NL8203768A - Werkwijze voor de bereiding van vincaminezuuresters. - Google Patents

Description

N/31.133-Kp/Pf/vdM * * - 1 -

Werkwijze voor de bereiding van vincaminezuuresters.

De uitvinding heeft betrekking op een nieuwe werkwijze voor de bereiding van vincaminezuuresters. Meer in het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op een nieuwe werkwijze voor de bereiding van racemische en optisch actieve 5 vincaminezuuresters met formule 1 van het formuleblad, waarin 1 2 R en R onafhankelijk van elkaar staan voor alkyl met 1-6 koolstofatomen, alsmede 14-epimeren van deze verbindingen.

Volgens de uitvinding wordt een octahydroxndolo- 10 ^2,3-a7chinolizineoximester met formule 2 van het formuleblad, "* 1 2 waarin R en R de boven vermelde betekenissen hebben, tot reactie gebracht met een waterige oplossing van zwavelig zuur of zouten daarvan, bij een temperatuur van 80-110°C en wordt het verkregen 14-epimeermengsel geepimeriseerd of gescheiden 15 op op zich bekende wijze en worden desgewenst de racemische vincaminezuuresters in hun antipoden gescheiden.

X 6

In de definitie van R en R wordt de uitdruk-king "alkyl met 1-6 koolstofatomen" gebruikt ter aanduiding van rechte of vertakte alkylgroepen met van 1 tot 6 koolstof-20 atomen, bij voorkeur methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl, tert-butyl, enz.

De verbindingen met formule 1 zijn bekend en ver-tonen farmaceutische activiteit. In het bijzonder zijn de tevens natuurlijk voorkomende (+)-vincaminezuurmethylester en 25 het (+)-vincamine krachtige cerebrale vasodilatoren.

Volgens het Amerikaanse octrooischrift 3.770.724 worden de racemische verbindingen met formule 1 bereid uit-gaande van de overeenkomstige racemische octahydroindolo-/2,3-a7chinolizine-esters met behulp van een synthese in vier 30 trappen. De opbrengsten van de opvolgende reactietrappen zijn 71 %, 61 %, 21 % en resp. 85 %, terwijl de totale opbrengst slechts 7,7 % bedraagt.

Optisch actieve verbindingen met de formule 1 kunnen volgens Helv. Chim. Acta £0, 1801 (1977) worden bereid 35 met een synthese in vier trappen. Hier kunnen de opvolgende reactietrappen uitgevoerd worden met de volgende opbrengsten: 8203768 %* * - 2 - 83 %, 68 % en voor de laatste twee trappen 34 %. Dienovereen-komstig is de totale opbrengst 19 %.

Door een in het Hongaarse octrooischrift 175.656 beschreven werkwijze kan de opbrengst van de laatste 5 twee trappen van laatstgenoemde synthese worden verbeterd tot 42 % en derhalve de berekende totale opbrengst voor de vier opvolgende reactietrappen worden verhoogd tot 24 %. Gedurende de reactie kunnen echter nevenreacties, zoals esterhydrolyse, afsplitsing van water, enz. optreden.

10 Alle boven genoemde werkwijzen hebben het nadeel dat zij relatief veel reactietrappen omvatten met als gevolg een nogal lage (ten hoogste 24 %) totale opbrengst.

Thans werd geheel verrassend gevonden, dat uit-gaande van de verbindingen met formule 2 de verbindingen met 15 formule 1 doelmatig in ddn enkele reactietrap kunnen worden bereid. In aanmerking genomen dat de verbindingen met formule 2 bereid worden uit de overeenkomstige octahydroindolo/2,3-a7“ chinolizine-esters volgens de Hongaarse octrooiaanvrage 1753/ 81, is het aantal benodigde reactietrappen verlaagd van vier 20 tot twee wanneer wordt uitgegaan van dezelfde uitgangsstof. Anderzijds kunnen onder de toegepaste reactie-omstandigheden de ongewenste nevenreacties, bijv. esterhydrolyse en afsplitsing van water, doelmatig worden onderdrukt met een aanzien-lijke toename van de opbrengst als gevolg.

