MXPA98000408A - Sales de derivados de amidina y de inhibidor de ciclooxigenasa, su procedimiento de preparacion, suaplicacion como medicamentos y composiciones farmaceuticas que los contienen - Google Patents

Abstract

La presente invención es concerniente con sales de derivados de amidina y del inhibidor de la ciclooxigenasa, procedimientos para su preparación, composiciones farmacéuticas que los contienen y su uso particular como inhibidores de la NO-sintasa y ciclooxigenasa.

Description

SALES DE DERIVADOS DE AMIDINA Y DE INHIBIDOR DE CICLOOXIGENASA, SU PROCEDIMIENTO DE PREPARACIÓN, SU APLICACIÓN COMO MEDICAMENTOS Y COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS QUE LOS CONTIENEN Descripción de la invención La presente invención es concerniente con nuevos compuestos que presentan una doble actividad biológica, es decir, inhiben a la vez la formación de monóxido de nitrógeno (NO) y la actividad de las ciclooxigenasas, un procedimiento para su preparación, composiciones farmacéuticas que los contienen y su uso en particular como inhibidores de NO sintasa (o liasa) y de la ciclooxigenasa. Los inhibidores de la ciclooxigenasa o de medicamentos análogos de la aspirina, es decir el ácido de acetilsalicílico y el ácido salicílico, los derivados de indol metilados, tales como la indometacina (DCI del ácido [1-(4-clorobenzoil)-5-metoxi-2-metil-1H-indol-3-il]acético y el sulindac (DCI del ácido [5-fluoro-2-metil-1-[[4-(metilsulfinil)fenil]-metilen]-1 H-inden-3-il]acético, los derivados de ácidos N-fenil antranílicos (meclofenamato, fenamato), los derivados de ácido propiónico tales como ibuprofeno (DCI del ácido p-isobutilhidratrópico), naproxeno, fenopreno, son ampliamente empleados y han dado pruebas de su capacidad como medicamentos eficaces en terapia de inflamación, con no obstante, algunos efectos secundarios indeseables a dosis elevadas (R. Flower, S. Moneada y J Vane, Mechanism of action of aspirin-like drugs- In the pharmacological basis of therapeutics, Goodman and Gilman, 1985, 29, 647-715). Además, estos compuestos han sido utilizados a la vez en el tratamiento agudo y profiláctico de la migraña. El valor de estos medicamentos es MF. : 26617 innegable, aunque sus respuesta terapéuticas sean frecuentemente incompatibles y que, en ciertas enfermedades, el tratamiento mediante tales compuestos no este adaptado. Debido a sus propiedades antiinflamatorias y antiagregantes de plaquetas, estos compuestos han sido igualmente utilizados para la trombosis y con una reducción evidente del edema, en modelos de isquemia cerebral y por consecuencia, se proponen en el tratamiento y la prevención de infartos, conmociones y enfermedades cerebrovasculares (W. Armtrong Recent trends in research and treatment of stroke, SCRIP, PJB publications, 1991). - La actividad biológica de los inhibidores de la NO-sintasa no ha sido descrita más que recientemente y su uso terapéutico potencial está solamente en estudio. Estas substancias, en donde las estructuras son representadas mediante análogos de la L-argenina se describen en la patente danesa 3041/90, son inhibidores de la producción de óxido nítrico (NO). El conocimiento actual sobre el NO ha sido revisado en 1991 por Moneada et al (S. Moneada, R.M.J. Palmer, E.A. Palmer, E.A. Higgs: Nitric oxide: Physiolgy, pathophysiology and pharmacology - Pharmacological reviews 43,2, 109-142) y más recientemente por Kerwin et al (Kerwin J., Lancaster J., Feldman P., Nitric oxide: a new paradigm for second messengers, J. Med. Chem (1995), Volumen 38, 22, 4343-4362. En esencia, parece que el NO sirve de mecanismo de transducción para la guanilato de ciclasa soluble en plaquetas, el sistema nervioso y de molécula efectiva en las reacciones inmunológicas en bastantes células y tejidos y comprende los macrófagos y los neutrófilos. El NO es producido enzimáticamente a partir de la L-arginina mediante una enzima denominada NO sintasa. Esta enzima existe en dos formas: la constitutiva (endotelial