 7.
Figura 14. Przedstawia ona średnią przeżywalność myszy SCID, którym podano dożylnie komórki ludzkiego chłoniaka B linii Raji, a następnie leczono podając raz dziennie od 7 do 11 dnia poprzez dootrzewnowe wstrzyknięcie elaidynian Ara-C, Ara-C lub substancję kontrolną. Średni czas przeżycia jest nieco przedłużony w przypadku stosowania elaidynianu Ara-C, kiedy leczenie jest powtarzane każdego dnia, a nie co drugi dzień.
183 601
Aktywacja komórkowego czynnika transkrypcyjnego NFkappaB
Stosowano komórki ludzkiego gruczoląkoraka okrężnicy SW480, stabilnie transfekowane promotorem/sekwencją wzmacniającą CMV, zawierającym gen dla β-galaktozydazy. Aktywacja czynnika transkrypcyjnego NFkappaB powoduje zwiększoną ilość enzymu β-galaktozydazy w cytoplazmie. Bóść β-galaktozydazy ocenia się wykorzystując jako parametr absorbancję przy długości fali 570 nm. Komórki ŚW380 inkubowano 2-3 dni przed poddaniem działaniu badanego związku na okres czterech godzin. Komórki wymyto i spreparowano i dla różnych związków zarejestrowano absorbancję.
Figura 15. Po ekspozycji na Ara-C nie stwierdzono żadnej aktywności β-galaktozydazy, podczas gdy odnotowano znaczący wzrost aktywności β-galaktozydazy jako wzrost absorbancji przy długości fali 570 nm po ekspozycji na elaidynian Ara-C. Wskazuje to na zaskakująco wysoką indukcję białkowego czynnika aktywującego transkrypcję, NFkappaB, za pomocą elaidynianu Ara-C. NFkappaB jest zaangażowany w kontrolę genów wielu czynników immunologicznych, a jego aktywacja przez elaidynian Ara-C mogłaby wyjaśnić lepsze działanie przeciwrakowe obserwowane podczas stosowania elaidynianu Ara-C. Można oczekiwać stymulacji pewnych komórek układu odpornościowego przez elaidynian Ara-C, co mogłoby być szczególnie interesujące w leczeniu białaczek i chłoniaków.
Przeciwnowotworowe działanie elaidynianu Ara-C w porównaniu z Ara-C w stosunku do mysiego chłoniaka TLX/5
Myszom CBA ważącym 20 - 25 g wszczepiono podskórnie w okolicy pachwinowej 1 x 105 komórek nowotworowych TLX/5 w dniu 0.W 3, 4, 5, 6 i 7 dniu podano dootrzewnowe elaidynian Ara-C lub Ara-C. Dawki wynosiły 6,25 - 50 mg/kg/dzień. Grupa składała się z 5 myszy leczonych oraz 10 kontrolnych, mających nowotwór. Aktywność oceniano jako wydłużenie okresu życia (ILS) w porównaniu ze zwierzętami kontrolnymi.
Figura 16. Przedstawiono tutaj wyniki badań myszy z białaczką TLX/5 i procentowy wzrost okresu ich życia (średnio 5 w grupie) po dootrzewnowym podawaniu elaidynianu Ara-C lub Ara-C przez 5 dni. Ara-C była aktywna jedynie w dawce 25 mg/kg, podczas gdy elaidynian Ara-C był aktywny w dawkach 12,5 mg/kg i 25 mg/kg. Maksymalny wzrost okresu życia wynosił 47,2% w porównaniu z 32,7% w przypadku Ara-C.
Przeciwnowotworowe działanie elaidynianu Ara-C w porównaniu z Ara-C u myszy SCID z wszczepionymi dootrzewnowe komórkami naczyniakomięsaka
Myszom SCID wszczepiono dootrzewnowe komórki naczyniakomięsaka PV/2b/35. Myszom podawano przez 5 dni w tygodniu 25 mg/kg elaidynianu Ara-C przygotowanego w micelach, elaidynianu Ara-C rozpuszczonego w DMSO i Ara-C rozpuszczonego w PBS. Próby kontrolne przeprowadzono stosując odpowiednio puste micele, DMSO lub PBS. Zwierzęta nie były leczone w soboty i niedziele. Punktem końcowym badania było przeżycie zwierząt.
Figura 17. Przeżywalność myszy SCID z wszczepionymi dootrzewnowe komórkami naczyniakomięsaka PV/2b/35. Przeżywalność znacznie wzrosła w przypadku zwierząt leczonych elaidynianem Ara-C. Zwiększoną przeżywalność w porównaniu z grupą kontrolną obserwowano zarówno dla elaidynianu Ara-C przygotowanego w micelach, jak i elaidynianu Ara-C rozpuszczonego w DMSO.
