NO320434B1

NO320434B1 - Farmasoytiske preparater som innbefatter proliposompulvere for inhalering

Info

Publication number: NO320434B1
Application number: NO19972847A
Authority: NO
Inventors: Katarina Bystrom; Per-Gunnar Nilsson
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 1994-12-22
Filing date: 1997-06-19
Publication date: 2005-12-05
Also published as: BR9510512A; TR199501633A1; MY114114A; WO1996019199A1; UA43886C2; SK81497A3; ATE240095T1; PL184393B1; CZ286469B6; DE69530792T2; PT800383E; EP0800383A1; RU2162689C2; EG23683A; US6045828A; AR002009A1; MX9704406A; NZ298180A; SK284918B6; CZ194897A3

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører farmasøytiske preparater inneholdende proliposompulvere, fremgangsmåter for fremstilling derav, anvendelse derav til fremstilling av legemidler for behandling av sykdommer via luftveiene, samt tørrpulveirnhalator-anordninger som inneholder preparatene.

Liposomer er membranlignende vesikler bestående av en serie konsentriske lipid-dobbeltlag vekslende med hydrofile rom. De kan fremstilles fra en rekke forsk jellige naturlige og syntetiske lipider slik som naturlige og syntetiske fosfoglycerolipider, sfingolipider og digalaktosylglycerolipider. En av hovedanvendelsene for liposomer har vært som bærere for forskjellige typer av farmasøytisk aktive komponenter, for å forbedre legemiddelavlevering og for å minimalisere bivirkninger til noen behandlinger. De farmasøytisk aktive komponentene kan inkorporeres i liposomer enten ved innkapsling i hydrofile rom i liposomet (når den aktive komponenten er vannoppløselig), eller ved innkapsling i lipid-dobbeltlagene, når den aktive komponenten er lipofil.

Et av hovedproblemene som er forbundet med farmasøytiske liposomale formuleringer er langtidsstabiliteten. Vandige liposomdispersjoner har en begrenset stabilitet på grunn av aggregering, tap av den innkapslede aktive komponenten til den utvendige fasen, kjemisk nedbrytning av den aktive komponenten eller lipidmaterialet, osv.

Disse problemene kan i stor utstrekning overvinnes dersom det anvendes en fast sammensetning. En slik fast sammensetning kan omfatte et liposompulver, dvs. en tørket liposomdispersjon eller et proliposompulver.

Fremgangsmåten for tørking av liposomdispersjoner har den tilknyttede risiko for skade på liposommembranene. For å minimalisere risikoen er det nødvendig å tørke liposomene i nærvær av beskyttende sukkere, som beskrevet for eksempel i WO 86/01103.

US-patent 4.906.476 beskriver liposomformuleringer for avlevering av steroider ved inhalering. Muligheten for avlevering av tørkede liposomer som en pulver-aerosol ved anvendelse av en egnet anordning er beskrevet. Avlevering ved spraying fra en komplett atomisør ved anvendelse av et oppløsningsmiddel som drivmiddel med suspenderte tørkede liposomer i et pulver, og ved spraying av tørkede partikler inn i lungene med et drivmiddel, er også beskrevet.

Liposomer som sådan er ikke til stede i proliposompulvere, men dannes når pulveret hydratiseres over lipidenes faseovergangstemperatur. Sammenlignet med tørkede liposomer har proliposompulvere derfor den fordel at risikoen for skade på liposommembranene ved dehydratisering er eliminert.

Proliposompulvere har tidligere blitt beskrevet.

For eksempel beskriver US-patent 4.311.712 en frysetørket potensiell liposomblanding oppnådd ved oppløsning av et liposomdannende amfipatisk lipid og en lipidoppløselig eller lipidbundet biologisk aktiv forbindelse i et organisk oppløsningsmiddel som forblir fast under frysetørkingsprosessen, og frysetørking av oppløsningen. Den potensielle liposomblandingen kan lagres og prepareres til et vandig liposompreparat når dette er ønskelig. Den biologisk aktive forbindelsen kan være en hvilken som helst forbindelse som har en egenskap av biologisk interesse.

WO 90/00389 beskriver en frysetørket potensiell liposomblanding med et amfipatisk lipid og en cyklosporin eller derivat derav, for anvendelse ved mulig liposomavlevering av cyklosporin i celler. Den frysetørkede blandingen rekonstitueres i vandig medium til oppnåelse av liposomer som innkapsler vesentlig all cyklosporin som er til stede i den frysetørkede blandingen.