y neuronal) y la otra inductible. En ciertas patologías, una producción excesiva de NO se puede producir, como ya se ha demostrado durante un choque y tal como se ha descrito en la patente citada anteriormente. En este contexto, los inhibidores de la NO sintasa son medicamentos eficaces para prevenir las deficiencias vasculares y la mortandad provocadas por una enfermedad, en particular cuando se combinan con los inhibidores de la ciclooxigenasa como la aspirina la indometacina o el meclofenamato. Los efectos benéficos de la combinación de dos principios activos en la misma molécula, son susceptibles de producirse para los pacientes que sufren de otras patologías, como por ejemplo: problemas cardiovasculares y cerebrovasculares que comprenden por ejemplo la aterosclerosis, la migraña, la hipertensión arterial, el choque séptico, los infartos cardíacos o cerebrales de origen isquémico o hemorrágico, las isquemias o trombosis; los problemas del sistema nervioso central o periférico como por ejemplo las enfermedades neurodegenerativas en donde se pueden citar en particular los infartos cerebrales, las demencias seniles y comprendidas la enfermedad de Alzheimer, la coria de Huntington, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Creutzfeld Jacob, la esclerosis lateral amiotrófica pero también el dolor, los traumatismos cerebrales o de la medula espinal, la adicción a las opiáceas, al alcohol y a las sustancias que inducen una costumbre, los problemas de la erección y la reproducción, los desordenes del conocimiento, las encefalopatías; las enfermedades proliferativas e inflamatorias como por ejemplo la aterosclerosis, la hipertensión pulmonar, la glomerulonef tis, la hipertensión portal, la psoriasis, la artrosis, y la artritis reumatoide. las fibrosis, la amiloidosis, las inflamaciones del sistema gastrointestinal (colitis, enfermedad de Crohn) o del sistema pulmonar y de las vías respiratorias (asma, sinusitis); los transplantes de órganos; las enfermedades autoinmunes y virales como por ejemplo el lupus, el sida, las enfermedades parasítorias y virales, la diabetes, la esclerosis de placa; el cáncer ; o cualquier patología caracterizada por una producción u una disfunción del NO y/o de las ciclooxigenasas. La invención tiene así por objeto los productos de formula general I. A.B (I) en forma de sal, en la cual : A representa un inhibidor de la ciclooxigenasa que presenta una función carboxi: B representa un compuesto de fórmula general ls el la cual : R, representa H, el radical nitro o fenilo. el radical fenilo está eventualmente sustituido por uno o varios substituyentes escogidos de los radicales halo, ciano, nitro, trifluorometilo. alquilo inferior o alcoxi inferior; R2 representa un radical alquilo inferior, alquiltio inferior, alquiltioalquilo, arilo eventualmente substituido por uno o varios substituyentes escogidos de entre los radicales halo, ciano, nitro, trifluorometilo, alquilo inferior o alcoxi inferior; o amino eventualmente substituido por un radical escogido de entre los radicales nitro, amino, alquilo inferior o fenilo, el radical fenilo está en sí mismo eventualmente sustituido por uno o varios sustituyentes escogidos de entre los radicales halo, ciano, nitro, trifluorometilo, alquilo inferior o alcoxi inferior; y cuando A representa el ácido acetilsalicílico y R el átomo de hidrógeno, entonces R2 no representa ni un radical arilo ni un radical fenilalquilo, el radical fenilo está eventualmente substituido. En las definiciones indicadas anteriormente en la presente, el término halo representa el radical flúor, cloro, bromo o yodo, de preferencia flúor o cloro. La expresión alquilo inferior representa de preferencia un radical alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal ramificado y en particular un radical alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, tal como los radicales metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo y ter-butilo. Los radicales alcoxi