25 Zoals boven vermeld, kunnen de verbindingen met formule 2 worden bereid uitgaande van octahydroindolo/2,3-§7" chinolizine-esters door reactie met tert-butylnitriet in een aromatisch koolwaterstofoplosmiddel en daarop met een alkali-metaal-tert-alcoholaat en evt. een aprotisch dipolair oplos-30 middel (Hongaarse octrooiaanvrage 1753/81), met een opbrengst van 80 %.

De zouten van zwavelig zuur die als reagens in de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding worden gebruikt, kunnen aan het reactiemengsel bij wijze van voorbeeld in een 35 van ddjvolgende vormen worden toegevoegd: alkalimetaalpyrosul-fiet en water; alkalimetaalpyrosulfiet, water en geconcen-treerd zwavelzuur; alkalimetaalpyrosulfiet, water en azijn-zuur; alkalimetaalhydroxide, water en zwaveldioxide; een alka- 8203768 4 - 3 - ' .

limetaalzout, bijv. natriumacetaat, water en zwaveldioxide; een waterige oplossing van natriumsulfiet en geconcentreerd zwavelzuur? een alkalimetaalzout, bijv. natriumacetaat, geconcentreerd zwavelzuur en zwaveldioxide, enz. In deze samen-5 hang kan bijv. als een alkalimetaal natrium of kalium worden gebruikt.

De reactie wordt bij voorkeur uitgevoerd bij een pH tussen 3,5 en 7. De pH-waarde kan gesteld worden met behulp van een willekeurig organisch of anorganisch zuur. Gezien de 10 oplosbaarheidsverhoudingen verdienen zwavelzuur en azijnzuur de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd bij een temperatuur van 80-110°C, bij voorkeur 85-95°C, onder atmosferische druk of een overdruk van 0,1-0,5 atm.

15 De werkwijze volgens de uitvinding levert een 14-epimeermengsel, dat met een alkalimetaalalcoholaat op op zich bekende wijze geepimeriseerd kan worden, of waarvan de epimeren gescheiden kunnen worden met behulp van geschikte op-losmiddelen.

20 In de uitgangsverbindingen met formule 2 kunnen 2 de R -groep in de 1-positie en het 12b-waterstofatoom in onderlinge cis- (a,a of β,β) of trans (α,β of $,a)-configu-ratie zijn. Deze configuratie verandert niet gedurende de reactie, d.w.z. blijft dezelfde in de eindprodukten.

25 Uitgaande van racemische verbindingen met formu le 2 worden racemische verbindingen met formule 1 verkregen, terwijl optisch actieve uitgangsmaterialen leiden tot optisch actieve eindprodukten. Desgewenst kan een racemisch eindpro-dukt volgens een bekende methode worden gesplitst in zijn 30 antipoden.

Het belangrijkste voordeel van de nieuwe werkwijze volgens de uitvinding bestaat uit het feit dat door vermindering van het aantal vereiste reactietrappen van vier tot twee (uitgaande van hetzelfde uitgangsmateriaal) een 2,5- tot 35 7,5-voudige toename in opbrengst wordt verkregen. Met betrek-king tot de industriele toepassing bestaat een verder voordeel uit het feit dat de nevenprodukten die eventueel worden ge-vormd, kunnen worden omgezet in de overeenkomstige farmaceu- 8203768 - 4 - tisch actieve apovincaminezuuresters.

Thans wordt de uitvinding nader toegelicht aan de hand van de volgende voorbeelden, welke dienen ter illu- stratie en niet ter beperking van de onderhavige uitvinding.

5 VERGELIJKINGSVOORBEELD

— (-)-1&-{ (21-methoxycarbonyl-2'-hydroxyimino)- ethyl7-la-ethyl-l,2,3,4,6,7,12,12ba-octahydro- indolo/2,3-a7chinolizine en zijn hydrochloride.

