SK283003B6 - 1-beta-D-Arabinofuranozylcytozínový derivát, jeho použitie a farmaceutický prípravok s jeho obsahom - Google Patents

1-beta-D-Arabinofuranozylcytozínový derivát, jeho použitie a farmaceutický prípravok s jeho obsahom Download PDF

Info

Publication number
SK283003B6
SK283003B6 SK80-98A SK8098A SK283003B6 SK 283003 B6 SK283003 B6 SK 283003B6 SK 8098 A SK8098 A SK 8098A SK 283003 B6 SK283003 B6 SK 283003B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
ara
elaidate
hydrogen
treatment
cells
Prior art date
Application number
SK80-98A
Other languages
English (en)
Other versions
SK8098A3 (en
Inventor
Finn Myhren
Bernt Borretzen
Are Dalen
Kjell Torgeir Stokke
Original Assignee
Conpharma As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Conpharma As filed Critical Conpharma As
Publication of SK8098A3 publication Critical patent/SK8098A3/sk
Publication of SK283003B6 publication Critical patent/SK283003B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/052—Imidazole radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/056—Triazole or tetrazole radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Artificial Filaments (AREA)
  • Polyamides (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Použitie nukleozidových derivátov vzorca (I), kde R1 a R2 sú nezávisle vybrané z vodíka a C18- a C20-nasýtených a mono-nenasýtených acylových skupín, s výhradou, že R1 a R2 nesmú byť oba vodíky, na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie tuhých tumorov a lymfónov. Ďalej sú opísané nukleozidové deriváty vzorca (I), kde R1 a R2 sú nezávisle vybrané z vodíka, elaidoylu, oleoylu, stearoylu, eikozenoylu (cis alebo trans) a eikozanoylu, s výhradou, že radikály R1 a R2 nesmú oba obsahovať vodík, oleoyl, elaidoyl, stearoyl alebo eikozanoyl, R1 nesmie byť vodík, ak R2 je oleoyl alebo stearoyl a R2 nesmie byť vodík, ak R1 je elaidoyl, oleoyl, stearoyl alebo eikozanoyl, a farmaceutické prípravky s ich obsahom.ŕ

Description

Oblasť techniky
Tento vynález sa týka určitých derivátov nukleozidov, pri ktorých sa zistilo, že majú cenné vlastnosti z hľadiska liečenia tumorov.
Doterajší stav techniky
Nuklcozidové deriváty sú estermi Ι-β-D-arabinofuranozylcytozínu (Ara-C) vzorca (A)
OH
Ara-C je tiež niekedy označený ako cytozar.
Ara-C je dávno známym chemoterapeutickým činidlom na liečenie akútnej myeloidnej leukémie, ale jeho účinnosť pri tuhých tumoroch je ohraničená (Fre et al., Cancer Res., 29, 1969, 1325-1332; Davis et al., 29, Oncology, 29 (1974), 190-200; Cullinan et al., Cancer Treat. Rep., 61, 1977, 1725-1726). Dokonca aj pri liečení leukémie sa zistilo, že Ara-C má iba obmedzené použitie, pretože má veľmi krátky biologický polčas a vysokú toxicitu.
Ohľadom prekonania týchto problémov množstvo vedcov vyrobilo a testovalo pro-liečivové deriváty Ara-C. Napríklad Hamamura et al. sledovali 3'-acylové a 3',5'-diacylové deriváty Ara-C (J. Med. Chem., 19, 1976, č. 5, 667-674). Títo pracovníci pripravili a testovali množstvo Ara-C derivátov s nasýtenými alebo nenasýtenými skupinami obsahujúcimi 2 až 22 atómov uhlíka a zistili, že mnoho zlúčenín sa prejavilo vyššou aktivitou proti leukémii u myši v porovnaní so samotným pôvodným nukleozidom.
Práca Hamamuru et al. a iných na pro-liečivových analógoch Ara-C bola posúdená Hadfíeldom et al., v Advances in Pharmacology and Chemotherapy, 20, 1984, s. 21-67. V diskusii o 5'-esteroch Ara-C títo autori vyslovujú záver (s. 27):
„...hoci sa zdá, že mnoho týchto látok pôsobí ako veľmi účinné depotné formy Ara-C u myší, u ľudí sa analogický účinok nepreukázal“.
Hoci práca na pro-liečivách na báze Ara-C pokračovala, vrátane 3'- a 5'- acylových derivátov (pozri napr. Rubas et al., Int. J. Cancer, 37, 1986, s. 149-154, ktorí medziiným testovali lipozomálne prípravky 5'-oleyl-Ara-C na účinok proti L 1210 leukémii a melanómu B 16, doteraz sa žiadne z takýchto liečiv nestali pre lekárov dostupné.
Spôsob účinku Ara-C spočíva na jeho enzymatickom rozlíšení, ako 2'-deoxy-ribozid a na následnej fosforylácii na nuleozid trifosfát, ktorý je kompetitívny s normálnym CTP pri inkorporácii do DNA. 2'-Hydroxylová skupina spôsobuje sterickú prekážku rotácii pyrimidínovej bázy okolo nukleozidovej väzby. Bázy polyarabinonukleozidov sa za normálnych okolností nemôžu hromadiť, ako sa hromadia bázy polydeoxynukleotidov. Ara-C inhibuje opravu DNA a syntézu DNA spomaľovaním predlžovania reťazca a pohybu novoreplikovanej DNA prostredníctvom matricovoviazaného replikačného aparátu. Mechanizmus účinku Ara-C má za následok „nevyrovnaný rast“ deliacich sa buniek. Ara-C pôsobí v S fáze bunkového cyklu. Pre priebežnú inhibíciu syntézy DNA a konečne pre smrť buniek je rozhodujúce, aby Ara-C bol prítomný v dostatočne vy sokej koncentrácii počas aspoň jedného bunkového cyklu.
Hlavným dôvodom, prečo sa Ara-C nepoužíva na liečenie tuhých tumorov je opäť rýchle uvoľňovanie účinného liečiva z rakovinových buniek a z plazmy. Zjavne nie je možné dosiahnuť významné intraceluláme hladiny liečiva v rakovinovom tkanive, napriek tomu, že ten-ktorý tumor je citlivý naAra-C in vitro. Prekvapujúco predĺžený polčas a zmenená distribúcia v tkanivách produktov podľa vynálezu bude mať veľký význam na terapeutický účinok pri týchto látkach.
Zistilo sa, ako to znázorňuje obr. 7, 8 a 9, že 3'- a 5'-O-estery Ara-C a určitých nasýtených a nenasýtených mastných kyselín vykazujú neočakávane dobrý účinok proti rôznym tumorom na rozdiel od samotného Ara-C a aj od iných mono- a di-esterov.
Predkladatelia vynálezu sa nazdávajú, že testovací model, ktorý má bežné použitie (injikovanie leukemických buniek do brušnej dutiny myší a intraperitoneálne liečenie), je viac porovnateľný s in vitro modelom, ako so skutočnou klinickou situáciou a mnohé slúžili na skrytie zvlášť cenných vlastnosti vybraných Ara-C esterov použitých v predkladanom vynáleze, ako bude opísané ďalej.
Podrobnejšie, 3'- a 5'-O-estery, ktoré sú použité v predkladanom vynáleze, sú tie, ktoré sú odvodené od C18 alebo C20 nasýtených a mononenasýtených mastných kyselín.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je použitie Ι-β-D-arabinofuranozylcytozínového (Ara-C) derivátu vzorca (I)
kde R1 a R2 sú nezávisle vodík a Cl8- a C20-nasýtené a mononenasýtené acylové skupiny, s výhradou, že R1 a R2 nesmú byť oba vodíkmi, na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie tuhých tumorov a lymfómov.
Výhodné sú deriváty vzorca (I), kde R1 a R2 sú vybrané z vodíka a nasýtených alebo ω-9 mononenasýtených C18- a C20-acylových skupín.
R1 znamená výhodne vodík a R2 je výhodne elaidoylová alebo eikozenoylová (cis alebo trans) skupina.
Dvojitá väzba mononenasýtených acylových skupín môže byť alebo v cis alebo v trans konfigurácii, hoci terapeutický účinok môže byť rozdielny podľa použitej konfigurácie.
Zdá sa, že pozícia dvojitej väzby v mononenasýtených acylových skupinách tiež ovplyvňuje účinok. V súčasnosti sú výhodné estery, ktoré majú nenasýtenú väzbu v polohe ω-9. (V ω-systéme nomenklatúry sa pozícia (ω) dvojitej väzby mononenasýtenej mastnej kyseliny počíta od koncovej metylovej skupiny, takže napríklad kyselina eikozenová (C2o: 1 ω-9) má v reťazci 20 atómov uhlíka a jedna dvojitá väzba sa vytvára medzi uhlíkovými atómami 9 a 10 počítanými od metylového zakončenia reťazca). Preto je výhodné použiť Ara-C estery odvodené od kyseliny olejovej (C18:1, ω-9, cis), kyseliny elaidovej (C18:l, ω-9, trans) a kyseliny eikozenovej (C20:1, ω-9, cis) a (C2t):l, ω-9, trans), a kyseliny stearovej (C18:0), a kyseliny eikozanovej (C20:0).
