NO170021B

NO170021B - Analogifremgangsmaate ved fremstilling av terapeutisk aktive 3-propenylcefem-derivater

Info

Publication number: NO170021B
Application number: NO874255A
Authority: NO
Inventors: Takashi Kamiya; Toshihiko Naito; Shigeto Negi; Yuuki Komatu; Yasunobu Kai; Takaharu Nakamura; Isao Sugiyama; Yoshimasa Machida; Seiichiro Nomoto; Kyosuke Kitoh; Kanemasa Katsu; Hiroshi Yamauchi
Original assignee: Eisai Co Ltd
Priority date: 1986-10-13
Filing date: 1987-10-12
Publication date: 1992-05-25
Also published as: CN87107610A; CN1020104C; FI874492A; DK531387D0; HU207088B; IL84128A0; EP0264091B1; IL84128A; DK174995B1; US5006649A; NO874255L; PT85906B; FI89169C; CA1290748C; NZ222116A; ES2039223T3; FI874492A0; FI89169B; US4921850A; US5089491A

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive 3-propenylcefemderivater.

Cefemderivater med ammoniogruppe er tidligere kjent fra japanske offentliggjorte patentsøknader 174 387/83,

198 490/83, 130 295/84, 172 493/84, 219 292/84, 97 983/85,

197 693/85, 5 084/86.

I særdeleshet er cefemderivater som har en ammoniopropenylgruppe i 3-stilling, lik forbindelsene ifølge oppfinnelsen, beskrevet i japansk ålment tilgjengelig patentsøknad 172 493/94 og 5 084/86.

Foreliggende oppfinnere har funnet at cefemderivater med en ammoniopropenylgruppe ved 3-stilling derav og en fluor-substituert lavere alkoxyiminogruppe eller en cyano-substituert lavere alkoxyiminogruppe i sidekjeden ved 7-stilling derav utviser glimrende antibakteriell aktivitet, og som har ført til fullførelsen av den foreliggende oppfinnelse.

Et mål med foreliggende oppfinnelse er derfor å til-veiebringer en fremgangsmåte for fremstilling av nye cefemfor-bindelser som er anvendbare som antibakterielle midler.

Foreliggende oppfinnelse angår fremstillingen av 3-propenylcefemderivater av formel I:

hvori Rx betegner en fluormethylgruppe, og A betegner en acyklisk ammoniumgruppe av formel: hvori R2, R3 og R4 er like eller forskjellige og betegner individuelt en gruppe valgt fra gruppen bestående av C1-C4-alkyl, hydroxyl-substituert C1-C4-alkyl, carbamoyl-substituert Cx-C4-alkyl, cyano-substituert C^-C^-alkyl, amino, (C^-C^j-alkyl)-carbonylamino-substituert C^-C^-alkyl, aminosulfonylamino-carbonyl-substituert C1-C4-alkyl, (C^-C^-alkyl)sulfonylamino-carbonyl-substituert C1-C4-alkyl, (C^-C^-alkyl)aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, hydroxyl- og carbamoyl-substituert C1-C4-alkyl, hydroxyl- og hydroxy(C^-C^-alkyl)aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, (C1-C4-alkyloxy )aminocarbonyl-substituert C^-Qj-alkyl, hydroxyaminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, carbamoyl( C^-Qj-alkyl )aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, hydroxy- (C1-C4-alkyl )aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, (^-^-alkyljamino-substituert C^-C^-alkyl, carboxylat(C^C^alkyl)di-(C^C4-alkyl)ammonio-substituert C^-C^-alkyl, (C1-C4-alkyl)amino- og hydroxyl-substituert C-t-Cj-alkyl, ureido, hydroxyl, carboxyl-substituert C^-C^-alkyl, C1-C4-alkyloxy-substituert C^-C^-alkyl, di-(C1-C4-alkyl )aminocarbonyl-substituert Cx-C4-alkyl, dicarbamoyl-substituert C^- C^-alkyl, bis [hydroxy (Cx-C4-alkyl)]-aminocarbonyl-substituert C1-C4-alkyl, dihydroxyl-substituert C^-C^-alkyl, trihydroxyl-substituert C^-C^-alkyl, bis [hydroxy- (C^-C^-alkyl)] amino-substituert C1-C4-alkyl, amino-substituert C1-C4-alkyl, oxo-substituert C1-C4-alkyl, di-C-L-C^-alkylaminosubstituert C^-C^-alkyl, 5-leddet heterocyklisk-substituert C^-C^-alkyl hvori angitte heterocyklus betegner pyrazolyl, imidazolyl, oxa-dizolyl eller tetrazolyl, eller hvor A betegner en cyklisk ammoniogruppe av én av følgende formler

hvori R5 betegner en gruppe valgt fra hydrogen, C^-C^-alkyl, carbamoyl-substituert C^-Qj-alkyl, amino-substituert C^-Qj-alkyl, hydroxyl-substituert C^-C^-alkyl, carboxyl-substituert C^-Qj-alkyl, cyano-substituert C1-C4-alkyl, dihydroxyl-substituert Cx-C4-alkyl og ureido-substituert C^-C^ alkyl-grupper,

R2' og R3' betegner en gruppe valgt fra hydrogen eller

hydroxylsubstituert C^-C^-alkyl;

R4' betegner en gruppe valgt fra hydrogen eller hydroxyl;

R6 betegner en gruppe valgt fra hydrogen, C^-C^-alkyl,

hydroxyl-substituert-Cj-^-alkyl, carboxyl-substituert-C1-C4-alkyl, carbamoyl, imino-substituert-Cj^-^-alkyl, formyl, sulfo, sulfonat-substituert-C^-C^-alkyl eller sulfamoyl;

R7 betegner en gruppe valgt fra hydroxyl, carbamoyl eller

sulfamoyl;

R8 og R9 betegner en gruppe valgt fra carbamoyl eller hydroxy

imino-substituert-C1-C4-alkyl;

R10 betegner en gruppe valgt fra hydrogen, hydroxyl, amino,

carbamoyl-substituert-C1-C4-alkyl, carboxyl-substituert-C^-Qj-alkyl eller sulfo;

RX1 betegner en gruppe valgt fra hydrogen, carboxyl, carbamoyl,

carboxyl-substituert-C^-C^-alkyl, carboxyl-C^-C^-alkyl-

thio, carboxyl-C^-C^-alkyl-oxy-C^-C^-alkyl, hydroxy-C^-C^-alkylaminocarbonyl, bisthydroxy-C^-C^-alkyl)aminocarbonyl

eller morfolin-4-yl-carbonyl,

R12 betegner en gruppe valgt fra hydrogen eller carbamoyl-substituert-Cj-Qj-alkyl.

Som ikke-toksiske salter av forbindelsene av formel (I) kan nevnes deres farmasøytisk akseptable salter for eksempel alkalimetallsalter slik som natriumsalter og kaliumsalter; ammoniumsalter; kvartære ammoniumsalter slik som tetraethyl-ammoniumsalter og betainsalter; jordalkalimetallsalter slik som calsiumsalter og magnesiumsalter; uorganiske syresalter slik som hydroklorider, hydrobromider, hydrojodider, sulfater, carbonater og bicarbonater; organiske carboxylater slik som acetater, maleater, lactater og tartrater; organiske sulfonater slik som methansulfonater, hydroxymethansulfonater, hydroxy-ethansulfonater, taurinsalter, benzensulfonater og toluen-sulfonater; aminosyresalter slik som argininsalter, lysinsalter, serinsalter, aspartater og glutamater; aminsalter slik som trimethylaminsalter, triethylaminsalter, pyridinsalter, procainsalter, picolinsalter, dicyclohexylaminsalter, N,N'-dibenzylethylendiaminsalter, N-methy1-glucaminsalter, diethanolaminsalter, triethanolaminsalter, tris(hydroxymethyl-amino) methansalter og fenethylbenzylaminsalter etc.

Hver av forbindelsene av formel (I), som omfattes av oppfinnelsen, har dets syn-isomer (Z) og anti-isomer (E) med hensyn til dets stereoskopiske konfigurasjon ved følgende gruppe:

•w/

Selv om begge isomerer er innbefattet ifølge oppfinnelsen er syn-isomerene foretrukne på grunn av deres antibakterielle aktiviteter.

Fremstillingen av forbindelsene er kjennetegnet ved at en forbindelse av formel II: hvori R1 har den ovenfor angitte betydning og X betegner et halogenatom, en forbindelse hvori angitte amino- og/eller carboxylgrupper er beskyttet med konvensjonelle beskyttende grupper, eller et salt derav omsettes med en forbindelse av formel III:

hvori A' betegner et amin tilsvarende A, en forbindelse hvori de funksjonelle grupper er beskyttet med konvensjonelle beskyttende grupper, eller et salt derav, etterfulgt av fjerning av de beskyttende grupper, og om ønsket, omdannelse av den ønskede forbindelse til dens tilsvarende farmasøytisk akseptable salt, på kjent måte.

