NO315691B1

NO315691B1 - Doseringsform omfattende krystallinsk amifostin

Info

Publication number: NO315691B1
Application number: NO20005775A
Authority: NO
Inventors: Paul E Kennedy; Roger A Rajewski; John M Baldoni
Original assignee: Medimmune Oncology Inc
Priority date: 1992-07-31
Filing date: 2000-11-15
Publication date: 2003-10-13
Also published as: CA2120133A1; PL178463B1; SG47101A1; NO309636B1; CN1146428C; NO20005775D0; PL307298A1; HK1010692A1; EP0655917A4; CN1307870A; HU9500277D0; AU681858B2; PT655917E; EP0655917A1; US5591731A; AU4796693A; NO950343D0; SK11395A3; CZ284417B6; NZ255182A

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en doseringform omfattende krystallinsk S-2-(3-aminopropylamino)etyl dihydrogenfosfortioat (amifostin).

Forbindelsen S-2-(3-aminopropylamino)etyl dihydrogenfosfortioat (som også er kjent som amifostin, etiofos, Ethyol, NSC 296961 og WR-2721 og som heretter blir referert til som "amifostin") og andre aminoalkyldihydrogenfosfortioater er beskrevet i U.S. patent nr. 3,892,824 til Piper et al. Dette patentet beskriver også den kjente fremgangsmåten for å lage en krystallinsk form av amifostinmedikamentsubstans og er med dette inkorporert her ved referanse. Denne krystalinske formen for amifostin har vist seg å være relativt stabil ved romtemperatur i flere år såvel som ved 50°C i flere måneder. Disse forbindelsene ble opprinnelige utviklet som antibestrålingsmidler (radiobeskyttelsesmidler), som særlig skulle bli anvendt mot røntgen eller kjernebestråling som man møter i militære konflikter.

I tillegg til utnyttelse som militært antibestrålingsmiddel, har amifostin demonstrert ypperlig utnyttelse som ikke-militær radiobeskyttelsesmiddel og kjemobeskyttelsesmiddel, dvs. som en beskyttelse for uønskede negative effekter som fremkommer under anvendelse av bestrålingsterapi i behandling av cancer og anvendelse av kjemoterapeutiske midler, for eksempel alkyleringsmidler slik som cyklofosfamid, cisplatin, karboplatin, doksorubicin og dens derivater, og mitomycin og dens derivater. Det har på tilsvarende måter blitt rapportert at amifostin har blitt anvendt eksperimentelt for å beskytte HIV infiserte pasienter (AIDS) fra skadelige sideeffekter av 3<!->azido-3'-deoksytymidin (AZT) terapi. Amifostin og dens derivater utviser sine beskyttelseseffekter uten signifikant påvirkning av de fordelaktige egenskapene hos de administrerte terapeutiske midlene. Dette skyldes delvis det selektive opptak av beskyttende tiol i normalt vev.

Slik det her blir anvendt, refererer begrepet "amifostinmedikamentsubstans" til dens for-vakuumtørkede eller for-vakuumtørkede tilstand som er tilgjengelig på en "slik den er" basis i en trihydratform. For tiden tilgjengelig sterile, vakuumtørkede formuleringer av amifostinmedikantprodukt vil bli referert til som "amorf amifostin", mens formen som er dekket av foreliggende oppfinnelse vil bli referert til som "krystallinsk amifostin" for å adskille mellom de to formene. Dersom annet ikke er spesifisert, skal mengder som er rapportert beregnes på en vannfri basis.

Selv om amifostin har mange fordelaktige egenskaper, har man møtt store vanskeligheter når man prøver å oppnå en hensiktsmessig, stabil, steril

doseringsformulering.

Den nåværende måte å fremstille og pakke amifostin omfatter trinnene med å fylle i for-steriliserte medisinglass en sterilisert vannoppløsning som omfatter amifostin til et forhåndsbestemt volum, avkjøle medisinglassene og deres innhold, og fjerning av oppløsningsmiddel ved lyofilisering for å fremstille tørket amifostin i en forhåndsbestemt mengde i hver medisinflaske. (Se L. Lachman et al., The Theory and Practice of Industrial Pharmacy s. 62-63,1986). Dette unngår de vesentlige praktiske problemene som angår pakking av bulk, fast amifostin ved å anvende såkalt "tørrfylling" eller "pulverfylling" metoden. Slike problemer innbefatter vanskeligheter med manuell manipulering av pulveret, behov for å oppmale pulveret til aksepterbar partikkelstørrelse og strømbarhet, vanskeligheter med å opprettholde partikkelfrie, aseptiske betingelser og vanskeligheter med å tilføre nøyaktig dose av fast amifostin i hvert medisinglass.

Den for tiden tilgjengelige formuleringen av amifostin er denne amorfe formen som blir fremstilt ved lyofilisering og som er termisk ustabile. Som et resultat må denne lyofiliserte formuleringen bli opprettholdt ved temperaturer ved ca. -20°C og transportert ved temperaturer ved ca. -70°C til ca. -20°C for å unngå nedbrytning av det formulerte produktet. Behovet for lav temperatur under transport og lagring er en hindring og mangel ved nåværende tilgjengelige vakuumtørkede former av amifostin. Spesiell innpakning og betydelige kostnader er involvert i transport og lagring av produktet. Sykehus uten fryselagringsforhold vil i tillegg ikke ha evnen til å tilføre amifostin for anvendelse til sine pasienter (f.eks. markeder i den tredje verden vil i stor grad være hindret fra å anvende amifostin). Siden imidlertid ingen alternative formuleringer er tilgjengelige, blir kliniske prøver gjennomført ved å anvende denne formuleringen.

Det er således behov for å utvikle en doseringsform som har tilstrekkelig stabilitet og som skaffer tilveie lang holdbarhet ved romtemperatur eller under mindre stringent avkjøling, som ikke er uvanlig for mange medikamentprodukter.

Foreliggende oppfinnelse beskriver en doseringsform fremstilt ved en fremgangsmåte som fremstiller faste stoffsammensetninger som inneholder vakuumtørket amifostin, med og uten farmasøytisk aksepterbare eksipienter slik som mannitol, som har forbedret stabilitet i forhold til de tidligere tilgjengelige sammensetningene.

Foreliggende oppfinnelse angår en doseringsform omfattende krystallinsk amifostin som er egnet for rekonstitusjon med en farmasøytisk akseptabel bærer til et injekterbart partikkelfritt legemiddelprodukt for parenteral administrering til et behandlingsobjekt, kjennetegnet ved at det krystallinske amifostin fremstilles anvendende en fremgangsmåte omfattende trinnene: (a) fremstilling og steril filtrering av en løsning omfattende amifostin, (C1-C5)-alkylalkohol, vann og eventuelt et farmasøytisk akseptabelt hjelpestoff i hvilket de relative mengdene av amifostin, (Ci-C5)-alkylalkohol, vann og det eventuelle farmasøytiske akseptable hjelpestoffet er slik at det oppnås en partikkelfri løsning i temperaturområder fra romtemperatur til 10°C, men som gir et krystallinsk presipitat av amifostin ved kjøling under 0°C; (b) kjøling av nevnte løsning til en temperatur under 0°C i en tidsperiode tilstrekkelig til å bevirke utfelning av det krystallinske amifostinet og (c) vakuumtørking av den resulterende blandingen for å etterlate et fast krystallinsk amifostinpreparat med økt stabilitet.