Figura 18. Przedstawione tutaj wyniki pochodzą z badania działania estru elaidynowego 5'-Ara-C w przypadku glejaka u nagich myszy. Hodowlę tkankową linii komórkową glejaka U-118 (Uppsala) wstrzyknięto podskórnie nagim myszom. Niewielką ilość rosnącego guza (2x2 mm) przeniesiono do nowych myszy. Guzy podskórne charakteryzują się nieco inną szybkością wzrostu u różnych zwierząt, lecz gdy guz miał wielkość 4-6 mm wstrzyknięto do mego 10 mg/ml roztworu micelamego estru Ara-C. W zależności od rzeczywistej wielkości guza, zwierzęta otrzymały taką samą względną ilość badanej substancji. Kontrolnie podano wodny roztwór solanki. Szybkość wzrostu oceniano poprzez względną objętość guza (RTV). Guz kontrolny wykazuje zupełnie normalny wzrost, typowy dla tego rodzaju raka. Zwraca uwagę całkowite zahamowanie wzrostu guza u leczonych zwierząt. Ponadto u leczonych zwierząt nie obserwowano objawów ubocznych, którymi w przypadku Ara-C są uszkodzenie szpiku kostnego z rozwojem niedokrwistości lub krwotoków, ani żadnych objawów zaburzeń czynności ośrodkowego układu nerwowego.
183 601
Porównanie farmakokinetyki, dystrybucji, metabolizmu i wydalania I4C-elaidynianu Ara-C i I4C-Ara-Cpodanych drogą dożylną samcom szczurów l4C-Elaidynian Ara-C (w micelach) lub *4C-Ara-C podano drogą dożylną samcom szczurów w dawkach równomolowych, 5 mg/kg 14C-elaidynianu Ara-C i 2,4 mg/kg44C-Ara-C. W różnych odstępach czasu mierzono stężenie w osoczu jako całkowitą radioaktywność oraz stężenie metabolitów. Określono stężenia w tkankach przez pomiar całkowitej radioaktywności dla szeregu tkanek w różnych przedziałach czasu do 120 godzin po iniekgi. Pobranie tkanki wątroby i pomiar stężenia metabolitów wykonano 72 godziny po iniekgi. Tkankowa dystrybucja elaidynianu Ara-C była znacznie zmieniona w porównaniu z dystrybugą Ara-C. Maksymalne stężenie w większości tkanek było znacząco wyższe i występowało później po podaniu I4C-elaidynianu Ara-C, zwłaszcza w pełnej krwi/osoczu, śledzionie, wątrobie i płucach. Maksymalne stężenie w mięśniach, śliniankach, skórze i pęcherzu moczowym było niższe. Procent dawki w pełnej krwi w 0,08 godziny po podaniu 14C-elaidynianu Ara-C określono na 64,7%, znacząco wyższy niż procent dawki w krążeniu dużym w tym samami czasie po podaniu 14C-Ara-C (7,76%). Wydalanie elaidynianu przez nerki było znacznie wolnigsze niż w przypadku samej Ara-C. Eliminacja 14C-elaidynianu Ara-C z tkanek była znacznie wolniejsza niż w przypadku 14C-Ara-C.
Tabela 1. Maksymalne wartości stężenia w wyniku pomiaru radioaktywności (wyrażone jako pg równoważników/g) po podaniu równomolowych dawek I4C-elaidynianu Ara-C lub C-Ara-C w odpowiadających sobie punktach czasowych dla maksymalnego stężenia. Jak wynika z tabeli, maksymalne stężenie wystąpiło w różnych tkankach i w różnych punktach czasowych dla obu związków.
Tabela 1
| Tkanka | 14C-Elaidynian Ara-C (t^fe/ godziny) | 14C-Ara-C (tmak·/ godziny) | ||
| śledziona | 175,2 | (0,25) | 2,406 | (0,08) |
| osocze | 55,60 | (0,08) | 3,058 | (0,08) |
| pełna krew | 47,32 | (0,08) | 2,707 | (0,08) |
| wątroba | 42,37 | (1 godzina) | 2,526 | (0,08) |
| komórki krwi | 34,37 | (0,08) | 2,201 | (0,08) |
| płuco | 28,97 | (0,08) | 2,144 | (0,08) |
| żyła główna | 17,29 | (0,08) | 1,887 | (0,25) |
| szpik kostny | 13,29 | (1 godzina) | 1,950 | (0,08) |
| serce | 10,15 | (0,08) | 1,916 | (0,25) |
| nerka | 9,108 | (0,08) | 7,752 | (0,08) |
| gruczoł krokowy | 9,014 | (4 godziny) | 2,810 | (0,25) |
| przysadka | 8,359 | (0,08) | 0,931 | (0,08) |
| aorta | 7,795 | (0,08) | 2,213 | (0,08) |
| pęcherz moczowy | 6,421 | (4 godziny) | 13,07 | (1 godzina) |
| nadnercza | 5,229 | (0,08) | 1,764 | (0,08) |
| ślinianki | 2,366 | (0,25) | 2,505 | (0,08) |
| gruczoły łzowe | 4,438 | (4 godz.) | 2,460 | (0,08) |
| węzły chłonne | 2,831 | (1 godz.) | 2,222 | (0,08) |
| skóra | 1,793 | (0,25) | 2,189 | (0,08) |
| mięśnie | 1,990 | (0,25) | 2,158 | (0,08) |
| trzustka | 2,817 | (0,08) | 2,148 | (0,08) |
| grasica | 2,090 | (0,25) | 2,054 | (0,08) |
| mózg | 1,408 | (0,08) | 0,233 | (1 godzina) |
183 601
Tabela 2. Wydalanie radioaktywności (% dawki) po dożylnym podaniu 14C-elaidynianu Ara-C (5 mg/kg) lub 14C-Ara-C (2,4 mg/kg) samcom szczurów. Szybkość wydalania 14C-elaidynianu Ara-C z moczem jest mniejsza niż szybkość wydalania l4C-Ara-C.