Som halogenatomer representert ved X i den ovenfor angitte formel (II) kan nevnes jodatom, bromatom og kloratom.

Den ovenfor angitte reaksjon kan utføres ved en reaksjonstemperatur på -10° - 60° C, fortrinnvis 0 - 40° C. Som reaksjonsløsningsmiddel anvendes fortrinnsvis et vannfritt organisk løsningsmiddel. Som anvendbare organiske løsnings-midler kan nevnes lavere alkylnitriler slik som acetonitril og propionitril, halogenerte lavere alkaner slik som klormethan, diklormethan og kloroform, ethere slik som tetrahydrofurån, dioxan og ethylether, amider slik som dimethylformamid, estere slik som ethylacetat, ketoner slik som aceton, hydrocarboner slik som benzen, alkoholer.slik som methanol og ethanol og sulfoxyder slik som dimethylsulfoxyd, såvel som blandede løs-ningsmidler derav.

Fjerning av de beskyttende grupper kan utføres etter

1 og for seg kjente metoder innen faget i henhold til type av den beskyttende gruppe, slik som hydrolyse eller reduksjon.

Som saltene av forbindelsene for formel (II) og (III) og de beskyttende grupper for forbindelsene, kan de også anvendes rutinemessig og anvendes så lenge de ikke svekker den ovenfor angitte reaksjon.

Eksempler på beskyttende grupper for aminogruppen kan innbefatte . formylgruppen, acetylgruppen, kloracetylgruppen, dikloracetylgruppen, fenylacetylgruppen, thienylacetylgruppen, t-butoxycarbonylgruppen, benzyloxycarbonylgruppen,

tritylgruppen, p-methoxybenzylgruppen, difenylmethylgruppen, benzylidengruppen, p-nitrobenzyliden-gruppen og m-klorbenzylidengruppen. Som eksempler på beskyttende grupper for carboxylgruppen kan nevnes p-methoxybenzylgruppen, p-nitrobenzylgruppen, t-butylgruppen, methylgruppen, 2 ,2, 2-triklor-:ethylgruppen, difenylmethylgruppen og pivaloyl-oxymethylgruppen. Anvendelse av et silyleringsmiddel slik som N,0-bis(trimethylsilyl)acetamid, N-methyl-N-(trimethyl-silyl)acetamid, N-methyl-N-(trimethylsilyl)trifluoracetamid eller N-(trimethylsilyl)acetamid er her hensiktsmessig fordi et slikt silyleringsmiddel kan beskytte både amino- og carboxylgrupper samtidig.

Som salter av forbindelsene av formel (II) og (III) kan egnet valg foretas fra deres salter slik som alkalimetallsalter slik som natriumsalter og kaliumsalter, jordalkalimetallsalter slik som calsiumsalter og magnesiumsalter, ammoniumsalter, kvartære ammoniumsalter slik som triethylammoniumsalter og betainsalter, uorganiske syresalter slik som hydroklorider; hydrobromider, sulfater, carbonater, hydrojodider og bicarbonater, organiske carboxylater slik som acetater, trifluor-acetater, maleater, lactater og tartrater, organiske sulfonater slik som methansulfonater, hydroxymethansulfonater, hydroxy-ethansulfonater, taurinsalter, benzensulfonater og toluen-sulfonater, aminsalter slik som trimethylaminsalter, triethylaminsalter, pyridinsalter, procainsalter, picolinsalter, dicyclohexylaminsalter, N,N'-dibenzylethylendiaminsalter, N-methylglucaminsalter, diethanolaminsalter, triethanolaminsalter, tris(hydroxymethylamino)methansalter og fenethylbenzylaminsalter, aminosyresalter slik som argininsalter, aspartater, lysinsalter, glutamater, serinsalter og glycinsalter.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen utviser sterk anti-bakteriell aktivitet overfor både grampositive og gramnegative bakterier og er således anvendbare som antibakterielle midler. Forbindelsene anvendes for behandling av sykdommer fremkalt av bakterier.

Når forbindelsene ifølge oppfinnelsen anvendes som injeksjonspreparater kan de generelt administreres i en daglig dose på 100 mg - 10 g i 1 - 4 porsjoner, enten intravenøst eller intramuskulært. Dosen kan økes eller reduseres avhengig av alder og sykdomstilstand.

En forbindelse av den ovenfor angitte formel (II), dvs. et mellomprodukt, en forbindelse hvori amino- og/eller carboxylgruppene er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller salter av disse forbindelser er alle nye forbindelser. Disse forbindelser kan fremstilles ved følgende fremgangsmåte.

Forbindelsene kan således fremstilles ved omsetning av en forbindelse av formel:

hvori R1 har den ovenfor angitte betydning, et reaktivt syrederivat derav, en forbindelse hvori en aminogruppe er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt av forbindelsen, med en forbindelse av formel: hvori X har den ovenfor angitte betydning, en forbindelse hvori en carboxylgruppe er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt derav, etterfulgt eventuelt av fjerning av den beskyttende gruppe og/eller omdannelse av et halogenatom representert ved symbolet X til det annet halogenatom. Den ovenfor angitte reaksjon kan utføres i henhold til konvensjonelle reaksjonsbetingelser ved en N-acylering. Eksempelvis kan reaksjonen utføres ved en temperatur på fra -50 til 50° C i et inert løsningsmiddel slik som for eksempel tetrahydrofuran, ethylacetat, aceton, N,N-dimethylformamid, acetonitril, dioxan eller et blandet løsningsmiddel derav.

Som reaktivt syrederivat av forbindelsen av formel (IV) kan nevnes et syrehalogenid slik som syreklorid, syre-bromid etc, symmetrisk syreanhydrid, et blandet syreanhydrid, en aktiv ester, ■et aktivt syreamid og lignende.

Når en fri carboxylsyre av formel (IV) eller et salt derav anvendes i reaksjonen, foretrekkes det å utføre reaksjoner i nærvær av et konvensjonelt kondenseringsmiddel slik som N,N'-dicyclohexylcarbodiimid, p-toluensulfonsyre og lignende.

Omdannelsen av et halogen representert ved X i et annet halogenatom utføres på konvensjonell måte. Eksempelvis kan det fremstilles en forbindelse av formel (II) hvori X' betegner et jodatom når en forbindelse av formel (II) hvori X betegner et kloratom omsettes med et alkalimetalljodid.

Mellomproduktene av den nedenfor angitte formel (VI) er også nye forbindelser, slik som forbindelsene av formelen:

hvori R13betegner en carboxylgruppe, en halogencarbonylgruppe, en carbamoylgruppe eller en cyanogruppe, en forbindelse hvori amino- og/eller carboxylgruppene er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt derav.

Eksempler på beskyttende grupper for aminogruppen

og carboxylgruppen kan innbefatte en lignende gruppe som eksemp-lifisert for forbindelsen av formel (II).

De ovenfor angitte forbindelser kan fremstilles ved etterfølgende eksempelvise fremgangsmåte.

Forbindelsen av formel (VIII) kan fremstilles Ved omsetning av en forbindelse av formel (VII) med et halogenfluormethan i et inert løsningsmiddel.

Som halogenfluormethan kan eksempelvis nevnes bromfluormethan, jodfluormethan og lignende.

Reaksjonen utføres ved en temperatur varierende fra -30 til 100° C.

Forbindelsen av formel (IX) kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse av formel (VIII) med et dehydratiseringsmiddel i et inert løsningsmiddel. Som reaksjonstemperatur er det fordelaktig å anvende romtemperatur eller høyere. Et dehydratiseringsmiddel kan innbefatte oxyfosforklorid, thionylklorid etc.

Forbindelsen av formel (X) kan fremstilles ved omsetning av forbindelsen av formel (IX) med ammoniakk og/eller ammoniumsalt i et inert løsningsmiddel slik som vann, en lavere alkohol, aceton, kloroform etc. Egnet reaksjonstemperatur kan variere fra -20° C til romtemperatur. Ammoniumsaltene kan innbefatte ammoniumklorid, ammoniumacetat, ammoniumsulfat og lignende.

Forbindelsene av formel (XI) kan fremstilles ved omsetning av forbindelsen av formel (X) med et halogenerings-middel slik som gassformig brom, gassformig klor etc. for å bevirke halogenering, etterfulgt av omsetning med et alkalimetallthiocyanat, fortrinnsvis i nærvær av en base. Egnet reaksjonstemperatur kan variere fra -20° C til romtemperatur. Som alkalimetallthiocyanat kan anvendes kaliumthiocyanat, natriumthiocyanat og lignende.

En forbindelse av formel (XII), en forbindelse hvori aminogruppen er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt derav, kan fremstilles ved hydrolyse av en forbindelse av formel (XI), en forbindelse hvori aminogruppen er beskyttet med en beskyttende gruppe eller et salt derav, i nærvær av et oxydasjonsmiddel og en base, etterfulgt eventuelt av fjerning av den beskyttende gruppe.