inferiores pueden corresponder a los radicales alquilo indicados anteriormente en la presente. Se prefieren los radicales metoxi, etoxi, o isopropiloxi. La expresión arilo representa un radical aromático, constituido de un ciclo o de ciclos condensados; cada ciclo puede eventualmente contener uno o varios heteroátomos idénticos o diferentes escogidos de entre el azufre, el nitrógeno o el oxígeno. Ejemplos del radical arilo son los radicales fenilo, naftilo, tienilo, furilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, isotiazolilo, tiazolilo, isoxasolilo, oxazol, piridilo, pirazinilo, pirimidilo, benzotienilo, benzofurilo e indolilo. La invención tiene más en particular por objeto, los productos de fórmula general I, tal como se define en la presente, caracterizados porque el compuesto A se escoge de entre los salicilatos tales como el ácido salicílico y sus derivados, la indometacina, el sulindac, los fenamatos y los derivados del ácido propiónico. De entre los derivados del ácido salicílico, se pueden citar los compuestos obtenidos mediante la esterificación de la función carboxi de ácido salicílico como por ejemplo el salicilato de metilo, los compuestos obtenidos mediante substitución del radical hidroxilo del ácido salicílico, como por ejemplo el ácido acetilsalicílico o bien los compuestos obtenidos mediante la adición del (los) substituyente (s) sobre los sitios libres del radical fenilo del ácido salicílico como por ejemplo el diflunisal. De entre los fenamatos se pueden citar el ácido mefenámico, meclofenámico, flufenámico y tolfenámico. Como ejemplos de derivados del ácido propionico, se pueden citar los compuestos tales como ibuprofeno, naproxeno, fenopreno, fenbufeno, flurbiprofeno, indoprofeno, cetoprofeno o supropfeno. La invención tiene en particular por objeto los compuestos de fórmula general I tal como se describen anteriormente en la presente, caracterizados porque: A representa el ácido salicílico, el salicilato de metilo, el ácido acetilsalicílico, la indometacina, el sulindac, el ácido mefenámico, el ácido meclofenámico o el ibuprofeno; y B es de fórmula general (lB) tal como se define anteriormente en la presente, en la cual Ri representa H, el radical nitro o fenilo, el radical fenilo está eventualmente sustituido por uno o varios substituyentes escogidos de entre los radicales cloro, flúor, ciano, nitro, triflourometilo, metilo, etilo, metoxi, etoxi o isopropiloxi; y R representa un radical amino; hidracino; nitroamino; metilamino; etilamino; metilo; etilo; metiltio; metiltiometilo; fenilo eventualmente substituido por uno o varios substituyentes escogidos de entre los radicales cloro, flúor, ciano, nitro, triflourometilo, metilo, etilo, metoxi, etoxi o isopropiloxi; tienilo; furilo o pirrolilo. Más en particular, la invención tiene por objeto los productos descritos posteriormente en la presente en los ejemplos, en particular los productos que responden a las fórmulas siguientes: salicilato de aminoguanidina; ibuprofenato de aminoguanidina; indometacinato de aminoguanidina; acetil salicilato de metilguanidina; salicilato de metilguanidina; ibuprofanato de metilguanidiníj; mefenamato de metilguanidina. La invención tiene igualmente por objeto un procedimiento para la preparación de productos de fórmula general I, tal como se define anteriormente en la presente, caracterizado porque se hace reaccionar, en agua, a una temperatura comprendida entre la temperatura ambiente y 70°C, una mezcla del compuesto de fórmula A, tal como se define anteriormente en la presente con un compuesto de fórmula B tal como se define anteriormente en la presente. Después de la aplicación del procedimiento, el compuesto de fórmula A puede ser utilizado tal cual o en forma de sal como por ejemplo la sal de sodio. Asimismo, el compuesto de fórmula B puede ser utilizado tal cual o en una forma, como por ejemplo de su bicarbonato o su clorihidrato. Los productos de fórmula A son conocidos o pueden ser fabricados mediante