3'-O- a 5'-O-monocstcry aj 3',5'-O-diestery je možné použiť na liečenie rozličných tumorov v súlade s predkladaným vynálezom, ale vo všeobecnosti sú výhodné 5'-O-monoestery. Očakáva sa, že 3',5'-O-diestery budú vhodné v tých prípadoch, kde sa výhodne uplatnia lipofilné vlast
SK 283003 Β6 nosti, napríklad absorpcia a vychytávanie v tukovom tkanive.
Farmaceutický prípravok s obsahom derivátov vzorca (I) môže byť použitý na lokálne alebo systémové liečenie tuhých tumorov alebo lymfómov. Výhodne sa môže použiť na liečenie tuhých tumorov alebo lymfómov v retikuloendoteliálnom systéme, v centrálnom nervovom systéme a na liečenie metastatických tumorov.
Podstatu vynálezu ďalej tvoria zlúčeniny vzorca (I), kde R1 a R2 sú nezávisle vybrané z vodíka, elaidoylu, oleoylu, stearoylu, eikozenoylu (cis alebo trans) a eikozanoylu s výhradou, že radikály R1 a R2 nesmú oba znamenať vodík, oleoyl, elaidoyl, stearoyl alebo eikozanoyl, R1 nesmie byť vodík, ak R2 je oleoyl alebo stearoyl a R2 nesmie byť vodík, ak R1 je elaidoyl, oleoyl, stearoyl alebo eikozanoyl, ktoré sú novými zlúčeninami, a ešte neboli prezentované.
Vynález sa taktiež týka farmaceutického prípravku, ktorý obsahuje tieto nové l-B-D-arabinofúranozylcytozinové deriváty vzorca (I) a farmaceutický prijateľný nosič alebo pomocnú látku.
Podrobnejšie sú tieto nové zlúčeniny vzorca (1) definované v tabuľke A, kde R1 a R2 sú, ako je nasledovne uvedené:
Tabuľka A
R1 R2
vodík elaidoyl
vodík eikozenoyl (cis)
vodík eikozenoyl (trans)
eikozenoyl (cis) vodík
eikozenoyl (trans) vodík
eikozenoyl (cis) eikozenoyl (cis)
eikozenoyl (trans) eikozenoyl (trans)
eikozenoyl (cis) eikozenoyl (trans)
eikozenoyl (trans) eikozenoyl (cis)
eikozenoyl (cis) elaidoyl
eikozenoyl (trans) elaidoyl
elaidoyl eikozenoyl (cis)
elaidoyl eikozenoyl (trans)
eikozenoyl (cis) oleoyl
eikozenoyl (trans) oleoyl
oleoyl eikozenoyl (cis)
oleoyl eikozenoyl (cis)
eikozanoyl eikozanoyl
eikozanoyl stearoyl
stearoyl eikozanoyl
elaidoyl stearoyl
eikozenoyl (cis) stearoyl
eikozenoyl (trans) stearoyl
elaidoyl eikozanoyl
eikozenoyl (cis) eikozanoyl
eikozenoyl (trans) eikozanoyl
stearoyl oleoyl
oleoyl stearoyl
Limitujúcim faktorom použitia Ara-C je jeho degradácia cytidín deaminázou a deoxycytidínmonofosfát (dCMP) deaminázou na neúčinné metabolity. Prekvapujúco sa zistilo, že monoestery podľa tohto vynálezu sú slabými substrátmi pre tieto deaktivačné enzýmy. Tento rozdiel môže znamenať, že tieto esterové deriváty sú vhodnejšie než samotný Ara-C na systémové alebo miestne liečenie malígnych tumorov, najmä malígnych tumorov v RES a CNS.
To je jasne dokázané na modeli metastáz mozgu opísanom na obr. 10,11 a 12 a najmä pri agresívnejších B-bun kových lymfómoch znázornených na obr. 11 samotný AraC je neúčinný.
Pri klinickom liečení myeloidnej leukémie je rýchla deaktivácia Ara-C kompenzovaná kontinuálnou infúziou v trvaní viac ako 5 až 7 dní, aby sa stanovila skutočne stabilná terapeuticky účinná plazmatická hladina Ara-C. Ukázalo sa, že po intravenóznom podávaní ekvimolámych množstiev rádioznačeného Ara-C a Ara-C-5'-esteru kyseliny elaidovej potkanom sa dosiahne zmena k lepšiemu v rýchlosti metabolizácie a vo vylučovacom profile. Ako možno vidieť z tab. 1 a obrázka 20, podávaním Ara-C-5'-esterov kyseliny elaidovej sa docieli vyššia iniciálna koncentrácia v celkovej krvi a v plazme a pomalšia konverzia na Ara-U. Deaminácia na Ara-U z Ara-C esterov podľa tohto vynálezu, v tomto prípade podávaním elaidátu sa ukázala ako významne pomalšia a ak hladiny Ara-C a Ara-U v plazme sú pod detekčnou hranicou stanovenia v 48 hod., keď sa podáva čistý Ara-C, možno ešte obe zlúčeniny kvantifikovať v 72 hod. po podaní Ara-C-5'-elaidátu. Ako možno vidieť z tab. 2, celkové vylúčené množstvo Ara-U (AUC, 0-72 hod.) je pri obidvoch podaných zlúčeninách rovnaké. V klinickej situácii sa tieto výsledky odrazia v širšom časovom rozsahu terapeuticky účinnej koncentrácie Ara-C v krvi. V modeli leukémie in vivo opísanom na obr. 13 sú porovnávané Ara-C a ester kyseliny 5'-elaidovej a podobné protirakovinové účinky pri podávaní Ara-C sú demonštrované podávaním 1/20 molámej dávky esteru.
Ak sú v klinickom hodnotení zistené podobné profily toxicity ako pri Ara-C pri podávaní esterových derivátov, zlepšenie terapeutického indexu by malo byť v tom istom poradí (x 20) ako zlepšenie pomeru dávka/účinok.
Najväčšiu dôležitosť pri liečení leukémií a iných ochorení obmedzených na retikuloendoteliálny systém (RES) má samozrejme časový rozsah účinnej koncentrácie v plazme, ale lokalizácia účinnej látky v tkanivách RES (definovaných ako pečeňové, slezinové, pľúcne bunky, bunky steny čreva a fagocytáme bunky prítomné napríklad v kostnej dreni alebo v celkovej krvi) má rovnako veľkú dôležitosť. Zistilo sa (obr. 21 a tab. 1), že intravenóznym podaním ekvimolámych množstiev Ara-C a Ara-C-5'-esteru kyseliny elaidovej je koncentrácia účinného liečiva v RES tkanivách významne vyššia a pretrváva dlhší čas, ak sa dávkuje esterový derivát. Známky distribúcie a metabolizmu sa sledujú podrobnejšie a výsledky týkajúce sa pečene sú znázornené na obr. 19. Terapeuticky významná hladina Ara-C pretrváva aspoň 72 hod. po podaní esterového derivátu. Toto umožňuje liečenie primárnej rakoviny pečene alebo metastáz v pečeni pri rakovine čreva a rekta, pri melanóme alebo pri iných druhoch rakoviny. Liečenie môže predstavovať monoterapiu, alebo aj paliatívnu/doplnkovú terapiu v kombinácii s chirurgiou, ožarovaním alebo inou chemoterapiou.
Tiež sa pozorujú zvýšené koncentrácie Ara-C v iných tkanivách a toto v kombinácii s menším objemom distribúcie môže otvárať možnosti liečenia pomocou Ara-C esterov pri takých druhoch rakoviny, ktoré za normálnych okolností nereagujú na liečenie Ara-C.
Navyše sa nečakane zistilo, že estery podľa vynálezu (obr. 15) vo veľkej miere stimulovali aktiváciu NFkappaB, zatiaľ čo Ara-C nevykazoval žiadnu stimuláciu. Stimulácia predstavuje biologický účinok, ktorý sa pri terapeuticky použitých chemických látkach normálne nevyskytuje, a najmä nie pri bežných cytostatikách. To by mohlo naznačovať, že Ara-C estery podľa tohto vynálezu majú stimulačný účinok na niektoré faktory imunity, čo by mohlo vysvetliť udivujúce zlepšenie protirakovinového účinku. Toto by mohlo mať neobyčajný význam pri liečení neoplastic kých ochorení súvisiacich s imunokompetentnými bunkami, ako sú leukémie a lymfómy.
