MXPA05014223A - Derivados de bencimidazol y su uso como inhibidores de proteinas quinasas. - Google Patents

Derivados de bencimidazol y su uso como inhibidores de proteinas quinasas.

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Abstract

La invencion proporciona compuestos que tienen actividad como inhibidores de quinasas dependientes de ciclina, glicogeno sintasa quinasa-3 y quinasas Aurora parta uso en el tratamiento de estados y condiciones de enfermedad, tales ocmo cancer, que son mediadas por las quinasas. Los compuestos tienen la formula general (I); en donde X es CR5 o N; A es un enlace o -(CH2)m-(B)n-; B es C=O; NRg(C=O), o O(C=O), en donde Rg es hidrogeno o hidrocarbilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido opcionalmente por hidroxi o por alcoxi de 1 a 4 atomos de carbono, m es 0, 1 o 2; n es 0 o 1; R0 es hidrogeno o, junto con NRg cuando esta presente, forma un grupo -(CH2)p- en donde p es de 2 a 4; R1 es hidrogeno, un grupo carboxilico o heterociclico que tiene desde 3 hasta 12 miembros anillo, o un gruo hidrocarbilo de 1 a 8 atomos de carbono sustituido opcionalmente; R2 es hidrogeno, un grupo carboxilico o heterociclico que tiene de 3 a 12 miembros anillo, o un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 atomos de carbono sustituido opcionalmente; R2 es hidrogeno, halogeno, metoxi o un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 atomos de carbono, sustituido opcionalmente por halogeno, hidroxilo o metoxi; R3 y R4 junto con los atomos de carbono a los cuales estan unidos, forman un anillo carbociclico o heterociclico fundido, sustituido opcionalmente, que tiene de 5 a 7 miembros anillo de los cuales hasta 3 pueden ser heteroatomos seleccionados de N, O Y S; y R5 es hidrogeno, un grupo R2 o un grupo R10 en donde R10 se selecciona de halogeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 atomos de carbono, grupos carbociclico y heterociclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros anillo; un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X1, X1C(X2)X1, S, SO, SO2, NRc, SO2NRc o NRcSO2; y Rb se selecciona de hidrogeno, grupos carbociclico y heterociclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros anillo, y en donde uno o mas atomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 atomos de carbono puede ser reemplazado opcionalmente por O, S, SO, SO2, NRc, X1C(X2), C(X2)X1 o X1C(X2)X1; Rc se selecciona de hidrogeno e hidrocarbilo de 1 a 4 atomos de carbono; y X1 es O, S, o NRc y X2 es=O, =S, o =NRc. Tambien estan incluidas en la formula (I) las sales, solvatos y N-oxidos de los compuestos.

Description

DERIVADOS DE BENCI MIDAZOL Y SU USO COMO INHIBIDORES DE PROTEÍNAS QUINASAS Esta invención se refiere a compuestos de pirazol que inhiben o modulan la actividad de quinasas dependientes de ciclina (CDK), glicógeno sintasa quinasas (GS ) y quinasas Aurora para el uso de los compuestos en el tratamiento o profilaxis de los estados o condiciones de enfermedad mediados por las quinasas, y a novedosos compuestos que tienen actividad inhibidora o moduladora de quinasa. También se proporcionan composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos y novedosos intermediarios químicos.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las proteínas quinasas constituyen una gran familia de enzimas relacionadas estructuralmente, que son responsables- por el control de una amplia variedad de procesos de transducción de señal dentro de la célula (Hardie, G. y Hanks, S. (1995) The Protein Kinase Facts Libros I y II, Academic Press, San Diego, CA). Las quinasas pueden ser categorizadas en familias por los sustratos que ellas fosforilan (por ejemplo, proteína tirosina, proteina-serina/treonina, lípidos, etc.). Se ha identificado motivos de secuencia que generalmente corresponden a cada una de estas familias quinasa (por ejemplo, Hanks, S. K., Hunter, T., FASEB J., 9: 576-596 (1995); Knighton, y coautores, Science, 253: 407-414 (1991); Hiles, y coautores, Cell, 70: 419-429 (1992); Kunz, y coautores, Cell, 73: 585-596 (1993); Garcia-Bustos, y coautores, EMBO J., 13: 2352-2361 (1994)). Las proteínas quinasas pueden ser caracterizadas por sus mecanismos de regulación. Estos mecanismos incluyen, por ejemplo, auto-fosforilación, trans-fosforilación por otras quinasas, interacciones proteína-proteína, interacciones proteína-lípido, e interacciones proteína-polinucleótido. Una proteína quinasa individual puede ser regulada mediante más de un mecanismo. Las quinasas regulan muchos procesos celulares diferentes, incluyendo, pero sin limitación a ellos, proliferación, diferenciación, apoptosis, motilidad, transcripción, traducción y otros procesos de señalización, añadiendo grupos fosfato a proteínas objetivo. Estos eventos de fosforilación actúan como interruptores moleculares de encendido/apagado que pueden modular o regular la función biológica de la proteína objetivo. La fosforilación de las proteínas objetivo ocurre en respuesta a una variedad de señales extracelulares (hormonas, neurotransmisores, factores de crecimiento y diferenciación, etc.), eventos del ciclo celular, tensiones ambientales o nutricionales, etc. Las funcionas apropiadas de la proteína quinasa en las vías de señalización para activar o inactivar (ya sea directa o indirectamente), por ejemplo, une enzima metabólica, proteína reguladora, receptor, proteína cito esquelética, canal o bomba de iones, o factor de transcripción. La señalización incontrolada debido a control defectuoso de fosforilación de proteína ha estado implicada en una cantidad de enfermedades, incluyendo, por ejemplo, inflamación, cáncer, alergia/asma, enfermedad y condiciones del sistema inmunológico, enfermedades y condiciones del sistema nervioso central, y angiogénesis.
QUINASAS DEPENDIENTES DE CICLINA El proceso de división celular eucariótica puede estar dividido ampliamente en una serie de fases secuenciales denominadas G1, S, G2 y M. La progresión correcta a través de las diversas fases del ciclo celular ha demostrado ser dependiente críticamente de la regulación espacial y temporal de una familia de proteínas conocidas como quinasas dependientes de ciclina (CDK), y un conjunto diverso de sus proteínas compañeras cognadas denominadas ciclinas. Las CDK son proteínas quinasa serina-treonina homologas de CDC2 (también conocidas como CDK1), que son capaces de utilizar ATP como un sustrato en la fosforilación de diversos polipéptidos en un contexto dependiente de la secuencia. Las ciclinas son una familia de proteínas caracterizadas por una región de homología, que contiene aproximadamente 100 aminoácidos, denominados la "caja ciclina", que se usan para enlazarse a, y definir selectivamente para, proteínas compañeras CDK. La modulación de los niveles de expresión, tasas de degradación, y niveles de activación de diversas CDK y ciclinas durante e l ciclo celu lar conduce a la formación cícl ica de una serie de complejos CDK/ciclinas, en los cuales las CDK son activas enzim áticamente. La formación de estos com plejos controla el paso a través de puntos de verificación discretos en el ciclo celular, y por ello hace posible que continúe el proceso de división celular. La falla en satisfacer los criterios bioqu ímicos req ueridos previamente , en un punto de verificació n dado del ciclo celular, es decir, la falla para formar un complejo cdk/ciclina req uerido, p uede conducir a la detención del ciclo celular y/o a la apoptosis celular. La prol iferación cel u lar aberrante, como la q ue se man ifiesta en el cáncer, puede atribuirse con frecuencia a pérdida del control correcto del ciclo celular. La in hibición de la actividad enzimática de la cd k proporciona por lo tanto un med io mediante el cual las células que se están dividiendo de manera anormal, pueden detener su división o pueden eliminarse. La d iversidad de ckd , y complejos cdk, y sus papeles críticos en la mediación del ciclo celular, proporcionan un amplio espectro de objetivos terapéuticos potenciales seleccionados sobre la base de un razonam iento bioqu ímico definido. La progresión de la fase G 1 hacia la fase S del ciclo celular, está regulada primordialmente por cdk2 , cdk3, cdk4 y cdk6 por asociación con los miembros de las ciclinas de tipo D y E . Las ciclinas de tipo D parecen instrumentales para permitir el paso más allá del punto de restricción de G 1 , en donde el com plejo cdk2/ciclina E es clave para la transición de la fase G 1 a la fase S. Se piensa que la progresión subsiguiente a través de la fase S y la entrada en G2 requieren el complejo cd k2/ciclina A. Tanto la m itosis, com o la transición desde la fase G2 hasta la fase M q ue la d ispara , están regulados por comp lejos de cdkl y las ciclinas de tipo A y B. Durante la fase G 1 la proteína retino blastoma (Rb) y las proteínas bolsillo relacionadas tales como p 1 30 , son sustratos para los complejos cd k(2,4 y 6)/cicl ina . La progresión a través de G1 en parte está facilitada por la hiperfosforilación , y por ello la inactivación , de Rb y p 1 30 por los com plejos cdk(4/6)/ciclina D. La h iperfosforilación de Rb y de p1 30 ocasiona la liberación de factores de transcripción , tales como E2F, y por ello la expresión de genes necesaria para la progresión a través de G 1 y para la entrada en la fase S, tal como el gen para la cicllna E. La expresión de la ciclina E facilita la formación del com plejo cdk2/ciclina E, el cual ampl ifica, o mantiene, los niveles de E2F por medio de fosforilación adicional de Rb. El complejo cdk2/ciclina E también fosforila otras proteínas necesarias para la replicación del ADN , tales como NPAT, la cual ha sido implicada en la biosíntesis de la histona. La progresión de G1 y la transición de G 1 hacia S, también están reguladas por medio de la vía Myc estimulada con mitógeno, la cual se alimenta en la ruta cdk2/ciclina. La cdk2 también está conectada a la ruta de respuesta al daño de ADN mediado por p53, por medio de la regulación de p53 de los niveles de p21 . La p21 es un inhibidor de proteína de cdk2/ciclina E, y por ello es capaz de bloquear, o de demorar, la transición de G 1 a S. El complejo cdk2/ciclina E puede representar así un punto en el cual los estím u los bioq uímicos de las rutas Rb , Myc y p53 están integ radas en algú n g rado. La cdk2 y/o el complejo cdk2/ciclina E, por lo tanto, representan buenos objetivos para las terapias diseñadas para detener o recuperar el control del ciclo celu lar en las células q ue se están dividiendo de manera aberrante. El papel exacto de la cdk3 en el ciclo celular no está claro. Como todavía no se h a identificado com pañero del cog nado ciclina , sino u na forma negativa dom inante de célu las cdk3 demoradas en G 1 , esto sugiere que la cd k3 tiene un papel en la reg ulación de la transición G 1 /S. A pesar de que la mayoría de las cdk ha estado implicada en la regulación del ciclo celular, hay evidencia de que ciertos miem bros de la fam ilia cdk están involucrados en otros procesos bioquímicos . Esto está ejemplificados por cdk5, la cual es necesaria para el correcto desarrollo neuronal y la cual tam bién ha estado implicada en la fosforilación de varias proteínas neuronales tales como Tau, NUDE- 1 , sinapxinal , DARPP32 y el complejo Mund 8/Sintaxina 1 A. La cdk5 neuronal se activa convencionalmente por enlace a las proteínas p35/p39. La actividad de cdk5, sin embargo, puede ser des-regulada por el enlace de p25, una versión truncada de p35. La conversión de p35 a p25, y la subsiguiente desregulación de la actividad cdk5, puede ser inducida por isquemia, excitotoxicidad, y péptido ß-amiloideo. Consecuentemente, la p25 ha estado implicada en la patogénesis de enfermedades neurovegetativas, tales como Alzheimer, y por lo tanto es de interés como un objetivo para terapias dirigidas contra estas enfermedades. La cdk7 es una proteína nuclear que tiene actividad CAK cdc2 y se enlaza a la ciclina H. La cdk7 ha sido identificada como componente del complejo transcripcional TFIIH, el cual tiene actividad en el dominio carboxi-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II. Esto ha sido asociado con la regulación de la transcripción de VIH-1 por medio de una ruta bioquímica mediada por Tat. La Cdk8 se enlaza con la ciclina C, y ha estado implicada en la fosforilación del CTD de la ARN polimerasa II. De manera similar, el complejo cdk9/ciclina-T1 (complejo P-TEFb) ha estado implicado en el control de alargamiento de la ARN polimerasa II. El PTEF-b también se requiere para la activación de la transcripción del genoma de VlH-1 por el transactivador viral Tat a través de su interacción con la ciclina T1. La cdk7, la cdk8, la cdk9, y el complejo P-TEFb, en consecuencia, son objetivos potenciales para la terapia antiviral. En un nivel molecular, la mediación de la actividad del complejo cdk/ciclina requiere una serie de eventos de fosforilación estimuladora e inhibidora, o desfosforilación. La fosforilación de cdk se realiza mediante un grupo de quinasas activadores de cdk (CAK) y/o quinasas tales como weel, mYt1 y Mik1. La desfosforilación se realiza mediante fosfatasas tales como cdc25(a y c), pp2a, o KAP. La actividad del complejo cdk/ciclina puede ser regulada adicionalmente por dos familias de inhibidores proteináceos celulares endógenos: la familia Kip/Cip, o la familia INK. Las proteínas iNK enlazan específicamente la cdk4 y la cdk6. El p16ink4 (tam bién conocido como MTS 1 ), es un gen supresor potencial de tum or q ue ha mutado o está borrado, en u na gran cantidad de cánceres primarios. La fam il ia Kip/Cipo contiene proteínas tales como p21 Cip 1 , Waf1 , p27Kip 1 y p57Kip2. Como se discutió previamente, la p21 es i nducida por la p53, y es capaz d e i nactívar los com plejos cdk2/ciclina (E/A) y cdk4/ciclin a(D 1 /D2/D3) . Se ha observado unos niveles típicam ente bajos de expresión de p27 en cánceres de mama, colon y próstata . Contrariamente, la sobre-expresión de la ciclina E en tumores sólidos , ha demostrado estar correlacionada con la prognosis deficiente del paciente. La sobre-expresión de la ciclina D1 ha estado asociada con carcinomas esofágicos, de mama , escam osos, y de célu las de pulmón no pequeñas. Los papeles pivote de las cdk y sus proteínas asociadas, en la coordinación y manejo del ciclo celular en las células en proliferación, han sido descritos anteriormente. Algunas de las rutas bioquímicas en las cuales las cdk juegan un papel clave, tam bién han sido descritas. El desarrollo de monoterapias para el tratamiento de desórdenes proliferativos, tales como cánceres, usando terapias dirigidas genéricamente a las cdk, o a cdk específicas, es por consig uiente altamente deseable: Los inhibidores de cdk podrían usarse también para tratar otras condiciones, tales como infecciones virales, enfermedades autoinmunológicas, y enfermedades neuro-degenerativas, entre otras. Las terapias dirigidas a las cdk también pueden proporcionar beneficios clínicos en el tratamiento de las enfermedades previamente descritas, cuando se usan en terapia de combinación con agentes terapéuticos ya existentes o nuevos. Las terapias anticancerosas dirigidas a las cdk podrían tener ventajas sobre muchos agentes antitumorales, dado que no interactúan directamente con el ADN y por lo tanto deben reducir el riesgo de desarrollo de tumores secundarios.
QUINASAS AURORA Relativamente de manera reciente, se ha descubierto una nueva familia de quinasas serina/treonina conocidas como las quinasas Aurora, las cuales están involucradas en las fases F2 y M del ciclo celular, y que son importantes reguladores de mitosis. El papel preciso de las quinasas Aurora ya ha sido elucidado, pero ellas juegan una parte en el control del punto de verificación mitótico, la dinámica del cromosoma y la citoquinesis (Adams y coautores, Trends Cell Biol., 11: 49-54 (2001). Las quinasas Aurora están localizadas en los centrosomas de las células de interfase, en los polos del eje bipolar y en el cuerpo medio del aparato mitótico. Se ha encontrado tres miembros de la familia de quinasas Aurora en mamíferos, hasta ahora (E. A. Nigg, Nat. Rev. Mol. Cell Biol.2: 21-32, (2001)). Estas son: Aurora A (también denominada en la literatura como Aurora 2); Aurora B (tam bién den ominada en la literatura como Aurora 1 ); y Aurora C (tam bién denominada en la literatura como Aurora 3) . Las q uinasas Aurora (Katayama H , Brinkley WR, Sen S. ; The Au rora kinases: role in cell transformation and tumorigenesis; Cáncer Metástasis Rev. 2003 Dec; 22 (4): 451 -64). Los sustratos de las quinasas Aurora A y B han sido id entificad os como incluyentes de una proteína motora similar a q uinesina, proteínas del aparato del huso acromático, proteína histona H3, proteína cinetócoro y la proteína supresora de tumores p53. Se cree q ue las quinasas Aurora A están involucradas en la formación de eje y se vuelven localizadas en el centrosoma d urante la fase G2 temprana, en donde ellas fosforilan las proteínas asociadas con el huso acromático (Prigent y coautores, Cell , 1 14: 531 -535 (2003). Hirota y coautores, Cell, 1 14: 585-598, (2003) encontraron que las células carentes de proteína quinasa Aurora A eran incapaces de in iciar la mitosis. Adicionalmente, se ha encontrado (Adams, 2001 ) que la mutación o la perturbación del gen Aurora A en diversas especies, conduce a anorma lidades mitóticas, incluyendo separación del centrosoma y defectos de maduración , aberraciones del huso cromático y defectos de segregación de cromosoma..
Las quinasas Aurora generalmente son expresadas a un nivel bajo en la mayoría de los tejidos normales, siendo las excepciones tejidos con una alta proporción de células que se dividen, tales como el timo y testis. Sin embargo, se ha encontrado niveles elevados de quinasas Aurora en muchos cánceres humanos (Giet y coautores, J. Cell. Sci. 112: 3591-361, (1999) y Katayama (2003). Adicionalmente, la quinasa Aurora A mapea a la región del cromosoma 20q13. , que frecuentemente se ha encontrado que está amplificado en muchos cánceres humanos. Así, por ejemplo, se ha encontrado una sobre-expresión significativa de Aurora A en los cánceres humanos de mama, ovarios y pancreático (véase Zhou y coautores, Nat. Genet. 20: 189- 193, (1998), Tanaka y coautores, Cáncer Res., 59: 2041-2044, (1999) y Han y coautores, cáncer Res., 62: 2890-2896, (2002). Más aún, Isola, American Journal of Pathology 147, 905- 911 (1995) ha reportado que la amplificación del locus Aurora A (20ql3) está correlacionada con una prognosis deficiente de los pacientes con cáncer de mama negativo a nodos. La amplificación y/o la sobre-expresión de Aurora A se observa en cánceres de vejiga humanos, y la amplificación de Aurora A está asociada con aneuploide y comportamiento clínico agresivo, véase Sen y coautores, J. Nati. Cáncer Inst, 94: 1320-1329 (2002). La expresión elevada de Aurora A ha sido detectada en más de 50% de cánceres coloréeteles, (véase Bischoff y coautores, EMBO J., 17: 3052-3065, (1998) y Takahashi y coautores, Jpn. J.
Cáncer Res., 91: 1007-1014 (2000)) cánceres de ovario (véase Gritsko y coautores Clin. Cáncer Res., 9: 1420-1426 (2003), y tumores gástricos Sakakura y coautores, British Journal of Cáncer, 84: 824-831 (2001). Tanaka y coautores Cáncer Research, 59: 2041-2044 (1999) encontraron evidencia de sobre-expresión de Aurora A en 94% de los adenocarcinomas de mama de ducto invasivo. También se ha encontrado altos niveles de quinasa Aurora A en líneas celulares tumorales renales, cervicales, neuroblastoma, melanoma, linfoma, pancreáticas y de próstata. Bischoff y coautores (1998), E BO J., 17: 3052-3065 (1998); Kimura y coautores J. Bioi. Chem., 274: 7334-7340 (1999); Zhou y coautores, Nature Genetics, 20: 189-193 (1998); Li y coautores, Clin Cáncer Res.9 (3): 991-7 (2003)]. Aurora-B está altamente expresado en múltiples líneas celulares tumorales humanas, incluyendo células leucémicas [Katayama y coautores, Gene 244: 1-7)]. Los niveles de esta enzima aumentan como una función de la etapa dé Duke en los cánceres colorectales primarios [Katayama y coautores, J. Nati Cáncer Inst., 91: 1160-1162 (1999)]. Se han detectado altos niveles de Aurora 3 (Aurora C) en varias líneas celulares tumorales, aún a pesar de que esta quinasa tiende a ser restringida a las células germinales en los tejidos normales (véase Kimura y coautores Journal of Biological Chemistry, 274: 7334-7340 (1999)). La sobre-expresión de Aurora 3 en aproximadamente 50% de los cánceres colorectales también ha sido reportada en el artículo por Takahashi y coautores, Jpn J. Cáncer Res. 91: 1007-1014 (2001)]. Se puede encontrar otros informes del papel de las quinasas Aurora en desórdenes proliferativos, en Bischoff y coautores, Trends in Cell Biology 9: 454-459 (1999); Giet y coautores Journal of Cell Science, 112: 3591-3601 (1999) y Dutertre, y coautores Oncogene, 21: 6175-6183 (2002). Royce y coautores reportan que la expresión del gen Aurora 2 (conocido como ST 15 o BTAK) ha sido notada en aproximadamente una cuarta parte de los tumores de mama primarios (Royce ME, Xia W, Sahin AA, Katayama H, Johnston DA, Hortobagyi G, Sen S, Hung MC; La expresión de STK15/Aurora-A en los tumores de mama primarios está correlacionada con el grado nuclear, pero no con la prognosis; Cáncer.2004 Jan 1; 100 (1): 12-9). El carcinoma endometrial (EC) comprende al menos dos tipos de cáncer: carcinomas endometrioides (EEC) que son tumores relacionados con estrógeno, los cuales frecuentemente son euploides y tienen una buena prognosis. Carcinomas no endometrioides (NEEC; formas celulares serosa y limpia) no están relacionados con el estrógeno, y frecuentemente aneuploides, y son clínicamente agresivos. También se ha encontrado que Aurora estaba amplificada en 55. 5% de los NEEC, pero no en cualquier EEC (P < 0.001) (Moreno-Bueno G, Sánchez-Estevez C, Cassia R, Rodríguez-Perales S, Díaz-Uriarte R, Domínguez O, Hardisson D, Yujar M, Prat J, Matías-Guiu X, Cigudosa JC, Palacios J. Cáncer Res. 2003 Sep 15; 63 (18): 5697-702). Reichardt y coautores (Oncol Rep. 2003 Sep-Oct; 10 (5): 1275-9) han reportado que el análisis cuantitativo de ADN mediante PCR para investigar la amplificación de Aurora en gliomas, reveló que cinco de 16 tumores (31 %) de diferente grado WHO (1 x grado II, 1 x grado III, 3x grado IV) mostraron amplificación del gen de Aurora 2 en el ADN. Se elaboró la hipótesis de que la amplificación del gen Aurora 2 puede ser una alteración genética no aleatoria en los gliomas humanos, que juega un papel en las rutas genéticas de la tumorigénesis. Los resultados de Hamada y coautores (Br. J. Haematol. 2003 May; 121 (3): 439-47) también sugieren que Aurora 2 es un candidato efectivo para indicar no solamente la actividad de la enfermedad, sino también la tumorigénesis de linfomas que no sean de Hodgkín. El retardo del crecimiento celular tumoral resultante de la restricción de estas funciones genéticas podría ser un enfoque terapéutico para los linfomas que no son de Hodgkin. En un estudio por Gritsko y coautores (Clin Cáncer Res. 2003 Abr; 9 (4): 1420-6)), se examinaron los niveles de la actividad quinasa y de la proteína de Aurora A en 92 pacientes con tumores ováricos primarios. Los análisis de quinasa in vitro revelaron elevada actividad quinasa en 44 casos (48%). Se detectaron niveles aumentados de proteína Aurora A en 52 muestras (57%). Los altos niveles de proteína de Aurora A mostraron correlación con la actividad quinasa elevada. Los resultados obtenidos por Li y coautores (Clin. Cáncer Res. 2003 Mar; 9 (3): 991-7) mostraron que el gen Aurora A está sobre-expresado en los tumores pancreáticos y el líneas celulares de carcinoma, y sugieren que la sobre expresión de Aurora A puede jugar un papel en la carcinogénesis pancreática. De manera similar, se ha demostrado que la amplificación del gen Aurora A y la expresión aumentada asociada de la quinasa mitótica que ella codifica, están asociadas con aneuploide y con comportamiento clínico agresivo en el cáncer de vejiga humano (J. Nati. Cáncer Inst.2002 Sep 4; 94 (17): 1320-9). La investigación por varios grupos (Dutertre S, Prigent C, Aurora-A overexpression leads to override of the microtubule-kinetochore attachment checkpoint; Mol. Interv. 2003 May; 3 (3): 127-30 y Any S, Penrhyn-Lowe S, Venkitaraman AR., Aurora-A amplification overrides the mitotic spindle assembly checkpoint, inducing resistance to Taxol, Cáncer Cell. 2003 Jan; 3 (1): 51-62) sugiere que la sobre expresión de la actividad de la quinasa Aurora está asociada con resistencia a algunas terapias actuales para el cáncer. Por ejemplo, la sobre expresión de Aurora A en fibroblastos de embriones de ratón, puede reducir la sensibilidad de esas células a los efectos citotóxicos de los derivados de taxano. En consecuencia, los inhibidores de la quinasa Aurora pueden encontrar uso particular en pacientes que han desarrollado resistencia a las terapias existentes.
Sobre la base del trabajo llevado a cabo hasta la fecha, se prevé que la inhibición de las quinasas Aurora, particularmente de la quinasa Aurora A y de la quinasa Aurora B, probará ser un medio efectivo para detener el desarrollo de tumores. Harrington y coautores (Nat Med.2004 Mar; 10 (3): 262-7) han demostrado que un inhibidor de las quinasas Aurora suprime el crecimiento tumoral e induce la regresión tumoral in vivo. En el estudio, el inhibidor de quinasa Aurora bloqueó la proliferación de las células cancerosas, y también disparó la muerte celular en un rango de líneas celulares cancerosas, incluyendo líneas celulares leucémicas, coloréeteles y de mama. Los cánceres que pueden ser particularmente receptivos a los inhibidores de Aurora incluyen los de mama, vejiga, colorrectal, pancreático, ovárico, de linfoma que no sea de Hodgkin, gliomas y carcinomas endometriales no endometrioides.
GLICÓGENO SINTASA QUINASA La glicógeno sintasa quinasa-3 (GSK3) es una quinasa serina/treonina que se origina como dos isoformas expresadas generalizadamente en los seres humanos (GSK3a y beta GSK3 ). La GSK3 ha estado implicada al jugar papeles en el desarrollo embriónico, síntesis de proteínas, proliferación celular, diferenciación celular, dinámicas de microtúbulo, motilidad celular, y apoptosis celular. Como tal, la GSK3 ha estado implicada en la progresión de estados de enfermedad tales como diabetes, cáncer, enfermedad de Alzheimer, apoplejía , epilepsia, enfermedad de las neuronas motoras y/o trauma en la cabeza . Filogenéticamente, la GS 3 es la m ás cercanamente relacionada con las qu inasas depend ientes de cicli na (CD K). El consenso de la secuencia del sustrato péptido reconocido por GS K3 es (Ser/Thr)-X-X- X- (pSer/pThr), en donde X es cualq uier aminoácido (en las posiciones (n + 1 ), (n+2), (n+3)) y pSer y pThr son fosfo-serina y fosfo-treonina, respectivamente (n+4). La GSK3 fosforila la primera serina, o trenonina, en la posición (n). La fosfo-serina o la fosfo-treonina, en la posición (n+4) parecen ser necesarias para cebar la GSK3 con el fin de obtener el máximo cam bio de sustrato. La fosforilación de GSK3a en Ser21 , o de G SK3p en Ser9, conduce a la inhibición de G SK3. Estudios de mutagénesis y com petencia péptida han conducido al modelo en el que el término N fosforilado de la GSK3 es capaz de competir con el sustrato fosfo-péptido (S/TXXXpS/pT) por medio de un mecanismo auto-inh ibidor. También hay datos que sugieren q ue GSK3a y GSK puede ser regulado sutilmente por la fosforilación de las tirosinas 279 y 21 6 respectivamente. La mutación de estos residuos a una Phe ocasiona una red ucción en una actividad q uinasa in vivo. La estructura cristalográfica con rayos X de la GSK3 P ha ayudado a esclarecer todos los aspectos de la activación y regulación de la GSK3. La GSK3 forma parte de la ruta de respuesta a la insulina en los mamíferos, y es capaz de fosforilar, y por lo tanto de inactivar, la glicógeno sintasa. La sobre-regulación de la actividad de la glicógeno sintasa, y por medio de ella la síntesis de glicógeno, a través de la inhibición de la GSK3, ha sido considerada por ello un medio potencial para combatir la diabetes mellitus de tipo II o no dependiente de insulina (NIDDM): una condición en la cual los tejidos del cuerpo se hacen resistentes a la estimulación con insulina. La respuesta celular a la insulina en el hígado, tejidos adiposos o musculares, es disparada por la insulina que se une a un receptor de insulina extracelular. Esto ocasiona la fosforilación, y el subsiguiente reclutamiento hacia la membrana plasmática, de las proteínas sustrato del receptor de insulina (IRS). La fosforilación de las proteínas IRS inicia el reclutamiento de la fosfoinositida-3 quinasa (P13K) hacia la membrana plasmática, en donde es capaz de liberar el segundo mensajero fosfatidilinositio 3,4,5-trifosfato (PIP3). Esto facilita la co-localización de la proteína quinasa 1 dependiente de 3-fosfoinositida (PDK1) y la proteína quinasa B (PKB o Akt) hacia la membrana, en donde la PDK1 activa la PKB. La PKB es capaz de fosforilar, y por ello de inhibir, la GSK3a y/o la GSKp mediante la fosforilación de Ser9, o ser21, respectivamente. La inhibición de GSK3 dispara entonces la sobre-regulación de la actividad de la glicógeno sintasa. Los agentes terapéuticos capaces de inhibir la GSK3 pueden ser capaces por ello de Inducir respuestas celulares parecidas a las que se observan en la estimulación con insulina. Un sustrato in vivo de GSK3 es el factor de iniciación de síntesis de proteína eucariótica 2B (elF2B). El elF2B se inactiva por medio de la fosforilación, y por ello es capaz de suprimir la biosíntesis de proteína. La inhibición de GSK3, por ejemplo, mediante la inactivación de la proteína "objetivo mamífero de la rapamicina" (mTOR), puede por ello sobre-regular la biosíntesis de proteína. Finalmente, hay alguna evidencia para la regulación de la actividad de GSK3 por medio de la ruta de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK) a través de la fosforilación de GSK3 por medio de la proteína quinasa \ activada por la proteína quinasa (MAPKAP-K1 o RSK). Estos datos sugieren que la actividad de GSK3 puede ser modulada por estímulos mitogénicos, insulina y/o aminoácidos. También se ha demostrado que la GSK3p es un componente clave en la vía de señalización Wnt de los veriebrados. Esta vía bioquímica ha demostrado ser crítica para el desarrollo embriónico normal y regula la proliferación celular en los tejidos normales. La GSK3 se vuelve inhibida en respuesta a los estímulos con Wnt. Esto puede conducir a la desfosforilación de los sustratos GSK3 tales como Axina, el producto del gen de la poliposis coli adenomatosa (APC) y la ß-catenina. La regulación aberrante de la ruta Wnt ha sido asociada con muchos cánceres. Las mutaciones en APC, y/o en la ß-catenina, son comunes en el cáncer colorrectal y en otros tumores. También se ha demostrado que la ß-catenina es de importancia en la adhesión celular. Por ello, la GSK3 puede modular también los procesos de adhesión celular en algún grado. Aparte de las rutas bioquímicas ya descritas, también hay datos que im plican a la GSK3 en la regu lación de la división celular por med io de la fosfori lación de la ciclina-D 1 , en la fosforilación de factores de transcripción tales como c-J u n, proteína en lazante de CCAAT/mejorador(C/EBPa), c-Myc y/u otros sustratos tales como Factor Nuclear de Células T Activadas (NFATc), Factor- 1 de choque térmico (H SF-1 ) y la proteína enlazante del elemento de respuesta a la c-AMP (CREB). La GSK3 también parece jugar un papel, au nq ue específico para el tejido, en la reg ulación de la apoptosis celular. El papel de la GSK3 en l a modulación de la apoptosis celular, por med io de u n meca nismo pro-apoptótico, pued.e ser de relevancia particu lar para las condiciones médicas en las cuales puede ocurrir la apoptosis neuronal . Los ejemplos de estas son trauma en la cabeza, apoplejía, epilepsia, enfermedad de Alzheimer, y enfermedad de las neuronas motoras, parálisis supran uclear progresiva, degeneración corticobasal, y enfermedad de Pick. Se ha demostrado in vitro q ue la GSK3 es capaz de hiper-fosforilar la proteína Tau asociada con el microtúbulo. La hiperfosforilación de Tau pertu rba su enlace normal a los m icrotúbulos y también puede conducir a la formación de filamentos de Tau intracelulares. Se cree que la acumulación progresiva de estos filamentos conduce a eventual d isfunción y degeneración neuronal. La inhibición de la fosforilación de Tau, mediante la inhibición de la GSK3, puede proporcionar por ello un medio para limitar y/o evitar efectos neurodegenerativos. WO 02/34721 de Du Pont, describe una clase de indeno[1 , 2-c]pirazol-4-onas como inhibidoras de las quinasas depend ientes de ciclina. WO 01 /81 348 de Bristol Myers Squibb describe el uso de 5-tio-, sulfinil- y sulfonilpirazolo[3,4-b]-pirid inas como inh ibidores de q uinasas depend ientes de ciclina. WO 00/62778 también de Bristol Myers Squibb describe u na clase de in hibidores de prote ína ti rosina q ui nasa. WO 01 /72745A1 de Ciclacel describe 4-heteroarilo-pi rimid inas 2-sustituidas y su preparación , composiciones farmacéuticas que las contienen y su uso como inhi bidores de q uinasas dependientes de ciclina (cdk), y por lo tanto su uso en el tratamiento de desórdenes proliferativos, tales como cáncer, leucemia, psoriasis y sim ilares. WO 99/21845 de Agouron describe derivados de 4-aminotiazol para inhibir quinasas dependientes de ciclina (cdk), tales como CDK1 , CDK2, CDK4, y CDK6. La invención está dirigida también al uso terapéutico o profiláctico de composiciones farmacéuticas q ue contienen estos compuestos, y a métodos para tratar malignidades y otros desórdenes mediante la administración de cantidades efectivas de estos compuestos. WO 01 /53274 de Agouron describe como inhibidores de q uinasa CDK a una clase de compuestos que pueden contener un anillo benceno sustitu ido con amida unido a un grupo heterocíclico q ue contiene N. Si bien no se mencionan genéricamente los compuestos de indazol, uno de los compuestos ejemplificados contiene una porción anilida ácido 3-carboxílico de indazol, unida por medio de un grupo metilsulfonilo a una pirazolopirimidina. WO 01/98290 (Pharmacia & Upjohn) describe una clase de derivados de 3-am¡nocarbonil-2-carboxamido tiofeno como inhibidores de proteína quinasa. Se señala que los compuestos tienen múltiple actividad de proteína quinasa. WO 01/53268 y WO 01/02369 de Agouron describen compuestos que median o inhiben la proliferación celular mediante la inhibición de proteínas quinasa tales como quinasas dependientes de ciclina o quinasa tirosina. Los compuestos de Agouron tienen un anillo arilo o heteroarilo unido directamente o mediante un grupo CH = CH o CH = N a la posición 3 de un anillo indazol. WO 00/39108 y WO 02/00651 (ambas para Du Pont Pharmaceuticals) describen extensas clases de compuestos heterocíclicos que son inhibidores de las enzimas proteasa serina similares a tripsina, especialmente factor Xa y trombina. Se señala que los compuestos son útiles como anticoagulantes o para la prevención de desórdenes tromboembólicos. También se describen compuestos heterocíclicos que tienen actividad contra el factor Xa en WO 01/1978 (Cor Therapeutics) y en US 2002/0091116 (Zhu y co-inventores). WO 03/035065 (Aventis) describe una extensa clase de derivados de bencimidazol como inhibidores de proteína quinasa, pero no describen actividad contra las quinasas CDK o las quinasas GSK.
WO 97/36585 y US 5,874,452 (ambas para Merck) describen compuestos biheteroarilo que son inhibidores de la farnesil transferasa. WO 03/066629 (Vértex) describe aminas de bencimidazolilpirazol como inhibidores de GSK-3. WO 97/12615 (Warner Lambert) describe bencimidazoles como inhibidores de 15-lipoxigenasa.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención proporciona compuestos que tienen actividad inhibidora o moduladora de quinasas dependientes de ciclina, y actividad moduladora o inhibidora de glicógeno sintasa quinasa 3 (GSK3), y/o actividad inhibidora o moduladora de quinasas Aurora, y los cuales se prevé que serán útiles para el tratamiento de estados o condiciones de enfermedad mediados por las quinasas. Así, por ejemplo, se prevé que los compuestos de la invención serán útiles para aliviar o para reducir la incidencia de cáncer. De acuerdo con esto, la invención proporciona, entre otros: - El uso de un compuesto de la fórmula (I), tal como se definió aquí, para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de un estado o. condición de enfermedad mediado por una quinasa dependiente de ciclina o glicógeno sintasa quinasa-3.
- Un método para la profilaxis o tratamiento de un estado o condición de enfermedad mediado por una quinasa dependiente de ciclina o glicógeno sintasa quinasa-3, cuyo método comprende administrar a un sujeto que lo necesita, un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí. - Un método para aliviar o reducir la incidencia de un estado o condición de enfermedad mediado por una quinasa dependiente de ciclina o glicógeno sintasa quinasa-3, cuyo método comprende administrar a un sujeto que lo necesita, un compuesto de la fórmula (I) tal como se define aquí. - Un método para tratar una enfermedad o condición que comprende o aparece a partir de crecimiento celular anormal en un mamífero, cuyo método comprende administrar ai mamífero un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí, en una cantidad efectiva para inhibir el crecimiento celular anormal. - Un método para aliviar o reducir la incidencia de una enfermedad o condición que comprende o aparece a partir de crecimiento celular anormal en un mamífero, cuyo método comprende administrar al mamífero un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí, en una cantidad efectiva para inhibir el crecimiento celular anormal. - Un método para tratar una enfermedad o condición que comprende o aparece a partir de crecimiento celular anormal en un mamífero, cuyo método comprende administrar al mamífero un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí, en una cantidad efectiva para inhibir la actividad de una quinasa cdk (tal como cdkl o cdk2), o actividad glicógeno sintasa quinasa-3. - Un método para aliviar o reducir la incidencia de una enfermedad o condición que comprende o aparece a partir de crecimiento celular anormal en un mamífero, cuyo método comprende administrar al mamífero un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí, en una cantidad efectiva para inhibir la actividad de una quinasa cdk (tal como cdkl o cdk2), o actividad glicógeno sintasa quinasa-3. - Un método para inhibir una quinasa dependiente de ciclina o glicógeno sintasa quinasa-3, cuyo método comprende poner en contacto la quinasa con un compuesto inhibidor de quinasa de la fórmula (I), tal como se define aquí. - Un método para modular un proceso celular (por ejemplo, división celular) mediante la inhibición de la actividad de una quinasa dependiente de ciclina o una glicógeno sintasa quinasa-3, usando un compuestos de la fórmula (I), tal como se define aquí. - El uso de un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí, para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de una enfermedad o condición caracterizada por la sobre-regulación de una quinasa Aurora (por ejemplo, quinasa Aurora A o quinasa Aurora B). - El uso de un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí, para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de un cáncer, siendo el cáncer uno de los cuales se caracterizan por la sobre-reg ulación de una q ui nasa Aurora (por ejemplo, q ui nasa Aurora A o q u i nasa Aurora B). - El uso de un com puesto de la fórmula (I) tal como se define aquí, para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento del cáncer en u n paciente seleccionado de una sub-población que posee la variante 11 e 31 del gen Aurora A. - El uso de un compuesto de la fórmu la (I ) tal como se define aq u í, para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de cáncer en un paciente al cual se le ha diagnosticado q ue forma parte de una sub-población q ue posee la variante I ie31 del gen Aurora A. - Un método para la profilaxis o para el tratamiento de una enfermedad o condición caracterizada por la sobre-regulación de una q uinasa Aurora (por ejemplo, q uinasa Aurora A o q uinasa Aurora B) , el método com prende administrar un compuesto de la fórm ula (I), tal como se define aquí. - U n método para aliviar o reducir la incidencia de una enfermedad o condición caracterizada por la sobre-regulación de una quinasa Aurora (por ejemplo quinasa Aurora A o quinasa Aurora B), el método comprende adm inistrar u n compuesto de la fórmula (I) , tal como se define aquí. - U n método para la profilaxis o tratamiento de (o para aliviar o reducir la incidencia de) cáncer en un paciente que sufre de cáncer o que se sospecha q ue sufre de cáncer, cuyo método comprende (i) someter a un paciente a una prueba diagnóstica para determinar si el paciente posee la variante Iie31 del gen Aurora A; y (ii) cuando el paciente posea dicha variante, administrar al paciente un compuesto de la fórmula (I) tal como se define aquí, con una actividad inhibidora de quinasa Aurora. - Un método para la profilaxis o tratamiento de (o para aliviar o reducir la incidencia de) un estado o condición de enfermedad caracterizado por la sobre-regulación de una quinasa Aurora (por ejemplo, quinasa Aurora A o quinasa Aurora B); cuyo método comprende (i) someter a un paciente a una prueba diagnóstica para detectar un marcador característico de la regulación hacia arriba de la quinasa Aurora y (¡i) cuando la prueba diagnóstica es indicativa de la regulación hacia arriba de la quinasa Aurora, administrar al paciente un compuesto de la fórmula (I), tal como se define aquí, con actividad inhibidora de quinasa Aurora. Los compuestos de la invención son compuestos de la fórmula general (I): en donde X es CR5 o N; A es un enlace o -(CH2)m-(B)n-; B es C=0; NR9(C=0), o 0(C = 0), en donde R9 es hidrógeno o hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido opcionalmente por hidroxi o por alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono; m es 0, 1 o 2; n es 0 o 1 ; R° es hidrógeno o, junto con NR9 cuando está presente, forma un grupo -(CH2)P- en donde p es de 2 a 4; R1 es hidrógeno, un grupo carboxílico o heterocíclico que tiene desde 3 hasta 12 miembros en el anillo, o un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido opcionalmente; R2 es hidrógeno, halógeno, metoxi o un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por halógeno, hidroxilo o metoxi; R3 y R4 junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, forman un anillo carbocíclico o heterocíclico fundido, sustituido opcionalmente, que tiene de 5 a 7 miembros en el anillo de los cuales hasta 3 pueden ser heteroátomos seleccionados de N, O y S; R5 es hidrógeno, un grupo R2 o un grupo R10 en donde R10 se selecciona de halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclico y heterocíclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo; un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X\ X1C(X )X\ S, SO, S02, NR°, S02NR° o NRcS02; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclico y heterocíclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo, y en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono puede ser reemplazado opcionalmente por O, S, SO, S02 l N RC, X1 C(X2), C(X2)X1 o X1 C(X2)X1 ; Rc se selecciona de hidrógeno e hid rocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono; y X1 es O, S , o N RC y X2 es =0, = S, o =N RC; y sus sales, solvatos y N-óxidos . Los métodos y usos antes mencionados, y cualesq u iera otros métodos y usos terapéuticos y diagnósticos, y métodos para tratamiento de animales y de plantas definidos aq uí, pueden em plear también cualq uier sub-grupo, sub-género, preferencia o ejemplo q ue caiga dentro de la fórm ula (I), por ejemplo los compuestos de las fórmulas (I I) hasta (IXa) y cualesquiera sub-grupos de ellos , a menos que el contexto indiq ue otra cosa.
PREFERENCIAS Y DEFINICIONES GEN ERALES Las siguientes preferencias y defin iciones generales deben aplicarse a cada una de las porciones desde R1 hasta R10, y a sus diversos sub-grupos, sub-definiciones, ejemplos y modalidades, a menos que el contexto indique otra cosa. En esta especificación, una letra superíndice después del número de un grupo R indica que el grupo R es un sub-grupo del grupo R designado solamente por el número. Así, por ejemplo, R1 a, R1 b y R1 c son todos sub-grupos de R\ y de manera análoga, R9a y R9b son sub-grupos de R9. Así, a menos que se indique otra cosa, las preferencias, definiciones y ejemplos generales establecidos, por ejemplo, para R , también son aplicables para los sub-grupos R1a, R1b, R c, etcétera, y de manera similar con los otros grupos R. Cualesquiera referencias a la fórmula (I) aquí, deben tomarse también para referirse a las fórmulas (II) a (VIII), y cualquier otro sub-grupo de compuestos dentro de la fórmula (I), a menos que el contexto requiera otra cosa. Como se usa en la presente solicitud, el término sobre-regulación de quinasa Aurora está definido incluyendo la expresión elevada o la sobre-expresión de la quinasa Aurora, incluyendo la amplificación genética (es decir, copias múltiples del gen), y la expresión aumentada por un efecto transcripcional, y la hiperactividad y activación de la quinasa Aurora, incluyendo activación por mutaciones. Como se usa en la presente solicitud, las referencias a grupos "carbocíclico" y "heterocíclico", a menos que el contexto indique otra cosa, incluyen los sistemas de anillo aromáticos y no aromáticos. Así, por ejemplo, el término "grupos carbocíclicos y heterocíclicos" incluye dentro de su alcance sistemas de anillo carbocíclico y heterocíclico aromáticos, no aromáticos, insaturados, parcialmente saturados y totalmente saturados. En general, estos grupos pueden ser monocíclico o bicíclicos, y pueden contener, por ejemplo, de 3 a 12 miembros de anillo, más usualmente de 3 a 7, y preferiblemente de 5 a 6 miembros en el anillo. Los ejemplos de grupos bicíclicos son aquellos que contienen 8, 9, 10, 11 y 12 miembros en el anillo, y más usualmente de 9 a 10 miembros en el anillo. Los grupos carbocíclico o heterocíclico pueden ser grupos arilo o heteroarilo que tengan desde 5 hasta 12 miembros en el anillo, más comúnmene desde 5 hasta 10 miembros en el anillo. Como se usa en la presente solicitud, el término "arilo" se refiere a un grupo carbocíclico que tiene carácter aromático, y el término "heteroarilo" se usa aquí para denotar un grupo heterocíclico que tiene carácter aromático. Los términos "arilo" y heteroarilo" abarcan sistemas de anillo policíclicos (por ejemplo, bicíclicos) en donde uno o más anillos son no aromáticos, siempre que al menos un anillo sea aromático. En estos sistemas policíclicos, el grupo puede estar unido por el anillo aromático, o por medio de un anillo no aromático. Los grupos arilo o heteroarilo pueden ser monocíclicos o bicíclicos, y pueden ser no sustituidos o sustituidos con uno o más sustituyentes, por ejemplo uno o más grupos R10 tal como se definen aquí. El término "grupo no aromático" abarca sistemas de anillo insaturado sin carácter aromático, sistemas de anillo carbocíclico y heterocíclico parcialmente saturados y completamente saturados. Los términos "insaturados" y "parcialmente saturados" se refieren a anillos en los cuales la estructura o estructuras de anillo contienen átomos que comparten más de un enlace de valencia, es decir, el anillo contiene al menos un enlace múltiple, por ejemplo, un enlace C=C, C=C o N = C. El térm ino "total mente saturado" se refiere a anillos en donde no hay enlaces múltiples entre átomos del an illo . Los grupos carbocíclicos saturados incl uyen grupos cicloa lq uilo como se defi nen más adelante. Los grupos carbocíclicos satu rados incluyen grupos cicloalquilo como se definen más adelante, por ejemplo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, cicloheptenilo y cicloocteni lo. Los ejemplos de grupos heteroarilo son g rupos monocícl icos y bicíclicos q ue contienen de cinco a doce miembros en el anillo, y más usualmente de cinco a d iez miembros en el an illo. El g rupo heteroarilo puede ser, por ejem plo, un anillo monocíclico de cinco miem bros o de seis m iembros, o una estructu ra bicíclica formada por dos anillos de cinco miembros fusionados. Cada anil lo puede contener hasta aproximadamente cuatro heteroátomos seleccionados típicamente de nitrógeno, azufre y oxígeno. Típicamente, el an illo heteroarilo contendrá hasta 4 heteroátomos, más com únmente hasta 3 heteroátomos , más usualmente hasta 2, por ejemplo un solo heteroátomo. En una modal idad, el anillo heteroarilo contiene al menos un átomo de nitrógeno en el anillo. Los átomos de nitrógeno en los anillos heteroarilo pueden ser básicos, como en el caso de un imidazol o plridina, o esencialmente no básicos , como en el caso de un nitrógeno indol o pirrol. En general , la cantidad de átomos de nitrógeno básico presentes en el grupo heteroarilo, incluyendo cualesq uiera sustituyentes del grupo amino del anillo, serán menos de cinco. Los ejemplos de grupos heteroarilo de cinco miembros incluyen, sin limitación a ellos, grupos pirrol, furano, tiofeno, ¡midazoi, furazan, oxazol, oxadiazol, oxatriazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, pirazol, triazol y tetrazol. Los ejemplos de grupos heteroarilo de seis miembros incluyen, sin limitación a ellos, piridina, pirazina, piridazina, pirimidina y triazina. Un grupo heteroarilo bicíclico puede ser, por ejemplo, un grupo seleccionado de: a) un anillo benceno fundido con un anillo de 5 o 6 miembros, que contiene 1, 2 o 3 heteroátomos en el anillo. b) un anillo piridino fundido a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1, 2 o 3 heteroátomos en el anillo; c) un anillo pirimidina fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; d) un anillo pirrol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros, que contiene 1, 2, o 3 heteroátomos en el anillo; e) un anillo pirazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros, que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; f) un anillo imidazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; g) un anillo oxazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; h) un anillo izoxazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; i) un anillo tiazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; j) un anillo isotiazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; k) un anillo tiofeno fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; I) un anillo furano fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; m) un anillo oxazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; n) un anillo izoxazol fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; o) un anillo ciclohexilo fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; p) un anillo ciclopentilo fusionado a un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1 o 2 heteroátomos en el anillo; Los ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen un anillo de cinco miembros fusionado con otro anillo de cinco miembros incluyen, sin limitación a ellos, imidotiazol (por ejemplo, ¡midazo [2,1-b] tiazol) e imidazoimidazol (por ejemplo, imidazo [1,2-a] imidazol). Los ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen un anillo de seis miembros fusionado a un anillo de cinco miembros incluyen, sin limitación a ellos, grupos benzofurano, benzotiofeno, bencimidazol, benzoxazol, isobenzoxazol, bencisoxazol, benzotiazol, bencisotiazol, isobenzofurano, indo!, isoindol, indolizina, ¡ndolina, isoindolina, purina (por ejemplo, adenina, guanina), indazol, pirazolopirimidina (por ejemplo pirazolo [1, 5-a] pirimidina), triazolopirimidina (por ejemplo [1, 2,4] triazolo [1, 5- a] pirimidina), benzodioxol y pirazolopiridina (por ejemplo pirazolo [1, 5-a] piridina). Los ejemplos particulares de grupos eteroarilo que contienen dos anillos de seis miembros fusionados incluyen, sin limitación a ellos, grupos quinolina, isoquinolina, croman, tiocroman, cromeno, isocromeno, croman, isocroman, benzodioxano, quinolizina, benzoxazina, benzodiazina, piridopiridina, quinoxalina, quinazolina, cinolina, ftalazina, naftiridina y pteridina. Los ejemplos de grupos arilo y heteroarilo que contienen un anillo aromático y un anillo no aromático, incluyen grupos tetrahidronaftaleno, tetrahidroisoquinolina, tetrahidroquinolina, dihidrobenzotieno, dihidrobenzofurano, 2,3-dihidro-benzo[1 ,4] dioxina, benzo[1,3] dioxol,4,5,6,7-tetrahidrobenzofurano, indolina e indano. Los ejemplos de grupos arilo carbocíclico incluyen grupos fenilo, naftilo, indenilo, y tetrahidronaftilo. Los ejemplos de grupos heterocíclicos no aromáticos son grupos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, más usualmente de 5 a 10 miembros en el anillo. Estos grupos pueden ser monocíclicos o bicíclicos, por ejemplo, y comúnmente tienen de 1 a 5 miembros heteroátomos en el anillo (más usualmente, 1, 2, 3 o 4 miembros heteroátomos en el anillo), seleccionados usualmente de nitrógeno, oxígeno y azufre. Los g rupos heterocícl icos pueden contener, por ejem plo, porciones éter cícl icas (por ejem plo como en tetrahidrofu rano y d ioxano), porciones tioéter cíclicas (por ejemplo como en tetrah idrotiofeno y d itiano), porciones am ino cíclicas (por ejemplo como en p irrolid ina), porciones amida cíclicas (por ejemplo como en pirrol idona), tioamidas cíclicas, tioésteres cíclicos, ureas cíclicas (por ejemplo como en imidazolidi n-2-ona) . porciones éster cíclicas (por ejemplo como en butirolactona), sulfonas cíclicas (por ejemplo como en sulfolano y sulfoleno), sulfóxid os cíclicos, sulfonamidas cíclicas y combinaciones de ellas (por ejemplo tiomorfolina). Los ejemplos particulares incluyen morfolina, piperidina (por ejemplo 1 -piperidin ilo, 2-piperidinilo, 3-piperidin ilo y 4-piperidinilo), piperidona, pirrolidina (por ejemplo 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidin ilo y 3-pirrolid inilo), pirrolidona, acetidina, pirano (2H-pirano o 4H-pirano), dihidrotiofeno, dihidropirano, d ihidrofurano, dih idrotiazol, tetrahidrofurano, tetrahidrotiofeno, dioxano, tetrahidropirano (por ejemplo 4-tetrahidro piranilo), imidazolina, imidazolidinona, oxazolina , tiazolina, 2-pirazolina, pirazolidina, piperazona, piperazina, y N-alq uil-piperazinas, tales como N-metlI pi perazina. En general, los gru pos heterocíclicos no aromáticos preferidos incluyen gru pos saturados tales como piperidina, pirrolid ina , acetidina, morfolina, piperazina y N-alq uil-piperazinas. Los ejemplos de grupos carbocíclicos no aromáticos incluyen grupos cicloalcano, tales como ciclohexilo y ciclopentilo, grupos cicloalquenilo tales como ciclopentenilo, ciclohexenilo, cicloheptenilo y ciclooctenilo, así como también ciclohexadienilo, ciclooctatetraeno, tetrahidronaftenilo y decalinilo. Cuando se hace referencia a grupos carbocíclicos y heterocíclicos, el anillo carbocíclico o heterocíclico, a menos que el contexto indique otra cosa, puede ser no sustituido o sustituido por uno o más grupos sustituyentes R 0 seleccionados de grupos halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo; un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X\ X1C(X2)X\ S, SO, S02, NR°, S02NR° o NR°S02; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, y en donde uno m más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono puede ser reemplazado por O, S, SO, S02, NRC, X1C(X2), C(X2)X1 o X1C(X2)X1; o dos grupos adyacentes R10 junto con los átomos de carbono o heteroátomos a los cuales están unidos, pueden formar un anillo heteroarilo de 5 miembros o un anillo carbocíclico o heterocíclico, en donde dichos grupos heteroarilo y heterocíclicos contienen hasta 3 miembros heteroátomos en el anillo, seleccionados de N, O y S; Re se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono; y X1 es O, S o NR° y X2 es =0, =S o =NRC. Cuando el grupo sustituyente R 0 comprende o incluye un grupo carbocíclico o heterocíclico, dicho grupo carbocíclico o .heterocíclico puede ser no sustituido o puede ser sustituido por sí solo con uno o más grupos sustituyentes R 0 adicionales. En un sub-grupo de compuestos de la fórmula (I), estos grupos sustituyentes R10 adicionales pueden incluir grupos carbocíclicos o heterocíclicos, los cuales típicamente no son sustituidos adicionalmente por sí solos. En otro sub-grupo de compuestos de la fórmula (I), los mencionados sustituyentes adicionales no incluyen grupos carbocíclicos o heterocíclicos, sino que son seleccionados de otra forma de los grupos enumerados anteriormente en la definición de R10. Los sustituyentes R10 pueden ser seleccionados de tal forma que no contengan más de 20 átomos diferentes de hidrógeno, por ejemplo, no más de 15 átomos diferentes de hidrógeno, por ejemplo, no más de 12, u 11, o 10, o 9, u 8, o 7, o 6, o 5 átomos diferentes de hidrógeno. Cuando los grupos carbocíclicos y heterocíclicos tienen un par de sustituyentes en átomos adyacentes en el anillo, los dos sustituyentes pueden estar unidos de tal manera que formen un grupo cíclico. Por ejemplo, un par de sustituyentes adyacentes en átomos de carbono adyacentes de un an il lo, pueden estar enlazados por medio de uno o m ás heteroátomos , y grupos alq uileno opciona lmente sustituidos, para formar un g rupo oxa-, dioxa-, aza-, d iaza- o oxa-aza-cicloalq u i lo. Los ejemplos de estos gru pos sustituyentes enlazados incluyen : Los ejemplos de sustituyentes halógenos incluyen flúor, cloro, bromo y yodo. El flúor y el cloro son particularmente preferidos. En la definición de los compuestos de la fórmula (I) anterior y como se usa aq uí en lo sucesivo, el término "hidrocarbilo" es un término genérico q ue comprende g rupos alifáticos, alicíclicos y aromáticos que tienen una estructura principal toda de carbono, excepto en donde se indique otra cosa. En ciertos casos, como se define aq u í, uno o más de los átomos de carbono que constituyen la estructura principal de carbono pueden ser reemplazados por un átomo especificado de un grupo de átomos.