Som et ytterligere trekk ved foreliggende oppfinnelse, kan en steril inert gass slik som argon, nitrogen og helium bli innført over preparatet. Temperaturen til hvilken formuleringen fortrinnsvis blir avkjølt for å starte utfelling av krystallinsk aminoalkyldihydrogenfosfortioat er i området fra eutektisk punkt av formuleringen. Formuleringen kan også optimalt inneholde eksipienter slik som mannitol.

Alkoholer som er velegnet for å gjennomføre krystallinsk utfelling av amifostin for anvendelse i foreliggende doseringsform innbefatter C\-C5 alkylalkoholer, slik som metanol, etanol, propanol, isopropanol, n-butanol, sek-butanol, tert-butanol, n-pentanol, 2-pentanol og lignende, fortrinnsvis etanol.

I en spesiell doseringsform ifølge oppfinnelsen, blir temperaturen i blandingen som resulterer fra trinn (b) hevet til en anneleringstemperatur som ligger ca. 1 til ca. 20°C over eutektisk temperatur i formuleringen, etterfulgt av avkjøling av temperaturen av blandingen av anneleringstemperatur tilbake til eutektisk temperatur eller under forut for gjennomføring av vakuumtørking i trinn (c). I spesielle tilfeller kan den eutektiske temperaturen falle innenfor området fra ca. -80°C til ca. 0°C, mens annelerings-temperaturen kan falle innenfor området fra ca. -30°C til ca. lO^C. Det er således et mål med foreliggende oppfinnelse å skaffe tilveie en doseringsform ved anvendelse av en formulering som omfatter ca. 50 til ca. 400 mg amifostin pr. ml formulering, ca. 1-35%

(v/v) alkohol, og ca. 65-99% (v/v) vann. Det er mest fordelaktig at formuleringen omfatter ca, 100 mg amifostin pr. ml formulering, ca. 10% (v/v) alkohol, og ca. 90%

(v/v) vann.

Temperaturene i de forskjellige avkjølings- og vakuumtørketrinnene kan variere vidt avhengig av de spesifikke forhold av amifostin til alkohol til vann. Generelt faller imidlertid temperaturene i trinnene (b) og (c) innenfor området fra ca. -40°C til ca. -5°C, fortrinnsvis ca. -20°C.

I en spesiell utførelsesform av foreliggende oppfinnelse innbefatter fremgangsmåten som anvendes et steriliseringstrinn. Sterilisering kan bli gjennomført på en lang rekke måter som er velkjent innenfor fagområdet, slik som ved oppvarming av blandingen i autoklave, behandling med gammabestråling, aseptisk rekrystallisering eller steril filtering av en oppløsning, f.eks. gjennom en 0,2 um porestørrelse filter. Det må videre bemerkes at krystallinsk amifostin kan være vannfri eller inneholde oppløsningsmidler fra krystallisasjon. Særlig kan krystallinsk amifostin være vannfri, et solvat eller et hydrat, slik som et monohydrat eller trihydrat. Hydratene kan generelt inneholde ca. 1 til ca. 5, fortrinnsvis ca. 1 til ca. 3 mol vann fra krystallisasjon.

I en alternativ fremgangsmåte for å fremstille formuleringen, blir amifostin og en hvilken som helst ønsket eksipient oppløst i vann for injeksjon, USP, og den resulterende oppløsningen blir deretter sterilfiltrert. Deretter blir ønsket mengde steril alkohol, slik som steril alkohol, USP tilsatt for å gi formuleringen som deretter blir utsatt for avkjøling eller anneleringstrinn.

Formuleringen som blir fremstilt ifølge den beskrevne fremgangsmåten kan videre omfatte en farmasøytisk aksepterbar eksipient. Velegnede eksipienter innbefatter, men er ikke begrenset til natriumklorid, propylenglykol, sukrose, dekstrose, sorbitol, inositol, mannitol, glycin, arginin eller andre aminosyrer, fortrinnsvis mannitol og mest åforetrekke mannitol, NF.

Det er et spesielt mål med foreliggende oppfinnelse å skaffe tilveie en doseringsform ved anvendelse av en fremgangsmåte for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning som omfatter krystallinsk amifostin som omfatter trinnene med (a) fremstilling av en formulering som omfatter ca. 50 til 300 mg amifostin pr. ml formulering, ca. 3 til ca. 30% (v/v) etanol, ca. 70-97% (v/v) vann, og eventuelt ca. 5 til ca. 300 mg av en farmasøytisk aksepterbar eksipient pr. ml av formuleringen, slik at man oppnår en partikkel-fri oppløsning ved temperaturer i området fra ca. romtemperatur til ca. 10°C, men som skaffer tilveie et krystallinsk presipitat av amifostin ved avkjøling under 0°C; (b) avkjøling av formuleringen til en temperatur som faller i området fra ca. -40°C til ca. -5°C i en tidsperiode som er tilstrekkelig til å gjennomføre utfelling av krystallinsk amifostin; og (c) vakuumtørking av den resulterende blandingen slik at det blir igjen et fast krystallinsk amifostinpreparat som har en bedret temperaturstabilitet. Generelt blir trinnene som tas etter trinn (a) og før trinn (c) gjennomført over en periode på ca. 0,5 til ca. 72 timer, fortrinnsvis ca. 2 til ca. 24 timer. De manipulasjoner som tas ved trinn (c) blir gjennomført over en periode på ca. 1 til ca. 72 timer, fortrinnsvis ca. 10 til ca. 20 timer. I tillegg blir vakuumtørketrinnet i (c) gjennomført ved et vakuum på ca. 10 til ca. 1000 mTorr, fortrinnsvis 150 mTorr.