Vývin rezistentých rakovinových buniek predstavuje v súčasnom liečení rakoviny vážny problém. Zistilo sa (obr. 7-9), že Ara-C deriváty podľa predkladaného vynálezu majú rovnaký účinok proti bunkám rezistentným na cisplatinu (NHIK 3025/DDP) a MDR rezistentým bunkám (A549), ako aj proti zodpovedajúcim nie rezistentným bunkám. Veríme, že toto je preto, že deriváty nie sú substrátmi pre bunkové mechanizmy efluxu liečiva, ako „gp 120 MDR pumpa“, zodpovedná za fenomén, ktorý sa prejaví ako mnohopočetná lieková rezistencia.
Cis a C2o mono- a di-estery Ara-C možno podľa predkladaného vynálezu použiť na liečenie množstva rakovinových nádorov. Zvlášť sľubný účinok bol zistený pri mozgových tumoroch, ako napríklad pri glióme a pri metastázach z iných tumorov, ako sú sarkómy, karcinómy, ako aj pri leukémii. V súčasnosti sa gliómy liečia chirurgicky, ožarovaním a cytostatikami, napríklad N,N-cis(2-chlóretyl)N-nitrózo-urea (NBCNU). Ale prognóza pri týchto liečeniach je veľmi zlá.
Dobré účinky s Ara-C estermi podľa vynálezu sa tiež zistili pri metastázujúcich tumoroch, ako sú karcinómy, sarkómy, leukémia a melanómy.
Zameranie vynálezu a jeho základné a výhodné charakteristiky sú také, ako sa uvádza v priložených nárokoch.
Biologické účinky Tvorba miciel
Micelárny prípravok 1 mg/ml sa vyrobí zmiešaním Ara-C esteru (v DMSO) a lecitinu v pomere 1 : 1 (v/v) v sterilnej vode.
Klonogénny agarózový test1
Pacientovi sa vykonala biopsia a tkanivo bolo okamžite vložené do rastového média. Tumorózne tkanivo sa mechanicky rozrušilo a vybrali sa živé bunky. Pridala sa chemoterpeuticky testovaná látka, BCNU (vo vode) a Ara-C estery (v micelách) a bunky boli kultivované v mäkkom agarózovom médiu. 24 hodín pred ukončením kultivácie (7 dní) sa pridal 3H tymidín. Aktivita testovanej látky sa preto kvantifikovala ako cpm v scintilačnom počítači.
(l) G. Unsgaard et al., Acta Neurochir (Viedeň), 1988, 91:60-66.
Na obr. 1 sú výsledky získané z biopsie glioblastómu pacienta. Taká istá odpoveď sa našla pri ďalších 8 glioblastomatických biopsiách. Graf vyjadruje porovnanie Ara-C a jeho 3'-elaidyl esteru a 5'-elaidylesteru in vitro. Výsledky sú uvádzané ako % neliečených kontrol. Hodnota 50 % (CD50) sa uvádza ako sľubná z hľadiska terapie tejto skutočnej rakovinovej bunkovej línie. Čo predstavuje nulovú hodnotu, je tu 101’5 vyššia koncentrácia Ara-C potrebná na dosiahnutie DC50 v porovnaní s elaidylestermi.
Na obr. 2 sú znázornené výsledky získané s tým istým glioblastómom ako na obr. 1. Graf porovnáva rádioterapiu a chemoterapiu (BCNU). Radiačná dávka vyššia ako 10 Grayov (Gy) potrebná na dosiahnutie CD:o je v zmysle praktického liečenia bezvýznamná. Porovnávajúc obr. 1 a 2 je potrebná koncentrácia BCNU na dosiahnutie CD50 asi lOx vyššia, ako je potrebná koncentrácia Ara-C esterov, ale je skutočne porovnateľná so samotným Ara-C.
Na obr. 3 sú znázornené výsledky, získané z biopsie odobranej z mozgových metastáz melanómu. Rozdiel medzi Ara-C a 3' a 5'-elaidylesterom nie je taký výrazný ako pri glióme, ale ešte stále je rádovo lOx vyšší.
Obr. 4 znázorňuje účinnosť BCNU na líniu melanómových buniek. V porovnaní s estermi Ara-C je BCNU potrebný vo viac ako 1 x 102 vyššej koncentrácii, aby sa dosiahla CD50.
Na obr. 5 je znázornený graf, ktorý znázorňuje výsledky s metastázami karcinómu (pľúc) v mozgu. Tieto rakovinové bunky sú viac rezistentné proti chemoterapii, ale rozdiel medzi Ara-C a Ara-C estermi stále existuje.
Na obr. 6 sú znázornené výsledky s BCNU liečením metastáz karcinómu (pľúc), ktoré sú uvedené, sú podobné tomu, čo sa už demonštrovalo pri iných bunkových líniách.
Pokiaľ ide o sledované rôzne bunkové línie, zdá sa, že medzi Ara-C estermi, samotným Ara-c a BCNU existuje explicitný rozdiel v účinnosti. Potenciácia 1 x 102 je z hľadiska terapeutickej situácie veľmi sľubná. Zistenia naznačujú, že 5'estery sú o niečo účinnejšie ako 3'estery.
Inaktivácia buniek - schopnosť tvorby kolónií
Inaktivácia buniek meraná prostredníctvom zníženia schopnosti tvoriť kolónie bola stanovená pri niekoľkých zlúčeninách. Použité bunky boli z diagnostikovanej rakoviny krčka maternice in situ, NHIK 3025, NHIK 3025/DDP, cis-DDP-rczistcntéhoj variantu tých istých buniek alebo A549 buniek (humánny karcinóm pľúc). Bunky boli vystavené testovanej zlúčenine počas 4 až 24 hod. Testované zlúčeniny boli podávané ako micelárny roztok. Množstvo kolónii sa spočítalo asi po 12 dňoch inkubácie.
Na obr. 7 je znázornený graf, ktorý vyjadruje in vitro porovnanie testovaných zlúčenín Ara-C, Ara-C-5'-elaidyl esteru, Ara-C-5'-stearyl esteru, Ara-C-5'-eikozenesteru a Ara-C-5'-petrozelín esteru. Výsledky sú uvedené ako dávka potrebná na zníženie prežívania buniek o 90 % v porovnaní s neliečenými kontrolami. Ako vidno z grafu, po expozícii esterom v porovnaní so samotným Ara-C sa zaznamenala podstatne vyššia inaktivácia NHIK 3025 buniek. Faktor modifikujúci dávku pri 10 % hladine prežívania je v rozmedzí 3 až 5 pre Ara-C-estery v porovnaní s Ara-C, čo znamená, že sa požaduje 3 až 5-násobne vyššia dávka Ara-C, aby sa dosiahla podobná schopnosť zníženej tvorby kolónií, ako bola zistená pri esteroch.
Na obr. 8 sú znázornené výsledky, získané 4-hod. opracovaním NHIK 3025/DDP buniek. Zvýšený účinok esteru Ara-C-5'-elaidátu v porovnaní s účinkom Ara-C sa podobá zvýšenému účinku, ktorý bol zistený pri NHIK 3025 bunkách. Zvýšený účinok nezávisí od rezistencie na cis-DDP.
Na obr. 9 je znázornený graf, ktorý vyjadruje in vitro výsledky s použitím A549 buniek (bunky karcinómu u ľudí) so schopnosťou tvoriť kolónie na porovnanie testovaných zlúčenín Ara-C, Ara-C-5'-elaidylesteru, Ara-C-5'-stearyl esteru, Ara-C-5'-eikozén esteru a Ara-C-5'-petrozelín esteru. Bunky boli exponované 24 hod. Najvyššia inaktivácia je zaznamenaná pri Ara-C-5'-stearyl esteri, ale zvýšený účinok sa zaznamenal aj pri elaidyl a petrozelín esteroch.
Raji bunky humánneho B-lymfómu - model leptomeningeálnej karcinomatózy na nahých potkanoch
Použitý model je modelom tumoru na leptomeningeálny rast tumorov na nahých potkanoch. 1 x 106 buniek B-bunkovej tumoróznej bunkovej línie Raji sa injikovalo do spinálnej tekutiny cez cisternu magna (c. m.) u 4 - 5 týždňových nahých potkanov. Bez liečenia sa u anestetizovaných zvierat po 12 až 14 dňoch rozvinú neurologické príznaky. Anestetizované zvieratá boli liečené intracerebrálne 40 μΐ injikovaním prostredníctvom 3 alebo 4 bolusových injekcií do cisterna magna. Liečenie sa začalo 1 deň po i4
SK 283003 Β6 nokulovaní buniek. Testované zlúčeniny predstavovali Ara-C-5'-elaidyl ester (v micelách) a Ara-C. Ara-C bol podaný v maximálnej tolerovateľnej dávke (MTD), ako aj v ekvimolárnej dávke zodpovedajúcej Ara-C-5'-elaidylesteru. U kontrolných zvierat (liečených NaCl) alebo prázdnymi lipozómami (micely bez Ara-C esterov) sa z centrálneho nervového systému rozvinuli symptómy asi po 14 dňoch.