Los ejemplos de grupos hidrocarbilo incluyen grupos alquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo carbocíclico, alquenilo, alquinilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, y aralquilo carbocíclico, aralquenilo y aralquinilo. Estos grupos pueden ser no sustituidos o, en donde se indique, sustituidos por uno o más sustituyentes como se define aquí. Los ejemplos y preferencias expresados más adelante se aplican a cada uno de los grupos hidrocarbilo sustituyentes o a los grupos sustituyentes que contienen hidrocarbilo, a los cuales se hace referencia en las diversas definiciones de sustituyentes para los compuestos de la fórmula (I), a menos que el contexto indique otra cosa. Los grupos hidrocarbilo no aromáticos preferidos son grupos saturados, tales como grupos alquilo y cicloalquilo. Generalmente, a manera de ejemplo, los grupos hidrocarbilo pueden tener hasta ocho átomos de carbono, a menos que el contexto requiera otra cosa. Dentro del sub-conjunto de grupos hidrocarbilo que tienen de 1 a 8 átomos de carbono, los ejemplos particulares son grupos hidrocarbilo que tienen de 1 a 8 átomos de carbono, los ejemplos particulares son grupos hidrocarbilo de 1 a 6 átomos de carbono, tales como grupos hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo grupos hidrocarbilo de 1 a 3 átomos de carbono o grupos hidrocarbilo de 1 a 2 átomos de carbono), los ejemplos específicos son cualquier valor individual o combinación de valores seleccionados de grupos hidrocarbilo con 1, 2, 3,4, 5, 6, 7 y 8 átomos de carbono.
El término "alquilo" cubre tanto los grupos alquilo de cadena recta como los grupos alquilo de cadena ramificada. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, tert-butilo, n-pentilo, 2-pentilo, 3-pentilo, 2-metilo butilo, 3-metil butilo, y n-hexilo y sus isómeros. Dentro del sub-conjunto de grupos alquilo que tienen de 1 a 8 átomos de carbono, los ejemplos particulares son grupos alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, tales como grupos alquilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo, grupos alquilo de 1 a 2 átomos de carbono). Los ejemplos de grupos cicloalquilo son los derivados de ciclopropano, ciclobutano, ciclopentano, ciclohexano y cicloheptano. Dentro del sub— conjunto de grupos cicloalquilo, el grupo cicloalquilo tendrá de 3 a 8 átomos de carbono, siendo ejemplos particulares los grupos cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos alquenilo incluyen, sin limitación a ellos, etenilo (vinilo), 1-propenilo, 2-propenilo (alilo), isopropenilo, butenilo, buta-1 ,4-dienilo, pentenilo, y hexenilo. Dentro del sub-, conjunto de grupos alquenilo, el grupo alquenilo tendrá de 2 a 8 átomos de carbono, siendo ejemplos particulares los grupos alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, tales como los grupos alquenilo de 2 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos cicloalquenilo incluyen, sin limitación a ellos, ciclopropenilo, ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclopentadienilo y ciclohexenilo. Dentro del sub-conjunto de grupos cicloalquenilo, los grupos cicloalquenilo tienen de 3 a8 átomos de carbono, y son ejemplos particulares los grupos cicloalquenilo de 3 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos alquinilo incluyen, sin limitación a ellos, grupos etinilo y 2-propinilo (propargilo). Dentro del sub-conjunto de grupos alquinilo que tienen de 2 a 8 átomos de carbono, los ejemplos particulares son grupos alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono, tales como grupos alquinilo de 2 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos arilo carbocíclicos incluyen grupos fenilo no sustituidos. Los ejemplos de grupos cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, aralquilo carbocíclicos, aralquenilo y aralquinilo incluyen grupos fenetilo, bencilo, estirilo, feniletinilo, ciclohexilmetilo, ciclopentilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopropilmetilo y ciclopentenilmetilo. Cuando está presente, y cuando se indica, un grupo hidrocarbilo puede estar sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, alcoxi, carboxi, halógeno, ciano, nitro, amino, mono- o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, y grupos monocíclicos o bicíclicos, carbocíclicos y heterocíclicos, grupos que tienen de 3 a 12 (típicamente de 3 a 10, y más usualmente de 5 a 10) miembros en el anillo. Los sustituyentes preferidos incluyen halógenos, tales como flúor. Así, por ejemplo, el grupo hidrocarbilo sustituido puede s.er un grupo parcialmente fluorado o perfluorado tal como difluorometilo o trifluorometilo. En una modalidad preferida, los sustituyentes i ncluyen grupos monocíclicos carbocícl icos y heterocíclicos q ue tienen 3-7 miembros en el anil lo, más usualmente 3,4, 5 o 6 miembros en el anillo. En donde se ind ica , uno o más átomos de carbono de un grupo h idrocarbilo puede estar reemplazado opciona lmente por O, S , SO , S02, N RC, X C(X2), C(X2)X1 o X1 C(X2)X1 , en donde X1 y X2 son como se definió aquí anteriormente, siem pre q ue al menos un átomo de carbono del g rupo hid rocarbilo permanezca. Por ejemplo, 1 , 2, 3, o 4 átomos de carbono del grupo hidrocarbilo pueden ser reemplazados por uno de los átomos o de los grupos nombrados, y los átomos o grupos reemplazantes pueden ser los mismos o d iferentes En general , la cantidad de átomos de carbono de la estructura pri ncipal lineal reem plazada corresponderá a la cantidad de átomos lineales o de la estructura principal en el grupo q ue los reemplaza. Los ejemplos de grupos en los cuales uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo han sido reemplazados por un átomo o grupo de reemplazo como se definió anteriormente, incluyen éteres y tioéteres (C reemplazado por O o por S), amidas, ésteres, tioamidas y tioésteres (C-C reemplazado por X1 C(X2) o por C(X2)X1 ), su lfonas y sulfóxidos (C reemplazado por SO o por S02), aminas (C reemplazado por NRC), y ureas, carbonatos y carbamatos (C-C-C reemplazado por X1 C(X )X1 ). En donde un g rupo amino tiene dos sustituyentes hidrocarbilo, ellos pueden, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, y opcionalmente con otro heteroátomo tal como nitrógeno, azufre u oxígeno, enlazarse para formar una estructura de anillo de 4 a 7 miembros en el anillo. Como se usa en la presente solicitud, la definición "Ra-R " ya sea con respecto a otros sustituyentes presentes en una porción carbocíclica o heterocíclica, o con respecto a otros sustituyentes presentes en otras ubicaciones en los compuestos de la fórmula (I), incluye entre otros, compuestos en donde Ra se selecciona de un enlace, O, CO, OC(O), SC(O), NRcC(0), OC(S), SC(S), NRCC(S), OC(NRc), SC(NRC), NRCC(NRC), C(0)0, C(0)S, C(O) NRC, C(S)0, C(S)S, C(S)NRC, C(NRc)0, C(NRC)S, C(NRC)NRC, OC(0)0, SC(0)0, NRcC(0)0, OC(S)0, SC(S)0, NRcC(S)0, OC(NRc)0, SC(NRc)0, NRcC(NRc)0, OC(0)S, SC(0)S, NR°C(0)S, OC(S)S, SC(S)S, NRCC(S)S, OC(NRc)S, SC(NRC)S, NRCC(NRC)S, OC(0)NRc, SC(0)NRc, NRcC(0)NRc, OC(S)NRc, SC(S)NRC, NRCC(S)NRC, OC(NRc)NRc, SC(NRC)NRC, NRCC(NR°NRC, S, SO, S02, NR°, S02NRc y NRcS02, en donde R° es como se definió aquí anteriormente. La porción Rb puede ser hidrógeno o puede ser un grupo seleccionado de grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tengan de 3 a 12 miembros en el anillo (comúnmente de 3 a 10 y más usualmente de 5 a 10), y un grupo hidrocarbilo sustituido opcionalmente tal como se definió anteriormente aquí. Los ejemplos de grupos hidrocarbilo, carbocíclico y heterocíclico son como se indicó anteriormente. Cuando Ra es O y Rb en un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, Ra y Rb juntos forman un grupo hidrocarboxiloxi. Los grupos hidrocarbiloxi incluyen hidrocarbiloxi saturado, tal como alcoxi (por ejemplo alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, más usualmente alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, tal como etoxi y metoxi, particularmente metoxi), cicloalcoxi (por ejemplo cicloalcoxi de 3 a 6 átomos de carbono, tales como ciclopropiloxi, ciclobutiloxi, ciclopentiloxi y ciclohexiloxi) y cicloalquialcoxi (por ejemplo cicloalquil de 3 a 6 átomos de carbono-alcoxi de 1 a 2 átomos de carbono, tales como ciclopropilmetoxi). Los grupos hidrocarbiloxi pueden estar sustituidos por varios sustituyentes, tal como se definen aquí. Por ejemplo, los grupos alcoxi pueden estar sustituidos por halógeno (por ejemplo como en difluorometoxi y trifluorometoxi), hidroxi (por ejemplo como en hidroxietoxi), alcoxi de 1 a 2 átomos de carbono (por ejemplo como en metoxietoxi), hidroxi de 1 a 2 átomos de carbono-alquilo (como en hidroxietoxietoxi) o un grupo cíclico (por ejemplo un grupo cicloalquilo o grupo heterocíclico no aromático, tal como se definió aquí anteriormente). Ejemplos de grupos alcoxi que contienen un grupo heterocíclico no aromático como un sustituyente, son aquellos en los cuales el grupo heterocíclico amina cíclica saturada, tal como morfolina, piperidina, pirrolidina, piperazina, alquil-piperazínas de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquil-piperazinas de 3 a 7 átomos de carbono, tetrahidropirano o tetrahidrofurano, y el grupo alcoxi es un grupo alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, más comúnmente un grupo alcoxi de 1 a 3 átomos de carbono, tal como metoxi, etoxi o n- propoxi. Los grupos a lcoxi sustituidos por u n g rupo monocíclico tal como pirrolidi na, piperid ina , morfolina y píperazina, y los derivados N-sustituidos de ellos, tales como N-bencilo , N-acilo de 1 a 4 átomos d e carbono y N-alcoxicarbon ¡lo de 1 a 4 átomos de ca rbono. Los ejemp los particulares incluyen pirrolidinoetoxi , piperidinoetoxi y piperazinoetoxi . Cuando Ra es u n enlace y Rb es un g rupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, los ejemplos de grupos hidrocarbilo Ra-Rb son tal como los definidos aquí anteriormente. Los grupos h idrocarbilo pueden ser g rupos saturados, tales como cicloalquilo y a lq u i lo y los ejemplos particu lares de estos g rupos incl uyen metilo, etilo y ciclopropilo. Los grupos hidrocarbilo (por ejemplo alquilo) pueden ser sustituidos por varios grupos y átomos, tal como se define aquí. Los ejemplos de grupos alq uilo sustituidos incluyen grupos alquilo sustituidos por uno o más átomos de halógenos, tales como flúor y cloro (los ejemplos particulares incluyen bromoetilo, cloroetilo y trifluorometilo), o hidroxi (por ejemplo hidroximetilo e hidroxietilo), aciloxi de 1 a 8 átomos de carbono (por ejemplo acetoximetilo y benciloximetilo), amino y mono-y dialq uilamino (por ejemplo aminoetilo, metilaminoetilo, dimetilaminometilo, dimetilaminoetilo y tert-butilaminometilo), alcoxi (por ejemplo alcoxi de 1 a 2 átomos de carbono, tal como metoxi -como en metoxietilo), y grupos cíclicos tales como g rupos cicloalq uilo, g rupos arilo, grupos heteroarilo y grupos heterocíclicos no aromáticos, tal como se definieron aquí anteriormente). Ejemplos particulares de grupos alquilo sustituidos por un grupo cíclico, son aquellos en donde el grupo cíclico es una amina cíclica saturada, tal como morfolina, piperidina, pirrolidina, piperazina, alquil-piperazinas de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquil-piperazinas de 3 a 7 átomos de carbono, tetrahidropirano o tetrahidrofurano, y el grupo alquilo es un grupo alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, más comúnmente un grupo alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, tal como metilo, etilo o n-propilo. Los ejemplos específicos de grupos alquilo sustituidos por un grupo cíclico incluyen pirrolidinometilo, pirrolidinopropilo, morfolinometilo, morfolinoetilo, morfolinopropilo, piperidinilmetilo, piperazinometilo y sus formas N-sustituidas, tal como se definió aquí. Cuando Ra es S02NRc, Rb puede ser, por ejemplo, hidrógeno o un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un grupo carbocíclico o heterocíclico. Ejemplos de Ra-Rb en donde Ra es S02NRc incluyen grupos aminosulfonilo, aiquilaminosulfonilo de 1 a 4 átomos de carbono y di-alquilaminosulfonilo de 1 a 4 átomos de carbono, y sulfonamidas formadas a partir de un grupo amino cíclico, tal como piperidina, morfolina, pirrolidina, o una piperazina N-sustituida opcionalmente, tal como N-metil piperazina. Los ejemplos de grupos Ra-R en donde Ra es S02 incluyen grupos alquilsulfonilo, heteroarilsulfonilo y arilsulfonilo, particularmente grupos monocíclicos arilo y heteroarilsulfonilo . Los ejemplos particulares incluyen metilsulfonilo, fenilsulfonilo y toluensulfonilo. Cuando Ra es NRC, Rb puede ser, por ejemplo, hidrógeno o un grupo hldrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido opcionalmente, o un grupo carbocíclico o heterocíclico. Ejemplos de Ra-Rb en donde Ra es NRC incluyen amino, alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo metilamino, etilamino, propilamino, isopropilamino, tert-butilamino), di-alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo dimetilamino y dietilamino) y cicloalquilamino (por ejemplo ciclopropilamino, ciclopentilamino y ciclohexilamino).
MODALIDADES ESPECÍFICAS Y PREFERENCIAS PARA R° HASTA R10 Y X En la fórmula (I), X puede ser CR5 o N. En una modalidad particular, X es N. En otra modalidad particular, X es CH. Preferiblemente, X es N. R° puede ser hidrógeno o, junto con el grupo R9 cuando está presente, puede formar un grupo enlazante -(CH2)P- en donde p es de 2 a 4, más usualmente de 2 a 3, por. ejemplo 2. Preferiblemente, R° es hidrógeno. Cuando R° y el grupo R9 forman un grupo enlazante -(CH2)P-, la entidad -(CH2)m-(B)n-NR0- puede representarse así: -iCHJp O \ Cuando A es un enlace 0 un grupo -(CH2)m(B)n- en donde n es 0, X puede ser N o CR5 en donde R5 es hidrógeno o un grupo R10. Más preferiblemente, X es N. Cuando UN es un enlace o un grupo -(CH2)m-(B)„- en donde n es 1, se prefiere que X sea N o CR5 en donde R5 es hidrógeno o un grupo R2. Más preferiblemente, X es N. Donde R es distinto de hidrógeno, más particularmente cuando n es 1, preferiblemente es un sustituyente pequeño, que no contiene más de 14 átomos, por ejemplo, un alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o un grupo cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, propilo y butilo, o ciclopropilo y ciclobutilo. A es un enlace o -(CH2)m-(B)n- en donde B es C=0, NR9(C=0) o 0(C=0), m es 0, 1 o 2; y n es 0 o 1. En un grupo de compuestos preferido de la invención, m es 0 o 1 , n es 1 y B es C=0 0 NR9(C=0), preferiblemente C=0. Más preferiblemente, m es 0, n es 1 y B es C=0. Se prefiere actualmente que cuando B sea NR9(C=0), Rs sea hidrógeno. Se tendrá en cuenta que la porción R1-A-NH unida a la posición 4 del anillo pirazol, puede tomar la forma de una amina R1-(CH2)m-NH, una amida R1(CH2)m-C(=0)NH, una urea R1-(CH2)m-NHC(=0)NH o un carbamato R -(CH2)m-OC(=0)NH, en donde en cada caso m es 0, 1 o 2, preferiblemente es 0 o 1 y más preferiblemente es 0. R1 es hidrógeno, un grupo carbocíclico o heterocíclico que tiene desde 3 hasta 12 miembros en el anillo, o un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono s ustituido opcionalmente, tal como se definió aquí anteriormente. Ejemplos de g rupos carbocíclicos y heterocíclicos, y de g ru pos hid rocarb ilo s ustituidos opcionalmente, son los d escritos anteriormente. Por ejemplo, R1 puede ser un grupo m onocícl ico o bicícl ico q ue te nga de 3 a 1 0 miembros en e l an illo. Cuando R es un grupo monocícl ico, comú nmente tiene de 3 a 7 miembros en el anillo, más us ualmente de 3 a 6 miembros en el anillo, por ejemplo, 3,4, 5 o 6. Cuando el grupo monocíclico R1 es u n grupo arilo, tendrá 6 miembros en el ani llo y será un anillo fen ilo no sustituido o sustitu ido. Cuando el grupo monocíclico R1 es un grupo carbocíclico no aromático, puede tener desde 3 hasta 7 miembros en el anillo, más usualmente desde 3 hasta 6 miembros en el anillo, por ejemplo, 3, o 4, o 5, o 6 miembros en el anillo. El grupo carbocíclico no aromático puede ser saturado o parcialmente insaturado, pero preferi blemente es saturado, es decir, R1 es un grupo cicloalq uilo. Cuando el grupo monocíclico R1 es un grupo heteroarilo, tendrá 5 o 6 miembros en el anillo. Los ejemplos de grupos heteroarilo que tienen 5 y 6 miembros en el anillo son los que se indicaron anteriormente, y más adelante, se describen ejemplos particulares. En un sub-grupo de compuestos , el grupo heteroarilo tiene 5 miembros en el a n illo. En otro su b-g ru po d e compuestos, el grupo heteroarilo tiene 6 miembros en el anillo. Los g rupos heteroari lo monocíclicos R1 com únmente tienen hasta 4 heteroátomos en el anillo , seleccionados de N , O y S , y más comúnmente hasta 3 heteroátomos en el anil lo, por ejem plo, 1 , o 2, o 3 heteroátomos en el an illo. Cuando R es un grupo monocíclico heterocíclico no aromático, puede ser uno de los g rupos enumerados anteriormente o más adelante. Estos grupos comúnm ente tienen desde 4hasta 7 miembros en el anillo, y más preferiblemente 5 o 6 m iembros en el a nil lo. Los grupos monocíclicos heterocíclicos no aromáticos com únmente contiene hasta 3 heteroátomos en el anillo, más comúnmente de 1 a 2 heteroátomos en el anillo, se leccionados de N , S y O. El grupo heterocíclico puede ser saturado o parcialmente insaturado, pero preferiblemente es saturado. Los ejemplos particulares de grupos monocíclicos heterocíclicos son los ejemplos particulares y preferidos definidos en la sección "Preferencias y Definiciones Generales" anterior, y están indicados en las tablas y ejemplos más adelante. Cuando R1 es un grupo bicíclico, típicamente tiene de 8 a 1 0 miembros en el anillo, por ejemplo 8, o 9 o 1 0 miembros. El grupo bicíclico puede ser un g rupo arilo o heteroarilo, y los ejemplos de estos grupos incluyen grupos que contienen un anillo de 5 miembros fusionado con otro anillo de 5 miembros; un anillo de 5 miembros fusionado con otro anillo de 6 miembros; y un anillo de 6 miembros fusionado con otro anillo de 6 miembros. Los ejemplos de grupos en cada una de estas categorías, están indicados anteriormente en la sección de "Preferencias y Definiciones Generales". Un grupo arilo bicíclico o un grupo heteroarilo pueden comprender dos anillo aromáticos o insaturados, o un anillo aromático y un anillo no aromático (por ejemplo, parcialmente saturado). Los grupos heteroarilo bicíclicos comúnmente contienen hasta 4 miembros heteroátomos en el anillo, seleccionados de N, S y O. Así, por ejemplo, pueden contener 1, o 2, o 3, o 4 miembros heteroátomos en el anillo. En los grupos monocíclicos y bicíclicos heterocíclicos R1, los ejemplos de combinaciones de miembros heteroátomos en el anillo incluyen N; NN; NNN; NNNN; NO; NNO; NS, NNS, O, S, 00 y SS. Los ejemplos particulares de R incluyen grupos heteroarilo sustituidos opcionalmente o no sustituidos, seleccionados de pirazolo[1 ,5-a] pirid inilo (por ejemplo pirazolo [1 ,5-a]piridin-3-ilo), furanilo (por ejemplo 2-furanilo y 3-furanilo), indolilo (por ejemplo 3-indolilo,4-indolilo y 7- indolilo), oxazolilo, tiazolilo (por ejemplo tiazol-2-ilo y tiazol-5-ilo), isoxazolilo (por ejemplo isoxazol-3-ilo y isoxazol-4-ilo), pirrolilo (por ejemplo 3-pirrolilo), piridilo (por ejemplo 2-piridilo), quinolinilo (por ejemplo quinolin-8-ilo), 2, 3-dihidro-benzo [1 ,4]dioxina (por ejemplo 2,3-dih¡dro-benzo[1 ,4]dioxin-5-¡lo), benzo [1,3]dioxol (por ejemplo benzo[1 ,3]dioxol-4-ilo), 2,3-dihidrobenzofuranilo (por ejemplo 2,3-d¡hidrobenzofuran-7-ilo), imidazolilo y tiofenilo (por ejemplo 3-tiofenilo). Otros ejemplos de R1 incluyen grupos heteroarilo sustituidos o no sustituidos, seleccionados de pirazolo[1 ,5-a] pirimidina, isobenzofurano, [1 ,2,4]triazolo[1 ,5-a]pir¡m¡d¡na, tetrazolilo, tetrahidroisoquinolinilo (por ejemplo 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-ilo), pirimidinilo, pirazolilo, triazolilo,4,5,6,7-tetrahidro-benzo[d]isoxazol, ftalazina, 2H-ftalazin-1 -ona, benzoxazol, cinolina, quinoxalina, naftaleno, benzo[c]isoxazol, imidazo[2,1-bjtiazol, piridona, tetrahidroquinolinilo (por ejemplo 1,2,3,4-tetrahidroquinolin-6-ilo), y grupos 4,5,6,7-tetrahidro-benzofurano. Los grupos heteroarilo R1 preferidos incluyen grupos pirazolo[1 ,5-a]piridinilo, furanilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo, tiofenilo, indolilo, tiazolilo, isoxazolilo y 2,3-díhidro-benzo[1 ,4] dioxina. Los grupos arilo R1 preferidos son grupos fenilo sustituidos opcionalmente. Los ejemplos de grupos R1 no aromáticos incluyen grupos cicloalquilo monocíclico y grupos azacicloalquilo, tales como ciclohexilo, ciclopentilo y piperidinilo, particularmente ciclohexilo y 4-piperidinilo. Otros ejemplos de grupos R1 no aromáticos incluyen cicloalquilo monocíclico y grupos azacicloalquilo, tales como grupos oxa cicloalquilo, como tetrahidropiranoilo y grupos aza-oxa cicloalquilo, tales como morfolino (por ejemplo 2-morfolino y 4-morfolino). .
Los grupos hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituidos y no sustituidos preferidos, incluyen grupos trífluorometilo y butilo terciario. Un sub-conjunto de grupos R preferidos incluye grupos fenilo, pirazolo[1, 5-a]piridinilo y 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxina. otro sub-conjunto de grupos R1 preferidos incluye los grupos sustituidos y no sustituidos fenilo, pirazolo [1,5-a] piridinilo, 2,3-di idro-benzo[1 ,4]dioxina, indol-4-ilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo, tert-butilo, furanilo, pirazolo[1 ,5-a]piridin-3-ilo, pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-3-ilo, oxazolilo, isoxazolilo, benzoxazol-2-ilo, 2H-tetrazol-5-ilo, pirazin-2-ilo, pirazolilo, bencilo, a,a-dimetilbencilo, -aminobencilo, a-metil-aminobencilo, 4,5,6,7-tetrahidro-benzo[d]isoxazol-3-ilo, 2H-ftalazin-1 -ona-4-ilo, benzoxazol-7-ilo, quinazolinilo, 2-naftilo, ciclopropilo, benzo[c]isoxazol-3-i!o,4-piperidinilo, 5-tiazolilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 3-pirrolilo, isoxazolilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo,4-pirimidin¡lo, ciclohexilo, tetrahidropirano-4-ilo, tetrahidroquinolinilo,4,5,6,7-tetrahidro-benzofuranilo y grupos morfolinilo. El grupo R1 puede ser un grupo carbocíclico o heterocíclico no sustituido o sustituido, en el cual uno o más sustituyentes pueden seleccionarse del grupo R10 , tal como se definió aquí anteriormente. En una modalidad, los sustituyentes en R1 pueden seleccionarse del grupo R10a que consiste en halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, grupos heterocíclicos que tienen 5 o 6 miembros en el anillo y hasta 2 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X3C(X4), C(X4)X3, X3C(X4)X3, S, SO, o S02, y R se selecciona de hidrógeno, grupos heterocíclicos que tienen 5 o 6 miembros en el anillo y hasta 2 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y grupos heterocíclicos que tienen 5 o 6 miembros en el anillo y hasta 2 heteroátomos seleccionados entre O, N y S; en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente puede ser reemplazado por O, S, SO, S02, X3C(X4), C(X4)X3 o X3C(X4)X3; X3 es O o S; y X4 es =0 o =S. En una modalidad adicional, los sustituyentes en R1 pueden seleccionarse del grupo R10b que consiste en halógeno, hidroxi, trifluorometiio, ciano, nitro, carboxi, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X3C(X4), C(X )X3, X3C(X4)X3, S, SO, o S02, y Rb se selecciona de hidrógeno y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi; en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente puede ser reemplazado por O, S, SO, S02, X3C(X4), C(X4)X3 o X3C(X )X3; X3 es O o S; y X4 es =0 o =S. En otra modalidad, los sustituyentes en R1 pueden ser seleccionados entre halógeno, hidroxi, trifluorometilo, un grupo Ra-R en donde Ra es un enlace o O, y Rb se selecciona de hidrógeno y un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxilo y halógeno. Un sub-conjunto de sustituyentes que puede estar presente en un grupo R (por ejemplo un grupo R arilo o heteroarilo) incluye flúor, cloro, metoxi, metilo, oxazolilo, morfolino, trifluorometilo, bromometilo, cloroetilo, pirrolidino, pirrolidiniletoxl, pirrolidinilmetilo, difluorometoxi y morfolinmetilo. Otro sub-conjunto de sustituyentes que pueden estar presentes en un grupo R incluye flúor, cloro, metoxi, etoxi, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, amino, oxazolilo, morfolino, trifluorometilo, bromometilo, cloroetilo, pirrolidino, pirrolidiniletoxi, pirrolidinilmetilo, difluorometoxi, trifluorometoxi, morfolino, N-metilpiperazino, piperazina, piperidino, pirrolidino, y morfolinometilo. La porción R1 puede estar sustituida por más de un sustituyente. Así, por ejemplo, puede haber 1 o 2 o 3 o 4 sustituyentes, más comúnmente 1, 2 o 3 sustituyentes. En una modalidad, en donde R es un anillo con seis miembros (por ejemplo un anillo carbocíclico tal como un anillo fenilo), puede haber un solo sustituyente, que puede estar colocado en cualquiera de las posiciones 2-, 3- y 4- en el anillo. En otra modalidad, puede haber dos o tres sustituyentes, y estos pueden estar localizados en las posiciones 2-, 3-, 4- o 6- alrededor del anillo. A manera de ejemplo, u n grupo R1 fenilo puede estar 2,6-d i sustituido, 2,3- di sustituido, 2,4-d i sustituido 2 ,5-d i sustitu ido, 2, 3, 6-trisustituido o 2,4,6-trisustitu ido. En u na modalidad , un grupo R1 fenilo puede estar di sustituido en las posiciones 2- y 6- con sustituyentes seleccionados entre flúor, cloro y Ra-Rb, en donde Ra es O y Rb es alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono , con flúor como un sustituyente particu lar. En un sub-grupo de compuestos , el grupo R1 es un grupo heteroari lo de cinco miem bros, que contiene de 1 a 2 heteroátomos en el anillo , seleccionados de O , N y S . Los grupos heteroarilo particulares incl uyen grupos furano, tiofeno, pirrol, oxazol , isoxazol y tiazol . Los grupos heteroarilo pueden ser no sustituidos o sustituidos por uno o más grupos sustituyentes, tal como se definió aquí anteriormente. Un grupo preferido de grupos heteroarilo de cinco miembros consiste en grupos isoxazol y tiazol sustituidos opcionalmente. En otro sub-grupo de compuestos, R1 es un grupo pirazolopiridina por ejemplo, un grupo pirazolo[1 ,5-a]piridina, tal como un grupo 3-pirazolo[1 , 5-a]piridinilo. Los ejemplos particulares de grupos R1 incluyen los grupos A1 hasta A1 83 (por ejemplo, A1 hasta A60), especificados en la Tabla 1 siguiente.
?? U n sub-conj unto preferido de compuestos de la invención, es el sub-conj unto en donde R es un grupo seleccionado desde A1 hasta A34. Otro sub-conju nto preferido de compuestos de la invención es el sub-conjunto en donde R1 es un grupo seleccionado entre Al hasta A24, A26 hasta A34, A38 hasta A46, A48 hasta A57, A59 hasta A64, A66 hasta A114, A116 hasta A165, A167 hasta A168 y A170 hasta A183. Otro sub-conjunto particularmente preferido de grupos R1 incluye 2,6-difluorofenilo, 2-cloro-6-fluorofenilo, 2-fluoro-6-metoxifenilo, 2,6-diclorofenilo, 2,4,6- trifluorofenilo, 2-cloro-6-metilo, 2.3- dihidro-benzo [1 ,4]dioxin-5-ilo y pirazolo[1 ,5-a]piridin-3-ilo. Los compuestos que contienen grupos R1 seleccionados de este sub-conjunto tienen actividad inhibidora de cdk particularmente buena. Otro subconjunto de grupos R particularmente preferidos incluye 2,6-difluorofenilo, 2-metoxifenilo, 2,6-difluoro-4-metoxifenilo, 2-fluoro-6-metoxifenilo, 2-fluoro-5-metoxifenilo, 2,6-d ¡metoxifenilo, 2.4- dimetoxifenilo, 2-cloro-6-fluorofenilo, 2,6-diclorofenilo, 2,4,6-trifluorofenilo, 2-cloro-6-metilo, 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxin-5-ilo y pirazolo[1 ,5-a]piridin-3-ilo. En el contexto de la inhibición de las quinasas cdk, un grupo R corrientemente mucho más preferido es 2,6-difluorofenilo. R es hidrógeno, halógeno, metoxi, o un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionaimente por halógeno, hidroxil o metoxi. Preferiblemente R2 es hidrógeno, cloro o metilo, y mucho más preferiblemente R2 es hidrógeno. En los compuestos de la fórmula (I), R3 y R4, junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, forman un grupo heterocíclico o carbocíclico fusionado, que tiene de 5 a 7 miembros en — frl — a-m-H-o-; — d« — los — etraies — hast — 3 — reden — s¾r— heteroátom S^ seleccionados entre N, O y S. El anillo fusionado carbocíclico o heterocíclico puede estar sustituido opcionalmente por 0 a 4 grupos R1 0, tal como se defi nen aq uí. El grupo heterocíclico o carbocíclico fusionado puede ser aromático o no aromático, pero preferiblemente es aromático. En un grupo de compuestos preferido, R3 y R4 ju nto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, forman un grupo carbocíclico fusionado, que tiene desde 5 hasta 7 miembros en el anil lo. Los grupos carbocíclicos o heterocíclicos fusionados de cinco y seis miembros, son particularmente preferidos. Los ejemplos de an illos heterocíclicos fusionados incluyen anillos de cinco y seis miembros, tales como los anillos fusionados tiazolo, isotiazolo, oxazolo, isoxazolo, pirrólo, pirido, tieno, furano, pirimido, pirazolo, pirazino, tetrahidroazepinona e imidazolo. Se prefiere que el grupo heterocíclico fusionado sea seleccionado de grupos con anillo de seis miembros, siendo un grupo particularmente preferido el grupo pirido. Los ejemplos de anillos carbocíclicos fusionados incluyen anillos de cinco y seis miembros, tales como los anillos benzo, dihidro o tetrahidro-benzo y ciclopenta-fusionados. Se prefieren los anillos con seis miem bros. Un grupo particularmente preferido es el grupo benzo. Los ejemplos particulares de sistemas de anillo formados por el anillo de cinco miembros y R3 y R4, son los sistemas de anillo (i) hasta (iv) especificados a continuación. El sistema de anillo (i) es preferido generalmente .
El grupo carbocíclico o heterocíclico preferido puede ser sustituido opcionalmente por uno o más g rupos 0 , tal como se defin ió aquí anteriormente. En una modalidad, los sustituyentes en el grupo carbocíclico o heterocíclico fusionado pueden ser seleccionados entre halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, grupos monocíclicos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 7 (típicamente 5 o 6) miembros en el an illo, un g rupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO , X1 C(X2), C(X2)X\ X1 C(X2)X\ S, SO, SO2, NRC, S02NRc o NRcS02; y R se selecciona de hidrógeno, un grupo carbocíclico o heterocíclico con 3-7 miembros en el anillo y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono , sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, afn ino, mono- o di-h id rocarbilam ino de 1 a 4 átomos de carbono, un g rupo carbocíclico o heterocíclico con 3-7 miembros en el a nillo y en donde u no o más átomos de carbono del g rupo hid rocarbilo d e 1 a 8 átomos de carbono, opcionalmente puede ser reemplazado por O, S, SO, S02, N R°, X C(X2) , C(X2)X1 o X C(X2)X1 ; y Rc, X1 y X2 son tal como se definió aquí anteriormente, o dos grupos R10 adyacentes junto con los átomos de carbono o heteroátomos a ios cuales están unidos , pueden formar un anillo heteroarilo o un anillo heterocíclico no aromático de 5- o 6- miembros, en donde d icho heteroarilo y g rupos heterocíclicos contengan hasta 3 miembros heteroátomo en el anil lo , seleccionados entre N , O y S. Los g rupos R1 0 preferidos en el grupo carbocíclico o heterocíclico fusionado, formados por R3 y R4 incluyen halógeno (por ejemplo fl úor y cloro), un g rupo Ra-R en donde Ra es un enlace, O , CO, C(X2)X\ y R se selecciona de hidrógeno, grupos heterocíclicos que tienen 3-7 miembros en el anillo (preferiblemente 5 o 6 miembros en el anillo) y un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo un grupo hid rocarbilo saturado, tal como un alquilo o un grupo cicloalquilo) sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de h idroxi , carboxi, amino, mono- o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, y grupos heterocíclicos con 3-7 miembros en el anillo (por ejemplo 5 o 6 miembros en el anillo). U n grupo preferido de compuestos de la invención está representado por la fórmula (I I): En donde R1 , R2 y X son como se define aquí; Y es N o CR9 en donde R9 es hidrógeno o un grupo R10; y R6, R7 y R8 son los mismos o diferentes, y cada uno es hidrógeno o un grupo R10 como se define aquí. En un sub-grupo de compuestos de la fórmu la (I I) , X es N. En otro sub-grupo de compuestos de la fórm ula (I I), Y es CR9. Cuando Y es N, se prefiere que R6 sea distinto de amino. En una modalidad, los compuestos de la invención están representados por la fórmula (I I I): en donde R1 , R2 y R6 hasta R9 son como se define aquí. Otra modalidad de la invención puede ser representada mediante la fórmula (I l la): En la fórmula (III) y en la fórmula (Illa), se prefiere que R2 sea hidrógeno o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, y más comúnmente, R2 es hidrógeno. Dentro del grupo de compuestos definidos por la fórmula (III), R1 preferiblemente es feniio 2,3 di sustituido, 2,6 di sustituido o 2,4,6 trisustituido, o 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxina, en donde los sustituyentes son seleccionados entre halógeno y alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono. Más preferiblemente, R1 se selecciona de 2,6-difluorofenilo, 2-fluoro-6-metoxifenilo, 2-cloro-6-fluorofenilo, 2,6-diclorofenilo, 2,4,6-trifluorofenilo, 2,6-difluoro-4- metoxifenilo, y 2,3-dih¡dro-benzo[1 ,4] dioxina. Un grupo R1 particularmente preferido es 2,6-difluorofenilo. Las porciones R6, R7, R8 y R9 típicamente se seleccionan entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, grupos monocíclicos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 12 (preferiblemente 3 hasta 7, y más comúnmente 5 o 6) miembros en el anillo, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X1), C(X2)X, X1C(X2)X1, S, SO, S02, NRC, S02NRc o NRcS02; y Rb se selecciona de hidrógeno, un grupo carbocíclico o heterocíclico con 3-7 miembros en el anillo y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, aciloxi de 1 a 4 átomos de carbono, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di- hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, un grupo carbocíclico o heterocíclico con 3-7 miembros en el anillo, y en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente puede ser reemplazado por O, S, SO, S02, NRC, X1C(X2), C(X2)X1 o X C(X2)X1; y R1, X, y X2; o un par adyacente de sustituyentes seleccionados entre R6, R7, R8 y R9 junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, pueden formar un anillo no aromático de cinco o seis miembros en al anillo que contenga hasta tres heteroátomos seleccionados entre O, N y S. En una modalidad, R6 hasta R9 son cada uno hidrógeno o están seleccionados entre halógeno, ciano, hidroxi, trifluorometilo, nitro, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO o C (X2)X1 y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo (preferiblemente desde 4 hasta 7 miembros en el anillo, por ejemplo 5 y 6 miembros en el anillo), y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono (preferiblemente un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, por ejemplo un grupo hidrocarbilo saturado tal como alquilo o ciclopropilo), sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, aciloxi de 1 a 4 átomos de carbono, mono-o d i- h idrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemp lo monoalqu ilam ino y dialq uilamino), gru pos heterocíclicos q ue tienen desde 3 hasta 1 2 miembros en el a n illo, m ás preferi blemente desde 4 hasta 7 miembros en el anillo (por ejemplo 5 o 6 miembros en e l ani l lo); en donde Rc se selecciona de h idrógeno e h idrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo hid rocarbi lo saturado, tal como alq uilo y cicloalq uilo), X1 es O o NRC y X2 es =0. En otra modal idad, R6, R7, R8 y R9 son seleccionados entre hidrógeno, flúor, cloro, bromo, nitro, trifluorometilo, carboxi, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, C(X2)X1 , y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos heterocícl icos que tienen 3-7 miembros en el anillo (por ejemplo pirrolid ina, N-metil piperazi na o morfolina) y un gru po hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hid roxi, carboxi, aciloxi de 1 a 4 átomos de carbono, amino, mono-o di- hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos heterocíclicos con 3-7 miembros en el anilio (por ejemplo pirrolidina, N-metil piperazina o morfolina); o un par adyacente de sustituyentes seleccionados entre R6, R7, R8 y R9 junto con los átomos de carbono a los cuales están u nidos, pueden formar un anillo no aromático de cinco o seis miembros, que contiene de uno a dos átomos de oxígeno como miembros del anillo. En una modalidad m ás preferida, R6, R7, R8 y R9 son seleccionados entre h idrógeno, flúor, cloro, trifluorometilo, un grupo Ra-Rb en d onde Ra es u n enlace, O , CO , C(XZ)X\ y R se selecciona de hidróge no, g rupos heterocícl icos saturados que tienen 5-6 miembros en el an illo y un grupo hidrocarbilo de 1 a 2 átomos de carbono, sustituido opciona lmente por uno o más sustituyentes seleccionados de h idroxi, carboxi, aciloxi de 1 a 2 átom os de carbono, amino, mono-o di- hidrocarbi lamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos heterocíclicos con 5-6 miembros en el an il lo; o un par adyacente de sustituyentes seleccionados entre R6, R7, R8 y R9 pueden formar u n g ru po metilenodioxi o etilenod ioxi , cada uno sustituido opcionalmente por uno o más átomos de flúor. En otra modalidad, los grupos sustituyentes particulares R6 hasta R9 incluyen halógeno , nitro, carboxi , un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace , O, CO, C(X2)X1 , y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos heterocíclicos que tienen 3-7 miembros en el anillo y un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi , carboxi, amino, mono- o di- hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos heterocíclicos con 3-7 miembros en el anillo. Si bien cada uno de R6 hasta R9 puede ser hidrógeno o un sustituyente, tal como sé definió aq uí anteriormente, se prefiere q ue al menos uno, más preferiblemente al menos dos, de R6 hasta R9 sea hidrógeno. En u na modalidad particular, uno de R6 hasta R9 es un sustituyente, y los otros son cada uno hidrógeno. Por ejemplo, R6 puede ser un gru po sustituyente y R7 hasta R9 pueden ser cada uno hidrógeno, o R9 puede ser un sustituyente y R6, R7 y R8 pueden ser cada uno hidrógeno. En otra modalidad particular, dos de R6 hasta R9 son sustituyentes y los otros dos son ambos hidrógeno. Por ejem plo, R6 y R9 pueden ser ambos sustituyentes, cuando R7 y R8 son ambos hidrógeno; o R6 y R7 pueden ser ambos sustituyentes , cuando R8 y R9 son ambos h idrógeno; o R7 y R9 pueden ser ambos sustituyentes , cuando R6 y R8 son ambos hidrógeno. R6 es preferiblemente seleccionado entre: hidrógeno; halógeno (preferiblemente flúor o cloro); metilo sustituido opcionalmente por un sustituyente seleccionado entre hidroxi , halógeno (por ejemplo flúor, preferiblemente difluoro o trifluoro, y más preferiblemente trifluoro) y NR1 R1 2; y C(=0)NR1 1 R12; en donde R 1 y R12 son los mismos o diferentes , y cada uno se selecciona de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o R1 y R1 2 junto con el átomo de n itrógeno forman un an illo heterocíclico de cinco o seis miem bros , que tiene 1 o 2 miem bros heteroátomo en el anillo, seleccionados entre O, N y S (preferiblemente O y N). R7 preferiblemente se selecciona entre: h idrógeno; halógeno (preferiblemente flúor o cloro); alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo metoxi); metilo sustituido opcionalmente por un sustituyente seleccionado entre hidroxi, halógeno (por ejemplo flúor, preferiblemente difluoro o trifluoro, y más preferiblemente trifluoro) y NR11R12; y C(=0)NR11 R12; en donde R1 y R12 son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o R 1 y R12 junto con el átomo de nitrógeno, forman un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros que tienen 1 o 2 miembros heteroátomo en el anillo, seleccionados entre O, N y S (preferiblemente O y N). R8 se selecciona preferiblemente entre hidrógeno, flúor y metilo, más preferiblemente hidrógeno. R9 se selecciona preferiblemente entre: hidrógeno; halógeno (preferiblemente flúor o cloro); alcoxi de uno a 4 átomos de carbono (por ejemplo metoxi); metilo sustituido opcionalmente por un sustituyente seleccionado entre hidroxi, halógeno (por ejemplo flúor, preferiblemente difluoro o trifluoro, y más preferiblemente trifluoro) y NR1 R12; y C(=0)NR11R12; en donde R11 y R12 son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o R11 y R12 junto con el átomo de nitrógeno, forman un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros que tiene 1 o 2 m iem bros heteroátomo en el anil lo, seleccionados entre O , N y S (preferiblemente O y N). Alternativamente , R6 y R9, o R7 y R9, junto con los átomos de carbono a los cua les están un idos, pueden formar un grupo cícl ico seleccionado entre: En las definiciones precedentes, cuando R y R1 2 junto con el átomo de nitrógeno en el grupo NR1 1 R12 forman un anil lo heterocíclico, los miembros heteroátomo en el anil lo preferiblemente se seleccionan entre O y N . El anillo heterocíclico típicamente es no-aromático, y los ejemplos de estos anillos incluyen morfolina, piperazina, N-alquilpiperazina de 1 a 4 átomos de carbono, piperidina y pirrolid ina. Los ejemplos particulares de grupos N-alquilpiperazina de 1 a 4 átomos de carbono incluyen N-metilpiperazina y N-isopropilpiperazina. Los gru pos preferidos R6 hasta R9 incluyen aquellos en los cuales el grupo bencimidazol es como se m uestra en la tabla 2 a continuación.
TABLA 2 De los grupos bencimidazol señalados en la Tabla 2 anterior, los grupos particulares incluyen los grupos B1, B3, B5-B8, B11-B20, B23-B30 y B32-B47. Un sub-conjunto de compuestos preferidos es el grupo de compuestos en donde la porción bencimidazol se selecciona de los grupos B1, B3, B5-B8, B11-B20, B24, B25, B27-B30 y B32-B47. Las porciones bencimidazol particularmente preferidas son los grupos B8, B15 y B35, y más particularmente el grupo B15. Un grupo de compuestos novedosos de la invención puede ser representado mediante la fórmula (IV): A es NH (C=0), O (C=0) o C=0; R6a, R7a, R8a y R9a son ios mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de hidrógeno, halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y grupos heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo; un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X\ X C(X2)X\ S, SO, S02, NR1 , S02NRc o NRcS02; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo, y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y grupos heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo y en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, opcionalmente puede ser reemplazado por O, S, SO, S02, NRC, X C(X2), C(X2)X1 o X C(X2)X1; o dos grupos adyacentes R6a, R7a, R8a o R9a junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, pueden formar un anillo heteroarilo de 5 miembros, o un anillo heterocíclico no aromático de 5 o 6 miembros, en donde dichos grupos heteroarilo y heterocíclicos contienen hasta 3 miembros heteroátomo en el anillo, seleccionados entre N, O y S; R° se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono; y X1 es O, S o NR° y X2 es =0, =S o =NRC; o par de sustituyentes adyacentes seleccionados entre R , R , R y R junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, pueden formar un anillo no aromático de cinco o seis miembros, que contiene hasta tres heteroátomos seleccionados entre O, N y S; R1a se selecciona de: - grupos arilo monocíclicos de 6 miembros, sustituidos por uno a tres sustituyentes R10c, siempre que cuando el grupo arilo está sustituido por un grupo metilo, esté presente al menos un sustituyente distinto de metilo: - grupos heteroarilo monocíclicos de 6 miembros, que contienen un solo heteroátomo en el anillo, el cual es nitrógeno, los grupos heteroarilo están sustituidos por uno hasta tres sustituyentes R10C. - grupos heteroarilo monocíclicos de 5 miembros, que contienen hasta tres miembros en el anillo seleccionados de nitrógeno y azufre, y están sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R10c; - grupos heteroarilo monocíclicos de 5 miembros, que contienen un solo oxígeno en el anillo heteroátomo, y opcionalmente un miembro heteroátomo nitrógeno en el anillo, y están sustituidos por uno a tres sustituyentes R10c siempre que cuando el grupo heteroarilo contenga un miembro nitrógeno en el anillo, y esté sustituido por un grupo metilo, esté presente al menos un sustituyente distinto de metilo: - grupos arilo bicíclico y heteroarilo que tienen hasta cuatro miembros heteroátomos e n el anillo, y en donde un anillo es aromático y el otro an il lo es no aromático, o en donde am bos an il los son aromáticos , los grupos bicíclicos están s ustitu idos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R 0c; - g rupos heterocíclicos saturados enlazados con carbono, m onocíclicos de cuatro miem bros, de seis miembros y de s iete m iembros, q ue contienen hasta tres heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre , los gru pos heterocíclicos están sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R10c, siempre que cuando el grupo heterocíclico tenga seis miembros en el anillo y conteng a solamente un heteroátomo que sea oxígeno, al men os esté presente u n sustituyente R 0c; - g rupos heterocíclicos saturados monocíclicos en lazados con carbono, de cinco miembros, que contienen hasta tres heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre, los grupos heterocíclicos están sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R10c, siempre q ue cuando el grupo heterocíclico tenga cinco miembros en el anillo y contenga solamente un heteroátomo que sea nitrógeno, esté presente al menos un sustituyente R1 0c diferente de hidroxi; - grupos cicloalquilo de cuatro y seis miembros, sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R10c; - grupos cicloalq uilo de tres y cinco miembros, sustituidos por uno a tres sustituyentes R10c; y - un grupo Ph'CR 7R1 8- en donde Ph es un grupo fen ilo sustituido por uno a tres sustituyentes R1 0 c; R17 y R 8 son los m ismos o diferentes , y cada uno se selecciona de h idrógeno y metilo; o R1 7 y R18 junto con el átom o de carbono al cua l están unidos , forma un grupo ciclopropilo; o uno de R17 y R1 8 es hidrógeno y el otro se selecciona de amino, metilami no, acilamino de 1 a 4 átomos de carbono, y alcoxicarbon ilamino de 1 a 4 átomos de carbono; y donde uno de R6a, R7a, R8a y R9 a es un grupo morfolinometilo, entonces R1 a se selecciona adicionalmente entre: - fenilo no sustituido y fenilo sustituido con uno o más g rupos metilo; - g rupos heteroarilo monocíciicos de seis m iembros, no sustituidos, q ue contienen un solo miembro heteroátomo en el anillo, el cual es n itrógeno; - furilo no sustituido; - grupos heteroarilo monocíciicos de 5 miembros que contienen un solo miembro heteroátomo oxígeno en el anillo y un miembro heteroátomo nitrógeno en el anillo, y están no sustituidos o sustituidos por uno o más g rupos metilo; - grupos heterocíclicos saturados monocíciicos enlazados con carbono, no sustituidos, de seis miembros, que contienen solamente un heteroátomo, el cual es oxígeno; y - grupos cicloalquilo no sustituidos de tres y cinco miembros; y R1 0 c se selecciona de: - halógeno (por ejemplo F y Cl); - h id roxilo; - hid rocarbi loxi de 1 a 4 átomos d e carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de h idroxilo y halógeno ; - h idrocarbilo sustituido por u no o más sustituyentes seleccionados entre h idroxilo, ha lógeno y anillos heterocíclicos saturados de cinco y seis miembros en el anillo, seleccionados entre n itrógeno, oxígeno y azufre; - S-h idrocarbi io de 1 a 4 átom os de carbono; - feni lo sustitu ido opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; - grupos heteroarilo que tienen 5 o 6 miembros en el anillo (por ejemplo oxazol , piridilo, pirimidinilo) y que contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, los grupos heteroarilo están s ustituidos opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; - g rupos heterocíclicos no aromáticos de 5 y 6 miembros (por ejemplo pirrolidino, piperidino, piperazina, N-metilpiperazino, morfolino) q ue contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S y están sustituidos opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; - ciano, nitro, amino, alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono, di-alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono, acilamino de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono; - un grupo R19-S(0)n- en donde n es 0, 1 o 2 y R 9 se selecciona de amino; alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono; di-alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono; hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono; fenilo sustituido opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; y grupos heterocíclicos no aromáticos de 5 y 6 miembros que contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S y están opcionalmente sustituidos con uno a tres grupos alquilo sustituyentes de 1 a 4 átomos de carbono; y - un grupo R20-Q- en donde R20 es fenilo sustituido opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; y Q es un grupo enlazante seleccionado entre OCH2, CH20, NH, CH2NH, NCH2, CH2, NHCO y CONH. En un sub-grupo de compuestos preferido, R1a se selecciona de grupos heteroariio que tienen 5 o 6 miembros en el anillo (por ejemplo oxazol, tiazol, piridilo, pirimidinilo) y que contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, los grupos heteroariio están sustituidos opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro. Un grupo tiazol sustituido, por ejemplo, 2-metilo-4-trifluorometMo-2-tiazol¡lo, represe nta una modalidad preferida. En otro sub-g rupo de compuestos preferido, R1 a se selecciona de grupos m onocíclicos heteroari lo q ue contienen un solo m iembro heteroátomo de oxígeno en el anillo, y están sustituidos por uno a tres sustituyentes R1 0c, siempre q ue cuando el grupo heteroarilo contenga un miembro nitróge no en el an illo y esté sustitu ido por un grupo metilo, esté presente al menos un sustituyente d istinto a metilo. Un g rupo de este tipo es isoxazol sustituido por un grupo alquilo de 2 a 4 átomos de carbono, tal como u n grupo propilo o butilo, por ejemplo isobutilo. En otro sub-g rupo de compuestos preferido, R a se selecciona de g rupos cicloalq uilo de tres y cinco miembros, sustituidos por uno a tres sustituyentes R1 0c. Los grupos ciclopropilo sustituidos se prefieren particularmente, por ejemplo grupo ciclopropilo sustituido por feni lo o ciano, por ejemplo 1 -cianociclopropilo y 1 - fenllciclopropilo. En un sub-grupo de compuestos adicional , R1 a se selecciona de un g rupo Ph'CR17R18- en donde Ph' es un grupo fenilo sustituido por uno a tres sustituyentes R10C; R17 y R18 son los mismos o diferentes, y cada u no se selecciona de hidrógeno y metilo; o R17 y R1 8 junto con el átomo de carbono al cual están unidos, forma un g rupo ciclopropilo; o uno de R1 7 y R18 es hidrógeno y el otro se selecciona de amino, metilamino, acilamino de 1 a 4 átomos de carbono, y alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono.
