NL192563C - Vloeibaar farmaceutisch preparaat voor toediening via de neus dat een in de natuur voorkomend calcitonine bevat. - Google Patents

Description

1 192563

Vloeibaar farmaceutisch preparaat voor toediening via de neus dat een in de natuur voorkomend calcitonine bevat

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een vloeibaar farmaceutisch preparaat voor toediening via de 5 neus dat een in de natuur voorkomend calcitonine bevat.

Een dergelijk preparaat is bekend uit het Britse octrooischrift 1.354.526. Deze literatuurplaats beschrijft farmaceutische en veterinaire preparaten die als werkzame stof een calcitonine bevatten. Het in voorbeeld D beschreven preparaat is een oplossing die geschikt is voor toepassing via de neus in de vorm van druppels of een spray.

10 Toediening via de neus verschaft een eenvoudige en pijnloze toedieningswijze, die gemakkelijk door de patiënt zelf kan worden uitgevoerd, bijvoorbeeld door een neusspray of druppeloplossing vanuit een inrichting voor het toedienen via de neus toe te dienen. Het zal duidelijk zijn dat deze methode van groot voordeel is ten opzichte van de tot nu toe gebruikte parenterale toediening, bijvoorbeeld injectie, die in het algemeen onder medisch toezicht wordt uitgevoerd. Eén probleem bij het via de neus toedienen van 15 complexe farmaceutische middelen, zoals de calcitoninen, is het verschaffen van geheel verenigbare en doeltreffende middelen ter vermijding van ontleding en bederf, bijvoorbeeld door pathogene of andere ongewenste micro-organismen. Het verschaffen van een geschikt en doeltreffend verduurzamingsmiddel dat verenigbaar is met het actieve bestanddeel teneinde tegen ontleding of bederf te beschermen is vooral kritisch voor nasale farmaceutische preparaten waar het risico van bederf bijzonder hoog is. Het 20 verduurzamingsmiddel moet er niet alleen voor zorgen dat ontleding of bederf in het begin wordt vermeden, bijvoorbeeld tijdens het samenstellen en het vullen van houders met het preparaat, doch bovendien dat verder tijdens het gebruik ontleding of bederf wordt vermeden, in het bijzonder indien veelvuldig doses uit één houder of toedieningsinrichting nodig is.

Verder moet een farmaceutisch preparaat dat voor nasale toepassing is ontwikkeld, tegelijkertijd goed 25 worden getolereerd, in het bijzonder door de toedieningsplaats. Het moet bijvoorbeeld noch irritatie van de neusslijmvliezen (bijvoorbeeld geen sterk prikkelend gevoel) opwekken, noch een aanzienlijke vermindering van de slagfrequentie van de trilhaartjes veroorzaken.

In het preparaat D van het Britse octrooischrift 1.354.526 wordt chloorbutanol toegepast. Gebleken is echter dat 0,6% chloorbutanol in calcitonine bevattende, farmaceutische neuspreparaten een onvoldoende 30 werking tegen de testschimmel Penn. steckii heeft; om het aantal cellen tot minder dan 0,1% te verlagen zijn meer dan 3 dagen nodig. Bovendien veroorzaakt chloorbutanol in een concentratie van 0,6% binnen 20 minuten, volgens de microfoto-oscillografische methode van L. Chevance et al., Acta Otolaryng. 70,16-28 (1970), meer dan 50% remming van de slagfrequentie van de trilharen van een rattentrachee. Daarnaast bleek chloorbutanol rubberstoppen en andere verbindingsstukken die in neussproeitoedieningsinrichtingen 35 tussen de sproeikop en kolf worden toegepast, aan te tasten.

Gevonden is nu die dat farmaceutische preparaten die een calcitonine als actief bestanddeel bevatten, en die voldoen aan hoge standaarden wat betreft de stabiliteit en tolerantie, en die bijvoorbeeld uitstekend geschikt zijn voor toepassing in neussproeitoedieninrichtingen voor het afgeven van meerdere doses, bijvoorbeeld het afgeven van een reeks afzonderlijke doses gedurende een periode van een aantal dagen of 40 weken, kunnen worden verkregen door gebruik te maken van een benzalkoniumchloride als mede-bestanddeel en verduurzamingsmiddel. Verrassenderwijs is eveneens gevonden dat het gebruik van benzalkoniumchloride, zelfs in de zeer lage concentratie die nodig is voor toepassing als een verduurzamingsmiddel, gunstige eigenschappen wat betreft de neusresorptiekarakteristieken van calcitonine bevattende preparaten kan verschaffen en dus de biologische beschikbaarheid van calcitonine na toedienen 45 via de neus verhoogt.