Na obr. 10 je graf, ktorý znázorňuje podanie 3 bolusových injekcií Ara-C-elaidátu v 1., 2. a 4. deň, ktoré zvýšili bezsymptomatický latentný čas o 135 % v porovnaní s AraC, pričom sa priemerný čas uhynutia oddialila z 13. dňa na 30,5. deň. Jeden potkan prežil viac ako 70 dní a bol považovaný za vyliečeného. Pri pitve na 76. deň neboli viditeľné žiadne tumory. Toto zvýšenie prežívania bez prejavov ochorenia predstavuje lepšie výsledky, ako bolo dosiahnuté inými terapeutickými možnosťami testovanými na porovnateľných modeloch na rozličné typy humánnych tumorov.
Na obr. 11 sú znázornené krivky prežívania z doplnkového experimentu s nahými potkanmi inokulovanými Raji bunkami do mozgu, liečenými 4 bolusovými dávkami sú znázornené na tomto obr. Do cisterna magna bola podaná jedna denná bolusová dávka v 1., 2. a 4. deň. Ako v predchádzajúcom experimente, sa pre Ara-C nezistili žiadne účinky, ani pri maximálnej tolerovateľnej dávke (MTD), ani pri dávke ekvimolámej Ara-C-elaidátu. Výsledky pre skupinu, kde bol podávaný Ara-C-elaidát boli dokonca ešte viac udivujúce než v predchádzajúcom experimente. 3 z 5 potkanov boli nažive a bez príznakov ešte na 70. deň. Boli považované za vyliečené. Toto je najviac sľubné. 5/6 kontrolovaných potkanov uhynulo na 13. deň. 6. kontrolovaný potkan nemal spätný tok spinálnej tekutiny do striekačky po injikovaní tumoróznych buniek a nemal žiadne neurologické symptómy po 70 dňoch. Podľa normálneho postupu bolo takéto zviera z výsledkov vylúčené.
Molt 4 bunky humánneho B-lymfómu - model leptomeningeálnej karcinomatózy na nahých potkanoch
Použitý model je modelom tumoru pre leptomeningeálny rast tumorov na nahých potkanoch. 1 x 106 buniek B-bunkovej tumoróznej bunkovej línie Molt 4 sa injikovalo do spinálnej tekutiny cez cisternu magna (c. m.) u 4 až 5 týždňových nahých potkanov. Bez liečenia sa u anestetizovaných zvierat po 20 až 22 dňoch rozvinú neurologické príznaky. Anestetizované zvieratá boli liečené intracerebrálne 40 μΐ injikovaním prostredníctvom 4 bolusových injekcií do cisterna magna. Liečenie sa začalo 1 deň po inokulovaní buniek. Testované zlúčeniny predstavovali Ara-C-5'-elaidyl ester (v micelách) a Ara-C. Ara-C bol podaný v maximálnej tolerovateľnej dávke (MTD), ako aj v ekvimolárnej dávke zodpovedajúcej Ara-C-5'-elaidylesteru. U kontrolných zvierat (liečených NaCl) sa symptómy z centrálneho nervového systému rozvinuli asi po 20 dňoch.
Na obr. 12 je znázornené prežívanie ako funkcia času u potkanov injikovaných Molt 4 lymfómovými bunkami do mozgu, 4x liečenými do cisterna magna. V tomto počiatočnom experimente bol začiatok hynutia pre zvieratá, ktoré dostali Ara-C-claidát v porovnaní so zvieratami, ktoré dostali Ara-C alebo kontrolu, oneskorený. Počet zvierat v jednej skupine bol: kontroly (7), Ara-C-elaidát (3) a Ara-C (5).
Model leukémie s použitím Raji buniek humánneho lymfómu
SCID myši boli intravenózne injikované 1 x 106 Raji bunkami humánneho B-lymfómu. Myši boli liečené 7., 9., ÍL, 13., a 15. deň po injikovaní tumoróznych buniek alebo 20 mg/kg/deň Ara-C-elaidátu, alebo 200 mg/kg/deň Ara-C alebo kontroly. U zvierat sa rozvinula paralýza zadných labiek, ako výsledok tumorózneho rastu. Priemerný deň uhynutia zvierat v každej skupine s odlišným liečením je znázornený na obr. 13.
Na obr. 13 je znázornené priemerné prežívanie SCID myší intravenózne injikovaných Raji bunkami humánneho B-lymfómu, liečených intravenózne jednou injekciou v každom z dní 7, 9, 11, 13 a 15 Ara-C-elaidátom, Ara-C alebo kontrolou. Dávky boli 20mg/kg Ara-C-elaidátu a 200 mg/kg pre Ara-C. Na ekvimolámej báze 20-násobne znížená dávka Ara-C-elaidátu v porovnaní s dávkou Ara-C zvýšila priemerné prežívanie v porovnaní s kontrolou a Ara-C liečenými zvieratami. Počet zvierat v každej skupine bol 7.
Na obr. 14 je znázornené priemerné prežívanie SCID myší intravenózne injikovaných Raji bunkami humánneho B-lymfómu, liečených intraperitoneálne injekciou Ara-C-elaidátu, Ara-C alebo kontroly lx denne v dňoch 7-11. Priemerné prežívanie je veľmi predĺžené v prípade Ara-C-elaidátu, keď sa liečenie opakuje každý deň, namiesto každý druhý deň.
Aktivácia celulámeho transkripčného faktora NFkappaB
Použili sa humánne SW480 bunky adenokarcinómu čreva transfekované CMV promoterom/zvyšovačom s obsahom génu pre β-galaktozidázu. Aktivácia transkripčného faktora NFkappaB sa prejavuje zvýšením množstva enzýmu β-galaktozidázy v cytoplazme. Množstvo β-galaktozidázy sa stanovuje pomocou optickej hustoty pri 570 nm ako parameter. SW380 bunky boli inkubované 2 - 3 dni pred expozíciou testovanej zlúčenine počas 4 hod. Bunky sa premyli a preparovali a pre rôzne zlúčeniny sa zaznamenala optická hustota.
Na obr. 15 znázorňuje, že po expozícii Ara-C sa nezaznamenala žiadna aktivita β-galaktozidázy, zatiaľ čo po expozícii Ara-C-elaidátu sa zaznamenalo podstatné zvýšenie aktivity β-galaktozidázy ako zvýšenie optickej hustoty pri 570 nm. Toto naznačuje, že sa pomocou Ara-C-elaidátu dosiahne prekvapujúco vysoká indukcia transkripčného aktivačného proteínu NFkappaB. NFkappaB sa podieľa na génovej regulácii množstva imunitných faktorov a táto aktivácia pomocou Ara-C-elaidátu by mohla vysvetliť zosilnené protirakovinové účinky zistené pri Ara-C-elaidáte. Dalo by sa očakávať, že pôsobením Ara-C-elaidátu dôjde k stimulácii určitých imunitných buniek, čo by mohlo byť zvlášť zaujímavé pri liečení leukémie a lymfómov.
Antitumorózna aktivita Ara-C-elaidátu verzus Ara-C v prípade murínneho TLX/5 lymfómu
CBA myši s hmotnosťou 20 až 25 g boli subkutánne ingvinálne inokulované dávkou 1 x 103 TLX/5 tumoróznych buniek v deň 0. Na 3., 4., 5., 6., a 7. deň sa intraperitoneálne podal Ara-C-elaidát alebo Ara-C. Dávky boli v rozmedzí 6,25 až 50 mg/kg/deň. V skupine bolo 5 liečených myši a 10 kontrol s tumorom. Účinnosť sa stanovila ako predĺženie života (ILS) oproti kontrolám.
Obr. 16 znázorňuje myši s TLX/5 lymfómom a ich % predĺženie života (priemerne 5 v skupine) po liečení Ara-C-elaidátom alebo Ara-C i. p. počas 5 dní. Ara-C bol účinný iba pri dávke 25 mg/kg, zatiaľ čo Ara-C-elaidát bol účinný pri dávkach 12,5 mg/kg aj 25 mg/kg. Maximálne predĺženie života bolo 47,2 % v porovnaní s 32,7 % pre Ara-C.
Antitumorózna aktivita Ara-C-elaidátu verzus Ara-C pri SCID myšiach intraperitoneálne inokulovaných bunkami hemangiosarkómu
SCID myši boli intraperitoneálne inokulované PV/2b/35 hemangiosarkómovými bunkami. Myši boli 5 dní v týždni liečené 25 mg/kg/deň alebo ARA-C-elaidátom v micelách, alebo Ara-C-elaidátom rozpusteným v DMSO, alebo Ara-C rozpusteným v PBS. Kontrolami boli prázdne micely, DMSO alebo PBS. Počas víkendu zvieratá liečené neboli. Prežívanie predstavovalo koniec štúdie.
Obr. 17 znázorňuje prežívanie SCUD myší intraperitoneálne inokulovaných PV/2b/35 hemangiosarkómovými bunkami. Prežívanie bolo veľmi zvýšené pri zvieratách liečených Ara-C-elaidátom. Zaznamenalo sa zvýšené prežívanie v porovnaní s kontrolami tak pri Ara-C-elaidátu v micelách, ako aj pri Ara-C-elaidátu rozpusteného v DMSO.