WO 92/11842 beskriver et preliposomalt pulver som danner en suspensjon av liposomer inneholdende et polyen-legemiddel slik som nystatin ved rekonstituering med vann eller saltoppløsning.

Alle de ovennevnte patenter og patentsøknader som angår proliposompreparater dreier seg om preparater som skal hydratiseres før administrasjon.

EP 309464 beskriver proliposompulverpreparater som kan inhaleres. Pulverpreparatene omfatter faste partikler hvori en biologisk aktiv komponent befinner seg i partikkelformig dispersjon i et lipid.

Man har funnet det fordelaktig å tilveiebringe proliposompulvere som har kun en enkelt fase når avlevering ved inhalering er ønsket. Det er derfor et formål med foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe et slikt proliposompulver.

Dette formål ved foreliggende oppfinnelse oppnås ved at det ifølge oppfinnelsen er tilveiebragt farmasøytisk preparat karakterisert ved at det innbefatter a) et proliposompulver, hvor pulveret i en enkelt fase omfatter adskilte partikler av en biologisk aktiv komponent sammen med et lipid eller blanding av lipider som har en faseovergangs-temperatur under 37°C; og b) en krystallinsk og hydrofil farmasøytisk akseptabel bærer; der det farmasøytiske preparatet kan oppnås ved tilsetning av den krystallinske og hydrofile farmasøytisk akseptable bæreren til proliposomsammensetningen etter en hvilken som helst mikronisering eller før en hvilken som helst mikronisering forutsatt at alle løsningsmidler er fullstendig fjernet.

Pulveret er særlig egnet for administrasjon ved inhalering.

Enkeltfasepulvere kan alternativt beskrives som omfattende en homogen molekylær blanding av en biologisk aktiv komponent og et lipid eller blanding av lipider som har en faseovergangstemperatur under 37°C.

Det vil fra betegnelsene "enkeltfase" og "homogen molekylær blanding" forstås at det ikke er noen separat krystallinsk fase av verken aktiv komponent eller lipid i pulveret ifølge foreliggende oppfinnelse.

Enkeltfasepulveret kan inhaleres direkte og vil in situ, for eksempel i det øvre eller nedre respirasjonssystemet, danne liposomer hvori en biologisk aktiv komponent er fullstendig inkorporert.

Generelt kunne et hvilket som helst amfipatisk lipid eller blanding av lipider som er kjent for å være egnet for fremstilling av liposomer ved hjelp av kjente metoder, bli benyttet i foreliggende oppfinnelse. Lipidet eller lipidblandingen må ha en faseovergangstemperatur under kroppstemperatur (37°C) for at proliposompulver-produktet skal være i stand til hydratisering under fysiologiske betingelser (dvs. for å kunne danne liposomer i respirasjonssystemet). Faseovergangstemperaturer for forskjellige lipidblandinger kan lett bestemmes under anvendelse av veletablerte metoder, for eksempel DSC-metoder, kfr. for eksempel J. Suurkuusk et al., Biochemistry, vol. 15, nr. 7, side 1393 (1976). Generelt er et hvilket som helst naturlig eller syntetisk lipid eller blanding av lipider som har en faseovergangstemperatur under 37°C nyttig i foreliggende oppfinnelse.

Som eksempler på potensielt nyttige lipider kan nevnes naturlige og syntetiske lipider slik som naturlige og syntetiske fosfoglycerolipider, srlngolipider og digalaktosylglycerolipider. Blant naturlige lipider kan nevnes sfmgolipider (SL) slik som sfingomyelin (SM), ceramid og cerebrosid; galaktosylglycerolipider slik som digalaktosyldiacylglycerol (DGalDG); fosfoglycerolipider slik som eggeplomme-fosfatidylkolin (e-PC) og soyabønnefosfatidylkolin (s-PC); og lecitiner slik som eggeplommelecitin (e-lecitin) og soyabønnelecitin (s-lecitin). Blant syntetiske lipider kan nevnes dimyristoylfosfatidylkolin (DMPC), dipalmitoylfosfatidylkolin (DPPC), distearoylfosfatidylkolin (DSPC), dilaurylfosfatidylkolin (DLPC), l-myristoyI-2-palmitoylfosfatidylkolin (MPPC), l-palmitoyl-2-myristoylfosfatidylkolin (PMPC), og dioleoylfosfatidylkolin (DOPC). Blant blandinger av lipider kan nevnes følgende: SM/PC, SM/kolesterol, ePC/kolesterol, sPC/kolesterol, PC/PS/kolesterol, DMPC/DPPC, DMPC/DPPC/CH, DMPC/CH, DPPC/DOPC, DPPC/DOPC/CH, DLPC/DPPC, DLPC/DPPC/CH, DLPC/DMPC, DLPC/DMPC/CH, DOPC/DSPC,