Et ytterligere mål med foreliggende oppfinnelse angår av en steril doseringsform som har en bedret temperaturstabilitet der aktiv ingrediens, dvs. krystallinsk amifostin forblir stabil ved ca. 4°C i ca. 2 år. Krystallinsk amifostin, forblir fortrinnsvis stabil ved ca. omgivelsestemperatur i minst 2 år. En steril sammensetning som har en forbedret temperaturstabilitet blir således tilveiebragt, og sammensetningen omfatter krystallinsk amifostin som kan bli rekondisjonert med en farmasøytisk akseptabel bærer til et injiserbart partikkel-fritt medikamentprodukt. Den sterile sammensetningen blir fortrinnsvis tilveiebragt som en steril enkelt doseformulering som har en bedret temperaturstabilitet og som omfatter ca. 10 til ca. 10000 mg krystallinsk amifostin, og eventuelt ca. 10 til ca. 10000 mg av en farmasøytisk aksepterbar eksipient, der formuleringen kan bli rekondisjonert med en farmasøytisk aksepterbar bærer til et injiserbart partikkel-fritt medikamentprodukt. I en foretrukket utførelsesform omfatter den sterile enkle doseformuleringen ca. 100 til ca. 1000 mg krystallinsk amifostin og ca. 100 til ca. 1000 mg av en eksipient. Det er mest å foretrekke at den sterile enkle doseringsformuleringen omfatter ca. 500 mg krystallinsk amifostin og ca. 500 mg mannitol. Bæreren kan bli valgt fra en lang rekke farmasøytisk aksepterbare bærere og kan innbefatte vann for injeksjon, USP, normalt saltvann, USP, 5% dekstrose i vann, USP, eller vandige buffere.

Doseringsformen ifølge foreliggende oppfinnelse kan anvendes i en fremgangsmåte for å behandle et subjekt som har behov for radio- eller kjemobeskyttelse, og omfatter administrering til subjektet av en effektiv mengde av en farmasøytisk sammensetning som inneholder et krystallinsk amifostin, som har blitt rekondisjonert med en farmasøytisk aksepterbar bærer. Den rekondisjonerte farmasøytiske sammensetningen kan bli administrert parenteralt. Om ønskelig kan den rekondisjonerte farmasøytiske sammensetningen bli administrert intravenøst, intramuskulært, subkutan, intrakavetart, og intratekalt.

Disse og andre mål med oppfinnelsen vil være åpenbare for personer med kunnskap innenfor fagområdet ved gjennomlesing av den generelle og detaljerte beskrivelsen som her foreligger.

BESKRIVELSE AV TEGNINGENE

Figur 1 Graf av amifostinmedikamentsubstans (WR-2721) oppløselighet i

vandige/etanoloppløsninger vs. temperatur (°C).

Figur 2 Graf av avhengighet av amifostinmedikamentsubstansoppløselighet på

etanolkonsentrasj on.

Figur 3 TGA av krystallinsk amifostinmedikamentprodukt formulert fra 10%

etanol i vann.

Figur 4 TGA av amifostinmedikamentsubstans.

Figur 5 DSC av krystallinsk amifostinmedikamentprodukt formulert fra 10%

etanol i vann.

Figur 6 DSC av amifostinmedikamentsubstans.

Figur 7 FTIR av krystallinsk amifostinmedikamentprodukt formulert fra 10%

etanol i vann.

Figur 8 FTIR av amifostinmedikamentsubstans.

Figur 9 Røntgendiffraksjon av krystallinsk amifostinmedikamentprodukt

formulert fra 10% etanol i vann.

Figur 10 Røntgendiffraksjon av amifostinmedikamentsubstans.

Figur 11 TGA av krystallinsk amifostin og mannitolmedikamentprodukt formulert fra 10% etanol i vann. Figur 12 DSC av krystallinsk amifostin og mannitolmedikamentprodukt formulert

fra 10% etanol i vann.

Figur 13 viser molekylstruktur og krystallstruktur av vakuumtørket amifostin.

Før foreliggende oppfinnelse var den tilgjengelige farmasøytiske formuleringen av amifostin (Ethyol) termisk ustabil. På grunn av dens ustabilitet, krevde Ethyol formuleringen anvendelse av lave temperaturer under transport og lagring for å forhindre produktnedbryting.

Foreliggende oppfinnelse skaffer tilveie den første stabile, vakuumtørkede farmasøytiske formuleringen av amifostin som på hensiktsmessig måte kan behandles og lagres ved temperaturer fra ca. 4°C til ca. romtemperatur over lengre tidsperioder uten signifikant produktnedbryting, og skaffer således tilveie en løsning som det har vært lenge behov for. Formuleringen vil tillate at amifostinmedikamentproduktet kan transporteres og lagres i sykehus rundt om i verden som ikke har fryselagringskapasiteter som er nødvendige for formuleringen som for tiden er tilgjengelig.

Det har uventet blitt oppdaget at et sterilt og stabilt produkt av krystallinsk amifostin med og uten eksipient(er) slik som mannitol kan bli fremstilt fra vakuumtørking av en amifostinmedikamentsubstans-inneholdende hydro-etanolisk oppløsning ved ca. 1 til ca. 35% etanol.

Et viktig trekk ved foreliggende oppfinnelse involverte preformuleirngsstudier som bestemte (1) oppløselighet av amifostinmedikamentsubstans (mg/ml) ved forskjellige konsentrasjoner av vann/etanol, (2) oppløselighet av amifostinmedikamentsubstans i vann/etanol ved forskjellige temperaturer, (3) passende temperatur i fryse-tørkeren som er nødvendig for å gjennomføre utfelling av amifostin før vakuumtørking og (4) konsentrasjon av etanol som er nødvendig i formuleringen for å gi en super-mettet løsning som når den blir avkjølt til den ønskede holdbarhetstemperatur i frysetørkeren resulterer i utfelling av amifostin i en krystallinsk form. Fra preformuleirngsstudiene over (se eksemplene under) ble det bestemt at den foretrakkede konsentrasjonen av amifostin, på vannfri basis var ca. 100 mg/ml i ca. 10% vandig etanol. En ytterligere foretrukket oppholdstemperatur på ca. -20°C vil gjennomføre utfelling av amifostin.

For å oppnå et elegant kakeprodukt, er prosentdelen av etanol i etanol/vannblandingen i området fra ca. 1 til ca. 35% v/v etanol (f.eks. forhold av etanol:vann 1:99; 35:65); på tilsvarende måte kan oppholdstemperaturen i frysetørkeren være i området fra ca. -40°C til ca. -10°C, fortrinnsvis -20°C. Resultatene fra preformuleringsstudiene som har vært presentert i oppfinnelsen tilveiebringer en viktig basis for justering av avhengige variable av amifostinkonsentrasjon, etanolkonsentrasjon og temperatur for å skaffe tilveie multippelbeholderstørrelse/fyllvolumkonsentrasjoner.

Generelt blir fryse-tørkerhyllen forhåndsavkjølt til en temperatur på ca. -30°C til ca. - 15°C, fortrinnsvis ca. -20°C. Medisinglassene blir fylt og temperaturen justert på nytt til ca. -30°C til ca. -15°C og fortrinnsvis -20°C og medisinglassene blir holdt ved denne temperatur i ca. 20 timer. Avhengig av konsentrasjon av etanol og amifostin eller amifostin og eksipient i oppløsningene, og avhengig av etanolkonsentrasjon, vil temperaturen som er nødvendig for å gjennomføre utfelling variere deretter. Utfelling av krystallinsk amifostin foregår deretter, etterfulgt av frysing av formuleringen.