métodos conocidos por el experimentado en la técnica. Los productos de fórmula B pueden ser obtenidos al aplicar los métodos de preparación de amidinas conocidos por el experimentado en la técnica (Schwan T.J.et al. y J. Pharm. Sci. (1975), 64, 337-338; Roger R. et al; Chem. Rev. 61 ,179, (1961) ; Tetrahedron, 29 (14), 2147-51 (1973); Patai, S ; Chem. Amidines Imidates, Volumen 1 , 283-348 (1975); Patai S., Chem. Amidine, Imidates. Vol 2, 339-366 (1990)). Los compuestos de la presente invención poseen interesantes propiedades farmacológicas. Presentan una doble actividad biológica, es decir, inhiben a la vez el proceso de la L-arginina/óxido nítrico (NO) y el proceso de la ciclooxigenasa. Los compuestos de la presente invención pueden así ser utilizados en diferentes aplicaciones terapéuticas. Teniendo en cuenta la función potencial de la NO sintasa y de la ciclooxigenasa en la fisiopatología, los compuestos de acuerdo a la invención pueden producir efectos benéficos y favorables en el tratamiento de: problemas cardiovasculares y cerebrovasculares que comprenden por ejemplo, las migrañas, las congestiones cerebrales, los infartos, las isquemias, los choques sépticos, endotoxínicos y hemorrágicos, los dolores; diversas formas de inflamación, que comprenden por ejemplo las fiebres reumáticas agudas, las artritis reumatoides o de otros tipos de artritis, la osteoartritis, el asma; los problemas del sistema inmunitario, que comprenden las infecciones virales o no virales, las enfermedades autoimunes y cualquier patología caracterizada por una producción excesiva de oxido nítrico y/o de los metabolitos del ácido araquídico. Se encontrará posteriormente en la presente, en la parte experimental, una ilustración de la propiedades farmacológicas de los compuestos de la invención. Estas propiedades vuelven a los productos de fórmula I aptos para un uso farmacéutico. La presente solicitud tiene igualmente por objeto, como medicamentos, los productos de fórmula I tal como se define anteriormente en la presente, así como las composiciones farmacéuticas que los contienen, como principio activo, por lo menos uno de los medicamentos tal como se definen anteriormente en la presente. La invención es concerniente así con las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la invención, en asociación con un soporte farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica puede estar en forma de sólido, por ejemplo, de polvos, granulos, comprimidos, cápsulas o supositorios. Los soportes sólidos apropiados pueden ser por ejemplo, fosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, azúcares, lactosa, dextrina almidón, gelatina, celulosa, celulosa de metilo, la celulosa carboximetil de sodio, la polivinil pirrolidina y la cera. Las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la invención pueden también presentarse en forma líquida, por ejemplo de soluciones, emulsiones, suspensiones o jarabes. Los soportes líquidos apropiados pueden ser por ejemplo agua, disolventes orgánicos tales como glicerol o glicoles, así como sus mezclas, en proporciones variadas en agua, adicionadas a aceites o grasas farmacéuticamente aceptables. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo a la invención pueden ser administradas de acuerdo a los modos de administración clásicos tales como la administración oral o mediante inyección intramuscular, intraperitonial, intravenosa o subcutánea. La invención tiene igualmente por objeto productos de fórmula I tal como se definen anteriormente en la presente, para al preparación de medicamentos destinados a tratar los problemas cardiovasculares y cerebrovasculares, de medicamentos destinados a tratar diversas formas de inflamación, medicamentos destinados a tratar problemas del sistema inmunitario. Los ejemplos siguientes se presentan para ilustrar los procedimientos citados anteriormente en la presente y no deben ser en ningún caso considerados como un límite para el alcance de la invención.