Aldus voorziet de uitvinding in een preparaat als in de aanhef omschreven, met het kenmerk, dat het preparaat voorts een benzalkoniumchloride en een vloeibaar verdunningsmiddel, geschikt voor toediening aan de neusslijmvliezen, bevat.

Opgemerkt wordt nog dat de Britse octrooiaanvrage 2.008.403 A een preparaat voor de behandeling van 50 pathologische processen in been en bindweefsel van het oor beschrijft dat een calcitonine en een oppervlakte-actief middel in een waterig medium bevat. Geschikte oppervlakte-actieve middelen zijn kationogene, anionogene en niet-ionogene oppervlakte-actieve middelen. Hoewel andere excipiënten, bijvoorbeeld hydrocortison of een anti-oxidant aanwezig kunnen zijn, leert deze literatuurplaats geen combinatie van een calcitonine en benzalkoniumchloride en evenmin een combinatie van een calcitonine, 55 benzalkoniumchloride en een niet-ionogeen oppervlakte-actief middel. Bovendien worden de calcitonine-preparaten van deze literatuurplaats gebruikt voor topische behandeling, de werkzaamheid ervan berust rechtstreeks op een transepitheliale werking (zie regels 21 tot 27, blz. 1). Hierdoor onderscheidt de 192563 2 toedieningswijze zich van de systemische behandeling met het onderhavige preparaat.

Verder beschrijft de Franse octrooiaanvrage 2.321.275 het gebruik van oppervlakte-actief middel voor het verbeteren van de biologische beschikbaarheid van insuline in plasma. Deze literatuurplaats leert noch suggereert het gebruik van benzalkoniumchloride als een essentieel nevenbestanddeel.

5 Tenslotte beschrijft de Britse octrooiaanvrage 12.903.957 een preparaat dat een quaternair tropaanalka-loïde als werkzaam bestanddeel en benzalkoniumchloride bevat en bedoeld is voor topische behandeling van de neusslijmvliezen (nasale hypersecretie). Het werkzame bestanddeel van deze literatuurplaats behoort tot een andere klasse verbindingen dan peptiden. Bovendien suggereert deze literatuurplaats niet het gebruik van een peptide. Evenmin is het topische gebruik dat met dit peptide-vrije preparaat beoogd 10 wordt een aansporing voor de deskundige die een calcitoninepreparaat voor toediening door de neus voor een systemische behandeling zoekt.

Het preparaat voor toediening via de neus volgens de onderhavige uitvinding vertoont zelfs bij langdurige therapie een goede lokale tolerantie, bijvoorbeeld bij de behandeling van de ziekte van Paget en postmeno-pausale osteoporosis.

15 Benzalkoniumchloride is een naam die gewoonlijk wordt gebruikt voor bekende mengsels van quaternaire alkylbenzyldimethylammoniumchloriden waarin de alkylgroep C8H17 tot C18H37 is.

Voor toepassing volgens de uitvinding aanbevolen calcitonine zijn zalm-, mensen- en varkenscalcitonine en het aalcalcitoninederivaat 1,7-ASU-aalcalcitonine, aangeduid als Elcatonine. Al deze verbindingen zijn in de handel verkrijgbaar en zijn met hun farmaceutische eigenschappen uitvoerig beschreven in de literatuur. 20 Gevonden is dat uitzonderlijk goede resultaten, bijvoorbeeld wat bio-beschikbaarheidsspiegels en de duur van de aanwezigheid in het bloedplasma betreft, bij toediening van zalmcalcitonine via de neus worden verkregen. Dientengevolge is zalmcalcitonine het meest aanbevolen calcitonine om bij de uitvinding worden toegepast.

Zoals duidelijk zal zijn kunnen de calcitoninen voor toepassing bij de uitvinding zowel in vrije vorm als in 25 een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm of complexvorm, bijvoorbeeld in een farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezoutvorm, aanwezig zijn. Dergelijke zouten en complexen zijn bekend en ze bezitten een overeenkomstige mate van werking en tolerantie als de vrije vormen. Onder geschikte zuuradditiezout-vormen die volgens de uitvinding kunnen worden toegepast vallen bijvoorbeeld de hydrochloriden en acetaten.