Reaksjonen kan utføres ved en reaksjonstemperatur på fra 0 til 70° C i vann, en bufferløsning eller et blandet løs-ningsmiddel av førstnevnte med en lavere alkohol.

Som oxydasjonsmiddel kan anvendes hydrogenperoxyd, oxygen etc. og som base natriumhydroxyd, kaliumhydroxyd etc.

Forbindelsen av formel (XIII), en forbindelse hvori aminogruppen er beskyttet med en beskyttende gruppe eller et salt derav, kan fremstilles ved hydrolyse av en forbindelse av formel (XII), en forbindelse hvori aminogruppen er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt derav, i nærvær av en base, etterfulgt eventuelt ved fjerning av den beskyttende gruppe.

Typene av base, løsningsmidler, reaksjonstemperaturer etc. kan være de samme som de som er beskrevet i reaksjons-sekvensen fra forbindelsen av formel (XI) til den av formel

(XII) .

Ennvidere kan en forbindelse av formel (XIII), en forbindelse hvori aminogruppen er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt derav, også fremstilles ved omsetning av en forbindelse av formel (XIV) hvori amino- og/eller carboxylgruppene er beskyttet med en beskyttende gruppe, med et halogenfluormethan, etterfulgt av eventuell fjerning av den beskyttende gruppe.

Halogenfluormethanet kan innbefatte bromfluormethan, jodfluormethan, klorfluormethan.

Reaksjonen kan utføres i et inert løsningsmiddel ved en temperatur varierende fra -3 0 til 100° C.

Eksempler på det anvendte inerte løsningsmiddel kan innbefatte sulfoxyder slik som dimethylsulfoxyd etc, amider slik som N,N-dimethylacetamid, formamid, hexamethylfosforyl-triamid, etc, ketoner slik som aceton eller et blandet løsnings-middel derav.

En forbindelse av formel (XV), en forbindelse hvori aminogruppene er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt derav, kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse av formel (XIII), en forbindelse hvori aminogruppen er beskyttet med en beskyttende gruppe, eller et salt derav, med et haloge-neringsmiddel.

Eksempler på halogeneringsmidlet kan innbefatte fosforpentoxyd, thionylklorid, thionylbromid, oxyfosforklorid og lignende.

Den ovenfor angitte reaksjon kan utføres i et inert løsningsmiddel slik som for eksempel diklormethan, tetrahydrofuran, ethylacetat, kloroform eller et blandet løsningsmiddel derav ved en temperatur på -50 til 50° C.

Oppfinnelsen beskrives nærmere i detalj i de etter-følgende forsøk og eksempler.

Forsøk 1 (Syntese av utgangsforbindelsen)

Ethyl-2-(5-tritylamino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoxyiminoacetat

60,4 g ethyl-2-(5-tritylamino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-hydroxyiminoacetat ble oppløst i 210 ml dimethylsulfoxyd hvorpå 96,48 g kaliumcarbonat ble tilsatt under isavkjøling. Løsningen ble omrørt i 10 minutter. 19 g bromfluormethan ble deretter tilsatt, og løsningen ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur. 1 liter ethylacetat ble tilsatt til reaksjons-løsningen og løsningen ble vasket med vann og deretter med mettet saltvann, etterfulgt av tørking under tilsetning av vannfritt magnesiumsulfat. Løsningen ble destillert fra og 120 ml ethanol ble tilsatt til residuet. De utfelte krystaller ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethanol under dannelse av 58,2 g produkt. Forsøk 2 (Syntese av utgangsforbindelsen) 2-(5-tritylamino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoximino-eddiksyre

I en blandet løsning inneholdende 2,04 g natriumhydroxyd, 146 ml ethanol og 29 ml vann ble tilsatt 17,87 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 1, og løsningen ble omrørt i 20 minutter under tilbakeløpskjøling. Etter at løsningen var konsentrert under redusert trykk ble 20 0 ml ethylacetat og 77 ml IN saltsyre tilsatt. Ethylacetatlaget ble fraskilt og oppsamlet og vasket med mettet saltvann, etterfulgt av tørking ved tilsetning av vannfritt magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble destillert fra under dannelse av krystaller. Krystallene ble knust ved tilsetning av petroleumether og ble deretter fjernet ved filtrering under dannelse av 16,55 g produkt.

Forsøk 3 (Syntese av utgangsforbindelsen)

p-methoxybenzyl-7|3- [ 2- (5-tritylamino-l, 2 , 4-thiadia-zol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoxyiminoacetamido]-3-[(Z)-3-klor-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

348 ul dimethylformamid og 4,1 ml tetrahydrofuran ble avkjølt til -10° C, og 418 ul fosforoxyklorid ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 90 minutter under isavkjøling. Til denne løsning ble tilsatt en løsning av 1,73 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 2 i 5,5 ml tetrahydrofuran under avkjøling til -10° C, og den resulterende løsning ble omrørt i 90 minutter under isavkjøling. Reaksjonsløsningen ble avkjølt til

-20° C, og en blandet løsning inneholdende 1,78 g p-methoxy-benzyl-7(5-amino-3-[ (Z) -3-klor-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-car-boxylathydroklorid, 2,95 g N-(trimethylsilyl)acetamid, 18 ml ethylacetat og 5,5 ml tetrahydrofuran ble tilsatt, og den

resulterende løsning ble omrørt i 1 time ved -10° C. Tir reaksjonsløsningen ble tilsatt 100 ml ethylacetat, og den resulterende løsning ble vasket suksessivt med vann, mettet vandig natriumhydrogencarbonat og mettet saltvann, etterfulgt av tørking under tilsetning av vannfritt magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble destillert fra og residuet ble renset ved silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 2,65 g produkt.

Forsøk 4 (Syntese av utgangsforbindelsen)

p-methoxybenzyl-7|3-[ 2- (5-tritylamino-l, 2 , 4-thiadia-zol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-jod-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

10,11 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 3 ble oppløst i 212 ml aceton og 9,03 g natriumjodid ble tilsatt under isavkjøling. Den resulterende løsning ble omrørt i 15 minutter under isavkjøling og i ytterligere 90 minutter ved romtemperatur. Løsningsmidlet ble destillert fra og residuet ble ekstrahert med 50 0 ml ethylacetat. Ekstraktet ble vasket med mettet vandig natriumthiosulfatløsning og med mettet saltvann, etterfulgt av tørking under tilsetning av vannfritt magnesiumsulfat. Det tørkede ekstrakt ble konsentrert under redusert trykk og n-hexan ble tilsatt. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 10,92 g produkt. Forsøk 5 (Syntese av utgangsforbindelsen) p-methoxybenzyl-7(3-[ 2- (5-tritylamino-l, 2 , 4-thiadia-zol-3-yl)-(Z)-difluormethoxyiminoacetamido]-3-[(Z)-3-klor-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

På samme måte som beskrevet i forsøk 3 ble 2,00 g 2-(5-tritylamino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-difluormethoxy-iminoeddiksyre omsatt med 1,795 g p-methoxybenzyl-7p-amino-3-[(Z)-3-klor-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat-hydroklorid under dannelse av 3,17 g produkt.

Forsøk 6 (Syntese av utgangsforbindelsen)

p-methoxybenzyl-7(3-[ 2- (5-tritylamino-l, 2 , 4-thiadia-zol-3-yl)-(Z)-2-difluormethoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-jod-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

På samme måte som beskrevet i forsøk 4 ble 3,00 g

av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 omsatt med 2,62 g natriumjodid under dannelse av 2,92 g produkt,

Eksempel 1

7|3-[2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido ]-3-[(E)-3-(carbamoylmethyl-ethylmethylammonio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

550 mg av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i en blandet løsning inneholdende 20 ml ethylacetat og 10 ml ethylether, hvorpå 117 mg ethylmethylaminoacetamid ble tilsatt. Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer og 30 minutter. Isopropylether ble tilsatt til re-aks jonsløsningen, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 400 mg gulbrunt pulver.

Pulveret ble omrørt i en blandet løsning av 4,5 ml trifluoreddiksyre - 4 ml anisol i 1 time under isavkjøling og ethylether ble tilsatt. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Bunnfallet ble suspendert i 5 ml vann. Suspensjonen ble justert til pH 5,5 - 6,5 med natriumacetat. Uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fasekromatogtafi under dannelse av 49 g produkt.

Eksempel 2

7(3-[2- (5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido] -3-[(E)-3[1-(2-hydroxyethyl)-4-carbamoyl-l-piperidinio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

700 mg av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i 3 ml dimethylformamid, og en løsning av 194 mg l-(2-hydroxyethyl)isonipecotamid i 0,5 ml dimethylformamid ble tilsatt. Løsningen ble omrørt over natten. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til 120 ml ethylether og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 680 mg gult pulver.