Tabela 2
| Próbka/czas (godziny) | 14C-Elaidynian Ara-C | ,4C-Ara-C |
| 0-6 | 59,1 ± 3,7 | 85,3 ± 3,1 |
| 6-24 | 34,1 ± 2,5 | 8,8 ± 1,9 |
| 24-48 | 2,7 ± 0,8 | 0,5 ± 0,3 |
| 48-72 | 0,5 ± 0,1 | 0,2 ± <0,1 |
| 72-96 | 0,2 ± 0,1 | 0,2 ± 0,1 |
| 96 - 120 | 0,1 ± <0,1 | 0,1 ± 0,1 |
Figura 19. Stężenie elaidynianu Ara-C (P-Ara-C-el) oraz metabolitów Ara-C (P-Ara-C) i Ara-U (P-Ara-U) w wątrobie przedstawiono w postaci wykresu w funkcji czasu po wstrzyknięciu 14C-elaidynianu Ara-C, a stężenie Ara-C (Ara-C) i metabolitu Ara-U (Ara-U) przedstawiono w postaci wykresu w funkgi czasu po wstrzyknięciu samej 14C-Ara-C. Podanie elaidynianu Ara-C spowodowało znacznie większą i przedłużoną ekspozycję wątroby szczura zarówno na elaidynian Ara-C, jak i na Ara-C, przy czym do 24 godzin nie wykrywano Ara-U. Stanowiło to dużą różnicę w stosunku do stężenia w wątrobie Ara-C po podaniu Ara-C jako takiej. Stężenia Ara-C w wątrobie zmniejszało się do niewykrywalnego po 4 godzinach, a metabolit Ara-U był obecny we wszystkich punktach czasowych.
Figura 20. Poziom elaidynianu Ara-C i metabolitów Ara-C i Ara-U w osoczu po dożylnym podaniu 14C-elaidynianu Ara-C przedstawiono w funkcji czasu. Również poziom Ara-C i metabolitu Ara-U w osoczu po dożylnym podaniu I4C-Ara-C przedstawiono w funkcji czasu. Podanie elaidynianu Ara-C spowodowało przedłużoną obecność Ara-C w osoczu, z poziomem wykrywalnym do 72 godzin po podaniu, w porównaniu z 24 godzinami po podaniu Ara-C. Metabolizm Ara-C do Ara-U jest mniej intensywny i rozpoczyna się później u zwierząt, które otrzymały elaidynian Ara-C.
Figura 21. Stężenie w tkankach mierzone jako całkowita radioaktywność po dożylnym podaniu 14C-elaidynianu Ara-C (P) lub 14C-Ara-C przedstawiono w postaci wykresu w funkcji czasu. Tkanki podane na wykresie to wątrobą śledzioną płucą kości i szpik kostny. Stężenie (radioaktywność) po iniekcji 14C-elaidynianu Ara-C jest wyższe we wszystkich punktach czasowych do 120 godzin we wszystkich wymienionych tkankach.
Estry Ara-C według wynalazku można formułować wraz ze znanymi nośnikami i zarobkami do podawania.
Jako najbardziej obiecujący tryb leczenia w przypadku glejaków i innych litych guzów mózgu obecnie sugeruje się miejscowe umieszczenie substancji czynnych w miejscu guzą na który mają działać. W tym celu substancje czynne można korzystnie formułować w postaci lecytynowego preparatu micelamego. Na przykład korzystnym leczeniem w przypadku przerzutów do mózgu będzie podanie preparatu estru Ara-C do płynu mózgowo-rdzeniowego lub do miejscą w którym znajduje się guz za pomocą pompy dozującej lub podobnego urządzenia.
Estry Ara-C według wynalazku można również podawać doukładowo, drogą doustną lub pozajelitową.