Otro g rupo de novedosos com puestos de la invención puede ser representado por la fórm ula (V) : en donde A es N H(OO) o C=0; R1 b es un gru po fen ilo sustitu ido q ue tiene desde 1 hasta 4 sustituyentes, en donde: (i) cuando R1 b contiene un solo sustituyente, éste se selecciona de halógeno, hidroxilo, hidrocarbiloxi de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hid roxilo y halógeno; hidrocarbilo de 1 a 4 átomos d e carbono, sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados entre h idroxilo y halógeno; grupos heteroarilo que tienen 5 miembros en el anillo; y grupos heterocíclicos no aromáticos de 5 y 6 miembros, en donde los grupos heteroarilo y los grupos heterocíclicos contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N , O y S; (ii) cuando R1 b contiene 2, 3 o 4 sustituyentes, cada uno se selecciona de halógeno, hid roxi lo, hidrocarbiloxi de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxilo y halógeno; hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxilo y halógeno; grupos heteroarilo que tienen 5 miembros en el anillo; amino; y grupos heterocíclicos de 5 y 6 miembros, no aromáticos; o dos sustituyentes adyacentes junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, forman un anillo heteroarilo de 5 miembros o un anillo heterocíclico no aromático, de 5 o 6 miembros; en donde dichos heteroarilo y grupos heterocíclicos contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S; y R6a, R7a, R8a y R9a son tal como se definió aquí anteriormente. El grupo R1a-A-NH o R1b-A-NH enlazado a la posición 4 del anillo pirazol, puede tomar la forma de una amida R1a/1b-C(=0)NH, urea R1a/1b-NHC(=0) o carbamato R1a/1b-OC(=0). Se prefieren las amidas y las ureas. En una modalidad, el compuesto es una amida. En otra modalidad, el compuesto es una urea. En la fórmula (V), el grupo fenilo sustituido R1b está sustituido por un solo sustituyente, tal como se definió aquí anteriormente, o por más de un sustituyente. Así, puede tener 1 o 2 o 3 o 4 sustituyentes, más preferiblemente 1, 2 o 3 sustituyentes. En una modalidad, puede tener dos o tres sustituyentes y estos pueden estar localizados en las posiciones 2-, 3-, 4-, 5- o 6- alrededor del anillo. A manera de ejemplo, un grupo fenilo R1b puede estar 2,6- di sustituido, 2,3-di sustituido, 2,4-di sustituido 2,5-di sustituido, 2,3,6-trisustituido o 2,4,6-trisustituido. En un grupo de compuestos preferido, el grupo R1b fenilo es 2,6-di sustituido, 2,3-di sustituido o 2,4,6-trisustituido. Más particularmente, el grupo R1b fenilo puede estar di sustituido en las posiciones 2-y 6- con sustituyentes seleccionados entre flúor, cloro y Ra-R , en donde Ra es O y Rb es alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, con flúor como un sustituyente particular. Alternativamente, dos sustituyentes adyacentes (preferiblemente en las posiciones 2- y 3-), junto con el anillo fenilo al cual están unidos, pueden formar un grupo 2,3-dihidro-benzo[1 ,4jdioxina, o un grupo indolilo, o un grupo 2,3-di idrobenzofuranilo. En otro grupo de compuestos preferidos, el grupo fenilo R1b es 2,4-di sustituido o 2,5-di sustituido. El 2-sustituyente puede ser, por ejemplo, un halógeno (por ejemplo F o Cl) o un grupo metoxi. En un grupo de compuestos particular, el 2-sustituyente es metoxi. El 5-sustituyente, cuando está presente, puede ser seleccionado, por ejemplo, entre halógeno (por ejemplo Cl o F), alquilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo tert-butilo o isopropilo), metoxi, trifluorometoxi, trifluorometilo, o un grupo HetN-S02- en donde "HetN" es un heterociclo monocíclico saturado que contiene nitrógeno, tal como piperazino, N-alquilpiperazino de 1 a 4 átomos de carbono, morfolino, piperidino o pirrolidino. Un 5-sustituyente preferido es Cl, y una 2,5-combinación preferida es 2-metoxi-5-clorofenilo.
En un grupo adicional de compuestos, el grupo fenilo R1b tiene un solo sustituyente en la posición 4 del anillo fenilo. El sustituyente puede ser, por ejemplo, un átomo de halógeno (preferiblemente flúor o cloro, más preferiblemente flúor) o un grupo trifluorometilo. En otro grupo de compuestos, el grupo fenilo R1b es 2,4-di sustituido. Cuando dos sustituyentes adyacentes junto con el anillo fenilo al cual están unidos forman un grupo indolilo o un grupo 2,3-dihidrobenzofuranilo, se prefiere que dichos grupos sean grupos 4-indolilo y 7-(2,3-dihidrobenzofuranilo) respectivamente. En donde R1b es mono-sustituido, y el sustituyente está localizado en la posición 4 del anillo fenilo, éste preferiblemente es distinto de un grupo difluorometoxi o un grupo 2-cloroetilo (a pesar de que el grupo 4- (2-cloroetil)-fenilo puede servir como un producto intermedio para otros compuestos de la fórmula (V)). En una modalidad, en donde R1b es di sustituido, el grupo fenilo sustituido puede ser diferente a un grupo dimetoxifenilo, y puede ser distinto a un grupo 2-fluoro-5- metoxifenilo. En otra modalidad, el sub-grupo R1b puede incluir el grupo 2-fluoro-5-metoxifenilo. Estos compuestos tienen buena actividad contra la quinasa Aurora. En donde se combinan dos sustituyentes adyacentes para formar un anillo, de manera que R1b es un grupo indol, preferiblemente el grupo indol es distinto de un grupo indol-7-ilo.
Un sub-grupo preferido de compuestos de la invención es el grupo en donde R1b se selecciona de los grupos A1 hasta A8, A10, A12 y A14 hasta A24 indicados en la Tabla 1 anterior. Los grupos R1 particularmente preferidos incluyen 2,6-difluorofenilo, 2-fluoro-6-metoxifenilo, 2-cloro-6-fluorofenilo, 2,6-diclorofenilo, 2,4,6-trifluorofenilo y 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxina.. Un grupo R1' actualmente preferido es 2,6-difluorofenilo. Las porciones R6a, R7a, R8a y R9a comúnmente son seleccionados entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, grupos monocíclicos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 12 (preferiblemente 3 hasta 7, y más comúnmente 5 o 6) miembros en el anillo, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X1, X1C(X2)X1, S, SO, S02, NRC, S02NRc NRcS02; y R se selecciona de hidrógeno, un grupo carbocíclico o heterocíclico con 3-7 miembros en el anillo y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, aciloxi de 1 a 4 átomos de carbono, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di- hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, un grupo carbocíclico o heterocíclico con 3-7 miembros en el anillo, y en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente puede ser reemplazado por O, S, SO, S02, NRC, X C(X1), C(X2)X1 o X1C(X2)X1; y Rc, X1 y X2; o un par adyacente de sustituyentes seleccionados entre R6a, R7a, R8a y R9a junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos , pueden formar un an i llo no aromático de cinco o seis miembros, que contiene hasta tres heteroátomos seleccionados entre O, N y S. En una modalidad , R6a hasta RS a son cada uno h idrógeno o está n seleccionados entre halógeno, cia no, hid roxi, trifluorometilo, nitro, un grupo Ra-R en donde Ra es un en lace, O , CO o C(X2)X1 y Rb se selecciona de hidrógeno, gru pos heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el ani llo (preferiblemente desde 4 hasta 7 miembros en el anillo), y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono (preferiblemente un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono) , sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, aciloxi de 1 a 4 átomos de carbono, mono-o d i- hid rocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos heterocíclicos q ue tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo, más preferiblemente desde 4 hasta 7 miembros en el an illo; en donde Rc se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, X1 es O o NR° y X2 es =0. En otra modalidad, R6a, R7a, R8a y R9a están seleccionados entre h idrógeno, flúor, cloro, bromo, nitro, trifluorometilo, carboxi, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO , C(X2)X1 , y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos heterocíclicos que tienen 3-7 (preferiblemente 5 o 6) miembros en el anillo (por ejemplo pirrolid ina, N-metil piperazina o morfolina) y un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de h idroxi, carboxi , aciloxi de 1 a 4 átomos de carbono , am ino, mono- o di-h id rocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos heterocícl icos con 3-7 (preferiblemente 5 o 6) miembros en el an illo (por ejemplo pirrol id ina, N-metil piperazina o morfolina); o un par adyacente de sustituyentes seleccionados entre R6a, R7a, R8a y R9a junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos pueden formar un ani l lo no aromático de ci nco o seis m iembros, que contiene uno o dos átomos de oxígeno como miembros en el anillo. En una modalidad m ás preferida, R6a, R7a, R8a y R9a son seleccionados entre h idrógeno, flúor, cloro , trifluorometi lo, u n g rupo Ra-R en donde Ra es un enlace, O, CO, C(X2)X1 , y Rb se selecciona de h idrógeno, grupos heterocíclicos saturados q ue tienen 5-6 miembros en el anillo y un grupo hidrocarbilo de 1 a 2 átomos de carbono (por ejemplo alq u ilo), sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, carboxi, aciloxi de 1 a 2 átomos de carbono, amino, mono- o di- hidrocarbílamino de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo mono- o dialquilamino), grupos heterocíclicos con 5-6 miembros en el anillo; o un par adyacente de sustituyentes seleccionados entre R6a, R7a, R8a y R9a pueden formar un grupo metilenod ioxi o etilenodioxi cada uno, sustituido opcionalmente por uno o más átomos de flúor. En otra modalidad , los grupos sustituyentes particulares R6a hasta R9a incl uyen halógeno, nitro, carboxi, un grupo Ra-Rb, en donde Ra es un enlace, O, CO, C(X2)X1 , y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos heterocíclicos que tienen 3-7 miembros en el anillo (preferiblemente 5 o 6 miembros en el anillo) y un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo alquilo o cicloalquilo) sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, carboxi, amino, mono- o d¡-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo mono- o di-alquilamino), grupo heterocíclico con 3-7 miembros en el anillo (preferiblemente 5 o 6 miembros en el anillo). Si bien cada uno de R6a hasta R9a puede ser hidrógeno o un sustituyente distinto de hidrógeno, tal como se definió aquí anteriormente, es preferible que al menos uno, más preferiblemente al menos dos, de R6a hasta R9a sean hidrógeno. En una modalidad particular, uno de R6a hasta R9a es un sustituyente distinto de hidrógeno y los otros son cada uno hidrógeno. Por ejemplo, R6a puede ser un grupo sustituyente distinto de hidrógeno y R7a hasta R9a pueden ser cada uno hidrógeno, o R9a puede ser un sustituyente distinto de hidrógeno y R6a, R7a y R8a pueden ser cada uno hidrógeno. En otra modalidad particular, dos de R6a hasta R9a are sustituyentes distintos de hidrógeno y los otros dos son ambos hidrógeno. Por ejemplo, R6a y R9a pueden ser ambos sustituyentes distintos de hidrógeno cuando R7a y R8a son ambos hidrógeno; o R9a y R7a pueden ser ambos sustituyentes distintos de hidrógeno cuando R9a y R8a son amt)0S hidrógeno; o R9a y R7a pueden ser ambos, sustituyentes distintos de hidrógeno cuando R6a y R8a son ambos hidrógeno.
R6a se selecciona preferiblemente entre: hidrógeno; halógeno (preferiblemente flúor o cloro); metilo sustituido opcionalmente por un sustituyente seleccionado entre hidroxi, halógeno (por ejemplo flúor, preferiblemente difluoro o trifluoro, y más preferiblemente trifluoro) y N 1 R12; y C(=0)NR11R12; en donde R11 y R12 son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o R11 y R12 junto con el átomo forman un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros en el anillo seleccionados entre O, N y S (preferiblemente O y N). R9a se selecciona preferiblemente entre: hidrógeno; halógeno (preferiblemente flúor o cloro); alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo metoxi); metilo sustituido opcionalmente por un sustituyente seleccionado entre hidroxi, halógeno (por ejemplo flúor, preferiblemente difluoro o trifluoro, y más preferiblemente trifluoro) y NR1 R12; y C(=0)NR 1R12; en donde R11 y R12 son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o R11 y R 2 junto con el átomo forman un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros que tiene 1 o 2 miembros heteroátomos en el anillo, seleccionados entre O, N y S (preferiblemente O y N). R7a se selecciona preferiblemente entre: hidrógeno; halógeno (preferiblemente flúor o cloro); alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo metoxi); metilo sustituido opcionalmente por un sustituyente seleccionado entre hidroxi, halógeno (por ejemplo flúor, preferiblemente difluoro o trlfluoro, y más preferiblemente trifluoro) y NR11R12; y C(=0)NR11R12; en donde R11 y R 2 son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o R 1 y R12 junto con el átomo de nitrógeno forman un anillo heterocíclico de cinco a seis miembros que tiene 1 o 2 miembros heteroátomo en el anillo, seleccionados entre O, N y S (preferiblemente O y N). R8a se selecciona preferiblemente entre hidrógeno, flúor y metilo, más preferiblemente hidrógeno. Alternativamente, R6a y R9a, o R9a y R7a, junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, pueden formar un grupo cíclico seleccionado entre: átomo de nitrógeno en el grupo NR 1R12 forman un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros, los miembros del anillo heteroátomo preferiblemente se seleccionan entre O y N. el anillo heterocíclico es típicamente no aromático, y los ejemplos de estos anillos incluyen morfolina, piperazina, alquilpiperazina de 1 a 4 átomos de carbono, piperidina y pirrolidina. Los ejemplos particulares de grupos alquilpiperazina de 1 a 4 átomos de carbono incluyen N-metilpiperazina y N-isopropilopiperazina. Los grupos preferidos R6a hasta R9a incluyen aquellos en los cuales el grupo bencimidazol es como se muestra en la Tabla 2 anterior. De los grupos bencimidazol indicados en la Tabla 2 anterior, los grupos particulares incluyen los grupos B1, B3, B5-B8, B11-B20, B23-B30 y B32-B47. Los grupos B1, B3, B5-B8, B11-B20, B24, B25, B27- B30 y B32-B47 son particularmente preferidos Un grupo particular de compuestos de la fórmula (V) puede ser representado por la fórmula (Va): en donde R6a hasta R9a son tal como se definió aquí anteriormente; y (i) R13 es metoxi y R14 hasta R 6 son cada uno, hidrógeno; o (¡i) R 4 es oxazolilo, imidazolilo o tiazolilo, preferiblemente oxazolilo, y R'3, R 5 y R16 son cada uno, hidrógeno; o (iii) R13 se selecciona de flúor, cloro y metilo, R 6 se selecciona de flúor, cloro, metilo y metoxi, y R 4 y R15 son cada uno, hidrógeno; o (iv) R 3 y R16 se seleccionan cada uno entre flúor, cloro y metilo; R14 se selecciona de flúor, cloro, metilo y metoxi; y R15 es hidrógeno; o (v) R13 y R14 son cada uno, hidrógeno; R15 se selecciona de flúor, cloro, metilo y metoxi (más preferiblemente metilo y metoxi), y R16 se selecciona de flúor, cloro y metilo (más preferiblemente flúor), o R15 y R 6 junto con los átomos de carbono del anillo fenilo, forman u n g rupo seleccionado entre: Los sustituyentes particu armente preferidos para el anillo fenilo son los grupos de sustituyentes (i) , (iii), (iv) y (v). En la fórm ula (Va), un sub-grupo particu lar de compuestos es el grupo de compuestos en donde: (i) R13 es metoxi y R14 hasta R 6 son cada uno, hidrógeno; o (iii) R1 3 se selecciona de flúor, cloro y metilo, R1 6 se selecciona de flúor, cloro, metilo y metoxi, y R14 y R15 son cada uno, hidrógeno; o (vi) R13 y R16 se selecciona cada uno entre flúor, cloro y metilo; R14 se selecciona de flúor, cloro y metoxi; y R15 es hidrógeno; o (vii) R 3 y R14 son cada uno, hidrógeno, R15 es metoxi y R1 6 es flúor, o R15 y R16 j unto con los átomos de carbono del an il lo fenilo forman un grupo seleccionado entre: ¾ Un siib-grupo de co m py esto d?¾r¾i cyl a i ¡§ nje* pFefe ri d o en la fórmula (Va) es el grupo de compuestos en donde: (iü) R13 se selecciona de flúor, cloro y metilo, R15 se selecciona de flúor, cloro, metilo y metoxi, y R 4 y R15 son cada uno, hidrógeno; o (vi) R13, R14 y R16 son cada uno, flúor y R15 es hidrógeno; o (vii) R 3 y R14 son cada uno, hidrógeno y R15 y R 6 junto con los átomos de carbono del anillo fenilo forman un grupo: Los compuestos de las fórmulas (V) y (Va) son particularmente preferidos como inhibidores de CDK. En una modalidad preferida, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (VI): cuando A es NH (C=0) o C=0; R1c se selecciona de: (a) un grupo fenilo mono-sustituido, en donde el sustituyente se selecciona de o-amino, o-metoxi; o-cloro; p-cloro; o-difluorometoxi; o-trifluorometoxi; o-tert-butiloxi; /77-metilsulfonilo y p-fluoro; (b) un grupo fenilo 2,4- o 2,6-di sustituido en donde un sustituyente se selecciona de o-metoxi, o-etoxi, o-fluoro, p-morfolino y el otro sustituyente se selecciona de o-fluoro, o-cloro, p-cloro, y p-amino; (c) un grupo feniio 2,5-di sustituido en donde un sustituyente se selecciona de o-fluoro y o-metoxi, y el otro sustituyente se selecciona de m- metoxi, m-isopropilo; m-fluoro, m-trifluorometoxi, m-trifluorometilo, /77-metilsulfanilo, m-pirrolidinsulfonilo, m-(4-metilpiperazin-1 -il)sulfonilo, m-morfolinsulfonilo, m-metilo, m-cloro y m- aminosulfonilo; (d) un grupo fenilo 2,4,6-tri-sustituido en donde los sustiíuyentes son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona entre o-metoxi, o-fluoro, p-fluoro, p- metoxi siempre que no esté presente más de un sustituyente metoxi; (e) un grupo fenilo 2,4,5-tri-sustituido en donde los sustiíuyentes son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona entre o-metoxi, m-cloro y p-amino; (f) bencilo no sustituido; 2,6-difluorobencilo; . a,a-dimetilbencilo; 1-fenilocicloprop-1-ilo; y a-tert-butoxicarbonilaminobencilo; (g ) u n g ru po 2-furilo no sustituido, o un grupo 2-furilo q ue contiene un solo sustituyente, seleccionado entre 4-(morfolin-4-ilmetilo), piperidinilmetilo; y opcionalmente un sustituyente adicional seleccionado de metilo; (h) un g ru po p ¡razolo[1 ,5-a]pirid in-3-ilo no sustituido; (i) isoxazol ilo sustituido por uno o dos g rupos alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; (j) 4,5,6,7-tetrahidro-benzo[d]isoxazol-3-ilo; (k) 3-tert-butil-fenil-IH-pirazol-5-¡lo; ( 1 ) quioxalinilo; (m) benzo[c] isoxazol-3-ilo; (n) 2-metilo-4-trifluorometil-tiazol-5-ilo; (o) 3-fenilamino-2-piridilo; (p) 1 -toluenosu lfonilpirrol-3-ilo; (q) 2,4-dimetoxi-3-pirid ilo; y 6-cloro-2-metoxi-4-metilo-3-piridilo; (r) imidazo[2, 1 -b]tiazol-6-ilo; (s) 5-cloro-2-metilsulfanilo-pirimidin-4-ilo; (t) 3-metoxi-naft-2-ilo; (u) 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxin-5-ilo; (v) grupo 2,3-dihidro-benzofuranilo sustituido opcionalmente en el anil lo de cinco miembros por uno o dos grupos metilo; (w) 2-metM-benzoxazol-7-ilo; (x) 4-aminociclohex-1 -ilo; (y) 1 ,2,3,4-tetrahidro-quinol¡n-6-ilo; (z) 2-metil-4,5,6,7-tetrahidro-benzofuran-3-ilo; (aa) 2-p¡rimidin¡l-1-piperid¡n-4-ilo; y 1- (5-tr¡fluorometil-2-piridil)-p¡peridin-4-¡lo y 1 -metilsulfonilpiperidin-4-ilo; (ab) 1 -cianociclopropilo; (ac) N-bencilmorfolin-2-ilo; y cuando A es NH(C=0), R1 se selecciona adicionalmente entre: (ad) fenilo no sustituido; R9 se selecciona de hidrógeno; cloro; metoxi; metilsulfonilo; 4-metil-piperazin-1 -ilcarbonilo; morfolincarbonilo; morfolinmetilo; pirrol id in ilcarbonilo; N-metil-piperidiniloxi; pirrolidiniletoxi; morfolinpropilaminometilo; 4-ciclopentil-piperazin-1-ilmetilo; 4-etilsulfonil-piperazin-1 -ilmetilo; morfolinsulfonilo; 4-(4-metilciclohexilo)-piperazin-1-ilmetilo; y R7b se selecciona de hidrógeno; metilo; metoxi y etoxi. Los compuestos de la fórmula (VI) tienen buena actividad contra las quinasas Aurora. Los compuestos preferidos de la fórmula (VI) son aquellos que tienen una IC50 media contra la quinasa Aurora A, de menos de 0.03 µ? o menos, cuando se determina por los métodos descritos aquí. Un sub-grupo particular de compuestos de la fórmula (VI) es el grupo de compuestos en el cual R9b se selecciona de morfolinmetilo y metoxi, y R7b es metoxi cuando R es metoxi, o R7b es hidrógeno cuando R es morfolinmetilo. Un grupo adicional de los novedosos compuestos de la invención, se puede representar por la fórmula (VII): en donde R d es un grupo R1, R1a, R1b o R1c , tal como se definió aquí anteriormente. Los compuestos de la fórmula (VII) muestran buena actividad inhibidora de CDK, y también son particularmente activos contra las quinasas Aurora. Un sub-grupo de compuestos particularmente preferido dentro de la fórmula (VII) está representado por la fórmula (Vlla): en donde R 1d es tal como se definió aquí anteriormente. Otro sub-grupo de compuestos novedosos de la invención, está representado por la fórmula (VI I I): en donde R1 e es un g ru po R1 a o u n grupo R1 b, tal como se definió aq uí anteriormente. Un grupo adicional de los novedosos compuestos de la invención, está representado por la fórmula general (IX): en donde R es como se define aquí, E es un enlace, CH2 o CH2CH2, R22 se selecciona de hidrógeno, halógeno (por ejemplo flúor o cloro), y alcoxi de 1 a 2 átomos de carbono (por ejemplo, metoxi), y G es un an illo heterocíclico saturado de 4 a 7 m iembros, que contiene hasta 3 miembros heteroátomos en el an illo, seleccionados entre N, O y S, el anillo heterocíclico está sustituido opcionalmente por 1 hasta 4 (preferiblemente hasta 2, por ejemplo 0 o 1 ) grupos R10 (o un sub-grupo de ellos, co mo se define aquí). En la fórm ula (IX), un g rupo particular de compuestos está representado por la fórm u la (IXa): En donde R1 d, E y R22 son como se define aq uí, y R21 se selecciona de h idrógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo metilo), acilo de 1 a 4 átomos de carbono, y alcoxicarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono. Una com binación preferida, es la combinación en la cual E es CH2, R21 es metilo y R22 es metoxi. Para evitar d udas, debe entenderse q ue cada preferencia general y específica, modal idad y ejemplo, de los grupos R1 , se puede combinar con cada preferencia general y específica, modalidad y ejemplo de los grupos R2 y/o R3 y/o R4 y/o R5 y/o R6 y/o R7 y/o R8 y/o R9 y/o R10 y cualesquiera sub-grupos de ellos, y q ue todas estas combinaciones están comprendidas en esta solicitud. Por ejemplo, cualq uiera de los grupos R (por ejemplo como en R1-A en donde A es C=0) que se muestran en la Tabla 1 , puede ser combinado con cualq uier otro de los grupos ben cimidazol q ue se muestran en la Tabla 2. Los diversos grupos funcionales y sustituyentes q ue constituyen los comp uestos de la fórmula ( I) se escogen comúnmente de tal forma que el peso molecu lar del compuesto no exceda de 1 000. Más usualmente, el peso m olecula r del compuesto será men or que 750, por ejemplo menor q ue 700, o menor q ue 650, o menor q ue 600 , o menor q ue 550. Más preferiblemente, el peso molecular es menor q ue 525 y, por ejemplo, es de 500 o menos. Los comp uestos particulares y específicos de la invención, son los que se ilustra n en los ejemplos más adelante. A menos que se especifique otra cosa, una referencia a u n compuesto particular también incluye las formas iónica, sal , solvato y formas protegidas del mismo, por ejemplo, tal como se describe más adelante. Muchos compuestos de la fórm ula (I) pueden existir en la forma de sales, por ejemplo, sales de adición de ácido, o en ciertos casos, sales de bases orgánicas e inorgánicas, tales como sales carboxilato, sales sulfonato y sales fosfato. Todas estas sales están dentro del alcance de esta invención, y las referencias a compuestos de la fórmula (I) incluyen las formas de sal de los compuestos. Las sales de adición de ácido pueden ser formadas con una amplia variedad de ácidos, tanto inorgánicos como orgánicos.
Los ejemplos de sales de ad ición de ácido incluyen las sales formadas con ácidos clorh ídrico, yodhídrico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, cítrico, láctico, succín ico , maleico, m élico , isotión ico , fu márico, bencenosulfónico , toluenosulfónico, metanosulfónico , etanosu lfón ico, naftalenosulfónico, valérico, acético, propan oico , butanoico, malón ico, glucurón ico y lactobiónico. Por ejemplo, si el compuesto es ani ónico, o tiene un grupo funcional que puede ser aniónico (por ejemplo, -COOH puede ser -COO-), entonces se puede formar una sal con un catión a propiado. Los ejemplos de cationes inorgán icos apropiad os incluyen, sin lim itación a el los, iones de metales alcalinos, tales como Na+ y K+, cationes de metales alcalino-térreos, tales como Ca2+ y Mg2+, y otros cationes tales como A13+. Los ejemplos de cationes orgánicos apropiados incluyen , sin limitación a ellos, ion amon io (es decir, N H4+) y iones amonio sustituidos (por ejemplo, N H3R+, NH2R2+, NHR3\ NR4+). Los ejemplos de alg unos iones amonio sustituidos apropiados, son los que se derivan de: etilamina, dietilamina, diciclohexilamina, trietilamina, butilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, bencilamina, fenilbencilamina, colina, meglumina, y tromehamina, así como también aminoácidos, tales como lisina y arginina. U n ejemplo de ion amonio cuaternario com ún es N(CH3)4+. En donde los compuestos de la fórmula (I) contienen una función amina, estos pueden formar sales de amonio cuaternario , por ejemplo mediante la reacción con un agente alquilante de acuerdo con métodos familiares para el conocedor de la materia. Estas sales de amonio cuaternarias están dentro del alcance de la fórmula (I).
Las formas de sal de los compuestos de la invención típicamente son sa les aceptables para uso farmacéutico, y los ejemplos de sales aceptables para uso farmacéutico están descritos en Berge y coa utores , 1 977, "Farmaceutica lly Acceptable Salts, " J. Farm. Sci. , Vol . 66, pp. 1 - 1 9. Sin embargo, las sales q ue no son aceptables para uso farmacéutico pueden ser preparadas también como formas intermed ias que pueden ser convertidas l uego en sales aceptables para uso farmacéutico. Estas formas de sales no aceptables para uso farmacéutico, las cuales pueden ser útiles, por ejemplo, en la purificación o separación de los compuestos de la invención, también forman parte de la invención . Los compuestos de la fórmula (I) q ue contienen una función amina también pueden formar N-óxidos. U na referencia aquí a un compuesto de la fórmula (I) que contiene una función amina, tam bién incluye el N-óxido. En donde un compuesto contiene varias funciones amina, uno o más átomos de carbono pueden ser oxidados para formar un N-óxido. Los ejemplos particulares de N-óxidos son los N-óxidos de una amina terciaria o un átomo de nitrógeno de un heterociclo que contiene un nitrógeno. Los N-óxidos se pueden formar mediante el tratamiento de la amina correspond iente con un agente oxidante tal como peróxido de hidrógeno, o un per-ácido (por ejemplo, un ácido peroxicarboxílico) , véase por ejemplo Advanced Organic Chemistry, por Jerry March, 4a. edición, Wiley I nterscience, páginas. Más particularmente, los N-óxidos pueden ser elaborados mediante el procedimiento de L. W. Deady (Syn. Comm. 1977, 7, 509-514) en el cual el compuesto amina se hace reaccionar con ácido m-cloroperoxibenzoico (MCPBA), por ejemplo, en un solvente inerte tal como diclorometano. Los compuestos de la fórmula pueden existir en una cantidad de diferentes formas isoméricas geométricas y tautoméricas, y las referencias a los compuestos de la fórmula (I) incluyen todas estas formas. Para evitar dudas, en donde pueda existir un compuesto en una de varias formas isoméricas geométricas o tautoméricas y solamente una sea específicamente descrita o mostrada, todas las otras están comprendidas no obstante, por la fórmula (I). Por ejemplo, en los compuestos de la fórmula (I), el grupo bencimidazol puede tomar cualquiera de las siguientes dos formas tautoméricas A y B. Por simplicidad, la fórmula general (I) ¡lustra la forma A, pero se debe asumir que la fórmula comprende ambas formas tautoméricas.
A El an illo pirazol tam bién puede m ostra r tautomerismo, y puede existir en las dos formas tautoméricas C y D siguientes .
D Otros ejemplos de formas tautoméricas incl uyen, por ejemplo, formas ceto-, enol, y enolato-, tales como, por ejemplo, los sigu ientes pares tautoméricos: ceto/enol (ilustrado más adelante), imina/enamina, amida/ alcohol ¡mino, amid ina/amid ina, nitroso/oxime, tiocetona/enetiol, y nitro/aci-nitro. ceto enol enolato En donde los compuestos de la fórmula (I) contienen uno o más centros quirales, y puedan existir en la forma de dos o más isómeros ópticos, las referencias a los compuestos de la fórmula (I) incl uyen todas las formas ópticas isoméricas de ellos (por ejemplo, enantiómeros, epímeros y diaestereoisómeros), ya sea como isómeros ópticos individuales, o mezclas de dos o más isómeros ópticos, a menos que el contexto req uiera otra cosa.
Por ejemplo, el grupo A puede incluir uno o más centros quirales. Así, cuando E y R1 están unidos ambos al mismo átomo de carbono o al grupo enlazante A, dicho átomo de carbono es típicamente quiral, y por lo tanto, el compuesto de la fórmula (I) existirá como un par de enantiomeros (o más de un par de enantiomeros en donde más de un centro quiral está presente en el compuesto). Los isómeros ópticos pueden ser caracterizados e identificados por su actividad óptica (es decir, como isómeros + y -, o como isómeros d y /) o pueden ser caracterizados en términos de su estereoquímica absoluta, usando la nomenclatura "R y S" desarrollada por Cahn, Ingold y Prelog, véase Advanced Organic Chemistry por Jerry March, 4a. edición, John Wiley & Sons, Nueva York, 1992, páginas 109-114, y véase también Cahn, ingold & Prelog, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1966,5,385-415. Los isómeros ópticos pueden ser separados por una cantidad de técnicas que incluyen cromatografía quiral (cromatografía en un soporte quiral) y estas técnicas son familiares para los conocedores de la materia. En donde los compuestos de la fórmula (I) existen como dos o más formas isoméricas ópticas, un enantiómero en un par de enantiomeros puede mostrar ventajas sobre el otro enantiómero, por ejemplo, en términos de actividad biológica. Así, en ciertas circunstancias, puede ser deseable usar como agente terapéutico solamente uno de un par de enantiomeros, o solamente uno de una pluralidad de diaestereoisómeros. De acuerdo con lo anterior, la invención proporciona composiciones que contienen un compuestos de la fórmula (I) que tiene uno o más centros quirales, en donde al menos 55% (por ejemplo, al menos 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 855, 90% o 95%) del compuestos de la fórmula (I) está presente como un solo isómero óptico (por ejemplo, enantiómero o diaestereoisómero). En una modalidad general, 99% o más (por ejemplo, sustancialmente toda) de la cantidad total del compuesto de la fórmula (I) puede estar presente como un solo isómero óptico (por ejemplo, enantiómero o diaestereoisómero). Los compuestos de la invención incluyen compuestos con una o más sustituciones isotópicas, y una referencia a un elemento particular incluye en su alcance todos los isótopos del elemento. Por ejemplo, una referencia a hidrógeno, incluye dentro de su alcance H, 2H(D), y 3H(T). De manera similar, las referencias a carbono y oxígeno incluyen dentro de su alcance respectivamente 12C, 13C y 4C y 60 y 180. Los isótopos pueden ser radiactivos o no radiactivos. En una modalidad de la invención, los compuestos no contienen isótopos radiactivos. Estos compuestos son preferidos para uso terapéutico. En otra modalidad, sin embargo, el compuesto puede contener uno o más radioisótopos. Los compuestos que contienen estos radioisótopos pueden ser útiles en un contexto de diagnóstico. Los ésteres tales como ésteres de ácido carboxílico y ésteres aciloxi de los compuestos de la fórmula (I) que tienen un grupo ácido carboxílico o un grupo hidroxilo, también están comprend idos en la fórmula (I) . Los ejemplos de ásteres son compuestos q ue contienen el g rupo -C(=0)OR, en donde R es un sustituyente éster, por ejemplo, un grupo alqui lo de 1 a y átomos de carbono , u n g rupo heterocicli lo de 3 a 20 átomos de carbono, o un g rupo arilo de 5 a 20 átomos de carbono, preferiblemente un g rupo a lqu i lo de 1 a 7 átomos de carbono. Los ejem plos particu lares de grupos éster incluyen , sin limitación a ellos, -C(=0)OCH3, -C(=0)OCH2CH3, -C(=0)OC(CH3)3, y -C(=0)OPh . Los ejemplos de g rupos aciloxi (éster reverso) están representados por -OC(=0)R, en d onde R es un sustituyente aciloxi , por ejemplo, un grupo alquilo de 1 a átomos de carbono, un grupo heterociclilo de 3 a 20 átomos de carbono, o un grupo arilo de 5 a 20 átomos de carbono, preferiblemente un grupo alq uilo de 1 a 7 átomos de carbono. Los ejemplos particulares de grupos aciloxi incluyen, sin limitación a ellos, -OC(=0)CH3 (acetoxi), -OC(=0)CH2CH3, -OC(=0)C(CH3)3, -OC(=0)Ph , y -OC(=0)CH2Ph. También están comprendidas por la fórmula (I) cualesquiera formas isoméricas de los compuestos, solvatos (por ejem plo, hidratos) , complejos (por ejemplo complejos de inclusión o clatratos con compuestos tales como ciclodextrinas, o complejos con metales) de los compuestos, y pro-fármacos de los compuestos. Por "profármacos" se quiere decir por ejemplo, cualquier compuesto que se convierta "in vivo" en un compuesto biológicamente activo de la fórmula (I) .
Por ejemplo, a u nos profármacos son ésteres com puesto activo (por ejemplo, un éster lábil metabólicamente, acepta ble fisiológ icamente) . Du ra nte el metabolismo, el grupo éster (-C(=0)OR) es dividido para producir el fármaco activo . Estos ésteres pueden formarse por esterificación, por ejem plo, de cualquiera de l os grupos ácido carboxílico (-C(=0)OH) en el com puesto precursor, con protección previa, cuando es apropiado, de cualquier otros grupos reactivos presentes en el compuesto precursor, seg uido por desprotección si se req uiere. Los ejemplos de estos ésteres lá biles metabólicamente, incluyen los de la fórmula -C(=0)OR, en donde R es: alq uilo de 1 a 7 átom os de carbono ejemplo, -Me, -Et, -n Pr, -iPr, -nBu, -sBu, -iBu , -tB u); aminoalquilo de 1 a 7 átomos de carbono (por ejemplo, aminoetilo; 2-(N , N-dietilamino) etilo; 2-(4-morfolino) etilo); y aciloxi-aiquilo de 1 a 7 átomos de carbono (por ejemplo, aciloximetilo); aciloxietilo; pivaloiloximetilo; acetoximetilo; 1 -acetoxietilo; 1 -(1 -metoxi-1 -metilo) etil-carbonxiloxietilo; 1 -(benzoiloxi)etilo; isopropoxi-carboniloximetilo; 1 -isopropoxi-carboniloxietilo; ciclón exil-carbon i loxi metilo; 1 -ciclohexil-carboni loxietilo; ciclón exi loxi-carboniloximetilo; 1 -ciclohexiloxi-carboniloxietilo; (4-tetrahidropiraniloxi)carbon iloximetilo; 1 -(4-tetrahidropiran iloxi)carbon iloxietilo; (4-tetrahidropiran il)carboniloximetilo; y 1 -(4-tetrahidropiranil)carboni loxietilo). También, alg unos profármacos son activados enzimáticamente para producir el compuesto activo, o un compuesto que, bajo reacción química adicional , produce el compuesto activo (por ejemplo, como en ADPT, GD EPT, LI DEPT, etc.). Por ejemplo, el profármaco puede ser un derivado de. azúcar u otro conjugado g licósido, o puede ser un derivado de éster de aminoácido.
ACTIVI DAD BIOLÓGICA Los compuestos de la fórm ula (l) son inhibidores de las quinasas dependientes de ciclina. Por ejemplo, los compuestos de la invención tienen actividad contra las quinasas CDK1 , CDK2, CD K3, CDK5, CDK6 y CDK7. Adicionalmente, CDK4, CDK8 y/o CDK9 pueden ser de interés. Los compuestos de la invención también tienen actividad contra la glicógeno sintasa quinasa 3 (GSK-3). Los com puestos de la invención también tienen actividad contra las quinasas Aurora. Como consecuencia de su actividad para modular o inh ibir las q uinasas CDK y las q u inasas Au rora, y la g licógeno sintasa quinasa, se espera que ellos sean útiles para proporcionar un medio para detener, o para recuperar el control d el ciclo celular en las célu las que se están dividiendo anormalmente. Por lo tanto, se prevé que los compuestos probarán ser útiles en el tratamiento o prevención de desórdenes proliferativos, tales como cánceres . También se vislumbra que los compuestos de la invención serán útiles para tratar condiciones tales como i nfecciones virales , e nfermedades autoi nmunológicas y enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo. Las CDK juega n un papel en la reg ulación del ciclo celular, apoptosis, transcripción, diferenciación y función CNS . Por lo tanto , los inhibidores de CDK podrían ser útiles en el tratam iento de enfermedades en las cuales hay un desorden de proliferación , apoptosis o diferenciación , ta l como el cáncer. En particular, los tumores RB+vr pueden ser particularmente sensibles a los inhibidores de CDK. Los tumores RB-ve también pueden ser sensibles a los in hibidores de CDK. Los ejemplos de cánceres que pueden ser inhibidos incluyen, sin limitación a ellos, un carcinoma, por ejemplo un carcinoma de la vejiga, mama, colon (por ejemplo, carcinomas coloréeteles tales como adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), riñón , epidermis, hígado, pulmón , por ejemplo adenocarcinoma, cáncer de células pequeñas del pulmón, y carcinomas de células pulmonares no pequeñas, esófago, vesícula biliar, ovario, páncreas, por ejemplo carcinoma exocrino pancreático, estómago, cérvix, tiroides, próstata, o piel, por ejemplo, carcinoma de células escamosas, un tumor hematopoyético de origen linfoide, por ejemplo leucemia, leucemia linfocítica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma de células pilosas, o linfoma de Burkett; un tumor hematopoyético de origen mieloide, por ejemplo, leucemias mieloginosas aguda y crónica, síndrome mielodisplástico, o leucemia promielocítica, cáncer folicular de tiroides, un tumor de origen mesenquimal, por ejemplo, fibrosarcoma o habdomiosarcoma; un tumor del sistema nervioso central o periférico, por ejemplo astrocitoma, neuroblastoma, glioma o schwannoma; melanoma, seminoma, teratocarcinoma; osteosarcoma; xenoderoma pigmentoum; queratoctantoma; cáncer folicular tiroideo, o sarcoma de Kaposi. También se sabe que las CDK juegan un papel en la apoptosis, proliferación, diferenciación y transcripción, y en consecuencia los inhibidores de CDK también podrían ser útiles en el tratamiento de las siguientes enfermedades diferentes al cáncer: infecciones virales, por ejemplo virus del herpes, virus de viruela, virus de Epstein-Barr, virus Sindibis, adenovirus, VIH, VPH, VCH y VMHC; prevención del desarrollo de SIDA en individuos infectados con VIH; enfermedades inflamatorias crónicas, por ejemplo lupus eritematoso sistémico, glomerulonefritis mediada por el sistema autoinmunológico, artritis reumatoide, psoriasis, enfermed ad inflamatori a i ntestinal, y diabetes mellitus autoinmunológ ica ; enfermedades cardiovasculares, por ejem plo hipertrofia cardiaca , restenosis, arteroesclerosis , desórdenes neurodegenerativos, por ejemplo enfermedad de Alzheimer, demencia relacionada con S I DA, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral am iotrópica, retinitis pig mentosa, atrofia muscu lar espinal y degeneración del cerebelo; glomerulonefritis; síndromes m ielodisplásticos , daño isquém ico asociado con infarto al m iocardio, apoplejía y daño por reperfusión, a rritm ia, arteroesclerosis, enfermedades del híg ado ind ucidas por toxinas o relacionadas con alcohol , enfermedades hematológicas, por ejemplo anem ia crónica y anemia aplásica; enfermedades degenerativas del sistema músculo esquelético, por ejemplo, osteoporosis y artritis, rinosinusitis sensible a la aspirina, fibrosis qu ística, esclerosis múltiple, enfermedades del riñon y dolor canceroso. También se ha descubierto que algunos inhibidores de q uinasas dependientes de ciclina pueden usarse en combinación con otros agentes anticancerosos. Por ejemplo, la actividad citotóxica del inhibidor de q uinasas depend ientes de ciclina flavopiridol, se ha usado con otros agentes anticancerosos en terapia de combinación. Así, en las composiciones farmacéuticas, usos o métodos de esta invención para tratar una enfermedad o condición que comprende crecimiento celular anormal, la enfermedad o condición que comprende crecimiento celular anormal en una modalidad es un cáncer. Los sub-conj u ntos particu lares de cánceres incluyen cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de colon , cáncer de próstata , cáncer oseofágico, cáncer escamoso y carcinomas de pulmón de células no pequeñas. En el caso de los compuestos que tienen actividad contra la q u inasa Aurora, los ejemplos particulares de cánceres en donde se prevé que los compuestos in hibidores de q uinasa Aurora serán útiles, incluyen : cánceres de mama humanos (por ejemplo, tumores primarios de mama, cáncer de mama negativo para nodos, adenocarcinomas de ducto invasivo de la mam a , cánceres de mama no endométricos) ; cánceres ováricos; cánceres de vejiga humana; cánceres colorectales (por ejemplo, cánceres colorectales primarios); tumores gástricos: cánceres renales: cánceres cervicales: neuroblastomas; melanomas: linfomas : cánceres de próstata: leucemia: carcinomas endometriales no endométricos: gliomas; linfoma que no es de Hodgkin; Los cánceres que pueden ser particularmente receptivos a los inhibidores de Aurora incluyen carcinomas de mama, vejiga, colorrectal, pancreático, ovárico, linfoma que no sea de Hodgkin, gliomas y carcinomas endometriales no endométricos. La actividad de los compuestos de la invención como inhibidores de quinasas dependientes de ciclina quinasas Aurora y glicógeno sintasa quinasas 3, puede medirse usando las pruebas que se exponen en los ejemplos más adelante, y el nivel de actividad demostrado por un compuesto dado se puede definir en términos del valor IC5o- Los compuestos preferidos de la presente invención son compuestos que tienen un valor de lC5o de menos de 1 micromol, más preferiblemente menos de 0.1 micromol.
MÉTODOS PARA LA PREPARACIÓN DE LOS COMPUESTOS DE LA FÓRMULA (\) Los compuestos de la fórmula (I) se pueden preparar de acuerdo con los métodos de síntesis familiares para el conocedor de la materia. A menos que se indique otra cosa, R1, R2, R3 y R4 son como se definió aquí. Los compuestos de la fórmula (I) en donde R1-A forman un grupo acilo, pueden prepararse como se ilustra en el Esquema 1 más adelante. Tal como se muestra en el Esquema I, una amina de la fórmula (X) puede hacerse reaccionar con un ácido carboxílico, o derivado reactivo de éste, de ia fórmula R1-B-C02H bajo condiciones estándar de formación de amidas. Así, por ejemplo, la reacción de acoplamiento entre el ácido carboxílico y la amina (X) se puede llevar a cabo en la presencia de un reactivo del tipo usado comúnmente en la formación de enlaces péptidos. Los ejemplos de estos reactivos incluyen 1,3-diciclohexilcarbodiimida (DCC) (Sheehan y coautores, J. Amer. Chem Soc. 1955, 77, 1067), 1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)-carbodiimida (EDC) (Sheehan y coautores, J. Org. Chem., 1961, 26, 2525), agentes de acoplamiento basados en uronio, tales como hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU) (L. A. Carpino, J. Amer. Chem. Soc, 1993, 115, 4397) y agentes de acoplamiento basados en fosfonio tales como hexafluorofosfato de 1-benzo-triazoliloxitris(pirrolidin)fosfon¡o (PyBOP) (Castro y coautores, Tetrahedron Letters, 1990, 31, 205). Los agentes de acoplamiento basados en carbodiimida se usan ventajosamente en combinación con 1-hydroxiazabenzotriazol (HOAt) o -hidroxibenzotriazol (HOBt) (Konig y coautores, Chem. Ber., 103, 708, 2024-2034). Los reactivos de acoplamiento preferidos incluyen EDC y DCC en combinación con HOAt o HOBt.
ESQUEMA 1 (X) La reacción de acoplamiento se lleva a cabo comúnmente solvente no acuoso, no prótico, tal como acetonitrilo, dioxan, dimetilsulfóxido, diclorometano, dimetilformamida o N-metilpirrolidina, o en un solvente acuoso opcionalmente junto con uno o más co-solventes miscibles. La reacción se puede llevar a cabo a temperatura ambiente, o donde los reactantes sean menos reactivos (por ejemplo en el caso de anilinas bajas en electrones que contienen grupos que quitan electrones, tales como grupos sulfonamida) a una temperatura elevada apropiada. La reacción se puede llevar a cabo en la presencia de una base no interfiriente, por ejemplo, una amina terciaria, tal como trietilamina o N,N-diisopropiletilamina. Como una alternativa, se puede usar un derivado reactivo del ácido carboxílico, por ejemplo un anhídrido o cloruro ácido. La reacción con un derivado reactivo tal como un anhídrido comúnmente se lleva a cabo agitando la amina y el anhídrido a temperatura ambiente en la presencia de una base tal como piridina. Las aminas de la fórmula (X) pueden prepararse por reducción del correspondiente compuesto nitro de la fórmula (XI) bajo condiciones estándar. La reducción puede ser efectuada, por ejemplo, por hidrogenación catalítica en la presencia de un catalizador tal como paladio sobre carbón en un solvente polar, tal como etanol o dimetilformamida a temperatura ambiente. Cuando X es nitrógeno, los compuestos de la fórmula (XI) se pueden preparar por la reacción de un ácido carboxílico nitro-pirazol de la fórmula (XII) con una diamina de la fórmula (XII). La reacción entre la diamina (XIM) y el ácido carboxílico (XII) se puede llevar a cabo en la presencia de un reactivo tal como DCC o EDC en la presencia de HOBt como se describió anteriormente, bajo condiciones de acoplamiento de amida, tal como se describió previamente, para dar un producto intermedio orfo-aminofenilamida (no se muestra), el cual luego se cicliza para formar el anillo bencimidazol. El paso final de ciclización se lleva a cabo típicamente calentando bajo reflujo en la presencia de ácido acético. Las diaminas de la fórmula (XIII) se pueden obtener comerciaimente, o se pueden preparar a partir de compuestos precursores fenilo sustituidos apropiadamente, usando química estándar e ¡nterconversiones de grupo funcional bien conocidas, véase por ejemplo, Fiesers'Reagents for Organic Synthesis, Volúmenes 1-17, John Wiley, editado por Mary Fieser (ISBN: 0-471-58283-2), y Organic Syntheses, Volúmenes 1-8, John Wiley, editado por Jeremiah P. Freeman (ISBN : 0-471-31 92-8), 1995. Los ejemplos de métodos para preparar diaminas de la fórmula (XIII) se proporcionan en los ejemplos más adelante. Las diaminas de la fórmula (XIII) también se pueden hacer reaccionar con ácidos carboxílicos de la fórmula (XIV) para dar los compuestos de la fórmula (I).
La reacción de l a di am ina (XI I I) con el ácido carboxílico (XIV) se puede llevar a cabo bajo condiciones análogas a las descritas anteriormente para preparar los compuestos nitro (XI). Los ácid os carboxílicos de la fórmula (XIV) se pueden preparar mediante la secuencia de reacciones q ue se muestra e n el Esq uema 2. Tal como se muestra en el esq uem a 2, un ácido 4-nitro-3-p irazol sustituido o no sustituido (XV) se puede esterificar med iante la reacción con cloruro de tionilo para dar el producto intermedio cloruro ácido seguido por reacción con etanol para formar el éster etíl ico (XVI). Alternativamente , la esterificación se puede llevar a cabo haciendo reaccionar el alcohol y el ácido carboxílico en la presencia de un catalizador ácido, un ejem plo del cual es cloruro de tionilo. La reacción típicamente se lleva a cabo a temperatura ambiente usando alcohol esterificante (por ejemplo, etanol) como el solvente. El gru po nitro puede ser reducido entonces usando palad io sobre carbón de acuerdo con métodos estándar para producir la amina (XVI I). La amina (XVI I) se acopla con un ácido carboxílico R1-C02H apropiado bajo condiciones formadoras de amina ig uales o a nálogas a las descritas anteriormente para producir la amida (XVI I I). El grupo éster de la amida (XVI II) puede ser hidrolizado entonces usando un hidróxido de metal alcalino, tal como hidróxido de sodio, en un solvente polar miscible en agua, tal como metanol, comúnmente a temperatura ambiente.
ESQUEMA 2 (XIV) Los compuestos de la fórmula (I) en la cual A es NH(CO) pueden preparar usando métodos estándar para la síntesis de ureas . Por ejemplo, estos compuestos pueden prepararse haciendo reacciona r un compuesto aminopirazo l de la fórm ula (X) con un fenilisocianato sustituido apropiadamente en un solvente polar tal como DM F. La reacción se lleva a cabo convenientemente a temperatura ambiente. Una ruta adicional para los compuestos de la fórmula (l) es la q ue se muestra en el Esq uema 3 siguiente.