30 Een aanbevolen concentratie voor het benzalkoniumchloridebestanddeel in de preparaten volgens de uitvinding ligt tussen ongeveer 0,002 en ongeveer 0,02, bijvoorbeeld ongeveer 0,01 % (gew./vol.) van het totale preparaat.

De hiervoor gedefinieerde preparaten kunnen volgens de uitvinding bijvoorbeeld in druppel- of spray-vorm, aan de neusslijmvliezen worden toegediend. Zoals hierna echter is beschreven, verdient het vooral 35 aanbeveling dat ze in sproeivorm, dat wil zeggen in de vorm van fijnverdeelde druppeltjes, worden toegepast.

De preparaten volgens de uitvinding kunnen natuurlijk eveneens extra bestanddelen bevatten, in het bijzonder die welke behoren tot de klasse van gebruikelijke, farmaceutisch aanvaardbare niet-ionogene oppervlakte-actieve middelen. Gevonden is dat in het algemeen het gebruik van oppervlakte-actieve 40 middelen in verband met de nasale toepassing van calcitoninen, in het bijzonder zalmcalcitonine, de resorptie via de neusslijmvliezen kan bevorderen en dus de verkregen bio-beschikbaarheidssnelheden verbetert.

Bij voorkeur zal het vloeibare verdunningsmiddel voor gebruik in de preparaten volgens de uitvinding water (farmaceutische kwaliteit) bevatten. Het verdient vooral aanbeveling dat een waterige zoutoplossing 45 aanwezig is. De preparaten volgens de uitvinding worden zodanig in een voor toepassing geschikte vorm gebracht dat toediening via de neus mogelijk is. Voor dit doel kunnen ze eveneens bijvoorbeeld minimale hoeveelheden van elk gewenst extra bestanddeel of excipiënt bevatten, bijvoorbeeld extra verduurzamings-middelen of bijvoorbeeld middelen die de werking van de trilharen bevorderen, zoals caffeine. In het algemeen verdient voor nasale toediening een mildzure pH de voorkeur. Bij voorkeur hebben de preparaten 50 volgens de uitvinding een pH van ongeveer 3-5, in het bijzonder van ongeveer 3,5 tot ongeveer 4,5. Het instellen van de pH geschiedt door toevoegen van een geschikt zuur, zoals waterstofchloride.

De preparaten volgens de uitvinding zullen eveneens een geschikte isotoniciteit en viscositeit moeten bezitten. Bij voorkeur hebben ze een osmotische druk van ongeveer 260 tot ongeveer 380 mOsm/liter. De voor de preparaten volgens de uitvinding gewenste viscositeit zal afhangen van de speciale toedienings-55 vorm, bijvoorbeeld of het toedienen via neusdruppels of een neusspray geschiedt. Voor neusdruppels ligt een geschikte viscositeit tussen ongeveer 2 en ongeveer 40 x 10‘3 Pa.S. Voor neussprays zal de viscositeit geschikt lager zijn dan 2 x 10'3 Pa.S., bijvoorbeeld van 1 tot 2 x 10‘3 Pa.S.

3 192563

Bevatten de preparaten volgens de uitvinding een gebruikelijk oppervlakte-actief middel, dan worden niet-ionogene oppervlakte-actieve middelen aanbevolen. Vooral aanbevolen oppervlakte-actieve middelen zijn polyoxyalkyleen hoge alcoholethers, bijvoorbeeld met de op het formuleblad weergegeven algemene formule, waarin RO de rest van een hogere alcohol, in het bijzonder lauryl- of cetylalcohol, of een alkylfenol 5 of een sterolrest, in het bijzonder een lanosterol-, dihydrocholesterol- of cholesterolrest, voorstelt, evenals mengsels van twee of meer van dergelijke ethers.

Aanbevolen polyoxyalkyleenethers voor toepassing bij de uitvinding zijn polyoxyethyleen- en polyoxypro-pyleenethers (dat wil zeggen waarin n in de formule weergegeven op het formuleblad 2 of 3 is), in het bijzonder polyoxypropyieen- en polyoxyethyleenlauryl, -cetyl-en-cholesterylethers, evenals mengsels van 10 twee of meer van dergelijke ethers.