Til dette pulver ble tilsatt 4,5 ml anisol og 5,3 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter under omrøring og under isavkjøling. Etter at den dråpevise tilsetning var fullført ble blandingen omrørt i ytterligere 1 time og 30 minutter. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 50 ml isopropylether og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert i 30 ml vann og suspensjonen ble justert til 7,0 med natriumacetat. Det resulterende uløselige materiale ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av følgende to typer av isomerer av forbindelsen:

Eksempel 3

7|3- [ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(ls-carbamoylethyl)-dimethylammonio]-1-propen-1-y1]-3-cefem-4-carboxylat

(3-1)

7(3-[ 2- (5-amino-l, 2 ,4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[ (E)-3-[ (l.R-carbamoylethyl) - dimethylammonio]-1-propen-l-yl3-3-cefem-4-carboxylat

(3-2)

600 mg av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble oppløst i en blandet løsning inneholdende 2 0 ml ethylacetat og 10 ml ethylether, hvorpå 150 mg 2-dimethylaminopropylamid ble

tilsatt. Den resulterende løsning ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Isopropylether ble tilsatt til reaksjonsløsningen og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering, etterfulgt av tørking under dannelse av 50 mg gulbrunt pulver.

Dette pulver ble omrørt i en blandet løsning inneholdende 5,5 ml trifluoreddiksyre og 5 ml anisol i 1 time under isavkjøling, hvoretter ethylether ble tilsatt. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Bunnfallet ble suspendert i 5 ml vann og suspensjonen ble justert til pH 5,5 - 6,5 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av produktene på 8 mg av (3-1), 7 mg av (3-2), og 4 mg av blandingen (1:1) av (3-1) og (3-2).

Eksempel 4

70-[2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(2-hydroxypropyl)-dimethylammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

550 mg av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i en blandet løsning inneholdende 20 ml ethylacetat og 10 ml ethylether hvorved 0,124 ml 3-dimethylamino-2-propanol ble tilsatt. Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og 30 minutter. Isopropanol ble tilsatt til reak-sjonsløsningen. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 530 mg gulbrunt pulver.

Dette pulver ble omrørt i en blandet løsning inneholdende 5,5 ml trifluoreddiksyre og 5 ml anisol i 1 time under isavkjøling. Ethylether ble deretter tilsatt. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Bunnfallet ble suspendert i 5 ml vann. Suspensjonen ble justert til pH 5,5 - 6,5 med natriumacetat. Uløselige bestånddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av 70 mg produkt.

Eksempel 5

7|3-[2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(lR-carbamoyl-2-hydroxyethyl)dimethylammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

1,00 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i 2 ml dimethylformamid. En løsning av N,N-dimethyl-D-serinamid ble fremstilt ved oppløsning av 590 mg N,N-dimethyl-D-serinamidotrifluoracetat i 5 ml methanol hvorpå 2,4 ml IN vandig natriumhydroxydløsning ble tilsatt, etterfulgt av avdestillering av løsningsmidlet under redusert trykk, og ekstrahering av residuet med 2 ml acetonitril. N,N-dimethyl-D-serinamid-løsningen ble tilsatt til løsningen av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 i dimethylformamid under isavkjøling. Den resulterende løsning ble omrørt i 30 minutter. Reaksjonsløs-ningen ble tilsatt til ethylether og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 1,1 g gult pulver.

Til dette pulver ble tilsatt 8 ml anisol og 9 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt i løpet av 3 0 minutter under omrøring og under isavkjøling, etterfulgt av omrøring i ytterligere 1 time og 30 minutter. Ethylether ble tilsatt til reaksjonsløsningen, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert i 10 ml vann. Suspensjonen ble deretter justert til pH 7 med natriumacetat.

De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av 30 mg produkt.

Eksempel 6

7(3 — E 2— (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(4R-hydroxy-2R-hydroxymethyl-l-methyl-l-pyrrolidinio)-1-propen-l-yl ] -3-cef em- 4-carboxylat

700 mg av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i 4 ml aceton og en løsning av 89 mg N-methyl-cis-4-hydroxy-D-prolinol i 2 ml aceton ble tilsatt. Den resulterende løsning ble omrørt over natten. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til 100 ml ethylether og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 700 mg gult pulver.

Til dette pulver ble tilsatt 4,5 ml anisol og 5,3 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter under omrøring og under isavkjøling, og blandingen ble omrørt i ytterligere 1 time og 30 minutter. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 50 ml isopropylether. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert i 30 ml vann og suspensjonen ble justert til pH 7 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av de følgende to typer av isomerer (vedrørende et nitrogenatom av pyrrolidin):

Eksempel 7 7|3-[2- (5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(4R-hydroxy-l-(2-hydroxyethyl)-2S-hydroxymethyl-l-pyrrolidinio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

2,0 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble tilsatt til en løsning inneholdende 450 mg (R)-4-hydroxy-l-(2-hydroxyethyl)-(S)-2-hydroxymethylpyrrolidin i 5 ml dimethylformamid. Den resulterende løsning ble omrørt over natten. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til ethylacetat. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 1,65 g gult pulver.

Til pulveret ble tilsatt 10 ml anisol hvorpå 11,7 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter under omrøring og under isavkjøling, og ble ytterligere omrørt i 1 time og 30 minutter. Isopropylether ble tilsatt til reak-sjonsløsningen, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert i 4,5 ml vann og suspensjonen ble justert til pH 7 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av to typer av isomerer (i forhold til nitrogenatomet av pyrrolidin) av forbindelsen som følger:

Eksempel 8 7|3-[2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3— (4R-hydroxy-2S-hydroxymethyl-l-methyl-l-pyrrolidinio)-1-propen-l-yl] -3-cef em-4-carboxylat

700 mg av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i 4 ml aceton, og en løsning av 89 mg N-methyl-trans-4-hydroxy-L-prolinol i 2 ml aceton ble tilsatt, og den resulterende løsning ble omrørt over natten. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til 100 ml ethylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 700 mg gult pulver.

Til pulveret ble tilsatt 4,5 ml anisol, og 5,3 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt under omrøring og under isavkjøling i løpet av 30 minutter, hvorpå blandingen ble omrørt i ytterligere 1 time og 30 minutter. Til reaksjons-løsningen ble tilsatt 50 ml isopropylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble deretter suspendert i 30 ml vann. Suspensjonen ble justert til pH 7 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av 92 mg tittel-forbindelse.

Eksempel 9

7|3-[ 2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1-carbamoylmethyl-3-hydroxy-l-pyrrolidinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

1,0 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i 4 ml dimethylformamid, og en løsning av 186 mg N-carbamoylmethyl-3-hydroxypyrrolidin i 2 ml dimethylformamid ble tilsatt. Den resulterende løsning ble omrørt over natten. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til 200 ml ethylether. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 970 mg gult pulver.

Til pulveret ble tilsatt 9,0 ml anisol hvorpå

10,6 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter under omrøring og under isavkjøling. Blandingen ble ytterligere omrørt i 1 time og 30 minutter. Til reaksjonsløs-ningen ble tilsatt 80 ml isopropylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert i 50 ml vann. Suspensjonen ble justert til pH 7 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble renset ved omvendt

fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av de respektive typer av isomerer (i forhold til et nitrogenatom, og et carbonatom i 3-stilling av pyrrolidinet, idet det ble utført fire typer av høytrykks-væskekromatografi) av tittelforbindel-sen som følger:

Eksempel 10 73-[2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl) - (Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(l-methyl-4-sulfo-l-piperazinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

2,0 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble tilsatt til en blandet løsning inneholdende 718 mg 4-methylpipera-zinosulfonsyresulfat, 2 ml N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluor-acetamid og 6 ml dimethylformamid, og den resulterende løsning ble omrørt over natten. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 2 ml methanol, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble tilsatt til en blandet løsning inneholdende 50 ml ethylacetat og 50 ml ethylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 1,79 g gult pulver.

Til dette pulver ble tilsatt 10,9 ml anisol og 12,7 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter under omrøring og under isavkjøling. Den resulterende løs-ning ble ytterligere omrørt i 1 time og 30 minutter. Til reak-sjonsløsningen ble tilsatt 100 ml isopropylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert i 4,5 ml vann og suspensjonen ble justert til pH 7 med natriumacetat. Uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av 50 mg av tittelproduktet.

Eksempel 11

7(3-[2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1-carbamoylmethyl-4-hydroxy-l-piperidinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

1,0 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble opp-løst i 9 ml aceton og 206 mg N-carbamoylmethyl-4-hydroxy-piperidin ble tilsatt. Løsningen ble omrørt over natten. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til 100 ml av en blandet løsning inneholdende ethylether og isopropylether (2:1), og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 1,0 g av et gult pulver.

Til dette pulver ble tilsatt 9,0 ml anisol, og 10,6 ml trifluoreddiksyre ble dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter under omrøring og under isavkjøling, og den resulterende løsning ble ytterligere omrørt i 1 time og 30 minutter. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 80 ml isopropylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert i 5 ml vann og suspensjonen ble justert til pH 7,0 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av 166 mg produkt.