Parte experimental Ejemplo 1 : Salicilato de aminoguanidina Se disuelven, en tanto que se calienta a una temperatura de 70°C, 420 mg (2.5 milimoles) de bicarbonato de aminoguanidina en 25 mi de agua, luego se agrega con agitación, una solución acuosa de 400 mg de salicilicato de sodio. Se calienta la mezcla durante 20 minutos, luego se liofiliza (polvo blanco; punto de fusión = 148°C).

Ejemplo 2: Ibuprofenato de aminoguanidina Se disuelven, en tanto que se calienta a una temperatura de 70°C, 420 mg (2.5 milimoles) de bicarbonato de aminoguanidina en 25 mi de agua. Se agrega una solución acuosa de 570 mg de sal de ibuprofeno de sodio. Se prolonga el calentamiento durante 20 minutos, luego se liofiliza (polvo blanco; punto de fusión = 134°C).

Ejemplo 3: Indometacinato de aminoguanídina Se procede como se describen en el ejemplo 1 , pero se utiliza la indometacina en lugar del salicilato de sodio (polvo amarillo; punto de fusión = 196°C).

Ejemplo 4: Acetilsalicilato de metilguanidina Se disuelven 450 mg (2.5 milimoles) de ácido acetilsalicílico en 20 mi de agua que contiene 2.5 mi de NaOH 1N. Se agregan enseguida 237.8 mg de clorhidrato de metilguanidina en 10 mi de agua. Se prosigue la agitación durante 15 minutos. Se obtiene una solución limpia. La liofilización produce un polvo blanco (punto de fusión = 153°C).

Ejemplo 5: Salicilato de metilguanidina Se disuelven, en tanto que se calienta, 345 mg (2.5 milimoles) de ácido salicílico en 20 mi de agua que contiene 2.5 mi de NaOH 1 N. Se agrega una solución de clorhidrato de metilguanidina (2.5 milimoles) en 10 mi de agua. Se prosigue la agitación a 40°C durante 10 minutos. La liofilización produce un polvo blanco muy voluminoso (punto de fusión = 140°C). RMN-1H (100 MHz, D2O):7-6.8 (m, 4H, aromático); 2.4 (s, 3H, NCH3).

Ejemplo 6: Ibuprofenato de metilguanidina Se disuelven, en tanto que se calienta, 2.5 milimoles de ibuprofen en 20 mi de agua que contienen 2.5 mi de NaOH 1 N. Se agrega una solución de clorhidrato de metilguanidina (2.5 milimoles) en 10 mi de agua. Se calienta, en tanto que se agita, a 60°C durante 15 minutos. La liofilización produce un polvo blanco (punto de fusión = 174°C). 1H-NMR (100 MHz, D2O): 7.2 (s, 4H, aromático); 3.4 (q, 1H, C6Hß-CH(Me)-CO); 2.6 (s, 3H, NCH3); 2.25 (d, 2H, ChbC6H6); 1.6 (m, 1H, CH[CH3)2); 1 2 (d, 3H, -CH(CH3)-CO2H); 0.8 (d, 6H, 2CH3).