Preparatami służącymi do podawania substancji czynnych według wynalazku mogą być np. miękkie lub twarde kapsułki żelatynowe, tabletki, granulki, ziarenką proszek, drażetki, syropy, zawiesiny lub roztwory.
Do podawania drogą pozajelitową odpowiednie są preparaty estrów Ara-C w postaci roztworów, zawiesin lub emulsji do iniekcji lub infuzji.
Preparat może zawierać obojętne lub farmakodynamicznie aktywne dodatki, dobrze znane fachowcom w tej dziedzinie. Na przykład tabletki lub granulki mogą zawierać szereg
183 601 środków wiążących, wypełniaczy, emulgatorów, nośników lub rozcieńczalników. Preparaty płynne mogąnp. być roztworami sterylnymi. Kapsułki oprócz substancji czynnej mogą zawierać wypełniacz lub środek zagęszczający. Ponadto preparaty mogą zawierać również dodatki poprawiające smak i zapach, jak również substancje zazwyczaj stosowane jako konserwanty, stabilizatory, substancje utrzymujące wilgoć, emulgatory, sole służące do zmiany ciśnienia osmotycznego, bufory oraz inne dodatki.
Dawką w jakiej będą podawane preparaty według wynalazku, będzie się różniła w zależności od drogi i sposobu podawanią jak również od wymogów dla poszczególnych pacjentów. Ogólnie dzienna dawka w leczeniu układowym dla przeciętnej dorosłej osoby będzie wynosiła około 0,1 - 150 mg/kg wagi ciała/dzień, korzystnie 1-50 mg/kg/dzień. Preparat do podawania miejscowego np. maść może zawierać 0,1 - 10% wagowych preparatu farmaceutycznego, a zwłaszcza 0,5 - 5% wagowych.
Jeżeli jest to pożądane, preparat farmaceutyczny zawierający estry Ara-C może zawierać przeciwutleniacze, np. tokoferol, N-metylotokoferaminę, butylowany hydroksyanizol, kwas askorbinowy lub butylowany hydroksytoluen.
Rozważane jest także leczenie skojarzone, to znaczy takie, gdzie podawaniu estru Ara-C według wynalazku towarzyszy inna forma terapii np. leczenie chirurgiczne, napromienianie lub chemioterapia. Na przykład korzystnym sposobem leczenia guzów mózgu wydaje się być połączenie leczenia chirurgicznego i leczenia za pomocą estru Ara-C według wynalazku, podawanego doukładowo lub miejscowo.
Estry Ara-C stosowane zgodnie z wynalazkiem można ogólnie wytwarzać zgodnie z poniższym równanięm reakcji:
Zasada
Nu - OH + FaX------> Nu - O - Fa
-HX gdzie Nu-OH oznacza Ara-C, O oznacza atom tlenu w pozycji 3' i/lub 5' grupy cukrowej Ara-C, Fa stanowi acylową grupę nasyconego lub mononienasyconego Cjg lub C20 kwasu tłuszczowego, a X może oznaczać Cl, Br lub OR', gdzie R' oznacza Fą COCH3 , COEt lub COCF3.
Reakcja zachodzi zatem poprzez acylowanie nukleozydu. Przeprowadza się ją wykorzystując odpowiednie reaktywne pochodne kwasów tłuszczowych, a zwłaszcza halogenki lub bezwodniki kwasowych. Gdy stosuje się taki halogenek kwasowy jak chlorek kwasowy, do mieszaniny reakcyjnej dodaje się jako katalizatora trzeciorzędowej aminy, takiej jak trietyloaminą Ν,Ν-dimetyloaniliną pirydyna lub Ν,Ν-dimetyloaminopirydyna w celu związania uwalnianego kwasu chlorowcowodorowego. Korzystnie reakcję tę prowadzi się w niereaktywnym rozpuszczalniku, takim jak Ν,Ν-dwumetyloformamid lub chlorowcowany węglowodór, taki jak dichlorometan. W razie potrzeby, powyżej wspomniane trzeciorzędowe aminy stosowane jako katalizatory można wykorzystać jako rozpuszczalnik, dbając o utrzymanie pożądanego nadmiaru. Korzystnie reakcję prowadzi się w temperaturze 5-25°Ć. Po okresie 24 - 60 godzin reakga jest w zasadzie zakończona. Postęp reakcji można śledzić stosując chromatografię cienkowarstwową (TLC) i odpowiedni układ rozpuszczalników. Po zakończeniu reakcji, wykazanym przez TLC, produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym i oczyszcza poprzez chromatografię i/iub rekrystalizację z odpowiedniego układu rozpuszczalników. Gdy Ara-C zawiera więcej niż jedną grupę hydroksylową a także grupę aminową to powstanie mieszanina acylowanych związków. Poszczególne pożądane mono- i di-O-estry można oddzielić poprzez np. chromatografię, krystalizację, nadkrytyczną ekstrakcję itp.