ESQ U EMA 3 Tal como se ilustra en el esquema 3, la cetona (XIX) se puede hacer reaccionar con dimetilformamida-dimetilacetal a temperatura elevada para dar una cetona a,ß-insatu rada (XX) (Jachak y coautores, Montash. Chem. , 1 993, 124 (2) , 1 99-207) , la cual al ser calentada con hidrato de hidrazina da un pirazol de la fórm u la (XXI ). Este puede ser nitrado entonces tal como se describe aquí, para dar el nitropirazol (XXI I). El procedimiento ¡lustrado en el esq uema 3 es de utilidad particular en la preparación de compuestos cuando X es un grupo CR5. Los materiales iniciales para las rutas sintéticas que se muestran en los esquemas anteriores, pirazoles de la fórmula (XI I) y (XV), pueden obtenerse de manera comercial o pueden ser preparados mediante métodos familiares para los conocedores de la materia. Estos pueden obtenerse usando métodos conocidos, por ejemplo a partir de cetonas, tal como en un proceso descrito en EP308020 (Merck), o los métodos descritos por Schmidt en Helv. Chim. Acta. , 1 956, 39, 986-991 y Helv. Chim. Acta. , 1 958, 41 , 306-309. Alternativamente, se pueden obtener por conversión de un pirazol disponible en el comercio, por ejemplo aquellos q ue contienen funcionalidades halógeno, nitro, éster, o amida, para pirazoles que contienen la funcionalidad deseada por métodos estándar familiares para un conocedor de la materia. Por ejemplo, en el 3-carboxi-4-nitropirazol , el grupo nitro puede ser reducido a una amina por métodos estándar. El ácido 4-Nitro-pirazol-3-carboxílico (XI I) se puede obtener comercialmente, o puede prepararse por nitración del compuesto carboxi pirazol 4-no sustituido, y los pirazoles que contienen un halógeno se pueden utilizar en reacciones q uím icas de acoplam iento con estaño o paladio. Un ácido 4-nitro-3-pirazol-carboxílico sustituido o no s ustituido puede ser esterificado mediante reacción con cloruro de tionilo , para dar el cloruro ácido intermed io, seguido por reacción con un alcohol para formar el éster de la fórm ula (XVI). Alternativamente, la esterificación se puede l levar a cabo haciendo reaccionar el alcohol y el ácido carboxilico en la presencia d e un catalizador ácido, un ejem plo del cual es cloruro de tionilo. La reacción se lleva a cabo comúnmente a temperatura ambiente usando el alcohol esterificante (por ejemplo, etanol) como solvente. En muchas d e las reacciones descritas anteriormente, puede ser necesario proteger uno o más grupos para evitar que la reacción tenga lugar en una ubicació n indeseable en la molécula. Los ejemplos de g rupos protectores , y métodos para proteger y desproteger grupos funcionales, se p ueden encontrar en Protective Groups in Organic Synthesis (T. Green y P. Wuts ; 3a. Edición ; John Wiley and Sons, 999). Se puede proteger un grupo hidroxi, por ejemplo, como un éter (-OR) o un éster (-OC(=0)R), por ejemplo, como: un éter t-butílico; un éter bencílico, bencihidrílico (difenilmetílico), o tritílico (trifenílmetílico); un éter trimetilsilílico o t-butildimetilsiíílico; o un éster acetílico (-OC(=0)CH3,-OAc) . Se puede proteger un grupo aldeh ido o cetona, por ejemplo, como u n acetal (R-CH(OR)2) o cetal (R2C(OR)2), respectivamente, en el cual el grupo carbonilo (>C=0) se convierte en diéter (>C(OR)2), por medio de reacción, por ejemplo, con un alcohol primario. El grupo aldehido o cetona es fácilmente regenerado por hidrólisis, usando un gran exceso de agua en la presencia de ácido. Se puede proteger un grupo amino, por ejemplo, como una amida (-NRCO-R) o un uretano (-NRCO-OR), por ejemplo, como: una metil amida (-NHCO-CH3) ; una benciloxi amida (-NHCO-OCH2C6H5, -NH-Cbz); como una t-butoxi amida (-NHCO-OC(CH3)3, -NH^Boc); una 2-bifenil-2-propoxi amida (-NHCO-OC(CH3) 2C6H4C6H5,-NH- Bpoc), como una 9-fluorenilmetoxi amida (-NH-Fmoc), como una 6-nitroveratriloxi amida (-NH-Nvoc), como una 2-trimetilsililetiloxi amida (-NH-Teoc), como una 2,2,2-tricloroetiloxi amida (-NH-Troc), como una aliloxi amida (-NH-Alloc), o como una 2 (-fenilsulfonil) etiloxi amida (-NH-Psec). Otros grupos protectores para aminas, tales como aminas cíclicas y grupos N-H heterocíclicos, incluyen toluenosulfoniio (tosilo) y metanosulfonilo (mesilo) y grupos bencilo tales como un grupo para-metoxibencilo (PMB). Un grupo ácido carboxílico se puede proteger mediante un éster, por ejemplo, como: un éster alquílico de 1 a 7 átomos de carbono (por ejemplo, un éster metílico; un éster tert-butílico); un éster haloalquílico de 1 a 7 átomos de carbono (por ejemplo, un éster trihaloalquílico de 1 a 7 átomos de carbono); un éster tri-alquilsil de 1 a 7 átomos de carbono-alquílico de 1 a 7 átomos de carbono; o un éster arílico de 5 a 20 átomos de carbono-alquílico de 1 a 7 átomos de carbono (por ejemplo, un éster bencílico; un éster nitrobencílico); o como una amida, por ejemplo, como una metil amida. Se puede proteger un grupo tío, por ejemplo, como un tioéter (-SR), por ejemplo, como un tioéter bencílico, un éter acetamidometílico (-S-CH2NHC(=0)CH3).
MÉTODOS DE PURIFICACIÓN Los compuestos se pueden aislar y purificar mediante una cantidad de métodos familiares para los conocedores de la materia, y los ejemplos de estos métodos incluyen técnicas cromatográficas tales como cromatografía de columna (por ejemplo cromatografía instantánea) y HPLC. La LC-MS preparativa es un método estándar y efectivo usado para la purificación de pequeñas moléculas orgánicas, tales como los compuestos descritos aquí. Los métodos para la cromatografía líquida (LC) y para la espectrometría de masa (MS) se pueden variar para proporcionar mejor separación de los materiales en bruto, y detección mejorada de las muestras por MS. La optimización del gradiente preparativo del método de LC involucrará variar las columnas, eluyentes volátiles y modificadores, y los gradientes. Los métodos son bien conocidos en la materia, para optimizar los métodos de LC/MS preparativas, y se usan ellos para purificar los compuestos. Estos métodos están descritos en Rosentreter U, Huber U. ; Optimal fraction collecting in preparative LC/MS ; J Comb Chem. ; 2004 ; 6 (2), 159- 64 y Leister W, Strauss K, Wisnoski D, Zhao Z, Lindsley C, Development of a custom high-throughput preparative liquid chromatography/mass spectrometer platform for the preparative purification and analytical analysis of compound librarles; J Comb Chem. ; 2003 ; 5 (3) ; 322-9. Un sistema de este tipo para purificar compuestos por medio de LC-MS preparativa se describe en la sección experimental más adelante, pese a que una persona conocedora de la materia se dará cuenta de que se puede usar sistemas y métodos alternativos a los allí descritos en lugar de los métodos de fase reversa descritos. La mayoría de los sistemas de LC-MS preparativos utilizan LC de fase reversa y modificadores ácidos volátiles, y debido a que los eluyentes son compatibles con la espectrometría de masa por electro rocío con iones positivos. El empleo de otras soluciones cromatográficas, por ejemplo LC de fase normal, alternativamente de fase móvil regulada, modificadores, etc., tal como se sugiere en los métodos analíticos descritos anteriormente, podría usarse alternativamente para purificar los compuestos.
FORMULACIONES FARMACÉUTICAS Si bien es posible que el compuesto activo sea administrado solo, es preferible presentarlo como una composición farmacéutica (por ejemplo, formulación) que contenga al menos un compuesto activo, tal como se definió anteriormente, junto con uno o más portadores, auxiliares, excipientes, diluyentes, rellenadores, reguladores, estabilizadores, conservadores, lubricantes, u otros materiales familiares para los conocedores de la materia, aceptables para uso farmacéutico, y opcionalmente otros agentes terapéuticos o profilácticos. Así, la presente invención proporciona además composiciones farmacéuticas, tal como se definieron anteriormente, y métodos para elaborar una composición farmacéutica, que comprenden mezclar al menos un compuesto activo, tal como se definió anteriormente, junto con uno o más portadores, excipientes, reguiadores, auxiliares, estabilizadores, u otros materiales, tal como se describe aquí. Como se usa aquí, el término "aceptable para uso farmacéutico" concierne a compuestos, materiales, composiciones, y/o formas de dosis que, dentro del alcance del juicio médico, son apropiados para su uso en contacto con los tejidos de un sujeto (por ejemplo, un ser humano) sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación, conmensurados con una tasa beneficio/riesgo razonable. Cada portador, excipiente, etc., debe ser también "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación. Las composiciones farmacéuticas pueden estar en cualquier forma apropiada para su administración oral, parenterai, tópica, intranasal, oftálmica, ótica, rectal, intra-vaginal, o transdérmica. En donde las composiciones están dirigidas a la administración parenterai, éstas se pueden formular para su administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, o para suministro directo en un órgano o tejido objetivo por inyección, infusión u otros medios de suministro.
Las formas de dosis farmacéutica apropiadas para la adm in istración ora l incluyen tabletas, cápsulas, comprimidos, pildoras , pastillas , ja rabes, soluciones, po lvos , granulos, elíxires y s uspensiones, tabletas s ubl ing uales, obleas o parches y parches bucales. Las com posiciones farmacéuticas que contienen com puestos de la fórmula (I ) pueden formularse de acuerdo con técn icas conocidas, véase por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, USA. Así, las com posiciones en tableta pueden contener una dosis unitaria de compuesto activo junto con un d iluyente inerte o portador tal como un azúcar o alcohol de azúcar, por ejemplo, lactosa, sacarosa, sorbitol o man nitol; y/o un dil uyente derivado no azucarado, tal como carbonato de sodio, fosfato de calcio, carbonato de calcio, o un derivado de celu losa de ellos, tal como metilcelulosa, étilcelulosa, hidroxipropil metilcelulosa , y almidones tales como almidón de maíz. Las tabletas también pueden contener estos ingredie ntes estándar como agentes enlazantes y granuladores, tales como polivinilpirrolidona, desintegrantes (por ejemplo, polímeros entrecruzados hinchables, tales como carboximetilcelulosa entrecruzada), agentes lubricantes (por ejemplo, estearatos), conservadores (por ejemplo, parabenos, antioxidantes (por ejemplo, BHT), agentes reguladores (por ejemplo reguladores fosfato o citrato), y agentes efervescentes tales como mezclas de citrato y bicarbonato. Estos excipientes son bien conocidos y no necesitan ser discutidos en detalle aqu í. Las form ulaciones en cápsula pueden ser de la variedad de gelati na du ra o de gelatina suave, y pueden contener el com ponente activo en form a sólida, sem i-sólid a o líq uida. Las cápsulas de gelatina se pueden formar de gelatina animal o sintética, o de equivalentes de ella derivados de plantes. Las formas de dosis sólidas (por ejemplo, tabletas , cápsulas, etc.) pueden ser recubiertas o no recubiertas, pero típicamente tienen un recubrimiento, por ejemplo un recubrimiento de película protectora, (por ejemplo, una cera o barniz) , o un recubrimiento pa ra controlar la li beración . El recubrimiento (por ejem plo, un polímero de tipo Eudrag it™) puede ser diseñado para li berar el componente . activo en u na ubicación deseada dentro del tracto gastrointestinal. Así, el recubrimiento puede ser seleccionado d e tal forma q ue se deg rade bajo ciertas condiciones de pH dentro del tracto gastrointestinal, liberando así selectivamente el compuesto en el estómago o en el íleo o el duodeno. En lugar de, o en adición a, un recubrim iento, el fármaco puede ser presentado en una matriz sólida que contenta un agente de liberación controlada , por ejemplo un agente retrasador de li beración, que puede estar adaptado para liberar selectivamente el compuesto bajo condiciones de acidez o alcalinidad variables, en el tracto gastrointestinal. Alternativamente, el material de la matriz o el recubrimiento retrasador de liberación , pueden tomar la forma de u n polímero erosible (por ejemplo, un pol ímero de anhídrido maleico), el cual es sustancial y continuamente erosionado, a medida que la forma de dosis pasa a través del tracto gastrointestinal . Como u na alternativa ad icional , el compuesto activo puede ser formulado en un sistema de liberación que proporcione control osmótico de la liberación del compuesto . Las formulaciones con liberación osmótica y otras con liberación retrasada o prolongad a , pueden ser preparadas de acuerdo con métodos bien fam iliares para los conocedores de la materia. Las composiciones para uso tópico incluyen ungüentos, cremas, atom izad ores, parches, geles , gotas líq uidas e insertos (por ejemplo, insertos ¡ntraocu lares). Estas composiciones pueden ser formuladas de acuerdo con métodos conocidos. Las composiciones para administración parenteral se presentan comúnmente como soluciones estériles acuosas o aceitosas, o como suspensiones finas, o pueden ser proporcionadas en polvo estéril finamente dividido para prepararlo extemporáneamente con agua estéril para inyección . Los ejemplos de formulaciones para adm inistración rectal o intra-vaginal incluyen pesarios y supositorios, los cuales, por ejemplo, pueden estar formados de un material moldeable o ceroso q ue contenga el compuesto activo. Las composiciones para la administración por inhalación pueden tomar la forma de composiciones en polvo inhalables, o de líq uido o de atomizadores en polvo, y pueden ser administradas en forma estándar usando dispositivos inhaladores de polvo o dispositivos dispensadores de aerosol . Estos dispositivos son bien conocidos. Para administración por inhalación, las formulaciones en polvo contienen típicamente el compuesto activo junto con un diluyente sólido inerte en polvo, tal como lactosa. Los compuestos de las invenciones generalmente estarán presentados en formas de dosis unitarias, y como tales, comúnmente contendrán suficiente compuesto para proporcionar un nivel deseado de actividad biológica. Por ejemplo, una formulación dirigida a la administración oral puede contener desde 0.1 miligramos hasta 2 gramos de ingrediente activo, más usualmente de 10 miligramos a 1 gramo, por ejemplo, 50 miligramos hasta 500 miligramos. El compuesto activo será administrado a un paciente que lo necesite (por ejemplo, un paciente humano o animal) en una cantidad suficiente para lograr el efecto terapéutico deseado.
MÉTODOS DE DIAGNOSIS Y TRATAMIENTO Se prevé que los compuestos de la fórmula (I) serán útiles en la profilaxis o tratamiento de una gama de estados o condiciones de enfermedad mediados por quinasas dependientes de ciclina, glicógeno sintasa quinasa 3 y quinasas Aurora. Los ejemplos de estos estados y condiciones de enfermedad se exponen más arriba. Los compuestos de la fórmula (I) generalmente se le administran a un sujeto que necesita de esta administración, por ejemplo un paciente humano o animal, preferiblemente un humano.
Los compuestos se administrarán común mente en cantidades q ue sean útiles terapéuticamente o profilácticamente, y las cua les generalmente no sean tóxicas. Sin em bargo, en ciertas situaciones (por ejemplo en el caso de enfermedades que ame nacen la vida) , los beneficios de administrar u n com puesto de la fórmula (I) pueden pesar más que las desventajas de cual esquiera efectos tóxicos o efectos colaterales, en cuyo caso puede considerarse deseable administrar com puestos en cantidades que están asociadas con un g rado de toxicidad . Los compuestos pueden ser ad ministrados durante un periodo prolongado para mantener efectos terapéuticos benéficos, o pueden ser administrados d urante un periodo corto solamente. Alternativamente, pueden ser adm in istrados de forma intermitente o continua. Una dosis diaria típica del compuesto puede estar en la escala desde 100 picogramos hasta 100 miligramos por ki log ramo de peso corporal, más comúnmente desde 1 0 nanogramos hasta 10 miligramos por kilogramo de peso corporal, a pesar de que se puede administrar dosis más altas o más bajas cuando se requiera. Finalmente, la cantidad de compuesto administrada y el tipo de composición usada estarán conmensuradas con la naturaleza de la enfermedad o condición fisiológica q ue está siendo tratada, y será a discreción del médico. Los compuestos de la fórmula (I) pueden ser administrados como el único agente terapéutico , o pueden ser administrados en terapia de combi nación con uno o más de otros compuestos para el tratamiento de u n estado de enfermedad particular, por ejemplo una enfermedad neoplásica tal como un cáncer, segú n se ha definido aq uí anteriormente. Los ejemplos de otros agentes terapéuticos que pueden ser administrados juntos (ya sea concurrentemente o en i ntervalos de tiempo d iferentes) con ios compuestos de la fórmula (I) incluyen, sin limitación a ellos , i n hibidores topoisomerasa, agentes a lq ui lantes, antimetabolitos , enlazantes de ADN e inhibidores de microtúbulos (agentes apuntadores de tubulina), tales como cisplatina, ciciofosfamida, doxorubicina, irinotecan, fludarabina, 5FU, taxanos, mitomicina C, o radioterapia. Para el caso de los in hibidores de CD K o Aurora combinados con otras terapias, los dos o más tratamientos pueden ser administrados en programas de dosis variables individualmente, y por diferentes vías. Cuando el compuesto de la fórmula (I) se administra en terapia de combinación con uno, dos, tres, cuatro o más agentes terapéuticos (preferiblemente uno o dos, preferiblemente uno), los compuestos se pueden administrar simultáneamente o secuencialmente. Cuando se administran secuencialmente, pueden ser administrados en intervalos cercanos (por ejemplo durante un periodo de 5 a 10 minutos) o intervalos más largos (por ejemplo, 1 , 2, 3, 4, o más horas de separación, o aún en periodos de separación más largos, cuando se requiera), el rég imen de dosis preciso está conmensurado con las propiedades del agente o de los agentes terapéuticos. Los compuestos de la invención tam bién se pueden administrar en conjunto con tratamientos no quimioterapéuticos, tales como radioterapia , terapia fotodinámica , terapia genética, cirug ía y dietas controladas. Para uso en terapia de combinación con otro agente quim iotera péutico, el com puesto de la fórmu la (I) y uno , dos, tres, cuatro o más agentes terapéuticos, pueden ser formulad os, por ejemplo, juntos en una forma de dosis q ue contenga dos, tres , cuatro o más agentes terapéuticos. En una alternativa, los agentes terapéuticos individuales pueden ser form ulados por separado y presentados juntos en la forma de un conjunto, opcionalmente con instrucciones para su uso. Una persona conocedora de la materia sabrá por sus conocimientos generales comunes, los regímenes de dosificación y las terapias de combinación que se puede usar. Antes de la administración de un compuesto de la fórmula (I), se puede examinar un paciente para determinar si una enfermedad o condición de la cual puede estar sufriendo el paciente sería susceptible al tratam iento con u n compuesto que tenga actividad contra las quinasas Aurora. Por ejemplo, una muestra biológ ica tomada de un paciente, se puede analizar para determinar si una condición o enfermedad, tal como un cáncer, que el paciente tiene o de la cual puede estar sufriendo, es una que está caracterizada por la sobre-regulación de la quinasa Aurora, esto in cl uye expresión elevada o sobre-expresión de q uinasa Aurora , i ncl uyendo la amplificación genética (es decir, mú ltiples copias del gen) y expresión aume ntada por u n efecto transcripcional, e hi peractividad y activación de quinasa aurora , incluyendo activación por mutaciones. As í, el paciente puede estar sometido a una prueba de d iagnóstico para detectar u n marcador característico de sobre-expresión , reg u lación hacia arriba o activación de quinasa Aurora. El término diagnóstico i ncluye el examen. Por marcador, incluimos marcadores genéticos que incluyen, por ejemplo, la medición de la com posición de ADN para identificar mutaciones de Aurora o de CDC4. El término marcador también incluye m arcadores q ue son característicos de la regulación hacia arriba de Aurora o de la ciclina E, i ncl uyendo actividad enzimática, niveles de enzimas , estado de enzimas (por ejemplo, fosforiladas o no), y n iveles de ARNm de las proteínas antes mencionadas. Las pruebas de diagnóstico se realizan com únmente en una muestra biológica seleccionada de muestras de biopsias tumorales, muestras de sangre (aislamiento y en riquecimiento de célu las tumorales eliminadas) biopsias de deposiciones, esputo, análisis de cromosomas, fluido pleural , fluido peritoneal, u orina. Se ha encontrado, véase Ewart-Toland y coautores, (Nat Genet. Ago 2003; 34 (4): 403- 12), que los individuos que forman parte de la sub-población que posee la variante Ile31 del gen STK (el gen de la quinasa Aurora A) pueden tener una susceptibilidad aumentada a ciertas formas de cáncer. Se prevé en consecuencia que estos individuos que sufren de cáncer se beneficiarán de la administración de los compuestos que tie nen actividad in hibidora de quinasa Aurora. U n paciente q ue sufre, o q ue se sospeche que sufre de u n cáncer, puede ser examinado , por lo tanto, para determinar si el o ella forma parte de la sub-población con la variante I le31 . El proceso de examen involucrará típicamente secuenciación d irecta, análisis de microarreglo o ligonucleótido, o u n a nticuerpo muíante específico. Los tumores con mutantes con activación de Aurora o regulación hacia a rriba de Aurora incluyendo cualquiera de sus isoformas , pueden ser particularmente sensibles a los in h ibidores de Aurora. Los tumores pueden ser examinados preferiblemente para investigar la regulación hacia arriba de Aurora , o para determ inar la posesión de la variante I le31 de Aurora antes del tratamiento (Ewart-Toland y coautores, (Nat Genet. Ago 2003; 34 (4): 403-12). Ewart Toland y coinvestigadores identificaron una variante genética común en la STK15 (resultante en la sustitución aminoácida F31 I), que es amplificada preferencialmente y asociada con el grado de aneuploide en los tumores de colon humanos. Estos resultados son consistentes con un importante papel para la variante 11 e31 de la STK15 en la susceptibilidad al cáncer en los seres humanos. El gen Aurora A mapea la región 20q 1 3 del cromosoma, que está amplificada frecuentemente en m uchos cánceres, por ejemplo, de mama, vejiga , colon, ovárico, pancreático. Los pacientes con un tumor que tiene esta amplificación de gen, podrían ser particularmente sensibles a tratamientos que apuntan a la inhibición de la quinasa Aurora. Los métodos de identificación y análisis de las mutaciones de Aurora y la regulación hacia arriba de isoformas Aurora y la amplificación del cromosoma 20q13, son familiares para un conocedor de la materia. Los métodos de examen podrían incluir, sin limitación a ellos, métodos estándar, tales como reacción de cadena polimerasa transcriptasa reversa (RT-PCR) o hibridación in situ. En el examen mediante RT-PCR, el nivel de ARNm de Aurora en el tumor se evalúa creando una copia de ADNc del ARNm seguida por amplificación del ADNc mediante PCR. Los métodos de amplificación de PCR, la selección de los sensibilizadores, y las condiciones para la amplificación, son familiares para un conocedor de la materia. Las manipulaciones de ácido nucleico y la PCR se llevan a cabo por medios estándar, tal como se describe, por ejemplo, en Ausubel, F. M. y coautores., eds. Current Protocols in Molecular Biology, 2004, John Wiley & Sons Inc., o Innis, M. A. y coautores, eds. PCR Protocols: a guide to methods and applications, 1990, Academic Press, San Diego. Las reacciones y manipulaciones que involucran las técnicas de ácido nucleico también se describen en Sambrook y coautores., 2001, 3a. Ed, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press. Alternativamente, se puede usar un equipo disponible en el comercio para RT-PCR (por ejemplo Roche Molecular Biochemicals), o una metodología como la descrita en las patentes estadounidenses números 4,666,828; 4,683,202; 4,801,531; 5,192,659, 5,272,057, 5,882,864, y 6,218,529, incorporadas a la presente solicitud mediante referencia. Un ejemplo de técnica de hibridación in-situ para evaluar las expresión del ARNm de Aurora sería la hibridación por fluorescencia in situ (FISH) (véase Angerer, 1987 Meth. Enzymol., 152:649). Generalmente, la hibridación in situ comprende los siguientes pasos principales: (1) fijación de tejidos para ser analizados; (2) tratamiento de pre-hibridación de la muestra para aumentar la accesibilidad del ácido nucleico objetivo, y para reducir el enlace no específico; (3) hibridación de la mezcla de ácidos nucleicos al ácido nucleico en la estructura biológica o tejido; (4) lavados posteriores a la hibridación para eliminar fragmentos de ácido nucleico no unidos en la hibridación, y (5) detección de los fragmentos de ácido nucleico hibridados. Las sondas usadas en estas aplicaciones comúnmente están marcadas, por ejemplo, con radioisótopos o informadores fluorescentes. Las sondas preferidas son suficientemente largas, por ejemplo, desde aproximadamente 50, 100, o 200 nucleótidos hasta aproximadamente 1000 o más nucleótidos, para permitir la hibridación específica con el ácido o los ácidos nucleicos objetivo bajo condiciones restringidas. Los métodos estándar para llevar a cabo la FISH están descritos en Ausubel, F. M. y coautores, eds. Current Protocols in Molecular Biology, 2004, John Wiley & Sons I nc y Fl uorescence ln Situ Hybridization : Techn ical Overview por John M. S . Bartlett en Molecular Diagnosis of Cá ncer, Methods and Protocols, 2da. ed. ; I SBN : 1 -59259-760-2; Marzo 2004, pps . 077-088; Serie; Methods in Molecular Medicine . Alternativamente, los productos de proteína expresados de los ARN m pueden ser sometidos a ensayo para determinar la inm unohistoqu ímica de las muestras tumorales, el inmunoensayo de fase sólida con placas de micro titulación , transferencia Western , electroforesis 2-d imensiona l en gel de SDS-poliacrilamida, ELISA, citometría de flujo, y otros métodos conocidos en la técnica para la detección de proteínas específicas. Los métodos de detección podrían incluir el uso de anticuerpos específicos para el sitio. El conocedor de la materia reconocerá que estas técnicas de detección bien conocidas para la regulación hacia arriba de Aurora y mutantes de Aurora, podrían ser aplicables en el presente caso. Además, todas estas técnicas podrían usarse también para identificar tumores particularmente apropiados para el tratamiento con inh ibidores de CDK. Los tumores con mutantes de CDC4 o regulación hacia arriba, en particular sobre-expresión, de ciclina E o pérdida de p21 o de p27 , pueden ser particularmente sensibles a los inhi bidores de CD K. Los tumores preferiblemente pueden ser examinados para investigar la regulación hacia arriba, en particular la sobre-expresión, de la ciclina E (Harwell RM, Mull BB, Porter DC, Keyomarsi K. ; J Biol Chem. 2004 Mar 26; 279 ( 13): 12695- 705) o la pérdida de p21 o de p27 o las variantes de CDC4 antes de l tratamiento (Rajagopalan H, Jallepalli PV, Rago C, Velculescu VE, Ki nzler KW, Vogelstein B, Lengauer C ; N ature. 2004 Mar 4 ; 428 (6978) : 77-81 ) .
USO ANTI FÚ N G ICO En un aspecto ad iciona l, la invención proporciona el uso de los compuestos de la fórm ula (I), tal como se definió anteriormente, como agentes antifúngicos. Los compuestos de la fórmula (I) se pueden usar en medicina animal (por ejemplo en el tratam iento de mam íferos, tales como seres humanos), o en el tratamiento de plantas (por ejemplo, en ag ricu ltura y horticultura) , o como agentes antifúng icos generales, por ejemplo como conservadores y desinfectantes. En una modalidad, la invención proporciona un compuesto de la fórm ula (I) como se definió anteriormente aqu í, para uso en la profilaxia o en el tratamiento de una i nfección fúngica en un mamífero, tal como un ser humano. También se provee el uso de un compuesto de la fórmula (I) para la fabricación de un medicamento para uso en la profilaxis o tratamiento de una infección fúngica en un mam ífero, tal como un ser humano. Por ejemplo, los com puestos de la invención se pueden adm inistrar a pacientes humanos que sufran de, o que estén en riesgo de infección por, infecciones fúng icas tópicas causadas, entre otros organismos, por especies de Cand ida , Trichoph iton, Microsporum o Epidermophyton , o en infecciones de las mucosas causadas por Candida albica ns (por ejemp lo, afta y candidiasis vagi nal) . Los compuestos de la i nvención tam bién pueden ser administrados para el tratamiento o profilaxis de infecciones fúng icas sistém icas ocasionadas , por ejemplo, por Cand ida albicans, Cryptococcus neoformans, Aspergillus flaus, Aspergillus fumigatus, Coccidioides, Paracoccid ioides , Histoplasma o Blastomyces. En otro aspecto, la invención proporciona una composición antifúngica para uso ag rícola (incluyendo hortícola) , q ue contiene un com puesto de la fórmula (I) junto con un d iluyente o portador aceptable para uso ag rícola. La invención proporciona además un método para tratar un animal (incluyendo un mam ífero tai como un ser humano), planta o semilla que tenga una infección fúngica, el cual comprende tratar dicho animal, planta o semilla, o el locus de dicha planta o semilla, con una cantidad efectiva de un com puesto de la fórmula (I). La invención también proporciona un método para tratar una infección fúng ica en una planta o semilla, el cual comprende tratar la planta o semilla con una cantidad efectiva antifúngicamente, de una composición fungicida que contiene un compuesto de la fórmula (I) como se definió aqu í anteriormente. Se puede usar pruebas de examen diferencial para seleccionar los com puestos de la presente invención con especificidad para enzimas CDK no h umanas . Los compuestos q ue actúan específicame nte en las enzim as CDK de patógenos eucarióticos , pueden usarse com o agentes anti-fúng icos o antiparasitarios. Los inh ibidores de la q uinasa CDK de la Candid a, CKS I , pueden usarse en el tratamiento de la candidiasis. Los agentes antifúng icos se pueden usar contra i nfecciones del tipo definido a nteriormente, o en infecciones oportunísticas que ocurren comú nmente en pacientes debilitados e inmunosuprimidos tales como pacientes con leucem ias y linfomas , personas q ue están recibiendo terapia inmunosupresiva, y pacientes con condiciones de predisposición tales como diabetes mel litus o S I DA, así como también pacientes no inm unosu primidos. Los ensayos descritos en la técnica se pueden usar para buscar agentes que puedan ser útiles para inhibir al menos un hongo implicado en micosis tales como candidiasis, asperg ilosis, mucromicosis, blastomicosis, conidiosporosis, histoplasmosis, mad uromicosis, rinosporidosis, nocaid iosis, para-actinomicosis, peniciliosis, monoliasis, o esporotricosis. Las pruebas de examen diferencial pueden usarse para identificar agentes anti-fúngicos que pueden tener valor terapéutico en el tratamiento de la aspergilosis haciendo uso de los genes CD K clonados a partir de levadura, tales como Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus nidulans, o Aspergillus terreus, o donde la infección micótica sea micosis en las mucosas, la prueba de CDK se puede derivar de levad uras tales como Rhizopus arrhizus, Rhizopus oryzae, Absidia corymbifera, Absid ia ramosa, o Mucorpusi l lus. Las fuentes de otras enzimas CDK incluyen el patógeno Pneumocystis carinii. A manera de ejemplo, la evaluación in vitro de la actividad antifúngica de los compuestos se puede realizar determ inando la concentración inhibidora m ínim a (M . I .C.) q ue es la concentración más baja de los compuestos de prueba , en u n medio apropiado, en la cual el crecimiento del microorganismo particu lar falla en ocurrir. En la práctica, se inocu la u na serie de placas con agar, cada u na con el compuesto de prueba incorporado en una concentración particular, con un cultivo estándar, por ejemplo, de Candida albicans, y cada placa se incuba luego durante un periodo apropiado a 37 °C: Las placas se examinan luego para determinar la presencia o a usencia de crecimiento de los hongos y se anota el valor de la M . I. C. apropiado. Alternativamente, se puede realizar una prueba de turbidez en cultivos líquidos, y un protocolo que describe un ejemplo de esta prueba se puede encontrar en el ejemplo 314. La evaluación in vivo de los compuestos se puede llevar a cabo a una serie de niveles de dosis por inyección intraperitoneal o intravenosa o por adm inistración oral, a ratones que han sido inoculados con un hongo, por ejemplo, una cepa de Cand ida albicans o de Aspergillus flavus. La actividad de los compuestos se puede evaluar vigilando el creci m iento de la infección fúngica en grupos de ratones tratados y no tratados (por histolog ía o recuperando hongos de la infección) . La actividad se puede medir en términos del nivel de dosis en el cual el compuesto proporciona 50% de protección contra el efecto letal de la i nfección (P D50) . Para el uso antifúngico en seres hu manos, los compuestos de la fórmu la (I) se pueden administrar solos o en mezcla con un portador farmacéutico seleccionado de acuerdo con la vía de adm in istración deseada y con la práctica farmacéutica estándar. Así, por ejem plo, pueden ser administrados oralmente, parenteralmente, intravenosamente, intramuscularmente o subcutáneamente, por medio de las formulaciones descritas anteriormente en la sección titulada " Form ulaciones Farmacéuticas". Para la administración oral y parenteral a pacientes humanos , el nivel de dosis diaria de los compuestos antifúng icos de la fórm ula (I) puede ser desde 0.01 hasta 1 0 mg/kg (en dosis d ivididas), dependiendo, entre otros , de la potencia de los compuestos cua ndo se administran ya sea por vía oral o parenteral. Las tabletas o cápsulas de los compuestos pueden contener, por ejemplo, desde 5 mg hasta 0.5 g de compuesto activo para ad ministración única o dos o más a la vez, según se a apropiado. El médico en cada caso determinará la dosis real (cantidad efectiva) que será más apropiada para un paciente individual, y variará con la edad, peso y respuesta del paciente en particular. Alternativamente, los com puestos antifúngicos de la fórmula (I) se pueden admin istrar en la forma de un supositorio o pesario, o pueden ser aplicados tópicamente en la forma de una loción, solución , crema, ungüento o talco. Por ejemplo, pueden i ncorporarse a una crema que consista en una em ulsión acuosa de pol ietileng licoles o parafina l íq uida; o se pueden i ncorporar, a una concentración de entre 1 y 1 0% , en un ung üento q ue consista en una emu lsión acuosa de polietileng licoles o parafina líq uida ; o se pueden incorporar, a una concentración de entre 1 y 1 0%, en un u ng üento q ue consista en u na base de cera blanca o de parafina suave j unto con los estabil izadores y conservadores que se puedan req uerir. Además de los usos terapéuticos descritos anteriormente , los agentes anti-fúngicos desarrollados con estos ensayos diferenciales de exploración, se pueden usar, por ejemplo, como conservadores en al imentos, suplementos alimenticios para promover el aumento de peso en ganadería , o en formulaciones desinfectantes para el tratamiento de material no viviente, por ejemplo, para descontaminar equipos y habitaciones de hospital. De manera sim ilar, la comparación lado a lado de la inhibición de una CDK de mam ífero y una CDK de insecto, tal como el gen CDK5 de la D rosophilia (Hellmich y coautores (1994) FE BS Lett 356 : 317-21 ), permitirá la selección entre los compuestos o inhibidores descritos, los cuales discriminan entre las enzimas humanas o de mamífero, y las enzimas de insecto. De acuerdo con esto, la presente invención contempla expresamente el uso y formulación de los compuestos de la invención en insecticidas, tal como para su uso en el manejo de insectos como la mosca de la fruta. En todavía otra modalidad, ciertos inhibidores de CDK del sujeto se pueden seleccionar sobre la base de la especificidad in hibidora para la CDK de la planta, con relación a la enzim a del mamífero. Por ejemplo , una CDK de pl anta se puede colocar en un examen d iferencial con una o más de la enzimas h um anas , para seleccionar aq uellos compuestos de mayor selectividad para in hibir la enzim a de la planta. Así, la presente i nvención contem pla específicamente formulaciones de i n hibidores de CD K del sujeto para aplicaciones agrícolas , tal como en la forma de un desfoliante o similar. Para fines ag rícolas u hortícolas, los com puestos de la invención se puede usar en la forma de una com posición formu lada de manera apropiada para el uso y propósito particulares a los q ue esté dirigida. Así, los com puestos se pueden aplicar en ia forma de polvos finos, o granu los, abono para semil las, soluciones acuosas, dispersiones o emulsiones, pastas, atomizadores, aerosoles o humos. Las composiciones tam bién se pueden sum inistrar en la forma de polvos dispersables, gránulos o granos, o concentrados para su dilución antes de usarlos. Estas composiciones pueden contener portadores, diluyentes o auxiliares convencionales, tal como se conocen y son aceptables en agricultura y horticultura, y éstos pueden fabricarse de acuerdo con procedimientos convencionales. Las composiciones pueden incorporar también otros ingred ientes activos, por ejemplo, compuestos q ue tengan actividad herbicida o actividad insecticida o adicionalmente fungicida. Los compuestos y composiciones pueden aplicarse en una variedad de formas, por ejemplo, pueden aplicarse d irectamente al follaje de la planta , troncos, ramas, sem illas o raíces, o al suelo u otro medio de crecim iento, y se pueden usar no sólo para erradicar enfermedades , , sino tam bién para proteger profi lácticamente las plantas o sem i llas de ataques . A manera de ejemplo, las composiciones pueden contener desde 0.01 hasta 1 por ciento por peso del ing rediente activo. Para uso en el cam po, las proporciones de aplicación de l i ngrediente activo pueden ser desde 50 hasta 5000 g/hectárea. La invención también contem pla el uso de los compuestos de la fórmula (I ) en el control de los hongos que carcomen la madera, y en el tratamiento del suelo donde crecen las plantas, cam pos para semilleros de arrozales , o ag ua para perfusión . También está contem plado por la invención el uso de los compuestos de la fórmula (I) para proteger grano almacenado y otros loci que no sean de plantas, de infestación fúngica.
EJ EMPLOS La invención será ilustrada ahora, pero no lim itada por ello, mediante referencia a modalidades específicas descritas en los siguientes ejemplos. En los ejemplos, los compuestos preparados se caracterizaron mediante cromatografía l íquida, y espectrografía de masa, usando los sistemas y condiciones operativas descritas más adelante.
Sistema de plataforma 1 Sistema: Aguas 2790/Platform LC Detector Espec. Masa: Micromass Platform LC Detector P DA: Ag uas 996 PDA Condiciones anal íticas: El uyente A: 5% CH3CN en 95% H20 (0.1 % Ácid o fórmico) Eluyente B: CH3CN (0. 1 % Ácido fórmico) Grad iente: 1 0-95% eluyente B Flujo: 1 .2 ml/min Col umna: Synergi 4µ?? Max-RP C 2, 80A, 50x4.6 mm (Phenomenex) Condiciones de Espectrografía de Masa: Voltaje capilar: 3.5 kV Voltaje de cono: 30 V Temperatura fuente: 120 °C FractionLynx Sistema 1 Sistema: Aguas FractionLynx (analítico dual/prep) Detector Espec. Masa: Aguas-Mícromass ZQ Detector PDA: Aguas 2996 PDA Condiciones analíticas: Eluyente A: H20 (0.1 % Ácido fórmico) Eluyente B: CH3CN (0.1 % Ácido fórm ico) Gradiente: 5-95% eluyente B Flujo: 1.5 ml/min Columna: Synergi 41µp? Max-RP Ci2, 80A, 50 x 4.6 mm (Phenomenex) Condiciones de Espectrografía de Masa: Voltaje capilar: 3.5 kV Voltaje de cono: 30 V Temperatura fuente: 120 °C Temperatura de desolvación: 300 °C Sistema de plataforma 2 Sistema HPLC: Aguas 2795 Detector Espec. Masa: Micromass Platform LC Detector PDA: Aguas 2996 PDA Condiciones analíticas ácidas: Eluyente A: H20 (0.1% Ácido fórmico) Eluyente B: CH3CN (0.1% Ácido fórmico) Gradiente: 5-95% eluyente B durante 3.5 minutos Flujo: 1.5 ml/min Columna: Phenomenex Synergi 4µ Max-RP 80A, 50x4.6mm Condiciones analíticas básicas: Eluyente A: H20 (I0 mM regulador NH4HC03 ajustado a pH=9.5 con NH40H) Eluyente B: CH3CN Gradiente: 05-95% eluyente B durante 3.5 minutos Flujo: 1.5 ml/min Columna: Aguas XTerra MS C185µ?? 4.6x50mm Condiciones analíticas polares: Eluyente A: H20 (0.1% Ácido fórmico) Eluyente B: CH3CN (0.1% Ácido fórmico) Gradiente: 00-50% eluyente B durante 3 minutos Flujo: 1.5 ml/min Columna: Phenomenex Synergi 4µ Hidro 80A, 50x4.6mm Condiciones de Espectrografía de Masa: Voltaje capilar: 3.5 kV Voltaje de cono: 30 V Temperatura fuente: 120 °C Rango de búsqueda: 165-700 amu Modo de ionización: Electro-rocío negativo, positivo, o positivo y negativo FractionLvnx Sistema 2 Sistema: Aguas FractionLynx (analítico dual/prep) Bomba HPLC: Aguas 2525 Inyector-Automuestreo: Aguas 2767 Detector Espec. Masa: Aguas-Micromass ZQ Detector PDA: Aguas 2996 PDA Condiciones analíticas: Eluyente A: H20 (0.1% Ácido fórmico) Eiuyente B: CH3CN (0.1% Ácido fórmico) Gradiente: 5-95% eluyente B durante 5 minutos Flujo: 2.0 ml/min Columna: Phenomenex Synergi 4µ Max-RP 80A, 50x4.6mm Condiciones analíticas polares: Eluyente A: H20 (0.1% Ácido fórmico) Eluyente B CH3CN (0.1% Ácido fórmico) Gradiente: 00-50% eluyente B durante 5 minutos Flujo: 2.0 ml/min Columna: Phenomenex Synergi 4µ Max-RP 80A, 50x4.6mm Condiciones de Espectrografía de Masa: Voltaje capilar: 3.5 kV Voltaje de cono: 25 V Temperatura fuente: 120 °C Sean Range: 125-800 amu Modo de ionización: Electro-rocío positivo, o positivo y negativo Sistema de Purificación LC-MS Dirigido a Masa Los siguientes sistemas de cromatografía preparativa se pueden usar para purificar los compuestos de la invención.
* Hardware: Aguas Fractionlynx System: Automuestreo dual/Recolector de Fracción 2767 Bomba preparativa 2525 Organización de columna fluida (CFO) para la selección de columna Manejador de reactivo Aguas (RMA) como ajustador de bomba Espectrómetro de Masa Aguas ZQ Detector de Arreglo de Fotodiodo Aguas 2996 * Software: Masslynx 4.0 * Columnas: 1. Cromatografía con pH bajo: Phenomenex Synergy MAX-RP, 10µ, 150 x 15mm (alternativamente se usó el mismo tipo de columna con dimensiones de 100 x 21.2mm). 2. Cromatografía con pH alto: Phenomenex Luna C18 (2), 10 R, 100 x 21.2 mm (alternativamente se usó Thermo Hypersil Keystone BetaBasic C18, 5µ, 100 x 21.2 mm) *Eluventes: 1. Cromatografía con pH bajo: Solvente A: H20 + 0.1% Ácido fórmico, pH 1.5 Solvente B: CH3CN + 0.1 % Ácido fórmico 2. Cromatog rafía con pH alto: Solvente A: H20 + 1 0 mM N H4H C03 + N H4O H, pH 9.5 Solvente B : CH3CN 3. Solvente aj ustador: MeO H + 0. 1 % ácido fórm ico (para ambos ti pos de cromatog rafía) * M étod os : Antes de usar la cromatog rafía preparativa para aislar y purificar los compuestos del producto, se puede usar primero LC-MS anal ítica para determinar las condiciones más apropiadas para la cromatografía preparativa. U na rutina típica es correr una LC-MS usando el tipo de cromatog rafía (pH alto o bajo) más apropiada para la estructura del compuesto. Una vez q ue el indicio anal ítico muestra buena cromatografía, se puede escoger un método preparativo apropiado del mismo tipo. Las condiciones de corrida típicas para los métodos de cromatografía con pH alto y bajo son: Tasa de fluio: 95% A + 5% B. Gradiente: Generalmente todos los gradientes tienen un paso inicial de 0.4 min con 95% A + 5% B. Luego, de acuerdo con un indicio analítico, se escoge un gradiente de 3.6 min con el fin de lograr una buena separación (por ejemplo, desde 5% hasta 50% de B para los com puestos de retención temprana; desde 35% hasta 80% de B para los compuestos de retención media y así sucesivamente). Lavado: Se real iza un paso de lavado de 1 minuto al final del gradiente Re-equilibración: Se lleva a cabo un paso de reequilibración de 2.1 minutos para preparar el sistema para la. próxima corrida. Tasa de flujo de equilibrio: 1 mL/min * Solvente: Todos los compuestos se disolvieron usualmeníe en 100% de MeOH o 100% de DMSO * Condiciones de corrida de S: Voltaje capilar:3.2 kV Voltaje de cono:25 V Temperatura fuente:120 °C Multiplicador: 500 V Rango de búsqueda:125-800 amu Modo de ionización: Electro-rocío positivo Sistema Analítico LC-MS Sistema HPLC: Aguas 2795 Detector Espec. Masa: Micromass Platform LC Detector PDA: Aguas 2996 PDA Condiciones analíticas ácidas: Eluyente A: H20 (Ácido fórmico al 0.1%) Eluyente B: CH3CN (Acido fórmico al 0.1%) Gradiente: 5-95% eluyente B durante 3.5 minutos Flujo: 0.8 ml/min Columna: Phenomenex Synergi 4µ MAX-RP 80A, 2.0 x 50 mm Condiciones analíticas básicas: Eluyente A: H20 (I0 mM de NH4HC03 regulador ajustado hasta pH = 9.5 con NH40H) Eluyente B: CH3CN Gradiente: 05-95% eluyente B durante 3.5 minutos Flujo: 0.8 ml/min Columna: Thermo Hypersil-Keystone BetaBasic-185µ?? 2.1x50 mm o Columna: Phenomenex Luna C 18 (2) 5µ?? 2.0 x 50 mm Condiciones analíticas polares: Eluyente A: H20 (0.1% Ácido fórmico) Eluyente B: CH3CN (0.1% Ácido fórmico) Gradiente: 00-50% eluyente B durante 3 minutos Flujo: 0.8 ml/min Columna: Thermo Hypersil-Keystone HyPurity Aquastar^, 2.1x50 mm o Columna: Phenomenex Synergi 4 MAX-RP 80A, 2.0 x 50 mm o Condiciones analíticas más largas: Eluyente A: H20 (0.1 % Ácido fórmico) Eluyente B: CH3CN (0.1% Ácido fórmico) Gradiente: 05-95% eluyente B durante 15 minutos Flujo: 0.4 ml/min Columna: Phenomenex Synergi 4µ MAX-RP 80A, 2.0 x 150 mm Condiciones de Espectrografía de Masa: Voltaje capilar: 3.6 kV Voltaje de cono: 30 V Temperatura fuente: 120 °C Rango de búsqueda: 165-700 amu Modo de ionización: Electro-rocío positivo o Electro-rocío negativo o Electro-rocío positivo y negativo Los materiales iniciales para cada uno de los ejemplos están disponibles comercialmente, a menos que se especifique otra cosa.
EJEMPLQ1 SÍNTESIS DE 2-(4-NITRO-1H-PIRAZOL-3-IL)-1H-BENCIMIDAZOL Una mezcla de o-fenilendiamina (1.51 g, .14.0 mmol), ácido 4-amino-1 H-pirazol-3-carboxílico (2.00 g, 12.7 mmol), EDC (2.93 g, 15.3 mmol) y HOBt (2.08 g, 15.3 mmol) en DMF (70 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se redujo la mezcla al vacío y se disolvió el residuo en AcOH (150 mi) y se calentó por reflujo durante 3 h. Se eliminó el solvente al vacío, se añadió agua (100 mi) y se recolectó el sólido resultante por filtración lavando con agua. Se secó el sólido mediante azeotropo con tolueno (3 x 150 mi) produciendo 2-(4-nitro-1 H-pirazol-3-il)-1 H-bencimidazol como un sólido amarillo (1.44 g, 50%). Se purificó una porción de 100 mg mediante LC/MS preparativa, y luego de la evaporación del producto que contenía las fracciones, se obtuvo 70 mg. (LC/MS: Rt 1.72, [M + H] + 229.61).
EJEMPLO 2 SÍNTESIS DE 3-(1 H-BENCIMIDAZOL-2-ID-1H-PIRAZOL-4-ILAMINA Una mezcla de 2-(4-nitro-1 H-pirazol-3-il)-1 H-bencimidazol (1.34 g, 5.85 mmol) y 10% Pd/C (0.13 g) en DMF (200 ml) se sometió a una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 36 h. Se filtró la mezcla de la reacción a través de un tapón de Celite y se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y agua y se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró, y se redujo al vacío. El residuo fue mezclado azeotrópicamente con tolueno (3 x 150 ml) produciendo 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina como un sólido color púrpura (0.32 g, 26%). (LC/ S: Rt 0.97, [M + H] + 199.62).
EJEMPLO 3 SÍNTESIS DE N-r3-(1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-I - BENZAMIDA Una mezcla de ácido benzoico (34 mg, 0.28 mmol), 3-(1H-benc¡midazol-2-il)-1 H- pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol), EDC (58 mg, 0.30 mmol) y HOBt (40.5 mg, 0.30 mmol) en DMF (5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se eliminó el solvente al vacío, se purificó el producto bruto mediante LC/MS preparativa y luego de la reducción de las fracciones que contenían el producto, se obtuvo N-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida como un sólido color café (23 mg, 30%). (LC/MS: Rt 3.66, [M + H] + 303.67).
EJEMPLO 4 SÍNTESIS DE N-r3-(1H-BENCÍMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-IL1- ACETAMIDA Se añadió anhídrido acético (27 u. I, 0.28 mmol) a una solución de 3-(1H- bencim¡dazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol) en piridina (5 mi), y la mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se redujo la mezcla al vacío y se purificó el residuo por cromatografía de columna instantánea [S¡02, EtOAc-gasolina (1:2.5, 2:1)] para dar N-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-acetamída como un sólido cristalino color café (29 mg, 48%). (LC/MS: Rt 1.70, [M + H] + 241.64).
EJEMPLO 5 SÍNTESIS DE ?-G1 H-BENCIMIDAZOL-2-ID-1 H-PIRAZOL-4-ILL-2.2. 2-TRIFLUORO-ACETA lDA anhídrido trifluoro acético (40 µ?, 0.28 mmol) se añadió a una solución de 3-(1H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol) en piridina (5 ml) y la mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se redujo la mezcla al vacío y se purificó el residuo por cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-gasolina (1:2)] para producir N-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2, 2, 2- trifluoro-acetamida como un sólido color crema (23 mg, 32%). (LC/MS: Rt 3.67, [M + H] + 295.63).
EJEMPLO 6 SÍNTESIS DE N-f3-(1 H-BENCIMIDAZOL-2-IL H-PIRAZOL-4-IU-2.6- DIFLUORO- BENZAMIDA Una mezcla de ácido 2,6-difluoro benzoico (43 mg, 0.28 mmol), 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol), EDC (58 mg, 0.30 mmol) y HOBt (40.5 mg, 0.30 mmol) en D F (10 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se redujo la mezcla al vacío, se le añadió agua (30 mi) y se recolectó el sólido resultante mediante filtración, se secó en el horno al vacío y se purificó mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-gasolina (1:2, 1:1, 3:1)] produciendo N-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida (20 mg, 24%). (LC/MS: Rt 3.29, [M + H] + 339.64).
EJEMPLO 7 SÍNTESIS DE r3-(1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PlRAZOL-4- IL1- AMIDA DE ÁCIDO Cl C LOH EX A N OC AR BOXÍ LICO Una mezcla de ácido ciclohexanocarboxílico (36 mg, 0.28 mmol), 3-(1H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol), EDC (58 mg, 0.30 mmol) y HOBt (41 mg, 0.30 mmol) en DMSO (2 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla de la reacción se particionó entre EtOAc (40 mi) y agua (40 mi) y se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-gasolina (1:4, 1:3, 1:2, 1:1)] produciendo [3-(1H-bencimidazoI-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-amida de ácido ciclohexano-carboxílico como un sólido color hueso (25 mg, 32%). (LC/MS: Rt 3.59, [ + H] + 310.16).
EJEMPLO 8 SÍNTESIS DE ?-G3-( H-BENCIMIDAZOL-2-ID-1 H-PIRAZOL-4-IL-2- FENIL-ACETAMIDA Una mezcla de ácido fenilacético (38 mg, 0.28 mmol), 3- (1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol), EDC (58 mg, 0.30 mmol) y HOBt (41 mg, 0.30 mmol) en DMSO (2 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla de la reacción se particionó entre EtOAc (40 mi) y agua (40 mi) y se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró y se redujo al vacío. Se purificó el residuo medíante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-gasolina (1:2, 1:1, 2:1)] para dar N~[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2-fenil-acetamida como un sólido color café (15 mg, 19%). (LC/MS: Rt 3.26, [M + H] + 318.13).
EJEMPLO 9 SÍNTESIS DE rnH-BENCIM>DAZOL-2-»L)-1H-PIRAZOL-4-lLl-AMIDA DE ÁCIDO 5-METÍL-3-FENIL-ISOXAZOL-4-CARBOXÍLICO Una mezcla de ácido 5-metil-3-fenilisoxazol-4-carboxílico (57 mg, 0.28 mmol), 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol), EDC (58 mg, 0.30 mmol) y HOBt (41 mg, 0.30 mmol) en DMSO (2 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla de la reacción se particionó entre EtOAc y agua y se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc- gasolina (1:2, 1:1, 2:1)] produciendo [3-(1H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-amida de ácido 5-metil-3-fenil-isoxazol-4-carboxílico como un sólido color crema (15 mg, 16%).
(LC/MS: Rt 3.73, [M + H] + 385.14).
EJEMPLO 10 SÍNTESIS DE ESTER METÍLICO DE ÁCIDO 2-r4-(2.6-PIFLUORO- BENZOILAMINO)-1H-PIRAZOL-3-IL1-1H-BENCIMIDAZOL-4- CARBOXILICO 10A.2-amino-3-n¡trobenzoato de metilo Se añadió metóxido de sodio (1.50 g, 27.7 mmol) a una solución de metil-2-(acetilamino)-3-n¡trobenzoato (1.0 g, 4.2 mmol) en MeOH (30 mi) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 16 h. Se acidificó cuidadosamente la reacción con ácido clorhídrico concentrado, luego se calentó por reflujo durante la noche, seguido por evaporación y re-evaporación con tolueno (2 x 30 mi). Se trató el residuo con CH2CI2 (50 mi), se eliminó el material insoluble mediante filtración, y se redujo el filtrado al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-hexano (1:4, 1:0)] produciendo metil-2-amino-3-nitrobenzoato (535 mg) como un sólido amarillo brillante. 10B.2,3-diaminobenzoato de metilo Una mezcla de 2-amino-3-nitrobenzoato de metilo (530 mg) y 10% Pd/C (55 mg) en EtOH (10 mi), se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno durante 16 h. Se eliminó el catalizador por filtración a través de Celite y se redujo el filtrado al vacío para dar 2,3-diaminobenzoato de metilo (420 mg) como un aceite amarillo/café que se solidificó al estabilizarse. 10C. Ester metílico de ácido 2-f4-(2.6-Difluoro-benzo ¡lamino )-1H-pirazol-3-M1-1 H-benc'imidazol-4-carboxílico Una mezcla de ácido 4-(2,6-difluorobenzoilam¡no)-1 H-pirazol-3-ácido carboxílico (690 mg, 2.6 mmol) (EJEMPLO 16D), metil 2, 3-diaminobenzoato (415 mg, 2.6 mmol), EDC (590 mg, 3.1 mmol) y HOBt (415 mg, 3.1 mmol) en DMF (10 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 16 h y luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y salmuera, y se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró, se redujo y luego se cristalizó a partir de EtOH caliente. El producto intermedio amida (480 mg) se disolvió en AcOH (10 mi) luego se calentó por reflujo durante 3 h. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y luego se mezcló azeotrópicamente con tolueno (2 x 20 mi) para producir éster metílico de ácido 2-[4-(2,6- difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-4-carboxílico (420 mg) como un sólido color castaño claro. (LC/MS: Rt 3.82, [M + H] + 398).