Aan 34 g (0,1 mol) (-)-1β-(2'-methoxycarbonyl- 10 ethyl) -loi-ethyl-1,2,3,4,6,7,12,12ba-octahydroindoloi/2,3-a7” chinolizine werd 20 ml absolute tolueen, een 55-60 % tolueen- oplossing van 30 ml tert-butylnitriet en vervolgens 17 g (0,15 mol) kalium-tert-butylaat toegevoegd. Het mengsel werd gedu- o rende 20 min bij 25-30 C geroerd, 150 ml absolute methanol 15 werd langzaam toegevoegd en het mengsel werd gedurende 3 h bij 40°C geroerd. Daarop werd het reactiemengsel gekoeld tot 20°C, werd aangezuurd tot aan een pH = 1 met geconcentreerd chloor-waterstofzuur, 50 ml water werd toegevoegd en het mengsel werd gedurende 2 h bij +5°C geroerd. Het neerslag werd afgefiltreerd, 20 het KC1 werd uitgewassen met water en het neerslag werd ge-droogd. Verkregen werd 32,5 g (80 %) hydrochloride van de titelverbinding, dat onder ontleding smolt bij 265-272°C.

= "57° (c = 1, DMF) .

Uit het verkregen hydrochloride werd de vrije 25 base bereid door het zout te suspenderen in 80 ml methanol en een mengsel van 25 ml 25 % waterige ammoniumhydroxide-oplos-sing en 40 ml water druppelgewijs toe te voegen onder roeren.

Na roeren gedurende 1 h werd gekoeld tot 10°C, gefiltreerd, gewassen met water en gedroogd. Verkregen werd 24-25 g van de 30 titelverbinding, welke smolt bij 208-2l0°C.

/“α7β° = -62° (c = 1, DMF).

VOORBEELD I (+)-vincamine

Een mengsel van 22 g (0,06 mol) (-)-la-ethyl-13-35 (21-methoxycarbonyl-2'-hydroxyiminoethyl)-1,2,3,4,6,7,12,12ba-octahydroindolo/2,3-a7chinolizine (Hongaarse octrooiaanvrage 1753/81, 20 ml azijnzuur, 100 ml water en 12 g natriumpyrosul-fiet werd gedurende 6 h bij 90-92°C geroerd. Men liet het 8203768 - 5 - .

3r '·♦ reactiemengsel koelen en de pH ervan werd gesteld op 9 met behulp van geconcentreerde waterige ammoniumhydroxide-oplos-sing. De alkalische oplossing werd geextraheerd met twee porties dichloormethaan van 60 ml. De dichloormethaanoplossing 5 werd drooggedampt en het residu werd onder terugvloeiing ver-warmd met 50 ml van een 2 % me'thanolische kaliummethylaatop-lossing gedurende 2 h. Het mengsel liet men daarop bij 0°C gedurende 2 h staan, waarna de neergeslagen (+)-vincaminekris-tallen werden afgefiltreerd, gewassen met twee porties van 10 10 ml methanol en gedroogd bij 60°C. Verkregen werd 13,7 g (65 %) van de titelverbinding.

Z«_7q° =+41° (c = 1,. pyridine) .

Smeltpunt: 234-235°C (chloorbenzeen).^

VOORBEELD II

15 (+)-vincamine

Een mengsel van 36,9 g (0,1 mol) (-)-lcr-ethyl-13 — (2*-methoxycarbonyl-2 *-hydroxyiminoethyl)-1,2,3,4,6,7,12, 12ba-octahydroindolo/2,3-a7chinolizine (Hongaarse octrooiaan-vrage 1753/81), 16,8 ml azijnzuur, 250 ml water, 5,8 ml gecon-20 centreerd zwavelzuur en 75 g natriumpyrosulfiet werd gedurende 7 h bij 90°C geroerd. Na koelen werd de pH van het mengsel gesteld op 9 met 60 ml van een geconcentreerde waterige ammo-niumhydroxide-oplossing. De alkalische oplossing werd geextraheerd met 200 ml en daarop met 100 ml dichloormethaan. Di-25 chloormethaan werd afgedestilleerd uit de samengevoegde di-chloormethaanextracten, aan het destillatieresidu werd 100 ml van een 2 % methanolische kaliummethylaatoplossing toegevoegd en het mengsel werd gedurende 4 h onder terugvloeiing verhit.

Het reactiemengsel werd daarop gekoeld, men liet het gedurende 30 1 h bij 0°C staan, het werd gefiltreerd en de vaste stof werd gewassen met twee porties methanol van 30 ml en daarop gedroogd bij 60°C. Verkregen werd 26,6 g (75 %) van de titelverbinding.

Z\7q° = +41° (c .-.1, pyridine).