DPSM/DMSM, e-lecitin/kolesterol og s-lecitin/kolesterol. I tillegg til hvilke som helst av de ovennevnte kan det innbefattes et ladet lipid slik som

dimyristoylfosfatidylglycerol (DMPG), difospalmitoylfosfatidylglycerol (DPPG), dimyristoylfosfatidinsyre (DMPA), dipalmitoylfosfatidinsyre (DPPA) eller stearylamin

(SA).

Lipider av spesiell interesse i foreliggende oppfinnelse er DPPC og/eller DMPC. En blanding av DPPC og DMPC inneholdende minst 10% (vekt/vekt) DMPC er foretrukket, for eksempel 10-50% DMPC. Spesielt foretrukket er en blanding av DPPC og DMPC som i tillegg inneholder minst ett ladet lipid slik som DMPG, DPPG, DMPA eller SA, for eksempel i en mengde på opptil 5% (vekt/vekt). Andre foretrukne blandinger innbefatter DPSM og DMSM eventuelt inneholdende minst ett ladet lipid, og blandinger av kolesterol med enten e-lecitin eller s-lecitin, eventuelt inneholdende minst ett ladet lipid, og med en Tc-verdi mindre enn 37°C. Andre blandinger kan lett velges av en fagmann innen teknikken under henvisning for eksempel til Gregor Cevc,

Phospholipids Handbook, Marcel Dekker, New York (1993) side 427-435.

Den aktive komponenten har fortrinnsvis et molekylstruktur som kan inkorporeres i lipid-dobbeltlagene for å hjelpe innkapsling i liposomene under hydratisering. Et eksempel på en slik er en fettsyreester som har en lang hydrokarbonkjede tilstrekkelig til å virke som hydrofobt anker.

Egnede aktive komponenter kan lett identifiseres av en fagmann på området og kan innbefatte for eksempel antiinflammatoriske og bronkorelakserende legemidler samt antihistaminer, cyklooksygenaseinhibitorer, leukotrien synteseinhibitorer, leukotrien antagonister, fosfolipase-A2 (PLA2) -inhibitorer, blodplateaggregeringsfaktor (PAF)-antagonister og astmaprofylaktiske midler. Antiarytmiske legemidler, beroligende midler, hjerteglykosider, hormoner, antihypertensive legemidler, antidiabetiske, antiparasittiske og antikreftlegemidler, sedativer, analgetiske legemidler, antibiotika, antireumatiske legemidler, immunoterapeutiske midler, antifungale legemidler, antihypotensjon-legemidler, vaksiner, antivirale legemidler, proteiner, peptider og vitaminer, kan også være av interesse.

Glukokortikosteroider, slik som budesonid, deksametason, betametason, fluocinolon, flumetason, triamcinolonacetonid, flunisolid, beklometason og 16,17-acetaler av pregnanderivater og forbindelser avledet derfra; og B-2 agonister slik som terbutalin, salmeterol, salbutamol, formoterol, fenoterol, clenbuterol, prokaterol, bitolterol og broksaterol, kan spesielt være nyttige i foreliggende oppfinnelse. Den aktive komponenten kan også være en blanding av farmasøytisk aktive substanser; for eksempel en blanding av et glukokortikosteroid med en bronkodilator slik som formoterol, salmeterol, terbutalin eller salbutamol, kan være nyttig. For å unngå tvil når det i foreliggende sammenheng vises til en hvilken som helst aktiv komponent, så er det ment at nevnte referanse skal innbefatte en referanse til farmasøytisk akseptable estere, salter og hydrater derav.

Når den aktive komponenten er et steroid, er det fortrinnsvis en steroidester.

Den aktive komponenten er fortrinnsvis et steroid, fortrinnsvis et steroid som er forestret i 21-stilling med en fettsyre med minst 8, for eksempel minst 10 eller minst 12 karbonatomer. Fettsyren kan for eksempel ha opptil 24 karbonatomer, for eksempel opptil 20 karbonatomer eller opptil 18 karbonatomer. Mer foretrukket er den aktive komponenten et steroid-21-palmitat, -myristat, -laurat, -kaprat, -kaprylat eller -stearat. Den mest foretrukne aktive komponenten ifølge oppfinnelsen er forbindelsen (22R)-16a, 17oc-butylidendioksy-6a,9a-difluor-11 B-hydroksy-21 -palmitoyloksypregn-4-en-3,20-dion, rofleponidpalmitat.