Gdy pożądane jest wytworzenie diestrowego związku o wzorze I, w którym Ri i R2 oznaczają takie same grupy acylowe, korzystnie realizuje się powyższy sposób z użyciem odpowiedniego chlorku acylu w nadmiarze.
183 601
W celu wytworzenia związku o wzorze I, w którym Ri i R2 są różne, korzystnie jest najpierw wytworzyć 3'- lub 5'-monoester, a potem poddać ten monoester reakcji z odpowiednim chlorkiem acylu.
Sposób wytwarzania nowych związków ilustrują poniższe przykłady.
Przykład 1
5'-O-(Elaidoilo)-1 -β-D-arabinofuranozylocytozyna
Do zawiesiny Ara-C-HCl (1,007 g, 3, 6 x 10'3mola w 15 ml dimetyloacetamidu (DMA) dodano roztworu chlorku elaidoilu (1,26 g, 4, 2 χ 10'3 mola) w 5 ml DMA i mieszaniną mieszano w temperaturze 30°C przez 22 godziny. Rozpuszczalnik odparowano pod wysoką próżnią a na pozostałość podziałano gorącym octanem etylu i przesączono. Surowy produkt poddano działaniu 2 M wodnego roztworu NaHCO3, przesączono i oczyszczono w kolumnie z żelem krzemionkowym, stosując jako układ ełuentów metanol (5-30%) w chloroformie. Homogeniczne frakqe poddano rekrystalizacji i otrzymano 1,31 g (72%) tytułowego związku w postaci białego proszku (temperatura topnienia 133-134°C).
'H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ: 7,58 (1H, d, H-6) 7,18 (2H, szeroki d, NH2) 6,20 (1H, d, H-5), 5,77 (1H, d, Η-Γ), 5,65 (2H, m, OH-2’ i OH-3’ ), 5,47 (2H, m, CH=CH), 4,43 (1H, m, Η-5'ι), 4,30 (1H, m, H-5'2), 4,1-4,0 (3H, m, H-2’, H-3' i H-4'), 2,45 (2H, t, CH2-COO), 2,05 (4H, m, CH2-C=), 1,63 (2H, m, CH2-C-COO), 1,35 (2OH, m, CH2), 0,97 (3H, t, CH3).
13C NMR (DMSO-dó, 75 MHz) δ: 172,8 (COO), 165,59 (C4-N), 155,05 (C=O 2), 142,86 (C-6), 130,11 (CH=CH), 92,54 (C-5), 86,23 (C-Γ, 81,86 (C-4'), 76,83 (C-3'), 74,35 (C-2'), 63,77 (C-5'), 33,46, 31,95, 31,30, 29,03, 28,97, 28,85, 28,73, 28,52, 28,43, 28,36, 24,48 i 22,12 (CH2), 13,97 (CH3).
Przykład 2 '-O-(-Elaidoilo)-1 - β-D-arabinofuranozylocytozyna
Mieszaniną kwasu 2-hydroksyizomasłowego (1,15 g, 12 x 10’3 mola) i chlorku elaidoilu (3,10 g, 10 x 10‘3 mola) mieszano w temperaturze 50°C przez 1 godziną. Dodano chlorku tionylu (1,5 ml, 21 χ 10’3 mola) i kontynuowano mieszanie przez 2 godziny. Mieszaniną reakcyjną utrzymywano w temperaturze 50°C pod zmniejszonym ciśnieniem (40 rnmHg) przez 14 godzin. Powstały chlorek 2-elaidoiloksy-2-metylopropylu wykorzystano bez dalszego oczyszczania i zdyspergowano w 13 ml bezwodnego acetonitrylu. Dodano cytydyny (0,608 g, 2,5 χ 10’3 mola) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 60°C przez 24 godziny. Rozpuszczalnik odparowano, a na pozostałość podziałano eterem. Surowy produkt mieszano z 40 ml mieszaniny 1:1 pirydyny i metanolu w temperaturze 80°C przez 20 godzin, po czym odparowano do suchą a produkt oczyszczono w kolumnie z żelem krzemionkowym. Homogeniczne frakcje poddano rekrystalizacji i otrzymano 0,446 g (35%) tytułowego związku w postaci białego proszku (temperatura topnienia 164-166°C).
'HNMR (DMSO-dó, 300 MHz) δ: 7,71 (1H, d, H-6) 7,2 (2H, szeroki d, NH2) 6,1 (1H, d, H-5), 5,88 (1H, d, H-l1), 5,81 (1H, d, OH-2'), 5,45 (2H, m, CH=CH), 5,18 (1H, m, OH-5'), 5,06 (1H, dd, H-3'-), 4,18 (1H, m, H-2'), 4,01 (1H, m, H-4'), 3,75 (2H, m, H-5'), 2,47 (2H, ζ CH2-COO), 2,06 (4OH, m, CH2-C=), 1,65 (2H, m, CH2-C-COO), 1,35 (2OH, m, CH2), 0,97 (3H, t CH3).