Med en gang den frosne formuleringen blir observert, blir den primære tørkesyklusen startet for å fjerne bulkvann og etanol. Trykket i kammeret blir generelt redusert til ca. 150 mTorr. Den primære tørkesyklusen blir fullført når formuleringstemperaturen er tilnærmet -20±2°C i mer enn 2 timer. Under den andre tørkeprosessen, blir formuleringen holdt ved ca. -20°C til ca. 10°C, fortrinnsvis ved en temperatur over den primære tørkesyklustemperaturen i ca. 40 til ca. 50 timer for å forenkle den andre tørkingen, dvs. fjerning av det resterende vann og etanol. Når partialtrykkene i vann og etanol i kammeret når en likevektstilstand, blir tørkingen betraktet å være fullført. Disse formuleringene skaffer tilveie et vakuumtørket produkt som har blitt funnet å være et krystallinsk amifostin som demonstrerer forbedret stabilitet i forhold til nåværende formulering som inneholder amorf amifostin. Medisinglassene kan deretter lagres og transporteres ved temperaturer fra ca. 4°C til ca. romtemperatur uten signifikant produktnedbryting.

Eksipienter kan videre bli tilsatt for å øke mengden av faste stoffer som er tilstede i formuleringen. Blant eksipientene som finnes nyttige til dette formål, ofte i kombinasjon, er natrium- eller kaliumfosfater, natriumklorid, sitronsyre, ravsyre, gelatin og karbohydrater slik som dekstrose, sukrose, sorbitol, inositol, mannitol og dekstran. I tillegg til de som her er nevnt, er andre kjent for personer innenfor fagområdet. Vakuumtørkede faste krystallinske amifostinsammensetninger kan tilveiebringes i enkeldosebeholderformer ved aseptisk fylling i egnede beholdere med sterile for-vakuumtørkede oppløsninger til et forhåndsbestemt amifostininnhold; preparering av den ønskede vakuumtørkede faste sammensetning; og deretter hermetisk forsegling av enkeldosebeholderen. Det har til hensikt at disse fylte beholderne nå tillater rask oppløsning av den faste sammensetningen ved rekondisjonering med passende sterile fortynningsmidler in situ som gir en passende steril løsning av ønsket amifostinkonsentrasjon for administrering. Slik den blir anvendt her, menes begrepet "egnede beholdere" en beholder som har evnen til å opprettholde et sterilt miljø, slik som et medisinglass, som har evnen til å avlevere et vakuumtørket produkt hermetisk forseglet med en stoppanordning. I tillegg medfører egnede beholdere passende størrelse, når man betrakter volumet av oppløsningen som skal holdes ved rekondisjonering av den vakuumtørkede sammensetningen; og passende beholdermateriale, generelt Type I glass. Stoppanordningen som blir benyttet f.eks. sterile gummilukninger eller tilsvarende, skal forstås å være en som skaffer tilveie forannevnte forsegling, men som også tillater innføring med det formål å introdusere fortynningsmiddel, f.eks. sterilt vann for injeksjon, USP, normalt saltvann, USP, eller 5% dekstrose i vann, USP, for rekondisjonering av den ønskede amifostinoppløsning. Disse og andre trekk vedrørende egnethet av beholdere for farmasøytiske produkter slik som de i foreliggende oppfinnelse er velkjent for personer med kunnskap og praksis innenfor det farmasøytiske fagområdet.

Selv om de fysikalske egenskapene, slik som utseendet, ble forbedret i de foreliggende faste sammensetningene, og dermed oppnådde et mål i oppfinnelsen, ble det uventet funnet at disse foreliggende faste sammensetningene også var i besittelse av forbedret termisk stabilitet sammenlignet med for tiden kjente formuleringer. Forventning om bedring av kjemisk stabilitet ved vakuumtørking angår en sammenligning av stabilitet av vakuumtørket faststoff med stabilitet av løsningsformen av den farmasøytiske sammensetning. I motsetning til dette, viser sammensetningene forbedret kjemisk stabilitet mellom faste doseringsformer, se eksemplene nedenfor.

De farmasøytiske doseringsformene i foreliggende oppfinnelse er velegnet for parenteral administrering, for eksempel intravenøs, intramuskulær, intrakavitært, intratekalt og subkutane injeksjoner.

Følgende eksempler har til hensikt å illustrere foreliggende oppfinnelse og må ikke på noen som helst måte betraktes å være begrensende.

EKSEMPLER

EKSEMPEL 1: FREMGANGSMÅTE FOR PREFORMULERINGSSTUDIER

Dette eksemplet skaffer tilveie en fremgangsmåte som blir anvendt for preformuleringsstudier som blir utformet for å evaluere passende parametere, dvs. amifostinkonsentrasjon, etanolkonsentrasjon og temperatur, for å oppnå en steril vakuumtørket form av krystallinsk amifostin med og uten farmasøytisk aksepterbare eksipienter ved å anvende vakuumtørking fra en vann/etanolblanding.

A. Fremstilling av prøveo<pp>løsnin<g>er

I separate testrør med skrulokk ble følgende tilsatt:

(a) 5000 ul vann

(b) 4750 ul vann og 250 ul etanol

(c) 4500 ul vann og 500 ul etanol

(d) 4250 ul vann og 750 ul etanol

(e) 4000 ul vann og 1000 ul etanol

Tilsett amifostin til hvert testrør inntil det faste stoffet forblir uoppløst. Soniker i 30 sekunder. Hvis all amifostin var oppløst, tilsett en ytterligere mengde av medikamentsubstans inntil partiklene forblir uoppløste i oppløsningsmidlet. Rist kraftig i testrørene i 30 minutter ved 25°C.

B. Fremstilling av standardoppløsninger

Fremstill 10 ml av følgende oppløsninger av medikamentsubstans i vann:

(a) 0,05 mg/ml

(b) 0,1 mg/ml

(c) 0,3 mg/ml

(d) 0,5 mg/ml

På et UV spektrofotometer, scan hver oppløsning mot en vannblindprøve over et område på 190-290 nm. Registrert absorbans ved 200 nm eller 210 nm. Gjennomfør lineær regressjonsanalyse av standarddata ved 200 nm eller 210 nm og oppnå en vinkelkoeffisient og et skjæringspunkt.

C. Analyse av prøveoppløsninger

Fjern tilnærmet 0,5 ml av hver oppløsning og sentrifuger til pelletfaststoff. Filtrer hver prøve med 0,45 um filter for å fjerne overskudd partikler om nødvendig. Fortynn hver prøve til en arbeidskonsentrasjon på 0,3 til 0,4 mg/ml med vann. På UV spektrofotometer, scan hver prøve over et område 190-290 nm. Oppnå en avlesning hver prøve ved 200 nm eller 210 nm. Fra standard vinkelkoeffisient og skjæringspunkt og fortynninger beregn konsentrasjon av amifostin i hver oppløsning. Avkjøl oppløsningene til nest laveste temperatur og gjenta det over etter at oppløsningen er ved en temperatur i 1 time. Tabell 1 tilveiebringer resultater av oppløslighetskjøringer fra amifostin i etanol/vannblandinger ved forskjellige temperaturer. Dette forhold er grafisk demonstrert i figur 1 og 2.