Zoals hiervoor reeds is opgemerkt kan de hydroxylgroep aan de alkyleeneindeenheid van dergelijke ethers gedeeltelijk of volledig geacyleerd zijn, bijvoorbeeld door acylresten van alifatische carbonzuren, zoals azijnzuur.

Aanbevolen ethers voor toepassing bij de uitvinding hebben een hydrofyl-lypofielbalans (HLB groep 15 nummer) van ongeveer 10 tot ongeveer 20, in het bijzonder van ongeveer 12 tot ongeveer 16.

Bijzonder geschikte ethers voor toepassing bij de uitvinding zijn die waarin het gemiddelde aantal zich herhalende eenheden in het polyoxyalkyleengedeelte (x in de formule op het formuleblad) tussen 4 en 75, geschikt tussen 8 en 30, vooral tussen 16 en 26, ligt. De ethers kunnen volgens bekende methoden worden verkregen. Een grote verscheidenheid van dergelijke producten is in de handel verkrijgbaar.

20 Lanolinealcoholen zijn eveneens bekend als wolvetalcoholen en zijn een mengsel van cholesterol, dihydrocholesterol en lanosterol.

Ethers die bij voorkeur bij de onderhavige uitvinding worden toegepast zijn polyoxyethyleencholesteryl-ethers, dat wil zeggen met de hiervoor genoemde formule, waarin n = 2 en RO een cholesterolrest is, in het bijzonder ethers waarin het aantal zich herhalende eenheden in het polyoxyethyleengedeelte tussen 16 en 25 26 ligt en vooral ongeveer 24 is.

Het verdient vooral aanbeveling dat dergelijke ethers vrijwel geen verontreinigingen, in het bijzonder van andere polyoxyalkyleenethers, bevatten. Het verdient in het bijzonder aanbeveling dat ze ten minste 75 gew.%, in het bijzonder ten minste 85 gew.%, vooral ten minste 90 gew.%, zuivere polyoxyethyleencholes-terylether bevatten.

30 Gebruikt men een oppervlakte-actief middel, bijvoorbeeld een polyoxyalkyleenether, dan zal de in de preparaten volgens de uitvinding aanwezige hoeveelheid variëren, afhankelijk van het speciaal gekozen oppervlakte-actieve middel, de toegepaste wijze van toediening (bijvoorbeeld druppels of een spray) en het gewenste effect.

In het algemeen zal de aanwezige hoeveelheid ether van de orde van ongeveer 2,0 tot ongeveer 200 35 zijn (bij voorkeur tot ongeveer 100, in het bijzonder tot ongeveer 20), geschikt tussen ongeveer 5 en ongeveer 30 (bij voorkeur tot ongeveer 15) en in het bijzonder ongeveer 10 mg/ml zijn.

De volgens de uitvinding toe te dienen hoeveelheid calcitonine en dus de hoeveelheid actief bestanddeel in de preparaten volgens de uitvinding zal natuurlijk afhangen van het gekozen calcitonine, de te behandelen aandoening, de gewenste frequentie van toediening en het gewenste effect.

40 Zoals uit het volgende voorbeeld II blijkt, is de bio-beschikbaarheid voor calcitoninen, in het bijzonder zalmcalcitonine, bepaald als de concentratie in het bloedplasma na een nasale toediening van het product volgens de uitvinding, verrassend hoog, in het algemeen van de orde van ongeveer 50% van de spiegels die bij intra-musculaire injectie worden verkregen. Dientengevolge zal het toedienen volgens de uitvinding geschikt zodanig worden uitgevoerd dat een doseringshoeveelheïd van de orde van twee malen of meer, 45 bijvoorbeeld van ongeveer twee tot vier malen, de doseringshoeveelheïd die voor het intra-parenteraal, bijvoorbeeld intramusculair, toedienen nodig is, wordt verkregen.