Obr. 18 prezentuje výsledky zo sledovania 5'-Ara-C-elaidylesteru pri glioblastómovom tumore pri nahých myšiach. Tkanivová kultúra glioblastómovej bunkovej línie U-118 (Uppsala) bola subkutánne injikovaná nahým myšiam. Malá časť (2x2 mm) rastúceho tumoru bola prenesená na nové myši. Subkutánne tumory majú o niečo odlišnú rýchlosť rastu pri rôznych zvieratách, ale pri veľkosti 4 až 6 mm bola podaná injekcia s 10 mg/ml micelámeho roztoku Ara-C esteru. V závislosti od skutočnej veľkosti tumoru zvieratá dostali rovnaké relatívne množstvo testovanej látky. Kontroly dostali fyziologický roztok. Rýchlosť rastu sa zaznamenávala ako relatívny objem tumoru (RTV). Tumor v prípade kontroly rastie celkom normálne podľa typu rakoviny. Čo sa ukázalo, jc úplné zastavenie tumorózneho rastu u liečených zvierat. Ďalej, pri zvieratách sa neprejavili žiadne známky toxických vedľajších účinkov, ktorými je v prípade Ara-C poškodenie kostnej drene s rozvinutím anémie alebo krvácania, ako aj neboli zaznamenané žiadne známky poškodenia CNS.
Porovnávacia farmakokinetika, distribúcia, metabolizmus a exkrécia 14C-Ara-C-elaidátu a 14C-Ara-C podávaných intravenózne samcom potkanov 14C-Ara-C-elaidát (v micelách) alebo 14C-Ara-C boli intravenózne podané samcom potkanov v ekvimolárnych dávkach, 5 mg/kg pre 14C-Ara-C-elaidát a 2,4 mg/kg pre 14C-Ara-C. Koncentrácie celkovej rádioaktivity a metabolitov v plazme boli stanovené v rôznych časových bodoch. Tkanivové koncentrácie celkovej rádioaktivity boli stanovené v množstve tkanív v rôznych časových bodoch až do 120 hod. po injikovaní. Extrahovali sa pečeňové tkanivá a koncentrácie metabolitov boli stanovené až do 72 hod. po injikovaní. Tkanivová distribúcia Ara-C-elaidátu bola významne zmenená v porovnaní s distribúciou Ara-C. Maximálne koncentrácie boli vo väčšine tkanív významne vyššie a vyskytovali sa v neskorších časových bodoch po podaní 14C-Ara-C-elaidátu, najmä v celkovej krvi/plazme, slezine, pečeni a pľúcach. Maximálne koncentrácie vo svale, slinných žľazách, koži a v močovom mechúre boli nižšie. Pomerná dávka v celkovej krvi v 0,08 hod. po podaní 14C-Ara-C-elaidátu bola zistená ako 64,7 %, významne vyššia ako pomerná dávka prítomná v systémovej cirkulácii v tom istom časovom bode po podaní ,4C-Ara-C (7,76 %). Exkrécia prostredníctvom renálneho systému bola oveľa pomalšia v prípade elaidátu ako v prípade samotného Ara-C. Vylučovanie z tkanív bolo pre 14C-Ara-C-elaidát oveľa pomalšie ako v prípade vylučovania z tkanív po podaní samotného Ara-C.
Tabuľka 1
Maximálne koncentrácie rádioaktivity (vyjadrené ako pg ekvivalentov/g) po podaní ekvimolárnych dávok l4C-Ara-C-elaidátu alebo l4C-Ara-C v zodpovedajúcom časovom bode pre maximálnu koncentráciu. Ako vidno z tabuľky, maximálne koncentrácie pre dve uvedené zlúčeniny sa vyskytovali v rôznych tkanivách a v rôznych časových bodoch.
Tabuľka 1
Tkanivo l4C-Ara-C-eIaidát Cmax-hod.) 14C-Ara-C (tmax-hod.)
slezina 175,2 (0,25) 2,406 (0,08)
plazma 55,60 (0,08) 3,058 (0,08)
celková krv 47,32 (0,08) 2,707 (0,08)
pečeň 42,37(1 h) 2,526 (0,08)
krvinky 34,37 (0,08) 2,201 (0,08)
pľúca 28,97 (0,08) 2,144(0,08)
vena cava 17,29 (0,08) 1,887 (0,25)
kostná dreň 13,29(1 h) 1,950(0,08)
srdce 10,15(0,08) 1,916(0,25)
obličky 9,108 (0,08) 7,752 (0,08)
prostata 9,014 (4 h) 2,810(0,25)
pituitáma žľaza 8,359 (0,08) 0,931 (0,08)
aorta 7,795 (0,08) 2,213 (0,08)
močový mechúr 6,421 (4 h) 13,07(1 h)
adrenálne žľazy 5,229 (0,08) 1,764 (0,08)
slinné žľazy 2,366 (0,25) 2,505 (0,08)
slzné žľazy 4,438 (4 h) 2,460 (0,08)
lymfatické uzliny 2,831 (1 h) 2,222 (0,08)
koža 1,793 (0,25) 2,189(0,08)
sval 1,990 (0,25) 2,158 (0,08)
pankreas 2,817(0,08) 2,148(0,08)
týmus 2,090 (0,25) 2,054 (0,08)
mozog 1,408(0,08) 0,233 (1 h)
Tabuľka 2
Vylučovanie rádioaktivity (% dávky) po intravenóznom podaní 14C-Ara-C elaidátu (5 mg/kg) alebo l4C-Ara-C (2,4 mg/kg) samcom potkanov. Rýchlosť vylučovania rádioaktivity v moči je pomalšia pre 14C-Ara-C-elaidát ako pre l4C-Ara-C.
Tabuľka 2
Vzorka/čas (hodiny) 14C-Ara-C-elaidát l4C-Ara-C
0-6 59,1 ±3,7 85,3 ±3,1
6-24 34,1 ±2,5 8,8 ± 1,9
24-48 2,7 ± 0,8 0,5 ± 0,3
48-72 0,5 ±0,1 0,2 ±<0,1
72-96 0,2 ±0,1 0,2 ±0,1
96-120 0,1 ±<0,1 0,1 ±0,1
Obr. 19 znázorňuje koncentrácie Ara-C-elaidátu (P-Ara-C-el) a metabolitov Ara-C (P-Ara-C) a Ara-U (P-Ara-U) v pečeni ako funkciu času po injikovaní l4C-Ara-C-elaidátu na obr. 15, ako aj koncentráciu Ara-C(Ara-C) a metabolitu Ara-U (Ara-U) ako funkcia času po injikovaní samotného 14C-Ara-C. Injikovaním Ara-C-elaidátu došlo k podstatnému zvýšeniu a predĺženiu expozície pečene potkana tak Ara-C-elaidátu ako Ara-C, pričom do 24 hod. sa nedetegoval Ara-U. Toto bolo v silnom rozpore s koncentráciou Ara-C v pečeni po podaní Ara-C samotného. Koncentrácia Ara-C v pečeni sa znížila na nedetegovateľné hladiny po 4 hod., pričom metabolit Ara-U bol prítomný vo všetkých časových bodoch.
Obr. 20 znázorňuje plazmatické hladiny Ara-C-elaidátu a metabolitov Ara-C a Ara-U po intravenóznom podaní 14C-Ara-C-elaidátu ako funkciu času rovnako ako plazmatické hladiny Ara-C a metabolitu Ara-U po intravenóznom podaní 14C-Ara-C, ktoré sú tiež funkciou času. Podávanie Ara-C-elaidátu zvýšilo prolongovanú plazmatickú hladinu Ara-C, s detegovateľnými hladinami až do 72 hod. po podaní Ara-C. Metabolizácia Ara-C na Ara-U je menej extenzívna nastupuje neskôr u zvierat, ktoré dostali Ara-C-elaidát.
Na obr. 21 tkanivová koncentrácia celkovej rádioativity je nanesená ako funkcia času po intravenóznom podaní 14C-Ara-C-elaidátu (P) alebo 14C-Ara-C. Tkanivami znázornenými na grafe sú pečeň, slezina, pľúca, kosť a kostná dreň. Koncentrácia rádioaktivity po injikovaní 14C-Ara-C-elaidátu je pre všetky zodpovedajúce tkanivá vyššia vo všetkých časových bodoch až do 120 hod.
Ara-C estery podľa predkladaného vynálezu možno upraviť do formy farmaceutických prípravkov pomocou bežne dostupných nosičov a pomocných látok.
Ako o najsľubnejšom spôsobe liečenia gliómov a iných mozgových tumorov sa v súčasnosti uvažuje o lokálnej depozícii aktívnych zlúčenín v mieste, kde má byť tumor atakovaný. Z tohto dôvodu možno aktívne zlúčeniny dať do podoby lecitínového micelámeho prípravku. Napr. výhodné liečenie mozgových metastáz sa realizuje podávaním prípravku Ara-C esteru do miešnej tekutiny alebo do oblasti tumoru pomocou dávkovacej pumpy alebo podobného zariadenia.