Dette eksemplet viser at oppløslighet av amifostinmedikamentsubstans er sterkt avhengig av både etanol ko-oppløsningsmiddelinnhold og temperatur. Grad av supermetting som resulterer fra et fall i temperatur av en gitt amifostinoppløsning minsker med økende etanol ko-oppløsningsmiddelinnhold (se tabell 1 og figur 1 og 2). Denne avhengighet er forklart i følgende eksempel 2 og 3 for å oppnå krystallinsk amifostin.

EKSEMPEL 2: FREMGANGSMÅTE FOR Å FREMSTILLE

KRYSTALLINSK AMIFOSTIN UTEN MANNITOL

Til 130 ml vann ved 25°C tilsett under omrøring 21,25 g amifostinmedikament-substanstirhydrat, som er ekvivalent til 17,0 g vannfri amifostinmedikamentsubstans. Etter oppløsning av amifostinmedikamentsubstans er fullført, blir 17 ml absolutt etanol, USP, tilsatt oppløsningen under omrøring. Vann ble deretter tilsatt til QS 170 ml. Den resulterende løsningen blir sterilfiltrert gjennom et 0,22 nm filter. Til hver av trettitre 10 ml medisinglass, blir det dispensert 5 ml av den filtrerte oppløsningen og dette gir 500 mg amifostin, på vannfri basis, pr. medisinglass i et etanol:vannforhold på 10:90. Spaltestoppere blir plassert på medisinglassene og prøvene blir utsatt for følgende vakuumtørkesyklus: prøvene ble passert på hyller i frysetørkeren, som har blitt forhåndsavkjølt til ca. -20°C i ca, 17 timer ved omgivelsestrykk, etter denne tidsperioden blir kammeret tømt og hyllene holdt ved ca. -20°C i 28 timer. Etter denne perioden, blir kammeret tilbakefylt med nitrogen og medisinglassene blir raskt stoppet med hånd. Denne fremgangsmåten resulterer i en termisk-stabil, frysetørket enkeldosemedisinglass som inneholder tilnærmet 500 mg krystallinsk amifostin som en elegant kake.

EKSEMPEL 3: FREMGANGSMÅTE VED FREMSTILLING AV

KRYSTALLINSK AMIFOSTIN

Tilnærmet 20 g mannitol ble tilsatt under omrøring til 150 ml vann ved 25°C. Til denne oppløsning blir det under omrøring tilsatt tilnærmet 25 g amifostinmedikantsubstans (trihydratbasis), som er ekvivalent med 20 g vannfri amifostinmedikamentsubstans. Etter at oppløsningen er fullført, blir 20 ml vannfri etanol USP, tilsatt volumetrisk til oppløsningen under omrøring. Vann ble tilsatt QS til 200 ml. Den resulterende løsning blir sterilfiltrert gjennom et 0,2 um filter og 5 ml oppløsning blir overført til hver av 40 10-ml glass. Spaltestoppere blir plassert på glassene og prøvene anbragt i frysetørker-hyllen ved omgivelsestemperaturer. Hylletemperaturen blir senket med 2°C/min. til - 25°C og holdt ved denne temperatur i 90 minutter for å starte amifostinkrystallisasjon. Etter dette tidsrom blir hylletemperaturen hevet over eutektisk punkt ved en hastighet på 2°C/min. til -5°C og holdt ved denne temperatur i 10 timer for å annelere produktet. Deretter blir hylletemperaturen senket til -25°C inntil produkttemperaturen er mindre enn -18°C i mer enn 60 minutter. Etter dette tidsrommet, blir frysetørkerkondensatoren slått på og vakuum i kammeret blir senket til 150 mTorr. Hylletemperaturen blir hevet til -20°C og prøvene får anledning til å vakuumtørke i 14 timer. På dette tidspunkt har de registrerte medisinglassene nådd hylletemperaturen, og dette indikerer slutten av den primære tørkesyklusen. Medisinglassene forblir ved 150 mTorr på -20°C hyllen i ytterligere 13,4 timer for å sikre fjerning av ikke-hydratisert vann. Kammeret blir tilbakefylt med nitrogen og glassene blir mekanisk stoppet. Denne fremgangsmåten resulterer i et termisk stabilt, vakuumtørket enkeldosemedisinglass som inneholder tilnærmet 500 mg amifostin (vannfri basis) og 500 ml mannitol som en elegant kake.

EKSEMPEL 4: VAKUUMTØRKET KRYSTALLINSK

AMIFOSTINSTABILITETSTESTING

Flere forseglede, nitrogenfylte medisinglass av krystallinsk amifostin formulert fra 10:90 etanol:vann, som beskrevet i eksempel 2 over, blir stresset ved 50°C i opptil 35 dager for å bestemme termisk stabilitet av krystallinsk amifostin.

Resultatene er satt opp i tabell 2 under. Alle data er rapport som prosent (%) av begynnende konsentrasjon, som er definert som 100%.

Av sammenligningshensikter blir foreliggende amorfe amifostinformulering også utsatt for stresstesting ved 50°C i opptil 28 dager. Resultatene er presentert i tabell 3 under. Alle data er rapportert som prosent (%) av begynnende konsentrasjon, som er definert som 100%.

Det er således helt klart, selv mellom faststofformuleringer, blir det oppnådd en dramatisk økning i termisk stabilitet ved krystallinske sammensetninger som ble oppnådd fra den beskrevne fremgangsmåten.

EKSEMPEL 5: FORETRUKKET FREMGANGSMÅTE FOR

FREMSTILLING AV KRYSTALLINSK AMIFOSTIN

Forbindelsesprosedvre for amifostin/ mannitol ( 100 mg vannfri hver/ mn

Følgende fremgangsmåte ble skrevet for å gi 3,5 liter oppløsning.

1. 350 g mannitol (USP) ble oppløst under omrøring (magnetisk teflonrørestav) i ca. 2300 ml Nanopure vann ved romtemperatur i en rustfri ståltrykkbeholder. 2. 438,3 g amifostintrihydrat ble tilsatt denne oppløsningen. Oppløsningen ble hjulpet med

kraftig røring.

3. Etter at amifostinoppløsningen var fullstendig, ble 525 ml dehydratisert etanol (USP) langsomt tilsatt oppløsningen under kraftig omrøring. Amifostinutfelling foregår ved tilsetningsstedet etterfulgt av rask gjenoppløsning når etanol blir

fortynnet ved oppløsning.