Werd calcitonine, bijvoorbeeld zalmcalcitonine, door intramusculaire injectie toegediend, dan werden tot nu toe individuele doses van ongeveer 50 tot 100 IU-eenheden in een frequentie van ongeveer eenmaal daags tot ongeveer drie malen per week toegediend (IU = internationale eenheid, de hoeveelheid calcitonine 50 die onder nauwkeurig gedefinieerde omstandigheden, na 1 uur een zelfde verlaging van de bloedcalcium-spiegel zal geven als de inhoud van een ampul (of gedeelte van een ampul) van het internationale calcitonine referentiepreparaat bij toediening aan jonge ratten). Voor nasale toediening volgens de uitvinding zal de behandeling dus geschikt omvatten het toedienen van doseringen van ongeveer 50 tot ongeveer 400 IU-eenheden, bij voorkeur van ongeveer 100 tot ongeveer 200 IU-eenheden, in een frequentie van ongeveer 55 eenmaal daags tot ongeveer drie malen per week. Geschikt zullen de hiervoor genoemde doseringen eenmaal worden toegediend, dat wil zeggen de behandeling zal het toedienen van enkelvoudige nasale doseringen die ongeveer 50 tot ongeveer 400 IU-eenheden, bijvoorbeeld ongeveer 100 tot ongeveer 200 192563 4 lU-eenheden, calcitonine bevatten, inhouden. Het is ook mogelijk dat dergelijke doseringen over een reeks van bijvoorbeeld 2-4 toedieningen met tussenpozen gedurende de dag worden uitgesmeerd, waarbij de dosering van elke toediening van ongeveer 10 tot ongeveer 200, bij voorkeur van ongeveer 25 tot ongeveer 100, IU-eenheden bevat.

5 De totale hoeveelheid van het preparaat die bij elke toediening aan de neus wordt toegepast is geschikt ongeveer 0,05-0,15 ml, bijvoorbeeld ongeveer 0,1 ml, bijvoorbeeld 0,09 ml. Preparaten volgens de uitvinding zullen dus geschikt ongeveer 150 tot ongeveer 8000, bij voorkeur ongeveer 500 tot ongeveer 4000, in het bijzonder ongeveer 500 tot ongeveer 2500, vooral ongeveer 1000 tot ongeveer 2000, IU-eenheden calcitonine, bijvoorbeeld zalmcalcitonine, per ml bevatten.

10 Voor de doeleinden van het toedienen via de neus zullen de preparaten volgens de uitvinding bij voorkeur in een houder worden gebracht die voorzien is van organen die het toedienen van het aanwezige preparaat aan de slijmvliezen van de neus, mogelijk maken, bijvoorbeeld in een toedieninrichting voor de neus. Geschikte toedieninrichtingen zijn bekend in de stand der techniek en hieronder vallen die welke aangepast zijn voor het toedienen van vloeibare preparaten aan de slijmvliezen in een druppel- of 15 sproeivorm. Aangezien het doseren met calcitoninen zo nauwkeurig mogelijk geregeld moet worden, zal in het algemeen het gebruik van sproeitoedieningsinrichtingen waarvan de toe te dienen hoeveelheid nauwkeurig geregeld kan worden, aanbeveling verdienen. Geschikte toedieningsinrichtingen zijn bijvoorbeeld verstuivingsinrichtingen, bijvoorbeeld pompverstuivers en aerosolverstuivers. In het laatste geval zal de toedieningsinrichting een preparaat volgens de uitvinding tezamen met een voortstuwingsmedium dat 20 geschikt is voor een toedieningsinrichting via de neus, bevatten. De verstuivingsinrichting zal voorzien zijn van een geschikt sproeiorgaan dat de afgifte van het aanwezige preparaat aan de neusslijmvliezen mogelijk maakt. Dergelijke organen zijn bekend uit de stand der techniek.

De houder, bijvoorbeeld de inrichting voor toediening aan de neus, kan voldoende preparaat voor een enkele dosering aan de neus of voor het verschaffen van een aantal opvolgende doseringen, bijvoorbeeld 25 gedurende een periode van dagen of weken, bevatten. De hoeveelheden van de afzonderlijke, toegediende doseringen zullen bij voorkeur de hiervoor vermelde waarden hebben.

"Bij voorkeur maakt de houder of toedieningsinrichting toediening van het aanwezige preparaat in afzonderlijke vaste hoeveelheden van 0,05 tot ongeveer 0,15 ml, bijvoorbeeld ongeveer 0,1 ml, mogelijk”.

De stabiliteit van de preparaten volgens de uitvinding kan op een gebruikelijke wijze worden bepaald.

30 Het calcitoninegehalte van de preparaten volgens de uitvinding in een inerte stikstofatmosfeer zal, zoals uit standaardanalytische proeven blijkt, in 2 jaren bij een temperatuur van 20°C minder dan 10% verminderen.