35 Smeltpunt: 234-235°C (chloorbenzeen)·.

Het filtraat (moederloog van de epimerisatie) werd drooggedampt, aan het residu werd 16 ml ethanol, 20 g droog p-tolueensulfonzuur en 120 ml tolueen toegevoegd. Het 8203768 - 6 - mengsel werd tot koken verhit en 80 ml van het oplosmiddel werd afgedestilleerd. Het mengsel werd daarop gedurende 2 h onder terugvloeiing verhit. Het reactiemengsel werd gekoeld tot 10°C, 50 ml tolueen en 50 ml water werden toegevoegd en 5 de pH werd gesteld op 9 met een geconcentreerde waterige ammo-niumhydroxide-oplossing. De tolueenlaag werd afgescheiden en de waterige laag werd geextraheerd met 50 ml tolueen. De samengevoegde tolueenoplossingen werden gedroogd boven water-vrij vast natriumsulfaat, gefiltreerd en het filtraat werd 10 ontkleurd met 1 g Brockmann-alumina. De oplossing werd daarop geconcentreerd tot 20 ml, een oplossing van 0,6 g kalium-tert-butylaat in 40 ml ethanol werd toegevoegd en het mengsel werd gedurende 1 h onder terugvloeiing verhit. Het reactiemengsel werd ingedampt tot 20 ml, gekoeld tot 10°C, en de neergeslagen 15 kristallen werden afgefiltreerd, gewassen met twee porties ethanol van 10 ml en gedroogd. Verkregen werd 3,5 g (+)-apo-vincaminezuurethylester met een smeltpunt van 145-147°C. Opbrengst: 10 % betrokken op de uitgangsstof.

[_ = 141° (c = 1, chloroform).

20 VOORBEELP III

(+)-vincamine

Een mengsel van 36,9 g (0,1 mol) (+)-la-ethyl- 13- (2 ' -methoxycarbonyl-2'-hydroxyiminoethyl)-1,2,3,4,6,7,12, l2ba-octahydroindolo/2,3-a7chinolizine (Hongaarse octrooi-25 aanvrage 1743/81), 16,8 ml azijnzuur, 250 ml water, 15 ml geconcentreerd zwavelzuur en 46,5 g natriumsulfiet werd gedurende 6 h bij 90°C geroerd. Na koelen werd de pH gesteld op 9 met 60 ml geconcentreerde waterige natriumhydroxide-oplossing en de alkalische oplossing werd geextraheerd met twee porties 30 dichloormethaan van 100 ml. Uit de samengevoegde dichloor- methaanextracten werd dichloormethaan afgedestilleerd, aan het residu werd 110 ml van een 2 % methanolische kaliummethylaat-oplossing toegevoegd en het mengsel werd gedurende 4 h onder terugvloeiing verhit. Het reactiemengsel werd gekoeld tot 0°C, 35 en de neergeslagen kristallen werden afgefiltreerd, gewassen ' met twee porties methanol van 30 ml en gedroogd bij 60°C. Verkregen werd 20,8 g (59 %) van de titelverbinding. Smeltpunt: 234-235°C (chloorbenzeen).

8203768 - 7 -

VOORBEELD IV

(+)-vincamine

In een geemailleerde autoclaaf van 2 1 werd in een mengsel van 50 g (-)-Ια-ethyl-lβ-(2'-methoxycarbonyl-2'-5 hydroxyiminoethyl)-1,2,3,4,6,7,12,i2ba-octahydroindolo/2,3-a7-chinolizine (Hongaarse octrooiaanvrage 1753/81), 82 g natrium-acetaat, 700 ml water en 15 ml geconcentreerd zwavelzuur 64 g zwaveldioxidegas geintroduceerd, waarop de autoclaaf werd afgesloten en gedurende 5 h bij 80-90°C onder een overdruk van 10 0,2-0,3 atm werd gehouden. Na koelen werd de autoclaaf geopend, werd 130 ml geconcentreerde waterige ammoniumhydroxide-oplos-sing toegevoegd aan het reactiemengsel en werd de alkalische oplossing geextraheerd met twee porties dichloormethaan van 200 ml. De samengevoegde dichloormethaanlagen werden droogge-15 dampt en het verdampingsresidu werd onder terugvloeixng verhit met 150 ml van een 2 % methanolische kaliummethylaatoplossing gedurende 4 h. Het mengsel werd gekoeld, en de neergeslagen kristallen werden afgefiltreerd, gewassen met twee porties methanol van 30 ml en gedroogd bij 60°C. Verkregen werd 29 g 20 (60,5 %) van de titelverbinding.