4. Etter at tilsetningen av etanol er fullstendig, ble oppløsningen fortynnet til 3500 ml med Nanopure vann. 5. Oppløsningen ble filtrert under et positivt trykk på 68,95 kPa (nitrogen) gjennom et

Millipore-40 filter.

6. 5 ml av den resulterende oppløsning ble overført til hver av 660 10-ml rørmedisinglass (Wheaton E-2910-B47B). Glassene ble delvis behandlet med butylgummistoppere (Tompkins PT23B0857 F2) og vakuumtørket.

Vakuumtørkesvklus for amifostin/ mannitol fl00 mg vannfri/ mO

1. Glassene blir plassert på hyllen ved ca. 25°C for å sikre at amifostinutfellingen ikke startes heterogent. 2. Hylletemperaturen blir senket med 2°C pr. minutt til -35°C. Med en gang hylletemperaturen blir oppnådd, blir den holdt konstant i 240 minutter for å sikre at oppløsningen fryser i alle glassene. I løpet av dette trinnet passerer prøvene

gjennom et eutektisk (tilnærmet -16°C).

3. På slutten av den 240 minutters holdetiden, blir hylletemperaturen hevet med 2°C pr. minutt til 0°C i løpet av 25 minutter. Med en gang denne hylletemperaturen blir

oppnådd, blir den holdt konstant i 600 minutter.

4. På slutten av 600 minutters holdetiden, blir hylletemperaturen igjen senket til -35°C med 2°C pr. minutt. Med en gang denne temperaturen blir oppnådd, blir den holdt

konstant i 180 minutter.

5. Etter dette tidspunkt blir kondensatoren slått av. Når kondensatortemperaturen er mindre enn -40°C, blir kammeret tømt. Når kammertrykket er mindre enn 150 mT, blir hylletemperaturen hevet til -20°C med 2°C pr. minutt og kammertrykket blir

holdt ved 150 mT med en nitrogenkammertilførsel.

6. Produktet blir forlatt i kammeret ved 150 mT i 12 til 24 timer etter at den registrerte produkttemperaturen har nådd hylletemperatur. Kammeret blir tilbakefylt med nitrogen og medisinglassene stoppet.

NOTE: 1 Torr er ekvivalent med 1 mm Hg ved 0°C.

Forseglede, nitrogenfylte 10 ml rørglass inneholdende vakuumtørket krystallinsk amifostin, oppnådd som beskrevet i eksempel 5, ble stresset ved 40°C i 4 uker. For krystallinsk amifostin tørket ved -20°C i 12 timer, ble det igjen 93% amifostin ved slutten av stresstestperioden. For krystallinsk amifostin tørket ved -20°C i 24 timer, ble det igjen 84% av amifostin på slutten av teststressperioden.

EKSEMPEL 6: MEST FORETRUKKET FREMGANGSMÅTE FOR Å

FREMSTILLE KRYSTALLINSK AMIFOSTIN

Det ble funnet at det mest stabile vakuumtørkede, krystallinske amifostin ble oppnådd ved vakuumtørking av en amifostin/mannitol, etanol/vannoppløsning, inneholdende 15% v/v etanol. Fremgangsmåten er den samme som beskrevet i eksempel 5 med unntagelse for at mindre mengder dehydratisert etanol ble tilsatt løsningen.

Den spesielle måten å gjennomføre vakuumtørkesyklusen for å fremstille mest stabil krystallinsk amifostin ble oppnådd etter flere studier som ble gjennomført for å evaluere effekter av endring av sluttørketemperatur, tidsperiode for sluttørking, og hastighet på begynnende tørking til -35°C i de løsnings-inneholdende glassene. Det ble funnet at generelt er stabiliteten av krystallinsk amifostin størst når sluttørketemperaturen var ved -20°C, og tiden for sluttørking var mellom 12 og 24 timer. I tillegg var stabiliteten av krystallinsk amifostin høyere når sluttavkjøling til -35°C i oppløsningsinneholdende glass ble gjennomført i 160 minutter i steden for ved 45 minutter.

Basert på de ovenfor nevnte utviklingsstudier, er den mest foretrukkede måten å gjennomføre vakuumtørkesyklusen som følger:

Vakuumtørkesvklus for amifostin/ mannitol fl 00 me vannfri/ ml)

1. Medisinglass blir plassert på hyllen ved ca. 25°C for å sikre at amifostinutfelling ikke blir startet heterogent. 2. Hylletemperaturen blir senket fra 25°C til 0°C i løpet av 20 minutter, 0 til -20°C i løpet av 60 minutter, og deretter fra -20°C til -35°C i løpet av 80 minutter. Med en gang hylletemperaturen blir oppnådd, blir den holdt konstant i 240 minutter for å sikre at oppløsningen fryser i alle medisinglass. I løpet av dette trinnet passerer

prøvene gjennom et eutektisk punkt (tilnærmet -16°C).

3. På slutten av den 240 minutters lange holdetiden, blir hylletemperaturen hevet til 0°C i løpet av 25 minutter. Med en gang man oppnår en hylletemperatur på 0°C,

blir den holdt konstant i 600 minutter.

4. På slutten av den 600 minutters lange holdetiden, blir hylletemperaturen igjen senket fra 0°C til -15°C i løpet av 15 minutter, og deretter fra -15°C til -35°C i løpet av 120 minutter. Med en gang man oppnår temperatur på -75°C, blir den holdt

konstant i 180 minutter.

5. Etter dette tidspunkt blir kondensatoren slått på. Når kondensatortemperaturen er mindre enn -40°C blir kammeret tømt. Når kammertrykket er mindre enn 150 mT, blir hylletemperaturen hevet fra -35°C til -20°C og 2°C pr. minutt mens

kammertrykket blir holdt ved 150 mT med en nitrogenkammertømming.

6. Produktet i medisinglassene blir holdt i kammeret ved 150 mT i 12 til 24 timer etter at den registrerte produkttemperaturen har nådd hylletemperaturen. Kammeret blir

tilbakefylt med nitrogen og medisinglassene tettet.

NOTE: 1 Torr er ekvivalent med 1 mm Hg ved 0°C.

Uten ønske om å være begrenset av noen teori, antas det at ovenfor nevnte trinn 2 sørger for dannelse av kimkrystaller av amifostin i frossen oppløsning og trinn 3 sørger for vekst av amifostinkrystaller rundt kimkrystallene og sikrer fullføring av krystallisasjon av amifostin fra en delvis frossen oppløsning.

Krystallinsk amifostin har blitt fremstilt ved å anvende ovenfor nevnte vakuumtørkesyklus, ved utnyttelse av 12,5% etanoloppløsning - et fremstilt med et sluttørketrinn på 12 timer og en annen fremstilt med et sluttørketrinn på 24 timer. Stresstesting av disse to produktene ved 40°C i 8 uker indikerte ikke noe merkbar dekomponering av amifostin for produkt tørket i 12 timer, og en 2% dekomponering av amifostin for produkt tørket i 24 timer.