Ara-C estery podľa predkladaného vynálezu možno podávať aj systémovo, enterálne alebo parenterálne.
Pri enterálnej aplikácii môžu byť aktívne látky podľa vynálezu vo forme napríklad mäkkých alebo tuhých želatínových kapsúl, tabliet, granúl, zrniečok alebo práškov, poťahovaných prípravkov, sirupov, suspenzií alebo roztokov.
Pri parenterálnom podávaní sú vhodné prípravky Ara-C esterov vo forme injekcií, infuznych roztokov, suspenzií alebo emulzií.
Prípravok môže obsahovať inertné alebo farmakodynamicky účinné aditíva, v súlade so znalosťami odborníkov v oblasti prípravy. Napríklad tablety alebo granuláty môžu obsahovať množstvo väzobných činidiel, plnív, emulzifikačných činidiel, nosičov alebo zried’ovadiel. Tekuté prípravky môžu byť napr. vo forme sterilného roztoku. Kapsuly môžu obsahovať plnivo alebo zahusťovädlo ako aditívum účinnej látky. Okrem toho v nich môžu byť aditíva upravujúce chuť, ako aj látky používané ako konzervačné, stabilizujúce, vlhkosť udržujúce činidlá, soli kvôli zmene osmotického tlaku, pufre a iné aditíva.
Dávka, v ktorej sú prípravky podľa vynálezu podávané, bude rozličná, podľa spôsobu užívania a miesta užívania, ako aj podľa potrieb pacienta. Vo všeobecnosti bude denná dávka v systémovej terapii pre dospelého priemerného pacienta v rozmedzí asi od 0,1 do 150 mg/kg telesnej hmotnosti/deň, výhodne 1 až 50 mg/kg/deň. Na povrchové podávanie, napríklad v masti, môže obsahovať od 0,1 do 10 % hmotn. farmaceutického prípravku, najmä 0,5 až 5 % hmotn.
Ak sa to požaduje, môže farmaceutický prípravok obsahujúci Ara-C obsahovať antioxidant, napríklad tokoferol, /V-metyi-tokoferamín. butylovaný hydroxyanizol, kyselinu askorbovú alebo butylovaný hydroxytoluén.
Do úvahy pripadajú aj kombinované liečenia, t. j. také, kde sa Ara-C ester podľa vynálezu podáva spolu s inými druhmi liečení, t. j. s chirurgicou liečením, ožarovaním a chemoterapiou. Napríklad ako výhodné pri mozgových tumoroch sa javí liečenie zahrnujúce kombináciu chirurgického liečenia a liečenia pomocou Ara-C podľa vynálezu, systémovým alebo miestnym podávaním.
Estery Ara-C použité podľa vynálezu možno vyrobiť podľa nasledovnej rovnice reakcie:
Báza
Nu-OH + FaX______Nu-O-Fa ’
-HX kde Nu-OH zastupuje Ara-C, O je kyslík v pozícii 3’ a/alebo 5'-cukrovej časti Ara-C, Fa je acylová skupina nasýtenej alebo mononasýtenej Cls- alebo C20-mastnej kyseliny a X môže byť Cl, Br alebo OR', kde R' je Fa,
COOCH3, COEt alebo COCF3.
Teda, reakcia začína acyláciou nukleozidu. Toto je spojené použitím vhodných reaktívnych derivátov mastných kyselín, hlavne halogenidov kyselín alebo anhydridov kyselín. Ak sa použije halogenid, napríklad chlorid kyseliny, pridá sa terciámy amín ako katalyzátor, napríklad trietylamín, Ν,Ν-dimetylanilin, pyridín alebo N,N-dimetylaminopyridín do reakčnej zmesi, aby viazali uvoľnenú halovú kyselinu. Reakcie sa výhodne uskutočňujú v nereaktívnom rozpúšťadle, akým je Ν,Ν-dimetylformamid alebo halogénovaný uhľovodík, ako napríklad dichlormetán. Ak je to požadované, možno ktorýkoľvek zo spomenutých terciámych amínov ako katalyzátorov použiť ako rozpúšťadlo, berúc do úvahy, aby boli v dostatočnom nadbytku. Reakcia by sa mala výhodne uskutočňovať pri teplote medzi 5 °C a 25 °C. Po 24 až 60 hodinách je reakcia v zásade ukončená. Postupovanie reakcie možno sledovať pomocou chromatografie na tenkých vrstvách (TCL) a pomocou primeraných systémov rozpúšťadiel. Keď je podľa TLC stanovenia reakcia ukončená, produkt sa extrahuje pomocou organického rozpúšťadla a purifikuje sa chromatografiou a/alebo rekryštalizáciou z primeraného systému rozpúšťadiel. Keďže v Ara-C je prítomných viac ako jedna hydroxylová skupina a tiež viac ako jedna aminoskupina, vyrobí sa zmes acylovaných zlúčenín. Jednotlivé požadované mono- a di-O-estery možno separovať napr. chromatograficky, kryštalizáciou, nadkritickou extrakciou atď.
Ak sa požaduje vyrobiť diesterovú zlúčeninu vzorca (I), v ktorej R1 a R2 sú rovnaké acylové skupiny, je výhodné použiť uvedený spôsob s použitím vhodného acylchloridu v prebytku.
Ak sa má vyrobiť diesterová zlúčenina vzorca (I), v ktorej R1 a R2 sú odlišné, je výhodné najprv vyrobiť 3' alebo 5'-monoester a potom nechať reagovať monoester s vlastným acylchloridom.
Tento postup ilustrujú nasledovné príklady.
Prehľad obrázkov na výkresoch
Na obr. 1 sú výsledky získané z biopsie glioblastómu pacienta.
Na obr. 2 sú znázornené výsledky získané s tým istým glioblastómom ako na obr. 1.
Na obr. 3 sú znázornené výsledky získané z biopsie 0dobranej z mozgových metastáz melanómu.
Obr. 4 znázorňuje účinnosť BCNU na líniu melanómových buniek.
Na obr. 5 je znázornený graf, ktorý znázorňuje výsledky s metastázami karcinómu (pľúc) v mozgu.
Na obr. 6 sú znázornené výsledky s BCNU liečením metastáz karcinómu (pľúc).
Na obr. 7 je znázornený graf, ktorý vyjadruje in vitro porovnanie testovaných zlúčenín Ara-C, Ara-C-5'-elaidyl esteru, Ara-C-5'-stearyl esteru, Ara-C-5'-eikozenesteru a Ara-C-5'-petrozelín esteru.
Na obr. 8 sú znázornené výsledky, získané 4-hod. opracovaním NHIK 3025/DDP buniek. Zvýšený účinok esteru Ara-C-5'-elaidátu v porovnaní s účinkom Ara-C sa podobá zvýšenému účinku, ktorý' bol zistený pri NHIK 3025 bunkách.
Na obr. 9 je znázornený graf, ktorý vyjadruje in vitro výsledky s použitím A549 buniek (bunky karcinómu u ľudí) so schopnosťou tvoriť kolónie na porovnanie testovaných zlúčenín Ara-C, Ara-C-5'-elaidylesteru, Ara-C-5'-ste aryl esteru, Ara-C-5'-eikozén esteru a Ara-C-5'-petro-zelín esteru.
Na obr. 10 je graf, znázorňujúci 3 bolusové injekcie Ara-C-elaidátu v 1., 2. a 4. deň, ktoré zvýšili bezsymptomatický latenčný čas o 135 % v porovnaní s Ara-C, pričom sa priemerný čas uhynutia oddialil z 13.
Na obr. 11 sú znázornené krivky prežívania z doplnkového experimentu s nahými potkanmi inokulovanými Raji bunkami do mozgu, liečenými 4 bolusovými dávkami.
Obr. 12 znázorňuje prežívanie ako funkciu času u potkanov injikovaných Molt 4 lymfómovými bunkami do mozgu, 4 x liečenými do cisterna magna.
Obr. 13 znázorňuje priemerné prežívanie SCID myší intravenózne injikovaných Raji bunkami humánneho B-lymfómu, liečených intravenózne jednou injekciou v každom z dní 7, 9, 11, 13 a 15 Ara-C-elaidátom, Ara-C alebo kontrolou.
Obr. 14 znázorňuje priemerné prežívanie SCID myší intravenózne injikovaných Raji bunkami humánneho B-lymfómu, liečených intraperitoneálne injekciou Ara-C-elaidátu, Ara-C alebo kontroly lx denne v dňoch 7 až 11.
Obr. 15 znázorňuje, že po expozícii Ara-C sa nezaznamenala žiadna aktivita β-galaktozidázy, zatiaľ čo po expozícii Ara-C-elaidátu sa zaznamenalo podstatné zvýšenie aktivity β-galaktozidázy ako zvýšenie optickej hustoty pri 570 nm.