Zo werd bijvoorbeeld het neussproeipreparaat van voorbeeld I, dat hierna wordt beschreven, 2 maanden in een stikstofatmosfeer in een glazen houder bij 5°C, 20°C en 30°C opgeslagen. Er werd bij 5°C en bij 35 20°C geen waarneembare (minder dan 1%) ontleding van calcitonine waargenomen. Bij 30°C nam men een ontleding van 4% waar, hetgeen niet meer is dan voor een zuivere, waterige oplossing werd verwacht. Uit deze resultaten blijkt dat de preparaten volgens de uitvinding een goede stabiliteit hebben, dat wil zeggen dat er minder dan 10% ontleding gedurende 2 jaren in een stikstofatmosfeer in een afgesloten houder optreedt.

40 De preparaten volgens de uitvinding zijn eveneens stabiel ten opzichte van aantasting door bacteriën, bijvoorbeeld volgens standaardproeven, zoals die beschreven door S. Urban en med., Zbl. Bakt. Hyg. I Abt. Orig. B. 1972, 478-484 (1981) en S. Urban, Acta Pharm. Technol. 22, 247-253 (1976). Zo zal bijvoorbeeld het celgetal van standaardbacteriën, namelijk E.coli ATCC 8739, Pseud, aeruginosa ATCC 9027, Staph, aureus ATCC 6538, Strept.pyogenes ATCC 8668 en standaardfungi Cand. albicans ATCC 10231, Sacch.

45 cerevisae ATCC 9763, Aspergillus niger ATCC 16404 en Pen. steckii ATCC 10499, na enting van het preparaat, binnen 24 uren, zoals uit standaardproeven blijkt, tot 0,1% of minder worden verlaagd.

Volgens een stabiliteitsproef werd het neussproeipreparaat van het hierna volgende voorbeeld I 3 maanden in een stikstofatmosfeer in een glazen houder bij 30°C opgeslagen. Pseud, aeruginosa ATCC 9027, Staph, aureus ATCC 6538, Strept. pyogenes ATCC 8668 en de schimmels Cand. Albicans ATCC 50 10231, Sacch. cerevisae ATCC 9763, Aspergilles niger ATCC 16404 en Pen. stechii ATCC 10499 werden toegevoegd ter verkrijging van een celgetal van ongeveer 2 x 105 organismen in de geënte vloeistof. Binnen 2 uren was dit getal gedaald tot minder dan 0,1%. Binnen 4 weken konden geen cellen meer worden waargenomen.

Zoals uit standaardproeven blijkt worden de preparaten bovendien goed verdragen, zo wordt bijvoorbeeld 55 tot 20 minuten na toediening volgens de microfoto-oscillografische methode van L. Chevance en med., Acta Otolaryng. 70, 26-28 (1970) minder dan 50% remming van de trilhaarslagfrequentie waargenomen.

Een onbetekenende of geen prikkelsensatie en een goede stabiliteit tegen bederf tijdens het gebruik kan 5 192563 eveneens volgens de standaard klinisch onderzoek worden aangetoond.

Het in de volgende voorbeelden toegepaste benzalconiumchloride in een in de handel verkrijgbaar product.

5 Voorbeeld I:

Een preparaat dat zalmcalcitonine bevat en geschikt is voor toediening via de neus.

Bestanddeel Hoeveelheid (per ml) 1) Zalmcalcitonine (actief bestanddeel) 0,1375 mg 10% overmaat 0,01375 mg 10 0,15125 mg 2) NaCI 7,5 mg 3) Benzalconiumchloride 0,1 mg 4) HCI (1 N) toegevoega tot pH 3,7 5) Gedestilleerd water tot een eindvolume van 1,0 ml.

15 De bestanddelen 1-3 werden op een gebruikelijke wijze onder bescherming van stikstofgas gecombineerd (op een dusdanige schaal dat een eindvolume van 2500 ml werd verkregen), waarbij 10% zalmcalcitonine werd toegevoegd teneinde rekening te houden met het verlies ten gevolge van filtratie. Daarna werd 4) toegevoegd teneinde de pH op 3,7 te stellen en gedestilleerd water werd toegevoegd tot een eindvolume van 2500 ml. De verkregen oplossing werd gefiltreerd (bijvoorbeeld onder toepassing van 0,2 20 μπι filter) teneinde een preparaat te verkrijgen dat geschikt is voor toepassing via de neus en voor het vullen van een neussproeiafgifteinrichting met een volume van de oplossing van 2 ml. Het preparaat bevatte ongeveer 550 MRC-eenheden actief bestanddeel per ml en de inrichting geeft een hoeveelheid die 55 eenheden bevat per beweging af.