Når den aktive komponenten er en ester, så må den hydrolyseres til det aktive prinsipp. Enkeltfase-proliposompulveret i preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse letter på overraskende måte den nødvendige hydrolysen in situ, mens estere i den krystallinske tilstand ikke vil bli hydrolysert.

Når avlevering ved inhalering er ønsket, bør så mye som mulig av proliposompulveret ifølge foreliggende oppfinnelse bestå av partikler som har en diameter på mindre enn 10 Hm, for eksempel 0,01-10 um eller 0,1-6 (im, for eksempel 0,1-5 um, eller agglomerater av nevnte partikler. Fortrinnsvis består minst 50% av pulveret av partikler innenfor det ønskede størrelsesområde. For eksempel består minst 60%, fortrinnsvis minst 70%, mer foretrukket minst 80% og mest foretrukket minst 90% av pulveret enten av partikler innenfor det ønskede størrelsesområde eller av agglomerater av nevnte partikler.

Farmasøytiske preparater som inneholder pulvrene ifølge foreliggende oppfinnelse innbefatter også andre farmasøytisk akseptable additiver slik som farmasøytisk akseptable hjelpemidler, fortynningsmidler og bærere. Disse tilsettes til proliposom-preparatet etter eventuell mikronisering, eller før eventuell mikronisering forutsatt at oppløsningsmidlet har blitt fullstendig fjernet. En foretrukket bærer er krystallinsk laktosemonohydrat. Andre egnede bærere inkluderer glukose, fruktose, galaktose, trehalose, sukrose, maltose, raffinose, maltitol, melezitose, stakyose, laktitol, palatinitt, stivelse, xylitol, mannitol, myoinositol og lignende, og hydrater derav, og aminosyrer, for eksempel alanin og betain.

Mengden av additiver som befinner seg i formuleringen kan variere over et meget bredt område. Under visse forhold kan det være nødvendig med lite eller intet additiv, mens det for eksempel ofte er foretrukket å fortynne et pulver med additiv, for å forbedre pulveregenskapene for bruk i en inhalator. I sistnevnte tilfelle kan for eksempel 50%, for eksempel minst 70% eller minst 80% av formuleringen suppleres med additiver, idet resten er proliposompulveret. Prosentandelen av additiver kan også være avhengig av virkningsgraden til den biologisk aktive forbindelsen og den optimale mengden av pulver for inhalering.

Når et additiv, for eksempel en bærer, er til stede, så kan hele preparatet være i form av partikler av en størrelse som er innenfor det respirerbare parukkelstørrelsesområde. Bæreren kan alternativt omfatte grovere partikler, av for eksempel massemidlere diameter som er større enn 20 um, eller den kan omfatte agglomerater av mindre partikler, hvor agglomeratene har en massemidlere diameter på for eksempel over 20 um, slik at det i hvert tilfelle dannes en ordnet blanding av proliposom og bærer.

Et annet formål med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe en fremgangsmåte for fremstilling av foreliggende proliposompulver, dvs. en fremgangsmåte som gir proliposompulveret i en enkelt fase.

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer følgelig også en fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk preparat som angitt over, omfattende oppløsning av et lipid eller blanding av lipider og en lipofil biologisk aktiv komponent i et oppløsningsmiddel, hvor lipidet eller blandingen av lipider har en faseovergangstemperatur under 37°C; oppnåelse av en krystallinsk oppløsningsmiddelmatrise og en enkelt lipidfase i dens glassaktige tilstand ved frysing av oppløsningen, hvor frysingen utføres ved en temperatur under lipidfasens faseovergangstemperatur; og inndampning av det frossede oppløsningsmidlet ved en temperatur under lipidfasens faseovergangstemperatur; og under fremgangsmåten tilsetning av en krystallinsk og hydrofil farmasøytisk akseptabel bærer til den proliposome sammensetningen etter en hvilken som helst mikronisering eller før en hvilken som helst mikronisering forutsatt at alle løsningsmidler er fullstendig fjernet.