Eksempel 12

7(3— C 2— (5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl).- (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(5-aza-l-methyl-2,8 dioxabicyclot 3.3.1]-nona-5-io)-1-propen-l-yl}-3-cefem-4-carboxylat

Forbindelsen fremstilt i forsøk 4 ble oppløst i 10 ml dimethylformamid, 800 mg 5-aza-l-methyl-2,8-dioxabicyclr<r>3,3,1]-nonan ble tilsatt ved romtemperatur. Den resulterende løsning ble omrørt i 2 0 minutter. Reaksjonsløsningen ble fortynnet med 25 ml ethylacetat, og løsningen ble tilsatt til ethylether under dannelse av 3,85 g brunt bunnfall.

Bunnfallet ble oppløst i 23 ml anisol og 26 ml trifluoreddiksyre ble tilsatt under isavkjøling. Løsningen ble omrørt i 30 minutter ved samme temperatur. Ethylether ble tilsatt til reaksjonsløsningen, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble suspendert med 40 ml vann og suspensjonen ble justert til pH 7,0 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekromatografi under dannelse av 408 mg produkt.

På samme måte som beskrevet i eksempel 1-12 ble følgende forbindelser i eksempel 13 - 113 fremstilt:

Flere isomerer kan dannes på grunn av delen av ammonio-gruppen på A. Når disse isomerer ble separert er de respektive utbytter vist for de respektive isomerer individuelt.

Følgende forkortelser er blitt anvendt:

Boe: t-butoxy-carbonylgruppe

tBu: t-butylgruppe

Bh: benzhydrylgruppe

Tr: tritylgruppe

Eksempel 114 7p-[2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-difluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(dimethylcarbamoyl-methylammonio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

500 mg av forbindelsen fra Forsøk 6 ble oppløst i en blandet løsning av 10 ml ethylacetat og 10 ml ethylether. Til løsningen ble tilsatt 160 mg dimethylglycinamid, etterfulgt av omrøring i 30 minutter ved romtemperatur. Til reaksjonsløsnin-gen ble tilsatt isopropylether. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble tørket under dannelse av 400 mg av et gulbrunt pulver.

Dette pulver ble omrørt inder isavkjøling i en blandet løsning av 5 ml trifluoreddiksyre og 4,5 ml anisol i 1 time. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt ethylether, og det resulterende bunnfall ble gjenvunnet ved filtrering, etterfulgt av vasking med ethylether. Dette bunnfall ble suspendert i 5 ml vann, etterfulgt av justering av pH til 5,5 - 6,5 med natriumacetat. De uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering og filtratet ble renset ved omvendt fasesilicagelkolonnekroma-tograf i under dannelse av 55 mg produkt.

På samme måte som beskrevet i eksempel 114 ble forbindelsene ifølge de etterfølgende eksempler 115 - 117 fremstilt.

Forsøk 7 (Syntese av utgangsforbindelse) p-methoxybenzyl-7|3- [ 2- (5-tritylamino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) (Z) -2- (2,2/ 2)-tr i f luorethyl) oxyiminoacetamido ] - 3—.[(Z)-3-klor-l-propen-l-yl]3-cefem-4-carboxylat

En blandet løsning omfattende 0,247 ml dimethylformamid og 3 ml tetrahydrofuran ble avkjølt til -10° C, og 0,297 ml fosforoxyklorid ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 40 minutter under isavkjøling. Til den resulterende løsning ble tilsatt 4 ml av en tetrahydrofuranløsning av 1,36 g 2-(5-tritylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-(2,2,2-trifluorethyl)oxyiminoeddik-syre, etterfulgt av omrøring i ytterligere 1 time ved samme temperatur. Den resulterende reaksjonsløsning ble tilsatt til en blandet løsning av 1,145 g p-methoxybenzyl-7|3-amino-3-[ (Z)-3-klor-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat-hydroklorid <p>g 2,09 g N-(trimethylsilyl)acetamid og 10 ml ethylacetat under avkjøling til -20° C, etterfulgt av økning av temperaturen opp til 0° C under omrøring og i løpet av 1 time. Etter at ethylacetat var tilsatt til reaksjonsløsningen ble denne vasket med vann og tørket med vannfritt natriumsulfat. Løsningsmidlet ble fordampet og residuet ble renset ved silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 1,43 g av det ønskede produkt.

Eksempel 118

7(3-[ 2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(carbamoylmethyl-dimethylammonio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat:

500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble oppløst i en blanding omfattende 3 ml methanol og 1 ml dimethylformamid, og 71,3 mg N,N-dimethylglycinamid ble tilsatt under isavkjøling, og blandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur. Den resulterende reaksjonsløsning ble tilsatt til en blandet løs-ning omfattende 50 ml ethylacetat og 50 ml ethylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 382 mg gult pulver.

Denne forbindelse ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 2,7 ml trifluoreddiksyre og 2,3 ml anisol, etterfulgt av omrøring i 2 timer under isavkjøling. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 25 ml ethylether og 25 ml isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Det således erholdte bunnfall ble suspendert i 4,5 ml vann, etterfulgt av justering av pH på den resulterende suspensjon til 5,5 - 6,5 med natriumacetat, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 94 g av ønsket produkt.

Eksempel 119

7[J-[ 2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(l-methyl-4-sulfamoyl-1-piperazinio)-1-propen-l-yl3-3-cefem-4-carboxylat:

500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble oppløst i en blandet løsning omfattende 3 ml methanol og 1 ml dimethylformamid, og 116 mg N-sulfamoyl-N<1->methylpiperazin ble tilsatt under isavkjøling, hvorpå blandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur.

Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 50 ml ethylacetat og 50 ml ethylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 402 mg av et gult pulver.

Forbindelsen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 2,8 ml trifluoreddiksyre og 2,5 ml anisol, og ble omrørt i 2 timer under isavkjøling. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 25 ml ethylether og 25 ml isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Det resulterende bunnfall ble suspendert i 4,5 ml vann, etterfulgt av justering av pH av den resulterende suspensjon til 5,5 til 6,5 med natriumacetat, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 58 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 120

7(3-[2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(1,3,4-oxadiazol-2-yl)methyldimethylammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat:

500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble oppløst i en blandet løsning omfattende 1 ml methanol og 4,8 ml ethylacetat, og 1 ml av en ethylacetatløsning av 88,8 mg 2-dimethyl-aminomethyl-1,3,4-oxadiazol ble tilsatt under isavkjøling, og ble deretter omrørt over natten ved romtemperatur. Den resulterende reaksjonsløsning ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 50 ml ethylacetat og 50 ml ethylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 443 mg gult pulver.

Forbindelsen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 3,1 ml trifluoreddiksyre og 2,7 ml anisol, og ble omrørt i 2 timer under isavkjøling. Den resulterende reaksjonsløsning ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 25 ml ethylether og 25 ml isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Det således erholdte bunnfall ble suspendert i 4,5 ml vann, etterfulgt av justering av pH på den resulterende suspensjon til området fra 5,5 til 6,5 med natriumacetat, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 92 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 121

73-[2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(l-methyl-4-carbamoyl-l-piperazinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat:

500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble oppløst i en blandet løsning omfattende 3 ml methanol og 1 ml dimethylformamid, og 100 mg N-methyl-N<1->carbamoylpiperazin ble tilsatt under isavkjøling, og blandingen ble deretter omrørt over natten ved romtemperatur. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 50 ml ethylacetat og 30 ml ethylether, og det dannede bunfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 425 mg av et gult pulver.

Forbindelsen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 3,0 ml trifluoreddiksyre og 2,6 ml anisol, og ble omrørt i 2 timer under isavkjøling. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 25 ml ethylether og 25 ml isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Bunnfallet ble suspendert i 4,5 ml vann, etterfulgt av justering av pH på den resulterende suspensjon til et område fra 5,5 til 6,5 med natriumacetat, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 107 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 122

73-E2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1,2-dimethyl-l-pyrazolidinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat (Isomerer: A og B):

783 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble oppløst i en blandet løsning omfattende 1,5 ml methanol og 7,1 ml ethylacetat, og 1,5 ml av en ethylacetatløsning av 103 mg N,N'-dimethylpyrazolidin ble tilsatt under isavkjøling, og ble deretter omrørt over natten ved romtemperatur. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 50 ml ethylacetat og 50 ml ethylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 631 mg av et gult pulver. Forbindelsen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 4,5 ml trifluoreddiksyre og 3,8 ml anisol, og ble omrørt i 2 timer under isavkjøling. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 25 ml ethylether og 25 ml isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Bunnfallet ble suspendert i 4,5 ml vann, etterfulgt av justering av pH på den resulterende suspensjon til et område på fra 5,5 til 6,5 med natriumacetat, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagélkolonnekromato-grafi under dannelse av 37 mg av den ønskede isomer A og 27 mg av isomer B. Eksempel 123 7|3-[2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(l-methyl-4-formimi-doyl-l-piperazinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat-hydroklorid:

750 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble oppløst i en blandet løsning omfattende 4,5 ml methanol og 1,5 ml dimethylformamid, og 158 mg N-methyl-N<1->formimidoylpiperazin-hydroklorid ble tilsatt under isavkjøling og ble deretter omrørt over natten ved romtemperatur. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 50 ml ethylacetat og 30 ml ethylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og tørket under dannelse av 485 mg gult pulver.