13C NMR (DMSO-dć, 75 MHz) δ: 172,15 (COO) , 165,67 (C4-N), 154,95 (C=O 2), 142,72 (C-6), 130,11 i 130,08 (CH=CH), 92,59 (C-5), 86,24 (C-Γ), 82,75 (C-4'), 78,72 (C-3'), 72,29 (C-2'), 61,15 (C-5·), 33,43, 31,97, 31,30, 29,03, 28,99, 28,85, 28,73, 28,53, 28,41, 28,36, 24,40, 22,12 (CH2), 13,97 (CH3).
Przykład 3
5'-O-(cis-11 -Eikozenoilo)-1 -β-D-arabinofuranozylocytozyna
Do zawiesiny Ara-C-HCI (0,87 g, 3,1 χ 10 3 mola) w 30 ml Ν,Ν-dimetyloformamidu dodano roztworu chlorku cis-11-eikozenoilu (1,06 g, 3,22 χ 10’3 mola) w 30 ml DMA i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 25°C przez 24 godziny. Rozpuszczalniki odparowywano pod wysoką próżnią a pozostałość rozpuszczono w 60 ml wrzącego etanolą do którego dodano 20 ml wody i 20 ml nasyconego roztworu NaHCO3. Surowy produkt przesączono w temperaturze pokojowej, a następnie rozpuszczono w 100 ml wrzącego etanolu (60% rozwtór
183 601 wodny). Surowy produkt poddano rekrystalizacji z octanu etylu i otrzymano 1,1 g (66%) tytułowego związku w postaci białego proszku.
JH NMR (DMSO-dć, 300 MHz) δ: 7,45 (1H, d, H-6) 7,1 (2H, szeroki d, NH2) 6,08 (1H, d, Η-Γ), 5,65 (1H, d, H-5), 5,55 (2H, m, OH-2' i OH-3'), 5,32 (2H, m, CH=CH), 4,25 (1H, m, H-5’0,4,15 (1H, m, H-5'2), 4,0-3,85 (3H, m, H-2’, H-3', H-4'), 2,33 (2H, t, CH2OO), 1,95 (4H, m, CH,-C=), 1,5 (2H, m, CH2-C-COO), 1,25 (24H, m, CH2), 0,85 (3H, t, CH3).
13C NMR (DMSO-d^, 75 MHz) δ: 172,79 (COO), 165,59 (C-4), 155,08 (C=O 2), 142,78 (C-6), 129,60 (CH=CH), 92,52 (C-5), 86,21 (C-Γ, 81,82 (C-41), 76,75 (C-3'), 74,25 (C-2'), 63,76 (C-5’), 33,41, 31,30, 29,11; 28,85, 28,72, 28,60, 28,42, 26,57, 24,46, 22,11 (CH2), 13,94 (CN3).
1. D. T. Gish i wsp.; J Med. Chem. 14 (1971) 1159
2. E. K. Hamamura i wsp.; J. Med. Chem. 19 (1976) 667
3. E. K. Hamamura i wsp.; J. Med. Chem. 19 (1976) 654
183 601
Zwalczenie (%) Zwalczenie (%) Zwalczenie (%)
Dawka promieniowania (Gy)
10 25 50
BONU (pg / ml)
Fig. 3
Stężenie (μΜ)
183 601
BCNU (pg /ml)
--BCNU
120
100 δ 80
I 60 N i 40
N
Fig. 5
0,004 0,04 0,4 4 40
Stężenie (μΜ)
Fig. 6
10 25
BCNU (pg / ml)
183 601
Fig. 9
0,01 ΊΟ
-+5
-ι---------------------1------10 15
Stężenie (μΜ)
-+20 —I
183 601
Fig. 10
Fig. U
5’-Elaidynian Ara-C Ara-C MTD równomolowa) Kontrola
100 o 90 $ 70 | 50
S 40
130
0 —I—U----1— -----1--------1--------1--------1--------*
20 30 40 50 60 70
Dni po wstrzyknięciu komórek chłoniaka linii Raji
Fig. 12
Ara-C ^»-Elaidynian Ara-C-*- Kontrola, NaCl
20 40 60 80
Dni po wstrzyknięciu komórek nowotworowych
183 601
Absorbancja przy długości fali 570 nm , Średni dzień śmierci
Fig. 14
183 601
Fig. 16
20 40 60
Dawka (mg/kg/dzień)
100
70 60 50 40 30 20 10
Fig. 17
-*-PBS
-e-DMSO
Ara-C
-n. Elaidynian Ara-C (DMSO) Elaidynian Ara-C (micele)
10 20 30 40
Dni po wszczepieniu
Micele
Fig. 18 o
eb NI
ΗΛ O
Dni po injekcji
183 601
Fig. 19
— P-Ara-C-el *- P-Ara-C
-*- P-Ara-U
-x-Ara-C Ara-U
Mg równoważników/gram tkanki Mg równoważników/gram Mg równoważników/gram tkanki
Fig. 21
P-Ara-C-el — P-Ara-C
-*- P-Ara-U
-B- Ara-C
Ara-U
Godziny po injekcji
-°- Ara-C, wątroba P-4055, wątroba Ara-C, śledziona
-*· P-4055, śledziona Ara-C, płuca P-4055, płuca Ara-C, kości — P-4055, kości Ara-C, szpik kostny | -t- P-4055, szpik kostny
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz. Cena 4,00 zł.