EJEMPLO 11 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORQ-N-r3-(4-HIDROXIMETIL-1H- BENCIMIDAZOL-2-IU-1H-PIRAZOL-4-IL1-BENZAMIDA Y ESTER 2- r4-(2,6-DIFLUORO-BENZOlLAMINO)-1H-PIRAZOL-3-ILl-1H- BENCIMIDAZOL-4-ILMETILlCO DE ÁCIDO ACÉTICO 11 A. ácido 2-amino-3-nitro benzoico Se trató una solución de 2-(acetilamino)-3-nitrobenzoato de metilo (2.6 g) en EtOH (50 mi), con ácido clorhídrico concentrado (10 mi), luego se calentó por reflujo durante 16 h. La mezcla de la reacción se enfrió, se redujo al vacío y se mezcló azeotrópicamente con tolueno (2 x 50 mi) para dar ácido 2-amino-3-nitro benzoico (1.83 g) como un sólido amarillo brillante. 11 B. alcohol 2-amino-3-nitrobencílico A una solución de ácido 2-amino-3-nitro benzoico (1.82 g, 10.0 mmol) en THF anhidro (50 mi) se le añadió borohidruro de sodio (770 mg, 20.0 mmol) seguido por dietileterato de trifluoruro de boro (2.5 mi, 20 mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno durante 2 h. Se le añadió cuidadosamente MeOH hasta que cesó la evolución gaseosa, y se redujo la mezcla al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y salmuera y se secó la parte orgánica (MgS04>) y se redujo al vacío para dar alcohol 2-amino-3-nitrobencílico (1.42 g) como un sólido amarillo.
I C. alcohol 2,3-diaminobencflico Una mezcla de alcohol 2-amino-3-nitrobencílico (1.4 g) y 10% Pd/C (140 mg) en EtOH (40 mi) y DMF (10 mi), se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno durante 18 h. Se eliminó el catalizador por filtración a través de Celite, se redujo el filtrado al vacío y se mezcló azeotrópicamente con tolueno (2 x 50 mi) para dar alcohol 2,3-diaminobencílico (1.15 g) como un sólido color café oscuro.
IID. Síntesis de (2-amino-3-hidroximetil-fenil)-arnida de ácido 4-(2.6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico mezcla de ácido 4-(2,6-difluorobenzoilamino)-1 H- pirazol-3-carboxílico (1.0 g, 3.7 mmol) (EJEMPLO 16D), alcohol 2, 3-diaminobencílico (560 mg, 4.1 mmol), EDC (870 mg, 4.5 mmol) y HOBt (610 mg, 4.5 mmol) en DMF (20 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y salmuera, y se secó la parte orgánica (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [S¡02. EtOAc-hexano (1:1, 2:1)] para dar ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (2-amino-3-hidroximet¡l-fenil)-amida (860 mg). 11E. Síntesis de 2.6-Difluoro-N-í3-(4-hidroximetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ill-benzamida y éster 2-r(2.6-difluoro-benzoilamino)-1 H- pirazol-3-M1-1 H-bencimidazol-4-ilmetílico de ácido acético Se disolvió (2-amino-3-hidroximetil-fenil)-amida de ácido 4-(2,6-Difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (100 mg, 0.26 mmol) en ácido acético (10 mi) luego se calentó durantelO min a 150 °C (100 W) en sintetizador por microondas CE Discover. La mezcla de la reacción se redujo, luego se mezcló azeotrópicamente con tolueno (2 x 20 mi). Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc- hexano (1:1, 2:1, 3:1)] para dar 2,6-difluoro-N-[3-(4-hidroximetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (25 mg) como un sólido color hueso (LC/MS: Rt 2.70, [M + H] + 370) y éster 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamíno)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-4-ilmetílico de ácido acético (20 mg) como un sólido color hueso. (LC/MS: Rt 3.60, [M + H] +412).
EJEMPLO 12 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-r3-(4-MORFOHN-4-EL-METIL-1 H- BENCIIVHDAZOL-2-1L}- 1 H-PIRAZOL-4-IL1-BENZ AMIDA 12A. 2.6-difluoro-N-r3-(4-formil-1H-bencimidazol-2-in-1H-p ¡razo ?.-4-iH-benza mida Una mezcla de 2,6-difluoro-N-[3-(4-hidroxirnetiI-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (200 mg, 0.54 mmol) y MnOz (500 mg) en CH2CI2/ MeOH (5:1, 12 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se filtró a través de Celite y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-hexano (1:3, 1:2)] para dar 2,6-difluoro-N-[3-(4-formil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (30 mg) como un sólido color crema. 12B 2,6-Difluoro-N-r3-(4-morfolin-4-il-metil-1 H-bencim¡dazol-2-il)-1 H-pirazol-4-in-benzamida A una solución de 2,6-difluoro-N-[3-(4-formil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4- il]-benzamida (30 mg, 0.08 mmol) y morfolina (14 mg, 0.16 mmol) en CH2CI2 (5 mi) y THF (2 mi) se le añadió tamizado molecular de 3 (1 g) seguido por triacetoxiborohidruro de sodio (50 mg, 0.24 mmol), y se agitó la mezcla a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno durante 2 h. Se filtró la mezcla de la reacción a través de Celite, se redujo al vacío, luego se purificó mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-hexano (1:1, 1: 0), luego CH2CI2-MeOH (95: 5)] para producir 2,6-difluoro-N-[3-(4-morfolin-4-il-metil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (13 mg) como un sólido color crema.
(LC/MS: Rt 1.80, [M + H] +439). EJEMPLO 13 SÍNTESIS DE 2,6-DIFLUORO-N-r3-(N- ET»L-PlPERAZINIL-4-lLMETIL-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-ILT-BENZAMIDA Se preparó el compuesto de forma análoga al Ejemplo B, pero usando N-metilpiperazina en lugar de morfolina. (LC/MS: Rt 1.93, [M + H] +452).
EJEMPLO 14 SÍNTESIS DE N- 3-r4-(rE/?r-BUTILAMINO-METIL)-1H- BENCIMIDAZOL-2-IL1-1 H-PIRAZOL- 4-IL>-2.6-DIFLUORO- BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 2B, pero usando tert-butilamina en lugar de morfolina. (LC/MS: Rt .04, [ + H]+ 425).
EJEMPLO 15 SÍNTESIS DE r3-(4-DIMETILAMINOMETIL-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)- 1 H-PIRAZOL-4-IL1-2.6-DIFLUORO-BENZA IDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 2B, pero usando 35% dimetilamina en EtOH en lugar de morfolina. (LC/MS: Rt 1.85, [M + H] + 397).
EJEMPLO 16 SÍNTESIS DE ESTER METÍLICO DE ÁCIDO 2-r4-(2.6-DIFLUORO- BENZOILAMINO)-1H-PIRAZOL-3-ILI-1H-BENCIMIDAZOL-5- CARBOXÍLICO 16A. Síntesis de éster etílico de ácido 4-Nitro-1 H-pirazol--carboxílico Se añadió lentamente cloruro de tionilo (2.90 mi, 39.8 mmol) a una mezcla de ácido 4-nitro-3-pirazolcarboxílico (5.68 g, 36.2 mmol) en EtOH (100 mi) a temperatura ambiente, y se agitó la mezcla durante 48 h. Se redujo la mezcla al vacío y se secó por mezcla azeotropica con tolueno para producir éster etílico de ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido blanco (6.42 g, 96%). (1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 14.4 (s, 1H), 9.0 (s, 1H), 4.4 (q, 2H), 1.3 (t, 3H)). 16B. Síntesis de éster etílico de ácido 4-Amino-1H-pirazol-3-carboxílico Se agitó una mezcla de éster etílico de ácido 4-nitro-1H-pirazol-3-carboxílico (6.40 g, 34.6 mmol) y 10% Pd/C (650 mg) en EtOH (150ml) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 20 h. Se filtró la mezcla a través de un tapón de Celite, se redujo al vacío y se secó por mezcla azeotropica con tolueno para producir éster etílico de ácido 4-amino-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido color rosa (5.28 g, 98%). (1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 12.7 (s, 1H), 7.1 (s, 1H), 4.8 (s, 2H), 4.3 (q, 2H), 1.3 (t, 3H)). 16C. Síntesis de éster etílico de ácido 4-(2 6-D¡fluoro-benzo ¡lamino )-1 H-pirazol-3-carboxílico Una mezcla de ácido 2,6-difluoro benzoico (6.32 g, 40.0 mmol), éster etílico de ácido 4-arnino-1 H-pirazol-3-carboxílico (5.96 g, 38.4 mmol), EDC (8.83 g, 46.1 mmol) y HOBt (6.23 g, 46.1 mmol) en DMF (100 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. Se redujo la mezcla al vacío, se le añadió agua y se recolectó el sólido formado mediante filtración, y se secó al aire para dar éster etílico de ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como componente principal de una mezcla (15.3 g). (LC/MS: Ru 3.11, [M + H] + 295.99). 16D. Síntesis de ácido 4-(2.6-Difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico Una mezcla de éster etílico de ácido 4-(2,6-d¡fluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (10.2 g) en 2 M de NaOH/MeOH acuoso (1:1, 250 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. Se eliminaron los materiales volátiles al vacío, se añadió agua (300 mi) t se llevó la mezcla a un pH de 5 usando 1M de HCI acuoso. Se recolectó el precipitado resultante por filtración, y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno para producir ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido color rosa (5.70 g). (LC/MS: Rt 2.33, [M + HJ + 267.96). 16E. Síntesis de éster metílico de ácido 2-G4-G2.6-Difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-ill-1 H-bencimidazol-5-carboxílico Una mezcla de ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (500 mg, 1.87 mmol), 3,4-diaminobenzoato de metilo (375 mg, 2.25 mmol), EDC (430 mg, 2.25 mmol) y HOBt (305 mg, 2.25 mmol) en DMF (5 ml), se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. Se redujo el residuo al vacío, y luego se disolvió en la cantidad mínima de metanol y éter de petróleo añadida para dar el producto intermedio amida como un sólido color rosa , el cual se recolectó por filtración (427 mg). (LC/MS: Rt 3.24, [M + H] + 416.02). Una mezcla de la amida (150 mg, 0.36 mmol) en ácido acético glacial (4 ml) se calentó en el microondas (100 W) a 120 °C durante 10 minutos. Se redujo la mezcla al vacío y se añadió éter de petróleo (3 ml) y metanol (2 ml) para formar un precipitado, el cual se recolectó por filtración para dar éster metílico de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-5-carboxílico (96 mg, 67%) como un sólido color rosa. (LC/MS: Rt 3.67, [M+H] + 397.99).
EJEMPLO 17 SÍNTESIS DE ÁCIDO 2-f4-(2.6-DIFLUORO-BENZOI LA INOM H- PIRAZOL-3-ILMH-BENCtH/HDAZOL-5-CARBOXÍLICO Una mezcla de éster metílico de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-5-carboxílico (12.0 mg, 0.03 mmol) en 2 M de NaOH/MeOH acuoso (1:1, 4 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. Se redujo la mezcla al vacío, se le añadió agua (5 mi) y se llevó la mezcla a un pH de 4 usando 1 M de HCI acuoso. Se recolectó el precipitado formado por filtración, y se secó al vacío para dar ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-5-carboxílico como un sólido de color pálido (6 mg, 52%). (LC/MS: Rt 2.88, [M + H] + 383.97).
EJEMPLO 18 SÍNTESIS DE AMIDA DE ÁCIDO 2-r2,6-DIFLUORO-BENZOlLAMINO)- 1 H-PIRAZOL-3-IL1-1 H-BENCÍMIDAZOL-5-CARBOXÍLICO A una mezcla de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-5-carboxílico (100 mg, 0.26 mmol), EDC (75 mg, 0.39 mmol) y HOBt (53 mg, 0.39 mmol) en DMF (1.5 mi) se le añadió sucesivamente diisopropiletilamina (0.15 mi, 1.04 mmol) y cloruro de amonio (28 mg, 0.52 mmol). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 48 h y luego se redujo al vacío. Se le añadió agua y se recolectó el precipitado formado por filtración, y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno para producir amida de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-5-carboxílico (49 mg, 49%) como un sólido pardo.
(LC/MS: Rt 2.54, [ + H] + 382.99).
EJEMPLO 19 SÍNTESIS DE 2,6-DIFLUORO-N-r3-(5-HIDROXlMETIL-1H- BENCIMIDAZOL-2-IU- H-PIRAZOL-4-IU-BENZAMIDA Una mezcla de ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (584 mg, 2.19 mmol), (3, 4-diamino-fenil)-metanol (332 mg, 2.40 mmol), EDC (504 mg, 2.63 mmol) y HOBt (355 mg, 2.63 mmol) en DMF (15 ml), se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. Se redujo la mezcla al vacío y se recogió el residuo en EtOAc, se lavó con agua y salmuera y se secó la parte orgánica (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida (591 mg) como un sólido color café. (LC/MS: Rt 2.34, [M+H] + 388.00). Una mezcla de la amida (575 mg) en AcOH glacial (4 ml) se calentó en el microondas (80 W) a 90 °C durante 20 min. Se vació la mezcla en agua y se recolectó el sólido formado mediante filtración. Se recogió el residuo en MeOH (10 ml) y se agitó en presencia de NaOMe (320 mg, 5.90 mmol) for 30 min. Se redujo la mezcla al vacío, se recogió en EtOAc y se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna [Si02, EtOAc] para dar 2,6-difluoro-N-[3-(5-hidroximetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida como un sólido blanco (78 mg, 10% después de dos pasos). (LC/MS: Rt 2.45, [M + H] + 370.05).
EJEMPLO 20 SÍNTESIS DE N-r3-1H-BENCIMIDAZOL-2 IL1-1 H-PI RAZOL-4-IL1-2- FLUORO-3-METOXI-BENZAMIDA Una mezcla de ácido 2-fluoro-3-metoxibenzoico (47 mg, 0.28 mmol), 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.25 mmol), EDC (58 mg, 0.30 mmol) y HOBt (41 mg, 0.30 mmol) en DMF (1.5 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. La mezcla de la reacción se vació en agua (30 mi) y se recolectó el sólido resultante mediante filtración, y se purificó por recristalización a partir de MeOH/gasolina para producir N-[3-(1H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2-fluoro-3-metoxi-benzamida (7 mg, 8%) como un sólido gris.
(LC/MS: Rt 3.63, [ + H] + 352.00).
EJEMPLO 21 SÍNTESIS DE 2,6-DIFLUORO-N-3-r5-(4-METIL-PIPERAZlN-1- CARBONID-1H- BENCIMIDAZOL-2-IU-1 H-PIRAZOL-4-ILI- BENZAMIDA Una mezcla de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-5-carboxílico (115 mg, 0.30 mmol), 1-meíil-piperazina (50.0 L, 0.45 mmol), EDC (104 mg, 0.54 mmol) y HOBt (73.0 mg, 0.54 mmol) en DMF (5 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. El residuo se redujo al vacío, se recogió en EtOAc y se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar 2,6-difluoro-N-f{-[5-(4-metii-piperazin-1-carbonil)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-¡l}-benzamida (37 mg, 26%) como un sólido amarillo claro. (LC/MS: Rt 1.78, [M + H] + 466.09).
EJEMPLO 22 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-F3-(5-MORFOLIN-4-IL ETIL-1H- BENCI IDAZOL-2-I -1H-PIRAZOL-4-IU-BENZAMIDA 22A. Síntesis de 2,6-Difluoro-N-f3-(5-formil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ill-benzamida Una mezcla de 2,6-difiuoro-N-[3-(5-hidroximetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H- pirazol-4-M3-benzamida (800 mg, 2.17 mmol) y Mn02 (5.00 g, 57.5 mmol) en CH2CI2/MeOH (10:1, 110 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 5 días. Se filtró la mezcla a través de un tapón de Celite, lavando con MeOH, y se redujo el filtrado al vacío para dar 2,6-difluoro-N-[3-(5-formil-1H-bencimidazol-2-il)-1H-pirazol-4-il]-benzamida (380 mg, 48%) como un sólido amarillo. (LC/MS: Rt 3.41, [M+H] + 368.04). 22B. Síntesis de 2,6-Diftuoro-N-f3-(5-morfol¡n-4-ilmet¡l- 1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-Dirazol-4-in-benzamida A una mezcla de 2,6-difluoro-N-[3-(5-formil-1 H-bencimidazol-2-M)-1 H-p¡razol-4-il]-benzamida (75.0 mg, 0.20 mmol) en THF anhidro (5 mi) con agitación a temperatura ambiente, se le añadió tamizados moleculares de 3Á, morfolina (35 µ?, 0.40 mmol) y triacetoxi borohidruro de sodio (127 mg, 0.60 mmol). Se agitó la mezcla durante 4 h, se le añadió MeOH (3 mi) y luego se redujo la mezcla al vacío. Se recogió el residuo en EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04), se redujo al vacío y luego se purificó mediante LC/MS preparativa para dar 2,6-difiuoro-N-[3-(5-morfolin-4~ ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (9mg, 10%) como un sólido blanco. (LC/MS: Rt 1.90, [M+H] + 439.09).
EJEMPLO 23 SÍNTESIS DE 2,6-DÍFLUORO-N-{3-r5-(4-METIL-PIPERAZIN-i- ILMETID-1H- BENCIMIDAZOL-2-IL1-1 H-PI RAZO L-4-IL1-BENZA IDA Se preparó el compuesto de manera análoga al ejemplo 22B, pero usando 1-metil piperazina (44.0 I1L, 0.40 mmol) como el fragmento de amina para dar 2,6- difluoro-N-{3-[5-(4-metil-piperazin-1 -i Imeti l)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-¡l}-benzamida (4 mg, 5%) como un sólido amarillo. (LC/MS: Rt 1.66, [M + H] + 452.11) EJEMPLO 24 SÍNTESIS DE N-f3-r5-(rE/?7-BUTILAMlNO-METIL)-1H- BE CIMIDAZOL-2-ILT-1 H-PIRAZOL- 4-IL1-2.6-DIFLUORO- BENZA IDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 22B, pero usando tert-butilamina (42 µ?_, 0.40 mmol) como el fragmento de amina para dar N-{3-[5-(tert-butilamino-metil)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-p¡razol-4-il}-2,6-difluoro-benzamida (5 mg, 6%) como un sólido blanco. (LC/MS: Rt 2.00, [M+H] + 425.11) EJEMPLO 25 SÍNTESIS DE N-r3-í5-DI ETILAMINOMETIL-1 H-BENCIMIDAZOL-2- ILÍ-1H-PIRAZOL-4-IL1-2.6-D1FLUORO-BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 22B, pero usando 2,6-difluoro-N-[3-(5-formil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]- benzamida (57.4 mg, 0.16 mmol), THF seca (5 mi), tamizados moleculares de 3Á, dimetilamina (35% en EtOH) (55 µ?, 0.31 mmol) y triacetoxi borohidruro de sodio (100 mg, 0.47 mmol) para dar N-[3-(5-dimetilaminometil-1 H-bencimidazoI-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida (11 mg, 18%) como un sólido amarillo. (LC/MS: Rt 2.85, [M + H] + 397.17).
EJEMPLO 26 SÍNTESIS DE r3-(5-CLORO-1H-BENClMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL- 4-IL1-2.6-DIFLUORO- BENZAMIDA Una mezcla de ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (50 mg, 0.18 mmol), 4-clorofenilenodiamina (30 mg, 0.21 mmol), EDC (45 mg, 0.22 mmol) y HOBt (30 mg, 0.22 mmol) en DMF (5 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y se purificó el residuo mediante cromatografía de columna [Si02, EtOAc/hexano (1:1)] para dar el producto intermedio amida. Una mezcla de la amida en AcOH (2 mi) se calentó en un microondas (50W) a 140 °C for 15 min y luego se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna [Si02, EtOAc/gasolina (1:1)] para dar N-[3-(5-cloro-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida (20 mg) como un sólido castaño claro. (LC/ S: Rt 4.16, [M+H] + 374).
EJEMPLO 27 SÍNTESIS DE 2.6-PIFLUORO-N-r5-METOXI-1H-BENCIMlDAZOL-2-IL- 1 H-PIRAZOL-4-IL1-BE ZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 26, pero usando 4-metoxifenilenodiamina (28 mg, 0.21 mmol) como el fragmento de amina, para dar 2,6-difluoro-N-[3-(5-metoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (25 mg) como un sólido color café claro. (LC/MS: Rt 3.26, [M + H] + 370).
EJEMPLO 28 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-r3-(5-NITRO-1H-BENCIMIDAZOL-2- Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 26, pero usando 4-nitrofenilenodiamina (32 mg, 0.21 mmol) como el fragmento de amina para dar 2,6-difluoro-N-[3-H-benclmidazol-2-il)-1H-pirazol-4-il]-benzamida (18 mg). (LC/MS: Rt 3.84, [M+H] +385).
EJEMPLO 29 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-r3-(1H-IMIDAZOr4.5-CTPIRIDIN-2- H-PIRAZOL-4-IL1-BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 26, pero usando 3,4-diaminopiridina (22 mg, 0.21 mmol) como el fragmento de amina para dar 2,6-difluoro-N-[3-(1 H-imidazo[4,5-c] piridin-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (13 mg) como un sólido color café. (LC/MS: Rt 4.16, [M + H] + 341).
EJEMPLO 30 SÍNTESIS DE ÁCIDO 2-r2.6-DIFLUORO-BENZOlLAMINO)-1 H- PIRAZOL-3-ILT-1H- BENCIMIDAZOL-4-CARBOXÍLICO Una solución de éster metílico de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-4-carboxílico (220 mg, 0.55 mmol) en THF/agua (1:1, 10 mi) se trató con hidrato de hidróxido de litio (70 mg, 1.66 mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 18 h. Se eliminaron las sustancias volátiles al vacío, se acidificó la mezcla hasta un pH de 5 mediante la adición de 2 de ácido clorhídrico acuoso, y se recolectó el sólido formado mediante filtración, se lavó con agua, luego se secó al vacío para dar ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilam¡no)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-4-carboxílico (165 mg) como un sólido color café.
(LC/MS: Rt 3.28, [M+H] + 384).
EJEMPLO 31 SÍNTESIS DE 2,6-DlFLUORO-N-3-r4-(4-METIL-PIPERAZIN-1- CARBONIL)- H-BENCIMIDAZOL-2-IL1-1H-PlRAZOL-4-IL>- BENZA IDA Una mezcla de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H- pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-4-carboxílico (50 mg, 0.13 mmol), N- metilpiperazina (20 p1, 0.18 mmol), EDC (30 mg, 0.15 mmol) y HOBt (22 mg, 0.15 mmol) en DMF (5 ml), se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se redujo la mezcla al vacío y se purificó el residuo por cromatografía de columna instantánea [Si02, CH2CI2/MeOH (95: 5, 90:10)] para dar 2,6-difluoro-N-{3-[4-(4-metil-piperazin-1- carbonil)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida (14 mg) como un sólido color crema. (LC/MS: Rt 2.21, [M+H]+ 466).
EJEMPLO 32 SINTESIS DE G3-? H-BE CIMIDAZOL-2-ID-1 H-PIRAZOL-4-lL1-2-(2- PIRROLIDIN-1-IL- ETOXD-BENZAM ID A 32A. Síntesis de éster metílico de ácido 2-(2-Pirrolidin-1 -il-etoxi)-benzoico A una mezcla de trifenilfosfina (0.79 g, 3.0 mmol) en THF (15 mi) se ie añadió sucesivamente diisopropilazodicarboxilato (0.61 g, 3.0 mmol) seguido por salicilato de metilo (0.46 g, 3.0 mmol), y se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 1h. Luego se añadió 1 -(2-Hidroxietil)-pirrolidina (0.35 g, 3.0 mmol) por goteo, y se dejó agitando la mezcla de la reacción a temperatura ambiente durante 5 h adicionales. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y se purificó mediante cromatografía de columna instantánea [S¡02, EtOAc/MeOH (3:1, 1:1)] para dar éster metílico de ácido 2-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-benzoico como un aceite amarillo claro (446 mg, 60 %). (LC/MS: Rt 1.58, [M + H] + 250.05). 32B. Síntesis de N-f3-(H-Bencimidazol-2-iD-1 H-pirazol-4-in-2-(2-pirrolidin- 1 -il-etoxi)-benzamida Se disolvió éster metílico de ácido 2-(2-Pirrolidin-1 -il-etoxi)-benzoico (125 mg, 0.50 mmol) y hidróxido de litio (21 mg, 0.50 mmol) en THF/H20 (1:1, 2 mi) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 20 h. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y se mezcló azeotrópicamente con tolueno (3 x 5 mi) para dar un sólido blanco, el cual se disolvió en agua (1 mi) y se acidificó con 2 M de HCI acuoso (1 mi). La solución resultante se redujo al vacío y se mezcló azeotrópicamente con tolueno (3 x 5 mi) para dar un gel amarillo claro, el cuál se combinó con 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (100 mg, 0.50 mmol), EDC (116 mg, 0.60 mmol) y HOBt (81 mg, 0.60 mmol) y se agitó a temperatura ambiente en DMF (3 mi) durante 20 h. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y se purificó mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, CH2CI2/MeOH (95:5, 87.5:12.5), luego 120 DMAW] para dar N-[3-(1H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2-(2-pirrolidin-1 -il-etoxi)-benzamida (63 mg, 30%) como un sólido color rosa claro. (LC/MS: Rt 2.08, [M + H] + 417.11).
EJEMPLO 33 SÍNTESIS DE N-r3nH-BENC!MlPAZOL-2-lL)-1H-PIRAZOL-4-lLl-3- METOXI-BENZ AMIDA Una mezcla de ácido 3-metoxi benzoico (84 mg, 0.55 mmol), 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (100 mg, 0.50 mmol), EDC (116 mg, 0.60 mmol) y HOBt (81 mg, 0.60 mmol) se agitó a temperatura ambiente en DMSO (3 mi) durante 20 h. La mezcla de la reacción se vació en agua (30 mi) y se recolectó el sólido resultante por filtración, y se purificó mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, (diclorometano 120 mi, metanol 15, ácido acético 3ml, agua 2 mi (D AW 120)] para producir N-[3-(1H-Bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-3-metoxi-benzamida como un sólido rosa claro-gris (21 mg, 13 %). (LC/MS: Rt 3.81, [M+H] + 334.03).
EJEMPLO 34 SÍNTESIS DE r3-H-BENCIMIDAZOL-2-IL1-1H-PIRAZOL-4-1-AMIDA DE ÁCIDO QUINOLIN-8-CARBOXÍLICO Una mezcla de ácido quinolin-8-carboxílico (104 mg, 0.60 mmol), 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (100 mg, 0.50 mmol), EDC (116 mg, 0.60 mmol) y HOBt (81 mg, 0.60 mmol), se agitó a temperatura ambiente en DMF (1.5 mi) durante 20 h. Se purificó la mezcla de la reacción mediante LC/MS preparativa para dar [3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-amida de ácido quinolin-8-carboxílico (11 mg, 6%) como un sólido color café. (LC/MS: Rt 3.85, [M + H] + 355.11).
EJEMPLOS 35-67 Siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 34, pero usando el ácido carboxílico apropiado en lugar de ácido quinolin-8-carboxílico, se prepararon los siguientes compuestos. 25 25 25 EJEMPLOS 68-70 Siguiendo los métodos descritos en los ejemplos 21 y 22, prepararon los siguientes compuestos.
EJEMPLOS 71-75 Procedimiento general A Una mezcla de 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-ácido carboxílico (0.134 g, 0.50 mmol), benceno-1 ,2-diamina (0.60 mmol), EDC (0.116 g, 0.60 mmol) y HOBt (0.081 g, 0.60 mmol) en DMF (3 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y el residuo se particionó entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético (6 mi) a la amida cruda, y se calentó la mezcla en un microondas (120 W) a 110 °C durante 10 min y luego se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa para dar el producto deseado. Los siguientes compuestos se prepararon siguiendo el procedimiento general A: EJEMPLO 76 SÍNTESIS DE 2,6-DIFLUORO-N-f3-r5-(1-METIL-PIPERlDlN-4-lLOXn- 1H-BENC1MÍDAZOL-2-IL1-1H-PIRAZOL-4-1L1-BENZAMIDA Se disolvió 3,4-dinitrofluorobenceno (1.86 g, 10 mmol) y 4-hidroxi-l -metilpiperidina (1.38 g, 12 mmol) en THF (20 ml), y se agitó a temperatura ambiente mientras se le añadió hidruro de sodio (60 % dispersión en aceite mineral, 0.40 g, 10 mmol) en varias porciones pequeñas. La mezcla de la reacción se agitó durante una hora y luego se redujo al vacío, se particionó entre acetato de etilo y agua, y se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó ( gS04) y se redujo al vacío. Se sometió el residuo resultante a cromatografía de columna, eluyendo con 5% MeOH/DCM para dar un sólido amarillo (1.76 g, proporción 2:1 del producto deseado 4-(3,4-dinitro-fenox¡)-1-metil-piperidina y un producto secundario, 4-(4-fluoro-2-nitro-fenox¡)-1 -metil-piperidina). Una muestra de la mezcla de productos obtenidos (0.562 g) se disolvió en D F (10 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de la reacción se agitó luego bajo una atmósfera de hidrógeno durante 40 horas, se eliminaron los sólidos por filtración y se redujo el filtrado al vacío para dar un aceite negro (mezcla 1:1 del producto deseado 4-(1 -metil-piperidin-4-iloxi)-benceno-1 ,2-diamina y el producto secundario reducido, 5-fluoro-2-(1 -metil-piperidin-4-iloxi)-fenilamina). Se combinó una muestra del aceite negro (0.221 g) con ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (0.134 g, 0.50 mmol), EDC (0.116 g, 0.60 mmol) y HOBt (0.081 g, 0.60 mmol) y DMF (3 mi), Y se agitó la mezcla de la reacción resultante a temperatura ambiente durante 18 horas. Se sometió una mitad de la mezcla de la reacción a condiciones dé elaboración: después de reducir al vacío se particionó el residuo entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético (6 mi) a la amida cruda, y se calentó la mezcla por reflujo durante 3.5 horas y luego se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa para dar la sal formato de 2,6-difluoro-N-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-iloxi)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida (0.035 g) como un sólido color café. (LC/MS: Rt 1.82, [M + 453.30).
EJEMPLO 77 SÍNTESIS DE N-r3-(4-CLORO-1H-BENCIMIDAZOL-2-IU-1H- PIRAZOL-4-IL1-2,6-DIFLUORO-BENZAMIDA 77A. Síntesis de 3-Cloro-benceno-1 , 2-diamina Se disolvió 3-Cloro-2-nitro-anilina (0.345 g, 2 mmol) en iso-propanol (10 mi) y agua (2 mi). Se le añadió ácido acético catalítico (0.1 mi), seguido por níquel Raney (0.02 g, como suspensión al 50 % en H20) bajo un flujo de nitrógeno. Luego se agitó la mezcla de la reacción bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 5 horas y el catalizador se eliminó por filtración bajo una atmósfera de nitrógeno. El filtrado se redujo al vacío, se particionó entre acetato de etilo y agua, y la capa orgánica se redujo al vacío para dar 3- cloro-benceno-1 , 2-diamina como un aceite color café (0.190 g, 67 %). (LC/MS: Rt 1.84, [M + H] + 143.07). 77B. Síntesis de N-f3-(4-cloro-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H- pirazol-4-ill-2.6- difluoro-benzamida Una mezcla de ácido 4-(2,6-difiuoro-benzoilamino)-1 H-pirazoi-3-carboxílico (0.134 g, 0.50 mmol), 3-cloro-benceno- ,2-diamina (0.085 g, 0.60 mmol), EDC (0.116 g, 0.60 mmol) y HOBt (0.081 g, 0.60 mmol) en DMF (3 ml), se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y el residuo se particionó entre acetato de etilo (50 ml) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 ml). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético (5 ml) a la amida cruda, y se calentó la mezcla por reflujo durante 3 horas, y luego se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa para dar N-[3-(4-cloro-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida (0.052 g, 28 %) como un sólido color café. (LC/MS: Rt 3.18, [M + H] + 374.09).
EJEMPLOS 78-81 Procedimiento general B Una mezcla de 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-ácido carboxílico (100 mg, 0.37 mmol), la diamina relevante (1.2 equivalente), EDC (1.2 equivalente) y HOAt (1.2 equivalente) en DMF (1.2 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, se desarrolló la reacción vaciándola en aguay extrayendo con EtOAc (x2). Se lavaron las capas orgánicas combinadas de nuevo con agua, con salmuera y se secaron sobre MgS04. Se filtró y se evaporó el producto hasta secar, para dejar el producto intermedio amida como un sólido. Una mezcla de esta amida en AcOH (2 mi) se calentó en un microondas (50W) a 110 °C hasta que se completó la reacción. La suspensión se redujo al vacío y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa. Los siguientes compuestos se prepararon mediante el Procedimiento general B: EJEMPLOS 82-86 Procedimiento general C Una mezcla de ácido 4-(2,6-d¡fluoro-benzoiIamino)-1 H-pirazol-3- carboxílico (150 mg, 0.56 mmol), la diamina relevante (1.1 equivalente), EDC (1.2 equivalente) y HOBt (1.2 equivalente) en DMF (4 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas y luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y NaHC03 acuoso saturado, Y se lavó con agua la porción orgánica, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se recogió el residuo en AcOH (4 mi) y se calentó en un microondas (100W) a 120 °C durante 10 minutos. Se redujo la mezcla al vacío y se purificó mediante HPLC preparativa.
Los siguientes compuestos se prepararon mediante Procedimiento general C: EJEMPLO 87 SÍNTESIS DE 1-r3-(1H-BENCiMIDAZOL-2-IL)-1H-PlRAZOL-4-ILT-3- TERT-BUTIL-UREA Una mezcla de 3-(1 H-Bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (100mg, 0.50 mmol), isocianato de tert-butilo (60ul, 0.60 mmol) en DMF (5ml) se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Se redujo la mezcla al vacío. Se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa, y luego de la evaporación, dio 52 mg del compuesto titulado como un sólido blanco (35%). (LC/MS: Rt 2.61, [M + H] +299.15).
EJEMPLO 88 SÍNTESIS DE 1-r3-(1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-ILl-3- (2,6-DIFLUORO- FENID-UREA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 87, pero usando 2,6-difiuorofenil isocianato para dar el compuesto titulado como un sólido blanco (15mg). (LC/MS: Rt 2.82, [M + H] + 355).
EJEMPLO 89 SÍNTESIS DE 2,6-DIFLUORO-N-(3-r5-(4-ISOPROPIL-PIPERAZlN-1- CARBONILMH-BENCIMIDAZOL-2-ILMH-PIRAZOL-4-IL>- BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 21 pero usando 1- isopropilpiperazina como el fragmento de amina para dar 2,6-difluoro-N-{3-[5-(4-isopropil-piperazin-1 -carbón i l)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida como un sólido amarillo (63 mg). (LC/MS: Rt 1.87, [M + H] + 494.18).
EJEMPLO 90 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-f3-f5-(PIRROLIDIN-1-CARBONlL)- 1H-BENCIMIDAZOL-2-I -1H-PIRAZOL-4-IU-BENZAMlDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 21, pero usando pirrolidina como el fragmento de amina para dar 2,6-difluoro-N-{3-[5-(pirrolidin-1 -carbón i l)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida como un sólido blanco (17 mg). (LC/MS: Rt 3.03, [M + H] + 437.16).
EJEMPLO 91 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-r3-(5-HIDROXI-1H-BENCIMIDAZOL- 2-ID- H-PIRAZOL-4- IL-BENZAM IDA Una mezcla de 2,6-difluoro-N-[3-(5-metoxi-1 H-bencimidazoI-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 27) (850 mg) y cloruro de aluminio (III) (220 mg) en tolueno (4 mi) se calentó a 80 °C durante 3 horas, se enfrió a temperatura ambiente y se le añadió NaHC03 (4 mi) seguido por ácido cítrico acuoso al 5% (4 mi). Se extrajo la muestra con EtOAc y se lavó el extracto orgánico con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se sometió el residuo a LC/MS preparativa para dar 2,6-difluoro-N-[3-(5-hidroxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (22 mg) como un sólido pardo. (LC/MS: Rt 2.01, [M + H] + 356.09).
EJEMPLO 92 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-(3-r5-HIDROXl-4-(4-METIL- PIPERAZIN-1-)LMETIL)-1H-BENCIMIDAZOL-2-ILl-1H-PlRAZOL-4- ID-BENIZAMIDA Me Una mezcla de 2,6-difluoro-N-[3-H-bencimidazol-2-il)-1 H-p¡razol-4- ¡l]-benzamida (50 mg), formaldehído acuoso al 37% (1 mi) y N-metilpiperazina (150 µ?) en benceno (1 mi) se calentó en un microondas a 100 °C y 50 W durante 10 minutos, se redujo al vacío y se sometió a LC/MS preparativa con el fin de purificarla, para dar 2,6-difluoro-N-{3-[5-hidroxi-4-(4-metil-piperazin-1 -ilmetil)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida (7 mg) como un sólido amarillo. (LC/MS: Rt 1.98, [M + H] + 468.19).
EJEMPLO 93 SÍNTESIS DE 2,6-DIFLUORO-N-r3-(5-HIDROXI-4-MORFOLIN-4- L ETlL- H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-ILT-BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 92, pero usando morfolina como el fragmento de amina para dar 2,6-difluoro-N-[3-(5-hidroxi-4-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (14 mg) como un sólido amarillo. (LC/MS: Rt 1.82, [M + H] + 455.13).
EJEMPLO 94 SÍNTESIS DE 2,6-DiCLO O-N-r3-(5-MORFOLIN-4-ILMETIL-1H- BENCIM1DAZOL-2-IU-1H-P RAZOL-4-1U-BENZAMIDA 94A. Síntesis de (3,4-dinitro-feni0-morfolin-4-¡l-metanona Una mezcla de ácido 3,4-dinitro benzoico (10.0 g) y cloruro de tioniio (30 mi) se calentó por reflujo durante 2 horas, se enfrió a temperatura ambiente y se eliminó el exceso de cloruro de tioniio mediante mezcla azeotrópica con tolueno. Se recogió el residuo en THF (100 mi) y morfolina (4.1 mi), y se añadió Et3N (7.2 mi) concurrentemente a la mezcla a 0 °C. Se agitó la mezcla durante 3 horas, se le añadió agua (100 mi) y luego se extrajo con EtOAc. Se lavó la porción orgánica con salmuera, se secó ( gS04) y se redujo al vacío. La recristalización del residuo a partir de MeOH dio (3,4-dinitro-fenil)-morfolin-4-il-metanona (8.23 g) como un sólido amarillo. (1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 8.3 (d, 1H), 8.3 (s, 1H), 8.0 (d, 1H), 3.7-3.5 (m, 8H)). 94B. Síntesis de (3.4-Diamino-fenin-morfol¡n-4-il- metanona Una mezcla de (3, 4-dinitro-fenil)-morfolin-4-il-metanona (1.0 g) y 10% Pd/C (150 mg) en MeOH (30 mi) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 10 horas, luego se filtró a través de un tapón de Celite y se redujo al vacío para dar (3, 4-diamino-fenil)-morfolin-4-il-metanona (900 mg). (1H MR (300 MHz, DMSO-d6) d 6.6 (s, 1H), 6.5 (s, 2H), 4.8 (s, 1.5H), 4.6 (s, 1.5H), 4.1 (s, 1H), 3.6 (m, 4H), 3.4 (m, 4H)). 94C. Síntesis de 4-Morfolin-4-ílmetil-benceno-1 ,2-diamina A una mezcla de (3, 4-dinitro-fenil)-morfolin-4-il-metanona (2.84 g) en THF seca (50 mi) se le añadió NaBH4 (954 mg) seguida por goteo con BF3. Et20 (3.2 mi). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 3 horas y luego se extinguió la reacción mediante la adición de MeOH. Se redujo la mezcla al vacío, se particionó entre EtOAc y agua y se lavó la porción orgánica con salmuera, se secó (MgS0 ) y se redujo al vacío. Se purificó el residu o mediante cromatografía de columna instantánea , eluyendo con EtOAc para dar 4-(3,4-d initro-ben cil )-morfol ina (1 .08 g ). Una mezcla de 4-(3, 4-dinitro-bencil)-morfolina (550 mg) y 1 0% Pd/C (75 mg) en MeOH ( 10 mi) se ag itó bajo u na atmósfera de h id rógeno a temperatura ambiente durante 4 horas, l uego se filtró a través de un tapón de Celite y se redujo al vacío para dar 4-morfol in-4-ilmetil-benceno-1 ,2-d iamina (483 mg) como componente princi pal de una mezcla . 94D . S íntesis de 4-(2,6-Dicloro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-ácido carboxílico Se añadió cloruro de tionilo (0.65 mi) a ácido 2,6-d icloro benzoico (825 mg) y se calentó la mezcla a 70 °C durante 2 horas. Se dejó enfriar la mezcla, y se eliminó el exceso de cloruro de tionilo mediante mezcla azeotrópica con tolueno. Se recogió el residuo en THF (30 mi) y éster metílico de ácido 4-amino-1 H-pirazol-3-carboxílico (609 mg), y se añadió a la mezcla concurrentemente Et3N (0.75 mi) a 0 °C. Se agitó la mezcla durante 4 horas, se añadió agua (100 mi) y luego se extrajo con EtOAc. Se lavó la porción orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar ésíer metílico de ácido 4-(2,6-dicloro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3- carboxílico (1.23 g) como un sólido rojo. (LC/MS: Rt 3.05, [M + H] + 313.96). Una mezcla de éster metílico de ácido 4-(2,6-dicloro- benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (1.21 g) en 2M de NaOH/MeOH (1:1, 50 mi) acuosa, se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas. Se eliminaron los materiales volátiles al vacío, se añadió agua (100 mi) y se llevó la mezcla a un pH de 5 usando 1 M de HCI acuoso. Se recolectó el precipitado resultante por filtración, y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno para producir ácido 4-(2,6- dicloro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido pardo (790 mg). (LC/MS: Rt 2.53, [M + H] + 299.95). 94E. Síntesis de 2.6-Dicloro-N-f3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-in-benzamída Una mezcla de ácido 4-(2,6-d¡cloro-benzoilamino)-1 H- pirazol-3-carboxíl¡co (75 mg, 0.25 mmol), 4-morfolin-4-ilmet¡l-benceno-1 ,2-diamina (52 mg, 0.25 mmoi), EDC (58 mg, 0.3 mmol) y HOBt (41 mg, 0.3 mmol) en DMF (4 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. La mezcla se particionó entre EtOAc y NaHC03 acuoso saturado, y se lavó la capa orgánica con NH4CI acuoso saturado, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se recogió el residuo en AcOH y se calentó a 100 °C durante 14 horas, se enfrió a temperatura ambiente y se redujo al vacío. Se purificó el residuo por cromatografía de columna instantánea, eluyendo con CH2CI2-MeOH (20:1-10:1) para dar 2,6-dicloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-benc¡midazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (30 mg) como un sólido color rosa. (LC/MS: Rt 2.12, [ + H] + 471.14).
EJEMPLO 95 SÍNTESIS DE 2-CLORO-6-FLUORO-N-r3-L- ORFOLIN-4-ILMET>L- 1H-BENCI iPAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-lU-BENZA IDA 95A. Síntesis de 4- H-pirazol-3-áoido carboxílico Se preparó el compuesto de manera análoga al ácido 4- (2, 6-difluoro-benzoilam ino)-1 H-pi razol-3-carboxílico (Ejemplo 1 6 D), pero usando ácido 2-cloro-6-fluorobenzoico como el ácido inicial para dar ácido 4-(2-cloro-6-fluoro-benzoi lamino)-1 H-pirazoI-3-carboxílico (4.42 g ) como un sólido azul claro. (LC/ S: Rt 2.35, [M + H] + 283.94). 95B. Síntesis de 2-Cloro-6-fl uoro-N-r3-(5-mofolin-4-i lmetil-1 H- bencimidazol-2-¡ n-1 H-pirazol-4-iH-benzamida Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-d icloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil- 1 H-bencimidazol-2-il)- 1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando 4-(2-cloro-6-fluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-ácido carboxíiico, para dar 2-cloro-6-fluoro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil- 1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (37 mg) como un sólido color rosa. (LC/MS: Rt 2.04, [M + H] + 455.1 8).
EJ EMPLO 96 SÍNTESIS DE 26-DlFLUORO-4-METOXI-N-r3-(5-MORFOLI N-4° EL ETIL-1H-BENCIM1DAZOL-2-IU-1H-PIRAZOL-4-IL1-BENZAMIDA 96A. Síntesis de ácido 4-(2,6-D¡fluoro-4-metoxi-benzoilamino-1 H-pirazol-3-carboxílico Se preparó el compuesto de manera análoga al ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 16D), pero usando ácido 2,6-difluoro-4-metoxibenzoico como el ácido inicial, para dar 4-(2,6-difluoro-4- metoxi-benzo¡lamino)-1 H-pirazol-3-ácido carboxílico (1.58 g) como un sólido blanco. (1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 13.0 (s, 2H), 10.7 (s, 1H), 8.0 (S, 1H), 6.9 (s, 1H), 6.8 (s, 1H), 3.7 (s, 3H)). 96B. Síntesis de 2,6-Difluoro-4-metoxi-N-f3-(5-morfolin-4-il metí 1-1 H- bencim¡dazol-2-i0-1 H-pirazol-4-in-benzamida Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-dicloro-N-[3-(5- morfolin-4-ilmet¡l-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (EJEMPLO 94E), pero usando 4-(2,6-difluoro-4-metox¡-benzoilam¡no)-1 H-pirazol- 3-ácido carboxílico para dar 2,6-d¡fluoro-4-metoxi-N-[3-(5-morfolin-4-¡lmetil- 1 H-benc¡m¡dazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (32 mg) como un sólido color rosa. (LC/MS: Rt 1.99, [M + H] + 469.21).
EJEMPLO 97 SÍNTESIS DE ÁCIDO 2, 3-DIHIDRO-BENZO G1.4? DlOXIN-5- CARBOXÍLICO r3-(5-MORFOLIN-4- IL ETIL-1 H-BENCIMIDAZOL-2- ID-1 H-PI RAZO L-4-IL1 -AMIDA 97A. Síntesis de ácido 4-f(2,3-Dihidro-benzof1 ,41dioxin-5-carbonil)-aminol-1 H-pirazol-3-ácido carboxílico Se preparó el compuesto de manera análoga al ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 16D), pero usando 2, 3-dihidro-benzo [1 ,4]dioxin-5-carboxílico como el ácido inicial para dar 4-[(2, 3-dihidro-benzo [ ,4]dioxin-5-carbonil)-amino]-1 H-pirazol-3-carboxílico (340 mg) como un sólido blanco. (1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 13.5 (s, 2H), 11.2 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 7.7 (d, 1 H), 7.1 (d, 1H), 7.0 (t, 1H), 4.5 (s, 2H), 4.4 (s, 2H)). 97B. Síntesis de f3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol- 2-Í0-1 H-pirazol-4-in-amida de ácido 2,3-Dihidro-benzoM ,41dioxin-5-carboxilico Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-dicloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-¡l)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando ácido 4-[(2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxin-5-carbonil)-amino]-1 H-pírazol-3-carboxílíco para dar [3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-¡l)-1 H-pirazol-4-il]-amida de ácido 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxin-5-carboxílico (39 mg) como un sólido color rosa. (LC/MS: Rt 1.99, [M + H] + 461.23).
EJEMPLO 98 SÍNTESIS DE 2.6-DICLORO-N-f3-r5-(MORFOLINA-4-CARBON»L)-1H- BENClMIDAZOL-2-ILl-1H-PlRAZOL-4»l -BENZAMlDA Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-dicloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando (3,4-diamino-fenil)-morfolin-4-il-metanona (Ejemplo 94B) para dar 2,6-dicloro-N-{3-[5-(morfolin-4-carbon¡l)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}benzamida (17 mg) como un sólido pardo. (LC/MS: Rt 2.98, [M + H] + 485.13).
EJEMPLO 99 SÍNTESIS DE 2-CLORO-6-FLUORO-N- {3-r5-(MORFOLIN-4- CARBONIL)-1H-BENCIMIDAZOL-2-IU-1H-PIRAZOL-4-IL - BENZ AMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6- dicIoro-N-[3-(5-morfolin-4-il metí 1-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H- pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando ácido 4-(2- cloro-6-fluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 95A) y (3,4-diamino-fenil)-morfolin-4-il-metanona (Ejemplo 94B) para dar 2-cloro-6-fluoro-N-{3-[5-(morfolin-4-carbonil)-1 H- benc¡midazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida (18 mg) como un sólido pardo. (LC/MS: Rt 2.89, [M + H] + 469.15).
EJEMPLO 100 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-4-METOXl-N-(3 5-(MORFOLlN-4- CARBONIL)-1H-BENCIMIDAZOL-2-iLl-1H-PIRAZOL-4-l - Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-dicloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando ácido 4-(2,6-difluoro-4-metoxi-benzoilamino)-1 H- pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 96A) y (3,4-diamino-fenil)-morfolin-4-il-metanona (Ejemplo 94B) para dar 2,6-difluoro-4-metoxi-N-{3-[5-(morfolin-4-carbonil)-1 H-bencimidazol-2-il]- 1 H-pirazol-4-il}-benzamida (24 mg) como un sólido pardo. (LC/MS: Rt 2.94, [M + H] + 483.20).
EJEMPLO 101 SÍNTESIS DE 3-r5-(MORFOHN-4-CARBONlLM H-BENCIMIDAZOL-2- ILL-1H-PIRAZOL-4-I -AMIDA DE ÁCIDO 2,3-DIHIDRO- ?????G1,4???????-5- CARBOXÍUCO Se preparó el compuesto de manera análoga a la 2,6-dicloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando ácido 4-[(2,3-dihidro-benzo [1,4] dioxin-5-carbonil)-amino]-1 H-pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 97A) y (3,4-diamino-fenil)-morfolin-4-il-metanona (Ejemplo 94B) para dar {3-[5-(morfolina-4-carbonil)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-ii}-amida de ácido 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxin-5-carboxílico (15 mg) como un sólido pardo. (LC/MS: Rt 2.89, [M + H] + 475.20).
EJEMPLO 102 SÍNTESIS DE N-r3-(4.6-BIS-TRIFLUOROMETIL-1H-BENCIMIDAZOL- 2-IU-1H-PIRAZOL-4- IL1-2.6-DIFLUORO-BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga a la 2,6-dicloro-N-t3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzam¡da (Ejemplo 94E), pero usando ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 16D) y 3,5-bis (írifluoromeíil)-l ,2-diaminobenceno para dar N-[3-(4,6-bis-trifluorometil-1 H-bencimid azo l-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida (51 mg) como un sólido color rosa. (LC/MS: Rt 3.64, [M + H] + 476.07).
EJEMPLO 103 SÍNTESIS DE N3-(5.6-DICLORO-1H-BENCIMlDAZOL-2-IH-1H- PIRAZOL-4-IL1-2.6-DIFLUORO-BENZAMID A Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-dicloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 16D) y 4,5-dicloro-1 , 2-fenileno diamina para dar N-[3-(5,6-dicloro-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida (29 mg) como un sólido pardo. (LC/MS: Rí 3.53, [M + H] + 408.02).
EJEMPLO 104 SÍNTESIS DE N-r3-(4,5-PIMETIL-1H-BENC[MtDAZOL-2-IL-1H- P1RAZOL-4-IL1-2.6- DIFLUQRO-BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-dicloro-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (Ejemplo 94E), pero usando ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamlno)-1 H-plrazol-3-carboxílico (Ejemplo 16D) y 3,4-dimetil- , 2-fenileno diamina para dar N-[3-(4,5-dimetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida (89 mg) como un sólido anaranjado claro.
(LC/MS: Rt 2.98, [M + H] + 368.15).
EJEMPLO 105 SÍNTESIS DE N-r3-(H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-IL1-2- FLUORO-3-PIRROLIDIN-1 -ILMETIL-BENZ AMIDA 105A. Síntesis de ácido 3-Bromometil-2-fluoro-benzoico Una mezcla de ácido 2-fluoro-3-metil benzoico (0.462 g, 3 mmol), N-bromosuccinimida (0.560 g, 3.15 mmol), azobis-¡sobutironitrilo (AIBN) (0.024 g, 0.15 mmol) y CCI4 (10 mi) se calentó por reflujo durante 18 h. La mezcla de la reacción luego se redujo al vacío, y se particionó entre acetato de etilo y K2C03 acuoso. Se acidificó la capa acuosa (2M HCI) y se enfrió en hielo. Se recolectó el precipitado obtenido por filtración, y se secó al vacío para dar ácido 3- bromometil-2-fluoro- benzoico (0.1225 g, 13 %) como un sólido incoloro. (LC/MS: Rt 3.18, [M-H]-232.91 ). 105B. Síntesis de N-f3-(1 H-Bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol- 4-¡n-2-fluoro-3- pirrolidin-1-ilmetil-benzamida Se agitó ácido 3-Bromometil-2-fluoro-benzoico (0.058 g, 0.25 mmol) y pirrolidina (0.036 g, 0.5 mmol) a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de la reacción se mezcló azeotrópicamente tres veces con tolueno, se acidificó con 2M de HCl y se mezcló azeotrópicamente tres veces más con tolueno, para dar ácido 2- fluoro-3-pirrolidin-1 -ilmetil-benzoico como su sal HCl. Ésta se combinó con 3-(1H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilam¡na (0.050 g, 0.25 mmol), EDC (0.048 g, 0.25 mmol) y HOBt (0.032 g, 0.25 mmol), y la mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente en DMF (0.5 mi) durante 20 h. Se purificó la mezcla de la reacción por LC/MS preparativa, para dar N-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2- fluoro-3-pirrol¡din-1-ilmetil-benzamida (0.015 g, 15 %) como un sólido color café. (LC/MS: Rt 1.79, [M + H] + 405.13).
EJEMPLO 106 SÍNTESIS PE N-f3-MH-BENCIMIPAZOL-2-IL)-1H-PERAZOL-4-lLT-3- P1RR0LIDIN-1 -ILMETIL-BENZ AMIDA Se disolvió 3-(bromometil)benzoato de metilo (0.115 g, 0.5 mmol), pirrolidina (0.036 g, 0.5 mmol) y K2C03 (0.069 g, 0.5 mmol) en DMF (2.5 mi) y se agitó a reflujo durante 18 h. Luego se redujo la mezcla de la reacción al vacío y se sometió a cromatografía de columna, eluyendo con hexanoracetato de etilo (1:1) para dar el éster metílico de ácido 3-p i rrol i d in- 1 -ilmetil-benzoico, el cual se añadió a una solución de LiOH (0.014 g, 0.33 mmol) en THF:H20 1:1 (1 mi). La mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, se redujo al vacío y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno (x3). Se disolvió el sólido resultante en agua (1 mi), se acidificó con 2M de HCI (1 mi), se redujo al vacío y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno (x3) para dar un gel transparente, amarillo claro. Esto se combinó con 3-(1H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (0.050 g, 0.25 mmol), EDC (0.058 g, 0.30 mmol) y HOBt (0.041 g, 0.30 mmol), y la mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente en DMSO (0.75 mi) durante 64 h. Se purificó la mezcla de la reacción por LC/MS preparativa para dar la sal formato de N-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-iI]-3-pirrolidin-1-ilmet¡l-benzamida (0.018 g, 9 % en 3 pasos) como un sólido color ante. (LC/MS: Rt 1.86, [M + H] + 387.16).