EKSEMPEL 7: FORETRUKKET MÅTE Å GJENNOMFØRE

KRYSTALLINSK AMIFOSTINSTABILITETSTESTING

Forseglede, nitrogenfylte 10 ml rørmedisinglass inneholdende vakuumtørket krystallinsk amifostin, oppnås som beskrevet i eksempel 6, ble stresset ved 40°C opp til 8 uker.

Det ble funnet at tidligere stabilitetstesting ved 50°C sørget for dekomponering av krystallinsk amifostin i forseglede medisinglass på en måte som ikke enkelt korrelerer med stabilitet av krystallinsk amifostin under typiske lagringsbetingelser (dvs. ved kjøleskapstemperatur på ca. 4°C). Resultatene fra stabilitetstesting ved 4°C og mindre kan imidlertid blir korrelert til stabilitet av krystallinsk amifostin under typiske lagringsbetingelser. Som en tilnærming, korrelerer stabilitet i en måned ved 30°C til 18 måneder ved 4°C; stabilitet i 2-3 uker ved 40°C korrelerer med 18 måneder ved 4°C; og stabilitet i 8-12 uker ved 40°C korrelerer med 18 måneder ved 25°C. Se L. Lachman et al. The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, sidene 766-67 for en generell diskusjon av stabilitetsforventning.

På slutten av stressperioden, ble krystallinsk amifostin i medisinglassene undersøkt for vanninnhold, tiolinnhold og amifostininnhold. Vanninnholdet ble bestemt ved Karl Fischer titrering. Fordi amifostin kan gjennomgå hydrolyse under stress for å produsere 2-[(3-aminopropyl)amino]etantiol og fosforsyre, gir bestemmelse av mengde av denne tiol en indikasjon på stabilitet av amifostin. Analyse av tiol og amifostininnhold ble gjennomført ved å anvende følgende fremgangsmåte:

1. Fremstilling av standarder og prøver

Vekt og volumer kan bli justert forutsatt at sluttkonsentrasjonene blir de samme. Lagringsoppløsninger under avkjøling og/eller i en avkjølt autoprøvetaker umiddelbart etter preparering.

1.1 Fremstilling av amifostinstandardoppløsninger ( 3 mg/ml. metanol/ vann f50/ 50])

Nøyaktig oppveid tilnærmet 30,0 mg amifostin standard i en 10 ml volumetrisk flaske. Oppløs S ml vann og fortynn til volum med metanol. Oppholdstid: 24 timer ved 4°C.

1.2 Fremstillin<g> av 2- r( 3- aminopropvl) amino1etantiol. dihvdroklorid

Standard oppløsning (0,012 mg/ml)

Fri base, metanol/vann [50/50])

Nøyaktig oppveid tilnærmet 1,85 mg av 2-[(3-aminopropyl)amino]etantiol, dihydroklorid i en 100 ml volumetrisk flaske. Tilsett 50 ml vann og deretter fortynn til volum med metanol.

Oppholdstid: 24 timer ved 4°C.

1.3 Fremstilling av amifostin ( medikamentsubstans)

A. Analysepreparering (3 mg/ml, metanol/vann [50/50])

Nøyaktig oppveid tilnærmet 30,0 mg amifostin i en 10 ml volumetrisk flaske. Oppløs i 5 ml vann og fortynn til volum med metanol.

Oppholdstid: 24 timer ved 4°C.

B. Beslektede substanser (15 mg/ml vann).

Nøyaktig oppveid tilnærmet 150,0 mg amifostin i en 10 ml volumetrisk flaske. Oppløs og fortynn til volum med vann. Oppholdstid: 24 timer ved 4°C.

1.4 Fremstiling av amifostin for injeksjon ( medikamentprodukt') ( 4. 8 me/ml.

metanol/ vann rSO/ 501)

Oppløs innhold i et medikamentproduktglass med ca. 9 ml vann. Kvantitativ overfør prøven til 25 ml volumetrisk flaske og fortynn til volum med vann. Overfør 6 ml av denne oppløsning til en 50 ml volumetrisk fase, tilsett 19 ml vann og fortynn til volum med metanol.

Oppholdstid: 24 timer ved 4°C.

2. Svstemegnethet

2-[(3-aminopropyl)amino]etantiol, diklorid ("WR-1065") (anvend standardoppløsning 1.2)

3. Utstyr og materialer ( som angitt under eller tilsvarende) Utstyr

HPLC system med UV dektor

Materialer

Amifostinstandard

Konsentrert fosforsyre (H3PO4): HPLC kvalitet

Metanol (MeOH): HPLC kvalitet

Renset vann: 16 meg-ohm eller høyere

1-oktansulfonsyre, natriumsalt (OSA): HPLC kvalitet

HPLC kromatografiske betingelser

Kolonnespesifikasjoner:

Pakkemateriale: TosoHaas TSK ODS-80TM endekappet (USP LI) Dimensjoner: 4,6 x 250 mm

Partikkelstørrelse: 5 um

Mobil fase: Metanol/vandig fosforsyre, pH 3,0,3,5 mM OSA (50/50)

1. Oppløs 0,38 g OSA i 500 ml vandig fosforsyre pH 3,0

2. Fortynn til 1000 ml med metanol

3. Filtrer og avgass mobil fase

Deteksjon: 220 nm absorbans

Strømhastighet: 1,0 ml/min.

Injeksjonsvolum: 10 ul

Kolonnetemperatur: omgivelsestemperatur

Prøvetemperatur: 4°C

Attenuering: juster for å frembringe tilnærmet 80% fullskala-amifostintopp.

4. Fremsean<g>småte

Injiser prøve og standardoppløsning, registrer retensjonstid av amifostintopp (tilnærmet 4 minutter). Retensjonstid av standard amifostintopp og prøvepreparattopp bør være innenfor 10% for å bekrefte identifikasjon av amifostin i prøven.

EKSEMPEL 8: STABILITETSRESULTATER AV VAKUUMTØRKET,

KRYSTALLINSK AMIFOSTIN STRESSET VED 40°C

Typiske resultater som ble oppnådd ved å stresse krystallinsk amifostin fremstilt ved fremgangsmåten som er beskrevet i eksempel 6 og testet som beskrevet i eksempel 7 er oppsummert i tabell 4.

Resultatene over viser klart den bedrede stabiliteten av krystallinsk amifostin fremstilt ved fremgangsmåten som er beskrevet i eksempel 6. Den bedrede stabiliteten er åpenbart fra lawektsprosent av tioldannelse, som indikerer meget lite dekomponering av amifostin ved hydrolyse for å danne 2-[(3-aminopropyl)amino]etantiol som følger. I tillegg er det lite tap av vanninnhold eller amifostininnhold over tid. Dette er i motsetning til den dårlige stabiliteten av vakuumtørket amorf amifostinformulering som utviser betydelig dekomponering i løpet av 14 dager ved 50°C (se tabell 3 i eksempel 4).