Claims (2)
- Zastrzeżenia patentowe1. Nowe pochodne 1-β-D-arabinofuranozylocytozyny o wzorze (I)ORj (I) w którym Ri i R2 niezależnie oznaczają atom wodoru, elaidoil, oleoil, stearoil, eikozenoil (cis lub trans) lub eikozanoil, przy czym gdy Ri i R2 oznaczają atom wodoru, oleoil, elaidoil, stearoil lub eikozanoil, to wówczas mają one różne znaczenie, Ri ma znaczenie inne niż atom wodoru gdy R2 oznacza oleoil lub stearoil, a R2 ma znaczenie inne niż atom wodoru gdy Ri oznacza elaidoil, oleoil, stearoil lub eikozanoil.
- 2. Środek farmaceutyczny zawierający substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub zaróbkę, zmamienmy tym, że jako substancję czynną zawiera nową pochodną 1β-D-arabinofuranozylocytozyny o wzorze (I)NHjORjO) w którym Ri i R2 niezależnie oznaczają atom wodoru, elaidoil, oleoil, stearoil, eikozenoil (cis lub trans) lub eikozanoil, przy czym przy czym gdy Ri i R2 oznaczają atom wodoru, oleoil, elaidoil, stearoil lub eikozanoil, to wówczas mają one różne znaczenie, Ri ma znaczę183 601 nie inne niż atom wodoru gdy R2 oznacza oleoil lub stearoil, a R2 ma znaczenie inne niż atom wodoru gdy Ri oznacza elaidoil, oleoil, stearoil lub eikozanoil.♦ * *
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9515279.9A GB9515279D0 (en) | 1995-07-25 | 1995-07-25 | Improved therapeutic agents |
| PCT/NO1996/000179 WO1997005154A1 (en) | 1995-07-25 | 1996-07-12 | Improved therapeutic agents |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL324690A1 PL324690A1 (en) | 1998-06-08 |
| PL183601B1 true PL183601B1 (pl) | 2002-06-28 |
Family
ID=10778247
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL96324690A PL183601B1 (pl) | 1995-07-25 | 1996-07-12 | Ulepszone środki terapeutyczne, nowe pochodne 1-beta-D-arabinofuranozylocytozyny |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6316425B1 (pl) |
| EP (1) | EP0842185B1 (pl) |
| JP (2) | JP4372227B2 (pl) |
| KR (1) | KR100401909B1 (pl) |
| AT (1) | ATE207076T1 (pl) |
| AU (1) | AU714814B2 (pl) |
| CA (1) | CA2227533C (pl) |
| CZ (1) | CZ291612B6 (pl) |
| DE (1) | DE69616074T2 (pl) |
| DK (1) | DK0842185T3 (pl) |
| ES (1) | ES2166900T3 (pl) |
| GB (1) | GB9515279D0 (pl) |
| HU (1) | HU224839B1 (pl) |
| IL (2) | IL122942A0 (pl) |
| MX (1) | MX9800622A (pl) |
| NO (1) | NO313985B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ313790A (pl) |
| PL (1) | PL183601B1 (pl) |
| PT (1) | PT842185E (pl) |
| RU (1) | RU2165260C2 (pl) |
| SK (1) | SK283003B6 (pl) |
| TW (1) | TW434251B (pl) |
| UA (1) | UA55389C2 (pl) |
| WO (1) | WO1997005154A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA966047B (pl) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6458772B1 (en) | 1909-10-07 | 2002-10-01 | Medivir Ab | Prodrugs |
| CA2271135A1 (en) * | 1996-11-12 | 1998-05-22 | Medivir Ab | Nucleosides |
| AU720451B2 (en) * | 1997-01-24 | 2000-06-01 | Conpharma As | Gemcitabine derivatives |
| US7393862B2 (en) * | 2002-05-17 | 2008-07-01 | Celgene Corporation | Method using 3-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione for treatment of certain leukemias |
| US20070160554A1 (en) * | 2003-11-03 | 2007-07-12 | Cognis Ip Management Gmbh | Acyl ribonucleosides and acyl deoxyribonucleosides, compositions of, and methods of making same |
| NO324263B1 (no) * | 2005-12-08 | 2007-09-17 | Clavis Pharma Asa | Kjemiske forbindelser, anvendelse derav ved behandling av kreft, samt farmasoytiske preparater som omfatter slike forbindelser |
| US8497292B2 (en) | 2005-12-28 | 2013-07-30 | Translational Therapeutics, Inc. | Translational dysfunction based therapeutics |
| AU2008304380A1 (en) * | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Mount Sinai School Of Medicine | Azacytidine analogues and uses thereof |
| GB0808357D0 (en) * | 2008-05-08 | 2008-06-18 | Cyclacel Ltd | Process |