25 Onderzoek betreffende de relatieve bio-beschikbaarheid: het toedienen via de neus of door intramusculaire injectie van zalmcalcitonine.

Het onderzoek werd uitgevoerd op 12 gezonde vrijwilligers, 6 mannen en 6 vrouwen, met een lichaamsgewicht tussen 50 en 85 kg. Aan elke vrijwilliger werd 4 malen zalmcalcitonine, 1 maal intramusculair en 3 maal nasaal, toegediend. Het toedienen geschiedde in de volgende doseringen: 30 A. Nasaal: A1. 55 MRC eenheden A2. 110 MRC eenheden A3. 220 MRC eenheden B. Intramusculair: 50 MRC eenheden

Het toedienen via de neus werd uitgevoerd onder toepassing van een preparaat volgens voorbeeld I en 35 een sproeiinrichting die 55 MRC-eenheden per afzonderlijke sproeidosis afgaf. Voor het toedienen werd de patiënt 5 minuten op de rug gelegd met het hoofd achterwaarts gebogen. De neusgaten werden gereinigd door onmiddellijk voor de toediening de neus te snuiten.

Het intramusculair toedienen geschiedde door injectie van een enkele dosis van 1 ml van een preparaat dat overeenkomt met dat van voorbeeld I, waarin echter benzalconiumchloride was weggelaten en dat 50 40 MRC-eenheden bevatte, in de gluteus medius spier.

Elke vrijwilliger ontving 4 toedieningen in willekeurige volgorde met ten minste 3 dagen tussen opeenvolgende toedieningen. Telkens werd ’s morgens na een licht ontbijt, waaruit melk, boter en kaas waren weggelaten, toegediend. Elk uur na de behandeling werden 100 ml water of sinaasappelsap gegeven, teneinde de urineafgifte te handhaven. Verder voedsel werd niet eerder dan 4 uren na de behandeling 45 toegestaan.

Onmiddellijk voor het toedienen (controle) en met tussenpozen van 5, 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 360 en 480 minuten na de toediening werden bloedmonsters genomen. Als controle werd een 20 ml monster genomen. Alle daarna volgende monsters waren monsters van 2 ml.

De concentratie van het zalmcalcitonine in elk serummonster werd door radio-immuno-assay gemeten.

50 Tijdens het verloop van de proef werd de bloeddruk gecontroleerd en werden urinemonsters op een mogelijk ongunstige reactie onderzocht. Het optreden van bijwerkingen, bijvoorbeeld symptomen van misselijkheid, werd genoteerd.

Het AUC (’’oppervlak onder de kromme”) voor de zalmcalcitonineplasmaconcentratie werd statistisch berekend, eenmaal onder toepassing van alle waarden, waaronder die onder de 26 pg/ml detectiegrens, 55 eenmaal met waarden onder de detectiegrens afgelezen als 0. De maximale plasmaconcentratie en de tijd waarbij dit werd bereikt, werd eveneens bepaald. De relatieve bio-beschikbaarheid voor toediening via de neus werd uit de relatieve dosering-gestandaardiseerde AUC (dat wil zeggen op basis van 50 MRC-

Claims (9)