Frysing av oppløsningen og oppløsningsmiddelfordampning kan bevirkes ved hjelp av konvensjonelle metoder, for eksempel i en konvensjonell frysetørker. Oppløsningen av lipider og biologisk aktiv komponent kan for eksempel helles på hyllene i en frysetørker og temperaturen senkes for å fryse oppløsningen. Oppløsningsmiddelfordampning kan deretter oppnås for eksempel ved å senke trykket i frysetørkerkammeret; det resulterende pulveret kan skrapes fra hyllene i kammeret og eventuelt føres gjennom en sikt.

Det frysetørkede pulveret kan om nødvendig underkastes ytterligere prosessering for å oppnå partikler innenfor det respirerbare partikkelstørrelsesområde; for eksempel kan det frysetørkede pulveret mikroniseres for oppnåelse av respirerbare partikler, for eksempel ved bruk av en luftstrålemølle.

Frysingen av oppløsningen av biologisk aktiv komponent og lipider utføres på en måte som gir en enkelt lipidfase i den frosne oppløsningsmiddelmatrisen. Fremstillingen av en enkelt lipidfase reguleres av sluttemperaturen og oppløsningens frysehastighet; den optimale hastigheten for frysing av enhver spesiell oppløsning vil være et eller annet sted mellom den tid som er nødvendig for krystallisering av det aktuelle oppløsningsmidlet og den tid som er nødvendig for krystallisering av lipidene og den aktive komponenten og kan bestemmes av en fagmann på området, ganske enkelt ved prøving og feiling. Den optimale sluttemperaturen bør være 10-20°C under lipidfasens glassovergangs-temperatur. For eksempel kan en røntgenpulvermetode anvendes for å overvåke krystallinitet og et differensial-scanning kalorimeter kan anvendes for å overvåke graden av inkorporering av biologisk aktiv komponent i liposomene etter hydratisering.

Oppløsningsmidlet må ha evne til å oppløse lipidene og den biologisk aktive komponenten fullstendig fordi det er vesentlig at alle komponentene er i oppløsning før frysing for å unngå utfelling eller faseseparering hvilket vil gi opphav til et pulver med mer enn én fase. I tillegg bør oppløsningsmidlet være toksikologisk akseptabelt, ha et passende frysepunkt og fortrinnsvis et høyt damptrykk. Oppløsningsmidlet kan for eksempel være et organisk oppløsningsmiddel, for eksempel en alkohol, eller en blanding av vandige og organiske oppløsningsmidler. Det foretrukne oppløsningsmidlet for bruk i foreliggende oppfinnelse er tertiær butanol.

Pulveret kan eventuelt agglomereres til små sfærer for å regulere pulverets kohesive evne. Sfærene bør fortrinnsvis ikke være større enn 1 mm i diameter; sfærer større enn dette kan fjernes for eksempel ved sikting. Eventuelle agglomerater bør være sprø slik at de lett kan deagglomereres for eksempel i en pulverinhalator.

Proliposompulveret (det farmasøytiske preparatet) ifølge foreliggende oppfinnelse er nyttig for lokal eller systemisk behandling av sykdommer og kan administreres via de øvre og nedre luftveiene, inkludert den nasale veien. Som sådan tilveiebringer foreliggende oppfinnelse også nevnte preparat for bruk i terapi; og anvendelsen av proliposompulverpreparatet i fremstillingen av et legemiddel for behandling av sykdommer via luftveiene.

Foreliggende proliposompulverpreparat kan for eksempel anvendes til fremstilling av et legemiddel for behandling av inflammatoriske sykdommer i luftveiene, for eksempel astma, rhinitt, alveolitt, bronkiolitt og bronkitt.

Administrasjon til luftveiene kan bevirkes for eksempel ved anvendelse av en tørrpulverinhalator eller en trykksatt aerosolinhalator.

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en tørrpulver-inhalatoranordning som inneholder det ovennevnte farmasøytiske preparat.

Egnede tørrpulveirnhalatorer inkluderer doseinhalatorer, for eksempel enkeltdose-inhalatoren kjent ved varemerket Monohaler<®> og flerdoseinhalatorer, for eksempel en pustaktivert flerdose-tønpulverinhalator slik som inhalatoren kjent ved varemerket Turbuhaler<®>.

Mens foreliggende proliposompulverpreparat er spesielt tilpasset for administrasjon ved inhalering, så kan det også innbefattes i formuleringer tilpasset for andre former for avlevering. For eksempel kan orale, topiske og injiserbare formuleringer fremstilles, for bruk i behandlingen av for eksempel inflammatoriske leddsykdommer, for eksempel artritt, hudsykdommer og intestinale tarmsykdommer.