Ejemplo 7: mefenamato de metilguanidina Se procede como se describe en el ejemplo 6, pero se utiliza ácido mefenámico en lugar de ibuprofeno. En el enfriamiento, el compuesto precipita. Se filtra y se seca el producto (punto de fusión = 124°C). 1H-NMR (100 MHz, D2O): 8.1 (m, 1H, H en o de CO2H); 7.2 - 6.8 (m, 6H, 2C6Hß); 2.9 (s, 3H, NCH3); 2.4 y 2.3 (d, 2CH3C6H6). Al utilizar el procedimiento indicado anteriormente, se pueden preparar igualmente los productos siguientes, que forman parte igualmente de la invención y que constituyen los productos preferidos : Estudio farmacológico de los productos de la invención Los productos de la invención han sido sometidos a pruebas biológicas in vitro con el fin de probar su actividad para bloquear la NO-sintasa inductible y la ciclooxigenasa. Han sido comparados con sustancias de referencia tales como la aminoguanidina, la L-nitroarginina, el ibuprofeno, la indometacina, el ácido acetilsalicílico. 1) Efecto in vitro sobre la NO-sintasa inductible de los macrofagos murinos J774A1: La prueba consiste en medir la transformación mediante la NO- sintasa de la L-arginina a L-citrulina, según el método de Bredt y Snyder (Proceedings of the National Academy of Sciences USA 87, 682-685, 1990). Los macrofagos murinos J774A1 producen una gran cantidad de NO después de la activación mediante los lipopolisacaridos (LPS) y el Las células son cultivadas en el medio DMEM (Dulbecco's Modified Eagles's Médium) enriquecido con 10% de suero de becerro fetal a 37°C bajo una atmósfera de 5% de CO2 después de la activación mediante el LPS y el IFN-?. Son sembrados a razón de 5,000 células/cm2 en matraces de 150 cm2. Las incubaciones se hacen en presencia de LPS (1 µg/ml) y de IFN-^y murino (50 U/ml) en DMEM enriquecido con 10% de suero de becerro fetal. La NO — sintasa se aisla con una solución reguladora del pH de extracción (HEPS 50 mM, pH 7.4, ditiotreitol 0.5 mM, pepstatina a 1 mg/ml, leupeptina 1 mg/ml, inhibidor de tripsina de soya 1 mg/ml, antipaína 1 mg/ml y PMSF 10mg/ml Después de la sonicación en la solución reguladora del pH de extracción a 4°C, los homogeneizados son ultracentrifugados (100,000 g a 4°C durante una hora). La dosificación se hace en tubos de ensayo de vidrio en los cuales se distribuyen 100 microlitros de la solución reguladora del pH de incubación que contiene 100 mM de HEPS, pH 7.4, 1 mM de ditiotreitol, 2.5 mM de CaCI2, 10 µM de tetrahidro biopteriana, FAD 10µM, BSA 1 mg/ml 2 mM de NADPH reducido, 2 mM de EDTA y 2.5 nM de CaCI2. Se agregan 25 microlitros de una solución que contiene 100 mM de argenina titulada (actividad específica: 56.4 Ci/milimoles, Amersham) y 40µM de arginina no radioactiva. La reacción es iniciada al agregar 50 microlitros del homogeneizado, el volumen final es de 200 microlitos (los 25 microlitros faltantes son ya sea de agua, ya sea del producto probado). Después de 15 minutos, la reacción es detenida con 2 mi de solución reguladora del pH de retención (20 mM de HEPES, pH 5.5, 2 mM de EDTA). Después del paso de las muestras en una columna de un mililitro de resina DOWEX, la radioactividad es cuantificada mediante un espectrómetro de centelleo líquido.