192563 6 eenheden) na toediening via de neus en intramusculaire toediening bepaald. Uit de verkregen resultaten blijkt dat de AUC-waarden volgende op de toediening van zowel 110 en 220 MRC-eenheden via de neus te vergelijken is met AUC-waarden verkregen na toediening van 50 MRC-eenheden i.m., waarbij serumspiegels voor zalmcalcitonine na het toedienen van 110 MRC-eenheden via de 5 neus gedurende 8 uren boven de detectiegrens bleven vergeleken met 6 uren na de i.m. toediening van 50 MRC-eenheden. Na toediening via de neus, zelfs bij de hoogste dosering van 220 MRC-eenheden, werden geen ongunstige bijwerkingen waargenomen. Voorbeeld II 10 Preparaten, geschikt voor toediening via de neus die zalmcalcitonine bevatten. Preparaat no. De hoeveelheid toegepast zalmcalcitonine Ha 0,06875 mg/ml ilb 0,275 mg/ml llc 0,55 mg/ml 15 lid 1,1 mg/ml De preparaten werden analoog aan voorbeeld I bereid onder toepassing van dezelfde hoeveelheden van de bestanddelen 2) en 3) (respectievelijk 7,5 mg of 0,1 mg/ml), bij een identieke instelling van de pH op 3,7 onder toepassing van bestanddeel 4) en aanvullen tot het gewenste eindvolume onder toepassing van bestanddeel 5). Het verkregen preparaat bevatte ongeveer 250 (preparaat lla), 1000 (Ilb), 2000 (llc) en 20 4000 (lid) MRC-eenheden actief bestanddeel per ml en werd in een neussproeitoedieninrichting met een afgifte van 0,2 ml actief bestanddeel per keer [=25,100, 200 en 400 MRC-eenheden afgegeven] van respectievelijk de preparaten lla, Ilb, llc en lid gebracht. Het zal natuurlijk duidelijk zijn dat indien zalm-calcitoninepreparaten met een verschillende activiteit worden toegepast, verschillende hoeveelheden nodig kunnen zijn om de benodigde concentratie, gedefinieerd in MRC-eenheden, te geven. 25 Voorbeeld III Preparaten die zalmcalcitonine tezamen met een niet-ionogeen oppervlakte-actief middel, geschikt voor toediening via de neus, bevatten. De preparaten werden op analoge wijze als beschreven in voorbeeld I bereid, echter onder toevoeging van 30 de volgende bestanddelen: Preparaat Extra bestanddeel Hoeveelheid lila Polyoxyethyleencholesterylether: x = 24 30 mg/ml lllb Polyoxyethyleencholesterylether: x = 2410 mg/ml lllc Polyxyethyleencetylether: x = 20-24 100 mg/ml 35 De preparaten werden op de wijze als beschreven in voorbeeld I in een neustoedieningsinrichting gebracht. Een vergelijkend bio-beschikbaarheidsonderzoek voor de preparaten van de voorbeelden I en lila. Met behulp van een neussproeiinrichting werden 0,2 ml porties van de preparaten I en lila via de neus 40 toegediend aan Rhesus-apen (0,1 ml/neusgat), waardoor een dosering van ongeveer 100 MRC-eenheden zalmcalcitonine per aap werd verkregen en de volgende 6 uren werden de zalmcalcitonineplasmaspiegels bepaald. Per preparaat werden 3 proeven uitgevoerd en de gecombineerde resultaten werden grafisch uitgezet. De resultaten (zie grafiek) laten zien dat de bio-beschikbaarheid voor beide preparaten (oppervlak onder de kromme) vrijwel equivalent is, waarbij het maximum van de piek iets eerder in het geval van het 45 preparaat van voorbeeld lila wordt verkregen.

1. Vloeibaar farmaceutisch preparaat voor toediening via de neus dat een in de natuur voorkomend calcitonine bevat, met het kenmerk, dat het preparaat voorts een benzalconiumchloride en een vloeibaar verdunningsmiddel, geschikt voor toediening aan de neusslijmvliezen, bevat.

2. Preparaat volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het calcitonine wordt gekozen uit de groep bestaande uit zalmcalcitonine, humaan calcitonine, varkenscalcitonine en aalcalcitonine.

3. Preparaat volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het calcitonine zalmcalcitonine is.

4. Preparaat volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de benzalconiumconcentratie tussen 0,002 en 0,02% (gew./vol.) ligt. 7 192563

5. Preparaat volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk, dat het vloeibare verdunningsmid-del water of waterige zoutoplossing omvat.

6. Preparaat volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk, dat het preparaat bovendien een niet-ionogeen oppervlacte-actief middel, geschikt voor toediening aan de neusslijmvliezen, bevat.

7. Preparaat volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat het niet-ionogene oppervlakte-actieve middel een verbinding met formule RO — (CH2)n-0--H 10 L ->X waarin RO de rest van een lauryl- of cetylalcohol, een alkylfenol- of sterolrest is, n 2 of 3 is en x 4 tot 75 is, of een mengsel van 2 of meer van dergelijke ethers is.

8. Preparaat volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk, dat de pH ervan tussen 3 en 5 ligt. 15

9. Preparaat volgens één der voorgaande conclusies voor toediening in de vorm van een spray, met het kenmerk, dat het preparaat een viscositeit die kleiner is dan 2 x 10~3 Pa.s heeft. Hierbij 2 bladen tekening