Smeltpunt: 234-235°C (chloorbenzeen).

/\7q° = 42° (c = 1, pyridine).

VOORBEELD V

(+)-vincaminezuurethylester 25 De in voorbeeld II beschreven procedure werd ge- volgd, met dien verstande dat als een uitgangsmateriaal 38,3 g (0,1 mol) (-)-la-ethyl-lB-(2,-ethoxycarbonyl-2'-hydroxyimino-ethyl)-1,2,3,4,6,7,12,12ba-octahydroindolo/2,3-a7chinolizine (Hongaarse octrooiaanvrage 1753/81) werd gebruikt. De epimeri-30 satie werd uitgevoerd met een overeenkomstige hoeveelheid ethanolische kaliummethylaatoplossing. Verkregen werd 27,4 g (74 %) van de titelverbinding.

Smeltpunt: 238-240°C.

Aan de moederloog van de epimerisatie werd 20 g " 35 droog p-tolueensulfonzuur toegevoegd en het mengsel werd inge-dampt tot 50 ml. Aan de geconcentreerde oplossing werd 150 ml tolueen toegevoegd, waarna 75 ml van het oplosmiddel werd af-gedestilleerd, waarbij de binnentemperatuur steeg tot 110°C.

8203768 - 8 -

Het reactiemengsel werd daarop gedurende 2 h onder terugvloei-ing verhit en daarop gekoeld tot 10°C, waarna 50 ml tolueen en 50 ml water werden toegevoegd en de pH gesteld werd op 9 met een geconcentreerde waterige ammoniumhydroxide-oplossing. De 5 tolueenlaag werd afgescheiden, de waterige laag werd geextra-heerd met 50 ml tolueen en de samengevoegde tolueenextracten werden gedroogd over vast watervrij natriumsulfaat, gefil-treerd en het filtraat werd ontkleurd met 5 g Brockmann-alu-mina. Het filtraat werd daarop ingedampt tot 20 ml en aan het 10 residu werd 50 ml ethanol toegevoegd, waarvan 25 ml werd afge-destilleerd. De moederloog werd gekoeld tot 10°C. De neerge-slagen kristallen werden afgefiltreerd, gewassen met twee porties ethanol van 10 ml en gedroogd. Verkregen werd 3,9 g (11 %, betrokken op de uitgangsstof) (+)-apovincaminezuur- 15 ethylester. Smeltpunt: 142°C.

VOORBEELD VI

(+)-trans-vineamine(33,16a) en (+)-trans-l4- epivincamine(3β,16a).

Een mengsel van 51 g (0,15 mol) van (-)-trans-20 1α-ethyl-l¢-(21-methoxycarbonyl-2'-hydroxyiminoethyl)-1,2,3, 4,6,7,12,12i£-octahydroindolo/2,3-§7chinolizine (Hongaarse octrooiaanvrage 1753/81), 600 ml water, 50 ml azijnzuur, 7,5 ml geconcentreerd zwavelzuur en 20 g natriumpyrosulfiet werd gedurende 2 h bij 92°C geroerd. Een volgende portie 25 natriumpyrosulfiet van 10 g werd toegevoegd aan het mengsel, dat daarop gedurende nog eens 4 h bij 92°C werd geroerd. De oplossing werd tot 20°C gekoeld, waarna 200 ml chloroform werd toegevoegd en de pH werd gesteld op 9 met een 20 % waterige natriumhydroxide-oplossing. Na roeren gedurende 1 min werden 30 de lagen gescheiden en werd de waterige laag geextraheerd met 100 ml chloroform. De chloroformoplossing werd gedroogd over vast watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en het filtraat werd in vacuum drooggedampt. Aan het verdampingsresidu werd 50 ml methanol toegevoegd, en het mengsel werd gedurende 2 min 35 tot koken verhit en daarna gedurende 1 h bij 0°C achtergela-ten. De neergeslagen kristallen werden afgefiltreerd, gewassen met drie porties methanol van 20 ml en gedroogd.