Los resultados son expresados en valor de CI5o y son resumidos en la tabla del párrafo 2 (segunda columna de los resultados intitulada NO-sintasa inductible, formación de citrulina"). 2. Efecto in vitro sobre la producción de nitritos mediante los macrófagos murinos J774A1 : Esta prueba es utilizada para medir la actividad inhibidora de los productos sobre la NO sintasa inductible de células de cultivos. Las células son cultivadas en el medio DMEM (Dulbecco's Modífied Eagles's Médium) enriquecido con 10% de suero de becerro fetal a 37°C bajo una atmósfera de 5% de CO2. Para los experimentos, se reparten en placas de 96 cavidades (50000 células por cavidad) e incubadas en DMEM sin rojo de fenol al 10% de suero de becerro fetal con LPS (1 µg/ml) y de IFN-? murino (50 U/ml) en presencia o ausencia de los productos a probar. Después de 48 horas, la concentración de nitritos en el medio de cultivo, los productos de degradación del No, se miden mediante un método colorimétrico de acuerdo a Green et al., Analytical Biochemistry 126, 131-138 (1982). Los resultados son expresados en valor de CI50 y se resumen en la tabla del párrafo 2 (segunda columna de resultados intitulada "NO sintasa inductible, formación de nitritos"). 3) Efecto in vitro sobre la producción de nitritos y de PGE2 mediante células microgliales de rata: Las células microgliales son aisladas a partir de cultivos de células guales procedentes de corteza de rata Wistar recién nacida según el protocolo de Thery y colaboradores (1991). Las células microgliales son sembradas en placas de 24 cavidades a razón de 5x105 células por mililitro y 0.5 mi por cavidad. Las células microgliales son incubadas en presencia de LPS (10 microgramos/ml) y de los inhibidores durante 24 horas a 37°C bajo una atmósfera de 5% de CO2. Después de 24 horas, los sobrenadantes son prelavados con el fin de medir las concentraciones de nitritos y de PGE2. La PGE2 es dosificada con la ayuda de una dosis radioinmunológica comercializada por NEN según el modo de operación descrito por el fabricante. Cada muestra es duplicada en dosis. Los resultados son expresados en forma de C o calculados con la ayuda de una regresión lineal sobre la parte lineal de la curva de inhibición (logicial Fig P6C). Los nitritos son dosificados según el método de Green et al, Analytical Biochemistry 126, 131-138, (1982). Los resultados son expresados en forma de CI50 y son indicados en la tabla a continuación por el ejemplo 2. 4) Efecto in vitro sobre la ciclooxigenasa inductible La ciclooxigenasa existe bajo dos isoformas, la COX-1 (constitutiva) y la COX-2 inducida por los agentes inflamatorios mitogenos, citocinas y endotoxinas. Los compuestos han sido probados sobre la actividad enzimatica de dos isoformas semipurificadas. El principio de prueba es de cuantificar la transformación del ácido araquidónico (AA) a PGE2 mediante la COX-1 o la COX-2. El método está inspirado de Futaki et al. (Prostaglandins, 47, 55-59, 1994). La COX-1 (Prostaglandina H Sintasa-1 , EC1.14.9.1) es conservada a -80°C y procedente de la vesícula seminal de carnero. La COX-2 (Prostaglandina H Sintasa-2) es también conservada a -80°C y procedente de placenta de cordero. Los tubos se llenan con 500 microlitros de solución reguladora del pH (100 mM de Tris HCI, pH 8, 1 µM de hematina, 1 mM de fenol) y los compuestos de la invención o las substancias de referencia a concentraciones que van de 1 nM a 1 mM. Los testigos o referencias son de solución reguladora del pH sin inhibidores. Después de 2 minutos de incubación con 5 U (COX-2) o 10 U (COX-1) de enzima se agregan 5 microlitros de ácido araquidónico a 10 µM por 2 minutos. La reacción es detenida con 30 microlitros de HCI a 1 N. La extracción se hace en columnas Seppack 18 (Waters). Después de la evaporación a sequedad, la PGE2 es medida mediante dosificación radioinmunológica a partir de un equipo comercial. Los resultados se expresan en valor de CI50 y se resumen en la tabla a continuación. CI50 (µM) Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la practica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes

Claims (11)

1. Reivindicaciones 1 Los compuestos de fórmula general I A B (I) en forma de sal caracterizados porque A representa un inhibidor de la ciclooxigenasa que presenta una función carboxi. B representa un compuesto de fórmula general IB el la cual Ri representa H. el radical nitro o fenilo, el radical fenilo está eventualmente sustituido por uno o vanos substituyentes escogidos de entre los radicales halo, ciano, nitro, tpfluorometilo, alquilo inferior o alcoxi inferior; R2 representa un radical alquilo inferior; alquiltio inferior; alquiltioalquilo; anlo eventualmente substituido por uno o vanos substituyentes escogidos de entre los radicales halo, ciano. nitro, tpfluorometilo, alquilo inferior o alcoxi inferior, o ammo eventualmente substituido por un radical escogido de entre los radicales nitro, ammo, alquilo inferior o fenilo, el radical fenilo está en si mismo eventualmente substituido por uno o varios substituyentes escogidos de entre los radicales halo, ciano nitro tpfluorometilo. alquilo inferior o alcoxi inferior y cuando A representa el ácido acetilsa cí co y Ri el átomo de hidrogeno, entonces R2 no representa ni un radical ailo ni un radical fenila ino, el radical fepilo está eventualmente substituido
2. 2. Los compuestos de fórmula general I, de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizados porque el compuesto A se escoge de entre los salicilatos, la indometacina, el sulindac, los fenamatos y los derivados del ácido propiónico.