Forbindelsen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 3,4 ml trifluoreddiksyre og 3,0 ml anisol, og ble omrørt i 2 timer under isavkjøling. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 25 ml ethylether og 25 ml isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Bunnfallet ble suspendert i 4,5 ml vann, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 58 mg ønsket produkt.

På samme måte som beskrevet i eksempel 118 - 123 ble forbindelsene i de etterfølgende eksempler 124 - 140 fremstilt.

Eksempel 124

7|3-[ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1-methyl-l-pipera-zinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat:

750 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 116 \ il N-methylpiperazin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe, under dannelse av 16 mg ønsket produkt. Eksempel 125 7(3-[ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(4-carboxypyridinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 750 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 198 mg isonicotinsyre, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe, under dannelse av 143 mg av det ønskede produkt. Eksempel 12 6 7(3-[ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1-methylpyrrolidi-nio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 55,8 pl N-methylpyrrolidin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe, under dannelse av 21 mg av det ønskede produkt. Eksempel 127 7|3- [2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 131 mg 4-carbamoylpyridin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe, under dannelse av 42 mg av det ønskede produkt. Eksempel 128 7(3-[2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(trimethylammonio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat:

500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med trimethylamin (hvorpå 57 mg trimethylaminhydroklorid, som nøytralisert, ble anvendt), etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe, under dannelse av 79 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 129

7(3-[2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1,4-diazabicyclo-[2,2,2]octan-l-io)wl-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat:

500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 72 mg 1,4-diazabicyclo[2,2,2]octan, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe, under dannelse av 61 mg av det ønskede produkt. Eksempel 130 7(3-[ 2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl).- (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1,5-diazabicyclo-[3,3, 0 ] -K3ctan-l-io) -1-propen-l-yl] -3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 120 mg 1,5-diazabicyclo[3,3,0]octan, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppen under dannelse av 32 mg av det ønskede produkt. Eksempel 131 7(3-[2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl)- (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(4-methyl-thio-morfolin-1,l-dioxyd-4-io)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 250 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 52 mg 4-methylthiomorfolin-1,1-dioxyd, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 17 mg av det ønskede produkt. Eksempel 132 7(3-[2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1,4-dimethyl-l-piperazinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 94 ul 1,4-dimethylpiperazin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 35 mg av det ønskede produkt. Eksempel 133 7(3-[ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl).- (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(2-aminoethyl)-dimethy1-ammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 750 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 115 pl N,N-dimethylethylendiamin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 15 mg av det ønskede produkt. Eksempel 134 7|3-[ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-y]) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(tetrazol-5-yl)-methyldimethylammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 150 mg 5-dimethylaminomethyltetrazol, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 37 mg av det ønskede produkt. Eksempel 135 7(3-[ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(3-sulfopyridinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 750 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 384 mg 3-pyridinsulfonsyre, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 68 mg av det ønskede produkt . Eksempel 136 7(3-[ 2- (5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(2-dimethylamino-ethyl)-dimethylammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 105 ul N,N,N',N'-tetramethylethylendiamin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 22 mg av det ønskede produkt.-Eksempel 13 7 7(3-[ 2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[(2-oxopropyl)dimethyl-ammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 80 ul (dimethylamino)aceton, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 6 0 mg av det ønskede produkt. Eksempel 138 73-[2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl) - (Z)-2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(4-carbamoylkinucli-dinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 107,6 mg 4-carbamoylkinuclidin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 77 mg av det ønskede produkt. Eksempel 139 7(B-[2- (5-amino-l, 2 ,4-thiadiazol-3-yl)'- (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[l-methyl-2-(2-hydroxyethyl)pyrrolidinio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat (Isomerer: A og B) : 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 83,3 mg l-methyl-2-(2-hydroxyethyl)-pyrrolidin, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 24 mg av den ønskede isomer A og 2 6 mg av isomer B. Eksempel 140 7B -[ 2- (5-amino-l, 2, 4-thiadiazol-3-yl), - (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(4-carboxymethyl-pyridinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 500 mg av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble omsatt med 280 mg 4-pyridyleddiksyre-hydroklorid, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe under dannelse av 5 mg av det ønskede produkt. Eksempel 141 7(3-[2- (5-amino-l, 2 ,4-thiadiazol-3-yl) - (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(1,4,4-trimethyl-l-piperazinio)-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat-jodid:

1,0 g av forbindelsen erholdt i Forsøk 4 ble suspendert i 100 ml ethylether og 40 ml ethylacetatløsning av 189 ] il 1,4-dimethylpiperazin ble dråpevis tilsatt og omrørt over natten. Det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og dette ble ytterligere utfelt på nytt i tetrahydrofuran/ethylacetat og ble deretter vasket med ethylacetat under dannelse av 492 mg av et gult pulver. Dette ble oppløst i 2 ml diklormethan og 4 ml methyljodid ble tilsatt under isavkjøling, og blandingen ble deretter omrørt over natten ved den samme temperatur. Reaksjonsløsningen ble helt over i ethylacetat og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 190 mg av et gulbrunt pulver.

Denne forbindelse ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 1,35 ml trifluoreddiksyre og 1,16 ml anisol, og ble omrørt i 2 timer under is-omrøring. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 25 ml ethylether og

25 ml isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med ethylether. Det resulterende bunnfall ble suspendert i 4,5 ml vann og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 23 mg av det ønskede produkt. Eksempel 142 73-[2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl) -(Z)-2- (2,2,2-trifluorethyl)oxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-(carbamoyl-methyldimethylammonio)-1-propen-l-yl3-3-cefem-4-carboxylat:

1,43 g av forbindelsen erholdt i Forsøk 7 ble oppløst i 20 ml aceton og 0,927 g natriumjodid ble tilsatt med isavkjø-ling, og ble omrørt i 10 minutter ved samme temperatur og deretter 1 time og 3 0 minutter ved romtemperatur. Løsningsmidlet ble fordampet, og etter at ethylacetat var tilsatt til det resulterende residuum ble dette vasket med en fortynnet natrium-thiosulfatløsning og mettet saltvann, og ble deretter tørket med natriumsulfat. Saltvannet ble fordampet og residuet ble oppløst i 40 ml ethylacetat. 237 mg dimethylglycinamid ble deretter tilsatt til den resulterende løsning, og denne ble omrørt i 1 time ved romtemperatur. Til den resulterende løsning ble tilsatt isopropylether, og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering under dannelse av 1,07 g av et gulbrunt pulver.

Forbindelsen ble tilsatt til en blandet løsning omfattende 8 ml trifluoreddiksyre og 6 ml anisol og ble omrørt i 1 time under isavkjøling. Ethylether ble tilsatt til den resulterende reaksjonsløsning og det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Dette bunnfall ble suspendert i 10 ml vann, etterfulgt av justering av pH av den resulterende suspensjon til et område fra 5,5 til 6,5 med natriumacetat, og de uløselige bestanddeler ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 268 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 143 7|3-[ 2- (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl)> (Z) -2-fluor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[tris(2-hydroxyethyl)-ammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat: 400 mg av forbindelsen fremstilt i Forsøk 4 ble opp-løst i 4 ml ethylacetat, og 96 mg triethanolaminløsning i 4 ml ethylacetat ble tilsatt. Den resulterende løsning ble omrørt i 6 timer ved romtemperatur. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 24 ml diisopropylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Dette bunnfall ble tilsatt til 4,5 ml av en blandet løsning inneholdende trifluoreddiksyre og anisol (1:1) under isavkjøling. Blandingen ble omrørt i 1 time og 30 minutter ved romtemperatur. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 18 ml diisopropylether. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og vasket med diisopropylether. Dette bunnfall ble suspendert i 3 ml vann og natriumacetat ble tilsatt for å justere den resulterende løsning til pH 6. Uløse-lige bestanddler ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble renset ved en omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 17 mg av det ønskede produkt. Eksempel 144 7(3-[ 2— (5-amino-l, 2 , 4-thiadiazol-3-yl).- (Z) -2-f luor-methoxyiminoacetamido]-3-[(E)-3-[bis(2-hydroxy-ethyl) methylammonio]-1-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat

På samme måte som beskrevet i eksempel 1 ble 500 mg av forbindelsen fremstilt i Forsøk 4 omsatt med 150 mg N-methyldiethanolamin, og den beskyttende gruppe ble fjernet under dannelse av 15 mg av det ønskede produkt.