| WO2011062503A1 (en) * | 2009-11-20 | 2011-05-26 | Clavis Pharma As | Parenteral formulations of gemcitabine derivatives |
| JP5903097B2 (ja) * | 2010-07-13 | 2016-04-13 | クラビス ファーマ エイエスエイ | エラシタラビン誘導体の非経口製剤 |
| AU2013241341B2 (en) * | 2012-03-28 | 2016-09-08 | Fujifilm Corporation | Salt of 1-(2-deoxy-2-fluoro-4-thio-beta-D-arabinofuranosyl)cytosine |
| US20210052619A1 (en) | 2018-01-15 | 2021-02-25 | Yinuoke Medicine Science And Technology Company Ltd. | Treatments for cachexia |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3894000A (en) * | 1971-01-27 | 1975-07-08 | Upjohn Co | Ara-cytidine derivatives and process of preparation |
| FI105556B (fi) | 1991-09-30 | 2000-09-15 | Sankyo Co | Menetelmä lääkeaineina käyttökelpoisten pyrimidiiniukleosidijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kasvaimen vastaista vaikutusta |
| GB9307043D0 (en) | 1993-04-05 | 1993-05-26 | Norsk Hydro As | Chemical compounds |
| US5641758A (en) | 1993-11-10 | 1997-06-24 | Kluge; Michael | Cytarabine derivatives, the preparation and use thereof |
-
1995
- 1995-07-25 GB GBGB9515279.9A patent/GB9515279D0/en active Pending
-
1996
- 1996-07-12 ES ES96926032T patent/ES2166900T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-12 RU RU98103238/04A patent/RU2165260C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-07-12 HU HU9900924A patent/HU224839B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-07-12 AU AU66335/96A patent/AU714814B2/en not_active Ceased
- 1996-07-12 PT PT96926032T patent/PT842185E/pt unknown
- 1996-07-12 EP EP96926032A patent/EP0842185B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-12 WO PCT/NO1996/000179 patent/WO1997005154A1/en active IP Right Grant
- 1996-07-12 CZ CZ1998163A patent/CZ291612B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-07-12 SK SK80-98A patent/SK283003B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-07-12 NZ NZ313790A patent/NZ313790A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-07-12 JP JP50750497A patent/JP4372227B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-12 DK DK96926032T patent/DK0842185T3/da active
- 1996-07-12 US US08/983,483 patent/US6316425B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-12 DE DE69616074T patent/DE69616074T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-12 IL IL12294296A patent/IL122942A0/xx active IP Right Grant
- 1996-07-12 PL PL96324690A patent/PL183601B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-07-12 AT AT96926032T patent/ATE207076T1/de active
- 1996-07-12 KR KR10-1998-0700463A patent/KR100401909B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-07-12 CA CA002227533A patent/CA2227533C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-16 ZA ZA9606047A patent/ZA966047B/xx unknown
- 1996-10-02 TW TW085111996A patent/TW434251B/zh not_active IP Right Cessation
- 1996-12-07 UA UA98020922A patent/UA55389C2/uk unknown
-
1998
- 1998-01-15 IL IL122942A patent/IL122942A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-01-21 MX MX9800622A patent/MX9800622A/es not_active IP Right Cessation
- 1998-01-23 NO NO19980296A patent/NO313985B1/no not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-11-09 US US09/435,641 patent/US6335322B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-07-03 JP JP2009159081A patent/JP5087052B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5087052B2 (ja) | 改良された治療剤 | |
| CA2278056C (en) | Gemcitabine derivatives | |
| CN110882251A (zh) | 一种10-HCPT和Crizotinib偶联化合物合成方法及抗肿瘤应用 | |
| US11440916B2 (en) | Selective A2A receptor antagonist | |
| RU2194711C2 (ru) | Производные гемцитабина | |
| KR100730768B1 (ko) | 5'-데옥시-ｎ-알킬옥시카르보닐-5-플루오로사이토신-5'-카르복실산 및 그 유도체와 이들의 제조방법 | |
| MXPA99006790A (en) | Gemcitabine derivatives | |
| NO318934B1 (no) | Gemcitabinderivater |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20130712 |