3. 3. Los compuestos de fórmula general I, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizados porque : A representa el ácido salicílico, el salicilato de metilo, el ácido acetilsalicílico, la indometacina, el sulindac, el ácido mefenámico, el ácido meclofenámico o el ibuprofeno; y B es de fórmula general (IB) tal como se define en la reivindicación 1 , en la cual Ri representa H, el radical nitro o fenilo, el radical fenilo está eventualmente sustituido por uno o varios substituyentes escogidos de entre los radicales cloro, flúor, ciano, nitro, triflourometilo, metilo, etilo, metoxi, etoxi o isopropiloxi; y R2 representa un radical amino; hidracino; nitroamino; metilamino; etilamino; metilo; etilo; metiltio; metiltiometilo; fenilo eventualmente substituido por uno o varios substituyentes escogidos de entre, los radicales cloro, flúor, ciano, nitro, triflourometilo, metilo, etilo, metoxi, etoxi o isopropiloxi; tienilo; furilo o pirrolilo.
4. 4. Los compuestos de fórmula general I, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizados porque responden a las fórmulas siguientes: salicilato de aminoguanidina; ibuprofenato de aminoguanidina; indometacinato de aminoguanidina; acetilsalicilato de metilguanidina; salicilato de metilguanidina; ibuprofenato de metilguanidina; mefenamato de metilguanidina.
5. 5. Un procedimiento para la preparación de los productos de fórmula general I, de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque se hace reaccionar en agua, a una temperatura comprendida entre la temperatura ambiente y 70°C, una mezcla del compuesto de fórmula A, tal como se define en la reivindicación 1 , con un compuesto de fórmula B, tal como se define en la reivindicación 1.
6. 6. Los productos de fórmula I de conformidad con la reivindicación 1, caracterizados como medicamentos.
7. 7. Los productos de fórmula I, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, caracterizados como medicamentos.
8. 8. Composiciones farmacéuticas, caracterizadas porque contienen, como principio activo, por lo menos uno de los medicamentos tal como se definen en cualquiera de las reivindicaciones 6 o 7.
9. 9. El uso de los productos de fórmula I, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque se emplea para la preparación de medicamentos destinados a tratar problemas cardiovasculares y cerebrovasculares, que comprenden por ejemplo, migrañas, congestiones cerebrales, infartos, isquemias, choques sépticos, endotoxínicos y hemorrágicos, los dolores.
10. 10. El uso de los productos de fórmula I, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizados porque se emplean para la preparación de medicamentos destinados a tratar las diversas formas de inflamación que comprenden fiebres reumáticas agudas, artritis reumatoides o otros tipos de artritis, la osteoartritis, el asma.
11. 11. El uso de los productos de fórmula I, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque se emplea para la preparación de medicamentos destinados a tratar los problemas del sistema inmunitario, que comprenden las infecciones virales o no virales, las enfermedades autoinmunes y cualquier patología caracterizada por una producción excesiva de óxido nítrico y/o de los metabolitos de ácido araquídico.