Følgende eksempler skal illustrere, men ikke begrense, oppfinnelsens omfang.

Eksempel 1

Rofleponidpalmitat (10 deler), DPPC (63 deler), DMPC (24 deler) og NaDPPG (3 deler) ble oppløst i tertiær butanol (1300 deler) ved 80°C. Oppløsningen ble helt på hyllene i en frysetørker avkjølt til -35°C. Oppløsningen nådde denne temperaturen etter ca. 30 minutter; trykket i frysetørkeren ble deretter redusert for å indusere sublimering av oppløsningsmidlet. Mens sublimeringshastigheten kunne justeres ved å minske trykket og øke temperaturen, fikk temperaturen gjennom hele prosessen ikke anledning til å overskride -10°C. Frysetørking ble fortsatt inntil alt oppløsningsmiddel hadde blitt fjernet. Det resulterende pulveret ble skrapet fra hyllene i frysetørkeren og ført gjennom en sikt.

Dette pulveret ble mikronisert i en luftstrålemølle til en pulverpartikkelstørrelse på mindre enn 5 um. Det mikroniserte pulveret ble blandet med laktosemonohydrat (20 deler pulver : 80 deler laktosemonohydrat) ved en sikteprosess og blandingen ble ytterligere homogenisert ved mikronisering ved lavt trykk i en strålemølle.

Pulverblandingen ble agglomerert til sfærer som ikke var større enn 1 mm under anvendelse av standard teknikker. Store sfærer ble fjernet ved sikting. Det agglomererte pulveret ble fylt i en Turbuhaler<®> tørrpulver-inhalator.

Eksempel 2

Fremgangsmåten i Eksempel 1 ble gjentatt med frysetider på 6 timer, 17 timer og 24 timer.

Sammenligningseksempel

Lipidene og den aktive komponenten i Eksempel 1 blandes ganske enkelt sammen. Det resulterende pulveret er et flerfasesystem omfattende separate partikler av den aktive komponenten og lipidene.

Eksempel 3

Fremgangsmåten i Eksempel 1 gjentas ved anvendelse av følgende lipidblandinger som har en faseovergangstemperatur under 37°C:

DPSM/DPSM

e-lecitin/kolesterol

s-lecitin/kolesterol

Eksempel 4

Fremgangsmåten i Eksempel 1 gjentas med følgende aktive komponenter: rofleponid-21 -myristat

rofleponid-21 -laurat

rofleponid-21 -kaprat

rofleponid-21 -kaprylat

rofleponid-21 -stearat

Pulveranalyse

Røntgen-pulverdiffraksjon utført på pulverblandingen i Eksemplene 1 og 2 viste at ingen krystallinsk tilstand var til stede i pulveret. Pulveret i sammenligningseksemplet inneholdt den aktive komponenten i krystallinsk tilstand.

Inkorporering av aktiv komponent i liposomene

Proliposompulvrene i Eksemplene 1 og 2 ble hydratisert og graden av inkorporering av den aktive komponenten ble målt ved anvendelse av differensial-scanning kalorimetri-metoder. DSC viste at den aktive komponenten var fullstendig inkorporert i liposomene. DSC utført på pulveret i sammenligningseksemplet viste vesentlig ingen inkorporering av den aktive komponenten i liposomet.

Esterhydrolyse

Graden av hydrolyse av proliposompulveret i Eksempel 1 og sammenligningseksemplet til det aktive prinsipp ble undersøkt. Proliposompulvrene i Eksemplene 1 og 2 og sammenligningseksemplet (50 um av steroidesteren i hvert tilfelle) ble hydratisert med vann og oppvarmet til 50°C i 15 minutter. Deretter ble prøvene inkubert ved 37°C i nærvær av porcin-pankreaslipase (2 mg/ml) i en buffer (1 mM EDTA, 80 mM KO, 10 mM HEPES, pH 7,4) og periodisk sonikert i varierende tidslengder på opptil 120 minutter. Prøvene ble analysert ved HPLC-metoder for å bestemme hvor mye av esteren som hadde blitt hydrolysert til det aktive prinsippet.

94% av proliposompulveret i Eksempel 1 ble hydrolysert til det aktive prinsipp, sammenlignet med bare 2% av pulveret i sammenligningseksemplet.

Farmakologiske studier

Anti-ødemeffektivitet ble bestemt ved anvendelse av Sephadex-modellen på rotter som beskrevet av L. Kailstrom et al. i Agents and Actions 17(3/4) 355 (1985).