Obr. 16 znázorňuje myši s TLX/5 lymfómom a ich % predĺženie života (priemerne 5 v skupine) po liečení Ara-C-elaidátom alebo Ara-C i. p. počas 5 dní.
Obr. 17 znázorňuje prežívanie SCUD myší mtraperitoneálne inokulovaných PV/2b/35 hemangiosarkómovými bunkami.
Na obr. 18 sú prezentované výsledky zo sledovania 5'-Ara-C elaidylesteru pri glioblastómovom tumore u nahých myší.
Obr. 19 znázorňuje koncentrácie Ara-C-elaidátu (P-Ara-C-el) a metabolitov Ara-C (P-Ara-C) a Ara-U (P-Ara-U) v pečeni ako funkciu času po injikovaní 14C-Ara-C-elaidátu na obr. 15, ako aj koncentráciu Ara-C(Ara-C) a metabolitu Ara-U (Ara-U) ako funkciu času po injikovaní samotného 14C-Ara-C.
Obr. 20 znázorňuje plazmatické hladiny Ara-C-elaidátu a metabolitov Ara-C a Ara-U po intravenóznom podaní l4C-Ära-C-elaidátu ako funkciu času rovnako ako plazmatické hladiny Ara-C a metabolitu Ara-U po intravenóznom podaní 14C-Ara-C, ktoré sú tiež funkciou času.
Obr. 21 znázorňuje tkanivovú koncentráciu celkovej rádioaktivity, ktorá je nanesená ako funkcia času po intravenóznom podaní 14C-Ara-C-elaidátu (P) alebo 14C-Ara-C.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1 ’-O-(E 1 ai doy 1)-1 -β-D-arabinofuranozyl-cytozín12
K suspenzii Ara-C HC1 (1,007 g, 3,6 x 10'3 mol) v 15 ml dimetylacetamidu (DMA) sa pridal roztok elaidoylchloridu (1,26 g, 4,2 x 10‘3 mol) v 5 ml DMA a zmes sa miešala pri 30 °C 22 hod. Rozpúšťadlo sa odparilo vo vysokom vákuu a zvyšok sa opracoval horúcim etylacetátom a bol odfiltrovaný. Surový produkt bol opracovaný 2 M roztokom NaHCO3, bol odfiltrovaný a purifikovaný na stĺpci silikagélu s metanolom (5 30 %) v chloroforme ako elučnom systéme. Homogénne frakcie boli rekryštalizované, aby vzniklo 1,31 g (72 %) hlavnej zlúčeniny ako bielej tuhej látky (t. t. 133 - 134 °C).
’H NMR (DMSO-d6, 300 MHz), δ: 7,58 (1H, d, H-6), 7,18 (2H, br. d, NH2), 6,20 (1 H, d, H - 5), 5,77 (1H, d,H-ľ), 5,65 (2H, m, OH-2' a OH-3’), 5,47 (2H, m, CH=CH), 4,43 (1H, m, H-5',), 4,30 (1H, m, H-5'2), 4,l-4,0(3H, m, H-2', H-3' a H -4’), 2,45 (2H, t, CH2-COO), 2,05(4H, m, CH2-C=), 1,63(2H, m, CH2-C-COO), l, 35(2OH,m,CH2), 0,97(3H,t,CH3).
,3C NMR (DMSO-d6, 75 MHz) δ: 172,8(COO), 165,59(C4-N), 155,05(C=O 2), 142,86(0-6),
130,11(CH=CH), 92,54(C-5), 86,23(C-ľ), 81,86(0-4'), 76,83 (C-3·), 74,35(02*), 63,77(0-5'), 33,46; 31,95; 31,30; 29,03; 28,97; 28,85; 28,73; 28,52; 28,43; 28,36; 24, 48 a 22,12(CH2), 13,97(CH3).
Príklad 2 '-O-(E1 aidoy 1) 1 -β-D-arabinofuranozy 1-cytozín2'3
Zmes kyseliny 2-hydroxyizomaslovej (1,15 g, 12 x 103 mol) a elaidoylchloridu (3,10 g, 10 x 10’3 mol) bola miešaná pri 50 °C 1 hod. Pridal sa tionylchlorid (1,5 ml, 21xl0'3) a miešanie pokračovalo 2 hod. Reakčná zmes sa pri zníženom tlaku (40 mm Hg) udržiavala pri teplote 50 °C 14 hod. Vytvorený 2-elaidoyloxy-2-metylpropanoylchlorid bol použitý bez akejkoľvek ďalšej purifikácie a nechal sa suspendovať v bezvodom acetonitrile. Pridal sa cytidín (0,608 g, 2,5x10’3 mol) a reakčná zmes sa miešala pri 60 °C 24 hodín. Rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa opracoval éterom. Surový produkt sa miešal v 40 ml zmesi pyridín-metanol 1 : 1 pri 80 °C 20 hodín, potom bol odparený do sucha a produkt bol purifikovaný na stĺpci silikagélu. Homogénne frakcie boli rekryštalizované, aby vzniklo 0,446 g (35 %) hlavnej zlúčeniny ako bielej tuhej látky (t. t. 164- 166 °C).
‘H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ: 7,71 (1H, d, H-6), 7,2 (2H, br. d, NH2), 6,1 (1 H, d, H - 5), 5,88 (1H, d,H-ľ), 5,81 (1H, d, OH-2'), 5,45 (2H, m, CH=CH), 5,18 (1H, m, OH-5'), 5,06 (1H, dd, H-3'), 4,18(1H, m, H-2'), 4,01 (1H, m, H-4'), 3,75 (2H, m, H-5'), 2,47 (2H, t, CH2-COO), 2,06(4H, m, CH2-C=), 1,65(2H, m, CH2-C-COO), l,35(2OH,m,CH2), 0,97 (3H,t,CH3).
13C NMR (DMSO-dfo 75 MHz) δ: 172,15(COO), 165,67(C4-N), 154,95(C=O), 142,72(C-6), 130,11 a 130,08(CH=CH), 92,59(C-5), 86,24(01’), 82,75(0-4'), 78,72 (C-3'), 72,29(0-2’), 61,15(C-5'), 33,43; 31,97; 31,30; 29,03; 28,99; 28,85; 28,73; 28,53; 28,41; 28,36; 24,40; 22,12(CH2), 13,97(0¾).
Príklad 3
-O-(cis-11 -Eikozenoyl) 1 -β-D-arabinofuranozy 1-cytozín
K suspenzii Ara-C-HCl (0,87 g, 3,1 x 10’3 mol) v 30 ml Ν,Ν-dimetylacetamidu (DMA) sa pridal roztok cis-11-eikozenoylchloridu (1,06 g, 3,22 x 10'3 mol) v 30 ml DMA a zmes sa miešala pri 25 °C 24 hod. Rozpúšťadlá sa odparili vo vysokom vákuu a zvyšok sa rozpustil v 60 ml vriaceho etanolu, ku ktorému sa pridalo 20 ml vody a 20 ml nasýteného roztoku NaHCO3. Surový produkt bol odfiltrovaný pri izbovej teplote a bol rozpustený v 100 ml vriaceho etanolu (60 % vody). Surový produkt bol rekryštalizovaný, aby vzniklo 1,1 g (66 %) hlavnej zlúčeniny ako bielej tuhej látky.
'H NMR (DMSO-d6,300 MHz), δ: 7,45 (1H, d, H-6), 7,1 (2H, br. d, NH2), 6,08 (1 H, d, H-ľ), 5,65 (1H, d,H-5), 5,55 (2H, m, OH-2' a OH-3’), 5,32 (2H, m, CH=CH), 4,25 (1H, m, Η-5'j), 4,15 (1H, m, H-5'2), 4,0-3,85(3H, m, H-2', H-3' a H-4'), 2,33 (2H, t, CH2-COO), 1,95(4H, m, CH2-C=), 1,5(2H, m, CH-.-C-COO), 1 ^5(24H,m,CÍ í2), 0,85(3H,t,CH3).
I3C NMR (DMSO-d6, 75 MHz) δ: 172,79(COO), 165,59(0-4), 155,08(0=0 2), 142,78(06), 129,60(CH=CH),
92,52(C-5), 86,21(C-ľ), 81,82(C-4’), 76,75 (C-3'),
74,25(02'), 63,76(0-51). 33,41; 31,30; 29,11; 28,85; 28,72; 28,60; 28,42; 26,57; 24,46; 22,11(CH2), 13,94(CH3).
výkresov
Literatúra:
1. D. T. Gish et al.: J. Med. Chem., 14 (1971) 1159.
2. E. K. Hamamura et al.: J. Med. Chem., 19 (1976) 667.
3. E. K. Hamamura et al.: J. Med. Chem. (1976) 654.

Claims (11)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použitie Ι-β-D-arabinofuranozylcytozínového derivátu vzorca (I) na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie tuhých tumorov a lymfómov:
    kde R1 a R2 sú nezávisle vybrané z vodíka a C]8- a C20nasýtených a mononenasýtených acylových skupín, s výhradou, že R1 a R2 nesmú byť oba vodíky.