Verkregen werd 30 g wit kristallijn materiaal, 8203768

V

- 9 - bestaande uit een mengsel van (+)-trans-vincamine en (+)-trans-14-epivincamine*

Het mengsel werd onder terugvloeiing verhit met 40 ml chloroform gedurende 2 min en daarna gedurende 2 h 5 achtergelaten bij 0°C. Het neerslag werd afgefiltreerd en gewassen met twee porties chloroform van 10 ml bij een tempera-tuur van 0°C. Verkregen werd 15 g van een stof die verrijkt was met (+)-vincamine. Het produkt werd in 40 ml chloroform onder terugvloeiing verhit, gedurende 1 h bij 0°C achtergela-10 ten en de neergeslagen stof werd afgefiltreerd, gewassen met koude chloroform en gedroogd.

Verkregen werd 10 g (19 %) zuiver (+)-trans-vincamine (33,16a). Smeltpunt: 189-190°C.

L = +89° (c = 1, chloroform).

15 -De chloroformfiltraten werden samengevoegd, in vacuum drooggedampt en het residu werd opgelost in 20 ml chloroform, waarna de oplossing werd verdund met 60 ml methanol en gedurende 2 h bij 0°C werd achtergelaten. De neergeslagen kristallen werden afgefiltreerd en gewassen met twee 20 porties methanol van 10 ml. Verkregen werd 12 g van een mate-riaal, dat verrijkt was aan (+)-trans-14-epivincamine. De stof werd opgelost in 20 ml hete chloroform, waarna de oplossing werd verdund met 50 ml methanol en gedurende 2 h bij 0°C werd achtergelaten. De neergeslagen kristallen werden afgefiltreerd, 25 gewassen met twee porties methanol van 5 ml en gedroogd. Verkregen werd 8 g (15 %) (+)-trans-14-epivincamine met een . smeltpunt van 167-168°C.

Z\7d° = +36,5° (c = 1, chloroform.

30 8203768

Claims (7)

1. Werkwijze voor de bereiding van racemische en optisch actieve vincaminezuuresters met formule 1 van het for- 1 2 muleblad, waarin R en R onafhankelijk van elkaar staan voor 5 alkyl met 1-6 koolstofatomen, alsmede 14-epimeren ervan, met het kenmerk, dat een octahydroindolo/2,3-a7chinolizineoximester met formule - i 2 2 van het formuleblad, waarin R en R de boven aangeduide betekenissen hebben, tot reactie wordt gebracht met een wate-10 rige oplossing van zwavelig zuur of een zout ervan, bij een temperatuur van 80-110°C en dat het verkregen 14-epimeer-mengsel op op zich bekende wijze wordt geepimeriseerd of ge-scheiden en desgewenst de verkregen racemische vincaminezuuresters in hun antipoden worden gesplitst.

2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de reactie wordt uitgevoerd bij een pH tussen 3,5 en 7.

3. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met het kenmerk, dat een octahydroindolo/2,3-a7chino- 1 2 "* 20 lizineoximester met formule 2, waarin R en R de betekenissen volgens conclusie 1 hebben, tot reactie wordt gebracht met een alkalimetaalpyrosulfiet in water, eventueel in aanwezigheid van een organisch of anorganisch zuur.

4. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met 25 het kenmerk, dat een octahydroindolo/2,3-a/chino- 1 2 ~ ~ lizineoximester met formule 2, waarin R en R de betekenissen volgens conclusie 1 hebben, tot reactie wordt gebracht met een alkalimetaalhydroxide of een alkalimetaalzout, terwijl zwavel-dioxide wordt toegevoerd en eventueel een organisch of anor-30 ganisch zuur aanwezig is.

5. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met het kenmerk, dat een octahydroindolo/2,3-a/chino- 12 ~ lizineoximester met formule 2, waarin R en R de betekenissen volgens conclusie 1 hebben, tot reactie wordt gebracht met 35 natriumsulfiet in water, terwijl desgewenst een organisch of anorganisch zuur aanwezig is.

6. Werkwijze volgens een der conclusies 3-5, met het kenmerk, dat azijnzuur als organisch 8203768 •f - 11 - zuur of zwavelzuur als anorganisch zuur wordt gebruikt.

7. Werkwijze volgens conclusie 4, met het kenmerk, dat natriumacetaat als een alkali- metaalzout wordt gebruikt. \ 5 8203768