EJEMPLOS 107-125 Procedimiento general D A una mezcla del ácido carboxílico relevante (1.2 equivalente), EDC (1.2 equivalente), HOAt (1.2 equivalente) en DIVISO (1 mi) se le añadió 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg). Se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 16 horas. Se purificó el producto mediante HPLC preparativa. Los siguientes compuestos se prepararon mediante el Procedimiento general D: Ejemplo COMPUESTO m/z [M+Hj+ 107 294, RT3.11min EJEMPLO 126 126A. Síntesis de éster tert-butílico de ácido {2-G3-1??-benc¡midazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamino)-carbámico.
Una mezcla de 3-(1 H-bencimidazol-2-iI)-1 H-pirazol-4-ilamina (250 mg, 1.3 mmol), ácido acético (108 ul, 1.9 mmol), triacetoxi borohidruro de sodio (401 mg, 1.9 mmol) y N-(2-oxoetil) carbamato de tert-butilo (301 mg, 1.9 mmol) en dimetil formamida (I0 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 4h. Se redujo la mezcla al vacío. Se particionó el residuo entre acetato de etilo y solución de hidróxido de sodio (2N). Se secó la porción orgánica (MgS04), se filtró y se redujo al vacío para dar 240 mg del compuesto titulado como un aceite incoloro (56%). (LC/MS: Rt 2.59, [ + H] + 343.19). 126B Síntesis de N*1*-3-(1 H-bencimidazol-2-¡n-1 H-pirazol-4-iH-etano-1 ,2-diamina disolvió éster tert-butílico de ácido {2-[3-(1H bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamino]-etil}-carbámico (240mg, 0.70 mmol) en una mezcla de ácido trifluoroacético (5ml) y diclorometano (5ml), y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se redujo el solvente al vacío. Se disolvió el residuo en una mezcla de metanol (10 mi) y tolueno (10 mi), y luego se redujo al vacío para dar 300 mg del compuesto titulado como una sal triflouoroacetato (91%). (LC/MS: Rt 1.86, [M + H] + 243.11). 126C. Síntesis de 1 -G3-? H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol- 4-¡n-imidazolidin-2-ona Una mezcla de N*-1 *-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol- 4-¡l]-etano-1 ,2- diamina (300mg, 0.64 mmol), trietilamina (535ul, 3.84 mmol) y ?,?'- carbonildiimidazol (156mg, 0.96 mmol) en diclorometano (I0 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se particionó la mezcla entre acetato de etilo y solución de hidróxido de sodio (2N). Se saturó la capa acuosa con cloruro de sodio y se lavó con acetato de etilo (x2). Se combinaron las porciones orgánicas, se secaron (MgS04), se filtraron y se redujeron al vacío. Se purificó ei residuo mediante LC/MS preparativa y luego de la evaporación del producto que contenía las fracciones, se obtuvo 8mg del compuesto titulado como un sólido blanco (5%). (LC/MS: Rt 1.86, [ + H] + 269.07).
EJEMPLO 127 SÍNTESIS DE r3-H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-»L1- PIRIDIN-2-IL-AMINA Una mezcla de 3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (150 mg, 0.75 mmol) y 2-fluoropiridina (0.26 mi, 3.0 mmol), se calentó en el microondas a 150 °C y 100 W durante 15 min. Se le añadió éter de petróleo se le añadió y se recolectó el sólido formado mediante filtración. La recristalización a partir de metano! produjo [3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-M]-piridin-2-il-amina (12 mg). (LC/MS: Rt 0.91, [M + H] + 277.00).
EJEMPLO 128 SÍNTESIS DE N-r3-(5.6-D METIL-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H- PIRAZOL-4-IU-4-METIL-BENZAM1DA 128A. Síntesis de ácido 4-(4-Metil-benzoilamino)-IH-pirazol-3- carboxílico Una mezcla de ácido p-toluico (272 mg), éster metílico de ácido 4-amino-1 H-pirazol-3-carboxílico (310 mg), EDC (460 mg) y HOBt (324 mg) en DMF (8 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. Se redujo la mezcla al vacío, se particionó entre EtOAc y NaHC03 acuoso saturado, y luego se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar éster metílico de ácido 4-(4- metil-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (486 mg).
U na mezcla de éster metílico de ácido 4-(4-metil-benzoilamino)- 1 H-pirazol-3-carboxílico (486 mg ) en 2 M de NaOH/MeOH acuoso (1 : 1 , 50 m i) se agitó a temperatura am biente durante 14 h . Se elimin aron los materiales volátiles al vacío , se añadió agua ( 1 00 mi) y se llevó la mezcla hasta un pH de 5 usando 2 d e HCI acuoso. Se recolectó el preci pitado resultante por filtración, y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno para prod ucir ácido 4-(4-met¡l-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido g ris (345 mg). (LC/MS: Rt 2.35, [ + H] + 246.09). 1 28B. Síntesis de N3-(5.6-Dimetil-1 H-bencimidazol-2-iD-1 H-pirazol-4-v1 -4-metil-benzamida Se preparó el compuesto de manera análoga al 2,6-dicloro-N-[3-(5- morfolin-4-¡lmetil-1 H-bencim¡dazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida, pero usando 4-(4-metil-benzoilam¡no)-1 H-pirazol-3-ácido carboxílico y 4, 5- dimetilbenceno- , 2-d iamina para dar N-[3-(5, 6-dimetil-1 H-bencimidazol-2-il)- 1 H-pirazol-4-il]-4-metil-benzamida (32 mg) como un sólido blanco. (LC/MS: Rt 3.42, [M + H] + 346.26).
EJEMPLO 129 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-f3-(5-METANOSULFONIL-1H- BENCIMIDAZOL-2-ID-1H- Pl RAZO L-4-IL1-BENZAM IDA Se le añadió Pd/C (10 %, 0.011 g) a una solución de 4-metoxisulfonil-2-nitroanilina (0.108 g, 0.5 mmol) en DMF (5 mi). La mezcla de la reacción se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 4 h. Se eliminaron los residuos del catalizador por filtrado a través de Celite y el filtrado se redujo al vacío, y luego se combinó con ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (0.112 g, 0.42 mmol), EDC (0.096 g, 0.50 mmol), y HOBt (0.068 g, 0.50 mmol) y DMF (4 mi). La mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 64 h, se redujo al vacío y el residuo se particionó entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 mi). Se aisló el precipitado blanco formado, mediante filtración, se lavó con agua (3 x 25 mi) y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno, para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético (3 mi) a la amida cruda, y se calentó la mezcla en un microondas (120 °C, 110 W, 40 min). Se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa para dar 2,6-difluoro-N-[3-(5-metanosulfonil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-p¡razol-4-il]-benzamida (0.016 g, 8% en 3 pasos) como un sólido incoloro. (LC/MS: Rt 2.61, [M + H] + 417.99).
EJEMPLO 130 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-3-r5-(2-PIPERIDIN-4-IL-ETOXn-1H- BENCIMIDAZOL-2- 1L1-1 H -Pl RAZO L-4-IL1-BENZAM IDA 130A. Síntesis de éster tert-butílico de ácido 4-G2-(3.4-dinitro-fenoxi)-etin-piperidin-1 -carboxílico Se añadió hidruro de sodio (60 % dispersión en aceite mineral, 0.096 g, 2.4 mmol) en varias porciones a una solución de N-Boc-4-piperidin-etanol (0.550 g, 2.4 mmol) en THF (20 mi). A esta mezcla se le añadió a solución de 3,4-dinitrofluorobenceno (0.372g, 2.0 mmol) y se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de la reacción se diluyó con acetato de etilo (100 mi), se lavó con agua (60 mi) y se extrajo la fase acuosa con acetato de etilo (3 x 50. mi). Se lavó la capa orgánica combinada con salmuera (50 mi), se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se sometió el residuo resultante a cromatografía de columna, eluyendo con un gradiente de 0-50% de acetato de etilo en éter de petróleo. Se obtuvo éster tert-butílico de ácido 4-[2-(3,4-dinitro- fenoxi)-etil]-piperidin-1 -carboxílico como un aceite amarillo (0.361 g, 46%). 130B. Síntesis de éster tert-butílico de ácido 4-G2-(3,4-diamino-fenoxH-etill-piperidin-l -carbo ílico Se disolvió éster tert-butílico de ácido 4-[2-(3,4-Dinitro-fenoxi)-etil]-piperidin-1-carboxílico (0.12 g, 0.3 mmol) en DMF (3 ml) bajo una atmósfera de nitrógeno. Se le añadió Pd/C (10 %, 0.012 g) y se agitó la mezcla de la reacción bajo una atmósfera de hidrógeno durante 24 h. Se diluyó la mezcla de la reacción con metanol (20 ml) y se eliminó el material insoluble mediante filtración. El filtrado se redujo al vacío para dar éster tert-butílico de ácido 4-[2-(3,4-diamino-fenoxi)-etil]-piperidin-1 -carboxílico como un aceite color café (0.101 g, 100%). (LC/MS: Rt 2.21, [ + H] + 336.16). 130C. Síntesis de 2.6-difluoro-N-f5-(2-piperidin-4-il-etoxi)-1 H-bencimidazol-2-¡n-1 H-pirazol-4-ill-benzamida Se disolvió éster tert-butílico de ácido 4-[2-(3,4-Diamino-fenoxi)-etil]-piperidin-1-carboxílico (0.101 g, 0.30 mmol), ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (0.080 g, 0.30 mmol), EDC (0.057 g, 0.30 mmol) y HOBt (0.040 g, 0.30 mmol) en D F (2 mi), y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y se particionó el residuo entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético (3 mi) a la amida cruda, y se calentó la mezcla en un microondas (120 °C, 110 W, 30 min) luego se redujo al vacío. Se observó una desprotección parcial in situ, y se purificó la amina desprotegida deseada, mediante LC/ S preparativa para dar la sal formato de 2,6-difluoro-N-{3-[5-(2-piperidin-4-il-etoxi)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida (0.017 g) como un aceite color café. (LC/MS: Rt 1.97, [M + H] + 467.05).
EJEMPLO 131 SÍNTESIS DE N-r3-(6-CLORO-4-HIDROXI ETIL-1 H-BENCIMIDAZOL- 2-ID- H-P1RAZOL- 4-IL1-2,6-DIFLUORO-BENZAMlDA 131A. Síntesis de éster 2-acetilamino-5-cloro- bencílico de ácido acético Se agitó alcohol 2-Amino-5-clorobencílico (3.0 g, 19 mmol) en anhídrido acético (150 mi) a temperatura ambiente durante 16 h. Se le añadió agua (50 mi) y se agitó la mezcla durante 16 h adicionales. La mezcla de la reacción se redujo al vacío, se secó mediante mezcla azeotrópica con tolueno (x2) y se le añadió anhídrido acético adicional (100 mi). Se agitó la suspensión resultante durante 16 h, luego se recolectaron los sólidos por filtración, para dar éster 2-acetilamino-5-cloro-bencílico de ácido acético como un sólido blanco (4.61 g). (LC/MS: Rt 2.46, [M-H]-240.10). 131B. Síntesis de éster 2-acetilamino-5-cloro-3-nitro-bencílico de ácido acético Se añadió nitrato de potasio (1.01 g, 10 mmol) a H2S04 concentrado (10 mi) a 0 °C. Esta mezcla se agitó a 0 °C durante 15 min, luego se le añadió éster 2-acetilamino-5-cloro-bencílico de ácido acético (1.92 g, 8 mmol) en pequeñas porciones durante 15 min. La mezcla de la reacción se agitó a 0 °C durante 1 h adicional, y luego se vació en hielo picado. Se recolectó el precipitado formado por filtración, para obtener una mezcla de isómeros, los cuales fueron separados mediante cromatografía de columna, eiuyendo con un gradiente de 0-60% de acetato de etilo en éter de petróleo para dar el éster 2-acetilamino-5-cloro-3-nitro-bencílico de ácido acético como un sólido amarillo (0.454 g, 20%). 1 31 C. Síntesis de (2-amino-5-cloro-3-nitro-fenin-metanol Se disolvió éster 2-aceti lamino-5-cloro-3-n itro-bencílico de ácido acético (0.454 g, 0.45 mmol) e hidróxido de sod io (0.436 g , 1 1 mmol) en metanol-agua (1 :3, 40 m i), y la solución resultante se calentó por reflujo durante 5 h . Después de enfriada, se llevó la mezcla hasta un pH de 6 mediante la adición de H CI concentrado. Se recolectó el precipitado formado mediante filtración , para dar (2-amino-5-cloro-3-nitro-fenil)-metanol como un sólido anaranjado oscuro (0.237 g , 73%) . (LC/MS: Rt 2.63, [M-H]'200.96). 131 D. S íntesis de (2,3-diam¡no-5-cloro-fenil)-metanol Se suspendió (2-Amino-5-cloro-3-nitro-fenil)-metanol (0.202 g , 1 mmol) en una mezcla de iso-propanol (5 mi), agua (2 mi), metanol (3 mi) y ácido acético (0.05 mi). Se le añadió níquel Raney (0.01 5 g, como una suspensión en agua) cuidadosamente bajo nitrógeno. La mezcla de la reacción se ag itó bajo una atmósfera de h idrógeno durante 4h , luego se diluyó con metanol-agua (1 : 1 , 50 mi) y se filtró para eliminar residuos del catalizador. Se eliminaron las sustancias volátiles al vacío, y se extrajo la capa acuosa restante con acetato de etilo (4 x 30 mi). Se lavaron las capas orgán icas combinadas con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar (2,3-diamino-5-cloro-fenil)-metanol como un sólido color naranja. (0.144 g, 84%). (LC/MS: Rt 0.85, [M + H] + 173.03). 131E. Síntesis de N-f3-(6-cloro-4-h¡drox¡metil-1 H-bencimidazol-2-el)-1 H- pirazol-4-iH-2.6-difluoro-benzamida Se disolvió (2,3-Diamino-5-cloro-fenil)-metanol (0.144 g, 0.84 mmol), ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (0.187 g, 0.70 mmol), EDC (0.161 g, 0.84 mmol) y HOBt (0.113 g, 0.84 mmol) en DMF (5 mi), y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y se particionó el residuo entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético (5 mi) a la amida cruda, y se calentó la mezcla por reflujo durante 4 h, luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04), y se redujo al vacío. Se recogió el sólido color naranja formado (0.185 g), en metanol (3 mi) y se le añadió NaO e (0.090 g, 1.6 mmol). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 4 h, luego se redujo al vacío y se particionó entre acetato de etilo (50 mi) y agua (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar un sólido color naranja, el icual se purificó mediante cromatografía de columna, eluyendo con un gradiente de 0-100% de acetato de etilo en éter de petróleo. Las fracciones que contenían el producto se redujeron al vacío, para dar N-[3-(6-cloro-4-hidroximetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2,6-difluoro-benzamida, como un sólido color naranja-café (0.061 g, 22%). (LC/MS: Rt 2.79, [M + H] + 403.98).
EJEMPLO 132 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-3-f5-(4-METIL-PIPERAZIN-1- SULFONlL H-BENCIMIDAZOL-2-IL1-1H-PIRAZOL-4-IL>- BENZAMIDA 132A. Síntesis de -(4-cloro-3-nitro-bencenosulfoniQ-4-metil-piperazina Se le añadió cloruro de 4-Cloro-3-nitro-bencenosulfoniIo (2.56 g, 10 mmol) en pequeñas porciones a una solución de N-metil piperazina (1.33 mi, 12 mmol) en DCM (25 mi) a 0 °C. A esta solución se le añadió trietilamina (2.08 mi, 15 mmol) por goteo. La mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre acetato de etilo y agua, y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. La purificación con cromatografía de columna, eluyendo con 0-20% de metanol en acetato de etilo, dio 1 -(4-cloro-3-nitro-bencenosulfonil)-4-metil-piperazina como un sólido color hueso (1.84 g, 58%). (LC/MS: Rt 1.84, [M + H] + 319.97). 132B. Síntesis de bencil-f4-(4-metil-piperazin-1 -sulfonil)-2-nitro-fenin-amina Se disolvió 1 -(4-Cloro-3-nitro-bencenosulfonil)-4-metil-piperazina (0.50 g, 1.57 mmol) y bencilamina (0.502 g, 4.70 mmol) en THF (10 ml), y se calentó por reflujo durante 3 h. La mezcla de la reacción luego se redujo al vacío y se particionó entre acetato de etilo y agua. Se lavaron las capas orgánicas con salmuera, se secaron (MgS04) y se redujeron al vacío, y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía de columna, eluyendo con 0-10% de metanol en acetato de etilo, para dar bencil-[4-(4- metil-piperazin-1-sulfonil)-2-nitro-fenil]-amina como un sólido amarillo (0.53 g, 86%). (LC/MS: Rt 2.21, [M + H] + 391.05). 132C. Síntesis de 4-(4-metil-piperazin-1-sulfonil !-benceno-1 2-diamina Se disolvió bencil-[4-(4-metil-piperazin-1 -sulfonil)-2-nitro-fenilj-amina (0.53 g, 1.35 mmol) en DMF (15 ml) y se añadió Pd/C (10 %, 0.05 g) bajo nitrógeno. Se agitó la mezcla de la reacción bajo una atmósfera de hidrógeno durante 16 h, luego se diluyó con acetato de etilo y se filtró a través de Celite. El filtrado se redujo al vacío para dar la N-1-bencil-4-(4-metil-piperaz¡n-1-sulfonil)-benceno- 1,2-diamina parcialmente reducida. Este material crudo se disolvió en etanol (15 mi), y se le añadió HCI (1 mi) concentrado, seguido por Pd/C (10 %, 0.05 g). Se agitó la mezcla de la reacción bajo una atmósfera de hidrógeno durante 16 h, se diluyó con acetato de etilo y se filtró a través de Celite, lavando con metanol. El filtrado se redujo al vacío y se secó mediante mezcla azeotrópica con tolueno. Se particionó el residuo entre acetato de etilo y solución saturada hidrogenada de carbonato de sodio. Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar 4-(4-metiI- piperazin-1 -sulfonil)-benceno-1 ,2-diamina como un sólido color hueso (0.114 g, 31%). (LC/MS: Rt 0.37, [M + H] + 271.02). 132D. Síntesis de 2.6-difluoro-N-{3-r5-(4-metil-piperazin- 1 -sulfonil)-1 H-bencimidazol-2-¡n-1 H-pirazol-4-il)-benzamida Se disolvió 4-(4-Metil-piperazin-1 -sulfonil)-benceno-1 ,2- diamina (0.083 g, 0.31 mmol), ácido 4-(2,6-difluoro-benzoilamino)- H-pirazol-3-carboxílico (0.069 g, 0.26 mmol), EDC (0.060 g, 0.31 mmol) y HOBt (0.041 g, 0.31 mmoi) en DMF (2 mi), y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y se particiono el residuo entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato de sodio (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético (3 mi) se le añadió a la amida cruda, y se calentó la mezcla en un microondas (120 "C, 110 W, 20 min) luego se redujo al vacío. Se particiono el residuo entre acetato de etilo (50 mi) y agua (50 mi). Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04), se redujo al vacío y se purificó mediante LC/MS preparativa para dar la sal formato de 2,6-difluoro-N-{3-[5-(4-metil-piperazin-1 -sulfonil)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida como un sólido blanco (0.031 g, 20%). (LC/MS: Rt 2.04, [M + H] + 502.06).
EJEMPLO 133 SÍNTESIS DE 2.6-DiFLUORO-N-l3-r5- PIPERIDIN-4-ILMETOXn-1H- BENCIMIDAZOL-2-IL1-1H-PIRAZOL-4-1L1-BENZAMIDA Se trató éster tert-butílico de ácido 4-{2-[4-(2,6-Difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-bencimidazol-5-iloximetil}-piperidin- -carboxílico (0.024 g, 0.043 mmol) (preparado de forma análoga al Ejemplo 130), con TFA:DCM (2 mi) 1:1 durante 20 min. Se redujo la solución al vacío, y se mezcló azeotrópicamente con tolueno (x3). La purificación mediante LC/MS preparativa produjo 2,6-difluoro-N-{3-[5-(piperidin-4-ilmetoxi)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-p¡razoI-4-il}-benzamida como un sólido blanco (8 mg, 41%). (LC/MS: Rt 1.99, [M + H] + 453.06).
EJEMPLO 134 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-3-r5-(1-METIL-PIPERIDlN-4- ILMETOXn-1H-BENCIMIDAZOL-2-ILl- H-PIRAZOL-4-lL}- BENZAMIDA 134A: Síntesis de éster etílico de ácido 1 -metil-piperidin-4-carboxílico Se añadió cloruro de tionilo (0.80 mi, 11 mmol) por goteo a una suspensión de la sal HCI de ácido 1 -metil-piperidin-4-carboxílico (1.80 g, 10 mmol) en etanol (25 mi). La mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se redujo al vacío por mezcla azeotrópica con tolueno (x3) para dar éster etílico de ácido 1-metil- piperidin-4-carboxílico como un sólido incoloro (1.7 g, 100 %).
(LC/MS: Ru 0.41, [M + H] + 172.08). 134B: Síntesis de (1 -Metil-piperidin-4-il)-metanol A una solución enfriada en hielo de éster etílico de ácido 1 -metil-piperidin-4-carboxíiico (0.855 g, 5 mmol) en THF (30 mi), se le añadió por goteo 1M de solución de LiAIH4 en THF (20 mi, 20 mmol). La mezcla de la reacción se agitó luego durante 18 h mientras se calentaba hasta temperatura ambiente, y luego se enfrió rápidamente con adición cuidadosa de agua (0.75 mi), NaOH acuoso al 10% (0.75 mi), luego agua (3 x 0.75 mi), y se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla resultante se redujo al vacío, se agitó con acetato de etilo y se filtró para eliminar los residuos inorgánicos. El filtrado se redujo al vacío para dar (1 -metil-piperidin-4-il)-metanol como un aceite incoloro (0.468 g, 73%). (LC/MS: Rt 0.33, [M + H] + 130.20). 134C: Síntesis de 2,6-difluoro-N-3-r5-(1 -metil-piperidin-4-¡Imetox0-1 H-bencimidazol-2-iH-1 H-pirazol-4-M-benzamida La síntesis de 2,6-difluoro-N-{3-[5-(1 -metil-piperidin-4-ilmetoxi)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida se llevó a cabo en una forma análoga al Ejemplo 130, usando (1-metil-piperidin-4-il)-metanol como el alcohol inicial para dar el compuesto titulado (1.0 mg). (LC/MS: Rt 1.99, [M + H] + 467.09).
EJEMPLO 135 SÍNTESIS DE ESTER METÍLICO DE ÁCIDO 2-r4-(2,6-DIFLUORO- BENZOILAMINO)-1H-PIRAZOL-3-IL1-6-ETOXI-1H-BENCIMIDAZOL-5- CARBOXÍLICO 135A. Síntesis de ácido 4.5-dinitro-2-etoxi-benzoico A una mezcla de nitrato de potasio (4.80 g, 47.4 mmol) en ácido sulfúrico concentrado (20 mL) se le añadió por porciones a 0°C, ácido 2-etoxi-4-nitrobenzoico (4.00 g, 19.0 mmol). Se agitó la mezcla a 0°C-temperatura ambiente durante 3 h, luego se vació en hielo (120 mL) y se agitó durante 1 hora adicional. Se recolectó el precipitado formado, mediante filtración, se lavó con agua, y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno para dar el compuesto titulado (4.28 g) como un sólido blanco. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 8.50 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 4.35 (q, 2H), 1.35 (t, 3H). 135B. Síntesis de éster metílico de ácido 4,5-dinitro-2-etoxi-benzoico Se añadió lentamente cloruro de tionilo (315 µ?, 4.30 mmol) a una mezcla de ácido 4,5-dinitro-2-etoxi-benzoico (1.00 g, 3.91 mmol) en metanol (10 mL) a temperatura ambiente. Se agitó la mezcla durante 16 h, luego se redujo al vacío por mezcla azeotrópica con tolueno. Luego se purificó el residuo mediante cromatografía de columna cuando P. E.-EtOAc (1: 0-1:1) para dar el compuesto titulado (606 mg) como un sólido blanco. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) µ 8.55 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.35 (q, 2H), 3.85 (s, 3H), 1.35 (t, 3H). 135C. Síntesis de éster metílico de ácido 4,5-diamino-2-etoxi-benzoico Una mezcla de éster metílico de ácido 4,5-dinitro-2-etoxi-benzoico (320 mg) y 10% Pd/C (40 mg) en MeOH (8 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno gaseoso durante 4 h a temperatura ambiente, se filtró a través de un tapón de Celite y se redujo al vacío para dar el compuesto titulado (234 mg) como una goma negra. 1H NMR (300 MHz, MeOD) d 7.30 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.00 (q, 2H), 3.80 (s, 3H), 1.35 (t, 3H). 135D. Síntesis de éster metílico de ácido 2-G4-(2.6- difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-iH-6-etoxi-1 H-bencimidazol-5- Una mezcla de ácido 4-(2 ,6-d ifluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3- carboxílico (254 mg, 0.95 mmol), éster metílico de ácido 4,5-diamino-2-etoxi-benzo¡co (234 mg, 1 .1 1 mmol), EDC (240 mg , 1 .25 mmol) y HOBt (169 mg, 1 .25 mmol) en DMF (10 ml_), se agitó a temperatura ambiente d urante 14 h. La mezcla de la reacción se redujo al vacío, y el residuo se particionó entre acetato de etilo y solución satu rada de bicarbonato de sodio. Se lavó la capa orgánica con salmuera , se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el producto intermedio amida. Se le añadió ácido acético ( 1 0 mL) a la amida cruda, y se calentó la mezcla por reflujo d urante 3 horas, se dejó enfriar hasta temperatura ambiente y luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre acetato de etilo y solución saturada de bicarbonato de sodio, y luego se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se le añadió ag ua al residuo, y se recolectó el sólido formado mediante filtración, y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno para dar el compuesto titulado (1 82 mg ) como un sólido color café.
(LC/MS: Rt 2.94, [M + H] + 442.02).
EJEMPLO 136 SÍNTESIS DE N-f3-r6-ETOXl-5-(MORFOLIN-4-CARBONlL)-1H- BENCIMIPAZOL-2-ILMH-PIRAZOL-4-IL}-2,6-DIFLUORO- BENZAMIDA 136A. Síntesis de ácido 2-f4-(2,6-difluoro-benzoilamino)- 1 H-pirazol-3-¡H-6-etox¡-1 H-bencimidazol-5-carboxílico Una mezcla de éster metílico de ácido 2-[4-(2,6-difIuoro- benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-6-etoxi-1 H-bencimidazol-5-carboxílico (90 mg) en MeOH y 2M de NaOH acuoso (1:1, 10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. El MeOH se eliminó al vacío, y se añadió agua (30 mL). Se llevó la mezcla hasta un pH = 3 usando 2M de HCI acuoso y luego se extrajo con EtOAc (x3). Los extractos orgánicos combinados se redujeron al vacío se'secaron por mezcla azeotrópica con tolueno para dar el compuesto titulado (72 mg) como un sólido gris. (LC/MS: Rt 2.70, [M + H] + 428.04). 136B. Síntesis de N- 3-f6-etoxi-5-(morfolin-4-carbonin-1 H-bencimidazol-2 H-pirazol-4-il}-2,6-difluoro-benzamida Una mezcla de ácido 2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-6-etoxi-1 H-bencimidazol-5-carboxílico (50 mg, 0.12 mmol), morfolina (13 p1, 0.14 mmol), EDC (29 mg, 0.15 mmol) y HOBt (21 mg, 0.15 mmol) en DMF (5 mL), se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. La mezcla de la reacción se redujo al vacío y el residuo se particionó entre acetato de etilo y solución saturada de bicarbonato de sodio. Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar el compuesto titulado (29 mg) como un sólido gris. (LC/MS: Rt 2.56, [M + H] + 497.03).
EJEMPLO 137 SÍNTESIS DE 2.6-DIFLUORO-N-r3-(5-PIPERAZIN-1-ILMETIL-1H- BENC1M1DAZOL-2-1D-1H- P1RAZOL-4-1L1-BENZAWHDA 137A. Síntesis de éster tert-butílico de ácido 4-{2-f4-(2.6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-in-1 H-bencimidazol-5-ilmetil)-piperazin-1 -carboxílíco A una mezcla de 2,6-difluoro-N-[3-(5-formil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (50 mg, 0.14 mmol) en THF anhidro (1.5 mL) en agitación a temperatura ambiente, se le añadió sucesivamente tamizados moleculares de 3 , éster tert-butílico de ácido piperazin-1 -carboxílico (52 mg, 0.28 mmol) y triacetoxi borohidruro de sodio (90 mg, 0.42 mmol). Se agitó la mezcla durante 4 h, se le añadió MeOH (3 mi), y luego se redujo la mezcla al vacío. Se recogió este residuo en EtOAc, se lavó con salmuera, se secó (MgS04), se redujo al vacío y luego se purificó mediante LC/MS preparativa, para dar el compuesto titulado (84 mg) como un aceite amarillo. (LC/MS: Rt 2.22, [M+H] + 538.15). 137B. Síntesis de 2.6-difluoro-N-r3-H-bencimidazol-2-in-1H H-pirazol-4-in-benzamida Una mezcla de éster tert-butílico de ácido 4-{2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-p irazol-3-il]- 1 H-bencimidazol-5-ilmetil}-piperazin-1-carboxíllco (84 mg), MeOH (3 mL) y HCI/EtOAc (3 mL), se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, y luego se redujo al vacío mediante mezcla azeotrópica con tolueno para dar el compuesto titulado (21 mg) como un sólido amarillo. (LC/MS: Rt 1.60, [M + H] + 438.09).
EJEMPLO 138 SÍNTESIS DE 2-FLUORO-6-METOXI-N-r3-(5-MORFOLIN-4-ILMETlL- 1H-BENCIMIDAZOL- 2-ID-1 H-PIRAZOL-4-IL1-BENZAMIDA 138A. Síntesis de éster etílico de ácido 4-Nitro-1H-pirazol-3-carboxílico Se le añadió cloruro de tionilo (3.8 mi, 52.5 mmol) cuidadosamente a una mezcla en agitación, enfriada con hielo, de ácido 4-nitropirazol-3-carboxílico (7.5 g, 47.7 mmol) en EtOH (150 mi), se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 hora, luego se calentó por reflujo durante 3 horas. La mezcla de la reacción se enfrió, se evaporó al vacío, luego se mezcló azeotrópicamente con tolueno para dar éster etílico de ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3- carboxíl ico (8.8 g ). 138B. S íntesis de éster etílico de ácido 1 -(4-metoxi-bencil)-4-n itro- 1 H -p ¡razo l-3-carboxíl ico A una solución de éster etílico de ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (8.8 g, 47.5 mmol) en MeCN ( 1 00 mi) se le añadió K2C03 (7.9 g , 57.0 mmol), seguido por cloruro de 4-metoxibencilo (7. 1 mi, 52.3 mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 20 horas. Se evaporó la mezcla al vacío, el residuo se particionó entre EtOAc y 2M ácido clorh ídrico acuoso, y se lavó la capa orgánica con carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado, se secó (MgS0 ) y se evaporó al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-hexano (1 :4)] para dar éster etílico de ácido 1 -(4-metoxi-bencil)-4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico ( 1 1 g) como una goma incolora. 1 38C. Síntesis de ácido 1 -(4-metoxi-bencil)-4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico Una mezcla de 1 -(4-metoxi-bencil)-4-n¡tro-1 H-pirazol-3-carboxílico éster etílico de ácido (15.9 g, 52 mmol) en 2 M de NaOH/MeOH acuosa (1:1, 400 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. Se eliminaron los materiales volátiles al vacío, se disolvió el residuo en EtOAc (200ml), se añadió agua (100 mi) y se llevó la mezcla hasta un pH de 3, usando 1M de HCI acuoso. Se separaron las capas, y se lavó la porción orgánica con carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado. Se le añadió EtOAc a la capa acuosa, la cual se acidificó hasta un pH de 3-4, y se secaron las porciones orgánicas combinadas ( gS04), y se redujo al vacío para dar ácido 1 -(4-metoxi-bencil)-4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (13 g, 86%) como un sólido blanco. (LC/MS: Rt 2.63, [ + H] + 292). 138D. Síntesis de 4-(3n4-dinitro-benzil)-morfolina A una solución de 3,4-dinitro-fenil)-morfol¡n-4-M-metanona (Ejemplo 94A) (4.5 g, 16 mmol) en THF anhidro (50 mi) a 0 °C, se le añadió borohidruro de sodio (1.2 g, 32 mmol) seguido por la adición por goteo de dietílesterato dé trifluoruro de boro (4 mi, 32 mmol) y se agitó la mezcla a 0 °C bajo una atmósfera de nitrógeno durante 2.5 h. Se añadió cuidadosamente MeOH seco, hasta que cesó la evolución de gas, y se redujo la mezcla al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y salmuera y se secó la parte orgánica (MgS04), y se redujo al vacío para dar un sólido amarillo-naranja, el cual se recristal izó a partir de MeOH para dar 4-(3,4-dinitro-bencil)-morfolina (3.5 g, 82%) como un sólido amarillo. (LC/MS: Rt 1.52, [M + H] 268). 138E. Síntesis de 4-morfolín-4-ilmetil-benceno- . 2-diamina A una mezcla de 4-(3, 4-din¡tro-bencil)-morfolina (2.5 g, 9.3 mmol), polvo de Fe (5.2 g, 93 mmol) y FeS04.7H20 (1.3 g, 4.6 mmol), se le añadió 1 ,4-dioxano:agua (5:1, 60ml). Se sometió a reflujo la mezcla durante 3 h, se filtró a través de Celite, se lavó con MeOH, y se redujo al vacío mediante mezcla azeotrópica con tolueno. Se le añadió EtOAc (100 mi) y se eliminó el material insoluble mediante filtración. El filtrado se redujo al vacío para dar 4-morfolin-4-ilmetil-benceno-1 ,2-diamina como un sólido color café oscuro (1.4 g, 73%). (LC/MS: Rt 0.40, sin ionización). 138F. Síntesis de 2~M-(4-metoxi-benciO-4-nitro-1 H-pirazol-3-in-5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol Una mezcla de 4-morfolin-4-ilmetil-benceno-1 ,2-diamina (2.5 g, 12 mmol), ácido 1-(4-metoxi-bencil)-4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (2.91 g, 10 mmol), EDC (2.3 g, 12 mmol) y HOBt (1.62 g, 12 mmol) DMF seco (40 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se redujo la mezcla al vacío, el residuo se particionó entre EtOAc (100 mi) y agua (50 mi) y se lavó la capa orgánica con carbonato de sodio acuoso hidrogenado, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. El residuo se disolvió en AcOH (70 mi) y se calentó por reflujo durante 3 h. Se eliminó el solvente al vacío y se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, MeOH: DCM (5: 95)] para dar 2-[l-(4-metoxi- bencil)-4-nitro-1 H-pirazol-3-il]-5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol (2 g, 37%) como una espuma amarilla. (LC/MS: Rt 1.91, [M + H] +449). 138G. Síntesis de 1 -(4-metoxi-bencil)-3-(5-morfolin-4~ ilmetil- H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-i lamina A una mezcla de 2-[1-(4-metoxi-bencil)-4-nitro-1 H-pirazol- 3-il]-5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol (1.6 g, 3.57 mmol), polvo de Fe (2 g, 35 mmol) y FeS04.7H20 (0.496 g, 1.78 mmol), se le añadió 1 ,4-dioxano:agua (5:1, 120 mi). Se sometió a reflujo la mezcla durante 3 h, se filtró a través de Celite, lavándola con MeOH, y se redujo al vacío mediante mezcla azeotrópica con tolueno. Se le añadió EtOAc (100 mi) y se eliminó el material insoluble por filtración. El filtrado se redujo al vacío para dar 1 -(4-metoxi-bencil)-3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-p i razol-4-i lamina como un sólido color café oscuro (1.4 g, 94%). (LC/MS: Rt 1.72, [M + H] + 419). 1 38 H . S íntesis de 2-fluoro-6-metoxi-N-r3-(5-morfoli n-4- il metil-1 H-bencimidazol-2-il )-1 H-pirazol-4-¡n-benzamida Se agitó una mezcla d e ácido 2-fluoro-6-metoxi-benzoico (20 mg , 0.1 2 mmol), 1 -(4-metoxi-bencil)-3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg , 0.12 mmol), EDC (1 16 mg , 0.14 mmol) y HOBt (81 mg , 0.14 mmol) a temperatura ambiente en DMF (2 mi) durante 20 h . Se redujo la mezcla al vacío y el residuo se particionó entre EtOAc (5 mi) y agua (2 mi) y se lavó la capa orgánica con carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado, se secó ( gS04) y se redujo al vacío . Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc] para dar 2- fluoro-6-metoxi-N-[l-(4-metoxi-bericil)-3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]- benzamida como un sólido blanco (80 mg , 61 %). Una mezcla de 2-fluoro-6-metoxi-N-[1 -(4-metoxi-bencil)-3- (5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (80 mg) y anisol (25 µ?) en ácido trifluoro acético (1 mi) se calentó a 140 °C (100W) durante 20 min en un sintetizador de microondas CEM Discover. La mezcla de la reacción se evaporó, y luego se mezcló azeotrópicamente con tolueno (2x10 mi). Se le añadió éter dietilico (5 mi) se le añadió al material crudo, para dar la sal trifluoroacetato de 2-fluoro-6-metoxi-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (30 mg, 32%) como un sólido blanco. (LC/MS: Rt 1.96, [M + H] +451).
EJEMPLO 139 SÍNTESIS DE N-r3-(5-MORFOLIN-4-lLMETIL-1H-BENCIMlDAZOL-2- I -1H-PIRAZOL-4-IL-2-TRIFLUOROMETOX1-BENZAMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 138F, pero usando 2- trifluorometoxi-ácido benzoico en lugar de ácido 2-fluoro-6-metoxi-benzoico y usando el procedimiento que se describe más adelante para la desprotección del sustituyente para-metoxi bencílico del anillo pirazol. Una mezcla de N-[1 -(4-metoxi-bencil)-3-(5-morfolin-4-il metí 1-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2-trifluorometoxi-benzamida (50 mg) y anisol (25 µ?) en ácido trifluoro acético (1 mi) se calentó a 140 °C (100 W) durante 20 min en un sintetizador por microondas CE Discover™. La mezcla de la reacción se evaporó, y luego se mezcló azeotrópicamente con tolueno (2x10 mi). Se le añadió EtOAc (5 mi) al material crudo, y se neutralizó la mezcla con carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado. Se lavó la porción orgánica con agua, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, CH2CI2-MeOH (100:0 - 95:5)] para dar N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-p ¡ razo I -4-i l]-2-trif lu oro metoxi-benza mida ( 2 mg) como un sólido blanco. (LC/MS: Rt 2.06, [M + H] +487).
EJEMPLO 140 SÍNTESIS DE r3-(5-MORFOLIN-4-ILMETlL-1H- BENCIMIDAZOL-2- 1D-1-H-PIRAZOL-4-1L1-AMIDA DE ÁCIDO BENZOrCTlSOXAZOL-3- CARBOXÍUCO 140A. Síntesis de 5-morfolin-4-ilmetil-2-(4-nitro-1 H-pirazo 1-3-11)1 H-bencimidazol Una mezcla de 4-morfol'in-4-'ilmetil-benceno-1 ,2-diamina (2.30 g, 11.1 mmol), ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (1.57 g, 10.0 mmol), EDC (2.13 g, 11.1 mmol) y HOBt (1.50 g, 11.1 mmol) en DMF seco (25 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se redujo la mezcla al vacío y se disolvió el residuo crudo en AcOH (40 mi) y se calentó por reflujo durante 3 h. Se eliminó el solvente al vacío y se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea, eluyendo con 0-20% MeOH en EtOAc para dar 5-morfolin-4-ilmetil-2-(4-nitro-1 H-pirazol-3-il)1 H-bencimidazol como un sólido amarillo. (1.0 g, 61%). (LC/MS: Rt 1.83, [M + H] + 329). 140B. Síntesis de 3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol- 2- V-1 H-pirazol-ilamina Se le añadió paladio sobre carbón (10%, 0.08 g) a una solución de 5-morfolin-4-ilmetil-2-(4-nitro-1 H-pirazol-3-il)1 H-bencimidazol (0.82 g, 2.5 mmol) en DMF (30 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno. Se agitó la mezcla bajo una atmósfera de hidrógeno durante 4 h, luego se filtró a través de Celite, lavando con metano!. El filtrado se concentró al vacío para dar 3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina como un sólido color café (530 mg, 71%). (LC/MS: Rt 1.94, [M + H] +299). 140C. Síntesis de f3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 -H-pirazol-4-in-amida de ácido benzorclisoxazol- 3- carboxílico Una mezcla de ácido benzo[c]isoxazol-3-carboxílico (46 mg, 0.28 mmol), 3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (100 mg, 0.33 mmol), EDC (64 mg, 0.33 mmol) y HOBt (45 mg, 0.33 mmol), se agitó a temperatura ambiente en DMF (2.5 mi) durante 20 h. Se redujo la mezcla al vacío y el residuo se particionó entre EtOAc (5 mi) y agua (2 mi), se lavó la porción orgánica con carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, EtOAc-MeOH (100:0-90:10)] para dar [3-(5-morfol¡n-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ii]-amida de ácido benzo[c]isoxazol-3-carboxílico como un sólido blanco (40 mg, 32%). (LC/ S: Rt 2.13, [M + H] +444).
EJEMPLO 141 SÍNTESIS DE N-r3-(4-BROMO-6-TRIFLUOROMETIL-1H- BENCIM1DAZOL-2-1 -1H-P1RAZOL-4-IU-2.6-DIFLUORO- BENZAMIDA Una mezcla de ácido 4-(2,6-difluorobenzoilamino)-1 H-pirazol-3- carboxílico (520 mg, 1.96 mmol) (Ejemplo 16D), 3-bromo-5-trifluorometil-1 ,2-bencenodiam'ma (500 mg, 1.96 mmol), EDC (413 mg, 2.15 mmol) y HOBt (290 mg, 2.15 mmol) en DMF (20 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, y luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y salmuera, y se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró y se evaporó. El producto intermedio amida se sometió a cromatografía usando EtOAc-P. E. (1:4-1: 0). El producto intermedio amida (271 mg), (LC/MS: Rt 3.31, [M + H] + 505), se disolvió en AcOH (3 mi), luego se calentó por reflujo durante 1 h. La mezcla de la reacción se dejó enfriar, a cuyo tiempo se produjo un sólido cristalizado, luego se filtró, se lavó con P. E. y se secó, para dar el compuesto titulado (50 mg). (LC/MS: Rt 3.42, [M + H] + 486, 488) EJEMPLO 142 SÍNTESIS DE N-(3-(5.6-DIMETOX»-1H-BENClMIDAZOL-2-IH-1H- PIRAZQL-4-IL1 -5- FLUORO-2-??????-????? ? D A 142A. Síntesis de 5,6-dimetoxi-2-nitro-1 H-pirazol-3-il)-1 H-bencimidazol A una solución de EDC (4.81 g, 25 mmol), HOBt (3.40 g, 25 mmol) y trietilamina (4.67 g, 46 mmol) en DMF (100 mi), se le añadió ácido 4-nitro-1 H-pirazol- 3-carboxílico (3.63 g, 23.09 mmol) y 4,5-dimetoxi-benceno-1 ,2-diamina, diclorhidrato (5.06 g, 20.99 mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Se eliminó el solvente al vacío y se particionó el sólido resultante entre acetato de etilo (50 mi) y bicarbonato de sodio (50 mi). Se formó un precipitado y se eliminó por filtración. Éste se lavó con agua seguida por éter dietílico, y luego se mezcló azeotrópicamente con metanol y tolueno para producir (2-amino-4, 5-dimetoxi-fenil)-amida de ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (2.35 g, 36%). Se disolvió (2-amlno-4,5-dimetoxi-fenil)-amida de ácido 4-Nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (2.35 g, 7.65 mmol) en ácido acético (150 mi) y se sometió a reflujo a 140 °C durante 5 horas. Se dejó enfriar la solución y se eliminó el solvente al vacío. El sólido resultante se particionó entre acetato de etilo (25'ml) y salmuera (25 mi). La capa orgánica se separó, se secó (MgS0 ), se filtró y se eliminó el solvente al vacío, para producir 5,6-dimetoxi-2-(4-nitro-1 H-pirazol-3-il)-1H-bencimidazol (2.08 g, 94%). 142B. Síntesis de 3-(5.6-dimetoxi-1H-bencimidazol-2-ih- 1 H-pirazol-4-ilamina Una mezcla de 5,6-d¡metoxi-2-(4-n¡tro-1 H-pirazol-3-il)-1 H-bencimidazol (2.08 g, 7.2 mmol) y 10% de paladio sobre carbón (200 mg) en etanol (150 mi) y DMF (50 mi), se hidrogenó a temperatura y presión ambientales durante la noche. Se filtró la mezcla de la reacción a través de Celite y se eliminó el solvente al vacio. El sólido resultante se mezcló azeotrópicamente con metanol y tolueno y se eliminó el solvente al vacío. Se colocó el material crudo en una columna en DCM, metanol, ácido acético, agua (120:18:3:2) [DMAW120] seguida por diclorometano 90ml, metanol 18ml, ácido acético 3ml, agua 2ml (90:18:3:2) (DMAW90). Se combinaron las fracciones del producto, y se eliminó el solvente al vacío para producir 3-(5,6-dimetoxi-1 H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (~1 g,~53%). 142C. Síntesis de N-f3-(5,6-dimetox¡-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-in-5-fluoro-2-metoxi-benzamida A una solución de EDC (44 mg, 0.23 mmol) y HOBt (31 mg, 0.23 mmol) en DMF (5 ml) se le añadió 3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-M)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.19 mmol) y ácido 5-fluoro-2-metoxi-benzoico (36 mg, 0.21 mmol), y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Se eliminó el solvente al vacio y se particionó el sólido resultante entre DCM (20 ml) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (20 ml). Se formó un precipitado que se eliminó mediante filtración, y se secó al horno, para producir N-[3-(5,6-dimetox¡-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-¡l]-5-fluoro-2-metoxi-benzamida (64 mg, 81%). (LC/MS: t 2.64, [M + H] + 412).
EJEMPLO 143 SÍNTESIS DE 1-(2.6-DIFLUORO-FENIL)-3-r3-(5.e-DIMETOXI-1H- BENClMIDAZOL-2-!L)- 1 H-PlRAZOL-4-ILL-UREA Una mezcla de 3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.19 mmol), 2,4 difluorofenil isocianato (31.4 mg, 0.20 mmol) y Et3N (0.027 ml,) se suspendió en una mezcla de DMF y EtOH (5 ml), se agitó a 70 °C durante 1 h y luego se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para dar 1-(2,6-difluoro-fen¡l)-3-[3-(5,6-d¡metoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-urea como un sólido blanco (1 mg) (LC/MS: Rt 2.10, [ + H] + 415).
EJEMPLO 144 SÍNTESIS DE 4-AMfNO-N-r3-(5,6-DIMETOXI-1H-BENCIMIDAZOL-2- ID-1 H-PIRAZOL-4-IL1-2-ETOXI-BENZAMIDA Una mezcla de 4-nitro-N-[3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2-etoxi-benzamida (115 mg) y 10% Pd/C (20 mg) en EtOH (10 mL), se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 2 h a temperatura ambiente. Se filtró la mezcla a través de Celite y se redujo al vacío para dar el compuesto titulado (95 mg). (LC/MS: Rt 2.11, [M + H] + 423).
EJEMPLOS 145-239 Siguiendo los procedimientos descritos en los ejemplos precedentes, modificándolos cuando fue necesario, se prepararon los compuestos indicados en la Tabla 3. En la columna titulada "método", se indica el procedimiento general usado con referencia a un ejemplo o procedimiento anterior. En la columna titulada "diferencias", se indican las diferencias clave entre el procedimiento general descrito en el ejemplo referido y el procedimiento específico usado para preparar el compuesto en cuestión.
TABLA 3 PREPARACIÓN DEL MATERIAL INICIAL PARA EL EJEMPLO 216: ÁCIDO 2-METOXl-5-(4-METIL-PIPERAZIN-1-SULFONIL)-BENZOICO A una solución de ácido 5-clorosulfonil-2-metoxi-benzoico (0.5g, 1.99mmol) en acetona (5 ml) se le añadió N-metilpiperazina (0.219g, 2.19 mmol) y trietilamina (0.33ml, 2.3mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Después de 2 horas, se filtró la mezcla de la reacción, y se lavó el sólido recolectado con acetona, agua y luego éter dietílico, para producir ácido 2-metoxi-5-(4-metil-piperazin-1 -sulfonil)-benzoico (150mg, 24%). (LC/MS (método ácido): Rt 0.34, [ + H] + 315).
EJEMPLO 270 SÍNTESIS DE 1-(2,6-DIFLUOROFENIL)-N-r3-(5-MORFOLIN-4- ILMETIL-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-IL1-UREA Una mezcla de 3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-benc¡midazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.16 mmol), isocianato de 2,4-difluorofenilo (26 mg, 0.16 mmol) y Et3N (0.024 ml) se suspendió en una mezcla de tolueno (2ml) y IPA (1 ml), se agitó a 80 °C durante 1 h, y luego se diluyó con EtOAc. La mezcla de la reacción se lavó con agua, luego con salmuera, se secó la capa orgánica (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, CH2CI2-MeOH (90:10)] para dar 1-(2,6- Difluo rof en il)-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H- pirazol-4-il]-urea (AT7787) como un sólido incoloro (30 mg, 39%). (LC/MS (método ácido): Rt 1.80, [M + H] + 454).
EJEMPLOS 271-278 Siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 270, se prepararon los compuestos indicados en la Tabla 4.
TABLA 4 EJEMPLO 279 SÍNTESIS DE N-r3-(5,6-DIMETQXI-1H-BENCHVHDAZOL-2-IL)-1H- PIRAZOL-4-IL1-TRANS-1.4-AMINOCICLOHEXANOCARBOXAMIDA 279A: Síntesis de N-f3-(5.6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ill-N-BOC-trans-1 , 4-a m i nocí clohexa noca rboxa mida A una suspensión de ácido BOC-trans-1 ,4-carboxílico-sal de cesio (95 mg, 0.25 mmol) en THF (2 mi) se le añadió DMF (1.9 µ?, 0.025 mmol) seguido por cloruro de oxalilo (30 µ?, 0.3 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 min. se evaporó la mezcla hasta secar y se re-suspendió en THF (2 mi). Luego se añadió una solución de 3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.17 mmol) y düsopropiletilamina (62 1, 0.5 mmol) en THF (1 mi), y se agitó la mezcla de la reacción a temperatura ambiente durante 1 h. Después de 1 h, se le añadió MeOH (1 mi) y se particionó la mezcla entre cloroformo y carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [S¡02, EtOAc] para dar N-[3-(5,6-dimetoxi-1 H- bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-N]-N-BOC-trans-1 ,4-aminociclohexan-carboxamida como un sólido blanco (45 mg, 55%). (LC/MS (método básico): Rt 2.79 min, [M + H] + 485). 279B: Síntesis de N-r3-(5,6-dimstox¡-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-iH-trans-1.4-aminociclohexan-carboxamida Se disolvió N-[3-(5,6-dimetox¡-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-N-BOC-trans-1 ,4-aminociclohexano carboxamida (45 mg, 0.093 mmol) y anisol (40 µ?, 0.28 mmol) se disolvió en una mezcla de ácido trifluoroacético y diclorometano (1:2 ; 3 mi). Después de 3 h a temperatura ambiente, se evaporó la mezcla hasta secar, para dar N-[3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-trans-1 ,4 aminociclohexanocarboxamida (AT8241) como un sólido blanco (49 mg). (LC/MS (método básico): Rt 2.03 min, [M + H] + 385).
EJEMPLO 280 r3-(5.6-DIMETOXI-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-ILl AMIDA DE ÁCIDO PIRROLIDI N-2-C ARBOXÍLICO Siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 279 se obtuvo el compuesto titulado. [M + H]+ 357 Rt 2.23 (método básico).
EJEMPLO 281 SÍNTESIS DE N-r3-(5.6-DIMETOXI-1H-BENCIMIDAZOL-2-lU-1H- PlRAZOL-4-lLT-flAC-4- BE CIL-2-MORFOLI -CARBOXAMIDA A una suspensión de clorhidrato de ácido rac-4-bencil-2-morfolin-carboxílico (77 mg, 0.30 mmol) en THF (2 mi) se le añadió D F (2.0 µ?_, 0.025 mmol), seguido por cloruro de oxalilo (36 ul, 0.41 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 min., se evaporó la mezcla hasta secar, y luego se re-suspendió en THF (2 mi). Luego se le añadió una solución de 3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1H-pirazol-4-ilamina (60 mg, 0.2 mmol) y diisopropiletilamina (110µ?, 0.9 mmol) en THF (1 mi), y se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 1 h. Después de 1 h, se le añadió MeOH (1 mL) se concentró la mezcla y se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa para dar N-[3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-M]-rac-4-bencil-2-morfolin- carboxamida (AT8769) como un sólido blanco (10 mg, 9%). (LC/MS (método básico): Rt 2.86 min, [ +H] +463).
EJEMPLO 282 SÍNTESIS DE N-F3-(5.6-DI ETOXI-1 H-BENCIMIDAZOL-2-ÍD-1 H- PIRAZOL-4-l -N-METlL-D-FENlLGLIClN AMIDA Se preparó el compuesto de manera análoga al N-[3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-5-fluoro-2-metoxi-benzamida (Ejemplo 142C), pero usando N-BOC-N-metil-D-fenilglicina en lugar de 5-fluoro-2- metoxi-ácido benzoico y HOAt en lugar de HOBt. La mezcla de la reacción cruda se particionó entre EtOAc y H20. Se lavó la capa de EtOAc con carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado, salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa, en lugar de cromatografía instantánea, para dar N-[3-(5,6-dimetoxi-IH-bencimidazol-2-il)-IH-pirazol-4-il]-N-BOC-N-metil-D-fenilglicinamida (10 mg, 10%) como un sólido blanco. (LC/MS (básico): Rt 3.07 min, [M+H] + 507).
Se realizó la desprotección de forma análoga al ejemplo 279B, para dar N-[3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-iI]-N-metil-D-fenilglicina (AT8768) como un sólido blanco (10 mg). (LC/MS (método básico): Rt 2.54 min, [M + H] +407).