EKSEMPEL 9: KRYSTALLSTRUKTUR AV VAKUUMTØRKET

AMIFOSTIN

Molekylstruktur og krystallstruktur av vakuumtørket krystallinsk amifostin er blitt bestemt. Krystalloversikt, enhetscellebestemmelse og datasamling ble gjennomført ved åanvende kobberbestråling ved romtemperatur.

Strukturen ble løst ved direktemetoder og raffinert ved full-matriksminstekvadrater og forskjellige Fourier-metoder. Alle ikke-hydrogenatomer ble raffinert anisotropisk. Hydrogenatomer festet til nitrogen og vannoksygenatomer ble lokalisert på forskjellige Fourier-kart og raffinert isotropisk. Posisjonene av de gjenværende hydrogenatomene ble beregnet ved å anta ideelle geometrier. Disse hydrogenatomene ble ikke raffinert på grunn av lav refleksjon til parameterforhold.

Forbindelsen krystalliserer i den chirale romgruppen P2i2i 2\. Data presentert i dette eksemplet er fra enantiomerstruktur med lavere R-verdier (R = 0,036 og Rw = 0,042). Den andre enantiomere strukturen har en R-verdi på 0,042 og Rw-verdi på 0,051. En grafisk tegning av molekyl og krystallstruktur av vakuumtørket amifostintrihydrat er vist i figur 13.

EKSPERIMENTELT

DATASAMLING

En fargeløs flat nålstrekformet krystall med C5H21N2O6PS som har tilnærmede dimensjoner på 0,350 x 0,50 x 0,030 mm ble montert på en glassfiber. Alle målinger ble gjort på et Rigaku AFC5R diffraktometer med grafittmonokromert Cu K_ bestråling og en 12KW roterende anodegenerator. Cellekonstanter og en orienterende matrisk for datasamling, oppnådd fra minste-kvadraters metode ved å anvende innstillingsvinkler på 20 nøyaktig sentrerte refleksjoner i området 40,45 < 2_ < 52,03°

tilsvarer en ortorombisk celle med dimensjoner:

a= 8,456 (2)Å

b= 21,553 (2)Å

c = 6,758 (2)Å

V =1231,6 (5)Å3

For z = 4 og F. W. = 268,26, er den beregnede tetthet 1,447 g/cm<3>. Basert på systematisk fravær av:

hOO: h 2n

OkO:k 2n

001: 1 2n

og vellykket løsning og raffinering av strukturen, ble romgruppen bestemt til å være:

Data ble samlet ved en temperatur på 23 ± 1°C ved å anvende co-28 scanteknikk til maksimalt 20 verdi på 120,0°. Omegascan av flere intense refleksjoner, laget før dataoppsamling, hadde en gjennomsnittlig bredde ved halvhøyde på 0,21° med en avtakingsvinkel på 6,0°. Sean av (0,89 + 0,14 tan 6)° ble gjort ved en hastighet på 8,0°/min. (i omega). Svake refleksjoner (I < 15,0a(I)) ble scannet på nytt (maksimum 4 gjenscanninger) og tellinger ble samlet for å sikre god tellestatistikk. Stasjonær bakgrunnstellinger ble registrert på hver side av refleksjonen. Forhold av topptellingstid til bakgrunnstellingstid var 2:1. Diameter av innfallende strålekollimator var 0,5 mm og krystall til detektoravstand var 400,0 mm.

DATAREDUKSJON

Totalt 1120 refleksjoner ble samlet. Intensitetene av tre respektive refleksjoner som ble målt etter hver 150 refleksjon for ble konstant gjennom datasamlingen og dette indikerer krystall- og elektrodestabilitet (ingen spaltningskorreksjon ble anvendt).

Lineær absorbsjonskoeffisienter for Cu K_ er 37,1 cm"<*>. En eksperimentell absorbsjonskorrigering, basert på azimutale scan av flere refleksjoner, ble anvendt og dette resulterte i transmisjonsfaktorer i området fra 0,89 til 1,00. Data ble korrigert for Lorentz og polariseringseffekter.

EKSPERIMENTELLE DETALJER

A. Krystalldata

B. Intensitetsmålinger

C. Strukturløsning og raffinering

Posisjonsparametere og B (eq) for C(5)H(21)N(2)0(6)P(1)S(1) Posisjonsparamctcre og B (eq) for C(5)H(21)N(2)0(6)P(1)S(1)

Det vil være åpenbart for en med kunnskap innfor fagområdet at andre utførelsesformer som ikke spesifikt er beskrevet ikke desto mindre faller innenfor rekkevidden og oppfinnelsestanken.

Claims

1. Doseringsform omfattende krystallinsk amifostin som er egnet for rekonstitusjon med en farmasøytisk akseptabel bærer til et injekterbart partikkelfritt legemiddelprodukt for parenteral administrering til et behandlingsobjekt, karakterisert ved at det krystallinske amifostin fremstilles anvendende en fremgangsmåte omfattende trinnene: (a) fremstilling og steril filtrering av en løsning omfattende amifostin, (C1-C5)-alkylalkohol, vann og eventuelt et farmasøytisk akseptabelt hjelpestoff i hvilket de relative mengdene av amifostin, (Ci-C5)-alkylalkohol, vann og det eventuelle farmasøytiske akseptable hjelpestoffet er slik at det oppnås en partikkelfri løsning i temperaturområder fra romtemperatur til 10°C, men som gir et krystallinsk presipitat av amifostin ved kjøling under 0°C; (b) kjøling av nevnte løsning til en temperatur under 0°C i en tidsperiode tilstrekkelig til å bevirke utfelning av det krystallinske amifostinet og (c) vakuumtørking av den resulterende blandingen for å etterlate et fast krystallinsk amifostinpreparat med økt stabilitet.

2. Dosisform ifølge krav 1, karakterisert ved at den videre omfatter et farmasøytisk hjelpestoff.

3. Doseringsform ifølge krav 2, karakterisert ved at det eventuelle hjelpestoffet er natriumklorid, glycin, dekstrose, sukrose eller mannitol.

4. Doseringsform ifølge krav 3, karakterisert ved at det eventuelle hjelpestoffet er mannitol.

5. Doseringsform ifølge krav 1, karakterisert ved at bæreren er "Vann for injeksjon", USP eller normalt saltvann.

6. Doseringsform ifølge krav 1, karakterisert ved at den er en steril enkeltdoseformulering.

7. Doseringsform ifølge krav 1, karakterisert ved at den omfatter omkring 10 til omkring 10.000 mg krystallinsk amifostin og eventuelt omkring 10 til omkring 10.000 mg av et farmasøytisk akseptabelt hjelpestoff.

8. Doseringsform ifølge krav 1, karakterisert ved at det krystallinske amifostinet vakuumtørkes.