Forsøk 11 (Syntese av utgangsforbindelse) 2-(5-tritylamino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)- (Z)-2-fluor-methoxyiminoacetylklorid-hydroklorid

395 mg fosforpentaklorid ble oppløst i 2,9 ml diklormethan og ble avkjølt til -5° C. Til løsningen ble tilsatt 627 mg av forbindelsen ifølge Forsøk 2, og blandingen ble omrørt i 2 1/2 time ved samme temperatur. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til en blanding av 9,4 ml n-hexan og 9,4 ml n-octan. Denne resulterende krystallinske substans ble oppsamlet ved filtrering og vasket med n-octan under dannelse av 325 mg av den ønskede forbindelse.

Smeltepunkt: 139 - 140° C (spaltning)

Massespektrum (m/e): M<+> 480 (<35>C£), 482 (<37> C£) Infrarødt absorpsjonsspektrum (CM-1, Nujol): 1795, 1780, 1740, 1630

NMR spektrum (6, DMSO-dg): 5,79 (2H, d, J=54Hz), 7,31 (15H, s), 10,09 (1H, s)

Forsøk 12 (Syntese av utgangsforbindelse)

2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoxy-iminoeddiksyjreethylester

2,00 g av forbindelsen fra Forsøk 1 ble omrørt i trifluoreddiksyre ved romtemperatur i 30 minutter. Løsningsmidlet ble destillert fra og residuet ble renset ved silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 405 mg av det ønskede produkt.

Smeltepunkt: 172 - 173° C

Infrarødt absorpsjonsspektrum (cm<-1>, Nujol): 1730, 1615 NMR-spektrum (6, DMSO-dg): 1,28(3H, t, J=7,0Hz), 4,34(2H, q, J=7,0'Hz), 5,83(2H, d, J=54,5Hz), 8,27(2H, brs)

Forsøk 13 (Syntese av utgangsforbindelse)

2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoxy-iminoeddiksyre

200 mg av forbindelsen fra Forsøk 12 ble suspendert i en blanding av 6 ml ethanol og 2 ml vann, 1,75 ml IN vandig natriumhydroxydløsning ble tilsatt, og blandingen ble omrørt ved 60° C i 1 time. Ethanolen ble destillert fra reaksjonsløs-ningen, og løsningen ble justert til pH 2 med IN saltsyre. Den resulterende løsning ble renset ved hjelp av "Dia-Ion SP207" (varemerke for ikke-ionisk adsorpsjonsharpiks) under dannelse av 30 mg av den ønskede forbindelse. Infrarødt absorps jonsspektrum (cm"''', Nujol): 1720, 1620 NMR-spektrum (6, DMS0-dg): 5,74 (2H, d, J=55 Hz), 8,24 (2H, br) Forsøk 14 (Syntese av utgangsforbindelse) p-methoxybenzyl-7|S-[ 2- (5-tritylamino-l, 2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoxyiminoacetamido]-3-[(Z)-3-klor-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat Til en blanding av 37 ml ethylacetat, 5 ml tetrahydrofuran og 15,7 ml diklormethan ble tilsatt 8,17 g N-(trimethyl-silyl) acetamid og 3,33 g p-methoxybenzyl-7(3-amino-3-[ (Z)-3-klor-l-propen-l-yl]-3-cefem-4-carboxylat-hydrokldrid for å opp-løse de sistnevnte bestanddeler. Løsningen ble avkjølt til -20° C hvorpå 3,80 g av forbindelsen ifølge .Forsøk . 11 ble tilsatt og omrørt ved 10° C i 1 time. Etter tilsetning av 500 ml ethylacetat til reaksjonsløsningen ble blandingen suksessivt vasket med vann, en mettet vandig natriumbicarbonatløsning, IN saltsyre og mettet saltløsning, hvorpå vannfritt magnesiumsulfat ble tilsatt for å tørke denne. Løsningsmidlet ble destillert fra og residuet ble renset ved silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 4,33 g av det ønskede produkt.

Det infrarøde absorpsjonsspektrum og NMR-spekteret av det resulterende produkt var i overensstemmelse med de som er angitt i Forsøk 3.

Forsøk 15 (Syntese av utgangsforbindelse):

2-cyano-2-fluormethoxyiminoacetamid

22,6 g 2-cyano-2-hydroxyiminoacetamid ble oppløst i 100 ml dimethylsulfoxyd hvorpå 55,2 g kaliumcarbonat ble tilsatt under omrøring ved romtemperatur, og løsningen ble ytterligere omrørt i 20 minutter. 27 g fluorbrommethan oppløst i 20 ml dimethylformamid ble deretter tilsatt til løsningen, og løsnin-gen ble omrørt i 20 timer ved romtemperatur og fikk deretter avkjøles. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til 1 liter isvann og ble ekstrahert med 150 ml ethylacetat. Det organiske lag ble vasket to ganger med mettet saltvann, og ble tørket under tilsetning av vannfritt magnesiumsulfat etterfulgt av destillering av løsningsmidlet. Residuet ble vasket med ethylether og tørket under dannelse av 14,4 g av det ønskede produkt.

Smeltepunkt: 124 - 125° C.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (cm ^, Nujol): 3410, 3290, 3150, 1690, 1590

NMR-spektrum (6, DMSO-dg): 5,94 (2H, d, J=54,0 Hz), 7,85 - 9,40 (2H, b)

Forsøk 16 (Syntese av utgangsforbindelse)

2-fluormethoxyiminopropandinitril

En blanding inneholdende 14,0 g av forbindelsen fremstilt i Forsøk 15, 15 ml acetonitril, 15 g natriumklorid og 14 ml f osf orylklorid ble omsatt under tilbakeløpskokning i 2 timer. Til blandingen ble-tilsatt 5 ml fosforylklorid, og det hele ble omsatt i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble etter av-kjøling tilsatt til 2 00 ml isvann og ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Løsningen ble ekstrahert to ganger med 50 ml methylenklorid. -Ekstraktet ble vasket med 5 % vandig løsning av natriumbicarbonat og med mettet saltvann, og ble deretter tørket under tilsetning av vannfritt magensiumsulfat. Løsnings-midlet ble destillert fra. Det resulterende oljeaktige produkt ble underkastet destillasjon under redusert trykk under dannelse av 9,1 g av en farveløs olje av det ønskede produkt.

Kokepunkt: 69 - 70° C/25 mmHg

NMR-spektrum (6, CDC13): 5,85 (2H, d, J=52,0 Hz)

Forsøk 17 (Syntese av utgangsforbindelse)

2-cyano-2-fluormethoxyiminoacetamidin

En blandet løsning inneholdende 50 ml 28 % vandig ammoniakk, 8 g ammoniumklorid og 50 ml ethanol ble avkjølt til -5° C, og 9,1 g av forbindelsen fremstilt i Forsøk 16 ble tilsatt under omrøring, og blandingen ble ytterligere omrørt ved den samme temperatur i 3 timer. 100 ml vann ble tilsatt til reaksjonsløsningen. Løsningen ble ekstrahert tre ganger med 50 ml methylenklorid. Etter tørking av ekstraktet med vannfritt magnesiumsulfat ble løsningsmidlet destillert fra. Residuet ble vasket med ethylether og tørket under dannelse av 3,4 g av det ønskede produkt.

En del av produktet ble oppløst i ethanol og iseddik ble dråpevis tilsatt under omrøring. Det resulterende bunnfall ble gjenvunnet ved filtrering og vasket med ethanol, etterfulgt av tørking under dannelse av et acetat av forbindelsen. Føl-gende data for fysikalske egenskaper gjelder acetatet.

Smeltepunkt: 125 - 127° C

Infrarødt absorps jonsspektrum (cm Nujol)::

3200, 1670, 1570

NMR-spektrum (6, DMSO-dg)

1,90 (3H, s), 5,95 (2H, d, J=54,0 Hz), 7,40 (3H, b)

Forsøk 18 (Syntese av utgangsforbindelse)

2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(E)-2-fluormethoxy-iminoacetonitril

3,0 g av forbindelsen fremstilt i forsøk 17 ble opp-løst i 50 ml methanol, og 4,2 g triethylamin ble tilsatt. Etter avkjøling av løsningen til -5° C ble 3,5 g brom dråpevis tilsatt. En løsning av 2,1 g kaliumthiocyanat i methanol ble deretter dråpevis tilsatt ved en temperatur på fra -3 til

-5° C, og løsningen ble omrørt ved den samme temperatur i 2 timer. Det resulterende bunnfall ble gjenvunnet ved filtrering og vasket med vann og med methanol. Bunnfallet ble deretter

omkrystallisert fra aceton under dannelse av 3,4 g av det ønskede produkt.