  2. 2. Použitie podľa nároku 1, kde R! a R2 sú vybrané z vodíka a nasýtených alebo ω-9 mononenasýtených C18- a C2o-acylových skupín.
  3. 3. Použitie podľa nároku 2, kde R1 je vodík.
  4. 4. Použitie podľa nároku 3, kde R2 je elaidoylová alebo eikozenoylová (cis alebo trans) skupina.
  5. 5. Použitie podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov na výrobu farmaceutického prípravku na lokálne liečenie tuhých tumorov alebo lymfómov.
  6. 6. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4 na výrobu farmaceutického prípravku na systémové liečenie tuhých tumorov alebo lymfómov.
  7. 7. Použitie podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie tuhých tumorov alebo lymfómov v retikuloendoteliálnom systéme.
  8. 8. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6 na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie tuhých tumorov alebo lymfómov v centrálnom nervovom systéme.
  9. 9. Použitie podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie metastatických tumorov.
  10. 10.1-β-D-Arabinofuranozylcytozínový derivát vzorca (I) kde R1 a R2 sú nezávisle vybrané z vodíka, elaidoylu, oleoylu, stearoylu, eikozenoylu (cis alebo trans) a eikozanoylu, s výhradou, že radikály R1 a R2 nesmú oba znamenať vodík, oleoyl, elaidoyl, stearoyl alebo eikozanoyl, R1 nesmie byť vodík, ak R2 je oleoyl alebo stearoyl a R2 nesmie byť vodík, ak R1 je elaidoyl, oleoyl, stearoyl alebo eikozanoyl.
  11. 11. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje Ι-β-D-arabinofuranozylcytozínový derivát vzorca (1) podľa nároku 10 a farmaceutický prijateľný nosič alebo pomocnú látku.
SK80-98A 1995-07-25 1996-07-12 1-beta-D-Arabinofuranozylcytozínový derivát, jeho použitie a farmaceutický prípravok s jeho obsahom SK283003B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9515279.9A GB9515279D0 (en) 1995-07-25 1995-07-25 Improved therapeutic agents
PCT/NO1996/000179 WO1997005154A1 (en) 1995-07-25 1996-07-12 Improved therapeutic agents

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK8098A3 SK8098A3 (en) 1998-07-08
SK283003B6 true SK283003B6 (sk) 2003-01-09

Family

ID=10778247

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK80-98A SK283003B6 (sk) 1995-07-25 1996-07-12 1-beta-D-Arabinofuranozylcytozínový derivát, jeho použitie a farmaceutický prípravok s jeho obsahom

Country Status (25)

Country Link
US (2) US6316425B1 (sk)
EP (1) EP0842185B1 (sk)
JP (2) JP4372227B2 (sk)
KR (1) KR100401909B1 (sk)
AT (1) ATE207076T1 (sk)
AU (1) AU714814B2 (sk)
CA (1) CA2227533C (sk)
CZ (1) CZ291612B6 (sk)
DE (1) DE69616074T2 (sk)
DK (1) DK0842185T3 (sk)
ES (1) ES2166900T3 (sk)
GB (1) GB9515279D0 (sk)
HU (1) HU224839B1 (sk)
IL (2) IL122942A0 (sk)
MX (1) MX9800622A (sk)
NO (1) NO313985B1 (sk)
NZ (1) NZ313790A (sk)
PL (1) PL183601B1 (sk)
PT (1) PT842185E (sk)
RU (1) RU2165260C2 (sk)
SK (1) SK283003B6 (sk)
TW (1) TW434251B (sk)
UA (1) UA55389C2 (sk)
WO (1) WO1997005154A1 (sk)
ZA (1) ZA966047B (sk)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6458772B1 (en) 1909-10-07 2002-10-01 Medivir Ab Prodrugs
EP0942916A2 (en) * 1996-11-12 1999-09-22 Medivir Aktiebolag Nucleosides
ATE236188T1 (de) * 1997-01-24 2003-04-15 Conpharma As Gemcitabin-derivate
US7393862B2 (en) 2002-05-17 2008-07-01 Celgene Corporation Method using 3-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione for treatment of certain leukemias
WO2005049633A1 (en) * 2003-11-03 2005-06-02 Cognis Ip Management Gmbh Acyl ribonucleosides and acyl deoxyribonucleosides
NO324263B1 (no) * 2005-12-08 2007-09-17 Clavis Pharma Asa Kjemiske forbindelser, anvendelse derav ved behandling av kreft, samt farmasoytiske preparater som omfatter slike forbindelser
US8497292B2 (en) * 2005-12-28 2013-07-30 Translational Therapeutics, Inc. Translational dysfunction based therapeutics
KR20100072230A (ko) * 2007-09-26 2010-06-30 마운트 시나이 스쿨 오브 메디신 오브 뉴욕 유니버시티 아자시티딘 유사체 및 이의 용도
GB0808357D0 (en) * 2008-05-08 2008-06-18 Cyclacel Ltd Process
AU2010322516A1 (en) * 2009-11-20 2012-05-17 Clavis Pharma Asa Parenteral formulations of gemcitabine derivatives
RU2571283C2 (ru) 2010-07-13 2015-12-20 Клавис Фарма Аса Парентеральные составы производных элацитарабина
CN104203969B (zh) * 2012-03-28 2016-08-31 富士胶片株式会社 1-(2-脱氧-2-氟-4-硫代-β-D-阿拉伯呋喃糖基)胞嘧啶的盐
EP3740287A4 (en) 2018-01-15 2021-11-03 Yinuoke Medicine Science And Technology Company Ltd. TREATMENTS FOR CACHEXIA

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3894000A (en) * 1971-01-27 1975-07-08 Upjohn Co Ara-cytidine derivatives and process of preparation
CA2079413C (en) 1991-09-30 2003-09-09 Masakatsu Kaneko Pyrimidine nucleoside derivatives having anti-tumor activity, their preparation and use
GB9307043D0 (en) 1993-04-05 1993-05-26 Norsk Hydro As Chemical compounds
US5641758A (en) 1993-11-10 1997-06-24 Kluge; Michael Cytarabine derivatives, the preparation and use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
NZ313790A (en) 1999-07-29
IL122942A0 (en) 1999-05-09
ZA966047B (en) 1997-02-04
UA55389C2 (uk) 2003-04-15
NO313985B1 (no) 2003-01-13
HUP9900924A2 (hu) 2001-05-28
US6316425B1 (en) 2001-11-13
PT842185E (pt) 2002-04-29
GB9515279D0 (en) 1995-09-20
PL183601B1 (pl) 2002-06-28
NO980296L (no) 1998-01-23
ATE207076T1 (de) 2001-11-15
CA2227533A1 (en) 1997-02-13
HUP9900924A3 (en) 2001-06-28
JP5087052B2 (ja) 2012-11-28
WO1997005154A1 (en) 1997-02-13
DE69616074T2 (de) 2002-06-06
MX9800622A (es) 1998-11-30
DK0842185T3 (da) 2002-02-04
JP2009215326A (ja) 2009-09-24
CZ291612B6 (cs) 2003-04-16
RU2165260C2 (ru) 2001-04-20
CA2227533C (en) 2007-01-09
US6335322B1 (en) 2002-01-01
TW434251B (en) 2001-05-16
SK8098A3 (en) 1998-07-08
EP0842185B1 (en) 2001-10-17
NO980296D0 (no) 1998-01-23
HU224839B1 (en) 2006-03-28
AU714814B2 (en) 2000-01-13
DE69616074D1 (de) 2001-11-22
IL122942A (en) 2006-12-10
JP2002504068A (ja) 2002-02-05
EP0842185A1 (en) 1998-05-20
KR100401909B1 (ko) 2004-02-14
AU6633596A (en) 1997-02-26
JP4372227B2 (ja) 2009-11-25
KR19990035804A (ko) 1999-05-25
CZ16398A3 (cs) 1998-06-17
PL324690A1 (en) 1998-06-08
ES2166900T3 (es) 2002-05-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5087052B2 (ja) 改良された治療剤
KR100483256B1 (ko) 젬시타빈 유도체
CA2140653A1 (en) Protein kinase inhibitors and related compounds combined with taxol
DK166830B1 (da) 5-fluor-2&#39;-deoxyuridin-3&#39;,5&#39;-derivater, hydrater og salte heraf, fremgangsmaade til fremstilling af disse samt antitumorpraeparater indeholdende disse derivater
KR100832167B1 (ko) 방사선치료 증감제
RU2194711C2 (ru) Производные гемцитабина
KR20220039748A (ko) 암 치료용 디뉴클레오티드 화합물 및 그의 의약 용도
CN111285900B (zh) 基于紫檀芪和香荚兰乙酮的偶联分子dcz0847类化合物、其制备方法及用途
MXPA99006790A (en) Gemcitabine derivatives
NO318934B1 (no) Gemcitabinderivater

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20130712