Prøver av pulvrene i Eksempel 1 og sammenligningseksemplet ble suspendert i kald saltoppløsning og gitt ved intratrakeal injeksjon til venstre lunge hos Sprague-Dawley rotter. Etter en time ble det fremkalt en inflammasjonsprosess ved intratrakeal instillasjon av Sephadex-kuler (5 mg/kg) til både venstre og høyre lunger. Det resulterende interstitielle ødem ble kvantifiserte etter 20 timer ved bestemmelse av vekten av høyre og venstre lunger. Minskingen i lungevekt ble tatt for å være betegnende for den farmakologiske effekten til pulvrene. Lungevekten til rottene som var behandlet med proliposompulveret i Eksempel 1 hadde minsket 40 ganger mer enn lungevekten til rottene behandlet med pulveret i sammenligningseksemplet; dvs. at effektiviteten til proliposompulveret ifølge foreliggende oppfinnelse var 40 ganger større enn effektiviteten til pulveret i sammenligningseksemplet.

Inhaleringssrudier

Beagle-hunder ble bedøvet, inturbert og eksponert for en pulveraerosol av formuleringen i Eksempel 1 eller i sammenligningseksemplet. Aerosolen ble utviklet fra en pulvertablett ved anvendelse av et Wright Dust Feed apparat operert ved 1800 omdr./min. Aerosolkonsentrasjon (Casella 950 AMS), respirasjonsvolum, inspiratorisk respirasjonsvolum og pustefrekvens ble registrert under inhalering. Den inhalerte måldosen var 25 ug rofleponidpalmitat/kg legemsvekt. Plasmaprøver ble tatt regelmessig etter inhalering. Biotilgjengelighet ble beregnet ved sammenligning med plasmakonsentrasjoner av rofleponid etter intravenøs administrasjon. Biotilgjengeligheten av rofleponid etter administrasjon av pulveret ifølge Eksempel 1 var nær 100%, mens biotilgjengeligheten av rofleponid etter administrasjon av pulveret i sammenligningseksemplet ikke var målbar.

Claims

1. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det innbefatter a) et proliposompulver, hvor pulveret i en enkelt fase omfatter adskilte partikler av en biologisk aktiv komponent sammen med et lipid eller blanding av lipider som har en faseovergangstemperatur under 37°C; og b) en krystallinsk og hydrofil farmasøytisk akseptabel bærer; der det farmasøytiske preparatet kan oppnås ved tilsetning av den krystallinske og hydrofile farmasøytisk akseptable bæreren til proliposomsammensetningen etter en hvilken som helst mikronisering eller før en hvilken som helst mikronisering forutsatt at alle løsningsmidler er fullstendig fjernet.

2. Farmasøytisk preparat ifølge krav 1, karakterisert ved at pulveret omfatter ett eller flere lipider valgt fra naturlige og syntetiske fosfoglycerolipider, sfingolipider og digalaktosylglycerlipider.

3. Farmasøytisk preparat ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at pulveret omfatter en blanding av lipider valgt fra blandingene SM/PC, SM/kolesterol, ePC/kolesterol, sPC/kolesterol, PC/PS/kolesterol, DMPC/DPPC, DMPC/DPPC/CH, DMPC/CH, DPPC/DOPC, DPPC/DOPC/CH, DLPC/DPPC, DLPC/DPPC/CH, DLPC/DMPC, DLPC/DMPC/CH, DOPC/DSPC.

4. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 1-3, karakterisert ved at pulveret omfatter DPPC, DMPC, eller en blanding av DPPC og DMPC.

5. Farmasøytisk preparat ifølge krav 4, karakterisert ved at blandingen omfatter minst 10% DMPC.

6. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 1-5, karakterisert ved at pulveret ytterligere innbefatter et ladet lipid.

7. Farmasøytisk preparat ifølge krav 6, karakterisert ved at det ladede lipidet er valgt fra DMPG, DPPG, DMPA og SA.

8. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten er valgt fra inflammatoriske legemidler, bronkorelakserende legemidler, antihistaminer, cyklooksygenaseinhibitorer, leukotrienantagonister, PLA2-inhibitorer, PAF-antagonister og astmaprofylaktika.

9. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten omfatter et glukokortikosteroid.

10. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten omfatter en fl-2 agonist.

11. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten omfatter et steroid som er forestret i 21-stillingen med en fettsyre med minst 8 karbonatomer.

12. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten omfatter et steroid som er forestret i 21-stillingen med en fettsyre med minst 10 karbonatomer.

13. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten omfatter en steroid som forestret i 21-stillingen med en fettsyre med minst 12 karbonatomer.

14. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten omfatter et steroid-21-palmitat.

15. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den aktive komponenten omfatter rofleponidpalmitat.

16. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at minst 50% av pulveret omfatter partikler som har en diameter mindre enn 10 nm.

17. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at minst 60% av pulveret omfatter partikler som har en diameter mindre enn 10 um.

18. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at minst 70% av pulveret omfatter partikler som har en diameter mindre enn 10 um.

19. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at minst 80% av pulveret omfatter partikler som har en diameter mindre enn 10 um.

20. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at minst 90% av pulveret omfatter partikler som har en diameter mindre enn 10 um.

21. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 16-20, karakterisert ved at partiklene har en diameter i området 0,01-10 pm.

22. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 16-20, karakterisert ved at partiklene har en diameter i området 0,1-6 pm.

23. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 16-20, karakterisert ved at partiklene har en diameter i området 0,1-5 p-m.

24. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at det omfatter agglomererte partikler.

25. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at bæreren er et krystallinsk laktosemonohydrat.

26. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 1-24, karakterisert ved at bæreren er valgt fra glukose, fruktose, galaktose, trehalose, sukrose, maltose, raffinose, maltitol, melezitose, stakyose, laktitol, palatinat, stivelse, xylitol, mannitol, myoinositol og hydrater derav, og aminosyrer.

27. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at bæreren omfatter partikler av massemidlere diameter større enn 20 pm.

28. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 1-26, karakterisert ved at bæreren omfatter partikler av massemidlere diameter mindre enn 10 pm.

29. Fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk preparat som definert i hvilket som helst av kravene 1-28, karakterisert ved oppløsning av et lipid eller blanding av lipider og en lipofil biologisk aktiv komponent i et oppløs-ningsmiddel, hvor lipidet eller blandingen av lipider har en faseovergangstemperatur under 37°C; oppnåelse av en krystallinsk oppløsningsmiddelmatrise og en enkelt lipidfase i dens glassaktige tilstand ved frysing av oppløsningen, hvor frysingen utføres ved en temperatur under lipidfasens faseovergangstemperatur; og inndampning av det frossede oppløsningsmidlet ved en temperatur under lipidfasens faseovergangs-temperatur; og under fremgangsmåten tilsetning av en krystallinsk og hydrofil farma-søytisk akseptabel bærer til den proliposome sammensetningen etter en hvilken som helst mikronisering eller før en hvilken som helst mikronisering forutsatt at alle løsningsmidler er fullstendig fjernet.

30. Fremgangsmåte ifølge krav 29, karakterisert ved at den ytterligere omfatter trinnet med mikronisering av det frysetørkede pulveret for oppnåelse av partikler innenfor det respirerbare partikkelstørrelsesområde.

31. Fremgangsmåte ifølge krav 29 eller 30, karakterisert v e d at frysing og oppløsningsmiddelfordampning bevirkes i en frysetørker.

32. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 29-31, karakterisert ved at oppløsningsmidlet omfatter et organisk oppløsningsmiddel.

33. Fremgangsmåte ifølge krav 32, karakterisert ved at oppløsningsmidlet omfatter en alkohol.

34. Fremgangsmåte ifølge krav 33, karakterisert ved at oppløsningsmidlet omfatter tertiær butanol.

35. Fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk preparat som definert i hvilket som helst av kravene 29-34, karakterisert ved at den i tillegg trinnet med mikronisering av blandingen av pulver og bærer for oppnåelse av partikler innenfor det respirerbare partikkelstørrelsesområde.

36. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 29-35, karakterisert ved at den ytterligere omfatter trinnet med agglomerering av partiklene til sfærer av en diameter på 1 mm eller mindre.

37. Farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 1-28, karakterisert ved at det er beregnet for bruk i terapi.

38. Anvendelse av et farmasøytisk preparat ifølge hvilket som helst av kravene 1-28 i fremstillingen av et legemiddel for behandling av sykdommer via luftveiene.

39. Tørrpulver-inhalatoranordning, karakterisert ved at den inneholder et farmasøytisk preparat som definert i hvilket som helst av kravene 1-28.

40. Tørrpulver-inhalatoranordning ifølge krav 39, karakterisert ved at inhalatoren er en enkeltdose-inhalator.

41. Tørrpulver-inhalatoranordning ifølge krav 39, karakterisert ved at inhalatoren er en flerdose-inhalator.