EJEMPLO 283 SÍNTESIS DE 4-MORFOLlNIL-N-r3-(5-MORFOLlN-4-ILMETIL-1H- BENCIMIDAZOL-2-I -1-H-PIRAZOL-4-IL1-UREA Una mezcla de 3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (70 mg, 0.23 mmol), cloruro de morfolin-4-carbonilo (80 µ?_, 0.7 mmol) y diisopropiletilamina (170 µ?, 0.92 mmol) en THF (2 mi) se agitó a 0 °C y luego se dejó calentar a temperatura ambiente durante 16 h. Se enfrió la reacción mediante la adición de NH3 acuoso concentrado, luego se concentró al vacío. Se purificó el residuo mediante LC/MS preparativa para dar 4-morfolinil-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 -H-pirazol-4-il]-urea como un sólido blanco (35 mg). (LC/MS (método básico): Rt 2.28 min, [M-H+]-415).
EJEMPLO 284 SÍNTESIS DE 2.6-PIFLUORO-N-f3- 4-OXO-1.4.5.6.7.8-HEXAHIDRO- 1,3,5-TRIAZA-AZULEN-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-lL1-BENZAMIDA 284A. Síntesis de éster tert-butílico de ácido i7-etoxi-4.6- dioxo-5-(trifenil-lamda*5*-fosfaniliden)-hept¡ncarbámico Una solución de (etoxicarbonilmetilen)trifenilfosforano (5.2 g, 14.91 mmoles), ácido 4-tert-butoxicarbonilamino-butírico (3.3 g, 16.26 mmoles), EDC (3.4 g, 17.89 mmoles) y DMAP (0.182 g, 1.49 mmoles) en diclorometano, se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. La mezcla de la reacción se particionó entre EtOAc y agua. Se secó la porción orgánica (MgS0 ), se filtró y se evaporó al vacío. Se purificó el residuo [Biotage SP4.40M, tasa de flujo 40ml/min, gradiente 3:2 EtOAc/Gasolina con respecto a EtOAc] para dar éster tert-butílico de ácido [7-etoxi-4,6-dioxo-5-(trifenil-lamda*5*- fosfaniliden)-heptil]carbám"ico como un sólido color café claro (4.7g, 59%). 284B. Síntesis de éster tert-butílico de ácido (7-etoxi- 4,5,6-trioxo-heptil)-carbámico BOONH C02Et O A una solución de éster tert-butílico de ácido [7-etox¡-4,6-dioxo-5-(trifenil-lamda*5*-fosfaniliden)-heptll]carbám¡co (4.7g, 8.82 mmoles) en THF (75ml) y agua (20ml) se le añadió Oxone™ (6.5g, 10.58 mmoles). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de la reacción se particionó entre EtOAc y agua. Se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró y se evaporó al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [sílice, EtOAcrgasolina (1:2)] para dar éster tert-butílico de ácido (7-etoxi-4,5,6-trioxo-heptil)-carbámico como un aceite incoloro (1.7g,67%). 284C. Síntesis de éster metílico de ácido 5-(3-tert-butoxicarbonilamino-propiO-2-f4-(2.6-d¡fluoro-benzoilamino-1- (tetrahidro-piran-2-il)-1 H-pirazol-3-??-? H-imidazol-4-carboxílico Una solución de éster tert-butílico de ácido (7-etoxi-4, 5,6-trioxo-heptil)-carbámico (1.7g, 5.92 mmoles) y 2,6-difluoro-N-[3-formi 1-1 -(tetra h id ro-piran-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (0.99g, 2.96 mmoles) en amoniaco (2N, 20ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el solvente al vacío. Se purificó el residuo [Biotage SP4.40M, tasa de flujo 40ml/min, gradiente 1:4 EtOAc/Gasolina con respecto a 4:1 EtOAc/Gasolina] para dar éster metílico de ácido 5-(3-tert-butoxicarbonilamino-propil)-2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino-1 - (tetra hidro-piran-2-il)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-imidazoi-4-carboxílico, como un sólido amarillo claro (320mg, 18%). (LC/MS: Rt 3.36, [M + H] + 589.16). 284D. Síntesis de ácido 5-(tert-butoxicarbonilamino-propil)-2-r4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1-(tetrahidro-piran-2-iO-1 H-p ¡razo l-3-i 11-1 H-imidazol-4-carboxílico A una solución de éster metílico de ácido 5-(3-tert-butoxicarbonilamino-propil)-2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 - (tetrahidro-p¡ran-2-il)-1 H- irazol-3-il]-1 H-i mida zol-4-carboxíl ico (320 mg, 0.544 mmoles) en metanol (10ml) se le añadió una solución de NaOH (2N, 10 mi). La mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Se eliminó el metanol al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y una solución de ácido cítrico al 5. Se secó la porción orgánica ( gS04), se filtró y se evaporó al vacío para dar ácido 5-(tert- butoxicarbonilamino-propil)-2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1 - (tetrahidro-plran-2-il)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-imidazol-4-carboxílico como un sólido amarillo claro (300 mg, 96%). (LC/MS: Rt 3.03 [M + H] + 575.17). 284E. Síntesis de ácido 5-(3-amino-propil)-2-f4-(2.6-difluoro-benzoilamino-1 H-pirazol-3-il1-1 H-imidazol carboxílico Una solución de ácido 5-(tert-butoxicarbonilamino-propil)-2-[4-(2,6-difluoro-benzoilamino)-1-(tetrahidro-piran-2-il)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-imidazol-4-carboxílico (300 mg, 0.52 mmoles) y anisol (114 µ?, 1.04 mmoles) en TFA (3ml) se calentó a 100°C (80W) en un sintetizador por microondas CEM Discover durante 10 minutos.
Se le añadió tolueno ( 1 0ml) y se elim inó el solvente al vacío, para dar ácido 5-(3-ami no-propil)-2-[4-(2,6-d ifluoro-benzoilamino)- 1 H-pirazol-3-i l]-1 H-imidazol carboxílico como u n sólido color amarillo/café (200mg , 99%). (LC/MS: Rt 1 .58, {M + H] + 391 .00). 284F. S íntesis de 2.6-difluoro-N-r3-(4-oxo- 1 .4.5.6.7.8-hexahidro-1 ,3.5-triaza-azu len-2-il)-1 H-pirazol-4-in-benzamida A una solución agitada de ácido 5-(3-amino-propil)-2-[4- (2,6-difluoro-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-il]-1 H-imidazol carboxílico (200 mg , 0.51 mmoles) en DMF (10ml) y diclorometano (I0 mi) se le añadió EDC (1 1 8mg , 0.62 mmoles), HOBt (84 mg, 0.62 mmoles) y N EM (260 µ?, 2.04 mmoles). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas y l uego se particionó entre EtOAc y agua. Se secó la porción orgánica (MgS04), se filtró y se evaporó al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [sílice, 3% MeOH en DCM para 5% a 1 0%], para dar 2,6-d ifluoro-N-[3-(4-oxo-1 ,4,5,6,7,8-hexahidro-1 ,3,5-triaza-azuIen-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida como un sólido amarillo claro (1 0 mg, 13%). (LC/MS: Rt 1.93, [M + H] + 372.99).
EJEMPLO 285 SÍNTESIS DE 2-AMlNO-N-r3-(5-MORFOLIN-4-lL-METIL-1 H- BENCIMIDAZOL-2-IL-)-1H-PIRAZOL-4-ILl-2-FENIL-ACETAMIDA Se disolvió éster tert-butílico de ácido {[3-(5-Morfolin-4-¡l-metil- H-bencimidazol-2-il)-1 H-p¡razol-4-il-carbamoil]-fenil-metil}-carbámico (Ejemplo 232) (30mg) en 4M de HCI/dioxano, y 3ml de metanol, y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se eliminó el solvente al vacío, y se trituró el residuo con éter dietílico para dar 2-amino-N-[3-(5-morfolin-4-il-metil-1 H- bencimidazol-2-il-)-1 H-pirazol-4-il]-2-fenil-acetamida (AT8162) como un sólido blanco (20mg, 83%). (LC/MS (método ácido): Rt 2.39 min, [M + H] +432).
EJEMPLOS 286-287 Siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 285, se prepararon los compuestos indicados en la Tabla 5.
TABLA 5 EJEMPLO 288 SÍNTESIS DE N-r3-(1H-BENCIMIDAZOL-2-IL -1H-PIRAZOL-4-IL1-5- TERT-BUTIL-2- METOXI-BENZAMIDA 288A: Síntesis de éster metílico de ácido 4-nitro-1H pirazol-3-carboxílico Se preparó el compuesto de manera análoga al éster etílico de ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (Ejemplo 16A), usando ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (100 g, 636 mmol), cloruro de tionilo (55.5 mi, 764 mi) y MeOH (750ml), en lugar de EtOH. Se obtuvo éster metílico de ácido 4-Nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido color hueso (109g, 100%). (LC/MS (método ácido): Rt 1.82 min, [M + H] + 172). 288B: Síntesis de éster metílico de ácido 4-amino-1H-pirazol-3-carboxílico Una mezcla de éster metílico de ácido 4-nitro-1 H-pirazol-3-carboxílico (10 g, 58 mmol) y 10% de paladio sobre carbón (500mg) en etanol (150ml) y DMF (30ml) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante la noche. Se filtró la mezcla de la reacción a través de Celite, se redujo al vacío y se secó por mezcla azeotrópica con tolueno y metanol, para producir éster metílico de ácido 4-amino-1 H-pirazol-3-carboxílico como un alquitrán ámbar oscuro (9.35g). (LC/MS (ácido): Rt 0.39 min, [M + H] + 142). 288C: Síntesis de éster metílico de ácido 4-(5-tert-butil-2-metoxi-benzoilamino)-1 H-pirazol-3- carboxílico A una solución de EDC (11.59 g, 60.7 mmol), HOBt (8.19 g, 60.7 mmol) y éster metílico de ácido 4-amino-1 H-pirazol-S-carboxílico (7.84 g , 55.6 mmol) en DM F ( 1 00ml) se le añadió ácido 5-tert-butil-2-metoxi-benzoico ( 1 0.52g , 50.6mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Se redujo la mezcla al vacío y el resid uo se particionó entre EtOAc (500ml) y salmuera (200ml), se lavó la porción orgán ica con carbonato d e sodio acuoso hid rogenado saturado (200ml), se secó (MgS04) y se redujo al vacío para producir éster metílico de ácido 4-(5-tert-butil-2-metoxi-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido amarillo claro ( 1 7.07 g , 93 %). (LC/MS (método ácido): Rt 3.1 2 min , [M + H] + 332). 288D: Síntesis de ácido 4-(5-tert-butil-2-metox¡-benzoi lamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 1 6D, pero usando éster metílico de ácido 4-(5-tert-butil-2-metox¡-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico ( 1 7.068g) como material inicial. Se obtuvo ácido 4-(5-tert-butil-2-metoxi-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido color café (~15.6g , 95%). (LC/MS (método ácido): Rt 2.79 min, [M + H] + 31 8). 288E: Síntesis de (2-amino-feniD-am ida de ácido 4-(5-tert-butil-2-metoxi-benzoilamino)-1 H-p ¡razo l-3-carboxíl ico A una solución de EDC (720mg, 3.8mmol), HOBt (510mg, 3.8mmol) y ácido 4-(5-tert-butil-2-metoxi-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (1 g, 3.16 mmol) en DMF (25ml), se le añadió benceno-1, 2-diamina (375 mg, 3.5mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas. Se redujo la mezcla al vacío y el residuo se particionó entre EtOAc (50 mi) y salmuera (2x50ml). Se eliminó el precipitado no disuelto mediante filtración, se lavaron las porciones orgánicas con carbonato de sodio acuoso hidrogenado saturado (50ml), se secó (MgS04) y se redujo al vacío, para producir (2-amino-fenil)-amida de ácido 4-(5-tert-butil-2-metoxi-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como un polvo amarillo claro (848 mg, 66%). (LC/MS (método ácido): Rt 3.21 min, [M + H] + 408). 288F: Síntesis de ?-G3-? H-bencimidazol-2-il)-1 H-pírazol- 4-ill-5-tert-butil-2-metoxi-benzamida Se disolvió (2- amino-fenil)-amida de ácido 4-(5-tert-Butil-2-metoxi-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (848 mg, 2.08 mmol) en ácido acético (150ml) y se sometió a reflujo a 140 "C durante 3 horas. Se dejó enfriar la solución, se eliminó el solvente al vacío y se secó el sólido resultante por mezcla azeotrópica con metanol y tolueno. Se purificó el producto crudo mediante cromatografía de columna [Si02, EtOAc/gasolina (2:1)] para dar N-[3-(1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-¡l]-5-tert-butil-2-metoxi-benzamida (500 mg, rendimiento 62%) como un polvo amarillo claro. (LC/MS: Rt 3.44, [M + H] + 390, método ácido.
EJEMPLO 289 SÍNTESIS DE 4-(2-CLORO-5-(METILTIO)-N-r3-(5-MORFOLIN-4- ILMETIL-1H-BENCIMIDAZOL-2-ÍL)-1H-PIRAZOL-4-»LT-BENZAMIDA 289A: Síntesis de éster metílico de ácido 4-(2-cloro-5-(metiltio)-benzoilamino)-IH-p¡razol-3-carboxílico El compuesto titulado se preparó de manera análoga al Ejemplo 288C, pero usando ácido 2-cloro-5-(metiltio) benzoico (15.34 g, 72.7 mmol) en lugar de ácido 5-tert-butil-2-metoxi-benzoico. Se obtuvo el producto como un sólido pardo que contenía éster metílico de ácido 4-(2-cloro-5-(metiltio)-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como componente principal (25 g). (LC/MS (método ácido): Rt 2.78, [M+H] + 325.94). 289B: Síntesis de ácido 4-(2-cloro-5-(metiltio)- benzoi lami no)- 1 H-pirazol-3-carboxílico Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 16D, pero usando éster metílico de ácido 4-(2-cloro-5-(metiltio)-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (11.8 g) como el éster inicial. Esto produjo ácido 4-(2-cloro-5-(metiltio)-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico como un sólido pardo (5.82 g). (LC/MS (método ácido): Rt 2.46, [M + H] + 311.99). 289C: Síntesis de 4-(2-cloro-5-(metilt¡o)-N3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H- bencim¡dazol-2-il)-1 H-pi razo l-4-i II -benza mida Una mezcla de ácido 4-(2-c!oro-5-(metiltio)-benzoilamino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (2 g, 6.43 mmol), 4-morfolin-4-ilmetil-benceno-1 ,2-diamina (1.33 g,6.43 mmol) (Ejemplo 138C), EDC (1.36 g, 7.07 mmol) y HOBt (0.96 g, 7.07 mmol) en DMF (20 mi), se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se redujo el residuo al vacío y luego se particionó entre solución de NaHC03 saturada (150 mi) y EtOAc (3x150 mi). Se secaron las capas orgánicas combinadas (Na2S04), se filtraron y se evaporaron al vacío, para dar un aceite crudo. Éste se purificó por cromatografía instantánea [Si02; eluyendo con CH2CI2:MeOH (100:0 - 95:5)] para producir el producto como un sólido pardo (1.23g). (LC/MS (método ácido): Rt 2.10, [M + H] + 501.09). Una mezcla de este producto (1.23 g, 2.46 mmol) en AcOH glacial (20 mi), se calentó a 120 °C durante 1.5 h. Se redujo la mezcla al vacío y se particionó entre solución de NaHC03 saturada (150 mi) y EtOAc (2x150 mi). Se secaron las capas orgánicas combinadas (Na2S04), se filtró y se evaporó al vacío para dar un aceite crudo. Éste se purificó por cromatografía instantánea [Si02 ; eluyendo con CH2Ci2:MeOH (100:0 - 95:5)] para producir 4-(2-cloro-5-(metiltio)-N-[3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-benzamida (AT8608) como un sólido pardo (0.9 g, 29%). (LC/MS (método ácido): Rt 2.14, [M + H] + 483.13). 1 EJEMPLO 290 SÍNTESIS DE ESTER 4-FLUORO-FENÍLICO DE ÁCIDO G3-(5-MORFOLIN-4-ILMETIL-1H-BENCIIVHDAZOL-2-lL -1H-PIRAZOL-4-ILL- CARBÁMICO Üna mezcla de 3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-ilamina (50 mg, 0.16 mmol) y piridina (0.02ml, 0.24mmol) se disolvió en una mezcla de CH2CI2 (1 mi) y THF (1 mi), se agitó a 0 °C y luego se trató con 4-fluorofenilcloroformato (30.7mg, 0.168 mmol). La mezcla de la reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó, y luego se diluyó con CH2CI2- Se lavó la fracción de CH2CI2 con solución saturada de bicarbonato, salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna instantánea [Si02, CH2CI2- eOH (90:10)] para dar éster 4-fluorofenílico de ácido [3-(5-morfolin-4-ilmetil-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-carbámico (AT8428) como un sólido incoloro (5 mg, 7%). (LC/MS (método ácido): Rt 2.08, [M+H] + 437).
EJEMPLO 291 SÍNTESIS DE N-r3- 6-CLORO-1H-IMIDAZOr4.5-CTPIRIDIN-2-IL)-1H- P I RAZO L-4-IL-2.6-DIFLUORO-BENZAM IDA Una mezcla de ácido 4-(2,6-difluorobenzoilamino)-1 H-pirazol-3- carboxílico (100 mg, 0.37 mmol) (Ejemplo 16D),6-cloro-piridin-3,4-diamina (54 mg, 0.37 mmol), EDC (72 mg, 0.40 mmol), HOBt (57.3 mg, 0.40 mmol) y Et3N (0.075 mi, 0.55 mmol) en DMF (20 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 48 h y luego se particionó entre EtOAc y bicarbonato de sodio acuoso saturado, y se secó la parte orgánica (MgS04), se filtró y se evaporó. El producto intermedio amida se disolvió en AcOH (3 mi), se calentó por reflujo durante 1H, y luego se calentó en el microondas (150W) a 160 °C, hasta que se completó la reacción. La mezcla de la reacción se dejó enfriar, se produjo un sólido cristalizado, el cual fue filtrado u luego se lavó con éter de petróleo y se secó, para dar el producto requerido (9 mg). (LC/MS: Rt 2.74, [M + H] + 375) EJEMPLOS 292-293 Se prepararon los siguientes compuestos usando el procedimiento general A, modificado según se muestra en la Tabla 6.
TABLA 6 EJEMPLOS 294-303 Los compuestos de los ejemplos 294 a 303 se prepararon mediante los métodos de los ejemplos precedentes.
EJEMPLO 294 ESTER TERT-BUTÍLICO DE ÁCIDO 4-2-r4-(2.6-DIFLUORO- BENZOILAMIN01-1H-PIRAZOL-3-IL1-1H-BENC1MIDAZOL-5-1LOXI}- ETIL)-PIPERIDIN-1-CARBOX¡LlCO EJEMPLO 295 G3 (5-MORFOLIN-4-ILMET1L- 1 H-BENCIMIDAZOL-2-ID-1 H-PIRAZOL- 4-IL1-AMIDA DE ÁCIDO 5-MET1L-2-TRIFLUOROMETIL-FURAN-3- CARBOXÍLICO EJEMPLO 296 G3 H-BENCIMIDAZOL-2-ID-1H-PIRAZOL-4-IL1-AMIDA DE ÁCIDO ISOBENZOFURAN-1-CARBOXÍLICO EJEMPLO 297 G3-(5.6-????????-1?- BENCIM1DAZOL-2-ID-1 H-PIRAZOL-4-IL1l- AMIDA DE ÁCIDO 2-(4-CLORO-FENIL)-4-METIL-TIAZOL-5- CARBOXÍLICO EJEMPLO 298 G3-(5.6- DIMETOXI-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-ILl- AMIDA DE ÁCIDO 2-(4-FLUORO-FENIL)-5-METIL-2H- M.2.3HRIAZOL-4-CARBOXÍLICO EJEMPLO 299 r3-f5-MORFOHN-4-ILMETlL-1H-BENCIMlDAZOL-2-IL)- 1 H-PIRAZOL- 4-ÍU-AMIDA DE ÁCIDO Bl FENIL-2-CARBOXÍLICO EJEMPLO 300 r3-(5-MORFOLIN-4-ILMETIL-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PIRAZOL-4-IL1-AMIDA DE ÁCIDO 4.6-DIMETIL-2-OXO-1. 2-DIHIDRO-PIRIDIN- 3-CARBOXÍLICO EJEMPLO 301 G3 -(5-MORFOL1N-4-ILMETIL-1H- BENCIMIDAZOL-2-IU-1 H- PIRAZOL-4-I -AMIDA DE ÁCIDO 2-OXO-1.2-P1HIDRO-PIR1DIN-3- CARBOXÍLICO EJEMPLO 302 F3- 5-MORFOLIN-4-ILMETIL-1H-BENCIMIDAZOL-2-IL)-1H-PiRAZOL- -IL1-AMIDA DE ÁCIDO 3-(4-FLUORO-FENIL)-5-METIL-ISOXAZOL-4- CARBOXÍLICO EJEMPLO 303 2-(4-CLORO-FEN[LSULFANIL)-N-r3-f5-MORFOLiN-4-ILMETIL-1H- BENCIMIDAZOL-2-IL-1 H-PIRAZOL-4-IL1 -NI COTIN AMIDA EJEMPLO 304 SÍNTESIS DE N-r3-(5.6-DIMETOXI-1H-BENCIMIDAZOL-2-lL)-1H- PIRAZOL-4-IL1-2- ETOXI-5-MORFOLIN-4-IL-BENZAMIDA 304A: Síntesis de éster metílico de ácido 2-metoxi-5-morfolin-4-il-ácido benzoico Se suspendió éster metílico de ácido 5-yodo-2-metoxi-benzoico (500 mg, 1.7 mmol), morfolina (223 p1, 2.5 mmol), carbonato de cesio (850 mg, 2.7 mmol) , xantfos (60 mg , 0. 1 mmol) y bis(d¡ bencil¡den-acetona)d ipalad io (35 mg, 0.04 mmoí) en dioxano (5 mi) y se calentó a 1 00 °C durante 5 h. Luego se enfrió la mezcl a, se filtró y se purificó el residuo mediante crom atog rafía de columna instantánea [Si02, EtOAc] para dar éster m etílico de ácido 2-metoxi-5-morfol in-4-il-benzoico ( 1 70 mg) como un sólido incoloro. (LC/MS (método básico): t 2.35 min, [M + H] + 252). 304B: S íntesis de ácido 2-metoxi-5-morfolin-4-il-benzoico Se disolvió éster metílico de ácido 2-metoxi-5-morfolin-4-¡l-benzoico (170 mg) se d isolvió en MeO H (5 mi) y H20 (5ml) , y se trató con 1 M de hidróxido de sodio acuoso (2 mi). Después de agitar a temperatura ambiente d urante 16 h, se concentró la mezcla y se particionó entre EtOAc y H20. Se acidificó la capa acuosa (pH 2.0) y luego se extrajo adicionalmente con EtOAc (x3). Se lavó la fracción orgánica combinada con salmuera, se secó (MgS04) y se redujo al vacío para dar ácido 2-metoxi-5-morfo!in-4-il-benzoico (90 mg) como un aceite amarillo. (LC/MS (método básico): Rt 0.91 min. , [M + H] + 238). 304C: Síntesis de N-r3-(5.6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-¡0-1 H-pirazol-4-in- 2-metoxi-5-morfolin-4-il-benzamida.
Se preparó el compuesto de manera análoga al Ejemplo 142C, pero usando EtOAc, en lugar de CH2CI2, durante la elaboración. Se purificó el producto crudo directamente mediante LC/ S preparativa, para dar N-[3-(5,6-dimetoxi-1 H-bencimidazol-2-il)-1 H-pirazol-4-il]-2-metoxi-5-morfolin-4-il-benzamida (AT8659) (20 mg) como un sólido incoloro. (LC/MS (método ácido): Rt 2.34 min., [M+H] + 479).
EJEMPLO 305 5-CLORO-2-METOXI-N-f3-r6-METOXI-5-(1-METIL-PIPERIDiN-4- ILMETOXl)-1H-BENCIMIDAZOL-2-ILl-1H-PIRAZOL-4-lL>- BENZAMIDA 305 A. N-f4-Metoxi-5-(4-metil-piperidin-1-ilmetoxi-2-nitro-fenill-acetamida A una solución de 1 -metil-4-piperidinmetanol (0.566g,4.3mmol) en THF (25ml) a 0 °C, se le añadió por porciones NaH al 60% (0.63 g, 15.48 mmol), y se agitó la mezcla durante 15 minutos. A la reacción se le añadió N-(5-Fluoro-4-metoxi-2-nitro-fenil)-acetamida [US 4431807] (1 g, 4.38 mmol) en THF (40ml) la cual se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, seguido de calentamiento a 50 °C durante 1 hora. Se extinguió la reacción con agua, y l uego se extrajo con EtOAc dos veces, se l avó la capa orgánica con salmuera, se secó sobre MgS04, se filtró y se redujo a l vacío para producir N-[4-metoxi-5-(4-metil-piperidin-1 -ilmetoxi)-2-nitro-fenilj-acetam ida ( 1 .34g). (LC/MS (método ácid o): Rt 1 .84, [M+H] + 338) 305B. 4-lyletoxi-5-(4-metil-piperidin-1 -ilmetoxi)-2-n itro-fenilamina A una solución de N-[4-metoxi-5-(4-metil-piperidin-1 -ilmetoxi)-2-nitro- fenilj-acetamida (1 .34g , 3.97mmol) en MeOH (40ml) se le añadió metóxido de sodio (1 g , 1 8.5 mmol), se ag itó la reacción durante 48 horas a temperatura ambiente, luego se red ujo al vacío. Se trituró el residuo con agua y se filtró el sólido y se lavó con más agua. Se secó el sólido para producir 4-Metoxi-5-(4-metil-piperidin-1 -i lmetoxi)-2- nitro-fe n ¡lamina (0.9g). (LC/MS (método ácido): Rt 1 .72, [M + H] + 296) 305C. 4-Metoxi-5-(4-metil-piperid in-1 -ilmetoxi)-benceno-1 ,2-diamina Se agitó una mezcla de 4-Metoxi-5-(4-metil-piperidin-1 -ilmetoxi)-2-nitro-fenilamina (0.9g, 3.0 mmol) y 10% de paladio sobre carbón (90mg) en MeOH (20ml), bajo una atmósfera de hidrógeno durante 4 horas. Se filtró la mezcla de la reacción a través de papel GF/A directamente en EtOAc/HCI saturado, para dar una solución púrpura, la cual se redujo al vacío, para producir 4-Metoxi-5-(4-metil-piper¡din-1-ilmetoxi)-benceno-1 ,2-diamina como una espuma púrpura (0.8g). (LC/MS (método ácido): Rt 0.34, [M+H] + 266) 305D. Síntesis de ácido 4-(5-cloro-2-metoxi-benzo¡lam¡no- 1 H-pirazol-3-carboxírico Se preparó el compuesto de manera análoga al ácido 4- (2, 6-difluoro-benzo ¡lamino)- 1H-pi razo ?-3-carboxíIico (Ejemplo 16D), pero usando ácido 5-cloro- 2-metoxi-benzoico como el ácido inicial, para dar ácido 4-(5-cloro-2-metoxi-benzoilmaino)-1 H-pirazol-3-carboxílico (12 g) como un sólido incoloro. (LC/MS: Rt 2.48, [M-H+J-294) 3Q5E. 5-Cloro-2-metoxi-3-(3-r6-metoxi-5-(l-metil-piperidin-4-¡lmetoxi)-1 H-bencimidazol-2-??-? H-pirazol-4-il}-benzamida Una mezcla de ácido 4-(5-Cloro-2-metoxi-benzoilamino)- 1 H-pirazol-3-carboxílico (0.22 g, 0.745 mmol), 4-Metoxi-5-(4-metil-piperidin-1 -ilmetoxi)-benceno-1 ,2-diamina (0.2 g, 0.745 mmol), EDC (0.173g, 0.89 mmol) y HOBt (0.122 g, 0.89 mmol) en DMF (20 ml), se agitó a 80°C durante 1 hora, luego a temperatura ambiente durante 16 horas, y luego se redujo al vacío. Se particionó el residuo entre EtOAc y bicarbonato saturado, se lavó la porción orgánica con salmuera y se secó (MgS04), se filtró y se evaporó. El producto intermedio amida (150 mg), (LC/MS (método ácido): Rt 2.13, [M + H] + 543) se disolvió en AcOH (5 ml), luego se calentó por reflujo durante 4 horas. La mezcla de la reacción se dejó enfriar, se redujo al vacío, se purificó el residuo mediante TLC preparativa, para producir 5-Cloro-2-metoxi-N-{3-[6-metoxi-5-(1-metil-piperidin-4-ilmetox¡)-1 H-bencimidazol-2-il]-1 H-pirazol-4-il}-benzamida (2mg). ' (LC/MS (método ácido): Rt 2.25, [M + H] + 525) ACTIVIDAD BIOLOGICA EJEMPLO 306 MEDICIÓN DE LA ACTIVIDAD INHIBIDORA DE LA QUINASA CDK2 (ICQQ) Se sometieron a prueba los compuestos de la invención para determinar su actividad inhibidora de quinasa, usando el procedimiento A o el procedimiento B.
PROCEDIMIENTO A 1.7 µ? de CDK2/Cicllna A activa (Upstate Biotechnology, 10U/µ?) se diluyó en regulador para ensayo (250 µL· de regulador para ensayo con fortaleza 10X (200mM de MOPS con pH 7.2, 250mM de ß-glicerofosfato, 50mM de EDTA, 150mM de MgCI2), 11.27 µ? 10mM de ATP, 2.5 µ? 1M de DTT, 25 µ? 100mM de ortovanadato de sodio, 708.53µ? de H20), y se mezclaron 10 µL· con 10 µL de mezcla sustrato de histona (60 de histona bovina H1 (Upstate Biotechnology, 5 mg/ml), 940 µ?. de H20, 35 µ?? ?33?-???) y se añadió a placas de 96 receptáculos junto con 5 µ\- de diversas diluciones el compuesto de prueba en DMSO (hasta 2.5%). Se dejó proseguir la reacción durante 5 horas antes de detenerla con un exceso de ácido orto-fosfórico (30 µ? a 2%). El ATP ?33? que permanece incorporado en la histona H1, se separa de la historia fosforilada H1 en una placa filtrante Millipore MAPH. Los receptáculos de la placa MAPH se humedecen con ácido ortofosfórico al 0.5%, y luego se filtran los resultantes de la reacción con una unidad de filtración al vacío Millipore, a través de los receptáculos. Luego de la filtración, se lava el residuo dos veces con 200 µ? de ácido ortofosfórico al 0.5%. Una vez que se han secado los filtros, se añade 25 µ? de Microscint 20 destellante, y luego se cuente en un aparato Packard Topcount durante 30 segundos. Se calcula el % de inhibición de la actividad de la CDR2 y se gráfica con el fin de determinar la concentración del compuesto de prueba requerida para inhibir el 50% de la actividad de la CDK2 Los compuestos de los ejemplos 3 a 128 tienen cada uno valores IC50 de menos de 20 µ?, o proporcionan al menos 50% de inhibición de la actividad de la CDK2 a una concentración de 10 µ?. Los compuestos preferidos tienen valores IC50 menores de 1 µ?.
PROCEDIMIENTO B Se diluye CDK2/Ciclina A activada (Brown y coautores, Nat. Cell Biol., 1, pp 438-443, 1999 ; Lowe, E. D., y coautores, Biochemistry, 41, pp 15625-15634, 2002) hasta 125 pM en regulador para ensayo con 2.5X de fortaleza (50mM de MOPS con pH 7.2, 62.5 mM de p-glicerofosfato, 12.5mM de EDTA, 37.5mM de MgCI2, 112.5 mM de ATP, 2.5 mM de DTT, 2.5 mM de ortovanadato de sodio, 0.25 mg/ml de albúmina de suero bovino), y 10 µ? se mezclaron con 10 µ? de mezcla de sustrato de histona (60 µL· de histona bovina H1 (Upstate Biotechnology, 5 mg/ml), 940 µ?_ de H20, 35 µ?? de ATP ?33?) y se añadió a placas de 96 receptáculos junto con 5 µL· de diferentes diluciones del compuesto de prueba en DMSO (hasta 2.5%). Se deja proseguir la reacción de 2 a 4 horas antes de ser detenida con un exceso de ácido orto-fosfórico (5 µ?, a 2%). El ATP ?33? que permanece desincorporado en la histona H1 se separa de histona H1 fosforilada, en una placa filtrante Millipore MAPH. Los receptáculos de la placa se humedecen con ácido ortofosfórico al 0.5%, y luego se filtran los resultantes de la reacción con una unidad de filtración al vacío Millipore a través de los receptáculos. Luego de la filtración, se lava dos veces el residuo con 200 µL· de ácido ortofosfórico al 0.5 %. Una vez que se han secado los filtros, se añade 20 µL· de destellante Microscint 20, y luego se cuenta en un aparato Packard Topcount durante 30 segundos. Se calcula el % de inhibición de la actividad de la CDR2 y se gráfica con el fin de determinar la concentración del compuesto de prueba requerida para inhibir el 50% de la actividad de la CDK2 (IC50).
PRUEBA DE CDK1/CICLINA B La prueba de CDK1/ciclina B es idéntica a la de CDK2/ciclina A anterior, excepto porque se usa CDK1/ciclina B (Upstate Discovery), y se diluye la enzima hasta 6.25 nM.
EJEMPLO 307 PRUEBA DE ACTIVIDAD INHIBIDORA DE GSK3-B/QUIN ASA AURORA Se diluyó Aurora A (Upstate Discovery) o GSIO-ß (Upstate Discovery) hasta 10 nM y 7.5 nM, respectivamente, en 25 mM de MOPS, con pH de 7.00, 25 mg/ml de BSA, 0.0025% de Brij-35, 1.25% de glicerol, 0.5 mM de EDTA, 25 mM de MgCI2, 0.025% de ß-mercaptoetanol, 37.5 mM de ATP y se mezcló 10 µ? con 10 µ?. de la mezcla de sustrato. La mezcla de sustrato para Aurora es 500 µ? de péptido Kemptide (LRRASLG, Upstate Discovery) en 1 mi de agua con 35 µ?? de ATP ?33?. La mezcla de sustrato para la GSK3-P es 12.5 µ? de fosfo-glicógeno sintasa péptido-2 (Upstate Discovery) en 1 mL de agua con 35 µ?? de ATP y33P. Se añadió la enzima y el sustrato a placas con 96 receptáculos junto con 5 µL· de diversas diluciones del compuesto de prueba en DMSO (hasta 2.5%). Se dejó proseguir la reacción durante 30 minutos (Aurora) o 3 horas (GSK3-ß) antes de detenerla mediante exceso de ácido orto-fosfórico (5 µL· a 2%). El procedimiento de filtración es el mismo que para la prueba de CDK2/Ciclina A activada anterior.
EJEMPLO 309 PRUEBAS COMPARATIVAS Las actividades de los novedosos compuestos de la invención como inhibidores de CDK han sido comparadas con las actividades de los compuestos descritos en WO 03/035065 (Aventis). Entre la gran cantidad de compuestos descritos en WO 03/035065 están los compuestos que contienen una estructura de anillo 4-benzoilamino-3-(2-bencimidazolil)-pirazol. Los siguientes ejemplos comparativos ilustran el efecto de la actividad inhibidora de la CDK a partir de diferencias en el patrón de sustitución del anillo fenilo del grupo benzoilamino.
EJEMPLO COMPARATIVO A El compuesto A siguiente se describe como combinación de A1-B32 en la página 110, columna 2, tabla 2 de WO 03/035065.
Este compuesto se puede preparar mediante los métodos generales descritos ei WO 03/035065.
Alternativamente, se puede preparar mediante el método descrito en el Ejemplo 3 de la presente solicitud . En la Tabla siguiente, la actividad inhibidora de CD del compuesto A (determinada usa ndo el procedimiento descrito en el Ejemplo 306 anterior) se compara con las actividades inhibidoras de los novedosos compuestos de la invención q ue tienen u n grupo bencimidazol no sustituido simi larmente, pero q ue tiene sustituyentes en el an illo fenilo.
EJ EMPLO COMPARATIVO B El compuesto B siguiente, se describe como una combinación Z9-B101 en la columna 1 de la Tabla de la página 1 1 7 de WO 03/035065, y está ejemplificado mediante el Ejemplo (y) en la página 428 de WO 03/035065. El compuesto B se puede preparar mediante el método descrito en WO 03/035065 o mediante el método descrito en el Ejemplo 128 de la presente solicitud.
El compuesto B tiene una IC50 de 3 µ? en la prueba de inhibición de CDK descrita en el Ejemplo 306. En contraste, el compuesto del Ejemplo 73, el cual es el análogo 2,6-difluorofenilo del Compuesto B, tiene una IC50 de 0.0046 µ?. La actividad anti-proliferadora de los compuestos de la invención, ha sido determinada midiendo la inhibición del crecimiento celular en la línea celular HCT-116. El Ejemplo 73 tiene una IC50 de 0.49 µ? en la línea celular HCT-116 (determinada usando el procedimiento establecido en el ejemplo 310 siguiente) comparada con el Compuesto B, el cual tiene una IC50 de 5.7 µ? en la línea celular HCT-116.
EJEMPLO 310 PRUEBAS DE SELECTIVIDAD DE CDK Se sometió a prueba la actividad inhibidora de quinasa de los compuestos de la invención contra una cantidad de quinasas diferentes, usando el procedimiento general descrito en el Ejemplo 129, pero modificado como se indica mas adelante. Las quinasas se diluyeron a una existencia funcional de 10x en 20 mM de MOPS con pH 7.0, 1mM de EDTA, 0.1% de ?-mercaptoetanol, 0.01% de Brij-35, 5% de glicerol, 1 mg/ml de BSA. Una unidad iguala la incorporación de 1 nmol de fosfato por minuto en 0.1 mg/ml de histona H1, o de péptido sustrato CDK7 a 30 °C a una concentración final de ATP de 100 u . El sustrato para todas las pruebas de CDK (excepto para la CDK7) es histona H1, diluida hasta una existencia funcional de 10X en 20 mM de MOPS con pH 7.4 antes de su uso. El sustrato para la CDK7 es un péptido específico diluido hasta una existencia funcional de 10X en agua des-ionizada.
PROCEDIMIENTO PARA LA PRUEBA DE CDK1/CICL1NA B. CDK2/CICLINA A. CDK2/CICLINA E.
CDK3/ciclina E. CDK5/P35. CDK6/ciclina D3: En un volumen de reacción final de 25µ?, se incuba la enzima (5-10mU) con 8mM de MOPS con pH de 7.0, 0.2mM de EDTA, 0.1 mg/ml de histona H1, 10 mM de acetato de Mg y [ATP ?-33?] (actividad específica aproximada de 500 cpm/pmol, concentración según se requiera). La reacción se inicia mediante la adición de Mg2+ [ATP ?- P]. Después de la incubación durante 40 minutos a temperatura ambiente, se detiene la reacción mediante la adición de 5 µ? de una solución de ácido fosfórico al 3%. Se colocan 10 mL de la reacción sobre una esterilla filtrante P30 y se lava 3 veces durante 5 minutos en 75 mM de ácido fosfórico y una vez en metanol antes de secar y contar.
PROCEDIMIENTO DE PRUEBA PARA CDK7/CICLIN A H/MAT1 En un volumen de reacción final de 25 µ?_, se incuba la enzima (5-10mU) con 8mM de MOPS con pH 7.0, 0.2 mM de EDTA, 500uM de péptido, 10 mM de acetato de Mg y [ATP ?-33?] (actividad específica aproximada 500cpm/pmol, concentración según se requiera). Se inicia la reacción mediante la adición de Mg2+ [ATP ?-33P]. Después de la incubación durante 40 minutos a temperatura ambiente, se detiene la reacción mediante la adición de 5 µ!_ de una solución de ácido fosfórico al 3%. Se colocan 10 mL de la reacción en una esterilla filtrante P30 y se lava 3 veces durante 5 minutos en ácido fosfórico y una vez en metanol antes de secar y contar. Los compuestos de los Ejemplos 6, 12, 13, 14, 21 y 41 tienen valores ICSo < 1 µ?, contra CDK 1, 3 y 5.
EJEMPLO 311 ACTIVIDAD ANTI- ROLIFERATIVA Se determinaron las actividades anti-proliferativas de los compuestos de la invención midiendo la habilidad de los compuestos para la inhibición del crecimiento celular en una cantidad de líneas celulares. La inhibición del crecimiento celular se midió utilizando la prueba Alamar Blue (Nociari, M. M, Shalev, A., Benias, P., Russo, C. Journal of Immunological Methods 1998, 213, 157-167). El método está basado en la habilidad de las células viables para reducir la resazurina a su producto fluorescente resorufina. Para cada prueba de proliferación, se colocaron células en placas de 96 receptáculos y se dejaron recuperar durante 16 horas antes de la adición de los compuestos inhibidores durante 72 horas adicionales. Al final del periodo de incubación, se añadió 10% (volumen/volumen) de Alamar Blue, y se incubó durante 6 horas adicionales, antes de la determinación del producto fluorescente a 535n ex/590nM em. En el caso de la prueba de células no proliferantes, se mantuvieron las células en confluencia durante 96 horas antes de la adición de los compuestos inhibidores durante 72 horas adicionales. La cantidad de células viables se determinó mediante la prueba Alamar Blue como anteriormente. Todas las líneas celulares se obtuvieron de ECACC (Colección Europea de Cultivos Celulares) Siguiendo el procedimiento descrito anteriormente, se encontró que los compuestos de la invención inhiben el crecimiento celular en una cantidad de líneas celulares.
EJEMPLO 312 MEDICIÓN PE LA ACTIVIDAD INHIBIDORA CONTRA LA GLICÓGENO SINTASA QUINASA 3 (GSK-3) Se diluye GSK3p (humana) hasta una existencia manejable de lOx en 50m de Tris con pH 7.5, 0.1mM de EGTA, 0.1mM de vanadato de sodio, 0.1% de ß-mercaptoetanol, 1 mg/ml de BSA. Una unidad equivale a la incorporación de 1 nmol de fosfato por minuto en péptido fosfo-glicógeno sintasa 2. En un volumen final de reacción de 25 µ?, se incuba GSK3p (5-10 mU) con 8mM de MOPS 7.0, 0.2 mM de EDTA, 20 µ? de YRRAAVPPSPSLSRHSSPHQS(p)EDEEE (péptido fosfo GS2), 10mM de acetato de Mg y [ATP ?-33?] (actividad específica aproximada 500 cpm/pmol, concentración según se requiera). La reacción se inicia mediante la adición de Mg2+[ ATP ?-33?]. Después de la incubación durante 40 minutos a temperatura ambiente, se detiene la reacción mediante la adición de 5 µ? de una solución de ácido fosfórico al 3%. Se colocan 10 µ? de la reacción en una almohacilla filtrante P30 y se lavan 3 veces durante 5 minutos en 50 mM de ácido fosfórico, y una vez en metanol, antes de secar y contar. Los compuestos de los ejemplos 6 y 12 tienen valores de IC50 de < 1 uM contra la GSK3p FORMULACIONES FARMACÉUTICAS EJEMPLO 313 (i) Formulación de tabletas Se prepara una composición que contiene un compuesto de la fórmula (I) mezclando 50 mg del compuesto con 197 mg de lactosa (BP) como diluyente, y 3 mg de estearato de magnesio como lubricante, y se comprime para formar una tableta, en una forma conocida. (ii) Formulación de cápsulas Se prepara una formulación en cápsulas mezclando 100 mg de un compuesto de la fórmula (I) con 100 mg de lactosa, y se rellena la mezcla en cápsulas de gelatina dura opacas estándar.
EJEMPLO 314 DETERMINACIÓN DE ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA Se determina la actividad antifúngica de los compuestos de la fórmula (I) usando el siguiente procedimiento. Los compuestos se someten a prueba contra un panel de hongos, incluyendo Candida parpsilosis, Candida tropicalis, Candida Albicans-ATCC 36082 y Cryptococcus neoformans. Los organismos de prueba se mantienen en tubos biselados con Dextrosa Agar Sa bourahd a 4 °C. Se preparan suspensiones en sing u lete de cada organismo, dejando crecer la levad ura durante la noche a 27 °C en un tambor g iratorio en cultivo de levad ura basado en n itrógeno (YN B) con aminoácidos (Difco, Detroit, Mich igan) , con pH de 7.0, con ácido morfolin-propanosulfónico (MOPS) . Luego se centrifuga la sus pensión y se lava dos veces con NaCI a l 0.85% antes de someter la suspensión de células lavadas a tratam iento por ultrasonido durante 4 seg undos (Branson Sonifier, modelo 350, Danbury, Connecticut). Las blastoesporas en singulete se cuentan en un hemocitómetro y se aj ustan a la concentración deseada en N aCI al 0.85% . Se determina la actividad de los compuestos de prueba usando una modificación de una técnica de micro dilución de cultivos. Los compuestos de prueba se di luyen en DMSO hasta una proporción de 1 .0 mg/ml, luego se diluyen hasta 64 µg/ml cultivo de YN B, con pH 7.0, con MOPS (se usa Fluconazol como control) para proporcionar una solución manejable de cada compuesto. Usando u na placa de 96 receptáculos, se parparan los receptáculos 1 y 3 hasta 12, con cu ltivo de YN B, se elaboran diez diluciones de la solución del compuesto en los receptáculos 2 a 1 1 (las escalas e concentración son de 64 hasta 0.125 µg/ml). El receptáculo 1 sirve como un control de esterilidad y vacío para las pruebas espectrométricas. El receptáculo 1 2 sirve como un control de crecimiento. Las placas para micro titulación se inoculan con 1 0 µ? en cada receptáculo del 2 al 1 1 (el tam año final del inoculo es de 104 organismos/ml). Se incuban las placas inoculadas durante 48 horas a 35 °C. Se determinan los valores de IC50 espectrofotométricamente, midiendo la absorbancia a 420 nm (Automatic Microplate Reader, DuPont Instruments, Wilmington, Del.). Después se agitan las placas durante 2 minutos con una mezcladora de vórtice (Vorte-Genie 2 Mixer, Scientific Industries, Inc., Bolemia, N. Y.). El punto final de la IC50 está definido como la concentración de fármaco más baja que muestra aproximadamente 50% (o más) reducción del crecimiento comparada con el receptáculo de control. Con la prueba de turbidez, esto se define como la concentración más baja de fármaco en la cual la turbidez en el receptáculo es < 50% del control (IC50). Las concentraciones catalíticas mínimas ( CC) se determinan sub-cultivando todos los receptáculos de la placa de 96 receptáculos en una placa con Dextrosa Agar Sabourhad (SDA), incubando durante 1 a 2 días a 35 °C y luego verificando la viabilidad.
EJEMPLO 315 PROCEDIMIE TO PARA LA EVALUACIÓN BIOLÓGICA DEL CONTROL DE LA INFECCIÓN FÚNGICA DE PLANTAS ENTERAS IN VIVO Se disolvieron los compuestos de la fórmula (I) acetona, con las diluciones en serie subsiguientes para obtener escala de concentraciones deseadas. Los volúmenes finales e tratamiento se obtienen añadiendo 9 volúmenes de Tween-20 TM acuoso ai 0.05% o de Tritón X-100 al 0.01%, dependiendo del patógeno. Las composiciones se usan luego para someter a prueba la actividad de los compuestos de la invención contra el mildiú del tomate (Phytophtora infestans) usando el procedimiento que se expone a continuación. Se cultivan tomates (cultivar Rutgers) sembrándolos en una maceta con mezcla de turba sin tierra, hasta que los cultivos tuvieron de 10 a 20 cm de altura. Luego se rociaron las planas con el compuesto de prueba en una proporción de 100 ppm hasta vaciarlo. Después de 24horas, las plantas de prueba se inocularon rociándolas con una suspensión acuosa de esporangios de Phytophthora infestans, y se mantuvieron en una cámara de rocío durante la noche. Luego se transfirieron las plantas al invernadero hasta que se desarrolló la enfermedad en las plantas de control no tratadas. También se usaron procedimientos similares para someter a prueba la actividad de los compuestos de la invención para combatir la roya café del trigo (Puccinia), peste ceniza del trigo (Ervisiphe vraminis), trigo (Cultivar Monon), septoriosis de las hojas (Septoria tritici) y mancha de la pluma del trigo (Leptosphaeria nodorum).
EQUIVALENTES Los ejemplos precedentes se presentan con el propósito de ¡lustrar la invención, y no deben ser interpretados como impositivos de limitación alguna del alcance de la invención. Será fácilmente evidente que se pueden realizar numerosas modificaciones y alteraciones a las modalidades específicas de la invención descritas anteriormente e ilustradas en los ejemplos, sin apartarse de los principios subyacentes de la invención. Se pretende que todas estas modificaciones y alteraciones estén comprendidas en esta solicitud.

Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES 1. El uso de un compuesto para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de un estado o condición de enfermedad mediada por una quinasa dependiente de ciclina o por una glicógeno sintasa quinasa 3, o por una quinasa Aurora, el compuesto tiene la fórmula (I): o una sal, N-óxido o solvato de ella; caracterizada porque X es CR5 o N; A es un enlace o -(CH2)m-(B)n-; B es C=0; NR3(C=0), o 0(C=0), en donde R9 es hidrógeno o hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido opcionalmente por hidroxi o por alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono; m es 0, 1 o 2; n es 0 o 1 ; R° es hidrógeno o, junto con NR9 cuando está presente, forma un grupo -(CH2)P- en donde p es de 2 a 4; R1 es hidrógeno, un grupo carboxílico o heterocíclico que tiene desde 3 hasta 12 miembros en ei anillo, o un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido opcionalmente; R2 es hidrógeno, halógeno, metoxi o un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por halógeno, hidroxilo o metoxi; R3 y R4 junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, forman un anillo carbocíclico o heterocíclico fundido, sustituido opcionalmente, que tiene de 5 a 7 miembros en el anillo de los cuales hasta 3 pueden ser heteroátomos seleccionados de N, O y S; R5 es hidrógeno, un grupo R2 o un grupo R 0 en donde R10 se selecciona de halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclico y heterocíclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo; un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X\ X1C(X2)X1, S, SO, S02, NRC, S02NRc o NRcS02; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclico y heterocíclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo, y en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono puede ser reemplazado opcionalmente por O, S, SO, S02, NR°, X1C(X2), C(X2)X1 o X1C(X2)X1; Rc se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de caVbono; y X1 es O, S, o NR° y X2 es =0, =S, o =NRC; 2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado además porque el medicamento es para la profilaxis o tratamiento de un estado o condición de enfermedad mediado por una quinasa dependiente de ciclina o por una glicógeno sintasa quinasa-3. 3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado además porque el medicamento es para la profilaxis o tratamiento de un estado o condición de enfermedad mediado por una quinasa Aurora. 4. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque X es N. 5. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque m es 0 o 1 (preferiblemente 0), n es 1 y B es C=0. 6. El uso de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque R° es hidrógeno. 7. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque B es NR9(C=0) y R9 es hidrógeno. 8. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque R1 es un grupo carbocíclico o heterocíclico monocíclico o bicíclico que tiene desde 2 hasta 12 miembros en el anillo, más preferiblemente desde 3 hasta 10 miembros. 9. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, caracterizado además porque el grupo carbocíclico o heterocíclico es un grupo ari lo. 1 0. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, caracterizado además porque el grupo carbocíclico o heterocíclico es un grupo heteroarilo. 1 1 . El uso de acuerdo con la reivindicación 9 o con la reivindi cación 1 0, caracterizad o además porque los grupos arilo y heteroarilo se seleccionan de grupos pirazolo[1 ,5-a] piridinilo (por ejemplo pirazolo [1 ,5-a] pi ridin-3-ilo) , fu ranilo (por ejemplo 2-furanilo y 3-furanilo), indolilo (por ejemplo 3-indolilo,4-indol ilo y 7- indolilo), oxazolilo, tiazolilo (por ejemplo tiazol-2-ilo y tiazol-5-ilo), isoxazolilo (por ejemplo isoxazol-3-ilo y isoxazol-4-ilo), pirrolilo (por ejemplo 3-pirroli lo), piridilo (por ejemplo 2-piridi lo), q uinolinilo (por ejemplo q uinol in-8-ilo), 2,3-d ih idro-benzo[1 ,4]d ioxina (por ejemplo 2, 3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxin-5-ilo), benzo[1 ,3]dioxol (por ejemplo benzo[1 ,3]dioxol-4-ilo), 2,3-d ihidrobenzofuranilo (por ejemplo 2,3-d ihidrobenzofuran-7-ilo), imidazol ilo y tiofenilo (por ejemplo 3-tiofenilo). 12. El uso de acuerdo con la invención 1 1 , caracterizado adem ás porque los grupos arilo y heteroarilo se seleccionan dé grupos sustituidos o no sustituidos fenilo, pirazolo[1 ,5-a]piridinilo, furanilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo, tiofenilo, indolilo, tiazolilo, isoxazolilo y 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxina. 1 3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 1 , caracterizado además porque los g rupos arilo y heteroarilo se seleccionan de grupos sustituidos o no sustituidos fenilo, furanilo, indolilo, oxazolilo, isoxazolilo, piridilo, quinolinilo, 2,3-dihidro-benzo[1 ,4]dioxina, benzo[1 ,3]dioxol, imidazolilo y tiofenilo. 14. El uso de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizado además porque R1 es un anillo fenilo sustituido o no sustituido. 15. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, caracterizado además porque R1 es un grupo no aromático seleccionado de grupos cicloalquilo monocíclicos y grupos aza-cicloalquilo, tales como ciclohexilo, ciclopentilo, y piperidinilo. 16. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 15, caracterizado además porque el grupo carbocíclico o heterocíclico R1 es un grupo no sustituido. 17. Ei uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 15, caracterizado además porque el grupo R1 carbocíclico o heterocíclico contiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo R10 tal como se define en la reivindicación 1. 18. El uso de acuerdo con la reivindicación 17, caracterizado además porque los sustituyentes en R1 se seleccionan del grupo R10a, que consiste en los grupos heterocíclicos halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, que tienen 5 o 6 miembros en el anillo y hasta 2 heteroátomos seleccionados de O, N y S, un grupo O, CO, X3C(X4), C(X4)X3, X3C(X )X3, S, SO, o S02, y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos heterocíclicos que tienen 5 o 6 miembros en el anillo, y hasta 2 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, y un grupo hidrocarbilo sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di- hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 5 a 6 miembros en el anillo, y hasta 2 heteroátomos seleccionados de O, N y S; caracterizado además porque uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono pueden estar reemplazados opcionalmente por O, S, SO, S02, X3C(X4), C(X4)X3 o X3C(X4)X3; X3 es O o S; y X4 es =0 o =S. 19. El uso de acuerdo con la reivindicación 18, caracterizado además porque los sustituyentes en R1 se seleccionan del grupo R10b que consiste en halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, un grupo Ra-Rb caracterizado porque Ra es un enlace, O, CO, X3C(X4), C(X )X3, X3C(X4) X3, S, SO, o S02, y Rb se selecciona de hidrógeno y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi; en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono puede estar reemplazado opcionalmente por O, S, SO, S02) X3C(X4), C(X4)X3 o X3C(X4)X3 ; X3 es O o S; y X4 es =0 o =S. 20. El uso de acuerdo con la reivindicación 19, caracterizado además porque los sustituyentes en R1 se seleccionan de halógeno, hidroxi, trifluorometilo, un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace u O, y Rb se selecciona de hidrógeno y un grupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxilo y halógeno. 21. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 17 a 20, caracterizado además porque R1 está sustituido por 1 o 2 o 3 o 4 sustituyentes. 22. El uso de acuerdo con la reivindicación 21, caracterizado además porque R1 es un grupo fenilo que está 2,6-di sustituido, 2,3-di sustituido, 2,4-di sustituido, 2,5-di sustituido, 2,3,6-trisustituido, o 2,4,6-trisustituido. 23. El uso de acuerdo con la reivindicación 2, caracterizado además porque R1 es un grupo fenilo que está di sustituido en las posiciones 2- y 6- con sustituyentes seleccionados de flúor, cloro y Ra-Rb, en donde Ra es O y Rb es alquilo de 1 a 4 átomos de carbono. 24. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque el compuesto está representado por la fórmula (II): de las reivindicaciones precedentes; Y es N o CR9 en donde R9 es hidrógeno o un grupo R10; y R6, R7 y R8 son los mismos o diferentes, y cada uno es hidrógeno o un grupo R10 , tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes. 25. El uso de acuerdo con la reivindicación 24, caracterizado además porque el compuesto está representado por la fórmula (III): en donde R1, R2 y R6 hasta R9 son como se definieron en cualquiera de las reivindicaciones precedentes. 26. El uso de acuerdo con la reivindicación 24, caracterizado además porque el compuesto está representado mediante la fórmula (Illa): (nía) en donde R1, R2 y R6 hasta R9 son como se definieron en cualquiera de las reivindicaciones precedentes. 27. Un compuesto de ia fórmula (IV): o una sal, N-óxido o solvato de él; en donde A es NH (C=0), O (C=0) o C=0; R6a, R7a, R8a y R9a son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de hidrógeno, halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y grupos heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo; un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X\ X1C(X2)X\ S, SO, S02, NRC, S02NR° o NRcS02; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 12 miembros en el anillo, y un grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono, sustituido, opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo; halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbiiamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclicos y grupos heterocíclicos que tienen desde 3 hasta 1 2 miem bros en el anillo y en do nde uno o m ás átomos de carbono del grupo hidroca rbilo de 1 a 8 átomos de carbono , opcionalmente puede esta r reemplazado por O, S, SO, S02, N RC, X C(X2), C(X2)X1 o X1 C(X2)X1 ; o dos g rupos adyacentes R6a, R7a, R8a o R9 a junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos , pueden formar un anillo heteroa rilo de 5 m iembros , o un ani llo hete rocíclico no aromático de 5 o 6 m iembros, en donde dichos grupos heteroarilo y heterocíclicos contienen hasta 3 m iem bros heteroátomos en el anillo, seleccionados entre N, O y S; R° se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono; y X1 es O, S o N RC y X2 es =0 , =S o =NRC; o par de sustituyentes adyacentes seleccionados entre R6a, R7a, R8a y R9a junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, pueden formar un anillo no aromático de cinco o seis miembros, que contiene hasta tres heteroátomos seleccionados entre O, N y S; R1 a se selecciona de: - grupos arilo monocíclicos de 6 miembros, sustitu idos por uno a tres sustituyentes R10c, siempre que cuando el grupo arilo esté sustituido por un grupo metilo, esté presente al menos un sustituyente distinto de metilo: - grupos heteroarilo monocíclicos de 6 miembros, que contienen un solo miembro heteroátomo en el anillo, el cual es nitrógeno, los grupos heteroari lo están s ustituidos por uno hasta tres sustituyentes R10 c; - g rupos heteroarilo monocíclicos de 5 m iembros, que contienen hasta tres miembros en el anillo seleccionados de nitrógeno y azufre, y están sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R 0 c; - grupos heteroarilo monocíclicos de 5 m iembros, que contienen un solo miembro heteroátomo oxígeno en el a n illo, y opciona lmente un miembro heteroátomo nitrógeno en el an illo, y están sustituidos por un o a tres sustituyentes R 0c siempre que cuando el grupo heteroarilo contenga un miembro nitrógeno en el a nil lo, y esté sustitu ido por u n g rupo metilo, esté presente al menos u n sustituyente distinto de metilo; - grupos arilo y heteroarilo bicícl icos, q ue tienen hasta cuatro m iembros heteroatomos en el anillo, y en donde un anillo es aromático y el otro anillo es no aromático, o en donde ambos anillos son aromáticos, los grupos bicíclicos están sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R 0c; - grupos heterocíclicos saturados mon ocíclicos de cuatro miembros, de seis miembros y de siete miembros, enlazados con carbono, q ue contienen hasta tres heteroátomos seleccionados de nitrógeno , oxígeno y azufre, los grupos heterocíclicos están sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R 0c, siempre q ue cuando el grupo heterocíclico tenga seis miembros en el anillo y contenga solamente un heteroátomo que sea oxígeno, al menos esté presente u n s ustituyente R 0 c; - grupos heterocíclicos satu rados enlazados con carbono monocíclico de cinco miembros, q ue contienen hasta tres heteroátomos seleccionados de nitrógeno , oxígeno y azufre, los grupos heterocíclicos está n sustituidos opcionalmente por uno a tres s ustituyentes R10c, siempre q ue cuando el grupo heterocíclico tenga cinco miembros en el anillo y contenga solamente un heteroáíomo que sea nitrógeno, esté presente al menos un sustituyente R1 0c diferente de h idroxi; - grupos cicloalquilo de cuatro y seis miembros, sustituidos opcionalmente por uno a tres sustituyentes R10c; - g rupos cicloalq uilo de tres y cinco miembros, sustituidos por u no a tres sustituyentes R 0 c; y - un grupo Ph'CR17R18- en donde Ph es un g rupo fenilo sustituido por uno a tres sustituyentes R10 c; R17 y R18 son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona de h idrógeno y metilo; o R1 7 y R1 8 junto con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un grupo ciclopropilo; o uno de R 7 y R1 8 es hidrógeno y el otro se selecciona de amino, metilamino, acilamino de 1 a 4 átomos de carbono, y alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono; y en donde uno de R6 a, R7a, R8a y R9a es un grupo morfolinmetilo, entonces R1 a se selecciona adicionalmente entre: - fenilo no sustituido y fenilo sustituido con uno o más grupos metilo; - grupos heteroarilo monocíclicos de seis m iembros, no sustitu idos , q ue contienen un solo miembro heteroátomo en el anillo , el cual es nitrógeno; - furilo no sustituido; - g rupos heteroarilo monocíclicos de 5 miembros que contienen u n solo miembro heteroátom o oxígeno en el a nillo y un m iem bro heteroátomo nitrógeno en el anillo, y están no sustitu idos o s ustituidos por uno o más grupos metilo; - grupos heterocíclicos saturados enlazados con carbono monocícl ico no sustitu idos , de seis miembros, q ue contienen solamente u n heteroátomo, el cual es oxígeno; y - grupos cicloalquilo no sustituidos de tres y cinco miembros; y R1 0c se selecciona de: - halógeno (por ejemplo F y Cl); - hidroxilo; - hidrocarbiloxi de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxilo y halógeno; - hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustitu ido por uno o más sustituyentes seleccionados entre hidroxilo, halógeno y anillos heterocícl icos saturados de cinco y seis miembros que contienen uno o dos miembros heteroátomos en el anillo, seleccionados entre nitrógeno, oxígeno y azufre; - hidrocarbilo S-1 a 4 átomos de carbono; - fenilo sustituido opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alq ui lo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; - grupos heteroarilo que tienen 5 o 6 miembros en e l ani llo (por ejemplo oxazol , piridilo, pirimid ini lo) y que contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N , O y S, los g rupos heteroari lo están sustituidos opcional m ente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fl uoro y cloro; - g ru pos heterocíclicos no aromáticos de 5 y 6 miembros (por ejemplo pirrolidino, piperidino, piperazina , N-metilpiperazino, morfolino) q ue contienen hasta 3 heteroátom os seleccionados entre N , O y S y están sustituidos opcionalmente con uno a tres s ustituyentes seleccionados entre alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fl uoro y cloro; - ciano, nitro, amino, alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono, di-alq uilamino de 1 a 4 átomos de carbono , acilamino de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono; - un grupo R19-S(0)n- en donde n és 0, 1 o 2 y R19 se selecciona de amino; alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono; di-alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono; hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono; fenilo sustituido opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; y grupos heterocíclicos no aromáticos de 5 y 6 m iembros que contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S y están opcionalmente sustituidos con uno a tres grupos alquilo sustituyentes de 1 a 4 átomos de carbono; y - un grupo R20-Q- en donde R20 es fenilo sustituido opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados entre alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, trifluorometilo, fluoro y cloro; y Q es un grupo enlazante seleccionado entre OCH2, CH20, NH, CH2NH, NCH2, CH2, NHCO y CONH. 28. Un compuesto de la fórmula (V): en donde A es NH(C=0) o C=0; R b es un grupo fenilo sustituido que tiene desde 1 hasta 4 sustituyentes, en donde: (i) cuando R1b contiene un solo sustituyente, éste se selecciona de halógeno, hidroxilo, hidrocarbiloxi de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxilo y halógeno; hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados entre hidroxilo y halógeno; grupos heteroarilo que tienen 5 miembros en el anillo; y grupos heterocícl icos no aromáticos de 5 y 6 miembros, en donde los g rupos heteroari lo y los grupos heterocíclicos contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N , O y S ; (i i) cuando R1 b contiene 2, 3 o 4 sustituyentes , cada uno se selecciona de halógeno, hidroxilo, hidrocarbiloxi de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hid roxi lo y halógeno; hid rocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados de hid roxilo y halógeno; grupos heteroarilo q ue tienen 5 miembros en el anillo; amino; y grupos heterocíclicos de 5 y 6 miem bros, no aromáticos; o dos sustituyentes adyacentes junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, forma n un anil lo heteroari lo de 5 miembros o u n anillo heterocíclico no aromático, de 5 o 6 miembros; en donde dichos grupos heteroarilo y heterocíclicos contienen hasta 3 heteroátomos seleccionados entre N , O y S; y R6a, R7a, R8a y R9a son tal como se definen en la reivindicación 8. 29. Un compuesto de la fórmula (Va): o una sal, N-óxido o solvato del mismo; en donde R6a hasta R9a son tal como se defi nió en la reivindicación 8; y (i) R 3 es metoxi y R14 hasta R16 son cada uno, hidrógeno; o (ii) R14 es oxazolilo, imidazolilo o tiazolilo, preferiblemente oxazolilo, y R13, R 5 y R16 son cada uno, hidrógeno; o (¡ii) R1 3 se selecciona de fl úor, cloro y metilo, R1 6 se selecciona de fl úor, cloro, metilo y metoxi, y R14 y R 5 son cada uno, h idrógeno; o (iv) R13 y R 6 se seleccionan cada uno entre flúor, cloro y metilo; R14 se selecciona de flúor, cloro, metilo y metoxi; y R1 5 es hidrógeno; o (v) R13 y R14 son cada uno, hidrógeno; R15 se selecciona de flúor, cloro, metilo y metoxi (más preferiblemente metilo y metoxi), y R1 6 se selecciona de flúor, cloro y metilo (más preferiblemente flúor), o R15 y R e junto con los átomos de carbono del anillo fenilo, forman un grupo seleccionado entre: 30. Un compuesto de la fórm ula (VI): o una sal o solvato del mismo; en donde: cuando A es NH (C = 0) o C=0; R1c se selecciona de: (a) un grupo fenilo mono-sustituido, en donde el sustituyente se selecciona de o-amino, o-metoxi; o-cloro; p-cloro; o-difluorometoxi; o-trifluorometoxi; o-tert-butiloxi; m-metilsulfonilo y p-fluoro; (b) un grupo fenilo 2,4- o 2,6-di sustituido, en donde un sustituyente se selecciona de o-metoxi, o-etoxi, o-fluoro, p-morfolino y el otro sustituyente se selecciona de o-fluoro, o-cloro, p-cloro, y p-amino; (c) un grupo fenilo 2,5-di sustituido en donde un sustituyente se selecciona de o-fluoro y o-metoxi, y el otro sustituyente se selecciona de m-metoxi, m-isopropilo; m-fluoro, m-trifluorometoxi, m-trifiuorometilo, m-metilsulfanilo, m-pirrolidinsulfonilo, m-(4-metilpiperazin-1 -il)sulfonilo, m-morfolinsulfonilo, m-metilo, m-cloro y m- aminosulfonilo; (d) un grupo fenilo 2,4,6-tri-sustituido en donde los s ustituyentes son los mismos o diferentes, y cada uno se selecciona entre o-metoxi , o-fluoro, p-fluoro, p-metoxi, siempre que no esté presente más de un sustituyente metoxi; (e) un g rupo fenilo 2,4,5-tri-sustituido en donde los sustituyentes son los mis mos o diferentes, y cada u no se selecciona entre o-metox¡ , m-cloro y p-ami no; (f) bencilo no sustituido; 2,6-difl uorobencilo; a,a-d imetilbencilo; 1 -fenilocicloprop-1 -ilo; y a-tert-butoxicarbon ilaminobencilo; (g ) un g ru po 2-furilo no sustituido , o un grupo 2-furilo que contiene un solo sustituyente, seleccionado entre 4-(morfolin-4-ilmetilo), piperid inilmetilo; y opcionalmente un sustituyente adicional seleccionado de metilo; (h) un grupo pirazolo[1 , 5-a]piridin-3-ilo no sustituido; (i) isoxazolilo sustituido por uno o dos grupos alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; (j) 4,5,6,7-tetrahidro-benzo[d]isoxazol-3-ilo; (k) 3-tert-butil-fenil-IH-pirazol-5-ilo; (1 ) quioxalinilo; (m) benzo[c]isoxazol-3-ilo; (n) 2-metil-4-trifluorometil-tiazol-5-ilo; (o) 3-fenilamino-2-piridilo; (p) 1 -toluenosulfonilpirrol-3-ilo; (q ) 2,4-dimetoxi-3-piridilo; y 6-cloro-2-metoxi-4-metil-3-piridilo; (r) imidazo[2, 1 -b]tiazol-6-ilo; (s) 5-cloro-2-metilsulfanil-pi r'imidin-4-ilo; (t) 3-metoxi-naft-2-ilo; (u) 2 ,3-dihidro-benzo[1 ,4jdioxin-5-ilo; (v) g rupo 2,3-d ihidro-benzofuranilo sustituido opcionalmente en el anil lo de cinco miembros por uno o dos grupos meti lo; (w) 2-metil-benzoxazol-7-ilo; (x) 4-aminociclohex- 1 -ilo; (y) 1 ,2, 3,4-tetrahidro-q uinolin-6-ilo; (z) 2-metil-4, 5,6 ,7-tetrahidro-benzofuran-3-ilo; (aa) 2-pirimid inil-1 piperidin-4-ilo; y 1 -(5-trifluorometil-2-piridil)-piperid in-4-ilo y 1 -metilsulfonilpiperidin-4-ilo; (ab) 1 -cianociclopropilo; (ac) N-bencilmorfolin-2-ilo; y cuando A es NH(C=0), R1 se selecciona adicionalmente entre: (ad) fenilo no sustituido; R9b se selecciona de hidrógeno; cloro; metoxi; metilsulfonilo; 4-metil-piperazin-1 -ilcarbonilo; morfolincarbonilo; morfolinmetilo; pirrolidinil carbón ilo; N-metil-piperidiniloxi; pirrolidiniletoxi; morfolinpropilaminometilo; 4-ciclopentil-piperazin-1 -ilmetilo; 4-etilsulfonil-piperazin-1 -ilmetilo; morfolinsulfonilo; 4-(4-meti Ici el ohexi lo )-p iperazi n- 1 -?? metilo; y R7b se selecciona de hidrógeno; metilo; metoxi y etoxi. 31. Un compuesto de la fórmula (VII): en donde R1d es un grupo R1 , R1a, R1b o R c , tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes. 32. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 31, que tiene la fórmula (Vlla): en donde R es tal como se definió en la reivindicación 31 33. Un compuesto de la fórmula (VIII): (VIII) en donde R e es un grupo R1 a o u n g rupo R , tal como se define en cualquiera de las reivind icaciones precedentes. 34. Un compuesto de la fórmula (IX): o una sal, N-óxido o solvato del m ismo; en donde R1 d es tal como se definió, E es un enlace, CH2 o CH2CH2, R22 se selecciona de hidrógeno, halógeno (por ejemplo flúor o cloro), y alcoxi de 1 a 2 átomos de carbono (por ejemplo, metoxi) , y R21 se selecciona de hidrógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono (por ejemplo metilo), acilo de 1 a 4 átomos de carbono, y alcoxicarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono. 35. El uso de un compuesto como el q ue se define en cualq uiera de las reivindicaciones 27 a 34, para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de un estado o condición de enfermedad med iado por una quinasa dependiente de ciclina , glicógeno sintasa quinasa, o quinasa Aurora. 36. U n método para inh ibir una quinasa dependiente de ciclina, glicógeno sintasa q uinasa o quinasa Aurora, cuyo método comprende poner en contacto la quinasa con un compuesto inhibidor de quinasa de la fórmula (I), tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34. 37. Un método para modular un proceso celular (por ejemplo, división celular) mediante la inhibición de la actividad de una quinasa dependiente de ciclina, de una glicógeno sintasa quinasa, o de una quinasa Aurora, usando un compuesto de la fórmula (I), tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34. 38. Un método para el tratamiento de una enfermedad o condición que comprende o aparece a partir de crecimiento celular anormal en un mamífero, cuyo método comprende administrar al mamífero un compuesto de la fórmula (I), tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34, en una cantidad efectiva para inhibir el crecimiento celular anormal. 39. Un método para el tratamiento de una enfermedad o condición que comprende o que aparece a partir de crecimiento celular anormal en un mamífero', el método comprende administrar al mamífero un compuesto de la fórmula (I), tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34, en una cantidad efectiva para inhibir la actividad de la cdkl o de la cdk2. 40. Un compuesto de la fórmula (I), tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34, para su uso en la profilaxis o en el tratamiento de un estado o condición de enfermedad mediado por glicógeno sintasa quinasa 3. 41 . El uso de un com puesto de la fórm ula (I) , tal como se define en cualquiera de las reivind icaciones 1 a 34, para la fa bricación de un medicamento para la profilaxis o para el tratamiento de un estado o condición de enfermedad mediado por glicógeno s intasa quinasa 3. 42. Un método para la profilaxis o tratamiento de un estado o condición de enfermedad mediada por glicógeno sintasa quinasa 3, cuyo método comprende adm inistrar a un sujeto q ue lo necesita , un com puesto de la fórm ula (I), tal como se define en cualq uiera de las reivind icaciones 1 a 34. 43. Un método para inhibir la glicógeno sintasa q uinasa 3, cuyo método com prende poner en contacto la qu inasa con un compuesto inhibidor de qu inasa de la fórm u la (I), tal como se define en cua lq uiera de las reivindicaciones 1 a 34. 44. Un método para modular un proceso celular (por ejemplo división celular) mediante la inhibición de la actividad de la glicógeno sintasa quinasa 3 usando un com puesto de la fórmula (I), tal como se define en cualq uiera de las reivind icaciones 1 a 34. 45. Un método para tratar una enfermedad o condición, q ue comprende o aparece a partir de crecimiento celular anormal en un mam ífero, el método comprende administrar al mam ífero un compuesto de la fórmula (I) tal como se define en cualq uiera de las reivindicaciones 1 a 34, en una cantidad efectiva para inhibir la actividad de la glicógeno sintasa quinasa 3. 46. Un uso o método como el que se define en cualquiera de las reivind icaciones precedentes , caracterizad o además porque el estado o condición se selecciona de desórdenes proliferativos, tales como cánceres y condiciones tales com o infecciones vira les , enfermedades auto in m u n ológicas y enfermedades neurodegenerativas. 47. U n uso o método de acuerdo co n la reivindicación 46 , caracterizado además porque el estado de enfermedad es un cánce r seleccionado de cáncer de mama , cá ncer ovárico, cáncer de colon , cáncer de próstata , cáncer esofágico, cáncer escamoso, y carcinomas de células de pulmón no pequeñas. 48. El uso de un compuesto como el que se define en cualquiera de las reivi ndicaciones 1 a 34, para la fabricación de un med icamento para el tratamiento o profilaxis de una infección fúngica en un animal. 49. U n método para el tratamiento o profilaxis de una infección fúngica en un animal o planta, que comprende administrar al animal o planta una cantidad efectiva como antifúng ico, de un compuesto de la fórmu la (I) tal como se define en cualq uiera de las reivindicaciones 1 a 34. 50. El uso de un compuesto de la fórmula (I) tal como se define en cualq uiera de las reivindicaciones 1 a 34 para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o para el tratamiento de una enfermedad o condición caracterizada por la regulación hacia arriba de una quinasa Aurora (por ejem plo quinasa Aurora A o qu inasa Aurora B). 51. Un método para la profilaxis o para el tratamiento (o para aliviar o reducir la incidencia) de un estado o condición de enfermedad caracterizado por la regulación hacia arriba de una quinasa Aurora (por ejemplo, quinasa Aurora A o quinasa Aurora B); cuyo método comprende (i) someter a un paciente a una prueba diagnóstica para detectar un marcador característico de la regulación hacia arriba de la quinasa Aurora y (ii) en donde la prueba diagnóstica sea indicativa de la regulación hacia arriba de la quinasa Aurora, administrar después al paciente un compuesto de la fórmula (I), tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34, con actividad inhibidora de la quinasa Aurora. 52. Un compuesto como el que se define en cualquiera de las reivindicaciones 27 a 34, para su uso en medicina. 53. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto como el definido en cualquiera de las reivindicaciones 27 a 34, y un portador farmacéuticamente aceptable. 54. Un proceso para la preparación de un compuesto como el definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34, cuyo proceso comprende: (i) la reacción de un compuesto de la fórmula: con un compuesto de la fórmula R1-A', en donde A' es un grupo isocianato N = C=0, o un grupo C02H, o un derivado activado del mismo; o (ii) la reacción de un compuesto de la fórmula: con un compuesto diamina de la fórmula: caracterizado porque R , A, R3 y R4 son tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes; y opcionalmente después convierten un compuesto de la fórmula (I) en otro compuesto de la fórmula (I). RESU M EN La invención proporciona com puestos que tienen actividad como inhibidores de qui nasas dependientes de ciclina , g l icógeno sintasa q uinasa-3 y quinasas Aurora para uso en el tratam iento de estados y condiciones de enfermedad, tales ocm o cá ncer, que son mediadas por las quinasas. Los compuestos tienen la fórm ula genera l (I ); en donde X es CR5 o N ; A es un enlace o -(CH2)m-(B)n-; B es C=0; N R9(C=0), o 0(C=0), en donde R9 es h idrógeno o h idrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono sustitu ido opcionalmente por hid roxi o por alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, m es 0, 1 o 2; n es 0 o 1 ; R° es hidrógeno o, junto con N R9 cuando está presente, forma un gru po -(CH2)P- en donde p es de 2 a 4; R es hidrógeno, un g rupo carboxílico o heterocíclico que tiene desde 3 hasta 12 miembros anillo, o un gruo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido opcionalmente; R2 es hidrógeno, un grupo carboxílico o heterocíclico que tiene de 3 a 12 miembros anillo, o un grupo h idrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido opcionalmente; R2 es hidrógeno, halógeno, metoxi o un g rupo hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por halógeno, hidroxilo o metoxi; R3 y R4 junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, forman un anillo carbocíclico o heterocíclico fundido, sustituido opcionalmente, q ue tiene de 5 a 7 miembros anillo de los cuales hasta 3 pueden ser heteroátomos seleccionados de N , O y S; y R5 es hidrógeno, un grupo R2 o un grupo R10 en donde R10 se selecciona de halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di-hidrocarbilamino de 1 a 4 átomos de carbono, grupos carbocíclico y heterocíclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros anillo; un grupo Ra-Rb en donde Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X1, X1C(X2)X1, S, SO, S02, NRC, S02NRc o NRcS02; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclico y heterocíclico que tienen desde 3 hasta 12 miembros anillo, y en donde uno o más átomos de carbono del grupo hidrocarbilo de 1 a 8 átomos de carbono puede ser reemplazado opcionalmente por O, S, SO, S02, NRC, X1C(X2), C(X2)X1 o X1C(X2)X1; Rc se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo de 1 a 4 átomos de carbono; y X1 es O, S, o NRC y X2 es = 0, =S, o =NRC. También están incluidas en la fórmula (I) las sales, solvatos y N-óxidos de los compuestos.
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Families Citing this family (116)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI372050B (en) * 2003-07-03 2012-09-11 Astex Therapeutics Ltd (morpholin-4-ylmethyl-1h-benzimidazol-2-yl)-1h-pyrazoles
PL2256106T3 (pl) 2003-07-22 2015-08-31 Astex Therapeutics Ltd Związki 3,4-pochodne 1h-pirazolu i ich zastosowanie jako kinazy zależne od cyklin (cdk) i modulatory kinazy syntazy glikogenu-3 (gsk-3)
JP4960708B2 (ja) 2004-01-30 2012-06-27 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ａｔｐ結合カセットトランスポーターのモジュレーター
US7977322B2 (en) 2004-08-20 2011-07-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
EP1781653A1 (en) * 2004-07-05 2007-05-09 Astex Therapeutics Limited 3,4-disubstituted pyrazoles as cyclin dependent kinases (cdk) or aurora kinase or glycogen synthase 3 (gsk-3) inhibitors
WO2006044687A2 (en) 2004-10-15 2006-04-27 Takeda San Diego, Inc. Kinase inhibitors
WO2006050506A1 (en) 2004-11-03 2006-05-11 Curis, Inc. Mediators of hedgehog signaling pathways, compositions and uses related thereto
US8110573B2 (en) 2004-12-30 2012-02-07 Astex Therapeutics Limited Pyrazole compounds that modulate the activity of CDK, GSK and aurora kinases
EP1836199A1 (en) 2004-12-30 2007-09-26 Astex Therapeutics Limited Thiazole and isothiazole derivatives that modulate the activity of cdk, gsk and aurora kinases
JP2008526723A (ja) * 2004-12-30 2008-07-24 アステックス、セラピューティックス、リミテッド Ｃｄｋ、ｇｓｋ及びオーロラキナーゼの活性を調節するピラゾール誘導体
AR054425A1 (es) 2005-01-21 2007-06-27 Astex Therapeutics Ltd Sales de adicion de piperidin 4-il- amida de acido 4-(2,6-dicloro-benzoilamino) 1h-pirazol-3-carboxilico.
JP5475235B2 (ja) * 2005-01-21 2014-04-16 アステックス・セラピューティクス・リミテッド 医薬化合物
KR101345002B1 (ko) * 2005-01-21 2013-12-31 아스텍스 테라퓨틱스 리미티드 제약 화합물
AR052559A1 (es) * 2005-01-21 2007-03-21 Astex Therapeutics Ltd Derivados de pirazol para inhibir cdk's y gsk's
US8404718B2 (en) 2005-01-21 2013-03-26 Astex Therapeutics Limited Combinations of pyrazole kinase inhibitors
EP1847531A4 (en) * 2005-02-09 2009-04-22 Takeda Pharmaceutical PYRAZOLE DERIVATIVE
WO2006108489A1 (en) 2005-04-14 2006-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Aminopyrazole derivatives, their manufacture and use as pharmaceutical agents
EP1749523A1 (en) * 2005-07-29 2007-02-07 Neuropharma, S.A. GSK-3 inhibitors
US8093401B2 (en) 2005-08-04 2012-01-10 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Sirtuin modulating compounds
US7855289B2 (en) 2005-08-04 2010-12-21 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Sirtuin modulating compounds
US8088928B2 (en) 2005-08-04 2012-01-03 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Sirtuin modulating compounds
AU2006278397B2 (en) * 2005-08-04 2013-01-17 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Oxazolopyridine derivatives as sirtuin modulators
JP2009506069A (ja) 2005-08-26 2009-02-12 ブレインセルス，インコーポレイティド ムスカリン性受容体調節による神経発生
EP2258359A3 (en) 2005-08-26 2011-04-06 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation with sabcomelin
US8119655B2 (en) 2005-10-07 2012-02-21 Takeda Pharmaceutical Company Limited Kinase inhibitors
AU2006304787A1 (en) 2005-10-21 2007-04-26 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by PDE inhibition
CA2625210A1 (en) 2005-10-31 2007-05-10 Braincells, Inc. Gaba receptor mediated modulation of neurogenesis
US7795273B2 (en) * 2005-12-08 2010-09-14 Novartis Ag Pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carboxylic acids as EphB and VEGFR2 kinase inhibitors
BRPI0619955A2 (pt) * 2005-12-15 2011-10-25 Hoffmann La Roche derivados tricìclicos da lactama, sua produção e seus usos como agentes farmacêuticos
US7572809B2 (en) 2005-12-19 2009-08-11 Hoffmann-La Roche Inc. Isoquinoline aminopyrazole derivatives
EP1968579A1 (en) * 2005-12-30 2008-09-17 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
CA2637392A1 (en) * 2006-01-23 2007-07-26 Crystalgenomics, Inc. Imidazopyridine derivatives inhibiting protein kinase activity, method for the preparation thereof and pharmaceutical composition containing same
US20100216734A1 (en) 2006-03-08 2010-08-26 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by nootropic agents
EP2377531A2 (en) 2006-05-09 2011-10-19 Braincells, Inc. Neurogenesis by modulating angiotensin
WO2008001115A2 (en) * 2006-06-29 2008-01-03 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations of 1-cyclopropyl-3- [3- (5-m0rphoolin-4-ylmethyl-1h-benzoimidazol-2-yl) -lh-1-pyrazol- 4-yl] -urea
US20110159111A1 (en) * 2006-06-29 2011-06-30 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations
FR2903406B1 (fr) * 2006-07-04 2012-08-10 Aventis Pharma Sa Derives de pyrazolylbenzimidazole,compositions les contenant et utilisation
US8314138B2 (en) 2006-08-24 2012-11-20 Novartis Ag Pyrazole derivative as SCD1 inhibitors for the treatment of diabetes
US20100184806A1 (en) 2006-09-19 2010-07-22 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by ppar agents
EP2066664A1 (en) 2006-09-22 2009-06-10 Novartis AG Heterocyclic organic compounds
CA2664356A1 (en) * 2006-10-05 2008-04-10 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Gene/protein marker for prediction or diagnosis of pharmacological efficacy of aurora a inhibitor
BRPI0719883A2 (pt) 2006-10-09 2015-05-05 Takeda Pharmaceutical Inibidores de quinase
US8883790B2 (en) * 2006-10-12 2014-11-11 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations
EP2073803B1 (en) 2006-10-12 2018-09-19 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations
ES2446269T3 (es) 2006-12-19 2014-03-06 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois 3-Benzofuranil-4-indolil-maleimidas como potentes inhibidores de GSK-3 para trastornos neurodegenerativos
WO2008074835A1 (en) 2006-12-20 2008-06-26 Novartis Ag 2-substituted 5-membered heterocycles as scd inhibitors
DE102006060598A1 (de) * 2006-12-21 2008-06-26 Merck Patent Gmbh Tetrahydrobenzoisoxazole
TW200916472A (en) 2007-06-20 2009-04-16 Sirtris Pharmaceuticals Inc Sirtuin modulating compounds
WO2009058728A1 (en) * 2007-10-29 2009-05-07 Schering Corporation Thiazole derivatives as protein kinase inhibitors
EP2217595A1 (en) * 2007-10-29 2010-08-18 Schering Corporation Diamido thiazole derivatives as protein kinase inhibitors
CN101910131B (zh) 2007-11-16 2014-04-23 里格尔药品股份有限公司 甲酰胺、磺酰胺和胺化合物及其使用方法
WO2009076631A1 (en) 2007-12-12 2009-06-18 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Carboxamide, sulfonamide and amine compounds for metabolic disorders
EP2294065B1 (en) * 2008-01-22 2014-03-19 Vernalis (R&D) Ltd. Indolyl-pyridone derivatives having checkpoint kinase 1 inhibitory activity
JP5658138B2 (ja) 2008-04-23 2015-01-21 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 代謝障害の処置のためのカルボキサミド化合物
EP2330894B8 (en) 2008-09-03 2017-04-19 BioMarin Pharmaceutical Inc. Compositions including 6-aminohexanoic acid derivatives as hdac inhibitors
PE20131197A1 (es) 2008-10-31 2013-11-06 Genentech Inc Compuestos de pirazolopirimidina como inhibidores de jak y composiciones farmaceuticas que los contienen
JP2012509249A (ja) * 2008-11-20 2012-04-19 オンコセラピー・サイエンス株式会社 ７−ヒドロキシ−ベンゾイミダゾール−４−イル−メタノン誘導体を含むグリコーゲン合成酵素キナーゼ−３ベータ阻害剤
US8318928B2 (en) * 2008-12-15 2012-11-27 Glenmark Pharmaceuticals, S.A. Fused imidazole carboxamides as TRPV3 modulators
EA021424B1 (ru) 2008-12-19 2015-06-30 Сертрис Фармасьютикалз, Инк. Тиазолопиридиновые соединения, регулирующие сиртуин
JP5738196B2 (ja) 2008-12-22 2015-06-17 ミレニアム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＭｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． オーロラキナーゼ阻害剤および抗ｃｄ２０抗体の併用
US20100216805A1 (en) 2009-02-25 2010-08-26 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis using d-cycloserine combinations
UA103918C2 (en) * 2009-03-02 2013-12-10 Айерем Элелси N-(hetero)aryl, 2-(hetero)aryl-substituted acetamides for use as wnt signaling modulators
JP2012531433A (ja) * 2009-06-25 2012-12-10 メドリューション リミテッド キナーゼ阻害剤としての置換複素環式化合物とその用法
UA110324C2 (en) * 2009-07-02 2015-12-25 Genentech Inc Jak inhibitory compounds based on pyrazolo pyrimidine
CA2780031A1 (en) * 2009-11-12 2011-05-19 Selvita S.A. A compound, a process for its preparation, a pharmaceutical composition, use of a compound, a method for modulating or regulating serine/threonine kinases and a serine/threonine kinases modulating agent
CN101857589B (zh) * 2010-06-08 2013-12-18 东南大学 吡唑-苯并咪唑类衍生物及其应用
MX340490B (es) * 2010-07-13 2016-07-11 F Hoffmann-La Roche Ag * Derivados de pirazolo [1, 5a] pirimidina y de tieno [3, 2b] pirimidina como moduladores de la cinasa asociada al receptor de la interleucina 4 (irak4).
US10059723B2 (en) 2011-02-28 2018-08-28 Biomarin Pharmaceutical Inc. Histone deacetylase inhibitors
CA2828524C (en) 2011-02-28 2020-01-07 Repligen Corporation Histone deacetylase inhibitors
US8957066B2 (en) 2011-02-28 2015-02-17 Biomarin Pharmaceutical Inc. Histone deacetylase inhibitors
GB201106817D0 (en) 2011-04-21 2011-06-01 Astex Therapeutics Ltd New compound
WO2013055949A2 (en) 2011-10-11 2013-04-18 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Pyrazol-3-ones that activate pro-apoptotic bax
PH12017500997A1 (en) 2012-04-04 2018-02-19 Samumed Llc Indazole inhibitors of the wnt signal pathway and therapeutic uses thereof
GB201211021D0 (en) * 2012-06-21 2012-08-01 Cancer Rec Tech Ltd Pharmaceutically active compounds
TW201406758A (zh) * 2012-06-28 2014-02-16 Daiichi Sankyo Co Ltd 三環性化合物
GB201218864D0 (en) 2012-10-19 2012-12-05 Astex Therapeutics Ltd Bicyclic heterocycle compounds and their uses in therapy
US9980973B2 (en) 2012-10-19 2018-05-29 Astex Therapeutics Limited Bicyclic heterocycle compounds and their uses in therapy
GB201218862D0 (en) 2012-10-19 2012-12-05 Astex Therapeutics Ltd Bicyclic heterocycle compounds and their uses in therapy
GB201218850D0 (en) 2012-10-19 2012-12-05 Astex Therapeutics Ltd Bicyclic heterocycle compounds and their uses in therapy
RU2015117950A (ru) * 2012-10-26 2016-12-20 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг 3,4-дизамещенный 1н-пиразол и 4,5-дизамещенный тиазол в качестве ингибиторов тирозинкиназы syk
JP6503338B2 (ja) 2013-03-15 2019-04-17 バイオマリン ファーマシューティカル インコーポレイテッド Ｈｄａｃ阻害剤
CN104211692B (zh) * 2013-06-04 2019-05-24 广东东阳光药业有限公司 作为欧若拉激酶抑制剂的衍生物
JO3368B1 (ar) 2013-06-04 2019-03-13 Janssen Pharmaceutica Nv مركبات 6، 7- ثاني هيدرو بيرازولو [5،1-a] بيرازين- 4 (5 يد)- اون واستخدامها بصفة منظمات تفارغية سلبية لمستقبلات ميجلور 2
CN104447701B (zh) * 2013-09-17 2019-03-22 广东东阳光药业有限公司 吡唑类衍生物及其用途
US10335494B2 (en) 2013-12-06 2019-07-02 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Combination of aurora kinase inhibitors and anti-CD30 antibodies
CN105829310B (zh) 2013-12-20 2019-04-12 阿斯特克斯治疗有限公司 双环杂环化合物及其治疗用途
SI3145929T1 (sl) * 2014-05-23 2021-10-29 Hoffmann La Roche 5-kloro-2-difluorometoksifenil pirazolopirimidinove spojine, ki so zaviralci janusove kinaze
JOP20150177B1 (ar) 2014-08-01 2021-08-17 Janssen Pharmaceutica Nv مركبات 6 ، 7 ثاني هيدرو بيرازولو [ 1، 5 الفا ] بيرازين – 4 (5 يد) – اون واستخدامها كمنظمات الوسترية سلبية لمستقبلات ملجور 2
JOP20150179B1 (ar) 2014-08-01 2021-08-17 Janssen Pharmaceutica Nv مركبات 6 ، 7 ثاني هيدرو بيرازولو [ 1، 5 الفا ] بيرازين – 4 (5 يد) – اون واستخدامها كمنظمات الوسترية سلبية لمستقبلات ملجور 2
WO2016024231A1 (en) 2014-08-11 2016-02-18 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor, a pd-1 inhibitor and/or a pd-l1 inhibitor
WO2016024232A1 (en) 2014-08-11 2016-02-18 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor and/or a cdk 4/6 inhibitor
PL3179991T3 (pl) 2014-08-11 2022-02-14 Acerta Pharma B.V. Kombinacje terapeutyczne inhibitora btk i inhibitora bcl-2
AU2015357169B2 (en) 2014-12-03 2021-03-04 Janssen Pharmaceutica Nv Radiolabelled mGluR2 PET ligands
EP3227295B1 (en) 2014-12-03 2019-02-20 Janssen Pharmaceutica NV 6,7-dihydropyrazolo[1,5- ]pyrazin-4(5h)-one compounds and their use as negative allosteric modulators of mglu2 receptors
CN105801563B (zh) * 2015-01-15 2020-01-14 广东东阳光药业有限公司 吡唑类衍生物及其用途
BR112017022349B1 (pt) * 2015-04-22 2023-11-07 Rigel Pharmaceuticals, Inc Composto, composição o compreendendo, seus usos, e, método
WO2016202758A1 (en) * 2015-06-18 2016-12-22 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituted 2-(1h-pyrazol-1-yl)-1h-benzimidazole compounds
KR20180080262A (ko) 2015-11-06 2018-07-11 사뮤메드, 엘엘씨 골관절염의 치료
CA3003962A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 Janssen Pharmaceutica Nv Radiolabelled mglur2/3 pet ligands
EP3389727B1 (en) 2015-12-18 2020-08-12 Janssen Pharmaceutica NV Radiolabelled mglur2/3 pet ligands
WO2017132511A1 (en) * 2016-01-27 2017-08-03 Southern Research Institute Benzimidazole compounds, use as inhibitors of wnt signaling pathway in cancers, and methods for preparation thereof
WO2018166993A2 (en) * 2017-03-14 2018-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Pyrazolochlorophenyl compounds, compositions and methods of use thereof
TW201902896A (zh) 2017-05-22 2019-01-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 治療化合物及組合物及其使用方法
DE102017127039A1 (de) 2017-11-16 2019-05-16 Eppendorf Ag Zentrifuge und Ausschwingrotor
US11874276B2 (en) 2018-04-05 2024-01-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. STING levels as a biomarker for cancer immunotherapy
MX2021007925A (es) 2018-12-31 2021-10-26 Biomea Fusion Llc Inhibidores irreversibles de la interaccion menina-mll.
US11174263B2 (en) 2018-12-31 2021-11-16 Biomea Fusion, Inc. Inhibitors of menin-MLL interaction
EP3911317A2 (en) * 2019-01-17 2021-11-24 BioSplice Therapeutics, Inc. Methods of treating cartilage disorders through inhibition of clk and dyrk
CN112047932B (zh) * 2019-06-05 2022-11-08 中国药科大学 吡唑类脾酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法与用途
WO2021041532A1 (en) 2019-08-26 2021-03-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Use of heparin to promote type 1 interferon signaling
JOP20220050A1 (ar) 2019-08-30 2023-01-30 Rigel Pharmaceuticals Inc مركبات بيرازول، صياغات منها وطريقة لاستخدام المركبات و/ أو صياغات
CN111004221B (zh) * 2019-12-13 2021-02-02 长治学院 一种嘧啶/苯并咪唑杂合物、制备方法及医药用途
CN112592839B (zh) * 2021-01-08 2022-08-19 浙江工业大学 一株降解氨基甲酸乙酯的米根霉及其应用
CN113149978A (zh) * 2021-02-04 2021-07-23 中国药科大学 一种中间体化合物、制备方法及其用途
CN113549038B (zh) * 2021-07-07 2023-05-23 常州大学 多取代异苯并呋喃化合物及其用途
CN116178358B (zh) * 2022-11-04 2024-04-19 济南大学 一种靶向c-Src激酶SH3结构域的化合物及其应用

Family Cites Families (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4431807A (en) 1980-06-12 1984-02-14 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army 4-Methyl-5-(unsubstituted and substituted phenoxy)-6-methoxy-8-(aminoalkylamino)quinolines
US4619686A (en) 1984-07-17 1986-10-28 Eli Lilly And Company Pyridazinylurea compounds and methods of use as herbicides
US4666828A (en) 1984-08-15 1987-05-19 The General Hospital Corporation Test for Huntington's disease
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4801531A (en) 1985-04-17 1989-01-31 Biotechnology Research Partners, Ltd. Apo AI/CIII genomic polymorphisms predictive of atherosclerosis
EP0308020A3 (en) 1987-09-18 1990-12-05 Merck & Co. Inc. 5-(aryl and heteroaryl)-6-(aryl and heteroaryl)-1,2-dihydro-2-oxo 3-pyridinecarboxylic acids and derivatives thereof
US5272057A (en) 1988-10-14 1993-12-21 Georgetown University Method of detecting a predisposition to cancer by the use of restriction fragment length polymorphism of the gene for human poly (ADP-ribose) polymerase
US5192659A (en) 1989-08-25 1993-03-09 Genetype Ag Intron sequence analysis method for detection of adjacent and remote locus alleles as haplotypes
US5451596A (en) 1992-12-29 1995-09-19 Rhone Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Cycloalkyl amine bis-aryl squalene synthase inhibitors
FR2707295A1 (fr) 1993-06-07 1995-01-13 Rhone Poulenc Agrochimie Fongicides pyrazoles substitués en position 3 par un hétérocycle.
EP0711768B1 (en) 1994-05-31 2002-02-13 Mitsui Chemicals, Inc. Benzimidazole derivative
DE69526790T2 (de) 1994-06-24 2003-03-06 Euro Celtique Sa Verbindungen zur hemmung von phosphodiesrerase iv
CA2214685C (en) * 1995-03-10 2008-05-20 Berlex Laboratories, Inc. Benzamidine derivatives their preparation and their use as anti-coagulants
WO1998004689A1 (en) 1995-07-31 1998-02-05 Urocor, Inc. Biomarkers and targets for diagnosis, prognosis and management of prostate disease
US6218529B1 (en) 1995-07-31 2001-04-17 Urocor, Inc. Biomarkers and targets for diagnosis, prognosis and management of prostate, breast and bladder cancer
AU6966696A (en) 1995-10-05 1997-04-28 Warner-Lambert Company Method for treating and preventing inflammation and atherosclerosis
JP2000507956A (ja) 1996-04-03 2000-06-27 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド ファルネシル−タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤
US5874452A (en) 1996-04-03 1999-02-23 Merck & Co., Inc. Biheteroaryl inhibitors of farnesyl-protein transferase
KR100303377B1 (ko) * 1996-05-30 2001-12-12 프리돌린 클라우스너, 롤란드 비. 보레르 신규피롤유도체
YU22400A (sh) 1997-10-27 2003-08-29 Agouron Pharmaceuticals Inc. Supstituisana 4-amino-tiazol-2-i jedinjenja kao cdks inhibitori
AU2713799A (en) 1998-03-12 1999-09-27 Novo Nordisk A/S Modulators of protein tyrosine phosphatases (ptpases)
WO1999061426A1 (en) 1998-05-22 1999-12-02 Scios Inc. Heterocyclic compounds and methods to treat cardiac failure and other disorders
CA2320730A1 (en) 1998-12-23 2000-07-06 Renhua Li Thrombin or factor xa inhibitors
UA73492C2 (en) 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
DE60003025T2 (de) 1999-04-02 2004-03-18 Bristol-Myers Squibb Pharma Co. Arylsulfonyle als faktor xa inhibitoren
BR0009721A (pt) 1999-04-15 2002-02-13 Bristol Myers Squibb Co Inibidores de tirosina quinase de proteìna cìclica
EP1177187B1 (en) 1999-04-28 2007-07-25 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Di-aryl acid derivatives as ppar receptor ligands
DE19920936A1 (de) * 1999-05-07 2000-11-09 Basf Ag Heterozyklisch substituierte Benzimidazole, deren Herstellung und Anwendung
ATE301651T1 (de) * 1999-06-23 2005-08-15 Aventis Pharma Gmbh Substituierte benzimidazole
JP4627356B2 (ja) 1999-06-30 2011-02-09 松森　　昭 ウイルス性心筋炎の予防または治療薬剤
FR2795726A1 (fr) 1999-06-30 2001-01-05 Aventis Cropscience Sa Nouveaux pyrazoles fongicides
PE20010306A1 (es) 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa
RU2002110295A (ru) 1999-09-17 2003-12-10 Милленниум Фармасьютикалс, Инк. (Us) Ингибиторы фактора Ха
NZ517829A (en) 1999-09-17 2004-12-24 Millennium Pharm Inc Benzamides and related inhibitors of factor Xa
US6632815B2 (en) 1999-09-17 2003-10-14 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of factor Xa
YU54202A (sh) 2000-01-18 2006-01-16 Agouron Pharmaceuticals Inc. Jedinjenja indazola, farmaceutske smeše i postupci za stimulisanje i inhibiranje ćelijske proliferacije
HN2001000008A (es) 2000-01-21 2003-12-11 Inc Agouron Pharmaceuticals Compuesto de amida y composiciones farmaceuticas para inhibir proteinquinasas, y su modo de empleo
NZ514583A (en) 2000-02-05 2004-05-28 Vertex Pharma Pyrazole compositions useful as inhibitors of ERK
WO2001064642A2 (en) 2000-02-29 2001-09-07 Cor Therapeutics, Inc. Benzamides and related inhibitors of factor xa
WO2001068585A1 (fr) 2000-03-14 2001-09-20 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Nouveaux composes amides
CN100355751C (zh) 2000-03-29 2007-12-19 西克拉塞尔有限公司 2－取代的4－杂芳基－嘧啶、其组合物及其用途
WO2001079198A1 (en) 2000-04-18 2001-10-25 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Pyrazoles for inhibiting protein kinase
ATE287886T1 (de) 2000-04-25 2005-02-15 Bristol Myers Squibb Co Verwendung von 5-thio, sulfinyl- und sulfonylpyrazolo 3,4-b) pyridinen als cyclin- abhängige kinase-hemmer
US6414013B1 (en) 2000-06-19 2002-07-02 Pharmacia & Upjohn S.P.A. Thiophene compounds, process for preparing the same, and pharmaceutical compositions containing the same background of the invention
JP2004501913A (ja) 2000-06-23 2004-01-22 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　ファーマ　カンパニー ヘテロアリール−フェニル置換Ｘａ因子阻害剤
AU2001268712A1 (en) 2000-06-23 2002-01-08 Bristol-Myers Squibb Company 1 - (heteroaryl-phenyl) - condensed pyrazol derivatives as factor Xa inhibitors
WO2002000651A2 (en) 2000-06-27 2002-01-03 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Factor xa inhibitors
EP1414804A1 (en) 2000-10-20 2004-05-06 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Acylsemicarbazides and their use as cyclin dependent kinase (cdk) inhibitors
US20030105090A1 (en) * 2000-12-21 2003-06-05 David Bebbington Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
DE10108480A1 (de) * 2001-02-22 2002-09-05 Bayer Ag Pyrazolylpyrimidine
DE10110750A1 (de) * 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Neuartige Aminodicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
WO2002072549A1 (en) 2001-03-12 2002-09-19 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Functionalized heterocycles as modulators of chemokine receptor function and methods of use therefor
JP2004535411A (ja) 2001-05-25 2004-11-25 ブリストルーマイヤーズ スクイブ カンパニー マトリックスメタロプロテナーゼ及び／またはＴＮＦ−α転換酵素（ＴＡＣＥ）の阻害剤としてのヒダントイン及び関連複素環化合物
DK1401837T3 (da) 2001-06-29 2005-11-07 Cv Therapeutics Inc Purinderivater som A2B-adenosinreceptorantagonister
US7064215B2 (en) * 2001-07-03 2006-06-20 Chiron Corporation Indazole benzimidazole compounds
WO2003006465A1 (en) 2001-07-13 2003-01-23 Cv Therapeutics, Inc. Partial and full agonist of a adenosine receptors
US6897208B2 (en) * 2001-10-26 2005-05-24 Aventis Pharmaceuticals Inc. Benzimidazoles
FR2831536A1 (fr) * 2001-10-26 2003-05-02 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation notamment comme inhibiteurs de kdr
JP5039268B2 (ja) 2001-10-26 2012-10-03 アベンティス・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテツド ベンゾイミダゾールおよび類縁体および蛋白キナーゼ阻害剤としてのその使用
EP1314733A1 (en) 2001-11-22 2003-05-28 Aventis Pharma Deutschland GmbH Indole-2-carboxamides as factor Xa inhibitors
US7622479B2 (en) 2001-11-26 2009-11-24 Takeda Pharmaceutical Company Limited Bicyclic derivative, its production and use
US7294624B2 (en) 2001-12-20 2007-11-13 Bristol Myers Squibb Company Barbituric acid derivatives as inhibitors of TNF-α converting enzyme (TACE) and/or matrix metalloproteinases
CA2475633C (en) 2002-02-06 2013-04-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heteroaryl compounds useful as inhibitors of gsk-3
AU2003286757B2 (en) 2002-11-01 2009-06-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Carbonylamino-benzimidazole derivatives as androgen receptor modulators
CA2507624A1 (en) 2002-12-04 2004-06-17 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Imidazole-derivatives as factor xa inhibitors
WO2004052371A2 (en) 2002-12-11 2004-06-24 7Tm Pharma A/S Cyclic quinoline compounds for use in mch receptor related disorders
AU2003297925A1 (en) 2002-12-13 2004-07-09 Smithkline Beecham Corporation Thrombopoietin mimetics
AU2003292218A1 (en) 2002-12-23 2004-07-14 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh PYRAZOLE-DERIVATIVES AS FACTOR Xa INHIBITORS
FR2854159B1 (fr) * 2003-04-25 2008-01-11 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de l'indole, leur preparation a titre de medicaments, compositions pharmaceutiques et notamment comme inhibiteurs de kdr
US20040242559A1 (en) * 2003-04-25 2004-12-02 Aventis Pharma S.A. Novel indole derivatives, preparation thereof as medicinal products and pharmaceutical compositions, and especially as KDR inhibitors
TWI372050B (en) * 2003-07-03 2012-09-11 Astex Therapeutics Ltd (morpholin-4-ylmethyl-1h-benzimidazol-2-yl)-1h-pyrazoles
GB0315657D0 (en) * 2003-07-03 2003-08-13 Astex Technology Ltd Pharmaceutical compounds
US20050032869A1 (en) 2003-07-08 2005-02-10 Pharmacia Italia S.P.A. Pyrazolyl-indole derivatives active as kinase inhibitors, process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
US20050164300A1 (en) 2003-09-15 2005-07-28 Plexxikon, Inc. Molecular scaffolds for kinase ligand development
US8969372B2 (en) 2003-11-14 2015-03-03 Aptose Boisciences Inc. Aryl imidazoles and their use as anti-cancer agents
JP3977411B2 (ja) * 2004-03-10 2007-09-19 株式会社クレハ アミン系塩基性化合物とその用途
EP1836199A1 (en) * 2004-12-30 2007-09-26 Astex Therapeutics Limited Thiazole and isothiazole derivatives that modulate the activity of cdk, gsk and aurora kinases
US8110573B2 (en) * 2004-12-30 2012-02-07 Astex Therapeutics Limited Pyrazole compounds that modulate the activity of CDK, GSK and aurora kinases
EP1968579A1 (en) * 2005-12-30 2008-09-17 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
US20110159111A1 (en) * 2006-06-29 2011-06-30 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations
WO2008001115A2 (en) 2006-06-29 2008-01-03 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations of 1-cyclopropyl-3- [3- (5-m0rphoolin-4-ylmethyl-1h-benzoimidazol-2-yl) -lh-1-pyrazol- 4-yl] -urea
US8883790B2 (en) * 2006-10-12 2014-11-11 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations

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