Smeltepunkt: 236 - 238° C.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (cm ^, Nujol)

3450, 3250, 3075, 1610, 1520

NMR-spektrum (6,DMS0-dg):

6,02 (2H, d, J=54,0 Hz), 8,32 (2H, b) Forsøk 19 (Syntese av utgangsforbindelse) 2- (5-amino-l, 2,4-thiadiazol-3-y])- (Z) -2-fluormethoxy-iminoacetamid

Til en løsning av 0,23 g natriumhydroxyd i 18 ml vann ble tilsatt 7,4 ml 35 % vandig hydrogenperoxyd. 2,0 g av forbindelsen fremstilt i Forsøk 18 ble tilsatt under omrøring ved romtemperatur. Løsningen ble ytterligere omrørt ved en temperatur på fra 25 til 30° C i ytterligere 8 timer. Det dannede bunnfall ble gjenvunnet ved filtrering og vasket med vann og med aceton, etterfulgt av tørking under dannelse av 1,3 g av det ønskede produkt.

Smeltepunkt: 210 - 211° C.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (cm 1, Nujol):

3450, 3260, 3180, 1690, 1610

NMR-spektrum (6, DMSO-dg):

5,73 (2H, d, J=55,0 Hz), 7,69 (2H, br), 7,98 (1H, br),

8,10 (1H, br)

Forsøk 20

2-(5-amino-l,2,4-thiadizol-3-yl)-(Z)-2-fluormethoxy-iminoeddiksyre

En blanding inneholdende 1,1 g av forbindelsen fremstilt i Forsøk 19 og 10 ml 2N vandig natriumhydroxydløsning ble omrørt ved 50° C i 5 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og justert til pH 1,0 med konsentrert saltsyre, etterfulgt av ekstraksjon tre ganger, hver gang med 20 ml ethylacetat. Etter tilsetning av vannfritt magnesiumsulfat til ekstraktet, etterfulgt av tørking, ble løsningsmidlet destillert fra. Residuet ble vasket med isopropylether under dannelse av 0,8 g urent produkt. Det urene produkt ble renset ved omvendt fase-silicagelkolonnekromatografi under dannelse av 0,4 g av det ønskede produkt.

Det infrarøde absorpsjonsspektrum og NMR-spekteret var identisk med de ifølge Forsøk 13.

Den akutte toksisitet og den anti-bakterielle aktivitet av forbindelsen ifølge oppfinnelsen ble bestemt som følger:

(1) Akutt toksisitet i mus:

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen oppløst i en fysiologisk saltvannsløsning ble intravenøst administrert til fem 6 uker gamle ICR hannmus. Som et resultat av disse forsøk var verdiene for akutt toksisitet av forbindelsene fremstilt i de etterfølgende eksempler alle over 2 g/kg.

Eksempel nummer: 1, 2-1, 2-2, 3-1, 3-2, 5, 6-1, 6-2, 7-1, 7-2, 9-1, 9-2, 9-3, 10, 11, 12, 13-1, 13-2, 96, 121

og 137

(2) Antibakteriell aktivitet (MIC):

MIC (ug/ml) ble bestemt ved agar-fortynningsmetoden [Chemotherapy (Japan), 29, 76 - 79, (1981)]. Døgnkulturer av de bakterielle stammer i Mueller-Hinton-kraft ble fortynnet til en sluttkonsentrasjon på ca. 10 CFU/ml, og 5 \ il av hver bak-teriesuspensjon ble flekkevis anbragt på Mueller-Hinton-agarplater som inneholdt doble seriefortynninger av antibiotika. MIC-verdiene ble målt etter inkubering i 18 timer ved 37° C.

Som kontroller ble utvalgt CAZ (Ceftazidime) og CTM (Cefotiam) ..

3. Anti-bakteriell aktivitet (MIC):

Sammenligningstester av de antibakterielle aktiviteter ble utført mellom forbindelsene av etterfølgende formel ifølge oppfinnelsen og de tilsvarende kontrollforbindelser hvori betegner en methylgruppe. Målinger av MIC var de samme som beskrevet i foregående avsnitt 2. Resultatene er vist i etter-følgende tabell.

Claims

Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive 3-propenylcefemderivater av formel I:

hvori Rx betegner en fluormethylgruppe, og A betegner en acyklisk ammoniumgruppe av formel:

hvori R2, R3 og R4 er like eller forskjellige og betegner individuelt en gruppe valgt fra gruppen bestående av C^ C^-alkyl, hydroxyl-substituert C^-C^-alkyl, carbamoyl-substituert C1-C4-alkyl, cyano-substituert C^-C^-alkyl, amino, (C1-C4-alkyl)-carbonylamino-substituert C^-C^-alkyl, aminosulfonylamino-carbonyl-substituert C^-C^-alkyl, (C^-C^-alkyl )sulfonylamino-carbonyl-substituert C1-C4-alkyl, (Cj-C^-alkyl )aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, hydroxyl- og carbamoyl-substituert C^-C-4-alkyl, hydroxyl- og hydroxy (C^-C^-alkyl )aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, (Cx-C4-alkyloxy )aminocarbonyl-substituert C-L-C^-alkyl, hydroxyaminocarbonyl-substituert C1-C4-alkyl, carbamoyl(C^-C^-alkyl )aminocarbonyl-substituert C1-C4-alkyl, hydroxy- (C^-C.j-alkyl )aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, (C^-Qj-alkyl )amino-substituert C^-C^-alkyl, carboxylat (C^-C^-alkyl )di- (C^^-alkyl )ammonio-substituert C1-C4-alkyl, (C^-C^-alkyl)amino- og hydroxyl-substituert C1-C4-alkyl, ureido, hydroxyl, carboxyl-substituert C1-C4-alkyl, C1-C4-alkyloxy-substituert C1-C4-alkyl, di-(C1-C4-alkyl )aminocarbonyl-substituert C1-C4-alkyl, dicarbamoyl-substituert C^- C^-

alkyl, bis[hydroxy(C^-C^-alkyl)]-aminocarbonyl-substituert C^-C^-alkyl, dihydroxyl-substituert C^-C^-alkyl, trihydroxyl-substituert Ci-^-alkyl, bis [hydroxy-(Ci-C^-alkyl) ] amino-substituert C^-C^-alkyl, amino-substituert C^-C^-alkyl, oxo-substituert C1-C4-alkyl, di-Ci-Qj-alkylaminosubstituert C^-C^-alkyl, 5-leddet heterocyklisk-substituert C^-C^-alkyl hvori angitte heterocyklus betegner pyrazolyl, imidazolyl, oxa-dizolyl eller tetrazolyl, eller hvor A betegner en cyklisk ammoniogruppe av én av følgende formler

hvori R5 betegner en gruppe valgt fra hydrogen, C^-C^-alkyl, carbamoyl-substituert C1-C4-alkyl, amino-substituert C^-C^-alkyl, hydroxyl-substituert C1-C4-alkyl, carboxyl-substituert Cx-C4-alkyl, cyano-substituert C^-C^-alkyl, dihydroxyl-substituert C1-C4-alkyl og ureido-substituert Cx-C4 alkyl-grupper,

R2' og R3' betegner en gruppe valgt fra hydrogen eller

hydroxylsubstituert C^-C^-alkyl; R/ betegner en gruppe valgt fra hydrogen eller hydroxyl;

R6 betegner en gruppe valgt fra hydrogen, C^-C^-alkyl,

hydroxyl-substituert-Cx-C4-alkyl, carboxyl-substituert-C1-C4-alkyl, carbamoyl, imino-substituert-Ci-C^-alkyl, formyl, sulfo, sulfonat-substituert-C^-Qj-alkyl eller sulfamoyl;

R7 betegner en gruppe valgt fra hydroxyl, carbamoyl eller

sulfamoyl;

Re og R9 betegner en gruppe valgt fra carbamoyl eller hydroxy

imino-substituert-C-L-Qj-alkyl;

R10 betegner en gruppe valgt fra hydrogen, hydroxyl, amino,

carbamoyl-substituert-C1-C4-alkyl, carboxyl-substituert-C1-C4-alkyl eller sulfo;

Rn betegner en gruppe valgt fra hydrogen, carboxyl, carbamoyl,

carboxyl-substituert-C^-C^-alkyl, carboxyl-C1-C4-alkyl-thio, carboxyl-C^^-alkyl-oxy-C^^-alkyl, hydroxy-C1-C4-alkylaminocarbonyl, bis( hydroxy-C^-C^-alkyl )aminocarbonyl eller morfolin-4-yl-carbonyl,

R12 betegner en gruppe valgt fra hydrogen eller carbamoyl-

substituert-Cx-C4-alkyl,

karakterisert ved at en forbindelse av formel II:

hvori Rx har den ovenfor angitte betydning og X betegner et halogenatom, en forbindelse hvori angitte amino- og/eller carboxylgrupper er beskyttet med konvensjonelle beskyttende grupper, eller et salt derav omsettes med en forbindelse av formel III:

hvori A' betegner et amin tilsvarende A, en forbindelse hvori de funksjonelle grupper er beskyttet med konvensjonelle beskyttende grupper, eller et salt derav, etterfulgt av fjerning av de beskyttende grupper, og om ønsket, omdannelse av den ønskede forbindelse til dens tilsvarende farmasøytisk akseptable salt, på kjent måte.